BR112020016785A2 - compostos de 4-metil di-hidropirimidinona e uso medicinal dos mesmos - Google Patents

Abstract

A presente invenção refere-se a um composto de 4-metil di-hidropirimidinona, que tem uma atividade antagonista de ROR¿, ou um sal farmacologicamente aceitável do composto; uma composição farmacêutica que contém o composto ou o sal; e um uso medicinal do composto ou do sal. São providos: o composto de fórmula (1) ou (2) ou um sal farmacologicamente aceitável do composto; uma composição medicinal que contém o composto ou o sal; e um uso medicinal do composto ou do sal.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COM- POSTOS DE 4-METIL DI-HIDROPIRIMIDINONA E USO MEDICINAL DOS MESMOS".

CAMPO TÉCNICO

[0001] A presente invenção refere-se a compostos de 4-metil di- hidropirimidinona ou aos sais farmaceuticamente aceitáveis do mes- mo, que têm a atividade antagonista a RORy, e às composições far- macêuticas que compreendem os mesmos, e ao uso farmacêutico dos mesmos.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[0002] O RORy (isto é, o gama receptor órfão relacionado a reti- noide) é um receptor nuclear que é importante para a diferenciação e a ativação das células Thi7. O RORyt também é conhecido como uma variante de splicing do RORy (Literatura de Não Patente 1). O RORy e o RORyt diferem somente em seus domínios do N-terminal e comparti- lham do mesmo domínio de ligação de ligante e o domínio de ligação de DNA. É relatado que o RORy é expresso em outros tecidos além das células Th17 (Literatura de Não Patente 1).

[0003] A inibição do RORy pode inibir a diferenciação e a ativação das células Th1i7. O IL-17 produzido nas células Th17 é envolvido na indução de uma variedade de quimiocinas, citosinas, metaloproteases e outros mediadores inflamatórios e na migração de neutrófilos e, por- tanto, a inibição de IL-17 pode levar a inibir tal indução e migração (Li- teratura de Não Patente 2 e 3). É sabido que as células Th17 estão envolvidas nas doenças autoimunes (tais como a artrite reumatoide, a psoríase, a doença inflamatória intestinal (tal como a doença de Crohn e a colite ulcerativa), a esclerose múltipla, o lúpus eritematoso sistêmi- co (SLE), a doença de Behcet, a sarcoidose, doença de Harada, a es- pondilite anquilosante, a uveíte, a polimialgia reumática, a diabetes tipo |, a doença do enxerto contra o hospedeiro, a alopecia areata e o vitiligo), as doenças alérgicas, o olho seco, a fibrose (tal como a fibro- se do pulmão e a cirrose biliar primária) e os cânceres (tais como o melanoma maligno e o câncer da próstata).

[0004] O RORy nos tecidos adiposos é relacionado à regulação da adipogênese e a inibição do RORy pode melhorar a resistência à insu- lina (Literatura de Não Patente 4). É sabido que os tecidos adiposos estão envolvidos nas doenças metabólicas (tais como a esteatose he- pática).

[0005] Também é sabido que as células IL-17 e Th17 estão envol- vidas na isquemia, na cardiomiopatia, na hipertensão e na periodonti- te.

[0006] Por exemplo, para a artrite reumatoide, é relatado que a administração do anticorpo anti-IL-17 pode melhorar o inchamento e a destruição articular associados com a artrite induzida por colágeno (Literatura de Não Patente 5). Também é relatado que o inchamento e a destruição articular associados com a artrite induzida por colágeno podem ser melhorados nos experimentos que utilizam camundongos deficientes de IL-17 (Literatura de Não Patente 6).

[0007] Quanto à psoríase, é relatado que a administração do anti- corpo anti-IL-17 é eficaz no tratamento da psoríase em ensaios clíni- cos (Literatura de Não Patente 7). Os anticorpos anti-IL-17 foram colo- cados no mercado para uso na psoríase (Literatura de Não Patente 8).

[0008] Quanto às doenças inflamatórias dos intestinos, tais como a doença de Crohn e a colite ulcerativa, a transferência adaptativa das células T derivadas dos camundongos RORy-KO não aumentam o |L- 17 na mucosa em um modelo de colite induzido por transferência adaptativa das células T, e desse modo o início da colite pode ser ini- bido (Literatura de Não Patente 9). Também é relatado que um anti- corpo anti-IL-23, um anticorpo contra o 11-23 que ativa as células Thi7 é eficaz no tratamento da doença de Crohn em ensaios clínicos

(Literatura de Não Patente 20).

[0009] Quanto à esclerose múltipla, o estado de doença de um modelo de encefalomielite autoimune em um experimento com ca- mundongos que é um modelo de animal com esclerose múltipla pode ser inibido nos camundongos RORy-KO (Literatura de Não Patente 10). Também é relatado que um anticorpo anti-IL-17A pode melhorar a observação por MRI na esclerose múltipla remitente recorrente em en- saios clínicos (Literatura de Não Patente 21).

[0010] Quanto ao lúpus eritematoso sistêmico, é relatado que a administração do anticorpo anti-IL-17 pode inibir o início do modelo de nefrite GBM em camundongos RORyt-KO que são um modelo de ani- mal com glomerulonefrite (Literatura de Não Patente 11). A adminis- tração do anticorpo anti-IL-17 também inibe potencialmente a nefrite associada com SLE (Literatura de Não Patente 12).

[0011] Quanto à espondilite anquilosante, é relatado que a admi- nistração do anticorpo anti-IL-17 é eficaz no tratamento da espondilite anquilosante (Literatura de Não Patente 13).

[0012] Quanto à uveite, é relatado que a administração do anticor- po anti-IL-17 é eficaz no tratamento da uveíte associada com a doença de Behcet, a sarcoidose e a doença de Harada (Literatura de Não Pa- tente 7).

[0013] Quanto à polimialgia reumática, a eficácia do anticorpo anti- IL-17 é avaliada atualmente em ensaios clínicos para a polimialgia reumática.

[0014] Quanto à diabetes tipo |, a administração do anticorpo anti- IL-17 pode inibir a progressão de estados da doença em um modelo de camundongo NOD que é um modelo de diabetes tipo | (Literatura de Não Patente 14). A eficácia do anticorpo anti-IL-17A é avaliada atu- almente em ensaios clínicos (Literatura de Não Patente 22).

[0015] Quanto à doença do enxerto contra o hospedeiro, é relata-

do que a transfecção de células derivadas de camundongos RORy-KO pode melhorar as taxas de sobrevivência e de rejeições em um hos- pedeiro em um modelo de transplante em camundongos (Literatura de Não Patente 19).

[0016] Quanto à alopecia areata, a eficácia do anticorpo anti-lL- 17A é avaliada atualmente em ensaios clínicos (Literatura de Não Pa- tente 25).

[0017] Quanto ao vitiligo, os aumentos de IL-17 e das células Thi7 são reconhecidos nos soros de pacientes e nos tecidos patológicos, respectivamente (Literatura de Não Patente 39).

[0018] Quanto às doenças alérgicas, tais como asma, a inflama- ção pulmonar eosinofílica atenuada, o número reduzido de linfócitos CD4+ e a diminuição dos níveis de citosinas/quimiocinas Th2 são exi- bidos nos camundongos RORy-KO em um modelo sensibizado com OVA, com o que então as reações alérgicas podem ser inibidas (Literatura de Não Patente 15). A eficácia do anticorpo anti-IL-17A é avaliada atualmente em ensaios clínicos para a dermatite atópica (Literatura de Não Patente 23). A eficácia do anticorpo anti-IL-23 é avaliada atualmente em ensaios clínicos para a asma (Literatura de Não Patente 24).

[0019] Quanto ao olho seco, é relatado que as células Th17 au- mentam em um modelo de animal com olho seco, e a eficácia do anti- corpo anti-IL-17 é avaliada atualmente em ensaios clínicos para paci- entes com olho seco (Literatura de Não Patente 16).

[0020] Quanto à fibrose, a administração do anticorpo anti-IL-17 pode inibir a inflamação e a fibrose no pulmão e estender a sobrevi- vência dos animais em um modelo de fibrose de pulmão induzido por bleomicina que é um modelo de animal com fibrose de pulmão (Literatura de Não Patente 17).

[0021] Quanto à cirrose biliar primária, é relatado que as células

Th1i7 aumentam na área de lesão de pacientes com cirrose biliar pri- mária, e a eficácia do anticorpo anti-IL-23 é avaliada atualmente em ensaios clínicos (Literatura de Não Patente 18).

[0022] Quanto ao melanoma maligno, a eficácia do anticorpo anti- IL-17 é avaliada atualmente em ensaios clínicos (Literatura de Não Pa- tente 26 e 27).

[0023] Quanto ao câncer de próstata, é reconhecido que o trata- mento com anticorpo anti-IL-17 diminui a formação de câncer de prós- tata microinvasivo em camundongos Pten-null (Literatura de Não Pa- tente 33).

[0024] Quanto à resistência a insulina, a resistência a insulina in- duzida pela alimentação com dietas ricas em gorduras pode ser inibida em camundongos RORy KO (Literatura de Não Patente 4).

[0025] Quanto à esteatose hepática, é reconhecido que o anticor- po anti-IL-17 melhora a esteatose em tecidos patológicos em um mo- delo de doença hepática alcoólica (Literatura de Não Patente 34).

[0026] Quanto à doença hepática gordurosa não alcoólica, é reco- nhecido que o tratamento com anticorpo anti-IL-17 melhora a função do fígado, atenua o acúmulo de lipídeo hepático, suprime a ativação das células de Kupffer e diminui os níveis de citosinas pro-inflamató- rias em um modelo de doença hepática gordurosa não alcoólica indu- zido por uma dieta com alto teor de gordura (Literatura de Não Patente 35).

[0027] Quanto à isquemia e à cardiomiopatia, é relatado que o IL- 17a contribui para a isquemia miocárdica/ferimento por reperfusão pe- la regulação do apoptose do cardiomiócito e da infiltração de neutrófi- los. É reconhecido que o tratamento com o anticorpo anti-IL-17A ou o knockout de IL-17a reduzem o tamanho do infarto, melhora a função cardíaca e, desse modo, melhora a isquemia miocárdica/ferimento por reperfusão (Literatura de Não Patente 36).

[0028] Quanto à hipertensão, é relatado que o tratamento com o anticorpo contra o IL-17a ou o IL-17ra suprime a pressão sanguínea aumentada pela administração de angiotensina |l (Literatura de Não Patente 37).

[0029] Quanto à periodontite, o aumento das células Th17 ou IL-17 foi reconhecido em um modelo de periodontite experimental. É relata- do que o tratamento com o antagonista de RORy, GSK805 ou o anti- corpo anti-IL-17A diminui a perda óssea no modelo (Literatura de Não Patente 38).

[0030] Com base nessas descobertas, os antagonistas de RORy são considerados benéficos para impedir ou tratar doenças autoimu- nes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres (tais como o me- lanoma maligno e o câncer de próstata), doença metabólica, isquemia, cardiomiopatia, hipertensão e doença periodental.

[0031] Literatura de Não Patente 1 - JETTEN, "Retinoid-related or- phan receptors (RORs): critical roles in development, immunity, circadian rhythm, and cellular metabolism", Nucl. Recept. Signal., 7: e003 (2009).

[0032] Literatura de Não Patente 2 - KOENDERS, et al., "Potential new targets in artrite therapy: interleukin (IL)-17 and its relation to tu- mour necrosis factor and IL-1 in experimental artrite”, Ann. Rheum. Dis., 65: ili29-33 (2006).

[0033] Literatura de Não Patente 3 - SCHMIDT-WEBER, et al., "Th17 cells in the big picture of immunology", J. Alergia Clin. Immunol., 120: 247-54 (2007).

[0034] Literatura de Não Patente 4 - MEISSBURGER, et al., " Adi- pogenesis and insulina sensitivity in obesity are regulated by retinoid- related orphan receptor gamma", EMBO Mol. Med., 3: 637-51 (2011).

[0035] Literatura de Não Patente 5 - KELCHTERMANS et al., "Ef- fector mechanisms of interleukin-17 in collagen-induced artrite in the absence of interferon-y and counteraction by interferon-y", Arthritis

Res. Ther., 11(4): R122 (2009).

[0036] Literatura de Não Patente 6 - NAKAE, et al., "Suppression of Immune Induction of Collagen-Induced Arthritis in IL-17-Deficient Mice", J. Immunol., 171: 6173-6177 (2003).

[0037] Literatura de Não Patente 7 - HUEBER et al., "Effects of AIN457, a Fully Human Antibody to Interleukin-17A, on Psoriasis, Rheu- matoid Arthritis, and Uveitis", Sci. Transl. Med., 2(52): 52ra72 (2010).

[0038] Literatura de Não Patente 8 - SANFORD et al., "Secuki- numa lb: first global approval", Drugs, 75(3): 329-338 (2015).

[0039] Literatura de Não Patente 9 - LEPPKES, et al, "RORy- Expressing Th1i7 Cells Induce MurineChronic Intestinal Inflammation via Redundant Effects of IL-17A and IL-17F", Gastroenterology, 136(1): 257-267 (2009).

[0040] Literatura de Não Patente 10 - IVANOV et al., "The Orphan Nuclear Receptor RORyt Directs the Differentiation Program of Proin- flammatory IL-17+ T Helper Cells", Cell, 126(6): 1121-1133 (2006).

[0041] Literatura de Não Patente 11 - STEINMETZ et al., "The Th17-Defining Transcription Factor RORyt Promotes Glomerulonephri- tis", J. Am. Soc. Nephrol., 22(3): 472-483 (2011).

[0042] Literatura de Não Patente 12 - CRISPIN et al., "Interleukin- 17-producing T cells in lupus", Curr. Opin. Rheumatol., 22(5): 499-503 (2010).

[0043] Literatura de Não Patente 13 - BAETEN et al, "Anti- interleukin-17A monoclional antibody secukinumab in treatment of an- kylosing spondylitis: a randomised, double-blind, placebo-controlled trial", Lancet, 382(9906): 1705-1713 (2013).

[0044] Literatura de Não Patente 14 - EMAMAULLEE et al., "Inhibi- tion of Th17 Cells Regulates Autoimunes Diabetes in NOD Mice", Dia- betes, 58: 1302-1311 (2009).

[0045] Literatura de Não Patente 15 - TILLEY, et al., "Retinoid-

Related Orphan Receptor y Controls Immunoglobulin Production and Th1/Th2 Cytokine Balance in the Adaptive Immune Response to Aller- gen", J. Immunol., 178: 3208-3218 (2007).

[0046] Literatura de Não Patente 16 - U.S. NATIONAL INSTI- TUTES OF HEALTH, "The Effects of a Single Intravenous Administra- tion of Secukinumab (AIN457) or Canakinumab (ACZ885) in Dry Eye Patients", ClinicalTrials.gov information for Clinical Trials Identifier NCTO01250171 (December 4, 2012).

[0047] Literatura de Não Patente 17 - MI et al., "Blocking IL-17A Promotes the Resolution of Pulmonar Inflammation and Fibrosis Via TGF-B1-Dependent and -Independent Mechanisms", J. Immunol., 187: 3003-3014 (2011).

[0048] Literatura de Não Patente 18 - U.S. NATIONAL INSTI- TUTES OF HEALTH, "A Study of Efficacy and Safety of Ustekinumab in Patients With Primary Biliary Cirrhosis (PBC) Who Had an Inade- quate Response to Ursodeoxycholic Acid", ClinicalTrials.gov infor- mation for Clinical Trials Identifier NCTO1389973 (April 2, 2015).

[0049] Literatura de Não Patente 19 - FULTON et al., "Attenuation of Acute Graft-versus-Host Disease in the Absence of the Transcription Factor RORYt", J. Immunol., 189(4): 1765-1772 (2012).

[0050] Literatura de Não Patente 20 - Brian G Feagan et al., "In- duction therapy with the selective interleukin-23 inhibitor risankizumab in patients with moderate-to-severe Crohn's disease: a randomised, double-blind, placebo-controlled phase 2 study", The Lancet, 389 (10080): 1699-1709 (2017).

[0051] Literatura de Não Patente 21 - Eva Havrdova et al., "Activity of secukinumab, an anti-IL-17A antibody, on brain lesions in RRMS: results from a randomized, proof-of-concept study", J. Neurol., 263(7): 1287-1295 (2016).

[0052] Literatura de Não Patente 22 - U.S. NATIONAL INSTI-

TUTES OF HEALTH, "Study of Secukinumab in Patients With Newly- diagnosed Type 1 Diabetes Mellitus", Clinical Trials.gov information for Clinical Trials Identifier NCTO2044848.

[0053] Literatura de Não Patente 23 - U.S. NATIONAL INSTI- TUTES OF HEALTH, "Secukinumab for Treatment of Atopic Dermati- tis", Clinical Trials.gov information for Clinical Trials Identifier NCTO02594098.

[0054] Literatura de Não Patente 24 - U.S. NATIONAL INSTI- TUTES OF HEALTH, "Efficacy and Safety of Bl 655066/ABBV-066 (Risankizumab) in Patients With Severe Persistent Asthma", Clinical- Trials.gov information for Clinical Trials Identifier NCTO2443298.

[0055] Literatura de Não Patente 25 - U.S. NATIONAL INSTI- TUTES OF HEALTH, "A Study of Secukinumab for the Treatment of Alopecia Areata", Clinical Trials.gov information for Clinical Trials Iden- tifier NCOTO02599129.

[0056] Literatura de Não Patente 26 - U.S. NATIONAL INSTI- TUTES OF HEALTH, "An Open-Label, Proof-of-Concept Study of Ixekizumab in the Treatment of Pyoderma Gangrenosum", Clinical Tri- als.gov information for Clinical Trials Identifier NCTO3137160.

[0057] Literatura de Não Patente 27 - US. NATIONAL INSTI- TUTES OF HEALTH, "Single-arm Study to Assess a Potential Effect of Anti-IL-17 (Secukinumab) in the Treatment of Pyoderma Gangreno- sum", Clinical Trials.gov information for Clinical Trials Identifier NCTO02733094.

[0058] Literatura de Não Patente 28 - A. David Rodrigues et al., "Oxidative Metabolism of Clarithromycin in the Presence of Human Liver Microsomes", Drug Metabolism and Disposition, 25(5): 623-630 (1997).

[0059] Literatura de Não Patente 29 - Yukiko Sugaya et al., "De- velopment of Solubility Screening Methods in Drug Discovery", YAKU- GAKU ZASSHI, 122(3): 237-246 (2002).

[0060] Literatura de Não Patente 30 - Margareth Marques, "Disso- lution Media Simulating Fasted and Fed States", Dissolution Technolo- gies, 11(2): 16 (2004).

