BRPI0921042A2 - extrato de partes aéreas de aveias colhidas antes do florescimento da espiga - Google Patents

Abstract

extrato de partes aéreas de aveias colhidas antes do florescimento da espiga. a presente invenção refere-se a um extrato de parte aérea de aveias excluindo grãos, a seu método de preparação e a seu uso.

Description

1V17 Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "EXTRATO - DE PARTES AÉREAS DE AVEIAS COLHIDAS ANTES DO FLORESCI- MENTO DA ESPIGA”. ' A presente invenção refere-se a um extrato de partes aéreas de aveias preferencialmente colhidas antes do florescimento da espiga e ao seu uso para tratar dermatoses inflamatórias.

As aveias ou Avena sativa L. é uma planta anual que pode cres- cer 1,50 de altura. Na germinação, a planta jovem cresce como grama e em seguida fornece vários caules com um hábito particular de crescimento. O caule ou restolho é oco, com um diâmetro de alguns milímetros, interrompido ' de lugar para lugar, no local onde as folhas estão inseridas, através de dia- . fragmas completos chamados nós. Os espaços entre nós, antes de mais nada muito curtos na base do caule, tornam-se cada vez mais longos As folhas são alternadas, dísticas, de uma cor verde azulada fosca; elas estão inseridas no caule nos nós, através de uma longa bainha cortada dianteiramente que abrange quase o todo do espaço internodal su- perior. O ramo é destacado dele nos ângulos direitos. É amplo, com fitas, revestido com muitas veias paralelas (rectinerves); é geralmente púbere. No ramo onde a bainha é cortada, uma expansão de membrana da bainha que écurtae truncada, chamada lígula, é observada entre o caule e o ramo.

O caule termina com uma grande panícula floral espalhada por todas as direções, com uma forma piramidal muito solta, todos os galhos da qual termina com uma inflorescência constante com uma estrutura constante na família inteira de Poaceae e chamada espigueta. As espiguetas são sus- pensas, relativamente grandes e apenas compreendem duas flores. A espi- gueta não nasce na eixo de uma bráctea mãe, porém em uma distância cur- ta de sua inserção, suportam duas brácteas opostas particulares, chamadas glumas.

As glumas de aveias têm um tamanho grande; elas alcançam um comprimento de 2 em e envolvem completamente a espigueta; elas são lanceoladas, fornecidas com 7 a 9 veias e púbere. As glumelas são peque- nas; a glumela externa suporta uma borda retorcida, não inserida no ápice, | mas no dorso, que excede a espigueta por mais de um centímetro. . Imediatamente acima das glumelas, os eixos florais suportam duas pequenas partes não muito visíveis, as grumelas e finamente a flor real que é reduzida a três estames e a três carpelos.

Os estames, primeiro subs- tancialMmente sésseis, em seguida observa-se sua rede se alongar sobre o florescimento, de modo que as anteras tornam-se protrusas e precipitam-se da espigueta.

As anteras são inseridas na rede através de sua região média exclusivamente, daí seu nome de anteras oscilantes e medificadas.

Os três carpelos formam um ovário uniocular, com um estilo que é dividido em mui- tos lóbulos estigmáticos dilatados e emplumados.

Todas estas característi- ' cas correspondem à polinização pelo vento.

Existe apenas um óvulo que é , anatrópico e fixado verticalmente no fundo da cavidade ovariana.

O fruto é um aquênio de um tipo particular, onde a fundação ex- terna será diretamente aplicada contra o pericarpo.

Este fruto é chamado de —cariopse.

É um grão alongado, afunilado, pubescente tendo albumina de a- miláceo volumosa.

O embrião tem um cotilédone muito desenvolvido circun- dando a tigela quase completamente, separando-o da albumina.

Todo o em- brião é rejeitado ao lado.

O fruto de aveias é reconhecido como um material cru medicinal —pormeio de uma rotina oral, como um laxante para seu efeito de lastro, po- rém também no caso de colesterolemia ou diabetes de tipo 2 para seu teor de B-glicano.

Por meio de uma rotina tópica, o fruto de aveias é principal- mente usado como farinha, uma quantidade do qual, chamada extrato de aveias coloide, tem uma monografia nos Estados Unidos de Pharmacopoeia USP22,1990. Este extrato coloidal tem propriedades emolientes e amacian- tes e é definido como o pó resultante de moagem e de outros tratamentos do grão completo, esta qualidade, portanto, corresponde a uma farinha de avei- a.

A monografia apresenta padrões de viscosidade, limites microbianos, per- das de dessecação, tamanho de partícula e teores de cinza, lipídeo e nitro- gênio.

