CN100429306C - 索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法 - Google Patents
索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN100429306C CN100429306C CNB2005101349773A CN200510134977A CN100429306C CN 100429306 C CN100429306 C CN 100429306C CN B2005101349773 A CNB2005101349773 A CN B2005101349773A CN 200510134977 A CN200510134977 A CN 200510134977A CN 100429306 C CN100429306 C CN 100429306C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- lily
- culture
- seedling
- bud
- substratum
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 241000234435 Lilium Species 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 21
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 title 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 claims abstract description 25
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 20
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000009395 breeding Methods 0.000 claims description 13
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 12
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000012549 training Methods 0.000 claims description 7
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 6
- 239000005631 2,4-Dichlorophenoxyacetic acid Substances 0.000 claims description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 5
- BYBLEWFAAKGYCD-UHFFFAOYSA-N Miconazole Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1COC(C=1C(=CC(Cl)=CC=1)Cl)CN1C=NC=C1 BYBLEWFAAKGYCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000002786 root growth Effects 0.000 claims 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 abstract description 5
- 239000012879 subculture medium Substances 0.000 abstract description 2
- 239000012883 rooting culture medium Substances 0.000 abstract 2
- 238000012136 culture method Methods 0.000 abstract 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 8
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 230000001902 propagating effect Effects 0.000 description 5
- 238000010923 batch production Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- 241000737241 Cocos Species 0.000 description 2
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 2
- 241000234280 Liliaceae Species 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 2
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 2
