BR112013026308B1 - Compostos de benzeno substituídos e composição farmacêutica que compreende os mesmos - Google Patents

Compostos de benzeno substituídos e composição farmacêutica que compreende os mesmos Download PDF

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Abstract

compostos de benzeno substituídos. a presente invenção se refere a compostos de benzeno substituídos. a presente invenção também se refere às composições farmacêuticas contendo estes compostos e a métodos para tratar câncer através da administração destes compostos e composições farmacêuticas aos pacientes em necessidade dos mesmos. a presente invenção também se refere ao uso de tais compostos para pesquisa ou outros propósitos não terapêuticos.

Description

Pedidos Relacionados
[001] Este pedido reivindica prioridade a, e o benefício dos Pedidos Provisórios U.S. N— 61/474.825, depositado 13 de Abril de 2011, e 61/505.676 depositado em 08 de Julho de 2011, os conteúdos totais dos quais são integralmente incorporados neste relatório como referência.
Incorporação Como Referência da Listagem de Sequências
[002] O teor do arquivo de texto nomeado “41478508001WOST25.txt”, que foi criado em 28 de Março de 2012 e apresenta 2 KB em tamanho, são integralmente incorporados como referência neste relatório.
Fundamentos da Invenção
[003] Em células eucarióticas, o DNA é empacotado com histonas para formar cromatina. Mudanças na estrutura ordenada da cromatina podem levar às alterações na transcrição de genes associados. O controle das mudanças na estrutura da cro- matina (e, consequentemente, da transcrição) é mediado por modificações covalentes em histonas, mais notavelmente de suas caudas N-terminais. Estas modificações são frequentemente referidas como epigenéticas, pois elas podem levar a mudanças hereditárias na expressão do gene, mas não afetam a sequência do DNA por si só. Modificações covalentes (por exemplo, metilação, acetilação, fosforilação e ubiquitina- ção) das cadeias laterais de aminoácidos são enzimaticamente mediadas. A adição seletiva de grupos metila aos sítios de aminoácidos específicos em histonas é controlada pela ação de uma família única de enzimas conhecidas como histona metiltrans- ferases (HMTs).
[004] A coleta orquestrada de sistemas bioquímicos após a regulação trans- cricional deve ser severamente controlada para que o crescimento e diferenciação celulares ocorram de forma ideal. Estados de doença resultam quando estes controles são interrompidos por expressão e/ou atividade anormais das enzimas responsáveis pela modificação de DNA e histona. Em cânceres humanos, por exemplo, existe um corpo crescente de evidência para sugerir que a atividade da enzima epigenética des- regulada contribui para a proliferação celular descontrolada associada com câncer, assim como outros fenótipos relevantes ao câncer, tais como migração e invasão celulares acentuadas. Além do câncer, existe evidência crescente para um papel de enzimas epigenéticas em várias outras doenças humanas, incluindo doenças metabólicas (tais como diabetes), doenças inflamatórias (tais como doença de Crohn), doenças neurodegenerativas (tais como doença de Alzheimer) e doenças cardiovasculares. Portanto, a modulação seletiva da ação anormal de enzimas epigenéticas pode ser uma esperança para o tratamento de uma variedade de doenças.
[005] Proteínas do grupo Policomb (PcG) e grupo tritorax (trxG) são conhecidas como parte do sistema de memória celular. Veja, por exemplo, Francis et al. (2001) Nat Rev Mol Cell Biol 2:409 - 21 e Simon et al. (2002) Curr Opin Genet Dev 12:210 - 8. Em geral, proteínas PcG são repressores transcricionais que mantêm o “estado off”, e as proteínas trxG são ativadores transcricionais que mantêm o “estado on”. Pelo fato de que os membros das proteínas PcG e trxG contêm atividade de his- tona metiltransferase (HMTase) intrínseca, as proteínas PcG e trxG podem participar na memória celular através da metilação de histonas de núcleo. Veja, por exemplo, Beisel et al. (2002) Nature 419:857 - 62; Cao et al. (2002) Science 298:1039 - 43; Czermin et al. (2002) Cell 111:185 - 96; Kuzmichev et al. (2002) Genes Dev 16:2893 - 905; Milne et al. (2002) Mol Cell 10:1107 - 17; Muller et al. (2002) Cell 111:197 - 208; e Nakamura et al. (2002) Mol Cell 10:1119 - 28.
[006] Estudos bioquímicos e genéticos forneceram evidência de que proteínas PcG de Drosophila funcionam em pelo menos dois complexos de proteína distintos, o complexo repressivo Policomb 1 (PRC 1) e o complexo ESC-E(Z) (também conhecido como complexo repressivo Policomb 2 (PRC2)). Otte et al. (2003) Curr Opin Genet Dev 13:448 - 54. Estudos em Drosophila demonstraram que os complexos ESC- E(Z)/EED-EZH2 (isto é, PRC2) têm atividade de histona metiltransferase intrínseca. Embora as composições dos complexos isolados por grupos diferentes sejam levemente diferentes, elas, em geral, contêm EED, EZH2, SUZ12 e RbAp48 ou homólogos de Drosophila dos mesmos. Entretanto, um complexo reconstituído compreendendo apenas EED, EZH2, e SUZ12 conserva atividade de histona metiltransferase para lisina 27 da histona H3. Patente U.S. 7.563.589.
[007] Entre as várias proteínas que constituem os complexos PRC2, EZH2 (Acentuador de Homólogo 2 de Zeste) é a subunidade catalítica. O sítio catalítico de EZH2, por sua vez, está presente dentro de um domínio de SET, um motivo de sequência altamente conservado (nomeado depois de Su(var)3-9, Acentuador de Zeste, Trithorax) que é encontrado em várias proteínas associadas à cromatina, incluindo membros do grupo Trithorax e grupo Policomb. O domínio de SET é característico de todas as histona lisina metiltransferases conhecidas, exceto a H3-K79 metiltransfe-rase DOT1.
[008] Além do silenciamento do gene Hox, a metilação da histona H3-K27 mediada por PRC2 foi mostrada participar na inativação de X. Plath et al. (2003) Science 300:131 - 5; Silva et al. (2003) Dev Cell4:481 - 95. O recrutamento do complexo PRC2 em Xi e trimetilação subsequente em histona H3-K27 ocorre durante o estágio de iniciação da inativação de X e é dependente de Xist RNA. Além disso, EZH2 e sua atividade de histona H3-K27 metiltransferase associada foram descobertas marcar de maneira diferente as células de epiblasto pluripotentes e o trofectoderma diferenciado, e compatíveis com um papel de EZH2 na manutenção dos padrões de modificação epi- genética de células de epiblasto pluripotentes, a deleção mediada por Cre de EZH2 resulta em perda da metilação de histona H3-K27 nas células. Erhardt et al. (2003) Development 130:4235 - 48). Além disso, estudos em linhagens celulares e tecidos de câncer de próstata e mama revelaram uma correlação forte entre os níveis de EZH2 e SUZ12 e a invasão destes cânceres, indicando que a disfunção do complexo PRC2 pode contribuir para o câncer. Bracken et al. (2003) EMBOJ22:5323 - 35; Kirmizis et al. (2003) Mol Cancer Ther 2:113 - 21; Kleer et al. (2003) Proc Natl Acad Sci USA 100:11606 - 11; Varambally et al. (2002) Nature 419:624 - 9.
[009] Recentemente, mutações somáticas da tirosina 641 (Y641C, Y641F, Y641N, Y641S e Y641H, algumas vezes também referida como Y646C, Y646F, Y646N, Y646S e Y646H, respectivamente) de EZH2 foram relatadas estar associadas com linfoma folicular (FL) e com o subtipo do tipo células B (GCB) do centro germinal de linfoma difuso de grandes células B (DLBCL). Morin et al. (2010) Nat Genet 42:181 - 5. Em todos os casos, a ocorrência do gene de EZH2 mutante foi descoberta ser heterozigótica, e a expressão dos alelos do tipo selvagem e mutantes foi detectada nas amostras de mutantes esboçadas por sequenciamento de transcriptoma. também foi demonstrado que todas as formas mutantes de EZH2 podem ser incorporadas no complexo PRC2 de múltiplas proteínas, mas que os complexos resultantes são desprovidos de a capacidade de catalisar a metilação do resíduo equivalente de H3-K27 de um substrato peptídico. Consequentemente, foi concluído que as mudanças associadas à doença em Tyr641 de EZH2 resultaram na perda de função com respeito à metilação de H3-K27 catalisada por EZH2.
Sumário da Invenção
[010] Em um aspecto, a presente invenção caracteriza um composto de benzeno substituído da Fórmula (I) abaixo ou um sal farmaceuticamente aceitável ou éster do mesmo.
[011] Nesta fórmula:
[012] X1 é N ou CR11;
[013] X2 é N ou CR13;
[014] X3 é N ou C, e quando X3 é N, R6 é ausente;
[015] Z é NR7R8, OR7, S(O)aR7, ou CR7R8R14, em que a é 0, 1 ou 2;
[016] cada um entre R1, R5, R9 e R10 é, independentemente, H ou alquila C1C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[017] cada um entre R2, R3 e R4 é, independentemente, -Q1-T1, em que Q1 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 opcionalmente substituído com halo, ciano, hidro- xila ou alcóxi C1-C6, e T1 é H, halo, hidroxila, COOH, ciano, azido, ou RS1, em que RS1 é alquila C1-C3, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, alcoxila C1-C6, C(O)O-alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e RS1 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, oxo, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[018] R6 é H, halo, ciano, azido, ORa, -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, - C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -S(O)bRa, -S(O)bNRaRb, ou RS2, em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros; b é 0, 1 ou 2; cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H ou RS3, e RS3 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterociclo- alquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um entre RS2, RS3, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T2 é H, halo, ciano, -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -C(O)NRcRd, -NRdC(O)Rc, - NRdC(O)ORc, -S(O)2Rc, -S(O)2NRcRd, ou RS4, em que cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou RS5, cada um entre RS4 e RS5 é, independentemente, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou hetero- arila de 5 ou 6 membros, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional, e cada um entre RS4, RS5, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Rc e Rd, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3, em que Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de halo, ciano, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ORe, COORe, -S(O)2Re, -NReRf, e - C(O)NReRf, cada um entre Re e Rf independentemente sendo H ou alquila C1-C6, ou - Q3-T3 é oxo; ou-Q2-T2 é oxo;
[019] R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação, ligante alquila C1-C4, ou ligante alquenila C2-C4, cada ligante opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T4 é H, halo, ciano, NRgRh, -ORg, -C(O)Rg, -C(O)ORg, -C(O)NRgRh, - C(O)NRgORh, -NRgC(O)Rh, -S(O)2Rg, ou RS6, em que cada um entre Rg e Rh é, independentemente, H ou RS7, cada um entre RS6 e RS7 é, independentemente, alquila C1C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 14 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e cada um entre RS6 e RS7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5, em que Q5 é uma ligação, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rk sendo H ou alquila C1-C6, e T5 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)qRq, em que q é 0, 1 ou 2 e Rq é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, hetero- cicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T5 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquila- mino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T5 é H, halo, hidro- xila ou ciano; ou -Q5-T5 é oxo;
[020] cada um entre R8, R11, R12 e R13 é, independentemente, H, halo, hidro- xila, COOH, ciano, RS8, ORS8 ou COORS8, em que RS8 é alquila C1-C6, alquenila C2C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6, ou di-alquilamino C1-C6, e RS8 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6 e di-alquilamino C1-C6; ou R7 e R8, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 a 2 heteroátomos adicionais, ou R7 e R8, juntamente com o átomo de C ao qual eles são ligados, formam cicloalquila C3-C8 ou um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 1 a 3 heteroátomos, e cada um entre o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou cicloalquila C3-C8 formado por R7 e R8 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6, em que Q6 é uma ligação, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rm sendo H ou alquila C1-C6, e T6 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloal- quila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)pRp em que p é 0, 1, ou 2 e Rp é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T6 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidro- xila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, ciclo- alquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T6 é H, halo, hidroxila, ou ciano; ou -Q6-T6 é oxo; e
[021] R14 é ausente, H, ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[022] contanto que o composto seja
[023] N-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metil- fenil)furan-2-carboxamida,
[024] N,N’-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-1,3- fenileno)diacetamida,
[025] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-pivalamidobenza- mida,
[026] 3-(3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepino-7-sulfonamido)-N-((4,6-dime- til-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida,
[027] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3,5-dimetoxibenza- mida,
[028] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3,4,5-trimetoxibenza- mida,
[029] 3-alil-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-4,5-dimetoxi- benzamida,
[030] 4-(2-amino-2-oxoetóxi)-3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-5-metoxibenzamida,
[031] 3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-4-hidróxi-5- metoxibenzamida, ou
[032] 3-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metóxi-4- propoxibenzamida.
[033] Em um outro aspecto, a presente invenção caracteriza um composto de benzeno substituído da Fórmula (I) acima ou um sal farmaceuticamente aceitável ou éster do mesmo, em que
[034] X1 é N ou CR11;
[035] X2 é N ou CR13;
[036] X3 é N ou C, e quando X3 é N, R6 é ausente;
[037] Z é NR7R8, OR7, S(O)aR7, ou CR7R8R14, em que a é 0, 1 ou 2;
[038] cada um entre R1, R5, R9, e R10 é, independentemente, H ou alquila C1C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[039] cada um entre R2, R3 e R4 é, independentemente, -Q1-T1, em que Q1 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 opcionalmente substituído com halo, ciano, hidro- xila ou alcóxi C1-C6, e T1 é H, halo, hidroxila, COOH, ciano, azido, ou RS1, em que RS1 é alquila C1-C3, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, alcoxila C1-C6, C(O)O-alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e RS1 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, oxo, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[040] R6 é H, halo, ciano, azido, -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, - NRbC(O)Ra, -S(O)bRa, -S(O)bNRaRb, ou RS2, em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros, b é 0, 1 ou 2, cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H ou RS3, e RS3 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um entre RS2, RS3, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T2 é H, halo, ciano, -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -C(O)NRcRd, -NRdC(O)Rc, - NRdC(O)ORc, -S(O)2Rc, -S(O)2NRcRd, ou RS4, em que cada um entre Rc e Rd é, inde-pendentemente, H ou RS5, cada um entre RS4 e RS5 é, independentemente, alquila C1C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou hetero- arila de 5 ou 6 membros, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional, e cada um entre RS4, RS5, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Rc e Rd, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3, em que Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de halo, ciano, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloal- quila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ORe, COORe, -S(O)2Re, - NReRf e -C(O)NReRf, cada um entre Re e Rf independentemente sendo H ou alquila C1-C6, ou -Q3-T3 é oxo; ou-Q2-T2 é oxo;
[041] R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação, ligante alquila C1-C4, ou ligante alquenila C2-C4, cada ligante opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T4 é H, halo, ciano, NRgRh, -ORg, -C(O)Rg, -C(O)ORg, -C(O)NRgRh, - C(O)NRgORh, -NRgC(O)Rh, -S(O)2Rg, ou RS6, em que cada um entre Rg e Rh é, independentemente, H ou RS7, cada um entre RS6 e RS7 é, independentemente, alquila C1C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 14 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e cada um entre RS6 e RS7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5, em que Q5 é uma ligação, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rk sendo H ou alquila C1-C6, e T5 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)qRq, em que q é 0, 1 ou 2 e Rq é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, hetero- cicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T5 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquila- mino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T5 é H, halo, hidro- xila ou ciano; ou -Q5-T5 é oxo; contanto que (i) R7 não seja C(O)Rg ou -S(O)2Rg quando Z é NR7R8; (ii) R7 não seja alquila C1-C6 quando Z é OR7, e (iii) R7 não seja H;
[042] cada um entre R8, R11, R12 e R13 é, independentemente, H, halo, hidro- xila, COOH, ciano, RS8, ORS8 ou COORS8, em que RS8 é alquila C1-C6, alquenila C2C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6, ou di-alquilamino C1-C6, e RS8 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, e di-alquilamino C1-C6; ou R7 e R8, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 a 2 hete- roátomos adicionais, ou R7 e R8, juntamente com o átomo de C ao qual eles são ligados, formam cicloalquila C3-C8 ou um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 1 a 3 heteroátomos, e cada um entre os anéis heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou cicloalquila C3-C8 formado por R7 e R8 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6, em que Q6 é uma ligação, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rm sendo H ou alquila C1-C6, e T6 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloal- quila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)pRp em que p é 0, 1 ou 2 e Rp é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T6 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidro- xila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, ciclo- alquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T6 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q6-T6 é oxo; e
[043] R14 é ausente, H, ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros.
[044] Um subconjunto dos compostos da Fórmula (I) inclui aqueles da Fór-mula (Ia):
[045]
[046] Um outro subconjunto dos compostos da Fórmula (I) inclui aqueles da Fórmula (Ib), (Ic) ou (Id):
[048] (Ib) (Ic) (Id)
[049] Um outro subconjunto dos compostos da Fórmula (I) inclui aqueles da Fórmula (Ie), (II) ou (IIA):
[050]
[051] (Ie) (II) (IIA)
[052] Os compostos das Fórmulas (I), (Ia), (Ib), (Ic), (Id), (Ie), (II) e (IIA) podem incluir uma ou mais entre as características seguintes:
[053] X1 é CR11 e X2 é CR13.
[054] X1 é CR11 e X2 é N.
[055] X1 é N e X2 é CR13.
[056] X1 é N e X2 é N.
[057] Z é NR7R8.
[058] Z é CR7R8R14.
[059] Z é OR7.
[060] Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2.
[061] Z é SR7.
[062] R6 é halo, alquila C1-C3, alquenila C2-C6, cicloalquila C3-C6, C(O)H ou - C(O)Ra, em que Ra é alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros (por exem- plo, 4 a 7 membros).
[063] R6 é heterocicloalquila de 4 a 12 membros (por exemplo, 4 a 7 membros) opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, em que -Q2-T2 é oxo ou Q2 é uma ligação e T2 é alquila C1-C6, -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -S(O)2Rc, ou heteroci- cloalquila de 4 a 12 membros (por exemplo, 4 a 7 membros) opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[064] -Q2-T2 não é H.
[065] Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de alquila C1-C3, ORe, -S(O)2Re ou -NReRf.
[066] R6 é piperidinila, 2,2,6,6-tetrametil-piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, 2,2,6,6-tetrametil-1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, morfolinila, tetra-hi- dro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila ou pirrolidinila.
[067] R6 é F, Br ou Cl.
[068] R7 não é H.
[069] R7 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, 4 a 7 membros), cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[070] R7 é piperidinila, tetra-hidropirano, tetra-hidrotiopirano, oxetanila, azeti- dinila, pirrolidinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 3’H-es- piro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-3’-ona-4-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’- furo[3,4-b]piridin]-7’-ona-4-ila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-3’-ona- 4-ila, 1-azaespiro[4.5]decan-2-ona-8-ila, ciclobutila, ciclopentila ou ciclo-hexila, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[071] T5 é H, halo, alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros (por exemplo, 4 a 7 membros).
[072] Q5 é uma ligação e T5 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterociclo- alquila de 4 a 12 membros (por exemplo, 4 a 7 membros).
[073] Q5 é uma ligação e T5 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, heterociclo- alquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6 ou di-alquilamino C1-C6, T5 sendo opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, alcoxila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[074] Q5 é CO, S(O)2 ou NHC(O); e T5 é alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros (por exemplo, 4 a 7 membros).
[075] Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é H ou arila C6-C10.
[076] Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é cicloalquila C3-C8, heterocicloalquila de 4 a 12 membros (por exemplo, 4 a 7 membros) ou S(O)qRq.
[077] R11 é H.
[078] R7 é ciclopentila ou ciclo-hexila, cada um opcionalmente substituído com -Q5-T5.
[079] Q5 é NHC(O) e T5 é alquila C1-C6 ou alcóxi C1-C6.
[080] R7 é isopropila.
[081] Cada um entre R2 e R4 é, independentemente, alquila C1-C3 opcionalmente substituído com alcoxila C1-C6.
[082] Cada um entre R2 e R4 é metila.
[083] R1 é H.
[084] R12 é H, metila, etila, etenila ou halo.
[085] R12 é metila.
[086] R12 é etila.
[087] R12 é etenila.
[088] R8 é H, metila ou etila.
[089] R8 é metila.
[090] R8 é etila.
[091] R8 é etenila ou propenila.
[092] R8 é heterocicloalquila de 4 a 12 membros (por exemplo, 4 a 7 membros), tal como piperidinila ou tetra-hidropiranila.
[093] Z é NR7R8 ou CR7R8R14, em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel selecionado a partir do grupo que consiste de piperidinila, morfolinila, piperazinila, azetidinila, pirrolidinila, 2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-ila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, e ciclo-hexenila, cada um opcionalmente substituído com -Q6-T6.
[094] R13 é H ou metila.
[095] R13 é H.
[096] R3 é H.
[097] Z é NR7R8, OR7 ou S(O)aR7; R1 é H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionado a partir de hidroxila, alcoxila C1C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, e arila C6-C10; cada um entre R2 e R4 é, independentemente, -Q1-T1, em que Q1 é uma ligação ou ligante alquila C1C3 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir de halo e hidroxila, e T1 é H, halo, ou azido; R3 é H ou halo; R5 é H ou alquila C1-C6; R6 é H, halo, ciano, azido, ORa, -NRaRb, -C(O)NRaRb, -S(O)bRa, ou RS2; em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e em que cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H, alquila C1-C6, ou heteroci- cloalquila de 4 a 12 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 he- teroátomo adicional; e cada um entre Ra, RS2 e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2; em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3, e T2 é H, halo, -ORc, -NRcRd, - C(O)ORc, ou alquila C1-C6, em que cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1-C6, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional e opcionalmente substituído com alquila C1-C6; R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou ligante alquila C1-C4 e T4 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, C(O)-alquila C1-6, C(O)-cicloalquila C3-6, ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5; R8 é H, alquila C1-C6 opcionalmente substituído com halo, hidroxila ou alcoxila C1-C6, alquenila C2-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros; ou R7 e R8, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 a 2 heteroátomos adicionais, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por R7 e R8 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6; e R12 é halo, alcoxila C1-C6, ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com halo ou alquenila C2-C6.
[098] R1 é H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído uma ou mais vezes com um substituinte selecionado a partir de hidroxila, alcoxila C1-C6 e arila C6-C10; R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou um ligante alquila C1-C4, e T4 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, C(O)-alquila C1-C6, C(O)-cicloalquila C3-C6, di-hidropi- ranila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, pirrolidinila, azetidinila e oxetanila, cada um opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de oxo e -Q5-T5; R8 é H ou alquila C1-C6, haloalquila C1-C6, alquenila C2-C6 ou cicloalquila C3-C8; e R12 é halo, alquila C1-C6, haloalquila C1C6 ou alcoxila C1-C6.
[099] Z é NR7R8 ou SR7; R6 é H, halo, ciano, ORa, -C(O)NRaRb, -S(O)2Ra, ou RS2; em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e em que cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H ou alquila C1-C6; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um entre RS2 e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2; em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3, e T2 é H, halo, -ORc, -NRcRd, -C(O)Oalquila C1-C6, ou alquila C1-C6, em que cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1C6, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional e 0 ou 1 substituintes alquila C1-C6; R7 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, di-hidropiranila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, pirrolidinila, azetidinila e oxeta- nila, cada um opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de oxo e -Q5-T5; e R12 é halo ou alquila C1-C6.
[0100] R2, R4 e R12 são, independentemente, alquila C1-C6 e R5 é H.
[0101] R7 é ciclo-hexila, di-hidropiranila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopira- nila, piperidinila, pirrolidinila, azetidinila, oxetanila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-ila, 1- oxaespiro[4.5]decan-8-ila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-4-ila, 7’H-es- piro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-4-ila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4- c]piridin]-4-ila ou 1-azaespiro[4.5]decan-8-ila, cada um substituído com um ou mais - Q5-T5.
[0102] Z é selecionado a partir do grupo que consiste de piperidinila, morfoli- nila, piperazinila, azetidinila, pirrolidinila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-ila, 1,4- dioxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-ila, e ciclo-hexenila, cada um opcionalmente substituído com -Q6-T6.
[0103] R6 é halo e Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2 e R7 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0104] R6 é halo e Z é OR7, em que R7 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0105] R6 é -S(O)bRa ou azido, em que b é 0, 1 ou 2 e Ra é alquila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8; e Z é NR7R8, em que R7 é cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5; e R8 é H ou alquila C1-C6.
[0106] R6 é halo e Z é NR7R8 ou CR7R8R14, em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 11 membros tendo 1 a 3 heteroátomos ou cicloalquila C3-C8, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6.
[0107] U é O, S, N-Q5-T5 ou CH-Q5-T5.
[0108] n é 0, 1 ou 2.
[0109] R12 é Cl, Br ou metila.
[0110] Um ou mais -Q5-T5 são oxo.
[0111] U é CH-Q5-T5 e n é 0.
[0112] Um ou mais -Q6-T6 são oxo.
[0113] Q6 é uma ligação ou C(O) e T6 é alquila C1-C6 ou alcóxi C1-C6.
[0114] A presente invenção também fornece composições farmacêuticas compreendendo um ou mais portadores farmaceuticamente aceitáveis e um ou mais compostos selecionados a partir daqueles de qualquer um entre as Fórmulas descritas neste relatório, e N-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2- metilfenil)furan-2-carboxamida, N,N’-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)carbamoil)-1,3-fenileno)diacetamida, N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-pivalamidobenzamida, 3-(3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepino-7-sulfona- mido)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida, N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3,5-dimetoxibenzamida, N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-3,4,5-trimetoxibenzamida, 3-alil-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)-4,5-dimetoxibenzamida, 4-(2-amino-2-oxoetóxi)-3-cloro-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metoxibenzamida, 3-cloro-N-((4,6-dime- til-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-4-hidróxi-5-metoxibenzamida, e 3-bromo-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metóxi-4-propoxibenzamida.
[0115] Um outro aspecto desta invenção é um método para tratar ou prevenir câncer. O método inclui administrar a um paciente em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais compostos selecionados a partir daqueles de qualquer uma entre as Fórmulas descritas neste relatório, e N-(5-(((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)furan-2-carboxa- mida, N,N’-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-1,3- fenileno)diacetamida, N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-pivalamido- benzamida, 3-(3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepino-7-sulfonamido)-N-((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida, N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)-3,5-dimetoxibenzamida, N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3,4,5-trimetoxibenzamida, 3-alil-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-4,5-dimetoxibenzamida, 4-(2-amino-2-oxoetóxi)-3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metoxibenzamida, 3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-4-hidróxi-5-metoxibenzamida, e 3-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metóxi-4-propoxibenzamida.
[0116] A menos que de outro modo estabelecido, qualquer descrição de um método de tratamento inclui usos dos compostos para fornecer tal tratamento ou profilaxia, conforme é descrito no relatório descritivo, assim como os usos dos compostos para preparar um medicamento para tratar ou prevenir tal condição. O tratamento inclui o tratamento de seres humanos ou não humanos, incluindo roedores e outros modelos de doença.
[0117] Por exemplo, o método compreende a etapa de administrar a um paciente tendo um câncer com metilação de H3-K27 anormal uma quantidade eficaz de um ou mais compostos das Fórmulas descritas neste relatório, em que o(s) com- posto(s) inibe(m) a atividade de histona metiltransferase de EZH2, desse modo, tratando o câncer. Exemplos de metilação de H3-K27 anormal podem incluir um aumento global em e/ou distribuição alterada da di ou tri-metilação de H3-K27 na cromatina de células de câncer.
[0118] Por exemplo, o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste de cânceres que superexpressam EZH2 ou outras subunidades de PRC2, contêm mutações de perda de função em H3-K27 demetilases, tais como UTX, ou superexpressam proteínas acessórias, tais como PHF19/PCL3 capazes de aumentar e ou mislocalizar a atividade de EZH2 (veja as referências em Sneeringer et al. Proc Natl Acad Sci USA 107(49):20980 - 5, 2010).
[0119] Por exemplo, o método compreende a etapa de administrar a um paciente tendo um câncer que superexpressa EZH2 uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais compostos das Fórmulas descritas neste relatório, em que o(s) composto(s) inibe(m) a atividade de histona metiltransferase de EZH2, desse modo, tratando o câncer.
[0120] Por exemplo, o método compreende a etapa de administrar a um paciente tendo um câncer com uma mutação de perda de função na H3-K27 demetilase UTX uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais compostos das Fórmulas descritas neste relatório, em que o(s) composto(s) inibe(m) a atividade de histona metiltransferase de EZH2, desse modo, tratando o câncer.
[0121] Por exemplo, o método compreende a etapa de administrar a um paciente tendo um câncer que superexpressa um componente acessório da PRC2, tal como PHF19/PCL3, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais compostos das Fórmulas descritas neste relatório, em que o(s) composto(s) inibe(m) a atividade de histona metiltransferase de EZH2, desse modo, tratando o câncer.
[0122] Ainda em um outro aspecto, esta invenção se refere a um método para modular a atividade da EZH2 do tipo selvagem, a subunidade catalítica do complexo PRC2 que catalisa a mono- a tri-metilação de lisina 27 em histona H3 (H3-K27). Por exemplo, a presente invenção se refere a um método para inibir a atividade de EZH2 em uma célula. Este método pode ser conduzido in vitro ou in vivo.
[0123] Ainda em um outro aspecto, esta invenção diz respeito a um método para inibir em um paciente a conversão de H3-K27 em H3-K27 trimetilada. O método compreende administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais entre os compostos das Fórmulas descritas neste relatório para inibir a atividade de histona metiltransferase de EZH2, desse modo, inibindo a conversão de H3-K27 em H3-K27 trimetilada no paciente.
[0124] Por exemplo, o método compreende a etapa de administrar a um paciente tendo um câncer que expressa um mutante Y641 de EZH2 uma quantidade te- rapeuticamente eficaz de um ou mais compostos das Fórmulas descritas neste relatório, em que o(s) composto(s) inibe(m) a atividade de histona metiltransferase de EZH2, desse modo, tratando o câncer.
[0125] Por exemplo, o câncer é selecionado a partir do grupo que consiste de linfoma folicular e linfoma difuso de grandes células B (DLBCL) do subtipo do tipo células B (GCB) do centro germinal. Por exemplo, o câncer é linfoma, leucemia ou melanoma. Preferivelmente, o linfoma é linfoma não Hodgkin, linfoma folicular ou lin- foma difuso de grandes células B. Alternativamente, a leucemia é leucemia mielógena crônica (CML), leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica aguda ou leucemia de linhagem mista.
[0126] A condição pré-cancerosa é síndromes mielodisplásicas (MDS, anteriormente conhecida como pré-leucemia).
[0127] Por exemplo, o câncer é um câncer hematológico.
[0128] Por exemplo, o método compreende a etapa de administrar a um paciente tendo um câncer que expressa um mutante Y641 de EZH2 uma quantidade te- rapeuticamente eficaz de um ou mais compostos das Fórmulas descritas neste relatório, em que o(s) composto(s) inibe(m) seletivamente a atividade de histona metil- transferase do mutante Y641 de EZH2, desse modo, tratando o câncer.
[0129] Por exemplo, o método compreende ainda as etapas de realizar um ensaio para detectar um mutante Y641 de EZH2 em uma amostra compreendendo células de câncer a partir de um paciente tendo um câncer.
[0130] Ainda em um outro aspecto, esta invenção se refere a um método para modular a atividade da histona metiltransferase EZH2 do tipo selvagem e mutante, a subunidade catalítica do complexo PRC2 que catalisa a mono- a tri-metilação de lisina 27 em histona H3 (H3-K27). Por exemplo, a presente invenção se refere a um método para inibir a atividade de certas formas mutantes de EZH2 em uma célula. As formas mutantes de EZH2 incluem uma substituição de um outro resíduo de aminoácido por tirosina 641 (Y641, também Tyr641) de EZH2 do tipo selvagem. O método inclui contatar a célula com uma quantidade eficaz de um ou mais entre os compostos de qualquer Fórmula descrita neste relatório. Este método pode ser conduzido in vitro ou in vivo.
[0131] Ainda em um outro aspecto, esta invenção diz respeito a um método para inibir em um paciente a conversão de H3-K27 em H3-K27 trimetilada. O método compreende administrar a um paciente que expressa um mutante Y641 de EZH2 uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais entre os compostos de qualquer Fórmula descrita neste relatório para inibir a atividade de histona metiltransferase de EZH2, desse modo, inibindo a conversão de H3-K27 em H3-K27 trimetilada no paciente. Por exemplo, a atividade de histona metiltransferase inibida é aquela do mutante Y641 de EZH2. Por exemplo, o composto desta invenção inibe seletivamente a atividade de histona metiltransferase do mutante Y641 de EZH2. Por exemplo, o mutante Y641 de EZH2 é selecionado a partir do grupo que consiste de Y641C, Y641F, Y641H, Y641N e Y641S.
[0132] O método para inibir em um paciente a conversão de H3-K27 em H3- K27 trimetilada também pode compreender a realização de um ensaio para detectar um mutante Y641 de EZH2 em uma amostra a partir de um paciente antes de administrar ao paciente que expressa um mutante Y641 de EZH2 uma quantidade tera- peuticamente eficaz de um ou mais entre os compostos de qualquer Fórmula descrita neste relatório. Por exemplo, a realização do ensaio para detectar o mutante Y641 de EZH2 inclui o resequenciamento do genoma total ou resequenciamento da região alvo que detecta um ácido nucleico que codifica o mutante Y641 de EZH2. Por exemplo, a realização do ensaio para detectar o mutante Y641 de EZH2 inclui contatar a amostra com um anticorpo que se liga especificamente a um polipeptídeo ou fragmento do mesmo característico do mutante Y641 de EZH2. Por exemplo, a realização do ensaio para detectar o mutante Y641 de EZH2 inclui contatar a amostra sob condições altamente severas com uma sonda de ácido nucleico que hibridiza em um ácido nucleico que codifica um polipeptídeo ou fragmento do mesmo característico do mutante Y641 de EZH2.
[0133] Além disso, a invenção também se refere a um método para identificar um inibidor de um mutante Y641 de EZH2. O método compreende as etapas de combinar um mutante Y641 de EZH2 isolado com um substrato de histona, um doador de grupo metila, e um composto de teste, em que o substrato de histona compreende uma forma de H3-K27 selecionada a partir do grupo que consiste de H3-K27 não me- tilada, H3-K27 monometilada, H3-K27 dimetilada, e qualquer combinação das mesmas; e a realizar um ensaio para detectar a metilação de H3-K27 (por exemplo, formação de H3-K27 trimetilada) no substrato de histona, desse modo, identificando o composto de teste como um inibidor do mutante Y641 de EZH2 quando a metilação de H3-K27 (por exemplo, formação de H3-K27 trimetilada) na presença do composto de teste é menor do que a metilação de H3-K27 (por exemplo, formação de H3-K27 trimetilada) na ausência do composto de teste.
[0134] Em uma modalidade, a realização do ensaio para detectar a metilação de H3-K27 no substrato de histona compreende medir a incorporação de grupos me- tila marcados.
[0135] Em uma modalidade, os grupos metila marcados são grupos metila isotopicamente marcados.
[0136] Em uma modalidade, a realização do ensaio para detectar a metilação de H3-K27 no substrato de histona compreende contatar o substrato de histona com um anticorpo que se liga especificamente à H3-K27 trimetilada.
[0137] Também no escopo da invenção está um método para identificar um inibidor seletivo de um mutante Y641 de EZH2. O método compreende as etapas de combinar um mutante Y641 de EZH2 isolado com um substrato de histona, um doador de grupo metila, e um composto de teste, em que o substrato de histona compreende uma forma de H3-K27 selecionada a partir do grupo que consiste de H3-K27 mono- metilada, H3-K27 dimetilada, e uma combinação de H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada, desse modo, formando uma mistura de teste; combinação uma EZH2 do tipo selvagem isolada com um substrato de histona, um doador de grupo metila e um composto de teste, em que o substrato de histona compreende uma forma de H3-K27 selecionada a partir do grupo que consiste de H3-K27 monometilada, H3-K27 dimeti- lada e uma combinação de H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada, desse modo, formando uma mistura controle; realizar um ensaio para detectar a trimetilação do substrato de histona na mistura de teste e na mistura controle; calcular a razão de (a) trimetilação com o mutante Y641 de EZH2 e o composto de teste (M+) para (b) trime- tilação com o mutante Y641 de EZH2 sem o composto de teste (M-); calcular a razão de (c) trimetilação com EZH2 do tipo selvagem e o composto de teste (WT+) para (d) trimetilação com EZH2 do tipo selvagem sem o composto de teste (WT-); comparação da razão (a)/(b) com a razão (c)/(d); e identificação do composto de teste como um inibidor seletivo do mutante Y641 de EZH2 quando a razão (a)/(b) é menor do que a razão (c)/(d).
[0138] A presente invenção ainda fornece um método para identificar um paciente como um candidato para o tratamento com um ou mais compostos da invenção. O método compreende as etapas de realizar um ensaio para detectar um mutante Y641 de EZH2 em uma amostra a partir de um paciente; e identificar um paciente que expressa um mutante Y641 de EZH2 como um candidato para o tratamento com um ou mais compostos da invenção, em que o(s) composto(s) inibe(m) a atividade de histona metiltransferase de EZH2.
[0139] Um outro aspecto da invenção é um método para inibir a conversão de H3-K27 em H3-K27 trimetilada. O método compreende a etapa de contatar um mutante Y641 de EZH2 com um substrato de histona compreendendo H3-K27 e uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção, em que o composto inibe a atividade de histona metiltransferase de EZH2, desse modo, inibindo a conversão de H3-K27 em H3-K27 trimetilada.
[0140] Além disso, os compostos ou métodos descritos neste relatório podem ser usados para pesquisa (por exemplo, estudo de enzimas epigenéticas) e outros propósitos não terapêuticos.
[0141] A menos que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos usados neste relatório têm o mesmo significado, conforme comumente entendido por aqueles de habilidade comum na técnica a qual esta invenção pertence. No relatório descritivo, as formas no singular também incluem o plural, a menos que o contexto claramente indique de outro modo. Embora os métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles descritos neste relatório possam ser usados na prática ou teste da presente invenção, os métodos e materiais adequados são descritos abaixo. Todas as publicações, pedidos de patente, patentes e outras referências mencionadas neste relatório são incorporadas como referência. As referências citadas neste relatório não são admitidas como técnica anterior à invenção reivindicada. No caso de conflito, o presente relatório descritivo, incluindo as definições, prevalecerá. Além disso, os materiais, métodos e exemplos são apenas ilustrativos e não são limitantes.
[0142] Outras características e vantagens da invenção serão evidentes a partir da descrição detalhada e reivindicações seguintes.
[0143] Breve Descrições Das Figuras
[0144] A Figura 1 (A) é um lote idealizado de contagem celular (isto é, número celular) como uma função de tempo que mostra a proliferação exponencial durante o crescimento celular na fase log.
[0145] A Figura 1(B) é um lote idealizado de ln(contagem celular) como uma função de tempo para os dados a partir do painel (A).
[0146] A Figura 2 é um gráfico que mostra as curvas de crescimento celular bifásico na presença de um composto antiproliferativo para o qual existe um retardo antes que o impacto do composto no crescimento celular seja realizado. O composto começa a afetar o crescimento celular no ponto de tempo “início de impacto” marcado. Os círculos cheios representam dados idealizados para a amostra controle veículo (ou solvente) que não é tratada com o Composto. Os outros símbolos representam as curvas de crescimento bifásico para as células tratadas com concentrações diferentes do composto (isto é, fármaco).
[0147] A Figura 3 é um novo lote de kp como uma função da concentração do composto para (A) um composto citostático e (B) citotóxico, ilustrando a determinação gráfica da LCC para um agente citotóxico. Observe que para um composto citostático (painel A), o valor de kp nunca pode estar abaixo de zero.
[0148] A Figura 4 é um diagrama que mostra o crescimento de tumor de camundongos portadores de xenoenxerto de WSU-DLCL2 tratados com o Composto 222 durante 27 dias.
[0149] A Figura 5 é um diagrama que mostra a metilação de H3K27me3 global em tumores WSU-DLCL2 a partir de camundongos tratados com o composto 222 ou veículo durante 27 dias.
[0150] Descrição Detalhada da Invenção
[0151] A presente invenção fornece novos compostos de benzeno substituídos, métodos sintéticos para fabricar os compostos, composições farmacêuticas contendo os mesmos e vários usos dos compostos.
[0152] Compostos de Benzeno Substituídos
[0153] A presente invenção fornece os compostos da Fórmula (I):
[0154]
[0155] (I).
[0156] Nesta fórmula:
[0157] X1 é N ou CR11;
[0158] X2 é N ou CR13;
[0159] X3 é N ou C, e quando X3 é N, R6 é ausente;
[0160] Z é NR7R8, OR7, S(O)aR7, ou CR7R8R14, em que a é 0, 1 ou 2;
[0161] cada um entre R1, R5, R9 e R10 é, independentemente, H ou alquila C1C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[0162] cada um entre R2, R3 e R4 é, independentemente, -Q1-T1, em que Q1 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 opcionalmente substituído com halo, ciano, hidro- xila ou alcóxi C1-C6, e T1 é H, halo, hidroxila, COOH, ciano, azido ou RS1, em que RS1 é alquila C1-C3, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, alcoxila C1-C6, C(O)O-alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e RS1 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, oxo, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[0163] R6 é H, halo, ciano, azido, ORa, -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, - C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -S(O)bRa, -S(O)bNRaRb, ou RS2, em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros; b é 0, 1 ou 2, cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H ou RS3, e RS3 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterociclo- alquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um entre RS2, RS3, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T2 é H, halo, ciano, -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -C(O)NRcRd, -NRdC(O)Rc, - NRdC(O)ORc, -S(O)2Rc, -S(O)2NRcRd, ou RS4, em que cada um entre Rc e Rd é, inde-pendentemente, H ou RS5, cada um entre RS4 e RS5 é, independentemente, alquila C1C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional, e cada um entre RS4, RS5, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Rc e Rd, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3, em que Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de halo, ciano, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ORe, COORe, -S(O)2Re, -NReRf e - C(O)NReRf, cada um entre Re e Rf independentemente sendo H ou alquila C1-C6 ou - Q3-T3 é oxo; ou-Q2-T2 é oxo;
[0164] R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação, ligante alquila C1-C4 ou ligante alquenila C2-C4, cada ligante opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T4 é H, halo, ciano, NRgRh, -ORg, -C(O)Rg, -C(O)ORg, -C(O)NRgRh, - C(O)NRgORh, -NRgC(O)Rh, -S(O)2Rg ou RS6, em que cada um entre Rg e Rh é, independentemente, H ou RS7, cada um entre RS6 e RS7 é, independentemente, alquila C1C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e cada um entre RS6 e RS7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5, em que Q5 é uma ligação, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2 ou ligante alquila C1-C3, Rk sendo H ou alquila C1-C6, e T5 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)qRq, em que q é 0, 1 ou 2 e Rq é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, hetero- cicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T5 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquila- mino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T5 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q5-T5 é oxo;
[0165] cada um entre R8, R11, R12 e R13 é, independentemente, H, halo, hidro- xila, COOH, ciano, RS8, ORS8 ou COORS8, em que RS8 é alquila C1-C6, alquenila C2C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6, ou di-alquilamino C1-C6, e RS8 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6 e di-alquilamino C1-C6; ou R7 e R8, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 a 2 heteroátomos adicionais, ou R7 e R8, juntamente com o átomo de C ao qual eles são ligados, formam cicloalquila C3-C8 ou um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 1 a 3 heteroátomos, e cada um entre os anéis heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou cicloalquila C3-C8 formado por R7 e R8 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6, em que Q6 é uma ligação, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rm sendo H ou alquila C1-C6, e T6 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloal- quila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros ou S(O)pRp, em que p é 0, 1 ou 2 e Rp é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T6 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidro- xila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, ciclo- alquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T6 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q6-T6 é oxo; e
[0166] R14 é ausente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[0167] contanto que o composto seja
[0168] N-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-me- tilfenil)furan-2-carboxamida,
[0169] N,N’-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-1,3- fenileno)diacetamida,
[0170] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-pivalamidobenza- mida,
[0171] 3-(3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepino-7-sulfonamido)-N-((4,6-di- metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida,
[0172] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3,5-dimetoxibenza- mida,
[0173] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3,4,5-trimetoxiben- zamida,
[0174] 3-alil-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-4,5-dimetoxi- benzamida,
[0175] 4-(2-amino-2-oxoetóxi)-3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)-5-metoxibenzamida,
[0176] 3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-4-hidróxi-5- metoxibenzamida, ou
[0177] 3-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metóxi-4- propoxibenzamida.
[0178] Por exemplo, X1 é CR11 e X2 é CR13.
[0179] Por exemplo, X1 é CR11 e X2 é N.
[0180] Por exemplo, X1 é N e X2 é CR13.
[0181] Por exemplo, X1 é N e X2 é N.
[0182] Por exemplo, X3 é C.
[0183] Por exemplo, X3 é N e R6 é ausente.
[0184] Por exemplo, Z é NR7R8.
[0185] Por exemplo, Z é CR7R8R14.
[0186] Por exemplo, Z é OR7.
[0187] Por exemplo, Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2.
[0188] Por exemplo, Z é SR7.
[0189] Por exemplo, R6 é H.
[0190] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo).
[0191] Por exemplo, R6 é alquila C1-C3 opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0192] Por exemplo, R6 é CF3.
[0193] Por exemplo, R6 é alquenila C2-C6, alquinila C2-C6 ou cicloalquila C3-C6 cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0194] Por exemplo, R6 é etenila.
[0195] Por exemplo, R6 é etinila.
[0196] Por exemplo, R6 é etinila substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T2 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pir- rolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra- hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-pira- nila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepa- nila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0197] Por exemplo, R6 é azido.
[0198] Por exemplo, R6 é ciano.
[0199] Por exemplo, R6 é C(O)H.
[0200] Por exemplo, R6 é ORa ou -C(O)Ra.
[0201] Por exemplo, Ra é alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes), que é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0202] Por exemplo, R6 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0203] Por exemplo, R6 é piperidinila, 2,2,6,6-tetrametil-piperidinila, 1,2,3,6-te- tra-hidropiridinila, 2,2,6,6-tetrametil-1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, morfoli- nila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila ou pirrolidinila, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0204] Por exemplo, R6 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, e -Q2-T2 é oxo ou Q2 é uma ligação e T2 é -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -S(O)2Rc, alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3- T3 quando Rc ou Rd não é H.
[0205] Por exemplo, R6 é -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, - NRbC(O)Ra, -SRa, -S(O)2Ra ou -S(O)2NRaRb.
[0206] Por exemplo, cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H, alquila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8 opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0207] Por exemplo, um entre Ra e Rb é H.
[0208] Por exemplo, Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 7 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional ao átomo de N (por exemplo, azetidinila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaes- piro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) e o anel é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0209] Por exemplo, -Q2-T2 não é H.
[0210] Por exemplo, -Q2-T2 é oxo.
[0211] Por exemplo, Q2 é uma ligação.
[0212] Por exemplo, Q2 é um ligante alquila C1-C3 não substituído.
[0213] Por exemplo, T2 é alquila C1-C6 ou arila C6-C10, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0214] Por exemplo, T2 é um alquila C1-C6 de cadeia reta ou C3-C6 ramificado não substituído, substituído, incluindo mas não limitado a, metila, etila, n-propila, i- propila, n-butila, s-butila, t-butila, n-pentila, s-pentila e n-hexila.
[0215] Por exemplo, T2 é fenila.
[0216] Por exemplo, T2 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo).
[0217] Por exemplo, T2 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0218] Por exemplo, T2 é -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc ou -S(O)2Rc.
[0219] Por exemplo, Rc é alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes), que é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0220] Por exemplo, cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0221] Por exemplo, Rc é H.
[0222] Por exemplo, Rd é H.
[0223] Por exemplo, Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 7 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional ao átomo de N (por exemplo, azetidinila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabici- clo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) e o anel é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0224] Por exemplo, Q2 é uma ligação e T2 é -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, - C(O)ORc, -S(O)2Rc, alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3 quando Rc ou Rd não é H.
[0225] Por exemplo,-Q3-T3 é oxo.
[0226] Por exemplo, T2 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros ou cicloalquila C3-C8 e um ou mais -Q3-T3 são oxo.
[0227] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 não substituído ou substituído.
[0228] Por exemplo, T3 é H, halo, heterocicloalquila de 4 a 7 membros, alquila C1-C3, ORe, COORe,-S(O)2Re,-NReRf ou -C(O)NReRf.
[0229] Por exemplo, um entre Rd e Re é H.
[0230] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de alquila C1-C3, halo, ORe, -S(O)2Re, -NReRf e- C(O)NReRf.
[0231] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de alquila C1-C3, ORe, -S(O)2Re ou -NReRf.
[0232] Por exemplo, Re é H.
[0233] Por exemplo, Rf é H.
[0234] Por exemplo, R7 não é H.
[0235] Por exemplo, R7 é -C(O)Rg.
[0236] Por exemplo, R7 é -C(O)Rg, em que Rg é cicloalquila C3-C8 ou hetero- cicloalquila de 4 a 7 membros, cicloalquila C3-C8.
[0237] Por exemplo, R7 é arila C6-C10 substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0238] Por exemplo, R7 é fenila opcionalmente substituído com um ou mais - Q5-T5.
[0239] Por exemplo, R7 é alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0240] Por exemplo, R7 é cicloalquila C3-C8 opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0241] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0242] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 8 a 14 membros, tal como 1,4- dioxaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il), 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il), 1-oxaes- piro[4.5]decanila (por exemplo, 1-oxaespiro[4.5]decan-8-ila ou 1-oxaespiro[4.5]decan- 2-ona-8-il), 1-azaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1-azaespiro[4.5]decan-8-ila ou 1- azaespiro[4.5]decan-2-ona-8-il), 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila (por exemplo, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-4-ila ou 3’H-espiro[ciclo-he- xano-1,1’-isobenzofuran]-3’-ona-4-il), 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]- ila (por exemplo, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-4-ila ou 7’H-espiro[ci- clo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-7’-ona-4-il) ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4- c]piridin]-ila (por exemplo, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-4-ila ou 3’H- espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-3’-ona-4-il), cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0243] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 5 a 6 membros opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0244] Por exemplo, R7 é isopropila.
[0245] Por exemplo, R7 é pirrolidinila, piperidinila, tetra-hidropirano, ciclopen- tila ou ciclo-hexila, ciclo-heptila, cada um opcionalmente substituído com -Q5-T5.
[0246] Por exemplo, R7 é ciclopentila ou ciclo-hexila, cada um opcionalmente substituído com -Q5-T5.
[0247] Por exemplo, Q5 é NHC(O) e T5 é alquila C1-C6 ou alcóxi C1-C6.
[0248] Por exemplo, -Q5-T5 é oxo.
[0249] Por exemplo, T4 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros ou cicloalquila C3-C8 ou arila C6-C10, e um ou mais -Q5-T5 são oxo.
[0250] Por exemplo, R7 é 1-óxido-tetra-hidro-2H-tiopiranila ou 1,1-dióxido-te- tra-hidro-2H-tiopiranila.
[0251] Por exemplo, R7 é ciclo-hexanonila, por exemplo, ciclo-hexanon-4-ila.
[0252] Por exemplo, T5 é H, halo, alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3C8, arila C6-C10 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0253] Por exemplo, Q5 é uma ligação e T5 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0254] Por exemplo, Q5 é uma ligação e T5 é heteroarila de 5 ou 6 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, T5 sendo opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, alcoxila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0255] Por exemplo, Q5 é CO, S(O)2 ou NHC(O); e T5 é alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0256] Por exemplo, T5 é alquila C1-C6 ou alcoxila C1-C6, cada um opcionalmente substituído com halo, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0257] Por exemplo, Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é H ou arila C6-C10.
[0258] Por exemplo, Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é cicloalquila C3-C8, hete- rocicloalquila de 4 a 7 membros ou S(O)qRq.
[0259] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2 e R7 é alquila C1-C6 (por exemplo, metila, etila, n-propila, i-propila, butila ou t-butila), cicloalquila C3-C8 (por exemplo, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptil) ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxeta- nila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepa- nila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]hepta- nila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, 1- oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-iso- benzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila ou 3’H-espiro[ciclo- hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes) e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0260] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é OR7 em que R7 é heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazoli- dinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, pipera- zinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4- diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabici- clo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo- hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila, ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes) e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0261] Por exemplo, R11 é H.
[0262] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é, independentemente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com amino, azido, halo, mono-alquilamino C1C6, di-alquilamino C1-C6 ou arila C6-C10.
[0263] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é, independentemente, alquila C1C3 opcionalmente substituído com alcoxila C1-C6.
[0264] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é metila.
[0265] Por exemplo, R1 é H.
[0266] Por exemplo, R1 é alquila C1-C6 opcionalmente substituído com azido, halo, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou arila C6-C10.
[0267] Por exemplo, R12 é H, metila, etila, etenila ou halo.
[0268] Por exemplo, R12 é metila.
[0269] Por exemplo, R12 é etila ou propenila.
[0270] Por exemplo, R12 é metoxila.
[0271] Por exemplo, R12 é etenila.
[0272] Por exemplo, R8 é H, metila, etila ou etenila.
[0273] Por exemplo, R8 é metila.
[0274] Por exemplo, R8 é etila.
[0275] Por exemplo, R8 é propila.
[0276] Por exemplo, R8 é etenila ou propenila.
[0277] Por exemplo, R8 é alquila C1-C6 substituído com um ou mais substituin- tes selecionados a partir do grupo que consiste de halo (por exemplo, F, Cl, ou Br), hidroxila ou alcoxila C1-C6.
[0278] Por exemplo, R8 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-pira- nila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabici- clo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes).
[0279] Por exemplo, R8 é piperidinila.
[0280] Por exemplo, R8 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído e R7 é-Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou ligante alquila C1-C4 e T4 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0281] Por exemplo, Z é NR7R8 ou CR7R8R14 em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 11 membros tendo 1 a 3 heteroátomos (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirroli- dinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hi- drofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-pira- nila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepa- nila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6- azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decanila, e semelhantes) ou cicloalquila C3-C8, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6.
[0282] Por exemplo, o anel formado por R7 e R8 é selecionado a partir do grupo que consiste de azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, morfolinila, piperazinila, 1,4- dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, e ciclo-hexenila, cada um opcionalmente substituído com -Q6-T6.
[0283] Por exemplo, Z é 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-ila, pirrolidino-2,5- diona-1-ila, ou piperidina-2,6-diona-1-ila.
[0284] Por exemplo, um ou mais -Q6-T6 é oxo.
[0285] Por exemplo, T6 é H, halo, alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3C8, arila C6-C10 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0286] Por exemplo, Q6 é uma ligação e T6 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0287] Por exemplo, Q6 é CO, S(O)2 ou NHC(O); e T6 é alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0288] Por exemplo, T6 é alquila C1-C6 ou alcoxila C1-C6, cada um opcionalmente substituído com halo, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0289] Por exemplo, Q6 é ligante alquila C1-C3 e T6 é H ou arila C6-C10.
[0290] Por exemplo, Q6 é ligante alquila C1-C3 e T6 é cicloalquila C3-C8, hete- rocicloalquila de 4 a 7 membros, ou S(O)pRp.
[0291] Por exemplo, cada um entre Rp e Rq é, independentemente, alquila C1C6.
[0292] Por exemplo, R6 é -S(O)bRa ou azido, em que b é 0, 1 ou 2 e Ra é alquila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8; e Z é NR7R8, em que R7 é cicloalquila C3-C8 (por exemplo, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptila) ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxa- zolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-es- piro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piri- din]-ila ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes), cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5; e R8 é H ou alquila C1-C6 (por exemplo, metila, etila, n-propila, i-propila, butila ou t-butila).
[0293] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é NR7R8 ou CR7R8R14, em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 11 membros tendo 1 a 3 heteroátomos (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-dia- zaespiro[3,3]heptanila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decan-8-ila, pirrolidino-2,5-diona-1-ila, piperidina-2,6-diona-1-ila, e semelhantes) ou cicloalquila C3-C8, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q6- T6.
[0294] Por exemplo, R13 é H ou metila.
[0295] Por exemplo, R13 é H.
[0296] Por exemplo, R3 é H.
[0297] Por exemplo, cada um entre R5, R9, e R10 é H.
[0298] Em um outro aspecto, a presente invenção caracteriza um composto de benzeno substituído da Fórmula (I) acima ou um sal farmaceuticamente aceitável ou éster do mesmo, em que
[0299] X1 é N ou CR11;
[0300] X2 é N ou CR13;
[0301] X3 é N ou C, e quando X3 é N, R6 é ausente;
[0302] Z é NR7R8, OR7, S(O)aR7 ou CR7R8R14, em que a é 0, 1 ou 2;
[0303] cada um entre R1, R5, R9, e R10 é, independentemente, H ou alquila C1C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[0304] cada um entre R2, R3, e R4 é, independentemente, -Q1-T1, em que Q1 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 opcionalmente substituído com halo, ciano, hi- droxila ou alcóxi C1-C6, e T1 é H, halo, hidroxila, COOH, ciano, azido ou RS1, em que RS1 é alquila C1-C3, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, alcoxila C1-C6, C(O)O-alquila C1C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1C6, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e RS1 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, oxo, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[0305] R6 é H, halo, ciano, azido, ORa, -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, - C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -S(O)bRa, -S(O)bNRaRb ou RS2, em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros; b é 0, 1 ou 2, cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H ou RS3 e RS3 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, hete- rocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterociclo- alquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um entre RS2, RS3, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T2 é H, halo, ciano, -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -C(O)NRcRd, -NRdC(O)Rc, - NRdC(O)ORc, -S(O)2Rc, -S(O)2NRcRd ou RS4, em que cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou RS5, cada um entre RS4 e RS5 é, independentemente, alquila C1C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou hetero- arila de 5 ou 6 membros, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional, e cada um entre RS4, RS5, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 mem-bros formado por Rc e Rd, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3, em que Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de halo, ciano, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ORe, COORe, -S(O)2Re, -NReRf e - C(O)NReRf, cada um entre Re e Rf independentemente sendo H ou alquila C1-C6 ou - Q3-T3 é oxo; ou-Q2-T2 é oxo;
[0306] R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação, ligante alquila C1-C4, ou ligante alquenila C2-C4, cada ligante opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T4 é H, halo, ciano, NRgRh, -ORg, -C(O)Rg, -C(O)ORg, -C(O)NRgRh, - C(O)NRgORh, -NRgC(O)Rh, -S(O)2Rg, ou RS6, em que cada um entre Rg e Rh é, independentemente, H ou RS7, cada um entre RS6 e RS7 é, independentemente, alquila C1C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e cada um entre RS6 e RS7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5, em que Q5 é uma ligação, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2 ou ligante alquila C1-C3, Rk sendo H ou alquila C1-C6, e T5 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)qRq, em que q é 0, 1 ou 2 e Rq é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, hetero- cicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T5 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquila- mino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T5 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q5-T5 é oxo; contanto que (i) R7 não seja C(O)Rg ou -S(O)2Rg quando Z é NR7R8; (ii) R7 não seja alquila C1-C6 quando Z é OR7, e (iii) R7 não seja H;
[0307] cada um entre R8, R11, R12 e R13 é, independentemente, H, halo, hidro- xila, COOH, ciano, RS8, ORS8 ou COORS8, em que RS8 é alquila C1-C6, alquenila C2C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6, ou di-alquilamino C1-C6 e RS8 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6 e di-alquilamino C1-C6; ou R7 e R8, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 a 2 hete- roátomos adicionais, ou R7 e R8, juntamente com o átomo de C ao qual eles são ligados, formam cicloalquila C3-C8 ou um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 1 a 3 heteroátomos, e cada um entre os anéis heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou cicloalquila C3-C8 formado por R7 e R8 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6, em que Q6 é uma ligação, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2 ou ligante alquila C1-C3, Rm sendo H ou alquila C1-C6, e T6 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)pRp, em que p é 0, 1 ou 2 e Rp é alquila C1-C6, alquenila C2C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T6 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T6 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q6-T6 é oxo; e
[0308] R14 é ausente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros.
[0309] Por exemplo, X1 é CR11 e X2 é CR13.
[0310] Por exemplo, X1 é CR11 e X2 é N.
[0311] Por exemplo, X1 é N e X2 é CR13.
[0312] Por exemplo, X1 é N e X2 é N.
[0313] Por exemplo, X3 é C.
[0314] Por exemplo, X3 é N e R6 é ausente.
[0315] Por exemplo, Z é NR7R8.
[0316] Por exemplo, Z é CR7R8R14.
[0317] Por exemplo, Z é OR7.
[0318] Por exemplo, Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2.
[0319] Por exemplo, Z é SR7.
[0320] Por exemplo, R6 é H.
[0321] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo).
[0322] Por exemplo, R6 é alquila C1-C3 opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0323] Por exemplo, R6 é CF3.
[0324] Por exemplo, R6 é alquenila C2-C6, alquinila C2-C6 ou cicloalquila C3-C6 cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0325] Por exemplo, R6 é etenila.
[0326] Por exemplo, R6 é etinila.
[0327] Por exemplo, R6 é etinila substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T2 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pir- rolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra- hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-pira- nila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepa- nila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0328] Por exemplo, R6 é azido.
[0329] Por exemplo, R6 é ciano.
[0330] Por exemplo, R6 é C(O)H.
[0331] Por exemplo, R6 é -C(O)Ra.
[0332] Por exemplo, Ra é alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes), que é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0333] Por exemplo, R6 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0334] Por exemplo, R6 é piperidinila, 2,2,6,6-tetrametil-piperidinila, 1,2,3,6-te- tra-hidropiridinila, 2,2,6,6-tetrametil-1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, morfoli- nila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila ou pirrolidinila, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0335] Por exemplo, R6 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2 e -Q2-T2 é oxo ou Q2 é uma ligação e T2 é -ORc, - NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -S(O)2Rc, alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3- T3 quando Rc ou Rd não é H.
[0336] Por exemplo, R6 é -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, - NRbC(O)Ra, -SRa, -S(O)2Ra ou -S(O)2NRaRb.
[0337] Por exemplo, cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H, alquila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8 opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0338] Por exemplo, um entre Ra e Rb é H.
[0339] Por exemplo, Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 7 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional ao átomo de N (por exemplo, azetidinila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabici- clo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) e o anel é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0340] Por exemplo, -Q2-T2 não é H.
[0341] Por exemplo, -Q2-T2 é oxo.
[0342] Por exemplo, Q2 é uma ligação.
[0343] Por exemplo, Q2 é um ligante alquila C1-C3 não substituído.
[0344] Por exemplo, T2 é alquila C1-C6 ou arila C6-C10, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0345] Por exemplo, T2 é um alquila C1-C6 de cadeia reta ou C3-C6 ramificado não substituído substituído, incluindo mas não limitado a, metila, etila, n-propila, i-pro- pila, n-butila, s-butila, t-butila, n-pentila, s-pentila e n-hexila.
[0346] Por exemplo, T2 é fenila.
[0347] Por exemplo, T2 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo).
[0348] Por exemplo, T2 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0349] Por exemplo, T2 é -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc ou -S(O)2Rc.
[0350] Por exemplo, Rc é alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes), que é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0351] Por exemplo, cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0352] Por exemplo, Rc é H.
[0353] Por exemplo, Rd é H.
[0354] Por exemplo, Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 7 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional ao átomo de N (por exemplo, azetidinila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabici- clo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) e o anel é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0355] Por exemplo, Q2 é uma ligação e T2 é -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, - C(O)ORc, -S(O)2Rc, alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3 quando Rc ou Rd não é H.
[0356] Por exemplo,-Q3-T3 é oxo.
[0357] Por exemplo, T2 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros ou cicloalquila C3-C8 e um ou mais -Q3-T3 são oxo.
[0358] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 não substituído ou substituído.
[0359] Por exemplo, T3 é H, halo, heterocicloalquila de 4 a 7 membros, alquila C1-C3, ORe, COORe,-S(O)2Re,-NReRf ou -C(O)NReRf.
[0360] Por exemplo, um entre Rd e Re é H.
[0361] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de alquila C1-C3, halo, ORe, -S(O)2Re, -NReRf e- C(O)NReRf.
[0362] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de alquila C1-C3, ORe, -S(O)2Re ou -NReRf.
[0363] Por exemplo, Re é H.
[0364] Por exemplo, Rf é H.
[0365] Por exemplo, R7 não é H.
[0366] Por exemplo, R7 é -C(O)Rg.
[0367] Por exemplo, R7 é -C(O)Rg, em que Rg é cicloalquila C3-C8 ou hetero- cicloalquila de 4 a 7 membros, cicloalquila C3-C8.
[0368] Por exemplo, R7 é arila C6-C10 substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0369] Por exemplo, R7 é fenila opcionalmente substituído com um ou mais - Q5-T5.
[0370] Por exemplo, R7 é alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0371] Por exemplo, R7 é cicloalquila C3-C8 opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0372] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0373] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 8 a 14 membros, tal como 1,4- dioxaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il), 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il), 1-oxaes- piro[4.5]decanila (por exemplo, 1-oxaespiro[4.5]decan-8-ila ou 1-oxaespiro[4.5]decan- 2-ona-8-il), 1-azaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1-azaespiro[4.5]decan-8-ila ou 1- azaespiro[4.5]decan-2-ona-8-il), 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila (por exemplo, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-4-ila ou 3’H-espiro[ciclo-he- xano-1,1’-isobenzofuran]-3’-ona-4-il), 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]- ila (por exemplo, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-4-ila ou 7’H-espiro[ci- clo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-7’-ona-4-il) ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4- c]piridin]-ila (por exemplo, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-4-ila ou 3’H- espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-3’-ona-4-il), cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0374] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 5 a 6 membros opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0375] Por exemplo, R7 é isopropila.
[0376] Por exemplo, R7 é pirrolidinila, piperidinila, tetra-hidropirano, ciclopen- tila ou ciclo-hexila, ciclo-heptila, cada um opcionalmente substituído com -Q5-T5.
[0377] Por exemplo, R7 é ciclopentila ou ciclo-hexila, cada um opcionalmente substituído com -Q5-T5.
[0378] Por exemplo, Q5 é NHC(O) e T5 é alquila C1-C6 ou alcóxi C1-C6.
[0379] Por exemplo, -Q5-T5 é oxo.
[0380] Por exemplo, T4 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros ou cicloalquila C3-C8 ou arila C6-C10 e um ou mais -Q5-T5 são oxo.
[0381] Por exemplo, R7 é 1-óxido-tetra-hidro-2H-tiopiranila ou 1,1-dióxido-te- tra-hidro-2H-tiopiranila.
[0382] Por exemplo, R7 é ciclo-hexanonila, por exemplo, ciclo-hexanon-4-ila.
[0383] Por exemplo, T5 é H, halo, alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0384] Por exemplo, Q5 é uma ligação e T5 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0385] Por exemplo, Q5 é uma ligação e T5 é heteroarila de 5 ou 6 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, T5 sendo opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, alcoxila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0386] Por exemplo, Q5 é CO, S(O)2 ou NHC(O); e T5 é alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0387] Por exemplo, T5 é alquila C1-C6 ou alcoxila C1-C6, cada um opcionalmente substituído com halo, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0388] Por exemplo, Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é H ou arila C6-C10.
[0389] Por exemplo, Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é cicloalquila C3-C8, hete- rocicloalquila de 4 a 7 membros ou S(O)qRq.
[0390] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2 e R7 é alquila C1-C6 (por exemplo, metila, etila, n-propila, i-propila, butila ou t-butila), cicloalquila C3-C8 (por exemplo, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptila) ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxeta- nila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepa- nila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]hepta- nila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, 1- oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-iso- benzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila ou 3’H-espiro[ciclo- hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes) e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0391] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é OR7 em que R7 é heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazoli- dinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, pipera- zinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4- diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabici- clo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo- hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes) e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0392] Por exemplo, R11 é H.
[0393] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é, independentemente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com amino, azido, halo, mono-alquilamino C1C6, di-alquilamino C1-C6 ou arila C6-C10.
[0394] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é, independentemente, alquila C1C3 opcionalmente substituído com alcoxila C1-C6.
[0395] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é metila.
[0396] Por exemplo, R1 é H.
[0397] Por exemplo, R1 é alquila C1-C6 opcionalmente substituído com azido, halo, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou arila C6-C10.
[0398] Por exemplo, R12 é H, metila, etila, etenila ou halo.
[0399] Por exemplo, R12 é metila.
[0400] Por exemplo, R12 é etila ou propenila.
[0401] Por exemplo, R12 é metoxila.
[0402] Por exemplo, R12 é etenila.
[0403] Por exemplo, R8 é H, metila, etila ou etenila.
[0404] Por exemplo, R8 é metila.
[0405] Por exemplo, R8 é etila.
[0406] Por exemplo, R8 é propila.
[0407] Por exemplo, R8 é etenila ou propenila.
[0408] Por exemplo, R8 é alquila C1-C6 substituído com um ou mais substituin- tes selecionados a partir do grupo que consiste de halo (por exemplo, F, Cl ou Br), hidroxila ou alcoxila C1-C6.
[0409] Por exemplo, R8 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-pira- nila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabici- clo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes).
[0410] Por exemplo, R8 é piperidinila.
[0411] Por exemplo, R8 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído e R7 é-Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou ligante alquila C1-C4 e T4 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0412] Por exemplo, Z é NR7R8 ou CR7R8R14, em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 11 membros tendo 1 a 3 heteroátomos (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pir- rolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra- hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-pira- nila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepa- nila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-aza- espiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decanila, e semelhantes) ou cicloalquila C3-C8, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6.
[0413] Por exemplo, o anel formado por R7 e R8 é selecionado a partir do grupo que consiste de azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, morfolinila, piperazinila, 1,4- dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila e ciclo-hexenila, cada um opcionalmente substituído com -Q6-T6.
[0414] Por exemplo, Z é 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-ila, pirrolidino-2,5- diona-1-ila ou piperidina-2,6-diona-1-ila.
[0415] Por exemplo, um ou mais -Q6-T6 é oxo.
[0416] Por exemplo, T6 é H, halo, alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3C8, arila C6-C10 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0417] Por exemplo, Q6 é uma ligação e T6 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0418] Por exemplo, Q6 é CO, S(O)2 ou NHC(O); e T6 é alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0419] Por exemplo, T6 é alquila C1-C6 ou alcoxila C1-C6, cada um opcionalmente substituído com halo, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0420] Por exemplo, Q6 é ligante alquila C1-C3 e T6 é H ou arila C6-C10.
[0421] Por exemplo, Q6 é ligante alquila C1-C3 e T6 é cicloalquila C3-C8, hete- rocicloalquila de 4 a 7 membros ou S(O)pRp.
[0422] Por exemplo, cada um entre Rp e Rq é, independentemente, alquila C1C6.
[0423] Por exemplo, R6 é -S(O)bRa ou azido, em que b é 0, 1 ou 2 e Ra é alquila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8; e Z é NR7R8, em que R7 é cicloalquila C3-C8 (por exemplo, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptila) ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-es- piro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piri- din]-ila ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes), cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5; e R8 é H ou alquila C1-C6 (por exemplo, metila, etila, n-propila, i-propila, butila ou t-butila).
[0424] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é NR7R8 ou CR7R8R14, em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 11 membros tendo 1 a 3 heteroátomos (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-dia- zaespiro[3,3]heptanila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decan-8-ila, pirrolidino-2,5-diona-1-ila, piperidina-2,6-diona-1-ila, e semelhantes) ou cicloalquila C3-C8, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q6- T6.
[0425] Por exemplo, R13 é H ou metila.
[0426] Por exemplo, R13 é H.
[0427] Por exemplo, R3 é H.
[0428] Por exemplo, cada um entre R5, R9 e R10 é H.
[0429] A presente invenção fornece os compostos da Fórmula (Ia)
[0430]
[0431] ou um sal farmaceuticamente aceitável ou éster dos mesmos, em que:
[0432] X1 é N ou CR11;
[0433] X2 é N ou CR13;
[0434] X3 é N ou C, e quando X3 é N, R6 é ausente;
[0435] Z é NR7R8, OR7, S(O)aR7 ou CR7R8R14, em que a é 0, 1 ou 2;
[0436] cada um entre R1 e R5 é, independentemente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[0437] cada um entre R2, R3 e R4 é, independentemente, -Q1-T1, em que Q1 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 opcionalmente substituído com halo, ciano, hidro- xila ou alcóxi C1-C6, e T1 é H, halo, hidroxila, COOH, ciano, azido ou RS1, em que RS1 é alquila C1-C3, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, alcoxila C1-C6, C(O)O-alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e RS1 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, oxo, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[0438] R6 é H, halo, ciano, azido, ORa, -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, - C(O)NRaRb, -NRbC(O)Ra, -S(O)bRa, -S(O)bNRaRb ou RS2, em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros, b é 0, 1 ou 2, cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H ou RS3 e RS3 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, hete- rocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloal- quila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um entre RS2, RS3, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T2 é H, halo, ciano, -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -C(O)NRcRd, -NRdC(O)Rc, - NRdC(O)ORc, -S(O)2Rc, -S(O)2NRcRd ou RS4, em que cada um entre Rc e Rd é, inde-pendentemente, H ou RS5, cada um entre RS4 e RS5 é, independentemente, alquila C1C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional, e cada um entre RS4, RS5, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Rc e Rd, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3, em que Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de halo, ciano, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ORe, COORe, -S(O)2Re, -NReRf e - C(O)NReRf, cada um entre Re e Rf independentemente sendo H ou alquila C1-C6, ou - Q3-T3 é oxo; ou-Q2-T2 é oxo; ou
[0439] R6 é H, halo, ciano, azido, -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, - NRbC(O)Ra, -S(O)bRa, -S(O)bNRaRb, ou RS2, em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2- C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros, b é 0, 1 ou 2, cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H ou RS3, e RS3 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um entre RS2, RS3, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T2 é H, halo, ciano, -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -C(O)NRcRd, -NRdC(O)Rc, - NRdC(O)ORc, -S(O)2Rc, -S(O)2NRcRd ou RS4, em que cada um entre Rc e Rd é, inde-pendentemente, H ou RS5, cada um entre RS4 e RS5 é, independentemente, alquila C1C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou hetero- arila de 5 ou 6 membros ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional, e cada um entre RS4, RS5, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Rc e Rd, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3, em que Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 cada um opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de halo, ciano, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ORe, COORe, -S(O)2Re, -NReRf e - C(O)NReRf, cada um entre Re e Rf independentemente sendo H ou alquila C1-C6 ou - Q3-T3 é oxo; ou-Q2-T2 é oxo;
[0440] R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação, ligante alquila C1-C4 ou ligante alquenila C2-C4, cada ligante opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T4 é H, halo, ciano, NRgRh, -ORg, -C(O)Rg, -C(O)ORg, -C(O)NRgRh, - C(O)NRgORh, -NRgC(O)Rh, -S(O)2Rg ou RS6, em que cada um entre Rg e Rh é, independentemente, H ou RS7, cada um entre RS6 e RS7 é, independentemente, alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloal- quila de 4 a 14 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e cada um entre RS6 e RS7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5, em que Q5 é uma ligação, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2 ou ligante alquila C1-C3, Rk sendo H ou alquila C1-C6 e T5 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)qRq, em que q é 0, 1 ou 2 e Rq é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, hetero- cicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T5 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquila- mino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T5 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q5-T5 é oxo; ou
[0441] R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação, ligante alquila C1-C4 ou ligante alquenila C2-C4, cada ligante opcionalmente substituído com halo, ciano, hidroxila ou alcóxi C1-C6, e T4 é H, halo, ciano, NRgRh, -ORg, -C(O)Rg, -C(O)ORg, -C(O)NRgRh, - C(O)NRgORh, -NRgC(O)Rh, -S(O)2Rg ou RS6, em que cada um entre Rg e Rh é, independentemente, H ou RS7, cada um entre RS6 e RS7 é, independentemente, alquila C1C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e cada um entre RS6 e RS7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5, em que Q5 é uma ligação, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rk sendo H ou alquila C1-C6, e T5 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)qRq, em que q é 0, 1 ou 2 e Rq é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, hetero- cicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T5 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquila- mino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T5 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q5-T5 é oxo; contanto que (i) R7 não seja C(O)Rg ou -S(O)2Rg quando Z é NR7R8; (ii) R7 não seja alquila C1-C6 quando Z é OR7, e (iii) R7 não seja H;
[0442] cada um entre R8, R11, R12 e R13 é, independentemente, H, halo, hidro- xila, COOH, ciano, RS8, ORS8 ou COORS8, em que RS8 é alquila C1-C6, alquenila C2C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6, ou di-alquilamino C1-C6, e RS8 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6 e di-alquilamino C1-C6; ou R7 e R8, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 a 2 hete- roátomos adicionais, ou R7 e R8, juntamente com o átomo de C ao qual eles são ligados, formam cicloalquila C3-C8 ou um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 1 a 3 heteroátomos, e cada um entre os anéis heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou cicloalquila C3-C8 formado por R7 e R8 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6, em que Q6 é uma ligação, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rm sendo H ou alquila C1-C6, e T6 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloal- quila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros ou S(O)pRp, em que p é 0, 1 ou 2 e Rp é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T6 é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, alquila C1-C6, hidro- xila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, ciclo- alquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T6 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q6-T6 é oxo; e
[0443] R14 é ausente, H, ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, COOH, C(O)O-alquila C1-C6, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros e heteroarila de 5 ou 6 membros;
[0444] contanto que o composto seja
[0445] N-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-me- tilfenil)furan-2-carboxamida,
[0446] N,N’-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-1,3- fenileno)diacetamida,
[0447] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-pivalamidobenza- mida,
[0448] 3-(3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepino-7-sulfonamido)-N-((4,6-di- metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida,
[0449] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3,5-dimetoxibenza- mida,
[0450] N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3,4,5-trimetoxiben- zamida,
[0451] 3-alil-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-4,5-dimetoxi- benzamida,
[0452] 4-(2-amino-2-oxoetóxi)-3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)-5-metoxibenzamida,
[0453] 3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-4-hidróxi-5- metoxibenzamida ou
[0454] 3-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metóxi-4- propoxibenzamida.
[0455] Por exemplo, X1 é CR11 e X2 é CR13.
[0456] Por exemplo, X1 é CR11 e X2 é N.
[0457] Por exemplo, X1 é N e X2 é CR13.
[0458] Por exemplo, X1 é N e X2 é N.
[0459] Por exemplo, X3 é C.
[0460] Por exemplo, X3 é N e R6 é ausente.
[0461] Por exemplo, Z é NR7R8.
[0462] Por exemplo, Z é CR7R8R14.
[0463] Por exemplo, Z é OR7.
[0464] Por exemplo, Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2.
[0465] Por exemplo, Z é SR7.
[0466] Por exemplo, R6 é H.
[0467] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo).
[0468] Por exemplo, R6 é alquila C1-C3 opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0469] Por exemplo, R6 é CF3.
[0470] Por exemplo, R6 é alquenila C2-C6, alquinila C2-C6 ou cicloalquila C3-C6 cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0471] Por exemplo, R6 é etenila.
[0472] Por exemplo, R6 é etinila.
[0473] Por exemplo, R6 é etinila substituído com um ou mais -Q2-T2, em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T2 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pir- rolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra- hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-pira- nila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepa- nila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0474] Por exemplo, R6 é azido.
[0475] Por exemplo, R6 é ciano.
[0476] Por exemplo, R6 é C(O)H.
[0477] Por exemplo, R6 é ORa ou -C(O)Ra.
[0478] Por exemplo, Ra é alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes), que é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0479] Por exemplo, R6 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0480] Por exemplo, R6 é piperidinila, 2,2,6,6-tetrametil-piperidinila, 1,2,3,6-te- tra-hidropiridinila, 2,2,6,6-tetrametil-1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, morfoli- nila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila ou pirrolidinila, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0481] Por exemplo, R6 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2, e -Q2-T2 é oxo ou Q2 é uma ligação e T2 é -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc, -S(O)2Rc, alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3- T3 quando Rc ou Rd não é H.
[0482] Por exemplo, R6 é -NRaRb, -C(O)Ra, -C(O)ORa, -C(O)NRaRb, - NRbC(O)Ra, -SRa, -S(O)2Ra ou -S(O)2NRaRb.
[0483] Por exemplo, cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H, alquila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8 opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0484] Por exemplo, um entre Ra e Rb é H.
[0485] Por exemplo, Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 7 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional ao átomo de N (por exemplo, azetidinila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabici- clo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) e o anel é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2.
[0486] Por exemplo, -Q2-T2 não é H.
[0487] Por exemplo, -Q2-T2 é oxo.
[0488] Por exemplo, Q2 é uma ligação.
[0489] Por exemplo, Q2 é um ligante alquila C1-C3 não substituído.
[0490] Por exemplo, T2 é alquila C1-C6 ou arila C6-C10, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0491] Por exemplo, T2 é um alquila de cadeia reta C1-C6 ou ramificado C3-C6 não substituído substituído, incluindo mas não limitado a, metila, etila, n-propila, i- propila, n-butila, s-butila, t-butila, n-pentila, s-pentila e n-hexila.
[0492] Por exemplo, T2 é fenila.
[0493] Por exemplo, T2 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo).
[0494] Por exemplo, T2 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0495] Por exemplo, T2 é -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, -C(O)ORc ou -S(O)2Rc.
[0496] Por exemplo, Rc é alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes), que é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0497] Por exemplo, cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0498] Por exemplo, Rc é H.
[0499] Por exemplo, Rd é H.
[0500] Por exemplo, Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 7 membros tendo 0 ou 1 heteroá- tomo adicional ao átomo de N (por exemplo, azetidinila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabici- clo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) e o anel é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3.
[0501] Por exemplo, Q2 é uma ligação e T2 é -ORc, -NRcRd, -C(O)Rc, - C(O)ORc, -S(O)2Rc, alquila C1-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros, cada um entre os quais é opcionalmente substituído com um ou mais -Q3-T3 quando Rc ou Rd não é H.
[0502] Por exemplo,-Q3-T3 é oxo.
[0503] Por exemplo, T2 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros ou cicloalquila C3-C8 e um ou mais -Q3-T3 são oxo.
[0504] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 não substituído ou substituído.
[0505] Por exemplo, T3 é H, halo, heterocicloalquila de 4 a 7 membros, alquila C1-C3, ORe, COORe,-S(O)2Re,-NReRf ou -C(O)NReRf.
[0506] Por exemplo, um entre Rd e Re é H.
[0507] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de alquila C1-C3, halo, ORe, -S(O)2Re, -NReRf e- C(O)NReRf.
[0508] Por exemplo, Q3 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 e T3 é selecionado a partir do grupo que consiste de alquila C1-C3, ORe, -S(O)2Re ou -NReRf.
[0509] Por exemplo, Re é H.
[0510] Por exemplo, Rf é H.
[0511] Por exemplo, R7 não é H.
[0512] Por exemplo, R7 é -C(O)Rg.
[0513] Por exemplo, R7 é -C(O)Rg, em que Rg é cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros, cicloalquila C3-C8.
[0514] Por exemplo, R7 é arila C6-C10 substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0515] Por exemplo, R7 é fenila opcionalmente substituído com um ou mais - Q5-T5.
[0516] Por exemplo, R7 é alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0517] Por exemplo, R7 é cicloalquila C3-C8 opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0518] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiri- dinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-ti- opiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaes- piro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes) opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0519] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 8 a 14 membros, tal como 1,4- dioxaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-il), 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il), 1-oxaes- piro[4.5]decanila (por exemplo, 1-oxaespiro[4.5]decan-8-ila ou 1-oxaespiro[4.5]decan- 2-ona-8-il), 1-azaespiro[4.5]decanila (por exemplo, 1-azaespiro[4.5]decan-8-ila ou 1- azaespiro[4.5]decan-2-ona-8-il), 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila (por exemplo, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-4-ila ou 3’H-espiro[ciclo-he- xano-1,1’-isobenzofuran]-3’-ona-4-il), 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]- ila (por exemplo, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-4-ila ou 7’H-espiro[ci- clo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-7’-ona-4-il) ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4- c]piridin]-ila (por exemplo, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-4-ila ou 3’H- espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-3’-ona-4-il), cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0520] Por exemplo, R7 é heterocicloalquila de 5 a 6 membros opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0521] Por exemplo, R7 é isopropila.
[0522] Por exemplo, R7 é pirrolidinila, piperidinila, tetra-hidropirano, ciclopen- tila ou ciclo-hexila, ciclo-heptila, cada um opcionalmente substituído com -Q5-T5.
[0523] Por exemplo, R7 é ciclopentila ou ciclo-hexila, cada um opcionalmente substituído com -Q5-T5.
[0524] Por exemplo, Q5 é NHC(O) e T5 é alquila C1-C6 ou alcóxi C1-C6.
[0525] Por exemplo, -Q5-T5 é oxo.
[0526] Por exemplo, T4 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros ou cicloalquila C3-C8 ou arila C6-C10, e um ou mais -Q5-T5 são oxo.
[0527] Por exemplo, R7 é 1-óxido-tetra-hidro-2H-tiopiranila ou 1,1-dióxido-te- tra-hidro-2H-tiopiranila.
[0528] Por exemplo, R7 é ciclo-hexanonila, por exemplo, ciclo-hexanon-4-ila.
[0529] Por exemplo, T5 é H, halo, alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3C8, arila C6-C10 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0530] Por exemplo, Q5 é uma ligação e T5 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0531] Por exemplo, Q5 é uma ligação e T5 é heteroarila de 5 ou 6 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, T5 sendo opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, alcoxila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0532] Por exemplo, Q5 é CO, S(O)2 ou NHC(O); e T5 é alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0533] Por exemplo, T5 é alquila C1-C6 ou alcoxila C1-C6, cada um opcionalmente substituído com halo, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-al- quilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0534] Por exemplo, Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é H ou arila C6-C10.
[0535] Por exemplo, Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é cicloalquila C3-C8, hete- rocicloalquila de 4 a 7 membros ou S(O)qRq.
[0536] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2 e R7 é alquila C1-C6 (por exemplo, metila, etila, n-propila, i-propila, butila ou t-butila), cicloalquila C3-C8 (por exemplo, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptil) ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxeta- nila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepa- nila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]hepta- nila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, 1- oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-iso- benzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila ou 3’H-espiro[ciclo- hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes) e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0537] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é OR7, em que R7 é heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazoli- dinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, pipera- zinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4- diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabici- clo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo- hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes) e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0538] Por exemplo, R11 é H.
[0539] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é, independentemente, H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com amino, azido, halo, mono-alquilamino C1C6, di-alquilamino C1-C6 ou arila C6-C10.
[0540] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é, independentemente, alquila C1C3 opcionalmente substituído com alcoxila C1-C6.
[0541] Por exemplo, cada um entre R2 e R4 é metila.
[0542] Por exemplo, R1 é H.
[0543] Por exemplo, R1 é alquila C1-C6 opcionalmente substituído com azido, halo, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou arila C6-C10.
[0544] Por exemplo, R12 é H, metila, etila, etenila ou halo.
[0545] Por exemplo, R12 é metila.
[0546] Por exemplo, R12 é etila ou propenila.
[0547] Por exemplo, R12 é metoxila.
[0548] Por exemplo, R12 é etenila.
[0549] Por exemplo, R8 é H, metila, etila ou etenila.
[0550] Por exemplo, R8 é metila.
[0551] Por exemplo, R8 é etila.
[0552] Por exemplo, R8 é propila.
[0553] Por exemplo, R8 é etenila ou propenila.
[0554] Por exemplo, R8 é alquila C1-C6 substituído com um ou mais substituin- tes selecionados a partir do grupo que consiste de halo (por exemplo, F, Cl ou Br), hidroxila ou alcoxila C1-C6.
[0555] Por exemplo, R8 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-pira- nila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabici- clo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila e morfolinila, e semelhantes).
[0556] Por exemplo, R8 é piperidinila.
[0557] Por exemplo, R8 é heterocicloalquila de 4 a 7 membros opcionalmente substituído e R7 é-Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou ligante alquila C1-C4 e T4 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0558] Por exemplo, Z é NR7R8 ou CR7R8R14, em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 11 membros tendo 1 a 3 heteroátomos (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pir- rolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra- hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-pira- nila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepa- nila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2-oxa-6-aza- espiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decanila, e semelhantes) ou cicloalquila C3-C8, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6.
[0559] Por exemplo, o anel formado por R7 e R8 é selecionado a partir do grupo que consiste de azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, morfolinila, piperazinila, 1,4- dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila e ciclo-hexenila, cada um opcionalmente substituído com -Q6-T6.
[0560] Por exemplo, Z é 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-ila, pirrolidino-2,5- diona-1-ila ou piperidina-2,6-diona-1-ila.
[0561] Por exemplo, um ou mais -Q6-T6 é oxo.
[0562] Por exemplo, T6 é H, halo, alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0563] Por exemplo, Q6 é uma ligação e T6 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0564] Por exemplo, Q6 é CO, S(O)2 ou NHC(O); e T6 é alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros.
[0565] Por exemplo, T6 é alquila C1-C6 ou alcoxila C1-C6, cada um opcionalmente substituído com halo, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0566] Por exemplo, Q6 é ligante alquila C1-C3 e T6 é H ou arila C6-C10.
[0567] Por exemplo, Q6 é ligante alquila C1-C3 e T6 é cicloalquila C3-C8, hete- rocicloalquila de 4 a 7 membros ou S(O)pRp.
[0568] Por exemplo, cada um entre Rp e Rq é, independentemente, alquila C1C6.
[0569] Por exemplo, R6 é -S(O)bRa ou azido, em que b é 0, 1 ou 2 e Ra é alquila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8; e Z é NR7R8, em que R7 é cicloalquila C3-C8 (por exemplo, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptila) ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxa- zolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-es- piro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piri- din]-ila ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes), cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5; e R8 é H ou alquila C1-C6 (por exemplo, metila, etila, n-propila, i-propila, butila ou t-butila).
[0570] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é NR7R8 ou CR7R8R14, em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 11 membros tendo 1 a 3 heteroátomos (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-dia- zaespiro[3,3]heptanila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decan-8-ila, pirrolidino-2,5-diona-1-ila, piperidina-2,6-diona-1-ila, e semelhantes) ou cicloalquila C3-C8, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q6- T6.
[0571] Por exemplo, R13 é H ou metila.
[0572] Por exemplo, R13 é H.
[0573] Por exemplo, R3 é H.
[0574] Por exemplo, cada um entre R5, R9 e R10 é H.
[0575] Um outro subconjunto dos compostos da Fórmula (I) inclui aqueles da Fórmula (Ib), (Ic) ou (Id):
[0576]
[0577] (Ib) (Ic) (Id)
[0578] ou um sal farmaceuticamente aceitável ou éster dos mesmos, em que Z, X2, X3, R1, R2, R3, R4, R5, R6, R11 e R12 são definidos neste relatório pela Fórmula (I).
[0579] Um outro subconjunto dos compostos da Fórmula (I) é aquele que apresenta a Fórmula (Ie):
[0580]
[0581] em que
[0582] Z é NR7R8, OR7 ou S(O)aR7;
[0583] R1 é H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir de hidroxila, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquila- mino C1-C6, di-alquilamino C1-C6 e arila C6-C10;
[0584] cada um entre R2 e R4 é, independentemente, -Q1-T1, em que Q1 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3 opcionalmente substituído com um ou mais substituin- tes selecionados a partir de halo e hidroxila, e T1 é H, halo ou azido;
[0585] R3 é H ou halo;
[0586] R5 é H ou alquila C1-C6;
[0587] R6 é H, halo, ciano, azido, ORa, -NRaRb, -C(O)NRaRb, -S(O)bRa, ou RS2; em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e em que cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H, alquila C1C6 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um entre Ra, RS2 e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2; em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3, e T2 é H, halo, -ORc, -NRcRd, -C(O)ORc ou alquila C1-C6, em que cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1-C6 ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional e opcionalmente substituído com alquila C1-C6;
[0588] R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou ligante alquila C1-C4 e T4 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, C(O)-alquila C1-6, C(O)-cicloalquila C36 ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5;
[0589] R8 é H, alquila C1-C6 opcionalmente substituído com halo, hidroxila ou alcoxila C1-C6, alquenila C2-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros; ou R7 e R8, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 a 2 heteroátomos adicionais, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por R7 e R8 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q6-T6; e
[0590] R12 é halo, alcoxila C1-C6 ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído com halo ou alquenila C2-C6.
[0591] Além das características descritas acima dos compostos desta invenção, onde aplicável, os compostos da Fórmula (Ie) podem incluir uma ou mais entre as características seguintes:
[0592] Por exemplo, R1 é H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituído uma ou mais vezes com um substituinte selecionado a partir de hidroxila, alcoxila C1-C6 e arila C6-C10; R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou um ligante alquila C1-C4, e T4 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, C(O)-alquila C1-C6, C(O)-cicloalquila C3C6, di-hidropiranila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, pirrolidinila, azetidinila e oxetanila, cada um opcionalmente substituído com um ou mais substituin- tes independentemente selecionados a partir de oxo e -Q5-T5; R8 é H ou alquila C1C6, haloalquila C1-C6, alquenila C2-C6 ou cicloalquila C3-C8; e R12 é halo, alquila C1C6, haloalquila C1-C6 ou alcoxila C1-C6.
[0593] Por exemplo, Z é NR7R8ou SR7; R6 é H, halo, ciano, ORa, -C(O)NRaRb, -S(O)2Ra, ou RS2; em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6 ou he- terocicloalquila de 4 a 12 membros, e em que cada um entre Ra e Rb é, independentemente, H ou alquila C1-C6; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 he- teroátomo adicional; e cada um entre RS2 e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído com um ou mais -Q2-T2; em que Q2 é uma ligação ou ligante alquila C1-C3, e T2 é H, halo, -ORc, -NRcRd, -C(O)Oa- lquila C1-C6 ou alquila C1-C6, em que cada um entre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1-C6 ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional e 0 ou 1 substituintes alquila C1-C6; R7 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, di- hidropiranila, tetra-hidropiranila, tetra-hidrotiopiranila, piperidinila, pirrolidinila, azeti- dinila e oxetanila, cada um opcionalmente substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de oxo e -Q5-T5; e R12 é halo ou alquila C1C6.
[0594] Por exemplo, R2, R4 e R12 são, independentemente, alquila C1-C6 e R5 é H.
[0595] Por exemplo, R7 é ciclo-hexila, di-hidropiranila, tetra-hidropiranila, tetra- hidrotiopiranila, piperidinila, pirrolidinila, azetidinila, oxetanila, 1,4-dioxaespiro[4.5]de- can-8-ila, 1-oxaespiro[4.5]decan-8-ila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-4- ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-4-ila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’- furo[3,4-c]piridin]-4-ila ou 1-azaespiro[4.5]decan-8-ila, cada um substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0596] Por exemplo, Z é selecionado a partir do grupo que consiste de piperi- dinila, morfolinila, piperazinila, azetidinila, pirrolidinila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]hep- tan-5-ila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-ila, e ciclo-hexenila, cada um opcionalmente substituído com -Q6-T6.
[0597] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é S(O)aR7, em que a é 0, 1 ou 2 e R7 é alquila C1-C6 (por exemplo, metila, etila, n-propila, i-propila, butila ou t-butila), cicloalquila C3-C8 (por exemplo, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptila) ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxeta- nila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4-diazepa- nila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]hepta- nila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, 1- oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-iso- benzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila ou 3’H-espiro[ciclo- hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes) e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0598] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é OR7, em que R7 é heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazoli- dinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, pipera- zinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro-2H-tiopiranila, 1,4- diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabici- clo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo- hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes) e R7 é opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5.
[0599] Por exemplo, R6 é -S(O)bRa ou azido, em que b é 0, 1 ou 2 e Ra é alquila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8; e Z é NR7R8, em que R7 é cicloalquila C3-C8 (por exemplo, ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclo-heptila) ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxa- zolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hi- dropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaespiro[4.5]decanila, 3’H-es- piro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piri- din]-ila ou 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes), cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q5-T5; e R8 é H ou alquila C1-C6 (por exemplo, metila, etila, n-propila, i-propila, butila ou t-butila).
[0600] Por exemplo, R6 é halo (por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo) e Z é NR7R8 ou CR7R8R14, em que R7 e R8, juntamente com o átomo ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 11 membros tendo 1 a 3 heteroátomos (por exemplo, azetidinila, oxetanila, tietanila, pirrolidinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piperazinila, tetra-hidro-2H-piranila, 3,6-di-hidro-2H-piranila, tetra-hidro- 2H-tiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4-oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, morfolinila, 2-oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-dia- zaespiro[3,3]heptanila, 1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decan-8-ila, pirrolidino-2,5-diona-1-ila, piperidina-2,6-diona-1-ila, e semelhantes) ou cicloalquila C3-C8, cada um opcionalmente substituído com um ou mais -Q6- T6.
[0601] Um outro subconjunto dos compostos da Fórmula (I) inclui aqueles da Fórmula (II):
[0602]
[0603] ou um sais farmaceuticamente aceitáveis ou ésteres dos mesmos, em que R6, R7, R8 e R12 são definidos neste relatório.
[0604] Um outro subconjunto dos compostos da Fórmula (I) inclui aqueles da Fórmula (IIA):
[0605]
[0606] ou um sais farmaceuticamente aceitáveis ou ésteres dos mesmos, em que n é 0, 1 ou 2; U é O, S, N-Q5-T5 ou CH-Q5-T5; R12 é Cl, Br ou metila; e R6, R7, R8, Q5 e T5 são definidos neste relatório.
[0607] Além das características descritas acima dos compostos desta invenção, onde aplicável, os compostos da Fórmula (II) ou (IIA) podem incluir uma ou mais entre as características seguintes:
[0608] Por exemplo, Q5 é uma ligação e T5 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3C8, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6 ou di-alquilamino C1-C6, T5 sendo opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo que consiste de halo, hidroxila, alcoxila C1-C6 ou cicloalquila C3-C8.
[0609] Por exemplo, Q5 é CO, S(O)2 ou NHC(O); e T5 é alquila C1-C6, alcoxila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros.
[0610] Por exemplo, Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é H ou arila C6-C10.
[0611] Por exemplo, Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é cicloalquila C3-C8, hete- rocicloalquila de 4 a 12 membros ou S(O)qRq.
[0612] Por exemplo, Q5 é NHC(O) e T5 é alquila C1-C6 ou alcóxi C1-C6.
[0613] Por exemplo, um ou mais -Q5-T5 são oxo.
[0614] Por exemplo, U é CH-Q5-T5 e n é 0.
[0615] Por exemplo, um ou mais -Q6-T6 são oxo.
[0616] Por exemplo, Q6 é uma ligação ou C(O) e T6 é alquila C1-C6 ou alcóxi C1-C6.
[0617] Um outro subconjunto dos compostos da Fórmula (I) inclui aqueles da Fórmula (III):
[0618]
[0619] ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou ésteres dos mesmos, em que R7 é um heterocicloalquila de 4 ou 6 membros tendo um átomo de nitrogênio no anel e é substituído com um ou dois grupos metila ou um grupo i-propila; R3 é H ou F; R4 é metila, etila, n-propila, isopropila ou CF3, e R6 é CF3, Cl ou F, contanto que quando R4 é metila, (1) R6 é CF3 ou (2) R3 é F ou (3) R6 é CF3 e R3 é F ou (4) R6 é F ou Cl e R7 é um heterocicloalquila de 6 membros tendo apenas um nitrogênio e é substituído com dois grupos metila.
[0620] Além das características descritas acima dos compostos desta invenção, onde aplicável, os compostos da Fórmula (III) podem incluir uma ou mais entre as características seguintes:
[0621] Por exemplo, R7 é um heterocicloalquila de 4 ou 6 membros tendo um e apenas um heteroátomo no anel e o heteroátomo é nitrogênio.
[0622] Por exemplo, R7 não é opcionalmente substituído além de um ou dois grupos metila ou um grupo i-propila.
[0623] Por exemplo, R7 é
[0624] Por exemplo, R7 é
[0625] Por exemplo, R7 é
[0626] Os compostos representativos da presente invenção incluem os com- postos listados na Tabela 1. Na tabela abaixo, cada ocorrência dedeve ser interpretada comoTabela 1 *As designações estereoquímicas cis/trans dos Compostos 58/59, 60/61, 107/108 e 416/417 são arbitrariamente determinadas.t MS- Espectrometria de massas da amostra. Isto pode ser registrado em modos de íon positivo ou negativo e os íons potenciais incluem M, M+1, M+23 (M+Na) e M-1.
[0627] Conforme usado neste relatório, “alquila”, “alquila C1, C2, C3, C4, C5 ou C6” ou “alquila C1-C6” é intencionado a incluir grupos hidrocarboneto alifático saturado de cadeia reta (linear) C1, C2, C3, C4, C5 ou C6 e grupos hidrocarboneto alifático saturado ramificado C3, C4, C5 ou C6. Por exemplo, alquila C1-C6 é intencionado a incluir grupos alquila C1, C2, C3, C4, C5 e C6. Exemplos de alquila incluem porções tendo de um a seis átomos de carbono, tais como, mas não limitadas a, metila, etila, n-propila, i-propila, n-butila, s-butila, t-butila, n-pentila, s-pentila ou n-hexila.
[0628] Em certas modalidades, um alquila de cadeia reta ou ramificada tem seis ou menos átomos de carbono (por exemplo, C1-C6 para cadeia reta, C3-C6 para cadeia ramificada), e em uma outra modalidade, um alquila de cadeia reta ou ramificada tem quatro ou menos átomos de carbono.
[0629] Conforme usado neste relatório, o termo “cicloalquila” se refere a um sistema de mono-ou multi-anel de hidrocarboneto não aromático saturado ou insatu- rado (por exemplo, fundido, ligado em ponte ou anéis espiro) tendo 3 a 30 átomos de carbono (por exemplo, C3-C10). Exemplos de cicloalquila incluem, mas não são limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila, ciclo-octila, ciclo- pentenila, ciclo-hexenila, ciclo-heptenila e adamantila. O termo “heterocicloalquila” se refere a um sistema de anel saturado ou insaturado não aromático de 3 a 8 membros monocíclico, 7 a 12 membros bicíclico (fundido, ligado em ponte ou anéis espiro) ou 11 a 14 membros tricíclico (fundido, ligado em ponte ou anéis espiro) tendo um ou mais heteroátomos (tai como O, N, S ou Se), a menos que especificado de outro modo. Exemplos de grupos heterocicloalquila incluem, mas não são limitados a, pipe- ridinila, piperazinila, pirrolidinila, dioxanila, tetra-hidrofuranila, isoindolinila, indolinila, imidazolidinila, pirazolidinila, oxazolidinila, isoxazolidinila, triazolidinila, tetra-hidrofura- nila, oxiranila, azetidinila, oxetanila, tietanila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, tetra-hidropi- ranila, di-hidropiranila, piranila, morfolinila, tetra-hidrotiopiranila, 1,4-diazepanila, 1,4- oxazepanila, 2-oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptanila, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptanila, 2- oxa-6-azaespiro[3,3]heptanila, 2,6-diazaespiro[3,3]heptanila, 1,4-dioxa-8-azaes- piro[4.5]decanila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decanila, 1-oxaespiro[4.5]decanila, 1-azaes- piro[4.5]decanila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-ila, 7’H-espiro[ciclo-he- xano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-ila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piridin]-ila, e semelhantes.
[0630] O termo “alquila opcionalmente substituído” se refere a alquila não substituído ou alquila tendo substituintes designados que substituem um ou mais átomos de hidrogênio em um ou mais carbonos da estrutura de hidrocarboneto. Tais substituintes podem incluir, por exemplo, alquila, alquenila, alquinila, halogênio, hidro- xila, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, carboxilato, alquilcarbonila, arilcarbonila, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, dialquilaminocarbonila, alquiltiocarbonila, alcoxila, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino e alquilarilamino), acila- mino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoila e ureido), amidino, imino, sulfidrila, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinila, sulfonato, sulfa- moila, sulfonamido, nitro, trifluorometila, ciano, azido, heterociclila, alquilarila ou uma porção aromática ou heteroaromática.
[0631] Uma porção “arilalquila” ou “aralquila” é um alquila substituído com um arila (por exemplo, fenilmetila (benzila)). Uma porção “alquilarila” é um arila substituído com um alquila (por exemplo, metilfenila).
[0632] Conforme usado neste relatório, “ligante alquila” é intencionado a incluir grupos hidrocarboneto alifático divalente saturado de cadeia reta (linear) C1, C2, C3, C4, C5 ou C6 e grupos hidrocarboneto alifático saturado ramificado C3, C4, C5 ou C6. Por exemplo, ligante alquila C1-C6 é intencionado a incluir grupos ligante alquila C1, C2, C3, C4, C5 e C6. Exemplos de ligante alquila incluem porções tendo de um a seis átomos de carbono, tais como, mas não limitadas a, metila (-CH2-), etila (- CH2CH2-), n-propila (-CH2CH2CH2-), i-propila (-CHCH3CH2-), n-butila (- CH2CH2CH2CH2-), s-butila (-CHCH3CH2CH2-), i-butila (-C(CH3) 2CH2-), n-pentila (- CH2CH2CH2CH2CH2-), s-pentila (-CHCH3CH2CH2CH2-) ou n-hexila (- CH2CH2CH2CH2CH2CH2-).
