CN100506977C - 一种中国仓鼠卵巢细胞扩增培养基及其用途 - Google Patents

一种中国仓鼠卵巢细胞扩增培养基及其用途 Download PDF

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Abstract

发明涉及一种培养基及其用途,更具体地说涉及一种中国仓鼠卵巢细胞扩增培养基及其用途。属于生物制品领域。本发明的一种中国仓鼠卵巢细胞扩增无蛋白培养基,其中,包括基本培养基,还包括:微量元素和Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素替代物。此中国仓鼠卵巢细胞无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,中国仓鼠卵巢细胞不需要适应过程。

Description

一种中国仓鼠卵巢细胞扩增培养基及其用途
技术领域
发明涉及一种培养基及其用途,更具体地说涉及一种中国仓鼠卵巢细胞扩增培养基及其用途。属于生物制品领域。
背景技术
细胞培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要。目前培养中国仓鼠卵巢细胞的培养基的缺点是:目前,动物血清作为哺乳动物细胞培养基的关键成分被广泛应用,以牛血清为主。但是动物血清缺点是:价格昂贵,成分不明确,产品批间差异大,含有细胞生长抑制成分,且更为严重的是可能含有细菌、病毒等,导致潜在生物性污染。
发明内容
【要解决的问题】
本发明的目的,是提供一种中国仓鼠卵巢细胞扩增培养基及其用途。
【技术方案】
本发明的一种中国仓鼠卵巢细胞(CH0细胞)扩增无蛋白培养基,其中,包括基本培养基,还包括:微量元素和Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素替代物。
上述的基本培养基包括:氨基酸、维生素、无机盐、其他营养物质。
上述的基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                          Mg/L
甘氨酸                        2-30
L-丙氨酸                      3-40
L-精氨酸盐酸盐                50-450
一水L-门冬酰胺                 3.0-45.0
L-天冬氨酸               5.0-25.0
L-半胱氨酸盐酸盐         3.0-45.0
一水L-半胱氨酸盐酸盐      10.0-65.0
L-谷氨酸                 4-35
一水L-组氨酸盐酸盐        10-75
L-异亮氨酸               20-100
L-亮氨酸                 15-150
L-赖氨酸盐酸盐           50-300
L-甲硫氨酸               3-40
L-苯丙氨酸               1.0-15
L-脯氨酸                 15-85
L-丝氨酸                 3.0-30
L-苏氨酸                 3.0-30
L-色氨酸                 0.5-8
L-酪氨酸二钠二水         3.0-25
L-缬氨酸                 15-100
维生素的组成及重量份如下:
成份                     Mg/L
生物素                   0.0005-0.09
氯化胆碱                 3.0-20
D-泛酸钙                 0.5-9
叶酸                     0.5-10
肌醇                     3.0-35
烟酰胺                   3.0-25
盐酸吡哆醛               0.1-5
盐酸吡哆辛               10-100
核黄素                0.1-3
核氨素盐酸盐          0.1-3
维生素B12             0.001-0.9
维生素C               0.001-0.2
维生素K3              0.001-0.2
烟酸                  0.008-0.3
维生素A醋酸           0.009-0.3
维生素D2              0.001-0.2
无机盐的组成及重量份如下:
成份                  Mg/L
氯化钙                45-250
氯化镁                10-65
硫酸镁                20-100
氯化钾                100-800
氯化钠                2500-10000
一水磷酸二氢钠         25-150
磷酸氢二钠            25-150
碳酸氢钠              900-5000
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                  Mg/L
葡萄糖                2000-6500
酚红                  0.5-15
丙酮酸钠              60-300
黄嘌呤                0.5-4.5
亚油酸                0.001-0.5
硫辛酸                 0.005-0.8
腐胺酸                 0.001-0.25
谷胱甘肽               0.1-1.5
胸苷                   0.08-0.85
4-羟乙基哌嗪乙磺酸     800-3000
乙醇胺                 0.4-4.0
上述的基本培养基包括的优选组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                     Mg/L
甘氨酸                   7.5
L-丙氨酸                 8.9
L-精氨酸盐酸盐           211
一水L-门冬酰胺            15.01
L-天冬氨酸               13.3
L-半胱氨酸盐酸盐         17.56
一水L-半胱氨酸盐酸盐      31.29
L-谷氨酸                 7.35
一水L-组氨酸盐酸盐        31.48
L-异亮氨酸               54.47
L-亮氨酸                 59.05
L-赖氨酸盐酸盐           91.25
L-甲硫氨酸               17.24
L-苯丙氨酸               5
L-脯氨酸                 34.5
L-丝氨酸                 10.5
L-苏氨酸                 11.9
L-色氨酸                 2.04
L-酪氨酸二钠二水                 7.81
L-缬氨酸                         46
维生素的组成及重量份如下:
成份                             Mg/L
生物素                           0.0035
氯化胆碱                         8.98
