JP3204510B2

JP3204510B2 - 勃起不全の診断および治療

Info

Publication number: JP3204510B2
Application number: JP52245594A
Authority: JP
Inventors: マック，イー．ハドリー
Original assignee: コンペティティブテクノロジーズ，インク．
Priority date: 1993-04-05
Filing date: 1994-04-04
Publication date: 2001-09-04
Anticipated expiration: 2016-09-04
Also published as: US6051555A; EP0696919B1; EP0696919A1; WO1994022460A1; US5576290A; EP0696919A4; DE69429768D1; DE69429768T2; JPH10509130A

Description

【発明の詳細な説明】勃起機能障害、すなわち勃起不全は開業医が遭遇する
恐らく最も一般的な男性の性的症候である。また、この
問題をよく理解し、その診断および治療に対して新規に
検討することにより、この問題に関して患者を助ける機
会を大幅に高めて来た。

陰茎の勃起は、最も簡単に言えば液圧事象であって、
弛緩した陰茎では空になっている血管が、全身的なレベ
ルに匹敵する圧力の血液で充填されることである。勃起
は、体と共に細動脈および血管の数洞平滑筋が弛緩し、
その結果これらの通路における抵抗が減少し、動脈血液
が陰茎中に流入する場合に起る。しかしながら、動脈血
液の退去は静脈抵抗の増加によって妨げられる。更に、
類洞構造の膨張状態はこの圧力を更に上昇させ、また、
静脈の流出を制限する最小量の膨張性白膜によって規制
される。このようにして、海綿体および海綿質は血液に
よって充填可能となり、心臓血液搏出量に対し過大な要
求を伴うことなく陰茎を勃起させることができる。詳細
については不明瞭な点が幾多あるとはいえ、増えつつあ
る証拠によれば、血管に作用する腸管ポリペプチド、恐
らくα−アドレナリン遮断、アセチルコリンおよび一般
化窒素によって補助されたものが勃起の間に生ずる血管
の変化を制御することを示している。

勃起については少なくとも３種類の制御が臨床的な重
要性を有している。すなわち、大動脈系からの適切な動
脈流入物の有効性、２つの経路−すなわち、反射発生経
路であって、外陰部神経が求心的に機能し、かつ副交感
神経線維が遠心的に作用するものと、性欲刺激性経路で
あって、非常に複雑であり、かつ多種多様な求心性経
路、未確認の中枢連結部および第二腰椎体節を介して第
十背面神経を経由する交感神経系流出物を包含するもの
とを含む神経学的制御、更に正常な勃起についての第三
の制御は、リビドの発現および陰茎の神経系制御に要す
るホルモン性テストステロンに基づく中枢神経系の制御
である。

勃起不全とは、性的試みの内少なくとも25％が性交に
適当な勃起およびその持続ができないことであると医学
的には定義されている。勃起機能障害の鑑別診断は、通
常大腿脈拍の減少、跛行または欠如を伴う大動脈のアテ
ローム性動脈硬化による勃起不全が見受けられるので、
勃起の正常な制御、たとえば主要血管不全症の制御を考
慮することによって最も良好に解決することができる。

より小さな動脈の疾病が勃起機能障害を惹き起こしつ
つあるという可能性は、現代の血液動力学技術をもって
追求可能である。海綿体中へパパベリンを注射した場合
に10分以内に正常な勃起を誘発すれば、それ以上血管成
分を試験する必要はない。すなわち、ドップラーおよび
超音波による検査によって、動脈、数洞構造または静脈
不全症を調べることができる。しかしながら、これらの
方法は広く利用できるわけではないので、鑑別診断は依
然として臨床的結果によって行なわれている。

末梢神経性勃起機能障害は脊髄損傷の結果として、自
律不全症の各種症候群において、またインシュリン依存
性の真性糖尿病を伴う約50％の男性において見出され
る。糖尿病において病歴は通常、神経病のその他の徴
候、たとえば状況的低血圧症、下痢および失禁を示して
いる。糖尿病に関連する勃起不全は、海綿体平滑筋の弛
緩の減損かも知れない。試験管内では、この応答が直接
的な電気または神経化学的刺激によって損われることが
示された。夜間の陰茎の腫脹状態の欠如は神経学的勃起
不全の症例を同定するために用いられて来た。

抗昇圧性薬剤、トランキライザー、抗抑制剤、および
数多くの他の薬剤は全て勃起性能力を減少させる可能性
がある。高血圧症および抗昇圧性の投薬は屡々勃起不全
の原因となる。１グループの高血圧症患者の17パーセン
トについて、何らかの治療前よりも性交能力が若干減少
することが報告された。利尿剤、中枢活性交感神経遮断
剤、β−遮断剤および末梢性活性剤は全て部分的または
完全な勃起不全を誘発する。これらの薬剤が勃起不全を
生ずるメカニズムは不明であり、また、どの薬剤がどの
患者に影響を及ぼすかを予測することは不可能である。
従って、本発明以前には、勃起不全の薬理学的原因と疾
病の心理学的影響と、その治療との間で試行錯誤法を用
いて弁別することが必要とされてきた。