[0633] “Alquenila” inclui grupos alifáticos insaturados análogos em comprimento e possível substituição aos alquilas descritos acima, mas que contêm pelo menos uma ligação dupla. Por exemplo, o termo “alquenila” inclui grupos alquenila de cadeia reta (por exemplo, etenila, propenila, butenila, pentenila, hexenila, heptenila, octenila, nonenila, decenila), e grupos alquenila de cadeia ramificada. Em certas modalidades, um grupo alquenila de cadeia reta ou ramificada tem seis ou menos átomos de carbono em sua estrutura (por exemplo, C2-C6 para cadeia reta, C3-C6 para cadeia ramificada). O termo “C2-C6” inclui grupos alquenila contendo dois a seis átomos de carbono. O termo “C3-C6” inclui grupos alquenila contendo três a seis átomos de carbono.
[0634] O termo “alquenila opcionalmente substituído” se refere a alquenila não substituído ou alquenila tendo substituintes designados que substituem um ou mais átomos de hidrogênio em um ou mais átomos de carbono na estrutura de hidrocarbo- neto. Tais substituintes podem incluir, por exemplo, alquila, alquenila, alquinila, halo- gênio, hidroxila, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, carboxilato, alquilcarbonila, arilcarbonila, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilami- nocarbonila, dialquilaminocarbonila, alquiltiocarbonila, alcoxila, fosfato, fosfonato, fos- finato, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino e alquilarila- mino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoila e ureido), amidino, imino, sulfidrila, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinila, sulfonato, sulfamoila, sulfonamido, nitro, trifluorometila, ciano, heterociclila, alquilarila ou uma porção aromática ou heteroaromática.
[0635] “Alquinila” inclui grupos alifáticos insaturados análogos em comprimento e possível substituição aos alquilas descritos acima, mas que contêm pelo menos uma ligação tripla. Por exemplo, “alquinila” inclui grupos alquinila de cadeia reta (por exemplo, etinila, propinila, butinila, pentinila, hexinila, heptinila, octinila, noninila, decinila), e grupos alquinila de cadeia ramificada. Em certas modalidades, um grupo alquinila de cadeia reta ou ramificada tem seis ou menos átomos de carbono em sua estrutura (por exemplo, C2-C6 para cadeia reta, C3-C6 para cadeia ramificada). O termo “C2-C6” inclui grupos alquinila contendo dois a seis átomos de carbono. O termo “C3- C6” inclui grupos alquinila contendo três a seis átomos de carbono.
[0636] O termo “alquinila opcionalmente substituído” se refere a alquinila não substituído ou alquinila tendo substituintes designados que substituem um ou mais átomos de hidrogênio em um ou mais átomos de carbono na estrutura de hidrocarbo- neto. Tais substituintes podem incluir, por exemplo, alquila, alquenila, alquinila, halo- gênio, hidroxila, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, carboxilato, alquilcarbonila, arilcarbonila, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilami- nocarbonila, dialquilaminocarbonila, alquiltiocarbonila, alcoxila, fosfato, fosfonato, fos- finato, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino e alquilarila- mino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoila e ureido), amidino, imino, sulfidrila, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinila, sulfonato, sulfamoila, sulfonamido, nitro, trifluorometila, ciano, azido, heterociclila, al- quilarila ou uma porção aromática ou heteroaromática.
[0637] Outras porções opcionalmente substituídas (tais como cicloalquila, he- terocicloalquila, arila ou heteroarila opcionalmente substituído) incluem as porções não substituídas e as porções tendo um ou mais entre os substituintes designados. Por exemplo, heterocicloalquila substituído inclui aqueles substituídos com um ou mais grupos alquila, tais como 2,2,6,6-tetrametil-piperidinila e 2,2,6,6-tetrametil- 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila.
[0638] “Arila” inclui grupos com aromaticidade, incluindo sistemas “conjugados” ou multicíclicos com pelo menos um anel aromático e não contêm qualquer he- teroátomo na estrutura do anel. Exemplos incluem fenila, benzila, 1,2,3,4-tetra-hidro- naftalenila, etc.
[0639] Grupos “heteroarila” são grupos arila, conforme definido acima, exceto aqueles que apresentam de um a quatro heteroátomos no estrutura no anel, e também podem ser referidos como “heterociclos de arila” ou “heteroaromáticos”. Conforme usado neste relatório, o termo “heteroarila” é intencionado a incluir um anel heterocíclico aromático estável de 5, 6 ou 7 membros monocíclico ou 7, 8, 9, 10, 11 ou 12 membros bicíclico que consiste de átomos de carbono e um ou mais heteroáto- mos, por exemplo, 1 ou 1 a 2 ou 1 a 3 ou 1 a 4 ou 1 a 5 ou 1 a 6 heteroátomos, ou por exemplo.J, 2, 3, 4, 5 ou 6 heteroátomos, independentemente selecionados a partir do grupo que consiste de nitrogênio, oxigênio e enxofre. O átomo de nitrogênio pode ser substituído ou não substituído (isto é, N ou NR em que R é H ou outros substituin- tes, conforme definido). Os heteroátomos de nitrogênio e enxofre podem ser opcionalmente oxidados (isto é, N >O e S(O)p, onde p = 1 ou 2). Deve ser observado que o número total de átomos de S e O no heterociclo aromático não é maior do que 1.
[0640] Exemplos de grupos heteroarila incluem pirrol, furano, tiofeno, tiazol, isotiazol, imidazol, triazol, tetrazol, pirazol, oxazol, isoxazol, piridina, pirazina, pirida- zina, pirimidina, e semelhantes.
[0641] Além disso, os termos “arila” e “heteroarila” incluem grupos arila e he- teroarila multicíclicos, por exemplo, tricíclicos, bicíclicos, por exemplo, naftaleno, ben- zoxazol, benzodioxazol, benzotiazol, benzoimidazol, benzotiofeno, metilenodioxife- nila, quinolina, isoquinolina, naftridina, indol, benzofurano, purina, benzofurano, dea- zapurina, indolizina.
[0642] No caso de anéis aromáticos multicíclicos, apenas um dos anéis precisa ser aromático (por exemplo, 2,3-di-hidroindol), embora todos os anéis possam ser aromáticos (por exemplo, quinolina). O segundo anel também pode ser fundido ou ligado em ponte.
[0643] O anel cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila pode ser substituído em uma ou mais posições no anel (por exemplo, o carbono formador de anel ou heteroátomo, tal como N) com tais substituintes, conforme descrito acima, por exemplo, alquila, alquenila, alquinila, halogênio, hidroxila, alcóxi, alquilcarbonilóxi, aril- carbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, carboxilato, alquilcarbonila, alquilami- nocarbonila, aralquilaminocarbonila, alquenilaminocarbonila, alquilcarbonila, arilcarbonila, aralquilcarbonila, alquenilcarbonila, alcoxicarbonila, aminocarbonila, al- quiltiocarbonila, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluindo alquilamino, dialquila- mino, arilamino, diarilamino e alquilarilamino), acilamino (incluindo alquilcarbonila- mino, arilcarbonilamino, carbamoila e ureido), amidino, imino, sulfidrila, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinila, sulfonato, sulfamoila, sulfonamido, nitro, trifluo- rometila, ciano, azido, heterociclila, alquilarila, ou uma porção aromática ou heteroa- romática. Grupos arila e heteroarila também podem ser fundidos ou ligados em ponte com anéis alicíclicos ou heterocíclicos, que não são aromáticos, de modo a formar um sistema multicíclico (por exemplo, tetralina, metilenodioxifenila).
[0644] Conforme usado neste relatório, “carbociclo” ou “anel carbocíclico” é intencionado a incluir qualquer anel monocíclico, bicíclico ou tricíclico estável tendo o número especificado de carbonos, qualquer um dos quais pode ser saturado, insatu- rado ou aromático. Carbociclo inclui cicloalquila e arila. Por exemplo, um carbociclo C3-C14 é intencionado a incluir um anel monocíclico, bicíclico ou tricíclico tendo 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ou 14 átomos de carbono. Exemplos de carbociclos incluem, mas não são limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclobutenila, ciclopentila, ciclopen- tenila, ciclo-hexila, ciclo-heptenila, ciclo-heptila, ciclo-heptenila, adamantila, ciclo-oc- tila, ciclo-octenila, ciclo-octadienila, fluorenila, fenila, naftila, indanila, adamantila e te- tra-hidronaftila. Anéis ligados em ponte também são incluídos na definição de carbo- ciclo, incluindo, por exemplo, [3,3,0]biciclo-octano, [4,3,0]biciclononano e [4,4,0] bici- clodecano e [2,2,2] biciclo-octano. Um anel ligado em ponte ocorre quando um ou mais átomos de carbono se ligam a dois átomos de carbono não adjacentes. Em uma modalidade, os anéis em ponte são um ou dois átomos de carbono. Deve ser observado que uma ponte sempre converte um anel monocíclico em um anel tricíclico. Quando um anel é ligado em ponte, os substituintes citados para o anel também podem estar presentes na ponte. Anéis fundidos (por exemplo, naftila, tetra-hidronaftila) e espiro também são incluídos.
[0645] Conforme usado neste relatório, “heterociclo” ou “grupo heterocíclico” inclui qualquer estrutura no anel (saturado, insaturado ou aromático) que contém pelo menos um heteroátomo no anel (por exemplo, N, O ou S). Heterociclo inclui heteroci- cloalquila e heteroarila. Exemplos de heterociclos incluem, mas não são limitados a, morfolina, pirrolidina, tetra-hidrotiofeno, piperidina, piperazina, oxetano, pirano, tetra- hidropirano, azetidina e tetra-hidrofurano.
[0646] Exemplos de grupos heterocíclicos incluem, mas não são limitados a, acridinila, azocinila, benzimidazolila, benzofuranila, benzotiofuranila, benzotiofenila, benzoxazolila, benzoxazolinila, benztiazolila, benztriazolila, benztetrazolila, benziso- xazolila, benzisotiazolila, benzimidazolinila, carbazolila, 4aH-carbazolila, carbolinila, cromanila, cromenila, cinolinila, deca-hidroquinolinila, 2H,6H-1,5,2-ditiazinila, di-hidro- furo[2,3-b]tetra-hidrofurano, furanila, furazanila, imidazolidinila, imidazolinila, imi- dazolila, 1H-indazolila, indolnila, indolinila, indolizinila, indolila, 3H-indolila, isatinoila, isobenzofuranila, isocromanila, isoindazolila, isoindolinila, isoindolila, isoquinolinila, isotiazolila, isoxazolila, metilenodioxifenila, morfolinila, naftiridinila, octa-hidroisoquino- linila, oxadiazolila, 1,2,3-oxadiazolila, 1,2,4-oxadiazolila, 1,2,5-oxadiazolila, 1,3,4-oxa- diazolila, 1,2,4-oxadiazol5(4H)-ona, oxazolidinila, oxazolila, oxindolila, pirimidinila, fe- nantridinila, fenantrolinila, fenazinila, fenotiazinila, fenoxatinila, fenoxazinila, ftalazinila, piperazinila, piperidinila, piperidonila, 4-piperidonila, piperonila, pteridinila, purinila, pi- ranila, pirazinila, pirazolidinila, pirazolinila, pirazolila, piridazinila, pirido-oxazol, piridoi- midazol, piridotiazol, piridinila, piridila, pirimidinila, pirrolidinila, pirrolinila, 2H-pirrolila, pirrolila, quinazolinila, quinolinila, 4H-quinolizinila, quinoxalinila, quinuclidinila, tetra-hi- drofuranila, tetra-hidroisoquinolinila, tetra-hidroquinolinila, tetrazolila, 6H-1,2,5-tiadia- zinila, 1,2,3-tiadiazolila, 1,2,4-tiadiazolila, 1,2,5-tiadiazolila, 1,3,4-tiadiazolila, tiantre- nila, tiazolila, tienila, tienotiazolila, tieno-oxazolila, tienoimidazolila, tiofenila, triazinila, 1,2,3-triazolila, 1,2,4-triazolila, 1,2,5-triazolila, 1,3,4-triazolila e xantenila.
[0647] O termo “substituído”, conforme usado neste relatório, significa que qualquer um ou mais átomos de hidrogênio no átomo designado é substituído com uma seleção a partir dos grupos indicados, contanto que a valência normal do átomo designado não seja excedida, e que a substituição resulte em um composto estável. Quando um substituinte é oxo ou ceto (isto é, =O), então 2 átomos de hidrogênio no átomo são substituídos. Os substituintes ceto não estão presentes nas porções aromáticas. As ligações duplas no anel, conforme usado neste relatório, são ligações duplas que são formadas entre dois átomos no anel adjacentes (por exemplo, C=C, C=N ou N=N). “Composto estável” e “estrutura estável” indicam um composto que é suficientemente robusto para sobreviver ao isolamento em um grau útil de pureza a partir de uma mistura de reação, e à formulação em um agente terapêutico eficaz.
[0648] Quando uma ligação a um substituinte é mostrada cruzar uma ligação que conecta dois átomos em um anel, então tal substituinte pode ser ligado a qualquer átomo no anel. Quando um substituinte é listado sem indicar o átomo por intermédio do qual tal substituinte é ligado ao restante do composto de uma dada fórmula, então tal substituinte pode ser ligado por intermédio de qualquer átomo em tal fórmula. As combinações de substituintes e/ou variáveis são permissíveis, mas apenas se tais combinações resultam em compostos estáveis.
[0649] Quando qualquer variável (por exemplo, R1) ocorre mais do que uma vez em qualquer constituinte ou fórmula para um composto, sua definição em cada ocorrência é independente de sua definição em outra ocorrência. Assim, por exemplo, se um grupo é substituído com 0 a 2 porções R1, então o grupo pode ser opcionalmente substituído com até duas porções R1 e R1 em cada ocorrência é selecionado independentemente da definição de R1. Além disso, as combinações de substituintes e/ou variáveis são permissíveis, mas apenas se tais combinações resultam em compostos estáveis.
[0650] O termo “hidróxi” ou “hidroxila” inclui grupos com um -OH ou -O-.
[0651] Conforme usado neste relatório, “halo” ou “halogênio” se refere a flúor, cloro, bromo e iodo. O termo “perhalogenado”, em geral, se refere a uma porção em que todos os átomos de hidrogênio são substituídos por átomos de halogênio. O termo “haloalquila” ou “haloalcoxila” se refere a um alquila ou alcoxila substituído com um ou mais átomos de halogênio.
[0652] O termo “carbonila” inclui compostos e porções que contêm um carbono conectado com uma ligação dupla a um átomo de oxigênio. Exemplos de porções contendo um carbonila incluem, mas não são limitados a, aldeídos, cetonas, ácidos carboxílicos, amidas, ésteres, anidridos, etc.
[0653] O termo “carboxila” se refere a -COOH ou seu éster alquílico C1-C6.
[0654] “Acila” inclui porções que contêm o radical acila (R-C(O)-) ou um grupo carbonila. “Acila substituído” inclui grupos acila onde um ou mais entre os átomos de hidrogênio são substituídos, por exemplo, por grupos alquila, grupos alquinila, halo- gênio, hidroxila, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, carboxilato, alquilcarbonila, arilcarbonila, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilami- nocarbonila, dialquilaminocarbonila, alquiltiocarbonila, alcoxila, fosfato, fosfonato, fos- finato, amino (incluindo alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino e alquilarila- mino), acilamino (incluindo alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoila e ureido), amidino, imino, sulfidrila, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinila, sulfonato, sulfamoila, sulfonamido, nitro, trifluorometila, ciano, azido, heterociclila, al- quilarila ou uma porção aromática ou heteroaromática.
[0655] “Aroila” inclui porções com uma porção arila ou heteroaromática ligada a um grupo carbonila. Exemplos de grupos aroila incluem fenilcarbóxi, naftil carbóxi, etc.
[0656] “Alcoxialquila”, “alquilaminoalquila” e “tioalcoxialquila” incluem grupos alquila, conforme descrito acima, em que os átomos de oxigênio, nitrogênio ou enxofre substituem um ou mais átomos de carbono na estrutura de hidrocarboneto.
[0657] O termo “alcóxi” ou “alcoxila” inclui grupos alquila, alquenila e alquinila substituídos e não substituídos covalentemente ligados a um átomo de oxigênio. Exemplos de grupos alcóxi ou radicais alcoxila incluem, mas não são limitados a, grupos metóxi, etóxi, isopropilóxi, propóxi, butóxi e pentóxi. Exemplos de grupos alcóxi substituídos incluem grupos alcóxi halogenados. Os grupos alcóxi podem ser substituídos com grupos, tais como alquenila, alquinila, halogênio, hidroxila, alquilcarboni- lóxi, arilcarbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, carboxilato, alquilcarbonila, arilcarbonila, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilaminocarbonila, dialquilaminocar- bonila, alquiltiocarbonila, alcoxila, fosfato, fosfonato, fosfinato, amino (incluindo alqui- lamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino e alquilarilamino), acilamino (incluindo al- quilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoila e ureido), amidino, imino, sulfidrila, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinila, sulfonato, sulfamoila, sulfona- mido, nitro, trifluorometila, ciano, azido, heterociclila, alquilarila ou uma porção aromática ou heteroaromática. Exemplos de grupos alcóxi substituídos com halogênio incluem, mas não são limitados a, fluorometóxi, difluorometóxi, trifluorometóxi, clorome- tóxi, diclorometóxi e triclorometóxi.
[0658] O termo “éter” ou “alcóxi” inclui compostos ou porções que contêm um oxigênio ligado a dois átomos de carbono ou heteroátomos. Por exemplo, o termo inclui “alcoxialquila”, que se refere a um grupo alquila, alquenila ou alquinila covalen- temente ligado a um átomo de oxigênio que é covalentemente ligado a um grupo alquila.
[0659] O termo “éster” inclui compostos ou porções que contêm um carbono ou um heteroátomo ligado a um átomo de oxigênio que é ligado ao carbono de um grupo carbonila. O termo “éster” inclui grupos alcoxicarbóxi, tais como metoxicarbo- nila, etoxicarbonila, propoxicarbonila, butoxicarbonila, pentoxicarbonila, etc.
[0660] O termo “tioalquila” inclui compostos ou porções que contêm um grupo alquila conectado com um átomo de enxofre. Os grupos tioalquila podem ser substituídos com grupos, tais como alquila, alquenila, alquinila, halogênio, hidroxila, alquilcarbonilóxi, arilcarbonilóxi, alcoxicarbonilóxi, ariloxicarbonilóxi, carboxilato, car- boxiácido, alquilcarbonila, arilcarbonila, alcoxicarbonila, aminocarbonila, alquilamino- carbonila, dialquilaminocarbonila, alquiltiocarbonila, alcoxila, amino (incluindo alquila- mino, dialquilamino, arilamino, diarilamino e alquilarilamino), acilamino (incluindo al- quilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoila e ureido), amidino, imino, sulfidrila, alquiltio, ariltio, tiocarboxilato, sulfatos, alquilsulfinila, sulfonato, sulfamoila, sulfona- mido, nitro, trifluorometila, ciano, azido, heterociclila, alquilarila, ou uma porção aromática ou heteroaromática.
[0661] O termo “tiocarbonila” ou “tiocarbóxi” inclui compostos e porções que contêm um carbono conectado com uma ligação dupla a um átomo de enxofre.
[0662] O termo “tioéter” inclui porções que contêm um átomo de enxofre ligado a dois átomos de carbono ou heteroátomos. Exemplos de tioéteres incluem, mas não são limitados a alqutioalquilas, alqutioalquenilas e alqutioalquinilas. O termo “alqutio- alquilas” inclui porções com um grupo alquila, alquenila ou alquinila ligado a um átomo de enxofre que é ligado a um grupo alquila. Similarmente, o termo “alqutioalquenilas” se refere a porções em que um grupo alquila, alquenila ou alquinila é ligado a um átomo de enxofre que é covalentemente ligado a um grupo alquenila; e alqutioalquini- las” se refere a porções em que um grupo alquila, alquenila ou alquinila é ligado a um átomo de enxofre que é covalentemente ligado a um grupo alquinila.
[0663] Conforme usado neste relatório, “amina” ou “amino” se refere a -NH2 não substituído ou substituído. “Alquilamino” inclui grupos de compostos em que o nitrogênio de -NH2 é ligado a pelo menos um grupo alquila. Exemplos de grupos al- quilamino incluem benzilamino, metilamino, etilamino, fenotilamino, etc. “Dialquila- mino” inclui grupos em que o nitrogênio de -NH2 é ligado a pelo menos dois grupos alquila adicionais. Exemplos de grupos dialquilamino incluem, mas não são limitados a, dimetilamino e dietilamino. “Arilamino” e “diarilamino” incluem grupos em que o nitrogênio é ligado a pelo menos um ou dois grupos arila, respectivamente. “Aminoarila” e “aminoarilóxi” se referem a arila e arilóxi substituído com amino. “Alquilarilamino”, “alquilaminoarila” ou “arilaminoalquila” se refere a um grupo amino que é ligado a pelo menos um grupo alquila e a pelo menos um grupo arila. “Alquaminoalquila” se refere a um grupo alquila, alquenila ou alquinila ligado a um átomo de nitrogênio que também é ligado a um grupo alquila. “Acilamino” inclui grupos em que o nitrogênio é ligado a um grupo acila. Exemplos de acilamino incluem, mas não são limitados a, grupos al- quilcarbonilamino, arilcarbonilamino, carbamoila e ureido.
[0664] O termo “amida” ou “aminocarbóxi” inclui compostos ou porções que contêm um átomo de nitrogênio que é ligado ao carbono de um grupo carbonila ou tiocarbonila. O termo inclui grupos “alquaminocarbóxi” que incluem grupos alquila, al- quenila ou alquinila ligados a um grupo amino que é ligado ao carbono de um grupo carbonila ou tiocarbonila. Ele também inclui grupos “arilaminocarbóxi” que incluem porções arila ou heteroarila ligadas a um grupo amino que é ligado ao carbono de um grupo carbonila ou tiocarbonila. Os termos “alquilaminocarbóxi”, “alquenilaminocar- bóxi”, “alquinilaminocarbóxi” e “arilaminocarbóxi” incluem porções em que porções alquila, alquenila, alquinila e arila, respectivamente, são ligadas a um átomo de nitrogênio que é, por sua vez, ligado ao carbono de um grupo carbonila. AS amidas podem ser substituídas com substituintes, tais como alquila de cadeia reta, alquila de cadeia ramificada, cicloalquila, arila, heteroarila ou heterociclo. Os substituintes em grupos amida podem ser adicionalmente substituídos.
[0665] Os compostos da presente invenção que contêm nitrogênios podem ser convertidos em N-óxidos através do tratamento com um agente oxidante (por exemplo, ácido 3-cloroperoxibenzoico (mCPBA) e/ou peróxidos de hidrogênio) para fornecer outros compostos da presente invenção. Assim, todos os compostos contendo nitrogênio mostrados e reivindicados são considerados, quando deixados por valência e estrutura, para incluir o composto, conforme mostrado, e seu derivado de N-óxido (que pode ser designado como N >O ou N+-O-). Além disso, em outros exemplos, os nitrogênios nos compostos da presente invenção podem ser convertidos em compostos de N-hidróxi ou N-alcóxi. Por exemplo, os compostos de N-hidróxi podem ser preparados por oxidação da amina precursora através de um agente oxidante, tal como m-CPBA. Todos os compostos contendo nitrogênio mostrados e reivindicados também são considerados, quando deixados por valência e estrutura, para cobrir o composto, conforme mostrado, e seus derivados de N-hidróxi (isto é, N-OH) e N-alcóxi (isto é, N-OR, em que R é alquila C1-C6, alquenila C1-C6, alquinila C1-C6 substituído ou não substituído, carbociclo de 3 a 14 membros ou heterociclo de 3 a 14 membros).
[0666] No presente relatório descritivo, a fórmula estrutural do composto representa um certo isômero, para conveniência, em alguns casos, mas a presente invenção inclui todos os isômeros, tais como isômeros geométricos, isômeros ópticos com base em um carbono assimétrico, estereoisômeros, tautômeros, e semelhantes, sendo entendido que nem todos os isômeros podem ter o mesmo nível de atividade. Além disso, um polimorfismo de cristal pode estar presente para os compostos representados pela fórmula. Deve ser observado que qualquer forma de cristal, mistura de forma de cristal, ou anidrido ou hidrato da mesma é incluída no escopo da presente invenção. Além disso, o metabólito que é produzido pela degradação do presente composto in vivo é incluído no escopo da presente invenção.
[0667] “Isomerismo” significa compostos que têm fórmulas moleculares idênticas, mas diferem na sequência de união de seus átomos ou no arranjo de seus átomos no espaço. Os isômeros que diferem no arranjo de seus átomos no espaço são denominados “estereoisômeros”. Estereoisômeros que não são imagens de espelho de um outro são denominados “diastereoisômeros”, e estereoisômeros que são imagens de espelho não superponíveis de um do outro são denominados “enantiômeros” ou, algumas vezes, isômeros ópticos. Uma mistura contendo quantidades iguais de formas enantioméricas individuais de quiralidade oposta é denominada uma “mistura racêmica”.
[0668] Um átomo de carbono ligado a quatro substituintes não idênticos é denominado um “centro quiral”.
[0669] “Isômero quiral” significa um composto com pelo menos um centro qui- ral. Os compostos com mais do que um centro quiral podem existir como um diaste- reômero individual ou como uma mistura de diastereômeros, denominada “mistura di- astereomérica”. Quando um centro quiral está presente, um estereoisômero pode ser caracterizado pela configuração absoluta (R ou S) de tal centro quiral. A configuração absoluta se refere ao arranjo no espaço dos substituintes ligados ao centro quiral. Os substituintes ligados ao centro quiral sob consideração são classificados, de acordo com a Sequence Rule de Cahn, Ingold e Prelog. (Cahn et al., Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511; Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn e Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (Londres), 612; Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116).
[0670] “Isômero geométrico” significa os diastereômeros que devem sua existência à rotação atrasada sobre as ligações duplas ou um ligante cicloalquila (por exemplo, 1,3-ciclobutila). Estas configurações são diferenciadas em seus nomes pelos prefixos cis e trans, ou Z e E, que indica que os grupos estão no mesmo lado ou lado oposto da ligação dupla na molécula, de acordo com as regras de Cahn-Ingold- Prelog.
[0671] Deve ser entendido que os compostos da presente invenção podem ser representados como isômeros quirais diferentes ou isômeros geométricos. Também deve ser entendido que quando os compostos têm formas isoméricas quirais ou isoméricas geométricas, todas as formas isoméricas são incluídas no escopo da presente invenção, e a nomenclatura dos compostos não exclui quaisquer formas isomé- ricas, sendo entendido que nem todos os isômeros podem ter o mesmo nível de atividade.
[0672] Além disso, as estruturas e outros compostos debatidos nesta invenção incluem todos os isômeros atrópicos dos mesmos, sendo entendido que nem todos os isômeros atrópicos podem ter o mesmo nível de atividade. Os “isômeros atró- picos” são um tipo de estereoisômero em que os átomos de dois isômeros são arranjados de forma diferente no espaço. Os isômeros atrópicos devem sua existência a uma rotação restrita causada pelo atraso de rotação de grandes grupos sobre uma ligação central. Tais isômeros atrópicos tipicamente existem como uma mistura, entretanto, como um resultado de avanços recentes em técnicas de cromatografia, foi possível separar misturas de dois isômeros atrópicos em casos selecionados.
[0673] “Tautômero” é um entre dois ou mais isômeros estruturais que existem em equilíbrio e é facilmente convertido a partir de uma forma isomérica em uma outra. Esta conversão resulta na migração formal de um átomo de hidrogênio acompanhado por uma troca de ligações duplas conjugadas adjacentes. Os tautômeros existem como uma mistura de um ajuste tautomérico na solução. Em soluções onde a tauto- merização é possível, um equilíbrio químico dos tautômeros será atingido. A razão exata dos tautômeros depende de vários fatores, incluindo temperatura, solvente e pH. O conceito de tautômeros que são interconversíveis por tautomerizações é cha-mado tautomerismo.
[0674] Entre os vários tipos de tautomerismo que são possíveis, dois são co- mumente observados. No tautomerismo de ceto-enol, uma troca simultânea de elétrons e um átomo de hidrogênio ocorre. Tautomerismo na cadeia do anel surge como um resultado do grupo aldeído (-CHO) em uma molécula da cadeia de açúcar que reage com um dos grupos hidróxi (-OH) na mesma molécula para fornecer à mesma uma forma cíclica (forma de anel), conforme exibido por glicose.
[0675] Os pares tautoméricos comuns são: tautomerismo de cetona-enol, amida-nitrila, lactama-lactima, amida-ácido imídico em anéis heterocíclicos (por exemplo, em nucleobases, tais como guanina, timina e citosina), imina-enamina e enamina- enamina. Um exemplo de equilíbrios ceto-enol é entre piridin-2(1H)-onas e os piridin- 2-óis correspondentes, conforme mostrado abaixo.
[0676]
[0677] Deve ser entendido que os compostos da presente invenção podem ser representados como tautômeros diferentes. Também deve ser entendido que quando os compostos têm formas tautoméricas, todas as formas tautoméricas são incluídas no escopo da presente invenção, e a nomenclatura dos compostos não exclui qualquer forma de tautômero. Será entendido que certos tautômeros podem ter um nível mais alto de atividade em relação a outros.
[0678] O termo “polimorfos de cristal”, “polimorfos” ou “formas de cristal” significa estruturas cristalinas em que um composto (ou um sal ou solvato do mesmo) pode cristalizar em arranjos de empacotamento de cristal diferentes, todos os quais têm a mesma composição elementar. As formas de cristal diferentes usualmente têm padrões de difração de raios X, infravermelho espectral, pontos de fusão, dureza de densidade, forma de cristal, propriedades ópticas e elétricas, estabilidade e solubilidade diferentes. O solvente de recristalização, taxa de cristalização, temperatura de armazenagem, e outros fatores podem fazer com que domine uma forma de cristal. Os polimorfos de cristal dos compostos podem ser preparados por cristalização sob condições diferentes.
[0679] Os compostos de qualquer Fórmula descrita neste relatório incluem os compostos por si só, assim como seus sais, seus solvatos e seus pró-fármacos, se aplicáveis. Um sal, por exemplo, pode ser formado entre um ânion e um grupo positivamente carregado (por exemplo, amino) em um composto de benzeno substituído. Os ânions adequados incluem cloreto, brometo, iodeto, sulfato, bissulfato, sulfamato, nitrato, fosfato, citrato, metanossulfonato, trifluoroacetato, glutamato, glicuronato, glu- tarato, malato, maleato, succinato, fumarato, tartrato, tosilato, salicilato, lactato, naftalenossulfonato e acetato (por exemplo, trifluoroacetato). O termo “ânion farma- ceuticamente aceitável” se refere a um ânion adequado para formar um sal farmaceu- ticamente aceitável. Do mesmo modo, um sal também pode ser formado entre um cátion e um grupo negativamente carregado (por exemplo, carboxilato) em um composto de benzeno substituído. Os cátions adequados incluem íon sódio, íon potássio, íon magnésio, íon cálcio e um cátion amônio, tal como íon tetrametilamônio. Os compostos de benzeno substituídos também incluem aqueles sais contendo átomos de nitrogênio quaternário.
[0680] Exemplos de pró-fármacos incluem ésteres e outros derivados farma- ceuticamente aceitáveis, que, após a administração a um paciente, são capazes de fornecer composto de benzeno substituídos ativos.
[0681] Adicionalmente, os compostos da presente invenção, por exemplo, os sais dos compostos, podem existir na forma hidratada ou não hidratada (o anidro) ou como solvatos com outras moléculas de solvente. Exemplos não limitantes de hidratos incluem mono-hidratos, di-hidratos, etc. Exemplos não limitantes de solvatos incluem solvatos de etanol, solvatos de acetona, etc.
[0682] “Solvato” significa formas de adição de solvente que contêm quantidades estequiométricas ou não estequiométricas de solvente. Alguns compostos têm uma tendência a capturar uma razão molar fixa de moléculas de solvente no estado sólido cristalino, assim, formando um solvato. Se o solvente for água, o solvato formado é um hidrato; e se o solvente for álcool, o solvato formado é um alcoolato. Os hidratos são formados pela combinação de uma ou mais moléculas de água com uma molécula da substância em que a água retém seu estado molecular como H2O.
[0683] Conforme usado neste relatório, o termo “análogo” se refere a um composto químico que é estruturalmente similar a um outro, mas difere levemente na composição (como na substituição de um átomo por um átomo de um elemento diferente ou na presença de um grupo funcional particular, ou na substituição de um grupo funcional por um outro grupo funcional). Assim, um análogo é um composto que é similar ou comparável em função e aparência, mas não na estrutura ou origem ao composto de referência.
[0684] Conforme definido neste relatório, o termo “derivado” se refere aos compostos que têm uma estrutura de núcleo comum, e são substituídos com vários grupos, conforme descrito neste relatório. Por exemplo, todos os compostos representados pela Fórmula (I) são compostos de benzeno substituídos e têm a Fórmula (I) como um núcleo comum.
[0685] O termo “bioisóstero” se refere a um composto resultante da troca de um átomo ou de um grupo de átomos com um outro átomo ou grupo de átomos amplamente similar. O objetivo de uma substituição bioisostérica é criar um novo composto com propriedades biológicas similares ao composto precursor. A substituição bioisostérica pode ocorrer com base fisicoquímica ou topológica. Exemplos de bioi- sósteros de ácido carboxílico incluem, mas não são limitados a, acil sulfonimidas, te- trazóis, sulfonatos e fosfonatos. Veja, por exemplo, Patani e LaVoie, Chem. Rev. 96, 3147 - 3176, 1996.
[0686] A presente invenção é intencionada a incluir todos os isótopos de átomos que ocorrem nos presente compostos. Os isótopos incluem aqueles átomos tendo o mesmo número atômico, mas números de massa diferentes. Por via de exemplo geral e sem limitação, os isótopos de hidrogênio incluem trítio e deutério e os isótopos de carbono incluem C-13 e C-14.
[0687] Síntese de Compostos de Benzeno Substituídos
[0688] A presente invenção fornece métodos para a síntese dos compostos de qualquer uma entre as Fórmulas descritas neste relatório. A presente invenção também fornece métodos detalhados para a síntese de vários compostos da presente invenção divulgados, de acordo com os esquemas seguintes, conforme mostrado nos Exemplos.
[0689] Por toda a descrição, onde as composições são descritos tendo, incluindo, ou compreendendo componentes específicos, é considerado que as composições também consistem essencialmente de, ou consistem dos componentes citados. Similarmente, onde os métodos ou processos são descritos tendo, incluindo ou compreendendo etapas de processo específicas, os processos também consistem essencialmente de, ou consistem das etapas de processamento citadas. Além disso, deve ser entendido que a ordem das etapas ou ordem para realizar certas ações é imaterial, contanto que a invenção permaneça operável. Além disso, duas ou mais etapas ou ações podem ser simultaneamente conduzidas.
[0690] Os processos sintéticos da invenção podem tolerar uma ampla variedade de grupos funcionais, portanto, vários materiais de partida substituídos podem ser usados. Os processos, em geral, fornecem os compostos finais desejados no, ou em proximidade ao final do processo global, embora possa ser desejável, em certos exemplos, converter adicionalmente o composto em um sal farmaceuticamente aceitável, éster ou pró-fármaco do mesmo.
[0691] Os compostos da presente invenção podem ser preparados em uma variedade de maneiras usando os materiais de partida comercialmente disponíveis, os compostos conhecidos na literatura ou a partir de intermediários facilmente preparados, através da utilização de métodos e procedimentos sintéticos padrão conhecidos àqueles habilitados na técnica, ou que serão evidentes ao técnico habilitado na luz dos ensinamentos neste relatório. Os métodos e procedimentos sintéticos padrão para a preparação de moléculas orgânicas e transformações e manipulações de grupo funcional podem ser obtidos a partir da literatura científica relevante ou a partir de manuais padrão no campo. Embora não limitados a qualquer uma ou várias fontes, textos clássicos, tais como Smith, M. B., Março, J., March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5a edição, John Wiley & Sons: Nova Iorque, 2001; Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Sinthesis, 3a edição, John Wiley & Sons: Nova Iorque, 1999; R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); L. Fieser e M. Fieser, Fieser e Fieser’s Reagents for Organic Synthesis, John Wiley e Sons (1994); e L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley e Sons (1995), incorporados como referência neste relatório, são úteis e manuais de referência reconhecidos de síntese orgânica conhecidos àqueles habilitados na técnica. As descrições seguintes dos métodos sintéticos são designadas para ilustrar, mas não limitar, os procedimentos gerais para a preparação dos compostos da presente invenção.
[0692] Os compostos da presente invenção podem ser convenientemente preparados por uma variedade de métodos familiares àqueles habilitados na técnica. Os compostos desta invenção com qualquer uma entre as Fórmulas descritas neste relatório podem ser preparados, de acordo com os procedimentos ilustrados nos Esquemas 1 a 10 abaixo, a partir de materiais de partida comercialmente disponíveis ou materiais de partida que podem ser preparados usando os procedimentos da literatura. Os grupos Z e R (tais como R1, R2, R3, R4, R6, R7, R8 e R12) nos Esquemas 1 a 10 são definidos em qualquer Fórmula descrita neste relatório, a menos que de outro modo especificado.
[0693] Uma pessoa de habilidade comum na técnica observará que, durante as sequências de reação e esquemas sintéticos descritos neste relatório, a ordem de certas etapas pode ser modificada, tal como a introdução e remoção de grupos de proteção.
[0694] Uma pessoa de habilidade comum na técnica reconhecerá que certos grupos podem exigir proteção a partir das condições de reação por intermédio do uso dos grupos de proteção. Os grupos de proteção também podem ser usados para diferenciar grupos funcionais similares em moléculas. Uma lista de grupos de proteção e como introduzir e remover estes grupos pode ser encontrada em Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edição, John Wiley & Sons: Nova Iorque, 1999.
[0695] Os grupos de proteção preferidos incluem, mas não são limitados a:
[0696] Para uma porção hidroxila: TBS, benzila, THP, Ac
[0697] Para ácidos carboxílicos: éster benzílico, éster metílico, éster etílico, éster alílico
[0698] Para aminas: Cbz, BOC, DMB
[0699] Para dióis: Ac (x2) TBS (x2), ou, quando tomados em conjunto, aceto- nidas
[0700] Para tióis: Ac
[0701] Para benzimidazóis: SEM, benzila, PMB, DMB
[0702] Para aldeídos: di-alquil acetais, tais como dimetóxi acetal ou dietil acetila.
[0703] Nos esquemas de reação descritos neste relatório, múltiplos estereoi- sômeros podem ser produzidos. Quando nenhum estereoisômero particular é indicado, é entendido significar todos os estereoisômeros possíveis que podem ser produzidos a partir da reação. Uma pessoa de habilidade comum na técnica reconhecerá que as reações podem ser otimizadas para fornecer um isômero, preferencialmente, ou novos esquemas podem ser desenvolvidos para produzir um isômero único. Se as misturas são produzidas, técnicas, tais como cromatografia em camada delgada preparativa, HPLC preparativa, HPLC quiral preparativa ou SFC preparativa, podem ser usadas para separar os isômeros.
[0704] As abreviações seguintes são usadas por todo o relatório descritivo e são definidas abaixo: AA acetato de amônio ACN acetonitrila Ac acetila AcOH ácido acético Atm atmosfera aq. Aquoso BID ou b.i.d. bis in die (duas vezes ao dia) tBuOK t-butóxido de potássio Bn benzila BOC terc-butóxi carbonila BOP hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)tris(dimeti- lamino)-fosfônio Cbz benzilóxi carbonila CDCl3 clorofórmio deuterado CH2Cl2 diclorometano COMU hexafluorofosfato de (1-ciano-2-etóxi-2-oxoetilidena- mino-óxi)dimetil-amino-morfolino-carbênio d dias DBU 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno DCE 1,2 dicloroetano DCM diclorometano DEAD Azodicarboxilato de dietila DIAD Azodicarboxilato de di-isopropila DiBAL-H hidreto de di-isobutil alumínio DIPEA N,N-di-isopropiletilamina (base de Hunig) DMA Dimetilacetamida DMAP N,N dimetil-4-aminopiridina DMB 2,4 dimetóxi benzila DMF N,N-Dimetilformamida DMSO Sulfóxido de dimetila DPPA Azida difenilfosfônica EA ou EtOAc Acetato de etila EDC ou EDCI N-(3-Dimetilaminopropil)-N’-etilcarbodi-imida Et2O éter dietílico ELS Difração de Luz Evaporativa ESI- Modo negativo por eletrospray ESI+ Modo positivo por eletrospray Et3N ou TEA trietilamina EtOH etanol FA ácido fórmico FC ou FCC Cromatografia instantânea h horas H2O água HATU N,N,N’,N’-tetrametilurônio HOAT hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)- 1-Hidróxi-7-azabenzotriazol HOBt 1-Hidroxibenzotriazol HO-Su N-Hidroxissuccinimida HCl cloreto de hidrogênio ou ácido clorídrico HPLC Cromatografia líquida de alto desempenho K2CO3 carbonato de potássio KHMDs Hexametildisilazida potássica LC/MS ou LC-MS Cromatografia líquida-espectro de massas LDA Lítio di-isopropilamida LiHMDs Lítio hexametildisilazida LG grupo de partida M Molar m/z razão massa/carga m-CPBA ácido meta-cloroperbenzoico MeCN Acetonitrila MeOD d4-metanol MeI Iodeto de metila MS3A peneiras moleculares 3A MgSO4 Min Sulfato de magnésio minutos Ms Mesila MsCl Cloreto de mesila MsO Mesilato MS Espectro de Massas MWI irradiação por micro-ondas Na2CO3 carbonato de sódio Na2SO4 sulfato de sódio NaHCO3 bicarbonato de sódio NaHMDs Hexametildisilazida sódica NaOH hidróxido de sódio NaHCO3 bicarbonato de sódio Na2SO4 sulfato de sódio NIS N-iodossuccinimida RMN Ressonância magnética nuclear o/n ou O/N durante a noite Pd/C Paládio em carbono Pd(dppf)Cl2.DCM [1, 1 ‘-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropalá- dio(II), complexo com diclorometano PPAA anidrido cíclico de ácido 1-propanofosfônico Pd(OH)2 Di-hidróxido de paládio PE Éter de Petróleo PG grupo de proteção PMB para metoxibenzila ppm partes por milhão p.o. por os (administração oral) prep HPLC Cromatografia líquida de alto desempenho prepara- tiva prep TLC cromatografia de camada delgada preparativa p-TsOH ácido para-toluenossulfônico PyBOP Hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)tripirrolidi- nofosfônio QD ou q.d. quaque die (uma vez ao dia) RBF frasco de fundo redondo RP-HPLC Cromatografia líquida de alto desempenho em fase reversa Rt ou RT Temperatura ambiente SEM (Trimetilsilil)etoximetila SEMCl cloreto de (trimetilsilil)etoximetila SFC Cromatografia super crítica SGC cromatografia em gel de sílica STAB Triacetóxi boro-hidreto de sódio TBAF fluoreto de tetra-n-butilamônio TBME éter terc-butil metílico TEA Trietilamina TFA ácido trifluoroacético TfO triflato THF tetra-hidrofurano THP tetra-hidropirano TID ou t.i.d ter in die (três vezes ao dia) TLC cromatografia em camada delgada TMSCl Cloreto de trimetilsilila Ts tosila TsOH ácido tósico UV ultravioleta
[0705] Esquema 1
[0706] O Esquema 1 mostra a síntese de análogos de benzeno em que Z = - N(R7)(R8) após uma via geral que utiliza química bem estabelecida. Ácidos nitroben- zoicos substituídos, muitos dos quais são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por nitrações dos ácidos benzoicos substituídos apropriados ou outra química conhecida a uma pessoa habilitada na técnica, podem ser convertidos em seus ésteres metílicos através do tratamento com metiliodeto em um solvente polar, tal como DMF, na presença de uma base apropriada, tal como carbonato de sódio, em uma temperatura apropriada, tal como 60 oC (Etapa 1). O grupo nitro pode ser reduzido a uma amina usando um agente redutor apropriado, tal como ferro, na presença de um ácido, tal como cloreto de amônio, em um solvente prótico, tal como etanol, em uma temperatura apropriada, tal como 80 oC (Etapa 2). A introdução do R7 pode ser feita usando uma aminação redutiva com uma R7-cetona ou R7-aldeído apropriado na presença de um agente redutor apropriado, tal como cianoboro-hidreto de sódio, e ácido catalítico, tal como ácido acético, em um solvente apropriado, tal como metanol. Uma variedade de grupos R8 pode ser introduzida por alquilação usando R8-LG, onde LG é um grupo de partida, tal como iodo, na presença de uma base suave, tal como carbonato de césio, em um solvente polar apropriado, tal como acetonitrila, em uma temperatura apropriada, tal como 80 oC (Etapa 4). Alternativamente, os grupos R8 podem ser introduzidos por aminação redutiva com R8-cetona ou R8-aldeído na presença de um agente redutor apropriado, tal como cianoboro-hidreto de sódio, e ácido catalítico, tal como ácido acético, em um solvente apropriado, tal como metanol. A porção éster pode ser convertida em uma amida usando um protocolo de duas etapas padrão. O éster pode ser hidrolisado no ácido correspondente usando uma base adequada, tal como hidróxido de sódio em um solvente polar, tal como etanol (Etapa 5). O ácido seria então submetido a uma reação de ligação amida padrão, em seguida, a amina apropriada seria adicionada juntamente com um reagente de ligação amida adequado, tal como PYBOP, em um solvente adequado, tal como DMSO, para fornecer a amida desejada (Etapa 6).
[0707] Esquema 2
[0708] Dependendo da natureza do substituinte R6, outra modificação química pode ser utilizada para converter o substituinte R6 em um substituinte R6 alternativo. Uma amostragem representativa de tais modificações pode incluir hidrogena- ção, remoção do grupo de proteção, seguido por reações de ligação amida adicionais, reações de ligação catalisadas por paládio, reações de aminação redutiva ou reações de alquilação. Por exemplo, se R6 é um brometo, substituintes R6 alternativos depois podem ser introduzidos usando protocolos com base em metal de transição padrão que contam com um grupo de partida, tal como um brometo como um ponto de conexão.
[0709] Em tal protocolo, conforme representado no Esquema 2, substituintes R6 não aromáticos ligados por intermédio de uma ligação carbono-carbono podem ser introduzidos através da reação de Suzuki de um composto onde R6 = Br com um derivado de éster borônico não aromático insaturado apropriado (por exemplo, um derivado de éster borônico olefínico, tal como vinil 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2- dioxaborolano na presença de uma base suave e um catalisador de paládio em um solvente polar, tal como dioxano/água, em temperatura elevada para fornecer o novo substituinte R6 desejado. Dependendo da natureza do substituinte R6, outra modificação química pode ser utilizada para converter o substituinte R6 insaturado em um substituinte R6 alternativo. Uma amostragem representativa de tais modificações pode incluir hidrogenação, remoção do grupo de proteção, seguido por reações de ligação amida adicionais, reações de ligação catalisadas por paládio, reações de ami- nação redutiva ou reações de alquilação. Por exemplo, em casos onde um grupo R6 não aromático insaturado é introduzido, modificação adicional através da hidrogena- ção pode fornecer o grupo R6 saturado correspondente (por exemplo, conversão de um grupo vinila em um grupo etila). Em casos onde os grupos R6 introduzidos têm funcionalidade amina protegida, modificações adicionais incluem desproteção para fornecer aminas que podem ser, em etapas subsequentes, adicionalmente modificadas, por exemplo, através de formação de amida ou reações de aminação redutiva.
[0710] Em um outro protocolo, conforme representado no Esquema 3, substi- tuintes R6 não aromáticos ligados por intermédio de uma ligação carbono-carbono podem ser introduzidos por reação de Sonogashira de um composto onde R6 = Br, opcionalmente seguido por modificação adicional do grupo alquinila introduzido. Na reação de Sonogashira, um composto onde R6 = Br é ligado com um derivado de alcino terminal na presença de uma base suave, um catalisador de cobre e um catalisador de paládio em um orgânico solvente, tal como tolueno em temperatura elevada. Isto resulta na substituição do grupo Br com um grupo alquinila. O composto resultante, em que o substituinte R6 é um grupo alquinila, pode estar sujeito a modificações adequadas subsequentes para fornecer um substituinte R6 alternativo. Uma amostragem representativa de tais modificações pode incluir hidrogenação, remoção do grupo de proteção, seguido por reações de ligação amida adicionais, reações de aminação redutiva ou reações de alquilação.
[0711] Esquema 3
[0712] Em um outro protocolo, substituintes R6 não aromáticos ligados por intermédio de uma ligação carbono-carbono podem ser preparados por outras reações de substituição dos compostos de átomo de bromo onde R6 = Br, opcionalmente seguido por modificação adicional do grupo R6 introduzido. Exemplos de tais reações de substituição incluem reações de ligação com reagentes de zinco, tais como reações de cianação e Negishi. No caso de reação de cianação, os compostos onde R6 = Br podem ser reagidos com cianeto de zinco sob condições de reação mediadas por catalisador de paládio padrão para fornecer os compostos onde R6 = CN. O grupo ciano em tais compostos pode estar sujeito a modificação adicional para fornecer outros grupos R6. Tais modificações de ciano incluem i. redução a uma amina que pode ser subsequentemente convertida em uma amida por acilação ou alquilação, ii. redução a um aldeído que pode ser submetido à reação de aminação redutiva para fornecer derivados correspondentes. Nas reações de Negishi, reagentes de alquil- zinco que podem ser preparados a partir de iodetos de alquila (por exemplo, N-Boc- 3-iodoazetidina) são ligados a compostos onde R6 = Br usando catalisadores de paládio ou níquel. Nos produtos resultantes, o grupo R6 introduzido pode ser convertido em um grupo alternativo através de modificações adicionais do grupo R6 nas etapas subsequentes, tais como desproteção, formação de amida ou alquilação.
[0713] Os compostos com substituintes R6 que são aminas ligadas por intermédio de uma ligação nitrogênio-carbono podem ser introduzidos através da reação de ligação de Buchwald dos compostos onde R6 = Br, seguido por modificação opcional do grupo R6, conforme representado no Esquema 4. Nas reação de Buchwald, os compostos onde R6 = Br são tratados com uma amina primária ou secundária (por exemplo, piperazino-1-carboxilato de terc-butila) na presença de um catalisador de paládio (por exemplo, Pd(dba)2/BINAP) e uma base (por exemplo, carbonato de césio) em um solvente orgânico (por exemplo, tolueno) em temperatura elevada. A ligação de Buchwald, o produto pode ser submetido às modificações adequadas subsequentes para fornecer um substituinte R6 alternativo. Tais modificações são exemplificadas pela remoção do grupo de proteção, reações de ligação amida, reações de aminação redutiva ou reações de alquilação.
[0714] Esquema 4
[0715] Os compostos com substituintes R6 que são grupos alquiltio ligados por intermédio de uma ligação enxofre-carbono podem ser preparados por reação de ligação dos compostos onde R6 = Br com tióis na presença de um catalisador de paládio e uma base fraca (por exemplo, DIPEA) em um solvente orgânico em temperatura elevada. Os sulfetos do produto de ligação podem estar sujeitos às modificações adequadas subsequentes para fornecer um substituinte R6 alternativo. Tais modificações incluem reações de oxidação de enxofre para fornecer sulfóxidos e sulfonas, remoção do grupo de proteção, reações de ligação amida, reações de aminação redutiva ou reações de alquilação.
[0716] Em uma modificação da síntese geral no Esquema 1, dependendo da natureza do substituinte R7, outra modificação química subsequente à Etapa 6 do Esquema 1 pode ser utilizada para converter o substituinte R7 em um substituinte R7 alternativo. Por exemplo, um grupo amino protegido contido dentro de R7 pode ser submetido à reação de desproteção (por exemplo, clivagem do grupo Boc) para fornecer grupos amino livres. Tais grupos amino livres podem ser submetidos às reações de aminação redutiva ou reações de alquilação para fornecer aminas substituídas.
[0717] O Esquema 5 mostra a síntese geral de compostos de picolinamida. A partida da oxidação de 3-bromo-6-cloropicolinato de metila no N-óxido, seguido por cloração com oxicloreto de fósforo fornece 3-bromo-4,6-dicloropicolinato de metila. O grupo 4-cloro pode ser seletivamente substituído com diversas mono e dialquil aminas que também podem conter grupos funcionais ou funcionais protegidos que podem ser não mascarados em um estágio posterior. O grupo 3-bromo pode ser retido ou pode ser opcionalmente convertido em um grupo R12 alternativo através de reação de substituição adequada e modificações de grupo funcional adicionais. Tais reações incluem reações de ligação mediadas com catalisadores de paládio. Por exemplo, o grupo 3-bromo pode ser convertido em um grupo R12 = metila através da reação de Stille com tetrametilestanho. A hidrólise de éster, seguido por ligação amida com 3- (aminometil)-piridin-2-onas apropriadas, fornece compostos de picolinamida, em que R6 é um grupo cloro. O grupo cloro pode ser opcionalmente convertido em grupos R6 alternativos através de reações de substituição adequadas em uma etapa final ou, alternativamente, antes da hidrólise de éster da Etapa 6. Exemplos de tais reações desubstituição incluem reações de cianação e aminação diretamente ou mediadas com catalisadores de paládio. Compostos análogos, em que R12 é cloro, podem ser preparados na forma análoga a partir de 3,4,6-tricloropiridina-2-carboxilato de metila.
[0718] Esquema 5
[0719] As sínteses gerais de intermediários de 3-(aminometil)-piridin-2(1H)- onas para a reação de ligação amida a partir do Esquema 1 são representadas no Esquema 6. Em um método, uma dicetona pode ser condensada com 2-cianoaceta- mida na presença de um reagente apropriado, tal como acetato de piperidina em um solvente polar, tal como etanol, para fornecer uma cianopiridona (Etapa 9). Em um outro método, quando R3 é H, uma alquinil cetona apropriadamente substituída pode ser condensada com 2-cianoacetamida na presença de um reagente apropriado, tal como acetato de piperidina, em um solvente polar, tal como etanol, para fornecer uma cianopiridona (Etapa 11). O grupo ciano pode ser reduzido sob condições apropriadas, tais como hidrogenação na presença de níquel Raney catalítico, em um solvente polar, tal como amônio em metanol, para fornecer a amina (Etapa 10).
[0720] Esquema 6
[0721] Adicionalmente, dependendo da natureza do grupo R2, R3 ou R4, outra modificação química pode ser utilizada para converter cada um entre os mesmos independentemente de um substituinte alternativo. Uma amostragem representativa de tais modificações pode incluir hidrogenação, remoção do grupo de proteção, seguido por reações de ligação amida adicionais, reações de ligação catalisadas por paládio, reações de aminação redutiva e reações de alquilação.
[0722] O Esquema 7 representa uma variante da síntese geral por intermédio do Esquema 1 com base em materiais de partida de 3-amino-5-bromo-benzoato de metila 2-substituído (o substituinte é um grupo R12). Estes materiais de partida, por sua vez, podem ser preparados a partir de ácidos 3-nitro-benzoicos 2-substituídos que são comercialmente disponíveis ou podem ser preparados por nitração de ácidos ben- zoicos 2-substituídos. Assim, a bromação de ácidos 3-nitro-benzoicos 2-substituídos com um reagente adequado, tal como 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinediona,fornece os ácidos 3-nitro-5-bromo-benzoicos 2-substituídos apropriados. Uma variedade de esterificação e depois métodos de redução do grupo nitro podem ser sequencialmente implementados para preparar os materiais de partida de 3-amino-5-bromo- benzoato de metila 2-substituído a partir dos ácidos 3-nitro-5-bromo-benzoicos 2- substituídos.
[0723] Esquema 7
[0724] Conforme representado no Esquema 7, o grupo R7 pode ser introduzido a partir de 3-amino-5-bromo-benzoatos de metila 2-substituídos na Etapa 1 usando uma aminação redutiva com um R7-cetona ou R7-aldeído apropriado na presença de um agente redutor apropriado, tal como cianoboro-hidreto de sódio, e ácido catalítico, tal como ácido acético, em um solvente apropriado, tal como metanol. Similarmente, grupos R8 podem ser introduzidos na Etapa 2 através de aminação redutiva com R8-cetona ou R8-aldeído na presença de um agente redutor apropriado, tal como cianoboro-hidreto de sódio, e ácido catalítico, tal como ácido acético, em um solvente apropriado, tal como metanol. Alternativamente, uma variedade de grupos R8 pode ser introduzida por alquilação usando R8-LG, onde LG é um grupo de partida, tal como iodo, na presença de uma base suave, tal como carbonato de césio, em um solvente polar apropriado, tal como acetonitrila, em uma temperatura apropriada, tal como 80 oC. Na Etapa 3, grupos R6, exceto bromo, podem ser introduzidos por intermédio de reações de ligação catalisadas por paládio. Exemplos de tais grupos R6 e métodos foram descritos acima. Por exemplo, aminas podem ser introduzidas por reações de Buchwald e grupos insaturados podem ser introduzidos por reações Suzuki ou Sono- gashiri. O substituinte R6 pode ser submetido às modificações adequados subsequentes para fornecer um substituinte R6 alternativo. Uma amostragem representativa de tais modificações pode incluir hidrogenação (por exemplo, para saturar grupos insa- turados), remoção do grupo de proteção, seguido por reações de ligação amida adicionais, reações de aminação redutiva ou reações de alquilação. Na Etapa 4, a porção éster pode ser hidrolisada no ácido correspondente usando uma base adequada, tal como hidróxido de sódio, em um solvente polar, tal como etanol. Na Etapa 5, o ácido pode ser submetido à uma reação de ligação amida padrão, em seguida, a 3-(amino- metil)-piridin-2-ona apropriado seria adicionada juntamente com um reagente de ligação amida adequado, tal como PYBOP, em um solvente adequado, tal como DMSO, para fornecer a amida desejada. Dependendo da natureza do substituinte R7, outra modificação química subsequente à Etapa 5 do Esquema 4 pode ser utilizada para converter o substituinte R7 em um substituinte R7 alternativo. Por exemplo, um grupo amino protegido contido dentro de R7 pode ser submetido à reação de desproteção (por exemplo, clivagem do grupo Boc) para fornecer grupos amino livres. Tais grupos amino livres podem ser submetidos à reações de aminação redutiva ou reações de alquilação para fornecer aminas substituídas.
[0725] O Esquema 8 abaixo representa a síntese geral de 2-monoalquilamino e 2-dialquilamino-3,6-dissubstituído-isonicotinamidas, em que o substituinte 3 corresponde a R12 e o 6-substituinte corresponde a R6. Na Etapa 1, o substituinte 3 pode ser introduzido pelo método descrito por Epsztain J. et al. Tetrahedron, 1991, v. 47, 1697 - 16708, através de metalação de 2-cloro-isonicotinanilida com n-butillítio, seguido por captura com um alquiliodeto, tal como metiliodeto ou aldeído ou outro grupo eletrofílico.
[0726] Esquema 8
[0727] Em casos onde o reagente de captura fornece um substituinte com um grupo funcional, este grupo pode ser mascarado ou convertido em um outro grupo funcional compatível com as etapas químicas subsequentes. Na Etapa 2, a hidrólise de anilida amida sob condições ácidas padrão pode ser conduzida, seguido por síntese de éster metílico sob condições padrão, por exemplo, conforme mostrado com iodeto de metila e base, fornece isonicotinatos de metila 2-cloro-3-substituídos correspondentes. Na Etapa 4, um grupo alquilamino pode ser introduzido por reação de ligação de Buchwald de uma R7NH2 monoalquilamina com os isonicotinatos de metila 2-cloro-3-substituídos. Esta reação é bem sustentada por diversos sistemas de 2-clo- ropiridina na literatura química. Em uma Etapa 5 opcional para compostos de dialqui- lamino, grupos R8 podem ser introduzidos por aminação redutiva com R8-cetona ou R8-aldeído na presença de um agente redutor apropriado, tal como cianoboro-hidreto de sódio, e ácido catalítico, tal como ácido acético, em um solvente apropriado, tal como metanol. Alternativamente, uma variedade de grupos R8 pode ser introduzida por alquilação usando R8-LG, onde LG é um grupo de partida, tal como iodo, na presença de uma base suave, tal como carbonato de césio, em um solvente polar apropriado, tal como acetonitrila, em uma temperatura apropriada, tal como 80 oC. Na Etapa 6, a oxidação ao N-óxido, seguido por cloração com oxicloreto de fósforo, fornece isonicotinatos de metila 6-cloro-2-mono ou dialquilamino-3-substituídos. Na Etapa 7, a porção éster pode ser hidrolisada no ácido correspondente usando uma base adequada, tal como hidróxido de sódio, em um solvente polar, tal como etanol. Na Etapa 8, o ácido pode ser submetido à uma reação de ligação amida padrão, em seguida, a 3-(aminometil)-piridin-2-ona substituída apropriada seria adicionada juntamente com um reagente de ligação amida adequado, tal como PYBOP, em um solvente adequado, tal como DMSO para fornecer a amida desejada. Na Etapa 9, o grupo cloro pode ser opcionalmente convertido em grupos R6 alternativos através das reações de substituição adequadas em uma etapa final ou, alternativamente, antes da hidrólise de éster da Etapa 6. Exemplos de tais reações de substituição incluem reações de cianação e aminação diretamente ou mediadas com catalisadores de paládio. O substituinte R6 pode ser submetido às modificações adequadas subsequentes para fornecer um substituinte R6 alternativo. Uma amostragem representativa de tais modificações pode incluir hidrogenação (por exemplo, para saturar grupos insaturados), remoção do grupo de proteção, seguido por reações de ligação amida adicionais, reações de aminação redutiva ou reações de alquilação. Dependendo da natureza do substituinte R7, outras etapas de modificação química podem ser utilizadas para converter o substituinte R7 em um substituinte R7 alternativo. Por exemplo, um grupo amino protegido contido dentro de R7 pode ser submetido à reação de desproteção (por exemplo, clivagem do grupo Boc) para fornecer grupos amino livres. Tais grupos amino livres podem ser submetidos à reações de aminação redutiva ou reações de alquilação para fornecer aminas substituídas.
[0728] Esquema 9
[0729] O Esquema 9 representa uma síntese de análogos de benzeno em que Z é um grupo sulfeto, sulfóxido ou sulfona após uma via geral que utiliza química bem estabelecida. Partindo com um ácido benzoico substituído, tal como ácido 5-cloro-2- metilbenzoico, a nitração usando condições padrão, tais como tratamento com H2SO4 conc. e HNO3 conc. pode fornecer o análogo de nitro. A esterificação do ácido pode ser obtida usando um agente alquilante, tal como iodeto de metila, na presença de uma base, tal como carbonato de sódio, em um solvente polar, tal como DMF. O grupo nitro pode ser reduzido usando condições, tais ferro e cloreto de amônio em um solvente prótico, tal como etanol, com aquecimento até uma temperatura, tal como 80 °C. A anilina resultante pode ser convertida em um brometo usando uma reação de Sandmeyer tal tratamento com CuBr2 e nitrito de t-butila em um solvente, tal como acetonitrila. Uma ligação catalisada por paládio de um tiol com o brometo pode ser obtida usando uma fonte de paládio, tal como Pd(OAc)2 com um ligante, tal como Xanthphos na presença de uma base, tal como N,N-di-isopropil etilamina em um solvente, tal como 1,4-dioxano aquecendo opcionalmente até uma temperatura, tal como 100 °C. O éster pode ser hidrolisado com uma base aquosa, tal como NaOH em água. O ácido resultante pode ser ligado à 3-(aminometil)-piridin-2-ona substituída apropriada (por exemplo, 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona, conforme representado no Esquema 9, usando condições de ligação aminoácido padrão, tais como PyBOP em DMSO. O tioéter resultante pode ser oxidado ao sulfóxido ou sulfona correspondente através do uso dos equivalentes apropriados de um oxidante, tal como m-CPBA em um solvente, tal como DCM. O grupo cloro R6 pode ser substituído com um grupo R6 alternativo em uma Etapa 10 adicional ou depois da Etapa 5 ou antes da ligação amida. Exemplos de grupos R6 alternativos incluem substituintes que podem ser incorporados através do uso de ligações de paládio, tais como uma reação de Buchwald para fornecer grupos amina (por exemplo, morfolino). O substituinte R6 pode ser submetido às modificações adequadas subsequentes para fornecer um substituinte R6 alternativo. Uma amostragem representativa de tais modificações inclui remoção do grupo de proteção, seguido por reações de ligação amida adicionais, reações de ami- nação redutiva ou reações de alquilação.
[0730] Esquema 10
[0731] O Esquema 10 representa uma síntese de análogos de benzeno modificados em que Z é um grupo éter após uma via geral que utiliza química bem estabelecida. Partindo com uma anilina substituída, tal como 3-amino-5-cloro-2-metilben- zoato de metila, a anilina pode ser convertida em um fenol usando uma reação de Sandmeyer, tal como tratamento com solução de NaNO2 aquosa em um ácido aquoso, tal como H2SO4 a 50 %. O fenol pode ser alquilado usando um agente alqui- lante, tal como 4-metilbenzenossulfonato de tetra-hidro-2H-pirano-4-ila na presença de uma base apropriada, tal como carbonato de césio, em como solvente polar, tal como DMF, aquecendo opcionalmente até uma temperatura, tal como 80 °C. O éster pode ser hidrolisado com uma base aquosa, tal como NaOH em água. O ácido resultante pode ser ligado à 3-(aminometil)-piridin-2-ona substituída apropriada usando condições de ligação aminoácido padrão, tais como PyBOP em DMSO. O grupo cloro R6 pode ser substituído com um grupo R6 alternativo em um adicional depois da Etapa 5 ou antes da ligação amida. Exemplos de grupos R6 alternativos incluem substituin- tes que podem ser incorporados através do uso de ligações de paládio, tais como uma reação de Buchwald para fornecer grupos amina (por exemplo, morfolino). O substi- tuinte R6 pode ser submetido às modificações adequadas subsequentes para fornecer um substituinte R6 alternativo. Uma amostragem representativa de tais modificações inclui remoção do grupo de proteção, seguido por reações de ligação amida adicionais, reações de aminação redutiva ou alquilação.
[0732] Uma pessoa de habilidade comum na técnica reconhecerá que nos esquemas acima a ordem de muitas das etapas é permutável.
[0733] Métodos de Tratamento
[0734] Os compostos da presente invenção inibem a atividade de histona me- tiltransferase de EZH2 ou um mutante da mesma e, consequentemente, a presente invenção também fornece métodos para tratar condições e doenças, o curso das quais pode ser influenciado pela modulação do estado de metilação de histonas ou outras proteínas, em que o dito estado de metilação é mediado, pelo menos em parte, pela atividade de EZH2. Em um aspecto da invenção, certos compostos divulgados neste relatório são candidatos para tratar ou prevenir certas condições e doenças. A modulação do estado de metilação de histonas, por sua vez, pode influenciar o nível de expressão de genes alvo ativados pela metilação, e/ou genes alvo suprimidos pela metilação. O método inclui administrar a um paciente em necessidade de tal tratamento, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo, sol- vato ou estereoisômero do mesmo.
[0735] O transtorno em que a metilação da proteína mediada por EZH2 desempenha um papel pode ser câncer ou uma condição pré-cancerosa. A presente invenção ainda fornece o uso de um composto da presente invenção, ou um sal far- maceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo no tratamento de câncer ou pré-câncer, o curso do qual pode ser influenciado pela modulação de metilação da proteína mediada por EZH2, ou, para a preparação de um medicamento útil para o tratamento de tal câncer ou pré-câncer. Cânceres exemplares que podem ser tratados incluem linfomas, incluindo linfoma não Hodgkin, linfoma foli- cular (FL) e linfoma difuso de grandes células B (DLBCL); melanoma; e leucemia,incluindo CML. A condição pré-cancerosa exemplar inclui síndrome mielodisplásica (MDS; anteriormente conhecida como pré-leucemia).
[0736] A presente invenção também fornece métodos para proteger contra um transtorno em que metilação da proteína mediada por EZH2 desempenha um papel em um paciente em necessidade dos mesmos através da administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de composto da presente invenção, ou um sal farma- ceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, a um paciente em necessidade de tal tratamento. O transtorno pode ser câncer, por exemplo, câncer em que a metilação da proteína mediada por EZH2 desempenha um papel. A presente invenção também fornece o uso do composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo, solvato, ou estereoisômero do mesmo, para a preparação de um medicamento útil para a pre-venção de um transtorno celular proliferativo associado, pelo menos em parte, com metilação da proteína mediada por EZH2.
[0737] Os compostos desta invenção podem ser usados para modular a me- tilação da proteína (por exemplo, histona), por exemplo, para modular a atividade da enzima histona metiltransferase ou histona demetilase. Pelo menos alguns dos compostos da invenção podem ser usados in vivo ou in vitro para modular a metilação da proteína. A metilação da histona foi relatada estar envolvida na expressão anormal de certos genes em cânceres, e no silenciamento de genes neuronais em células não neuronais. Pelo menos alguns compostos descritos neste relatório são candidatos adequados para tratar estas doenças, isto é, diminuir a metilação ou restaurar a me- tilação em aproximadamente seu nível em células normais de contraparte.
[0738] Os compostos que são moduladores de metilação podem ser usados para modular a proliferação celular. Por exemplo, em alguns casos, a proliferação excessiva pode ser reduzida com agentes que diminuem a metilação, ao passo que a proliferação insuficiente pode ser estimulada com agentes que aumentam a metilação. Consequentemente, as doenças que podem ser tratadas pelos compostos da invenção podem incluir doenças hiperproliferativas, tais como crescimento celular benigno e crescimento celular maligno.
[0739] Conforme usado neste relatório, um “paciente em necessidade do mesmo” é um paciente tendo um transtorno em que a metilação da proteína mediada por EZH2 desempenha um papel, ou um paciente tendo um risco aumentado de desenvolver tal transtorno em relação à população em geral. Um paciente em necessidade do mesmo pode ter uma condição pré-cancerosa. Preferivelmente, um paciente em necessidade do mesmo tem câncer. Um “paciente” inclui um mamífero. O mamífero pode ser, por exemplo, um ser humano ou mamífero não humano apropriado, tal como primata, camundongo, rato, cão, gato, vaca, cavalo, cabra, camelo, ovelha ou um porco. O paciente também pode ser um pássaro ou qualquer ave. Em uma modalidade, o mamífero é um ser humano.
[0740] Conforme usado neste relatório, o termo “transtorno celular prolifera- tivo” se refere às condições em que o crescimento não regulado ou anormal, ou ambos, de células pode levar ao desenvolvimento de uma condição ou doença indese- jada, que pode ser ou não cancerosa. Transtornos celulares proliferativos exemplares que podem ser tratados com os compostos da invenção abrangem uma variedade de condições em que a divisão celular é desregulada. Os transtornos celulares prolifera- tivos exemplares incluem, mas não são limitados a, neoplasmas, tumores benignos, tumores malignos, condições pré-cancerosas, tumores in situ, tumores encapsulados, tumores metastáticos, tumores líquidos, tumores sólidos, tumores imunológicos, tumores hematológicos, cânceres, carcinomas, leucemias, linfomas, sarcomas e células que se dividem rapidamente. O termo “célula que se divide rapidamente”, conforme usado neste relatório, é definido como qualquer célula que se divide em uma taxa que excede ou é maior do que o que é esperado ou observado entre células vizinhas ou justapostas no mesmo tecido. Um transtorno celular proliferativo inclui um pré-câncer ou uma condição pré-cancerosa. Um transtorno celular proliferativo inclui câncer. Os métodos e usos fornecidos neste relatório podem ser usado para tratar ou aliviar um sintoma de câncer ou para identificar candidatos adequados para tais propósitos. O termo “câncer” inclui tumores sólidos, assim como tumores hematológicos e/ou malignidades. Uma “célula de pré-câncer” ou “célula pré-cancerosa” é uma célula que manifesta um transtorno celular proliferativo que é um pré-câncer ou uma condição pré- cancerosa. Um “célula de câncer” ou “célula cancerosa” é uma célula que manifesta um transtorno celular proliferativo que é um câncer. Quaisquer meios reproduzíveis de medição podem ser usados para identificar células de câncer ou células pré-cancerosas. Células de câncer ou células pré-cancerosas podem ser identificadas por tipificação ou graduação histológica de uma amostra de tecido (por exemplo, uma amostra de biópsia). Células de câncer ou células pré-cancerosas podem ser identificadas através do uso de marcadores moleculares apropriados.
[0741] Condições não cancerosas exemplares ou transtornos que podem ser tratados usando um ou mais compostos da presente invenção incluem, mas não são limitados a, artrite reumatoide; inflamação; doença autoimune; condições linfoprolife- rativas; acromegalia; espondilite reumatoide; osteoartrite; gota, outras condições artríticas; sepsia; choque séptico; choque endotóxico; sepsia gram-negativa; síndrome do choque tóxico; asma; síndrome da angústia respiratória do adulto; doença pulmonar obstrutiva crônica; inflamação pulmonar crônica; doença inflamatória intestinal; doença de Crohn; psoríase; eczema; colite ulcerativa; fibrose pancreática; fibrose hepática; doença renal aguda e crônica; síndrome do intestino irritável; pirese; restenose; malária cerebral; acidente vascular cerebral e lesão isquêmica; trauma neural; doença de Alzheimer; doença de Huntington; doença de Parkinson; dor aguda e crônica; rinite alérgica; conjuntivite alérgica; insuficiência cardíaca crônica; síndrome coronária aguda; caquexia; malária; hanseníase; leishmaniose; doença de Lyme; síndrome de Reiter; sinovite aguda; degeneração muscular, bursite; tendinite; tenossinovite; rupturas herniadas ou síndrome do disco intervertebral deslocado; osteopetrose; trombose; restenose; silicose; sarcose pulmonar; doenças de reabsorsão óssea, tais como osteoporose; reação enxerto versus hospedeiro; Esclerose múltipla; lúpus; fibromial- gia; AIDS e outras doenças virais, tais como Herpes Zoster, Herpes Simples I ou II, vírus da influenza e citomegalovírus; e diabetes mellitus.
[0742] Cânceres exemplares que podem ser tratados usando um ou mais compostos da presente invenção incluem, mas não são limitados a, carcinoma adrenocortical, cânceres relacionados à AIDS, linfoma relacionado à AIDS, câncer anal, câncer anorretal, câncer do canal anal, câncer de apêndice, astrocitoma cerebelar da infância, astrocitoma cerebral da infância, carcinoma de células basais, câncer de pele (não melanoma), câncer biliar, câncer do tubo bílico extra-hepático, câncer intra-he- pático do tubo bílico, câncer de bexiga, câncer de bexiga urinária, câncer de osso e articulação, osteossarcoma e histiocitoma fibroso maligno, câncer cerebral, tumor cerebral, glioma de tronco cerebral, astrocitoma cerebelar, astrocitoma cerebral/glioma maligno, ependimoma, meduloblastoma, tumores neuroectodérmicos primitivos su- pratentoriais, glioma visual do caminho e hipotalâmico, câncer de mama, adeno- mas/carcinoides brônquicos, tumor carcinoide, gastrointestinal, câncer do sistema nervoso, linfoma do sistema nervoso, câncer do sistema nervoso central, linfoma do sistema nervoso central, câncer cervical, cânceres da infância, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielógena crônica, transtornos mieloproliferativos crônicos, câncer de cólon, câncer colorretal, linfoma cutâneo de células T, neoplasma linfoide, micose fun- goide, Síndrome de Seziary, câncer do endométrio, câncer esofágico, tumor de células germinativas extracranianas, tumor de células germinativas extragonadais, câncer do tubo bílico extra-hepático, câncer de olho, melanoma intraocular, retinoblastoma, câncer da vesícula biliar, câncer gástrico (estômago), tumor carcinoide gastrointestinal, tumor estromal gastrointestinal (GIST), tumor de células germinativas, tumor de células germinativas ovarianas, tumor trofoblástico gestacional glioma, câncer de cabeça e pescoço, câncer hepatocelular (fígado), linfoma de Hodgkin, câncer hipofa- ríngeo, melanoma intraocular, câncer ocular, tumores das ilhotas (pâncreas endó- crino), sarcoma de Kaposi, câncer renal, câncer renal, câncer de laringe, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielógena crônica, leucemia de células pilosas, câncer de lábio e cavidade oral, câncer de fígado, câncer de pulmão, câncer de pulmão de células não pequenas, câncer de pulmão de células pequenas, linfoma relacionado à AIDS, linfoma não Hodgkin, linfoma do sistema nervoso central primário, macroglobulinemia de Waldenstram, me- duloblastoma, melanoma, melanoma intraocular (olho), carcinoma de células de merkel, mesotelioma maligno, mesotelioma, câncer de pescoço escamoso metastático, câncer de boca, câncer da língua, síndrome das neoplasias endócrinas múltiplas, micose fungoide, síndromes mielodisplásicas, doenças mielodisplásicas/mieloprolifera- tivas, leucemia mielógena crônica, leucemia mieloide aguda, mieloma múltiplo, transtornos mieloproliferativos crônicos, câncer nasofaríngeo, neuroblastoma, câncer oral, câncer da cavidade oral, câncer orofaríngeo, câncer ovariano, câncer epitelial ovari- ano, tumor de ovário de baixo potencial maligno, câncer pancreático, câncer de células das ilhotas pancreáticas, câncer do seio paranasal e cavidade nasal, câncer da paratireoide, câncer de pênis, câncer de faringe, feocromocitoma, pineoblastoma e tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriais, tumor pituitário, neoplasma de células plasmáticas/mieloma múltiplo, blastoma pleuropulmonar, câncer de próstata, câncer de reto, pelve renal e ureter, câncer celular transicional, retinoblastoma, rab- domiossarcoma, câncer de glândulas salivares, família ewing de tumores de sarcoma, sarcoma de Kaposi, sarcoma de tecidos moles, câncer uterino, sarcoma uterino, câncer de pele (não melanoma), câncer de pele (melanoma), carcinoma de células de merkel da pele, câncer de intestino delgado, sarcoma de tecidos moles, carcinoma de células escamosas, câncer de estômago (gástrico), tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriais, câncer testicular, câncer de garganta, timoma, timoma e carcinoma tímico, câncer da tireoide, câncer de células transicionais de pelve renal e ureter e outros órgãos urinários, tumor trofoblástico gestacional, câncer de uretra, câncer uterino endometrial, sarcoma uterino, câncer de corpo uterino, câncer vaginal, câncer vulvar e Tumor de Wilm.
[0743] Um “transtorno celular proliferativo do sistema hematológico” é um transtorno celular proliferativo que envolve células do sistema hematológico. Um transtorno celular proliferativo do sistema hematológico pode incluir linfoma, leucemia, neoplasmas mieloides, neoplasmas de mastócitos, mielodisplasia, gamopatia monoclonal benigna, granulomatose linfomatoide, papulose linfomatoide, policitemia vera, leucemia mielocítica crônica, metaplasia mieloide agnogênica e trombocitemia essencial. Um transtorno celular proliferativo do sistema hematológico pode incluir hiperpla- sia, displasia e metaplasia de células do sistema hematológico. Em um aspecto, as composições da presente invenção podem ser usadas para tratar um câncer selecionado a partir do grupo que consiste de um câncer hematológico da presente invenção ou um transtorno celular proliferativo hematológico da presente invenção, ou usadas para identificar candidatos adequados para tais propósitos. Um câncer hematológico da presente invenção pode incluir mieloma múltiplo, linfoma (incluindo linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfomas da infância e linfomas de origem linfocítica e cutânea), leucemia (incluindo leucemia da infância, tricoleucemia, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielocítica aguda, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielocítica crônica, leucemia mielógena crônica e leucemia de mastócitos), neoplasmas mieloi- des e neoplasmas de mastócitos.
[0744] Um “transtorno celular proliferativo do pulmão” é um transtorno celular proliferativo que envolve células do pulmão. Os transtornos celulares proliferativos do pulmão podem incluir todas as formas de transtornos celulares proliferativos que afetam as células do pulmão. Transtornos celulares proliferativos do pulmão podem incluir câncer de pulmão, uma condição de pré-câncer ou pré-cancerosa do pulmão, crescimentos benignos ou lesões do pulmão, e crescimentos malignos ou lesões do pulmão, e lesões metastáticas no tecido e órgãos no corpo, exceto no pulmão. Em um aspecto, as composições da presente invenção podem ser usadas para tratar câncer de pulmão ou transtornos celulares proliferativos do pulmão, ou usadas para identificar candidatos adequados para tais propósitos. Câncer de pulmão pode incluir neoplasmas malignos de pulmão, carcinoma in situ, carcinoides de tumor típicos e carcinoides de tumor atípicos. Câncer de pulmão pode incluir câncer de pulmão de células pequenas (“SCLC”), câncer de pulmão de células não pequenas (“NSCLC”), carcinoma de células escamosas, adenocarcinoma, carcinoma de células pequenas, carcinoma de células grandes, adenocarcinoma de células escamosas e mesotelioma. Câncer de pulmão pode incluir “carcinoma com mácula”, carcinoma bronquioalveolar, carcinoma de células gigantes, carcinoma de células fusiformes e carcinoma neuroendócrino de grandes células. Câncer de pulmão pode incluir neoplasmas de pulmão tendo heterogeneidade histológica e ultraestrutural (por exemplo, tipos celulares mistos).
[0745] Os transtornos celulares proliferativos do pulmão podem incluir todas as formas de transtornos celulares proliferativos que afetam as células do pulmão. Transtornos celulares proliferativos do pulmão podem incluir câncer de pulmão, condições pré-cancerosas do pulmão. Transtornos celulares proliferativos do pulmão podem incluir hiperplasia, metaplasia e displasia do pulmão. Transtornos celulares pro- liferativos do pulmão podem incluir hiperplasia induzida por asbesto, metaplasia escamosa e metaplasia mesotelial reativa benigna. Transtornos celulares proliferativos do pulmão podem incluir a substituição de epitélio colunar com epitélio escamoso estratificado e displasia mucosal. Indivíduos expostos a agentes ambientais prejudiciais inalados, tais como fumo e asbesto, podem estar em risco aumentado quanto ao de-senvolvimento de transtornos celulares proliferativos do pulmão. Doenças pulmonares anteriores que podem predispor indivíduos ao desenvolvimento de transtornos celulares proliferativos do pulmão podem incluir doença pulmonar intersticial crônica, doença pulmonar necrosante, esclerodermia, doença reumatoide, sarcoidose, pneumonite intersticial, tuberculose, pneumonias repetidas, fibrose pulmonar idiopática, granulomata, asbestose, alveolite fibrosante e doença de Hodgkin.
[0746] Um “transtorno celular proliferativo do cólon” é um transtorno celular proliferativo que envolve células do cólon. Em um aspecto, as composições da presente invenção podem ser usadas para tratar câncer de cólon ou transtornos celulares proliferativos do cólon, ou usadas para identificar candidatos adequados para tais propósitos. Câncer de cólon pode incluir todas as formas de câncer do cólon. Câncer de cólon pode incluir cânceres de cólon esporádicos e hereditários. Câncer de cólon pode incluir neoplasmas de cólon malignos, carcinoma in situ, carcinoides de tumor típicos e carcinoides de tumor atípicos. Câncer de cólon pode incluir adenocarcinoma, carcinoma de células escamosas, e adenocarcinoma de células escamosas. Câncer de cólon pode estar associado com uma síndrome hereditária selecionada a partir do grupo que consiste de câncer colorretal não poliposo hereditário, polipose adenoma- tosa familiar, síndrome de Gardner, Peutz-Jeghers síndrome, síndrome de Turcot e polipose juvenil. Câncer de cólon pode ser causado por uma síndrome hereditária selecionada a partir do grupo que consiste de câncer colorretal não poliposo hereditário, polipose adenomatosa familiar, síndrome de Gardner, Peutz-Jeghers síndrome, sín- drome de Turcot e polipose juvenil.
[0747] Transtornos celulares proliferativos do cólon podem incluir todas as formas de transtornos celulares proliferativos que afetam células do cólon. Transtornos celulares proliferativos do cólon podem incluir câncer de cólon, condições pré-cancerosas do cólon, pólipos adenomatosos do cólon e lesões metacrônicas do cólon. Um transtorno celular proliferativo do cólon pode incluir adenoma. Transtornos celulares proliferativos do cólon podem ser caracterizados por hiperplasia, metaplasia e displasia do cólon. Doenças do cólon anteriores que podem predispor indivíduos ao desenvolvimento de transtornos celulares proliferativos do cólon podem incluir câncer de cólon anterior. Doença corrente que pode predispor indivíduos ao desenvolvimento de transtornos celulares proliferativos do cólon pode incluir doença de Crohn e colite ul- cerativa. Um transtorno celular proliferativo do cólon pode estar associado com uma mutação em um gene selecionado a partir do grupo que consiste de p53, ras, FAP e DCC. Um indivíduo pode ter um risco elevado de desenvolvimento de um transtorno celular proliferativo do cólon devido à presença de uma mutação em um gene selecionado a partir do grupo que consiste de p53, ras, FAP e DCC.
[0748] Um “transtorno celular proliferativo do pâncreas” é um transtorno celular proliferativo que envolve células do pâncreas. Transtornos celulares proliferativos do pâncreas podem incluir todas as formas de transtornos celulares proliferativos que afetam células pancreáticas. Transtornos celulares proliferativos do pâncreas podem incluir câncer de pâncreas, uma condição de pré-câncer ou pré-cancerosa do pâncreas, hiperplasia do pâncreas e displasia do pâncreas, crescimentos benignos ou lesões do pâncreas e crescimentos malignos ou lesões do pâncreas, e lesões metas- táticas no tecido e órgãos no corpo, exceto no pâncreas. Câncer pancreático inclui todas as formas de câncer do pâncreas. Câncer pancreático pode incluir adenocarcinoma ductal, carcinoma adenoescamoso, carcinoma de células gigantes pleomórfi- cas, adenocarcinoma mucinoso, carcinoma de células gigantes do tipo osteoclasto, cistoadenocarcinoma mucinoso, carcinoma acinar, carcinoma de células grandes não classificado, carcinoma de células pequenas, pancreatoblastoma, neoplasma papilar, cistadenoma mucinoso, neoplasma cístico papilar e cistadenoma seroso. Câncer pan- creático também pode incluir neoplasmas pancreáticos tendo heterogeneidade histológica e ultraestrutural (por exemplo, tipos celulares mistos).
[0749] Um “transtorno celular proliferativo da próstata” é um transtorno celular proliferativo que envolve as células da próstata. Transtornos celulares proliferativos da próstata podem incluir todas as formas de transtornos celulares proliferativos que afetam células da próstata. Transtornos celulares proliferativos da próstata podem incluir câncer de próstata, uma condição de pré-câncer ou pré-cancerosa da próstata, crescimentos benignos ou lesões da próstata, e crescimentos malignos ou lesões da próstata, e lesões metastáticas no tecido e órgãos no corpo, exceto na próstata. Transtornos celulares proliferativos da próstata podem incluir hiperplasia, metaplasia e displasia da próstata.
[0750] Um “transtorno celular proliferativo da pele” é um transtorno celular pro- liferativo que envolve células da pele. Transtornos celulares proliferativos da pele podem incluir todas as formas de transtornos celulares proliferativos que afetam as células da pele. Transtornos celulares proliferativos da pele podem incluir uma condição de pré-câncer ou pré-cancerosa da pele, crescimentos benignos ou lesões da pele, melanoma, melanoma maligno e outros crescimentos malignos ou lesões da pele, e lesões metastáticas no tecido e órgãos no corpo, exceto na pele. Transtornos celulares proliferativos da pele podem incluir hiperplasia, metaplasia e displasia da pele.
[0751] Um “transtorno celular proliferativo do ovário” é um transtorno celular proliferativo que envolve células do ovário. Transtornos celulares proliferativos do ovário podem incluir todas as formas de transtornos celulares proliferativos que afetam células do ovário. Transtornos celulares proliferativos do ovário podem incluir uma condição de pré-câncer ou pré-cancerosa do ovário, crescimentos benignos ou lesões do ovário, câncer ovariano, crescimentos malignos ou lesões do ovário e lesões me- tastáticas no tecido e órgãos no corpo, exceto no ovário. Transtornos celulares proli- ferativos da pele podem incluir hiperplasia, metaplasia e displasia de células do ovário.
[0752] Um “transtorno celular proliferativo da mama” é um transtorno celular proliferativo que envolve células da mama. Transtornos celulares proliferativos da mama podem incluir todas as formas de transtornos celulares proliferativos que afetam células da mama. Transtornos celulares proliferativos da mama podem incluir câncer de mama, uma condição de pré-câncer ou pré-cancerosa da mama, crescimentos benignos ou lesões da mama, e crescimentos malignos ou lesões da mama, e lesões metastáticas no tecido e órgãos no corpo, exceto na mama. Transtornos celulares proliferativos da mama podem incluir hiperplasia, metaplasia e displasia da mama.
[0753] Um transtorno celular proliferativo da mama pode ser uma condição pré-cancerosa da mama. As composições da presente invenção podem ser usadas para tratar uma condição pré-cancerosa da mama. Uma condição pré-cancerosa da mama pode incluir hiperplasia da mama atípica, carcinoma ductal in situ (DCIS), carcinoma intraductal, carcinoma lobular in situ (LCIS), neoplasia lobular e crescimento ou lesão estágio 0 ou grau 0 da mama (por exemplo, câncer de mama estágio 0 ou grau 0, ou carcinoma in situ). Uma condição pré-cancerosa da mama pode ser graduada de acordo com o esquema de classificação TNM, conforme aceito pelo American Joint Committee on Cancer (AJCC), onde o tumor primário (T) foi avaliado como um estágio de T0 ou Tis; e onde os linfonodos regionais (N) foram avaliados como um estágio de N0; e onde a metástase distante (M) foi avaliada como um estágio de M0.
[0754] O transtorno celular proliferativo da mama pode ser câncer de mama. Em um aspecto, as composições da presente invenção podem ser usadas para tratar câncer de mama, ou usadas para identificar candidatos adequados para tais propósitos. Câncer de mama pode incluir todas as formas de câncer da mama. Câncer de mama inclui todas as formas de câncer da mama. Câncer de mama pode incluir cânceres de mama epiteliais primários. Câncer de mama pode incluir cânceres em que a mama está envolvida por outros tumores, tais como linfoma, sarcoma ou melanoma. Câncer de mama pode incluir carcinoma da mama, carcinoma ductal da mama, carcinoma lobular da mama, carcinoma não diferenciado da mama, cistossarcoma filoide da mama, angiossarcoma da mama, e linfoma primário da mama. Câncer de mama pode incluir câncer de mama Estágio I, II, IIIA, IIIB, IIIC e IV. Carcinoma ductal da mama pode incluir carcinoma invasivo, carcinoma invasivo in situ com componente intraductal predominante, câncer de mama inflamatório e um carcinoma ductal da mama com um tipo histológico selecionado a partir do grupo que consiste de pústula, mucinoso (coloide), medular, medular com infiltrado linfocítico, papilar, fibroso e tubular. Carcinoma lobular da mama pode incluir carcinoma invasivo lobular com componente in situ predominante, carcinoma invasivo lobular e carcinoma lobular infiltrante. Câncer de mama pode incluir doença de Paget, doença de Paget com carcinoma intraductal, e doença de Paget com carcinoma invasivo ductal. Câncer de mama pode incluir neoplasmas da mama tendo heterogeneidade histológica e ultraestrutural (por exemplo, tipos celulares mistos).
[0755] Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo, ou solvato do mesmo, pode ser usado para tratar câncer de mama, ou usado para identificar candidatos adequados para tais propósitos. Um câncer de mama que deve ser tratado pode incluir câncer de mama familiar. Um câncer de mama que deve ser tratado pode incluir câncer de mama esporádico. Um câncer de mama que deve ser tratado pode surgir em um paciente macho. Um câncer de mama que deve ser tratado pode surgir em uma paciente fêmea. Um câncer de mama que deve ser tratado pode surgir em uma paciente fêmea na pré- menopausa ou uma paciente fêmea na pós-menopausa. Um câncer de mama que deve ser tratado pode surgir em um paciente que apresenta ou é mais velho do que 30 anos de idade, ou um paciente mais novo do que 30 anos de idade. Um câncer de mama que deve ser tratado surgiu em um paciente que apresenta ou é mais velho do que 50 anos de idade ou um paciente mais novo do que 50 anos de idade. Um câncer de mama que deve ser tratado pode surgir em um paciente que apresenta ou é mais velho do que 70 anos de idade ou um paciente mais novo do que 70 anos de idade.
[0756] Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado para identificar uma mutação familiar ou espontânea em BRCA1, BRCA2 ou p53. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado por apresentar amplificação do gene HER2/neu, conforme superexpressa HER2/neu, ou por apresentar um nível baixo, intermediário ou alto de expressão de HER2/neu. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado para um marcador selecionado a partir do grupo que consiste de receptor de estrogênio (ER), receptor de progesterona (PR), receptor de fator de crescimento epidérmico humano-2, Ki-67, CA15-3, CA 27-29 e c-Met. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado como ER-desconhecido, ER-rico ou ER-deficiente. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado como ER-negativo ou ER-positivo. A tipificação de ER de um câncer de mama pode ser realizada por quaisquer meios reproduzíveis. A tipificação de ER de um câncer de mama pode ser realizada, conforme apresentado em Onkologie 27: 175 - 179 (2004). Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado como PR- desconhecido, PR-rico ou PR-deficiente. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado como PR-negativo ou PR-positivo. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado como receptor positivo ou receptor negativo. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado por apresentar associado com níveis sanguíneos elevados de CA 15-3 ou CA 27-29, ou ambos.
[0757] Um câncer de mama que deve ser tratado pode incluir um tumor da mama localizado. Um câncer de mama que deve ser tratado pode incluir um tumor da mama que está associado com uma biópsia de linfonodo sentinela negativo (SLN). Um câncer de mama que deve ser tratado pode incluir um tumor da mama que está associado com uma biópsia de linfonodo sentinela positivo (SLN). Um câncer de mama que deve ser tratado pode incluir um tumor da mama que está associado com um ou mais linfonodos axilares positivos, onde os linfonodos axilares foram graduados por qualquer método aplicável. Um câncer de mama que deve ser tratado pode incluir um tumor da mama que foi classificado por apresentar estado nodal negativo (por exemplo, nodo-negativo) ou estado nodal positivo (por exemplo, nodo-positivo). Um câncer de mama que deve ser tratado pode incluir um tumor da mama que apresentou metástase para outras localizações no corpo. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado por apresentar metástase a uma localização selecionada a partir do grupo que consiste de osso, pulmão, fígado ou cérebro. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser classificado, de acordo com uma característica selecionada a partir do grupo que consiste de metastática, localizada, regional, local- regional, localmente avançada, distante, multicêntrica, bilateral, ipsilateral, contralateral, recém diagnosticada, recorrente e inoperável.
[0758] Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode ser usado para tratar ou prevenir um transtorno celular proliferativo da mama, ou para tratar ou prevenir câncer de mama, em um paciente tendo um risco aumentado de desenvolver câncer de mama em relação à população em geral, ou usado para identificar candidatos adequados para tais propósitos. Um paciente com um risco aumentado de desenvolver câncer de mama em relação à população em geral é uma paciente fêmea com um histórico familiar ou histórico pessoal de câncer de mama. Um paciente com um risco aumentado de desenvolver câncer de mama em relação à população em geral é uma paciente fêmea tendo uma linhagem germinativa ou mutação espontânea em BRCA1 ou BRCA2, ou ambos. Um paciente com um risco aumentado de desenvolver câncer de mama em relação à população em geral é uma paciente fêmea com um histórico familiar de câncer de mama e uma linhagem germinativa ou mutação espontânea em BRCA1 ou BRCA2, ou ambos. Um paciente com um risco aumentado de desenvolver câncer de mama em relação à população em geral é uma fêmea que apresenta mais do que 30 anos de idade, mais do que 40 anos de idade, mais do que 50 anos de idade, mais do que 60 anos de idade, mais do que 70 anos de idade, mais do que 80 anos de idade ou mais do que 90 anos de idade. Um paciente com um risco aumentado de desenvolver câncer de mama em relação à população em geral é um paciente com hiperplasia da mama atípica, carcinoma ductal in situ (DCIS), carcinoma intraductal, carcinoma lobular in situ (LCIS), neoplasia lobular ou um crescimento ou lesão da mama estágio 0 (por exemplo, câncer de mama estágio 0 ou grau 0, ou carcinoma in situ).
[0759] Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser histologicamente classificado, de acordo com o sistema de Scarff-Bloom-Ricoardson, em que um tumor da mama foi avaliado como um escore de contagem de mitose de 1, 2 ou 3; um escore de pleiomorfismo nuclear de 1, 2 ou 3; um escore de formação de túbulo de 1, 2 ou 3; e um escore de Scarff-Bloom-Ricoardson total entre 3 e 9. Um câncer de mama que deve ser tratado pode ser avaliado como um grau de tumor de acordo com o International Consensus Panel on the Treatment of Breast Cancer selecionado a partir do grupo que consiste de grau 1, grau 1 a 2, grau 2, grau 2 a 3 ou grau 3.
[0760] Um câncer que deve ser tratado pode ser graduado, de acordo com o sistema de classificação TNM do American Joint Committee on Cancer (AJCC), onde o tumor (T) foi avaliado como um estágio de TX, T1, T1mic, T1a, T1b, T1c, T2, T3, T4, T4a, T4b, T4c ou T4d; e onde os linfonodos regionais (N) foram avaliados como um estágio de NX, N0, N1, N2, N2a, N2b, N3, N3a, N3b ou N3c; e onde a metástase distante (M) pode ser avaliada como um estágio de MX, M0 ou M1. Um câncer que deve ser tratado pode ser graduado, de acordo com uma classificação do American Joint Committee on Cancer (AJCC) como Estágio I, Estágio IIA, Estágio IIB, Estágio IIIA, Estágio IIIB, Estágio IIIC ou Estágio IV. Um câncer que deve ser tratado pode ser avaliado como um grau, de acordo com uma classificação do AJCC como Grau GX (por exemplo, o grau não pode ser avaliado), Grau 1, Grau 2, Grau 3 ou Grau 4. Um câncer que deve ser tratado pode ser graduado, de acordo com uma classificação patológica do AJCC (pN) de pNX, pN0, PN0 (I-), PN0 (I+), PN0 (mol-), PN0 (mol+), PN1, PN1(mi), PN1a, PN1b, PN1c, pN2, pN2a, pN2b, pN3, pN3a, pN3b ou pN3c.
[0761] Um câncer que deve ser tratado pode incluir um tumor que foi determinado apresentar menos do que ou igual a cerca de 2 centímetros em diâmetro. Um câncer que deve ser tratado pode incluir um tumor que foi determinado apresentar de cerca de 2 a cerca de 5 centímetros em diâmetro. Um câncer que deve ser tratado pode incluir um tumor que foi determinado apresentar mais do que ou igual a cerca de 3 centímetros em diâmetro. Um câncer que deve ser tratado pode incluir um tumor que foi determinado ser maior do que 5 centímetros em diâmetro. Um câncer que deve ser tratado pode ser classificado por aparência microscópica como bem diferenciado, moderadamente diferenciado, deficientemente diferenciado ou não diferenciado. Um câncer que deve ser tratado pode ser classificado por aparência microscópica com respeito à contagem de mitose (por exemplo, quantidade de divisão celular) ou pleio- morfismo nuclear (por exemplo, mudança nas células). Um câncer que deve ser tratado pode ser classificado por aparência microscópica como estando associado com áreas de necrose (por exemplo, áreas de células de morte ou degeneração). Um câncer que deve ser tratado pode ser classificado por apresentar um cariótipo anormal, tendo um número anormal de cromossomos, ou tendo um ou mais cromossomos que são anormais na aparência. Um câncer que deve ser tratado pode ser classificado por apresentar aneuploide, triploide, tetraploide ou por apresentar uma ploidia alterada. Um câncer que deve ser tratado pode ser classificado por apresentar uma transloca- ção cromossômica, ou uma deleção ou duplicação de um cromossomo total, ou uma região de deleção, duplicação ou amplificação de uma porção de um cromossomo.
[0762] Um câncer que deve ser tratado pode ser avaliado por citometria de DNA, citometria de fluxo ou citometria de imagem. Um câncer que deve ser tratado pode ser classificado por apresentar 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 % ou 90 % de células no estágio de síntese de divisão celular (por exemplo, na fase S de divisão celular). Um câncer que deve ser tratado pode ser classificado por apresentar uma baixa fração na fase S ou uma alta fração na fase S.
[0763] Conforme usado neste relatório, uma “célula normal” é uma célula que não pode ser classificada como parte de um “transtorno celular proliferativo”. Uma célula normal é desprovida de crescimento não regulado ou anormal, ou ambos, que pode levar ao desenvolvimento de uma condição ou doença indesejada. Preferivelmente, uma célula normal possui mecanismos de controle de ponto de verificação de ciclo celular que funcionam normalmente.
[0764] Conforme usado neste relatório, “contatar uma célula” se refere a uma condição em que um composto ou outra composição de matéria está em contato direto com uma célula, ou está perto o suficiente para induzir um efeito biológico desejado em uma célula.
[0765] Conforme usado neste relatório, “composto candidato” se refere a um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, que foi ou será testado em um ou mais ensaios biológicos in vitro ou in vivo, de modo a determinar se tal composto provavelmente induz uma resposta biológica ou médica desejada em uma célula, tecido, sistema, animal ou ser humano que está sendo estudado por um pesquisador ou clínico. Um composto candidato é um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuti- camente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo. A resposta biológica ou médica pode ser o tratamento de câncer. A resposta biológica ou médica pode ser o tratamento ou prevenção de um transtorno celular proliferativo. A resposta ou efeito biológico também pode incluir uma mudança na proliferação ou crescimento celular que ocorre in vitro ou em um modelo animal, assim como outras mudanças biológicas que são observáveis in vitro. Os ensaios biológicos in vitro ou in vivo podem incluir, mas não são limitados a, ensaios de atividade enzimática, ensaios de troca de mobilidade eletroforética, ensaios de gene repórter, ensaios de viabilidade celular in vitro e os ensaios descritos neste relatório.
[0766] Conforme usado neste relatório, “monoterapia” se refere à administração de um composto ativo ou terapêutico único a um paciente em necessidade do mesmo. Preferivelmente, a monoterapia envolverá a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ativo. Por exemplo, a monoterapia de câncer com o composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, análogo ou derivado do mesmo, a um paciente em necessidade de tratamento de câncer. A monoterapia pode ser contrastada com terapia de combinação, em que uma combinação de múltiplos compostos ativos é administrada, preferivelmente com cada componente da combinação presente em uma quantidade terapeuticamente eficaz. A monoterapia com um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode ser mais eficaz do que a terapia de combinação na indução de um efeito biológico desejado.
[0767] Conforme usado neste relatório, “tratamento” ou “tratar” descreve o gerenciamento e cuidado de um paciente para o propósito de combater uma doença, condição ou transtorno e inclui a administração de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, para aliviar os sintomas ou complicações de uma doença, condição ou transtorno, ou para eliminar a doença, condição ou transtorno. O termo “tratar” também pode incluir o tratamento de uma célula in vitro ou um modelo animal.
[0768] Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, também pode ser usado para prevenir uma doença, condição ou transtorno relevante, ou usado para identificar candidatos adequados para tais propósitos. Conforme usado neste relatório, “prevenção” ou “prevenir” descreve reduzir ou eliminar o início dos sintomas ou complicações de tal doença, condição ou transtorno.
[0769] Conforme usado neste relatório, o termo “aliviar” descreve um processo pelo qual a severidade de um sinal ou sintoma de um transtorno é diminuída. Com importância, um sinal ou sintoma pode ser aliviado sem ser eliminado. A administração de composições farmacêuticas da invenção pode levar à eliminação de um sinal ou sintoma, entretanto, a eliminação não é exigida. Dosagens eficazes devem ser esperadas diminuir a severidade de um sinal ou sintoma. Por exemplo, um sinal ou sintoma de um transtorno, tal como câncer, que pode ocorrer em múltiplas localizações, é aliviado se a severidade do câncer for diminuída dentro de pelo menos uma entre múltiplas localizações.
