BRPI0712063A2 - tratamento de doenças isquêmicas usando eritropoietina - Google Patents
tratamento de doenças isquêmicas usando eritropoietina Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI0712063A2 BRPI0712063A2 BRPI0712063-0A BRPI0712063A BRPI0712063A2 BR PI0712063 A2 BRPI0712063 A2 BR PI0712063A2 BR PI0712063 A BRPI0712063 A BR PI0712063A BR PI0712063 A2 BRPI0712063 A2 BR PI0712063A2
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- subject
- peripheral blood
- erythropoietin
- mononuclear cells
- cells
- Prior art date
Links
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 114
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 title claims abstract description 49
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 title claims abstract description 49
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 title claims abstract description 49
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 title claims abstract description 30
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 58
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 claims abstract description 37
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 claims abstract description 37
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 33
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 claims abstract description 32
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 claims abstract description 29
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 claims abstract description 26
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 claims abstract description 26
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims abstract description 14
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 claims description 50
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 26
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 16
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 12
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 abstract description 17
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 abstract description 13
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 abstract description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 6
- 238000007745 plasma electrolytic oxidation reaction Methods 0.000 description 63
- 102100031939 Erythropoietin Human genes 0.000 description 61
- 108010092408 Eosinophil Peroxidase Proteins 0.000 description 60
- -1 amino acid modified EPO Chemical class 0.000 description 41
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 28
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 24
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 24
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 24
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 16
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 13
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 12
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 12
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 12
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 9
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 8
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 7
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 7
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 6
- 238000002617 apheresis Methods 0.000 description 6
- 230000021235 carbamoylation Effects 0.000 description 6
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 6
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 6
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 6
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 6
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 5
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 5
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 5
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 5
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 5
- 229920002503 polyoxyethylene-polyoxypropylene Polymers 0.000 description 5
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- 101000987586 Homo sapiens Eosinophil peroxidase Proteins 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 4
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 4
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 4
- 102000044890 human EPO Human genes 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000002583 angiography Methods 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 3
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 3
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 3
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 3
- 230000001483 mobilizing effect Effects 0.000 description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 208000000575 Arteriosclerosis Obliterans Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 2
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 2
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 2
- 208000030831 Peripheral arterial occlusive disease Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N Propyl gallate Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 ZTHYODDOHIVTJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010043540 Thromboangiitis obliterans Diseases 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008321 arterial blood flow Effects 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 2
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 229960001777 castor oil Drugs 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N ethylparaben Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 2
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 2
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 210000002894 multi-fate stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 2
- 230000009707 neogenesis Effects 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000004976 peripheral blood cell Anatomy 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000010483 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000249 polyoxyethylene sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 2
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 2
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 2
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- GHBFNMLVSPCDGN-UHFFFAOYSA-N rac-1-monooctanoylglycerol Chemical compound CCCCCCCC(=O)OCC(O)CO GHBFNMLVSPCDGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- PBTPTBMYJPCXRQ-MGMRMFRLSA-N (2r)-2-[(1s)-1,2-dihydroxyethyl]-3,4-dihydroxy-2h-furan-5-one;hexadecanoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O PBTPTBMYJPCXRQ-MGMRMFRLSA-N 0.000 description 1
- CSTRPYAGFNTOEQ-MGMRMFRLSA-N (2r)-2-[(1s)-1,2-dihydroxyethyl]-3,4-dihydroxy-2h-furan-5-one;octadecanoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O CSTRPYAGFNTOEQ-MGMRMFRLSA-N 0.000 description 1
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- DYIOSHGVFJTOAR-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s,5r)-6-sulfanylhexane-1,2,3,4,5-pentol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)CS DYIOSHGVFJTOAR-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 125000006702 (C1-C18) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MOMKYJPSVWEWPM-UHFFFAOYSA-N 4-(chloromethyl)-2-(4-methylphenyl)-1,3-thiazole Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=NC(CCl)=CS1 MOMKYJPSVWEWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 6-chloro-2-n,2-n-diethylpyrimidine-2,4-diamine Chemical compound CCN(CC)C1=NC(N)=CC(Cl)=N1 XZIIFPSPUDAGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 208000031104 Arterial Occlusive disease Diseases 0.000 description 1
- 200000000007 Arterial disease Diseases 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 208000033386 Buerger disease Diseases 0.000 description 1
- 101100289995 Caenorhabditis elegans mac-1 gene Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-araboascorbic acid Natural products OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 201000003066 Diffuse Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L EDTA disodium salt (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].OC(=O)CN(CC([O-])=O)CCN(CC(O)=O)CC([O-])=O ZGTMUACCHSMWAC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- FPVVYTCTZKCSOJ-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol distearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCCOC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC FPVVYTCTZKCSOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001046686 Homo sapiens Integrin alpha-M Proteins 0.000 description 1
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 description 1
- 101000917824 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100022338 Integrin alpha-M Human genes 0.000 description 1
- 206010048858 Ischaemic cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 1
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 108010090054 Membrane Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000012750 Membrane Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N Poloxamer Chemical compound C1CO1.CC1CO1 RVGRUAULSDPKGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 229920001219 Polysorbate 40 Polymers 0.000 description 1
- 102000016971 Proto-Oncogene Proteins c-kit Human genes 0.000 description 1
- 108010014608 Proto-Oncogene Proteins c-kit Proteins 0.000 description 1
- 208000003782 Raynaud disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012322 Raynaud phenomenon Diseases 0.000 description 1
- 206010063837 Reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- IYFATESGLOUGBX-YVNJGZBMSA-N Sorbitan monopalmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O IYFATESGLOUGBX-YVNJGZBMSA-N 0.000 description 1
- 239000004147 Sorbitan trioleate Substances 0.000 description 1
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N [14c]-nicotinamide Chemical compound N[14C](=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008051 alkyl sulfates Chemical class 0.000 description 1
- 238000005937 allylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 1
- 208000028922 artery disease Diseases 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N butylated hydroxyanisole Chemical compound COC1=CC=C(O)C(C(C)(C)C)=C1.COC1=CC=C(O)C=C1C(C)(C)C CZBZUDVBLSSABA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000008004 cell lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002771 cell marker Substances 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 description 1
- 229940013361 cresol Drugs 0.000 description 1
- XLJMAIOERFSOGZ-UHFFFAOYSA-M cyanate Chemical compound [O-]C#N XLJMAIOERFSOGZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N cysteamine Chemical compound NCCS UFULAYFCSOUIOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 229940119744 dextran 40 Drugs 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 239000004318 erythorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010350 erythorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000025215 erythrocyte homeostasis Effects 0.000 description 1
- 210000003013 erythroid precursor cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000913 erythropoietic effect Effects 0.000 description 1
- HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diol;propane-1,2-diol Chemical compound OCCO.CC(O)CO HQPMKSGTIOYHJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010228 ethyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004403 ethyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229940071106 ethylenediaminetetraacetate Drugs 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000012953 feeding on blood of other organism Effects 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N glycerine monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CO)CO YQEMORVAKMFKLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N glycerol monostearate Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO SVUQHVRAGMNPLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002327 glycerophospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940100608 glycol distearate Drugs 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003701 histiocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical group 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 208000012947 ischemia reperfusion injury Diseases 0.000 description 1
