CN101195817A - 一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途 - Google Patents

一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途 Download PDF

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CN101195817A CNA2007103070627A CN200710307062A CN101195817A CN 101195817 A CN101195817 A CN 101195817A CN A2007103070627 A CNA2007103070627 A CN A2007103070627A CN 200710307062 A CN200710307062 A CN 200710307062A CN 101195817 A CN101195817 A CN 101195817A
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sodium
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黄宗堂
唐贺文
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TIANJIN BAINUOKE MEDICINE BIOTECHNOLOGY CO Ltd
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TIANJIN BAINUOKE MEDICINE BIOTECHNOLOGY CO Ltd
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Abstract

本发明涉及一种培养基及其用途，更具体地说涉及一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途。属于生物制品领域。本发明的一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途，其中，包括基本培养基，还包括：核苷酸和激素。此杂交瘤细胞无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，杂交瘤细胞不需要适应过程。

Description

一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途
技术领域
发明涉及一种培养基及其用途，更具体地说涉及一种杂交瘤细胞扩增培养基及其用途。属于生物制品领域。
背景技术
细胞培养基是生物制品领域中常用的物质，在细菌和细胞培养中十分必要。目前培养杂交瘤细胞的培养基的缺点是：目前，动物血清作为哺乳动物细胞培养基的关键成分被广泛应用，以牛血清为主。但是动物血清缺点是：价格昂贵，成分不明确，产品批间差异大，含有细胞生长抑制成分，且更为严重的是可能含有细菌、病毒等，导致潜在生物性污染。
发明内容
【要解决的问题】
本发明的目的，是提供一种杂交瘤细胞(HYBRIDOMA细胞)扩增培养基及其用途。
【技术方案】
一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途，其中，包括基本培养基，还包括：核苷酸和激素。
上述的基本培养基包括：氨基酸、维生素、无机盐、其他营养物质。
上述的基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                 Mg/L
L-丙氨酸             5-35
L-精氨酸盐酸盐       50-450
一水L-门冬酰胺          3.5-25
L-天冬氨酸              13-45
L-胱氨酸盐酸盐          5.3-45
一水L-半胱氨酸盐酸盐    3.2-25
L-谷氨酸                25-120
L-谷氨酰胺              68-500
谷氨酸                  12-65
一水L-组氨酸盐酸盐      8-65
L-羟脯氨酸              2.5-8.0
L-异亮氨酸              12-50
L-亮氨酸                15-85
L-赖氨酸盐酸盐          30-150
L-甲硫氨酸              5-35
L-苯丙氨酸              5-45
L-脯氨酸                25-89
L-丝氨酸                10-45
L-苏氨酸                10-45
L-色氨酸                3.5-15
L-酪氨酸                12-65
L-缬氨酸                5-36
维生素的组成及重量份如下：
成份                    Mg/L
抗坏血酸钠              0.01-0.65
D-生物素                0.001-0.08
维生素D2                0.01-0.5
氯化胆碱                3.6-16
叶酸                  0.1-3.5
肌醇                  12-35
烟酰胺                0.01-0.5
烟酸                  0.001-0.25
P-对氨基苯甲酸        0.007-0.6
D-泛酸钙              0.06-0.98
盐酸吡哆醛            0.01-0.6 5
盐酸吡哆辛            0.01-0.75
维生素A               0.01-0.65
核黄素                0.005-0.5
维生素E               0.001-0.03
维生素B1盐酸盐        0.05-1.2
维生素B12             0.2-2.6
无机盐的组成及重量份如下：
成份                  Mg/L
偏钒酸铵              0.0000001-0.002
氯化钙                50-200
五水硫酸铜            0.00001-0.02
硝酸铁                0.002-3
七水硫酸铁            0.05-4
氯化镁                10-80
硫酸镁                20-150
硫酸锰                0.00001-0.05
氯化钾                150-600
碳酸氢钠              2000-8000
氯化钠                4000-10000
磷酸氢二钠             50-150
七水硫酸锌             0.02-5
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份                   Mg/L