[0061] Literatura de Não Patente 31 - Miller SD et al., "Experi- mental autoimmune encephalomyelitis in the mouse.", Current Proto- cols in Immunology, Chapter 15: Unit 15,1. (2010)

[0062] Literatura de Não Patente 32 - Fauber BP et al., "Discovery of 1-f4-[3-fluoro-4-((3s,6r)-3-metil-1,1-dioxo-6-fenil-[1,2]thiazinan-2- ylmethyl)-fenil]-piperazin-1-il)-etanone (GNE-3500): a potent, selective, and orally bioavailable retinoic acid receptor-related orphan receptor C (RORc or RORy) inverse agonist.", J. Med. Chem., 58(13): 5308-22 (2015)

[0063] Literatura de Não Patente 33 - Q Zhang et al., "Targeting Th17-IL-17 Pathway in Prevention of Microinvasive Prostate Cancer in a Mouse Model", Prostate, 77(8): 888-899 (2017).

[0064] Literatura de Não Patente 34 - W Shi et al., "Anti-IL-17 Anti- body Improves Hepatic Steatosis by Suppressing Interleukin-17- Related Fatty Acid Synthesis and Metabolism", Clin. Dev. Immunol., Volume 2013, Article ID 253046 (2013).

[0065] Literatura de Não Patente 35 - R Xu et al., "Neutralization of interleukin-17 attenuates high fat diet-induced non-alcoholic fatty liver disease in mice", Acta Biochim. Biophys. Sin. (Shanghai), 45(9): 726- 733 (2013).

[0066] Literatura de Não Patente 36 - Y.H. Lial et al., "Interleukin- 17A Contributes to Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury by Regulat- ing Cardiomyocyte Apoptose and Neutrophil Infiltration", J. Am. Coll. Cardiol. 59(4): 420-429 (2012).

[0067] Literatura de Não Patente 37 - M.A. Saleh et al., "Inhibition of Interleukin 17-A but not Interleukin-17F Signaling Lowers Blood Pressure and Reduces End-organ Inflammation in Angiotensin |l-

induced Hypertension", JACC Basic Transl. Sci. 1(7): 606-616 (2016).

[0068] Literatura de Não Patente 38 - N. Dutzan et al., "A dysbiotic microbiome triggers TH17 cells to mediate oral mucosal immunopatholo- gy in mice and humans", Sci. Transl. Med. 10(463): eaato797 (2018).

[0069] Literatura de Não Patente 39 - R Speeckaert et al., "The many faces of interleukin-17 in inflammatory skin diseases", Br. J. Dermatol. 175(5): 892-901 (2016).

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

[0070] A presente invenção apresenta os compostos de 4-metil di- hidropirimidinona ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, que têm a atividade antagonista de RORy, as composições farmacêu- ticas que compreendem o mesmo e seu uso médico. Um aspecto da presente invenção inclui as modalidades ilustrativas a seguir. ltem 1

[0071] Um composto de acordo com a fórmula (1) ou (2): CH; CH; re Pr Ss PI Ss a ha, neo a Va “eo HaãC N He e N CHs Po CH, yo o o O) (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. ltem 2

[0072] Composto de acordo com o Item 1, em que o composto é um composto de acordo com a fórmula (1): CH; HE, CH H5e De É o Cc ” E H;3C. e N CH; Po o (1) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Item 3

[0073] Composto de acordo com o Item 1, em que o composto é um composto de acordo com a fórmula (2):

CH PXof Cc Ex HaC N o (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. ltem 4

[0074] Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com qualquer um dos Itens 1 a 3 ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável. ltem 5

[0075] Antagonista de RORy que compreende um composto de acordo com qualquer um dos itens 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Item 6

[0076] Agente terapêutico ou preventivo para uma doença selecio- nada de um grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doenças metabólicas, isque- mia, cardiomiopatia, hipertensão e doença periodental, que compreen- de um composto de acordo com qualquer um dos ltens 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Item 7

[0077] Método para antagonizar RORy, o qual compreende a ad- ministração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um com- posto de acordo com qualquer um dos Itens 1 a 3 ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo a um mamífero.

Item 8

[0078] Um método para o tratamento ou a prevenção de uma do- ença selecionada do grupo que consiste em doenças autoimunes, do- enças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doença metabólicas, is- quemia, cardiomiopatia, hipertensão e doença periodental, que com- preende administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com qualquer um dos ltens 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um mamífero. ltem9

[0079] Uso de um composto de acordo com qualquer um dos ltens 1 a 3 ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabrica- ção de um antagonista de ROR y. lttem 10

[0080] Uso de um composto de acordo com qualquer um dos ltens 1 a 3 ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabrica- ção de um agente terapêutico ou preventivo para uma doença selecio- nada do grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgi- cas, olho seco, fibrose, cânceres, doença metabólicas, isquemia, car- diomiopatia, hipertensão e doença periodental. lttem 11

[0081] Composto de acordo com qualquer um dos ltens 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em um anta- gonista de RORy. Item 12

[0082] Composto de acordo com qualquer um dos ltens 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento ou na prevenção de uma doença selecionada do grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânce- res, doença metabólicas, isquemia, cardiomiopatia, hipertensão e do- ença periodental.

Item 13

[0083] Embalagem comercial que compreende uma composição farmacêutica de acordo com o item 4 e um folheto informativo a respei- to da composição farmacêutica que descreve que a composição far- macêutica pode ser usada para tratamento ou prevenção de uma do- ença selecionada de um grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doença metabólicas, isquemia, cardiomiopatia, hipertensão e doença periodental. ltem 14

[0084] Kit que compreende uma composição farmacêutica de acordo com o Item 4 e um folheto informativo a respeito da composi- ção farmacêutica que descreve que a composição farmacêutica pode ser usada para tratamento ou prevenção de uma doença selecionada de um grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doença metabólicas, isquemia, cardiomi- opatia, hipertensão e doença periodental. ltem 15

[0085] Forma Cristalina de um composto de acordo com a fórmula (1):

CH Po Gs Cc Le H3C e. N CH; Pos o (1) que mostra um padrão de difração de raios X em pó que tem quais- quer dentre três ou mais picos selecionados do grupo que consiste em 7,4 + 0,2º, 9,9 + 0,2º, 10,5 + 0,2º, 11,4 + 0,2º, 11,6 + 0,2º, 13,4 + 0,2º, 14,2 + 0,2º, 17,4 + 0,2º, 18,3 + 0,2º, 18,7 + 0,2º e 19,4 + 0,2º do ângu- lo de difração (28) medido com radiação CuKa.

Item 16

[0086] Monoidrato de um composto de acordo com a fórmula (1):

CH Po Gs Cc e. H3C e. N CH; Pos o (1) . Item 17

[0087] Forma Cristalina de um monoidrato de um composto de acordo com a fórmula (1):

CH Po Gs Cc e. H3C e. N CH; Pos o (1) que mostra um padrão de difração de raios X em pó que tem quais- quer dentre três ou mais picos selecionados do grupo que consiste em 4,2 + 0,2º, 9,7 + 0,2º, 13,7 + 0,2º, 14,0 + 0,2º, 15,2 + 0,2º, 15,4 + 0,2º, 16,9 + 0,2º, 18,8 + 0,2º, 20,5 + 0,2º, 21,9 + 0,2º e 22,4 + 0,2º do ângu- lo de difração (28) medido com radiação CuKa.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0088] A Figura 1 mostra um padrão de difração de raios X em pó da Forma Cristalina A. o eixo vertical mostra a intensidade da difração (cps: contagens por segundo), e o eixo horizontal mostra o ângulo de difração 286 (º).

[0089] A Figura 2 mostra uma curva da calorimetria de varredura diferencial (DSC) da Forma Cristalina A. o eixo vertical mostra o fluxo de calor (watt por grama), e o eixo horizontal mostra a temperatura (ºC).

[0090] A Figura 3 mostra um padrão de difração de raios X em pó da Forma Cristalina B. O eixo vertical mostra a intensidade da difração (cps: contagens por segundo), e o eixo horizontal mostra o ângulo de difração 286 (º).

[0091] A Figura 4 mostra uma curva de DSC da Forma Cristalina B. O eixo vertical mostra o fluxo de calor (watt por grama), e o eixo ho- rizontal mostra a temperatura (ºC).

[0092] A Figura 5 mostra um padrão de difração de raios X em pó da Forma Cristalina C. O eixo vertical mostra a intensidade da difração (cps: contagens por segundo), e o eixo horizontal mostra o ângulo de difração 286 (º).

[0093] A Figura 6 mostra uma curva de DSC da Forma Cristalina C. O eixo vertical mostra o fluxo de calor (watt por grama), e o eixo ho- rizontal mostra a temperatura (ºC).

[0094] A Figura 7 mostra um padrão de difração de raios X em pó da Forma Cristalina D. O eixo vertical mostra a intensidade da difração (cps: contagens por segundo), e o eixo horizontal mostra o ângulo de difração 286 (º).

[0095] A Figura 8 mostra uma curva TG-DTA da Forma Cristalina D. A parte superior do eixo vertical mostra o peso (grama), a parte in- ferior do eixo vertical mostra a temperatura (ºC) e o eixo horizontal mostra a temperatura (ºC).

[0096] A Figura 9 mostra uma curva de DSC da Forma Cristalina D. O eixo vertical mostra o fluxo de calor (watt por grama), e o eixo ho- rizontal mostra a temperatura (ºC).

[0097] A Figura 10 mostra um padrão de difração de raios X em pó da Forma Cristalina E. O eixo vertical mostra a intensidade da difração (cps: contagens por segundo), e o eixo horizontal mostra o ângulo de difração 286 (º).

[0098] A Figura 11 mostra uma curva TG-DTA da Forma Cristalina

E. A parte superior do eixo vertical mostra o peso (grama), a parte infe- rior do eixo vertical mostra a temperatura (ºC) e o eixo horizontal mos- tra a temperatura (ºC).

[0099] A Figura 12 mostra uma curva de DSC da Forma Cristalina E. O eixo vertical mostra o fluxo de calor (watt por grama), e o eixo ho- rizontal mostra a temperatura (ºC).

DESCRIÇÃO DAS MODALIDADES

[00100] As definições dos termos usados no presente documento são mostradas tal como segue.

[00101] "Um composto de fórmula (1)" e "um composto de fórmula (2)" também são indicados opcionalmente como "Composto (1)" e "Composto (2)", respectivamente. "Composto (1) ou Composto (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo" significa o Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável do Composto (1) ou do Composto (2), e destina-se a incluir qualquer um dos sais farmaceuticamente aceitáveis do Composto (1) e os sais far- maceuticamente aceitáveis do Composto (2).

[00102] O termo "sal farmaceuticamente aceitável" pode ser quais- quer sais sem toxicidade adicional conhecidos no estado da técnica. Especificamente, ele inclui, por exemplo, os sais com ácidos inorgâni- COS, Os sais com ácidos orgânicos, os sais com bases inorgânicas e os sais com bases orgânicas. Várias formas de sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidas no estado da técnica e listadas, por exemplo, nas referências a seguir: (a) Berge et al., J. Pharm. Sci., 66, p1-19 (1977); (b) Stahl et al., "Handbook of Pharmaceutical Salts: Prop- erties, Selection, and Use" (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002); (c) Paulekuhn et al., J. Med. Chem., 50, p6665-6672 (2007).

[00103] De acordo com os métodos conhecidos, o Composto (1) ou o Composto (2) pode reagir com um ácido inorgânico, um ácido orgâ- nico, uma base inorgânica ou uma base orgânica para dar cada sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00104] Tais sais com ácidos inorgânicos incluem, por exemplo, os sais com ácido fluorídrico, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido io- dídrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e ácido sulfúrico. Os sais preferí- veis incluem os sais com ácido clorídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico e ácido bromídrico.

[00105] Tais sais com ácidos orgânicos incluem, por exemplo, os sais com ácido acético, ácido adípico, ácido algínico, ácido 4-ami- nosalicílico, ácido anidro metileno cítrico, ácido benzoico, ácido ben- zeno sulfônico, ácido canfórico, ácido canfor-10-sulfônico, ácido car- bônico, ácido cítrico, ácido edético, ácido etano-1,2-dissulfônico, ácido dodecil sulfônico, ácido etano sulfônico, ácido fumárico, ácido gluco- heptônico, ácido glucônico, ácido glicurônico, ácido gluco-heptônico, ácido glicolil sarnílico, ácido hidróxi naftoico, ácido 2-hidróxi-1-etano sulfônico, ácido láctico, ácido lactobiônico, ácido málico, ácido maleico, ácido mandélico, ácido metano sulfônico, ácido metil sulfúrico, ácido metil nítrico, ácido metilenobis(salicílico), ácido galactárico, ácido naf- taleno-2-sulfônico, ácido 2-naftoico, ácido 1,5-naftaleno dissulfônico, ácido oleico, ácido oxálico, ácido pamoico, ácido pantotênico, ácido péctico, ácido pícrico, ácido propiônico, ácido poligalacturônico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido succínico, ácido tânico, ácido tartárico, ácido teoclicólico, ácido tiociânico, ácido trifluoroacético, ácido p-tolu- eno sulfônico, ácido undecanoico, ácido asparagínico e ácido glutâmi- co. Os sais preferíveis incluem os sais com ácido oxálico, ácido malei- co, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido málico, ácido suc- cínico, ácido tartárico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido ben- zoico, ácido glicurônico, ácido oleico, ácido pamoico, ácido metano sulfônico, ácido benzeno sulfônico, ácido p-tolueno sulfônico e ácido 2-

hidroxi-1-etano sulfônico.

[00106] Tais sais com bases inorgânicas incluem, por exemplo, os sais com lítio, sódio, potássio, magnésio, cálcio, bário, alumínio, zinco, bismuto e amônio. Os sais preferíveis incluem os sais com sódio, po- tássio, cálcio, magnésio e zinco.

[00107] Tais sais com bases orgânicas incluem, por exemplo, os sais com arecolina, betaína, colina, clemizol, etileno diamina, N-metil glucamina, N-benzil fenotil amina, tris(hidroximetil)]metilamina, arginina e lisina. Os sais preferíveis incluem os sais com tris(hidroximetil)me- tilamina, N-metil glucamina e lisina.

[00108] O Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo podem existir na forma de solvato.

[00109] O termo "solvato" significa o Composto (1) ou Composto (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos coordenado com uma molécula solvente e inclui um hidrato. Tal solvato é de preferência um solvato farmaceuticamente aceitável e inclui hidratos, etanolatos e solvatos com o sulfóxido de dimetila do Composto (1) ou do Composto (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00110] Especificamente, tal solvato inclui um hemi-hidrato, um mo- noidrato, um di-hidrato ou um monoetanolato do Composto (1) ou do Composto (2) ou um monoidrato de um sal de cloridreto ou um 2/3 etanolato de um sal de dicloridreto do Composto (1) ou do Composto (2). Um solvato preferível inclui um monoidrato do Composto (1). Tal solvato pode ser obtido de acordo com os métodos conhecidos.

[00111] O Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuti- camente aceitável dos mesmos podem ser etiquetados com um átomo de isótopo tal como 2H, 3H, 14Ce35S.

[00112] Por exemplo, quaisquer átomos de hidrogênio do Composto (1) ou do Composto (2) incluem o prótio *H (H), o deutério PH (D) e o trítio ?*H (T).

[00113] O Composto (1) ou o Composto (2), ou um sal farmaceuti- camente aceitável dos mesmos, são de preferência o Composto (1) ou o Composto (2), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, substancialmente purificados. O mais preferível é o Composto (1) ou o Composto (2), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, que tem 80% ou mais de pureza.

[00114] Uma forma cristalina preferível do Composto (1) ou do Composto (2), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, incluem uma forma cristalina do Composto (1) que mostra um padrão de difração de raios X em pó que tem pelo menos 3 picos, por exem- plo, pelo menos 3, 4 ou 5 picos, em qualquer um dentre 7,4 + 0,2º, 9,9 + 0,2º, 10,5 + 0,2º, 11,4 + 0,2º, 11,6 + 0,2º, 13,4 + 0,2º, 14,2 + 0,2º, 17,4 + 0,2º, 18,3 + 0,2º, 18,7 + 0,2º ou 19,4 + 0,2º do ângulo de difra- ção (28) medido com a radiação CuKa. Uma forma cristalina mais pre- ferível do Composto (1) pode mostrar um padrão de difração de raios X em pó que tem picos a 7,4 + 0,2º, 9,9 + 0,2º e 13,4 + 0,2º de 20. Uma forma cristalina ainda mais preferível do Composto (1) pode mos- trar um padrão de difração de raios X em pó que tem picos a + 7,4 + 0,2º, 9,9 + 0,2º, 13,4 + 0,2º, 18,7 + 0,2º e 19,4 + 0,2º de 20.

[00115] Outra forma cristalina preferível do Composto (1) ou do Composto (2), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, incluem uma forma cristalina de um monoidrato do Composto (1) que mostra um padrão de difração de raios X em pó que tem pelo menos 3 picos, por exemplo, pelo menos 3, 4 ou 5 picos, em qualquer um den- tre 4,2 + 0,2º, 9,7 + 0,2º, 13,7 + 0,2º, 14,0 + 0,2º, 15,2 + 0,2º, 15,4 + 0,2º, 16,9 + 0,2º, 18,8 + 0,2º, 20,5 + 0,2º, 21,9 + 0,2º ou 22,4 + 0,2º do ângulo de difração (28) medido com a radiação CuKa. Uma forma cris- talina mais preferível de um monoidrato do Composto (1) pode mostrar um padrão de difração de raios X em pó que tem picos a 4,2 + 0,2º, 9,7 + 0,2º e 16,9 + 0,2º de 20. Uma forma cristalina ainda mais preferí-

vel de um monoidrato do Composto (1) pode mostrar um padrão de difração de raios X em pó que tem picos a 4,2 + 0,2º, 9,7 + 0,2º, 13,7 + 0,2º, 15,2 + 0,2º e 16,9 + 0,2º de 20.

[00116] A faixa de erro do ângulo de difração (28) em um padrão de difração de raios X em pó é de preferência de + 0,2º, com mais prefe- rência de + 0,1º, e ainda com mais preferência de + 0,05º.

[00117] De acordo com os métodos conhecidos no estado da técni- ca das formulações farmacêuticas, a composição farmacêutica do pre- sente documento pode ser preparada, por exemplo, pela mistura do Composto (1) ou do Composto (2) ou de um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos com pelo menos um ou mais veículo(s) farma- ceuticamente aceitável em uma quantidade apropriada. O teor (tam- bém indicado no presente documento como "uma quantidade terapeu- ticamente eficaz") do Composto (1) ou do Composto (2) ou de um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos na composição farmacêuti- ca varia, dependendo das formas de dosagem e das doses e é, por exemplo, de 0,1 a 100% em peso da composição.

