CH642397A5 - Antibiotique bn-183b et procede pour sa preparation. - Google Patents

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CH642397A5
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Norio Ezaki
Shinji Miyadoh
Yasuaki Ogawa
Takashi Hisamatsu
Harumi Fukuyashu
Yujiro Yamada
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Meiji Seika Kaisha
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Description

Cette invention se rapporte à un nouvel antibiotique et à un procédé pour la préparation de celui-ci. Plus particulièrement, cette invention se rapporte à un nouvel antibiotique désigné par l'indication BN-183B qui existe dans le produit cultivé d'une souche spécifiée du genre Pseudomonas, et qui présente une action inhibitrice puissante de la croissance sur les bactéries Gram-positives et Gram-négatives ainsi que des propriétés anti-cancéreuses et anti-virales.
L'antibiotique BN-183B selon l'invention, se distingue par le fait que son chlorhydrate présente les caractéristiques suivantes.
(1) Valeurs de l'analyse élémentaire: C 39,84%, H 5,25%, N 6,43%, Cl 22,90%
(2) Poids moléculaire: 383
(3) Formule moléculaire: C14H2oN206C/2-HC/
(4) Point de fusion: commence à virer au brunâtre à 190 °C, et à mousser et se décomposer à 214 °C.
(5) Spectre d'absorption ultraviolet: voir figure 1.
(6) Spectre d'absorption infrarouge: bandes d'absorption 5 à 3400,3020, 1680,1620,1570,1520,1400,1360,1330,1270,
1240,1180,1160,1130, 1090,1080,1020,930,880,850,830, 800,740,700 cm -1 et spectre d'absorption tel que montré sur la figure 2. ^3
(7) Rotation spécifique: [a] ^ — 9° (c = 1, eau)
10 (8) Solubilité: très soluble dans l'eau, légèrement soluble dans le méthanol, et pratiquement pas soluble dans l'acétone, le chloroforme et l'acétate d'éthyle.
(9) Réactions colorées: Positives: chlorure ferrique, ninhy-drine et Fehling
15 Négatives: Molisch et biuret
(10) Distinction par neutralité, acidité et basicité: se comporte comme une substance basique dans une électrophorèse sur papier filtre.
(11) Apparence: poudre blanche ou légèrement jaunâtre 20 (12) Valeurs RF en Chromatographie sur couche mince:
Butanol-acide acétique-eau (2:1:1) : 0,66 Acétate d'éthyle-acide acétique-eau (60:17:17) : 0,34 Butanol-pyridine-acide acétique-eau (6:4:1:3) : 0,65
Cette invention fournit également un procédé pour la préparation de la substance BN-183B par culture d'une souche du genre Pseudomonas, puis par séparation et récupération de la substance BN-183B du bouillon de culture.
La figure 1 annexée présente le spectre d'absorption ultraviolet du chlorhydrate de la substance BN-183B, la mesure étant réalisée en une concentration de 10 mcg/m/ dans de l'eau distillée (I), dans de l'acide sulfurique 0,1 N (II) et dans du NaOH 0,1 N (III): et la figure 2 représente un spectre d'absorption infrarouge du chlorhydrate de la substance BN-183B mesuré par la mé-35 thode de la tablette de KBr
Un exemple de la souche pour la production de la substance BN-183B utilisée dans cette invention est la souche Pseudomonas sp. BN-183 (souche BN-183) isolée à partir du 40 sol de Tokaimura, préfecture d'Ibaragi au Japon. La souche BN-183 est déposée au «Fermentation Research, Institute, Agency of Industriai Science and Industry», Inage, Chiba City, Japon, sous la référence FERM-P No. 3332 et à la «American Type Culture Collection», 12301 Parklawn Drive, 45 Rockville, Maryland 20852, U.S.A. sous la référence ATCC No. 31571 (déposée le 26 septembre 1979).
Les propriétés bactériologiques de la souche BN-183 sont décrites comme suit dans la demande de brevet japonais publiée (OPI) No. 105 292/77 (publiée le 3 septembre 1977). 50 (A) Caractéristiques morphologiques.
Les cellules cultivées dans un milieu bouillon-agar sont en forme de tiges, de 0,5-0,7 x 0,7-2,0 p. en dimensions, et un mouvement avec flagelles polaires est observé. Aucune formation de spores ni de manifestation de polymorphisme n'ont 55 été relevées, et la tache «Gram» est négative.
(B) Caractéristiques de culture.
