BRPI0821619B1

BRPI0821619B1 - método para preparação de um copolímero de bloco anfifílico

Info

Publication number: BRPI0821619B1
Application number: BRPI0821619A
Authority: BR
Inventors: Oh Kim Bong; Seo Min-Hyo; Seob Shim Myung
Original assignee: Samyang Biopharmaceuticals; Samyang Corp; Samyang Holdings Corp
Priority date: 2007-12-31
Filing date: 2008-12-31
Publication date: 2018-12-18
Also published as: AU2008347720C1; EP2229417A2; EP2229417B1; WO2009091150A2; JP5576291B2; RU2010130423A; CA2709967A1; CN101910246B; CN101910246A; US20100280214A1; BRPI0821619A2; WO2009091150A3; KR101187487B1; AU2008347720B2; EP2229417A4; JP2011508046A; US8853351B2; AU2008347720A1; RU2459840C2; CA2709967C

Description

MÉTODO PARA PREPARAÇÃO DE UM COPOLÍMERO DE BLOCO ANFIFÍLICO [0001]

A presente invenção refere-se a um copolímero de bloco anfifílico de alta pureza contendo hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido), um bloco polimérico e um método para preparação do dito copolímero.

[0002] Um copolímero de bloco anfifílico contém um bloco polimérico hidrofílico e um bloco polimérico hidrofóbico. Uma vez que, in vivo, o bloco polimérico hidrofílico fica em contato direto com as proteínas do sangue e com membranas celulares, um polímero biocompatível como polietilenoglicol ou

monometoxipolietilenoglicol tem	sido	usado	como bloco
polimérico hidrofílico.	Por sua	vez,	o bloco polimérico
hidrofóbico aumenta a	afinidade	por	drogas	hidrofóbicas;

exemplos específicos desse tipo de polímero, que têm sido usados até o momento, incluem polímeros biodegradáveis como polilactídeo, poliglicolídeo, poli(láctico-co-glicolídeo), policaprolactona, poliaminoácidos ou poliortoésteres. Em especial, derivados de polilactídeos têm sido utilizados em carreadores de drogas, sob várias formas, devido à sua excelente biocompatibilidade e ao fato que são hidrolisados ao inofensivo ácido láctico in vivo. Derivados de polilactídeos possuem propriedades físicas diversas, dependendo de seus pesos moleculares. Além disso, derivados de polilactídeos têm sido desenvolvidos sob diversas formas, entre elas microesferas, nanopartículas, géis poliméricos e agentes implantáveis.

[0003] Quando um copolímero de bloco anfifílico é usado como um carreador de droga, as taxas de liberação da droga são controladas modificando-se as composições do bloco polimérico

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2/23 hidrofílico e do bloco polimérico hidrofóbico, o peso molecular de cada bloco, etc. Para controlar as taxas de liberação de drogas com precisão, a pureza do copolímero de bloco anfifílico é importante. Monômeros são usados na preparação do bloco polimérico hidrofóbico biodegradável. Contudo, monômeros que ficaram sem reagir e que permanecem no copolímero de bloco anfifílico final podem levar a uma distribuição ampla de peso molecular. Quando um polímero de baixo peso molecular é administrado ao organismo humano, pode ocorrer liberação excessiva de droga no início. Além disso, qualquer monômero residual pode ser decomposto reduzindo o pH, de modo que o polímero é rapidamente decomposto, levando a falha na liberação contínua da droga.

[0004] Diante desse quadro, foi sugerido um método para purificação de copolímero de bloco anfifílico contendo um derivado polilactídeo como bloco hidrofóbico, o qual consiste de um processo de solvente/não-solvente. Neste método, é usado um sistema diclorometano/éter, como o sistema solvente/nãosolvente, para remover d, L-lactídeos monoméricos. Embora o método seja efetivo para remoção de d, L-lactídeos, o octoato estanoso utilizado como catalisador da polimerização precipita junto com o copolímero de bloco no não-solvente, e é difícil de separar do copolímero de bloco. Além disso, devido aos baixíssimos pontos de ebulição dos éteres usados como nãosolvente, o método é comercialmente inadequado. O catalisador, octoato estanoso, que ainda permanece após a purificação pelo sistema solvente/não-solvente, pode acelerar a hidrólise dos derivados polilactídeos, resultando em redução do peso molecular do copolímero de bloco e, em consequência, do pH.

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3/23 [0005] Em outra abordagem, foi sugerido um método para remoção de monômeros sem utilização de qualquer solvente. Neste método, depois que um copolímero anfifílico contendo um derivado polilactídeo é preparado, os monômeros de lactídeos que não reagiram são removidos por sublimação a vácuo, em alta temperatura, com base na propriedade de sublimação dos lactídeos. O método é comercialmente adequado, mas apresenta dificuldade em reduzir o teor de monômeros residuais a 1 % em peso ou menos. Além disso, as condições de alta temperatura e vácuo por longo período de tempo impedem o controle do peso molecular desejado devido à pirólise do polímero resultante. Ademais, um catalisador organometálico usado na polimerização ainda permanece após a utilização do método.

