CN100537742C - 花溪掷孢酵母及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种花溪掷孢酵母(Sporobolomyces huaxiensis Liu)，其菌学特性为：孢子弹射法分离茶饼病菌之后，用显微镜观察可见担孢子经吸水膨胀至20～25×6.5～8μm具3个分隔后，生出4条芽管，在其1.2μm长的小梗上直接产生一端稍细的柱状小孢子。成熟小孢子一般(6～)7.2～7.8(～9)×1.2～1.5(～1.8)μm。小孢子以出芽的方式进行繁殖极易散开。以上表明，经诱发茶饼病菌担子孢子微循环产孢发现，由有性型担子孢子弹射在载玻片上，吸水膨胀后，在其发芽管的小梗上会直接产生一端稍细的以出芽方式繁殖的柱状小孢子。本发明还公开了其用途，能刺激植物种子萌发及提高红曲霉发酵产品中洛伐他汀含量。
Description
技术领域
本发明涉及茶饼病菌(Exobasidium vexans Massen)，具体来说涉及花溪掷孢酵母(Sporobolomyces huaxiensis Liu)，同时还涉及其用途。
背景技术
目前，市场上出现的降脂类药有洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、脂必妥、血脂康等，它们的降血脂机理都与洛伐他汀(又名Monacolin K)有关，都是以对洛伐他汀进行结构改造后的一系列药物，这些化学合成的降脂药物均存在一定的毒副作用。天然的中国红曲的降脂效果很好，然而，红曲中洛伐他汀的含量却相当之低，据文献报道一般出口红曲米粉的洛伐他汀含量仅4mg/g，极大的限制了红曲的大规模应用。随着人们生活水平的提高，对天然的功能性食品需求增大，红曲制品被作为食品添加剂、功能性红曲食品和红曲饮料来使用，而如果能提高红曲中洛伐他汀的含量则可大大提高红曲制品的应用价值。
发明内容
本发明的目的在于克服上述缺点而提供的一种对植物种子萌发有刺激作用、能提高红曲霉发酵产品洛伐他汀含量的花溪掷孢酵母。
本发明的另一目的在于提供该花溪掷孢酵母在刺激植物种子萌发方面的用途。
本发明的再一目的在于提供该花溪掷孢酵母在提高红曲霉发酵产品洛伐他汀含量方面的用途。
花溪掷孢酵母的培养方法：每年4月中下旬至5月在油茶树林将茶叶新梢肿大的“茶泡”摘下。“茶泡”扁圆至圆形中空，白色疏松海棉状质地，厚约2～3mm，表面淡绿色，尚残留有叶片的下表皮。一般35～48(～55)mm大。其上满布白色粉末。将茶泡悬挂于灭菌的载玻片或具有双抗的PDA平板培养基(土豆200g；蔗糖20g；琼脂20g；自来水补足1000ml)上，让孢子自由弹射后，然后取出喷射有担孢子的载玻片和平板进行微循环产孢观察。发射到载玻片上的茶饼病菌担孢子在32℃温箱保湿条件下培养24小时后达20.7x6.9μm，经吸水膨涨至20～25x6.5～8μm具2～3个分隔后降至常温25℃，生出3～4条芽管，在其1.2μm长的小梗上直接产生一端稍细的柱状小孢子即为本发明的花溪掷孢酵母(Sporobolomyces huaxiensisLiu)。
该菌种已于2007年2月7日保藏在中国典型培养物保藏中心(地址：中国武汉武汉大学)，名称为：花溪掷孢酵母(Sporobolomyces huaxiensisLiu)，保藏号：CCTCC NO：M 207017。
本发明的花溪掷孢酵母(Sporobolomyces huaxiensis Liu)，具有以下微生物学特性：
1、形态学特性：成熟分生孢子一般(6～)7.2～7.8(～9)x1.2～1.5(～1.8)μm，分生孢子以出芽方式进行繁殖，极易散开。
2、培养学特性：在PDA培养基上的培养性状观察发现：芽生孢子生长非常缓慢，表面质地与细菌菌落相似，但难以挑起，茶黄色，不产生水溶性色素。对其PD液体培养物观察，菌丝宽1μm。
3、生理学特性：于pH5～7，20至30℃下能正常生长。