D-泛酸钙                         2.24
叶酸                             2.65
肌醇                             18
烟酰胺                           12
盐酸吡哆醛                       1
盐酸吡哆辛                       35
核黄素                           1
核氨素盐酸盐                     1
维生素B12                        0.01
维生素C                          0.05
维生素K3                         0.05
烟酸                             0.025
维生素A醋酸                      0.025
维生素D2                         0.01
无机盐的组成及重量份如下:
成份                             Mg/L
氯化钙                           116.6
氯化镁                           28.64
硫酸镁                           48.84
氯化钾                     311.8
氯化钠                     6995.5
一水磷酸二氢钠              62.5
磷酸氢二钠                 71.02
碳酸氢钠                   2200
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                       Mg/L
葡萄糖                     3900
酚红                       4
丙酮酸钠                   150
黄嘌呤                     1.66
亚油酸                     0.035
硫辛酸                     0.075
腐胺酸                     0.004
谷胱甘肽                   0.6
胸苷                       0.28
4-羟乙基哌嗪乙磺酸         1800
乙醇胺                     1.2
上述的微量元素包括的组份及含量为:
组份                        Mg/L
五水硫酸铜                  0.0009-0.02
氟化钠                      0.0008-0.01
九水亚硒酸钠                0.05-0.2
醋酸钡                      0.001-0.03
八水硫酸镉                  0.0007-0.004
氧氯化锆                         0.001-0.0085
上述的微量元素包括的组份及含量为:
组份                             Mg/L
五水硫酸铜                       0.00182
氟化钠                           0.00197
九水亚硒酸钠                     0.094
醋酸钡                           0.0079
八水硫酸镉                       0.00122
氧氯化锆                         0.0015
上述的Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素蛋白替代物包括的组份及含量为:
成份                              Mg/L
硫酸锌                            1.0-15
1,2-花生四烯酰卵磷脂             1.0-16
硫酸亚铁七水                      0.05-0.12
硝酸铁九水水                      0.01-0.45
草酸铁                            0.1-2.0
乙二胺四乙酸4钠                   0.01-0.45
上述的Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素蛋白替代物包括的组份及含量为:
成份                              Mg/L
硫酸锌                            5
1,2-花生四烯酰卵磷脂             5
硫酸亚铁七水                      0.094
硝酸铁九水水                      0.05
草酸铁                       0.6
乙二胺四乙酸4钠              0.03
上述培养基在培养中国仓鼠卵巢细胞中有用途。
上述的培养基,此中国仓鼠卵巢细胞扩增无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,中国仓鼠卵巢细胞不需要适应过程。
本发明产品的优点是:本发明的中国仓鼠卵巢细胞无蛋白培养基,不含任何动物血清,以氨基酸,维生素,无机盐,糖类,脂肪酸和微量元素组成。不含有转铁蛋白和胰岛素,这两种成分。以ZnSO4,1,2-Diarachidonoyl-Phosphatidylcholine,FeSO4.7H2O,Fe(NO3)3.9H2O,Ferric Oxalate,EDTA 4Na代替。这些替代组分均可人工合成,均为结构明确的化学物质,使本培养基产品具有极高的一致性和稳定性。转铁蛋白和胰岛素,无论动物源性提取纯化来源或经重组蛋白技术人工合成获得,都价格昂贵,用以上组分替代后,培养基成本显著降低。另外,因本培养基不含蛋白质组分,使得应用本培养基培养的中国仓鼠卵巢细胞进行重组蛋白生产时,其下游纯化工作极大简化,节约成本,利于提高重组蛋白的纯度。
此中国仓鼠卵巢细胞无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,中国仓鼠卵巢细胞不需要适应过程。
附图说明
图1为无血清培养基中国仓鼠卵巢细胞扩增培养基的实施例3的培养曲线;
图2为无血清培养基中国仓鼠卵巢细胞扩增培养基的实施例2的培养曲线。
具体实施方式
实施例1
培养基由基本培养基、微量元素和Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素替代物组成,其中,基本培养基的组成和成份如下:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                         Mg/L
甘氨酸                       7.5
L-丙氨酸                     8.9
L-精氨酸盐酸盐                211
一水L-门冬酰胺                 15.01
L-天冬氨酸                    13.3
L-半胱氨酸盐酸盐              17.56
一水L-半胱氨酸盐酸盐           31.29
L-谷氨酸                      7.35
