CN101195817A - 一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种培养基及其用途,更具体地说涉及一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途。属于生物制品领域。本发明的一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途,其中,包括基本培养基,还包括:核苷酸和激素。此杂交瘤细胞无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,杂交瘤细胞不需要适应过程。
Description
技术领域
发明涉及一种培养基及其用途,更具体地说涉及一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途。属于生物制品领域。
背景技术
细胞培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要。目前培养杂交瘤细胞的培养基的缺点是:目前,动物血清作为哺乳动物细胞培养基的关键成分被广泛应用,以牛血清为主。但是动物血清缺点是:价格昂贵,成分不明确,产品批间差异大,含有细胞生长抑制成分,且更为严重的是可能含有细菌、病毒等,导致潜在生物性污染。
发明内容
【要解决的问题】
本发明的目的,是提供一种杂交瘤细胞(HYBRIDOMA细胞)扩增培养基及其用途。
【技术方案】
一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途,其中,包括基本培养基,还包括:核苷酸和激素。
上述的基本培养基包括:氨基酸、维生素、无机盐、其他营养物质。
上述的基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 5-35
L-精氨酸盐酸盐 50-450
一水L-门冬酰胺 3.5-25
L-天冬氨酸 13-45
L-胱氨酸盐酸盐 5.3-45
一水L-半胱氨酸盐酸盐 3.2-25
L-谷氨酸 25-120
L-谷氨酰胺 68-500
谷氨酸 12-65
一水L-组氨酸盐酸盐 8-65
L-羟脯氨酸 2.5-8.0
L-异亮氨酸 12-50
L-亮氨酸 15-85
L-赖氨酸盐酸盐 30-150
L-甲硫氨酸 5-35
L-苯丙氨酸 5-45
L-脯氨酸 25-89
L-丝氨酸 10-45
L-苏氨酸 10-45
L-色氨酸 3.5-15
L-酪氨酸 12-65
L-缬氨酸 5-36
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.01-0.65
D-生物素 0.001-0.08
维生素D2 0.01-0.5
氯化胆碱 3.6-16
叶酸 0.1-3.5
肌醇 12-35
烟酰胺 0.01-0.5
烟酸 0.001-0.25
P-对氨基苯甲酸 0.007-0.6
D-泛酸钙 0.06-0.98
盐酸吡哆醛 0.01-0.6 5
盐酸吡哆辛 0.01-0.75
维生素A 0.01-0.65
核黄素 0.005-0.5
维生素E 0.001-0.03
维生素B1盐酸盐 0.05-1.2
维生素B12 0.2-2.6
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.0000001-0.002
氯化钙 50-200
五水硫酸铜 0.00001-0.02
硝酸铁 0.002-3
七水硫酸铁 0.05-4
氯化镁 10-80
硫酸镁 20-150
硫酸锰 0.00001-0.05
氯化钾 150-600
碳酸氢钠 2000-8000
氯化钠 4000-10000
磷酸氢二钠 50-150
七水硫酸锌 0.02-5
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 3.5-12.3
三磷酸腺苷 0.12-1.6
胆固醇 0.05-0.4
2-脱氧-D-核糖 0.06-0.78
D-核糖 0.06-0.78
D-葡萄糖 1500-5600
谷胱甘肽(还原型) 0.01-0.065
鸟嘌呤盐酸盐 0.052-0.65
羟脯氨酸钠 0.65-4.5
亚油酸 0.009-0.3
消旋硫辛酸 0.05-0.65
酚红 4.5-25
腐胺 0.65-3.6
丙酮酸钠 50-350
乙醇胺 0.008-0.25
半乳糖 0.002-0.6
2巯基乙醇 0.008-0.35
胸腺嘧啶 0.06-0.8
上述的基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 19.662
L-精氨酸盐酸盐 162.98
一水L-门冬酰胺 8.7
L-天冬氨酸 24.94
L-胱氨酸盐酸盐 20.358
