CN100506791C

CN100506791C - 五氟硫基苯甲酰基胍、其制备方法、其作为药物或诊断剂的用途以及包含它们的药物

Info

Publication number: CN100506791C
Application number: CNB038113198A
Authority: CN
Inventors: H-W·克勒曼
Original assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Current assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Priority date: 2002-05-18
Filing date: 2003-05-05
Publication date: 2009-07-01
Anticipated expiration: 2023-05-05
Also published as: MA27277A1; NO20045447L; NO333288B1; PT1509498E; RS50772B; AU2003242531A1; PE20040452A1; ZA200408886B; CN1653044A; IL165213A0; RS99004A; EP1509498A1; HK1076095A1; CA2486336A1; MY139310A; RU2315752C2; RU2004137115A; IL165213A; ATE343563T1; KR20040111635A

Abstract

其中R1至R4具有权利要求中所述含义的式I和/或II的五氟硫基苯甲酰基胍适于与用于预防梗塞和治疗梗塞和用于治疗心绞痛的心脏保护成分一起作为抗心律失常药。其还可以预防性地抑制与局部缺血诱发的损害形成、尤其是引发局部缺血诱发的心律失常有关的病理生理学过程。

Description

五氟硫基苯甲酰基胍、其制备方法、其作为药物或诊断剂的用途以及包含它们的药物

本发明涉及式I和II的五氟硫基苯甲酰基胍及其可药用盐：

其中：

R1 是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基、含1、2、3或4个碳原子的烷氧基、F、Cl、Br、I、CN、NR10R11、-O_p-(CH₂)_n-(CF₂)_o-CF₃或-(SO_m)_q-(CH₂)_r-(CF₂)_s-CF₃；

R10和R11

彼此独立地是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH₂-CF₃；

m是0、1或2

n、o、p、q、r和s

彼此独立地是0或1；

R2 是氢、F、Cl、Br、I、-CN、-SO₂CH₃、-(SO_h)_z-(CH₂)_k-(CF₂)_l-CF₃、含1、2、3、4、5或6个碳原子的烷基、含3、4、5、6、7或8个碳原子的环烷基，

其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子所替代；

h 是0、1或2；

z 是0或1；

k 是0、1、2、3或4；

l 是0或1；

或者

R2 是-(CH₂)_t-苯基或-O-苯基，

其是未取代的或被1、2或3个选自F、Cl、Br、I、-O_u-(CH₂)_v-CF₃、含1、2、3或4个碳原子的烷氧基、含1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO₂CH₃的基团所取代；

t 是0、1、2、3或4；

u 是0或1；

v 是0、1、2或3；

或者

R2 是-(CH₂)w-杂芳基，

其是未取代的或被1、2或3个选自F、Cl、Br、I、-O_x-(CH₂)_y-CF₃、含1、2、3或4个碳原子的烷氧基和含1、2、3或4个碳原子的烷基、-SO₂CH₃的基团所取代；

w 是0、1、2、3或4；

x 是0或1；

y 是0、1、2或3；

R3和R4

彼此独立地是氢或F。

优选的是以下的式I或式II的化合物及其可药用盐，其中的含义是：

R1是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基、含1、2、3或4个碳原子的烷氧基、F、Cl、NR10R11、-O-CH₂-CF₃或SO_m(CH₂)_r-CF₃；

R10和R11

彼此独立地是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH₂-CF₃；

m 是0、1或2；

r 是0或1；

R2 是氢、F、Cl、-SO₂CH₃、-(SO_h)_z-(CH₂)_h-CF₃、含1、2、3或4个碳原子的烷基、含3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，

其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子所替代；

h是0、1或2；

z是0或1；

k是0、1、2、3或4；

或者

R2 是苯基或-O-苯基，

其是未取代的或被1或2个选自F、Cl、-O_u-(CH₂)_v-CF₃、甲氧基、乙氧基、含1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO₂CH₃的基团所取代；

u 是0或1；

v 是0、1、2或3；

或者

R2 是杂芳基，

其是未取代的或被1或2个选自F、Cl、-O_x-(CH₂)_y-CF₃、甲氧基、乙氧基、含1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO₂CH₃的基团所取代；

x 是0或1；

y 是0、1、2或3；

R3和R4

彼此独立地是氢或F。

特别优选的是以下的式I和II化合物及其可药用盐，其中的含义是：

R1 是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基、甲氧基、乙氧基、F、Cl、NR10R11、-O-CH₂-CF₃或-SO_m-(CH₂)_r-CF₃；

R10和R11

彼此独立地是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基或-CH₂-CF₃；

m 是0、1或2；

r 是0或1；

R2 是氢、F、Cl、-SO₂CH₃、-(SO_h)_z-(CH₂)_k-CF₃、含1、2、3或4个碳原子的烷基、含3、4、5、6或7个碳原子的环烷基，

其中1、2、3或4个氢原子可以被氟原子所替代；

h 是0或2；

z 是0或1；

k 是0或1；

或者

R2 是苯基或-O-苯基，

其是未取代的或被1或2个选自F、Cl、-O-(CH₂)_v-CF₃、甲氧基、乙氧基、含1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO₂CH₃的基团所取代；

v 是0、1、2或3；

或者

R2 是杂芳基，

其是未取代的或被1或2个选自F、Cl、-O-(CH₂)_y-CF₃、甲氧基、乙氧基、含1、2、3或4个碳原子的烷基和-SO₂CH₃的基团所取代；

y 是0、1、2或3；

R3和R4

是氢。

特别优选在式I和/或II化合物中R1是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基、F或Cl。还特别优选在式I和/或II化合物中R2是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基、F、Cl或所述的未取代或取代的-O-苯基。

如果取代基R1至R4包含一个或多个不对称中心，则这些不对称中心可以彼此独立地具有S和R构型。这些化合物可以是旋光异构体、非对映体、外消旋体或它们的混合物形式。

本发明包括式I和II化合物的所有互变异构形式。

烷基可以是直链或支链的。如果它们带有取代基或作为其它基团的取代基，例如在氟代烷基或烷氧基的情况中，这也是适用的。烷基的实例有甲基、乙基、正丙基、异丙基(＝1-甲基乙基)、正丁基、异丁基(＝2-甲基丙基)、仲丁基(＝1-甲基丙基)、叔丁基(＝1，1-二甲基乙基)、正戊基、异戊基、叔戊基、新戊基和己基。优选的烷基有甲基、乙基、正丙基和异丙基。烷基中的一个或多个、例如1、2、3、4或5个氢原子可以被氟原子所替代。所述氟代烷基的实例有三氟甲基、2，2，2-三氟乙基和五氟乙基。被取代的烷基可以在任何位置上被取代。

环烷基的实例有环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基。环烷基中的一个或多个、例如1、2、3或4个氢原子可以被氟原子所替代。被取代的环烷基可以在任何位置上被取代。

苯基可以是未取代的或被相同或不同的基团取代一次或多次，例如被取代一次、两次或三次。如果苯基被取代，其优选具有一个或两个相同或不同的取代基。这同样适用于在基团如例如苯基烷基或苯氧基中的被取代的苯基。单取代苯基中的取代基可以在2位、3位或4位上。二取代的苯基可以在2，3位、2，4位、2，5位、2，6位、3，4位或3，5位上被取代。三取代苯基中的取代基可以在2，3，4位、2，3，5位、2，4，5位、2，4，6位、2，3，6位或3，4，5位上。

