CH622101A5

CH622101A5 -

Info

Publication number: CH622101A5
Application number: CH1684275A
Authority: CH
Inventors: Norbert Dr Heimburger; Axel Dr Sieber; Horst Dr Schwinn
Original assignee: Behringwerke Ag
Priority date: 1974-12-31
Filing date: 1975-12-29
Publication date: 1981-03-13
Also published as: IL48700A0; NL7515088A; FI753671A; BR7508573A; BE837242A; ES443840A1; DK139897B; SE7514763L; ATA989175A; DK139897C; AT341098B; DK594475A; IT1052008B; GB1536560A; LU74113A1; DE2461969A1; FR2296849A1; US4056484A; FR2296849B1; AU499191B2

Description

Die Erfindung betrifft ein lyophilisiertes Blutplasma, das dioxid enthalten kann, kommen die für diesen Zweck bekann-

hinsichtlich seiner Gerinnungseigenschaften in für Gerin- ten Gase in Frage. Dies sind ganz allgemein inerte Stoffe, die nungsuntersuchungen geeigneten Testsystemen ein weitge- 35 bei -25 °C in gasförmiger Phase vorliegen. Zu diesen Gasen hend unverändertes Verhalten zeigt und demzufolge als Stan- gehört in erster Linie Stickstoff, aber auch andere inerte Gase,

dardplasma für Gerinnungsuntersuchungen geeignet ist, ein z.B. Edelgase, wie Helium, Neon oder Argon. Daneben enthält

Verfahren zu dessen Herstellung und seine Verwendung als das Blutplasma in der Regel noch ein Antikoagulans zur Ver-

Vergleichsplasma bei Gerinnungsuntersuchungen in der Dia- hinderung der Gerinnung des Blutes, z.B. Oxalat- oder Citratio-

gnostik. 40 nen. Diese Ionen werden allgemein in einer bei der Plasmage-

Eine auffallende Eigenschaft des Blutes nach dessen Aus- winnung üblicherweise angewandten Konzentration einge-

tritt aus Gefässen ist seine Gerinnung. Es zeigt sich jedoch setzt, und zwar wird bevorzugt etwa 1 Teil Antikoagulans auf 9

auch, dass die Gerinnungszeiten von Patienten mit bestimmten Teile Blut verwendet. Daneben können gegebenenfalls noch

Erkrankungen von denen gesunder Normalpersonen abwei- kolloid-stabilisierende Zusätze hinzugefügt werden. Geeignete chen. Diese Abweichungen können auch durch bestimmte 45 kolloid-stabilisierende Zusätze sind z. B. niedermolekulare Koh-

Pharmaka gezielt herbeigeführt werden. Dazu ist bekannt, dass lehydrate, die in der Regel in einer Konzentration von 1 bis 5%

die Blutgerinnung aus dem Zusammenwirken verschiedener eingesetzt werden.

aktivierender und inhibierender Faktoren resultiert. Die Gerin- Das erfindungsgemässe lyophilisierte Blutplasma wird mit nungsfaktoren sind mehr oder weniger empfindlich und ihre Hilfe des in Patentanspruch 3 definierten Verfahrens herge-

Lagerung ohne Aktivitätsverlust ist mit grossen Schwierigkei- 50 stellt. Besonders bevorzugt ist dabei die in Patentanspruch 5

ten verbunden. Insbesondere zeigt es sich, dass gelagerte Blut- definierte Ausführungsform.

plasmen hinsichtlich ihrer Gerinnungsparameter sehr bald Ver- Bei der Durchführung des erfindungsgemässen Verfahrens

änderungen erfahren. Bei der diagnostischen Überwachung geht man zweckmässigerweise so vor, dass man frisch gewon-

des Gerinnungsstatus ist es erforderlich, die in den einzelnen nenes Blut zu einer vorgelegten Menge eines Antikoagulans