アルコールは数多くのメカニズムによって勃起不全を
惹き起こす可能性があるが、その情緒的および社会的影
響からその薬理学的効果を解明することは非常に困難で
ある。勃起機能障害は側頭葉癲癇を伴う可能性があり、
若干の患者は超プロラクチン状態（hyperprolactinemi
a）を呈し、その他の患者にはその障害は明白な原因と
はならず、適切な機能に関連する未知の通路における異
常を反映するであろうと思われる。

精神性の因子は勃起不全の最も頻繁な原因と考えられ
ている。心配事、疲労、対人関係ストレスおよび慢性病
などが通常の要因である。抑鬱症は頻度が多いので別に
言及する必要がある。すなわち、勃起不全は正しい診断
と治療を必要とする。心因性勃起不全の患者は、ある状
況においては勃起が可能である。例えば、自慰の場合や
異なった相手と性交渉を行なう場合である。他方、内分
泌性勃起不全（例えば、下垂体または睾丸疾病によるテ
ストステロン欠乏、エストロゲン過剰および過プロラク
チン排出症候群を含む異常を包含する）は、徐々に発現
し、次いで定常的になりがちである。

勃起機能障害の特定の治療可能な原因を明らかにする
場合、各患者における機能障害の主原因を検出し得る臨
床記録に従うことが必要である。その出発点は詳細な性
的履歴と組合わせた注意深い病歴および身体検査であ
る。症候の期間、それが現れる状況、疾病または投薬の
履歴およびアルコール中毒または抑鬱症などについて患
者に質問するべきである。身体検査には末梢系反射およ
び陰茎領域における刺針知覚検査も行なう必要がある。
もし、既に述べた何らかの特定的状態が示唆されれば、
適切な治療法が明らかになる。勃起不全を患っている多
数の患者で、何等の明白な病因が確認されない場合に
は、通常次の２種類の付加的試験を行なう。

非立入り試験に関する「最も良い基準（gold standar
d）」は夜間の陰茎の腫脹状態の記録である。この試験
は睡眠実験室内で行うことができ、また数種類の装置は
家庭用にも入手可能である。この種の試験によって、有
る程度の勃起状態と膣内挿入に充分な緊張が持続された
ことを識別することが可能である。代替的に本発明に先
立って、医師は陰茎体にパパベリン、パパベリン＋フェ
ントラミン、あるいはプロスタグランディンE₁を直接注
射することができる。この方法で得られる強い勃起状態
は、勃起についての血管成分が適切であること、またあ
る程度有効な治療上の代替物があることを示している。
勃起を誘発できない場合には完全な血管の検査を行なう
べきである。

非特定的な原因の勃起機能障害を適切に治療するため
には、数種類の方法を選択する。上に示したように、パ
パベリンのみ、あるいはフェントラミンとの組合わせを
注射することにより、患者の約70％が30〜120分間持続
する勃起を誘発する。しかしながら、副作用としては、
痛み、斑状出血および時折話題となる陰茎強直症（持続
的な勃起であり、性交や自慰により緩和することが不可
能な状態）などがある。勃起機能障害を取除くためのこ
の解決法は依然として実験的なものであるが、広く採用
されている。本発明は「相乗的多元薬理学」の可能な効
果を提供し、それによって、より少ない量の体内（陰
茎）注射を利用し得るものであり、その結果、パパベリ
ンおよびその他の局部的注射薬剤にしばしば付随する不
快な陰茎強直症の問題を排除するものである。

現在、男性における性的機能障害について統一的な治
療法は存在しないが、大部分の薬剤対処法では、恰も欠
陥が本質的に（陰茎の中枢に）もともと存在しているか
のようにみなしているが、それが原因であることは滅多
にない。大部分の薬剤療法は、交感神経系（α−アドレ
ノセプター）活性を抑制し、かつ筋肉（括約筋）を弛緩
させることを目的とする薬剤のオート・インジェクショ
ン（体内）を包含する。既に述べたように、パパベリン
はこの種の機能障害に対する薬剤療法において最も頻繁
に利用され、平滑筋の非特定的弛緩剤として機能する。
プロスタグランディン類、特にＥ−シリーズに属するも
のもまた薬剤療法においてしばしば用いられる。それは
勃起性組織に対する平滑筋弛緩剤効果の故である。血管
に作用する腸管ペプチドが試験に使用され勃起を誘発し
たが、このペプチドの陰茎内注射は性交に必要な充分な
勃起を誘発するには有効でないことが立証されている。
一酸化窒素（ガス）は今や勃起の問題を生理学的に解決
するものであると考えられているが、満足すべき勃起を
達成するためには、如何にしてそれを陰茎に対し有効に
投与するかが不明である。

このような薬剤投与による対策に代るべき手段として
は、プラスチックチューブと吸引ポンプを用いて陰茎の
周囲に真空を生成させることがある。勃起が生じたと
き、ゴムバンドを陰茎の基部に配置すれば、満足すべき
性交が可能となる。付随的な選択は、数種類のタイプの
補綴物の何れを外科的に埋込むことであり、それらは数
多くの男女に成功裡に用いられて来た。最後に、性的治
療は心因性勃起不全に対して少なからぬ対処法があり、
更に維持的カウンセリングおよび元気付けが、勃起機能
障害、特に失敗の心配および恐れが局部的な勃起障害の
原因になっている全ての患者について必要な補助処置と
なる。

