CN101129130A - 月季试管开花的方法 - Google Patents

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梁硕
吴坤林
陈之林
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Abstract

本发明涉及月季试管开花的方法，首先在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(Rosahybrida cv.mini)的茎尖或带节茎段为外植体，经消毒后接种到每升含有6－苄基嘌呤1.0～2.0mg的MS培养基中至形成不定芽，然后将诱导出的不定芽切割后再继代培养于含有6－苄基嘌呤1.0～2.0mg，萘乙酸0.1～0.2mg的MS培养基中进行不定芽的增殖，当芽高约2～3cm时，切下接种到每升含有6－苄基嘌呤0.1～0.3mg，萘乙酸0.1～0.2mg的MS培养基中进行试管开花诱导。本发明方法培育速度快，消毒方法简单、消毒成功率在80％～90％，培养基成分独特且简单实惠，开花诱导率较高，花率可达60％以上，花色鲜艳。

Description

月季试管开花的方法
技术领域
本发明涉及月季的栽培方法，具体来说是涉及迷你月季(Rosa hybrida cv.mini)试管开花的方法。
背景技术
花卉的试管内诱导开花是一种新型的生物技术。试管内开花的植株由于观赏时间长、观赏价值高、管理简单而深受人们的喜爱，在欧洲花卉市场上十分畅销。迷你月季是有刺灌木，它的花多而艳，连续开花能力强，是深受大众欢迎的盆栽植物之一。但在试管内开花的迷你月季花色更为鲜艳、开花时间更长、运输方便、易栽培管理而成为一种新型的室内观赏花卉，具有广阔的市场前景。目前，国内未见对月季试管开花进行规模生产和专利申请的报道，国外文献(Wang G Y，Yuan M F，Hong Y.In vitro flower induction in roses.In Vitro Cellularand Dcvclopmcntal Biology-Plant，2002，38：513-518.)报道采用的品种不同，所采用的方法也较复杂。
发明内容
本发明的目的在于提供一种简单的、开花诱导率较高的月季试管开花的方法。
我们通过在生长季节选取生长旺盛的月季的茎尖或带节茎段为外植体，采用成分独特培养基进行组织培养，方法简单，开花诱导率较高，从而实现了本发明的目的。
本发明月季试管开花的方法，其特征包括以下的步骤：
(1)外植体诱导材料消毒和不定芽诱导：在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(Rosahybrida cv.mini)的茎尖或带节茎段为外植体，用水冲洗干净后，先用70％～75％的酒精浸泡10～30s，再用0.1％～0.2％升汞溶液或1％～2％的次氯酸钠溶液消毒5～10min，无菌水冲洗后，接种到培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，培养形成不定芽，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤1.0～2.0mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH5.5～5.8；
(2)不定芽的继代增殖：将步骤(1)诱导出的不定芽切割后再继代培养于培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天进行不定芽的增殖，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤1.0～2.0mg，萘乙酸0.1～0.2mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH5.5～5.8；
(3)试管开花诱导：当步骤(2)芽高约2～3cm时，切下接种到开花诱导培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天培养，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤0.1～0.3mg，萘乙酸0.1～0.2mg，蔗糖20～40g和琼脂5～7g，其余为MS，pH5.5～5.8。
步骤(1)所述的无菌水冲洗次数为4～5次，所述的茎尖和带节茎段最好切成长度为约1cm，培养15～20天能在外植体上形成不定芽，消毒成功率80％～90％。
步骤(2)中的一个继代增殖周期为30～35天，每一个继代增殖周期后的增殖倍数为3～5倍，继代10代后仍能保持增殖率。
步骤(3)中培养至开花时间一般是40～50天，45天左右开花率可达60％以上，苗高约7～8厘米。
上述培养基中的MS为国际通用的培养基，其成分和配制方法参看文献(谭文澄、戴策刚主编.观赏植物组织培养技术.北京：中国林业出版社，1991.)。
本发明月季试管开花的方法培育速度快，消毒方法简单、消毒成功率在80％～90％，培养基成分独特且简单实惠，开花诱导率较高，花率可达60％以上，花色鲜艳。
具体实施方式
以下的实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。
实施例1：
在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(Rosa hybrida cv.mini)的茎尖或带节茎段为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在70％酒精中浸泡10s，再用0.2％升汞溶液消毒5分钟，无菌水冲洗4次，切成1cm左右，接种到培养基(每升含有6-苄基嘌呤2.0mg，，蔗糖30g和琼脂7g，其余为MS，pH5.5)，在温度28℃，光照度1500lx，光照12h/天，消毒成功率80％，15天左右能在外植体上形成不定芽。将诱导出的不定芽切割后再继代培养在培养基(每升含有6-苄基嘌呤1.0mg，萘乙酸0.2mg，蔗糖30g和琼脂7g，其余为MS，pH5.5)，在温度28℃，光照度1500lx，光照12小时/天进行不定芽的增殖，30天为1个继代增殖周期，一个继代增殖周期后的增殖倍数为3倍，能多次继代，继续继代后增殖倍数略有升高。当芽高约3cm时，切下接种到开花培养基(每升含有6-苄基嘌呤0.1mg，萘乙酸0.1mg，蔗糖30g和琼脂7g，其余为MS，pH5.5)，在温度28℃，光照度1500lx，光照12h/天，培养48天时开花率达65％，苗高约7～8厘米。
实施例2：
在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(Rosa hybrida cv.mini)的茎尖或带节茎段为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在75％酒精中浸泡30s，再用0.1％升汞溶液消毒10min，无菌水冲洗5次，切成长1cm左右，接种到培养基(每升含有6-苄基嘌呤1.0mg，蔗糖30g和琼脂7g，其余为MS，pH5.5)，在温度26℃，光照度2000lx，光照8h/天，消毒成功率90％，20天在外植体上形成不定芽。将诱导出的不定芽切割后再继代培养在培养基(每升含有6-苄基嘌呤2.0mg，萘乙酸0.1mg，蔗糖30g和琼脂7g，其余为MS，pH5.5)，在温度26℃，光照度2000lx，光照8h/天，进行不定芽的增殖，30天为1个继代增殖周期，一个继代增殖周期后的增殖倍数为5倍，能多次继代。当芽高约3cm时，切下接种到开花培养基(每升含有6-苄基嘌呤0.2mg，萘乙酸0.2mg，蔗糖40g和琼脂7g，其余为MS，pH5.5)，在温度26℃，光照度2000lx，光照8h/天，培养50天时开花率达70％，苗高约7～8厘米。
实施例3：
在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(Rosa hybrida cv.mini)的茎尖或带节茎段为外植体，在自来水下冲洗干净后，先在70％酒精中浸泡30s，再用1.5％次氯酸钠溶液溶液消毒10min，无菌水冲洗5次，切成长约1cm，接种到培养基(每升含有6-苄基嘌呤1.5mg，蔗糖20g和琼脂5g，其余为MS，pH5.8)，在温度30℃，光照度1800lx，光照10h/天，消毒成功率90％，18天在外植体上形成不定芽。将诱导出的不定芽切割后再继代培养在培养基(每升含有6-苄基嘌呤1.5mg，萘乙酸0.15mg，蔗糖20g和琼脂5g，其余为MS，pH5.8)，在温度30℃，光照度1800lx，光照10h/天，进行不定芽的增殖，35天为1个继代增殖周期，一个继代增殖周期后的增殖倍数为4倍，可进行多次继代。当芽高约2cm时，切下接种到开花培养基(每升含有6-苄基嘌呤0.3mg，萘乙酸0.2mg，蔗糖20g和琼脂5g，其余为MS，pH5.8)，在温度30℃，光照度1800lx，光照10h/天，培养45天时开花率达60％，苗高约7～8厘米。