[0006] A patente norte-americana n. 2005-0238168 apresenta um método para purificação de ácido d,L-poliláctico de baixo peso molecular por meio de separação de fases líquido/líquido. Ocorre um fenômeno de separação de fases quando o polímero obtido é aquecido e dissolvido em metanol ou etanol após a polimerização e, em seguida, refrigerado e guardado a -78 °C. O ácido poliláctico de baixo peso molecular dissolve-se na camada superior, orgânica, enquanto o ácido poliláctico de alto peso molecular solidifica-se na camada inferior. A camada inferior é separada e o solvente nela contido é removido por destilação, para retirar monômeros e oligômeros. Está descrito que o método fornece ácido d, L-poliláctico de alta pureza, com uma distribuição estreita de peso molecular. Contudo, como a refrigeração a baixa temperatura provoca queda na solubilidade dos monômeros de lactídeos que não reagiram e a precipitação desses mesmos monômeros, fica difícil removê-los. Ainda mais,

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4/23 copolímeros de bloco anfifílicos não são separáveis por separação de fases liquido/liquido mesmo sob refrigeração a baixa temperatura. Sendo assim, o método não é adequado para purificação de copolímeros de bloco anfifílicos.

[0007] Apresenta-se um método para preparação de um copolímero de bloco anfifílico de alta pureza, contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido); método este que inclui a remoção efetiva de monômeros, de polímeros de baixo peso molecular e de um catalisador organometálico do copolímero de bloco anfifílico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido).

[0008] Apresenta-se, também, um copolímero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido).

[0009]	Apresenta-se,	ainda, uma	composição	farmacêutica	de
microesferas, micelas	poliméricas	y G t C y	que	utiliza	o
copolímero	de bloco anfifílico de	alta pureza	contendo	um

bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido).

[0010] Em um aspecto, é apresentado um método para preparação de um copolímero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(ahidroxiácido); o método inclui: dissolver um copolímero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido) em um solvente orgânico miscível com água; adicionar água ou uma solução aquosa contendo um sal de metal alcalino à solução de polímero resultante e, em seguida, misturar; separar a solução resultante em uma camada orgânica e uma camada aquosa por meio

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5/23 de salting out; recolher a camada orgânica e dela remover o solvente para recuperar um polímero.

[0011] Em outro aspecto, apresenta-se um copolímero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido) , em que o copolímero de bloco anfifílico possui um percentual de monômeros lactônicos de um α-hidroxiácido igual ou menor que 1,0 % em peso, com base no peso total do copolímero, e um teor do metal de um catalisador organometálico igual ou menor que 50 ppm, com base no peso total do copolímero.

[0012] De acordo com o copolímero de bloco anfifílico e com o método para prepará-lo apresentados aqui, é possível obter um polímero de alta pureza pela remoção efetiva dos monômeros que não reagiram e do catalisador organometálico contidos no copolímero de bloco anfifílico. É possível, também, reduzir significativamente a toxicidade e as reações colaterais provocadas por subprodutos. Além disso, o método para purificação do copolímero de bloco anfifílico é fácil de ser aplicado nos processos comerciais de preparação de polímeros de uso médico aumentando, assim, a aplicabilidade médica e industrial do copolímero de bloco anfifílico.

[0013] Os aspectos acima e outros, assim como as características e vantagens das modalidades exemplificativas aqui apresentadas ficarão mais claros a partir da descrição detalhada a seguir, juntamente com os desenhos anexos nos quais:

[0014] Fig. 1 apresenta o espectro de RMN ^-H do copolímero de dibloco mPEG-PLA obtido da Preparação Exemplo 1; e

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6/23 [0015] Fig. 2 apresenta o espectro de RMN ^-H do copolímero de dibloco mPEG-PLA purificado de acordo com o Exemplo 1.

[0016] Modalidades exemplificativas são descritas mais completamente a seguir, com referência aos desenhos anexos, nos quais modalidades exemplificativas são apresentadas. A invenção aqui apresentada pode, contudo, ser exemplificada de diferentes formas e não deve ser considerada como limitada às modalidades exemplificativas aqui apresentadas. Ao contrário, essas modalidades exemplificativas são mostradas para que a apresentação da invenção seja profunda e completa, e para que o escopo desta invenção fique completamente claro para os versados na técnica. Na descrição, detalhes de características e técnicas bem conhecidas podem ser omitidos, a fim de evitar obscurecer desnecessariamente as modalidades apresentadas.

