CN101034085A - 夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱 - Google Patents

夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱 Download PDF

Info

Publication number
CN101034085A
CN101034085A CN 200710026346 CN200710026346A CN101034085A CN 101034085 A CN101034085 A CN 101034085A CN 200710026346 CN200710026346 CN 200710026346 CN 200710026346 A CN200710026346 A CN 200710026346A CN 101034085 A CN101034085 A CN 101034085A
Authority
CN
China
Prior art keywords
rsd
peaks
peak area
retention time
mobile phase
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN 200710026346
Other languages
English (en)
Other versions
CN100573138C (zh
Inventor
孙维广
柯雪红
许招懂
苏广丰
方铁铮
符素平
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Xingqun Pharmaceutical Co., Ltd.
Original Assignee
GUANGZHOU XINGQUN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by GUANGZHOU XINGQUN PHARMACEUTICAL CO Ltd filed Critical GUANGZHOU XINGQUN PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CNB2007100263469A priority Critical patent/CN100573138C/zh
Publication of CN101034085A publication Critical patent/CN101034085A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100573138C publication Critical patent/CN100573138C/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱，涉及中药制剂的质量控制方法，具体是建立HPLC指纹图谱以检测夏桑菊制剂中醇提物的方法。方法包括：(a)对照品溶液的制备；(b)供试品溶液的制备；(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相为0.1～3％醋酸与甲醇组成的梯度洗脱液；柱温：25～50℃；紫外检测波长为285～295nm；流速：0.5～1.5ml·min－1；时间：30～80min；(d)测定：高效液相色谱法得指纹图谱。本发明的有益效果：能有效表征夏桑菊制剂的质量，有利于监控产品的质量；具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好；可快速、准确地鉴别产品的真伪优劣。

