CN109053849A - 山茱萸综合利用的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种从山茱萸综合利用的方法，包括如下步骤：将山茱萸果实进行干燥并粉碎，醇提，过滤，滤渣加入酸性蛋白酶和肽酶进行室温酶解，再次醇提，过滤，滤液合并后上ADS‑2大孔树脂柱进行吸附，经洗脱得莫诺苷纯品；滤渣上硅胶柱，结晶重结晶一次得熊果酸和马钱苷纯品。

Description

山茱萸综合利用的方法

技术领域

本发明属于天然产物综合利用技术领域，涉及一种山茱萸综合利用的方法。

背景技术

山茱萸的成熟干燥果实，去核后即为名贵药材山芋肉。果肉内含有16种氨基酸，另外，含有大量人体所必需的元素。另外，含有生理活性较强的皂甙原糖、多糖、苹果酸、酒石酸、酚类、树脂、鞣质和维生素A、C等成分。果肉入药，为收敛性补血剂及强壮剂；可健胃、补肝肾、治贫血、腰痛、神经及心脏衰弱等症。其性味酸涩、入肝、肾经。酸涩收敛，有滋肝补肾、固肾涩精的作用，适用于肝肾不足所致的腰膝酸软、遗精滑泄、眩晕耳鸣之症。

莫诺苷主要来源于山茱萸，山茱萸的果肉内含有16种氨基酸，另外，含有大量人体所必需的元素。另外，含有生理活性较强的皂甙原糖、多糖、苹果酸、酒石酸、酚类、树脂、鞣质和维生素A、C等成分。其味酸涩，具有滋补、健胃、利尿、补肝肾，益气血等功效。主治血压高、腰膝酸痛、眩晕耳鸣、阳萎遗精、月经过多等症。

熊果酸高含量为有光泽的棱柱状(无水乙醇)或细毛样针状结晶(稀乙醇)，低含量为棕黄色或黄绿色粉末，具特殊的气味，是存在于天然植物中的一种五环三萜类化合物。不溶于水，尚溶于甲醇，乙醇，丙酮，吡啶，石油醚。具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应，熊果酸还具有明显的抗氧化功能，因而被广泛地用作医药和化妆品原料。熊果酸临床表现有显著而迅速降低谷丙转氨酶、血清转氨酶、消退黄疽、增进食欲、抗纤维化和恢复肝功能的作用，具有见效快、疗程短、效果稳定的特点。现已有较多文献资料公开了熊果酸提取纯化工艺研究。

公开号为CN1100607的中国专利公开了一种山茱萸原汁和饮料的生产方法，以山茱萸果实作原料，经清洗、破碎、种霉、加水搅拌、过滤除核、加胶、种酶、精滤、杀菌、浓缩、无菌热封装等几道工序制成原汁浓缩液，再将此原汁浓缩液与糖、蜂蜜、水及其它果汁合理配方，经调配、过滤、杀菌、封装，再杀菌抽样检验合格，便制成饮料。

公开号为CN1448141的中国专利公开了一种山茱萸总苷为主要成份的药物的生产工艺，其特征在于生产工艺按下述步骤进行：a.提取山茱萸总苷有效部位，1).首先将山茱萸果肉洗净、晒干、粉碎、过筛；2).将粉碎过筛的山茱萸粉先用8倍量70％浓度的乙醇浸泡6小时，加热70℃回流提取2小时，滤过，药渣继续加6倍量70％浓度的乙醇回流提取2小时，滤过，合并两次提取液；3).减压回收溶剂，在温度50℃浓缩至含醇量20％，相对密度1.05(60℃)；4).将浓缩液低温(4℃)静置24小时，取上清液，过大孔树脂D101，先用5～7倍量纯水冲洗，柱子的直径(40cm)和高度200cm)，洗脱液流速20～25ml/min，用本发明给出的毛细管电泳(CE)指纹图谱监控总苷指标指，水洗液弃除，改用20％浓度的乙醇冲洗，洗脱液由混变清，以CE监控有关指标，洗脱液弃去；继续用5～6倍量50～80％乙醇洗脱，流速20～25ml/min，CE指纹图谱监控，收集50％乙醇洗脱液；5).收集洗脱液，50℃～60℃减压蒸馏，真空度为0.088Mpa，回收乙醇，所得的稠膏经真空干燥后即得山茱萸总苷。b.制剂，用山茱萸总苷有效部位65～85份，赋形剂25～35份混合搅拌均匀，分装在胶囊中或制成片剂或制成药学上可以接受的任何剂型。