[0017] A terminologia aqui usada tem o propósito de descrever modalidades especificas apenas, e não pretende ser limitante desta invenção. Como utilizada neste relatório, as formas singulares um, uma e o/a incluem também as formas plurais, a menos que o contexto indique claramente o contrário. Além disso, o uso dos termos um, uma, etc. não indica uma limitação de quantidade, mas indica a presença de pelo menos um dos itens referenciados. Ficará mais claro que os termos compreender e/ou compreendendo, ou inclui e/ou incluindo quando utilizadas nesta situação, especifica a presença das características, regiões, numerais, etapas, operações, elementos e/ou componentes, mas não impede a presença ou adição de uma ou mais características, regiões, numerais, etapas, operações, elementos, componentes e/ou grupos deles.

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7/23 [0018] Exceto quando definido de outra forma, todos os termos (incluindo termos técnicos e científicos) usados neste documento têm o mesmo significado utilizado normalmente pelos técnicos da área. Deve ser entendido, ainda, que termos definidos em dicionários de uso corrente devem ter seus significados interpretados de modo consistente com o contexto da técnica relevante e da invenção aqui apresentada; eles não devem ser interpretados de forma idealizada nem excessivamente formal, exceto se definidos dessa forma, expressamente, neste documento.

[0019] Em um aspecto, apresenta-se um copolimero de bloco anfifilico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido). Em outro aspecto, apresenta-se um método para preparação do copolimero de bloco anfifilico acima.

[0020] Em uma modalidade, o método para preparação do copolimero de bloco anfifilico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(a-hidroxiácido) inclui:

- dissolver um copolimero de bloco anfifilico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(ahidroxiácido) em um solvente orgânico miscivel com água;

- misturar a solução resultante, do polímero, com água ou com uma solução aquosa contendo um sal de metal alcalino;

- separar a solução resultante em uma fase orgânica e uma fase aquosa por meio de salting out; e

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8/23 recolher a fase orgânica e remover o solvente contido nela para recuperar o polímero.

[0021]

Em outra modalidade, o copolimero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(a-hidroxiácido) possui um percentual de monômeros lactônicos de um α-hidroxiácido igual ou menor que 1,0 % em peso, com base no peso total do copolimero, e um teor do metal de um catalisador organometálico igual ou menor que 50 ppm com base no peso total do copolimero. Mais particularmente, o copolimero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(ahidroxiácido) tem um percentual de monômeros lactônicos de um α-hidroxiácido igual ou menor que 0,5 % em peso, com base no peso total do copolimero, e um teor do metal de um catalisador organometálico igual ou menor que 20 ppm, com base no peso total do copolimero. De acordo com uma modalidade, apresentase um copolimero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um polímero de bloco de polilactídeo, em que o copolimero possui um percentual de lactídeo igual ou menor que 1,0 % em peso, com base no peso total do copolimero, e um teor de metal

de um catalisador organometálico igual ou menor	que	50 ppm,
com base	no peso total do copolimero.
[0022]	0 copolimero de bloco anfifílico	de	alta	pureza
contendo	um bloco polimérico hidrofóbico	de	um	poli(a-

hidroxiácido) , e sua preparação são descritos em mais detalhes a seguir.

[0023] De acordo com uma modalidade, apresenta-se um método para preparação de um copolimero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um

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9/23 poli(α-hidroxiácido) . 0 método inclui a hidrólise de monômeros para aumentar a solubilidade destes em uma solução aquosa, e a utilização da técnica de salting-out com o emprego de um sal para realizar uma separação de fases líquido/líquido.

[0024] Mais particularmente, o método de acordo com uma modalidade inclui:

- dissolver um copolímero de bloco anfifílico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(ahidroxiácido) em um solvente orgânico miscível com água;

- recolher a fase orgânica e remover o solvente contido nela para recuperar o polímero.

[0025] O copolímero de bloco anfifílico obtido pelo método de acordo com uma modalidade inclui um copolímero de dibloco do tipo A-B ou um copolímero de tribloco do tipo B-A-B consistindo de um bloco hidrofílico (A) e um bloco hidrofóbico (B) . O copolímero de bloco anfifílico possui um teor de bloco hidrofílico entre 20 e 95 % em peso, mais particularmente entre 40 e 95 % em peso, e um teor de bloco hidrofóbico entre 5 e 80 % em peso, mais particularmente entre 5 e 60 % em peso. O copolímero de bloco anfifílico pode ter um valor de peso molecular médio entre 1.000 Daltons e 50.000 Daltons, mais particularmente entre 1.500 Daltons e 20.000 Daltons.

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10/23 [0026]

O bloco polimérico hidrofílico contém um polímero biocompatível como polietilenoglicol ou um derivado dele, polivinilpirrolidona, álcool polivinílico ou poliacrilamida.

Mais particularmente, o bloco polimérico hidrofílico contém polietilenoglicol ou monometoxipolietilenoglicol. O bloco hidrofílico pode ter um valor de peso molecular médio entre

200 Daltons e

20.000 Daltons, especificamente entre 200

Daltons e 10.000

Daltons.

[0027] bloco polimérico hidrofóbico inclui um polímero biodegradável tal como um polímero cujos monômeros são derivados de α-hidroxiácido.