[00118] Uma forma de dosagem do Composto (1) ou do Composto (2) ou de um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos inclui uma preparação oral, tal como comprimidos, cápsulas, grânulos, pós, drá- geas, xaropes, emulsões e suspensões, e uma preparação parenteral, tal como preparações externas, supositórios, injeções, colírios, prepa- rações nasais e preparações pulmonares.

[00119] O termo "veículo farmaceuticamente aceitável" inclui várias substâncias de veículo orgânicas ou inorgânicas convencionais para os materiais da formulação, tais como excipientes, desintegradores, aglutinantes, fluidificantes e lubrificantes nas formulações sólidas; sol- ventes, agentes de solubilização, agentes de suspensão, agentes de tonicidade, tampões e agentes suavizantes nas formulação líquidas; e bases, agentes emulsificantes, agentes umectantes, estabilizantes,

agentes estabilizantes, dispersantes, plastificantes, reguladores de pH, promotores de absorção, agentes de gelificação, conservantes, car- gas, solubilizantes, agentes de solubilização e agentes de suspensão nas formulações semissólidas. Um agente conservante, um agente antioxidante, um corante ou um agente edulcorante também podem ser usados opcionalmente como um aditivo.

[00120] Tal "excipiente" inclui, por exemplo, a lactose, o açúcar branco suave, o D-manitol, o D-sorbitol, o amido de milho, a dextrina, a celulose microcristalina, a celulose cristalina, a carmelose, a carmelo- se cálcica, o carbóxi metil amido sódico, a hidróxi propil celulose baixa substituída e a goma arábica.

[00121] Tal "desintegrante" inclui, por exemplo, a carmelose, a car- melose cálcica, a carmelose sódica, o carbóxi metil amido sódico, a croscarmelose sódica, a crospovidona, a hidróxi propil celulose baixa substituída, o hidróxi propil metil celulose e a celulose cristalina.

[00122] Tal "aglutinante" inclui, por exemplo, a hidróxi propil celulo- se, a hidróxi propil metil celulose, a povidona, a celulose cristalina, o açúcar branco suave, a dextrina, o amido, a gelatina, a carmelose só- dica e a goma arábica.

[00123] Tal "fluidificante" inclui, por exemplo, o ácido silícico anidro suave e o estearato de magnésio.

[00124] Tal "lubrificante" inclui, por exemplo, o estearato de magné- sio, o estearato de cálcio e o talco.

[00125] Tal "solvente" inclui, por exemplo, a água purificada, o eta- nol, o propilenoglicol, o macrogol, o óleo de gergelim, o óleo de milho e o azeite de oliva.

[00126] Tal "agente solubilizante" inclui, por exemplo, o propileno- glicol, o D-manitol, o benzoato de benzila, o etanol, a trietanolamina, o carbonato de sódio e o citrato de sódio.

[00127] Tal"agente de suspensão" inclui, por exemplo, o cloreto de benzalcônio, a carmelose, a hidróxi propil celulose, o propileno glicol, a povidona, a metil celulose e o monoestearato de glicerila.

[00128] Tal "agente de tonicidade" inclui, por exemplo, a glicose, o D-sorbitol, o cloreto de sódio e o D-manitol.

[00129] Tal "tampão" inclui, por exemplo, o fosfato de sódio hidro- genado, o acetato de sódio, o carbonato de sódio e o citrato de sódio.

[00130] Tal "agente suavizante" inclui, por exemplo, o álcool benzí- lico.

[00131] Tal "base" inclui, por exemplo, a água, os óleos animais ou vegetais, tais como o azeite de oliva, o óleo de milho, o óleo de amen- doim, o óleo de gergelim e o óleo de rícino, álcoois inferiores tais como o etanol, o propanol, o propileno glicol, o 1,3-butileno glicol e o fenol, ácidos graxos superiores e ésteres dos mesmos, ceras, álcoois supe- riores, poliálcoois, hidrocarbonetos, tais como petrolato branco, parafi- na líquida e parafina, petrolato hidrofílico, lanolina purificada, pomada absorvente, lanolina hidratada, pomada hidrofílica, amido, pululano, goma arábica, goma tragacanto, gelatina, dextrano, derivados da celu- lose, tais como a metil celulose, a carbóxi metil celulose, a hidróxi etil celulose e a hidróxi propil celulose, polímeros sintéticos, tais como po- límeros de carbóxi vinila, polacrilato de sódio, álcool polivinílico e poli- vinil pirrolidona, propileno glicol, macrogol, tal como macrogol 200 a , e uma combinação de qualquer um dentre dois ou mais dos 600 bi d | dentre d d mesmos.

[00132] Tal"agente conservante" inclui, por exemplo, o para-hidróxi benzoato de etila, o clorobutanol, o álcool benzílico, o deidroacetato de sódio e o ácido sórbico.

[00133] Tal "agente antioxidante" inclui, por exemplo, o sulfito de sódio e o ácido ascórbico.

[00134] Tal "corante" inclui, por exemplo, um corante alimentar, tal como o corante Food Red nº 2 e nº 3, e o corante Food Yellow nº 4 e nº 5, e o B-caroteno.

[00135] Tal"agente edulcorante" inclui, por exemplo, a sacarina só- dica, o glicotirrizato dipotássico e o aspartame.

[00136] A composição farmacêutica do presente documento pode ser administrada oral ou parenteralmente, bem como localmente, re- talmente, intravenosalmente, intramuscularmente e subcutaneamente aos mamíferos, com exceção do ser humano, tal como camundongos, ratos, hamsters, porquinhos-da-índia, coelhos, gatos, cães, porcos, gado, cavalos, carneiros e macacos, assim como no ser humano. À dose pode variar, dependendo de quais indivíduos ela será adminis- trada, das doenças, dos sintomas, das formas de dosagem, das rotas de administração, etc. Por exemplo, na administração oral a um paci- ente adulto, a dose do Composto (1) ou do Composto (2), o ingredien- te ativo, variam geralmente de cerca de 0,01 mg a cerca de 1 g por dia, e podem ser administrados uma vez ou várias vezes em uma quantidade dividida.

[00137] Também é útils um kit, tais como kits para administração, tratamento e/ou prevenção, uma embalagem, tal como produtos emba- lados, e um conjunto e/ou uma caixa de medicamentos que consiste em uma composição farmacêutica que compreende o Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos como o ingrediente ativo ou o agente ativo e um material escrito a res- peito da composição, que indica que a composição pode ou deve ser usada para tratamento e/ou prevenção. Tais kits, embalagens e con- juntos de medicamentos podem compreender um ou mais recipientes preenchidos com a composição farmacêutica ou um ou mais ingredi- entes ativos e outros fármacos ou medicamentos (ou ingredientes) usados na composição. Os exemplos de tais kits, embalagens e con- juntos de medicamentos incluem kits comerciais, embalagens comer- ciais e os conjuntos de medicamentos comerciais para uso apropriado no tratamento e/ou na prevenção das doenças consideradas. O mate- rial escrito compreendido em tais kits, embalagens e conjuntos de me- dicamentos inclui uma nota de advertência ou um folheto informativo na forma designada pela organização governamental que regula a fa- bricação, o uso ou as vendas de produtos farmacêuticos ou biológicos, que garante a aprovação, pela organização governamental, da fabri- cação, do uso ou das vendas dos produtos a respeito da administra- ção aos seres humanos. O kit, a embalagem e o conjunto de medica- mento podem incluir produtos embalados, bem como estruturas confi- guradas para etapas de administração apropriadas e configuradas pa- ra poder para obter o tratamento médico e/ou a prevenção mais prefe- ríveis, incluindo o tratamento e/ou a prevenção das doenças conside- radas.

[00138] O Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuti- camente aceitável dos mesmos têm o antagonismo de RORy e são úteis para um antagonista de RORy.

[00139] Os termos "que tem a atividade antagonista de RORY", "que tem o antagonismo de RORy" ou "antagonismo de RORy" signifi- cam que a função de RORy é antagonizada, de preferência especifi- camente antagonizada, para acabar ou reduzir sua atividade, e inclui, por exemplo, a antagonismo, de preferência especificamente o anta- gonismo da função de RORy de acordo com as condições descritas no Exemplo de Teste 1 abaixo.

[00140] O termo "antagonista de RORy" significa quaisquer subs- tâncias que antagonizam a função de RORy, de preferência quaisquer substâncias que antagonizem especificamente a função de RORy.

[00141] Otermo"RORy" é de preferência um "RORy humano".

[00142] O Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuti- camente aceitável dos mesmos têm o antagonismo de RORy, e se es- pera que eles sejam eficazes contra as doenças que envolvem a fun-

ção de RORy.

[00143] Especificamente, é esperado que o Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos se- jam úteis para o tratamento ou a prevenção de uma doença seleciona- da do grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doenças metabólicas, isquemia, cardio- miopatia, hipertensão e doença periodental.

[00144] O termo "doenças autoimunes" significa um nome genérico das doenças em que o sistema imune de um indivíduo tem uma rea- ção exagerada e ataca as células e os tecidos normais causando os sintomas, e inclui, especificamente, a artrite reumatoide, a psoríase, as doenças inflamatórias dos intestinos, tais como a doença de Crohn e a colite ulcerativa, a esclerose múltipla, o lúpus eritematoso sistêmico (SLE), a doença de Behcet, a sarcoidose, a doença de Harada, a es- pondilite anquilosante, a uveíte, a polimialgia reumática, a diabetes tipo |, a doença do enxerto contra o hospedeiro, a alopecia areata e o vitiligo.

[00145] O termo "doenças alérgicas" refere-se às doenças deriva- das da condição em que uma reação imune ocorre excessivamente contra um determinado antígeno e inclui, especificamente, a dermatite atópica, a rinite alérgica, tal como a alergia a pólen, a conjuntivite alér- gica, a gastroenterite alérgica, a asma, tal como a asma brônquica e a asma infantil, a alergia a alimentos, a alergia a medicação e as urticá- rias.

[00146] O termo "fibrose" significa uma condição com os tecidos fibroconectivos aumentados, e inclui, especificamente, a fibrose de pulmão e a cirrose biliar primária.

[00147] O termo "cânceres" inclui, especificamente, o melanoma maligno e o câncer de próstata.

[00148] O termo "doença metabólica" significa uma doença causa-

da pela anormalidade do turnover metabólico ou uma doença que in- clui a anormalidade metabólica como um elemento que constitui a pa- togênese e inclui, por exemplo, a diabetes, tal como a diabetes tipo | e a diabetes tipo |l, a esteatose hepática e a doença hepática gordurosa não alcoólica.

[00149] O termo "tratamento", utilizado no presente documento, também inclui a melhora dos sintomas, impedindo que eles se tornem muito graves, mantendo a remissão, evitando a exacerbação e impe- dindo a recaída.

[00150] O termo "que evita", utilizado no presente documento, signi- fica a supressão da patogênese dos sintomas.

[00151] O Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuti- camente aceitável dos mesmos têm as propriedades indicadas a se- guir: (i) alta estabilidade metabólica, no que se refere ao Exem- plo de Teste 2; (ii) perfil farmacocinético benéfico, incluindo uma meia-vida plasmática favorável, no que se refere ao Exemplo de Teste 5; (iii) baixa potência para induzir enzimas metabólicas do fármaco, tais como CYP3A4A, no que se refere ao Exemplo de Teste 3; (iv) solubilidade favoravelmente alta, no que se refere ao Exemplo de Teste 4; e (v) efeito farmacológico sustentado e/ou potente, no que se refere aos Exemplos de Teste 6 e 7.

[00152] Essas propriedades tornam o Composto (1) ou o Composto (2), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, particular- mente vantajosos. Por exemplo, o Composto (1) ou o Composto (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos: (i) exibem efeitos farmacológicos sustentados que podem permitir uma frequência de dosagem mais baixa ou intervalos de do-

sagem mais longos, o que pode impactar favoravelmente na obser- vância do paciente e, desse modo, melhorar o resultado terapêutico total; (ii) exibem uma baixa indução de enzimas metabólicas do fármaco, tais como CYP3AA4, o que pode resultar em um metabolismo diminuído dos fármacos concomitantes metabolizados por tais enzi- mas, e desse modo o presente composto pode ser mais apropriado para os pacientes que utilizam simultaneamente múltiplos fármacos terapêuticos; e (iii) podem apresentar uma biodisponibilidade oral favorável com base na alta solubilidade e, desse modo, podem expressar o au- mento dependente da dose na concentração de plasma mesmo em uma quantidade alta de dosagem e/ou exibir pequena variabilidade individual no processo de absorção.

[00153] Embora uma modalidade descrita no presente documento seja compatível com outra modalidade descrita em uma outra parte da descrição, quaisquer duas ou mais combinações dessas modalidades também são consideradas como incluídas na invenção.

[00154] Um método de preparação do Composto (1) ou do Com- posto (2) ou de um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos é ilustrado nos Exemplos abaixo. Um método de preparação do Com- posto (1) ou do Composto (2) ou de um sal farmaceuticamente aceitá- vel dos mesmos não é considerado como sendo limitado ao mesmo.

[00155] Cada composto obtido em cada etapa pode ser isolado e/ou purificado pelos métodos conhecidos, tais como por destilação, recristalização e cromatografia de coluna, se necessário, mas cada reação pode opcionalmente prosseguir para uma etapa sequencial sem isolamento e/ou purificação.

[00156] À temperatura ambiente no presente documento significa uma temperatura sob nenhum controle, e inclui de 1ºC a 40ºC como uma modalidade.

EXEMPLOS

[00157] Os espectros *H-RMN foram medidos com tetrametil silano como um padrão interno em CDClI3 ou DMSO-ds e todos os valores à são mostrados em ppm. Os símbolos nos dados espectrais significam tal como a seguir.

[00158] s:singleto

[00159] d:dupleto

[00160] ttripleto

[00161] q: quarteto

[00162] dd: dupleto duplo

[00163] —ddd:dupleto duplo duplo

[00164] brs: singleto amplo

[00165] m:multipleto

[00166] J:constantede acoplamento Exemplo 1 Síntese de ácido 3-((S)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-ciclopropil)-3-cloro-fe- nil]-S-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-ilXbiciclo [1.1.1 pentano-1-carboxílico Etapa 1 1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-et-(E)-iliden]--amida de ácido (S)-2-metil-pro- pano-2-sulfínico Br. Br Hs CH dA .eH TAI DO não ee A erAP o CHs

[00167] 1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-etanona (60,0 g) e amida de ácido (S)-(-)-2-metil-propano-2-sulfínico (37,3 g) foram misturadas em éter ciclopentilmetílico (257 ml). À solução de reação foi adicionado ortoti- tanato de tetraetila (70,3 g), e a solução de reação foi agitada a 100ºC por 5 horas. À solução de reação foram adicionados 40% em pe- so/volume da solução aquosa de lactato de amônio (308 ml) à tempe-

ratura ambiente, e a mistura foi extraída com acetato de etila. A cama- da orgânica resultante foi lavada com água e salmoura, e então seca- da sobre sulfato de magnésio. O sulfato de magnésio foi removido através de um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado pela cromatogra- fia de coluna com gel de sílica (acetato de etila:n-hexano = 1:4 -> 2:3). O resíduo resultante foi solidificado com n-hexano/éter dietílico e o só- lido precipitado foi filtrado para obter o composto do título (70,6 9).

[00168] H-RMN (400 MHz, CDCI3) 1,30 (s, 9H), 2,72 (s, 3H), 7,58 (dd, J = 8,55, 2,08 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,55 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 2,08 Hz, 1H). Etapa 2 Éster metílico de ácido de (R)-3-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-isopropil-3- ((S)-2-metil-propano-2-sulfinilamino)butírico ta La eU AR O A er KUN CHs o nes PO CH;3 “en;

[00169] —Di-isopropilamina (124 ml) foi misturada em tetra-hidro- furano (89,1 ml) sob argônio. À solução de reação foi adicionada em gotas uma solução 2,66M de n-butil lítio/n-hexano (33,5 ml) a -78ºC, e a solução de reação foi agitada por 5 minutos sob resfriamento com gelo. À solução de reação foi adicionada em gotas uma solução mista de éster metílico de ácido 3-metil-butírico (11,7 ml) em tetra-hidro- furano (44,5 ml), e a solução de reação foi agitada a -78ºC por 1 hora. À solução de reação foi adicionada em gotas uma solução mista de ácido (S)-2-metil-propano-2-sulfínico e [1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-et- (E)-ilideno]-amida (15,0 g) em tetra-hidrofurano (44,5 ml), e a solução de reação foi agitada por 2 horas. À solução de reação foi adicionada uma solução mista de ácido acético (5,1 ml) em tetra-hidrofurano (25,4 ml), e a mistura foi agitada sob temperatura ambiente. À solução de reação foi adicionado IM de solução aquosa de citrato monossódico (100 ml), e as camadas foram separadas. A camada orgânica resultan- te foi lavada com água (100 ml, duas vezes). As camadas aquosas combinadas foram extraídas com acetato de etila (100 ml, duas ve- zes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com IM de solução aquosa de citrato monossódico (100 ml), água (100 ml, duas vezes) e salmoura, e então secada com sulfato do magnésio. O sulfato de magnésio foi removido através de um filtro, e o material filtrado foi então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi puri- ficado pela cromatografia de coluna com gel de sílica (acetato de eti- la:n-hexano = 1:4 -> 3:2) para obter o composto do título (18,0 g).

[00170] H-RMN (400 MHz, CDCI3) 0,76 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 0,93 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 0,95 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 1,00 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 1,26 (s, 5,4H), 1,34 (s, 3,6H), 1,74-1,81 (m, 0,4H), 1,87 (s, 1,2H), 1,88 (s, 1,8H), 2,04-2,13 (m, 0,6H), 2,46 (d, J = 3,93 Hz, 0,4H), 2,80 (d, J = 3,93 Hz, 0,6H), 3,60 (s, 1,8H), 3,70 (s, 1,2H), 5,13 (s, 0,6H), 5,42 (s, 0,4H), 7,17-7,21 (m, 1H), 7,54-7,59 (m, 2H). Etapa 3 (R)-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-hidroximetil-1,3-dimetil-butilamida — de ácido (S)-2-metil-propano-2-sulfínico Ro TE, ser, cr er “is, > er ado Pena H3C A Hs Oo, CH3 OH

[00171] Éster metílico de ácido (R)-3-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-iso- propil-3-((S)-2-metil-propano-2-sulfinilamino)butírico (18,0 g) foi mistu- rado em tolueno (39,7 ml) sob argônio. À solução de reação foi adicio- nada em gotas IM de uma solução de hidreto de di-isobutil alumí-

nio/tolueno (59,1 ml) a -78ºC, e a solução de reação foi agitada a - 78ºC por 2 horas. A seguir, a solução de reação foi aquecida gradual- mente até 0ºC e então agitada por 30 minutos. À solução de reação foi adicionado metanol! (39 ml) a -78ºC. À solução de reação foram adici- onados 30% em peso/volume da solução aquosa de ácido L-tartárico (75 ml) e acetato de etila (300 ml) sob resfriamento com gelo, e as camadas foram separadas. A camada aquosa resultante foi extraída com acetato de etila (100 ml). As camadas orgânicas combinadas fo- ram lavadas com 30% em peso/volume da solução aquosa de ácido L- tartárico (80 ml, duas vezes), água (80 ml, duas vezes) e salmoura, e então secada com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi azeotropado com tolueno para obter um produto bruto do composto do título (18,5 g).