杂芳基可以是其中一个或多个环原子是氧原子、硫原子或氮原子、例如1、2或3个氮原子、1或2个氧原子、1或2个硫原子或各种杂原子的组合的芳环化合物。所述杂芳基可以在所有位置上被连接，例如在1位、2位、3位、4位、5位、6位、7位或8位上被连接。杂芳基可以是未取代的或被相同或不同的基团取代一次或多次，例如一次、两次或三次。这同样适用于如例如杂芳基烷基中的杂芳基。杂芳基的实例有呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、2，3-二氮杂萘基、喹喔啉基、喹唑啉基和噌啉基。

杂芳基特别是2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、1-、3-、4-或5-吡唑基、1，2，3-三唑-1-、-4-或-5-基、1，2，4-三唑-1-、-3-或-5-基、1-或5-四唑基、2-、4-或5-噁唑基、3-、4-或5-异噁唑基、1，2，3-噁二唑-4-或-5-基、1，2，4-噁二唑-3-或-5-基、1，3，4-噁二唑-2-基或-5-基、2-、4-或5-噻唑基、3-、4-或5-异噻唑基、1，3，4-噻二唑-2-或-5-基、1，2，4-噻二唑-3-或-5-基、1，2，3-噻二唑-4-或-5-基、2-、3-或4-吡啶基、2-、4-、5-或6-嘧啶基、3-或4-哒嗪基、吡嗪基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基、1-、2-、4-或5-苯并咪唑基、1-、3-、4-、5-、6-或7-吲唑基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基、2-、4-、5-、6-、7-或8-喹唑啉基、3-、4-、5-、6-、7-或8-噌啉基、2-、3-、5-、6-、7-或8-喹喔啉基、1-、4-、5-、6-、7-或8-2，3-二氮杂萘基。还包括这些化合物的相应的N-氧化物，即例如2-、3-或4-吡啶基1-氧化物。

特别优选的杂芳基是2-或3-噻吩基、2-或3-呋喃基、1-、2-或3-吡咯基、1-、2-、4-或5-咪唑基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基、1-、3-、4-或5-吡唑基、2-、3-或4-吡啶基、2-或3-吡嗪基、2-、4-、5-或6-嘧啶基和3-或4-哒嗪基。

本发明还涉及制备式I和II化合物和/或其可药用盐的方法，该方法包括：使式III或IV化合物与胍反应，

其中R1至R4具有所述的含义，且L是易于进行亲核取代的离去基团。

其中L是烷氧基、优选甲氧基、苯氧基、苯硫基、甲硫基、2-吡啶硫基、含氮杂环、优选1-咪唑基的式III和IV的活化酸衍生物可以以本身已知的方法由相应的酰氯(式III、IV；L＝Cl)获得，酰氯又可以通过本身已知的方法由相应的羧酸(式III、IV；L＝OH)获得，例如使用亚硫酰氯。除式III和IV的酰氯(L＝Cl)外，通过本身已知的方法直接由相应的苯甲酸(式III、IV；L＝OH)制备式III和IV的其它活化酸衍生物也是可能的，例如，通过用氯化氢气体的甲醇溶液处理制备其中L＝OCH₃的式III和IV的甲酯、通过用羰基二咪唑处理制备式III和IV的酰基咪唑(imidazolide)[L＝1-咪唑基，Staab，Angew.Chem.Int.英文版1，351-367(1962)]、用Cl-COOC₂H₅或甲苯磺酰氯在惰性溶剂中在存在三乙胺的情况下制备式III和IV的混合酸酐、用二环己基碳二亚胺(DCC)或用O-[(氰基(乙氧基羰基)-亚甲基)氨基]-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(“TOTU”)对苯甲酸进行活化[21届欧洲肽会议的会议录，Peptides 1990，编者E.Giralt和D.Andreu，Escom，Leiden，1991]。在J.March，Advanced Organic Chemistry，第3版(John Wiley & Sons，1985，350页)中给出了许多制备式III和IV的活化羧酸衍生物的适宜方法，其中给出了源文献。

式III和IV的活化羧酸衍生物与胍的反应优选在质子或非质子极性但惰性有机溶剂中以本身已知的方法进行。已经证明适于苯甲酸甲酯(III、IV；L＝OCH₃)与胍的反应的那些溶剂有20℃至这些溶剂沸点的甲醇、异丙醇或THF。化合物III和IV与无盐胍的大部分反应已在非质子惰性溶剂如THF、二甲氧基乙烷、二噁烷中有利地进行。但是，在III和IV与胍的反应中，在碱如例如NaOH存在下用水作为溶剂也是可能的。

如果L是Cl，则加入酸清除剂例如过量的胍以结合氢卤酸是有利的。

本发明还包括式V的前体，

R5等于氢或(C₁-C₄)-烷基，其中甲基可以位于芳环的2位或3位上。

五氟硫基苯甲酰基胍I和II通常是弱碱并且能与酸结合形成盐。适宜的酸加成盐是所有药理学可接受的酸的盐，例如卤化物，特别是盐酸盐、乳酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、醋酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐。

化合物I和II是被取代的酰基胍，并且可抑制细胞的钠-质子反向转运器(Na⁺/H⁺交换器，NHE)。

与已知化合物相比，本发明的化合物的显著区别在于具有十分高的抑制Na⁺/H⁺交换的活性和改善的ADMET性质。异生素结构(特别是合适的“非天然/人造”SF₅取代基的引入)阻碍代谢攻击的可能性。这尤其导致更长的S9稳定性(肝稳定性、对酶攻击的稳定性)和更长的体内半衰期。这对吸收特性没有显著的影响，并且保留了酰基胍的高生物利用度。

与文献中所述的一些酰基胍相反，此处所述的式I和/或II化合物和/或其可药用盐没有显示出不需要的和不利的促尿钠排泄性质。

由于其NHE-抑制性质，式I和/或II化合物和/或其可药用盐适用于预防和治疗由NHE活化或活化的NHE引起的疾病以及由与NHE有关的损害继发引起的疾病。

因此，式I和/或II化合物和/或其可药用盐可用于治疗或预防由局部缺血或再灌注事件所造成的器官和组织的急性或慢性损害、病症或间接后遗症，用于治疗或预防心律失常、威胁生命的心室纤维性颤动、心肌梗塞、心绞痛，用于治疗或预防心脏的局部缺血状态、外周和中枢神经系统的局部缺血状态或中风或外周器官和组织的局部缺血状态，用于治疗或预防休克状态、其中细胞增殖代表了原发或继发性因素的疾病、癌症、转移灶、前列腺肥大和前列腺增生、动脉粥样硬化或脂质代谢紊乱、高血压、特别是原发性高血压、中枢神经系统病症、特别是CNS兴奋过度引起的病症，例如癫痫或中枢诱导的惊厥、或中枢神经系统病症，特别是焦虑状态、抑郁或精神病，用于治疗或预防非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)或糖尿病的晚期损害、血栓形成、由内皮功能障碍所导致的病症、间歇性跛行，用于治疗或预防内部器官的纤维化病症、肝的纤维化病症、肾的纤维化病症、血管的纤维化病症和心脏的纤维化病症，用于治疗或预防心力衰竭或充血性心力衰竭、急性或慢性炎症、由原生动物所引起的病症、疟疾和家禽的球虫病、用于手术和器官移植、用于保护和储存用于手术操作的移植物、用于预防与年龄有关的组织改变的药物，用于对抗老化、延长生命、治疗和降低甲状腺毒症中的心脏毒性作用。