勃起機能障害を克服するためのこれらの対策はないよ
りもましであるが、もしその治療が何等の投与処置、た
とえば陰茎への直接的注射または補綴物の植込みを含ま
ないものであり、また代りに、より少ない損傷性方法論
に頼るものであれば、それはより好ましいことであろ
う。1980年代の初期において、抑鬱症のために経口的薬
剤トラゾドンを摂取した二、三百人の患者は、長時間
の、かつ苦痛を伴う勃起を予期せずに経験した。二、三
の症例では、勃起を停止させるために外科医を必要とし
た。このことがトラゾドンを、勃起を延長させることが
見出された最初の経口的薬剤とするのである。その副作
用は、トラゾドンが性的機能障害について容認可能な療
法ではないが、それは代替的により非投与的治療法がこ
の種の状態の処置に関して可能であるということを示唆
している。

処置のための本精神薬理学的対策は、脳内のノイロン
活性の改変を経る性的応答、すなわち性的起動力乃至リ
ビドの挙動的構成要素に最初に影響を及ぼす薬剤療法を
包含するけれども、この効果は性的起動力に限られるも
のではない。それは性的起動力を調整する脳領域内のノ
イロン活性の増大が示されて、勃起反射に関する応答閾
値を低下させるからである。実際のところ、脊髄および
脊柱上の中枢間の相互作用は正常な勃起機能に関して必
須である。神経薬理学的対策はまた、ノイロン活性にお
ける薬剤−誘発変化をも包含するが、作用の部位は脳、
脳幹、脊髄および／または末梢神経線維を含んでいても
よく、そして本来の効果は脊柱の反射機能の改変に限ら
れる。血管の薬理学的対策は、陰茎血管系の平滑筋応答
を改変するあらゆる薬理学的対策を含むものである。

ある種の薬剤は中枢的に作用する。これはそれらの作
用が中枢神経系のレベルにあるからである。中枢神経系
催眠通路の作用は勃起機能を抑制するように現れるのに
対し、催眠レセプターの抑制はこの種の作用を刺激する
ように出現する。オキシトシンは勃起機能の中枢刺激剤
のように現れ、そしてアポモルフィン（ドーパミン働
筋）が中枢神経系においてオキシトシンを解放すること
によって陰茎の勃起を誘発するという証拠が存在する。
しかし、アポモルフィンの臨床的応用可能性は副作用お
よび作用が短時間であるということによって部分的に制
限される。最も興味深いことは、齧歯類の研究において
脳の第三室に注入すると、オキシトシンおよびACTH/MSH
−様分子の両者が勃起を誘発することである。興味があ
るのは、齧歯類においてMSH−株ペプチドが緊張および
欠伸行動を惹き起こしたことであり、類似の現象が、本
発明による化合物を投与されたボランティアにも見られ
た。このようなわけで、本発明による化合物の作用は恐
らく陰茎のレベルではなく、むしろCNSのノイロンに作
用するものであることが推測できる。

心因性勃起不全を器質または血管障害から区別するこ
とに関連する問題の見地から、現在利用されているもの
に対する代替的対策が依然として医師により必要とされ
ている。代替的対策が依然として医師により必要とされ
ている。

従って、本発明の一つの特徴は、心因性勃起不全を器
質病変あるいは血管障害によりもたらされる性的機能障
害から識別する手段を説明することである。

本発明の第二の特徴は、心因性の理由によって惹き起
こされる性的機能障害を克服する手段を男性に与えるこ
とである。

本発明の更に他の特徴は、動物（特に哺乳動物、そし
てより詳細には、限定的ではないが人間）において（男
性における心因性の性的機能障害を克服するか、あるい
は女性における性的受容性を誘発することによる）リビ
ドの強化をもたらす際に活性である一連の化合物であっ
て、外科的処置、例えば注射あるいは非外科的方法、た
とえば眼、経口または他の経路による投薬により投与す
ればよいものを説明することである。

本発明のこれらの特徴および他の特徴は下記の詳細な
説明および実施例において一層容易に明らかとなろう。

本発明の生物学的に活性な化合物を含む線状および環
状ペプチドの構造は：またはそれらの混合物である。

本発明による化合物のこの表の記載において、アミノ
酸残基はそれらの慣用された意味を有している。従っ
て、“Nle"はノルロイシンを意味し、“Asp"はアスパラ
ギン酸を意味し、“His"は……グリシンを意味し、“Pr
o"はプロリンを意味し、“Tyr"はチロシンを意味し、そ
して“Ser"はセリンを意味する。

本発明の線状化合物は固相合成により合成し、そして
例えば、Sawyer他により報告された基本的方法［P.N.A.
S.USA 77:5754（1980）;P.N.A.S.USA 79:1751（198
2）；またはJ.Med.Chem.25:1022（1982）参照］およびA
l−Obeidi他により報告された特殊の方法［J.Med.Chem.
32:147（1989）およびJ.Med.Chem.32:25555（1989）参
照］に従って精製すればよい。