Description

夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱
                       技术领域
本发明涉及中药制剂的质量控制方法，具体涉及夏桑菊制剂高效液相色谱法指纹图谱的构建方法和标准指纹图谱。
                       背景技术
夏桑菊制剂由中药材夏枯草、桑叶、野菊花为原料，经水提取后，按常规的制药工艺制成，具有清肝明目、疏风散热、除湿痹、解疮毒的功能，用于风热感冒、目赤头痛、高血压、头晕耳鸣、咽喉肿痛、疗疮肿毒等症。夏桑菊制剂在中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂第十五册收载有夏桑菊颗粒剂，是深受欢迎的中药制剂，现已有夏桑菊无糖颗粒剂，夏桑菊口服液，夏桑菊饮料等剂型上市。
国家和企业对夏桑菊颗粒的质量控制主要采用薄层色谱法鉴别是否有主药夏枯草的熊果酸的成分；
杨冬梅等在文献“夏桑菊冲剂的质量标准研究”安徽医药，2001，5(3)：218报道了用分光光度法测定夏桑菊制剂中总黄酮的含量；
马稳等在杂志“分析科学学报”2004，20(3)：284公开了用高效液相色谱紫外可见检测夏桑菊中熊果酸的分析方法；黄淑彰在文献“现代中药研究与实践”2004，18(3)：33报道了采用HPLC法测定了夏桑菊颗粒中熊果酸的含量；熊国营等在文献“江西中医学院学报”2004，16(6)：48)中报道了用HPLC法测定颗粒中所含活性成分绿原酸的含量方法。
以上均是针对个别成分进行鉴别或含量测定的方法，难以全面表征夏桑菊制剂的物理化学特征，因此，对复方夏桑菊制剂的质量控制方法有待进一步完善。
                       发明内容
本发明的目的为夏桑菊制剂的质量控制和真伪鉴别提供一种新的方法，通过建立夏桑菊制剂指纹图谱的方法，并由此方法得到夏桑菊制剂共有模式的指纹图谱。
为达到本发明的目的所采用的技术方案：用高效液相色谱法建立夏桑菊制剂指纹图谱的方法，具体包括如下步骤：
(a)对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品，用甲醇配制成每1ml含绿原酸0.2～0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
(b)供试品溶液的制备：A.精密称取夏桑菊颗粒剂粉末溶于甲醇中、超声处理后，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置容量瓶，定溶，滤膜过滤，即得供试品溶液；或B.精密量取夏桑菊饮料或口服液，挥干，残渣用甲醇溶解，置容量瓶，定溶，滤膜过滤，即得供试品溶液；
(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相为醋酸与甲醇组成的梯度洗脱液；紫外检测：波长为285～295nm；
(d)测定：精密吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。
进一步优选的方法可以通过下述步骤实施：
(a)对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量置于容量瓶，用甲醇稀释至刻度，配制成每1ml含绿原酸0.2～0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
(b)供试品溶液的制备：A.精密称取夏桑菊颗粒剂粉末0.1～20g置20～100mL磨口锥型瓶中，精密加入甲醇20～100ml，塞紧，浸泡、超声处理后，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置1～5mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤膜过滤，即得供试品溶液；或B.精密量取夏桑菊饮料或口服液25～50mL，水浴上挥干，残渣用甲醇溶解，置1～5mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤膜过滤，即得供试品溶液；
(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相为0.1～3％醋酸与甲醇组成的梯度洗脱液；柱温：25～50℃；紫外检测：波长为285～295nm；流速：0.5～1.5mL·min-1；时间：30～80min；