腺嘌呤硫酸盐           3.5-12.3
三磷酸腺苷             0.12-1.6
胆固醇                 0.05-0.4
2-脱氧-D-核糖          0.06-0.78
D-核糖                 0.06-0.78
D-葡萄糖               1500-5600
谷胱甘肽(还原型)       0.01-0.065
鸟嘌呤盐酸盐           0.052-0.65
羟脯氨酸钠             0.65-4.5
亚油酸                 0.009-0.3
消旋硫辛酸             0.05-0.65
酚红                   4.5-25
腐胺                   0.65-3.6
丙酮酸钠               50-350
乙醇胺                 0.008-0.25
半乳糖                 0.002-0.6
2巯基乙醇              0.008-0.35
胸腺嘧啶               0.06-0.8
上述的基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                    Mg/L
L-丙氨酸                19.662
L-精氨酸盐酸盐          162.98
一水L-门冬酰胺          8.7
L-天冬氨酸              24.94
L-胱氨酸盐酸盐          20.358
一水L-半胱氨酸盐酸盐    15.08
L-谷氨酸                52.026
L-谷氨酰胺              232
谷氨酸                  33.35
一水L-组氨酸盐酸盐      24.94
L-羟脯氨酸              5.8
L-异亮氨酸              25.52
L-亮氨酸                42.34
L-赖氨酸盐酸盐          61.77
L-甲硫氨酸              11.31
L-苯丙氨酸              17.4
L-脯氨酸                43.21
L-丝氨酸                20.59
L-苏氨酸                24.36
L-色氨酸                6.96
L-酪氨酸                38.164
L-缬氨酸                21.286
维生素的组成及重量份如下：
成份                    Mg/L
抗坏血酸钠              0.061828
D-生物素                0.00986
维生素D2          0.058
氯化胆碱          8.41
叶酸              0.7598
肌醇              20.909
烟酰胺            0.0377
烟酸              0.0145
P-对氨基苯甲酸    0.029
D-泛酸钙          0.2958
盐酸吡哆醛        0.0435
盐酸吡哆辛        0.0493
维生素A           0.0812
核黄素            0.029
维生素E           0.0058
维生素B1盐酸盐    0.1798
维生素B12         0.812
无机盐的组成及重量份如下：
成份              Mg/L
偏钒酸铵          0.0013572
氯化钙            135.256
五水硫酸铜        0.00145
硝酸铁            0.4176
七水硫酸铁        0.4814
氯化镁            33.1876
硫酸镁            56.84
硫酸锰            0.00017516
氯化钾            361.688
碳酸氢钠               4278.08
氯化钠                 6200
磷酸氢二钠             82.36
七水硫酸锌             0.4988
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份                   Mg/L
腺嘌呤硫酸盐           5.8
三磷酸腺苷             0.58
胆固醇                 0.116
2-脱氧-D-核糖          0.29
D-核糖                 0.29
D-葡萄糖               3480
谷胱甘肽(还原型)       0.029
鸟嘌呤盐酸盐           0.174
羟脯氨酸钠             2.9986
亚油酸                 0.0464
消旋硫辛酸             0.1218
酚红                   12.296
腐胺                   1.96098
丙酮酸钠               191.4
乙醇胺                 0.0232
半乳糖                 0.06
2巯基乙醇              0.0232
胸腺嘧啶               0.174
上述的核苷和激素包括的组份及含量为：
成份                Mg/L
腺苷                2.5-8.5
尿嘧啶              2.5-8.5
胞苷                2.5-8.5
鸟嘌呤              2.5-8.6
胰岛素              3.5-8.9
地塞米松            0.07-0.75
氢化可的松          0.006-0.5
前列腺素E1          0.007-0.21
三碘甲状腺原氨酸    0.000006-0.0001
上述的核苷和激素包括的组份及含量为：
成份                Mg/L
腺苷                4.06
尿嘧啶              4.06
胞苷                4.06
鸟嘌呤              4.06
胰岛素              5.8
地塞米松            0.232
氢化可的松          0.01856
前列腺素E1          0.029
三碘甲状腺原氨酸    0.00003828
上述的培养基在培养杂交瘤细胞培养过程中的用途。
上述的杂交瘤细胞扩增无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，杂交瘤细胞不需要适应过程；上述的培养基使用条件为：温度37℃，CO2浓度5％，相对湿度＞95％；优选的培养基使用条件为：温度37℃，CO2浓度5％，相对湿度＞98％。
本发明产品的优点是：本发明的杂交瘤细胞无血清培养基，不含任何动物血清，以氨基酸，维生素，无机盐，糖类，脂肪酸和核苷酸和激素组成。
