CN104740647A - 一种艾塞那肽口服制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生物多肽的口服给药制剂技术领域，具体公开了一种艾塞那肽口服制剂及其制备方法。本发明艾塞那肽口服制剂包含艾塞那肽-带电荷辅料微粒，所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒由占口服制剂固形物总重量0.1%～20%的艾塞那肽和0.5%～50%的带电荷辅料制成。本发明提供的艾塞那肽口服制剂，可以降低餐后血糖，同时适度降低空腹血糖，可以应用于II型糖尿病的治疗，也可用于对二甲双胍和磺脲类药物治疗失效者。

Description

一种艾塞那肽口服制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物多肽的口服给药制剂技术领域，具体涉及一种艾塞那肽口服制剂及其制备方法。

背景技术

糖尿病是继心脑血管疾病之后最主要的、严重危害人类健康的慢性非传染性疾病，近年来，随着人们生活方式的改变，糖尿病患病率呈急剧上升趋势。目前我国是糖尿病第一大国，发病率为6.4%，远高于欧美发达国家。我国糖尿病患者已逾9400万，2型糖尿病(Type 2 Diabetes，T2DM)是糖尿病的主体，占糖尿病患者的90％左右。T2DM是由遗传和多种环境因素相互作用而引起胰岛索分泌作用缺陷。其患病率较高，尤以中老年人为多，并呈现年轻化趋势。胰岛口细胞数目减少或分泌功能障碍是导致T2DM发病的中心环节。治疗一般遵循生活方式干预(如饮食控制、运动治疗等)、口服降糖药和联合使用胰岛素等方式。传统治疗T2DM的药物的副作用都较大，长期使用会因胰岛素分泌过度导致胰岛细胞功能衰竭。胰岛素注射剂的长期使用会导致胰岛素耐受性增加(胰岛素抵抗)。

近年来胰高血糖素样肽(GLP-1)激动剂成为糖尿病治疗研究的热点，代表药物为exenatide（艾塞那肽）和liraglutide(利拉鲁肽)。Exenatide是一条39个氨基酸组成的直链多肽，最初由南美巨蜥的唾液分离提取获得。其氨基酸序列与哺乳动物GLP-1序列有53％的同源性，并且生物学效应几乎完全一致，能模拟GLP-1这种内源性多肽的糖调控作用，降低空腹和餐后血糖，而半衰期远远大于GLP-1。艾塞那肽（Exenatide）的活性主要通过与人体胰脏GLP-1受体结合而介导，改进内源胰岛素的初期快速释放，抑制胰腺胰高血糖素的释放，延迟胃排空以及降低食欲，这些都有降低血糖的作用。Exenatide的降糖作用时间较长，延缓胃排空和抑制摄食冲动对肥胖病人体重的有益作用又有别于传统的降糖药物，因此其作为2型糖尿病治疗药物开发的潜力巨大。艾塞那肽仅在葡萄糖存在下提高胰岛素的合成和分泌，降低了低血糖的风险，不仅可使初治的２型糖尿病患者血糖恢复正常，而且对磺脲类药物治疗失效者也有降血糖作用，一些医师还将exenatide用于治疗胰岛素抵抗。

艾塞那肽注射剂（商品名为Byetta）己于2005年4月获美国食品和药品管理局批准上市。该制剂已被证实在改善血糖控制及减轻体重方面具有良好效果。但由于艾塞那肽的频繁的注射使患者顺应性较差，造成患者在身体心理与经济上的极大负担。目前市场上尚无艾塞那肽口服剂型，艾塞那肽口服剂型的开发存在以下技术难点：（1）艾塞那肽属于蛋白多肽类药物，很容易被胃肠道中的各种蛋白酶降解而失去作用。（2）艾塞那肽是大分子药物，分子量大，难以通过胃肠道屏障而吸收到血液中。3）通过胃肠道吸收到血液的药物面临肝的首过作用，以致生物利用度低。因此，口服剂型的研制，将是艾塞那肽非注射剂型研究的革命性突破，为其它多肽类药物的口服给药提供了依据，并会产生巨大的理论和商业价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，为了克服现有技术中的上述不足，提供一种艾塞那肽口服制剂及其制备方法。

本发明所要解决的上述技术问题通过以下技术方案予以实现：

一种艾塞那肽口服制剂，包含艾塞那肽-带电荷辅料微粒，所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒由艾塞那肽（exenatide）和带电荷辅料制成；所述的带电荷辅料选自壳聚糖，丙烯酸树脂（EudragitL100），海藻酸钠和聚酰胺-胺聚合物（PAMAM dendrimer）中的一种或者几种。

