KR20090042073A - 자극완화 효능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 종래의 화장료 조성물에 인체에 안전한 특정 식물추출물을 배합하여 함유한 것으로서 보다 더 자세하게는 측백나무, 편백나무, 향나무 등과 같은 측백나무 과(科) 식물로부터 얻은 추출물들 중 한 가지를 필수 함유 성분으로 하고 여기에 백작약, 미치광이풀의 지하경, 감초, 대추, 줄풀로부터 얻은 식물추출물을 1종 이상을 더 함유하는 것을 특징으로 하는 것으로서 피부에 저자극성이어서 장기간 사용시에 안전하면서도 소양감(가려움증), 발진 등을 나타내는 알레르기성 피부나 아토피성 피부의 증상 개선에 대해 효과적인 자극완화 효능을 가진 특정의 복합식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 아토피성 피부염, 심마진 등의 알레르기성 피부에서 공통적으로 나타나는 심한 소양감과 발진 등의 자극 증상과 자극 유발 물질로 인하여 민감한 피부에 흔히 나타나는 피부 부작용(skin irritation) 등의 자극 증상을 피부면역상태의 조절을 통해 개선하는데 유효한 효과를 갖도록 종래의 화장료 조성물에 인체에 안전한 측백나무, 편백나무, 향나무 등과 같은 측백나무 과(科) 식물로부터 얻은 추출물들 중 한 가지를 필수 함유 성분으로 하고 여기에 백작약, 미치광이풀의 지하경, 감초, 대추, 줄풀 등으로부터 얻은 식물추출물을 1종 이상을 더 함유하는 것으로서 구성된 것이다.
이상과 같은 본 발명에 의한 자극완화 효능을 가진 특정의 식물추출 혼합물 과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물의 효과를 측정한 결과, 본 발명의 조성물은 피부면역조절을 유도하여 자극물질에 의한 피부 자극을 완화시켜 줄 뿐만 아니라, 소양증, 피부 발진을 동반하는 아토피성 피부염이나 피부발진, 심마진, 기타 알레르기성 피부질환의 증상 개선에 있어서도 종래 처방의 화장료 조성물에 비해 우수한 효과를 가진다.
자극완화, 소양증, 알레르기, 측백나무, 편백나무, 향나무, 백작약, 미치광이풀, 줄풀.

Description

자극완화 효능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물{Compositions of the specific herb extracted complex which has the function of alleviating the irritation and those of cosmetics for allergic skin containing it }
본 발명은 종래의 화장료 조성물에 인체에 안전한 특정 식물추출물을 배합하여 함유한 것으로서 보다 더 자세하게는 측백나무, 편백나무, 향나무 등과 같은 측백나무 과(科) 식물로부터 얻은 추출물들 중 한 가지를 필수 함유 성분으로 하고 여기에 백작약, 미치광이풀의 지하경, 대추, 줄풀로부터 얻은 식물추출물을 1종 이상을 더 함유하는 것을 특징으로 하는 것으로서 피부에 저자극성이어서 장기간 사용시에 안전하면서도 소양감(가려움증), 발진 등을 나타내는 알레르기성 피부나 아토피성 피부의 증상 개선에 대해 효과적인 자극완화 효능을 가진 특정의 복합식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물에 관한 것이다.
피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되는 신체 부위로서, 과도한 자외선이나 오염물질 등에 노출되면 홍반, 부종, 가려움증 등의 피부 자극 및 염증 반응이 유발된다. 이러한 스트레스 원에 의한 피부 트러블은 미관상 문제가 될 뿐만 아니라, 염증 반응 과정에서 생성되는 물질들이 부수적으로 피부의 색소 침착을 일으키고, 피부 탄력 섬유의 붕괴를 촉진시켜 피부 주름의 증가에까지 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 또한 최근 사회가 복잡해지고 산업과 문명의 발달로 인해 자연의 환경오염증가, 식생활의 변화, 스트레스의 가중 등으로 인해 피부 자극이 심해지고 그로 인해 알레르기성 피부 소유자가 매년 급격히 증가하고 있다. 특히 1980년에 들어 이러한 피부자극 요인으로 인해 발생된 아토피성 피부염을 비롯한 알레르기성 피부질환자의 수는 전체 인구의 1% 미만이었으나 2000년대에 이르러서는 5% 이상으로 급증하고 있는 것으로 보고되고 있으며, 잠재적인 환자까지 포함하면 10%가 넘는 것으로 추정하고 있다.
한편 최근 민감성 피부라고 느끼는 소비자가 증가하는 추세에 있다. 일반 소비자를 대상으로 한 의식조사에서 자신이 민감 피부라고 회답한 비율이 30-40%정도였으며, 이러한 비율은 계속 증가하는 추세이다. 이처럼 민감 피부라고 느끼는 비율이 증가하고 있는 요인은 오존층 파괴에 따른 자외선 조사량 증가, 생활공간의 건조화, 개인의 알레르기 체질, 스트레스, 화학유해물질의 증가 등이다. 한편으로 최근 소비자의 지향이 자연 친화적, 저자극으로 이행되고 있는 것도 민감 피부에 대한 의식을 향상시키는 요인이 되고 있는 것으로 추측되고 있으며, 이에 따라 화장품에 의한 피부자극을 완화시켜 주는 물질에 대한 관심이 높아지고 있다.
한편, 현대 사회에서는 남녀 노소를 불문하고 많은 사람들이 화장품을 사용하고 있는데, 일부 민감성 피부의 경우, 화장품의 사용으로 인해 피부 자극 및 염증이 유발되기도 한다. 일반적으로 화장품을 만들기 위해서는 다양한 원료들이 사 용되며 통상적으로는 수십 종의 원료를 사용하게 된다.특히, 화장료 성분 중 각질제거, 피부주름 개선 및 예방 등을 목적으로 하는 기능성 제품의 원료로 사용되는 레티노이드류나 과일산, 및 제형화를 위해 첨가되는 계면활성제들이 피부에 트러블을 일으키는 주된 물질들로써, 이들 물질을 최대한의 효능을 나타낼 수 있는 농도로 사용하는 데에는 많은 제한이 있었다. 이들 원료들은 피부 자극 검사를 통하여 그 안전성이 입증되었으나, 제품에 적용되는 경우 피부에 염증, 가려움증 및 알레르기 등의 자극을 일으킬 수 있다. 그러나, 이러한 자극 반응들이 모든 사람에게 일어나는 것은 아니며, 특정인에게만 일어날 수도 있다. 화장품의 사용에 의해 일어날 수 있는 피부자극에는 가려움 (itching), 따끔거림 (stinging) 및 화끈거림 (burning) 등의 자극감과 홍반 (erythema) 및 부종 (edema) 등이 있다. 무엇보다도 피부 자극이 일어나기 위해서는 우선 화장품에 의한 피부 침투가 일어나야 하며, 이들이 표피 혹은 진피 세포와 상호 작용을 함으로써 면역체계가 활성화되어 자극이 일어난다고 할 수 있다. 한편 이와 유사한 피부자극 현상으로서 접촉성 피부염은 자극성 접촉 피부염, 알레르기성 접촉 피부염, 감각성 자극 및 광독성 피부염 등이 있으나, 이들을 명확하게 구별하기는 어려우며 서로 혼합되어 일어나는 경우가 대부분이다.