(d)测定：精密吸取供试品溶液5～25μL注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。
本发明最佳的检测方法可以通过下述步骤实施：(b)供试品溶液的制备：A.精密称取夏桑菊颗粒剂粉末5.0g置50mL磨口锥型瓶中，精密加入甲醇50ml，塞紧，浸泡2小时，超声处理30分钟后，放至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置5mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，用滤膜过滤，即得供试品溶液；或B.精密量取夏桑菊饮料或口服液25mL，水浴上挥干，残渣用甲醇溶解，置5mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤膜过滤，即得供试品溶液；(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相为1％醋酸与甲醇组成的梯度洗脱液，柱温：30℃；检测波长为290nm；流速1.0mL.min-1；分析时间：65min。
在步骤(c)中，所述的梯度洗脱，优选梯度洗脱程序以如下体积浓度配置进行：
0分钟时，流动相A为100％的1％醋酸、流动相B为0％的甲醇溶液；
5分钟时，流动相A为93％的1％醋酸、流动相B为7％的甲醇溶液；
9分钟时，流动相A为90％的1％醋酸、流动相B为10％的甲醇溶液；
13分钟时，流动相A为82％的1％醋酸、流动相B为18％的甲醇溶液；
20分钟时，流动相A为78％的1％醋酸、流动相B为22％的甲醇溶液；
35分钟时，流动相A为60％的1％醋酸、流动相B为40％的甲醇溶液；
55分钟时，流动相A为30％的1％醋酸、流动相B为70％的甲醇溶液；
60分钟时，流动相A为0％的1％醋酸、流动相B为100％的甲醇溶液；
65分钟时，流动相A为100％的1％醋酸、流动相B为0％的甲醇溶液；
具体见下表：
流动相 时间   流量mL.min-1   A1％醋酸钠mL   B甲醇mL
  1   0   1   100   0
  2   5   1   93   7
  3   9   1   90   10
  4   13   1   82   18
  5   20   1   78   22
  6   35   1   60   40
  7   55   1   30   70
  8   60   1   0   100
  9   65   1   100   0
按照本发明所提供指纹图谱的建立方法所得夏桑菊制剂的指纹图谱中有20个特征共有峰，其中8号色谱峰为绿原酸参照峰，最强峰为16色谱峰，图谱总长度为65min，其中单峰面积超总峰面积1％的峰有20个，它们是1～20号峰；其中单峰面积超总峰面积5％的峰有4个，它们是4号峰、8号峰(绿原酸)、16号峰、20号峰；单峰面积超总峰面积10％的峰有1个，是16号峰。具体如下：
1号峰，平均保留时间RT为1.57min，RSD为2.06％，峰面积为1542541，RSD为23.75％。
2号峰，平均保留时间RT为1.91min，RSD为1.08％，峰面积为1660403，RSD为23.47％。
3号峰，平均保留时间RT为3.56min，RSD为1.43％，峰面积为1572609，RSD为24.14％。
4号峰，平均保留时间RT为10.83min，RSD为0.55％，峰面积为3730363，RSD为23.20％。
5号峰，平均保留时间RT为11.22min，RSD为0.63％，峰面积为1023133，RSD为18.56％。
6号峰，平均保留时间RT为14.60min，RSD为0.48％，峰面积为763899，RSD为33.34％。
7号峰，平均保留时间RT为15.25min，RSD为0.66％，峰面积为2077260，RSD为24.81％。
8号峰为绿原酸，平均保留时间RT为19.85min，RSD为％0.35，峰面积为2613097，RSD16.46为％。
9号峰，平均保留时间RT为20.69min，RSD为0.78％，峰面积为805465，RSD为18.00％。
10号峰，平均保留时间RT为22.66min，RSD为0.51％，峰面积为2258797，RSD为13.57％。