一水L-组氨酸盐酸盐             31.48
L-异亮氨酸                    54.47
L-亮氨酸                      59.05
L-赖氨酸盐酸盐                91.25
L-甲硫氨酸                    17.24
L-苯丙氨酸                    5
L-脯氨酸                      34.5
L-丝氨酸                      10.5
L-苏氨酸                      11.9
L-色氨酸                      2.04
L-酪氨酸二钠二水              7.81
L-缬氨酸                      46
维生素的组成及重量份如下:
成份                          Mg/L
生物素                        0.0035
氯化胆碱                      8.98
D-泛酸钙                      2.24
叶酸                          2.65
肌醇                          18
烟酰胺                        12
盐酸吡哆醛                     1
盐酸吡哆辛                     35
核黄素                         1
核氨素盐酸盐                   1
维生素B12                      0.01
维生素C                        0.05
维生素K3                       0.05
烟酸                           0.025
维生素A醋酸                    0.025
维生素D2                       0.01
无机盐的组成及重量份如下:
成份                           Mg/L
氯化钙                         116.6
氯化镁                         28.64
硫酸镁                         48.84
氯化钾                         311.8
氯化钠                         6995.5
一水磷酸二氢钠                  62.5
磷酸氢二钠                     71.02
碳酸氢钠                       2200
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                           Mg/L
葡萄糖                         3900
酚红                           4
丙酮酸钠                       150
黄嘌呤                   1.66
亚油酸                   0.035
硫辛酸                   0.075
腐胺酸                   0.004
谷胱甘肽                 0.6
胸苷                     0.28
4-羟乙基哌嗪乙磺酸       1800
乙醇胺                   1.2
微量元素包括的组份及含量为:
组份                     Mg/L
五水硫酸铜               0.00182
氟化钠                   0.00197
九水亚硒酸钠             0.094
醋酸钡                   0.0079
八水硫酸镉               0.00122
氧氯化锆                 0.0015
Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素蛋白替代物包括的组份及含量为:
成份                      Mg/L
硫酸锌                    5
1,2-花生四烯酰卵磷脂     5
硫酸亚铁七水              0.094
硝酸铁九水水              0.05
草酸铁                    0.6
乙二胺四乙酸4钠           0.03
实施例2
培养基由基本培养基、微量元素和Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素替代物组成,其中,基本培养基的组成和成份如下:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                        Mg/L
甘氨酸                       2
L-丙氨酸                     3
L-精氨酸盐酸盐               50
一水L-门冬酰胺                3.0
L-天冬氨酸                   5.0
L-半胱氨酸盐酸盐             3.0
一水L-半胱氨酸盐酸盐          10.0
L-谷氨酸                     4
一水L-组氨酸盐酸盐            10
L-异亮氨酸                   20
L-亮氨酸                     15
L-赖氨酸盐酸盐               50
L-甲硫氨酸                   3
L-苯丙氨酸                   1.0
L-脯氨酸                     15
L-丝氨酸                     3.0
L-苏氨酸                     3.0
L-色氨酸                     0.5
L-酪氨酸二钠二水             3.0
L-缬氨酸                     15
维生素的组成及重量份如下:
成份                        Mg/L
生物素                      0.0005
氯化胆碱                    3.0
D-泛酸钙                    0.5
叶酸                        0.5
肌醇                        3.0
烟酰胺                      3.0
盐酸吡哆醛                  0.1
盐酸吡哆辛                  10
核黄素                      0.1
核氨素盐酸盐                0.1
维生素B12                   0.001
维生素C                     0.001
维生素K3                    0.001
烟酸                        0.008
维生素A醋酸                 0.009
维生素D2                    0.001
无机盐的组成及重量份如下:
成份                        Mg/L