本发明组分均可人工合成，均为结构明确的化学物质，使本培养基产品具有极高的一致性和稳定性。转铁蛋白和胰岛素，无论动物源性提取纯化来源或经重组蛋白技术人工合成获得，都价格昂贵，用以上组分替代后，培养基成本显著降低。另外，因本培养基不含蛋白质组分，使得应用本培养基培养的CHO细胞进行重组蛋白生产时，其下游纯化工作极大简化，节约成本，利于提高重组蛋白的纯度。
此杂交瘤细胞无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，杂交瘤细胞不需要适应过程。
附图说明
图1为无血清培养基杂交瘤细胞扩增培养基实施例1的培养曲线；
图2为无血清培养基杂交瘤细胞扩增培养基实施例2的培养曲线。
具体实施方式
实施例1
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                    Mg/L
L-丙氨酸                35
L-精氨酸盐酸盐          450
一水L-门冬酰胺          25
L-天冬氨酸              45
L-胱氨酸盐酸盐          45
一水L-半胱氨酸盐酸盐    25
L-谷氨酸                120
L-谷氨酰胺              500
谷氨酸                  65
一水L-组氨酸盐酸盐        65
L-羟脯氨酸                8.0
L-异亮氨酸                50
L-亮氨酸                  85
L-赖氨酸盐酸盐            150
L-甲硫氨酸                35
L-苯丙氨酸                45
L-脯氨酸                  89
L-丝氨酸                  45
L-苏氨酸                  45
L-色氨酸                  15
L-酪氨酸                  65
L-缬氨酸                  36
维生素的组成及重量份如下：
成份                      Mg/L
抗坏血酸钠                0.65
D-生物素                  0.08
维生素D2                  0.5
氯化胆碱                  16
叶酸                      3.5
肌醇                      35
烟酰胺                    0.5
烟酸                      0.25
P-对氨基苯甲酸            0.6
D-泛酸钙                  0.98
盐酸吡哆醛                0.65
盐酸吡哆辛               0.75
维生素A                  0.65
核黄素                   0.5
维生素E                  0.03
维生素B1盐酸盐           1.2
维生素B12                2.6
无机盐的组成及重量份如下：
成份                     Mg/L
偏钒酸铵                 0.002
氯化钙                   200
五水硫酸铜               0.02
硝酸铁                   3
七水硫酸铁               4
氯化镁                   80
硫酸镁                   150
硫酸锰                   0.05
氯化钾                   600
碳酸氢钠                 8000
氯化钠                   10000
磷酸氢二钠               150
七水硫酸锌               5
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份                     Mg/L
腺嘌呤硫酸盐             12.3
三磷酸腺苷               1.6
胆固醇                0.4
2-脱氧-D-核糖         0.78
D-核糖                0.78
D-葡萄糖              5600
谷胱甘肽(还原型)      0.065
鸟嘌呤盐酸盐          0.65
羟脯氨酸钠            4.5
亚油酸                0.3
消旋硫辛酸            0.65
酚红                  25
腐胺                  3.6
丙酮酸钠              350
乙醇胺                0.25
半乳糖                0.6
2巯基乙醇             0.35
胸腺嘧啶              0.8。
核苷和激素包括的组份及含量为：
成份                  Mg/L
腺苷                  8.5
尿嘧啶                8.5
胞苷                  8.5
鸟嘌呤                8.6
胰岛素                8.9
地塞米松              0.75
氢化可的松            0.5
前列腺素E1            0.21
三碘甲状腺原氨酸        0.0001。
实施例2
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                   Mg/L
L-丙氨酸               5
L-精氨酸盐酸盐         50
一水L-门冬酰胺         3.5
L-天冬氨酸             13
L-胱氨酸盐酸盐         5.3
一水L-半胱氨酸盐酸盐   3.2
L-谷氨酸               25
L-谷氨酰胺             68
谷氨酸                 12
一水L-组氨酸盐酸盐     8
L-羟脯氨酸             2.5
L-异亮氨酸             12
L-亮氨酸               15
L-赖氨酸盐酸盐         30
L-甲硫氨酸             5
L-苯丙氨酸             5
L-脯氨酸               25
L-丝氨酸               10
L-苏氨酸               10
L-色氨酸               3.5
L-酪氨酸               12
L-缬氨酸            5
维生素的组成及重量份如下：
成份                Mg/L
抗坏血酸钠          0.01
D-生物素            0.001