Blutgerinnungstests erhaltenen Werte mit bestimmten Normal- ss gibt, wobei im Falle der Verwendung von Citrat beispielsweise werten in Beziehung zu setzten. Als Bezugssystem eignet sich 1 Volumenteil einer 0,1-molaren Natriumcitratösung von pH

beispielsweise ein Mischplasma von mehreren gesunden Blut- 7,0 mit 9 Volumenteilen des frisch gewonnenen Blutes ver-

spendern, das jeweils möglichst gleichzeitig mit dem Plasma mischt wird. Das Blut wird zentrifugiert, beispielsweise bei des Probanden gewonnen wird. Ein solches Vorgehen ist in dia- 7500±500 g 20 bis 40 min, vorzugsweise 30 min, und das über gnostischen Laboratorien nicht immer praktikabel. 60 den Blutkörperchen stehende Plasma abgegossen und gegebe-

Es stellt sich deshalb die Aufgabe, ein lagerfähiges Blut- nenfalls mit stabilisierenden Substanzen versetzt. Das Plasma plasma herzustellen, das hinsichtlich der für den Gerinnungsta- wird danach in nicht benetzbare, vorteilhaft in silikonisierte,

tus wichtigen Faktoren eine gute Stabilität aufweist. Wichtige Glasgefässe oder entsprechende Kunststoffgefässe gefüllt,

Gerinnungsparameter sind hierbei die Einphasengerinnungs- wobei darauf geachtet wird, dass die eingefüllte Plasmamenge zeit nach Quick, die partielle Thrombopiastinzeit, die Plasma- 65 nur etwa % bis '/io des Gesamtvolumens des Gefässes füllt. Das thrombinzeit, die Gerinnungsfaktoren II, V, X und XIII und Plasma wird in den Gefässen mit möglichst grosser Oberfläche schliesslich Fibrinogen. eingefroren - dies kann vorteilhaft durch rotierendes Einfrie-

Es ist bekannt, dass frisch gewonnenes Plasma von gesun- ren erreicht werden - und schliesslich getrocknet. Die das

622101

getrocknete Plasma enthaltenden Gefässe werden evakuiert, wobei es sich als vorteilhaft erweisen hat, ein Vakuum von 10"3 bis IO-4 Torr anzulegen und die Plasmen 2 bis 5 Stunden, vorzugsweise 3 bis 4 Stunden, im Vakuum zu belassen, anschliessend den luftleeren Raum mit einem Kohlendioxid enthaltenden Schutzgas zu füllen und schliesslich die Gefässe luftdicht abzuschliessen.

Bekanntlich ist der Gerinnungsmechanismus bei allen Wirbeltieren grundsätzlich ähnlich, so dass kein Hinderungsgrund der Blutplasmaproteine, vorzugsweise in Form von niedrigmolekularen Kohlenhydraten.

Es hat sich auch im Rahmen der vorliegenden Erfindung als zweckmässig erwiesen, derartige Verbindungen zuzusetzen. Es muss jedoch dabei darauf geachtet werden, dass die verwendeten Stoffe das Gerinnungssystem nicht beeinflussen. Unter diesem Gesichtspunkt sind als stabilisierende Substanzen vorteilhaft neutrale Kohlenhydrate in einer Konzentration bis zu 5 Gew.-% den zu lyophilisierenden Plasmen zuzusetzen. Beson-

besteht, entsprechend dem beabsichtigten Verwendungszweck io ders geeignet sind beispielsweise Saccharose und Lactose, die jedes Blutplasma von Wirbeltieren in der beschriebenen Form einzeln oder zusammen 1 -2 % im Plasma vorhanden sein kön-hinsichtlich der Gerinnungsparameter zu stabilisieren. In der nen. Zudem hat es sich als vorteilhaft erwiesen, dem Plasma klinischen Diagnostik besteht jedoch ein Bedarf an menschli- Puffersubstanzen zuzusetzen, die das flüssige Plasma auf eine chen Plasmen mit standardisierten Gerinnungsparametern, so pH-Wert zwischen etwa 7,1 und 7,2 einzustellen vermögen,