公开号为CN101348817的中国专利公开了一种酶解提取山茱萸多糖的方法，所述方法包括：取山茱萸干燥果肉粉碎制得的山茱萸干粉，加入质量为山茱萸干粉质量15～60倍的蒸馏水，加入酶于35～60℃、pH3.5～7.0下酶解0.5h～4h，酶解结束后灭酶，提取液分离纯化得到山茱萸多糖提取物；所述酶为下列之一或其中两种以上的混合物：①纤维素酶、②木瓜蛋白酶、③果胶酶、④淀粉水解酶，酶质量用量为山茱萸干粉质量的0.1～24％。

公开号为CN102127140A的中国专利公开了一种从山茱萸中联合提取莫诺苷、山茱萸多糖和熊果酸的方法，包含以下步骤：1)提取：将山茱萸粉碎，加入10‐15倍量水加热提取2‐3次，合并提取液，水提后的残渣加6‐8倍量90％醇回流提取，提取液浓缩；2)大孔树脂柱I吸附：把上述水提取液加入大孔树脂柱I吸附，收集下柱液，依次用水和乙醇溶液洗脱，将水洗脱液与下柱液合并，加醇沉淀，滤出沉淀干燥即得山茱萸多糖，收集醇洗脱液，浓缩无醇，加水分散，加等体积的正丁醇萃取2‐4次，正丁醇萃取液浓缩回收正丁醇，干燥即得莫诺苷；3)大孔树脂柱II吸附：上述醇提浓缩液上大孔树脂柱II吸附，用90％乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液加入活性炭回流脱色，滤除活性炭，放冷结晶，滤出结晶，干燥即得熊果酸。

公开号为CN102477053A的中国专利公开了一种从山茱萸中提取莫诺苷和马钱苷的方法，包括以下几个步骤：1)提取：将干燥山茱萸粉碎，用6‐8倍量的70％乙醇超声提取2‐3小时，提取2‐3次，合并提取液；2)萃取：将上述提取液浓缩至无醇，加水分散，加等体积的正丁醇萃取2‐4次，正丁醇萃取液浓缩回收正丁醇，至干，得到粗苷；3)高速逆流色谱分离：以正丁醇‐乙醇‐水为两相溶剂系统，将上述粗苷用下相溶解，以上相为固定相，下相为流动相，流出物分别减压蒸干；4)结晶：将上述干燥物正丁醇加热溶解，再加5‐8倍量乙酸乙酯结晶2‐3次，干燥即得产品。

公开号为CN102204655A的中国专利公开了一种山茱萸果渣不溶性膳食纤维的制备方法，按下列步骤制备：步骤一，将去核挤压果汁后剩余的山茱萸果渣用纯净水洗净，将山茱萸果渣用食用酒精冲洗两遍，然后置于50℃烘箱内干燥，粉碎至380μm，将山茱萸果渣粉末浸泡在正己烷中除去脂类物质，浸泡后挥发除去正己烷；步骤二，正己烷浸泡后山茱萸果渣粉末，加入适量NaOH，置于60℃水浴锅中2h后，4000r/min下离心10min，沉淀，NaOH溶液冲洗，再沉淀，用水洗至中性；步骤三，将洗至中性的沉淀物真空干燥，粉碎过筛，制成山茱萸果渣不溶性膳食纤维。