- 229940026239 isoascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960003151 mercaptamine Drugs 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000003003 monocyte-macrophage precursor cell Anatomy 0.000 description 1
- PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N monothioglycerol Chemical compound OCC(O)CS PJUIMOJAAPLTRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000003643 myeloid progenitor cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000002669 organ and tissue protective effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical group 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 229960000502 poloxamer Drugs 0.000 description 1
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 1
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 description 1
- 229920000223 polyglycerol Polymers 0.000 description 1
- 229920000259 polyoxyethylene lauryl ether Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229940101027 polysorbate 40 Drugs 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 230000026341 positive regulation of angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000001508 potassium citrate Substances 0.000 description 1
- 229960002635 potassium citrate Drugs 0.000 description 1
- QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K potassium citrate (anhydrous) Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O QEEAPRPFLLJWCF-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011082 potassium citrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 210000004206 promonocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000473 propyl gallate Substances 0.000 description 1
- 235000010388 propyl gallate Nutrition 0.000 description 1
- 229940075579 propyl gallate Drugs 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940080236 sodium cetyl sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019983 sodium metaphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011008 sodium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- SLBXZQMMERXQAL-UHFFFAOYSA-M sodium;1-dodecoxy-4-hydroxy-1,4-dioxobutane-2-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOC(=O)C(S(O)(=O)=O)CC([O-])=O SLBXZQMMERXQAL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MWZFQMUXPSUDJQ-KVVVOXFISA-M sodium;[(z)-octadec-9-enyl] sulfate Chemical compound [Na+].CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOS([O-])(=O)=O MWZFQMUXPSUDJQ-KVVVOXFISA-M 0.000 description 1
- GGHPAKFFUZUEKL-UHFFFAOYSA-M sodium;hexadecyl sulfate Chemical group [Na+].CCCCCCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O GGHPAKFFUZUEKL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940035044 sorbitan monolaurate Drugs 0.000 description 1
- 235000011071 sorbitan monopalmitate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001570 sorbitan monopalmitate Substances 0.000 description 1
- 229940031953 sorbitan monopalmitate Drugs 0.000 description 1
- 235000019337 sorbitan trioleate Nutrition 0.000 description 1
- 229960000391 sorbitan trioleate Drugs 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000001931 thermography Methods 0.000 description 1
- YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N thiodiglycol Chemical compound OCCSCCO YODZTKMDCQEPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950006389 thiodiglycol Drugs 0.000 description 1
- 229940035024 thioglycerol Drugs 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 230000005944 tissue migration Effects 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 210000001364 upper extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
- A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/462—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells
- A61K39/4621—Cellular immunotherapy characterized by the effect or the function of the cells immunosuppressive or immunotolerising
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/46—Cellular immunotherapy
- A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
- A61K39/4643—Vertebrate antigens
- A61K39/46433—Antigens related to auto-immune diseases; Preparations to induce self-tolerance
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
- A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/10—Growth factors
- C12N2501/14—Erythropoietin [EPO]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Virology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
TRATAMENTO DE DOENçAS ISQUEMICAS USANDO ERITROPOIETINA. é descrito um processo para estimulação de revascularização em um sujeito compreendendo as etapas de: (a) administração de eritropoietina a um sujeito; (b) coleta de células mononucleares de sangue periférico do sujeito; e (c)administração de células mononucleares de sangue periférico coletadas a um sitio-alvo do sujeito. Células mononucleares de sangue periférico, e particularmente células CD34-positivas, são mobilizadas no sangue periférico de um sujeito através de administração de eritropoietina ao sujeito. O processo da presente invenção é útil para o tratamento de doen- ças isquêmicas, como distúrbio vascular periférico.
Description
Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "TRATAMEN- TO DE DOENÇAS ISQUÊMICAS USANDO ERITROPOIETINA".
Campo da Invenção
A presente invenção refere-se a um processo de revasculariza- ção, um processo para tratamento de doenças isquêmicas, e uma composi- ção usada para estes métodos. Antecedentes da Invenção
Distúrbio vascular periférico é uma condição médica na qual te- cido periférico torna-se um estado isquêmico devido a um fluxo de sangue arterial periférico reduzido causado, por exemplo, por constrição do lúmen de vaso, desenvolvimento de coágulos de sangue, oclusão de vaso, vasculi- te, contração de vaso, ou um aumento em viscosidade de sangue. Em anos recentes foi verificado que neogênese de vaso de sangue é aperfeiçoada quando células mononucleares derivadas de medula óssea são transplanta- das para um sítio isquêmico, e transplante de célula mononuclear derivada de medula óssea é acreditado ser um potencial processo para tratamento de distúrbio vascular periférico. Entretanto, o transplante de células mononucle- ares derivadas de medula óssea requer coleta de medula óssea do paciente, o que impõe uma substancial carga sobre o paciente.
Foi tentado o uso de células mononucleares derivadas de san- gue periférico no lugar de células mononucleares derivadas de medula ós- sea de modo a diminuir a carga sobre o paciente; entretanto, este processo não foi bem-sucedido no provimento de uma terapia eficaz devido ao peque- no número de células mononucleares presentes no sangue periférico.
Eritropoietina (também referida como EPO) é um hormônio de glicoproteína ácida que promove a diferenciação e proliferação de células progenitoras eritróides e é produzida principalmente nos rins. Eritrócitos, as células mais abundantes no sangue, funcionarão por um certo período de tempo e então são destruídos principalmente no baço (a extensão de vida média em seres humanos é de cerca de 120 dias). Sob condições normais, a contagem de eritrócitos periféricos total é continuamente mantida constan- te através de contínuo suprimento a partir da medula óssea. EPO desempenha um papel central nesta homeostase de eritrócitos no corpo. Em instalações clínicas, EPO é usada para tratar anemia e para gerenciamento pré- e pós-cirúrgico.
Em adição, foi reportado que EPO tem uma atividade de promo- ção de angiogênese e é eficaz como um agente terapêutico para doenças isquêmicas (Besarab A et al., The New England Journal of Medicine, 339(9), 584-590, (1998), Heeschen C et al., Blood,102(4), 1340-1346, (2003), Bahl- mann F H et al., Blood, 103(3), 921-926, (2004), Smith K J et al., Cardiovas- cular Research, (59), 538-548, (2003), Bahlmann F H et al., Kidney Internati- onal, 64, 1648-1652, (2003)). Também foi reportado que EPO promove a mobilização de células progenitoras endoteliais vasculares no sangue perifé- rico (Heeschen C et al., Blood, 102(4), 1340-1346, (2003), Bahlmann F H et al., Blood, 103(3), 921-926, (2004)).
É incerto, entretanto, se as células mobilizadas no sangue peri- férico por EPO são eficazes para o tratamento de doenças isquêmicas como distúrbios vasculares periféricos.
Sumário da Invenção
Os presentes inventores verificaram que a mobilização de célu- las mononucleares no sangue periférico é promovida pela administração de EPO e que as células mononucleares assim mobilizadas por EPO são parti- cularmente úteis para o tratamento de doenças isquêmicas.
A presente invenção provê uma composição para mobilização de células mononucleares para uso no tratamento de doenças isquêmicas ou em estimulação de revascularização em sangue periférico, onde a com- posição compreende eritropoietina como um ingrediente ativo. Preferivel- mente, as células mononucleares mobilizadas são coletadas de um sujeito e então administradas ao mesmo sujeito.
Preferivelmente, a composição da presente invenção é adminis- trada a um sujeito de 3 a 12 dias antes de coleta de sangue periférico do sujeito.
A presente invenção também provê a composição para o trata- mento de doenças isquêmicas e uma composição para estimulação de re- vascularização, compreendendo como ingrediente ativo células mononuclea- res separadas de sangue periférico de um sujeito para quem eritropoietina foi previamente administrada. Em tais composições, a eritropoietina é prefe- rivelmente administrada de 3 a 12 dias antes de coleta de sangue periférico.
A presente invenção também provê uma composição para mobi- lização de células CD34-positivas para uso no tratamento de doenças is- quêmicas ou na estimulação de revascularização em sangue periférico com- preendendo eritropoietina como um ingrediente ativo.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê um processo para preparação de células mononucleares para estimulação de revasculari- zação e para o tratamento de doenças isquêmicas, compreendendo separa- ção de células mononucleares de sangue periférico de um sujeito ao qual eritropoietina foi previamente administrada.
Em um outro aspecto, a presente invenção provê um processo para tratamento de uma doença isquêmica ou estimulação de revasculariza- ção em um sujeito compreendendo as etapas de:
(a) administração de eritropoietina ao sujeito;
(b) coleta de células mononucleares de sangue periférico do su- jeito; e
(c) administração de células mononucleares de sangue periférico coletadas a um sítio-alvo do sujeito. Breve Descrição dos Desenhos
A figura 1 mostra os resultados de análises FACS que mediram a mobilização de células-tronco hematopoiéticas por eritropoietina;
A figura 2 mostra os resultados de medição do número de colô- nias de células-tronco hematopoiéticas mobilizadas através de administra- ção de eritropoietina; e
A figura 3 mostra um angiograma, em um mês após o transplan- te de células mononucleares de sangue periférico, para um paciente (caso 3) que recebeu eritropoietina. Descrição das Modalidades Preferidas
Mobilização de Células Mononucleares de Sangue Periférico Por Eritropoie- tina
Um aspecto da presente invenção refere-se a uma composição para mobilização das células mononucleares para uso no tratamento de do- enças isquêmicas ou em estimulação de revascularização no sangue perifé- rico, onde a composição compreende eritropoietina como um ingrediente ativo. Os termos "mobilizando'1 e "mobilização de" células mononucleares representam estimulação de diferenciação e proliferação de células-tronco multipotentes presentes em vários órgãos e liberação de células mononucle- ares compreendendo células-tronco multipotentes no sangue. As células mononucleares mobilizadas desta maneira podem ser coletadas do sangue periférico do sujeito e administradas ao sujeito de modo a tratar doenças isquêmicas ou para estimular revascularização. O sujeito é preferivelmente um paciente sofrendo de uma doença isquêmica ou um paciente em neces- sidade de uma terapia de revascularização.
