AT508554B1 - Chalkon-hydroxylase - Google Patents

Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft ein isoliertes Nukleinsäuremolekül, umfassend eine Nukleotidsequenz, welche für ein Polypeptid mit Chalkon 3-Hydroxylase-Aktivität kodiert, wobei die Nukleotidsequenz SEQ ID Nr. 1 umfasst oder mindestens 60% Identität zu SEQ ID Nr. 1 aufweist oder in der Lage ist mit einem Molekül umfassend die Sequenz aus SEQ ID Nr. 1 zu hybridisieren, wobei die Nukleotidsequenz für ein Polypeptid kodiert, welches das Motiv FASRPLSX1X2GX3 (GSAGGD)n umfasst, wobei X1 Threonin oder Serin, X2 Alanin oder Glycin, X3 eine beliebige Aminosäuresequenz mit 50 bis 200 Aminosäuren und n 0 oder 1 ist.

Description

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Beschreibung [0001] Die vorliegende Erfindung betrifft Nukleinsäuremoleküle, umfassend eine Nukleotidsequenz, welche für ein Polypeptid mit Chalkon 3-Hydroxylase-Aktivität kodiert.

[0002] Die Blütenfarbe ist eine der auffallendsten Eigenschaften von Zierpflanzen und ist daher ein bedeutender Faktor für ihren Marktwert. Neben der traditionellen Züchtung gewinnen gentechnische Ansätze zur Schaffung neuer Sorten immer mehr an Bedeutung. Beispiele dafür sind die Erzeugung blauer Nelken sowie die der so genannten blauen Rose, welche bereits weltweit in sehr vielen Ländern kommerziell erhältlich sind.

[0003] Die Ausprägung der Blütenfarben basiert hauptsächlich auf der Anwesenheit von zwei verschiedenen Pigmentgruppen, den Carotinoiden und den Flavonoiden. Für die Bildung der roten, blauen und lila Blütenfarbe ist hauptsächlich die Flavonoidklasse der Anthocyane verantwortlich, während gelbe Blütenfarbe in den meisten Fällen durch die Akkumulation von Carotinoiden entsteht. In einigen Pflanzenarten wird die gelbe Pflanzenfarbe jedoch von gelben Flavonoiden und deren biosynthetisch verwandten anthochloren Pigmenten (Chalkone und Aurone) gebildet. Daher kann eine Modifikation des Chalkon- bzw. Flavonoidstoffwechsels entscheidend zur Veränderung von Blütenfarben beitragen. Neben der Züchtung von Pflanzen mit blauen Blüten ist die Einführung der gelben Blütenfarbe in Zierpflanzen, von denen keine oder nur vereinzelte gelbe Sorten erhältlich sind, von besonderem Interesse. Oft führen nur kleine Änderungen in der Pigmentstruktur zu drastischen Farbveränderungen. Dies gilt vor allem für die Anzahl der Hydroxylgruppen in den Grundstrukturen.

[0004] Obwohl viele Flavonoide in chemisch reiner Form eine blassgelbe Farbe aufweisen, führt ihre Anwesenheit in Petalen nicht zur Ausprägung von gelber Blütenfarbe. Die sogenannten „gelben Flavonole" weisen neben dem gewöhnlichen 5,7-Hydroxylierungsmuster des A-Rings eine zusätzliche Hydroxylgruppe in Position 6 oder 8 auf, die eine Absorptionsverschiebung in den längenwelligen Bereich und damit eine Verstärkung der gelben Farbe bewirkt. Die Anwesenheit solcher höher hydroxylierten Verbindungen führt zur Ausprägung gelber Blütenfarbe. Quercetagetin wurde zuerst als gelbes Pigment in verschiedenen Tagetes-Arten identifiziert und kommt auch in den Blüten von Rudbeckia hirta vor.

[0005] Gelbe Flavone stellen die Hauptpigmente in einigen Blüten von Asteraceaen dar. Während die gewöhnlichen verbreiteten Flavone nicht zur Ausprägung von gelben Blütenfarben führen, bewirkt die Anwesenheit einer zusätzlichen Hydroxylgruppe an der Position 2' des B-Rings von Luteolin eine Gelbfärbung des Pigments. Isoetin (2'-Hydroxyluteolin) wurde als gelbes Hauptpigment von Heywoodiella oligocephala identifiziert. Die Einführung einer Hydroxylase, welche die 2'-Hydroxylierung katalysiert, könnte zur Bildung von gelb gefärbten Flavonen in den Blüten transgener Pflanzen führen, die generell nur gewöhnliche Flavone produzieren.