dass als Ausgangsmaterial für das lyophilisierte Plasma gemäss 15 wobei auch hier darauf zu achten ist, dass Puffersubstanzen der vorliegenden Erfindung vorzugsweise menschliche Blut- gewählt werden, die in der erforderlichen Menge das Gerin-plasmen verwendet werden. Insbesondere werden von gesun- nungssystem im vorliegenden Plasma nicht beeinflussen, keine den Spendern erhaltene Blutplasmen vermischt und erfin- Komplexbildung eingehen und pKa-Werte von etwa 6 bis 8,5

dungsgemäss stabilisiert. Es besteht jedoch kein Hinderungs- besitzen. Von den diesbezüglichen von N. E. Good et al. 1966 grund, Plasmen von Probanden mit definierten Gerinnungsstö- 20 (Biochemistry 5,467-477) vorgeschlagenen Puffern, die in der rangen in der gleichen Weise aufzuarbeiten, um als ein stabiles nachfolgenden Tabelle aufgeführt sind und die in biochemi-Bezugssystem für die Bestimmung bzw. den Nachweis von ent- sehen Systemen ein weitgehend indifferentes Verhalten zeigen, sprechender Gerinnungsstörung verwendet werden zu können, hat sich beispielsweise der N-2-Hydroxyäthylpiperazin-N-

Es wurden schon bisher den Blutplasmen bzw. Seren stabili- äthansulfonsäure-(Hepes)-Puffer in einer Konzentration bis zu sierende Substanzen zugesetzt, insbesondere zur Stabilisierung 25 0,01 M als günstig erwiesen.

Tabelle

Chemische Bezeichnung

Kurzbezeichnung Formel

2-(N-Morpholino)-äthansulfonsäure

MES

0 ^HCHoŒLS0-v_v 223

N<2-Acetamido>iminodiessigsäure ADA

.GH C00-H NCOCH N<^

H CH COONa

Piperazin-N,N'-Bis(2-äthansulfonsäure) PIPES

NaO^SCH2CH2lQtHCH^^SO.

N-(2-Acetamido)-2-aminoäthansulfonsäure ACES

HîNCOCHzN+HzCHzCHzSOa-

(2-Aminoäthyl)trimethylammoniumchlorid-Cholaminchlorid (CH3)3=N+-CH2CH2NH2C1-hydrochlorid

N,N-Bis(2-hydroxyäthyl)-2-aminoäthan- BES sulfonsäure

(HOCHiCHz^N+HCHiCHzSCh-

N-Tris(hydroxymethyl)methyl-2-amino- TES äthansulfonsäure

(HOCHz^N+HCHzCHzSCh-

N-2-Hydroxyäthylpiperazin-N'-2- HEPES

äthansulfonsäure

H0CH2CH2S^JCH2CH2S03-

622101

Chemische Bezeichnung

4

Kurzbezeichnung Formel

N-(2-Acetamido)glycin

N-Tris(hydroxymethyl)me]thylglycin

Glycinamid-hydrochlorid

Tris(hydroxymethyl)aminomethan

N,N-Bis(hydroxyäthyl)glycin

Glycylglycin

Acetamidoglycin HzNCOClrLN+HiCHiCOO-

Tricin (HOCm^CN+HzCHzCOO-

Glycinamid H2NCOH2NH2

Tris (HOCH2)3^CNH2

Bicin (HOCH2)2=N+HCH2COO-

Glycylglycin HsN+CmCONHCTfcCOO-

Die Schwierigkeit bei Puffersätzen ist u. a. auch dadurch Weise ermittelt. Die partielle Thrombopiastinzeit zeigt Nor-

gegeben, dass der Pufferzusatz in fester Form eine lokale Ver- malwerte zwischen 40 und 60 Sekunden. Gerinnungszeiten, die Schiebung des pH-Wertes im Plasma mit der Folge der Störung 55 Sekunden überschreiten, deuten auf Gerinnungsstörungen des Gerinnungssystems bewirkt, wohingegen der Zusatz des hin und erfordern detaillierte Untersuchungen insbesondere Puffers in gelöster Form eine unzulässige Verdünnung des Pias- 25 der Faktoren VIII und IX.

mas verursacht.

