BR112012011787B1 - Peptídeo cíclico e composição farmacêutica - Google Patents

Abstract

PEPTÍDEO CÍCLICO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, MÉTODO PARA TRATAMENTO DE UMA DOENÇA, INDICAÇÃO, CONDIÇÃO OU SÍNDROME MEDIADA POR RECEPTOR DE MELANOCORTINA EM UM MAMÍFERO HUMANO OU NÃO HUMANO E MÉTODO PARA TRATAMENTO DE UMA CONDIÇÃO RESPONSIVA A MUDANÇAS NA FUNÇÃO DE RECEPTOR DE MELANOCORTINA EM UM MAMÍFERO HUMANO OU NÃO HUMANO Trata-se de peptídeos cíclicos específicos de receptor de melanocortina da Fórmula (I) ern que R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8 e R9 são conforme definido no relatório descritivo, sendo que as composições e formulações incluem os peptídeos da Fórmula precedente ou sais da mesma, e métodos para prevenir, melhorar ou tratar doenças, indicações, condições e síndromes responsivas ou mediadas por receptor de melanocortina-1. (I)

Description

REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDO RELACIONADO

Este pedido reivindica prioridade e benefício do depósito de Pedido de Patente Provisório número de série 61/263.490, intitulado “Melanocortin-1 Receptor Specific Cyclic Peptides”, depositado em 23 de novembro de 2009 e cujo relatório descritivo e reivindicações do mesmo são incorporados no presente documento a título de referência.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

Campo da Invenção (Campo da Técnica):

A presente invenção refere-se a peptídeos cíclicos de receptor específico de melanocortina, particularmente peptídeos cíclicos seletivos e específicos para o receptor de melanocortina tipo 1, que pode ser usado no tratamento de doenças, indicações, condições e síndromes mediadas por receptor responsivo ou de melanocortina tipo 1.

Descrição de Técnica relacionada:

A seguinte discussão refere-se a várias publicações por autor(s) e ano de publicação, e em razão de datas de publicação recentes, determinadas publicações não devem ser consideradas como a técnica anterior em relação à presente invenção. A discussão de tais publicações no presente documento é dada para completar mais o antecedente e não deve ser construída como uma admissão de que tais técnicas de publicações anteriores são para fins de determinação de patenteabilidade.

Uma família de tipos de receptor de melanocortina e subtipos foram identificados. Tipos de receptor incluem receptor (MCR-1) de melanocortina-1 (MC-1), comumente conhecidos para serem expressos em melanócitos humanos normais e em células de melanoma, mas que são também 5 reportados para serem expressos em várias outras células, que incluem aquelas envolvidas em respostas imunes, como monócitos, neutrófilos, linfócitos, células dendríticas, células assassinas naturais (NK) e células endoteliais. Consulte, em geral, Kang, L. , et al. , "A selective small 10 molecule agonist of melanocortin-1 receptor inhibits lipopolysaccharide-induced cytokine accumulation and leukocyte infiltration in mice", J. Leuk. Biol. 80:897 a 904 (2006), e referências citadas no mesmo. Uma variedade de subtipos e variantes MCR-1 humanos são conhecidos, incluindo 15 aqueles revelados na Patente N° U.S. 6.693.184 e 7.115.393.

Em adição a MCR-1, outros tipos de receptor de melanocortina incluem receptor de melanocortina tipo 2 (MCR-2) para ACTH (adrenocorticotropina), expressos em células da glândula adrenal, receptores de melanocortina tipo 3 e melanocortina 20 tipo 4 (MC-4) (MCR-3 e MCR-4), expressos primariamente em células no hipotálamo, mesencéfalo e tronco cerebral, e receptor de melanocortina tipo 5 (MCR-5), expressos em uma ampla distribuição de tecidos periféricos.

O agonista de melanocortina endógeno primário é o 25 pepetídeo de hormônio a-melanócito estimulante ("a-MSH") cíclico. Peptídeos de receptor específico de melanocortina geralmente contêm a sequência de tetrapeptídeo central de OÍ- MSH nativo, Hise-Fe-Arg8-Trp9 (SEQ ID NO:1), ou um mimético ou variação dos mesmos, que incluem várias substituições em uma 30 ou mais posições (consulte, por exemplo, Hruby, V. J. , et al., "Alpha-Melanotropin: the minimal active sequence in the frog skin bioassay", J. Med. Chem., 30:2.126 a 2.130 (1987); Castrucci, A. M. L., et al., "Alpha-melanotropin: the minimal active sequence in the lizard skin bioassay", Gen. Comp. Endocrinol., 73:157 a 163 (1989); Haskel1-Luevano, C., et al., "Discovery of prototype peptidomimetic agonists at the human melanocortin receptors MC1R and MC4R" J. Med. Chem., 5 40:2.133 a 2.139 (1997); Holder, J. R. , et al., "Structure activity relationships of the melanocortin tetrapeptide Ac- His-DPhe-Arg-Trp-NH2. 1. Modifications at the His position", J. Med. Chem., 45:2.801 a 2.810 (2002); Abdel-Malek, Z. A., et al., "Melanoma prevention strategy based on using 10 tetrapeptide α-MSH analogs that protect human melanocytes from UV-induced DNA damage and cytotoxicity" FASEB J., 20:E888 a E896 (2006); Bednarek, M. A., et al., "Cyclic analogs of α-melanocyte-stimulating hormone (otMSH) with high agonist potency and selectivity at human melanocortin 15 receptor lb", Peptideos, 29:1.010 a 1.017 (2008); Koikov, L. N. , et al., "Analogs of subnanomolar hMClR agonist LK-184 [Ph(CH2) 3CO-His-D-Phe-Arg-Trp-NH2] . An additional binding site with the human melanocortin receptor 1?", Bioorg. Med. Chem. Lett. 14:3.997 a 4.000 (2004); e Abdel-Malek, Z. A., et al., 20 "Alpha-MSH tripeptide analogs activate the melanocortin 1 receptor and reduce UV-induced DNA damage in human melanocytes", Pigment Cell Melanoma Res. 22:635 a 44 (2009)).

Compostos de peptideos ou similares a peptideos declarados como sendo específicos para um ou mais receptores 25 de melanocortina são revelados em Patente N° U.S. 5.576.290, 5.674.839, 5.683.981, 5.714.576, 5.731.408, 6.051.555, 6.054.556, 6.284.735, 6.350.430, 6.476.187, 6.534.503, 6.600.015, 6.613.874, 6.693.165, 6.699.873, 6.887.846, 6.951.916, 7.008.925, 7.049.398, 7.084.111, 7.176.279, 30 7.473.760, e 7.582.610; em Publicação de Pedido de Patente

Publicado de N° U.S. 2001/0056179, 2002/0143141, 2003/0064921, 2003/0105024, 2003/0212002, 2004/0023859, 2005/0130901, 2005/0187164, 2005/0239711, 2006/0105951, 2006/0111281, 2006/0293223, 2007/0027091, 2007/0105759, 2007/0123453, 2007/0244054, 2008/0039387, e 2009/0069242; e em pedidos de patente internacional n° WO 98/27113, WO 99/21571, WO 00/05263, WO 99/54358, WO 00/35952, WO 00/58361, WO 01/30808, WO 01/52880, WO 01/74844, WO 01/85930, WO 01/90140, WO 02/18437, WO 02/26774, WO 03/006604, WO 2004/046166, WO 2005/000338, WO 2005/000339, WO 2005/000877, WO 2005/030797, WO 2005/060985, W02006/048449, WO 2006/048450, WO 2006/048451, WO 2006/048452, WO 2006/097526, WO 2007/008684, WO 2007/008704, WO 2007/009894 e WO 2009/061411.

Apesar disso, o intenso interesse científico e farmacêutico em peptídeos de receptor específico de melanocortina, mantém uma necessidade por altaly seletivos e peptídeos agonistas de MCR-1 específicos para uso em aplicações farmacêuticas. Ê contra esse antecedente que a presente invenção foi criada.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Em um aspecto, a invenção fornece um peptídeo cíclico de fórmula (I):

que inclui todos os enantiômeros, estereoisômeros ou diastereoisômeros dos mesmos, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos precedentes, em que: Ri é -H, -NH-Rio, -NH-Rio-Rii ou -NH-RX1; R2 é -CH- ou -N-; R3 é -H, -CH3 ou -CH2-, e se ele é -CH2-, forma com R4 um anel da estrutura geralz ;

R4 é -H, -(CH2)Z- se R3 é -CH2-, e se ele é -(CH2)Z-, forma o anel com R3, em que qualquer H em -(CH2)Z- é opcionalmente substituído por RX2, ou R4 é - (CH2) W-Ri3-(CH2) w- R14, em que qualquer H em cada (CH2)W é opcionalmente substituído por -(CH2)W-CH3; R5 é -(CH2)W-R15; R6 é -H, -CH3 OU -CH2-, e se ele é -CH2-, forma com V ,N—X, R7 um anel da estrutura geralz ;

R7 é -(CH2)Z- se Rs é -CH2-, e se ele é -(CH2)Z-, forma o anel com R6, ou R7 é -(CH2)W-R16; Re é -Ri7-Ri8 OU "Ris/ R9 é - (CH2)X-C(=O) -NH- (CH2)y-, - (CH2)X-NH-C(=O) - (CH2)y-, - (CH2)X-C(=O) - (CH2) Z-C(=O) - (CH2)y-, - (CH2)X-C(=O) -NH-C(=O) - (CH2)y-, - (CH2)X-NH-C(=O) -NH- (CH2)y-, - (CH2)X-NH-C(=O) - (CH2) Z-C(=O) -NH- (CH2)y-, ou - (CH2)X-S-S- (CH2)y-; R10 é de um a três resíduos de aminoácido; Rlx é H ou um grupo acila Cx a CX7 em que o compreende uma alquila, cicloalquila, alquilcicloalquila, arila ou alquilarila Cx a C17 linear ou ramificada; R12 está opcionalmente presente, e se presente, é independentemente em cada caso, -R13-(CH2) W-RX4 ; R13 está opcionalmente presente, e se presente, é independentemente em cada caso -O- , -S-, -NH- , -S(=0)2-, -S(=0) -S(=O)2-NH-, -NH-S(=O)2-, -C(=O)-, -C(=0)-0-, -0-C(=0) - NH-C(=0)-O-, - 0-C(=0)-NH-, - NH-C(=O)-, ou - C(=0)-NH-; R14 é independentemente, em cada caso -H, -CH3, -N(R19a) (R19b) , -NH- (CH2) z-N(R19a) (R19b) , -NH-CH(=NH) -N(R19a) (R19b) , -NH-CH (=0)-N (R19a) (R19b) , -0(Rx9a), - (Risa) (R19b) , -S(=O)2(R19a) , -C(=0) -O (Ri9a) ,

em que qualquer um anel em Ri4 é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes do anel, e quando um ou mais substituintes estão presentes, são os mesmos ou diferentes e independentemente hidroxila, halogênio, sulfonamida, alquila, -O-alquila, arila, -0-arila, C(=O)-OH, ou C(=0) -N(R19a) (R19b) ;

Ris é fenila, naftila ou piridila, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halo, alquil-halo (Ci-C10) , alquila (Ci-Cio), alcóxi (Ci-Cio), alquiltio (Ci-Cio) , arila, arilóxi, nitro, nitrila, sulfonamida, amino, amino monosubstituído, amino dissubstituído, hidróxi, carbóxi, e alcóxi-carbonila; R16 é -H, -N(R19a) (R19b) , -NH-(CH2)z-N(R19a) (R19b) , -NH-CH(=NH)-N(R19a) (RX9b) , -NH-CH (=0)-N (R19a) (R19b) , -O(R19a), uma cadeia alquila Ci a Ci7 linear ou ramificada, -C(=0)- N(Ri9a) (R19b) , -S (=O) 2 (R19a) ,

em que qualquer anel é opcionalmente substituído por uma ou mais substituintes do anel opcionais, e quando um ou mais substituintes estão presentes, são os mesmos ou diferentes e independentemente hidroxila, halogênio, sulfonamida, alquila, -0-alquila, arila, aralquila, 0- aralquila, ou -0-arila; Ri, é de um a três resíduos de aminoácido; R18 é -OH, -N(R19a) (R19b) , - N(R19a) (CH2)W-(Cx- C7) cicloalquila, ou -O-(CH2) w-(Cx-C7) cicloalquil ; Risa θ Rist são cada um, independentemente H ou uma cadeia alquila Cx a C4 linear ou ramificada; w é, em cada caso independente, 0 a 5; x é 1 a 5; y é 1 a 5; e z é, em cada caso, independentemente 1 a 5.

No peptídeo cíclico de fórmula (I) , Ri7 pode ser um resíduo de aminoácido único da fórmula

opcionalmente substituído por um ou mais substituintes do anel, e quando um ou mais estão presentes, são os mesmos ou diferentes e independentemente hidroxila, halogênio, sulfonamida, alquila, -O-alquila, arila, ou -0- arila.

Em outro aspecto, foi fornecido o peptídeo cíclico 10 de fórmula (II):

em que variáveis são como atribuídas para a fórmula (I) .

Em outro aspecto, foi fornecido o peptídeo cíclico 15 de fórmula (III):

em que R21a, Raw e R2IC são independentemente em cada caso, hidrogênio, halo, alquil-halo (Ci-Ci0) , alquila (Ci-Cio), alcóxi (Ci-Cio) , alquiltio (Ci-Cio) , arila, arilóxi, nitro, 5 nitrila, sulfonamida, amino, amino monosubstituido, amino dissubstituído, hidróxi, carbóxi, ou alcóxi-carbonila, e todas as outras variáveis são conforme atribuídas para a fórmula (I).

Em outro aspecto, foi fornecido o peptídeo cíclico 10 de fórmula (IV):

em que R22 é H ou uma alquila, cicloalquila, alquilcicloalquila, arila ou alquilarila Ci a C9 linear ou ramificada; Raiar Raib e R2ic são como definidos para a fórmula (III); e todos os outras variáveis são como atribuídas para a fórmula (I).

Em outro aspecto, foi fornecido o peptídeo cíclico de fórmula (V) :

em que variáveis são como atribuídas para o peptídeo cíclico de fórmula (IV).

Em outro aspecto, foi fornecido o peptídeo cíclico de fórmula (VI):

peptídeo cíclico de fórmula (III).

No peptídeo cíclico de fórmula (I) , Rg pode ser - (CH2) X-C (=0)-NH-(CH2) y- onde x é 4 e y é 3, onde x é 3 e y é 2, ou onde x é 2 e y é 1. Alternativamente, Rg pode ser - 15 (CH2)X-NH-C(=O) - (CH2)y- onde x é 1 e y é 2, onde x é 2 e y é 3, ou onde x é 3 e y é 4.

No peptideo cíclico de fórmula (I), R3 pode formar com R4 um anel da estrutura geral

onde z é 3.

No peptideo cíclico de fórmula (I) , R17 pode ser um resíduo de aminoácido único da fórmula

Em outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica com base em peptideo de receptor específico de melanocortina para uso em tratamento de 10 doenças, indicações, condições e síndromes mediadas por receptor de melanocortina.

Em outro aspecto, z presente invenção fornece uma composição farmacêutica de receptor específico de melanocortina com base em peptideo, em que o peptideo é a 15 ligantes de MCR-1 seletivo, para uso em tratamento de distúrbios, doenças, indicações, condições e/ou síndromes associados a MCR-1.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece peptideos que são específicos para receptor de melanocortina 20 MCR-1 e que são agonistas.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica de receptor específico de melanocortina para uso em tratamento em que a administração do tratamento é por meio de administração pulmonar.

Em outro aspecto, a presente invenção fornece peptideos cíclicos de MCR-1 específicos que são eficazes em uma faixa de dosagem significante.

Ainda outro aspecto da presente invenção fornece peptídeos cíclicos de MCR-1 específicos que, por causa de eficácia aumentada em doses baixas, podem ser administrados por sistemas de distribuição diferentes de injeção intravenosa, subcutânea ou intramuscular convencional da técnica, que incluem, mas não estão limitados a sistemas de distribuição orais, sistemas de distribuição por inalação, sistemas de distribuição pulmonar, sistemas de distribuição nasal e sistemas de distribuição de membrana mucosa.

Outros aspectos e novos recursos, e o escopo adicional de aplicabilidade da presente invenção serão apresentados em parte na descrição detalhada a seguir, e em parte serão evidentes a elementos versados na técnica sob exame do seguinte, ou pode ser aprendido na prática da invenção. Os aspectos da invenção podem ser realizados e alcançados por meio dos instrumentos e combinações particularmente destacados nas reivindicações anexas.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO 1.0 Definições.

Antes de prosseguir com a descrição da invenção, determinados termos são definidos como apresentados no presente documento.

Nas sequências dadas para os peptídeos de acordo com a presente invenção, os resíduos de aminoácido têm seu significado convencional como dado no Capítulo 2.400 do Manual of Patent Examining Procedure, 8a Edição. Então, "Nle" é norleucina, "Asp" é ácido aspártico, "His" é histidina, "Fe" é fenilalanina, "Arg" é arginina, "Trp" é triptofano, e "Lis" é lisina, e daí por diante. Deve ser entendido que isômeros "D" são designados por um "D-" antes do código de três letras ou nome do aminoácido, de forma que, por exemplo, D-Fe seja D-fenilalanina. Resíduos de aminoácido não abrangidos pelos precedentes têm as seguintes definições:

Um "aminoácido α,a-dissubstituído" significa qualquer a-aminoácido que tem um substituinte adicional na posição a, cujo substituinte pode ser o mesmo ou diferente da porção química de cadeia lateral do a-aminoácido.

Substituintes adequados, em adição à porção química de cadeia lateral do a-aminoácido, incluem alquila Ci a C6 linear ou ramificada. Aib é um exemplo de um aminoácido α,α- dissubstituído. Apesar do aminoácido a,a-dissubstituído poder ser referido usando referências isoméricas L e D convencionais, deve ser entendido que tais referências são para conveniência, e que onde os substituintes na posição α são diferentes, tal aminoácido pode alternadamente ser referido como um aminoácido a,a-dissubstituído derivado do isômero L ou D, conforme apropriado, de um resíduo com a 5 designada porção química de cadeia lateral de aminoácido.

Então, o ácido (S)-2-Amino-2-metil-hexanóico pode ser referido ou como um aminoácido a,a-dissubstituído derivado de L-Nle ou como um aminoácido a,a-dissubstituído derivado de D- Ala. Semelhantemente, Aib pode ser referido como um 10 aminoácido a,a-dissubstituído derivado de Ala. Sempre que um aminoácido a,a-dissubstituído é fornecido, deve ser entendido como inclusão de todas as configurações (J?) e (S) dos mesmos. Sempre que uma reivindicação ou descrição no presente documento estiverem se referindo a um "aminoácido", tal 15 designação inclui, mas não está limitada a, um "aminoácido α,a-dissubstituído".

Um "aminoácido N-substituído" significa qualquer aminoácido em que uma porção química de cadeia lateral de aminoácido é covalentemente ligada ao grupo amino de cadeia 20 principal, que inclui opcionalmente onde não existe nenhum substituinte exceto H na posição de a-carbono. Sarcosina é um exemplo de um aminoácido N-substituído. A título de exemplo, sarcosina pode ser referida como um derivado de aminoácido N- substituído de Ala, em que a porção química de cadeia lateral 25 de aminoácido de sarcosina e Ala é a mesma, metila. Sempre que uma reivindicação ou descrição no presente documento forem referidas a um "aminoácido", tal designação inclui, mas não está limitada a, um "aminoácido N-substituído".

Em determinados casos, grupos podem ser substituído 3 0 por um aminoácido, como particularmente, o uso de um ácido dicarboxílico no lugar de um aminoácido. Um ácido dicarboxílico particular utilizado no presente documento é ácido succínico, abreviado como "Sue", que tem a fórmula estrutural

O termo "alcano" inclui hidrocarbonetos saturados lineares ou ramificados. Exemplos de grupos alcano linear 5 incluem metano, etano, propano, e similares. Exemplos de grupos alcano ramificados ou substituídos incluem metilbutano ou dimetilbutano, metilpentano, dimetilpentano ou trimetilpentano, e similares. Em geral, qualquer um grupo alquila pode ser um substituinte de um alcano.

O termo "alceno" inclui hidrocarbonetos insaturados que contêm uma ou mais ligações carbono-carbono duplas. Exemplos de tais grupos alceno que incluem etileno, propeno, e similares.

O termo "alquenila" inclui um radical de 15 hidrocarboneto monovalente linear de dois a seis átomos de carbono ou a radical de hidrocarboneto monovalente ramificado de três a seis átomos de carbono contendo pelo menos uma ligação dupla; exemplos dos mesmos incluem etenil, 2- propenil, e similares. Os Grupos "Alquila" Especificados No Presente Documento incluem aqueles radicais alquila do comprimento designado ou em uma configuração linear ou ramificada. Exemplos de tais radicais alquila incluem metila, etila, propila, isopropila, butila, sec-butila, butila terciária, 25 pentila, isopentila, hexila, isohexila, e similares.

O termo "alcino" inclui um radical de hidrocarboneto monovalente linear de dois a seis átomos de carbono ou um radical de hidrocarboneto monovalente ramificado de três a seis átomos de carbono contendo pelo 30 menos uma ligação tripla; exemplos dos mesmos incluem etino, propina, butino, e similares.

O termo "arila" inclui um radical de hidrocarboneto aromático monocíclico ou bicíclico de 6 a 12 átomos de anel, e opcionalmente substituído independentemente por um ou mais • 5 substituintes selecionados a partir de alquila, haloalquila, cicloalquila, alcóxi, alquiltio, halo, nitro, acila, ciano, amino, amino monosubstituído, amino dissubstituído, hidróxi, carbóxi, ou alcóxi-carbonila. Exemplos de um grupo arila incluem fenila, bifenila, naftila, 1-naftila, e 2-naftila, 10 derivados dos mesmos, e similares.

O termo "aralquila" inclui um radical - RaRb onde Ra é um grupo alquileno (um alquil bivalente) e Rb é um grupo arila como definido acima. Exemplos de grupos aralquil incluem benzila, feniletila, 3-(3-clorofenil)-2-metilpentila, 15 e similares.

O termo "alifático" inclui compostos com cadeias de hidrocarboneto, como por exemplo, alcanos, alcenos, alcinos, e derivados dos mesmos.

O termo "acila" inclui um grupo R(C=O)-, onde R é 20 um grupo orgânico. Um exemplo é o grupo acetila CH3-C(=O)-, referido no presente documento como "Ac". Como usado no presente documento, R pode compreender uma alquila, cicloalquila, alquilcicloalquila, arila ou alquilarila Ci a C17 linear ou ramificada.

Um peptideo ou porção química alifática é "acilada" quando um grupo alquila ou alquila substituída como definido acima é ligado através de um ou mais grupos carbonila {- (C=0)-}. Um peptideo é mais normalmente acilado no N- terminal.

Uma "cadeia alifática de ômega amino" inclui uma porção química alifática com um grupo amino terminal. Exemplos de cadeias alifáticas de ômega amino incluem aminoheptanoil e the porções químicas de cadeia lateral de aminoácido de ornitina e lisina.

O termo "heteroarila" inclui anéis aromáticos mono e bicíclicos contendo de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, heteroarila de 5 o • 5 u6 membros são anéis heteroaromáticos monocíclicos; exemplos dos mesmos incluem tiazol, oxazol, tiofeno, furano, pirrol, ’ imidazol, isoxazol, pirazol, triazol, tiadiazol, tetrazol, oxadiazol, piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, e similares. Anéis heteroaromáticos bicíclicos incluem, mas não 10 estão limitados a, benzotiadiazol, indol, benzotiofeno, benzofurano, benzimidazol, benzisoxazol, benzotiazol, quinolina, benzotriazol, benzoxazol, isoquinolina, purina, furopiridina e tienopiridina.