一水L-半胱氨酸盐酸盐 15.08
L-谷氨酸 52.026
L-谷氨酰胺 232
谷氨酸 33.35
一水L-组氨酸盐酸盐 24.94
L-羟脯氨酸 5.8
L-异亮氨酸 25.52
L-亮氨酸 42.34
L-赖氨酸盐酸盐 61.77
L-甲硫氨酸 11.31
L-苯丙氨酸 17.4
L-脯氨酸 43.21
L-丝氨酸 20.59
L-苏氨酸 24.36
L-色氨酸 6.96
L-酪氨酸 38.164
L-缬氨酸 21.286
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.061828
D-生物素 0.00986
维生素D2 0.058
氯化胆碱 8.41
叶酸 0.7598
肌醇 20.909
烟酰胺 0.0377
烟酸 0.0145
P-对氨基苯甲酸 0.029
D-泛酸钙 0.2958
盐酸吡哆醛 0.0435
盐酸吡哆辛 0.0493
维生素A 0.0812
核黄素 0.029
维生素E 0.0058
维生素B1盐酸盐 0.1798
维生素B12 0.812
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.0013572
氯化钙 135.256
五水硫酸铜 0.00145
硝酸铁 0.4176
七水硫酸铁 0.4814
氯化镁 33.1876
硫酸镁 56.84
硫酸锰 0.00017516
氯化钾 361.688
碳酸氢钠 4278.08
氯化钠 6200
磷酸氢二钠 82.36
七水硫酸锌 0.4988
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 5.8
三磷酸腺苷 0.58
胆固醇 0.116
2-脱氧-D-核糖 0.29
D-核糖 0.29
D-葡萄糖 3480
谷胱甘肽(还原型) 0.029
鸟嘌呤盐酸盐 0.174
羟脯氨酸钠 2.9986
亚油酸 0.0464
消旋硫辛酸 0.1218
酚红 12.296
腐胺 1.96098
丙酮酸钠 191.4
乙醇胺 0.0232
半乳糖 0.06
2巯基乙醇 0.0232
胸腺嘧啶 0.174
上述的核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 2.5-8.5
尿嘧啶 2.5-8.5
胞苷 2.5-8.5
鸟嘌呤 2.5-8.6
胰岛素 3.5-8.9
地塞米松 0.07-0.75
氢化可的松 0.006-0.5
前列腺素E1 0.007-0.21
三碘甲状腺原氨酸 0.000006-0.0001
上述的核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 4.06
尿嘧啶 4.06
胞苷 4.06
鸟嘌呤 4.06
胰岛素 5.8
地塞米松 0.232
氢化可的松 0.01856
前列腺素E1 0.029
三碘甲状腺原氨酸 0.00003828
上述的培养基在培养杂交瘤细胞培养过程中的用途。
上述的杂交瘤细胞扩增无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,杂交瘤细胞不需要适应过程;上述的培养基使用条件为:温度37℃,CO2浓度5%,相对湿度>95%;优选的培养基使用条件为:温度37℃,CO2浓度5%,相对湿度>98%。
本发明产品的优点是:本发明的杂交瘤细胞无血清培养基,不含任何动物血清,以氨基酸,维生素,无机盐,糖类,脂肪酸和核苷酸和激素组成。
本发明组分均可人工合成,均为结构明确的化学物质,使本培养基产品具有极高的一致性和稳定性。转铁蛋白和胰岛素,无论动物源性提取纯化来源或经重组蛋白技术人工合成获得,都价格昂贵,用以上组分替代后,培养基成本显著降低。另外,因本培养基不含蛋白质组分,使得应用本培养基培养的CHO细胞进行重组蛋白生产时,其下游纯化工作极大简化,节约成本,利于提高重组蛋白的纯度。
此杂交瘤细胞无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,杂交瘤细胞不需要适应过程。
附图说明
图1为无血清培养基杂交瘤细胞扩增培养基实施例1的培养曲线;
图2为无血清培养基杂交瘤细胞扩增培养基实施例2的培养曲线。
具体实施方式
实施例1
培养基由基本培养基、核苷和激素组成,其中,基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 35
L-精氨酸盐酸盐 450
一水L-门冬酰胺 25
L-天冬氨酸 45
L-胱氨酸盐酸盐 45
一水L-半胱氨酸盐酸盐 25
L-谷氨酸 120
L-谷氨酰胺 500
谷氨酸 65
一水L-组氨酸盐酸盐 65
L-羟脯氨酸 8.0
L-异亮氨酸 50
L-亮氨酸 85
L-赖氨酸盐酸盐 150
L-甲硫氨酸 35
L-苯丙氨酸 45
L-脯氨酸 89