Das unter einem Kohlendioxid enthaltende Schutzgas auf- 3. Plasmathrombingerinnungszeit:

bewahrte Blutplasma wird wegen seiner Stabilität als Ver- Zur Bestimmung der Plasmathrombingerinnungszeit wird gleichsplasma bei Gerinnungsuntersuchungen verwendet, ins- Zitratplasma wie bei der Bestimmung der Quickzeit beschrie-

besondere zur Bestimmung des Quickwertes der partiellen 30 ben mit dem gleichen Volumen einer Lösung, die 6 Einheiten

Thrombopiastinzeit, der Plasmathrombingerinnungszeit, der Thrombin pro ml enthält, inkubiert und die Gerinnungszeit in

Gerinnungsfaktoren II, V, XIII und des Fibrinogens. Die gewohnter Weise bestimmt Die Normalwerte für die Plasma-

Bestimmungsmethoden werden beispielsweise nach folgenden thrombingerinnungszeit liegen zwischen 17 und 24 Sekunden.

Verfahren vorgenommen: Die Plasmathrombingerinnungszeit dient vor allem der Über-

35 wachung einer Streptokinase- oder Heparin-Therapie. Bei

1. Quickwert: einer Streptokinase-Therapie werden Gerinnungszeiten in die-

1 Teil einer Natriumzitratlösung von 0,1 M pro Liter und sem Testsystem zwischen 34 und 96 Sekunden registriert, wäh-

einem pH-Wert von 4,5-7 wird mit 9 Teilen Venenblut des Pro- rend eine Heparin-Therapie die Gerinnungszeit von 34 bis 110

banden sorgfältig unter Vermeidung von Schaumbildung ver- Sekunden verlängert.

mischt und 10 min bei etwa 3000 UpM entsprechend 1500 x g 40

zentrifugiert Das überstehende Plasma wird abgegossen und 4. Gerinnungsfaktoren II und V:

bis zur Durchführung des Testes bei 4 °C aufbewahrt, zu 0,1 ml Die Bestimmung der Gerinnungsfaktoren II und V kann in des auf 37 °C vorgewärmten Plasmas werden 0,2 ml einer eben- der Regel zusammen erfolgen. Dazu wird das zu testende falls auf 37 °C vorgewärmten Calciumthromboplastinlösung Plasma in der gleichen Weise wie bei der Quickwert-Bestim-zugegeben und mit Hilfe von bekannten Verfahren zur Bestim- 45 mung gewonnen und das Plasma mit dem gleichen Volumen mung der Zeit bis zum Eintreten der Gerinnung beobachtet, (0,1 ml) eines Faktor-II- bzw. Faktor-V-Mangelplasmas inku-beispielsweise nach der Häkchen-Methode, Kugel-Methode, biert. Wie bei der Quickwert-Bestimmung wird zu beiden Kipp-Methode oder mit automatischen Koagulometern. Die Mischungen jeweils 0,2 ml Calciumthromboplastinlösung zuge-gefundene Gerinnungszeit wird anhand einer vorher zu erstel- geben und die Gerinnungszeit anschliessend in gewohnter lenden Standardkurve unter Verwendung des erfindungsge- 50 Weise bestimmt. Die gemessene Gerinnungszeit ist den Kon-mäss aufbewahrten oder eines frisch gewonnene Blutplasmas zentrationen der Gerinnungsfaktoren II und V proportional, in Beziehung gesetzt. Die Norm des Quickwertes liegt bei Nor- Der Gehalt der Gerinnungsfaktoren wird an einer Bezugsmalplasmen, die entweder frisch gewonnen werden oder erfin- kurve abgelesen, die mit frischem oder erfindungsgemäss auf-dungsgemäss aufbewahrt werden, bei 12-16 Sekunden für bewahrtem Normalplasma erstellt worden ist. Die Bestimmung unverdünnt eingesetztes Plasma. 55 der Konzentration des Gerinnungsfaktors II dient der detail-

