CN100457119C

CN100457119C - 注射用人参多糖冻干粉针及其制备工艺

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Publication number: CN100457119C
Application number: CNB2006100347281A
Authority: CN
Inventors: 汤玉生
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2006-03-30
Filing date: 2006-03-30
Publication date: 2009-02-04
Anticipated expiration: 2026-03-30
Also published as: CN1857300A

Abstract

本发明涉及一种人参多糖的新剂型以及相关制备工艺，具体是一种注射用人参多糖冻干粉针及其制备工艺。本发明所述的一种注射用人参多糖冻干粉针，包括人参多糖和水溶性注射用药用辅料，其原料组分按重量百分比为：人参多糖0.1～20%，药用辅料1～15%，注射用水65～98.9%。本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针的性质与效果均有显著的提高，具有起效快、疗效确切、副作用小的优点，具有很大的市场空间，尤其是用于减轻肿瘤放、化疗引起的副作用，可作为免疫调节和肿瘤治疗的辅助用药。

Description

注射用人参多糖冻干粉针及其制备工艺

技术领域

本发明属于药物及其制剂领域，涉及一种人参多糖的新剂型以及相关制备工艺。

背景技术

人参在我国有悠久的药用历史，人参的化学成分十分复杂，除了人参皂苷外，还含有多种糖类，包括单糖、低聚糖和多糖。国内外对人参皂苷的研究报道较多见，近年来对人参多糖的研究也取得较大进展。

药理研究表明，人参多糖具有免疫调节活性、抗补体活性、抗肿瘤活性、细胞保护活性、降血糖活性等(张彬等，人参多糖的研究概况，中国药事，2004年第18卷第9期，566-569)。赵俊也报道了类似的综述(赵俊，人参多糖的化学与药理学研究进展，国外医学中医中药分册，2004年第26卷第2期，79-81)。由于人参多糖具有多方面的生物活性与功能，并且无毒副作用，因此普遍认为它将是很有开发前景的天然药物。同时，上述研究综述也明确指出，从不同来源的人参提取的人参多糖，或者从同一种人参植物的不同部位提取的人参多糖，或者通过不同的提取方法获得的人参多糖，其成分很复杂，不同组分的生物学活性差异甚大。因此，必须重视人参多糖的提取纯度、稳定性和规格化等因素，在人参多糖的化学提取、药理学、药剂学等方面仍要做大量的工作。

我国目前仅有“人参多糖注射液”的国家标准，其中的“人参多糖质量标准”提到一种人参多糖的制法，其制备流程是：醇提——药渣加水煎煮——加活性炭，过滤——过树脂柱——浓缩、醇沉——沉淀洗涤、干燥、粉碎即为人参多糖。该法制得的人参多糖原料为灰白色至暗灰色粉末。许多药厂在试图改进人参多糖的制备方法，以提高药效，例如吉林威威药业股份有限公司申请的发明专利“一种人参多糖制备方法”(专利申请号：200410000209.4，公开号：CN1580078，公开日：2005年2月16日)就提出一种新方法来制备人参多糖，该方法是采用将人参重复水煮醇沉、冷藏离心的方法来得到人参多糖产品。该专利也提及将人参醇提后的药渣作为原料，再反复水煮醇沉、冷藏离心的方法来得到人参多糖产品。但经实验表明，包括上述方法在内的现有制备方法得到的人参多糖产品，其纯度与药效提高并不明显，也仅适用于制备人参多糖注射液，而不适用于制备冻干粉针等剂型。

尽管目前已有人参多糖注射液产品上市，但存在药物稳定性较差、有效期短、不利于贮存和运输等缺陷外，临床应用时也存在产生药物过敏等不良反应。目前，国内许多药厂正在改进人参多糖的制备方法，进而将质量更高的人参多糖用于研制新剂型。人参多糖原料药的制备效果不佳，已直接制约到新剂型的研发。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种制备工艺优越、产品质量提高的注射用人参多糖冻干粉针，能在药厂大批量生产，且适于临床应用，可申报为国家新药。