L-丝氨酸 45
L-苏氨酸 45
L-色氨酸 15
L-酪氨酸 65
L-缬氨酸 36
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.65
D-生物素 0.08
维生素D2 0.5
氯化胆碱 16
叶酸 3.5
肌醇 35
烟酰胺 0.5
烟酸 0.25
P-对氨基苯甲酸 0.6
D-泛酸钙 0.98
盐酸吡哆醛 0.65
盐酸吡哆辛 0.75
维生素A 0.65
核黄素 0.5
维生素E 0.03
维生素B1盐酸盐 1.2
维生素B12 2.6
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.002
氯化钙 200
五水硫酸铜 0.02
硝酸铁 3
七水硫酸铁 4
氯化镁 80
硫酸镁 150
硫酸锰 0.05
氯化钾 600
碳酸氢钠 8000
氯化钠 10000
磷酸氢二钠 150
七水硫酸锌 5
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 12.3
三磷酸腺苷 1.6
胆固醇 0.4
2-脱氧-D-核糖 0.78
D-核糖 0.78
D-葡萄糖 5600
谷胱甘肽(还原型) 0.065
鸟嘌呤盐酸盐 0.65
羟脯氨酸钠 4.5
亚油酸 0.3
消旋硫辛酸 0.65
酚红 25
腐胺 3.6
丙酮酸钠 350
乙醇胺 0.25
半乳糖 0.6
2巯基乙醇 0.35
胸腺嘧啶 0.8。
核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 8.5
尿嘧啶 8.5
胞苷 8.5
鸟嘌呤 8.6
胰岛素 8.9
地塞米松 0.75
氢化可的松 0.5
前列腺素E1 0.21
三碘甲状腺原氨酸 0.0001。
实施例2
培养基由基本培养基、核苷和激素组成,其中,基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 5
L-精氨酸盐酸盐 50
一水L-门冬酰胺 3.5
L-天冬氨酸 13
L-胱氨酸盐酸盐 5.3
一水L-半胱氨酸盐酸盐 3.2
L-谷氨酸 25
L-谷氨酰胺 68
谷氨酸 12
一水L-组氨酸盐酸盐 8
L-羟脯氨酸 2.5
L-异亮氨酸 12
L-亮氨酸 15
L-赖氨酸盐酸盐 30
L-甲硫氨酸 5
L-苯丙氨酸 5
L-脯氨酸 25
L-丝氨酸 10
L-苏氨酸 10
L-色氨酸 3.5
L-酪氨酸 12
L-缬氨酸 5
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.01
D-生物素 0.001
维生素D2 0.01
氯化胆碱 3.6
叶酸 0.1
肌醇 12
烟酰胺 0.01
烟酸 0.001
P-对氨基苯甲酸 0.007
D-泛酸钙 0.06
盐酸吡哆醛 0.01
盐酸吡哆辛 0.01
维生素A 0.01
核黄素 0.005
维生素E 0.001
维生素B1盐酸盐 0.05
维生素B12 0.2
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.0000001
氯化钙 50
五水硫酸铜 0.00001
硝酸铁 0.002
七水硫酸铁 0.05
氯化镁 10
硫酸镁 20
硫酸锰 0.00001
氯化钾 150
碳酸氢钠 2000
氯化钠 4000
磷酸氢二钠 50
七水硫酸锌 0.02
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 3.5
三磷酸腺苷 0.12
胆固醇 0.05
2-脱氧-D-核糖 0.06
D-核糖 0.06
D-葡萄糖 1500
谷胱甘肽(还原型) 0.01
鸟嘌呤盐酸盐 0.052
羟脯氨酸钠 0.65
亚油酸 0.009
消旋硫辛酸 0.05
酚红 4.5
腐胺 0.65
丙酮酸钠 50
乙醇胺 0.008
半乳糖 0.002
2巯基乙醇 0.008
胸腺嘧啶 0.06。
核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 2.5
尿嘧啶 2.5
胞苷 2.5
鸟嘌呤 2.5
胰岛素 3.5
地塞米松 0.07
氢化可的松 0.006
前列腺素E1 0.007
三碘甲状腺原氨酸 0.000006。
实施例3
培养基由基本培养基、核苷和激素组成,其中,基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 19.662
L-精氨酸盐酸盐 162.98
一水L-门冬酰胺 8.7
L-天冬氨酸 24.94
L-胱氨酸盐酸盐 20.358
一水L-半胱氨酸盐酸盐 15.08
L-谷氨酸 52.026
L-谷氨酰胺 232
谷氨酸 33.35
一水L-组氨酸盐酸盐 24.94
L-羟脯氨酸 5.8
