CN100422737C - 一种血府逐瘀胶囊的制备方法及其质量标准 - Google Patents

Abstract

本发明涉及来源于植物的含有不明结构之反应产物的医用配制品(国际专利分类号35/79)的技术领域，具体地说是以中药材提取物为原料制成的一种血府逐瘀胶囊的制备方法及其质量标准。质量标准中设置桃仁、枳壳、甘草的鉴别项目，每粒胶囊含赤芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于2.20mg的定量指标及检验方法，提高产品质量，并确定最佳工艺路线和工艺条件，使血府逐瘀胶囊具有服用剂量小，在体内吸收快，服用方便等特点。

Description

一种血府逐瘀胶囊的制备方法及其质量标准

技术领域

本发明涉及来源于植物的含有不明结构之反应产物的医用配制品(国际专利分类号35/79)的技术领域，具体地说是以中药材提取物为原料制成的一种血府逐瘀胶囊的制备方法及其质量标准。

背景技术

血府逐瘀胶囊(Xuefu Zhuyu Jiaonang)是一种经典中成药，卫生部标准WS₃-B-0928-91记载处方及质量标准：

桃仁(炒)  当归  枳壳(麸炒)  川芎  柴胡

红花      牛膝  赤芍        地黄  桔梗  甘草

【性状】本品为胶囊剂，内容物为棕褐色的粉末；气辛，味微苦。

【鉴别】(1)取本品，置显微镜下观察：石细胞黄色，贝壳形，壁一面较厚，层纹细密。薄壁细胞纺锤形，壁略厚，有极微细的斜向交错纹理。油管含黄色或棕黄色分泌物。螺纹导管直径8～23μm，加厚壁互相连接，似网状螺纹导管，草酸钙方晶成片存在于薄壁组织中。

(2)取本品5g，加甲醇20ml，冷浸过夜，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取橙皮甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-乙醇-水(8∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％醋酸镁甲醇溶液，待甲醇挥干后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【检查】应符合胶囊剂项下有关的各项规定(附录I L)。

【含量测定】照高效液相色谱法(附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-冰醋酸(16∶84∶1)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药甙峰计算应不低于2500。分离度应符合规定。

对照品溶液的制备取在80℃干燥至恒重的芍药甙对照品2mg，精密称定，置10ml容量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得(每1ml中含芍药甙0.2mg)。

供试品溶液的制备取本品装量差异项下的内容物，精密称定，混匀，称取约3g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入无水乙醇50ml，密塞，称定重量，在水浴中回流提取4小时后，再超声提取1小时，取出，放冷，称定重量，补足损失的无水乙醇量，滤过，取续滤液25ml置水浴上浓缩至2ml，并转溶至10ml量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，按外标法计算供试品中芍药甙的含量。本品每粒含芍药甙(C₂₃H₂₈O₁₁)不得低于0.24mg。

【功能与主治】活血祛瘀，行气止痛。用于瘀血内阻，胸痛或头痛，内热瞀闷，失眠多梦，心悸怔忡，急躁善怒。

【用法与用量】口服，一次6粒，一日2次，一个月为一疗程。

【注意】忌食辛冷食物。孕妇忌服。【规格】每粒装0.4g【贮藏】密封，置阴凉干燥处。

原有制备工艺：将桃仁100g、当归、赤芍、枳壳、川芎、柴胡粉碎成细粉，过筛，混匀，其余红花等五味及桃仁100g加水煎煮三次，滤过，合并滤液，浓缩成相对密度为1.15～1.25(65～70℃)的稠膏，与上述粉末混匀，制成颗粒，烘干，粉碎，过筛，装胶囊，即得。

另有申请日2001.1.5，公开号CN1362075A“纳米血府逐瘀制剂药物及其制备方法”的专利记载处方：

纳米桃仁10-50份  纳米当归8-60份  纳米枳壳10-70份  纳米川芎8-60份

纳米柴胡10-60份  纳米红花8-60份  纳米牛膝8-50份   纳米赤芍8-60份

纳米地黄10-60份  纳米桔梗5-50份  纳米甘草5-30份

记载纳米血府逐瘀制剂药物的制备方法，功能与主治：可用于头痛、眩晕、脑损伤后遗症、冠心病心绞痛等病症的治疗。

中药药理与临床，1990，6(6)，第1-4页，彭康，郑有顺著“血府逐瘀汤的拆方研究——对微循环的药理作用”证明能够改善微循环，对因微血管阻力增加引起的血压升高有一定的抑制作用。

以上公开的血府逐瘀胶囊质量标准现有技术中还存在鉴别项目、鉴别手段、含量测定方法不完善，在制备方法上存在纳米血府逐瘀制剂药物的制备方法尚未得到药效证明且生产成本高，原胶囊剂型的制备方法，每次服用量6粒，服用剂量大在体内吸收慢，服用不方便等缺点，不符合三小、三效和五方便的标准。

发明内容

本发明的目的是提供一种血府逐瘀胶囊的制备方法及其质量标准，力求使研制出改进工艺后的血府逐瘀胶囊符合三小、三效和五方便的标准。

为了严格控制药品的质量，确保疗效，制定了质量标准

1.在本品的定性鉴别的研究中，设计对处方中桃仁，枳壳，甘草，牛膝、桔梗进行定性鉴别，首先采用文献报道方法试验，结果制剂样品不理想，严重拖尾，多次换展开剂，分离仍较差。采用不同的样品处理方法和不同极性的展开系统进行分离，尤其是牛膝、桔梗干扰大，在与对照品相同位置呈重叠斑点，而且阴性有干扰。在样品处理上进行改进后，再点板鉴别，结果桃仁、甘草、枳壳药味分离较好，在与对照品相同位置上呈相同斑点，且阴性无干扰，重现性好。故建立了处方中桃仁、甘草、枳壳的薄层鉴别方法。

2.本品在定量分析的设计中，首先以处方中臣药赤芍进行了成分分析的实验。根据文献报导，赤芍中含有芍药苷成分，所以采用高效液相色谱法进行芍药苷的含量测定。按药典法选择检测波长λ＝230nm试验，并进行了方法学考察，样品前处理采用不同超声时间的进行提取，选定加入50％甲醇超声10分钟提取，有效成分基本提取出来。调整流动相的比例为：乙睛-水(16∶84)，流速为1.0ml/min，等色谱条件，经过对精密度、重现性、稳定性、回收率的试验考察，确定了以芍药苷对照品采用HPLC法测定含量，重现性好，能快速准确的检测药品的质量。

