BR112020011161A2

BR112020011161A2 - forma cristalina de um inibidor de canal medular renal externo, composição farmacêutica que a compreende, método de preparação da referida forma cristalina e composição farmacêutica e uso das mesmas

Info

Publication number: BR112020011161A2
Application number: BR112020011161-9A
Authority: BR
Inventors: Guaili Wu; Quanliang ZHANG; Yun Lu; Fei Yao
Original assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd.
Priority date: 2017-12-06
Filing date: 2018-12-05
Publication date: 2020-11-17
Also published as: EP3722293A1; MX2020005930A; CN111372929B; WO2019109935A1; CN111372929A; KR20200096802A; CA3084848A1; EP3722293A4; ZA202004017B; TWI685492B; AU2018380171A1; RU2020122014A; TW201925191A; JP2021505602A; US20200347039A1

Abstract

A presente invenção fornece uma forma cristalina de um inibidor do canal de potássio medular renal externo e um método de preparação da mesma. Em particular, a presente invenção fornece a forma cristalina III de um L-tartarato de um inibidor do canal de potássio medular renal externo (ROMK) (I) e um método de preparação da mesma. A forma cristalina III tem boa estabilidade química e estabilidade da forma cristalina, e o solvente de cristalização usado tem baixa toxicidade e resíduo. Assim, a presente invenção pode ser melhor usada no tratamento clínico.

Description

FORMA CRISTALINA DE UM INIBIDOR DE CANAL MEDULAR RENAL EXTERNO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA QUE A COMPREENDE, MÉTODO DE PREPARAÇÃO DA REFERIDA FORMA CRISTALINA E COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E USO DAS MESMAS

[001] A presente invenção reivindica a prioridade do Pedido de Patente Chinês CN201711273099.2 depositado em 6 de dezembro de 2017, o conteúdo do qual é, por meio deste, incorporado por referência em sua totalidade. Campo da invenção

[002] A presente invenção se refere a uma forma cristalina do inibidor do canal medular renal externo e um método de preparação da mesma. Estado da técnica

[003] O fortalecimento da função de reabsorção de sal dos rins causará risco de hipertensão. Ao contrário, a inibição da função de reabsorção dos rins pode promover a excreção da urina e desempenhar um papel diurético e anti- hipertensivo. Diuréticos comuns incluem medicamentos diuréticos tiazídicos, que são fármacos anti-hipertensivos de primeira linha nos Estados Unidos e principalmente agem sobre carreadores de transporte de Na+-Cl; Diuréticos de alça são mais eficazes para pacientes com disfunção renal, principalmente através de transportador de Na+-K+-2Cl. Entretanto, ambos os tipos dos diuréticos podem causar hipocalemia (sintomas: fraqueza, fadiga, espasmo muscular, constipação e problemas no ritmo cardíaco tais como arritmia), o que aumenta o risco de morbidez e mortalidade de doenças cardiovasculares.

[004] O canal de potássio medular renal externo (ROMK) é também chamado canal de potássio retificador de influxo 1.1 (KIR 1.1). O canal iônico de ROMK pode regular a reabsorção de Na+ através da condutância de membrana apical do ramo ascendente espesso renal (TAL) em coordenação com o cotransportador de Na+-K+-2Cl- NKCC2 (responsável pelo transporte de NaCl).

Estudos descobriram que ROMK está diretamente relacionado ao canal secretório do rim, depois de nocautear o gene de ROMK, o canal iônico 35-pS do TAL e CCD de camundongo e outros canais iônicos K+ de TAL são deletados. A síndrome de Bartter é uma doença hereditária recessiva autossômica, caracterizada por uma grande quantidade de perda de sal no rim, hipocalemia e pressão arterial baixa. Hiperplasia de células parabulbares é principalmente causada por mutações de ROMK ou cotransportador de Na+-K+-2Cl-, exceto que a hipocalemia de hiperplasia de células parabulbares causada pela mutação de ROMK é consideravelmente aliviada comparado com aquela causada por mutações de cotransportador de Na+-K+-2Cl-. Em uma conclusão, a inibição da função de ROMK pode inibir eficazmente a função de reabsorção de sal do transportador de Na+-K+-2Cl-, promover a excreção da urina, e obter diurese e efeitos anti-hipertensivos sem causar hipocalemia.

[005] O WO2016091042A1 (data de publicação 16-06-2016) revela um inibidor do canal de potássio medular renal externo (ROMK), cujo nome químico é (R)-5-ciano-N-(1-(2-hidróxi-2-(4-metil-1-carbonil-1,3-di-hidroisobenzofuran-5- il)etil)piperidin-4-il)-4-metoxipiridinocarboxamida. Comparado com outros inibidores de ROMK, o composto tem grupos polares adicionais, o que reduz ClogP, melhora a seletividade de hERG e aumenta a segurança com base na manutenção da atividade de inibidor de ROMK, a estrutura do qual é representada pela fórmula (II): .

[006] A estrutura cristalina do ingrediente farmacêutico ativo frequentemente afeta a estabilidade química e física do medicamento. Diferentes condições de cristalização e condições de armazenamento podem levar a mudanças na estrutura cristalina do composto, algumas vezes acompanhadas pela geração de outras formas cristalinas. Em geral, produtos farmacológicos amorfos não têm nenhuma estrutura cristalina regular e frequentemente têm outros defeitos, tais como estabilidade deficiente do produto, filtração difícil, aglomeração fácil e fluidez deficiente. Portanto, é necessário melhorar várias propriedades do composto representado pela fórmula (II). Conteúdo da presente invenção

[007] O problema técnico a ser resolvido pela presente invenção é fornecer uma forma cristalina III de tartarato de (R)-5-ciano-N-(1-(2-hidróxi-2-(4-metil-1- carbonil-1,3-di-hidroisobenzofuran-5-il)etil)piperidin-4-il)-4- metoxipiridinocarboxamida (representado pela fórmula (I)) e um método de preparação da mesma, e a forma cristalina tem boa estabilidade.