L-异亮氨酸 25.52
L-亮氨酸 42.34
L-赖氨酸盐酸盐 61.77
L-甲硫氨酸 11.31
L-苯丙氨酸 17.4
L-脯氨酸 43.21
L-丝氨酸 20.59
L-苏氨酸 24.36
L-色氨酸 6.96
L-酪氨酸 38.164
L-缬氨酸 21.286
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.061828
D-生物素 0.00986
维生素D2 0.058
氯化胆碱 8.41
叶酸 0.7598
肌醇 20.909
烟酰胺 0.0377
烟酸 0.0145
P-对氨基苯甲酸 0.029
D-泛酸钙 0.2958
盐酸吡哆醛 0.0435
盐酸吡哆辛 0.0493
维生素A 0.0812
核黄素 0.029
维生素E 0.0058
维生素B1盐酸盐 0.1798
维生素B12 0.812
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.0013572
氯化钙 135.256
五水硫酸铜 0.00145
硝酸铁 0.4176
七水硫酸铁 0.4814
氯化镁 33.1876
硫酸镁 56.84
硫酸锰 0.00017516
氯化钾 361.688
碳酸氢钠 4278.08
氯化钠 6200
磷酸氢二钠 82.36
七水硫酸锌 0.4988
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 5.8
三磷酸腺苷 0.58
胆固醇 0.116
2-脱氧-D-核糖 0.29
D-核糖 0.29
D-葡萄糖 3480
谷胱甘肽(还原型) 0.029
鸟嘌呤盐酸盐 0.174
羟脯氨酸钠 2.9986
亚油酸 0.0464
消旋硫辛酸 0.1218
酚红 12.296
腐胺 1.96098
丙酮酸钠 191.4
乙醇胺 0.0232
半乳糖 0.06
2巯基乙醇 0.0232
胸腺嘧啶 0.174。
核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 4.06
尿嘧啶 4.06
胞苷 4.06
鸟嘌呤 4.06
胰岛素 5.8
地塞米松 0.232
氢化可的松 0.01856
前列腺素E1 0.029
三碘甲状腺原氨酸 0.00003828。
实施例4
培养基由基本培养基、核苷和激素组成,其中,基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 5
L-精氨酸盐酸盐 450
一水L-门冬酰胺 3.5
L-天冬氨酸 45
L-胱氨酸盐酸盐 5.3
一水L-半胱氨酸盐酸盐 25
L-谷氨酸 25
L-谷氨酰胺 500
谷氨酸 12
一水L-组氨酸盐酸盐 8
L-羟脯氨酸 8.0
L-异亮氨酸 12
L-亮氨酸 15
L-赖氨酸盐酸盐 150
L-甲硫氨酸 35
L-苯丙氨酸 5
L-脯氨酸 89
L-丝氨酸 10
L-苏氨酸 10
L-色氨酸 15
L-酪氨酸 12
L-缬氨酸 36
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.01
D-生物素 0.08
维生素D2 0.01
氯化胆碱 3.6
叶酸 0.1
肌醇 35
烟酰胺 0.01
烟酸 0.001
P-对氨基苯甲酸 0.6
D-泛酸钙 0.98
盐酸吡哆醛 0.01
盐酸吡哆辛 0.75
维生素A 0.01
核黄素 0.5
维生素E 0.001
维生素B1盐酸盐 1.2
维生素B12 2.6
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.0000001
氯化钙 200
五水硫酸铜 0.00001
硝酸铁 0.002
七水硫酸铁 4
氯化镁 10
硫酸镁 20
硫酸锰 0.05
氯化钾 600
碳酸氢钠 2000
氯化钠 10000
磷酸氢二钠 50
七水硫酸锌 0.02
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 12.3
三磷酸腺苷 0.12
胆固醇 0.4
2-脱氧-D-核糖 0.06
D-核糖 0.78
D-葡萄糖 5600
谷胱甘肽(还原型) 0.01
鸟嘌呤盐酸盐 0.65
羟脯氨酸钠 0.65
亚油酸 0.3
消旋硫辛酸 0.05
酚红 25
腐胺 0.65
丙酮酸钠 350
乙醇胺 0.008
半乳糖 0.6
2巯基乙醇 0.008
胸腺嘧啶 0.8。
核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 2.5
尿嘧啶 8.5
胞苷 2.5
鸟嘌呤 8.6
胰岛素 3.5
地塞米松 0.75
氢化可的松 0.5
前列腺素E1 0.007
三碘甲状腺原氨酸 0.000006。
实施例5