[0770] Conforme usado neste relatório, o termo “severidade” descreve o potencial de o câncer se transformar de um estado pré-canceroso, ou benigno, em um estado maligno. Alternativamente, ou além disso, a severidade descreve um estágio de câncer, por exemplo, de acordo com o sistema TNM (aceito pela International Union Against Cancer (UICC) e pelo American Joint Committee on Cancer (AJCC)) ou por outros métodos reconhecidos na técnica. O estágio do câncer se refere à extensão ou severidade do câncer, com base em fatores, tais como a localização do tumor primário, tamanho do tumor, número de tumores e envolvimento de linfonodos (propagação de câncer em linfonodos). Alternativamente, ou além disso, a severidade descreve o grau de tumor por métodos reconhecidos na técnica (veja, National Cancer Institute, www.cancer.gov). O grau do tumor é um sistema usado para classificar cé-lulas de câncer em termos de quanto anormais elas parecem sob um microscópio e quanto rapidamente o tumor provavelmente cresce e se espalha. Muitos fatores são considerados para determinar o grau do tumor, incluindo a estrutura e padrão de crescimento das células. Os fatores específicos usados para determinar o grau do tumor variam com cada tipo de câncer. A severidade também descreve um grau histológico, também chamado diferenciação, que se refere a quanto as células de tumor se assemelham às células normais do mesmo tipo de tecido (veja, National Cancer Institute, www.cancer.gov). Além disso, a severidade descreve um grau nuclear, que se refere ao tamanho e forma do núcleo nas células de tumor e à porcentagem de células de tumor que são divididas (veja, National Cancer Institute, www.cancer.gov).
[0771] A severidade também pode descrever o grau ao qual um tumor tem secretado fatores de crescimento, degradada a matriz extracelular, se torna vascularizado, perde adesão aos tecidos justapostos ou sofre metástase. Além disso, a severidade pode descrever o número de localizações às quais um tumor primário sofreu metástase. Finalmente, a severidade pode incluir a dificuldade de tratar tumores de tipos e localizações variados. Por exemplo, tumores inoperáveis, aqueles cânceres que têm maior acesso a múltiplos sistemas do corpo (tumores hematológicos e imunológicos), e aqueles que são mais resistentes aos tratamentos tradicionais são considerados mais severos. Nestas situações, prolongar a expectativa de vida do paciente e/ou reduzir a dor, diminuir a proporção de células cancerosas ou restringir as células a um sistema, e melhorar o estágio do câncer/grau do tumor/grau histoló- gico/grau nuclear são considerados aliviar um sinal ou sintoma do câncer.
[0772] Conforme usado neste relatório o termo “sintoma” é definido como uma indicação de doença, enfermidade, lesão ou alguma coisa que não está correta no corpo. Os sintomas são percebidos ou notados pelo indivíduo que experiencia o sintoma, mas podem não ser facilmente notados por outros. Outros são definidos como não profissionais de saúde.
[0773] Conforme usado neste relatório, o termo “sinal” também é definido como uma indicação de que alguma coisa não está correta no corpo. Não obstante, os sinais são definidos como coisas que podem ser observadas por um médico, enfermeiro ou outro profissional da saúde.
[0774] Câncer é um grupo de doenças que podem causar quase todo sinal ou sintoma. Os sinais e sintomas dependerão de onde o câncer está, do tamanho do câncer e de quanto ele afeta os órgãos ou estruturas vizinhos. Se um câncer se espalha (sofre metástase), então os sintomas podem aparecer em partes diferentes do corpo.
[0775] Conforme um câncer cresce, ele começa a empurrar os órgãos vizinhos, vasos sanguíneos e nervos. Esta pressão cria alguns dos sinais e sintomas de câncer. Se o câncer está em uma área crítica, tal como certas partes do cérebro, mesmo o menor tumor pode causar sintomas iniciais.
[0776] Algumas vezes, os cânceres iniciam em lugares onde eles não causam quaisquer sintomas até que o câncer se torne bastante grande. Cânceres de pâncreas, por exemplo, usualmente, não crescem tanto para que sejam sentidos na parte externa do corpo. Alguns cânceres pancreáticos não causam sintomas até que eles comecem a crescer em torno dos nervos vizinhos (isto causa uma dorsalgia). Outros crescem em torno do tubo bílico, que bloqueia o fluxo da bile e leva a um amarela- mento da pele conhecido como icterícia. Quando um câncer pancreático causa estes sinais ou sintomas, ele usualmente atingiu um estágio avançado.
[0777] Um câncer também pode causar sintomas, tais como febre, fadiga ou perda de peso. Isto ocorre porque as células de câncer usam muito fornecimento de energia do corpo ou liberam substâncias que mudam o metabolismo do corpo. Ou o câncer pode fazer com que o sistema imune reaja em maneiras que produzam estes sintomas.
[0778] Algumas vezes, as células de câncer liberam substâncias na corrente sanguínea que causam sintomas não usualmente pensados resultar a partir de cânceres. Por exemplo, alguns cânceres do pâncreas podem liberar substâncias que causam coágulos de sangue que se desenvolvem nas veias das pernas. Alguns cânceres de pulmão promovem substâncias do tipo hormônio que afetam os níveis de cálcio no sangue, afetando nervos e músculos e causando fraqueza e vertigem.
[0779] O câncer apresenta vários sinais ou sintomas gerais que ocorrem quando uma variedade de subtipos de células de câncer está presente. A maioria das pessoas com câncer perderá peso em algum momento com sua doença. Uma perda de peso inexplicável (involuntário) de 10 libras ou mais pode ser o primeiro sinal de câncer, particularmente cânceres do pâncreas, estômago, esôfago ou pulmão.
[0780] Febre é muito comum com câncer, mas é mais frequentemente observada na doença avançada. Quase todos os pacientes com câncer terão febre em algum momento, especialmente se o câncer ou seu tratamento afeta o sistema imune e torna mais difícil para o corpo combater a infecção. Menos frequentemente, a febre pode ser um sinal de câncer precoce, tais como com leucemia ou linfoma.
[0781] A fadiga pode ser um sintoma importante, conforme o câncer progride. Pode acontecer anteriormente, no entanto, em cânceres, tais como com leucemia, ou se o câncer é causador de uma perda avançada de sangue, como em alguns cânceres de cólon ou estômago.
[0782] A dor pode ser um sintoma precoce com alguns cânceres, tais como cânceres ósseos ou câncer testicular. Mas, na maioria das vezes, a dor é um sintoma de doença avançada.
[0783] Junto com cânceres da pele (veja a próxima seção), alguns cânceres internos podem causar sinais na pele que podem ser observados. Estas mudanças incluem a aparência da pele mais escura (hiperpigmentação), amarela (icterícia) ou vermelha (eritema); coceira; ou crescimento excessivo do cabelo.
[0784] Alternativamente, ou além disso, subtipos de câncer apresentam sinais ou sintomas específicos. Mudanças no hábito do intestino ou função da bexiga podem indicar câncer. Constipação a longo prazo, diarreia ou uma mudança no tamanho das fezes pode ser um sinal de câncer de cólon. Dor com urina, sangue na urina ou uma mudança na função da bexiga (tal como urina mais frequente ou menos frequente) pode estar relacionada ao câncer de bexiga ou próstata.
[0785] Mudanças na condição ou aparência da pele de uma nova condição da pele podem indicar câncer. Cânceres de pele podem sangrar e ter aparência de ferida que não cicatriza. Uma ferida duradoura na boca pode ser um câncer oral, especialmente em pacientes que fumam, mastigam tabaco, ou, frequentemente, bebem álcool. Feridas no pênis ou vagina podem ser sinais de infecção ou um câncer precoce.
[0786] Hemorragia ou descarga incomum pode indicar câncer. Hemorragia in- comum pode acontecer no câncer precoce ou avançado. Sangue na saliva (fleuma) pode ser um sinal de câncer de pulmão. Sangue nas fezes (ou fezes escuras ou pretas) pode ser um sinal de câncer de cólon ou reto. Câncer do colo do útero ou do endométrio (revestimento do útero) podem causar sangramento vaginal. Sangue na urina pode ser um sinal de câncer na bexiga ou renal. Uma descarga de sangue a partir do mamilo pode ser um sinal de câncer de mama.
[0787] Um espessamento ou caroço na mama ou em outras partes do corpo pode indicar a presença de um câncer. Muitos cânceres podem ser sentidos através da pele, a maioria na mama, testículo, linfonodos (glândulas) e nos tecidos moles do corpo. Um caroço ou fornecimento pode ser um sinal de câncer precoce ou tardio. Qualquer caroço ou espessamento pode ser indicativo de câncer, especialmente se a formação for nova ou cultivada em tamanho.
[0788] Indigestão ou dificuldade para engolir pode indicar câncer. Embora estes sintomas comumente tenham outras causas, indigestão ou problemas de deglutição podem ser um sinal de câncer do esôfago, estômago ou faringe (garganta).
[0789] Mudanças recentes em uma verruga ou mancha podem ser indicativos de câncer. Qualquer verruga, mancha ou sarda que muda em cor, tamanho ou forma, ou perde suas bordas definidas, indica o desenvolvimento potencial de câncer. Por exemplo, a lesão na pele pode ser um melanoma.
[0790] Uma tosse ou rouquidão persistente pode ser indicativo de câncer. Uma tosse que não passa pode ser um sinal de câncer de pulmão. A rouquidão pode ser um sinal de câncer da laringe (caixa de voz) ou tireoide.
[0791] Embora os sinais e sintomas listados acima sejam os mais comuns entre aqueles observados com câncer, existem muitos outros que são menos comuns e não são listados neste relatório.
[0792] O tratamento do câncer pode resultar em uma redução no tamanho de um tumor. Uma redução no tamanho de um tumor também pode ser referida como “regressão do tumor”. Preferivelmente, depois do tratamento, o tamanho do tumor seria reduzido em 5 % ou mais em relação a seu tamanho anterior ao tratamento; mais preferivelmente, o tamanho do tumor é reduzido em 10 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 20 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 30 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 40 % ou mais; ainda mais preferivelmente, reduzido em 50 % ou mais; e, mais preferivelmente, reduzido em mais do que 75 % ou mais. O tamanho de um tumor pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis de medição. O tamanho de um tumor pode ser medido como um diâmetro do tumor.
[0793] O tratamento do câncer pode resultar em uma redução no volume do tumor. Preferivelmente, depois do tratamento, o volume do tumor seria reduzido em 5 % ou mais em relação a seu tamanho anterior ao tratamento; mais preferivelmente, o volume do tumor é reduzido em 10 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 20 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 30 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 40 % ou mais; ainda mais preferivelmente, reduzido em 50 % ou mais; e, mais preferivelmente, reduzido em mais do que 75 % ou mais. O volume do tumor pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis de medição.
[0794] O tratamento do câncer pode resultar em uma diminuição no número de tumores. Preferivelmente, depois do tratamento, o número do tumor seria reduzido em 5 % ou mais em relação ao número anterior ao tratamento; mais preferivelmente, o número do tumor é reduzido em 10 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 20 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 30 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 40 % ou mais; ainda mais preferivelmente, reduzido em 50 % ou mais; e, mais preferivelmente, reduzido em mais do que 75 %. O número de tumores pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis de medição. O número de tumores pode ser medido por contagem de tumores visíveis ao olho nu ou em uma ampliação especificada. Preferivelmente, a ampliação especificada é de 2x, 3x, 4x, 5x, 10x ou 50x.
[0795] O tratamento do câncer pode resultar em uma diminuição no número de lesões metastáticas em outros tecidos ou órgãos distantes do sítio de tumor primário. Preferivelmente, depois do tratamento, o número de lesões metastáticas seria reduzido em 5 % ou mais em relação ao número anterior ao tratamento; mais preferivelmente, o número de lesões metastáticas é reduzido em 10 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 20 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 30 % ou mais; mais preferivelmente, reduzido em 40 % ou mais; ainda mais preferivelmente, reduzido em 50 % ou mais; e, mais preferivelmente, reduzido em mais do que 75 %. O número de lesões metastáticas pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis de medição. O número de lesões metastáticas pode ser medido por contagem de lesões metastáticas visíveis ao olho nu ou em uma ampliação especificada. Preferivelmente, a ampliação especificada é de 2x, 3x, 4x, 5x, 10x ou 50x.
[0796] O tratamento do câncer pode resultar em um aumento no tempo de intervalo médio de uma população de pacientes tratados em comparação a uma população que recebe o portador sozinho. Preferivelmente, o tempo de sobrevivência médio seria aumentado em mais do que 30 dias; mais preferivelmente, em mais do que 60 dias; mais preferivelmente, em mais do que 90 dias; e, mais preferivelmente, em mais do que 120 dias. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população pode ser medido, por exemplo, através do cálculo para uma população da duração média de sobrevivência após a iniciação do tratamento com um composto ativo. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população também pode ser medido, por exemplo, através do cálculo para uma população da duração média de sobrevivência após a conclusão de uma primeira rodada do tratamento com um composto ativo.
[0797] O tratamento do câncer pode resultar em um aumento no tempo de intervalo médio de uma população de pacientes tratados em comparação a uma população de pacientes não tratados. Preferivelmente, o tempo de sobrevivência médio seria aumentado em mais do que 30 dias; mais preferivelmente, em mais do que 60 dias; mais preferivelmente, em mais do que 90 dias; e, mais preferivelmente, em mais do que 120 dias. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população pode ser medido, por exemplo, através do cálculo para uma população da duração média de sobrevivência após a iniciação do tratamento com um composto ativo. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população também pode ser medido, por exemplo, através do cálculo para uma população da duração média de sobrevivência após a conclusão de uma primeira rodada do tratamento com um composto ativo.
[0798] O tratamento do câncer pode resultar no aumento do tempo de sobrevivência médio de uma população de pacientes tratados em comparação a uma população que recebe monoterapia com um fármaco que não é um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, análogo ou derivado do mesmo. Preferivelmente, o tempo de sobrevivência médio seria aumentado em mais do que 30 dias; mais preferivelmente, em mais do que 60 dias; mais preferivelmente, em mais do que 90 dias; e, mais preferivelmente, em mais do que 120 dias. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população pode ser medido, por exemplo, através do cálculo para uma população da duração média de sobrevivência após a iniciação do tratamento com um composto ativo. Um aumento no tempo de sobrevivência médio de uma população também pode ser medido, por exemplo, através do cálculo para uma população da duração média de sobrevivência após a conclusão de uma primeira rodada do tratamento com um composto ativo.
[0799] O tratamento do câncer pode resultar em uma diminuição na taxa de mortalidade de uma população de pacientes tratados em comparação a uma população que recebe o portador sozinho. O tratamento do câncer pode resultar em uma diminuição na taxa de mortalidade de uma população de pacientes tratados em comparação a uma população não tratada. O tratamento do câncer pode resultar em uma diminuição na taxa de mortalidade de uma população de pacientes tratados em comparação a uma população que recebe monoterapia com um fármaco que não é um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fár- maco, metabólito, análogo ou derivado do mesmo. Preferivelmente, a taxa de mortalidade seria diminuída em mais do que 2 %; mais preferivelmente, em mais do que 5 %; mais preferivelmente, em mais do que 10 %; e, mais preferivelmente, em mais do que 25 %. Uma diminuição na taxa de mortalidade de uma população de pacientes tratados pode ser medida por quaisquer meios reproduzíveis. Uma diminuição na taxa de mortalidade de uma população pode ser medida, por exemplo, através do cálculo para uma população do número médio de mortes relacionadas à doença por unidade de tempo após a iniciação do tratamento com um composto ativo. Uma diminuição na taxa de mortalidade de uma população também pode ser medida, por exemplo, através do cálculo para uma população do número médio de mortes relacionadas à doença por unidade de tempo após a conclusão de uma primeira rodada de tratamento com um composto ativo.
[0800] O tratamento do câncer pode resultar em uma diminuição na taxa de crescimento do tumor. Preferivelmente, depois do tratamento, a taxa de crescimento do tumor seria reduzida em pelo menos 5 % em relação ao número anterior ao tratamento; mais preferivelmente, a taxa de crescimento do tumor seria reduzida em pelo menos 10 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 20 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 30 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 40 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 50 %; ainda mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 50 %; e, mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 75 %. A taxa de crescimento do tumor pode ser medida por quaisquer meios reproduzíveis de medição. A taxa de crescimento do tumor pode ser medida, de acordo com uma mudança no diâmetro do tumor por unidade de tempo.
[0801] O tratamento do câncer pode resultar em uma diminuição no novo crescimento do tumor. Preferivelmente, depois do tratamento, o novo crescimento do tumor seria menor do que 5 %; mais preferivelmente, o novo crescimento do tumor seria menor do que 10 %; mais preferivelmente, menor do que 20 %; mais preferivelmente, menor do que 30 %; mais preferivelmente, menor do que 40 %; mais preferivelmente, menor do que 50 %; ainda mais preferivelmente, menor do que 50 %; e, mais preferivelmente, menor do que 75 %. O novo crescimento do tumor pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis de medição. O novo crescimento do tumor é medido, por exemplo, através da medição de um aumento no diâmetro de um tumor depois de uma redução do tumor anterior após o tratamento. Uma diminuição no novo crescimento do tumor é indicada pela não ocorrência de tumores depois que o tratamento foi interrompido.
[0802] O tratamento ou prevenção de um transtorno celular proliferativo pode resultar em uma redução na taxa de proliferação celular. Preferivelmente, depois do tratamento, a taxa de proliferação celular seria reduzida em pelo menos 5 %; mais preferivelmente, em pelo menos 10 %; mais preferivelmente, em pelo menos 20 %; mais preferivelmente, em pelo menos 30 %; mais preferivelmente, em pelo menos 40 %; mais preferivelmente, em pelo menos 50 %; ainda mais preferivelmente, em pelo menos 50 %; e, mais preferivelmente, em pelo menos 75 %. A taxa de proliferação celular pode ser medida por quaisquer meios reproduzíveis de medição. A taxa de proliferação celular é medida, por exemplo, através da medição do número de células que se dividem em uma amostra de tecido por unidade de tempo.
[0803] O tratamento ou prevenção de um transtorno celular proliferativo pode resultar em uma redução na proporção de células proliferativas. Preferivelmente, depois do tratamento, a proporção de células proliferativas seria reduzida em pelo menos 5 %; mais preferivelmente, em pelo menos 10 %; mais preferivelmente, em pelo menos 20 %; mais preferivelmente, em pelo menos 30 %; mais preferivelmente, em pelo menos 40 %; mais preferivelmente, em pelo menos 50 %; ainda mais preferivelmente, em pelo menos 50 %; e, mais preferivelmente, em pelo menos 75 %. A proporção de células proliferativas pode ser medida por quaisquer meios reproduzíveis de medição. Preferivelmente, a proporção de células proliferativas é medida, por exemplo, através da quantificação do número de células que se dividem em relação ao número de células que não se dividem em uma amostra de tecido. A proporção de células prolife- rativas pode ser equivalente ao índice mitótico.
[0804] O tratamento ou prevenção de um transtorno celular proliferativo pode resultar em uma diminuição no tamanho de uma área ou zona de proliferação celular. Preferivelmente, depois do tratamento, o tamanho de uma área ou zona de proliferação celular seria reduzida em pelo menos 5 % em relação a seu tamanho anterior ao tratamento; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 10 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 20 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 30 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 40 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 50 %; ainda mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 50 %; e, mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 75 %. O tamanho de uma área ou zona de proliferação celular pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis de medição. O tamanho de uma área ou zona de proliferação celular pode ser medido como um diâmetro ou largura de uma área ou zona de proliferação celular.
[0805] O tratamento ou prevenção de um transtorno celular proliferativo pode resultar em uma diminuição no número ou proporção de células tendo uma aparência ou morfologia anormal. Preferivelmente, depois do tratamento, o número de células tendo uma morfologia anormal seria reduzido em pelo menos 5 % em relação a seu tamanho anterior ao tratamento; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 10 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 20 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 30 %; mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 40 %; mais pre-ferivelmente, reduzido em pelo menos 50 %; ainda mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 50 %; e, mais preferivelmente, reduzido em pelo menos 75 %. Uma aparência ou morfologia celular anormal pode ser medida por quaisquer meios reproduzíveis de medição. Uma morfologia celular anormal pode ser medida por microscópio, por exemplo, usando um microscópio de cultura de tecido invertido. Uma morfologia celular anormal pode tomar a forma de pleiomorfismo nuclear.
[0806] Conforme usado neste relatório, o termo “seletivamente” significa tendência a ocorrer em uma frequência maior em uma população em relação a uma outra população. As populações comparadas podem ser populações celulares. Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, me- tabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode atuar seletivamente em um câncer ou célula pré-cancerosa, mas não em uma célula normal. Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode atuar seletivamente para modular um alvo molecular (por exemplo, uma proteína metiltransferase alvo), mas não modula significantemente um outro alvo molecular (por exemplo, uma proteína metiltransferase não alvo). A invenção também fornece um método para inibir seletivamente a atividade de uma enzima, tal como uma proteína metiltransferase. Preferivelmente, um evento ocorre seletiva-mente na população A em relação à população B se ele ocorre mais do que duas vezes mais frequentemente na população A em comparação à população B. Um evento ocorre seletivamente se ele ocorre mais do que cinco vezes mais frequentemente na população A. Um evento ocorre seletivamente se ele ocorre mais do que dez vezes mais frequentemente na população A; mais preferivelmente, mais do que cinquenta vezes; ainda mais preferivelmente, mais do que 100 vezes; e, mais preferivelmente, mais do que 1000 vezes mais frequentemente na população A em comparação à população B. Por exemplo, a morte celular ocorreria seletivamente nas células de câncer se ela ocorre mais do que duas vezes, conforme frequentemente nas células de câncer em comparação às células normais.
[0807] Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode modular a atividade de um alvo molecular (por exemplo, uma proteína metiltransferase alvo). Modular se refere a estimular ou inibir uma atividade de um alvo molecular. Preferivelmente, um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, modula a atividade de um alvo molecular se ele estimula ou inibe a atividade do alvo molecular em pelo menos 2 vezes em relação à atividade do alvo molecular sob as mesmas condições, mas carecendo apenas da presença do dito composto. Mais preferivelmente, um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabó- lito, polimorfo ou solvato do mesmo, modula a atividade de um alvo molecular se ele estimula ou inibe a atividade do alvo molecular em pelo menos 5 vezes, pelo menos 10 vezes, pelo menos 20 vezes, pelo menos 50 vezes, pelo menos 100 vezes em relação à atividade do alvo molecular sob as mesmas condições, mas carecendo apenas da presença do dito composto. A atividade de um alvo molecular pode ser medida por quaisquer meios reproduzíveis. A atividade de um alvo molecular pode ser medida in vitro ou in vivo. Por exemplo, a atividade de um alvo molecular pode ser medida in vitro por um ensaio de atividade enzimática ou um ensaio de ligação de DNA, ou a atividade de um alvo molecular pode ser medida in vivo através da avaliação para a expressão de um gene repórter.
[0808] Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, não modula signi- ficantemente a atividade de um alvo molecular se a adição do composto não estimula ou inibe a atividade do alvo molecular em mais do que 10 % em relação à atividade do alvo molecular sob as mesmas condições, mas carecendo apenas da presença do dito composto.
[0809] Conforme usado neste relatório, o termo “isozima seletiva” significa inibição ou estímulo preferencial de uma primeira isoforma de uma enzima em comparação a uma segunda isoforma de uma enzima (por exemplo, inibição ou estímulo preferencial de uma proteína metiltransferase isozima alfa em comparação a uma proteína metiltransferase isozima beta). Preferivelmente, um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, demonstra um mínimo de um diferencial de quatro vezes, preferivelmente um diferencial de dez vezes, mais preferivelmente um diferencial de cinquenta vezes, na dosagem exigida para obter um efeito biológico. Preferivelmente, um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fár- maco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, demonstra este diferencial através da faixa de inibição, e o diferencial é exemplificado na IC50, isto é, uma inibição de 50 %, para um alvo molecular de interesse.
[0810] A administração de um composto da presente invenção, ou um sal far- maceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, a uma célula ou um paciente em necessidade do mesmo pode resultar na modulação (isto é, estímulo ou inibição) de uma atividade de uma proteína metiltransferase de interesse.
[0811] A presente invenção fornece métodos para avaliar a atividade biológica de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró- fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo ou métodos para identificar um composto de teste como um inibidor de um mutante Y641 de EZH2. Em uma modalidade, o método inclui combinação um mutante Y641 de EZH2 isolado com um substrato de histona, um doador de grupo metila (tal como S-adenosilmetionina (SAM)), e um composto de teste, em que o substrato de histona compreende uma forma de H3- K27 selecionada a partir do grupo que consiste de H3-K27 não metilada, H3-K27 monometilada, H3-K27 dimetilada, e qualquer combinação das mesmas; e a realização de um ensaio para detectar a metilação de H3-K27 no substrato de histona, desse modo, identificando o composto de teste como um inibidor do mutante Y641 de EZH2 quando a metilação de H3-K27 na presença do composto de teste é menor do que a metilação de H3-K27 na ausência do composto de teste. O ensaio para detectar a metilação de H3-K27 pode ser selecionado para medir a taxa de metilação, a extensão da metilação ou a taxa e extensão da metilação.
[0812] O mutante Y641 de EZH2 é isolado como um complexo PRC2 ou equivalente funcional do mesmo. Conforme usado neste relatório, o termo “isolado” significa substancialmente separado de outros componentes com os quais o complexo pode ser encontrado na natureza. Um composto pode ser isolado sem necessariamente ser purificado. Em uma modalidade, o mutante de EZH2 é isolado como um complexo de um mutante Y641 de EZH2 junto com EED e SUZ12. Em uma outra modalidade, o mutante de EZH2 é isolado como um complexo de um mutante Y641 de EZH2 junto com EED, SUZ12 e RbAp48. Sob condições apropriadas, um complexo PRC2 ou equivalente funcional do mesmo exibe atividade de histona metiltransferase para H3-K27. Em uma modalidade, o complexo é composto de polipeptídeos de componente recombinantemente expressado, por exemplo, EZH2, EED, SUZ12, com ou sem RbAp48.
[0813] O mutante Y641 de EZH2 isolado é combinado com um substrato de histona. Um substrato de histona inclui qualquer fonte adequada de polipeptídeos de histona ou fragmentos dos mesmos que podem servir como substrato para EZH2. Em uma modalidade, o substrato de histona inclui histonas isoladas a partir de um paciente. As histonas podem ser isoladas de células de um paciente usando qualquer método adequado; tais métodos são bem conhecidos às pessoas habilitadas na técnica e não precisam ser especificados neste relatório. Veja, por exemplo, Fang et al. (2004) Methods Enzymol 377:213 - 26. De acordo com os Exemplos abaixo, em uma modalidade, o substrato de histona é fornecido como nucleossomas. De acordo com os Exemplos abaixo, em uma modalidade, o substrato de histona é fornecido como nucleossomas de eritrócitos aviários (galinha).
[0814] O substrato de histona fornecido pode incluir uma mistura de estados de modificação de histona, incluindo vários estados da metilação de H3-K27, conforme julgado por Western blotting, com anticorpos específicos do estado de metilação de H3-K27. Em uma modalidade, o substrato de histona pode ser fornecido como histona H3 de comprimento total purificada. Tal histona H3 de comprimento total purificada pode ser fornecida como uma preparação homogênea em respeito de estados da metilação de H3-K27, ou como uma mistura de vários estados da metilação de H3- K27. As preparações homogêneas de histona H3 isolada em respeito de estados da metilação de H3-K27 podem ser preparadas, em parte, através da passagem em uma coluna de imunoafinidade carregada com anticorpos específicos do estado de metila- ção de H3-K27 adequados ou através de imunoprecipitação usando pérolas magnéti-cas revestidas com anticorpos específicos do estado de metilação de H3-K27 adequados. Alternativamente ou além disso, o estado de metilação de H3-K27 pode ser caracterizado como parte da realização do ensaio. Por exemplo, o substrato de his- tona do material de partida pode ser caracterizado como contendo 50 por cento de H3-K27 não metilada, 40 por cento de H3-K27 monometilada, 10 por cento de H3-K27 dimetilada e 0 por cento de H3-K27 trimetilada.
[0815] Em uma modalidade, o substrato de histona inclui uma biblioteca de peptídeos ou um peptídeo adequado compreendendo uma ou mais sequências de aminoácidos relacionada à histona H3, incluindo, em particular, uma sequência que abrange H3-K27. Por exemplo, em uma modalidade, o substrato de histona é um fragmento de peptídeo que corresponde aos resíduos de aminoácidos 21 a 44 da histona H3. A biblioteca de peptídeos ou peptídeo pode ser preparada por síntese de peptí- deos, de acordo com técnicas bem conhecidas no ramo, e opcionalmente modificada, de modo a incorporar qualquer grau desejado de metilação de lisina correspondente a H3-K27. Conforme descrito nos Exemplos abaixo, tais peptídeos também podem ser modificados para incorporar uma marcação, tal como biotina, útil na realização de ensaios a jusante. Em uma modalidade, a marcação é anexada ao terminal amino (N) do(s) peptídeo(s). Em uma modalidade, a marcação é anexada ao terminal carbóxi (C) do(s) peptídeo(s).
[0816] A detecção da metilação de H3-K27 pode ser realizada usando qualquer método adequado. Em uma modalidade, a fonte de grupos metila doadores inclui grupos metila que são marcados com uma marcação detectável. A marcação detec- tável, em uma modalidade, é uma marcação isotópica, por exemplo, trítio. Outros tipos de marcações podem incluir, por exemplo, marcações fluorescentes.
[0817] A detecção da formação de H3-K27 trimetilada pode ser realizada usando qualquer método adequado. Por exemplo, a detecção da formação de H3-K27 trimetilada pode ser realizada usando um ensaio para detectar a incorporação de grupos metila marcados, tais como aqueles descritos acima, opcionalmente combinado com um método cromatográfico ou outro método para separar produtos marcados por tamanho, por exemplo, eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE), eletroforese capilar (CE) ou cromatografia líquida de alta pressão (HPLC). Alternativamente ou além disso, a detecção da formação de H3-K27 trimetilada pode ser realizada usando anticorpos que são específicos para H3-K27 trimetilada.
[0818] A detecção da conversão de H3-K27 monometilada em H3-K27 dime- tilada pode ser realizada usando qualquer método adequado. Em uma modalidade, a conversão é medida usando anticorpos específicos para H3-K27 monometilada e H3- K27 dimetilada. Por exemplo, quantidades ou concentrações de partida de H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada podem ser determinadas usando anticorpos específicos apropriados para H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada. Após a combinação da enzima, substrato, doador de grupo metila e composto de teste, quantidades ou concentrações resultantes de H3-K27 monometilada e H3-K27 dime- tilada depois podem ser determinadas usando anticorpos específicos apropriados para H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada. As quantidades ou concentrações iniciais e resultantes de H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada depois podem ser comparadas. Alternativamente ou além disso, as quantidades ou concentrações iniciais e resultantes de H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada depois podem ser comparadas a quantidades correspondentes de concentrações a partir de um controle negativo. Uma reação do controle negativo, em que nenhum agente de teste é incluído no ensaio, pode ser conduzida em paralelo ou como um controle histórico. Os resultados de tal reação de controle podem ser opcionalmente subtraídos a partir dos resultados correspondentes da reação experimental antes ou fazendo a comparação mencionada acima.
[0819] Pelo fato de que a forma dimetilada de H3-K27 pode ser ainda metilada no mesmo ensaio, uma redução na quantidade ou concentração de H3-K27 monome- tilada pode não parecer corresponder diretamente a um aumento na H3-K27 dimeti- lada. Neste exemplo, pode ser presumido, entretanto, que uma redução na quantidade ou concentração de H3-K27 monometilada é, por si só, refletiva da conversão de H3- K27 monometilada em H3-K27 dimetilada.
[0820] A detecção da conversão de H3-K27 dimetilada em H3-K27 trimetilada pode ser realizada usando qualquer método adequado. Em uma modalidade, a conversão é medida usando anticorpos específicos para H3-K27 dimetilada e H3-K27 tri- metilada. Por exemplo, quantidades ou concentrações de partida de H3-K27 dimeti- lada e H3-K27 trimetilada podem ser determinadas usando anticorpos específicos apropriados para H3-K27 dimetilada e H3-K27 trimetilada. Após a combinação da enzima, substrato e composto de teste, quantidades ou concentrações resultantes de H3-K27 dimetilada e H3-K27 trimetilada depois podem ser determinadas usando anticorpos específicos apropriados para H3-K27 dimetilada e H3-K27 trimetilada. As quantidades ou concentrações iniciais e resultantes de H3-K27 dimetilada e H3-K27 trimetilada depois podem ser comparadas. Alternativamente ou além disso, as quantidades ou concentrações iniciais e resultantes de H3-K27 dimetilada e H3-K27 trime- tilada depois podem ser comparadas a quantidades correspondentes de concentrações a partir de um controle negativo. Uma reação do controle negativo, em que nenhum agente de teste é incluído no ensaio, pode ser conduzida em paralelo ou como um controle histórico. Os resultados de tal reação de controle podem ser opcionalmente subtraídos a partir dos resultados correspondentes da reação experimental antes ou fazendo a comparação mencionada acima.
[0821] Um agente de teste é identificado como um inibidor do mutante Y641 de EZH2 quando a metilação de H3-K27 com o composto de teste é menor do que a metilação de H3-K27 sem o composto de teste. Em uma modalidade, um agente de teste é identificado como um inibidor do mutante Y641 de EZH2 quando a formação de H3-K27 trimetilada na presença do composto de teste é menor do que formação de H3-K27 trimetilada na ausência do composto de teste.
[0822] A presente invenção também fornece um método para identificar um inibidor seletivo de um mutante Y641 de EZH2. Em uma modalidade, o método inclui combinação de um mutante Y641 de EZH2 isolada com um substrato de histona, um doador de grupo metila (por exemplo, SAM) e um composto de teste, em que o substrato de histona compreende uma forma de H3-K27 selecionada a partir do grupo que consiste de H3-K27 monometilada, H3-K27 dimetilada e uma combinação de H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada, desse modo, formando uma mistura de teste; combinação de uma EZH2 do tipo selvagem isolada com um substrato de histona, um doador de grupo metila (por exemplo, SAM) e um composto de teste, em que o substrato de histona compreende uma forma de H3-K27 selecionada a partir do grupo que consiste de H3-K27 monometilada, H3-K27 dimetilada e uma combinação de H3-K27 monometilada e H3-K27 dimetilada, desse modo, formando uma mistura controle; realização de um ensaio para detectar a trimetilação do substrato de histona na mistura de teste e na mistura controle; calcular a razão de (a) trimetilação com o mutante Y641 de EZH2 e o composto de teste (M+) para (b) trimetilação com o mutante Y641 de EZH2 sem o composto de teste (M-); calcular a razão de (c) trimetilação com EZH2 do tipo selvagem e o composto de teste (WT+) para (d) trimetilação com EZH2 do tipo selvagem sem o composto de teste (WT-); comparação da razão (a)/(b) com a razão (c)/(d); e identificação do composto de teste como um inibidor seletivo do mutante Y641 de EZH2 quando a razão (a)/(b) é menor do que a razão (c)/(d). Em uma modalidade, o método ainda inclui considerar um controle negativo sem composto de teste para a mistura de teste e a mistura controle.
[0823] Em alguns ensaios, os reagentes imunológicos, por exemplo, anticorpos e antígenos, são utilizados. A fluorescência pode ser utilizada na medição da atividade enzimática em alguns ensaios. Conforme usado neste relatório, “fluorescência” se refere a um processo através do qual uma molécula emite um fóton como um resultado de absorver um fóton de entrada de maior energia pela mesma molécula. Os métodos específicos para avaliar a atividade biológica dos compostos divulgados são descritos nos exemplos.
[0824] A administração de um composto da presente invenção, ou um sal far- maceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, a uma célula ou um paciente em necessidade do mesmo pode resultar na modulação (isto é, estímulo ou inibição) de uma atividade de um alvo intracelular (por exemplo, substrato). Vários alvos intracelulares podem ser modulados com os compostos da presente invenção, incluindo, mas não limitados à proteína metiltrasferase.
[0825] A ativação se refere à colocação de uma composição de matéria (por exemplo, proteína ou ácido nucleico) em um estado adequado para realizar uma função biológica desejada. Uma composição de matéria capaz de ser ativada também tem um estado não ativado. Uma composição de matéria ativada pode ter uma função biológica inibitória ou estimulante, ou ambas.
[0826] Elevação se refere a um aumento em uma atividade biológica desejada de uma composição de matéria (por exemplo, uma proteína ou um ácido nucleico). A elevação pode ocorrer através de um aumento na concentração de uma composição de matéria.
[0827] Conforme usado neste relatório, “uma via de ponto de verificação de ciclo celular” se refere a uma via bioquímica que está envolvida na modulação de um ponto de verificação de ciclo celular. Uma via de ponto de verificação de ciclo celular pode ter efeitos estimulantes ou inibitórios, ou ambos, em uma ou mais funções compreendendo um ponto de verificação de ciclo celular. Uma via de ponto de verificação de ciclo celular é compreendida de pelo menos duas composições of matéria, preferivelmente proteínas, as quais contribuem para a modulação de um ponto de verificação de ciclo celular. Uma via de ponto de verificação de ciclo celular pode ser ativada através de uma ativação de um ou mais membros da via de ponto de verificação de ciclo celular. Preferivelmente, uma via de ponto de verificação de ciclo celular é uma via de sinalização bioquímica.
[0828] Conforme usado neste relatório, “regulador de ponto de verificação de ciclo celular” se refere a uma composição de matéria que pode funcionar, pelo menos em parte, na modulação de um ponto de verificação de ciclo celular. Um regulador de ponto de verificação de ciclo celular pode ter efeitos estimulantes ou inibitórios, ou ambos, em uma ou mais funções compreendendo um ponto de verificação de ciclo celular. Um regulador de ponto de verificação de ciclo celular pode ser ou não uma proteína.
[0829] O tratamento de câncer ou de um transtorno celular proliferativo pode resultar em morte celular, e, preferivelmente, a morte celular resultaria em uma diminuição de pelo menos 10 % no número de células em uma população. Mais preferivelmente, morte celular significa uma diminuição de pelo menos 20 %; mais preferivelmente, uma diminuição de pelo menos 30 %; mais preferivelmente, uma diminuição de pelo menos 40 %; mais preferivelmente, uma diminuição de pelo menos 50 %; mais preferivelmente, uma diminuição de pelo menos 75 %. O número de células em uma população pode ser medido por quaisquer meios reproduzíveis. Várias células em uma população podem ser medidas por separador celular ativado por fluorescência (FACS), microscopia de imunofluorescência e microscópio de luz. Os métodos para medir a morte celular são mostrados em Li et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 100(5): 2674 - 8, 2003. Em um aspecto, a morte celular ocorre por apoptose.
[0830] Preferivelmente, uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, não seria significantemente citotóxica a células normais. Uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto não é significantemente citotó- xica às células normais se a administração do composto em uma quantidade terapeu- ticamente eficaz não induz a morte celular em mais do que 10 % de células normais. Uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto não afeta significantemente a viabilidade de células normais se a administração do composto em uma quantidade terapeuticamente eficaz não induz a morte celular em mais do que 10 % de células normais. Em um aspecto, a morte celular ocorre por apoptose.
[0831] Contatar uma célula com um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode induzir ou ativar a morte celular seletivamente nas células de câncer. A administração de um composto da presente invenção a um paciente em necessidade do mesmo, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode induzir ou ativar a morte celular seletivamente nas células de câncer. Contatar uma célula com um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode induzir a morte celular seletivamente em uma ou mais células afetadas por um transtorno celular proliferativo. Preferivelmente, a administração de um composto da presente invenção a um paciente em necessidade do mesmo, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, induziria a morte celular seletivamente em uma ou mais células afetadas por um transtorno celular proliferativo.
[0832] Um aspecto da presente invenção se refere a um método para tratar ou prevenir câncer (por exemplo, o curso do qual pode ser influenciado pela modulação da metilação da proteína mediada por EZH2) através da administração de um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, a um paciente em necessidade do mesmo, onde a administração do composto da presente invenção, ou um sal farma- ceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, resulta em um ou mais entre os seguintes: prevenção de proliferação de células de câncer através do acúmulo de células em uma ou mais fases do ciclo celular (por exemplo, G1, G1/S, G2/M) ou indução de senescência celular, ou promoção de diferenciação de células de tumor; promoção de morte celular nas células de câncer por intermédio de citotoxicidade, necrose ou apoptose, sem uma quantidade significante de morte celular em células normais, atividade antitumor em animais com um índice terapêutico de pelo menos 2. Conforme usado neste relatório, “índice terapêutico” é a dose máxima tolerada dividida pela dose eficaz. A presente invenção também se refere a um método usado para identificar candidatos adequados para tratar ou prevenir câncer.
[0833] Uma pessoa habilitada na técnica pode se referir a textos de referência geral para descrições detalhadas de técnicas conhecidas debatidas neste relatório ou técnicas equivalentes. Estes textos incluem Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley e Sons, Inc. (2005); Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual (3a edição), Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, Nova Iorque (2000); Coligan et al., Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, N.Y.; Enna et al., Current Protocols in Pharmacology, John Wiley & Sons, N.Y.; Fingl et al., The Pharmacological Basis of Therapeutics (1975), Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 18a edição (1990). Certamente, estes textos também podem ser referidos fazendo ou usando um aspecto da invenção.
[0834] Conforme usado neste relatório, “terapia de combinação” ou “cotera- pia” inclui a administração de um composto da presente invenção, ou um sal farma- ceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, e pelo menos um segundo agente como parte de um regime de tratamento específico intencionado a fornecer o efeito benéfico a partir da coação destes agentes terapêuticos. O efeito benéfico da combinação pode incluir, mas não é limitado a, coação far- macocinética ou farmacodinâmica resultante da combinação de agentes terapêuticos. A administração destes agentes terapêuticos em combinação tipicamente é realizada durante um período de tempo definido (usualmente minutos, horas, dias ou semanas, dependendo da combinação selecionada). “Terapia de combinação” pode ser, mas, em geral, não é intencionada a abranger a administração de dois ou mais entre estes agentes terapêuticos como parte de regimes de monoterapia separados que incidentemente e arbitrariamente resultam nas combinações da presente invenção.
[0835] “Terapia de combinação” é intencionada a abranger a administração destes agentes terapêuticos em uma maneira sequencial, em que cada agente terapêutico é administrado em um tempo diferente, assim como a administração destes agentes terapêuticos, ou pelo menos dois entre os agentes terapêuticos, em uma maneira substancialmente simultânea. A administração substancialmente simultânea pode ser realizada, por exemplo, através da administração de uma cápsula única ao paciente tendo uma razão fixa de cada agente terapêutico ou em cápsulas múltiplas, únicas para cada um entre os agentes terapêuticos. A administração sequencial ou substancialmente simultânea de cada agente terapêutico pode ser efetuada por qualquer via apropriada incluindo, mas não limitada a, vias orais, vias intravenosas, vias intramusculares e absorção direta através de tecidos da membrana mucosa. Os agentes terapêuticos podem ser administrados pela mesma via ou por vias diferentes. Por exemplo, um primeiro agente terapêutico da combinação selecionada pode ser administrado por injeção intravenosa, enquanto os outros agentes terapêuticos da combinação podem ser oralmente administrados. Alternativamente, por exemplo, todos os agentes terapêuticos podem ser oralmente administrados ou todos os agentes terapêuticos podem ser administrados por injeção intravenosa. A sequência em que os agentes terapêuticos são administrados não é estreitamente crítica.
[0836] “Terapia de combinação” também abrange a administração dos agentes terapêuticos, conforme descrito acima em combinação adicional com outros ingredientes biologicamente ativos e terapias sem fármaco (por exemplo, cirurgia ou tratamento por radiação). Onde a terapia de combinação compreende ainda um tratamento sem fármaco, o tratamento sem fármaco pode ser conduzido em qualquer tempo adequado, contanto que um efeito benéfico a partir da coação da combinação dos agentes terapêuticos e do tratamento sem fármaco seja obtido. Por exemplo, em casos apropriados, o efeito benéfico ainda é obtido quando o tratamento sem fármaco é temporariamente removido da administração dos agentes terapêuticos, possivelmente durante dias ou ainda semanas.
[0837] Um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, análogo ou derivado do mesmo, pode ser administrado em combinação com um segundo agente quimioterápico. O segundo agente quimioterápico (também referido como um agente antineoplásico ou agente antiproli- ferativo) pode ser um agente alquilante; um antibiótico; um antimetabólito; um agente desintoxicante; um interferon; um anticorpo policlonal ou monoclonal; um inibidor de EGFR; um inibidor de HER2; um inibidor de histona deacetilase; um hormônio; um inibidor mitótico; um inibidor de MTOR; um inibidor de multi-cinase; um inibidor de serina/treonina cinase; um inibidor de tirosina cinase; um inibidor de VEGF/VEGFR; um taxano ou derivado de taxano, um inibidor de aromatase, uma antraciclina, um fármaco alvejante de microtúbulos, um fármaco de veneno de topoisomerase, um inibidor de um alvo molecular ou enzima (por exemplo, uma cinase ou uma proteína metiltransferase), um fármaco análogo de citidina ou qualquer agente quimioterápico, antineoplásico ou antiproliferativo listado em www.cancer.org/docroot/cdg/cdg_0.asp.
[0838] Agentes alquilantes exemplares incluem, mas não são limitados a, ci- clofosfamida (Cytoxan; Neosar); clorambucil (Leukeran); melfalano (Alkeran); carmus- tina (BiCNU); bussulfano (Busulfex); lomustina (CeeNU); dacarbazina (DTIC-Dome); oxaliplatina (Eloxatin); carmustina (Gliadel); ifosfamida (Ifex); mecloretamina (Mustar- gen); bussulfano (Myleran); carboplatina (Paraplatin); cisplatina (CDDP; Platinol); te- mozolomida (Temodar); tiotepa (Tioplex); bendamustina (Treanda); ou estreptozocina (Zanosar).
[0839] Antibióticos exemplares incluem, mas não são limitados a, doxorrubi- cina (Adriamicina); doxorrubicina lipossômica (Doxil); mitoxantrona (Novantrone); ble- omicina (Blenoxane); daunorrubicina (Cerubidine); daunorrubicina lipossômica (Dau- noXome); dactinomicina (Cosmegen); epirrubicina (Ellence); idarrubicina (Idamycin); plicamicina (Mithracin); mitomicina (Mutamycin); pentostatina (Nipent); ou valrubicina (Valstar).
[0840] Antimetabólitos exemplares incluem, mas não são limitados a, fluorouracil (Adrucil); capecitabina (Xeloda); hidroxiureia (Hydrea); mercaptopurina (Purine- thol); pemetrexede (Alimta); fludarabina (Fludara); nelarabina (Arranon); cladribina (Cladribine Novaplus); clofarabina (Clolar); citarabina (Cytosar-U); decitabina (Daco- gen); citarabina lipossômica (DepoCyt); hidroxiureia (Droxia); pralatrexato (Folotyn); floxuridina (FUDR); gencitabina (Gemzar); cladribina (Leustatin); fludarabina (Oforta); metotrexato (MTX; Rheumatrex); metotrexato (Trexall); tioguanina (Tabloid); TS-1 ou citarabina (Tarabine PFS).
[0841] Agentes desintoxicantes exemplares incluem, mas não são limitados a, amifostina (Ethyol) ou mesna (Mesnex).
[0842] Interferons exemplares incluem, mas não são limitados a, interferon alfa-2b (Intron A) ou interferon alfa-2a (Roferon-A).
[0843] Anticorpos policlonais ou monoclonais exemplares incluem, mas não são limitados a, trastuzumabe (Herceptina); ofatumumabe (Arzerra); bevacizumabe (Avastin); rituximabe (Rituxan); cetuximabe (Erbitux); panitumumabe (Vectibix); tositu- momabe/iodo131 tositumomabe (Bexxar); alemtuzumabe (Campath); ibritumomabe (Zevalin; In-111; Y-90 Zevalin); gemtuzumabe (Mylotarg); eculizumabe (Soliris) ordenosu- mabe.
[0844] Inibidores de EGFR exemplares incluem, mas não são limitados a, ge- fitinibe (Iressa); lapatinibe (Tykerb); cetuximabe (Erbitux); erlotinibe (Tarceva); panitu- mumabe (Vectibix); PKI-166; canertinibe (CI-1033); matuzumabe (Emd7200) ou EKB- 569.
[0845] Inibidores de HER2 exemplares incluem, mas não são limitados a, tras- tuzumabe (Herceptina); lapatinibe (Tykerb) ou AC-480.
[0846] Inibidores de histona deacetilase incluem, mas não são limitados a, vo- rinostate (Zolinza).
[0847] Hormônios exemplares incluem, mas não são limitados a, tamoxifeno (Soltamox; Nolvadex); raloxifeno (Evista); megestrol (Megace); leuprolida (Lupron; Lupron Depot; Eligard; Viadur); fulvestrante (Faslodex); letrozol (Femara); triptorelina (Trelstar LA; Trelstar Depot); exemestano (Aromasin); goserelina (Zoladex); bicaluta- mida (Casodex); anastrozol (Arimidax); fluoximesterona (Androxy; Halotestin); medro- xiprogesterona (Provera; Depo-Provera); estramustina (Emcyt); flutamida (Eulexin); toremifeno (Fareston); degarelix (Firmagon); nilutamida (Nilandron); abarelix (Plenaxis); ou testolactona (Teslac).
[0848] Inibidores mitóticos exemplares incluem, mas não são limitados a, paclitaxel (Taxol; Onxol; Abraxane); docetaxel (Taxotere); vincristina (Oncovin; Vincasar PFS); vinblastina (Velban); etoposídeo (Toposar; Etopophos; VePesid); teniposídeo (Vumon); ixabepilona (Ixempra); nocodazol; epotilona; vinorelbina (Navelbina); camp- totecina (CPT); irinotecano (Camptosar); topotecano (Hycamtin); ansacrina ou lamela- rina D (LAM-D).
[0849] Exemplar inibidores de MTOR incluem, mas não são limitados a, eve- rolimo (Afinitor) ou tensirolimo (Torisel); rapamune, ridaforolimo; ou AP23573.
[0850] Inibidores de multi-cinase exemplares incluem, mas não são limitados a, sorafenibe (Nexavar); sunitinibe (Sutent); BIBW 2992; E7080; Zd6474; PKC-412; motesanibe; ou AP24534.
[0851] Inibidores de serina/treonina cinase exemplares incluem, mas não são limitados a, ruboxistaurina; cloridreto de eril/easudil; flavopiridol; seliciclibe (CYC202; Roscovitrina); SNS-032 (BMS-387032); Pkc412; briostatina; KAI-9803;SF1126; VX680; Azd1152; Arry-142886 (AZD-6244); SCIO-469; GW681323; CC-401; CEP-1347 ou PD 332991.
[0852] Inibidores de tirosina cinase exemplares incluem, mas não são limitados a, erlotinibe (Tarceva); gefitinibe (Iressa); imatinibe (Gleevec); sorafenibe (Nexavar); sunitinibe (Sutent); trastuzumabe (Herceptina); bevacizumabe (Avastin); rituxi- mabe (Rituxan); lapatinibe (Tykerb); cetuximabe (Erbitux); panitumumabe (Vectibix); everolimo (Afinitor); alemtuzumabe (Campath); gemtuzumabe (Mylotarg); tensirolimo (Torisel); pazopanibe (Votrient); dasatinibe (Sprycel); nilotinibe (Tasigna); vatalanibe (Ptk787; ZK222584); CEP-701; SU5614; MLN518; XL999; VX-322; Azd0530; BMS- 354825; SKI-606 CP-690; AG-490; WHI-P154; WHI-P131; AC-220; ou AMG888.
[0853] Inibidores de VEGF/VEGFR exemplares incluem, mas não são limitados a, bevacizumabe (Avastin); sorafenibe (Nexavar); sunitinibe (Sutent); ranibizumabe; pegaptanibe; ou vandetinibe.
[0854] Fármacos alvejantes de microtúbulos exemplares incluem, mas não são limitados a, paclitaxel, docetaxel, vincristina, vinblastina, nocodazol, epotilonas e navelbina.
[0855] Fármacos de veneno de topoisomerase exemplares incluem, mas não são limitados a, teniposídeo, etoposídeo, adriamicina, camptotecina, daunorrubicina, dactinomicina, mitoxantrona, ansacrina, epirrubicina e idarrubicina.
[0856] Taxanos ou derivado de taxanos exemplares incluem, mas não são limitados a, paclitaxel e docetaxol.
[0857] Agentes quimioterápicos, antineoplásicos, antiproliferativos gerais exemplares incluem, mas não são limitados a, altretamina (Hexalen); isotretinoína (Accutane; Amnesteem; Claravis; Sotret); tretinoína (Vesanoid); azacitidina (Vidaza); bor- tezomibe (Velcade) asparaginase (Elspar); levamisol (Ergamisol); mitotane (Lyso- dren); procarbazina (Matulane); pegaspargase (Oncaspar); denileucina diftitox (Ontak); porfímero (Photofrin); aldesleucina (Proleukin); lenalidomídeo (Revlimid); bexaroteno (Tar- gretin); talidomídeo (Thalomid); tensirolimo (Torisel); trióxido de arsênio (Trisenox); verte- porfina (Visudyne); mimosina (Leucenol); (tegafur 1 M - 5-cloro-2,4-di-hidroxipirimidina 0,4 M - oxonato de potássio 1 M) ou lovastatina.
[0858] Em um outro aspecto, o segundo agente quimioterápico pode ser uma citocina, tal como G-CSF (fator estimulante da colônia de granulócitos). Em um outro aspecto, um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, análogo ou derivado do mesmo, pode ser administrado em combinação com terapia de radiação. A terapia de radiação também pode ser administrada em combinação com um composto da presente invenção e um outro agente quimioterápico descrito neste relatório como parte de uma terapia de múltiplos agentes. Ainda em um outro aspecto, um composto da presente invenção, ou um sal far- maceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, análogo ou derivado do mesmo, pode ser administrado em combinação com combinações de quimioterapia padrão, tais como, mas não limitadas a, CMF (ciclofosfamida, metotrexato e 5-fluorouracil), CAF (ciclofosfamida, adriamicina e 5-fluorouracil), AC (adriamicina e ciclofosfamida), FEC (5-fluorouracila, epirrubicina e ciclofosfamida), AGE ou ATC (adriamicina, ciclo- fosfamida e paclitaxel), rituximabe, Xeloda (capecitabina), Cisplatina (CDDP), Carboplatina, TS-1 (tegafur, gimestate e otastate potássico em uma razão molar de 1:0,4:1), Camptotecina-11 (CPT-11, Irinotecano ou Camptosar™), CHOP (ciclofosfamida, hi- droxidaunorrubicina, oncovin, e prednisona ou prednisolona), R-CHOP (rituximabe, ciclofosfamida, hidroxidaunorrubicina, oncovin, prednisona ou prednisolona) ou CMFP (ciclofosfamida, metotrexato, 5-fluorouracil e prednisona).
[0859] Em modalidades preferidas, um composto da presente invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável, pró-fármaco, metabólito, polimorfo ou solvato do mesmo, pode ser administrado com um inibidor de uma enzima, tal como uma cinase receptora ou não receptora. Cinases receptoras e não receptoras são, por exemplo, tirosina cinases ou serina/treonina cinases. Inibidores de cinase descritos neste relatório são moléculas pequenas, ácidos polinucleicos, polipeptídeos ou anticorpos.
[0860] Inibidores de cinase exemplares incluem, mas não são limitados a, Be- vacizumabe (alvos VEGF), BIBW 2992 (alvos EGFR e Erb2), Cetuximabe/Erbitux (alvos Erb1), Imatinibe/Gleevic (alvos Bcr-Abl), Trastuzumabe (alvos Erb2), Gefiti- nibe/Iressa (alvos EGFR), Ranibizumabe (alvos VEGF), Pegaptanibe (alvos VEGF), Erlotinibe/Tarceva (alvos Erb1), Nilotinibe (alvos Bcr-Abl), Lapatinibe (alvos Erb1 e Erb2/Her2), GW-572016/ditosilato de lapatinibe (alvos HER2/Erb2), Panitumu- mabe/Vectibix (alvos EGFR), Vandetinibe (alvos RET/VEGFR), E7080 (múltiplos alvos, incluindo RET e VEGFR), Herceptina (alvos HER2/Erb2), PKI-166 (alvos EGFR), Canertinibe/CI-1033 (alvos EGFR), Sunitinibe/SU-11464/Sutent (alvos EGFR e FLT3), Matuzumabe/Emd7200 (alvos EGFR), EKB-569 (alvos EGFR), Zd6474 (alvos EGFR e VEGFR), PKC-412 (alvos VEGR e FLT3), Vatalanibe/Ptk787/ZK222584 (alvos VEGR), CEP-701 (alvos FLT3), SU5614 (alvos FLT3), MLN518 (alvos FLT3), XL999 (alvos FLT3), VX-322 (alvos FLT3), Azd0530 (alvos SRC), BMS-354825 (alvos SRC), SKI-606 (alvos SRC), CP-690 (alvos JAK), AG-490 (alvos JAK), WHI-P154 (alvos JAK), WHI-P131 (alvos JAK), sorafenibe/Nexavar (alvos RAF cinase, VEGFR-1, VEGFR-2, VEGFR-3, PDGFR-β, KIT, FLT-3 e RET), Dasatinibe/Sprycel (BCR/ABL e Src), AC-220 (alvos Flt3), AC-480 (alvos, todas as proteínas HER, “panHER”), Difos- fato de motesanibe (alvos VEGF1 a 3, PDGFR, e c-kit), Denosumab (alvos RANKL, inibe SRC), AMG888 (alvos HER3) e AP24534 (múltiplos alvos, incluindo Flt3).
[0861] Inibidores de serina/treonina cinase exemplares incluem, mas não são limitados a, Rapamune (alvos mTOR/FRAP1), Deforolimo (alvos mTOR), Certi- can/Everolimo (alvos mTOR/FRAP1), AP23573 (alvos mTOR/FRAP1), Cloridreto de eril/fasudil (alvos RHO), Flavopiridol (alvos CDK), Seliciclibe/CYC202/Roscovitrina (alvos CDK), SNS-032/BMS-387032 (alvos CDK), Ruboxistaurina (alvos PKC), Pkc412 (alvos PKC), Briostatina (alvos PKC), KAI-9803 (alvos PKC), SF1126 (alvos PI3K), VX-680 (alvos Aurora cinase), Azd1152 (alvos Aurora cinase), Arry-142886/AZD-6244 (alvos MAP/MEK), SCIO-469 (alvos MAP/MEK), GW681323 (alvos MAP/MEK), CC401 (alvos JNK), CEP-1347 (alvos JNK) e PD 332991 (alvos CDK).
[0862] O transtorno em que metilação da proteína mediada por EZH2 desempenha um papel pode ser uma doença neurológica. Os compostos desta invenção também podem ser usados para tratar ou estudar doenças neurológicas, tais como epilepsia, esquizofrenia, transtorno bipolar ou outros transtornos psicológicos e/ou psiquiátricos, neuropatias, atrofia músculo-esquelética e doenças neurodegenerativas, por exemplo, uma doença neurodegenerativa. Doenças neurodegenerativas exemplares incluem: doença de Alzheimer, esclerose lateral amiotrófica (ALS) e doença de Parkinson. Uma outra classe de doenças neurodegenerativas inclui doenças causadas, pelo menos em parte, pela agregação de poli-glutamina. Doenças desta classe incluem: Doenças de Huntington, Atrofia Muscular Espinolbulbar (SBMA ou Doença de Kennedy) Atrofia Dentatorrubropalidoluisiana (DRPLA), Ataxia Espinocerebelar 1 (SCA1), Ataxia Espinocerebelar 2 (SCA2), Doença de Machado-Joseph (MJD; SCA3), Ataxia Espinocerebelar 6 (SCA6), Ataxia Espinocerebelar 7 (SCA7) e Ataxia Espinocerebelar 12 (SCA12).
[0863] Qualquer outra doença em que a metilação epigenética, que é mediada por EZH2, desempenha um papel, pode ser tratada ou prevenida usando os compostos e métodos descritos neste relatório, ou tais doenças e tratamentos potenciais das mesmas podem ser estudados com os compostos descritos neste relatório.
[0864] Composições Farmacêuticas
[0865] A presente invenção também fornece composições farmacêuticas compreendendo um composto de qualquer uma entre as Fórmulas descritas neste relatório em combinação com pelo menos um excipiente ou portador farmaceutica- mente aceitável.
[0866] Uma “composição farmacêutica” é uma formulação contendo os compostos da presente invenção em uma forma adequada para a administração a um paciente. Em uma modalidade, a composição farmacêutica está em massa ou na forma de dosagem unitária. A forma de dosagem unitária é qualquer uma entre uma variedade de formas, incluindo, por exemplo, uma cápsula, uma bolsa IV, um tablete, uma bomba única em um inalador aerossol ou um frasco. A quantidade de ingrediente ativo (por exemplo, uma formulação do composto divulgado ou sal, hidrato, solvato ou isômero do mesmo) em uma dose unitária da composição é uma quantidade eficaz e é variada, de acordo com o tratamento particular envolvido. Uma pessoa habilitada na técnica avaliará que algumas vezes é necessário fazer variações de rotina na dosagem, dependendo da idade e condição do paciente. A dosagem também dependerá da via de administração. Uma variedade de vias é considerada, incluindo oral, de forma pulmonar, retal, parenteral, transdérmica, subcutânea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, por inalação, bucal, sublingual, intrapleural, intratecal, intranasal, e semelhantes. As formas de dosagem para a administração tópica ou transdérmica de um composto desta invenção incluem pós, pulverizações, unguentos, pastas, cremes, loções, géis, soluções, emplastros e inaladores. Em uma modalidade, o composto ativo é misturado sob condições estéreis com um portador farmaceutica- mente aceitável, e com quaisquer preservantes, tampões ou propelentes que são exigidos.
[0867] Conforme usado neste relatório, a frase “farmaceuticamente aceitável” se refere àqueles compostos, ânions, cátions, materiais, composições, portadores e/ou formas de dosagem que são, no escopo do julgamento médico, adequados para o uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade, irritação, resposta alérgica excessiva, ou outro problema ou complicação, compatível com uma razão benefício/risco razoável.
[0868] “Excipiente farmaceuticamente aceitável” significa um excipiente que é útil na preparação de uma composição farmacêutica que é, em geral, segura, não tóxica e nem biologicamente nem de outro modo indesejável, e inclui um excipiente que é aceitável para uso veterinário, assim como uso farmacêutico humano. Um “ex- cipiente farmaceuticamente aceitável”, conforme usado no relatório descritivo e reivindicações, inclui um e mais do que um tal excipiente.
[0869] Uma composição farmacêutica da invenção é formulada para ser compatível com sua via de administração intencionada. Exemplos de vias de administração incluem parenteral, por exemplo, intravenosa, intradérmica, subcutânea, oral (por exemplo, inalação), transdérmica (tópica) e administração transmucosa. Soluções ou suspensões usadas para aplicação parenteral, intradérmica ou subcutânea podem incluir os componentes seguintes: um diluente estéril, tal como água para injeção, solução salina, óleos fixos, polietilenoglicóis, glicerina, propileno glicol ou outros solventes sintéticos; agentes antibacterianos, tais como álcool benzílico ou metil parabenos; an- tioxidantes, tais como ácido ascórbico ou bissulfito de sódio; agentes quelantes, tais como ácido etilenodiaminotetra-acético; tampões, tais como acetatos, citratos ou fos- fatos, e agentes para o ajuste de tonicidade, tais como cloreto de sódio ou dextrose. O pH pode ser ajustado com ácidos ou bases, tais como ácido clorídrico ou hidróxido de sódio. A preparação parenteral pode ser envolvida em ampolas, seringas descartáveis ou frascos de múltiplas doses de vidro ou plástico.
[0870] Um composto ou composição farmacêutica da invenção pode ser administrado a um paciente em muitos entre os métodos bem conhecidos correntemente usados para tratamento quimioterápico. Por exemplo, para o tratamento de cânceres, um composto da invenção pode ser diretamente injetado nos tumores, injetado na corrente sanguínea ou cavidades do corpo ou tomados oralmente ou aplicados através da pele com emplastros. A dose escolhida deve ser suficiente para constituir tratamento eficaz, mas não tão alta, de modo a causar efeitos colaterais inaceitáveis. O estado da condição da doença (por exemplo, câncer, pré-câncer, e semelhantes) e a saúde do paciente devem ser, preferivelmente, monitorados durante um período de tempo razoável depois do tratamento.
[0871] O termo “quantidade terapeuticamente eficaz”, conforme usado neste relatório, se refere a uma quantidade de um agente farmacêutico para tratar, melhorar ou prevenir uma doença ou condição identificada, ou para exibir um efeito terapêutico ou inibitório detectável. O efeito pode ser detectado por qualquer método de ensaio conhecido na técnica. A quantidade eficaz precisa para um paciente dependerá do peso corpóreo, tamanho e saúde do paciente; da natureza e extensão da condição; e do produto terapêutico ou combinação de produtos terapêuticos selecionados para a administração. Quantidades terapeuticamente eficazes para uma dada situação podem ser determinadas por experimentos de rotina feitos por pessoas habilitadas e julgamento do médico. Em um aspecto preferido, a doença ou condição que será tratada é câncer. Em um outro aspecto, a doença ou condição que será tratada é um transtorno celular proliferativo.
[0872] Para qualquer composto, a quantidade terapeuticamente eficaz pode ser estimada inicialmente em ensaios de cultura celular, por exemplo, de células neo- plásicas, ou em modelos animais, usualmente ratos, camundongos, coelhos, cães ou porcos. O modelo animal também pode ser usado para determinar a faixa de concentração apropriada e via de administração. Tal informação depois pode ser usada para determinar doses e vias úteis para a administração em seres humanos. A eficácia terapêutica/profilática e toxicidade podem ser determinadas por procedimentos farmacêuticos padrão em culturas celulares ou animais experimentais, por exemplo, ED50 (a dose terapeuticamente eficaz em 50 % da população) e LD50 (a dose letal para 50 % da população). A razão de dose entre os efeitos tóxicos e terapêuticos é o índice terapêutico, e pode ser expressado como a razão, LD50/ED50. As composições farmacêuticas que exibem grandes índices terapêuticos são preferidas. A dosagem pode variar dentro de sua faixa dependendo da forma de dosagem utilizada, sensibilidade do paciente e a via de administração.
[0873] A dosagem e administração são ajustadas para fornecer níveis suficientes do(s) agente(s) ativo(s) ou manter o efeito desejado. Os fatores que podem ser levados em conta incluem a severidade do estado da doença, saúde geral do paciente, idade, peso e sexo do paciente, dieta, tempo e frequência de administração, combinação(ões) de fármaco, sensibilidades de reação e tolerância/resposta à terapia. As composições farmacêuticas de longa ação podem ser administradas a cada 3 a 4 dias, a cada semana, ou uma vez a cada dois semanas, dependendo da meia- vida e taxa de clearance da formulação particular.
[0874] As composições farmacêuticas contendo os compostos ativos da presente invenção podem ser preparadas em uma maneira que é, em geral, conhecida, por exemplo, por meio de processos de mistura, dissolução, granulação, dragea- mento, levigação, emulsificação, encapsulamento, captura ou liofilização convencionais. As composições farmacêuticas podem ser formuladas em uma maneira convencional usando um ou mais portadores farmaceuticamente aceitáveis compreendendo excipientes e/ou auxiliares que facilitam o processamento dos compostos ativos nas preparações que podem ser farmaceuticamente usadas. Certamente, a formulação apropriada é dependente da via de administração escolhida.
[0875] As composições farmacêuticas adequadas para uso injetável incluem soluções aquosas estéreis (onde solúveis em água) ou dispersões e pós estéreis para a preparação extemporânea de soluções injetáveis estéreis ou dispersão. Para a administração intravenosa, portadores adequados incluem solução salina fisiológica, água bacteriostática, Cremophor EL™ (BASF, Parsippany, N.J.) ou solução salina tamponada com fosfato (PBS). Em todos os casos, a composição deve ser estéril e deve ser fluida no grau que exista fácil seringabilidade. Ela deve ser estável sob as condições de fabricação e armazenagem e deve ser preservada contra a ação conta- minante de micro-organismos, tais como bactérias e fungos. O portador pode ser um solvente ou meio de dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (por exemplo, glicerol, propileno glicol, e polietilenoglicol líquido, e semelhantes), e misturas ade-quadas dos mesmos. A fluidez apropriada pode ser mantida, por exemplo, através do uso de um revestimento, tal como lecitina, através da manutenção do tamanho de partícula exigido no caso de dispersão e através do uso de tensoativos. A prevenção da ação de micro-organismos pode ser obtida através de vários agentes antibacteria- nos e antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, ti- merosal, e semelhantes. Em muitos casos, será preferível incluir agentes isotônicos, por exemplo, açúcares, poliálcoois, tais como manitol e sorbitol e cloreto de sódio na composição. A absorção prolongada das composições injetáveis pode ser realizada incluindo na composição um agente que retarda a absorção, por exemplo, monoeste- arato de alumínio e gelatina.
[0876] Soluções injetáveis estéreis podem ser preparadas através da incorporação do composto ativo na quantidade exigida em um solvente apropriado com uma combinação de ingredientes enumerados acima, conforme exigido, seguido por esterilização filtrada. Em geral, as dispersões são preparadas através da incorporação do composto ativo em um veículo estéril que contém um meio de dispersão básico e os outros ingredientes exigidos a partir daqueles enumerados acima. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injetáveis estéreis, os métodos de preparação são secagem a vácuo e liofilização que produz um pó do ingrediente ativo mais qualquer ingrediente desejado adicional a partir de uma solução filtrada previamente estéril do mesmo.
[0877] As composições orais, em geral, incluem um diluente inerte ou um portador farmaceuticamente aceitável comestível. Elas podem ser envolvidas em cápsulas de gelatina ou comprimidas em tabletes. Para o propósito de administração terapêutica oral, o composto ativo pode ser incorporado com excipientes e usado na forma de tabletes, pastilhas ou cápsulas. As composições orais também podem ser preparadas usando um portador fluido para o uso como um colutório, em que o composto no portador fluido é oralmente aplicado e expectorado ou engolido. Os agentes de ligação farmaceuticamente compatíveis e/ou materiais adjuvantes podem ser incluídos como parte da composição. Os tabletes, pílulas, cápsulas, pastilhas e semelhantes podem conter qualquer um entre os ingredientes seguintes, ou compostos de uma natureza similar: um aglutinante, tal como celulose microcristalina, goma tragacanto ou gelatina; um excipiente, tal como amido ou lactose, um agente desintegrante, tal como ácido algínico, Primogel, ou amido de milho; um lubrificante, tal como estearato de magnésio ou Sterotes; um deslizante, tal como dióxido de silício coloidal; um agente adoçante, tal como sacarose ou sacarina; ou um agente flavorizante, tal como menta, salicilato de metila ou flavorizante de laranja.
[0878] Para a administração por inalação, os compostos são liberados na forma de uma pulverização por aerossol a partir de recipiente ou dispensador pressurizado, que contém um gás propelente adequado, por exemplo, um gás, tal como dióxido de carbono, ou um nebulizador.
[0879] A administração sistêmica também pode ser realizada por meios trans- mucosos ou transdérmicos. Para a administração transmucosa ou transdérmica, penetrantes apropriados à barreira a ser permeada são usados na formulação. Tais penetrantes são, em geral, conhecidos na técnica, e incluem, por exemplo, para a administração transmucosa, detergentes, sais biliares e derivados de ácido fusídico. A administração transmucosa pode ser realizada através do uso de pulverizações nasais ou supositórios. Para a administração transdérmica, os compostos ativos são formulados em unguentos, pomadas, géis ou cremes, conforme geralmente conhecido na técnica.
[0880] Os compostos ativos podem ser preparados com portadores farmaceu- ticamente aceitáveis que protegerão o composto contra eliminação rápida do corpo, tais como uma formulação de liberação controlada, incluindo implantes e sistemas de liberação microencapsulada. Os polímeros biodegradáveis e biocompatíveis podem ser usados, tais como etileno vinil acetato, polianidridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres e ácido poliláctico. Os métodos para a preparação de tais formulações serão evidentes àqueles habilitados na técnica. Os materiais também podem ser comercialmente obtidos a partir da Alza Corporation e Nova Pharmaceuticals, Inc. As suspensões lipossômicas (incluindo lipossomas alvejados em células infectadas com anticorpos monoclonais para antígenos virais) também podem ser usadas como portadores farmaceuticamente aceitáveis. Estas podem ser preparadas, de acordo com métodos conhecidos àqueles habilitados na técnica, por exemplo, conforme descrito na Patente U.S. No 4.522.811.
[0881] É especialmente vantajoso formular composições orais ou parenterais na forma de unidade de dosagem por facilidade de administração e uniformidade da dosagem. A forma de unidade de dosagem, conforme usado neste relatório, se refere a unidades fisicamente distintas adequadas como dosagens unitárias para o paciente a ser tratado; cada unidade contendo uma quantidade pré-determinada de composto ativo calculada para produzir o efeito terapêutico desejado em associação com o portador farmacêutico exigido. A especificação quanto às formas de unidade de dosagem da invenção são ditadas pelas e diretamente dependentes das características únicas do composto ativo e do efeito terapêutico particular a ser obtido.
[0882] Em aplicações terapêuticas, as dosagens das composições farmacêuticas usadas, de acordo com a invenção, variam, dependendo do agente, da idade, peso e condição clínica do paciente, e da experiência e julgamento do médico ou profissional da saúde que administra a terapia, entre outros fatores que afetam a dosagem selecionada. Em geral, a dose deve ser suficiente para resultar em diminuição, e, preferivelmente, regressão do crescimento dos tumores e, também, preferivelmente, causando regressão completa do câncer. As dosagens podem variar de cerca de 0,01 mg/kg por dia a cerca de 5000 mg/kg por dia. Em aspectos preferidos, as dosagens podem variar de cerca de 1 mg/kg por dia a cerca de 1000 mg/kg por dia. Em um aspecto, a dose estará na faixa de cerca de 0,1 mg/dia a cerca de 50 g/dia; cerca de 0,1 mg/dia a cerca de 25 g/dia; cerca de 0,1 mg/dia a cerca de 10 g/dia; cerca de 0,1 mg a cerca de 3 g/dia; ou cerca de 0,1 mg a cerca de 1 g/dia, em doses únicas, divididas ou contínuas (a dose pode ser ajustada quanto ao peso do paciente em kg, área de superfície do corpo em m2, e idade em anos). Uma quantidade eficaz de um agente farmacêutico é aquela que fornece uma melhora objetivamente identificável, conforme observado pelo clínico ou outro observador qualificado. Por exemplo, a regressão de um tumor em um paciente pode ser medida com referência ao diâmetro de um tumor. A diminuição no diâmetro de um tumor indica regressão. A regressão também é indicada pela não reocorrência de tumores depois que o tratamento foi interrompido. Conforme usado neste relatório, o termo “maneira eficaz de dosagem” se refere à quantidade de um composto ativo para produzir o efeito biológico desejado em um paciente ou célula.
[0883] As composições farmacêuticas podem ser incluídas em um recipiente, pacote ou dispensador juntamente com as instruções para a administração.
[0884] Os compostos da presente invenção ainda são capazes de formar sais. Todas estas formas também são consideradas no escopo da invenção reivindicada.
[0885] Conforme usado neste relatório, “sais farmaceuticamente aceitáveis” se referem a derivados dos compostos da presente invenção em que o composto precursor é modificado através da preparação de sais de ácido ou base do mesmo. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a, sais minerais ou de ácido orgânico de resíduos básicos, tais como aminas, sais alcalinos ou orgânicos de resíduos ácidos, tais como ácidos carboxílicos, e semelhantes. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem os sais não tóxicos convencionais ou os sais de amônio quaternário do composto precursor formado, por exemplo, a partir de ácidos inorgânicos ou orgânicos não tóxicos. Por exemplo, tais sais não tóxicos convencionais incluem, mas não são limitados àqueles derivados de ácidos inorgânicos e orgânicos selecionados a partir de 2-acetoxibenzoico, 2-hidroxietano sulfônico, acético, ascórbico, benzeno sulfônico, benzoico, bicarbônico, carbônico, cítrico, edético, etano dissulfônico, 1,2-etano sulfônico, fumárico, gluco-heptônico, glicônico, glutâ- mico, glicólico, glicolliarsanílico, hexilresorcínico, hidrabâmico, bromídrico, clorídrico, iodídrico, hidroximaleico, hidroxinaftoico, isetiônico, láctico, lactobiônico, lauril sulfô- nico, maleico, málico, mandélico, metano sulfônico, napsílico, nítrico, oxálico, pa- moico, pantotênico, fenilacético, fosfórico, poligalacturônico, propiônico, salicílico, esteárico, subacético, succínico, sulfâmico, sulfanílico, sulfúrico, tânico, tartárico, tolu- eno sulfônico e aminoácidos que ocorrem comumente, por exemplo, glicina, alanina, fenilalanina, arginina, etc.
[0886] Outros exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem ácido hexanoico, ácido ciclopentano propiônico, ácido pirúvico, ácido malônico, ácido 3-(4- hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinâmico, ácido 4-clorobenzenossulfônico, ácido 2-naf- talenossulfônico, ácido 4-toluenossulfônico, ácido canforsulfônico, 4-metilbiciclo- [2,2,2]-oct-2-eno-1-ácido carboxílico, ácido 3-fenilpropiônico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciário, ácido mucônico, e semelhantes. A presente invenção também abrange sais formados quando um próton ácido presente no composto precursor é substituído por um íon metálico, por exemplo, um íon de metal alcalino, um íon alcalino terroso ou um íon alumínio; ou coordenado com uma base orgânica, tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina, e semelhantes. Na forma de sal, é entendido que a razão do composto para o cátion ou ânion do sal pode ser 1:1, ou qualquer razão, exceto 1:1, por exemplo, 3:1, 2:1, 1:2 ou 1:3.
[0887] Deve ser entendido que todas as referências aos sais farmaceutica- mente aceitáveis incluem formas de adição de solvente (solvatos) ou formas de cristal (polimorfos), conforme definido neste relatório, do mesmo sal.
[0888] Os compostos da presente invenção também podem ser preparados como ésteres, por exemplo, ésteres farmaceuticamente aceitáveis. Por exemplo, um grupo com função ácido carboxílico em um composto pode ser convertido em seu éster correspondente, por exemplo, um metila, etila ou outro éster. Além disso, um grupo álcool em um composto pode ser convertido em seu éster correspondente, por exemplo, acetato, propionato ou outro éster.
[0889] Os compostos da presente invenção também podem ser preparados como pró-fármacos, por exemplo, pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis. O termo “pró-fármaco” se refere a qualquer composto que libera um fármaco precursor ativo in vivo. Visto que os pró-fármacos são conhecidos para realçar diversas qualidades desejáveis dos produtos farmacêuticos (por exemplo, solubilidade, biodisponibili- dade, fabricação, etc.), os compostos da presente invenção podem ser liberados na forma de pró-fármaco. Assim, a presente invenção é intencionada a cobrir pró-fárma- cos dos compostos presentemente reivindicados, métodos de liberar os mesmos e composições contendo os mesmos. “Pró-fármacos” são intencionados a incluir quaisquer portadores covalentemente ligados que liberam um fármaco precursor ativo da presente invenção in vivo quando tal pró-fármaco é administrado a um paciente. Os pró-fármacos na presente invenção são preparados através da modificação de grupos funcionais presentes no composto em tal maneira que as modificações são clivadas, na manipulação de rotina ou in vivo, ao composto precursor. Os pró-fármacos incluem os compostos da presente invenção em que um grupo hidróxi, amino, sulfidrila, car- bóxi ou carbonila é ligado a qualquer grupo que pode ser clivado in vivo para formar um grupo hidroxila livre, amino livre, sulfidrila livre, carbóxi livre ou carbonila livre, respectivamente.
[0890] Exemplos de pró-fármacos incluem, mas não são limitados a, ésteres (por exemplo, derivados de acetato, dialquilaminoacetatos, formiatos, fosfatos, sulfatos e benzoato) e carbamatos (por exemplo, N,N-dimetilaminocarbonila) de grupos hidróxi funcionais, ésteres (por exemplo, ésteres etílicos, morfolinoetanol ésteres) de grupos carboxila funcionais, derivados de N-acila (por exemplo, N-acetila) bases de N-Mannich, bases de Schiff e enaminonas de grupos amino funcionais, oximas, acetais, cetais e enol ésteres de grupos funcionais cetona e aldeído nos compostos da invenção, e semelhantes, Veja Bundegaard, H., Design of Prodrugs, p1 - 92, Elese- vier, Nova Iorque-Oxford (1985).
[0891] Os compostos, ou sais farmaceuticamente aceitáveis, ésteres ou pró- fármacos dos mesmos, são administrados oralmente, nasalmente, transdermica- mente, de forma pulmonar, por inalação, bucalmente, sublingualmente, intraperinto- nealmente, subcutaneamente, intramuscularmente, intravenosamente, retalmente, in- trapleuralmente, intratecalmente e parenteralmente. Em uma modalidade, o composto é oralmente administrado. Uma pessoa habilitada na técnica reconhecerá as vantagens de certas vias de administração.
[0892] O regime de dosagem que utiliza os compostos é selecionado, de acordo com uma variedade de fatores, incluindo tipo, espécie, idade, peso, sexo e condição médica do paciente; a severidade da condição a ser tratada; a via de administração; a função renal e hepática do paciente; e o composto particular ou sal do mesmo utilizado. Um médico ou veterinário comumente habilitado pode facilmente determinar e prescrever a quantidade eficaz do fármaco exigido para prevenir, agir contra ou interromper o progresso da condição.
[0893] As técnicas para a formulação e administração dos compostos divulgados da invenção podem ser encontradas em Remington: the Science and Practice of Pharmacy, 19a edição, Mack Publishing Co., Easton, PA (1995). Em uma modalidade, os compostos descritos neste relatório, e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, são usados em preparações farmacêuticas em combinação com um portador ou diluente farmaceuticamente aceitável. Os portadores adequados farma- ceuticamente aceitáveis incluem enchedores ou diluentes sólidos inertes e soluções aquosas estéreis ou orgânicas. Os compostos estarão presentes em tais composições farmacêuticas em quantidades suficientes para fornecer a quantidade de dosagem desejada na faixa descrita neste relatório.
[0894] Todas as porcentagens e razões usadas neste relatório, a menos que de outro modo indicado, estão em peso. Outras características e vantagens da presente invenção são evidentes a partir dos exemplos diferentes. Os exemplos fornecidos ilustram componentes diferentes e metodologia útil na prática da presente invenção. Os exemplos não limitam a invenção reivindicada. Com base na presente divulgação, o técnico habilitado pode identificar e utilizar outros componentes e metodologia útil para a prática da presente invenção.
[0895] Nos esquemas sintéticos descritos neste relatório, os compostos podem ser esboçados com uma configuração particular para simplicidade. Tais configurações particulares não devem ser interpretadas como limitantes da invenção a um outro isômero, tautômero, regioisômero ou estereoisômero, nem excluem misturas de isômeros, tautômeros, regioisômeros ou estereoisômeros; entretanto, será entendido que um dado isômero, tautômero, regioisômero ou estereoisômero pode ter um nível mais alto de atividade em relação a um outro isômero, tautômero, regioisômero ou estereoisômero.
[0896] Os compostos projetados, selecionados e/ou otimizados pelos métodos descritos acima, uma vez produzidos, podem ser caracterizados usando uma variedade de ensaios conhecidos àqueles habilitados na técnica para determinar se os compostos têm atividade biológica. Por exemplo, as moléculas podem ser caracterizadas por ensaios convencionais, incluindo, mas não limitados àqueles ensaios descritos abaixo, para determinar se elas têm uma atividade prognosticada, atividade de ligação e/ou especificidade de ligação.
[0897] Além disso, a triagem de alta produção pode ser usada para acelerar a análise usando tais ensaios. Como um resultado, pode ser possível triar rapidamente as moléculas descritas neste relatório quanto à atividade, usando técnicas conhecidas no ramo. Metodologias gerais para a realização de triagem de alta produção são descritas, por exemplo, em Devlin (1998) High Throughput Screening, Marcel Dekker; e Patente U.S. No 5.763.263. Ensaios de alta produção podem usar uma ou mais técnicas de ensaio diferentes incluindo, mas não limitadas àquelas descritas abaixo.
[0898] Todas as publicações e documentos de patente citadas neste relatório são incorporadas como referência como se cada publicação ou documento fosse específica e individualmente indicada para ser incorporada neste relatório como referência. A citação das publicações e documentos de patente não é intencionada como uma admissão de que é pertinente à técnica anterior, nem constitui qualquer admissão quanto aos conteúdos ou data da mesma. A invenção descrita reconhecerá que a invenção pode ser praticada em uma variedade de modalidades e que a descrição precedente e exemplos abaixo são para propósitos de ilustração e não limitação das reivindicações que seguem.
[0899] Exemplos
[0900] Experimentos Gerais
[0901] RMN
[0902] Os espectros de RMN de 1H foram tomados usando CDCl3 a menos que de outro modo estabelecido e foram registrados a 400 ou 500 MHz usando um instrumentos com ímã Varian ou Oxford (500 MHz). As multiplicidades indicadas são s = singleto, d = dubleto, t = tripleto, q = quarteto, quint = quinteto, sxt = sexteto, m = multipleto, dd = dubleto de dubletos, dt = dubleto de tripletos; br indica um sinal amplo.
[0903] LCMS e HPLC
[0904] Shimadzu LC-Q, Shimadzu LCMS-2010EV ou Waters Acquity Ultra Performance LC. HPLC: Os produtos foram analisados por Shimadzu SPD-20A com coluna 150 x 4,5 mm YMC ODS- M80 ou coluna 150 x 4,6 mm YMC-Pack Pro C18 a 1,0 ml/min.
[0905] A fase móvel foi MeCN:H2O = 3:2 (contendo SDS a 0,3 % e H3PO4 a 0,05 %).
[0906] TFA a 0,05 % em água, TFA a 0,05 % em acetonitrila (gradiente Inicial 20 %, depois TFA/MeCN a 0,05 % a conc., a 95 % em 3 min. manter durante 0,5 min. entre 3,51 a 4,50 min, depois TFA/MeCN a 0,05 % conc. 20 %).
[0907] Alternativamente à LCMS, 2 métodos diferentes foram usados; em um deles usamos o pH alto (METCR1600) e o outro para mais compostos padrão (METCR1416).
[0908] Ácido fórmico a 0,1 % em água - Fase móvel “A” Ácido fórmico a 0,1 % em acetonitrila - Fase móvel “B” utilizando coluna Waters Atlantis dC18, 2,1 mm x 100 mm, 3 μm, com uma taxa de fluxo = 0,6 ml/min Temperatura da coluna = 40 °C; Tempo (min) %B 0,00 min 5 % B. 5,0 min 100 % B, 5,4 min 100 % B e 42 min 5 %B.
[0909] O método de 3,5 minutos se refere à coluna Atlantis dC18, 2,1 mm x 50 mm, 3 μm, taxa de fluxo de 1 ml/min a 40 °C. Fase móvel A Ácido fórmico (aq.) 0,1 % fase móvel B ácido fórmico (MeCN) 0,1 %), injeção 3 μL, gradiente 0 min (5 % orgânico), 2,5 min (100 % orgânico), 2,7 min (100 % orgânico), 2,71 min (5 % orgânico), 3,5 min (5 % orgânico).
[0910] O método de 7,0 minuto se refere à coluna Atlantis dC18, 2,1 mm x 100 mm, 3 μm, taxa de fluxo de 0,6ml/min a 40 °C. Fase móvel A Ácido fórmico (aq.) 0,1 % fase móvel B ácido fórmico (MeCN) 0,1 %, injeção 3 μL, gradiente 0 min (5 % orgânico), 5 min (100 % orgânico), 5,4 min (100 % orgânico), 5,42 min (5 % orgânico), 7 min (5 % orgânico).
[0911] Os métodos de 3,5 e 7 minutos foram realizados em um sistema MS18 Shimadzu LCMS- 2010EV ou um MS19 Shimadzu LCMS-2010EV utilizando bombas de LC-20AB e detectores SPD- M20A PDA.
[0912] Os produtos foram purificados por HPLC/MS usando Waters AutoPurification System com 3100 Mass Detector.
[0913] As análises de HPLC também podem ser realizadas em um Shimdazu LC-2010 CHT usando uma coluna YMC ODS-A, C18, (150 x 4,6 x 5 μm) na temperatura ambiente com uma taxa de fluxo de 1,4 ml/min. Um volume de injeção de 10 μL é utilizado e a detecção ocorre por intermédio de UV/PDA. A fase móvel A é TFA a 0,05 % em água e a Fase móvel B é TFA a 0,05 % em acetonitrila com um programa de gradiente de Inicial 5 % B a 95 % B em 8 min, manter durante 1,5 min, a 9,51 a 12 min B. conc. 0,5 %. O diluente é a fase móvel.
[0914] Outro
[0915] A cromatografia instantânea em coluna automática foi realizada em um Biotage Isolera versão 4. Cartucho de 10 g SNAP rodando a 12 ml/min ou uma cartucho de 25 g SNAP rodando a 25 ml/min e detectando a 254 nm e 280 nm.
[0916] A seleção de reduções de Nitrila pode ser realizada em um ThalesNano H-Cube®, de acordo com as condições descritas no procedimento experimental.
[0917] Procedimento geral pela síntese das piridona aminas
[0918] A uma solução do composto de ciano (1 eq.) em MeOH, uma quantidade catalítica de Níquel Raney e solução de amônia foram adicionadas. A mistura foi agitada na temperatura ambiente sob hidrogênio (pressão por balão) durante 1 h. Em conclusão da reação, a mistura foi filtrada através de um leito de lavagem com celite com MeOH. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer a amina desejada. Este procedimento é aplicável a uma ampla variedade de grupos R descritos dentro dos exemplos. Em geral, as ciano piridinas podem estar disponíveis a partir dos vendedores comerciais ou podem ser sintetizados por intermédio de métodos conhecidos à aqueles de habilidade comum na técnica.
[0919] Síntese de materiais de partida ou intermediários
[0920] sal de HCl de 3-(aminometil)-6-metil-4-propil-1,2-di-hidropiridin-2-ona
[0921] A uma solução agitada de t-BuOK (20,0 g, 179 mmols) e cianoaceta- mida (16,5 g, 196 mmols) em DMSO (300 mL) foi adicionado (3E)-3-hepten-2-ona (20,0 g, 178 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 30 minutos e depois t-BuOK adicional (60,0 g, 712 mmols) foi adicionado à mistura de reação. A mistura de reação foi colocada sob atmosfera de oxigênio e agitada durante 16 h. A mistura de reação depois foi purgada com argônio e foi esfriada a 0 oC. A mistura foi diluída com HCl aq. e o precipitado resultante foi coletado. O sólido foi lavado com água e seco para fornecer 6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila (15,0 g, 47 % de rendimento).
[0922] A uma solução agitada de 6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridino-3- carbonitrila (15,0 g, 85,1 mmols) em metanol (600 mL) e HCl concentrado (15 mL) foi adicionado Pd(OH)2 (15,0 g). A mistura foi agitada durante 48 horas sob atmosfera de H2. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado a vácuo. Etanol foi adicionado ao resíduo, o precipitado resultante foi coletado e seco para fornecer o composto do título como um sólido branco (13,0 g, 60 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 11,86 (br. s., 1H), 6,00 (s, 1H), 3,78 (q, J = 5,5 Hz, 2H), 3,61 (br. s., 2H), 2,46 (m, 2H), 2,17 (s, 3H), 1,50 (sxt, J = 7,4 Hz, 2H), 0,91 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
[0923] 6-Metil-2-oxo-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila
[0924] A uma solução de 2-cianoacetamida (35,1 g, 417 mmols) e t-BuOK (42,5 g, 379 mmols) em DMSO (631 ml) foi adicionado 5-metil-3-hexen-2-ona (50,0 ml, 379 mmols) sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 23 °C durante 30 min e depois t-BuOK adicional (127 g, 1137 mmols) foi adicionado. O gás N2 foi substituído por gás O2 e a mistura foi agitada durante 45 h a 23 °C sob oxigênio. A mistura foi esfriada a 0 °C, diluída com H2O (200 ml) e HCl (5N, 227 ml, lentamente adicionado). A mistura foi agitada durante 15 min a 0 °C e o sólido foi filtrado com funil de Buchner. O sólido foi lavado com H2O (1500 ml) e seco com ar quente (55 °C, 16 h) para fornecer 6-metil-2-oxo-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila (26,6 g, 40 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 6,14 ppm (s, 1H), 3,25 - 3,29 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 1,26 (d, J = 6,8Hz, 6H); LC-MS: m/z 177,1 [M + 1], 198,9 [M + 23].
[0925] sal de HCl de 3-(Aminometil)-6-metil-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridin- 2-ona
[0926] A uma solução de 6-metil-2-oxo-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridino-3- carbonitrila (5,00 g, 28,4 mmols) e em MeOH (400 ml) e HCl (8,8 ml, 12 M) foi adicionado Pd(OH)2 a 10 % (5,17 g, 3,68 mmols) sob atmosfera de N2. O gás N2 foi substituído por gás H2 e a mistura foi agitada durante 24 h a 23 °C sob hidrogênio. O gás H2 foi substituído por gás N2 e a mistura foi filtrada através de celite, lavada com MeOH e concentrada. O resíduo foi triturado com EtOH-TBME, o sólido foi coletado com funil de Buchner e seco a vácuo para fornecer o composto do título (6,15 g, 100 %). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 11,9 (br-s, 1H), 8,03 (br-s, 2H), 6,12 (s, 1H), 3,82 - 3,84 (m, 2H), 3,08 - 3,12 (m, 1H), 2,19 (s, 3H), 1,12 (d, J = 6,8Hz, 6H).
[0927] 6-Metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila
[0928] A uma solução de 2-cianoacetamida (14,0 g, 166 mmols) e trifluoroa- cetilacetona (20,0 ml, 166 mmols) em H2O (332 ml) foi adicionado K2CO3 (6,60 g, 47,9 mmols). A mistura foi agitada a 23 °C durante 15 h. O sólido precipitado foi filtrado com funil de Buchner, lavado com H2O gelada, e seco com ar quente (60 oC, 16 h) para fornecer o composto do título (17,6 g, 52 %). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 2,38 (s, 3H), 6,66 (s, 1H).
[0929] sal de HCl de hidrocloridreto de 3-(Aminometil)-6-metil-4-(trifluorome-til)-1,2-di-hidropiridin-2-ona
[0930] A uma solução de 6-metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridino-3- carbonitrila (400 mg, 1,98 mmol) em MeOH (19,8 ml) e HCl (436 ul, 12 M) foi adicionado Pd(OH)2 a 10 % (361 mg, 0,257 mmol) sob atmosfera de N2. O gás N2 foi substituído por gás H2 e a mistura foi agitada durante 18 h a 23 °C sob hidrogênio. O gás H2 foi substituído por gás N2. A mistura foi filtrada através de Celite, lavada com MeOH e concentrada. O resíduo foi triturado com MeOH-Et2O, coletado com funil de Buchner, e seco a vácuo para fornecer o composto do título (433 mg, 100 %). RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 2,31 (s, 3H), 3,88 (s, 2H), 6,43 (s, 1H).
[0931 ] 5-Fluoro-4-isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila
[0932] A uma solução agitada de 6-metil-2-oxo-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropi- ridino-3-carbonitrila (225 mg, 1,277 mmol) em MeCN (6 mL) foi adicionado Selectfluor (620 mg, 1,75 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 oC durante 3 h. Depois do esfriamento a 23 °C, a mistura de reação foi concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (EtOAc-heptano a 50 % a 100 % para obter o composto do título (90 mg, 36 %). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,39 (m, 1H), 2,44 (d, J = 3,1 Hz, 3H), 1,41 (dd, J = 7,0, 3,1 Hz, 6H); LCMS E-S (M + H) = 195,2.
[0933] 5-Fluoro-6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila
[0934] O composto do título foi preparado da mesma maneira conforme descrito para 5-Fluoro-4-isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila (20 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,80 (dt, J = 7,9, 1,9 Hz, 2H), 2,31 (d, J = 2,1 Hz, 3H), 1,73 (tq, J = 7,4, 7,4 Hz, 2H), 1,06 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LCMS E-S (M + H) = 195,2.
[0935] 5-Fluoro-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila
[0936] O composto do título foi preparado da mesma maneira conforme descrito para 5-Fluoro-4-isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila (15 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,46 (d, J = 3,1 Hz, 3H), 2,44 (d, J = 7,4, 3,1 Hz, 3H); LCMS E-S (M + H) = 167,2.
[0937] 3-(Aminometil)-5-fluoro-4-isopropil-6-metilpiridin-2(1H)-ona
[0938] 5-Fluoro-4-isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila (100 mg, 0,515 mmol) em frasco de 100 mL foi dissolvido em uma mistura de MeOH (6 mL) e 2 mL NH3 aq. (2 mL, 25 %). A redução foi conduzida usando H-Cube com Ni Raney como um catalisador na temperatura ambiente durante 3 a 4 h. Na conclusão da reação (monitorada por TLC), a reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título como um sólido cinza (90 mg, 90 %). RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 4,04 (s, 2H), 3,22 (m, 1H), 2,24 (d, J = 3,4 Hz, 3H), 1,32 (dd, J = 7,0, 1,8 Hz, 6H); LCMS E-S (M + H) = 199,2.
[0939] 3-(Aminometil)-5-fluoro-6-metil-4-propilpiridin-2(1H)-ona
[0940] O composto do título foi preparado da mesma maneira conforme descrito para 3-(aminometil)-5-fluoro-4-isopropil-6-metilpiridin-2(1H)-ona (92 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,76 (s, 2H), 2,61 (dt, J = 7,2, 1,8 Hz, 2H), 2,31 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 1,57 (tq, J = 7,6, 7,6 Hz, 2H), 1,00 (t, J = 7,3 Hz, 3H);LCMS E-S (M + H) = 199,2.
[0941] 3-(Aminometil)-5-fluoro-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona
[0942] O composto do título foi preparado da mesma maneira conforme descrito para 3-(Aminometil)-5-fluoro-4-isopropil-6-metilpiridin-2(1H)-ona (92 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,79 (s, 2H), 2,29 (d, J = 3,3 Hz, 3H), 2,24 (d, J = 2,1 Hz, 3H); LCMS E-S (M + H) = 171,2.
[0943] Ácido 2-Metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoico
[0944] A uma solução agitada de ácido 2-metil-5-(trifluorometil)benzoico (2,00 g, 9,80 mmols) em H2SO4 (20 mL, 12 N) foi adicionado HNO3 (2 mL, 12 N) a 0 °C. Depois da agitação durante 3 horas, água foi adicionada e o precipitado resultante foi coletado. O sólido foi lavado com água e seco para fornecer o composto do título como um sólido branco (1,90 g, 76 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm; 8,43 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 2,77 (s, 3H); MS (ES) [M-H] 247,8.
[0945] 2-metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoato de metila
[0946] A uma solução de ácido 2-metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoico (21,0 g, 84,3 mmols) em DMF (200 mL) foi adicionado carbonato de potássio (35,0 g, 253 mmols) e iodeto de metila (24,0 g, 169 mmols). A mistura foi agitada a 60 °C e depois da agitação durante 6 h a mistura de reação foi esfriada a 23 °C e foi filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo e o resíduo foi dissolvido em EtOAc e água. A fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 250 mL e as camadas orgânicas combinadas foram concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2 hep- tano-EtOac = 4/1) para fornecer o composto do título (20,0 g, 90 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ (ppm); 8,27 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 3,99 (s, 3H), 2,71 (s, 3H); MS (ES) [M-H] 261,9.
[0947] 3-amino-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila
[0948] A uma solução agitada de 2-metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoato de metila (20,0 g, 76,0 mmols) em MeOH (400 ml) foi adicionado Pd(OH)2 (2,00 g). A mistura de reação foi agitada durante 3 horas sob atmosfera de hidrogênio. Depois de purgada com nitrogênio, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado a vácuo para fornecer o composto do título como um sólido laranja (10,2 g, 58 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,47 (brs, 1H), 7,01 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,92 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 2,39 (s, 3H).
[0949] 4-{[3-(metoxicarbonil)-2-metil-5-(trifluorometil)fenil]amino}piperidina-1- carboxilato de terc-butila
[0950] A uma solução agitada de 3-amino-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (6,00 g, 25,7 mmols) em CH2Cl2 (120 mL) e AcOH (6 mL) foi adicionado N- Boc piperidinona (6,70 g, 33,4 mmols) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (13,6 g, 64,3 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 20 horas. Em seguida, NaHCO3 saturado foi adicionado e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 50 mL) e a camada orgânica combinada foi concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (SiO2 heptano/EtOAc = 4/1) para fornecer o composto do título (10,6 g, 98 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,37 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 4,05 (m, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,01 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 1,71 (m, 2H), 1,48 - 1,61 (m, 2H), 1,45 (s, 9H); MS (ES) [M-H] 415,1.
[0951] 4-{etil[3-(metoxicarbonil)-2-metil-5-(trifluorometil)fenil]amino}piperi- dina-1-carboxilato de terc-butila
[0952] A uma solução agitada de 4-{[3-(metoxicarbonil)-2-metil-5-(trifluorome- til)fenil]amino}piperidina-1-carboxilato de terc-butila (10,6 g, 25,4 mmols) em CH2Cl2 (200 mL) e AcOH (10 mL) foi adicionado acetaldeído (2,80 g, 63,5 mmols) e triaceto- xiboro-hidreto de sódio (13,4 g, 63,5 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 24 horas. Em seguida, NaHCO3 saturado foi adicionado e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 50 mL) e a camada orgânica combinada foi concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (SiO2 Heptano/EtOAc = 5/1) para fornecer o composto do título como óleo (4,50 g, 40 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,82 (br.s., 1H), 7,45 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 3,96 - 4,18 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,08 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,89 (tt, J = 11,0, 3,7 Hz, 1H), 2,69 (m, 2H), 2,55 (s, 3H), 1,73 (m, 2H), 1,49 - 1,56 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) [M + Na] 467,0.
[0953] sal de TFA de 3-[etil(piperidin-4-il)amino]-2-metil-5-(trifluorometil)ben- zoato de metila
[0954] A uma solução agitada de 4-{etil[3-(metoxicarbonil)-2-metil-5-(trifluoro- metil)fenil]amino}piperidina-1-carboxilato de terc-butila (4,50 g, 10,1 mmols) em CH2Cl2 (50 mL) foi adicionado TFA (5 mL). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 18 horas. Em seguida, a mistura de reação foi concentrada a vácuo para fornecer o composto do título como um produto bruto (7,70 g).
[0955] 3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila
[0956] A uma solução agitada de sal de TFA de 3-[etil(piperidin-4-il)amino]-2- metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (material bruto, 5,30 g, 12,0 mmols) em CH2Cl2 (150 mL) e AcOH (10 mL) foi adicionado formaldeído (15 mL, solução aquosa a 44 %) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (6,40 g, 30,0 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 2,5 dias. Em seguida, NaHCO3 saturado foi adicionado e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 50 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 heptano/EtOAc = 2/1) para fornecer o composto do título como óleo (1,20 cg, 28 % de rendimento). RMN de 1H (400 cMHz, CDCl3) δppm; 7,81 (br.s., 1H), 7,45 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,10 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,83 (m, 2H), 2,66 - 2,77 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,84 -1,94 (m, 2H), 1,63 - 1,78 (m, 4H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 359,1.
[0957] 3-{etil[1-(propan-2-il)piperidin-4-il]amino}-2-metil-5-(trifluorometil)ben-zoato de metila
[0958] A uma solução agitada de sal de TFA de 3-[etil(piperidin-4-il)amino]-2- metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (material bruto, 1,30 g, 3,36 mmols) em CH2Cl2 (20 mL) e AcOH (5 mL) foi adicionado acetona (590 mg, 10,1 mmols) e tria- cetoxiboro-hidreto de sódio (1,80 g, 8,40 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 6 dias e depois NaHCO3 saturado foi adicionado e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 30 mL) e a camada orgânica combinada foi concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 heptano/acetato de etila = 5/1) para fornecer o composto do título como óleo (220 mg, 17 % de rendimento). 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,79 (br.s., 1H), 7,44 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,10 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,86 (m, 2H), 2,61 - 2,75 (m, 2H), 2,53 (s, 3H), 2,06 (m, 2H), 1,70 - 1,80 (m, 2H), 1,58 - 1,69 (m, 2H), 1,00 (s x 2, 6H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 387,2.
[0959] Ácido 3-[Etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-5-(trifluorometil)ben- zoico
[0960] A uma solução agitada de 3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-5- (trifluorometil)benzoato de metila (700 mg, 1,95 mmol) em metanol (15 mL) foi adicionado NaOH aq. (5M, 590 ul, 2,93 mmols). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 3 horas. Depois do esfriamento a 23 °C, HCl (2 M) foi adicionado à mistura. A mistura foi acidificada ao pH = 5 e foi concentrada a vácuo para fornecer o composto do título como produto bruto (1,26 g).