将带电荷辅料壳聚糖，丙烯酸树脂，海藻酸钠和PAMAM dendrimer与艾塞那肽通过静电等作用结合成艾塞那肽-带电荷辅料微粒，可以保护艾塞那肽不被胃酸破坏和胃肠道内蛋白酶降解，可以增强其生物膜黏附性、增大生物相容性、利用肠道内的酸碱度微环境的变化定点释放药物，此外，这些静电结合形成的微粒能使药物在到达肠道时，迅速崩解释放药物，肠道中较大的药物浓度可以减小药物降解，打开细胞间紧密连接，调控M细胞，促进肠粘膜药物吸收，以提高药物的生物利用度。

所述艾塞那肽的英文名为：exenatide。

优选地，所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒由占口服制剂固形物总重量0.1%～20%的艾塞那肽和0.5%～50%的带电荷辅料制成。

优选地，所述带电荷辅料的分子量为2万～10万。

优选地，所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒的粒径为100nm~10μm。

优选地，所述的艾塞那肽口服制剂中还包含促进艾塞那肽口服吸收的辅料，所述的辅料选自：泊洛沙姆，聚乙二醇，十二烷基硫酸钠，生物素，吐温80，甘露醇，癸酸钠，脂肪酸，EDTA钠，甘氨胆酸钠，水杨酸钠，鱼油，聚乙烯醇，玉米支链淀粉，乙基纤维素和卵磷脂中的一种或者几种。

优选地，所述的艾塞那肽口服制剂中还包含蛋白酶制剂，所述的蛋白酶制剂选自：福东链霉菌抑肽素，马铃薯胃抑肽素，豇豆胰蛋白酶抑制剂，南瓜胰蛋白酶抑制剂，大豆胰蛋白酶抑制剂，牛胰蛋白酶抑制剂，猪蛋白酶抑制剂，对虾胰蛋白酶抑制剂，家蚕糜蛋白酶抑制剂，马铃薯糜蛋白酶抑制剂中的一种或几种。

由于艾塞那肽可以被胃液中的胃蛋白酶 （胃蛋白酶1，最佳作用PH值为1.3， 酶切位点7个，分别位于第 5， 6， 9 ，10， 21， 25， 26氨基酸； 胃蛋白酶2， 最佳作用PH>2, 酶切位点10个，分别位于第5 ，6， 9 ，10， 21， 21， 24， 25， 25， 26氨基酸）， 胰液中的胰蛋白酶（酶切位点3个，分别位于第12 ，20， 27氨基酸）和糜蛋白酶（高专一性糜蛋白酶1，酶切位点3个，分别位于第 6， 22， 25氨基酸， 低专一性糜蛋白酶2，酶切位点8个，分别位于1， 6， 10， 14， 21， 22， 25， 26氨基酸），和肠液中的氨肽酶和羧肽酶所水解；因此，在艾塞那肽口服制剂中加入上述蛋白酶制剂，可以进一步防止艾塞那肽在消化道中的降解。

优选地，所述的艾塞那肽口服制剂，其特征在于，所述的口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂或纳米混悬剂。

一种艾塞那肽口服制剂的制备方法，包含如下步骤：

S1.取带电荷辅料置于体积分数为1%~5%的冰醋酸水溶液中充分溶解，使带电荷辅料的浓度为0.5~4 mg/ml，得带电荷辅料溶液；取艾塞那肽置于水中充分溶解，使浓度为0.5~8 mg/ml，得艾塞那肽溶液；

S2.将带电荷辅料溶液与艾塞那肽溶液按体积比为4~20：1~4混合，搅拌0.5～3h；然后加入交联剂，搅拌3～24h得艾塞那肽-带电荷辅料微粒溶液；

S3. 在艾塞那肽-带电荷辅料微粒溶液中加入促进艾塞那肽口服吸收的辅料得艾塞那肽纳米混悬剂；或将艾塞那肽-带电荷辅料微粒溶液离心去除上清液、冷冻干燥得艾塞那肽-带电荷辅料微粒，再将艾塞那肽-带电荷辅料微粒制备成片剂，胶囊剂，颗粒剂或散剂。