公开号为CN102613531A的中国专利公开了一种茱萸酱油的生产方法，以下步骤：A、小麦、麸皮预处理：取小麦10‐20重量份，麸皮按25～30重量份，焙炒至有焦香味时，冷却至室温，粉碎过80‐100目筛；B、山茱萸预处理：新鲜山茱萸在清洗设备中清洗干净，取10‐20重量份，用粉碎机进行破碎打浆，后加入山茱萸重量0.05‐0.1％的果胶酶和0.1‐0.15％的纤维素酶进行联合水解，联合水解时保持温度38‐40℃，时间为40‐60分钟，制成山茱萸泥；C、大豆预处理：取大豆50‐60重量份，加水适量，在38‐42℃条件下浸泡8‐12小时，后置蒸煮设备中蒸0.5‐1小时，取出后冷却至45‐50℃；D、接种：当预处理过的大豆冷却至45‐50℃时，均匀拌入预处理过的小麦、麸皮、山茱萸泥，料醅冷却至30‐35℃时，再均匀拌入原料总重量的2‐4％米曲霉和黑曲霉混合种曲，加入原料总重量4‐6％的食盐，制成酱醅；E、发酵：酱醅采用静置发酵，前3天控制酱醅温度在40‐45℃，后酱醅逐渐自然升温至48‐52℃，通过倒醅保持温度在48‐52℃，发酵至第21天，制成红褐色的熟酱醅；F、淋油、配制：采用传统三淋法，取头油与二淋油根据要求进行配兑，制成生山茱萸酱油；G、灭菌、沉淀：将步骤F制成的生山茱萸酱油加热至70‐80℃，保持30‐40分钟灭菌、冷却，静置于贮藏罐中8‐10天，取澄清液制成山茱萸酱油；H、检验、包装：成品经检验合格后包装，入通风、干燥仓库中贮存。

公开号为CN102356800A的中国专利公开了一种山茱萸果脯的生产方法，其特征在于包括以下步骤：1)原料选择选择水分含量低，固形物质含量高，肉质细腻，坚实紧密，耐煮性强的山茱萸，然后去核，去心，去蒂梗后清洗干净；2)原料漂烫将清洗干净的原料置于80～100℃的热水中热烫2～5min捞出，浸入冷水中急速冷却；3)硬化将漂烫后的原料置于质量浓度为0.1％～0.5％的CaCl2溶液中浸泡1～3h；4)漂洗将硬化处理后的原料用水漂洗除去残余的CaCl2溶液；5)糖制将漂洗后的原料放入沸糖液中，煮制5～10分钟，将原料和糖液一起转入容器中，然后浸渍1～4h，所述的糖液含质量浓度30％～50％蔗糖液和0.1％～0.3％柠檬酸；6)干燥将糖制后的山茱萸果脯从浸渍的糖液中捞出，沥干糖液，散放于托盘中，放入烘箱，在55～75℃的温度烘制30～60min。

公开号为CN102293250A的中国专利公开了一种山茱萸减糖速溶奶粉固体饮料，由以下按重量计的组分制成：山茱萸多糖颗粒1‐5份、奶粉3‐10份、木糖醇0.1‐0.5份、植脂末0.1‐0.3份；所述的山茱萸多糖颗粒是，将山茱萸果肉置于索氏提取器中，加入山茱萸果肉重量4倍量的质量浓度为95％的乙醇回流提取2‐3h，过滤，弃除滤液，残渣20‐25℃的常温下干燥，得脱脂山茱萸肉，空气中挥干乙醇，备用；将挥干乙醇脱脂后的山茱萸肉500g加入其重量10‐12倍的水煎煮1小时，纱布粗滤的滤液1，备用；将纱布粗滤后的脱脂山茱萸肉药渣其重量10‐12倍的水煎煮1小时，过滤，得滤液2，备用，弃去药渣；合并滤液1和滤液2，煎煮浓缩至300‐500ml，加入质量浓度为95％的乙醇至乙醇含量为80‐85％之间，20‐25℃的常温下静置15‐20h，过滤，弃去滤液，得沉淀物1；将沉淀物1减压干燥至无醇味，得沉淀物2；沉淀物2加沉淀物重量的15‐20倍的水溶解后，在20‐25℃的常温下静置5‐10h，取上清液，减压浓缩至比重为1.3‐1.5的浸膏，再加入浸膏重量的8‐10倍量的麦芽糊精、糖粉的混合粉，麦芽糊精和糖粉的重量比为1∶1，制成手握成团、轻压即散的软材，制成颗粒，60℃恒温干燥，得山茱萸多糖颗粒；所述的奶粉是，以鲜牛奶为原料，先95℃下灭菌24s，然后浓缩至鲜牛奶体积的1/4，于进风温度130‐160℃、出风温度70‐90℃下喷雾干燥，得干奶粉，再将干奶粉置于流化床上，喷干奶粉重量的0.2‐0.4％的卵磷脂，在60℃下干燥后，冷却，得奶粉。