[00172] —H-RMN (400 MHz, CDCI3) 0,70 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 0,76 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 0,79 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 0,83 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 1,145 (s, 5,4H), 1,30 (s, 3,6H), 1,56-1,59 (m, 0,4H), 1,71-1,82 (m, 1H), 1,95 (s, 1,8H), 1,98 (s, 1,2H), 2,04-2,08 (m, 0,6H), 3,86-4,13 (m, 2H), 5,13 (s, 0,6H), 5,99 (s, 0,4H), 7,16-7,21 (m, 1H), 7,54-7,58 (m, 2H). Etapa 4 (R)-3-amino-3-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-isopropil-butan-1-ol EL H3C SE O DE cr É Ns, — cr "Ino H3C H3;C À ud bed

[00173] Ácido (S)-2-metil-propano-2-sulfínico e o [(R)-1-(4-bromo-3- cloro-fenil)-2-hidroximetil-1,3-dimetil-butilJamida (18,5 g) foram mistu- rados em metanol (79,5 ml). À solução de reação foi adicionada em gotas uma solução 2M de cloreto de hidrogênio/metanol (39,8 ml) sob resfriamento com gelo, e a solução de reação foi agitada por 1,5 hora.

A solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e ao resí- duo foram adicionados 10% em peso/volume da solução aquosa de carbonato de sódio (50,0 ml). A solução de reação foi extraída com ace- tato de etila (80 ml). A camada aquosa resultante foi extraída com aceta- to de etila (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lava- das com 10% em peso/volume de uma solução aquosa de carbonato de sódio (50 ml), água (50 ml) e salmoura, e então secada com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e então a ca- mada orgânica resultante que foi concentrada sob pressão reduzida foi secada com sulfato de magnésio. O sulfato de magnésio foi removido através de um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi azeotropado com tolueno para obter um produto bruto do composto do título (15,7 g).

[00174] H-RMN (400 MHz, CDCI3) 0,69 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 0,83 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 0,85 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 0,87 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 1,36-1,47 (m, 0,6H), 1,59 (s, 1,2H), 1,60 (s, 1,8H), 1,64 (ddd, J = 5,32, 3,24, 2,31 Hz, 0,4H), 1,66-1,77 (m, 0,4H), 1,85 (ddd, J = 8,79, 3,47, 2,31 Hz, 0,6H), 3,69 (dd, J = 11,33, 3,47 Hz, 0,6H), 3,81 (dd, J = 11,79, 5,32 Hz, 0,4H), 3,91 (dd, J = 11,33, 8,79 Hz, 0,6H), 3,96 (dd, J = 11,79, 3,47 Hz, 0,4H), 7,18-7,20 (m, 1H), 7,50 (d, J = 2,31 Hz, 0,6H), 7,53 (d, J = 2,31 Hz, 0,4H), 7,58 (d, J = 6,70 Hz, 0,6H), 7,60 (d, J = 6,70 Hz, 0,4H) Etapa 5 Éster metílico de ácido 3-(3-[(R)-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-hidroxime- til-1,3-dimetil-butilJureído)biciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico

SA A LATSUS e A NH —— CI SO Di He. is ST CH, OH Ch OA et

O

[00175] Ácido 3-(metoxicarbonil)biciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico

(4,00 g) e tolueno (47,0 ml) foram misturados sob nitrogênio, e a eles foram adicionadas difenil fosforil azida (5,58 ml) e trietilamina (3,60 ml) à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada a 120ºC por 50 minutos. A solução de reação foi adicionada lentamente em gotas a uma solução de (R)-3-amino-3-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-isopropil- butano-1-ol (9,77 g) em tetra-hidrofurano (47,0 ml) por 15 minutos sob resfriamento com gelo. A solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. À solução de reação foram adicionados 10% em peso/volume de solução aquosa de ácido cítrico (100 ml), e as cama- das foram separadas. A camada orgânica resultante foi lavada com água (60 ml). As camadas aquosas combinadas foram extraídas com acetato de etila (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas fo- ram lavadas com 10% em peso/volume de solução aquosa de ácido cítrico (60 ml), água (60 ml), 10% em peso/volume de solução aquosa de carbonato de sódio (60 ml), água (60 ml) e salmoura, e então seca- da com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado pela cromatografia de coluna com gel de sílica (acetato de etila:n-hexano = 7:13 -> 100:0) para obter o composto do título (8,34 9).

[00176] *H-RMN (400 MHz, CDCI3) 0,28 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 0,79 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 0,85 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 0,92 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 1,52-1,59 (m, 0,6H), 1,79-1,88 (m, 0,4H), 1,84 (s, 1,8H), 1,90 (s, 1,2H), 2,12-2,18 (m, 0,4H), 2,21-2,32 (m, 0,6H), 2,29 (s, 3,6H), 2,29 (s, 2,4H), 3,67 (s, 3H), 3,82-3,75 (m, 1,4H), 3,89 -3,94 (m, 0,6H), 4,61 (s, 0,6H), 4,70 (s, 0,4H), 6,92 (s, 0,4H), 7,04 (s, 0,6H), 7,13-7,16 (m, 1H), 7,44 (d, J = 2,31 Hz, 0,4H), 7,45 (d, J = 2,08 Hz, 0,6H), 7,53 (d, J = 8,55 Hz, 1H).

Etapa 6 Éster metílico de ácido 3-[(S)-4-(4-bromo-3-cloro-fenil)-5-isopropil-4- metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-il]-biciclo[1.1.1]pentano-1-carbo- xílico LA toa E Ns GI ta E as AO TT sr trio 2

HC À HNO HC ARNS ns, On e, a, ES

O O

[00177] Éster metílico de ácido 3-(3-[(R)-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2- hidroximetil-1,3-dimetil-butilJureído)biciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (10,0 g) e clorofórmio (68,4 ml) foram misturados sob nitrogênio, e aos mesmos foi adicionado (diacetóxi-iodo)benzeno (6,06 g) e o radical 2,2,6,6-tetrametilpiperidina-1-oxila (0,267 g) à temperatura ambiente. À solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3,5 horas, e então à mesma foram adicionados 10% em peso/peso da solução aquosa de sulfito de sódio (50 ml) à temperatura ambiente. As cama- das foram separadas. A camada aquosa resultante foi extraída com clorofórmio (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 ml) e salmoura, e então secadas com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resul- tante foi azeotropado com tolueno. O resíduo resultante foi misturado em tolueno (213 ml), e então ao mesmo foi adicionado trifluorometa- nosulfonato de pentafluoro anilina (0,307 g) à temperatura ambiente. À solução de reação foi agitada sob aquecimento a 100ºC por 2 horas, e então à mesma foi adicionado sulfeto de sódio (880 mg) e 10% em pe- so/volume da solução aquosa de carbonato de sódio (50 ml) à tempe- ratura ambiente. As camadas foram separadas. A camada aquosa re- sultante foi extraída com acetato de etila (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 ml) e salmoura, e então secadas com sulfato de magnésio. O sulfato de magnésio foi removido através de um filtro, e o material filtrado foi então concentra- do sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cro- matografia de coluna com gel de sílica (acetato de etila:n-hexano = 1:4 -> 3:2). O resíduo resultante foi solidificado com n-hexano, e o sólido precipitado foi filtrado para obter o composto do título (6,35 9).

[00178] H-RMN (400 MHz, CDCI3) 0,72 (d, J = 6,94 Hz, 3H), 1,06 (d, J = 6,94 Hz, 3H), 1,70 (s, 3H), 1,81-1,92 (m, 1H), 2,47 (s, 6H), 3,71 (s, 3H), 4,69 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 7,20 (dd, J = 8,32, 2,31 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 2,31 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,32 Hz, 1H). Etapa 7 Éster metílico de ácido 3-[(S)-4-[4-(2-terc-butil-ciclopropil)-3-cloro-fenil -5-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-ilXbiciclo 111 pentano-1-carboxílico HC CH; Of: . po? DO: ; CHa Pro, CH; Pro, o o

[00179] Éster metílico de ácido 3-[(S)-4-(4-bromo-3-cloro-fenil)-5- isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-piramidin-1-il]-biciclo[1.1.1] pen- tano-1-carboxílico (5,23 g), trans-2-terc-butil-cicloropropil-trifluorobo- rato de potássio (2,79 g), dicloreto de [1,1'-bis(di-terc-butil-fosfino)ferro- cenolpaládio (II) (0,729 g), carbonato de césio (10,9 g), tolueno (112 ml) e água (11,2 ml) foram misturados sob argônio, e a mistura foi agi- tada a 100ºC por 2 horas. À solução de reação foi adicionada água (50 ml) à temperatura ambiente, e as camadas foram separadas. A cama- da aquosa resultante foi extraída com acetato de etila (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (50 ml, duas vezes) e salmoura, e então secadas com sulfato secado de magnésio. Então, às mesmas foi adicionado carbono ativado, e a mistura foi agi-

tada à temperatura ambiente por 1 hora. O sulfato de magnésio e o carbono ativado foram removidos através de um filtro, e então o mate- rial filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia de coluna com gel de sílica (acetato de etila:n-hexano = 1:9 -> 1:1). O resíduo resultante foi misturado em me- tanol, e ao mesmo foi adicionado carbono ativado à temperatura ambi- ente. O carbono ativado foi removido através de um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resul- tante foi purificado por cromatografia de coluna com gel de sílica (ace- tato de etila:n-hexano = 1:4 -> 1:1) para obter uma mistura de diaste- reômeros do composto do título (3,70 g). A purificação com uma colu- na de preparação quiral resultou no composto do título (0,344 9).

[00180] As condições de purificação para a coluna preparativa são mostradas tal como segue.

[00181] Aparelho de preparação: Recycling Preparative Liquid Chromatograph LC-92XX NEXT SERIES, Japan Analytical Industry Co., Ltd.

[00182] Coluna: Daicel CHIRALPAK IA 2,0 cm q x 25 cm L

[00183] Fase móvel: n-hexano:2-propanol = 93:7

[00184] Vazão: 10,0ml/min

[00185] Detecção: UV (220 nm)

[00186] A medição com a coluna de quiral mostrou 8,3 minutos do tempo de retenção para o composto do título resultante (7,6 minutos do tempo de retenção para os diastereômeros do composto do título) com > 99% de pureza. As condições analíticas para a coluna de quiral são mostradas tal como segue.

[00187] Aparelho de medição: HPLC system, Shimadzu Corpora- tion, High-Performance Liquid Chromatograph Prominence

[00188] Coluna: Daicel CHIRALPAK IA-3 0,46 cm q x 15 cm L

[00189] “Temperatura da coluna: 40ºC

[00190] Fase móvel: n-hexano:2-propanol = 93:7

[00191] Vazão: 1.0ml/min

[00192] Detecção: UV (220 nm)

[00193] H-RMN (400 MHz, CDCI3) 0,71 (d, J = 7,09 Hz, 3H), 0,77 - 0,83 (m, 1H), 0,90-0,95 (m, 2H), 0,94 (s, 9H), 1,04 (d, J = 7,09 Hz, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,85-1,92 (m, 1H), 2,07-2,12 (m, 1H), 2,48 (s, 6H), 3,71 (s, 3H), 4,56 (s, 1H), 5,83 (s, 1H), 6,86 (d, J = 8,31 Hertz, 1H), 7,22 (dd, J = 8,31, 1,96 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 1,96 Hz, 1H). Etapa 8 Ácido — 3-[(S)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-ciclopropil)-3-cloro-fenil]-5-iso- propil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-ilXbiciclo[1.1.1]pentano- 1-carboxílico Cc ses o CI LX H3C. “e N H3;C “e N CH; Pro CH; Po o o

[00194] Éster metílico de ácido 3-1(S)-4-[4-(2-terc-butil-cicloropro- pil)-3-cloro-fenil]-5-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-piramidin-1- ilXbiciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (49,1 g), tetra-hidrofurano (246 ml) e metanol (246 ml) foram misturados sob nitrogênio, e aos mesmos foi adicionada uma solução aquosa de hidróxido de sódio 2N (101 ml) à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 24 horas 30 minutos. A solução de reação foi concentra- da sob pressão reduzida, e ao resíduo foram adicionados água adicio- nada (400 ml) e ácido clorídrico 1N (250 ml). A seguir, ao mesmo foi adicionado acetato de etila (900 ml), e as camadas foram separadas. A camada aquosa resultante foi extraída com acetato de etila (100 ml! x 2), e a camada orgânica foi lavada com água (250 ml) e salmoura, e então foi secada com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

[00195] O resíduo e o acetonitrilo resultantes (1.000 ml) foram mis- turados, e a mistura foi agitada sob aquecimento a 85ºC por 1 hora e minutos. Então, a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 13 horas e 15 minutos, e então o sólido resultante foi filtrado para ob- ter um cristal do composto do título (Forma Cristalina A; 44,7 9).

[00196] Um cristal do composto do título (29,7 mg) obtido de uma maneira similar, acetato de etila (297 ul) e metanol (891 ul) foram mis- turados. Os sólidos foram completamente dissolvidos, e então os sol- ventes foram concentrados sob pressão reduzida com um evaporador giratório, para obter um outro cristal do composto do título (Forma Cris- talina B).

[00197] Os dois cristais acima (10,0 mg cada) obtidos de uma ma- neira similar e acetato de isobutila (80 ul) foram misturados, e a pasta resultante foi agitada à temperatura ambiente por uma semana, e en- tão o sólido resultante foi filtrado para obter um outro cristal do com- posto do título (Forma Cristalina C), que foi usado para um cristal de semente nos procedimentos a seguir.

[00198] Um cristal bruto (2,00 g) obtidos em uma reação similar àquela acima e acetato de isobutila (10 ml) foram misturados e agita- dos a 90ºC. Depois que o cristal bruto foi completamente dissolvido, o cristal de semente foi adicionado à mistura a 47ºC de temperatura in- terna, e a mistura foi agitada por 1 hora. A cerca de 45ºC da tempera- tura interna, o n-heptano (30 ml) foi adicionado à solução de reação, e a mistura foi agitada por 2 horas. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 24 horas. O sólido precipitado foi filtrado para obter o composto do título (Forma Cristalina C; 1,7 g).

[00199] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,71 (d, J = 6,94 Hz, 3H), 0,86-0,94 (m, 3H), 0,90 (s, 9H), 1,04 (d, J = 6,94 Hz, 3H), 1,60 (s, 3H),

1,93-2,04 (m, 2H), 2,29 (s, 6H), 5,97 (s, 1H), 6,99 (d, J = 7,86 Hz, 1H), 7,06 (s, 1H), 7,21 (dd, J = 7,86, 1,85 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 1,85 Hz, 1H), 12,44 (s, 1H).

[00200] As configurações absolutas dos carbonos assimétricos do composto do título foram determinadas pela análise estrutural de raios X de cristal único. Síntese Intermediária 1 Trans-2-terc-butil-ciclopropil-trifluoroborato de potássio He O n.e Ss HãC BOAZCHS — ND 0 os 3 BF3K eng 2-(trans-2-terc-butil-cicloropropil)-4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborola- no (8,03 g), metanol (200 ml) e água (40 ml) foram misturados sob ni- trogênio, e aos mesmos foi adicionado fluoreto de potássio hidrogena- do (14 g) à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada a 100ºC por 7 horas. A seguir, a solução foi deixada em repouso à tem- peratura ambiente durante toda a noite, e então concentrada sob pres- são reduzida. O resíduo resultante foi azeotropado com tolueno. O re- síduo resultante e o acetonitrilo (120 ml) foram misturados e agitados a 60ºC por 2 horas. O sólido resultante foi removido através de um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O re- síduo resultante e éter dietílico (80 ml) foram misturados e agitados à temperatura ambiente. O sólido precipitado foi filtrado para obter o composto do título (2,86 9).

[00201] —H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) -0,94 -0,87 (m, 1H), -0,26 - - 0,23 (m, 2H), 0,25-0,30 (m, 1H), 0,73 (s, 9H).

Exemplo 1A Síntese alternativa de ácido 3-((S)-4-[4-((1IR, 2R)-2-terc-butil-ciclo- propil)-3-cloro-fenil]-5-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin- 1-ilbiciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico Etapa 1 bis-Dimetilamida de ácido (48,58)-2-((E)-3,3-dimetil-1-butenil)-[1,3,2 dioxaborolano-4,5-dicarboxílico CH; H3C, CH; RC Ag, o HR, a no HC Css o H3CN CH;

[00202] A solução de complexo de dibromoborano-sulfeto de dimeti- la/ tolueno 2M (1,250 ml) foi misturada em tolueno (1,169 ml). À solu- ção de reação foi adicionado, em gotas, 3,3-dimetil-1-butino (338 ml) sob resfriamento com água por 45 minutos. A solução de reação foi agitada sob resfriamento com água por 2,5 horas. A solução de reação foi resfriada por adição de gelo em um banho de água contra exoter- mia retardada. A solução de reação foi adicionada, em gotas, a uma solução mista de 8N de solução aquosa de hidróxido de potássio (969 ml) e água (2.922 ml) sob resfriamento com gelo por 30 minutos. Tolu- eno (1.461 ml) e tetra-hidrofurano (292 ml) foram adicionados à cama- da aquosa, e aos mesmos foram adicionados, em gotas, ácido clorídri- co 6N (417 ml) sob resfriamento com gelo por 20 minutos. Aos mes- mos foi adicionado cloreto de sódio (584 g), e a camada orgânica foi separada.

[00203] A camada orgânica foi misturada em tolueno (1.581 ml), e então foram adicionados ácido tartárico-N,N,N' N'-tetrametilamida (562 g). A solução de reação foi agitada por 2 horas sob aquecimento a 130ºC. A camada orgânica foi separada e concentrada sob pressão reduzida. Os sólidos precipitados durante a concentração foram remo-

vidos com um filtro, e o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter um produto bruto do composto do título (599 9).