培养基由基本培养基、核苷和激素组成,其中,基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 5
L-精氨酸盐酸盐 50
一水L-门冬酰胺 25
L-天冬氨酸 45
L-胱氨酸盐酸盐 5.3
一水L-半胱氨酸盐酸盐 25
L-谷氨酸 25
L-谷氨酰胺 68
谷氨酸 65
一水L-组氨酸盐酸盐 65
L-羟脯氨酸 8.0
L-异亮氨酸 12
L-亮氨酸 15
L-赖氨酸盐酸盐 30
L-甲硫氨酸 35
L-苯丙氨酸 5
L-脯氨酸 89
L-丝氨酸 45
L-苏氨酸 10
L-色氨酸 3.5
L-酪氨酸 65
L-缬氨酸 5
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.01
D-生物素 0.001
维生素D2 0.5
氯化胆碱 16
叶酸 0.1
肌醇 12
烟酰胺 0.01
烟酸 0.001
P-对氨基苯甲酸 0.6
D-泛酸钙 0.06
盐酸吡哆醛 0.65
盐酸吡哆辛 0.01
维生素A 0.65
核黄素 0.005
维生素E 0.03
维生素B1盐酸盐 0.05
维生素B12 0.2
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.0000001
氯化钙 50
五水硫酸铜 0.02
硝酸铁 3
七水硫酸铁 4
氯化镁 10
硫酸镁 20
硫酸锰 0.04
氯化钾 150
碳酸氢钠 6000
氯化钠 10000
磷酸氢二钠 50
七水硫酸锌 0.02
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 3.5
三磷酸腺苷 1.6
胆固醇 0.4
2-脱氧-D-核糖 0.78
D-核糖 0.06
D-葡萄糖 5600
谷胱甘肽(还原型) 0.01
鸟嘌呤盐酸盐 0.65
羟脯氨酸钠 4.5
亚油酸 0.3
消旋硫辛酸 0.09
酚红 25
腐胺 0.65
丙酮酸钠 350
乙醇胺 0.008
半乳糖 0.002
2巯基乙醇 0.35
胸腺嘧啶 0.06。
核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 8.5
尿嘧啶 2.5
胞苷 8.5
鸟嘌呤 2.5
胰岛素 8.9
地塞米松 0.07
氢化可的松 0.006
前列腺素E1 0.21
三碘甲状腺原氨酸 0.0001。
Claims (10)
1.一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途,其特征在于:包括基本培养基,还包括:核苷酸和激素。
2.如权利要求1所述的培养基,其特征在于:其中所述的基本培养基包括:氨基酸、维生素、无机盐、其他营养物质。
3.如权利要求2所述的培养基,其特征在于:其中所述的基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 5-35
L-精氨酸盐酸盐 50-450
一水L-门冬酰胺 3.5-25
L-天冬氨酸 13-45
L-胱氨酸盐酸盐 5.3-45
一水L-半胱氨酸盐酸盐 3.2-25
L-谷氨酸 25-120
L-谷氨酰胺 68-500
谷氨酸 12-65
一水L-组氨酸盐酸盐 8-65
L-羟脯氨酸 2.5-8.0
L-异亮氨酸 12-50
L-亮氨酸 15-85
L-赖氨酸盐酸盐 30-150
L-甲硫氨酸 5-35
L-苯丙氨酸 5-45
L-脯氨酸 25-89
L-丝氨酸 10-45
L-苏氨酸 10-45
L-色氨酸 3.5-15
L-酪氨酸 12-65
L-缬氨酸 5-36
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.01-0.65
D-生物素 0.001-0.08
维生素D2 0.01-0.5
氯化胆碱 3.6-16
叶酸 0.1-3.5
肌醇 12-35
烟酰胺 0.01-0.5
烟酸 0.001-0.25
P-对氨基苯甲酸 0.007-0.6
D-泛酸钙 0.06-0.98
盐酸吡哆醛 0.01-0.65
盐酸吡哆辛 0.01-0.75
维生素A 0.01-0.65
核黄素 0.005-0.5
维生素E 0.001-0.03
维生素B1盐酸盐 0.05-1.2
维生素B12 0.2-2.6
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.0000001-0.002
氯化钙 50-200
五水硫酸铜 0.00001-0.02
硝酸铁 0.002-3
七水硫酸铁 0.05-4
氯化镁 10-80
硫酸镁 20-150
硫酸锰 0.00001-0.05
氯化钾 150-600
碳酸氢钠 2000-8000
氯化钠 4000-10000
磷酸氢二钠 50-150
七水硫酸锌 0.02-5