优选地，S1.中所述的带电荷辅料选自壳聚糖，丙烯酸树脂，海藻酸钠和PAMAM dendrimer中的一种或者几种。

优选地，S2.中所述的交联剂选自三聚磷酸钠（TPP），抗坏血酸棕榈酸酯，京尼平，海藻酸钠，FeCl₃，CaCl₂, DTPA，戊二醛，聚乙二醇，甘露醇，聚谷氨酸（γ-pGA），牛血清白蛋白和泊洛沙姆中的一种或者几种。

优选地，S3.中所述的离心，其条件为：8000~15000 rpm离心5min～20min。

优选地，S3.冷冻干燥过程中使用冻干保护剂，所述的冻干保护剂选自乳糖，甘露醇，海藻糖，牛血清白蛋白，蔗糖和泊洛沙姆中的一种或几种。

优选地，S3.中将艾塞那肽-带电荷辅料微粒与促进艾塞那肽口服吸收的辅料，粘合剂，润滑剂和崩解剂混合，制备成片剂，胶囊剂，颗粒剂，散剂。

进一步优选地，所述的促进艾塞那肽口服吸收的辅料选自：泊洛沙姆，聚乙二醇，十二烷基硫酸钠，生物素，吐温80，甘露醇，癸酸钠，脂肪酸，EDTA钠，甘氨胆酸钠，水杨酸钠，鱼油，聚乙烯醇，玉米支链淀粉，乙基纤维素和卵磷脂中的一种或者几种。

优选地，将艾塞那肽-带电荷辅料微粒制备成口服制剂时所述的粘合剂选自：羟丙基纤维素，淀粉，聚乙烯吡咯烷酮，甲基纤维素，糊精，乙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，卡波姆，阿拉伯胶中的一种或者几种；所述的润滑剂选自：硬脂酸，硬脂酸镁，微粉硅胶，聚乙二醇，十二烷基硫酸钠和滑石粉中的一种或者几种；崩解剂选自羧甲淀粉钠，玉米淀粉，交联聚维酮，羧甲基纤维素钠，泊洛沙姆，海藻酸，瓜耳胶中的一种或者几种。

优选地，对制备好的片剂，胶囊剂，颗粒剂或散剂进行结肠溶包衣，包衣材料选自明胶，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，乙基纤维素，丙烯酸酯类，羟丙基甲基纤维素酞酸酯，羟丙基甲基邻苯二甲酸醋酸纤维素，虫胶和聚维酮，玉米直链淀粉中的一种或者几种；所述包衣方法为喷雾涂或胶囊壳、片剂外涂布。通过选择结肠肠溶包衣，利用pH值的敏感性、时滞型或者压力依赖型、对包衣对结肠特殊菌群产生的淀粉酶的敏感性的一种或者几种方式提供结肠定位释放药物。

优选地，所述的艾塞那肽口服制剂给药剂量为10μg~500μg，在餐前20min~240min给药，每天的给药次数为1次到6次。

有益效果：本发明首次制备到了艾塞那肽口服制，克服了将艾塞那肽制备成口服制剂的技术难题。所述的艾塞那肽口服制剂具有适度的降低空腹血糖的作用，降低餐后血糖的作用非常明显，效果和艾塞那肽注射剂相当。可以应用于II型糖尿病的治疗，对二甲双胍和磺脲类药物治疗失效者也有降血糖作用，还将有潜力用于治疗胰岛素抵抗，可以减少人的摄食量。此外，所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒可以保护艾塞那肽不被胃酸破坏和胃肠道内蛋白酶降解；增强其生物膜黏附性、增大生物相容性、利用肠道内的酸碱度微环境的变化定点释放药物；所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒能使药物在到达肠道时，迅速崩解释放药物，肠道中较大的药物浓度可以减小药物降解，打开细胞间紧密连接，调控M细胞，促进肠粘膜药物吸收，以提高药物的生物利用度。

附图说明

图1为艾塞那肽-带电荷辅料微粒冻干后的的扫描电镜图片。

图2为艾塞那肽-带电荷辅料微粒对健康SD大鼠血糖降低作用时间-血糖曲线图。

图3为艾塞那肽-带电荷辅料微粒对糖尿病大鼠血糖降低作用时间-血糖曲线图。

图4为艾塞那肽-带电荷辅料微粒给药后大鼠体内的血药浓度-时间曲线。

图5为健康男性志愿者1的血糖-时间曲线图。

图6为健康男性志愿者2的血糖-时间曲线图。

图7为健康男性志愿者3的血糖-时间曲线图。

图8为健康男性志愿者4的血糖-时间曲线图。

图9为健康男性志愿者5的血糖-时间曲线图。

具体实施方式

以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明不做任何形式的限定。

实施例1 艾塞那肽-带电荷辅料微粒的制备

S1.取一定量的带电荷辅料壳聚糖（分子量为2万～10万）置于5% (v/v)的冰醋酸水溶液中充分溶解，使壳聚糖的浓度为4 mg/ml（m/v）；配置exenatide水溶液，使浓度为8 mg/ml；，