维生素D2            0.01
氯化胆碱            3.6
叶酸                0.1
肌醇                12
烟酰胺              0.01
烟酸                0.001
P-对氨基苯甲酸      0.007
D-泛酸钙            0.06
盐酸吡哆醛          0.01
盐酸吡哆辛          0.01
维生素A             0.01
核黄素              0.005
维生素E             0.001
维生素B1盐酸盐      0.05
维生素B12            0.2
无机盐的组成及重量份如下：
成份                Mg/L
偏钒酸铵            0.0000001
氯化钙              50
五水硫酸铜          0.00001
硝酸铁               0.002
七水硫酸铁           0.05
氯化镁               10
硫酸镁               20
硫酸锰               0.00001
氯化钾               150
碳酸氢钠             2000
氯化钠               4000
磷酸氢二钠           50
七水硫酸锌           0.02
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份                 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐         3.5
三磷酸腺苷           0.12
胆固醇               0.05
2-脱氧-D-核糖        0.06
D-核糖               0.06
D-葡萄糖             1500
谷胱甘肽(还原型)     0.01
鸟嘌呤盐酸盐         0.052
羟脯氨酸钠           0.65
亚油酸               0.009
消旋硫辛酸           0.05
酚红                 4.5
腐胺                 0.65
丙酮酸钠             50
乙醇胺              0.008
半乳糖              0.002
2巯基乙醇           0.008
胸腺嘧啶            0.06。
核苷和激素包括的组份及含量为：
成份                Mg/L
腺苷                2.5
尿嘧啶              2.5
胞苷                2.5
鸟嘌呤              2.5
胰岛素              3.5
地塞米松            0.07
氢化可的松          0.006
前列腺素E1          0.007
三碘甲状腺原氨酸    0.000006。
实施例3
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                Mg/L
L-丙氨酸            19.662
L-精氨酸盐酸盐      162.98
一水L-门冬酰胺      8.7
L-天冬氨酸          24.94
L-胱氨酸盐酸盐      20.358
一水L-半胱氨酸盐酸盐    15.08
L-谷氨酸                52.026
L-谷氨酰胺              232
谷氨酸                  33.35
一水L-组氨酸盐酸盐      24.94
L-羟脯氨酸              5.8
L-异亮氨酸              25.52
L-亮氨酸                42.34
L-赖氨酸盐酸盐          61.77
L-甲硫氨酸              11.31
L-苯丙氨酸              17.4
L-脯氨酸                43.21
L-丝氨酸                20.59
L-苏氨酸                24.36
L-色氨酸                6.96
L-酪氨酸                38.164
L-缬氨酸                21.286
维生素的组成及重量份如下：
成份                    Mg/L
抗坏血酸钠              0.061828
D-生物素                0.00986
维生素D2                0.058
氯化胆碱                8.41
叶酸                    0.7598
肌醇                    20.909
烟酰胺                  0.0377
烟酸                0.0145
P-对氨基苯甲酸      0.029
D-泛酸钙            0.2958
盐酸吡哆醛          0.0435
盐酸吡哆辛          0.0493
维生素A             0.0812
核黄素              0.029
维生素E             0.0058
维生素B1盐酸盐      0.1798
维生素B12            0.812
无机盐的组成及重量份如下：
成份                Mg/L
偏钒酸铵            0.0013572
氯化钙              135.256
五水硫酸铜          0.00145
硝酸铁              0.4176
七水硫酸铁          0.4814
氯化镁              33.1876
硫酸镁              56.84
硫酸锰              0.00017516
氯化钾              361.688
碳酸氢钠            4278.08
氯化钠              6200
磷酸氢二钠          82.36
七水硫酸锌          0.4988
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份                 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐         5.8
三磷酸腺苷           0.58
胆固醇               0.116
2-脱氧-D-核糖        0.29
D-核糖               0.29
D-葡萄糖             3480
谷胱甘肽(还原型)     0.029
鸟嘌呤盐酸盐         0.174
羟脯氨酸钠           2.9986
亚油酸               0.0464
消旋硫辛酸           0.1218
