CN101200713A - 稳定化的酶组合物 - Google Patents

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Abstract

提供了用咖啡衍生的材料稳定化的酶组合物。所述稳定化的酶组合物在由焙炒的咖啡固体生产可溶咖啡中特别有用。

Description

稳定化的酶组合物
技术领域
[0001]本发明涉及稳定化的酶组合物。更具体地，本发明涉及用咖啡衍生的材料稳定化的酶组合物。稳定化的酶组合物在咖啡产品的生产中特别有用。
背景技术
[0002]食物级的酶一般通过微生物发酵或通过从植物或动物组织提取来生产。一般处于水溶液中的粗品酶，可以通过一些技术，例如离心、膜超滤、微量过滤、盐沉淀、溶剂沉淀等来纯化和浓缩。然后精炼的酶被标准化并配制成可销售的形式，例如水溶液、干燥的粒状粉末或附聚的粒状。未配制的制剂，例如含水的酶浓缩物或盐沉淀物，常用于研究目的而很少作为商业上的酶，这是由于在处理中的难度、微生物生长的高概率和/或保存期间活性的降低。酶的稳定化涉及在加工和保存期间抑制微生物生长和保持酶活性两方面。酶活性可能由于多种自然过程而降低，包括氧化、热水解和蛋白水解。微生物生长在含水系统中更常见，而在干燥制剂中很少发生问题。然而，不是所有的酶都可以容易地干燥，而且在许多情况下由于没有空气传播的污染物和使用方便，含水制剂可能是优选的。
[0003]某些允许用于食物的材料或成分可以添加到液体或干燥的酶制剂中，以(1)在纯化、加工、保存和/或误用(abuse)期间稳定酶活性，(2)抑制微生物的生长，(3)允许活性成分的标准化，和/或(4)便于更方便地分配酶。这些材料或成分包括，抑制产品中的微生物生长的抗微生物剂，在干燥、保存或误用期间保持酶活性的稳定剂，帮助弄湿或分散酶的分散剂，在配制和使用期间控制pH值的缓冲剂，和允许将活性调整到标准化水平并便于酶的分配的填充剂/标准化试剂。食物级别的抗微生物剂的实例包括山梨酸、丙酸、山梨酸钾、异抗坏血酸钠。其它稳定剂包括糖类，例如蔗糖和乳糖，多元醇，例如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇，盐，例如氯化钠、氯化钾、氯化铵，有机酸，例如柠檬酸，蛋白材料，例如脱脂奶和乳清蛋白浓缩物等等，低聚物，例如聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇，和两性材料，例如甜菜碱和γ-氨基二丁酸。稳定化的机制(作用方式)通常不是都完全清楚；但似乎涉及保护酶蛋白(或在某些情况下，活性所需的非蛋白实体)免于热极限、干燥、剪切、渗透应力、pH应激、离子梯度、蛋白水解和其它有害的影响力的变性和灭活。缓冲剂包括乙酸、乙酸钠、磷酸钠、硫酸、碳酸钙等等。分散剂包括卵磷脂、皂苷等等。如果酶制剂将要被干燥，那么优选在干燥之前向水性液体中添加制剂或稳定成分，因为它们较好地与酶混合并且在干燥期间稳定剂可以保护酶。
[0004]可溶咖啡，也称为速溶咖啡，是相对于传统的焙炒和磨制咖啡(R&G)的一种便利的选择。然而，速溶咖啡常常用快速制备的方便性换取了R&G豆的浓风味。可溶咖啡一般通过对焙炒和磨制(R&G)咖啡的提取和热水解作用、继之以对提取物的分离和干燥来制备。可溶咖啡常常由于高度的加工和相关的损失而具有不平衡的风味和香味。在这种方法中使用的高温和压力常常生产不希望的臭味，从而产生与传统的R&G咖啡相比品质较低的产品。
[0005]可溶咖啡的低质量已经是长期的问题。已经进行了各种尝试来设计高产的、可溶的咖啡的方法，其消除不希望的臭味并尽可能多地保持了咖啡风味和香味。已经研究了在可溶咖啡的生产中使用酶，以求解决这个长期的问题。