Desta mesma porção da aveia, o óleo usado em cosmetologia e as proteínas podem também ser extraídos.

As últimas, que são insolúveis,

não são diretamente usadas, exceto apenas após hidrólise enzimática e . química. Um hidrolisado mais ou menos elaborado é preparado, com o qual é possível obter peptídeos de aveia com pesos moleculares variáveis, ou aminoácidos dependendo da força da hidrólise. As proteínas de aveia hidro- lisadas foram examinadas quanto às suas propriedades nos campos cosmé- ticos e dermatológicos. Desse modo, suas propriedades foram demonstra- das em cabelo, tal como a capacidade que estas propriedades têm de for- mar uma película no pelo do caule, de penetrar na cutícula e, assim, pelo efeito de bainha resultante, de fornecer um efeito de condicionamento.

Com trabalho realizado in vitro em culturas de célula, a atividade ' anti-inflamatória de extrato coloide de aveias pôde ser avaliada. Desse mo- R do, este extrato mostrou atividade inibidora em matabolismo de ácido ara- quidônico e eicosanoides, na expressão de fosfolipase A, citosólica e de ci- clo-oxigenase em uma cepa de ceratinócito humano, bem como uma ativi- dade indutora de citocina TGFB1 anti-inflamatória. As citocinas Th1 e Th2 das células da imunidade tais como IL>, ILu, ILs, IL13, são também controla- das pelo mesmo extrato coloidal. Finalmente, um estudo clínico mostra o benefício de um extrato coloidal de aveias em um modelo irritante da pele em um modelo irritante da pele duplo cego e em 12 voluntários sadios.

A porção externa do grão fornece os glicanos usados em dietéti- cos em fibras de aveia para reduzir o nível de colesterol e riscos cardiovas- culares.

Os glicanos de aveias foram também investigados quanto à pro- priedade viscosificante e gelificante como um suplemento alimentar.

Os glicanos extraídos de aveias também têm uma boa atividade imunoestimulante. Outras atividades fornecendo valor no campo cosmético foram demonstradas: proteção contra efeitos deletérios de UV, estimulação de metabolismo celular, estimulação da síntese de colágeno e melhora da resistência à tração de cabelo.

Separada dos grãos, as aveias são usadas como uma planta for- ragem. O corte, quando jovem, fornece muita forragem verde estimulada. À palha deve ser dada a cavalos, vacas e carneiro, porém não é usada em | alimento humano.

Na medicina tradicional, a folha de aveia é usada para + preparar banhos para aliviar dores de reumatismo, ciática e afeições do fi- gado. ' Na índia, as ordinárias decocções de aveia foram usadas para abstinência dos viciados do pó de ópio.

Um extrato alcoólico preparado de plantas frescas foi usado para abstinência de álcool! com resultados estatisti- camente significantes.

Os banhos com base em folha de aveia ou extratos comerciais teriam como indicações: reumatismo, neuralgia, eczema crônico, neuroder- matite, distúrbios vasculares periféricos... ' Aveias "herbáceas" é o objeto de uma monografia de EMEA . (Ref.

EMEA/HMPC/202966/2007) em que a menção é feita ao uso de partes aéreas secadas colhidas antes do florescimento, ou um extrato líquido (1 :5, 45% em volume/volume de etanol) preparado de partes aéreas frescas da planta colhida durante o período de florescimento.

O uso tradicional destas partes aéreas é descrito no caso de es- tresse mental ligeiro e para promover a indução de sono.

A partir da bibliografia, as partes aéreas de aveias consistem em: -Flavonoides: => C-glicosil-flavonas do tipo de apigenina (vitexina, isovitexi- na...) ou luteolina (orientina, isoorientina, isoscoparina...), => flavonas O-glicosiladas do tipo de tricina, => flavonolignanos (salcolinas A e B) —-Saponinas esteroides Bidesmosídicas: Avenacosídeos A e B (aglicona: nua- tigenina) -Proteínas =Outros: Compostos fenólicos (Avenantramidas, ácidos hidroxicinâmicos...), esteróis, cerebrosídeos... A dermatite atópica (ou eczema atópico) é uma doença dermato- lógica, afetando de 10 a 15% dos recém-nascidos na França, aumentando durante as últimas décadas.