酚红                 12.296
腐胺                 1.96098
丙酮酸钠             191.4
乙醇胺               0.0232
半乳糖               0.06
2巯基乙醇            0.0232
胸腺嘧啶             0.174。
核苷和激素包括的组份及含量为：
成份                 Mg/L
腺苷                 4.06
尿嘧啶               4.06
胞苷                 4.06
鸟嘌呤                  4.06
胰岛素                  5.8
地塞米松                0.232
氢化可的松              0.01856
前列腺素E1              0.029
三碘甲状腺原氨酸        0.00003828。
实施例4
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                    Mg/L
L-丙氨酸                5
L-精氨酸盐酸盐          450
一水L-门冬酰胺          3.5
L-天冬氨酸              45
L-胱氨酸盐酸盐          5.3
一水L-半胱氨酸盐酸盐    25
L-谷氨酸                25
L-谷氨酰胺              500
谷氨酸                  12
一水L-组氨酸盐酸盐      8
L-羟脯氨酸              8.0
L-异亮氨酸              12
L-亮氨酸                15
L-赖氨酸盐酸盐          150
L-甲硫氨酸              35
L-苯丙氨酸              5
L-脯氨酸             89
L-丝氨酸             10
L-苏氨酸             10
L-色氨酸             15
L-酪氨酸             12
L-缬氨酸             36
维生素的组成及重量份如下：
成份                 Mg/L
抗坏血酸钠           0.01
D-生物素             0.08
维生素D2             0.01
氯化胆碱             3.6
叶酸                 0.1
肌醇                 35
烟酰胺               0.01
烟酸                 0.001
P-对氨基苯甲酸       0.6
D-泛酸钙             0.98
盐酸吡哆醛           0.01
盐酸吡哆辛           0.75
维生素A              0.01
核黄素               0.5
维生素E              0.001
维生素B1盐酸盐       1.2
维生素B12            2.6
无机盐的组成及重量份如下：
成份                 Mg/L
偏钒酸铵             0.0000001
氯化钙               200
五水硫酸铜           0.00001
硝酸铁               0.002
七水硫酸铁           4
氯化镁               10
硫酸镁               20
硫酸锰               0.05
氯化钾               600
碳酸氢钠             2000
氯化钠               10000
磷酸氢二钠           50
七水硫酸锌           0.02
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份                 Mg/L
腺嘌呤硫酸盐         12.3
三磷酸腺苷           0.12
胆固醇               0.4
2-脱氧-D-核糖        0.06
D-核糖               0.78
D-葡萄糖             5600
谷胱甘肽(还原型)     0.01
鸟嘌呤盐酸盐         0.65
羟脯氨酸钠          0.65
亚油酸              0.3
消旋硫辛酸          0.05
酚红                25
腐胺                0.65
丙酮酸钠            350
乙醇胺              0.008
半乳糖              0.6
2巯基乙醇           0.008
胸腺嘧啶            0.8。
核苷和激素包括的组份及含量为：
成份               Mg/L
腺苷               2.5
尿嘧啶             8.5
胞苷               2.5
鸟嘌呤             8.6
胰岛素             3.5
地塞米松           0.75
氢化可的松         0.5
前列腺素E1         0.007
三碘甲状腺原氨酸   0.000006。
实施例5
培养基由基本培养基、核苷和激素组成，其中，基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                  Mg/L
L-丙氨酸              5
L-精氨酸盐酸盐        50
一水L-门冬酰胺        25
L-天冬氨酸            45
L-胱氨酸盐酸盐        5.3
一水L-半胱氨酸盐酸盐  25
L-谷氨酸              25
L-谷氨酰胺            68
谷氨酸                65
一水L-组氨酸盐酸盐    65
L-羟脯氨酸            8.0
L-异亮氨酸            12
L-亮氨酸              15
L-赖氨酸盐酸盐        30
L-甲硫氨酸            35
L-苯丙氨酸            5
L-脯氨酸              89
L-丝氨酸              45
L-苏氨酸              10
L-色氨酸              3.5
L-酪氨酸              65
L-缬氨酸              5
维生素的组成及重量份如下：
成份                  Mg/L
抗坏血酸钠            0.01
D-生物素             0.001
维生素D2             0.5
氯化胆碱             16
叶酸                 0.1
肌醇                 12
烟酰胺               0.01
烟酸                 0.001