Uma "amida" inclui compostos que têm um nitrogênio 15 trivalente ligado a um grupo carbonila (-C(=0)-NH2) , como por exemplo, metilamida, etilamida, propilamida, e similares. Uma "imida" inclui compostos contendo um grupo imido (-C(=0)-NH-C(=0)-).

Uma "amina" inclui compostos que contêm um grupo 2 0 amino (-NH2) - Uma "nitrila" inclui compostos que contêm um grupo (-CN) ligado a um grupo orgânico.

O termo "halogênio" inclui os átomos de halogênio, flúor, cloro, bromo e iodo, e grupos que incluem uma ou mais 25 átomos de halogênio, como -CF3 e similares.

O termo "composição", como em composição farmacêutica, abrange um produto que compreende o ingrediente(s) ativo, e o ingrediente(s) inerte que constrói o carreador, bem como qualquer produto que resulta, 30 diretamente ou indiretamente, de combinação, complexação ou agregação de qualquer dois ou mais dos ingredientes, ou da dissociação de um ou mais dos ingredientes, ou de outros tipos de reações ou interações de um ou mais dos ingredientes. Consequentemente, as composições farmacêuticas utilizadas na presente invenção abrangem qualquer composição feita por misturar um ingrediente ativo e um ou mais carreadores farmaceuticamente aceitáveis.

Um receptor de melanocortina "agonista" significa uma substância endógena, substância de fármaco ou composto, que inclui um composto como os peptídeos da presente invenção, que podem interagir com um receptor de melanocortina e iniciar uma resposta farmacológica, que 10 inclui mas não está limitada a ativação de adenil ciclase, característica do receptor de melanocortina. Para a presente invenção, um agonista do receptor de melanocortina é um agonista em MCR-1 que é preferido. "a-MSH" significa que o peptídeo Ac-Ser-Tir-Ser- 15 Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gli-Lis-Pro-Val-NH2 (SEQ ID NO:2) e análogos e homólogos dos mesmos, que incluem sem limitação NDP-a-MSH. "NDP-a-MSH" significa o peptídeo Ac-Ser-Tir-Ser- Nle-Glu-His-D-Fe-Arg-Trp-Gli-Lis-Pro-Val-NH2 (SEQ ID NO:3) e 20 análogos e homólogos dos mesmos. "EC5O" significa a concentração molar de um agonista, que inclui um agonista parcial, que produziu 50% da resposta máxima possível para o tal agonista. A título de exemplo, um composto de teste que, em uma concentração de 72 25 nM, produz 50% da resposta máxima possível para o tal composto como determinado em um ensaio cAMP em um sistema de expressão de célula de MCR-1, tem um EC50 de 72 nM. A menos que seja especificado de outra forma, a concentração molar associada com uma determinação EC50 está em nanomoles per 30 litro (nM). "Ki (nM)" significa a constante dissociação de inibidor de equilíbrio que representa a concentração molar de um composto concorrente que liga a metade dos sítios de ligação de um receptor em equilíbrio na falta de radioligantes ou outros competidores. Em geral, o valor numérico do Ki é inversamente correlacionado à afinidade do composto para o receptor, de forma que, se o Ki é baixo, a 5 afinidade é alta. Ki pode ser determinado usando a equação de Cheng e Prusoff (Cheng Y., Prusoff W. H., Biochem. Pharmacol. 22: 3.099 a 3.108, 1973):

em que "ligante" é a concentração de radioligante e KD é uma medida inversa de afinidade de receptor para o radioligante que produz 50% de ocupação do receptor pelo radioligante. A menos que seja especificado de outra forma, a concentração molar associada com uma determinação de Ki está em nM. Ki pode ser expresso em termos de receptores específicos (por exemplo, MCR-1, MCR-3, MCR-4 ou MCR-5), espécies específicas (por exemplo, humano ou murino), e ligantes específicos (por exemplo, a-MSH ou NDP-a-MSH).

"Inibição" significa a porcentagem de atenuação, ou diminuição em ligação de receptor, em um ensaio de inibição 20 competitiva comparado a um padrão conhecido. Então, "inibição em 1 μM (NDP-α-MSH)" significa a diminuição de porcentagem em ligação de NDP-a-MSH por adição de uma determinado quantidade do composto a ser testado, como 1 μM de um composto de teste, como sob as condições de ensaio descritas a seguir. A título 25 de exemplo, um composto de teste que não inibe ligação de NDP-a-MSH tem uma inibição de 0%, e um composto de teste que inibe completamente a ligação de NDP-a-MSH tem uma inibição de 100%. Tipicamente, como descrito a seguir, um radioensaio é usado para teste de inibição competitiva, como com NDP-a- 30 MSH I125-identifiçado, ou um ensaio fluorescente de quelato de lantanídeo, como com Eu-NDP-a-MSH. Contudo, outros métodos de testar a inibição competitiva são conhecidos, que incluem o uso de sistemas de identificação ou etiqueta exceto radioisótopos, e em geral, qualquer método conhecidos na técnica para testar a inibição competitiva pode ser empregado nessa invenção. Pode então ser visto que "inibição" é uma medida para determinar se um composto de teste atenua a ligação de α-MSH a receptores de melanocortina.

"Afinidade de ligação" significa a habilidade de um composto ou fármaco ser ligado a seu alvo biológico, expresso no presente documento como Ki (nM).

Em geral, "atividade funcional" é uma medida da sinalização de um receptor, ou medida de uma alteração em sinalização associada ao receptor, como um receptor de melanocortina, e em particular, MCR-1 ou hMCR-1, sob ativação por um composto. Receptores de melanocortina iniciam transdução de sinal através de ativação de proteínas G heterotriméricas. Em um aspecto, receptores de melanocortina sinalizam através de Gas, que catalisa a produção de cAMP por adenill ciclase. Então, a determinação de estímulo de adenill ciclase, como determinação de estímulo máximo de adenill ciclase, é uma medida de atividade funcional, e é a medida primária exemplificada no presente documento. Contudo, deve ser entendido que medidas alternativas de atividade funcional podem ser empregadas na prática dessa invenção, e são especificamente contempladas e incluídas no escopo dessa invenção. Dessa forma, em um exemplo, cálcio livre intracelular pode ser medido, como reportado e com o uso dos métodos revelados em Mount joy, K. G. , et al. , "Melanocortin receptor-medicated mobilization of intracellular free calcium in HEK293 cells", Physiol. Genomics 5:11 a 19 (2001), ou

Kassack, M. U. , et al., "Functional screening of G protein- coupled receptors by measuring intracellular calcium with a fluorescence microplate reader", Biomol. Screening 7:233 a 246 (2002). É também possível medir a ativação por medida da produção de trifosfato de inositol ou diacilglicerol de fosfatidilinositol 4,5-bifosfato, como por uso de radioensaios. Já outra medida de atividade funcional é a • 5 internalização receptor, resultando da ativação de trahetórias reguladoras, como usando os métodos revelados em Nickoils, S. A., et al. , "Functional selectivity of melanocortin 4 receptor peptide and nonpeptide agonists: evidence for ligand specific conformational states", J.

Pharm. Exper. Therapeutics 313:1.281 a 1.288 (2005). Já outra medida de atividade funcional é a troca, e taxa de troca, de nucleotídeos associados com a ativação de um receptor de proteína G, como a troca de GDP (guanosina difosfato) para GTP (guanosina trifosfase) na subunidade α de proteína G, 15 que pode ser medida por qualquer número de significados, que inclui um radioensaio que usa guanosina 5 ' - (y-[35s] tio) - trifosfato, como revelado em Manning, D. R., "Measures of efficacy using G proteins as endpoints: differential engagement of G proteins through single receptors," Mol.

Pharmacol. 62:451 a 452 (2002). Vários ensaios baseados em gene foram desenvolvidos para medir ativação de proteínas G acopladas, como aquelas reveladas em Chen, W. , et al. , "A colorimetric assay from measuring activation of Gs- and Gq- coupled signaling pathways", Anal. Biochem. 226:349 a 354 25 (1995); Kent, T. C., et al., "Development of a generic dual reporter gene assay for screening G-protein-coupled receptors", Biomol Screening 5:437 a 446 (2005); ou Kotarsky, K. , et al., "Improved receptor gene assays used to identify ligands acting on orphan seven-transmembrane receptors",

Pharmacology & Toxicology 93:249 a 258 (2003). O ensaio colorimétrico de Chen et al. foi adaptado para uso em medição da ativação do receptor de melanocortina, como revelado em Hruby, V. J., et al., "Cyclic lactam α-melanocortin analogues of Ac-Nle4-cyclo [Asp5,D-Phe7, Lys101 α-melanocyte-stimulating hormone-(4-10)-NH2 with bulky aromatic amino acids at position 7 shows high antagonist potency and selectivity at specific melanocortin receptors", J. Med. Chem., 38:3.454 a • 5 3.461 (1995). Em geral, a atividade funcional pode ser medido por qualquer método, que inclui os métodos para determinar ativação e/ou sinalização de um receptor acoplado por G, e que ainda incluem os métodos que pode ser a seguir desenvolvidos ou reportados. Cada um dos artigos precedentes, 10 e os métodos revelados nos mesmos, é incorporado aqui a título de referência como apresentado em sua totalidade.

Os termos "tratar", "que trata" e "tratamento", como usado no presente documento, contemplam uma ação que ocorre enquanto um paciente está sofrendo da doença ou 15 distúrbios especificados, que reduz a severidade da doença ou distúrbio.

Como usado no presente documento, o termo "quantidade terapeuticamente eficaz" significa a quantidade de um composto que inclui um peptideo da invenção que 20 produzirá uma resposta biológica ou médica no mamífero que está sendo tratado por um médico ou outros clínicos.

Como usado no presente documento, o termo "profilaticamente eficaz" ou "preventivo" significa a quantidade de um composto que inclui um peptideo da invenção 25 irá prevenir ou inibir aflição ou mitigar aflição de um mamífero com a condição médica que um médico ou outro clínico está tentando prevenir, inibir, ou mitigar antes de uma paciente começar a sofrer da doença ou distúrbio especificado.

"Choque circulatório" significa a condição médica geral em que órgãos e/ou tecidos do corpo do sujeito, tal sujeito pode ser humano ou animal, que não estão recebendo um fluxo adequado de sangue. 0 choque circulatório inclui condições como choque hipovolêmico, choque cardiogênico, choque com vasodilatação e similares. Essas condições ou disfunções em circulação podem por sua vez, ter diferentes causas, como infecção bacteriana no sangue (choque séptico ou 5 infeccioso), reação alérgica severa (choque anafilático), trauma (choque traumático), hemorragia grave ou perda de sangue (choque hemorrágico), disfunção neurológica causando abertura abdominal de vasos sanguíneos (choque neurogênico) ou endócrino relacionado (choque endócrino). O choque 10 circulatório pode ainda resultar em isquemia e dano isquêmico a órgãos corporais, tecidos, células ou outras partes. Sob reperfusão, ou restauração de fluxo sanguíneo, lesão de isquemia-reperfusão pode ocorrer, também resultando em danos a órgãos do corpo, tecidos, ou células.

"Doença inflamatória," também algumas vezes chamada de uma "condição inflamatória" significa um doença ou condição caracterizada em parte mecanismos por inflamatória, como reações de linfócitos T específicos ou interações de antígeno de anticorpo causando o recrutamento de células 20 inflamatórias e mediadores endógenos químicos, que incluem, mas não estão limitados a citocinas, que mediadores químicos incluem, mas não estão limitados a uma ou mais de atividade NF-KB aumentada, produção de TNF-a aumentada, produção de IL- 1 aumentada e produção de IL-6 aumentada. 2.0 Indicações e Utilidade clínica.

As composições e métodos revelados no presente documento podem ser usados tanto para aplicações médicas quanto para aplicações pecuárias animais ou veterinárias. Tipicamente, os métodos são usados em humanos, mas podem 30 também ser usados em outros mamíferos. O termo "paciente" denota um individual mamífero, e é então usado por todas a especificação e nas reivindicações. As aplicações primárias da presente invenção envolvem pacientes humanos, mas a presente invenção pode ser aplicada a animais de laboratório, de fazenda, de zoológico, animais selvagens, domésticos, esportivos ou outros animais. Indicações clínicas e utilidades específicas incluem o seguinte: 5 2.1 Doenças inflamatórias, Indicações, Condições e Síndromes.

Peptideos, composições e métodos da presente invenção são direcionados ao tratamento de doenças inflamatórias e condições inflamatórias em um sujeito.

Existem várias doenças inflamatórias e condições inflamatórias que podem ser então tratadas. Em um aspecto, a condição inflamatória resulta de uma doença que inclui uma forma de artrite, que inclui, mas não está limitada a artrite, osteoartrite reumatóide, artrite séptica, gota e doença de pseudogout, artrite idiopática juvenil, doença de Still e espondilite anquilosante, bem como artrite secondária para outras doenças, como artrite secundária ara lúpus eritematoso, púrpura de Henoch-Schõnlein, artrite psoriática, artrite reativa, hemocromatose, hepatitis, granulomatose de Wegener, síndromes de vasculite, doença de Lyme, febre familiar do Mediterrâneo, hiperimunoglobulinemia D com feber recorrente, síndrome periódica associada ao receptor TNF e doença inflamatória intestinal, que incluem doença de Crohn e colite ulcerativa. Em outro aspecto, a condição inflamatória resulta de um doença que inclui uma forma de doença inflamatória intestinal, como doença de Crohn, colite ulcerativa, colite colagenosa, colite linfocítica, colite isquêmica, colite de derivação, síndrome de Behçet, colite infecciosa e colite indeterminada. Em outro aspecto, a condição inflamatória resulta de uma doença autoimune, que inclui, mas não está limitada a síndromes sistêmicas como lúpus eritematoso sistêmico, Síndrome de Sjõgren, escleroderma, artrite reumatóide e polimiosite, ou a síndrome que afeta apenas um sistema do corpo local, como o sistema endócrino (diabetes mellitus tipo 1, Tireoidite de Hashimoto, doença de Addison, etc.), sistema dermatológico (pênfigo vulgar), sistema hematológico (anemia hemolítica autoimune), • 5 ou sistema nervoso (esclerose múltipla). Dessa forma, doenças autoimunes incluem, além das síndromes gerais discutidas acima, as doenças e condições como encefalomielite seriamente disseminada, doença de Addison, espondilite anquilosante, síndrome do anticorpo antifosfolípide, anemia aplástica, 10 hepatite autoimune, oophoritis autoimune, doença celíaca, doença de Crohn, penfigóide gestacional, síndrome de Goodpasture, doença de Graves, Síndrome de Guillain-Barré, doença de Hashimoto, púrpura trombocitopênica idiopática, doença de Kawasaki, lúpus eritematoso, doença mista do tecido 15 conjuntivo, esclerose múltipla, miastenia gravis, Síndrome de opsoclonia-mioclonia, neurite óptica, tireoide de Ord, pênfigo, anemia perniciosa, cirrose biliar primária, síndrome de Reiter, síndrome de Sjogren, arterite de Takayasu, arterite temporal, anemia hemolítica autoimune e 20 granulomatose de Wegener.

Em outro aspecto, a condição inflamatória resulta de ou é relacionada à doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), também conhecida como doenças obstrutivas das vias aéreas crônicas, incluindo, mas não se limitando a doenças 25 caracterizadas pela limitação patológica de fluxo de ar nas vias aéreas que não é totalmente reversível, como, por exemplo, bronquite crônica, enfisema, pneumoconiose, neoplasias pulmonares e outras desordens pulmonares. Outras condições inflamatórias incluem desordens e doenças das vias 30 aéreas superiores e inferiores, como asma alérgica, asma não alérgica, rinite alérgica, rinite vasomotora, conjuntivite alérgica, conjuntivite não alérgica, e similares, bem como doenças das vias aéreas relacionadas a substâncias ou toxinas externas, como várias formas de pneumoconiose (pneumoconiose dos mineiros de carvão, asbestose, silicose, fibrose por bauxita, beriliose ou siderose), bissinose ou pneumonite hipersensível (pulmão de fazendeiro ou pulmão dos criadores • 5 de pássaros). Outras doenças pulmonares envolvendo uma condição inflamatória incluem síndrome da angústia respiratória aguda. Os peptídeos e composições da presente invenção são de utilidade particular para o tratamento de condições em que glicocorticoides são ineficazes ou 10 inadequados para produzir a resposta farmacológica desejada, como COPD, asma em indivíduos que fumam, e outras condições caracterizadas, no todo ou em parte, por acúmulo de eosinófilos no pulmão, ativação e infiltração de neutrófilos, ativação e recrutamento de macrófago alveolar, expressão de 15 célula epitelial de IL-8 ou expressão aumentada de TNF-a.

Para desordens pulmonares ou das vias aéreas, em um aspecto, os peptídeos da presente invenção são entregues de maneira sistêmica; em outro aspecto, os peptídeos da presente invenção são entregues de maneira local, como por 20 administração por inalação.

Em ainda outro aspecto, a condição inflamatória resulta de ou é relacionada a alguma forma de síndrome ou condição relacionada a transplante, como doença do enxerto contra hospedeiro, rejeição hiperaguda, rejeição aguda ou 25 rejeição crônica. Doença do enxerto contra hospedeiro é uma complicação comum de transplante de medula óssea alogênico, mas pode ocorrer com outros transplantes, e particularmente aqueles com células T presentes no enxerto, como contaminantes ou introduzidos intencionalmente. A rejeição 30 hiperaguda, aguda ou crônica pode ocorrer com órgãos corporais como rins, fígado, pâncreas, baço, útero, coração ou pulmões, bem como transplante de osso, córnea, face, mão, pênis ou pele. Em uma modalidade, uma composição farmacêutica que inclui um ou mais dentre os peptideos da presente invenção é administrada profilaticamente para limitar ou prevenir uma síndrome ou condição relacionada a transplante, como imediatamente antes, durante ou após o transplante de 5 uma parte, órgão ou fluido corporal. Em outra modalidade, a parte, órgão ou fluido corporal que é transplantada é perfundida com uma solução de uma composição farmacêutica que inclui um ou mais dentre os peptideos da presente invenção. Em ainda outra modalidade, um ou mais dentre os peptideos da 10 presente invenção são administrado em conjunção com, combinação com ou série com um ou mais dentre os agentes para rejeição de transplante, como inibidores de calcineurina que incluem ciclosporina ou tacrolimo, inibidores de mTOR que incluem sirolimo ou everolimo, antiproliferativos que incluem 15 azatioprina ou ácido micofenólico, corticosteroides que incluem prednisolona ou hidrocortisona, anticorpos como anticorpos receptores de anti-lL-2Rα monoclonal, basiliximabe ou daclizumabe, ou anticorpos anti-célula-T policlonais como globulina antitimócito ou globulina antilinfócito. 2.2 Síndromes, Condições, indicações e Doenças Escleróticas e Fibróticas.

Peptideos, composições e métodos da presente invenção são direcionados ao tratamento de síndromes, condições, indicações e doenças escleróticas e fibróticas em 25 um sujeito. Há várias síndromes, condições, indicações e doenças escleróticas e fibróticas que podem ser tratadas assim. Síndromes, condições, indicações e doenças escleróticas e fibróticas frequentemente incluem um componente inflamatório, e, assim, muitas podem ser 30 categorizadas de maneira semelhante conforme uma condição ou doença inflamatória, e são listadas na seção 2.1 acima. Condições e doenças escleróticas e fibróticas, adicionalmente à inclusão de um componente inflamatório, também podem ser desordens idiopáticas, tóxicas, hereditárias e/ou farmacologicamente induzidas. Em general, as desordens fibróticas são caracterizadas por produção excessiva de matriz extracelular, principalmente o colágeno tipo I, que 5 pode resultar em perda de função do órgão. Acredita-se, sem limitação à teoria, que o agonismo de MCR-1 pode resultar em supressão de síntese de colágeno induzida pelo fator de crescimento transformante βl por fibroblastos dérmicos humanos, fornecendo, desse modo, benefícios terapêutico e/ou 10 profilático para síndromes, condições, indicações e doenças escleróticas e fibróticas. Condições e doenças escleróticas e fibróticas representativas que podem ser tratadas assim incluem, mas não se limitam a, esclerodermia localizada, esclerose sistêmica, doença do enxerto contra hospedeiro 15 esclerodérmica da pele, fibrose pulmonar idiopática, fibrose pulmonar induzida por bleomicina, nefropatia induzida por ciclosporina, cirrose do fígado, cicatrizes hipertróficas, queloides e similares. 2.3 Doenças Relacionadas a Expressão de Citocina 20 Aumentada e Síndromes, Condições, Indicações e Doenças Relacionadas.

A expressão de várias citocinas é aumentada durante um processo inflamatório, incluindo um processo inflamatório secundário ao choque circulatório, isquemia, lesão de 25 reperfusão e similares. TNF-ot é uma citocina pleiotrópica produzida principalmente por macrófagos, e também por outros tipos de células. Outras citocinas que aumentam durante um processo inflamatório, incluindo um processo inflamatório secundário ao choque circulatório, isquemia, lesão de 30 reperfusão e similares, incluem IL-1 e IL-6. Enquanto citocinas como TNF-a têm efeitos benéficos em muitos casos, níveis significativamente aumentados, como secundários ao choque circulatório, isquemia, lesão de reperfusão e similares, podem ter efeitos patológicos. Em um aspecto, a reperfusão de tecidos isquêmicos ou hipóxicos, como secundários ao choque circulatório, resultam em respostas inflamatórias, incluindo expressão de citocina aumentada.

Em uma modalidade, a invenção é direcionada a métodos de uso de um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção para diminuir a expressão e produção de citocina pró-inflamatória, incluindo diminuir a expressão e produção de citocina pró-inflamatória secundária ao choque 10 circulatório, isquemia, lesão de reperfusão e similares. A diminuição na expressão e produção de citocina pró- inflamatória, incluindo sem limitação um ou mais dentre TNF- α, IL-1 e IL-6, ocorre instantaneamente ou dentro de um curto período de tempo seguindo a administração de uma composição 15 que compreende um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção, preferencialmente, dentro de pelo menos cerca de 40 minutos seguindo a administração, mais preferencialmente, dentro de 1 a 20 minutos, mais preferencialmente, dentro de 1 a 15 minutos e, com a máxima preferência, dentro de cerca de 20 1 a 10 minutos.

Em uma modalidade relacionada, a invenção é direcionada a métodos de uso de um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção para aumentar a expressão e produção de citocina anti-inflamatória. 0 aumento na expressão e produção de citocina anti-inflamatória, incluindo sem limitação IL-10, ocorre instantaneamente ou dentro de um curto período de tempo seguindo a administração de uma composição que compreende um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção, preferencialmente, dentro de pelo menos 30 cerca de 40 minutos seguindo a administração, mais preferencialmente dentro de 1 a 20 minutos, mais preferencialmente, dentro de 1 a 15 minutos e, com a máxima preferência, dentro de cerca de 1 a 10 minutos. 2.4 Síndromes, Condições, Indicações e Doenças Dermatológicas.

Peptideos, composições e métodos da presente invenção são direcionados, ainda, ao tratamento de síndromes, * 5 condições, indicações e doenças cosméticas e dermatológicas.

Em um aspecto, peptideos e composições da presente invenção são antagonistas de MCR-1 que estimulam melanócitos e células relacionadas para aumentar o nível de melanina na pele. Aumentando-se o nível de melanina na pele, a proteção contra radiação ultravioleta (UVR) e luz do sol é proporcionada, incluindo a proteção contra fototoxicidade e fotossensibilidade da pele causada por UVR, sol e luz.