Não existem limitações particulares na presente invenção sobre o número de doses de eritropoietina administrada ao sujeito antes de coleta de células mononucleares de sangue periférico, mas genericamente de uma a três doses. No caso de três doses serem administradas, por exemplo, a primeira administração de eritropoietina é dada sistemicamente (por exem- plo, injeção subcutânea ou intravenosa) ao sujeito cerca de duas semanas antes de coleta das células mononucleares de sangue periférico. Cerca de uma semana depois, a segunda administração de eritropoietina é dada sis- temicamente após doação de sangue (retirada de sangue). Uma outra se- mana depois, a terceira administração de eritropoietina é dada localmente, e então as desejadas células mononucleares periféricas podem ser coletadas do sangue periférico do sujeito. No caso de duas doses serem administra- das, por exemplo, a primeira administração de eritropoietina é dada ao sujei- to sistemicamente cerca de uma semana antes de coleta das células mono- nucleares de sangue periférico e a segunda administração de eritropoietina é dada localmente cerca de uma semana depois, e então as desejadas células mononucleares periféricas podem ser coletadas do sangue periférico. No caso de uma administração simples, por exemplo, eritropoietina é adminis- trada sistemicamente ao sujeito e as desejadas células mononucleares po- dem ser coletadas cerca de uma semana depois.
Uma dose unitária de eritropoietina genericamente contém 1000 U/corpo a 100000 U/corpo e preferivelmente é de 3000 U/corpo a 12000 U/corpo (por exemplo, 6000 U/corpo). A dose para o sujeito individual será determinada pelo médico atendente considerando, por exemplo, a idade, peso e condição do sujeito, e a rota de administração. Da mesma maneira, a dose de eritropoietina não é limitada na presente invenção às doses estabe- lecidas acima.
Eritropoietina é genericamente administrada através de uma rota parenteral, por exemplo, ela pode ser administrada como injetável (por e- xemplo, subcutâneo, intravenoso, intramuscular, intraperitoneal) ou através de uma rota percutânea, transmucosa, nasal ou pulmonar. Ela também pode ser administrada oralmente.
Células mononucleares de sangue periférico são células mono- nucleares presentes no sangue periférico. Células mononucleares, também conhecidas como monócitos, são células que estão presentes principalmen- te no sangue e que residem em um estágio de diferenciação para células tipo macrófagos. Células tronco hematopoiéticas diferenciam na medula óssea a monoblastos e promonócitos e então a células mononucleares, que são liberadas no sangue. Com migração nos tecidos, as células mononucle- ares diferenciam em, por exemplo, macrófagos, células dendríticas, e histiócitos.
Com relação à mobilização de células mononucleares no sangue periférico usando EPO, foi pensado que duas semanas são requeridas após administração de EPO para mobilização das células mononucleares no san- gue periférico (Bahlmann F H et al., Blood, 103(3), 921-926, (2004)). Entre- tanto, foi verificado de acordo com a presente invenção que células mono- nucleares são mobilizadas em quantidades suficientes para uso no trata- mento de doenças isquêmicas ou em estimulação de revascularização no sangue periférico em cerca de uma semana após a administração de EPO.
Da mesma maneira, a presente invenção refere-se a um proces- so de obtenção de células mononucleares ou um processo de preparação de células mononucleares para transplante, compreendendo as etapas de:
(a) administração de eritropoietina a um sujeito; e
(b) coleta de células mononucleares de sangue periférico do sujeito cerca de uma semana após a administração de eritropoietina.
No contexto da presente invenção, a frase "cerca de uma sema- na" é genericamente de 3 a 12 dias, e preferivelmente de 5 a 9 dias (por e- xemplo, de 6 a 8 dias, ou 7 dias).
Em um outro aspecto, a presente invenção refere-se a uma composição para mobilização de células CDF34-positivas para uso no tra- tamento de doenças isquêmicas ou em estimulação de revascularização no sangue periférico compreendendo eritropoietina como um ingrediente ativo.
CD34 é um antígeno de célula-tronco de sangue. Ele é expresso em células-tronco de sangue, e também é expresso em, por exemplo, célu- las endoteliais vasculares, células progenitoras endoteliais vasculares, e cé- lulas estromais. Uma vez que células CD34-positivas, tais como células pro- genitoras endoteliais vasculares, são conhecidas estarem envolvidas em angiogênese, a proporção de células CD34-positivas em uma população de células mononucleares transplantadas é desejavelmente aumentada de mo- do a obter-se um melhor resultado terapêutico de doenças isquêmicas ou um melhor efeito de revascularização. Uma população das células mononu- cleares mobilizada no sangue periférico de acordo com o processo da pre- sente invenção genericamente tem um título de célula CD34-positiva sufici- ente para obtenção de um resultado terapêutico de doenças isquêmicas ou um efeito de revascularização. É particularmente útil no transplante com o objetivo de tratamento de doenças isquêmicas ou estimulação de revascula- rização aumentar a proporção de células CD34-positivas através de isola- mento ou concentração de células CD34-positivas a partir da população das células mononucleares obtidas através do processo da presente invenção.
Na presente invenção, uma alta proporção de células CD34- positivas nas células mononucleares significa que células CD34-positivas representam pelo menos 1 %, preferivelmente pelo menos 2%, e mais prefe- rivelmente pelo menos 3% das células mononucleares. O limite superior so- bre a proporção de células CD34-positivas nas células mononucleares pode ser, por exemplo, 99,99%, 99,9%, ou 99% e é teoricamente 100%.
As células CD34-positivas presentes nas células mononucleares obtidas de acordo com a presente invenção também podem ser CD45- positivas. CD45 é um antígeno comum de leucócito e é uma glicoproteína de membrana-chave de células tipo hematopoiéticas.
As células mononucleares de sangue periférico podem ser cole- tadas do sujeito através de um processo comum. Por exemplo, as células mononucleares podem ser obtidas através de recuperação direta de células mononucleares derivadas de sangue através de aférese de sangue, remo- ção de uma substancial porção dos eritrócitos, granulócitos, e plaquetas a- través de centrifugação quando necessário para capturar os leucócitos de sangue periférico, e então lavando os leucócitos de sangue periférico obtidos através de, por exemplo, centrifugação.
As células mononucleares de sangue periférico obtidas desta maneira opcionalmente ainda podem ser processadas através de adição, isolamento, ou purificação. Por exemplo, células desejadas, tais como célu- las CD34-positivas e/ou células progenitoras endoteliais vasculares, ainda podem ser concentradas ou isoladas a partir das células mononucleares de sangue periférico coletadas para administração. Células CD34-positivas substancialmente puras podem ser preparadas usando-se técnicas-padrão. Por exemplo, as células mononucleares de sangue periférico são reagidas com anticorpo anti-CD34, e então as células CD34-positivas são ligadas a pérolas magnéticas transportando anticorpo IgG anti-camundongo. As célu- las CD34-positivas ligadas às pérolas magnéticas são coletadas com um magneto de folha, e subseqüentemente as células CD34-positivas podem ser liberadas das pérolas magnéticas através de um tratamento com enzima. Alternativamente, as células CD34-positivas são ligadas a um anticorpo anti- CD34 marcado com um corante fluorescente e coletadas usando um sepa- rador mecânico de célula fluorescente.