[0006] Im Gegensatz zu den gelben Flavonolen, bei denen die Anwesenheit einer zusätzlichen Hydroxylgruppe zur Ausprägung gelber Blütenfarbe führt, ist der Verlust einer Hydroxylgruppe an der Position 3 von Anthocyanen bzw. Anthocyanidinen für eine Verschiebung der Absorption in den kürzerwelligen Bereich und damit für die orange und gelbe Farbe der sogenannten 3-Deoxyanthocyane verantwortlich. 3-Deoxyanthocyane sind seltene pflanzliche Pigmente, die als solche nur in einigen wenigen Pflanzen wie Gesneriaceen, Zea mays (Mais) und in Sorghum-Arten (Hirse) Vorkommen. Drei Vertreter dieser Gruppe konnten identifiziert werden, Api-geninidin (3-Deoxypelargonidin), Luteolinidin (3-Deoxycyanidin) und Columnidin. Von diesen tragen jedoch nur Apigeninidin-Derivate zur gelben Blütenfarbe bei. Die anderen weisen eine orange- bis hellrote Färbung auf. Die biochemische Bildung der Flavan-4-ole als Vorläufer für die 3-Deoxyanthocyane wird durch die Reduktion der Carbonylgruppe der Flavanone an Position 4 bedingt. Diese Reaktion wird in einer großen Anzahl von Kultur-und Zierpflanzen durch die Dihydroflavonol-4-Reduktase katalysiert, findet aber gewöhnlich nur in Pflanzen statt, in denen die FHT-Reaktion gehemmt ist.

[0007] Die tiefgelben anthochloren Pigmente (Chalkone und Aurone) haben in der Natur nur eine beschränkte Verbreitung, kommen jedoch häufig in Asteraceae- oder Scrophulariaceae- 1 /109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Arten vor. Generell können zwei Arten von Chalkonen in den Blüten synthetisiert werden, die 6'-Hydroxychalkone (Phloroglucinoltyp) und die 6'-Deoxychalkone (Resorcinoltyp). Die entsprechenden Aurone sind die 4-Hydroxy- und die 4-Deoxyaurone (identische Position, unterschiedliche Nummerierung der Ringe). 6'-Deoxychalkone werden durch die Chalkonsynthase zusammen mit der Chalkonketidreduktase (CHKR, synonym Polyketidreduktase, PKR, Chalcone reductase) über ein Polyketid-Intermediat gebildet.

[0008] Chalkone sind pflanzliche Sekundärmetabolite und biochemische Vorläufer für alle Flavonoidklassen. Deshalb und aufgrund ihrer physiologischen Funktionen in Pflanzen, wie z.B. die Beeinflussung der Blütenfarbe, spielen sie eine wichtige Rolle in der Pflanzenphysiologie. Neben den gewöhnlichen 6'-Flydroxychalkonen, welche Intermediate der Biosynthese der weit verbreiteten 5-Flydroxyflavonoide darstellen, werden die selteneren 6'-Deoxychalkone häufig in Blüten von Asteraceen-Arten akkumuliert, da sie chemisch nicht zu den jeweiligen 5-Deoxyflavanonen umgesetzt werden können und auch von den Chalkonisomerasen (CHIs) der meisten Pflanzen nicht als Substrate akzeptiert werden. Die Akkumulation von 6'-Deoxychalkonen führt zur Ausprägung von gelber Blütenfarbe. 6'-Flydroxychalkone werden dagegen nur in seltenen Fällen im Pflanzengewebe akkumuliert, da sie leicht enzymatisch oder chemisch zu Flavanonen umgewandelt werden können. Daher sind sie nur in wenigen Fällen für Gelbfärbung von Blüten verantwortlich, wie in den gelben Blüten von Nelken (Dianthus caryophyllus), Löwenmäulchen (Antirrhinum majus) und Strohblumen (Helichrysum bractea-tum), da diesen Mutanten neben der CHI zumindest eine weitere Enzymaktivität des Flavonoidstoffwechsels fehlt.

[0009] Wie die Flavonoide, können auch Chalkone im B-Ring neben der Hydroxylgruppe an der Position 4 (entspricht der Position 4' bei Flavonoiden) weitere Hydroxylgruppen besitzen, und zwar an den Positionen 3 oder 3 und 5 (entsprechend den Positionen 3' oder 3' und 5' bei den Flavonoiden). Im Gegensatz zu der sehr gut untersuchten Hydroxylierung von Flavonoiden an der Position 3' und 3',5', welche von den CytochromP450 abhängigen Monooxygenasen Flavo-noid-3'-Hydroxylase (F3'H) bzw. Flavonoid-3',5'-Hydroxylase (F3',5'H) katalysiert werden, bestand für lange Zeit Unklarheit darüber, welches Enzym für die Einführung von zusätzlichen Hydroxylgruppen im B-Ring von Chalkonen verantwortlich ist. Es konnte gezeigt werden, dass die Einführung einer Hydroxylgruppe an der Position 3 von 6'-Deoxychalkonen durch eine Cy-tochrom-P450-abhängige Monooxygenase katalysiert wird. Untersuchungen mit rekombinanten F3'Hs von verschiedenen Pflanzen, welche Chalkone in ihren Blütenblättern akkumulieren, als auch von solchen, die keine Chalkone akkumulieren, zeigten jedoch, dass diese F3'Hs nicht in der Lage sind, die Hydroxylierung von Chalkonen zu katalysieren.

