BR112012021445B1 - formulação farmacêutica ou neutracêutica, e uso de um agente promotor de biodisponibilidade - Google Patents

Abstract

FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA OU NEUTRACÊUTICA. A invenção refere-se a um formulação farmacêutica ou nutracêutica compreendendo um núcleo, compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração e um agente promotor de biodisponibilidade, e um revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo, caracterizada pelo fato em que o agente promotor de biodisponibilidade é um inibidor farmaceuticamente aceitável de enzimas proteolíticas, que aumenta a biodisponibilidade oral do ingrediente ativo por um fator de pelo menos cinco, comparado a uma formulação correspondente sem o agen-te promotor de biodisponibilidade.

Description

Campo da Invenção

A invenção refere-se à formulação farmacêutica ou nutracêutica compreendendo um núcleo compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração, um agente promotor de bi- odisponibilidade que aumenta a biodisponibilidade do ingrediente ativo e um revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo.

Antecedentes Técnicos

DE 19724458 A1 descreve o uso de enzimas proteolíticas para a melhora da absorção de ingredientes ativos farmacêuticos.

EP 1302201 A1 descreve composições farmacêuticas melhoradas em capacidade de absorção peroral. A composição compreende um fár- maco, um copolímero E de metacrilato de aminoalquila e uma substância ácida.

EP 1466626 A1 descreve composições médicas para melhorar a absorção oral. O copolímero E de metacrilato de aminoalquila é descrito nesta como um agente para inibir a decomposição de um peptídeo ativo biológico.

WO2005007139A2 descreve uma forma farmacêutica multiparti- culada oral compreendendo péletes tendo um tamanho na faixa de 50 a 2500 μ m, que são substancialmente compostas de a) uma camada de matriz interna compreendendo uma substância ativa que é um peptídeo ou uma proteína, incluindo derivados ou conjugados destes, e é embutida em uma matriz de um polímero tendo um efeito mucoa- desivo, onde a matriz pode compreender opcionalmente excipientes farma- ceuticamente usuais adicionais, b) um revestimento de película externo consistindo essencialmente em um polímero ou copolímero aniônico que pode ser opcionalmente formulado com excipientes farmaceuticamente usuais, especialmente plastifi- cantes, caracterizado em que a forma farmacêutica multiparticulada é formulada de modo que as péletes contidas são liberadas na faixa do pH do estômago, o revestimento externo é ajustado através da escolha do polímero ou copolímero aniônico ou sua formulação com excipientes e sua espessura da camada tal que o revestimento dissolve nas faixas do pH de 4,0 a 8,0 no intestine dentro de 15 a 60 min, de modo que a camada de matriz mucoadesiva, contendo substância ativa é exposta, e pode ligar-se à mucosa intestinal e liberar a substância ativa nessa, onde o polímero tendo um efeito mucoadesivo é escolhido de modo que ele exibe um efeito mucoadesivo de r|b = 150 a 1000 mPa s e uma captação de água de 10 a 750 % em 15 min em uma faixa de +/- 0,5 unidade de pH em relação ao pH no qual o revestimento externo começa a dissolver, e o teor de substância ativa da camada de matriz é um máximo de 40 % em peso do teor de polímero tendo um efeito mucoadesivo.

É mencionado que a camada de matriz mucoadesiva pode conter excipientes adicionais tais como inibidores de protease, por exemplo, um inibidor de tripsina de soja, ou promotores de penetração. Entretanto é sugerido usar promotores de penetração apenas em combinação com ingredientes ativos de peso molecular alto (Mw) tais como proteínas com um Mw de 10.000 ou mais. Inibidores de protease podem ser usados em combinação com proteínas ou peptídeos com um Mw de 3.000 a 10.000 e estabilizadores tais como ácidos graxos ou álcoois graxos que formam uma matriz lipofílica. Não existe nenhum exemplo concreto em que inibidores de protease e pro-motores de penetração são combinados.

EP 1771157 B1 descreve uma forma de dosagem farmacêutica de multipartícula para uma substância ativa fracamente solúvel e método para produzir a dita forma de dosagem farmacêutica.

WO 2006/061069 A1 descreve uma forma de multipartícula de administração compreendendo ingredientes ativos mucoadesivos contendo ácido nucleico e métodos para produzir as ditas formas de administração.

O inibidor de Bowman-Birk (BBI) é uma designação bem conhecida de uma família de inibidores de tripsina e quimiotripsina de peso molecular baixo estáveis encontrados em sojas e várias outras sementes, princi-

palmente em sementes leguminosas e materiais vegetais. Ver por exemplo US 5.962.414 ou US 6.767.564.

US 6.767.564 B2 descreve o uso de inibidor de Bowman-Birk (BBI) para o tratamento de esclerose múltipla e outras doenças autoimunes tais como Síndrome de Guillian Barre e artrite reumatoide. É mencionado que o inibidor de Bowman-Birk oralmente ingerido é absorvido e tem efeitos sistêmicos. Aproximadamente 50 % do inibidor de Bowman-Birk ingerido são absorvidos na circulação sanguínea. É mencionado ainda que o concentrado de inibidor de Bowman-Birk (BBIC), um extrato derivado de soja enriquecido no inibidor de protease, é supostamente um melhor inibidor de quimases humanas do que qualquer outro inibidor de protease fisiológico descrito até agora.

Problema e solução

Durante seus estudos os inventores descobriram que formulações farmacêuticas ou nutracêuticas compreendendo um núcleo, compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração e um revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo forneceram bons efeitos de penetração celular em ensaios de célula in vitro.

Entretanto, os resultados promissores obtidos com o ingrediente ativo desmopressina in vitro levam apenas a resultados insatisfatórios in vivo. Quando as formulações correspondentes foram testadas in vivo em mi- niporcos apenas biodisponibilidade de fluidez, medida in vivo como os níveis de concentração plasmática, pode ser detectada.

Visto que desmopressina é um peptídeo a adição de um inibidor enzimático proteolítico que pode impedir a degradação enzimática do peptídeo por enzimas pancreáticas in vivo foi testada primeiro in vitro e depois in vivo. No ensaio in vitro na presença de um coquetel de enzima pancreática contendo diferentes peptidases e proteinases um certo efeito protetor da a- dição do inibidor de Bowman-Birk (BBI) como inibidor enzimático proteolítico foi observado. Foi esperado encontrar este efeito sobre o mesmo nível ou um pouco mais baixo no sistema in vivo.

Entretanto, para a grande surpresa dos inventores o efeito in vivo da adição do inibidor de Bowman-Birk foi mais do que cinco vezes respectivamente quase dez vezes mais alto do que esperado. Devido ao fato de que o efeito in vivo foi muito mais alto comparado aos resultados in vitro os inventores mostram que este efeito não pode ser explicado meramente pelo efeito protetivo do inibidor enzimático proteolítico contra as enzimas pan- creáticas. Além disso, parece haver um novo efeito desconhecido que aumenta a biodisponibilidade de ingredientes ativos causada pela adição de um inibidor enzimático proteolítico em geral ou pelo menos por um tal de origem vegetal ou pelo menos pelo inibidor de Bowman-Birk em combinação com os outros elementos do sistema conforme reivindicado. Assim os inventores acreditam que a formulação farmacêutica ou nutracêutica conforme reivindicada será aplicável a outros ingredientes ativos que não são peptí- deos ou proteínas igualmente.

Foi um objetivo da presente invenção fornecer uma formulação farmacêutica ou nutracêutica compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico para aplicações orais com biodisponibilidade aumentada.

O problema foi resolvido por uma formulação farmacêutica ou nutracêutica compreendendo um núcleo, compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração e um agente promotor de biodisponibilidade, e um revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo, caracterizado em que, o agente promotor de biodisponibilidade é um inibidor farmaceuticamente aceitável de enzimas proteolíticas, que aumenta a biodisponibili-dade oral do ingrediente ativo por um fator de pelo menos cinco, comparado a uma formulação correspondente sem o agente promotor de biodisponibilidade.

Descrição detalhada

Formulação farmacêutica ou nutracêutica

A invenção refere-se a uma formulação farmacêutica ou nutra- cêutica compreendendo um núcleo compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração, um agente promotor de biodisponibilidade que aumenta a biodisponibilidade oral do ingrediente ativo e um revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo.

Em uma forma de realização simples a formulação farmacêutica ou nutracêutica é um comprimido de matriz revestido. Entretanto é preferido que a formulação farmacêutica ou nutracêutica seja formulação multiparticu- lada.

Formulação farmacêutica ou nutracêutica multiparticulada

A invenção refere-se preferivelmente a uma formulação farmacêutica ou nutracêutica multiparticulada compreendendo uma grande quantidade de partículas em uma unidade de dosagem. As partículas são preferivelmente péletes revestidos ou não revestidos.

Tamanhos de partícula preferidos podem ser 0,2 a 2, preferivelmente 0,3 a 1 mm. O tamanho de partícula pequeno comparativo tem a vantagem de que existe pelo menos no caso de péletes revestidos uma transferência rápida e segura do estômago ao duodeno. Em todos os casos existe a vantagem de uma padronização alta da dosagem de ingrediente ativo e boa distribuição no intestino.

Uma formulação farmacêutica ou nutracêutica multiparticulada pode conter 10 a 1000, preferivelmente 50 a 500 partículas que são preferivelmente péletes revestidos ou não revestidos.

O medicamento na forma de multicamada da presente invenção faz sentido principalmente como uma forma farmacêutica ou nutracêutica multiparticulada.

A forma multiparticulada pode ser por exemplo, um comprimido contendo pélete ou comprimido prensado, um minicomprimido, um sachê ou uma cápsula enchida com uma pluralidade de partículas ou péletes contendo ingrediente ativo.

Todos estes termos são bem conhecidos a uma pessoa habilitada no campo de farmácia e arte galênica.

O termo comprimido contendo pélete ou comprimido prensado é bem conhecido a uma pessoa habilitada. Um tal comprimido pode ter um tamanho em torno de 5 a 25 mm por exemplo. Usualmente, pluralidades definidas de péletes pequenos contendo ingrediente ativo são comprimidas neste junto com excipientes de ligação para fornecer a forma de comprimido bem conhecida. Depois da ingestão oral e contato com o fluido corporal a forma de comprimido é rompida e os péletes são liberados. O comprimido prensado combina a vantagem da forma de dose única para ingestão com as vantagens de uma forma múltipla, por exemplo, a precisão de dosagem.

O termo minicomprimido é bem conhecido à pessoa habilitada. Um minicomprimido é menor do que o comprimido tradicional e pode ter um tamanho em torno de 1 a 4 ou menos do que 5 mm. O minicomprimido é, como um pélete, uma forma de dosagem única a ser usada em dosagens múltiplas. Em comparação a péletes, que podem estar no mesmo tamanho, minicomprimidos usualmente têm a vantagem de ter superfícies mais regulares que podem ser revestidas mais perfeitamente e mais uniformemente. Minicomprimidos podem ser fornecidos inclusos em cápsulas, tais como cápsulas de gelatina. Tais cápsulas se rompem depois da ingestão oral e contatam com os fluidos gástricos ou intestinais e os minicomprimidos são liberados. Uma outra aplicação dos minicomprimidos é o ajuste fino individual da dosagem de ingrediente ativo. Neste caso o paciente pode ingerir um número definido de minicomprimidos diretamente que compara-se ao severo da diminuição à cura mas também ao seu peso corporal individual. Um minicomprimido é diferente do comprimido prensado contendo pélete como debatido acima.

O termo sachê é bem conhecido à pessoa habilitada. Ele refere- se à embalagem selada pequena que contém o ingrediente ativo frequentemente na forma líquida contendo pélete ou também na forma de pélete seco ou em pó. O sachê propriamente dito é apenas a forma de embalagem e não é intencionado a ser ingerido. O conteúdo do sachê pode ser dissolvido em água ou como uma característica vantajosa pode ser molhado ou ingerido diretamente sem líquido adicional. O último é característica vantajosa para o paciente quando a forma de dosagem deve ser ingerida em uma situação onde nenhuma água está disponível. O sachê é uma forma de dosagem alternativa para comprimidos, minicomprimidos ou cápsulas.

O termo cápsula é bem conhecido à pessoa habilitada. Uma cápsula é como o sachê um recipiente para péletes contendo líquidos ou também péletes secos ou pós. Entretanto ao contrário do sachê a cápsula consiste em excipientes farmaceuticamente aceitáveis tais como gelatina ou hidroxipropilmetilcelulose e é intencionada a ser ingerida como um comprimido. As cápsulas se rompem depois da ingestão oral e contatam com os fluidos gástricos ou intestinais e as unidades múltiplas contidas são liberadas. Cápsulas para propósitos farmacêuticos estão comercialmente disponíveis em diferentes tamanhos padronizados.

Péletes

Péletes compreendem um núcleo, compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração e um agente promotor de biodisponibilidade que aumenta a biodisponibilidade do ingrediente ativo. O núcleo pode ter preferivelmente um revestimento para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo (revestimento entérico). Por exemplo, uma cápsula de hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) ou uma cápsula de gelatina pode ser enchida com uma grande quantidade de péletes revestidos entéricos.

Se as péletes não têm um revestimento para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo, então a unidade de dosagem deve compreender um tal revestimento polimérico. Por exemplo, uma cápsula de HPMC ou uma cápsula de gelatina pode conter péletes sem um revestimento entérico, mas a cápsula propriamente dita depois é revestida com um polímero entérico. O revestimento entérico das cápsulas, especialmente de cápsulas de HPMC é por exemplo, conhecido da EP 1117386 A1.

O diâmetro de partícula médio de tamanhos de pélete revestida ou não revestida pode variar de 100 a 1500 μm, preferivelmente de 200 a 800 μm.

Preferivelmente, os péletes são compostos de um núcleo, com- preendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração, um agente promotor de biodisponibilidade e opcionalmente um revestimento entérico.

O mais preferivelmente os péletes são compostos de um núcleo essencialmente consistindo em um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração, um agente promotor de biodisponibilidade que aumenta a biodisponibilidade oral do ingrediente ativo, uma camada de separação ou sincronização e um revestimento entérico. Esta forma preferida é reduzida aos seus elementos essenciais com a vantagem de reduzir o número de excipientes, que é sempre de vantagem visto que os riscos de interações com o ingrediente ativo ou intolerâncias possíveis para o paciente são reduzidos.

Preferivelmente, os péletes, partículas ou núcleos não contêm nenhuma ou qualquer quantidade essencial de polímeros tendo um efeito mucoadesivo. Uma quantidade essencial de um polímero tendo um efeito mucoadesivo é aproximadamente mais do que 10 % em peso na formulação final. Preferivelmente, as partículas não contêm nenhuma ou qualquer quantidade essencial de polímeros mucoadesivos que exibem um efeito mucoadesivo de T]b = 150 a 1000, preferivelmente 150 a 600 mPa-s e uma captação de água de 10 a 750, preferivelmente 10 a 250, particular e preferivelmente 10 a 160 % em 15 min em uma faixa de +/-0,5, preferivelmente +/- 0,3 unidades de pH em relação ao pH no qual o revestimento externo começa a dissolver. Preferivelmente, as partículas não contêm nenhuma ou qualquer quantidade essencial de um quitosano ou um copolímero de (met)acrilato consistindo em 20 a 40 % em peso de metacrilato de metila e 60 a 80 % em peso de ácido metacrílico ou carboximetilcelulose sódica ou um ácido poliacrílico reticulado e/ou não reticulado ou uma lectina ou um alginato de sódio ou uma pectina.

Medição das propriedades mucoadesivas

Um método de medição adequado para caracterizar propriedades mucoadesivas está contido em Hassan e Gallo (1990) (ver Hassan E.E. e Gallo J.M. "A Simple Rheological Method for the in vitro Assessment of

Mucin-Polymer Bioadhesive Bond Strength" Pharma Res. 7(5), 491 (1990)). O método é fundamentado na suposição de que a viscosidade (T|, viscosidade dinâmica ou coeficiente de viscosidade) de uma mistura de polímeros com mucina é diferente do total das viscosidades dos componentes individuais. A relação que aplica-se é Tlmistura de polímero com mucina = rimucina + T]poiímero + hb, onde T|b significa a diferença. Um r|b mais alto significa propriedades mucoadesivas maiores. Os componentes individuais são inicialmente medidos quanto à sua viscosidade usando um viscosímetro rotational. Uma solução aquosa de concentração a 0,5 % (p/p) do polímero mucoadesivo e uma solução de concentração a 15 % de mucina gástrica porcina são empregadas. Para determinar as propriedades mucoadesivas T|b, mucina e polímero são medidos sozinhos e misturados nas concentrações estabelecidas.

