BR112021010125A2 - Nanopartículas que contêm membrana celular e usos das mesmas - Google Patents

Abstract

NANOPARTÍCULAS QUE CONTÊM MEMBRANA CELULAR E USOS DAS MESMAS. A presente invenção refere-se a nanopartículas que contêm membrana celular e seus usos. A nanopartícula compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornecendo um suporte sólido para a dita membrana celular na dita superfície externa (ou envoltório). A presente invenção também se refere a processos de fabricação de nanopartículas. A presente invenção refere-se ainda a composições que compreende as nanopartículas e métodos de uso das nanopartículas.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "NANOPARTÍCULAS QUE CONTÊM MEMBRANA CELULAR E USOS DAS MESMAS" I. PEDIDO RELACIONADO

[0001] O presente pedido reivindica prioridade ao pedido de patente provisório Norte-Americana N° 62/771,561, depositado em 26 de novembro de 2018, cuja descrição é incorporada a título de referência na íntegra para todas as finalidades. II. CAMPO DA INVENÇÃO

[0002] A presente invenção refere-se a nanopartículas que contêm membrana celular e usos das mesmas. A nanopartícula compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornecendo um suporte sólido para a dita membrana celular na dita superfície externa (ou envoltório). A presente invenção refere-se também a processos de fabricação de nanopartículas. A presente invenção refere-se ainda a composições que compreendem as nanopartículas e métodos de uso das nanopartículas. III. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0003] O documento WO 2013/052167 A2 refere-se a nanopartículas encapsuladas em membrana e métodos de uso. Zhang et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2017, 56: 14075-14079 refere-se ao carregamento remoto de pequenas moléculas terapêuticas em vesículas derivadas de membrana celular enriquecidas com colesterol. Ying et al., Adv. Fund. Mater. 2018, 28, 1801032 refere-se a vesículas de plaquetas carregadas remotamente para distribuição direcionada à doença de produtos terapêuticos. Brian et al., Nature Biotechnology, 33: 81-88 (2015) refere-se a lipossomas manipulados que sequestram exotoxinas bacterianas e protegem contra infecções invasivas graves em camundongos.

[0004] Novas nanopartículas que contêm membrana celular são necessárias. A presente invenção aborda esta e as necessidades relacionadas na técnica. IV. SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0005] Em um aspecto, a presente invenção fornece uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornecendo um suporte sólido à dita membrana celular na dita superfície externa (ou envoltório) e em que: a) o dito compartimento interno (ou núcleo interno) é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico; e/ou b) a dita membrana celular da dita superfície externa (ou envoltório) compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide contanto que, quando a dita membrana celular é derivada de um glóbulo vermelho, o dito compartimento interno (ou núcleo interno) é isotônico a um líquido celular ou fisiológico.

[0006] Em outro aspecto, a presente invenção fornece uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório), em que o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornece um suporte sólido para a dita superfície externa (ou envoltório) e/ou é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e a dita superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina.

[0007] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um processo para produzir uma nanopartícula que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação em um líquido para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide.

Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um processo para produzir uma nanopartícula que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação para formar um nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide; e c) exercer energia exógena sobre a dita nanopartícula em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e a dita superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende o dito nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide.

Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um processo para produzir uma nanopartícula que compreende exercer energia exógena sobre uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular.

[0008] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um processo para produzir uma nanopartícula que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide e um esfingolipídio dissolvido em um solvente miscível em água para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação, por exemplo, combinação em um líquido, para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende a dita membrana celular, o dito esteroide e o dito esfingolipídio.

[0009] Nanopartículas produzidas por meio dos processos descritos acima também são fornecidas.

[0010] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um sistema ou dispositivo de administração de medicamento que compreende uma quantidade eficaz da nanopartícula descrita acima.

[0011] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz da nanopartícula descrita acima e um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[0012] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um método para tratar ou prevenir uma doença ou condição em um indivíduo que precisa que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e um superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornecendo um suporte sólido à dita membrana celular na dita superfície externa (ou envoltório). Opcionalmente e em algumas modalidades: a) o dito compartimento interno (ou núcleo interno) da dita nanopartícula é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou líquido fisiológico; e/ou b) a dita membrana celular da dita superfície externa (ou invólucro) da dita nanopartícula compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide. Ainda opcionalmente, em algumas modalidades, quando a nanopartícula compreende uma membrana celular que é derivada de um glóbulo vermelho, o compartimento interno (ou núcleo interno) é isotônico a um líquido celular ou fisiológico. Em algumas modalidades, as nanopartículas são administradas usando um sistema de distribuição de medicamento ou composição farmacêutica que compreende as nanopartículas.

[0013] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de uma quantidade eficaz da nanopartícula descrita acima para a fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir uma doença ou condição em um indivíduo que precisa.

[0014] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição imunogênica que compreende uma quantidade eficaz da nanopartícula descrita acima e, opcionalmente, compreende ainda um adjuvante imunogênico ou um intensificador imune. Uma vacina que compreende a composição imunogênica específica para neoplasma descrita acima também é fornecida. Um método para tratar ou prevenir uma neoplasia em um indivíduo usando a composição imunogênica ou a vacina é ainda fornecido. O uso de uma quantidade eficaz da composição imunogênica específica para neoplasma para a fabricação de uma vacina para o tratamento ou proteção de um indivíduo contra um neoplasma é ainda fornecido.

[0015] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição imunogênica que é configurada para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula e em que a superfície externa da nanopartícula compreende a porção. Uma vacina que compreende a composição imunogênica descrita acima também é fornecida. Um método para induzir a uma resposta imune a uma porção associada a uma doença ou condição em um indivíduo usando a composição imunogênica ou a vacina é ainda fornecido. O uso de uma quantidade eficaz da composição imunogênica para a fabricação de uma vacina para proteger um indivíduo contra uma doença ou condição associada à porção é ainda fornecido.

[0016] Em algumas modalidades, as presentes nanopartículas, sistemas de distribuição de medicamentos, composições farmacêuticas e métodos podem ser usados para distribuir os medicamentos exemplificativos listados no Orange Book: Approved Drug Products with Therapeutic Equivalence Evaluations (Atual até março de 2012) publicado pela US Food and Drug Administration, os medicamentos exemplificativos listados no The Merck Index (uma publicação Norte- Americana, a 14ª edição impressa, Whitehouse Station, N J., EUA) e sua versão online (The Merck Index OnlineSM, Última postagem na Web: terça-feira, 01 de maio de 2012) e os medicamentos exemplificativos listados em Biologies Products & Establishments publicado pela US Food and Drug Administration e podem ser usados para tratar ou prevenir as doenças e transtornos correspondentes.

[0017] Em alguns aspectos, a presente invenção refere-se ao Pedido de Patente Norte-Americana N° de Série 13/827.906, depositado em 14 de março de 2013 e publicado como documento US 2013/337066 A1, Pedido Internacional Nº PCT/US2012/039411, depositado em 24 de maio de 2012 e publicado como documento WO 2013/052167 A2 e Pedido Provisório Norte-Americano Nº de Série 61/492.626, depositado em 02 de junho de 2011. O conteúdo dos pedidos acima é incorporado a título de referência na íntegra. V. BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0018] Aqueles versados na técnica entenderão que os desenhos, descritos abaixo, são apenas para fins ilustrativos. Os desenhos não se destinam a limitar o escopo dos presentes ensinamentos de forma alguma.

[0019] A Figura 1 ilustra a formulação e caracterização de vesículas de membrana de RBC enriquecidas com colesterol (Cho-RBC-V). (A) O rendimento da carga de colesterol exógeno em diferentes cargas iniciais de colesterol. (B) Vazamento de calceína de Cho-RBC-V (carga inicial de 10 %) comparado com vesículas de membrana sem adição de colesterol exógeno. (C) Neutralização dependente da dose do sobrenadante da cultura de MRS A contra hemólise de hemácias. Em todos os estudos, os dados representam a média  DP, n = 3.

[0020] A Figura 2 ilustra a formulação e caracterização de vesículas de membrana plaquetária enriquecidas com colesterol (Cho-PL-V). (A) O rendimento da carga de colesterol exógeno em diferentes cargas iniciais de colesterol. (B) Vazamento de calceína de Cho-PL-V (carga inicial de 10 %) comparado com vesículas de membrana sem adição de colesterol exógeno. (C) Neutralização dependente da dose de anticorpo antiplaquetário com Cho-PL-V. Em todos os estudos, os dados representam a média  DP, n = 3.

[0021] A Figura 3 ilustra a formulação e caracterização de vesículas de membrana de macrófagos enriquecidas com colesterol (Cho-MO-V). (A) O rendimento da carga de colesterol exógeno em diferentes cargas iniciais de colesterol. (B) Vazamento de calceína de Cho-MO-V (carga inicial de 10 %) comparado com vesículas de membrana sem adição de colesterol exógeno. (C) Neutralização dependente da dose de LPS (endotoxina), conforme refletido pela produção reduzida de IL-6 em cultura por células de macrófagos. Em todos os estudos, os dados representam a média  DP, n = 3.

[0022] A Figura 4 ilustra a formulação e caracterização de vesículas de membrana de neutrófilos enriquecidas com colesterol (Cho-Neu-V). (A) O rendimento da carga de colesterol exógeno em diferentes cargas iniciais de colesterol. (B) Vazamento de calceína de Cho-Neu-V (carga inicial de 10 %) comparado com vesículas de membrana sem adição de colesterol exógeno. (C) Neutralização dependente da dose de TNF-. Em todos os estudos, os dados representam a média  DP, n = 3.

[0023] A Figura 5 ilustra um processo exemplificativo para produzir a Composição A que compreende uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório), em que o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornece um suporte sólido para a dita superfície externa (ou invólucro) e a dita superfície externa (ou invólucro) compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, colesterol e esfingomielina.

[0024] A Figura 6 ilustra a distribuição de tamanho de partícula de uma Composição A exemplificativa.

[0025] A Figura 7 ilustra a eficácia exemplificativa in vivo da Composição A. (A). Curvas de sobrevida nas primeiras 48 horas após o desafio bacteriano e o tratamento com a formulação. (B). Cargas bacterianas em tecidos pulmonares coletados de camundongos que sobreviveram por 48 horas após o desafio bacteriano e o tratamento com formulação. Os dados foram analisados usando o teste Log-rank (Mantal-Cox) (A) e o t-teste de Student (B). As contagens de CFU nos pulmões coletados dos camundongos individuais que sobreviveram 48 horas após o desafio/tratamento foram transformadas em log e representadas na Figura 7B. A contagem de bactérias pulmonares em camundongos tratados com a Composição A foi significativamente menor do que nos camundongos tratados com o veículo.

[0026] A Figura 8 ilustra efeitos reproduzíveis exemplificativos da Composição A sobre taxa de sobrevida. A. Curvas de sobrevida de um único estudo no qual 2 lotes diferentes da Composição A, 5-257-06 e 5- 257-16, foram dosados por via intratraqueal em camundongos imediatamente após a instilação intratraqueal com MRSA. * p < 0,05; ** p < 0,01. B. Média das curvas de sobrevida de 3 estudos separados nos quais 3 lotes de Composição A, 5-257-06, 5-257-16 e 5-260-02, foram dosados por via intratraqueal em camundongos imediatamente após a instilação intratraqueal com MRSA. Os dados são expressos como média ± SEM. As taxas de sobrevida nos grupos tratados com veículo vs. lote em cada ponto de tempo (19, 26, 48 ou 96 horas) foram analisadas usando o t-teste de Student não pareado. * p < 0,05; ** p < 0,01.

[0027] A Figura 9 ilustra efeitos exemplificativos de dose-curva da Composição A sobre a taxa de sobrevida. O lote 5-266-01 foi usado no estudo. A data de sobrevida foi agrupada a partir de 4 testes independentes com um total de 40 camundongos dosados com veículo, 5-266-01 a 19 mg/kg ou 2 mg/kg e um total de 30 camundongos dosados com 5-266-01 a 6 mg/kg.

[0028] A Figura 10 ilustra efeitos exemplificativos da Composição A sobre as cargas bacterianas pulmonares. Composição A, lote 5-257-16, foi dosada a 22,5 mg/kg ou veículo. Os pulmões dos camundongos foram coletados 24 horas após o desafio/tratamento.

[0029] A Figura 11 ilustra a caracterização exemplificativa da DiR- Composição A in vitro. A tabela do painel superior mostra os dados de dispersão dinâmica de luz da Dir-Composição A. O gráfico inferior mostra a estabilidade da intensidade de fluorescência da Dir- Composição A após diálise por até 180 horas.

[0030] A Figura 12 ilustra a absorção pulmonar e distribuição exemplificativas da DiR-Composição A após administração intratraqueal. Os tempos indicam minutos ou horas após a administração intratraqueal de DiR-Composição A. Cada amostra representa o pulmão de um único camundongo.

[0031] A Figura 13 ilustra o curso do tempo de retenção exemplificativo da DiR-Composição A nos pulmões de camundongos após administração intratraqueal.

[0032] A Figura 14 ilustra o curso do tempo de retenção exemplificativo da DiR-Composição A nos pulmões de camundongos após administração intratraqueal.

[0033] A Figura 15 ilustra a distribuição de absorção exemplificativa da DiR-Composição A em duas concentrações diferentes. Há pouca ou nenhuma diferença entre a distribuição de absorção da DiR- Composição A nos pulmões de camundongos administrados por via intratraqueal com DiR-Composição A a 20 mg/mL (22 mg/kg) ou 40 mg/mL (44 mg/kg). VI. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0034] A prática da presente invenção empregará, salvo indicação em contrário, técnicas convencionais de nanotecnologia, nanoengenharia, biologia molecular (incluindo técnicas recombinantes), microbiologia, biologia celular, bioquímica, imunologia e farmacologia, as quais estão dentro da habilidade na técnica. Tais técnicas são totalmente explicadas na literatura, tal como Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2ª ed. (Sambrook et al., 1989); Oligonucleotide Synthesis (M. J. Gait, ed., 1984); Animal Cell Culture (R. I. Freshney, ed., 1987); Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.); Current Protocols in Molecular Biology (F. M. Ausubel et al., Eds., 1987 e atualizações periódicas); PCR: The Polymerase Chain Reaction (Mullis et al., Eds., 1994); Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 20ª ed. (Lippincott, Williams & Wilkins 2003) e Remington, The Science and Practice of Pharmacy, 22ª ed., (Pharmaceutical Press and Philadelphia College of Pharmacy na University of the Sciences 2012).

[0035] A menos que definido de outra forma, todos os termos técnicos e científicos usados no presente documento têm o mesmo significado conforme comumente entendido por aqueles versados na técnica à qual a presente invenção pertence. Todas as patentes, pedidos, pedidos publicados e outras publicações citados no presente documento são incorporados a título de referência na íntegra. Se uma definição apresentada nesta seção for contrária ou de outra forma inconsistente com uma definição apresentada nas patentes, pedidos, pedidos publicados e outras publicações que são incorporados ao presente documento a título de referência, a definição apresentada nesta seção prevalecerá sobre a definição que é incorporada ao presente documento a título de referência. A. Definições

[0036] Para facilitar a compreensão da invenção, uma série de termos e abreviaturas, conforme usado no presente documento, são definidos a seguir:

[0037] Ao introduzir elementos da presente invenção ou a(s) modalidade(s) preferida(s) da mesma, os artigos "um", "uma", "o", "a" e "dito(a)" se destinam significar que há um ou mais dos elementos. Os termos "compreendendo", "incluindo" e "tendo" se destinam a ser inclusivos e significam que pode haver elementos adicionais além dos elementos listados.

[0038] O termo "e/ou", quando usado em uma lista de dois ou mais itens, significa que qualquer um dos itens listados pode ser empregado individualmente ou em combinação com qualquer um ou mais dos itens listados. Por exemplo, a expressão "A e/ou B" se destina a significar um ou ambos de A e B, ou seja, A apenas, B apenas ou A e B em combinação. A expressão "A, B e/ou C" se destina a significar A apenas, B apenas, C apenas, A e B em combinação, A e C em combinação, B e C em combinação ou A, B e C em combinação.

[0039] Membrana Celular: O termo "membrana celular", conforme usado no presente documento, refere-se a uma membrana biológica que envolve ou separa a estrutura que atua como uma barreira seletiva, dentro ou ao redor de uma célula ou de uma partícula viral emergente. A membrana celular é seletivamente permeável a íons e moléculas orgânicas e controla o movimento de substâncias para dentro e para fora das células. A membrana celular compreende uma uni- ou bicamada fosfolipídica e, opcionalmente, proteínas e carboidratos associados. Conforme usado no presente documento, membrana celular refere-se a uma membrana obtida a partir de uma membrana biológica de ocorrência natural de uma célula ou organelas celulares ou uma derivada dos mesmos. Conforme usado no presente documento, o termo "ocorrência natural" refere-se a uma existente na natureza. Conforme usado no presente documento, o termo "derivada dos mesmos" refere-se a qualquer modificação subsequente da membrana natural, tal como isolar a membrana celular, criar porções ou fragmentos da membrana, remover e/ou adicionar determinados componentes, tais como lipídios, proteínas ou carboidratos, retirada de ou para a membrana de uma célula ou organela celular. Uma membrana pode ser derivada de uma membrana de ocorrência natural através de quaisquer métodos adequados. Por exemplo, uma membrana pode ser preparada ou isolada a partir de uma célula ou de um vírus e a membrana preparada ou isolada pode ser combinada com outras substâncias ou materiais para formar uma membrana derivada. Em outro exemplo, uma célula ou vírus pode ser modificado de forma recombinante para produzir substâncias "não naturais" que são incorporadas em sua membrana in vivo e a membrana celular ou viral pode ser preparada ou isolada a partir da célula ou do vírus para formar uma membrana.

[0040] Em várias modalidades, a membrana celular que cobre qualquer uma das nanopartículas unilamelares ou multilamelares pode ser ainda modificada para ser saturada ou insaturada com outros componentes lipídicos, tais como colesterol, ácidos graxos livres e fosfolipídios, também pode incluir proteínas endógenas ou adicionadas e carboidratos, tal como um antígeno na superfície celular. Nestes casos, uma quantidade em excesso dos outros componentes lipídicos pode ser adicionada à parede da membrana, que se desprenderá até que a concentração na parede da membrana atinja o equilíbrio, o que pode ser dependente do ambiente das nanopartículas. As membranas também podem compreender outros agentes que podem ou não aumentar a atividade da nanopartícula. Em outros exemplos, grupos funcionais, tais como anticorpos e aptâmeros, podem ser adicionados à superfície externa da membrana para aumentar o direcionamento para o local, tais como os epítopos da superfície celular encontrados em células cancerosas. A membrana das nanopartículas também pode compreender partículas que podem ser biodegradáveis, nanopartículas catiônicas incluindo, porém sem limitações, ouro, prata e nanopartículas sintéticas.

[0041] Membrana Sintética ou Artificial: Conforme usado no presente documento, o termo "membrana sintética" ou "membrana artificial" refere-se a uma membrana feita pelo homem que é produzida a partir de um material orgânico, tais como polímeros e líquidos, bem como materiais inorgânicos. Uma grande variedade de membranas sintéticas é bem conhecida na técnica.

[0042] Nanopartícula: Em algumas modalidades, o termo "nanopartícula", conforme usado no presente documento, refere-se a nanoestrutura, partículas, vesículas ou fragmentos das mesmas que têm pelo menos uma dimensão (por exemplo, altura, comprimento, largura ou diâmetro) entre cerca de 1 nm e cerca de 10 μm. Para uso sistêmico, um diâmetro médio de cerca de 30 nm a cerca de 500 nm, ou cerca de 30 nm a cerca de 300 nm, ou cerca de 50 nm a cerca de 250 nm pode ser preferido. O termo "nanoestrutura" inclui, porém não está necessariamente limitado a, partículas e elementos manipulados. As partículas e elementos manipulados podem ter, por exemplo, um formato regular ou irregular. Estas partículas também são denominadas de nanopartículas. As nanopartículas podem ser compostas de materiais orgânicos ou outros materiais e, alternativamente, podem ser implementadas com partículas porosas. A camada de nanopartículas pode ser implementada com nanopartículas em uma monocamada ou com uma camada que contém aglomerados de nanopartículas. Em algumas modalidades, a nanopartícula compreende ou consiste em um compartimento interno (ou um núcleo interno) coberto por uma superfície externa (ou envoltório) que compreende a membrana conforme discutido no presente documento. A invenção considera quaisquer nanopartículas agora conhecidas e posteriormente desenvolvidas que possam ser revestidas com a membrana descrita no presente documento.

[0043] Farmaceuticamente Ativo: O termo "farmaceuticamente ativo", conforme usado no presente documento, refere-se à atividade biológica benéfica de uma substância sobre a matéria viva e, em particular, células e tecidos do corpo humano. Um "agente farmaceuticamente ativo" ou "medicamento" é uma substância que é farmaceuticamente ativa e um "ingrediente farmaceuticamente ativo" (Pharmaceutically Active Ingredient, API) é a substância farmaceuticamente ativa em um medicamento.

[0044] Farmaceuticamente Aceitável: O termo "farmaceuticamente aceitável", conforme usado no presente documento, significa aprovado por uma agência reguladora do governo federal ou estadual ou listado na Farmacopeia dos EUA, outra farmacopeia geralmente reconhecida, além de outras formulações que são seguras para uso em animais e, mais particularmente, em seres humanos e/ou mamíferos não humanos.

[0045] Sal Farmaceuticamente Aceitável: O termo "sal farmaceuticamente aceitável", conforme usado no presente documento, refere-se a sais de adição de ácido ou sais de adição de base dos compostos, tais como os conjugados de múltiplos medicamentos, na presente invenção. Um sal farmaceuticamente aceitável é qualquer sal que retém a atividade da nanopartícula ou composto original e não confere qualquer efeito deletério ou indesejável a um indivíduo a quem ele é administrado e no contexto no qual é administrado. Os sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser derivados de aminoácidos incluindo, porém sem limitações, cisteína. Métodos para a produção de compostos como sais são conhecidos por aqueles versados na técnica (consulte, por exemplo, Stahl et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, Wiley-VCH; Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurique, 2002; Berge et al., J Pharm. Sci. 66: 1, 1977). Em algumas modalidades, um "sal farmaceuticamente aceitável" se destina a significar um sal de um ácido livre ou base de uma nanopartícula ou composto representado no presente documento que não é tóxico, biologicamente tolerável ou de outra forma biologicamente adequado para administração ao indivíduo. Consulte, de modo geral, Berge, et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1 -19. Sais farmaceuticamente aceitáveis preferidos são aqueles que são farmacologicamente eficazes e adequados para contato com os tecidos de indivíduos sem toxicidade indevida, irritação ou resposta alérgica. Uma nanopartícula ou composto descrito no presente documento pode possuir um grupo suficientemente ácido, um grupo suficientemente básico, ambos os tipos de grupos funcionais ou mais de um de cada tipo e, consequentemente, reagir com uma série de bases inorgânicas ou orgânicas e ácidos inorgânicos e orgânicos para formar um sal farmaceuticamente aceitável.

[0046] Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sulfatos, pirossulfatos, bissulfatos, sulfitos, bissulfitos, fosfatos, mono-

hidrogeno fosfatos, di-hidrogeno fosfatos, metafosfatos, pirofosfatos, cloretos, brometos, iodetos, acetatos, propionatos, decanoatos, caprilformatos, acrilatos, isobutiratos, caproatos, heptanoatos, propiolatos, oxalatos, malonatos, succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos, butino-1,4-dioatos, hexino-1,6-dioatos, benzoatos, clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos, metoxibenzoatos, ftalatos, sulfonatos, metilsulfonatos, propilsulfonatos, besilatos, xilenossulfonatos, naftaleno-1-sulfonatos, naftaleno-2- sulfonatos, fenilacetatos, fenilpropionatos, fenilbutiratos, citratos, lactatos, [gama]-hidroxibutiratos, glicolatos, tartaratos e mandelatos.

[0047] Carreador Farmaceuticamente Aceitável: O termo "carreador farmaceuticamente aceitável", conforme usado no presente documento, refere-se a um excipiente, diluente, conservante, solubilizante, emulsificante, adjuvante e/ou veículo com o qual uma nanopartícula ou composto, tal como um conjugado de múltiplos medicamentos, é administrado. Estes carreadores podem ser líquidos estéreis, tais como água e óleos, incluindo aqueles originários de petróleo, animal, vegetal ou sintética, tais como óleo de amendoim, óleo de soja, óleo mineral, óleo de gergelim e assim por diante, polietileno glicóis, glicerina, propileno glicol ou outros solventes sintéticos. Agentes antibacterianos, tais como álcool benzílico ou metil parabenos; antioxidantes, tais como ácido ascórbico ou bissulfito de sódio; agentes quelantes, tal como ácido etilenodiaminotetracético; e agentes para o ajuste de tonicidade, tais como cloreto de sódio ou dextrose, também podem ser um carreador. Métodos para a produção de composições em combinação com veículos são conhecidos por aqueles versados na técnica. Em algumas modalidades, a expressão "carreador farmaceuticamente aceitável" se destina a incluir todos e quaisquer solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes isotônicos e para retardo de absorção e assim por diante, compatíveis com a administração farmacêutica. O uso de tais meios e agentes para substâncias farmaceuticamente ativas é bem conhecido na técnica. Consulte, por exemplo, Remington, The Science and Practice of Pharmacy. 20ª ed., (Lippincott, Williams & Wilkins 2003). Exceto na medida em que qualquer meio ou agente convencional seja incompatível com o composto ativo, tal uso nas composições é considerado.

[0048] Fosfolipídio: O termo "fosfolipídio", conforme usado no presente documento, refere-se a qualquer um dos numerosos lipídios que contêm um diglicerídeo, um grupo fosfato e uma molécula orgânica simples, tal como colina. Exemplos de fosfolipídios incluem, porém sem limitações, ácido fosfatídico (fosfatidato) (PA), Fosfatidiletanolamina (cefalina) (PE), Fosfatidilcolina (lecitina) (PC), Fosfatidilserina (PS) e Fosfoinositídeos os quais incluem, porém sem limitações, Fosfatidilinositol (PI), Fosfato de Fosfatidilinositol (PIP), Bifosfato de Fosfatidilinositol (PIP2) e Trifosfato de Fosfatidilinositol (P1P3). Exemplos adicionais de PC incluem DDPC, DLPC, DMPC, DPPC, DSPC, DOPC, POPC, DRPC e DEPC, conforme definido na técnica.