本发明的技术方案是：在现有质量标准中增加了桃仁的鉴别：取血府逐瘀胶囊的内容物1g，加甲醇15ml超声处理10min，滤过，滤液减压蒸发至小体积，加100-160目的硅胶0.5g，混匀，蒸干，加入硅胶柱上，柱直径Icm柱长25cm，硅胶100-160目5g，干法装柱；以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水体积比为15∶40∶22∶10的混合液于5-10℃放置12小时，取下层液为洗脱液，洗脱，收集16-21ml洗脱液即得供试品溶液；另取苦杏仁苷为对照品，加甲醇制1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照“中国药典”2005一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以洗脱剂为展开剂展开，取出，晾干，立即喷以磷钼酸溶液，置105℃加热显色约10分钟，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的深蓝色斑点；磷钼酸溶液配制：磷钼酸2g，加水20ml使溶解，再缓缓加入硫酸30ml混匀即得；

枳壳的鉴别：其中所设置的枳壳的鉴别检验方法是：取血府逐瘀胶囊的内容物1g，加水20ml溶解，加入乙醚20ml萃取2次，弃去乙醚液，水溶液再用醋酸乙酯30ml萃取2次，收集醋酸乙酯液挥干，加2ml甲醇即得供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照“中国药典”2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水体积比为45∶17∶5的混合液，放置12小时，取下层液为展开液，展开，取出晾干，喷以三氯化铝甲醇溶液置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的亮荧光斑点；

甘草的鉴别：取本品内容物2g，加乙醚30ml，超声处理10min，滤过，弃去乙醚液，残渣加甲醇30ml，超声处理10min，滤液减压蒸发至干，加水40ml溶解，用正丁醇萃取3次，每次20ml合并正丁醇液，减压至干，加甲醇5ml溶解，即得供试品溶液。另取甘草酸单铵盐对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2～4μl，分别点于同一高效硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正丁醇-20％氨水-甲醇(5∶2∶1.5)为展开剂展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的蓝黑色斑点。

改进了含量测定方法并提高赤芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计的标准如下

【含量测定】照高效液相色谱法(附录VI D)测定

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基键合硅胶为填充剂；以乙睛-水(16∶84)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于4300。

对照品溶液的制备称取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品内容物0.3g，研细，精密称定。置入25ml量瓶中加入甲醇24ml，超声10min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，取续滤液置棕色瓶中，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每粒含赤芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于2.20mg。

质量标准研究资料：

一、.鉴别对象本处方共十一味药，设计对方中桃仁、枳壳、甘草、牛膝、桔梗五味药材建立鉴别方法。在试验研究中，分别采用不同的样品处理方法及不同极性的展开系统分离层析，由于处方中药味较多，成分复杂，干扰大，结果对处方中桃仁、甘草、枳壳三味药材建立了薄层鉴别方法。比原工艺胶囊增加了两项定性鉴别。

二、对照品来源：本品所用对照品均购于中国生物制品检定所

三.、鉴别方法：

1、桃仁的鉴别

供试品溶液的制备取本品内容物1g，加甲醇15ml，超声处理10min，滤过，滤液减压蒸发至小体积，加硅胶(100-160目)0.5g，混匀，蒸干，加入硅胶柱上(柱直径1cm柱长25cm，硅胶100～160目5g，干法装柱)以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)5～10℃放置12小时的下层为洗脱液，洗脱，收集16-21ml液即得供试品溶液。

对照品溶液的制备取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以洗脱剂为展开剂展开，

阴性空白对照溶液的制备按处方组成份量，取除桃仁外的其余药味，按工艺要求制成阴性样品，称取1g，按供试品溶液制备项下的方法操作，得阴性样品液。

薄层层析：吸附剂硅胶G板(10×10cm)青岛海洋化工厂点样量5--10μl；展开剂氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)5～10℃放置12小时的下层为洗脱液；展距8cm

结果：取出，晾干，立即喷以磷钼酸溶液(磷钼酸2g，加水20ml使溶解，再缓缓加入硫酸30ml混匀。)置105℃加热显色约10分钟，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的深蓝色斑点。阴性样品无此斑点。

2、枳壳的鉴别

供试品溶液的制备取本品内容物1g，加水20ml溶解，加入乙醚20ml萃取2次，弃去乙醚液，水溶液再用醋酸乙酯30ml萃取2次，收集醋酸乙酯液挥干，加2ml甲醇即得供试品溶液。

对照品溶液的制备取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

阴性空白对照溶液的制备按处方组成份量，取除枳壳外的其余药味，按工艺要求制成阴性样品，称取1g，按供试品溶液制备项下的方法操作，得阴性样品液。

薄层层析：吸附剂硅胶G板(10×10cm)青岛海洋化工厂

点样量5～10μl展开剂氯仿-甲醇-水(45∶17∶5)下层展开，展距8cm，结果取出，晾干，喷以三氯化铝甲醇溶液置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的亮荧光斑点。阴性样品液无此斑点。

3、甘草的鉴别：供试品溶液的制备取本品内容物2g，加乙醚30ml，超声处理10min，滤过，弃去乙醚液，残渣加甲醇30ml，超声处理10min，滤液减压蒸发至干，加水40ml溶解，用正丁醇萃取3次，每次20ml合并正丁醇液，减压至干，加甲醇5ml溶解，即得供试品溶液。

对照品溶液的制备取甘草酸单铵盐对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

阴性空白溶液的制备按处方组成份量，取除甘草外的其余药味，按工艺要求制成阴性样品，称取1g，按供试品溶液制备项下的方法操作，得阴性样品液。

薄层层析：吸附剂高效硅胶GF₂₅₄薄层板，(10×10cm)青岛海洋化工厂，点样量2-5μl，展开剂正丁醇-20％氨水-甲醇(5∶2∶1.5)；展距8cm

结果：取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的蓝黑色斑点。阴性样品液无此斑点。

[含量测定]含量测定对象和成分选择依据：本品赤芍主要含芍药苷，选择在本方中具有专属性的芍药苷作为成分指标，测定含量，能较好的控制药品质量。

一.仪器与试药

HP1100高效液相色谱仪，检测器：G1314A，Als：1313A，Colcomp：G1316A，泵：G1310A；甲醇、乙晴均为分析纯和色谱纯；芍药苷对照品：购于中国药品生物制品检定所；血府逐瘀胶囊：3批，由血府逐瘀胶囊专题组提供。

二.高效液相色谱条件：色谱柱：YWG-C₁₈(250×4.6mm)5μm；检测波长：λ＝230nm  柱温：30℃；流动相：乙晴-水(16∶84)；流速：1.0ml/min