(1) Milieu bouillon-agar: Les cellules brunes pâles prolifèrent. Les colonies ne présentent pas de croissance plissée marquée, de viscosité et de motilité. Aucune formation de pig-
60 ments diffusibles.
(2) Milieu bouillon: Le milieu entier est trouble et une fine pellicule est formée sur la surface du liquide.
(3) Milieu bouillon-culture de gélatine stabilisée: Liquéfié.
(4) Culture de lait de tournesol: Complètement liquéfiée
65 par culture à 28 °C pendant 2 semaines pour présenter une faible alcalinité.
(C) Caractéristiques physiologiques.
(1) Réduction de nitrate: négative.
3
642 397
(2) Réaction de dénitration: négative.
(3) Test MR: positif.
(4) Test VP: négatif.
(5) Formation d'indole: négative.
(6) Formation de sulfure d'hydrogène: négative par la méthode du papier au plomb.
(7) Hydrolyse d'amidon: positive.
(8) Utilisation de l'acide citrique: positive par la méthode de Simmons et Christensen.
(9) Utilisation de sources inorganiques d'azote: un sel d'ammonium peut être utilisé comme seule source d'azote.
(10) Formation de pigments: aucune formation marquée de pigments est notée dans les milieux «King A et B».
(11) Oxydase: positive.
(12) Ne peut pas croître au-dessous de 5 °C et au-dessus de 41 °C.
(13) Aucune exigence pour les vitamines ou les amino-acides.
(14) Test OF (méthode d'Heuleifson) type 0.
(15) Aucune croissance dans des conditions anaérobiques.
(16) Utilisation de sources de carbone: glucose, maltose, xylose, lactose, D-arabinose, cellobiose, L-thréonine, L-orni-thine et saccharate.
La souche BN-183 ayant les propriétés bactériologiques ci-dessus a été comparée avec les souches décrites dans le «Bergey's Manual of Determinative Bacteriology» 8ème édition (1974), et les conclusions suivantes ont été tirées.
1. Cette souche appartient au genre Pseudomonas, à cause du fait qu'elle est une bactérie en forme de tige Gram-néga-tive, qui ne forme pas de spores, qui se déplace avec des flagelles polaires et qui est absolument aérobique.
2. A partir de son aptitude caractéristique à utiliser un large domaine de sources de carbone, cette souche est jugée comme étant proche de Pseudomonas cepacia.
Divers milieux de culture utilisés dans les procédés de fermentation microbiens ordinaires peuvent être utilisés pour cultiver les souches de production de la substance BN-183B, et pour produire et accumuler cette substance BN-183B. Le glucose, le glycérol, la dextrine et la gelée de millet, par exemple, peuvent être utilisés comme source de carbone. Les sources d'azote qui peuvent être utilisées comprennent, par exemple, une peptone, de l'extrait de viande, de la poudre de bouillon, de la liqueur de macération de céréales, un gâteau de soja, du sulfate d'ammonium et du chlorure d'ammonium. Des sels inorganiques, tels que le chlorure de sodium et le carbonate de calcium sont utilisés additionnellement lorsque cela est requis. Si désiré, un antimoussant peut être ajouté.
La culture peut être réalisée de façon appropriée en utilisant un milieu de culture liquide, telle qu'une méthode de culture avec secoueuse, ou une méthode de culture avec agitation par aération. La température de culture est optimale dans le domaine compris entre environ 20 et environ 35°, et une durée de culture appropriée est située entre 1 et 3 jours.
La substance BN-183B est principalement accumulée de façon extracellulaire dans le liquide de culture.
Pour l'expérimentation de la substance BN-183B, son activité antibactérienne a été utilisée et la souche Bacillus subti-lis ATCC 6632 a été utilisée comme souche d'essai. Un mélange de 2% de «mycin assay agar» (un produit de Kyoei Sei-yaku K.K.) et de 0,5% de «bacto-agar» (un produit de Difco) a été utilisé comme milieu de culture d'expérimentation. Lorsque la substance BN-183B (produit pur) a été testée dans les conditions ci-dessus, la relation entre le logarithme de la concentration dans un domaine compris entre 20 et 500 mcg/m/ et le diamètre de la zone inhibitrice est linéaire, et une zone in-hibitrice ayant un diamètre de 16 à 29 mm est donnée correspondant au domaine de concentration ci-dessus (méthode du disque de papier).