Hidratação e captação de água

A hidratação de polímeros é fundamentada na afinidade do polímero para absorver água. Polímeros intumescem devido a esta captação de água. Isto diz respeito a um desequilíbrio entre o potencial químico da água no polímero e a água no meio adjacente. A água é absorvida, devido à pressão osmótica do polímero, até que um equilíbrio seja estabelecido entre a fase interna e externa. O polímero depois é 100 % hidratado. Polímeros tendo um peso molecular médio baixo depois estão na forma de uma solução. Um gel é produzido com polímeros tendo um peso molecular mais alto ou com polímeros reticulados. A captação de água até o equilíbrio é estabelecida e pode somar por exemplo, até 10 vezes o peso inerente, correspondendo a 1000 % do peso do polímero.

Medição da porcentagem de captação de água

A medição da porcentagem captação de água é familiar ao técnico habilitado. Um método adequado é descrito por exemplo, no Lehrbuch der pharmazeutischen Technologie/Rudolf Voigt, Basel: Verlag Chemie, 5a edição completamente revisada, 1984, página 151, 7.7.6 sob "Aufsaugvermõgen". O método faz uso do assim chamado aparelho Enslin, em que um funil de filtro de sucção de vidro é conectado por tubagem a uma pipeta graduada. A pipeta é montada exatamente horizontalmente em um tal modo que ela está no mesmo nível como a frita de vidro. Uma captação de água de 100 % é definida no presente caso como uma captação de água de 1 ml de água por 1 g de polímero tendo um efeito mucoadesivo em 15 min.

Núcleo

O núcleo está compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração e um agente promotor de biodisponibilidade que aumenta a biodisponibilidade do ingrediente ativo. O núcleo pode compreender excipientes farmacêuticos ou nutracêuticos adicionais que são diferentes do ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, do promotor de penetração e do agente promotor de biodisponibilidade. O núcleo pode compreender ainda opcionalmente uma camada de sincronização.

O núcleo pode compreender uma partícula central neutra (não similar) na qual o ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, o promotor de penetração e o agente promotor de biodisponibilidade são aplicados por exemplo, por técnicas de pulverização, preferivelmente ligados em um aglutinante como por exemplo lactose ou polivinilpirrolidona. Entretanto, preferivelmente o núcleo não compreende uma partícula central neutra (não similar).

Preferivelmente o núcleo compreende, está essencialmente compreendendo ou contém o ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, o promotor de penetração e o agente promotor de biodisponibilidade. Preferivelmente o núcleo está na forma de um pélete esférico que pode ser produzido por métodos conhecidos como extrusão úmida, extrusão por fusão, rotaglomeração ou esferonização. O núcleo pode conter o ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, o promotor de penetração e o agente promotor de biodisponibilidade na forma de uma estrutura de matriz ou na forma de uma estrutura de camada. Uma estrutura de camada pode ser gerada ou aplicada por técnicas de revestimento por pulverização conhecidas.

O ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, o promotor de penetração e o agente promotor de biodisponibilidade podem ser misturados entre si para formar uma estrutura de matriz única.

O núcleo no total pode conter até 90, até 50, até 30, até 20, até 10 % em peso de excipientes adicionais. Preferivelmente o núcleo não contém quantidades essenciais ou quaisquer excipientes adicionais.

O núcleo pode compreender ainda uma camada de sincronização.

O núcleo pode ser revestido ainda por um revestimento entérico polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo.

O núcleo pode ser revestido ainda por uma camada de sincronização e por um revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo.

O núcleo, se revestido ou não, pode ser revestido ainda com um revestimento de topo rapidamente dissolvente compreendendo um aglutinante como açúcar e por exemplo, um pigmento.

Método galênico específico para ingredientes ativos aniônicos

No caso onde o ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico é aniônico e o promotor de penetração é catiônico, interações indesejadas, tais como precipitação ou inativação das propriedades de penetração do promotor de penetração, podem ocorrer quando as substâncias são misturadas entre si em quantidades que são aproximadamente equimolares a respeito de suas cargas ou onde o ingrediente ativo está presente em acesso sobre o promotor de penetração.

De modo a evitar tais interações indesejadas o ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico e o promotor de penetração podem ser separados em camadas separadas (estrutura central em camadas). As camadas individuais podem conter excipientes adicionais, que são diferentes do ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, do promotor de penetração e do agente promotor de biodisponibilidade, tais como aglutinantes por exemplo, polivinil pirrolidona ou lactose ou polímeros tais como celuloses ou copo- límeros (met)acrílicos.

Um outro método para evitar a precipitação ou inativação das propriedades de penetração do promotor de penetração pode ser usar a es- trutura de matriz mas com a adição de excipientes que enfraquecem as interações iônicas indesejadas, tais como sais, tais como cloreto de sódio, cloreto de potássio, estearato de Mg ou semelhantes, polímeros anfifílicos ou polímeros não iônicos de ligação a hidrogênio.

Assim a formulação inventiva pode ser caracterizada ainda em que o ingrediente ativo é aniônico e o promotor de penetração é catiônico e que interações iônicas entre ambos os componentes são evitadas • por uma quantidade excessiva do promotor de penetração em uma mistura de ambos os componentes no mesmo compartimento da formulação ou • por separação local de ambos os componentes em diferentes compartimentos da formulação ou • pela adição de sais, polímeros anfifílicos ou polímeros não iônicos de ligação a hidrogênio a uma mistura de ambos os componentes no mesmo compartimento da formulação.

O termo compartimentos da formulação é significado no sentido do núcleo com uma estrutura de matriz homogênea compreendendo o ingrediente ativo e o promotor de penetração (mistura de ambos os componentes no mesmo compartimento) ou do núcleo com o ingrediente ativo e camada separada que pode conter o promotor de penetração ou vice versa (separação local em diferentes compartimentos).

Quantidades dos componentes principais na formulação final

A quantidade do promotor de penetração na formulação final, que significa a dosagem única total a ser ingerida, pode estar na faixa de 1 a 60 % em peso, preferivelmente 10 a 40 % em peso.

Se o promotor de penetração também for um polímero com um efeito mucoadesivo, como quitosano, a quantidade na formulação final não deve exceder 10 % em peso para evitar que a formulação torne-se mucoadesiva. Assim polímeros com um efeito mucoadesivo, como quitosano, devem ser preferivelmente combinados com promotores de penetração sem um tal efeito mucoadesivo, como EUDRAGIT® E por exemplo, se quantidades de mais do que 10 % em peso de promotores de penetração são neces- sárias para garantir um efeito de promotor de penetração suficiente.

A quantidade certa deve ser escolhida de modo a preferivelmente obter uma concentração final nos líquidos fisiológicos relevantes, por e- xemplo, 100 ml de fluido intestinal, entre 0,1 e 2,5 mg/ml, preferivelmente 0,5 e 1 mg/ml. Isto deveria corresponder a uma resistência elétrica transepitelial (valor de TEER) de células Caco-ll em um sistema de teste in vitro de 50 % ou menos, preferivelmente de 40 % ou menos, preferivelmente de 30 % ou menos, preferivelmente de 20 % ou menos na presença do promotor de penetração em uma concentração de 1 mg/ml depois de 30 min medida em um experimento de transporte usando desmopressina como agente ativo e uma cultura de monocamada de célula Caco-2 como barreira de transporte.

A quantidade do agente promotor de biodisponibilidade na formulação final, que significa a dosagem única total a ser ingerida, pode estar na faixa de 0,1 a 10 % em peso, preferivelmente 0,5 a 5 % em peso o mais preferivelmente 1 a 2,5 % em peso. A quantidade certa deve ser escolhida de modo a preferivelmente obter uma concentração final nos líquidos fisiológicos relevantes, por exemplo, 100 ml de fluido intestinal, entre 0,004 e 0,1 mg/ml, preferivelmente 0,02 e 0,04 mg/ml. Isto deveria corresponder a um aumento da biodisponibilidade oral do ingrediente ativo por um fator de pelo menos cinco, comparado a uma formulação correspondente sem o agente promotor de biodisponibilidade.

A quantidade do ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico na formulação é muito variável dependendo da quantidade terapeuticamente necessária. Como um exemplo para a quantidade terapeuticamente necessária total de desmopressina é cerca de 200 μg por forma de dosagem ao passo que a quantidade terapeuticamente necessária total de heparina pode ser cerca de 200 mg por forma de dosagem.

Ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico

O ingrediente ativo pode ser qualquer ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico onde a liberação perorai é desejável. Preferivelmente o ingrediente ativo pertence ao grupo de classes III e IV de BCS, onde uma melhora da absorção oral é desejável. Preferivelmente o ingrediente ativo é uma molécula de origem biológica, por exemplo uma proteína ou um peptí- deo, um ácido nucleico, um lipídeo ou um carboidrato ou um derivado natural ou sintético destas substâncias.

O ingrediente ativo pode ser uma proteína ou um peptídeo tendo um peso molecular médio Mw de menos do que 3000 Da. Exemplos de tais peptídeos são em particular abarelix, angiotensina II, anidulafungina, antide, argipressina, azalina e azalina B, antagonista de bombesina, bradicinina, buserelina, cetrorelix, ciclosporina A, desmopressina, detirelix, encefalinas (Leu-, Met-) ganirelix, gonadorelina, goserelina, secretagogo do hormônio do crescimento, micafungina, nafarelina, leuprolida, leuprorelina, octreotida, orn- tida, oxitocina, ramorelix, secretina, somatotropina, terlipressina, tetracosac- tida, teverelix, triptorelina, tiroliberina, tirotropina, vasopressina.

O ingrediente ativo pode ser uma proteína ou peptídeo tendo um peso molecular médio Mw de 3000 a 10 000 Da. Exemplos de tais proteínas ou peptídeos são em particular calcitonina, corticotrofina, endorfinas, fator de crescimento epitelial, glucagon, insulina, novolina, hormônio da paratireoide, relaxina, pró-somatostatina, secretina de salmão.

O ingrediente ativo pode ser uma proteína ou peptídeo tendo um peso molecular médio Mw de mais do que 10 000. Exemplos de tais proteínas ou peptídeos são em particular interferons (alfa, beta, gama), interleuci- nas (IL1, IL2), somatotropina, eritropoietina, fator de necrose tumoral (TNF alfa, beta), relaxina, endorfina, domase alfa, hormônio folículo estimulante (FSH), gonadotropina de córion humano (HCG), fator de liberação do hormônio do crescimento humano (hGRF), hormônio luteinizante (LH) ou fator de crescimento epidérmico.

O ingrediente ativo pode ser desmopressina ou um derivado deste como diferentes sais ou acetato de desmopressina ou lactato de desmopressina.

O ingrediente ativo pode ser um polissacarídeo. O ingrediente a- tivo pode ser uma heparina ou um derivado deste como heparinas não fracionadas ou heparinas de peso molecular suave e heparinas de peso molecular baixo ou heparinas de peso molecular muito baixo.

O ingrediente ativo pode ser um ácido nucleico ou derivado deste como por exemplo, 5-Fluoro-Uracila.

Exemplos para ingredientes ativos nutracêuticos são vitaminas, ácidos graxos essenciais, resveratrol de produtos da uva como um antioxi- dante, produtos de fibra dietética solúvel, tais como casca de semente de psílio para reduzir hipercolesterolemia, brócolis (sulfeto de hidrogênio) como uma defesa contra o câncer, e soja ou trevo (isoflavonoides) para melhorar a saúde arterial. Outros exemplos de nutracêuticos são flavonoides, antioxi- dantes, ácido alfa-oleicolinoleico da semente de linho, beta-caroteno de pétalas de calêndula ou antocianinas de bagas.

Outros exemplos para nutracêuticos são vitaminas e minerais, taurina, Ômega-3, catequinas de chá verde, coenzima Q10, Aloe vera, glico- samina, condroitina, proteína do soro do leite, guaraná, gingko, ácido gama amino butírico. Outros nutracêuticos podem ser escolhidos das classes de botânicos, probióticos, prebióticos, fitosteróis e enzimas. Classes III e IV de BCS

O(s) ingrediente(s) ativo(s) podem pertencer, por exemplo, ao grupo de classes III e IV de BCS (Sistema de classificação biofarmacêutica de acordo com Prof. Amidon; Amidon et al., Pharm. Res. 12, 413 - 420 (1995)) e/ou do grupo dos antiandrogênicos, antidepressivos, antidiabéticos, antirreumáticos, glicocorticoides, citostáticos, fármacos para enxaqueca, neurolépticos, antibióticos, estrogênios, vitaminas, fármacos psicotrópicos, inibidores de ACE, β-bloqueadores, bloqueadores do canal de cálcio, diuréticos, glicosídeos cardíacos, antiepiléticos, diuréticos/antiglaucoma, uricostáti- cos, bloqueadores do receptor de H2 e virostáticos.

A formulação farmacêutica ou nutracêutica compreende pelo menos um, geralmente apenas um ingrediente ativo, mas se apropriado também combinações de dois ou mais ingredientes ativos. O ingrediente ativo presente pode, portanto, consistir em um único ingrediente ativo ou se apropriado também de uma pluralidade de ingredientes ativos individuais.

Classe III de BCS - Permeabilidade baixa, Solubilidade alta

A absorção é limitada pela taxa de permeação mas o fármaco é solvatado muito rápido.

Classe IV de BCS - Permeabilidade baixa, Solubilidade baixa

Estes compostos têm uma biodisponibilidade deficiente. Usualmente eles não são bem absorvido sobre a mucosa intestinal e uma variabilidade alta é esperada.

O(s) ingrediente(s) ativo(s) das classes III e IV de BCS tem/têm preferivelmente uma permeabilidade que é menos do que 90 % da dose administrada com base em uma determinação de equilíbrio de massa ou em comparação à dose intravenosa. Permeabilidade é fundamentada indiretamente na extensão da absorção de uma substância medicamentosa em seres humanos e diretamente na medição de taxas de transferência de massa através da membrana intestinal humana. Alternativamente, sistemas não humanos capazes de prognosticar os sistemas de absorção de fármaco capazes de prognosticar a absorção do fármaco em seres humanos podem ser usados (tais como métodos de cultura in vitro). Uma substância medicamentosa é considerada altamente permeável quando a extensão da absorção em seres humanos é determinada ser 90 % ou mais da dose administrada com base em uma determinação de equilíbrio de massa ou em comparação à dose intravenosa.

Os ingredientes ativos da Classe IV de BCS podem ter uma solubilidade em água desmineralizada de 3,3 g/l ou menos. Os ingredientes ativos da Classe III de BCS têm boa solubilidade em água. Os ingredientes ativos da Classe IV de BCS têm uma permeabilidade baixa. As vantagens da invenção são, portanto, exibidas em particular para os ingredientes ativos da Classe III de BCS, visto que a permeabilidade do ingrediente ativo aqui constitui a única limitação de sua biodisponibilidade. Entretanto, a permeabilidade aumentada do ingrediente ativo também pode ser útil no caso de in-gredientes ativos da Classe IV de BCS, de modo a obter uma certa melhora na biodisponibilidade pelo menos gradualmente apesar da limitação de solubilidade deficiente em água destes ingredientes ativos.

O(s) ingrediente(s) ativo(s) podem ser bicalutamida, anastrozol, albendazol, amitriptilina, arteméter, clorpromazina, ciprofloxacina, clofazimi- na, dapsona, diloxanida, efavirenz, ácido fólico, furosemida, glibenclamida, griseofulvina, haloperidol, ivermectina, ibuprofeno, idinavir, lopinavir, lume- fantrina, mebendazol, mefloquina, niclosamida, nelfinavir, nifedipina, nitrofurantoin, fenitoína, pirantel, piremetamina, retinol, ritonavir, espironolactona, sulfadiazina, sulfasalazina, sulfametoxazol, triclabendazol, trimetoprim, ácido valpróico, verapamil, warfarina, ácido nalidíxico, nevirapina, praziquantel, rifampicina, glimipirida, nilutamida, bromocriptina, cetotifeno, letrozol, nara- triptano, ganciclovir, orlistat, misoprostol, granistron, pioglitazona, lamivudi- na, rosiglitazona, zidovudina, enalapril, atenolol, nadolol, felodipina, bepridil, digoxina, digitoxina, carbamazepina, acetazolamida, alopurinol, cimetidina, ranitidina ou oxcarbazepina.