Die Bestimmung des Quickwertes ist ein Suchtest für Man- lierten Erfassung von Prothrombin-Mangelzuständen, während gelzustände der am exogenen Gerinnungssystem beteiligten die des Faktors V beim Verdacht auf Parahämophilie angezeigt

Faktoren VII, X,V, II und I. ist.

2. Partielle Thrombopiastinzeit: 60 5. Gerinnungsfaktor X:

Bei der Bestimmung der partiellen Thrombopiastinzeit Die Bestimmung des Gerinnungsfaktors X erfolgt gleichwird das Plasma in der gleichen Weise wie für die Quickzeit falls mit dem auch bei der Bestimmung der Quickzeit verwen-gewonnen und gleiche Teile (0,2 ml) des Plasmas und 0,2 ml deten Zitratplasma, welches in einer Verdünnung von 1:20 mit einer Suspension von gewaschenen Humanthrombozyten mit den gleichen Volumina (0,1 ml) eines Faktor-X-Mangelplasmas einem Zusatz von Kaolin werden 2 min bei 37 °C inkubiert. Zu es und einer Lösung von Schlangengift-Thromboplastin 30 Sekun-0,2 ml des Inkubationsgemisches wird eine 0,025 molare Calci- den bei 37 °C inkubiert, danach 0,1 ml einer 0,025 molaren Cal-umchloridlösung hinzugefügt und der Zeitpunkt des Gerin- ciumchloridlösung zugegeben und die Gerinnungszeit in nungseintritts wie in der bei der Quickzeit beschriebenen gewohnter Weise bestimmt wird. Die resultierende Gerin-

5

nungszeit ist der Faktor-X-Konzentration des zu prüfenden Plasmas proportional. Der Faktor-X-Gehalt wird an einer Bezugskurve abgelesen, die mit Hilfe eines frisch gewonnenen Mischplasmas von Normalpersonen oder eines erfindungsge-mäss aufbewahrten Plasmas erhalten wurde. 5

6. Gerinnungsfaktor XIII:

Bei der Bestimmung des Faktors XIII wird die Gewinnung des Zitratplasmas in Gegenwart eines polyvalenten Proteina sen-inhibitors von 2,5 Antiplasmin-Einheiten pro ml Blut vorge- 10 nommen. Für die Durchführung der Bestimmung werden benötigt ein Antifaktor-XIII-Serum, das in einer Reihenverdünnung angesetzt mit Plasma 30 min bei Raumtemperatur inkubiert wird. Sodann wird zu jeder Inkubationsmischung Antiserum mit Plasma, Thrombin und Calciumchlorid zugesetzt und das 15 Plasma damit zur Gerinnung gebracht. Zur vollständigen Gerinnselbildung bleiben die Ansätze etwa 1 Stunde bei Raumtemperatur stehen. Durch Zusatz einer l%igen Monochlores-sigsäurelösung zu jeder Inkubationsmischung wird diejenige Plasmaverdünnung ermittelt, bei der sich das Gerinnsel in der 20 Monochloressigsäure gerade noch gelöst hat. Die Menge des Faktors XIII in dem zu bestimmenden Plasma wird mit der Menge in Beziehung gesetzt, die sich bei der Bestimmung des Faktors XIII in Normalplasmen ergibt, die frisch gewonnen oder erfindungsgemäss gelagert werden können. 25