S2. 量取10ml的壳聚糖溶液于西林瓶中，加入2ml exenatide溶液搅拌， 3h之后加入交联剂三聚磷酸钠，搅拌24h，得艾塞那肽-壳聚糖微粒溶液；

S3. 停止搅拌，去除上清液，15000 rpm离心5min；加入冻干保护剂乳糖，进行冷冻干燥，艾塞那肽-壳聚糖微粒。

实施例2 艾塞那肽-带电荷辅料微粒的制备

S1.取一定量的带电荷辅料丙烯酸树脂EudragitL100置于甲醇和二氯甲烷的混合溶剂中充分溶解，使EudragitL100的浓度为0.5 mg/ml（m/v）；配置exenatide水溶液，使浓度为0.5 mg/ml；两种溶液混合，低温条件下8000rpm/1min均质。混合后的溶液转移至含有司盘80的液体石蜡中，搅拌状态下快速挥发溶剂。

S2.将得到的微粒用石油醚和超纯水进行清洗，并且过滤。

S3.微粒分散于纯水中，8000 rpm离心20min，除去上清液；加入冻干保护剂甘露醇，进行冷冻干燥，得到艾塞那肽-丙烯酸树脂微粒。

实施例3 艾塞那肽-带电荷辅料微粒的制备

S1.取一定量的带电荷辅料海藻酸钠（分子量为2万～10万），用水充分溶解，使海藻酸钠的浓度为2 mg/ml（m/v）；配置exenatide水溶液，使浓度为2 mg/ml；

S2.量取10ml的海藻酸钠溶液于西林瓶中，加入0.5ml exenatide溶液搅拌，0.5h之后加入交联剂戊二醛，搅拌12h，得艾塞那肽-海藻酸钠微粒溶液；

S3.停止搅拌，去除上清液，8000 rpm离心20min；加入冻干保护剂蔗糖，进行冷冻干燥，艾塞那肽-海藻酸钠微粒。

实施例4 艾塞那肽-带电荷辅料微粒的制备

S1.取一定量的带电荷辅料PAMAM（分子量为2万～10万），用水充分溶解，使PAMAM的浓度为2 mg/ml（m/v）；配置exenatide水溶液，使浓度为0.5 mg/ml；两个溶液在2ml的TES溶液混合，搅拌24h。

S2.停止搅拌，去除上清液，12000 rpm离心20min；加入冻干保护剂海藻糖，进行冷冻干燥，艾塞那肽-PAMAM微粒。

实施例5 艾塞那肽-带电荷辅料微粒对健康SD大鼠血糖降低作用

选取健康SD大鼠30只，体重200g左右。取血前禁食8～10h，自由饮水。随机分为4组。0时刻，利用强生稳豪血糖测定仪和配套试纸，剪尾取血测定基础血糖值。然后第1组灌胃给予空白辅料（玉米淀粉）的水混悬液作为阴性对照组；第2和3组灌胃给予实施例1制备的艾塞那肽-壳聚糖微粒及辅料（玉米淀粉）的水混悬液，其中艾塞那肽的含量分别为200μg和50μg，作为样品组；第4组，皮下注射10μg艾塞那肽溶液，作为阳性对照组。30min后给予1.5ml的50%的葡萄糖溶液。给予后每隔一段时间测量血糖。以每只大鼠的基础血糖为标准100，计算每个时间点的各个大鼠的血糖值。时间-血糖曲线附图2所示。由附图2中的时间-血糖曲线可以看出，本发明所述的艾塞那肽-壳聚糖微粒具有很好的降血糖作用，可以用于降低健康大鼠的餐后血糖，效果与艾塞那肽注射液相当。因此，本发明所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒可以应用于II型糖尿病的治疗。