[00204] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 1,00 (s, 9H), 2,87 (s, 6H), 3,06 (s, 6H), 5,30 (d, J = 18,24 Hz, 1H), 5,44 (s, 2H), 6,64 (d, J = 18,24 Hz, 1H). Etapa 2 Ácido (1R,2R)-2-terc-butil ciclopropil borônico Mel re meto ros o e o no o o", Dwa-o

HCN HICN OH CH; CH;

[00205] A solução 1,1M de dietil zinco/n-hexano (1.892 ml) foi mis- turada em éter metil terc-butílico (838 ml) sob argônio. À solução de reação foi adicionado, em gotas, cloroiodo metano (301 ml) sob resfri- amento com gelo seco-acetona por 35 minutos. A solução de reação foi agitada sob resfriamento com gelo seco-acetona por 30 minutos. Então, aos mesmos foram adicionados ácido L-tartárico-N,N,N' N'- tetrametilamida (70,8 g) sob resfriamento com gelo seco-acetona, e a mistura foi agitada por 20 minutos. À solução de reação foi adicionada, em gotas, uma solução mista de ácido (4S, 58)-2-((E)-3,3-dimetil-1- butenil)-[1,3,2]dioxaborolano-4,5-dicarboxílico, bis-dimetilamida (222 g) em éter metil terc-butílico (838 ml) sob resfriamento com gelo seco- acetona por 30 minutos. A solução de reação foi agitada sob resfria- mento com gelo seco-acetronitrila por 4,5 horas. Então, à mesma fo- ram adicionados 30% em peso/volume de uma solução aquosa de ácido cítrico (1.438 ml) sob resfriamento com gelo seco-acetronitrila por 10 minutos. À solução de reação foram adicionados acetato de eti- la (1.047 ml) e cloreto do sódio (335 g), e a camada orgânica foi lava- da com água (1.047 ml) e 25% em peso/volume de uma solução aquosa de cloreto do sódio (1.047 ml) e então secada com sulfato de magnésio. O sulfato de magnésio foi removido com um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter um produto bruto (82,6 g).

[00206] O produto bruto resultante (82,6 g) foi misturado em 8N de uma solução aquosa de hidróxido de potássio (87 ml) e água (150 ml). À solução de reação foi adicionado, em gotas, ácido clorídrico 6N (117 ml) sob resfriamento com gelo por 1 hora. A solução de reação foi agi- tada sob resfriamento com gelo por 1 hora. O sólido precipitado foi fil- trado para obter o composto do título (68,8 9).

[00207] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) -0,46 (td, J = 5,98, 9,27 Hz, 1H), 0,30 - 0,37 (m, 2H), 0,70 - 0,82 (m, 1H), 0,79 (s, 9H), 12,94 (Br s, 2H). Etapa 3 4-((1R, 2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-clorobenzoato de metila Br. He St TÁ o, —— TA a Ô Cc CH o

[00208] Carbonato de potássio (1.329 g) foi misturado em água (1.600 ml) sob argônio. À reação foram adicionados tolueno (4.800 ml), 4-bromo-3-clorobenzoato de metila (800 g), ácido (1R,2R)-2-terc- butil-cicloropropil borônico (1.454 g) e dicloreto de bis(trifenilfosfino) paládio (11) (112 g), e a solução de reação foi agitada por 4,5 horas sob aquecimento a 80ºC. A solução de reação foi resfriada até a tempera- tura ambiente. À solução de reação foi adicionado uma solução aquo- sa de hidróxido de potássio 0,5N (3.200 ml) sob aquecimento a 60ºC, e a mistura foi agitada por 2 horas. A camada orgânica foi separada, e então a camada aquosa foi extraída com tolueno (1.200 ml). As cama- das orgânicas combinadas foram lavadas com água (3.200 ml), e en- tão às mesmas foi adicionado Celite (800 g). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. O Celite foi removido com um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo resultante foi adicionado isopropanol (2.000 ml), e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para obter um produto bruto do composto do título (1.061 9).

[00209] —“H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,91 (s, 9H), 1,02 - 1,07 (m, 3H), 2,13 (td, J = 8,07, 5,68 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 7,15 (d, J = 8,37 Hz, 1H), 7,79 (dd, J = 8,37, 1,79 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 1,79 Hz, 1H). Etapa 4 Ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-clorobenzoico CH; CH;

DL DL MOO Cc *cHa cl oH o o

[00210] 4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-clorobenzoato de me- tila (1.061 g) foi misturado em isopropanol (4.600 ml). À solução de reação foi adicionada uma solução aquosa de hidróxido de sódio 2N (4.000 ml), e a solução de reação foi agitada à temperatura ambiente durante toda a noite. À solução de reação foi adicionado carbono ati- vado (160 g), e a mistura foi agitada por 30 minutos. Após a filtração com Celite, ácido clorídrico 2N (4.100 ml) foi adicionado ao material filtrado sob resfriamento com gelo. O material filtrado foi extraído com acetato de etila (4.800 ml). A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (1.200 ml), e as camadas orgânicas combinadas foram lava- das com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (1.600 ml) e en- tão secadas com sulfato de magnésio. O sulfato de magnésio foi re- movido com um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo resultante foi adicionado acetonitrilo (1.600 ml), e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para ob- ter um produto bruto do composto do título (920 g).

[00211] —H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,92 (s, 9H), 1,00 - 1,06 (m, 3H), 2,10 - 2,15 (m, 1H), 7,12 (d, J = 7,77 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 7,77 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 13,11 (Br s, 1H).

Etapa 5 Ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-clorobenzoico CH; CH; O — NO Cc! OH Cc! oH o o

[00212] Ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-clorobenzoico (920 g) foi misturado em acetonitrilo (7.200 ml) e água (4.000 ml). À solução de reação foi agitada sob aquecimento a uma temperatura in- terna de 67ºC, e o ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-cloro- benzoico foi confirmado como tendo sido completamente dissolvido. Em seguida, foi adicionada água (3.700 ml) à solução de reação, e à mesma foi adicionado um cristal de semente. A mistura foi agitada por 6 horas sob aquecimento a 60ºC e então agitada durante toda a noite, sendo resfriada lentamente até a temperatura ambiente. O sólido pre- cipitado foi filtrado para obter o composto do título (518 g). Nesta eta- pa, o cristal de semente foi usado para obter de modo eficiente o cris- tal, mas o cristal pode ser obtido sem o cristal de semente em proce- dimentos similares a esta etapa.

[00213] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,92 (s, 9H), 1,00 - 1,06 (m, 3H), 2,10 - 2,15 (m, 1H), 7,12 (d, J = 7,77 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 7,77 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 13,11 (br s, 1H). Etapa 6 Sal de (S)-fenetilamina de ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3- clorobenzoico

[00214] Ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-clorobenzoico (790 g) foi misturado em acetato de isopropila (7,900 ml). À mistura foi adicionada, em gotas, (S)-(-)-fenetilamina (417 g) sob aquecimento a uma temperatura interna de 87ºC por 10 minutos. Em seguida, um cristal de semente foi adicionado à mesma. A mistura foi agitada por 2 horas sob aquecimento a 83ºC e então agitada durante toda a noite,

sendo resfriada lentamente até a temperatura ambiente. O sólido pre- cipitado foi filtrado para obter o composto do título (1.087 g). Nesta etapa, o cristal de semente foi usado para obter de modo eficiente o cristal, mas o cristal pode ser obtido sem o cristal de semente em pro- cedimentos similares a esta etapa.

[00215] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,91 (s, 9H), 0,94 - 1,00 (m, 3H), 1,41 (d, J = 6,58 Hz, 3H), 2,05 - 2,09 (m, 1H), 4,25 (q, J = 6,58 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,27 — 7,30 (m, 1H), 7,35 — 7,38 (m, 2H), 7,45 — 7,47 (m, 2H), 7,70 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H). Etapa 7 Sal de (S)-fenetilamina de ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3- clorobenzoico CH; CH; MOU es — Sou Da c OH o OH o o

[00216] Salde (S)-fenetilamina de ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilciclo- propil)-3-clorobenzoico (1.087 g) foi misturado em acetato de isopropi- la (7.600 ml). À solução de reação foi adicionada (S)-(-)-fenetilamina (35,2 g). A mistura foi agitada por 2 horas sob aquecimento a 83ºC e então agitada durante toda a noite, sendo resfriada lentamente até a temperatura ambiente. O sólido precipitado foi filtrado para obter o composto do título (1.044 9).

[00217] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,91 (s, 9H), 0,94 - 1,00 (m, 3H), 1,41 (d, J = 6,58 Hz, 3H), 2,05 - 2,09 (m, 1H), 4,25 (q, J = 6,58 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,27 — 7,30 (m, 1H), 7,35 — 7,38 (m, 2H), 7,45 — 7,47 (m, 2H), 7,70 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H)

[00218] Etapa 8 Ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-clorobenzoico CH; CH; Poa. th — Do, cl OH [e oH o o

[00219] Sal de (S)-fenetilamina de ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilciclo- propil)-3-clorobenzoico (1.044 g) foi misturado em acetonitrilo (5.200 ml) e água (3.800 ml). Aos mesmos foi adicionado ácido clorídrico 2N (1.470 ml), e a mistura foi agitada por 2 horas sob aquecimento a 80ºC e então agitada durante toda a noite, sendo resfriada lentamente até a temperatura ambiente. Em seguida, à mesma foi adicionada, em go- tas, água (4.200 ml) por 1 hora, e então a mistura foi agitada à tempe- ratura ambiente por 2 horas. O sólido precipitado foi filtrado para obter o composto do título (697 9).

[00220] —H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,92 (s, 9H), 1,00 - 1,06 (m, 3H), 2,10 - 2,15 (m, 1H), 7,12 (d, J = 7,77 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 7,77 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 13,11 (br s, 1H). Etapa 9 4-((1R, 2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-cloro-N-metóxi-N-metil benzamida CH; CH; ID — “DOE c fe a N. CH o o

[00221] Ácido 4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-clorobenzoico (1.000 g) foi misturado em N-metil pirrolidona (5.000 ml). À solução de reação foram adicionados cloridreto de N,O-dimetil-hidroxilamina (540 g), 1-monoidrato de hidróxi benzotriazol (60,6 g) e carbonato de sódio hidrogenado (465 g). À mistura foi adicionado cloridreto de N-(3- dimetilaminopropil)-N'-etil carbodiimida (1.099 g) sob resfriamento com gelo, e a mistura foi agitada por 1 hora. A mistura foi agitada à tempe-

ratura ambiente por 1 hora, e então ao mesmo foi adicionado éter metil ciclopentílico (5.000 ml) e água (2.500 ml). A camada aquosa foi extra- ída com éter metil ciclopentílico (400 ml), e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2.500 ml) e 20% em pe- so/volume de solução aquosa de cloreto de sódio (2.500 ml) e então seco com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido com um filtro, e então concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo resultante foi adicionado éter metil ciclopentílico (3.000 ml), e a mistura foi con- centrada sob pressão reduzida para obter um produto bruto do com- posto do título (1.356 9).

[00222] —“H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,92 (s, 9H), 0,95 - 1,04 (m, 3H), 2,07 - 2,12 (m, 1H), 3,25 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 7,08 (d, J = 7,77 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7,77 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H). Etapa 10 1-[4-((1R, 2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-cloro-fenilJetanona CH; CH; Pas. — PDo, e N.5-CHs TAmr a CHa o o

[00223] 4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-cloro-N-metóxi-N-metil benzamida (1.356 g) foi misturada em tetra-hidrofurano (5.900 ml). À solução de reação foram adicionados, em gotas, uma solução 3M de cloreto de metilmagnésio/tetra-hidrofurano (1.700 ml) sob resfriamento com gelo por 2 horas, e então a mistura foi agitada por 1 hora. À solu- ção de reação foi adicionado o isopropanol (117 ml) e então à mesma foram adicionados, em gotas, 2N de ácido clorídrico (5.900 ml). Tolue- no (6.000 ml) foi adicionado à mesma, e a camada orgânica foi lavada com de 20% em peso/volume de solução aquosa de cloreto de sódio (6.000 ml) e água (3.600 ml). Em seguida, a solução foi secada com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido com um filtro, e então concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo resultante foi adiciona-

do éter metil ciclopentílico (3.500 ml), e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para obter um produto bruto do composto do título (1.193 9g).

[00224] —“H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,92 (s, 9H), 1,02 - 1,07 (m, 3H), 2,11 - 2,16 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 7,14 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,07 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H). Etapa 11 1-[4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-cloro-fenilJet-(E)-ilidentamida de ácido (S)-2-metil-propano-2-sulfínico neo O, no, O. "Ve, CI CHs Tm, c PS o CHsz

[00225] 1-[4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-cloro-fenilJetanona (207 g) e amido de ácido (S)-(-)-2-metil-propano-2-sulfínico (116 g) fo- ram misturados com éter metil ciclopentílico (1.000 ml). À solução de reação foi adicionado ortotitanato de tetraetila (335 ml) e a solução de reação foi agitada por 3 horas sob aquecimento a 110ºC. À solução de reação foi adicionado metanol (1.000 ml) sob resfriamento com água e a mistura foi agitada por 10 minutos. À mesma foi adicionada, em go- tas, uma solução aquosa mista de 28% em peso/peso de solução aquosa de amônia (100 ml), ácido L-láctico (178 ml) e água (1.000 ml) a uma temperatura interna de 30ºC ou mais baixa por 15 minutos. À mistura foi agitada à temperatura ambiente por 4 horas e então manti- da em repouso durante toda a noite. À camada aquosa foi adicionado éter metil ciclopentílico (1.000 ml) e as camadas orgânicas combina- das foram lavadas com 25% em peso/volume de uma solução aquosa de cloreto de sódio (1.000 ml) e então secadas com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido com um filtro, e então o material filtra- do foi concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado n- hexano (400 ml) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo também foi adicionado n-hexano (400 ml), e então a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Então, à mesma foi adicionado sulfóxido de dimetila (500 ml) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado sulfóxido de dimetila (500 ml) e à mistura foi adicionada, em gotas, água (50 ml) à temperatura ambien- te. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos, e en- tão à mesma foi adicionada, em gotas, água (150 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 12 horas, e então o sólido precipi- tado foi filtrado para obter o composto do título (261 9).

[00226] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,91 (s, 9H), 1,01 - 1,05 (m, 3H), 1,21 (s, 9H), 2,12 (td, J = 7,63, 5,78 Hz, 1H), 2,69 (s, 3H), 7,11 (d, J = 8,55 Hz, 1H), 7,75 (dd, J = 8,55, 1,62 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 1,62 Hz, 1H). Etapa 12 (R)-3-[4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-cloro-fenil]-2-isopropil-3-((S)- 2-metil-propano-2-sulfinilamino)butanoato de metila CH; He H3C, CH e Pro e Vet, Ha. CH, e Mm EN-S, DA o PO Ha Hs xo,

[00227] Uma solução 2M de di-isopropilamida de lítio/tetra-hidrofu- rano/n-heptano/etilbenzeno (740 ml) foi misturada em tetra-hidrofurano (786 ml) sob um fluxo de nitrogênio. À solução de reação foi adiciona- da, em gotas, uma solução mista de 3-metil-butanoato de metila (224 ml) em tetra-hidrofurano (524 ml) sob resfriamento a -78ºC por 45 mi- nutos, e a solução de reação foi agitada sob resfriamento a -78ºC por 2 horas e 30 minutos. À solução de reação foi adicionada, em gotas, uma solução mista de (1-[4-((1R, 2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-cloro- fenilJet-(E)-ilidenojamida de ácido (S)-2-metil-propano-2-sulfínico (261 g) em tetra-hidrofurano (393 ml) por 40 minutos, e a solução de reação foi agitada por 4 horas. À solução de reação foi adicionado, em gotas, sequencialmente, metanol (131 ml) e água (131 ml) dentro de 5 minu- tos, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 14 horas. À solução de reação foi adicionada água (786 ml) sob resfriamento com água, e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com to- lueno (1.048 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com 1N de ácido sulfúrico (1.309 ml), água (786 ml), 5% em peso/volume de solução aquosa de carbonato de sódio hidro- genado (786 ml) e 25% em peso/volume de solução aquosa de cloreto de sódio (786 ml) e então secadas com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido com um filtro, e então concentrado sob pressão re- duzida. Ao resíduo resultante foi adicionado tolueno (262 ml) e a mis- tura foi concentrada sob pressão reduzida para obter um produto bruto do composto do título (348 9).

[00228] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,76 - 0,92 (m, 18H), 1,15 (s, 6,3H), 1,20 (s, 2,7H), 1,75 (s, 0,9H), 1,76 (s, 2,1H), 1,93 - 2,04 (m, 2H), 2,68 (d, J = 3,59 Hz, 0,3H), 2,93 (d, J = 3,89 Hz, 0,7H), 3,52 (s, 2,1H), 3,58 (s, 0,9H), 5,15 (s, 0,7H), 5,44 (s, 0,3H), 6,97 (d, J = 8,37 Hz, 0,7H), 6,98 (d, J = 8,37 Hz, 0,3H), 7,31 (d, J = 8,37 Hz, 1H), 7,46 (s, 0,7H), 7,49 (s, 0,3H). Etapa 13 (R)-1-[4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-cloro-fenil]-2-hidroximetil- 1,3-dimetil-butil)amida de ácido (S)-2-metil-propano-2-sulfínico

CH CH o Do E, Do en EO, c “nn, LN-S, — - “mm INS ão 2 Hs Oo, CH; OH

[00229] A uma solução IM de hidreto de di-isobutilalumínio/tolueno (2.932 ml) foi adicionada, em gotas, uma solução mista de (R)-3-[4- ((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-cloro-fenil]-2-isopropil-3-((S)-2-metil

-propano-2-sulfinilamino)butanoato de metila (348 g) em tolueno (1.392 ml) sob resfriamento a -78ºC por 1 hora sob um fluxo de nitro- gênio. A solução de reação foi agitada sob resfriamento a -78ºC por 2 horas. A solução de reação foi adicionada a uma solução mista de monoidrato de ácido cítrico (622 g) em água (2.088 ml) a uma tempe- ratura interna de 20ºC ou mais baixa sob resfriamento com gelo. À mistura foi agitada à temperatura ambiente por 15 horas e então sepa- rada. A camada aquosa foi extraída com tolueno (1.044 ml). As cama- das orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com água (1.740 ml) e 25% em peso/volume de solução aquosas de cloreto de sódio (1.740 ml) e então secadas com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido com um filtro, e então o material filtrado foi concen- trado sob pressão reduzida para obter um produto bruto do composto do título (645 9).