从现有公开的文献资料来看，利用山茱萸果实分为两种，一种是直接添加到各种食品中，另一种是从其中提取各种功能性成分。在提取过程中存在利用不充分、易产生废液和废渣等问题。

发明内容

针对山茱萸果肉提取加工过程中，存在利用不充分、易产生废液和废渣等问题，本发明提供一种从山茱萸综合利用的方法，彻底解决在提取过程中出现的上述问题。

本发明提供一种从山茱萸综合利用的方法，包括如下步骤：

A、将山茱萸果实进行干燥并粉碎，加入70～85％乙醇水溶液进行室温提取1～3h，过滤得滤液(1)和滤渣(1)，其中加入乙醇水溶液体积L与山茱萸干重比为3～5：1。

B、滤液(1)在45℃～55℃下进行真空或减压浓缩至原有体积的1/15～1/25，陶瓷膜过滤一次得滤液(2)和滤渣(2)。

C、向滤渣(1)中加入水，再用0.05～0.5mol/L盐酸调节pH至3.5～4.5，再加入酸性蛋白酶和肽酶分别至终浓度为50U/L以上，进行室温酶解3～5h，得酶解液，其中加入水体积L与山茱萸干重比为4～6：10。

D、将酶解液加入乙醇进行室温提取1～3h，过滤得滤液(3)和滤渣(3)，其中加入乙醇体积L与酶解液体积L比为3～6：1，乙醇为95％以上的乙醇或无水乙醇。

E、滤液(3)在45℃～55℃下进行真空或减压浓缩至原有体积的1/30～1/60，陶瓷膜过滤一次得滤液(4)和滤渣(4)。

F、将滤液(2)和滤液(4)合并后上ADS-2大孔树脂柱进行吸附，先用三倍至五倍柱体积的水进行冲洗，用四倍至六倍柱体积的25～50％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液(1)和废液。

G、将滤渣(2)和滤渣(4)加入无水甲醇溶解，上硅胶柱进行吸附，用三倍至五倍柱体积的甲醇水溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(2)，最后三倍至五倍柱体积氯仿‐甲醇溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(3)，洗脱液(2)和洗脱液(3)在50℃～65℃下进行真空或减压浓缩至干，分别获得干燥物(2)、干燥物(3)。

H、干燥物(2)加入乙醇溶液在40～45℃下保温15～30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶得到熊果酸粗品，再重结晶一次得熊果酸纯品。

I、干燥物(3)加入丙酮在35～40℃下保温15～30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶，重结晶一次，得马钱苷。