因为NHE抑制剂主要通过其对细胞pH调节的影响发挥作用，所以它们通常可以与调节胞内pH的其它化合物有益地进行组合，适宜的组合伙伴有碳酸酐酶抑制剂、碳酸氢根离子转运系统的抑制剂，如碳酸氢钠协同转运蛋白(NBC)抑制剂或钠依赖性氯离子-碳酸氢根交换器(NCBE)抑制剂和对其它NHE亚型具有抑制作用的NHE抑制剂，因为通过它们增强或调节此处所述的NHE抑制剂的药理学相关的pH-调节作用是可能的。

本发明的化合物的用途涉及预防和治疗兽医学和人类医学中的急性和慢性疾病。

因此，本发明的NHE抑制剂适用于治疗由局部缺血和由再灌注引起的疾病。

因为其药理学性质，此处所述的化合物适于用作抗心律失常药。

由于其心脏保护性质，式I和/或II的NHE抑制剂和/或其可药用盐非常适用于预防和治疗梗塞并适用于治疗心绞痛，在这些情况中其还可以预防性地抑制或显著降低与局部缺血诱发的损害的发展有关的病理生理学过程，特别是在引发局部缺血诱发的心律失常中。由于其对病理性缺氧和局部缺血情况的保护作用，本发明所用的式I和/或II化合物和/或其可药用盐由于其抑制细胞Na⁺/H⁺交换的机制而可用作治疗所有急性或慢性局部缺血诱发的损害或由此原发性或继发性诱发的疾病的药物。

本发明还涉及它们作为用于手术介入的药物的用途。因此，可以在器官移植过程中使用所述化合物，可以用这些化合物在摘除前和切除期间保护供体的器官、保护例如用生理浴液处理或在生理浴液中保存的以及转移至受体机体过程中的已摘除的器官。

当进行血管成形手术介入时，例如对心脏以及外周器官和血管进行手术介入时，本发明的化合物同样是具有保护作用的有价值的药物。

已经表明本发明的化合物对于威胁生命的心律失常是非常有效的药物。可停止心室纤维性颤动并恢复心脏的生理窦性心律。

因为人组织和器官、尤其是心脏的NHE1抑制剂不仅可以针对局部缺血和再灌注引起的损害，而且可以针对药物、如特别是用于癌症治疗和自身免疫性疾病治疗的那些药物的细胞毒性作用提供有效保护，所以与式I和/或II化合物和/或其可药用盐组合施用适用于抑制所述化合物的细胞毒性、尤其是心脏毒性副作用。与NHE1抑制剂共同给药而产生的细胞毒性作用、尤其是心脏毒性的降低使得还可能增加细胞毒性治疗剂的剂量和/或延长该类药物的药物治疗。通过与NHE抑制剂组合可以大大增加所述细胞毒性治疗的治疗益处。

此外，当存在损害心脏的甲状腺激素过量产生、甲状腺毒症或外部供给甲状腺激素时，可以使用本发明式I和/或II的NHE1抑制剂和/或其可药用盐。因此，式I和/或II化合物和/或其可药用盐适用于改善用心脏毒性药物进行的治疗。

鉴于其针对局部缺血诱发的损害的保护作用，本发明的化合物还适于作为治疗神经系统、尤其是中枢神经系统局部缺血的药物，例如适于作为治疗中风或脑水肿的药物。

式I和/或II化合物和/或其可药用盐还适用于治疗和预防由中枢神经系统兴奋过度引起的疾病和病症，特别是用于治疗癫痫病症、中枢诱发的阵挛性和强直性痉挛、心理抑郁状态、焦虑症和精神病。在这些情况中，可以使用单独的、或者与具有抗癫痫活性的其它物质或抗精神病活性成分或碳酸酐酶抑制剂例如乙酰唑胺组合的、或者与其它NHE抑制剂或其它钠依赖性氯离子-碳酸氢根交换器(NCBE)抑制剂组合的此处所述的NHE抑制剂。

本发明所用的式I和/或II化合物和/或其可药用盐也同样适用于治疗各种类型的休克，例如，过敏性休克、心源性休克、低血容量性休克和细菌性休克。

式I和/或II化合物和/或其可药用盐也可用于预防和治疗血栓形成性病症，因为作为NHE抑制剂它们能抑制血小板本身的凝集。它们还能抑制或预防在局部缺血和再灌注后发生的炎症和凝血介质、尤其是冯·维勒布兰德(Von Willebrand)因子和血栓形成性选择蛋白的过度释放。因此，其可减少和消除重要血栓形成因子的致病作用。因此，本发明的NHE抑制剂可以与其它抗凝剂和/或血栓溶解活性成分如例如重组或天然的组织纤溶酶原激活物、链激酶、尿激酶、乙酰水杨酸、凝血酶拮抗剂、Xa因子拮抗剂、具有溶解纤维蛋白活性的药物、血栓烷受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂、VIIa因子拮抗剂、氯吡格雷、噻氯匹定等组合使用。本发明的NHE抑制剂与NCBE抑制剂和/或与碳酸酐酶抑制剂如例如乙酰唑胺组合使用特别有益。

本发明所用的式I和/或II化合物和/或其可药用盐的另一显著特征在于其对细胞增殖、例如成纤维细胞增殖和平滑肌细胞增殖的强抑制作用。因此，式I和/或II化合物和/或其可药用盐适于作为其中细胞增殖是主要或次要原因的疾病的有价值的治疗剂，因此，可以用作抗动脉粥样硬化药、用于慢性肾衰竭、癌症的药物。

还表明本发明的化合物可抑制细胞迁移。因此，式I和/或II化合物和/或其可药用盐适于作为其中细胞迁移是主要或次要原因的疾病如例如具有显著转移倾向的癌症的有价值的治疗剂。

式I和/或II化合物和/或其可药用盐的另一显著特征在于其可延缓或预防纤维化病症。因此，它们适于作为治疗心脏纤维化、肺纤维化、肝纤维化、肾纤维化及其它纤维化病症的极佳物质。因此，它们还可用于治疗器官肥大和增生，例如心脏肥大和增生以及前列腺肥大和增生。因此，其适用于预防和治疗心力衰竭(充血性心力衰竭＝CHF)和用于治疗和预防前列腺增生或前列腺肥大。

因为在原发性高血压中NHE显著升高，所以式I和/或II化合物和/或其可药用盐适用于预防和治疗高血压以及心血管病症。

在这些情况中，它们可以被单独使用或与适宜的组合和制剂伙伴一起使用用于治疗高血压和心血管病症。因此，例如，可以与一种或多种具有噻嗪样作用的利尿药、袢利尿药、醛固酮和伪醛固酮(pseudoaldosterone)拮抗剂，如氢氯噻嗪、吲达帕胺、泊利噻嗪、呋塞米、吡咯他尼、托拉塞米、布美他尼、阿米洛利、氨苯蝶啶、螺内酯或依普利酮(eplerone)组合使用。本发明的NHE抑制剂还可以与钙通道阻断剂如维拉帕米、地尔硫