要約すれば、各化合物は、先ずｐ−メチルベンズヒド
リルアミン樹脂を調製し、引続きこれに対し所望のアミ
ノ酸を、そのN^a−Boc（“Boc"はｔ−ブチロキシカルボ
ニルを意味する）誘導体として結合することにより合成
した。ペプチド技術分野で周知のように、それぞれの三
官能性アミノ酸の反応性側鎖側基は適切な保護基の取込
みによって保護された。全てのアミノ酸残基が樹脂に結
合された後、ペプチド樹脂のアミノ末端はアセチル化さ
れ、保護ペプチドを樹脂から開裂させ、そして全ての保
護基は除去された。次いで、粗製化合物はシリカゲル上
で適当な溶剤を用いてイオン交換クロマトグラフィーに
より精製された。旋光性の値を基準として用い、Perkin
−Elmer 241 MC旋光計により水銀／グリーン線（546n
m）によって測定した。

この要約した手順の他に、他の樹脂および試薬を利用
するその他周知の手順を用いて本発明による化合物を調
製してもよい。しかし、製造の容易さと信頼性のため
に、本発明による化合物の合成に際して自動化された固
相化学的方法を利用することが好ましい。

より詳細には、本発明の線状化合物は一般に以下の実
施例に従って調製される。

実施例Ｉこの化合物は、ペプチド合成の固相法を利用して３倍
量過剰のアミノ酸を使用し、Ｎ^α−Boc−Lys−（N^e2Cl
z）をｐ−メチルベンズヒドリルアミン樹脂（pMBHA樹脂
2.0gr,0.7mmol NH₂/樹脂gr）に結合することによって調
製した。90分後、この樹脂をジクロロメタンで洗浄し、
中和し、そしてアミノ酸基を無水酢酸−ピリジン混合物
でアセチル化した。30分後ニンヒドリン試験によって樹
脂上に反応性アミノ基は全く検出されなかった。成長す
るペプチド鎖に対する各アミノ酸残基を結合するための
サイクルは以下のように構成されていた。すなわち、
（１）４回に及ぶ30−ml部分のCH₂Cl₂による洗浄、２分
／洗浄；（２）２％のアニソールを含有するジクロロメ
タン中の48％トリフルオロ酢酸30mlによるBoc基の開
裂、１回目の処理時間５分、２回目は20分間；（３）４
回に及ぶ30−ml部分のジクロロメタンによる洗浄、２分
／洗浄；（４）２回に及ぶジクロロメタン中10％ジイソ
プロピルエチルアミン30−ml部分の添加による中和およ
び２分間洗浄のための振盪；（５）４回に及ぶ30−ml部
分のジクロロメタンによる洗浄、２分／洗浄；（６）ジ
クロロメタン5ml中の３倍量過剰のBocアミノ酸誘導体、
DMF中のＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（HOBt）の1
mmol/ml溶液の2.4mlのHOBt（但し、Ｎ−Boc−N^imTos−H
isの場合を除く、術語“N^imTos"はＮ−イミダゾールト
シルを意味する）の添加、引続くDMF中ジシクロヘキシ
ルカルボジイミド（DCC）の1mmol/ml溶液の2.4mlのDCC
の添加。次いで、この混合物を２〜３時間に亘り振盪し
た（Trp、ArgおよびHisの場合にはDMFを結合溶媒として
用いた）；（７）結合完了の後（ニンヒドリン陰性）、
３回に及ぶ30−ml部分のジクロロメタンによる洗浄、２
分／洗浄；（８）3ml部分の100％エタノールによる洗
浄；（９）４回に及ぶ30−ml部分のジクロロメタンによ
る洗浄、１分／洗浄であった。表題化合物に相当する保
護ペプチド樹脂は、以下のＮ^α−Bocアミノ酸（または
誘導体）（添加の順序において）:N^α−Boc−Nⁱ−For−
Trp;N^α−Boc−ＮγTos−Arg;N^α−Boc−Ｄ−Phe;N^α−
Boc−N^imTos−His;N^α−Boc−Asp（βBzl）；およびＮ
^α−Boc−Nleの階段結合の後、得られた。結合反応にお
ける誘導体は次のように定義される。すなわち、“Nⁱ"
はＮ−インドリルを意味し、“2 Cl₂"は２−クロロベン
ゾイルオキシカルボニルを意味し、“For"はホルミルを
意味し、そして“Ｎγ”はＮ−グアニジノを意味してい
る。最後のアミノ酸を結合した後、Ｎ^α−Boc保護基を
除去し、アミノ基を中和し、そして２倍量過剰の無水酢
酸／ピリジン1:1混合物をもって１時間アセチル化し
た。このAc−Nle−Asp（βBzl）−His（N^im−Tos）−Ｄ
−Phe−Arg（Ｎγ−Tos）−Trp−（Nⁱ−For）−Lys（Ｎ
^ε−２−Clz）−ｐ−MBHA樹脂はジクロロメタンで洗浄
し、そして真空中で乾燥して2.1gを得た。保護ペプチド
樹脂の試料1.5gを液体HFによって開裂し、そして揮発性
物質の蒸発の後、乾燥し、清浄にしたペプチドを３×30
mlの無水ジエチルエーテルで洗浄し、そして３×30mlの
HoAc水溶液で抽出した。この残渣を凍結乾燥して粗製ペ
プチドを得た。次いで、これを2mlのNH₂OAc緩衝液（pH
4.5）中に溶解し、そしてカルボキシメチルセルロース
のカラム頂部のカートリッジ・フィルターを介して濾過
した。主ピークを収集し、かつ凍結乾燥して白色粉末を
得た。CMCクロマトグラフ的に純粋な粉末をHPLCで精製
して純粋な表題ペプチド64mgを得た。