氯化钙                      45
氯化镁                      10
硫酸镁                      20
氯化钾                      100
氯化钠                      2500
一水磷酸二氢钠              25
磷酸氢二钠                 25
碳酸氢钠                   900
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                       Mg/L
葡萄糖                     2000
酚红                       0.5
丙酮酸钠                   60
黄嘌呤                     0.5
亚油酸                     0.001
硫辛酸                     0.005
腐胺酸                     0.001
谷胱甘肽                   0.1
胸苷                       0.08
4-羟乙基哌嗪乙磺酸         800
乙醇胺                     0.4。
微量元素包括的组份及含量为:
组份                       Mg/L
五水硫酸铜                 0.0009
氟化钠                     0.0008
九水亚硒酸钠               0.05
醋酸钡                     0.001
八水硫酸镉                 0.0007
氧氯化锆                   0.001。
Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素蛋白替代物包括的组份及含量为:
成份                        Mg/L
硫酸锌                      1.0
1,2-花生四烯酰卵磷脂       1.0
硫酸亚铁七水                0.05
硝酸铁九水水                0.01
草酸铁                      0.1
乙二胺四乙酸4钠             0.01。
实施例3
培养基由基本培养基、微量元素和Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素替代物组成,其中,基本培养基的组成和成份如下:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                        Mg/L
甘氨酸                      30
L-丙氨酸                    40
L-精氨酸盐酸盐              450
一水L-门冬酰胺               45.0
L-天冬氨酸                  25.0
L-半胱氨酸盐酸盐            45.0
一水L-半胱氨酸盐酸盐         65.0
L-谷氨酸                    35
一水L-组氨酸盐酸盐           75
L-异亮氨酸                  100
L-亮氨酸                    150
L-赖氨酸盐酸盐              300
L-甲硫氨酸                  40
L-苯丙氨酸                15
L-脯氨酸                  85
L-丝氨酸                  30
L-苏氨酸                  30
L-色氨酸                  8
L-酪氨酸二钠二水          25
L-缬氨酸                  100
维生素的组成及重量份如下:
成份                       Mg/L
生物素                     0.09
氯化胆碱                   20
D-泛酸钙                   9
叶酸                       10
肌醇                       35
烟酰胺                     25
盐酸吡哆醛                 5
盐酸吡哆辛                 100
核黄素                     3
核氨素盐酸盐               3
维生素B12                  0.9
维生素C                    0.2
维生素K3                   0.2
烟酸                       0.3
维生素A醋酸                0.3
维生素D2                   0.2
无机盐的组成及重量份如下:
成份                      Mg/L
氯化钙                    250
氯化镁                    65
硫酸镁                    100
氯化钾                    800
氯化钠                    10000
一水磷酸二氢钠             150
磷酸氢二钠                150
碳酸氢钠                  5000
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                       Mg/L
葡萄糖                     6500
酚红                       15
丙酮酸钠                   300
黄嘌呤                     4.5
亚油酸                     0.5
硫辛酸                     0.8
腐胺酸                     0.25
谷胱甘肽                   1.5
胸苷                       0.85
4-羟乙基哌嗪乙磺酸         3000
乙醇胺                     4.0。
微量元素包括的组份及含量为:
组份                    Mg/L
五水硫酸铜              0.02
氟化钠                  0.01
九水亚硒酸钠            0.2
醋酸钡                  0.03
八水硫酸镉              0.004
氧氯化锆                0.0085。
Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素蛋白替代物包括的组份及含量为:
成份                     Mg/L
硫酸锌                   15
1,2-花生四烯酰卵磷脂    16
硫酸亚铁七水             0.12
硝酸铁九水水             0.45
草酸铁                   2.0
乙二胺四乙酸4钠          0.45。
实施例4