、氨氯地平或硝苯地平以及与ACE抑制剂例如雷米普利、依那普利、赖诺普利、福辛普利或卡托普利组合使用。其它有益的组合伙伴还有β-阻断剂如美托洛尔、沙丁胺醇等、血管紧张素受体及其受体亚型拮抗剂如氯沙坦、依贝沙坦、缬沙坦、奥马曲拉、gemopatrilat、内皮缩血管肽拮抗剂、肾素抑制剂、腺苷受体激动剂、钾通道抑制剂和活化剂如格列本脲、格列美脲、二氮嗪、克罗卡林、米诺地尔及其衍生物、线粒体ATP-敏感性钾通道(mitoK(ATP)通道)活化剂、Kv1.5抑制剂等。

已经表明式I和/或II的NHE1抑制剂和/或其可药用盐具有显著的抗炎作用，因此可用作抗炎药。在这方面，对炎症介质释放的抑制作用特别值得注意。因此，可以使用单独的或与抗炎药组合的所述化合物用于预防或治疗慢性和急性炎性病症。优选使用的组合伙伴是甾体和非甾体抗炎药。

另外，已经发现式I和/或II化合物和/或其可药用盐对血清脂蛋白表现出有益作用。根据公知常识可知，被称为高脂蛋白血症的血脂水平过高是形成动脉硬化性血管损伤、尤其是冠心病的主要危险因素。因此，使升高的血清脂蛋白降低对于预防和消退动脉粥样硬化损伤非常重要。除了降低血清总胆固醇外，特别重要的是降低所述总胆固醇中特定的致动脉粥样化脂质部分的比例，特别是降低低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)的比例，因为这些脂质部分是致动脉粥样化危险因子。相反，针对冠心病的保护作用归因于高密度脂蛋白。因此，降血脂药应当不仅能降低总胆固醇，而且特别是应能降低VLDL和LDL血清胆固醇分数。现已发现NHE1抑制剂在影响血清脂质水平方面表现出有价值的治疗上可利用的性质。因此，正如所观察到的那样，它们显著降低升高的LDL和VLDL血清浓度，所述的血清浓度升高可例如由摄入的富含胆固醇-和脂质-饮食增加或发生病理性代谢改变、例如与遗传有关的高脂血症引起。因此，它们可通过消除作为起因的危险因素而用于预防和消退动脉粥样硬化损伤。在此不仅包括原发性高脂血症，而且还包括某些继发性高脂血症，例如与糖尿病相伴而发生的高脂血症。此外，式I和/或II化合物和/或其可药用盐可以显著降低由代谢异常所诱发的梗塞，特别是可以显著降低所诱发的梗塞尺寸及其严重程度。因此，所述化合物可有利地用于制备治疗高胆固醇血症的药物；制备预防动脉粥样化形成的药物；制备预防和治疗动脉粥样硬化的药物；制备预防和治疗由胆固醇水平升高诱发的疾病的药物；制备预防和治疗由内皮功能障碍诱发的疾病的药物；制备预防和治疗动脉粥样硬化诱发的高血压的药物；制备预防和治疗动脉粥样硬化诱发的血栓形成的药物；制备预防和治疗高胆固醇血症诱发的和内皮功能障碍诱发的局部缺血性损害和局部缺血后的再灌注损害的药物；制备预防和治疗高胆固醇血症诱发的和内皮功能障碍诱发的心脏肥大和心肌病的药物以及预防和治疗充血性心力衰竭(CHF)的药物；制备预防和治疗高胆固醇血症诱发的和内皮功能障碍诱发的冠状动脉血管痉挛和心肌梗塞的药物；制备与降血压物质、优选与血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂组合的治疗和预防所述病症的药物。已证明式I和/或II的NHE抑制剂和/或其可药用盐与降低血脂水平的活性成分、优选与HMG-CoA还原酶抑制剂(例如洛伐他汀或普伐他汀)的组合(后者产生降血脂作用并因此增加式I和/或II的NHE抑制剂和/或其可药用盐的降血脂性质)是一种具有增强的作用并可降低活性成分用量的有利组合。

因此，式I和/或II的化合物和/或其可药用盐对各种起因的内皮损害都具有有效的保护作用。这种保护血管不受内皮功能障碍综合征影响的保护作用指的是式I和/或II的化合物和/或其可药用盐是预防和治疗冠状动脉痉挛、外周血管疾病，特别是间歇性跛行、动脉粥样化形成和动脉粥样硬化、左心室肥大和扩张性心肌病和血栓形成性病症的有价值的药物。

还已经发现，式I和/或II的苯甲酰基胍和/或其可药用盐适用于治疗胰岛素耐受性受限的非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)。在这种情况中，将本发明的化合物与双胍如甲福明，与抗糖尿病的磺酰脲类如格列本脲、格列美脲、甲苯磺丁脲等等，与葡萄糖苷酶抑制剂，与PPAR激动剂如罗格列酮、吡格列酮等等，与不同给药形式的胰岛素产品，与DB4抑制剂，与胰岛素敏化剂或与氯茴苯酸联合可有益地增强本发明化合物的抗糖尿病活性及其作用的质量。

除急性抗糖尿病作用外，式I和/或II的化合物和/或其可药用盐还可以阻碍糖尿病后期并发症的形成，因此，可以用作预防和治疗糖尿病晚期损害，如糖尿病性肾病、糖尿病性视网膜病、糖尿病性心肌病和由于糖尿病而发生的其它病症的药物。在这种情况中，可以有利地将其与刚才在NIDDM治疗中所描述的抗糖尿病药联用。在这种情况中，与胰岛素有益剂型的组合特别重要。

除了保护不受急性局部缺血事件和随后同样急性的应力性再灌注事件影响的保护作用外，本发明I和/或II的NHE抑制剂和/或其可药用盐还具有对抗整个哺乳动物生物体与表现出慢性进行性老化过程有关的疾病和病症和独立发生的急性灌注不足状态以及低于正常的非局部缺血性情况的疾病和病症的可利用的直接治疗作用。现在可以用NHE抑制剂进行治疗的在漫长的老化过程中诱发的这些病理学的与年龄有关的表现，如疾病、劳动能力丧失和死亡是实际上是由生命器官及其功能中与年龄有关的改变所造成的疾病和病症，并且对于日益变老的生物体而言越来越重要。

和与年龄有关的功能损害或与年龄有关的器官衰竭的表现有关的病症有例如，血管对收缩和松弛反应的响应和反应性不足。这种与年龄有关的血管对收缩和松弛刺激的反应性方面的下降是心血管系统的必然过程，因此也是生命和健康的必然过程，NHE抑制剂可以显著消除或降低这种过程。血管反应性得到维护的一个重要函数和量度是内皮功能障碍中与年龄有关的进程被阻滞或延迟，NHE抑制剂可以十分显著地消除这一进程。因此，式I和/或II的化合物和/或其可药用盐十分适用于治疗和预防内皮功能障碍中与年龄有关的进程，尤其是间歇性跛行。

可以刻划老化进程的另一个变量的实例是心脏的收缩性下降和心脏对所需的心脏泵出量的适应性下降。在大多数情况中，由于老化过程而导致的这种心脏效率的降低与特别是心肌组织中结缔组织的沉积而造成的心脏功能障碍有关。这种结缔组织的沉积的特征为心脏的重量增加、心脏增大和心脏功能受限。令人吃惊地是，几乎可以完全抑制心脏器官的该类老化。因此，式I和/或II的化合物和/或其可药用盐十分适用于治疗和预防心力衰竭、充血性心力衰竭(CHF)。