이러한 피부 자극을 완화하기 위해서 피부 자극 유발 물질을 제거하는 방법 등 다양한 방법이 동원되었으나, 최근에는 피부 자극이 더 많이 유발될 수 있는 기능성 화장품 제조가 늘어나고 있어 화장품 제조업자들은 일반적으로 사용되는 자극 완화 물질을 제품에 적용시켜줌으로써 화장품 원료의 자극을 최소화시키기 위한 노 력을 진행하고 있다. 그러나, 기능성 원료 자체가 자극원으로 작용하는 경우가 허다하기 때문에 이와 같은 연구는 한계가 있다고 할 수 있다. 따라서, 기능성 원료의 효과를 그대로 유지하면서 화장품에 의한 부작용을 줄이고 피부자극을 완화할 수 있는 물질의 선별이 필요하다.
한편 알레르기성 피부란 알레르기 반응에 민감한 피부를 일컫는 바, 알레르기(Allergy)라 함은 이물질(항원;Allergen)에 대한 인체의 특이하고도 변형된 반응을 나타내는 생화학적 현상이며, 이때 방출된 물질이 증상을 일으키게 되면 이를 항원(Allergen)이라고 하고 그 결과 생긴 질환을 알레르기 질환이라고 한다. 알레르기의 발생원인 항원항체반응(Allergen-Antibody Reaction)의 결과로 나타나는 생체의 병적 과정이며 일반적으로 반응을 일으키는데 시간 및 보체관여의 유형에 따라 1 - 4형으로 분류되고 있다.
이 중 제1형은 아나필락시스(anaphylacsis;즉시형) 형태로 표적기관이 주로 소화장기, 피부 및 폐장으로 일반적인 증상은 위장관알레르기, 심마진(두드러기;은진, Urticaria), 위축성 피부염, 알레르기성 비염 및 기관지성 천식 등이 있다. 제1형의 병리기전은 항원이 비만세포와 호염기구의 표면에 부착되어 있는 면역 글로블린E(IgE) 항체에 접촉됨으로써 표적세포를 활성화시켜 히스타민, 세로토닌, 루코트리엔, PAF 등의 화학매체를 분비하여 혈관과 평활근을 수축시킨다고 알려져 있는데 이는 주로 제4형(지연형)과 복합되는 경우가 많다. 즉, 이 아나필라시스와 알레르기 반응은 비만 세포 등에서 일어나는 다양한 변화에 기인한다고 볼 수 있다.제1형 알레르기에 대한 면역반응 중 가장 심각한 형태인 아토피성 피부염은 심한 소양감을 가지는 재발성의 만성 피부염으로 종전에는 유아기에 주로 발생하여 태열이라고도 하였으며 주로 유전적으로나 잦은 샤워 등 생활 습관에 의해 각질층내의 세라마이드(ceramides)의 함량이 감소됨에 따라 발생하는 것으로서 각질층의 수분유지기능이 떨어짐에 따라 피부가 건조되어 각질이 쉽게 일어나며, 피부 장벽(skin barrier) 기능이 저하됨에 따라 자극유발물질(또는 allergen)이 각질층내로 침입하여 자극을 유발시키고 정상피부에서는 침입하기 어려운 항원 단백질이 침입함에 따라 피부 알레르기 등이 용이하게 발생하여 견디기 힘들만큼의 소양증 증상을 나타내기도 하는 것이다. 또한 환경오염 등에 의한 공기매개성 알레르기의 원인물질(allergen)의 증가와 건성 피부를 형성시키는 조건의 증가 등으로 인해 최근 수십년동안 아토피성 피부염에 대한 유병율이 증가하고 있다. 즉, 주변환경에 접하는 집먼지 진드기, 동물의 털, 꽃가루, 음식물 등과 같은 단백 항원에 대한 피부반응검사를 수행했을 때, 수분 내지 수시간내에 아나필락시스성 쇼크, 두드러기와 혈과부종, 호흡곤란, 코막힘과 콧물, 재채기, 결막충혈, 및 부종, 구토, 설사, 복통 등의 즉시형 반응을 피부, 호흡기, 눈 및 장 점막에서 잘 일으키고 이러한 특성들은 가족적으로 나타나는 특징이 있다. 임상학적으로 아토피성 피부염도 넓게는 피부면역반응의 일종으로 해석되고 있고 이러한 피부면역반응은 표피조직 내에 있는 랑겔한스 세포가 그 역할을 한다. 이 세포는 말초적 위치에서 항원제공세포 (antigen presenting cell)로서 기능을 한다. 즉, T림프구에 대한 항원을 제조 및 제공하는 역할을 담당한다. 항원의 제공은 랑겔한스 세포에 의해 발현되는 주요 조직적 합성복합체의 제2부류 분자들과 CD4+ 림프구의 T수용체 사이의 상호작용을 포 함한다. 면역 감작의 초기단계 동안에 항원은 랑겔한스 세포의 표면에 있는 복합체인 HLA-DR-면역원성 펩티드와 CD4+ 림프구의 T수용체 사이의 상호작용을 통해서 일어난다. 혼합림프상피배양물(MLEC)은 물질로 처리하거나 또는 처리함 없이 항원을 제공하는 동종성 상피세포에 의하여 유도된 림프구의 증식을 측정함으로써 피부의 면역학적 평형을 조절할 수 있는 물질의 면역조절 성질을 측정하는 것을 가능하게 하는 하나의 모델이 될 수 있다. 항 알레르기 활성은 각질화 세포(Keratinocyte)와 대식세포상에서 확인된다. 대식세포는 그것이 국소적인 염증반응 뿐만 아니라 그것들의 항원을 제공하는 능력 및 국소적인 면역성을 조절하는 대다수의 싸이토카인을 생성하는 능력을 통해서 면역반응까지도 조절하는 피부의 수준에서도 존재하는 세포이기 때문에 특히 유익한 세포이다. 이들 대식세포는 또한 필요에 따라 다양한 유형의 세포들(단핵세포,호중구,에오신 호성 백혈구 및 T림프구)을 고정시킬 수 있음으로서, 관심의 대상인 조직의 비특이적 방어력을 증가시킬수 있는 순환 시스템과 관련하여 포함된다. 또 최근에는 이러한 피부 면역학적으로 뿐만 아니라 피부장벽분야 연구의 진보로 아토피 피부가 피부장벽의 부실에 의한 피부내 수분의 손실에 따른 피부건조증이 아토피 피부염의 중요한 병태로서 인식되어졌다. 