11号峰，平均保留时间RT为35.66min，RSD为％1.02，峰面积为588056，RSD为28.63％。
12号峰，平均保留时间RT为36.58min，RSD为0.64％，峰面积为1739577，RSD为23.95％。
13号峰，平均保留时间RT为37.48min，RSD为0.87％，峰面积为1144232，RSD为29.03％。
14号峰，平均保留时间RT为37.99min，RSD为0.61％，峰面积为1210576，RSD为24.05％。
15号峰，平均保留时间RT为39.32min，RSD为0.72％，峰面积为838066，RSD为20.36％。
16号峰，平均保留时间RT为40.45min，RSD为0.85％，峰面积为18321566，RSD为17.22％。
17号峰，平均保留时间RT为44.58min，RSD为0.91％，峰面积为1925024，RSD为20.23％。
18号峰，平均保留时间RT为45.45min，RSD为1.13％，峰面积为1666840，RSD为31.43％。
19号峰，平均保留时间RT为48.01min，RSD为0.88％，峰面积为550287，RSD为22.56％。
20号峰，平均保留时间RT为55.14min，RSD为0.77％。峰面积为3131146，RSD为27.56％。
RT为60min以后出现的峰为溶剂峰。
本发明的原理是根据夏桑菊制剂中主要的活性成分是药材夏枯草、桑叶、野菊花的提取物，其指纹图谱能从色谱的整体面貌上把握夏桑菊制剂的质量，所说的夏桑菊制剂包括固体制剂和液体制剂如夏桑菊含糖颗粒剂、无糖颗粒剂、片剂、胶囊剂、饮料、合剂和口服液等。用本方法测定按国家标准制备的夏桑菊制剂均能得到相同、相近似的指纹图谱。
本发明的有益效果如下：
(1)用本发明所提供的方法所建立的HPLC指纹图谱，能有效地表征夏桑菊制剂的质量，有利于全面监控产品的质量。
(2)指纹图谱注重各个构成指纹特征峰的前后顺序和相互关系，注重整体面貌特征，既避免了因测定一、二个化学成分而判定夏桑菊颗粒剂整体质量的片面性，又减少了为质量达标而人为处理的可能性。
(3)本发明具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。
(4)该方法可快速、准确地鉴别产品的真伪优劣。
下面通过实施例及其附图详细阐述本发明的技术方案，所列举的实施例及附图对本发明并没有限制。
                       附图说明
图1、夏桑菊颗粒剂的HPLC指纹图谱
图2、夏桑菊颗粒剂的10批次原始指纹图谱
图3、夏桑菊颗粒剂的10批次匹配后的指纹图谱
图4、夏桑菊制剂的HPLC共有模式的指纹图谱
下面通过实施例及其附图详细阐述本发明的技术方案，所列举的实施例及附图对本发明并没有限制。
                       具体实施方式
实施例1.检测夏桑菊含糖颗粒剂的指纹图谱
1.仪器与试药
1.1仪器Waters2695高效液相色谱仪，Waters 2996紫外检测器，Empower色谱工作站，AE-200型电子分析天平。
1.2试剂绿原酸对照品；甲醇(色谱纯)、二次重蒸水、醋酸(分析纯)。
2.高效液相色谱
2.1色谱条件：色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料(SunfrieC18，分析柱150mm×4.6mm，5um)；流动相为1％醋酸与甲醇组成的梯度洗脱液，柱温：30℃；紫外检测：波长为290nm；流速1.0mL.min-1；分析时间：65min。进样量：供试品溶液与对照品溶液各10μL。理论塔板数按绿原酸计算应不低于3000。
梯度洗脱程序如下表：
流动相 时间   流量mL.min-1   A1％醋酸钠mL   B甲醇mL
  1   0   1   100   0
  2   5   1   93   7
  3   9   1   90   10
  4   13   1   82   18
  5   20   1   78   22
  6   35   1   60   40
  7   55   1   30   70
  8   60   1   0   100
  9   65   1   100   0
2.2对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品5.0mg置于25mL容量瓶，用甲醇稀释至刻度，即得。