4、菌学特性：孢子弹射法分离茶饼病菌之后，用显微镜观察可见担孢子经吸水膨胀至20～25 x 6.5～8μm具3个分隔后，生出4条芽管，在其1.2μm长的小梗上直接产生一端稍细的柱状小孢子。成熟小孢子一般(6～)7.2～7.8(～9)x1.2～1.5(～1.8)μm。小孢子以出芽的方式进行繁殖极易散开。以上经诱发茶饼病菌担子孢子微循环产孢发现，由有性型担子孢子弹射在载玻片上，吸水膨胀后，在其发芽管的小梗上会直接产生一端稍细的以出芽方式繁殖的柱状小孢子，所以确证该芽生小孢子为其有性型担子孢子的无性型，并命名为花溪掷孢酵母(Sporobolomyces huaxiensis Liu)。
本发明的花溪掷孢酵母对植物种子萌发有刺激作用、能提高红曲霉发酵产品洛伐他汀含量。
具体实施方式
花溪掷孢酵母的培养方法：每年4月中下旬至5月在油茶树林将茶叶新梢肿大的“茶泡”摘下。“茶泡”扁圆至圆形中空，白色疏松海棉状质地，厚约2～3mm，表面淡绿色，尚残留有叶片的下表皮。一般35～48(～55)mm大。其上满布白色粉末。将茶泡悬挂于灭菌的载玻片或具有双抗的PDA平板培养基(土豆200g；蔗糖20g；琼脂20g；自来水补足1000ml)上，让孢子自由弹射后，然后取出喷射有担孢子的载玻片和平板进行微循环产孢观察。发射到载玻片上的茶饼病菌担孢子在32℃温箱保湿条件下培养24小时后达20.7x6.9μm，经吸水膨涨至20～25x6.5～8μm具2～3八分隔后降至常温25℃，生出3～4条芽管，在其1.2μm长的小梗上直接产生一端稍细的柱状小孢子即为本发明的花溪掷孢酵母(Sporobolomyces huaxiensisLiu)。成熟分生孢子一般(6～)7.2～7.8(～9)x1.2～1.5(～1.8)μm，分生孢子以出芽方式进行繁殖，极易散开。在PDA培养基上的培养性状观察发现：芽生孢子生长非常缓慢，表面质地与细菌菌落相似，但难以挑起，茶黄色，不产生水溶性色素。对其PD液体培养物观察，菌丝宽1μm无色具有隔膜。
萝卜种子发芽试验
用马铃薯蔗糖培养基(土豆200g；蔗糖20g；琼脂20g；自来水补足1000ml)摇瓶培养21天的花溪掷孢酵母上清稀释液作萝卜种子发芽试验结果表明，用芽生孢子1/100的发酵稀释上清液处理萝卜种子，明显刺激根生长，与对照比较分别为90.3及51.9cm。用芽生孢子发酵上清液的1/10、1/50、1/100稀释液及CK对萝卜种子作发芽试验结果，不同处理萝卜种子的芽、根长度(cm)和植株重(g)见下表：
添加到液态发酵的红曲培养物中提高洛伐他汀含量试验
试验一：在红曲发酵液的较后时间(第7～9天)添加培养5天孢子数为2至3×108个/ml的花溪掷孢酵母活菌液1ml于20ml红曲发酵液/100ml三角瓶中，发酵13天采收时，可使红曲液态发酵物中洛伐他汀的含量较出发菌株提高大约3倍。
试验二：在红曲液体发酵的较前期(第3～5天)添加培养5天孢子数为2至3×108个/ml花溪掷孢酵母灭活菌液(120℃ 10分钟)1ml于20ml红曲发酵菌液/100ml三角瓶中，发酵13天采收时，可使红曲液态发酵物中洛伐他汀的含量较出发菌株提高4至5倍。
添加到固态发酵的红曲培养物中提高洛伐他汀含量试验
在红曲固液态发酵的较后时间(第7～9天)添加培养5天孢子数为2至3×108个/ml的花溪掷孢酵母灭活菌液(120℃ 10分钟)5ml于70g大米红曲固态发酵物/500ml罐头瓶中，发酵13天采收时，其发酵物中洛伐他汀的含量最高达到了34.99mg/g，与出发菌株中洛伐他汀的含量2.48mg/g相比，提高了近17倍。
Claims (3)
1、一种花溪掷孢酵母(Sporobolomyces huaxiensis Liu)CCTCC NO：M 207017。
2、如权利要求1所述的花溪掷孢酵母在刺激萝卜种子萌发方面的用途。
3、如权利要求1所述的该花溪掷孢酵母在提高红曲霉发酵产品洛伐他汀含量方面的用途。
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