Tratamento de doenças isquêmicas e revascularizacão
As células mononucleares de sangue periférico preparadas de acordo com a presente invenção podem ser administradas ao sujeito para o propósito de tratamento de uma doença isquêmica. Assim, um outro aspecto da presente invenção refere-se a um processo para tratamento de uma doença isquêmica em um sujeito compreendendo as etapas de:
(a) administração de eritropoietina ao sujeito;
(b) coleta de células mononucleares de sangue periférico do sujeito; e
(c) administração de células mononucleares de sangue periféri- co coletadas a um sítio-alvo do sujeito.
Doença isquêmica é uma condição médica na qual tecido cai em um estado isquêmico devido a reduzido fluxo de sangue na vasculatura cau- sado por vários fatores, tais como constrição do lúmen de vaso, desenvolvi- mento de coágulos de sangue, oclusão de vaso, vasculite, contração de va- so, ou um aumento em viscosidade de sangue. Doenças isquêmicas incluem distúrbio vascular periférico, doença isquêmica do coração (por exemplo, cardiomiopatia isquêmica, infartação miocardial, insuficiência cardíaca is- quêmica), doença cerebrovascular isquêmica, doença isquêmica de rim, do- ença isquêmica de pulmão, e doenças isquêmicas associadas com doenças infecciosas.
Distúrbio vascular periférico é uma condição médica na qual te- cido periférico cai em um estado isquêmico devido a um reduzido fluxo de sangue arterial periférico causado por exemplo, por constrição do lúmen de vaso, desenvolvimento de coágulos de sangue, oclusão de vaso, vasculite, contração de vaso, ou um aumento em viscosidade de sangue. Doenças associadas com distúrbio vascular periférico incluem doenças oclusivas arte- riais crônicas como arteriosclerose obliterante e doença de Buerger, e escle- rose sistêmica progressiva, eritematoso sistêmico, doença de Raynaud, sín- drome de vibração, aneurisma, e vasculite. Distúrbio vascular periférico é uma doença-alvo preferida do agente terapêutico da presente invenção, com arteriosclerose obliterante e doença de Buerger sendo alvos particularmente preferidos.
Em adição, as células mononucleares de sangue periférico pre- paradas de acordo com a presente invenção podem ser administradas ao sujeito para o propósito de estimulação de revascularização. Assim, um ou- tro aspecto da presente invenção refere-se a um processo para estimulação de revascularização em um sujeito compreendendo as etapas de:
(a) administração de eritropoietina ao sujeito;
(b) coleta de células mononucleares de sangue periférico do sujeito; e
(c) administração de células mononucleares de sangue periféri- co coletadas a um sítio-alvo do sujeito.
Como aqui usado, revascularização representa estimulação de angiogênese e/ou o crescimento e desenvolvimento de vasos sangüíneos. O processo da presente invenção é útil para estimulação de neogênese, cres- cimento e desenvolvimento de qualquer tipo de vaso sangüíneo, preferivel- mente artérias, e particularmente preferivelmente artérias periféricas. Revas- cularização pode ser monitorada através de técnicas conhecidas por aqueles versados na técnica, por exemplo, através de medição de densidade capilar usando um corante fosfatase alcalina.
Como aqui usado, um sítio-alvo em geral refere-se a um sítio onde isquemia está ocorrendo e a um sítio onde revascularização é deseja- da. No caso de que o transplante de células mononucleares de sangue peri- férico para um outro sítio conduzirá a revascularização em um sítio onde revascularização é desejada, o sítio-alvo pode referir-se a um tal outro sítio. Exemplos específicos do sítio para administração local incluem músculo de esqueleto de membro inferior, músculo de esqueleto de membro superior, e o coração (músculo de coração).
O número de células mononucleares coletadas administradas ou transplantadas para o sítio-alvo não é particularmente limitado, mas é gene- ricamente de 1,0x107 a 1,0x1012 células, e preferivelmente de 1 x109 a 1 x1011 células. Administração local é um processo que permite eficiente admi- nistração das células para a localização de uma área afetada sem exercer significante influência sistêmica. Administração local pode ser realizada u- sando, por exemplo, uma seringa comum, agulha, ou pino localizado.
Na administração das células mononucleares coletadas para o sítio-alvo, as células mononucleares podem ser administradas sozinhas ou em combinação com uma outra substância. A substância co-administrada com as células mononucleares não é particularmente limitada, mas é prefe- rivelmente uma substância que aperfeiçoa a atividade de revascularização.
Eritropoietina
Qualquer tipo de EPO pode ser empregada na presente inven- ção, mas é preferivelmente uma EPO de alta pureza, e também preferivel- mente aquelas tendo substancialmente a mesma atividade biológica como EPO mamífera, particularmente EPO humana.
A EPO usada na presente invenção pode ser preparada através de qualquer processo; por exemplo, ela pode ser EPO humana natural obti- da através de purificação a partir de um extrato de origem humana (ver, por exemplo, Publicação de Pedido de Patente Examinado Japonês N0 Hei 1- 38800) ou ela pode ser EPO humana produzida por técnicas de engenharia genética em E. coli, levedura, células de ovário de hamster Chinês (células CHO), células C127, células COS, células de mieloma, células BHK, ou célu- las de inseto, e então extraída, separada, e purificada através de qualquer um de vários métodos. A EPO usada na presente invenção é preferivelmen- te EPO produzida por técnicas de engenharia genética e é preferivelmente EPO produzida usando células mamíferas (particularmente células CHO) (ver, por exemplo, Publicação de Pedido de Patente Japonês N0 Hei 1- 44317, Kenneth Jacobset ai-, Nature, 313, 806-810 (1985)).
A EPO obtida por técnicas de recombinação genética pode ter a mesma seqüência de aminoácidos como EPO de origem natural, ou pode ter a mesma atividade biológica como EPO de origem natural mas tem uma se- qüência de aminoácidos com supressão, substituição, ou adição de um ou mais aminoácidos. A supressão, substituição ou adição de aminoácido pode ser introduzida através de métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, aqueles versados na técnica podem preparar um polipeptídeo funcionalmen- te equivalente a EPO através de introdução de apropriadas mutações na seqüência de aminoácidos de EPO usando mutagênese específica de sítio (Gotoh, T. et al. (1995) Gene 152, 271-275; Zoller, M. J. and Smith, M. (1983) Methods Enzymol. 100, 468-500; Kramer, W. et al. (1984) Nucleic Acids Res. 12, 9441-9456; Kramer, W. and Fritz, H. J. (1987) Methods Enzymol. 154, 350-367; Kunkel, T. A. (1985) Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 82, 488-492; Kunkel (1988) Methods Enzymol. 85, 2763-2766). Mutações de aminoácidos também podem ser criadas espontaneamente. Em geral, um resíduo de aminoácido é preferivelmente substituído com um outro resíduo de aminoácido que tem propriedades similares da cadeia lateral de aminoá- cido. Propriedades da cadeia lateral de aminoácido incluem, por exemplo, aminoácidos hidrofóbicos (A, I, L, M, F, P, W, Υ, V), aminoácidos hidrofílicos (R, D, N, C, E, Q, G, Η, K, S, T), aminoácidos que têm uma cadeia lateral alifática (G, A, V, L, I, P), aminoácidos que têm uma cadeia lateral de funcio- nalidade hidroxila (S, Τ, Y), aminoácidos que têm uma cadeia lateral conten- do enxofre (C, M), aminoácidos que têm uma cadeia lateral contendo amida ou ácido carboxílico (D, Ν, E, Q), aminoácidos que têm uma cadeia lateral contendo base (R, Κ, H), e aminoácidos que têm uma cadeia lateral aromáti- ca (H, F, Y, W) (as designações de uma letra dos aminoácidos são dadas em parênteses). Já é conhecido que um polipeptídeo com uma seqüência de aminoácidos modificada causada por supressão, adição ou substituição de um ou mais resíduos de aminoácidos retém sua atividade biológica (Mark, D.F. et al., Proc. NatL Acad. Sei. USA (1984) 81, 5662-5666; Zoller, M.J. & Smith, M. Nucleic Acids Research (1982) 10, 6487-6500; Wang, A. et al., Science 224, 1431-1433; DaIbadie-McFarIand, G. et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA (1982) 79, 6409-6413).
Uma proteína de fusão de EPO e uma outra proteína também podem ser usadas. Uma proteína de fusão pode ser construída, por exem- plo, através de ligação de ADN codificando EPO com um ADN codificando uma outra proteína em estrutura; inserção de ADN em um vetor de expres- são; que por sua vez é expresso em um hospedeiro. Uma outra proteína a ser fundida com a EPO da presente invenção não é particularmente limitada.