Em um aspecto, peptideos, composições e métodos da presente invenção podem ser utilizados para o tratamento terapêutico e/ou profilático de síndromes, condições, indicações e doenças dérmicas como acne vulgaris (comumente chamada de acne), dermatite atópica (comumente chamada de eczema atópico ou eczema), erupção polimórfica leve, psoríase, rosácea, dermatite seborreica, vitiligo, porfiria, porfiria cutânea tardia, protoporfiria eritropoiética, urticária solar, urticária pigmentosa ou xeroderma pigmentoso. Em outro aspecto, peptideos, composições e métodos da presente invenção podem ser utilizados para prevenir, limitar ou tratar infecções virais fotorresponsivas ou fotossensíveis, como vírus herpes simples (comumente chamado de feridas frias e herpes genital dependendo do local da infecção), vírus de papiloma humano e vírus de varicela zoster. Em outro aspecto, peptideos, composições e métodos da presente invenção podem ser utilizados para prevenir, limitar ou tratar cânceres da pele, incluindo o uso em condições pré- cancerosas, e incluindo o uso em queratose actínica, carcinoma de células basais, melanoma ou carcinoma de células escamosas. Em outro aspecto, peptideos, composições e métodos da presente invenção podem ser utilizados para prevenir ou limitar efeitos adversos de várias terapias, incluindo fototerapias, como terapia fotodinâmica. Em ainda outro aspecto, peptídeos, composições e métodos da presente • 5 invenção podem ser utilizados para induzir um bronzeado, para diminuir o branqueamento dos cabelos ou para propósitos relacionados e semelhantes relacionados à produção de melanina aumentada.

Peptídeos da presente invenção podem ser 10 administrados por qualquer um dentre uma variedade de meios, incluindo aplicação direta na pele como por meio de óleos, pomadas, cremes, géis, unguentos e similares, ou por administração sistêmica, incluindo por meio de implantes, como implantes de dissolução subcutânea. 2.5 Cânceres Responsivos ao Fator de Crescimento e/ou Citocina.

Determinados cânceres, como mesotelioma, são relatados como sendo muito sensíveis à influências promotoras de crescimento de citocinas e fatores de crescimento, e podem 20 ser tratáveis por meio de peptídeos seletivos para MCR-1. Canania, A., et al. , "Autocrine inhibitory influences of α- melanocyte-stimulating hormone in malignant pleural mesothelioma", J. Leukoc. Biol. 75:253 a 259 (2004). Cânceres que podem ser tratados assim incluem mesotelioma pleural, 25 conhecido por expressar mRHA para MCR-1 e a proteína receptora, bem como outros tumores que expressam MCR-1, incluindo, mas não se limitando a adenocarcinoma, como adenocarcinoma pulmonar. 2.6 Síndromes, Condições, Indicações e Doença 30 Ocular.

Há várias síndromes, condições, indicações e doenças oculares caracterizadas por inflamação, incluindo, mas não se limitando à produção de citocina aumentada. Um exemplo é doença do olho seco, uma doença ocular que afeta aproximadamente 10 a 20% da população. Essa doença afeta progressivamente porcentagens maiores da população conforme envelhecem, sendo que a maioria desses pacientes são 5 mulheres. Adicionalmente, quase todas as pessoas experimentam irritação ocular, ou os sintomas e/ou sinais de olho seco conforme a condição, de tempos em tempos em determinadas circunstâncias, como tarefa visual prolongada (por exemplo, trabalhar em um computador), estar em um ambiente seco, usar 10 medicações que resultam em ressecamento ocular e assim por diante. Em indivíduos que sofrem de olho seco, a camada protetora de lágrimas que normalmente protege a superfície ocular é comprometida, resultado de produção insuficiente ou não saudável de um ou mais componentes lacrimais. Isso pode 15 levar à exposição da superfície do olho, finalmente promover dessecação e dano das células superficiais. Sinais e sintomas de olho seco incluem, mas não se limitam a ceratite, manchas na conjuntiva e na córnea, vermelhidão, visão embaçada, diminuição do tempo de ruptura do filme lacrimal, diminuição 20 da produção lacrimal, volume lacrimal, e fluxo lacrimal, vermelhidão da conjuntiva aumentada, excesso de detritos no filme lacrimal, secura ocular, aspereza ocular, queimação ocular, sensação de corpo estranho no olho, excesso de lacrimejamento, fotofobia, ardor ocular, insuficiência de 25 refração, sensibilidade ocular, e irritação ocular. Os pacientes podem experimentar um ou mais dentre esses sintomas. A resposta de excesso de lacrimejamento pode parecer contraditória, mas é uma resposta de reflexo natural à irritação e sensação de corpo estranho causada pelo olho 30 seco. Alguns dos pacientes também podem experimentar coceira ocular devido à combinação de sintomas de alergia ocular e olho seco.

Há muitas variáveis possíveis que podem influenciar os sinais ou sintomas de olho seco de um paciente incluindo níveis de hormônios circulantes, várias doenças autoimunes (por exemplo, síndrome de Sjogren e lúpus eritematoso sistêmico), cirurgias oculares incluindo PRK ou LASIK, muitas • 5 medicações, condições ambientais, tarefas visuais como uso de computador, fadiga ocular, usar lentes de contato, e influências mecânicas como sensibilidade da córnea, fechamento parcial da pálpebra, irregularidades superficiais (por exemplo, pterígio), e irregularidades da pálpebra (por 10 exemplo, ptose, entrópio/ectrópio, pinguécula). Ambientes com umidade baixa, como aqueles que causam desidratação, podem exacerbar ou causar sintomas de olho seco, como estar em um carro com o desembaçador ligado ou morar em uma zona de clima seco. Adicionalmente, tarefas visuais podem exacerbar os 15 sintomas. Tarefas que podem influenciar bastante os sintomas incluem assistir TV ou usar um computador por longos períodos de tempo em que a taxa de piscamento é diminuída.

A uveíte é uma doença ocular que envolve inflamação da camada média ou úvea do olho, e também pode ser entendida 20 como incluindo qualquer processo inflamatório que envolve o interior do olho. A uveíte inclui formas panuveíticas anterior, intermediária e posterior, com a maioria de casos de uveíte anterior em locais, que envolvem inflamação da íris e da câmara anterior. Essa condição pode ocorrer como um 25 episódio único e diminuir com tratamento apropriado ou pode adquirir uma natureza crônica ou recorrente. Sintomas incluem olho vermelho, conjuntiva injetada, dor e visão diminuída. Sinais incluem vasos ciliares dilatados, presença de células e dilatação na câmara anterior, e precipitados ceráticos na 30 superfície posterior da córnea. A uveíte intermediária inclui inflamação e a presença de células inflamatórias na cavidade vítrea, e a uveíte posterior inclui a inflamação da retina e coroide. A uveíte pode ser secundária a quaisquer dentre várias doenças e desordens, incluindo epiteliopatia pigmentosa placoide multifocal posterior aguda, espondilite anquilosante, doença de Behçet, retinocoroidopatia "birdshot", brucelose, herpes simples, herpes zoster, doença intestinal inflamatória, artrite reumatoide juvenil, doença de Kawasaki, leptospirose, doença de Lyme, esclerose múltipla, artrite psoriática, síndrome de Reiter, sarcoidose, sífilis, lúpus eritematoso sistêmico, toxocaríase, toxoplasmose, tuberculose, síndrome de Vogt-Koyanagi-Harada, doença de Whipple ou poliarterite nodosa.

Em uma modalidade, a invenção é direcionada a métodos de uso de um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção para o tratamento de qualquer uma dentre as síndromes, condições, indicações e doenças oculares anteriores. Tal tratamento pode incluir tratamento por meio de gotas, pomadas, géis, lavagens, implantes, plugues nos olhos ou outros meios e métodos para entregar um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção em uma superfície ocular. 2.7 Isquemia e Síndromes, Condições, Indicações e Doenças Relacionadas.

Isquemia refere-se a qualquer diminuição ou paragem no fornecimento sanguíneo a qualquer órgão corporal, tecido, célula, ou parte, particularmente em que aquela diminuição ou paragem leva a ou possivelmente levaria a dano isquêmico ao órgão corporal, tecido, célula, ou parte. Um "episódio isquêmico" se refere a período transiente ou permanente de isquemia. A isquemia pode resultar de qualquer constrição ou obstrução da vasculatura, ou pode resultar de choque circulatório, como choque hemorrágico, choque hipovolêmico, ou similares. A diminuição ou falta de fluxo sanguíneo resulta em uma diminuição ou falta de oxigênio para a parte afetada do corpo, e também pode resultar em um aumento de produtos químicos mediadores de doença inflamatória como várias citocinas e outras substâncias. Durante determinados procedimentos cirúrgicos como cirurgia cardíaca e transplante de órgãos, o fluxo de sangue é temporariamente interrompido e ' 5 então reiniciado (reperfusão), resultando em lesão de reperfusão de isquemia. Durante um ataque cardíaco, o sangue que supre o coração é interrompido, também resultando em isquemia que pode envolver infarto. O tratamento atual para aliviar ataques cardíacos exige a reperfusão da área 10 isquêmica do coração, como usando-se fármacos trombolíticos ou angioplastia coronária.

A invenção tem aplicação particular na prevenção de danos devido à isquemia renal, incluindo danos pulmonares secundários à isquemia renal, prevenção ou limitação de danos 15 cardíacos isquêmicos subsequentes a um infarto do miocárdio, prevenção ou limitação de danos cerebrais isquêmicos subsequentes a um dano cardiovascular, incluindo sem limitação infarto do miocárdio, derrame ou similares. A neuroproteção é fornecida pela administração de uma 20 composição da invenção a um paciente com isquemia cerebral ou derrame, particularmente os pacientes que são simultaneamente hipotensos. A invenção tem, ainda, aplicação particular em prevenção ou limitação de dano de órgão isquêmico em transplante de órgãos, incluindo transplante do coração, rim, 25 fígado, pulmões, pâncreas ou intestino delgado. Em um aspecto, a composição farmacêutica da presente invenção pode ser utilizada para a perfusão de um órgão transplantado, essa perfusão pode ser anterior, durante ou subsequente ao transplante do órgão.

Em uma modalidade, a invenção é direcionada a métodos de uso de um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção para proteger o coração, cérebro ou outros órgãos de um paciente contra danos causados por isquemia. O efeito protetor contra isquemia ocorre instantaneamente ou dentro de um curto período de tempo seguindo a administração de uma composição que compreende um ou mais dentre os peptideos da presente invenção, preferencialmente dentro de pelo menos 5 cerca de 40 minutos seguindo a administração, mais preferencialmente, dentro de 1 a 20 minutos, mais preferencialmente, dentro de 1 a 15 minutos e, com a máxima preferência, dentro de cerca de 1 a 10 minutos.

A isquemia pode também resultar de qualquer uma dentre uma variedade de doenças ou condições, e em uma modalidade a invenção é direcionada a métodos de uso de um ou mais dentre os peptideos da presente invenção para proteger os órgãos de um paciente contra danos que resultam de isquemia, essa isquemia é causada por uma doença ou condição.

Tal doença ou condição pode incluir, a título de exemplo e não de limitação, doenças ateroscleróticas como ateromas com trombose, embolia do coração ou do vaso sanguíneo de qualquer órgão, vasoespasmo, hipotensão devido a doença cardíaca, hipotensão devido a doença sistêmica incluindo infecção ou reações alérgicas, ou hipotensão que resultam da administração, ingestão ou outra exposição a um ou mais fármacos ou compostos tóxicos. A isquemia também pode ser isquemia secundária, e em outra modalidade a invenção é direcionada a métodos de uso de um ou mais dentre os peptideos da presente invenção para proteger os órgãos de um paciente contra danos que resultam de isquemia secundária. Tal isquemia secundária pode ser secundária a uma doença ou condição como diabetes mellitus, hiperlipidemia, hiperlipoproteinemia, dislipidemia, doença de Buerger, também chamada de tromboangeite obliterante, arterite de Takayasu, arterite temporal, doença de Kawasaki, também chamada de síndrome do linfonodo, doença do nodo mucocutâneo, poliarterite infantil, sífilis cardiovascular, e várias doenças e desordens do decido conjuntivo. 2.8 Lesão de Reperfusão de Isquemia, Síndromes, Condições, Indicações e Doenças Relacionadas.

A reperfusão de isquemia é a interrupção de fluxo sanguíneo a um tecido corporal e a restauração subsequente e frequentemente abrupta de fluxo sanguíneo ao tecido. Enquanto a restauração de fluxo sanguíneo seguindo a isquemia é essencial para preservar o tecido funcional, a reperfusão em si é conhecida por ser prejudicial ao tecido. A isquemia e a reperfusão são conhecidas por serem importantes contribuidoras para necrose de tecido. Diversos mecanismos aparecem para desempenhar um papel causal na geração de dano de tecido associados à lesão de reperfusão de isquemia.

Vários métodos de limitação da lesão de reperfusão foram descritos, como hipotermia induzida, reperfusão controlada, e pré-condicionamento isquêmico. A hipotermia induzida é a indução de hipotermia moderada, considerada por suprimir muitas das reações químicas associadas à lesão de reperfusão. A reperfusão controlada se refere a controlar o período inicial da reperfusão reperfundindo-se o tecido em uma pressão baixa com o uso de sangue que foi modificado para ser hiperosmolar, alcalótico e enriquecido por substrato. O pré-condicionamento isquêmico é a causa proposital de pequenos eventos isquêmicos para ter efeito protetor tornando lento o metabolismo celular durante um evento isquêmico mais longo. Embora esses tratamentos possam ser úteis em contextos cirúrgicos (por exemplo, antes ou após a cirurgia cardíaca planejada), os mesmos não são possíveis em contextos emergenciais.

A invenção tem aplicação particular em prevenção ou limitação da severidade da lesão de reperfusão renal, incluindo danos pulmonares secundários à reperfusão renal, prevenção ou limitação das lesões de reperfusão cardíaca subsequentes a um infarto do miocárdio, prevenção ou limitação das lesões de reperfusão cerebrais subsequentes a um dano cardiovascular, incluindo sem limitação infarto do miocárdio, derrame ou similares. A invenção tem, ainda, * 5 aplicação particular em prevenção ou limitação do dano de órgão de reperfusão em transplante de órgãos, incluindo transplante do coração, rim, fígado, pulmões, pâncreas ou intestino delgado. Em um aspecto, a composição farmacêutica da presente invenção pode ser utilizada para a perfusão de um 10 órgão transplantado, que perfusão pode ser anterior, durante ou subsequentes ao transplante do órgão.

Em uma modalidade, a invenção é direcionada a métodos de uso de um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção para proteger o coração, cérebro ou outros órgãos de 15 um paciente contra danos causados por lesão de reperfusão de isquemia, incluindo danos causados por ou durante a reperfusão. O efeito protetor contra lesão de reperfusão de isquemia ocorre instantaneamente ou dentro de um curto período de tempo seguindo a administração de uma composição 2 0 que compreende um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção, preferencialmente, dentro de pelo menos cerca de 40 minutos seguindo a administração, mais preferencialmente, dentro de 1 a 20 minutos, mais preferencialmente, dentro de 1 a 15 minutos e, com a máxima preferência, dentro de cerca de 25 1 a 10 minutos. 2.9 Choque Circulatório, Síndromes, Condições, Indicações e Doenças Relacionadas.

Peptídeos, composições e métodos da presente invenção podem ser empregados para o tratamento de choque 30 circulatório em um sujeito. As composições e métodos fornecidos no presente documento podem ser empregados para tratar choque de Estágio I, choque de Estágio II ou choque de Estágio III. em uma modalidade particular, os métodos da presente invenção são usados para tratar o estágio inicial do choque, esse estágio inicial do choque é caracterizado por débito cardíaco insuficiente para atender às necessidades metabólicas do corpo, mas não, de outro modo, baixo o 5 suficiente para produzir sintomas significativos. 0 paciente pode estar ansioso e alerta, com respiração aumentada.

"Choque de Estágio I" , às vezes também chamado de "choque compensado" ou "choque não progressivo", significa uma condição que ocorre quando o corpo detecta fluxo sanguíneo diminuído ou perfusão e inicia a ativação de um ou mais dentre vários mecanismos reativos para restaurar perfusão ou fluxo sanguíneo direto aos órgãos corporais mais vitais. 0 choque de Estágio I pode ser assintomático, mas também pode incluir, mas não se limita a, sintomas como baixo fluxo sanguíneo ou perfusão, taxa cardíaca rápida ou aumentada, respiração irregular ou pouco profunda, hipotensão, hipertensão, palidez e cianose.

"Choque de Estágio II", às vezes também chamado de "choque descompensado" ou "choque progressivo", significa uma 20 condição que ocorre quando os mecanismos compensatórios do corpo começam a falhar e a perfusão do órgão não pode ser restaurada ao normal ou mantida. Sintomas de choque de Estágio II incluem, mas não se limitam a, confusão, ansiedade, desorientação e outros distúrbios mentais que indicam uma falta de oxigênio para o cérebro, dores no peito, taxa cardíaca aumentada, oligúria, disfunção múltipla dos órgãos, pressão sanguínea em queda (hipotensão), respiração rápida, fraqueza e dilatação da pupila.

"Choque de Estágio III", às vezes também chamado de "choque irreversível", significa uma condição que ocorre após o estado de perfusão ou fluxo sanguíneo diminuído que existiu por um período em que os órgãos e tecidos do corpo são permanentemente afetados. Tais sintomas incluem, mas não se limitam a, insuficiência múltipla dos órgãos, insuficiência renal, coma, acúmulo de sangue nas extremidades e morte.

A invenção fornece composições para usar e métodos para tratar ou prevenir choque hemorrágico em um paciente, * 5 que incluem administrar uma composição incluindo um ou mais dentre os peptídeos da presente invenção a um paciente diagnosticado como sofrendo de perda de sangue. A perda de sangue pode, não necessariamente, ser medida conforme uma porcentagem do volume sanguíneo do sujeito, como, por 10 exemplo, a perda de sangue acima de cerca de 15% do volume de sangue total, ou acima de 20%, 25%, 30%, 35%, 40% ou 50% de do volume total do sujeito. Alternativamente, a perda de sangue pode, mas não necessita, ser medida em termos de uma gota no volume de sangue em qualquer quantidade suficiente 15 para causar choque hemorrágico em um sujeito particular, como, por exemplo, a perda de cerca de 750 ml, 1.00 0 ml, de cerca de 1.50 0 ml, ou de cerca de 2.000 ml ou mais em um sujeito humano. A perda de sangue também pode ser medida em termos de uma gota na pressão sistólica do sangue, como, por 20 exemplo, uma gota na pressão sistólica do sangue que é cerca de 2 0 mm Hg, 3 0 mm Hg, 4 0 mm Hg, 5 0 mm Hg, 6 0 mm Hg, 7 0 mm Hg, 8 0 mm Hg, 90 mm Hg ou 10 0 mm Hg ou acima de 100 mm Hg abaixo da pressão sistólica do sangue normal do sujeito. Modalidades particulares, o sujeito está se submetendo ou se 25 submeteu a procedimento médico, como, mas não se limitando a, cirurgia, uma transfusão ou parto. Em outras modalidades particulares, o sujeito sofreu um dano traumático, como, mas não se limitando a, que resulta de um acidente de automóvel, de um dano industrial, ou de um ferimento à bala.

Em modalidades adicionais da presente invenção, as composições e métodos são usados para tratar choque cardiogênico, choque hipovolêmico e choque com vasodilatação, cada um dos quais pode ser em qualquer dos estágios de choque mencionados acima. Em uma modalidade particular da presente invenção, os métodos são usados para tratar choque cardiogênico. 0 choque cardiogênico é, de um modo geral, baixo fluxo sanguíneo ou perfusão que é causado por mau funcionamento do coração em que o coração não bombeia adequadamente o sangue. As causas podem incluir qualquer condição que interfere no esvaziamento ou preenchimento ventricular, como, mas não se limitando a, embolia, isquemia, regurgitação e mau funcionamento da válvula. Em outra 10 modalidade particular da presente invenção, os métodos são usados para tratar choque com vasodilatação. O choque com vasodilatação é causado por dilatação venosa ou arterial severa, que resulta em fluxo sanguíneo inadequado. Diversas causas conhecidas contribuem para o choque com vasodilatação 15 incluindo, mas não se limitando a, trauma cerebral, toxicidade por veneno ou fármaco, anafilaxia, insuficiência do fígado, bacteremia e sepse. Em outra modalidade mais particular da presente invenção, os métodos são usados para tratar choque que resultam de sepse ou bacteremia. Em uma 20 modalidade ainda mais particular, as composições e métodos são usados,para tratar choque séptico ou choque bacterêmico no Estágio I, II ou III. Em ainda outra modalidade, as composições e métodos da presente invenção são usados para tratar choque hipovolêmico. Choque hipovolêmico é, de um modo 25 geral, volume intravascular diminuído, essa diminuição no volume intravascular pode ser relativa ou absoluta. A hemorragia a partir de condições como, mas não se limitando a, úlceras, dano gastrointestinal, trauma, acidentes, cirurgia, e aneurisma podem causar choque hipovolêmico; mas a 30 perda de outros fluidos corporais também pode causar choque hipovolêmico. Por exemplo, perda de fluido renal, perda de fluido intravascular, água ou outra perda de fluido peritoneal pode contribuir para choque hipovolêmico. Em uma modalidade particular da presente invenção, as composições e métodos, incluindo a administração de um ou mais dentre os peptideos da presente invenção, são usados para tratar choque hipovolêmico. Em uma modalidade ainda mais particular, as • 5 composições e métodos são usados para tratar choque hipovolêmico no Estágio I, Estágio II ou Estágio III.

Choque circulatório, incluindo choque hemorrágico, também pode resultar de sangramento parcialmente controlado ou descontrolado dentro de um ou mais órgãos internos ou 10 vasos de um paciente. 0 sangramento pode resultar de qualquer causa, incluindo a título de exemplo, de um aneurisma rompido, aorta dissecada, uma úlcera, trauma ou outro gastrointestinal sangramento. Em alguns casos, o paciente exibe sinais de choque circulatório ou hipovolemia, que pode 15 incluir hipotensão, mas a fonte de sangramento interno é desconhecida.

Em uma modalidade, a invenção é direcionada a métodos de uso de um ou mais dentre os peptideos da presente invenção para proteger o coração, cérebro ou outros órgãos de 20 um paciente contra danos causados por choque circulatório. 0 efeito protetor contra choque circulatório ocorre instantaneamente ou dentro de um curto período de tempo seguindo a administração de uma composição que compreende um ou mais dentre os peptideos da presente invenção, 25 preferencialmente dentro de pelo menos cerca de 40 minutos seguindo a administração, mais preferencialmente dentro de 1 a 20 minutos, mais preferencialmente dentro de 1 a 15 minutos, e com a máxima preferência dentro de cerca de 1 a 10 minutos. 2.10 Imageamento Direcionado e Terapia Citotóxica para Melanoma e Outras Indicações.

Peptideos, composições e métodos da presente invenção podem ser empregados para imagear melanoma e outros cânceres ou doenças ou condições caracterizadas, em parte, por expressão de MCR-1 relativamente alta, como por imageamento diagnóstico com o uso de um radionuclídeo em combinação com um peptídeo da presente invenção. Para 5 imageamento diagnóstico, tipicamente um peptídeo da presente invenção é conjugado a um radionuclídeo com o uso de um ligante, como um agente de reticulação que acopla o peptídeo da presente invenção a um radionuclídeo. 0 radionuclídeo é, preferencialmente, um emissor gama que pode ser imageado com 10 o uso de uma câmera ou detector gama, como tomografia computadorizada de emissão de fóton único, ou é um emissor de positrons que pode ser imageado com o uso de tomografia de emissão de positrons. Emissores gama que podem ser assim empregados incluem "raTc, 1:L1In, 123I e 67Ga, entre outros. Emissores de positrons que pode ser assim empregados incluem ∑1C, 13N, 15O e 18F.