[0006]例如，Kellogg的美国专利No.2,282,138描述了使用转化酶，例如，高峰淀粉酶来处理咖啡材料的可溶咖啡生产。这个方法使用高压蒸汽(15psi)来软化和疏松咖啡豆基质，继之以冷却，随后在基本上不高于65℃且一般在48和54℃之间的温度下用酶处理。
[0007]Colton的美国专利4,983,408描述了一种在使磨制的咖啡经历“蒸汽爆发(steam explosion)”预处理、继之以急速减压到大气压力之后，使用酶来使咖啡组分溶解的方法。使用的酶包括淀粉酶、半纤维素酶、纤维素酶、蛋白酶、纤维二糖酶、果胶酶和脂肪酶。
[0008]Small等的美国专利No.4,904,484描述了一种通过在最终焙炒之前用酶处理生的或部分焙炒的咖啡豆来生产R&G咖啡的方法。使用的酶包括细胞壁消化酶、细胞保存组分消化酶或酚氧化酶。细胞壁消化酶包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、葡聚糖酶、甘露聚糖酶和木质素酶(ligninase)。细胞保存组分消化酶包括淀粉酶、葡糖苷酶、甘露糖苷酶、葡聚糖酶和蛋白酶。酚氧化酶包括酪氨酸酶、酚酶，和其它提取物，例如茶、苹果汁、梨汁和葡萄汁。
[0009]已经报道了使用咖啡材料，例如用过的咖啡渣滓作为酶的微生物生产的发酵营养物。参见，例如，Regalado等人，J.Sci.Food Agr.，80：9，第1343-1350页(2000)。
[0010]更新近地，已经制备了在水解方法中使用酶、偶联膜通透技术制备的可溶咖啡提取物(参见2005年7月18日提交的欧洲专利申请05106563.9，在此引入作为参考)。将焙炒的咖啡固体精细地湿磨以形成咖啡浆。用有效量的适合的酶来处理咖啡浆以形成反应混合物，然后在约20到约90℃处理来水解焙炒的咖啡固体的咖啡组分以形成可溶咖啡材料。用水提取可溶咖啡材料，然后使用半透膜分离成包含酶和其它不溶性颗粒的滞留物(retentate)，和包含纯化的可溶咖啡提取物的渗透物(permeate)。在这个方法中特别有用的酶包括水解酶，例如甘露聚糖酶、纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、核酸酶和脂肪酶。该方法提供了与热加工相比具有更为平衡的、优越的风味、而没有不希望的热降解化合物的可溶咖啡，同时保持了相当的增溶得率。
[0011]虽然通过显著地降低产品暴露的热输入，酶使得克服可溶咖啡制造领域的许多局限成为可能，但它们在咖啡加工中的结合可能带来一定程度的复杂性。酶蛋白本身是高分子量的，并将通过可溶咖啡加工来除去，但是许多一般的制剂或稳定成分是低分子量的，并将保留在最终产品中。具体地，用于在保存期限保存期间稳定酶活性的成分可能被带入成品中，且可能引起不希望的质量副作用。例如，虽然欧洲专利申请05106563.9中描述的方法使用了膜分离，但但这些制剂成分可能通过膜，并且在可溶咖啡产品中被浓缩。甚至例如麦芽糖糊精这样的起初不溶的制剂试剂也可能被酶加工部分地溶解并出现在咖啡产品中。除去这些制剂试剂也将提高加工的复杂度和成本。
[0012]因而，仍然需要提供生产可溶咖啡的有效的方法，所述可溶咖啡保持了类似于R&G咖啡的浓郁的咖啡风味和香味，所述方法使用酶但没有通常用于稳定这些酶制剂的常规制剂成分。此外，仍然需要提供降低了成本和单位操作的可溶咖啡生产的简单方法。
发明内容
发明概述
[0013]本发明涉及稳定化的酶组合物。更具体地，本发明涉及用咖啡衍生的材料稳定化的酶组合物。本发明的稳定化的酶组合物具有与常规的稳定化制剂相当的活性组分稳定性，但仅含有咖啡衍生的制剂成分。本发明的稳定化的酶组合物可用于任何需要避免含入常规的稳定剂和其它增强稳定性的添加剂的应用中。稳定化的酶组合物在可溶咖啡和其它咖啡产品的酶促生产中特别有用。
[0014]本发明提供了稳定化的酶组合物，其包含酶和有效量的用来稳定酶的咖啡衍生的材料。优选的，该稳定化的酶基本上由酶和有效量的用来稳定该酶的咖啡衍生的材料组成，并且是水溶液或悬浮液、干燥粉末、干燥颗粒，或咖啡衍生的油中的干燥粉末或干燥颗粒的悬浮液的形式。