三.对照品芍药苷的纯度确定：来源：中国药品生物制品检定所

纯度：将对照品配成0.92mg/ml的甲醇溶液，注入11μl，平行注入甲醇11μl，记录色谱图，峰面积归一化法计算含量，含量98.10％。

四.对照品、样品、阴性的液相色谱图及芍药苷理论塔板数计算按照含量测定项下进行操作。

1.对照品芍药苷液相色谱图；2.阴性的液相色谱图3.阳性药材液相色谱图；4.供试品的液相色谱图；5.芍药苷的理论塔板数计算：N＝5.54×(t_R/W_1/2h)²＝5.54×(9.989/0.3589)²＝4291；理论塔板数为4291

五.含量测定

(一)方法考察：样品提取方法依据所含测定的成分芍药苷为水溶性成分，参照药典赤芍含量测定方法，对样品前处理用超声提取的比较和流动相的选择进行了考察。

1、超声提取试验，在样品中加入溶媒后不同超声时间处理。测定含量见表6，

表6不同超声时间提取含量测定结果

试验结果表明：不同超声提取方法测出的含量大小基本近似，在10分钟超声基本提取完全。故选择了超声时间为10分钟。

2、流动相的选择：流动相选择参照药典赤芍含量测定方法，其流动相为甲醇-磷酸二氢钾0.05M(40∶65)，对其进行了试验，单味药供试品色谱图还可以，而样品色谱图则不理想，主峰分离不好，故对流动相进行了调整，经过反复试验，最后确定最佳流动相及比例为乙晴-水(16∶84)，主峰分离较好，稳定。

3、检测波长选择参照药典方法，检测芍药苷波长λ＝230nm，对其进行了试验。结果表明：阴性在230nm波长处无干扰，，样品与对照品有相同的最大吸吸收峰，结果较理想，故采用检测波长为λ＝230nm。

(二)系统适用性实验色谱柱YWG-C₁₈(250×4.6mm)5μm；流动相乙睛-水(16∶84)；检测波长λ＝230nm。理论塔板数按芍药苷计算不低于4300

(三)供试品溶液的制备取适量内容物研细，称0.3g，精密称定。置入25ml量瓶中精密加入50％甲醇24ml，超声10min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。

(四)阳性溶液的制备取赤芍粗粉0.1g，精密称定，同赤芍制备法得阳性溶液。

(五)对照品溶液的制备取芍药苷对照品，加甲醇制成1ml含0.5072mg的溶液作为对照品储备液。

(六)阴性溶液的制备取缺赤芍提取物23g，同(二)法制得阴性溶液。

(七)含量测定

1、线性关系的考察：吸取对照品储备液0.6，0.8，1.0，1.2，1.4，1.6ml，分别置入5.0ml量瓶中，加入甲醇至刻度，摇匀，即得。各注入10μl，以注入量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线图，进行处理得回归方程，见表7、图1。

表7芍药苷标准曲线

浓度(μg)	0.60864	0.81152	1.01440	1.21728	1.42016	1.62304
							峰面积	809.7949	1108.939	1400.748	1692.776	1950.427	2250.17

结果：在0.60864～1.62304g范围内呈良好的线性关系。

2、空白试验：取缺赤芍的处方药，按样品的制备方法制成阴性样品。同含量测定项下供试品溶液方法处理，并测得色谱图，确认无干扰

3、稳定性试验：将待进样的样品液(040907)放置不同时间，注入液相色谱仪进行测定，记录峰面积积分值。见表8

表8稳定性试验结果

RSD＝0.51％

4.精密度试验：取含量测定项下的样品液(040907)10μl，进样五次，分别记录峰面积积分值。结果见表9

表9精密度试验结果

RSD＝0.32％

5.重现性试验：按照含量测定方法项下操作，分别精密称取040907样品5份，进行含量测定。结果见表10

表10重现性试验结果

RSD＝0.08％

6.回收率试验：取040907批样品0.15g，精密称定，加对照品1.268mg到成品中，按制备供试品溶液方法处理，按照含量测定方法项下进行测定。含量结果见表11

表11回收率试验结果

RSD＝2.7％

7.样品测定：按含量测定法拟定的色谱条件，将供试品溶液和对照品溶液各10μl注入液相色谱仪中，测定芍药苷含量结果。三批样品的含量测定结果见表12

表12样品测定结果

本实验测含量均值为8.03mg/g，相当于处方中赤芍0.24g，折算处方中赤芍的含量为33.45mg/g，制剂与单味药赤芍测定含量(44.20mg/g)相比其提取率为75.7％。考虑到工厂实际情况，规定本品以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计含量不应低于4.80mg/g。每粒胶囊不低于2.20mg。

血府逐瘀(原剂型为胶囊)是天津市宏仁堂制药厂生产的中药复方制剂。该药已广泛用于临床，并取得了较好的效果。由于临床用量较大，对血府逐瘀进行了工艺改进为保证和提高血府逐瘀胶囊的质量，本发明的技术方案是：一种血府逐瘀胶囊的制备方法，其特征是以下述重量配比中药材为原料：

当归162g  桃仁216g  红花162g  牛膝162g  地黄162g  赤芍108g  枳壳108g  桔梗81g  川芎81g  柴胡54g  甘草54g，

制备方法是：取当归等十一味药用水提取1-3次，用水量6-10倍，每次0.5-1h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.07-1.35，60-70℃测定，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为60-80％，搅匀，静置5-25h使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.30-1.50，60-70℃测定，加入浸膏量10-15％的淀粉，于干燥箱中干燥5-12h，T＝65-80℃，得干燥物，干膏率20-28％，加入干燥物重量2％-8％的二氧化硅，装入胶囊，粉碎过24-60目筛，每克胶囊相当于生药3.10-3.38g。

所述的血府逐瘀胶囊的制备方法，其特征是以下述重量配比中药材为原料：

当归162g  桃仁216g  红花162g  牛膝162g  地黄162g  赤芍108g

枳壳108g  桔梗81g   川芎81g   柴胡54g   甘草54g，

制备方法是：取当归等十一味药用水提取2次，每次用水量8倍，每次提取时间1h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.16-1.19，60℃测定，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为70％，搅匀，静置使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.35-1.43，60℃测定，加入浸膏量15％的淀粉，于干燥箱中干燥9h，T＝70-75℃，得干燥物，干膏率23-25％，加入干燥物重量6％的二氧化硅，粉碎过40目筛，装入胶囊，制成1000粒，每克胶囊相当于生药3.375g。

血府逐瘀胶囊生产工艺的研究资料：原剂型为胶囊，每次服用量6粒。由于服用量的原因和在市场覆盖面的局限，不能满足广大患者的需要。将原胶囊剂工艺改进使降低服用剂量的设计思路为：对血府逐瘀胶囊工艺、质量、药理、等进行系统性的研究，以保证和提高改进工艺胶囊的疗效为目的，以质量标准控制工艺及药效为指标，确定最佳工艺路线和工艺条件，使具有服用剂量小在体内吸收快，服用方便等特点。力求使研制出改进工艺后的血府逐瘀胶囊符合三小、三效和五方便的标准。