[0049] Quantidade Terapeuticamente Eficaz: Conforme usado no presente documento, o termo "quantidade terapeuticamente eficaz" refere-se a quantidades as quais, quando administradas a um indivíduo específico em vista da natureza e gravidade da doença ou condição deste indivíduo, terão um efeito terapêutico desejado, por exemplo, uma quantidade que curará, prevenirá, inibirá ou pelo menos interromperá parcialmente ou prevenirá parcialmente uma doença ou condição-alvo. Modalidades mais específicas estão incluídas na seção Preparações Farmacêuticas e Métodos de Administração abaixo. Em algumas modalidades, o termo "quantidade terapeuticamente eficaz" ou "quantidade eficaz" refere-se a uma quantidade de um agente terapêutico a qual, quando administrada individualmente ou em combinação com um agente terapêutico adicional a uma célula, tecido ou indivíduo, é eficaz para prevenir ou melhorar a doença ou condição, tal como uma doença ou condição hemolítica, ou a progressão da doença ou condição. Uma dose terapeuticamente eficaz refere-se ainda à quantidade do agente terapêutico suficiente para resultar na melhoria dos sintomas, por exemplo, tratamento, cura, prevenção ou melhoria da condição médica relevante, ou um aumento na taxa de tratamento, cura, prevenção ou melhoria de tais condições. Quando aplicada a um ingrediente ativo individual administrado individualmente, uma dose terapeuticamente eficaz refere-se a este ingrediente apenas. Quando aplicada a uma combinação, uma dose terapeuticamente eficaz refere- se a quantidades combinadas dos ingredientes ativos que resultam no efeito terapêutico, seja administrado em combinação, em série ou simultaneamente.

[0050] "Tratar" ou "tratamento" ou "alívio" refere-se ao tratamento terapêutico em que o objetivo é desacelerar (diminuir), se não curar, a condição patológica ou transtorno-alvo ou prevenir a recorrência da condição. Um indivíduo é "tratado" com sucesso se, após receber uma quantidade terapêutica de um agente terapêutico, o indivíduo mostra redução observável e/ou mensurável ou ausência de um ou mais sinais e sintomas da doença em particular. A redução dos sinais ou sintomas de uma doença também pode ser sentida pelo paciente. Um paciente também é considerado tratado se apresentar doença estável. Em algumas modalidades, o tratamento com um agente terapêutico é eficaz para resultar em pacientes livres da doença 3 meses após o tratamento, de preferência 6 meses, mais preferivelmente um ano, ainda mais preferivelmente 2 ou mais anos após o tratamento. Estes parâmetros para avaliar o tratamento bem-sucedido e a melhora da doença são facilmente mensuráveis por meio de procedimentos de rotina familiares para um médico com habilidade apropriada na técnica.

[0051] Conforme usado no presente documento, o tratamento

"preventivo" se destina a indicar um adiamento do desenvolvimento de uma doença, um sintoma de uma doença ou condição médica, suprimindo os sintomas que possam aparecer ou reduzindo o risco de desenvolvimento ou recorrência de uma doença ou sintoma. O tratamento "curativo" inclui reduzir a gravidade ou suprimir o agravamento de uma doença, sintoma ou condição existente.

[0052] O termo "combinação" refere-se a uma combinação fixa em uma forma de unidade de dosagem ou um kit de partes para a administração combinada onde uma nanopartícula ou composto e um parceiro de combinação (por exemplo, outro medicamento conforme explicado abaixo, também denominado como como "agente terapêutico" ou "coagente") pode ser administrado independentemente ao mesmo tempo ou separadamente dentro de intervalos de tempo, especialmente onde estes intervalos de tempo permitem que os parceiros da combinação mostrem um efeito cooperativo, por exemplo, sinérgico. Os termos "coadministração" ou "administração combinada" ou similar, conforme usado no presente documento, se destinam a abranger a administração do parceiro de combinação selecionado a um único indivíduo que precisa (por exemplo, um paciente) e se destinam a incluir regimes de tratamento nos quais os agentes não são necessariamente administrados através da mesma via de administração ou ao mesmo tempo. O termo "combinação farmacêutica", conforme usado no presente documento, significa um produto que resulta da mistura ou combinação de mais de um ingrediente ativo e inclui combinações fixas e não fixas dos ingredientes ativos. O termo "combinação fixa" significa que os ingredientes ativos, por exemplo, uma nanopartícula ou composto e um parceiro de combinação, são administrados a um paciente simultaneamente na forma de uma única entidade ou dosagem. O termo "combinação não fixa" significa que os ingredientes ativos, por exemplo, uma nanopartícula ou composto e um parceiro de combinação, são administrados a um paciente como entidades separadas simultânea, concorrente ou sequencialmente, sem limites de tempo específicos, em que tal administração confere níveis terapeuticamente eficazes das duas porções ou compostos no corpo do paciente. Este último também se aplica à terapia de coquetel, por exemplo, à administração de três ou mais ingredientes ativos.

[0053] Deve ser entendido que os aspectos e modalidades da invenção descritos no presente documento incluem "que consiste(m)" e/ou "que consiste(m) essencialmente em" aspectos e modalidades.

[0054] Ao longo da descrição, vários aspectos da presente invenção são apresentados em um formato de faixas. Deve ser entendido que a descrição em formato de faixas é meramente por conveniência e brevidade e não deve ser interpretada como uma limitação inflexível no escopo da invenção. Consequentemente, a descrição de uma faixa deve ser considerada como tendo descrito especificamente todas as subfaixas possíveis, bem como valores numéricos individuais dentro desta faixa. Por exemplo, a descrição de uma faixa, tal como a partir de 1 a 6, deve ser considerada como tendo subfaixas especificamente descritas, tal como a partir de 1 a 3, a partir de 1 a 4, a partir de 1 a 5, a partir de 2 a 4, a partir de 2 a 6, a partir de 3 a 6, etc., bem como números individuais dentro desta faixa, por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5 e 6. Isto se aplica independentemente da amplitude da faixa.

[0055] Conforme usado no presente documento, um indivíduo que precisa refere-se a um animal, um mamífero não humano ou um ser humano. Como usado no presente documento, "animais" incluem um animal de estimação, um animal de fazenda, um animal agronômico, um animal esportivo e um animal experimental, tal como um gato, um cachorro, um cavalo, uma vaca, um boi, um porco, um burro, uma ovelha, um cordeiro, uma cabra, um rato, um coelho, uma galinha, um pato, um ganso, um primata, incluindo um macaco e um chimpanzé.

[0056] Outros objetivos, vantagens e características da presente invenção se tornarão evidentes a partir do relatório descritivo a seguir tomado em conjunto com os desenhos em anexo. B. Nanopartículas que Contêm Membrana Celular

[0057] Em um aspecto, a presente invenção fornece para uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornecendo um suporte sólido para a dita membrana celular na dita superfície externa (ou envoltório) e em que: a) o dito compartimento interno (ou núcleo interno) é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico; e/ou b) a dita membrana celular da dita superfície externa (ou envoltório) compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide contanto que, quando a dita membrana celular é derivada de um glóbulo vermelho, o dito compartimento interno (ou núcleo interno) é isotônico a um líquido celular ou fisiológico.

[0058] O compartimento interno (ou um núcleo interno) da presente nanopartícula pode ser isotônico a um líquido celular ou fisiológico de qualquer maneira adequada. Por exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode compreender um líquido que é isotônico para uma célula ou líquido fisiológico. Em outro exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode compreender (uma) substância(s) seca(s) a(s) qual(is), quando reconstituída(s) com um líquido, forma(m) um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico.

[0059] O compartimento interno (ou um núcleo interno) da presente nanopartícula pode ser isotônico a um líquido celular ou fisiológico em qualquer ambiente adequado. Por exemplo, o compartimento interno

(núcleo interno) pode ser isotônico a um líquido celular ou fisiológico existente fora de uma célula ou de um indivíduo. Em outro exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode ser isotônico a um líquido celular ou fisiológico existente em uma célula ou um indivíduo.

[0060] Em algumas modalidades, o compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula pode compreender um líquido que é isotônico a um líquido celular compreendido em uma célula. Em algumas modalidades, o compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula pode compreender (uma) substância(s) seca(s) a(s) qual(is), quando reconstituída(s) com um líquido, forma(m) um líquido isotônico a um líquido celular existente em uma célula.

[0061] O compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula pode ser isotônico a um líquido celular compreendido em qualquer célula adequada. A célula pode ser uma célula procariota ou uma célula eucariota. Em algumas modalidades, a célula pode ser uma célula de um organismo unicelular, por exemplo, uma bactéria ou um fungo. A célula também pode ser uma célula de um organismo multicelular, por exemplo, uma planta, um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano.

[0062] Em algumas modalidades, a célula é uma célula animal, por exemplo, uma célula de mamífero não humano ou uma célula humana. A célula pode ser qualquer célula animal adequada. Por exemplo, a célula pode ser uma célula de um tecido conjuntivo, por exemplo, sangue, osso, tendão, ligamento, tecido adiposo ou areolar, tecido conjuntivo fibroso, tecido conjuntivo esquelético ou tecido conjuntivo fluido. Em outro exemplo, a célula pode ser uma célula de um tecido muscular, por exemplo, músculo visceral ou liso, músculo esquelético ou músculo cardíaco. Em ainda outro exemplo, a célula pode ser uma célula de um tecido nervoso, por exemplo, uma célula em um sistema nervoso central (Central Nervous System, CNS) ou um sistema nervoso periférico (Peripheral Nervous System, PNS). Em ainda outro exemplo, a célula pode ser uma célula de um tecido epitelial, por exemplo, epitélio escamoso simples, epitélio escamoso estratificado, epitélio cuboidal simples, epitélio transicional, epitélio colunar pseudoestratificado (também conhecido como epitélio colunar ciliado), epitélio colunar, epitélio glandular ou epitélio colunar ciliado. Em ainda outro exemplo, a célula pode ser uma célula do sistema nervoso, sistema cardiovascular, sistema circulatório, sistema vascular, sistema digestivo, sistema endócrino, sistema imunológico, sistema tegumentar, sistema linfático, sistema musculoesquelético, sistema reprodutivo, sistema respiratório, aparelho respiratório, sistema ventilatório, sistema urinário ou sistema renal ou trato urinário. Em ainda outro exemplo, a célula pode ser uma célula sanguínea, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula-tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial.

[0063] O compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula pode ser isotônico a um líquido fisiológico em qualquer ambiente adequado. Por exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode ser isotônico a um líquido fisiológico existente fora de uma célula ou de um indivíduo. Em outro exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode ser isotônico a um líquido fisiológico existente em uma célula ou um indivíduo.

[0064] O compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula pode ser isotônico a um líquido fisiológico em qualquer indivíduo adequado. Por exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode ser isotônico a um líquido fisiológico em um organismo multicelular, por exemplo, uma planta, um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano. Em algumas modalidades, o compartimento interno (núcleo interno) pode ser isotônico a um líquido fisiológico em um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano, por exemplo, sangue em circulação em um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano.

[0065] O compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula pode ser isotônico a qualquer líquido fisiológico adequado. Por exemplo, o líquido fisiológico pode ser um líquido fisiológico do sistema nervoso, sistema cardiovascular, sistema circulatório, sistema vascular, sistema digestivo, sistema endócrino, sistema imunológico, sistema tegumentar, sistema linfático, sistema musculoesquelético, sistema reprodutivo, sistema respiratório, aparelho respiratório, sistema ventilatório, sistema urinário ou sistema renal ou trato urinário.

[0066] Em algumas modalidades, o compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico ex vivo. Em outras modalidades, o compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico in vivo.

[0067] O compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula pode compreender qualquer material adequado. Em algumas modalidades, o compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula não suporta a superfície externa (ou envoltório). Qualquer material adequado pode ser usado. Por exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode compreender apenas líquido, por exemplo, um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, e tal líquido não suporta a superfície externa (ou envoltório). Em outro exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) não compreende nenhum material sólido. Em outro exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode compreender (um) material(is) sólido(s), por exemplo, (uma) substância(s) seca(s) a(s) qual(is), quando reconstituída(s) com um líquido, forma(m) um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico. Estes materiais, no entanto, não são suficientemente grandes e/ou fortes para suportar a superfície externa (ou envoltório).

[0068] A presente nanopartícula pode compreender qualquer membrana celular adequada derivada de uma célula ou uma fonte celular, por exemplo, um glóbulo vermelho. Por exemplo, a nanopartícula pode compreender uma membrana plasmática ou uma membrana intracelular derivada de uma célula, por exemplo, um glóbulo vermelho. Em algumas modalidades, a membrana celular compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, por exemplo, uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho humano. Em algumas modalidades, a nanopartícula pode compreender qualquer membrana celular de ocorrência natural adequada derivada de uma célula, por exemplo, um glóbulo vermelho. Em algumas modalidades, a membrana celular compreende uma membrana plasmática de ocorrência natural derivada de um glóbulo vermelho, por exemplo, uma membrana plasmática de ocorrência natural derivada de um glóbulo vermelho humano.

[0069] Em algumas modalidades, a membrana celular pode ser derivada de um organismo unicelular (por exemplo, uma bactéria ou fungo) ou um organismo multicelular (por exemplo, uma planta, um animal, um mamífero não humano, vertebrado ou um ser humano). Em outras modalidades, a membrana celular pode ser derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco ou uma plaqueta. Em ainda outras modalidades, a membrana celular pode ser derivada de uma célula imune (por exemplo, macrófago, monócito, célula B ou célula T), um tumor ou célula cancerosa e outras células, tais como uma célula epitelial, uma célula endotelial ou uma célula neural. Em ainda outras modalidades, a membrana celular pode ser derivada de uma célula não terminalmente diferenciada, tal como uma célula-tronco, incluindo uma célula-tronco hematopoiética, uma célula-tronco da medula óssea, uma célula-tronco mesenquimal, um célula-tronco cardíaca, uma célula-tronco neural. Em ainda outras modalidades, a membrana celular pode ser derivada de um componente celular ou organela celular incluindo, porém sem limitações, um exossomo, uma vesícula secretora, uma vesícula sináptica, um retículo endoplasmático (ER), um aparelho de Golgi, uma mitocôndria, um vacúolo ou um núcleo.

[0070] Em algumas modalidades, a membrana celular é derivada de uma célula de um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano. A membrana celular pode ser derivada de qualquer tipo adequado de célula. Por exemplo, a membrana celular é derivada de uma célula de um tecido conjuntivo, por exemplo, sangue, osso, tendão, ligamento, tecido adiposo ou areolar, tecido conjuntivo fibroso, tecido conjuntivo esquelético ou tecido conjuntivo fluido. Em outro exemplo, a célula é uma célula de um tecido muscular, por exemplo, músculo visceral ou liso, músculo esquelético ou músculo cardíaco. Em ainda outro exemplo, a célula é uma célula de um tecido nervoso, por exemplo, uma célula em um sistema nervoso central (CNS) ou um sistema nervoso periférico (PNS). Em ainda outro exemplo, a célula é uma célula de um tecido epitelial, por exemplo, epitélio escamoso simples, epitélio escamoso estratificado, epitélio cuboidal simples, epitélio transicional, epitélio colunar pseudoestratificado (também conhecido como epitélio colunar ciliado), epitélio colunar, epitélio glandular ou epitélio colunar ciliado. Em ainda outro exemplo, a célula é uma célula do sistema nervoso, sistema cardiovascular, sistema circulatório, sistema vascular, sistema digestivo, sistema endócrino, sistema imunológico, sistema tegumentar, sistema linfático, sistema musculoesquelético, sistema reprodutivo, sistema respiratório, aparelho respiratório, sistema ventilatório, sistema urinário ou sistema renal ou trato urinário. Em ainda outro exemplo, a célula é uma célula sanguínea,

uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula-tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial. Em ainda outro exemplo, a membrana celular compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta.

[0071] A superfície externa (ou envoltório) da presente nanopartícula pode compreender um nível aumentado ou enriquecido de qualquer esteroide adequado. Por exemplo, o esteroide pode ser um esteroide fúngico, um esteroide animal, um esteroide vegetal ou um esteroide procariota. Esteroides fúngicos exemplificativos incluem ergosterol, ergosta-5,7,22,24(28)-tetraen-3-ol, Zimosterol, lanosterol ou 5,6-di-hidroergosterol. O esteroide animal pode ser um esteroide de vertebrado ou um esteroide de inseto. Um esteroide de inseto exemplificativo pode ser um ecdiesteroide, por exemplo, 20- hidroxiecdisona (ecdisterona ou 20E).

[0072] Um esteroide de vertebrado exemplificativo pode ser um hormônio esteroidal ou colesterol. Em algumas modalidades, o esteroide de vertebrado pode ser colesterol. Em outras modalidades, o hormônio esteroidal pode ser um esteroide sexual, por exemplo, um androgênio, um estrogênio ou um progestogênio, um corticosteroide, por exemplo, um glucocorticoide ou um mineralocorticoide, ou um esteroide anabolizante, por exemplo, testosterona ou um éster do mesmo.

[0073] Um esteroide vegetal exemplificativo pode ser um alcaloide, um glicosídeo cardíaco, um fitosterol ou um brassinosteroide. Um esteroide procariota exemplificativo pode ser um esteroide tetracíclico ou triterpenos, por exemplo, hopano.

[0074] Em algumas modalidades, o esteroide é um colestano, por exemplo, colesterol, um colano, por exemplo, ácido cólico, um pregnano, por exemplo, progesterona, um androstano, por exemplo,

testosterona, ou um estrano, por exemplo, estradiol. Em outras modalidades, o esteroide é selecionado a partir do grupo que consiste em um gonano, testosterona, ácido cólico, dexametasona, lanosterol, progesterona, medrogestona, -sitosterol, colesterol e 5-colestano.

[0075] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula fúngica e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide fúngico. Em outras modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula vegetal e a membrana celular compreende um nível aprimorado ou enriquecido de um esteroide vegetal. Em ainda outras modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula procariota e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide procariota. Em ainda outras modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula animal e a membrana celular compreende um nível aprimorado ou enriquecido de um esteroide animal. Em ainda outras modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula de vertebrado e a membrana celular compreende um nível aprimorado ou enriquecido de um esteroide de vertebrado. Em ainda outras modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula de mamífero, por exemplo, uma célula humana e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de mamífero, por exemplo, um esteroide humano.

[0076] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de mamífero, por exemplo, colesterol. A superfície externa (ou envoltório) pode compreender uma membrana celular derivada de qualquer célula sanguínea adequada, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco ou uma plaqueta e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de mamífero, por exemplo, colesterol. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana plasmática derivada de células sanguíneas, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta, e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de mamífero, por exemplo, colesterol. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea humano, por exemplo, um glóbulo vermelho humano, um glóbulo branco humano e/ou uma plaqueta humana e a membrana celular compreende um ou nível enriquecido de um esteroide humano, por exemplo, colesterol.

[0077] A superfície externa (ou envoltório) da presente nanopartícula pode compreender um esteroide cujo nível é aumentado ou enriquecido de qualquer maneira adequada. Por exemplo, o nível aumentado ou enriquecido de um esteroide na membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode ser em virtude do esteroide adicionado exogenamente. Em outro exemplo, o nível aumentado ou enriquecido de um esteroide na membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode ser em virtude do uso de uma membrana celular derivada de uma célula que é modificada para conter um nível aumentado ou enriquecido de esteroide em sua membrana.

[0078] A membrana celular da superfície externa (ou envoltório) da presente nanopartícula pode compreender qualquer nível adequado de um esteroide. Por exemplo, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender um nível de um esteroide que é pelo menos 0,1 %, por exemplo, pelo menos cerca de 1 %, 2 %, 3 %, 4 %, 5

%, 6 %, 7 %, 8 %, 9 %, 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 1 vez, 2 vezes, 4 vezes, 5 vezes ou mais alto do que o nível basal do esteroide na membrana celular.

[0079] Em algumas modalidades, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender a partir de cerca de 0,1 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 1 %, 2 %, 3 %, 4 %, 5 %, 6 %, 7 %, 8 %, 9 %, 10 %, 11 %, 12 %, 13 %, 14 %, 15 %, 16 %, 17 %, 18 %, 19 %, 20 %, 21 %, 22 %, 23 %, 24 %, 25 %, 26 %, 27 %, 28 %, 29 %, 30 %, 31 %, 32 %, 33 %, 34 %, 35 %, 36 %, 37 %, 38 %, 39 %, 40 %, 41 %, 42 %, 43 %, 44 %, 45 %, 46 %, 47 %, 48 %, 49 %, 50 % do esteroide adicionado exogenamente. Opcionalmente, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender a partir de cerca de 0,1 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 1 %, 2 %, 3 %, 4 %, 5 %, 6 %, 7 %, 8 %, 9 %, 10 %, 11 %, 12 %, 13 %, 14 %, 15 %, 16 %, 17 %, 18 %, 19 %, 20 %, 21 %, 22 %, 23 %, 24 %, 25 %, 26 %, 27 %, 28 %, 29 %, 30 %, 31 %, 32 %, 33 %, 34 %, 35 %, 36 %, 37 %, 38 %, 39 %, 40 %, 41 %, 42 %, 43 %, 44 %, 45 %, 46 %, 47 %, 48 %, 49 %, 50 % do esteroide adicionado exogenamente, comparado com o peso total da proteína da membrana da membrana celular. Em algumas modalidades, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e compreende a partir de cerca de 0,1 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 1 %, 2 %, 3 %, 4 %, 5 %, 6 %, 7 %, 8 %, 9 %, 10 %, 1 1 %, 12 %, 13 %, 14 %, 15 %, 16 %, 17 %, 18 %, 19 %, 20 %, 21 %, 22 %, 23 %, 24 %, 25 %, 26 %, 27 %, 28 %, 29 %, 30 %, 31 %, 32 %, 33 %, 34 %, 35 %, 36 %, 37 %, 38 %, 39 %, 40 %, 41 %, 42 %, 43 %, 44 %, 45 %, 46 %, 47 %, 48 %, 49 %, 50 % do esteroide adicionado exogenamente, por exemplo, colesterol. Opcionalmente, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e compreende a partir de cerca de 0,1 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 1 %, 2 %, 3 %, 4 %, 5 %, 6 %, 7 %, 8 %, 9 %, 10 %, 11 %, 12 %, 13 %, 14 %, 15 %, 16 %, 17 %, 18 %, 19 %, 20 %, 21 %, 22 %, 23 %, 24 %, 25 %, 26 %, 27 %, 28 %, 29 %, 30 %, 31 %, 32 %, 33 %, 34 %, 35 %, 36 %, 37 %, 38 %, 39 %, 40 %, 41 %, 42 %, 43 %, 44 %, 45 %, 46 %, 47 %, 48 %, 49 %, 50 % do esteroide adicionado exogenamente, por exemplo, colesterol, comparado com o peso total da proteína da membrana da membrana celular.

[0080] Em algumas modalidades, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 100 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 %, 99,9 %, 99,99 %, 99,999 % ou 100 % do esteroide. Opcionalmente, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 100 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 %, 99,9 %, 99,99 %, 99,999 % ou 100 % do esteroide, comparado com o peso total da proteína da membrana da membrana celular. Em algumas modalidades, "100 %" significa quantidade ou nível igual do esteroide, por exemplo, colesterol, e peso total da proteína da membrana. Em algumas modalidades, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 100 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 %, 99,9 %, 99,99 %, 99,999 % ou 100 % do esteroide, por exemplo, colesterol. Opcionalmente, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) pode compreender uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 100 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 %, 99,9 %, 99,99 %, 99,999 % ou 100 % do esteroide, por exemplo, colesterol, comparado com o peso total da proteína da membrana da membrana celular.

[0081] O compartimento interno (núcleo interno) da presente nanopartícula pode ter qualquer pH adequado. Por exemplo, o compartimento interno (núcleo interno) pode ter um pH que varia a partir de cerca de 4 a cerca de 10, por exemplo, a partir de cerca de 6 a cerca de 9 ou cerca de 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5 ou 9.

[0082] A presente nanopartícula pode compreender ainda uma carga liberável. A nanopartícula pode compreender uma carga liberável em qualquer local adequado. Por exemplo, a carga liberável pode estar localizada dentro ou sobre o compartimento interno (núcleo interno), entre o compartimento interno (núcleo interno) e a superfície externa (ou envoltório) ou dentro ou sobre a superfície externa (ou envoltório). A liberação da carga liberável pode ser acionada por meio de quaisquer mecanismos adequados. Por exemplo, a liberação da carga liberável pode ser desencadeada por um contato entre a nanopartícula e o indivíduo ou por uma mudança de um parâmetro físico em torno da nanopartícula. A nanopartícula pode compreender qualquer tipo adequado de carga liberável. Por exemplo, a carga liberável pode ser um agente terapêutico, um agente profilático, um agente diagnóstico ou marcador, um agente prognóstico ou uma combinação dos mesmos. O agente terapêutico pode ser um fármaco citotóxico capaz de matar células. Qualquer fármaco citotóxico adequado pode ser usado. Por exemplo, fármacos citotóxicos podem ser uma antraciclina, por exemplo, doxorrubicina ou daunorrubicina, um taxano, por exemplo,

docetaxel ou paclitaxel, ou um agente imunossupressor, por exemplo, metotrexato ou ciclosporina A. Em outro exemplo, a carga liberável pode ser uma partícula metálica, uma partícula polimérica, uma partícula dendrimérica ou uma partícula inorgânica ou a carga liberável pode estar na forma de uma partícula metálica, uma partícula polimérica, uma partícula dendrimérica ou uma partícula inorgânica.

[0083] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula não compreende uma carga liberável.