[0015]本发明还提供了生产可溶咖啡提取物的方法，所述方法包括：
(1)处理咖啡固体来形成含有咖啡固体的咖啡浆；
(2)在一定温度下并以足够水解咖啡固体的时间，用有效量的处于稳定化的酶组合物形式的酶来处理咖啡浆以形成可溶咖啡提取物材料，其中稳定化的酶组合物包括酶和有效量的用来稳定该酶的咖啡衍生的材料；以及
(3)处理可溶咖啡提取物材料来获得可溶咖啡提取物。
[0016]本发明还提供了生产可溶咖啡提取物的方法，所述方法包括：
(1)精细地湿磨焙炒的咖啡固体以形成含有咖啡固体的咖啡浆；
(2)在一定温度下并以足够水解所述咖啡固体的时间，用有效量的处于稳定化的酶组合物形式的酶来处理所述咖啡浆以形成可溶咖啡提取物材料，其中稳定化的酶组合物包括酶和有效量的用来稳定该酶的咖啡衍生的材料；以及
(3)将所述可溶咖啡提取物材料分离为滞留物和渗透物，其中渗透物包含可溶咖啡提取物。
[0017]本发明还提供了生产可溶咖啡提取物的半连续的或连续的方法，所述方法包括：
(1)在容器中用有效量的处于稳定化的酶组合物形式的酶来处理精细地磨制的焙炒的咖啡固体以水解咖啡固体，以形成含有可溶咖啡提取物的可溶咖啡提取物材料，其中稳定化的酶组合物包含酶和有效量的用来稳定化该酶的咖啡衍生的材料；
(2)将可溶咖啡提取物材料循环通过半透膜分离设备来连续地形成滞留物和渗透物，其中渗透物含有可溶咖啡提取物并且被连续地收集，而其中至少一部分滞留物被再循环到容器中。
详细说明
[0018]如已经提到的，本发明涉及用咖啡衍生的材料稳定化的酶组合物。本发明的稳定化的酶组合物可用于任何需要避免含入或使用常规稳定剂和其它增强稳定性的添加剂的应用中。因而，只要在加工期间和在最终产品中咖啡衍生的材料是可以接受的，本发明稳定化的酶组合物就可用于各种食物产品、药物产品、化妆品产品等的生产。这些稳定化的酶组合物避免了常规稳定剂，而仅使用咖啡衍生的材料在保存和/或误用期间仍保持了所需的酶稳定性和活性。
[0019]稳定化的酶组合物在可溶咖啡和其它咖啡产品的生产中特别有用，其中使用的酶不含通常与酶制剂结合的常规稳定剂。因而，本发明的稳定化的酶组合物在酶处理咖啡固体以水解其中的咖啡材料中特别有用。
[0020]本发明也可以用于稳定在不希望有常规稳定剂的食物、药物、化妆品和其它工业中有用的酶制剂。可以使用这种方法来稳定化的、在食物制备中特别有用的酶包括甘露聚糖酶、纤维素酶、葡聚糖酶、半纤维素酶、脂肪酶、酯酶、蛋白酶、糖酶(例如，阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶(galactanase)、阿拉伯半乳聚糖酶(arabino-galactanase))、核酸酶、果胶酶、异构酶、淀粉酶和木质素酶，以及它们的混合物。使用本发明咖啡衍生材料稳定化的酶组合物，可以容易地制备可溶咖啡产品而不使用常规的酶稳定剂。
[0021]对于稳定酶组合物有用的咖啡衍生的材料包括，例如，可溶咖啡、焙炒和磨制咖啡、咖啡油、用过的(即，部分提取的)咖啡渣滓、磨制的生咖啡豆、含水的咖啡提取物、生咖啡豆提取物等等以及它们的混合物；如果需要，可以浓缩提取物或其它咖啡材料。当然，这种咖啡衍生的材料不应包括本发明设法从最终产品中消除的常规稳定剂，或不应当用含有所述常规稳定剂的酶组合物来制备。因而，例如，用来稳定本发明酶组合物的可溶咖啡材料不应当衍生自利用常规稳定化的酶组合物而制备的可溶咖啡。