Solubilidade em água

Os ingredientes ativos podem ter uma solubilidade em água desmineralizada de 3,3 g/l ou menos, preferivelmente 3,3 g/l ou menos, em particular 1,1 g/l ou menos.

A solubilidade em água para o ingrediente ativo pode ser definida de acordo com DAB 10 (Deutsches Arzneibuch [Farmacopeia Alemã], 10â edição com 3- revisão em 1994, Deutscher Apothekerverlag, Stuttgart e Govi Verlag, Frankfurt am Main, 2- revisão (1993), IV Allgemeine Vorschriften [IV Genral Methods], p. 5 - 6, "Lõslichkeit und Lõsungsmittel" ["Solubility and solvents"]; ver também Ph. Eur. 4.07, 2004).

Inibidor da degradação enzimática do ingrediente ativo

Quando o ingrediente ativo é uma molécula de origem biológica, por exemplo, uma proteína ou um peptídeo, um ácido nucleico, um lipídeo ou um carboidrato ou um derivado natural ou sintético destas substâncias, um inibidor pode ser adicionado que previne ou reduz a degradação enzimática do ingrediente ativo, que pode ocorrer sob as condições ambientais do trato gastrointestinal. O inibidor é diferente do agente promotor de biodisponibilidade e assim pode ser adicionado além disso. Preferivelmente, um tal inibidor que previne ou reduz a degradação enzimática do ingrediente ativo deve ser mais ou menos específico para o ingrediente ativo de origem biológica. Preferivelmente o inibidor que previne ou reduz a degradação enzimá- tica do ingrediente ativo deve ser farmaceuticamente aceitável em relação a certa aplicação em animais ou em seres humanos. Farmaceuticamente aceitável pode ser definido no sentido de que um estado geralmente reconhecido como seguro (GRAS) ou um pouco comparável ao estado GRAS existe.

No caso do ingrediente ativo ser uma proteína ou um peptídeo que é principalmente um substrato de tripsina ou quimiotripsina não existe normalmente nenhuma necessidade para adicionar um inibidor de enzimas proteolíticas visto que o promotor de biodisponibilidade já é um tal inibidor. Entretanto não é excluído que uma outra enzima proteolítica pode ser adicionada no caso outras enzimas proteolíticas serem responsáveis pela degradação, embora seja preferido que além do promotor de biodisponibilidade não existe nenhum outro inibidor de enzimas proteolíticas presente na formulação.

No caso do ingrediente ativo ser um ácido nucleico, preferivelmente um DNA ou um RNA, o inibidor de degradação enzimática é um inibidor de DNAse ou RNAse, preferivelmente inibidores de DNAse ou RNAse de animal mamífero ou de fontes humanas.

No caso do ingrediente ativo ser uma substância glicosídica, pre-ferivelmente um glicosaminoglicano sulfonado ou um não sulfonado, como por exemplo, um proteoglicano, uma heparina ou um heparansulfato, o inibidor de degradação enzimática pode ser um inibidor de heparanase (EC. 3.2.1.B2) ou uma heparina liase (EC. 4.2.2.7) ou heparinsulfato liase (EC. 4.2.2.8). Outros inibidores podem ser o inibidor de L-lduronidase (EC 3.2.1.76), N-sulfoglicosamina-3-sulfatase (EC 3.1.6.15), iduronato-2- sulfatase (EC 3.1.6.13), heparan-alfa-glicosaminida N-acetiltransferase (EC 2.3.1.78), alfa e beta amilase (EC 3.2.1.1, EC 3.2.1.2), glucano 1,4-alfa- glicosidase (EC 3.2.1.3), alfa.alfa-trehalase (EC 3.2.1.28) ou sacarose alfa- glicosidase (EC 3.2.1.48).

Heparanases (EC. 3.2.1.B2) são enzimas endogênicas que podem especificamente cortar cadeias de heparansulfato de superfícies celulares e membrana basal-heparanossulfato-proteoglicanos.

Exemplos de inibidor de degradação enzimática de heparanase são polifenóis, preferivelmente dos grupos de estilbenos, flavonoides ou an- tocianos. Preferido é resveratrol (trans-3,4,5-tri-hidroxiestilbeno) que pode ser isolado por exemplo de Polygonum cuspidatum ou da parreira. O efeito inibitório de resveratrol sobre heparanase foi mostrado por exemplo, por Ahn et al. (2006) Life Sciences 79, 1661 - 1665.

Promotor de penetração

Um promotor de penetração no sentido da presente invenção diminui a resistência elétrica transepitelial (valores de TEER) de células Ca- co-ll em um sistema de teste in vitro.

Preferivelmente o promotor de penetração no sentido da presente invenção pode ser definido reduzindo-se o valor de TEER inicial da solução tampão sem promotor de penetração (100 %) para 50 % ou menos, preferivelmente 40 % ou menos, preferivelmente 30 % ou menos, preferivelmente 20 % ou menos na presença do promotor de penetração em uma concentração de 1 mg/ml depois de 60 min medida em uma cultura de mo- nocamada de célula Caco-2 como barreira de transporte. O método de testar valores de TEER em um experimento de transporte usando uma cultura de monocamada de célula Caco-2 respectivamente através de uma barreira de cultura de monocamada de célula Caco-2 é bem estabelecido e conhecido a uma pessoa habilitada na técnica.

Para se evitar dúvida, as condições esboçadas como também usado no exemplo 12 podem ser resumidas aqui: número de passagem de Caco-2 menor do que 50; Idade da cultura de 14 a 30 dias em filtros Trans- well®; valores de TEER antes e depois do transporte acima de 200 Q cm2 (indicando integridade e estanqueidade da monocamada de célula); coeficiente de permeabilidade aparente (apical/basolateral e basolateral/apical (ab e ba)) de um marcador fracamente permeável (Fluoresceína) menor do que 1 -10’6 cm-s'1 (indicando conformidade do modelo para identificar o transporte fracamente permeável, garantindo estanqueidade da monocamada de célula); Coeficiente de permeabilidade aparente (ba) de Rodamina 123 mais alto do que 4-10'6 cm-s’1 (indicando expressão evidente de P-glicoproteína); Coeficiente de permeabilidade aparente (ab) de propranolol mais alto do que 5-10-6 cm s'1 (indicando conformidade do modelo para identificar o transporte altamente permeável); tampões que podem ser usados nos experimentos de transporte para o lado apical ou para o lado basolateral são tampão de HBSS de pH 6,5 a 7,4 para o lado apical e tampão de HBSS de pH 7,4 para o lado basolateral (pH ajustado individualmente); Meio de cultura celular: Meio de Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) preferivelmente suplementado sem nenhum aminoácido essencial e sulfato de gentamicina como conhecido na técnica.

Preferivelmente, o promotor de penetração é uma substância polimérica ou mais preferida uma substância polimérica catiônica.

Preferivelmente, o promotor de penetração pode ser um copolí- mero de (met)acrilato catiônico compreendendo grupos amino terciário.

O mais preferivelmente o promotor de penetração pode ser um copolímero composto de 30 a 80 % em peso de ésteres alquílicos Ci a C4 de ácido acrílico ou ácido metacrílico, e 70 a 20 % em peso de monômeros de (met)acrilato de alquila tendo um grupo amino terciário no radical alquila.

Promotores de penetração que podem ser excluídos são em particular plastificantes tais como, por exemplo, citrato de trietila, citrato de acetil trietila, sebacato de dietila, sebacato de dibutila, polímeros tais como carbô- mero, carboximetilcelulose sódica, policarbofil-cisteínas, ácidos graxos de cadeia longa, seus ésteres (por exemplo, mono- e diglicerídeos) e seus sais tais como ácido láurico, ácido laurinsulfônico, ácido palmítico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido oleico, acilcarnitinas, agentes quelantes tais como EDTA, salicilatos, ciclodextrinas, ácidos poliacrílicos, ácidos biliares tais como ácido cólico, coliltaurina, colilsarcosina, ácido quenodesoxicólico e seus sais tais como colato de Na, glicocolato de Na, taurocolato de Na, taurodi- hidrofusidato de Na, glicodi-hidrofusidato de Na, tensoativos e emulsificado- res tais como, em particular, dodecilsulfato de sódio (SDS), polisorbato 80 (Tween 80), óleo de mamona polietoxilado (Cremophor EL), a toxina da zonula occludens (ZOT) e vitaminas tais como vitamina E (tocoferol) ou vitamina B12. EUDRAGIT® tipo E

O copolímero de (met)acrilato catiônico compreendendo grupos amino terciário pode ser composto parcial ou totalmente de acrilatos de alquila e/ou metacrilatos de alquila tendo um grupo amino terciário no radical alquila. Copolímeros de (met)acrilato adequados são conhecidos, por exemplo, da EP 0 058 765 B1.

O copolímero de (met)acrilato catiônico compreendendo grupos amino terciário pode ser composto, por exemplo, de 30 a 80 % em peso de ésteres alquílicos Ci a C4 polimerizados de radical livre de ácido acrílico ou de ácido metacrílico, e 70 a 20 % em peso de monômeros de (met)acrilato tendo um grupo amino terciário no radical alquila.

Monômeros adequados com grupos funcionais amino terciário são detalhados em US 4 705 695, coluna 3 linha 64 à coluna 4 linha 13. Menção deve ser feita em particular de acrilato de dimetilaminoetila, acrilato de 2-dimetilaminopropila, metacrilato de dimetilaminopropila, acrilato de di- metilaminobenzila, metacrilato de dimetilaminobenzila, acrilato de (3- dimetilamino-2,2-dimetil)propila, metacrilato de dimetilamino-2,2- dimetil)propila, acrilato de (3-dietilamino-2,2-dimetil)propila e metacrilato de dietilamino-2,2-dimetil)propila. Preferência particular é dada a metacrilato de dimetilaminoetila.

O teor dos monômeros com grupos amino terciário no copolímero vantajosamente pode estar entre 20 e 70 % em peso, preferivelmente entre 40 e 60 % em peso. A proporção dos ésteres alquílicos Ci a C4 de ácido acrílico ou ácido metacrílico é 70 para 30 % em peso. Menção deve ser feita de metacrilato de metila, metacrilato de etila, metacrilato de butila, acrilato de metila, acrilato de etila e acrilato de butila.

Um copolímero de (met)acrilato adequado com grupos amino terciário pode ser formado, por exemplo, de 20 a 30 % em peso de metacrilato de metila, 20 a 30 % em peso de metacrilato de butila e 60 a 40 % em peso de metacrilato de dimetilaminoetila.

Um copolímero de (met)acrilato comercial especificamente adequado com grupos amino terciário é, por exemplo, formado de 25 % em peso de metacrilato de metila, 25 % em peso de metacrilato de butila e 50 % em peso de metacrilato de dimetilaminoetila (EUDRAGIT® E100 ou EUDRAGIT® E PO (forma em pó)). EUDRAGIT® E100 e EUDRAGIT® E PO são solúveis em água abaixo aprox. do pH 5,0 e são assim também solúveis em suco gástrico.

O promotor de penetração pode ser um assim chamado "copo- límero de amino metacrilato (USP/NF)", "copolímero de metacrilato butilado básico (Ph. Eur)" ou "copolímero E de amino metacrilatoalquila (JPE)" que são do tipo E de EUDRAGIT®.

Uso de copolímero de amino(met)acrilato carbonado

O promotor de penetração que é um copolímero de ami- no(met)acrilato, um copolímero de (met)acrilato catiônico compreendendo grupos amino terciário, pode ser vantajosamente aplicado ao núcleo na forma de um meio aquoso carbonado com dióxido de carbono por exemplo por revestimento por pulverização. Assim torna-se possível adicionar o promotor de penetração à formulação dos núcleos, que podem ter uma estrutura de matriz ou uma estrutura em camadas, por meio da qual o promotor de penetração na matriz ou em uma camada em torno do núcleo não contém nenhum traço de ácidos.

Foi descoberto que um meio aquoso carbonado com dióxido de carbono pode ser usado para realizar uma solução ou uma dispersão de um copolímero de amino(met)acrilato. Foi demonstrado que os grupos amino são pelo menos parcialmente neutralizados pelo ácido carbônico/carbonato de hidrogênio dissolvido na fase aquosa e assim o copolímero de ami- no(met)acrilato torna-se pelo menos disperso, parcialmente dissolvido ou ainda completamente dissolvido ou um tanto em entre estas condições.

O copolímero de amino(met)acrilato contendo meio aquoso carbonado pode ser facilmente manejado em um modo similar como soluções de solvente orgânico. Entretanto neste caso nada do solvente orgânico é removido, mas a água carbonada. Isto significa que um revestimento seco fabricado da dispersão ou solução inventivas consistirá mais ou menos no polímero ou copolímero de amino(met)acrilato puro visto que o dióxido de carbono é removido com o vapor. Isto é uma vantagem notável sobre as dis- persões aquosas que são parcialmente neutralizadas por ácidos sólidos ou líquidos, onde os ácidos ou outros excipientes sempre permanecem com a formulação de copolímero de amino(met)acrilato seca.

Assim é vantajoso usar um meio aquoso contendo um copolímero de amino(met)acrilato que não é solúvel em água desmineralizada, onde o meio pode ter um teor da fase aquosa de pelo menos 60 % em peso e um teor de sólidos de até 40 % em peso compreendendo o copolímero de ami- no(met)acrilato, por meio do qual a fase aquosa é carregada por uma quantidade suficiente de dióxido de carbono que faz com que o copolímero de amino(met)acrilato esteja presente na forma de soluto no meio.

Agente promotor de biodisponibilidade

O agente promotor de biodisponibilidade é um inibidor farmaceu- ticamente aceitável de enzimas proteolíticas, que aumenta a biodisponibilidade oral do ingrediente ativo por um fator de pelo menos cinco, comparado a uma formulação correspondente sem o agente promotor de biodisponibilidade.

O agente promotor de biodisponibilidade é um inibidor farmaceu- ticamente aceitável de enzimas proteolíticas, preferivelmente um inibidor de tripsina e quimiotripsina.

Um inibidor de enzimas proteolíticas pode ser definido dentro dos limites dos experimentos de inibição de enzima do exemplo 14. Assim um inibidor de enzimas proteolíticas no sentido da invenção pode ser definido como um tal inibidor que em uma concentração não excedendo 1 mg/ml previne uma quantidade inicial de uma solução de 20 μg de acetato de des- mopressina/ml em tampão de HBSS de pH 6,5 a 37 °C e um tempo de incubação de 180 minutos a ser reduzido para menos do que 80 % na presença de uma solução de pancreatina com uma concentração de 10 mg/ml.

O agente promotor de biodisponibilidade é um inibidor farmaceu- ticamente aceitável de enzimas proteolíticas, preferivelmente um inibidor de enzimas proteolíticas de origem mamífera, preferivelmente um inibidor de enzimas proteolíticas do trato gastrointestinal de mamífero, que aumenta a biodisponibilidade do ingrediente ativo por um fator de 5, preferivelmente por

um fator de pelo menos 6, preferivelmente por um fator de pelo menos 7, preferivelmente por um fator de pelo menos 8, preferivelmente por um fator de pelo menos 9, preferivelmente por um fator de pelo menos 10, por meio do qual o aumento na biodisponibilidade do ingrediente ativo medida in vivo como biodisponibilidade relativa comparado à formulação correspondente ou à mesma formulação mas sem o inibidor enzimático proteolítico. Inibidores enzimáticos proteolíticos incluem inibidores de peptidases ou proteinases.

O agente promotor de biodisponibilidade é diferente do promotor de penetração. O agente promotor de biodisponibilidade é diferente do copolímero de (met)acrilato catiônico compreendendo grupos amino terciário.

Exemplos de inibidores de protease farmaceuticamente adequados são antipaína, aprotinina, bacitracina, benzamidina, bestatina, quimiosta- tina, inibidor de ovo de galinha, conjugados de quitosano-EDTA, leupeptina, pepstatina, inibidores de tripsina de soja, tiorfano, tos-lis clorometil cetona, inibidor de carboxipeptidase de batata.

Preferivelmente, o inibidor de enzimas proteolíticas é um peptídeo ou uma proteína. Preferivelmente, o inibidor de peptidase ou proteinase é um peptídeo ou uma proteína com um peso molecular (Mw médio ponderado) de 3.000 a 100.000, preferivelmente 3.000 a 10.000 (g/mol).