EPO quimicamente modificada também pode ser usada na in- venção. EPO quimicamente modificada inclui EPO ligada a um composto inorgânico ou orgânico, por exemplo, polietileno glicol ou vitamina B12. A EPO usada na presente invenção também pode ser um derivado de EPO.
Como aqui usado, um derivado de EPO refere-se a EPO com modificação dos aminoácidos na molécula de EPO ou EPO com modificação das cadeias de açúcar na molécula de EPO. Modificação das cadeias de açúcar na molécula de EPO inclui a adição, substituição, ou supressão de uma cadeia de açúcar. Uma modificação de cadeia de açúcar preferida na presente invenção é supressão de ácido siálico da molécula de EPO.
A EPO produzida por células animais recombinantes ou EPO derivada de urina é genericamente obtida como uma composição EPO que contem vários tipos de EPOs tendo diferentes estruturas de cadeia açúcar. O número de ácidos siálicos ligados à molécula de EPO em uma composi- ção EPO irá variar entre moléculas de EPO, mas em geral de 11 a 15 ácidos siálicos estão ligados a cada molécula de EPO individual. EPO asialilada (asialo-EPO) pode ser preparada através de remoção de ácido siálico. O número de ácidos siálicos a serem removidos durante processo de asialila- ção não é particularmente limitado; todos os ácidos siálicos podem ser re- movidos, ou 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, ou 14 ácidos siálicos po- dem ser removidos. Asialo-EPO preferida para uso na presente invenção tem não mais que 10 ácidos siálicos ligados à molécula de EPO, mais prefe- rivelmente não mais que 5, particularmente preferivelmente não mais que 2. O número de ácidos siálicos aqui mencionado refere-se ao número médio dos ácidos siálicos sobre as moléculas de EPO contidas na composição de EPO. Os ácidos siálicos médios por molécula podem ser medidos através de métodos conhecidos por aqueles versados na técnica (ver, por exemplo, EP 0428267).
EPO da qual ácido siálico foi removido (asialo-EPO) pode ser produzida através de métodos conhecidos por aqueles versados na técnica. Por exemplo, ela pode ser preparada através de tratamento de EPO com uma enzima tal como sialidase. Uma sialidase comercialmente disponível pode ser usada para este propósito (ver, por exemplo, National Publication of Translated Version No. 2005-507426; Nobuo Imai et al., Eur. J. Biochem. 194,457-462(1990)).
Exemplos de modificação dos aminoácidos em uma molécula de EPO incluem carbamilação, biotinilação, amidinação, acetilação, e guanidi- nação. Carbamilação é uma modificação de aminoácido preferida na presen- te invenção.
O resíduo de aminoácido a ser modificado não é particularmente limitado, e pode incluir lisina, arginina, ácido glutâmico, e triptofano. Lisina é um aminoácido preferido para ser modificado na presente invenção.
Da mesma maneira, EPO contendo lisina carbamilada é uma modalidade particularmente preferida de EPO com aminoácido modificado na presente invenção (ver, por exemplo, Mareei L. et al., Derivatives of eryt- hropoietin that are tissue protective but not erythropoietic. Science, 2004; 305:239; Fiordaliso E. et al., A nonerythropoietic derivative of erythropoietin protects the myocardium from ischemia-reperfusion injury. PNAS, 2005; 102:2046). Métodos para carbamilação de EPO incluem, por exemplo, car- bamilação através de reação com o íon cianato, alquil carbamilação através de reação com isocianato de alquila, e aril carbamilação através de reação com isocianato de arila.
Formulações Farmacêuticas
A EPO pode ser formulada de acordo com técnicas conhecidas através de adição de, por exemplo, um agente de suspensão, solubilizante, estabilizador, isotonizador, conservante, inibidor de adsorção, tensoativo, diluente, excipiente, regulador de pH, agente atenuante, tampão, agente re- dutor contendo enxofre, inibidor de oxidação, e assim por diante.
O agente de suspensão inclui metil celulose, polissorbato 80, hidroxietil celulose, goma Arábica, pulverizado de tragacanto, sódio carboxi- metil celulose, e monolaurato de polioxietileno sorbitano.
O solubilizante inclui óleo de mamona hidrogenado polioxietile- no, polissorbato 80, nicotinamida, monolaurato de sorbitano polioxietileno, macrogol, e os etil ésteres de ácidos graxos de óleo de mamona.
O estabilizante inclui dextrano 40, metil celulose, gelatina, sulfito de sódio, e metassulfito de sódio.
Certos aminoácidos também podem ser adicionados como um estabilizante (ver, por exemplo, Pedido de Patente Japonês aberto à inspe- ção pública Hei 10-182481). O aminoácido a ser adicionado como estabili- zante inclui, por exemplo, o aminoácido livre e seus sais, tais como sal de sódio, sal de potássio, e cloridrato. Um aminoácido simples ou uma combi- nação de dois ou mais aminoácidos pode ser adicionada. Não existem limi- tações particulares sobre o aminoácido adicionado como um estabilizante, mas aminoácidos preferidos neste sentido são, por exemplo, leucina, tripto- fano, serina, ácido glutâmico, arginina, histidina, e lisina.
O isotonizador inclui D-manitol e sorbitol.
O conservante inclui para hidroxibenzoato de metila, para- hidro- xibenzoato de etila, ácido sórbico, fenol, cresol, e clorocresol.
O inibidor de adsorção inclui albumina de soro humano, lecitina, dextrano, copolímero de óxido de etileno - óxido de propileno, hidroxipropil celulose, metil celulose, óleo de mamona hidrogenado polioxietileno, e polie- tileno glicol.
Exemplos representativos do tensoativo são tensoativos não- iônicos, por exemplo, tensoativos não-iônicos tendo um HLB de 6 a 18, por exemplo os ésteres de ácido graxo de sorbitano, como monocaprilato de sorbitano, monolaurato de sorbitano, e monopalmitato de sorbitano; os éste- res de ácido graxo de glicerol, como monocaprilato de glicerol, monomirista- to de glicerol, e monoestearato de glicerol; os ésteres de ácido graxo de po- liglicerol, como monoestearato de decaglicerila, diestearato de decaglicerila, e monolinolato de decaglicerila; ésteres de ácido graxo sorbitano polioxieti- leno, tais como monolaurato de sorbitano polioxietileno, monooleato de sor- bitano polioxietileno, monoestearato de sorbitano polioxietileno, monopalmi- tato de sorbitano polioxietileno, trioleato de sorbitano polioxietileno, e trieste- arato de sorbitano polioxietileno; ésteres de ácido graxo de sorbitol polioxieti- leno, como tetraestearato de sorbitol polioxietileno e tetraoleato de sorbitol polioxietileno; ésteres de ácido graxo de glicerol polioxietileno, tais como monoestearato de gliceril polioxietileno; ésteres de ácido graxo de polietileno glicol, tais como diestearato de polietileno glicol; poli oxietileno alquil éteres, tais como polioxietileno lauril éter; polioxietileno - polioxipropileno alquil éte- res, tais como polioxietileno - polioxipropileno glicol, polioxietileno - polioxi- propileno propil éter, e polioxietileno - polioxipropileno cetil éter; polioxietile- no alquilfenil éteres, tais como polioxietileno nonilfenil éter; óleo de mamona polioxietileno e óleo de mamona endurecido polioxietileno (óleo de mamona hidrogenado com polioxietileno); polioxietileno/derivados de cera de abelha como cera de abelha sorbitol polioxietileno; polioxietileno/derivados de Iano- lina tal como polioxietileno lanolina; e amidas de ácido graxo polioxietileno como polioxietileno estearamida. Adicionais exemplos representativos do tensoativo são tensoativos aniônicos, por exemplo, sulfatos de alquila que têm grupos alquila C10-18, como cetil sulfato de sódio, lauril sulfato de sódio, e oleil sulfato de sódio; polioxietileno alquil éter sulfatos que têm uma adição de óxido de etileno média de 2 a 4 mols e um grupo alquila C1O-18, tal como polioxietileno lauril sulfato de sódio; e sais de alquil sulfossuccinato éster tendo grupos alquila C8-18, tais como lauril sulfossuccinato de sódio. Adicio- nais exemplos representativos do tensoativo são tensoativos naturais, por exemplo, lecitina, glicerofosfolipídeos, esfingofosfolipídeos como esfingomie- lina, e ésteres de ácido graxo de sucrose com ácidos graxos C12-18· Somente um destes tensoativos ou uma combinação de dois ou mais destes tensoati- vos pode ser adicionada à formulação da presente invenção. Ésteres de áci- do graxo de sorbitano polioxietileno, como polissorbato 20, 40, 60, e 80, são tensoativos preferidos, e polissorbato 20 e 80 são particularmente preferidos. Polioxietileno - polioxipropileno glicóis como poloxâmero (por exemplo, Plu- ronic-F68 (marca registrada)) também são preferidos.