[0022]本发明的稳定化的酶组合物可以被配制为含水组合物或可以被干燥以形成固体组合物(例如，粉末或附聚的颗粒)。一般地，根据总组合物，这种组合物将含有约1％到约25％的酶以及约10％到约99％的咖啡材料。一般地对于含水制剂，活性酶蛋白构成总制剂的约1％到约25％，且咖啡衍生的材料构成总制剂的约10％到约50％(优选约20％到约40％)。对于干燥的制剂，活性酶蛋白构成总制剂的约1％到约25％，且咖啡衍生的材料构成总制剂的约75％到约99％。对于干燥的形式，咖啡衍生的材料优选在干燥的酶组合物形成期间(例如，通过喷雾干燥、冷冻干燥等等)存在。含水组合物优选保存在冷藏或冷冻条件下，干燥的组合物一般可以保存在环境的、冷藏的或冷冻的条件下。
[0023]对本发明来说，“常规稳定剂”包括抑制产品中微生物生长的常规抗微生物剂和在干燥、保存或误用期间保持酶活性的常规稳定剂。虽然不希望受理论的限制，但看起来在本发明中使用的咖啡衍生的材料起到了这两种作用(即，抑制微生物生长和在保存和/或误用期间保持酶活性)。还是不希望受理论的限制，咖啡衍生的材料又似乎还具有其它功能，例如，酶制剂中的缓冲剂和分散剂。因而，看起来本发明的咖啡衍生的稳定剂提供了保护酶蛋白(或在某些情况下，活性所需的非蛋白实体)免于热极限、干燥、剪切、渗透应力、pH应激、离子梯度、蛋白水解和其它有害影响力的变性或灭活。
[0024]当本发明的稳定化的酶被用于制备可溶咖啡提取物时，未纯化的提取材料包括可溶咖啡提取物、酶和其它不溶性颗粒。当然，由于所述酶组合物是用咖啡衍生的材料稳定的，所以不存在常规的稳定剂，且可以通过常规方法分离酶和其它不溶颗粒来获得基本上没有非咖啡材料的可溶咖啡提取物。所需的咖啡提取物优选地可以通过使反应混合物通过半透膜而与其它组分分离，如在例如2005年7月18日提交的欧洲专利申请05106563.9中描述的。该膜可以是具有一定孔径大小的任何类型的材料，所述孔径大小能够保留酶和其它不溶物而允许水溶性的糖类、咖啡提取物和其它材料的透过。一般地，具有低于约0.8微米的标称孔径大小的膜是适合的。例如，由聚醚砜(polyethersulfone)制成的具有约20,000到约50,000道尔顿的分子量截止值(cut-off)的膜适合于分离可溶咖啡提取物。适合在本发明的方法中使用的优选的聚醚砜膜可以从Sepro，Inc.(Oceanide，CA)获得。当然，可以使用其它的膜构建材料。膜可以被包含在错流膜分离单元或其它可用于膜分离的类似装置的内部，例如螺旋缠绕模块、中空纤维系统、管形束或平板和框架模块。
[0025]通过以下实施例进一步说明了本发明的益处和实施方式，但是其中引用的特定材料和其量、以及其它条件和细节不应被理解为是过度地限制本发明。除非另有说明，所有份、比率和百分比都是根据重量的。所有公开物，包括专利和公开的专利申请都在此引入作为参考。
具体实施方式
[0026]实施例1.使用冷冻的、未配制的甘露聚糖酶(FUM：ChemGenCL160，来自ChemGen Corp.，Gaithersburg，MO)。FUM酶来自迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)发酵；通过离心取出细胞和残渣，随后使用膜超滤进行酶浓缩和纯化；不添加其它材料。解冻的酶在去离子水(样品1)和含有10％
Figure A20071010358500111
Really Rich零售可溶咖啡的去离子水(样品2)中1∶20稀释。将两个溶液的样品浸于沸水浴中30秒，然后立即在冰浴中冷却。对处理的溶液以及样品1的未加热的溶液(即，对照)使用角豆树胶粘度测定来进行甘露聚糖酶活性测定。与对照相比，处理的样品1损失了约33％的初始酶活性，而用咖啡衍生的材料稳定化的样品2仅损失了约2％的初始酶活性(即，在实验限度内基本上不变的活性)。
[0027]实施例2.这个实施例说明了由咖啡衍生的材料稳定化的干燥酶制剂的制备。使用实施例1的冷冻的未配制的甘露聚糖酶(“FUM”)。解冻冷冻FUM的部分，并通过向解冻的FUM样品中添加以下单独成分(20％)来制备五个干燥(固体)制剂：
(1)可溶咖啡(Maxwell)；