아토피 피부염환자의 피부는 정상인에 비하여 피부의 최외각층인 각질층의 각질세포들 사이를 채우고 있는 세라마이드(ceramide)의 양이 저하되어 보호기능을 하는 지질층막을 형성치 못하기 때문에 피부 내 수분을 유지하고 외부로부터 피부를 보호해주는 피부장벽기능에 문제가 있다. 피부장벽 부실로 인한 건조피부가 되면 외부의 자극원이나 알레르기 원인물질의 피부 내 침투가 용이하여 표피 내에 존재하는 케라티 노사이트에 반응하여 염증반응 관련 싸이토카인(예를 들면 TNE-alpha, Interleukin-1)등을 생성케 유도하여 비알레르기성 염증반응과 습진이 일어나거나 피부면역세포인 랑겔한스세포에 반응하여 항원-항체반응까지 유도되어 혈청증 IgE라는 항체의 양이 증가하고 피부에 담마진을 형성시키는데 피부장벽이 부실한 사람의 경우는 가려움 때문에 긁음으로써 습진화 될 수 있다. 최근에는 IgE가 직접 습진반응을 일으킬 수도 있다고 알려졌다. 즉 알러젠(집먼지,진드기등)과 IgE의 항원-항체반응이 비만세포에서 사이토카인을 생성. 방출케 하고 림프구와 호산구의 침윤을 수반한 습진반응을 일으킨다. 이런 의미에서 볼 때 아토피성 피부염, 피부 소양감, 알레르기성 건선, 두드러기, 피부 발적 등 알레르기성 피부 자극은 피부면역체계에 의한 알레르기성 피부병 증세로서 그 공통적인 증상이 심한 피부자극이라 할 수 있는 바, 이들 증상의 치료 또는 예방을 위해 다양한 방법들이 시도되고 있다. 현재 아토피 피부에 나타나는 소양감을 개선시키기 위해 피부장벽을 복구하는 세라마이드, 필수지방산과 콜레스테롤의 지질복합체를 도포 등의 방법으로 적용하거나(한국특허 공개 2000 -0044622) 가려움을 예방키 위한 항히스타민제의 경구복용, 항염증등을 위한 스테로이드제제의 적용등이 일반적으로 사용되고 있고 필수지방산인 감마리놀렌산의 복용 및 적용(에포감, 한독약품, 한국 특허공개2000- 004633), 피부면역 상태개선을 위한 올리고당(한국 특허공개2000-0029754), 은행잎추출물(한국 특허 공개1999 -0076619) 등의 적용 등이 특허로 나와 있으나 아토피성 피부를 포함한 알레르기성 피부의 제 증상 개선을 위한 보다 근본적인 접근은 면역적 조절이라 할 수 있다. 왜냐하면 이러한 면역 상태를 조절하지 않고는 지속 적인 가려움을 동반한 알레르기적 반응은 피부상태를 또 악화시킬 수 있기 때문이다. 그러나 현재 이러한 자극 완화나 개선을 위해 면역조절제로 사용되는 의약품은 Cyclosporin, FK506등이 이용되고 있으나 아토피등의 피부국소적 치료제로는 비용등의 한계로 인하여 이용되지 못하고 있고 피부외용제로서 하이드로코티손 (hydrocortisone)과 같은 스테로이드 제품이 여전히 대부분 이용되고 있다. 이러한 방법들은 급진적인 면역학의 발전으로 알레르기성 피부 질환의 구명 및 치료에 있어서 어느 정도 성과를 거두고 있으나, 효과적인 측면이나 피부안전성 측면에 있어서 아직까지 몇 가지 한계를 가지고 있다. 즉, 알레르기성 피부질환이나 아토피 피부염용 외용제에 사용되는 스테로이드제의 사용은 표피의 성장억제나 부작용 등의 역효과를 유발할 수 있다고 보고되고 있으며, 우레아 퍼록사이드 등은 피부의 자극성과 또다른 접촉성 피부염의 우려가, 항히스타민제와 같은 항생물질은 내균성의 발생과 광과민 작용의 가능성이 있다고 알려져 있다. 또한 공지의 상기생, 합환피, 창이자, 맥아, 쑥, 프로폴리스 등의 천연 추출물을 이용한 아토피에 유효한 화장료 조성물은 심한 소양증상(가려움증)이 효과적으로 해소되지 않아 계속 손으로 긁어대므로 홍반성 발진이나 태선화 등으로 그 증세가 악화되는 등 효과에 있어서 미미하거나 유효한 효과는 인정되는 반면 오히려 알레르기 과민반응을 보이는 경우도 있어 그 사용 범위가 다소 한정될 수 있는 문제점을 가지고 있다. 또한 세라마이드(ceramides)에 의한 피부 장벽의 보습 물질 강화로는 아토피 피부의 가려움증 등의 자극을 해소하기엔 역부족이다. 그외에 일반적인 화장품의 원료로 제품에 함유되는 계면활성제, 향료, 알코올 등은 보호 능력이 약한 피부에 쉽게 흡수 되어 피부 자극(skin irritation) 또는 피부 알레르기(skin allergy) 반응을 오히려 유발시키고 있다. 결국 이러한 문제를 해결하기 위해서 피부면역조절을 통한 피부 자극을 해소해야하는 보다 근본적인 대안이 필요하게 되었다.
한편 각종 스트레스 원에 의한 피부 자극 및 염증을 감소시키고, 화장품 사용으로 인한 부작용을 줄이기 위해서는 항염증 및 피부자극 완화 효능이 있는 물질을 개발하는 것이 절실히 요구된다. 이에, 피부 자극 및 염증의 생성을 줄일 수 있는 방법에 관한 연구가 활발히 진행되고 있다. 지금까지의 연구 결과로는 면역조절 즉, 신경세포에서 분비되는 물질 P 등의 신경 펩티드 또는 조직이나 혈장에서 스트레스에 의해서 활성화되는 브라디키닌과 같은 키닌류(kinins) 등에 의해, 피부세포와 면역세포에서 다양한 사이토카인(cytokine; 특히, IL-6 및 IL-8) 및 PGE2 등이 분비됨으로써, 염증이 형성된다는 것이 알려져 있고, 이에 따라, 물질 P를 비롯한 신경펩티드 길항제, 브라디키닌 길항제 등이 제시되어 왔으나, 뚜렷한 효과를 나타내지는 못하였다.