O bloco polimérico hidrofóbico pode conter pelo menos um polímero selecionado do grupo cujos elementos são polilactídeo, poliglicolídeo, poli(ácido mandélico), policaprolactona ou poli(dioxan-2-ona), seus copolímeros, poliaminoácidos, poliortoésteres, polianidridos e policarbonatos.

Mais particularmente, o bloco polimérico hidrofóbico contém polilactídeo, poliglicolideo, policaprolactona ou poli(dioxan-2-ona).

[0028]

O copolímero de bloco anfifílico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido) pode ser representado pela Fórmula 1 abaixo:

[Fórmula 1] ho-IRV-MHRV-R⁴

Onde

R¹ é -CHZ-C(=0)-O-;

R² é -CHY-C (=0)-O-, -CH2CH2CH2CH2CH2-C (=0)-O- ou

CH2CH2OCH2-C (=0) -O-;

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11/23

R³ é -CH2CH2O-, -CH(OH)-CH₂-, -CH(C(=O)-NH₂)-CH₂- ou

-CH-CH2A_

Cp—O

H?C---CH₂ r

R⁴ é -CH₃ ou -C (=0) - [R¹] 1- [R²] m-CHZ-OH;

Z e Y são, cada um, -H, -CH₃, -C6H5 ou C6H5-CH2-;

e m são, cada um, um inteiro entre 0 e 300, com a ressalva de que 1 e m não podem ser iguais a 0 ao mesmo tempo; e n é um inteiro entre 4 e 1.100.

[0029] Primeiro, no método de acordo com uma modalidade exemplificativa, um copolímero de bloco anfifílico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido) é dissolvido em um solvente orgânico miscível com água. Este é um solvente capaz de solubilizar o copolímero de bloco anfifílico e tem ponto de ebulição igual ou menor que 100°C. Exemplos específicos do solvente miscível com água incluem acetona ou acetonitrila. O solvente orgânico pode ser usado em quantidade correspondente a 0,5 a 5 vezes, mais particularmente 0,5 a 2 vezes o peso do copolímero de bloco anfifílico.

[0030] Depois, água ou uma solução aquosa contendo um sal de metal alcalino é adicionada lentamente, e misturada com o solvente orgânico no qual o polímero está dissolvido. Durante esse processo, derivados polilactídeos de baixo peso molecular e monômeros lactônicos são hidrolisados, e logo neutralizados

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12/23 pelo sal de metal alcalino formando, então, um sal. No entanto, uma vez que o poli(α-hidroxiácido) contido no copolímero de bloco anfifílico possui um grupo hidroxila terminal, ele não reage com o sal de metal alcalino. Exemplos particulares de solução aquosa contendo um sal de metal alcalino, que pode ser usada incluem soluções aquosas de bicarbonato de sódio, carbonato de sódio, bicarbonato de potássio, carbonato de potássio ou carbonato de lítio. Mais particularmente, a solução aquosa contendo um sal de metal alcalino pode ser uma solução aquosa de bicarbonato de sódio. A solução aquosa pode ter uma concentração entre 0,05 g/mL e 0,2 g/mL, mais particularmente em torno de 0,1 g/mL. A quantidade de água ou de solução aquosa de um sal de metal alcalino a ser adicionada vai depender do teor de monômeros que não reagiram e da quantidade de solvente orgânico. Em particular, pode-se adicionar água ou solução aquosa de sal de metal alcalino em quantidade correspondente a 0,5 a 5 vezes, especificamente 0,5 a 2 vezes o volume de solvente orgânico. Em seguida, a mistura resultante deve ser aquecida a uma temperatura entre 25 e 100 °C por um tempo, que varia de 10 minutos a 24 horas, mais particularmente, entre 60 e 80 °C por um tempo entre 2 e 6 horas para que a reação ocorra. Se a mistura for aquecida a temperaturas mais altas do que as faixas acima, o copolímero de bloco anfifílico resultante pode ser hidrolisado no sitio do seu bloco hidrofóbico, resultando em um decréscimo do peso molecular do copolímero.

[0031] Em seguida, a solução mista é separada em uma camada orgânica e uma camada aquosa por meio da adição de outro sal, já que o sal formado pela operação anterior possui

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13/23 alta solubilidade na solução aquosa. Exemplos específicos de sais que podem ser utilizados nessa etapa incluem cloreto de sódio e cloreto de potássio. 0 sal pode ser adicionado na proporção de 0,1 a 50 % em peso, mais particularmente de 0,1 a 20 % em peso, com base no peso total do copolímero de bloco anfifílico.

[0032] Assim, a camada orgânica contém um copolímero de bloco anfifílico purificado, enquanto a camada aquosa contém o sal usado para separação das fases, o sal de metal alcalino, sais metálicos dos monômeros neutralizados e o catalisador organometálico.