- 230000008676 import Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 206010011409 Cross infection Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001359444 Lilium tenuifolium Species 0.000 description 1
- 206010029803 Nosocomial infection Diseases 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241001185310 Symbiotes <prokaryote> Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001680 brushing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000001784 detoxification Methods 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011474 orchiectomy Methods 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
本发明属于生物技术领域。运用组织培养方法,通过室内扩繁获得大量的索尔邦百合无菌组培苗。选取索尔邦百合鳞片叶为外植体,经消毒后切块接入含不同植物激素的培养基中,诱导培养基诱导出愈伤及芽丛,经继代培养基增殖后,当苗高5cm以上并且基部鳞茎球形成时移入生根培养基,经练苗7天后移栽入基质中。诱导培养基为MS+2,4-D 1.0~2.0mg/L和MS+BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L;增殖培养基为MS+2,4-D 1.0~1.5mg/L和MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L和NAA0.2mg/L。培养条件是,培养温度22~26℃,光照度2000~2200lx,光照12h.d-1,pH 5.8。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域,涉及一种快速繁殖百合组织培养苗的方法,包括选取索尔邦百合外植体部位,诱导、增殖继代、生根培养基配方、培养时间、条件及组培苗移栽的条件。
背景技术
百合(Lilium tenuifolium Fisch)是百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)植物的统称,百合是世界著名的观赏花卉,同时又有药用及食用价值。索尔邦百合(Sorbonne)属于东方百合杂种系(The Oriental Hybrids),为百合中的名贵品种群,由于其花色艳丽、花形奇特、芳香宜人而深受人们的喜爱,成为近年国内外市场热销的花卉种类之一,东方百合是通过杂交育种选育出来的,种子高度败育,常采用传统的鳞茎球繁殖方法,繁殖速度缓慢,在短期内难以满足市场需求,目前国内主要通过进口种球进行生产,为了降低生产成本,实现种球的自主繁育,进行组织培养与快速繁殖已十分必要,并且在百合的优良品种快速繁殖、脱毒复壮、新品种培育以及应用生物技术进行分子育种中,组织培养都是比较合宜的方法,百合许多器官和组织都可进行组织培养诱导成苗,索尔邦百合采用花丝、花托、子房等花器官进行离体培养的研究有报导,但采用鳞茎球快繁的未见报导。而花器官作外植体取材易受开花期的限制,不能常年进行组培生产,而鳞茎球却不受此制约,可连年取材进行组培生产。
组培快繁技术有一些报道:如CN1631111斑叶兰组培培养基及其快速繁殖方法,包括基本培养基及分别适用于不同组培阶段的诱导培养基、增殖培养基壮苗培养、基生根培养基。CN1460409A报道了兰州百合的快速繁殖方法,选取兰州百合的鳞片、叶和根的切段,经外植体消毒后,接入含不同植物激素的培养基,诱导产生芽,继代培养后接入生根培养基,当试管苗高3-5cm时移栽入种植练苗,鳞片和不定芽的诱导和繁殖培养基为MS BA2mg/L、NAA0.2mg/L,根、叶诱导和繁殖培养基为MS BA2mg/L、NAA0.4mg/L,试管苗生根培养基为1/2MS NAA0.3mg/L,温度27±2℃,光照为12h.d-1,pH5.8。
上述培养基和方法不能针对索尔邦百合Sorbonne(粉红色)的鳞茎球的鳞片作外植体。国外引进的索尔邦百合其快繁配方明显不同于我国的本土品种兰州百合的快繁方法,而这种索尔邦百合是东方百合中热销的品种,具有良好的观赏和经济价值,因此其快繁方法有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是:利用植物组织培养方法,短时间内获得室内大规模繁殖的百合组培苗,或是应用于花卉的工厂化生产,或是用作转基因时转化受体系统,并克服了传统鳞茎繁殖倍数低,速度慢的缺点,同时改变了以花器官为外植体受花期限制的不足,可常年提供组培苗的新的繁殖方法。
本发明的技术方案是:选取索尔邦百合鳞片叶为外植体,经消毒后切块接入含不同植物激素的培养基中,诱导培养基诱导出愈伤及芽丛,经继代培养基增殖后,当苗高3-6cm以上并且基部鳞茎球形成时移入生根培养基,经练苗5-8天后移栽入基质中。