(2)山梨糖醇和氯化钠(各10％)；
(3)硅石(40-100目；Fisher Scientific)；
(4)纤维素(NeocelTM粉末；Mingtai Chemical)；和
(5)焙炒和磨制(R&G)咖啡(Maxwell
Figure A20071010358500113
干磨至30目)。
用酶制剂中使用的一般稳定剂配制样品2-4。将每种制剂充分混合，然后立即在VirTis型25ES冷冻干燥器中冷冻干燥。将冷冻干燥的制剂的部分保存在20℃和50℃；以不同的时间间隔取出样品用于酶活性和微生物学测定。
[0028]利用新鲜制备的刺槐豆胶的水溶液(1％；20℃ 2800-3500cP的初始粘度)使用粘度测定来测量酶的活性。在水中1∶10稀释酶制剂，充分混合，然后按需要来进一步稀释。稀释的样品在制备之后立即进行测定。在20℃“零时间”点向含有30ml树胶溶液的管添加25微升适当稀度的给定的酶溶液。酶制剂的适合的稀度(一般约1∶100)可有效在约5-15分钟内将树胶粘度降低到＜500cP。
[0029]每个树胶-酶溶液被混合约30秒，然后在布氏(Brookfield)DVII+粘度计(Spindle 6，在20RPM)上进行分析。使用Brookfield Wingather软件记录粘度对比时间。以到500cP的粘度对时间的曲线线性拟合斜率和/或达到500cP所需的时间来测定相对酶活性。由于斜率反应不是必须与酶稀度成线性，所以优选在相同稀度(一般约1∶100)测量比较样品和参考对照。由于冷冻干燥中涉及的浓缩因素，干燥的样品，假定没有活性损失，应具有最初的FUM样品(即，100)的约2.5倍的每单位重量活性(即，250)。结果在以下表1中示出。
[0030]表1
Figure A20071010358500121
*FUM的相对活性是100。由于浓缩作用，制剂可能具有大于100的活性。
+酶制剂中使用的常规稳定剂。
[0031]保存在20℃的咖啡材料稳定化的样品甚至在几乎3个月的保存后也令人惊讶地具有比其它制剂更高一些的活性。
[0032]在50℃的误用温度保存的制剂比在20℃保存的那些有显著更低的活性。然而，令人惊讶地，与非咖啡材料制剂相比，基于咖啡的制剂保持了更高的活性百分比(即，在20℃保存时保持了超过约60％的活性)。因此，在20℃和50℃的保存温度下，干燥的制剂中咖啡衍生的材料充当了稳定剂。
[0033]通过使用AOAC方法966.23测定微生物总平板计数(TPC)来评估微生物学稳定性。初始冷冻的FUM具有9800计数/gm的TPC。冷冻干燥处理将干燥物质浓度提高了2.5倍。表2显示了在20℃保存3周和9周以及在50℃保存3周的样品中的微生物TPC。
[0034]表2
Figure A20071010358500131
*参考FUM液体具有9800的总平板计数/g。
+酶制剂中使用的常规稳定剂。
所有的干燥样品都显示了TPC的明显降低(与仅由于浓缩因素的提高相反)。用咖啡材料配制的样品与其它制剂材料是相当的。在50℃保存的样品比在20℃保存的那些的计数低得多。在20℃保存9周的干燥样品均测定为低于300TPC/gm。这些干燥样品具有非常低的水活性，从而微生物生长被抑制。所有干燥样品都具有可接受的低微生物TPC。
[0035]实施例3.这个实施例说明了由咖啡衍生的材料稳定化的液体酶制剂的制备。解冻实施例1的冷冻的未配制的甘露聚糖酶，并通过添加以下单独成分(以20％)制备液体制剂：
(1)可溶咖啡(Maxwell
Figure A20071010358500132
)；
(2)山梨糖醇和氯化钠(各20％)；和
(3)对照FUM(无添加剂)。
将水性液体制剂的部分保存在4、20和50℃，并在不同的时间间隔抽取样品用于采用与实施例1中相同的分析技术来进行酶活性和微生物学测定。在表3和4中分别显示酶活性和微生物学结果。
[0036]表3.