[008] As soluções técnicas da presente invenção são como segue:

[009] A presente invenção fornece uma forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I), em que depois da radiação Cu-Kα, um espectro de difração de raio X em pó representado por ângulos de difração 2θ é obtido, em que existem picos característicos em 3,88; 7,54; 14,76; 18,64 e 22,21, .

[010] Preferencialmente, o espectro de difração de raio X em pó da forma cristalina III tem picos característicos em 3,88; 7,54; 11,22; 14,76; 17,29; 18,64;

20,28; 22,21; 23,79; 25,34 e 27,09.

[011] Mais preferencialmente, o espectro de difração de raio X em pó da forma cristalina III tem picos característicos em 3,88; 7,54; 11,22; 11,61; 12,26; 12,73; 13,35; 13,64; 14,76; 15,98; 16,47; 17,07; 17,29; 18,64; 20,28; 20,62; 22,21; 23,16; 23,79; 24,14; 24,85; 25,34; 26,08; 26,85; 27,09; 28,77; 29,74; 32,22; 33,66; 34,50; 35,60; 37,42 e 39,27.

[012] A presente invenção fornece ainda um método de preparação da forma cristalina III, que é um dos métodos seguintes:

[013] Método (1): reagir o estado livre do composto representado pela fórmula (I) com ácido L-tartárico em um solvente ou um solvente misto, e então depois da agitação, cristalização, filtração e secagem, a forma cristalina III alvo é obtida; o solvente é um solvente sulfóxido, um solvente amida ou um solvente alcoólico, e o solvente misto é um solvente misto de um solvente sulfóxido e um solvente alcoólico, ou um solvente misto de um solvente amida e um solvente alcoólico; o solvente sulfóxido é preferencialmente dimetil sulfóxido, o solvente amida é preferencialmente N,N-dimetilformamida ou N,N-dimetilacetamida, e o solvente alcoólico é preferencialmente metanol, etanol, n-propanol, iso- propanol ou n-butanol;

[014] Método (2): dissolver o composto representado pela fórmula (I) em um solvente ou um solvente misto, e então depois da cristalização, filtração e secagem, a forma cristalina III alvo é obtida; a cristalização é conduzida a temperatura ambiente, ou enquanto resfriando ou volatilizando o solvente ou induzida por cristal semente, e a temperatura para o resfriamento é -10 a 25°C, preferencialmente a cristalização é conduzida a temperatura ambiente; o solvente é um solvente sulfóxido, um solvente amida ou um solvente alcoólico, e o solvente misto é um solvente misto de um solvente sulfóxido e um solvente alcoólico, ou um solvente misto de um solvente amida e um solvente alcoólico;

o solvente sulfóxido é preferencialmente dimetil sulfóxido, o solvente amida é preferencialmente N,N-dimetilformamida ou N,N-dimetilacetamida, e o solvente alcoólico é preferencialmente metanol, etanol, n-propanol, iso-propanol ou n- butanol, o solvente misto é mais preferencialmente dimetil sulfóxido/metanol, dimetil sulfóxido/etanol, dimetil sulfóxido/n-propanol, dimetil sulfóxido/iso- propanol, dimetil sulfóxido/n-butanol, N,N-dimetil formamida/etanol ou N,N- dimetil acetamida/etanol.

[015] A presente invenção se refere ainda a uma composição farmacêutica da forma cristalina III compreendendo a forma cristalina III e um carreador, um diluente ou um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[016] A presente invenção se refere ainda a um método de preparação a composição farmacêutica compreendendo misturar a forma cristalina III descrita acima com o carreador, o diluente ou o excipiente farmaceuticamente aceitável.

[017] A presente invenção se refere ainda a um uso da forma cristalina III ou da composição farmacêutica da forma cristalina III na fabricação de um medicamento para tratar e/ou prevenir doenças ou condições associadas a inibidores do canal de potássio medular renal externo (ROMK), em que as doenças ou condições são preferencialmente hipertensão ou insuficiência cardíaca. De acordo com pesquisas, comparado com a forma de base livre, a biodisponibilidade e a higroscopicidade da forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) são melhoradas: a biodisponibilidade da forma cristalina III no experimento com camundongo (5 mg/kg) é aumentada de 9283ng/mL x h da base livre para 12618ng/mL x h, e pode ser observado que a biodisponibilidade in vivo da forma cristalina III é obviamente melhor do que aquela da base livre; por outro lado, comparado com a base livre, a forma cristalina III tem uma mudança de peso de apenas 0,93 % em 0 % de RH a 80 % de RH, o que tem vantagens óbvias.

[018] O espectro de difração de raio X em pó (XRPD) e calorimetria diferencial de varredura (DSC) foram usados para determinar a estrutura e estudar a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I).

[019] O método de recristalização da forma cristalina III não é particularmente limitado e pode ser realizado se referindo a operações de recristalização convencionais. Por exemplo, a matéria-prima do composto representado pela fórmula (I) pode ser dissolvida em um solvente orgânico e depois adicionada com um antissolvente para cristalização, e depois da conclusão da cristalização, o cristal requerido pode ser obtido através de filtração e secagem.