본 발명은 이러한 상기 문제점을 고려하여 안출한 것으로서 피부 자극 및 염증 생성에 막대한 영향을 주는 자외선 및 기타 환경적 스트레스에 의한 피부 자극을 효과적으로 통제하여, 피부 자극을 완화하고, 염증이 생성되는 것을 방지 또는 완화시키기 위해, 피부에서 다양한 자극 매개 인자들에 의해 증가되는 IL-6, IL-8 및 PGE2(COX-2에 의해 생성되는 프로스타글란딘)를 조절하는 원료를 찾고자 연구하였다. 이에, 활성성분으로 사용하기 위한 수다한 종류의 천연물을 검색하였고, 그 결과, 본 발명에 의한 특정의 식물추출 혼합물이 피부 자극 및 염증의 생성에 관여하는 IL-6, IL-8 및 PGE2를 모두 억제하는 효능이 있으며, 화장료에 포함된 레티놀 등에 의한 피부 자극을 완화시키는 효능도 있음을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다. 또한 장기간 사용해도 인체 안전성이 높고 면역조절을 통해 아토피 피부염, 소양감, 발진, 담마진 등의 알레르기성 피부질환의 증상 완화에 대해서도 유효한 효과가 있는 것을 알게 되었다. 또한 본 발명의 식물추출 혼합물이 그 특정 식물들의 단일 추출물에 비해 보다 더 유효한 효과를 나타낸다는 사실을 알게 되었다. 뿐만 아니라 본 발명의 자극완화기능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물에 공지의 세라마이드를 첨가하면 아토피의 원인과 증상으로 알려져 있는 각질층의 세포간지질의 감소에 따른 각질층의 수분유지기능 저하와 피부 건조, 피부장벽(skin barrier) 기능 저하에 대해 보습 및 보호 기능을 강화시킬 수도 있다는 것도 알게 되었다. 그리하여 이 특정 식물추출 혼합물을 종래의 화장료 조성물에 함유함으로써 장기간 사용시에 안전하면서도 효과적인 자극완화 효능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물을 개발하게 된바, 이를 본 발명의 실시예와 함께 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 외부의 피부자극 요인에 의한 피부 자극 뿐만 아니라, 아토피성 피부염, 심마진 등의 알레르기성 피부질환에서 공통적으로 나타나는 심한 소양감과 발진 등의 자극 증상과 자극 유발 물질로 인하여 민감한 피부에 흔히 나타나는 피 부 부작용(skin irritation) 등의 자극을 피부면역상태의 조절을 통해 개선하는데 유효한 효과를 갖도록 종래의 화장료 조성물에 인체에 안전한 측백나무, 편백나무, 향나무 등과 같은 측백나무 과(科) 식물로부터 얻은 추출물들 중 한 가지를 필수 함유 성분으로 하고 여기에 백작약, 미치광이풀의 지하경, 감초, 대추, 줄풀 등으로부터 얻은 식물추출물을 1종 이상을 더 함유하는 것으로서 구성된 것이다.
이는 상기에서 언급한 바와 같이 자극완화용 화장료 조성물과 관련하여 과거에는 소양감을 예방키 위한 항 히스타민제의 경구복용, 항 염증용 스테로이드 제제의 적용 등이 일반적으로 사용되고 있고 필수지방산인 감마리놀렌산의 복용 및 적용, 피부면역상태 개선을 위한 올리고당, 은행잎추출물 등의 적용이 이용되고 있으나, 본 발명은 안정성과 실효성을 지닌 피부면역조절을 통한 자극완화 성분의 개발과 함께 피부면역체계와 그 조절에 관한 오랜 기간 동안의 메카니즘 연구 결과, 피부 자극 및 염증의 생성에 관여하는 IL-6, IL-8 및 PGE2를 모두 억제하는 효능이 있으며, 화장료에 포함된 레티놀 등에 의한 피부 자극을 완화시키는 효능을 가질 뿐만 아니라 알레르기성 피부 질환자의 자극 증상에도 효과적인 특정의 식물추출 혼합물을 함유한 화장료 조성물로 구성되었기 때문에 보다 탁월한 자극완화 또는 항알레르기 효과를 나타낼 것으로 본 발명의 자극완화기능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유하는 화장료 조성물에서 기대할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 식물들의 인체에 미치는 작용에 대해 이미 알려진 사실을 기초로 간략히 설명하면 다음과 같다.
측백(側柏)나무는 측백나무 과의 상록교목으로서 학명은 Thuja orientalis, 높이 25m, 지름 1m에 달하는 관상목으로 작은 가지가 수직으로 벌어진다. 잎은 비늘같이 생기고 마주나며 좌우의 잎과 가운데 달린 잎의 크기가 비슷하게 생겼기 때문에 세 잎이 W자형을 이룬다. 주로 한국과 중국에 분포하며, 어린 잎은 측백엽, 근피는 백근백피, 가지는 백지절, 열매는 백자인, 그 나무에서 생기는 수지(resin)는 백지라고 하며 약용한다. 본 발명에서는 잎을 이용한다.
편백(扁柏)나무는 측백나무 과의 상록교목으로서 학명은 Chamaecyparis obtusa, 높이 40m, 지름 2m로 노송나무라고도 한다. 가지는 수평으로 퍼져서 원뿔형의 수관을 이룬다. 수피는 적갈색의 섬유성이며 세로로 얇게 벗겨진다. 잎은 마주나고 두꺼우며 비늘같이 작고 뒷면의 기공조선은 Y자형이다. 일본 특산종이며 재질이 좋으므로 한국에서는 남부지방에서 조림수종으로 재배한다. 최근 이 나무로부터 정유를 추출하여 탈취제, 항균제 등 다양한 용도로 사용되고 있다. 본 발명에서는 잎을 이용한다.
향나무는 측백나무 과의 상록교목으로서 학명은 Juniperus Chinensis L.이며 원산지는 한국이며 일본과 중국에서도 분포한다. 높이 20m, 지름 3.5m에 달하며 잎은 나무가 어릴 때 침엽이지만 큰 나무가 되면 모두 인엽으로 된다. 변종과 교잡종이 많으며 잎은 회엽이라 하여 약용, 특히 살충제 등으로 줄기와 뿌리에는 정유가 함유되어 향 재료로 사용된다. 본 발명에서는 어린 잎을 이용한다.
백작약(白灼藥)은 작약과의 다년초로 산지의 숲에 나는데 마디가 있는 뿌리를 이용하며, 피부소독 작용이 강하여 바이러스 침투를 막아주며 노화된 각질 제거에 효과적이다. 뿌리를 진통·진경·부인병에 사용한다. 한국·일본·중국·사할린 섬 등지에 분포한다. 본 발명에서는 뿌리를 이용한다.