La substance BN-183B peut être extraite et purifiée selon ses propriétés physiques et chimiques, par une méthode décrite ci-après qui est efficace. Ainsi, le bouillon de fermentation contenant l'ingrédient actif est filtré pour éliminer toute s matière solide. Au filtrat est ajouté un absorbant tel qu'un charbon actif, comme par exemple un charbon actif pour Chromatographie (un produit de Wako Purechemical Industries Limited) ou une résine très poreuse, comme par exemple Diaion HP-20 (marque de commerce d'un produit de Mitsu-îo bishi Chemical Industries Limited, Japon), suivi par agitation et, ainsi, la substance active est adsorbée sur ledit adsorbant. Ensuite, la substance active est éluée avec une solution aqueuse d'acétone ou avec une solution aqueuse de méthanol, et la solution est concentrée à sec pour obtenir une substance i5 brute BN-183B. Le produit brut est alors purifié par une combinaison appropriée d'une Chromatographie sur colonne utilisant du CM Sephadex C-25 (un produit de Pharmacie Corporation, Suède), une filtration sur gel, une Chromatographie sur colonne utilisant des résines échangeuses d'ions, telles que 20 Amberlite IRC-50 et CG-50 (marques de commerce de Rohm et Haas Corporation, U.S.A.), et les similaires, afin d'obtenir la substance BN-183B sous forme de poudre blanche. Une séparation entre la substance BN-183B selon l'invention et la substance BN-183 de la demande de brevet japonais (OPI) 25 No. 105 292/77 peut être effectuée, par exemple au moyen d'une Chromatographie en couche mince utilisant du süica gel et comme solvant développeur un mélange acétate d'éthyle-acide acétique-eau (60:17:17 en volume). La substance BN-183B peut être obtenue en recueillant les fractions ayant 30 une valeur RF de 0,34 dans la Chromatographie en couche mince ci-dessus et la substance BN-183 de la demande de brevet japonais publiée précitée peut être obtenue en recueillant les fractions ayant une valeur RF de 0,55 dans la Chromatographie en couche mince, et ainsi la substance BN-183B selon 35 l'invention peut être séparée de la substance BN-183 de la demande de brevet japonais (OPI) No. 105 292/77.
Lorsque le produit en poudre obtenu est soumis à une Chromatographie sur couche mince de silica gel en utilisant différents systèmes solvants, par exemple butanol-acide acéti-40 que-eau, acétate d'éthyle-acide acétique-eau, butanol-pyridine-acide acétique-eau, etc., un spot unique est formé dans tous les systèmes utilisés. Ceci montre que le produit en poudre obtenu est bien la substance BN-183B sous forme pure. 45 Les caractéristiques physico-chimiques de la substance BN-183B, sous la forme de son chlorhydrate, sont les suivantes.
(1) Analyse élémentaire: C 39,84%, H 5,25%, N 6,43% C/22,90%
50 (2) Poids moléculaire: 383
(3) Formule moléculaire: C14H2oN206C/2-HC/
(4) Point de fusion: il commence à virer au brunâtre à 190 °C, et à mousser et se décomposer à 214 °C.
(5) Spectre d'absorption ultraviolet: voir figure 1.
55 (6) Spectre d'absorption infrarouge: bandes d'absorption à 3400,3020,1680,1620,1570,1520,1400,1360,1330,1270, 1240,1180,1160,1130,1090,1080,1020,930,880,850,830, 800,740,700 cm-1 et spectre d'absorption tel que montré sur la figure 2. 23
60 (7) Rotation spécifique [a]^ — 9° (c = 1, eau)
(8) Solubilité: très soluble dans l'eau, légèrement soluble dans le méthanol, et pratiquement pas soluble dans l'acétone, le chloroforme et l'acétate d'éthyle.
(9) Réactions colorées: Positives: chlorure ferrique, ninhy-65 drine et Fehling Négatives: Molisch et biuret
(10) Distinction par neutralité, acidité et basicité: se comporte comme une substance basique dans une électrophorèse sur papier filtre.
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4
(11) Apparence: poudre blanche ou légèrement jaunâtre.
(12) Valeurs RF en Chromatographie sur couche mince.
Butanol-acide acétique-eau (2:1:1) : 0,66
Acétate d'éthyle-acide acétique-eau (60:17:17) : 0,34
Butanol-pyridine-acide acétique-eau (6:4:1:3) : 0,65
Le tableau 1 ci-après résume les concentrations inhibitri-ces minimales de croissance de la substance BN-183B sur différents microorganismes. Cette substance montre une activité inhibitrice puissante sur les bactéries Gram-positives et Gram-négatives, et est par conséquent utile dans des médicaments, des médicaments vétérinaires et des désinfectants.
la substance BN-183B n'a pas été administrée. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 3 ci-dessous.