[0033] Por fim, a camada orgânica separada como descrito acima é recolhida, e o solvente orgânico removido para recuperar o polímero purificado. O solvente orgânico pode ser removido por um processo de destilação fracionada, conhecido, ou por um processo de precipitação solvente/não-solvente. Mais particularmente, destilação fracionada pode ser usada para remoção do solvente orgânico, por exemplo, a uma temperatura entre 60 e 80°C.

[0034] De acordo com outra modalidade exemplificativa, o método pode incluir, ainda, as etapas abaixo a fim de remover o sal usado para separação das fases e o sal de metal alcalino presentes em pequena quantidade no polímero formado:

- dissolver o polímero, recuperado após remoção do solvente orgânico, em um solvente orgânico anidro, filtrar e obter uma solução contendo o polímero; e

- remover o solvente orgânico da solução que contém o polímero.

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14/23 [0035] Em particular, a adição do solvente orgânico anidro ao polímero permite que o copolímero de bloco anfifílico seja dissolvido no solvente orgânico e provoca a precipitação do sal utilizado para separar as fases e do sal de metal alcalino presentes, em pequena quantidade, no polímero. Assim, os sais precipitados podem ser removidos por filtração. Qualquer solvente orgânico anidro pode ser usado, sem qualquer limitação, desde que ele seja capaz de dissolver o polímero purificado. Exemplos específicos de solvente orgânico anidro incluem solventes pouco tóxicos, de baixo ponto de ebulição, como acetona e acetonitrila.

[0036]

Finalmente, após remoção dos sais como descrito acima, o solvente orgânico é removido da solução orgânica contendo o polímero purificado.

Neste caso, o solvente orgânico pode ser removido por um processode destilação fracionada, conhecido, ou por um processo de precipitação solvente/não-solvente. Mais particularmente, destilação fracionada pode ser usada para remover o solvente orgânico, por exemplo, a uma temperatura entre 60 e 80 °C.

[0037] O copolímero de bloco anfifílico conforme uma modalidade exemplificativa inclui um copolímero de dibloco do tipo A-B ou um copolímero de tribloco do tipo B-A-B, consistindo de um bloco hidrofílico (A) e um bloco hidrofóbico (B) . O copolímero de bloco anfifílico tem um percentual de bloco hidrofílico entre 20 e 95 % em peso, mais particularmente entre 40 e 95 % em peso, e um percentual de bloco hidrofóbico entre 5 e 80 % em peso, mais particularmente entre 5 e 60 % em peso. O copolímero de bloco anfifílico pode ter um valor de peso molecular médio entre 1.000 Daltons e

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15/23

50.000

Daltons, mais particularmente entre 1.500 Daltons e

20.000

Daltons.

[0038]

O bloco polimérico hidrofilico inclui um polímero biocompativel como polietilenoglicol ou um derivado dele, polivinilpirrolidona, álcool polivinilico ou poliacrilamida.

Mais particularmente, o bloco polimérico hidrofilico contém polietilenoglicol ou monometoxipolietilenoglicol. O bloco hidrofilico pode ter um valor de peso molecular médio entre

200 Daltons e

20.000 Daltons, especificamente entre 200

Daltons e 10.000

Daltons.

[0039]

O bloco polimérico hidrofóbico inclui um polímero biodegradável como um polímero cujos monômeros são derivados de um α-hidroxiácido.

O bloco polimérico hidrofóbico pode incluir pelo menos um polímero selecionado do grupo constituído de polilactideo, poliglicolideo, poli(ácido mandélico), policaprolactona ou poli(dioxan-2-ona), copolímeros destes, poliaminoácidos, poliortoésteres, polianidridos e policarbonatos. Mais particularmente, o bloco polimérico hidrofóbico inclui polilactideo, poliglicolideo, policaprolactona ou poli(dioxan-2-ona).

[0040]

O copolimero de bloco anfifilico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido) pode ser sintetizado através de um processo conhecido de polimerização com abertura de anel usando um polímero hidrofilico contendo grupo hidroxila como iniciador e monômeros lactônicos de ahidroxiácido.

Por exemplo, polietilenoglicol ou monometoxipolietilenoglicol hidrofilicos contendo grupo hidroxila pode ser usado como iniciador da polimerização de llactideo ou D,L-lactideo por abertura de anel. Copolímeros de

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16/23 dibloco ou de tribloco podem ser obtidos, dependendo do número de grupos hidroxila presentes no bloco hidrofilico usado como iniciador. Para polimerização através de abertura de anel, pode-se usar um catalisador organometálico como óxido estanoso, óxido de chumbo, octoato estanoso ou octoato de antimônio. Na preparação de um polímero para uso médico, octoato estanoso pode ser usado como catalisador organometálico, pois ele é biocompativel.