[0961] Após o mesmo método de preparação para ácido 3-[etil(1-metilpiperi- din-4-il)amino]-2-metil-5-(trifluorometil)benzoico, os compostos dos títulos seguintes foram preparados com 3-amino-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila e 3-oxoa- zetidino-1-carboxilato de terc-butila.
[0962] 3-((3-(metoxicarbonil)-2-metil-5-(trifluorometil)fenil)amino)azetidino-1-carboxilato de t-butila
[0963] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,49 (s, 1H), 6,60 (s, 1H), 4,39 (dd, J = 7,2 Hz, 8,8 Hz, 2H), 4,26 (m, 1H), 4,19 (br, d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,78 (m, 2H), 2,41 (s, 3H), 1,47 (s, 9H).
[0964] 3-(etil(3-(metoxicarbonil)-2-metil-5-(trifluorometil)fenil)amino)azetidino- 1-carboxilato de terc-butila
[0965] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,86 (s, 1H), 7,20 (s, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,99 (dd, J = 8,4 Hz, J = 8,4 Hz, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,65 (br, 2H), 3,00 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,60 (s, 3H), 1,43 (s, 9H), 0,90 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + 1) 417,41.
[0966] 3-(azetidin-3-il(etil)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila
[0967] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,89 (s, 1H), 7,20 (s, 1H), 4,39 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,87 (m, 2H), 3,68 (br, 2H), 2,99 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,64 (s, 3H), 0,92 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + 1) 317,32.
[0968] 3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila
[0969] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,83 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,60 (br, dd, J = 7,2, 7,2 Hz, 2H), 2,94 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,72 (br, t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,59 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 0,90 (t, J = 7,2 Hz, 3H); MS (ES) (M + 1) 331,09.
[0970] Ácido 3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)ben-zoico
[0971]
[0972] RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,83 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 4,44 (br, 1H), 3,86 (br, 2H), 3,33 (s, 2H), 3,04 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 3,03 (s, 3H), 2,64 (s, 3H), 0,90 (t, J = 7,2 Hz, 3H); MS (ES) (M + 1) 317,32.
[0973] 3-((5-Cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil)amino)azetidino-1-carboxi-lato de terc-butila
[0974]
[0975] RMN de 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 7,05 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 7,2, 7,8 Hz, 2H), 4,26 - 4,21 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,82 (dd, J = 4,4, 8,3 Hz, 2H), 2,29 (s, 3H), 1,45 (s, 9H).
[0976] 3-((5-Cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil)(etil)amino)azetidino-1-car- boxilato de terc-butila
[0977]
[0978] RMN de 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 7,57 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,19 - 4,14 (m, 1H), 3,98 (dd, J = 8,0, 7,5 Hz, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,62 - 3,56 (br, 2H), 2,98 (q, J = 6,7 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 0,88 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[0979] 5-cloro-3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metilbenzoato de metila
[0980]
[0981] RMN de 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 7,53 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,01 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,57 (dd, J = 6,5, 8,0 Hz, 2H), 2,93 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,83 (bt, J = 7,0 Hz, 2H), 2,49 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 0,90 (t, J = 7,0 Hz, 3H); LCMS (M + H) = 297,30.
[0982] Ácido 3-{Etil[1-(propan-2-il)piperidin-4-il]amino}-2-metil-5-(trifluorome- til)benzoico
[0983]
[0984] A uma solução agitada de 3-{etil[1-(propan-2-il)piperidin-4-il]amino}-2- metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (220 mg, 0,569 mmol) em metanol (4 mL) foi adicionado NaOH aq. (5 M, 170 ul, 0,854 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 2 horas. Depois do esfriamento a 23 °C HCl (2 M) foi adicionado à mistura.A mistura foi acidificada ao pH = 5 e foi concentrada a vácuo para fornecer o composto do título como produto bruto (510 mg).
[0985] 3-{[(2R*,6R*)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il]amino}-2-metil-5-(trifluo- rometil)benzoato de metila
[0986]
[0987] A uma solução agitada de 3-amino-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (400 mg, 1,72 mmol) em THF (15 mL) e TFA (491 uL) foi adicionado (2R, 6S)-1-benzil-2,6- dimetilpiperidin-4-ona (410 mg, 1,89 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada a 60 °C durante 1 hora sob atmosfera de nitrogênio. Em seguida, a mistura foi esfriada a 0 °C em um banho de gelo, triacetoxiboro-hidreto de sódio (765 mg, 3,43 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 2 horas. Em seguida, NaHCO3 aq. foi adicionado a 0 °C até o pH 8 a 9, e o teor foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2; heptano/acetato de etila = 3/1) para fornecer o composto do título como um óleo incolor. (278 mg, 37 % de rendimento). RMN de 1H (400M Hz, CDCl3) δppm; 7,21 - 7,40 (m, 6H), 6,90 (s, 1H), 3,95 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,60 - 3,73 (m, 2H), 3,46 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 3,08 - 3,12 (m, 1H), 2,98 - 3,03 (m, 1H), 2,30 (s, 3H), 2,02 - 2,08 (m, 1H), 1,83 - 1,88 (m, 1H), 1,52 - 1,60 (m, 1H), 1,17 - 1,26 (m, 1H), 1,11 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,13 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
[0988] 3-{[(2R*,6S*)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il]amino}-2-metil-5-(trifluo- rometil)benzoato de metila (mistura diastereomérica)
[0989]
[0990] A uma mistura agitada de MS3A (1,0 g), 3-amino-2-metil-5-(trifluoro- metil)benzoato de metila (350 mg, 1,50 mmol) e (2R, 6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin- 4-ona (359 mg, 1,65 mmol) em clorofórmio (10 mL) foi adicionado ácido acético (500 uL) a 0 °C e agitada na r.t. durante 7 horas. À mistura de reação foi adicionado triace- toxiboro-hidreto de sódio (670 mg, 3,00 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 1,5 horas. Em seguida, a mistura de reação foi resfriada com NaHCO3 aq. até o pH 8 a 9. A MS3Â foi removido através de filtração por Celite e o teor foi extraído com acetato de etila, seco em MgSO4, filtrado e o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (hep- tano/acetato de etila = 5/1 a 3/1). As frações alvo foram coletadas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH- SiO2; heptano/acetato de etila = 5/1) para fornecer o composto do título como um óleo amarelo claro (223 mg, 62 % de rendimento.). Para o isômero principal; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm; 7,40 - 7,21 (m, 6H), 6,85 (s, 1H), 4,00 - 3,95 (m, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,88 (d, 2H), 3,84 - 3,76 (m, 1H), 2,83 - 2,73 (m, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,83 - 1,69 (m, 4H), 1,13 (d, J = 6,4 Hz, 6H).
[0991] 3-{[(2R*,6R*)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-2-metil-5- (trifluorometil)benzoato de metila
[0992]
[0993] A uma solução agitada de 3-{[(2R, 6R)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4- il]amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (278 mg, 0,640 mmol) em CH2Cl2 (5 mL) e AcOH (500 uL) foi adicionado acetaldeído (359 mg, 6,40 mmol) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (428 mg, 1,92 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 7 horas. Em seguida, a mistura de reação foi resfriada com NaHCO3 aq. até o pH 8 a 9. O teor foi extraído com acetato de etila, seco em MgSO4 e filtrado. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2; heptano/acetato de etila = 5/1) para fornecer o composto do título como um óleo amarelo claro (236 mg, 80 % de rendimento.). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,79 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,21 - 7,36 (m, 5H), 3,92 (s, 3H), 3,87 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 3,38 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 3,04 - 3,15 (m, 4H), 2,73 - 2,80 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 1,76 - 1,82 (m, 1H), 1,51 - 1,63 (m, 2H), 1,34 - 1,42 (m, 1H), 1,06 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 0,93 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
[0994] 3-{[(2R*,6S*)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-2-metil-5- (trifluorometil)benzoato de metila (mistura diastereomérica)
[0995]
[0996] A uma solução agitada de 3-{[(2R, 6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4- il] amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (223 mg, 0,513 mmol) em clorofórmio (4 mL) e ácido acético (500 uL) foi adicionado acetaldeído (1,0 ml) e agitada durante 30 min a 0 °C. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (343 mg, 1,54 mmol) foi adicionado à mistura de reação a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 23 C durante 4 horas. Em seguida, a mistura de reação foi resfriada com NaHCO3 aq. até o pH 8 a 9. O teor foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com salmoura. A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (heptano/acetato de etila = 4/1 a 1/2) para fornecer o composto do título como um óleo incolor. (105,5 mg, 44 % de rendimento). MS (ES) [M + H] 463,3.
[0997] 3-{[(2R*,4S*,6R*)-1-Benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-N-[(4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[0998]
[0999] A uma solução agitada de 3-{[(2R, 6R)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4- il] (etil)amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (236 mg, 0,510 mmol) em etanol (5 mL) foi adicionado NaOH aq. (5 M, 269 ul, 1,02 mmol). A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 2 horas. Depois do esfriamento até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi concentrada a vácuo e seca sob pressão reduzida para fornecer o sal de sódio do ácido carboxílico bruto.
[01000] A uma solução agitada de sal de sódio do ácido carboxílico bruto e sal de HCl 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (125 mg, 0,664 mmol) em DMSO (5 mL) foi adicionado PyBOP (398 mg, 0,766 mmol) e base de Hunig (445 ul, 2,55 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 19 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água (duas vezes) e salmoura. A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada. A camada orgânica combinada foi concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2; acetato de etila/MeOH = 50/1 a 8/1) para fornecer o composto do título como um amorfo branco (267 mg, 90 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,14 - 7,36 (m, 8H), 5,94 (s, 1H), 4,53 - 4,56 (m, 2H), 3,85 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 3,58 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 3,02 - 3,14 (m, 4H), 2,72 - 2,80 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,32 - 1,82 (m, 4H), 1,05 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 0,92 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
[01001] 3-{[(2R*,4R*,6S*)-1-Benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-N- [(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[01002]
[01003] A uma solução agitada de 3-{[(2R, 6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4- il](etil)amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (106 mg, 0,228 mmol) em etanol (2,0 mL) foi adicionado NaOH aq. (5 M, 91,2 ul, 0,456 mmol). A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 1,5 horas. Depois do esfriamento até a temperatura ambiente, o solvente foi removido a vácuo e seco sob pressão reduzida. A uma solução agitada desse resíduo e sal de HCl 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin- 2-ona (55,9 mg, 0,297 mmol) em DMSO (2 mL) foi adicionada base de Hunig (199 ul, 1,14 mmol) e PyBOP (178 mg, 0,342 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura de reação foi resfriada com água. O teor foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água duas vezes e salmoura. A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH SiO2, acetato de etila/MeOH = 50/1 a 40/1) para fornecer o composto do título como um óleo incolor (35,6 mg, 27 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,34 - 7,08 (m, 7H), 5,96 (s, 1H), 4,54 (d, J = 6,0Hz, 2H), 3,81 (s, 2H), 3,53 (m, 1H), 2,99 - 2,91 (m, 2H), 2,81 (m, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,82 - 1,47 (m, 4H), 1,00 (d, J = 6,4Hz, 6H), 0,81 (t, J = 6,8Hz, 3H); MS(ES) [M + H] 583,0.
[01004] 4-{[5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil]amino}piperidina-1-carboxi- lato de terc-butila
[01005]
[01006] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1,40 g, 7,04 mmols) em CH2Cl2 (30 mL) e AcOH (2,50 g, 42,2 mmols) foi adicionado N-Boc piperidinona (1,96 g, 9,85 mmols) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (4,40 g, 21,1 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 18 horas e depois NaHCO3 saturado foi adicionado e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 20 mL) e as camadas orgânicas combinadas foram concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (SiO2 hep- tano/acetato de etila = 10/1 a 1/1) para fornecer o composto do título como óleo (2,40 g, 89 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,09 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 4,05 (m, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,63 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 2,97 (m, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,05 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,27 (m, 2H).
[01007] 4-{[5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil](etil)amino}piperidina-1-car- boxilato de terc-butila
[01008]
[01009] A uma solução agitada de 4-{[5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil] amino}piperidina-1-carboxilato de terc-butila (2,40 g, 6,28 mmols) em diclorometano (50 mL) e ácido acético (1,8 mL) foi adicionado acetaldeído (830 ul, 12,6 mmols) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (4,00 g, 18,8 mmols). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 18 horas. Em seguida, NaHCO3 aq. foi adicionado e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com diclorometano. A camada orgânica combinada foi concentrada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatogra- fia em coluna em gel de sílica (SiO2 heptano/acetato de etila = 10/1) para fornecer o composto do título como óleo (2,40 g, 89 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,56 (s, 1H), 7,21 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 4,04 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,02 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,88 (m, 1H), 2,68 (m, 2H), 2,44 (s, 3H), 1,71 (m, 2H), 1,48 - 1,61 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 0,83 - 0,89 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS(ES) [M + Na] 433,0.
[01010] 5-cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metilbenzoato de metila
[01011]
[01012] A uma solução agitada de 4-{etil[3-(metoxicarbonil)-2-metil-5-clorofe- nil]amino}piperidina-1-carboxilato de terc-butila (2,20 g, 5,35 mmols) em diclorome- tano (20 mL) foi adicionado TFA (4 mL). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 horas. Em seguida, a mistura de reação foi concentrada a vácuo para fornecer sal de TFA como um produto bruto.
[01013] A uma solução agitada de sal de TFA em THF (20 mL) e ácido acético (305 ul) foi adicionado formaldeído (3 mL, solução aquosa a 44 %) e triacetoxiboro- hidreto de sódio (3,40 g, 16,1 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 19 horas e depois NaHCO3 saturado foi adicionado e a mistura foi separada. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (50 mL) e a camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca em Na2SO4 e filtrada e o filtrado concentrado a vácuo.O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 hep- tano/acetato de etila = 1/1) para fornecer o composto do título como óleo (1,54 g, 89 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,54 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,07 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,81 - 2,85 (m, 2H), 2,66 - 2,70 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,86 - 1,93 (m, 2H), 1,65 - 1,75 (m, 4H), 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
[01014] Ácido 5-Cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metilbenzoico
[01015]
[01016] A uma solução agitada de 5-cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]- 2-metilbenzoato de metila (1,06 g, 3,26 mmols) em metanol (10 mL) foi adicionado NaOH aq. (5 M, 780 ul, 3,92 mmols). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 18 horas. Depois do esfriamento a 23 °C, HCl (2 M, 2 mL) foi adicionado à mistura e a mistura foi acidificada ao pH = 5 e foi concentrada a vácuo para fornecer o composto do título como produto bruto (1,80 g).
[01017] 3-{[(2R,6R)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il]amino}-5-fluoro-2-metil- benzoato de metila
[01018]
[01019] A uma solução agitada de 3-amino-5-fluoro-2-metilbenzoato de metila (520 mg, 2,84 mmols) em THF (20 mL) e TFA (813 uL) foi adicionado (2R, 6S)-1- benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-ona (679 mg, 3,12 mmols) a 0 °C. A mistura foi agitada a 60 °C durante 1 hora sob atmosfera de nitrogênio. Em seguida, a mistura foi esfriada a 0 °C em um banho de gelo, triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,27 g, 5,68 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 horas. Em seguida, NaHCO3 aq. foi adicionado a 0 °C até o pH 8 a 9, e o teor foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2; heptano/acetato de etila = 5/1) para fornecer o composto do título como um óleo incolor (331 mg, 30 % de rendimento.). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,35 - 7,39 (m, 2H), 7,27 - 7,30 (m, 2H), 7,21 - 7,26 (m, 1H), 6,76 (dd, J = 2,4, 9,2 Hz, 1H), 6,45 (dd, J = 2,4, 11,2 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,58 - 3,65 (m, 2H), 3,46 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 3,06 - 3,12 (m, 1H), 2,94 - 3,01 (m, 1H), 2,21 (s, 3H), 2,02 - 2,07 (m, 1H), 1,82 - 1,89 (m, 1H), 1,15 - 1,22 (m, 1H), 1,12 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,09 (d, J = 7,2 Hz, 3H).
[01020] 3-{[(2R,4R,6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il]amino}-5-fluoro-2- metilbenzoato de metila
[01021]
[01022] A uma solução agitada de 3-amino-5-fluoro-2-metilbenzoato de metila (171 mg, 0,931 mmol) em clorofórmio (6 mL) e AcOH (266 uL) foi adicionado (2R, 6S)- 1-benzil- 2,6-dimetilpiperidin-4-ona (212 mg, 0,980 mmol) e MS3A (500 mg) a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 2 horas sob atmosfera de nitrogênio. Em seguida, a mistura foi esfriada a 0 °C em um banho de gelo e triacetoxiboro- hidreto de sódio (415 mg, 1,86 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 horas. Em seguida, NaHCO3 aq. foi adicionado a 0 °C até o pH 8 a 9, e o teor foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (1. SiO2; heptano/acetato de etila= 5/1 a 3/1, 2. NH-SiO2; heptano/acetato de etila =5/1, 3. NH-SiO2; heptano/acetato de etila =10/1 a 6/1) para fornecer o composto do título como um óleo incolor (85,0 mg, 24 % de rendimento.). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,38 - 7,20 (m, 5H), 6,77 (dd, J = 2,4, 9,2 Hz, 1H), 6,40 (dd, J = 2,4, 11,6 Hz, 1H), 3,95 - 3,90 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,87 (s, 2H), 2,84 - 2,74 (m, 2H), 2,16 (s, 3H), 1,81 - 1,66 (m, 4H), 1,11 (d, J = 6,0 Hz, 6H).
[01023] 3-{[(2R,6R)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-5-fluoro-2- metilbenzoato de metila
[01024]
[01025] A uma solução agitada de 3-{[(2R, 6R)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4- il] amino}-5-fluoro-2-metilbenzoato de metila (269 mg, 0,701 mmol) em diclorometano (5 mL) e ácido acético (500 uL) foi adicionado acetaldeído (124 mg, 2,80 mmols) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (469 mg, 2,10 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 12 horas. Em seguida, a mistura de reação foi resfriada com NaHCO3 aq. até o pH 8 ao 9. O teor foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2; hep- tano/acetato de etila = 5/1) para fornecer o composto do título como um óleo amarelo claro (277 mg, 96 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,19 - 7,36 (m, 6H), 6,97 (dd, J = 2,4, 10,4 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,86 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,39 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,02 - 3,10 (m, 4H), 2,74 - 2,80 (m, 1H), 2,43 (s, 3H), 1,74 - 1,82 (m, 1H), 1,51 - 1,63 (m, 2H), 1,32 - 1,40 (m, 1H), 1,05 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 0,93 (d, J =7,2 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 413,0.
[01026] 3-{[(2R,4R,6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-5-fluoro- 2-metilbenzoato de metila
[01027]
[01028] A uma solução agitada de 3-{[(2R, 4R, 6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperi- din-4-il]amino}-5-fluoro-2-metilbenzoato de metila (84,9 mg, 0,221 mmol) e acetalde- ído (124 mg, 2,21 mmols) em clorofórmio (2 mL), foi adicionado ácido acético (200 uL) a 0 °C e agitada a 23 °C durante 1 hora. À mistura de reação foi adicionado triaceto- xiboro-hidreto de sódio (148 mg, 0,662 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 3,5 horas. À mistura de reação foram adicionados MS3A (200 mg) e acetaldeído (500 ul) a 0 °C e agitada na r.t. durante 25 minutos. À mistura de reação foi adicionado triacetoxiboro-hidreto de sódio (148 mg, 0,662 mmol) a 0 °C e agitada na temperatura ambiente durante 12 horas. Em seguida, a mistura de reação depois foi resfriada com NaHCO3 saturado até o pH = 8 ao 9. O teor foi extraído com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com salmoura. A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2; heptano/acetato de etila = 5/1) para fornecer o composto do título como um óleo incolor (48,5 mg, 53 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,36 - 7,19 (m, 6H), 6,96 (dd, J = 2,8, 9,6Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,82 (s, 2H), 3,44 (m, 1H), 2,98 - 2,91 (m, 2H), 2,88 - 2,87 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 1,82 - 1,70 (m, 2H), 1,57 - 1,47 (m, 2H), 0,99 (d, J = 6,4 Hz, 6H), 0,83 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
[01029] 3-{[(2R,6R)-1-Benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-N-[(4,6-di- metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-5-fluoro-2-metilbenzamida
[01030]
[01031] A uma solução agitada de 3-{[(2R, 6R)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4- il] (etil)amino}-5-fluoro-2-metilbenzoato de metila (277 mg, 0,672 mmol) em etanol (5 mL) foi adicionado NaOH aq. (5 M, 269 ul, 1,35 mmol). A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 2 horas. Depois do esfriamento até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi concentrada a vácuo e seca sob pressão reduzida para fornecer o sal de sódio do ácido carboxílico bruto.
[01032] A uma solução agitada de sal de sódio do ácido carboxílico bruto e sal de HCl 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (165 mg, 0,874 mmol) em DMSO (5 mL) foi adicionado PyBOP (525 mg, 1,01 mmol) e base de Hunig (586 ul, 3,36 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 5 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água (2 x 10 mL) e salmoura (1 x 10 mL). A camada orgânica foi seca em MgSO4 e filtrada e o filtrado concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2; acetato de etila apenas to acetato de etila/MeOH = 50/1 a 8/1) para fornecer o composto do título como um sólido branco (378 mg, rendimento quantitativo). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,20 - 7,38 (m, 5H), 7,02 - 7,10 (m, 1H), 6,80 - 6,84 (m, 1H), 6,73 - 6,78 (m, 1H), 5,93 (s, 1H), 4,51 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,85 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,38 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 3,01 - 3,05 (m, 4H), 2,67 - 2,81 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,52 - 1,83 (m, 3H), 1,32 - 1,39 (m, 1H), 1,05 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 0,93 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
[01033] 3-{[(2R, 4R, 6S)-1-Benzil-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-5-fluoro-2-metilbenzamida
[01034]
[01035] A uma solução agitada de 3-{[(2R, 4R, 6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperi- din-4-il] (etil)amino}-5-fluoro-2-metilbenzoato de metila (48,5 mg, 0,118 mmol) em eta- nol (1,5 mL) foi adicionado NaOH aq. (5 M, 47,0 ul, 0,235 mmol). A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 1,5 horas. Depois do esfriamento até a temperatura ambiente, o solvente foi removido a vácuo e seco sob pressão reduzida. A uma solução agitada desse resíduo e sal de HCl 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (28,8 mg, 0,153 mmol) em DMSO (1 mL) foi adicionado PyBOP (91,8 mg, 0,176 mmol) e base de Hunig (102 ul, 0,588 mmol). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 13,5 horas. A mistura de reação foi resfriada com água, e a mistura foi extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com água (2 x 10 mL) e salmoura (1 x 10 mL). A camada orgânica foi seca em MgSO4, filtrada e o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH SiO2, acetato de etila/MeOH = 50/1 a 8/1) para fornecer o composto do título como um sólido branco (50,1 mg, 79 % de rendimento). MS(ES) [M + H] 533,3.
[01036] Exemplo 1: Síntese do Composto 1: 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01037]
[01038] Composto 1
[01039] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilben- zoato de metila
[01040]
[01041] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzo- ato de metila (0,5 g, 1,75 mmol) em acetonitrila (10 mL), Cs2CO3 (1,02 g, 2,63 mmols) e iodeto de metila (1,45 g, 3,5 mmols) foram adicionados à mesma. A mistura de reação resultante foi agitada a 80 °C durante 4 h. Após a conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dissolvido em água e extraído com acetato de etila. O material bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica, fornecendo o produto composto desejado sem purificação adicional (0,39 g).
[01042] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01043]
[01044] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-me- tilbenzoato de metila (1 equiv.) em etanol (5 mL), solução de NaOH aquosa (1 equiv.) foi adicionada e a reação agitada a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado com 1 N HCl ao pH 6. A fase aquosa foi extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e o solvente removido sob pressão reduzida fornecendo ácido puro (50 a 60 % de rendimento). A uma solução deste ácido (1 equiv.) em DMSO (1,5 mL), PyBOP (1,5 equiv.) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 15 min. Em seguida, 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (2 equiv.) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, água foi adicionada e o sólido precipitado resultante filtrado e lavado com água. Em seguida, este sólido foi agitado com acetonitrila durante 10 min e filtrado novamente para obter molécula alvo pura (50 a 60 % de rendimento). LCMS: 446,15 (M + 1)+; HPLC: 94,48 % (@ 254 nm) (Rt; 5,257); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,20 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 7,25 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,37 - 3,45 (m, 1H), 2,49 (3H ligado em solvente de pico), 2,17 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,53 - 1,67 (m, 4H), 1,38 - 1,50 (m, 4H).
[01045] Exemplo 2: Síntese do Composto 2: 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(piperidina-4-il)amino)benzamida
[01046]
[01047] Composto 2
[01048] Etapa 1: ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01049]
[01050] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50 g, 276,2 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (43,4 g, 151,8 mmols) foi adicionada às porções na temperatura ambiente e a massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Em conclusão, a massa de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo resultante foi lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto desejado (71,7 g, 99,9 %) que foi usado para reação adicional.
[01051] Etapa 2: 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila
[01052]
[01053] A uma solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (287 g, 1103 mmols) em DMF (150 mL), carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (626,63 g, 4415 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto desejado (302 g, 99 %) que foi usado para reação adicional.
[01054] Etapa 3: 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01055]
[01056] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila (150 g, 544 mmols) em etanol (750 mL), cloreto de amônio (150 g, 2777 mmols) dissolvido em água (750 mL) e pó de ferro (93,3 g, 1636 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada através de celite, fornecendo lavagem de água e acetato de etila, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto desejado.
[01057] Etapa 4: 4-((5-bromo-3-(metoxicarbonil)amino)piperidina-1-carboxi- lato de terc-butila
[01058]
[01059] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila bruto acima (5 g, 20,57 mmols) e 4-oxopiperidino-1-carboxilato de terc-butila (8,2 g, 41,15 mmols) em metanol (50 mL), ácido acético (1,2 g, 20,57 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro- hidreto de sódio (1,55 g, 24,6 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer composto 5 (5 g, 57 %).
[01060] Etapa 5: 4-((5-bromo-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil(metil)amino)pi- peridina-1-carboxilato de terc-butila
[01061]
[01062] A uma solução agitada de 4-((5-bromo-3-(metoxicarbonil)amino)pipe- ridina-1-carboxilato de terc-butila (3 g, 7,06 mmols) em acetonitrila (25 mL), carbonato de césio (4,57 g, 14,11 mmols) e iodeto de metila (5 g, 35,2 mmols) foram adicionados; a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por croma- tografia em coluna para fornecer o composto desejado (2,5 g, 81 %).
[01063] Etapa 6: 4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)piperidin-1-carboxilato de terc-butila
[01064]
[01065] NaOH aquoso (0,37 g, 9,38 mmols) foi adicionado a uma solução de 4-((5-bromo-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil(metil)amino)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (2 g, 4,69 mmols) em MeOH (20 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (1,7 g, 90 %).
[01066] O ácido (1,7 g, 4,22 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (10 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (1,42 g, 9,38 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (3,66 g, 7,04 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por purificação com cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (1,3 g, 50 %).
[01067] Etapa 7: 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)- 2-metil-3-(metil(piperidina-4-il)amino)benzamida
[01068]
[01069] Uma solução agitada de 4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)piperidin-1-carboxilato de terc-butila (1,3 g, 2,39 mmols) em DCM (10 mL) foi esfriada a 0 °C e TFA (2 mL) foi adicionado à mesma. A massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Em conclusão, a reação foi concentrada à secura. O resíduo foi basificado com bicarbonato de sódio aquoso até o pH 8 e a camada aquosa extraída com MeOH/DCM a 20 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o composto desejado (0,9 g, 85 %). LCMS: 461,15 (M + 1)+; HPLC: 98,52 % (@ 254 nm) (Rt; 4,673; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8,22 (t, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4 Hz), 2,91 (d, 2H, J = 11,6 Hz), 2,78 (bs, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,32 - 2,35 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (s, 6H), 1,44 - 1,50 (m, 4H).
[01070] Exemplo 3: Síntese do Composto 3: 5-cloro-3-(ciclo-hexil(me- til)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01071]
[01072] Composto 3
[01073] Etapa 1: Ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[01074]
[01075] Ácido 5-Cloro-2-metilbenzoico (4 g, 23,39 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (27 mL) a -10 °C aos lotes. Depois de 10 minutos, a mistura de nitração {preparada como mistura de HNO3 Conc. (3,3 g, 52,68 mmols) com H2SO4 conc. (4,4 mL)} foi adicionado às gotas a -10 °C. A massa de reação resultante foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto desejado (4,95 g, 99 %).
[01076] Etapa 2: 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01077]
[01078] À solução agitada de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (6,75 g, 31,25 mmols) em DMF (33 mL), carbonato de sódio (13,23 g, 125,18 mmols) e iodeto de metila (17,77 g, 125,2 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, água foi adicionada à massa de reação e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coluna em sílica (tamanho da malha 60 a 120) fornecendo o composto desejado (6 g, 83 %).
[01079] Etapa 3: 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01080]
[01081] À solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6 g, 26,13 mmols) em etanol (60 mL), cloreto de amônio (6 g, 112,1 mmols) dissolvido em água (60 mL) e pó de ferro (11,88 g, 208,4 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada à massa de reação e a mistura de reação foi filtrada através de celite, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto desejado.
[01082] Etapa 4: 5-cloro-3-(ciclo-hexilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01083]
[01084] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1 g, 5,025 mmols) e ciclo-hexanona (0,739 g, 7,75 mmols) em metanol (10 mL), ácido acético (0,301 g, 5,02 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (390 mg, 0,00621 mmol) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (1,4 g, contaminado com ciclo-hexanona).
[01085] Etapa 5: 5-cloro-3-(ciclo-hexil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01086]
[01087] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclo-hexilamino)-2-metilbenzo- ato de metila (1,4 g, 0,0049 mol) em acetonitrila (10 mL), carbonato de césio (3,2 g, 0,0099 mol) e iodeto de metila (3,5 g, 0,0024 mol) foram adicionados; a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 13 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (800 mg, 55 %).
[01088] Etapa 6: 5-cloro-3-(ciclo-hexil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01089]
[01090] NaOH aquoso (0,16 g, 4,06 mmols) foi adicionado a uma solução de composto 6 (0,8 g, 2,71 mmols) em EtOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,7 g, 91 %).
[01091] O ácido (0,7 g, 2,49 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (2 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,752 g, 4,98 mmols) foi adicionado à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,9 g, 3,73 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila seguido por purificação em coluna para fornecer o composto do título (0,250 g, 25 %).
[01092] LCMS: 416,35 (M + 1)+; HPLC: 99,01 % (@ 254 nm) (Rt; 5,408; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,20 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 7,05 (d, 1H, J = 2 Hz), 6,88 (d, 1H, J = 2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 2,70 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,75 - 1,35 (m, 7H), 1,25 - 1,05 (m, 3H).
[01093] Exemplo 4: Síntese do Composto 4: 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(1-pivaloilpiperidin-4-il)amino)benzamida
[01094]
[01095] Composto 4
[01096] A uma solução agitada de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(piperidina-4-il)amino)benzamida (0,05 g, 0,112 mmol) em DMF (2 mL), EDCI.HCl (0,064 g, 0,336 mmol), HOBt (0,03 g, 0,22 mmol), trietil amina (0,03 g, 0,336 mmol) e ácido piválico (0,023 g, 0,224 mmol) foram adicionados na temperatura ambiente e agitada a mesmo temperatura durante 18 h. Em conclusão, água foi adicionada e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas fornecendo material bruto; que em seguida, purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,03g, 56 %). LCMS: 545,20 (M + 1)+; HPLC: 98,60 % (@ 254 nm) (Rt; 6,355; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,20 (t, 1H, J = 4,4 Hz), 7,25 (d, 1H, J = 2,8 Hz), 7,05 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,23 - 4,25 (m, 4H), 3,00 (m, 1H), 2,76 (t, 2H, J = 12,4 Hz), 2,54 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,62 - 1,65 (m, 2H), 1,42 - 1,48 (m, 2H), 1,18 (s, 9H).
[01097] Exemplo 5: Síntese do Composto 5: 5-bromo-3-(ciclopen- til(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01098]
[01099] Composto 5
[01100] Etapa 1: ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01101]
[01102] A uma mistura de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (15 g, 82,80 mmols) em H2SO4 conc. (60 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (13,07 g, 45,71 mmols) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Em seguida, a mistura de reação foi lentamente vertida em 400 ml de água gelada. O sólido que foi separado por precipitação foi filtrado, lavado e seco sob vácuo o composto desejado (21 g, 98,22 %).
[01103] Etapa 2: 3-bromo-5-nitrobenzoato de metila (3):
[01104]
[01105] A uma solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (16 g, 61,54 mmols) em DMF (160 mL), iodometano (35,72 g, 248 mmols) e carbonato de sódio (26,28 g, 248 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi agitada a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada e o resíduo sólido inorgânico lavado com acetato de etila. Os filtrados combinados foram concentrados sob vácuo até a secura. O resíduo foi re-dissolvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio a 5 % (700 mL) seguido por solução de 5 M HCl (300 mL). A camada orgânica foi finalmente lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada para fornecer o composto desejado (16 g, 95 %).
[01106] Etapa 3: 3-amino-5-bromobenzoato de etila
[01107]
[01108] A uma solução agitada de 3-bromo-5-nitrobenzoato de metila (17 g, 62,04 mmols) em etanol (85 mL), foi adicionado NH4Cl solução (17 g em 85 mL água, 317,8 mmols) seguido por pó de Fe (27,82 g, 498,12 mmols). A massa de reação resultante foi agitada a 90 °C durante 1 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada e o filtrado concentrado até a secura para fornecer um sólido que foi dissolvido em uma solução de bicarbonato de sódio sat. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 X 50 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o composto desejado (15 g, 99,14 %).
[01109] Etapa 4: 3-bromo-5-(ciclopentilamino)benzoato de metila
[01110]
[01111] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromobenzoato de etila (2 g, 8,73 mmols) e ciclopentanona (2,2 g, 26,1 mmols) em metanol (20 mL), ácido acético (1,04 g, 17,4 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (1,37 g, 21,83 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer composto desejado (1,6 g, 61 %).
[01112] Etapa 5: 5-bromo-3-(ciclopentil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01113]
[01114] A uma solução agitada de 3-bromo-5-(ciclopentilamino)benzoato de metila (0,3 g, 0,96 mmol) em DMF (5 mL), carbonato de césio (0,628 g, 1,92 mmol) e iodeto de etila (0,748 g, 4,8 mmols) foram adicionados; a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 24 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,150 g, 46 %).
[01115] Etapa 6: 5-bromo-3-(ciclopentil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01116]
[01117] NaOH aquoso (0,03 g, 0,75 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-(ciclopentil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,170 g, 0,75 mmol) em EtOH (10 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,15 g, 92,59 %).
[01118] O ácido (0,15 g, 0,461 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,14 g, 0,923 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,35 g, 0,692 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por HPLC purificação para fornecer o composto do título (0,050 g, 24 %) como sal de TFA.: LCMS: 460,10 (M + 1)+; HPLC: 99,22 % (@ 254 nm) (Rt; 5,115; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,09 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,47 - 3,48 (m, 1H), 2,96 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,33 - 1,63 (m, 8H), 0,78 (t, 3H, J = 6,4 Hz).
[01119] Exemplo 6: Síntese do Composto 7: 5-cloro-3-(ciclopentil(me- til)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01120]
[01121] Composto 7
[01122] Etapa 1: Síntese de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[01123]
[01124] Ácido5-cloro-2-metilbenzoico (4 g, 23,4 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (27 mL) a -10 °C em porções pequenas e agitada durante 10 minutos. A mistura de nitração {preparada através da mistura de HNO3 Conc. (3,3 g, 52,68 mmols) com H2SO4 conc. (4,4 mL)} foi adicionado às gotas a -10 °C. A mistura resultante foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada, o sólido foi coletado por filtração, lavado com água e seco sob vácuo para fornecer ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (4,95 g, 99 %).
[01125] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01126]
[01127] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico, pre- parado de forma análoga ao acima, (6,75 g, 31,3 mmols) em DMF (33 mL) foi adicionado carbonato de sódio (13,2 g, 125 mmols) e iodeto de metila (17,8 g, 125 mmols). A mistura resultante foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, água foi adicionada à mistura e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas com- binadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromato- grafia em coluna em sílica para fornecer 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6 g, 83,6 %).
[01128] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01129]
[01130] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6 g, 26,1 mmols) em etanol (60 mL), foi adicionado cloreto de amônio (6 g, 112 mmols) dissolvido em água (60 mL) e pó de ferro (11,9 g, 208 mmols). A mistura resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada a mistura e a mistura de reação foi filtrada através de celite, e o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila.
[01131] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01132]
[01133] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1 g, 5,0 mmols) e ciclopentanona (2,1 g, 25,0 mmols) em metanol (10 mL) foi adicionado ácido acético (0,6 g, 5,0 mmols), e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,78 g, 12,5 mmols) foi adicio- nado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna em sílica para fornecer 5-cloro-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila (1,2 g, 89 %).
[01134] Etapa 5: Síntese de 5-cloro-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzo-ato de metila
[01135]
[01136] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzo- ato de metila (0,5 g, 1,86 mmol) em acetonitrila (5 mL) foi adicionado carbonato de césio (1,22 g, 3,7 mmols) e iodeto de metila (1,32 g, 9,33 mmols). A mistura resultante foi aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a tempe- ratura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-3- (ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,5 g, 95 %).
[01137] Etapa 6: Síntese de 5-cloro-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01138] NaOH aquoso (0,106 g, 2,66 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,5 g, 1,77 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, metanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila.As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,4 g, 84 %).
[01139] O ácido (0,1 g, 0,37 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (0,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,114 g, 0,74 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,29 g, 0,56 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo para obter um sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila seguido por purificação em coluna para fornecer 5-cloro-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (100 mg, 66 %). LCMS: 402,15 (M + 1)+; HPLC: 96,46 % (@ 254 nm) (Rt; 5,289; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,19 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 7,13 (d, 1H, J = 2 Hz), 6,91 (d, 1H, J = 2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 5,2 Hz), 3,41 - 3,45 (m, 1H), 2,50 (3H ligados em solvente de pico), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,38 - 1,67 (m, 8H).
[01140] Exemplo 7: Síntese do Composto 8: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(piperidin-4-il)amino)benzamida
[01141]
[01142] Composto 8
[01143] Etapa 1: ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[01144]
[01145] Ácido 5-cloro-2-metilbenzoico (4 g, 23,39 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (27 mL) a -10 °C aos lotes. Depois de 10 minutos, a mistura de nitração preparada como mistura de HNO3 Conc. (3,3 g, 52,68 mmols) com H2SO4 conc. (4,4 mL)} foi adicionada às gotas a -10 °C. A massa de reação resultante foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto desejado (4,95 g, 99 %).
[01146] Etapa 2: 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01147]
[01148] À solução agitada de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (6,75 g, 31,25 mmols) em DMF (33 mL), carbonato de sódio (13,23 g, 125,18 mmols) e iodeto de metila (17,77 g, 125,2 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, água foi adicionada à massa de reação e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coluna em sílica (tamanho da malha 60 a 120) fornecendo o composto desejado (6 g, 84 %).
[01149] Etapa 3: 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01150]
[01151] À solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6 g, 26,13 mmols) em etanol (60 mL), cloreto de amônio (6 g, 112,1 mmols) dissolvido em água (60 mL) e pó de ferro (11,88 g, 208,4 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada à massa de reação e a mistura de reação foi filtrada através de celite, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto desejado.
[01152] Etapa 4: 4-((5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil)amino)piperidina- 1-carboxilato de terc-butila
[01153]
[01154] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (6 g, 30,15 mmols) e 4-oxopiperidino-1-carboxilato de terc-butila (29 g, 150 mmols) em metanol (10 mL), ácido acético (1,8 g, 30,1 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (4,7 g, 75,3 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cro- matografia em coluna para fornecer o composto desejado (4 g, 30 %).
[01155] Etapa 5: 4-((5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil)(metil)amino)pipe- ridina-1-carboxilato de terc-butila
[01156]
[01157] A uma solução agitada de 4-((5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfe- nil)amino) piperidina-1-carboxilato de terc-butila (4 g, 9,09 mmols) em acetonitrila (50 mL), carbonato de césio (5,9 g, 18,09 mmols) e iodeto de metila (6,95 g, 48,94 mmols) foram adicionados; a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (2,2 g, 53 %).
[01158] Etapa 6: 4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[01159]
[01160] NaOH aquoso (0,75 g, 1,86 mmol) foi adicionado a uma solução de 4-((5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil)(metil)amino)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,5 g, 1,26 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,4 g, 84 %).
[01161] O ácido (0,4 g, 1,04 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,316 g, 2,09 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,816 g, 1,56 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila seguido por purificação em coluna para fornecer o composto desejado (0,225 g, 41 %).
[01162] Etapa 7: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2- metil-3-(metil(piperidin-4-il)amino)benzamida
[01163]
[01164] Uma solução agitada de terc-butila 4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)piperidina-1-carboxi- lato (0,2 g, 0,632 mmol) em DCM (5 mL) foi esfriada a 0 °C e TFA (0,15 mL) foi adicionada à mesma. A massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Em conclusão, a reação foi concentrada à secura. O resíduo foi purificado por lavagens com solvente para fornecer o composto desejado (0,14 g, 53 %) como seu sal de TFA. LCMS: 417,25 (M + 1)+; HPLC: 96,16 % (@ 254 nm) (Rt; 4,677; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,49 (bs, 1H), 8,20 (t, 1H), 8,18 (bs, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,25 (d, 2H, J = 12 Hz), 3,08 (m, 1H), 2,88 (bs, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,76 (bs, 4H).
[01165] Exemplo 8: Síntese do Composto 10: 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benza- mida:
[01166]
[01167] Composto 10
[01168] Etapa 1: Síntese de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01169]
[01170] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50 g, 276 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (43,4 g, 152 mmols) foi adicionado às porções na temperatura ambiente, e a agitação foi continuada na temperatura ambiente durante 5 h. Em conclusão, a mistura foi vertida em água gelada, o sólido resultante foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo para fornecer ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (71,7 g, 99,9 %).
[01171] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila
[01172]
[01173] À solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico, preparado de forma análoga ao acima, (287 g, 1103 mmols) em DMF (150 mL), carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (626,6 g, 4415 mmols) foram adicionados. A mistura resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, o sólido foi removido por filtração, e o resíduo lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida para fornecer 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila (302 g, 99 %).
[01174] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01175]
[01176] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno (150 g, 544 mmols) em etanol (750 mL) foi adicionado uma solução de cloreto de amônio (150 g, 2777 mmols) em água (750 mL) e pó de ferro (93,3 g, 1636 mmols). A mistura resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, mistura foi filtrada através de celite; o celite foi lavado com água e acetato de etila e o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida para fornecer 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila.
[01177] Etapa 4: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il)amino)benzoato de metila
[01178]
[01179] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (2 g, 8,23 mmols) e di-hidro-2H-piran-4(3)-ona (1,06 g, 10,6 mmols) em metanol (20 mL), ácido acético (0,5 g, 8,23 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,622 g, 9,87 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura am- biente. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-bromo-2-metil-3-((tetra-hi- dro-2H-piran-4-il)amino)benzoato de metila (1,6 g, 61 %).
[01180] Etapa 5: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzoato de metila
[01181]
[01182] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il)amino)benzoato de metila (0,4 g, 1,26 mmol) em acetonitrila (15 mL), carbonato de césio (0,79 g, 2,44 mmols) e iodeto de metila (0,86 g, 6,11 mmols) foram adicionados; a mistura resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer Síntese de 5-bromo-2-metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzoato de metila (0,33 g, 80 %).
[01183] Etapa 6: Síntese de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-2-metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzamida
[01184]
[01185] NaOH aquoso (0,19 g, 4,89 mmols) foi adicionado a uma solução de composto 6 (0,8 g, 2,4 mmols) em MeOH (20 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h.Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,70 g, 92 %).
[01186] O ácido (0,7 g, 2,24 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,74 g, 4,89 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,9 g, 3,6 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão, a mistura foi vertida em gelo para obter um sólido. O sólido foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por purificação com cro- matografia em coluna para fornecer 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-2-metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzamida (0,53 g, 54 %). LCMS: 462,23 (M + 1)+; HPLC: 98,57 % (@ 254 nm) (Rt; 5,276; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,20 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 7,24 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,04 (d, 1H, J = 2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,84 (d, 2H, J = 10,8 Hz), 3,22 - 3,28 (m, 2H), 2,96 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,52 - 1,61 (m, 4H).
[01187] Exemplo 9: Síntese do Composto 13: 2, 5-dicloro-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida
[01188]
[01189] Composto 13
[01190] Etapa 1: Síntese de ácido 2,5-dicloro-3-nitrobenzoico:
[01191]
[01192] Ácido 2,5-diclorobenzoico (5 g, 26,2 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (50 mL) a -10 °C em porções pequenas. Depois de 10 minutos, a mistura de nitração preparada através da mistura de HNO3 Conc. (2,5 mL) com H2SO4 conc. (10 mL)} foi adicionada às gotas a -10 °C. A mistura de reação resultante foi agitada a -10 °C durante 2 h. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada e um sólido precipitado. O sólido foi coletado por filtração, lavado com água e seco sob vácuo para fornecer ácido 2,5-dicloro-3-nitrobenzoico (3,4 g, 65 %).
[01193] Etapa 2: Síntese de 2,5-dicloro-3-nitrobenzoato de metila:
[01194]
[01195] À solução agitada de ácido 2,5-dicloro-3-nitrobenzoico (3,2 g, 13,67 mmols) em DMF (30 mL) foi adicionado carbonato de sódio (4,3 g, 40,56 mmols) e iodeto de metila (9,7 g, 68,30 mmols). A mistura de reação foi aquecida a 60 °C durante 18 h. Em conclusão, água foi adicionada à mistura de reação, e o produto foi extraído usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentra- das sob pressão reduzida para fornecer 2,5-dicloro-3-nitrobenzoato de metila (3 g, 90 %).
[01196] Etapa 3: Síntese de 3-amino-2,5-diclorobenzoato de metila:
[01197]
[01198] À solução agitada de 2,5-dicloro-3-nitrobenzoato de metila (3,3 g, 13,1 mmols) em etanol (20 mL) foi adicionado cloreto de amônio (3,5 g, 64,81 mmols) dissolvido em água (20 mL) e pó de ferro (7 g, 82,35 mmols). A mistura de reação foi aquecida a 80 °C durante 3 h. Em conclusão, água foi adicionada à mistura de reação e os sólidos removidos por filtração através de celite. O filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 3-amino-2,5-diclorobenzoato de metila (2,5 g, 66 %).
[01199] Etapa 4: Síntese de 2, 5-dicloro-3-(ciclopentilamino)benzoato de me- tila:
[01200]
[01201] A uma solução agitada de 3-amino-2,5-diclorobenzoato de metila (2,5 g, 11,5 mmols) e ciclopentanona (4,8 g, 57,1 mmols) em metanol (5 mL) foi adicionado ácido acético (0,6 g, 11,3 mmols) e a agitação foi continuada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (1,4 g, 22,2 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 2,5- dicloro-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila (0,275 g, 8 %).
[01202] Etapa 5: Síntese de 2,5-dicloro-3-(ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila:
[01203]
[01204] A uma solução agitada de 2,5-dicloro-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila (0,275 g, 0,958 mmol) em acetonitrila (5 mL) foi adicionado carbonato de césio (0,622 g, 1,9 mmol) e iodeto de metila (0,689 g, 4,78 mmols). A mistura de reação foi aquecida a 80 °C durante 18 h. Em conclusão, a reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concen- trado para fornecer 2,5-dicloro-3-(ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila (0,27 g, 93 %).
[01205] Etapa 6: Síntese de 2,5-dicloro-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-di-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida
[01206]
[01207] NaOH aquoso (0,50 g, 1,24 mmol) foi adicionado a uma solução de 2,5-dicloro-3-(ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila (0,25 g, 0,83 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, metanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ao pH 4 usando ácido cítrico. O produto foi extraído usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido desejado (0,21 g, 88 %).
[01208] O ácido (0,21 g, 0,755 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,3 g, 1,97 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,757 g, 1,45 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo para obter um sólido. O sólido foi filtrado e lavado com acetonitrila. O composto foi purificado novamente através de HPLC prep. para fornecer 2,5-dicloro-3- (ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida (0,1 g, 36 %) como sal de TFA. LCMS: 422,10 (M + 1)+; HPLC: 97,58 % (@ 254 nm) (Rt; 6,973; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,35 (t, 1H), 7,23 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,66 (m, 1H), 2,59 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,70 (bs, 2H), 1,61 (bs, 2H), 1,48 (bs, 4H).
[01209] Exemplo 10: Síntese do Composto 14: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benza-mida 1
[01210]
[01211] Composto 14
[01212] Etapa 1: Ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[01213]
[01214] Ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (4 g, 23,39 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (27 mL) a -10 °C aos lotes. Depois de 10 minutos, a mistura de nitração preparada como mistura de HNO3 Conc. (3,3 g, 52,68 mmols) com H2SO4 conc. (4,4 mL)} foi adicionada às gotas a -10 °C. A massa de reação resultante foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto desejado (4,95 g, 99 %).
[01215] Etapa 2: 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01216]
[01217] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (6,75 g, 31,25 mmols) em DMF (33 mL), carbonato de sódio (13,23 g, 125,18 mmols) e iodeto de metila (17,77 g, 125,2 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, água foi adicionada à massa de reação e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coluna em sílica (tamanho da malha 60 a 120) fornecendo o composto desejado (6 g, 84 %).
[01218] Etapa 3: 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01219]
[01220] À solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6 g, 26,13 mmols) em etanol (60 mL), cloreto de amônio (6 g, 112,1 mmols) dissolvido em água (60 mL) e pó de ferro (11,88 g, 208,4 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada a massa de reação e a mistura de reação foi filtrada através de celite, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto desejado.
[01221] Etapa 4: 5-cloro-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzoato de metila
[01222]
[01223] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1 g, 5,025 mmols) e di-hidro-2H-piran-4(3H)-ona (753 mg, 7,537 mmols) em metanol (10 mL), ácido acético (301 mg, 5,025 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (373 mg, 6,03 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromato- grafia em coluna para fornecer o composto desejado (700 mg, 49 %).
[01224] Etapa 5: 5-cloro-2-metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)ben- zoato de metila
[01225]
[01226] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il)amino) benzoato de metila (700 mg, 2,473 mmols) em acetonitrila (10 mL), carbonato de césio (1,61 g, 4,946 mmols) e iodeto de metila (1,82 g, 0,8 ml, 12,36 mmols) foram adicionados; a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 13 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (480 mg, 65 %).
[01227] Etapa 6: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2- metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzamida
[01228]
[01229] NaOH aquoso (96 mg, 2,424 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-2-metil-3-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzoato de metila (0,48 g, 1,616 mmol) em EtOH (2 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,4 g, 87 %).
[01230] O ácido (0,4 g, 1,41 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,429 g, 2,82 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,10 g, 2,12 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila seguido por purificação em coluna para fornecer o composto do título (0,17 g, 29 %): LCMS: 418,25 (M + 1)+; HPLC: 97,72 % (@ 254 nm) (Rt; 5,022; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,48 (s, 1H), 8,21 (t, 1H, J = 4,4 Hz), 7,13 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,84 (d, 2H, J = 10,8 Hz), 3,25 (t, 2H, J = 11,2 Hz), 2,96 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,65 - 1,52 (m, 4H).
[01231] Exemplo 11: Síntese do Composto 15: (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)ciclo-hexil)car- bamato de terc-butila
[01232]
[01233] Composto 15
[01234] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil) amino)-2-metilbenzoato de metila
[01235]
[01236] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (5 g, 20,6 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (5,6 g, 26,7 mmols) em metanol (50 mL) foi adicionado ácido acético (1,2 g, 20,6 mmols) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (1,6 g, 26,7 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo- hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila (3 g, 33,3 %).
[01237] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo- hexil) (metil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01238]
[01239] A uma solução agitada de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbo- nil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,5 g, 4,6 mmols) em acetoni- trila (15 mL) foi adicionado carbonato de césio (2,63 g, 8,1 mmols) e iodeto de metila (2,86 g, 20,32 mmols). A mistura foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a reação foi esfriada até a temperatura ambiente, filtrada, e o resíduo foi lavado com acetato de etila. O filtrado foi concentrado para fornecer 5-bromo-3-((4-((terc-butoxi- carbonil)amino)ciclo-hexil)(metil) amino)-2-metilbenzoato de metila (1,5 g).
[01240] Etapa 3: Síntese de (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropi- ridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[01241]
[01242] NaOH aquoso (0,26 g, 6,62 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,5 g, 3,3 mmols) em MeOH (20 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, metanol foi removido sob pressão reduzida e a mistura foi acidificada usando HCl diluído até o pH 6 e ao pH 4 usando ácido cítrico. O produto foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido desejado (1,33 g, 92 %).
[01243] O ácido (1,3 g, 2,96 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (10 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,34 g, 2,2 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,88 g, 1,7 mmol) foi adicionada à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo para obter o sólido. O sólido foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por purificação com cromatografia em coluna para fornecer (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila. (0,5 g, 26 %). LCMS: 575,80 (M + 1)+; HPLC: 99,99 % (@ 254 nm) (Rt; 6,094,7,065 [mistura de diastereômeros]; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,20 (d, 1H, J = 3,6 Hz), 7,21 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,66 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 3,2 Hz), 3,44 (bs, 1H), 3,15 (bs, 1H), 2,55 - 2,66 (m, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (s, 6H), 1,76 - 1,79 (m, 2H), 1,51 - 1,63 (m, 3H), 1,36 - 1,38 (m, 11H), 1,07 - 1,16 (m, 1H).
[01244] Exemplo 12: Síntese do Composto 16: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(1-metil-1,2,3,6-tetra-hidro- piridin-4-il)benzamida
[01245]
[01246] Composto 16
[01247] Etapa 1: ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01248]
[01249] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50 g, 276,2 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (43,4 g, 151,8 mmols) foi adicionado às porções na temperatura ambiente e a massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Em conclusão, a massa de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo resultante foi lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto desejado (71,7 g, 100 %)
[01250] Etapa 2: 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila
[01251]
[01252] À solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (287 g, 1103 mmols) em DMF (150 mL), carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (626,63 g, 4415 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto bruto desejado (302 g, 99 %) que foi usado sem purificação adicional.
[01253] Etapa 3: 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01254]
[01255] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila (150 g, 544 mmols) em etanol (750 mL), cloreto de amônio (150 g, 2777 mmols) dissolvido em água (750 mL) e pó de ferro (93,3 g, 1636 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada através de celite, fornecendo lavagem de água e acetato de etila, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto desejado.
[01256] Etapa 4: 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01257]
[01258] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (0,3 g, 1,33 mmol) e ciclopentanona (0,56 g, 6,6 mmols) em metanol (3 mL), ácido acético (0,159 g, 2,6 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,208 g, 3,3 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi usado como é na etapa seguinte.
[01259] Etapa 5: Síntese de 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilben- zoato de metila
[01260]
[01261] Uma solução de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila (1 g, 3,22 mmols), Cs2CO3 (2,10 g, 6,45 mmols) e iodeto de metila (2,3 g, 16,12 mmols) em acetonitrila (15 mL) foi aquecido a 80 °C durante 14 h. Depois do consumo completo do material de partida a mistura de reação foi filtrada. O filtrado foi concentrado e o resíduo obtido foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,9 g, 86 %).
[01262] Etapa 6: 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01263]
[01264] NaOH aquoso (0,166 g, 4,15 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,9 g, 2,76 mmols) em EtOH (9 mL) e água (2,2 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,85 g, 98 %).
[01265] O ácido (0,85 g, 2,73 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (10 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,83 g, 5,46 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (2,13 g, 4,09 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continu- ada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por éter, para fornecer o composto desejado (0,450 g, 37 %).
[01266] Etapa 7: 4-(3-(ciclopentil(metil)amino)-5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-4-metilfenil)-5,6-di-hidropiridino-1(2H)-carboxilato de terc-butila
[01267]
[01268] A uma solução desgaseificada de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (1,0 g, 2,24 mmols) e ácido borônico (0,833 g, 2,69 mmols) em dioxano (20 mL) foi adicionado Pd(PPh3)4 (0,260 g, 0,224 mmol, 0.1 eq) e a solução foi novamente purgada com argônio durante 20 min. À mistura de reação de solução de Na2CO3 aq (0,857, 8,08 mmols) em 1 mL água foi adicionada e a mistura de reação foi novamente purgada com argônio durante 20 min. A reação foi aquecida a 100 °C durante 90 min. A mistura de reação depois foi esfriada até a temperatura ambiente e vertida em água fria e extraída com dicloro- metano. O composto bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,900 g, 64 %).
[01269] Etapa 8: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-2-metil-5-(1,2,3,6-tetra-hidropiridin-4-il)benzamida
[01270]
[01271] A uma solução agitada de 4-(3-(ciclopentil(metil)amino)-5-(((4,6-dime- til-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-4-metilfenil)-5,6-di-hidropiridino-1(2H)-carboxilato de terc-butila (0,800 g, 1,45 mmol) em DCM foi adicionado TFA (3 mL) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em conclusão, a reação foi concentrada à secura. O resíduo foi basificado com bicarbonato de sódio aquoso até o pH 8 e a camada aquosa extraída com MeOH/DCM a 20 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o material bruto que foi purificado por HPLC preparativa para fornecer o com- posto desejado (0,620 g, 95 %).
[01272] Etapa 9: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-2-metil-5-(1-metil-1,2,3,6-tetra-hidropiridin-4-il)benzamida
[01273]
[01274] 3-(Ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-2-metil-5-(1,2,3,6-tetra-hidropiridin-4-il)benzamida (0,100 g, 0,223 mmol) foi dissolvido em metanol (5 mL) e esfriado a 0 °C, formalina (0,067 g, 0,19 mL, 2,23 mmols) foi adicionado. A massa de reação resultante foi agitada a mesma temperatura durante 30 minutos. Cianoboro-hidreto de sódio (0,041 g, 0,66 mmol) foi adicionado a massa de reação acima e agitada na temperatura ambiente durante 4 h. Depois da conclusão, os solventes foram removidos sob pressão reduzida e água foi adicionada ao resíduo, a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas e purificadas por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,065 g, 63 %): LCMS: 463,40 (M + 1)+; HPLC: 98,79 % (@ 254 nm) (Rt; 3,911; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,43 (s, 1H), 8,04 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 7,17 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,07 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,45 (m, 1H), 2,98 (bs, 2H), 2,53 (m, 2H), 2,42 (bs, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,67 (m, 2H), 1,59 (m, 2H), 1,49 (m, 2H), 1,40 (m, 2H).
[01275] Exemplo 13: Síntese do Composto 17: 3-((1-acetilpiperidin-4-il)(me- til)amino)-5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenza- mida
[01276]
[01277] Composto 17
[01278] A 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil- 3-(metil(piperidina-4-il)amino)benzamida (0,2 g, 0,447 mmol) dissolvido em DMSO (2 mL) e ácido acético (0,054 g, 0,896 mmol) foram adicionados a mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,342 g, 0,672 mmol) foi adicionada à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão, a massa de reação foi vertida em gelo, e extraída usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas para fornecer o material bruto, que em seguida, foi purificado com cromatografia em coluna usando sílica (tamanho da malha 100 a 200) para fornecer o composto desejado (0,15 g, 17 %). LCMS: 503,20 (M + 1)+; HPLC: 96,06 % (@ 254 nm) (Rt; 5,143; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,48 (s, 1H), 8,21 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 7,23 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,04 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,32 (d, 1H, J = 12,4 Hz), 4,23 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,77 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 2,98 (t, 2H, J = 11,2 Hz), 2,54 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,97 (s, 3H), 1,53 - 1,60 (m, 4H), 1,38 - 1,41 (m, 1H).
[01279] Exemplo 14: Síntese do Composto 18: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(1-metilpiperidin-4-il)benza-mida
[01280]
[01281] Composto 18
[01282] A uma solução de 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(1-metil-1,2,3,6-tetra-hidropiridin-4-il)benza- mida (0,045 g, 0,097 mmol) em etanol adicionado Pd/C a 10 % e a reação foi agitada sob H2 em pressão por bexiga. Depois de consumo completo do material de partida a mistura de reação foi filtrada através de celite. O filtrado foi concentrado e triturado em acetonitrila e filtrado para fornecer o composto desejado (0,030 g, 66 %): LCMS: 465,40 (M + 1)+; HPLC: 95,39 % (@ 254 nm) (Rt; 3,884; Método: Coluna: YMC ODS- A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,44 (s, 1H), 7,98 (t, 1H), 7,00 (s, 1H), 6,77 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,42 (m, 1H), 2,84 (d, 2H, J = 11,2 Hz), 2,47 (s, 3H), 2,37 (m, 1H), 2,18 (s, 6H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,93 (t, 2H, J = 10,8 Hz), 1,70 - 1,55 (m, 8H), 1,48 (m, 2H), 1,38 (m, 2H).
[01283] Exemplo 15: Síntese do Composto 20: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[01284]
[01285] Composto 20
[01286] Etapa 1: Síntese de ácido 2-metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoico
[01287]
[01288] Ácido 2-metil-5-(trifluorometil)benzoico (4 g, 19,6 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (27 mL) a -10 °C em porções pequenas. Depois de 10 minutos, a mistura de nitração preparado através da mistura de HNO3 conc. (2,77 g, 44,44 mmols) com H2SO4 conc. (3,6 mL)} foi adicionada às gotas a -10 °C. A solução resultante foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada. O sólido foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo para fornecer ácido 2-metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoico (4,95 g, 99 %).
[01289] Etapa 2: Síntese de 2-metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoato de metila
[01290]
[01291] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoico (1 g, 4,01 mmols) em DMF (3 mL) foi adicionado carbonato de sódio (0,63 g, 6,02 mmols) e iodeto de metila (1,14 g, 8,03 mmols). A mistura resultante foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, água foi adicionada à reação, e o produto extraído usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coluna em sílica para fornecer 2-metil-3- nitro-5-(trifluorometil)benzoato de metila (1 g, 95,2 %).
[01292] Etapa 3: Síntese de 3-amino-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de me- tila
[01293]
[01294] A uma solução agitada de 2-metil-3-nitro-5-(trifluorometil)benzoato de metila (5,6 g, 20,97 mmols) em etanol (40 mL) foi adicionado cloreto de amônio (5,6 g, 104,6 mmols) dissolvido em água (30 mL) e pó de ferro (4,67 g, 85,16 mmols). A mistura resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada à reação em seguida, a mistura foi filtrada através de celite. O filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em seguida, concentradas sob pressão reduzida para fornecer 3-amino-2-metil-5-(trifluorometil)benzo- ato de metila.
[01295] Etapa 4: Síntese de 3-(ciclopentilamino)-2-metil-5-(trifluorometil)ben- zoato de metila
[01296]
[01297] A uma solução agitada de 3-amino-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (2,5 g, 10,7 mmols) e ciclopentanona (4,5 g, 53,49 mmols) em metanol (25 mL) foi adicionado ácido acético (1,98 g, 21,44 mmols). Depois de 3 h, cianoboro- hidreto de sódio (1,68 g, 24,3 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 3-(ciclopentilamino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (1,8 g, 55,9 %).
[01298] Etapa 5: Síntese de 3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metil-5-(trifluorome-til) benzoato de metila
[01299]
[01300] A uma solução agitada de 3-(ciclopentilamino)-2-metil-5-(trifluorome- til)benzoato de metila (1,6 g, 5,38 mmols) em acetonitrila (25 mL) foi adicionado carbonato de césio (3,5 g, 10,7 mmols) e iodeto de metila (3,8 g, 26,8 mmols). A mistura foi aquecida a 80 °C durante 8 h. Em conclusão, a reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi con- centrado para fornecer 3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila.
[01301] Etapa 6: Síntese de 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il) metil)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[01302]
[01303] NaOH aquoso (0,762 g, 15,4 mmols) foi adicionado a uma solução de 3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (2 g, 6,34 mmols) em MeOH (20 mL) e a mistura foi agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, metanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ao pH 4 usando ácido cítrico. O produto foi extraído usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido desejado (1,5 g, 78 %).
[01304] O ácido (0,5 g, 1,69 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,505 g, 3,32 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,29 g, 2,49 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo para obter um sólido. O sólido foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por éter, para fornecer composto 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il) me- til)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida (100 mg, 14 %). Dados Analíticos: LCMS: 436,20 (M + 1)+; HPLC: 89,22 % (@ 254 nm) (Rt; 6,094; Método: Coluna: YMC ODS- A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,30 (t, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,26 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,51 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,41 - 1,69 (m, 8H).
[01305] Exemplo 16: Síntese do Composto 21: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01306]
[01307] Composto 21
[01308] Etapa 1: Síntese de 3-amino-2-metilbenzoato de metila
[01309]
[01310] À solução agitada de ácido 3-amino-2-metilbenzoico de metila (5 g, 33,1 mmols) em metanol (50 mL), foi adicionado H2SO4 conc. (5 mL) a 0 °C e a mistura foi aquecida a 70 °C durante 22 h. Em conclusão, metanol foi removido sob pressão reduzida, e depois solução de bicarbonato de sódio sat. foi adicionado e o produto extraído com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas para fornecer 3-amino-2-metilbenzoato de metila (5 g, 91 %).
[01311] Etapa 2: Síntese de 3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01312]
[01313] A uma solução agitada de 3-amino-2-metilbenzoato de metila (2 g, 12,1 mmols) e ciclopentanona (5 g, 60,6 mmols) em metanol (20 mL) foi adicionado ácido acético (0,72 g, 12,12 mmols) e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Cianoboro-hidreto de sódio (1,13 g, 18,2 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 3-(ciclopentila- mino)-2-metilbenzoato de metila (2,2 g, 78 %).
[01314] Etapa 3: Síntese de 3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01315]
[01316] A uma solução agitada de 3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila (2,2 g, 9,44 mmols) em acetonitrila (20 mL) foi adicionado carbonato de césio (6,13 g, 18,8 mmols) e iodeto de metila (6,7 g, 47,2 mmols). A mistura resultante foi aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, lavando com acetato de etila. O filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer 3-(ciclopentil(metil)amino)-2-me- tilbenzoatode metila (2 g, 85 %).
[01317] Etapa 4: Síntese de 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01318]
[01319] NaOH aquoso (0,48 g, 12,14 mmols) foi adicionado a uma solução de 3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (2 g, 8,09 mmols) em MeOH (20 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, metanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido desejado (1,3 g, 69 %).
[01320] O ácido (0,3 g, 1,28 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (5 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,39 g, 2,5 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,99 g, 1,92 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila seguido por purificação em coluna para fornecer 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,020 g, 4 %).
[01321] Dados Analíticos: LCMS: 368,15 (M + 1)+; HPLC: 99,49 % (@ 254 nm) (Rt; 4,186; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min,Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,43 (s, 1H), 8,00 (t, 1H, J = 4 Hz), 7,09 - 7,16 (m, 2H), 6,90 (d, 1H, J = 6,8 Hz), 5,84 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 5,2 Hz), 3,41 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 2,47 (s, 3H), 2,18 (d, 6H, J = 4,4 Hz), 2,10 (s, 3H), 1,58 - 1,67(m, 4H),1,37 - 1,52 (m, 4H).
[01322] Exemplo 17: Síntese do Composto 23: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(1-metilpiperidin-4-il)amino)benzamida
[01323]
[01324] Composto 23
[01325] 5-Cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3- (metil(piperidin-4-il)amino)benzamida (0,08 g, 0,192 mmol) foi dissolvido em metanol (5 mL) e esfriado a 0 °C, formalina (0,028 g, 0,965 mmol) foi adicionado. A massa de reação resultante foi agitada a mesma temperatura durante 30 minutos. Cianoboro- hidreto de sódio (0,023 g, 0,38 mmol) foi adicionado a massa de reação acima e agitada na temperatura ambiente durante 4 h. Depois da conclusão, os solventes foram removidos sob pressão reduzida e água foi adicionada ao resíduo, a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas e purificadas por cromatografia em coluna fornecendo o composto desejado (0,02 g, 24 %): LCMS: 431,25 (M + 1)+; HPLC: 98,80 % (@ 254 nm) (Rt; 4,757; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,20 (t, 1H), 7,15 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 6,94 (d, 1H, J = 2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,05 (bs, 2H), 2,88 (bs, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,44 (bs, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,68 (bs, 4H).
[01326] Exemplo 18: Síntese do Composto 25: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(2,2,6,6-tetrametil-1,2,3,6- tetra-hidropiridin-4-il)benzamida
[01327]
[01328] Composto 25
[01329] Etapa 1: ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01330]
[01331] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50 g, 276,2 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (43,4 g, 151,8 mmols) foi adicionado às porções na temperatura ambiente e a massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Em conclusão, a massa de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo resultante foi lavado com água e seco sob vácuo para fornecer o composto desejado (71,7 g, 100 %).
[01332] Síntese de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila
[01333]
[01334] A uma solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (287 g, 1103 mmols) em DMF (150 mL), carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (626,63 g, 4415 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto bruto desejado (302 g, 99 %).
[01335] Etapa 2: 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01336]
[01337] À solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila (150 g, 544 mmols) em etanol (750 mL), cloreto de amônio (150 g, 2777 mmols) dissolvido em água (750 mL) e pó de ferro (93,3 g, 1636 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada através de celite, fornecendo lavagem de água e acetato de etila, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto desejado.
[01338] Etapa 3: 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01339]
[01340] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (0,3 g, 1,33 mmol) e ciclopentanona (0,56 g, 6,6 mmols) em metanol (3 mL), ácido acético (0,159 g, 2,6 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,208 g, 3,3 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto desejado.
[01341] Etapa 4: 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzoato de me- tila
[01342]
[01343] A uma solução agitada do 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2- metilbenzoato de metila bruto (0,7 g, 2,25 mmols) em acetonitrila (15 mL), carbonato de césio (1,47 g, 4,50 mmols) e iodeto de metila (1,6 g, 11,26 mmols) foram adicionados; a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi la- vado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por croma- tografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,6 g, 82 %).
[01344] Etapa 5: 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01345]
[01346] NaOH aquoso (0,11 g, 2,75 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,6 g, 1,8 mmol) em MeOH (1,5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido respectivo (0,5 g, 87 %).
[01347] O ácido (0,5 g, 1,60 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,49 g, 3,22 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,25 g, 2,41 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por éter, para fornecer o composto desejado (0,315 g, 44 %).
[01348] Etapa 6: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(2,2,6,6-tetrametil-1,2,3,6-tetra-hidropiridin-4-il)benza-mida
[01349]
[01350] Uma solução de 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (1 equiv.), ácido (2,2,6,6-tetra- metil-1,2,3,6-tetra-hidropiridin-4-il)borônico (1,2 equiv.) e Pd (PPh3)4 (0,1 equiv.) em 1,4-dioxano (4 mL) foi purgada com argônio durante 10 min. Em seguida, solução de Na2CO3 2 M (3,6 equiv.) foi adicionada à mesma e argônio foi purgado novamente durante 10 min. A mistura de reação foi agitada a 100 °C durante 2 h. Depois da conclusão da reação, água foi adicionada à mesma e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em anidro Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto desejado como seu sal de TFA (0,045, 23 %). LCMS: 505,39 (M + 1)+; HPLC: 99,95 % (@ 254 nm) (Rt; 4,091; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (MeOD, 400 MHz) δ 7,70 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 6,13 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,23 (bs, 1H), 3,14 (s, 3H), 2,69 (s, 2H), 2,42 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,92 (, 2H), 1,81 (m, 2H), 1,67 (m, 4H), 1,60 (s, 6H), 1,53 (s, 6H).
[01351] Exemplo 19: Síntese do Composto 26: (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[01352]
[01353] Composto 26
[01354] Etapa 1: ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01355]
[01356] A uma mistura de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (15 g, 82,80 mmols) em H2SO4 conc. (60 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (13,07 g, 45,71 mmols) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi lentamente vertida em água gelada (400 mL). O precipitado foi coletado por filtração para fornecer o composto desejado (21 g, 98,22 %).
[01357] Etapa 2: 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01358]
[01359] A uma solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (16 g, 61,54 mmols) em DMF (160 mL), iodometano (35,72 g, 248 mmols) e carbonato de sódio (26,28 g, 248 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi agitada a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada e o resíduo sólido inorgânico lavado com acetato de etila. O filtrado combinado foi concentrado sob vácuo até a secura. O resíduo foi re-dissolvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio a 5 % (700 mL) seguido por solução de HCl 5M (300 mL). A camada orgânica foi finalmente lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer o composto desejado (16 g, 94,50 %).
[01360] Etapa 3: 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01361]
[01362] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (17 g, 62,04 mmols) em etanol (85 mL), foi adicionado solução de NH4Cl (17 g em 85 mL água, 317,8 mmols) seguido por pó de Fe (27,82 g, 498,11 mmols). A massa de reação resultante foi agitada a 90 °C durante 1 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado até a secura para fornecer um sólido que foi dissolvido em solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o composto desejado 4 (15 g, 99 %).
[01363] Etapa 4: 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he-xil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01364]
[01365] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (5 g, 20,57 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (5,67 g, 26,74 mmols) em metanol (50 mL), ácido acético (1,2 g, 20,57 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 4 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (1,68 g, 26,74 mmols) foi adicionado e a reação agitada 18 h. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida; água foi adicionada e extraída com DCM. Os orgânicos combinados foram secos, concentrados e purificados por croma- tografia em coluna usando sílica (tamanho de malha 100 a 200) para fornecer o composto desejado (3 g, 33 %).
[01366] Etapa 5: (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[01367]
[01368] NaOH aquoso (0,247 g, 6,83 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de me- tila (1,5 g, 3,41 mmols) em MeOH (20 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (1,28 g, 89 %).
[01369] O ácido (1,28 g, 3,01 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (10 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (1,03 g, 6,83 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (2,6 g, 5,12 mmols) foi adicionada à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 5 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para obter um bruto sólido, que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,75 g, 45 %). LCMS: 561,15 (M + 1)+; HPLC: 99,99 % (@ 254 nm) (Rt; 6,876,7,080 [mistura de diastereômeros]; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,44 (s, 1H), 8,07 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 6,77 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 6,66 (s, 1H), 6,51 - 6,54 (m, 1H), 5,84 (s, 1H), 4,71 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 4,21 - 4,22 (m, 2H), 3,44 (bs, 1H), 3,19 (bs, 1H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,93 - 2,03 (m, 5H), 1,78 (s, 1H), 1,56 - 1,72 (m, 3H), 1,37 (s, 9H), 1,26 - 1,31 (m, 2H).
[01370] Exemplo 20: Síntese do Composto 28: 5-bromo-3-(ciclo-hexilamino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01371]
[01372] Composto 28
[01373] Etapa 1: ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01374]
[01375] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50 g, 276,2 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (43,4 g, 151,8 mmols) foi adicionado às porções na temperatura ambiente e a massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Em conclusão, a massa de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo resultante foi lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto desejado (71,7 g, 100 %).
[01376] Etapa 2: 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila
[01377]
[01378] À solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (287 g, 1103 mmols) em DMF (150 mL), carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (626,63 g, 4415 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto desejado (302 g, 99 %).
[01379] Etapa 3: 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01380]
[01381] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila (150 g, 544 mmols) em etanol (750 mL), cloreto de amônio (150 g, 2777 mmols) dissolvido em água (750 mL) e pó de ferro (93,3 g, 1636 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada através de celite, fornecendo lavagem de água e acetato de etila, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto desejado que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[01382] Etapa 4: 5-bromo-3-(ciclo-hexilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01383]
[01384] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (0,3 g, 1,33 mmol) e ciclo-hexanona (0,64 g, 6,6 mmols) em metanol (3 mL), ácido acético (0,159 g, 2,6 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,208 g, 3,3 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e foi usado diretamente na etapa seguinte.
[01385] Etapa 5: 5-bromo-3-(ciclo-hexilamino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01386]
[01387] NaOH aquoso (0,049 g, 1,23 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-(ciclo-hexilamino)-2-metilbenzoato de metila (0,2 g, 0,61 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido res- pectivo (0,17 g, 89 %).
[01388] O ácido (0,17 g, 0,54 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,099 g, 0,65 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,42 g, 0,817 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto desejado como seu sal de TFA (0,042 g, 15 %). LCMS: 446,16 (M + 1)+; HPLC: 99,85 % (@ 254 nm) (Rt; 6,918; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s,1H), 8,08 (s, 1H), 6,66 (s, 1H), 6,51 (d, 1H, J = 0,8 Hz), 5,84 (s, 1H), 4,70(s, 1H), 4,21 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,24 (s, 1H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,94 (s, 3H), 1,88 (d, 2H, J = 10 Hz), 1,69 - 1,72 (m, 3H), 1,22 - 1,36 (m, 5H).
[01389] Exemplo 21: Síntese do Composto 30: 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(1-metilpiperidin-4-il)amino)benzamida
[01390]
[01391] Composto 30
[01392] Etapa 1: ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01393]
[01394] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50 g, 276,2 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (43,4 g, 151,8 mmols) foi adicionado às porções na temperatura ambiente e a massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Em conclusão, a massa de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo resultante foi lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto desejado (71,7 g, 99,9 %) que foi usado para reação adicional.
[01395] Etapa 2: 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila
[01396]
[01397] À solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (287 g, 1103 mmols) em DMF (150 mL), carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (626,63 g, 4415 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto desejado (302 g, 99).
[01398] Etapa 3: 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01399]
[01400] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila (150 g, 544 mmols) em etanol (750 mL), cloreto de amônio (150 g, 2777 mmols) dissolvido em água (750 mL) e pó de ferro (93,3 g, 1636 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada através de celite, fornecendo lavagem de água e acetato de etila, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, fornecendo o composto desejado.
[01401] Etapa 4: 5-bromo-2-metil-3-((1-metilpiperidin-4-il)amino)benzoato de metila
[01402]
[01403] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (2 g, 8,23 mmols) e 1-metilpiperidin-4-ona (1,86 g, 16,46 mmols) em metanol (20 mL), ácido acético (0,5 g, 8,23 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,622 g, 9,87 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,9 g, 33 %).
[01404] Etapa 5: 5-bromo-2-metil-3-(metil(1-metilpiperidin-4-il)amino)benzo- ato de metila
[01405]
[01406] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-((1-metilpiperidin-4- il)amino)benzoato de metila (0,6 g, 1,76 mmol) em acetonitrila (15 mL), carbonato de césio (1,14 g, 3,52 mmols) e iodeto de metila (1,2 g, 8,8 mmols) foram adicionados; a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,5 g, 80 %).
[01407] Etapa 6: 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(metil(1-metilpiperidin-4-il)amino)benzamida
[01408]
[01409] NaOH aquoso (0,11 g, 2,75 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-2-metil-3-(metil(1-metilpiperidin-4-il)amino)benzoato de metila (0,5 g, 1,4 mmol) em MeOH (20 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,42 g, 90 %).
[01410] O ácido (0,5 g, 0,974 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,45 g, 2,8 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,1 g, 2,1 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por purificação com cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,2 g, 30 %).LCMS: 475,02 (M + 1)+; HPLC: 94,25 % (@ 254 nm) (Rt; 4,570; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,13 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 6,78 (d, 1H, J = 0,8 Hz), 6,60 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,94 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,22 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,62 - 3,64 (m, 1H), 3,37 - 3,46 (m, 3H), 3,11 (s, 3H), 3,09 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,99 - 2,09 (m, 2H), 1,98 (s, 3H), 1,86 - 1,93 (m, 2H).
[01411] Exemplo 22: Síntese do Composto 31: 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(isopropil(metil)amino)-2-metilbenzamida
[01412]
[01413] Composto 31
[01414] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-(isopropilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01415]
[01416] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (1 equiv.) em metanol (5 mL), acetona (5 equiv.) e ácido acético (2 equiv.) foram adicionados e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em seguida, NaBH3CN (3 equiv.) foi adicionado a 0 °C. A mistura de reação resultante foi agitada durante 16 h adicionais na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi evaporado e água adicionada ao resíduo e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o produto bruto que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional (80 a 90 % de rendimento).
[01417] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-3-(isopropil(metil)amino)-2-metilbenzo- ato de metila
[01418]
[01419] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(isopropilamino)-2-metilbenzo- ato de metila (0,5 g, 1,75 mmol) em acetonitrila (10 mL), Cs2CO3 (1,02 g, 2,63 mmols) e iodeto de metila (1,45 g, 3,5 mmols) foram adicionados a mesma. A mistura de reação resultante foi agitada a 80 °C durante 4 h. Após a conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo dissolvido em água e extraído com acetato de etila. O material bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica, fornecendo o produto composto desejado sem purificação adicional (0,39 g)
[01420] Etapa 3: 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)- 3-(isopropil(metil)amino)-2-metilbenzamida
[01421]
[01422] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(isopropil(metil)amino)-2-metil- benzoato de metila (1 equiv.) em etanol (5 mL), solução de NaOH aquosa (1 equiv.) foi adicionada e a reação agitada a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado com 1N HCl ao pH 6. A fase aquosa foi extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e o solvente removido sob pressão reduzida fornecendo ácido puro (50 a 60 % de rendimento). A uma solução deste ácido (1 equiv.) em DMSO (1,5 mL), PyBOP (1,5 equiv.) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 15 min. Em seguida, 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (2 equiv.) foi adicionada e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, água foi adicionada e o sólido precipitado resultante filtrado e lavado com água. Em seguida, este sólido foi agitado com acetonitrila durante 10 min e filtrado novamente para obter molécula alvo pura (50 a 60 % de rendimento).
[01423] LCMS: 420,15 (M + 1)+; HPLC: 93,04 % (@ 254 nm) (Rt; 4,791); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,19 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 7,14 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,16 - 3,20 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 6H), 1,01 (d, 6H, J = 6,4 Hz).
[01424] Exemplo 23: Síntese do Composto 32: 5-bromo-N-((4,6-di-hidro-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzoato
[01425]
[01426] Composto 32
[01427] Etapa 1: ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01428] A uma mistura de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (15 g, 82,80 mmols) em H2SO4 conc. (60 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (13,07 g, 45,71 mmols) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi lentamente vertida em água gelada (400 mL). O sólido que foi separado por precipitação foi filtrado e seco sob vácuo para obter o composto desejado (21 g, 98 %).
[01429] Etapa 2: 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01430]
[01431] A uma solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (16 g, 61,54 mmols) em DMF (160 mL), iodometano (35,72 g, 248 mmols) e carbonato de sódio (26,28 g, 248 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi agitada a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada e o resíduo sólido inorgânico lavado com acetato de etila. O filtrado combinado foi concentrado sob vácuo até a secura. O resíduo foi re-dissolvido em acetato de etila e lavado com solução de bicarbonato de sódio a 5 % (700 mL) seguido por solução de 5M HCl (300 mL). A camada orgânica foi finalmente lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada para fornecer o composto desejado (16 g, 95 %).
[01432] Etapa 3: 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01433]
[01434] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (17 g, 62,04 mmols) em etanol (85 mL), foi adicionado solução de NH4Cl (17 g em 85 mL água, 317,8 mmols) seguido por pó de Fe (27,82 g, 498,11 mmols). A massa de reação resultante foi agitada a 90 °C durante 1 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado até a secura para fornecer um sólido que foi dissolvido em solução de bicarbonato de sódio saturada. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o composto desejado (15 g, 99 %).
[01435] Etapa 4: 5-bromo-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzo- ato de metila
[01436]
[01437] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (2 g, 8,23 mmols) e tetra hidro piran-4-ona (1,06 g, 10,66 mmols) em metanol (20 mL), ácido acético (0,5 g, 8,23 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 18 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,62 g, 9,83 mmols) foi adicionado e a reação agitada 3 h. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida; água foi adicionada e extraída com DCM. Os orgânicos combi- nados foram secos, concentrados e purificados por cromatografia em coluna usando sílica (tamanho de malha 100 a 200) para fornecer o composto desejado (1,6 g, 62 %).
[01438] Etapa 5: 5-bromo-N-((4,6-di-hidro-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)- 2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzoato
[01439]
[01440] NaOH aquoso (0,146 g, 3,66 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzoato de metila (0,6 g, 1,88 mmol) em MeOH (8 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,515 g, 90 %).
[01441] O ácido (0,515 g, 1,67 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,50 g, 3,3 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1 g, 1,98 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 5 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para obter sólido bruto, este foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,30 g, 37 %). LCMS: 447,84 (M + 1)+; HPLC: 99,78 % (@ 254 nm) (Rt; 5,753; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,09 (t, 1H, J = 4,8 Hz), 6,76 (s, 1H), 6,53 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 5,84 (s, 1H), 4,82 (d, 1H, J = 8 Hz), 4,42 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,85 (d, 2H, J = 11,2 Hz), 3,37 - 3,53 (m, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,81 (d, 2H, J = 12,8 Hz), 1,44 - 1,54 (m, 2H).
[01442] Exemplo 24: Síntese do Composto 33: 5-bromo-3-(ciclopentilamino)- N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01443]
[01444] Composto 33
[01445] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01446]
[01447] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (1 equiv.) em metanol (5 mL), ciclopentanona (5 equiv.) e ácido acético (2 equiv.) foram adicionados e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em seguida, NaBH3CN (3 equiv.) foi adicionado a 0 °C. A mistura de reação resultante foi adicionalmente agitada durante 16 h na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi evaporado e água adicionada ao resíduo e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o produto bruto que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional (80 a 90 % de rendimento).
[01448] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01449]
[01450] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzo- ato de metila (1 equiv.) em etanol (5 mL), solução de NaOH aquosa (1 equiv.) foi adicionada e a reação agitada a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado com 1N HCl ao pH 6. A fase aquosa foi extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e o solvente removido sob pressão reduzida fornecendo ácido puro (50 a 60 % de rendimento). A uma solução deste ácido (1 equiv.) em DMSO (1,5 mL), PyBOP (1,5 equiv.) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 15 min. Em seguida, 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (2 equiv.) foi adicionada e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, água foi adicionada e o sólido precipitado filtrado e lavado com água. Este sólido depois foi agitado com acetonitrila durante 10 min e filtrado novamente para obter a molécula alvo pura (50 a 60 % de rendimento).
[01451] LCMS: 432,10 (M + 1)+; HPLC: 97,15 % (@ 254 nm) (Rt; 6,834); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,09 (t, 1H, J = 4,4&5,2 Hz), 6,65 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 6,54 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 5,84 (s, 1H), 4,85 (d, 1H, J = 6 Hz), 4,22 (d, 2H, J = 5,2 Hz), 3,73 (m, 1H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,91 (m 2H), 1,70 - 1,62 (m, 2H), 1,60 - 1,45 (m, 4H).
[01452] Exemplo 25: Síntese do Composto 36: 5-bromo-3-(ciclopentil(me- til)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2,4-dimetilbenzamida
[01453]
[01454] Composto 36
[01455] Etapa 1: ácido 5-bromo-2,4-dimetilbenzoico
[01456]
[01457] A uma solução agitada de NaOH (60 g) em água (1152 ml) foi adicionado bromo (36 ml) às gotas a 0 oC e a mistura de reação agitada durante 45 min. a mesma temperatura. Ácido 2,4-dimetilbenzoico (12 g, 79,9 mmols) foi adicionado na mistura de reação acima a 0 oC às porções e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Depois da conclusão da reação (TLC), a mistura de reação foi acidificada usando HCl conc., o sólido foi filtrado através de funil de Buchner e lavagem com água e seco para fornecer o composto desejado (12 g, 65 %) que foi usado sem purificação adicional.
[01458] Etapa 2: ácido 5-bromo-2,4-dimetil-3-nitrobenzoico
[01459]
[01460] Ácido 5-bromo-2,4-dimetilbenzoico (12 g, 52,17 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (48 mL) a -10 °C aos lotes. Depois de 10 minutos, a mistura de nitração preparada como mistura de HNO3 Conc. (6 mL,) com H2SO4 conc. (24 mL)} foi adicionada às gotas a -10 °C. A massa de reação resultante foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o com- posto desejado (13 g, 91 %).
[01461] Etapa 3: 3-bromo-5-nitrobenzoato de metila
[01462]
[01463] À solução agitada de ácido 5-bromo-2,4-dimetil-3-nitrobenzoico (13 g, 47,44 mmols) em DMF (120 mL), carbonato de sódio (15 g, 142,2 mmols) e iodeto de metila (4,4 ml, 71,16 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, água foi adicionada à massa de reação e a extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato sat. e 5 N HCl, secas em sulfato de sódio, concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto desejado (12,9 g, 86 %).
[01464] Etapa 4: 3-amino-5-bromo-2,4-dimetilbenzoato de metila
[01465]
[01466] À solução agitada de 3-bromo-5-nitrobenzoato de metila (12,9 g, 44,79 mmols) em etanol (65 mL), cloreto de amônio (13 g, 223,95 mmols) dissolvido em água (65 mL) e pó de ferro (20 g, 358,33 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de leito de celite, leito de celite foi lavado com etanol, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto desejado (11,0 g, 95 %).
[01467] Etapa 5: 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2,4-dimetilbenzoato de metila
[01468]
[01469] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2,4-dimetilbenzoato de metila (1,4 g, 5,42 mmols) e ciclopentanona (2,4 mL, 27,13 mmols) em metanol (20 mL), ácido acético (0,650 g, 10,84 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,85 g, 13,56 mmols) foi adicionado e a reação foi agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido, água foi adicionada e o composto foi extraído com acetato de etila. A camada orgânica combinada foi coletada, seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (1,2 g, 68 %).
[01470] Etapa 6: 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2,4-dimetilbenzoato de metila
[01471]
[01472] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2,4-dimetil- benzoato de metila (0,3 g, 1,07 mmol) em DMF (5 mL), carbonato de césio (0,697g, 2,14 mmols) e iodeto de etila (0,3 mL, 5,38 mmols) foram adicionados; a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer composto desejado (0,3 g, 82 %).
[01473] Etapa 7: 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2,4-dimetilbenzamida
[01474]
[01475] NaOH aquoso (0,022 g, 0,553 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2,4-dimetilbenzoato de metila (0,125 g, 0,368 mmol) em EtOH (10 mL) e H2O (1 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida para fornecer o respectivo ácido (0,1 g, 84,03 %).
[01476] O ácido (0,1 g, 0,308 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,07 g, 0,462 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,320 g, 0,616 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por purificação por HPLC para fornecer o composto do título (0,018 g, 12,7 %) como seu sal de TFA: LCMS: 460,10 (M + 1)+; HPLC: 98,10 % (@ 254 nm) (Rt; 8,291; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,18 (t, 1H, J = 4,4 Hz), 7,20 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,26 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,51 - 3,52 (m, 1H), 2,64 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,48 - 1,59 (m, 6H), 1,31 - 1,32 (m, 2H).
[01477] Exemplo 26: Síntese do Composto 48: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-3-(N-metilciclopentanecarboxamido)benzamida \JL„N^^\Xl
[01478]
[01479] Composto 48
[01480] Etapa 1: Síntese de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[01481]
[01482] A um H2SO4 conc. agitado gelado (-10 a -15 °C) (136 mL) foi adicionado ácido 5-cloro-2-metilbenzoico (20 g, 0,117 mmol) em porções. A mistura de ni- tração [H2SO4 Conc. (22 mL) e HNO3 (11,05 mL)] foi adicionada às gotas a -10 a -15 °C e a mistura resultante foi agitada durante 30 min. O precipitado obtido foi filtrado e seco. O sólido foi dissolvido em acetato de etila e seco (Na2SO4) e concentrado para fornecer o produto desejado (23,6 g, 93 %) como um sólido branco.
[01483] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila Gi^^.MQ2
[01484]
[01485] A uma solução de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (23,5 g, 0,109 mmol) em DMF (120 mL) foi adicionado carbonato de sódio (46,21, 0,436 mmol) e iodeto de metila (27,2 mL, 0,43 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi aquecida a 60 °C durante 3 h. Depois do consumo completo do material de partida a mistura de reação foi filtrada e o resíduo lavado com acetato de etila. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o produto bruto purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (16 g, 64 %) como óleo espesso que solidificou em repouso.
[01486] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01487]
[01488] À solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (16 g, 69 mmols) em etanol (160 mL), cloreto de amônio (16 g, 53,4 mmols) dissolvido em água (160 mL) e pó de ferro (31,2 g, 55,85 mmols) foram adicionados sob agitação. A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada e a mistura de reação filtrada através de celite. O filtrado foi extraído com acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto desejado (12,10 g, 86 %) sem purificação adicional.
[01489] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-3-(ciclopentanecarboxamido)-2-metilben- zoato de metila
[01490]
[01491] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (0,4 g, 2,0 mmols) em piridino (2 mL), ciclopentil cloreto (0,39 mL, 3,00 mmols) foi adicionado a 0 °C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Depois do consumo completo do material de partida a reação foi resfriada com água gelada. O precipitado resultante foi filtrado para fornecer o produto desejado (0,5 g, 84 %).
[01492] Etapa 5: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-(N-metilciclopentanecarboxa- mido)benzoato de metila
[01493]
[01494] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclopentanecarboxamido)-2- metilbenzoato de metila (0,3 g, 1,01 mmol) em DMF, hidreto de sódio (0,060 g, 0,0015 mmol) foi adicionado a 0 °C e a mistura de reação foi agitada durante 15 min. Iodeto de metila (0,32 mL, 0,50 mmol) foi adicionado a mistura de reação e foi agitada na temperatura ambiente. Depois do consumo completo do material de partida, a reação foi resfriada com adição de água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca (Na2SO4) e concentrada. O composto bruto foi usado para a etapa seguinte.
[01495] Etapa 6: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-2-metil-3-(N-metilciclopentanecarboxamido)benzamida
[01496]
[01497] NaOH aq. (0,077 g, 1,94 mmol) foi adicionado a uma solução de 5- cloro-2-metil-3-(N-metilciclopentanecarboxamido)benzoato de metila (0,4 g, 1,2 mmol) em 4:1 EtOH: Água (15 mL) e agitada a 65 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado com 1N HCl. A mistura de reação foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas e concentradas para fornecer o ácido respectivo (0,35 g, 91 %).
[01498] O ácido (0,3 g, 0,10 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,309 g, 0,20 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,826 g, 0,155 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão a mistura de reação foi vertida em gelo para obter um sólido que foi filtrado e lavado com acetonitrila. A purificação final foi realizada usando purificação por HPLC prep. ao produto desejado como o sal de TFA (0,120 g, 27 %).
[01499] LCMS: 430,20 (M + 1)+; HPLC: 99,79 % (@ 254 nm) (Rt; 6,086); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,55 (bs, 1H), 8,43 (t, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,29 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,25 (s, 2H), 3,01 (s, 3H), 2,35 (m, 1H), 2,19 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,06 (s, 3H), 1,70 - 1,45 (m, 6H), 1,35 (m, 2H).
[01500] Exemplo 27: Síntese do Composto 49: 3-((2-aminoetil)(metil)amino)- 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01501]
[01502] Composto 49
[01503] Uma solução agitada de (2-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)etil)carbamato de terc-butila (0,2 g, 4,2 mmols) em DCM (5 mL) foi esfriada a 0 °C e TFA (1 mL) foi adicionado à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Em conclusão, a reação foi concentrada à secura. Metade do material foi purificado por lavagens com solvente puro fornecendo 3-((2-aminoetil)(metil)amino)-5-cloro-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida como o sal de TFA (0,060 g, 76 %).
[01504] LCMS: 377,15 (M + 1)+; HPLC: 97,57 % (@ 254 nm) (Rt; 4,611); RMNde 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,69 (bs, 3H), 7,16 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,07 (t, 2H), 2,96 (m, 2H), 2,59 (s, 3H), 2,18 (s, 6H), 2,10 (s, 3H).
[01505] O material remanescente foi basificado com bicarbonato de sódio aquoso até o pH 8 e a camada aquosa extraída com MeOH/DCM a 20 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o composto desejado como base livre que foi usada para reação adicional (0,075 g).
[01506] Exemplo 28: Síntese do Composto 50: (2-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)etil)carbamato de terc-butila
[01507]
[01508] Composto 50
[01509] Etapa 1: Síntese de 3-((2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)amino)-5- cloro-2-metilbenzoato de metila
[01510]
[01511] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1 g, 4,6 mmols) e (2-oxoetil)carbamato de terc-butila (1,4 g, 8,8 mmols) em methanol (10 mL), ácido acético (0,027 g, 4,6 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,352 g, 4,68 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o sol- vente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromato- grafia em coluna para fornecer o produto desejado (0,62 g, 38 %).
[01512] Etapa 2: Síntese de 3-((2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)(me- til)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01513]
[01514] A uma solução agitada nil)amino)etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoatode metila (0,5 g, 1,46 mmol) em acetoni- trila (10 mL), carbonato de césio (0,95 g, 2,92 mmols) e iodeto de metila (1 g, 7,3 mmols) foram adicionados e a mistura de reação resultante aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo lavado com acetato de etila e o filtrado concentrado antes de purifi- cação por cromatografia em coluna para fornecer o produto desejado (0,325 g, 62 %).de 3-((2-((terc-butoxicarbo-
[01515] Etapa 3: Síntese de (2-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)etil)carbamato de terc-butila I O I ^z^^-l
[01516]
[01517] NaOH aquoso (0,071 g, 1,79 mmol) foi adicionado a uma solução de 3-((2-((terc-butoxicarbonil)amino)etil)(metil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (0,425 g, 1,19 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e pH 4 e ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,34 g, 84 %).
[01518] O ácido (0,34 g, 0,99 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,300 g, 1,98 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,77 g, 1,48 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila seguido por purifi- cação em coluna para fornecer (2-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)etil)carbamato de terc-butila (0,27 g, 58 %).
[01519] LCMS: 477,25 (M + 1)+; HPLC: 97,92 % (@ 254 nm) (Rt; 6,229); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,17 (t, 1H), 7,07 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 6,78 (bs, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,07 (t, 2H), 2,84 (t, 2H), 2,62 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,35 (s, 9H).
[01520] Exemplo 29: Síntese do Composto 51: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-((2-(dimetilamino)etil)(metil)amino)-2-metilbenzamida
[01521]
[01522] Composto 51
[01523] 3-((2-Aminoetil)(metil)amino)-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,075 g, 0,199 mmol) foi dissolvido em meta- nol (5 mL) e esfriado a 0 °C, formaldeído (0,056 g, 1,86 mmol) foi adicionado. A mistura de reação resultante foi agitada na mesma temperatura durante 30 minutos em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,023 g, 0,366 mmol) foi adicionado à mistura de reação acima e agitada na temperatura ambiente durante 4 h. Depois da conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e água adicionada antes de extração com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas e purifica- das por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-3-((2-(dimetilamino)etil)(metil)amino)-2-metilbenzamida (0,040 g, 50 %). LCMS: 405,25 (M + 1)+; HPLC: 89,93 % (@ 254 nm) (Rt; 4,634); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (bs, 2H), 2,91 (t, 2H), 2,63 (s, 3H), 2,33 - 2,35 (m, 2H), 2,11 - 2,18 (m, 15H).
[01524] Exemplo 30: Síntese do Composto 52: 3-(alil(ciclopentil)amino)-5- cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01525]
[01526] Composto 52
[01527] Etapa 1: Síntese de 3-(alil(ciclopentil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01528]
[01529] 5-Cloro-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila (1,2 g, 4,46 mmols) foi dissolvido em DMF (12 mL) e esfriado a 0 °C. NaH (0,21 g, 8,92 mmols) foi adicionado depois de 10 minutos e alil brometo (1,07 g, 8,9 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 4 h e depois aquecida a 80 0 °C durante 18 h. A reação foi resfriada com água gelada e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas fornecendo o bruto 3-(alil(ciclopentil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (0,4 g, 29,4 %).
[01530] Etapa 2: Síntese de 3-(alil(ciclopentil)amino)-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il) metil)-2-metilbenzamida
[01531]
[01532] NaOH aquoso (0,078 g, 1,95 mmol) foi adicionado a uma solução de 3-(alil(ciclopentil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (0,4 g, 1,30 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,37 g, 97,6 %).
[01533] O ácido (0,25 g, 0,85 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,259 g, 1,74 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,66 g, 1,27 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo para obter um sólido, que foi filtrado e lavado com acetonitrila seguido por purificação em coluna para fornecer a 3-(alil(ciclopentil)amino)-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il) metil)-2-metilbenzamida desejada (0,175 g, 48 %).
[01534] LCMS: 428,30 (M + 1)+; HPLC: 96,37 % (@ 254 nm) (Rt; 6,357); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 5,63 - 5,69 (m, 1H), 4,98 (m, 2H), 4,23 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,54 (d, 2H, J = 5,6 Hz), 3,46 - 3,50 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,67 (m, 2H), 1,59 (m, 2H), 1,47 (m, 2H), 1,36 (m, 2H).
[01535] Exemplo 31: Síntese do Composto 53: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il) metil)-2-metil-5-(piperazin-1-il)benzamida
[01536]
[01537] Composto 53
[01538] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01539]
[01540] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (3 g, 13,3 mmols) e ciclopentanona (5,6 g, 66 mmols) em metanol (30 mL), ácido acético (1,59 g, 26,6 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambi- ente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (2,08 g, 29,4 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi usado sem purificação adicional.
[01541] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-3-(ciclopentil (metil) amino)-2-metilben- zoato de metila
[01542]
[01543] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzo- ato de metila (1,6 g, 5,38 mmols) em acetonitrila (20 mL), carbonato de césio (3,5 g, 10,73 mmols) e iodeto de metila (3,87 g, 27,25 mmols) foram adicionados e a mistura de reação resultante aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e filtrado, concentrado e purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (1,6 g, 95 %).
[01544] Etapa 3: Síntese de 4-(3-(ciclopentil(metil)amino)-5-(metoxicarbonil)- 4-metilfenil)piperazino-1-carboxilato de terc-butila
[01545]
[01546] Uma solução de 5-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1 g, 3,07 mmols), piperazina-1-carboxilato de terc-butila (0,85 g, 4,61 mmols) e Cs2CO3 (0,5 g, 1,53 mmol) em tolueno (25 mL) foi purgada com argônio durante 10 min. Em seguida, Pd2(dba)3 (0,31 g, 0,307 mmol) e BINAP (0,038 g, 0,061 mmol) foi adicionado à mesma e argônio purgado novamente durante 10 min. A mistura de reação foi agitada a 100 °C durante 8 h. Depois da conclusão, água foi adicionada à mesma e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em anidro Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,44 g, 33,3 %).
[01547] Etapa 4: Síntese 4-(3-(ciclopentil (metil)amino)-5-(((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-4-metilfenil)piperazina-1-carboxilato de terc- butila
[01548]
[01549] NaOH aquoso (0,061 g, 1,53 mmol) foi adicionado a uma solução de 4-(3-(ciclopentil(metil)amino)-5-(metoxicarbonil)-4-metilfenil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila (0,44 g, 1,02 mmol) em MeOH (10 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,3 g, 70 %).
[01550] O ácido (0,3 g, 0,71 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,215 g, 1,43 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,56 g, 1,07 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, que foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por éter, para fornecer 4-(3-(ciclopentil(metil) amino)-5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)carbamoil)-4-metilfenil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila (0,30 g, 75,7 %).
[01551] Etapa 5: Síntese de 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(piperazin-1-il)benzamida
[01552]
[01553] Uma solução agitada de 4-(3-(ciclopentil(metil)amino)-5-(((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-4-metilfenil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila (0,30, 0,54 mmol) em DCM (10 mL) foi esfriada a 0 °C e TFA (3 mL) foi adicionado à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Após a conclusão, a mistura foi concentrada à secura. Metade do bruto foi purificado por lavagens com solvente fornecendo o composto do título como sal de TFA (0,01 g, 8,33 %).
[01554] LCMS: 452,39 (M + 1)+; HPLC: 83,92 % (@ 254 nm) (Rt; 3,825); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,71 (s, 2H), 7,98 (s, 1H), 6,79 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 3,2 Hz), 3,46 (1H em solvente de pico), 3,22 - 3,26 (m, 8H), 2,50 (3H em solvente de pico) 2,18 (s, 3H), 2,10 (s, 6H), 1,41 - 1,67 (m, 8H).
[01555] Metade do bruto foi basificado com bicarbonato de sódio aquoso até o pH 8 e a camada aquosa extraída com MeOH/DCM a 20 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas para fornecer o composto do título como base livre.