[0010] Wie schon erwähnt, handelt es sich bei den F3'Hs um membrangebundene Cytochrom (Cyt)P450 abhängige Monooxygenasen. Die Superfamilie der CytP450 Enzyme ist eine Gruppe sehr unterschiedlicher Enzyme, welche viele verschiedene und komplexe Oxygenierungsreakti-onen mit einer großen Anzahl von Substraten in Anwesenheit von NADPH oder NADH katalysieren. Sie beinhalten eine Hämgruppe und kommen sowohl in Pro- als auch in Eukaryoten vor. In Pflanzen kann eine außergewöhnlich hohe Anzahl von Cyt-P450 Genen gefunden werden. In Arabidopsis z.B. konnten 272 Cyt-P450 Gene detektiert werden. Die Sequenzidentitäten der CytP450 Enzyme sind oft sehr niedrig.

[0011] Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung von Nukleinsäuren kodierend für Polypeptide, die in der Lage sind, Chalkone im B-Ring zu hydroxylieren, um beispielsweise die Farbgebung bei Pflanzen zu beeinflussen.

[0012] Die vorliegende Erfindung betrifft ein isoliertes Nukleinsäuremolekül, umfassend eine Nukleotidsequenz, welche für ein Polypeptid mit Chalkon 3-Hydroxylase-Aktivität kodiert, wobei die Nukleotidsequenz SEQ ID Nr. 1 umfasst oder mindestens 60% Identität zu SEQ ID Nr. 1 aufweist oder in der Lage ist mit einem Molekül umfassend die Sequenz aus SEQ ID Nr. 1 zu hybridisieren, wobei die Nukleotidsequenz für ein Polypeptid kodiert, welches das Motiv FASRPLSXiX2GX3 (GSAGGD)n umfasst, wobei X, Threonin oder Serin, X2 Alanin oder Glycin, X3 eine beliebige Aminosäuresequenz mit 50 bis 200 Aminosäuren und n 0 oder 1 ist. 2/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 [0013] Es wurde erfindungsgemäß herausgefunden, dass Polypeptide, insbesondere Hydroxy-lasen, wie beispielsweise Flavonoid 3'-Hydroxylasen, welche ein bestimmtes Motiv (wie oben definiert) aufweisen, in der Lage sind, Chalkone an der Position 3 zu hydroxylieren. Die Kenntnis derartiger Hydroxylasen ermöglicht es die Expression dieser Hydroxylasen zu modulieren, um diese beispielsweise in vivo überzuexprimieren oder zu inhibieren. Insbesondere ermöglicht die Kenntnis dieser Enzyme die Menge an hydroxylierten Chalkonen in einer Pflanze bzw. Pflanzenzelle zu modulieren, um dadurch die Farbzusammensetzung in derselbigen zu verändern. So weisen Pflanzen, welche die erfindungsgemäßen Nukleinsäuremoleküle umfassen, beispielsweise Blüten mit einer intensiven Gelbfärbung auf.

[0014] Das erfindungsgemäße Nukleinsäuremolekül katalysiert die Hydroxylierung von verschiedenen Chalkonen (das inkludiert beispielsweise auch 6'-Deoxychalkone und Dihydrochal-kone) an der Position 3. Dies führt im Fall der 6'-Hydroxychalkone und 4-Deoxyaurone zu einer Intensivierung der Gelbfärbung durch die Anreicherung von Chalkonen mit einem 3,4-Hydroxymuster, und auch zu einer vermehrten Bildung von Auronen, da solche Chalkone auch die bevorzugten Precursor für Auron-bildende Enzyme darstellen. Im Fall der Dihydrochalkone wird die Bildung von 3-Hydroxychalkonderivaten begünstigt, die an der Pathogenabwehr beteiligt sind bzw. aufgrund ihrer antioxidativen Eigenschaften gesundheitsfördernde Wirkung besitzen.

[0015] Das erfindungsgemäße Nukleinsäuremolekül kann SEQ ID Nr. 1 als Nukleotidsequenz oder mindestens 60 %, vorzugsweise mindestens 65 %, vorzugsweise mindestens 70 %, vorzugsweise mindestens 75 %, vorzugsweise mindestens 80 %, vorzugsweise mindestens 85 %, vorzugsweise mindestens 90 %, vorzugsweise mindestens 95 %, vorzugsweise mindestens 97 %, vorzugsweise mindestens 98 %, vorzugsweise mindestens 99 %, insbesondere 100 %, Identität zu SEQ ID Nr. 1 aufweisen.

[0016] Identität zwischen mindestens zwei Sequenzen kann durch Überlagerung durchgeführt werden, bei der eine Nukleinsäure- oder Aminosäuresequenz mit mindestens einer weiteren entsprechenden Sequenz übereinander gelegt werden („Alignment"). Beispielsweise nach dem Verfahren von D. J. Lipman und W. R. Pearson (Science 227 (1985), 1435-1441) oder F. Cor-pet (Nucl. Acids Res. 16 (1988), 10881-10890). Vorzugsweise geschieht dies über Algorithmen, welche von kommerziell erhältlichen Computerprogrammen angewendet werden. Hierzu gehört beispielsweise das Programm Vector NTi""Suite 7.0, erhältlich von der Firma InforMax, Inc., USA, vorzugsweise mit den vorgegebenen Standard-Parametern. Eine weitere Software, mit deren Hilfe Sequenzidentität bestimmt werden kann, ist z.B. „Sequence Analysis Software Package der Genetics Computer Group, University of Wisconsin Biotechnology Center, 1710 University Avenue, Madison, WI53705". Diese Software überlagert ähnliche Sequenzen durch Zuordnung von Homologiegraden.