[0041] Mas, o copolimero de bloco anfifilico obtido pelo processo de polimerização acima ainda inclui monômeros lactônicos de um α-hidroxiácido - como lactideos -, que não reagiram, produtos de decomposição dos monômeros lactônicos,

oligômeros de	a-hidroxiácidos	de baixo	peso	molecular,	e o
catalisador organometálico.
[0042] Os	monômeros	lactônicos,	seus	produtos	de
decomposição e	oligômeros	de	a-hidroxiácidos	de baixo	peso

molecular são decompostos com facilidade in vivo e em solução aquosa, resultando em redução do pH. Isto acelera a decomposição do polímero resultante ou afeta, negativamente, a estabilidade de uma droga contida no polímero, gerando impurezas. Além disso, o catalisador organometálico, contido como impureza no polímero resultante, acelera a hidrólise do bloco hidrofóbico e provoca uma diminuição do peso molecular, resultando em diminuição do pH. Esta hidrólise acelerada provocada pela impureza (catalisador organometálico) impede que o bloco hidrofóbico - usado como carreador de droga em uma composição formulada - libere a droga continuamente, resultando em uma liberação rápida, indesejada, da droga e em uma falha no controle da taxa de liberação da droga. Portanto,

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17/23 ao se aplicar o copolímero de bloco anfifílico aqui apresentado como carreador de drogas, é necessário controlar as quantidades dos monômeros, oligômeros e do catalisador organometálico presentes em combinação com o copolímero de bloco anfifílico, a fim de controlar a taxa de liberação de droga e evitar a geração de impurezas.

[0043] Neste contexto, apresenta-se um copolímero de bloco anfifílico de alta pureza contendo bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido), tendo o copolímero um percentual de monômeros lactônicos de um α-hidroxiácido igual ou menor que 1,0 % em peso, com base no peso total do copolímero, e um teor do metal de um catalisador organometálico igual ou menor que 50 ppm, com base no peso total do copolímero. Mais particularmente, o copolímero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido) possui um percentual de monômeros lactônicos de um α-hidroxiácido igual ou menor que 0,5 % em peso, com base no peso total do copolímero, e um teor do metal de um catalisador organometálico igual ou menor que 20 ppm, com base no peso total do copolímero. De acordo com uma modalidade exemplificativa, apresenta-se um copolímero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um polímero de bloco de polilactídeo, em que o copolímero possui um percentual de lactídeo igual ou menor que 1,0 % em peso, com base no peso total do copolímero, um teor do metal de um catalisador organometálico igual ou menor que 50 ppm, com base no peso total do copolímero.

Um percentual maior do que 1,0 % em peso do monômero lactônico acelera a decomposição do polímero e afeta negativamente a estabilidade de uma droga contida no

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18/23 polímero, gerando impurezas. Além disso, um teor de catalisador organometálico maior do que 50 ppm acelera a hidrólise do bloco hidrofóbico e provoca a redução do pH, o que leva à falha na liberação contínua e controlada da droga.

[0044] De acordo com uma modalidade, o copolimero de bloco anfifílico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido) é representado pela Fórmula 1 acima.

[0045] É apresentada, ainda, uma composição farmacêutica de microesferas, micelas poliméricas, etc., que contém o copolimero de bloco anfifílico de alta pureza contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido).

[0046] A seguir serão descritos os exemplos. Estes são apresentados com propósito ilustrativo e não pretendem limitar o escopo desta invenção.

Preparação Exemplo 1. Síntese do Copolimero de Dibloco mPEGPLA Contendo MonometoxipolietilenoGlicol e D,L-Lactídeo [0047] Primeiro, 100 g de monometoxipolietilenoglicol

(mPEG: valor	de	peso	molecular	médio	igual a 2.000)	foram
introduzidos	em	balão	de fundo	redondo	, de 250 mL, equipado
com agitador,	e	foram	desidratados sob	agitação a 120°C	por 2

horas, sob vácuo. Em seguida, foi adicionado ao balão 0,1 g de octoato estanoso (Sn(Oct)2) dissolvido em 200 pL de tolueno. O tolueno foi removido por destilação, ao mesmo tempo em que a mistura reacional foi agitada, sob vácuo, por 1 hora.

[0048] Após, 100 g de D,L-lactídeo foram acrescentados à mistura e dissolvidos nela com agitação, sob atmosfera de nitrogênio. Completada a dissolução do d, L-lactídeo, o balão de reação foi selado para proceder à reação, a 120°C, por 20

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19/23 horas. Após o término da reação, 193 g de um copolímero de dibloco bruto mPEG-PLA (valor de peso molecular médio: 3.725 Daltons) foram obtidos. Por fim, o produto foi analisado por RMN i-H, e o peso molecular do copolímero de dibloco determinado através do cálculo da intensidade dos sinais, com base no sinal de -OCH3, isto é, o grupo terminal do monometoxipolietilenoglicol. A Fig. 1 apresenta o espectro de RMN i-H do copolímero anfifílico resultante. Monômeros lactídeos foram identificados em 1,5 ppm e 5,0 ppm.