本发明所述诱导培养基MS+2,4-D 1.0~2.0mg/L和MS+BA 1.5mg/L+NAA0.2mg/L;增殖培养基为MS+2,4-D 1.0~1.5mg/L和MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L和NAA0.2mg/L。培养条件是,培养温度22~26℃,光照度2000~2200lx,最优条件选光照10-14h.d-1,pH5.5-6.2。
本发明以索尔邦百合Sorbonne(粉红色)鳞茎球的鳞片作外植体,经诱导培养基培养后经80-100d,诱导出愈伤与芽丛,增值出新植株,又经继代增值培养基培养约30-40d后愈伤增值又新增出更多的芽及愈伤,长大的苗经生根培养基培养约40-50d后生出大量根系,即再生出完整植株,经练苗移栽入基质中。每次继代增值芽数达到了约2-3倍。即从接入外植体后经历约150-180d(加上生根和练苗时间)芽增殖倍数达到了1∶5~7以上(每个3mm×3mm3的外植体块经历一次继代至少可获得5-7株苗)。该方法繁殖速度快,繁殖倍数大,优于传统的分株繁殖方法。
本发明的特点是:利用植物组织培养方法,短时间内获得室内大规模繁殖的优质百合组培苗,可应用于花卉的工厂化生产,本发明确定的三种培养基配方,具有良好的作用。
具体实施方式
1.百合无菌鳞茎球外植体的处理:
中国芊卉种苗公司购买的国外进口的百合鳞茎球,先经自来水流水冲洗2h后,用细软毛刷刷去泥土冲洗干净,把鳞茎球中的鳞片叶剥下后,剔出病残者,挑选靠近鳞茎盘基部的幼嫩鳞片叶,用刀修整,剔除菌斑及瑕眦,放入培养皿中待用。在超净工作台上,用75%酒精浸泡30s,用无菌水漂洗后再放入0.1%Agcl2(0.02%吐温)中浸泡5-8min,用无菌水漂洗5次后,放入无菌的培养皿中用灭菌的滤纸吸干水分,切成3mm×3mm的小块作外植体备用。
2.百合组培的培养基及培养条件:
包括基本培养基附加不同激素组合,适用于不同组培阶段的培养基组成,具体各阶段培养基如下:①基本培养基:选用MS培养基或1/2MS培养基,以上培养基均加入0.55%琼脂,3%蔗糖,pH5.8,培养温度22~26℃,光照度2000~2200lx,光照12h.d-1;②诱导培养基:MS+2,4-D 1.0~2.0mg/L和MS+BA 1.5mg/L+NAA 0.2mg/L的一种;③增殖培养基:MS+2,4-D 1.0~1.5mg/L和MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L中的一种;④生根培养基:1/2MS+IBA0.2mg/L和1/2MS+NAA0.2mg/L中的一种。
3.百合鳞片愈伤、芽的诱导、继代及生根过程
在超净工作台上,将由步骤1获得的外植体小块背面朝下放在诱导基①中,在组织培养室中暗培养一周后进行光照培养,20d左右时鳞片表面及切口处出现白色及浅绿色突起,40-45d后在突起中诱导出芽丛,同时基部淡黄绿色愈伤组织长大。培养至80-100d愈伤组织中一部分发出芽丛,还有一部分继续增殖长大,培养至120d时将高度生长至5cm以上并生出鳞茎球的小苗移至生根培养基中生根,其它在诱导培养基中的愈伤组织部分可经切割后移至增殖培养基中继续诱导,继代产生大量的愈伤和芽丛。继代培养每隔30-40d进行一次,每次继代芽的增殖达到了2-3倍,愈伤的增殖达到了3-4倍,增殖循环不断进行下去就达到的扩繁的目的。
在组织培养室培养期间注意观察,随时剔除污染的材料,以免交叉感染。
4.练苗及移栽
移入生根培养基中的苗经40-50d生长出大量根系,并且苗基部的鳞茎球发育至直径达3mm,就可敞开瓶口在培养室中练苗。一周后,用流动水清洗干净根系上的培养基,移入事先喷洒过0.2%达克宁的基质(沙∶花肥∶椰糠为1∶1∶1)中,放入培养箱中培养,温度为25℃,平均光照强度2000lx,每日光照12h。每隔两天浇水,培养15d后再移入花盆或大田中生长。
本发明的效果在于:
1)获得了百合的无菌苗。百合鳞茎本身带有许多杂菌和病毒,该方法经自来水流水冲洗2h后,又经人工用毛刷清洗,初步降低污染,然后通过75%酒精和Agcl2彻底灭菌,在超净工作台上进行系列无菌操作,获得了再生的无菌苗,该无菌苗可用作转基因研究中的转化受体,该方法可达到接种无菌率75%,存活率60%以上。
2)建立了百合组培苗的快速繁殖途径。百合经诱导培养后生出了愈伤和新的芽丛,每隔30-40d继代1次的频率,即从接入外植体后经历约150-180d(加上生根和练苗时间)芽增殖倍数达到了1∶5~7以上(每个3mm×3mm3的外植体块经历一次继代至少可获得5-7株苗)。而每个新生的无菌小苗,可继续进行以上的增殖培养。技术简单,操作方便,而且所用的试剂均为常规化工产品,成本低廉,有利于大规模的工厂化生产。
3)本项发明可不分季节,可随时提供健康的百合无菌小苗。该方法克服传统的鳞茎球繁殖方法繁殖速度缓慢的缺点,即使百合的工厂化生产成为可能,也为转基因等生物工程方面的研究提供无菌小苗或愈伤。
上述实施例说明本发明,但本发明的内容并不局限于此。
实施例1:
1材料与方法:如上具体实施方式中1和2所述
2结果:2.1百合鳞片不定芽的诱导
鳞片块接入培养基在组织培养室中先暗培养7d,约15d左右鳞片颜色由白变成绿色,20d时鳞片表面及切口处出现白色及浅绿色突起,每个鳞片上有数个这种突起,40-45d时突起上长出很密的绿色的芽丛同时鳞片基部出现的愈伤组织并增大,至70-80d已出的芽丛继续长高,而基部愈伤在生长的同时又出现新的芽点及芽丛。至60d(约8周)四个诱导培养基芽的分化率都大于40%。诱导培养情况见表1。芽丛在诱导培养基上能正常生长说明诱导培养基也能继续培养愈伤与芽丛的共生体,培养时的120d(约17周)结果如表2所示。