7. Fibrinogen:

Die Bestimmung des Fibrinogens erfolgt gleichfalls unter Verwendung von Zitratplasma, das mit Thrombin zum Gerinnen gebracht wird. Das dabei entstehende Gerinnsel wird 30 durch Zentrifugation bei 45 000 UpM als Sediment gewonnen. Der Überstand wird abdekantiert, das Sediment mehrfach mit isotonischer Kochsalzlösung gewaschen und schliesslich im Vakuum getrocknet, über eine Bestimmung des Stickstoffgehaltes nach Kjeldahl wird auf den Eiweissgehalt des Gerinnsels 35 in mg umgerechnet, der als Fibrinogen angegeben wird. Auch hierbei dient der Fibrinogengehalt des erfindungsgemäss gelagerten Normalplasmas als Bezugssystem.

Die Erfindung soll am nachstehenden Beispiel näher erläutert werden. 40

622101

Beispiel:

Zu 50 ml einer Zitratpufferlösung mit einem Gehalt von 0,1 M/1 Natriumzitrat und einem pH-Wert von 7,0, die steril und frei von Konservierungsmitteln ist, lässt man 450 ml Venenblut eines gesunden Spenders vorsichtig unter Vermeidung von Schaumbildung zulaufen und mischt die beiden Bestandteile sorgfältig. Das Zitratblut wird bei 8000 g 30 min lang zentrifugiert und das Plasma abgehebert. Das Plasma wird mit dem auf die gleiche Weise gewonnenen Zitratplasma von 9 weiteren Spendern vermischt, so dass ein Pool von insgesamt 10 gesunden Blutspendern resultiert. Zu der Plasmamischung wird Lactose und Saccharose jeweils bis zu einer Endkonzentration von 1 % zugesetzt. Ferner wird mit einem Zusatz von 4 g N-2-Hydro-xyäthylpiperazin-N-äthansulfonsäure (HEPES) pro Liter Plasma, der pH-Wert des Plasmas auf 7,1 eingestellt. Die Plasmamischung wird danach in 1,0 ml Portionen in Gefässen mit einem Gesamtinhalt von 6,5 ml abgefüllt und im Block eingefroren. Das eingefrorene Plasma wird in einer Lyophilisationsan-lage getrocknet. Anschliessend wird ein Vakuum von 5x 10-4 Torr erzeugt. Die lyophilisierten Plasmen verbleiben in diesem Vakuum 3 Stunden. Danach lässt man in den evakuierten Raum Kohlendioxidgas bis zum Ausgleich auf Atmosphärendruck einströmen. Die Gefässe werden schliesslich luftdicht verschlossen.

Eine Qualitätsprüfung von 5 willkürlich herausgegriffenen Mustern ergab im Durchschnitt für die Quickzeit 12,0 Sekunden, die partielle Thrombopiastinzeit 41,8 Sekunden und für die Plasmathrombingerinnungszeit 19,4 Sekunden. Es hat sich gezeigt, dass diese Werte nach einigen Monaten Lagerung selbst bei 37 °C kaum verändert sind und bei einer Lagerung bei 4 °C über mehr als 3 Jahre nur unwesentliche Abweichungen erwarten lassen.

In den evakuierten Raum kann statt Kohlendioxid eine Mischung von 50% Kohlendioxid mit 50% Stickstoff (v:v) oder eine Mischung von 5% Kohlendioxid und 95% Stickstoff eingefüllt werden, wobei beispielsweise der Stickstoff durch ein internes stabiles Edelgas wie Helium, Neon oder Argon mit dem Kohlendioxid gemischt, ersetzt werden kann.

Claims

622101 2 PATENTANSPRÜCHE den Spendern im Hinblick auf die Gerinnungseigenschaften die.