미치광이풀은 쌍떡잎식물로서 가지 과의 여러해살이풀이며, 학명은 Scopolia japonica이고 주로 한국·일본에 분포한다. 높이가 30∼60cm이며, 광대작약·미친풀·미치광이라고도 한다. 잎은 어긋나고 긴 타원 모양이며 가장자리는 대부분 밋밋하고 끝이 뾰족하며 잎자루가 있다. 열매는 삭과이고 둥글며 꽃받침에 싸이고 다 익으면 뚜껑이 열리듯이 갈라져서 종자가 나온다. 뿌리줄기는 알칼로이드인 히오시아민과 스코폴라민이 들어 있어 독성이 강하고 진통제와 진경제의 원료로 쓰인다. 한방에서는 뿌리줄기를 동낭탕이라는 약재로 쓰는데, 진통 효과와 진정 효과가 있고 알코올 중독으로 인한 수전증을 제거하며 종기를 가라앉히고 옴이나 버짐에도 효과가 있지만, 중독될 수도 있으므로 주의해서 사용해야 한다. 본 발명에서는 지하경(땅속줄기)을 이용한다.
대추는 열매의 주성분은 당(과당, 서당, 포도당, 람노즈)이고, 유기산(싱아산, 사과산, 포도주산, 호박산, 글리콜산)과 단백질(치스틴, 리진, 아르기닌 등 14종), 비타민C, P와 무기염류(철, 코발트, 인, 요드) 등이 들어있다. 열매 추출액은 이뇨작용이 있으며 고혈압환자에게 혈압강하 효과가 있다. 대추는 항알레르기 성분이 있어서 기관지천식을 비롯한 내분비질병, 정신병 등에 좋다. 예로부터 감초와 함께 대추는 해독약, 완화약으로 써 왔고, 신경안정제로, 불면증을 치료하고, 건위, 해독제로 사용되었다. 강장약, 기침, 곪은 데, 온몸이 아플 때, 과민성자반증 등에도 효력이 있다. 본 발명에서는 열매를 이용한다.
줄풀은 벼과에 속하고 고장초 또는 고미라는 속명을 가지고 있으며 강가나 연못 방죽에 자라는 1년초 또는 다년초이다. 줄풀의 잎, 뿌리, 줄기에는 단백질과 정유, 회분 그리고 미량원소가 많이 들어 있어서 줄풀을 그늘에 말렸다가 차로 끓여 마시거나 발효시켜 먹으면 여러 질병에 두루 뛰어난 효력을 발휘한다. 당뇨병, 고혈압, 중풍, 심장병, 변비, 비만, 동맥경화, 관절염, 부종, 비만증, 면역강화, 피부병, 위염, 위궤양 등 갖가지 질병에 뛰어난 치료효과가 있을 뿐 아니라 몸 안에 있는 독을 풀어주고 대장과 위를 튼튼하게 한다. 줄풀에는 갖가지 미네랄이 풍부하게 들어있을 뿐 아니라 유기 게르마늄이 가장 많이 들어있기도 하다. 또한 줄풀에는 사포닌, 비타민 B1, 비타민 B16, 칼슘, 인, 철분, 섬유질, 탄수화물 및 지방이 들어있다. 특히 줄풀을 달인 물의 경우 오랫동안 방치하여 두어도 변질이 없는 바, 본 발명에서는 방부의 기능을 하는 화학적 성분을 포함하지 않는 대신 줄풀의 추출물을 포함함으로써 방부의 효능이 우수하다. 이와 같은 효능을 갖는 줄풀 추출물은 줄풀의 뿌리와 잎으로부터 얻어지는 것으로서 알레르기성 체질을 개선하기 위하여서는 바이러스나 세균을 먹어 치우는 백혈구의 작용을 활발하게 하는 것이 제일이다. 줄풀은 부신피질 호르몬을 왕성하게 하여 백혈구를 활발하게 한다. 하루에 7~8회 음용을 하므로 건강 증진에 효과를 높인다. 최근 화제인 알레르기성 비염 등은 자율신경의 실조도 영향을 가하고 있으므로 40도 정도의 미지근한 줄탕으로 15분 정도 가슴 밑 요탕(腰湯)을 하면 대단히 효과가 높다.
본 발명의 식물 추출은 먼저 이에 사용되는 각 식물들의 잎이나 줄기(껍질), 뿌리를 종래의 동결건조 방법으로 건조시키고 미세 분말화 한 후 공지된 통상의 용매 추출 방법으로 하되, 추출 용매는 메탄올, 에탄올, 아세톤 등의 극성 용매 또는 이것들과 글리세린(Glycerin), 프로필렌 글리콜(Propylene Glycol), 부틸렌 글리콜(Butylene Glycol) 등과 같은 폴리올류(Polyols)의 혼합 용액이며, 구체적인 방법으로 예를 들면, 건조된 식물의 분말에 중량비로 5∼10배 량의 상기 추출 용매를 가하여 1∼7일간 실온에서 침적 추출하거나 1∼5시간동안 1기압하 섭씨 50℃까지 가온 추출하여 식물추출물을 얻는다.
본 발명에 있어서 자극완화기능을 가진 특정의 식물추출 혼합물을 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물의 경우, 화장료 중의 상기 식물추출혼합물은 측백나무, 편백나무, 향나무 등과 같은 측백나무 과(科) 식물로부터 얻은 추출물들 중 한 가지를 필수 함유 성분으로 하고 여기에 백작약, 미치광이풀의 지하경, 대추, 줄풀로부터 얻은 식물추출물을 1종 이상을 더 함유하는 것으로서 그것의 총배합량은 전체의 0.5∼50.0 중량%, 특히 0.5∼20.0 중량%로 하는 것이 바람직하다. 상기 함량 미만일 경우에는 기대효과가 나타나기 어렵고, 상기 함량을 초과하는 경우에는 효과가 더 이상 증가하지 않는다. 본 발명의 화장료 조성물은 상기와 같은 특정의 식물추출 혼합물을 유효 성분으로 포함하는 조성물로서 제조되어, 피부 자극성이 큰 화장료 조성물을 피부에 적용하기 전 또는 적용한 후에 적용될 수 있다. 또한, 본 발명에 의한 특정의 식물추출 혼합물을 피부 자극성이 큰 화장료 조성물에 추가적으로 첨가시켜 피부에 적용될 수도 있다. 여기서 피부 자극성이 큰 화장료 조성물은 젖산(lactic acid), 글리콜산 (glycolic acid), 살리실산 (salicylic acid) 또는 레틴산(retinoic acid) 등을 함유한 화장료이다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 특정의 식물추출 혼합물 이외에 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.
본 발명의 조성물은 동 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 사용될 때에는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜, 오일, 글리세롤 지방족 에스 테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다. 본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
한편 본 발명에 사용되는 식물들은 오래전부터 동양에서는 민간 요법 또는 한방에서 사용해 오던 재료로서 일정 함유량 내에서 화장료로 사용시 인체에 대한 안전성이 확인되어 있어서,피부 및 점막에 대한 자극은 거의 없는 것으로 알려져 있다.