表1 不同激素含量培养基60d诱导芽分化情况
表2 诱导培养基上生长120d时芽的生长情况
2.2继代增殖
培养120d时,将高度为大于5cm并且基部鳞茎球已形成的苗接入生根培养基,其余的愈伤和小芽丛切成小块,接入不同的芽增殖培养基中继代增殖,培养约40d后,便又形成新的从生芽,同时愈伤还在继续增大,同时芽在长大过程中鳞茎球也在形成、生长,每次继代芽的增殖倍数如表3所示。
表3 不同激素含量培养基继代增殖结果
2.3生根
将苗高达5cm以上且基部鳞茎球达到直径3mm的无菌苗移入生根培养基中,经40d后,生根情况见表4,其中的效果较好的培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L、1/2MS+IBA0.2mg/L。
表4不同激素含量生根培养基继代增殖结果
2.4练苗及移栽
移入生根培养基中的苗15d开始生根,经40-50d生长出大量根系,并且苗基部的鳞茎球发育至直径达3mm,就可敞开瓶口在培养室中练苗。一周后,用流动水清洗干净根系上的培养基,移入事先喷洒过0.2%达克宁的基质(沙∶花肥∶椰糠比为1∶1∶1)中,放入培养箱中,温度为25℃,平均光照强度2000lx,每日光照12h。每隔两天浇水管理,15d后再移入花盆或大田中生长。
3讨论 本培养经历初代培养中短暂愈伤阶段很快就进入芽丛阶段,可以说愈伤与芽丛是共生的,MS+2,4-D 1.0~1.5mg/L培养基诱导愈伤效果很好,诱导芽密度大,但苗的健壮成度比在MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L诱导的差。而在MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L继代培养的芽密度中等,增殖倍数较好芽更健壮。因此若为转基因培养时愈伤增殖用MS+2,4-D 1.0~1.5mg/L继代最好,而为获得无菌组培苗可选用MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L继代最好。经诱导培养120d后每隔30-40d进行继代增殖,达到每个外植体新生芽5-7株,其中愈伤增殖倍数也达到了3-4倍。
Claims (2)
1.索尔邦百合组培培养基培养及其快速繁殖方法,其特征是该方法由以下步骤组成:选取索尔邦百合鳞片叶为外植体,经消毒后切块接入含植物激素的培养基中,由诱导培养基诱导出愈伤及芽丛,经增殖.培养基增殖后,当苗高3-6cm以上并且基部鳞茎球形成时移入生根培养基,经练苗5-8天后移栽入基质中;所述诱导培养基采用如下配方:MS+2,4-D 1.0~2.0mg/L;增殖培养基为MS+2,4-D 1.0~1.5mg/L或MS+BA 0.5mg/L+NAA0.2mg/L;生根培养基为1/2MS+IBA0.2mg/L或1/2MS+NAA0.2mg/L;培养条件是,培养温度22~26℃,光照度2000~2200lx,光照10-14h.d-1,pH5.5-6.2。
2.由权利要求1所述的索尔邦百合组培培养基培养及其快速繁殖方法,其特征是当移入生根培养基中的苗经40-50d根系生长完成,并且苗基部的鳞茎球发育至直径达3mm,敞开瓶口在培养室中练苗,一周后,用流动水清洗干净根系上的培养基,移入事先喷洒过0.2%达克宁的基质中,放入培养箱中培养,温度为25℃,平均光照强度2000lx,每日光照12h;每隔两天浇水培养,15d后再移入花盆中生长备用。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB2005101349773A CN100429306C (zh) | 2005-12-31 | 2005-12-31 | 索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNB2005101349773A CN100429306C (zh) | 2005-12-31 | 2005-12-31 | 索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1810097A CN1810097A (zh) | 2006-08-02 |
CN100429306C true CN100429306C (zh) | 2008-10-29 |
Family
ID=36843328
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNB2005101349773A Expired - Fee Related CN100429306C (zh) | 2005-12-31 | 2005-12-31 | 索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN100429306C (zh) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101971775B (zh) * | 2010-10-18 | 2013-01-16 | 北京林业大学 | 百合无菌苗叶片直接诱导小鳞茎的繁殖方法 |
CN102405845B (zh) * | 2011-12-12 | 2015-08-19 | 中山火炬职业技术学院 | 一种观赏百合的组织培养快速繁殖方法 |
CN102696483B (zh) * | 2012-06-19 | 2013-09-04 | 西安文理学院 | 绿花百合快速繁殖方法 |