M、将洗脱液(1)进行40℃～55℃下进行真空或减压浓缩至干燥物(1)，得莫诺苷纯品。

所述废液可以直接用于复合氨基酸制备，也可以调节PH到6.0左右后直接作为植物营养剂使用。

所述滤渣(4)可以直接用于土壤改良剂使用，也可以用于生物炭制备原料。

所述乙醇水溶液，是指用无水乙醇与水配制而成，如70％乙醇水溶液为70mL无水乙醇与30mL水混合即可。

所述过滤过程是纱布过滤、陶瓷膜过滤，其中，优选是三层纱布过滤2次、陶瓷膜过滤1次。

在一个具体实施方案中，步骤G中所述无水甲醇的使用量，按体积/滤渣(1)重量比为0.5～2L:1kg。

在一个具体实施方案中，步骤G所述甲醇水溶液是指含有70～90％甲醇的pH5.5～6.5的盐酸水溶液。

在一个具体实施方案中，步骤G中所述氯仿‐甲醇溶液是指氯仿与甲醇的体积比为25:10。

在一个实施方案中，步骤H中所述乙醇溶液是指85％乙醇水溶液，所用体积与所得干燥物(2)的重量比为1L～2L：1kg。

在一个具体实施方案中，步骤I中所述丙酮的体积与干燥物(3)重量比为1～3L:1kg。

技术效果

1、本发明充分利用了山茱萸果，获得多种功能性产品，有效地降低了生产成本。

2、通过先醇提后酸酶水解提取工艺，有效提高了莫诺苷、熊果酸和马钱苷提取率，对废液重新利用降低了氨基酸排放造成环境污染风险。

具体实施方式

下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。

实施例1

山茱萸果实进行干燥并粉碎，取150kg加入85％乙醇水溶液500L进行室温提取3h，过滤得滤液(1)和滤渣(1)；滤液(1)在55℃下进行真空或减压浓缩至20L，陶瓷膜过滤一次得滤液(2)和滤渣(2)；向滤渣(1)中加入60L水，再用0.1mol/L盐酸调节pH至4，再加入酸性蛋白酶和肽酶至终浓度为80U/L，进行室温酶解3～5h，得酶解液。将酶解液加入95％乙醇1000L进行室温提取2h，过滤得滤液(3)和滤渣(3)；滤液(3)在55℃下进行真空或减压浓缩至20L，陶瓷膜过滤一次得滤液(4)和滤渣(4)；将滤液(2)和滤液(4)合并后上ADS-2大孔树脂柱进行吸附，先用四倍柱体积的水进行冲洗，用六倍柱体积的40％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液(1)和废液。将滤渣(2)和滤渣(4)加入无水甲醇溶解，上硅胶柱进行吸附，用五倍柱体积的甲醇水溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(2)，最后五倍柱体积氯仿‐甲醇溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(3)，洗脱液(2)和洗脱液(3)在65℃下进行真空或减压浓缩至干，分别获得干燥物(2)、干燥物(3)。干燥物(2)加入乙醇溶液在40℃下保温20min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶得到1.48kg熊果酸粗品，再重结晶一次得熊果酸纯品。干燥物(3)加入丙酮在35℃下保温20min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶，重结晶一次，得2.61kg马钱苷。将洗脱液(1)进行55℃下进行真空或减压浓缩至干燥物(1)，得3.74kg莫诺苷纯品。

经过HPLC法检测，熊果酸样品的含量为98.74％，马钱苷样品的含量为99.01％，莫诺苷样品的含量为98.88％。

实施例2

山茱萸果实进行干燥并粉碎，取300kg加入85％乙醇水溶液500L进行室温提取2h，过滤得滤液(1)和滤渣(1)；滤液(1)在55℃下进行真空或减压浓缩至30L，陶瓷膜过滤一次得滤液(2)和滤渣(2)；向滤渣(1)中加入120L水，再用0.1mol/L盐酸调节pH至4，再加入酸性蛋白酶和肽酶至终浓度为100U/L，进行室温酶解3～5h，得酶解液。将酶解液加入95％乙醇2000L进行室温提取3h，过滤得滤液(3)和滤渣(3)；滤液(3)在55℃下进行真空或减压浓缩至30L，陶瓷膜过滤一次得滤液(4)和滤渣(4)；将滤液(2)和滤液(4)合并后上ADS-2大孔树脂柱进行吸附，先用四倍柱体积的水进行冲洗，用六倍柱体积的40％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液(1)和废液。将滤渣(2)和滤渣(4)加入无水甲醇溶解，上硅胶柱进行吸附，用五倍柱体积的甲醇水溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(2)，最后五倍柱体积氯仿‐甲醇溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(3)，洗脱液(2)和洗脱液(3)在65℃下进行真空或减压浓缩至干，分别获得干燥物(2)、干燥物(3)。干燥物(2)加入乙醇溶液在40℃下保温30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶得到3.01kg熊果酸粗品，再重结晶一次得熊果酸纯品。干燥物(3)加入丙酮在35℃下保温30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶，重结晶一次，得5.37kg马钱苷。将洗脱液(1)进行55℃下进行真空或减压浓缩至干燥物(1)，得7.58kg莫诺苷纯品。