一.处方组成：

当归162g  桃仁216g  红花162g  牛膝162g  地黄162g

赤芍108g  枳壳108g  桔梗81g   川芎81g   柴胡54g  甘草54g

二.最佳制备工艺：取当归等十一味药用水提取2次，每次用水量8倍，每次提取时间1h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.16-1.19(60℃)，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为70％，搅匀，静置使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.35-1.43(60℃)，加入浸膏量15％的淀粉，于干燥箱中干燥9h(T＝70-75℃)，得干燥物(干膏率23-25％)，加入干燥物重量6％的二氧化硅，粉碎过40目筛，装入胶囊，制成1000粒。(每克胶囊相当于生药3.375g)最佳制备工艺流程见图2。

三.制备工艺的研究

(一)工艺药效比较：根据该药具有活血化瘀的功效，对以上两种工艺进行了血液流变学和颈动脉血栓形成两个模型的药效学试验。结果如下：

1.供试药物由本院血府逐瘀课题组提供：

血府逐瘀1号工艺样品：浅棕色粉末，每克粉末相当于生药3.38克，批号0513。

血府逐瘀2号工艺样品：深棕色粉末，每克粉末相当于生药2.87克，批号0514。

血府逐瘀胶囊：深棕色粉末，每克粉末相当于生药1.69克，每粒胶囊装0.675g药粉。由天津市宏仁堂制药厂生产。批号D03022。

复方丹参片：石家庄市华龙药业股份有限公司，批号040504。

10％高分子右旋糖苷注射液：中国医学科学院血液研究所产品，分子量30万。

阿司匹林：白色结晶，99.5％，西北合成制药厂提供。

2.供试动物Wistar种小鼠，雌雄兼用，体重200~250g；以上动物均由本院动物室提供，合格证“津动质字第001号”。

3.仪器BR2-500E型锥板年度计：日本东京计器株式会社产品BT87-3型实验性体内血栓形成测定仪：包头医学院研制

4.试验方法与结果

1)对高分子右旋糖苷所致大鼠血液流变学的影响

选取上述健康大鼠，按性别、体重随机分为正常组、模型对照组、2号样品组、1号样品组、原剂型组、阳性药复方丹参片组。血府逐瘀1号样品组、2号样品组、原剂型对照组均按1.5、3、6g生药/kg灌胃给药，阳性药对照组复方丹参片按2.0g药粉/kg灌胃给药，给药体积均为1ml/100g，模型对照组、正常对照组给予等容量0.5％CMC，每天一次，连续10天。各组大鼠均于末次给药后1小时，戊巴比妥钠(40mg/kg)，尾静脉注射10％高分子右旋糖苷注射液1ml/kg，造成高粘滞血症模型。静注10分钟后，自腹主动脉取血，以3.8％枸橼酸钠抗凝(抗凝剂与全血的比为1∶9)，在锥板型粘度计上测定4个切速下的全血粘度。在压积管中测定红细胞压积和血沉。3000转/分离心10分钟，取血浆在毛细管粘度计上测定血浆比粘度。见表1

试验结果采用两组均数统计分析-t值法进行显著性检验，结果表明，与正常对照组比较，模型对照组明显升高各切速下的全血粘度、血浆比粘度，表明造型成功。血府逐瘀1号样品6g生药/kg剂量组，与模型对照组比较，明显降低各切速下的全血粘度，明显降低血浆比粘度。血府逐瘀原剂型、阳性对照药复方丹参片亦有明显作用。血府逐瘀2号样品仅降低低切速下的全血粘度。各剂量组对红细胞血沉、红细胞压积均无明显影响。

2)血府逐瘀1号、2号样品对颈动脉血栓形成的影响

选取上述健康大鼠，按性别、体重随机分为正常组、2号样品组、1号样品组、原剂型组、阳性药阿司匹林对照组。血府逐瘀1号样品组、2号样品组、原剂型组均按1.5、3、6g生药/kg灌胃给药，每天一次，连续10天，阳性药对照组阿司匹林按150mg/kg灌胃给药，每天一次，连续5天，给药体积均为1ml/100g，正常对照组给予等容量0.5％CMC。各组大鼠均于末次给药后1小时，戊巴比妥钠腹腔麻醉(40mg/kg)，分离一侧颈动脉约15mm，用BT-87-3型血栓形成仪刺激电极及温度传感器钩于颈动脉上，以1.5mA的电流持续刺激血管壁7分钟，同时由温度传感器检测血管表面温度的变化，当血栓形成，堵塞血流时，血管远心端温度突降，仪器报警，从刺激开始至报警时间作为血栓形成时间(OT值)，试验结果采用两组均数统计分析t-值法进行显著性测验，见表2

表1血府逐瘀1号、2号工艺样品对高分子右旋糖酐所致大鼠血液流变学的影响(X±SD)

^△△：p＜0.01(与正常对照组比较)  *p＜0.05、**p＜0.01(与模型对照组比较)

表2血府逐瘀1号、2号工艺样品对颈动脉血栓形成的影响(±SD)

*：：P＜0.05  **：：P＜0.01(与正常对照组比较)

结果表明，与正常对照组比较，血府逐瘀1号样品6g生药/kg剂量组明显延长大鼠颈动脉血栓形成时间。血府逐瘀原剂型、阳性对照药阿司匹林亦有明显作用。血府逐瘀2号样品无明显作用。

结论：血府逐瘀1号工艺样品6g生药/kg剂量组，明显降低高粘滞血症大鼠各切速下的全血粘度，血浆比粘度。明显延长大鼠颈动脉血栓形成时间。血府逐瘀2号样品组6g生药/kg剂量组仅降低高粘滞血症大鼠低切速下的血液流变学，大鼠颈动脉血栓形成无明显作用。

(二)提取工艺的研究

根据上述的药效学实验结果，并考虑到工厂大生产的实际操作，确定1号工艺路线，即水提醇沉工艺，并对此工艺路线分别对水提取和醇沉条件进行了考察。

1.水提取工艺的考察：选择不同用量、提取次数，提取时间三个因素，三个水平的试验方案。因素水平见表3，以测芍药苷含量为成分指标，进行正交试验，对水提工艺优化研究。

表3因素水平表L₉(3³)

正交实验样品的制备：称取处方量100g药材9份，分别以不同水的用量、提取时间、提取次数分别进行提取，得提取液。按含量测定方法进行样品的前处理及测定芍药苷的含量，选用L₉(3³)正交实验表进行试验，结果见表4