Um inibidor de enzimas proteolíticas no sentido da invenção inibe a atividade proteolítica de peptidase ou proteinases de origem mamífera, tais como tripsina humana ou quimiotripsina. O inibidor de enzimas proteolíticas pode ser uma enzima de ocorrência natural ou derivado desta. Derivado de uma enzima de ocorrência natural significa fragmentos ou variantes desta. Fragmentos ou variantes desta estão disponíveis por processamento sintético ou modificação por métodos tecnológicos genéticos.

Preferivelmente, o inibidor de enzimas proteolíticas origina-se de uma fonte de planta tal como por exemplo, sojas, grãos-de-bico ou feijões- de-lima. Matérias-primas ou fontes típicas das quais o inibidor de enzimas proteolíticas pode ser isolado podem ser farinhas ou flocos de soja, farinha de grão-de-bico, farinha de feijão-de-lima ou soro de soja fabricados de concentrado de proteína de soja industrial ou processos de proteína de soja tra- dicionais.

O inibidor de Bowman-Birk (BBI) é uma designação de inibidor enzimático proteolítico bem conhecida de uma família de inibidor de tripsina e quimiotripsina de peso molecular baixo estável encontrado em sojas e várias outras sementes, principalmente em sementes leguminosas e materiais vegetais. O inibidor de Bowman-Birk (BBI) no sentido da presente invenção deve significar pelo menos um ou mais dos membros da família de enzima de inibidor de Bowman-Birk.

O inibidor enzimático proteolítico pode ser um inibidor de Bowman-Birk ou um derivado deste. O inibidor de Bowman-Birk pode ser preferivelmente um polipeptídeo de 71 aminoácidos derivado de soja com lados inibitórios distintos para tripsina e para quimiotripsina. O inibidor de Bowman- Birk pode ser isolado em uma maneira conhecida das fontes de planta mencionadas acima por extração aquosa, cromatografia por afinidade e eluição subsequente. Alternativamente, o inibidor de Bowman-Birk está comercialmente disponível de diferentes fontes.

Um derivado do inibidor de Bowman-Birk pode ser um fragmento ou variante deste. Fragmentos ou variantes destes estão disponíveis por processamento sintético ou por modificação por métodos tecnológicos genéticos. O termo derivado neste sentido é bem conhecido a uma pessoa habilitada.

A concentração em peso do inibidor enzimático proteolítico pode ser preferivelmente 0,1 a 100 vezes, preferivelmente 0,5 a 50 vezes, preferivelmente 5 a 25 vezes, comparada ao peso do ingrediente ativo.

Assim a invenção refere-se ao uso de um agente promotor de biodisponibilidade que é um inibidor farmaceuticamente aceitável de enzimas proteolíticas como um excipiente que aumenta a biodisponibilidade oral de um ingrediente ativo em uma formulação inventiva.

Biodisponibilidade oral aumentada

O agente promotor de biodisponibilidade é um inibidor farmaceuticamente aceitável de enzimas proteolíticas, que aumenta a biodisponibilidade oral do ingrediente ativo por um fator de pelo menos cinco, preferível- mente por um fator de pelo menos 6, preferivelmente por um fator de pelo menos 7, preferivelmente por um fator de pelo menos 8, preferivelmente por um fator de pelo menos 9, preferivelmente por um fator de pelo menos 10.

Cálculo de biodisponibilidade oral aumentada

Os termos biodisponibilidade oral e o cálculo da biodisponibilidade oral relativa são bem conhecidos à pessoa habilitada.

O fator de aumento da biodisponibilidade oral do ingrediente ativo pode ser calculado dividindo-se a concentração do nível sanguíneo de um grupo de animal de teste expressado como área sob a curva de concentração-tempo (AUCo- ~ [pg/ml_*min]) depois da liberação oral da formulação com uma concentração do nível sanguíneo correspondente de um grupo de animal de teste correspondente depois da liberação oral de uma formulação correspondente sem o inibidor enzimático proteolítico.

O grupo de animal de teste deve naturalmente ser um representante ou respectivamente um grupo relevante estatístico. Uma pessoa habilitada é familiar com as estatísticas envolvidas. Assim um representante ou um número estatístico relevante de animais de teste pode ser facilmente determinado pela pessoa habilitada. O animal experimental preferido é o mini- porco (Gottingen). Um representante ou um grupo estatístico relevante de animais de teste de miniporco pode consistir por exemplo, em 8 animais (n = 8).

A área sob a curva de concentração-tempo (AUCo- - [pg/ml_*min]) do sangue de miniporcos depois da liberação oral de desmopressina com a formulação de acordo com o exemplo 11 com o inibidor de enzimas proteolíticas no presente exemplo inventivo 16 é 53823 pg/mL*min. Esta é comparada com a AUCo-« da formulação correspondente sem o inibidor de enzimas proteolíticas (exemplo 10) que AUC0- - é 5155 pg/ml_*min. Assim o fator de aumento de biodisponibilidade oral é calculado 53823/5155 = 10,44.

Revestimento entérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo

Pelo menos os núcleos das partículas ou da unidade de dosa- gem compreendem um revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo. O revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo é um revestimento entérico respectivamente uma camada de revestimento entérico.

A camada de revestimento entérico pode conter até 50, até 40, até 30, até 20, até 10 % em peso de excipientes adicionais como plastifican- tes ou deslizantes. Preferivelmente a camada de revestimento entérico não contém quantidades essenciais ou quaisquer excipientes adicionais.

Revestimentos entéricos são bem conhecidos à pessoa habilitada. Revestimentos entéricos não são solúveis em fluidos gástricos, mas solúveis em fluidos entéricos. Resistência gástrica significa que não mais do que 10 % do ingrediente ativo é liberado em um tampão de pH 1,2 dentro de 120 min. Solúveis em fluidos entéricos significa que eles dissolvem em um certo valor de pH entre 5,0 e 7,5 dependendo de sua natureza química no duodeno, jejuno, íleo ou cólon.

O revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo pode compreender polissacarídeos aniônicos de copolímeros funcionais em carboxila, polímeros celulósicos ou copolímeros de (met)acrilato aniônicos.

Adequado polissacarídeos funcionais em carboxila ou polímeros celulósicos podem ser selecionados de alginato de sódio, carboximetil celulose e seus sais (CMC, Na-CMC, Blanose, Tylopur), carboximetiletil celulose e seus sais, ftalato de acetato de celulose (CAP), succinato de acetato de celulose (CAS), trimeliato de acetato de celulose (CAT), ftalato de hidroxi- propil metil celulose (HPMCP, HP50, HP55), succinato de acetato de hidro- xipropilmetil celulose (HPMCAS-LF, -MF, -HF).

Copolímeros funcionais em carboxila adequados são copolímeros de vinila compreendendo unidades estruturais que são derivadas de ácidos carboxílicos insaturados exceto ácido acrílico ou ácido metacrílico como exemplificado por ftalato de acetato de polivinila ou um copolímero de acetato de vinila e ácido crotônico 9:1.

Copolímero de (met)acrilato aniônico

O revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo é preferivelmente um copolímero de (met)acrilato aniônico. Copolimeros de (met)acrilato aniônicos podem ser também chamados polímeros entéricos. O copolímero de (met)acrilato aniônico compreende 25 a 95, preferivelmente 40 a 95, em particular 60 a 40, % em peso de ésteres alquílicos C-i a C4 polimerizados de radical livre de ácido acrílico ou de ácido metacrílico e 75 a 5, preferivelmente 60 a 5, em particular 40 a 60, % em peso de monômeros de (met)acrilato tendo um grupo aniônico.

As proporções mencionadas podem somar até 100 % em peso. Entretanto, também pode ser possível, além disso, sem isto levando a uma deficiência ou alteração das propriedades essenciais, que quantidades pequenas na região de 0 a 10, por exemplo, 1 a 5, % em peso de monômeros adicionais capazes de copolimerização vinílica, tais como, por exemplo, metacrilato de hidroxietila ou acrilato de hidroxietila, podem estar presentes. Entretanto, é preferido que nenhum de tais monômeros adicionais capazes de copolimerização vinílica está presente.

Ésteres alquílicos Ci a C4 de ácido acrílico ou ácido são em particular metacrilato de metila, metacrilato de etila, metacrilato de butila, acrilato de metila, acrilato de etila e acrilato de butila.

Um monômero de (met)acrilato tendo um grupo aniônico é, por exemplo, ácido acrílico, com preferência para ácido metacrílico.

Copolimeros de (met)acrilato aniônicos adequados são aqueles compostos de 40 a 60 % em peso de ácido metacrílico e 60 a 40 % em peso de metacrilato de metila ou 60 a 40 % em peso de acrilato de etila (EUDRAGIT® L ou EUDRAGIT® L tipos 100-55).

EUDRAGIT® L é um copolímero de 50 % em peso de metacrilato de metila e 50 % em peso de ácido metacrílico. O pH do início da liberação de ingrediente ativo específica no suco intestinal ou suco intestinal simulado pode ser estabelecido para ser pH 6,0.

EUDRAGIT® L 100-55 é um copolímero de 50 % em peso de a- crilato de etila e 50 % em peso de ácido metacrílico. EUDRAGIT® L 30 D-55 é uma dispersão compreendendo 30 % em peso de EUDRAGIT® L 100-55.

O pH do início da liberação de ingrediente ativo específica no suco intestinal ou suco intestinal simulado pode ser estabelecido para ser pH 5,5.

Do mesmo modo adequados são copolímeros de (met)acrilato aniônicos compostos de 20 a 40 % em peso de ácido metacrílico e 80 a 60 % em peso de metacrilato de metila (EUDRAGIT® tipo S). O pH do início da liberação de ingrediente ativo específica no suco intestinal ou suco intestinal simulado pode ser estabelecido para ser pH 7,0.

Copolímeros de (met)acrilato adequados são aqueles consistindo em 10 a 30 % em peso de metacrilato de metila, 50 a 70 % em peso de acrilato de metila e 5 a 15 % em peso de ácido metacrílico (EUDRAGIT® tipo FS). O pH no início da liberação de ingrediente ativo específica no suco intestinal ou suco intestinal simulado pode ser estabelecido para ser pH 7,0.

EUDRAGIT® FS é um copolímero de 25 % em peso de metacrilato de metila, 65 % em peso de acrilato de metila e 10 % em peso de ácido metacrílico. EUDRAGIT® FS 30 D é uma dispersão compreendendo 30 % em peso de EUDRAGIT® FS.

Adicionalmente adequado é um copolímero composto de 20 a 34 % em peso de ácido metacrílico e/ou ácido acrílico, 20 a 69 % em peso de acrilato de metila e 0 a 40 % em peso de acrilato de etila e/ou onde apropriado 0 a 10 % em peso de monômeros adicionais capazes de copoli- merização vinílica, com a condição de que a temperatura de transição vítrea do copolímero de acordo com ISO 11357-2, subseção 3.3.3, não é mais do que 60 °C. Este copolímero de (met)acrilato é particularmente adequado, por causa de seu boas propriedades de alongamento na ruptura, para comprimir péletes a comprimidos.

Adicionalmente adequado é um copolímero composto de 20 a 33 % em peso de ácido metacrílico e/ou ácido acrílico, 5 a 30 % em peso de acrilato de metila e 20 a 40 % em peso de acrilato de etila e mais do que 10 a 30 % em peso de metacrilato de butila e onde apropriado 0 a 10 % em peso de monômeros adicionais capazes de copoli- merização vinílica, onde as proporções dos monômeros somam até 100 % em peso, com a condição de que a temperatura de transição vítrea do copolímero de acordo com ISO 11357-2, subseção 3.3.3 (temperatura de ponto médio Tmg), é 55 a 70 °C. Copolímeros deste tipo são particularmente adequados, por causa de suas boas propriedades mecânicas, para comprimir péletes a comprimidos. O copolímero mencionado acima é composto em particular de unidades polimerizadas de radical livre de 20 a 33, preferivelmente 25 a 32, particular e preferivelmente 28 a 31 % em peso de ácido metacrílico ou ácido acrílico, com preferência para ácido metacrílico, 5 a 30, preferivelmente 10 a 28, particular e preferivelmente 15 a 25 % em peso de acrilato de metila, 20 a 40, preferivelmente 25 a 35, particular e preferivelmente 18 a 22 % em peso de acrilato de etila, e mais do que 10 a 30, preferivelmente 15 a 25, particular e preferivelmente 18 a 22 % em peso de metacrilato de butila, onde a composição de monômero é escolhida de modo que a temperatura de transição vítrea do copolímero é de 55 a 70 °C, preferivelmente 59 a 66, particular e preferivelmente 60 a 65 °C. Temperatura de transição vítrea significa nesta conexão em particular a temperatura de ponto médio Tmg de acordo com ISO 11357-2, subseção 3.3.3. A medição ocorre sem plastificante adicionado, com teores de monômero residuais (REMO) de menos do que 100 ppm, com uma taxa de aquecimento de 10 °C/min e sob uma atmosfera de nitrogênio.

O copolímero preferivelmente consiste essencialmente ou exclusivamente em 90, 95 ou 99 a 100 % em peso dos monômeros ácido metacrílico, acrilato de metila, acrilato de etila e metacrilato de butila nas faixas de quantidades indicadas acima. Entretanto, é possível, sem isto necessariamente levar a uma deficiência das propriedades essenciais, que quantidades pequenas na faixa de 0 a 10, por exemplo, 1 a 5 % em peso de monômeros adicionais capazes de copolimerização vinílica adicionalmente estejam presentes, tais como, por exemplo, metacrilato de metila, acrilato de butila, metacrilato de hidroxietila, vinilpirrolidona, ácido vinilmalônico, estireno, álcool vinílico, acetato de vinila e/ou derivados destes. Preparação de copolimeros de (met)acrilato aniônicos

Os copolimeros de (met)acrilato aniônicos podem ser preparados em uma maneira conhecida por si por polimerização de radical livre dos monômeros (ver, por exemplo, EP 0 704 207 A2 e EP 0 704 208 A2). O copolímero de acordo com a invenção pode ser preparado em uma maneira conhecida por si por polimerização de emulsão de radical livre em fase a- quosa na presença de, preferivelmente, emulsificadores aniônicos, por e- xemplo, pelo processo descrito na DE-C 2 135 073.

O copolímero pode ser preparado por processos convencionais de polimerização de radical livre contínua ou descontinuamente (processos em batelada) na presença de iniciadores de formação de radical livre e, onde apropriado, reguladores para ajustar o peso molecular não diluído, em solução, por polimerização de pérola ou em emulsão. O peso molecular médio Mw (médio ponderado, determinado por exemplo medindo-se a viscosidade da solução) pode estar por exemplo na faixa de 80 000 a 1 000 000 (g/mol). A polimerização de emulsão em fase aquosa na presença de emulsificadores de iniciadores solúveis em água e (preferivelmente aniônicos) é preferida.

No caso de polimerização em massa, o copolímero pode ser obtido na forma sólida por esmagamento, extrusão, granulação ou corte a quente.

Os copolimeros de (met)acrilato são obtidos em uma maneira conhecida por si por polimerização em massa, de solução, pérola ou emulsão de radical livre. Eles devem ser levados antes do processamento à faixa de tamanho de partícula da invenção por processos de moagem, secagem ou pulverização adequados. Isto pode ocorrer por esmagamento simples de péletes extrusados e resfriados ou corte a quente.

O uso de pós pode ser vantajoso especialmente em mistura com outros pós ou líquidos. Aparelhos adequados para produzir pós são familiares à pessoa habilitada, por exemplo, moinhos de jato de ar, moinhos de disco fixo, moinhos de compartimento. É possível onde apropriado incluir etapas de peneiração apropriadas. Um moinho adequado para grandes quantidades industriais é, por exemplo, um moinho de jato oposto (Multi No. 4200) operado com uma pressão manométrica de cerca de 0,6 MPa (6 bar).

Neutralização parcial

Bases adequadas para os propósitos da invenção são aquelas mencionadas na EP 0 088 951 A2 ou WO 2004/096185 ou derivável destes. Outras bases adequadas para neutralização são solução de hidróxido de sódio, solução de hidróxido de potássio (KOH), hidróxido de amónio ou bases orgânicas tais como, por exemplo, trietanolamina, carbonato de sódio, carbonato de potássio, bicarbonato de sódio, fosfato de trissódio, citrato de trissódio ou amónia ou aminas fisiologicamente toleradas tais como trietanolamina ou tris(hidroximetil)aminometano.

Outras bases orgânicas, catiônicas adequadas são os aminoácidos básicos histidina, arginina e/ou lisina.