Exemplo Comparativo 1. Purificação do Copolímero de Dibloco mPEG-PLA pelo Processo de Sublimação [0049] Primeiro, 50 g do mPEG-PLA obtido na Preparação

Exemplo 1 foram introduzidos em um balão e dissolvidos a 120°C. Ao mesmo tempo em que se mantinha o polímero sob agitação magnética, o balão de reação foi conectado a uma bomba de vácuo para remoção do lactídeo por sublimação, sob pressão igual ou menor que 1 torr. Após sublimado, o lactídeo foi precipitado sobre a superfície do frasco, e o precipitado removido para se obter 46 g de mPEG-PLA purificado, fundido. Os teores de lactídeo e de Sn (catalisador) foram, então, medidos. Os resultados estão mostrados na Tabela 1.

Exemplo Comparativo 2. Purificação do Copolímero de Dibloco mPEG-PLA Através do Processo Solvente/Não-Solvente [0050] Primeiro, 50 g do mPEG-PLA obtido na Preparação

Exemplo 1 foram dissolvidos em 100 mL de diclorometano. A esta solução foi adicionado, lentamente, 1 L de éter dietílico, sob agitação, para precipitar o polímero sob a forma de partículas. O polímero obtido nesta precipitação foi filtrado e, em

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20/23 seguida, seco em estufa a vácuo, por 24 horas, obtendo-se 43 g do mPEG-PLA purificado, sob a forma de partículas sólidas brancas. Em seguida, os teores de lactídeo e Sn (catalisador) foram medidos. Os resultados estão mostrados na Tabela 1.

Exemplo 1. Purificação do Copolímero de Dibloco mPEG-PLA [0051] Primeiro, 50 g do mPEG-PLA obtido na Preparação

Exemplo 1 foram adicionados a 100 mL de acetonitrila e dissolvidos nesta. Ao mPEG-PLA dissolvido em acetonitrila, 100 mL de uma solução aquosa de bicar bonato de sódio (0,1 g/mL) foram acrescentados, lentamente, e a mistura resultante foi agitada a 60 °C por 2 horas. Em seguida, 10 g de cloreto de sódio foram adicionados, agitados e dissolvidos em temperatura ambiente, causando separação de fases entre dois tipos de solventes, em temperatura ambiente. As camadas dos dois solventes resultantes foram separadas, uma da outra, usando um funil de separação, e a camada orgânica recolhida. À camada orgânica foram acrescentados 100 mL de água destilada e 10 g de cloreto de sódio, dissolvendo-se por agitação. As duas camadas de solventes resultantes foram novamente separadas em funil de separação e a camada orgânica recolhida. Esta foi submetida a destilação fracionada a 80 °C por 2 horas, sob vácuo, para remoção completa da acetonitrila e da água. Depois disto, 100 mL de acetonitrila anidra foram adicionados para provocar a precipitação do cloreto de sódio e do bicarbonato de sódio incorporados ao polímero durante a dissolução deste. O precipitado foi separado e a acetonitrila removida por destilação fracionada a 80 °C por 2 horas, sob vácuo, para se obter 45 g de mPEG-PLA purificado. A seguir, os teores de lactídeo e de Sn (catalisador) foram medidos. Os resultados

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21/23 estão mostrados na Tabela 1. Adicionalmente, o espectro de RMN i-H do mPEG-PLA purificado mostrou que os picos correspondentes aos monômeros lactídeos foram significativamente reduzidos (ver Fig. 2).

Exemplo 2. Purificação do Copolímero de Dibloco mPEG-PLA [0052] O Exemplo 1 foi repetido, exceto pelo fato de que 50 mL de uma solução aquosa de bicarbonato de sódio (0,1 g/mL) foram adicionados, lentamente, ao mPEG-PLA para se obter 47 g de mPEG-PLA purificado. Então, os teores de lactideo e de Sn (catalisador) foram medidos. Os resultados estão apresentados na Tabela 1.

Exemplo 3. Purificação do Copolímero de Dibloco mPEG-PLA [0053] O Exemplo 1 foi repetido, exceto pelo fato de que a hidrólise dos monômeros foi conduzida sob agitação, a 40°C por 2 horas, para se obter 47 g de mPEG-PLA purificado. Então, os teores de lactideo e de Sn (catalisador) foram medidos. Os resultados estão apresentados na Tabela 1.

Tabela 1

	Teor de Lactideo®¹ (% em peso)	Teor de Sn^b) (ppm)
Preparação Exemplo 1	2, 75	128, 8
Exemplo Comparativo 1	1, 85	127,1
Exemplo Comparativo 2	0, 41	117, 4
Exemplo 1	0,38	4,0
Exemplo 2	0, 42	0, 62
Exemplo 3	0,4	0,57

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22/23 ^a) 0 teor de Lactídeo foi calculado por análise de RMN ^-H, calculando-se a intensidade com base na do sinal de -OCH3, isto é, do grupo terminal de monometoxipolietilenoglicol.

^b) 0 teor de Sn foi determinado por espectroscopia de emissão de plasma indutivamente acoplado (ICP).