A dermatite atópica é o sintoma cutâneo de atopia, esta é uma - dermatite ou eczema inflamatória crônica, ocorrendo em uma condição ge- neticamente determinada, afetando de 15 a 30 % das crianças e 2 a 10% ' dos adultos; sua predominância está em constante aumento em países in- —dustrializados, dobrou ou até triplicou durante as últimas três décadas e ago- ra é considerada como uma questão principal de saúde pública. A dermatite atópica está frequentemente associada com outros distúrbios atópicos tais como rinite alérgica e asma. Esta afeição mais frequentemente aparece du- rante a infância e é caracterizada por erupções repetidas durante vários a- nos. Desenvolve-se por erupções interrompidas com remissões es- 7 pontâneas.

' A qualidade de vida de pacientes afetados com dermatite atópi- ca é profundamente perturbada; os tratamentos adotados incluem corticoste- roides e imunomoduladores tópicos, agentes sistêmicos, os frequentes efei- tos secundários dos quais limitam o uso a longo prazo, emolientes. A pre- sente terapia é reativa — tratamento das erupções — porém estima-se agora que uma intervenção precoce focalizada no controle das erupções e da in- flamação cutânea pode ser benéfica tanto em termos de controle da doença quanto do possível aparecimento de asma e/ou rinite (BIEBER, T. 2008, dermatite atópica, The New England Journal of Medicine, Volume 358 (14) 1483-1494), a dermatite atópica sendo considerada como a fase inicial do desenvolvimento assim chamado. Na maioria dos casos, cuidado local asso- ciado fornece um complemento aos tratamentos usados, e fornece alívio ao paciente. Existe uma necessidade significante de tratamentos alternativos a tratamentos por corticosteroides.

A dermatite atópica seria o resultado de interações de complexo entre predisposições genéticas, fatores ambientais tais como alergenos e micro-organismos, disfunção da barreira da pele, desregulação do sistema imune (SPERGEL, JM. 2008, Immunology and treatment of atopic dermatitis, AmdJClin Dermatol, Vol 9(4) 233-244).

A psoríase é também uma doença inflamatória cutânea com de- senvolvimento crônico; afeta 2% da população. Com a dermatite atópica,

estas são as mais frequentes doenças inflamatórias crônicas da pele. Ela é - caracterizada por um crescimento anormal de células epidêmicas associa- das com uma reação inflamatória. O mecanismo central deste fenômeno de inflamação está relacionado com a ação das células T do sistema imune, predominantemente células do tipo Th1 (WILSMANN-THEIS, D. ; HAGE- MANN, T ; JORDAN, J ; BIEBER, T ; NOVAK, N. 2008, Facing psoriasis and atopic dermatitis : are there more similarities or more differences ?, Eur J Dermatol, Volume 18 (2) 172-180) que inícia e mantém o processo inflama- tório e estimula a proliferação excessiva de ceratinócitos que em seguida se submete a uma fase de diferenciação acelerada e incompleta. Os ceratinóci- ' tos expressam receptores que os tornam sensíveis aos sinais inflamatórios e . liberam mediadores pró-inflamatórios. A inflamação psoriásica é desse mo- do, sustentada por estimulação mútua das células T e dos ceratinócitos.

A doença tem, portanto, que ser tratada a longo prazo.

Existe assim uma necessidade e uma forte demanda de alterna- tivas terapêuticas a estas dermatoses inflamatórias.

Inesperadamente e surpreendentemente, as invenções mostra- ram novas maneiras de adicionar valor a um extrato de partes aéreas de aveias em dermatologia terapêutica e cosmética, Vantajosamente, o referido extrato tem propriedades de imunomodulação e anti-inflamatória úteis no tratamento de dermatite atópica. O extrato de acordo com a presente inven- ção também mostrou boas capacidades de tratar acne e envelhecimento de pele.

O objeto da presente invenção é desse modo, um extrato de par- te(s) aérea(S) de aveias, excluindo grãos, caracterizado por 2 a 15% de fla- vonoides e 0,2 a 2% de avenacosídeos A e B.

Por partes aéreas de aveijas, entende-se no sentido da presente invenção qualquer porção da planta de aveia localizada acima do solo, ex- cluindo os grãos.

Preferivelmente, as partes aéreas de aveias compreendem as folhas e/ou caules e/ou espiguetas e/ou flores.

O extrato de aveia obtido é caracterizado por seu teor de flavo-

noides e de saponinas de interesse.

As últimas são analisadas por cromato- * grafia líquida de alta pressão, por dois métodos diferentes adequados a cada tipo de composto.

Os teores destas moléculas diferentes variam dependendo das condições de extração.

Os flavonoides principais são isovitexina-2"-O- rabinopiranosídeo e isoorientina-2"-O-arabinopiranosídeo.

Os avenacosí- deos A e B são as saponinas principais.

Estas são saponinas esteroides bis- desmosídicas.