[01556] Exemplo 32: Síntese do Composto 54: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(4-metilpiperazin-1-il)benza- mida
[01557]
[01558] Composto 54
[01559] 3-(Ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-2-metil-5-(piperazin-1-il)benzamida (base livre) (0,100 g, 0,223 mmol) foi dissolvido em metanol (5 mL) e esfriado a 0 °C antes de formalina (0,033 g, 1,1 mL, 2,23 mmols) foi adicionado. A mistura de reação resultante foi agitada a mesma temperatura durante 30 minutos. Cianoboro-hidreto de sódio (0,013 g, 0,22 mmol) foi adicionado à mistura de reação acima e agitada na temperatura ambiente durante 4 h. Depois da conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e água adicionada ao resíduo, com extração realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas e purificadas por cromatografia em coluna para fornecer 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil- 5-(4-metilpiperazin-1-il)benzamida desejado (0,037 g, 36 %).
[01560] LCMS: 466,40 (M + 1)+; HPLC: 99,18 % (@ 254 nm) (Rt; 3,871); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 7,94 (t, 1H), 6,71 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 3,2 Hz), 3,39 - 3,43 (m, 1H), 3,07 (bs, 4H), 2,46 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,66 (m, 2H), 1,59 (m, 2H), 1,39 - 1,48 (m, 4H).
[01561] Exemplo 33: Síntese do Composto 55: 5-cloro-3-(ciclo-he- xil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01562]
[01563] Composto 55
[01564] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(ciclo-hexilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01565]
[01566] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1 g, 5,02 mmols) e ciclo-hexanona (2,45 g, 25 mmols) em metanol (10 mL), ácido acético (0,3 g, 5,02 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,63 g, 10,05 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-3-(ciclo-hexilamino)-2-metilbenzoato de metila (1,2 g, 89,92 %).
[01567] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-(ciclo-hexil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01568]
[01569] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclo-hexilamino)-2-metilbenzo- ato de metila (1,2 g, 4,3 mmols) em DMF seca (15 mL), carbonato de césio (2,78 g, 8,5 mmols) e iodeto de etila (3,35 g, 21,47 mmols) foram adicionados. A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 18 h. Em conclusão, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, e o resíduo lavado com acetato de etila. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-3-(ciclo-hexil (etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,25 g, 22,7 %).
[01570] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-3-(ciclo-hexil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01571]
[01572] NaOH aquoso (0,065 g, 1,61 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(ciclo-hexil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,25 g, 0,809 mmol) em EtOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,22 g, 92 %).
[01573] O ácido (0,22 g, 0,745 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (2 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,246 g, 1,49 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,58 g, 1,11 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo para obter um sólido que foi filtrado e lavado com acetonitrila. A purificação final por purificação em coluna forneceu 5-cloro-3-(ciclo-hexil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,200 g, 46,6 %). LCMS: 430,20 (M + 1)+; HPLC: 92,49 % (@ 254 nm) (Rt; 5,264); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,12 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,01 - 3,03 (m, 2H), 2,64 - 2,66 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,68 (m, 4H), 1,51 - 1,53 (m, 1H), 1,07 - 1,34 (m, 5H), 0,78 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[01574] Exemplo 34: Síntese do Composto 56: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metilbenzamida
[01575]
[01576] Composto 56
[01577] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il)amino) benzoato de metila
[01578] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1 g, 5,02 mmols) e tetra-hidropiran-4-ona (2,5 g, 25 mmols) em metanol (10 mL), ácido acético (0,3 g, 5,02 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,63 g, 10,05 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzoato de me- tila (0,5 g, 35,5 %).
[01579] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-(etila(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2- metilbenzoato de metila
[01580]
[01581] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il)amino)benzoato de metila (0,5 g, 1,76 mmol) em CAN seco (15 mL), carbonato de césio (1,2 g, 3,68 mmols) e iodeto de etila (2,7 g, 17,3 mmols) foram adicionados e a mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 18 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada com o resíduo lavado com acetato de etila. O filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-3-(etila(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metilbenzoato de me- tila desejado (0,180 g, 34 %).
[01582] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metilbenzamida
[01583]
[01584] NaOH aquoso (0,05 g, 1,22 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(etila(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,18 g, 0,608 mmol) em EtOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e pH 4 e ajustada usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,15 g, 87 %).
[01585] O ácido (0,15 g, 0,530 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,160 g, 1,06 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,413 g, 0,79 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas e purificadas por coluna em gel de sílica para fornecer 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)amino)-2-metilbenzamida (0,100 g, 43,88 %). LCMS: 432,25 (M + 1)+; HPLC: 90,46 % (@ 254 nm) (Rt; 4,833); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,22 (t, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,81 (d, 2H, J = 10 Hz), 3,20 - 3,21 (m, 2H), 2,94 - 3,02 (m, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,48 - 1,61 (m, 4H), 0,78 (t, 3H, J = 6,4 Hz).
[01586] Exemplo 35: Síntese do Composto 57: 5-cloro-3-(ciclohep- til(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01587]
[01588] Composto 57
[01589] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(cicloheptilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01590]
[01591] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1 g, 5,02 mmols) e cicloheptanona (2,81 g, 25 mmols) em metanol (10 mL), ácido acético (0,3 g, 5,02 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,65 g, 10,05 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-3-(cicloheptilamino)-2-metilbenzoato (0,8 g, 56,2 %).
[01592] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-(cicloheptil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01593]
[01594] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(cicloheptilamino)-2-metilbenzo- ato (0,8 g, 2,70 mmols) em DMF seca (10 mL), carbonato de césio (1,76 g, 5,4 mmols) e iodeto de etila (2,11 g, 13,5 mmols) foram adicionados e a mistura de reação resultante aquecida a 80 °C durante 18 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo lavado com acetato de etila e o filtrado concentrado antes de purificação por cromatografia em coluna para fornecer o 5-cloro-3-(ci- cloheptil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila desejado (0,220 g, 25 %).
[01595] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-3-(cicloheptil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01596]
[01597] NaOH aquoso (0,04 g, 1,02 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(cicloheptil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,22 g, 0,68 mmol) em EtOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e pH 4 e ajustada usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. Com as camadas orgânicas combinadas, secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,18 g, 85 %).
[01598] O ácido (0,18 g, 0,585 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,177 g, 1,16 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,45 g, 0,87 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi conti- nuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, que foi filtrado e lavado com acetonitrila antes da purificação em coluna à 5-cloro-3-(cicloheptil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,100 g, 38,7 %). LCMS: 444,25 (M + 1)+; HPLC: 89,74 % (@ 254 nm) (Rt; 5,933); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,07 (s, 1H), 6,88 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,02 - 3,03 (m, 2H), 2,77 (bs, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,76 (m, 2H), 1,59 - 1,62 (m, 4H), 1,46 (m, 4H), 1,28 (m, 2H), 0,78 (t, 3H, J = 6 Hz).
[01599] Exemplo 36: Síntese do Composto 58: Cis-3-((4-aminociclo-he- xil)(metil)amino)-5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil- benzamida
[01600]
[01601] Composto 58
[01602] Step1: Síntese de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[01603]
[01604] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50 g, 276,2 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (43,4 g, 151,8 mmols) foi adicionado às porções na temperatura ambiente e a massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo resultante foi lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto desejado (71,7 g, 100 %) que foi usado nas etapas subsequentes.
[01605] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila
[01606]
[01607] À solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (287 g, 1103 mmols) em DMF (150 mL), carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (626,63 g, 4415 mmols) foram adicionados. A mistura de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, um sólido precipitado foi filtrado, o resíduo lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto desejado (302 g, 99 %) que foi usado nas etapas subsequentes.
[01608] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[01609]
[01610] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila (150 g, 544 mmols) em etanol (750 mL), cloreto de amônio (150 g, 2777 mmols) dissolvido em água (750 mL) e pó de ferro (93,3 g, 1636 mmols) foram adicionados sob agitação. A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a massa de reação foi filtrada através de celite; fornecendo lavagens de água e acetato de etila ao resíduo, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto desejado que foi usado nas etapas subsequentes sem purificação adicional.
[01611] Etapa 4: Síntese de cis e trans 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbo- nil)amino) ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01612]
[01613] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (5 g, 20,57 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (5,6 g, 26,7 mmols) em metanol (50 mL), ácido acético (1,2 g, 20,57 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 8 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (1,6 g, 26,74 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purifi- cado por cromatografia em coluna duas vezes eluindo com acetato de etila:hexano para fornecer (4 g, 44 %) do isômero cis menos polar e (3 g, 33 %) do isômero trans mais polar puro.
[01614] Etapa 5: Síntese de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo- hexil) (metil)amino)-2-metilbenzoato de Cis-metila
[01615]
[01616] A uma solução agitada de mistura de cis isômero de 5-bromo-3-((4- ((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila (4 g, 9,09 mmols) em acetonitrila (50 mL) foi adicionado carbonato de césio (5,9 g, 18,18 mmols) e iodeto de metila (6,45 g, 45,45 mmols). A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado para fornecer o composto bruto desejado que em seguida, purificado por cromatogra- fia em coluna fornecendo o composto desejado (1,4 g, 34 %).
[01617] Etapa 6: Síntese de (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)ciclo-hexil)carbamato Cis- terc-butila
[01618]
[01619] NaOH aquoso (0,23 g, 5,72 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)(metil)amino)-2-metilbenzoato de cis-metila (1,3 g, 2,86 mmols) em MeOH (20 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (1,13 g, 90,1 %).
[01620] O ácido (1,13 g, 2,57 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (10 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,87 g, 5,72 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (2,23 g, 4,28 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por purificação com cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,8 g, 49 %).
[01621] Etapa 7: Síntese de Cis-3-((4-aminociclo-hexil)(metil)amino)-5- bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01622]
[01623] Uma solução agitada de (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)ciclo-hexil)carbamato de cis- terc-butila (0,8 g, 1,39 mmol) em DCM (25 mL) foi esfriada a 0 °C e TFA (5 mL) foi adicionado à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Após a conclusão, a reação foi concentrada à secura. O resíduo foi basifi- cado com bicarbonato de sódio aquoso até o pH 8 e a camada aquosa extraída com MeOH/DCM a 20 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e concentradas para fornecer o composto desejado (600 mg, 91 % de rendimento). LCMS: 475,15 (M + 1)+; HPLC % 95,88 (@ 254 nm) (Rt; 4,832; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8,22 (t, 1H), 7,20 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 3,6 Hz), 2,82 - 2,86 (m, 2H), 2,53 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,82 - 1,84 (m, 2H), 1,34 - 1,44 (m, 6H).
[01624] 100 mg de cis-3-((4-aminociclo-hexil)(metil)amino)-5-bromo-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (base livre) depois foram dissolvidos em HCl metanólico (5 mL) e agitados na temperatura ambiente durante 1 h. Em conclusão, o solvente de formação de sal foi removido sob pressão reduzida e sólido resultante foi purificado por lavagens com éter dietílico para fornecer o sal de HCl correspondente. Dados Analíticos de sal de HCl: LCMS: 475,20 (M + 1)+; HPLC % 96,09 (@ 254 nm) (Rt; 4,818; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.:10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,51 (s, 1H), 8,28 (t, 1H), 8,08 (s, 3H), 7,31 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 5,90 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,05 - 3,13 (m, 2H), 2,54 (s, 3H), 2,19 (s, 6H), 2,12 (s, 3H), 1,83 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 1,59 - 1,60 (m, 2H), 1,46 (m, 2H).
[01625] Exemplo 37: Síntese do Composto 59: Trans-3-((4-aminociclo-he- xil)(metil)amino)-5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-benzamida
[01626]
[01627] Composto 59
[01628] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil) (metil)amino)-2-metilbenzoato de trans-metila
[01629]
[01630] A uma solução agitada de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbo- nil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de trans-metila (3 g, 6,81 mmols) em acetonitrila (40 mL), carbonato de césio (4,4 g, 13,62 mmols) e iodeto de metila (4,83 g, 34,05 mmols) foram adicionados; a mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Após a conclusão, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada, o resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado para fornecer o composto bruto desejado que em seguida, purificado por cromatogra- fia em coluna fornecendo o composto desejado (1,3 g, 43 %).
[01631] Etapa 2: Síntese de (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropi- ridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)ciclo-hexil)carbamato de trans-terc-butila
[01632]
[01633] NaOH aquoso (0,23 g, 5,72 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)(metil)amino)-2-metilbenzoato de trans-metila (1,3 g, 2,86 mmols) em MeOH (20 mL) e foi agitado a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ao pH 4 usando ácido cítrico. A mistura foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas, filtradas e concentradas para fornecer o respectivo ácido (1 g, 83 %).
[01634] O ácido (1 g, 2,27 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (5 mL) e 3- (amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,65 g, 4,54 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,7 g, 3,4 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter o sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por purificação com cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,7 g, 54 %).
[01635] Etapa 3: Síntese de Trans-3-((4-aminociclo-hexil)(metil)amino)-5- bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01636]
[01637] Uma solução agitada de (4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(metil)amino)ciclo-hexil)carbamato de trans-terc-butila (0,7 g, 1,21 mmol) em DCM (8 mL) foi esfriada a 0 °C e TFA (2,5 mL) foi adicionado à mesma. A massa de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Em conclusão, a reação foi concentrada à secura. O resíduo foi basificado com bicarbonato de sódio aquoso até o pH 8 e a camada aquosa extraída com MeOH/DCM a 20 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio, filtradas e concentradas para fornecer o material bruto que depois foi purificado por lavagens com solvente fornecendo o composto desejado (0,5 g, 86 %). LCMS: 475,20 (M + 1)+; HPLC % 92,35 (@ 254 nm) (Rt; 4,416; Método: Coluna: YMC ODS- A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8,21 (t, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H), 2,63 - 2,66 (m, 2H), 2,55 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 6H), 1,79 - 1,82 (m, 2H), 1,60 (m, 2H), 1,46 - 1,49 (m, 2H), 1,06 - 1,09 (m, 2H).
[01638] 100 mg de trans-3-((4-aminociclo-hexil)(metil)amino)-5-bromo-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (base livre) depois foi dissolvido em HCl metanólico (5 mL) e agitado na temperatura ambiente durante 1 h. Em conclusão da formação de sal, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o sólido resultante foi purificado por lavagens com éter dietílico para fornecer o sal de HCl correspondente. Dados Analíticos de sal de HCl: LCMS: 475,20 (M + 1)+; HPLC % 91,40 (@ 254 nm) (Rt; 4,408; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,51 (s, 1H), 8,28 (t, 1H), 8,06 (s, 3H), 7,31 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 2,92 (bs, 1H), 2,62 - 2,91 (m, 4H), 2,19 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,97 (d, 2H, J = 10,8 Hz), 1,70 (m, 2H), 1,53 - 1,56 (m, 2H), 1,31 - 1,34 (m, 2H).
[01639] Exemplo 38: Síntese do Composto 60: Cis-3-((4-acetamidociclo-he- xil)(metil)amino)-5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil- benzamida
[01640]
[01641] Composto 60
[01642] A uma solução agitada do composto cis-3-((4-aminociclo-hexil)(me- til)amino)-5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenza- mida (base livre) (0,225, 0,474 mmol) em DMF (3 mL), EDCI.HCl (0,138 g, 0,718 mmol), HOBt (0,064 g, 0,47 mmol), trietil amina (0,1 g, 0,99 mmol) e ácido acético (0,057 g, 0,949 mmol) foram adicionados na temperatura ambiente e agitada a mesma temperatura durante 18 h. Em conclusão, água foi adicionada e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas fornecendo material bruto; que em seguida, purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,17 g, 72 %). LCMS: 517,25 (M + 1)+; HPLC % 95,83 (@ 254 nm) (Rt; 4,894; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,22 (t, 1H), 7,76 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 7,23 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 3,6 Hz), 3,71 (bs, 1H), 2,89 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,81 (s, 3H), 1,74 - 1,76 (m, 2H), 1,53 (m, 2H), 1,39 (m, 4H).
[01643] Exemplo 39: Síntese do Composto 61: Trans-3-((4-acetamidociclo- hexil)(metil)amino)-5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-me- tilbenzamida
[01644]
[01645] Composto 61
[01646] A uma solução agitada de trans-3-((4-aminociclo-hexil)(metil)amino)- 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,225, 0,474 mmol) em DMF (3 mL), EDCI.HCl (0,138 g, 0,718 mmol), HOBt (0,064 g, 0,47 mmol), trietil amina (0,1 g, 0,99 mmol) e ácido acético (0,057 g, 0,949 mmol) foram adicionados na temperatura ambiente e agitada a mesma temperatura durante 18 h. Em conclusão, água foi adicionada e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas fornecendo material bruto; que em seguida, purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto desejado (0,13 g, 53 %).
[01647] LCMS: 517,20 (M + 1)+; HPLC % 93,92 (@ 254 nm) (Rt; 4,713; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,20 (t, 1H), 7,65 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,18 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 3,6 Hz), 3,42 - 3,44 (m, 1H), 2,68 - 2,71 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (s, 6H), 1,77 - 1,80 (m, 2H), 1,74 (s, 3H), 1,62 - 1,65 (m, 2H), 1,46 - 1,54 (m, 2H), 1,07 - 1,23 (m, 2H).
[01648] Exemplo 40: Síntese do Composto 62: 2-bromo-3-(ciclopentil(me- til)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida
[01649]
[01650] Composto 62
[01651] Etapa 1: 2-bromo-3-nitrobenzoato de metila
[01652]
[01653] A uma solução agitada de 2-bromo-3-nitrobenzoato (3 g, 12,19 mmols) em DMF (33 mL), carbonato de sódio (5,16 g, 48,67 mmols) e iodeto de metila (6,92 g, 48,67 mmols) foram adicionados. A mistura de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, água foi adicionada à mistura e extração realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida para obter 2-bromo-3-nitrobenzoato de metila bruto (4 g, bruto).
[01654] Etapa 2: Síntese de 3-amino-2-bromobenzoato de metila
[01655]
[01656] A uma solução agitada de 2-bromo-3-nitrobenzoato de metila (4 g, 15,38 mmols) em etanol (20 mL), cloreto de amônio (4 g, 74,07 mmols) dissolvido em água (20 mL) e pó de ferro (6,88 g, 123 mmols) foram adicionados sob agitação. A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada à mistura e filtrada através de celite. O filtrado foi extraído com acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas lavadas com água e solução de bicarbonato de sódio, secas e concentradas sob pressão reduzida fornecendo o 3-amino-2-bro- mobenzoato de metila desejado (3 g, 85 %) que foi usado sem purificação adicional.
[01657] Etapa 3: Síntese de 2-bromo-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila
[01658]
[01659] A uma solução agitada de 3-amino-2-bromobenzoato de metila (3 g, 13,0 mmols) e ciclopentanona (5,4 g, 64,28 mmols) em metanol (20 mL), ácido acético (1,56 g, 26 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (2 g, 31,7 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto purificado por cromatografia em coluna para fornecer 2-bromo- 3-(ciclopentilamino) benzoato de metila (1,4 g, 36 %).
[01660] Etapa 4: Síntese de 2-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila
[01661]
[01662] A uma solução agitada de 2-bromo-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila (1,4 g, 4,69 mmols) em acetonitrila (10 mL), carbonato de césio (3 g, 9,2 mmols) e iodeto de metila (3,38 g, 23,3 mmols) foram adicionados e a mistura de reação resultante aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada e o resíduo foi lavado com acetato de etila. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna para fornecer 2-bromo-3- (ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila (1,1 g, 75 %).
[01663] Etapa 5: Síntese de 2-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dime- til-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida
[01664]
[01665] NaOH aquoso (0,064 g, 1,6 mmol) foi adicionado a uma solução de 2-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila (0,25 g, 0,801 mmol) em MeOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,2 g, 84 %).
[01666] O ácido (0,2 g, 0,67 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,204 g, 1,34 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,516 g, 1,00 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo para obter um sólido, que foi filtrado e lavado com acetonitrila. A purificação final por HPLC preparativa forneceu 2-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)benzamida como o sal de TFA (0,02 g, 6,89 %). LCMS: 432,10 (M + 1)+; HPLC % 96,05 (@ 254 nm) (Rt; 4,908); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,26 - 7,29 (m, 2H), 6,94 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, 2H), 3,59 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,61 - 1,67 (m, 4H), 1,46 (bs, 4H).
[01667] Exemplo 41: Síntese do Composto 63: 3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-vinilbenzamida
[01668]
[01669] Composto 63
[01670] Etapa 1: Síntese de 2-bromo-3-nitrobenzoato de metila
[01671]
[01672] A uma solução agitada de ácido 2-bromo-3-nitrobenzoico (3 g, 12,19 mmols) em DMF (30 mL), carbonato de sódio (5,16 g, 48,6 mmols) e iodeto de metila (6,92 g, 48,7 mmols) foram adicionados. A mistura de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, o sólido precipitado foi filtrado, o resíduo lavado com acetato de etila (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida fornecendo o bruto 2-bromo-3-nitrobenzoato desejado (4 g, 99 %) que foi usado sem purificação adicional.
[01673] Etapa 2: Síntese de 3-amino-2-bromobenzoato de metila
[01674]
[01675] À solução agitada de bruto acima 2-bromo-3-nitrobenzoato (4 g, 15,38 mmols) em etanol (20 mL), cloreto de amônio (4 g, 74,0 mmols) dissolvido em água (20 mL) e pó de ferro (6,87 g, 123 mmols) foram adicionados sob agitação. A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 7 h. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de celite, lavando com água e acetato de etila e o filtrado extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e con- centradas sob pressão reduzida fornecendo o produto bruto desejado (3 g).
[01676] Etapa 3: Síntese de 2-bromo-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila
[01677]
[01678] A uma solução agitada de 3-amino-2-bromobenzoato de metila (3 g, 13,01 mmols) e ciclopentanona (5,6 g, 66 mmols) em metanol (30 mL), ácido acético (1,59 g, 26,6 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (2,08 g, 29,4 mmols) foi adicionado e a mistura agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 2-bromo-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila (1,4 g, 36 %).
[01679] Etapa 4: Síntese de 2-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila
[01680]
[01681] A uma solução agitada de 2-bromo-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila (1,4 g, 4,69 mmols) em acetonitrila (20 mL), carbonato de césio (3,0 g, 9,2 mmols) e iodeto de metila (3,38 g, 23,4 mmols) foram adicionados e a mistura de reação resultante aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada e o resíduo lavado com acetato de etila. O filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer 2- bromo-3-(ciclopentil(metil)amino) benzoato de metila desejado (1,1 g, 75 %).
[01682] Etapa 5: Síntese de 3-(ciclopentil(metil)amino)-2-vinilbenzoato de me- tila
[01683]
[01684] A uma solução agitada de 2-bromo-3-(ciclopentil(metil)amino)benzo- ato de metila (1 equiv.) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (1,2 equiv.) em mistura de dioxano/água (5 mL + 1 mL), Na2CO3 (3,6 equiv.) foi adicionado e a solução purgada com argônio durante 15 min. Em seguida, Pd(PPh3)4 (0,1 equiv.) foi adicionado e argônio purgado durante 10 min. e a mistura de reação aquecido a 100 °C durante 2 h. Em conclusão, a mistura de reação foi diluída com água e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o 3- (ciclopentil(metil)amino)-2-vinilbenzoato de metila desejado.
[01685] Etapa 6: Síntese de 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-vinilbenzamida
[01686]
[01687] A uma solução agitada de 3-(ciclopentil(metil)amino)-2-vinilbenzoato de metila (1 equiv.) em etanol (10 mL), solução de NaOH aquosa (1,5 equiv. em 10 mL água) foi adicionada e a reação agitada a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado com 1N HCl ao pH 6. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco para obter o ácido puro correspon- dente.
[01688] A uma solução deste respectivo ácido (1 equiv.) em DMSO (10 mL), PyBOP (1,5 equiv.) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 15 min. Em seguida, 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (2 equiv.) foi adicionada e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, água foi adicionada e o sólido resultante filtrado e lavado com água. Este sólido foi agitado com acetonitrila durante 10 min e filtrado novamente para obter 3-(ciclopentil(metil)amino)-N-((4,6-di- metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-vinilbenzamida que foi purificado por HPLC preparativa fornecendo o sal de TFA (0,045 g, 10,39 %). LCMS: 380,25 (M + 1)+; HPLC % 98,00 (@ 254 nm) (Rt; 4,323); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,51 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,25 (bs, 2H), 6,81 - 6,88 (m, 2H), 5,85 (s, 1H), 5,49 (d, 1H, J = 18 Hz), 5,40 (bs, 1H), 4,34 (3H ligado em solvente de pico), 4,19 (d, 3H, J = 4,8 Hz), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,61 (m, 4H), 1,47 (bs, 4H).
[01689] Exemplo 42: Síntese do Composto 64: 5-cloro-3-(ciclopen- til(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01690]
[01691] Composto 64
[01692] Etapa 1: Síntese de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[01693]
[01694] Ácido 5-cloro-2-metilbenzoico (4 g, 23,39 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (27 mL) a -10 °C aos lotes. Depois de 10 minutos, a mistura de nitração [Preparada através da mistura de HNO3 Conc. (3,3 g, 52,68 mmols) com H2SO4 conc. (4,4 mL)] foi adicionado às gotas a -10 °C. A mistura de reação resultante foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura foi vertida em água gelada e o sólido precipitado resultante foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o ácido cloro-2-metil-3-nitrobenzoico desejado (4,95 g, 99 %).
[01695] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01696]
[01697] A uma soIução agitada de ácido cIoro-2-metiI-3-nitrobenzoico (6,75 g, 31,25 mmoIs) em DMF (33 mL), carbonato de sódio (13,23 g, 125,18 mmoIs) e iodeto de metiIa (17,77 g, 125,2 mmoIs) foram adicionados. A mistura de reação resuItante foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em concIusão, água foi adicionada e extraída usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coIuna em síIica (tamanho da maIha 60 a 120) fornecendo 5-cIoro-2-metiI-3-nitrobenzoato de metiIa (6 g, 83,65 %).
[01698] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01699]
[01700] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6 g, 26,13 mmols) em etanol (60 mL), cloreto de amônio (6 g, 112,1 mmols) dissolvido em água (60 mL) e pó de ferro (11,88 g, 208,4 mmols) foram adicionados sob agitação. A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada a reação e a mistura foi filtrada através de celite. O filtrado foi extraído com acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, concentradas sob pressão reduzida fornecendo 3-amino-5-cloro-2-metilbenzo- ato de metila que foi usado sem purificação adicional.
[01701] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila
[01702]
[01703] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1 g, 5,02 mmols) e ciclopentanona (2,1 g, 25 mmols) em metanol (10 mL), ácido acético (0,3 g, 5,02 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (0,37 g, 5,90 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzoato de metila (0,62 g, 46,2 %).
[01704] Etapa 5: Síntese de 5-cloro-3-(ciclopentil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[01705]
[01706] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclopentilamino)-2-metilbenzo- ato de metila (0,62 g, 2,32 mmols) em DMF seca (10 mL), carbonato de césio (3,78 g, 11,6 mmols) e iodeto de etila (5,43 g, 34,8 mmols) foram adicionados e a massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 18 h. Em conclusão, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e filtrado, concentrado e purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-cloro-3-(ciclopentil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila desejado (0,101 g, 15 %).
[01707] Etapa 6: Síntese de 5-cloro-3-(ciclopentil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil- 2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01708]
[01709] NaOH aquoso (0,1 g, 2,5 mmols) foi adicionado a uma solução de 5- cloro-3-(ciclopentil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,5 g, 1,69 mmol) em EtOH (10 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,41 g, 86 %).
[01710] O ácido (0,10 g, 0,355 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,104 g, 0,77 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,277 g, 0,533 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo e o sólido resultante filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por lavagens com solvente adicionais para fornecer 5-cloro-3-(ciclopentil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,107 g, 72 %). LCMS: 416,25 (M + 1)+; HPLC % 91,83 (@ 254 nm) (Rt; 5,021); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,45 (t, 1H), 2,94 - 2,96 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,58 - 1,64 (m, 4H), 1,47 (m, 2H), 1,32 (m, 2H), 0,77 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[01711] Exemplo 43: Síntese do Composto 19: 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopen- til(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida
[01712]
[01713] Composto 19
[01714] Etapa 1: Síntese de ácido 5-bromo-2-cloro-3-nitrobenzoico:
[01715]
[01716] Ácido 5-bromo-2-clorobenzoico: (5 g, 27,3 mmols) foi adicionado ao H2SO4 conc. esfriado (20 mL) a -10 °C em porções pequenas. Depois de 10 minutos, a mistura de nitração {preparada através da mistura de HNO3 conc. (2,5 mL) com H2SO4 conc. (10 mL)} foi adicionado às gotas a -10 °C. A mistura de reação foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada e o sólido coletado por filtração. O sólido foi lavado com água e seco sob vácuo para fornecer ácido 5-bromo-2-cloro-3-nitrobenzoico: (3,6 g, 60,5 %).
[01717] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-2-cloro-3-nitrobenzoato de metila:
[01718]
[01719] À solução agitada de ácido-bromo-2-cloro-3-nitrobenzoico (3,6 g, 12,9 mmols) em DMF (40 mL) foi adicionado carbonato de sódio (4,1 g, 38,6 mmols) e iodeto de metila (4 mL, 64,3 mmols). A mistura de reação foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, água foi adicionada à mistura de reação e o produto foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato sat. e 5 N HCl. Os orgânicos foram secos e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 5-bromo-2-cloro-3-nitrobenzoato de metila (3,4 g, 89,9 %).
[01720] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-bromo-2-clorobenzoato de metila:
[01721]
[01722] À solução agitada de 5-bromo-2-cloro-3-nitrobenzoato de metila (3,4 g, 11,6 mmols) em etanol (19 mL) foi adicionado cloreto de amônio (3,4 g, 57,8 mmols) dissolvido em água (30 mL) e pó de ferro (5,16 g, 92,5 mmols). A mistura de reação foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de lavagens com celite com etanol e acetato de etila. O filtrado foi extraído com acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 3-amino-5-bromo-2-clorobenzoato de metila (2,8 g, 92,1 %).
[01723] Etapa 4: Síntese de 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila:
[01724]
[01725] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-clorobenzoato de me- tila (2,8 g, 10,6 mmols) e ciclopentanona (4,47 g, 53,2 mmols) em metanol (20 mL) foi adicionado ácido acético (1,3 mL, 21,2 mmols) e a reação agitada na temperatura ambiente durante 3 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (1,7 g, 26,6 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o produto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopentilamino)benzoato de metila (0,5 g, 14,2 %).
[01726] Etapa 5: Síntese de 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopentil(metil)amino)ben- zoato de metila:
[01727]
[01728] A uma solução agitada de 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopentilamino)ben- zoato de metila (0,550 g, 1,65 mmol) em acetonitrila (20 mL) foi adicionado carbonato de césio (1,08 g, 3,31 mmols) e iodeto de metila (1,17 g, 8,25 mmols). A mistura de reação foi aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna para fornecer 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila (0,350 g, 61 %).
[01729] Etapa 6: Síntese de 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopentil(metil)amino)-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida
[01730]
[01731] NaOH aquoso (0,06 g, 1,52 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopentil(metil)amino)benzoato de metila (0,350 g, 1,01 mmol) em EtOH (4 mL) e água (1 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ao pH 4 com ácido cítrico. O produto foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido desejado (0,266 g, 79,4 %).
[01732] O ácido (0,265 g, 0,80 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,243 g, 1,60 mmol) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,624 g, 1,20 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo para obter um sólido. O sólido foi filtrado e lavado com acetonitrila, seguido por purificação por cromatografia em coluna e HPLC prep. para fornecer 5-bromo-2-cloro-3-(ciclopen- til(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida (0,012 g, 3,22 %).
[01733] Dados Analíticos: LCMS: 466,05 (M + 1)+; HPLC: 99,28 % (@ 254 nm) (Rt; 6,917; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 7,42 (d, 1H, J = 2 Hz), 7,24 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 6,16 (s, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,71 (m, 1H), 2,70 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,79 (m, 2H), 1,70 (m, 2H), 1,56 (m, 4H).
[01734] Exemplo 44: Síntese dos Compostos 91, 92, 97, 98, 102, 104, 105, 117 a 123, 126, 127, 137, 144, 157, 191, 192, 205 a 209, 212, 213, 222, 243 a 245, 268, 269, 273, 276 a 279, 282 a 287, 290, 301, 302, 306, 308 a 311, 313, 315, 319 a 322, 328, 332 a 336, 339, 340, 344, 347 a 349, 356, 386, 387, 389, 390, e 392 a 417
[01735] Compostos 91, 92, 97, 98, 102, 104, 105, 117 a 123, 126, 127, 137, 144, 157, 191, 192, 205 a 209, 212, 213, 222, 243 a 245, 268, 269, 273, 276 a 279, 282 a 287, 290, 301, 302, 306, 308 a 311, 313, 315, 319 a 322, 328, 332 a 336, 339, 340, 344, 347 a 349, 356, 386, 387, 389, 390, e 392 a 417 foram sintetizados conforme descrito abaixo.
[01736] Composto 91: 3-(alil(piperidin-4-il)amino)-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01737]
[01738] Etapa 1: Síntese de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[01739]
[01740] Ácido 5-cloro-2-metilbenzoico (4,0 g, 23 mmols) foi adicionado às porções ao H2SO4 conc. esfriado (27 mL) a -10 °C. Depois de 10 minutos a mistura de nitração {que consiste de HNO3 concentrado (3,3 g, 52 mmols) e H2SO4 concentrado (4,4 mL)} foi adicionado às gotas a -10 °C. A mistura foi agitada a -10 °C durante 30 minutos e vertida em água gelada. O sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo para fornecer o composto do título (4,95 g, 99 %).
[01741] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01742]
[01743] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (6,75 g, 31,3 mmols) em DMF (33 mL), foram adicionados carbonato de sódio (13,23 g, 125 mmols) e iodeto de metila (17,77 g, 125 mmols). A mistura foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, água foi adicionada à massa de reação e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida, e purificadas por cromatografia em coluna em gel de sílica (para fornecer o composto do título (6,0 g, 83 %).
[01744] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[01745]
[01746] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6,0 g, 26 mmols) em etanol (60 mL) foram adicionados cloreto de amônio (6,0 g, 110 mmols) dissolvido em água (60 mL) e pó de ferro (11,9 g, 208 mmols) sob agitação. A mistura foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada e a mistura de reação foi filtrada através de celite. O filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título que foi usado sem purificação adicional.
[01747] Etapa 4: Síntese de 4-((5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil)amino) piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[01748]
[01749] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (5,0 g, 25 mmols) e 4-oxopiperidino-1-carboxilato de terc-butila (25,3 g, 127 mmols) em metanol (50 mL), ácido acético (1,5 g, 25 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 8 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (1,89 g, 30,1 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (5,0 g, 52 %).
[01750] Etapa 5: Síntese de 4-(alil(5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil) amino)piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[01751]
[01752] A uma solução agitada de 4-((5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfe- nil)amino) piperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,70 g, 1,82 mmol) em DMF (7 mL), foi adicionado NaH (0,052 g, 2,19 mmols) a 0 °C. Depois da agitação durante 20 mi- nutos, 3-bromoprop-1-eno (0,44 g, 3,64 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 80 °C durante 15 h. Em conclusão, a massa de reação foi resfriada com água gelada e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,3 g, 39 %).
[01753] Etapa 6: Síntese de 4-(alil(5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)amino)piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[01754]
[01755] NaOH aquoso (0,113 g, 2,83 mmols) foi adicionado a uma solução de 4-(alil(5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil)amino)piperidina-1-carboxilato de terc- butila (0,60 g, 1,41 mmol) em etanol (15 mL). Depois da agitação a 60 oC durante 1 h etanol foi removido sob pressão reduzida e a mistura acidificada usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,5 g, 86 %). O ácido acima (0,5 g, 1,22 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (5 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,37 g, 2,44 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,95 g, 1,83 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas, e purificadas por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,2 g, 30 %).
[01756] Etapa 7: Síntese de 3-(alil(piperidin-4-il)amino)-5-cloro-N-((4,6-dime- til-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[01757]
[01758] Uma solução agitada de composto 4-(alil(5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)amino)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,2 g, 0,36 mmol) em DCM (5 mL) foi esfriada a 0 °C e TFA (0,5 mL) foi adicionado. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 18 h. e concentrada à secura. O resíduo foi lavado com éter dietílico e depois purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto do título como sal de TFA (0,06 g, 37 %). LCMS: 443,25 (M + 1)+; HPLC: 97,14 % (@ 254 nm) (Rt; 5,074; Método: Coluna: YMC ODS- A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,38 (bs, 1H), 8,21 (t, 1H), 8,05 (d, 1H), 7,21 (d, 1H, J = 4,4 Hz), 6,97 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 5,86 (s, 1H), 5,56 - 5,64 (m, 1H), 4,97 - 5,09 (m, 2H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,62 (d, 2H, J = 5,2 Hz), 3,23 (m, 2H), 3,10 - 3,16 (m, 1H), 2,85 - 2,88 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,83 - 1,86 (m, 2H), 1,68 - 1,73 (m, 2H).
[01759] Composto 97: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-2-metil-3-(piperidin-4-il(propil)amino)benzamida
[01760]
[01761] A uma solução agitada de 3-(alil(piperidin-4-il)amino)-5-cloro-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,04 g, 0,09 mmol) em MeOH (3 mL) foi adicionado Pd/C a 10 % (0,01 g) e a reação agitada na temperatura ambiente sob hidrogênio (pressão por balão) durante 2 h. A mistura foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter um sólido bruto que foi purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto do título como sal de TFA (0,012 g, 40 %). LCMS: 445,25 (M + 1)+; HPLC: 95,52 % (@ 254 nm) (Rt; 5,102; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,39 (bs, 1H), 8,22 (t, 1H), 8,03 (bs, 1H), 7,25 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,24 - 3,27 (m, 2H), 3,00 (m, 1H), 2,92 (m, 2H), 2,83 - 2,86 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,79 - 1,82 (m, 2H), 1,67 - 1,71 (m, 2H), 1,18 - 1,23 (m, 2H), 0,75 (t, 3H, J = 8 Hz).
[01762] Composto 144: 3,6-dicloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-4-[metil(piperidin-4-il)amino]piridino-2-carboxamida
[01763]
[01764] Etapa 1: Síntese de 3,4,6-tricloropiridino-2-carboxilato de metila
[01765]
[01766] A uma solução agitada de 3,6-dicloropiridino-2-carboxilato de metila (0,96 g, 4,66 mmols) em TFA (5 ml) foi adicionado peróxido de hidrogênio (solução aquosa 30 % p/p, 435 μl, 2,5 mmols) e a mistura de reação foi aquecida a 60 oC durante 20 h. A mistura de reação depois foi esfriada e lentamente vertida em solução de K2CO3 saturada (100 ml), seguido por extração da camada aquosa com EtOAc (2 x 200 ml), lavagem das fases orgânicas combinadas com salmoura (2 x 50ml), secagem (Na2SO4) e evaporação. O 3,6-dicloro-2-(metoxicarbonil)piridin-1-ium-1-olato desejado foi usado bruto no estágio seguinte da síntese sem qualquer outra purificação. Ao 3,6-dicloro-2-(metoxicarbonil)piridin-1-ium-1-olato bruto (~70 % de pureza, 2,40 g, 7,7 mmols) foi adicionado POCl3 (3,5 ml, 38 mmols) e a solução foi aquecida a 100 oC durante 4 h. Depois do esfriamento, o POCl3 foi removido a vácuo para fornecer um sólido branco que foi cromatografado em gel de sílica eluindo com 0 % a 10 % de EtOAc em heptano para fornecer o composto do título como agulhas incolores (340 mg, 30 % em duas etapas). LC-MS 100 %, 2,20 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 239,8/241,7, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,51 (1H, s), 3,92 (3H, s).
[01767] Etapa 2: Síntese de 4-({1-[(terc-butóxi)carbonil]piperidin-4-il}(me- til)amino)-3,6-dicloropiridino-2-carboxilato de metila
[01768]
[01769] A uma solução agitada de 3,4,6-tricloropiridino-2-carboxilato de metila (310 mg, 1,29 mmol) em DMF (5 ml) foi adicionado TEA (359 μl, 2,58 mmols) seguido por 4-(metilamino)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (276 mg, 1,29 mmol) e a mistura de reação foi aquecida a 100 oC durante 4 h. A mistura de reação depois foi esfriada até a temperatura ambiente e vertida em água (50 ml), seguido por extração do produto em TBME (3 x 50ml), lavagem dos orgânicos combinados com salmoura (50 ml), secagem com Na2SO4 e evaporação. O produto bruto depois foi purificado em uma coluna de sílica Isolute 10 g eluindo com um gradiente de 0 % a 50 % EtOAc em heptano para fornecer o composto do título como um sólido branco (95 mg, 18 %). LC-MS 95 %, 2,29 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 418,1/419,8, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 6,87 (s, 1H) 4,12 - 4,34 (m, 2H) 3,99 (s, 3H) 3,69 - 3,80 (m, 1H) 2,79 (s, 3H) 2,64 - 2,77 (m, 2H) 1,75 (br. s., 4H) 1,48 (s, 9H).
[01770] Etapa 3: Síntese de ácido 4-({1-[(terc-butóxi)carbonil]piperidin-4- il}(metil)amino)-3,6-dicloropiridino-2-carboxílico boc
[01771]
[01772] A uma solução agitada de 4-({1-[(terc-butóxi)carbonil]piperidin-4- il}(metil)amino)-3,6-dicloropiridino-2-carboxilato de metila (95 mg, 0,23 mmol) em THF (5 ml) foi adicionado 2 M NaOH aquoso (2,3 ml, 4,54 mmols) e a mistura de reação foi deixada agitar na temperatura ambiente durante 16 h depois do tempo que THF foi evaporado a vácuo. A fase aquosa depois foi tratada com uma solução de ácido cítrico aquosa a 10 % ao pH 5 ao 6 e depois extraída com EtOAc (3 x 50ml), as fases orgânicas combinadas foram em seguida, secas com Na2SO4 e evaporadas para fornecer o composto do título como um pó branco (77 mg, 84 %). LC-MS 100 %, 2,02 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 403,9/405,6, RMN de 1H (500 MHz, Metanol- d4) δ 7,09 (s, 1H) 4,14 - 4,22 (m, 2H) 3,80 - 3,89 (m, 1H) 2,84 (s, 5H) 1,74 - 1,81 (m, 4H) 1,46 (s, 9H).
[01773] Etapa 4: Síntese de 4-[(3,6-dicloro-2-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil]carbamoil}piridin-4-il)(metil)amino]piperidina-1-carboxilato de terc-bu-tila
[01774]
[01775] A uma solução agitada de ácido 4-({1-[(terc-butóxi)carbonil]piperidin- 4-il}(metil)amino)-3,6-dicloropiridino-2-carboxílico (75 mg, 0,19 mmol) em DMF (2 ml) esfriada a 0 oC foi adicionado DIPEA (48 μl, 0,28 mmol) seguido por PyBOP (116 mg, 0,22 mmol) e 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 % de pureza, 35 mg, 0,2 mmol). A mistura de reação depois foi agitada na temperatura ambiente durante 16 h depois de que a reação foi vertida em água (30 ml) e extraída com EtOAc (3 x 50ml) depois de que os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 ml) e secos (Na2SO4) e evaporados. O produto bruto foi purificado usando uma coluna de sílica Isolute 5 g eluindo com um gradiente de 0 % a 100 % de EtOAc em heptano para fornecer o composto do título como um sólido branco que continha ~45 % p/p de óxido de tripirrolidinofosfano por RMN - este composto foi usado no estágio seguinte da síntese sem qualquer outra purificação. LC-MS 93 %, 1,97 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 538,0/539,45/542,05, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 10,03 (br. s, 1H), 8,13 - 7,97 (m, 1H), 6,79 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,50 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 4,16 (br. m, 2H), 3,78 - 3,62 (m, 1H), 2,72 (s, 3H), 2,65 (br. m, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,73 - 1,63 (m, 4H), 1,44 (s, 9H).
[01776] Etapa 5: Síntese de cloridreto de 3,6-dicloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidropiridin-3-il)metil]-4-[metil(piperidin-4-il)amino]piridino-2-carboxamida
[01777]
[01778] 4-[(3,6-dicloro-2-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]car- bamoil}piridin-4-il)(metil)amino]piperidina-1-carboxilato de terc-butila (310 mg, 1,29 mmol) foi dissolvido em 4M HCl em solução de dioxano (3 ml) e agitada na tempera- tura ambiente durante 16 h depois de que o solvente foi evaporado e o composto purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto do título como um pó bege (13 mg, 14 %). LC-MS 100 %, 2,41 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 438,1/439,8, RMN de 1H (500 MHz, Metanol-d4) δ 7,12 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,01 - 3,81 (m, 1H), 3,45 (d, J = 12,9 Hz, 2H), 3,12 - 2,97 (m, 2H), 2,82 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,13 - 1,93 (m, 4H).
[01779] Composto 386: 3,6-dicloro-n-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-4-[metila(oxan-4-il)amino]piridino-2-carboxamida
[01780]
[01781] Etapa 1: Síntese de 3,6-dicloro-4-[metil(oxan-4-il)amino]piridino-2- carboxilato de metila
[01782] A uma solução agitada de 3,4,6-tricloropiridino-2-carboxilato de metila (600 mg, 2,50 mmols) em DMF (12 ml) foi adicionado TEA (696 μl, 4,99 mmols) se- guido por N-metiloxan-4-amina (287 mg, 2,50 mmols) e a mistura de reação foi aquecida a 100 oC durante 20 h. A mistura de reação depois foi esfriada até a temperatura ambiente e vertida em água (100 ml), seguido por extração do produto em EtOAc (3 x 100ml), lavagem dos orgânicos combinados com salmoura (50 ml), secagem com Na2SO4 e evaporação. O produto bruto depois foi purificado em uma coluna de sílica Isolute 10 g eluindo com um gradiente de EtOAc a 0 % a 60 % em heptano para fornecer o composto do título como um sólido branco (114 mg, 14 %). LC-MS 100 %, 1,91 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 319,3/320,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 6,87 (s, 1H), 4,15 - 4,00 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,93 - 3,71 (m, 1H), 3,54 - 3,24 (m, 2H), 2,82 (s, 3H), 1,94 (dd, J = 12,1, 4,7 Hz, 2H), 1,70 (d, J = 10,2 Hz, 2H). (br. s., 4H) 1,48 (s, 9H)
[01783] Etapa 2: Síntese de ácido 3,6-dicloro-4-[metil(oxan-4-il)amino]piri- dino-2- carboxílico
[01784]
[01785] A uma solução agitada de 3,6-dicloro-4-[metil(oxan-4-il)amino]piri- dino-2-carboxilato de metila (114 mg, 0,36 mmol) em THF (5 ml) foi adicionado 2 M NaOH aquoso (0,89 ml, 1,79 mmol) e a mistura de reação foi deixada agitar na temperatura ambiente durante 20 h depois do tempo que o THF foi evaporado a vácuo. A fase aquosa depois foi tratada com uma solução de ácido cítrico aquosa a 10 % ao pH 5 a 6 e depois extraída com EtOAc (3 x 50ml) seguido por uma solução de 1:1 IPA/CHCl3 (2 x 50ml), as fases orgânicas combinadas foram em seguida, lavadas com salmoura (50 ml) secas com Na2SO4 e evaporadas para fornecer o composto do título como um sólido branco (85 mg, 78 %). LC-MS 100 %, 1,47 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 305,5/306,9, RMN de 1H (500 MHz, Metanol-d4) δ 7,10 (s, 1H), 4,03 (dd, J = 11,5, 4,4 Hz, 2H), 3,99 - 3,86 (m, 1H), 3,47 (t, J = 11,0 Hz, 2H), 2,90 (s, 3H), 2,05 - 1,90 (m, 2H), 1,74 (d, J = 12,4 Hz, 2H).
[01786] Etapa 3: Síntese de 3,6-dicloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil]-4-[metila(oxan-4-il)amino]piridino-2-carboxamida
[01787]
[01788] A uma solução agitada de ácido 3,6-dicloro-4-[metil(oxan-4- il)amino]piridino-2-carboxílico (85 mg, 0,28 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionado DIPEA (73 μl, 0,42 mmol) e HATU (127 mg, 0,33 mmol). A reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 min depois do tempo que 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2- di-hidropiridin-2-ona (89 %, 52 mg, 0,31 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação depois foi vertida em 50 ml de água e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 50ml), lavada com salmoura (50 ml) seca (Na2SO4) e evaporada para fornecer um óleo. O produto depois foi purificado usando uma coluna de sílica Isolute 5 g eluindo com MeOH em DCM a 0 % a 5 % e evaporado para fornecer um sólido vítreo que foi triturado com éter dietílico e filtrado para fornecer o composto do título como um pó branco (50 mg, 41 %). LC-MS 95 %, m/z = 439,0/440,8, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,33 (br. s, 1H), 8,20 (br. s, 1H), 6,79 (s, 1H), 5,93 (s, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,02 (dd, J = 11,4, 3,8 Hz, 2H), 3,92 - 3,72 (m, 1H), 3,39 (t, J = 11,3 Hz, 2H), 2,78 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 1,89 (tt, J = 12,0, 6,2 Hz, 2H), 1,83 - 1,52 (m, 2H).
[01789] Composto 387: 3-bromo-6-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil]-4-[metil(oxan-4-il)amino]piridino-2-carboxamida
[01790]
[01791] Etapa 1: Síntese de 3-bromo-6-cloropiridino-2-carboxilato de metila
[01792]
[01793] A uma solução agitada de ácido 3-bromo-6-cloropiridino-2-carboxílico (2,00 g, 8,46 mmols) em MeOH (40 ml) foi adicionado H2SO4 (189 μl, 3,55 mmols) e a solução foi aquecida em refluxo durante 16 h. A reação foi esfriada e o MeOH removido sob pressão reduzida, o sólido resultante foi dissolvido em EtOAc (100 ml) e lavado com solução de NaHCO3 saturada (2 x 50ml) seguido por salmoura (50 ml), seco (Na2SO4) e evaporado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (1,97 g, 93 %) que foi usado sem qualquer outra purificação. LC-MS 98 %, m/z = 249,8/251,7/253,7
[01794] Etapa 2: Síntese de 3-bromo-4,6-dicloropiridino-2-carboxilato de me-tila
[01795]
[01796] A uma solução agitada de 3-bromo-6-cloropiridino-2-carboxilato de metila (1,92 g, 7,67 mmols) em TFA (18ml) foi adicionado peróxido de hidrogênio (30 % p/p de solução aquosa, 5,22 ml, 53,7 mmols) e a mistura de reação foi aquecida a 60 oC durante 21 h. A mistura de reação depois foi esfriada e lentamente vertida em solução de K2CO3 saturada (100 ml), seguido por extração da camada aquosa com EtOAc (3 x 100ml), lavagem das fases orgânicas combinadas com salmoura (2 x 50ml), secagem (Na2SO4) e evaporação. O 3-bromo-6-cloro-2-(metoxicarbonil)piri- din-1-ium-1-olato desejado (2,61 g, ~75 % de pureza) foi usado bruto no estágio seguinte da síntese sem qualquer outra purificação. Ao 3-bromo-6-cloro-2-(metoxicarbo- nil)piridin-1-ium-1-olato bruto (~75 % de pureza, 2,61 g, 7,35 mmols) foi adicionado POCl3 (3,42 ml, 36,7 mmols) e a solução foi aquecida a 100 oC durante 4 h. Depois do esfriamento o POCl3 foi removido a vácuo para fornecer um sólido branco que foi colocado em coluna em sílica eluindo com EtOAc a 0 % a 10 % em heptano para fornecer o composto do título como um pó amarelo claro (1,07 g, 49 % em duas etapas). LC-MS 99 %, 2,02 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 283,7/285,7/287,7, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,56 (s, 1H) 4,00 (s, 3H).
[01797] Etapa 3: Síntese de 3-bromo-6-cloro-4-[metil(oxan-4-il)amino]piridino- 2-carboxilato de metila
[01798]s
[01799] A uma solução agitada de 3-bromo-4,6-dicloropiridino-2-carboxilato de metila (600 mg, 2,1 mmols) em DMF (5 ml) foi adicionado TEA (587 μl, 4,21 mmols) seguido por N-metiloxan-4-amina (240 mg, 2,1 mmols) e a mistura de reação foi aquecida a 80 oC durante 20 h. A mistura de reação depois foi esfriada até a temperatura ambiente e vertida em água (100 ml), seguido por extração do produto em EtOAc (3 x 100ml), lavagem dos orgânicos combinados com salmoura (50 ml), secagem com Na2SO4 e evaporação. O produto bruto depois foi purificado em uma coluna de sílica Isolute 10 g eluindo com um gradiente de EtOAc a 0 % a 100 % em heptano para fornecer o composto do título como um sólido branco (110 mg, 14 %). LC-MS 100 %,1,94 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 362,8/365,2/346,8, RMN de 1H (250 MHz, Clorofórmio-d) δ 6,87 (s, 1H), 4,17 - 3,99 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,93 - 3,70 (m, 1H), 3,41 (t, J = 10,9 Hz, 2H), 2,81 (s, 3H), 1,93 (dd, J = 11,9, 4,6 Hz, 2H), 1,71 (d, J = 10,3Hz, 2H).
[01800] Etapa 4: Síntese de ácido 3-bromo-6-cloro-4-[metil(oxan-4- il)amino]piridino-2-carboxílico
[01801]
[01802] A uma solução agitada de 3-bromo-6-cloro-4-[metil(oxan-4- il)amino]piridino-2-carboxilato de metila (102 mg, 0,28 mmol) em THF (2 ml) foi adicionado 2 M NaOH aquoso (0,70 ml, 1,40 mmol) e a mistura de reação foi deixada agitar na temperatura ambiente durante 18 h depois do tempo que o THF foi evaporado a vácuo. A fase aquosa depois foi tratada com uma solução de ácido cítrico aquosa a 10 % ao pH 5 ao 6 e depois extraída com EtOAc (3 x 50ml) seguido por uma solução de 1:1 IPA/CHCl3 (2 x 50ml), as fases orgânicas combinadas foram em seguida, lavadas com salmoura (50 ml), secas com Na2SO4 e evaporadas para fornecer o composto do título como um sólido branco (72 mg, 73 %). LC-MS 100 %, 1,49 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 349,0/351,0/352,9, RMN de 1H (500 MHz, Metanol-d4) δ 7,07 (s, 1H), 4,02 (dd, J = 11,3, 4,3 Hz, 2H), 3,96 - 3,87 (m, 1H), 3,46 (t, J = 11,0 Hz, 2H), 2,85 (s, 3H), 1,96 (dd, J = 12,3, 4,3 Hz, 2H), 1,77 (s, 2H).
[01803] Etapa 5: Síntese de 3-bromo-6-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil]-4-[metil(oxan-4-il)amino]piridino-2-carboxamida
[01804]
[01805] A uma solução agitada de ácido 3-bromo-6-cloro-4-[metil(oxan-4- il)amino]piridino-2-carboxílico (73 mg, 0,21 mmol) em DMF (2 ml) foram adicionados DIPEA (56 μl, 0,31 mmol) e HATU (95 mg, 0,25 mmol) a 0 oC. A reação foi agitada a 0 oC durante 5 min depois do tempo que 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin- 2-ona (89 %, 52 mg, 0,31 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação depois foi vertida em 50 ml de água, a fase aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 50ml), lavada com salmoura (50 ml), seca (Na2SO4) e evaporada para fornecer um óleo. O produto depois foi purificado usando uma coluna de sílica Isolute 5 g eluindo com MeOH em DCM a 0 % a 4 % e evaporado para fornecer um sólido vítreo que foi triturado com éter dietílico e filtrado e seco em um forno a vácuo a 40 oC durante 24 h para fornecer o composto do título como um pó branco (50 mg, 41 %). LC-MS 99 %, m/z = 483,1/485,0/486,9, RMN de 1H (500 MHz, CDCl3) δ 10,94 (br. s, 1H), 8,14 - 7,98 (m, 1H), 6,83 (s, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,55 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 4,15 - 3,94 (m, 2H), 3,93 - 3,70 (m, 1H), 3,40 (t, J = 11,0 Hz, 2H), 2,78 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,99 - 1,82 (m, 2H), 1,79 - 1,64 (m, 2H).
[01806] Composto 213: 5-(azetidin-3-il)-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil]-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metilbenzamida
[01807]
[01808] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de metila
[01809]
[01810] A uma solução agitada de 3-amino-2-metil-5-bromobenzoato de me- tila (4,06 g, 16,6 mmols) em DCE (60 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicio- nado oxan-4-ona (3,07 ml, 33,3 mmols) seguido por ácido acético (5,71 ml, 99,8 mmols) e a reação foi deixada agitar durante 5 min antes da adição de triacetoxiboro- hidreto de sódio (10,6 g, 49,9 mmols). A reação foi agitada durante 3 h na temperatura ambiente, em seguida, água destilada (50 ml) foi adicionada e a solução foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e depois a fase aquosa foi lavada com EtOAc (2 x 100ml), os orgânicos combinados foram em seguida, secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por FCC usando sílica e eluindo com um EtOAc a 10 % a 40 % em heptano gradiente para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (3,88 g, 71 %). LC-MS 100 %, 2,10 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 327,9/329,8, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,23 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 4,02 (dt, J = 11,7, 3,5 Hz, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,65 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,59 - 3,45 (m, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,05 (d, J = 13,8 Hz, 2H), 1,51 (ddd, J = 24,1, 10,8, 4,2 Hz, 2H).
[01811] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metilbenzoato de metila
[01812]
[01813] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)amino]benzo- ato de metila (2,0 g, 6,1 mmols) em DCE (10 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado acetaldeído (1,0 ml, 18 mmols) seguido por ácido acético (2,1 ml, 37 mmols) e a reação foi deixada agitar durante 5 min antes da adição de triacetoxiboro- hidreto de sódio (6,6 g, 31 mmols). A reação foi agitada durante 16 h na temperatura ambiente depois do tempo que acetaldeído adicional (1,0 ml, 22 mmols) e triacetoxi- boro-hidreto de sódio (3,0 g, 14 mmols) foram adicionados e a reação foi agitada durante um adicional de 6 h, em seguida, água destilada (100 ml) foi adicionada e as fases foram separadas. A fase aquosa foi lavada com EtOAc (3 x 100ml), os orgânicos combinados foram em seguida, secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados para fornecer o composto do título como um óleo incolor (2,10 g, 93 %) que foi adequado para o uso sem qualquer outra purificação. LC-MS 96 %, 2,38 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 356,1/357,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,70 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,95 (d, J = 11,3 Hz, 2H), 3,88 (d, J = 9,1 Hz, 3H), 3,32 (td, J = 11,5, 2,5 Hz, 2H), 3,04 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,98 - 2,87 (m, 1H), 2,44 (s, 3H), 1,77 - 1,55 (m, 4H), 0,86 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[01814] Etapa 3: Síntese de 3-{3-[etil(oxan-4-il)amino]-5-(metoxicarbonil)-4-metilfenil} azetidino-1-carboxilato de terc-butila
[01815]
[01816] A um frasco seco foi adicionado pó de zinco (40 mg, 0,61 mmol) seguido por DMA anidra (2 ml) e o vaso foi fluxado com nitrogênio durante a agitação vigorosa e aquecimento a 65 oC. TMS-Cl (9 μl, 0,07 mmol) e 1,2-dibromoetano (6 μl, 0,07 mmol) foram adicionados e a reação foi agitada a 65 oC durante 30 min, seguido por adição às gotas de N-Boc-3-iodoazetidina (133 mg, 0,47 mmol) como uma solução em DMA anidra (1 ml). A reação depois foi esfriada até a temperatura ambiente e 5- bromo-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metilbenzoato de metila (100 mg, 0,28 mmol) foi adicionado como uma solução em DMA anidra (2 ml). A solução resultante foi desgasei- ficada com nitrogênio durante 5 min depois de que Pd(dppf)Cl2.DCM (7 mg, 0,01 mmol) e iodeto de cobre (I) (3 mg, 0,02 mmol) foram adicionados como sólidos. A reação foi aquecida a 80 oC durante 16 h e depois esfriada até a temperatura ambiente seguido pela adição de solução de NH4Cl saturada (50 ml). A fase aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 100ml), e depois as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2 x 50ml), secas com Na2SO4, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado em uma coluna Isolute 5 g usando EtOAc 10 a 30 % em heptano como o eluente para fornecer o composto do título como um óleo incolor (77 mg, 62 %). LC- MS 98 %, 2,19 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 433,2, RMN de 1H (500 MHz, CDCl3) δ 7,49 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 3,94 (dd, J = 14,4, 5,5 Hz, 4H), 3,89 (s, 3H), 3,77 - 3,64 (m, 1H), 3,31 (td, J = 11,4, 2,7 Hz, 2H), 3,06 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,99 - 2,87 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 1,65 (ddd, J = 11,1, 8,6, 6,0 Hz, 4H), 1,46 (s, 9H), 0,85 (dd, J = 13,1, 6,1 Hz, 3H).
[01817] Etapa 4: Síntese de ácido 5-{1-[(terc-butóxi)carbonil]azetidin-3-il}-3- [etil(oxan-4-il)amino]-2-metilbenzoico
[01818]
[01819] A uma solução agitada de 3-{3-[etil(oxan-4-il)amino]-5-(metoxicarbo- nil)-4-metilfenil}azetidino-1-carboxilato de terc-butila (78 mg, 0,18 mmol) em THF (2 ml) e MeOH (0,1 ml) foi adicionado solução de 2 M NaOH (0,9 ml, 1,8 mmol) e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16 h seguido por aquecimento a 50 oC durante 22 h. A reação foi esfriada até a temperatura ambiente e o solvente removido a vácuo depois de que a solução aquosa foi ajustada ao pH 5 usando 1M HCl. O produto foi extraído em DCM (2 x 50ml), seco com Na2SO4 e filtrado para fornecer o composto do título como um óleo incolor (54 mg, 72 %). LC-MS 100 %, 1,70 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 419,2, RMN de 1H (500 MHz, MeOD) δ 7,77 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 4,36 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 3,90 (d, J = 27,0 Hz, 5H), 3,71 (t,J = 6,5 Hz, 1H), 3,36 (t, J = 11,3 Hz, 3H), 2,55 (s, 3H), 1,92 - 1,81 (m, 1H), 1,64 (d, J = 55,8 Hz, 3H), 1,49 - 1,42 (m, 10H), 0,93 (s, 3H).
[01820] Etapa 5: Síntese de 5-(azetidin-3-il)-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil]-3-[etil(oxan-4- il)amino]-2-metilbenzamida
[01821]
[01822] A uma solução agitada de ácido 5-{1-[(terc-butóxi)carbonil]azetidin-3- il}-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metilbenzoico (54 mg, 0,13 mmol) em DMF (2 ml) e a reação foi esfriada usando um banho de gelo seguido pela adição de DIPEA (45 μl, 0,26 mmol) e HATU (59 mg, 0,15 mmol). A reação foi agitada a 0 oC durante 5 min depois do tempo que 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 24 mg, 0,14 mmol) foi adicionada e a reação foi aquecida na temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação depois foi vertida em 50 ml de água e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 50ml), lavada com salmoura (50 ml) seca (Na2SO4), filtrada e evaporada para fornecer um óleo. O produto depois foi purificado usando uma coluna de sílica Isolute 5 g eluindo com MeOH em DCM a 0 % a 2,5 % e evaporado para fornecer 3-(3-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]carbamoil}-5-[etil(oxan- 4-il)amino]-4-metilfenil)azetidino-1-carboxilato de terc-butila como um óleo incolor (29 mg). LC-MS 90 %, m/z = 553,3. Este material foi dissolvido em 4M HCl em solução de dioxano (3 ml) e agitado na temperatura ambiente durante 90 min depois que o solvente foi evaporado à secura e o composto purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto do título como um sólido branco (11 mg, 8 % em 2 etapas). LC-MS 97 %, 2,17 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 453,2, RMN de 1H (500 MHz, MeOD) δ 7,26 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,39 (s, 2H), 4,22 (s, 3H), 3,93 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 3,40 - 3,33 (m, 2H), 3,29 - 2,90 (m, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,68 (d, J = 26,3 Hz, 4H), 0,87 (s, 3H).
[01823] Composto 245: 5-(azetidin-3-il)-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil]-2-metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzamida
[01824]
[01825] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzo- ato de metila
[01826]
[01827] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)amino]benzo- ato de metila (1,20 g, 3,66 mmols) em DCE (10 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado paraformaldeído (659 mg, 21,9 mmols) seguido por ácido acético (1,26 ml, 21,9 mmols) e a reação foi deixada agitar durante 5 min antes da adição de tria- cetoxiboro-hidreto de sódio (4,65 g, 21,9 mmols). A reação foi agitada durante 16 h na temperatura ambiente depois do tempo que paraformaldeído adicional (325 mg, 10,8 mmols) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (2,40 g, 11,3 mmols) foi adicionado e a reação foi agitada durante um adicional de 18 h, em seguida, água destilada (30 ml) foi adicionada e NaHCO3 sólido foi adicionado até que a fase aquosa apresentou o pH 7 e as fases foram separadas, a fase aquosa foi lavada com EtOAc (3 x 50ml), os orgânicos combinados foram em seguida, lavados com salmoura (50 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados. O resíduo bruto foi purificado usando FCC em sílica eluindo com EtOAc a 0 a 10 % em heptano para fornecer o composto do título como um óleo incolor (728 mg, 52 %). LC-MS 87 %, m/z = 341,9/343,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 3,92 (d, J = 11,1 Hz, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,27 (td, J = 11,5, 2,0 Hz, 2H), 2,94 - 2,79 (m, 1H), 2,57 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 1,74 - 1,52 (m, 4H).
[01828] Etapa 2: Síntese de ácido 5-{1-[(terc-butóxi)carbonil]azetidin-3-il}-2- metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzoico
[01829]
[01830] A um frasco seco foi adicionado pó de zinco (436 mg, 6,67 mmols) e o frasco foi aquecido usando uma pistola de calor durante alguns minutos. Em seguida, DMA anidra (20 ml) foi adicionada sob nitrogênio durante agitação vigorosa e aquecimento a 65 oC. TMS-Cl (102 μl, 0,8 mmol) e 1,2-dibromoetano (70 μl, 0,8 mmol) foram adicionados e a reação foi agitada a 65 oC durante 30 min seguido por adição às gotas de N-Boc-3-iodoazetidina (1,46 g, 5,16 mmols) como uma solução em DMA anidra (15 ml). A reação depois foi esfriada até a temperatura ambiente e 5-bromo-2- metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzoato de metila (1,06 g, 3,09 mmols) foi adicionado como uma solução em DMA anidra (15 ml). A solução resultante foi desgaseificada com nitrogênio durante 10 min depois de que Pd(dppf)Cl2.DCM (76 mg, 0,09 mmol) e iodeto de cobre (I) (35 mg, 0,19 mmol) foram adicionados como sólidos. A reação foi aquecida a 80 oC durante 90 min e depois esfriada até a temperatura ambiente seguido por adição de água destilada (100 ml) e solução de NH4Cl saturada (10 ml). A fase aquosa foi extraída com TBME (3 x 50ml), e depois as fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado em uma coluna Isolute 25 g usando EtOAc a 0 % a 40 % em heptano como o eluente para fornecer o composto do título como um óleo marrom claro (507 mg). LC-MS 97 %, m/z = 420,0. A uma solução agitada de 3-[3-(metoxicarbonil)-4-metil-5-[metil(oxan-4- il)amino]fenil]azetidino-1-carboxilato de terc-butila (85 mg, 0,2 mmol) em THF (2 ml) e MeOH (0,1 ml) foi adicionado solução de 2 M NaOH (1,02 ml, 2,03 mmols) e a reação foi agitada a 50 oC durante 16 h depois do tempo que a solução de NaOH 4 M (0,5 ml, 2,0 mmols) foi adicionada e a reação foi aquecida durante 24 h adicionais. A reação foi esfriada até a temperatura ambiente e o solvente removido a vácuo depois de que a solução aquosa foi ajustada ao pH 3 usando 1M HCl. O produto foi extraído em DCM (2 x 50ml), lavado com salmoura (20 ml), seco com Na2SO4 e filtrado para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (47 mg, 21 % em duas etapas). LC-MS 95 %, m/z = 405,1, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,66 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,34 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 3,98 (dd, J = 16,6, 10,2 Hz, 4H), 3,79 - 3,69 (m, 2H), 3,35 (dd, J = 11,5, 10,0 Hz, 2H), 2,97 (td, J = 10,8, 5,3 Hz, 1H), 2,67 (s, 3H), 2,55 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,74 (ddd, J = 15,5, 12,1, 4,3 Hz, 2H), 1,66 (d, J = 11,1 Hz, 2H), 1,48 (s, 9H).
[01831] Etapa 3: Síntese de 3-(3-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]carbamoil}-4-metil-5-[metil(oxan-4-il)amino]fenil)azetidino-1-carboxilato de terc-butila
[01832]
[01833] A uma solução agitada de ácido 5-{1-[(terc-butóxi)carbonil]azetidin-3- il}-2-metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzoico (47 mg, 0,12 mmol) em DMF (2 ml) foram adicionados DIPEA (40 μl, 0,23 mmol) e HATU (53 mg, 0,14 mmol) a 0 oC. A reação foi agitada a 0 oC durante 5 min depois do tempo que 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2- di-hidropiridin-2-ona (89 %, 22 mg, 0,13 mmol) foi adicionada e a reação foi aquecida na temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação depois foi vertida em água destilada (50 ml) e a fase aquosa foi extraída com DCM (3 x 50ml), lavada com salmoura (50 ml), seca (Na2SO4), filtrada e evaporada para fornecer um óleo. O produto depois foi purificado usando uma coluna de sílica Isolute 5 g eluindo com MeOH em DCM a 0 % a 5 % e evaporado para fornecer o composto do título como um óleo incolor (44 mg, 67 %). LC-MS 96 %, m/z = 539,4, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio- d) δ 11,68 (s, 1H), 6,95 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 5,88 (s, 1H), 4,47 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 4,20 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 3,90 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,86 - 3,73 (m, 2H), 3,62 -3,50 (m, 1H), 3,26 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 2,89 (ddd, J = 14,6, 10,8, 3,7 Hz, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,75 - 1,47 (m, 4H), 1,39 (d, J = 5,7 Hz, 9H).
[01834] Etapa 4: Síntese de 5-(azetidin-3-il)-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil]-2-metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzamida
[01835]
[01836] A uma solução agitada de 3-(3-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil]carbamoil}-4-metil-5-[metil(oxan-4-il)amino]fenil)azetidino-1-carboxilato de terc-butila (29 mg, 1,29 mmol) em DCM (4 ml) foi adicionado TFA (1 ml) e a solução foi agitada na temperatura ambiente durante 90 min depois que o solvente foi evaporado e saturado NaHCO3 aquoso foi adicionado até o pH 7 ao 8. A fase aquosa foi extraída com uma mistura IPA:CHCl3 1:1 (2 x 50 ml), e as fases orgânicas combinadas lavadas com salmoura (30 ml), secas com Na2SO4, filtradas e evaporadas. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto do título como um sólido branco (15 mg, 42 %). LC-MS 100 %, m/z = 439,3, RMN de 1H (500 MHz, MeOD) δ 7,19 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 6,12 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,41 - 4,27 (m, 2H), 4,26 - 4,13 (m, 3H), 3,93 (d, J = 11,4 Hz, 2H), 3,36 (td, J = 11,3, 3,3 Hz, 2H), 3,06 (dq, J = 14,6, 5,0 Hz, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,75 - 1,60 (m, 4H).
[01837] Composto 269: N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]-5-(1-metilazetidin-3-il)benzamida
[01838]
[01839] Etapa 1: Síntese de 5-(azetidin-3-il)-2-metil-3-[metil(oxan-4- il)amino]benzoato de metila
[01840]
[01841] A uma solução agitada de 3-[3-(metoxicarbonil)-4-metil-5-[metil(oxan- 4-il)amino]fenil]azetidino-1-carboxilato de terc-butila (400 mg, 0,96 mmol) em DCM (4 ml) foi adicionado TFA (1 ml) e a solução foi agitada na temperatura ambiente durante 45 min depois de que o solvente foi evaporado à secura e NaHCO3 saturado aquoso foi adicionado até o pH 7 ao 8. A fase aquosa foi extraída com DCM (3 x 30 ml), lavada com salmoura (30 ml), seca com MgSO4, filtrada e evaporada para fornecer o composto do título como um óleo laranja (370 mg, 95 %). LC-MS 96 %, m/z = 319,1, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,49 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,32 - 4,10 (m, 5H), 3,98 (d, J = 11,0 Hz, 2H), 3,90 (d, J = 8,4 Hz, 3H), 3,34 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 2,99 (ddd, J = 14,7, 10,9, 3,8 Hz, 1H), 2,65 (d, J = 8,3 Hz, 3H), 2,51 - 2,41 (m, 3H), 1,73 (ddd, J = 15,7, 12,1, 4,3 Hz, 2H), 1,64 (d, J = 11,2 Hz, 2H).
[01842] Etapa 2: Síntese de 2-metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]-5-(1-metilazeti- din-3-il)benzoato de metila
[01843]
[01844] A uma solução agitada de 5-(azetidin-3-il)-2-metil-3-[metil(oxan-4- il)amino]benzoato de metila (320 mg, 1,01 mmol) em DCE (10 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado paraformaldeído (151 mg, 5,03 mmols) seguido por ácido acético (0,115 ml, 2,01 mmols) e a reação foi deixada agitar durante 5 min antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (852 mg, 4,02 mmols). A reação foi agitada durante 16 h na temperatura ambiente depois do tempo que paraformaldeído adicional (21 mg) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (98 mg) foi adicionado e a reação foi agitada durante um adicional de 4 h, em seguida, água destilada (20 ml) foi adicionada e NaHCO3 sólido foi adicionado até que a fase aquosa apresentou o pH 7. As fases foram separadas, a fase aquosa foi lavada com DCM (3 x 20ml), as fases orgânicas combinadas foram em seguida, lavadas com salmoura (50 ml), secas usando MgSO4, filtradas e evaporadas para fornecer o composto do título como um óleo (296 mg, 89 %). LC-MS 100 %, m/z = 333,1, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,42 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,09 (s, 1H), 3,96 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,92 - 3,82 (m, 5H), 3,74 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 3,30 (dt, J = 22,2, 15,0 Hz, 4H), 3,00 - 2,89 (m, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,49 - 2,39 (m, 6H), 1,75 - 1,59 (m, 4H).
[01845] Etapa 3: Síntese de N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til]-2-metil-3-[metil(oxan -4-il)amino]-5-(1-metilazetidin-3-il)benzamida
[01846]
[01847] A uma solução agitada de 2-metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]-5-(1-meti- lazetidin-3-il)benzoato de metila (296 mg, 0,89 mmol) em THF (10 ml) e MeOH (1 ml) foi adicionado solução de NaOH 2 M (4,5 ml, 8,9 mmols) e a reação foi agitada a 50 oC durante 16 h depois do tempo que a solução de NaOH 4M (1 ml, 4,5 mmols) foi adicionada e a reação foi aquecida durante 24 h adicionais. A reação foi esfriada até a temperatura ambiente e o produto foi neutralizado com HCl 1 M e evaporado à secura seguido por azeótropo com tolueno para remover a água residual. O ácido bruto foi tomado através do estágio seguinte sem qualquer purificação. O resíduo bruto de ácido 2-metil-3-[metil(oxan-4-il)amino]-5-(1-metilazetidin-3-il)benzoico foi colocado em suspensão em DMF (10 ml) e a solução foi esfriada usando um banho de gelo seguido por adição de DIPEA (433 μl, 2,49 mmols) e HATU (567 mg, 1,49 mmol). A reação foi agitada a 0 oC durante 5 min depois do tempo que 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di- hidropiridin-2-ona (89 %, 221 mg, 1,29 mmol) foi adicionada e a reação foi aquecida na temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação depois foi vertida em água destilada (50 ml) e a fase aquosa foi extraída com DCM (3 x 50ml), lavada com salmoura (50 ml) seca (Na2SO4), filtrada e evaporada para fornecer um óleo. O produto depois foi purificado usando método de HPLC preparativa (e evaporado à secura seguido por trituração com éter e filtração para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (51 mg, 10 %). LC-MS 91 %, m/z = 453,2, RMN de 1H (500 MHz, MeOD) δ 7,14 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,12 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,41 (t, J = 9,2 Hz, 2H), 4,22 (t, J = 9,3 Hz, 2H), 4,14 (dd, J = 17,4, 8,5 Hz, 1H), 3,98 - 3,89 (m, 2H), 3,36 (td, J = 11,3, 3,4 Hz, 2H), 3,06 (ddd, J = 14,6, 9,8, 4,9 Hz, 1H), 2,97 (s, 3H), 2,64 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,73 - 1,62 (m, 4H).
[01848] Composto 389: N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-5- [etil(oxan-4-il)amino]-4-metilpiridino-3-carboxamida
[01849]
[01850] Etapa 1: Síntese de 5-amino-4-metilpiridino-3-carboxilato de metila
[01851]
[01852] A uma solução agitada de ácido 5-amino-4-metilpiridino-3-carboxílico (0,94 g, 6,18 mmols) em MeOH (20 ml a 0 oC foi adicionado cloreto de tionila às gotas). A solução depois foi aquecida a 50 oC durante 3,5 h, um adicional de 10 ml de MeOH foi adicionado e a reação aquecida a 50 oC durante 5 h seguido por agitação na temperatura ambiente durante 64 h. O solvente depois foi evaporado sob pressão reduzida e solução de NaHCO3 saturada foi adicionada até o pH 7 ao 8. O produto foi extraído em EtOAc (2 x 50ml) e os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados para fornecer o composto do título como um pó branco amarelado (824 mg, 80 %) que foi adequado para o uso no estágio seguinte sem qualquer purificação. LC-MS m/z = 167,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,52 (d, J = 34,2 Hz, 1H), 8,16 (s, 1H), 3,95 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 3,78 (s, 2H), 2,42 (s, 3H).
[01853] Etapa 2: Síntese de 4-metil-5-[(oxan-4-il)amino]piridino-3-carboxilato de metila
[01854]
[01855] A uma solução agitada de 5-amino-4-metilpiridino-3-carboxilato de metila (805 mg, 4,84 mmols) em DCE (20 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionada oxan-4-ona (537 μl, 5,80 mmols) seguido por ácido trifluoroacético (742 μl, 9,69 mmols) e a reação foi deixada agitar durante 5 min antes da adição de triaceto- xiboro-hidreto de sódio (1,54 g, 7,27 mmols). A reação foi agitada durante 16 h na temperatura ambiente depois do tempo que mais oxan-4-ona (100 μl) e triacetoxiboro- hidreto de sódio (300 mg) foram adicionados e a reação agitada durante 6 h adicionais. Água destilada (20 ml) foi adicionada e NaHCO3 sólido foi adicionado até o pH 8. As fases foram separadas e depois a fase aquosa foi lavada com EtOAc (2 x 50ml), os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados para fornecer o composto do título como um sólido amarelo claro (1,11 g, 88 %) que foi usado no estágio seguinte sem qualquer outra purificação. LC-MS 96 %, m/z = 251,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,40 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 4,03 (dt, J = 11,9, 3,5 Hz, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,68 - 3,58 (m, 1H), 3,54 (tt, J = 8,1, 4,1 Hz, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,12 - 2,05 (m, 2H), 1,53 (ddd, J = 23,8, 11,0,4,3 Hz, 2H).
[01856] Etapa 3: Síntese de 5-[etil(oxan-4-il)amino]-4-metilpiridino-3-carboxi- lato de metila
[01857]
[01858] A uma solução agitada de 4-metil-5-[(oxan-4-il)amino]piridino-3-car- boxilato de metila (600 mg, 2,40 mmols) em DCE (20 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado acetaldeído (1,07 ml, 19,2 mmols) seguido por ácido trifluoroacé- tico (367 μl, 4,79 mmols) e a reação foi deixada agitar durante 5 min antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (3,05 g, 14,4 mmols). A reação foi agitada durante 16 h na temperatura ambiente depois do tempo que mais acetaldeído (500 μl) e tria- cetoxiboro-hidreto de sódio (1,0 g) foram adicionados e a reação agitada durante 16 h adicionais. Água destilada (20 ml) foi adicionada e NaHCO3 sólido foi adicionado até o pH 8. As fases foram separadas e depois a fase aquosa foi lavada com DCM (2 x 50ml), os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado usando uma coluna de silica Isolute 25 g usando um gradiente de EtOAc a 0 % a 50 % em heptano para fornecer o composto do título como um óleo amarelo claro (418 mg, 60 %). LC-MS 96 %, m/z = 279,1, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,76 (s, 1H), 8,44 (s, 1H), 3,97 (d, J = 11,0 Hz, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,33 (td, J = 11,6, 2,1 Hz, 2H), 3,13 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,04 (tt, J = 10,9, 4,0 Hz, 1H), 2,54 (s, 3H), 1,76 - 1,59 (m, 4H), 0,89 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[01859] Etapa 4: Síntese de ácido 5-[etil(oxan-4-il)amino]-4-metilpiridino-3- carboxílico
[01860]
[01861] A uma solução agitada de 5-[etil(oxan-4-il)amino]-4-metilpiridino-3- carboxilato de metila (415 mg, 1,49 mmol) em THF (7 ml) e MeOH (3 ml) foi adicionado solução de NaOH 4M (932 μl, 3,73 mmols). A reação foi agitada na temperatura ambiente durante 4,5 h depois de que a solução foi neutralizada via a adição de HCl 1 M e o solvente foi removido sob pressão reduzida, seguido por adição de salmoura saturada (10 ml). A fase aquosa foi extraída com 1:1 IPA:CHCl3 (3 X 50ml), os orgânicos combinados lavados com salmoura (30 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (305 mg, 77 %) que foi adequado para o uso no estágio seguinte sem qualquer outra purificação. LC-MS 99 %, m/z = 265,1, RMN de 1H (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,57 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 3,82 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,25 (t, J = 10,9 Hz, 2H), 3,16 - 2,99 (m, 3H), 2,45 (s, 3H), 1,64 (d, J = 11,0 Hz, 2H), 1,48 (dt, J = 11,9, 5,7 Hz, 2H), 0,81 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[01862] Etapa 5: Síntese de N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til]-5-[etil(oxan-4-il) amino]-4-metilpiridino-3-carboxamida
[01863]
[01864] A uma solução agitada de ácido 5-[etil(oxan-4-il)amino]-4-metilpiri- dino-3- carboxílico (300 mg, 1,13 mmol) em DMF (10 ml) foi adicionado DIPEA (395 μl, 2,27 mmols) e HATU (518 mg, 1,36 mmol). A reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 min depois do tempo que 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidro- piridin-2-ona (89 %, 214 mg, 1,25 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 18 h. A mistura de reação depois foi vertida em 500 ml de água e o produto foi extraído em EtOAc (3 x 200 ml), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (2 x 100 ml), seca (Na2SO4) e evaporada. O produto bruto depois foi purificado usando HPLC preparativa e o sólido resultante foi triturado com éter dietílico e isolado por filtração para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (115 mg, 25 %). LC-MS 100 %, m/z = 399,2, RMN de 1H (500 MHz, Acetona) δ 10,97 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,41 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 3,85 (dd, J = 11,3, 3,0 Hz, 2H), 3,28 (td, J = 11,7, 1,9 Hz, 2H), 3,15 (q, J = 7,1 Hz, 2H),3,09 (ddd, J = 11,1, 7,2, 3,9 Hz, 1H), 2,32 (d, J = 1,5 Hz, 6H), 2,23 (s, 3H), 1,69 (dd, J = 12,6, 1,7 Hz, 2H), 1,55 (ddd, J = 24,3, 12,2, 4,4 Hz, 2H), 0,85 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[01865] Composto 322: N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3- [etil(oxan-4-il)amino]-2-metil-5-(1-metilazetidin-3-il)benzamida
[01866]
[01867] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metilbenzoato de metila
[01868]
[01869] A uma solução agitada de 5-bromo-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metil- benzoato de metila (622 mg, 1,90 mmol) em DCE (10 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado acetaldeído (318 μl, 5,69 mmols) seguido por ácido acético (650 μl, 11,4 mmols) e a reação foi deixada agitar durante 5 min antes da adição de triace- toxiboro-hidreto de sódio (2,00 g, 9,48 mmols). A reação foi agitada durante 16 h na temperatura ambiente depois do tempo que acetaldeído adicional (300 μl) e triaceto- xiboro-hidreto de sódio (1,2 g) foram adicionados. A reação foi agitada durante um adicional de 6 h, em seguida, água destilada (100 ml) foi adicionada e NaHCO3 sólido foi adicionado até que a fase aquosa apresentou o pH 7. As fases foram separadas, a fase aquosa foi lavada com DCM (2 x 50 ml), as fases orgânicas combinadas foram em seguida, lavadas com salmoura (100 ml), secas usando Na2SO4, filtradas e evaporadas. O resíduo bruto foi purificado usando FCC em sílica eluindo com EtOAc a 0 a 5 % em heptano para fornecer o composto do título como um óleo amarelo claro (470 mg, 70 %). LC-MS 100m/z = 356,0/357,9. RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,64 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,89 (d, J = 11,3 Hz, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,26 (td, J = 11,5, 2,6 Hz, 2H), 2,98 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,86 (dd, J = 9,7, 5,2 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H), 1,67 - 1,52 (m, 4H), 0,80 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[01870] Etapa 2: Síntese de 5-(azetidin-3-il)-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metil- benzoato de metila
[01871]
[01872] A um frasco seco foi adicionado pó de zinco (186 mg, 2,85 mmols) e o frasco foi aquecido usando uma pistola de calor durante alguns minutos. Em seguida, DMA anidra (15 ml) foi adicionado sob nitrogênio durante agitação vigorosa e aquecimento a 65 oC. TMSCl (44 μl, 0,34 mmol) e 1,2-dibromoetano (30μl, 0,34 mmol) foram adicionados e a reação foi agitada a 65 oC durante 30 min seguido por adição às gotas de N-Boc-3-iodoazetidina (624 mg, 2,20 mmols) como uma solução em DMA anidra (5 ml). A reação depois foi esfriada até a temperatura ambiente, 5-bromo-3- [etil(oxan-4-il)amino]-2-metilbenzoato de metila (470 mg, 1,32 mmol) foi adicionado como uma solução em DMA anidra (10 ml). A solução resultante foi desgaseificada com nitrogênio durante 10 min depois de que Pd(dppf)Cl2.DCM (32 mg, 0,04 mmol) e iodeto de cobre (I) (15 mg, 0,08 mmol) foram adicionados como sólidos. A reação foi aquecida a 80 oC durante 60 min e depois esfriada até a temperatura ambiente se-guido por adição de água destilada (50 ml) e solução de NH4Cl saturada (10 ml). A fase aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 50ml) e depois os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 ml), secos com Na2SO4, filtrados e evaporados à secura seguido por azeótropo de heptano para remover qualquer residual DMA. O resíduo foi purificado em uma coluna Isolute 10 g usando EtOAc a 0 % a 25 % em heptano como o eluente para fornecer o composto do título como um óleo marrom claro (565 mg). LC-MS 100 %, 2,12 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 433,2. A este óleo foi adicionado DCM (4 ml) seguido por TFA (1 ml) e a solução foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h depois de que o solvente foi evaporado e NaHCO3 aquoso saturado foi adicionado até o pH 7 ao 8. A fase aquosa foi extraída com DCM (3 x 30 ml), lavada com salmoura (30 ml), seca com MgSO4, filtrada e evaporada para fornecer o composto do título como um óleo amarelo (440 mg). LC- MS 100 %, m/z = 333,1.
[01873] Etapa 3: Síntese de N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til]-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metil-5-(1-metilazetidin-3-il)benzamida
[01874]
[01875] A uma solução agitada de 5-(azetidin-3-il)-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2- metilbenzoato de metila (440 mg, 1,32 mmol) em DCE (10 ml) sob uma atmosfera de nitrogênio foi adicionado paraformaldeído (278 mg, 9,27 mmols) seguido por ácido acético (0,15 ml, 2,65 mmols) e a reação foi deixada agitar durante 5 min antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,40 g, 6,62 mmols). A reação foi agitada durante 16 h na temperatura ambiente depois do tempo que água destilada (20 ml) foi adicionada e NaHCO3 sólido foi adicionado até que a fase aquosa apresentou o pH 8 e as fases foram separadas, a fase aquosa foi lavada com DCM (3 x 30 ml), os orgânicos combinados foram em seguida, lavados com salmoura (50 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados. O resíduo foi purificado por cromatografia em uma Isolute 10 g (eluição com MeOH em DCM a 0 % a 5 %) e evaporado seguido por purificação em alumina (eluição com MeOH em DCM a 0 % a 1 %) para fornecer o composto do título como um óleo amarelo que foi usado diretamente no estágio seguinte da síntese. LC-MS 77 %, 1m/z = 347,1.
[01876] 3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metil-5-(1-metilazetidin-3-il)benzoato de metila (103 mg, 0,30 mmol) foi dissolvido em THF (20 ml) e MeOH (5 ml) e NaOH 2 M (1,49 ml, 2,97 mmols) foi adicionado. A reação foi agitada a 50 oC durante 16 h, esfriada, acidificada ao pH 4 usando HCl 6 M e o solvente evaporado sob pressão reduzida, e o resíduo seco em um forno a vácuo a 40 oC durante 5 h para fornecer o ácido bruto. Ao ácido em DMF (10 ml) foram adicionados HATU (170 mg, 0,45 mmol) e DIPEA (130 μl, 0,74 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 5 min e depois 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 66 mg, 0,39 mmol) foi adicionada. A reação foi agitada durante 16 h depois de que HATU adicional (80 mg) e 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (30 mg) e a mistura agitada durante um adicional de 5 h. A mistura de reação foi vertida em destilado depois de (50 ml), extraída com EtOAc (3 x 50ml), lavada com salmoura (2 x 20ml), seca com Na2SO4, filtrada e evaporada. O resíduo bruto foi purificado usando HPLC preparativa e evaporado para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (28 mg, 5 % em três etapas). LC-MS 95 %, m/z = 467,3, RMN de 1H (500 MHz, Ace- tona-d6) δ 10,73 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,74 (t,J = 9,9 Hz, 2H), 4,60 (t, J = 9,6 Hz, 2H), 4,38 (q, J = 6,2 Hz, 3H), 3,83 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,23 (t, J = 11,6 Hz, 2H), 3,10 (dd, J = 14,1, 7,0 Hz, 2H), 3,04 - 2,97 (m, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,67 (d, J = 11,1 Hz, 2H), 1,56 (td, J = 11,8, 4,1 Hz, 2H), 0,83 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[01877] Composto 332: 3-[benzil(metil)amino]-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil]-2-(trifluorometil)benzamida
[01878]
[01879] Etapa 1: Síntese de N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til]-3-fluoro-2-(trifluorometil)benzamida
[1880]
[01881] A uma solução agitada de ácido 3-fluoro-2-(trifluorometil)benzoico (1,00 g, 4,81 mmols) em DMF (25 ml) esfriada em um banho de gelo foi adicionadoHATU (2,19 g, 5,77 mmols) e DIPEA (1,67 ml, 9,61 mmols). A reação foi agitada a 0 oC durante 5 min depois do tempo que 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin- 2-ona (89 %, 904 mg, 5,29 mmols) foi adicionada e a reação foi aquecida a temperatura ambiente durante 4 h. A mistura de reação depois foi vertida em água destilada (300 ml) e agitada durante 1 h depois do tempo que o precipitado foi coletado por intermédio de filtração a vácuo usando papel de microfibra. O sólido resultante foi triturado usando éter dietílico e filtrado para fornecer o composto do título como um sólido marrom claro (1,19 g, 72 %). LC-MS 100 %, m/z = 343,0, RMN de 1H (500 MHz, DMSO) δ 11,48 (s, 1H), 8,54 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 7,71 (dd, J = 13,3, 8,0 Hz, 1H), 7,56 - 7,45 (m, 1H), 7,20 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,11 (s, 3H).
[01882] Etapa 2: Síntese de 3-(benzilamino)-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi-dropiridin-3-il)metil]-2-(trifluorometil)benzamida
[01883]
[01884] Uma suspensão de N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]- 3-fluoro-2-(trifluorometil)benzamida (0,80 g, 2,34 mmols) em benzilamina (2,6 ml, 23,4 mmols) foi aquecida em um reator de micro-ondas a 210 oC durante 4 h. Depois do esfriamento, água destilada (20 ml) foi adicionada à pasta fluida e HCl 2 M foi adicionado até que a suspensão apresentou o pH 5, e a mistura foi extraída usando EtOAc (3 x 50 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com solução de HCl pH 5 (2 x 50 ml), salmoura (30 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados. O óleo resultante foi purificado usando uma coluna de sílica Isolute 50 g eluindo com um gradiente de MeOH em DCM a 0 % a 5 % para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (313 mg, 29 %). LC-MS 94 %, m/z = 430,2, RMN de 1H (500 MHz, Acetona-d6) δ 7,41 - 7,16 (m, 8H), 6,69 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,50 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 5,87 (s, 1H), 5,84 (s, 1H), 4,53 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,35 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 2,28, (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,21 (s, 3H).
[01885] Etapa 3: Síntese de 3-[benzil(metil)amino]-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidropiridin-3-il)metil]-2-(trifluorometil)benzamida
[01886]
[01887] A uma solução de 3-(benzilamino)-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil]-2-(trifluorometil)benzamida (100 mg, 0,23 mmol) em DCE (5 ml) foi adicionado ácido acético (27 μl, 0,47 mmol) seguido por paraformaldeído (7 mg, 0,23 mmol) depois de que a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 10 min. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (74 mg, 0,35 mmol) foi adicionado em uma porção e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16 h. Tratamento adicional com acetaldeído (35 mg), triacetoxiboro-hidreto de sódio (250 mg) e AcOH (100 ml) foi realizado. Depois de um adicional de 24 h, acetaldeído adicional (445 mg) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (250 mg) foram adicionados e a reação foi agitada durante um adicional de 3 h. Água (20 ml) depois foi adicionada à mistura de reação e a fase aquosa foi neutralizada às porções pela adição de NaHCO3. A fase aquosa foi extraída com DCM (2 x 50 ml), em seguida, as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (Na2SO4) e evaporadas. O produto foi purificado usando FCC em uma Isolute 5 g, eluindo com MeOH em DCM a 0 a 5 % para fornecer o composto do título como um pó branco amarelado (24 mg, 22 %). LC-MS 95 %, 4,12 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 444,2, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio- d) δ 11,10 (br. s, 1H), 7,44 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,38 - 7,29 (m, 5H), 7,27 - 7,23 (m, 1H), 7,12 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,04 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,52 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 4,09 (s, 2H), 2,60 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,19 (s, 3H).
[01888] Composto 333: 3-[benzil(etil)amino]-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil]-2-(trifluorometil)benzamida
[01889]
[01890] A uma solução de 3-(benzilamino)-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil]-2-(trifluorometil)benzamida (198 mg, 0,46 mmol) em DCE (5 ml) foi adicionado ácido acético (80 μl, 1,38 mmol) seguido por acetaldeído (129 μl, 2,31 mmols) depois de que a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 10 min. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (490 mg, 2,31 mmols) foi adicionado em uma porção e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16 h. Tratamentos adicionais de 4 x 130 uL com acetaldeído e 4 x 0,5 g de triacetoxiboro-hidreto de sódio foram realizados durante 3 dias para concluir a reação. Água (100 ml) depois foi adicionada à mistura de reação e a fase aquosa foi neutralizada pelo às porções adição de NaHCO3. A fase aquosa foi extraída com DCM (2 x 50 ml), em seguida, as fases orgânicas combinadas lavadas com salmoura, secas (Na2SO4) e evaporadas. O produto foi purificado usando FCC em uma Isolute 5 g, eluindo com MeOH em DCM a 0 a 5 % seguido por purificação via RP-HPLC para fornecer o composto do título como um pó branco amarelado (76 mg, 34 %). LC-MS 100 %, m/z = 458,3, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,70 (s, 1H), 7,42 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,36 - 7,27 (m, 5H), 7,24 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,90 (s, 1H), 4,50 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,05 (s, 2H), 2,96 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,36 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 0,89 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[01891] Composto 334: 3-[benzil(etil)amino]-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil]-2-metilbenzamida
[01892]
[01893] Etapa 1: Síntese de 3-(benzilamino)-2-metilbenzoato de etila
[01894]
[01895] A uma solução agitada de 3-amino-2-metilbenzoato de etila (1,00 g,5,58 mmols) em DCE (20 ml) foi adicionado benzaldeído (569 μl, 5,58 mmols) seguido por ácido acético (0,64 ml, 11,2 mmols). A reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h e depois triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,77 g, 8,37 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante 2 h. Água destilada (20 ml) foi adicionada e NaHCO3 sólido foi adicionado até que a fase aquosa apresentou o pH 7 e as fases foram separadas. A fase aquosa foi lavada com DCM (2 x 50 ml), os orgânicos combinados foram em seguida, lavados com salmoura (50 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados para fornecer o composto do título como um óleo amarelo (1,52 g, 96 %) que foi usado no estágio seguinte sem qualquer outra purificação. LC-MS 95 %, m/z = 270,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,42 - 7,32 (m, 4H), 7,32 - 7,28 (m, 1H), 7,17 - 7,06 (m, 2H), 6,73 (dd, J = 7,8, 1,1 Hz, 1H), 4,40 (s, 2H), 4,36 (q, J = 14,3, 5,3 Hz, 2H), 4,08 (br. s, 1H), 2,35, (s, 3H), 1,39 (t, 3H).
[01896] Etapa 2: Síntese de 3-[benzil(etil)amino]-2-metilbenzoato de etila
[01897]
[01898] A uma solução agitada de 3-(benzilamino)-2-metilbenzoato de etila (396 mg, 1,47 mmol) em DCE (10 ml) foi adicionado acetaldeído (164 μl, 2,94 mmols) seguido por ácido acético (0,17 ml, 2,94 mmols). A reação foi agitada na temperatura ambiente durante 10 min e depois triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,62 g, 2,94 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante 16 h. Água destilada (30 ml) foi adicionada e NaHCO3 sólido depois foi adicionado até que a fase aquosa apresentou o pH 7, as fases foram separadas, a fase aquosa foi lavada com DCM (2 x 50 ml), os orgânicos combinados foram em seguida, lavados com salmoura (50 ml), secos usando Na2SO4, filtrados e evaporados. O resíduo resultante depois foi purificado usando uma coluna de sílica Isolute 25 g eluindo e usando um gradiente de EtOAc a 0 % a 5 % em heptano para fornecer o composto do título como um óleo incolor (372 mg, 81 %). LC-MS 94 %, m/z = 298,1, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,48 (dd, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,29 - 7,08 (m, 8H), 4,32 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 4,05 (s, 2H), 2,92 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 2,56 (s, 3H), 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 0,92 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[01899] Etapa 3: Síntese de ácido 3-[benzil(etil)amino]-2-metilbenzoico
[01900]
[01901] A uma solução agitada de 3-[benzil(etil)amino]-2-metilbenzoato de etila (370 mg, 1,24 mmol) em THF (20 ml) e MeOH (5 ml) foi adicionado NaOH 2 M (3,11 ml, 6,22 mmols) e a reação foi agitada a 50 oC durante 16 h. A reação foi esfriada até a temperatura ambiente e o solvente removido a vácuo depois de que a solução aquosa foi ajustada ao pH 1 usando HCl 1 M. O produto foi extraído em DCM (3 x 50 ml), lavado com salmoura (20 ml), seco com Na2SO4, concentrado e filtrado para fornecer o composto do título como um óleo laranja (296 mg, 80 %) que foi usado no estágio seguinte sem qualquer outra purificação. LC-MS 91 %, m/z = 270,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,73 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,34 - 7,30 (m, 4H), 7,23 (dt,J = 15,4, 6,9 Hz, 3H), 4,12 (d, J = 13,5 Hz, 2H), 3,04 - 2,94 (m, 2H), 2,69 (s, 3H), 0,99 (t, J =7,0 Hz, 3H).
[01902] Etapa 4: Síntese de 3-[benzil(etil)amino]-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil]-2-metilbenzamida
[01903]
[01904] A uma solução agitada de ácido (3-[benzil(etil)amino]-2-metilbenzoico (91 % de pureza, 296 mg, 1,0 mmol) em DMF (10 ml) foi adicionado DIPEA (440 μl, 2,5 mmols) e HATU (570 mg, 1,5 mmol). A reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 min depois do tempo que 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2- ona (89 %, 222 mg, 1,3 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação depois foi vertida em 150 ml de água e agitada durante 20 min. O produto foi filtrado, seco ao ar sob vácuo e depois purificado usando RP-HPLC. O sólido resultante foi triturado com éter dietílico e isolado por filtração para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (86 mg, 21 %). LC-MS 99 %, m/z = 404,3, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 12,04 (s, 1H), 7,33 - 7,23 (m, 4H), 7,21 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 7,14 - 7,05 (m, 3H), 7,05 - 6,99 (m, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,53 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 4,06 (s,2H), 2,92 (q, J = 6,9 Hz, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 0,92 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[01905] Composto 191: 2-bromo-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)-3-(etil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzamida
[01906]
[01907] Etapa 1: Síntese de 2-bromo-5-cloro-3-nitrobenzoato de metila
[01908]
[01909] Uma solução de 2-bromo-5-clorobenzoato de metila (10 g, 40 mmols) em H2SO4 concentrado (48 ml, 910 mmols) foi esfriada a -5 °C em um acetona/banho de gelo em ar. Uma mistura de ácido nítrico concentrado (3,35 ml, 52 mmols) e H2SO4 concentrado (3,4 ml, 64 mmols) foi adicionado às gotas à mistura de reação a 0 °C durante 30 minutos. A mistura de reação amarela foi agitada a 0 °C durante 1,5 horas antes de ser vertida em gelo. EtOAc (150 ml) foi adicionado e as fases foram separadas. A fase orgânica foi lavada com água desionizada (3 x 50 ml) seguido por salmoura (50 ml). A fase orgânica foi seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 12,0 g (60 %) do composto do título como um material de óleo amarelo claro que solidificou em repouso. Este material continha 40 % do isômero 6- nitro. Este material foi usado sem purificação adicional. LC-MS 91 %, m/z = nenhuma ionização, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,86 (1H, d, J = 2,52 Hz), 7,77 (1H, d, J = 2,52 Hz), 3,99 (3H, s).
[01910] Etapa 2: Síntese de 3-amino-2-bromo-5-clorobenzoato de metila
[01911]
[01912] A uma solução de 2-bromo-5-cloro-3-nitrobenzoato de metila (4,0 g, 14 mmols) em metanol (130 ml) na temperatura ambiente foi adicionado cloreto de amônio (7,13 g, 136 mmols) seguido por água desionizada (65 ml). A mistura foi aquecida a 70 °C em ar antes da adição de ferro (4,55 g, 81,5 mmols). A reação foi agitada a 70 °C durante 3 horas, deixada esfriar até a temperatura ambiente e filtrada através de Kieselgel. A almofada do filtro foi lavada com MeOH (65 ml) e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em NaHCO3 saturado (50 ml) e EtOAc (100 ml). As fases foram separadas e a fase orgânica foi lavada com NaHCO3(aq) saturado (3 x 50 ml) antes de serem secas em MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (50 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 95:5 a Heptano:EtOAc 7:3) para fornecer 1,92 g (48 %) do composto do título como um óleo incolor. LC-MS 92 %, m/z = 268,8/265,8/267,6, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,08 (1H, d, J = 2,36 Hz), 6,86 (1H, d, J = 2,36 Hz), 4,34 - 4,49 (2H, m), 3,93 (3H, s).
[01913] Etapa 3: Síntese de 2-bromo-5-cloro-3-(oxan-4-ilamino)benzoato de metila
[01914]
[01915] A uma solução de 3-amino-2-bromo-5-clorobenzoato de metila (1,0 g, 3,8 mmols) em 1,2-dicloroetano (15 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionada oxan-4-ona (0,7 ml, 7,6 mmols) seguido por ácido acético (1,3 ml, 23 mmols). Esta solução foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro- hidreto de sódio (2,4 g, 11 mmols) na temperatura ambiente. Depois de 21 h, oxan-4- ona adicional (0,7 ml, 7,6 mmols) foi adicionada à mistura de reação, com agitação durante 10 minutos antes de adicionar triacetoxiboro-hidreto de sódio (2,4 g, 11 mmols). Depois da agitação durante 20 h, água desionizada (30 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 30 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (25 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 9:1 a Heptano:EtOAc 8:2) para fornecer 903 mg (68 %) do composto do título como um sólido branco. LC-MS 92 %, 2,11 min (método LC-MS de 3 minutos), m/z = 348,2/350,2/351,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 6,94 - 7,07 (1H, m), 6,70 (1H, d, J = 2,36 Hz), 4,72 (1H, d, J = 7,57 Hz), 3,96 - 4,15 (2H, m), 3,87 - 3,96 (3H, m), 3,40 - 3,67 (3H, m), 2,05 (2H, d, J = 13,08 Hz), 1,49 - 1,69 (2H, m).