Em um aspecto relacionado, peptídeos, composições e métodos da presente invenção podem ser empregados para terapia citotóxica de melanoma, outros cânceres ou doenças ou 20 condições caracterizadas, em parte, por expressão relativamente alta de MCR-1, como utilizando-se um agente quimioterápico, incluindo toxinas, ou agente radioterápico, em combinação com um peptídeo da presente invenção. Agentes quimioterápicos incluem qualquer produto químico ou fármaco 25 antineoplásico, como por exemplo, agentes alquilantes, antimetabólitos, antraciclinas, alcaloides de planta, inibidores de topoisomerase, e outros agentes antitumorais. Exemplos não limitadores de agentes alquilantes incluem cisplatina, carboplatina, oxaliplatina, mecloretamina, 30 ciclofosfamida, clorambucil e ifosfamida; exemplos de antimetabólitos incluem azatioprina e mercaptopurina; exemplos de antraciclinas incluem daunorrubicina, doxorrubicina, epirrubicina, idarrubicina, valrubicina e mitoxantrona; exemplos de alcaloides de planta incluem alcaloides de vinca como vincristina, vinblastina, vinorelbina e vindesina e taxanos como paclitaxel e docetaxel; exemplos de inibidores de topoisomerase incluem 5 camptotecinas como irinotecan e topotecan e topoisomerases tipo II como amsacrina, etoposídeo, fosfato de etoposídeo e teniposídeo. Entretanto, qualquer agente adequado para usar em terapia citotóxica direcionada pode ser assim empregado. Exemplos não limitadores de agentes radioterápicos que podem 10 ser assim empregados incluem 131I, 125I, 211At, 186Re, 188Re, 90Y, 153Sm, 212Bi e 32P, entre outros.

Agentes de terapia citotóxica ou imageamento diagnóstico podem ser incorporados em um peptídeo da presente invenção, por exemplo, como com o uso de 1:LC, 13N, 15O, entre 15 outros, em lugar de isótopos não radioativos; podem ser ligados diretamente a um peptídeo da presente invenção, como por exemplo, por halogenação ou outros métodos de complexação direta; ou podem ser ligados indiretamente a um peptídeo da presente invenção, como conjugação por meio de um ligante ou 20 unidade de quelação. Unidades de ligante são bem conhecidas na técnica, e incluem, mas não se limitam a, conjugados quimicamente ligados incluindo pelo menos uma ligação de dissulfeto, ligação de tioéter ou ligação covalente entre grupos reativos livres. Reagentes de conjugação e reticulação são descritos nas Patentes n2 U.S. 7.169.603, 7.820.164 e 5.443.816 e Publicação n2 U.S. 2009/0297444, entre outras, incorporadas ao presente documento por referência. 3.0 Terapia de Combinação para Certas Indicações.

Os peptídeos, composições e métodos da presente 30 invenção podem ser usados para o tratamento de qualquer uma das doenças dispostas acima, indicações, condições ou síndromes, ou qualquer doença, indicação, condição ou síndrome que seja mediada por MCR-1 ou responsiva, mediante administração em combinação com um ou mais outros compostos farmaceuticamente ativos. Tal administração de combinação pode ser por meio de uma forma de dosagem única que inclui tanto um peptideo da presente invenção quanto mais do que um 5 de outros compostos farmaceuticamente ativos, tal forma de dosagem única inclui a tablete, cápsula, aspersão, pó de inalação, líquido injetável ou similares. Alternativamente, a administração de combinação pode ser por meio de administração de duas formas de dosagem diferentes, com uma 10 forma de dosagem que contém um peptideo da presente invenção, e a outra forma de dosagem inclui outro composto farmaceuticamente ativo. Nesse caso, as formas de dosagem podem ser as mesmas ou diferentes. O termo "coadministrar" indica que cada um de pelo menos dois compostos na terapia de 15 combinação são administrados durante um quadro de tempo em que os períodos respectivos de atividade biológica ou os efeitos se sobrepõem. Assim o termo inclui administração sequencial assim como concorrente de compostos em que um composto é um ou mais dos peptideos da presente invenção. Se 20 mais do que um composto é coadministrado, a rotas de administração dos dois ou mais compostos não precisam ser os mesmos. Sem significar a limitação das terapias de combinação, o seguinte exemplifica certas terapias de combinação que podem ser empregadas. 3.1 Terapia de Combinação com Agentes Anti- Inflamatórios.

Para o tratamento de doenças relacionadas à inflamação, indicações, condições e síndromes, os peptideos da presente invenção podem ser usados na terapia de 3 0 combinação, inclui por meio de coadminis tração, com um ou mais agentes anti-inflamatórios. Uma classe de agente anti- inflamatório é de glucocorticoides, que inclui, mas não se limita a cortisona, incluindo acetato de cortisona, hidrocortisona, prednisona, prednisolona, metilprednisolona, dexametasona, betametasona, triamcinolona, beclometasona, prednisona, acetato de fludrocortisona, acetato de deoxicorticosterona e aldosterona. Outros agentes anti- • 5 inflamatórios que podem ser usados na terapia de combinação, incluindo por coadministração, incluem aspirina, fármacos anti-inflamatórios não esteroidais (NSAIDs) (tais como ibuprofeno e naproxina), inibidores de TNF-a (tais como tenidap e rapamicina ou derivados dos mesmos), ou 10 antagonistas de TNF-a (por exemplo, infliximab, OR1384), inibidores de ciclooxigenase (isto é, inibidores de COX-1 e/ou COX-2 tais como Naproxen® ou Celebrex®), agonistas/antagonistas de CTLA4-lg, antagonistas de ligação de CD4 0, inibidores de IMPDH, tal como micofenolato (CellCept®) , antagonistas de integrina, antagonistas de integrina alfa-4 beta-7, inibidores de adesão de célula, antagonistas de gama interferão, ICAM-1, inibidores de síntese de prostaglandina, budesonida, clofazimina, inibidores de proteínas quinases ativadas por mitógeno p38, 20 inibidores de proteína tirosina quinase (PTK), inibidores de IKK, terapias para o tratamento de síndrome do intestino irritável (por exemplo, abertores Zelmac® e Maxi-K® tais como os apresentados no documento de patente n2 US 6.184.231), ou outros inibidores de NF-KB, tais como corticosteroides, 25 calfostina, CSAIDs, 4-substituído imidazo [1,2-A]quinoxalinas conforme apresentado no documento de patente n2 US 4.200.750; Interleucina-10, salicilatos, óxido nítrico, e outros imunosuppressores; e inibidores de translocação nuclear, tal como deoxispergualina (DSG). 3.2 Terapia de Combinação com Inibidores de Fosfodiesterase.

Para certas aplicações e indicações, é desejável aumentar a produção de e manter os níveis de monofosfato 3',5' adenoise cíclico (cAMP), a mensageiro de nuçleotídeo associado à atividade de célula inflamatória. Os peptídeos da presente invenção aumentam os níveis intracelulares de cAMP, e podem ser coadministrados com os compostos ou substâncias 5 que inibem a degradação de cAMP. cAMP é hidrolisado para uma forma inativa para fosfodiesterase (PDE); compostos ou substâncias que inibem PDE podem através disso resultar na manutenção de e/ou em um aumento de cAMP disponível. Uma classe de compostos conhecidos como inibidores de PDE foi 10 estudada extensivamente para o uso no tratamento de doenças inflamatórias, tais como asma, COPD e síndrome da dificuldade respiratória aguda. Os inibidores preferenciais são do tipo de PDE 1, 2, 3, 4, 7, 8, 10 ou 11; em um aspecto isso inclui inibidores de cAMP e PDE que são tipos seletivos de 15 inibidores de PDE 4 ou inibidores que têm seletividade para um tipo particular de isoenzima de PDE 4, tais como, como forma de exemplo, rolipram, cilomilast, ibudilast, e piclamilast. No geral, os métodos e composições desta invenção podem compreender o uso de um ou mais inibidores de 20 cAMP e PDE descritos em um ou mais das seguinte Patentes ou pedidos de patente US, cada uma das quais é incorporado no presente documento como referência: Pedido de patente n2 US 20090221664, "Pharmaceutical Compositions of Muscarinic Receptor Antagonists"; Pedido de patente n2 US 20090054382, 25 "Compositions of Phosphodiesterase Type IV Inhibitors";

Pedido de patente n2 US 20090017036, "Pharmaceutical Compositions for Treatment of Respiratory and Gastrointestinal Disorders"; Pedido de patente n2 US 20080292562, "Medicaments for Inhalation Comprising PDE IV 30 Inhibitors and Enantiomerically Pure Glycopyrrolate Salts";

Pedido de patente n2 US 20080085858, "Pharmaceutical Composition"; Pedido de patente n2 US 20080045718, "Process and intermediates for the synthesis of 2-(quinolin-5-yl)-4,5 disubstituted-azole derivatives"; Pedido de patente n2 US 20070287689, "Therapeutic and/or Preventive Agents for Chronic Skin Diseases"; Pedido de patente n2 US 20060239927, "Drug for airway administration"; documento de patente n2 US 5 7.544.675, "Chemical compounds with dual activity, processes for their preparation and pharmaceutical compositions"; documento de patente n2 US 7.459.451, "Pyrazolopyridine derivatives"; documento de patente n2 US 7.317.009, "Pyrazolopyridine derivatives"; documento de patente n2 US 10 7.312.328, "Benzoylpyridazines"; documento de patente n2 US 7.153.854, "Pyrrolopyridazine derivatives"; documento de patente n2 US 7.115.623, "PDE IV inhibitors"; documento de patente n2 US 6.924.292, "Furoisoquinoline derivatives, process for producing the same and use thereof"; Documento de patente n2 US 6.872.382, "Use of selective PDE IV inhibitors to treat dry eye disorders"; Documento de patente n2 US 6.765.095, "2,3-disubstituted pyridine derivative, process for the preparation thereof, pharmaceutical composition containing the same, and intermediate therefor"; Documento de patente n2 US 6.740.662, "Naphthyridine derivatives";

Documento de patente n2 US 6.683.186, "2,3-Disubstituted pyridine derivative, process for the preparation thereof, pharmaceutical composition containing the same, and intermediate therefor"; Documento de patente n2 US 6.656.959, 25 "PDE IV inhibiting pyridine derivatives"; Documento de patente n2 US 6.642.250, "1,8-naphthyridin-2(1H)-one derivatives"; Documento de patente n2 US 6.555.557, "2,3- disubstituted pyridine derivatives, process for the preparation thereof, drug compositions containing the same 30 and intermediates for the preparation"; Documento de patente n2 US 6.440.979, "Aryl isoguanines"; Documento de patente n2 US 6.436.965, "PDE IV inhibiting amides, compositions and methods of treatment"; Documento de patente n2 US 6.417.190,

"Tricyclic nitrogen heterocycles as PDE IV inhibitors"; Documento de patente n2 US 6.413.975, "Purine derivatives having phosphodiesterase IV inhibition activity"; Documento de patente n2 US 6.403.805, "1,3-dihydro-l-(phenylalkyl)-2H- imidazol-2-one derivatives"; Documento de patente n2 US 6.372.770, "Benzoxazoles"; Documento de patente n2 US 6.365.606, "6,5-fused aromatic ring systems having enhanced phosphodiesterase IV inhibitory activity"; Documento de patente n2 US 6.310.205, "Hypoxathine compounds"; Documento de patente n2 US 6.306.583, "Human brain phosphodiesterase"; Documento de patente n2 US 6.268.373, "Trisubstituted thioxanthines"; Documento de patente n2 US 6.248.769, "Phenyl-triazole compounds for PDE-IV inhibition"; Documento de patente n2 US 6.248.768, "Benzimidazole derivatives and pharmacologically acceptable salts thereof"; Documento de patente n2 US 6.248.746, "3 -(arylalkyl) xanthines";

Documentos de patente n2 US 6.211.222 e 6.127.398, "Substituted indazole derivatives and related compounds";

Documento de patente n2 US 6.211.203, "Benzofuran-4- carboxamides"; Documento de patente n2 US 6.200.993, "Heterosubstituted pyridine derivatives as PDE4 inhibitors"; Documento de patente n2 US 6.191.138, "Phenanthridines";

Documento de patente n2 US 6.180.650, "Heterosubstituted pyridine derivatives as PDE4 inhibitors"; Documento de patente n2 US 6.136.821, "Naphthyridine derivatives";

Documento de patente n2 US 6.054.475, "Substituted dihydrobenzofuran-based phosphodiesterase 4 Inhibitors useful for treating airway disorders"; Documento de patente n2 US 6.043.263, "2,3-dihydrobenzofuranyl)-thiazoles as phosphodiesterase inhibitors"; Documento de patente n2 US 6.011.037, "Thiazole derivatives with phosphodiesteraseinhibiting action"; Documento de patente n2 US 5.972.927, "Diazepinoindoles as phosphodiesterase 4 inhibitors";

Documento de patente n2 US 5.919.801, "N-substituted piperidines as PDE4 inhibitors"; Documento de patente n2 US 6.204.275, "PDE IV Inhibiting compounds, compositions and methods of treatment"; Documento de patente n2 US 6.143.782, * 5 "Anti-inflammatory and anti-asthma treatment with reduced side effects"; Documento de patente n2 US 6.103.749, "Aryl imidazole compounds having phosphodiesterase IV activity"; Documento de patente n2 US 6.096.768, "Compounds containing phenyl linked to aryl or heteroaryl by an aliphatic or

O heteroatom containing linking group"; Documento de patente n2 US 6.075.016, "6,5-fused aromatic ring systems having enhanced phosphodiesterase IV inhibitory activity"; Documento de patente n2 US 6.040.447, "Purine compounds having PDE IV inhibitory activity and methods of synthesis"; Documento de patente n2 US 6.034.089, "Aryl thiophene derivatives as PDE IV inhibitors"; Documento de patente n2 US 6.020.339, "Aryl furan derivatives as PDE IV inhibitors"; Documento de patente n2 US 5.935.978, "Compounds containing phenyl linked to aryl or heteroaryl by an aliphatic or heteroatom containing linking group"; Documento de patente n2 US 5.935.977, "Substituted vinyl pyridine derivative and drugs containing same"; Documento de patente n2 US 5.840.724, "Compounds containing phenyl linked to aryl or heteroaryl by an aliphatic or heteroatom containing linking group"; Documento de patente n2 US 5.710.170, "Tri-aryl ethane derivatives as PDE IV inhibitors"; Documento de patente n2 US 5.710.160, "Diphenyl pyridyl ethane derivatives as PDE IV inhibitors"; Documento de patente n2 US 5.698.711, "Compounds containing phenyl linked to aryl or heteroaryl by an aliphatic or heteroatom containing linking group"; Documento de patente n2 US 5.691.376, "Substituted biphenyl derivatives"; Documento de patente n2 US 5.679.696, "Compounds containing phenyl linked to aryl or heteroaryl by an aliphatic or heteroatom containing linking group"; Documento de patente n2 US 5.665.737, "Substituted benzoxazoles"; Documento de patente n2 US 5.650.444, "Substituted biphenyl derivatives"; Documento de patente n2 US 5.616.614, "Naphthylalkylamines";

Documento de patente n2 US 5.541.219, "1-Alkoxy-2-(alkoxy or cycloalkoxy)-4-(cyclothio- alkyl or cyclothioalkenyl)benzenes as inhibitors of cyclic AMP phosphodiesterase and tumor necrosis factor"; Documento de patente n2 US 5.502.072, "Substituted oxindoles"; Documento de patente n2 US 5.466.697, "8-phenyl-1,6-naphthyri-dine-5-ones"; Documento de patente n2 US 5.459.151, "N-acyl substituted phenyl piperidines as bronchodilators and anti-inflammatory agents"; Documento de patente n2 US 5.393.788, "Phenylalkyl oxamides"; Documento de patente n2 US 5.356.923, "l-hydroxy-4(3- cyclopentyloxy-4-methoxyphenyl)-2-pyrrolidone and antihypertensive use thereof"; Documento de patente n2 US 5.250.700, "Phenyl pyrazolidinones as bronchodilators and anti-inflammatory agents"; Documento de patente n2 US 5.191.084, "Phenyl pyrazolidinones as bronchodilators and anti-inflammatory agents"; Documento de patente n2 US 5.124.455, "Oxime carbamates and oxime carbonates as bronchodilators and anti- inflammatory agents"; Documento de patente n2 US 6.180.791, "Synthesis of 8 - substituted xanthines"; Documento de patente n2 US 6.057.369, "Substituted (aryl, heteroaryl, arylmetil ou heteroarylmetil)hydroxamic acid compounds"; Documento de patente n2 US 5.541.219, "1-Alkoxy-2-(alkoxy or cycloalkoxy)- 4-(cyclothioalkyl or cyclothioalkenyl)benzenes as inhibitors of cyclic AMP phosphodiesterase and tumor necrosis factor";

Documento de patente n2 US 5.362.915, "Phenyl substituted cycloalkenyl compounds useful as PDE IV inhibitors"; Documento de patente n2 US 6.040.329, "Substituted indazole analogs"; Documento de patente n2 US 5.958.953, "Substituted indazole derivatives"; Documento de patente n2 US 6.090.817, "Phenylpyridine derivatives useful as phosphodiesterase inhibitors"; Documento de patente n2 US 5.922.740, "Heterocyclylcarbonyl substituted benzofuranylureas";

Documento de patente n2 US 5.866.571, "9-substituted 2-2-n- alkoxyphenyl)-purin-6-ones-"; Documento de patente n2 US 5.861.404, "2,9-disubstituted purin-6-ones"; Documento de patente n2 US 5.861.396, "Purin-6-one derivatives"; Documento de patente n2 US 5.721.238, "2,8-disubstituted quinazolinones"; Documento de patente n2 US 5.723.463, "Pyrido 3,2-Pyrazinones with Anti-asthmatic action and Processes for their Manufacture"; e Documento de patente n2 US 5.596.013, "Dihydro pyrazolopyrroles." 3.3 Terapia de combinação em Indicações oculares.

Para indicações oculares, uma forma oftamológica de dosagem pode incluir um ou mais ingredientes ativos adicionalmente a um ou mais dos peptídeos da presente invenção, tais como por exemplo componentes de lágrima artificial, corticosteroides tópicos, fármacos anti- 20 infamatórios não esteroidais, ou inibidores de calcineurina tal como ciclosporina-A (Restasis® - Allergan). Também é possível que a coadministração inclua a administração de um ou mais compostos adicionais dados separadamente de um peptídeo da presente invenção, tal como administração separada de uma forma oftálmica de dosagem inclui um componente de lágrima artificial, um corticosteroide tópico, fármacos anti-infamatórios não esteroidais, um inibidor de calcineurina tal como ciclosporina-A, ou uma combinação de quaisquer dos dispostos acima.

Soluções oftálmicas de combinação que podem ser empregadas incluem especificamente soluções que incluem mais do que um ingrediente farmacêutico ativo. Em um aspecto, um fármaco anti-inflamatório não esteroidal(NSAID) é empregado em combinação com um peptídeo da presente invenção. NSAIDs adequados para o uso em soluções oftálmicas de combinação incluem agentes, seus ésteres e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos que inibem a enzima cicloxigenase 5 (COX)-1 e/ou -2, inclui, mas não está limitado a, compostos de ácido propiônico tais como naproxeno, flurbiprofeno, oxaprozina, ibuprofeno, cetoprofeno, fenoprofeno; trometamina de cetorolac; derivados de ácido acético tais como sulindac, indometacina, e etodolac; ácidos fenilacéticos tais como 10 diclofenaco, bromfenaco, e suprofeno; pró-fármacos arilacéticos tais como nepafenaco, e amfenaco; ácidos salicíclicos, tais como aspirina, salsalato, diflunisal, trisalicilato de magnésio colina; derivados de para- aminofenol tais como acetaminofeno; naftilalcanonas tal como 15 nabumetona; derivados de ácido enólico tais como piroxicam e meloxicam; femanates tais como ácido mefenâmico, meclofenamato e ácido flufenâmico; ácidos pirroleacéticos tal como tolmetina; e pirazóis tal como fenilbutazona; e inibidores seletivos de COX-2 tais como celecoxib, 20 valdecoxib, parecoxib, etoricoxib, e luaricoxib. As soluções oftálmicas podem compreender adicionalmente outros ingredientes ativos, incluem, mas não estão limitadas à, vasoconstritores, agentes antialérgicos, anti-infeccioso, esteroides, anestésicos, anti-inflamatórios, analgésicos, agentes de tratamento de olho seco (por exemplo secretagogas, mucomiméticos, polímeros, lipídeos, antioxidantes), e similares, ou ser administrado conjuntamente (simultaneamente ou sequencialmente) com composições farmacêuticas que compreendem outros ingredientes ativos, inclui, mas não está 30 limitado a, vasoconstritores, agentes antialérgicos, anti- infeccioso, esteroides, anestésicos, anti-inflamatórios, analgésicos, agentes de tratamento para olho seco (por exemplo secretagogas, mucomiméticos, polímeros, lipídios, antioxidantes), e similares. 3.4 Terapia de combinação em indicações relacionadas ao choque.

Os métodos de tratamento ou prevenção de choque 5 circulatório da presente invenção referem-se também a coadministração um ou mais substâncias no sujeito adicionalmente a um ou mais dos peptideos da presente invenção. Por exemplo, um ou mais dos peptideos da presente invenção podem ser coadministrados com androstenetriol, 10 androstenediol ou derivados dos mesmos, vários agonistas vasopressina, ou outras substâncias farmaceuticamente ativas, tais como catecolaminas ou outros agonistas adrenergéticos a, agonistas adrenergéticos a2/ agonistas adrenergéticos β ou agonistas adrenergéticos β2, incluem mas não estão limitados 15 à epinefrina, norepinefrina, dopamina, isoproterenol, vasopressina e dobutamina. Alternativamente, um ou mais dos peptideos da presente invenção podem ser coadministrados com fluídos ou outras substâncias que são capazes de aliviar, atenuar, prevenir ou remover os sintomas em um sujeito que 20 sofre de, exibe os sintomas de, ou no risco de sofrer de choque hipovolêmico, choque vasodilatador ou choque cardiogênico. Tipos de fluídos que podem ser coadministrados com um ou mais dos peptideos da presente invenção deveriam ser específicos para as circunstâncias que envolvem o sujeito 25 particular que está sofre de, exibe os sintomas de, ou no risco de sofrer choque. Por exemplo, os fluídos que podem ser coadministrados com um ou mais dos peptideos da presente invenção incluem, mas não estão limitados a, soluções de sal - tais como cloreto de sódio e bicarbonato de sódio -- assim 30 como sangue integral, substitutos sintéticos de sangue, plasma, soro, albumina de soro e soluções coloidais. Soluções coloidais incluem, mas não estão limitados a, soluções que contém hetastarch, albumina ou plasma. Em uma modalidade particular da presente invenção, fluídos tal como uma ou mais soluções de sal, soluções coloidais, sangue integral, substitutos sintéticos de sangue, plasma ou soro são coadministrados com um ou mais dos peptídeos da presente invenção em pacientes que sofrem de ou exibem os sintomas de um choque hipovolêmico, tal como choque hemorrágico.

As modalidades particulares dos métodos de coadministração da presente invenção incluem métodos de executar uma transfusão em um sujeito, e os métodos de transfusão compreendem fornecer sangue ou substitutos sintéticos de sangue que compreendem um ou mais dos peptídeos da presente invenção a um sujeito. 0 sangue usado nos métodos de transfusão pode ser sangue integral, substitutos sintéticos de sangue, ou qualquer porção fracionada de sangue integral, tais como plasma, soro, ou células de sangue vermelhas. 4.0 Métodos de Administração e Uso.

O método de administração e uso varia dependendo da característica dos peptídeos específicos da presente invenção, a doença, indicação, condição ou síndrome a ser tratada, e outros fatores conhecidos pelos versados na técnica. No geral, qualquer método de administração e uso conhecido na técnica ou desenvolvido doravante pode ser empregado com os peptídeos da presente invenção. Sem limitar o disposto acima, os seguintes métodos de administração e uso têm aplicação específica. 4.1 Uso de Inalação.

Em um aspecto, a composição inclui um ou mais peptídeos da presente invenção é formulada para a administração ao trato respiratório, tal como na forma de um aerossol ou solução para um nebulizador, ou como um pó microfino para insuflação ou inalação (por exemplo, topicamente para o pulmão e/ou vias aéreas) , por si só ou em combinação com um ou mais carreadores inertes ou ingredientes * farmacêuticos ativos adicionais, e na forma de uma solução, . uma suspensão, um aerossol ou uma formulação de pó seco.