虽然之前的专利和专利申请已经对已经发生的各种形式的癌症的治疗提出了保护，但是现在不仅十分令人吃惊地发现通过用NHE抑制剂抑制增殖可治愈已经存在的癌症，而且还可以用NHE抑制剂预防和十分显著地阻滞与年龄有关的癌症的发生率。一种特别制得注意的发现是不仅某些类型的癌症，而且由于变老而发生的所有器官的病症都可以被抑制，或其发生可以被显著延迟。因此，式I和/或II的化合物和/或其可药用盐十分适用于治疗并且特别是预防与年龄有关的各种类型的癌症。

现在发现，不仅可以延迟(在时间上明显偏移并且超出了正常统计的程度)所研究的所有器官，包括心、血管、肝发生与年龄有关的病症，而且可以显著延迟老年人的癌症。相反，还令人吃惊地将生命延长至迄今为止没有其它任何药物或任何天然产物可以获得的程度上。除给人和动物单独应用该活性成分外，NHE抑制剂这种独特的作用还使得可以将这些NHE抑制剂与老年医学中所用的基于不同机理起作用的其它活性成分、措施、物质和天然产物联用。在老年医学治疗中所用的该类活性成分有：特定的维生素和具有抗氧化活性的物质。因为在热量负载或食物摄入和老化过程之间有相关性，所以可以采取与饮食措施的组合，例如与食欲抑制剂相结合。同样可以考虑与降血压药如ACE抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂、利尿药、Ca⁺²拮抗剂等等相结合或与代谢正常化药物如降低胆固醇的物质相结合。

因此，在保持高的生活质量的同时，式I和/或II的化合物和/或其可药用盐十分适用于预防与年龄有关的组织改变并且十分适用于延长生命。

本发明的化合物是有效的细胞钠-质子反向转运器(Na/H交换器)抑制剂，在许多病症(原发性高血压、动脉粥样硬化、糖尿病等等)中所说的细胞钠-质子反向转运在易于进行测量的细胞如红细胞、血小板或白细胞中也会增加。因此，本发明所用的化合物适宜作为重要和简单的科学工具，例如其不仅可作为测定和区分不同类型的高血压的诊断剂，而且还可以作为测定和区分不同类型的动脉粥样硬化、糖尿病和糖尿病晚期并发症、增殖性病症等的诊断剂。

还要求保护一种用于人、兽医或植物保护应用的药物，其包含有效量的式I和/或II的化合物和/或其可药用盐以及可药用的载体和添加剂，其可以仅包含式I和/或II的化合物和/或其可药用盐或者可以还包含其它的药学成分或药物。

在这种情况中，例如可以将包含式I和/或II的化合物或其可药用盐的药物口服给药、胃肠外给药、静脉内给药、直肠给药、经皮给药或吸入给药，优选的给药将取决于病症的特定特性。此外，在兽药和人药中可以单独使用化合物I和/或II或者可以将其与药学赋形剂一起使用。所说的药物一般每个剂量单位包含0.01mg至1g式I和/或II的化合物或其可药用盐作为活性成分。

适于所需药物制剂的赋形剂对于本领域普通技术人员而言是熟悉的。除溶剂、胶凝剂、栓剂基质、片剂赋形剂和其它活性成分载体外，其还可以使用例如抗氧剂、分散剂、乳化剂、止泡剂、矫味剂、防腐剂、增溶剂或着色剂。

对于口服给药而言，将活性化合物与适用于此目的的添加剂如载体、稳定剂或惰性稀释剂进行混合，然后用常规方法将其转化成适宜的剂型如片剂、包衣片、硬明胶胶囊、水性、醇性或油性溶液。可以使用的惰性载体的实例有阿拉伯胶、氧化镁、碳酸镁、磷酸钾、乳糖、葡萄糖或淀粉，尤其是玉米淀粉。此外，该制备既可以采取干颗粒的形式又可以采取湿颗粒的形式。适宜的油性载体或溶剂的实例有植物或动物油如向日葵油或鱼肝油。

对于皮下、肌内或静脉内给药而言，如果需要，可以用常用于此目的的物质如增溶剂、乳化剂或其它赋形剂将该活性化合物转化成溶液、混悬液或乳剂。适宜溶剂的实例有：水、生理盐水或醇，例如乙醇、丙醇、甘油、以及糖溶液如葡萄糖或甘露醇溶液，或者所提及的各种溶剂的混合物。

适宜作为以气雾剂或喷雾剂的形式进行给药的药物制剂有例如式I和/或II的活性成分和/或其可药用盐在可药用的溶剂中的溶液、混悬液或乳剂，所说的可药用的溶剂如，特别是乙醇或水，或者该类溶剂的混合物。

如果需要的话，该类制剂还包含其它药用赋形剂如表面活性剂、乳化剂和稳定剂以及抛射剂气体。该类制剂通常包含约0.1至10，特别是约0.3至3％重量的活性成分。

式I和/或II的活性成分的给药剂量以及给药频率取决于所用化合物作用的效力和持续时间；此外，还取决于被治疗病症的性质和严重程度以及被治疗哺乳动物的性别、年龄、体重和个体响应能力。

对于体重约75kg的患者而言，式I和/或II的化合物和/或其可药用盐的日剂量平均为至少0.001mg/kg体重，优选0.01mg/kg体重至最大10mg/kg，优选1mg/kg体重。对于病症的急性发作而言，例如出现心肌梗塞后立即，可能需要给予更高，并且特别是更频繁的剂量，例如每天高至4个单一剂量。例如对于重症监护病房的梗塞患者而言，可能需要每天高至700mg，特别是以静脉给药来进行，并且本发明的化合物可以通过输入来进行给药。

缩写列表：

ADMET 吸收-分布-代谢-排泄-毒理学

CDI 二咪唑-1-基甲酮

DIP 二异丙醚

DIPEA 二异丙基乙胺

DME 1，2-二甲氧基乙烷

DMF N，N-二甲基甲酰胺

EA 乙酸乙酯(EtOAc)

eq. 当量

HEP 正-庚烷

HOAc 醋酸

KOtBu 2-甲基丙-2-醇钾

MeOH 甲醇

mp 熔点

MTB 叔-丁基甲基醚

Pd(dppf)₂ 氯化[1，1′-二-(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)(1:1)二氯甲烷

复合物

RT 室温

TFA 三氟醋酸

THF 四氢呋喃

TMEDA N，N，N′，N′-四甲基乙烷-1，2-二胺

实验部分

实施例1

3-五氟硫基苯甲酰基胍，盐酸盐

a)3-五氟硫基苯甲酸

将700mg(3-碘苯基)硫五氟化物(Tetrahedron 56，(2000)3399)和300mg碘甲烷溶解于20ml乙醚(无水)中，然后将该溶液缓慢滴加到155mg镁/10ml乙醚中。在将其在回流下搅拌1小时后，将该反应混合物冷却至-10℃并在大气压下通入CO₂。将该反应混合物在RT下搅拌16小时，然后用稀HCl水溶液将其调节至pH＝1并用EA对其萃取3次，每次使用50ml EA。在用MgSO₄干燥后，在真空中除去溶剂。进行硅胶色谱，用DIP/2％HOAc进行洗脱，得到200mg无色的无定形粉末。