Vantajosamente, o extrato de acordo com a invenção compre- ende uma proporção de 5 a 10% dos flavonoides principais: isovitexina-2"-O0- ' arabinopiranosídeo e isoorientina-2"-O-arabinopiranosídeo. . Vantajosamente, o extrato de acordo com a invenção é um ex- trato obtido em um solvente orgânico.

Vantajosamente, o extrato de acordo com a invenção compre- ende menos do que 1 ppm de proteínas, preferencialmente menos do que 0,5 ppm e ainda mais preferencialmente menos do que 0,3 ppm de proteí- nas.

Vantajosamente, o extrato de acordo com a invenção é um ex- trato de partes aéreas de aveias colhidas antes do florescimento da espiga.

No sentido da presente invenção, «partes aéreas de aveias co- . —lhidas antes do florescimento da espiga» indica as partes aéreas de aveias colhidas após a germinação (cerca de 2 semanas a 2 meses após a germi- nação) durante a fase de alongamento do caule reto para cima para flores- cimento da espiga, não incluídas.

No sentido da presente invenção, "alongamento de caule” indica a fase de crescimento que corresponde ao alongamento do caule e ao flo- rescimento da formação de espiga, antes da floração.

Outro objeto da presente invenção é um método de preparação de um extrato de parte(s) aérea(S) de aveias, as referida(s) parte(s) aérea(s) —não compreendendo nenhum grão, compreendendo as seguintes etapas: - secagem e moagem da(s) parte(s) aérea(s) de aveias, - extração em um solvente orgânico selecionado do grupo con- | sistindo em cetonas, ésteres, C1-C, alcoóis, e misturas miscíveis em qual- . quer proporção destes solventes, e - centrifugação e filtragem.

Vantajosamente, o solvente orgânico do método de acordo com ainvençãoé selecionado do grupo consistindo em acetona, metiletilcetona, metilisobutilcetona, acetato de etila, um C;-C, álcool e uma mistura em qual- quer proporção miscível destes solventes.

Vantajosamente, a parte aérea é colhida após 2 meses, no final do alongamento, porém antes do florescimento da espiga, e em seguida se- caemoída.

' A extração é realizada sob agitação ou de uma maneira estática. - A extração é realizada com refluxo ou em temperatura ambiente.

Vantajosamente, a extração é realizada em uma relação de planta/solvente que pode variar de 1/7 a 1/20, preferivelmente de 1/8 a 1/12.

Preferencialmente, a extração é realizada durante um período de 30 minutos a 48 horas, mais preferivelmente de 60 a 120 minutos.

A extração pode ser renovada 2 ou 3 vezes.

O bagaço obtido pela etapa de extração é em seguida separado do extrato por centrifugação ou filtragem e a solução pode ser mais ou me- nos concentrada até um extrato seco ser obtido.

Um tratamento de descoloração pode ser realizado com delipi- dação por concentração, precipitação e filtragem, ou adicionando-se à solu- ção extraída concentrada ou não um suporte de absorção tal como carvão ativo ou uma resina de absorção.

Um suporte pode ser adicionado durante a etapa de secagem em proporções de massa, relativamente, ao material seco extraído que pode variar de 1 a 75%. O suporte pode ser um açúcar tal como maltodextrina, lactose, sílica ou qualquer outro suporte cosmeticamente aceitável.

Outro objeto da presente invenção é um extrato de partes aé- reasde aveia excluindo grãos, capazes de ser obtidas pelo método de acor- do com a invenção.

Vantajosamente, este extrato é obtido por extração com acetona * Ou acetona/água, até 20% de água. Um extrato da acetona ou tipo acetona/água com até 20% de água, incluí as moléculas de interesse, flavonoides e saponinas, e é muito consideravelmente empobrecido em proteínas. De fato, os métodos de dosar proteínas descritos na farmacopeia europeia não produzem a qualquer resul- tado, e a migração em um gel de SDS-Page por eletroforese após precipita- ção de acetona e a descrição com azul de Coomassie ou com nitrato de pra- CC ta mostra a ausência de qualquer faixa sinalizando a presença de proteína. Depositando-se um controle sobre este mesmo eletroforese é possível quan- ' tificar o limite de detecção de proteína a 1 ng, este extrato, portanto, tem um . teor de proteína menor do que 1 ppm (reduzido à quantidade de extrato de- positado sobre o gel). Preferencialmente, o referido teor de proteína é menor do que 0,5 ppm e ainda mais preferencialmente menor do que 0,3 ppm de proteínas.

Outro objeto da presente invenção refere-se a uma composição dermatológica ou cosmética compreendendo um extrato de acordo com a invenção e um ou mais excipientes dermatologicamente ou cosmeticamente aceitáveis, respectivamente.