Consulte geralmente, Cryan, S.-A., "Carrier-based strategies ’ 5 for targeting protein and peptide drugs to the lungs", The AAPS Journal 7:E20-41 (2005). Em geral, os peptídeos da « presente invenção podem ser usados nos dispositivos, formulações, composições e meios descritos em um ou mais das seguintes patentes ou pedidos de patente US, cada uma das 10 quais é incorporado no presente documento como referência:

Pedido de patente n- US 20090241949, "Dry powder inhalation system"; Pedido de patente n2 US 20080066741, "Methods and systems of delivering medication via inhalation"; Pedido de patente n2 US 20070298116, "Amorphous, spray-dried powders 15 having a reduced moisture content and a high long term stability"; Pedido de patente n2 US 20070140976, "Aqueous inhalation pharmaceutical composition"; Pedido de patente n2 US 20060054166, "Inhalation nebulizer"; Pedido de patente n2 US 20050211244, "Dry powder preparations"; Pedido de patente 20 n2 US 20050123509. "Modulating charge density to produce improvements in the characteristics of spray-dried proteins"; Pedido de patente n2 US 20040241232, "Dry powder medicament formulations"; Documento de patente n2 US 7.582.284, "Particulate materials"; Documento de patente n2 US 25 7.481.212, "Increased dosagem metered dose inhaler";

Documento de patente n2 US 7.387.794, "Preparation of powder , agglomerate"; Documento de patente n2 US 7.258.873, "Preservation of bioactive materials by spray drying"; • Documento de patente n2 US 7.186.401, "Dry powder for inhalation"; Documento de patente n2 US 7.143.764, "Inhalation device"; Documento de patente n2 US 7.022.311, "Powdery inhalational preparations e process for producing the same"; Documento de patente n2 US 6.962.151, "Inhalation nebulizer"; Documento de patente n2 US 6.907.880, "Inhalation device"; Documento de patente n2 US 6.881.398, "Therapeutic dry powder preparation"; Documento de patente n2 US 6.698.425, "Powder inhaler"; Documento de patente n2 US 5 6.655.380, "Inhalation device"; Documento de patente n2 US 6.645.466, "Dry powder for inhalation"; Documento de patente n2 US 6.632.456, "Compositions for inhalation"; Documento de patente n2 US 6.610.272, "Medicinal aerosol formulation";

Documento de patente n2 US 6.596.261, "Method of administering a medicinal aerosol formulation"; Documento de patente n2 US 6.585.957, "Medicinal aerosol formulation";

Documento de patente n2 US 6.582.729, "Powered pharmaceutical formulations having improved dispersibility"; Documento de patente n2 US 6.572.893, "Systems and processes for spray drying hydrophobic drugs with hydrophilic excipients"; Documento de patente n2 US 6.551.578, "Modulated release particles for aerosol delivery"; Documento de patente n2 US 6.520.179, "Inhalation device"; Documento de patente n2 US 6.518.239, "Dry powder compositions having improved dispersivity"; Documento de patente n2 US 6.503.481, "Compositions for aerosolization and inhalation"; Documento de patente n2 US 6.358.530, "Powdered pharmaceutical formulations having improved dispersibility"; Documento de patente n2 US 6.325.061, "Inhalation device"; Documento de patente n2 US 6.257.232, "Inhalation device"; Documento de patente n2 US 6.187.344, "Powdered pharmaceutical formulations having improved dispersibility"; Documento de patente n2 US 6.116.237, "Methods of dry powder inhalation"; Documento de patente n2 US 5.934.272, "Device and method of creating aerosolized mist of respiratory drug"; e Documento de patente n2 US 5.558.085, "Intrapulmonary delivery of peptide drugs".

Assim, a composição pode ser uma composição de pó seco para entrega tópica para o pulmão mediante inalação. Tipicamente a composição poderia conter uma mistura de pó para inalação de um peptídeo da presente invenção e uma base de pó adequada, a substância diluente ou carreadora tais como 5 lactose, glicose, dextrano, manitol ou outro sugar ou amido.

A composição pode ser usada em qualquer variedade de dispositivos de pó seco, tais como um inalador de pó seco com reservatório, um inalador de pó seco com múltiplas doses, ou a inalador dose com medidor. A composição pode incluir 10 excipientes adicionais, tais como um álcool, um tensoativo, um lubrificante, um antioxidante ou um agente estabilizante. Propelentes adequados incluem propelentes de hidrocarboneto, clorofluorocarbono e de hidrofluoroalcano, ou misturas de quaisquer de tais propelentes. Soluções de inalação também podem ser formuladas em um propelente liquefeito para entrega por aerossol, tal como com um inalador de dose medida pressurizada. Em ainda outra formulação, as soluções podem estar na forma de uma suspensão ou solução aquosa nebulizada, com ou sem um pH adequado ou 20 ajuste de tonicidade, ou como um dispositivo de dose única ou de múltiplas doses. 4.2 Uso de Injeção Subcutânea.

Em um aspecto, em que uma composição inclui um ou mais peptídeos da presente invenção é formulada para injeção 25 subcutânea, e uma injeção subcutânea é aplicada uma ou mais vezes a cada dia, preferencialmente antes das refeições, mais preferencialmente entre cerca de uma a três horas antes de um meio. Em outro aspecto, a composição é formulada como uma formulação de liberação prolongada injetável. Em uma 30 modalidade, um peptídeo da presente invenção é formulado com um polietileno glicol, tal como polietileno glicol 3350, e opcionalmente um ou mais excipientes adicionais e conservantes, incluem, mas não estão limitados a excipientes tais como sais, polisorbato 80, hidróxido de sódio ou ácido hidroclórico para ajustar o pH, e similares. Em outra modalidade um peptídeo da presente invenção é formulado com um poli(orto éster), que pode ser um poli(orto éster) 5 autocatalisado com qualquer porcentagem variável de ácido lático na cadeia principal polimérica e, opcionalmente, um ou mais excipientes adicionais. Em uma modalidade polímero poli (D,L-lactídeo-co-glicolídeo) (polímero PLGA) é empregado, preferencialmente um polímero PLGA com um grupo de 10 extremidade hidrofílica, tal como PLGA RG502H da Boehringer Ingelheim, Inc. (Ingelheim, Alemanha). Tais formulações podem ser feitas, por exemplo, mediante a combinação de um peptídeo da presente invenção em um solvente adequado, tal como metanol, com uma solução de PLGA em cloreto de metilleno, e 15 pela adição a isso de uma solução de fase contínua de álcool polivinílico em condições de misturação adequadas em um reator. No geral, inúmeros polímeros injetáveis e biodegradáveis, que são preferencialmente também polímeros adesivos, podem ser empregados em uma formulação injetável de 20 liberação prolongada. Os ensinamentos das Patentes n° US 4.938.763, US 6.432.438 e US 6.673.767, e os polímeros biodegradáveis e os métodos de formulação apresentados neste documento, são incorporados no presente documento como referência. A formulação pode ser tal que uma injeção seja 25 necessária em uma base semanal, mensal ou outra base periódica, dependendo da concentração e da quantidade de peptídeo, a taxa de biodegradação do polímero, e outros fatores conhecidos pelos os versados na técnica. 4.3 Métodos de Administração e Uso para Choque 30 Circulatório e Doenças, Indicações, Condições e Síndromes relacionadas.

Em ainda outro aspecto, a invenção inclui métodos que opcionalmente incluem monitorar o sujeito para os sintomas de choque circulatório tanto antes quanto depois da administração de uma composição farmacêutica inclui um ou mais dos peptideos da presente invenção. Assim, um sujeito pode ser administrado com um ou mais dos peptideos da • 5 presente invenção por um dos métodos da invenção após sofre um ferimento que provavelmente induzirá um choque circulatório, mas antes da manifestação de sintomas claros de choque cardiovascular, inclui antes da manifestação de choque circulatório no Estágio I, Estágio II ou no Estágio III.

Quando a administração é para o propósito de tratamento, um ou mais dos peptideos da presente invenção são fornecidos no momento, ou após o início de um sintoma de choque. A administração terapêutica de um ou mais dos peptideos da presente invenção pode servir adicionalmente 15 para atenuar qualquer sintoma, ou prevenir que sintomas adicionais surjam. Quando a administração é para os propósitos de prevenir choque ("administração profilática"), um ou mais dos peptideos da presente invenção são fornecidos antecipadamente a qualquer sintoma visível ou detectável. A administração profilática de um ou de mais dos peptideos da presente invenção serve para atenuar sintomas que surgem subsequentemente ou prevenir que os sintomas surjam no geral. A rota de administração de um ou mais dos peptideos da presente invenção inclui, mas não está limitada a, tópica, 25 transdérmica, intranasal, pulmonar, vaginal, retal, oral, subcutânea, intravenosa, intra-arterial, intramuscular, intraóssea, intraperitoneal, epidural e intratecal. 4.4 Métodos de Administração e Uso para Terapia Profilática.

A invenção refere-se também aos métodos de prevenir expressão de citoquina não desejada mediante a administração a quantidade terapeuticamente efetiva de um ou mais dos peptideos da presente invenção ao sujeito, antes ou imediatamente no início dos primeiros sintomas. Conforme usado neste, o termo "prevenir", conforme este se refere ao • choque, indica que uma substância da presente invenção é administrada a um sujeito para proibir um ou mais sintomas de • 5 choque de aparecer detectável ou para atenuar os efeitos de um ou mais sintomas de choque. 0 termo "prevenir" também V abrange proibir ou limitar citoquina excessiva ou a expressão não desejada, tal como com a "tempestade de citocina". Assim um sujeito pode ser "pré-tratado", tal como um sujeito em um 10 cenário cirúrgico, mediante o uso as substâncias da presente invenção para prevenir a expressão de citoquina não desejada ou o choque de surgir. A frase "previne o progresso", conforme a mesma se relaciona ao choque, é usada para significar um procedimento projetado para proibir a aparição 15 detectável de um ou mais sintomas adicionais de choque em um paciente que já exibe um ou mais sintomas de choque, e também é usado para significar a proibição que os sintomas já presentes de choque piorem no sujeito. Os sintomas de choque que estão incluídos nos métodos preventivos da presente 20 invenção incluem, mas não estão limitados a, tais sintomas de choque conforme enfatizados neste documento, tais como taquicardia, respiração superficial ou errática e morte. Um sujeito que está em risco de choque pode ser reconhecido com base nas circunstâncias específicas que envolvem um sujeito.

De maneira similar, um paciente com uma infecção bacteriana ou virai e que exibe febre ou pressão sanguínea baixa também pode estar em risco de expressão excessiva de citocina, choque ou uma doença ou condição inflamatória.

Nas modalidades adicionais da presente invenção, os métodos são usados para prevenir o choque cardiogênico, choque hipovolêmico e choque vasodilatador, cada um dos quais pode estar em qualquer um dos estágios acima mencionados de choque. Em uma modalidade particular da presente invenção, os métodos são usados para prevenir choque cardiogênico. Em outra modalidade particular da presente invenção, os métodos são usados para prevenir choque vasodilatador. Em outra modalidade mais particular da presente invenção, os métodos 5 são usados para prevenir choque sepsia ou bacteriemia resultante disso. Em uma modalidade ainda mais particular, os métodos são usados para prevenir choque séptico ou choque bacterêmico no Estágio I, II ou III choque. Em ainda outra modalidade, os métodos da presente invenção são usados para 10 prevenir o choque hipovolêmico.

Similar aos métodos para tratar o choque descrito neste documento, uma modalidade dos métodos de prevenir choque da presente invenção compreende a coadministração de outra substância com um ou mais dos peptídeos da presente 15 invenção ou a derivados dos mesmos. O escopo da invenção não é limitado pela identidade da substância que pode ser coadministrado com um ou mais dos peptídeos da presente invenção para prevenir o choque. Por exemplo, um ou mais dos peptídeos da presente invenção podem ser coadministrados com 20 androstenetriol, androstenediol ou derivados dos mesmos, vários agonistas de vasopressina, ou outras substâncias farmaceuticamente ativas, tais como catecolaminas ou outros agonistas adrenergéticos a, agonistas adrenergéticos a2, agonistas adrenergéticos β ou agonistas adrenergéticos β2, 25 incluem mas não estão limitados à epinefrina, norepinefrina, dopamina, isoproterenol, vasopressina e dobutamina, para prevenir choque.

Alternativamente, um ou mais dos peptídeos da presente invenção podem ser coadministrados com fluídos ou 30 outras substâncias que são capazes de prevenir ou remover os sintomas em um sujeito no risco de sofrer de choque hipovolêmico, choque vasodilatador ou choque cardiogênico. Os tipos de fluído que podem ser coadministrados com um ou mais dos peptideos da presente invenção para prevenir o choque deveriam ser especificos para as circunstâncias que circundam o sujeito particular que está em risco de sofrer choque. Por exemplo, os fluidos que podem ser coadministrados com um ou 5 mais dos peptideos da presente invenção incluem, mas não estão limitados a, soluções de sal - tais como cloreto de sódio e bicarbonato de sódio -- assim como sangue integral, substitutos sintéticos de sangue, plasma, soro, soro albumina e soluções coloidais. Soluções coloidais incluem, mas não 10 estão limitados a, soluções que contém hetastarch, albumina ou plasma. Em uma modalidade particular da presente invenção, os fluidos incluem um ou mais soluções de sal, soluções coloidais, sangue integral, substitutos sintéticos de sangue, plasma ou soro são coadministrados com um ou mais dos 15 peptideos da presente invenção ou um derivado dos mesmos em sujeitos com risco de sofrer um choque hipovolêmico, tal como choque hemorrágico. 4.5 Métodos de Administração e Uso para Aplicações, Doenças, Indicações, Condições e Sindromes 20 relacionadas à inflamação.

Em ainda outro aspecto, a invenção inclui métodos que opcionalmente incluem monitorar o sujeito para sinais ou sintomas de inflamação, doenças inflamatórias ou condições inflamatórias tanto antes quanto depois administração de um 25 ou mais dos peptideos da presente invenção. Assim, um sujeito pode ser administrado um ou mais dos peptideos da presente invenção por um dos métodos da invenção após ser diagnosticado com uma condição, doença ou síndrome provável de induzir uma resposta inflamatória, mas antes da manifestação de sintomas claros de inflamação, doença inflamatória ou condição inflamatória. Os métodos de tratamento ou prevenção de inflamação, doenças inflamatórias ou condições inflamatórias descritas neste documento compreendem administrar uma quantidade terapeuticamente efetiva de um ou mais dos peptídeos da presente invenção a um sujeito. Conforme usado neste, o termo "administrar" e "administração" são usados para significar a introdução de 5 pelo menos um composto em um sujeito. Quando a administração é para o propósito de tratamento, a substância é fornecida em, ou após o início de, um sinal ou sintoma de inflamação, doença inflamatória ou condição inflamatória. A administração terapêutica dessa substância serve para atenuar qualquer 10 sintoma, ou prevenir que sintomas adicionais surjam. Quando a administração é uma administração profilática para os propósitos de prevenir ou limitar a inflamação, a doença inflamatória ou uma condição inflamatória, uma composição farmacêutica inclui um ou mais dos peptídeos da presente 15 invenção é fornecida antecipadamente a qualquer sintoma visível ou detectável. A administração profilática de um ou mais dos peptídeos da presente invenção serve para atenuar os sintomas que surgem subsequentemente ou prevenir que os sintomas surjam no geral. A rota de administração de um ou 20 mais dos peptídeos da presente invenção inclui, mas não estão limitados a, tópica, transdérmica, intranasal, pulmonar, vaginal, retal, oral, subcutânea, intravenosa, intraarterial, intramuscular, intraóssea, intraperitoneal, epidural e intratecal. 4.6 Métodos de Administração e Uso para Doenças Oculares, Indicações, Condições e Síndromes.

Para aplicações oculares, em um aspecto um ou mais dos peptídeos da presente invenção são formuladas e,m uma forma oftálmica de dosagem e administrada na forma de gotas 30 de olho, lavagens de olho ou por meio de sistemas de entrega oculares. Emulsões, unguentos, géis, insertos oculares, insertos oculares biodegradáveis, lipossomas, micropartículas, nanopartículas, nanoesferas ou formulações de pareamento de ions também podem ser empregadas, que podem, em alguns casos, resultar no aumento dos tempos de residência ocular de um peptídeo da presente invenção. Em uma modalidade, a formulação oftálmica é uma solução que inclui 5 entre cerca de 0,0000001% e cerca de 5% (p/v) de um peptídeo da presente invenção ou um sal dos mesmos, alternativamente entre cerca de 0,000001% e cerca de 0,2% (p/v) de um peptídeo da presente invenção ou um sal dos mesmos, ou alternativamente entre cerca de 0,00001% e cerca de 0,2% 10 (p/v) de um peptídeo da presente invenção ou um sal dos mesmos. 5.0 Métodos de Fabricação.

Em geral, os peptídeos da presente invenção podem ser sintetizados por síntese de fase sólida e purificados, de 15 acordo com métodos conhecidos na técnica. Qualquer um de vários procedimentos bem conhecidos que utilizam uma variedade de resinas e reagentes podem ser usados para preparar os peptídeos da presente invenção.

Os peptídeos cíclicos da presente invenção podem 20 ser prontamente sintetizados por procedimentos convencionais conhecidos para a formação de uma ligação de peptídeo entre aminoácidos. Tais procedimentos convencionais incluem, por exemplo, qualquer procedimento de fase de solução que permite uma condensação entre o grupo alfa-amino livre de um 25 aminoácido ou resíduo do mesmo que tem seu grupo carboxila e outros grupos reativos protegidos e o grupo carboxila primário livre de outro aminoácido ou resíduo do mesmo que tem seu grupo amino ou outros grupos reativos protegidos. Em um procedimento convencional preferencial, os peptídeos 30 cíclicos da presente invenção podem ser sintetizados por síntese de fase sólida e purificados, de acordo com métodos conhecidos na técnica. Qualquer um de vários procedimentos bem conhecidos que utilizam uma variedade de resinas e reagentes podem ser usados para preparar os peptideos da presente invenção.

O processo para sintetizar os peptideos ciclicos pode ser realizado por um procedimento, segundo o qual cada 5 aminoácido na sequência desejada é adicionado um de cada vez em sucessão a outro aminoácido ou residue do mesmo ou por um procedimento, segundo o qual fragmentos de peptideo com a sequência de aminoácidos desejada são primeiramente sintetizados de forma convencional e então condensados para 10 fornecer o peptideo desejado. O peptideo resultante é então ciclizado para render um peptideo ciclico da invenção.

Métodos de sintese de peptideo de fase sólida são bem conhecidos e praticados na técnica. Em tais métodos, a síntese de peptideos da invenção pode ser realizada ao 15 incorporar, de forma sequencial, os resíduos de aminoácido desejados um de cada vez no interior da cadeia de peptideo em crescimento, de acordo com os princípios gerais de métodos de fase sólida. Esses métodos são revelados em numerosas referências, sendo que inclui Merrifield, R.B., "Solid phase 20 synthesis (Nobel lecture)," Angew Chem 24:799 a 810 (1985) e Barany et al., The Peptides, Analysis, Synthesis and Biology, Vol. 2, Gross, E. e Meienhofer, J., Eds. Academic Press 1 a 284 (1980) .

Em síntese química de peptideos, grupos de cadeia 25 lateral reativa dos diversos resíduos de aminoácidos são protegidos com grupos de proteção adequados, os quais evitam uma reação química de ocorrer naquele sítio até que o grupo de proteção seja removido. Também comum é a proteção do grupo alfa-amino de um fragmento ou resíduo de aminoácido enquanto 30 que a entidade reage no grupo carboxila, seguido pela remoção seletiva do grupo de proteção alfa-amino para permitir que uma reação subsequente aconteça naquele sítio. Grupos de proteção específicos têm sido revelados e são conhecidos em métodos de síntese de fase sólida e métodos de síntese de fase de solução.

Grupos alfa-amino podem ser protegidos por um grupo de proteção adequado, sendo que inclui um grupo de proteção 5 do tipo uretano, tal como benziloxicarbonila (Z) e benziloxicarbonila substituída, tal como p- clorobenziloxicarbonila, p-nitrobenziloxicarbonila, p- bromobenziloxicarbonila, p-bifenil-isopropoxicarbonila, 9- fluorenilmetoxicarbonila (Fmoc) e p-metoxibenziloxicarbonila (Moz) e grupos de proteção do tipo uretano alifático, tal como t-butiloxicarbonila (Boc), diisopropilmetoxicarbonila, isopropoxicarbonila, e aliloxicarbonila (Alloc). Fmoc é preferido para proteção de alfa-amino. Grupos guadinino podem ser protegidos por um grupo 15 de proteção adequado, tal como nitro, p-toluenosulfonila (Tos), Z, pentametilcromanosulfonila (Pmc), adamantiloxicarbonila, pentametildihidrobenzofuran-5- sulf onila (Pbf) e Boc. Pbf e Pmc são grupos de proteção preferidos para Arg.

Os peptídeos da invenção descritos no presente documento foram preparados com o uso de síntese de fase sólida, tal como por meio de um sintetizador de peptídeo automatizado Symphony Multiplex Peptide Synthesizer (Rainin Instrument Company), com uso de módulos de programação 25 conforme fornecido pelo fabricante e que segue os protocolos apresentados no manual do fabricante.

Síntese de fase sólida iniciada a partir da extremidade de C-terminal do peptídeo ao acoplar um alfa- aminoácido protegido a uma resina adequada. Tal material de 30 partida é preparado ao fixar um aminoácido protegido por alfa-amino por uma ligação de amido a resina 9-Fmoc- aminoxanten-3-iloxi-Merrifield (resina Sieber Amide) ou a 4- (21,4'-Dimetoxifenil-Fmoc-aminometil) resina fenoxi (resina Rink Amide), por uma ligação de éster a uma resina de álcool p-benziloxibenzilico (Wang), uma resina de cloreto 2- clorotritil ou uma resina oxima, ou por outros meios bem conhecidos na técnica. As resinas são transportadas através 5 de ciclos repetitivos conforme necessário para adicionar aminoácidos, de forma sequencial. Os grupos de proteção alfa- amino Fmoc são removidos sob condições básicas. Piperidina, piperazina, dietilamina, ou morfolina (20 a 40% v/v) em N,N- dimetilformamida (DMF) podem ser usadas para esse propósito.

Após a remoção do grupo de proteção alfa-amino, os aminoácidos protegidos subsequentes são acoplados gradualmente na ordem desejada para obter um intermediário, peptídeo-resina protegida. Os reagentes de ativação usados para o acoplamento dos aminoácidos na síntese de fase sólida dos peptídeos são bem conhecidos na técnica. Após o peptídeo ser sintetizado, se desejado, os grupos de proteção de cadeia lateral protegida ortogonalmente podem ser removidos com o uso de métodos bem conhecidos na técnica para derivação adicional do peptídeo.

Tipicamente, grupos de proteção ortogonais são usados conforme apropriado. Por exemplo, os peptídeos da invenção contêm múltiplos aminoácidos com uma cadeia lateral que contém grupo amino. Em um aspecto, um esquema de proteção Alil-Aloc é empregado com os aminoácidos que formam uma ponte 25 de lactama através de suas cadeias laterais, e grupos de proteção ortogonais, cliváveis sob condições reativas diferentes, uso para outros aminoácidos com cadeia lateral que contém grupo aminos. Portanto, por exemplo, aminoácidos Fmoc-Lis(Alloc)-OH, Fmoc-Orn(Alloc)-OH, Fmoc-Dap(Alloc)-OH, Fmoc-Dab(Alloc)-OH, Fmoc-Asp(0A11)-OH ou Fmoc-Glu(OA11)-OH podem ser empregados para as posições que formam uma ponte de lactama mediante ciclização, enquanto que outros aminoácidos com cadeias laterais que contêm grupo amino têm um grupo de proteção ortogonal e diferente, tal como com Fmoc-Arg(Pbf)- OH, Fmoc-Lis(Boc)-OH, Fmoc-Dab(Boc)-OH ou similares. Outros grupos de proteção podem ser empregados de forma semelhante; a título exemplificative e não limitativo, Mtt/OPp (4- 5 metiltritil/ 2-fenilisopropil) pode ser empregado com as cadeias laterais que formam uma ponte de lactama mediante ciclização, sendo que com grupos de proteção ortogonais que são utilizados para outras posições que não são cliváveis com o uso de condições adequadas para clivagem de Mtt/OPp.