培养基由基本培养基、微量元素和Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素替代物组成,其中,基本培养基的组成和成份如下:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                       Mg/L
甘氨酸                     2
L-丙氨酸                   40
L-精氨酸盐酸盐             50
一水L-门冬酰胺              45.0
L-天冬氨酸                 5.0
L-半胱氨酸盐酸盐                  45.0
一水L-半胱氨酸盐酸盐               10.0
L-谷氨酸                          35
一水L-组氨酸盐酸盐                 10
L-异亮氨酸                        100
L-亮氨酸                          15
L-赖氨酸盐酸盐                    300
L-甲硫氨酸                        3
L-苯丙氨酸                        15
L-脯氨酸                          15
L-丝氨酸                          30
L-苏氨酸                          3.0
L-色氨酸                          8
L-酪氨酸二钠二水                  3.0
L-缬氨酸                          100
维生素的组成及重量份如下:
成份                              Mg/L
生物素                            0.0005
氯化胆碱                          20
D-泛酸钙                          0.5
叶酸                              10
肌醇                              3.0
烟酰胺                            25
盐酸吡哆醛                        0.1
盐酸吡哆辛                        100
核黄素                            0.1
核氨素盐酸盐               3
维生素B12                  0.001
维生素C                    0.2
维生素K3                   0.001
烟酸                       0.3
维生素A醋酸                0.009
维生素D2                   0.2
无机盐的组成及重量份如下:
成份                       Mg/L
氯化钙                     45
氯化镁                     65
硫酸镁                     20
氯化钾                     800
氯化钠                     2500
一水磷酸二氢钠              150
磷酸氢二钠                 25
碳酸氢钠                   5000
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                      Mg/L
葡萄糖                    2000
酚红                      15
丙酮酸钠                  60
黄嘌呤                    4.5
亚油酸                    0.001
硫辛酸                    0.8
腐胺酸                          0.001
谷胱甘肽                        1.5
胸苷                            0.08
4-羟乙基哌嗪乙磺酸              3000
乙醇胺                          0.4。
微量元素包括的组份及含量为:
组份                            Mg/L
五水硫酸铜                      0.02
氟化钠                          0.0008
九水亚硒酸钠                    0.2
醋酸钡                          0.001
八水硫酸镉                      0.004
氧氯化锆                        0.001。
Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素蛋白替代物包括的组份及含量为:
成份                             Mg/L
硫酸锌                           15
1,2-花生四烯酰卵磷脂            1.0
硫酸亚铁七水                     0.12
硝酸铁九水水                     0.01
草酸铁                           2.0
乙二胺四乙酸4钠                  0.01。
实施例5
培养基由基本培养基、微量元素和Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素替代物组成,其中,基本培养基的组成和成份如下:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                           Mg/L
甘氨酸                         30
L-丙氨酸                       3
L-精氨酸盐酸盐                 450
一水L-门冬酰胺                  3.0
L-天冬氨酸                     25.0
L-半胱氨酸盐酸盐               3.0
一水L-半胱氨酸盐酸盐            65.0
L-谷氨酸                       4
一水L-组氨酸盐酸盐              75
L-异亮氨酸                     20
L-亮氨酸                       150
L-赖氨酸盐酸盐                 50
L-甲硫氨酸                     40
L-苯丙氨酸                     1.0
L-脯氨酸                       85
L-丝氨酸                       3.0
L-苏氨酸                       30
L-色氨酸                       0.5
L-酪氨酸二钠二水               25
L-缬氨酸                       15
维生素的组成及重量份如下:
成份                           Mg/L