经过HPLC法检测，熊果酸样品的含量为98.83％，马钱苷样品的含量为98.94％，莫诺苷样品的含量为98.92％。

对照实施例1

山茱萸果实进行干燥并粉碎，取150kg加入85％乙醇水溶液500L进行室温提取3h，过滤得滤液(1)和滤渣(1)；滤液(1)在55℃下进行真空或减压浓缩至20L，陶瓷膜过滤一次得滤液(2)和滤渣(2)；向滤渣(1)中加入60L水，再用0.1mol/L盐酸调节pH至4，进行室温保温3～5h，再加入95％乙醇1000L进行室温提取2h，过滤得滤液(3)和滤渣(3)；滤液(3)在55℃下进行真空或减压浓缩至20L，陶瓷膜过滤一次得滤液(4)和滤渣(4)；将滤液(2)和滤液(4)合并后上ADS-2大孔树脂柱进行吸附，先用四倍柱体积的水进行冲洗，用六倍柱体积的40％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液(1)和废液。将滤渣(2)和滤渣(4)加入无水甲醇溶解，上硅胶柱进行吸附，用五倍柱体积的甲醇水溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(2)，最后五倍柱体积氯仿‐甲醇溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(3)，洗脱液(2)和洗脱液(3)在65℃下进行真空或减压浓缩至干，分别获得干燥物(2)、干燥物(3)。干燥物(2)加入乙醇溶液在40℃下保温20min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶得到1.14kg熊果酸粗品，再重结晶一次得熊果酸纯品。干燥物(3)加入丙酮在35℃下保温20min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶，重结晶一次，得2.46kg马钱苷。将洗脱液(1)进行55℃下进行真空或减压浓缩至干燥物(1)，得2.97kg莫诺苷纯品。

经过HPLC法检测，熊果酸样品的含量为98.41％，马钱苷样品的含量为98.71％，莫诺苷样品的含量为98.36％。

对照实施例2

山茱萸果实进行干燥并粉碎，取150kg加入酸性蛋白酶和肽酶分别至终浓度为80U/L，进行室温酶解3～5h，得酶解液，再加入85％乙醇水溶液500L进行室温提取3h，过滤得滤液(1)和滤渣(1)；滤液(1)在55℃下进行真空或减压浓缩至20L，陶瓷膜过滤一次得滤液(2)和滤渣(2)；向滤渣(1)中加入95％乙醇1000L进行室温提取2h，过滤得滤液(3)和滤渣(3)；滤液(3)在55℃下进行真空或减压浓缩至20L，陶瓷膜过滤一次得滤液(4)和滤渣(4)；将滤液(2)和滤液(4)合并后上ADS-2大孔树脂柱进行吸附，先用四倍柱体积的水进行冲洗，用六倍柱体积的40％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液(1)和废液。将滤渣(2)和滤渣(4)加入无水甲醇溶解，上硅胶柱进行吸附，用五倍柱体积的甲醇水溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(2)，最后五倍柱体积氯仿‐甲醇溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(3)，洗脱液(2)和洗脱液(3)在65℃下进行真空或减压浓缩至干，分别获得干燥物(2)、干燥物(3)。干燥物(2)加入乙醇溶液在40℃下保温20min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶得到1.42kg熊果酸粗品，再重结晶一次得熊果酸纯品。干燥物(3)加入丙酮在35℃下保温20min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶，重结晶一次，得2.38kg马钱苷。将洗脱液(1)进行55℃下进行真空或减压浓缩至干燥物(1)，得3.26kg莫诺苷纯品。