[0084] A nanopartícula pode ter qualquer tamanho adequado. Por exemplo, a nanopartícula pode ter um diâmetro a partir de cerca de 10 nm a cerca de 10 μm. Em determinadas modalidades, o diâmetro da nanopartícula é cerca de 10 nm, 20 nm, 30 nm, 40 nm, 50 nm, 60 nm, 70 nm, 80 nm, 90 nm, 100 nm, 110 nm, 120 nm, 130 nm, 140 nm, 150 nm, 200 nm, 300 nm, 400 nm, 500 nm, 600 nm, 700 nm, 800 nm, 900 nm, 1 μm, 2 μm, 3 μm, 4 μm, 5 μm, 6 μm, 7 μm, 8 μm, 9 μm e 10 μm ou qualquer subfaixa dentro de cerca de 10 nm a cerca de 10 μm, por exemplo, qualquer faixa entre quaisquer dois dos tamanhos acima.

[0085] A nanopartícula pode ter qualquer formato adequado incluindo, porém sem limitações, esfera, quadrado, retângulo, triângulo, disco circular, formato similar a um cubo, cubo, paralelepípedo retangular (cuboide), cone, cilindro, prisma, pirâmide, cilindro circular em ângulo reto e outros formatos regulares ou irregulares.

[0086] Em algumas modalidades, a nanopartícula carece substancialmente dos constituintes da célula a partir da qual a membrana celular é derivada. Por exemplo, a nanopartícula pode carecer de cerca de 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou 100 % dos constituintes da célula, por exemplo, glóbulos vermelhos, dos quais a membrana celular é derivada. Em algumas modalidades, a nanopartícula compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho e a nanopartícula carece substancialmente de hemoglobina. Por exemplo, a nanopartícula pode carecer de cerca de 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou 100 % da hemoglobina.

[0087] Em algumas modalidades, a nanopartícula mantém substancialmente a integridade estrutural natural ou atividade da membrana celular ou os constituintes da membrana celular. Por exemplo, a nanopartícula pode reter cerca de 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou 100 % da integridade estrutural natural. Em algumas modalidades, a nanopartícula mantém substancialmente a integridade estrutural natural da membrana celular ou os constituintes da membrana celular, incluindo a estrutura primária, secundária, terciária e/ou quaternária da membrana celular ou os constituintes da membrana celular. Em algumas modalidades, a nanopartícula mantém substancialmente a atividade da membrana celular ou os constituintes da membrana celular, incluindo a atividade de ligação, atividade de receptor e/ou atividade enzimática da membrana celular ou os constituintes da membrana celular.

[0088] O compartimento interno (ou um núcleo interno) da presente nanopartícula pode compreender qualquer substância adequada. Por exemplo, o compartimento interno (ou um núcleo interno) da presente nanopartícula pode compreender qualquer substância adequada para tornar o compartimento interno (ou um núcleo interno) isotônico a um líquido celular ou fisiológico.

[0089] Em algumas modalidades, o compartimento interno (ou um núcleo interno) pode compreender um sal, um açúcar ou um álcool de açúcar. O compartimento interno (ou um núcleo interno) pode compreender qualquer sal, açúcar ou um álcool de açúcar adequado.

Por exemplo, o açúcar pode ser um monossacarídeo ou um dissacarídeo. Monossacarídeos exemplificativos podem ser frutose, galactose ou glicose. Dissacarídeos exemplificativos podem ser lactose, maltose ou sacarose. Sais exemplificativos podem ser um sal de sódio, potássio ou magnésio, por exemplo, NaCl, KCl ou MgCl2.

[0090] Em outro exemplo, o álcool de açúcar pode ser etileno glicol, glicerol, eritritol, treitol, arabitol (ou arabinitol), xilitol, ribitol (ou adonitol), manitol, sorbitol, galactitol (dulcitol), fucitol, iditol, inositol, volemitol, isomalte, maltitol, lactitol, maltotritol, maltotetraitol ou poliglicitol. Em algumas modalidades, o álcool de açúcar é sorbitol.

[0091] O açúcar ou o álcool de açúcar podem ter qualquer osmolalidade ou concentração adequada. Por exemplo, o açúcar ou o álcool de açúcar pode ter uma osmolalidade a partir de cerca de 250 mmol/kg a cerca de 350 mmol/kg, por exemplo, a partir de cerca de 275 mmol/kg a cerca de 295 ou 300 mmol/kg, ou cerca de 250 mmol/kg, 260 mmol/kg, 270 mmol/kg, 280 mmol/kg, 290 mmol/kg, 295 mmol/kg ou 300 mmol/kg. Em outro exemplo, o açúcar ou o álcool de açúcar pode ter uma concentração que varia a partir de cerca de 250 mmol/kg a cerca de 1.000 mmol/kg, por exemplo, cerca de 250 mmol/kg, 300 mmol/kg, 400 mmol/kg, 500 mmol/kg, 600 mmol/kg, 700 mmol/kg, 800 mmol/kg, 900 mmol/kg ou 1.000 mmol/kg.

[0092] Em algumas modalidades, o compartimento interno (ou um núcleo interno) pode compreender um sal. O compartimento interno (ou um núcleo interno) pode compreender qualquer sal adequado. Por exemplo, o sal pode ser um sal de sódio, potássio ou magnésio, por exemplo, NaCl, KCl ou MgCl2. O sal pode ter qualquer osmolalidade ou concentração adequada. Por exemplo, o sal pode ter uma osmolalidade de cerca de 250 mmol/kg a cerca de 350 mmol/kg, por exemplo, a partir de cerca de 275 mmol/kg a cerca de 295 ou 300 mmol/kg ou cerca de 250 mmol/kg, 260 mmol/kg, 270 mmol/kg, 280 mmol/kg, 290 mmol/kg,

295 mmol/kg ou 300 mmol/kg. Em outro exemplo, o sal pode ter uma concentração que varia a partir de cerca de 250 mmol/kg a cerca de

1.000 mmol/kg, por exemplo, cerca de 250 mmol/kg, 300 mmol/kg, 400 mmol/kg, 500 mmol/kg, 600 mmol/kg, 700 mmol/kg, 800 mmol/kg, 900 mmol/kg ou 1.000 mmol/kg.

[0093] Em algumas modalidades, a nanopartícula é biocompatível ou biodegradável. Por exemplo, o núcleo interno da nanopartícula pode compreender um material biocompatível ou biodegradável e a superfície externa da nanopartícula compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula, por exemplo, um glóbulo vermelho. Em outro exemplo, o compartimento interno (ou um núcleo interno) compreende apenas material biocompatível ou biodegradável ou não compreende qualquer material que não seja biocompatível ou biodegradável.

[0094] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula compreende: a) um compartimento interno (ou um núcleo interno) que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico; ou b) uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, a dita membrana celular da dita superfície externa (ou envoltório) compreendendo um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide. Uma membrana celular exemplificativa pode ser derivada de um glóbulo vermelho, um glóbulo branco, uma plaqueta, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula-tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial. Em algumas modalidades, a membrana celular na superfície externa (ou envoltório) não compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide, por exemplo, uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho, um glóbulo branco, uma plaqueta, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula-tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial que não compreende um ou nível enriquecido de um esteroide.

[0095] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula compreende: a) um compartimento interno (ou um núcleo interno) que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico; e b) uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, a dita membrana celular da dita superfície externa (ou envoltório) compreendendo um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide. Uma membrana celular exemplificativa pode ser derivada de um glóbulo vermelho, um glóbulo branco, uma célula, uma plaqueta, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula-tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial.

[0096] Em algumas modalidades, o compartimento interno (ou núcleo interno) compreende sorbitol e a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho.

[0097] A presente nanopartícula pode ter qualquer meia-vida adequada in vivo. Por exemplo, a presente nanopartícula pode ter uma meia-vida na circulação sanguínea in vivo durante pelo menos cerca de 1 minuto, 5 minutos, 10 minutos, 20 minutos, 30 minutos, 40 minutos, 50 minutos, 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 5 horas, 6 horas, 7 horas, 8 horas, 9 horas, 10 horas, 11 horas, 12 horas, 13 horas, 14 horas, 15 horas, 16 horas, 17 horas, 18 horas, 19 horas, 20 horas, 21 horas, 22 horas, 23 horas, 24 horas, 25 horas, 26 horas, 27 horas, 28 horas, 29 horas, 30 horas, 31 horas, 32 horas, 33 horas, 34 horas, 35 horas, 36 horas, 37 horas, 38 horas, 39 horas, 40 horas ou mais.

[0098] Em algumas modalidades, a nanopartícula carece substancialmente de imunogenicidade para um indivíduo, um mamífero, um mamífero não humano ou um ser humano, ao qual a nanopartícula está configurada para ser administrada. Por exemplo, a membrana celular pode ser derivada de uma célula, por exemplo, um glóbulo vermelho, da mesma espécie do indivíduo. Em outro exemplo, o indivíduo é um ser humano e a membrana celular é derivada de uma célula humana, por exemplo, um glóbulo vermelho humano. Em algumas modalidades, a membrana celular pode ser derivada de uma célula, por exemplo, um glóbulo vermelho, do indivíduo a ser tratado. Por exemplo, a membrana celular pode ser derivada de um glóbulo vermelho do ser humano a ser tratado.

[0099] A superfície externa da presente nanopartícula pode compreender uma membrana híbrida que compreende uma membrana celular derivada de uma célula e uma membrana sintética. Em algumas modalidades, a superfície externa da nanopartícula pode compreender uma membrana híbrida que compreende pelo menos cerca de 5 % (peso/peso), 6 % (peso/peso), 7 % (peso/peso), 8 % (peso/peso), 9 % (peso/peso), 10 % (peso/peso), 20 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 50 % (peso/peso), 60 % (peso/peso), 70 % (peso/peso), 80 % (peso/peso), 90 % (peso/peso), 91 % (peso/peso), 92 % (peso/peso), 93 % ( peso/peso), 94 % (peso/peso), 95 % (peso/peso), 96 % (peso/peso), 97 % (peso/peso), 98 % (peso/peso), 99 % (peso/peso) de uma membrana celular. Em outras modalidades, a superfície externa da nanopartícula pode compreender uma membrana híbrida que compreende pelo menos cerca de 1 % (peso/peso), 2 % (peso/peso), 3 % (peso/peso), 4 % (peso/peso), 5 % (peso/peso), 6 % (peso/peso), 7 % (peso/peso), 8 % (peso/peso), 9 % (peso/peso), 10 % (peso/peso), 20 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 50 % (peso/peso), 60 % (peso/peso), 70 % (peso/peso), 80 % ( peso/peso), 90 % (peso/peso), 91 % (peso/peso), 92 % (peso/peso), 93

% (peso/peso), 94 % (peso/peso), 95 % (peso/peso) de uma membrana sintética. Por exemplo, a superfície externa da nanopartícula pode compreender uma membrana híbrida que compreende cerca de 5-10 % (peso/peso) de uma membrana celular e cerca de 95-99 % (peso/peso) de uma membrana sintética, cerca de 11-25 % (peso/peso) de uma membrana celular e cerca de 75-89 % (peso/peso) de uma membrana sintética, cerca de 50 % (peso/peso) de uma membrana celular e cerca de 50 % (peso/peso) de uma membrana sintética, cerca de 51-75 % (peso/peso) de uma membrana celular e cerca de 49-25 % (peso/peso) de uma membrana sintética ou cerca de 90-99 % (peso/peso) de uma membrana celular e cerca de 1-10 % (peso/peso) de uma membrana sintética.

[0100] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da presente nanopartícula pode compreender ainda um esfingolipídio. A superfície externa (ou envoltório) da presente nanopartícula pode compreender qualquer esfingolipídio adequado. Por exemplo, o esfingolipídio pode ser um esfingolipídio simples. Em outro exemplo, o esfingolipídio pode ser um esfingolipídio complexo, por exemplo, uma esfingomielina, um glicoesfingolipídio ou uma ceramida que contém inositol.

[0101] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da presente nanopartícula pode compreender uma membrana celular fundida derivada de uma célula, esteroide, por exemplo, colesterol e um esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da presente nanopartícula pode compreender uma membrana plasmática fundida derivada de uma célula, esteroide, por exemplo, colesterol e um esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da presente nanopartícula pode compreender uma membrana plasmática fundida derivada de um glóbulo vermelho, esteroide, por exemplo, colesterol e um esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina.

[0102] Em outro aspecto ou modalidade, a presente invenção fornece uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório), em que o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornece um suporte sólido à dita superfície externa (ou envoltório) e/ou é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e a dita superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina.

[0103] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende membrana celular fundida derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina. Por exemplo, a superfície externa (ou envoltório) pode compreender membrana plasmática fundida derivada de um glóbulo vermelho, colesterol e esfingomielina.

[0104] A superfície externa (ou envoltório) pode compreender qualquer nível adequado de membrana celular derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina. Por exemplo, a superfície externa (ou envoltório) pode compreender a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) de colesterol, a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 80 % (peso/peso) esfingomielina e a partir de cerca de 10 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) membrana celular derivada de uma célula, por exemplo, membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho. O nível de colesterol a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) refere-se a um nível de colesterol que é independente (ou não inclui) o nível de colesterol na membrana celular. Da mesma forma, um nível de esfingomielina a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 80 % (peso/peso) refere-se a um nível de esfingomielina que é independente (ou não inclui) o nível de esfingomielina na membrana celular.

[0105] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende cerca de 20 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 50 % (peso/peso) de colesterol ou uma subfaixa das mesmas. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende cerca de 20 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 50 % (peso/peso), 60 % (peso/peso), 70 % (peso/peso), 80 % (peso/peso) de esfingomielina ou uma subfaixa das mesmas. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende cerca de 10 % (peso/peso), 20 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 50 % (peso/peso) de membrana celular derivada de uma célula, por exemplo, membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, ou uma subfaixa das mesmas. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) compreende cerca de 40 % (peso/peso) de colesterol, cerca de 40 % (peso/peso) de esfingomielina e cerca de 20 % (peso/peso) da membrana celular derivada de uma célula, por exemplo, membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho.

[0106] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula tem uma estabilidade melhor comparado com uma nanopartícula comparável sem o nível aumentado ou enriquecido de um esteroide.

[0107] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula é configurada para se ligar a um tipo de célula a partir da qual a membrana celular da nanopartícula é derivada.

[0108] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula é configurada para se ligar ou neutralizar uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula. A presente nanopartícula pode ser configurada para se ligar ou neutralizar qualquer porção adequada. Uma porção exemplificativa pode ser um agente, por exemplo, um agente químico, uma molécula ou um organismo.

[0109] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula é configurada para se ligar ou neutralizar uma toxina, uma citocina, um autoanticorpo ou uma quimiocina que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula. Uma toxina exemplificativa pode ser uma toxina bacteriana, fúngica, animal ou química. Uma toxina química exemplificativa pode ser um organofosfato. Uma toxina animal exemplificativa pode ser uma toxina em um veneno animal.

[0110] Em algumas modalidades, uma "toxina" refere-se a um material ou produto tóxico de plantas, animais, micro-organismos (incluindo, porém sem limitações, bactérias, vírus, fungos, riquétsias ou protozoários), ou substâncias infecciosas, ou uma molécula recombinante ou sintetizada, qualquer que seja sua origem e método de produção. Em determinadas modalidades, uma "toxina" inclui uma toxina bacteriana, fúngica ou animal que é produzida dentro de células ou organismos vivos. Consulte, por exemplo, documento US 2013/337066 A1, parágrafos [0131] - [0134].

[0111] Em determinadas modalidades, a toxina bacteriana inclui exotoxina e endotoxina. Conforme usado no presente documento, "exotoxinas" são geradas pelas bactérias e ativamente secretadas, enquanto que "endotoxinas" são parte da própria bactéria (por exemplo, membrana externa bacteriana) e não são liberadas até que a bactéria seja morta pelo sistema imune. A presente invenção considera qualquer exotoxina e endotoxina agora conhecida e posteriormente descoberta. O tipo de toxina bacteriana inserida na membrana celular não está particularmente limitado. Em determinadas modalidades, a toxina bacteriana é uma toxina que insere a membrana celular de S. aureus, tal como alfa-hemolisina. Em determinadas modalidades, as toxinas bacterianas incluem exotoxinas secretadas por Clostridium, streptpcoccus, listeria, bacilus, tal como pneumolisina de Streptococcus pneumoniae, estreptolisina, por exemplo, estreptolisina O (SLO) e estreptolisina S (SLS) de Streptococcus pyogenes.

[0112] A presente invenção considera ainda quaisquer toxinas fúngicas agora conhecidas e descobertas posteriormente incluindo, porém sem limitações, aflatoxina, citrinina, ergotamina, fumonisinas, ergovalina, ocratoxina, fomopsina, slaframina, esporidesmina, tricotecenos (por exemplo, satratoxina, desoxinivalenol), zearalenona. O tipo de toxina fúngica inserida na membrana celular não está particularmente limitado.

[0113] As toxinas animais consideradas na presente invenção incluem quaisquer substâncias tóxicas produzidas por um animal. Exemplos de toxinas animais incluem, porém sem limitações, toxinas cardiovasculares, toxinas gastrintestinais, toxinas respiratórias, toxinas neurológicas, toxinas de insuficiência de órgãos/renal. A presente invenção considera quaisquer toxinas animais agora conhecidas e posteriormente descobertas e o tipo de toxina animal inserida na membrana celular não está particularmente limitado. Em determinadas modalidades, a toxina animal que se insere na membrana celular é de um artrópode, tais como os insetos, aracnídeos e crustáceos, ou um réptil, tais como crocodilos, rhynchocephalia, squamata (incluindo lagartos e cobras) e testudines.

[0114] Toxinas químicas exemplificativas incluem inibidores de acetilcolinesterase (AChE), tal como envenenamento por organofosfato. Consulte, por exemplo, documentos WO 2016/176041 A1 e US 2018/0140558 Al. Organofosfatos ou venenos de organofosfato exemplificativos incluem Acefato (Orthene), Aspon, Azinfos-Metila (Gluthion), Carbofurano (Furadan, Formulação F), Carbofenotiona (Trithion), Clorfenvinfós (Birlane), Clorfós-Metila (Gluthion), Carbofurano (Furadan, Formulação F), Carbofenotiona (Trithion), Clorfenvinfós (Birlane), Clorpirifós (Dursban-Lomaalphos), Crotoxifós (Ciodrin,

Ciovap), Crufomato (Ruelene), Demetona (Systox), Diazinona (Spectracide), Diclorvós (DDVP, Vapona), Dicrotofós (Bidrin), Dimetoato (Cygon, De-Fend), Dioxationa (Delnav), Dissulfotona (Di-Syston), EPN, Etiona, Etoprope (Mocap), Fanfur, Fenamifós (Nemacur), Fenitrotiona (Sumithion) Fensulfotiona (Dasanit), Fentiona (Baytex, Tiguvon), Fonofós (Dyfonate), Isofenfós (Oftanol, Amaze), Malationa (Cythion), Metamidofós (Monitor), Metidationa (Supracide), Metil Parationa, Mevinfós (Phosdrin), Monocrotofós, Naled (Dibrom), Agentes Nervosos (Sarin, Soman, Soman, VX), Oxidemetona-Metila (Meta Systox-R), Parationa (Niran, Foskil), Forato (Thimet), Fosalona (Zolonc), Fosmete (Imidan, Prolato), Fosfamidona (Dimecron), Temefós (Abate), TEPP, Terbufós (Contador), Tetraclorvinfós (Rabon, Ravap) e Triclorfós (Dylox, Neguvon). As presentes nanopartículas podem ser usadas para diminuir ou neutralizar o efeito dos organofosfatos acima ou de um veneno de organofosfato em um indivíduo.

[0115] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula é configurada para se ligar ou neutralizar uma bactéria, um fungo ou um parasita que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula.

[0116] Em algumas modalidades, a presente nanopartícula tem uma melhor capacidade de se ligar ou neutralizar uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula comparado com uma nanopartícula comparável sem o nível aprimorado ou enriquecido de um esteroide.

[0117] Em outro aspecto, a presente invenção fornece um sistema ou dispositivo de administração de medicamento que compreende uma quantidade eficaz da nanopartícula descrita acima. O sistema ou dispositivo de administração de medicamento pode compreender ainda outro ingrediente ativo, ou um carreador ou excipiente médica ou farmaceuticamente aceitável.

[0118] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz da nanopartícula acima descrita e um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável. A composição farmacêutica pode compreender ainda outro ingrediente ativo.

[0119] A composição farmacêutica pode ser configurada para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula. Em algumas modalidades, a superfície externa da presente nanopartícula pode compreender uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta. C. Processos para Produzir Nanopartículas

[0120] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um processo para produzir uma nanopartícula que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação em um líquido para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide. Em algumas modalidades, a etapa b) compreende exercer energia exógena sobre a combinação em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o líquido que é isotônico a um líquido celular ou líquido fisiológico e uma superfície externa que compreende a membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do esteroide.

[0121] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um processo para produzir uma nanopartícula que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide; e c) exercer energia exógena sobre a dita nanopartícula em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e o dito líquido externo superfície que compreende a dita membrana celular que compreende o dito nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide.

[0122] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um processo para produzir uma nanopartícula que compreende exercer energia exógena sobre uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular. Em algumas modalidades, o processo compreende as etapas de: a) contatar uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho com um esteroide para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide. Em outras modalidades, o processo compreende as etapas de: a) contatar uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho com um esteroide para formar uma combinação; b) exercer energia exógena sobre a dita combinação para formar uma nanopartícula que compreende um núcleo interno e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide; e c) exercer energia exógena sobre a dita nanopartícula em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide

[0123] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um processo para produzir uma nanopartícula que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide e um esfingolipídio dissolvido em um solvente miscível em água para formar uma combinação, por exemplo, uma combinação em um líquido; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação ou combinação em um líquido para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende a dita membrana celular, o dito esteroide e o dito esfingolipídio.

[0124] A membrana celular usada no presente processo ou na presente nanopartícula pode ser qualquer membrana celular adequada ou ser derivada de qualquer célula adequada. Consulte, por exemplo, os parágrafos 68-70 acima. Por exemplo, a membrana celular pode ser derivada de uma célula animal, por exemplo, uma célula de mamífero não humano ou uma célula humana. Em algumas modalidades, a membrana celular é derivada de uma célula sanguínea, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula-tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial. Em algumas modalidades, a membrana celular compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula ou célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta.

[0125] No presente processo, a membrana celular pode estar contida em qualquer líquido ou líquido aquoso adequado. Por exemplo, o líquido aquoso pode ser água, um tampão que tem um pH que varia a partir de cerca de 5 a cerca de 9, por exemplo, PBS, ou um líquido ou tampão isotônico, por exemplo, IX PBS. Qualquer tampão adequado pode ser usado. Em algumas modalidades, o tampão pode ter um pH de cerca de 5, 6, 7, 8, 9 ou uma subfaixa das mesmas.

[0126] O esteroide usado no presente processo ou na presente nanopartícula pode ser qualquer esteroide adequado. Consulte, por exemplo, os parágrafos 71-80 acima. Por exemplo, o esteroide pode ser um colestano, por exemplo, colesterol, um colano, por exemplo, ácido cólico, um pregnano, por exemplo, progesterona, um androstano, por exemplo, testosterona ou um estrano, por exemplo, estradiol. Em outro exemplo, o esteroide pode ser um gonano, testosterona, ácido cólico, dexametasona, lanosterol, progesterona, medrogestona, -sitosterol, colesterol e 5-colestano.

[0127] O esfingolipídio usado no presente processo ou na presente nanopartícula pode ser qualquer esfingolipídio adequado. Consulte, por exemplo, o parágrafo 100 acima. Por exemplo, o esfingolipídio pode ser um esfingolipídio simples. Em outro exemplo, o esfingolipídio pode ser um esfingolipídio complexo, por exemplo, uma esfingomielina, um glicoesfingolipídio ou uma ceramida que contém inositol.

[0128] Em algumas modalidades, o esteroide, por exemplo,

colesterol, e o esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, podem ser dissolvidos no mesmo solvente miscível em água. Em algumas modalidades, o esteroide, por exemplo, colesterol, e o esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, podem ser dissolvidos em diferentes solventes miscíveis em água.

[0129] A dissolução do esteroide e/ou do esfingolipídio no solvente miscível em água pode ser facilitada por qualquer procedimento ou meio adequado. Por exemplo, a dissolução do esteroide e/ou do esfingolipídio no solvente miscível em água pode ser facilitada por meio de aquecimento e/ou mistura, por exemplo, agitação. Em algumas modalidades, o aquecimento é conduzido em uma temperatura que varia a partir de cerca de 35 °C a cerca de 65 °C, por exemplo, a cerca de 35 °C, 40 °C, 45 °C, 50 °C, 55 °C, 60 °C, 65 °C, ou uma subfaixa das mesmas.

[0130] Qualquer solvente miscível em água adequado pode ser usado no presente processo. Por exemplo, o solvente miscível em água pode ser um composto orgânico. Qualquer composto orgânico adequado pode ser usado. Por exemplo, o composto orgânico pode ser um álcool, por exemplo, um C1-C5 álcool. Em algumas modalidades, o álcool é metanol, etanol, 1-propanol, 1,3-propanodiol, 1,5-pentanodiol ou álcool isopropílico (isopropanol ou IPA). Em algumas modalidades, o solvente miscível em água pode ser um ou mais compostos orgânicos selecionados a partir de acetaldeído, ácido acético, acetona, acetonitrila, 1,2-butanodiol, 1,3-butanodiol, 1,4-butanodiol, 2- butoxietanol, ácido butírico, dietanolamina, dietilenotriamina, dimetilformamida, dimetoxietano, sulfóxido de dimetila (DMSO), 1,4- dioxano, etanol, etilamina, etileno glicol, ácido fórmico, álcool furfurílico, glicerol, metanol, metil dietanolamina, isocianeto de metila, N-metil-2- pirrolidona (NMP), 1-propanol, 1,3-propanodiol, 1,5-pentanodiol, álcool isopropílico, ácido propiônico, propileno glicol, piridina, tetra-hidrofurano

(THF) ou trietileno glicol.