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 3.5-12.3
三磷酸腺苷 0.12-1.6
胆固醇 0.05-0.4
2-脱氧-D-核糖 0.06-0.78
D-核糖 0.06-0.78
D-葡萄糖 1500-5600
谷胱甘肽(还原型) 0.01-0.065
鸟嘌呤盐酸盐 0.052-0.65
羟脯氨酸钠 0.65-4.5
亚油酸 0.009-0.3
消旋硫辛酸 0.05-0.65
酚红 4.5-25
腐胺 0.65-3.6
丙酮酸钠 50-350
乙醇胺 0.008-0.25
半乳糖 0.002-0.6
2巯基乙醇 0.008-0.35
胸腺嘧啶 0.06-0.8。
4.如权利要求3所述的培养基,其特征在于:其中所述的基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
L-丙氨酸 19.662
L-精氨酸盐酸盐 162.98
一水L-门冬酰胺 8.7
L-天冬氨酸 24.94
L-胱氨酸盐酸盐 20.358
一水L-半胱氨酸盐酸盐 15.08
L-谷氨酸 52.026
L-谷氨酰胺 232
谷氨酸 33.35
一水L-组氨酸盐酸盐 24.94
L-羟脯氨酸 5.8
L-异亮氨酸 25.52
L-亮氨酸 42.34
L-赖氨酸盐酸盐 61.77
L-甲硫氨酸 11.31
L-苯丙氨酸 17.4
L-脯氨酸 43.21
L-丝氨酸 20.59
L-苏氨酸 24.36
L-色氨酸 6.96
L-酪氨酸 38.164
L-缬氨酸 21.286
维生素的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
抗坏血酸钠 0.061828
D-生物素 0.00986
维生素D2 0.058
氯化胆碱 8.41
叶酸 0.7598
肌醇 20.909
烟酰胺 0.0377
烟酸 0.0145
P-对氨基苯甲酸 0.029
D-泛酸钙 0.2958
盐酸吡哆醛 0.0435
盐酸吡哆辛 0.0493
维生素A 0.0812
核黄素 0.029
维生素E 0.0058
维生素B1盐酸盐 0.1798
维生素B12 0.812
无机盐的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
偏钒酸铵 0.0013572
氯化钙 135.256
五水硫酸铜 0.00145
硝酸铁 0.4176
七水硫酸铁 0.4814
氯化镁 33.1876
硫酸镁 56.84
硫酸锰 0.00017516
氯化钾 361.688
碳酸氢钠 4278.08
氯化钠 6200
磷酸氢二钠 82.36
七水硫酸锌 0.4988
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐 5.8
三磷酸腺苷 0.58
胆固醇 0.116
2-脱氧-D-核糖 0.29
D-核糖 0.29
D-葡萄糖 3480
谷胱甘肽(还原型) 0.029
鸟嘌呤盐酸盐 0.174
羟脯氨酸钠 2.9986
亚油酸 0.0464
消旋硫辛酸 0.1218
酚红 12.296
腐胺 1.96098
丙酮酸钠 191.4
乙醇胺 0.0232
半乳糖 0.06
2巯基乙醇 0.0232
胸腺嘧啶 0.174。
5.如权利要求1所述的培养基,其特征在于:所述的核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 2.5-8.5
尿嘧啶 2.5-8.5
胞苷 2.5-8.5
鸟嘌呤 2.5-8.6
胰岛素 3.5-8.9
地塞米松 0.07-0.75
氢化可的松 0.006-0.5
前列腺素E1 0.007-0.21
三碘甲状腺原氨酸 0.000006-0.0001。
6.如权利要求5所述的培养基,其特征在于:所述的核苷和激素包括的组份及含量为:
成份 Mg/L
腺苷 4.06
尿嘧啶 4.06
胞苷 4.06
鸟嘌呤 4.06
胰岛素 5.8
地塞米松 0.232
氢化可的松 0.01856
前列腺素E1 0.029
三碘甲状腺原氨酸 0.00003828。
7.如权利要求1-6中任意一项所述的培养基在培养杂交瘤细胞中的用途。
8.如权利要求7所述的用途,其特征在于:所述的杂交瘤细胞扩增无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,杂交瘤细胞不需要适应过程。
9.如权利要求8所述的用途,其特征在于:所述的培养基使用条件为:温度37℃,CO2浓度5%,相对湿度>95%。
10.如权利要求8所述的用途,其特征在于:所述的培养基使用条件为:温度37℃,CO2浓度5%,相对湿度>98%。
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