本発明による環状ペプチド類似体の固相ペプチド合成
は慣用の固相合成技術によって行われる。簡単に要約す
れば、Ｎ^α−tert−ブチロキシカルボニル保護アミノ酸
およびそれらの誘導体は、３倍量過剰のBoc−保護アミ
ノ酸誘導体、2.4倍量過剰のDMF中Ｎ−ヒドロキシベンゾ
トリアゾール（HOBt）の1mmol/ml溶液（但し、Hisの場
合は除く）および2.4倍量過剰のDMF中ジシクロヘキシル
カルボジイミドの1mmol/ml溶液をもってｐ−メチルベン
ズヒドリルアミン樹脂に結合した。結合反応はジクロロ
メタン中で１乃至３時間にわたり行われ、そしてニンヒ
ドロンおよび／またはクロラニル試験によりモニター
し、これを必要により反復した。アミノ酸の反応性側鎖
は下記のように保護された。すなわち、Lys 2,4−ジク
ロロベンジルオキシカルボニル:Trp、ホルミル;Arg、ト
シル;His、トシル;GluおよびAsp、ベンジルエステル。
Ｎ−Boc保護基の開裂は、ジクロロメタン中２％アニソ
ールを含有する48％トリフルオロ酢酸をもって、それぞ
れ５分および20分間処理することによって行われた。

各アミノ酸残基を成長するペプチド鎖内に取込むため
のサイクルは以下のように構成されている。（１）CH₂C
l₂（４×30ml、１分／洗浄）による洗浄、（２）Bocの
保護は各工程において、２％アニソールを含有するCH₂C
l₂中の48％TFAによる各５分および20分間に及ぶ２回の
処理によって除去された、（３）CH₂Cl₂（２×3ml）に
よる洗浄、（４）CH₂Cl₂中10％ジイソプロフィルエチル
−アミン（２×30ml、３分／洗浄）により中和、（５）
CH₂Cl₂（３×30ml、２分／洗浄）による洗浄、CH₂Cl₂中
20mlのBoc−保護アミノ酸誘導体を添加し（但し、溶解
度の故でDMFがCH₂Cl₂に置換えられた際のTrp、Argおよ
びHisの場合を除く）、引続きHOBtを、更にDDCを添加
し、そして１〜３時間の振盪が続いた、（７）CH₂Cl
₂（３×30ml、２分／洗浄）による洗浄、そして（８）1
00％EtOH（３×30ml、２分／洗浄）による洗浄。結合の
完了はモニターされ、そして最後のアミノ酸が結合され
た後、Ｎ^α−Boc保護基は除去され、アミノ基は中和さ
れ、そして10倍量過剰のCH₂Cl₂中のＮ−アセチルイミダ
ゾールにより、またはCH₂Cl₂中の無水酢酸：ピリジン1:
1混合物（２倍量過剰、１時間）を用いてアセチル化し
た。

ペプチドは10％アニソールおよび８％1,2−ジチオエ
タンを含有する無水液体HF（樹脂10ml/1g）によって０
℃で、45分間に亘り樹脂から脱保護および除去された。
真空中における揮発性物質の蒸発の後、遊離のペプチド
はジエチルエーテルまたは酢酸エチル（３×30ml）によ
り洗浄され、次いで酢酸の30％水溶液（３×30ml）およ
び蒸留水（３×30ml）で抽出された。合わせた水性抽出
物を凍結乾燥して粗製ペプチドの白色粉末を得た。各ペ
プチドは、下記のような不連続勾配酢酸アンモニウム緩
衝液:0.01MのNH₄OAc（pH4.5）250ml、0.01MのNH₄OAc（p
H6.8）250ml、0.1MのNH₄OAc（pH6.8）250mlおよび0.2M
のNH₄OAc（pH6.8）250mlを用いて、カチオン交換カルボ
キシメチルセルロース樹脂上のカラムクロマトグラフィ
ーにより精製した。0.01MのNH₄OAc（pH6.8）の最後の部
分および0.1MのNH₄OAc（pH6.8）緩衝液の最初の半分の
間に溶離された主ピークを凍結乾燥して、白色粉末とし
て精製されたペプチドを得た。

より詳細には、本発明による環状化合物は以下の実施
例により調製された：実施例II 実施例Ｉにおけるように調製されたBoc−His（N^im−T
os）−Ｄ−Phe−Arg（Ｎγ−Tos）−Trp−（Nⁱ−For）
−Lys（N^c−2,4−Cl₂Z）−ｐ−MBHA樹脂1.4g（0.5mmo
l）から表題化合物の保護ペプチド樹脂が、Ｎ^α−Boc−
Asp（βBzl）およびＮ^α−Boc−Nleの階段結合によって
調製された。それぞれの結合反応は、一般的な固相ペプ
チドの方法論の下に報告された同一の結合体系に従うこ
とにより成就された。最後のアミノ酸の結合の後、Ｎ^α
−Boc保護基は除去され、アミノ基は中和され、そして1
0倍量過剰のジクロロメタン中のＮ−アセチルイミダゾ
ール（６〜８時間）か、あるいは２倍量過剰のジクロロ
メタン中の無水酢酸：ピリジン1:1混合物（１〜２時
間）によってアセチル化されて、保護ペプチド樹脂、す
なわちAc−Nle−Asp（βBzl）−His（N^im−Tos）−Ｄ−
Phe−Arg（Ｎγ−Tos）−Trp（Nⁱ−For）−Lys（Ｎ^ε−
2,4−Cl₂Z）−ｐ−MBHA樹脂を得た。真空乾燥したペプ
チド樹脂の試料1.0gを、アニソール1mlおよび1,2−ジチ
オエタン0.8mlの存在下で無水HFをもって０℃で45分間
処理した。