[020] A cristalização na presente invenção pode ser conduzida enquanto volatilizando o solvente, ou a temperatura ambiente, ou enquanto resfriando, ou induzida por cristal semente e semelhantes.

[021] O material de partida usado no método de preparação a forma cristalina da presente invenção pode ser qualquer forma do composto representado pela fórmula (I), que inclui, mas não é limitada à forma cristalina amorfa ou qualquer forma cristalina e etc. Descrição detalhada da presente invenção

[022] Na descrição e nas reivindicações do presente pedido, a menos que de outro modo especificado, termos científicos e técnicos usados na presente invenção têm os significados comumente entendidos por aqueles técnicos no assunto. Entretanto, de modo a melhor entender a presente invenção, definições e explanações de alguns termos relevantes são fornecidas abaixo. Além disso, quando a definição e a interpretação dos termos fornecidos no presente pedido são incompatíveis com o significado comumente entendido por aqueles técnicos no assunto, a definição e a interpretação dos termos fornecidos no presente pedido devem prevalecer.

[023] O termo “C1-6 alquila” usado na presente invenção representa um grupo alquila linear ou ramificado tendo 1 a 6 átomos de carbono, e exemplos específicos incluem, mas não são limitados a, metila, etila, n-propila, iso-propila, n-butila, iso-butila, sec-butila, terc-butila, n-pentila, iso-pentila, 2-metilbutila, neo-pentila, 1-etilpropila, n-hexila, iso-hexila, 3-metilpentila, 2-metilpentila, 1- metilpentila, 3,3-dimetilbutila, 2,2-dimetilbutila, 1,1-dimetilbutila, 1,2- dimetilbutila, 1,3-dimetilbutila, 2,3-dimetilbutila, 2-etilbutila, 1,2-dimetilpropila, e semelhantes.

[024] O termo “solvente alcoólico” usado na presente invenção se refere ao solvente derivado da substituição de um ou mais do que um átomo de hidrogênio em “C1-6 alquila” com um ou mais do que uma “hidroxila (-OH)”, o “C1-6 alquila” é como definido acima, e exemplos específicos incluem, mas não são limitados a, metanol, etanol, iso-propanol, n-propanol, n-butanol, iso-pentanol ou trifluoroetanol.

[025] O “solvente sulfóxido” usado na presente invenção se refere a um composto formado combinando-se tionila (-SO-) e hidrocarbila, e exemplos específicos incluem, mas não são limitados a, dimetil sulfóxido, dietil sulfóxido ou benzil sulfóxido.

[026] O “solvente amida” usado na presente invenção se refere a um composto líquido em que o grupo hidroxila de um grupo carboxila contido em uma molécula carboxílica é substituído por um grupo amino ou um grupo hidrocarboneto amino (-NHR ou -NR2); ele pode ser também considerado como um composto líquido formado substituindo-se o hidrogênio em um átomo de nitrogênio contido em uma amônia ou uma molécula de amina com um acila; exemplos específicos incluem, mas não são limitados a, N,N-dimetilformamida e N,N-dimetilacetamida.

[027] O “solvente misto” usado na presente invenção se refere a um solvente obtido misturando-se um ou mais do que um tipo diferente de solventes orgânicos em uma certa razão; o solvente misto é preferencialmente um solvente misto de um solvente sulfóxido e um solvente alcoólico, ou um solvente misto de um solvente amida e um solvente alcoólico; o solvente sulfóxido é preferencialmente dimetil sulfóxido, o solvente amida é preferencialmente N,N- dimetilformamida ou N,N-dimetilacetamida, o solvente alcoólico é preferencialmente metanol, etanol, n-propanol, iso-propanol ou n-butanol, mais preferencialmente dimetil sulfóxido/metanol, dimetil sulfóxido/etanol, dimetil sulfóxido/n-propanol, dimetil sulfóxido/iso-propanol, dimetil sulfóxido/n- butanol, N,N-dimetil formamida/etanol ou N,N-dimetil acetamida/etanol, a certa razão pode ser razão de volume ou razão de massa, a razão de volume é 0,05:1 a 1:0,05, preferencialmente 1:1, 1:2, 2:1, 4:1, 5:1 ou 10:1, e a razão de massa é 10:1 a 1:10, preferencialmente 5:1, 2:1, 1:2 ou 1,6:1.

[028] O “espectro de difração de raio X em pó ou XRPD” usado na presente invenção se refere àquele de acordo com a fórmula de Bragg 2d sin θ = nλ (na fórmula, λ é o comprimento de onda do raio X, λ = 1,54056 Å, o número da ordem de difração n é qualquer número inteiro positivo, geralmente tomando o pico de difração de primeira ordem, n = 1), quando o raio X é incidente a um plano atômico tendo espaçamento no plano de treliça D de um cristal ou parte de uma amostra cristalina em um ângulo rasante θ (o ângulo residual de um ângulo incidente, também conhecido como ângulo de Bragg), a equação de Bragg pode ser depois satisfeita, assim este grupo de padrões de difração de raio X em pó pode ser medido.

[029] A “análise de calorimetria diferencial de varredura ou DSC” usada na presente invenção se refere à medição da diferença de temperatura e diferença de fluxo de calor entre a amostra e a substância de referência no processo de aquecimento ou temperatura constante da amostra, de modo a caracterizar todas as mudanças físicas e químicas relacionadas ao efeito térmico e obter a informação de mudança de fase da amostra.