Tableau 3 Dose par ' administration
Pourcentage d'augmentation de la durée de vie
Tableau 1 Microorganismes
Staphylococcus aureus 209P JC-1 Staphylococcus aureus Smith S-424 Staphylococcus epidermidis ATCC14990 Staphylococcus faecalis ATCC8043 Escherichia coli NIHJ JC-2 Escherichia coli K-12IAM 1264,.
Proteus vulgaris OX19
Concentration minimale inhibitrice de croissance
(mcg/cO
0,20 0,20 0,20 0,39 1,56 0,78 6,25
(mg/kg)
(%)
P-388
L-1210
4
66,0
59,5
2
79,2
45,9
1
54,7
32,4
0,5
41,5
35,1
0,25
32,1
10,8
Les milieux de culture utilisés étaient constitués par un agar nutritif (un produit de Difco).
Les valeurs LD50 de la substance selon l'invention chez les souris sont présentées dans le tableau 2 ci-dessous.
Tableau 2
Voie d'administration Orale
Intraveineuse Intramusculaire Intrapéritonéale Sous-cutanée
LDjo (mg/kg) 50 4,1 4,1 4,3 6,0
15
La substance BN-183B présente une activité antivirale, et est utile comme agent antiviral. Son activité antivirale a été mesurée par un test de culture de tissu, et les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 4 ci-après. Cette substance 20 montre une activité très forte contre les virus de type DNA et de type RNA. Par des expériences animales utilisant des souris, son activité antivirus Herpes a été mesurée, et le nombre de jours de 50% de survie (ET50) a été mesuré. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 5 ci-après. La méthode 25 de test était la suivante. Des souris ICR-SLC (mâles, âgées de 4 semaines, d'un poids de 20 ± 0,5 g) ont été utilisées dans des groupes consistant chacun en 10 souris. Des virus Herpes simplex type II196 ont été administrés intrapéritonéalement aux souris en une quantité de 103 pfu/souris. 24 heures plus 30 tard, la substance BN-183B ou de la 5-iodo-2'-déoxyuridine (IUDR) comme contrôle a été administrée de façon intrapéritonéale aux souris. Celles-ci ont été observées pendant 2 semaines. Il apparaît du tableau 5 que le même effet que dans le groupe auquel 100 mg/kg de IUDR ont été administrés a été 35 noté dans le groupe auquel 1,25 mg/kg de la substance BN-183B ont été administrés.
Tableau 4 Virus utilisé
La substance BN-183B présente également une activité anticancéreuse, et une composition contenant cette substance est un agent anticancer efficace. Des cellules de leucémie lymphocytique P-388 ou le leucémie lymphoïde L-1210 ont été transplantées intrapéritonéalement en une quantité de 1 x 106 par souris chez des souris CDF[ ou BDFi (âgées d'environ 5 semaines, d'un poids de 20 ± 1 g), avec 5 souris pour chaque groupe. 24 heures après la transplantation de la tumeur, une solution de la substance BN-183B dans l'eau distillée pour injection a été administrée intrapéritonéalement aux souris une fois par jour pendant 3 jours successifs. L'augmentation en pourcentage de la durée de vie (ILS) a été mesurée par comparaison du nombre moyen de jour de survie de chaque groupe traité par rapport à un groupe de contrôle auquel
40
« Virus Influenza AO/PR-8 Virus Miyadera de la maladie de Newcastle Virus Vaccinia Lister Virus Herpes type II196 50 Virus de la nécrose infectieuse pancréatique (IPN) de la truite arc-en-ciel Virus de la nécrose infectieuse hématopoiétique (IHN) 55 de la truite arc-en-ciel
Dose
(mcg/m)
3,9
3,9 3,9 3,9
0,5
0,5
Différence de Log TCID50/m/ par rapport au contrôle
2,50
6,00
>3,00
3,83
6,801 3,000
Tableau 5 Produit de traitement
BN-183B
BN-183B
IUDR
Aucun médicament administré
Mortalité cumulative (%) après le nombre de jours indiqué à Dose partir de l'inoculation du virus
5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 ET50
(mg/kg) (jours)
2,5 0 10 20 70 80 100 7,65
1,25 0 20 20 60 70 70 80 90 90 90 8,38
100 0 0 30 40 60 70 70 70 70 70 8,50
0 10 40 90 100
7,61
5
642 397
En ce qui concerne la nouveauté de la substance BN-183B ayant les caractéristiques physico-chimiques et bactériologiques précitées, les demandes de brevets japonais publiées (OPI), les brevets japonais, la publication en langue japonaise de Antibiotics, volumes 1 et 2 et suppléments I et II (écrite par Yusuke Sumiki), l'Index of Antibiotics from Actinomycetes (écrit par Hamao Umezawa) et les Chemical Abstracts ont été examinés. Aucune substance correspondant à la substance BN-183B n'a été retrouvée.