본 발명에 사용되는 특정의 식물추출혼합물의 제조 방법을 실시예 1∼11를 통해 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
<실시예 1> - 본 발명에 사용된 측백나무 추출물의 제조방법
정선된 국산 측백나무 껍질을 건조약재 기준으로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,510g의 농축물을 얻었다.
<실시예 2> - 본 발명에 사용된 편백나무 추출물의 제조방법
정선된 국산 편백나무 껍질을 건조약재 기준으로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,450g의 농축물을 얻었다.
<실시예 3> - 본 발명에 사용된 향나무 추출물의 제조방법
정선된 국산 향나무 껍질을 건조약재 기준으로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,480g의 농축물을 얻었다.
<실시예 4> - 본 발명에 사용된 백작약 추출물의 제조방법
정선된 국산 백작약 껍질을 건조약재 기준으로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,550g의 농축물을 얻었다.
<실시예 5> - 본 발명에 사용된 (미치광이풀)지하경 추출물의 제조방법
정선된 국산 미치광이풀의 지하경을 건조약재 기준으로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,510g의 농축물을 얻었다. .
<실시예 6> - 본 발명에 사용된 대추 추출물의 제조방법
정선된 국산 대추 열매 속을 건조약재 기준으로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,580g의 농축물을 얻었다.
<실시예 7> - 본 발명에 사용된 줄풀 추출물의 제조방법
정선된 국산 줄풀 잎을 건조약재 기준으로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,500g의 농축물을 얻었다.
<실시예 8> - 본 발명에 사용된 특정의 식물추출혼합물(I)의 제조방법
정선된 국산 측백나무 잎과 백작약 껍질을 건조약재 기준으로 4 : 1 비율로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,530g의 농축물을 얻었다.
<실시예 9> - 본 사용된 특정의 식물추출혼합물(II)의 제조방법
정선된 국산 편백나무 잎과 대추 열매 속을 건조약재 기준으로 4 : 1 비율로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,510g의 농축물을 얻었다.
<실시예 10> - 본 발명에 사용된 특정의 식물추출혼합물(III)의 제조방법
정선된 국산 향나무 잎과 줄풀 잎을 건조약재 기준으로 4 : 1 비율로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50 ℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,490g의 농축물을 얻었다.
<실시예 11> - 본 발명에 사용된 특정의 식물추출혼합물(IV)의 제조방법
정선된 국산 편백나무 잎과 줄풀 잎을 건조약재 기준으로 4 : 1 비율로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,490g의 농축물을 얻었다.
<실시예 12> - 본 발명에 사용된 특정의 식물추출혼합물(V)의 제조방법
정선된 국산 편백나무 잎과 미치광이풀의 지하경을 건조약재 기준으로 4 : 1 비율로 500g 분쇄한 것을 부틸렌 글리콜과 에탄올을 1:3으로 혼합한 용액 4,000㎖에 가하여 50℃에서 5시간 가온, 추출하고 300메쉬 여과포로 여과 및 농축하여 추출물 1,480g의 농축물을 얻었다.
<실시예1∼12>의 알레르기성 피부용 식물추출물과 이를 함유하는 화장료 조성물 중 크림 제형(처방예1∼12)과 종래의 화장료 조성물(대조용 크림제형; 처방예13)을 표 1을 통해 나타내면 아래와 같다. 그리고 이들 크림들은 처방예 1∼13에 따라서 유성성분과 수성성분을 75℃로 각각 가열한 다음 크림제조용 혼합기에서 균질화용 믹서(homogenizer)를 이용하여 유화시킨 다음 탈기, 여과, 냉각하여 통상의 방법대로 제조하여 얻었다.
또한 본 발명의 자극완화기능을 가진 특정의 식물추출혼합물을 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물 중 기타 제형의 조성물을 구체적인 처방예 14∼19 을 표 2를 통해 나타내면 아래와 같다.
<처방예 1∼13> - 크림(Cream)
원료명 처방 1 처방 2 처방 3 처방 4 처방 5 처방 6 처방 7 처방 8 처방 9 처방 10 처방 11 처방 12 처방 13
스테아린산 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
스테아릴 알코올 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0
1,3-BG 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
모노스테아린산글리콜 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0
수산화칼륨 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
정제수 77.9 77.9 77.9 77.9 77.9 77.9 77.9 77.9 77.9 77.9 77.9 79.9 79.9
방부제 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
레시틴 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
콜레스테롤 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
실시예1의 식물추출물 2.0 - - - - - - - - - - - -
실시예2의 식물추출물 - 2.0 - - - - - - - - - - -
실시예3의 식물추출물 - - 2.0 - - - - - - - - - -
실시예4의 식물추출물 - - - 2.0 - - - - - - - - -
실시예5의 식물추출물 - - - - 2.0 - - - - - - - -
실시예6의 식물추출물 - - - - - 2.0 - - - - - - -
실시예7의 식물추출물 - - - - - - 2.0 - - - - - -
실시예8의 식물추출물 - - - - - - - 2.0 - - - - -
실시예9의 식물추출물 - - - - - - - - 2.0 - - - -
실시예10의 식물추출물 - - - - - - - - 2.0 - - -
실시예11의 식물추출물 - - - - - - - - - 2.0 - -
실시예12의 식물추출물 - - - - - - - - - - 2.0 -
소 계 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100.0 100.0
<처방예 14> - 화장수(Skin Toner)
성 분 명 함 량 (중량%)