A composição de acordo com a invenção pode, em particular, conter aditivos e auxiliares tais como emulsificantes, espessantes, agentes gelificantes, fixadores de água, agentes de expansão, estabilizantes, agen- tes corantes, perfumes e conservantes.

A composição cosmética e dermatológica de acordo com a in- venção também compreende excipientes dermatologicamente compatíveis usuais.

Preferencialmente, a composição de acordo com a invenção compreende uma quantidade de extrato de parte(s) aérea(s) de aveias, co- mo um ingrediente ativo, compreendido entre 0,1 e 5% em peso com base no peso totalda composição.

Vantajosamente, a referida quantidade de extrato é compreendi- da entre 0,1% e 0,5% em peso, com base no peso total da composição, )

A composição dermatológica ou cosmética de acordo com a . presente invenção pode ser preparada como uma emulsão de água em óleo (W/O) ou óleo em água (OM), como uma emulsão múltipla tal como, por ' exemplo, uma emulsão água em óleo — óleo em água (W/ONMW) ou uma e- mulsãoóleoem-água-em óleo (0OW/O), uma microemulsão ou ainda co- mo uma hidrodispersão ou polidispersão, um gel ou um aerossol.

Os excipientes dermatológicos ou cosmetologicamente compati- veis podem ser quaisquer excipientes entre aqueles conhecidos por alguém versado na técnica para obter uma composição para uma aplicação tópica como leite, creme, bálsamo, óleo, loção, gel, gel espumante, unguentos, s- ' pray, etc. . Outro objeto da presente invenção refere-se a um extrato de a- cordo com a invenção para uso como um fármaco. Outro objeto da presente invenção refere-se a um extrato de a- cordocom a invenção para uso no tratamento de dermatoses inflamatórias.

Outro objeto da presente invenção refere-se a um extrato de a- cordo com a invenção para uso no tratamento de dermatite atópica, psoríase ou eczema que são dermatoses inflamatórias.

Outro objeto da presente invenção refere-se ao uso de um extra- tode acordo com a invenção para preparar um fármaco destinado ao trata- mento de dermatoses inflamatórias. —| Outro objeto da presente invenção refere-se ao uso de um extra- to de acordo com a invenção para preparar um fármaco destinado ao trata- mento de dermatite atópica, psoríase ou eczema que são dermatoses infla- matórias.

Outro objeto da presente invenção refere-se a um extrato de a- cordo com a Invenção para uso no tratamento de acne ou envelhecimento de pele.

Outro objeto da presente invenção refere-se ao uso de um extra- tode acordo com a invenção em uma composição cosmética e/ou dermato- lógica destinada ao tratamento de acne ou envelhecimento de pele.

Outro objeto da presente invenção refere-se a um extrato de a-

cordo com a invenção para uso no tratamento de rosácea. . Outro objeto da presente invenção refere-se ao uso de um extra- to de acordo com a invenção em uma composição cosmética e/ou dermato- ' lógica destinada ao tratamento de rosácea, A rosácea é uma doença inflamatória e crônica da pele da face. Esta é uma doença da pele da pele incurável, mais frequentemente benigna, que é expressa por manchas vermelhas crônicas no nariz, nas bochechas, algumas vezes também no queixo, e na testa.

Outro objeto da presente invenção refere-se a um extrato de a- —cordo com a invenção para uso no tratamento de peles sensíveis. ' Outro objeto da presente invenção refere-se ao uso de um extra- . to de acordo com a invenção em uma composição cosmética e/ou dermato- lógica destinada ao tratamento de peles sensíveis. Por pele sensível, entende-se no sentido da presente invenção, peles com sensibilidade aumentada. Pele sensível ou pele reativa é uma síndrome caracterizada por sinais neurossensitivos tais como uma inflama- ção, prurido, dor pungente. Entre os sinais clínicos resultantes da avaliação clínica de dermatologistas, são encontrados: eritema, edema, secu- ra/descamação, lesões de acne, pápulas/vesícula (L. Misery e outros, JE- ADV 2009,23, 376). Peles sensíveis são peles hiper-reativas que requerem o uso de produtos de cuidado e higiene bem tolerados. Indivíduos sensíveis são pessoas que particularmente reagem às agressões mais rapidamente do que a pele da maioria das outras pessoas. Os seguintes exemplos ilustram a invenção sem limitar o escopo damesma, Exemplo 1: preparação de um extrato de partes aéreas de aveias colhi- das antes do florescimento da espiga.” de acordo com a invenção a. por extração de acetona. 400 kg de partes aéreas secas de aveias colhidas antes do flo- rescimento da espiga são moídos e em seguida colocados em um reator com 10 volumes da mistura de acetona/água, sob agitação durante uma ho- ra em temperatura ambiente.