O agente redutor contendo enxofre inclui agentes redutores con- tendo grupo sulfidrila tais como N-acetilcisteína, N-acetilhomocisteína, ácido tiolático, tiodiglicol, tioetanolamina, tioglicerol, tiossorbitol, ácido tioglicólico e seus sais, tiossulfato de sódio, glutationa, e ácido tioalcanóicos C1-7. O inibidor de oxidação inclui ácido eritórbico, dibutilhidroxitolue- no, butilhidroxianisol, α-tocoferol, acetato de tocoferol, ácido L-ascórbico e seus sais, palmitato de ácido L-ascórbico, estearato de ácido L-ascórbico, bissulfito de sódio, sulfito de sódio, gaiato de triamila, e gaiato de propila e agentes quelantes tais como etilenodiaminotetraacetato de dissódio (EDTA) pirofosfato de sódio, e metafosfato de sódio.
Componentes que podem ser adicionados quando apropriado também incluem sais inorgânicos como cloreto de sódio, cloreto de potássio, cloreto de cálcio, fosfato de sódio, fosfato de potássio, e bicarbonato de só- dio, e sais orgânicos como citrato de sódio, citrato de potássio, e acetato de sódio.
O conteúdo de todas as patentes e documentos de referência expressamente citados no relatório descritivo deste pedido de patente são pelo que aqui incorporadas por referência em suas totalidades. Em adição, o conteúdo do relatório descritivo e desenhos de pedido de patente Japonês 2006-158998, que é a base para a reivindicação de prioridade deste Pedido de Patente, são aqui incorporados por referência em sua totalidade.
A presente invenção é descrita em detalhes pelos Exemplos a- baixo, mas não é limitada por estes exemplos.
Exemplo 1
Mobilização de células hematopoiéticas por EPO
EPO humana recombinante (Epogin (marca registrada), ingredi- ente ativo: beta epoetina) foi administrada subcutaneamente a camundongos (C57BL/6, idade: 9 semanas) uma vez por dia por 4 dias em uma dose de 100 pg/kg/dia. Veículo sozinho foi similarmente administrado subcutanea- mente ao camundongos controle. Os camundongos foram sacrificados no dia 5 e células de sangue periférico (0,6 a 1 mL) foram coletadas. Tampão de lise de célula vermelha de sangue (SIGMA) contendo 8,3 g/L de cloreto de amônio em tampão Tris-HCI a 0,01 M pH 7,5 +/- 0,2 foi adicionado como agente de hemolizante e deixadas em repouso por 5 a 10 minutos em tem- peratura ambiente, seguido por lavagem com BSF+PBS(-). Anticorpo de bloqueio de reação não-específica CD16/CD32 (receptor de Fcy lll/ll) (BD- Pharmingen, San Diego, CA) foi adicionado em 1 pg/106 células e mantido sobre gelo por 30 minutos. Anticorpo anti-mSca-1 conjugado - FITC (BD Pharmingen, San Diego, CA), anticorpo anti-mCD34 conjugado - PE, anti- corpo anti-mc-Kit conjugado - APC (BD Pharmingen, San Diego, CA), e um coquetel de anticorpos anti-mCD3 conjugado - APC-Cy7, CD4, CD8a, CD45R/B220, Ly6G (Gr-1), CD11b (cadeia alfa Mac-1), e Terl 19 foram usa- dos como marcadores de linhagem. Após manchamento com anticorpo, as células foram analisadas por FACSvantage SE (Becton Dickinson, Mountain View, CA).
Os resultados são mostrados na figura 1. Como mostrado em R3 em figura 1, o número de células c-Kit+Sca—1+Lin" foi aumentado por cerca de 13 vezes através da administração de EPO. Na medida em que células c- Kit+Sca-I+Lin- são um marcador de células similares a CFU-S em camun- dongos (ver, por exemplo, Blood, 1992 Dec. 15;80(12):3044-50). Os resulta- dos reportados acima demonstram que células similares a CFU-S são mobi- lizadas no sangue periférico através de administração de EPO. Ensaio de colônia de CFU-S
Células de sangue periférico de camundongos C57/b6 que rece- beram EPO subcutaneamente por 5 dias foram usadas como as células do- adoras. As células doadoras de 104 a 105 células/100-200 μΙ_ foram trans- plantadas via a veia de cauda dos camundongos C57/b6 receptores que re- ceberam uma dose letal de radiação-γ (950 cGy de 137Cs) usando um ins- trumento de exposição radiológica (Hitachi Medico). O baço foi excisado 8 ou 12 dias após transplante e foi analisado para colônias de baço através de manchamento de Bouin (número de colônias formadas no baço).
Os resultados são mostrados na figura 2 consistentes com os resultados das análises FACS, a mobilização de células similares a CFU-S no sangue periférico foi observada.
Exemplo 2
Terapia de anqioqênese através de transplante de células mononucleares de sangue periférico
Este estudo foi designado para investigar se células-tronco he- matopoiéticas podem ser mobilizadas no sangue periférico em 5 pacientes com doença de extremidade isquêmica severa através de administração de uma formulação de eritropoietina. Um estudo clínico de terapia de angiogê- nese através de transplante autólogo de células mononucleares periféricas também foi realizado. Um protocolo de estudo rotulado aberto foi empregado para o desenho geral do estudo clínico.
Os pacientes receberam 6000 U EPO através de injeção subcu- tânea duas semanas antes do planejado transplante de células (primeira administração). Uma semana antes de transplante de células, sangue foi retirado (cerca de 400 mL) para o propósito de doação de sangue autóloga e 6000 U EPO foram injetadas subcutaneamente (segunda administração). Na manhã do dia da operação, 6000 U EPO foram injetadas (terceira adminis- tração), seguida pela separação de cerca de 109 células mononucleares pe- riféricas do sangue periférico através de aférese de sangue. Amostras de sangue periférico foram coletadas antes de administração de EPO, após a segunda administração, e imediatamente antes de aférese e foram submeti- das a testes de sangue (WBC, CRP, CK) e a contagem de células CD34- positivas.
As células mononucleares periféricas separadas foram injetadas em 50 a 100 sítios no músculo do membro ou membros isquêmicos do paci- ente. O efeito da terapia de angiogênese foi avaliado baseado em observa- ção e medição dos seguintes itens antes de transplante de célula, no dia seguinte a uma administração, após uma semana, duas semanas, 1 mês, 2 meses, e 6 meses.
QOL: dor foi avaliada sobre uma escala análoga visual (VAS) com 0 sendo nenhuma dor e 10 sendo a dor mais intensa
amostragem de sangue
testes de sangue
angiografia
Ergometria: a distância caminhando absoluta ou distância de aparecimento de dor foram medidas em 2,4 km/h, horizontal
avaliação objetiva de lesões de pele e úlcera: índice de pressão braquial - tornozelo (ABPI), pletismografia digital, ergometria (capacidade ambulatória), termografia, doppler laser (LDPI), e medição de pressão parci- al de oxigênio transdérmica (TdPOa)
Mudanças em células CD34-positivas
Um sumário do caso, contagem de células transplantadas, e contagem de célula CD34-positivas são dadas na Tabela 1 abaixo. Como normalizada com o valor antes de administração de eritropoietina como 100%, a proporção de células CD34-positivas no sangue periférico mostrou um aumento de 82 a 245% (média 158%) no sangue retirado uma semana após a primeira administração de eritropoietina. O aumento foi 88 a 175% (média 139%) imediatamente antes de aférese após uma semana adicional.
Estes resultados indicam que a contagem de células CD34-positivas (duran- te flebotomia) em uma semana após a primeira administração de eritropoie- tina é a mesma ou maior que a contagem de células após duas semanas (imediatamente antes de aférese).