[030] O “2θ ou ângulo 2θ” usado na presente invenção se refere ao ângulo de difração, θ é o ângulo de Bragg, a unidade é ° ou grau, e a faixa de erro de 2θ é ±0,1 a ±0,5, preferencialmente ±0,1 a ±0,3, mais preferencialmente ±0,2.

[031] O “espaçamento no plano cristalino ou espaçamento no plano cristalino (valor d)” usado na presente invenção se refere a 3 vetores unitários a, b e c selecionados da treliça espacial que não são paralelos e que conectam os dois pontos de treliça adjacentes, que dividem a treliça em unidades paralelepipédicas justapostas, o que é chamado espaçamento no plano cristalino. A treliça espacial é dividida em um conjunto de treliças lineares, chamadas treliças espaciais ou treliças, de acordo com as linhas unitárias paralelepipédicas determinadas. A matriz e treliça de pontos refletem a periodicidade da estrutura cristalina com pontos e linhas geométricos respectivamente, planos cristalinos diferentes têm espaçamento de superfície diferente (isto é, a distância entre dois planos cristalinos paralelos adjacentes); a unidade é Å ou angstrom.

[032] A presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica compreendendo a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I), e opcionalmente um ou mais do que um carreador e/ou diluente farmacêutico. A composição farmacêutica pode ser formulada em qualquer forma de dosagem farmaceuticamente aceitável. Por exemplo, a forma cristalina III ou a preparação farmacêutica do composto representado pela fórmula (I) da presente invenção pode ser formulada em comprimidos, cápsulas, pílulas, grânulos, soluções, suspensões, xaropes, injeções (incluindo injeção, pó estéril para injeção e solução concentrada para injeção), supositórios, inalantes ou pulverizações.

[033] Além disso, a composição farmacêutica da presente invenção pode ser também submetida a pacientes ou indivíduos em necessidade de tal tratamento em qualquer administração adequada, tal como administração oral, parenteral, retal, pulmonar ou local, etc. Quando usada para administração oral, a composição farmacêutica pode ser fabricada em preparações orais, tais como preparações sólidas orais, tais como comprimidos, cápsulas, pílulas, grânulos etc.; ou, preparações líquidas orais, tais como soluções orais, suspensões orais, xaropes, etc. Quando formulada em uma preparação oral, a preparação farmacêutica pode conter também agentes de enchimento, aglutinantes, desintegrantes, lubrificantes adequados, etc. Quando usada para administração parenteral, a preparação farmacêutica pode ser fabricada em injeções, incluindo líquido para injeção, pó estéril para injeção e solução concentrada para injeção. Quando preparada em uma formulação de injeção, a composição farmacêutica pode ser produzida de acordo com métodos convencionais no campo farmacêutico existente. Quando preparada em uma injeção, pode não haver nenhum aditivo adicionado à preparação farmacêutica, e aditivos apropriados podem ser também adicionados de acordo com a natureza do fármaco. Quando usada para administração retal, a preparação farmacêutica pode ser formulada em supositório, etc. Quando usada para administração pulmonar, a preparação farmacêutica pode ser fabricada em inalante ou pulverização, etc. Em algumas modalidades preferidas, a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) da presente invenção está presente em uma composição farmacêutica ou um fármaco em uma quantidade terapeuticamente e/ou profilaticamente eficaz. Em algumas modalidades preferidas, a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) da presente invenção está presente na composição farmacêutica ou fármaco em forma de dose unitária.

[034] O composto da fórmula (I) e a forma cristalina III da mesma podem ser usados na fabricação de um medicamento para tratar uma doença ou uma condição associada a inibição do canal de potássio medular renal externo (ROMK). Portanto, o presente pedido também se refere a um uso da forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) na fabricação de um medicamento, a medicação é usada para tratar a doença associada a inibição do canal de potássio medular renal externo (ROMK). Além disso, o pedido também se refere a um método para inibir uma doença associada a inibição do canal de potássio medular renal externo (ROMK) compreendendo administrar a um indivíduo em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente e/ou profilaticamente eficaz do cristal III do composto representado pela fórmula (I) da presente invenção, ou a composição farmacêutica da presente invenção.

[035] Em algumas modalidades preferidas, a doença é associada a inibição do canal de potássio medular renal externo (ROMK), que se refere à hipertensão ou insuficiência cardíaca. Os efeitos benéficos da presente invenção

[036] Comparada com o estado da técnica, a solução técnica da presente invenção tem as vantagens seguintes:

[037] Estudos mostram que a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) preparado pelo presente invenção tem boa solubilidade e pureza mais alta, e a forma cristalina detectada por XRPD continua a mesma sob as condições de temperatura alta, umidade alta e iluminação, o que ilustra boa estabilidade da forma cristalina; a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) obtido pela solução técnica da presente invenção pode satisfazer os requisitos médicos de produção, transporte e armazenamento, tem processo de produção estável, repetível e controlável, o que é adequado para a produção industrial. Breve descrição dos desenhos

[038] A Fig. 1 é um espectro de XRPD da forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I).

[039] A Fig. 2 é um padrão de DSC da forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I).

[040] A Fig. 3 é um espectro de XRPD da forma cristalina I do composto representado pela fórmula (I).