[00230] “H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,65 (d, J = 7,09 Hz, 2,1H), 0,68 - 0,71 (m, 3H), 0,75 (d, J = 7,09 Hz, 0,9H), 0,82 - 0,95 (m, 12H), 1,05 (s, 6,3H), 1,18 (s, 2,7H), 1,73 (s, 2,1H), 1,79 (s, 0,9H), 1,84 - 1,88 (m, 0,7H), 1,99 - 2,05 (m, 1,3H), 3,65 - 3,80 (m, 2H), 5,14 (t, J = 3,55 Hz, 0,3H), 5,50 (t, J = 3,91 Hz, 0,7H), 6,03 (s, 0,3H), 6,56 (s, 0,7H), 6,93 - 6,99 (m, 1H), 7,28 - 7,34 (m, 1H), 7,38 (d, J = 1,96 Hz, 0,7H), 7,43 (d, J = 1,71 Hz, 0,3H). Etapa 14 Cloridreto de (R)-3-amino-3-[4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-cloro- fenil]-2-isopropil-butan-1-o1 CH; CH; O E Do o. a TT —> Cc TT" He HJ;C HC CH; OH CH; OH

[00231] [(R)-1-[4-((1IR, 2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-cloro-fenil]-2- hidroximetil-1,3-dimetil-butilkamida de ácido (S)-2-metil-propano-2-sul-

fínico (327 g) foi misturada em tolueno (1.309 ml). À solução de reação foi adicionada, em gotas, uma solução 2M de cloreto de hidrogê- nio/metanol (740 ml) por 20 minutos sob resfriamento com gelo, e a mistura foi agitada por 2 horas sob resfriamento com água. A solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e ao resíduo foi adi- cionado éter di-isopropílico (250 ml). A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, e então ao resíduo foi adicionado éter di-isopropílico (4.155 ml). A mistura foi agitada por 6 horas sob aquecimento a 90ºC. A solução de reação foi agitada por 8 horas, sendo resfriada lentamen- te até a temperatura ambiente, e então o sólido precipitado foi filtrado para obter o composto do título (195 g).

[00232] “H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,64 (d, J = 6,88 Hz, 0,9H), 0,67 (d, J = 6,88 Hz, 2,1H), 0,78 (d, J = 6,88 Hz, 2,1H), 0,91 (s, 9H), 0,94 - 0,98 (m, 3H), 1,03 (d, J = 6,88 Hz, 0,9H), 1,33 - 1,40 (m, 0,7H), 1,66 (s, 0,9H), 1,68 (s, 2,1H), 1,92 - 2,08 (m, 2,3H), 3,31 - 3,35 (m, 0,3H), 3,50 — 3,55 (m, 0,3H), 3,56 — 3,77 (m, 1,AH), 5,14 (br s, 0,3H), 5,29 (br s, 0,7H), 7,06 (d, J = 8,37 Hz, 0,3H), 7,08 (d, J = 8,37 Hz, 0,7H), 7,43 (d, J = 8,37 Hz, 0,3H), 7,49 (d, J = 8,37 Hz, 0,7H), 7,60 (s, 1H), 8,31 (br s, 2,1H), 8,49 (br s, 0,9H). Etapa 15 3-13-[(R)-1-[4-((1R,2R)-2-terc-butilciclopropil)-3-cloro-fenil]-2-hidroxime- til-1, 3-dimetil-butilJureídolbiciclo[1.1.1]pentano-1-carboxilato de metila bo 2 bo e a TT" HS e! vs. He H3C HN CHy OH Ha OH Poa o

[00233] Ácido 3-(metoxicarbonil)biciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (63,8 g) foi misturado em tolueno (761 ml) sob um fluxo de argônio, e aos mesmos foi adicionada, em gotas, trietilamina (57,5 ml) por 5 mi- nutos ou mais sob resfriamento com água. Aos mesmos foi adiciona-

da, em gotas, difenil fosforil azida (89 ml) por 7 minutos ou mais sob resfriamento com água, e a mistura foi agitada por 30 minutos. A mis- tura foi agitada por 1 hora e 30 minutos com aquecimento a 100ºC. À solução de reação foi adicionada, em gotas, por 37 minutos sob resfri- amento com gelo a uma suspensão que foi preparada pela mistura de cloridreto de (R)-3-amino-3-[4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)-3-cloro -fenil]-2-isopropyl-butan-1-0l (117 g) com tetra-hidrofurano (819 ml) seguido pela adição, em gotas, de trietilamina (47,9 ml) à mistura por 5 minutos ou menos sob resfriamento com água. A mistura foi agitada por 30 minutos sob resfriamento com gelo, e então agitada à tempera- tura ambiente por 1 hora e 30 minutos. À mistura foi adicionado, em gotas, ácido clorídrico 1N (1.170 ml) por 15 minutos ou mais sob res- friamento com gelo, e então a mistura foi separada. A camada orgâni- ca foi lavada sequencialmente com água (585 ml), 5% em peso/volu- me de uma solução aquosa de carbonato de sódio hidrogenado (585 ml, duas vezes), água (585 ml) e 25% em peso/volume de solução aquosas de cloreto do sódio (585 ml), e então secada com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido com um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo resultante foi adicionado éter metil ciclopentílico, e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. Este procedimento foi repetido duas vezes para ob- ter um produto bruto do composto do título (192 g).

[00234] —“H-RMN (400 MHz, CDCI3) 0,27 (d, J = 6,94 Hz, 0,9H), 0,73 - 0,79 (m, 1H), 0,82 (d, J = 6,94 Hz, 2,1H), 0,86 - 0,99 (m, 2,9H), 0,89 (d, J = 6,94 Hz, 2,1H), 0,93 (s, 2,7H), 0,94 (s, 6,3H), 1,49 - 1,55 (m, 1H), 1,84 (s, 2,1H), 1,89 (s, 0,9H), 2,07 (dt, J = 8,79, 5,09 Hz, 1H), 2,27 (s, 4,2H), 2,28 (s, 1,8H), 2,36 - 2,29 (m, 1H), 3,66 (s, 2,1H), 3,69 (s, 0,9H), 3,73 - 3,82 (m, 1,3H), 3,91 (dd, J = 10,98, 7,51 Hz, 0,7H), 4,52 (s, 0,7H), 4,59 (s, 0,3H), 6,71 (s, 0,3H), 6,82 - 6,85 (m, 1H), 6,92 (s, 0,7H), 7,14 - 7,18 (m, 1H), 7,30 - 7,31 (m, 1H).

Etapa 16 3-1(S)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-ciclopropil)-3-cloro-fenil]-5-isopropil-4- metil-2-0x0-3, 4-di-hidro-2H-pirimidin-1-ilXbiciclo[1.1.1]pentano-1-carbo- xilato de metila /LNÇO /n LNÇO CH;3 OH Proc CH; Pro, o o

[00235] (Diacetoxi-iodo)benzeno (111 g) e o radical 2,2,6,6-tetra- metilpiperidina-1-oxila (2,44 g) foram misturados em ácido acético (632 ml) sob um fluxo de nitrogênio, e à mistura foi adicionada, em gotas, uma solução mista de 3-13-[(R)-1-[4-((1R,2R)-2-terc-butilcicloropropil)- 3-cloro-fenil]-2-hidroximetil-1,3-dimetil-butilJureídolbiciclo[1,1.1] penta- no-1-carboxilato de metila (158 g) e radical 2,2,6,6-tetrametilpiperidina- 1-oxila (2,44 g) em éter metil ciclopentílico (632 ml) à temperatura am- biente por 20 minutos. A solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 17 horas, e então à mesma foi adicionado, em gotas, ácido trifluoroacético (94 ml) por 9 minutos sob resfriamento com água. A solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas e minutos, e então à mesma foram adicionados 10% em peso/peso de uma solução aquosa de sulfito de sódio (474 ml) sob resfriamento com água. A mistura foi agitada por 45 minutos. À mistura foi adicio- nado n-heptano (790 ml) e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com n-heptano (474 ml). As camadas orgânicas combina- das foram lavadas com água (790 ml, duas vezes) e então secadas com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido com um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Ao re- síduo resultante foi adicionado tolueno, e a mistura foi concentrada sob a pressão reduzida. Este procedimento foi repetido duas vezes. Ao resíduo resultante foi adicionado isopropanol, e a mistura foi con-

centrada sob pressão reduzida. Este procedimento foi repetido três vezes para obter um produto bruto do composto do título (197 g).

[00236] H-RMN (400 MHz, CDCI3) 0,71 (d, J = 7,09 Hz, 3H), 0,77 - 0,83 (m, 1H), 0,90 - 0,95 (m, 2H), 0,94 (s, 9H), 1,04 (d, J = 7,09 Hz, 3H), 1,68 (s, 3H), 1,85 - 1,92 (m, 1H), 2,07 - 2,12 (m, 1H), 2,48 (s, 6H), 3,71 (s, 3H), 4,56 (s, 1H), 5,83 (s, 1H), 6,86 (d, J = 8,31 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 8,31, 1,96 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 1,96 Hz, 1H). Etapa 17 Ácido — 3-f(S)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-ciclopropil)-3-cloro-fenil]-5-iso- propil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-il)biciclo[1.1.1]pentano- 1-carboxílico /, LN o NO Of of, CH; Pro, CH; Pos o Oo

[00237] — 3-4(S)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-cicloropropil)-3-cloro-fenil]- Bb-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-piramidin-1-ilXbiciclo[1.1.1] pentano-1-carboxilato de metila (197 g) foi misturado em isopropanol (437 ml) sob um fluxo de nitrogênio, e à mistura foi adicionada, em go- tas, uma solução aquosa de hidróxido de sódio 2N (376 ml) por 12 mi- nutos sob resfriamento com água. A solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 horas, e então à mesma foi adicionado n- heptano (730 ml). A mistura foi separada. A camada aquosa foi lavada com n-heptano (730 ml). A camada aquosa foi misturada em éter metil terc-butílico (730 ml), e à mesma foram adicionados, em gotas, 2N de ácido clorídrico (584 ml) sob resfriamento com gelo. Então, a mistura foi separada. A camada orgânica foi lavada com água (438 ml, duas vezes) e então secada com sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi re- movido com um filtro, e então o material filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo resultante foi adicionado acetonitrilo, e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para obter um produto bruto do composto do título (152 9).

[00238] O produto bruto resultante foi misturado em acetonitrilo (2.127 ml) sob um fluxo de nitrogênio, e a mistura foi agitada por 6 ho- ras sob aquecimento a 90ºC. A solução de reação foi agitada por 17 horas, sendo resfriada lentamente até a temperatura ambiente, e en- tão o sólido precipitado foi filtrado para obter a Forma Cristalina A (110 g) do composto do título.

[00239] O cristal bruto resultante foi misturado em acetato de isobu- tila (659 ml) e agitado sob aquecimento a 105ºC. Depois que o cristal bruto foi completamente dissolvido, a filtração a quente foi realizada. O filtro foi lavado com acetato de isobutila (200 ml) e o material filtrado foi agitado sob aquecimento a 105ºC, de modo que o sólido precipitado fosse completamente dissolvido. A solução de reação foi agitada por 3 horas, sendo resfriada sob aquecimento a 50ºC, e então um cristal de semente foi adicionado à solução. A solução de reação foi agitada por 1 hora e 50 minutos, sendo resfriada lentamente sob aquecimento a 45ºC. À solução de reação foi adicionado, em gotas, n-heptano (2.601 ml) por 56 minutos sob aquecimento a 55ºC, e então a mistura foi agi- tada por 2 horas. A solução de reação foi agitada por 18 horas, sendo resfriada lentamente até a temperatura ambiente, e então o sólido pre- cipitado foi filtrado para obter a Forma Cristalina C (153 g) do compos- to do título.

[00240] H-RMN (400 MHz, DMSO-Ds) 0,71 (d, J = 6,94 Hz, 3H), 0,86 - 0,94 (m, 3H), 0,90 (s, 9H), 1,04 (d, J = 6,94 Hz, 3H), 1,60 (s, 3H), 1,93 - 2,04 (m, 2H), 2,29 (s, 6H), 5,97 (s, 1H), 6,99 (d, J = 7,86 Hz, 1H), 7,06 (s, 1H), 7,21 (dd, J = 7,86, 1,85 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 1,85 Hz, 1H), 12,44 (s, 1H).

[00241] Ácido 3-((S)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-cicloropropil)-3-cloro- fenil]-5-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-piramidin-1-

ilXbiciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (50,0 mg) foi misturado em tolue- no (0,1 ml) e n-heptano (0,1 ml), e a mistura foi agitada sob aqueci- mento a 80ºC, de modo que os sólidos fossem completamente dissol- vidos. Um cristal de semente foi adicionado à mistura, e a solução de reação foi agitada por 6 horas, sendo resfriada lentamente até a tem- peratura ambiente. Então, o sólido precipitado foi filtrado para obter a Forma Cristalina B (45,0 mg) do composto do título.

[00242] Ácido 3-((S)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-cicloropropil)-3-cloro- fenil]-5-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-piramidin-1- ilXbiciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (9,71 g) foi misturado em acetona (87,5 ml) e água (29 ml), e a mistura foi agitada por 2 horas sob aque- cimento a 70ºC, de modo que os sólidos fossem completamente dis- solvidos. A solução de reação foi agitada por 2 horas sob aquecimento a 42,5ºC, sendo resfriada lentamente. A solução de reação foi agitada por 15 horas, sendo resfriada lentamente até a temperatura ambiente, e então o sólido precipitado foi filtrado para obter a Forma Cristalina D (7,52 g) do composto do título.

[00243] Um cristal do composto do título (Forma Cristalina D; 50,0 mg) foi misturado em acetona (0,375 ml) e água (0,125 ml), e a mistu- ra foi agitada sob aquecimento a 58ºC até que os sólidos estivessem completamente dissolvidos. A solução de reação foi agitada por 8 dias, sendo resfriada até a temperatura ambiente, e então o sólido resultan- te foi filtrado para obter um outro cristal (Forma Cristalina E; 18,6) do composto do título, que foi usado para um cristal de semente no pro- cedimento a seguir.

[00244] Ácido 3-((S)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-cicloropropil)-3-cloro- fenil]-5-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-piramidin-1- ilXbiciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (500 mg) foi misturado em aceto- na (3,6 ml) e água (0,9 ml), e a mistura foi agitada sob aquecimento a 70ºC, de modo que os sólidos fossem completamente dissolvidos. O cristal de semente foi adicionado à solução de reação com aquecimen- to a 50ºC, e a solução de reação foi agitada por 1 hora. À mesma foi adicionada água (3 ml) com aquecimento a 50ºC, e a mistura foi agita- da por 2 horas. A solução de reação foi agitada por 3 horas, sendo resfriada lentamente até a temperatura ambiente, e então o sólido pre- cipitado foi filtrado para obter a Forma Cristalina E (483 mg) do com- posto do título. Exemplo 2 Síntese de ácido 3-f(S)-5-((S)-sec-butil)-4-[4-(2-terc-butil-ciclopropil)-3- cloro-fenil]-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-ilbiciclo[1.1.1 pentano-1-carboxílico Etapa 1 Éster etílico de ácido (S)-2-[(R)-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-1-((S)-2-metil- propano-2-sulfinilamino)-etil]-3-metil pentanoico Br H3C. CH AL en Os, T e Neg a GA Ns, ada > We + 3 O -CHs

[00245] Uma solução de lítio di-isopropilamida/tetra-hidrofurano/n- heptano/etil benzeno 2M (45 ml) foi misturada em tetra-hidrofurano (45 ml) sob argônio. À solução de reação foi adicionada em gotas uma so- lução mistua de éster atílico de ácido (S)-3-metil pentanoico (12,9 g) em tetra-hidrofurano (30 ml) sob resfriamento a -78ºC, e a solução de reação foi agitada a -78ºC por 2 horas. À solução de reação, foi adici- onada em gotas uma solução mista de [1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-et- (E)-iliden]-amida de ácido (S)-2-metil-propano-2-sulfínico (15,0 g) em tetra-hidrofurano (40 ml), e a solução de reação foi agitado sob resfri- amento a -78ºC por 2 horas. À solução de reação, foi adicionada uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente. As camadas da solução de reação foram se-

paradas, e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com sal- moura, e então secadas sobre sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e o material filtrado foi então concentra- do sob pressão reduzida. O resíduo resultante foir purificado por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica (tolueno:acetato de etila = 4:1) para obter uma mistura de diastereômeros do composto do título (8,9 g).

[00246] H-RMN (400 M Hz, CDCI3) 0,66 (t, J = 7,17 Hz, 2,4H), 0,87 (t, J =7,17 Hz, 0,6H), 0,92 (d, J = 6,94 Hz, 0,6H), 1,00 (d, J = 6,94 Hz, 2,4H), 1,05-1,13 (m, 1,6H), 1,19 (t, J = 7,17 Hz, 0,6H), 1,24 (s, 1,8H), 1,27 (t, J = 7,17 Hz, 2,4H), 1,32-1,35 (m, 7,6H), 1,42-1,52 (m, 0,8H), 1,67-1,73 (m, 0,2H), 1,88 (s, 0,6H), 1,90 (s, 2,4H), 2,52 (d, J = 3,01 Hz, 0,8H), 2,82 (d, J = 3,70 Hz, 0,2H), 4,07 (q, J = 7,17 Hz, 0,4H), 4,18 (q, J = 7,17 Hz, 1,6H), 5,04 (s, 0,2H), 5,49 (s, 0,8H), 7,18-7,21 (m, 1H), 7,55-7,59 (m, 2H). Etapa 2 (1R, 3S)-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-hidroximetil-1, —3-dimetil-pentil) amida de ácido (S)-2-metil-propano-2-sulfínico O (o) He EO BOA CH3 O. CH; CH3 OH

[00247] A uma solução de hidreto de di-isobutil alumínio/tolueno 1M (202 ml), foi adicionada em gotas uma solução mistura de éster etílico de ácido (S)-2-[(R)-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-1-((S)-2-metil-propano-2- sulfinilamino)-etil]-3-metil pentanoico (24,3 g) em tolueno (100 ml) sob argônio e sob resfriamento a -78ºC. A solução de reação foi agitada sob resfriamento a -78ºC por 2 horas e 25 minutos. Metanol (24,5 ml) foi adicionado à solução de reação sob resfriamento a -78ºC. À solu-

ção de reação, foi adicionada uma solução aquosa saturada de tartrato de (+)-potássio e sódio (250 ml) sob resfriamento a -78ºC, e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. As camadas da solu- ção de reação foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com tolueno (300 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução aquosa saturada de tartrato de (+)-potássio e sódio (200 ml), água (200 ml), e salmoura (200 ml), e então secadas sobre sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e o material filtrado foi então concentrado sob pressão reduzida. O resí- duo resultante foi azeotropado com tolueno para obter uma mistura bruta de diastereômeros do composto do título (24,7 g).