Rf(DIP/2％HOAc)＝0.51

MS(ES⁺)：249

b)3-五氟硫基苯甲酰基胍，盐酸盐

将30mg 3-五氟硫基苯甲酸与24mg CDI一起在5ml DMF(无水)中在RT下搅拌3小时。同时，将69mg氯化胍与68mg KOtBu一起在5ml DMF(无水)中在RT下搅拌30分钟。然后，将两种溶液合并并将其在RT下放置18小时。将该反应混合物用20ml EA进行稀释并用50％浓NaHCO₃水溶液洗涤3次，每次使用5ml 50％浓NaHCO₃水溶液。将其用MgSO₄进行干燥，然后在真空下除去溶剂，然后加入过量的5％ HCl水溶液。在真空下除去挥发性组分，得到33mg无定形的固体。

Rf(EA)＝0.30

MS(ES⁺)：290

实施例2：4-五氟硫基苯甲酰基胍，盐酸盐

a)4-五氟硫基苯甲酸

将2.7g(4-碘苯基)硫五氟化物(Tetrahedron 56，(2000)3399)与实施例1a)相似地进行反应，得到630mg无色的无定形固体。

Rf(DIP/2％HOAc)＝0.51

MS(ES⁺)：249

b)4-五氟硫基苯甲酰基胍，盐酸盐

将50mg 4-五氟硫基苯甲酸与实施例1b)相似地进行反应，得到33mg无定形粉末形式的实施例2的标题化合物。

Rf(EA)＝0.30

MS(ES⁺)：290

实施例3：4-五氟硫基-2-甲基苯甲酰基胍

a)4-五氟硫基-2-甲基苯甲酸

将3.09g TMEDA溶解于30ml THF(无水)中并将其在-90℃下滴加到20.5ml 1.3M仲-丁基锂的环己烷溶液中。然后在-90℃下向其中滴加3.0g 4-五氟硫基苯甲酸在20ml THF(无水)中的溶液。在将其在-90℃下搅拌1小时后，向其中滴加5.15g碘甲烷在20ml THF(无水)中的溶液。在此期间，将温度保持在-80℃下。在将其在-78℃下搅拌20分钟后，向其中注入100ml水，用稀HCl水溶液将pH调至pH＝1，用MTB将该混合物萃取3次，每次使用100ml MTB。在用MgSO₄干燥后，在真空条件下除去溶剂。先用硅胶色谱对残余物进行纯化，用DIP/2％ HOAc进行洗脱，得到1.60g 4-五氟硫基苯甲酸和4-五氟硫基-2-甲基苯甲酸的混合物。在下面的条件下，将该混合物重新用色谱法进行处理：

柱：Waters X-terra 250×50mm+预柱50×50mm

填充物：C1810μM

流速：150ml/分钟

梯度(线性过程)：

溶剂A 水+2％三氟醋酸

溶剂B 乙腈

时间[分钟]	溶剂A[％]	溶剂B[％]
时间[分钟]	溶剂A[％]	溶剂B[％]	0.00	90	10
4.00	90	10	0.00	90	10
4.00	90	10	24.00	25	75
25.00	5	95	24.00	25	75
25.00	5	95	30.00	5	95
31.00	90	10	30.00	5	95
31.00	90	10	35.00	90	10

得到900mg保留时间为21.14分钟的无色固体形式的标题化合物和360mg保留时间为20.18分钟的4-五氟硫基苯甲酸(在220nm的波长下进行检测)。

Rf(DIP/2％HOAc)＝0.5

MS(Cl⁺)：263；MS(ES^-)：261

b)4-五氟硫基-2-甲基苯甲酰基胍

将910mg 4-五氟硫基-2-甲基苯甲酸溶解于25ml DMF(无水)中，在RT下向其中加入844mg CDI，然后将该混合物在RT下搅拌6小时(溶液1)。此外，将1.988g盐酸胍和1.947g KOtBu在RT下在10ml DMF(无水)中搅拌30分钟(溶液2)。然后，将溶液2加入到溶液1中，并将该反应混合物在RT下搅拌17小时。然后，将其用200ml MTB进行稀释并用100ml水洗涤一次。然后用100ml MTB对水相进行萃取。然后将所合并的有机相再用水洗涤三次，每次使用50ml水，然后用MgSO₄对其进行干燥。在真空下除去溶剂，将残余物用硅胶色谱进行处理，用EA进行洗脱。得到600mg白色结晶，mp为185℃。

Rf(EA)＝0.22

MS(ES⁺)：304

实施例4 N-[2-氯-4-五氟硫基苯甲酰基]胍

a)2-氯-4-五氟硫基苯甲酸

将20.0ml TMEDA溶解于150ml THF(无水)中并且在-80℃至-90℃的温度下向其中加入93.0ml 1.25M仲丁基锂的环己烷溶液。然后，在-87℃至-93℃的温度下，在35分钟内向其中滴加4-五氟硫基苯甲酸(实施例2a)在50ml THF(无水)中的溶液。在将其在-90℃下搅拌2小时后，在-90℃下向其中滴加38.2g1，1，1，2，2，2-六氯乙烷在60ml THF(无水)中的溶液。将该混合物加温至-70℃，然后，向其中滴加100ml水。在真空下除去溶剂，将残余物用硅胶色谱进行处理，用DIP/2％HOAc进行洗脱，得到5.0g部分结晶的油状物形式的所需产物。

Rf(DIP/2％HOAc)＝0.21

MS(EI)：282(M+1)⁺

b)N-[2-氯-4-五氟硫基苯甲酰基]胍

将170mg 2-氯-4-五氟硫基苯甲酸溶解于3ml DMF(无水)中，并且在RT下向其中加入127mg CDI。将其在RT下搅拌2小时，产生中间体酰基咪唑。

同时，将337mg KOt-Bu溶解于5ml DMF(无水)中，然后向其中滴加344mg盐酸胍在5ml DMF(无水)中的溶液。将该溶液在RT下搅拌30分钟，然后在RT下向其中滴加酰基咪唑的溶液。将该反应混合物在RT下放置16小时，然后在真空下除去溶剂。向残余物中加入50ml EA/20ml水并用水将其洗涤两次，每次使用20ml水，然后用饱和NaCl水溶液洗涤两次，每次使用20ml饱和NaCl水溶液。用MgSO₄干燥，然后在真空下除去溶剂。将残余物用硅胶色谱进行处理，用EA进行洗脱，得到90mg产物(无定形的)。

Rf(EA)0.13

MS(ES⁺)：324(M+1)⁺

实施例5 N-[2-(4-氟苯氧基)-4-五氟硫基苯甲酰基]胍

a)2-氯-4-五氟硫基苯甲酸甲酯

将4.3g 2-氯-4-五氟硫基苯甲酸溶解于50ml甲醇中，并在RT下向其中缓慢滴加5.6ml SOCl₂。在将其在回流下煮沸6小时并在真空下除去挥发性组分后，向残余物中加入100ml甲苯吸收，并再次在真空下除去挥发性组分。得到4.1g无色的油状物。

Rf(HEP/DIP 1:1)＝0.44

b)2-(4-氟苯氧基)-4-五氟硫基苯甲酸甲酯

将300mg 2-氯-4-五氟硫基苯甲酸甲酯、113mg 4-氟苯酚和659mgCs₂CO₃溶解于1.5ml DMF(无水)中并将其在120℃下进行搅拌。然后，将该混合物冷却并用10ml EA对其进行稀释，然后用水洗涤3次，每次使用5ml水。用MgSO₄干燥，然后在真空下除去溶剂。得到120mg无定形的固体，然后用反相硅胶色谱对其进行处理：