Grupos reativos em um peptideo podem ser modificados de forma seletiva, seja durante síntese de fase sólida ou após remoção a partir da resina. Por exemplo, peptideos podem ser modificados para obter modificações em N- terminal, tal como acetilação, enquanto na resina, ou podem 15 ser removidos da resina pelo uso de um reagente de clivagem e então modificados. De forma semelhante, os métodos para modificar cadeias laterais de aminoácidos são bem conhecidos para aqueles versados na técnica de síntese de peptideo. A escolha de modificações feitas para grupos reativos presentes 20 no peptideo será determinada, em parte, pelas características que são desejadas no peptideo.

Nos peptideos da presente invenção, em uma modalidade o grupo N-terminal é modificado pela introdução de um grupo N-acetila. Em um aspecto, um método, em que é 25 empregado após remoção do grupo de proteção no N-terminal, o peptideo ligado à resina é reagido com anidrido acético em N,N-dimetilformamida (DMF) na presença de uma base orgânica, tal como piridina. Outros métodos de acetilação de N-terminal são conhecidos na técnica, sendo que incluem acetilação de 30 fase de solução, e podem ser empregados.

O peptideo pode, em uma modalidade, se ciclizado antes da clivagem a partir da peptídeo-resina. Para ciclização através de porções químicas de cadeia lateral 71/144 α reativa, as cadeias laterais desejadas são desprotegidas, e o peptídeo suspenso em um solvente adequado e um agente de acoplamento cíclico adicionado. Solventes adequados incluem , por exemplo, DMF, diclorometano (DCM) ou l-metil-2- pirrolidona (NMP). Reagentes de acoplamento cíclico adequado incluem, por exemplo, tetrafluoroborato de 2-(lH- benzotriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametilurônio (TBTU), hexafluorofosfato de 2-(IH-benzotriazol-l-il)-1,1,3,3 - tetrametilurônio (HBTU), hexafluorofosfato de benzotriazole- 1-il-oxi-tris(dimetilamino)fosfônio (BOP), hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris(pirrolidino)fosfônio (PyBOP), tetrafluoroborato de 2 -(7-aza-IH-benzotriazol-l-il)-1,1,3,3 - tetrametilurônio (TATU), tetrafluoroborato de 2-(2-oxo-l(2H)- piridil)-1,1,3,3-tetrametilurônio (TPTU) ou N,N'- diciclohexilcarbodiimida/l-hidroxibenzotriazola (DCCI/HOBt). O acoplamento é iniciado, de forma convencional, pelo uso de uma base adequada, tal como N,N-diisopropiletilamina (DIPEA), sim-colidina ou N-metilmorfolina (NMM).

Para peptídeos com uma ponte cíclica de não lactama, tal como peptídeos que contêm a ponte: - (CH2)X-NH-C(=O) - (CH2)Z-C(=O) -NH- (CH2)y-, em que x, y e z são, cada um, independentemente 1 a 5, os peptídeos pode ser feitos com o uso de síntese de fase sólida que emprega uma aminoácido diamina protegida por cadeia lateral para as posições a serem ciclizadas. Particularmente preferidos em tais posições são Dap, Dab ou Lis, preferencialmente com um grupo de proteção amina tal como Alloc, Mtt, Mmt (metoxitritil), Dde (1-(4,4-dimetil-2,6- dioxociclohex-1-ilidene))etil), ivDde (1-(4,4-dimetil-2,6- dioxociclohex-l-ilidene)-3-metilbutil) ou qualquer outro grupo de proteção ortogonalmente clivável. Tipicamente, um grupo de proteção de cadeia lateral é removido primeiro, tal como remoção de Mtt com o uso de 2% de TFA em diclorometano.

Após lavagem da resina, a amina não protegida ligada a resina resultante é acilada, tal como com uma solução de 0,5 M de um anidrido cíclico tal como anidrido succínico ou anidrido glutárico em diclorometano/piridina 1:1. Após etapas de 5 lavagem adicionais , o grupo de proteção ortogonalmente clivável do segundo aminoácido diamino é clivado, tal como remoção de Alloc com o uso de tetrakis(trifenilfosfina)paládio(0) e fenil silano em diclometano. Após a lavagem com diclorometano e DMF o 10 peptideo ligado à resina é ciclizado com o uso de reagentes de acoplamento padrão tal como TBTU e uma base. Alternativamente, um aminoácido diamino ligado a resina protegido por ivDde pode ser desprotegido com o uso de uma solução de 5% de hidrazina em DMF, e após lavagem com DMF a 15 amina ligada a resina resultante pode ser acilada com um anidrido cíclico ou pode ser ciclizado com um ácido carboxílico ligado a resina.

Os peptideos ciclizados podem, então, ser clivados a partir da fase sólida, com o uso de qualquer reagente 20 adequado, tal como etilamina em DCM ou várias combinações de agentes, tal como ácido trifluoroacético (TFA), tri- isopropilsilano (TIS), dimetoxibenezeno (DMB), água e similares. O peptideo bruto resultante é seco e grupos de proteção de cadeia lateral de aminoácido remanescentes, se 25 houver, são clivados com o uso de qualquer reagente adequado, tal como (TFA) na presença de água, TIS, 2-mercaptopetano (ME), e/ou 1,2-etanoditiol (EDT). O produto final é precipitado ao adicionar éter frio e coletado por filtragem. A purificação final é por cromatografia líquida de alto 30 desempenho em fase reversa (RP-HPLC), com o uso de uma coluna adequada, tal como uma coluna de C18, ou outros métodos de separação ou purificação, tal como métodos com base no tamanho ou carga do peptideo, também podem ser empregados.

Uma vez purificado, o peptídeo pode ser caracterizado por qualquer número de métodos, tal como cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC), análise de aminoácido, espectrometria em massa, e similares.

Para peptídeos da presente invenção as quais tem um derivado de amida substituída de C-terminal ou grupo N- alquila, síntese pode prosseguir por síntese de fase sólida começada a partir da extremidade de C-terminal do peptídeo ao acoplar um alfa-aminoácido protegido a uma resina adequada. Tais métodos para preparar derivados de amida substituída em fase sólida foram descrito na técnica. Consulte, por exemplo, Barn, D. R., et al. , "Synthesis of an array of amides by aluminum chloride assisted cleavage on resin bound esters," Tetrahedron Letters, 37:3.213 a 3.216 (1996); DeGrado, W. F. e Kaiser E. T., "Solid-phase synthesis of protected peptides on a polimer bound oxime: Preparation of segments comprising the sequences of a cytotoxic 26-peptide analogue," J. Org. Chem., 47:3.258 a 3.261 (1982). Tai material de partida pode ser preparado ao fixar um aminoácido protegido de alfa-amino por uma ligação de éster para uma resina de álcool p- benziloxibenzílico (Wang) ou uma resina oxima por meios bem conhecidos. A cadeia de peptídeo é cultivada com a sequência desejada de aminoácidos, o peptídeo ciclizado e a peptídeo- resina tratada com uma solução de amina apropriada (tal como metil amina, dimetil amina, etilamina, e assim por diante). Peptídeos que empregam uma resina de álcool p- benziloxibenzílico (Wang) podem ser clivados pelo cloreto de alumínio em DCM, e peptídeos que empregam uma resina podem ser clivados por DCM. Outro método para preparar um peptídeo com uma amida substituída de C-terminal é para fixar uma alquil amina por aminação redutiva para uma resina de formil , tal como resina de 4-(4-Formil-3-metoxifenoxi)butiril-AM (resina de FMPB AM ), e então incorpora sequencialmente resíduos de aminoácido desejados que utilizam princípios gerais de síntese de fase sólida.

Enquanto síntese tem sido descrita primariamente com referência a química de Fmoc de fase sólida , deve ser 5 compreendido que outros métodos químicos e sintéticos podem ser empregados para fazer os peptideos cíclicos da invenção, tal como a título exemplificative e não limitativo , métodos que empregam química de Boc, química de solução, e outros métodos químicos e sintéticos. 6.0 Formulações.

Dependendo da rota desejada de administração, a formulação de uma composição que inclui um ou mais peptideos cíclicos da presente invenção podem ser variados. Portanto a formulação pode ser adequada para injeção subcutânea, ou 15 injeção intravenosa, para aplicações tópicas, para aplicações oculares, para aplicações de aspersão nasal, para aplicações de inalação, para outras aplicações transdérmicas e similares. 6.1 Forma de sal de Peptideos cíclicos da Presente 20 Invenção.

Os peptideos cíclicos da presente invenção podem estar na forma de qualquer sal farmaceuticamente aceitável . O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" se refere a sais preparados de bases não tóxicas farmaceuticamente aceitáveis 25 ou ácidos que incluem bases orgânicas ou inorgânicas e ácidos orgânicos ou inorgânicos. Sais derivados de bases inorgânicas incluem alumínio, amónio, cálcio, cobre, férrico, ferroso, lítio, magnésio, sais mangânicos, manganoso, potássio, sódio, zinco, e similares. Particularmente preferidos são os sais de 30 amónio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, e sódio. Sais derivados de bases não tóxicas orgânicas farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de aminas primárias, secundárias e terciárias, aminas substituídas que incluem aminas substituídas de ocorrência natural, aminas cíclicas, e resinas de troca de íon básico, tal como arginina, betaína, cafeína, colina, N,N'-dibenziletilenodiamina, dietilamina, 2- dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilenodiamina, N-etil-morfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, poliamina resinas, procaina, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina, e similares.

Quando o peptídeo cíclico da presente invenção é básico, sais de adição de ácido podem ser preparados a partir de ácidos não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis, que incluem ácidos orgânicos e inorgânicos. Tais ácidos incluem acético, benzenosulfônico, benzóico, camforsulfônico, carboxílico, cítrico, etanosulfônico, fórmico, fumárico, glucônico, glutâmico, hidrobrômico, hidroclórico, isetiônico, láctico, maléico, málico, mandélico, metanosulfônico, malônico, múcicos, nítricos, pamóico, pantotênico, fosfórico, propiônico, succicínico, sulfúrico, tartárico, ácido p- toluenosulfônico, ácido trifluoroacético, e similares. Sais de adição de ácido dos peptídeos da presente invenção são preparados em um solvente adequado do peptídeo e um excesso de um ácido, tal como ácido hidroclórico, hidrobrômico, sulfúrico, fosfórico, acético, trifluoroacético, cítrico, tartárico, maléico, succicínico ou metanosulfônico. 0 acetato, acetato de amónio e formas de sal de ácido trifluoracético são especialmente úteis. Quando os peptídeos da presente invenção incluem uma porção química ácida, sais farmaceuticamente aceitáveis adequados podem incluir sais de metal álcali, tal como sais de sódio ou potássio, ou sais de metal terroso alcalino, tal como sais de cálcio ou magnésio. 6.2 Composições farmacêuticas.

A invenção fornece uma composição farmacêutica que inclui um peptídeo cíclico da presente invenção e um carreador farmaceuticamente aceitável. O carreador pode ser uma formulação líquida, e é preferencialmente uma solução 5 aquosa, tamponada e isotônica. Carreadores farmaceuticamente aceitáveis também incluem excipientes, tais como diluentes, carreadores e similares, e aditivos, tais como agentes de estabilização, conservantes, agentes solubilizantes, tampões e similares, conforme descrito a seguir.

As composições de peptídeo cíclico da presente invenção podem ser formuladas ou compostas em composições farmacêuticas que incluem include pelo menos um peptídeo cíclico da presente invenção junto com um ou mais carreadores farmaceuticamente aceitáveis, sendo que incluem excipientes, 15 tais como diluentes, carreadores e similares, e aditivos, tais como agentes de estabilização, conservantes, agentes solubilizantes, tampões e similares, conforme pode ser desejado. Excipientes de formulação podem incluir polivinilpirrolidona, gelatina, hidroxi celulose, acácia, 20 polietileno glicol, maniton, cloreto de sódio e citrato de sódio. Para injeção ou outras formulações de administração líquida, sendo que água contém pelo menos um ou mais constituintes de tamponagem é preferencial , e agentes de estabilização, conservantes e agentes solubilizantes também podem ser empregados. Para formulações de administração de sólido, qualquer um de uma variedade de aditivos espessantes, de preenchimento, avolumantes e de carreadores podem ser empregados, tal como amidos, açúcares, ácidos graxos e similares. Para formulações de administração tópica , 30 qualquer um de uma variedade de cremes, pomadas, géis, loções e similares podem ser empregados. Para a maioria de formulações farmacêuticas, ingredientes não ativos constituirão a maior parte , em peso ou volume, da preparação. Para formulações farmacêuticas, também é contemplado que qualquer um de uma variedade de formulações de liberação medida, liberação lenta ou liberação prolongada e aditivos podem ser empregados, de modo que a dosagem possa 5 ser formulada de modo a afetar entrega de um peptideo da presente invenção sobre um período de tempo.

Em geral, a quantidade atual de peptideos cíclicos da presente invenção administrada a um paciente irá variar entre faixas bastante amplas dependendo do modo de 10 administração, a formulação usada, e a resposta desejada.

Em uso prático, os peptideos cíclicos da invenção podem ser combinados como o ingrediente ativo em uma mistura por adição com um carreador farmacêutico, de acordo com técnicas de composição farmacêutica convencionais. O 15 carreador pode tomar uma ampla variedade de formas dependendo da forma de preparação desejada para administração , por exemplo, oral, parenteral (que inclui intravenosa), uretral, vaginal, nasal, bucal, sublingual, ou similares. Na preparação de composições para forma de dosagem oral, 20 qualquer um dos meios farmacêuticos usuais podem ser empregados, tal como, por exemplo, água, glicóis, óleos, álcoois, agentes flavorizantes, conservantes, agentes colorantes e similares no caso de preparações líquidas orais tal como, por exemplo, suspensões, elixires e soluções; ou 25 carreadores tal como amidos, açúcares, microcristalina celulose, diluentes, agentes granuladores, lubrificantes, ligantes, agentes de desintegração e similares no caso de preparações sólidas orais tal como, por exemplo, pós, cápsulas e tabletes duros e moles.

Por conta de sua facilidade de administração, tabletes e cápsulas representam uma forma de unidade de dosagem oral vantajosa. Se desejado, os tabletes podem ser revestidos por técnicas aquosas ou não aquosas padrão. A quantidade de peptídeo ativo em tais composições terapeuticamente úteis é tal que uma dosagem eficaz será obtida. Em outra forma de unidade de dosagem vantajosa, construtos sublinguais podem ser empregados, tal como lâminas, pastilhas, tabletes ou similares.

Os tabletes, pílulas, cápsulas e similares também podem conter um ligante, tal como goma tragacanto, acácia, amido de milho ou gelatina; excipientes tais como dicálcio fosfato; uma agente de desintegração tal como amido de milho, amido de batata ou ácido algínico; um lubrificante tal como estearato de magnésio; e um agente adoçante tal como sacarose, lactose ou sacarina. Quando uma forma de unidade de dosagem é uma cápsula , esta pode conter, em adição a materiais do tipo acima, um carreador líquido tal como óleo gordo.

Vários outros materiais podem ser utilizados como revestimentos ou para modificar a forma física da unidade de dosagem. Por exemplo, tabletes podem ser revestidos com goma- laca, açúcar ou ambos. Um xarope ou elixir pode conter , em adição ao ingrediente ativo , sacarose como um agente adoçante, metil e propilparabens como conservantes, uma corante e um flavorizante tal como sabor de cereja ou laranj a.

Peptídeos cíclicos também podem ser administrados de forma parental. Soluções ou suspensões desses peptídeo ativos podem ser preparados em água misturada de forma adequada com um tensoativo tal como hidroxi-propilcelulose. As dispersões também podem ser preparadas em glicerol, polietilenoglicóis líquidos, e misturas dos mesmos em óleos. Essas preparações podem, opcionalmente, conter um conservante para evitar a proliferação de microrganismos.

As formas farmacêuticas adequadas para uso injetável incluem dispersões ou soluções aquosas estéreis e pós estéreis para o preparo extemporâneo de soluções ou dispersões injetáveis estéreis. Em todos os casos, a forma deve ser estéril e deve ser fluido na medida em que possa ser administrada por seringa. A forma deve ser estável sob as 5 condições de produção e armazenagem e deve ser protegida contra a ação contaminante de microrganismos, como bactérias e fungos. 0 carreador pode ser um meio de solvente ou dispersão que contém, por exemplo, água, etanol, um poliol, por exemplo glicerol, propileno glicol ou polietileno glicol 10 líquido, misturas adequadas dos mesmos, e óleos vegetais.

Os peptídeos cíclicos da presente invenção podem ser aplicados de forma terapêutica por meio de administração nasal. Por "administração nasal" entende-se qualquer forma de administração intranasal de quaisquer dos peptídeos cíclicos 15 da presente invenção. Os peptídeos podem estar em uma solução aquosa, tal como uma solução que inclui salina, citrato ou outros excipientes comuns ou conservantes. Os peptídeos também podem estar em uma formulação de pó ou seca.

Os peptídeos cíclicos da presente invenção podem 20 ser formulados com qualquer um de uma variedade de agentes que aumentam absorção nasal eficaz de fármacos, sendo que inclui fármacos de peptídeo. Esses agentes deveriam aumentar absorção nasal sem danos inaceitáveis á membrana mucosa. Patentes sob N- U.S. 5.693.608, 5.977.070 e 5.908.825, dentre 25 outros, ensinam várias composições farmacêuticas que podem ser empregadas, sendo que incluem acentuadores de absorção, e os ensinamentos de cada um dos precedentes , e todas as referências e patentes citadas neste, são incorporadas a título de referência.

Se em uma solução aquosa, os peptídeos cíclicos podem ser apropriadamente tamponados por meio de salino, acetato, fosfato, citrato, acetato ou outros agentes de tamponagem, os quais podem estar em qualquer pH fisiologicamente aceitável, geralmente a partir de cerca de pH 4 a cerca de pH 7. Uma combinação de agentes de tamponagem também podem ser empregados , tal como salina tamponada, um tampão de acetato e salina , e similares. No caso de salina, 5 uma solução salina de 0,9% pode ser empregada. No caso de acetato, fosfato, citrato, e similares, uma solução de 50 mm pode ser empregada. Em adição aos agentes de tamponagem, um conservante adequado pode ser empregado, para evitar ou limitar proliferação de bactérias e outros micróbios. Tal 10 conservante que pode ser empregado é cloreto de benzalcônio a 0,05%.

Em uma modalidade alternativa, peptideos cíclicos da presente invenção podem ser administrados diretamente no interior do pulmão. Administração intrapulmonar pode ser 15 executada por meio de um inalador de dose medida, um dispositivo que permite autoadministração de um bolus medido de um peptideo da presente invenção quanto atuado por um paciente durante inspiração. Em um aspecto dessa modalidade, o peptideo cíclico pode estar em uma forma particulada e seca por exemplo, partículas entre cerca de 0,5 e 6,0 μm, de modo que as partículas tenham massa suficiente para assentar na superfície do pulmão, e não ser exalada, mas sejam pequenas o suficiente que elas não sejam depositadas nas superfícies de passagem de ar antes de alcançar o pulmão.

Qualquer uma de uma variedade de técnicas diferentes pode ser usada para fabricar micropartículas de pó seco , sendo que inclui, mas não são limitados a microfresagem , secagem por aspersão e um aerossol de congelamento rápido seguido por liofilização. Com micropartículas, os peptideos podem ser 30 depositados ao pulmão profundo, sendo que, através disso, fornece absorção rápida e eficaz na corrente sanguínea. Adicionalmente, com tal abordagem acentuadores de penetração não são requeridos, como é algumas vezes o caso em rotas de entrega mucosal oral, nasal e transdérmica. Qualquer um de uma variedade de inaladores podem ser empregados, sendo que inclui aerossóis, nebulizadores, inaladores de pó seco de dose única e inaladores de pó seco de múltiplas doses baseados em propelente. Dispositivos comuns em uso atual incluem inaladores de dose medida, as quais são usadas para entregar medicações para o tratamento de asma, doenças obstrutivas das vias aéreas crônicas e similares. Dispositivos preferenciais incluem inaladores de pó seco, projetados para formar uma nuvem ou aerossol de pó fino com um tamanho de partícula que é sempre menos que cerca de 6,0 μm.

Tamanho de micropartícuia, que inclui distribuição de tamanho médio, pode ser controlada por meio do método de fabricação. Para microfresagem, o tamanho da cabeça de fresagem, velocidade do rotor, tempo de processamento e similares controlam o tamanho de micropartícula. Para secagem por aspersão, o tamanho de bocal, taxa de fluxo, calor mais seco e similares controlam o tamanho de micropartícula. Para fabricação por meio de aerossol de congelamento rápido seguido por liofilização, o tamanho de bocal, taxa de fluxo, concentração de solução pulverizada via aerossol e similares controlam o tamanho de micropartícula. Esses parâmetros outros podem ser empregados para controlar o tamanho de micropartícula.

Os peptídeos cíclicos da presente invenção podem ser administrados de forma terapêutica por meio de uma injeção de uma formulação de liberação prolongada. Em uma modalidade, um peptídeo cíclico da presente invenção é formulado para uma injeção intramuscular profunda, tal como no músculo deltoide ou do glúteo, de uma formulação com um polietileno glicol, tal como polietileno glicol 3350, e opcionalmente um ou mais conservantes ou excipientes adicionais, que incluem, mas não são limitados a excipientes, tal como sais, polisorbato 80, hidróxido de sódio ou ácido hidroclórico para ajustar pH, e similares. Em outra modalidade, um peptídeo cíclico da presente invenção é 5 formulado com um poli(orto éster), o qual pode ser um poli(orto éster) autocatalisado com qualquer um de uma porcentagem variável de ácido láctico na espinha dorsal polimeróica, e opcionalmente um ou mais excipientes adicionais. Em uma modalidade polímero poli(D,L-lactídeo-co- glicolídeo) é empregado. Em geral, qualquer um dos vários polímeros bioerosíveis e injetáveis, as quais também são preferencialmente polímeros adesivos, podem ser empregados em uma formulação injetável de liberação prolongada. Alternativamente, outras formulações de liberação prolongada 15 podem ser empregadas, sendo que incluem formulações que permitem injeção subcutânea, as quais outras formulações podem incluir um ou mais de nano/microesf eras (tal como composições que incluem polímeros de PLGA), lipossomos, emulsões (tal como emulsões de água-em-óleo), géis, 2 0 suspensões ou sais insolúveis em água em óleo. A formulação pode ser de modo que uma injeção seja requerida em uma base diária, semanal, mensal ou outra periódica , dependendo da concentração e quantidade de peptídeo cíclico, a taxa de liberação prolongada dos materiais empregados, e outros 25 fatores conhecidos por aqueles de habilidade na técnica. 6.3 Formulações Orais de Peptídeos da Presente Invenção.