[01916] Etapa 4: Síntese de 2-bromo-5-cloro-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzoato de metila
[01917]
[01918] A uma solução de 2-bromo-5-cloro-3-(oxan-4-ilamino)benzoato de metila (300 mg, 0,86 mmol) em 1,2-dicloroetano (3 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado acetaldeído (96 μl, 1,7 mmol) seguido por ácido acético (0,3 ml, 5,16 mmols). Esta solução foi agitada durante 5 minutos antes da adição de tria- cetoxiboro-hidreto de sódio (0,55 g, 2,6 mmols) na temperatura ambiente com monitoramento de reação por LCMS. Depois de 22 h, acetaldeído adicional (96 μl, 1,7 mmol) foi adicionado à mistura de reação e este foi agitado durante 10 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,55 g, 2,6 mmols). Depois de 3 dias, a mistura de reação foi diluída com 1,2-dicloroetano (5 ml). Acetaldeído (962 μl, 17,2 mmols) foi adicionado à mistura de reação e este foi agitado durante 10 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,82 g, 8,6 mmols). Depois de 15 h, ace- taldeído adicional (960 μl, 17,2 mmols) foi adicionado à mistura de reação e este foi agitado durante 10 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,82 g, 8,6 mmols). A mistura de reação depois foi agitada na temperatura ambiente durante um adicional de 22 horas antes que água desionizada (25 ml) fosse adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. EtOAc (25 ml) foi adicionado e as fases foram separadas. A camada aquosa depois foi extraída com EtOAc (2 x 25 ml) e os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 99:1 a Heptano:EtOAc 8:2) para fornecer 122 mg (38 %) do composto do título como um óleo incolor. LC-MS 85 %, m/z = 376,3/378,2/379,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,31 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,98 (dd, J = 8,7, 5,5 Hz, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,35 (td, J = 11,6, 5,5 Hz, 2H), 3,19 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 3,12 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 1,75 (td, J = 10,1, 8,8, 3,9 Hz, 4H), 0,92 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[01919] Etapa 5: Síntese de ácido 2-bromo-5-cloro-3-[etil(oxan-4- il)amino]benzoico
[01920]
[01921] A uma solução de 2-bromo-5-cloro-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzoato de metila (122 mg, 0,32 mmol) em tetra-hidrofurano (3 ml) foi adicionado NaOH 4M (3,2 ml). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 20 horas. A mistura de reação foi acidificado ao pH 2 ao 3 com HCl 6M e extraída com DCM (3 x 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 109 mg (93 %, 83 % de rendimentos corrigidos) de ácido 2- bromo-5-cloro-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzoico como uma espuma amarela clara. LC- MS 89 %, m/z = 361,9/364,2/365,8, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,50 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,00 (d, J = 11,5 Hz, 2H), 3,49 - 3,27 (m, 2H), 3,21 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 3,14 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 1,78 (dd, J = 7,4, 3,4 Hz, 4H), 0,93 (t,J = 7,0 Hz, 3H).
[01922] Etapa 6: Síntese de 2-bromo-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)-3-(etil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzamida
[01923]
[01924] A uma solução de ácido 2-bromo-5-cloro-3-[etil(oxan-4-il)amino]ben- zoico (109 mg, 0,3 mmol) em DMF (3 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado PyBOP (187 mg, 0,36 mmol) seguido por N-etil-N-(propan-2-il)propan-2- amina (78 μl, 0,45 mmol) e 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 56 mg, 0,33 mmol). Depois da agitação durante 1 hora em EtOAc ambiente (30 ml) foi adicionado à mistura de reação e este depois foi lavado com água desionizada (2 x 10 ml) seguido por NaHCO3(aq) saturado (2 x 10 ml). A fase orgânica foi seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado duas vezes por FCC (5 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; DCM:MeOH a 100 % de DCM a 98:2). A amostra foi seca em um forno a vácuo durante 18 horas para fornecer 103 mg (65 %) do composto do título como um sólido amarelo claro. LC-MS 94 %, m/z = 496,0/498,0/500,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,00 (s, 1H), 7,20 - 7,10 (m, 1H), 7,10 - 7,05 (m, 2H), 5,94 (s, 1H), 4,54 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,96 (d, J = 11,4 Hz, 2H), 3,42 - 3,26 (m, 2H), 3,28 - 3,12 (m, 1H), 3,09 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,39 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,72 (td, J = 8,5, 3,8 Hz, 4H), 0,90 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[01925] Composto 102: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-3-[etil(piperidin-4-il)amino]-2-metilbenzamida
[01926]
[01927] Etapa 1: Síntese de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[01928]
[01929] Uma solução de ácido 5-cloro-2-metilbenzoico (9,9 g, 58 mmols) em H2SO4 concentrado (70 ml, 1310 mmols) foi esfriada a -5 °C em um acetona/banho de gelo. Uma mistura de ácido nítrico concentrado (4,9 ml, 75 mmols) e H2SO4 concentrado (5,0 ml, 94 mmols) foi adicionado às gotas à mistura de reação a -5 °C durante 30 minutos. A mistura de reação foi agitada a -5 °C durante 2 horas antes de ser vertida em gelo (150 g) e o precipitado coletado por filtração. O precipitado foi dissolvido em EtOAc (100 ml) e lavado com salmoura (100 ml) antes de ser seco em MgSO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para fornecer 11,9 g do composto do título como um sólido branco amarelado. Este material foi usado sem purificação adicional. LC-MS 57 %, m/z = 214,0/216,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio- d) δ 10,37 (1H, br. s.), 8,19 (1H, d, J = 2,21 Hz), 7,91 (1H, d, J = 2,21 Hz), 2,67 (2H, s).
[01930] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[01931]
[01932] A uma solução de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (1,17 g, 5,43 mmols) em DMF (11 ml) na temperatura ambiente e nitrogênio, foi adicionado Na2CO3 (862 mg, 8,14 mmols) seguido por iodometano (0,51 ml, 8,14 mmols). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 19 horas antes de ser diluída com água desionizada (30 ml) e extraída com EtOAc (3 x 30 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO3(aq) saturado (30 ml), secas em MgSO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 99:1 a Heptano:EtOAc 95:5) para fornecer 900 do composto do título como um óleo amarelo claro. LC-MS 89 %, m/z = nenhuma ionização, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 8,00 (1H, d, J = 2,21 Hz), 7,86 (1H, d, J = 2,21 Hz), 3,96 (3H, s), 2,60 (3H, s).
[01933] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila Cl
[01934]
[01935] A uma solução de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (9,19 g, 40 mmols) em metanol (200 ml) na temperatura ambiente foi adicionado cloreto de amônio (21 g, 400 mmols) seguido por água desionizada (100 ml). A mistura foi aquecida a 70 °C antes da adição de ferro (13,4 g, 240 mmols). A reação se tornou escura durante 2,5 horas e foi agitada a 70 °C. Esta mistura foi deixada esfriar até a temperatura ambiente e foi filtrada através de Kieselgel. A almofada do filtro foi lavada com MeOH (100 ml) e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água desionizada (100 ml) e EtOAc (100 ml). As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (100 ml), secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 7,6 g do composto do título como um óleo laranja viscoso que solidificou em repouso. Este material foi usado sem purificação adicional. LC-MS 63 %, m/z = 200,3/202,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 7,20 (1H, d, J = 2,21 Hz), 6,80 (1H, d, J = 2,05 Hz), 3,89 (3H, s), 3,74 - 3,87 (2H, m), 2,30 (3H, s).
[01936] Etapa 4: Síntese de 4-{[5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfe-nil]amino}piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[01937]
[01938] A uma solução de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (100 mg, 0,50 mmol) em 1,2-dicloroetano (2,5 ml) na temperatura ambiente e sob nitrogênio foi adicionado 4-oxopiperidino-1-carboxilato de terc-butila (200 mg, 1,0 mmol) seguido por ácido acético (0,17 ml, 3,0 mmols). Esta solução foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,32 g, 1,5 mmol) na temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada durante 20 horas sob nitrogênio. Água de- sionizada (5 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 5 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 99:1 a Heptano:EtOAc 7:3) para fornecer 131 mg (68 %) do composto do título como um sólido branco. LC-MS 98 %, m/z = 405,4/406,9 (M + Na), RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,10 (1H, d, J = 2,05 Hz), 6,70 (1H, d, J = 1,89 Hz), 3,98 - 4,16 (2H, m), 3,88 (3H, s), 3,58 - 3,72 (1H, m), 3,37 - 3,52 (1H, m), 2,97 (2H, br. t, J = 11,50, 11,50 Hz), 2,24 (3H, s), 2,06 (2H, br. d, J = 10,60Hz), 1,44 - 1,51 (9H, m), 1,32 - 1,44 (2H, m).
[01939] Etapa 5: Síntese de 4-{[5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfe- nil](etil)amino}piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[01940]
[01941] A uma solução de 4-{[5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfenil]amino}pi- peridina-1-carboxilato de terc-butila (125 mg, 0,33 mmol) em 1,2-dicloroetano (1,6 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado acetaldeído (37 μl, 0,65 mmol) seguido por ácido acético (0,11 ml, 1,96 mmol). Esta solução foi agitada durante 5 minutos antes de adicionar triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,21 g, 0,98 mmol) na temperatura ambiente. A reação foi monitorada por LCMS e depois de 4,5 h um acetalde- ído adicional (73 μl, 1,31 mmol) e triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,28 g, 1,31 mmol) foram adicionados à mistura de reação. A mistura foi agitada durante um adicional de 18 horas depois de que água desionizada (10 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 10 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 99:1 a Hep- tano:EtOAc 8:2) para fornecer 131 mg (98 %) do composto do título como um óleo espesso incolor. LC-MS 98 %, m/z = 433,5/435,1 (M + Na), RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,57 (1H, d, J = 2,21 Hz), 7,22 (1H, d, J = 2,05 Hz), 3,97 - 4,14 (2H, m), 3,90 (3H, s), 3,04 (2H, q, J = 6,99 Hz), 2,81 - 2,91 (1H, m), 2,70 (2H, br. t, J = 11,50, 11,50 Hz), 2,45 (3H, s), 1,69 - 1,80 (2H, m), 1,47 - 1,56 (2H, m), 1,46 (9H, s), 0,87 (3H, t, J = 7,09 Hz).
[01942] Etapa 6: Síntese de ácido 3-({1-[(terc-butóxi)carbonil]piperidin-4-il}(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoico
[01943]
[01944] A uma solução de 4-{[5-cloro-3-(metoxicarbonil)-2-metilfe- nil](etil)amino}piperidina-1-carboxilato de terc-butila (131 mg, 0,32 mmol) em tetra-hi-drofurano (2 ml) foi adicionado LiOH (8,4 mg, 0,35 mmol) em água desionizada (2 ml). A mistura de reação foi agitada em ar na temperatura ambiente durante 24 horas. NaOH 1 M (3,19 ml) foi adicionado à mistura de reação e esta foi agitada durante um adicional de 24 horas. A mistura de reação depois foi aquecida a 40 °C durante 25 h. A mistura de reação foi acidificada ao pH 2 ao 3 com HCl 1 M e extraída com EtOAc (3 x 20 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 122 mg do composto do título como um óleo espesso laranja. LC-MS 76 %, m/z = 397,5/399,4, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,74 (1H, s), 7,20 - 7,35 (2H, m), 3,92 - 4,11 (2H, m), 2,97 - 3,13 (2H, m), 2,81 - 2,95 (1H, m), 2,62 - 2,79 (2H, m), 2,53 (3H, s), 1,75 (2H, br. s.), 1,48 - 1,61 (2H, m), 1,46 (9H, s), 0,89 (3H, t, J = 6,86 Hz).
[01945] Etapa 7: Síntese de 4-[(5-cloro-3-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil]carbamoil}-2-metilfenil)(etil)amino]piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[01946]
[01947] A uma solução de ácido 3-({1-[(terc-butóxi)carbonil]piperidin-4- il}(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoico (60 mg, 0,15 mmol) em DMF (2 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado PyBOP (94 mg, 0,18 mmol) seguido por N-etil-N-(propan-2-il)propan-2-amina (40 μl, 0,23 mmol) e 3-(aminometil)-4,6-dimetil- 1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 28 mg, 0,17 mmol). Depois de agitação durante 1 hora na temperatura ambiente EtOAc (30 ml) foi adicionado à mistura de reação e este depois foi lavado com água desionizada (5 ml) seguido por NaHCO3(aq) saturado (3 x 5 ml). A fase orgânica foi seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (2 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluen- tes; EtOAc:MeOH a 100 % EtOAc a 96:4) para fornecer 71 mg (88 %) do composto do título como um sólido amarelo claro. LC-MS 97 %, m/z = 531,1/533,1, RMN de 1H (250 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 11,17 (1H, br. s.), 7,11 - 7,18 (1H, m), 7,06 (2H, dd, J = 7,46, 2,28 Hz), 5,96 (1H, s), 4,53 (2H, d, J = 5,94 Hz), 3,93 - 4,14 (2H, m), 2,97 - 3,08 (2H, m), 2,78 - 2,88 (1H, m), 2,68 (2H, t, J = 11,57 Hz), 2,39 (3H, s), 2,26 (3H, s), 2,24 (3H, s), 1,71 (2H, d, J = 11,27 Hz), 1,52 (2H, br. s.), 1,45 (9H, s), 0,86 (3H, t, J = 6,93 Hz).
[01948] Etapa 8: Síntese de 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3-[etil(piperidin-4-il)amino]-2-metilbenzamida
[01949]
[01950] A uma solução de 4-[(5-cloro-3-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil]carbamoil}-2-metilfenil)(etil)amino]piperidina-1-carboxilato de terc-butila (140 mg, 0,26 mmol) em 1,4-dioxano (5 ml) na temperatura ambiente foi adicionado HCl (4M em dioxano) (1,32 ml). Uma goma foi formada depois da agitação durante um tempo curto, em seguida, dissolvida após a adição de água desionizada (2 ml). A reação foi agitada durante 21 h antes de ser concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo espesso. DCM (3 ml) foi adicionado e um sólido formado. Esta mistura foi concentrada para fornecer 105 mg de um sólido amarelo que foi agitado em DCM (10 ml) durante 1 hora antes de ser filtrado e seco sob alto vácuo em um forno a vácuo durante 24 horas. A amostra depois foi dissolvida em água desionizada (0,2 ml) e liofilizada para fornecer 86 mg (70 %) do composto do título como um sólido bege. LC-MS 100 %, m/z = 431,2/433,2, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,44 (bs, 1H), 7,26 (bs, 1H), 6,69 (bs, 1H), 4,55 (s, 2H), 3,53 - 3,34 (m, 3H), 3,28 - 3,08 (m, 2H), 3,01 (t, J = 11,8 Hz, 2H), 2,51 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,16 - 1,96 (m, 2H), 1,91 - 1,76 (m, 2H), 0,92 (t, J = 6,9 Hz, 3H).
[01951] Composto 192: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metoxibenzamida
[01952]
[01953] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-2-metóxi-3-nitrobenzoato de metila
[01954]
[01955] Ao concentrado H2SO4 (90 mL) foi adicionado às porções ácido 5- cloro-2-metilbenzoico (13,2 g, 77,6 mmols) a 0 °C. Em seguida, uma mistura de HNO3 conc. (10,5 g, 1740 mmols) em H2SO4 conc. (15 mL) foi adicionado às gotas a 0 °C em um período de cerca de 1,5 h. Depois da adição, a mistura foi agitada nesta temperatura durante 2 h. A mistura foi vertida em água gelada com agitação vigorosa e o precipitado foi coletado por filtração. O precipitado foi dissolvido em EtOAc, lavado com salmoura, seco em anidro Na2SO4, e concentrado para fornecer um bruto composto do título (13,2 g), que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LC-MS 95 %, m/z = 245,9/247,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 8,01 (1H, d, J = 2,68 Hz), 7,91 (1H, d, J = 2,68 Hz), 4,01 (3H, s), 3,97 - 3,99 (3H, s).
[01956] Etapa 2: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-metoxibenzoato de metila Cl
[01957]
[01958] A uma solução de 5-cloro-2-metóxi-3-nitrobenzoato de metila (1,21 g, 4,93 mmols) em metanol (50 ml) na temperatura ambiente foi adicionado cloreto de amônio (2,59 g, 49,2 mmols) seguido por água desionizada (25 ml). A mistura foi aquecida a 70 °C antes da adição de ferro (1,65 g, 29,6 mmols). A reação se tornou escura durante 2 horas e foi agitada a 70 °C. Esta mistura foi deixada esfriar até a temperatura ambiente e foi filtrada através de Kieselgel. A almofada do filtro foi lavada com MeOH (50 ml) e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água desionizada (25 ml) e EtOAc (25 ml). As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 25 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (25 ml), secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 892 mg (67 %) do composto do título como um óleo viscoso marrom. Este material foi usado sem purificação adicional. LC-MS 89 %, 1,75 min (método LC-MS de 3 minutos), m/z = 216,3/218,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,16 (1H, d, J = 2,52 Hz), 6,87 (1H, d, J = 2,52 Hz), 4,03 (2H, br. s.), 3,89 - 3,94 (3H, m), 3,84 (3H, s).
[01959] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-2-metóxi-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de metila
[01960]
[01961] A uma solução de 3-amino-5-cloro-2-metoxibenzoato de metila (440 mg, 2 mmols) em 1,2-dicloroetano (8 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado oxan-4-ona (0,38 ml, 4,0 mmols) seguido por ácido acético (0,7 ml, 12 mmols). Esta solução foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro- hidreto de sódio (1,3 g, 6,1 mmols) na temperatura ambiente. Depois da agitação durante 23 horas, água desionizada (16 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 16 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 9:1 a Heptano:EtOAc 7:3) para fornecer 439 mg (72 %) do composto do título como um sólido branco. LC- MS 97 %, m/z = 300,3/302,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,06 (1H, d, J = 2,52 Hz), 6,73 (1H, d, J = 2,52 Hz), 4,38 - 4,45 (1H, m), 4,02 (2H, dt, J = 11,78, 3,49 Hz), 3,91 (3H, s), 3,81 (3H, s), 3,54 (2H, td, J = 11,47, 2,13 Hz), 3,40 - 3,50 (1H, m), 2,03 (2H, br. d, J = 13,70 Hz), 1,48 - 1,55 (2H, m).
[01962] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metoxibenzoato de metila
[01963]
[01964] A uma solução de 5-cloro-2-metóxi-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de metila (220 mg, 0,73 mmol) em 1,2-dicloroetano (2 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado acetaldeído (82 μl, 1,47 mmol) seguido por ácido acético (0,25 ml, 4,4 mmols). Esta solução foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,47 g, 2,2 mmols) na temperatura ambiente. Depois da agitação durante 16 horas acetaldeído (82 μl, 1,47 mmol) foi adicionado à mistura de reação e agitado durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,47 g, 2,2 mmols). Depois da agitação durante 24 horas, um acetaldeído adicional (82 μl, 1,47 mmol) foi adicionado à mistura de reação e agitado durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,47 g, 2,2 mmols). A reação foi agitada durante 24 h depois de que água desionizada (10 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 10 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 95:5 a Heptano:EtOAc 7:3) para fornecer 127 mg (53 %) do composto do título como um óleo amarelo. LC-MS 93 %, m/z = 328,4/330,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio- d) δ ppm 7,35 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 3,98 (dd, J = 11,3, 4,2 Hz, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,48 (tt, J = 11,6, 4,0 Hz, 1H), 3,36 (td, J = 11,8, 1,9 Hz, 2H), 3,15 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 1,78 (qd, J = 12,2, 4,6 Hz, 2H), 1,72 - 1,59 (m, 2H), 0,99(t, J = 7,0 Hz, 3H).
[01965] Etapa 5: Síntese de ácido 5-cloro-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metoxi- benzoico
[01966]
[01967] A uma solução de 5-cloro-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metoxibenzoato de metila (127 mg, 0,39 mmol) em THF (4 ml) foi adicionado NaOH 4 M (3,87 ml) . A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 24 horas. A mistura de reação foi acidificada ao pH 2 a 3 com HCl 6 M e extraída com DCM (5 x 15 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 111 mg (91 %) do composto do título como um óleo amarelo. LC-MS 80 %, 1,25 min (método LC-MS de 3 minutos), m/z = 314,4/315,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 10,02 - 9,55 (m, 1H), 8,01 - 7,47 (m, 1H), 7,36 - 6,96 (m, 1H), 4,15 - 3,86 (m, 5H), 3,76 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,55 - 3,12 (m, 3H), 1,95 - 1,59 (m, 4H), 1,15 - 0,88 (m, 3H).
[01968] Etapa 6: Síntese de 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metoxibenzamida
[01969]
[01970] A uma solução de ácido 5-cloro-3-[etil(oxan-4-il)amino]-2-metoxiben- zoico (111 mg, 0,35 mmol) em DMF (3 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado PyBOP (220 mg, 0,42 mmol) seguido por N-etil-N-(propan-2-il)propan-2- amina (92 μl, 0,53 mmol) e 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 66 mg, 0,39 mmol). Depois da agitação durante 1,5 horas na temperatura ambiente, nenhum material de partida foi observado por LCMS. Água desionizada (20 ml) foi adicionada à mistura de reação e o precipitado resultante foi coletado por filtração. O sólido foi lavado com água desionizada (3 x 5 ml) antes de ser seco ao ar. O sólido foi purificado novamente por FCC (5 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; DCM:MeOH a 100 % DCM a 97:3). A amostra foi seca em um forno a vácuo durante 18 horas para fornecer 105 mg (64 %) do composto do título como um sólido branco amarelado. LC-MS 98 %, m/z = 449,5/452,1, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 11,47 (s, 1H), 8,79 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 2,6Hz, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,55 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,98 (dd, J = 11,3, 3,8 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,35 (t, J = 11,6 Hz, 3H), 3,12 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,42 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,92 - 1,61 (m, 4H), 0,94 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[01971] Composto 212: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-metóxi-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzamida
[01972]
[01973] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-2-metóxi-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzo- ato de metila
[01974]
[01975] A uma solução de 5-cloro-2-metóxi-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de metila (500 mg, 1,67 mmol) em 1,2-dicloroetano (16 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado paraformaldeído (300 mg, 10 mmols) seguido por ácido acético (0,57 ml, 10 mmols). Esta mistura foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (2,12 g, 10 mmols). Depois da agitação durante 64 horas, água desionizada (30 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido e as fases foram separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (3 x 15 ml) e os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 9:1 a Heptano:EtOAc 7:3) para fornecer 431 mg (82 %) do composto do título como um óleo incolor. LC-MS 98 %, m/z = 314,0/316,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,30 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,00 (dd, J = 11,3, 4,3 Hz, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,82 (s, 3H), 3,70 (ddt, J = 11,7, 7,7, 3,8 Hz, 1H), 3,39 (t, J = 11,1 Hz, 2H), 2,71 (s, 3H), 1,84 (qd, J = 12,3, 4,6 Hz, 2H), 1,66 - 1,55 (m, 2H).
[01976] Etapa 2: Síntese de ácido 5-cloro-2-metóxi-3-[metil(oxan-4- il)amino]benzoico
[01977]
[01978] A uma solução de 5-cloro-2-metóxi-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzoato de metila (413 mg, 1,32 mmol) em THF (13 ml) e MeOH (2 ml) foi adicionado NaOH 4 M (13,16 ml) . A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 16 horas. A mistura de reação foi acidificada ao pH 2 a 3 com HCl 6 M e extraída com DCM (5 x 10 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 385 mg (98 %) do composto do título como um óleo amarelo espesso. LC-MS 94 %, m/z = 300,0/302,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofór- mio-d) δ ppm 7,74 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,30 - 7,12 (m, 1H), 4,11 - 4,02 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 3,54 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 3,40 (t, J = 11,3 Hz, 2H), 2,76 (s, 3H), 1,97 - 1,78 (m, 2H), 1,63 (d, J = 11,8 Hz, 2H).
[01979] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-metóxi-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzamida
[01980]
[01981] A uma solução de ácido 5-cloro-2-metóxi-3-[metil(oxan-4- il)amino]benzoico (200 mg, 0,67 mmol) em DMF (2 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado HBTU (304 mg, 0,80 mmol) seguido por N-etil-N-(propan-2- il)propan-2-amina (174 μl, 1,0 mmol) e 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2- ona (89 %, 125 mg, 0,73 mmol). Depois da agitação durante 2 horas na temperatura ambiente EtOAc (30 ml) foi adicionado à mistura de reação e esta depois foi lavada com água desionizada (5 ml) seguido por NaHCO3(aq) saturado (3 x 5 ml). A fase orgânica foi seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; DCM:MeOH a 100 % DCM a 96:4) para fornecer 182 mg (63 %) do composto do título como um sólido branco amarelado. LC-MS 98 %, m/z = 434,1/436,1, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 12,52 (br s, 1H), 8,76 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,56 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,99 (dd, J = 11,2, 3,9 Hz, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,49 (tt, J = 11,5, 3,7 Hz, 1H), 3,36 (t, J = 11,2 Hz, 2H), 2,67 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 1,93 - 1,73 (m, 2H), 1,64 - 1,52 (m, 2H).
[01982] Composto 205: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-etil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzamida
[01983]
[01984] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-2-[2-(trimetilsilil)etinil]benzoato de metila
[01985]
[01986] A uma solução de 2-bromo-5-clorobenzoato de metila (14,8 g, 59 mmols) em TEA (124 ml, 890 mmols) foi adicionado iodeto de cobre (I) (338 mg, 1,78 mmol) e trifenilfosfina (778 mg, 2,97 mmols) na temperatura ambiente sob nitrogênio. Esta mistura apresentou nitrogênio borbulhado através da mesma durante 10 minutos antes da adição de etinil(trimetil)silano (12,45 ml, 89 mmols) e Pd(OAc)2 (266 mg, 1,19 mmol). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 20 horas antes de ser concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água desionizada (50 ml) e EtOAc (50 ml) e filtrado através de celite. A torta do filtro foi lavada com EtOAc (50 ml) antes das fases serem separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 99:1 a Heptano:EtOAc 85:15) para fornecer 16,2 g (102,4 %) do composto do título como um óleo laranja que solidificou em repouso e continha heptano residual. LC-MS 91 %, m/z = 267,4/268,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,89 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,41 (dd, J = 8,3, 2,3 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 0,27 (s, 9H).
[01987] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-etinilbenzoato de metila
[01988]
[01989] A uma solução de 5-cloro-2-[2-(trimetilsilil)etinil]benzoato de metila (10 g, 37,5 mmols) em MeOH (150 ml) foi adicionado K2CO3 (10,4 g, 75 mmols) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada durante 1 hora antes de ser concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água desionizada (50 ml) e EtOAc (50 ml). As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (50 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 95:5 a Heptano:EtOAc 9:1) para fornecer 5,75 g (55 %) do composto do título como um óleo laranja que solidificou em repouso. Este material continha 30 % de éster etílico e foi adequado para o uso sem qualquer outra purificação. LC-MS 38 %, m/z = 195,0/196,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,93 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,45 (dd, J = 8,3, 2,3 Hz, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,43 (s, 1H).
[01990] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-2-etilbenzoato de metila
[01991]
[01992] A uma solução de 5-cloro-2-etinilbenzoato de metila (5,34 g, 27 mmols) em acetato de etila (135 ml) foi adicionado Pd/C (10 %) (água a 50 %, 2,92 g, 1,37 mmol). A mistura de reação foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio na temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura foi filtrada através de Celite. A torta do filtro lavada com EtOAc (50 ml) e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 5,12 g (94 %) do composto do título como um óleo marrom que foi adequado para o uso sem qualquer outra purificação. LC-MS 56 %, m/z = 198,9/200,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,84 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,39 (dd, J = 8,3, 2,3 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,94 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,21 (t, J = 7,5 Hz, 3H).
[01993] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-2-etil-3-nitrobenzoato de metila
[01994]
[01995] Uma solução de 5-cloro-2-etilbenzoato de metila (5,12 g, 25,8 mmols) em H2SO4 concentrado (31 ml, 587 mmols) foi esfriada a -5 °C em um acetona/banho de gelo. Uma mistura de ácido nítrico concentrado (2,15 ml, 33,5 mmols) e H2SO4 concentrado (2,0 ml, 37,5 mmols) foi adicionada às gotas à mistura de reação a -5 °C durante 15 minutos. A mistura de reação amarela clara foi agitada a -5 °C durante 1 hora antes de ser vertida em gelo (500 ml) e esta foi extraída com EtOAc (3 x 100 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água desionizada (100 ml) e depois salmoura (100 ml). A fase orgânica foi seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. LCMS e RMN mostraram ~30 % de hidrólise do éster. O material bruto foi dissolvido em metanol (30 ml) e esfriado a 0 °C sob nitrogênio onde SOCl2 (2,25 ml, 30,93 mmols) foi adicionado lentamente. A mistura de reação depois foi aquecida em refluxo durante 6 horas antes de ser concentrada sob pressão reduzida para fornecer 6,18 g (98 %) do composto do título contendo material como um óleo laranja que foi uma mistura de isômeros 3-nitro:6-nitro 1:1 junto com algum éster etílico. O material foi adequado para o uso na etapa seguinte sem qualquer outra purificação.
[01996] Etapa 5: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-etilbenzoato de metila
[01997]
[01998] A uma solução de 5-cloro-2-etil-3-nitrobenzoato de metila (6,18 g, 25,4 mmols) em metanol (250 ml) na temperatura ambiente foi adicionado cloreto de amônio (13,3 g, 253 mmols) seguido por água desionizada (125 ml). A mistura foi aquecida a 70 °C antes da adição de ferro (8,50 g, 152 mmols). A reação se tornou escura durante 2,5 horas e foi agitada a 70 °C. Esta mistura foi deixada esfriar até a temperatura ambiente e foi filtrada através de Kieselgel. A almofada do filtro foi lavada com MeOH (250 ml) e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em NaHCO3(aq) saturado (50 ml) e EtOAc (150 ml). As fases foram separadas e a fase orgânica foi lavada com NaHCO3(aq) saturado (2 x 50 ml) antes de ser seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (50 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 95:5 a Hep- tano:EtOAc 75:25) para fornecer 2,42 g do 3-amino-5-cloro-2-etilbenzoato de metila bruto como um óleo amarelo. O material foi tomado através da etapa seguinte sem purificação adicional. LC-MS 31 %, m/z = 295,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio- d) δ ppm 7,17 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,86 - 3,81 (m, 2H), 2,74 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,20 (t, J = 7,5 Hz, 3H).
[01999] Etapa 6: Síntese de 5-cloro-2-etil-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de metila
[02000]
[02001] A uma solução de 3-amino-5-cloro-2-etilbenzoato de metila (1,5 g, 7,02 mmols) em 1,2-dicloroetano (28 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado oxan-4-ona (1,3 ml, 14 mmols) seguido por ácido acético (2,41 ml, 42 mmols). Esta solução foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro- hidreto de sódio (4,46 g, 21 mmols) na temperatura ambiente. Depois da agitação durante 20 horas, água desionizada (28 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 28 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (50 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 95:5 a Heptano:EtOAc 8:2) para fornecer 1,76 g de 5-cloro-2-etil-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de metila bruto como um sólido branco. O material foi tomado através da etapa seguinte sem purificação adicional. LC-MS 60 %, m/z = 298,0/300,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio- d) δ ppm 7,07 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 4,01 (dt, J = 11,8, 3,4 Hz, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,82 - 3,76 (m, 1H), 3,64 - 3,47 (m, 3H), 2,79 - 2,63 (m, 2H), 2,06 (d, J = 13,2 Hz, 2H), 1,55 - 1,46 (m, 2H), 1,18 (t, J = 7,5 Hz, 3H).
[02002] Etapa 7: Síntese de 5-cloro-2-etil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzoato de metila
[02003]
[02004] A uma solução de 5-cloro-2-etil-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de me- tila (350 mg, 1,18 mmol) em 1,2-dicloroetano (10 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado paraformaldeído (212 mg, 7,05 mmols) seguido por ácido acético (0,4 ml, 7,05 mmols). Esta mistura foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,49 g, 7,05 mmols). Depois da agitação durante 23 horas, paraformaldeído adicional (212 mg, 7,05 mmols) foi adicionado à mistura de reação e esta foi agitada durante 10 minutos antes da adição de triacetoxiboro- hidreto de sódio (1,49 g, 7,05 mmols). Depois da agitação durante 3 horas, água de- sionizada (15 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido e as fases foram separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 15 ml) e os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 99:1 a Heptano:EtOAc 85:15) para fornecer 334 mg do composto do título como um óleo incolor. O produto contém ~22 % de éster etílico. O material foi tomado através da etapa seguinte sem purificação adicional. LC- MS 56 %, m/z = 312,0/314,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,52 (d, J= 2,2 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 4,01 - 3,93 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,34 (td, J = 11,7, 2,3 Hz, 2H), 3,06 - 2,96 (m, 2H), 2,94 - 2,85 (m, 1H), 2,61 (s, 3H), 1,76 - 1,59 (m, 4H), 1,10 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
[02005] Etapa 8: Síntese de ácido 5-cloro-2-etil-3-[metil(oxan-4-il)amino]ben-
[02006]
[02007] A uma solução de 5-cloro-2-etil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzoato de metila (334 mg, 1,07 mmol) em THF (11 ml) foi adicionado NaOH 4 M (10,7 ml). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 27 horas. MeOH (5 ml) foi adicionado à mistura de reação e esta foi agitada durante um adicional de 21 horas a 50 °C. A mistura de reação foi acidificada ao pH 2 a 3 com HCl 6 M e extraída com DCM (5 x 10 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 311 mg do composto do título como um óleo laranja que solidificou em repouso. O material foi tomado através da etapa seguinte sem purificação adicional. LC-MS 79 %, 2,01 min (método LC-MS de 3 minutos), m/z = 298,0/300,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,72 (d, J = 2,1Hz, 1H), 7,37 - 7,27 (m, 1H), 4,00 (brd, J = 11,1 Hz, 2H), 3,36 (td, J = 11,6, 2,0 Hz, 2H), 3,11 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 2,94 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 2,64 (s, 3H), 1,78 - 1,56 (m, 4H), 1,15 (t, J = 7,4 Hz, 3H).
[02008] Etapa 9: Síntese de 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-etil-3-[metil(oxan-4-il)amino]benzamida
[02009]
[02010] A uma solução de ácido il)amino]benzoico (100 mg, 0,34 mmol) em DMF (2 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado HBTU (153 mg, 0,4 mmol) seguido por N-etil-N-(propan-2- il)propan-2-amina (88 μl, 0,5 mmol) e 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2- ona (89 %, 63 mg, 0,37 mmol). Depois da agitação durante 3 horas na temperatura ambiente EtOAc (30 ml) foi adicionado à mistura de reação e esta depois foi lavada com água desionizada (5 ml) seguido por NaHCO3(aq) saturado (3 x 5 ml). A fase orgânica foi seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (5 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; DCM:MeOH a 100 % DCM a 96:4) para fornecer 94 mg (65 %) do composto do título como um sólido branco amarelado. LC-MS 95 %, m/z = 432,1/434,1, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 11,34 (s, 1H), 7,14 - 7,08 (m, 2H), 7,03 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,95 (s, 1H), 4,52 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 3,96 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,33 (td, J = 11,4, 2,3 Hz, 2H), 2,96 - 2,85 (m, 1H), 2,79 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 2,58 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,73 - 1,62 (m, 4H), 1,05 (t, J = 7,4 Hz, 3H).5-cloro-2-etil-3-[metil(oxan-4-
[02011] Composto 206: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-etil-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzamida
[02012]
[02013] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-2-etil-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzoato de metila
[02014]
[02015] A uma solução de 5-cloro-2-etil-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de me- tila (350 mg, 1,18 mmol) em 1,2-dicloroetano (10 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado acetaldeído (0,66 ml, 11,8 mmols) seguido por ácido acético (0,4 ml, 7,05 mmols). Esta solução foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (2,49 g, 11,8 mmols) na temperatura ambiente. Depois da agitação durante 23 horas, acetaldeído (0,66 ml, 11,8 mmols) foi adicionado à mis- tura de reação escura e esta foi agitada durante 10 minutos antes da adição de tria- cetoxiboro-hidreto de sódio (2,49 g, 11,8 mmols). Depois da agitação durante 3 horas água desionizada (15 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 15 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (10 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; Heptano:EtOAc 99:1 a Heptano:EtOAc 85:15) para fornecer 317 mg do composto do título como um óleo incolor. O produto contém ~25 % de éter éster. O material foi tomado através da etapa seguinte sem purificação adicional. LC-MS 55 %, 2m/z = 326,0/328,0, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,52 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 3,97 (d, J = 11,1 Hz, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,32 (td, J = 11,6, 2,5 Hz, 2H), 3,04 (q, J = 7,1 Hz, 4H), 2,93 (ddd, J = 15,1, 10,8, 4,3 Hz, 1H), 1,76 - 1,62 (m, 4H), 1,08 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,88 (t, J = 7,1 Hz, 3H).
[02016] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-etil-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzamida
[02017]
[02018] A uma solução de 5-cloro-2-etil-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzoato de metila (317 mg, 0,97 mmol) em THF (10 ml) foi adicionado NaOH 4 M (9,73 ml). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 27 horas. MeOH (5 ml) foi adicionado à mistura de reação e esta foi agitada durante um adicional de 21 horas a 50 °C. A mistura de reação foi acidificada ao pH 2 ao 3 com HCl 6 M e extraída com DCM (5 x 10 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer 289 mg do composto do título como um óleo laranja que solidificou após o repouso. O material foi tomado através da etapa seguinte sem purificação adicional. LC-MS 79 %, m/z = 311,95/313,95, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,73 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 3,99 (d, J = 11,0 Hz, 2H), 3,38 - 3,29 (m, 2H), 3,20 - 3,03 (m, 4H), 3,02 - 2,91 (m, 1H), 1,78 - 1,61 (m, 4H), 1,13 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,91 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[02019] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-etil-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzamida
[02020]
[02021] A uma solução de ácido 5-cloro-2-etil-3-[etil(oxan-4-il)amino]benzoico (100 mg, 0,32 mmol) em DMF (2 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio foi adicionado HBTU (146 mg, 0,38 mmol) seguido por N-etil-N-(propan-2-il)propan-2-amina (84 μl, 0,48 mmol) e 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 60,3 mg, 0,35 mmol). Depois da agitação durante 3 horas na temperatura ambiente, EtOAc (30 ml) foi adicionado à mistura de reação e esta depois foi lavada com água desioni- zada (5 ml) seguido por NaHCO3(aq) saturado (3 x 5 ml). A fase orgânica foi seca em MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por FCC (5 g sílica, cartucho Isolute, gradiente de eluentes; EtOAc:MeOH a 100 % EtOAc a 97:3) para fornecer 90 mg (63 %) do composto do título como um sólido branco. LC- MS 97 %, m/z = 446,1/448,2, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 11,93 (s, 1H), 7,14 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,95 (s, 1H), 4,52 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 3,95 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,30 (td, J = 11,3, 3,6 Hz, 2H), 3,01 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,93 (ddd, J = 15,3, 10,0, 5,3 Hz, 1H), 2,83 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,71 - 1,63 (m, 4H), 1,02 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[02022] Composto 243: 5-bromo-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-metil-3-[(oxan-4-il)(2,2,2-trifluoroetil)amino]benzamida
[02023]
[02024] Etapa 1: Síntese de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[02025]
[02026] Uma solução de ácido 5-bromo-2-metilbenzoico (5,0 g, 23 mmols) em H2SO4 concentrado (27 ml, 512 mmols) foi esfriado a 5 °C em um acetona/banho de gelo. Uma mistura de ácido nítrico concentrado (1,9 ml, 30 mmols) e H2SO4 concentrado (2,8 ml, 52 mmols) foi adicionada às gotas à mistura de reação a -5 t0 °C durante 15 minutos. A mistura de reação amarela foi agitada a -5 °C durante 2 horas e um precipitado amarelo foi formado. A mistura de reação foi vertida em gelo (150 g) e o precipitado depois foi coletado por filtração. O precipitado foi seco ao ar para fornecer o composto do título (5,5 g, 52 %) como um sólido amarelo claro; RMN de 1H (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,29 (s, 1H) 8,13 (d, J = 1,58 Hz, 1H) 2,43 (s, 3H).
[02027] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila NO2
[02028]
[02029] A uma solução de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (5,5 g, 21 mmols) em DMF (42 ml) sob nitrogênio, foi adicionado Na2CO3 (3,4 g, 32 mmols) seguido por iodometano (2,0 ml, 32 mmols). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura foi diluída com água desionizada (150 ml) e extraída com EtOAc (4 x 50 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO3 (aq) saturado (2 x 50 ml), secas em MgSO4, filtradas e concentradas a vácuo para fornecer o composto do título (6,3 g, 61 %) como um óleo amarelo. RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,38 (d, J = 2,05 Hz, 1H) 7,23 (d, J = 2,05 Hz, 1H) 3,20 (s, 3H) 1,82 (s, 3H).
[02030] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[02031]
[02032] A uma solução de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6,3 g, 21 mmols) em metanol (150 ml) foi adicionado cloreto de amônio (11,0 g, 210 mmols) seguido por água desionizada (75 ml). A mistura foi aquecida a 70 °C antes da adição de ferro (7,0 g, 125 mmols). A mistura de reação foi agitada a 70 °C durante 2 horas, antes de ser deixada esfriar até a temperatura ambiente e filtrada através de Kieselgel. A almofada do filtro foi lavada com MeOH (150 ml) e o filtrado concentrado a vácuo. O resíduo foi dissolvido em NaHCO3 (aq) saturado (50 ml) e EtOAc (150 ml). As fases foram separadas e a fase orgânica foi lavada com NaHCO3 (aq) saturado (3 x 50 ml), secas em MgSO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cro- matografia instantânea em coluna (50 g de sílica, cartucho Isolute, 5 a 20 % de EtOAc:Heptanos) para fornecer o composto do título (3,0 g, 51 %) como um óleo amarelo claro espesso. LC-MS 87 %, m/z = 243,9, 244,9, 245,9, 246,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,34 (d, J = 1,89 Hz, 1H) 6,95 (d, J = 1,89 Hz, 1H) 3,88 (s, 3H) 3,80 (br. s., 2H) 2,29 (s, 3H).
[02033] Etapa 4: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de metila
[02034]
[02035] A uma solução de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila (3,0 g, 12 mmols) em 1,2-dicloroetano (48 ml) sob nitrogênio, foi adicionado oxan-4-ona (2,3 ml, 25 mmols) seguido por ácido acético (4,2 ml, 74 mmols). A mistura de reação foi agitada durante 5 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (7,8 g, 37 mmols). Depois da agitação durante 64 horas, água desionizada (100 ml) foi adicionada e a mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido. As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (4 x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (50 g de sílica, cartucho Isolute, 10 a 30 % de EtOAc:Heptanos) para fornecer o composto do título (3,5 g 85 %) como um sólido branco. LC-MS 99,8m/z = 327,9, 328,9, 329,9, 330,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,24 (d, J = 1,73 Hz, 1H) 6,85 (d, J = 1,58 Hz, 1H) 4,03 (dt, J = 11,82, 3,31 Hz, 2H) 3,88 (s, 3H) 3,66 (br.s., 1H) 3,56 (td, J = 11,55, 1,97 Hz, 2H) 3,47 - 3,55 (m, 1H) 2,24 (s, 3H) 2,06 (d, J = 13,56 Hz, 2H) 1,47 - 1,60 (m, 2H).
[02036] Etapa 5: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)(2,2,2-trifluoro- etil)amino]benzoato de metila
[02037]
[02038] A uma solução de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)amino]benzoato de metila (500 mg, 1,5 mmol) e TFA (15 ml), foi adicionado NaBH4 (1,0 g, 26 mmols) às porções durante 5 minutos. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 horas e depois aquecida a 50 °C durante 3 horas e tratada com um alíquota adicional de NaBH4 (300 mg) durante 25 minutos. A mistura de reação depois foi aquecida a 60 °C durante 2 horas e agitada na temperatura ambiente durante 17 horas. A mistura de reação foi tratada com TFA (5 ml) e NaBH4 (200 mg) e aquecida novamente a 60 °C durante 3,5 horas. Uma alíquota adicional de NaBH4 (200 mg) foi adicionada durante 15 minutos, junto com TFA (5 ml) e o aquecimento continuado durante um adicional de 3 horas, antes de ser deixada em repouso na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi vertida em gelo (75 ml) e agitada até que o gelo foi fundido. A mistura de reação depois foi basificada pela adição de NaOH 6 M (aq) (40 ml) e re-ajustada ao pH 7 usando HCl 1 M (aq) (40 ml). A suspensão branca resultante foi coletada por filtração, o sólido lavado com água (20 ml) e seco a vácuo a 40 °C durante 3 horas para fornecer o composto do título (577 mg, 91 %) como um sólido branco. LC-MS 98 %,), m/z = 409,90, 410,9, 411,90, 412,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,80 (d, J = 1,73 Hz, 1H) 7,41 (d, J = 1,73 Hz, 1H) 4,01 (dd, J = 11,51, 4,10 Hz, 2H) 3,91 (s, 3H) 3,64 (d, J = 5,20 Hz, 2H) 3,32 (t, J = 11,82 Hz, 2H) 2,99 (tt, J = 11,43, 3,63 Hz, 1H) 2,48 (s, 3H) 1,80 (dd, J = 12,53, 1,50 Hz, 2H) 1,54 - 1,62 (m, 2H).
[02039] Etapa 6: Síntese de ácido 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)(2,2,2-trifluo- roetil)amino]benzoico
[02040]
[02041] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)(2,2,2-trifluo- roetil)amino]benzoato de metila (572 mg, 1,4 mmol) em uma mistura de THF (14 ml) e MeOH (2,1 ml), foi adicionado NaOH 4 M (aq) (13,9 ml). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 5,5 horas e depois agitada na temperatura ambiente durante 17 horas. O THF foi removido através de concentração a vácuo e o resíduo aquoso foi acidificado ao pH 4 com HCl 6 M (9,5 ml). A suspensão resultante foi deixada em repouso na temperatura ambiente durante 20 minutos antes de coletar o sólido por filtração. A torta sólida foi lavada com água (20 ml) e seca sob alto vácuo durante 2 horas para fornecer o composto do título (507 mg, 90 %) como um sólido branco. LC- MS 98 %, m/z = 395,9, 396,9, 397,9, 398,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,97 (d, J = 1,73 Hz, 1H) 7,48 (d, J = 1,73 Hz, 1H) 4,02 (dd, J = 11,35, 3,94 Hz, 2H) 3,65 (br. s, 2H) 3,33 (t, J = 11,59 Hz, 2H) 3,00 (tt, J = 11,49, 3,80 Hz, 1H) 2,55 (s, 3H) 1,82 (d, J = 11,98 Hz, 2H) 1,55 - 1,69 (m, 2H). OH não visível.
[02042] Etapa 7: Síntese de 5-bromo-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil]-2-metil-3-[(oxan-4-il)(2,2,2-trifluoroetil)amino]benzamida
[02043]
[02044] Uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)(2,2,2-trifluoro- etil)amino]benzoato de metila (250 mg, 0,63 mmol) em DMF seca (3,0 ml) a 0 °C sob nitrogênio, foi tratada com HATU (288 mg, 0,76 mmol) e DIPEA (220 μl, 1,3 mmol) às gotas. A solução resultante foi agitada durante 5 minutos e depois tratada com 3- (aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 119 mg, 0,69 mmol). A suspensão resultante foi agitada a 0 °C durante 20 minutos e depois agitada na temperatura ambiente durante 16,5 horas. A mistura de reação foi tratada com 3-(aminometil)- 4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (30 mg). A agitação foi continuada durante 23 horas e a mistura de reação depois foi particionada entre água (30 ml) e CH2Cl2 (20 ml). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 20 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com uma solução de NaHCO3 saturada) (50 ml), água (60 ml), salmoura (2 x 40 ml), secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (10 g de cartucho SNAP, Isolera, 0 a 10 % de MeOH/CH2Cl2) e triturada a partir de éter (10 ml) com sonicação. O precipitado resultante foi coletado por filtração e seco a vácuo para fornecer o composto do título (249 mg, 74 %) como um sólido branco. LC-MS 100 %, m/z = 530,0, 531,0, 532,0, 533,0; RMN de 1H (500 MHz, Acetona) δ 10,67 (s, 1H), 7,55 (d, J = 1,8 Hz, 2H), 7,27 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 5,90 (s, 1H), 4,40 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 3,90 (dd, J = 11,2, 4,6 Hz, 4H), 3,28 (t, J = 11,6 Hz,2H), 3,07 - 2,97 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,76 (dd, J = 12,3, 1,6 Hz, 2H), 1,61 (qd, J = 12,0, 4,5 Hz, 2H).
[02045] Composto 244: 5-bromo-3-[(2,2-difluoroetil)(oxan-4-il)amino]-N-[(4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metilbenzamida
[02046]
[02047] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-[(2,2-difluoroetil)(oxan-4-il)amino]-2- metilbenzoato de metila
[02048]
[02049] Uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-[(oxan-4-il)amino]benzo- ato de metila (500 mg, 1,5 mmol) em ácido difluoro acético (15 ml), foi tratada com tetra-hidroborato de sódio (1000 mg, 26 mmols) às porções durante 12 minutos. A mistura de reação foi aquecida a 50 °C e agitada durante 4 horas. A mistura de reação foi deixada atingir a temperatura ambiente e depois vertida em gelo (130 ml) e deixada durante 5 minutos. A mistura foi basificada pela adição de NaOH 6 M (aq) (35 ml) e o pH ajustado a 7 usando HCl 1 M (aq) (20 ml). A suspensão resultante foi deixada em repouso até que a solução se tornou clara e o sólido resultante coletado por filtração e seco a vácuo a 40 °C para fornecer o composto do título (572 mg, 96 %) como um sólido branco. LC-MS 100 %, m/z = 391,9, 392,9, 393,9, 394,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,79 (d, J = 1,89 Hz, 1H) 7,44 (d, J = 1,89 Hz, 1H) 5,44 - 5,71 (m, 1H) 4,00 (dd, J = 11,51, 4,10 Hz, 2H) 3,91 (s, 3H) 3,41 (td, J = 13,99, 4,18 Hz, 2H) 3,32 (t, J = 11,27 Hz, 2H) 2,97 (tt, J = 11,37, 3,84 Hz, 1H) 2,47 (s, 3H) 1,72 - 1,81 (m, 2H) 1,59 - 1,67 (m, 2H).
[02050] Etapa 2: Síntese de ácido 5-bromo-3-[(2,2-difluoroetil)(oxan-4-il)amino]-2-metilbenzoico il)amino]-2-metilbenzoato de metila (571 mg, 1,5 mmol) em uma mistura de THF (14,6 ml) e MeOH (2,2 ml), foi adicionado NaOH 4 M (14,6 ml). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 7 horas. O calor foi removido e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16,5 horas. THF foi removido a vácuo e o resíduo aquoso foi acidificado ao pH 4 pela adição de HCl 6 M (aq) (10 ml) com esfriamento em gelo. O sólido resultante foi coletado por filtração, lavado com água (20 ml), e seco a vácuo para fornecer o composto do título (526 mg, 96 %) como um sólido bege claro. LC-MS 100 %, m/z = 377,9, 378,9, 379,9, 380,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio- d) δ ppm 7,91 (d, J = 1,58 Hz, 1H) 7,49 (d, J = 1,58 Hz, 1H) 5,43 - 5,75 (m, 1H) 4,01 (dd, J = 11,43, 3,55 Hz, 2H) 3,42 (td, J = 13,95, 3,78 Hz, 2H) 3,32 (t, J = 11,35 Hz, 2H) 2,98 (tt, J = 11,37, 3,53 Hz, 1H) 2,52 (s, 3H) 1,77 (d, J = 10,88 Hz, 2H) 1,56 - 1,69 (m, 2H). OH não visível.
[02051]
[02052] A uma solução agitada de5-bromo-3-[(2,2-difluoroetil)(oxan-4-
[02053] Etapa 3: Síntese de 5-bromo-3-[(2,2-difluoroetil)(oxan-4-il)amino]-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metilbenzamida H
[02054]
[02055] Uma solução agitada de ácido 5-bromo-3-[(2,2-difluoroetil)(oxan-4- il)amino]-2-metilbenzoico (250 mg, 0,66 mmol) em DMF seca (3,0 ml) a 0 °C sob nitrogênio, foi tratada com HATU (327 mg, 0,86 mmol) e DIPEA (230 μl, 1,3 mmol) às gotas. A solução resultante foi agitada durante 5 minutos e depois tratada com 3- (aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 136 mg, 0,79 mmol). A suspensão resultante foi agitada a 0 °C durante 20 minutos e depois agitada na temperatura ambiente durante a noite. Depois de 18 horas, 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di- hidropiridin-2-ona (25 mg) foi adicionada e a agitação continuada durante um adicional de 25 horas. A mistura de reação foi diluída com água (30 ml) e CH2Cl2 (30 ml). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 15 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução de NaHCO3 saturada (aq) (45 ml), água (2 x 50 ml), salmoura (2 x 50 ml), secas (MgSO4), filtradas e concentradas à vacuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (10 g de cartucho SNAP, Isolera, 0 a 3 % de MeOH:CH2Cl2) e depois trituradas com éter. O sólido resultante foi coletado por filtração e seco à vacuo a 40 °C para fornecer o composto do título (259 mg, 77 %) como um sólido branco amarelado. LC-MS 100 %, m/z = 512,0, 513,0, 514,0, 515,0; RMN de 1H (500 MHz, Acetona) δ 10,71 (s, 1H), 7,57 - 7,49 (m, 2H), 7,25 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 5,91 (s, 1H), 5,76 (tt, J = 56,2, 4,3 Hz, 1H), 4,40 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 3,88 (dd, J = 11,3, 4,2 Hz, 2H), 3,52 (td, J = 14,6, 4,2 Hz, 2H), 3,33 - 3,23 (m, 2H), 3,02 (tt, J = 11,6, 3,9 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,73 (dd, J = 12,4, 1,9 Hz, 2H), 1,59 (qd, J = 12,2, 4,5 Hz, 2H).
[02056] Composto 328: N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2- [etil(oxan-4-il)amino]-3-metilpiridino-4-carboxamida
[02057]
[02058] Etapa 1: Síntese de 2-cloro-N-fenilpiridino-4-carboxamida
[02059]
[02060] A uma suspensão agitada de ácido 2-cloroisonicotínico (5,0 g, 0,03 mol) em tolueno seco (100 ml) e 4 gotas de DMF, foi adicionado às gotas cloreto de tionila (7,4 ml, 0,10 mol) sob nitrogênio. A mistura de reação foi agitada a 60 °C durante 2,5 horas e a temperatura foi gradualmente aumentada para 100 °C durante 1,5 hora e mantida nesta temperatura durante 2 horas. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 65 horas, antes de ser tratada com um outro equivalente de cloreto de tionila (2,3 ml) e aquecida a 95 °C durante 40 minutos. A reação foi deixada esfriar até a temperatura ambiente e depois foi concentrada à secura a vácuo e submetida à azeotropia com tolueno seco (2 x 10 ml) para fornecer um óleo móvel amarelo que foi usado diretamente na etapa seguinte sem purificação adicional.
[02061] A uma solução agitada de anilina (2,9 ml, 0,03 mol) e N-etil-N-(propan-2-il)propan-2-amina (13,6 ml, 83 mmols) em THF seco (50 ml) foi adicionado o cloreto de ácido preparado acima às gotas. A mistura de reação foi agitada sob nitrogênio durante 19 horas. A mistura de reação depois foi resfriada pela adição de uma solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio (aq) (100 ml) e agitada durante 35 minutos. As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída com acetato de etila (3 x 55 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (3 x 66 ml), salmoura (80 ml), secos (MgSO4), filtrados e concentradas a vácuo. O resíduo foi colocado em suspensão em éter dietílico (100 ml), brevemente sonicado e o produto coletado por filtração. Este foi seco sob alto vácuo durante 3 horas na temperatura ambiente, em seguida, deixado sob vácuo durante a noite para fornecer o composto do título (6,1 g, 83 %) como um sólido branco. LC-MS 100 %, m/z = 233,0, 234,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 8,58 (d, J = 5,04 Hz, 1H) 7,81 (br. s., 1H) 7,77 (s, 1H) 7,63 (d, J = 7,41 Hz, 3H) 7,42 (t, J = 7,96 Hz, 2H) 7,19 - 7,26 (m, 1H).
[02062] Etapa 2: Síntese de 2-cloro-N,3-dimetil-N-fenilpiridino-4-carboxamida
[02063]
[02064] A uma solução agitada de 2-cloro-N-fenilpiridino-4-carboxamida (2,0 g, 8,6 mmols) em THF seco (40 ml) a -78 °C sob nitrogênio, foi adicionado às gotas butillítio 1,6 M em n-hexanos (11,8 ml, 18,9 mmols) durante 24 minutos. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 50 minutos e depois tratada com iodometano (1,8 ml, 28 mmols) às gotas durante 8 minutos. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 1 hora e depois deixada atingir lentamente a temperatura ambiente e agitada durante 20 horas. A mistura de reação foi resfriada com água (20 ml), e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 20 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (60 ml), secas (MgSO4), filtradas, concentradas a vácuo para fornecer o composto do título (2,2 g, 93 %) como um óleo marrom espesso. LC-MS 95 %, m/z = 261,0, 263,0; RMN de 1H (500 MHz, Clorofór- mio-d) δ ppm 8,03 (d, J = 4,89 Hz, 1H) 7,23 (d, J = 7,88 Hz, 2H) 7,16 - 7,21 (m, 1H) 7,02 (d, J = 7,25 Hz, 2H) 6,89 (d, J = 4,89 Hz, 1H) 3,51 (s, 3H) 2,34 (s, 3H).
[02065] Etapa 3: Síntese de ácido 2-cloro-3-metilpiridino-4-carboxílico
[02066]
[02067] 2-cloro-N,3-dimetil-N-fenilpiridino-4-carboxamida (2,2 g, 8,5 mmols) foi tratada com uma mistura de H2SO4 concentrado (23,2 ml) e água (16,8 ml) e depois aquecida a 130 °C durante 46 horas. Em seguida, a mistura de reação foi deixada atingir a temperatura ambiente e vertida em gelo (200 ml) e agitada até que o gelo foi fundido. A mistura se tornou alcalina (pH 8) pela adição de Na2CO3 sólido (50,3 g) às porções. A suspensão foi filtrada e o filtrado acidificado ao pH 3 pela adição de HCl 6 M (aq) (~1,5 ml). O sólido resultante foi coletado por filtração, lavado com água (20 ml) e seco a vácuo a 40 °C durante 10 horas para fornecer o composto do título (779 mg, 54 %) como um sólido rosa. LC-MS 100 %, m/z = 171,9, 173,9; RMN de 1H (500 MHz, MeOD) δ ppm 8,30 (d, J = 4,89 Hz, 1H) 7,64 (d, J = 5,04 Hz, 1H) 2,58 (s, 3H).
[02068] Etapa 4: Síntese de 2-cloro-3-metilpiridino-4-carboxilato de metila
[02069]
[02070] A uma solução agitada de ácido 2-cloro-3-metilpiridino-4-carboxílico (780 mg, 4,5 mmols) em DMF anidra (5,0 ml), foi adicionado carbonato de potássio (1,25 g, 9,1 mmols), seguido por iodeto de metila (0,42 ml, 6,8 mmols) às gotas. Um adicional de 4 ml de DMF foi adicionado e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente sob nitrogênio durante 18,5 horas. O solvente foi removido a vácuo e o resíduo depois foi particionado entre CH2Cl2 (20 ml) e água (20 ml). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 15 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 x 30 ml), salmoura (40 ml), secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (cartucho SNAP 10 g, Isolera, 0 a 6 % de acetato de etila:heptanos) para fornecer o composto do título (591 mg, 59 %) como um óleo incolor. LC-MS 84 %, m/z = 185,9, 187,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 8,33 (d, J = 5,04 Hz, 1H) 7,54 (d, J = 5,04 Hz, 1H) 3,95 (s, 3H) 2,60 (s, 3H).
[02071] Etapa 5: Síntese de 3-metil-2-[(oxan-4-il)amino]piridino-4-carboxilato de metila
[02072]
[02073] Uma suspensão purgada com nitrogênio de Pd(OAc)2 (77 mg, 0,34 mmol) e 1,1’-binaftaleno-2,2’-diilbis(difenilfosfano) (430 mg, 0,69 mmol) em 1,4- dioxano (11 ml) foi aquecida a 40 °C durante 1 hora. Oxan-4-amina (237 μl, 2,3 mmols), uma solução de metila 2-cloro-3-metilpiridino-4-carboxilato (213 mg, 1,2 mmol) em dioxano desgaseificado (2 ml) e Cs2CO3 (562 mg, 1,7 mmol) foram, em seguida, adicionados e a suspensão vermelha foi aquecida a 100 °C durante 6 horas. Depois do esfriamento até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com CH2Cl2 (30 ml) e água (20 ml). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 15 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (25 ml), secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna (cartucho SNAP 25 g, Isolera, 0 a 28 % de acetato de etila:heptanos), seguido por HPLC prep. (MeCN/Água) para fornecer o composto do título (112 mg, 39 %) como um sólido branco cristalino. LC-MS 100 %, m/z = 251,0; RMN de 1H (500 MHz, MeOD) δ ppm 7,91 (d, J = 5,20 Hz, 1H) 6,77 (d, J = 5,36 Hz, 1H) 4,07 - 4,17 (m, 1H) 3,98 (dd, J = 12,06, 1,81 Hz, 2H) 3,88 (s, 3H) 3,55 (td, J =11,78, 1,66 Hz, 2H) 2,22 (s, 3H) 1,97 (dd, J = 12,69, 1,97 Hz, 2H) 1,62 (qd, J = 12,03, 4,41 Hz, 2H). NH não observado.
[02074] Etapa 6: Síntese de ácido 2-[etil(oxan-4-il)amino]-3-metilpiridino-4- carboxílico
[02075]
[02076] Uma solução de 3-metil-2-[(oxan-4-il)amino]piridino-4-carboxilato de metila (67 mg, 0,27 mmol) em DMF seca (1,0 ml) foi adicionada a uma suspensão agitada de hidreto de sódio (60 % de dispersão em óleo mineral, 16 mg, 0,4 mmol) em DMF (0,3 ml) a 0 °C sob nitrogênio. A mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos. A reação depois foi tratada com iodoetano (16 μl, 0,20 mmol) e agitada durante 30 minutos, e depois tratada novamente com iodoetano (16 μl, 0,20 mmol) e agitada durante um adicional de 30 minutos. A mistura de reação foi adicionada a uma suspensão de hidreto de sódio (16 mg, 0,4 mmol) em DMF (0,3 ml) a 0 °C. Uma vez que a adição foi concluída, a mistura de reação foi deixada atingir a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora antes de tratar com iodoetano (2 x 16 μl, 0,40 mmol). A mistura de reação foi agitada durante um adicional de 30 minutos. Hidreto de sódio (16 mg, 0,4 mmol) foi adicionado à mis-tura de reação e a mistura foi agitada durante 45 minutos antes de tratar com iodoe- tano (2 x 16 μl, 0,40 mmol) e agitada durante 15 minutos antes de adicionar sob nitrogênio a uma solução 4 M de HCl/dioxano (5,0 ml) com esfriamento.
[02077] A mistura de reação depois foi concentrada a vácuo a 40 °C e foi tratada com NaOH 1 M (aq) (5 ml) e basificada pela adição de 10 pelotas de NaOH ao pH 12 com esfriamento. O pH foi novamente ajustado ao pH 10 pela adição de HCl 6 M. A solução resultante foi agitada na temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura de reação depois foi acidificada ao pH 5 pela adição de HCl 1 M (80 gotas). A solução resultante foi extraída com CHCl3/IPA (1:1) (6 x 10 ml). Os extratos combinados foram concentrados a vácuo para fornecer o composto do título bruto (207 mg) como um óleo amarelo. LC-MS 100 %, m/z = 265,1. Este material foi usado diretamente na reação de ligação, conforme descrito abaixo.
[02078] Etapa 7: Síntese de N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til]-2-[etil(oxan-4-il)amino]-3-metilpiridino-4-carboxamida
[02079]
[02080] Uma solução agitada de ácido 2-[etil(oxan-4-il)amino]-3-metilpiridino- 4-carboxílico (20 mg, 0,08 mmol) em DMF seca (1,0 ml) a 0 °C sob nitrogênio, foi tratada com HATU (37 mg, 0,1 mmol) e DIPEA (26 μl, 0,15 mmol) às gotas. A solução resultante foi agitada durante 10 minutos e depois tratada com 3-(aminometil)-4,6- dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 15 mg, 0,09 mmol). A suspensão resultante foi agitada a 0 °C durante 20 minutos e depois agitada na temperatura ambiente durante 18,5 horas. A mistura de reação foi esfriada a 0 °C e novamente tratada com HATU (120 mg, 0,31 mmol) e DIPEA (84 μl, 0,48 mmol). Depois da agitação durante 10 minutos, 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 49 mg, 0,29 mmol) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada durante 1 hora a 0 °C e depois foi retirada do banho de gelo e agitada na temperatura ambiente durante 48 horas. A mistura de reação foi diluída com água (20 ml) e CH2Cl2 (20 ml). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 15 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 x 25 ml), salmoura (2 x 25 ml), secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por croma- tografia em coluna (cartucho SNAP 10 g, Isolera, 0 a 40 % de MeOH:CH2Cl2 e 0 a 25 % de MeOH (contendo 10 % de NH4OH):CH2Cl2) para fornecer 6,7 mg (22 % de rendimento) do composto do título como um sólido branco amarelado. LC-MS 100 %,, m/z = 399,1; RMN de 1H (250 MHz, DMSO) δ 11,49 (s, 1H), 8,32 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,26 (d, J = 4,7 Hz, 2H),3,84 (dd, J = 10,3, 3,5 Hz,2H), 3,21 (dt, J = 13,6, 4,6 Hz, 5H), 2,19 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,62 (dt, J = 21,1, 6,6 Hz, 4H), 0,80 (t, J = 6,9 Hz, 3H).
[02081] Composto 356: 5-cloro-3-{etil[(1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-he- xil]amino}-N-[(5-fluoro-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metilbenza- mida
[02082]
[02083] Etapa 1: Síntese de 5-fluoro-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino-3- carbonitrila
[02084]
[02085] A uma solução agitada de 2-cianoacetamida (689 mg, 8,2 mmols) em EtOH anidro (7,0 ml) a 75 °C, foi adicionada 3-fluoropentano-2,4-diona (880 mg, 7,5 mmols), seguido por piperidina (96 μl, 0,97 mmol). A mistura de reação foi agitada nesta temperatura durante 3 horas e a mistura de reação deixada atingir a temperatura ambiente antes de ser armazenada no refrigerador durante 4 dias. O sólido bege foi coletado por filtração e enxaguado com EtOH gelado (4 x 0,4 ml) até que o filtrado se tornou claro. O sólido bege resultante foi seco a vácuo a 40 °C durante 5 horas para fornecer o composto do título (733 mg, 58 %) como um sólido bege. LC-MS 97 %, m/z = 166,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 13,67 (br. s., 1H) 2,46 (d, J = 2,05 Hz, 3H) 2,45 (d, J = 2,84 Hz, 3H).
[02086] Etapa 2: Síntese de 3-(aminometil)-5-fluoro-4,6-dimetil-1,2-di-hidropi- ridin-2-ona
[02087]
[02088] Uma solução de 5-fluoro-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino-3-car- bonitrila 0,05 M (731 mg, 4,4 mmols) em NH3/MeOH 1,75 M (87 ml) foi passada através do hidrogenador de fluxo H-Cube a 80 °C e 50 bar em uma taxa de fluxo de 1 ml/min. A solução resultante foi concentrada a vácuo. O sólido resultante foi dividido em 2 lotes e 350 mg do produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna (cartucho SNAP 25 g, Isolera, 0 a 25 % de MeOH (contendo 10 % de NH4OH):CH2Cl2) para fornecer o composto do título (307 mg, 20 %) como um sólido branco amarelado e uma mistura 1:1 de produto:material de partida. LC-MS (ELS) 100 %, m/z = 170,9, RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 3,79 (s, 2H) 2,31 (d, J = 2,84 Hz, 3H) 2,25 (d, J = 2,05 Hz, 3H).
[02089] Etapa 3: Síntese de ácido 5-cloro-3-{etil[(1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo- hexil]amino}-2-metilbenzoico
[02090]
[02091] A uma solução agitada de 5-cloro-3-{etil[(1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo- hexil]amino}-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 2,8 mmols) em THF (21 ml), foi adicionada uma solução de NaOH 4 M (aq) (21,3 ml, 85,0 mmols), seguido por MeOH (8,0 ml). A solução resultante foi agitada a 50 °C durante 16,5 horas e esfriada até a temperatura ambiente. Os solventes orgânicos foram removidos a vácuo e a fase aquosa remanescente foi tratada com uma solução de HCl 6 M (aq) (14 ml) para ajustar o pH a 7 e depois HCl 0,1 M (aq) (24 ml) para ajustar o pH a 4. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 35 ml). O extrato aquoso foi adicionalmente extraído com uma mistura de CHCl3:IPA (1:1) (3 x 30 ml). Os extratos de CHCl3:IPA combinados foram secos (MgSO4), filtrados e concentrados a vácuo e depois completamente secos na alta linha de vácuo. O sólido resultante foi submetido à azeotropia com tolueno (3 x 20 ml). CH2Cl2 (10 ml) depois foi adicionado à amostra, concentrado a vácuo e adicionalmente seco na alta linha de vácuo durante várias horas. Isto forneceu o composto do título (831 mg, 88 %) como um sólido branco. LC-MS 92m/z = 339,0, 341,0; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 12,21 (s, 1H) 7,69 (d, J = 2,05 Hz, 1H) 7,22 - 7,26 (m, 1H) 2,99 - 3,11 (m, 3H) 2,69 - 2,79 (m, 7H) 2,47 (s, 3H) 2,28 (d, J = 11,98 Hz, 2H) 2,05 (d, J = 13,08 Hz, 2H) 1,35 - 1,65 (m, 4H) 0,88 (t, J = 7,01 Hz, 3H).
[02092] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-3-{etil[(1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-he- xil]amino}-N-[(5-fluoro-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metilbenza- mida
[02093]
[02094] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-3-{etil[(1r,4r)-4-(dimetila- mino)ciclo-hexil]amino}-2-metilbenzoico (100 mg, 0,27 mmol) em DMF anidra (2,0 ml) a 0 °C sob uma f nitrogênio, foi tratada com HATU (121 mg, 0,32 mmol) e DIPEA (93 μl, 0,53 mmol) às gotas. A solução resultante foi agitada durante 10 minutos e depois tratada com 3-(aminometil)-5-fluoro-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (50 %, 99 mg, 0,29 mmol). A suspensão resultante foi agitada a 0 °C durante 1 hora e depois agitada durante 17 horas na temperatura ambiente. A mistura de reação foi particionada entre água (15 ml) e CH2Cl2 (20 ml). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (2 x 15 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com uma solução saturada de NaHCO3 (aq) (30 ml), água (2 x 25 ml), salmoura (20 ml), secos (MgSO4), filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por croma- tografia instantânea em coluna (cartucho SNAP 10 g, Isolera, 0 a 29 % de MeOH:CH2Cl2) para fornecer o composto do título (68 mg, 52 %) como um sólido bege. LC-MS 99 %, m/z = 491,1, 493,1; RMN de 1H (500 MHz, Metanol-d4) δ 7,17 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,44 (s, 2H), 3,06 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,69 (tt, J = 12,1, 3,2 Hz, 1H), 2,41 - 2,29 (m, 10H), 2,24 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,91 (dd, J = 27,7, 12,2 Hz, 4H), 1,44 (q, J = 12,3, 11,1 Hz, 2H), 1,30 - 1,20 (m, 2H), 0,83 (t, J = 7,0 Hz, 3H). um próton considerado coincidente com um pico de solvente.
[02095] Composto 347: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil]-2-etil-3-{etil[(1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil]amino}benzamida e Composto 348: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-etil-3-{etil[(1s,4s)-4- (dimetilamino)ciclo-hexil]amino}benzamida
[02096]
[02097] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-2-[2-(trimetilsilil)etinil]benzoato de metila
[02098]
[02099] A uma solução agitada de 2-bromo-5-clorobenzoato de metila (14,8 g, 59 mmols) em trietilamina (124 ml, 890 mmols) foi adicionado iodeto de cobre (339 mg, 1,8 mmol) e trifenilfosfina (778 mg, 3,0 mmols) na temperatura ambiente, sob nitrogênio. Esta mistura foi purgada com nitrogênio antes da adição de etinil(trimetil)si- lano (12,5 ml, 89 mmols) e Pd(OAc)2 (266 mg, 1,2 mmols). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 20 horas e concentrada a vácuo. O resíduo foi dissolvido em água desionizada (50 ml) e EtOAc (50 ml) e filtrado através de Celite. A torta do filtro foi lavada com EtOAc (50 ml) antes que as fases fossem separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo foi purificado por cro- matografia instantânea em coluna (cartucho Isolute Sílica 10 g, 1 a 15 % de EtOAc:Heptanos) para fornecer o composto do título (16,2 g, 93 %) como um sólido laranja. LC-MS 91 %, m/z = 267,4, 268,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,90 (d, J = 2,21 Hz, 1H) 7,52 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,42 (dd, J = 8,28, 2,29 Hz, 1H) 3,93 (s, 3H) 0,28 (s, 9H).
[02100] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-etinilbenzoato de metila
[02101]
[02102] Uma suspensão de carbonato de potássio (5,0 g, 36 mmols) em metanol (20 ml) foi agitada sob nitrogênio, adicionando uma solução de 5-cloro-2-[2-(tri- metilsilil)etinil]benzoato de metila (4,8 g, 18,0 mmols) em metanol (50 ml). A mistura resultante foi agitada a 20 °C durante 2 horas. A mistura de reação foi filtrada, e o sólido lavado com metanol. O filtrado foi concentrado a vácuo e depois redissolvido em metanol (50 ml) e cuidadosamente tratado com cloreto de acetila (4,0 ml). A mistura de reação foi agitada durante a noite e concentrada a vácuo. TBME (50 ml) foi adicionado ao resíduo e a suspensão resultante filtrada. O filtrado foi lavado com uma solução saturada de NaHCO3 (40 ml). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com TBME (3 x 40 ml). Os orgânicos combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (cartucho Isolute 50 g, 0 a 10 % de TBME:Heptanos) para fornecer o composto do título (1,2 g, 33 %) como um sólido branco. LC-MS 93 %, m/z = 194,9, 196,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,94 (s, 1H), 7,56 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,95 (s, 3H), 3,44 (s, 1H).
[02103] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-2-etilbenzoato de metila
[02104]
[02105] A uma solução de 5-cloro-2-etinilbenzoato de metila (1,13 g, 5,8 mmols) em TBME (50 ml) foi adicionado Pd/C (10 %) (50 % água, 0,61 g, 0,29 mmol). A mistura de reação foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio durante 130 minutos. A mistura foi filtrada através de Celite e a torta do filtro foi lavada com TBME. O filtrado foi concentrado a vácuo para fornecer o composto do título (1,08 g, 74 %) como um óleo marrom claro. LC-MS 79 %, m/z = 198,9/200,9; RMN de 1H (500 MHz, Clo- rofórmio-d) δ ppm 7,85 (s, 1H) 7,40 (d, J = 8,20 Hz, 1H) 7,22 (d, J = 8,20 Hz, 1H) 3,91 (s, 3H) 2,95 (q, J = 7,46 Hz, 2H) 1,22 (t, J = 7,49 Hz, 3H).
[02106] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-2-etil-3-nitrobenzoato de metila O2N^.,Cl
[02107]
[02108] Uma solução de 5-cloro-2-etilbenzoato de metila (1,08 g, 5,4 mmols) em ácido sulfúrico concentrado (7,0 ml) foi esfriada a -5 °C em um banho de ace- tona/gelo. Uma mistura de 70 % de ácido nítrico (0,45 ml, 7,1 mmols) e ácido sulfúrico concentrado (0,5 ml) foi adicionada às gotas à mistura de reação a -5 °C durante 15 minutos. A mistura de reação amarela clara resultante foi agitada a -5 °C durante 1 hora antes de ser vertida em gelo (100 ml) e extraída com CH2Cl2 (3 x 20 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água desionizada (20 ml), salmoura (20 ml), secas em Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo. O óleo resultante foi adicionado a uma solução contendo metanol (25 ml) e cloreto de tionila (0,75 ml) a 0 °C. Após a adição, a mistura foi aquecida sob refluxo suave durante 6 horas, antes de esfriar até a temperatura ambiente e concentrar a vácuo para fornecer o composto do título (1,2 g) como um óleo laranja que foi usado sem purificação adicional na etapa seguinte.
[02109] Etapa 5: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-etilbenzoato de metila
[02110]
[02111] A uma solução de 5-cloro-2-etil-3-nitrobenzoato de metila (1,2 g, 5,0 mmols) em metanol (50 ml) e água deionizada (25 ml), foi adicionado cloreto de amô- nio (2,6 g, 50 mmols). A mistura foi aquecida a 70 °C antes da adição de ferro (1,7 g, 30 mmols). A mistura de reação foi agitada a 70 °C durante 3,5 horas, filtrada a quente através de Celite e a almofada do filtro foi lavada com MeOH (20 ml). O filtrado foi concentrado a vácuo e o resíduo aquoso foi dissolvido em uma solução saturada de NaHCO3(aq) (50 ml) e EtOAc (100 ml). As fases foram separadas e a fase orgânica foi lavada com NaHCO3(aq) saturado (2 x 65 ml), salmoura (30 ml), secas em MgSO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (cartucho SNAP 25 g, Isolera, 0 a 11 % de acetato de etila/heptanos) para fornecer o composto do título (372 mg, 33 %) como um óleo amarelo. LC-MS 94 %, m/z = 213,9, 215,9; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) d ppm 7,18 (d, J = 2,21 Hz, 1H) 6,80 (d, J = 2,05 Hz, 1H) 3,88 (s, 3H) 3,85 (d, J = 2,52 Hz, 2H) 2,75 (q, J = 7,57Hz, 2H) 1,21 (t, J = 7,49 Hz, 3H).
[02112] Etapa 6: Síntese de 3-[(4-{[(terc-butóxi)carbonil]amino}ciclo-he- xil)amino]-5-cloro-2-etilbenzoato de metila
[02113]
[02114] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-etilbenzoato de metila (365 mg, 1,7 mmol) em 1,2-dicloroetano (20 ml) sob nitrogênio, foi adicionado (4- oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (364 mg, 1,7 mmol), seguido por ácido acético (587 μl, 10,3 mmols). A solução foi agitada durante 10 minutos antes da adição às porções de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,09 g, 5,1 mmols) durante 1 hora. A solução resultante foi agitada na temperatura ambiente durante 17 horas, antes de tratar com (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (364 mg, 1,7 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos e depois tratada com triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,09 g, 5,1 mmols) durante 2,5 horas. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante um adicional de 26 horas antes da adição de água desioni- zada (40 ml). A mistura foi neutralizada com NaHCO3 sólido (2,95 g) e foi extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (35 ml), secos (MgSO4), filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia em coluna (cartucho SNAP 25 g, Isolera, 0 a 18 % de EtOAc/Heptanos) para fornecer o composto do título como um óleo (623 mg, 85 %) como uma mistura de isômeros cis/trans. LC-MS 46,1 %, 2,61 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 411,1, 413,1 e 50,2 %, 2,66 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 411,1, 413,1; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) d ppm 7,05 (dd, J = 7,09, 2,05 Hz, 1H) 6,68 (t, J = 2,36 Hz, 1H) 4,36 - 4,63 (m, 1H) 3,88 (d, J = 3,31 Hz, 3H) 3,62 - 3,78 (m, 1H) 3,49 (br. s., 1H) 3,23 (br. s., 1H) 2,63 - 2,76 (m, 2H) 2,07 - 2,18 (m, 2H) 1,77 - 1,89 (m, 2H) 1,69 (br. s., 1H) 1,46 (s, 9H) 1,27 (m, 3H) 1,13 - 1,24 (m, 3H).
[02115] Etapa 7: Síntese de 3-[(4-{[(terc-butóxi)carbonil]amino}ciclo-he- xil)(etil)amino]-5-cloro-2-etilbenzoato de metila
[02116] A uma solução agitada de 3-[(4-{[(terc-butóxi)carbonil]amino}ciclo-he- xil)amino]-5-cloro-2-etilbenzoato de metila (200 mg, 0,49 mmol) em 1,2-dicloroetano seco (5,0 ml), foi adicionado acetaldeído (54 μl, 1,0 mmol), seguido por ácido acético (167 μl, 2,9 mmols). A mistura de reação foi agitada durante 50 minutos, triacetoxi- boro-hidreto de sódio (309 mg, 1,5 mmol) foi adicionado durante 2 horas e a reação foi agitada durante 20 horas. A mistura de reação foi tratada com acetaldeído (54 μl, 1,0 mmol) agitada durante 1 hora e triacetoxiboro-hidreto de sódio (309 mg, 1,5 mmol) foi adicionado às porções durante 2 horas. A mistura de reação foi agitada durante um adicional de 22 horas e depois tratada com acetaldeído (136 μl, 2,4 mmols) e agitada durante 1 hora, seguido por triacetoxiboro-hidreto de sódio (516 mg, 2,4 mmols) durante 1,5 hora e agitada durante 22 horas. A mistura de reação foi tratada com acetal- deído (109 μl, 2,0 mmols) e agitada durante 1,5 hora antes de triacetoxiboro-hidreto de sódio (413 mg, 2,0 mmols) foi adicionado durante 2 horas, junto com dicloroetano (5,0 ml) para auxiliar na agitação. A mistura de reação foi agitada durante 19 horas antes da adição de acetaldeído (82 μl, 1,5 mmol), agitada durante 1,5 horas, seguido por triacetoxiboro-hidreto de sódio (309 mg, 1,5 mmol) durante 45 minutos. A mistura de reação foi agitada durante um adicional de 70 horas antes de ser diluída com água (20 ml) e o pH foi ajustado a 8 pelo adição gradual de NaHCO3 sólido (2,53 g). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 20 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (60 ml), secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (cartucho SNAP de 10 g, Isolera, 0 a 30 % EtOAc/Heptanos) para fornecer o composto do título (163 mg, 73 %) como um óleo amarelo e uma mistura de isômeros cis/trans. LC-MS 100 %, 5,83 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 439,2, 441,2; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ ppm 7,45 - 7,55 (m, 1H) 7,22 (dd, J = 4,33, 2,13 Hz, 1H) 4,25 - 4,67 (m, 1H) 3,90 (d, J = 2,21 Hz, 3H) 3,29 -3,76 (m, 1H) 2,95 - 3,11 (m, 4H) 2,58 - 2,96 (m, 1H) 1,62 - 2,03 (m, 4H) 1,38 - 1,53 (m, 11H) 1,01 - 1,14 (m, 4H) 0,81 - 0,94 (m, 4H).
[02117] Etapa 8: Síntese de ácido 3-[(4-{[(terc-butóxi)carbonil]amino}ciclo- hexil)(etil)amino]-5-cloro-2-etilbenzoico
[02118]
[02119] A uma solução agitada de 3-[(4-{[(terc-butóxi)carbonil]amino}ciclo-he- xil)(etil)amino]-5-cloro-2-etilbenzoato de metila (156 mg, 0,36 mmol) em THF (4,0 ml) e MeOH (0,29 ml), foi adicionado uma solução de NaOH 4 M (aq) (2,7 ml, 10,7 mmols). A solução resultante foi agitada a 50 °C durante 17 horas. A mistura de reação foi tratada com NaOH 4 M (aq) (0,5 ml, 2,0 mmols) e a agitação foi continuada a 50 °C durante 32 horas. O calor foi removido e a mistura de reação foi deixada agitar na temperatura ambiente durante 65 horas. A mistura de reação foi tratada com NaOH 4 M (aq) (1,0 ml, 4,0 mmols) e aquecido novamente a 50 °C durante 24 horas. Os solventes orgânicos foram removidos a vácuo e a fase aquosa foi tratada com uma solução de ácido cítrico 0,5 M (20 ml) para ajustar o pH a 4/5 . O produto foi extraído com acetato de etila (3 x 25 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 ml), secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo e depois adicionalmente secas na alta linha de vácuo durante 4 horas para fornecer o composto do título (142 mg, 92 %) como um sólido branco e uma mistura de isômeros cis/trans. LC-MS 98 %, 5,49 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 425,1, 427,1. RMN de 1H mostra uma mistura de isômeros cis/trans.
[02120] Etapa 9: Síntese de N-{4-[(5-cloro-3-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil]carbamoil}-2-etilfenil)(etil)amino]ciclo-hexil}carbamato de terc-butila
[02121]
[02122] Uma solução agitada de ácido 3-[(4-{[(terc- butóxi)carbonil]amino}ciclo-hexil)(etil)amino]-5-cloro-2-etilbenzoico (139 mg, 0,33 mmol) em DMF anidra (2,0 ml) a 0 °C sob nitrogênio, foi tratada com HATU (149 mg, 0,39 mmol) e DIPEA (114 μl, 0,65 mmol). A solução resultante foi agitada durante 10 minutos e depois tratada com 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 61 mg, 0,36 mmol). A suspensão resultante foi agitada a 0 °C durante 1 hora e depois agitada na temperatura ambiente durante 98,5 horas. A mistura de reação foi tratada com HATU (37 mg, 0,1 mmol), agitada durante 1 hora e depois 3-(aminometil)- 4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 11 mg, 0,07 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante um adicional de 23 horas e depois particionada entre água (20 ml) e CH2Cl2 (20 ml). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 10 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com uma solução saturada de NaHCO3 (aq) (40 ml), água (20 ml), salmoura (2 x 20 ml), secos (MgSO4), filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (cartucho SNAP 10 g, Isolera, 0 a 13 % de MeOH/CH2Cl2) e triturada a partir de éter/heptano (2,0 ml) com sonicação e o líquido decantado. O sólido remanescente foi seco sob alto vácuo para fornecer o composto do título (101 mg, 52 %) como um sólido bege. LC-MS 93 %, 4,54 min (método LC- MS de 7 minutos), m/z = 559,2, 561,2. RMN de 1H mostra uma mistura de isômeros cis/trans.
[02123] Etapa 10: Síntese de 3-[(4-aminociclo-hexil)(etil)amino]-5-cloro-N- [(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-etilbenzamida
[02124]
[02125] A uma solução agitada de N-{4-[(5-cloro-3-{[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil]carbamoil}-2-etilfenil)(etil)amino]ciclo-hexil}carbamato de terc- butila (100 mg, 0,18 mmol) em CH2Cl2 (4,0 ml) a 0 °C, foi adicionado ácido trifluoro acético (1,0 ml). A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 40 minutos e depois agitada durante 2 horas na temperatura ambiente. A mistura de reação foi concentrada a vácuo e o resíduo foi basificado com uma solução saturada de NaHCO3 (aq) (10 ml) até que o pH foi 8. O resíduo aquoso foi extraído com MeOH/CH2Cl2 a 20 % (4 x 15 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo para fornecer o composto do título (108 mg, 113 %) como um sólido amarelo. LC-MS 48 %, 2,88 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 459,1 e 39 %, 2,96 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 459,1. RMN de 1H mostra uma mistura de isômeros cis/trans.
[02126] Etapa 11: Síntese de 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil]-2-etil-3-{etil[(1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil]amino}benzamida e 5-cloro- N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-etil-3-{etil[(1s,4s)-4-(dimetila- mino)ciclo-hexil]amino}benzamida.
[02127]
[02128] Uma solução agitada de 3-[(4-aminociclo-hexil)(etil)amino]-5-cloro-N- [(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-etilbenzamida (80 mg, 0,18 mmol) em 1,2-dicloroetano (3,0 ml), foi tratada com ácido acético (60 μl, 1,0 mmol) e para- formaldeído (31 mg, 1,0 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 35 minutos sob nitrogênio antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (222 mg, 1,0 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 16,5 horas antes de paraformaldeído (16 mg, 0,52 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante 1 hora antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (111 mg, 0,52 mmol). A mistura de reação foi agitada durante um adicional de 6 horas e depois tratada com paraformaldeído (10 mg, 0,35 mmol), agitada durante 10 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (74 mg, 0,35 mmol) e 1,2-dicloroetano (1,0 ml) e agitada durante um adicional de 89 horas. A mistura de reação foi diluída com água (20 ml) e basificada ao pH 8 pela adição de NaHCO3 sólido (1,45 g). CH2Cl2 (20 ml) foi adicionado e as camadas foram separadas. A fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 10 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 ml), secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo bruto foi purificado por HPLC preparativa (MeCN/água + 0,2 % hidróxido de amônio) para fornecer o composto do título isômero trans puro 347: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-etil-3- {etil[(1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil]amino}benzamida (22 mg, 26 %) como um só-lido branco e composto do título isômero cis puro 348: 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-etil-3-{etil[(1s,4s)-4-(dimetilamino)ciclo-he- xil]amino}benzamida-(18 mg, 21 %) como um sólido branco.
[02129] 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-etil-3- {etil[(1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil]amino}benzamida
[02130] LC-MS 100 %, 3,07 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 487,2, 489,2; RMN de 1H (500 MHz, Clorofórmio-d) δ 11,09 (s, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 2H), 7,00 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,51 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,00 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,79 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 2,65 (t, J = 11,5 Hz, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,24 (s, 6H), 2,22 (s, 3H), 2,14 (t, J = 11,4 Hz, 1H), 1,87 (d, J = 10,3 Hz, 4H), 1,37 (q, J = 12,1 Hz, 2H), 1,17 (q, J = 11,5 Hz, 2H), 1,02 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,85 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[02131] 5-cloro-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-etil-3- {etil[(1s,4s)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil]amino}benzamida LC-MS 100 %, 3,13 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 487,2, 489,2; RMN de 1H (500 MHz, clorofórmio- d) δ 10,72 (s, 1H), 7,09 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 7,01 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 5,93 (s, 1H), 4,51 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,01 (q, J = 6,7 Hz, 3H), 2,89 (q, J = 7,4 Hz, 2H), 2,39 (s, 3H), 2,23 (s, 9H), 2,06 (s, 1H), 1,87 - 1,72 (m, 4H), 1,43 (td, J = 8,3, 3,8 Hz, 2H), 1,33 (dd, J = 12,6, 9,2 Hz, 2H), 1,01 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H).
[02132] Composto 92: 3-(alil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-5-cloro-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02133]
[02134] Etapa 1: Síntese de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[02135]
[02136] Ácido 5-cloro-2-metilbenzoico (4,0 g, 23 mmol) foi adicionado às porções ao H2SO4 conc. esfriado (27 mL) a -10 °C. Depois de 10 minutos, uma mistura de nitração {preparada através da mistura de HNO3 conc. (3,3 g, 52,68 mmols) com H2SO4 conc. (4,4 mL)} foi adicionado às gotas a -10 °C. A massa de reação resultante foi agitada a -10 °C durante 30 minutos. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto do título (4,95 g, 99 %).
[02137] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[02138]
[02139] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (6,75 g, 31,3 mmols) em DMF (33 mL), carbonato de sódio (13,2 g, 125 mmols) e iodeto de metila (17,8 g, 125 mmols) foram adicionados. A mistura foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, água foi adicionada à massa de reação e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coluna em gel de sílica fornecendo o composto do título (6,0 g, 83 %).
[02140] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02141]
[02142] À solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6,0 g, 26 mmols) em etanol (60 mL), cloreto de amônio (6,0 g, 110 mmols) dissolvido em água (60 mL) e pó de ferro (11,9 g, 208 mmols) foram adicionados sob agitação. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Em conclusão, água foi adicionada a massa de reação e a mistura de reação foi filtrada através de celite, o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, e concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto do título.
[02143] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il)amino) benzoato de metila
[02144]
[02145] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (5,0 g, 19 mmols) e di-hidro-2H-piran-4(3H)-ona (2,86 g, 28,6 mmols) em metanol (50 mL), ácido acético (2,3 g, 38 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 8 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (3,0 g, 48 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (3,0 g, 42 %).
[02146] Etapa 5: Síntese de 3-(alil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-5-cloro-2- metilbenzoato de metila
[02147]
[02148] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il)amino) benzoato de metila (1,0 g, 3,3 mmols) em DMF (10 mL), NaH (0,25 g, 10 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura agitada durante 20 minutos. 3-bromoprop-1- eno (1,7 g, 14,13 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 80 °C durante 15 h. Em conclusão, a reação foi resfriada com água gelada e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas e o bruto resultante foi purificado por cromatografia em coluna fornecendo o composto do título (0,50 g, 44 %).
[02149] Etapa 6: Síntese de 3-(alil(tetra-hidro-2H-piran-4-il) amino)-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02150]
[02151] NaOH aquoso (0,092 g, 2,32 mmols) foi adicionado a uma solução de 3-(alil (tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (0,50 g, 1,54 mmol) em etanol (15 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,47 g, 98 %).
[02152] O ácido acima (0,47 g, 1,52 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,462 g, 3,04 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,18 g, 2,28 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter um sólido que foi filtrado e seco para fornecer o composto do título (0,40 g, 59 %). LCMS: 444,25 (M + 1)+; HPLC: 96,85 % (@ 254 nm) (Rt; 6,310; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,22 (t, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,93 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 5,56 - 5,62 (m, 1H), 5,02 - 5,07 (m, 1H), 4,94 - 4,96 (m, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 3,6 Hz), 3,83 (d, 2H, J = 9,6 Hz), 3,64 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,23 (t, 2H, J = 10 Hz), 2,97 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,54 - 1,60 (m, 4H).
[02153] Composto 98: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-2-metil-3-(propil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)benzamida
[02154]
[02155] A uma solução agitada de 3-(alil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-5- cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,10 g) em MeOH (10 mL) foi adicionado Pd/C a 10 % (0,03 g) e a reação agitada na temperatura ambiente sob hidrogênio (pressão por balão) durante 2 h. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter sólido bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,02 g, 20 %). LCMS: 445,25 (M + 1)+; HPLC: 90,40 % (@ 254 nm) (Rt; 5,609; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,23 (t, 1H), 7,19 (s,1H), 6,93 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 5,88 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,83 (d, 2H, J = 10,4 Hz), 3,22 - 3,25 (m, 2H), 2,94 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 2,88 - 2,90 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,56 (m, 4H), 1,14 - 1,23 (m, 2H), 0,75 (t, 3H, J = 8 Hz).
[02156] Composto 104: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(isobutil(metil)amino)-2-metilbenzamida
[02157]
[02158] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(isobutilamino)-2-metilbenzoato de me- tila
[02159]
[02160] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (5,0 g, 25 mmols) e isobutiraldeído (4,5 g, 62 mmols) em metanol (50 mL), ácido acético (3,0 g, 50 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (3,94 g, 62 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (6,0 g, 94 %).
[02161] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-(isobutil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02162]
[02163] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(isobutilamino)-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 3,9 mmols) em seco acetonitrila (10 mL), carbonato de césio (2,55 g, 7,8 mmols) e iodeto de metila (5,55 g, 39 mmols) foram adicionados. A mistura foi aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concen- trado ao composto do título (1,0 g, 95 %).
[02164] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(isobutil(metil)amino)-2-metilbenzamida
[02165]
[02166] NaOH aquoso (0,22g, 5,5 mmols) foi adicionado a uma solução de 5- cloro-3-(isobutil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 3,7 mmols) em EtOH (5 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,900 g, 95 %). O ácido (0,30 g, 1,17 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1,5 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,357 g, 2,34 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,915 g, 1,76 mmol) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter um sólido, este foi filtrado e purificado por cro- matografia em coluna para fornecer o composto do título (0,245 g, 53 %). LCMS: 390,25 (M + 1)+; HPLC: 97,59 % (@ 254 nm) (Rt; 6,063; Método: Coluna: YMC ODS- A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,20 (t, 1H), 7,07 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 2,63 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 2,54 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,75 - 1,78 (m, 1H), 0,85 (d, 6H, J = 6 Hz).
[02167] Composto 105: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etila(isobutil)amino)-2-metilbenzamida
[02168]
[02169] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(etila(isobutil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02170]
[02171] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(isobutilamino)-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 3,9 mmols) em DMF seca (10 mL), carbonato de césio (2,55 g, 7,82 mmols) e iodeto de etila (6,09 g, 39,1 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 12 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado para fornecer o material bruto que em seguida foi usado para a etapa seguinte. (1,0 g, 91 %).
[02172] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il) metil)-3-(etila(isobutil)amino)-2-metilbenzamida
[02173]
[02174] NaOH aquoso (0,212g, 5,28 mmols) foi adicionado a uma solução de composto 7 (1,0 g, 3,50 mmols) em EtOH (5 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,900 g).
[02175] O ácido (0,90 g, 3,33 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (4,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (1,01 g, 6,67 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (2,60 g, 4,9 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura foi vertida em gelo para fornecer um sólido, este foi filtrado e purificado por lavagens com acetonitrila e éter dietílico para fornecer o composto do título (1,0 g, 75 %). LCMS: 404,25 (M + 1)+; HPLC: 90,28 % (@ 254 nm) (Rt; 6,063; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,19 (t, 1H), 7,10 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 2,86 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 2,73 (d, 2H, J = 7,6 Hz), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,57 - 1,61(m, 1H), 0,91 (t, 3H, J = 6,8 Hz), 0,82 (d, 6H, J = 6,4 Hz).
[02176] Composto 117: 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)(metil)amino)-N-((4,6-di- metil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02177]
[02178] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)amino)-2-metilbenzo- ato de metila
[02179]
[02180] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (3,0 g, 15 mmols) e ciclopentanocarbaldeído (2,2 g, 22 mmols) em metanol (30 mL), ácido acético (1,8 g, 30 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 8 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (2,4 g, 37 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em con- clusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (4,2 g, 99 %).
[02181] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)(metil)amino)-2-metil- benzoato de metila
[02182]
[02183] A uma solução agitada de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)amino)-2-metil- benzoato de metila (1,0 g, 3,5 mmols) em acetonitrila (10 mL), carbonato de césio (2,3 g, 7,1 mmols) e iodeto de metila (5,0 g, 35 mmols) foram adicionados. A mistura foi aquecida a 80 °C durante 12 h, esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resí- duo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado e depois purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,0 g, 95 %).
[02184] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)(metil)amino)-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02185]
[02186] NaOH aquoso (0,206 g, 15,1 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 3,38 mmols) em etanol (10 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. O etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,9 g). O ácido acima (0,3 g, 1,06 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,324 g, 2,12 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,831 g, 1,57 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura foi vertida em gelo para obter um sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila para fornecer o composto do título (0,25 g, 56 %). LCMS: 416,15 (M + 1)+; HPLC: 92,58 % (@ 254 nm) (Rt; 6,169; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,19 (t, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 2,77 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 2,57 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,04 - 2,06 (m, 1H), 1,63 - 1,65 (m, 2H), 1,49 - 1,52 (m, 2H), 1,45 - 1,46 (m, 2H), 1,15 - 1,18 (m, 2H).
[02187] Composto 118: 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)(etil)amino)-N-((4,6-dime- til-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02188]
[02189] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)(etil)amino)-2-metil- benzoato de metila
[02190]
[02191] A uma solução agitada de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)amino)-2-metil- benzoato de metila (1,0 g, 3,54 mmols) em DMF (10 mL), carbonato de césio (2,31 g, 7,09 mmols) e iodeto de etila (5,53 g, 35,4 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 12 h. A mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado a um resíduo que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,0 g, 91 %).
[02192] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)(etil)amino)-N-((4,6-di- metil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il) metil)-2-metilbenzamida
[02193]
[02194] NaOH aquoso (0,193 g, 15,1 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-((ciclopentilmetil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 3,22 mmols) em etanol (10 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,9 g).
[02195] O ácido acima (0,3 g, 1,01 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (1,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,308 g, 2,12 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,791 g, 1,52 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo para obter um sólido, este foi filtrado e lavado com acetonitrila para fornecer o composto do título (0,25 g, 57 %). LCMS: 430,2 (M + 1)+; HPLC: 91,54 % (@ 210 nm) (Rt; 9,378; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,20 (t, 1H), 7,12 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 3,6 Hz), 2,83 - 2,89 (m, 4H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,85 - 1,89 (m, 1H), 1,51 - 1,58 (m, 4H), 1,41 - 1,46 (m, 2H), 1,14 - 1,15 (m 2H), 0,91 (t, 3H, J = 8 Hz).
[02196] Composto 123: 5-cloro-3-(ciclobutil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02197]
[02198] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(ciclobutilamino)-2-metilbenzoato de metila
[02199]
[02200] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (2,0 g, 10 mmols) e ciclobutanona (1,4 g, 20 mmols) em dicloroetano (20 mL), ácido acético (3,6 g, 60 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (6,3 g, 30 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante 3 h na temperatura ambiente. Em con- clusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,4 g, 56 %).
[02201] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-(ciclobutil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02202]
[02203] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclobutilamino)-2-metilbenzoato de metila (0,7 g, 2,8 mmols) em acetonitrila (10 mL), carbonato de césio (2,2 g, 6,8 mmols) e iodeto de metila (3,9 g, 28 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 8 h. Em conclusão, a massa de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado para fornecer o composto do título (0,62 g, 84 %).
[02204] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-3-(ciclobutil(metil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02205]
[02206] NaOH aquoso (0,134 g, 3,34 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(ciclobutil(metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,60 g, 2,23 mmols) em etanol (10 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,5 g).
[02207] O ácido acima (0,25 g, 0,98 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,22 g, 1,41 mmol) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,767 g, 1,47 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para obter material bruto que depois foi purificado por cromatografia em coluna fornecendo o composto do título (0,36 g, 95 %). LCMS: 388,09 (M + 1)+; HPLC: 96,62 % (@ 254 nm) (Rt; 5,461; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,44 (s, 1H), 8,18 (t, 1H), 6,90 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,65 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,18 (s,3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,03 (bs, 2H), 1,76 - 1,81 (m, 2H), 1,61 - 1,62 (m, 2H).
[02208] Composto 137: 5-cloro-3-(ciclobutil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1, 2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02209]
[02210] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(ciclobutil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02211]
[02212] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclobutilamino)-2-metilbenzoato de metila (0,70 g, 2,73 mmols) e acetaldeído (0,36 g, 8,20 mmols) em dicloroetano (15 mL), ácido acético (0,98 g, 16,4 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,7 g, 8,2 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante 3 h na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,71 g, 91 %).
[02213] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-(ciclobutil(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il) metil)-2-metilbenzamida
[02214]
[02215] NaOH aquoso (0,149 g, 3,7 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(ciclobutil(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,70 g, 2,48 mmols) em eta- nol (10 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,6 g).
[02216] O ácido acima (0,6 g, 2,2 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,67 g, 4,44 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (1,7 g, 3,33 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a massa de reação foi vertida em gelo; a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para obter material bruto que depois foi purificado por lavagens com solvente fornecendo o composto do título (0,45 g, 50 %). LCMS: 402,20 (M + 1)+; HPLC: 98,73 % (@ 254 nm) (Rt; 4,096; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,22 (t, 1H, J = 4,4 Hz), 6,97 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,75 - 3,79 (m, 1H), 2,87 - 2,93 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,99 (m, 2H), 1,58 - 1,69 (m, 4H), 0,77 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[02217] Composto 126: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3- il)metil)-2-metil-3-(metila((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)amino)benzamida
[02218]
[02219] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-(((tetra-hidro-2H-piran-4-il)me- til)amino) benzoato de metila
[02220]
[02221] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (2,0 g, 10 mmols) e tetra-hidro-2H-piran-4-carbaldeído (1,71 g, 15 mmols) em metanol (20 mL), ácido acético (1,2 g, 20 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 8 h. Em seguida, cianoboro-hidreto de sódio (2,11 g, 25,1 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,8 g, 60 %).
[02222] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-(metila((tetra-hidro-2H-piran-4- il)metil) amino)benzoato de metila
[02223]
[02224] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-(((tetra-hidro-2H-piran-4- il)metil) amino)benzoato de metila (0,80 g, 2,71 mmols) em acetonitrila (20 mL), carbonato de césio (1,75 g, 5,42 mmols) e iodeto de metila (1,93 g, 13,6 mmols) foram adicionados. A massa de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 8 h. Em conclusão, a mistura foi esfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O resíduo foi lavado com acetato de etila e o filtrado foi concentrado para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,70 g, 84 %).
[02225] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il) metil)-2-metil-3-(metila((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)amino)benzamida
[02226]
[02227] NaOH aquoso (0,18 g, 4,5 mmols) foi adicionado a uma solução de 5- cloro-2-metil-3-(metila((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)amino)benzoato de metila (0,70 g, 2,25 mmols) em etanol (10 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. O etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,2 g).