经过HPLC法检测，熊果酸样品的含量为98.65％，马钱苷样品的含量为98.86％，莫诺苷样品的含量为98.81％。

Claims (9)

1.一种从山茱萸综合利用的方法，包括如下步骤：

A、将山茱萸果实进行干燥并粉碎，加入70～85％乙醇水溶液进行室温提取1～3h，过滤得滤液(1)和滤渣(1)，其中加入乙醇水溶液体积L与山茱萸干重比为3～5：1。

B、滤液(1)在45℃～55℃下进行真空或减压浓缩至原有体积的1/15～1/25，陶瓷膜过滤一次得滤液(2)和滤渣(2)。

C、向滤渣(1)中加入水，再用0.05～0.5mol/L盐酸调节pH至3.5～4.5，再加入酸性蛋白酶和肽酶分别至终浓度为50U/L以上，进行室温酶解3～5h，得酶解液，其中加入水体积L与山茱萸干重比为4～6：10。

D、将酶解液加入乙醇进行室温提取1～3h，过滤得滤液(3)和滤渣(3)，其中加入乙醇体积L与酶解液体积L比为3～6：1，乙醇为95％以上的乙醇或无水乙醇。

E、滤液(3)在45℃～55℃下进行真空或减压浓缩至原有体积的1/30～1/60，陶瓷膜过滤一次得滤液(4)和滤渣(4)。

F、将滤液(2)和滤液(4)合并后上ADS-2大孔树脂柱进行吸附，先用三倍至五倍柱体积的水进行冲洗，用四倍至六倍柱体积的25～50％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液(1)和废液。

G、将滤渣(2)和滤渣(4)加入无水甲醇溶解，上硅胶柱进行吸附，用三倍至五倍柱体积的甲醇水溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(2)，最后三倍至五倍柱体积氯仿‐甲醇溶液进行柱洗脱，得到洗脱液(3)，洗脱液(2)和洗脱液(3)在50℃～65℃下进行真空或减压浓缩至干，分别获得干燥物(2)、干燥物(3)。

H、干燥物(2)加入乙醇溶液在40～45℃下保温15～30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶得到熊果酸粗品，再重结晶一次得熊果酸纯品。

I、干燥物(3)加入丙酮在35～40℃下保温15～30min，趁热陶瓷膜过滤1次，滤液放置冰箱中过夜，结晶，重结晶一次，得马钱苷。

M、将洗脱液(1)进行40℃～55℃下进行真空或减压浓缩至干燥物(1)，得莫诺苷纯品。

2.权利要求1方法，其中所述废液可以直接用于复合氨基酸制备，也可以调节PH到6.0左右后直接作为植物营养剂使用。

3.权利要求1方法，其中所述滤渣(4)可以直接用于土壤改良剂使用，也可以用于生物炭制备原料。

4.权利要求1方法，其中所述过滤过程是纱布过滤、陶瓷膜过滤，其中，优选是三层纱布过滤2次、陶瓷膜过滤1次。

5.权利要求1方法，其中步骤G中所述无水甲醇的使用量，按体积/滤渣(1)重量比为0.5～2L:1kg。

6.权利要求1方法，其中步骤G所述甲醇水溶液是指含有70～90％甲醇的pH5.5～6.5的盐酸水溶液。

7.权利要求1方法，其中步骤G中所述氯仿‐甲醇溶液是指氯仿与甲醇的体积比为25:10。

8.权利要求1方法，其中步骤H中所述乙醇溶液是指85％乙醇水溶液，所用体积与所得干燥物(2)的重量比为1L～2L：1kg。

9.权利要求1方法，其中步骤I中所述丙酮的体积与干燥物(3)重量比为1～3L:1kg。