Figure A20071010358500133
+酶制剂中使用的常规稳定剂。
[0037]表4
Figure A20071010358500141
+酶制剂中使用的常规稳定剂。
[0038]在不同时间和温度保存的液体样品的酶活性在表3中示出。由于制剂成分的稀释作用，假定添加剂没有作用，配制的液体预计将具有对照(即，未配制的FUM)的活性的约60％。
[0039]对于在4℃保存的样品，甚至在超过7周的保存之后，未配制的FUM也保持了高百分比的对照活性(即，超过97％)。令人惊讶地，在4℃保存超过7周的可溶咖啡制剂具有超过73％的对照活性；这高于假如成分没有作用的预测的60％。保存在4℃的盐/山梨糖醇制剂具有47.6％的对照活性。
[0040]对于在50℃的误用条件下保存8周，未配制的FUM仅维持了11％的对照活性。在50℃可溶咖啡制剂形成了实际上不溶的凝胶，并损失了基本上所有的活性。对于20℃的保存，虽然在未配制的FUM中存在相当大的微生物生长(见下文)，保持了约32％的对照酶活性；但这种材料将由于微生物生长而不能接受。该可溶咖啡制剂仅保持了10％的对照活性，且形成了部分不溶的凝胶。
[0041]根据这个数据，可溶咖啡看起来是在冷藏条件(4℃)下保存的水性液体制剂的有效的酶活性稳定剂。然而，对于室温(20℃)保存或对于更高的误用条件(50℃)，它不是有效的。
[0042]如表4所示，当保存在20℃时，未配制的对照FUM是微生物不稳定的；在3周时间内总平板计数已经显著地提高。然而，在4℃保存的未配制的对照显示了TPC中超过60％的降低，且当在50℃保存时为99％。推测起来这是由于最初存在的部分微生物在保存期间的死亡。相反，当在20℃保存3周时，两种配制的样品都显示了良好的微生物稳定性，可溶咖啡制剂得出了更低一些的TPC。因此，40wt.％的可溶咖啡在20℃保存期间抑制了微生物生长。在20℃的6周保存时，配制的样品显示了TPC中的轻微改变。

Claims (24)

1.一种稳定化的酶组合物，其包含酶和有效量的用来稳定化酶的咖啡衍生的材料。
2.权利要求1的组合物，其中所述酶是水解酶。
3.权利要求2的组合物，其中所述的水解酶选自甘露聚糖酶、纤维素酶、葡聚糖酶、半纤维素酶、脂肪酶、酯酶、蛋白酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、阿拉伯半乳聚糖酶、核酸酶、果胶酶、异构酶、淀粉酶、木质素酶和它们的混合物。
4.权利要求1的组合物，其中所述咖啡衍生的材料选自可溶咖啡、焙炒和磨制咖啡、咖啡油、用过的咖啡渣滓、磨制的生咖啡豆、含水咖啡提取物、生咖啡豆提取物和它们的混合物。
5.权利要求3的组合物，其中所述咖啡衍生的材料选自可溶咖啡、焙炒和磨制咖啡、咖啡油、用过的咖啡渣滓、磨制的生咖啡豆、含水咖啡提取物、生咖啡豆提取物和它们的混合物。
6.权利要求1的组合物，其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约10％到约99％的咖啡衍生的材料。
7.权利要求4的组合物，其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约10％到约99％的咖啡衍生的材料。
8.权利要求5的组合物，其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约10％到约99％的咖啡衍生的材料。
9.权利要求1的组合物，其中所述组合物是含水的组合物的形式，且其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约10％到约50％的咖啡衍生的材料。
10.权利要求1的组合物，其中所述组合物是干燥的形式，且其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约75％到约99％的咖啡衍生的材料。
11.一种生产可溶咖啡提取物的方法，所述方法包括：
(1)处理焙炒的咖啡固体来形成含有咖啡固体的咖啡浆；