[0131] Em outro exemplo, o solvente miscível em água pode ser um composto inorgânico. Em algumas modalidades, o solvente miscível em água pode ser um ou mais compostos inorgânicos selecionados a partir de 1,2-dimetil-hidrazina, dimetil-hidrazina assimétrica, hidrazina, ácido fluorídrico, peróxido de hidrogênio, ácido nítrico ou ácido sulfúrico.

[0132] Na combinação, o solvente miscível em água, por exemplo, IPA, pode ter qualquer concentração ou nível adequado. Por exemplo, na combinação, o solvente miscível em água, por exemplo, IPA, pode ter uma concentração ou nível que varia a partir de cerca de 5 % (v/v) a cerca de 40 % (v/v), por exemplo, cerca de 5 % ( v/v), 10 % (v/v), 15 % (v/v), 20 % (v/v), 25 % (v/v), 30 % (v/v), 35 % (v/v), 40 % (v/v) ou uma subfaixa das mesmas.

[0133] A combinação pode ter qualquer concentração em massa adequada. Por exemplo, a combinação pode ter qualquer concentração em massa adequada que varia a partir de cerca de 0,25 mg/ml a cerca de 20 mg/ml, por exemplo, cerca de 0,25 mg/ml, 0,5 mg/ml, 1 mg/ml, 1,5 mg/ml, 2 mg/ml, 2,5 mg/ml, 3 mg/ml, 3,5 mg/ml, 4 mg/ml, 4,5 mg/ml, 5 mg/ml, 6 mg/ml, 7 mg/ml, 8 mg/ml, 9 mg/ml, 10 mg/ml, 15 mg/ml, 20 mg/ml ou uma subfaixa das mesmas.

[0134] Na combinação, o esteroide, por exemplo, colesterol, pode ter qualquer concentração ou nível adequado. Por exemplo, na combinação, o esteroide, por exemplo, colesterol, pode ter uma concentração ou nível que varia a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 20 % (peso/peso), 25 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 35 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 45 % (peso/peso), 50 % (peso/peso) ou uma subfaixa das mesmas. O nível de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) de esteroide, por exemplo, colesterol, refere-se a um nível de esteroide, por exemplo, colesterol, que é independente (ou não inclui) do nível de esteroide, por exemplo, colesterol, na membrana celular.

[0135] Na combinação, o esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, pode ter qualquer concentração ou nível adequado. Por exemplo, na combinação, o esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, pode ter uma concentração ou nível que varia a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 90 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 20 % (peso/peso), 25 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 35 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 45 % (peso/peso), 50 % (peso/peso), 55 % (peso/peso), 60 % (peso/peso), 65 % (peso/peso), 70 % (peso/peso), 75 % (peso/peso), 80 % (peso/peso), 85 % (peso/peso), 90 % (peso/peso) ou uma subfaixa das mesmas. O nível de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 90 % (peso/peso) de esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, refere-se a um nível de esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, que é independente (ou não inclui) do nível de esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, na membrana celular.

[0136] Na combinação, a membrana celular, por exemplo, membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, tal como um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta, pode ter qualquer concentração ou nível adequado. Por exemplo, na combinação, a membrana celular, por exemplo, membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, tal como uma célula de glóbulo vermelho, uma célula de glóbulo branco e/ou uma plaqueta, pode ter uma concentração ou nível que varia a partir de cerca de 5 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 5 % (peso/peso), 10 % (peso/peso), 15 % (peso/peso), 20 % (peso/peso), 25 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 35 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 45 % (peso/peso), 50 % (peso/peso) ou uma subfaixa das mesmas.

[0137] No presente processo, a energia exógena pode ser exercida na combinação usando qualquer dispositivo, procedimento ou meio adequado. Por exemplo, no presente processo, exercer energia exógena sobre a combinação pode compreender submeter a combinação à sonicação em um líquido.

[0138] No presente processo, a combinação pode ser submetida à sonicação em qualquer temperatura adequada. Por exemplo, a combinação pode ser submetida à sonicação em uma temperatura que varia a partir de cerca de 15 °C a cerca de 50 °C, por exemplo, cerca de 15 °C, 20 °C, 25 °C, 30 °C, 35 °C, 40 °C, 45 °C, 50 °C ou uma subfaixa das mesmas.

[0139] No presente processo, a combinação pode ser submetida à sonicação em qualquer frequência adequada. Por exemplo, a combinação pode ser submetida à sonicação em uma frequência que varia de cerca de 20 kilohertz (kHz) a cerca de 60 kHz, por exemplo, a cerca de 20 kHz, 30 kHz, 40 kHz, 50 kHz, 60 kHz ou uma subfaixa das mesmas.

[0140] No presente processo, a combinação pode ser submetida à sonicação durante qualquer período de tempo adequado. Por exemplo, a combinação pode ser submetida à sonicação durante um tempo que varia a partir de cerca de 5 minutos a cerca de 50 minutos, por exemplo, durante cerca de 5 minutos, 10 minutos, 15 minutos, 20 minutos, 25 minutos, 30 minutos, 35 minutos, 40 minutos, 45 minutos, 50 minutos ou uma subfaixa dos mesmos.

[0141] No presente processo, a energia exógena pode ser exercida sobre a combinação para qualquer finalidade adequada. Por exemplo, exercer energia exógena sobre a combinação, por exemplo, submeter a combinação à sonicação, pode ser conduzido para homogeneizar a membrana celular, esteroide e esfingolipídio na combinação.

[0142] O presente processo pode ser usado para gerar qualquer/quaisquer nanopartícula(s) adequada(s). Por exemplo, o presente processo pode ser usado para gerar nanopartícula(s) na(s) qual(is) a superfície externa (ou envoltório) compreende a membrana celular, esteroide e esfingolipídio fundidos na(s) nanopartícula(s).

[0143] As nanopartículas produzidas ou preparadas por meio do presente processo podem ter qualquer distribuição de tamanho adequada. Por exemplo, as nanopartículas produzidas ou preparadas por meio do presente processo podem ter um índice de distribuição de partículas (Particle Distribution Index, PDI) em cerca de 0,2 ou maior, por exemplo, cerca de 0,3 ou maior.

[0144] O presente processo pode compreender ainda, após a etapa b), submeter a(s) nanopartícula(s) a um tratamento de cisalhamento elevado (ou tratamento de alta força de cisalhamento) em um processador de fluido de cisalhamento elevado. Qualquer processador de fluido de cisalhamento elevado adequado pode ser usado. Por exemplo, o processador de fluido de cisalhamento elevado pode ser um microfluidizador (ou um processador de microfluidizador) ou um homogeneizador que gera alta força de cisalhamento.

[0145] Em algumas modalidades, o processador de fluido de cisalhamento elevado usado no presente processo é um microfluidizador (ou um processador de microfluidizador). Qualquer microfluidizador adequado (ou um processador de microfluidizador) pode ser usado. Em algumas modalidades, o microfluidizador é configurado para gerar uma pressão substancialmente constante de cerca de 10.000 psi a cerca de 30.000 psi, por exemplo, cerca de 10.000 psi, 15.000 psi, 20.000 psi, cerca de 25.000 psi, 30.000 psi ou uma subfaixa das mesmas.

[0146] Em algumas modalidades, o microfluidizador tem a configuração de tecnologia de reação microfluídica (Microfluidics Reaction Technology, MRT) que compreende, a partir de a montante para a jusante, uma entrada para inserir a nanopartícula, uma bomba intensificadora para gerar uma pressão estática, uma câmara de jato de impacto para gerar uma alta pressão de cisalhamento na nanopartícula e uma saída para enviar a nanopartícula. Em algumas modalidades, o microfluidizador compreende uma câmara de interação de tipo Z. Em algumas modalidades, o microfluidizador compreende uma câmara de interação de tipo Y.

[0147] A microfluidização pode ser conduzida usando qualquer número adequado de pressão(ões). Por exemplo, a microfluidização pode ser conduzida usando uma única pressão. Em outro exemplo, a microfluidização pode ser conduzida usando uma combinação de diferentes pressões. A microfluidização também pode ser conduzida usando qualquer número adequado de passagens. Por exemplo, a microfluidização pode ser conduzida usando um único número de passagem. Em outro exemplo, a microfluidização pode ser conduzida usando vários números de passagem.

[0148] O presente processo pode compreender ainda o resfriamento da(s) nanopartícula(s). Em algumas modalidades, as nanopartículas em um canal, após saírem de uma câmara do microfluidizador, são resfriadas por um resfriador de produto que contém um refrigerante. O resfriador de produto ou o refrigerante no resfriador de produto pode ser ajustado em qualquer temperatura adequada. Por exemplo, o resfriador de produto ou o refrigerante no resfriador de produto pode ser ajustado para uma temperatura que varia a partir de cerca de 4 °C a cerca de 55 °C, por exemplo, cerca de 4 °C, 5 °C, 10 °C, 15 °C, 20 °C, 25 °C, 30 °C, 35 °C, 40 °C, 45 °C, 50 °C, 55°C ou uma subfaixa das mesmas.

[0149] O presente processo pode ser usado para gerar nanopartículas com qualquer tamanho e/ou distribuição de tamanho adequados. Em geral, as nanopartículas geradas com um tratamento de cisalhamento elevado (ou tratamento de alta força de cisalhamento),

comparado com as nanopartículas geradas sem o tratamento de cisalhamento elevado (ou tratamento de alta força de cisalhamento), têm tamanhos menores e uma faixa menor de distribuição de tamanho. Em algumas modalidades, as nanopartículas geradas com um tratamento de cisalhamento elevado (ou tratamento de alta força de cisalhamento) têm um índice de distribuição de partículas (PDI) que varia a partir de cerca de 0,05 a cerca de 0,2, por exemplo, um PDI de cerca de 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,11, 0,12, 0,13, 0,14, 0,15, 0,16, 0,17, 0,18, 0,19, 0,2 ou um subfaixa das mesmas. Em algumas modalidades, as nanopartículas geradas com um tratamento de cisalhamento elevado (ou tratamento de alta força de cisalhamento) têm um tamanho de partícula com uma média Z que varia a partir de cerca de 30 nm a cerca de 300 nm, por exemplo, com uma média Z de cerca de 30 nm, 40 nm, 50 nm, 60 nm, 70 nm, 80 nm, 90 nm, 100 nm, 110 nm, 120 nm, 130 nm, 140 nm, 150 nm, 160 nm, 170 nm, 180 nm, 190 nm, 200 nm, 210 nm, 220 nm, 230 nm, 240 nm, 250 nm, 260 nm, 270 nm, 280 nm, 290 nm, 200 nm ou uma subfaixa das mesmas.

[0150] O presente processo pode compreender ainda um ou mais dos seguintes: 1) uma etapa de remoção ou redução do nível de partículas que têm um tamanho de partícula em cerca de 200 nm, 210 nm, 220 nm, 230 nm, 240 nm, 250 nm ou maior; 2) uma etapa de remoção ou redução do nível de solvente miscível em água; 3) uma etapa de concentração das nanopartículas; 4) uma etapa de esterilização das nanopartículas; e/ou 5) uma etapa de enchimento das nanopartículas em recipientes individuais. Em algumas modalidades, o presente processo pode compreender ainda 2, 3 4 ou 5 dos seguintes: 1) uma etapa de remoção ou redução do nível de partículas que têm um tamanho de partícula em cerca de 200 nm, 210 nm, 220 nm, 230 nm, 240 nm, 250 nm ou maior; 2) uma etapa de remoção ou redução do nível de solvente miscível em água; 3) uma etapa de concentração das nanopartículas; 4) uma etapa de esterilização das nanopartículas; e/ou 5) uma etapa de enchimento das nanopartículas em recipientes individuais.

[0151] A etapa de remoção ou redução do nível de partículas que têm um tamanho de partícula de cerca de 200 nm, 210 nm, 220 nm, 230 nm, 240 nm, 250 nm ou mais pode ser conduzida usando qualquer dispositivo, procedimento ou meio adequado. Por exemplo, a etapa 1) pode compreender submeter à filtração um líquido que contém as nanopartículas. Qualquer tipo de filtração ou filtro adequado pode ser usado. Em algumas modalidades, a filtração pode ser conduzida usando um filtro que compreende poliéter sulfona (PES), difluoreto de polivinilideno (PVDF), fibra de vidro, acetato de celulose ou uma combinação dos mesmos. O filtro pode ter qualquer tamanho de poros adequado. Por exemplo, o filtro pode ter um tamanho de poros que varia a partir de cerca de 0,2 μm a cerca de 1,2 μm, por exemplo, cerca de 0,2 μm, 0,3 μm, 0,4 μm, 0,5 μm, 0,6 μm, 0,7 μm, 0,8 μm, 0,9 μm, 1,0 μm, 1,1 μm, 1,2 μm ou uma subfaixa das mesmas. Em algumas modalidades, a filtração é conduzida usando um único filtro. Em algumas modalidades, a filtração é conduzida usando vários filtros com diferentes tamanhos de poros. Em algumas modalidades, a filtração é conduzida para remover ou reduzir o nível de partículas que têm um tamanho de partícula de cerca de 200 nm, 210 nm, 220 nm, 230 nm, 240 nm, 250 nm ou maior e para esterilizar as nanopartículas.

[0152] A etapa de remoção ou redução do nível de solvente miscível em água e/ou a etapa de concentração das nanopartículas pode ser conduzida usando qualquer dispositivo, procedimento ou meio adequado. Por exemplo, a etapa 2) e/ou 3) pode compreender submeter um líquido que contém as nanopartículas à filtração de fluxo tangencial (Tangential Flow Filtration, TFF).

[0153] A TFF pode ser conduzida usando qualquer dispositivo ou sistema de TFF adequado. Por exemplo, a TFF pode ser conduzida usando um sistema de TFF que compreende um reservatório de alimentação, um dispositivo de filtro e um dispositivo de coleta, o reservatório de alimentação está em comunicação fluídica com o dispositivo de filtro por meio de uma entrada no dispositivo de filtro, o dispositivo de filtro está em comunicação fluídica com o dispositivo de coleta por meio de uma saída de permeado no dispositivo de filtro e o dispositivo de filtro está em comunicação fluídica com o reservatório de alimentação por meio de uma saída de retentado no dispositivo de filtro.

[0154] O dispositivo de filtro pode estar em qualquer forma adequada. Por exemplo, o dispositivo de filtro pode ter a forma de um cartucho, um cassete ou uma coluna que contém um filtro de fibra oca. O dispositivo de filtro pode compreender uma membrana de filtração que tem qualquer tamanho de poros adequado. Por exemplo, o dispositivo de filtro pode compreender uma membrana de filtração que tem um tamanho de poros que varia a partir de cerca de 100 Kd a cerca de 300 Kd, por exemplo, cerca de 100 Kd, 150 Kd, 200 Kd, 250 Kd, 300 Kd ou uma subfaixa das mesmas.

[0155] A TFF pode ser conduzida por meio de qualquer tipo de processo adequado. Por exemplo, a TFF pode ser conduzida por meio de um processo de diafiltração. Em algumas modalidades, o processo de diafiltração é um processo de diafiltração contínuo, descontínuo ou sequencial. A TFF pode ser conduzida através de qualquer número adequado de ciclo(s). Em algumas modalidades, a TFF é conduzida através de um único ciclo. Em algumas modalidades, a TFF é conduzida através de múltiplos ciclos de processos de diafiltração, por exemplo, múltiplos ciclos de processos de diafiltração contínuos.

[0156] O presente processo ou a TFF pode compreender ainda coletar a(s) nanopartícula(s). A(s) nanopartícula(s) pode(m) ser coletada(s) usando qualquer dispositivo, procedimento ou meio adequado. Por exemplo, a(s) nanopartícula(s) pode(m) ser coletada(s) por meio de uma saída de retentado no dispositivo de filtro.

[0157] A TFF pode ser conduzida para qualquer/quaisquer finalidade(s) adequada(s). Em algumas modalidades, a TFF é usada para reduzir a quantidade ou nível de solvente miscível em água de uma composição, por exemplo, um líquido, que contém a nanopartícula. Em algumas modalidades, a TFF é usada para remover o solvente miscível em água de uma composição, por exemplo, um líquido, que contém a nanopartícula. Em algumas modalidades, a TFF é usado para remover cerca de 50 % a cerca de 99,9999 % do solvente miscível em água da composição, por exemplo, para remover cerca de 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 %, 99 %, 99,9 % 99,99 % 99,999 % ou 99,9999 % do solvente miscível em água da composição. Em algumas modalidades, o solvente miscível em água usado no presente processo é IPA e TFF é usada para reduzir a concentração ou nível de IPA abaixo de 5.000 ppm na composição, por exemplo, para reduzir a concentração ou nível de IPA abaixo de 5.000 ppm, 4.000 ppm, 3.000 ppm, 2.000 ppm, 1.000 ppm ou 500 ppm na composição.

[0158] A TFF também pode ser usado para concentrar e/ou enriquecer a(s) nanopartícula(s). Em algumas modalidades, a TFF é usada para concentrar e/ou enriquecer a(s) nanopartícula(s) cerca de 1 vez a cerca de 400 vezes, por exemplo, para concentrar e/ou enriquecer a(s) nanopartícula(s) 1 vez, 2 vezes, 5 vezes, 10 vezes, 50 vezes, 100 vezes, 200 vezes, 300 vezes, 400 vezes ou uma subfaixa das mesmas.

[0159] A etapa de remoção ou redução do nível de solvente miscível em água e a etapa de concentração das nanopartículas podem ser conduzidas como uma etapa combinada ou como etapas separadas. Por exemplo, as etapas 2) e 3) podem ser combinadas em uma única etapa que compreende submeter um líquido que contém as nanopartículas à filtração de fluxo tangencial (TFF).

[0160] O presente processo pode compreender ainda uma etapa de esterilização das nanopartículas ou uma composição, por exemplo, um líquido, que contém as nanopartículas. Por exemplo, no presente processo, antes e/ou após o tratamento de TFF, uma composição, por exemplo, um líquido, que contém a nanopartícula é submetida a uma etapa para esterilizar a composição que contém a nanopartícula. Em algumas modalidades, antes do tratamento de TFF, uma composição, por exemplo, um líquido, que contém a nanopartícula é submetida a uma etapa para esterilizar a composição que contém a nanopartícula. Em algumas modalidades, após o tratamento de TFF, uma composição, por exemplo, um líquido, que contém as nanopartículas é submetida a uma etapa para esterilizar a composição que contém as nanopartículas. Em algumas modalidades, antes e após o tratamento de TFF, uma composição, por exemplo, um líquido, que contém a nanopartícula é submetida a uma etapa para esterilizar a composição que contém a nanopartícula.

[0161] A etapa para esterilizar a composição que contém as nanopartículas pode ser conduzida usando qualquer dispositivo, procedimento ou meio adequado. Por exemplo, a etapa para esterilizar a composição pode compreender submeter a composição à filtração. Qualquer tipo de filtração ou filtro adequado pode ser usado. Em algumas modalidades, a filtração pode ser conduzida usando um filtro que compreende poliéter sulfona (PES), difluoreto de polivinilideno (PVDF), fibra de vidro, acetato de celulose ou uma combinação dos mesmos. O filtro pode ter qualquer tamanho de poros adequado. Por exemplo, o filtro pode ter um tamanho de poros de cerca de 0,2 μm. Em algumas modalidades, a filtração é conduzida usando um único filtro. Em algumas modalidades, a filtração é conduzida usando vários filtros com diferentes tamanhos de poros.

[0162] Em algumas modalidades, o presente processo não compreende remover ou vaporizar o solvente miscível em água para formar uma membrana que compreende o esteroide e o esfingolipídio.

[0163] Em algumas modalidades, o presente processo é conduzido em que a membrana celular compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, o esteroide é colesterol, o esfingolipídio é uma esfingomielina e o solvente miscível em água é IPA. Por exemplo, o presente processo pode ser conduzido para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende a dita membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, colesterol e esfingomielina. Em algumas modalidades, o compartimento interno (ou um núcleo interno) da nanopartícula não fornece um suporte sólido para a superfície externa (ou envoltório). Em algumas modalidades, o compartimento interno (ou núcleo interno) da nanopartícula é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende cerca de 40 % (peso/peso) de colesterol, cerca de 40 % (peso/peso) de esfingomielina e cerca de 20 % (peso/peso) da membrana plasmática derivada de uma glóbulo vermelho. O nível de colesterol de cerca de 40 % (peso/peso) refere-se a um nível de colesterol que é independente (ou não inclui) do nível de colesterol na membrana celular. Da mesma forma, um nível de esfingomielina de cerca de 40 % (peso/peso) refere-se a um nível de esfingomielina que é independente (ou não inclui) do nível de esfingomielina na membrana celular.

[0164] A membrana celular usada nos presentes processos pode estar em qualquer forma adequada. Por exemplo, a membrana celular derivada de uma célula pode estar na forma de um "fantasma" (ghost)

de membrana celular.

[0165] Qualquer energia exógena adequada pode ser usada nos presentes processos. Por exemplo, a energia exógena usada nos presentes processos pode ser uma energia mecânica, uma energia acústica ou uma energia térmica.

[0166] Qualquer membrana celular adequada pode ser usada nos presentes processos. Por exemplo, a membrana celular usada nos presentes processos pode ser derivada de uma célula sanguínea de um mamífero ou ser humano, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco ou uma plaqueta.

[0167] Qualquer esteroide adequado pode ser usado nos presentes processos. Por exemplo, o esteroide usado nos presentes processos pode ser um colestano, por exemplo, colesterol.

[0168] Uma nanopartícula preparada por meio do presente processo também é fornecida.

[0169] Em algumas modalidades, o compartimento interno (ou um núcleo interno) da nanopartícula não fornece um suporte sólido para a superfície externa (ou envoltório). Em algumas modalidades, o compartimento interno (ou núcleo interno) da nanopartícula é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico. Em algumas modalidades, o compartimento interno (ou núcleo interno) da nanopartícula não fornece um suporte sólido para a superfície externa (ou envoltório) e é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico.

[0170] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende uma membrana celular derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, colesterol e esfingomielina.

[0171] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende a membrana celular fundida derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina. Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende uma membrana plasmática fundida derivada de um glóbulo vermelho, colesterol e esfingomielina.

[0172] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) de colesterol, a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 90 % (peso/peso) de esfingomielina e a partir de cerca de 5 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) da membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho. O nível de colesterol a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) refere-se a um nível de colesterol que é independente (ou não inclui) do nível de colesterol na membrana celular. Da mesma forma, o nível de esfingomielina a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 90 % (peso/peso) refere-se a um nível de esfingomielina que é independente (ou não inclui) do nível de esfingomielina na membrana celular.

[0173] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) de colesterol, por exemplo, cerca de 20 % (peso/peso), 25 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 35 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 45 % (peso/peso), 50 % (peso/peso) colesterol ou uma subfaixa das mesmas.

[0174] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende a partir de cerca de 20 %

(peso/peso) a cerca de 90 % (peso/peso) de esfingomielina, por exemplo, cerca de 20 % (peso/peso), 25 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 35 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 45 % (peso/peso), 50 % (peso/peso), 55 % (peso/peso), 60 % (peso/peso), 65 % (peso/peso), 70 % (peso/peso), 75 % (peso/peso), 80 % (peso/peso), 85 % (peso/peso), 90 % (peso/peso) de esfingomielina ou uma subfaixa das mesmas.

[0175] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende a partir de cerca de 5 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) da membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, por exemplo, cerca de 5 % ( peso/peso), 10 % (peso/peso), 15 % (peso/peso), 20 % (peso/peso), 25 % (peso/peso), 30 % (peso/peso), 35 % (peso/peso), 40 % (peso/peso), 45 % (peso/peso), 50 % (peso/peso) da membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho ou uma subfaixa das mesmas.

[0176] Em algumas modalidades, a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula compreende cerca de 40 % (peso/peso) de colesterol, cerca de 40 % (peso/peso) de esfingomielina e cerca de 20 % (peso/peso) da membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho.

[0177] Um sistema ou dispositivo de administração de medicamento que compreende uma quantidade eficaz da presente nanopartícula também é fornecido. O sistema ou dispositivo de administração de medicamento pode ainda compreender outro ingrediente ativo ou um carreador ou excipiente médica ou farmaceuticamente aceitável.

[0178] Uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz da presente nanopartícula e um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável também é fornecida. O produto farmacêutico pode ainda compreender outro ingrediente ativo. A composição farmacêutica também pode ser configurada para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula. A superfície externa da nanopartícula na composição farmacêutica pode compreender qualquer membrana celular adequada, por exemplo, uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta. D. Métodos para Tratar ou Prevenir Uma Doença ou Condição

[0179] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um método para tratar ou prevenir uma doença ou condição em um indivíduo que precisa que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornecendo um suporte sólido à dita membrana celular na dita superfície externa (ou envoltório). Opcionalmente e em algumas modalidades: a) o dito compartimento interno (ou núcleo interno) da dita nanopartícula é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou líquido fisiológico; e/ou b) a dita membrana celular da dita superfície externa (ou invólucro) da dita nanopartícula compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide. Ainda opcionalmente e em algumas modalidades, quando a nanopartícula compreende uma membrana celular que é derivada de um glóbulo vermelho, o compartimento interno (ou núcleo interno) é isotônico a um líquido celular ou fisiológico. Em algumas modalidades, as nanopartículas são administradas usando um sistema de distribuição de medicamento ou composição farmacêutica que compreende as nanopartículas.

[0180] O presente método pode ser usado para tratar ou prevenir uma doença ou condição em qualquer indivíduo adequado. Por exemplo, o indivíduo pode ser um mamífero humano ou não humano.

[0181] A nanopartícula usada nos presentes métodos pode compreender qualquer membrana celular adequada. Por exemplo, a membrana celular na nanopartícula pode ser derivada de uma célula da mesma espécie do indivíduo ou é derivada de uma célula do indivíduo. A membrana celular na nanopartícula pode ser derivada de qualquer célula adequada. Por exemplo, a membrana celular na nanopartícula pode ser derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta. Em outro exemplo, a membrana celular na nanopartícula pode ser derivada de um glóbulo vermelho da mesma espécie do indivíduo e o glóbulo vermelho tem o mesmo tipo de sangue do indivíduo.