Por separação de sólido/líquido, é possível obter um primeiro . suco de extração.

O bagaço é extraído uma segunda vez com 10 volumes da mis- ' tura de acetona/água durante uma hora em temperatura ambiente, sob agi- tação.

Por separação de sólido/líquido, é possível obter um segundo suco de extração que é concentrado com o primeiro.

A solução obtida é concentrada em água para 1,33 volumes/kg e em seguida filtrada.

O extrato desse modo obtido é secado por micro-ondas após adição de suporte de maltodextrina (qsp 25%/extrato nativo). Desse modo, 36 kg de um pó marrom claro são obtidos com um ] título de 6% de flavonoides (isovitexina-2"-O-arabinopiranosídeo e isoorienti- . na-2"-O-arabinopiranosídeo) e de 0,6% de avenacosídeo B e o teor de pro- teína do extrato desse modo obtido é menor do que 0,3 ppm. b. por extração de etanol A extração de 100 g de plantas secaas e extraídas com uma mistura de 50:50 de etanol/água 50:50 durante uma hora com refluxo, sepa- ração de sólido/líquido e evaporação em vácuo a 50 ºC. 26 g de extrato são desse modo, obtidos como um pó marrom, com um título compreendido de entre 1,5 e 3 % de flavonoídes (isovitexina-2"-O-arabinopiranosídeo e isoori- entina-2"-O-arabinopiranosídeo). Exemplo 2: Estudo biológico do extrato de partes aéreas de aveias co- lhidas antes do florescimento da espiga a partir do exemplo 1.a O estudo farmacológico do extrato de partes aéreas de aveias intervém com o componente imunoinflamatório de dermatite atópica.

A alte- ração da barreira epidérmica (mutação de forma notável do gene de filagri- na) facilita a penetração dos alérgenos de peso molecular elevado (de áca- ros, pólens,...), sua captura por células dendríticas e sua apresentação para as células T; está interação induz à resposta de célula T na pele — inicial- mente Th2 com produção de um painel de citocinas pró-inflamatórias e qui- —miocinas capazes de manter a inflamação: ILHA, IL-5, IL-13 associadas com dermatite atópica, com emersão significante de IL- 17 e 11-31 -, porém mais tardiamente Th1 (INCORVAIA, C ; FRATI, F. ; VERNA N ; D'ALO, S. ; MO-

TOLESE, A. ; PUCCI, S. 2008, Allergy and the skin, Clin Exp Immunol, Vol . 153 (1) 27-29) ; (BIEBER , T 2008, Atopic dermatitis, The New England Jour- ' nal of Medecine, Volume 358 (14) 1483-1494). A ativação de linfócitos T é ' seguida pela ativação de outros tipos de célula, principalmente ceratinócitos ecélulas endoteliais, que resulta na produção de mediadores inflamatórios (citocinas, prostaglandinas) e na produção de quimiocinas seguindo o recru- tamento de células inflamatórias.

a. Preparação das frações: O extrato de partes aéreas de aveias pode ser fracionado para identificar a classe de moléculas ou as moléculas responsáveis pela ativida- ' de.

- Para isto, o extrato pode ser depositado em uma coluna de sílica de média pressão e sucessivamente eluído com solventes de polaridade crescente, por exemplo, uma concentração crescente de metanol em água.

De fato, o fracionamento obtido após se depositar o extrato preparado de acordo com o exemplo 1.a em uma coluna de sílica e primeiro eluindo-o com uma mistura de metanol/água de 25:75 para 50:50 e em seguida para 100 % de metano! tornando possível separar uma fração rica em flavonoide (50:50 de fração de metanol/água,y 19% de flavonoides isovitexina-2-O- —arabinopiranosídeo e isoorientina-2-O-arabinopiranosídeo expressos como vitexina-2-arabinose) e uma fração rica em saponina (fração com 100% de metanol, 15% de avenacosídeo B). A partir da primeira fração os flavonoides isovitexina-2-O-arabinopiranosídeo e isoorientina-2-O-arabinopiranosídeo foram isolados por HPLC semipreparativa usando uma coluna de sílica re- versa C-18, incluindo estruturas que foram confirmadas por espectrometria de massa e ressonância magnética nuclear.