Ajuste do grau de neutralização parcial por misturas

Misturas também podem resultar em vantagens técnicas no a- juste do grau de neutralização parcial. Em uma forma de realização preferida da invenção para o revestimento interno é feito uso de misturas de copolímeros de (met)acrilato aniônicos que diferem no grau de neutralização parcial, consistindo em unidades polimerizadas de radical livre de 25 a 95 % em peso de ésteres alquílicos C-i a C4 de ácido acrílico ou de ácido metacrílico e 5 a 75 % em peso de monômeros de (met)acrilato tendo um grupo aniônico, em que 1 a 80 % dos grupos aniônicos contidos, conforme calculada a média para a mistura, são neutralizados por uma base. É possível por exemplo, misturar um copolímero de (met)acrilato aniônico que não é parcialmente neutralizado e consiste em unidades polimerizadas de radical livre de 25 a 95 % em peso de ésteres alquílicos Ci a C4 de ácido acrílico ou de ácido metacrílico e 5 a 75 % em peso de monômeros de (met)acrilato tendo um grupo aniônico com um copolímero de (met)acrilato parcialmente neutralizado da mesma composição de monômero dentro das faixas quantitativas estabelecidas de modo que 1 a 80 % dos grupos aniônicos contidos, conforme calculada a média para a mistura, são neutralizados. A mistura pode ser preparada por exemplo, agitando-se um pó que foi obtido de uma dispersão de um copolímero de (met)acrilato aniônico, parcialmente neutralizado, por exemplo, por secagem por pulverização ou secagem por congelamento, em uma dispersão de um copolímero de (met)acrilato aniônico que não foi parcialmente neutralizado.

Camada de sincronização como parte do núcleo.

Uma camada de sincronização opcional (camada de sub- revestimento) pode ser adicionada ao núcleo. A camada tem a função de sincronização da dissolução do ingrediente ativo e do agente promotor de biodisponibilidade. A camada de sincronização pode ser chamada também como uma camada de sub-revestimento ou uma camada de separação.

Uma camada de sub-revestimento pode ter a função para separar substâncias do núcleo de substâncias da camada de revestimento entérico que podem ser incompatíveis entre si. Especialmente quando o promotor de penetração no núcleo é um copolímero de (met)acrilato catiônico compreendendo grupos amino terciário e o revestimento entérico externo é um polímero celulósico aniônico ou um copolímero de (met)acrilato aniônico pode haver interações indesejadas que podem ser evitadas adicionando-se um sub-revestimento. O sub-revestimento não tem essencialmente nenhuma influência sobre as características de ligação. Um sub-revestimento é prefe-rivelmente essencialmente solúvel em água, por exemplo, ele pode consistir em substâncias como hidroxil propil metil celulose (HPMC) como um formador de película. A espessura média da camada de sub-revestimento é muito fina, por exemplo, não mais do que 50 μm, preferivelmente não mais do que 30 μm.

A camada de sub-revestimento pode compreender pelo menos 50 % em peso de hidroxipropilmetilcelulose.

A camada de sub-revestimento pode compreender até 90 % em peso, preferivelmente até 50 % em peso da quantidade total do agente promotor de biodisponibilidade na formulação. Se o peso molecular do ingrediente ativo for mais baixo ou muito mais baixo do que o peso molecular do agente promotor de biodisponibilidade, o ingrediente ativo pode difundir mais rápido fora da substância central do que o agente promotor de biodisponibilidade. Neste caso o ingrediente ativo pode atingir as células-alvo sem ser acompanhado pelo agente promotor de biodisponibilidade. Assim o efeito desejado pode não ser atingido conforme ele seria se ambas as substâncias atingissem as células juntas. Assim a camada de sub-revestimento pode compreender preferivelmente até 90 % em peso, preferivelmente até 50 % em peso do agente promotor de biodisponibilidade respectivamente e do inibidor de enzimas proteolíticas. Isto tem a vantagem de que antes da liberação do ingrediente ativo fora do núcleo pelo menos uma quantidade pequena do agente promotor de biodisponibilidade fora do sub-revestimento de dissolução rápida já pode estar a caminho das células-alvo. Isto ajuda a sincronizar a liberação do ingrediente ativo e do agente promotor de biodisponibilidade (camada de sincronização).

Reciprocamente a camada de sub-revestimento pode compre-ender até 20 % do ingrediente ativo. Se o peso molecular do ingrediente ativo for mais alto ou muito mais alto do que o peso molecular do inibidor de peptidase ou proteinase o ingrediente ativo pode difundir mais lento fora da substância central do que o inibidor de peptidase ou proteinase. Neste caso o inibidor de peptidase ou proteinase pode atingir as células-alvo sem ser acompanhado pelo ingrediente ativo. Assim o efeito desejado pode não ser atingido como ele seria se ambas as substâncias atingissem as células juntas. Assim a camada de sub-revestimento pode compreender preferivelmente até 20 % do ingrediente ativo. Isto tem a vantagem de que antes da liberação do inibidor de peptidase ou proteinase fora do núcleo pelo menos uma certa quantidade do ingrediente ativo fora do sub-revestimento de dissolução rápida já pode estar a caminho das células-alvo. Isto ajuda a sincronizar o ingrediente ativo e o inibidor de peptidase ou proteinase (camada de sincronização).

A camada de sincronização se presente pode conter até 50, até 40, até 30, até 20, até 10 % em peso de excipientes adicionais. Preferivelmente a camada de sincronização não contém quantidades essenciais ou quaisquer excipientes adicionais.

Produção de formas farmacêuticas multiparticuladas

Os núcleos de pélete contendo substância ativa podem ser processados por meio de excipientes farmaceuticamente usuais e em uma maneira conhecida por si a formas farmacêuticas multiparticuladas, em particular a péletes contendo comprimido, minicomprimidos, cápsulas, sachês ou pós para reconstituição, que são formulados tal que os péletes contidos são liberados na faixa do pH do estômago. A preparação como forma farmacêutica multiparticulada deposita alta confiabilidade de dosagem e oferece a vantagem de distribuição de maneira uniforme dos péletes no lúmen intestinal. A forma farmacêutica multiparticulada da invenção pode adicionalmente também compreender diferentes tipos de pélete com diferentes substâncias ativas e/ou diferente estrutura de pélete.

Comprimidos prensados

A produção de formas farmacêuticas multiparticuladas por compressão de um aglutinante farmaceuticamente usual com partículas contendo ingrediente ativo é descrita por exemplo, em Beckert et al. (1996), "Compression of enteric-coated pellets to disintegrating tablets", International Journal of Pharmaceutics 143, pp. 13-23, e no WO 96/01624.

Revestimentos de película em péletes contendo substância ativa são normalmente aplicados em aparelhos de leito fluidizado. Exemplos de formulação são mencionados neste pedido. Formadores de película são normalmente misturados com plastificantes e liberam agentes por um processo adequado. É possível neste caso que os formadores de película estejam na forma de uma solução ou suspensão. Os excipientes para formação de película podem do mesmo modo ser dissolvidos ou colocado em suspen- são. Solventes orgânicos ou aquosos ou agentes de dispersão podem ser usados. Estabilizadores podem ser usados adicionalmente para estabilizar a dispersão (exemplo: Tween 80 ou outros emulsificadores ou estabilizadores adequados).

Exemplos de agentes de liberação são monoestearato de glicerol ou outros derivados de ácido graxo adequados, derivados de sílica ou talco. Exemplos de plastificantes são propileno glicol, ftalatos, polietileno gli- cóis, sebacatos ou citratos, e outras substâncias mencionadas na literatura.

Misturas para produzir comprimidos compostas de partículas revestidas são preparadas misturando-se os péletes com aglutinantes adequados para formação de comprimidos, se necessário adicionando-se substâncias promotoras de desintegração e se necessário adicionando-se lubrificantes. A mistura pode ocorrer em máquinas adequadas. Misturadores inadequados são aqueles que levam a dano às partículas revestidas, por e- xemplo, misturadores tipo relha. Para obter tempos de desintegração curtos adequados pode ser necessário adicionar os excipientes às partículas revestidas em uma sequência específica. É possível pré-misturar com a partícula revestida com o lubrificante ou agente de liberação de molde estearato de magnésio para que sua superfície torne-se hidrofóbica e assim para que a adesão seja evitada.

Misturas adequadas para formação de comprimidos normalmente compreendem 3 a 15 % em peso de um auxiliar de desintegração, por exemplo, Kollidon CL e, por exemplo, 0,1 a 1 % em peso de um lubrificante e agente de liberação de molde tal como estearato de magnésio. A proporção de aglutinante é determinada pela proporção necessária de partículas revestidas.

Exemplos de aglutinantes típicos são Cellactose®, celulose mi- crocristalina, fosfatos de cálcio, Ludipress®, lactose ou outros açúcares adequados, sulfatos de cálcio ou derivados de amido. Substâncias de densidade volumétrica baixa são preferidas.

Auxiliares de desintegração típicos (desintegrantes) são derivados de amido ou derivados de celulose reticulados, e polivinilpirrolidona reti- culada. Derivados de celulose são do mesmo modo adequados. É possível dispensar com o uso de auxiliares de desintegração através da seleção de um aglutinante adequado.

Lubrificantes e agentes de liberação de molde típicos são estea- ratos de magnésio ou outros sais adequados de ácidos graxos ou substâncias detalhadas na literatura para este propósito (por exemplo, ácido láurico, estearato de cálcio, talco, etc.). É possível dispensar com o uso de um lubrificante e agente de liberação de molde na mistura em uso de máquinas adequadas (por exemplo, prensa de comprimido com lubrificação externa) ou formulações adequadas.

É possível onde apropriado adicionar um auxiliar à mistura para melhorar o fluxo (por exemplo, derivados de sílica coloidal, talco, etc.).

A formação de comprimidos pode ocorrer em prensas de comprimido usuais, prensas de comprimido excêntricas ou rotativas, com forças compressivas na faixa de 5 a 40 kN, preferivelmente 10 a 20 kN. As prensas de comprimido podem ser equipadas com sistemas para lubrificação externa. Sistemas especiais para enchimento do molde, que evitam o enchimento do molde por meio de pás de impulsão, são empregados onde apropriado.

Outras formas farmacêuticas multiparticuladas

Como uma alternativa para comprimidos prensados ou minicomprimidos, também é possível que as péletes revestidos contendo substância ativa sejam processadas a qualquer outra forma farmacêutica multiparticula- da oralmente administrada. As péletes revestidos podem, por exemplo, ser embaladas em cápsulas, por exemplo, cápsulas de gelatina, ou formuladas a sachês ou pós reconstituíveis. Uso

A invenção refere-se ainda ao uso de um agente promotor de bi-odisponibilidade que é um inibidor farmaceuticamente aceitável de enzimas proteolíticas como um excipiente que aumenta a biodisponibilidade oral de um ingrediente ativo em uma formulação inventiva. A formulação farmacêutica ou nutracêutica inventiva pode ser aplicada para aplicações humanas ou veterinárias.

Nutracêuticos

Nutracêuticos podem ser definidos como extratos de alimentos reivindicados para ter efeitos médicos sobre a saúde humana. O nutracêutico é usualmente contido em um formato médico tal como cápsula, comprimido ou pó em uma dose prescrita. Exemplos para nutracêuticos são resveratrol de produtos da uva como um antioxidante, produtos de fibra dietética solúvel, tais como casca de semente de psílio para reduzir hipercolesterole- mia, brócolis (sulfeto de hidrogênio) como uma defesa contra o câncer, e soja ou trevo (isoflavonoides) para melhorar a saúde arterial. Outros exemplos de nutracêuticos são flavonoides, antioxidantes, ácido alfa- oleicolinoleico de semente de linho, beta-caroteno de pétalas de calêndula ou antocianinas de bagas. Algumas vezes a expressão neutracêuticos é u- sada como sinônimo para nutracêuticos.

Excipientes

O núcleo, opcionalmente a camada de sincronização e o revestimento entérico podem além de seus ingredientes essenciais incluir excipientes adicionais, que são diferentes dos ingredientes essenciais. Os ingredientes essenciais são o ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, o promotor de penetração, o agente promotor de biodisponibilidade e o revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo. No caso de uma camada de sincronização é naturalmente essencial que a camada seja formada por um polímero formador de película preferivelmente solúvel em água com uma porção do ingrediente ativo farmacêutico ou neutracêutico ou do agente promotor de biodisponibilidade.

O núcleo sem a camada de sincronização opcional pode conter até 50, até 40, até 30, até 20, até 10 % em peso de excipientes adicionais. Preferivelmente o núcleo não contém quantidades essenciais ou quaisquer excipientes adicionais.

A camada de sincronização se presente pode conter até 50, até 40, até 30, até 20, até 10 % em peso de excipientes adicionais. Preferivelmente a camada de sincronização não contém quantidades essenciais ou quaisquer excipientes adicionais.

A camada de revestimento entérico pode conter até 50, até 40, até 30, até 20, até 10 % em peso de excipientes adicionais. Preferivelmente a camada de revestimento entérico não contém quantidades essenciais ou quaisquer excipientes adicionais.

Excipientes farmacêuticos ou nutracêuticos são bem conhecidos à pessoa habilitada. Excipientes farmacêuticos ou nutracêuticos podem ser contidos por razões práticas, por exemplo, para evitar viscosidade ou para adicionar uma cor. Entretanto estes excipientes usualmente não contribuem ou mostram qualquer ou quase nenhum efeito sobre a invenção propriamente dita conforme reivindicado aqui. Eles podem ser usados como adjuvantes de processamento e são intencionados a garantir um processo de preparação confiável e reproduzível assim como boa estabilidade em armazenamento a longo prazo, ou eles obtêm propriedades vantajosas adicionais na forma farmacêutica.

Excipientes adequados podem ser antioxidantes, branqueadores, agentes de ligação, agentes flavorizantes, auxiliares de fluxo, fragrâncias, deslizantes, agentes promotores de penetração, pigmentos, plastifican- tes, polímeros, agentes formadores de poro ou estabilizadores. Todas as substâncias usadas devem naturalmente ser toxicologicamente seguras e ser usadas em produtos farmacêuticos ou nutracêuticos sem risco para pacientes.

Plastificantes

Plastificantes obtêm através de interação física com um polímero uma redução na temperatura de transição vítrea e promovem formação de película, dependendo da quantidade adicionada. Substâncias adequadas usualmente têm um peso molecular entre 100 e 20 000 e compreendem um ou mais grupos hidrofílicos na molécula, por exemplo, grupos hidroxila, éster ou amino. Exemplos de plastificantes adequados são citratos de alquila, ésteres de glicerol, ftalatos de alquila, sebacatos de alquila, ésteres de sacarose, ésteres de sorbitano, sebacato de dietila, sebacato de dibutila, propile- noglicol e polietileno glicóis 200 a 12 000. Plastificantes preferidos são citrato de trietila (TEC), citrato de acetil trietila (ATEC), sebacato de dietila e sebacate de dibutila (DBS). Menção deve adicionalmente ser feita de ésteres que são usualmente líquidos em temperatura ambiente, tais como citratos, ftala- tos, sebacates ou óleo de mamona. Ésteres de ácido cítrico e ácido sebací- nico são preferivelmente usados.

A adição dos plastificantes à formulação pode ser realizada em uma maneira conhecida, diretamente, em solução aquosa ou depois do pré- tratamento térmico da mistura. Também é possível empregar misturas de plastificantes.

Deslizantes / Agentes de liberação / Redutores de viscosidade:

Deslizantes, agentes de liberação ou redutores de viscosidade usualmente têm propriedades lipofílicas e são usualmente adicionados a suspensões de pulverização. Eles podem ser adicionados à formulação central ou ao revestimento entérico. Eles impedem a aglomeração de núcleos durante a formação de película ou aglomeração dos péletes revestidos. E- xemplos são talco, estearato de Mg ou Ca, sílica triturada, caulim ou emulsi- ficadores não iônicos com um valor de HLB entre 2 e 8. Proporções padrões para uso de deslizantes nos agentes de revestimento e ligação inventivos variam entre 0,5 e 70 % em peso em relação ao peso dos núcleos ou em relação ao peso do revestimento entérico.

Cálculo de dados Cálculos foram realizados usando o pacote da planilha eletrônica do MS Excel. Coeficiente de permeabilidade aparente (Papp) O P aPP foi calculado de acordo com a Eq.1. P [cm-s1] Eq. 1

ΔQ/Δt taxa de permeabilidade (taxa de transporte no estado estacionário) obtida do perfil da quantidade transportada de substrato versus tempo [μg ou dpm s’1]. Calculada pela regressão linear de tempo e concentração

A área da monocamada de célula exposta [cm2] m0 massa inicial do composto de teste no compartimento doador [μg ou dpm] VD volume do tampão do compartimento doador [cm3] Resistência elétrica transepitelial (TEER) A TEER foi calculada de acordo com a Eq. 2.