CN102754598B (zh) * | 2012-07-10 | 2013-08-14 | 中国长江三峡集团公司 | 百合试管小鳞茎诱导方法 |
CN102939900B (zh) * | 2012-11-22 | 2014-01-29 | 北京市农林科学院 | 诱导ot型百合花药获得(双)单倍体植株的方法及其培养基 |
CN112470932A (zh) * | 2020-12-14 | 2021-03-12 | 连云港市农业科学院 | 一种利用ems试剂诱变进行耐盐百合新品系选育的方法 |
CN114793893B (zh) * | 2022-03-29 | 2023-03-24 | 陇东学院 | 一种香水百合鳞茎再生及多倍体诱导的方法 |
CN116491422A (zh) * | 2023-05-30 | 2023-07-28 | 安徽农业大学 | 百合离体快繁体系建立方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1613297A (zh) * | 2003-11-07 | 2005-05-11 | 云南省农业科学院园艺作物研究所 | 切花百合组培种苗一次成苗的方法 |
-
2005
- 2005-12-31 CN CNB2005101349773A patent/CN100429306C/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1613297A (zh) * | 2003-11-07 | 2005-05-11 | 云南省农业科学院园艺作物研究所 | 切花百合组培种苗一次成苗的方法 |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
兰州百合和野百合组织培养及快速繁殖研究. 王刚等.西北师范大学学报(自然科学版),第38卷第1期. 2002 |
兰州百合和野百合组织培养及快速繁殖研究. 王刚等. 西北师范大学学报(自然科学版),第38卷第1期. 2002 * |
兰州百合的组织培养. 罗智凤等.亚热带植物科学,第32卷第2期. 2003 |
兰州百合的组织培养. 罗智凤等. 亚热带植物科学,第32卷第2期. 2003 * |
新普百合叶片的组织培养. 王志等.山东农业科学,第5期. 2005 |
新普百合叶片的组织培养. 王志等. 山东农业科学,第5期. 2005 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1810097A (zh) | 2006-08-02 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101647393B (zh) | 毛花猕猴桃组培快速繁殖方法 | |
CN100429306C (zh) | 索尔邦百合组培培养基及其快速繁殖方法 | |
CN105815213A (zh) | 一种猕猴桃离体再生体系的建立方法 | |
CN104663453A (zh) | 一种杉木组培快繁方法 | |
CN103190344B (zh) | 一种灰楸的组织培养方法 | |
CN102845313A (zh) | 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法 | |
CN101897297B (zh) | 一种萱草组织培养两步成苗的快繁方法 | |
CN103141387A (zh) | 一种万象组织培养的方法 | |
CN104885948A (zh) | 一种油茶子叶节直接再生植株的方法 | |
CN106613988A (zh) | 瓶内塑型快速培育难扦插繁殖的拟石莲属商品小盆栽方法 | |
CN101810144B (zh) | 瓜叶菊的快速繁殖方法 | |
CN103828716B (zh) | 少女石竹的组织培养方法 | |
CN101103702A (zh) | 花楸离体繁殖的方法 | |
CN102210267A (zh) | 玫瑰再生为完整植株的方法 | |
CN102144543A (zh) | 一项铁线莲阿拉贝拉组织培养快繁技术 | |
CN113243295B (zh) | 朱顶红组培繁育方法 | |
CN101983555A (zh) | 一种诱导菊花体细胞胚间接发生的方法 | |
CN101015280B (zh) | 滇北球花报春的组培快繁方法 | |
CN101743908A (zh) | 红花银桦组培快繁及栽培方法 | |
CN101946704A (zh) | 以未成熟种子为外植体的月季再生植株的方法 | |
CN101836589B (zh) | 一种南抗杨的快速繁殖方法 | |
CN103609444A (zh) | 常绿萱草的组织培养法 | |
CN100391333C (zh) | 安祖花无菌苗组织培养和试管苗炼苗移栽方法 | |
CN109042322A (zh) | 一种金心阿尔塔冬青的快速繁殖方法 | |
CN108094200A (zh) | 一种热处理结合茎尖剥离获得安祖花脱毒苗的培育方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C17 | Cessation of patent right | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20081029 Termination date: 20100201 |