[0017] Das erfindungsgemäße Nukleinsäuremolekül ist in der Lage, mit einem Molekül umfassend die Sequenz aus SEQ ID Nr. 1 zu hybridisieren.

[0018] Hybridisierung bezeichnet die Bindung komplementärer Stränge von Nukleinsäuren (d.h. sense: Antisense-Stränge) miteinander durch Wasserstoffbindungen, ähnlich den Bindungen, die natürlicherweise in chromosomaler DNA Vorkommen. Dabei werden Stringenzniveaus verwendet, um eine Nukleinsäure mit einer Ziel-Nukleinsäure zu hybridisieren. Diese Bedingungen können leicht durch den Fachmann variiert werden. Erfindungsgemäß hybridisiert das Nukleinsäuremolekül unter mehr oder weniger stringenten Bedingungen.

[0019] Der Ausdruck „stringente Hybridisierung“ wird hier verwendet, um Bedingungen zu bezeichnen, unter welchen Nukleinsäurehybride stabil sind. Wie dem Fachmann bekannt ist, wird die Stabilität von Hybriden in der Schmelztemperatur (Tm) der Hybride reflektiert. Im Allgemeinen ist die Stabilität eines Hybrids eine Funktion der Natriumionenkonzentration und der Temperatur. Typischerweise wird die Hybridisierungsreaktion unter Bedingungen niedrigerer Stringenz, gefolgt von Waschungen variierender, aber höherer Stringenz, durchgeführt. Bezugnahme auf Hybridisierungsstringenz betrifft derartige Waschbedingungen.

[0020] Wie hier verwendet bezeichnet der Ausdruck "mäßig stringente Hybridisierung" Bedin- 3/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 gungen, die Ziel-Nukleinsäure gestatten, eine komplementäre Nukleinsäure zu binden, die etwa 60% Identität, vorzugsweise etwa 75% Identität, stärker bevorzugt etwa 85% Identität mit der Ziel-DNA hat; wobei mehr als etwa 90% Identität mit der Ziel-DNA besonders bevorzugt werden. Vorzugsweise sind mäßig stringente Bedingungen Bedingungen, äquivalent der Hybridisierung in 50% Formamid, 5 x Denhart-Lösung, 5 x SSPE, 0,2% SDS bei 42° C und nachfolgendes Waschen in 0,2 x SSPE, 0,2 % SDS bei 65° C.

[0021] Der Ausdruck "Hybridisierung mit hoher Stringenz" bezeichnet Bedingungen, die Hybridisierung von nur denjenigen Nukleinsäuresequenzen gestatten, die stabile Hybride in 0,018 M NaCI bei 65° C bilden (d.h., wenn ein Hybrid in 0,018 M NaCI bei 65° C nicht stabil ist, wird es unter Bedingungen hoher Stringenz, wie sie hier in Betracht gezogen werden, nicht stabil sein). Bedingungen hoher Stringenz können zum Beispiel durch Hybridisierung in 50 % Formamid, 5 x Denhart-Lösung, 5 x SSPE, 0,2 % SDS bei 42° C und nachfolgendes Waschen in 0,1 x SSPE und 0,1% SDS bei 65°C bereitgestellt werden.

[0022] Der Ausdruck "Hybridisierung mit geringer Stringenz" bezeichnet Bedingungen, äquivalent der Hybridisierung in 10% Formamid, 5 x Denhart-Lösung, 6 x SSPE, 0,2% SDS bei 42° C und nachfolgendes Waschen in 0,1 x SSPE, 0,2% SDS bei 50° C. Denhart-Lösung und SSPE (siehe z.B. Sambrook et al., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Labo-ratory Press, 1989) sind dem Fachmann bekannt, wie es andere geeignete Hybridisierungspuffer sind.

[0023] SEQ ID Nr. 1 hat erfindungsgemäß die folgende Nukleotidsequenz :