1. Lyophilisiertes, nicht für therapeutische Zwecke Kriterien für ein Bezugssystem bei Gerinnungsunter suchungen bestimmtes, Blutplasma unter einem Schutzgas, dadurch ausreichend erfüllt. Es ist gleichfalls bekannt, dass ein Plasma gekennzeichnet, dass das Schutzgas mindestens 5% Kohlen- durch Lyophilisation auch in Bezug auf die Aktivität der Gerin-dioxid enthält. s nungsfaktoren stabilisiert werden kann. Doch hat es sich auch

2. Lyophilisiertes Blutplasma nach Patentanspruch 1, bei den lyophilisierten Plasmen gezeigt, dass sich ihre Gerin-dadurch gekennzeichnet, dass es Antikoagulans und kolloid-sta- nungsparameter im Laufe der Zeit in unterschiedlicher Weise bilisierende Zusätze enthält. verändern. Dies hat dazu geführt, dass lyophilisierte Plasmen,

3. Verfahren zur Herstellung eines lyophilisierten Blutpias- die als Bezugsgrössen bei Gerinnungsuntersuchungen Verwen-mas nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man i o dung finden können, nicht für alle der oben angeführten Gerin-lyophilisiertes Blutplasma mit einem mindestens 5% Kohlen- nungsparameter einzusetzen sind. Insbesondere hat es sich dioxid enthaltenden Schutzgas in einem Gefäss einschliesst. erwiesen, dass die Plasmathrombingerinnungszeit der wieder-

4. Verfahren nach Patentanspruch 3, dadurch gekennzeich- aufgelösten lyophilisierten Plasmen bereits zu einer Zeit nicht net, dass man ein durch kolloid-stabilisierende Zusätze stabili- mehr mit den von Normalplasma zu erhaltenden Werten über-siertes Blutplasma verwendet. 15 einstimmt, wenn die übrigen Gerinnungsfaktoren noch ein rela-

5. Verfahren nach Patentanspruch 3, dadurch gekennzeich- tiv gute Übereinstimmung mit Normalwerten zeigen.

net, dass man frisch gewonnenes Blut zu einer vorgelegten Es wurde nun überraschend gefunden, dass ein lyophilisier-Menge eines Antikoagulans gibt, das Blut zentrifugiert, das tes Blutplasma, das unter einem Schutzgas gelagert wird, min-Plasma gewinnt, gegebenenfalls mit kolloid-stabilisierenden destens in Bezug auf die folgenden zu nennenden Gerinnungs-Zusätzen versetzt, in ein nicht benetzbares Gefäss einfüllt, 20 parameter stabil bleibt, wenn das Schutzgas mindestens 5%, unter Ausbildung einer grossen Oberfläche einfriert, lyophili- vorzugsweise 10 bis 50%, Kohlendioxid enthält. Die in Frage siert, das Gefäss evakuiert, ein mindestens 5 % Kohlendioxid kommenden Gerinnungsparameter sind insbesondere Quickenthaltendes Schutzgas einbringt und das Gefäss unter diesem zeit, partielle Thrombopiastinzeit, Plasmathrombingerinnungs-Schutzgas verschliesst. zeit, die Gerinnungsfaktoren II (Prothrombin), V (Akzellerin),

6. Verwendung des lyophilisierten Blutplasmas nach Patent-25 X (Stuart-Prower-Faktor), XIII (fibrinstabilisierender Faktor) anspruch 1 als Vergleichsplasma bei Gerinnungsuntersuchun- und Fibrinogen.

gen. Gegenstand der Erfindung ist demnach ein lyophilisiertes,

nicht für therapeutische Zwecke bestimmtes, Blutplasma unter einem Schutzgas, das dadurch gekennzeichnet ist, dass das 30 Schutzgas mindestens 5%, vorzugsweise 10 bis 50%, Kohlendioxid enthält.

Als weitere Bestandteile, die das Schutzgas neben Kohlen-