글리세린 1,3-부틸렌글리콜 에탄올 폴리옥시에틸렌노닐페닐에테르 향료 실시예9의 식물추출물 방부제 정제수 5.0 3.0 5.0 0.5 0.2 2.0 적량 to 100
<처방예 15> - 로션(Milk Lotion)
성 분 명 함 량 (중량%)
스테아린산 바셀린 스쿠알란 유동파라핀 모노올레인산 폴리옥시에틸렌 소르비탄(6 E.O) 글리세린 프로필렌글리콜 트리에탄올아민 향료 방부제 산화방지제 실시예10의 식물추출물 정제수 1.0 2.0 3.0 5.0 2.0 3.0 4.0 1.0 0.3 적량 적량 2.0 to 100
<처방예 16> - 비누(Soap)
성 분 명 함 량 (중량%)
야자유 지방산 이산화티탄 에틸렌아민 테트라초산나트륨 향료 색소 글리세린 산화방지제 실시예11의 식물추출물 비누칩(베이스) 1.0 0.3 0.1 0.5 적량 1.0 적량 2.0 to 100
<처방예 17> - 샴푸(Shampoo)
성 분 명 함 량 (중량%)
Sodium laureth sulfate(세정제) Sodium lauryl sulfate(세정제) Cocamidopropyl betaine(세정제) Lauramide DEA(기포안정제) Propyl glycol(보습제) Benzophenone-9(퇴색방지제) Methylchloroisothiazolinone(방부제) Sodium chloride(점도조절제) Fragrance(향료) Disodium EDTA(금속이온봉쇄제) 실시예12의 식물추출물 Citric acid(pH조절제) Deionized water(정제수) 9.0 6.0 1.2 5.0 3.5 0.05 0.01 0.1 0.5 0.01 2.0 적량 to 100
<처방예 18> - 세안액(Cleansing Water)
성 분 명 함 량 (중량%)
Polysorbate 80(세정제) Polysorbate 60(세정제) PEG-8(보습제) Propyl gycol(보습제) SD Alcohol(알코올) Fragrance(향료) Disodium EDTA(금속이온봉쇄제) Methyl paraben(방부제) 실시예9의 식물추출물 실시예10의 식물추출물 FD&C Blue No.1(색소) Deionized water(정제수) 9.0 0.5 7.0 5.0 12.0 적량 0.01 0.1 1.0 1.0 적량 to 100
<처방예 19> - 연고(Ointment)
성 분 명 함 량 (중량%)
스테아린산 바셀린 밀납 트리글리세라이드 라놀린 유동파라핀 모노올레인산 폴리옥시에틸렌 소르비탄(6 E.O) 글리세린 프로필렌글리콜 트리에탄올아민 향료 방부제 산화방지제 실시예11의 식물추출물 실시예12의 식물추출물 정제수 1.0 2.0 1.0 4.0 2.0 5.0 2.0 3.0 4.0 1.0 0.3 적량 적량 1.5 0.5 to 100
실험예 1; 자극물질 젖산에 의한 세포자극의 완화 효능 시험
본 발명의 특정의 식물추출 혼합물이 피부자극 완화 효능을 가지는지 확인하기 위해 젖산(lactic acid)에 의한 세포자극을 완화하는지의 확인실험을 in-vitro방식으로 수행하였다. 인간 피부 세포인 섬유아세포(한국세포주은행)를 T-75 플라스크 (Falcon, 미합중국)에서 80%정도 성장할 때까지 배양하였다. 배양된 세포를 다시 96-웰 플레이트 (Falcon, 미합중국)의 각 웰에 3 × 104 세포수/웰이 되게 옮겨 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 현미경을 통해 세포가 완전히 부착되어 잘 자라는지 여부를 확인한 뒤 피부 세포 자극원인 젖산을 이용하여 실험을 진행하였다. 이때 젖산은 피부 세포를 모두 사멸시키는 농도인 0.2%로 사용하였다. 즉, 96웰-플레이트의 각 웰에 0.2% 젖산이 함유된 DMEM (시그마, 미합중국) 배지를 200 ㎕씩 첨가하고, 실시예 1과 실시예 7의 특정의 단일 식물추출물, 그리고 실시예 9∼12에서 얻은 특정의 식물추출 혼합물을 100, 200, 500 및 1000 ㎍/㎖농도로 조절하여 첨가하였다. 이때, 젖산과 식물추출 혼합물을 모두 첨가하지 않은 것을 대조군으로, 젖산만 첨가한 것을 비교군으로 사용하였다. 시험 물질을 첨가하고 12시간 경과 후 세포의 생존율을 비교하기 위하여 MTT ([3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) 시약을 각 웰에 10 ㎕씩 첨가하였다. MTT 시약을 첨가하여 4시간이 경과된 후에 엘라이저 리더 (ELISA Reader)를 이용하여 570 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다. 측정된 흡광도 값을 이용해 하기 수학식 1에 따라 세포 생존율을 계산하여 표 3으로 나타내었다.
*수학식 1; 세포 생존율(%) = [(대조군 흡광도-시험 물질 흡광도)/ 대조군 흡광도] ×100
<세포자극의 완화효과; 세포생존율(%)>
추출물 농도 세포 생존율(%)
실시예1 실시예7 실시예9 실시예10 실시예11 실시예12 비교군 대조군
100㎍/㎖ 30.2 32.1 42.4 41.8 43.5 44.4 0.0 100.0
200 44.6 45.6 56.3 55.0 56.0 58.8 0.0 100.0
500 60.8 61.0 73.7 71.8 74.2 77.4 0.0 100.0
1,000 76.6 78.2 89.2 87.8 88.7 90.3 0.0 100.0
상기 표 3에서 보는 바와 같이, 특정의 식물추출 혼합물이 단일 식물추출물이나 비교군에 비해 처리 농도에 의존적으로 세포의 생존율이 훨씬 높았다.
실험예 2; 피부 자극 완화 효과 - 인체 피부 첩포 시험
본 발명의 특정의 식물추출 혼합물을 인체 피부에 직접 적용하였을 때, 피부 자극 완화 효과를 가지는지 확인하기 위해 인체 피부 첩포 시험을 하였다. 과거력상 피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알레르기 증상이 없는 20-30대 여성 20명을 대상으로 하였다. 표 1과 같은 크림 제형에 피부 자극 물질인 젖산을 자극원으로서 5.0% 첨가하고, 실시예 2에서 얻은 특정의 식물추출물 2%와 실시예 12에서 얻은 특정의 식물추출 혼합물 2%를 각각 첨가하여 시험물질로 사용하였다. 이 때 젖산 및 이들 식물 추출물을 모두 첨가하지 않은 것을 대조예로 사용하였고, 젖산만 첨가한 것을 비교예로 사용하였다. 우선 시험 부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시켰다. 준비된 시험물질을 15 ㎍씩 핀 챔버(Finn chamber,100 ×10,EPITEST,핀란드국) 내에 적하시킨 후 시험 대상자의 전박(forearm) 안쪽 부위에 밀폐 첩포하였다. 24시간 동안 첩포하고, 첩포를 제거한 후 표시펜으로 시험부위를 표시하였다. 각각 1시간 및 24시간 후(첩포 제거 후 1시간, 24시간 후 = 첩포 부착 포함 24시간, 48시간) 확대경 (8MC-150, DAZOR, 미합중국)을 이용하여 시험 부위의 홍반 및 부종 유무를 관찰하였다. 피부반응은 국제접촉피부염연구회(ICDRG: International Contact Dermatitis Research Group)의 규정 (표 4)에 따라 판정하였으며, 하기 수학식 2에 의하여 평균 피부 반응도를 계산하고 그 결과를 표 5에 나타내었다.