[0054] Como pode ser observado da Tabela 1, o mPEG-PLA é preparado através de polimerização de D,L-lactideo por abertura de anel usando octoato estanoso como catalisador organometálico.

O mPEG-PLA bruto obtido da Preparação Exemplo contém uma quantidade significativa de lactídeo e de organometálico.

No mPEG-PLA purificado por sublimação, de acordo com o Exemplo Comparativo 1, o lactídeo e o catalisador ainda permanecem, com pequena redução em seus teores. Além disso, embora o processo de purificação solvente/não-solvente de acordo com o Exemplo Comparativo seja razoavelmente efetivo para remoção do lactídeo, ele não é substancialmente efetivo na remoção do organometálico.

Embora o catalisador usado na polimerização seja um produto químico aprovado pelo

FDA, qualquer catalisador que permaneça no polímero final pode acelerar a hidrólise do polímero provocando, assim a degradação das propriedades físicas deste. Já pelo método de purificação aqui apresentado, o qual inclui hidrólise dos monômeros e separação de fases liquido/liquido, é possível reduzir significativamente o teor do monômero residual, assim como do catalisador organometálico, no polímero purificado.

[0055]

Embora modalidades exemplificativas tenham sido mostradas e descritas, as pessoas versadas na técnica entenderão que várias mudanças na forma e nos detalhes poderão

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23/23 ser feitas, sem se afastar do espírito e do escopo desta invenção como definida pelas reivindicações anexas.

[0056] Adicionalmente, diversas modificações podem ser feitas para adaptar uma situação ou material particulares ao entendimento desta invenção, sem se afastar da essência de seu escopo. Portanto, não se pretende que esta invenção seja limitada às modalidades exemplificativas específicas apresentadas como os melhores modos de realizar esta invenção; outrossim, pretende-se que esta invenção inclua todas as modalidades cabíveis no escopo das reivindicações anexas.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método para preparação de um copolimero de bloco anfifilico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(α-hidroxiácido) , método este caracterizado por incluir:

dissolver um copolimero de bloco anfifilico contendo um bloco polimérico hidrofóbico de um poli(a-hidroxiácido) em um solvente orgânico miscivel com água;

misturar a solução resultante, do polímero, com água ou com uma solução aquosa contendo um sal de metal alcalino;

separar a solução resultante em uma fase orgânica e uma fase aquosa por meio de salting out; e recolher a fase orgânica e remover o solvente orgânico contido nela, para recuperar um polímero.
2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o bloco polimérico hidrofóbico de um poli(ahidroxiácido) é um, ou mais, bloco(s) hidrofóbico(s) selecionado(s) de um grupo composto por polilactídeo, poliglicolídeo, poli(ácido mandélico) , policaprolactona ou poli(dioxan-2-ona), e copolímeros destes.
3. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o copolimero de bloco anfifilico é representado pela Fórmula 1:

[Fórmula 1]

HO-tR^i-tR^m-tR^n-R⁴ onde

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2/3

R¹ é -CHZ-C(=0)-0-;

R² é -CHY-C (=0)-0-, -CH2CH2CH2CH2CH2-C (=0)-0- ou

-CH2CH2OCH2-C (=0) -0-;

R³ é -CH2CH2O-, -CH(OH)-CH₂-, -CH(C(=O)-NH₂)-CH₂- ou

-CH-CH2H?C ch₂

R⁴ é -CH₃ ou -C (=0) - [R¹] 1- [R²] m-CHZ-OH;

Z e Y são, cada um, -H, -CH3, -C6H5 ou C6H5-CH2-;

1 e m são, cada um, um inteiro entre 0 e 300, com a ressalva de que 1 e m não podem ser iguais a 0 ao mesmo tempo; e n é um inteiro entre 4 e 1.100.
4. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o copolímero de bloco anfifílico tem um valor de peso molecular médio entre 1.000 Daltons e 50.000 Daltons.
5. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o copolímero de bloco anfifílico contém entre 20 e 95 % em peso de um polímero hidrofílico.
6. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o sal de metal alcalino é bicarbonato de sódio, carbonato de sódio, bicarbonato de potássio, carbonato de potássio ou carbonato de lítio.

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7. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a solução aquosa de metal alcalino ou água é adicionada em quantidade correspondente a 0,5 a 5 vezes o volume do solvente orgânico.
8. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o salting out inclui a adição de cloreto de sódio ou cloreto de potássio para promover a separação de fases.
9. Método de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que cloreto de sódio ou cloreto de potássio é adicionado em uma proporção entre 0,1 e 50 % em peso, com base no peso total do copolímero de bloco anfifílico.
10. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o método inclui ainda, após a recuperação do polímero:

dissolver < d polímero, recuperado após a remoção do solvente orgânico, em um solvente orgânico anidro e, em seguida, filtrar para obter uma solução contendo o polímero; e remover o solvente orgânico da solução que contém o

polímero.