Células CD34-positivas totalizaram 0,02 a 0,1% (média = 0,06%) das células mononucleares recuperadas através de aférese de sangue.
Tabela 1
<table>table see original document page 20</column></row><table>
Avaliação Clínica de Transplante de Células
Avaliação por sintomas subjetivos e angiografia Tabela 2
<table>table see original document page 21</column></row><table>
A partir de um ponto de vista subjetivo, um aperfeiçoamento em dor foi observado em 3 de 4 casos.
Em adição, revascularização foi observada em angiografia no caso 3 em um mês após transplante (figura 3).
Avaliação Objetiva
Tabela 3
<table>table see original document page 21</column></row><table>
Aperfeiçoamentos em ABPI e TdPO2 foram notados em alguns casos. Um significante aperfeiçoamento na distância da caminhada na er- gometria foi visto no caso 2, de 160 m para 915 m.
Os resultados anteriores mostraram que células-tronco hemoto- poiéticas podem ser mobilizadas no sangue periférico através de administra- ção de eritropoietina e que doenças de artéria oclusivas periféricas podem ser tratadas através de terapia de angiogênese via o transplante de células mononucleares periféricas no músculo de esqueleto isquêmico.
Alem disso, o teor de células CD34-positivas em células mono- nucleares de sangue periférico recuperadas em uma semana após a primei- ra administração de EPO foi igual a ou maior que aquela nas células mono- nucleares recuperadas após duas semanas, indicando que as células mono- nucleares recuperadas em uma semana após administração de EPO são capazes de proverem um efeito terapêutico angiogenético igual ou maior que as células mononucleares recuperadas após duas semanas.
Aplicabilidade Industrial
Os métodos e composição da presente invenção são úteis para o tratamento de doenças isquêmicas, como distúrbio vascular periférico.
Claims (12)
1. Composição para mobilização de células mononucleares para uso no tratamento de doenças isquêmicas no sangue periférico, compreen- dendo eritropoietina como um ingrediente ativo.
2. Composição para mobilização de células mononucleares para uso em estimulação de revascularização em sangue periférico, compreen- dendo eritropoietina como um ingrediente ativo.
3. Composição de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que as células mononucleares mobilizadas são coletadas de um sujeito e então administradas ao sujeito.
4. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações -1 a 3, a qual é administrada a um sujeito de 3 a 12 dias antes de coleta de sangue periférico do sujeito.
5. Composição para o tratamento de doenças isquêmicas, com- preendendo como um ingrediente ativo células mononucleares separadas de sangue periférico de um sujeito a quem eritropoietina foi previamente admi- nistrada.
6. Composição para estimulação de revascularização, compre- endendo como um ingrediente ativo células mononucleares separadas de sangue periférico de um sujeito a quem eritropoietina foi previamente admi- nistrada.
7. Composição de acordo com a reivindicação 5 ou 6, em que a eritropoietina é administrada de 3 a 12 dias antes de coleta de sangue peri- férico.
8. Composição para mobilização de células CD34-positivas para uso no tratamento de doenças isquêmicas em sangue periférico, compreen- dendo eritropoietina como um ingrediente ativo.
9. Composição para mobilização de células CD34-positivas para uso na estimulação de revascularização em sangue periférico, compreen- dendo eritropoietina como um ingrediente ativo.
10. Método de preparação de células mononucleares para trans- plante, compreendendo as etapas de: (a) administração de eritropoietina a um sujeito; e (b) coleta de células mononucleares de sangue periférico do sujeito cerca de uma semana após a administração de eritropoietina.
11. Método para tratamento de uma doença isquêmica em um sujeito compreendendo as etapas de: (a) administração de eritropoietina a um sujeito; (b) coleta de células mononucleares de sangue periférico do sujeito; e (c) administração de células mononucleares de sangue perifé- rico coletadas a um sítio-alvo do sujeito.
12. Método para estimulação de revascularização em um sujeito compreendendo as etapas de: (a) administração de eritropoietina a um sujeito; (b) coleta de células mononucleares de sangue periférico do sujeito; e (c) administração de células mononucleares de sangue perifé- rico coletadas a um sítio-alvo do sujeito.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006-158998 | 2006-06-07 | ||
| JP2006158998 | 2006-06-07 | ||
| PCT/JP2007/061525 WO2007142288A1 (ja) | 2006-06-07 | 2007-06-07 | エリスロポエチンを用いた虚血性疾患の治療 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI0712063A2 true BRPI0712063A2 (pt) | 2011-12-20 |
Family
ID=38801534
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI0712063-0A BRPI0712063A2 (pt) | 2006-06-07 | 2007-06-07 | tratamento de doenças isquêmicas usando eritropoietina |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20090280094A1 (pt) |
| EP (1) | EP2047859A4 (pt) |
| JP (2) | JP5326079B2 (pt) |
| KR (1) | KR20090031547A (pt) |
| CN (1) | CN101460188B (pt) |
| AR (1) | AR061269A1 (pt) |
| AU (1) | AU2007255717B2 (pt) |
| BR (1) | BRPI0712063A2 (pt) |
| CA (1) | CA2654154A1 (pt) |
| HK (1) | HK1128419A1 (pt) |
| IL (1) | IL195648A0 (pt) |
| MX (1) | MX2008015392A (pt) |
| NO (1) | NO20085098L (pt) |
| NZ (1) | NZ573792A (pt) |
| RU (1) | RU2008152746A (pt) |
| TW (1) | TW200815026A (pt) |
| WO (1) | WO2007142288A1 (pt) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007142288A1 (ja) * | 2006-06-07 | 2007-12-13 | The University Of Tokushima | エリスロポエチンを用いた虚血性疾患の治療 |
| AU2010254811B2 (en) | 2009-06-05 | 2015-02-19 | FUJIFILM Cellular Dynamics, Inc. | Reprogramming T cells and hematopoietic cells |
| FR2957799B1 (fr) | 2010-03-26 | 2012-08-17 | Inst Des Vaisseaux Et Du Sang | Compositions proangiogeniques, leur procede de preparation et leurs utilisations |
| CN101940590B (zh) * | 2010-08-27 | 2013-09-18 | 上海士腾生物技术有限公司 | 促进创伤愈合的制剂及其制备方法 |
| CN101940594B (zh) * | 2010-08-27 | 2013-12-04 | 上海士腾生物技术有限公司 | 用于治疗缺血性心血管疾病的制剂及其制备方法 |
| JP5582983B2 (ja) * | 2010-11-24 | 2014-09-03 | 楠本化成株式会社 | 水系沈降防止剤 |
| KR101544674B1 (ko) | 2013-06-05 | 2015-09-02 | 서울대학교산학협력단 | 에리쓰로포이에틴으로 프라이밍된 혈관 생성능이 향상된 말초혈액 줄기세포 및 그 용도 |
| DE102017116204A1 (de) | 2017-07-18 | 2019-01-24 | Universität Rostock | Verfahren zur Vorhersage der Antwort auf die kardiovaskuläre Regeneration |
Family Cites Families (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62501010A (ja) | 1984-12-04 | 1987-04-23 | ジェネティックス・インスチチュ−ト・インコ−ポレ−テッド | エリトロポエチンの生産方法 |
| US4677195A (en) | 1985-01-11 | 1987-06-30 | Genetics Institute, Inc. | Method for the purification of erythropoietin and erythropoietin compositions |
| AU646822B2 (en) | 1989-10-13 | 1994-03-10 | Kirin-Amgen Inc. | Erythropoietin isoforms |
| TWI240627B (en) | 1996-04-26 | 2005-10-01 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Erythropoietin solution preparation |