本发明所述的一种注射用人参多糖冻干粉针，包括人参多糖和水溶性注射用药用辅料，其原料组分按重量百分比为：人参多糖0.1～20％，药用辅料1～15％，注射用水65～98.9％。

虽然人参多糖冻干粉针剂是一种比注射剂更好的剂型，但由于人参多糖成分复杂，要研制成功实属不易。人参多糖冻干粉针剂最常出现的问题是杂质(蛋白质、鞣质、树脂等)不合格，产生混浊或沉淀，溶液颜色加深等。出现这些问题的主要原因或是提取、纯化工艺不当，或是成型工艺不当。

本发明所述的人参多糖的提取方法，包括以下步骤：

A)采集鲜人参的根部，洗净，粉碎，过筛，加水浸泡过夜，晾干，用乙醇浸渍提取或者回流提取至少5次；

B)将药渣挥发去尽乙醇后，加水浸泡，加热至沸腾，保持微沸提取，共提取至少5次；

C)合并提取液，浓缩，加入乙醇提取三次以上，至醇浓度为80-90％，离心，弃去沉淀，用无水乙醇浸洗1～2次，得到粗人参多糖；

D)再经葡聚糖凝胶柱或者聚酰胺柱分离纯化，用水洗脱，洗脱液浓缩，再用乙醇沉淀，沉淀用无水乙醇浸洗1～2次，得到精人参多糖。

上述提取方法是发明人经反复筛选试验得到的，人参先采用乙醇回流提取至少5次，使其他有效成分如人参皂苷充分分离提取(提取率在95％以上)，然后将药渣再用水提取人参多糖，经浓缩后醇沉，再经聚酰胺柱分离纯化，人参多糖不但收得率高，为药材量的5～8％，而且纯度高，含量可达75％以上，外观性状颜色浅，为白色或类白色，易于过滤澄明，优于“人参多糖注射液”国家标准所述的制法。

上述提取方法也克服了前述现有人参多糖提取技术的不足：如果人参采用水提取，提取率仅能达到70％左右，而且在醇沉分离纯化时，当人参多糖等成分沉淀时，包裹不少皂苷，所得人参多糖纯度较低，含量仅为60％左右，色泽较深，为黄色或浅黄色，由于中间体色泽深，制的粉针剂色泽也较深。

优选地，所述的步骤A中，用75-80％乙醇浸渍提取或者回流提取。

优选地，所述的步骤C中采用多次醇沉法：合并提取液，浓缩至1/10体积，加入95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为40％，3000rpm离心15分钟，弃去沉淀，上清液继续加95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为60％，3000rpm离心15分钟，收集沉淀，再用水溶解后冷藏或离心，弃沉淀，浓缩后加入95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为80-90％，3000rpm离心15分钟，收集沉淀，用无水乙醇浸洗1～2次，得到粗人参多糖。

第一次低浓度醇沉时，主要是除去变性固化的蛋白质、胶质等水不溶性杂质；然后逐步提高醇浓度进行反复醇沉，去尽水不溶性杂质。由于人参多糖的分子量相对较低，因此最后醇沉时的醇浓度提高到80-90％。

应用本发明所述的人参多糖提取方法，即采用经过筛选试验确定的溶剂和工艺提取，以及采用适宜的分离纯化工艺，使所得提取物(中间体)最大限度地保留有效成分，尽可能除去蛋白质，鞣质、树脂等无效成分，尽可能提高中间体的纯度，为人参多糖冻干粉针剂的成型工艺奠定可靠的基础。

人参经提取、分离纯化，制得合格的人参提取物(中间体)，方可进行成型工艺研究。所谓合格提取物(或称半成品或称中间体)，是指符合规定的内控质量标准，一是指杂质检查(蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子)符合注射用标准；二是检查指标成分总量占总固体的百分率应符合注射用标准。