2.3供试品溶液的制备
夏桑菊含糖颗粒剂供试品溶液的制备：精密称取夏桑菊颗粒5.0g置具塞三角瓶中，精密加入甲醇50ml，塞紧，浸泡2小时，超声处理30分钟后，放至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置5mL容量瓶，加甲醇至刻度。摇匀，用针孔式微孔滤膜过滤，即得供试品溶液，备用。平行2份。
2.4测定：精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μL注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱，如图1所示。
实施例2.检测10批次夏桑菊含糖颗粒剂的指纹图谱
取夏桑菊颗粒10批次，按实施例1条件进行检测，得10批样品的HPLC图谱，如图2所示。通过10批HPLC图谱的比较，进行相似度评价，确定其特征共有峰：
指纹图谱中有20个特征共有峰，现将图谱的保留时间、峰面积的平均值以及占总峰面积汇总，具体如下：
1号峰，平均保留时间RT为1.57min，RSD为2.06％，峰面积为1542541，RSD为23.75％，占总峰面积的2.46％。
2号峰，平均保留时间RT为1.91min，RSD为1.08％，峰面积为1660403，RSD为23.47％，占总峰面积的2.72％。
3号峰，平均保留时间RT为3.56min，RSD为1.43％，峰面积为1572609，RSD为24.14％，占总峰面积的2.84％。
4号峰，平均保留时间RT为10.83min，RSD为0.55％，峰面积为3730363，RSD为23.20％，占总峰面积的6.54％。
5号峰，平均保留时间RT为11.22min，RSD为0.63％，峰面积为1023133，RSD为18.56％，占总峰面积的1.93％。
6号峰，平均保留时间RT为14.60min，RSD为0.48％，峰面积为763899，RSD为33.34％，占总峰面积的1.46％。
7号峰，平均保留时间RT为15.25min，RSD为0.66％，峰面积为2077260，RSD为24.81％，占总峰面积的4.52％。
8号峰为绿原酸，平均保留时间RT为19.85min，RSD为％0.35，峰面积为2613097，RSD16.46为％，占总峰面积的5.10％。
9号峰，平均保留时间RT为20.69min，RSD为0.78％，峰面积为805465，RSD为18.00％，占总峰面积的1.86％。
10号峰，平均保留时间RT为22.66min，RSD为0.51％，峰面积为2258797，RSD为13.57％，占总峰面积的4.24％。
11号峰，平均保留时间RT为35.66min，RSD为％1.02，峰面积为588056，RSD为28.63％，占总峰面积的1.10％。
12号峰，平均保留时间RT为36.58min，RSD为0.64％，峰面积为1739577，RSD为23.95％，占总峰面积的3.08％。
13号峰，平均保留时间RT为37.48min，RSD为0.87％，峰面积为1144232，RSD为29.03％，占总峰面积的2.28％。
14号峰，平均保留时间RT为37.99min，RSD为0.61％，峰面积为1210576，RSD为24.05％，占总峰面积的2.18％。
15号峰，平均保留时间RT为39.32min，RSD为0.72％，峰面积为838066，RSD为20.36％，占总峰面积的1.63％。
16号峰，平均保留时间RT为40.45min，RSD为0.85％，峰面积为18321566，RSD为17.22％，占总峰面积的31.48％。
17号峰，平均保留时间RT为44.58min，RSD为0.91％，峰面积为1925024，RSD为20.23％，占总峰面积的3.40％。
18号峰，平均保留时间RT为45.45min，RSD为1.13％，峰面积为1666840，RSD为31.43％，占总峰面积的3.23％。
19号峰，平均保留时间RT为48.01min，RSD为0.88％，峰面积为550287，RSD为22.56％，占总峰面积的1.12％。
20号峰，平均保留时间RT为55.14min，RSD为0.77％。峰面积为3131146，RSD为27.56％，占总峰面积的5.82％。
RT为60min以后出现的峰为溶剂峰。