表4水提取工艺考察L₉(3³)试验表

R值：RC＞RA＞RB

由表4可知，三个因素对芍药苷含量均有一定的影响。各因素的影响程度依次为C＞A＞B，其中A因素A₃＞A₂＞A₁，B因素B₃＞B₂＞B₁，C因素C₃＞C₂＞C₁.在诸因素中，数据ABC中K2与ABC中K3基本近似，考虑到能耗及成本低，省时，适宜大生产，采用A₂，B₂，C₂因素。确定水提工艺条件：A₂ B₂ C₂，即采用8倍量水提取两次，每次60分钟的最佳条件进行提取。并进行了三批试验验证，按上述提取方法操作，测定含量。计算转移率结果如下表5：

表5三批试验转移率结果

	样1	样2	样3
				含量转移率(％)X	76.77	82.9477.8	73.64

三批验证结果表明：含量转移率均值为77.8％。改进的工艺条件稳定，重复性好，可操作。

2.水提醇沉工艺的考察

在工艺中水提取后，其杂质较多，服用量过大，直接影响剂型的建立，选择了水提后进行醇沉，以测定含量为考察指标，取处方量900g药材，按水提取工艺条件提取，水提取两次，每次1小时，其水提取液浓缩至与药材不同比例时测定相对密度，分别加入乙醇，使其达到不同浓度的含醇量，醇沉不同时间，考察其含量。选用L₉(3³)正交实验表进行试验，结果见表6、表7，表8

表6因素水平表

试验计算表结果

R：A＞B＞C

表8方差分析表

方差分析结果显示：正交试验A因素有显著的影响，B、C因素影响不显著。

正交试验结果表明：水提浓缩液的相对密度对含量有一定的影响，R值说明水浓液的相对密度是主要因素，醇沉浓度和醇沉时间是次要因素。各因素影响的程度依次为RA＞RB＞RC，而A因素中A₁和A2数值基本近似，但A2要比A1节省一倍的用醇量成本低，采用A2。B因素采用B₂，C因素数值基本近似，从可操作性考虑，采用C₂。故确定A₂B₂C₂条件即：水提取浓缩液至相对密度为1.16，醇沉使达含醇量为70％，醇沉时间15h。

对上述工艺进行了三批验证，按上述提取方法操作，测定含量的转移率结果如下表9

表9醇沉三批验证含量转移率结果

结果含量转移率平均值为76.5％。说明此试验工艺条件可靠。

3、干燥物含量转移率考察结果

按上述水提醇沉工艺提取，得提取液浓缩清膏，加入辅料，置烘干箱中干燥，温度在70-75℃，得干燥物，测定含量，三批试验含量转移率结果如表10

表10干燥物含量转移率考察结果

结果表明，提取液浓缩干燥物的含量转移率为73.4％，是水提醇沉液含量转移率的97.7％。说明此干燥条件是可行的。

(三)制剂成型工艺的考察

根据本品改进工艺的目的是减少服用剂量，并对其制剂成型的条件进行了考察：

1.加入淀粉量的选择根据药效选择了上述工艺，将工艺提取物制备成稳定的

胶囊内容物需要加入淀粉使更好成型，分别以10％，15％，30％的淀粉量加入到提取物中，考察其成型情况见表11

表11加入辅料淀粉量的考察

结果表明，该制剂内容物以15％，30％成型好，流动性亦好，考虑到服用剂量，选择了加入15％淀粉量使制备的内容物成型。但在稳定性考察中发现内容物有结块现象，从剂型剂量考虑不能增加辅料淀粉，为此又加入助流剂二氧化硅进行考察。

2.加入二氧化硅量的选择：在内容物中分别加入以2％，4％，6％，8％不同

比例的二氧化硅，在室温25℃，湿度45％的条件下，以测定休止角考察其内容物的流动性，结果见表12

表12加入不同量二氧化硅量的考察

结果表明，以6％，8％的加入量其流动性好，且室温放置无结块吸潮现象，表明稳定。考虑各方面因素，选定6％为二氧化硅加入量是可行的。

(四)、改工艺后剂量确定依据

血府逐瘀原胶囊的剂量：口服6粒/次，每日二次，(每次服用量相当生药4.05g)。本品剂量是依据原血府逐瘀胶囊的服用剂量确定的：改进工艺后的血府逐瘀胶囊的剂量：口服3粒/次，每日二次。(每次服用量相当生药4.05g)。原血府逐瘀胶囊与改进工艺的血府逐瘀胶囊的口服剂量含生药量是一致的。

改进工艺后的血府逐瘀胶囊与原工艺血府逐瘀胶囊进行了比较，结果见下表：

新工艺胶囊与原工艺胶囊的比较

上述数据表明新胶囊优于原胶囊，工艺合理，质量可控，工艺先进，药效显著，服用剂量小，临床剂量是安全有效的。

血府逐瘀药效学试验：

血府逐瘀(原剂型为胶囊)该药已广泛用于临床，并取得了较好的效果。由于临床用量较大，对血府逐瘀进行了工艺改进，我们对新工艺样品进行了血液流变学、血小板聚集和微循环3个试验模型的药效学研究，并和原剂型进行了比较。结果如下：

血液流变学试验：选取上述健康大鼠，雌雄兼用，体重200~250g。按性别、体重随机分为正常对照组、模型对照组、血府逐瘀1.5、3、6g生药/kg剂量组，原剂型(6g生药/kg)剂量组、阳性药复方丹参(3g药粉/kg)剂量组，共7组，每组均为10只。灌胃给药，每天一次，连续10天，灌胃容积均为1ml/100g体重，正常对照组及模型对照组均灌胃给予等容量0.5％CMC。末次给药后1小时，除正常对照组外，其余各组大鼠均尾静脉注射10％高分子右旋糖酐注射液1ml/kg，造成高粘滞血症模型。静注10分钟后，自腹主动脉取血，以3.8％枸橼酸钠抗凝(抗凝剂与全血的比为1∶9)，在LG-R-80C粘度计上测定4个切速下的全血和血浆比粘度。在压积管中测定红细胞压积和血沉。试验结果采用两组均数统计分析-t值法进行显著性检验，与正常对照组比较，模型对照组明显升高各切速下的全血粘度、血浆比粘度，红细胞压积，明显降低血沉速度，表明造型成功。与模型对照组比较，血府逐瘀1.5、3、6g生药/kg剂量组，均明显降低高粘滞血症大鼠的全血粘度，6g生药/kg剂量组还明显降低血浆比粘度和红细胞压积。各剂量组对血沉速度均无明显差异。血府逐瘀原剂型、阳性对照药复方丹参片亦有相似作用。