HF、アニソールおよび1,2−ジチオエタンを真空中で
蒸発した後、乾燥した生成物混合物を３回の30ml部分の
ジエチルエーテルで洗浄し、そしてペプチドを３回の30
ml部分の30％酢酸で抽出した。ペプチドの水性抽出物の
凍結乾燥の結果、粗製Ac−Nle−Asp−His−Ｄ−Phe−Ar
g−Trp−Lys−NH₂を得た。粗製ヘプタペプチドの一部
（110mg）を精製体系であって、粗製ペプチドをpH4.5の
0.01M NH₄OAc 2〜4ml中に溶解することを包含するもの
により精製し、そして不連続勾配0.01（pH4.5）、0.01
および0.02M NH₄OAc（pH6.8）（各250ml）をもったカル
ボキシメチルセルロースのカラム（2.0×25.0cm）をク
ロマトグラフに掛けた。280nmにおいて検出された主ピ
ークを0.1M NH₄OAc（pH6.8）緩衝液の最初の半分の間に
溶出し、そして凍結乾燥して線状ペプチドの白色粉末82
mgを得た。純粋線状生成物40.0mgは、純粋線状ペプチド
を５％HCl水溶液1ml中に溶解することによって環化し、
この溶液を５％HCl水溶液100mlと共に（塩化水素酸形状
の）ジエチルアミノエチルセルロースのカラム（1.0×1
5.0cm）上でクロマトグラフに掛け、そして溶出された
ピークを280nmでモニターした。収集されたペプチドの
ピークを凍結乾燥し、塩酸塩として線状ペプチドを得
た。このペプチド塩を乾燥DMFおよび第二アミンを含ま
ないDMF（減圧下でニンヒドリンより蒸留）3ml中に溶解
した。DMF中のこのペプチド溶液に対し無水K₂HPO₄を添
加し、反応混合物を氷浴中で０℃に冷却し、ジフェニル
ホスホリルアジド17mlを添加し、反応混合物を０℃で攪
拌し、次いで反応フラスコ全体を12℃の冷室に移した。
反応混合物を12℃で一晩中攪拌し、そして反応の完了は
0.1％トリフルオロ酢酸/CH₃CNをもってHPLC（Vydacカラ
ム、25.0cm×4.6mmによりモニターした。更に、ニンヒ
ドリン試験を用いて環化の完了を検出した。反応を10％
HOAc水溶液で急冷した後、環化生成物は、30％HOAcを
使用するP₄ポリアクリルアミドカラム（80.0cm×1.0c
m）上で脱塩することにより精製され、更に半分取HPLC
により精製されて純粋な表題生成物12mgを得た。［Al−
Obeidi他、上記参照］。

同様な方法ではあるが、適切な試薬の置換を伴う公知
の手順に従って、性欲刺激活性を示す下記のペプチドが
調製され、かつ試験された。

本発明によるそれぞれのペプチドは人間の男性におけ
る勃起を常に誘発し、そして全身的に投与すれば、検出
し得る副作用を全く伴わずに非常に低い投薬量で勃起す
る。その効果は明らかに中枢神経内で発生する。従っ
て、これらのペプチドによって誘発される勃起は、医師
をして脳から陰茎へのCNS−由来の衝動が損われていな
いか否かを決定させることになるであろう。もし、そう
であるなら、その性的機能障害は事実上心因性のもので
あるとすることができる。本発明によるペプチドに対す
る応答の失敗は陰茎または何処か、より高位の脊髄通路
のレベルにおける欠陥が示唆されよう。陰茎内への或る
物質（たとえば、パパベリン）の局所的注射と組合わせ
て用いれば、欠陥の真の本性を正確に突止めることがで
きる。

本発明による生物学的に活性なペプチドについての性
欲刺激特性に対する最近の観察所見は以下の実施例にお
いて示される。

実施例III ここで説明するペプチドは生理的食塩水ml当りペプチ
ド10mgの最終濃度まで滅菌法により調製された。一人に
対しこのペプチド10mgを供給する全投与量の他に、原料
物質0.1乃至0.3mlの投与量（各人に対しペプチド1mg乃
至3mgを供給する）もまた、ボランティアに対し注射さ
れた。0.1乃至0.2mlの投与量が最も屡々用いられる適量
である。