[00248] H-RMN (400 M Hz, CDCI3) 0,67-0,95 (m, 6H), 1,14 (s, 3,6H), 1,20-1,27 (m, 2H), 1,29 (s, 5,4H), 1,35-1,50 (m, 1H), 1,80-1,82 (m, 0,6H), 1,92 (s, 1,2H), 1,94 (s, 1,8H), 2,02-2,05 (m, 0,4H), 2,73-2,80 (m, 0,6H), 3,18-3,26 (m, 0,4H), 3,78-4,08 (m, 2H), 5,35 (s, 0,6H), 6,23 (s, 0,4H), 7,16-7,20 (m, 1H), 7,52-7,62 (m, 2H). Etapa 3 (S)-2-[(R)-1-amino-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-etil]-3-metil-pentan-1-ol AR Sec, O e A Mm NS, —— er Ar NH? o O

HBO HO CH3 OH CH3 OH [[1R,3S)-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-hidroximetil-1,3-dimetil-pentil) amida de ácido 2-metil-propano-2-sulfínico (24,7 g) foi misturada em tolueno (124 ml). À solução de reação, foi adicionada em gotas uma solução de cloreto de hidrogênio/metanol 2M (50,4 ml) sob resfriamen- to com gelo, e a solução de reação foi agitada por 3 horas sob resfria- mento com um banho de água. À solução de reação, foi adicionada uma solução aquosa de hidróxido de sódio 4N (25 ml) sob resfriamen- to com gelo. O valor do pH da solução de reação foi ajustado em 12 mediante a adição da solução aquosa de hidróxido de sódio 2N sob resfriamento com gelo. As camadas da solução de reação foram sepa- radas, e a camada aquosa foi extraída com tolueno (200 ml). As ca- madas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, e então secadas sobre sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido atra- vés de um filtro, e o material filtrado foi então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi azeotropado com tolueno para obter uma mistura bruta de diastereômeros do composto do título (19,5 9).

[00249] H-RMN (400 M Hz, CDCI3) 0,55 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 0,75 (t, Jy = 7,28 Hz, 1,2H), 0,79 (t, J = 7,17 Hz, 1,8H), 0,84 (d, J = 7,51 Hz, 1,2H), 0,86-1,07 (m, 1H), 1,20-1,29 (m, 1H), 1,35-1,45 (m, 1H), 1,59 (s, 1,2H), 1,62 (s, 1,8H), 1,72-1,74 (m, 0,6H), 1,87-1,90 (m, 0,4H), 3,69 (dd, J = 12,02, 3,47 Hz, 0,4H), 3,75 (dd, J = 11,56, 6,24 Hz, 0,6H), 3,85 (dd, J = 12,02, 3,47 Hz, 0,6H), 3,92 (dd, J = 11,56, 8,90 Hz, 0,4H), 7,18 (dd, J = 8,55, 2,31 Hz, 0,4H), 7,22 (dd, J = 8,55, 2,31 Hz, 0,6H), 7,50 (d, J = 2,31 Hz, 0,4H), 7,56 (d, J = 2,31 Hz, 0,6H), 7,59 (d, J = 8,55 Hz, 0,6H), 7,60 (d, J = 8,55 Hz, 0,4H). Etapa 4 Éster metílico de ácido 3-[3-[(1R, 3S)-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-2-hidro- ximetil-1,3-dimetil-pentilJureídolbiciclo[1.1.1])pentano-1-carboxílico

OF UR e Au —> cr Ato, SO Ee MOTO CH; OH CH3 OH IT oHs o

[00250] Ácido —3-(mtoxicarbonil)biciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (5, g) e tolueno (50 ml) foram misturados sob argônio, e então foram adicionadas difenil fosforil azida (7,2 ml) e trietilamina (4,6 ml) à tem- peratura ambiente. A solução de reação foi agitada sob aquecimento a 110ºC por 1 hora. A solução de reação foi adicionada em gotas a uma solução de (S)-2-[(R)-1-amino-1-(4-bromo-3-cloro-fenil)-etil]-3-metil-

pentan-1-ol (9,8 g) em tetra-hidrofurano (50 ml) por 10 minutos sob resfriamento com gelo. A solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 4 horas. À solução de reação foi adicionada N,N'-trimetil etileno diamina (1,0 ml), e a solução foi concentrada sob pressão re- duzida. Ao resíduo resultante, foi adicionada uma solução aquosa de ácido cítrico a 10%, e a mistura foi extraída com acetato de etila (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com sal- moura, e então secadas sobre sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e o material filtrado foi então concentra- do sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica (acetato de etila:n-hexano = 1:1) para obter o composto do título (10,4 9).

[00251] H-RMN (400 M Hz, CDCI3) 0,18 (d, J = 6,94 Hz, 1,8H), 0,76 (d, J = 6,94 Hz, 1,2H), 0,80 (t, J = 7,17 Hz, 1,2H), 0,87 (t, J = 7,17 Hz, 1,8H), 1,23-1,28 (m, 1H), 1,48-1,77 (m, 3H), 1,84 (s, 1,2H), 1,91 (s, 1,8H), 2,29 (s, 2,4H), 2,29 (s, 3,6H), 3,67 (s, 3H), 3,67-3,70 (m, 0,6H), 3,77-3,85 (m, 1H), 3,97 (dd, J = 11,33, 8,32 Hz, 0,4H), 4,60 (brs, 1H), 7,09-7,16 (m, 1H), 7,40-7,46 (m, 1H), 7,53 (d, J = 8,32 Hz, 1H). Etapa 5 Éster metílico de ácido 3-[(S)-4-(4-bromo-3-cloro-fenil)-5-((S)-sec- butil)-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-il]-biciclo[1.1.1]pentano- 1-carboxílico Br Br Mo Ti

AA HNO AIAAN neo Em Si rc, neo Ex É ora, O Oo

[00252] Éster metílico de ácido 3-(3-[(1R, 3S)-1-(4-bromo-3-cloro- fenil)-2-hidroximetil-1,3-dimetil-pentilJureídolbiciclo[1.1.1]pentano-1- carboxílico (10,4 g) e diclorometano (100 ml) foram misturados sob argônio, e então foram adicionados (diacetoxiiodo)benzeno (7,3 g) e um radical 2,2,6,6-tetrametilpiperidin-1-oxila (0,323 g) à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 16,5 horas. A seguir, foi então adicionada uma solução mista de tiosul- fato de sódio (0.954 g) e água (40 ml) e uma solução aquosa saturada de carbonato de sódio hidrogenado sob resfriamento com gelo. As camadas da solução de reação foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com clorofórmio (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução aquosa saturada de car- bonato de sódio hidrogenado e salmoura, e então secadas sobre sulfa- to de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e o material filtrado foi então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi azeotropado com tolueno. O resíduo resultante foi mistu- rado em tolueno (100 ml), e foi então adicionado trifluorometanosulfonato de pentafluoro anilina (0,345 g) à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada sob aquecimento a 110ºC por 3 horas. A solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por meio de cromatografia em coluna de gel de sílica (acetato de etila:n-hexano = 1:2) para obter o composto do título (4,6 9).

[00253] “H-RMN (400 M Hz, CDCI3) 0,64 (d, J = 6,70 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 7,28 Hz, 3H), 1,25-1,36 (m, 1H), 1,40-1,51 (m, 1H), 1,53-1,63 (m, 1H), 1,67 (s, 3H), 2,47 (s, 6H), 3,71 (s, 3H), 4,61 (s, 1H), 5,77 (s, 1H), 7,21 (dd, J = 8,44, 2,31 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 2,31 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,44 Hz, 1H). Etapa 6 Éster metílico de ácido 3-1(S)-5-((S)-sec-butil)-4-[4-(2-terc-butil-ciclo- propil)-3-cloro-fenil]-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-ilXbiciclo

1.1.1]pentano-1-carboxílico He Ga Sb E HC DZ OT He S CHs Poor CH Pos

[00254] Éster metílico de ácido 3-[(S)-4-(4-bromo-3-cloro-fenil)-5- ((S)-sec-butil)-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-il]-biciclo[1.1.1] pentano-1-carboxílico (4,6 g), trans-2-terc-butil ciclopropil trifluorobora- to de potássio (2,4 g), dicloreto de [1,1'-bis(di-terc-butil-fosfino)ferro- cenolpaládio (11) (0,62 g), carbonato de césio (9,4 9), tolueno (50 ml) e água (5 ml) foram misturados sob argônio. A solução de reação foi agi- tada sob aquecimento a 100ºC por 3,5 horas. À solução de reação, foi adicionado 1-pirrolidinacarboditioato de amônio (0,69 g) sob resfria- mento com um banho de água, e a mistura foi agitada por 50 minutos. À solução de reação também foi adicionado 1-pirrolidinacarboditioato de amônio adicional (0,69 g) à temperatura ambiente, e a mistura foi agitada por 20 minutos. As substâncias insolúveis foram filtradas atra- vés de celite. O material filtrado foi separado, e a camada aquosa re- sultante foi extraída com acetato de etila (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, e então secadas sobre sulfato de sódio. O sulfato de sódio foi removido através de um filtro, e o material filtrado foi então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por meio de cromatografia em colu- na de gel de sílica (acetato de etila:n-hexano = 1:2) para obter uma mistura de diastereômeros (3,5 g). A mistura de diastereômeros resul- tante (0,84 g) foi purificada com uma coluna de preparação quiral para obter o composto do título (0,29 g).

[00255] As condições de purificação para a coluna de preparação são mostradas a seguir.

[00256] Aparelho de preparação: Recycling Preparative Liquid Chromatograph LC-9225 NEXT SERIES, Japan Analytical Industry Co., Ltd.

[00257] Coluna: Daicel CHIRALPAKIA 2,0 cm q x 25 cm

[00258] Fase móvel: hexano:2-propanol = 93:7

[00259] Vazão: 10,0ml/min

[00260] Detecção: UV (220 nm)

[00261] A medição com uma coluna quiral mostrou 10,0 minutos do tempo de retenção para o composto do título resultante (9,4 minutos do tempo de retenção para os diastereômeros do composto do título) com uma pureza de 99%. As condições analíticas para a coluna quiral são mostradas a seguir.

[00262] Aparelho de medição: Sistema HPLC, Shimadzu Corpora- tion, High-Performance Liquid Chromatograph Prominence

[00263] Coluna: Daicel CHIRALPAK la-3 0,46 cm q x 15 cm

[00264] “Temperatura da coluna: 40ºC

[00265] Fase móvel: hexano:2-propanol = 95:5

[00266] Vazão: 1,0ml/min

[00267] Detecção: UV (220 nm)

[00268] H-RMN (400 M Hz, CDCI3) 0,63 (d, J = 6,70 Hz, 3H), 0,83- 0,77 (m, 1H), 0,85 (t, J = 7,28 Hz, 3H), 0,88-0,94 (m, 11H), 1,25-1,34 (m, 1H), 1,41-1,50 (m, 1H), 1,58-1,63 (m, 1H), 1,66 (s, 3H), 2,08-2,12 (m, 1H), 2,47 (s, 6H), 3,71 (s, 3H), 4,55 (s, 1H), 5,75 (s, 1H), 6,86 (d, J = 8,09 Hz, 1H), 7,24 (dd, J = 8,09, 2,08 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 2,08 Hz, 1H). Etapa 7 Ácido — 3-f(S)-5-((S)-sec-butil)-4-[4-((1R,2R)-2-terc-butil-ciclopropil)-3- cloro-fenil]-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1-il)biciclo[1.1.1 pentano-1-carboxílico c e o c Ex H3C AN HC SN CH; Pro CH; Pos o Oo

[00269] Éster metílico de ácido 3-1(S)-5-((S)-sec-butil)-4-[4-(2-terc- butil-ciclopropil)-3-cloro-fenil]-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-pirimidin-1- ilXbiciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (0,287 g), tetra-hidrofurano (2 ml)

e metanol (2 ml) foram misturados, e então foi adiconada uma solução aquosa de hidróxido de sódio 2N (0.58 ml) à temperatura ambiente. À solução de reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. À solução de reação foi concentrada, e ao resíduo resultante foram adi- cionados ácido clorídrico 1N e água. A mistura foi extraída com aceta- to de etila (duas vezes). As camadas orgânicas combinadas foram la- vadas com salmoura, e então secadas sobre sulfato de sódio. O sulfa- to de sódio foi removido através de um filtro, e o material filtrado foi então concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo resultante foram adicionados acetonitrila (1,5 ml) e água (10 ml), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente. O sólido precipitado foi filtrado para obter o composto do título (0,268 9).

[00270] H-RMN (400 M Hz, DMSO-D6) 0,61 (d, J = 6,70 Hz, 3H), 0,81 (t, J = 7,40 Hz, 3H), 0,86-0,91 (m, 12H), 1,22-1,32 (m, 1H), 1,39- 1,49 (m, 1H), 1,56 (s, 3H), 1,63-1,71 (m, 1H), 1,98-2,04 (m, 1H), 2,27 (s, 6H), 5,87 (s, 1H), 6,98 (d, J = 8,20 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,20 (dd, J = 8,21, 2,20 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 2,20 Hz, 1H), 12,42 (brs, 1H).

[00271] As configurações absolutas dos carbonos assimétricos do composto do título foram determinadas pela análise estrutural com rai- os X de um só cristal. Exemplo 3 Polimorfos cristalinos de ácido 3-1(S)A4-[4-((1IR, 2R)-2-terc-butil- ciclopropil)-3-cloro-fenil]-5-isopropil-4-metil-2-0x0-3,4-di-hidro-2H-piri- midin-1-il)biciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico

[00272] A difração com raios X (XRD) em pó, a medição simultânea da análise termogravimétrica e da análise térmica diferencial (TG- DTA), e a calorimetria de varredura diferencial (DSC) foram executa- das para as Formas Cristalinas A a E do composto do título. O apare- lho e as condições de medição para cada medição são mostrados a seguir.

Difractometria com raios X em pó:

[00273] Aparelho de medição: X'pert-PRO-MPD (Spectris Co., Ltd.)

[00274] “Condição de medição: raios X, Cu/45 kV/40 mA, analisada pelo método de transmissão Medição simultânea da análise de termogravimetria e da análise térmi- ca diferencial:

[00275] Aparelho de medição: TGA/SDTA851º*/SF (Mettler Toledo Internacional Inc.)

[00276] Condição de medição: Taxa de aquecimento de 5ºC/min Calorimetria de varredura diferencial:

[00277] Aparelho de medição: DSC Q2000 (TA Instruments Japan Inc.)

[00278] Condições de medição: Taxa de aquecimento de 10º C/min

[00279] Cada resultado da medição para cada forma cristalina é mostrado tal como segue.

A. Forma Cristalina A

[00280] Os dados de XRD são mostrados na Figura 1. O ângulo de difração 20 e a intensidade de difração de cada pico são mostrados tal como segue.

[00281] Os dados de DSC são mostrados na Figura 2. A entalpia dos picos endotérmicos na curva de DSC era de 68,5 J/g, a temperatu- ra endotérmica era de 195ºC, e a temperatura inicial extrapolada era de 193ºC. B. Forma Cristalina B

[00282] Os dados de XRD são mostrados na Figura 3. O ângulo de difração 26 e a intensidade de difração de cada pico são mostrados tal como segue.

[00283] Os dados de DSC são mostrados na Figura 4. A entalpia dos picos endotérmicos na curva de DSC era de 76,0 J/g, a temperatu- ra endotérmica era de 230,2ºC, e a temperatura inicial extrapolada era de 229,6ºC. C. Forma Cristalina C

[00284] Os dados de XRD são mostrados na Figura 5. O ângulo de difração 26 e a intensidade de difração de cada pico são mostrados tal como segue.

[00285] “Os dados de DSC são mostrados na Figura 6. D. Forma Cristalina D

[00286] Os dados de XRD são mostrados na Figura 7. O ângulo de difração 26 e a intensidade de difração de cada pico são mostrados tal como segue. E pese ssa E |

[00287] Os dadosde TG-DTA são mostrados na Figura 8. A taxa de diminuição do peso era de 3,6% por meio de desidratação. Este valor correspondia ao teor de água teórico de um monoidrato do composto do título, e a Forma Cristalina D foi considerada como um monoidrato do composto do título.

[00288] Os dados de DSC são mostrados na Figura 9. A entalpia dos picos endotérmicos na curva de DSC era de 118,4 J/g, a tempera- tura endotérmica era de 128,0ºC, e a temperatura inicial extrapolada era de 118,9ºC.

E. Forma Cristalina E

[00289] Os dados de XRD são mostrados na Figura 10. O ângulo de difração 26 e a intensidade de difração de cada pico são mostrados tal como segue.

[00290] Os dados de TG-DTA são mostrados na Figura 11. A taxa da diminuição do peso era de 3,9% por meio de fusão. Este valor cor- respondia ao teor de água teórico de um monoidrato do composto do título, e a Forma Cristalina E foi considerada como um monoidrato do composto do título.

[00291] Os dados de DSC são mostrados na Figura 12. A entalpia dos picos endotérmicos na curva de DSC era de 138,1 J/g, a tempera- tura endotérmica era de 125,9ºC, e a temperatura inicial extrapolada era de 115,0ºC.

Exemplo de Teste 1 Ensaio in-vitro para o efeito de inibição contra a atividade transcricional de RORy

[00292] O efeito de ihibição contra a atividade transcricional de RORYy foi avaliado pelo ensaio de gene repórter para os compostos de teste.

[00293] Os cDNAs que codificam os domínios de ligação de ligante (LBD) de RORy de seres humanos e camundongos foram obtidos com base nas sequências de RORy de seres humanos (número registrado no Genbank NM 005060.3) e de RORy de camundongos (número re- gistrado no Genbank NM 011281.2) (sequências de LBD: de Ser253 a Lys518 para RORy de seres humanos; de lle251 a Lys516 para RORy de camundongos).

[00294] Os cDNAs de LBD de RORy de seres humanos e camun- dongos foram inseridos no vetor de pFA-CMV (Agilent Technologies, Inc.), que expressa a proteína de fusão do domínio de ligação de GALA4-DNA. Os plasmídios resultantes são indicados a seguir como plasmídio pFA/DRORy e plasmídio prFA/MRORYy, respectivamente.

[00295] O plasmídio pFA/DRORy ou o plasmídio prFA/MRORy foram co-transfectados de maneira transiente em células do ovário de hams- ter chinês (células de CHO) com pG5-Luc (Promega), em que plasmí- dio repórter expressa a luciferase de vagalume de uma maneira de- pendente de GALA.