RC(A) resistência elétrica da monocamada com a área A [Q cm2] Rc+f resistência elétrica da monocamada incluindo o filtro [Q] Rf resistência elétrica do filtro sem células [Q]

A área da monocamada [cm2] A resistência elétrica de um filtro isento de célula com uma área de 1,13 cm2 é 100 Q. Fluxo O fluxo foi calculado de acordo com a Eq.3.

CAK-120 Concentração de API [μg mL'1] no aceitante depois de 120 min CDO Concentração de API [μg -mL’1] no doador no começo do experimento (0 min)

Exemplos

Materiais EUDRAGIT® E é um copolímero composto de 25 % em peso de metacrilato de metila, 25 % em peso de metacrilato de butila e 50 % em peso de metacrilato de dimetilaminoetila. EUDRAGIT® E PO é a forma em pó de EUDRAGIT® E com um tamanho de partícula médio de cerca de 15 μm. EUDRAGIT® L 30 D-55 é uma dispersão compreendendo 30 % em peso de EUDRAGIT® L 100-55. EUDRAGIT® L 100-55 é um copolímero de 50 % em peso de acrilato de etila e 50 % em peso de ácido metacrílico. Minirin® é um medicamento contendo acetato de desmopressina comercialmente disponível na forma de comprimidos. Um comprimido de Minirin® pesa 200 mg e contém um teor nominal de 200 μg de desmopressina. Inibidor de Bowman-Birk (BBI) da fonte de feijão-soja foi usado (Sigma Aldrich, Alemanha) Heparina: Heparina de peso molecular baixo (LMW-Heparina); Fraxiparin® (Nadroparin cálcica); Glaxo Smith Kline Exemplos de preparação 1 a 11

Exemplo 1

Como a preparação de desmopressina para o exemplo 1 comprimidos contendo desmopressina comercialmente disponíveis foram usados (Minirin®) Formulação de controle de Minirin foi obtida misturando-se um comprimido de Minirin® junto com cellets (péletes de celulose microcristalina) de modo a obter um peso igual às outras formulações de desmopressina. Um comprimido de Minirin® (200 mg contendo um teor nominal de 200 μg de desmopressina) foi cortado em metades. Estes pedaços foram misturados com Cellets® 500 (péletes de celulose microcristalina) de modo a obter um peso total de 350 mg.

Exemplo 2

Preparação de péletes de desmopressina e EUDRAGIT® E PO como promotor de penetração A formulação do exemplo 2 foi fabricada em duas etapas. A primeira etapa é a preparação da solução de revestimento por pulverização. A segunda etapa é a aplicação da solução de revestimento por pulverização em um processo de revestimento por pulverização. Deste modo péletes de EUDRAGIT® E / desmopressina com uma fração de tamanho de partícula de 400 a 710 μm foram obtidas. Preparação de uma solução de pulverização 83 g de EUDRAGIT® E PO foram enchidos em um béquer de vidro de 1000 ml. Durante a agitação mecânica a 700 rpm a quantidade total de HCI 1 N e 90 % da quantidade total de água foram adicionados na dispersão de polímero. Depois de agitar constantemente a 10 min, 8,3 g de Tween® 80 foram adicionados à dispersão. Uma solução clara com viscosidade média e uma formação de espuma leve foi obtida depois de agitação adicional de 1 h em 850 rpm. Depois da filtração da solução de EUDRAGIT® E PO neutralizada com HCI através de uma tela metálica de 0,315 mm, a solução de desmopressina foi adicionada. A solução integral foi agitada mais 10 min para obter uma mistura uniforme.

Fabricação de péletes de desmopressina/EUDRAGIT® E PO por processo de revestimento por pulverização

Material de partida para a preparação dos núcleos de desmo-pressina/EUDRAGIT® E PO foi 50 g de fração de péletes de açúcar não similares de 250 a 355 μm. Deste, 591,3 ml de solução de EUDRAGIT® EPO neutralizada com HCI contendo desmopressina foram aplicados por revestimento por pulverização.

Em resumo, o processo foi conduzido como segue:

O ar de entrada foi ajustado para 35 a 51 °C e a temperatura do produto foi ajustada para 29 a 35 °C. A velocidade de pulverização foi iniciada com 0,3 a 2,5 g de solução/min e o fluxo de ar foi mantido de 16 a 20 m3/h. O processo de pulverização foi concluído depois de 327 min. No final as péletes foram secas na máquina por 10 min e peneiradas através de uma peneira de 710 μm. O rendimento final obtido foi 139,77 g correspondendo a 95 % do peso teórico.

Exemplo 3

Preparação de péletes de desmopressina, EUDRAGIT® E PO como promotor de penetração e inibidor de Bowman-Birk (BBI)

A formulação do exemplo 3 foi fabricada em duas etapas. A primeira etapa é a preparação da solução de revestimento por pulverização. A segunda etapa é a aplicação da solução de revestimento por pulverização em um processo de revestimento por pulverização. Deste modo péletes de EUDRAGIT® E / desmopressina / BBI com uma fração de tamanho de partícula de 400 a 710 μm foram obtidas. Preparação de uma solução de pulverização 189,9 g de EUDRAGIT® E PO foram enchidos em um béquer de vidro de 1000 ml. Sob agitação mecânica em 600 rpm, 16,31 g de dodecil- sulfato de sódio dissolvido em 60 % da quantidade total de água foram adi- cionados ao polímero. Depois de agitar constantemente por 10 min, 182,7 g de solução de ácido acético a 10 % foram adicionados lentamente no béquer para evitar a coagulação do polímero. 30 min mais tarde a quantidade total de ácido cáprico fundido foi adicionada na mistura. Uma solução clara com viscosidade média e uma formação de espuma leve foi obtida depois de agitação adicional de 2 h em 850 rpm. 25,31 g de Inibidor de Bowman-Birk (BBI) e a quantidade remanescente de dodecilsulfato de sódio foram dissolvidos em 190,4 g de água usando um frasco de vidro de 250 ml e adicionados na solução de polímero durante a agitação. Desmopressina foi dissolvida em 10 % da água remanescente usando um béquer de vidro de 50 ml. Depois da filtração da solução de EUDRAGIT® E PO neutralizada através de uma tela metálica de 0,315 mm, a solução de desmopressina foi adicionada. A solução integral foi agitada mais 10 min para obter homogeneidade na mistura.

Fabricação de péletes de desmopressina/EUDRAGIT® E PO/BBI por processo de revestimento por pulverização

Material de partida para a preparação dos núcleos de desmo-pressina/EUDRAGIT® E PO/BBI foi 50 g de fração de péletes de açúcar não similar de 250 a 355 μm.

O processo foi conduzido como segue:

O ar de entrada foi ajustado para 40 a 48 °C e a temperatura do produto foi ajustada para 29 a 33 °C. A velocidade de pulverização foi iniciada com 0,8 a 4,0 g de solução/min e o fluxo de ar foi mantido de 16 a 27 m3/h. O processo de pulverização foi concluído depois de 314 min. No final as péletes foram secas na máquina por 10 min e peneiradas através de uma peneira de 710 μm. O peso final obtido foi 146,15 g correspondendo a 77 % de péletes de desmopressina/EUDRAGIT® E PO/BBI de 400 a 710 μm do peso total de péletes de desmopressina/EUDRAGIT® E PO/BBI.

Exemplo 4

Preparação de péletes do exemplo 2 com uma camada de revestimento de HPMC adicional

As péletes do exemplo 2 foram tomadas e revestidas ainda com

HPMC. Em uma primeira etapa a solução de revestimento por pulverização de HPMC é preparada. Em uma segunda etapa a solução de revestimento por pulverização de HPMC foi aplicada aos péletes em um processo de revestimento por pulverização. Deste modo péletes de EUDRAGIT® E / desmopressina com um revestimento de HPMC com uma fração de tamanho de partícula de 400 a 710 μm foram obtidas.

Preparação da solução de pulverização de HPMC 252,8 g de água foram enchidos em um frasco de vidro de 250 ml e aquecidos até cerca de 70 °C sob agitação usando um agitador magnético. A quantidade total de 25 g de hidroxipropilmetilcelulose foi adicionada gradualmente à água quente. Depois de agitar constantemente por 15 min, a solução foi removida do aquecedor e foi resfriada até a temperatura ambiente. A água perdida por evaporação foi completada. A solução de HPMC foi filtrada através de uma tela metálica de 0,315 mm. Fabricação de péletes de desmopressina/EUDRAGIT® E PO com revestimento de HPMC

Material de partida para a preparação dos péletes revestidos foi 100 g de péletes peneirados do exemplo 2, fração < 600 μm. Disto, 277,8 g da solução de revestimento por pulverização de HPMC foram aplicados por revestimento por pulverização.

O processo foi realizado como segue: a temperatura do produto foi ajustada para 29 a 35 °C ajustando-se uma temperatura de ar de entrada de 30 °C no começo aumentando para 55 °C no final do processo dependendo da umidade do ar do processo. A pulverização foi iniciada com 0,7 a 1,4 g de solução/min e o fluxo de ar foi ajustado de 12 a 16 m3/h. O processo de pulverização foi concluído depois de 215 min. Os péletes foram secos 10 min em 10 m3/h e 34 até a temperatura de 35 °C do produto usando o reves- tidor por pulverização e depois peneiradas através de uma peneira de 600 μm. O peso final obtido foi 122,99 g correspondendo a 98 % de péletes revestidos < 600 μm de peso esperado teórico total.

Exemplo 5

Preparação dos péletes do exemplo 3 com uma camada de sin-

cronização de HPMC adicional contendo BBI

Os péletes do exemplo 3 foram tomados e revestidos ainda com HPMC contendo BBI. Em uma primeira etapa a solução de revestimento por pulverização de HPMC/BBI é preparada. Em uma segunda etapa a solução de revestimento por pulverização de HPMC/BBI foi aplicada aos péletes em um processo de revestimento por pulverização. Deste modo, péletes de EUDRAGIT® E/desmopressina/BBI com um revestimento de HPMC/BBI com uma fração de tamanho de partícula de 400 a 710 μm foram obtidos. Preparação da solução de pulverização de HPMC contendo BBI 178 g de água foram enchidos em um frasco de vidro de 250 ml e aquecidos até cerca de 70 °C durante agitação usando um agitador magnético. A quantidade total de 19,5 g de HPMC foi adicionada gradualmente à água quente. Depois de agitar constantemente por 15 min, a solução foi removida do aquecedor e foi resfriada até a temperatura ambiente. A água perdida por evaporação foi completada. 2,6 g de Inibidor de Bowman-Birk (BBI) foram dissolvidos em 45,5 g de água usando um béquer de vidro de 50 ml. Depois da filtração da solução de HPMC clara através de uma tela metálica de 0,315 mm a solução de BBI foi adicionada. A solução integral foi agitada mais 15 min para obter homogeneidade na mistura.

Fabricação de péletes de desmopressina/EUDRAGIT® E PO/BBI com revestimento de HPMC/BBI 130 g de péletes peneirados do exemplo 3, fração de 500 a 710 μm foram usados como material de partida. Disto, 245,6 ml da solução de revestimento de HPMC/BBI foram aplicados por revestimento por pulverização.

O processo foi realizado como segue: o ar de entrada foi ajustado para 30 a 45 °C e a temperatura do produto foi ajustada para 29 a 33 °C. A velocidade de pulverização foi iniciada com 0,6 e elevada para 2,2 g de solução/min e o fluxo de ar foi mantido de 18 a 24 m3/h. O processo de pulverização foi concluído depois de 134 min. No final os péletes foram secos na máquina por 10 min e peneirados através de uma peneira de 710 μm e o rendimento foi verificado por pesagem. O peso final obtido foi 149,23 g cor- respondendo a 98 % de péletes revestidos < 710 μm de peso esperado teórico total.

Exemplo 6

Preparação de péletes do exemplo 4 com uma camada de revestimento entérico de EUDRAGIT® L 30 D-55 adicional

Os péletes do exemplo 4 foram tomados e revestidos ainda com EUDRAGIT® L30D-55. Em uma primeira etapa a solução de revestimento por pulverização de EUDRAGIT® L30D-55 é preparada. Em uma segunda etapa a solução de revestimento por pulverização de EUDRAGIT® L30D-55 foi aplicada aos péletes em um processo de revestimento por pulverização. Deste modo, péletes de EUDRAGIT® E/desmopressina com um revestimento de HPMC e revestimento entérico de EUDRAGIT® L30D-55 com uma fração de tamanho de partícula de 400 a 710 μm foram obtidas.

Preparação de dispersão de pulverização de EUDRAGIT® L30D- 55

Em um frasco de vidro de 100 ml, 105 g de água foram enchidos e aquecidos até cerca de 80 °C sob agitação com um agitador magnético. Depois de aumentar a velocidade do agitador magnético, 3,6 g de solução de Tween 80 (33,33 %) foram adicionados à água quente antes de adicionar 3,0 g de monoestearato de glicerol. Depois de agitar vigorosamente por 15 min, a dispersão foi retirada do aquecedor e resfriada durante agitação de maneira vigorosa até a temperatura ambiente. A água perdida por evaporação foi completada. 133,3 g de dispersão de EUDRAGIT® L 30 D-55 peneirada e 72,4 g de água foram misturados em um frasco de vidro de 250 ml. Sob agitação 4 g de citrato de trietila foram adicionados na dispersão. Depois da agitação adicional de 10 min, a dispersão de monoestearato de glicerol preparada mencionada acima foi adicionada. A dispersão integral foi agitada mais 40 min para obter homogeneidade na solução de pulverização.

Fabricação de péletes revestidos entéricos do exemplo 4

Material de partida para a preparação dos péletes revestidos foi 100 g de péletes peneirados do exemplo 4, fração < 600 μm. Disto, 321,3 g da dispersão de pulverização de EUDRAGIT® L30D-55 foram aplicados por revestimento por pulverização.

O processo foi realizado como segue: A temperatura do produto foi ajustada para 30 a 36 °C ajustando-se uma temperatura de ar de entrada de 37 °C no começo aumentando para 52 °C no final do processo dependendo da umidade do ar do processo. O processo de pulverização foi iniciado com 0,6 aumentando para 2,6 g de solução/min e o fluxo de ar foi ajustado de 16 m3/h no começo a 18 m3/h. O processo de pulverização foi concluído depois de 213 min. Os péletes foram secos 10 min em 10 m3/h e na temperatura do produto de 35 a 36 °C usando o revestidor por pulverização e depois peneirados através de uma peneira de 710 μm. Os péletes foram secos ainda adicionalmente 2 h a 40 °C em um forno de secagem. O peso final obtido foi 145,03 g correspondendo a 98 % de péletes revestidos < 710 μm do peso esperado teórico total.

Exemplo 7

Preparação das péletes do exemplo 5 com uma camada de revestimento entérico de EUDRAGIT® L 30 D-55 adicional

Os péletes do exemplo 5 foram tomados e revestidos ainda com EUDRAGIT® L30D-55. Em uma primeira etapa, a solução de revestimento por pulverização de EUDRAGIT® L30D-55 é preparada. Em uma segunda etapa a solução de revestimento por pulverização de EUDRAGIT® L30D-55 foi aplicada aos péletes em um processo de revestimento por pulverização. Deste modo péletes de EUDRAGIT® E/desmopressina/BBI com um revestimento de HPMC/BBI e revestimento entérico de EUDRAGIT® L30D-55 com uma fração de tamanho de partícula de 400 a 710 μm foram obtidas.

Preparação da dispersão de pulverização de EUDRAGIT® L30D- 55 52,5 g de água foram enchidos em um frasco de vidro de 100 ml e aquecidos até cerca de 80 °C sob agitação com um agitador magnético. 1,8 g de solução de Tween 80 (33,33 %) foram adicionados à água quente agitando a dispersão vigorosamente antes de adicionar 1,5 g de monoestea- rato de glicerol. Depois de 15 min agitando vigorosamente, a dispersão foi retirada do aquecedor e foi resfriada durante agitação de maneira vigorosa até a temperatura ambiente. A água perdida da evaporação foi completada. 66,7 g de dispersão de EUDRAGIT® L 30 D-55 peneirada e 36,2 g de água foram misturados em um frasco de vidro de 250 ml. Sob agitação 2 g de citrato de trietila foram adicionados na dispersão. Depois da agitação adicional de 10 min, a dispersão de monoestearato de glicerol preparada mencionada acima foi adicionada. A suspensão integral foi agitada mais 40 min para obter homogeneidade na solução de pulverização.