実施例IIにおいて同定されるペプチドの10mg投与量を
人間のボランティアの上腕または内腿に皮下的に与え、
勃起を６乃至８時間生じさせた。勃起の始りは注射後約
１乃至２時間で観られた。3.2mgの投与量でもそうであ
ったが、半分の投与量（5mg）のペプチドは４乃至６時
間に及ぶ継続した腫脹状態をもたらした。より少ない投
与量2.5mgでは２乃至６時間に及ぶオン−オフ勃起性応
答をもたらした。最小量（1.25mg）の投与においては、
この試験を受けたボランティアにおいて通常勃起活性は
全く認められなかった。3.75mgの投与量を受けたボラン
ティアは４乃至６時間に及ぶ長時間持続する勃起を生じ
た。過大な勃起性応答をもたらした全ての濃度におい
て、胃の不快が認められた。若干の例では、この不快さ
は相当なものであった。勃起をもたらしたより少ない投
与量の1.25乃至2.5mgでは胃の不快は全く認められなか
った。従って約1.0mg乃至10.0mgの投薬量は本発明によ
る所望の活性を示したけれども、望ましくない副作用を
伴わずに所望の勃起をもたらす、より低い範囲の投薬量
を用いるのが好ましい。従って、投与の経路が皮下また
は筋肉内であれば、ペプチド約1.5mg乃至2.5mgの投薬量
を供すべきことが好ましい。投与の他の経路によって、
この範囲は調整を必要とするが、選択された投与の経路
について調整された効果的な投薬量のより低い範囲を採
用すべきことが依然として好ましい。

本発明による他のペプチド濃度2.5mgにおける投与に続いて60分以内に勃起が誘発
された。この勃起は間欠的に６時間まで継続した。1.25
mgの投与量もまた勃起を誘発したが、これは最初に勃起
を起すまでにより長い時間が掛った。しかし、これもま
た間欠的に６時間まで持続された。胃の不快は全く経験
されなかった。

更に他の本発明によるリストアップされたペプチドも
また、非常に低い投与量（１〜3mg）において勃起性応
答を誘発することを示している。

勃起を誘発するペプチドのより低い投与量において、
射精の後に腫脹減退が来るが、これが何故より低い投薬
量が好ましいかという他の理由である。最初の腫脹減退
に続いて、次の勃起が（最初に与えた投薬量によって）
続き得るが、これは腫脹減退によって再び解放される。
そのようなわけで、本発明によるペプチドでは、薬剤、
たとえばプロスタグラディンおよびパパベリンを用いて
従来の治療法による陰茎への自動注射（auto−injectio
n）の場合のように、時に問題となるような長過ぎる強
直性（持続勃起症）を惹き起こすことは確認されていな
い。

性的機能障害に関して安全な治療を提供する他に、本
発明のペプチドはまた、医師によって皮下的または筋肉
内に投与することにより勃起の潜在能力についての迅速
かつ信頼性ある評価（診断）を提供することもできる。
このペプチドの使用は機能障害の二つの主要原因（心因
性および血管／器質）を迅速に識別することになり、そ
れは30乃至120分以内に完了可能であり、また家庭内で
自己評価可能である。本発明によるペプチドは正常なボ
ランティアにおいて勃起を誘発するのに100％有効なこ
とを証明しているので、本発明は勃起障害の評価に関し
て新しい最良基準となる筈である。現在の性欲刺激性評
価方法が非常に時間が掛り、従って患者にとって非常に
費用が掛ることもまた指摘されるべきである。

関連するペプチド、すなわちAc−Ser−Tyr−Ser−Nle
−Glu−His−Ｄ−Phe−Arg−Trp−Gly−Lys−Pro−Val
−NH₂が最大の投薬量（約20mg）を投与しても勃起性反
応を惹き起こせなかったことに注目するのは興味深い。
これは本発明によるペプチドの効能がその構造に関係す
ることを示唆している。

人間のボランティアにおいて勃起性応答をもたらす他
に、これらのペプチドをまた、ラットやマウスに対し皮
下的または筋肉内に投与すると、勃起性応答をもたらす
ことも確認されている。更に、化合物IIのペプチドを去
勢した犬に注射すると、勃起性応答を全く惹き起こさな
いが、その動物に先ずテストステロンを与えておけば、
勃起がみられた。これは、年齢と共にテストステロンの
レベルが衰えるつつある年輩男性の勃起不全の処置にお
いて、本発明が有効である証明足り得ることを示唆して
いる。器質的な機能障害として分類されるけれど、これ
らの個体は、本発明のペプチドをテストステロンまたは
他のアスドロゲンと別個に、あるいは連係して投与すれ
ば、本発明のペプチドに応答する筈である。

興味を引く疑問は、本発明によるペプチドが女性に対
し何らかの効果を有しているか否かに関する。人間につ
いての試験は全く行っていないが、本発明に関するペプ
チドを雌ラットの脳室に注入したところ、脊椎前彎（性
的体位）を誘発し、また本発明によるペプチドを引続き
雌家兎へ（皮下的）注射したところ、性的興奮に関連す
る行動的応答であると思われる尾振りの応答を誘発し
た。従って、本発明のペプチドはまた、抑制的性欲症候
群の治療を含む雌の性的応答を刺激する手段ともなり得
るものである。