流速：30ml/分钟

梯度：ACN＝A；水+0.2％TFA＝B

0-3分钟5％A；-14分钟95％A；15-18分钟95％A；-20分钟5％A

柱：XTerra C18 5μm30×100mm

得到20mg无定形的固体。

Rf硅胶(HEP/DIP 1:1)＝0.44

c)N-[2-(4-氟苯氧基)-4-五氟硫基苯甲酰基]胍

将270mg KOt-Bu和324mg盐酸胍在RT下在1ml DMF(无水)中搅拌30分钟。然后向其中加入54mg 2-(4-氟苯氧基)-4-五氟硫基苯甲酸甲酯在1ml DMF(无水)中的溶液。将其在RT下搅拌2小时后，将其倒入到10ml水中，用HCl水溶液将其pH调至pH＝8，用MTB对其萃取3次，每次使用5ml MTB。将有机相用10ml水进行洗涤，然后用MgSO₄干燥，最后，在真空下除去溶剂。得到20mg无定形的固体。

Rf(EA)＝0.22

MS(ES⁺)：400(M+1)⁺

实施例6 N-(2-甲基-5-五氟硫基苯甲酰基)胍

a)1-二氯甲基-2-硝基-4-五氟硫基苯

将5.4g KOtBu溶解于25ml DMF(无水)和20ml THF(无水)中并将其冷却至-73℃。然后在将温度维持在低于-67℃的情况下，尽可能迅速地向其中滴加3.0g 1-硝基-3-五氟硫基苯和1.1ml CHCl₃在15ml DMF(无水)中的溶液。将该混合物在-70℃下搅拌1分钟，然后向其中注入15ml在15ml甲醇中的冰醋酸并将其加温至RT。将该反应混合物倾倒到200ml水中并用CH₂Cl₂对其萃取3次，每次使用100ml CH₂Cl₂。然后将有机相用饱和Na₂CO₃水溶液洗涤三次，每次使用50ml饱和Na₂CO₃水溶液。用MgSO₄进行干燥，然后在真空下除去溶剂。将残余物用硅胶色谱进行处理，用EA/HEP 1:10进行洗脱，得到3.0g无色油状物。

Rf(EA/HEP 1:10)＝0.78

b)2-甲基-5-五氟硫基苯胺

将2.0g 1-二氯甲基-2-硝基-4-五氟硫基苯溶解于25ml DME中，然后，在加入200mg Pd/C(5％)和100ml饱和NaHCO₃水溶液后，将其在5巴H₂下氢化54小时。然后，通过过滤除去催化剂并用MTB对该反应溶液萃取3次，每次使用50ml MTB。用MgSO₄进行干燥，然后在真空下除去溶剂。得到1.1g无色的油状物。

Rf(DIP)＝0.42

c)2-溴-1-甲基-4-五氟硫基苯

将1.6g 2-甲基-5-五氟硫基苯胺溶解于15ml冰醋酸中，然后在5℃下向其中滴加3ml 48％的HBr水溶液。在此期间形成沉淀。然后，在0℃至5℃的温度下，在10分钟内向其中滴加0.52g在3ml水中的NaNO₂。然后，将这种重氮盐的溶液倾倒到1.2g CuBr在10ml 48％ HBr水溶液和10ml水中的混悬液中。将其在RT下搅拌30分钟，然后用50ml水进行稀释，然后用DIP萃取3次，每次使用50ml DIP。然后将有机相用饱和Na₂CO₃水溶液洗涤2次，每次使用50ml饱和Na₂CO₃水溶液。用MgSO₄进行干燥，然后在真空下除去溶剂。得到1.6g可流动的油状物。

Rf(MTB/正-戊烷1:5)＝0.67

d)2-甲基-5-五氟硫基苯甲酸

将200mg 2-溴-1-甲基-4-五氟硫基苯溶解于6ml DMF、3ml三-正丁基胺和0.5ml水中，并向其中加入129mg Cs₂CO₃。然后向其中加入15.1mgPd(OAc)₂和35.3mg三苯基膦，并将该混合物在CO下，在大气压下回流煮沸6小时。将该反应混合物用100ml EA和30ml水稀释，用HCl水溶性将其调至pH＝2-3并用EA对其萃取两次，每次使用30ml EA。用MgSO₄进行干燥，然后在真空下除去溶剂。用反相色谱进行处理，得到17mg无定形固体。

色谱法：运行3次HPLC；用梯度1运行1次，用梯度2运行2次。

HPLC：梯度1和梯度2，二者的运行时间都为20分钟

流动相：水(双蒸水)+0.2％TFA，乙腈(Chromasolv)；流速：30ml/分钟

柱：Waters Xterra^TM MS C18 5μm，30×100mm

MS：标准20分钟，级分：随时间流逝进行(by time)

梯度1：梯度2：

0-2.5分钟 10％ ACN 0-2.5分钟 10％ ACN

3.0分钟 25％ ACN 3.0分钟 20％ ACN

14.0分钟 75％ ACN 14.0分钟 60％ ACN

15.0分钟 95％ ACN 15.0分钟 95％ ACN

17.5分钟 10％ ACN 17.5分钟 10％ ACN

LCMS(ES-)：261(M-1)^-

e)N-(2-甲基-5-五氟硫基苯甲酰基)胍

将17.0mg 2-甲基-5-五氟硫基苯甲酸溶解于2mI DMF(无水)中，在加入15mg CDI后，将其在RT下搅拌4小时。

同时，将36.5mg KOt-Bu和37.3mg盐酸胍溶解于2ml无水DMF中并将其在RT下搅拌30分钟。然后，将该胍碱的溶液滴加到上面的酰基咪唑中并将其在RT下放置16小时。在真空下除去溶剂，将残余物用5ml水稀释并用HCl水溶液调至pH＝9。然后用EA萃取3次，每次使用10ml EA。用MgSO₄进行干燥，然后在真空下除去溶剂。用硅胶色谱进行处理，用EA进行洗脱，得到7.0mg无定形固体形式的产物。

Rf(EA)＝0.20

MS(ES⁺)：304(M+1)⁺

NHE抑制方法

如下所述的那样来测定NHE-1抑制的IC₅₀[nM]：

通过测量在表达人NHE-1的转染细胞系中pHi的恢复来测定NHE-1抑制作用的FLIPR试验

该试验是用具有带有透明底的黑壁96-孔微量滴定板的FLIPR(荧光成像板读数器)进行的。在前一天以25000个细胞/孔的密度将表达各种NHE亚型的转染细胞系(由于诱变和随后的选择，母细胞系LAP-1不表现出内源性NHE活性)进行接种。[用于转染细胞的生长培养基(Iscove+10％胎牛血清)还包含作为选择抗生素的G418从而确保存在转染的序列。]

实际的试验是通过除去生长培养基并向每个孔中加入100μl加样缓冲液(5μM在20mM NH₄Cl、115mM氯化胆碱、1mM MgCl₂、1mM CaCl₂、5mM KCl、20mM HEPES、5mM葡萄糖中的BCECF-AM[2′，7′-二(羧基乙基)-5-(和-6-)羧基荧光素，乙酰氧基甲基酯]；pH7.4[用KOH进行调节])开始的。然后将这些细胞在37℃下培养20分钟。这种培养可使细胞带有荧光染料(其荧光强度取决于pHi)和NH₄Cl(其使得细胞略微呈碱性)。[酯形式的无荧光的染料前体BCECF-AM可以透过膜。真正的染料BCECF不能透过膜，但是可以通过酯酶被释放到细胞内。]