Fabricação de péletes revestidos entéricos do exemplo 5

Material de partida para a preparação das péletes revestidos foi 100 g de péletes peneiradas do exemplo 4, fração <710 μm. Disto, 160,7 ml da dispersão de pulverização de EUDRAGIT® L30D-55 descrita acima foram aplicados por revestimento por pulverização.

O ar de entrada foi ajustado para 35 a 46 °C e a temperatura do produto foi ajustada para 30 a 33 °C. A velocidade de pulverização foi iniciada com 0,3 e elevada para 1,6 g de solução/min e o fluxo de ar foi mantido de 16 a 18 m3/h. O processo de pulverização foi concluído depois de 146 min. Os péletes depois foram secos na máquina por 10 min e peneirados através de uma peneira de 710 μm e o rendimento foi verificado por pesagem. O peso final obtido foi 123,98 g correspondendo a 100 % de péletes revestidos < 710 μm do peso esperado teórico total.

Exemplo 8 (controle do fármaco (cápsula))

Os péletes do exemplo 1 foram enchidos em uma cápsula de HPMC tamanho 1.

As misturas do exemplo 1 foram enchidas em uma cápsula de HPMC tamanho 1 usando um funil de enchimento de modo a obter um peso total de 350 mg. A uniformidade do peso da cápsula foi 350,2 mg +/- 0,9 (desvio padrão, n = 10). A uniformidade do conteúdo de desmopressina nas cápsulas foi 215,62 +/- 5,55 μg (desvio padrão, n = 10).

Exemplo 9 (formulação não inventiva (cápsula))

Os péletes do exemplo 2 foram enchidos em uma cápsula de HPMC tamanho 1.

Para uma cápsula de 107 mg péletes do exemplo 2, com um teor de cerca de 205 μg de desmopressina, foram misturadas com Cellets® 500 como material de enchimento para encher cápsulas de HPMC tamanho 1 com um peso total de 350 mg. A uniformidade do peso da cápsula foi 350,5 mg +/- 0,3 (desvio padrão, n = 10). A uniformidade do conteúdo de desmopressina nas cápsulas foi 204,57 +/- 2,42 μg (desvio padrão, n = 10). Exemplo 10 (formulação não inventiva (cápsula))

Os péletes do exemplo 6 foram enchidos em uma cápsula de HPMC tamanho 1.

Para uma cápsula de 195,6 mg péletes de exemplo 6, com um teor de cerca de 225 μg de desmopressina, foram misturados com Cellets® 500 como material de enchimento para encher cápsulas de HPMC tamanho 1 com um peso total de 350 mg. A uniformidade do peso da cápsula foi 350,1 mg +/- 0,2 (desvio-padrão, n = 10). A uniformidade do conteúdo de desmopressina nas cápsulas foi 225,4 +/- 0,51 μg (desvio padrão, n = 10). Exemplo 11 (formulação inventiva (cápsula))

Os péletes do exemplo 7 foram enchidos em uma cápsula de HPMC tamanho 1.

Para uma cápsula de 145,5 mg, péletes do exemplo 7, com um teor de cerca de 211 μg de desmopressina, foram misturados com Cellets® 500 como material de enchimento para encher cápsulas de HPMC tamanho 1 com um peso total de 350 mg. A uniformidade do peso da cápsula foi 350,0 mg +/- 0,2 (desvio-padrão, n = 10). A uniformidade do conteúdo de desmopressina nas cápsulas foi 211,31 +/-1,19 μg (desvio padrão, n = 10). Exemplos de teste 12 a 16

Exemplo 12 (TEER)

Teste in vitro das preparações dos exemplos 1, 4 e 5 em células Cacoll (valores de TEER)

Preparação de monocamadas de célula Cacoll para medições da resistência elétrica transepitelial (TEER)

Para os experimentos de transporte, células Caco-2 foram semeadas com uma densidade de 60.000 células por centímetro quadrado em inserções de filtro Transwell®, que foram colocadas em placas de agrupamento de fundo plano de 12 reservatórios. As inserções (compartimentos apicais) foram abastecidas com 0,5 mL e os reservatórios externos (compartimentos basais) com 1,5 mL de meio de cultura DMEM. As células foram cultivadas a 37 °C, 10 % de CO2 e 90 % de umidade relativa em meio de cultura DMEM por 14 a 30 dias até que elas formassem monocamadas confluentes. O meio de cultura foi substituído a cada 2 a 3 dias. Confluência e estanqueidade da monocamada de célula foram rotineiramente verificadas medindo-se a resistência elétrica transepitelial usando um volt-ohmômetro EVOM®.

Um lote de monocamada de Caco-2 é definido como células Ca- co-2 semeadas e cultivadas em paralelo sob as mesmas condições em filtros Transwell®. Qualificação dos lotes de monocamada de Caco-2 por meio de marcadores de transporte selecionados é realizada em triplicate para cada condição de transporte. Os critérios de qualidade seguintes têm que ser satisfeitos antes que um lote de monocamada seja liberado para estudos de permeabilidade: • Número de passagem de Caco-2 menor do que 50 • Idade da cultura de 14 a 30 dias em filtros Transwell® • Valores de TEER antes e depois do transporte acima de 200 Q cm2 (indicando integridade e estanqueidade da monocamada de célula) • Coeficiente de permeabilidade aparente (ab e ba) de um marcador fracamente permeável (Fluoresceína) menor do que 1-10-6 cm-s'1 (indicando conformidade do modelo para identificar transporte fracamente permeável, garantindo estanqueidade da monocamada de célula). • Coeficiente de permeabilidade aparente (ba) de Rodamina 123 mais alto do que 4-1 O’6 cm s'1 (indicando expressão evidente de P- glicoproteína) • Coeficiente de permeabilidade aparente (ab) de Propranolol mais alto do que 5-10’6 cm s’1 (indicando conformidade do modelo para identificar transporte altamente permeável)

Os seguintes critérios de qualidade têm que ser satisfeitos para cada monocamada individual usada para estudos de permeabilidade com os compostos de teste: • Monocamadas são parte de um lote qualificado. • TEER deve ser mais alta do que 200 Qcm2 depois da pré- incubação (30 a 45 min), de outro modo a monocamada é rejeitada • TEER deve ser mais alta do que 200 Q cm2 depois do estudo de transporte, valores de TEER mais baixos indicam uma carência da integridade da monocamada sobre o estudo Tampões usados nos experimentos para o lado apical ou para o lado basolateral Tabela 1

O pH foi ajustado por NaOH/HCI

Preparação e medição das amostras Para os experimentos 1 mg dos comprimidos em pó Minirin® do exemplo 1 ou péletes intactas dos exemplos 4 e 5 foram aplicados ao compartimento doador. Como um outro controle uma mistura de acetato de desmopressina e Cellets® 700 foi aplicada. O efeito da formulação de pélete sobre a TEER foi avaliado por monitoramento de TEER durante o experimento de transporte. A TEER foi medida em 0, 15, 30, 60, 120 e 240 min. Depois da última medição de TEER, o conteúdo do compartimento apical e basolateral foi removido e as cé- lulas foram lavadas e recultivada em meio de cultura celular por 20 h adicio-nais. A TEER foi medida novamente para avaliar a reversibilidade do realce da permeação. Resultados Tabela 2

Os valores de TEER dos péletes dos exemplos 4 e 5 foram re duzidos a menos do que 15 % comparado ao controle de tampão. Ao contrário disto, a formulação do exemplo 1 mostrou apenas uma redução para 70 %.

Exemplo 13 (Fluxo)

Teste in vitro das preparações dos exemplos 1, 4 e 5 em células Cacoll (Medições de fluxo) Preparação de monocamadas de célula Cacoll para Medições de fluxo Monocamadas de célula Caco-ll foram preparadas do mesmo modo como no exemplo 12 Preparação e medição das amostras Uma solução de acetato de desmopressina contendo 1000 μgmL’1 foi preparada em tampão de HBSS pH 6,5 dissolvendo-se 10 mg de substância em 10 ml de tampão.

A solução foi e aplicada ao compartimento doador junto com 1 mg da formulação de pélete, ou do comprimido de Minirin em pó.

Para os experimentos 1 mg do comprimido em pó de Minirin® do exemplo 1 ou péletes intactos dos exemplos 4 e 5 foram aplicados ao compartimento doador. Como um outro controle uma mistura de acetato de desmopressina e Cellets® 700 foi aplicada.

Como nenhuma pré-incubação foi realizada a concentração do composto de teste encontrado na solução de transporte foi tomada como concentração de doador inicial (cD0). Depois de 120 minutos, amostras de 100 μL foram tomadas dos compartimentos aceptores e dos compartimentos doadores. Entre os pontos de amostragem, as monocamadas foram incubadas a 37 °C em uma incubadora de CO2. Todos os experimentos foram realizados em triplicata.

Como um controle péletes inertes (cellets) foram usados.

A solução foi analisada por HPLC usando uma coluna RP-18 como uma fase estacionária e uma mistura de água/acetonitrila (80:20) co-mo fase eluente em um comprimento de onda de 220 nm. O Fluxo foi calculado como porcentagem de 1000 μg ml’1 de desmopressina que representa a quantidade de 100 % aplicada no lado doador. O teor de desmopressina nas péletes aplicadas (cerca de 2 μg) foi desprezado para o cálculo.

Resultados

Os resultados dos experimentos de "Fluxo" são resumidos na tabela 3. Tabela 3

Como um resultado torna-se evidente que formulações dos e- xemplos 4 e 5 aumentam o Fluxo de desmopressina em células Cacoll a um valor de mais do que 20 %.

Exemplo 14 (Inibição da enzima proteolítica)

Teste de inibição de enzima pancreática in vitro das preparações dos exemplos 1,4 e 5

Projetos Experimentais

Experimentos de inibição foram realizados usando um novo projeto de estudo considerando a dissolução dos péletes. 80 mg de cada formulação foram agitados em 10 ml de HBSS pH 5,8 na velocidade de agitação mais baixa disponível. A agitação foi parada depois de 30 min e as suspensões deixadas depositar antes que um alíquota (2 ml) fosse retirada e misturada com 2 mL de uma solução contendo 80 μg-ml'1 de acetato de desmopressina em tampão de HBSS pH 6,5. O pH das soluções foi medido mas não ajustado. Como um controle negativo 2 ml de tampão de HBSS foram misturados com 2 ml de uma solução contendo 80 μg-ml'1 de acetato de desmopressina em tampão de HBSS pH 6,5. O pH das soluções foi medido mas não ajustado. Como um controle positivo uma solução contendo 4 mg de BBI por ml em HBSS foi usada. 2 ml da solução foram misturados com 2 ml de uma solução contendo 80 μg-ml’1 de acetato de desmopressina em tampão de HBSS pH 6,5. O pH das soluções foi medido mas não ajustado. 200 μL das soluções preparadas foram misturados com 200 μl de uma solução de pancreatina (20 mg-ml’1) e incubadas por 1, 2 e 3 h a 37°C. Cada experimento foi realizado em triplicata (três soluções individual- mente preparadas). (Concentrações finais no controle positivo: 1 mg/ml de BBI, 20 μg/ml de acetato de desmopressina e 10 mg/ml de pancreatina)

Para o valor de 100 % 80 mg de péletes foram agitados em 10 5 ml de HBSS pH 5,8 por 30 min e homogeneizados usando um ultraturrax. A suspensão foi agitada por 15 minutos adicionais e deixada depositar.

O sobrenadante foi coletado e diluído ainda com acetato de desmopressina em tampão de HBSS pH 6,5 como descrito acima. O pH das soluções foi medido mas não ajustado.

Para os valores de partida (t0) a mistura foi diretamente adicio nada a 400 μl de acetonitrila e diluída com 1200 μL de tampão de HBSS pH 6,5. A solução foi analisada por HPLC usando uma coluna RP-18 como uma fase estacionária e uma mistura de água/acetonitrila (80:20) como fase elu- ente em um comprimento de onda de 220 nm. 15 Resultados Os resultados dos experimentos de inibição de enzima são re-sumidos na tabela 4. Tabela 4

RSD = desvio-padrão relativo, n = 3

Resultados obtidos para formulações e controles (n = 3). A for-mulação de comprimido (Minirin®) e pélete do exemplo 4 mostrou quase nenhuma propriedade inibitória, a cinética de degradação é similar ao controle negativo (tampão). Quase nenhuma diferença foi observada entre amostras dissolvidas (30 minutos) e homogeneizadas. Apenas o controle positivo e os péletes do exemplo 5 podem reduzir acentuadamente a degradação de acetato de desmopressina por pancreatina. Entretanto, mesmo na ausência do BBI uma recuperação de mais do que 60 % of desmopressina é observada. Isto indica que o efeito do BBI é detectável, mas marginal.

Exemplo 15 (Sincronização)

Teste in vitro das preparações dos exemplos 5, 7 e 11 para sin-cronização de desmopressina e inibidor de Bowman-Birk

Testes de dissolução de péletes foram realizados de acordo com aparelho 2 de USP a 37 °C, velocidade da pá de 100 rpm, tampão de fosfato pH 6,0, n = 6, 1 g por vaso de acordo com cerca de 1400 a 2100 μg de acetato de desmopressina. Adicionalmente, os péletes entéricos foram tratados 2 h em ácido clorídrico, 0,1 N, antes da comutação no pH 6,0.

Testes de dissolução de cápsulas foram realizados do mesmo modo, n = 6, 5 cápsulas por vaso correspondendo a um total de 1080 μg de acetato de desmopressina.

Amostras coletadas foram analisadas usando uma HPLC foram desmopressina e BBI foram medidas separadamente com detecção de UV em 210 nm.

Resultados

O efeito de sincronização é mostrado nas tabelas 5, 6 e 7 em porcentagem da quantidade total de cada substância. Perfil de dissolução de péletes do exemplo 5 em tampão de fosfato pH 6,0 mostrado individualmente para desmopressina e para BBI Tabela 5

Perfil de dissolução de péletes do exemplo 7 depois de 2 h de HCI 0,1 N e mudança para pH 6,0 mostrada individualmente para desmo-pressina e para BBI Tabela 6

Perfil de dissolução de cápsulas do exemplo 11 depois de 2 h de 15 HCI 0,1 N e mudança para pH 6,0 mostrada individualmente para desmo- pressina e para BBI Tabela 7

O perfil de dissolução de péletes dos exemplos 5 e 7 e das cápsulas do exemplo 11 mostram uma liberação rápida (> 90 % depois de 20 min) e liberação completa (aproximadamente 100 % depois de 30 min) no pH 6,0 de desmopressina e BBI em uma matéria sincronizada. O desvio nestes pontos no tempo (20/30 min no exemplo 5 ou 140/150 min nos exemplos 7 e 11) é menos do que 5 %.

Exemplo 16 (estudo in vivo)

Teste in vivo das preparações dos exemplos 8, 9, 10 e 11 em miniporcos (biodisponibilidade relativa) Descrição do método Miniporcos foram selecionados como sendo um bom modelo para estudar a biodisponibilidade oral no ser humano. Os miniporcos são menores do que porcos domésticos e são, portanto, mais fáceis para manejar. Espécie: Miniporco (Gottingen) Fonte: Miniporcos Ellegaard Gottingen A/S (Dalmose, DK) Número, Sexo: 8 machos; nenhum animal extra foi incluído. Nenhuma complicação inesperada surgiu com nenhum dos animais. Idade, peso corporal: Os animais foram de 7 a 8 meses de idade no tempo da dosagem com um peso corporal médio de 12 kg. Na chegada no TNO os animais foram pesados e alocado em dois grupos. Um dia antes de cada sessão de dosagem, os pesos do animal foram registrados. Aclimatização: Os animais foram aclimatados às condições laboratoriais, o serviço de apoio biotécnico e o procedimento de dosagem e a- mostragem por treino diário nos dias da semana por 3 semanas antes do início do estudo. Condição de saúde: Na chegada, os animais foram tomados a um ambiente de quarentena e verificados quanto aos sinais evidentes de má saúde e anomalias. O ambiente de quarentena foi subsequentemente limpo para o uso como ambiente experimental. Ambiente: Os animais foram alojados sob condições convencionais em um ambiente. Nenhum outro sistema de teste foi alojado no mesmo ambiente durante o estudo. O ambiente foi ventilado com cerca de 10 mudanças de ar por hora e mantido em uma temperatura de 22 °C +/- 2 °C e uma umidade relativa de pelo menos 40 % e não excedendo 70 % exceto durante a limpeza do ambiente. A iluminação foi artificial com uma sequência de 12 horas de luz e 12 horas de escuridão. Alojamento: Durante a aclimatização e durante o estudo, os a- nimais foram alojados em cercados com palha como leito e brinquedos, 4 miniporcos por cercado. Nos dias de coleta de sangue os animais foram alojados individualmente. Durante a segunda semana de dosagem, os animais começaram a disputar entre si e foram, portanto, alojados individualmente desde então de modo a evitar ferimentos por mordida. Identificação: Os animais foram identificados na orelha com um número único pelo fornecedor. Eles mantiveram esta identificação por todo o estudo. Os ani-mais foram também numerados de 1 a 8 por um número escrito na testa. Dieta: Os miniporcos foram alimentados duas vezes por dia em torno de 350 g de uma dieta para miniporco comercial (Mpig-H). Cada um dos lotes desta dieta é analisado pelo fornecedor (Ssniff Spezialdiaten GmbH, Soest, Alemanha) quanto a nutrientes e contaminantes. Certificados de análise pertencendo ao lote usado neste estudo são incluídos nos arquivos de estudo. Água potável: Água potável foi oferecida à vontade. A água po-tável foi adequada para o consumo humano.