[0024] ATG ACT ATT CT ACCCCT ACT ACT CT ACCCTTCCCT AACTGCCTT ACT ACT GT ACGT AC TT CTT AACCT GCGCCCCCG

[0025] TCACCCTAACCGTCTCCCGCCGGGACCAAGCCCATGGCCGATCGTCGGAAACCTA CCGCACCTCGGCGCGAGTCCGC

[0026] ATCAGTCGCTGGCGACGTTGGCCGCAAAGTACGGCCCGTTGATGTACCTCCGACT CGGGTTTGTTGACGTGGTGGTG

[0027] GCGGCGT CTGCTT CAGTCGCTGCACAGTTTTT AAAAGTT CAT GAT CTT AACTT CGCA AGCCGGCCGCTGAGCTCTGG

[0028] CGGGAAGTATATCGCGTATAATTATCAGGATATGGTGTTTGCACCGTACGGTCCGA GAT GGCGGATGCTT AGG AAG A

[0029] TTT GCT CCGT GCAT AT GTTTT CTGCTAAAGCAAT GGACGGATTT CGT CAT GTT CGGC AGGAGG AAGTAGCTATACT C

[0030] ACGCGCACTTTAGTAAGCGCTGGAAAATCGCCGGTGAAGTTAGGTCAAATACTTAA CGT GTGCACCACGAACGCATT

[0031 ] AGCACG AGTGGT GTTAGGT CGG AG AGTATT CGCCG ACGG AAGT GCAGGTGGT GAT CCGAAGGCGGATGAGTTCAAGG

[0032] AT AT GGTGGT GG AGCT GATGGT GTT GGCCGG AG AATTT CACAT CGGT G ACTTT AT C CCGGCGCTTGACTGGCTGGAC

[0033] CT GCAAGGCATTAAAAACAAG ATG AAG AAACTT CACGCTCGATT CG ATT CGTT CCTT CACGGG AT CCTT GAAG AGCA

[0034] T AAGT CCGGCAAGTTTGGCGCGCCG AGT CAT GGT G ATTT GTT G AGCACATT GAT CT CGTTGAAGGATGATGCCGATG

[0035] GTGAAGGCGGGAAGCTTTCAGATGTTGAAATCAAAGCTTTGCTTCTGAACTTATTTG TCGCCGGAACAGACACATCA

[0036] TCAAGTACAGTGGAATGGGCAATAGCCGAGCTAATTCGACATCCAAAGCTACTAAA ACAAGCCCAAAAAGAAATGGA

[0037] C AAT GTAGTTGGT CG AG ACCGGCTT GTAACT G AATT AG ACTTAAACG AGTT AAATTT T CT ACAAGCCATT GT AAAAG

[0038] AG ACCTTTAGGCTT CACCCTT CAACACCACT CT CGTT ACCAAG AATTGCAT CAG AG A GTTGT G AAGTT GACGG AT AT

[0039] T ACATT CCCAAGGG AT CCACGCT CCTTGTT AAT GT GT GGGCCATTGCTCGTG ACCC G AAT GT GTGGGCT G ACCCACT

[0040] T G AATT CCGGCCCATGCGGTT CTTGCCTGGAGGCG AAAAGCCT AAT GTT GAT GTT C 4/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

AAGGAAACAACTTTGAAGTTA

[0041] TACCGTTTGGGGCTGGGCGAAGGATTTGTGTGGGTATTAGTCTAGGGTTGAGAATG GT CCAGCTACTTGTTGCAACA

[0042] TTGGTTCAAACCTTTGATTGGGAATTGGCTAATGGGTTAAACCCGGAGAAGCTAAAC ATGGATGAAGCCTTTGGGTT

[0043] AACCCTTCAGAAGGCTGAGCCCTTGATGGTGCACCCAATGCCGAGACTAGCTCCAC ACGTGTATGGAAGTCATTAA

[0044] Das von SEQ ID Nr. 1 kodierte Polypeptid hat erfindungsgemäß die folgende Aminosäuresequenz:

[0045] MTILPLLLYPSLTALLLYVLLNLRPRHPNRLPPGPSPWPIVGNLPHLGASPHQSLATLAA KYGP

[0046] LMYLRLGFVDVVVAASASVAAQFLKVHDLNFASRPLSSGGKYIAYNYQDMVFAPYGPR WRMLRK

[0047] ICSVHMFSAKAMDGFRHVRQEEVAILTRTLVSAGKSPVKLGQILNVCTTNALARVVLGR RVFAD

[0048] GSAGGDPKADEFKDMVVELMVLAGEFHIGDFIPALDWLDLQGIKNKMKKLHARFDSFL HGILEE

[0049] HKSGKFGAPSHGDLLSTLISLKDDADGEGGKLSDVEIKALLLNLFVAGTDTSSSTVEWAI AELI

[0050] RHPKLLKQAQKEMDNVVGRDRLVTELDLNELNFLQAIVKETFRLHPSTPLSLPRIASESC

EVDG

[0051] YYIPKGSTLLVNVWAIARDPNVWADPLEFRPMRFLPGGEKPNVDVQGNNFEVIPFGAG

RRICVG

[0052] ISLGLRMVQLLVATLVQTFDWELANGLNPEKLNMDEAFGLTLQKAEPLMVHPMPRLA

PHVYGSH

[0053] (SEQ ID Nr. 2) [0054] Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist das Motiv FASRPLSTAGXs (GSAGGD)n oder FASRPLSS-GGX3 (GSAGGD)n.

[0055] Polypeptide, welche dieses Motiv aufweisen, sind besonders gut geeignet, um erfindungsgemäß eingesetzt zu werden.

[0056] Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft einen Vektor umfassend ein Nukleinsäuremolekül gemäß der vorliegenden Erfindung.