[041] A Fig. 4 é um espectro de XRPD da forma cristalina II do composto representado pela fórmula (I). Descrição detalhada das modalidades preferidas

[042] A presente invenção será explicada em mais detalhe abaixo com referência às modalidades, que são apenas usadas para ilustrar as soluções técnicas da presente invenção, e não limitam a essência e escopo da presente invenção. Aparelho de teste para os experimentos

1. Padrão de DSC

[043] Modelo do aparelho: MettlerToledo DSC 1 Staree System

[044] Gás de purgação: nitrogênio

[045] Taxa de aquecimento: 10,0°C/min

[046] Faixa de temperatura: 40 a 350°C

2. Espectro de difração de raio X

[047] Modelo do aparelho: Bruker D8 Focus X-ray powder diffractometer

[048] Raio: Raio monocromático Cu-Kα (λ = 1,5406)

[049] Modo de varredura: θ/2θ, faixa de varredura: 2 a 40°

[050] Voltagem: 40 KV, Corrente: 40 mA

[051] O composto representado pela fórmula (II) (estado livre) é preparado se referindo ao método descrito no pedido de patente WO2016091042A1 (data de publicação de 16 de junho de 2016).

Exemplo Comparativo 1: Preparação da forma cristalina I

[052] Ácido L-tartárico (0,4 g, 2,66 mmol) foi adicionado em um frasco de reação de 50 mL, 30 mL de metanol foi adicionado, depois a mistura foi aquecida até 70°C até dissolver, e (R)-5-ciano-N-(1-(2-hidróxi-2-(4-metil-1-carbonil-1,3-di- hidroisobenzofuran-5-il)etil)piperidin-4-il)-4-metoxipiridinocarboxamida (1,0 g, 2,22 mmol) (preparado de acordo com o método descrito no pedido de patente WO2016091042A1 (data de publicação de 16 de junho de2016)) foi adicionado, depois a mistura foi reagida a 70°C por 24 horas, resfriada até a temperatura ambiente, seguido por filtração por sucção e secagem para obter 1,22 de g de sólido, com um rendimento de 91,7 %. O espectro de difração de raio X em pó foi mostrado na fig. 3, e a forma cristalina foi definida como forma cristalina I. Exemplo Comparativo 2: Preparação da forma cristalina II

[053] (R)-5-ciano-N-(1-(2-hidróxi-2-(4-metil-1-carbonil-1,3-di- hidroisobenzofuran-5-il)etil)piperidin-4-il)-4-metoxipiridinocarboxamida (1,0 g, 2,22 mmol) (preparado de acordo com o método no pedido de patente WO2016091042A1 (data de publicação de 16 de junho de 2016)), ácido L- tartárico (0,4 g, 2,66 mmol) foram adicionados em um frasco de reação de 50 mL, 30 mL de iso-propanol/tetrahidrofurano/água (V:V:V = 20:10:1) foi adicionado, a mistura foi aquecida até 70°C por reação por 24 h, e depois reduzida até a temperatura ambiente, seguido por filtração por sucção e secagem para obter 1,15 g de sólido, com um rendimento de 86,5 %. O espectro de difração de raio X em pó foi mostrado na fig. 4, e a forma cristalina foi definida como forma cristalina II. Modalidade 1: Preparação da forma cristalina III

[054] Ácido L-tartárico (0,4 g, 2,66 mmol) foi adicionado em um frasco de reação, 25 mL de etanol foi adicionado, a mistura foi aquecida até 70°C até dissolver, e (R)-5-ciano-N-(1-(2-hidróxi-2-(4-metil-1-carbonil-1,3-di-

hidroisobenzofuran-5-il)etil)piperidin-4-il)-4-metoxipiridinocarboxamida (1,0 g, 2,22 mmol) (preparado de acordo com o método descrito no pedido de patente WO2016091042A1 (data de publicação de 16 de junho de 2016)) foi adicionado, a mistura foi reagida a 70°C por 24 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente, seguido por filtração por sucção para obter 1,23 g de sólido com um rendimento de 92,3 %. O espectro de difração de raio X em pó (espectro de XRPD) da amostra cristalina foi mostrado na Figura 1 e o espectro de DSC foi mostrado na Figura 2, um pico endotérmico de fusão acentuado se apresenta a 227,60°C, esta forma cristalina foi definida como forma cristalina III, e os picos característicos 2θ se posicionam como segue: Tabela 1, picos característicos da forma cristalina III Número do pico 2θ[°] d[Å] Pico 1 3,88 22,75 Pico 2 7,54 11,71 Pico 3 11,22 7,88 Pico 4 11,61 7,62 Pico 5 12,26 7,21 Pico 6 12,73 6,95 Pico 7 13,35 6,63 Pico 8 13,64 6,49 Pico 9 14,76 6,00 Pico 10 15,98 5,54 Pico 11 16,47 5,38 Pico 12 17,07 5,19 Pico 13 17,29 5,13 Pico 14 18,64 4,76 Pico 15 20,28 4,38 Pico 16 20,62 4,31 Pico 17 22,21 4,00 Pico 18 23,16 3,84 Pico 19 23,79 3,74 Pico 20 24,14 3,68 Pico 21 24,85 3,58 Pico 22 25,34 3,51

Pico 23 26,08 3,41 Pico 24 26,85 3,32 Pico 25 27,09 3,29 Pico 26 28,77 3,10 Pico 27 29,74 3,00 Pico 28 32,22 2,78 Pico 29 33,66 2,66 Pico 30 34,50 2,60 Pico 31 35,60 2,52 Pico 32 37,42 2,40 Pico 33 39,27 2,29 Modalidade 2: Preparação da forma cristalina III