雌のラットおよび家兎において観られる行動は、動物
畜産における本発明によるペプチドについての興味ある
可能性を示している。たとえば、本発明によるペプチド
を監禁状態にある希少な種に属する雌動物のリビドを高
めるために、彼等の発情サイクル中の適当な時期に投与
して彼等が性交をより受け入れ易くすると共にこのペプ
チドの投与に続く誘発された勃起応答から得られる増強
されたリビドを伴う雄動物を提供するようにしてもよ
い。このようにして、本発明によるペプチドを、危機に
曝され、あるいは家畜化された動物の繁殖用の補助薬と
して使用することもできる。

本発明によるペプチドはまた、人工受精プログラムに
おいて使用してもよい。たとえば、心因性および／また
は肉体的理由によって精子の収集のために使用する贋の
雌模型に乗り掛らない種馬に投与してもよい。更に、本
発明によるペプチドを、牧畜業プログラムにおいて、牡
牛から精液を収集するに際して用いる電気射精管（elec
tro−ejaculator probe）の代替物として使用してもよ
く、精子を採集するために必要な牡牛における勃起応答
をもたらすための電気的刺激を提供するよりは、寧ろこ
れらのペプチドを牡牛に対し勃起応答を提供する手段と
して投与し、次いで通常の方法において精子を人工膣内
に収集してもよい。

本発明はまた、人工受精用の精子を採集する診療所に
おいて、勃起が困難な場合に使用することができる。

人間を含む動物に対して本発明の性欲刺激性ペプチド
を投与するに際し、これらのペプチドは数多くの治療実
施法、たとえば皮下、体内または筋肉内注射において、
また眼に適用される局所的溶液によって、ピル、カプセ
ル等の経口手段により、更にまた、例えば経皮投与のた
めに直接陰茎に適用する局所的膏薬、軟膏およびクリー
ムによって投与すればよい。これらの治療実施法のそれ
ぞれにおいて、本発明によるペプチドは単独または本発
明による他の性欲刺激性ペプチドと共に、あるいは他の
性欲刺激性化合物、たとえばパパベリンとの組合わせに
よって投与すればよい。投与する場合、本発明によるペ
プチドは、適切な注射液、局所用溶液、ピル、カプセ
ル、局所用膏薬、軟膏、クリーム等の処方に関する配合
技術において公知の、例えば、適切な充填剤、緩衝液、
溶媒、担体、増量剤およびその他の慣用の物質との組合
わせて使用してもよい。

上記のように、自己の発明の好ましい実施態様を例示
し、かつ説明したが、本発明は変更および変形が可能で
あることは理解されるべきであり、従って、上に述べた
厳密な術語の限定を望むものではなく、本発明を様々な
用途および状態に適合せしめ得る変更および改変に役立
つものであることを望むものである。この種の改変およ
び変更は、たとえば哺乳動物に対する本発明によるペプ
チド投与のための異なった薬学的組成物；投与すべき組
成物におけるペプチドの異なった量；本発明によるペプ
チドを投与する異なった期間および手段；そして、たと
えば異なったペプチドの組合わせ、または性欲刺激性ペ
プチドと他の生物学的活性化合物（包含はするが、限定
はしない他の性欲刺激性化合物）との組合わせを含む投
与量中に含まれる異なった物質を包含していてもよい。
この種の変更および改変はまた、ここに記載した特定の
性欲刺激性ペプチドのアミノ酸配列順序における変形
は、ペプチドの性欲刺激性潜在力を変えることに関する
のではなく、投与すべき薬学的組成物中または体内にお
ける溶解度、身体によるペプチドの吸収、ペプチドの生
物学的作用が所望の効果をもたらし得る時間までの貯蔵
寿命あるいは身体内のペプチドの保護の変更に関する方
法において、配列順序を改変するものであり、更に類似
の変形を包含することをも意図するものである。従っ
て、この種の変更および改変は完全に均等物の範囲内に
あり、それ故に、以下の請求の範囲内に包含されるもの
である。

従って、私の発明およびそれを製造し、かつ利用する
方法および工程は当業者または当該技術に最も密接に関
連する全ての人が本発明を実施し、かつ利用し得るよう
に、このように詳細な、明瞭、簡潔そして精確な術語に
よって記載した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献米国特許4649191（ＵＳ，Ａ) Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｖｏｌ．４（1981）ｐ．241− 251 Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．32 （1989）ｐ．2555−2561 Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．32 （1989）ｐ．174−179 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 38/00 - 38/54 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】下記式〔Ｉ〕から〔VII〕で表わされる化
合物からなる群から選択されるペプチドを含有する、動
物の勃起機能障害を治療するための組成物。
【請求項２】下記式〔Ｉ〕から〔VII〕で表わされる化
合物からなる群から選択されるペプチドを含有する、動
物の雄の陰茎を勃起させる組成物。
【請求項３】下記式〔Ｉ〕から〔VII〕で表わされる化
合物からなる群から選択されるペプチドを含有する、動
物の雌の性的応答を刺激するための医薬組成物。
【請求項４】下記式〔III〕で表わされるアミノ酸連鎖
からなるペプチド。
【請求項５】下記式〔IV〕で表わされるアミノ酸連鎖か
らなるペプチド。
【請求項６】下記式〔Ｖ〕で表わされるアミノ酸連鎖か
らなるペプチド。
【請求項７】下記式〔Ｖ〕で表わされるアミノ酸連鎖か
らなるペプチド。
【請求項８】下記式〔VII〕で表わされるアミノ酸連鎖
からなるペプチド。