[0182] Os presentes métodos podem ser usados para qualquer finalidade adequada. Por exemplo, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula. Uma porção exemplificativa pode ser um agente, por exemplo, um agente químico, uma molécula ou um organismo.

[0183] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a um organismo que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula. Um organismo exemplificativo pode ser um vírus, uma bactéria, um fungo ou um parasita.

[0184] Em algumas modalidades, "vírus" refere-se a um parasita intracelular obrigatório de natureza viva, mas não celular, que consiste em DNA ou RNA e um revestimento de proteína. Os vírus variam, quanto ao diâmetro, a partir de cerca de 20 a cerca de 300 nm. Os vírus de classe I (classificação de Baltimore) têm um DNA fita dupla como genoma; os vírus da classe II têm um DNA fita simples como genoma;

os vírus de classe III têm um RNA fita dupla como genoma; os vírus da classe IV têm um RNA fita simples positivo como genoma, o próprio genoma atuando como mRNA; os vírus de classe V têm um RNA fita única negativo como genoma usado como modelo para a síntese de mRNA; e os vírus da Classe VI têm um genoma de RNA fita simples positivo, mas com um intermediário de DNA não apenas na replicação, mas também na síntese de mRNA. A maioria dos vírus é reconhecida pelas doenças que causam em plantas, animais e procariotas. Os vírus de procariotas são conhecidos como bacteriófagos.

[0185] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a um vírus patogênico. Vírus patogênicos exemplificativos incluem vírus da varíola, vírus da gripe, vírus da caxumba, vírus do sarampo, vírus da varicela, vírus ebola, vírus da imunodeficiência humana (HIV), vírus da rubéola, vírus da hepatite A (HAV), hepatite B (HB V), hepatite C (HCV) e hepatite D (HDV).

[0186] Em algumas modalidades, "bactérias" refere-se a pequenos organismos procariotas (dimensões lineares de cerca de 1 mícron) com DNA circular não compartimentado e ribossomos de cerca de 70S. A síntese de proteínas em bactérias difere da síntese de eucariotas. Muitos antibióticos antibacterianos interferem na síntese de proteínas bacterianas, mas não afetam o hospedeiro infectado. As principais subdivisões das bactérias incluem eubactérias e arqueobactérias. Em algumas modalidades, "eubactérias" refere-se a uma subdivisão principal das bactérias, exceto quanto às arqueobactérias. A maioria das bactérias Gram-positivas, cianobactérias, micoplasmas, enterobactérias, pseudomonas e cloroplastos são eubactérias. A membrana citoplasmática de eubactérias contém lipídios ligados a éster; há peptidoglicano na parede celular (se presente); e nenhum íntron foi descoberto em eubactérias. Em algumas modalidades,

"arqueobactérias" refere-se a uma subdivisão principal das bactérias, exceto quanto às eubactérias. Há três ordens principais de arqueobactérias: halófilos extremos, metanógenos e termófilos extremos dependentes de enxofre. As arqueobactérias diferem das eubactérias quanto à estrutura ribossômica, a posse (em alguns casos) de íntrons e outras características, incluindo a composição da membrana.

[0187] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma bactéria patogênica. Bactérias patogênicas exemplificativas incluem bactérias que causam ou estão associadas à tuberculose (TB), por exemplo, Mycobacterium tuberculosis (M. tb), pneumonia, por exemplo, Streptococcus ou Pseudomonas, doença de origem alimentar, por exemplo, E. coli, Shigella, Campylobacter, Salmonella, tétano, febre tifoide, difteria, sífilis e lepra.

[0188] Em algumas modalidades, "fungo" refere-se a uma divisão de organismos eucariotas que crescem em massas irregulares, sem raízes, caules ou folhas e são desprovidos de clorofila ou outros pigmentos capazes de fotossíntese. Cada organismo (talo) é unicelular a filamentoso e possui estruturas somáticas ramificadas (hifas) rodeadas por paredes celulares que contêm glucano ou quitina, ou ambos, e que contêm núcleos verdadeiros.

[0189] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a um fungo patogênico. Fungos patogênicos exemplificativos incluem Candida albicans que é a causa mais comum de Candidíase e Cryptococcus neoformans que pode causar uma forma grave de meningite.

[0190] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a um parasita. Parasitas humanos exemplificativos incluem parasitas que causam ou estão associados à malária, leishmaniose, criptosporidiose, amebíase, doença de Chagas, tripanossomíase Africana, esquistossomose, ascaríase, equinococose e cisticercose.

[0191] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma toxina, uma citocina, um autoanticorpo ou uma quimiocina que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula. Uma toxina exemplificativa pode ser uma toxina bacteriana, fúngica, animal ou química. Uma toxina química exemplificativa pode ser um organofosfato. Uma toxina animal exemplificativa pode ser uma toxina em um veneno animal.

[0192] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma toxina de inserção na membrana celular. Em modalidades específicas, a toxina se insere na membrana celular ou membrana plasmática de uma célula alvo do indivíduo como parte do mecanismo patológico natural da toxina. Em modalidades específicas, a membrana celular ou membrana plasmática na superfície externa da nanopartícula usada nos presentes métodos retém substancialmente a toxina. Em modalidades específicas, a superfície externa da nanopartícula usada nos presentes métodos compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta.

[0193] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir infecção cutânea, sepse, pneumonia, uma reação autoimune, por exemplo, uma reação autoimune em virtude da produção de um anticorpo autoimune, tal como um anticorpo autoimune contra células sanguíneas ou eritrócitos.

[0194] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem compreender ainda administrar outro ingrediente ativo, ou um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável, ao indivíduo que precisa. Em algumas modalidades, a presente nanopartícula pode ser administrada por meio de um sistema ou dispositivo de distribuição de medicamento.

[0195] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para tratar ou prevenir infecção, por exemplo, infecção cutânea, sepse, pneumonia ou uma reação autoimune, por exemplo, uma reação autoimune em virtude da produção de um anticorpo autoimune, tal como um anticorpo autoimune contra células sanguíneas ou glóbulos vermelhos.

[0196] A(s) nanopartícula(s) ou uma composição que compreende a(s) nanopartícula(s), por exemplo, uma composição farmacêutica que compreende a(s) nanopartícula(s), pode ser administrada através de qualquer via ou procedimento adequado. Por exemplo, a nanopartícula ou uma composição que compreende a(s) nanopartícula(s), por exemplo, uma composição farmacêutica, pode ser administrada através da via entérica/gastrintestinal, oral, parentérica, intravenosa, retal, nasal, tópica, ocular, inalatória ou intratraqueal.

[0197] Em algumas modalidades, a nanopartícula ou uma composição que compreende as nanopartículas, por exemplo, uma composição farmacêutica, pode ser administrada através da via intratraqueal. Por exemplo, a doença ou condição a ser tratada ou prevenida pode ser infecção, por exemplo, infecção cutânea, sepse ou pneumonia, e a nanopartícula ou uma composição que compreende a(s) nanopartícula(s), por exemplo, uma composição farmacêutica, pode ser administrada através da via intratraqueal. Qualquer administração intratraqueal adequada pode ser usada. Por exemplo, a nanopartícula ou uma composição que compreende a(s) nanopartícula(s), por exemplo, uma composição farmacêutica, pode ser administrada por meio de instilação intratraqueal ou inalação intratraqueal.

[0198] Em algumas modalidades, a composição imunogênica específica para neoplasma ou vacina pode ser administrada através da via entérica/gastrintestinal, oral, parentérica, intravenosa, retal, nasal, tópica, ocular, inalação ou via intratraqueal.

[0199] Em algumas modalidades, a composição imunogênica para desencadear uma resposta imune a uma porção associada a uma doença ou condição em um indivíduo pode ser administrada através da via entérica/gastrintestinal, oral, parentérica, intravenosa, retal, nasal, tópica, ocular, inalação ou intratraqueal.

[0200] Em algumas modalidades, os presentes métodos compreendem ainda administrar ao indivíduo um segundo agente terapêutico. Qualquer segundo agente terapêutico adequado pode ser usado. Por exemplo, o segundo agente terapêutico pode ser um antibiótico, um agente antitumoral ou anticâncer, ou um modulador de resposta imune, por exemplo, um ativador ou supressor de resposta imune.

[0201] Em algumas modalidades, os presentes métodos não compreendem administrar ao indivíduo um segundo agente terapêutico.

[0202] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece o uso de uma quantidade eficaz da presente nanopartícula para a fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir uma doença ou condição em um indivíduo que precisa. E. Composições Imunogênicas E Usos das Mesmas

[0203] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição imunogênica que compreende uma quantidade eficaz da presente nanopartícula e, opcionalmente, compreende ainda um adjuvante imunogênico ou um intensificador imune.

[0204] A presente composição imunogênica pode ser configurada para qualquer uso adequado para aplicação. Em algumas modalidades,

a presente composição imunogênica pode ser configurada como uma composição imunogênica específica para neoplasma e em que a superfície externa da nanopartícula compreende uma membrana celular derivada de uma célula de neoplasma.

[0205] A membrana celular da nanopartícula na composição imunogênica específica para neoplasma pode ser derivada de qualquer célula neoplásica adequada. Por exemplo, a membrana celular da nanopartícula na composição imunogênica específica para neoplasma pode ser derivada de uma célula neoplásica benigna, uma célula neoplásica potencialmente maligna, uma célula cancerosa, uma linhagem de células cancerosas ou uma célula cancerosa de um indivíduo.

[0206] Em algumas modalidades, a membrana celular na superfície externa da nanopartícula na composição imunogênica específica para neoplasma retém substancialmente sua integridade estrutural para induzir a uma resposta imune à célula neoplásica.

[0207] Em outras modalidades, o compartimento interno (núcleo interno) da nanopartícula na composição imunogênica específica para neoplasma não suporta a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula.

[0208] Em algumas modalidades, a nanopartícula na composição imunogênica específica para neoplasma pode compreender ainda outro ingrediente ativo ou uma carga liberável.

[0209] A nanopartícula na composição imunogênica específica para neoplasma pode ter qualquer tamanho adequado. Por exemplo, a nanopartícula pode ter um diâmetro a partir de cerca de 10 nm a cerca de 10 pm. Em determinadas modalidades, o diâmetro da nanopartícula é cerca de 10 nm, 20 nm, 30 nm, 40 nm, 50 nm, 60 nm, 70nm, 80 nm, 90 nm, 100 nm, 110 nm, 120 nm, 130 nm, 140 nm, 150 nm, 200 nm, 300 nm, 400 nm, 500 nm, 600 nm, 700 nm, 800 nm, 900 nm, 1 μm, 2 μm, 3 μm, 4 μm, 5 μm, 6 μm, 7 μm, 8 μm, 9 μm e 10 μm ou qualquer subfaixa das mesmas, por exemplo, qualquer faixa entre quaisquer dois dos tamanhos acima.

[0210] Em algumas modalidades, a nanopartícula na composição imunogênica específica para neoplasma carece substancialmente de constituintes da célula neoplásica da qual a membrana celular é derivada. Por exemplo, a nanopartícula pode carecer de cerca de 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou 100 % dos constituintes da célula neoplásica da qual a membrana celular é derivada.

[0211] Em algumas modalidades, a nanopartícula na composição imunogênica específica para neoplasma mantém substancialmente a integridade estrutural natural ou a atividade da membrana celular ou dos constituintes da membrana celular. Por exemplo, a nanopartícula pode reter cerca de 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % ou 100 % da integridade estrutural natural. Em algumas modalidades, a nanopartícula mantém substancialmente a integridade estrutural natural da membrana celular ou dos constituintes da membrana celular, incluindo a estrutura primária, secundária, terciária e/ou quaternária da membrana celular ou dos constituintes da membrana celular. Em algumas modalidades, a nanopartícula retém substancialmente a atividade da membrana celular ou dos constituintes da membrana celular, incluindo a atividade de ligação, atividade de receptor e/ou atividade enzimática da membrana celular ou dos constituintes da membrana celular.

[0212] Em algumas modalidades, a presente composição imunogênica específica para neoplasma pode compreender ainda um adjuvante imunogênico ou um intensificador imune.

[0213] Em algumas modalidades, a superfície externa da nanopartícula na presente composição imunogênica específica para neoplasma compreende uma membrana celular de ocorrência natural e compreende ainda uma membrana sintética.

[0214] Uma vacina que compreende a presente composição imunogênica específica para neoplasma também é fornecida.

[0215] Também é fornecido um método para tratar ou prevenir uma neoplasia em um indivíduo que precisa caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz da presente composição imunogênica específica para neoplasma.

[0216] O presente método pode ser usado para tratar ou prevenir uma neoplasia em qualquer indivíduo adequado. Por exemplo, o indivíduo pode ser um mamífero humano ou não humano.

[0217] A nanopartícula usada nos presentes métodos pode compreender qualquer membrana celular adequada. Por exemplo, a membrana celular na nanopartícula pode ser derivada de uma célula da mesma espécie do indivíduo ou é derivada de uma célula neoplásica do indivíduo.

[0218] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem compreender ainda administrar outro ingrediente ativo ou um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável ao indivíduo que precisa. Em algumas modalidades, a presente nanopartícula pode ser administrada por meio de um sistema ou dispositivo de distribuição de medicamento.

[0219] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um uso de uma quantidade eficaz da presente composição imunogênica específica para neoplasma para a fabricação de uma vacina para o tratamento ou proteção de um indivíduo contra uma neoplasia.

[0220] Em algumas modalidades, a presente composição imunogênica pode ser configurada para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula e em que a superfície externa da nanopartícula compreende a porção. Uma porção exemplificativa pode ser um agente, por exemplo, um agente químico, uma molécula ou um organismo.

[0221] Em algumas modalidades, as presentes composições imunogênicas podem ser usadas para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a um organismo que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula. Um organismo exemplificativo pode ser uma bactéria, um fungo ou um parasita.

[0222] Em algumas modalidades, as presentes composições imunogênicas podem ser usadas para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma toxina, uma citocina, um autoanticorpo ou uma quimiocina. Uma toxina exemplificativa pode ser uma toxina bacteriana, fúngica, animal ou química. Uma toxina química exemplificativa pode ser um organofosfato. Uma toxina animal exemplificativa pode ser uma toxina em um veneno animal.

[0223] Em algumas modalidades, as presentes composições imunogênicas podem ser usadas para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma toxina de inserção na membrana celular. Em modalidades específicas, a toxina se insere na membrana celular ou membrana plasmática de uma célula alvo do indivíduo como parte do mecanismo patológico natural da toxina. Em modalidades específicas, a membrana celular ou membrana plasmática na superfície externa da nanopartícula retém substancialmente a toxina.

[0224] A membrana celular na superfície externa da nanopartícula nas presentes composições imunogênicas pode ser derivada de qualquer célula adequada. Em algumas modalidades, a membrana celular é uma membrana plasmática derivada de uma célula. Em algumas modalidades, a superfície externa compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho.

[0225] Em algumas modalidades, a superfície externa da nanopartícula nas presentes composições imunogênicas pode compreender uma membrana celular de ocorrência natural e pode compreender ainda uma membrana sintética.

[0226] Em algumas modalidades, a nanopartícula nas presentes composições imunogênicas pode ser biocompatível, biodegradável ou pode compreender um material sintético.

[0227] Em outras modalidades, o compartimento interno (núcleo interno) da nanopartícula na presente composição imunogênica não suporta a superfície externa (ou envoltório) da nanopartícula.

[0228] Em algumas modalidades, a presente composição imunogênica pode compreender ainda outro ingrediente ativo ou um adjuvante imunogênico ou intensificador imune.

[0229] Uma vacina que compreende a presente composição imunogênica também é fornecida.

[0230] Um método para desencadear uma resposta imune a uma porção associada a uma doença ou condição em um indivíduo também é fornecido, o qual compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz da presente composição imunogênica.

[0231] Um método para proteger um indivíduo contra uma porção associada a uma doença ou condição em um indivíduo também é fornecido, o qual compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz da presente vacina.

[0232] O presente método pode ser usado para tratar ou prevenir uma doença ou condição em qualquer indivíduo adequado. Por exemplo, o indivíduo pode ser um mamífero humano ou não humano.

[0233] Em algumas modalidades, a membrana celular ou membrana plasmática das nanopartículas usadas nos presentes métodos pode ser derivada de uma célula da mesma espécie do indivíduo ou de uma célula do indivíduo. Em algumas modalidades, a membrana plasmática é derivada de um glóbulo vermelho da mesma espécie do indivíduo e o glóbulo vermelho tem o mesmo tipo de sangue do indivíduo.

[0234] Em algumas modalidades, os presentes métodos podem compreender ainda administrar outro ingrediente ativo ou um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável ao dito indivíduo.

[0235] Os presentes métodos podem ser usados para induzir a qualquer tipo adequado de resposta imune em um indivíduo. Em algumas modalidades, os presentes métodos podem ser usados para induzir a uma resposta imune mediada por células T ou uma resposta imune mediada por células B em um indivíduo.

[0236] Em ainda outro aspecto, a presente invenção fornece um uso de uma quantidade eficaz da presente composição imunogênica para a fabricação de uma vacina para proteger um indivíduo contra uma doença ou condição associada à porção. F. Composições Farmacêuticas e Vias de Administração

[0237] As composições farmacêuticas que compreendem as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), descritas no presente documento podem compreender ainda um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Um excipiente farmaceuticamente aceitável é uma substância que não é tóxica e de outra forma biologicamente adequada para administração a um indivíduo. Tais excipientes facilitam a administração das nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), descritas no presente documento e são compatíveis com o ingrediente ativo. Exemplos de excipientes farmaceuticamente aceitáveis incluem estabilizantes, lubrificantes, tensoativos, diluentes, antioxidantes, aglutinantes, agentes corantes, agentes de volume, emulsificantes ou agentes modificadores de sabor. Em modalidades preferidas, as composições farmacêuticas de acordo com as várias modalidades são composições estéreis. As composições farmacêuticas podem ser preparadas usando técnicas de composição conhecidas ou que se tornarão disponíveis para aqueles versados na técnica.

[0238] As composições estéreis estão dentro da presente invenção, incluindo composições que estão de acordo com os regulamentos nacionais e locais que regem tais composições.

[0239] As composições farmacêuticas e as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), descritas no presente documento podem ser formuladas como soluções, emulsões, suspensões ou dispersões em solventes ou carreadores farmacêuticos adequados, ou como pílulas, comprimidos, pastilhas, supositórios, sachês, drágeas, grânulos, pós, pós para reconstituição ou cápsulas juntamente com carreadores sólidos de acordo com métodos convencionais conhecidos na técnica para a preparação de várias formas de dosagem. As nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), descritas no presente documento e, de preferência, na forma de uma composição farmacêutica, podem ser administradas através de uma via de distribuição adequada, tal como as vias oral, parentérica, retal, nasal, tópica ou ocular, ou através de inalação. Em algumas modalidades, as composições são formuladas para administração intravenosa ou oral.

[0240] Para administração oral, as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), podem ser fornecidas na forma sólida, tal como um comprimido ou cápsula, ou como uma solução, emulsão ou suspensão. Para preparar as composições orais, as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), podem ser formuladas para produzir uma dosagem, por exemplo, a partir de cerca de 0,01 a cerca de 50 mg/kg por dia, ou a partir de cerca de 0,05 a cerca de 20 mg/kg por dia, ou a partir de cerca de 0,1 a cerca de 10 mg/kg por dia. Os comprimidos orais podem incluir o(s) ingrediente(s) ativo(s) misturado(s) com excipientes farmaceuticamente aceitáveis compatíveis, tais como diluentes, agentes desintegrantes, agentes aglutinantes, agentes lubrificantes, agentes adoçantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes conservantes. Materiais de enchimento inertes adequados incluem carbonato de sódio e cálcio, fosfato de sódio e cálcio, lactose, amido, açúcar, glicose, metilcelulose, estearato de magnésio, manitol, sorbitol e assim por diante. Excipientes orais líquidos exemplificativos incluem etanol, glicerol, água e assim por diante. Amido, polivinilpirrolidona (PVP), glicolato de amido sódico, celulose microcristalina e ácido algínico são agentes desintegrantes exemplificativos. Agentes aglutinantes podem incluir amido e gelatina. O agente lubrificante, se presente, pode ser estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Se desejado, os comprimidos podem ser revestidos com um material tal como monoestearato de glicerila ou diestearato de glicerila para retardar a absorção no trato gastrintestinal, ou podem ser revestidos com um revestimento entérico.

[0241] Cápsulas para administração oral incluem cápsulas de gelatina dura e mole. Para preparar cápsulas de gelatina dura, o(s) ingrediente(s) ativo(s) pode(m) ser misturado(s) com um diluente sólido, semissólido ou líquido. As cápsulas de gelatina mole podem ser preparadas misturando o ingrediente ativo com água, um óleo, tal como óleo de amendoim ou azeite, parafina líquida, uma mistura de mono- e di-glicerídeos de ácidos graxos de cadeia curta, polietileno glicol 400 ou propileno glicol.

[0242] Os líquidos para administração oral podem estar na forma de suspensões, soluções, emulsões ou xaropes ou podem ser liofilizados ou apresentados como um produto seco para reconstituição com água ou outro veículo adequado antes de uso. Estas composições líquidas podem conter opcionalmente: excipientes farmaceuticamente aceitáveis, tais como agentes de suspensão (por exemplo, sorbitol, metilcelulose, alginato de sódio, gelatina, hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose, gel de estearato de alumínio e assim por diante); veículos não aquosos, por exemplo, óleo (por exemplo, óleo de amêndoa ou óleo de coco fracionado), propileno glicol, álcool etílico ou água; conservantes (por exemplo, p-hidroxibenzoato de metila ou propila ou ácido sórbico); agentes umectantes, tal como lecitina; e, se desejado, agentes aromatizantes ou corantes.

[0243] As composições podem ser formuladas para administração retal como um supositório. Para uso parentérico, incluindo as vias intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intranasal ou subcutânea, as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), podem ser fornecidas em soluções ou suspensões aquosas estéreis, tamponadas para um pH e isotonicidade apropriados ou em óleo parentericamente aceitável. Veículos aquosos adequados podem incluir solução de Ringer e cloreto de sódio isotônico. Estas formas podem ser apresentadas em forma de dose unitária, tais como ampolas ou dispositivos de injeção descartáveis, em formas de dose múltipla, tais como frascos dos quais a dose apropriada pode ser retirada, ou em uma forma sólida ou pré-concentrada que pode ser usada para preparar uma formulação injetável. Doses para infusão ilustrativas variam a partir de cerca de 1 a 1000 pg/kg/minuto de agente misturado com um carreador farmacêutico ao longo de um período que varia de vários minutos a vários dias.

[0244] Para administração nasal, inalada ou oral, as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), podem ser administradas usando, por exemplo, uma formulação em spray que contém também um carreador adequado.

[0245] Para aplicações tópicas, as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s) são, de preferência, formuladas como cremes ou pomadas ou um carreador similar adequado para administração tópica. Para administração tópica, as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), podem ser misturadas com um carreador farmacêutico em uma concentração a partir de cerca de 0,1 % a cerca de 10 % de fármaco para carreador. Outro modo de administração das nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), pode usar uma formulação de adesivo para obter distribuição transdérmica.

[0246] Em determinadas modalidades, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), e metilcelulose. Em determinadas modalidades, a metilcelulose está em uma suspensão a partir de cerca de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 ou 0,5 a cerca de 1 %. Em determinadas modalidades, a metilcelulose está em uma suspensão a partir de cerca de 0,1 a cerca de 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9 ou 1 %. Em determinadas modalidades, a metilcelulose está em uma suspensão a partir de cerca de 0,1 a cerca de 1 %. Em determinadas modalidades, a metilcelulose está em uma suspensão a partir de cerca de 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,8 ou 1 %. Em determinadas modalidades, a metilcelulose está em uma suspensão a partir de cerca de 0,5 %.

[0247] Conforme usado no presente documento, tratamento "preventivo" se destina a indicar um adiamento do desenvolvimento de uma doença, um sintoma de uma doença ou condição médica, supressão dos sintomas que possam aparecer ou redução do risco de desenvolvimento ou recorrência de uma doença ou sintoma. Tratamento "curativo" inclui reduzir a gravidade ou suprimir o agravamento de uma doença, sintoma ou condição existente.

[0248] Aqueles versados na técnica podem modificar as formulações dentro dos ensinamentos do relatório descritivo para fornecer numerosas formulações para uma via de administração particular. Em particular, as nanopartículas, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), podem ser modificadas para torná-las mais solúveis em água ou outro veículo. Também está dentro do conhecimento comum da técnica modificar a via de administração e o regime de dosagem de uma determinada nanopartícula, individualmente ou em combinação com outro(s) ingrediente(s) ativo(s), a fim de gerenciar a farmacocinética dos presentes compostos para benefício máximo efeito em um paciente. E. EXEMPLOS

[0249] Aspectos dos presentes ensinamentos podem ser melhor compreendidos à luz dos exemplos a seguir, os quais não devem ser interpretados como limitando o escopo dos presentes ensinamentos de qualquer forma. EXEMPLO 1 Formulação e Caracterização de Nanopartículas Enriquecidas com Colesterol Detalhes Experimentais

[0250] Derivação de Membrana Celular: Para derivar membranas de RBC desprovidas de conteúdo citoplasmático, RBCs empacotados de camundongos ICR (6-8 semanas, obtidos a partir da BioIVT) foram lavados com centrifugação repetida a 800 x g durante 5 min em 1X PBS gelado a 4 °C. Para tratamento hipotônico, as células foram, então, suspensas em 0,25X PBS em um banho de gelo durante 20 min e foram centrifugadas a 800 x g durante 5 min. A hemoglobina foi removida, enquanto que o pelete rosa foi coletado. O processo foi repetido três vezes. O teor de proteína da membrana foi quantificado com um ensaio Pierce BCA (Life Technology). Para derivar a membrana de células de mamíferos (por exemplo, plaquetas, macrófagos de camundongo J774 e células similares a neutrófilos induzidas a partir de células HL-60), as células foram centrifugadas e os peletes foram lavados três vezes com 1X PBS. Em seguida, os peletes celulares foram dispersos em uma solução de isolamento que consiste em 15 mL de 1X PBS, etileno glicol- ácido bis(2-aminoetiléter)-N,N,N',N'-tetra-acético (EGTA; Sigma) a 0,5 mM e 50 μL de inibidor de fosfatase e coquetéis de inibidor de protease (100X, Sigma). A suspensão foi carregada em um homogeneizador Dounce e as células foram rompidas com 15 passagens. Após a ruptura, a suspensão foi centrifugada a 800 x g durante 5 min para remover grandes detritos. O sobrenadante foi coletado e centrifugado novamente a 10.000 x g durante 25 min, após o que o pelete foi descartado e o sobrenadante foi centrifugado a 150.000 x g durante 35 min. Após a centrifugação, o sobrenadante foi descartado e a membrana plasmática foi coletada como um pelete esbranquiçado. O pelete da membrana foi, então, lavado uma vez com ácido etilenodiaminotetracético (EDTA; USB Corporation) a 1 mM em H2O, ressuspenso com sonicação suave para experimentos subsequentes. O teor de proteína da membrana foi quantificado com um ensaio Pierce BCA (Life Technology).