[055] (R)-5-ciano-N-(1-(2-hidróxi-2-(4-metil-1-carbonil-1,3- di- hidroisobenzofuran-5-il)etil)piperidin-4-il)-4-metoxipiridinocarboxamida (1,0 g, 2,22 mmol) (preparado de acordo com o método descrito no pedido de patente WO2016091042A1 (data de publicação de 16 de junho de2016)) foi adicionado a um frasco de reação A, e 10 mL de dimetil sulfóxido foi adicionado, a mistura foi aquecida até 70°C até dissolver, ácido L-tartárico (0,4 g, 2,66 mmol) foi adicionado em um frasco de reação B, 20 mL de etanol anidro foi adicionado, a mistura foi aquecida até 70°C até dissolver, depois a solução clara no frasco de reação B foi adicionada no frasco de reação A, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente, e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 1,13 g de sólido foi obtido com um rendimento de 85,0 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 3: Preparação da forma cristalina III

[056] (R)-5-ciano-N-(1-(2-hidróxi-2-(4-metil-1-carbonil-1,3-di- hidroisobenzofuran-5-il)etil)piperidin-4-il)-4-metoxipiridinocarboxamida (1,0 g, 2,22 mmol) (preparado de acordo com o método descrito no pedido de patente WO2016091042A1 (data de publicação de 16 de junho de 2016)) foi adicionado a um frasco de reação A, e 10 mL de N,N-dimetil formamida foi adicionado, depois a mistura foi aquecida até 70°C até dissolver, e ácido L-tartárico (0,4 g, 2,66 mmol) foi adicionado a um frasco de reação B, 20 mL de etanol anidro foi adicionado, a mistura foi aquecida até 70°C até dissolver, a solução clara no frasco de reação B foi adicionada no frasco de reação A, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 1,10 g de sólido foi obtido com um rendimento de 82,7 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 4: Preparação da forma cristalina III

[057] (R)-5-ciano-N-(1-(2-hidróxi-2-(4-metil-1-carbonil-1,3-di- hidroisobenzofuran-5-il)etil)piperidin-4-il)-4-metoxipiridinocarboxamida (1,0 g, 2,22 mmol) (preparado de acordo com o método descrito no pedido de patente WO2016091042A1 (data de publicação de 16 de junho 2016)) foi adicionado a um frasco de reação A, e 10 mL de N,N-dimetil acetamida foi adicionado e a mistura foi aquecida até 70°C até dissolver, e ácido L-tartárico (0,4 g, 2,66 mmol) foi adicionado a um frasco de reação B, 20 mL de etanol anidro foi adicionado e a mistura foi aquecida até 70°C até dissolver, a solução clara no frasco de reação B foi adicionada no frasco de reação A, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 1,12 de g sólido foi obtido com um rendimento de 84,2 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 5: Preparação da forma cristalina III

[058] O composto representado pela fórmula (I) (1,0 g, 1,67 mmol)

(preparado de acordo com a Modalidade 1) foi adicionado em um frasco de reação, 6 mL de N,N-dimetil formamida foi adicionado, a mistura foi agitada e dissolvida a 70°C, depois 12 mL de etanol anidro pré-aquecido foi adicionado, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente, e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 816 mg de sólido foi obtido com um rendimento de 81,6 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 6: Preparação da forma cristalina III

[059] O composto representado pela fórmula (I) (1,0 g, 1,67 mmol) (preparado de acordo com a Modalidade 1) foi adicionado em um frasco de reação, 6 mL de N,N-dimetil acetamida foi adicionado, a mistura foi agitada e dissolvida a 70°C, depois 12 mL de etanol anidro pré-aquecido foi adicionado, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente, e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 828 mg de sólido foi obtido com um rendimento de 82,8 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 7: Preparação da forma cristalina III

[060] O composto representado pela fórmula (I) (1,0 g, 1,67 mmol) (preparado de acordo com a Modalidade 1) foi adicionado em um frasco de reação, 5 mL de dimetil sulfóxido foi adicionado, a mistura foi agitada e dissolvida a 70°C, depois 10 mL de metanol pré-aquecido foi adicionado, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 794 mg de sólido foi obtido com um rendimento de 79,4 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 8: Preparação da forma cristalina III

[061] O composto representado pela fórmula (I) (1,0 g, 1,67 mmol) (preparado de acordo com a Modalidade 1) foi adicionado em um frasco de reação, 5 mL de dimetil sulfóxido foi adicionado, a mistura foi agitada e dissolvida a 70°C, depois 10 mL de etanol anidro pré-aquecido foi adicionado, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente, e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 864 mg de sólido foi obtido com um rendimento de 86,4 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 9: Preparação da forma cristalina III

[062] O composto representado pela fórmula (I) (1,0 g, 1,67 mmol) (preparado de acordo com a Modalidade 1) foi adicionado em um frasco de reação, 5 mL de dimetil sulfóxido foi adicionado, a mistura foi agitada e dissolvida a 70°C, depois 10 mL de iso-propanol pré-aquecido foi adicionado, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente, e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 906 mg de sólido foi obtido com um rendimento de 90,6 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 10: Preparação da forma cristalina III

[063] O composto representado pela fórmula (I) (1,0 g, 1,67 mmol) (preparado de acordo com a Modalidade 1) foi adicionado em um frasco de reação, 5 mL de dimetil sulfóxido foi adicionado, a mistura foi agitada e dissolvida a 70°C, depois 10 mL de n-butanol pré-aquecido foi adicionado, a reação foi realizada a 70°C por 4 horas, depois resfriada até a temperatura ambiente, e agitada durante a noite. Depois da filtração por sucção e secagem, 896 mg de sólido foi obtido com um rendimento de 89,6 %. O espectro de difração de raio X em pó e padrão de DSC do produto foram estudados e comparados, e o produto foi confirmado como sendo a forma cristalina III. Modalidade 11: Investigação da estabilidade da forma cristalina