对“血瘀”大鼠血小板聚集功能的影响试验：选用健康雄性Wistar种大鼠，体重250g～300g，按体重随机分为6组，每组10只。血府逐瘀给药组分别灌胃给予1.5、3、6g生药/kg、血府逐瘀原剂型组灌胃给予6g生药/kg、阳性药组灌胃给予阿司匹林150mg/kg，灌胃容积均为1ml/100g体重，模型对照组灌胃给予等容量0.5％CMC，每天一次，连续10天。各剂量组大鼠均于试验前1天皮下注射1mg/ml的盐酸肾上腺素0.08ml/100g体重，共两次，间隔6小时，其间(约3小时)将大鼠放入冰水中游泳5分钟，然后禁食(不禁水)过夜。次日灌胃给药后1小时，戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔麻醉，腹主动脉取血，以3.8％枸橼酸钠抗凝(抗凝剂与全血的比为1∶9)，离心，制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)，以PPP调PRP(血小板数约为30万/mm³)。采用比浊法，以ADP、AA、胶原作为诱导剂，在PAM-3型双通道血小板聚集仪进行血小板聚集试验，根据描记曲线，计算血小板最大聚集百分率，观察血府逐瘀的作用。结果采用两组均数统计分析-t值法进行显著性检验，血府逐瘀1.5、3、6g生药/kg剂量组与模型对照组比较，明显抑制由ADP、AA(除1.5g生药/kg剂量组)、胶原(除1.5g生药/kg剂量组)诱导的“血瘀”大鼠的血小板聚集，并随剂量增加，作用增强，表明血府逐瘀具有明显的抗血小板聚集作用。血府逐瘀原剂型、阳性药阿司匹林也有明显抑制作用。

对微循环障碍小鼠耳廓微循环的影响试验：选用健康昆明种小鼠，体重18～22g，随机分为7组，每组11只，均雌雄兼用。实验设正常对照组、模型对照组、血府逐瘀3、6、12g生药/kg剂量组、血府逐瘀原剂型6g生药/kg剂量组、阳性药复方丹参片4g药粉/kg剂量组。灌胃给药，每天一次，连续10天，灌胃容积均为0.2ml/10g体重，正常对照组及模型对照组均灌胃给予等容量0.5％CMC。末次给药后1小时，腹腔注射戊巴比妥钠50mg/kg，麻醉后，在载玻片上滴一滴橄榄油，将小鼠左耳平展、固定。在50倍显微镜下观察并记录小鼠耳廓微血管的流态、红细胞聚集程度、毛细血管网交点数，作为造型前数值。然后尾静脉注射10％高分子右旋糖酐(正常对照组除外)0.1ml/10g体重，记录注射后5分钟、10分钟、20分钟、30分钟同一部位微血管的流态、红细胞聚集程度、毛细血管网交点数，比较造型前后的变化，观察血府逐瘀的作用。流态和红细胞聚集程度采用等级序值法进行显著性检验，毛细血管网交点数采用配对t-值法进行显著性检验，试验结果表明：与正常对照组比较，模型对照组小鼠在注射高分子右旋糖酐造型前，血液流态、红细胞聚集程度、毛细血管网交点数均无明显差异，造型后5、10、20、30分钟，血流明显减慢、红细胞聚集明显增加、毛细血管网交点数明显减少(30分钟无明显差异)，表明已形成微循环障碍，模型复制成功。和模型对照组比较，造型前各给药剂量组血液流态、红细胞聚集程度、毛细血管网交点数均无明显差异，造型后5、10、20、30分钟，血府逐瘀6、12g生药/kg和原剂型6g生药/kg剂量组均能明显降低血液流态级别及红细胞聚集(5分钟、10分钟及20分钟)，明显增加毛细血管网交点数(5分钟、10分钟及20分钟)。复方丹参片4g药粉/kg剂量组亦有明显作用。

对家兔眼球结膜微循环的影响试验：选用健康大耳白种家兔，雌雄兼用，体重2~2.6kg，按性别、体重随机分为7组，每组均为8只。实验设正常对照组、模型对照组、血府逐瘀0.75、1.5、3g生药/kg剂量组、血府逐瘀原剂型3g生药/kg剂量组、阳性药复方丹参片2g药粉/kg剂量组。灌胃给药，每天一次，连续7天，灌胃容积均为5ml/kg体重，正常对照组及模型对照组均灌胃给予等容量0.5％CMC。末次给药后1小时，静脉注射戊巴比妥钠30mg/kg，麻醉后，在解剖显微镜下(20×2.5倍)观察并记录家兔眼球结膜微血管的红细胞流速、流态及毛细血管网交点数，作为造型前数值。然后耳缘静脉注射10％高分子右旋糖酐(正常对照组除外)1ml/kg体重，造成家兔微循环障碍，记录注射后20分钟同一部位微血管的红细胞流速、流态、毛细血管网交点数，比较造型前后的变化，观察血府逐瘀的作用。流态采用等级序值法进行显著性检验，流速及毛细血管网交点数采用配对t-值法进行显著性检验，试验结果表明：与正常对照组比较，模型对照组家兔在注射高分子右旋糖酐造型前，眼球结膜微血管的血液流态、流速、毛细血管网交点数均无明显差异；造型后20分钟，血液流速明显减慢、流态级别明显增大、毛细血管网交点数明显减少，表明已形成微循环障碍，模型复制成功。和模型对照组比较，造型前各给药剂量组眼球结膜微血管的血液流态、流速、毛细血管网交点数均无明显差异；造型后20分钟，血府逐瘀1.5、3g生药/kg和原剂型3g生药/kg剂量组均能明显增加血液流速和毛细血管网交点数，明显降低血液流态级别。阳性药复方丹参片2g药粉/kg剂量组亦有明显作用。

试验结论：

1.血府逐瘀1.5、3、6g生药/kg剂量组和原剂型(6g生药/kg)组均明显降低高粘滞血症大鼠的全血粘度，6g生药/kg剂量组还明显降低血浆粘度和红细胞压积。

2.血府逐瘀1.5、3、6g生药/kg剂量组和原剂型组均明显抑制“血瘀”大鼠由ADP、AA(除1.5g生药/kg剂量组)、胶原(除1.5g生药/kg剂量组)诱导的血小板聚集。

3.血府逐瘀6、12g生药/kg剂量组和原剂型组均明显降低微循环障碍小鼠耳廓微血管血液流态的级别、红细胞聚集程度，明显增加毛细血管网交点数。

4.血府逐瘀1.5、3g生药/kg剂量组和原剂型组均明显降低微循环障碍家兔眼球结膜微血管血液流态的级别，明显增加血流速度及毛细血管网交点数。

以上试验结果表明，新工艺血府逐瘀具有明显的“活血化瘀”作用。与该药的功能主治基本相符。与相同剂量血府逐瘀原剂型作用相当。府逐瘀原胶囊的剂量：口服6粒/次，每日二次，(每次服用量相当生药4.05g)。本品剂量是依据原血府逐瘀胶囊的服用剂量确定的：改进工艺后的血府逐瘀胶囊的剂量：口服3粒/次，每日二次。(每次服用量相当生药4.05g)。原血府逐瘀胶囊与改进工艺的血府逐瘀胶囊的口服剂量含生药量是一致的。