P-对氨基苯甲酸       0.6
D-泛酸钙             0.06
盐酸吡哆醛           0.65
盐酸吡哆辛           0.01
维生素A              0.65
核黄素               0.005
维生素E              0.03
维生素B1盐酸盐       0.05
维生素B12             0.2
无机盐的组成及重量份如下：
成份                 Mg/L
偏钒酸铵             0.0000001
氯化钙               50
五水硫酸铜           0.02
硝酸铁               3
七水硫酸铁           4
氯化镁               10
硫酸镁               20
硫酸锰               0.04
氯化钾              150
碳酸氢钠            6000
氯化钠              10000
磷酸氢二钠          50
七水硫酸锌          0.02
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份                Mg/L
腺嘌呤硫酸盐        3.5
三磷酸腺苷          1.6
胆固醇              0.4
2-脱氧-D-核糖       0.78
D-核糖              0.06
D-葡萄糖            5600
谷胱甘肽(还原型)    0.01
鸟嘌呤盐酸盐        0.65
羟脯氨酸钠          4.5
亚油酸              0.3
消旋硫辛酸          0.09
酚红                25
腐胺                0.65
丙酮酸钠            350
乙醇胺              0.008
半乳糖              0.002
2巯基乙醇           0.35
胸腺嘧啶            0.06。
核苷和激素包括的组份及含量为：
成份                  Mg/L
腺苷                  8.5
尿嘧啶                2.5
胞苷                  8.5
鸟嘌呤                2.5
胰岛素                8.9
地塞米松              0.07
氢化可的松            0.006
前列腺素E1            0.21
三碘甲状腺原氨酸      0.0001。

Claims (10)

1.一种杂交瘤细胞扩增无血清培养基及其用途，其特征在于：包括基本培养基，还包括：核苷酸和激素。
2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于：其中所述的基本培养基包括：氨基酸、维生素、无机盐、其他营养物质。
3.如权利要求2所述的培养基，其特征在于：其中所述的基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                      Mg/L
L-丙氨酸                  5-35
L-精氨酸盐酸盐            50-450
一水L-门冬酰胺            3.5-25
L-天冬氨酸                13-45
L-胱氨酸盐酸盐            5.3-45
一水L-半胱氨酸盐酸盐      3.2-25
L-谷氨酸                  25-120
L-谷氨酰胺                68-500
谷氨酸                    12-65
一水L-组氨酸盐酸盐        8-65
L-羟脯氨酸                2.5-8.0
L-异亮氨酸                12-50
L-亮氨酸                  15-85
L-赖氨酸盐酸盐            30-150
L-甲硫氨酸                5-35
L-苯丙氨酸                5-45
L-脯氨酸                  25-89
L-丝氨酸           10-45
L-苏氨酸           10-45
L-色氨酸           3.5-15
L-酪氨酸           12-65
L-缬氨酸           5-36
维生素的组成及重量份如下：
成份                Mg/L
抗坏血酸钠          0.01-0.65
D-生物素            0.001-0.08
维生素D2            0.01-0.5
氯化胆碱            3.6-16
叶酸                0.1-3.5
肌醇                12-35
烟酰胺              0.01-0.5
烟酸                0.001-0.25
P-对氨基苯甲酸      0.007-0.6
D-泛酸钙            0.06-0.98
盐酸吡哆醛          0.01-0.65
盐酸吡哆辛          0.01-0.75
维生素A             0.01-0.65
核黄素              0.005-0.5
维生素E             0.001-0.03
维生素B1盐酸盐      0.05-1.2
维生素B12           0.2-2.6
无机盐的组成及重量份如下：
成份                   Mg/L
偏钒酸铵               0.0000001-0.002
氯化钙                 50-200
五水硫酸铜             0.00001-0.02
硝酸铁                 0.002-3
七水硫酸铁             0.05-4
氯化镁                 10-80
硫酸镁                 20-150
硫酸锰                 0.00001-0.05
氯化钾                 150-600
碳酸氢钠               2000-8000
氯化钠                 4000-10000
磷酸氢二钠             50-150
七水硫酸锌             0.02-5
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份                   Mg/L
腺嘌呤硫酸盐           3.5-12.3
三磷酸腺苷             0.12-1.6
胆固醇                 0.05-0.4
2-脱氧-D-核糖          0.06-0.78
D-核糖                 0.06-0.78
D-葡萄糖               1500-5600