[02228] O ácido acima (0,2 g, 0,68 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (0,5 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,206 g, 1,35 mmol) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,528 g, 1,01 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura foi vertida em gelo e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para obter material bruto que foi purificado por cromato- grafia em coluna fornecendo o composto do título (0,2 g, 69 %). LCMS: 432,25 (M + 1)+; HPLC: 99,95 % (@ 254 nm) (Rt; 5,750; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,19 (t, 1H), 7,10 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 6,90 (d, 1H, J = 2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,80 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 3,21 - 3,27 (m, 2H), 2,73 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 2,55 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,74 - 1,75 (m, 1H), 1,58 - 1,61 (m, 2H), 1,07 - 1,16 (m, 2H).
[02229] Composto 127: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)amino)-2-metilbenzamida
[02230]
[02231] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(etila((tetra-hidro-2H-piran-4-il)me-til)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02232]
[02233] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-(((tetra-hidro-2H-piran-4- il)metil) amino)benzoato de metila (0,40 g, 1,35 mmol) e acetaldeído (0,120 g, 2,71 mmols) em dicloroetano (5 mL), ácido acético (0,48 g, 8,1 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxi- boro-hidreto de sódio (0,663 g, 4,05 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante 3 h na temperatura ambiente. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto purificado por cromatografia em coluna ao composto do título (0,38 g, 86 %).
[02234] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)amino)-2-metilbenzamida
[02235]
[02236] NaOH aquoso (0,099 g, 2,46 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(etila((tetra-hidro-2H-piran-4-il)metil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,38 g, 1,2 mmol) em etanol (20 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,2 g).
[02237] O ácido acima (0,2 g, 0,64 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (2 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,196 g, 1,29 mmol) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (0,504 g, 0,97 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura foi vertida em gelo e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para obter material bruto que foi purificado por cromato- grafia em coluna para fornecer o composto do título (0,15 g, 52 %). LCMS: 446,20 (M + 1)+; HPLC: 99,89 % (@ 254 nm) (Rt; 5,381; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,14 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,78 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 3,18 (t, 2H, J = 11,6 Hz), 2,82 - 2,89 (m, 4H), 2,18 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,54 - 1,57 (m, 3H), 1,09 - 1,15 (m, 2H), 0,91 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[02238] Composto 157: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (etil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2,5-dimetilbenzamida
[02239]
[02240] Etapa 1: Síntese de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[02241]
[02242] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50 g, 276 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodiona (43,4 g, 152 mmols) foi adicionada às porções na temperatura ambiente. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h e vertida em água gelada. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto do título (71 g, 99 %).
[02243] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila
[02244]
[02245] A uma solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (287 g, 1100 mmols) em DMF (150 mL), foram adicionados carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (627 g, 4415 mmols). A mistura foi aquecida a 60 °C durante 8 h. O precipitado foi filtrado e lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto do título (302 g, 99 %) que foi usado diretamente sem purificação adicional.
[02246] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[02247]
[02248] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzeno de metila (150 g, 544 mmols) em etanol (750 mL), cloreto de amônio (150 g, 2777 mmols) dissolvido em água (750 mL) e pó de ferro (93,3 g, 1636 mmols) foram adicionados sob agitação. A mistura foi aquecida a 80 °C durante 7 h e filtrada através de celite. Os sólidos foram lavados com água e acetato de etila e os filtrados combinados foram extraídos com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (175 g) que foi usado sem purificação adicional.
[02249] Etapa 4: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il)amino) benzoato de metila
[02250]
[02251] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (15 g, 61 mmols) e di-hidro-2H-piran-4(3H)-ona (9,2 g, 92 mmols) em dicloroetano (300 mL), ácido acético (22 g, 368,4 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (39 g, 184 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (14 g, 69 %).
[02252] Etapa 5: Síntese de 5-bromo-3-(etila(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)- 2-metilbenzoato de metila
[02253]
[02254] A uma solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-((tetra-hidro-2H-piran-4- il) amino)benzoato de metila (14 g, 43 mmols) e acetaldeído (3,75 g, 85 mmols) em dicloroetano (150 mL), foi adicionado ácido acético (15,4 g, 256 mmols) e a reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hi- dreto de sódio (27,0 g, 128 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada na temperatura ambiente durante 2 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida e água adicionada ao resíduo. A extração foi realizada usando DCM e as camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (14 g, 93 %).
[02255] Etapa 6: Síntese de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il) metil)-3-(etila(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metilbenzamida
[02256]
[02257] NaOH aquoso (2,36 g, 59 mmols) foi adicionado a uma solução de 5- bromo-3-(etila(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metilbenzoato de metila (14 g, 39 mmols) em etanol (100 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. O etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (13,9 g).
[02258] O ácido acima (10 g, 29 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (25 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (8,8 g, 58 mmols) e trietil amina (5,6 g, 58 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PYBOP (22 g, 43,8 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para obter material bruto que foi purificado por lavagens com solvente para fornecer o composto do título (14 g, 74 %).
[02259] Etapa 7: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me-til)-3-(etil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2,5-dimetilbenzamida
[02260]
[02261] À solução agitada de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il) metil)-3-(etila(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metilbenzamida (0,30 g, 0,63 mmol) em DMF (2 mL), foi adicionado diclorobis (trifenilfosfino) paládio (II) (0,028 g, 0,034 mmol) seguido por tetrametil estanho (0,124 g, 0,69 mmol). A mistura foi aquecida a 160 °C durante 30 minutos em um reator de microondas. A massa de reação foi resfriada com água e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o material bruto. A purificação por cromatografia em coluna e depois por HPLC preparativa forneceu o composto do título como o sal de TFA correspondente (0,15 g, 57,7 %). LCMS: 412,15 (M + 1)+; HPLC: 94,29 % (@ 254 nm) (Rt; 4,245; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (CD3OD, 400 MHz) δ 7,54 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 6,13 (s, 1H), 4,47 (s, 2H), 3,95 - 3,98 (m, 4H), 3,74 (bs, 2H), 3,37 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,37 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,61 - 1,91 (bs, 4H), 1,01 (t, 3H, J = 3,2 Hz).
[02262] Composto 222: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(((1s,4s)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida
[02263]
[02264] Etapa 1: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02265]
[02266] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (5,0 g, 25 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (6,95 g, 32,6 mmols) em 25 ml de dicloroetano, foi adicionado ácido acético (9,0 mL, 450,75 mmols) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi esfriada e triacetoxiboro-hidreto de sódio (22,8 g, 108 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secos em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e os isômeros dos produtos separados por gel de sílica (100 a 200) cromato- grafia em coluna para fornecer o composto do título menos polar como isômero cis, 3- (((1s,4s)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (5,2 g, 52 %) e o composto do título mais polar isômero trans, 3-(((1r,4r)-4- ((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (3,5 g, 35 %).
[02267] Etapa 2: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil) amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02268]
[02269] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (3,0 g, 7,6 mmols) e acetaldeído (0,66 g, 15 mmols) em 15 ml de dicloroetano, foi adicionado ácido acético (2,72 mL, 45,45 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura de reação foi esfriada a 0 °C e triacetoxiboro-hidreto de sódio (4,81 g, 22,72 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o material bruto purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (100 a 200) para fornecer o composto do título (3,5 g, 96 %).
[02270] Etapa 3: Síntese de ((1r,rs)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc- butila
[02271]
[02272] Uma mistura de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil) amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (3,5 g, 8,2 mmols) e NaOH (0,49 g, 12 mmols) em 20 ml de etanol:água (4:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi esfriada a 0 °C e acidificada ao pH 6 através do uso de HCl 1 N. A mistura foi concentrada e o resíduo particionado entre água e acetato de etila. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 3,2 g de ácido bruto. Uma mistura de ácido bruto (3,2 g, 7,8 mmols), 3-(ami- nometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (2,36 mg, 15,5 mmols) e PyBOP (6,07 mg, 11,7 mmols) foi agitada em 15 ml de DMSO na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com MeOH a 10 % em DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (100 a 200) para fornecer o composto do título (3,0 g, 71 %).
[02273] Etapa 4: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro- N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02274]
[02275] A uma solução esfriada de ((1r,4r)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (400 mg, 0,73 mmol) em 5 ml de DCM, 2 ml de TFA foi adicionado e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada à secura sob pressão reduzida. O produto bruto foi dissolvido em MeOH a 10 % em DCM e lavado com NaHCO3 sat, água e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (320 mg, 98 %).
[02276] Etapa 5: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida
[02277]
[02278] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)- 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (300 mg, 0,67 mmol) e formaldeído (0,5 ml de solução a 38 %, 6,75 mmols) em 3 ml de metanol, triacetoxiboro-hidreto de sódio (83,0 mg, 1,35 mmol) foi adicionado a 0 °C e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada à secura e particionada entre água e MeOH a 10 % em DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado em alumina básica para fornecer o composto do título (120 mg, 32 %).
[02279] Composto 268: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida
[02280]
[02281] A uma solução de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida (80 mg, 0,16 mmol) em 5 ml de metanol, foi adicionada uma quantidade catalítica de 10 % de paládio em carbono. A mistura foi agitada sob atmosfera de hidrogênio a pressão por balão durante 13 h. A mistura de reação foi filtrada através de um leito de celite, concentrada sob pressão reduzida a um óleo viscoso que em lavagem com éter forneceu o composto do título (40 mg, 54 %) como um sólido branco amarelado.
[02282] LCMS: 439,25 (M + 1)+; HPLC: 88,61 % (@ 254 nm) (Rt4,084; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 8,03 (t, 1H), 7,15 - 7,13 m, 2H), 6,94 (d, 1H), 4,26 (d, 2H, J = 4,4Hz), 3,02(d, 2H, J = 6,8 Hz), 2,61 (s, 6H), 2,18 (s 6H), 2,10 (s, 3H), 1,97 - 1,83 (m, 4H),1,39 (m, 4H), 0,8 (t, 3H,J = 6,8 Hz), (3H ligado em solvente de pico).
[02283] Composto 273: 5-cloro-3-(((1s,4s)-4-(dietilamino)ciclo-he- xil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02284]
[02285] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)- 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (150 mg, 0,33 mmol) e acetaldeído (0,15 ml, 2,70 mmols) em 5 ml de dicloroetano, ácido acético (0,14 mL, 2,36 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura de reação foi esfriada a 0 °C e triacetoxiboro-hidreto de sódio (286 mg, 1,35 mmol) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM, seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida a um resíduo. A purificação através de HPLC prep. forneceu o composto do título (100 mg, 59 %). LCMS: 501,50 (M + 1)+; HPLC: 93,90 % (@ 210 - 370 nm) (Rt; 4,543; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (bs, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 3,6 Hz), 3,03 - 3,01 (m, 2H), 2,67 - 2,61 (m, 2H), 2,42 - 2,33 (m, 4H), 2,19 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,73 (m, 4H), 1,39 - 1,19 (m, 4H), 0,92 (m, 6H), 0,78 (t, 3H).
[02286] Composto 277: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-etinil-2-metilbenzamida
[02287]
[02288] Etapa 1: Síntese de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbo- nil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila.
[02289]
[02290] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbo- nil)amino) ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila (6,0 g, 13,0 mmols) e acetal- deído (1,5 ml, 27,0 mmols) em dicloroetano (60 mL), foi adicionado ácido acético (5,4 ml, 82 mmols) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos.Triacetoxiboro-hidreto de sódio (8,6 g, 41 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 2 h. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat. e foi extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (100 a 200) para fornecer o composto do título (5,0 g, 79 %).
[02291] Etapas 2 e 3: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil) (etil)amino)-5-etinil-2-metilbenzoato de metila.
[02292]
[02293] Uma solução de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,5 g, 3,20 mmols), trimetilsilil acetileno (0,52 ml, 3,84 mmols), iodeto de cobre (12 mg, 0,06 mmol) e N,N-di-isopropil amina (1,0 ml, 8,38 mmols) em 20 ml de tolueno foi purgada com argônio. Dicloro- bis(trifenil fosfina) paládio (II) (44 mg, 0,06 mmol) foi adicionado a mistura de reação aquecida a 80 °C durante 16 h. A mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e a lavada com água. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para obter 1,8 g do composto silil protegido bruto. Este foi dissolvido em 15 ml de THF e tetra-butilamônio fluoreto (7,5 ml de 1M solução em THF, 7,40 mmols) foi adicionado na temperatura ambiente. A mistura agitada durante 2h, diluída com acetato de etila e lavada com água. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (100 a 200) para fornecer o composto do título (800 mg, 52 %).
[02294] Etapas 4 e 5: Síntese de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-5-etinil-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila.
[02295]
[02296] Uma mistura de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil) amino)-5-etinil-2-metilbenzoato de metila (800 mg, 1,92 mmol) e NaOH (115 mg, 2,89 mmols) em 12 ml de etanol:água (3:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada à secura e o resíduo foi particionado entre água e DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 700 mg do ácido bruto. O ácido bruto (700 mg, 1,75 mmol), 3- (aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (532 mg, 3,5 mmols) e PyBOP (1,36 g, 2,62 mmols) foram agitados em 7 ml de DMSO na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água, e o produto precipitado foi filtrado e purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (750 mg, 80 %).
[02297] Etapa 6: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-etinil-2-metilbenzamida.
[02298]
[02299] A uma solução esfriada de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-5-etinil-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (750 mg, 1,40 mmol) em 10 ml de DCM, foi adicionado 3 ml de TFA. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h e foi concentrada à secura sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH a 10 % em DCM e lavado com NaHCO3 sat, água e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto (600 mg, 98 %).
[02300] Etapa 7: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-etinil-2-metilbenzamida.
[02301]
[02302] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-etinil-2-metilbenzamida bruta (600 mg, 1,38 mmol) e formaldeído (0,4 ml de solução a 38 %, 6,75 mmols) em 10 ml de dicloroetano foi adicionado triacetoxiboro-hidreto de sódio (731 mg, 3,45 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 3 h e particionada entre água e MeOH a 10 % em DCM. A camada orgânica foi separada, seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado em alumina básica para fornecer o composto do título (450 mg, 70 %).
[02303] Dados Analíticos para sal de TFA de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-etinil-2-metil- benzamida: LCMS: 463,65 (M + 1)+; HPLC: 92,65 % (@ 254 nm) (Rt; 4,748; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 9,43(bs, 1H), 8,23 (t, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,12 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,26 (d, 2H, J = 4,0Hz), 3,17 - 3,03 (m, 4H),2,69 - 2,68 (m, 6H), 2,50 (1H ligado em solvente de pico), 2,21 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,96 - 1,84 (m, 4H), 1,43 (m, 4H), 0,79 (t, 3H).
[02304] Composto 278: 5-ciano-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida
[02305]
[02306] Etapa 1: Síntese de 3-(((1s,4s)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil) amino)-5-ciano-2-metilbenzoato de metila.
[02307]
[02308] Uma solução de composto 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbo- nil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,0 gm, 2,13 mmols) e Zn(CN)2 (370 mg, 3,19 mmols) em 6 ml de DMF foi desgaseificada com argônio durante 20 min seguido por adição de Pd(PPh3)4 (240 mg, 0,21 mmol). A mistura foi aquecida a 100 °C durante a noite, diluída com água e foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (280 mg, 82 %).
[02309] Etapas 2 e 3: Síntese de ((1r,4r)-4-((5-ciano-3-(((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila.
[02310]
[02311] Uma mistura de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil) (etil)amino)-5-ciano-2-metilbenzoato de metila (735 mg, 1,78 mmol) e NaOH (85 mg, 2,13 mmols) em 12 ml de etanol:água (3:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada à secura e o produto bruto foi particionado entre água e DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 380 mg de ácido bruto. Uma mistura de ácido bruto (380 mg, 0,94 mmol), 3-(ami- nometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (287 mg, 1,89 mmol) e PyBOP (737 mg, 1,41 mmol) em 4 ml de DMSO foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água e foi extraída com MeOH a 10 % em DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em sílica para fornecer o composto do título (350 mg, 75 %).
[02312] Etapa 4: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-5-ci- ano-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida.
[02313]
[02314] A uma solução esfriada de composto ((1r,4r)-4-((5-ciano-3-(((4,6-di- metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-he- xil)carbamato de terc-butila (350 mg, 0,80 mmol) em 5 ml de DCM, foi adicionado 1 ml de TFA. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h. e concentrada à secura sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH a 10 % em DCM e lavado com NaHCO3 sat, água e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida para obter 284 mg do composto do título bruto.
[02315] Etapa 5: Síntese de 5-ciano-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida.
[02316]
[02317] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)- 5-ciano-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida bruta (325 mg, 0,74 mmol) e formaldeído (0,3 ml de solução a 38 %, 3,72 mmols) em 10 ml de metanol, cianoboro-hidreto de sódio (100 mg, 1,49 mmol) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 4 h e particionada entre água e MeOH a 10 % em DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por alumina básica por purificação em coluna para fornecer o composto do título (75 mg, 22 %).
[02318] Dados Analíticos de 5-ciano-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-3-(((1s,4s)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida: LCMS: 464,30 (M + 1)+; HPLC: 87,24 % (@ 254 nm) (Rt; 4,540; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (bs, 1H), 8,31 (t, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,26 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,07 - 3,05 (m, 3H), 2,73 - 2,63 (m, 7H), 2,25 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,96 - 1,82 (m, 4H), 1,41 - 1,37 (m, 4H), 0,78 (t, 3H).
[02319] Composto 279: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)ciclo-hexil)amino)-2-me-tilbenzamida
[02320]
[02321] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)ciclo-hexil)amino)-2-me- tilbenzamida.
[02322]
[02323] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)- 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (300 mg, 0,67 mmol) e di-hidro-2H-piran-4(3H)-ona (99 mg, 1,01 mmol) em 5 ml de dicloroe- tano, foi adicionado ácido acético (0,24 mL, 4,05 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura foi esfriada a 0 °C e triacetoxiboro- hidreto de sódio (429 mg, 2,02 mmols) foi adicionado e a reação agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secos em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (175 mg, 57 %).
[02324] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(metil(tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)ciclo-hexil)amino)-2-me-tilbenzamida.
[02325]
[02326] A uma solução agitada de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-((tetra-hidro-2H-piran-4-il)amino)ciclo-hexil)amino)-2- metilbenzamida (175 mg, 0,33 mmol) e formalina (99 mg, 3,31 mmols) em 2 ml de metanol foi adicionado cianoboro-hidreto de sódio (41 mg, 0,66 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secos em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto do título (70 mg, 39 %).
[02327] LCMS: 543,65 (M + 1)+; HPLC: 98,19 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 4,515; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (bs, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,84 - 3,82 (m, 2H), 3,26 - 3,23 (m, 3H), 3,03 - 3,01 (m, 2H), 2,67 - 2,53 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11 (s, 6H), 1,75 - 1,57 (m, 6H), 1,41 - 1,24 (m, 6H), 0,78 (t, 3H).
[02328] Composto 276: Síntese de composto 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil- benzamida
[02329]
[02330] Etapa 1: Síntese de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[02331]
[02332] À solução agitada do composto ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50,0 g, 276 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL), 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazolidinodi- ona (43,4 g, 152 mmols) foi adicionada às porções na temperatura ambiente e a agitação foi continuada durante 5 h. Em conclusão, a massa de reação foi vertida em água gelada, o sólido precipitado foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo fornecendo o composto do título bruto (71,7 g, 99,9 %) que foi usado sem purificação adicional.
[02333] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila.
[02334]
[02335] A uma solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico bruto (287 g, 1103 mmols) em DMF (150 mL), carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) e iodeto de metila (626 g, 4415 mmols) foram adicionados. A mistura foi aquecida a 60 °C durante 8 h, esfriada até a temperatura ambiente. O sólido precipitado foi filtrado e lavado com éter dietílico (5 vezes). As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (302 g, 99 %) que foi usado diretamente.
[02336] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila.
[02337]
[02338] A uma solução agitada de composto acima 5-bromo-2-metil-3-nitro- benzoato de metila bruto (150 g, 0,54 mol) em etanol (750 mL), cloreto de amônio (150 g, 2,78 mols) dissolvido em 750 ml de água foi adicionado seguido por pó de ferro (93,3 g, 1,64 mol) com agitação vigorosa. A mistura foi aquecida a 80 °C durante 7 horas e filtrada através de celite. A almofada do filtro foi lavada com água e acetato de etila e o filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (175 g bruto).
[02339] Etapa 4: Síntese de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbo- nil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila.
[02340]
[02341] A uma solução agitada de composto 3-amino-5-bromo-2-metilbenzo- ato de metila bruto (15 g, 62 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (17 g, 8 mmols) em dicloroetano (200 mL), foi adicionado ácido acético (23 ml, 368 mmols) e a reação agitada na temperatura ambiente durante 10 min. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (40 g, 185 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, e concentradas sob pressão reduzida. A separação por cromatografia em coluna da mistura isomérica bruta forneceu o composto do título desejado (6,0 g, 22 %).
[02342] Etapa 5: Síntese de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbo- nil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila.
[02343]
[02344] A uma solução agitada do composto 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-bu- toxicarbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila (6,0 g, 13,0 mmols) e acetaldeído (1,5 ml, 27,0 mmols) em dicloroetano (60 mL) foi adicionado ácido acético (5,4 ml, 82 mmols) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (8,6 g, 40,9 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 2 h. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (5,0 g, 79 %).
[02345] Etapas 6 e 7: Síntese de ((1r,4r)-4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila.
[02346]
[02347] Uma mistura de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil) (etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,00 g, 2,13 mmols) e NaOH (102 mg, 2,56 mmols) em 6 ml de etanol:água (2:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada à secura e o resíduo foi particionado entre água e DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 1,0 g de ácido bruto. O ácido bruto (1,0 g, 2,20 mmols), 3-(aminometil)- 4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (669 mg, 4,40 mmol), PyBOP (1,71 g, 3,30 mmols) e 1 ml de trietil amina foram agitados em 2 ml de DMSO na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (1,0 g, 83 %).
[02348] Etapa 8: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-5- bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida.
[02349]
[02350] A uma solução esfriada do composto ((1r,4r)-4-((5-bromo-3-(((4,6-di- metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-he- xil)carbamato de terc-butila (1,0 g, 1,60 mmol) em 10 ml de DCM, foi adicionado 2 ml de TFA. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h, e concentrada à secura sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH a 10 % em DCM e lavado com NaHCO3 sat, água e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto (650 mg, 81 %).
[02351] Etapa 9: Síntese de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida.
[02352]
[02353] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)- 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida bruta (650 mg, 1,32 mmol) e formaldeído (0,5 ml de solução a 38 %, 13,3 mmols) em 10 ml de metanol, foi adicionado cianoboro-hidreto de sódio (82 mg, 1,32 mmol a 0 °C) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi particionada entre água e MeOH a 10 % em DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por alumina básica por purificação em coluna para fornecer o composto do título (450 mg, 65 %).Dados Analíticos de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida: LCMS: 519,30 (M + 1)+; HPLC: 98,35 % (@ 254 nm) (Rt; 4,392); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 9,39 (bs, 1H), 8,23 (t, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,09 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4,0 Hz),3,03 - 3,01 (m, 3H), 2,69 - 2,69 (m, 6H), 2,50 (1H ligado em solvente de pico), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,94 - 1,84 (m, 4H), 1,42 (m, 4H), 0,79 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[02354] Composto 282: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-etil-2-metilbenzamida
[02355]
[02356] Etapa 1: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-vinilbenzamida.
[02357]
[02358] Uma mistura de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida (200 mg, 0,38 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (71 mg, 0,46 mmol) e carbonato de sódio (147 mg, 1,39 mmol) em 10 ml de dioxano foi desgaseificada com argônio durante 20 min, Pd(PPh3)4 (44 mg, 0,04 mmol) foi adicionado e a mistura aquecida a 100 °C durante a noite. A reação foi esfriada até a temperatura ambiente e diluída com água. A mistura foi extraída com MeOH a 10 % em DCM, as fases orgânicas combinadas secas em Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica para obter o composto do título (150 mg, 83 %).
[02359] Etapa 2: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-etil-2-metilbenzamida.
[02360]
[02361] A uma solução do composto N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-vinilbenzamida (150 mg, 0,32 mmol) em 5 ml de metanol, foi adicionado uma quantidade catalítica de 10 % de paládio em carbono. A mistura foi agitada sob atmosfera de hidrogênio a pressão por balão durante 12 h, filtrada através de celite, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título como um sal de TFA (65 mg, 43 %).
[02362] LCMS: 467,35 (M + 1)+; HPLC: 93,41 % (@ 254 nm) (Rt; 10,946; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; 10m M formiato de amônio em água + 0,1 % NH3, B; Acetonitrila + 5 % de solvente A + 0,1 % NH3; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,0 mL/min.; Gradiente: 15 % B a 95 % B em 6,0 min, Manter até 8,0 min, 15 % B a 8,5 min manter até 15 min); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (bs, 1H), 9,45 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,03 (s, 2H), 7,26 - 6,84 (m, 2H), 5,87 (s, 1H), 4,26 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 3,17 - 2,89 (m, 3H), 2,70, 2,68 (2s, 6H), 2,19, 2,11 (3s, 9H), 1,96 - 1,87 (m, 4H), 1,42 (m, 4H), 1,15 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,80 (s, 3H).
[02363] Composto 283: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(3-(4-metilpiperazin-1-il)prop-1-in-1-il)benzamida
[02364]
[02365] Etapa 1 Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil) amino)-2-metil-5-(3-(4-metilpiperazin-1-il)prop-1-in-1-il)benzoato de metila.
[02366]
[02367] Uma solução de 5-(3-bromoprop-1-in-1-il)-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxi- carbonil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (500 mg, 1,0 mmol) e 1-metilpiperazina (0,49 ml, 4,9 mmols) em 5 ml de DMF foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, e concentradas sob vácuo para fornecer o composto do título (550 mg).
[02368] Etapas 2 e 3: Síntese de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metil-5-(3-(4-metilpiperazin-1-il)prop-1-in-1-il)fe- nil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila.
[02369]
[02370] Uma mistura do composto 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(3-(4-metilpiperazin-1-il)prop-1-in-1-il)benzoato de me- tila (550 mg, 1,0 mmol) e NaOH (83 mg, 2,1 mmols) em 8 ml de etanol:água (3:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada à secura e o resíduo foi particionado entre água e DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para fornecer 470 mg de ácido. O ácido bruto (470 mg, 0,92 mmol), 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (279 mg, 1,83 mmol), PyBOP (716 mg, 1,37 mmol) e trietil amina (0,38 ml, 2,75 mmols) mistura foram agitados em 5 ml de DMSO na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água e o composto foi extraído em MeOH a 10 % em DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (350 mg, 50 %).
[02371] Etapa 4: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(3-(4-metilpiperazin-1-il)prop-1-in- 1-il)benzamida.
[02372]
[02373] A uma solução esfriada de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metil-5-(3-(4-metilpiperazin-1-il)prop-1-in-1-il)fe- nil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (350 mg, 0,54 mmol) em 5 ml de DCM, foram adicionados 2 ml de TFA . A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h, concentrada à secura sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH a 10 % em DCM e lavado com NaHCO3 sat, água e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para obter o composto do título bruto (250 mg, 84 %).
[02374] Etapa 5: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(3-(4-metilpiperazin-1- il)prop-1-in-1-il)benzamida.
[02375]
[02376] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(3-(4-metilpiperazin-1- il)prop-1-in-1-il)benzamida bruta (250 mg, 0,45 mmol) e formaldeído (0,35 ml de solução a 38 %, 4,56 mmols) em 3 ml de metanol foi adicionado cianoboro-hidreto de sódio (85 mg, 1,37 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 4 h e particionada entre água e MeOH a 10 % em DCM. A camada orgânica foi separada, seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título como um sal de TFA (40 mg, 15 %).
[02377] LCMS: 575,45 (M + 1)+; HPLC: 99,30 % (@ 254 nm) (Rt; 3,849; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (D2O, 400 MHz) δ 7,75 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,45 (d, J = 4,0Hz, 2H), 3,80 - 3,63 (m, 5H), 3,40 - 3,21 (m, 9H), 2,92 (s, 3H), 2,79 (2s, 6H), 2,35 (m, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,19 - 2,05 (m, 4H), 1,65 - 1,57 (m, 4H), 0,97 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[02378] Composto 284: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(metilamino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02379]
[02380] Etapa 1: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila.
[02381]
[02382] A uma solução agitada do composto 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (5,0 g, 25 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (6,95 g, 32,7 mmols) em 25 ml de dicloroetano foi adicionado ácido acético (9,0 mL, 450 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 10 min. A mistura foi esfriada e triacetoxiboro-hidreto de sódio (22,8 g, 108 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi neutralizada com NaHCO3 sat. e foi extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer (3,5 g, 35 %) o composto do título isômero trans mais polar 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-5-cloro-2-metil- benzoato, junto com (5,2 g, 52 %) o isômero cis menos polar 3-(((1s,4s)-4-((terc-buto- xicarbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato.
[02383] Etapa 2: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil) amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila.
[02384]
[02385] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (3,0 g, 7,6 mmols) e acetaldeído (0,66 g, 15 mmols) em 15 ml de dicloroetano, foi adicionado ácido acético (2,7 mL, 45 mmols) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura foi esfriada a 0 °C, triacetoxiboro-hidreto de sódio (4,8 g, 22 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi neutralizada com NaHCO3 sat. e foi extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (3,5 g, 96 %).
[02386] Etapa 3: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)(metil)amino)ci- clo-hexil) (etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila.
[02387]
[02388] A uma solução esfriada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1,1 g, 3,3 mmols) em 12 ml deTHF, foi adicionado hidreto de sódio (410 mg, 10 mmols) seguido por iodeto de metila (2,1 ml, 34 mmols), a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, resfriada através da adição lenta de água gelada e acidificada com solução de ácido cítrico. A extração com MeOH a 10 % em DCM seguido por secagem e concentração das fases orgânicas combinadas sob pressão reduzida forneceu o composto do título (1,0 g, 88 %).
[02389] Etapas 4 e 5: Síntese de ((1r,4r)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)(metil)carba-mato de terc-butila.
[02390]
[02391] Uma mistura de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)(metil)amino)ciclo- hexil)(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 2,4 mmols) e NaOH (140 mg, 3,5 mmols) em 10 ml de etanol:água (4:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada à secura e o resíduo foi particionado entre água e DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 1,0 g de ácido bruto. Uma mistura de ácido bruto (1,0 g, 2,4 mmols), 3- (aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (716 mg, 4,71 mmols), PyBOP (1,83 g, 3,53 mmols) e 2 ml de trietil amina foi agitada em 5 ml de DMSO na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com água e extraída com MeOH a 10 % em DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (700 mg, 53 %).
[02392] Etapa 6: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(metilamino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida.
[02393]
[02394] A uma solução esfriada de ((1s,4s)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)(metil)carba- mato de terc-butila (700 mg, 1,25 mmol) em 20 ml de DCM, foram adicionados 3 ml de TFA . A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h, e concentrada à secura sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH a 10 % em DCM e lavado com NaHCO3 sat, água e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida e o resíduo purificado por HPLC preparativa para obter o composto do título como seu sal de TFA (500 mg, 87 %).
[02395] LCMS: 459,35 (M + 1)+; HPLC: 97,63 % (@ 254 nm) (Rt; 4,565; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-D6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 8,32 (s, 2H), 8,22 (m, 1H), 7,20 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 3,74 (m, 3H), 3,03 - 3,01 (m, 3H), 2,67 (m, 1H), 2,19 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,33 (m, 2H), 1,82 - 1,80 (m, 2H), 1,42 - 1,23 (m, 2H + 2H), 0,78 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[02396] Composto 285: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(etil(metil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02397]
[02398] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(etil(metil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida.
[02399]
[02400] A uma solução agitada do composto 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(metilamino)ciclo-hexil)amino)-2-metil- benzamida (200 mg, 0,43 mmol) e acetaldeído (0,03 ml, 0,43 mmol) em 5 ml de diclo- roetano, foi adicionado ácido acético (0,15 mL, 2,62 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura foi esfriada a 0 °C e triacetoxi- boro-hidreto de sódio (0,28 g, 1,31 mmol) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat. e foi extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida, e o resíduo purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título como um sal de TFA (80 mg, 37 %). LCMS: 487,35 (M + 1)+; HPLC: 99,87 % (@ 254 nm) (Rt; 4,711; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-D6, 400 MHz) δ 11,47 (bs, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,24 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 3,16 - 3,01 (m, 5H), 2,64 - 2,63 (m, 4H), 2,19 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,91 - 1,83 (m, 4H), 1,47 (m, 4H), 1,19 (m, 3H), 0,79 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[02401] Composto 286: 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-((ciclopropilmetil)(metil)amino)ci- clo-hexil) (etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenza- mida
[02402]
[02403] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(((1r,r)-4-((ciclopropilmetil)(me- til)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2- metilbenzamida.
[02404]
[02405] A uma solução agitada de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(metilamino)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida (200 mg, 0,43 mmol) e ciclopropanocarbaldeído (0,03 gm, 0,43 mmol) em 5 ml de dicloroetano, foi adicionado ácido acético (0,15 mL, 2,62 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura foi esfriada a 0 °C e triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,277 g, 1,31 mmol) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi neutralizada com NaHCO3 sat. e foi extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida, e o resíduo purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título como um sal de TFA (100 mg, 44 %). LCMS: 513,40 (M + 1)+; HPLC: 94,81 % (@ 254 nm) (Rt; 4,924; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-D6, 400 MHz) δ 11,47 (bs, 1H), 9,09 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 3,24 (m, 1H), 3,03 - 3,01 (m, 3H), 2,89 - 2,87 (m, 1H), 2,71 - 2,70 (m, 4H), 2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,93 - 1,83 (m, 4H), 1,46 - 1,44 (m, 4H), 1,05 (m, 1H), 0,79 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,63 (m, 2H), 0,38 - 0,31 (m, 2H).
[02406] Composto 287: Síntese do composto 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(ciclobu- til(metil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-2-metilbenzamida
[02407]
[02408] Etapas 1 e 2: Síntese de ((1r,4r)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila.
[02409]
[02410] Uma mistura do composto 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (3,5 g, 8,2 mmols) e NaOH (0,5 g, 12 mmols) em 20 ml de etanol:água (4:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi esfriada a 0 °C e acidificada ao pH 6 através do uso de HCl 1 N e concentrada. O resíduo foi particionado entre água e acetato de etila, a camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 3,2 g de ácido bruto. O ácido bruto (3,2 g, 7,8 mmols), 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (2,36 mg, 15,6 mmols) e PyBOP (6,1 mg, 11 mmols) foram agitados em 15 ml de DMSO na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com MeOH a 10 % em DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (3,0 g, 71 %).
[02411] Etapa 3: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro- N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida.
[02412]
[02413] A uma solução esfriada de ((1s,4s)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (400 mg, 0,73 mmol) em 5 ml de DCM, foram adicionados 2 ml de TFA.A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h e concentrada à secura sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH a 10 % em DCM e lavado com NaHCO3 sat, água e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (320 mg, 98 %).
[02414] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(ciclobutilamino)ciclo-he-xil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida.
[02415]
[02416] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)- 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (300 mg, 0,67 mmol) e ciclobutanona (141 mg, 2,02 mmols) em 20 ml de metanol, foi adicionado cianoboro-hidreto de sódio (127 mg, 2,02 mmols) a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para obter o composto do título bruto (260 mg, 77 %).
[02417] Etapa 5: Síntese de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(ciclobutil(metil)amino)ciclo- hexil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenza- mida.
[02418]
[02419] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(ciclobutilamino)ciclo- hexil) (etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2- metilbenzamida (230 mg, 0,46 mmol) e formalina (138 mg, 4,61 mmols) em 10 ml de metanol, foi adicionado cianoboro-hidreto de sódio (43 mg, 0,69 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite, neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (150 mg, 63 %).
[02420] Dados Analíticos de sal de TFA de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(ciclobutil(me- til)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2- metilbenzamida: LCMS: 513,25 (M + 1)+; HPLC: 96,89 % (@ 254 nm) (Rt; 4,886; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-D6, 400 MHz) δ 11,45 (bs, 1H), 9,40 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,18 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 3,77 - 3,75 (m, 1H), 3,12 - 3,02 (m, 3H), 2,69 (m, 1H), 2,50 (4H ligados em solvente de pico), 2,18, 2,15, 2,11 (3s, 6H + 3H + 3H), 1,83 - 1,44 (m, 10H), 0,78 (t, 3H).
[02421] Composto 290: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(3-(dimetilamino)prop-1-in-1-il)-2- metilbenzamida
[02422]
[02423] Etapas 1 e 2: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil) (etil)amino)-5-(3-hidroxiprop-1-in-1-il)-2-metilbenzoato de metila:
[02424]
[02425] Uma solução de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (1,5 g, 3,2 mmols), terc-butildime- til(prop-2-in-1-ilóxi)silano (1,6 g, 9,6 mmols), iodeto de cobre (183 mg, 0,96 mmol) e trietil amina (1,30 ml, 9,60 mmol) em 10 ml de DMF foi purgada com gás argônio durante 20 min. Tetracis-(trifenilfosfino)paládio (369 mg, 0,32 mmol) foi adicionado à mistura de reação e a mistura aquecida a 100 °C durante 5 h e esfriada até a temperatura ambiente. A mistura foi diluída com acetato de etila, lavada com água, e a camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para obter 1,9 g do produto intermediário silil protegido bruto. O produto foi dissolvido em 15 ml de THF e fluoreto de tetra-butil amônio (6,81 ml de 1 M solução em THF, 6,81 mmols) foi adicionado na temperatura ambiente e a mistura agitada durante 2 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila e lavada com água. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo purificado por cromato- grafia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (950 mg, 630 %).
[02426] Etapa 3: Síntese de 5-(3-bromoprop-1-in-1-il)-3-(((1r,4r)-4-((terc-buto- xicarbonil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila.
[02427]
[02428] A uma solução de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil) (etil)amino)-5-(3-hidroxiprop-1-in-1-il)-2-metilbenzoato de metila (950 mg, 2,14 mmols) em 13 ml de DCM, trifenilfosfina (840 mg, 3,21 mmols) e tetrabrometo de carbono (1,06 gm, 3,21 mmols) foram adicionados na temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 3 h, diluída com DCM e lavada com água. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida e o resíduo purificado em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (900 mg, 82 %).
[02429] Etapa 4: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil) amino)-5-(3-(dimetilamino)prop-1-in-1-il)-2-metilbenzoato de metila.
[02430]
[02431] Uma solução de 5-(3-bromoprop-1-in-1-il)-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxi- carbonil) amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila (500 mg, 0,98 mmol) e um solução de 2 M em THF of N,N-dimetilamina (2,5 ml, 4,9 mmols) em 5 ml de DMF foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, diluída com água e extraída com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas sob vácuo para fornecer o composto do título (450 mg, 96 %).
[02432] Etapas 5 e 6: Síntese de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-5-(3-(dimetilamino)prop-1-in-1-il)-2-metilfe- nil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila.
[02433]
[02434] Uma mistura de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil) amino)-5-(3-(dimetilamino)prop-1-in-1-il)-2-metilbenzoato de metila (450 mg, 0,95 mmol) e NaOH (57 mg, 1,40 mmol) em 10 ml de etanol:água (4:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada à secura e o resíduo particionado entre água e DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 430 mg de ácido. O ácido bruto (430 mg, 0,94 mmol), 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (280 mg, 1,88 mmol), PyBOP (733 mg, 1,40 mmol) e trietil amina (0,1 ml, 0,94 mmol) foram agitados em 7 ml de DMSO na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água, o composto precipitado foi filtrado e seco sob vácuo para obter o composto do título bruto (450 mg, 81 %).
[02435] Etapa 7: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-(3-(dimetilamino)prop-1-in-1-il)-2-metil- benzamida.
[02436]
[02437] A uma solução esfriada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)(etil)amino)-5-(3-(dimetilamino)prop-1-in-1-il)-2-metilbenzoato de metila (450 mg, 0,76 mmol) em 6 ml de DCM, foi adicionado 1 ml de TFA. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h, e concentrada à secura sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em MeOH a 10 % em DCM e lavado com NaHCO3 sat, água e salmoura. A fase orgânica foi seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para obter o composto do título bruto (350 mg, 93 %).
[02438] Etapa 8: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(3-(dimetilamino)prop-1- in-1-il)-2-metilbenzamida.
[02439]
[02440] A uma solução agitada do composto 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-he- xil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-(3-(dimetila- mino)prop-1-in-1-il)-2-metilbenzamida bruta (350 mg, 0,71 mmol) e formaldeído (0,56 ml de solução a 38 %, 7,10 mmols) em 8 ml de metanol, foi adicionado cianoboro- hidreto de sódio (132 mg, 2,10 mmols) a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 4 h, e particionada entre água e MeOH a 10 % em DCM. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em alumina básica para fornecer o composto do título (120 mg, 32 %).
[02441] LCMS: 520,6 (M + 1)+; HPLC: 92,27 % (@ 254 nm) (Rt; 3,886; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (bs, 1H), 8,18 (t, 1H), 7,15 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, 2H), 3,02 - 3,00 (m, 2H), 2,50 (13 prótons ligados em solvente de pico), 2,33 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,82 (m, 4H), 1,39 - 1,28 (m, 4H), 0,77 (t, 3H).
[02442] Composto 301: N-((1-benzil-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida
[02443]
[02444] Ácido 5-Cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2- metilbenzoico (1 eq) foi dissolvido em DMSO e 3-(aminometil)-1-(2-hidroxietil)-4,6-di- metilpiridin-2(1H)-ona (2 eq) e trietilamina (1 eq) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (1,5 eq) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para obter o produto bruto que foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título (0,011g, 16 %) como o sal de TFA. LCMS: 563,40 (M + 1)+; HPLC: 90,27 % (@ 210 nm a 370 nm) (Rt; 6,122; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (MeOD, 400 MHz) δ,7,31 - 7,26(m, 2H), 7,24 - 7,04 (m, 5H), 6,23 (s, 1H), 5,40 (d, 2H), 4,50(s, 2H), 3,34 (1 próton ligado em solvente de pico) 3,11 - 3,08 (m, 2H + 1H), 2,81(s, 3H + 3H), 2,42 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 2,08 - 1,99 (m, 2H + 2H), 1,52 - 1,49 (m, 4H), 0,86 (t, 3H J = 7,2 Hz).
[02445] Composto 302: 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-he-xil)(etil)amino)-N-((1-(2-hidroxietil)-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2- metilbenzamida
[02446]
[02447] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-he- xil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02448]
[02449] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de etila (3,4 g, 8,0 mmols) em DCM (35 mL) foi adicionado TFA (10 mL) . A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 1 hora, o solvente foi removido sob pressão reduzida e solução de NaHCO3 saturada foi adicionada. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 % e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura e secas em anidro Na2SO4. A evaporação do solvente sob pressão reduzida forneceu 3-(((1r,4r)-4- aminociclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (2,5 g, 96 %).
[02450] O composto acima (2,4 g, 7,4 mmols) foi dissolvido em metanol (25 mL) e a mistura esfriada a 0 °C. Formalina (2,21 g, 73,95 mmols) foi adicionada e a mistura de reação resultante foi agitada a mesma temperatura durante 20 minutos. Cianoboro-hidreto de sódio (0,92 g, 14,8 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente foi removido sob pressão reduzida, água adicionada ao resíduo, e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto do título (2,3 g, 88) que foi usado sem purificação adicional.
[02451] Etapa 2: Síntese de ácido 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-he- xil)(etil)amino)-2-metilbenzoico
[02452]
[02453] NaOH aquoso (0,73 g, 18,35 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzoato de etila (2,3 g, 9,1 mmols) em etanol (25mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 hora. O etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ajustado ao pH 4 usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o composto do título (2,0 g, 92 %).
[02454] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-he- xil)(etil)amino)-N-((1-(2-hidroxietil)-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2- metilbenzamida
[02455]
[02456] Ácido 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-me- tilbenzoico (1 eq) foi dissolvido em DMSO e 3-(aminometil)-1-(2-hidroxietil)-4,6-dime- tilpiridin-2(1H)-ona (2 eq) e trietilamina (1 eq) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (1,5 eq) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão, a mistura de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para obter um produto bruto que foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título (0,07 g, 20 %) como o sal de TFA. LCMS: 517,35 (M + 1)+; HPLC: 91,15 % (@ 254 nm) (Rt; 5,134; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-D2O Troca 400 MHz) δ 7,17 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,01 (s, 1H), 4,26 (m, 2H), 3,99 (s, 2H), 3,01 - 2,99 (m, 3H), 2,67(s, 3H + 3H), 2,35 (1 Próton ligado em solvente de pico), 2,33 (m, 2H + 2H), 2,19 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 1,94 - 1,81 (m, 5H) 1,40 (m, 4H), 0,77 (t, 3H).
[02457] Composto 306: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[02458]
[02459] Etapa 1: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila
[02460]
[02461] Ácido acético (3,28 g, 54,8 mmols) foi adicionado a uma solução agitada de 3-amino-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (2,0 g, 9,1 mmols) e (4- oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (2,52 g, 11,87 mmols) em dicloroetano (20 mL) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (5,80 g, 27,4 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura de reação foi agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso. A fase orgânica foi separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (2,8 g, 82 %).
[02462] Etapa 2: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-ciclo-he- xil)(etil)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila
[02463]
[02464] Ácido acético (0,85 g, 14,2 mmols) foi adicionado a uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-2-metil-5-(trifluoro- metil)benzoato de metila (0,9 g, 2,40 mmols) e acetaldeído (0,21 g, 4,80 mmols) em dicloroetano (10 mL) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,53 g, 7,21 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura de reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. A reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas, concentradas sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,8 g, 83 %).
[02465] Etapa 3: Síntese de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)carbamoil)-2-metil-5-(trifluorometil)fenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[02466]
[02467] Hidróxido de sódio aquoso (0,12 g, 2,97 mmols) foi adicionado a uma solução do composto 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)- 2-metil-5-(trifluorometil)benzoato de metila (0,80 g, 1,98 mmol) em etanol (8 mL) e a mistura foi agitada a 60 oC durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e depois ajustado ao pH 4 usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,7 g). O ácido (0,7 g, 1,8 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (10 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,54 g, 3,59 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (1,40 g, 2,69 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas para obter produto bruto que depois foi purificado por lavagem com ace- tonitrila para fornecer o composto do título (0,7 g, 74 %).
[02468] Etapa 4: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[02469]
[02470] A uma solução de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)carbamoil)-2-metil-5-(trifluorometil)fenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (0,7 g, 1,3 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionado TFA (3 mL) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão da reação, o solvente foi removido sob pressão reduzida e solução de NaHCO3 saturada foi adicionada. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %; as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura; secas em Na2SO4 anidro; filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,56 g, 98 %) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02471] Etapa 5: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[02472]
[02473] A uma solução de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida (0,5 g, 1,2 mmol) em DCM (5 mL) a 0 °C foi adicionada formalina (0,124 g, 4,13 mmols). A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 20 minutos. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,63 g, 2,95 mmols) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão, água foi adicionada e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida. O sólido bruto obtido foi lavado com ace- tonitrila e éter para fornecer o composto do título (0,4 g, 67 %). LCMS: 507,45 (M + 1)+; HPLC: 96,81 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 4,857; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 8,34 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,20 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,27 (d, 2H), 3,08 (m, 2H), 2,67 (m, 1H), 2,40 (s, 6H), 2,24 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,85 (m, 2H), 1,80 (m, 2H), 1,42 (m, 2H), 1,25 (m, 2H), 0,78 (t, 3H).
[02474] Composto 390: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-4-metilnicotinamida
[02475]
[02476] Etapa 1:Síntese de 5-amino-4-metilnicotinato de metila
[02477]
[02478] A uma solução agitada de ácido 5-amino-4-metilnicotínico (5,0 g, 32 mmols) em metanol (75 mL), foi adicionado H2SO4 conc. (5 mL) lentamente na temperatura ambiente. A mistura foi agitada a 70 °C durante 12 h. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi neutralizado com solução de NaHCO3 saturada. A extração foi realizada usando EtOAc; as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, salmoura e secas em Na2SO4 anidro e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (4,1 g, 75 %) que foi usado sem purificação adicional.
[02479] Etapa 2: Síntese de 5-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-4-metilnicotinato de metila
[02480]
[02481] A uma solução agitada de 5-amino-4-metilnicotinato de metila (1,20 g, 7,22 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (2,30 g, 10,8 mmols) em dicloroetano (20 mL), foi adicionado ácido acético (2,59 g, 43 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (4,59 g, 21,56 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida. O composto bruto foi purificado por cro- matografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (0,65 g, 25 %).
[02482] Etapa 3: Síntese de 5-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)-amino)-ciclo- hexil)-(etil)-amino)-4-metilnicotinato de metila
[02483]
[02484] A uma solução agitada de 5-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)amino)-4-metilnicotinato de metila (0,65 g, 1,79 mmol) e acetaldeído (0,39 g, 8,95 mmols) em dicloroetano (20 mL) foi adicionado ácido acético (0,64 g, 10,7 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triace- toxiboro-hidreto de sódio (1,13 g, 5,33 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,55 g, 79 %).
[02485] Etapa 4: Síntese de ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)carbamoil)-4-metilpiridin-3-il)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc- butila
[02486]
[02487] NaOH aquoso (0,11 g, 2,81 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)-amino)-ciclo-hexil)-(etil)-amino)-4-metilnicotinato de metila (0,55 g, 1,40 mmol) em etanol (7 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h.Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e a mistura acidificada usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,5 g). O ácido acima (0,5 g, 1,3 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (5 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiri- din-2(1H)-ona (0,48 g, 2,65 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (1,02 g, 1,58 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas a um resíduo que foi purificado por cromatografia em gel de sílica para fornecer o composto do título (0,5 g, 74 %).
[02488] Etapa 5: Síntese de 5-(((1r,r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6- dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-4-metilnicotinamida
[02489]
[02490] A uma solução agitada de ((1r,4r)-4-((5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-4-metilpiridin-3-il)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (0,5 g, 0,97 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionado TFA (2 mL). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h e o solvente foi removido sob pressão reduzida. Solução de NaHCO3 saturada foi adicionada ao resíduo e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura; secas em Na2SO4 anidro; filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,35 g, 88 %).
[02491] Etapa 6: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-5-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-4-metilnicotinamida
[02492]
[02493] 5-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-4-metilnicotinamida (0,35 g, 0,85 mmol) foi dissolvida em DCM (5 mL) e formalina (0,089 g, 2,96 mmols) foi adicionada a 0 °C. A mistura foi agitada durante 20 minutos, triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,45 g, 2,12 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão, a mistura foi diluída com água e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida. O sólido obtido foi purificado novamente através de lavagens com acetonitrila e éter para fornecer o composto do título (0,3 g, 80 %). LCMS: 440,45 (M + 1)+; HPLC: 73,44 % & 21,34 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 3,769 & 3,965); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (bs, 1H), 8,34 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,27 (d, 2H), 3,18 (m, 1H), 3,01 (m, 2H), 2,22 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,12 (s, 6H), 2,10 (s, 3H), 1,74 (m, 2H), 1,64 (m, 2H), 1,40 - 1,20 (m, 4H), 0,81 (t, 3H).
[02494] Composto 308: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-metóxi-2-metilbenzamida
[02495]
[02496] Etapa 1: Síntese de 5-metóxi-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[02497]
[02498] A uma solução agitada de ácido 5-hidróxi-2-metil-3-nitrobenzoico (1,50 g, 7,61 mmols) em DMF (15 mL) foi adicionado carbonato de sódio (3,23 g, 30,5 mmols) e iodeto de metila (1,88 mL, 30,5 mmols). A mistura de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Em conclusão, a mistura de reação foi diluída com água e a extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto (1,7 g) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02499] Etapa 2: Síntese de 3-amino-5-metóxi-2-metilbenzoato de metila
[02500]
[02501] A uma solução agitada de 5-metóxi-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (1,7 g, 7,6 mmols) em etanol (20 mL) foi adicionado cloreto de amônio (1,7 g, 32 mmols) dissolvido em água (20 mL) e pó de ferro (3,38 g, 60,44 mmols). A mistura foi aquecida a 80 °C durante 3 h, filtrada e o resíduo bem lavado com etanol quente. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi basificado com bicarbonato de sódio aquoso. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto (1,2 g) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02502] Etapa 3: Síntese 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-5-metóxi-2-metilbenzoato de metila
[02503]
[02504] A uma solução agitada de 3-amino-5-metóxi-2-metilbenzoato de me- tila (1,2 g, 6,15 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (1,70 g, 7,99 mmols) em dicloroetano (20 mL) foi adicionado ácido acético (2,21 g, 36,8 mmols). A reação foi agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Triacetoxiboro-hi- dreto de sódio (3,91 g, 18,4 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,35 g, 14 %).
[02505] Etapa 4: Síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)-(etil)amino)-5-metóxi-2-metilbenzoato de metila
[02506]
[02507] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)amino)-5-metóxi-2-metilbenzoato (0,35 g, 0,89 mmol) e acetaldeído (0,2 g, 4,46 mmols) em dicloroetano (5 mL) foi adicionado ácido acético (0,32 g, 5,35 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,57 g, 2,67 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,3 g, 80 %).
[02508] Etapa 5: Síntese de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)carbamoil)-5-metóxi-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[02509]
[02510] NaOH aquoso (0,06 g, 1,42 mmol) foi adicionado a uma solução de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)-(etil)amino)-5-metóxi-2-metilben- zoato de metila (0,3 g, 0,71 mmol) em etanol (4 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido bruto (0,25 g).
[02511] O ácido (0,25 g, 0,62 mmol) foi dissolvido em DMSO (3 mL) e 3- (amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,19 g, 1,23 mmol) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (0,48 g, 0,92 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada durante a noite. A reação foi resfriada vertendo em gelo, e a mistura foi extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,2 g, 60 %).
[02512] Etapa 6: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-metóxi-2-metilbenzamida
[02513]
[02514] A uma solução de ((1r,4r)-4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)carbamoil)-5-metóxi-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (0,2 g, 0,37 mmol) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (2 mL) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão da reação, o solvente foi removido sob pressão reduzida e solução de NaHCO3 saturada foi adicionada. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %; as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura; secas em Na2SO4 anidro; filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer composto Boc-desprote- gido (0,15 g).
[02515] O composto Boc desprotegido (0,15g, 0,34 mmol) foi dissolvido em DCM (2 mL) e formalina (0,035 g, 1,19 mmol) foi adicionada ao mesmo a 0 °C. A mistura de reação resultante foi agitada a 0 °C durante 10 minutos. Triacetoxiboro- hidreto de sódio (0,18 g, 0,85 mmol) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão da reação, água foi adicionada e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título como um sal de TFA (0,02 g, 12 %). LCMS: 469,80 (M + 1)+; HPLC: 96,80 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 3,802); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 9,42 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,58 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,26 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,72 (s, 3H), 3,09 (m, 3H), 2,69 (s, 3H), 2,68 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,10 (s, 6H), 1,95 (m, 2H), 1,87 (m, 2H), 1,41 (m, 4H), 0,801 (t, 3H).
[02516] Composto 309: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- ((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzamida
[02517]
[02518] Etapa 1: Síntese de 5-hidróxi-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[02519]
[02520] A uma solução agitada de ácido 5-hidróxi-2-metil-3-nitrobenzoico (3,50 g, 17,8 mmols) em metanol (40 mL) foi adicionado cloreto de tionila (3,9 mL, 53 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida em refluxo durante 3 h. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida. Bicarbonato de sódio aquoso foi adicionado, seguido por extração com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (3,0 g, 80 %).
[02521] Etapa 2: Síntese de 5-(2-hidroxietóxi)-2-metil-3-nitrobenzoato de me- tila
[02522]
[02523] A uma solução agitada de 5-hidróxi-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (1,5 g, 7,1 mmols) em ACN (15 mL), foram adicionados carbonato de césio (4,6 g, 14 mmols) e 2-bromoetanol (2,5 mL, 35 mmols). A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante a noite. Em conclusão, a mistura de reação foi diluída com água e a extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (1,35 g, 74 %).
[02524] Etapa 3: Síntese de 3-amino-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzoato de metila
[02525]
[02526] A uma solução agitada de 5-(2-hidroxietóxi)-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (1,5 g, 5,88 mmols) em etanol (20 mL), foram adicionados cloreto de amônio (1,5 g, 28 mmols) dissolvido em água (20 mL) e pó de ferro (1,3 g, 23 mmols). A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 3 h. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o resíduo bem lavado com etanol quente. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi basificado por bicarbonato de sódio aquoso. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto do título bruto (1,3 g) que foi usado diretamente.
[02527] Etapa 4: Síntese de 3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzoato de metila
[02528]
[02529] A uma solução agitada de 3-amino-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzoato de metila (1,3 g, 5,77 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (1,6 g, 7,5 mmols) em dicloroetano (20 mL) foi adicionado ácido acético (2,07 g, 34,66 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (3,7 g, 17 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (2,0 g, 82 %) como uma mistura de isômeros cis/trans que foi transitada como uma mistura através do composto final 309 que também foi isolado como uma mistura de isômeros cis/trans.
[02530] Etapa 5: Síntese de 3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)- (etil)amino)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzoato de metila
[02531]
[02532] A uma solução agitada de 3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzoato de metila (2,0 g, 4,7 mmols) e acetalde- ído (0,63 g, 14,2 mmols) em dicloroetano (20 mL) foi adicionado ácido acético (1,7 g, 28 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (3,0 g, 14,2 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica foi separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,9 g, 89 %).
[02533] Etapa 6: Síntese de (4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)carbamoil)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilfenil)-(etil)-amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[02534]
[02535] NaOH aquoso (0,25 g, 6,33 mmols) foi adicionado a uma solução de 3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)-(etil)amino)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metil- benzoato de metila (1,9 g, 4,2 mmols) em etanol (20 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido bruto correspondente (1,8 g).
[02536] O ácido (1,8 g, 4,1 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (15 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (1,25 g, 8,25 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (3,22 g, 6,19 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para forne- cer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,4 g, 59 %).
[02537] Etapa 7: Síntese de 3-((4-aminociclo-hexil)-(etil)-amino)-N-((4,6-dime- til-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzamida
[02538]
[02539] A uma solução de (4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)carbamoil)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilfenil)-(etil)-amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (0,80 g, 1,40 mmol) em DCM (5 mL) foi adicionado TFA (2 mL) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão da reação, o solvente foi removido sob pressão reduzida e solução de NaHCO3 saturada foi adicionada. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %; as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura; secas em Na2SO4 anidro; filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,5 g, 76 %).
[02540] Etapa 8: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzamida
[02541]
[02542] A uma solução de 3-((4-aminociclo-hexil)-(etil)-amino)-N-((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenzamida (0,30 g, 0,63 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionada formalina (0,07 g, 2,23 mmols) a 0 °C. A mistura de reação resultante foi agitada a 0 °C durante 20 minutos. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,34 g, 1,59 mmol) foi adicionado e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e água foi adicionada ao resíduo e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida. O sólido obtido foi novamente purificado através de lavagens com acetoni- trila e éter para fornecer o composto do título N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-3-((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(2-hidroxietóxi)-2-metilbenza- mida como uma mistura de isômeros cis/trans (0,25 g, 78 %). LCMS: 499,55 (M + 1)+; HPLC: 51,61 & 47,78 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 3,539 & 3,751); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (bs, 1H), 8,04 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,51 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H), 3,92 (t, 2H), 3,67 (t, 2H), 2,97 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,89 (s, 3H), 1,76 (m, 3H), 1,65 (bs, 1H), 1,33 (m, 3H), 1,10 (m, 1H), 0,788 (bs, 3H).
[02543] Composto 310: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- ((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)-(etil)-amino)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzamida
[02544]
[02545] Etapa 1: Síntese de 5-(2-metoxietóxi)-2-metil-3-nitrobenzoato de me- tila
[02546]
[02547] À solução agitada de 5-hidróxi-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (1,50 g, 7,61 mmols) em ACN (15 mL) foi adicionado carbonato de césio (4,96 g, 15,2 mmols) e 1-bromo-2-metoxietano (1,57 g, 11,4 mmols). A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante a noite. Em conclusão, a mistura de reação foi diluída com água e a extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,3 g, 68).
[02548] Etapa 2: Síntese de 3-amino-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzoato de metila
[02549]
[02550] À solução agitada de 5-(2-metoxietóxi)-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (1,35 g, 4,83 mmols) em etanol (20 mL) foram adicionados cloreto de amônio (1,35 g, 25,0 mmols) dissolvido em água (20 mL) e pó de ferro (1,07 g, 19,3 mmols). A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 3 h. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o resíduo bem lavado com etanol quente. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi basificado por bicarbonato de sódio aquoso. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto (1,23 g) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02551] Etapa 3: Síntese de 3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzoato de metila
[02552]
[02553] A uma solução agitada de 3-amino-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzoato de metila (1,23 g, 5,14 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (1,42 g, 6,69 mmols) em dicloroetano (15 mL) foi adicionado ácido acético (1,8 g, 31 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (3,2 g, 15 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,6 g, 72 %) como uma mistura de isômeros cis/trans que foi transitada através do composto final como uma mistura de isômero cis/trans.
[02554] Etapa 4: Síntese de 3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)- (etil)-amino)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzoato de metila
[02555]
[02556] A uma solução agitada de 3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzoato de metila (1,60 g, 3,67 mmols) e acetal- deído (0,48 g, 10,9 mmols) em dicloroetano (20 mL) foi adicionado ácido acético (1,3 g, 22 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (2,33 g, 11,0 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h. A reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida, o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,6 g, 94 %).
[02557] Etapa 5: Síntese de (4-((3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)carbamoil)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilfenil)-(etil)-amino)-ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[02558]
[02559] NaOH aquoso (0,2 g, 5,3 mmols) foi adicionado a uma solução de 3- ((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)-(etil)-amino)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilben- zoato de metila (1,6 g, 3,5 mmols) em etanol (20 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h.Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e o pH 4 foi ajustado usando ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram concentradas para fornecer o ácido bruto correspondente (1,4 g).
[02560] O ácido (1,4 g, 3,1 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (15 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,95 g, 6,2 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (2,4 g, 4,6 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cro- matografia em coluna para fornecer o composto do título (1,9 g, 95 %).
[02561] Etapa 5: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)-(etil)-amino)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzamida
[02562]
[02563] A uma solução de 3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)-(etil)- amino)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzoato de metila (1,2 g, 2,67 mmols) em DCM (10 mL) foi adicionado TFA (2 mL) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão da reação, o solvente foi removido sob pressão reduzida e solução de NaHCO3 saturada foi adicionada ao resíduo. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %; as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura; secas em Na2SO4 anidro; filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto Boc desprotegido (0,78 g).
[02564] O composto Boc desprotegido (0,30 g, 0,62 mmol) foi dissolvido em DCM (3 mL) e formalina (0,07 g, 2,33 mmols) foi adicionada a 0 °C. A mistura de reação resultante foi agitada a 0 °C durante 20 minutos. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,33 g, 1,56 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e água foi adicionada ao resíduo, a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-((4-(dimetila- mino)ciclo-hexil)-(etil)-amino)-5-(2-metoxietóxi)-2-metilbenzamida como uma mistura de isômeros cis/trans (0,02 g, 6,3 %). LCMS: 513,60 (M + 1)+; HPLC: 44,48 % & 50,77 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 3,879 & 4,316); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 6,68 (s, 1H), 6,52 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 4,03 (bs, 2H), 3,61 (bs, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,10 (m, 1H), 2,95 (m, 2H), 2,18 (s, 6H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 2,08 (s, 3H), 1,77 (m, 2H), 1,65 (bs, 2H), 1,33 (m, 3H), 1,15 (m, 1H), 0,78 (t, 3H, J = 4 Hz).
[02565] Composto 311: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)-(etil)-amino)-5-(etiltio)-2-metilbenzamida
[02566]
[02567] Etapa 1: Síntese de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico
[02568]
[02569] À solução agitada de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (50,0 g, 276 mmols) em H2SO4 conc. (200 mL) foi adicionada 1,3-dibromo-5,5-dimetil-2,4-imidazo- lidinodiona (43,4 g, 151,8 mmols) às porções na temperatura ambiente e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Em conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada, o precipitado resultante foi filtrado, lavado com água, e seco sob vácuo fornecendo o composto do título bruto desejado (71,7 g, 99,9 %) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02570] Etapa 2: Síntese de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[02571]
[02572] À solução agitada de ácido 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoico (285 g, 1104 mmols) em DMF (2,8L) foi adicionado carbonato de sódio (468 g, 4415 mmols) seguido por adição de iodeto de metila (626 g, 4415 mmols) na temperatura ambiente. A mistura de reação resultante foi aquecida a 60 °C durante 8 h. Depois da conclusão, a mistura de reação foi filtrada e lavada com acetato de etila. Os filtrados combinados foram lavados com água e a fase aquosa foi retro extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (290 g, 97 % de rendimento). O composto isolado foi tomado diretamente na etapa seguinte.
[02573] Etapa 3: síntese de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de metila
[02574]
[02575] À solução agitada de 5-bromo-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (290 g, 1060 mmols) em etanol (1,5L) foi adicionado cloreto de amônio aquoso (283 g, 5290 mmols dissolvidos em 1,5 L de água). A mistura resultante foi agitada e aquecida a 80 oC seguido por adição de pó de ferro (472 g, 8450 mmols) em porções a 80 oC. A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 12 h. Depois da conclusão, a mistura de reação foi filtrada a quente em celite e o leito de celite foi lavado com metanol (5 L) seguido por lavagens com MeOH a 30 % em DCM (5L). O filtrado combinado foi concentrado a vácuo, o resíduo obtido foi diluído com bicarbonato aquoso e extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título como sólido marrom (220 g, 89 % de rendimento).
[02576] Etapa 4: síntese de 5-bromo-3-(((1R,4R)-4-((terc-butoxicarbonil)- amino)-ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02577]
[02578] A uma solução agitada de 3-amino-5-bromo-2-metilbenzoato de me- tila (15,0 g, 617 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (17,1 g, 80,2 mmols) em dicloroetano (150 mL) foi adicionado ácido acético (22,2 g, 370 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (39,3 g, 185 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título 5-bromo-3-(((1r,4r)-4- ((terc-butoxicarbonil)-amino)-ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila (10,5 g, 39 %).
[02579] Etapa 5: síntese de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)- amino)-ciclo-hexil)-(etil)-amino)-2-metilbenzoato de metila
[02580]
[02581] A uma solução agitada de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)- amino)-ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato (10,0 g, 22,7 mmols) e acetaldeído (2,99 g, 68 mmols) em dicloroetano (100 mL) foi adicionado ácido acético (8,18 g, 136 mmols) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (14,5 g, 68,1 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida, o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (9,0 g, 84 %).
[02582] Etapa 6: síntese de ((1r,4r)-4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)-(etil)-amino)-ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[02583]
[02584] NaOH aquoso (1,15 g, 28,8 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-bromo-3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)-amino)-ciclo-hexil)-(etil)-amino)-2-metil- benzoato de metila (9,0 g, 19 mmols) em etanol (100 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ajustado ao pH 4 com ácido cítrico. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido bruto (8,6 g).
[02585] O ácido (8,6 g, 19 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (10 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (5,74 g, 37,8 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (14,7 g, 2845 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas para obter material bruto que foi purificado por lavagens com acetonitrila para fornecer o composto do título (10,2 g, 92 %).
[02586] Etapa 7: síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)-(etil)-amino)-5- bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02587]
[02588] A uma solução de ((1r,4r)-4-((5-bromo-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)-(etil)-amino)-ciclo-hexil)carbamato de terc- butila (3,0 g, 5,10 mmols) em DCM (20 mL) foi adicionado TFA (5 mL) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão da reação, o solvente foi removido sob pressão reduzida e solução de NaHCO3 saturada foi adicionada ao resíduo. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %; as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura; secas em Na2SO4 anidro; filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (2,2 g, 88 %) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02589] Etapa 8: síntese de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin- 3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)-(etil)-amino)-2-metilbenzamida
[02590]
[02591] A uma solução de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)-(etil)-amino)-5- bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (2,20 g, 4,50 mmols) em DCM (25 mL) foi adicionada formalina (0,49 g, 16,3 mmols) a 0 °C. A mistura de reação resultante foi agitada a 0 °C durante 20 minutos. Triacetoxiboro- hidreto de sódio (2,39 g, 11,2 mmols) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão, água foi adicionada e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (2,3 g, 98 %) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02592] Etapa 9: síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)- 3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)-(etil)-amino)-5-(etiltio)-2-metilbenzamida
[02593]
[02594] A uma solução agitada de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)-(etil)-amino)-2-metilbenza- mida (0,40 g, 0,77 mmol) em dioxano foi adicionado etanotiol (0,048 g, 0,77 mmol) e DIPEA (2,70 mL, 1,55 mmol) e a mistura de reação em seguida, purgada com argônio durante 10 min. Em seguida, Pd(OAc)2 (0,009 g, 0,038 mmol) e Xantphos (0,045 g, 0,077 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 100 °C durante a noite. Depois da conclusão da reação, água foi adicionada e a extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,17 g, 44 %). LCMS: 499,55 (M + 1)+; HPLC: 99,30 % (entre 210 a 370 nm) (Rt; 4,264); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 9,37 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,15 - 2,90 (m, 6H), 2,69 (s, 3H), 2,68 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,94 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 1,41 (m, 4H), 1,20 (t, 3H, J = 7,2), 0,78 (t, 3H, J = 6 Hz).
[02595] Composto 313: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil(4-hidroxiciclo-hexil)-amino)-2-metilbenzamida
[02596]
[02597] Etapa 1: síntese de 3-(1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8-ilamino)-5-cloro-2- metilbenzoato de metila
[02598]
[02599] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (5,0 g, 25 mmols) e 1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8-ona (5,86 g, 37,8 mmols) em dicloroe- tano (50 mL) foi adicionado ácido acético (9,0 g, 150 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hi- dreto de sódio (15,9 g, 752 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclo- rometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (6,6 g, 76 %).
[02600] Etapa 2: síntese de 5-cloro-3-(etil(1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8- il)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02601]
[02602] A uma solução agitada de 3-(1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8-ilamino)-5- cloro-2-metilbenzoato de metila (6,6 g, 19 mmols) e acetaldeído (2,56 g, 58,4 mmols) em dicloroetano (70 mL) foi adicionado ácido acético (7,0 g, 120 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triace- toxiboro-hidreto de sódio (12 g, 57 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatogra- fia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (4,0 g, 56 %).
[02603] Etapa 3: síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil(1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8-il)amino)-2-metilbenzamida
[02604]
[02605] NaOH aquoso (1,5 g, 38 mmols) foi adicionado a uma solução de 5- cloro-3-(etil(1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8-il)amino)-2-metilbenzoato de metila (6,9 g, 19 mmols) em etanol (70 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ajustado ao pH 4 com ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido bruto (6,5 g).
[02606] O ácido bruto (6,5 g, 18 mmols) foi dissolvido em DMSO (50 mL) e 3- (aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (5,6 g, 37 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (14,3 g, 27,5 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura de reação foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (5,9 g 66 %) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02607] Etapa 4: síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil(4-oxociclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02608]
[02609] A uma solução agitada de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-3-(etil(1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8-il)amino)-2-metilbenzamida (2,0 g, 4,1 mmols) em acetona: água (14 mL + 6 mL) foi adicionado PTSA (3,1 g, 16 mmols). A mistura de reação resultante foi agitada a 70 °C durante a noite. Em conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi basificado com bicarbonato de sódio aquoso. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (1,5 g, 83 %) que foi usado diretamente na etapa seguinte.
[02610] Etapa 5: síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil(4-hidroxiciclo-hexil)-amino)-2-metilbenzamida
[02611]
[02612] A uma solução agitada de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-3-(etil(4-oxociclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida (0,30 g, 0,68 mmol) em MeOH foi adicionado NaBH4 (0,038 g, 1,01 mmol) lentamente a 0 °C. A mistura de reação resultante foi agitada a 0 °C durante 2 h. Em conclusão, a reação foi resfriada com água e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida e o material bruto obtido foi purificado por acetonitrila e lavagens com éter para fornecer o composto do título como uma mistura de isômeros (175 mg, 58 %). LCMS: 446,35 (M + 1)+; HPLC: 74,32 % & 24,18 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 5,157 & 5,276); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,49 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,17 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,33 (m, 1H), 3,04 (m, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,78 (m, 2H), 1,66 (m, 2H), 1,38 (m, 3H), 1,10 (m, 2H), 0,78 (t, 3H).
[02613] Composto 315: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)benzamida
[02614]
[02615] Etapa 1: Síntese de 5-(3,6-di-hidro-2H-piran-4-il)-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida
[02616]
[02617] A uma solução agitada de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenza- mida (0,30 g, 0,58 mmol) e 2-(3,6-di-hidro-2H-piran-4-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxa- borolano (0,18 g, 0,88 mmol) em mistura de dioxano-água foi adicionado Na2CO3 (0,22 g, 2,07 mmols) . A solução foi purgada com argônio durante 15 min, Pd(PPh3)4 (0,067 g, 0,05 mmol) foi adicionado e a solução foi purgada novamente com argônio durante 10 min. A mistura de reação foi aquecida a 100 °C durante 3 horas. Em conclusão, a mistura de reação foi diluída com água e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,30 g, 98 %).
[02618] Etapa 2: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)benzamida
[02619]
[02620] A uma solução agitada de 5-(3,6-di-hidro-2H-piran-4-il)-N-((4,6-dime- til-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-he- xil)(etil)amino)-2-metilbenzamida (0,3 g, 0,576 mmol) em metanol, foi adicionado uma quantidade catalítica de 10 % de Pd/C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente sob hidrogênio pressão por balão durante 1 hora. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de um leito de celite, o celite lavado com metanol e o filtrado concentrado sob pressão reduzida, para fornecer um composto bruto que foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto alvo N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-3-(((1s,4s)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(te- tra-hidro-2H-piran-4-il)benzamida como o sal de TFA (0,08 g, 26 %).
[02621] LCMS: 523,60 (M + 1)+; HPLC: 48,41+51,05 % (@ 210nm a 370 nm) (Rt; 3,93 & 3,99); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min,Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (bs, 1H), 8,39 (t, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,07(s,1H), 6,86 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,26 (d, 2H, J = 2,8Hz), 3,94 - 3,92 (m, 2H), 3,41 (m, 2H), 3,09 - 2,89 (m, 3H), 2,69 (s, 3H + 3H), 2,19 (s, 3H + 3H), 2,11 (s, 3H), 1,99 - 1,86 (m, 5H), 1,64 (m, 4H), 1,42 (m, 3H), 1,25 (m, 2H), 0,79 (t, 3H).
[02622] Composto 319: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(etilsulfonil)-2-metilbenzamida
[02623]
[02624] Etapa 1: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(etiltio)-2-metilbenzamida
[02625] A uma solução agitada de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida (0,4 g, 0,77 mmol) em dioxano foi adicionado etanotiol (0,048 g, 0,77 mmol) e DIPEA (2,7 mL, 1,55 mmol) . A solução foi purgada com argônio durante 10 min, Pd(OAc)2 (0,009 g, 0,038 mmol) e Xantphos (0,045 g, 0,077 mmol) foram adicionados a mesma e argônio foi purgado novamente durante 10 min. A mistura de reação foi agitada a 100 °C durante a noite, água foi adicionada e a extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,17 g, 44 %). LCMS: 499,55 (M + 1)+; HPLC: 99,30 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 4,264); Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 9,37 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,25 (d, 2H,J = 4 Hz), 3,15 - 2,90 (m, 6H), 2,69 (s, 3H), 2,68 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,94 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 1,41 (m, 4H), 1,20 (t, 3H, J = 7,2), 0,78 (t, 3H, J = 6 Hz).
[02626] Etapa 2: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(etilsulfonil)-2-metilbenzamida
[02627]
[02628] A uma solução agitada de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(etiltio)-2-metilbenzamida (0,085 g, 0,17 mmol) em metanol foi adicionada oxona (0,105g, 0,34 mmol) na temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 4 h, água foi adicionada e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título como o sal de TFA (0,07 g, 77 %). LCMS: 531,60 (M + 1)+; HPLC: 89,24 % (@ 210nm a 370 nm) (Rt; 4,082; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (s, 1H), 9,36 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,09 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,29 - 4,28 (d, 2H, J = 4,8Hz), 3,0 - 3,20 (m, 4H), 2,60 - 2,80 (m, 8H), 2,27 (s, 9H), 2,20 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,90 - 2,0 (m, 2H), 1,80 - 1,90 (m, 2H), 1,40 - 1,50(m, 4H), 1,05 - 1,15 (t, 3H, J = 7,6Hz), 0,75 - 0,85 (t, 3H, J = 6,8Hz).
[02629] Composto 320: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-isopropil-2-metilbenzamida
[02630]
[02631] Etapa 1: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(prop-1-en-2-il)benza-mida
[02632]
[02633] A uma solução agitada de 5-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metilbenzamida (0,30 g, 0,58 mmol) e 4,4,5,5-tetrametil-2-(prop-1-en-2-il)-1,3,2-dioxaborolano (0,147 g, 0,875 mmol) em mistura de dioxano/água foi adicionado Na2CO3 (0,22 g, 2,07 mmols) e a solução purgada com argônio durante 15 min. Em seguida, Pd(PPh3)4 (0,067 g, 0,058 mmol) foi adicionado e argônio foi purgado novamente durante 10 min. A mistura de reação foi aquecida a 100 °C durante 2 horas, diluída com água e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (0,20 g, 71 %).
[02634] Etapa 2: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(((1r,4r)- 4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-isopropil-2-metilbenzamida
[02635]
[02636] A uma solução agitada de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-(prop-1-en-2- il)benzamida (0,20 g, 0,41 mmol) em metanol foi adicionado uma quantidade catalítica de 10 % de Pd/C. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente sob pressão de hidrogênio (pressão por balão) durante 2 h. A mistura foi filtrada através de um leito de celite, lavada com metanol e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O composto bruto resultante foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título como o sal de TFA (0,07 g, 35 %). LCMS: 481,40 (M + 1)+; HPLC: 97,01 % (@ 210 nm a 370 nm) (Rt; 3,996; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO- d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 9,37 (bs, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 5,86 (s, 1H), 4,26 - 4,25 (d, 2H, J = 4,0Hz), 3,0 - 3,25 (m, 3H), 2,70 - 2,8 (m, 1H), 2,60 - 2,75 (m, 6H), 2,19 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,90 - 2,0 (m, 2H), 1,80 - 1,90 (m, 2H), 1,35 - 1,50 (m, 4H), 1,16 - 1,20 (d, 6H, J = 6,8Hz), 0,75 - 0,85 (t, 3H).
[02637] Composto 321: 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)-(etil)- amino)-N-((4-etil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02638]
[02639] Etapa 1: síntese de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[02640]
[02641] À solução agitada de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (126 g, 0,59 mol) em DMF (1,0 L) foi adicionado carbonato de sódio (249 g, 2,34 mols) e iodeto de metila (145 mL, 2,34 mols). A mistura de reação foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada e o resíduo lavado com DCM. A fase aquosa foi separada e extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coluna em sílica eluindo com acetato de etila: hexano para fornecer o composto do título (85 g, 63 %), RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz): δ 8,25 (d, 1H), 8,05 (s, 1H), 3,9 (s, 1H), 2,4 (s, 1H).
[02642] Etapa 2: síntese de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02643]
[02644] À solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (85 g, 0,37 mol) em etanol (425 mL) foram adicionados cloreto de amônio (85 g, 112 mmols) dissolvido em água (425 mL) e pó de ferro (169 g, 2,96 mols) com agitação. A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 16 h, filtrada e o resíduo bem lavado com etanol quente. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi basificado com bicarbonato de sódio aquoso. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto (70 g) que foi usado diretamente. RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz): δ 6,8 (s, 2H), 5,45 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 2,15 (s, 3H)
[02645] Etapa 3: síntese de 3-(((1r, 4r)-4-((terc-butóxi-carbonil)amino)ciclo- hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02646]
[02647] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (12 g, 60 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (15,4 g, 72 mmols) em dicloroetano (120 mL) foi adicionado ácido acético (21 g, 360 mmols) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triace- toxiboro-hidreto de sódio (38,2 g, 180 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante 2 h na temperatura ambiente. Em conclusão, água foi adicionada à mistura de reação e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato, secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que depois foi purificado em coluna para fornecer composto do título isômero trans 3-(((1r, 4rs)-4-((terc-butoxicarbo- nil)amino)ciclo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (8,0 g, 33 %).
[02648] Etapa 4: síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-ciclo-he- xil)-(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02649]
[02650] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (11,4 g, 28,8 mmols) e acetaldeído (2,5 g, 56 mmols) em dicloroetano (120 mL) foi adicionado ácido acético (10,7 g, 169 mmols) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (17,95 g, 84,6 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante 2 h na temperatura ambiente. Em conclusão, água foi adicionada à mistura de reação e a extração foi realizada usando DCM. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução de bicarbonato, secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que depois foi purificado em coluna para fornecer o composto do título (9,8 g, 80 %).
[02651] Etapa 5: síntese de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)-ciclo-hexil)- (etil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02652]
[02653] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (9,8 g, 23 mmols) em DCM (50 mL) a 0 oC foi adicionado TFA (10 mL) e a mistura de reação foi agitada durante 2 h na temperatura ambiente. Depois da conclusão, a reação foi concentrada à secura. O resíduo depois foi basificado com solução de bicarbonato sat. aquosa (100 mL) ao pH 8 e a camada aquosa extraída com metanol a 20 % em DCM (100 mL x 4). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e o solvente removido sob pres- são reduzida para fornecer amina bruta (7,4 g) que foi usada para a reação seguinte.
[02654] A uma solução agitada da amina (7,4 g, 23 mmols) em DCM (70 mL) a 0 oC, foi adicionada solução de formalina aq. entre 37 a 41 % (2,4 g, 81 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 10 min. NaBH(OAc)3 (12,1 g, 57 mmols) depois foi adicionado e a reação agitada durante 2 h. Em conclusão, a mistura de reação foi resfriada com água. MeOH (8 mL) foi adicionado e as camadas foram separadas. A extração foi realizada com MeOH a 10 % em DCM e as fases orgânicas combinadas foram secos e concentradas. O resíduo foi purificado em coluna em alumina básica para fornecer o composto do título (8,0 g, 99 %).
[02655] Etapa 6: síntese de ácido 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-he-xil)-(etil)-amino)-2-metil-benzoico
[02656]
[02657] NaOH aquoso (1,8 g, 45 mmols em 7 mL de H2O) foi adicionado a uma solução do composto 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)-ciclo-hexil)- (etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (8,0 g, 23 mmols) em etanol (70 mL) e agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ajustado ao pH 4 com ácido cítrico. A extração foi realizada usando MeOH a 10 % em DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas para forne- cer o composto do título (7,6 g, 99 %).
[02658] Etapa 7: síntese de 3-(aminometil)-4-etil-6-metilpiridin-2(1H)-ona
[02659]
[02660] A uma solução de 4-etil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino-3-carboni- trila (1 eq) em metanol e solução de amônia aq. (9:1) foi adicionado uma quantidade catalítica de Níquel Raney. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente sob pressão de hidrogênio (pressão por balão) durante 2 a 5 h. Na conclusão da reação, a mesma foi filtrada através de um leito de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título.
[02661] Etapa 8: síntese de 5-cloro-3-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)- (etil)-amino)-N-((4-etil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02662]
[02663] O ácido acima, ácido 5-cloro-3-(((trans)-4-(dimetilamino)ciclo-hexil)- (etil)-amino)-2-metil-benzoico, (1 eq) foi dissolvido em DMSO e 3-(aminometil)-4-etil- 6-metilpiridin-2(1H)-ona (2 eq.) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (1,5 eq.) e trietilamina (1 eq.) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada durante a noite. A mistura de reação depois foi vertida em gelo, e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas, e concentradas para obter o produto que foi purificado por cro- matografia em coluna seguido por HPLC prep. para fornecer o composto do título como um sal de TFA (0,1 g, 70 %). LCMS: 487,45 (M + 1)+; HPLC: 96,17 % (@ 254 nm) (Rt; 6,026; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min,Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 9,33 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,88 (s, 1H), 4,20 - 4,25 (d, 2H), 3,0 - 3,15 (m, 1H + 2H), 2,60 - 2,75 (m, 1H + 3H + 3H), 2,35 - 2,45 (m, 2H), 2,20 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,90 - 2,0 (m, 2H), 1,80 - 1,90 (m, 2H), 1,35 - 1,50 (m, 4H), 1,10 - 1,20 (t, 3H, J = 7,2 Hz), 0,75 - 0,85 (t, 3H).
[02664] Composto 335: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)tio)-2-metilbenzamida
[02665]
[02666] Etapa 1: Síntese de 3-bromo-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02667]
[02668] À solução agitada de CuBr2 (12,3 g, 55,3 mmols) em acetonitrila (150 mL), nitrito de terc-butila (7,77 g, 75,4 mmols) foi adicionado a 0 °C e depois 3-amino- 5-cloro-2-metilbenzoato de metila (10,0 g, 50,3 mmols) dissolvido em acetonitrila foi adicionada à mesma. A mistura de reação resultante foi agitada a 0 °C durante 2 horas e depois na temperatura ambiente durante 18 h. Em conclusão, a mistura de reação foi diluída com água e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combina- das foram secas, concentradas sob pressão reduzida e purificadas por cromatografia em coluna em gel de sílica fornecendo o composto do título (6,6 g, 50 %).
[02669] Etapa 2: Síntese de 3-bromo-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hi- dropiridin-3-il)-metil)-2-metilbenzamida
[02670]
[02671] NaOH aquoso (0,45g, 11,4 mmols) foi adicionado a uma solução de 3-bromo-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (2,0 g, 7,6 mmols) em EtOH (20 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo acidificado usando HCl diluído até o pH 8 e depois com ácido cítrico até o pH 6. A fase aquosa foi extraída com metanol a 10 % em DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o respectivo ácido intermediário bruto (1,5 g).
[02672] O ácido (1,5 g, 6,2 mmols) foi dissolvido em DMSO (15 mL) e 3-(amino metil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (1,67 g, 12,43 mmols) e trietilamina (0,61 g, 6,01 mmols) foram adicionadas. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PyBop (4,81 g, 9,26 mmols) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite na temperatura ambiente. Depois da conclusão, a mistura de reação foi vertida em água gelada. O sólido colocado em suspensão foi coletado por filtração, lavado bem com água e seco. O sólido obtido foi novamente purificado através de lavagens com acetonitrila para fornecer o composto do título (2,18 g, 92 %).
[02673] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-2-metil-3-((4-oxociclo-hexil)tio)benzamida
[02674]
[02675] Uma solução de 3-bromo-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropi- ridin-3-il)-metil)-2-metilbenzamida (0,35g, 0,91 mmol), 4-mercaptociclo-hexanona (0,142 g, 1,09 mmol) e DIPEA (0,235 g, 1,82 mmol) em dioxano foi purgada com ar- gônio durante 10 min. Em seguida, Pd(OAc)2 (0,01 g, 0,044 mmol) e Xantphos (0,052 g, 0,089 mmol) foram adicionados e argônio foi purgado novamente durante 10 min. A mistura de reação foi agitada a 100 °C durante a noite. Depois da conclusão da reação, água foi adicionada e a extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,50 g, 88 %).
[02676] Etapa 4: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)tio)-2-metilbenzamida
[02677]
[02678] A uma solução agitada de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)metil)-2-metil-3-((4-oxociclo-hexil)tio)benzamida (0,45 g, 1,03 mmol) e di- metilamina (0,14 g, 3,11 mmols) em dicloroetano (5 mL) foi adicionado ácido acético (0,37g, 6,16 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,66 g, 3,11 mmols) foi adicionado a 0 °C e a mistura agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão da reação, o solvente foi removido sob pressão reduzida. Água foi adicionada ao resíduo e a extração foi realizada usando MeOH/DCM a 5 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,016 g, 3,3 %). Dados Analíticos: LCMS: 462,35 (M + 1)+; HPLC: 89,00 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 4,949; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 7,44 (s, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,44 (s, 2H), 3,63 (m, 1H), 3,13 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,36 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,75 - 2,08 (m, 8H).
[02679] Composto 336: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-((4-hidroxiciclo-hexil)tio)-2-metilbenzamida
[02680]
[02681] Este composto também foi isolado como um produto adicional a partir da purificação do composto 335 (0,235 g, 50 %) Dados Analíticos de: LCMS: 435,30 (M + 1)+; HPLC: 99,37 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 5,900; Método: Coluna: YMC ODS- A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (bs, 1H), 8,31 (t, 1H), 7,72 - 7,68 (m, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,58 (d, 1H, J = 4 Hz), 4,24 (d, 2H, J = 4 Hz), 4,13 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,95 - 1,80 (m, 1H), 1,75 - 1,55 (m, 1H), 1,40 - 1,20 (m, 4H), 0,87 (m, 2H).
[02682] Composto 339: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (etil(4-hidróxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02683]
[02684] Etapa 1: síntese de 2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[02685]
[02686] A uma solução de ácido 2-metil-3-nitrobenzoico (10,0 g, 55,0 mmols) em 120 ml de metanol, foi adicionado H2SO4 conc. (15 ml) na temperatura ambiente e a mistura agitada a 60 °C durante a noite. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, o material bruto foi neutralizado com NaHCO3 sat., e extraído com acetato de etila. A fase orgânica foi seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (10 g).
[02687] Etapa 2: síntese de 3-amino-2-metilbenzoato de metila
[02688]
[02689] A uma solução agitada de 2-metil-3-nitrobenzoato de metila (10,0 g, 56,4 mmols) em 60 ml de etanol foram adicionados cloreto de amônio (18,0 g, 338 mmols) dissolvido em 60 ml de água e pó de ferro (18,8 g, 338,2 mmols). A mistura de reação resultante foi aquecida a 80 °C durante 3 h. Água foi adicionada à mistura de reação e depois esta foi filtrada através de celite. O filtrado foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (7,0 g, 83 %).
[02690] Etapa 3: síntese de 3-((4-hidróxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metilben- zoato de metila
[02691]
[02692] A uma solução agitada de 3-amino-2-metilbenzoato de metila (1,5 g, 9,1 mmols) e 4-hidróxi-4-metilciclo-hexanona (1,51 ml, 11,8 mmols) em 10 ml de di- cloroetano foi adicionado ácido acético (3,2 mL, 55 mmols) e a mistura de reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura de reação foi esfriada a 0 °C e triacetoxiboro-hidreto de sódio (5,78 g, 27,3 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat., extraída com DCM, seca em Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida, e purificada por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título que foi transitado como uma mistura de isômeros cis e trans (1,4 g, 56 %).
[02693] Etapa 4: síntese de 3-(etil(4-hidróxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2- metilbenzoato de metila
[02694]
[02695] A uma solução agitada de 3-((4-hidróxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2- metilbenzoato de metila (1,4 g, 5,05 mmols) e acetaldeído (0,7 ml, 13 mmols) em 20 ml de dicloroetano foi adicionado ácido acético (1,7 mL, 30 mmols) e a mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. A mistura de reação foi esfriada a 0 °C e triacetoxiboro-hidreto de sódio (3,2 g, 15 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi neutralizada com NaHCO3 sat. e extraída com DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas sob pressão reduzida, e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (1,42 g, 94 %).
[02696] Etapa 5: síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)- 3-(etil(4-hidróxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02697]
[02698] Uma mistura de 3-(etil(4-hidróxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metilben- zoato de metila (300 mg, 0,98 mmol) e NaOH (58 mg, 1,47 mmol) em 5 ml de etanol e água (3:2) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada à secura e o resíduo foi particionado entre água e acetato de etila. A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 270 mg do ácido bruto. O ácido bruto (270 g, 0,92 mmol), 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)- ona (282 mg, 1,85 mmol), PyBOP (717 mg, 1,38 mmol) e trietilamina (0,12 ml, 0,92 mmol) foram agitados em 3 ml de DMSO na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água e extraída com MeOH a 10 % em DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas e o resíduo purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil(4-hidróxi-4-metilciclo- hexil)amino)-2-metilbenzamida como uma mistura de isômeros (120 mg, 30 %). LCMS: 426,45 (M + 1)+; HPLC: 62,09 & 33,24 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 3,982 & 4,164; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,44 (s, 1H), 8,04 (m, 1H), 7,12 (s, 2H), 6,91 (m, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 4 Hz), 4,15 (m, 1H), 3,00 (m, 2H), 2,84 (m, 1H), 2,18 (s, 6H), 2,10 (s, 3H), 1,75 - 1,60 (m, 2H), 1,55 - 1,35 (m, 4H), 1,35 - 1,15 (m, 4H), 1,08 & 1,03 (s, 3H), 0,87 & 0,77 (t, 3H).
[02699] Composto 340: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- (etil(4-metóxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02700]
[02701] Etapa 1: síntese de 3-(etil(4-metóxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metil- benzoato de metila
[02702]
[02703] A uma solução esfriada de 3-(etil(4-hidróxi-4-metilciclo-hexil)amino)- 2-metilbenzoato de metila (300 mg, 0,98 mmol) em THF (5 ml), foi adicionado hidreto de sódio (235 mg, 5,89 mmols) às porções, seguido por iodeto de metila (0,61 ml, 9,8 mmols). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h, esfriada a 0 °C, resfriada com água gelada e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para for- necer 300 mg do composto do título bruto.
[02704] Etapa 2: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-(etil(4-metóxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02705]
[02706] Uma mistura de 3-(etil(4-metóxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metilben- zoato (300 mg, 0,94 mmol) e NaOH (56 mg, 1,41 mmol) em 5 ml de etanol e água (4:1) foi aquecida a 70 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada à secura e o material bruto foi particionado entre água e acetato de etila. A camada orgânica foi seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 280 mg do ácido bruto. Uma mistura de ácido bruto (280 mg, 0,91 mmol), 3-(aminometil)-4,6-di- metilpiridin-2(1H)-ona (279 mg, 1,83 mmol), PyBOP (716 mg, 1,37 mmol) e trietilamina (0,12 ml, 0,91 mmol) em DMSO (3 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água, extraída com MeOH a 10 % em DCM, seca em Na2SO4, e concentrada a um resíduo que foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil(4-metóxi-4-metilciclo-hexil)amino)-2-metilbenza- mida como uma mistura de isômeros (70 mg, 17 %). LCMS: 440,45 (M + 1)+; HPLC: 45,77 & 48,47 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 4,297 & 4,430; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,03 (bs, 1H), 7,15 (bs, 2H), 6,91 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 2,8 Hz), 3,10 - 2,90 (m, 7H), 2,19 (s, 6H), 2,10 (s, 3H), 1,72 - 1,10 (m, 8H), 1,08 & 0,99 (s, 3H), 0,77 (t, 3H).
[02707] Composto 344: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1s,4s)-4-metoxiciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02708]
[02709] Etapa 1: Síntese de 5-cloro-3-(((1s,4s)-4-metoxiciclo-hexil)amino)-2- metilbenzoato de metila
[02710]
[02711] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 5,0 mmols) e 4-metoxiciclo-hexanona (1,28 g, 10,0 mmols) em dicloroetano (10 mL) foi adicionado ácido acético (1,8 g, 30 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (3,2 g, 15 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica e o composto do título isômero cis foi isolado como o produto isômero menos polar (0,60 g, 38 %). O isômero trans também pode ser transitado para produzir o produto final trans correspondente, composto 343.
[02712] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-(etil((1s,4s)-4-metoxiciclo-hexil)amino)- 2-metilbenzoato de metila
[02713]
[02714] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(((1s,4s)-4-metoxiciclo-he- xil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,60 g, 1,92 mmol) e acetaldeído (0,25 g, 5,78 mmols) em dicloroetano (10 mL), foi adicionado ácido acético (0,69g, 11,6 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 10 minutos. Em seguida, triacetoxi- boro-hidreto de sódio (1,22 g, 5,78 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada durante a noite na temperatura ambiente. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida e o produto bruto purificado por croma- tografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (0,60 g, 92 %).
[02715] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1s,4s)-4-metoxiciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02716]
[02717] NaOH aquoso (0,07 g, 1,76 mmol) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(etil((1r,4r)-4-metoxiciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila (0,4 g, 1,17 mmol) em etanol (5 mL) e a mistura foi agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ajustado usando ao pH 4 ácido cítrico. A extração foi realizada usando acetato de etila e as camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo bruto (0,35 g).
[02718] O acima ácido bruto (0,35g, 1,1 mmol) foi dissolvido em DMSO (4 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,33g, 2,14 mmols) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (0,84 g, 1,61 mmol) foi adicionado e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a mistura foi vertida em gelo e extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio anidro e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (0,55 g, 79 %). LCMS: 460,30 (M + 1)+; HPLC: 97,37 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 5,026; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,44 (bs, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,93 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,25 (d, 2H, J = 3,2 Hz), 3,27 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 2,99 (q, 2H), 2,79 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,77 (m, 2H), 1,60 (m, 2H), 1,45 (m, 2H), 1,33 (m, 2H), 0,78 (t, 3H, J = 6 Hz).
[02719] Composto 349: N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3- ((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-((1-metilazetidin-3-il)óxi)benzamida
[02720]
[02721] Etapa 1: Síntese de 5-hidróxi-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[02722]
[02723] A uma solução agitada de ácido 5-hidróxi-2-metil-3-nitrobenzoico (3,50 g, 17,8 mmols) em metanol (40 mL), foi adicionado cloreto de tionila (3,9 mL, 53 mmols) a 0 °C. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 3 horas e concentrada sob pressão reduzida. Bicarbonato de sódio aquoso foi adicionado ao resíduo que foi extraído com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (3,0 g, 80 %).
[02724] Etapa 2: Síntese de 3-(3-(metoxicarbonil)-4-metil-5-nitrofenóxi)azeti- dino-1-carboxilato de terc-butila
[02725]
[02726] À solução agitada de 5-hidróxi-2-metil-3-nitrobenzoato (1,5 g, 7,1 mmols) em ACN (15 mL) foram adicionados carbonato de césio (4,64 g, 14,2 mmols) e 3-iodoazetidino-1-carboxilato de terc-butila (3,0 g, 11 mmols). A mistura resultante foi aquecida a 80 °C durante a noite. Em conclusão, a mistura de reação foi diluída com água e a extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (1,2 g, 46 %).
[02727] Etapa 3: Síntese de 3-(3-amino-5-(metoxicarbonil)-4-metilfenóxi)aze- tidino-1-carboxilato de terc-butila
[02728]
[02729] À solução agitada de 3-(3-(metoxicarbonil)-4-metil-5-nitrofenóxi)azeti- dino-1-carboxilato de terc-butila (1,0 g, 2,7 mmols) em metanol (10 mL) foi adicionada uma quantidade catalítica de 10 % de Pd/C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogênio (pressão por balão) durante 3 horas. Em conclusão, a mistura de reação foi filtrada através de um leito de celite que foi adicionalmente lavado com metanol. Os filtrados combinados foram concentrados sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,90 g, 98 %).
[02730] Etapa 4: Síntese de 3-(3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)amino)-5-(metoxicarbonil)-4-metilfenóxi)azetidino-1-carboxilato de terc-butila
[02731]
[02732] A uma solução agitada de 3-(3-amino-5-(metoxicarbonil)-4-metilfe- nóxi)azetidino-1-carboxilato de terc-butila (0,90 g, 2,67 mmols) e (4-oxociclo-hexil)car- bamato de terc-butila (0,741 g, 3,47 mmols) em dicloroetano (10 mL) foi adicionado ácido acético (0,96 g, 16,1 mmols) e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,7 g, 8,0 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida e o material bruto purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,9 g, 63 %) como uma mistura de isômeros cis/trans.
[02733] Etapa 5: Síntese de 3-(3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo- hexil)(etil)amino)-5-(metoxicarbonil)-4-metilfenóxi)azetidino-1-carboxilato de terc-bu-tila
[02734]
[02735] A uma solução agitada de 3-(3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo- hexil)amino)-5-(metoxicarbonil)-4-metilfenóxi)azetidino-1-carboxilato de terc-butila (0,90 g, 1,69 mmol) e acetaldeído (0,22 g, 5,06 mmols) em dicloroetano (10 mL), foi adicionado ácido acético (0,61 g, 10 mmols) e a reação agitada na temperatura ambiente durante 20 minutos. Em seguida, triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,07 g, 5,05 mmols) foi adicionado a 0 °C e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h. Em conclusão, a reação foi resfriada com bicarbonato de sódio aquoso, a fase orgânica separada e a fase aquosa extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas e concentradas sob pressão reduzida fornecendo o composto do título que foi usado sem purificação adicional (0,85 g).
[02736] Etapa 6: Síntese de 3-(3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil)(etil)amino)-5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-4-metilfe-nóxi)azetidino-1-carboxilato de terc-butila
[02737]
[02738] NaOH aquoso (0,12 g, 3,03 mmols) foi adicionado a uma solução de 3-(3-((4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(metoxicarbonil)-4-metil- fenóxi)azetidino-1-carboxilato de terc-butila (0,85 g, 1,52 mmol) em etanol (10 mL) e a mistura agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e acidificado usando HCl diluído até o pH 6 e ajustado usando ácido cítrico ao pH 4. A extração foi realizada usando acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o ácido respectivo (0,75 g).
[02739] O ácido acima (0,75 g, 1,37 mmol) depois foi dissolvido em DMSO (7 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,42 g, 2,74 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min, PYBOP (1,06 g, 2,05 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão, a mistura de reação foi vertida em gelo, extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,80 g, 85 %).
[02740] Etapa 7: Síntese de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-3-((4-(dimetilamino)ciclo-hexil)(etil)amino)-2-metil-5-((1-metilazetidin-3-il)óxi)ben- zamida
[02741]
[02742] A uma solução esfriada agitada de 3-(3-((4-((terc-butoxicarbo- nil)amino)ciclo-hexil)(etil)amino)-5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)carbamoil)-4-metilfenóxi)azetidino-1-carboxilato de terc-butila (0,80 g, 1,17 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionado TFA (2 mL). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 1 h, concentrada sob pressão reduzida e solução de NaHCO3 saturada foi adicionada ao resíduo. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 % e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água e salmoura e secas em Na2SO4 anidro. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto intermediário Boc desprotegido (0,5 g).
[02743] O intermediário acima (0,5 g, 1,0 mmol) foi dissolvido em MeOH (3 mL) e formalina (0,16 g, 5,33 mmols) foi adicionada a 0 °C. A mistura foi agitada a mesma temperatura durante 20 minutos. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,55 g, 2,59 mmols) foi adicionado e a mistura agitada na temperatura ambiente durante 1 h. Depois da conclusão, o solvente foi removido sob pressão reduzida e água adicionada ao resíduo. A extração foi realizada usando MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer o composto do título (0,03 g, 5,5 %).
[02744] LCMS: 524,55 (M + 1)+; HPLC: 37,93+61,46 % (@ 210 a 370 nm) (Rt; 3,462 e 3,810; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min,Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (bs, 1H), 8,05 (bs, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,36 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,69 (bs, 1H), 4,24 (bs, 2H), 3,67 (m, 2H), 3,08 - 2,92 (m, 4H), 2,33 - 2,11 (m, 20H), 1,73 - 1,65 (m, 4H), 1,35 - 1,29 (m, 4H), 0,77 (t, 3H).
[02745] Composto 119: 3-(((1s,4s)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02746]
[02747] Etapa 1: síntese de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico
[02748]
[02749] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-2-metilbenzoico (4,0 g, 24 mmols) em H2SO4 concentrado (27 mL) a -10 °C foi adicionada uma solução de ni- tração compreendida de HNO3 concentrado (3,3 g, 53 mmols) dissolvido em H2SO4 concentrado (4,4 mL). A mistura resultante foi agitada a -10 °C durante 3 h e vertida em água gelada. O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água e seco sob vácuo para fornecer o composto do título (4,95 g, 99 %).
[02750] Etapa 2: síntese de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila
[02751]
[02752] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoico (6,75 g, 31,3 mmols) em DMF (33 mL), foram adicionados carbonato de sódio (13,2 g, 125 mmols) e iodeto de metila (17,8 g, 125 mmols). A mistura foi aquecida a 60 °C durante 4 h. Água foi adicionada à mistura de reação seguido por extração com diclorometano. Os extratos orgânicos combinados foram secos em sulfato de sódio, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (6,0 g, 84 %).
[02753] Etapa 3: síntese de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02754]
[02755] À solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-nitrobenzoato de metila (6,0 g, 26 mmols) em etanol (60 mL), foram adicionados uma solução de cloreto de amônio (6,0 g, 112 mmols) em água (60 mL) e pó de ferro (11,9 g, 208 mmols). A mistura foi aquecida a 80 °C durante 1 h. Água foi adicionada e a mistura resultante foi filtrada através de celite seguido por extração com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água, secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto (5,0 g).