La présente invention sera maintenant décrite et illustrée en référence aux exemples suivants.
Exemple 1
15 litres d'un milieu de culture contenant 1,5% de glycé-rol, 1 % de dextrine, 2% de farine de soja dégraissée, 0,5% de chlorure de potassium, 0,2% de carbonate de calcium et 0,03% d'une huile de silicone comme anti-moussant ont été introduits dans une cuve de fermentation de 30 litres, stérilisés à 120 °C pendant 10 minutes et refroidis. Des germes de Pseudomonas sp. BN-183 (FERM-P No. 3332) précultivés pendant 2 jours dans le même milieu que décrit ci-dessus dans deux flacons de Sakaguchi ont été inoculés de façon aseptique dans la cuve de fermentation. La culture ensemencée a été cultivée avec agitation et aération à 28 °C (débit de l'air =15 Ij minute; vitesse d'agitation = 200 rpm). Après culture pendant deux jours, 13 litres d'un bouillon de culture (130 mcg / rat) ont été obtenus. Au bouillon de culture ont été ajoutés 40 g d'un charbon actif pour Chromatographie (un produit de Wako Purechemical Industries, Limited) et le mélange a été agité, après quoi le charbon actif a été séparé par décantation, et introduit dans une colonne. La colonne a été lavée avec 1 litre d'une solution aqueuse à 50% d'acétone, et éluée avec une solution aqueuse à 80% d'acétone ayant un pH de 2 afin d'obtenir des fractions actives. L'acétone a été éliminé de ces fractions actives par distillation sous pression réduite, et le résidu a été introduit dans une colonne de 300 m/ de CM Sepha-dex C-25 (un produit de Pharmacia Corporation, Suède) afin d'adsorber sur celui-ci l'ingrédient actif. La colonne de Se-phadex a été lavée avec de l'eau, et éluée avec une solution aqueuse de chlorure de sodium 0,1 M pour obtenir des fractions actives. Celles-ci ont été introduites dans une colonne ( 150 m/) de Diaion HP-20 (marque de commerce d'un produit de Mitsubishi Chemical Industries, Limited, Japon) pour adsorber l'ingrédient actif. La colonne a été lavée avec de l'eau afin d'éliminer le sel de sodium, puis l'ingrédient actif a été élué avec une solution aqueuse à 80% de méthanol. Les fractions actives ont été concentrées à sec sous pression réduite pour obtenir 230 mg de la substance BN-183B sous forme d'une poudre jaune ayant une pureté d'environ 70%.
Exemple 2
5 350 litres d'un milieu de culture contenant 2% de glycérol, 1 % de dextrine, 3% de farine de soja dégraissée, 0,5% de chlorure de sodium 0,3% de carbonate de calcium et 0,03% d'une huile silicone comme anti-moussant ont été introduits dans une cuve de fermentation de 570 litres, stérilisés à 120 °C io pendant 20 minutes et refroidis. 20 litres de germes de Pseudomonas sp. BN-183 (FERM-P No. 3332) précultivés pendant 24 heures dans le même flacon de fermentation que dans l'exemple 1 ont été inoculés de façon aseptique dans la cuve de fermentation. La culture ensemencée a été cultivée avec agitais tion et aération à 28 °C pendant 2 jours (débit d'air = 200 litres/minute; vitesse d'agitation = 100 rpm) afin d'obtenir 320 litres d'un bouillon de culture (200 mcgjml). Les produits solides ont été éliminés par filtration, et 300 litres d'un filtrat ont été obtenus.