Formulações de teste Cápsulas dos exemplos 8, 9, 10 e 11 foram usadas para os es-tudos Conteúdo: cerca de 215 μg de desmopressina por cápsula Condições de armazenamento: + 2 a + 8 °C Estabilidade: estável sob condições de armazenamento Procedimentos experimentais

Os animais receberam uma única dose de cada formulação (1 cápsula) e amostras de sangue foram tomadas depois de cada dosagem.

Animais 1 a 4 receberam as quatro formulações na seguinte or-dem: Cápsulas dos exemplos 9, 10, 11 e 8.

Animais 5 a 8 receberam as mesmas formulações em ordem inversa.

Este procedimento (estudo cruzado) permite considerar efeitos indesejáveis possíveis da dosagem repetida de desmopressina (por exem-plo, produção de anticorpo) em parâmetros que administram sua própria farmacocinética ou efeitos inexplicáveis das formulações (por exemplo, efeito sobre as funções intestinais).

Nível de dose, administração, tamanho do grupo e identificação

O nível de dose foi selecionado por cerca de 215 μg de acetato de desmopressina absoluto como com base em um peso corporal de 70 kg no ser humano. Cada grupo compreendeu 4 miniporcos machos. Os números dos animais designados para os grupos de tratamento foram registrados durante o estudo para permitir uma identificação clara do grupo.

O item de teste foi administrado oralmente a cada animal na base de 1 cápsula contendo a quantidade correspondente de substância de teste. A administração oral foi realizada colocando-se um bastão de mordida (perfurado em seu centro) entre os dentes dos animais. Uma pistola de pílula equipada com uma tubagem (de aproximadamente 0,5 cm de diâmetro) foi inserida através do furo na boca do miniporco e a cápsula foi lançada dire- tamente na garganta. O bastão de mordida foi removido depois que o animal engoliu. Aos animais foi dado acesso à água potável recentemente retirada da torneira imediatamente depois da dosagem. Cada formulação foi fornecida uma vez apenas e cada dosagem foi seguida por um período de lavagem de uma semana. Coleta de sangue

Amostras de sangue de aproximadamente 0,5 ml todas foram coletadas da veia jugular de cada animal em 15, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 360, 480 minutos depois de cada dosagem, alternando-se os lados por cisão de modo a permitir que o sítio de amostragem recupere entre duas sessões de amostragem.

Amostras foram coletadas em Vaccutainers contendo K2EDTA. Os tubos foram centrifugados a +4 °C (3000 rpm por 10 minutos) dentro de 30 minutos depois da coleta e o plasma coletado em duas alíquotas (A e B) em tubos de polietileno. As amostras de plasma foram armazenadas congeladas a < -70 °C até o carregamento em gelo seco ao sítio de análise.

Cada amostra foi identificada por número de estudo, código de animal, tipo de amostra, data de amostragem, tempo de amostragem.

Bioanálise: As amostras de plasma foram analisadas quanto à concentração de desmopressina por um método de RIA.

Análise farmacocinética e estatísticas

Os resultados da bioanálise foram analisados usando-se Kineti- caR v4.2.. As curvas de concentração plasmática versus tempo foram cons-truídas a partir dos resultados definitivos e analisadas por análise não compartimentai.

Os seguintes parâmetros farmacocinéticos foram calculados onde os dados permitiram:

Cmax, Tmax, a meia-vida terminal (T1/2,), o volume de distribuição (Vz), a liberação total (CIT), a área sob a curva de concentração-tempo (AUCo-).

A biodisponibilidade relativa foi calculada como a razão entre a AUC0-~ média de cápsulas do exemplo 8 (Minirin®) e a AUCo-~ das formula- ções dos exemplos 9, 10 e 11 respectivamente. Os resultados foram expressados como área total sob a curva e como porcentagem e relatados na tabela 8. Tabela 8

Os exemplos 9 e 10 não foram melhores do que o exemplo de referência 8 (Minirin®, controle do fármaco), apresentando uma biodisponibilidade relativa em torno de 59 e 68 % comparado ao controle do fármaco. Entretanto os exemplos 9 e 10 podem ser considerados em uma faixa comparável como o controle do fármaco do exemplo 8 que é fundamentado em 10 um produto comercialmente disponível.

Ao contrário, a formulação do exemplo 11 apresentou uma biodisponibilidade relativa AUCo-~ sete vezes mais alta (711 %) do que o controle do fármaco do exemplo 8 (100 %).

O aumento na biodisponibilidade oral conforme reivindicado é 15 calculado por comparação do exemplo 11 com o exemplo 10. A área sob a curva de concentração-tempo (AUC0. ~ [pg/mL*min]) do sangue dos minipor- cos depois da liberação oral de desmopressina com a formulação de acordo com o exemplo 11 com o inibidor de enzimas proteolíticas é 53823 pg/ml_*min. Isto é comparado com a AUC0. ~ da formulação correspondente sem o inibidor de enzimas proteolíticas (exemplo 10) AUC0- ~ esta que é 5155 pg/mL*min (= 100 %). Assim o fator de aumento de biodisponibilidade oral é calculado 53823/5155 = 10,44 (= 1044 %).

Os péletes contidos nas cápsulas dos exemplos 8, 9, 10 e 11 corresponderam aos péletes dos exemplos 1, 4, 6 e 7 respectivamente. As formulações 6 e 7 representam os péletes revestidos entéricos dos exem-plos 4 e 5 respectivamente.

Os péletes dos exemplos 4 e 5 forneceram bons efeitos de pe-netração celular em ensaios de célula in vitro mostrados nos exemplos 12 e 13 (valores de TEER e Fluxo). As formulações dos exemplos 4 e 5 aumentaram o Fluxo de desmopressina em células Cacoll para um valor de mais do que 20 %. Os valores de TEER dos péletes dos exemplos 4 e 5 foram reduzidos para menos do que 15 % comparados ao controle de tampão. Ao contrário disto a formulação do exemplo 1 (Minrin®) mostrou apenas uma redução até 70 %.

Entretanto, os resultados promissores dos péletes do exemplo 4 que são colocados nas cápsulas dos exemplos 9 e 10, sem ou com revestimento entérico respectivamente, obtido in vitro levaram apenas a resultados insatisfatórios in vivo. Quando as formulações correspondentes foram testadas in vivo em miniporcos, apenas biodisponibilidade de fluidez pode ser detectada. Isto foi menos do que o valor obtido para a cápsula do exemplo 8 que contém a preparação de referência do exemplo 1 (controle do fármaco).

Apenas a formulação de cápsula do exemplo 11 (contendo os péletes do exemplo 7, que é a versão revestida entérica dos péletes do e- xemplo 5) que como a única que continha o agente promotor de biodisponibilidade BBI mostrou um aumento claro de biodisponibilidade por um fator de 10,44, quando comparado à formulação de controle do exemplo 10 que é a formulação correspondente à formulação inventiva do exemplo 11.

Este aumento forte da biodisponibilidade relativa não pode ser explicado meramente apenas pelo efeito fraco da atividade de inibição de enzima de BBI mostrada no exemplo 14.

Devido ao fato de que o efeito in vivo foi muito mais alto comparado aos resultados in vitro os inventores acreditam que este efeito não pode ser explicado meramente pelo efeito protetivo do inibidor enzimático proteolítico contra as enzimas pancreáticas. Além disso, parece haver um novo efeito desconhecido que aumenta a biodisponibilidade dos ingredientes ativos causada pela adição de um inibidor enzimático proteolítico em geral ou pelo menos por um tal de origem vegetal ou pelo menos pelo inibidor de Bowman-Birk (BBI) em combinação com os outros elementos do sistema conforme reivindicado.

Exemplo 17 (TEER, promotor de penetração puro)

O promotor de penetração no sentido da presente invenção pode ser definido reduzindo-se o valor de TEER inicial da solução tampão sem promotor de penetração (100 %) a 50 % ou menos, preferivelmente 40 % ou menos, preferivelmente 30 % ou menos, preferivelmente 20 % ou menos na presença do promotor de penetração em uma concentração de 1 mg/ml depois de 60 min medido em uma cultura de monocamada de célula Caco-2 como barreira de transporte.

O teste de TEER foi realizado análogo ao exemplo 12. Acetato de EUDRAGIT® E = EUDRAGIT® E dissolvido em água por adição de ácido acético até que solução clara fosse obtida; base de EUDRAGIT® E PO = dispersão de EUDRAGIT® E PO (forma em pó de EUDRAGIT® E) em água (não dissolvido); acetato de quitosano = quitosano dissolvido em água por adição de ácido acético até que solução clara fosse obtida. Tabela 9

*) SD=desvio padrão; n = 3

Acetato de EUDRAGIT® E, base de EUDRAGIT® E e acetato de quitosano satisfazem o requerimento de TEER para promotor de penetração 5 visto que eles reduzem TEER a menos do que 50 % depois de 60 min mesmo em uma concentração de 0,005 % = 0,05 mg/ml (abaixo de 1 mg/ ml).

Exemplo 18 (TEER, promotor de penetração catiôni- co/ingrediente ativo aniônico)

Teste de TEER foi realizado análogo ao exemplo 12. Tabela. 10: TEER em % de TEER no Meio durante o teste (média de n = 3)

Descrição das formulações: As seguintes misturas em tampões de HBSS foram testadas

Abreviações:

Acetato de desmopressina = Desmo, Carbonato de EUDRAGIT® E = E (s. descrição: copolímero de amino(met)acrilato carbonado) Inibidor de Bowman-Birk = BBI Heparina: Heparina de peso molecular baixo (LMW-Heparina); Fraxiparin® (Nadroparin cálcica); 0,6 ml pronto para usar seringa para injeção subcutânea (5700 IU anti-Xa/mg); Ch.B.: 3394-1 ; Glaxo Smith Kline Exemplo 18a: Desmo a 0,01 % / E a 0,1 % / BBI a 0,01 % Exemplo 18b: Desmo a 0,01 % / BBI a 0,01 % Exemplo 18c: Desmo a 0,01 % (controle de ingrediente ativo) Exemplo 18d: Heparina a 0,1 % (controle de ingrediente ativo) Exemplo 18e: Heparina a 0,1 % / E a 0,4 % / BBI a 0,01 % Exemplo 18f: Heparina a 0,1 % / E a 0,1 % / BBI a 0,01 % Exemplo 18g: Heparina a 0,1 % / E a 0,25 % / BBI a 0,01 % Exemplo 18h: dodecilsufato de sódio (SDS) a 0,1 % (controle positivo) Exemplo 18i: tampão de HBSS (controle negativo)

Debate dos resultados:

Os Exemplos 18a, 18e, 18f e 18g estão reapresentando a com-posição qualitativa do núcleo das formulações inventivas (sem revestimento gastrointestinal). Exemplos 18a e 18e são eficazes na redução de valores de

TEER, ao passo que os exemplos 18f e 18g não são.

O Exemplo 18a mostra redução do valor de TEER forte que é devido à presença de EUDRAGIT® E que torna-se evidente a partir de e- xemplos comparativos 18b e 18c sem EUDRAGIT® E ou sem EUDRAGIT® E e BBI respectivamente.

Nos exemplos 18e, 18f e 18g heparina é usada como um exemplo para um ingrediente ativo aniônico forte. Nestes exemplos heparina é misturada com o EUDRAGIT® catiônico como promotor de penetração e BBI. Nos exemplos 18f e 18g não existe nenhuma redução de TEER. Isto é suposto ser devido a um excesso de heparina aniônica que interfere que a atividade do promotor de penetração catiônico e inibe sua funcionalidade. No exemplo 18e uma redução retardada de TEER é observada. Isto é suposto ser devido a um excesso da atividade do promotor de penetração catiônico sobre a heparina aniônica, de modo que a atividade do promotor de penetração não é completamente inibida como no exemplo 18f e 18g. Os exemplos 18e, 18f e 18g mostram que a perda da atividade do promotor de penetração pode ocorrer quando as substâncias aniônicas e as catiônicas são misturadas entre si em quantidades que são aproximadamente equimolares a respeito de suas cargas ou onde o ingrediente ativo está presente em acesso sobre o promotor de penetração. Isto pode ser superado por exemplo au- mentando-se a quantidade total de promotor de penetração sobre o ingrediente ativo como mostrado no exemplo 18e.

Claims (13)

1. Formulação farmacêutica ou nutracêutica, caracterizada pelo fato de que compreende: um núcleo compreendendo um ingrediente ativo farmacêutico ou nutracêutico, um promotor de penetração e um agente promotor de biodisponi- bilidade, e um revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo, sendo que o agente promotor de biodisponibilidade é um inibidor farmaceuticamente aceitável de enzimas proteolíticas, que aumenta a biodis- ponibilidade oral do ingrediente ativo por um fator de pelo menos cinco, comparado a uma formulação correspondente sem o agente promotor de biodis- ponibilidade, sendo que o promotor de penetração é um copolímero composto de 30 a 80 % em peso de C1 a C4 alquil ésteres de ácido acrílico ou de ácido metacrílico, e 70 a 20 % em peso de monômeros de (met)acrilato de alquila apresentando um grupo amino terciário no radical alquila, e sendo que o núcleo compreende uma camada de sincronização.

2. Formulação, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o inibidor de enzimas proteolíticas é um inibidor de Bowman- Birk ou um derivado deste.

3. Formulação, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o ingrediente ativo apresenta uma permeabilidade baixa de acordo com as classes III e IV de BCS.

4. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que o ingrediente ativo é de origem biológica e um inibidor que previne ou reduz a degradação enzimática do ingrediente ativo é adicionado.

5. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o ingrediente ativo é uma proteína ou um peptídeo, um lipídeo, um polissacarídeo ou um ácido nucleico ou um derivado natural ou sintético destas substâncias.

6. Formulação, de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que o ingrediente ativo é desmopressina ou um derivado deste ou uma heparina ou um derivado deste.

7. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que é uma formulação farmacêutica ou nu- tracêutica multiparticulada compreendendo uma grande quantidade de partículas em uma unidade de dosagem.

8. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a quantidade do agente promotor de biodisponibilidade na formulação final está na faixa de 0,1 a 10 % em peso.

9. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada de que o promotor de penetração é uma substância poli- mérica catiônica.

10. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de que a camada de sincronização compreende até 90 % em peso da quantidade total de agente promotor de biodisponibili- dade.

11. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que o revestimento polimérico para a liberação gastrointestinal alvejada do ingrediente ativo compreende um polímero celulósico aniônico ou um copolímero de (met)acrilato aniônico.

12. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada pelo fato de que o ingrediente ativo é aniônico e o promotor de penetração é catiônico e que interações iônicas entre ambos os componentes são evitadas: • por uma quantidade excessiva do promotor de penetração em uma mistura de ambos os componentes no mesmo compartimento da formulação ou • por separação local de ambos os componentes em diferentes compartimentos da formulação ou • pela adição de sais, polímeros anfifílicos ou polímeros de ligação não iônicos a hidrogênio a uma mistura de ambos os componentes no mesmo compartimento da formulação.

13. Uso de um agente promotor de biodisponibilidade, que é um 5 inibidor farmaceuticamente aceitável de enzimas proteolíticas, caracterizado pelo fato de que é como um excipiente que aumenta a biodisponibilidade oral de um ingrediente ativo em uma formulação como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 12.