[064] A forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) obtida na Modalidade 1, e as amostras da forma cristalina I e II obtidas nos Exemplos Comparativos 1 e 2 foram respectivamente colocadas abertas e uniformemente difundidas, e a estabilidade das amostras sob as condições de iluminação (4500Lux), aquecimento (40°C, 60°C), e umidade alta (75% de RH, 90% de RH) foi investigada. O tempo de amostragem foi 5 dias e 10 dias, e a pureza foi detectada por HPLC. Resultados experimentais: Tabela 2. Comparação de estabilidade das amostras das formas cristalinas I, II e III do composto representado pela fórmula (I) Nome da Tempo Iluminação 40°C 60°C 75 % de 90 % de amostra (dias) RH RH Forma 0 99,67 % 99,67 % 99,67 % 99,67 % 99,67 % cristalina I 5 99,54 % 99,52 % 99,55 % 99,53 % 99,59 % 10 99,34 % 99,45 % 99,39 % 99,39 % 99,43 % Forma 0 99,47 % 99,47 % 99,47 % 99,47 % 99,47 % cristalina 5 99,23 % 99,38 % 99,22 % 99,30 % 99,30 % II 10 98,62 % 99,15 % 98,87 % 99,10 % 99,10 % Forma 0 99,65 % 99,65 % 99,65 % 99,65 % 99,65 % cristalina 5 99,65 % 99,66 % 99,67 % 99,69 % 99,69 % III 10 99,57 % 99,66 % 99,64 % 99,66 % 99,66 % Conclusão experimental:

[065] Os resultados da investigação de estabilidade mostram que quando as amostras das formas cristalinas I, II e III do composto representado pela fórmula (I) foram colocadas respectivamente sob condições abertas, a pureza de HPLC da forma cristalina III foi mais alta do que aquela das formas cristalinas I e II sob as condições de iluminação, umidade alta e temperatura alta, indicando que a estabilidade da forma cristalina III da presente invenção é melhor do que as formas cristalinas I e II. Modalidade 13: Investigação sobre a Estabilidade Especial da Forma Cristalina

[066] A forma cristalina III obtida na Modalidade 1 foi triturada, aquecida e comprimida para investigar a estabilidade da amostra. Resultados experimentais: Tabela 3. Estudo sobre a estabilidade especial da forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) Amostra Método de Processo experimental Forma Pico de processamento cristalina DSC Forma Trituração por 1 g de amostra da forma Forma III 226,91°C III 10 min cristalina III do composto representado pela fórmula (I) foi triturado em um almofariz por 10 min sob a proteção de nitrogênio. Forma Aquecimento a 1 g de amostra da forma Forma III 226,57°C III 80°C por 3 h cristalina III do composto representado pela fórmula (I) foi colocado plano, e aquecido a 80°C por 3 h. Forma Formação de A amostra da forma cristalina Forma III 226,58°C III comprimidos III do composto representado pela fórmula (I) foi comprimida em comprimidos. Conclusão experimental:

[067] De acordo com os dados na tabela 3, a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) permanece inalterada sob as condições de tratamento com trituração, aquecimento em temperatura alta e formação de comprimidos, o que indica que a estabilidade da forma cristalina III da presente invenção foi relativamente alta. Modalidade 14: Estudo de higroscopicidade da forma cristalina III da presente invenção

[068] Adotando-se TAQ5000VSA, a umidade foi 10 a 90 % a 25°C, o degrau foi 10 %, e o padrão de julgamento foi que a mudança de massa foi menos do que 0,01 % dentro de 10000 min, e o ciclo foi conduzido duas vezes. Resultados experimentais Tabela 4. Resultados do teste de higroscopicidade da forma cristalina III da presente invenção Amostra de teste 10,0 % de RH a 80,0 % de RH tipo cristalino Forma III 0,9332 % (levemente higroscópica) Não alterada Conclusão experimental:

[069] Como pode ser observado a partir da tabela 4, a absorção de água da amostra da forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) aumenta com o aumento da umidade entre 10,0 % RH e 80,0 % RH sob a condição de 25°C, a mudança de peso é 0,9332 %, menos do que 15 % mas não menos do que 2 %, e a amostra foi levemente higroscópica; o processo de dessorção da amostra coincide com o processo de adsorção durante a mudança de umidade variando de 0 % a 85 %. Modalidade 15: Experimento farmacocinético da forma cristalina III da presente invenção e do estado livre em ratos

[070] Ratos SD foram usados como animais de teste, o método de LC/MS/MS foi utilizado para medir a concentração de fármaco no plasma em diferentes pontos no tempo depois que os ratos SD foram administrados por gavagem com a forma cristalina III e estado livre do composto representado pela fórmula (I), para estudar o comportamento farmacocinético da forma cristalina

III e estado livre do composto representado pela fórmula (I) em ratos SD, e para avaliar suas características farmacocinéticas.

[071] Amostras de teste: forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) (consultar a modalidade 1 para seu método de preparação) e estado livre (preparado de acordo com o método descrito no pedido de patente WO2016091042A1).

[072] Animais experimentais: oito ratos SD saudáveis, metade machos e metade fêmeas, foram divididos em 2 grupos, adquiridos da Sippr-BK Experimental Animal Co., Ltd. com o número de licença de produção animal SCXK (Shanghai) 2008-0016.