实施例6 艾塞那肽-带电荷辅料微粒对糖尿病大鼠血糖降低作用

选取STZ-DM模型大鼠15只，称重，将糖尿病大鼠随机均分为3组，每组5只。0时刻，利用强生稳豪血糖测定仪和配套试纸，剪尾取血测定基础血糖值。然后第1组灌胃给予空白辅料（玉米淀粉）的水混悬液作为阴性对照组；第2灌胃给予实施例1制备的艾塞那肽-壳聚糖微粒及辅料（玉米淀粉）的水混悬液，其中艾塞那肽的含量为200μg，作为样品组；第3组，皮下注射10μg艾塞那肽溶液，作为阳性对照组。给予后每隔一段时间测量血糖。以每只大鼠的基础血糖为标准100，计算每个时间点的各个大鼠的血糖值。时间-血糖曲线附图3。由附图3中的血糖-时间曲线可以看出，本发明所述的艾塞那肽-壳聚糖微粒具有很好的降低糖尿病大鼠的血糖作用，效果与艾塞那肽注射液相当。因此，本发明所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒可以应用于II型糖尿病的治疗。

实施例7艾塞那肽-带电荷辅料微粒在糖尿病大鼠体内的药代动力学过程

选取STZ-DM模型大鼠15只，称重，将糖尿病大鼠随机均分为3组，每组5只。第1组灌胃给予空白辅料（玉米淀粉）的水混悬液作为阴性对照组；第2组灌胃给予实施例3制备的艾塞那肽-海藻酸钠微粒及辅料（玉米淀粉）的水混悬液，其中艾塞那肽的含量为200μg，作为样品组；第3组，皮下注射10μg艾塞那肽溶液，作为阳性对照组。在各个不同的时间点进行大鼠尾静脉取血。将血样进行离心（4000rpm/15min， 4℃），然后用艾塞那肽试剂盒（exendin-4 EIA kit）测定血浆中的艾塞那肽的浓度。血药浓度-时间曲线附图4。根据相对生物利用度：

由血药浓度-时间曲线和给药剂量得到，计算得到相对生物利用度为15.3%。且从曲线看出，艾塞那肽-带电荷辅料微粒的口服制剂具有一定的缓释性，能够延长药物作用时间。

实施例8艾塞那肽-带电荷辅料微粒所制备的口服制剂对健康志愿者血糖降低作用

空腹6小时后，利用强生稳豪血糖测定仪和配套试纸，以采血笔取血，测定5名健康男性志愿者的基础血糖值。给予5名健康志愿者艾塞那肽-带电荷辅料微粒所制备肠溶胶囊，其中包括促进艾塞那肽口服吸收的辅料及蛋白酶抑制剂。一种代表性的制剂是每个胶囊里面含有200-500ug的艾塞那肽，30-50mg的大豆胰蛋白酶抑制剂，100-200mg的胆酸钠，25-50mg的癸酸钠，100-200mg的泊洛沙姆，50-100mg玉米支链淀粉。给胶囊后30分钟，志愿者服用溶解有75g葡萄糖的水溶液，并且测定血糖值，以此时为0时刻。然后在30、60、90、120、180、240min测定血糖值。三天后，空腹6小时，测定5名健康男性志愿者的基础血糖值，30分钟后，志愿者服用溶解有75g葡萄糖的水溶液，并且测定血糖值，以此时为0时刻。然后在30、60、90、120、180、240min测定血糖值。此5名志愿者的血糖-时间曲线如图5、6、7、8、9所示。由图5~9说明，艾塞那肽-带电荷辅料微粒所制备肠溶胶囊，能够降低健康人的负荷血糖。是否能够降低糖尿病人的血糖值，需要进一步验证。

实施例9 艾塞那肽片剂的制备

取实施例1制备得到的艾塞那肽-壳聚糖微粒1g，泊洛沙姆0.1g，福东链霉菌抑肽素0.1g，甲基纤维素27g,硬脂酸镁2g，EDTA-2Na 2g混合，用单冲压片机打成直径为6mm，重量为300mg的片，用400ml尤特奇®L100水分散体进行包衣，即得艾塞那肽片剂。

实施例10 艾塞那肽胶囊剂的制备

取实施例3制备得到的艾塞那肽-海藻酸钠微粒1g，卵磷脂0.1g，福东链霉菌抑肽素和胰蛋白酶0.1g，乳糖27g,硬脂酸镁2g，混合，以300mg填充入1号肠溶胶囊，即得艾塞那肽胶囊剂。

实施例11 艾塞那肽颗粒剂的制备

取实施例2制备得到的艾塞那肽-丙烯酸树脂EudragitL100微粒5g，十二烷基磺酸钠0.5g，淀粉25g混合，加水制成软材，过12目筛进行造粒，干燥后即得艾塞那肽散剂。