人参多糖冻干粉针的研发，必须使用膨松剂，膨松剂起两种作用，一是起膨松骨架作用，使冻干后形成饱满而膨松的骨架；二是起助溶作用，使冻干后易于溶解形成澄明的溶液。膨松剂分为两大类，氨基酸类、如甘氨酸、丙氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺等主要起膨松骨架作用，甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、蔗糖、右旋糖酐、多元醇肌醇、白蛋白、明胶等主要起助溶作用，但也起膨松骨架作用，尤其是葡聚糖、甘露醇、聚乙二醇既有良好的助溶作用也有很好的膨松骨架作用，在中药冻干成型工艺中最常用。

本发明的另一目的是提供所述的注射用人参多糖冻干粉针的制备工艺，其包括以下步骤：

a)无菌条件下称取人参多糖与水溶性注射用药用辅料，置于无菌容器中，加适量注射用水溶解，制成物料溶液；

b)按重量体积百分比为0.1～2％向物料溶液中加入活性炭，搅拌，过滤；

c)滤液水浴加热至40～50℃，在10～50℃放置10～60分钟，再加入注射用水至组成比例；

d)用0.22μm微孔滤膜过滤，检查pH和人参多糖含量，检查合格后无菌分装于西林瓶中，半加丁基橡胶塞；

e)将西林瓶置于冻干箱中冷冻干燥；压盖，即可。

优选地，所述的步骤b中，所述活性炭的加入量优选为0.1～2％。

优选地，所述的步骤e中，所述冷冻干燥的步骤为：将西林瓶置于冻干箱中降温至-40～-45℃，保持4～12小时，抽真空至-300～-600mmHg，保持5～16小时，然后升温干燥，干燥温度低于35℃，干燥至残留水分≤5％，干燥时间需24小时。

本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针，具有以下优点：

(1)本发明采用更新的人参多糖提取工艺，所制备的人参多糖质地更纯，有效成分含量更高，疗效也有提高，较现有产品而言更为优越。

(2)相比于人参多糖注射液，本品适宜干燥条件运输和贮藏，较为方便，而且产品含水量低(控制在5％以内)，药物稳定性好，保质期长。

(3)本品药性稳定，临床时将粉针剂加入注射用水后速溶，避免了现有注射液容易出现浑浊的现象，所得注射液经严格质量标准检验，各项指标均符合中国药典标准。

(4)本品制备过程中加活性炭可出去热源，避免注射给药后可能发生的不良反应，使药物品质可靠。

综上所述，本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针的性质与效果均有显著的提高，具有起效快、疗效确切、副作用小的优点，具有很大的市场空间，尤其是用于减轻肿瘤放、化疗引起的副作用，可作为免疫调节和肿瘤治疗的辅助用药。

具体实施方式

实施例一：人参多糖的提取

本发明所述的人参多糖的提取方法，包括以下步骤：

A)采集鲜人参的根部，洗净，粉碎，过80-100目筛，加水浸泡过夜，晾干，用75-80％乙醇浸渍提取或者回流提取至少5次；

C)合并提取液，浓缩至1/10体积，加入95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为40％，3000rpm离心15分钟，弃去沉淀，上清液继续加95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为60％，3000rpm离心15分钟，收集沉淀，再用水溶解后冷藏或离心，弃沉淀，浓缩后加入95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为80％，3000rpm离心15分钟，收集沉淀，用无水乙醇浸洗1～2次，得到粗人参多糖；

本实施例为优选提取方案，其步骤C可简化为：合并提取液，浓缩，加入乙醇提取三次以上，至醇浓度为40％，离心，弃去沉淀，用无水乙醇浸洗1～2次，所得到粗人参多糖经步骤D纯化为精人参多糖后，也可用于制备本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针。