Avenacosídeo A e avenacosídeo B foram isolados da fração rica em saponina por HPLC semipreparativa, incluindo estruturas que foram i- dentificadas por espectrometria de massa e ressonância nuclear.

b. Atividade deimunomodulação As citocinas, que representam um vasto conjunto de proteínas reguladoras do sistema imune, são produzidas por células da pele residen-

tes ou infiltradas, ativadas durante os processos inflamatórios ou imunes. . As interleucinas incluindo 112, 14, 15 e 113, produzidas pelos lin- . fócitos, são divididas em dois grupos: as citocinas de tipo Th1 incluindo 11; e as citocinas de tipo Th2 incluindo 114, 15 e 1113. Todas estas interleucinas são superproduzidas durante as patologias inflamatórias tal como atopia, eczema de contato ou psoríase.

Entre elas, a interleucina humana 2 (IL-2), derivada de células T, é capaz de sustentar a proliferação de linfócitos T ativados e induzir os pro- cessos para diferenciação e ativação de células B e NK (Célula Extermina- dora). ' In vitro, as células mononucleares humanas podem ser estimu- . ladas e produzir citocinas.

O princípio deste teste é estudar a influência dos extratos sobre as produções de IL, llu, ILs, IL13 induzidas por Acetato de Miristato de Forbol /lonomicina de estimulação dual.

Resultados: um extrato de acetona de partes aéreas de aveias colhidas antes do florescimento da espiga de acordo com o exemplo 1.a inibe em 52% o número de linfócitos CD4 expressando interleucina 2 e em 21% do nível IL7 intracelular na concentração de 30ug/ml.

Este mesmo extrato na concentração de 30upg/ml iníbe a produções de linfócito de interleucina 4 em 51%, de interleucina 5 em 31% e interleucina 13 em 78%. Esta atividade interessante para tratar dermatite atópica é transmitida pelas saponinas do extrato, incluindo os avenacosídeos A e B. c.

Atividade anti-inflamatória Princípio: o ceratinócito, a célula mais representada na epiderme, apresenta um papel significante em iniciar e modular reações inflamatórias da pele.

Com o modelo é possível determinar in vitro as capacidades de várias molé- culas de modulação da produção de mediadores que se originam do meta- bolismo de ácido araquidônicos.

A prostaglandina PGBKFla é um metabólito estável de prostaciclina PGI2, um metabólito principal produzido pelo cerati- —nócito humano estimulado.

Um extrato de acetona de partes aéreas de avei- as colhidas antes do florescimento da espiga e suas frações foram evaliados na produção desta prostaglandina induzida no ceratinócito pelo ionóforo de cálcio A23187 (estimulando a cascata de ácido araquidônico). . Resultados: o extrato de acetona de acordo com o exemplo 1.a tem ativida- ' de significante (40% de inibição a 0,1 ug/ml), e a fração rica em flavonoide tem atividade significante com um máximo de 49% de inibição a 10 ug/ml.

Esta atividade anti-inflamatória é transmitida pelos flavonoides presentes no extrato, e em particular por iso-orientina-2"-O-arabinosila (55% de inibição a 10 po/ml).

O mecanismo de ação desta inibição da liberação de prostacicli- na foi parcialmente elucidado: a inibição direta in vitro de ciclo-oxigenase 2 pelo extrato de acetona (68% de inibição a 100 pg/ml) é observada, e ne- ' nhuma inibição de fosfolipase A2. : d. Atividade antioxidante A atividade antirradical de um extrato de partes aéreas de aveias preparado de acordo com o exemplo 1.a, é avaliada com o teste de DPPH* (2,2'-difenil-1-picrilidrazila). Este rápido teste fácil para aplicar é com base na medição das capacidades de captura de radical livre estável DPPH*. O radi- cal livre DPPH* que absorve a 517 nm, é reduzido em hidrazina correspon- dente quando ela reage com os doadores de próton: ROH + DPPIT RO" + DPPH, O IC50 corresponde à concentração do extrato causando 50% de redução na absorção de uma solução de metanol de DPPH* (C = 25 p- giml).

Sob estas condições, a vitamina E tem um IC50 de 6-10 pg/ml e o extrato de acetona de partes aéreas de aveias antes do florescimento um IC50 de 70 po/ml.

Este extrato, portanto, tem uma atividade antioxidante, e pode, portanto, ser usado em uma formulação dermocosmética como um agente de antienvelhecimento.

e. Atividade antimicrobiana O extrato de acetona preparado de acordo com o exemplo 1.a tem uma ação seletiva no germe implícito na acne, Propionibacterium acnes (vide tabela 1).