实施例12 艾塞那肽散剂

取实施例1制备得到的艾塞那肽-壳聚糖微粒1g，胆酸钠5g，福东链霉菌抑肽素和胰蛋白酶0.1g，硬脂酸镁2g，玉米支链淀粉20g，过200目筛混合，即得艾塞那肽散剂。

实施例13 艾塞那肽纳米混悬液

取实施例4制备得到的艾塞那肽-PAMAM纳米微粒0.5g，吐温-80 5g，PVP20g，聚乙二醇2g, 加入1L水，即得艾塞那肽纳米混悬液。

Claims (10)

1.一种艾塞那肽口服制剂，其特征在于，包含艾塞那肽-带电荷辅料微粒，所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒由艾塞那肽和带电荷辅料制成；所述的带电荷辅料选自壳聚糖，丙烯酸树脂，海藻酸钠和聚酰胺-胺聚合物中的一种或者几种。

2.根据权利要求1所述的艾塞那肽口服制剂，其特征在于，所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒由占口服制剂固形物总重量0.1%～20%的艾塞那肽和0.5%～50%的带电荷辅料制成。

3.根据权利要求1所述的艾塞那肽口服制剂，其特征在于，所述的艾塞那肽-带电荷辅料微粒的粒径为100nm~10μm；所述带电荷辅料的分子量为2万～10万。

4.根据权利要求1所述的艾塞那肽口服制剂，其特征在于，还包含促进艾塞那肽口服吸收的辅料，所述的辅料选自：泊洛沙姆，聚乙二醇，十二烷基硫酸钠，生物素，吐温80，甘露醇，癸酸钠，脂肪酸，EDTA钠，甘氨胆酸钠，水杨酸钠，鱼油，聚乙烯醇，玉米支链淀粉，乙基纤维素和卵磷脂中的一种或者几种。

5.根据权利要求1所述的艾塞那肽口服制剂，其特征在于，还包含蛋白酶制剂，所述的蛋白酶制剂选自：福东链霉菌抑肽素，马铃薯胃抑肽素，豇豆胰蛋白酶抑制剂，南瓜胰蛋白酶抑制剂，大豆胰蛋白酶抑制剂，牛胰蛋白酶抑制剂，猪蛋白酶抑制剂，对虾胰蛋白酶抑制剂，家蚕糜蛋白酶抑制剂，马铃薯糜蛋白酶抑制剂中的一种或几种。

6.根据权利要求1所述的艾塞那肽口服制剂，其特征在于，所述的口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂或纳米混悬剂。

7.权利要求1~6任一项所述的艾塞那肽口服制剂的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：

S1.取带电荷辅料置于体积分数为1%~5%的冰醋酸水溶液中充分溶解，使带电荷辅料的浓度为0.5~4 mg/ml，得带电荷辅料溶液；取艾塞那肽置于水中充分溶解，使浓度为0.5~8 mg/ml，得艾塞那肽溶液；

S2.将带电荷辅料溶液与艾塞那肽溶液按体积比为4~20：1~4混合，搅拌0.5～3h；然后加入交联剂，搅拌3～24h得艾塞那肽-带电荷辅料微粒溶液；

S3. 在艾塞那肽-带电荷辅料微粒溶液中加入促进艾塞那肽口服吸收的辅料得艾塞那肽纳米混悬剂；或者，将艾塞那肽-带电荷辅料微粒溶液离心去除上清液、冷冻干燥得艾塞那肽-带电荷辅料微粒，再将艾塞那肽-带电荷辅料微粒制备成片剂，胶囊剂，颗粒剂或散剂。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，S2.中所述的交联剂选自三聚磷酸钠（TPP），抗坏血酸棕榈酸酯，京尼平，海藻酸钠，FeCl₃，CaCl₂，DTPA，戊二醛，聚乙二醇，甘露醇，聚谷氨酸（γ-pGA），牛血清白蛋白和泊洛沙姆中的一种或者几种。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，S3.冷冻干燥过程中使用冻干保护剂，所述的冻干保护剂选自乳糖，甘露醇，海藻糖，牛血清白蛋白，蔗糖和泊洛沙姆中的一种或几种。

10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，对制备好的片剂，胶囊剂，颗粒剂或散剂进行肠溶包衣，包衣材料选自明胶，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，乙基纤维素，丙烯酸酯类，羟丙基甲基纤维素酞酸酯，羟丙基甲基邻苯二甲酸醋酸纤维素，虫胶和聚维酮，玉米直链淀粉中的一种或者几种；所述包衣方法为喷雾涂或胶囊壳、片剂外涂布。