谷胱甘肽(还原型)       0.01-0.065
鸟嘌呤盐酸盐           0.052-0.65
羟脯氨酸钠             0.65-4.5
亚油酸                 0.009-0.3
消旋硫辛酸                0.05-0.65
酚红                      4.5-25
腐胺                      0.65-3.6
丙酮酸钠                  50-350
乙醇胺                    0.008-0.25
半乳糖                    0.002-0.6
2巯基乙醇                 0.008-0.35
胸腺嘧啶                  0.06-0.8。
4.如权利要求3所述的培养基，其特征在于：其中所述的基本培养基包括的组份及含量为：
氨基酸的组成及重量份如下：
成份                      Mg/L
L-丙氨酸                  19.662
L-精氨酸盐酸盐            162.98
一水L-门冬酰胺            8.7
L-天冬氨酸                24.94
L-胱氨酸盐酸盐            20.358
一水L-半胱氨酸盐酸盐      15.08
L-谷氨酸                  52.026
L-谷氨酰胺                232
谷氨酸                    33.35
一水L-组氨酸盐酸盐        24.94
L-羟脯氨酸                5.8
L-异亮氨酸                25.52
L-亮氨酸                  42.34
L-赖氨酸盐酸盐            61.77
L-甲硫氨酸                11.31
L-苯丙氨酸           17.4
L-脯氨酸             43.21
L-丝氨酸             20.59
L-苏氨酸             24.36
L-色氨酸             6.96
L-酪氨酸             38.164
L-缬氨酸             21.286
维生素的组成及重量份如下：
成份                 Mg/L
抗坏血酸钠           0.061828
D-生物素             0.00986
维生素D2             0.058
氯化胆碱             8.41
叶酸                 0.7598
肌醇                 20.909
烟酰胺               0.0377
烟酸                 0.0145
P-对氨基苯甲酸       0.029
D-泛酸钙             0.2958
盐酸吡哆醛           0.0435
盐酸吡哆辛           0.0493
维生素A              0.0812
核黄素               0.029
维生素E              0.0058
维生素B1盐酸盐       0.1798
维生素B12            0.812
无机盐的组成及重量份如下：
成份               Mg/L
偏钒酸铵           0.0013572
氯化钙             135.256
五水硫酸铜         0.00145
硝酸铁             0.4176
七水硫酸铁         0.4814
氯化镁             33.1876
硫酸镁             56.84
硫酸锰             0.00017516
氯化钾             361.688
碳酸氢钠           4278.08
氯化钠             6200
磷酸氢二钠         82.36
七水硫酸锌         0.4988
其他营养物质的组成及重量份如下：
成份               Mg/L
腺嘌呤硫酸盐       5.8
三磷酸腺苷         0.58
胆固醇             0.116
2-脱氧-D-核糖      0.29
D-核糖             0.29
D-葡萄糖           3480
谷胱甘肽(还原型)   0.029
鸟嘌呤盐酸盐       0.174
羟脯氨酸钠              2.9986
亚油酸                  0.0464
消旋硫辛酸              0.1218
酚红                    12.296
腐胺                    1.96098
丙酮酸钠                191.4
乙醇胺                  0.0232
半乳糖                  0.06
2巯基乙醇               0.0232
胸腺嘧啶                0.174。
5.如权利要求1所述的培养基，其特征在于：所述的核苷和激素包括的组份及含量为：
成份                    Mg/L
腺苷                    2.5-8.5
尿嘧啶                  2.5-8.5
胞苷                    2.5-8.5
鸟嘌呤                  2.5-8.6
胰岛素                  3.5-8.9
地塞米松                0.07-0.75
氢化可的松              0.006-0.5
前列腺素E1              0.007-0.21
三碘甲状腺原氨酸        0.000006-0.0001。
6.如权利要求5所述的培养基，其特征在于：所述的核苷和激素包括的组份及含量为：
成份                    Mg/L
腺苷                    4.06
尿嘧啶              4.06
胞苷                4.06
鸟嘌呤              4.06
胰岛素              5.8
地塞米松            0.232
氢化可的松          0.01856
前列腺素E1          0.029
三碘甲状腺原氨酸    0.00003828。
7.如权利要求1-6中任意一项所述的培养基在培养杂交瘤细胞中的用途。
8.如权利要求7所述的用途，其特征在于：所述的杂交瘤细胞扩增无血清培养基，可以直接替换含血清常规培养基，杂交瘤细胞不需要适应过程。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于：所述的培养基使用条件为：温度37℃，CO2浓度5％，相对湿度＞95％。
10.如权利要求8所述的用途，其特征在于：所述的培养基使用条件为：温度37℃，CO2浓度5％，相对湿度＞98％。
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