20 A ce filtrat ont été ajoutés 30 litres de Diaion HP-20, et le mélange a été agité pour adsorber l'ingrédient actif sur la résine. Celle-ci a été lavée avec 60 litres d'une solution aqueuse à 50% de méthanol, etéluée trois fois avec 60 litres d'une solution aqueuse 80% de méthanol pour obtenir un ingrédient ac-25 tif. Le méthanol a été éliminé par distillation sous pression réduite, et la solution aqueuse a été diluée jusqu'à 50 litres avec de l'eau. La solution aqueuse diluée a été introduite dans une colonne de 9 litres de CM Sephadex C-25 préalablement gonflée avec de l'eau pour produire l'adsorption de l'ingrédient 30 actif.
La colonne.a été lavée avec 12 litres d'eau et éluée avec une solution aqueuse de chlorure de sodium 0,1M. Les fractions actives (16 litres) ont été introduites dans une colonne de 10 litres de Diaion HP-20 pour produire l'adsorption de l'ingré-35 dient actif. La résine a été lavée avec de l'eau pour éliminer le chlorure de sodium, puis éluée avec une solution aqueuse à 50% de méthanol. Les fractions actives ont été concentrées sous pression réduite pour fournir 8,3 g de la substance BN-183B sous la forme d'une poudre jaune ayant une pureté 40 d'environ 90%.
La poudre a été dissoute dans 300 m/ de méthanol, puis les produits insolubles ont été éliminés, et la solution a été passée à travers une colonne de 200 m/ de charbon actif et remplie de méthanol et enfin développée avec du méthanol. 45 Les fractions actives ont été concentrées à sec sous pression réduite pour fournir 6,7 g de la substance BN-183B sous la forme d'un produit pur.
C
2 feuilles dessins

Claims (5)

  1. 642 397
    REVENDICATIONS
    1. Antibiotique désigné par l'indication BN-183B dont le chlorhydrate présente les caractéristiques suivantes:
    (1) Valeurs de l'analyse élémentaire: C 39,84%, H 5,25%, N 6,43%, Cl 22,90%
    (2) Poids moléculaire: 383
    (3) Formule moléculaire: Cl4H2oN206C/2-HC/
    (4) Point de fusion: commence à virer au brunâtre à 190 °C et à mousser et se décomposer à 214 °C.
    (5) Spectre d'absorption ultraviolet: voir figure 1.
    (6) Spectre d'absorption infrarouge: bandes d'absorption à 3400,3020,1680,1620,1570,1520,1400,1360,1330,1270, 1240,1180,1160,1130,1090,1080,1020,930,880,850, 830, 800,740,700 cm-1 et spectre d'absorption tel que montré sur la figure 2.
    (7) Rotation spécifique: [a] ^ — 9° (C = 1, eau)
    (8) Solubilité: très soluble dans l'eau, légèrement soluble dans le méthanol, et pratiquement pas soluble dans l'acétone, le chloroforme et l'acétate d'éthyle.
    (9) Réactions colorées: Positives: chlorure ferrique, ninhy-drine et Fehling Négatives: Molisch et biuret
    (10) Distinction par neutralité, acidité et basicité: se comporte comme une substance basique dans une électrophorèse sur papier filtre.
    (11) Apparence: poudre blanche ou légèrement jaunâtre
    (12) Valeurs RF en Chromatographie sur couche mince: Butanol-acide acétique-eau (2:1:1) : 0,66 Acétate d'éthyle-acide acétique-eau (60:17:17) : 0,34 Butanol-pyridine-acide acétique-eau (6:4:1:3) : 0,65; et un sel de celui-ci acceptable du point de vue pharmaceutique.
  2. 2. Procédé pour la préparation d'un antibiotique BN-183B, caractérisé par le fait qu'il comprend la culture d'une souche du genre Pseudomonas pour accumuler la substance BN-183B, et la récupération de cette substance à partir du bouillon de culture.
  3. 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé par le fait que la souche de genre Pseudomonas est la souche Pseudomonas sp. BN-183 (FERM-P No. 3332, ATCC No. 31571).
  4. 4. Composition pharmaceutique pour le traitement thérapeutique d'un animal ou d'un être humain atteint d'une tumeur ou d'un cancer comprenant, comme ingrédient actif, la substance BN-183B selon la revendication 1, ainsi que d'autres supports ou diluants acceptables du point de vue pharmaceutique.
  5. 5. Composition pharmaceutique pour le traitement thérapeutique d'un animal ou d'un être humain atteint par un virus comprenant, comme ingrédient actif, la substance BN-183B selon la revendication 1, ainsi que d'autres supports ou diluants acceptables du point de vue pharmaceutique.
CH1139779A 1978-12-27 1979-12-21 Antibiotique bn-183b et procede pour sa preparation. CH642397A5 (fr)

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