[0057] Die Nukleinsäuremoleküle der gegenständlichen Erfindung können in einen Vektor eingebracht werden. Mit Hilfe dieses Vektors können die Nukleinsäuremoleküle in Zellen von Pflanzen oder Mikroorganismen eingebracht werden. Die verwendeten Vektoren können für die Klonierung oder für die Expression von entsprechenden Produkten eingesetzt werden. Daher sind in den Vektoren entsprechende Elemente wie Promotoren, Replikationsursprünge, usw. vorgesehen. Die erfindungsgemäß eingesetzten Vektoren können einen Pflanzenzellen wirksamen Promotor, wie beispielsweise den CaMV 35S-Promotor, den Nopalinsynthase-Promotor oder den Saccharosesynthase-Promotor, enthalten.

[0058] Falls die Vektoren dazu verwendet werden, um das erfindungsgemäße Nukleinsäuremolekül in das Genom einer Zielzelle einzubringen, können am Vektor entsprechende Elemente vorgesehen sein, die eine Rekombination der Nukleinsäure in das Genom ermöglichen.

[0059] Vektoren, welche erfindungsgemäß eingesetzt werden können, sind dem Fachmann hinreichend bekannt und können auf verschiedenste Weise in eine Zelle eingebracht werden. So kann der Vektor gemäß der vorliegenden Erfindung durch Elektroporation, Mikroprojektil-Bombardierung, Transfer mittels Agrobakterium oder durch RNA- bzw. DNA-Viren in die Zielzelle eingebracht werden.

[0060] Ein noch weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft eine Zelle, insbesondere Pflanzenzelle, umfassend ein Nukleinsäuremolekül oder einen Vektor gemäß der vorliegenden Erfindung. Selbstverständlich ist es auch möglich das Nukleinsäuremolekül bzw. den Vektor 5/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 gemäß der vorliegenden Erfindung in anderen Zellen, wie beispielsweise Hefen, E. coli, fila-mentösen Pilzen und dergleichen zur Verfügung zu stellen.

[0061] Ein noch weitere Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft die Verwendung der erfin-dungsgemäßen Nukleinsäuremoleküle oder Proteine bei der Herstellung von Chalkonderivaten mit einem 3,4-Hydroxylierungsmuster, wie z.B. 3-Hydroxyphloretin-derivate, Butein und Eriodic-tyolchalkon.

[0062] Die Nukleinsäuremoleküle der vorliegenden Erfindung können in Pflanzenzellen und somit in Pflanzen eingebracht werden, um transgene Pflanzen herzustellen, welche in der Lage sind, das erfindungsgemäße Polypeptid zu exprimieren. Daher betrifft ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung auch eine transgene Pflanze umfassend ein Nukleinsäuremolekül oder einen Vektor gemäß der vorliegenden Erfindung. Das erfindungsgemäße Nukleinsäuremolekül bzw. der erfindungsgemäße Vektor kann in Pflanzenzellen und Pflanzen mit Verfahren eingebracht werden, die dem Fachmann hinreichend bekannt sind.

[0063] Vorzugsweise ist die Pflanze ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Zierpflanzen, wie beispielsweise Usambaraveilchen, Azaleen, Rhododendren, Pelargonien, Fuchsien, Cyclamen, Weihnachtssterne, Antirrhinum, Aster (Asteraceae), Begonia (Begoniaceae), Cal-listephus (Asteraceae), Campanula (Campanulaceae), Catharanthus (Apocynaceae), Chrysanthemum (Asteraceae), Cineraria (Asteraceae), Dedanthremum (Asteraceae), Dianthus (Cary-ophyllaceae), Dahlia (Asteraceae), Euphorbia (Euphorbiaceae), Gerbera (Asteraceae), Hydran-gea (Hydrangeaceae), Lilium (Liliaceae), Lisianthus (= Eustoma (Gentianaceae)), Myosotis (Boraginaceae), Nierembergia (Solanaceae), Orchidaceae, Osteospermum (Asteraceae), Petu-nia (Solanaceaea), Rosa (Rosaceae), Saintpaulia (Gesneriaceae), Scaevola (Goodeniaceae), Sinningia (Gesneriaceae), Streptocarpus (Gesneriaceae), Torenia (Linderniaceae), Tulipa (Liliaceae), Verbena (Verbenaceae), Veronica (Plantaginaceae), Viola (Violaceae) und Malus sp.. Durch die Anwesenheit des erfindungsgemäßen Nukleinsäuremoleküls werden auch gentechnologische Ansätze, die auf Polyketidreduktase oder Auronsynthase beruhen, wesentlich verstärkt. Soll ein rein gelber Farbton erzielt werden, werden vorzugsweise weiße oder cremefarbene Pflanzen eingesetzt, dabei sind Chalkonisomerase-Mutanten oder Pflanzen, die eine Polyketidreduktase besitzen, bevorzugt. Beim Einsatz von rosa oder rotblühenden Pflanzen kommt es zur Ausbildung von orangefarbenen oder lachsfarbigen Blüten.