发明有益效果：质量标准中设置桃仁、枳壳、甘草的鉴别项目，每粒胶囊含赤芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于2.20mg的定量指标及检验方法，提高产品质量，并确定最佳工艺路线和工艺条件，使血府逐瘀胶囊具有服用剂量小，在体内吸收快，服用方便等特点。

附图说明

图1是芍药苷标准曲线图。

图2是最佳工艺流程图。

具体实施方式

实施例1改进后的血府逐瘀胶囊质量标准

1.名称：血府逐瘀胶囊

2.处方：桃仁(炒)  当归  枳壳(麸炒)  川芎  柴胡  红花

        牛膝      赤芍  地黄        桔梗  甘草

【性状】本品为胶囊剂，内容物为棕褐色的粉末；气辛，味微苦。

【制法】取当归等十一味药用水提取1-3次，用水量6-10倍，每次0.5-1.5h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.07-1.35(60-70℃)，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为60-80％，搅匀，静置(5-25h)使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.30-1.50(60-70℃)加入浸膏量10-15％的淀粉，于干燥箱中干燥5-12h(T＝65-80℃)，得干燥物(干膏率20-28％)，加入干燥物重量2％-8％的二氧化硅，装入胶囊，粉碎过24-60目筛。(每克胶囊相当于生药3.10～3.38g)

【鉴别】

1、显微鉴别

取本品，置显微镜下观察：薄壁细胞纺锤形，壁略厚，有极微细的斜向交错纹理。油管含黄色或棕黄色分泌物。螺纹导管直径8～23μm，加厚壁互相连接，似网状螺纹导管，草酸钙方晶成片存在于薄壁组织中。

2、橙皮甙鉴别

取本品5g，加甲醇20ml，冷浸过夜，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取橙皮甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-乙醇-水(8∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％醋酸镁甲醇溶液，待甲醇挥干后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3、赤芍鉴别

供试品溶液的制备取成品粉末10g，加70％乙醇50ml溶解，放置过夜。过滤，滤液挥尽乙醇，加水至20ml，用醋酸乙酯萃取2次，每次20ml。合并萃取液，用无水硫酸钠2g脱水，过滤后浓缩至约2ml，作为供试品溶液。

对照药材溶液的制备取赤芍细粉2g，加70％乙醇30ml溶解后，按供试品溶液制备项下的方法制成赤芍对照药材溶液。

空白对照溶液的制备将血府逐瘀胶囊的处方除去赤芍，按照生产工艺制成空白对照品，再按供试品溶液制备项下的方法制成空白对照品溶液。

薄层分析取上述3种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂，展距约15cm。取出，晾干。喷以5％香草醛硫酸溶液，热吹风吹至斑点显现。供试品色谱与对照药材色谱在相应的位置上有相同颜色的斑点，空白对照无干扰。

4、桃仁的鉴别：取血府逐瘀胶囊的内容物1g，加甲醇15ml超声处理10min，滤过，滤液减压蒸发至小体积，加100-160目的硅胶0.5g，混匀，蒸干，加入硅胶柱上，柱直径Icm柱长25cm，硅胶100-160目5g，干法装柱；以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水体积比为15∶40∶22∶10的混合液于5-10℃放置12小时，取下层液为洗脱液，洗脱，收集16-21ml洗脱液即得供试品溶液；另取苦杏仁苷为对照品，加甲醇制1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照“中国药典”2005一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以洗脱剂为展开剂展开，取出，晾干，立即喷以磷钼酸溶液，置105℃加热显色约10分钟，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的深蓝色斑点；磷钼酸溶液配制：磷钼酸2g，加水20ml使溶解，再缓缓加入硫酸30ml混匀即得；

5、枳壳的鉴别：其中所设置的枳壳的鉴别检验方法是：取权利要求1，2的血府逐瘀胶囊的制备方法制得的血府逐瘀胶囊的内容物1g，加水20ml溶解，加入乙醚20ml萃取2次，弃去乙醚液，水溶液再用醋酸乙酯30ml萃取2次，收集醋酸乙酯液挥干，加2ml甲醇即得供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照“中国药典”2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水体积比为45∶17∶5的混合液，放置12小时，取下层液为展开液，展开，取出晾干，喷以三氯化铝甲醇溶液置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的亮荧光斑点；

6、甘草的鉴别：取本品内容物2g，加乙醚30ml，超声处理10min，滤过，弃去乙醚液，残渣加甲醇30ml，超声处理10min，滤液减压蒸发至干，加水40ml溶解，用正丁醇萃取3次，每次20ml合并正丁醇液，减压至干，加甲醇5ml溶解，即得供试品溶液。另取甘草酸单铵盐对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～4μl，分别点于同一高效硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正丁醇-20％氨水-甲醇(5∶2∶1.5)为展开剂展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的蓝黑色斑点。

【检查】装量差异：取供试品，依照《中国药典》2005年版一部附录I L胶囊剂项下装量差异法测定，每粒装量与标准装量相比较，应在±10.0％以内(法定标准应在±10.0％以内)，超出装量差异限度的不得多于2粒，并不得有1粒超出限度一倍。

水分：取供试品内容物，依照《中国药典》2005年版一部附录IX H水分测定法测定，应不得过8.0％(法定标准应不得过9.0％)。

崩解时限：依照《中国药典》2005年版一部附录XII A崩解时限检查法测定，以水为介质，崩解时限不得过20分钟(法定不得过30分钟)。

微生物限度检查：依照《中国药典》2005年版一部附录XIII C检查，应符合下

列规定：细菌数不得过10000个/g(法定标准不得过10000个/g)。霉菌和酵母菌数

不得过100个/g(法定标准不得过100个/g)。大肠埃希菌及活螨不得检出。大肠菌

群小于100个/g(法定标准小于100个/g)。

【含量测定】照高效液相色谱法(附录VI D)测定

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基键合硅胶为填充剂；以乙睛-水(16∶84)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于4300。

对照品溶液的制备称取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品内容物0.3g，研细，精密称定。置入25ml量瓶中加入甲醇24ml，超声10min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，取续滤液置棕色瓶中，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含赤芍以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，不得少于2.20mg。