生物素                         0.09
氯化胆碱                       3.0
D-泛酸钙                       9
叶酸                           0.5
肌醇                           35
烟酰胺                         3.0
盐酸吡哆醛                     5
盐酸吡哆辛                     10
核黄素                         3
核氨素盐酸盐                   0.1
维生素B12                      0.9
维生素C                        0.001
维生素K3                       0.2
烟酸                           0.008
维生素A醋酸                    0.3
维生素D2                       0.001
无机盐的组成及重量份如下:
成份                            Mg/L
氯化钙                          250
氯化镁                          10
硫酸镁                          100
氯化钾                          100
氯化钠                          10000
一水磷酸二氢钠                   25
磷酸氢二钠                      150
碳酸氢钠                        900
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                         Mg/L
葡萄糖                       6500
酚红                         0.5
丙酮酸钠                     300
黄嘌呤                       0.5
亚油酸                       0.5
硫辛酸                       0.005
腐胺酸                       0.25
谷胱甘肽                     0.1
胸苷                         0.85
4-羟乙基哌嗪乙磺酸           3000
乙醇胺                       0.4。
微量元素包括的组份及含量为:
组份                         Mg/L
五水硫酸铜                   0.02
氟化钠                       0.0008
九水亚硒酸钠                 0.2
醋酸钡                       0.001
八水硫酸镉                   0.004
氧氯化锆                     0.001。
Transferrin转铁蛋白和Insulin胰岛素蛋白替代物包括的组份及含量为:
成份                         Mg/L
硫酸锌                     15
1,2-花生四烯酰卵磷脂      1.0
硫酸亚铁七水               0.12
硝酸铁九水水               0.01
草酸铁                     2.0
乙二胺四乙酸4钠            0.01。
此中国仓鼠卵巢细胞无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,中国仓鼠卵巢细胞不需要适应过程。

Claims (6)

1.一种中国仓鼠卵巢细胞扩增无蛋白培养基,其特征在于:其中所述的基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                         mg/L
甘氨酸                       2-30
L-丙氨酸                     3-40
L-精氨酸盐酸盐               50-450
一水L-门冬酰胺               3.0-45.0
L-天冬氨酸                   5.0-25.0
L-半胱氨酸盐酸盐             3.0-45.0
一水L-半胱氨酸盐酸盐         10.0-65.0
L-谷氨酸                     4-35
一水L-组氨酸盐酸盐           10-75
L-异亮氨酸                   20-100
L-亮氨酸                     15-150
L-赖氨酸盐酸盐               50-300
L-甲硫氨酸                   3-40
L-苯丙氨酸                   1.0-15
L-脯氨酸                     15-85
L-丝氨酸                     3.0-30
L-苏氨酸                     3.0-30
L-色氨酸                     0.5-8
L-酪氨酸二钠二水             3.0-25
L-缬氨酸                     15-100
维生素的组成及重量份如下:
成份                  mg/L
生物素                0.0005-0.09
氯化胆碱              3.0-20
D-泛酸钙              0.5-9
叶酸                  0.5-10
肌醇                  3.0-35
烟酰胺                3.0-25
盐酸吡哆醛            0.1-5
盐酸吡哆辛            10-100
核黄素                0.1-3
核氨素盐酸盐          0.1-3
维生素B12             0.001-0.9
维生素C               0.001-0.2
维生素K3              0.001-0.2
烟酸                  0.008-0.3
维生素A醋酸           0.009-0.3
维生素D2              0.001-0.2
无机盐的组成及重量份如下:
成份                  mg/L
氯化钙                45-250
氯化镁                10-65
硫酸镁                20-100
氯化钾                100-800
氯化钠                2500-10000
一水磷酸二氢钠                25-150
磷酸氢二钠                   25-150
碳酸氢钠                     900-5000
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                         mg/L
葡萄糖                       2000-6500