[0251] Formulação de Vesículas de Membrana Estabilizadas com Colesterol: Para produzir vesículas de membrana celular enriquecidas com colesterol, o colesterol (Avanti Polar Lipids) dissolvido a 50 mg/mL em clorofórmio foi adicionado em carga inicial variável a "fantasmas" de membrana, seguido por mistura suave a 37 °C durante 10 minutos. Para formar vesículas, as suspensões foram sonicadas durante 6 minutos em um sonicador de banho Fisher Scientific FS30D ou foram extrudadas sequencialmente através de membranas de policarbonato com um tamanho de poros de 1 μm, 400 nm e 200 nm (Whatman) usando uma mini extrusora Avanti Polar Lipids. Para remover o colesterol não incorporado, suspensões de vesículas de membrana foram adicionadas a hexano (na proporção de volume de aproximadamente ~ 1:1) e a mistura foi colocada em temperatura ambiente durante 30 min.

[0252] Quantificação de Colesterol: O teor de colesterol total foi quantificado usando o kit Amplex Red Cholesterol Assay (ThermoFisher Scientific) com base nas instruções do fabricante.

[0253] Preparação do Sobrenadante (MS) de MRSA 300: Estoque de MRSA USA300 (American Type Culture Collection, ATCC) foi inoculado em uma placa de ágar com caldo de soja tríptica (TSB) e incubado a 37 °C durante 30 h. Em seguida, uma única colônia foi transferida da placa de ágar para 4 mL de caldo TSB, seguido por incubação a 37 °C com agitação suave durante 12 h. Em seguida, a cultura bacteriana foi transferida para 200 mL de TSB fresco, seguido por cultura a 37 °C durante aproximadamente 24 h até que o valor de OD600 atingiu ~ 7 (OD600 = 1 corresponde a 1 * 108 CFU/mL de bactérias). Para coletar o sobrenadante, a cultura bacteriana foi primeiro centrifugada a 4.500xg por 30 min e, em seguida, o sobrenadante foi passado por um filtro de membrana de 0,2 μm. O sobrenadante foi, então, liofilizado e reconstituído a 1/10 do seu volume (equivalente a uma concentração de 10X). Alíquotas de MS foram armazenadas a -80 °C para experimentos subsequentes.

[0254] Neutralização da Atividade Hemolítica do Sobrenadante de MRSA (MS) com Vesículas de Membrana de Hemácias Enriquecidas com Colesterol (Cho-RBC-V): Para avaliar a neutralização da atividade hemolítica de MS, 4,5 μL de MS foram misturados com várias concentrações de Cho-RBC-V primeiro para um volume final de 60 μL em sacarose a 10 % p/v e DTT a 10 mM. A mistura foi incubada a 37 °C durante 30 min e depois adicionada a 100 μL de suspensão de RBC humano a 5 % v/v, seguido por uma incubação de 30 min a 37 °C. Após incubação, os sobrenadantes foram coletados e a hemoglobina liberada foi quantificada pela medição da absorbância a 540 nm em um leitor de placas. Todos os experimentos foram realizadas em triplicata.

[0255] Neutralização do Anticorpo Antiplaquetário com Vesículas de Membrana de Plaquetas Enriquecidas com Colesterol (Cho-PL-V): TNF-  humano recombinante (Thermo Fisher Scientific, concentração final 8,82 ± 0,80 ng ml-1) foi misturado com Cho-Neu-V (concentrações finais 64, 128, 256, 512 e 1024 μg/mL). As misturas foram incubadas durante 2 h a 37 °C e, então, centrifugadas a 16.100 g durante 10 min para remover as vesículas. A concentração de citocinas no sobrenadante foi quantificada por kits Human TNF- Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) (Biolegend). Todos os experimentos foram realizados em triplicata.

[0256] Neutralização de Endotoxina com Vesículas de Membrana de Macrófago Enriquecidas com Colesterol (Cho-MO-V): Para determinar a neutralização de lipopolissacarídeo (LPS) com Cho-MF-V, amostras de Cho-MO-V (64, 128, 256, 512 e 1024 μg/mL) foram misturadas com LPS (LPS-EK, InvivoGen, 50 microg/mL) e imediatamente adicionadas a macrófagos J774 (2 x 104 células/cavidade em uma placa de cultura tecidual com 96 cavidades). As células foram cultivadas a 37 °C durante 5 horas. Após o período de cultura, a concentração de IL-6 no meio de cultura foi quantificada pelo kit Mouse IL-6 Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) (Biolegend). Todos os experimentos foram realizados em triplicata.

[0257] Neutralização de Citocinas Inflamatórias (TNF-) com Vesículas de Membrana de Neutrófilos Enriquecidas com Colesterol (Cho-Neu-V): TNF- humano recombinante (Thermo Fisher Scientific, concentração final 8,82 ± 0,80 ng ml-1) foi misturado com Cho-Neu-V (concentrações finais 64, 128, 256, 512 e 1024 μg/mL). As misturas foram incubadas durante 2 h a 37 °C e, em seguida, filtradas usando filtro centrífugo com corte de MW de 1 300 kDa (Nanosep, Pall Laboratory) a 16.000 x g durante 5 min para separar citocinas não ligadas das citocinas ligadas à vesícula. A concentração de citocinas no filtrado foi quantificada por kits Human TNF- Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) (Biolegend).

[0258] As Figuras 1-4 ilustram a formulação e caracterização de vários tipos de vesículas de membrana celular enriquecidas com colesterol, incluindo vesículas de membrana de RBC enriquecidas com colesterol (Cho-RBC-V), vesículas de membrana de plaquetas enriquecidas com colesterol (Cho-PL-V), vesículas de membrana de macrófagos enriquecidas com colesterol (Cho-MO-V) e vesículas de membrana de neutrófilos enriquecidas com colesterol (Cho-Neu-V). EXEMPLO 2 Preparação da Composição A Concepção Experimental e Métodos Material e Dispositivos

[0259] A esfingomielina foi adquirida a partir da NOF. O colesterol era da Spectrum. O álcool isopropílico era da Sigma Aldrich. O PBS estéril (IX) era da Hyclone. O microfluidizador M-110EH-30 era da Microfluidics International Corporation. O sistema de bomba KMPi TFF era da Repligen. O filtro de cápsula de acetato de celulose (CA) (0,2 μm) foi adquirido a partir da Sartorius. A fibra de cápsula de vidro (0,2 μm) foi adquirida a partir da PALL.

[0260] A membrana de hRBC foi preparada com filtração de fluxo tangencial (TFF) para reduzir o nível de hemoglobina e outras impurezas usando os princípios descritos no documento WO 2017/087897 A1. De modo geral, hRBCs lisados são submetidos à diluição, concentração e diafiltração usando TFF uma ou mais vezes para remover a hemoglobina e outras impurezas. A membrana de hRBC em tampão de 1X PBS é recoletada ao final do processo. Métodos de Teste

[0261] O tamanho da nanopartícula (ou nanoesponja) e o índice de distribuição (PDI) foram medidos através do Zetasizer Nano Series Modelo: ZEN 3600. A amostra foi diluída em 1X PBS com a concentração de medição de 0,25 mg/ml. Procedimentos

[0262] Com base na concentração inicial, calcular a quantidade para teores individuais. Por exemplo, para a concentração inicial de 2,5 mg/ml, 2.000 ml, resultado do cálculo para cada componente conforme mostrado na Tabela 1 abaixo. Tabela 1 2,5 mg/ml, 2.000 ml SM 2.000 mg Colesterol 2.000 mg IPA 200 ml hRBC 1.000 mg Preparação da Solução SM/Chol IPA

[0263] A SM e o colesterol foram pesados e adicionados a uma garrafa de vidro. IPA foi adicionado ao frasco de SM/colesterol. O SM/Chol IPA foi aquecido até estar totalmente dissolvido. Preparação da Mistura Inicial de Trabalho Para Sonicação

[0264] Membrana de hRBC em 1x PBS foi misturada com SM e solvente de colesterol IPA (proporção em peso de membrana de SM:colesterol:hRBC é igual a 4:4:2). A mistura foi bem misturada através de vórtice ou uma barra de agitação. A mistura de membrana de hRBC, SM e colesterol foi homogeneizada por meio do banho de sonicação. Microfluidização para Preparação de Nanopartículas (ou Nanoesponja)

[0265] A mistura de membrana de RBC/SM/colesterol após sonicação foi passada através do microfluidizador a 20 kpsi. Nanopartículas (ou nanoesponjas) foram resfriadas por um resfriador de produto e coletadas. Pré-Filtração de Nanoesponja

[0266] A suspensão de nanoesponja resultante foi pré-filtrada através de uma fibra de vidro de 0,45 μm combinada com filtro estéril de acetato de celulose de 0,2 μm para esterilização e para remover partículas maiores (> 200 μm). Em seguida, TFF (coluna de fibra oca de 300 kd) foi usada para concentrar a nanoesponja e remover o IPA (abaixo de 5.000 ppm) por meio de diafiltração.

[0267] A distribuição do tamanho de partícula de uma preparação exemplificativa da Composição A (lote 5-270-01-S-MF-média final) é mostrada na Figura 6. EXEMPLO 3 Efeitos da Composição A Sobre a Taxa de Sobrevida em um Modelo de Pneumonia em Murinos Infectados com Staphylococcus aureus Resistente à Meticilina, USA300 Sumário

[0268] O Staphylococcus aureus é uma das principais causas de pneumonia adquirida no hospital ou na comunidade, com taxas de mortalidade de até 60 %. O tratamento da infecção é dificultado pelo fato de que metade dos isolados de Staphylococcus aureus de pacientes com pneumonia são Staphylococcus aureus resistentes à meticilina (MRSA). A vancomicina e a linezolida são atualmente os antibióticos primários para a pneumonia por MRSA. No entanto, a taxa de mortalidade em pacientes com pneumonia tratados com ambos permanece alta e o surgimento de resistência e a ocorrência de efeitos colaterais limitam a utilidade destes antibióticos. Uma evolução consistente em direção à resistência aos antibióticos levou à exploração de métodos alternativos de prevenção e tratamento da pneumonia por MRSA. Uma de tais abordagens é ter como alvo fatores virulentos, como toxinas formadoras de poros produzidas por MRSA, para prevenir a inflamação pulmonar e citólise epitelial.

[0269] Neste estudo, desenvolvemos um modelo de infecção pulmonar causada por MRSA US A300 em murinos e usamos o modelo para avaliar os efeitos da administração intratraqueal da Composição A, uma formulação protótipo de nanoesponjas de hRBC, sobre a melhora da sobrevida de camundongos infectados. Os resultados deste estudo mostram que a administração intratraqueal da Composição A reduziu consistentemente a mortalidade de camundongos com pneumonia infectados com MRSA USA300. A melhora na sobrevida não depende do lote, mas depende da dose. A 2, 6 e 19 mg/kg, a Composição A melhorou significativamente a taxa de sobrevida dos camundongos em 38 %, 66 % e 68 %, respectivamente, comparado com aqueles (taxa de sobrevida de 26 %) tratados com veículo. Além disso, a administração intratraqueal da Composição A reduziu a carga bacteriana nos pulmões de camundongos infectados com MRSA US A300, potencialmente subjacente aos mecanismos de ação da Composição A. Materiais e Métodos Animais e Criação

[0270] Camundongos CD1 fêmeas ou machos com oito semanas de idade (24-28 gramas de peso corporal) foram adquiridos a partir da Charles River Laboratories. Os camundongos foram alojados em grupos (5/gaiola) em gaiolas microisolantes de fundo sólido em prateleiras de aço inoxidável e foram alimentados com Teklad Global 2918 Rodent Diet irradiado e água ad libitum. A forragem foi fornecida na forma de uma forragem Teklad de 1/8" com forragem de sabugo de milho 7902 irradiada.

[0271] O ambiente foi controlado em uma faixa de temperatura de 74 ± 5 °F e uma faixa de umidade de 30-70 %. A iluminação fluorescente fornecia iluminação 12 horas por dia.

[0272] Os camundongos foram aclimatados por um mínimo de 24 horas antes do início do estudo. Os animais foram observados quanto à saúde geral e aceitabilidade para uso neste estudo. Apenas animais considerados saudáveis foram incluídos neste estudo. Os animais foram manuseados de acordo com os procedimentos do IACUC e estavam de acordo com o Animal Use Protocol (AUP) número S00227m. Bactérias, Cultura e Instilação Intratraqueal

[0273] As bactérias Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) USA300 (TPPS 1056) foram cultivadas durante a noite a 37 °C em uma atmosfera com 5 % de CO2 em placas de ágar de soja sobre tripticase Todd Hewitt suplementadas com 5 % de células sanguíneas de ovelha. A cultura foi esfregada assepticamente e transferida para uma cultura líquida em caldo Todd Hewitt para crescimento durante a noite. No dia da infecção, as bactérias foram subcultivadas na diluição de 1:10 e deixadas crescer até a fase mid-log em uma OD600 nm de 0,4. As culturas foram lavadas com solução salina de tampão fosfato 1X (PBS) várias vezes para remover as toxinas liberadas por bactérias durante a cultura e diluídas para fornecer um inóculo de desafio alvo na faixa de 1 x 107 - 8 x 109 CFU por camundongo em um volume de 30 μL. A contagem de inóculo será estimada antes da inoculação pela densidade óptica e confirmada após a inoculação por meio de diluição, plaqueamento, incubação de 24 horas e contagem regressiva. Os dados são, então, registrados como "inóculo".

[0274] No dia do experimento, os camundongos foram anestesiados com cetamina e xilazina (90 mg/kg e 10 mg/kg intraperitonealmente, respectivamente) e um camundongo anestesiado foi mantido na ponta de um otoscópio e a glote e cordas vocais do camundongo foram visualizadas usando a lupa do Otoscópio e fonte de luz. 30 μL de cultura de bactérias foram, então, aplicados na traqueia por meio de uma pipeta de plástico longa.

Administração de Composição Intratraqueal

[0275] Imediatamente após a instilação bacteriana (< 1 min), quando os camundongos ainda estavam anestesiados, 30 μL de Composição A ou PBS como o veículo foram administrados através da via intratraqueal por meio da ponta de uma pipeta de plástico longa. Os camundongos foram deixados se recuperar da anestesia e retornados às gaiolas de origem. A dose por animal foi calculada com base na concentração do lote da Composição A usada e no peso corporal médio do grupo de animais testados. Mortalidade Como Parâmetro

[0276] Os camundongos foram observados de perto ao longo do período de estudo quanto a sinais de morbidade e mortalidade iminente. A sobrevida foi monitorada durante 4 dias (a menos que de outra forma indicado) após o desafio/tratamento com nanoesponja. Os camundongos que sobreviveram ao final do estudo foram sacrificados humanamente por meio de superexposição ao CO2. Contagem Bacteriana Pulmonar Como Parâmetro

[0277] Os camundongos designados para contagem de bactérias pulmonares foram deixados a viver durante 24 ou 48 horas após o desafio bacteriano/tratamento com nanoesponja. Em qualquer ponto do tempo, os camundongos serão sacrificados humanamente por meio da superexposição ao CO2 e os pulmões direito e esquerdo serão coletados. Os tecidos pulmonares foram homogeneizados e semeados em uma placa com 96 cavidades. A placa foi incubada durante a noite a 30 °C ou 37 °C em uma incubadora. A diluição mais fácil de contar foi contada e a diluição e as contagens foram registradas. A partir destes dados, a CFU/grama de tecido foi calculada. Análise Estatística

[0278] Os dados quantitativos foram expressos como a média ± SEM. Os dados de sobrevida foram analisados usando o teste de

Mantel-Cox Log-rank ou o teste de Gehan-Breslow-Wilcoxon conforme apropriado (ou a menos que de outra forma indicado). Os dados de CFU foram analisados usando Análise de Variância (ANOVA), seguido por testes de Dunnett ou t-teste de Student, conforme apropriado. Todas as análises estatísticas foram realizadas usando o GraphPad Prism versão

7.01. Um p valor < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Resultados Identificação da Composição A

[0279] Um estudo de triagem inicial (007) foi realizado para identificar uma formulação principal no modelo de pneumonia por MRSA em camundongos. Neste estudo, a pneumonia foi induzida através de instilação intratraqueal de 30 μL de caldo de cultura de MRSA USA300 que contém 5 x 107 unidades formadoras de colônias (CFU)/camundongo. Imediatamente após o desafio bacteriano (dentro de 1 minuto), camundongos (n = 10 camundongos/grupo) foram dosados através da via intratraqueal com a Composição A ou 5 % de sorbitol/95 % de solução salina tamponada com fosfato (PBS) como veículo. Os camundongos foram deixados sobreviver por 48 horas após o desafio bacteriano/tratamento com a formulação. O número de camundongos que morreram em cada grupo de tratamento em 48 horas foi contado e analisado quanto à taxa de sobrevida. No ponto de tempo de 48 horas, os camundongos sobreviventes restantes foram sacrificados e os pulmões foram coletados e processados para contagem de CFU. Os dados de sobrevida estão resumidos na Tabela 2 abaixo e mostrados na Figura 7A. Dentro das primeiras 48 horas, 5 camundongos tratados com o veículo morreram e nenhum camundongo tratado com a Composição A morreu; a taxa de sobrevida foi de 50 % e 100 %, respectivamente. A diferença na taxa de sobrevida entre os grupos tratados com veículo e Composição A foi estatisticamente significativa.

Tabela 2. Concepção de Estudo e Resultados Mortes de Animais/Taxa de Sobrevida Horas após n MRSA USA300 Tratamento Mortes totais Sobrevida % desafio / tratamento Dose CFU / camundongo Tratamento Vol. (μL) Esquema 0-24 25-48 (mg/kg) 5 % de sorbitol / 10 5x107 30 N/A < 1 min 3 2 5 50 % 95 % de PBS 10 5x107 Composição A 30 19 < 1 min 0 0 0 100 % Efeitos Reproduzíveis da Composição Sobre a Melhora da Taxa de Sobrevida

[0280] No estudo descrito acima, demonstramos que a Composição A, lote 5-257-06, melhorou significativamente a taxa de sobrevida e reduziu a carga bacteriana pulmonar no modelo de pneumonia por MRSA em camundongos. Para determinar a reprodutibilidade do efeito, testamos 3 lotes diferentes de Composição A com concentrações similares no modelo. A Figura 8A mostra um exemplo dos testes. Neste estudo (011), após a instilação bacteriana, os camundongos foram dosados através da via intratraqueal com PBS (veículo), lote 5-257-06 a 19 mg/kg ou lote 5-257-16 a 22 mg/kg e foram observados durante 96 horas após o tratamento. Conforme mostrado na Figura 8A, 96 horas após o desafio/tratamento, a taxa de sobrevida no grupo tratado com veículo foi de 55 %. O tratamento com os lotes 5-257-06 e 5-257-16 melhorou significativamente a taxa de sobrevida (para 80 % e 95 %, respectivamente). A Figura 8B representa os dados da taxa de sobrevida média de testes com 3 lotes diferentes de Composição A (5- 257-06 a 19 mg/kg, 5-257-16 a 22 mg/kg e 5-260-02 a 25 mg/kg). Uma melhora significativa da taxa de sobrevida foi observada após os tratamentos em todos os pontos de tempo de observação de 19 horas a 96 horas após o desafio/tratamento. Estudo de Curva de Dose da Composição A

[0281] Neste estudo, a Composição A, lote 5-266-01, foi dosada através da via intratraqueal em 3 concentrações, 19 mg/kg, 6 mg/kg e 2 mg/kg, em 4 testes independentes (022, 023, 024 e 026). Em geral, veículo, 19 mg/kg e 2 mg/kg foram administrados a um total de 40 camundongos e 6 mg/kg foram administrados a um total de 30 camundongos. Os dados de sobrevida agrupados foram representados conforme mostrado na Figura 9. No ponto de tempo de 96 horas após o desafio bacteriano/tratamento com nanoesponja, a taxa de sobrevida no grupo tratado com veículo foi de 26 %. A taxa de sobrevida aumentou para 68 %, 66 % e 38 % na dose de 19 mg/kg, 6 mg/kg e 2 mg/kg, respectivamente. Uma melhora significativa da taxa de sobrevida foi observada com todas as 3 doses. Inibição da Carga Bacteriana Pulmonar

[0282] No estudo inicial (007), demonstramos que a Composição A, lote 5-257-06, reduziu significativamente a carga bacteriana nos pulmões 48 horas após a infecção por MRSA (Figura 7). Neste estudo (012), examinamos se o efeito inibidor sobre a carga bacteriana nos pulmões era reproduzível com um lote diferente da Composição A, 5- 257-16. 5-257-16 foi administrado através da via intratraqueal a 22,5 mg/kg imediatamente após a instilação bacteriana e os pulmões dos camundongos foram coletados 24 horas após o desafio/tratamento. O homogenato pulmonar foi semeado para contagem de CFU, conforme descrito na seção Método. Conforme mostrado na Figura 10, 5-257-16 reduziu significativamente a carga bacteriana nos pulmões de camundongos com pneumonia por MRSA. EXEMPLO 4 Avaliação da Exposição Pulmonar da Composição A Marcada com Marcador Fluorescente em Camundongos Não Expostos (naive) Sumário

[0283] Uma versão fluorescente da Composição A, DiR- Composição A, foi usada para estudar a absorção, distribuição e retenção de DiR-Composição A nos pulmões de camundongos após administração intratraqueal. Nos pontos de tempo designados após a administração de DiR-Composição A, os camundongos foram sacrificados e os pulmões foram coletados para medição ex vivo da intensidade de fluorescência de DiR-Composição A usando um dispositivo de imagiologia de fluorescência ou um leitor de fluorescência para microplacas. DiR-Composição A foi absorvida e distribuída nos pulmões rapidamente após administração intratraqueal; em 5 minutos, ela se dispersou para o tecido pulmonar central e periférico com distribuição bastante uniforme. DiR-Composição A foi retida no pulmão por um tempo prolongado; a meia-vida de retenção estimada da DiR- Composição A no pulmão foi de 7 a 10 dias. Materiais e Métodos Formulação e Caracterização

[0284] Para preparar a Composição A marcada com fluorescência, 0,1 por cento em peso de corante DiR dissolvido em 10 ml de DMSO foi adicionado à membrana de RBC humana antes da adição de esfingomielina e colesterol. Esta solução foi aquecida a 45 °C e agitada durante uma hora, depois o banho foi sonicado durante 10 minutos para incorporar todo o DiR na bicamada lipídica da membrana de RBC. Estas moléculas de corante devem se inserir diretamente na bicamada lipídica de maneira similar aos esteróis. Após marcação da membrana RBC, o colesterol e a esfingomielina foram adicionados da mesma forma que foram preparados os lotes da Composição A usados em vários estudos de eficácia. DiR-Composição A usada nas Figuras 11-14 foi fabricada usando o mesmo protocolo que a Composição A (lote 5-257-16). Na Figura 15, o protocolo para o lote 5-265-01 foi usado.

[0285] DiR-Composição A foi caracterizada usando dispersão dinâmica de luz (Malvern Analytical) para avaliar o tamanho, polidispersidade e potencial zeta e confirmar a similaridade com a formulação não marcada com DiR. Um teste de estabilidade de corante foi realizado para avaliar a estabilidade fluorescente da DiR- Composição A. Para o estudo de liberação, béqueres de diálise de 20 kDa foram colocados em um grande volume (1 L) de PBS e 200 μl de DiR-Composição A a 15 mg/mL foram adicionados a cada béquer de diálise (n = 3). As amostras foram tampadas e agitadas lentamente a 300 rpm por mais de uma semana. Amostras de dez (10) μl foram retiradas em pontos de tempo designados e diluídas 10x em água. A intensidade da fluorescência das amostras foi medida e comparada com os pontos de tempo iniciais, bem como aos controles internos para avaliar a estabilidade das amostras. Animais e Criação

[0286] Camundongos CD1 fêmeas, 8 semanas de idade e entre 25 e 30g foram adquiridos a partir da Charles River Laboratories e foram aclimatados às condições de alojamento e manuseados de acordo com o Animal Use Protocol número S00227m e de acordo com os procedimentos do IACUC. Os camundongos foram alojados em grupos (5/gaiola) em gaiolas de plástico descartáveis em prateleiras de aço inoxidável e foram alimentados com Teklad Global 2918 Rodent Diet e água ad libitum. A forragem foi fornecida na forma de forragem Teklad 1/8" com forragem de sabugo de milho 7902. O ambiente foi controlado em uma faixa de temperatura de 74 ± 5 °F e uma faixa de umidade de 30-70 %. A iluminação fluorescente fornecia iluminação 12 horas por dia.

[0287] Os camundongos foram aclimatados durante um mínimo de 24 horas antes do início do estudo. Os animais foram observados quanto à saúde geral e aceitabilidade para uso neste estudo. Apenas animais considerados saudáveis foram incluídos neste estudo. Administração de Nanoesponja

[0288] Os camundongos foram anestesiados com cetamina e xilazina (90 mg/kg e 10 mg/kg intraperitonealmente, respectivamente) e os camundongos anestesiados foram, então, mantidos na ponta do otoscópio e a glote e as cordas vocais visualizadas usando a lente de aumento do otoscópio e uma fonte de luz. Um volume de 30 ml de DiR- Composição A foi pipetado na traqueia por meio de pontas de pipeta de plástico longas com carregamento de gel. Os camundongos foram deixados se recuperar da anestesia e retornados às gaiolas de origem. N = 3/grupo de teste foi usado nos estudos.