采用实施例一所述方法得到的精制人参多糖，用于以下各实施例的冻干粉针剂型的制备。

实施例二：注射用人参多糖冻干粉针的制备

本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针，包括人参多糖和水溶性注射用药用辅料，其原料组分按重量百分比为：3％的人参多糖，5％右旋糖苷，92％的注射用水。其制备步骤为：(1)无菌条件下称取人参多糖30g，右旋糖苷50g，置于无菌容器中，加100g注射用水溶解，制成物料溶液；(2)按重量体积百分比为0.2％向物料溶液中加入活性炭，搅拌，过滤；(3)滤液水浴加热至50℃，在30～50℃放置60分钟，再加入820g注射用水；(4)用0.22μm微孔滤膜过滤，检查pH和人参多糖含量，检查合格后无菌分装于西林瓶中，半加丁基橡胶塞；(5)将西林瓶置于冻干箱中降温至-45℃，保持10小时，抽真空至-500mmHg，保持12小时，然后升温干燥，干燥温度低于35℃，干燥至残留水分≤5％，干燥时间约需24小时，压塞、轧盖，即得。上述全部操作应在无菌条件下进行。

实施例三：注射用人参多糖冻干粉针的制备

本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针，包括人参多糖和水溶性注射用药用辅料，其原料组分按重量百分比为：0.3％的人参多糖，5％的甘露醇，94.7％的注射用水，其制备步骤为：(1)无菌条件下称取人参多糖3g，甘露醇50g，置于无菌容器中，加100g注射用水溶解，制成物料溶液；(2)按重量体积百分比为0.3％向物料溶液中加入活性炭，搅拌，过滤；(3)滤液水浴加热至50℃，在35～45℃放置50分钟，再加入845g注射用水；(4)用0.22μm微孔滤膜过滤，检查pH和人参多糖含量，检查合格后无菌分装于西林瓶中，半加丁基橡胶塞；(5)将西林瓶置于冻干箱中降温至-40℃，保持12小时，抽真空至-400mmHg，保持15小时，然后升温干燥，干燥温度低于35℃，干燥至残留水分≤5％，干燥时间约需24小时，压塞、轧盖，即得。上述全部操作应在无菌条件下进行。

实施例四：注射用人参多糖冻干粉针的制备

本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针，包括人参多糖和水溶性注射用药用辅料，其原料组分按重量百分比为：20％的人参多糖，2％乳糖，78％的注射用水。

其制备步骤为：(1)无菌条件下称取人参多糖200g，乳糖20g，置于无菌容器中，加100g注射用水溶解，制成物料溶液；(2)按重量体积百分比为2％向物料溶液中加入活性炭，搅拌，过滤；(3)滤液水浴加热至50℃，在40～50℃放置60分钟，再加入680g注射用水；(4)用0.22μm微孔滤膜过滤，检查pH和人参多糖含量，检查合格后无菌分装于西林瓶中，半加丁基橡胶塞；(5)将西林瓶置于冻干箱中降温至-45℃，保持12小时，抽真空至-600mmHg，保持16小时，然后升温干燥，干燥温度低于35℃，干燥至残留水分≤5％，干燥时间约需24小时，压塞、轧盖，即得。上述全部操作应在无菌条件下进行。

实施例五：注射用人参多糖冻干粉针的制备

本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针，包括人参多糖和水溶性注射用药用辅料，其原料组分按重量百分比为：5％的人参多糖，15％甘氨酸，80％的注射用水。

其制备步骤为：(1)无菌条件下称取人参多糖50g，甘氨酸150g，置于无菌容器中，加100g注射用水溶解，制成物料溶液；(2)按重量体积百分比为0.5％向物料溶液中加入活性炭，搅拌，过滤；(3)滤液水浴加热至50℃，在10～50℃放置60分钟，再加入700g注射用水；(4)用0.22μm微孔滤膜过滤，检查pH和人参多糖含量，检查合格后无菌分装于西林瓶中，半加丁基橡胶塞；(5)将西林瓶置于冻干箱中降温至-40℃，保持7小时，抽真空至-400mmHg，保持8小时，然后升温干燥，干燥温度低于35℃，干燥至残留水分≤5％，干燥时间约需24小时，压塞、轧盖，即得。上述全部操作应在无菌条件下进行。

实施例六：注射用人参多糖冻干粉针的制备

本发明所述的注射用人参多糖冻干粉针，包括人参多糖和水溶性注射用药用辅料，其原料组分按重量百分比为：5％的人参多糖，15％的甘露醇、乳糖和右旋糖苷的混合物，80％的注射用水。