培养20分钟后，通过在细胞洗涤器(Tecan Columbus)中用400μl洗涤缓冲液(133.8mM氯化胆碱，4.7mM KCl，1.25mM MgCl₂，1.25mM CaCl₂，0.97mM K₂HPO₄，0.23mM KH₂PO₄，5mM HEPES，5mM葡萄糖；pH7.4[用KOH进行调节])洗涤3次来除去包含NH₄Cl和游离BCECF-AM的加样缓冲液。留在孔里的残余体积为90μl(可能为50-125μl)。这种洗涤步骤可以除去游离BCECF-AM，并且由于除去了外部的NH₄ ⁺离子而产生了细胞内的酸化(～pHi6.3-6.4)。

因为通过除去细胞外的NH₄ ⁺和随后NH₃立即通过细胞膜排出而扰乱了NH₄ ⁺与NH₃和H⁺的细胞内平衡，所以洗涤过程使得H⁺留在细胞内，其造成了细胞内的酸化。如果其持续的足够长，则其最终可导致细胞死亡。

因此，在洗涤缓冲液中不含钠(<1mM)很重要，这是因为细胞外钠离子将通过克隆的NHE异构形的活性而导致pHi的立即恢复。

同样重要的是，所用的所有缓冲液(加样缓冲液、洗涤缓冲液、恢复缓冲液)均不包含任何HCO₃ ^-离子，这是因为存在的碳酸氢根将导致存在于母LAP-1细胞系中的干扰性碳酸氢根依赖性pHi调节系统的活化。

然后，将该具有酸化的细胞的微量滴定板(在酸化后最多20分钟)转移到FLIPR中。在FLIPR中，用氩激光器所产生的波长为488nm的光来激发细胞内的荧光染料，并对测量参数(激光功率、照明时间和FLIPR中所含有的CCD相机的孔径)进行选择，从而使得每孔的平均荧光信号为30000至35000个相对荧光单位。

FLIPR中的实际测量是在软件控制下每隔两秒用CCD相机进行照相来开始的。在10秒后，通过用FLIPR中的96-孔吸管操纵器加入90μl恢复缓冲液(133.8mM NaCl，4.7mM KCl，1.25mM MgCl₂，1.25mM CaCl₂，0.97mM K₂HPO₄，0.23mM KH₂PO₄，10mM HEPES，5mM葡萄糖；pH7.4[用NaOH进行调节])来开始细胞内pH的恢复。

阳性对照孔(100％ NHE活性)是向其中加入了纯恢复缓冲液的孔，而阴性对照(0％ NHE活性)中加入的是洗涤缓冲液。向所有其它孔中加入具有两倍试验物质浓度的恢复缓冲液。在60次测量(2分钟)后结束FLIPR中的测量。

将原始数据输出到ActivityBase程序中。这种程序首先计算所试验的各物质浓度的NHE活性，然后从这些值计算出这些物质的IC₅₀值。由于在整个实验期间pHi的恢复过程不是线性的(其在末端下降，因为NHE活性在较高pHi值下降低)，所以选择其中阳性对照荧光的增加呈线性的部分用于测量的评估是很重要的。

实施例	NHE1抑制IC<sub>50</sub>[nM]
实施例	NHE1抑制IC<sub>50</sub>[nM]	1	237
2	131	1	237
2	131	3	14.5
4	220	3	14.5
4	220	5	12000
6	20.3	5	12000

Claims

1.式I或II的五氟硫基苯甲酰基胍或其可药用盐

其中

R1 是氢、含1、2、3或4个碳原子的烷基、F或Cl；

R2 是氢或-O-苯基，

所述苯基是未取代的或被1或2个选自F或Cl的基团所取代；

R3和R4是氢。

2.一种制备式I或II的化合物或其可药用盐的方法，其包括将式III或IV的化合物分别与胍进行反应，

其中R1至R4具有权利要求1中所定义的含义，并且L是易于进行亲核取代的离去基团。

3.如权利要求1所述的式I或II的化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防由局部缺血或再灌注事件所造成的器官和组织的急性或慢性损害、病症或间接后遗症，用于治疗或预防心律失常、威胁生命的心室纤维性颤动、心肌梗塞、心绞痛，用于治疗或预防心脏的局部缺血状态、外周神经系统的局部缺血状态，用于治疗或预防休克状态、其中细胞增殖代表了原发或继发性因素的疾病、转移灶、动脉粥样硬化或脂质代谢紊乱、高血压、中枢神经系统病症，用于治疗或预防非胰岛素依赖型糖尿病或糖尿病的晚期损害、血栓形成、由内皮功能障碍所导致的病症，用于治疗或预防内部器官的纤维化病症，用于治疗或预防心力衰竭、急性或慢性炎症、由原生动物所引起的病症、用于手术和器官移植、用于预防与年龄有关的组织改变的药物中的应用。

4.如权利要求1所述的式I或II的化合物或其可药用盐与细胞毒性药物联合在制备具有降低的细胞毒性的药物中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其中所述的细胞毒性为心脏毒性。

6.如权利要求3所述的应用，用于制备治疗或预防由局部缺血或再灌注事件所造成的器官和组织的急性或慢性损害、病症或间接后遗症的药物。

7.如权利要求3所述的应用，用于制备治疗威胁生命的心室纤维性颤动的药物。

8.如权利要求3所述的应用，用于制备治疗或预防转移灶的药物。

9.如权利要求3所述的应用，其中所述的中枢神经系统病症是中枢神经系统的局部缺血状态。

10.如权利要求9所述的应用，其中所述的中枢神经系统的局部缺血状态是中风。

11.如权利要求3所述的应用，其中所述的细胞增殖代表了原发或继发性因素的疾病是癌症。

12.如权利要求3所述的应用，其中所述的由内皮功能障碍所导致的病症是间歇性跛行。

13.如权利要求3所述的应用，其中所述的内部器官的纤维化病症是肝的纤维化病症、肾的纤维化病症、血管的纤维化病症和心脏的纤维化病症。

14.如权利要求3所述的应用，其中所述的心力衰竭是充血性心力衰竭。

15.如权利要求3所述的应用，其中所述的由原生动物所引起的病症是疟疾。

16.如权利要求3所述的应用，其中所述用于手术和器官移植的药物是用于保护和储存用于手术操作的移植物的药物。

17.如权利要求3所述的应用，其中所述用于预防与年龄有关的组织改变的药物是用于对抗老化、延长生命的药物。

18.如权利要求3所述的应用，其中所述的高血压为原发性高血压。

19.如权利要求3所述的应用，其中所述的中枢神经系统病症是癫痫或中枢诱导的惊厥。

20.如权利要求3所述的应用，其中所述的中枢神经系统病症是精神病。

21.如权利要求3所述的应用，其中所述的中枢神经系统病症是焦虑状态或抑郁。

22.如权利要求3所述的应用，用于制备治疗或预防心脏的纤维化病症、心力衰竭的药物。

23.一种用于人的药物，其包含有效量的如权利要求1所述的式I或II的化合物或其可药用盐以及可药用的载体和添加剂。

24.式V的化合物

其中R5为氢或C₁-C₄烷基。