<피부반응의 평가기준 및 점수>
기 호 점 수 평가 기준
0.0 무반응
± 0.5 희미한 또는 가벼운 홍반
1.0 경계가 뚜렷하나 약한 홍반, 부종 및 구진
++ 2.0 뚜렷한 홍반, 구진 및 소수포
+++ 3.0 심한 홍반 및 대수포, 가피형성
*수학식 2; 평균 피부 반응도 (mean score) = {( 점수 × 반응 피검자수) / (최대 점수 × 총피검자수)} ×100
<평균 피부 반응도>
시험 물질 24시간 48시간 평균 피부반응도 (n=20)
± + ++ ± + ++
대조예 3 - - - - - 1.25
비교예 10 2 - 2 1 - 7.50
실시예2 7 2 - 1 1 - 5.83
실시예12 5 1 - 1 - - 3.33
상기 표 5에서 알 수 있듯이, 젖산에 의해 유발된 피부자극에 대해 특정의 식물추출물 또는 그 혼합물을 함유하는 제형(실시예 2와 12)은 피부 자극 완화효과를 나타내었으며, 특히 특정의 식물추출 혼합물을 함유하는 제형(실시예 12)의 피부자극의 완화 효과가 보다 더 우수하였다.
실험예 3: 특정의 식물추출 혼합물의 신경교세포주, U373 MG에서 물질 P 자극에 의한 IL-6 생합성 억제 효능 시험.
사람의 신경교세포주 U373 MG를 10%의 우태아 혈청(fetal bovine serum, FBS)이 함유된 MEM(Minimum Essential Media, GIBCO BRL, Life Technologues社) 배지로 96-웰 시험 플레이트의 각 웰에 2×10 4 개씩 세포를 부착시켜 24시간 동안 배양하였다. 배지를 제거한 후, 인산염완충용액(phosphate buffered saline, PBS) 200㎕로 1회 세척하고, FBS가 함유되지 않은 MEM 배지 200㎕에 평가하고자 하는 참고예 1~3의 추출물을 하기 표 6에 나타낸 농도만큼씩 처리하여 5시간 동안 배양시켰다. 배양액 25㎕를 취하여 IL-6 ELISA(Pharmingen社, OptEIA Human IL-6set 사용)를 통해 물질 P에 의한 IL-6 유리 억제 효과를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
<물질 P 자극에 의한 IL-6 생합성의 억제 정도>
성 분 추출물농도 (ppm) IL-6 (pg/100000cells) %억제율(*)
(-)기질(Substance) P+부형제(Vehicle) - 10.5 ±32 -
(+)SP(1μM)+부형제(Vehicle) - 981.4 ±61 -
(+)SP(1μM)+식물추출물(실시예 2) 100ppm 658.2 ±37 32.9
(+)SP(1μM)+식물추출혼합물(실시예 11) 100ppm 498.3 ±40 49.2
(+)SP(1μM)+식물추출혼합물(실시예 12) 100ppm 503.0 ±41 48.7
* Substance P를 처리하지 않은 U373 세포와 Substance P를 처리한 U373 세포의 IL-6 생성량의 차이를 기준으로 계산함.
상기 표 5로부터 본 발명에 의한 특정의 식물추출 혼합물과 특정의 단일 식물추출물, 특히 특정의 식물추출 혼합물이 사람의 신경교세포 U373에서 물질 P 자극에 의한 염증 매개 물질인 IL-6의 생합성을 억제하는 효과가 있음을 알 수 있다.
그리고 알레르기성 피부(질환)에서 나타나는 자극 증상에 대해 본 발명에 의한 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유한 화장료 조성물이 자극완화 효능을 가짐을 확인하기 위하여 동일한 피부 병리 현상의 아토피 피부염을 가진 사람들에게서 나타나는 소양증 및 염증의 개선 효과를 평가하는 실험을 직접 사용과 육안 관찰을 통해 수행하였다(실험예 4).
실험예 4: 인체 적용시 자극완화 효과 시험.
처방예 1∼13에서 제조한 크림 조성물을 인체에 직접 발랐을 때 자극완화 효과를 알아보기 위해 알레르기성 피부질환의 일종인 아토피 피부염 환자의 증상개선 효과를 가려움증 완화, 염증 감소, 수면량 증가의 측면에서 확인하는 바, 6세에서 18세까지의 소양증과 염증을 동반한 아토피 피부염 환자 52명에게 무처치군(처방예13), 처방예 1∼12군 등으로 13개 그룹으로 분류하여 한 그룹당 4명씩 4주간 적용하고 피검자에게 아래와 같은 기준으로 평가를 하게 한 뒤 이를 평균하였다. 이 평가에서 평균 3.5점 이상이 되어야 아토피 피부염의 개선 효과가 있는 것으로 판단하였으며 그 결과를 표 7에 나타내었다.
5점:매우 호전되었다. 4점:완화된 것이 확실히 느껴진다. 3점:약간 완화된 것 같으나 잘 느껴지지 않는다. 2점:효과 없다. 1점:더욱 심해졌다
<아토피 피부의 개선 여부에 대한 임상효과>
처방 1 처방 2 처방 3 처방 4 처방 5 처방 6 처방 7 처방 8 처방 9 처방 10 처방 11 처방 12 처방 13
5일후 3.3 3.5 3.1 3.1 3.1 2.8 2.5 3.9 4.0 4.2 4.1 4.2 2.0
10일후 3.5 3.7 3.3 3.3 3.3 3.0 2.8 4.1 4.2 4.4 4.3 4.4 2.2
20일후 3.6 3.8 3.5 3.5 3.5 3.2 3.1 4.3 4.4 4.6 4.7 4.7 2.2
위의 실험에서도 실시예 1의 본 발명에 사용되는 특정의 식물추출 혼합물(처방9∼12)을 함유하는 크림 조성물이 대조용(처방13)인 종래의 화장료 조성물이나 각 식물들의 단일 추출물(처방1∼8)을 함유하는 화장료 조성물보다 탁월하게 좋은 효과를 보였고 각 식물들의 단일 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 대조용인 종래의 화장료 조성물보다 나은 효과를 보였다.
이러한 모든 결과를 두고 볼 때, 이상과 같은 본 발명에 의한 자극완화 효능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물의 효과를 측정한 결과, 본 발명의 조성물은 피부면역조절을 유도하여 자극물질에 의한 피부 자극을 완화시켜 줄 뿐만 아니라, 소양증, 피부 발진을 동반하는 아토피성 피부염이나 피부발진, 심마진, 기타 알레르기성 피부질환의 증상 개선에 있어서도 종래 처방의 화장료 조성물에 비해 우수한 효과를 가진다.

Claims (3)

  1. 종래의 화장료 조성물에 측백나무, 편백나무, 향나무로부터 얻은 추출물들 중 한 가지 이상을 필수 함유 성분으로서 0.5 내지 20.0 중량% 함유하는 것을 특징으로 하는 자극완화 효능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 백작약, 미치광이풀의 지하경, 대추, 줄풀로부터 얻은 식물추출물 1종 이상을 더 함유하는 것을 특징으로 하는 자극완화 효능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제 함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형 을 갖는 것을 특징으로 하는 자극완화 효능을 가진 특정의 식물추출 혼합물과 이를 함유하는 알레르기성 피부용 화장료 조성물.
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