所述指纹图谱中，夏桑菊颗粒的指纹图谱中含有20个特征共有峰，其中参照峰为绿原酸(8号峰)，即S色谱峰，最强峰为16色谱峰，图谱总长度为65min，其中单峰面积超总峰面积1％的峰有20个，它们是1～20号峰；其中单峰面积超总峰面积5％的峰有4个，它们是4号峰、8号峰(绿原酸)、16号峰、20号峰；单峰面积超总峰面积10％的峰有1个，是16号峰。
相似度评价：采用中国药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)对HPLC图谱进行综合评价，相似度评价结果见表2，经匹配后的图谱见附图3。
                   表2HPLC指纹图谱相似度评价
相似度(对照)    0.987    0.990    0.991    0.993    0.993    0.993    0.995    0.992    0.994    0.993
相似度(参照)    0.983    0.974    0.976    0.989    0.987    0.990    0.992    0.979    0.989    1.000
供试品指纹图谱与共有模式图谱经计算机辅助相似度评价软件计算，相似度大于0.90。
通过上述方法所建立的夏桑菊制剂HPLC共有模式的指纹图谱如图4所示。
实施例3夏桑菊含糖颗粒剂指纹图谱的测定方法
参照溶液：同实施例1
(b)供试品溶液的制备：精密称取夏桑菊颗粒2.0g置具塞三角瓶中，精密加入甲醇20ml，塞紧，浸泡2小时，超声处理30分钟后，放至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置2mL容量瓶，加甲醇至刻度。摇匀，用针孔式微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料(Sunfrie C18，分析柱150mm×4.6mm，5um)；采用梯度洗脱，流动相为1％L醋酸钠缓冲液(A相)与甲醇组成的梯度洗脱液(B相)；梯度洗脱程序如下：0分钟时，流动相A为100％的1％醋酸溶液、流动相B为0％的甲醇溶液；5分钟时，流动相A为93％的1％醋酸溶液、流动相B为7％的甲醇溶液；9分钟时，流动相A为90％的1％醋酸溶液、流动相B为10％的甲醇溶液；13分钟时，流动相A为82％的1％醋酸溶液、流动相B为18％的甲醇溶液；20分钟时，流动相A为78％的1％醋酸溶液、流动相B为22％的甲醇溶液；35分钟时，流动相A为60％的1％醋酸溶液、流动相B为40％的甲醇溶液；55分钟时，流动相A为30％的1％醋酸溶液、流动相B为70％的甲醇溶液；60分钟时，流动相A为0％的1％醋酸溶液、流动相B为100％的甲醇溶液；65分钟时，流动相A为100％的1％醋酸溶液、流动相B为0％的甲醇溶液。柱温：30℃；紫外检测：波长为290nm；流速1.0mL.min-1；分析时间：65min。
(c)测定：精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱与图1相似。
实施例4.夏桑菊含糖颗粒剂指纹图谱的测定方法
(b)供试品溶液的制备：精密称取夏桑菊颗粒10g置具塞三角瓶中，精密加入甲醇100ml，塞紧，浸泡2小时，超声处理30分钟后，放至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置10mL容量瓶，加甲醇至刻度。摇匀，用针孔式微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
其它同实施例3操作，所得指纹图谱与图1相似。
实施例5.夏桑菊饮料指纹图谱的测定方法
供试品溶液的制备：精密量取夏桑菊饮料25mL，水浴上挥干，残渣用甲醇溶解，置5mL容量瓶，加甲醇至刻度。摇匀，用针孔式微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
其它同实施例3操作，所得指纹图谱与图1相似。
实施例6.夏桑菊口服液指纹图谱的测定方法
供试品溶液的制备：精密量取夏桑菊口服液25mL，水浴上挥干，残渣用甲醇溶解，置5mL容量瓶，加甲醇至刻度。摇匀，用针孔式微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。
其它同实施例3操作操作，所得指纹图谱与图1相似。