(2)在一定温度下并以足够水解咖啡固体的时间，用有效量的处于稳定化的酶组合物形式的酶来处理所述咖啡浆以形成可溶咖啡提取物材料，其中所述稳定化的酶组合物包括酶和有效量的用来稳定酶的咖啡衍生的材料；和
(3)处理所述可溶咖啡提取物材料来获得可溶咖啡提取物。
12.权利要求11的方法，其中所述步骤(1)中的咖啡浆通过湿磨焙炒的咖啡固体来形成，且其中在步骤(3)中的可溶咖啡提取物是通过将所述可溶咖啡提取物材料分离为滞留物和渗透物来获得的，其中所述渗透物包含可溶咖啡提取物。
13.权利要求11的方法，其中所述酶选自甘露聚糖酶、纤维素酶、葡聚糖酶、半纤维素酶、脂肪酶、酯酶、蛋白酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、阿拉伯半乳聚糖酶、核酸酶、果胶酶、异构酶、淀粉酶、木质素酶和它们的混合物；且其中所述咖啡衍生的材料选自可溶咖啡、焙炒和磨制咖啡、咖啡油、用过的咖啡渣滓、磨制生咖啡豆、含水咖啡提取物、生咖啡豆提取物和它们的混合物。
14.权利要求12的方法，其中所述酶选自甘露聚糖酶、纤维素酶、葡聚糖酶、半纤维素酶、脂肪酶、酯酶、蛋白酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、阿拉伯半乳聚糖酶、核酸酶、果胶酶、异构酶、淀粉酶、木质素酶和它们的混合物；且其中所述咖啡衍生的材料选自可溶咖啡、焙炒和磨制咖啡、咖啡油、用过的咖啡渣滓、磨制生咖啡豆、含水咖啡提取物、生咖啡豆提取物和它们的混合物。
15.权利要求13的方法，其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约10％到约99％的咖啡衍生的材料。
16.权利要求14的方法，其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约10％到约99％的咖啡衍生的材料。
17.权利要求12的方法，其中将所述可溶咖啡提取物材料分离成滞留物和渗透物是通过使用具有约20,000到约50,000道尔顿的分子量截止值的半透膜来进行的。
18.权利要求14的方法，其中将所述可溶咖啡提取物材料分离成滞留物和渗透物是通过使用具有约20,000到约50,000道尔顿的分子量截止值的半透膜来进行的。
19.一种生产可溶咖啡提取物的半连续的或连续的方法，所述方法包括：
(1)用有效量的处于稳定化的酶组合物形式的酶来处理精细地磨制的咖啡固体以水解所述咖啡固体，以形成含有可溶咖啡提取物的可溶咖啡提取物材料，其中所述稳定化的酶组合物包含酶和有效量的用来稳定酶的咖啡衍生的材料：
(2)将所述可溶咖啡提取物材料循环通过半透膜分离设备来连续地形成滞留物和渗透物，其中所述渗透物含有可溶咖啡提取物并且被连续地收集，和其中至少部分滞留物被再循环到所述容器中。
20.权利要求19的方法，其中所述酶选自甘露聚糖酶、纤维素酶、葡聚糖酶、半纤维素酶、脂肪酶、酯酶、蛋白酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、阿拉伯半乳聚糖酶、核酸酶、果胶酶、异构酶、淀粉酶、木质素酶和它们的混合物；和其中所述咖啡衍生的材料选自可溶咖啡、焙炒和磨制咖啡、咖啡油、用过的咖啡渣滓、磨制生咖啡豆、含水咖啡提取物、生咖啡豆提取物和它们的混合物。
21.权利要求19的方法，其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约10％到约99％的咖啡衍生的材料。
22.权利要求20的方法，其中所述组合物含有约1％到约25％的酶和约10％到约99％的咖啡衍生的材料。
23.权利要求21的方法，其中所述半透膜具有约20,000到约50,000道尔顿的分子量截止值。
24.权利要求22的方法，其中所述半透膜具有约20,000到约50,000道尔顿的分子量截止值。
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