Em um aspecto, os peptídeos da presente invenção são formulados por entrega oral. O peptídeo é formulado e 30 feito, de preferência, de modo que seja encerrado em um protetor entérico, mais preferencialmente de modo que não seja liberado até que o tablete ou cápsula tenha transitado o estômago, e opcionalmente tenha transitado adicionalmente em uma porção do intestino pequeno. No contexto dessa aplicação será compreendido que o termo revestimento ou material entérico se refere a um revestimento ou material que passará através do estômago essencialmente intacto, mas irá 5 desintegrar rapidamente no intestino pequeno para librar a substância de fármaco ativa. Uma solução de revestimento entérico que pode ser usada inclui acetato de ftalato celulose, e opcionalmente outros ingredientes tal como hidróxido de amónio, triacetina, álcool etílico, metileno azul, e água purificada. Acetato de ftalato celulose é um polímero que tem sido usada na indústria farmacêutica para revestir, de forma entérica, formas de dosagem individual tal como tabletes e cápsulas, e não é solúvel em água em um pH de menos que cerca de 5,8. Revestimentos entéricos que inclui 15 acetato de ftalato celulose fornecem proteção contra o ambiente acídico do estômago, mas começa a dissolver no ambiente do duodeno (pH de cerca de 6 a 6,5) , e são completamente dissolvidos até o momento em que a forma de dosagem alcança o íleo (pH de cerca de 7 a 8) . Em adição a acetato de ftalato celulose, outros materiais de revestimento entérico são bem conhecidos e podem ser usados com peptideos da presente invenção, sendo que inclui, sem limitação, hidroxipropilmetilcelulose succinato, hidroxipropilmetilcelulose ftalato, polivinil acetato ftalato, e Copolímeros de metacrilato de metila e ácido metacrílico. O revestimento entérico empregado promove dissolução da forma de dosagem primariamente em um sítio fora do estômago, e pode ser selecionado de modo que o revestimento entérico dissolve em um pH de, aproximadamente, 3 0 pelo menos 6,0, mais preferencialmente em um pH de a partir de cerca de 6,0 a cerca de 8,0. Em um aspecto preferencial, o revestimento entérico dissolve e quebra na proximidade do íleo.

Qualquer um de uma variedade de acentuadores de permeação podem ser empregados, para aumentar influxo nos intestinos mediante dissolução do revestimento entérico. Em um aspecto, acentuadores de permeação aumentam sistemas de transporte transcelular ou paracelular. Um aumento em transporte paracelular pode ser alcançado ao abrir as junções justas das células; um aumento em transporte transcelular pode ser alcançado ao aumentar a fluidez da membrana de célula. Exemplos não limitadores e representativos de tais acentuadores de permeação incluem quelantes de cálcio, sais de bilis (tal como colato de sódio), e ácidos graxos. Os peptídeos da presente invenção podem ser em uma forma de dosagem individual de revestimento entérico que inclui um ácido graxo, tal como, por exemplo, oleato, palmitato, estearato, caprato de sódio, ou ácido linoléico conjugado, em uma cápsula revestida por entérico, para aumentar transporte paracelular.

Em um aspecto, a forma de dosagem individual, tal como um tablete ou cápsula, opcionalmente, inclui adicionalmente ligantes farmacêuticos comuns tal como povidona, diluentes, glidantes, cargas tal como microcristalina celulose, lubrificantes tal como estearato de magnésio, desintegrantes tal como sódio croscarmelose, conservantes, colorantes e similares em suas quantidades e tamanhos conhecidos comuns. Em algumas modalidades, peptídeos ou polipeptídeos que agem como substratos para proteases intestinais são adicionados adicionalmente. 6.4 Formulações Oftálmicas.

Em uma modalidade, doenças oculares, indicações, condições e síndromes, tal como, por exemplo, ou doença do olho seco ou uveíte, podem ser tratadas com uma forma de dosagem oftálmica incluindo um ou mais dos peptídeos da presente invenção. A forma de dosagem oftálmica pode incluir um ou mais ingredientes ativos adicionalmente a um ou mais dos peptídeos da presente invenção, tal como, por exemplo, componentes de lágrima artificial tear, corticosteroides tópicos, fármacos de anti-inflamatórios não esteroides ou 5 inibidores de calcineurina tal como ciclosporina-A (Restasé® - Allergan). Em uma modalidade relacionada, um ou componentes adicionais podem ser proporcionados separadamente a partir de um ou mais dos peptídeos da presente invenção, tal como administração separada de uma forma de dosagem oftálmica 10 incluindo um componente de lágrima artificial, um corticosteroide tópico, um fármaco de anti-inflamatório não esteroide, um inibidor de calcineurina tal como ciclosporina- A ou uma combinação de qualquer um dos antecedentes.

As soluções oftálmicas são preferencialmente 15 mantidas em uma faixa de pH entre cerca de pH 3,5 a 9,0 e preferencialmente cerca de pH 6,5 e pH 7,2, com um tampão adequado. 0 pH pode ser ajustado por qualquer meio, tal como pelo uso de HC1 ou NaOH. Os tampões podem incluir acetato, ácido bórico, borato de sódio, citrato de potássio, ácido 20 cítrico, bicarbonato de sódio, TRÊ, vários tampões de fosfato misturados (tal como, combinações de Na2HPO4, NaH2PO4 e KH2PO4) e misturas dos mesmos. Geralmente, os tampões serão usados em quantidades que variam de cerca de 0,05% a 2,5% (w/v) e preferencialmente de cerca de 0,1% a 1,5% por cento; os 25 tampões devem ser tão próximos Às concentrações de íon fisiológicas quanto possível para minimizar a irritação potencial, mas ainda manter o pH de produto de fármaco sobre a vida de prateleira do produto.

As soluções oftálmicas empregadas na presente 30 invenção podem ser feitas de água purificada e em um aspecto preferencialmente de uma solução salina fisiológica. Os agentes de intensificação de tonicidade adicionais podem ser empregados, incluindo agentes de intensificação de tonicidade iônicos ou não iônicos ou ambos. Os agentes de intensificação de tonicidade iônicos incluem haletos de metais alcalinos ou metais terrosos, tal como CaCl2, KBr, KC1, LiCl, Nal, NaBr, NaCl, Na2SO4 ou ácido bórico. Os agentes de intensificação de 5 tonicidade não iônicos incluem ureia, glicerol, sorbitol, manitol, propileno glicol ou dextrose. As soluções aquosas da presente invenção são tipicamente ajustadas com agentes de tonicidade para aproximar uma pressão osmótica equivalente a uma solução de 0,9% (p/v) de cloreto de sódio ou uma solução 10 de 2,5% de glicerol. Entretanto, as faixas de tonicidade equivalentes a entre 0,7% e 1,5% de NaCl são geralmente consideradas como aceitáveis.

As soluções podem também conter conservantes farmaceuticamente aceitáveis, convencionais, estabilizantes, 15 cossolventes e/ou acentuadores de penetração assim como substâncias viscoelásticas incluídas em preparações de lágrima artificial. Os conservantes farmaceuticamente aceitáveis incluem compostos de amónio quaternários tal como cloreto de benzalcônio, cloreto de benzoxônio ou similares; sais de alquil-mercúrio de ácido tiossalicílico tal como tiomersal, nitrato fenilmercúrio, acetato fenilmercúrico ou borato fenilmercúrico; perborato de sódio; cloreto de sódio; parabenos, tal comometilparabeno ou propilparabeno; álcoois tal como clorobutanol, álcool benzílico ou fenil etanol; derivados de guanidina tal como clorohexidina ou biguanida de polihexametileno; ácido sórbico; ácido bórico; ou peróxido que forma preservativos ou combinações de dois ou mais dos antecedentes. Os antioxidantes farmaceuticamente aceitáveis e agentes quelantes podem ser usados incluindo vários sulfitos 30 (tal como metabissulfito de sódio, tiossulfato de sódio, bissulfito de sódio, ou sulfito de sódio), a-tocoferol, ácido ascórbico, acetilcisteína, 8-hidroxiquinoloma, antipirina, hidroxianisol butilado ou hidroxitolueno butilado, EDTA e outros. Cossolventes tal como alcoóis e outros podem também ser usados. Várias substâncias podem também ser usadas para intensificar a estabilidade de formulação, tal como ciclodextrinas.

Os acentuadores de penetração podem ser empregados em soluções oftálmicas, incluindo compostos tais como tensoativos, certos solventes orgânicos, tal como dimetilsulfóxido e outros sulfóxidos, dimetilacetamida e pirrolidina, certas amidas de aminas heterocíclicas, glicóis (por exemplo, propileno glicol), propileno carbonato, ácido oleico, alquilaminas e derivados, vários tensoativos catiônicos, aniônicos e não iônicos, tensoativos anfotéricos e similares. Os acentuadores de penetração adicionais que podem ser empregados incluem cloreto de cetilpiridínio, ionofores tal como lasalocida, cloreto de benzalcônio, polissorbatos tal como polissorbato 20 (Tween® 20) , parabenos, saponinas, vários compostos de éter de polioxietileno tal como Brij® 35, Brij® 78 ou Brij® 98, ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA), sais biliares e ácidos biliares (tal como colato de sódio, taurocolato de sódio, glicodeoxicolato de sódio, taurodeoxicolato de sódio, ácido taurocólico, ácido quenodesoxicólico e ácido ursodeoxicólico) , ácido cáprico, azona, ácido fusídico, hexametileno lauramida, saponinas, hexametileno octanamida e sulfóxido de decilmetila. Formulações de pareamento de íon que utilizam excipientes carregados ou contraíons para proteger/neutralizar grupos carregados em moléculas de fármaco podem também ser empregadas para reduzir a lipofilicidade do composto para aumentar a penetração córnea. Essas formulações incluem, mas não são limitadas a íons tal como ácido sórbico, ácido bórico e ácido maleico, dentre outros agentes de pareamento de ion carregado.

Os acentuadores de viscosidade e lubrificantes podem ser empregados conforme necessário ou apropriado. Em um aspecto, o acentuador de viscosidade inclui um polímero solúvel em água, tal como polióis, incluindo álcool polivinólico, um polietileno glicol ou combinações de polímeros solúveis em água. Em um aspecto, polietileno glicol 300 ou 400 é empregado. Os teores de polímero solúvel em água podem estar entre cerca de 0,25% e cerca de 4.0% (p/v). Dessa forma, uma solução oftálmica pode incluir, pode meio de exemplo, 1% de álcool polivinílico, 1% de polietileno glicol 300 ou 400 ou ambos. Outros polióis podem ser empregados, incluindo glicerol, glicerina, polisorbato 80, propileno glicol, etileno glicol, povidona, e polivinilpirrolidona. Outros lubrificantes, algumas vezes também chamados de substituintes de lágrima, podem também ser empregados, incluindo derivados de celulose tal como hidroxipropil metil celulose, carboximetil celulose sódica, hidroxipropil celulose, hidroxietil celulose e metil celulose; dextranos tal como dextrano 70; proteínas solúveis em água tal como gelatina; carbômeros tal como carbômero 934P, carbômero 941, carbômero 940 e carbômero 974P; e gomas tal como HP-guar, goma xantana ou combinações dos mesmos. Outros acentuadores de viscosidade que podem ser empregados incluem compostos de polissacarídeo, tal como compostos de glicosaminoglicano sulfatado ou não sulfatado. Em um aspecto, o composto de polissacarídeo é um glicosaminoglicano não sulfatado tal como ácido hialurônico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, tal como hialuronato de sódio. Qualquer faixa de peso molecular comercialmente disponível de ácido hialurônico ou sais do mesmo pode ser empregada. De cerca de 0,05% a cerca de 0,4% (p/v) de ácido hialurônico ou a sal do mesmo pode ser empregado em uma solução oftálmica. Em outro aspecto, o composto de polissacarídeo é um glicosaminoglicano não sulfatado tal como dextrano. Em ainda outro aspecto, o polissacarídeo é um glicosaminoglicano sulfatado tal como sulfato de condroitina.

As formulações semissólidas podem ser empregadas para entrega oftálmica para aumentar os tempos de permanência córnea das moléculas de fármaco. As pomadas que contêm polietilenos glicóis, álcoois de lanolina, ozocerite, ceresina, cera microcristalina, tensoativos, conservantes, monolaurato de sorbitano, petrolato branco e petrolato líquido claro (óleo mineral) ou outras bases de tipo petrolato podem ser usadas. Suspensões aquosas ou não aquosas podem também ser usadas. Para peptideos hidrofílicos, as suspensões que usam óleos farmaceuticamente aceitáveis ou petrolato podem ser usadas. As suspensões podem conter microesferas ou microparticulados, nanoparticulados, partículas mucoadesivas, agentes de aumento de viscosidade, tensoativos e outros agentes. Os compostos mucoadesivos incluem polímeros sintéticos, tal como ácido poliacrílico e policarbofil; biopolímeros, tal como ácido hialurônico ou carbóxi metilcelulose de sódio (CMC); polímeros polianiônicos tal como ácido poliacrílico (PAA); ácidos poliacrílicos tal como Carbopol® 934P, policarbofil e CMC ou PAA com ésteres de polioxalquileno Pluronic®; ou polímeros policatiônicos tal como quitosano. Emulsões (óleo em água ou água em óleo), incluindo microemulsões, podem também ser empregadas que são compostas de óleos farmaceuticamente aceitáveis juntamente com 1 um ou mais agentes de aumento de viscosidade, conservantes, cossolventes, tensoativos e outros agentes. Os óleos farmaceuticamente aceitáveis incluem óleos minerais e óleos orgânicos, incluindo óleos que compreende ácidos graxos saturados ou não saturados de cadeia longa ou cadeia média ou ésteres dos mesmos. Os óleos farmaceuticamente aceitáveis incluem dessa forma qualquer um dentre uma faixa de triglicerídeos de cadeia média, assim como óleos tal como óleo de amêndoa, óleo de rícino, óleo de semente de algodão, glicerina (glicerol), óleo de amendoim, óleo mineral, Polietileno glicol, óleo de papoula, propileno glicol, óleo de cártamo, óleo de sésamo, óleo de soja, óleo de oliva e 5 óleo vegetal. Um tensoativo tal como um éter alquil polioxietileno, óleo de rícino polioxil, tiloxapol, alquil aril éter sulfonato, lecitina, ésteres de sorbitano, monoestearato de gliceril, álcool cetílico, octoxinol-9, nonoxinol-9, estearatos de polioxietileno, ésteres de ácido 10 graxo de polioxietileno sorbitano tal como polissorbato 20, 60 e 80 ou outros podem também ser empregados. Géis aquosos, frequentemente compostos de polímeros tal como álcool polivinílico (PVA), poliacrilamida, poloxâmero, hidroxipropil metilcelulose (HPMC), carbômero, polimetilviniléter anidrido 15 maleico e hidroxipropil etilcelulose podem também ser usados.

Os hidrogéis que contém polímeros insolúveis em água, expansíveis podem ser utilizados contendo polímeros tal como poli(ácido acrílico), poli(ácidos acrílicos), poli(acrilamida) e etileno anidrido maleico e gelatinas 20 tratadas química ou termicamente. Os insertos oculares, lipossomas, discomas, niosomas, dedrimeros, nanossuspensões, nanopartículas e micropartículas podem também ser usados para fornecer uma liberação controlada do fármaco. Os lipossomas e outros agentes de liberação controlada podem ser carregados 25 positivamente para aumentar os tempos de permanência através das interações iônicas com a superfície córnea carregada negativamente. As nanopartículas podem ser compostas de polímeros biodegradáveis tal como poliactídeos (PLAs), acrilatos de policiano, poli(D,L-lactídeos) e polímeros 30 naturais tal como quitosano, gelatina, alginato de sódio, albumina e outros. 6.5 Rotas de Administração de Formulações.

Se uma formulação incluindo um ou mais peptídeos da presente invenção for administrada por injeção, a injeção pode ser intravenosa, subcutânea, intramuscular, intraperitoneal ou outros meios conhecidos na técnica. Os peptídeos da presente invenção podem ser formulados por 5 quaisquer meios conhecidos na técnica incluindo mais não limitados comprimidos, cápsulas, pílulas, suspensões, pós, preparações liofilizadas, supositórios, gotas oculares, manchas da pele, formulações orais solúveis, aspersões, aerossóis e similares e podem ser misturados e formulados com 10 tampões, aglutinantes, estabilizadores, antioxidantes e outros agentes conhecidos na técnica. Em geral, qualquer rota de administração pela qual os In peptídeos as invenção são introduzidos através de uma camada epidérmica de células pode ser empregada. Os meios de administração podem, dessa forma, 15 incluir formulações para administração através de membranas, administração bucal, administração oral, administração dérmica, administração por inalação, administração nasal, administração uretral, administração vaginal e similares. 6.6 Quantidade Terapeuticamente Eficaz

Em geral, a quantidade real do peptídeo cíclico da presente invenção administrada a um paciente irá variar entre faixas bastante amplas dependendo do modo de administração, a formulação usada e a resposta desejada. A dosagem para o tratamento é administrada por qualquer um dos meios 25 anteriores ou por outros meios conhecidos na técnica de uma quantidade suficiente para trazer o efeito terapêutico desejado. Dessa forma, uma quantidade terapeuticamente eficaz inclui uma quantidade de um peptídeo ou composição farmacêutica da presente invenção que é suficiente para 30 aliviar terapeuticamente a disfunção sexual em um paciente ou prevenir ou retardar o início ou recorrência da disfunção sexual.

Em geral, os peptídeos cíclicos da presente invenção são altamente ativos. Por exemplo, o peptideo cíclico pode ser administrado sistemicamente a cerca de 0,1, 0,5, 1, 5, 50, 100, 500, 1000 ou 5000 μg/kg de peso corporal, dependendo do peptideo específico selecionado, a resposta terapêutica desejada, a rota de administração, a formulação e outros fatores conhecidos por versados na técnica. 7.0 Peptideos da Presente invenção.

Em um aspecto, a invenção fornece um peptideo cíclico que contém uma sequência de núcleo derivada de His- Fe-Arg dentro da porção cíclica, mas não incluindo Trp dentro da porção de núcleo e em que Trp ou um derivado ou mimético do mesmo (definido como resíduo de aminoácido como uma cadeia lateral incluindo pelo menos uma arila ou heteroarila, incluindo, mas não limitado a Nal 1 ou Nal 2) é de aminoácido imediatamente fora da porção cíclica no lado de terminal C. Dessa forma, a sequência é derivada de His-Phe-Arg-Xaa6-Trp, em que Xaa6 é um aminoácido em que a cadeia lateral da mesma forma uma ponte cíclica ou com a cadeia lateral de outro aminoácido ou com o grupo de terminal N do peptideo.

A sequência de núcleo derivada de His-Phe-Arg-Xaa6- Trp pode incluir várias substituições. A posição de His pode ser His ou pode ser um Pro substituído ou não substituído ou um aminoácido com uma cadeia lateral incluindo pelo menos uma amina primária, amina secundária, alquila, cicloalquila, cicloheteroalquila, arila, heteroarila, álcool, éter, sulfeto, sulfona, sufóxido, carbomila ou carboxila. 0 Pro substituído inclui, mas não é limitado a, aminoácidos tal como Hip, Hip(Bzl), Pro(4R-Bzl) ou Pro(4R-NH2) . A posição Fe pode ser Fe, mas é mais tipicamente D-Fe, D-Nal 1, D-Nal 2 substituído ou não substituído ou um aminoácido com uma cadeia lateral incluindo piridil. A posição de Arg pode ser Arg, Lis, Orn, Dab ou Dap ou um Pro substituído ou não substituído ou Cit ou pode ser um aminoácido com uma cadeia lateral incluindo pelo menos uma amina primária, amina secundária, guanidina, ureia, alquila, cicloalquila, cicloheteroalquila, arila, heteroarila ou éter. Xaa6 pode ser um aminoácido com uma cadeia lateral incluindo uma amina primária, tal como Lis, Orn, Dab, Dap, um aminoácido com um grupo carboxila, tal como Asp, Glu ou hGlu ou um aminoácido com um grupo bissulfeto, tal como Cis ou Pen, todos dependendo da natureza da ponte cíclica. A posição Trp pode ser um aminoácido com uma cadeia lateral incluindo pelo menos 10 uma arila ou heteroarila substituída ou não substituída, tal como Trp, Nal 1 ou Nal 2.

A invenção fornece, dessa forma, um peptídeo cíclico da fórmula (VII): Z-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaae-Xaa7-Y (VII) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: Z é H ou um grupo de terminal N; Xaa1 é opcionalmente presente e se for presente é de um a três resíduos de aminoácido de L- ou D-isômero; 2 0 Xaa2 e Xaa6 são aminoácidos de L- ou D-isômero em que as cadeias laterais dos mesmos compreendem uma ponte cíclica; Xaa3 é L- ou D-Pro, opcionalmente substituído por hidroxila, halogênio, sulfonamida, alquila, -O-alquila, 25 arila, alquil-arila, alquil-O-arila, alquil-O-alquil-arila ou -0-arila ou Xaa3 é um L- ou D-isômero de um aminoácido com uma cadeia lateral incluindo pelo menos uma amina primária, amina secundária, alquila, cicloalquila, cicloheteroalquila, arila, heteroarila, éter, sulfeto ou carboxila; 3 0 Xaa4 é um aminoácido de L- ou D-isômero com uma cadeia lateral incluindo fenila, naftil ou piridil, opcionalmente em que o anel é substituído com um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halo, alquil-halo CÍ-CKJ, alquil Ci-Cio, alcóxi Ci-Cio, alquiltio Ci-Cio, arila, arilóxi, nitro, nitrilo, sulfonamida, amino, amino monossubstituido, amino dissubstituído, hidróxi, carbóxi e alcóxi-carbonila; Xaa5 é L- ou D-Pro ou Xaa5 é um aminoácido de L- ou D-isômero com uma cadeia lateral incluindo pelo menos uma amina primária, amina secundária, guanidina, ureia, alquila, cicloalquila, cicloheteroalquila, arila, heteroarila ou éter; Xaa7 é opcionalmente presente e se for presente é de um a três resíduos de aminoácido de isômero L ou D; Y é um grupo de terminal C.

Em um aspecto, Xaa4 pode ser D-Fe, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halo, alquil-halo Ci-C10, alquila Ci- Cio, alcóxi Ci-Cio, alquiltio Ci-Ci0, arila, arilóxi, nitro, nitrilo, sulfonamida, amino, amino monossubstituido, amino dissubstituído, hidróxi, carbóxi e alcóxi-carbonila.

Em outro aspecto, um dentre Xaa2 e Xaa6 pode ser um L- ou D-isômero de Asp, hGlu ou Glu e o ouro dentre Xaa2 e Xaa6 é um L- ou D-isômero de Lis, Orn, Dab ou Dap. Em um aspecto alternativo, cada um dentre Xaa2 e Xaa6 pode ser Cis, D-Cis, Pen ou D-Pen.

Em outro aspecto, Xaa1 pode ser um aminoácido com uma cadeia lateral incluindo uma alquila linear ou ramificada, cicloalquila, cicloheteroalquila, arila ou heteroarila.

Em outro aspecto, Xaa7 pode ser um aminoácido com uma cadeia lateral incluindo pelo menos uma arila ou heteroarila, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes de anel e quando um ou mais substituintes estão presentes, são os mesmos ou diferentes e independentemente hidroxila, halogênio, sulfonamida, alquila, -0-alquila, arila ou -0-arila.

Em outro aspecto, o grupo de terminal N pode ser um grupo acila de Cx a CX7, em que o Cx a C17 compreende uma alquila linear ou ramificada, cicloalquila, alquilcicloalquila, arila ou alquilarila, uma cadeia de arila, heteroarila, alceno, alquenila, aralquila ou alquila Ci a Ci7 linear ou ramificada ou uma cadeia de arila, heteroarila, alceno, alquenila, aralquila ou alquila Cx a C17linear ou ramificada N-acilada.

Em outro aspecto, Y pode ser uma hidroxila, uma amida ou uma amida substituída por uma ou duas cadeia de cicloalquila, arila, alquilcicloalquila, aralquila, heteroarila, alceno, alquenila, aralquila ou alquila Cx a C17 linear ou ramificada.

A invenção fornece, dessa forma, em outro aspecto, um peptideo cíclico da fórmula (VII) definida conforme acima, mas em que Xaa4 é D-Fe, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir de halo, alquil-halo Ci-Ci0, alquila Ci-Ci0, alcóxi Ci-Ci0, alquiltio Ci-Cio, arila, arilóxi, nitro, nitrilo, sulfonamida, amino, amino monossubstituído, amino dissubstituído, hidróxi, carbóxi e alcóxi-carbonila. Xaa5 é um L- ou D-isômero de Arg, Lis, Orn, Dab ou Dap; e Xaa7 é um L- ou D-isômero de Trp, Nal 1 ou Nal 2.