Claims (2)

1.月季试管开花的方法，其特征包括以下的步骤：
(1)外植体诱导材料消毒和不定芽诱导：在生长季节选取生长旺盛的迷你月季(Rosahybrida cv.mini)的茎尖或带节茎段为外植体，用水冲洗干净后，先用70％～75％的酒精浸泡10～30s，再用0.1％～0.2％升汞溶液或1％～2％的次氯酸钠溶液消毒5～10min，无菌水冲洗后，接种到培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天，培养形成不定芽，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤1.0～2.0mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH 5.5～5.8；
(2)不定芽的继代增殖：将步骤(1)诱导出的不定芽切割后再继代培养于培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天进行不定芽的增殖，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤1.0～2.0mg，萘乙酸0.1～0.2mg，蔗糖20～30g和琼脂5～7g，其余为MS，pH 5.5～5.8；
(3)试管开花诱导：当步骤(2)芽高约2～3cm时，切下接种到开花诱导培养基中，在温度(28±2)℃，光照度1500～2000lx，光照8～12h/天培养，所述的培养基每升中含有6-苄基嘌呤0.1～0.3mg，萘乙酸0.1～0.2mg，蔗糖20～40g和琼脂5～7g，其余为MS，pH 5.5～5.8。
2.根据权利要求1的月季试管开花的方法，其特征是步骤(1)所述的无菌水冲洗次数为4～5次，培养15～20天在外植体上形成不定芽；步骤(2)中的一个继代增殖周期为30～35天。
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