Claims (5)

1、一种夏桑菊制剂指纹图谱的建立方法，其特征在于采用高效液相色谱法，具体包括如下步骤：
(a)对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品，用甲醇配制成每1ml含绿原酸0.2～0.5mg的溶液，作为对照品溶液；
(b)供试品溶液的制备：A.精密称取夏桑菊颗粒剂粉末溶于甲醇中、超声处理后，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置容量瓶，定溶，滤膜过滤，即得供试品溶液；或B.精密量取夏桑菊饮料或口服液，挥干，残渣用甲醇溶解，置容量瓶，定溶，滤膜过滤，即得供试品溶液；
(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相为醋酸与甲醇组成的梯度洗脱液；紫外检测：波长为285～295nm；
(d)测定：精密吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。
2、如权利要求1所述的夏桑菊制剂指纹图谱的建立方法，其特证在于：所述步骤：
(b)供试品溶液的制备：A.精密称取夏桑菊颗粒剂粉末0.1～20g置20～100mL磨口锥型瓶中，精密加入甲醇20～100ml，塞紧，浸泡、超声处理后，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置1～5mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤膜过滤，即得供试品溶液；或B.精密量取夏桑菊饮料或口服液25～50mL，水浴上挥干，残渣用甲醇溶解，置1～5mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤膜过滤，即得供试品溶液；
(c)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相为0.1～3％醋酸与甲醇组成的梯度洗脱液；柱温：25～50℃；紫外检测：波长为288～292nm；流速：0.5～1.5mL·min-1；时间：30～80min；
(d)测定：精密吸取供试品溶液5～25μL注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。
3、如权利要求1所述的夏桑菊制剂指纹图谱的建立方法，其特证在于：所述步骤(b)供试品溶液的制备：A.精密称取夏桑菊颗粒剂粉末5.0g置50mL磨口锥型瓶中，精密加入甲醇50ml，塞紧，浸泡2小时，超声处理30分钟后，放至室温，用甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，滤液挥干，残渣用甲醇溶解，置5mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，用滤膜过滤，即得供试品溶液；或B.精密量取夏桑菊饮料或口服液25mL，水浴上挥干，残渣用甲醇溶解，置5mL容量瓶，加甲醇至刻度，摇匀，滤膜过滤，即得供试品溶液；(c)色谱条件中流动相为1％醋酸与甲醇组成的梯度洗脱液，柱温：30℃；检测波长为290nm；流速1.0mL.min-1；分析时间：65min。
4、如权利要求3所述的夏桑菊制剂指纹图谱的建立方法，其特证在于：步骤(c)色谱条件中所述的梯度洗脱，梯度洗脱程序以如下体积浓度配置进行：0分钟时，流动相A为100％的1％醋酸、流动相B为0％的甲醇溶液；
5分钟时，流动相A为93％的1％醋酸、流动相B为7％的甲醇溶液；
9分钟时，流动相A为90％的1％醋酸、流动相B为10％的甲醇溶液；
13分钟时，流动相A为82％的1％醋酸、流动相B为18％的甲醇溶液；
20分钟时，流动相A为78％的1％醋酸、流动相B为22％的甲醇溶液；
35分钟时，流动相A为60％的1％醋酸、流动相B为40％的甲醇溶液；
55分钟时，流动相A为30％的1％醋酸、流动相B为70％的甲醇溶液；
60分钟时，流动相A为0％的1％醋酸、流动相B为100％的甲醇溶液；
65分钟时，流动相A为100％的1％醋酸、流动相B为0％的甲醇溶液。
5、一种如权利要求1所述的指纹图谱的建立方法所得夏桑菊制剂的指纹图谱，其特征在于指纹图谱中有20个特征共有峰，其中8号色谱峰为绿原酸参照峰，最强峰为16色谱峰，图谱总长度为65min，具体如下：
1号峰，平均保留时间RT为1.57min，RSD为2.06％，峰面积为1542541，RSD为23.75％；
2号峰，平均保留时间RT为1.91min，RSD为1.08％，峰面积为1660403，RSD为23.47％；
3号峰，平均保留时间RT为3.56min，RSD为1.43％，峰面积为1572609，RSD为24.14％；
4号峰，平均保留时间RT为10.83min，RSD为0.55％，峰面积为3730363，RSD为23.20％；
5号峰，平均保留时间RT为11.22min，RSD为0.63％，峰面积为1023133，RSD为18.56％；
6号峰，平均保留时间RT为14.60min，RSD为0.48％，峰面积为763899，RSD为33.34％；
7号峰，平均保留时间RT为15.25min，RSD为0.66％，峰面积为2077260，RSD为24.81％；
8号峰为绿原酸，平均保留时间RT为19.85min，RSD为％0.35，峰面积为2613097，RSD为16.46为％；
9号峰，平均保留时间RT为20.69min，RSD为0.78％，峰面积为805465，RSD为18.00％；
10号峰，平均保留时间RT为22.66min，RSD为0.51％，峰面积为2258797，RSD为13.57％；
11号峰，平均保留时间RT为35.66min，RSD为％1.02，峰面积为588056，RSD为28.63％；
12号峰，平均保留时间RT为36.58min，RSD为0.64％，峰面积为1739577，RSD为23.95％；
13号峰，平均保留时间RT为37.48min，RSD为0.87％，峰面积为1144232，RSD为29.03％；
14号峰，平均保留时间RT为37.99min，RSD为0.61％，峰面积为1210576，RSD为24.05％；
15号峰，平均保留时间RT为39.32min，RSD为0.72％，峰面积为838066，RSD为20.36％。
16号峰，平均保留时间RT为40.45min，RSD为0.85％，峰面积为18321566，RSD为17.22％；
17号峰，平均保留时间RT为44.58min，RSD为0.91％，峰面积为1925024，RSD为20.23％；
18号峰，平均保留时间RT为45.45min，RSD为1.13％，峰面积为1666840，RSD为31.43％；
19号峰，平均保留时间RT为48.01min，RSD为0.88％，峰面积为550287，RSD为22.56％；
20号峰，平均保留时间RT为55.14min，RSD为0.77％。峰面积为3131146，RSD为27.56％。
CNB2007100263469A 2007-01-17 2007-01-17 夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱 Active CN100573138C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2007100263469A CN100573138C (zh) 2007-01-17 2007-01-17 夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2007100263469A CN100573138C (zh) 2007-01-17 2007-01-17 夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101034085A true CN101034085A (zh) 2007-09-12
CN100573138C CN100573138C (zh) 2009-12-23