[sema e ' ; Tabela 1: As concentrações mínimas expressas como porcentagem (pe- so/peso) de um extrato de acetona de partes aéreas de aveias de acordo com o Exemplo 1.a de germes diferentes, Gram +, Gram - bactérias, levedu- * 5 rasefungos. : Exemplo 3: composições de acordo com a presente invenção

CREME EMOLIENTE PARA PELES ATÓPICAS Exirato de partes aéreas de aveias (Exemplo 1.9) 0,1-0,5% Óleo mineral 10-20% Óleode prímula da noite 2,5% Ciclometicona 5-8% Estearato de glicerida / estearato de PEG-100 5% Glicerina 5% Poliacrilamida & C 13-14 isoparafina & lauret- 73% PEG- 124% EDTA 0,2% Trietanolamina 0,1% Conservantes qs Água qsp 100%

LEITE HIDRATANTE PARA PELES ATÓPICAS Extrato de partes aéreas de aveias (Exemplo 1.a) 0,1-0,5% Óleo mineral 3% Vaselina 6-12% Dimeticona 2% —Óleodeprímulada noite 2,5% Estearato sorbitano / cocoato de sacarose 5%

Goma xantan 0,4% . Carbômero 0,2% , Trietanolamina 0,1% Glicerina 3% EDTA 0,2% Álcool beênico 1% Conservantes qs água qsp 100%

Claims (19)

1. REIVINDICAÇÕES . 1. Extrato de parte(s) aérea(s) de aveias excluindo os grãos, . caracterizado por 2 a 15% de flavonoides e 0,2 a 2% de avenacosídeos A e B.
2. 2. "Extrato, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por uma proporção de 5 para 10% de flavonoides, isovitexina-2"-O- arabinopiranosídeo e iso-orientina-2"-O-arabinopiranosídeo.
3. 3. "Extrato, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracteriza- do pelo fato de que ele é um extrato obtido em um solvente orgânico.
4. 4. "Extrato, deacordo com quaisquer das reivindicações de 1 a N 3, compreendendo menos do que 1 ppm de proteínas.
5. . 5. — Extrato, de acordo com quaisquer das reivindicações de 1 a 4, referida(s) parte(s) aérea(s) sendo colhida(s) antes do florescimento da espiga.
6. 6. “Método de preparação de um extrato de parte(s) aérea(s) de aveias, referida(s) parte(s) aérea(s) não compreendendo nenhum grão, caracterizado pelas seguintes etapas: - extração em um solvente orgânico selecionado do grupo formado por acetona, metiletilcetona, metilisobutilcetona, acetato de etila, um CrC, álcool e uma mistura em qualquer proporção miscível destes solven- tes, e - centrifugação e filtragem.
7. 7. “Método, de acordo com a reivindicação 6, referida(s) par- te(s) aérea(s) sendo colhida(s) antes do florescimento da espiga.
8. 8. Exiratode parte(s) aérea(S) de aveias, capaz de ser obtido pelo método como definido em quaisquer das reivindicações de 6 a 7.
9. 9. Composição dermatológica compreendendo como um ingre- diente ativo um extrato como definido em quaisquer das reivindicações de 1 a5e8eum ou mais excipientes dermatologicamente aceitáveis.
10. 10. Composição dermatológica, de acordo com a reivindicação 9, compreendendo 0,1 a 5% em peso de extrato como definido em quaisquer das reivindicações de 1 a 5 e 8, com base no peso total da composição.
11. 11. Composição cosmética compreendendo um extrato de co- . mo definido em quaisquer das reivindicações de 1 a 5€e 8, e um ou mais ex- cipientes cosmeticamente aceitáveis. '
12. 12. Composição cosmética, de acordo com a reivindicação 11, compreendendo 0,1 a 5% em peso de extrato como definido em quaisquer das reivindicações de 1 a 5 e 8, com base no peso total da composição.
13. 13. Extrato, de acordo com quaisquer das reivindicações de 1 a 5 e 8, para uso como um fármaco.
14. 14. Extrato, de acordo com quaisquer das reivindicações de 1 a S5e8para uso no tratamento de dermatoses inflamatórias. '
15. 15. Extrato, de acordo com a reivindicação 14, a dermatose in- . flamatória sendo dermatite atópica, psoríase ou eczema.
16. 16. Extrato, de acordo com quaisquer das reivindicações de 1 a 5 e 8 para uso no tratamento de acne.
17. 17. Extrato, de acordo com quaisquer das reivindicações de 1 a 5 e 8 para uso no tratamento de envelhecimento de pele.
18. 18. Extrato, de acordo com quaisquer das reivindicações de 1 a 5 e 8 para uso no tratamento de rosácea.
19. 19. Extrato, de acordo com quaisquer das reivindicações de 1 a 5e8 para uso no tratamento de peles reativas.