Nos antecedentes, em um aspecto Xaa3 pode ser um Lou D-isômero de His e em outro aspecto Z pode ser um grupo acila de Cx a Ci7 e Xaa1 pode ser um L- ou D-isômero de Nle.

Nos antecedentes e na formula (I) , o Pro substituído pode ser, por exemplo, Hip, Hip(Bzl), Pro(4-Bzl) e Pro (4-NH2) .

Os peptideos abrangidos dentro das fórmulas (I) até (VII) contêm um ou mais elementos assimétricos tal como centros estereogênicos, eixos estereogênicos e similares, de modo que os peptídeos abrangidos dentro da fórmula (I) podem existir em diferentes formas estereoisoméricas. Para ambos os peptídeos descritos especifica e genericamente, incluindo os peptídeos abrangidos dentro das fórmulas (I) até (VI), todas as formas de isômeros em todos os quirais ou outros centros isoméricos, incluindo enantiômeros e diastereômero, têm a intenção de serem cobertos na presente invenção. Cada um dos peptídeos da invenção inclui múltiplos centros de quiral e podem ser usados como uma mistura racêmica ou uma mistura enriquecida enantiomericamente, adicionalmente para o uso dos peptídeos da invenção em preparações enantiopuras. Tipicamente, os peptídeos da invenção serão sintetizados com o uso dos reagentes quiralmente puros, tal como L- ou D- aminoácidos especificados, usando reagentes, condições e métodos de tal modo que a pureza enantiomérica é mantida, mas é possível que as misturas racêmicas sejam feitas. Tais misturas racêmicas podem ser opcionalmente separadas com o uso de técnicas bem conhecidas e um enantiômero individual pode ser usado sozinho. Em casos e sob condições específicas de temperatura, solventes e pH em que os peptídeos podem existir nas formas tautoméricas, cada forma tautomérica é contemplada como sendo incluída dentro desta invenção se existir em equilíbrio ou predominantemente em uma forma. Dessa forma, um único enantiômero de um peptídeo da formula (I) , que é uma forma opticamente ativa, pode ser obtido por síntese assimétrica, síntese a partir de precursores opticamente puros ou pela resolução dos racematos.

A invenção pretende adicionalmente incluir pró- fármacos dos presentes peptídeos, que em administração submetem-se à conversão química por processos metabólicos antes de se tornarem peptídeos farmacológicos ativos. Geralmente, tais pró-fármacos serão derivados funcionais dos presentes peptídeos, que são prontamente convertíveis in vivo em um peptídeo da fórmula (I) até (VII). Os pró-fármacos são quaisquer compostos covalentemente ligados, que liberam o fármaco de peptídeo progenitor ativo da fórmula (I) até (VII) 5 in vivo. Os procedimentos convencionais para a seleção e preparação de derivados de pró-fármaco adequados são descritos, por exemplo, em "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985. Os exemplos típicos de pró- fármacos têm grupos protetores biologicamente estáveis em uma 10 porção química funcional tal como, por exemplo, por esterificação de funções de hidroxila, carboxial ou amino. Dessa forma, por meio de exemplo e não limitação, um pró- fármaco inclui peptídeos da fórmula (I) em que uma forma de pró-fármaco de éster é empregada, tal como, por exemplo, 15 ésteres de alquila inferiores de um grupo R da fórmula (I), tal como em que R é -OH, tais ésteres de alquila inferiores podem incluir de 1 a 8 carbonos em um radical alquila ou ésteres de aralquila que têm 6 a 12 carbonos em um radical aralquila. Falando-se amplamente, os pró-fármacos incluem 20 compostos que podem ser oxidados, reduzidos, aminados, desaminados, hidroxilado, desidroxilado, hidrolizado, desidrolizada, alquilados, dealquilados, acilados, deacilados, fosforilados ou desfosforilados para produzir um fármaco de peptídeo progenitor ativo da fórmula (I) in vivo.

A invenção em questão também inclui peptídeos que são idênticos para aqueles citados na fórmula (I) até (VI), mas para o fato de que um ou mais átomos retratados na fórmula (I) até (VI) são substituídos por um átomo que tem uma massa atômica ou número de massa diferente da massa 30 atômica ou número de massa usualmente encontrado na natureza.

Os exemplos de isótopos que podem ser incorporados em compostos da invenção incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio e oxigênio, tal como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 180 e 170, respectivamente. Os peptideos da presente invenção e sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos dos ditos compostos que contêm os isótopos mencionados anteriormente e/ou outros isótopos de outros átomos estão dentro do escopo 5 desta invenção. Certos compostos etiquetados isotopicamente da presente invenção, por exemplo, aqueles em que isótopos radioativos tal como 3H e 14C são incorporados, pode ter o uso em uma variedade de ensaios, tal como em ensaios de distribuição de tecido de fármaco e/ou substrato. A substituição com isótopos mais pesados, tal como a substituição de um ou mais átomos de hidrogênio com deutério (2H), pode fornecer vantagens farmacológico em algumas ocorrências, incluindo estabilidade metabólica aumentada. Os peptideos etiquetados isotopicamente da fórmula (I) até (VI) 15 pode ser geralmente preparados substituindo-se um reagente etiquetado isotopicamente para um reagente etiquetado não isotopicamente. 8.0 Testes e Ensaios Empregados em Avaliação dos Peptideos da Presente Invenção.

Os peptideos específicos por receptor de melanocortina da presente invenção desta invenção podem ser testados por uma variedade de sistemas de ensaio e modelos de animal para determinar a ligação, estado funcional e eficácia. 8.1 Ensaio de Inibição Competitiva com o uso de [I125] -NDP-a-MSH.

Um ensaio de ligação de inibição competitiva foi realizado com o uso de homogeneizados de membrana preparados a partir de células HEK-293 que expressam hMCR-la 30 recombinante ou hMCR-4 (em cada ocorrência em que o prefixo h refere-se a humano) ou alternativamente homogeneizados de membrana de células de melanoma de rato B16-F10 que contêm murina endógena MCR-1. Nos exemplos que seguem, todos os valores de MCR-1 e MCR-4 são para receptores de recombinante humano, a não ser que notado de outra maneira. Os ensaios foram realizados em placas de fundo arredondados de polipropileno de 96 poços (número de catálogo VWR 12777-030) . Os homogeneizados de membrana foram incubados com 0,1 nM [I125] -NDP-α-MSH (Perkin Elmer) e aumentando as concentrações dos peptídeos de teste da presente invenção no tampão contendo tampão HEPES a 25 mM (pH 7,5) com NaCl a 100 mM, CaCl2 a 2 mM, MgCl2 a 2 mM, 1,10-fenantrolina a 0,3 mM e 0,2% de albumina de soro bovina. Após a incubação por 90 minutos a 37°C, a mistura de ensaio foi filtrada em placas de GF/B Unifiltro (número de catálogo de Perkin-Elmer 6005177) e lavada com 3 ml de tampão gelado por poço. Os filtros foram secos com ar e 35 μl de coquetel de cintilação adicionado a cada poço. As placas foram contadas em um contador Microbeta para radioatividade de ligação. A ligação não específica foi medida por inibição da ligação de [I125] -NDP-α-MSH na presença de 1 μM NDP-α-MSH. A ligação específica máxima (100%) foi definida como a diferença na radioatividade (cpm) ligada a membranas celulares na ausência e presença de 1 μM NDP-α-MSH. Cada ensaio foi conduzido em duplicata e os valores médios atuais são descritos, com resultados menos que 0% relatados como 0%. Os valores Ki para os peptídeos da presente invenção foram determinados com o uso do software de ajuste de curva Graph-Pad Prém®. 8.2 Ensaio para Atividade de Agonista.

O acúmulo de cAMP intracelular foi examinado como uma medição da capacidade dos peptídeos da presente invenção de obter uma resposta funcional em uma linhagem de célula de melanoma humano, HBL, que expressam hMCR-1 (consulte Kang, L., et al. , "A selective small molecule agonist of melanocortin-1 receptor inhibits lipopolisaccharide-induced cytokine accumulation and leukocyte infiltration in mice," J. Leuk. Biol. 80:897 a 904 (2006)) ou células HEK-293 que expressam hMCR-4. Células de HBL confluente que expressam hMCR-1 ou células HEK-293 que expressam hMCR-4 recombinante foram separadas das placas de cultura por incubação no tampão de dissociação de célula livre de enzima. As células dispersadas foram suspensas em Solução Salina Equilibrada de Earle que contém HEPES a 10 mM (pH 7,5), MgCl2 a 1 mM, glutamina a ImM, 0,5% de albumina e 3-isobutil-l-metil- xantina a 0,3 mM (IBMX), um inibidor de fosfodiesterase. As células foram plaqueadas em placas de 96 poços a uma densidade de 0,4 x 105 células por poço para células de HBL e 0,5 x 105 células por poço para células HEK-293 e pré- incubadas por 10 minutos. As células foram expostas por 15 minutos a 37 °C para peptideos da presente invenção dissolvidas em DMSO (concentração de DMSO final de 1%) a uma faixa de concentração de 0,05 - 5.000 nM em um volume de ensaio total de 200 μl. NDP-α-MSH foi usado como o agonista de referência. Os níveis de cAMP foram determinados por um sistema de ensaio com base em célula de cAMP HTRF® de Bioensaios Cisbio utilizando anti-cAMP etiquetado por criptato e cAMP etiquetado por d2, com leitura de placas em um leitor de placa Perkin-Elmer Victor a 665 e 620nM. A análise de dados foi realizada por análise de regressão não linear com software Graph-Pad Prém®. Os valores de eficácia máxima (Emax) foram determinados para cada peptideo de teste da presente invenção, em comparação a esses alcançados pelo agonista de melanocortina de referência NDP-a-MSH. 9.0 Exemplos.

Os peptideos das seguintes estruturas foram sintetizados e os valores Ki de MCR-1 e MCR-4 médios foram determinados conforme indicado. Todos os valores Ki foram determinados com o uso de [I125] -NDP-a-MSH. Todos os resultados são expressos em nM exceto para valores Emax, que são valores de porcentagem. Os peptídeos com a sequência primária legendada foram sintetizados e purificados conforme descritos na Seção 5 acima, com o peptídeo resultante que tem a estrutura retratada. Após a síntese e purificação, cada peptídeo foi testado conforme descrito na Seção 8 acima, com os resultados conforme mostrado. 9.1 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Lis)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:4)

Resultado: MC-4 Ki (média) MC-1 Ki (média) MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,007 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 97% 9.2 Ac-Nle-cíclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:5)

MC-4 Ki (média) 110 MC-1 Ki (média) 0,012 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,006 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 95% 9.3 Ac-Nle-cic2o(Glu-His-D-Fe-Arg-Dap)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:6)

Resultado MC-4 Ki (média) MC-1 Ki (média) MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,008 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 91% 9.4 Ac-Nle-ciclo(Asp-His-D-Fe-Arg-Dap)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:7)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 1325 MC-1 Ki (média) 2 MC-1 EC5O (média; cAMP HBL) 0,195 MC-1 Emax (média; CAMP HBL) 88% 9.5 Ac-Nle-ciclo(Cys-His-D-Fe-Arg-Cys)-Trp-NH2

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 540 MC-1 Ki (média) 0,35 MC-1 ECso (média; cAMP HBL) 0,025 MC-1 Emax (média; CAMP HBL) 8 7% 9.6 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Orn)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:9)

MC-4 Ki (média) MC-1 Ki (média) O,07 MC-1 ECδo (média; cAMP HBL) 0,014 MC-1 Eraax (média; CAMP HBL) 91% 9.7 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-D-Trp-NH2 (SEQ ID NO:10)

MC-4 Ki (média) 33 MC-1 Ki (média) 0,55 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,025 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 93% 9.8 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ 5 ID NO:11)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 2 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,052 MC-1 Eraax (média; cAMP HBL) 88% 9.9 Ac-Nle-cic2o(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-D-Nal 1-NH2 (SEQ ID NO:12)

Ensaio MC-4 Ki (média) MC-1 Ki (média) f I NH* Qj Resultado 2 0,1 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,008 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 9.10 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Nal 2-NH2 (SEQ ID NO:13)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 3 MC-1 Ki (média) 0,01 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,004 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 83% 9.11 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-D-Nal 2-NH2

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 0,095 MC-1 Ki (média) 0,02 MC-1 EC5O (média; cAMP HBL) 0,005 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 6 9% 9.12 Ac-D-Fe-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2

MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,015 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 75% 9.13 Ac-Fe-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:16)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 510 MC-1 Ki (média) 0,195 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,01 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 75% 9.14 ciclo(Suc-His-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:17)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 310 MC-1 EC5O (média; cAMP HBL) 31 MC-1 Eraax (média; cAMP HBL) 8 0% 9.15 CH3- (CH2)2-C(=O)-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)- Trp-NH2 (SEQ ID NO:18)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 890 MC-1 Ki (média) 0,65 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,012 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 91% 9.16 CH3- (CH2)3-C(=O)- ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 365 MC-1 Ki (média) 0,12 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,005 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 89% 9.17 CH3- (CH2) 4-C(=0)-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)- Trp-NH2 (SEQ ID NO:20)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 110 I 112/144 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,004 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 90% 9.18 CH3- (CH2) 5-C(=0)-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)- Trp-NH2 (SEQ ID NO:21)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 100 MC-1 Ki (média) 0,015 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,003 MC-1 Emax (média; CAMP HBL) 87% 9.19 ciclo-propanoil-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 640 MC-1 Ki (média) 3 MC-1 EC5O (média; cAMP HBL) 0,031 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 83% 9.20 cic2o-hexanoil-cíclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-

MC-1 Ki (média) 0,025 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,004 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 7 9% 9.21 ciclopentil acetil-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg- Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:24)

MC-4 Ki (média) 93 MC-1 Ki (média) 0,01 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,004 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 83% 9.22 ciclohexil acetil-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 63 MC-1 Ki (média) 0,01 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,004 MC-1 Eraax (média; cAMP HBL) 85% 9.23 fenil acetil-cício(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Trp- NH2 (SEQ ID NO:26)

Ensaio Resultado MC-1 Ki (média) 0,04 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,007 MC-1 Emax (média; CAMP HBL) 82% 9.24 fenil propanoil-cido(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)- Trp-NH2 (SEQ ID NO:27)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 285 MC-1 Ki (média) 0,03 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,006 MC-1 Emax (média; CAMP HBL) 83% 9.25 Ac-Nle-cic2o-(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Ala-NH2

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 7475 MC-1 Ki (média) 2 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,08 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 97% 9.26 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dap)-Trp-OH (SEQ ID NO:29)

MC-4 Ki (média) MC-1 Ki (média) 1 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,107 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 81% 9.27 Ac-Nle-ciclo(Dab-His-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:30)

Resultado MC-4 Ki (média) 380 MC-1 Ki (média) 0,015 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,009 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 92% 9.28 Ac-Nle-ciclo(Dap-His-D-Fe-Arg-Dap)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:31)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 680 MC-1 Ki (média) 0,03 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,007 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 70% 9.29 Ac-Nle-cicIo(Dab-His-D-Fe-Arg-Dap)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:32)

Ensaio MC-4 Ki (média) MC-1 Ki (média) MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) «JH2 NH Resultado 325 0,025 0,006 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 9.30 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Nal 1-NH2 (SEQ ID NO:33)

MC-4 Ki (média) 0,75 MC-1 Ki (média) 0,005 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,002 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 72% 9.31 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-OH (SEQ ID NO:34)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 2 MC-1 EC5O (média; cAMP HBL) 0,095 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 79% 9.32 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 7 MC-1 EC5O (média; CAMP HBL) 0,32 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 8 5% 9.33 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Ala-Dab)-NH2 (SEQ ID

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 645 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 44 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 73% 9.34 Ac-Nle-cic2o(Glu-His-D-Fe-Gli-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:37)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 9 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 4 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 59% 9.35 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Ala-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:38)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 0,8 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,115 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 72% 9.36 Ac-Nle-ciclo(Glu-Ala-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:39)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 455 MC-1 Ki (média) 4 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,21 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 86% 9.37 Ac-Nle-ciclo(Glu-Arg-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:40)

MC-1 Ki (média) 0,014 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,003 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 100% 9.38 Ac-Nle-ciclo(GLu-Cit-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID N0:41)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 98 MC-1 Ki (média) 0,45 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,065 MC-1 Emax (média; CAMP HBL) 97% 9.39 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Lis-NH2

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 7.375 MC-1 Ki (média) 2 MC-1 EC5O (média; cAMP HBL) 0,175 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 91% 9.40 Ac-Nle-ciclo(Glu-Lis-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:43)

Resultado MC-1 Ki (média) 0,04 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,006 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 108% 9.41 Ac-Nle-ciclo(Glu-Dab-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:44)

Resultado MC-4 Ki (média) 98 MC-1 Ki (média) 0,05 MC-1 EC5O (média; cAMP HBL) 0,008 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 108% 9.42 Ac-Nle-cic2o(Glu-Orn-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2

HN=( NH2 Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 45 MC-1 Ki (média) 0,015 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,002 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 109% 9.43 Ac-Nle-ciclo(Dap-His-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:46)

Ensaio MC-4 Ki (média) ^^0 5 y' NH o Resultado 860 MC-1 Ki (média) 0,065 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,016 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 85% 9.44 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID NO:47)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 7 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,32 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 8 5% 9.45 Ac-Nle-cicIo(Glu-His-D-Fe-Ala-Dab)-NH2 (SEQ ID

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 645 MC-1 ECS0 (média; cAMP HBL) 44 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 73% 9.46 Ac-Nle-cic2o(Glu-His-D-Fe-Dab)-NH2 (SEQ ID

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 10.000 MC-1 ECS0 (média; cAMP HBL) NA MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 51% 9.47 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Gli-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:50)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 9 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 4 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 5 9% 9.48 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Ala-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:51)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 0.8 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,115 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 9.49 Ac-Nle-ciclo(Glu-Ala-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:52)

MC-4 Ki (média) 455 MC-1 Ki (média) 4 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,21 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 86% 9.50 Ac-Nle-cicio(Glu-Arg-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 20 MC-1 Ki (média) 0,014 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,003 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 100% 9.51 Ac-Nle-ciclo(Glu-Cit-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:54)

Ensaio Resultado 134/144 MC-1 Ki (média) 0,45 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,065 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 97% 9.52 Ac-Nle-ciclo(Glu-His-D-Fe-Arg-Dab)-Lis-NH2 (SEQ ID NO:55)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 7375 MC-1 Ki (média) 2 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,17 5 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 91% 9.53 Ac-Nle-ciclo(Glu-Lis-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:56)

Resultado MC-4 Ki (média) 95 MC-1 Ki (média) 0,04 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,006 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 10 8% 9.54 Ac-Nle-cic2o(Glu-Dab-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:57)

MC-1 Ki (média) 0,05 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,008 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 108% 9.55 Ac-Nle-ciclo(Glu-Orn-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:58)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 45 MC-1 Ki (média) 0,015 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,002 MC-1 Emax (média; CAMP HBL) 109% 9.56 Ac-Nle-ciclo(Glu-Orn-D-Fe-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 3625 MC-1 Ki (média) 4 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,5 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 102% 9.57 Ac-Nle-cic2o(Glu-0rn-D-Fe(2-C1)-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID NO:60)

Ensaio Resultado MC-1 Ki (média) 30 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 1 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 88% 9.58 Ac-Nle-cic2o(Glu-0rn-D-Fe(3-Cl)-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID NO:61)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 35 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 2 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 8 6% 9.59 Ac-Nle-cic2o(Glu-Orn-D-Fe(4-C1)-Arg-Dab)-NH2

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 1235 MC-1 Ki (média) 2 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,1 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 10 0% 9.60 Ac-Nle-cic2o(Glu-Orn-D-Fe(2-F)-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID NO:63)

Ensaio „/O NH RÂ/NH2 ò 0 Resultado MC-1 Ki (média) 18 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 0,8 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 95% 9.61 Ac-Nle-ciclo(Glu-Orn-D-Fe(4-F)-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID NO:64)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 20 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 1 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 102% 9.62 Ac-Nle-cic2o(Glu-Orn-D-Fe(3,4-F)-Arg-Dab)-NH2

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 40 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 1 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 97% 9.63 Ac-Nle-cic2o(Glu-0rn-D-Fe(4-Me)-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID NO:66)

MC-1 Ki (média) 3 MC-1 EC5O (média; cAMP HBL) 0,076 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 96% 9.64 Ac-Nle-cic2o(Glu-0rn-D-Fe(4-OMe)-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID NO:67)

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 2 MC-1 EC50 (média; CAMP HBL) 0,12 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 99% 9.65 Ac-Nle-cic2o(Glu-Pro-D-Fe-Arg-Dab)-NH2 (SEQ ID

Ensaio Resultado MC-4 Ki (média) 10.000 MC-1 Ki (média) 2.250 MC-1 EC50 (média; cAMP HBL) 332 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 102% 9.66 Ac-Nle-ciclo(Glu-Pro-D-Fe-Arg-Dab)-Trp-NH2 (SEQ ID NO:69)

Resultado MC-1 ECso (média; cAMP HBL) 0,18 MC-1 Emax (média; cAMP HBL) 97%

Embora a invenção tenha sido descrita em detalhes com referência particular a essas modalidades preferenciais, outras modalidades podem alcançar os mesmos resultados. Variações e modificações da presente invenção se tornarão 5 evidentes para aquele versado técnica e pretende-se cobrir todas essas modificações e equivalentes. A totalidade das revelações de todas as referências, pedidos de patente, patentes e publicações citadas acima estão aqui incorporadas a título de referência.

Claims (4)

1. PEPTÍDEO CÍCLICO, caracterizado por compreender a fórmula (V) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

em que R9 é - (CH2)x-C(=O)-NH-(CH2)y-, - (CH2)x-NH-C(=O)-(CH2)y-, - (CH2)x-C(=O)-(CH2)z-C(=O)-(CH2)y-, - (CH2)x-C(=O)-NH-C(=O)-(CH2)y-, - (CH2)x-NH-C(=O)-NH-(CH2)y-, - (CH2)x-NH-C(=O)-(CH2)z-C(=O)-NH-(CH2)y-, ou - (CH2)x-S-S-(CH2)y-; R11 é H ou um grupo acila C1 a C17, em que C1 a C17 compreende uma alquila, cicloalquila, alquilcicloalquila, arila ou alquilarila linear ou ramificada; R18 é -OH, -N(R19a)(R19b), -N(R19a)(CH2)w-(C1- C7)cicloalquila, ou -O-(CH2)w-(C1-C7)cicloalquila; cada um dentre R19a e R19b ser independentemente H ou uma cadeia de alquila C1 a C4 linear ou ramificada; R21a, R21b e R21c são independentemente, em cada caso, hidrogênio, halo, alquil-halo(C1-C10), alquila(C1-C10), alcóxi(C1-C10), alquiltio(C1-C10), arila, arilóxi, nitro, nitrila, sulfonamida, amino, amino monossubstituído, amino 5 dissubstituído, hidróxi, carbóxi, ou alcóxi-carbonila; R22 é H ou uma alquila, cicloalquila, alquilcicloalquila, arila ou alquilarila C1 a C9 linear ou ramificada; w é, em cada caso, independentemente 0 a 5; 10 x é 1 a 5; y é 1 a 5; e z é, em cada caso, independentemente 1 a 5.

2. PEPTÍDEO CÍCLICO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por compreender a fórmula:

em que y é 1 ou 2.

3. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, caracterizada por compreender um peptídeo cíclico ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, e um veículo farmaceuticamente aceitável.

4. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada por ser para uso no tratamento 5 de uma doença, indicação, condição ou síndrome mediada pelo receptor de melanocortina em um mamífero humano ou não humano.