[073] Preparação do fármaco: 0,5 % de CMC-Na, uma suspensão uniforme foi preparada por ultrassom com uma concentração de preparação de 0,5 mg/mL para administração oral.

[074] Administração: oito ratos SD saudáveis, metade machos e metade fêmeas, foram administrados por gavagem depois de jejuar por uma noite com um volume de 10 mL/kg. Métodos:

[075] Oito ratos SD saudáveis, metade machos e metade fêmeas, foram administrados gavagem depois de jejuar durante a noite. 0,1 mL de sangue foi coletado através de punção da veia jugular antes de e 0,5; 1; 2; 4; 6; 8; 12; 24 h depois da administração, heparina sódica foi usada para anticoagulação, e o plasma foi separado por centrifugação em 3500 rpm por 10 min e armazenado a -20°C. LC/MS/MS foi usado para determinar o teor do composto a ser detectado no plasma de ratos SD depois da administração por gavagem do composto. Resultados experimentais Tabela 5. Resultados da avaliação farmacocinética em ratos SD (po: 5,0 mg/kg)

Amostra de teste T1/2(h) AUClast (ng/mL×h) Cl/F_obs (mL/min/kg) Vz/F_obs (mL/kg) Forma III 4,21 12618 6,70 2453 estado livre 3,62 9283 9,82 3019

[076] Em que, T1/2 é período de meia-vida; AUClast é a área sob a curva 0 → t durante a administração; Cl/F é a taxa de depuração; Vz/F é o volume de distribuição aparente. Conclusão experimental:

[077] Como pode ser observado a partir da tabela 5, comparado com o estado livre, a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) tem um período de meia-vida mais longo, taxa de depuração mais baixa, quantidade de exposição mais alta, indicando que a forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I) tem boas propriedades farmacocinéticas.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Forma cristalina III do composto representado pela fórmula (I): , caracterizada pelo fato de que, depois da radiação Cu-Kα, um espectro de difração de raio X em pó representado por ângulos de difração 2θ é obtido, no qual existem picos característicos a 3,88; 7,54; 14,76; 18,64 e 22,21.

2. Forma cristalina III de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que tem picos característicos a 3,88; 7,54; 11,22; 14,76; 17,29; 18,64; 20,28; 22,21; 23,79; 25,34 e 27,09.

3. Forma cristalina III de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que tem picos característicos a 3,88; 7,54; 11,22; 11,61; 12,26; 12,73; 13,35; 13,64; 14,76; 15,98; 16,47; 17,07; 17,29; 18,64; 20,28; 20,62; 22,21; 23,16; 23,79; 24,14; 24,85; 25,34; 26,08; 26,85; 27,09; 28,77; 29,74; 32,22; 33,66; 34,50; 35,60; 37,42 e 39,27.

4. Forma cristalina III de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que a faixa de erro do ângulo 2θ é ± 0,2.

5. Método de preparação da forma cristalina III definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de ser um dos seguintes métodos: método (1): reagir o estado livre do composto representado pela fórmula (I) com ácido L-tartárico em um solvente ou um solvente misto, e então depois da agitação, cristalização, filtração e secagem, a forma cristalina III alvo é obtida; o solvente é um solvente sulfóxido, um solvente amida ou um solvente alcoólico, e o solvente misto é um solvente misto de um solvente sulfóxido e um solvente alcoólico, ou um solvente misto de um solvente amida e um solvente alcoólico; em que o solvente sulfóxido é preferencialmente dimetil sulfóxido, o solvente amida é preferencialmente N,N-dimetilformamida ou N,N-dimetilacetamida, e o solvente alcoólico é preferencialmente metanol, etanol, n-propanol, iso- propanol ou n-butanol; método (2): dissolver o composto representado pela fórmula (I) em um solvente ou um solvente misto, e então depois da cristalização, filtração e secagem, a forma cristalina III alvo é obtida; a cristalização é conduzida a temperatura ambiente, ou enquanto resfriando ou volatilizando o solvente, ou induzida por cristal semente, e a temperatura para o resfriamento é -10 a 25°C, preferencialmente a cristalização é conduzida a temperatura ambiente; o solvente é um solvente sulfóxido, um solvente amida ou um solvente alcoólico, e o solvente misto é um solvente misto de um solvente sulfóxido e um solvente alcoólico, ou um solvente misto de um solvente amida e um solvente alcoólico; em que o solvente sulfóxido é preferencialmente dimetil sulfóxido, o solvente amida é preferencialmente N,N-dimetil formamida ou N,N-dimetil acetamida, e o solvente alcoólico é preferencialmente metanol, etanol, n-propanol, iso- propanol ou n-butanol, o solvente misto é mais preferencialmente dimetil sulfóxido/metanol, dimetil sulfóxido/etanol, dimetil sulfóxido/n-propanol, dimetil sulfóxido/iso-propanol, dimetil sulfóxido/n-butanol, N,N-dimetil formamida/etanol ou N,N-dimetil acetamida/etanol.

6. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende a forma cristalina III definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 e um carreador, um diluente ou um excipiente farmaceuticamente aceitável.

7. Método de preparação da composição farmacêutica, caracterizado pelo fato de que compreende misturar a forma cristalina III definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 com um carreador, um diluente ou um excipiente farmaceuticamente aceitável.

8. Uso da forma cristalina III definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 ou da composição farmacêutica definida na reivindicação 6, caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medicamento para tratar e/ou prevenir uma doença ou uma condição associada a inibição do canal de potássio medular renal externo (ROMK), em que a doença ou condição é preferencialmente hipertensão ou insuficiência cardíaca.