[0064] Es hat sich zudem gezeigt, dass Pflanzen, welche das erfindungsgemäße Polypeptid -kodiert durch das erfindungsgemäße Nukleinsäuremolekül - exprimieren, insbesondere übe-rexprimieren, eine erhöhte Resistenz gegenüber Pathogenen, insbesondere gegenüber Pilzen, Viren, Viroiden, Bakterien und Nematoden, aufweisen. Insbesondere zeigen derartige Pflanzen Resistenzen gegenüber Puccinia/Ustilago, Phytophora, Blumeria/Peronosporacea, barley yellow dwarf virus, sugarcane mosaic virus, plum pox, Xanthomonas campestric pv. Citri, Erwinia amylovora, Erwinia carotovora, Meloidogyne incognita und Heterodera schachtii.

[0065] Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung betrifft eine Schnittblume oder Samen einer transgenen Pflanze gemäß der vorliegenden Erfindung.

[0066] Die gegenständliche Erfindung wird ferner anhand der folgenden Figuren und Beispiele eingehender erläutert, ohne jedoch auf diese beschränkt zu sein.

[0067] Fig. 1 zeigt ein paarweises Alignment der Cosmos CH3H und F3'H Aminosäurese quenzen.

[0068] In Fig. 2 sind Alignments von Regionen verschiedener F3'Hs Aminosäuresequenzen abgebildet.

[0069] In Fig. 3 sind die Substratspezifitäten von Cosmos F3'H und M2 in Prozent relativ zu Naringenin (100%) dargestellt.

[0070] Fig. 4 zeigt eine schematische Darstellung der Konstruktion von Chimären und mutierten Genen der CH3H bzw. F3'H aus Cosmos sulphureus und Umsatzraten der resultierenden rekombinanten Enzyme (0-5%: -, 6-30%: +, 31-60%: ++, 61-100%:+++). 6/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 [0071] Fig. 5 zeigt die verwendeten Primer für die Konstruktion der Chimären Gene.

[0072] Fig. 6-17 zeigen die Nukleinsäuresequenzen verschiedener Flavonoid-Hydroxylasen. BEISPIELE: BEISPIEL 1:

MATERIAL UND METHODEN PFLANZENMATERIAL

[0073] Die Untersuchungen wurden mit Blütenblättern von Cosmos sulphureus cv. „Sunny Goldgelb" (Austrosaat, Österreich) durchgeführt. Das Pflanzenmaterial wurde im Sommer 2006 und Sommer 2007 gesammelt, in flüssigem Stickstoff schockgefroren und bei -80° C gelagert.

CHEMIKALIEN

[0074] [14C]lsoliquiritigenin (ISO) wurde ausgehend von 4-Hydroxy[ring-U-14C]Benzaldehyd (33.1 Mbq/mg) (Amersham International, UK) wie in Halbwirth et al. (2006) [Plant Science 170 (2006) 587-595] beschrieben synthetisiert. Die Synthesen von [14C]Naringenin (NAR), [14C]Dihydrokaempferol (DHK), [14C]Kaempferol (KAM) und [14C]Apigenin (API) wurden gemäß Halbwirth and Stich (2008) [Phytochemistry 67 (2006) 1080-1087] durchgeführt: Für die Naringeninsynthese wurden [2-14C]Malonylcoenzym A (55 mCi/mmol) (Amersham International, UK) und rekombinante Chalkonsynthase verwendet, und die anschließenden Synthesen von DHK, KAM und API wurden jeweils mit rekombinanter, Flavanon-3-Hydroxylase aus Malus domestica, rekombinanter Flavonol-Synthase aus Rudbeckia hirta und mikrosomalen Enzympräparationen mit hoher Flavon-Synthasell-Aktivität aus Dahlia variabilis durchgeführt.

KLONIERUNG DER COSMOS SULPHUREUS CH3H

[0075] Für die cDNA-Synthese wurde mRNA aus den Cosmos sulphureus-Blütenblättern mit dem pMACS mRNA Isolation kit (Miltenyi Biotec) extrahiert, und die reverse Transkription wurde mit dem RevertAid H Minus MuLV reverse transcriptase-Kit (Fermentas Life Science) und dem Oligo(-dT) Anker-Primer GACCACGCGTATCGATGTC-GAC(T)16V durchgeführt. Eine RT PCR wurde dann mit den degenerierten Primern TGGMGDATGCTKMGGAARATYTG (fonward pri-mer) und GCCCATTCMAYNGTRCTAGATGA (reverse primer) durchgeführt, welche aus den konservierten Regionen folgender Asteraceae-F3'H-Sequenzen aus der NCBI GenBank abgeleitet wurden: Rudbeckia hirta (Acc.-No: FJ216431), Echinops bannaticus (Acc.-No: FJ753549), Centaurea cyanus (Acc.-No: FJ753550), Gerbera hybrida (Acc.-No: ABA64468), Osteosper-mum hybrida (Acc.-No: ABB29899), Cichorium intibus (Acc.-No: FJ753548) und Callistephus chinensis (Acc.-No: AF313488). Der gesamte, Open Reading Frame' (ORF) wurde dann mit den spezifischen Primern ATGACTATTCTACCCCTACTACTC (forward primer) und CCTTAATGACTTCCATACACGTG (reverse primer) amplifiziert, welche aus den bei der 5'- und 3'-RACE erhaltenen Fragmente abgeleitet wurden.