酚红                         0.5-15
丙酮酸钠                     60-300
黄嘌呤                       0.5-4.5
亚油酸                       0.001-0.5
硫辛酸                       0.005-0.8
腐胺酸                       0.001-0.25
谷胱甘肽                     0.1-1.5
胸苷                         0.08-0.85
4-羟乙基哌嗪乙磺酸           800-3000
乙醇胺                       0.4-4.0。
微量元素包括的组份及含量为:
组份                         mg/L
五水硫酸铜                   0.0009-0.02
氟化钠                       0.0008-0.01
九水亚硒酸钠                 0.05-0.2
醋酸钡                       0.001-0.03
八水硫酸镉                   0.0007-0.004
氧氯化锆                     0.001-0.0085。
还包括的组份及含量为:
成份                          mg/L
硫酸锌                        1.0-15
1,2-花生四烯酰卵磷脂         1.0-16
硫酸亚铁七水                  0.05-0.12
九水硝酸铁                    0.01-0.45
草酸铁                        0.1-2.0
乙二胺四乙酸4钠               0.01-0.45。
2.如权利要求1所述的培养基,其特征在于:其中所述的基本培养基包括的组份及含量为:
氨基酸的组成及重量份如下:
成份                          mg/L
甘氨酸                        7.5
L-丙氨酸                      8.9
L-精氨酸盐酸盐                211
一水L-门冬酰胺                15.01
L-天冬氨酸                    13.3
L-半胱氨酸盐酸盐              17.56
一水L-半胱氨酸盐酸盐          31.29
L-谷氨酸                      7.35
一水L-组氨酸盐酸盐            31.48
L-异亮氨酸                    54.47
L-亮氨酸                      59.05
L-赖氨酸盐酸盐                91.25
L-甲硫氨酸                    17.24
L-苯丙氨酸                    5
L-脯氨酸                      34.5
L-丝氨酸                    10.5
L-苏氨酸                    11.9
L-色氨酸                    2.04
L-酪氨酸二钠二水            7.81
L-缬氨酸                    46
维生素的组成及重量份如下:
成份                        mg/L
生物素                      0.0035
氯化胆碱                    8.98
D-泛酸钙                    2.24
叶酸                        2.65
肌醇                        18
烟酰胺                      12
盐酸吡哆醛                  1
盐酸吡哆辛                  35
核黄素                      1
核氨素盐酸盐                1
维生素B12                   0.01
维生素C                     0.05
维生素K3                    0.05
烟酸                        0.025
维生素A醋酸                 0.025
维生素D2                    0.01
无机盐的组成及重量份如下:
成份                        mg/L
氯化钙                      116.6
氯化镁                      28.64
硫酸镁                      48.84
氯化钾                      311.8
氯化钠                      6995.5
一水磷酸二氢钠              62.5
磷酸氢二钠                  71.02
碳酸氢钠                    2200
其他营养物质的组成及重量份如下:
成份                        mg/L
葡萄糖                      3900
酚红                        4
丙酮酸钠                    150
黄嘌呤                      1.66
亚油酸                      0.035
硫辛酸                      0.075
腐胺酸                      0.004
谷胱甘肽                    0.6
胸苷                        0.28
4-羟乙基哌嗪乙磺酸          1800
乙醇胺                      1.2。
3.如权利要求1所述的培养基,其特征在于:所述的微量元素包括的组份及含量为:
组份                        mg/L
五水硫酸铜                  0.00182
氟化钠                       0.00197
九水亚硒酸钠                 0.094
醋酸钡                       0.0079
八水硫酸镉                   0.00122
氧氯化锆                     0.0015。
4.如权利要求1所述的培养基,其特征在于:所述的组份及含量为:
成份                         Mg/L
硫酸锌                       5
1,2-花生四烯酰卵磷脂        5
硫酸亚铁七水                 0.094
九水硝酸铁                   0.05
草酸铁                       0.6
乙二胺四乙酸4钠              0.03。
5.如权利要求1-4中任意一项所述的培养基在培养中国仓鼠卵巢细胞中的用途。
6.如权利要求5所述的用途,其特征在于:所述的培养基,即中国仓鼠卵巢细胞扩增无血清培养基,可以直接替换含血清常规培养基,中国仓鼠卵巢细胞不需要适应过程。
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