[00296] O Kit de Transfecção de CHO TransIT (marca registrada) (Mirus) foi usado para co-transfectar as células de CHO com os plas- mídios. Um dia antes do ensaio, as células de CHO foram suspensas no meio nutriente HAM F-12 contendo 10% (v/v) de soro fetal bovino e semeadas a 5,5 x 10º células por frasco de cultura de células de 225 cm? cada. 72 ul de reagente de CHO TransIT (marca registrada) foram adicionados em um tubo de 2 ml contendo 1,55 ml de Opti-MEM, e en- tão misturados e incubados à temperatura ambiente por 10 minutos. 50,4 ul de uma solução de plasmídio contendo 300 ng de plasmídio PFA/hROR y, 12.000 ng de plasmídio pG5-Luc, e 11.700 ng de plas- mídio pcDNA3.1 foram adicionados no tubo e misturados suavemente. No caso do ensaio de camundongo, ao invés disto, foi adicionada uma solução de plasmídio contendo 300 ng de plasmídio pFA/MRORy,

12.000 ng de plasmídio pG5-Luc e 11.700 ng de plasmídio pcDNA3.1. A mistura foi incubada à temperatura ambiente por 10 minutos. 12 ul de reagente de CHO Mojo foram então adicionados a cada tubo e mis- turados suavemente. A mistura foi incubada à temperatura ambiente por 10 minutos. O reagente de transfecção resultante foi aplicado à cultura de células. Após uma incubação a 37ºC, 5% de CO,» por 4 ho- ras, as células de CHO transfectadas com plasmídio foram colhidas por meio de tratamento com tripsina. As células coletadas foram re- suspensas no meio de cultura e foram chapeadas em uma placa bran- ca de 384 poços a 8.000 células/ 35 ul/poço. A placa foi mantida em repouso à temperatura ambiente por 1 hora e a seguir incubada a 37ºC, 5% de CO» por 3 horas. Os compostos de teste foram dissolvi- dos em sulfóxido de dimetila (DMSO) para obter uma concentração de mM. Cada solução foi diluída em série com DMSO e também diluí- da com o meio de cultura imediatamente antes do uso. As soluções do composto de teste foram adicionadas às células na placa em 6 con- centrações diferentes. A concentração final de DMSO era de 0,2% (v/v). Após a adição do composto de teste, as células foram incubadas a 37ºC, 5% de CO,» por 2 dias.

[00297] A viabilidade das células foi testada pelo método de lumi- nescência com CellTiter-Glo (Promega). Dois dias após a adição do composto de teste, cada 40 ul de CellTiter-Glo foram adicionados à placa de 384 poços. Dez minutos após a adição, a luminescência foi medida para cada poço com um leitor de microplacas. A contagem da luminescência nas células tratadas com 0,2% de DMSO apenas foi definida como igual a 100%, e a viabilidade das células depois do tra- tamento com o composto de teste foi calculada como uma porcenta- gem (% de controle) com base no valor de 0,2% de DMSO apenas. Quando a viabilidade das células era de 70% ou menos, um composto de teste era avaliado como dotado de citotoxicidade.

[00298] A atividade transcricional de RORy foi detectada como a atividade intracellular da luciferase ao usar o Sistema de Ensaio de Gene Repórter SteadyLite HTS (Perkin Elmer). O reagente StedayLite foi diluído 2,5 vezes com o tampão Extension (10 mM de Tricina, 0,2% (peso/volume) de albumina de soro bovino, 0,02% (v/v) de Tween-20) para obter uma solução do substrato de luciferase. Dois dias após a adição do composto de teste, 40 ul cada da solução do substrato de luciferase foram adicionados à placa de 384 poços. Após a incubação à temperatura ambiente por 10 minutos, a luminescência de cada poço foi medida com um leitor de microplacas. A atividade da luciferase de- rivada da contagem da luminescência em um poço de controle de veí- culo tratado com 0,2% de DMSO apenas foi definida como igual a 100%, e a atividade da luciferase depois do tratamento com o compos- to de teste foi calculada como uma porcentagem (% de controle) com base no valor de controle do veículo. Um valor de EC5o do composto de teste foi calculado pelo ajuste de curva. As contagens da lumines- cência à concentração do composto de teste onde a citotoxicidade foi observada foram excluídas da análise de dados.

[00299] Os resultados são mostrados na tabela a seguir.

Exemplo de Teste 2 Avaliação quanto à estabilidade metabólica in-vitro A. Estabilidade metabólica em microssomas do fígado (1) Preparação de uma solução de teste

[00300] “Uma solução de teste foi preparada ao diluir 10 mM da so- lução de DMSO de uma substância de teste com acetonitrilo por 100 vezes.

(2) Estudo metabólico da estabilidade com microssomas do fígado

[00301] “Microssomas do fígado de seres humanos e animais (SEKI- SUI XENOTECH; ser humano (H2610), rato (R1000), camundongo (M1000), o macaco (P2000), cão (D1000)) foram ajustados com tam- pão de fosfato de potássio (pH 7,4) a 0,2 mg/ml no sistema de reação.

Em seguida, 1% da solução de uma substância de teste preparada foi adicionado ao sistema de reação. A esta, foi adicionado um sistema de geração de NADPH (preparado de acordo com o método da Literatura de Não Patente 28), e a reação metabólica foi iniciada. Em um tempo designado, 0,1% de ácido fórmico-acetonitrilo/água (3:1) foi adicionado a isto, e a reação foi encerrada.

(3) Análise por LC/MS

[00302] A amostra depois do encerramento da reação foi separada por meio de centrifugação (1.400 g, 20 min), e o sobrenadante foi me- dido então por LC/MS (UPLC-SQD (Waters)) para calcular uma razão residual das substâncias não reagidas.

B. Estabilidade metabólica nos hepatócitos (1) Preparação de uma solução de teste

[00303] “Uma solução de teste foi preparada ao diluir 10 mM da so- lução de uma substância de teste com acetonitrilo por 20 vezes.

(2) Estudo metabólico da estabilidade com hepatócitos

[00304] “ Hepatócitos de seres humanos e animais criopreservados (BIOIVT; ser humano (IVI-X008000), rato (IVT-MOO0005), macaco (IVT- MOO0305), cão (IVT-MOO0205)) foram ajustados com meio E de William (SIGMA; W1878) até 1 x 10º células de uma suspensão de células, que foi então adicionada a uma placa de 96 poços. A seguir, 1% de uma solução de uma substância de teste preparada foi adicionado ao sistema de reação, e a reação metabólica foi iniciada. Em um tempo designado, 0,1% de ácido fórmico-acetonitrila foi adicionado à mesma,

e a reação foi encerrada.

(3) Análise por LC/MS

[00305] A amostra depois do encerramento da reação foi separada por meio de centrifugação (1.400 g, 20 min), e o sobrenadante foi en- tão medido por LC/MS (UPLC-SQD (Waters)) para calcular uma razão residual das substâncias não reagidas.

[00306] Os resultados são mostrados na tabela a seguir.

| consoso. sraniva ] Rs | camundongo [ Maeiss |. 6ão [Mm oa a as as 1a q se joe | e | | os | Ds a a lg" Exemplo de Teste 3 Medição do potencial para a indução de CYP3A4

[00307] O potencial para a indução de CYP3AA4 foi avaliado com Kits de Ativação de Receptores Nucleares (PURACYP; DPX2-96-002) de acordo com os protocolos anexados.

[00308] A experiência a seguir foi realizada com as substâncias que acompanham os Kits de Ativação de Receptores Nucleares (PU- RACYP; DPX2-96-002).

[00309] Um método de medição é mostrado especificamente tal como segue. Células DPX2 foram semeadas em uma placa de 96 po- ços e incubadas com uma incubadora de CO» por 24 horas. Um meio suplementado com composto foi preparado ao adicionar 0,1% de uma solução de DMSO do composto de teste (1, 3, 10 mM) ou rifampicina (10 MM) como um controle positivo a um meio. Os meios na placa de 96 poços foram removidos com um aspirador 24 horas após a semea-

dura, e então foi adicionado o meio suplementado com composto que foi preparado. CellTiter-Fluor foi adicionado ao meio 48 horas após a adição do composto, e a mistura foi incubada com uma incubadora de CO,» por 1 hora. A seguir, a viabilidade das células foi medida pelo mé- todo fluorométrico. ONE-Glo foi adicionado à mistura, e a mistura foi incubada com uma incubadora de CO» por 5 minutos. A seguir, a ativi- dade do repórter foi medida pela determinação luminescente. A razão da indução foi calculada ao comparar a atividade resultante do repórter com uma amostra de controle de DMSO. A % de controle positivo foi calculada a partir da equação a seguir. % de controle positivo = (atividade das células tratadas com fármaco de teste — atividade do controle negativo) x 100 (atividade do controle positivo - atividade do controle negativo)

[00310] Os resultados são mostrados na tabela a seguir. a Exemplo de Teste 4 Medição da solubilidade

[00311] 10mM de uma solução de DMSO (10 ul) da substância de teste foram adicionados a uma placa de 96 poços, e a mistura foi con- centrada e secada com um evaporador centrífugo (Genevac HT-4X). 200 ul de cada solvente (JP1, JP2, FaSSIF, FeSSIF) (vide as Literatu- ras de Não Patente 29 e 30) foram adicionados ao poço após a evapo- ração. A mistura foi agitada à temperatura ambiente a 2.500 rpm por 4 horas. A seguir, a mistura foi filtrada em duas partes com um filtro Mul- tiScreen PCF (MERCK Millipore; MSSLBPC) para obter as amostras (50 e 100 ul). 40 ul foram coletados da amostra obtida na segunda fil-

tração, e então foi adicionado acetonitrilo (300 ul). Após a centrifuga- ção (4.000 g, 5 minutos) da mistura, uma parte do sobrenadante foi medida por LC-UV/MS (UPLC-Premier (Waters)).

[00312] Os resultados são mostrados na tabela a seguir. Exemplo de Teste 5 Ensaio farmacocinético de rato (PK) e medição das concentrações de plasma (1) Estudo PK de rato

[00313] Uma solução de DMSO (0,1 ml/kg) da substância de teste (0,3 mg/kg) foi administrada a um rato macho (7 semanas de idade), e o sangue foi coletado nas horas designadas (5, 10, 15, 30 min, 1,2, 4,8, horas). Amostras depois da coleta do sangue foram separadas por meio de centrifugação (11.000 g, 5 minutos) para obter os plasmas. (2) Medição das concentrações de plasma

[00314] Um volume duplo de uma solução mista de acetonitri- lo/água (9:1) foi adicionado a uma amostra de plasma obtida em (1) a fim de que as proteínas fossem extraídas da mistura. A amostra de- pois da extração foi separada por meio de centrifugação (11.000 g, 5 min), e o sobrenadante foi medido por LC/MSMS (Nexera (Shimadzu)- QTrap5500 (AB SCIEX)). Uma curva de calibração foi medida simulta- neamente, e as concentrações de plasma foram calculadas.

[00315] A constante da taxa de eliminação (Kel) foi calculada a par- tir de dois pontos da fase de eliminação no perfil de concentração de plasma, e a meia-vida (T1/2) foi calculada a partir da constante da taxa de eliminação.

[00316] Kel=-(InConc1-lnConc2)/(t1 -t2)

[00317] T1/2=0,693/Kel

[00318] Os resultados são mostrados na tabela a seguir. Exemplo de Teste 6 Efeitos de substâncias de teste na produção de I|L-17 nos plasmas de camundongos sensiblizados com antígenos

[00319] Os efeitos das substâncias de teste na produção de IL-17 nos plasmas foram avaliados em camundongos sensibilizados com antígenos. A sensibilização com antígeno foi realizada de acordo com a Literatura de Não Patente 31. Camundongos C57BL/6J fêmeas com nove semanas de idade (Japan Charles River K.K.) foram usados co- mo um animal de teste.

[00320] Uma emulsão preparada ao misturar 3 mg/ml de glicoprote- ína de oligodendrócito de mielina (MOG; ANASPEC) e 4 mg/ml de ad- juvante de Freund completo (CFA; Chondrex) em uma mesma razão foi administrada subcutaneamente a um camundongo nos abdômen bilateral a um volume de 50 ul/sítio (dia 1). 1 ug/ml da toxina de coque- luche (PTX; List Biological Laboratories) foi administrado intraperitone- almente a um volume de 200 ul/cabeça (dia 1 e 3). O sangue foi cole- tado no dia 8.

[00321] A administração foi executada uma vez ao dia por 7 dias após a administração da emulsão (dias 1 a 7). 0,5% (peso/volume) de metil celulose (MC) foi administrado oralmente a um volume de 10 ml/kg ao grupo normal (camundongos normais) e o grupo do veículo (camundongos sensibilizados com antígenos), e 0,038 mg/ml ou 0,1 mg/ml de uma substância de teste suspensa em 0,5% (peso/volume) de MC foi administrado oralmente a um volume de 10 ml/kg a um gru- po ao qual o composto foi administrado.

[00322] O sangue foi separado por meio de centrifugação, e a con- centração de IL-17 no plasma foi medida então com kit Mouse IL-17 ELI- SA Quantikine (marca de comércio registrada) (R&D Systems, Inc.).

[00323] A concentração de IL-17 do grupo normal foi considerada como igual ar 0% e aquela do grupo do veículo foi considerada como igual a 100%. A porcentagem de concentração de IL-17 (% de contro- le) do grupo ao qual o composto foi administrado foi calculada a partir da equação a seguir.

% de controle = (a - b)/(c - b) x 100 a: Concentração de IL-17 do grupo ao qual o composto foi administrado b: Concentração de IL-17 do grupo normal c: Concentração de IL-17 do grupo do veículo

[00324] Em seguida, uma dose do composto onde a concentração de IL-17 foi diminuída por 50% (EDso) foi calculada a partir da equação a seguir.

[00325] EDso = 10 (oa(A/B)x(50-D)((C-D)+log(B)): contanto que EDso = B no caso em que D = 50, e EDso > B no caso em que D > 50 A: a quantidade dosada do grupo de dose menor (isto é, 0,3 mg/kg) B: a quantidade dosada do grupo de dose maior (isto é, 1 mg/kg) C: % de controle no grupo de dose menor D: % de controle no grupo de dose maior

[00326] Os resultados são mostrados na tabela a seguir.

Exemplo de Teste 7 Efeitos de substâncias de teste na produção de IL-17 nos plasmas de camundongos normais estimulados com citocinas

[00327] Os efeitos de substâncias de teste na produção de IL-17 nos plasmas foram avaliados em camundongos normais. A avaliação foi executada de acordo com a Literatura de Não Patente 32. Camun- dongos C57BL/6J fêmeas com nove semanas de idade (Japan Char- les Rivers K.K.) foram usados como um animal de teste.

[00328] Uma solução mista preparada ao misturar a proteína IL-1 beta/IL-1F2 de Camundongo Recombinante (R&D Systems, INC.) e a proteína I1L-23 de Camundongo Recombinante (R&D Systems, INC.) a uma concentração final de 1,5 ug/ml foi administrada intravenosamen- te a todos os grupos na veia da cauda a um volume de 200 ul/cabeça. O sangue foi coletado 2 horas após a administração da solução de ci- tocina.

[00329] A administração foi executada 28 horas antes da adminis- tração da solução de citocina. 0,5% (peso/volume) de metil celulose (MC) e 0,1 mg/ml de uma substância de teste suspensa em 0,5% (pe- so/volume) de MC foram administrados oralmente em um único volu- me de 0,2 ml/cabeça ao grupo do veículo e a um grupo ao qual o composto foi administrado, respectivamente.

[00330] O sangue foi separado por meio de centrifugação, e a con- centração de IL-17 no plasma foi medida então com o kit Mouse IL-17 ELISA Quantikine (marca de comércio registrada) (R&D Systems, Inc.).

[00331] A concentração de IL-17 do grupo do veículo foi conside- rada como igual a 100%, e a porcentagem da concentração de IL-17 do grupo ao qual o composto foi administrado em relação ao grupo do veículo foi calculada a partir da equação a seguir. Os resultados são mostrados na tabela a seguir. % = a/b x 100 a: Concentração de IL-17 do grupo ao qual o composto foi administrado b: Concentração de IL-17 do grupo do veículo Exemplos de Formulação

[00332] Os exemplos de formulação na presente invenção incluem, por exemplo, as formulações a seguir. A presente invenção, no entan- to, não deve ser limitada a estes Exemplos de Formulação. Exemplo de Formulação 1 (Preparação de uma cápsula) 1) Composto do Exemplo 1 30 mg 2) Celulose microcristalina 10 mg 3) Lactose 19 mg 4) Estearato de magnésio 1 mg

[00333] Os ingredientes 1), 2), 3) e 4) são misturados para serem inseridos em uma cápsula de gelatina. Exemplo de Formulação 2 (Preparação de um comprimido) 1) Composto do Exemplo 1 10 g 2) Lactose 50 g 3) Amido de milho 15 g 4) Carmelose cálcica 44 g 5) Estearato de magnésio 19g

[00334] A quantidade total de ingredientes 1), 2) e 3), e 30 g do in- grediente 4), são combinados com água, secados em vácuo e então granulados. Os grânulos resultantes são misturados com 14 g do in- grediente 4) e 1 g do ingrediente 5), e transformados em comprimidos com uma máquina de formação de comprimidos. Desta maneira, são obtidos 1.000 comprimidos que compreendem 10 mg do composto do Exemplo 1 para cada um.

APLICABILIDADE INDUSTRIAL

[00335] Um composto de fórmula (1) ou (2) ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo deve ser útil para o tratamento ou a pre- venção de doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibro- ses, cânceres, doenças metabólicas, a isquemia, a cardiomiopatia, a hipertensção e doenças periodontais.

Claims (12)

REIVINDICAÇÕES

1. Composto, caracterizado pelo fato de possuir a fórmula (1) ou (2): CH; CH; HC HaC. PIO) Es PIO) gt e . seo c Ari seo HC. e N H3C e N CH; oH CH, OH o o (1) (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que o composto é um composto da fórmula (1): CH. HC] ? HC O go

NO fe) UA Dá H3;C N o (1) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que o composto é um composto da fórmula (2): HS" HC e go

NÃO e rs H3;C SN CH oH o (2) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivin- dicações 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

5. Antagonista de RORy, caracterizado pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivin- dicações 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Agente terapêutico ou preventivo para uma doença sele- cionada do grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doença metabólica, isquemia, cardiomiopatia, hipertensão e doença periodontal, caracterizado pelo fato de que compreende um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

7. Método para antagonizar RORy, caracterizado pelo fato de que compreende a administração de uma quantidade terapeutica- mente eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um mamífero.

8. Método para o tratamento ou a prevenção de uma doen- ça selecionada do grupo que consiste em doenças autoimunes, doen- ças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doença metabólica, isque- mia, cardiomiopatia, hipertensão e doença periodontal, caracterizado pelo fato de que compreende a administração de uma quantidade te- rapeuticamente eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um mamífero.

9. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de serve na manufatura de um anta- gonista de RORy.

10. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que serve na manufatura de um agente terapêutico ou preventivo para uma doença selecionada do grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doença metabólica, isquemia, cardiomiopatia, hipertensão e doença periodontal.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracte- rizado pelo fato de que serve para o uso em um antagonista de RORy.

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracte- rizado pelo fato de que serve para o uso no tratamento ou na preven- ção de uma doença selecionada do grupo que consiste em doenças autoimunes, doenças alérgicas, olho seco, fibrose, cânceres, doença metabólica, isquemia, cardiomiopatia, hipertensão e doença periodon- tal.