| DE19857609A1 (de) * | 1998-12-14 | 2000-06-15 | Hannelore Ehrenreich | Verwendung von Erythropoietin zur Behandlung von cerebralen Ischämien des Menschen |
| BR0213402A (pt) | 2001-10-29 | 2004-10-13 | Crucell Holland Bv | Métodos para identificar uma célula de mamìfero capaz de produzir uma molécula proteinácea, para selecionar uma célula de mamìfero capaz de produzir uma molécula proteinácea, para se obter uma célula de mamìfero a partir de uma população heterogênea de células, e para produzir uma molécula proteinácea, composição farmaceuticamente aceitável, eritropoietina recombinantemente produzida, usos de uma célula de mamìfero, da eritropoietina recombinantemente produzida, e de uma composição de moléculas semelhantes à eritropoietina, preparação farmacêutica, método para o tratamento preventivo e/ou terapêutico de um distúrbio, composição de moléculas semelhates à eritropoietina, métodos para produzir, em uma célula de mamìfero, moléculas proteináceas, para produzir uma fração enriquecida em uma molécula proteinácea, e para fracionar uma mistura que contém moléculas proteináceas, fração, e, usos de uma fração ou composição, e de eritropoietina recombinantemente produzìvel em uma célula de mamìfero |
| US6784154B2 (en) * | 2001-11-01 | 2004-08-31 | University Of Utah Research Foundation | Method of use of erythropoietin to treat ischemic acute renal failure |
| US20040009908A1 (en) * | 2002-07-10 | 2004-01-15 | Stamler Jonathan S. | Methods for treating or preventing ischemic injury |
| DE10234192B4 (de) * | 2002-07-26 | 2009-11-26 | Epoplus Gmbh Co.Kg | Verwendung von Erythropoetin |
| US20050058622A1 (en) * | 2002-12-06 | 2005-03-17 | Lyman Stewart D. | Methods of using Flt3-Ligand in hematopoietic cell transplantation procedures incorporating nonmyeloablative conditioning regimens |
| CN1764470A (zh) * | 2003-03-27 | 2006-04-26 | 詹森药业有限公司 | 促红细胞生成素在中风康复中的用途 |
| BRPI0408829A (pt) * | 2003-03-27 | 2006-04-04 | Janssen Pharmaceutica Nv | uso de eritropoietina em recuperação de acidente vascular cerebral |
| US20040198663A1 (en) * | 2003-04-04 | 2004-10-07 | Baker John E. | Method of treating cardiac ischemia by using erythropoietin |
| DE102004063927A1 (de) * | 2004-01-23 | 2005-12-15 | Epoplus Gmbh Co.Kg | Einsatz von niedrig dosiertem Erythropoietin zur Stimulation endothelialer Vorläuferzellen sowie zur Organregeneration und Progressionsverlangsamung von Endorganschäden |
| JP2007217283A (ja) * | 2004-03-30 | 2007-08-30 | Niigata Tlo:Kk | 血管新生促進剤および血管新生療法 |
| JP2006158998A (ja) | 2004-12-02 | 2006-06-22 | Nippon Sheet Glass Co Ltd | ロッドの反り選別装置 |
| UA100222C2 (uk) * | 2005-08-05 | 2012-12-10 | Араім Фармасьютікалз, Інк. | Тканинозахисні пептиди і їх застосування |
| WO2007142288A1 (ja) * | 2006-06-07 | 2007-12-13 | The University Of Tokushima | エリスロポエチンを用いた虚血性疾患の治療 |
-
2007
- 2007-06-07 WO PCT/JP2007/061525 patent/WO2007142288A1/ja active Application Filing
- 2007-06-07 MX MX2008015392A patent/MX2008015392A/es active IP Right Grant
- 2007-06-07 US US12/303,669 patent/US20090280094A1/en not_active Abandoned
- 2007-06-07 NZ NZ573792A patent/NZ573792A/en not_active IP Right Cessation
- 2007-06-07 RU RU2008152746/15A patent/RU2008152746A/ru not_active Application Discontinuation
- 2007-06-07 EP EP07744855A patent/EP2047859A4/en not_active Withdrawn
- 2007-06-07 BR BRPI0712063-0A patent/BRPI0712063A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-06-07 CN CN2007800209636A patent/CN101460188B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2007-06-07 JP JP2008520614A patent/JP5326079B2/ja active Active
- 2007-06-07 CA CA002654154A patent/CA2654154A1/en not_active Abandoned
- 2007-06-07 TW TW096120549A patent/TW200815026A/zh unknown
- 2007-06-07 KR KR1020097000110A patent/KR20090031547A/ko not_active Application Discontinuation
- 2007-06-07 AU AU2007255717A patent/AU2007255717B2/en not_active Ceased
- 2007-06-07 AR ARP070102478A patent/AR061269A1/es not_active Application Discontinuation
-
2008
- 2008-12-02 IL IL195648A patent/IL195648A0/en unknown
- 2008-12-08 NO NO20085098A patent/NO20085098L/no not_active Application Discontinuation
-
2009
- 2009-08-20 HK HK09107647.3A patent/HK1128419A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-03-15 JP JP2013054102A patent/JP2013116919A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2047859A4 (en) | 2010-05-05 |
| IL195648A0 (en) | 2011-08-01 |
| JP2013116919A (ja) | 2013-06-13 |
| JPWO2007142288A1 (ja) | 2009-10-29 |
| MX2008015392A (es) | 2009-05-05 |
| EP2047859A1 (en) | 2009-04-15 |
| NZ573792A (en) | 2011-09-30 |
| HK1128419A1 (en) | 2009-10-30 |
| NO20085098L (no) | 2009-02-27 |
| US20090280094A1 (en) | 2009-11-12 |
| CA2654154A1 (en) | 2007-12-13 |
| TW200815026A (en) | 2008-04-01 |
| JP5326079B2 (ja) | 2013-10-30 |
| AU2007255717A1 (en) | 2007-12-13 |
| AU2007255717B2 (en) | 2013-07-11 |
| KR20090031547A (ko) | 2009-03-26 |
| RU2008152746A (ru) | 2010-07-20 |
| WO2007142288A1 (ja) | 2007-12-13 |
| AR061269A1 (es) | 2008-08-13 |
| CN101460188B (zh) | 2013-09-04 |
| CN101460188A (zh) | 2009-06-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| BRPI0712063A2 (pt) | tratamento de doenças isquêmicas usando eritropoietina | |
| JP3459248B2 (ja) | 合成肺界面活性ペプチド | |
| US7563459B2 (en) | Methods and compositions for regenerating tissue | |
| JP6796143B2 (ja) | トロンビン処理幹細胞に由来するエキソソームを含む慢性肺疾患治療用組成物 | |
| US8673580B2 (en) | Agent for recruitment of bone-marrow-derived pluripotent stem cell into peripheral circulation | |
| EA007967B1 (ru) | Защита, восстановление и усиление эритропоэтинреактивных клеток, тканей и органов | |
| JPWO2009020201A1 (ja) | 単離された細胞集団 | |
| JP2023002657A (ja) | α１－アンチトリプシン（ＡＡＴ）を発現する遺伝子改変された間葉系幹細胞 | |
| BR112014011488B1 (pt) | Medicamento para tratamento terapêutico e/ou melhora de sépsis | |
| WO2004100972A1 (ja) | 組織破壊を伴う疾患の予防及び／または治療剤 | |
| KR101144687B1 (ko) | Ｇ－ｃｓｆ 를 함유하는 선유아세포 동원제 및 창상 치료제 | |
| JP4200509B2 (ja) | Ｅｐｏ誘導体含有血液関連疾患治療剤 | |
| JP5924611B2 (ja) | 造血細胞移植に伴う生着症候群の予防及び／又は治療のための医薬 | |
| RU2773055C2 (ru) | Пептид для индукции регенерации ткани и его применение | |
| Caradonna et al. | Different methods of bone marrow harvesting influence cell characteristics and purity, affecting clinical outcomes | |
| EP3539561A1 (en) | Therapeutic agent for cerebral infarction | |
| JPWO2006075587A1 (ja) | Ｃｓｆ含有低用量投与用治療剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B08F | Application dismissed because of non-payment of annual fees [chapter 8.6 patent gazette] |
Free format text: REFERENTE A 8A ANUIDADE. |
|
| B08K | Patent lapsed as no evidence of payment of the annual fee has been furnished to inpi [chapter 8.11 patent gazette] |
Free format text: EM VIRTUDE DO ARQUIVAMENTO PUBLICADO NA RPI 2310 DE 14-04-2015 E CONSIDERANDO AUSENCIA DE MANIFESTACAO DENTRO DOS PRAZOS LEGAIS, INFORMO QUE CABE SER MANTIDO O ARQUIVAMENTO DO PEDIDO DE PATENTE, CONFORME O DISPOSTO NO ARTIGO 12, DA RESOLUCAO 113/2013. |