Family

ID=38730735

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2007100263469A Active CN100573138C (zh) 2007-01-17 2007-01-17 夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100573138C (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101251518B (zh) * 2008-01-31 2012-05-30 恩施土家族苗族自治州农业科学院 一种魔芋指纹图谱的建立方法
CN102928523A (zh) * 2011-08-11 2013-02-13 上海雷允上科技发展有限公司 一种野菊花指纹图谱的测定方法及其应用和野菊花的质量检测方法
CN103926344A (zh) * 2014-04-18 2014-07-16 广州白云山星群(药业)股份有限公司 夏枯草指纹图谱的检测方法
CN105675739A (zh) * 2015-12-31 2016-06-15 吉林修正药业新药开发有限公司 一种治疗风热感冒中药的hplc特征图谱的构建方法
CN105717241A (zh) * 2016-04-27 2016-06-29 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 一种野菊花中的绿原酸的测定方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4129511B2 (ja) * 2002-09-26 2008-08-06 国立大学法人 東京医科歯科大学 高速液体クロマトグラフィーによるアミノ酸の分析方法
CN100362346C (zh) * 2006-06-21 2008-01-16 广州星群（药业）股份有限公司 检测夏桑菊制剂中氨基酸类成分的方法

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101251518B (zh) * 2008-01-31 2012-05-30 恩施土家族苗族自治州农业科学院 一种魔芋指纹图谱的建立方法
CN102928523A (zh) * 2011-08-11 2013-02-13 上海雷允上科技发展有限公司 一种野菊花指纹图谱的测定方法及其应用和野菊花的质量检测方法
CN102928523B (zh) * 2011-08-11 2014-07-30 上海雷允上药业有限公司 一种野菊花指纹图谱的测定方法和野菊花的检测方法
CN103926344A (zh) * 2014-04-18 2014-07-16 广州白云山星群(药业)股份有限公司 夏枯草指纹图谱的检测方法
CN103926344B (zh) * 2014-04-18 2015-12-30 广州白云山星群(药业)股份有限公司 夏枯草指纹图谱的检测方法
CN105675739A (zh) * 2015-12-31 2016-06-15 吉林修正药业新药开发有限公司 一种治疗风热感冒中药的hplc特征图谱的构建方法
CN105675739B (zh) * 2015-12-31 2017-10-31 吉林修正药业新药开发有限公司 一种治疗风热感冒中药的hplc特征图谱的构建方法
CN105717241A (zh) * 2016-04-27 2016-06-29 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 一种野菊花中的绿原酸的测定方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN100573138C (zh) 2009-12-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101034085A (zh) 夏桑菊制剂指纹图谱的建立及指纹图谱
CN1865988A (zh) 检测夏桑菊制剂中氨基酸类成分的方法
CN101040915A (zh) 一种双黄连注射液的制备方法及其成分检测方法
CN1785255A (zh) 一种中药制剂的质量控制方法
CN1712051A (zh) 一种宫炎平制剂的质量控制方法
CN1785293A (zh) 心脉通口服制剂的质量控制方法
CN101057925A (zh) 接骨七厘胶囊制备工艺及其质量控制方法
CN1824258A (zh) 妇月康中药制剂的质量控制方法
CN1255678C (zh) 四季三黄胶囊活性成分含量检测方法
CN1785295A (zh) 一种中药制剂的质量控制方法
CN1857551A (zh) 一种中药制剂的质量控制方法
CN1907340A (zh) 一种肾石通制剂的质量检测控制方法
CN1785219A (zh) 芒果叶干浸膏复方制剂的质量控制方法
CN1813860A (zh) 一种脑心清分散片及其制备工艺
CN1844912A (zh) 一种地龙指纹图谱的建立方法和地龙药材的鉴别方法
CN1824126A (zh) 滋阴补肾的口服制剂的质量控制方法
CN1785220A (zh) 补血当归制剂的质量控制方法
CN1844911A (zh) 一种水蛭指纹图谱的建立方法和水蛭药材的鉴别方法
CN1824245A (zh) 骨筋丸制剂的质量控制方法
CN1824192A (zh) 清热解表的口服制剂的质量控制方法
CN1824244A (zh) 乙肝解毒中药制剂的质量控制方法
CN1785268A (zh) 舒筋定痛制剂的质量控制方法
CN1823975A (zh) 一种宫炎平制剂及其质量控制方法
CN1857380A (zh) 一种黄芪药材的质量检测方法
CN1823858A (zh) 穿心莲口服制剂的质量控制方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: GUANGZHOU BAIYUNSHAN XINGQUN (PHARMACEUTICAL) CO.,

Free format text: FORMER NAME: GUANGZHOU XINGQUN (PHARMACEUTICAL) CO., LTD.

CP03 Change of name, title or address

Address after: Haizhuqu District Guangzhou City, Guangdong province 510288 South Island Road No. 162

Patentee after: Guangzhou Xingqun Pharmaceutical Co., Ltd.

Address before: Haizhuqu District Prefecture in Guangdong province Guangzhou City Road 510289 No. 162

Patentee before: Guangzhou Xingqun Pharmaceutical Co., Ltd.