[0289] Os camundongos foram observados de perto ao longo do período de estudo quanto a quaisquer sinais de morbidade ou condições de saúde. Os camundongos foram sacrificados humanamente em pontos de tempo previamente determinados para o estudo via superexposição de CO2 e, secundariamente, deslocamento cervical. Os pulmões foram dissecados e armazenados em tubos de plástico de 2 mL com tampa de rosca envoltos em papel alumínio. Imagiologia In Vivo

[0290] Os pulmões dissecados de camundongos foram alinhados de acordo com o grupo em um fundo preto fosco. Um dispositivo e software de imagiologia fluorescente I VIS foram usados para fotografar os pulmões e sobrepor suas contagens de fluorescência correspondentes com as imagens de campo claro do pulmão tiradas simultaneamente. Homogeneização Pulmonar e Quantificação de Fluorescência

[0291] Em alguns estudos, os tecidos pulmonares foram homogeneizados em água com grânulos de quartzo (entre 10-20 grânulos) foram adicionados a cada tubo usando um homogeneizador Bead Beater durante 60 segundos. As amostras foram colocadas em uma placa com 96 cavidades e a fluorescência foi medida usando um leitor de placas com excitação a 760 nm, emissão a 805 nm. Um sinal de fundo de um pulmão não dosado com DiR-Composição A foi subtraído dos resultados finais. Resultados Caracterização DiR-Composição A

[0292] A Figura 11 mostra a análise do tamanho e estabilidade de DiR-Composição A. A Tabela 3 abaixo mostra dados de dispersão dinâmica de luz para DiR-Composição A. O tamanho médio da DiR- Composição A foi de 98,6 nm, com um índice de polidispersidade de 0,2 e D(50) de 67,2. Estas medições de tamanho e potencial zeta indicam uma formulação muito similar à Composição A não marcada. Os dados de tamanho são, em média, de 3 medições independentes. Os dados de estabilidade mostram que a intensidade da fluorescência permanece efetivamente a mesma após diálise por mais de uma semana, sugerindo que o corante não vaza das camadas lipídicas e permanece inserido nas partículas ao longo do estudo. Tabela 3. Dados de dispersão dinâmica de luz da DiR -Composição A Potencial zeta Z-média PDI D(5) D(50) D(95) D(10) -2 mV 98,57 0,206 35,9 67,2 182 40,8 Absorção e Distribuição Pulmonar de DiR-Composição A

[0293] A Figura 12 mostra a absorção e distribuição de DiR- Composição A ao longo de doze horas após administração intratraqueal. Nos pontos de tempo especificados após administração intratraqueal, os camundongos foram sacrificados e os pulmões foram coletados. As amostras de pulmão foram fotografadas em um I VIS In Vivo Imager usando o filtro de fluorescência infravermelho. Após 5 minutos de administração, DiR-Composição A estava distribuída pelos tecidos pulmonares em cada ponto de tempo com uma distribuição bastante uniforme e um acúmulo de nanopartículas notável na maioria das partes dos pulmões. Estes resultados mostram que as nanoesponjas têm boa perfusão em todos os pulmões, mesmo dentro de 5 minutos. Isto indica que há pouco retardo para que a formulação chegue à periferia dos pulmões. Retenção Pulmonar de DiR-Composição A Após Administração Intratraqueal

[0294] Para o estudo de retenção mostrado na Figura 13, camundongos (n = 3) foram dosados através da via intratraqueal com DiR-Composição A. Em pontos de tempo predeterminados de 2 horas, 7 dias, 14 dias e 21 dias, 3 camundongos de cada grupo foram sacrificados. Os pulmões foram ressecados e homogeneizados em 900 μl de água, em seguida, a fluorescência foi lida por meio de um leitor de placas (Excitação a 760 nm/Emissão a 805 nm). A quantificação da fluorescência do pulmão mostra que há um decaimento da DiR- Composição A nos pulmões ao longo de 3 semanas, com uma meia- vida estimada de 7 a 10 dias. A barra de erro entre os camundongo é traçada como medição de erro padrão (SEM). O sinal foi normalizado para colocar 100 % no ponto de tempo de duas horas e 0 foi definido como a fluorescência de fundo do próprio tecido pulmonar. Efeitos da DiR-Composição A Altamente Concentrada Sobre a Distribuição Pulmonar

[0295] Nos estudos mostrados nas Figuras 11-14, a nanoesponja permaneceu a 15 mg/mL, comparável ao lote 5-257-16. Para testar o efeito da concentração da nanoesponja sobre a distribuição pulmonar, criamos um lote altamente concentrado de 46 mg/mL, refletindo o mesmo método e concentração do lote 5-265-01. Este lote foi, então, diluído para 23 mg/mL para criar um controle similar aos estudos anteriores. Os camundongos receberam 30 ml de 46 mg/mL ou 23 mg/mL de nanoesponja. Os camundongos foram sacrificados 5 minutos após a dosagem e os pulmões foram fotografados usando o sistema I VIS.

[0296] A Figura 15 mostra a distribuição de nanopartículas em cada grupo. A fim de avaliar de forma justa a dispersão das nanoesponjas dentro dos pulmões, o grupo de 20 mg/mL também foi fotografado com uma exposição de fluorescência mais longa, a fim de compensar ter apenas metade do número de fluoroforos no mesmo volume. A comparação entre estes grupos mostra que as partículas mais concentradas se distribuem tão uniforme e rapidamente quanto a concentração mais baixa de nanoesponja e não foram observadas diferenças distintas entre cada grupo.

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Claims (275)

REIVINDICAÇÕES

1. Nanopartícula, caracterizada pelo fato de que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornecendo um suporte sólido à dita membrana celular na dita superfície externa (ou envoltório), sendo que: a) o dito compartimento interno (ou núcleo interno) é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico; e/ou b) a dita membrana celular da dita superfície externa (ou envoltório) compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide, contanto que, quando a dita membrana celular deriva de um glóbulo vermelho, o dito compartimento interno (ou núcleo interno) seja isotônico a um líquido celular ou fisiológico.

2. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (núcleo interno) compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular.

3. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (núcleo interno) compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular compreendido em uma célula.

4. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula procariota ou uma célula eucariota.

5. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um organismo unicelular.

6. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que o organismo unicelular é uma bactéria ou um fungo.

7. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um organismo multicelular.

8. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o organismo multicelular é uma planta, um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano.

9. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula animal, por exemplo, uma célula de mamífero não humano ou uma célula humana.

10. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um tecido conjuntivo, por exemplo, sangue, osso, tendão, ligamento, tecido adiposo ou areolar, tecido conjuntivo fibroso, tecido conjuntivo esquelético ou tecido conjuntivo fluido.

11. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um tecido muscular, por exemplo, músculo visceral ou liso, músculo esquelético ou músculo cardíaco.

12. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um tecido nervoso, por exemplo, uma célula em um sistema nervoso central (CNS) ou um sistema nervoso periférico (PNS).

13. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um tecido epitelial, por exemplo, epitélio escamoso simples, epitélio escamoso estratificado, epitélio cuboidal simples, epitélio transicional, epitélio colunar pseudoestratificado (também conhecido como epitélio colunar ciliado), epitélio colunar, epitélio glandular ou epitélio colunar ciliado.

14. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula do sistema nervoso, sistema cardiovascular, sistema circulatório, sistema vascular, sistema digestivo, sistema endócrino, sistema imunológico, sistema tegumentar, sistema linfático, sistema musculoesquelético, sistema reprodutivo, sistema respiratório, aparelho respiratório, sistema ventilatório, sistema urinário ou sistema renal ou trato urinário.

15. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula sanguínea, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula- tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial.

16. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (núcleo interno) compreende um líquido que é isotônico a um líquido fisiológico.

17. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 16, caracterizada pelo fato de que o líquido fisiológico é um líquido fisiológico em um organismo multicelular.

18. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que o organismo multicelular é uma planta, um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano.

19. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que o líquido fisiológico é um líquido fisiológico em um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano, por exemplo, sangue em circulação em um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano.

20. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 19, caracterizada pelo fato de que o líquido fisiológico é um líquido fisiológico do sistema nervoso, sistema cardiovascular, sistema circulatório, sistema vascular, sistema digestivo, sistema endócrino, sistema imunológico, sistema tegumentar, sistema linfático, sistema musculoesquelético, sistema reprodutivo, sistema respiratório, aparelho respiratório, sistema ventilatório, sistema urinário ou sistema renal ou trato urinário.

21. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (núcleo interno) compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico ex vivo.

22. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (núcleo interno) compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico in vivo.

23. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, caracterizada pelo fato de que a membrana celular compreende uma membrana plasmática.

24. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, caracterizada pelo fato de que a membrana celular compreende uma membrana intracelular.

25. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 24, caracterizada pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula procariota.

26. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, caracterizada pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula de um organismo unicelular, por exemplo, uma bactéria ou um fungo.

27. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 24 e 26, caracterizada pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula eucariota.

28. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 24 e 27, caracterizada pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula de um organismo multicelular, por exemplo, uma planta, um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano.

29. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 28, caracterizada pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula de um animal, um vertebrado, um mamífero não humano ou um ser humano.

30. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um tecido conjuntivo, por exemplo, sangue, osso, tendão, ligamento, tecido adiposo ou areolar, tecido conjuntivo fibroso, tecido conjuntivo esquelético ou tecido conjuntivo fluido.

31. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um tecido muscular, por exemplo, músculo visceral ou liso, músculo esquelético ou músculo cardíaco.

32. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um tecido nervoso, por exemplo, uma célula em um sistema nervoso central (CNS) ou um sistema nervoso periférico (PNS).

33. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula de um tecido epitelial, por exemplo, epitélio escamoso simples, epitélio escamoso estratificado, epitélio cuboidal simples, epitélio transicional, epitélio colunar pseudoestratificado (também conhecido como epitélio colunar ciliado), epitélio colunar, epitélio glandular ou epitélio colunar ciliado.

34. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula do sistema nervoso,

sistema cardiovascular, sistema circulatório, sistema vascular, sistema digestivo, sistema endócrino, sistema imunológico, sistema tegumentar, sistema linfático, sistema musculoesquelético, sistema reprodutivo, sistema respiratório, aparelho respiratório, sistema ventilatório, sistema urinário, ou sistema renal ou trato urinário.

35. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que a célula é uma célula sanguínea, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula- tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial.

36. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que a membrana celular compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta.

37. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 36, caracterizada pelo fato de que o esteroide é um esteroide fúngico, um esteroide animal, um esteroide vegetal ou um esteroide procariota.

38. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 37, caracterizada pelo fato de que o esteroide fúngico é ergosterol, ergosta- 5,7,22,24(28)-tetraen-3-ol, Zimosterol, lanosterol ou 5,6-di- hidroergosterol.

39. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 37, caracterizada pelo fato de que o esteroide animal é um esteroide de vertebrado ou um esteroide de inseto.

40. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 39, caracterizada pelo fato de que o esteroide de inseto é um ecdiesteroide, por exemplo, 20-hidroxiecdisona (ecdisterona ou 20E).

41. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 39, caracterizada pelo fato de que o esteroide de vertebrado é um hormônio esteroide ou colesterol.

42. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 41, caracterizada pelo fato de que o esteroide de vertebrado é o colesterol

43. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 41, caracterizada pelo fato de que o hormônio esteroide é um esteroide sexual, por exemplo, um androgênio, um estrogênio ou um progestogênio, um corticosteroide, por exemplo, um glicocorticoide ou um mineralocorticoide, ou um esteroide anabolizante, por exemplo, testosterona ou um éster da mesma.

44. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 37, caracterizada pelo fato de que o esteroide vegetal é um alcaloide, um glicosídeo cardíaco, um fitosterol ou um brassinosteroide.

45. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 37, caracterizada pelo fato de que o esteroide procariota é um esteroide tetracíclico ou triterpenos, por exemplo, hopano.

46. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 36, caracterizada pelo fato de que o esteroide é um colestano, por exemplo, colesterol, um colano, por exemplo, ácido cólico, um pregnano, por exemplo, progesterona, um androstano, por exemplo, testosterona ou um estrano, por exemplo, estradiol.

47. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 36, caracterizada pelo fato de que o esteroide é selecionado do grupo que consiste em um gonano, testosterona, ácido cólico, dexametasona, lanosterol, progesterona, medrogestona, - sitosterol, colesterol e 5-colestano.

48. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 47, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula fúngica e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide fúngico.

49. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 47, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula vegetal e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide vegetal.

50. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 47, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula procariota e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide procariota.

51. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 47, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula animal e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide animal.

52. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 51, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula de vertebrado e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de vertebrado.

53. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 52, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula de mamífero, por exemplo, uma célula humana e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de mamífero, por exemplo, um esteroide humano.

54. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 53, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de mamífero, por exemplo, colesterol.

55. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 53 ou 54, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho, um glóbulo branco ou uma plaqueta e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de mamífero, por exemplo, colesterol.

56. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 55, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta e a membrana celular compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide de mamífero, por exemplo, colesterol.

57. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 56, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho humano, um glóbulo branco humano e/ou uma plaqueta humana e a membrana celular compreende uma membrana celular um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide humano, por exemplo, colesterol.

58. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 57, caracterizada pelo fato de que o nível aumentado ou enriquecido de um esteroide na membrana celular da superfície externa (ou envoltório) é em virtude do esteroide adicionado exogenamente.

59. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 57, caracterizada pelo fato de que o nível aumentado ou enriquecido de um esteroide na membrana celular da superfície externa (ou envoltório) é em virtude do uso de uma membrana celular derivada de uma célula que é modificada para conter um nível aumentado ou enriquecido de esteroide em sua membrana.

60. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 59, caracterizada pelo fato de que a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende um nível de um esteroide que é pelo menos 0,1 % maior do que o nível basal do esteroide na membrana celular.

61. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 60, caracterizada pelo fato de que a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende a partir de cerca de 0,1 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) do esteroide adicionado exogenamente e, opcionalmente, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende a partir de cerca de 0,1 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) do esteroide adicionado exogenamente comparado com o peso total da proteína da membrana de a membrana celular.

62. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 61, caracterizada pelo fato de que a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e compreende a partir de cerca de 0,1 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) de o esteroide adicionado exogenamente, por exemplo, colesterol e, opcionalmente, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e compreende a partir de cerca de 0,1 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) do exogenamente adicionado esteroide, por exemplo, colesterol, comparado com o peso total da proteína da membrana da membrana celular.

63. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 62, caracterizada pelo fato de que a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 100 % (peso/peso) do esteroide e, opcionalmente, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 100 % (peso/peso) do esteroide comparado com o peso total da proteína da membrana da membrana celular.

64. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 63, caracterizada pelo fato de que a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 100 % (peso/peso) do esteroide, por exemplo, colesterol e, opcionalmente, a membrana celular da superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula sanguínea e compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 100 % (peso/peso) do esteroide, por exemplo, colesterol, comparado com o peso total da proteína da membrana da membrana celular.

65. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 64, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (núcleo interno) tem um pH que varia a partir de cerca de 4 a cerca de 10, por exemplo, de cerca de 6 a cerca de 9.

66. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 65, caracterizada pelo fato de que compreende ainda uma carga liberável.

67. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 66, caracterizada pelo fato de que a carga liberável está localizada dentro ou sobre o compartimento interno (núcleo interno), entre o compartimento interno (núcleo interno) e a superfície externa (ou envoltório) ou dentro ou sobre a superfície externa (ou envoltório).

68. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 66 ou 67, caracterizada pelo fato de que a liberação da carga liberável é desencadeada por um contato entre a nanopartícula e uma célula alvo, tecido, órgão ou indivíduo ou por uma mudança de um parâmetro físico em torno da nanopartícula.

69. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 66 a 68, caracterizada pelo fato de que a carga liberável é um agente terapêutico, um agente profilático, um agente diagnóstico ou marcador, um agente prognóstico ou uma combinação dos mesmos.

70. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 66 a 69, caracterizada pelo fato de que a carga liberável é uma partícula metálica, uma partícula polimérica, uma partícula de dendrímero ou uma partícula inorgânica.

71. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 65, caracterizada pelo fato de que não compreende uma carga liberável.

72. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 71, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula tem um diâmetro de cerca de 10 nm a cerca de 10 μm.

73. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 72, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula carece substancialmente de constituintes da célula da qual a membrana celular é derivada.

74. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 73, caracterizada pelo fato de que a membrana celular compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho e a nanopartícula substancialmente carece de hemoglobina.

75. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 74, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula retém substancialmente a integridade estrutural natural ou atividade da membrana celular ou dos constituintes da membrana celular.

76. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 75, caracterizada pelo fato de que o núcleo interno compreende um sal, um açúcar ou um álcool de açúcar.

77. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 76,

caracterizada pelo fato de que o açúcar é um monossacarídeo ou um dissacarídeo.

78. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 77, caracterizada pelo fato de que o monossacarídeo é frutose, galactose ou glicose.

79. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 77, caracterizada pelo fato de que o dissacarídeo é lactose, maltose ou sacarose.

80. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 76, caracterizada pelo fato de que o álcool de açúcar é selecionado a partir do grupo que consiste em etileno glicol, glicerol, eritritol, treitol, arabitol (ou arabinitol), xilitol, ribitol (ou adonitol), manitol, sorbitol, galactitol (dulcitol), fucitol, iditol, inositol, volemitol, isomalte, maltitol, lactitol, maltotritol, maltotetraitol ou poliglicitol.

81. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 80, caracterizada pelo fato de que o álcool de açúcar é sorbitol.

82. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 76 a 81, caracterizada pelo fato de que o sal, açúcar ou álcool de açúcar tem uma osmolalidade a partir de cerca de 250 mOsm/kg a cerca de 350 mOsm/kg, por exemplo, a partir de cerca de 275 mOsm/kg a cerca de 295 ou 300 mOsm/kg, ou uma concentração que varia a partir de 250 mmol/kg a cerca de 1.000 mmol/kg.

83. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 82, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula é biocompatível ou biodegradável.

84. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 83, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula compreende: a) um compartimento interno (ou um núcleo interno) que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico; ou b) uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, a dita membrana celular da dita superfície externa (ou envoltório) compreendendo um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide.

85. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 84, caracterizada pelo fato de que a membrana celular na superfície externa (ou envoltório) não compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide, por exemplo, uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho, um glóbulo branco, um plaqueta, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula-tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial que não compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide.

86. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 83, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula compreende: a) um compartimento interno (ou um núcleo interno) que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico; e b) uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, a dita membrana celular da dita superfície externa (ou envoltório) compreendendo um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide.

87. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 86, caracterizada pelo fato de que a membrana celular é derivada de um sangue vermelho, um glóbulo branco, uma célula, uma plaqueta, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula- tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial.

88. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (ou núcleo interno) compreende um açúcar ou um álcool de açúcar, por exemplo, sorbitol e a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho.

89. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 88, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula tem uma meia-vida na circulação sanguínea in vivo de pelo menos cerca de 1 minuto.

90. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 89, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula carece substancialmente de imunogenicidade para uma espécie ou indivíduo do qual a membrana celular é derivada.

91. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 90, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular de ocorrência natural e compreende ainda uma membrana sintética.

92. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 91, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende ainda um esfingolipídio.

93. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 92, caracterizada pelo fato de que o esfingolipídio é um esfingolipídio simples.

94. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 92, caracterizada pelo fato de que o esfingolipídio é um esfingolipídio complexo, por exemplo, uma esfingomielina, um glicoesfingolipídio ou uma ceramida que contém inositol.

95. Processo para produzir uma nanopartícula, caracterizado pelo fato de que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação em um líquido para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide.

96. Processo, de acordo com a reivindicação 95, caracterizado pelo fato de que a etapa b) compreende exercer energia exógena sobre a combinação em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e uma superfície externa que compreende a membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do esteroide.

97. Processo para produzir uma nanopartícula, caracterizado pelo fato de que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide; e c) exercer energia exógena sobre a dita nanopartícula em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e a dita superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende o dito nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide.

98. Processo para produzir uma nanopartícula, caracterizado pelo fato de que compreende exercer energia exógena sobre uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular.

99. Processo, de acordo com a reivindicação 98, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas: a) contatar uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho com um esteroide para formar uma combinação; e b) exercer energia exógena sobre a dita combinação em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide.

100. Processo, de acordo com a reivindicação 98, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas: a) contatar uma membrana celular derivada de um glóbulo vermelho com um esteroide para formar uma combinação; b) exercer energia exógena sobre a dita combinação para formar uma nanopartícula que compreende um núcleo interno e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide; e c) exercer energia exógena sobre a dita nanopartícula em um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende o dito líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e uma superfície externa que compreende a dita membrana celular que compreende um nível aumentado ou enriquecido do dito esteroide.

101. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 95 a 100, caracterizado pelo fato de que a membrana celular derivada de uma célula está na forma de um "fantasma" de membrana celular.

102. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 95 a 101, caracterizado pelo fato de que a energia exógena é uma energia mecânica, uma energia acústica ou uma energia térmica.

103. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 95 a 102, caracterizado pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula sanguínea de um mamífero ou humano, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco ou uma plaqueta.

104. Processo, de acordo com a reivindicação 103, caracterizado pelo fato de que o esteroide é um colestano, por exemplo, colesterol.

105. Processo para produzir uma nanopartícula, caracterizado pelo fato de que compreende: a) contatar uma membrana celular derivada de uma célula com um esteroide e um esfingolipídio dissolvido em um solvente miscível com água para formar uma combinação; b) exercer energia exógena sobre a dita combinação em um líquido para formar uma nanopartícula que compreende um compartimento interior (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende a dita membrana celular, o dito esteroide e o dito esfingolipídio.

106. Processo, de acordo com a reivindicação 105, caracterizado pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula animal, por exemplo, uma célula de mamífero não humano ou uma célula humana.

107. Processo, de acordo com a reivindicação 105 ou 106, caracterizado pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula sanguínea, uma célula tumoral, uma célula cancerosa, uma célula imune, uma célula-tronco, uma célula endotelial ou uma célula epitelial.

108. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 107, caracterizado pelo fato de que a membrana celular compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta.

109. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 108, caracterizado pelo fato de que a membrana celular está contida em um líquido aquoso.

110. Processo, de acordo com a reivindicação 109, caracterizado pelo fato de que o líquido aquoso é água, um tampão com um pH que varia a partir de cerca de 5 a cerca de 9, por exemplo, PBS, ou um líquido ou tampão isotônico.

111. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 110, caracterizado pelo fato de que o esteroide é um colestano, por exemplo, colesterol, um colano, por exemplo, ácido cólico, um pregnano, por exemplo, progesterona, um androstano, por exemplo, testosterona ou um estrano, por exemplo, estradiol.

112. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 110, caracterizado pelo fato de que o esteroide é selecionado do grupo que consiste em um gonano, testosterona, ácido cólico, dexametasona, lanosterol, progesterona, medrogestona, - sitosterol, colesterol e 5-colestano.

113. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 112, caracterizado pelo fato de que o esfingolipídio é um esfingolipídio simples.

114. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 112, caracterizado pelo fato de que o esfingolipídio é um esfingolipídio complexo, por exemplo, uma esfingomielina, um glicoesfingolipídio ou uma ceramida que contém inositol.

115. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 114, caracterizado pelo fato de que o esteroide, por exemplo, colesterol e o esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, são dissolvidos no mesmo solvente miscível em água.

116. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 114, caracterizado pelo fato de que o esteroide, por exemplo, colesterol e o esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, são dissolvidos em diferentes solventes miscíveis em água.

117. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 116, caracterizado pelo fato de que a dissolução do esteroide e/ou do esfingolipídio no solvente miscível em água é facilitada por meio de aquecimento e/ou mistura, por exemplo, agitação.

118. Processo, de acordo com a reivindicação 117, caracterizado pelo fato de que o aquecimento é conduzido em uma temperatura que varia a partir de cerca de 35 °C a cerca de 65 °C.

119. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 118, caracterizado pelo fato de que o solvente miscível em água é um composto orgânico ou um composto inorgânico.

120. Processo, de acordo com a reivindicação 119, caracterizado pelo fato de que o composto orgânico é um álcool, por exemplo, um C1-C5 álcool.

121. Processo, de acordo com a reivindicação 120, caracterizado pelo fato de que o álcool é metanol, etanol, 1-propanol,

1,3-propanodiol, 1,5-pentanodiol ou álcool isopropílico (isopropanol ou IPA).

122. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 121, caracterizado pelo fato de que, na combinação, o solvente miscível em água, por exemplo, IPA, tem uma concentração ou nível que varia a partir de cerca de 5 % (v/v) a cerca de 40 % (v/v).

123. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 122, caracterizado pelo fato de que a combinação tem uma concentração em massa que varia a partir de cerca de 0,25 mg/ml a cerca de 20 mg/ml, por exemplo, cerca de 2,5 mg/ml.

124. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 123, caracterizado pelo fato de que, na combinação, o esteroide, por exemplo, colesterol, tem uma concentração ou nível que varia a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 40 % (peso/peso).

125. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 124, caracterizado pelo fato de que, na combinação, o esfingolipídio, por exemplo, esfingomielina, tem uma concentração ou nível que varia a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 90 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 40 % (peso/peso).

126. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 125, caracterizado pelo fato de que, na combinação, a membrana celular tem uma concentração ou nível que varia a partir de cerca de 5 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso), por exemplo, cerca de 20 % (peso/peso).

127. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 126, caracterizado pelo fato de que exercer energia exógena sobre a combinação compreende submeter a combinação à sonicação em um líquido.

128. Processo, de acordo com a reivindicação 127, caracterizado pelo fato de que a combinação é submetida a sonicação a uma temperatura que varia a partir de cerca de 15 °C a cerca de 50°C.

129. Processo, de acordo com a reivindicação 127 ou 128, caracterizado pelo fato de que a combinação é submetida a sonicação a uma frequência que varia a partir de cerca de 20 kilohertz (kHz) a cerca de 60 kHz.

130. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 127 a 129, caracterizado pelo fato de que a combinação é submetida à sonicação por um tempo que varia a partir de cerca de 5 minutos a cerca de 50 minutos.

131. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 130, caracterizado pelo fato de que exercer energia exógena na combinação, por exemplo, submeter a combinação à sonicação, é conduzido para homogeneizar a membrana celular, esteroide e esfingolipídio na combinação.

132. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 130, caracterizado pelo fato de que gera uma nanopartícula, em que sua superfície externa (ou envoltório) compreende a membrana celular fundida, esteroide e esfingolipídio.

133. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 132, caracterizado pelo fato de que gera nanopartículas com um índice de distribuição de partículas (PDI) de cerca de 0,2 ou maior.

134. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 133, caracterizado pelo fato de que compreende ainda, após a etapa b), submeter as nanopartículas a um tratamento de cisalhamento elevado (ou tratamento de alta força de cisalhamento) em um processador de fluido de cisalhamento elevado.

135. Processo, de acordo com a reivindicação 134,

caracterizado pelo fato de que o processador de fluido de cisalhamento elevado é um microfluidizador (ou um processador de microfluidizador) ou um homogeneizador que gera alta força de cisalhamento.

136. Processo, de acordo com a reivindicação 135, caracterizado pelo fato de que o processador de fluido de cisalhamento elevado é um microfluidizador (ou um processador de microfluidizador).

137. Processo, de acordo com a reivindicação 136, caracterizado pelo fato de que o microfluidizador é configurado para gerar uma pressão substancialmente constante de cerca de 10.000 psi a cerca de 30.000 psi.

138. Processo, de acordo com a reivindicação 136 ou 137, caracterizado pelo fato de que o microfluidizador tem a configuração da tecnologia de reação microfluídica (MRT) que compreende, a partir de a montante para a jusante, uma entrada para inserir a nanopartícula, uma bomba intensificadora para gerar uma pressão estática, uma câmara de jato de impacto para gerar uma alta pressão de cisalhamento na nanopartícula e uma saída para enviar a nanopartícula.

139. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 136 a 138, caracterizado pelo fato de que o microfluidizador compreende uma câmara de interação de tipo Z.

140. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 136-138, caracterizado pelo fato de que o microfluidizador compreende uma câmara de interação de tipo Y.

141. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 136 a 140, caracterizado pelo fato de que a microfluidização é conduzida usando uma única pressão ou combinação de diferentes pressões.

142. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 136 a 141, caracterizado pelo fato de que a microfluidização é conduzida usando um único número de passagem ou vários números de passagem.

143. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 136 a 142, caracterizado pelo fato de que compreende ainda resfriamento da nanopartícula.

144. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 136 a 143, caracterizado pelo fato de que as nanopartículas em um canal após sair de uma câmara do microfluidizador são resfriadas por um resfriador de produto que contém um refrigerante.

145. Processo, de acordo com a reivindicação 144, caracterizado pelo fato de que o resfriador de produto ou o refrigerante no resfriador de produto é ajustado para uma temperatura que varia a partir de cerca de 4 °C a cerca de 55 °C.

146. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 145, caracterizado pelo fato de que gera nanopartículas com um índice de distribuição de partículas (PDI) que varia a partir de cerca de 0,05 a cerca de 0,2.

147. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 146, caracterizado pelo fato de que gera nanopartículas que têm um tamanho de partícula tendo uma média Z que varia a partir de cerca de 30 nm a cerca de 300 nm.

148. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 147, caracterizado pelo fato de que compreende ainda um ou mais dos seguintes: 1) uma etapa de remover ou reduzir o nível de partículas que têm um tamanho de partícula de cerca de 200 nm ou maior; 2) uma etapa de remover ou reduzir o nível de solvente miscível em água; 3) uma etapa de concentrar as nanopartículas; 4) uma etapa de esterilizar as nanopartículas; e/ou

5) uma etapa de encher as nanopartículas em recipientes individuais.

149. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 149, caracterizado pelo fato de que compreende ainda 2, 3, 4 ou 5 dos seguintes: 1) uma etapa de remover ou reduzir o nível de partículas que têm um tamanho de partícula de cerca de 200 nm ou maior; 2) uma etapa de remover ou reduzir o nível de solvente miscível em água; 3) uma etapa de concentrar as nanopartículas; 4) uma etapa de esterilizar as nanopartículas; e/ou 5) uma etapa de encher as nanopartículas em recipientes individuais.

150. Processo, de acordo com a reivindicação 148 ou 149, caracterizado pelo fato de que a etapa 1) compreende submeter à filtração um líquido que contém as nanopartículas.

151. Processo, de acordo com a reivindicação 150, caracterizado pelo fato de que a filtração é conduzida usando um filtro que compreende poliéter sulfona (PES), difluoreto de polivinilideno (PVDF), fibra de vidro, acetato de celulose ou uma combinação dos mesmos.

152. Processo, de acordo com a reivindicação 150 ou 151, caracterizado pelo fato de que o filtro tem um tamanho de poros que varia a partir de cerca de 0,2 μm a cerca de 1,2 μm.

153. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 150 a 152, caracterizado pelo fato de que a filtração é conduzida usando um único filtro.

154. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 150 a 153, caracterizado pelo fato de que a filtração é conduzida usando vários filtros com diferentes tamanhos de poros.

155. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 150 a 154, caracterizado pelo fato de que a filtração é conduzida para remover ou reduzir o nível de partículas que têm um tamanho de partícula em cerca de 200 nm ou maior e para esterilizar as nanopartículas.

156. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 150 a 155, caracterizado pelo fato de que a etapa 2) e/ou 3) compreende submeter um líquido que contém as nanopartículas à filtração de fluxo tangencial (TFF).

157. Processo, de acordo com a reivindicação 156, caracterizado pelo fato de que a TFF é conduzida usando um sistema de TFF que compreende um reservatório de alimentação, um dispositivo de filtro e um dispositivo de coleta, o reservatório de alimentação está em comunicação fluídica com o dispositivo de filtro por meio de uma entrada no dispositivo de filtro, o dispositivo de filtro está em comunicação fluídica com o dispositivo de coleta por meio de uma saída de permeado no dispositivo de filtro e o dispositivo de filtro está em comunicação fluídica com o reservatório de alimentação por meio de uma saída de retentado no dispositivo de filtro.

158. Processo, de acordo com a reivindicação 157, caracterizado pelo fato de que o dispositivo de filtro tem a forma de um cartucho, um cassete ou uma coluna que contém um filtro de fibra oca.

159. Processo, de acordo com a reivindicação 158, caracterizado pelo fato de que o dispositivo de filtro compreende uma membrana de filtração que tem um tamanho de poros que varia a partir de cerca de 100 Kd a cerca de 300 Kd, por exemplo, 300 Kd.

160. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 156 a 159, caracterizado pelo fato de que a TFF é conduzida por meio de um processo de diafiltração.

161. Processo, de acordo com a reivindicação 160,

caracterizado pelo fato de que o processo de diafiltração é um processo de diafiltração contínuo, descontínuo ou sequencial.

162. Processo, de acordo com a reivindicação 160 ou 161, caracterizado pelo fato de que a TFF é conduzida por meio de um único ciclo ou múltiplos ciclos de processos de diafiltração, por exemplo, múltiplos ciclos de processos de diafiltração contínuos.

163. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 156 a 162, caracterizado pelo fato de que compreende ainda coletar a nanopartícula.

164. Processo, de acordo com a reivindicação 163, caracterizado pelo fato de que a nanopartícula é coletada por meio de uma saída de retentado no dispositivo de filtro.

165. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 156 a 164, caracterizado pelo fato de que a TFF é usada para reduzir a quantidade ou o nível de solvente miscível em água de uma composição, por exemplo, um líquido, que contém a nanopartícula.

166. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 156-164, caracterizado pelo fato de que a TFF é usada para remover o solvente miscível em água de uma composição, por exemplo, um líquido, que contém a nanopartícula.

167. Processo, de acordo com a reivindicação 165 ou 166, caracterizado pelo fato de que a TFF é usada para remover cerca de 50 % a cerca de 99,9999 % do solvente miscível em água da composição.

168. Processo, de acordo com a reivindicação 165 ou 166, caracterizado pelo fato de que o solvente miscível em água é IPA e a TFF é usada para reduzir a concentração ou nível de IPA abaixo de

5.000 ppm na composição.

169. Processo, de acordo com a reivindicação 168, caracterizado pelo fato de que o solvente miscível em água é IPA e a TFF é usada para reduzir a concentração ou nível de IPA abaixo de

1.000 ppm na composição.

170. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 156 a 169, caracterizado pelo fato de que a TFF é usada para concentrar e/ou enriquecer a nanopartícula a partir de cerca de 1 vez a cerca de 400 vezes.

171. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 156 a 170, caracterizado pelo fato de que as etapas 2) e 3) são combinadas em uma única etapa que compreende submeter um líquido que contém as nanopartículas à filtração de fluxo tangencial (TFF).

172. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 156 a 171, caracterizado pelo fato de que após o tratamento de TFF, uma composição, por exemplo, um líquido, que contém a nanopartícula é submetida a uma etapa para esterilizar a composição que contém a nanopartícula.

173. Processo, de acordo com a reivindicação 172, caracterizado pelo fato de que a etapa para esterilizar a composição compreende submeter a composição à filtração.

174. Processo, de acordo com a reivindicação 173, caracterizado pelo fato de que a filtração é conduzida usando um filtro com um tamanho de poro a cerca de 0,2 μm e/ou a filtração é conduzida usando um filtro que compreende PES, PVDF, fibra de vidro, acetato de celulose ou uma combinação dos mesmos.

175. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 174, caracterizado pelo fato de que não compreende remover ou vaporizar o solvente miscível em água para formar uma membrana que compreende o esteroide e o esfingolipídio.

176. Processo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 105 a 175, caracterizado pelo fato de que a membrana celular compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, o esteroide é o colesterol, o esfingolipídio é uma esfingomielina e o solvente miscível em água é IPA.

177. Nanopartícula, caracterizada pelo fato de que é preparada por meio do processo, como definido em qualquer uma das reivindicações 95 a 176.

178. Nanopartícula, caracterizada pelo fato de que é preparada por meio do processo, como definido em qualquer uma das reivindicações 105 a 176.

179. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 178, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (ou núcleo interno) da nanopartícula não fornece um suporte sólido para a dita superfície externa (ou envoltório) e/ou é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico.

180. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 178 ou 179, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina.

181. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 180, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende membrana celular fundida derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina.

182. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 180 ou 181, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, colesterol e esfingomielina.

183. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 182, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 %

(peso/peso) de colesterol, de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 80 % (peso/peso) de esfingomielina e de cerca de 10 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) da membrana plasmática derivado de um glóbulo vermelho.

184. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 183, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende cerca de 40 % (peso/peso) de colesterol, cerca de 40 % (peso/peso) de esfingomielina e cerca de 20 % (peso/peso) de membrana plasmática derivada de uma hemácia.

185. Nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório), em que o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornece um suporte sólido para a dita superfície externa (ou envoltório) e/ou é isotônico a um líquido celular ou fisiológico, por exemplo, um compartimento interno (ou um núcleo interno) que compreende um líquido que é isotônico a um líquido celular ou fisiológico e a dita superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana celular derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina.

186. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 185, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende membrana celular fundida derivada de uma célula, colesterol e esfingomielina.

187. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 185 ou 186, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho, colesterol e esfingomielina.

188. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 187, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende a partir de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) de colesterol, de cerca de 20 % (peso/peso) a cerca de 80

% (peso/peso) esfingomielina e de cerca de 10 % (peso/peso) a cerca de 50 % (peso/peso) da membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho.

189. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 188, caracterizada pelo fato de que a superfície externa (ou envoltório) compreende cerca de 40 % (peso/peso) de colesterol, cerca de 40 % (peso/peso) de esfingomielina e cerca de 20 % (peso/peso) de membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho.

190. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 189, caracterizada pelo fato de que tem uma estabilidade melhor comparado com uma nanopartícula comparável sem o nível aumentado ou enriquecido de um esteroide.

191. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 190, caracterizada pelo fato de que é configurada para se ligar a um tipo de célula da qual a membrana celular da nanopartícula é derivada.

192. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 191, caracterizada pelo fato de que é configurada para se ligar ou neutralizar uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula.

193. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 192, caracterizada pelo fato de que a porção é um agente, por exemplo, um agente químico, uma molécula ou um organismo.

194. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 193, caracterizada pelo fato de que a porção é uma toxina, uma citocina, um autoanticorpo ou uma quimiocina.

195. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 194, caracterizada pelo fato de que a toxina é uma toxina bacteriana, fúngica, animal ou química.

196. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 195,

caracterizada pelo fato de que a toxina química é um organofosfato.

197. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 195, caracterizada pelo fato de que a toxina animal é uma toxina em um veneno animal.

198. Nanopartícula, de acordo com a reivindicação 193, caracterizada pelo fato de que o organismo é um vírus, uma bactéria, um fungo ou um parasita.

199. Nanopartícula, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 198, caracterizada pelo fato de que tem uma melhor capacidade para se ligar ou neutralizar uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula comparado com uma nanopartícula comparável sem o nível aprimorado ou enriquecido de um esteroide.

200. Sistema ou dispositivo de distribuição de medicamento, caracterizado pelo fato de que compreende uma quantidade eficaz da nanopartícula, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 199.

201. Sistema ou dispositivo de distribuição de medicamento, de acordo com a reivindicação 200, caracterizado pelo fato de que compreende ainda outro ingrediente ativo ou um carreador ou excipiente medicamente ou farmaceuticamente aceitável.

202. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade eficaz da nanopartícula, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 199 e um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

203. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 202, caracterizada pelo fato de que compreende ainda outro ingrediente ativo.

204. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 202 ou 203, caracterizada pelo fato de que é configurada para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula.

205. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 202 a 204, caracterizada pelo fato de que a superfície externa da nanopartícula compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta.

206. Método para tratar ou prevenir uma doença ou condição em um indivíduo que precisa, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz de: a) uma nanopartícula que compreende um compartimento interno (ou um núcleo interno) e uma superfície externa (ou envoltório) que compreende uma membrana celular derivada de uma célula, o dito compartimento interno (ou um núcleo interno) não fornecendo um suporte sólido à dita membrana celular em a dita superfície externa (ou envoltório); ou b) a nanopartícula, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 199, o sistema ou dispositivo de distribuição de medicamento, como definido em qualquer uma das reivindicações 200 a 201, ou a composição farmacêutica, como definido em qualquer uma das reivindicações 202 a 205.

207. Método, de acordo com a reivindicação 206, caracterizado pelo fato de que o indivíduo é um ser humano ou um mamífero não humano.

208. Método, de acordo com a reivindicação 206 ou 207, caracterizado pelo fato de que a membrana celular na nanopartícula é derivada de uma célula da mesma espécie do indivíduo ou é derivada de uma célula do indivíduo.

209. Método, de acordo com a reivindicação 208,

caracterizado pelo fato de que a membrana celular na nanopartícula é derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta.

210. Método, de acordo com a reivindicação 209, caracterizado pelo fato de que a membrana celular na nanopartícula é derivada de um glóbulo vermelho da mesma espécie do indivíduo e o glóbulo vermelho tem o mesmo tipo de sangue do indivíduo.

211. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 206 a 210, caracterizado pelo fato de que é usado para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula.

212. Método, de acordo com a reivindicação 211, caracterizado pelo fato de que a porção é um agente, por exemplo, um agente químico, uma molécula ou um organismo.

213. Método, de acordo com a reivindicação 212, caracterizado pelo fato de que o organismo é uma bactéria, um fungo ou um parasita.

214. Método, de acordo com a reivindicação 212, caracterizado pelo fato de que a porção é uma toxina, uma citocina, um autoanticorpo ou uma quimiocina.

215. Método, de acordo com a reivindicação 214, caracterizado pelo fato de que a toxina é uma toxina bacteriana, fúngica, animal ou química.

216. Método, de acordo com a reivindicação 215, caracterizado pelo fato de que a toxina química é um organofosfato.

217. Método, de acordo com a reivindicação 215, caracterizado pelo fato de que a toxina animal é uma toxina em um veneno animal.

218. Método, de acordo com a reivindicação 215, caracterizado pelo fato de que a toxina é uma toxina que insere a membrana celular.

219. Método, de acordo com a reivindicação 218, caracterizado pelo fato de que a toxina se insere na membrana celular ou membrana plasmática de uma célula alvo do indivíduo como parte do mecanismo patológico natural da toxina.

220. Método, de acordo com a reivindicação 218 ou 219, caracterizado pelo fato de que a membrana celular ou membrana plasmática na superfície externa da nanopartícula retém substancialmente a toxina.

221. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 206 a 220, caracterizado pelo fato de que a superfície externa da nanopartícula compreende uma membrana plasmática derivada de uma célula sanguínea, por exemplo, um glóbulo vermelho, um glóbulo branco e/ou uma plaqueta.

222. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 206 a 221, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a administração de outro ingrediente ativo ou um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável ao indivíduo que precisa ou a nanopartícula é administrada por meio de um sistema ou dispositivo de distribuição de medicamento.

223. Uso de uma quantidade eficaz da nanopartícula, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 199, para a fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir uma doença ou condição em um indivíduo que precisa.

224. Composição imunogênica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade eficaz de uma nanopartícula, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 94 e 177 a 199.

225. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 224, caracterizada pelo fato de que é configurada como uma composição imunogênica específica para neoplasma e em que a superfície externa da nanopartícula compreende uma membrana celular derivada de uma célula neoplásica.

226. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com a reivindicação 225, caracterizada pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula neoplásica benigna, uma célula neoplásica potencialmente maligna, uma célula cancerosa, uma linha celular cancerosa ou uma célula cancerosa de um indivíduo.

227. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com a reivindicação 225 ou 226, caracterizada pelo fato de que a membrana celular na superfície externa da nanopartícula retém substancialmente sua integridade estrutural para induzir a uma resposta imune à célula do neoplasma.

228. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com qualquer uma das reivindicações 225 a 227, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um adjuvante imunogênico.

229. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com qualquer uma das reivindicações 225 a 228, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um intensificador imune.

230. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com qualquer uma das reivindicações 225 a 229, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula compreende ainda outro ingrediente ativo ou uma carga liberável.

231. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com qualquer uma das reivindicações 225 a 230, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula tem um diâmetro de cerca de 10 nm a cerca de 10 μm.

232. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com qualquer uma das reivindicações 225 a 231,

caracterizada pelo fato de que a nanopartícula carece substancialmente de constituintes da célula neoplásica da qual a membrana celular é derivada.

233. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com qualquer uma das reivindicações 225 a 231, caracterizada pelo fato de que a membrana celular na superfície externa (ou envoltório) não compreende um nível aumentado ou enriquecido de um esteroide.

234. Composição imunogênica específica para neoplasma, de acordo com qualquer uma das reivindicações 225 a 233, caracterizada pelo fato de que a superfície externa da nanopartícula compreende uma membrana celular de ocorrência natural e compreende ainda uma membrana sintética.

235. Vacina, caracterizada pelo fato de que compreende a composição imunogênica específica para neoplasma, como definido em qualquer uma das reivindicações 225 a 234.

236. Método para tratar ou prevenir uma neoplasia em um indivíduo que precisa, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz da composição imunogênica específica para neoplasma, como definido em qualquer uma das reivindicações 225 a 234, ou a vacina, como definido na reivindicação 235.

237. Método, de acordo com a reivindicação 236, caracterizado pelo fato de que o indivíduo é um mamífero humano ou não humano.

238. Método, de acordo com as reivindicações 236 ou 237, caracterizado pelo fato de que a membrana celular é derivada de uma célula neoplásica da mesma espécie do indivíduo, ou uma célula neoplásica do indivíduo.

239. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 236 a 238, caracterizado pelo fato de que compreende ainda administrar ao dito indivíduo outro ingrediente ativo ou um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

240. Uso de uma quantidade eficaz da composição imunogênica específica para neoplasma, como definido em qualquer uma das reivindicações 225 a 234, para a fabricação de uma vacina para o tratamento ou proteção de um indivíduo contra uma neoplasia.

241. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 224, caracterizada pelo fato de que é configurada para tratar ou prevenir uma doença ou condição associada a uma porção que tem como alvo ou se liga à membrana celular da nanopartícula e em que a superfície externa da nanopartícula compreende a porção.

242. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 241, caracterizada pelo fato de que a porção é um agente, por exemplo, um agente químico, uma molécula, um organismo ou um antígeno do mesmo.

243. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 242, caracterizada pelo fato de que o organismo é uma bactéria, um fungo ou um parasita.

244. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 241, caracterizada pelo fato de que a porção é uma toxina, uma citocina, um autoanticorpo ou uma quimiocina.

245. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 244, caracterizada pelo fato de que a toxina é uma toxina bacteriana, fúngica, animal ou química.

246. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 245, caracterizada pelo fato de que a toxina química é um organofosfato.

247. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 245, caracterizada pelo fato de que a toxina animal é uma toxina em um veneno animal.

248. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 244, caracterizada pelo fato de que a toxina é uma toxina que insere a membrana celular.

249. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 248, caracterizada pelo fato de que a toxina se insere na membrana celular ou membrana plasmática de uma célula alvo do indivíduo como parte do mecanismo patológico natural da toxina.

250. Composição imunogênica, de acordo com a reivindicação 248 ou 249, caracterizada pelo fato de que a membrana celular ou membrana plasmática na superfície externa da nanopartícula retém substancialmente a toxina.

251. Composição imunogênica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 241 a 250, caracterizada pelo fato de que a membrana celular é uma membrana plasmática derivada de uma célula.

252. Composição imunogênica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 241 a 251, caracterizada pelo fato de que a superfície externa da nanopartícula compreende uma membrana celular de ocorrência natural e compreende ainda uma membrana sintética.

253. Composição imunogênica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 241 a 252, caracterizada pelo fato de que a nanopartícula é biocompatível, biodegradável ou compreende um material sintético.

254. Composição imunogênica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 241 a 253, caracterizada pelo fato de que o compartimento interno (núcleo interno) não suporta a superfície externa.

255. Composição imunogênica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 241 a 254, caracterizada pelo fato de que a superfície externa compreende uma membrana plasmática derivada de um glóbulo vermelho.

256. Composição imunogênica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 241 a 255, caracterizada pelo fato de que compreende ainda outro ingrediente ativo.

257. Composição imunogênica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 241 a 256, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um adjuvante imunogênico ou intensificador imune.

258. Vacina, caracterizada pelo fato de que compreende a composição imunogênica, como definido em qualquer uma das reivindicações 241 a 257

259. Método para induzir uma resposta imune a uma porção associada a uma doença ou condição em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz da composição imunogênica, como definido em qualquer uma das reivindicações 241 a 257.

260. Método para proteger um indivíduo contra uma porção associada a uma doença ou condição em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao dito indivíduo uma quantidade eficaz da vacina, como definido na reivindicação 258.

261. Método, de acordo com a reivindicação 260, caracterizado pelo fato de que o indivíduo é um mamífero humano ou não humano

262. Método, de acordo com a reivindicação 260 ou 261, caracterizado pelo fato de que a membrana celular ou membrana plasmática é derivada de uma célula da mesma espécie do indivíduo ou de uma célula do indivíduo

263. Método, de acordo com a reivindicação 262, caracterizado pelo fato de que a membrana plasmática é derivada de um glóbulo vermelho da mesma espécie do indivíduo e o glóbulo vermelho tem o mesmo tipo de sangue do indivíduo.

264. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 259 a 263, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a administração de outro ingrediente ativo ou um carreador ou excipiente farmaceuticamente aceitável ao dito indivíduo.

265. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 259 a 264, caracterizado pelo fato de que a resposta imune é uma resposta imune mediada por células T ou uma resposta imune mediada por células B.

266. Uso de uma quantidade eficaz da composição imunogênica, como definido em qualquer uma das reivindicações 241 a 257, para a fabricação de uma vacina para proteger um indivíduo contra uma doença ou condição associada à porção.

267. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 206 a 222, caracterizado pelo fato de que a doença ou condição é infecção, por exemplo, infecção cutânea, sepse, pneumonia ou uma reação autoimune, por exemplo, uma reação autoimune em virtude da produção de um anticorpo autoimune, como um anticorpo autoimune contra células sanguíneas ou glóbulos vermelhos.

268. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 206 a 222 e 267, caracterizado pelo fato de que a nanopartícula ou a composição farmacêutica é administrada através da via entérica/gastrintestinal, oral, parentérica, intravenosa, retal, nasal, tópica, ocular, inalação ou intratraqueal.

269. Método, de acordo com a reivindicação 267 ou 268, caracterizado pelo fato de que a doença ou condição é infecção, por exemplo, infecção cutânea, sepse ou pneumonia e a nanopartícula ou a composição farmacêutica é administrada através da via intratraqueal.

270. Método, de acordo com a reivindicação 269, caracterizado pelo fato de que a nanopartícula ou a composição farmacêutica é administrada por meio de instilação intratraqueal ou inalação intratraqueal.

271. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 236 a 239, caracterizado pelo fato de que a composição imunogênica específica para neoplasma ou vacina é administrada através da via entérica/gastrintestinal, oral, parentérica, intravenosa, retal, nasal, tópica, ocular, inalação ou intratraqueal.

272. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 259 a 265, caracterizado pelo fato de que a composição imunogênica é administrada através da via entérica/gastrintestinal, oral, parentérica, intravenosa, retal, nasal, tópica, ocular, inalação ou intratraqueal.

273. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 206 a 222, 236 a 239, 259 a 265 e 267 a 272, caracterizado pelo fato de que compreende ainda administrar ao indivíduo de um segundo agente terapêutico.

274. Método, de acordo com a reivindicação 273, caracterizado pelo fato de que o segundo agente terapêutico é um antibiótico, um agente antitumoral ou anticâncer ou um modulador de resposta imune, por exemplo, um ativador ou supressor de resposta imune.

275. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 206 a 222, 236 a 239, 259 a 265 e 267 a 272, caracterizado pelo fato de que não compreende administrar ao indivíduo de um segundo agente terapêutico.