【功能与主治】

活血祛瘀，行气止痛。用于瘀血内阻，胸痛或头痛，内热瞀闷，失眠多梦，心悸怔忡，急躁善怒；冠心病心绞痛、血管及外伤性头痛，属上述症候者。

【用法与用量】口服，一次3粒，一日2次，一个月为一疗程。

【注意事项】忌食辛冷食物。孕妇忌服。

【注意事项】规格每粒装0.4g

【贮藏】密封，置阴凉干燥处。

【有效期限】三年。

实施例2

取当归等十一味药1.35kg，用水提取2次，每次用水量8倍，每次提取时间1h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.16(60℃)，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为70％，搅匀，静置使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.402(60℃)，加入61.5g的淀粉，于干燥箱中干燥9h(T＝70-75℃)，得干燥物378g，加入22.68g的二氧化硅，粉碎过40目筛，装入胶囊，制成1000粒。(每克胶囊相当于生药3.375g)

实施例3

取当归等十一味药1.35kg，用水提取3次，每次用水量6倍，每次提取时间0.5h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.08(60℃)，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为60％，搅匀，静置使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.43(60℃)，加入64.8g的淀粉，于干燥箱中干燥9h(T＝65-70℃)，得干燥物375g，加入25.53g的二氧化硅，粉碎过24目筛，装入胶囊，制成1000粒。(每克胶囊相当于生药3.215g)

实施例4

取当归等十一味药1.35kg，用水提取1次，每次用水量10倍，每次提取时间1.5h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.21(60℃)，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为80％，搅匀，静置使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.38(60℃)，加入67.9g的淀粉，于干燥箱中干燥9h(T＝75-80℃)，得干燥物371g，加入29.82的二氧化硅，粉碎过24目筛，装入胶囊，制成1000粒。(每克胶囊相当于生药3.185g)

Claims (4)

1. 一种血府逐瘀胶囊的制备方法，其特征是以下述重量配比中药材为原料：

当归162g  桃仁216g  红花162g  牛膝162g  地黄162g  赤芍108g

枳壳108g  桔梗81g   川芎81g   柴胡54g   甘草54g，

制备方法是：取当归等十一味药用水提取1-3次，用水量6-10倍，每次0.5-1h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.07-1.35，60-70℃测定，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为60-80％，搅匀，静置5-25h使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.30-1.50，60-70℃测定，加入浸膏量10-15％的淀粉，于干燥箱中干燥5-12h，T＝65-80℃，得干燥物，干膏率20-28％，加入干燥物重量2％-8％的二氧化硅，装入胶囊，粉碎过24-60目筛，每克胶囊相当于生药3.10-3.38g。

2. 根据权利要求1所述的血府逐瘀胶囊的制备方法，其特征是以下述重量配比中药材为原料：

当归162g  桃仁216g  红花162g  牛膝162g  地黄162g  赤芍108g

枳壳108g  桔梗81g   川芎81g   柴胡54g   甘草54g，

制备方法是：取当归等十一味药用水提取2次，每次用水量8倍，每次提取时间1h，滤过，收集滤液，减压浓缩至相对密度为1.16-1.19，60℃测定，待冷放置室温，加入乙醇使含醇量为70％，搅匀，静置使沉淀，取上清液减压浓缩至相对密度为1.35-1.43，60℃测定，加入浸膏量15％的淀粉，于干燥箱中干燥9h，T＝70-75℃，得干燥物，干膏率23-25％，加入干燥物重量6％的二氧化硅，粉碎过40目筛，装入胶囊，制成1000粒，每克胶囊相当于生药3.375g。

3. 如权利要求1或2所述的血府逐瘀胶囊的制备方法制得的血府逐瘀胶囊，其特征在于每粒胶囊含赤芍以芍药苷C₂₃H₂₈O₁₁计，不得少于2.20mg的定量指标。

4. 根据权利要求1或2所述的血府逐瘀胶囊的制备方法制得的血府逐瘀胶囊，其特征在于质量标准中设置了桃仁、枳壳、甘草和芍药苷含量测定的鉴别检验项目：

其中所设置的枳壳的鉴别检验方法是：取权利要求1或2的一种血府逐瘀胶囊的内容物1g，加水20ml溶解，加入乙醚20ml萃取2次，弃去乙醚液，水溶液再用醋酸乙酯30ml萃取2次，收集醋酸乙酯液挥干，加2ml甲醇即得供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液照“中国药典”2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水体积比为45∶17∶5的混合液，放置12小时，取下层液为展开液，展开，取出晾干，喷以三氯化铝甲醇溶液置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的亮荧光斑点；

其中所设置的桃仁的鉴别检验方法是：取权利要求1或2的一种血府逐瘀胶囊的内容物1g，加甲醇15ml超声处理10min，滤过，滤液减压蒸发至小体积，加100-160目的硅胶0.5g，混匀，蒸干，加入硅胶柱上，柱直径Icm柱长25cm，硅胶100-160目5g，干法装柱；以氯仿∶醋酸乙酯∶甲醇∶水体积比为15∶40∶22∶10的混合液于5-10℃放置12小时，取下层液为洗脱液，洗脱，收集16-21ml洗脱液即得供试品溶液；另取苦杏仁苷为对照品，加甲醇制1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照“中国药典”2005一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以洗脱剂为展开剂展开，取出，晾干，立即喷以磷钼酸溶液，置105℃加热显色约10分钟，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的深蓝色斑点；磷钼酸溶液配制：磷钼酸2g，加水20ml使溶解，再缓缓加入硫酸30ml混匀即得；

其中所设置的甘草的鉴别检验方法是：取权利要求1或2的一种血府逐瘀胶囊的内容物2g，加乙醚30ml，超声处理I0min，滤过，弃去乙醚液，残渣加甲醇30ml，超声处理10min，滤液减压蒸发至干，加水40ml溶解，用正丁醇萃取3次，每次20ml合并正丁醇液，减压至干，加甲醇5ml溶解，即得供试品溶液；另取甘草酸单铵盐对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照“中国药典”2005一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2-4μl，分别点于同一高效硅胶GF₂₅₄薄层板上，以正丁醇-20％氨水-甲醇体积比5∶2∶1.5的混合液为展开剂展开，晾干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品相应的位置上，显相同的蓝黑色斑点；

芍药苷含量测定：照“中国药典”2005一部附录VID高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基键合硅胶为填充剂，以乙睛-水16∶84为流动相，检测波长为230nm，理论板数按芍药苷峰计算应不低于4300；

对照品溶液的制备：称取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取权利要求1或2的一种血府逐瘀胶囊的内容物0.3g，研细，精密称定；置入25ml量瓶中加入甲醇24ml，超声10min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，取续滤液置棕色瓶中，即得；

测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

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