其制备步骤为：(1)无菌条件下称取人参多糖50g，甘露醇50g，乳糖20g，右旋糖苷80g，置于无菌容器中，加100g注射用水溶解，制成物料溶液；(2)按重量体积百分比为0.5％向物料溶液中加入活性炭，搅拌，过滤；(3)滤液水浴加热至50℃，在10～50℃放置60分钟，再加入700g注射用水；(4)用0.22μm微孔滤膜过滤，检查pH和人参多糖含量，检查合格后无菌分装于西林瓶中，半加丁基橡胶塞；(5)将西林瓶置于冻干箱中降温至-40℃，保持7小时，抽真空至-400mmHg，保持8小时，然后升温干燥，干燥温度低于35℃，干燥至残留水分≤5％，干燥时间约需24小时，压塞、轧盖，即得。上述全部操作应在无菌条件下进行。

上述实施例二至六中，所述的水溶性注射用药用辅料可选自甘氨酸、丙氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、蔗糖、右旋糖酐、多元醇肌醇、白蛋白、明胶、葡聚糖、聚乙二醇的一种或一种以上的组合。

实施例七：注射用人参多糖冻干粉针稳定性试验

注射用人参多糖冻干粉针稳定性考察：将制得的注射用人参多糖冻干粉针进行稳定试验研究。依照《中国药典》2005年版二部附录XIX C“原料药与药物制剂稳定性试验指导原则”，对注射用人参多糖冻干粉针进行高温试验研究。

试验方法：

将样品置于稳定性试验箱中，设定条件为60℃放置10天，于第5天和第10天取样，检查制剂的外观性状、含量等各项指标。

制得的注射用人参多糖冻干粉针稳定试验研究结果见表1。

表1：加速试验检查结果

试验结果表明，本发明的人参多糖冻干粉针稳定，外观性状良好(呈疏松块状)，复水性好。本发明不但便于临床用药，而且更易于贮藏和运输。

Claims

1、一种注射用人参多糖冻干粉针，包括人参多糖和水溶性注射用药用辅料，其特征在于其原料组分按重量百分比为：人参多糖0.1～20％，水溶性注射用药用辅料1～15％，注射用水65～98.9％；所述的人参多糖是通过以下工艺提取的：

C)合并提取液，浓缩，加入乙醇至少提取三次，至醇浓度为80-90％，离心，收集沉淀，用无水乙醇浸洗1～2次，得到粗人参多糖；

2、根据权利要求1所述的注射用人参多糖冻干粉针，其特征在于，所述的步骤A中，用75-80％乙醇浸渍提取或者回流提取。

3、根据权利要求1所述的注射用人参多糖冻干粉针，其特征在于，所述的步骤C中，合并提取液，浓缩至1/10体积，加入95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为40％，3000rpm离心15分钟，弃去沉淀，上清液继续加95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为60％，3000rpm离心15分钟，收集沉淀，再用水溶解后冷藏或离心，弃沉淀，浓缩后加入95％乙醇或无水乙醇，至醇浓度为80％，3000rpm离心15分钟，收集沉淀，用无水乙醇浸洗1～2次，得到粗人参多糖。

4、根据权利要求1所述的注射用人参多糖冻干粉针，其特征在于：所述的水溶性注射用药用辅料选自甘氨酸、丙氨酸、组氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、甘露醇、山梨醇、乳糖、葡萄糖、蔗糖、右旋糖酐、多元醇肌醇、白蛋白、明胶、葡聚糖、聚乙二醇的一种或一种以上的组合。

5、如权利要求1所述的注射用人参多糖冻干粉针的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：

e)将西林瓶置于冻干箱中冷冻干燥；压盖，即可。

6、根据权利要求5所述的制备工艺，其特征在于：所述的步骤e中，所述冷冻干燥的步骤为：将西林瓶置于冻干箱中降温至-40～-45℃，保持4～12小时，抽真空至-300～-600mmHg，保持5～16小时，然后升温干燥，干燥温度低于35℃，干燥至残留水分≤5％，干燥时间需24小时。