[02756] Etapa 4: síntese de 3-(((1s,4s)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil) amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02757]
[02758] A uma solução agitada de 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato (5,0 g, 25 mmols) e (4-oxociclo-hexil)carbamato de terc-butila (6,95 g, 32,7 mmols) em dicloroe- tano (25 mL), foi adicionado ácido acético (9,0 g, 150 mmols) na temperatura ambiente. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (15,97 g, 75,4 mmols) foi adicionado e a reação agitada 1 h na temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer 5,2 g (52 %) do primeiro composto do título do produto isômero cis eluindo 3- (((1s,4s)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-hexil) amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila e 3,5 g (35 %) do produto isômero trans mais polar 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxi- carbonil)amino)ciclo-hexil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila.
[02759] Etapa 5: síntese de 3-(((1s,4s)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil) (etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02760]
[02761] A uma solução agitada de 3-(((1s,4s)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil) amino)-5-cloro-2-metilbenzoato (5,20 g, 13,1 mmols) e acetaldeído (1,15 g, 26,3 mmols) em dicloroetano (15 mL), foi adicionado ácido acético (4,72 g, 78,8 mmols) na temperatura ambiente. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (8,35 g, 39,4 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 1 h. Água foi adicionada, a mistura foi extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (5,3 g, 99 %).
[02762] Etapa 6: síntese de ((1s, 4s)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc- butila
[02763]
[02764] A uma solução agitada de 3-(((1s,4s)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)- ciclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato (5,20 g, 12,2 mmols) em etanol (15 mL) foi adicionada uma solução aquosa de NaOH (0,73 g, 18,4 mmols). A mistura foi agitada a 60 oC durante 1 h, concentrada sob pressão reduzida e depois acidificada ao pH 4 através da adição de HCl diluído seguido por ácido cítrico. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila e os extratos combinados foram secos e concentrados sob pressão reduzida para fornecer o ácido bruto correspondente (4,4 g). A uma solução agitada do ácido (4,4 g, 10,7 mmols), 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)- ona (3,25 g, 21,4 mmols) e trietilamina (1,08 g, 10,70 mmols) em DMSO (15 mL) foi adicionado PYBOP (8,34 g, 16,05 mmols) a 0 °C. Depois da agitação durante a noite na temperatura ambiente, a mistura foi vertida em gelo e extraída com MeOH/CH2Cl2 a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para obter o material bruto que foi purificado por cro- matografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (4,20 g, 72 %). LCMS: 548,40 (M + 1)+; HPLC: 98,62 % (@ 254 nm) (Rt; 5,736; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,20 (t, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,91 (m, 2H), 5,85 (s, 1H), 4,22 (d, 2H), 3,47 (bs, 1H), 3,00 - 3,02 (m, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,71 (m, 2H), 1,53 (m, 2H), 1,39 (m, 4H), 1,37 (s, 9H), 0,78 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[02765] Etapa 7: síntese de 3-(((1s,4s)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro- N-((4,6-dimetil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02766]
[02767] A uma solução agitada de ((1s, 4s)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)-(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (0,60 g, 1,10 mmol) em CH2Cl2 (10 mL) foi adicionado ácido trifluoro acético (2 mL) a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h e concentrada à secura. O resíduo foi dissolvido em bicarbonato de sódio aquoso seguido por extração com MeOH/CH2Cl2 a 20 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi triturado para fornecer o composto do título (0,5 g, 100 %). LCMS: 445,30 (M + 1)+; HPLC: 99,3 % (@ 254 nm) (Rt; 4,524; Método: Coluna: YMC ODS- A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8,21 (t, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,91 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 2,99 - 3,04 (m, 2H), 2,82 - 2,85 (m, 2H),2,18 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,75 - 1,77 (m, 2H), 1,36 - 1,39 (m, 6H), 0,79 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[02768] Composto 121: 3-(((1s,4s)-4-acetamidociclo-hexil)(etil)amino)-5- cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il) metil)-2-metilbenzamida
[02769]
[02770] A uma solução agitada de 3-(((1s,4s)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)- 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,30g, 0,68 mmol) e EDCI.HCl (0,194 g, 1,01 mmol) em DMF (5 mL) foram adicionados HOBt (0,091 g, 0,675 mmol) e ácido acético (0,081 g, 1,35 mmol) na temperatura ambiente. Depois da agitação durante 18 h água foi adicionada e a mistura foi extraída com MeOH/CH2Cl2 a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas a um resíduo que foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (0,10 g, 30 %). LCMS: 487,30 (M + 1)+; HPLC: 91,72 % (@ 254 nm) (Rt; 4,585; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8,22 (t, 1H), 7,75 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 7,15 (s, 1H), 6,93 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 3,69 (bs, 1H), 3,01 - 3,03 (m, 2H), 2,94 (m,1H), 2,18 (s, 6H), 2,10 (s, 3H), 1,80 (s, 3H), 1,69 - 1,71 (m, 2H), 1,37 - 1,51 (m, 6H), 0,79 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[02771] Composto 120: 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-N- ((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02772]
[02773] Etapa 1: síntese de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ciclo-he- xil) (etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02774]
[02775] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil) amino)-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (3,5 g, 8,8 mmols) preparado conforme descrito acima e acetaldeído (0,77 g, 17,7 mmols) em dicloroetano (15 mL), foi adicionado ácido acético (3,17 g, 53 mmols) na temperatura ambiente. Depois da agitação durante 10 minutos, triacetoxiboro-hidreto de sódio (5,61 g, 26,5 mmols) foi adicionado e a reação foi agitada durante 1 h na temperatura ambiente. Água foi adicionada e a mistura foi extraída com diclorometano. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o material bruto que foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (3,5 g, 93 %).
[02776] Etapa 2: síntese de ((1r, 4r)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila
[02777]
[02778] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-((terc-butoxicarbonil)amino)ci- clo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-2-metilbenzoato (3,50 g, 8,23 mmols) em etanol (15 mL) foi adicionado uma solução aquosa de NaOH (0,49 g, 12,4 mmols). A mistura foi agitada a 60 oC durante 1 h, concentrada sob pressão reduzida e acidificada ao pH 4 através da adição de HCl diluído seguido por solução de ácido cítrico. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila, e as camadas orgânicas combinadas foram secas sob pressão reduzida para fornecer o ácido bruto correspondente (3,2 g). A uma solução agitada do ácido (3,2 g, 7,8 mmols), 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin- 2(1H)-ona (2,36 g, 15,6 mmols) e trietilamina (0,79 g, 7,8 mmols) em DMSO (15 mL) foi adicionado PYBOP (6,07 g, 11,7 mmols) a 0 °C. Depois da agitação durante a noite na temperatura ambiente, a mistura foi vertida em gelo e extraída com MeOH/CH2Cl2 a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para obter material bruto que foi purificado por cro- matografia em coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (3,0 g, 70 %). Dados Analíticos: LCMS: 545,25 (M + 1)+; HPLC: 99,92 % (@ 254 nm) (Rt; 5,677; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,46 (s, 1H), 8,23 (t, 1H), 7,14 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 6,65 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,14 (bs, 1H), 3,00 - 3,02 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,67 - 1,76 (m, 4H), 1,40 (m, 2H), 1,35 (m, 9H), 1,04 - 1,13 (m, 2H), 0,77 (t, 3H, J = 6 Hz).
[02779] Etapa 3: síntese de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro- N-((4,6-dimetil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02780]
[02781] A uma solução agitada de ((1r, 4r)-4-((5-cloro-3-(((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)(etil)amino)ciclo-hexil)carbamato de terc-butila (0,6 g, 1,10 mmol) em diclorometano (2 mL) foi adicionado TFA (2 mL) a 0 °C. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 2 h e concentrada à secura. O resíduo foi dissolvido em bicarbonato de sódio aquoso e extraído com MeOH/CH2Cl2 a 20 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna em sílica para fornecer o composto do título (0,40 g, 81 %). LCMS: 445,18 (M + 1)+; HPLC: 98,13 % (@ 254 nm) (Rt; 4,096; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 8,22 (t, 1H), 7,13 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,23 (d, 2H, J = 4 Hz), 3,00 - 3,01 (m, 2H), 2,59 (m,1H), 2,18 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,73 - 1,76 (m, 2H), 1,65 - 1,68 (m, 2H), 1,36 - 1,39 (m, 2H), 0,97 - 1,00 (m, 2H), 0,77 (t, 3H, J = 6 Hz). [1H ligado em solvente de pico].
[02782] Composto 122: 3-(((1r,4r)-4-acetamidociclo-hexil)(etil)amino)-5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1, 2-di-hidropiridin-3-il) metil)-2-metilbenzamida
[02783]
[02784] A uma solução agitada de 3-(((1r,4r)-4-aminociclo-hexil)(etil)amino)- 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,30 g, 0,68 mmol) e EDCI.HCl (0,19 g, 1,0 mmol) em DMF (5 mL) foram adicionados HOBt (0,09 g, 0,68 mmol) e ácido acético (0,081 g, 1,35 mmol) na temperatura ambiente. Depois da agitação durante 18 h, água foi adicionada e a mistura foi extraída com MeOH/DCM a 10 %. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas fornecendo o material bruto que depois foi purificado por cromatografia em coluna em sílica para fornecer o composto do título (0,10 g, 30 %). LCMS: 487,25 (M + 1)+; HPLC: 92,95 % (@ 254 nm) (Rt; 4,445; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,45 (s, 1H), 8,21 (t, 1H), 7,64 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,14 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,41 - 3,43 (m, 1H), 3,01 - 3,03 (m, 2H), 2,61 (m,1H), 2,18 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,10 (s, 3H), 1,74 (t, 7H, J = 18 Hz), 1,40 - 1,43 (m, 2H), 1,07 - 1,12 (m, 2H), 0,77 (t, 3H, J = 6,8 Hz).
[02785] Composto 207: 5-cloro-3-(ciclo-hexiltio)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02786]
[02787] Etapa 1: Síntese de 3-bromo-5-cloro-2-metilbenzoato de metila
[02788] A uma solução agitada de CuBr2 (12,3 g, 55,3 mmols) em acetonitrile (100 mL), nitrito t-butila (7,79 g, 75,4 mmols) foi adicionado a 0 oC. A esta solução, 3- amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (10 g, 50,3 mmols) em acetonitrila (50 mL) foi adicionado e agitado a 0 oC durante 2 h na temperatura ambiente durante a noite. Em conclusão, água adicionada e o produto extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi lavada com solução de NH4Cl aq. e seca em sulfato de sódio, em seguida, concentrada sob pressão reduzida. Purificação em coluna em gel de sílica fornecendo o composto do título (6,6 g, 50 %).
[02789] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-3-(ciclo-hexiltio)-2-metilbenzoato de me- tila
[02790] A uma solução agitada de 3-bromo-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 3,79 mmols) em 1,4-dioxano foi adicionado N,N-di-isopropil etilamina (0,98 g, 7,59 mmols). A mistura de reação foi purgada com argônio durante 20 min. Em seguida, Pd(OAc)2 (0,042 g, 0,189 mmol), Xanthphos (0,22 g, 0,38 mmol) e ciclo-hexiltiol (0,44 g, 3,79 mmols) foram adicionados à mesma sequencialmente e novamente purgados com argônio durante 10 min. A mistura de reação depois foi submetida ao refluxo durante 16 h. Em conclusão, água foi adicionada, e o produto extraído com acetato de etila. A camada orgânica foi seca em sulfato de sódio e o produto foi purificado por coluna em gel de sílica para fornecer o composto do título (1,0 g, 83 %)
[02791] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-3-(ciclo-hexiltio)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02792] NaOH aquoso (0,2 g em 2,5 mL de H2O, 5,02 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-cloro-3-(ciclo-hexiltio)-2-metilbenzoato de metila (1,0 g, 3,35 mmols) em etanol (10 mL) e a solução foi agitada a 60 oC durante 1 h. Depois da conclusão da reação, etanol foi removido sob pressão reduzida e a camada aquosa foi acidificada usando HCl diluído ao pH 6 e depois ácido cítrico ao pH 4. O produto foi extraído usando metanol a 10 % em DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas e concentradas para fornecer o ácido respectivo (0,91 g, 95 %).
[02793] O ácido acima (0,91g, 3,2 mmols) depois foi dissolvido em DMSO (2 mL) e 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (0,974g, 6,41 mmols) e trietil amina (0,65g, 3,2 mmols) foi adicionada à mesma. A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 15 min antes de PyBOP (2,5g, 4,8 mmols) foi adicionado à mesma e a agitação foi continuada durante a noite. Depois da conclusão da reação, a solução foi vertida em gelo e o produto foi extraído com MeOH a 10 % em DCM. As camadas orgânicas combinadas foram secas, concentradas para obter produto bruto. Purificação através de lavagens com solvente, forneceu o composto do título (1,3 g, 93 %).
[02794] Dados Analíticos: LCMS: 419,2 (M + 1)+; HPLC: 98,38 % (@ 254 nm) (Rt; 7,989; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,47 (bs, 1H), 8,32 (t, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 5,85 (s, 1H), 4,24 - 4,25 (d, 1H, J = 4Hz), 2,21 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,88 - 1,91 (m, 2H), 1,56 - 1,69 (m, 3H), 1,25 - 1,38 (m, 5H), 2 prótons ligados em solvente de pico.
[02795] Composto 208: 5-cloro-3-(ciclo-hexilsulfinil)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2- di-hidro-piridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02796]
[02797] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclo-hexiltio)-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,2g, 0,48 mmol) em DCM (7 mL) a 0 oC, m-CPBA (0,098 g, 0,57 mmol) foi adicionado e agitado a 0 oC durante 2 h. A reação foi monitorada por TLC. Depois da conclusão, a mistura de reação foi diluída com DCM e lavada com NaHCO3 aq. O produto foi purificado por lavagens com solvente para fornecer o composto do título (0,17 g, 82,3 %).
[02798] Dados Analíticos: LCMS: 435,1 (M + 1)+; HPLC: 92,68 % (@ 220 nm) (Rt; 5,996; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (CDCl3, 400 MHz) δ 11,44 (bs, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,45 (t, 1H), 7,39 (s, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,52 (bs, 2H), 2,53 - 2,59 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,85 - 1,93 (m, 3H), 1,65 (m, 2H), 1,20 - 1,29 (m, 3H).
[02799] Composto 209: 5-cloro-3-(ciclo-hexilsulfonil)-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidro-piridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02800]
[02801] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(ciclo-hexiltio)-N-((4,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida (0,1 g, 0,238 mmol) em DCM (4 mL) a 0 oC, m-CPBA (0,082 g, 0,48 mmol) foi adicionado e agitado na temperatura ambiente durante 2 h. A reação foi monitorada por TLC. Depois da conclusão, a mistura de reação foi diluída com DCM e lavada com NaHCO3 aq. O produto foi purificado por HPLC prep. para fornecer o composto do título (0,075 g, 23 %).
[02802] Dados Analíticos: LCMS: 451,1 (M + 1)+; HPLC: 83,44 % (@ 254 nm) (Rt; 6,547; Método: Coluna: YMC ODS-A 150 mm x 4,6 mm x 5 μ; Fase Móvel: A; TFA a 0,05 % em água/B; TFA a 0,05 % em acetonitrila; Vol de Inj.: 10 μL, Temp. de Col.: 30 oC; Taxa de Fluxo: 1,4 mL/min.; Gradiente: B a 5 % a B a 95 % em 8 min, Manter durante 1,5 min, 9,51 a 12 min B a 5 %); RMN de 1H (CDCl3, 400 MHz) δ 11,44 (bs, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,45 (t, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,51 (d, 2H, J = 4Hz), 2,94 - 3,00 (m, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,88 - 1,95 (m, 4H), 1,70 (m, 1H), 1,52 - 1,55 (m, 2H), 1,21 (m, 3H).
[02803] Composto 416: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1s,4s)-4-(metilsulfonil)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02804]
[02805] Etapa 1: Síntese de 4-metanossulfonilciclo-hexan-1-ona
[02806]
[02807] Uma solução contendo (buta-1,3-dien-2-ilóxi)(trimetil)silano (12,5 ml, 70,7 mmols) em tolueno (50 ml), foi tratada com (metilsulfonil)eteno (4,1 ml, 47,1 mmols) e aquecido sob refluxo durante 76 horas. Em seguida, a mistura de reação foi esfriada até a temperatura ambiente e concentrada a vácuo para fornecer um óleo amarelo. O óleo foi dissolvido em CH2Cl2 (120 ml) e filtrado através de Celite®. O filtrado foi concentrado a vácuo e o resíduo resultante depois foi dissolvido em MeOH (8 ml) com esfriamento (gelo/água). Esta depois foi tratada com TFA (2,0 ml). A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante um adicional de 10 minutos e depois na temperatura ambiente durante 25 horas. A mistura de reação foi concentrada a vácuo e o resíduo foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (MeOH/CH2Cl2 a 0 a 10 %) 100 g de cartucho SNAP no Biotage Isolera para fornecer o composto do título 1,2 g (14 %) como um óleo amarelo espesso. LC-MS 94 %, 0,39 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 177,0 (ELS visível apenas). RMN de 1H (500 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 3,24 - 3,32 (m, 1H) 2,94 (s, 3H) 2,62 - 2,70 (m, 2H) 2,50 - 2,56 (m, 2H) 2,38 - 2,45 (m, 2H) 2,07 - 2,18 (m, 2H).
[02808] Etapa 2: Síntese de 5-cloro-2-metil-3-(((1s,4s)-4-(metilsulfonil)ciclo- hexil)amino)benzoato de metila
[02809]
[02810] A uma solução agitada de 4-metanosulfonilciclo-hexan-1-ona (94 %, 0,56 g, 3,0 mmols) em 1,2-dicloroetano (10 ml) sob um balão de nitrogênio, foi adicio- nado 3-amino-5-cloro-2-metilbenzoato de metila (0,60 g, 3,0 mmols), seguido por ácido acético (1,0 ml, 18,0 mmols). A solução foi agitada durante 50 minutos antes da adição às porções de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,9 g, 9,0 mmols) durante 4 horas. A suspensão resultante foi agitada durante a noite antes da adição de 4-metano- sulfonilciclo-hexan-1-ona (0,28 g, 1,5 mmol) em 1,2-dicloroetano (1,5 ml) e triacetoxi- boro-hidreto de sódio (0,96 g, 4,5 mmols) durante 2,5 horas. A mistura de reação foi agitada durante um adicional de 67 horas antes da adição de água desionizada (40 ml) à mistura de reação e neutralização (pH 8) pela adição gradual de NaHCO3 sólido (4,8 g). A mistura foi extraída com CH2Cl2 (3 x 25 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (40 ml), secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo foi pré-absorvido em sílica e purificado por cromatografia instantânea em coluna (0 a 55 % de acetato de etila/heptanos) 100 g de cartucho SNAP no Biotage Isolera para fornecer o composto do título (131 mg, 12 %). LC-MS 96 %, 2,09 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 359,85, 360,85, 361,90, 362,85; RMN de 1H (500 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,12 (br. s., 1H) 6,68 (br. s., 1H) 3,89 (s, 3H) 3,82 (br. s., 1H) 3,71 (br. s., 1H) 2,93 - 3,02 (m, 1H) 2,89 (s, 3H) 2,29 (s, 3H) 2,03 - 2,18 (m, 4H) 1,91 - 2,02 (m, 2H) 1,71 - 1,83 (m, 2H).
[02811] O outro isômero 5-cloro-2-metil-3-(((1r,4r)-4-(metilsulfonil)ciclo- hexil)amino)benzoato de metila também foi isolado
[02812]
[02813] (92 mg, 8 %), LC-MS 96 %, 2,06 min (método LC-MS de 3,5 minutos), m/z = 359,85, 360,90, 361,90, 362,85; RMN de 1H (500 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,11 (br. s, 1H) 6,68 (br. s., 1H) 3,89 (s, 3H) 3,62 (br. s., 1H) 3,27 - 3,36 (m, 1H) 2,84 - 2,95 (m, 4H) 2,32 - 2,42 (m, 4H) 2,24 (br. s., 3H) 1,72 - 1,85 (m, 2H) 1,27 - 1,35 (m, 2H).
[02814] As designações de cis e trans a partir de experimentos de RMN adicionais podem não ser feitas e a designação é arbitrária.
[02815] Etapa 3: Síntese de 5-cloro-3-(etil((1s,4s)-4-(metilsulfonil)ciclo-he- xil)amino)-2-metilbenzoato de metila
[02816]
[02817] A uma solução agitada de 5-cloro-2-metil-3-(((1s,4s)-4-(metilsulfo- nil)ciclo-hexil)amino)benzoato de metila (246 mg, 0,68 mmol) em seco 1,2-dicloroe- tano (6,0 ml), foi adicionado acetaldeído (115 μl, 2,1 mmols), seguido por ácido acético (235 μl, 4,1 mmols). A reação foi agitada durante 35 minutos antes de triacetoxiboro- hidreto de sódio (435 mg, 2,1 mmols) foi adicionado em porções durante 50 minutos e a reação foi agitada durante a noite e depois tratada com acetaldeído (115 μl, 2,1 mmols). A mistura de reação foi agitada durante 1 hora antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (435 mg, 2,1 mmols) em porções durante 1 hora e a mistura de reação agitada durante a noite. Acetaldeído (229 μl, 4,1 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante 2,5 horas, seguido por adição de triacetoxiboro-hi- dreto de sódio (869 mg, 4,1 mmols) em porções durante 1,5 hora e a agitação foi continuada durante a noite. Acetaldeído (229 μl, 4,1 mmols) foi adicionado junto com 1,2-dicloroetano (4,0 ml) para auxiliar na solução e a reação agitada durante 4 horas. Triacetoxiboro-hidreto de sódio (869 mg, 4,1 mmols) foi adicionado em porções durante 2 horas e a agitação foi continuada no fim de semana. Acetaldeído (229 μl, 4,1 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante 1,5 horas, seguido por adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (869 mg, 4,1 mmols) em porções iguais durante 1 hora, junto com 1,2-dicloroetano (5,0 ml) e a agitação foi continuada durante a noite. Ace- taldeído (382 μl, 6,8 mmols) foi adicionado e a reação agitada durante 2,5 horas, seguido por adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,4 g, 6,8 mmols) em porções iguais durante 4 horas, junto com 1,2-dicloroetano (10 ml) e a agitação foi continuada durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água (40 ml) e neutralizada (ao pH 8) pelo adição gradual de NaHCO3 sólido (5,79 g). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 25 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml), secas (MgSO4), filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo bruto foi pré-absorvido em sílica e purificado por cromatografia em coluna (0 a 50 % de EtOAc/Heptanos) 10 g de cartucho SNAP no Biotage Isolera para fornecer o composto do título (140 mg, 51 %) como um sólido vítreo incolor. LC-MS 97 %, 2,29 min (método LC-MS de 3 minutos), m/z = 387,95, 388,95, 389,90, 390,95. RMN de 1H (500 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,59 (d, J = 1,89 Hz, 1H) 7,21 (d, J = 1,89 Hz, 1H) 3,91 (s, 3H) 3,45 (br. s., 1H) 3,01 (m, 2H) 2,86 - 2,95 (m, 1H) 2,82 (s, 3H) 2,52 (s, 3H) 2,08 (br. s., 2H) 1,94 (br. s., 2H) 1,86 (br. s., 2H) 1,46 - 1,54 (m, 2H) 0,89 (t, J = 7,01 Hz, 3H).
[02818] Etapa 4: Síntese de ácido 5-cloro-3-(etil((1s,4s)-4-(metilsulfonil)ciclo- hexil)amino)-2-metilbenzoico
[02819]
[02820] A uma solução agitada de 5-cloro-3-(etil((1s,4s)-4-(metilsulfonil)ciclo- hexil)amino)-2-metilbenzoato de metila (140 mg, 0,36 mmol) em THF (5,0 ml) e MeOH (0,3 ml), foi adicionada uma solução de NaOH 4 M (2,7 ml). A solução resultante foi agitada a 50 °C durante 21 horas e depois tratada com NaOH 4 M (0,9 ml, 3,6 mmols) e o aquecimento foi continuado durante um adicional de 4 horas. Em seguida, a mistura de reação foi deixada atingir a temperatura ambiente e depois concentrada a vácuo. O resíduo aquoso resultante foi extraído com CH2Cl2 (20 ml) e éter (20 ml). O pH da fase aquosa depois foi ajustado a 3 ao 4 pela adição de HCl 1 M (aq) (13 ml) e extraído com acetato de etila (3 x 25 ml). Os extratos de acetato de etila combinados foram secos em MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo para fornecer o composto do título (122 mg, 80 % de rendimento) como um sólido amarelo claro. LC-MS 89 %, 4,03 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 373,95, 374,90, 375,95, 377,00. RMN de 1H (500 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,77 (d, J = 1,89 Hz, 1H) 3,47 (br. s., 1H) 3,03 (br. s., 2H) 2,88 - 2,97 (m, 1H) 2,84 (s, 3H) 2,60 (s, 3H) 2,12 (br. s, 2H) 1,96 (br. s, 2H) 1,88 (br. s., 2H) 1,55 (br. s., 2H) 0,91 (t, J = 7,01 Hz, 3H). 1 x ArH considerado estar sob o pico de CDCl3 e o pico de CO2H também não visível.
[02821] Etapa 5: Síntese de 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1s,4s)-4-(metilsulfonil)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02822]
[02823] Uma solução agitada de ácido 5-cloro-3-(etil((1s,4s)-4-(metilsulfo- nil)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzoico (90 %, 122 mg, 0,29 mmol) em DMF anidra (2,0 ml) a 0 °C sob um balão de N2, foi tratada com HATU (134 mg, 0,35 mmol) e DIPEA (102 μl, 0,59 mmol) às gotas. A solução resultante foi agitada durante 10 minutos e depois tratada com 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (89 %, 60 mg, 0,35 mmol). A suspensão resultante foi agitada a 0 °C durante 15 minutos e depois agitada na temperatura ambiente no fim de semana. A mistura de reação foi particionada entre água (10 ml) e CH2Cl2 (10 ml). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com CH2Cl2 (3 x 15 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com uma solução saturada de NaHCO3 (aq) (10 ml), água (40 ml), salmoura (2 x 25 ml), secos (MgSO4), filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia instantânea em coluna (MeOH/CH2Cl2 a 0 a 9 %) 10 g de cartucho SNAP no Biotage Isolera para fornecer o composto do título (120 mg, 76 % de rendi-mento) como um sólido branco amarelado. LC-MS: 95 %, 3,71 min (método LC-MS de 7 minutos), m/z = 508,10, 509,10, 510,10, 511,10. RMN de 1H (500 MHz, Clorofór- mio-d) δ 10,84 (s, 1H), 7,07 (s, 2H), 7,00 (m, 1H), 6,10 (s, 1H), 4,53 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 3,45 (s, 1H), 3,07 - 2,95 (m, 2H), 2,93 - 2,85 (m, 1H), 2,81 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,14 - 2,01 (m, 2H), 1,97 - 1,89 (m, 2H), 1,87 - 1,80 (m, 2H), 1,50 (br s, 2H), 0,88 (t, J = 5,9 Hz, 3H).
[02824] Composto 417: 5-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3-(etil((1r,4r)-4-(metilsulfonil)ciclo-hexil)amino)-2-metilbenzamida
[02825] Este composto foi preparado em um maneira análoga àquela do com posto 416 usando o outro isômero obtido na etapa 2
[02826]
[02827] Composto 392: N-[(4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3- [etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[02828]
[02829] A uma solução agitada de ácido 3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2- metil-5-(trifluorometil)benzoico (material bruto, 580 mg, 1,68 mmol) e sal de HCl de 3- (aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (477 mg, 2,53 mmols) em DMSO (6 mL) foi adicionado PyBOP (1,57 g, 3,02 mmols) e base de Hunig (650 mg, 5,04 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 20 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e o precipitado resultante foi coletado. O sólido foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 acetato de etila/MeOH = 25/1) para fornecer o composto do título como um amorfo branco (386 mg, 48 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,31 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,18 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 5,95 (s, 1H), 4,55 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,17 (dq, J = 6,4, 3,3 Hz, 2H), 3,08 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,81 (m, 2H), 2,70 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,78 - 1,93 (m, 2H), 1,70 (m, 2H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS(ES) [M + H] 479,2, [M + Na] 501,3; HPLC 96,8 % de pureza.
[02830] Composto 393: 3-[Etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-N-[(6-metil- 2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-5-(trifluorometil)benzamida
[02831]
[02832] A uma solução agitada de ácido 3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2- metil-5-(trifluorometil)benzoico (material bruto, 680 mg, 1,97 mmol) e sal de HCl de 3- (aminometil)-6-metil-4-propil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (642 mg, 2,96 mmols) em DMSO (7 mL) foi adicionado PyBOP (1,85 g, 3,55 mmols) e base de Hunig (764 mg, 5,91 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 20 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e o precipitado resultante foi coletado. O sólido foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 acetato de etila/MeOH = 20/1) para fornecer o composto do título como um sólido branco (224 mg, 22 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,31 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,16 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,55 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,08 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,82 (m, 2H), 2,66 - 2,73 (m, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,24 (s x 2, 6H), 1,79 - 1,98 (m, 2H), 1,67 - 1,75 (m, 4H), 1,59 - 1,66 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) [M - H] 505,2; HPLC 98,1 % de pureza.
[02833] Composto 394: 3-[Etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-N-{[6-metil- 2-oxo-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridin-3-il]metil}-5-(trifluorometil)benzamida
[02834]
[02835] A uma solução agitada de ácido 3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2- metil-5-(trifluorometil)benzoico (material bruto, ~0,313 mmols) e sal de HCl de 3-(ami- nometil)-6-metil-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridin-2-ona (88,0 mg, 0,407 mmol) em DMSO (2,4 mL) foi adicionado PyBOP (244 mg, 0,470 mmol) e base de Hunig (164 ul, 0,939 mmol). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e diluída com acetato de etila. A camada aquosa foi extraída com diclorometano. A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 acetato de etila/MeOH = 20/1 + 5 % de trietilamina). O composto bruto foi dissolvido com DMSO, diluído com água. O sólido precipitado foi coletado e triturado com acetato de etila/TBME/hexano para fornecer o composto do título como um sólido branco (80,0 mg, 51 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,31 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,03 - 7,10 (m, 1H), 6,04 (s, 1H), 4,59 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,49 - 3,55 (m, 1H), 3,09 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,81 - 2,84 (m, 2H), 2,70 - 2,78 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,86 - 1,89 (m, 2H), 1,68 - 1,71 (m, 4H), 1,22 (d, J = 6,4 Hz, 6H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 507,2, [M + Na] 529,2; HPLC 97,7 % de pureza.
[02836] Composto 395: 3-[Etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-N-{[6-metil- 2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-3-il]metil}-5-(trifluorometil)benzamida
[02837]
[02838] A uma solução agitada de ácido 3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2- metil-5-(trifluorometil)benzoico (material bruto, ~0,313 mmol) e sal de HCl de cloridreto de 3-(aminometil)-6-metil-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-2-ona (100 mg, 0,91mmol) em DMSO (2,4 mL) foi adicionado PyBOP (248 mg, 1,05 mmol) e base de Hunig (166 ul, 2,10 mmols). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e o precipitado resultante foi coletado. O sólido foi triturado a partir de acetato de etila/hexano. O sólido resultante foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 acetato de etila/MeOH = 10/1 + 10 % de trietilamina). O composto bruto foi triturado a partir de acetato de etila/hexano, e seco para fornecer o composto do título como um sólido branco (75,0 mg, 44 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,32 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 6,86 - 6,89 (m, 1H), 6,34 (s, 1H), 4,73 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,08 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,80 - 2,85 (m, 2H), 2,70 - 2,78 (m, 1H), 2,37 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,85 - 1,89 (m, 2H), 1,69 - 1,72 (m, 4H), 0,84 (t, J = 7,2 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 533,1, [M + Na] 555,2; HPLC 95,8 % de pureza.
[02839] Composto 395: diformiato de 3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)-2-me- til-N-((6-metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-(trifluorometil)ben-zamida
[02840]
[02841] RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,39 (s, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 6,36 (s, 1H), 4,52 (s, 2H), 3,38 (br, 2H), 3,18 (br, m, 1H), 3,11 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,96 (br, m, 2H), 2,77 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 1,97 (br, d, J = 12,0 Hz, 2H), 1,83 (br, m, 2H), 0,84 (t, J = 7,2 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) = 533,53.
[02842] Seguindo a mesma preparação do método acima de 3-[Etil(1-metilpi- peridin-4-il)amino]-2-metil-N-{[6-metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-3- il]metil}-5-(trifluorometil)benzamida, os análogos seguintes foram preparados usando o ácido carboxílico correspondente e amina, e purificado por HPLC em fase reversa (ACN-H2O contendo ácido fórmico a 0,1 %).
[02843] Composto 396: formiato de 3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)-N-((5- fluoro-6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluorometil)ben-benzamida
[02844]
[02845] RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,31 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,39 (br, 2H), 3,17 (br, 1H), 3,10 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,97 (br, m, 2H), 2,77 (s, 3H), 2,74 (br, m, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,22 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 1,97 (br, m, 2H), 1,85 (br, m, 2H), 1,60 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) = 525,58.
[02846] Composto 397: formiato de 3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)-N-((5- fluoro-4-isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluorome- til)benzamida
[02847]
[02848] LCMS ES + (M + 1) = 525,58. RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,31 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,49 (s, 2H), 3,48 (m, 1H), 3,39 (br, 2H), 3,18 (br, m, 1H), 3,09 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,97 (br, m, 2H), 2,78 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,21 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 1,96 (br, d, J = 12,0 Hz, 2H), 1,86 (br, m, 2H), 1,32 (dd, J = 1,6 Hz, J = 7,2 Hz, 6H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) = 525,58.
[02849] Composto 398: formiato de 3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)-N-((5- fluoro-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluorometil)benza-mida
[02850]
[02851] RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,29 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,39 (br, 2H), 3,19 (br, 1H), 3,09 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,97 (br, m, 2H), 2,77 (s, 3H), 2,34 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,22 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 1,97 (br, m, 2H), 1,86 (br, m, 2H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) = 497,51.
[02852] Composto 399: diformiato de 3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)-N-((5- fluoro-6-metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluoro- metil)benzamida
[02853]
[02854] RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,32 (s, 2H), 7,50 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,59 (s, 2H), 3,40 (br, 2H), 3,18 (br, m, 2H), 3,09 (q, J = 6,8, 2H), 2,96 (br, m, 2H), 2,78 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,29 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 1,98 (br, d, J = 13,2 Hz, 2H), 1,86 (m, 1H), 1,80 (br, m, 2H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) = 551,53.
[02855] Composto 399: diformiato de 3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)-N-((5- fluoro-6-metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluoro- metil)benzamida
[02856]
[02857] 6-Metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila foi fluorado conforme descrito para 5-fluoro-4-isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridino- 3-carbonitrila. O produto foi isolado como uma mistura 3:1 de 6-metil-2-oxo-4-(trifluo- rometil)-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila (material de partida) e 5-fluoro-6-metil-2- oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila. Para 5-fluoro-6-metil-2-oxo-4- (trifluorometil)-1,2-di-hidropiridino-3-carbonitrila, LCMS E - S (M + H) = 221,2. Esta mistura de nitrilas foi submetida às condições de redução, conforme descrito acima para 3-(Aminometil)-5-fluoro-4-isopropil-6-metilpiridin-2(1H)-ona. Para o composto flu- orado, LCMS (ES) (M + H) mostrou 225,2 e para o análogo não fluorado, LCMS (ES) (M + H) mostrou 207,2. A reação de ligação subsequente foi realizada com a mistura de aminas brutas sem purificações adicionais. Para diformiato de 3-(etil(1-metilpiperi- din-4-il)amino)-N-((5-fluoro-6-metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-3-il)me- til)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida; RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,32 (s, 2H), 7,50 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 4,59 (s, 2H), 3,40 (br, 2H), 3,18 (br, m, 1H), 3,09 (q, J = 6,8, 2H), 2,96 (br, m, 2H), 2,78 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,29 (d, J = 3,2 Hz, 3H), 1,98 (br, d, J = 13,2 Hz, 2H), 1,80 (br, m, 2H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) 551,5.
[02858] Composto 400: N-[(4,6-Eimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3- {etil[1-(propan-2-il)piperidin-4-il]amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[02859]
[02860] A uma solução agitada de ácido 3-{etil[1-(propan-2-il)piperidin-4- il]amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benzoico (material bruto, 510 mg, 0,569 mmol) e sal de HCl de 3-(aminometil)-4,6-dimetil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (161 mg, 0,854 mmol) em DMSO (2 mL) foi adicionado PyBOP (534 mg, 1,02 mmol) e base de Hunig (220 mg, 1,71 mmol). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 20 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e precipitado resultante foi coletado. O sólido foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 acetato de etila/MeOH = 20/1) para fornecer o composto do título como um sólido branco (129 mg, 44 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,30 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,22 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 5,95 (s, 1H), 4,54 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,16 (m, 2H), 3,08 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,85 (m, 2H), 2,62 - 2,74 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,00 - 2,09 (m, 1H), 1,81 (m, 2H), 1,58 - 1,76 (m, 2H), 0,99 (s x 2, 6H), 0,83 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 507,2, [M + Na] 529,3; HPLC 97,2 % de pureza.
[02861] Composto 401: N-[(4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3- {[(2R*,6R*)-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[02862]
[02863] A uma solução agitada de 3-{[(2R,6R)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4- il] (etil)amino}-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metil-5-(trifluorome- til)benzamida (267 mg, 0,459 mmol) em MeOH (5 mL) foi adicionado Pd/C (250 mg). A mistura de reação foi agitada durante 2 horas sob atmosfera de hidrogênio. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (1. NAM-300H gel de sílica produzido pela Nagara Science Co., Ltd., acetato de etila/MeOH=4/1 a acetato de etila/MeOH/tri- etilamina=1/1/0,01, 2. NH-SiO2, heptano/acetato de etila = 30/1 a 8/1) para fornecer o composto do título como um sólido branco (127 mg, 56 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,30 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,14 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,54 (dd, J = 5,9, 1,6 Hz, 2H), 3,41 - 3,49 (m, 1H), 3,01 - 3,13 (m, 3H), 2,85 - 2,92 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,32 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,63 - 1,80 (m, 4H), 1,13 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,2 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 7,0 Hz, 3H); LC-MS: m/z [M + H] 493,1, [M + Na] 515,3; HPLC; 97,2 % de pureza.
[02864] Composto 402: N-[(4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3- {[(2R*,4R*,6S*)-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benza- mida
[02865]
[02866] A uma solução agitada de 3-{[(2R,4R,6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperi- din-4-il](etil)amino}-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-2-metil-5-(triflu-orometil)benzamida (35,6 mg, 0,0611 mmol) em MeOH (3,0 ml) foi adicionado Pd/C (120 mg). A mistura de reação foi agitada durante 30 minutos sob atmosfera de hidrogênio. Depois de purgada com nitrogênio, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (TLC em gel de sílica 60F254, MERCK, MeOH/Et3N = 100/1) duas vezes para fornecer composto do título como um sólido branco (4,4 mg, 15 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm; 7,33 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,18 (m, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,54 (d, J = 6,0Hz, 2H), 3,73 (m, 1H), 3,26 - 2,69 (m, 4H), 2,40 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,90 - 1,10 (m, 4H), 1,10 - 0,86 (m, 6H), 0,83 (t, J = 7,2Hz, 3H). (-2H); LC-MS: m/z [M + H] 493,2, [M + Na] 515,3; HPLC; 88,8 % de pureza.
[02867] Composto 403: formiato de 3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metil- N-((6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-(trifluorometil)benzamida
[02868]
[02869] RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,33 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 6,11 (s, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,42 (br, m, 1H), 4,21 (br, 2H), 3,82 (br, 2H), 3,00 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,88 (s, 3H), 2,65 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,61 (m, 2H), 0,99 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + 1) 480,53.
[02870] Composto 404: formiato de 3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-N-((4- isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metil-5-(trifluorometil)benza-mida
[02871]
[02872] RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,31 (s, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 6,21 (s, 1H), 4,50 (s, 2H), 4,41 (br, 1H), 4,21 (br, 2H), 3,81 (br, 2H), 3,38 (m, 1H), 3,00 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,87 (s, 3H), 2,40 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,20 (d, J = 6,4 Hz, 6H), 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + 1) 479,54.
[02873] Composto 405: formiato de N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metil-5-(trifluorometil)benzamida
[02874]
[02875] RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,32 (s, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,26 (s, 1H), 6,08 (s, 1H), 4,44 (s, 2H), 4,41 (br, m, 1H), 4,21 (br, 2H), 3,82 (br, 2H), 3,00 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,88 (s, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,34 (d, J = 1,2 Hz, 3H), 2,21 (s, 3H), 0,86 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) (M + 1) 451,49.
[02876] Composto 406: 5-Cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-N- [(6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]benzamida
[02877]
[02878] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4- il)amino]-2-metilbenzoico (material bruto, 1,80 g, 3,26 mmols) e sal de HCl de 3-(ami- nometil)-6-metil-4-propil-1,2-di-hidropiridin-2-ona (916 mg, 4,24 mmols) em DMSO (10 mL) foi adicionado PyBOP (3,10 g, 5,87 mmols) e base de Hunig (1,20 g, 9,78 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 16 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e o precipitado resultante foi coletado. O sólido foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 Acetato de etila/MeOH = 10/1) para fornecer o composto do título como um sólido branco (264 mg, 17 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,20 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 2,0Hz, 1H), 7,02 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,54 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,02 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,81 (m, 2H), 2,64 - 2,71 (m, 3H), 2,21 - 2,27 (s x 3, 9H), 1,84 - 1,94 (m, 2H), 1,55 - 1,65 (m, 6H), 1,00 (t, J = 7,4 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 473,1, [M + Na] 495,3; HPLC 94,7 % de pureza.
[02879] Composto 407: 5-Cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-N- {[6-metil-2-oxo-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridin-3-il]metil}benzamida
[02880]
[02881] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4- il)amino]-2-metilbenzoico (material bruto, ~0,7 mmol) e sal de HCl de cloridreto de 3- (aminometil)-6-metil-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridin-2-ona (200 mg, 0,91 mmol) em DMSO (5,3 mL) foi adicionado PyBOP (550 mg, 1,05 mmol) e base de Hunig (366 ul, 2,10 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 7 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e o precipitado resultante foi coletado. O sólido foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2 Acetato de etila/MeOH = 10/1 + 10 % de trietilamina). O composto bruto foi triturado a partir de acetato de etila/hexano, e seco para fornecer o composto do título como um sólido branco (166 mg, 50 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,06 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,01 - 7,05 (m, 1H), 7,00 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,04 (s, 1H), 4,57 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,49 - 3,57 (m, 1H), 3,02 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,80 - 2,84 (m, 2H), 2,61 - 2,69 (m, 1H), 2,29 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 1,86 - 1,90 (m, 2H), 1,66 - 1,70 (m, 4H), 1,21 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 0,84 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) [M + Na] 495,2; HPLC 95,7 % de pureza.
[02882] Composto 408: 5-Cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-N- {[6-metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-3-il]metil}benzamida
[02883]
[02884] A uma solução agitada de ácido 5-cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4- il)amino]-2-metilbenzoico (material bruto, ~0,7 mmol) e sal de HCl de cloridreto de 3- (aminometil)-6-metil-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-2-ona (200 mg, 0,91 mmol) em DMSO (5,3 mL) foi adicionado PyBOP (550 mg, 1,05 mmol) e base de Hunig (366 ul, 2,10 mmols). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 7 horas. A mistura de reação foi resfriada com água e diluída com acetato de etila. A camada aquosa foi extraída com diclorometano. A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (SiO2 Acetato de etila/MeOH = 10/1 + 5 % de trietilamina). O composto bruto foi triturado com acetato de etila/hexano, e seco para fornecer o composto do título como um sólido branco (145 mg, 42 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,08 (d, J = 2,4Hz, 1H), 7,03 (d, J = 2,4Hz, 1H), 6,81 - 6,85 (m, 1H), 6,35 (s, 1H), 4,71 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 3,03 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 2,81 - 2,85 (m, 2H), 2,68 - 2,72 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,88 - 1,94 (m, 2H), 1,67 - 1,72 (m, 4H), 0,85 (t, J = 6,8 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 499,1, [M + Na] 521,1; HPLC 96,0 % de pureza.
[02885] Seguindo a mesma preparação do método descrito acima para 5- cloro-3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-N-{[6-metil-2-oxo-4-(trifluorometil)-1,2-di-hidropiridin-3-il]metil}benzamida, os análogos seguintes foram preparados usando os fragmentos de piridona correspondentes descritos anteriormente, e purificados por HPLC/MS reversa (ACN-H2O, contendo ácido fórmico a 0,1 %).
[02886] Composto 409: formiato de 5-cloro-3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)-N-((5-fluoro-4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02887]
[02888] RMN de 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,45 - 8,25 (br, 1H), 7,30 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,47 (s, 2H), 3,50 - 3,38 (br, 2H), 3,25 - 3,15 (br, 1H), 3,08 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,06 - 2,98 (br, 2H), 2,83 (s, 3H), 2,38 (d, J = 2,0 Hz, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,26 (d, J = 2,0 Hz, 3H), 2,03 (bd, J = 14,75 Hz, 2H), 1,90 - 1,77 (br, 2H), 0,89 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) 463,50.
[02889] Composto 410: formiato de 5-cloro-3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)- N-((5-fluoro-6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02890]
[02891] RMN de 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,43 - 8,26 (br, 1H), 7,30 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,47 (s, 2H), 3,47 - 3,39 (br, 2H), 3,23 - 3,15 (br, 1H), 3,08 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,05 - 2,96 (br, 2H), 2,82 (s, 3H), 2,79 (bd, J = 8,2Hz, 2H), 2,28 - 2,26 (br, 6H), 2,06 - 1,99 (br, 2H), 1,93 - 1,82 (br, 2H), 1,68 - 1,59 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 0,89 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) 491,52.
[02892] Composto 411: formiato de 5-cloro-3-(etil(1-metilpiperidin-4-il)amino)- N-((5-fluoro-4-isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02893]
[02894] RMN de 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,48 - 8,34 (br, 1H), 7,35 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,57 (s, 2H), 3,61 - 3,53 (m, 1H), 3,52 - 3,44 (br, 2H), 3,30 - 3,20 (br, 1H), 3,13 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,10 - 3,01 (br, 2H), 2,87 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,31 (d, J = 2,8 Hz, 3H), 2,10 - 2,04 (br, 2H), 1,98 - 1,87 (br, 2H), 1,41 (d, J = 6,5 Hz, 6H), 0,93 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) 491,51.
[02895] Composto 412: formiato de 5-cloro-3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)- 2-metil-N-((6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida
[02896]
[02897] 5-cloro-3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metilbenzoato de metila foi hidrolisado ao ácido 5-cloro-3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metilbenzoico seguindo a mesma preparação do método para o ácido 3-{Etil[1-(propan-2-il)piperidin-4- il]amino}-2-metil-5-(trifluorometil)benzoico a partir de seu carboxilato correspondente. O ácido 5-cloro-3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metilbenzoico bruto depois foi ligado com sal de HCl de 3-(Aminometil)-6-metil-4-propil-1,2-di-hidropiridin-2-ona preparada anteriormente após o método de preparação descrito para N-[(4,6-Dimetil-2- oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3-[etil(1-metilpiperidin-4-il)amino]-2-metil-5-(trifluoro- metil)benzamida. Depois da purificação através de HPLC em fase reversa/MS (CAN- H2O contendo ácido fórmico a 0,1 %), o composto do título foi obtido. RMN de 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,58 - 8,24 (br, 1H), 7,15 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,41 - 4,34 (m, 1H), 4,25 (br, 2H), 3,85 (br, 2H), 3,00 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,72 - 2,66 (m, 2H), 2,34 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,70 - 1,61 (m, 2H), 1,04 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 0,91 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) (M + H) 445,48.
[02898] Composto 413: formiato de 5-cloro-3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-N-((4-isopropil-6-metil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-2-metilbenzamida
[02899]
[02900] A mesma maneira para o composto prévio formiato de 5-cloro-3- (etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metil-N-((6-metil-2-oxo-4-propil-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)benzamida preparado, o composto do título preparado usando ácido 5-cloro- 3-(etil(1-metilazetidin-3-il)amino)-2-metilbenzoico e sal de HCl de 3-(Aminometil)-6- metil-4-(propan-2-il)-1,2-di-hidropiridin-2-ona. Depois da purificação através de HPLC em fase reversa/MS (CAN-H2O contendo ácido fórmico a 0,1 %), o composto do título foi obtido. RMN de 1H (500 MHz, CD3OD) δ ppm 8,43 - 8,25 (br, 1H), 7,15 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,25 (s, 1H), 4,52 (s, 2H), 4,40 - 4,34 (m, 1H), 4,29 - 4,21 (br, 2H), 3,90 - 3,79 (br, 2H), 3,48 - 3,40 (m, 1H), 3,00 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,24 (d, J = 7,0 Hz, 6H), 0,90 (t, J = 7,0 Hz, 3H). MS (ES) (M + H) 445,47.
[02901] Composto 414: N-[(4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3- {[(2R,6R)-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-5-fluoro-2-metilbenzamida
[02902]
[02903] A uma solução agitada de 3-{[(2R,6R)-1-benzil-2,6-dimetilpiperidin-4- il] (etil)amino}-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-5-fluoro-2-metilben- zamida (378 mg, 0,709 mmol) em MeOH (7 mL) foi adicionado Pd/C (150 mg). A mistura de reação foi agitada a 23 °C durante 1 hora sob atmosfera de hidrogênio. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (1. NAM-300H gel de sílica produzido pela Nagara Science Co., Ltd., acetato de etila/MeOH=4/1 a acetato de etila/MeOH/trietilamina = 1/1/0,01, 2. NH-SiO2, heptano/acetato de etila = 30/1 a 8/1) para fornecer o composto do título como um sólido branco (235 mg, 75 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δppm; 7,08 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 6,82 (dd, J = 10,7, 2,5 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 8,2, 2,7 Hz, 1H), 5,93 (s, 1H), 4,51 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 3,40 - 3,48 (m, 1H), 2,95 - 3,09 (m, 3H), 2,83 - 2,92 (m, 1H), 2,39 (s, 3H), 2,22 (s x 2, 6H), 1,63 - 1,78 (m, 4H), 1,13 (d, J = 7,0 Hz, 3H), 1,02 (d, J = 6,2 Hz, 3H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 3H); MS (ES) [M + H] 443,1, [M + Na] 465,2; HPLC; 99,3 % de pureza.
[02904] Composto 415: N-[(4,6-Dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-3- {[(2R,4R,6S)-2,6-dimetilpiperidin-4-il](etil)amino}-5-fluoro-2-metilbenzamida
[02905]
[02906] A uma solução agitada de 3-{[(2R,4R,6S)-1-benzil-2,6-dimetilpiperi- din-4-il] (etil)amino}-N-[(4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil]-5-fluoro-2-metil- benzamida (50,1 mg, 0,0860 mmol) em MeOH (2 ml) foi adicionado Pd/C (100 mg). A mistura de reação foi agitada durante 3 horas sob atmosfera de hidrogênio a 23 °C. Depois de purgada com nitrogênio, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NAM- 300H gel de sílica produzido pela Nagara Science Co., Ltd., acetato de etila/MeOH = 4/1 a acetato de etila/MeOH/trietilamina = 1/1/0,01). As frações alvo foram coletadas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (NH-SiO2, acetato de etila/MeOH = 30/1 a 20/1 a 8/1). As frações alvo foram coletadas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado com TLC preparativa (TLC em gel de sílica 60F254, MERCK, MeOH/Et3N = 100/1) para fornecer o composto do título como um sólido branco (17,2 mg, 45 % de rendimento). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm; 7,10 (m, 1H), 6,81 (m, 2H), 5,91 (s, 1H), 4,52 (d, J = 6,0Hz, 2H), 3,61 (m, 1H), 3,23 - 2,73 (m, 4H), 2,40 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,64 - 1,05 (m, 4H), 1,05 - 0,86 (m, 6H), 0,82 (t, J = 7,2Hz, 3H). (-2H); LC-MS: m/z [M + H] 443,2, [M + Na] 465,3; HPLC; 97,4 % de pureza.
[02907] Exemplo 45: Síntese dos Compostos 6, 9, 11 - 12, 19, 22, 24, 27, 29, 34 - 35, 37 - 47, 65 - 90, 93 - 96, 99 - 101, 103, 106 - 116, 124, 125, 128 - 136, 138 - 143, 145 - 156, 158 - 190, 193 - 204, 210, 211, 214 - 221, 223 - 242, 244 - 267, 270 - 272, 274, 275, 280, 281, 288, 289, 291 - 300, 303 - 305, 307, 312, 314, 316 - 318, 323 - 327, 329 - 331, 337, 338, 341 - 343, 345, 346, 350 - 355, 357 - 385, 388, 391, e 418
[02908] Compostos 6, 9, 11 - 12, 19, 22, 24, 27, 29, 34 - 35, 37 - 47, 65 - 90, 93 - 96, 99 - 101, 103, 106 - 116, 124, 125, 128 - 136, 138 - 143, 145 - 156, 158 - 190, 193 - 204, 210, 211, 214 - 221, 223 - 242, 244 - 267, 270 - 272, 274, 275, 280, 281, 288, 289, 291 - 300, 303 - 305, 307, 312, 314, 316 - 318, 323 - 327, 329 - 331, 337, 338, 341 - 343, 345, 346, 350 - 355, 357 - 385, 388, 391, e 418 foram sintetizados através de métodos similares àqueles descritos para os Exemplos 1 a 44 ou pelos esquemas de reação representados nos esquemas gerais.
[02909] Exemplo 46: Protocolo de Bioensaio e Métodos Gerais
[02910] Protocolo para Ensaios de Enzima PRC2 do Tipo Selvagem e Mutante
[02911] Materiais Gerais. S-adenosilmetionina (SAM), S-adenosilhomociteína (SAH), bicina, KCl, Tween20, dimetilsulfóxido (DMSO) e gelatina de pele bovina (BSG) foram adquiridos a partir da Sigma-Aldrich no mais alto nível de pureza possível. Diti- otreitol (DTT) foi adquirido a partir da EMD. 3H-SAM foi adquirido a partir da American Radiolabeled Chemicals com uma atividade específica de 80 Ci/mmol. Flashplates de estreptavidina de 384 poços foram adquiridas a partir da PerkinElmer.
[02912] Substratos. Peptídeos representativos de resíduos de histona H3 humana 21 a 44 contendo uma lisina não modificada 27 (H3K27meO) ou lisina dimeti- lada 27 (H3K27me2) foram sintetizados com um motivo tag de afinidade ao ligante C terminal G(K-biotina) e uma cap de amida C-terminal pela 21st Century Biochemicals. Os peptídeos foram purificados por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC) em mais do que 95 % de pureza e confirmados por cromatografia líquida- espectrometria de massas (LC-MS). As sequências são listadas abaixo.
[02913] H3K27me0: ATKAARKSAPATGGVKKPHRYRPGGK(biotina)-amida (SEQ ID NO: 1)
[02914] H3K27me2: ATKAARK(me2)SAPATGGVKKPHRYRPGGK(biotina)- amida (SEQ ID NO: 2)
[02915] Oligonucleossomas de eritrócitos de galinha foram purificados a partir do sangue da galinha, de acordo com os procedimentos estabelecidos.
[02916] Enzimas PRC2 Recombinantes. As enzima PRC2 humanas foram purificadas como complexos de enzima de 4 componentes co-expressados em células de Spodoptera frugiperda (sf9) usando um sistema de expressão de baculovírus. As subunidades expressadas foram EZH2 do tipo selvagem (NM_004456) ou mutantes de EZH2 Y641 F, N, H, S ou C gerados a partir do constructo de EZH2 do tipo selvagem, EED (NM_003797), Suz12 (NM_015355) e RbAp48 (NM_005610). A subuni- dade EED continha uma tag FLAG N-terminal que foi usada para purificar o complexo de 4 componentes total a partir de lisatos celulares sf9. A pureza dos complexos satisfez ou excedeu 95 %, conforme determinado por SDS-PAGE e análise Agilent Bioanalyzer. As concentrações de concentrações de estoque de enzima (em geral, 0,3 a 1,0 mg/mL) foi determinada usando um ensaio de Bradford contra uma albumina de soro bovino (BSA) padrão.
[02917] Procedimento geral para Ensaios de Enzima PRC2 em Substratos de Peptídeo. Os ensaios foram realizados em um tampão que consiste de bicina 20 mM (pH = 7,6), DTT 0,5 mM, BSG a 0,005 % e Tween20 a 0,002 %, preparado no dia do uso. Os compostos em DMSO a 100 % (1 μL) foram marcados em placas de fundo em V de 384 poços de polipropileno (Greiner) usando uma Platemate 2 X 3 equipada com uma cabeça de pipeta de 384 canais (Thermo). DMSO (1 μL) foi adicionado às colunas 11, 12, 23, 24, as linhas A a H para o controle sinal máximo, e SAH, um produto e inibidor conhecido de PRC2 (1 μL) foi adicionado às colunas 11, 12, 23, 24, linhas I a P para o controle sinal mínimo. Um coquetel (40 μL) contendo a enzima PRC2 do tipo selvagem e peptídeo H3K27meO ou qualquer uma entre as enzimas mutantes Y641 e peptídeo H327me2 foi adicionado por Multidrop Combi (Thermo). Os compostos foram deixados incubar com PRC2 durante 30 min a 25 °C, em seguida, um coquetel (10 μL) contendo uma mistura de não radioativo e 3H-SAM foi adicionado para iniciar a reação (volume final = 51 μL). Em todos os casos, as concentrações finais foram as seguintes: enzima PRC2 do tipo selvagem ou mutante foi de 4 nM, SAH nos poços controle sinal mínimo foi de 1 mM e a concentração de DMSO foi de 1 %. As concentrações finais do resto dos componentes são indicadas na Tabela 2, abaixo. Os ensaios foram interrompidos pela adição de SAM não radioativa (10 μL) em uma concentração final de 600 μM, que dilui a 3H-SAM em um nível onde sua incorporação no substrato de peptídeo já não é detectável. 50 μL da reação na placa de polipropileno de 384 poços depois foram transferidos a uma Flashplate de 384 poços e os peptídeos biotinilados foram deixados ligar na superfície de estreptavidina durante pelo menos 1 h antes da lavagem três vezes com Tween20 a 0,1 % em um lavador de placa Biotek ELx405. As placas foram, em seguida, lidas em um leitor de placa PerkinElmer TopCount para medir a quantidade de peptídeo marcado com 3H ligado à superfície de Flashplate, medida como desintegrações por minuto (dpm) ou, alternativamente, referida como contagens por minuto (cpm).
[02918] Tabela 2: Concentrações finais dos componentes para cada variação de ensaio com base na identidade de EZH2 EZH2 do tipo selvagem ou mutante Y641
[02947] O procedimento geral para o Ensaio de Enzima PRC2 do Tipo selvagem em Substrato de Oligonucleossoma. Os ensaios foram realizados em um tampão que consiste de bicina 20 mM (pH = 7,6), DTT 0,5 mM, BSG a 0,005 %, KCl 100 mM e Tween20 a 0,002 %, preparado no dia do uso. Os compostos em DMSO a 100 % (1 μL) foram marcados em placas de fundo em V de 384 poços de polipropileno (Greiner) usando uma Platemate 2 X 3 equipada com uma cabeça de pipeta de 384 canais (Thermo). DMSO (1 μL) foi adicionado às colunas 11, 12, 23, 24, linhas A - H para o controle sinal máximo, e SAH, um produto e inibidor conhecido de PRC2 (1 μL) foi adicionado às colunas 11, 12, 23, 24, linhas I a P para o controle sinal mínimo. Um coquetel (40 μL) contendo a enzima PRC2 do tipo selvagem e oligonucleossoma de eritrócitos de galinha foi adicionado por Multidrop Combi (Thermo). Os compostos foram incubados com PRC2 durante 30 min a 25 °C, em seguida, um coquetel (10 μL) contendo uma mistura de SAM não radioativo e 3H foi adicionado para iniciar a reação (volume final = 51 μL). As concentrações finais foram as seguintes: enzima PRC2 do tipo selvagem foi de 4 nM, SAM não radioativo foi de 430 nM, 3H-SAM foi de 120 nM, olignonucleossoma de eritrócitos de galinha foi de 120 nM, SAH nos poços controle sinal mínimo foi de 1 mM e a concentração de DMSO foi de 1 %. O ensaio foi interrompido pela adição de SAM não radioativo (10 μL) em uma concentração final de 600 μM, que dilui o 3H-SAM em um nível onde sua incorporação no olignonucleos- soma de eritrócitos de galinha substrato já não é detectável. 50 μL da reação na placa de polipropileno de 384 poços depois foram transferidos a uma Flashplate de 384 poços e os nucleossomas de eritrócitos de galinha foram imobilizados na superfície da placa, que depois foi lavada três vezes com Tween20 a 0,1 % em um lavador de placa Biotek ELx405. As placas foram, em seguida, lidas em um leitor de placa Perki- nElmer TopCount para medir a quantidade de oligonucleossoma de eritrócitos de galinha marcada com 3H ligado à superfície de Flashplate, medida como desintegrações por minuto (dpm) ou, alternativamente, referida como contagens por minuto (cpm).
[02948] % de Cálculo de Inibição
[02949]
[02950] Onde dpm = desintegrações por minuto, cmpd = sinal em poço de ensaio, e mín e máx são os controles de sinal máximo e mínimo respectivos.
[02951] Ajuste de IC50 de quatro parâmetros
[02952]
[02953] Onde o topo e fundo são deixados flutuar normalmente, mas podem ser fixados a 100 ou 0, respectivamente, em um ajuste de 3 parâmetros. O Coeficiente de Hill normalmente deixado flutuar, mas também pode ser fixado a 1 em um ajuste de 3 parâmetros. Y é a % de inibição e X é a concentração do composto.
[02954] Os valores de IC50 para os ensaios de enzima PRC2 em substrato de peptídeos (por exemplo, EZH2 do tipo selvagem e Y641F) são apresentadas na Tabela 3 abaixo.
[02955] Ensaio de Metilação de WSU-DLCL2
[02956] As células de suspensão WSU-DLCL2 foram adquiridas a partir da DSMZ (German Collection of Microorganisms and Cell Cultures, Braunschweig, Alemanha). Meio RPMI/Glutamax, Penicilina-Estreptomicina, Soro Fetal Bovino Inativado por Calor e D-PBS foram adquiridos a partir da Life Technologies, Grand Island, NY, USA. O Tampão de Extração e o Tampão de Neutralização (5X) foram adquiridos a partir da Active Motif, Carlsbad, CA, USA. O anticorpo anti-Histona H3 de coelho foi adquirido a partir da Abcam, Cambridge, MA, USA. Anti-H3K27me3 de coelho e anti- coelho-IgG conjugada a HRP foram adquiridas a partir da Cell Signaling Tecnologia, Danvers, MA, USA. O substrato TMB “Super sensitive” foi originados da BioFX Laboratories, Owings Mills, MD, USA. Albumina de soro bovino livre de IgG foi adquirida a partir da Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA, USA. PBS com Tween (10X PBST) foi adquirida a partir da KPL, Gaithersburg, MD, USA. Ácido sulfúrico foi adquirido a partir da Ricca Chemical, Arlington, TX, USA. As placas Immulon ELISA foram adquiridas a partir da Thermo, Rochester, NY, USA. As placas de cultura celular de fundo em V foram adquiridos a partir da Corning Inc., Corning, NY, USA. As placas de polipropileno de fundo em V foram adquiridas a partir da Greiner Bio-One, Monroe, NC, USA.
[02957] As células de suspensão WSU-DLCL2 foram mantidas em meio de crescimento (RPMI 1640 suplementado com soro fetal bovino inativado por calor 10 % v/v e 100 unidades/mL de penicilina-estreptomicina) e cultivadas a 37 °C sob CO2 a 5 %. Sob condições de ensaio, as células foram incubadas em Meio de Ensaio (RPMI 1640 suplementado com soro fetal bovino inativado por calor 20 % v/v e 100 unidades/mL de penicilina-estreptomicina) a 37 °C sob CO2 a 5 % em um agitador de placa.
[02958] As células WSU-DLCL2 foram semeadas em meio de ensaio em uma concentração de 50.000 células por mL a uma placa de fundo em V de 96 poços de cultura celular com 200 por poço. O Composto (1 μL) a partir de placas de fonte de 96 poços foi adicionado diretamente à placa celular de fundo em V. As placas foram incubadas em um titulador-agitador de placa a 37 °C, CO2 a 5 % durante 96 horas. Depois de quatro dias de incubação, as placas foram giradas a 241 x g durante cinco minutos e o meio foi aspirado suavemente a partir de cada poço de placa celular sem perturbar a pelota celular. A pelota foi recolocada em suspensão em DPBS 200 μL e as placas foram giradas novamente a 241 x g durante cinco minutos. O sobrenadante foi aspirado e tampão de Extração frio (4 °C) (100 μL) foi adicionado por poço. As placas foram incubadas a 4 °C em agitador orbital durante duas horas. As placas foram giradas a 3427 x g x 10 minutos. O sobrenadante (80 μL por poço) foi transferido a seu poço respectivo em placa de polipropileno de fundo em V de 96 poços. O Tampão de Neutralização 5X (20 μL, por poço) foi adicionado à placa de polipropileno de fundo em V contendo o sobrenadante. Placas de polipropileno em fundo V contendo preparação de histona bruta (CHP) foram incubadas em agitador orbital x cinco minutos. Preparações de Histona Bruta foram adicionadas (2 μL por poço) a cada poço respectivo, placas de ELISA em duplicata de 96 poços contendo 100 μL, o Tampão Revestimento (1 X PBS + BSA 0,05 % p/v). As placas foram vedadas e incubadas durante a noite a 4 °C. No dia seguinte, as placas foram lavadas três vezes com 300 μL, por poço 1 X PBST. Os poços foram bloqueado durante duas horas com 300 μL, por poço de Diluente (de ELISA (PBS (1 X) BSA (2 % p/v) e Tween20 (0,05 % v/v)). As placas foram lavadas três vezes com 1 X PBST. Para a placa de detecção de trimetilação H327, 100 μL, por poço foram adicionados de anti- H3K27me3 diluído 1:2000 em diluente de ELISA. As placas foram incubadas durante 90 minutos na temperatura ambiente. As placas foram lavadas três vezes com 300 μL. 1 X PBST por poço. Para a detecção de Histona H3, 100 μL, de anticorpo IgG anti-coelho conjugado a HRP diluído a 1:6000 em diluente de ELISA foram adicionados por poço. Para a detecção de H3K27me3, 100 μL de anticorpo IgG anti-coelho conjugado a HRP diluído a 1:4000 em diluente de ELISA foram adicionados por poço. As placas foram incuba-das na temperatura ambiente durante 90 minutos. As placas foram lavadas quatro vezes com 1 X PBST 300 por poço. O substrato TMB 100 μL foi adicionado por poço. As placas de Histona H3 foram incubadas durante cinco minutos na temperatura am- biente. As placas de H3K27me3 foram incubadas durante 10 minutos na temperature ambiente. A reação foi resfriada com ácido sulfúrico 1 N (100 por poço). A absorvância para cada placa foi lida a 450 nm.
[02959] Primeiro, a razão para cada
[02960] Cada placa incluiu oito poços controle de DMSO apenas tratamento (Inibição Mínima), assim como oito poços controle para inibição máxima (poços de fundo).
[02961] A média dos valores de razão para cada tipo de controle foi calculada e usada para determinar a porcentagem de inibição para cada poço de teste na placa. O composto de teste foi diluído em série três vezes em DMSO durante um total de dez concentrações de teste, iniciando a 25 μM. A porcentagem de inibição foi determinada e as curvas de IC50 foram geradas usando poços em duplicata por concentração do composto. Os valores IC50 para este ensaio são apresentados na Tabela 3 abaixo.
[02962] Análise de Proliferação Celular
[02963] As células de suspensão WSU-DLCL2 foram adquiridas a partir da DSMZ (German Collection of Microorganisms and Cell Cultures, Braunschweig, Alemanha). Meio RPMI/Glutamax, Penicilina-Estreptomicina, Soro Fetal Bovino Inativado por Calor foram adquiridos a partir da Life Technologies, Grand Island, NY, USA. As placas de polipropileno de fundo em V de 384 poços foram adquiridas a partir da Greiner Bio-One, Monroe, NC, USA. Placas brancas opacas de 384 poços de cultura celular foram adquiridas a partir da Perkin Elmer, Waltham, MA, USA. Cell-Titer Glo(R) foi adquirido a partir da Promega Corporation, Madison, WI, USA. O leitor de placas SpectraMax M5 foi adquirido a partir da Molecular Devices LLC, Sunnyvale, CA, USA.
[02964] As células de suspensão WSU-DLCL2 foram mantidas em meio de crescimento (RPMI 1640 suplementado com 10 % v/v de soro fetal bovino inativado por calor e cultivado a 37 °C sob CO2 a 5 %. Sob condições de ensaio, as células foram incubadas em Meio de ensaio (RPMI 1640 suplementado com 20 % v/v de soro fetal bovino inativado por calor e 100 unidades/mL de penicilina-estreptomicina) a 37 °C sob CO a 5 %.
[02965] Para a avaliação do efeito dos compostos na proliferação da linhagem celular WSU- DLCL2, células exponencialmente crescentes foram plaqueadas em placas opacas brancas de 384 poços em uma densidade de 1250 células/ml em um volume final de 50 μL de meio de ensaio. Uma placa de fonte de composto foi preparada através da realização de diluições em série 3 vezes em triplicata de nove pontos em DMSO, iniciando a 10 mM (concentração de topo final do composto no ensaio foi de 20 μM e o DMSO foi de 0,2 %). Uma alíquota 100 nL a partir da placa de estoque do composto foi adicionada ao mesmo poço respectivo na placa celular. O controle de inibição de 100 % consistiu de células tratadas com concentração final de 200 nM de estaurosporina e o controle de inibição de 0 % consistiu de células tratadas com DMSO. Depois da adição dos compostos, as placas de ensaio foram incubadas durante 6 dias a 37 °C, CO2 a 5 %, umidade relativa > 90 % durante 6 dias. A viabilidade celular foi medida por quantização de ATP presente nas culturas celulares, adicio-nando 35 μL de reagente Cell Titer Glo® às placas celulares. A luminescência foi lida no SpectraMax M5. A concentração que inibe a viabilidade celular em 50 % foi determinada usando um ajuste de 4-parâmetros da curva de resposta de doses normalizada. Os valores da IC50 para este ensaio também são apresentados na Tabela 3 abaixo.Tabela 3
[02966] Exemplo 47: Derivação da Concentração Citotóxica Mais Baixa (LCC)
[02967] É bem estabelecido que a proliferação celular procede através da divisão celular que resulta em uma dobra do número de células depois da divisão, em relação ao número de células antes da divisão. Sob um conjunto fixo de condições ambientais (por exemplo, pH, concentração iônica, temperatura, densidade celular, teor de meio de proteínas e fatores de crescimento, e semelhantes), células serão proliferadas por dobra consecutiva (isto é, divisão), de acordo com a equação seguinte, contanto que nutrientes suficientes e outros fatores exigidos estejam disponí-veis.
[02968] onde Nt é o número celular em um ponto no tempo (t) depois da iniciação do período de observação, N0 é o número celular na iniciação do período de observação, t é o tempo depois da iniciação do período de observação e tD é o intervalo de tempo exigido para a dobra celular, também referido como o tempo de dobra. A equação A.1 pode ser convertida na forma mais conveniente de uma equação exponencial em base e, tomando vantagem da igualdade, 0,693 = ln(2).
[02969] A constante de taxa para a proliferação celular (kp) está inversamente relacionada ao tempo de dobra, como segue.
[02970] A equação de combinação A.2 e A.3 fornece,
[02971] Assim, de acordo com equação A.4, o número celular é esperado aumentar exponencialmente com o tempo (Figura 1 A) durante o período anterior do crescimento celular referido como crescimento em fase log. Equações exponenciais como a equação A.4 podem ser linearizadas tomando o logaritmo natural de cada lado.
[02972] Assim, um lote de ln(Nt) como uma função de tempo é esperado produzir uma linha reta ascendente com inclinação igual a kp e intercepção de y igual a ln(N0), conforme ilustrado na Figura 1 B.
[02973] Mudanças nas condições ambientais podem resultar em uma mudança na taxa de proliferação celular que é quantificável como mudanças na constante de taxa de proliferação kp. Entre as condições que podem resultar em uma mudança na taxa de proliferação é a introdução ao sistema de um composto antiprolife- rativo na iniciação do período de observação (isto é, a t = 0). Quando um composto antiproliferativo tem um impacto imediato sobre a proliferação celular, espera-se que diagramas de ln(Nt) como uma função de tempo continuem sendo lineares em todas as concentrações do composto, com valores decrescentes de kp em concentrações aumentadas do composto.
[02974] Dependendo da base mecanicista de ação antiproliferativa, alguns compostos podem não efetuar imediatamente uma mudança na taxa de proliferação. Em vez disso, pode ser um período de latência antes que o impacto do composto seja realizado. Em tais casos, um lote de ln(Nt) como uma função de tempo aparecerá bifásico, e um ponto no tempo em que o impacto do composto inicia pode ser identifi- cada como o ponto de parada entre as fases (Figura 2). Não obstante, se um impacto do composto sobre a proliferação é imediato ou começa depois de um período de latência, a constante de taxa para a proliferação em cada concentração do composto é melhor definido pela inclinação de ln(Nt) vs. curva de tempo a partir do ponto no tempo em que o impacto do composto começa até o final do período de observação do experimento.
[02975] Um composto aplicado em células crescentes pode afetar a proliferação observada em uma das duas vias gerais: através da inibição de divisão celular adicional (citoestase) ou através da morte celular (citotoxicidade). Se um composto é citostático, concentração aumentada do composto reduzirá o valor de kp até que não exista outra divisão celular. Neste ponto, a taxa de crescimento celular, e, portanto, o valor de kp, será zero. Se, por outro lado, o composto é citotóxico, em seguida, o valor de kp será composto de duas constantes de taxa: uma constante de taxa para cresci- mento celular continuado na presença do composto (kg) e uma constante de taxa para a morte celular pelo composto (kd). A constante de taxa global para a proliferação em uma concentração fixa de composto, assim, será a diferença entre os valores absolu-tos destas constantes de taxa opostas.
[02976] Em concentrações do composto para as quais a taxa de crescimento celular excede aquela da morte celular, o valor de kp terá um valor positivo (isto é, kp > 0). Em concentrações do composto para as quais a taxa de crescimento celular é menor do que aquela para a morte celular, o valor de kp terá um valor negativo (isto é, kp < 0) e o número celular diminuirá com o tempo, indicativo de citotoxicidade robusta. Quando kg corresponde exatamente kd, em seguida, a constante de taxa de proliferação global, kp, terá um valor de zero. Assim, podemos definir a concentração citotóxica mais baixa (LCC) como aquela da concentração do composto que resulta em um valor de kp igual a zero, porque qualquer concentração maior do que isto resultará em citotoxicidade claramente observável. Nota bene: em concentrações abaixo do LCC não é provável que ocorra morte celular, mas, em uma taxa que é menor do que aquela da proliferação celular residual. O tratamento neste relatório não é intencionado a definir os detalhes biológicos de ação do composto. Em vez disso, o objetivo neste relatório é definir meramente um parâmetro prático com o qual objeti-vamente quantifica a concentração do composto na qual a taxa de morte celular excede novo crescimento celular. De fato, o LCC representa um ponto de parada ou concentração crítica acima do qual a citotoxicidade franca é observada, ao invés de uma concentração citotóxica por si. Neste respeito, a LCC pode ser similar a outra métrica de ponto de parada físico, tal como a concentração de micela crítica (CMC) usada para definir a concentração de lipídeos, detergente ou outra espécie de tenso- ativo acima da qual todas as moléculas se incorporam em estruturas micelares.
[02977] Tradicionalmente, o impacto dos compostos antiproliferativos sobre o crescimento celular foi o mais comumente quantificado pelo valor de IC50, que é definido como aquela concentração do composto que reduz a taxa of proliferação celular à metade daquela observada na ausência de composto (isto é, para a amostra veículo ou solvente controle; Figura 2). A IC50, entretanto, não permite que o investigador diferencie entre compostos citostáticos e citotóxicos. A LCC, ao contrário, permite facilmente que uma pessoa faça tal diferenciação e ainda quantifique a concentração na qual a transição para comportamento citotóxico robusto ocorre.
[02978] Se uma pessoa limita a janela de tempo de observação entre o início do impacto (conforme definido acima e na Figura 2) e o final do experimento, em se-guida, os dados, em geral, se ajustarão adequadamente a uma equação linear quando plotada como ln(Nt) como uma função de tempo (vide supra). A partir de ajustes deste tipo, o valor de kp pode ser determinado em cada concentração de composto testado.Um replot do valor de kp como uma função da concentração do composto ([I]) terá a forma de um isoterma descendente, com um valor máximo a [I] = 0 de kmáx (definido pela amostra veículo ou solvente controle) e um valor mínimo na concentração infinita do composto de kmín Figura 3).
[02979] onde Imid é a concentração do composto, fornecendo um valor de kp que é a metade entre os valores de kmax e kmin (observe que o valor de Imid não é o mesmo da IC50, exceto no caso de um composto completo e puramente citostático). Assim, o ajuste dos dados de replot à equação A.7 fornece estimativas de kmax, kmin e Imid. Se um composto é citostático (conforme definido neste relatório), o valor de kmin não pode ser menor do que zero. Para compostos citotóxicos, kmin será menor do que zero e o valor absoluto de kmin estará diretamente relacionado à eficácia do composto em células de morte.
[02980] Os valores ajustados derivados da equação A.7 também podem ser usados para determinar o valor da LCC. Por definição, quando [I] = LCC, kp = 0. As- sim, sob estas condições, a equação A.7 é dada.
[02981] O reagrupamento algébrico da equação A.8 produz uma equação para a LCC.
[02982] Esta análise é simples de implementar com software de ajuste de curva não linear e pode ser aplicada durante os ensaios celulares da atividade do composto por todo o processo de descoberta e desenvolvimento do fármaco. Desta maneira, a LCC pode fornecer uma métrica valiosa para a determinação do SAR do composto (relação estrutura-atividade).
[02983] A Tabela 4 abaixo fornece dados de LCC e IC50 para certos compos- tos da invenção em células WSU-DLCL2. Tabela 4
[02984] Exemplo 48: Ensaio In vivo
[02985] Camundongos
[02986] Camundongos fêmeas Fox Chase SC1D® (CB17/Icr- Prkdcscid/IcrIcoCrl, Charles River Laboratories) ou camundongos nus atímicos (Crl:NU(Ncr)-Foxn1mu Charles River Laboratories) apresentavam 8 semanas de vida e uma faixa de peso corpóreo (BW) de 16,0 a 21,1 g no D1 do estudo. Aos animais foi fornecida água à vontade (osmose reversa Cl 1 ppm) e NIH 31 Modified and Irradiated Lab Diet® que consiste de 18,0 % de proteína bruta, 5,0 % de gordura bruta, e 5,0 % de fibra bruta. Os camundongos foram alojados em colchão Enrich-o’cobs(TM) irradiado em microisolantes estáticos em um ciclo de luz de 12 horas entre 20 a 22 °C (68 a 72 °F) e 40 a 60 % de umidade. Todos os procedimentos são condescendentes com as recomendações do Guide for Care and Use of Laboratory Animals com respeito a procedimentos de restrição, agrícola, cirúrgicos, regulação de alimentação e fluido e cuidado veterinário.
[02987] Cultura Celular do Tumor
[02988] Linhagens celulares de linfoma humano foram obtidas a partir de fontes diferentes (ATCC, DSMZ) e mantidas em Piedmont como culturas de suspensão em meio RPMI-1640 contendo 100 unidades/mL de penicilina G-sal de sódio, 100 g/mL de estreptomicina e 25 g/mL de gentamicina. O meio foi suplementado com soro fetal bovino a 10 % e glutamina 2 mM. As células foram cultivadas em frascos de cultura de tecido em um incubador umedecido a 37 °C, em uma atmosfera de CO2 a 5 % e ar a 95 %.
[02989] Implante do Tumor In Vivo
[02990] Linhagens celulares de linfoma humano, por exemplo, células WSU- DLCL2, foram coletadas durante o crescimento de fase mid-log, e recolocadas em suspensão em PBS com 50 %) Matrigel(TM) (BD Biosciences). Cada camundongo recebeu 1 x 107 células (0,2 mL de suspensão celular) subcutaneamente no flanco direito.
[02991] Os tumores foram calibrados em duas dimensões para monitorar o crescimento conforme o volume médio abordou a faixa de 80 a 120 mm3 desejada. O tamanho do tumor, em mm3, foi calculado a partir de:
[02992] onde w = largura e/ = comprimento, em mm, do tumor. O peso do tumor pode ser estimado assumindo que 1 mg é equivalente a 1 mm3 do volume do tumor. Depois de 10 a 30 dias, os camundongos com tumores de 108 a 126 mm3 foram organizados em grupos tratamento com volume médio dos tumores de 117 a 119 mm3.
[02993] Artigos de Teste
[02994] Os compostos de teste foram armazenados na temperatura ambiente e protegidos da luz. Em cada dia do tratamento, formulações do composto frescas foram preparadas através da suspensão dos pós em carboximetilcelulose sódica a 0,5 % (NaCMC) e Tween® 80 a 0,1 % em água desionizada. O veículo EM10, NaCMC a 0,5 % e Tween® 80 0,1 % em água desionizada foi usado para tratar os grupos controle nos mesmos programas. As formulações foram armazenadas longe da luz a 4 °C antes da administração.
[02995] Plano de Tratamento
[02996] Os camundongos foram tratados em doses do composto variando de 1 a 1000 mg/kg e em programas de TID (3 vezes ao dia a cada 8 h), BID (duas vezes ao dia a cada 12 h) ou QD (uma vez ao dia) para várias quantidades de dias por oral gavagem ou injeções por intermédio das vias intravenosas, intraperitoneais ou subcutâneas. Cada dose foi liberada em um volume de 0,2 mL/20 g de camundongo (10 mL/kg), e ajustada para o último peso registrado de animais individuais. A duração de tratamento máxima foi de 28 dias.
[02997] Análise do Volume do Tumor Médio (MTV) e Inibição do Crescimento do Tumor (TGI)
[02998] A eficácia do tratamento foi determinada no último dia do tratamento.MTV(n), o volume do tumor médio para o número de animais, n, avaliável no último dia, foi determinado para cada grupo. A porcentagem da inibição do crescimento do tumor (% de TGI) pode ser definida de várias maneiras. Primeiro, a diferença entre o MTV(n) do grupo controle designado e o MTV(n) do grupo tratado com fármaco é expressada como uma porcentagem do MTV(n) do grupo controle:
[02999] Uma outra maneira de calcular a % de TG1 é tomando a mudança do tamanho do tumor a partir do dia 1 ao dia n com n sendo o último dia do tratamento.
[03000] Análise do retardo do crescimento do tumor
[03001] Alternativamente, os camundongos foram mantidos vivos depois do último dia do tratamento para a análise do retardo do crescimento do tumor. Os tumores foram medidos duas vezes na semana e cada animal de teste foi submetido à eutanásia quando seu neoplasma atingiu a volume de 2000 mm3 ou no último dia pré- especificado do estudo, o que viesse primeiro. O time-to-endpoint (TTE) para cada camundongo foi calculado a partir da equação seguinte:
[03002] onde b é the intercepção e m é a inclinação da linha obtida por regressão linear de um grupo de dados de crescimento do tumor log-transformado. Os grupos de dados foram compostos da primeira observação que excedeu o volume final do estudo e as três observações consecutivas que imediatamente antecederam o alcance do volume final. Os animais que não atingiram o volume final foram determinados como um valor de TTE igual ao último dia do estudo (pré-especificado). Qualquer animal classificado como uma morte relacionada ao tratamento (TR) foi determinado como um valor de TTE igual ao dia da morte. Qualquer animal classificado como uma morte relacionada a não tratamento (NTR) foi excluído dos cálculos de TTE e de todas as outras análises.
[03003] O resultado do tratamento foi determinado a partir do retardo do crescimento do tumor (TGD), definido como o aumento no TTE médio em um grupo tratamento em comparação ao grupo controle:
[03004] expressado em dias, ou como uma porcentagem do TTE médio do grupo controle:
[03005] onde:
[03006] T = TTE médio para um grupo tratamento
[03007] C = TTE médio para o grupo controle
[03008] Toxicidade
[03009] Os animais foram pesados diariamente nos Dias 1 a 5, e depois duas vezes por semana até a conclusão do estudo. Os camundongos foram examinados com frequência para sinais evidentes de quaisquer efeitos colaterais adversos relacionados ao tratamento que foram documentados. A toxicidade aceitável para a dose máxima tolerada (MTD) foi definida como uma perda de BW média do grupo menor do que 20 % durante o teste, e não mais do que 10 % de mortalidade devido a mortes por TR. Uma morte foi classificada como TR se ela foi atribuível a efeitos colaterais do tratamento, conforme evidenciado por sinais clínicos e/ou necropsia, ou devido a causas desconhecidas durante o período de dosagem. Uma morte foi classificada como NTR se houve evidência de que a morte não foi relacionada aos efeitos colaterais do tratamento. As mortes por NTR durante o intervalo de dosagem tipicamente seriam categorizadas como NTRa (devido a um acidente ou erro humano) ou NTRm (devido à disseminação do tumor confirmada por necropsia por invasão e/ou metás- tase). Animais oralmente tratados que morreram de causas desconhecidas durante o período de dosagem podem ser classificados como NTRu quando o desempenho do grupo não suporta uma classificação de TR e necropsia, para descartar um erro de dosagem, não é possível.
[03010] Amostragem
[03011] Em vários dias durante o estudo, os camundongos foram experimentados em uma forma pré-específica. A amostragem incluiu sangrias não terminais (0,25 mL) a partir da veia mandibular sem anestesia e coleta de sangue de volume total por intermédio de punção cardíaca terminal sob anestesia com CO2. As amostras de sangue foram processadas para o plasma, com K2-EDTA como anticoagulante. As amostras de plasma foram congeladas a -80 °C e armazenadas antes da bioanálise dos níveis do composto.
[03012] Os tumores foram coletados a partir de camundongos especificados sob condições livres de RNAse e divididos em duas partes. Uma parte de 2 mm de espessura a partir de uma metade de cada tumor foi fixada com formalina durante 24 h e transferida para etanol a 70 %. Os tecidos de tumor fixados foram embebidos em parafina. O tecido de tumor remanescente a partir de cada animal foi congelado por pressão em N2 líquido e pulverizado com um almofariz e pilão.
[03013] Os camundongos especificados foram experimentados quanto aos tecidos substitutos, incluindo baço, pele, medula óssea e bigode. Cada tecido foi isolado e fixado e/ou congelado por pressão.
[03014] Análises Estatísticas e Gráficas
[03015] Todas as análises estatísticas e gráficas foram realizadas com Prism 3.03 (GraphPad) para Windows. Vários métodos de análises foram aplicados. Os volumes do tumor D29 médios foram comparados com o teste de Kruskal-Wallis, e um teste pós-hoc de múltipla comparação de Dunn. Estes testes foram realizados três vezes.
[03016] As análises estatísticas bidirecionais foram conduzidas em P = 0,05. Prism relata os resultados como não significantes (ns) em P > 0,05, significantes (representado por “*”) em 0,01 < P < 0,05, muito significantes (“**”) em 0,001 < P < 0,01 e extremamente significantes (“***”) em P < 0,001.
[03017] Para testar a significância estatística entre os grupos controle e tratados durante o curso de tempo de tratamento total, um teste ANOVA de medidas repetidas, seguido por pós teste de comparação múltipla de Dunnets ou um teste ANOVA bidirecional, foi utilizado.
[03018] Para representações gráficas, diagrama em “caixa e whiskers” foi construído para mostrar a distribuição de volumes do tumor individuais para cada grupo. A caixa representa entre 25o a 75o percentil de observações, a linha horizontal corresponde ao valor médio, e os “whiskers” indicam os valores máximos e mínimos. Os volumes do tumor médios (± SEM) foram graficamente representados em um gráfico semilog ou linear como funções de tempo. As mudanças médias BW do grupo durante o estudo foram graficamente representadas como porcentagem de mudança, ± SEM, a partir de D1.
[03019] Um diagrama de dispersão foi construído para mostrar os valores de TTE, por grupo. O diagrama de TTE inclui mortes NTR, que são excluídas de todos as outras análises gráficas. Quando um animal saiu do estudo por causa do tamanho do tumor, o volume do tumor final registrado para o animal foi incluído com os dados usados para calcular o volume médio em pontos no tempo subsequentes. A porcentagem de animais em cada grupo remanescente no estudo versus tempo foi apresentada em um diagrama de sobrevivência de Kaplan-Meier.
[03020] Extração de Histona
[03021] Para o isolamento de histonas, 60 a 90 mg de tecido de tumor foram homogeneizados em 1,5 ml de tampão de extração nuclear (Tris-HCl 10 mM, MgCl2 10 mM, KCl 25 mM, Triton X-100 a 1 %, Sacarose a 8,6 %, mais um tablete 1 de inibidor de protease Roche 836145) e incubados em gelo durante 5 minutos. Os núcleos foram coletados por centrifugação a 600 g durante 5 minutos a 4 °C e lavados uma vez em PBS. O sobrenadante foi removido e as histonas extraídas durante uma hora, com vórtex a cada 15 minutos, com ácido sulfúrico frio 0,4 N. Os extratos foram clarificados por centrifugação a 10000 g durante 10 minutos a 4 °C e transferidos a um tubo microcentrifugador fresco contendo volume 10x de acetona gelada. As histo- nas foram precipitadas a -20 °C durante 2 horas durante a noite, peletizadas por centrifugação a 10000 g durante 10 minutos e recolocadas em suspensão em água.
[03022] Análise Western Blot
[03023] As concentrações de proteína para histonas extraídas com ácido foram determinadas pelo ensaio BCA (Pierce). 400 a 800 ng de cada lisato foram fracionados em gel de Tris-Glicina a 10 a 20 % (Biorad), transferidos usando iBlot (7 minutos no programa 3, usando pilhas de transferência de Nitrocelulose), e colocados em sonda com os anticorpos seguintes em tampão de bloqueio Odyssey: anti- H3K27me3 de coelho (CST 9733; diluição 1:20000) e anti-Total H3 de camundongo (CST 3638; diluição 1:20000). Após a incubação de Ab primário, as membranas foram colocadas em sonda com Ab secundário IgG Donkey-anti-camundongo IRDye 800CW (LiCOR #926-32212) e IgG cabra-anti-coelho Alexa Fluor 680 (Invitrogen #A-21076) e visualmente representadas usando o sistema LiCOR Odyssey.
[03024] ELISA
[03025] As histonas foram preparadas em concentrações equivalentes em tampão de revestimento (PBS + BSA a 0,05 %), produzindo 0,5 ng/μl de amostra, e 100 μl de amostra ou padrão foram adicionados em duplicata a 2 placas de ELISA de 96 poços (Thermo Labsystems, Immulon 4HBX #3885). As placas foram vedadas e incubadas durante a noite a 4 °C. No dia seguinte, as placas foram lavadas 3x com PBST 300 pl/poço (PBS + Tween 20 a 0,05 %; PBST 10X, KPL #51-14-02) em um lavador de placa Bio Tek. As placas foram bloqueadas com 300 μl/poço de diluente (PBS + BSA a 2 % + Tween 20 a 0,05 %), incubadas na temperatura ambiente durante 2 horas, e lavadas 3x com PBST. Todos os anticorpos foram diluídos em diluente. 100 pl/poço de anti-H3K27me3 (CST #9733, estoque de glicerol a 50 % 1:1.000) ou H3 anti-total (Abcam ab1791, glicerol a 50 % 1:10.000) foram adicionados a cada placa. As placas foram incubadas durante 90 min na temperatura ambiente e lavadas 3x com PBST. 100 μl/poço de anti-Rb-IgG-HRP (Cell Signaling Technology, 7074) foram adicionados 1:2.000 à placa de H3K27Me3 e 1:6.000 à placa H3 e incubados durante 90 min na temperatura ambiente. As placas foram lavadas 4X com PBST. Para detecção, 100 μl/poço de substrato de TMB (BioFx Laboratories, #TMBS) foram adicionados e as placas incubadas no escuro na temperatura ambiente durante 5 min. A reação foi resfriada com 100 μl/poço de H2SO4 1 N. A absorvância a 450 nm foi lida em leitor Microplate SpectaMax M5.
[03026] Os resultados in vivo para o Composto 222 foram mostrados nas Figuras 4 e 5. A Figura 4 mostra o crescimento do tumor de camundongos portadores de tumor de xenoenxerto de WSU-DLCL2 tratados com o Composto 222 durante 27 dias. A inibição do crescimento do tumor foi observada em todas as 3 doses de 100 mg/kg (b.i.d., 27 dias), 200 mg/kg (b.i.d., 27 dias) e 400 mg/kg (400 mg/kg b.i.d. 7 dias, 0 mg/kg durante 7 dias e 300 mg/kg b.i.d., 13 dias). A Figura 5 mostra a metilação de H3K27me3 global em tumores WSU-DLCL2 a partir de camundongos tratados com o composto 222 ou veículo durante 27 dias. Esta figura mostra uma redução na marca de H3K27Me3 para cada um dos grupos de dose.
[03027] INCORPORAÇÃO COMO REFERÊNCIA
[03028] A divulgação total de cada um entre os documentos de patente e artigos científicos referidos neste relatório é incorporada como referência para todos os propósitos.
[03029] EQUIVALENTES
[03030] A invenção pode ser realizada em outras formas específicas sem divergir do espírito ou características essenciais da mesma. As modalidades precedentes, portanto, devem ser consideradas em todos os respeitos ilustrativos ao invés de limitar a invenção descrita neste relatório. O escopo da invenção é, assim, indicado pelas reivindicações anexas ao invés da descrição precedente, e todas as mudanças no significado e faixa de equivalência das reivindicações são abrangidas na mesma.

Claims (19)

1. Composto CARACTERIZADO pelo fato de que apresenta a Fórmula (Ie) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: em que Z é NR7R8 ou S(O)aR7, em que a é 0; R1 é H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituída por um ou mais substituin- tes selecionados dentre hidroxila, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di- alquilamino C1-C6 e arila C6-C10; cada um dentre R2 e R4 é, independentemente, -Q1-T1, em que Q1 é uma ligação ou um ligante alquila C1-C3 opcionalmente substituído por um ou mais substi- tuintes selecionados dentre halo e hidroxila, e T1 é H, halo ou azido; R3 é H ou halo; R5 é H ou alquila C1-C6; R6 é H, halo, ciano, azido, ORa, -NRaRb, -C(O)NRaRb,-S(O)bRa ou RS2, em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros, em que b é 0, 1 ou 2, e em que cada um dentre Ra e Rb é, independentemente, H, alquila C1-C6, ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um dentre Ra, RS2 e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído por um ou mais -Q2-T2; em que Q2 é uma ligação ou um ligante alquila C1C3, e T2 é H, halo, -ORc, -NRcRd, -C(O)ORc, alquila CI-C6,OU RS4, em que cada um dentre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1-C6, RS4 é cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e RS4 é opcionalmente substituído por um ou mais -Q3-T3, em que Q3 é uma ligação ou um ligante alquila C1-C3, cada um opcionalmente substituído por halo, ciano, hidro- xila ou alcóxi C1-C6, e T3 é selecionado dentre o grupo que consiste em halo, ciano, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ORe, COORe, -S(O)2Re, -NReRf e -C(O)NReRf, cada um dentre Re e Rf sendo, independentemente, H ou alquila C1-C6, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional e opcionalmente substituído por alquila C1-C6; R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou um ligante alquila C1-C4 e T4 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, alquila C(O)-C1-6, cicloalquila C(O)-C3-6 ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros, cada um opcionalmente substituído por um ou mais -Q5-T5, em que Q5 é uma ligação, C(O), C(O)NRk, NRkC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rk sendo H ou alquila C1-C6, e T5 é H, halo, alquila C1-C6, hidroxila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, cicloal- quila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, ou S(O)qRq, em que q é 0, 1 ou 2 e Rq é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e T5 é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados dentre o grupo que consiste em halo, alquila C1-C6, hidro- xila, ciano, alcoxila C1-C6, amino, mono-alquilamino C1-C6, di-alquilamino C1-C6, ciclo- alquila C3-C8, arila C6-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando T5 é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -Q5-T5 é oxo; R8 é H, alquila C1-C6 opcionalmente substituída por halo, hidroxila ou alcoxila C1-C6, alquenila C2-C6, cicloalquila C3-C8, ou heterocicloalquila de 4 a 7 membros; ou R7 e R8, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 a 2 heteroátomos adicionais, e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por R7 e R8 é opcionalmente substituído por um ou mais -QG-TG, em que QG é uma ligação, C(O), C(O)NRm, NRmC(O), S(O)2, ou ligante alquila C1-C3, Rm sendo H ou alquila CI-CG, e TG é H, halo, alquila CI-CG, hidroxila, ciano, alcoxila C1-Cg, amino, mono-alquilamino C1-Cg, di-alquilamino C1-Cg, cicloalquila C3-C8, arila Cg-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou g membros, ou S(O)pRp, em que p é 0, 1 ou 2 e Rp é alquila C1-Cg, alquenila C2- Cg, alquinila C2-Cg, cicloalquila C3-C8, arila Cg-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros ou heteroarila de 5 ou 6 membros, e TG é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados dentre o grupo que consiste em halo, alquila C1-Cg, hidroxila, ciano, alcoxila C1-Cg, amino, mono-alquilamino C1-Cg, di-alquilamino C1-Cg, cicloalquila C3-C8, arila Cg-C10, heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e heteroarila de 5 ou 6 membros, exceto quando TG é H, halo, hidroxila ou ciano; ou -QG-TG é oxo; e R12 é halo, alcoxila C1-Cg ou alquila C1-Cg opcionalmente substituída por halo ou C2-Cg alquenila.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o composto apresenta a fórmula (II):
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o composto apresenta a fórmula (IIA): em que n é 0, 1 ou 2; U é O, S, N-Q5-T5, ou CH-Q5-T5; e R12 é Cl, Br ou metila.
4. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3, N- (5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metilfenil)furan-2-car- boxamida, N,N’-(5-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-1,3-fe- nileno)diacetamida, N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-3-pivalamido- benzamida, 3-(3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]dioxepina-7-sulfonamido)-N-((4,6-dimetil- 2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)benzamida, N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiri- din-3-il)metil)-3,5-dimetoxibenzamida, N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-3,4,5-trimetoxibenzamida, 3-alil-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidropiridin-3- il)metil)-4,5-dimetoxibenzamida, 4-(2-amino-2-oxoetóxi)-3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metoxibenzamida, 3-cloro-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-di- hidropiridin-3-il)metil)-4-hidróxi-5-metoxibenzamida ou 3-bromo-N-((4,6-dimetil-2-oxo- 1,2-di-hidropiridin-3-il)metil)-5-metóxi-4-propoxibenzamida, ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que: R1 é H ou alquila C1-C6 opcionalmente substituída uma ou mais vezes por um substituinte selecionado dentre hidroxila, alcoxila C1-C6 e arila C6-C10; R7 é -Q4-T4, em que Q4 é uma ligação ou um ligante alquila C1-C4, e T4 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, arila C6-C10, C(O)-alquila C1-C6, C(O)-cicloalquila C3-C6, di- hidropiranila, tetrahidropiranila, tetrahidrotiopiranial, piperidinila, pirrolidinila, azeti- dinila e oxetanila, cada um opcionalmente substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados dentre oxo e -Q5-T5; R8 é H, alquila C1-C6, haloalquila C1-C6, alquenila C2-C6 ou cicloalquila C3-C8; e R12 é halo, alquila C1-C6, haloalquila C1-C6 ou alcoxila C1-C6.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que: Z é NR7R8ou SR7; R6 é H, halo, ciano, ORa, -C(O)NRaRb, -S(O)2Ra, ou RS2; em que RS2 é alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros, e em que cada um dentre Ra e Rb é, independentemente, H ou alquila C1-C6; ou Ra e Rb, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterociclo- alquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional; e cada um dentre RS2 e o anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros formado por Ra e Rb, é opcionalmente substituído por um ou mais -Q2-T2; em que Q2 é uma ligação ou um ligante alquila C1C3, e T2 é H, halo, -ORc, -NRcRd, -C(O)O-alquila C1-C6 ou alquila C1-C6, em que cada um dentre Rc e Rd é, independentemente, H ou alquila C1-C6, ou Rc e Rd, juntamente com o átomo de N ao qual eles são ligados, formam um anel heterocicloalquila de 4 a 12 membros tendo 0 ou 1 heteroátomo adicional e 0 ou 1 substituinte alquila C1-C6; R7 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, dihidropiranila, tetrahidropiranila, tetra- hidrotiopiranila, piperidinila, pirrolidinila, azetidinila e oxetanila, cada um opcionalmente substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados dentre oxo e -Q5-T5; e R12 é halo ou alquila C1-C6.
7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que cada R2, R4 e R12 é, independentemente, alquila C1-C6 e R5é H.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R7 é ciclohexila, dihidropiranila, tetrahidropiranila, tetrahidrotiopiranila, piperi- dinila, pirrolidinila, azetidinila, oxetanila, 1,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-ila, 1-oxaes- piro[4.5]decan-8-ila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-isobenzofuran]-4-ila, 7’H-espiro[ci- clo-hexano-1,5’-furo[3,4-b]piridin]-4-ila, 3’H-espiro[ciclo-hexano-1,1’-furo[3,4-c]piri- din]-4-ila ou 1-azaespiro[4.5]decan-8-ila, cada uma substituída por um ou mais -Q5-T5.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que Z é selecionado dentre o grupo que consiste em piperidinila, morfolinila, pipe- razinila, azetidinila, pirrolidinila, 2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptan-5-ila, e 1,4-dioxa-8- azaespiro[4.5]decan-8-ila, cada uma opcionalmente substituída por -Q6-T6.
10. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que (i) R6 é halo e Z é SR7, em que R7 é alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8 ou hete-rocicloalquila de 4 a 7 membros e R7 é opcionalmente substituído por um ou mais - Q5-T5; ou (ii) R6 é -S(O)bRa ou azido, em que b é 0, 1 ou 2 e Ra é alquila C1-C6; e Z é NR7R8, em que R7 é cicloalquila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 14 membros, cada um opcionalmente substituído por um ou mais -Q5-T5; e R8 é H ou alquila C1-C6.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que (i) Q5 é uma ligação e T5 é H, alquila C1-C6, cicloalquila C3-C8, heterocicloal- quila de 4 a 12 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, amino, mono-alquilamino C1-C6 ou di-alquilamino C1-C6, T5 sendo opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados dentre o grupo que consiste em halo, hidroxila, alcoxila C1- C6 ou cicloalquila C3-C8; (ii) Q5 é CO, S(O)2, ou NHC(O), e T5 é alquila Ci-Cβ, alcoxila Ci-Cβ, cicloal- quila C3-C8 ou heterocicloalquila de 4 a 12 membros; ou (iii) Q5 é ligante alquila C1-C3 e T5 é H, arila Cβ-Cio, cicloalquila C3-C8, hete- rocicloalquila de 4 a i2 membros, ou S(O)qRq.
12. Composto, de acordo com a reivindicação i, CARACTERIZADO pelo fato de que um ou mais -Q5-T5 é oxo.
13. Composto, de acordo com a reivindicação 3, CARACTERIZADO pelo fato de que U é CH-Q5-T5 e n é 0.
14. Composto, de acordo com a reivindicação i, CARACTERIZADO pelo fato de que (i) um ou mais -Qβ-Tβ é oxo; ou (ii) Qβ é uma ligação ou C(O) e Tβ é alquila Ci-Cβ e alcoxila Ci-Cβ.
15. Composto, de acordo com a reivindicação i, CARACTERIZADO pelo fato de que Rβ é halo ou Rβ é alquinila C2-Cβ opcionalmente substituído por um ou mais - Q2-T2.
16. Composto, de acordo com a reivindicação i5, CARACTERIZADO pelo fato de que Ri2 é alquila Ci-Cβ ou halo.
17. Composto, de acordo com a reivindicação i5, CARACTERIZADO pelo fato de que -Q2-T2 é heterocicloalquila de 4 a i2 membros opcionalmente substituído por um ou mais -Q3-T3.
18. Composto, de acordo com a reivindicação i, CARACTERIZADO pelo fato de que um Z é NR7R8, em que R8 é H e R7 é alquila Ci-Cβ opcionalmente substituída por alcoxila Ci-Cβ.
19. Composto CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado dentre: e um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
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