SEQUENZANALYSEN UND KONSTRUKTION VON CHIMÄREN GENEN

[0076] Paarweise und multiple Sequenzalignments wurden mit dem Softwaretool ClustalW durchgeführt, um Regionen zu identifizieren, die die Determinierung der Substratspezifität beeinflussen könnten. Folgende F3' H-Sequenzen, hauptsächlich aus Asteraceae Arten, wurden für multiple Sequenzalignments verwendet: Cosmos sulphureus (Acc.-No: FJ216426), Dahlia variabilis (Acc.-No: FJ216428), Tagetes erecta (Acc.-No: FJ216430), Rudbeckia hirta (Acc.-No: FJ216431), Echinops bannaticus (Acc.-No: FJ753549), Centaurea cyanus (Acc.-No: FJ753550), Gerbera hybrida (Acc.-No: ABA64468), Osteospermum hybrida (Acc.-No: ABB29899), Cichorium intibus (Acc.-No: FJ753548), Antirrhinum majus (Acc.-No: DQ272592) and Arabidopsis thaliana (Acc.-No: AF271651) (Schlangen et al. 2009). Ein paarweises Sequenzalignment wurde mit der aufgelisteten F3'H aus Cosmos sulphureus (Acc.-No: FJ216426) gemacht. Chimäre Gene, die aus cDNA-Fragmenten der erwähnten F3'H aus Cosmos sulphureus sowie aus 7/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 cDNA-Fragmenten der neu isolierten Sequenz bestehen, wurden nach Seitz et al. (2007) hergestellt [FEBS letters 581 (2007) 3429-3434], Dafür wurden die Fragmente, die fusioniert werden sollten, mit einer Pfu DNA polymerase (Promega, Germany) in separaten PCR-Reaktionen amplifiziert und 10 Minuten in einem Gesamtvolumen von 20 μΙ mit jeweils ca. 50 ng cDNA von jedem Fragment und einer T4 DNA ligase (Promega, Germany) ligiert. Die verdünnte Ligation wurde als Template für die anschließende proofreading-PCR verwendet, in der das gesamte Chimäre Gen mit dem Taq/Pwo polymerase System (Invitrogen, UK) amplifiziert wurde.

INSERTIONEN ODER DELETIONEN VON AMINOSÄURERESTEN

[0077] Insertionen von Aminosäureresten wurden mit Primern eingeführt, die über einen Überhang von Basen verfügen, die für die jeweiligen Aminosäurereste kodieren, die inseriert werden sollten. Deletionen wurden mittels Amplifikation von zwei Fragmenten der jeweiligen F3'H cDNA eingefügt, denen die Basen fehlen, die für die Aminosäurereste kodieren, die deletiert werden sollten. Die anschließende Fusion der beiden amplifizierten Fragmente wurde wie bei der Konstruktion der Chimären Gene beschrieben durchgeführt.

GEZIELTE MUTAGENESE

[0078] Gezielte Mutagenesen wurden mittels der Megaprimer-PCR durchgeführt. Diese PCR wurde in zwei Schritten gemacht: in der ersten PCR wurde ein Megaprimer mit Pfu DNA Polymerase (Promega) amplifiziert. Dafür wurde das Plasmid mit der inserierten cDNA, die mutiert werden sollte, als Template verwendet. Als Primer wurden einerseits ein interner Primer verwendet, der an der Stelle bindet, in der die gewünschte Mutation eingefügt werden soll, und über die dafür notwendige veränderte Basenabfolge verfügt, sowie ein externer Expressionsprimer. Dieses amplifizierte mutierte Fragment wiederum wurde dann in einer zweiten PCR als Primer zusammen mit dem korrespondierenden Expressionsprimer verwendet, um den gesamten ORF mit den gewünschten Mutationen mit dem 'Expand High Fidelity PCR System' (Roche) zu amplifizieren.

HETEROLOGE EXPRESSION IN HEFE

[0079] Für die heterologe Expression wurden die Proofreading-Amplikons in den Hefe-Expressionsvektor pYES2.1/V5-His-TOPO® (Invitrogen, UK) ligiert und in.E. coli TOP10F. (Invitrogen, UK) transformiert. Die Identifizierung der sense-Konstrukte erfolgte mit einer PCR, bei der ein Gen-spezifischer forward- und ein Plasmid-spezifischer reverse-Primer verwendet wurde. Sense-Konstrukte wurden isoliert und die richtige Sequenz durch Sequenzierung bestätigt. Gewünschte Plasmide wurden dann in den Hefestamm INVSc 1 (Invitrogen, UK) transformiert. Die heterologe Expression wurde nach in der Wissenschaft bekannten Methoden durchgeführt und die präparierten Proteine wurden in flüssigem Stickstoff schockgefroren und bei -80 °G gelagert. Die Proteinmenge in den Präparationen wurde nach einer modifizierten Lowry Methode durchgeführt.

ENZYM-ASSAYS UND IDENTIFIZIERUNG DER PRODUKTE

[0080] Um die Substratspezifität der heterolog exprimierten F3'Hs zu bestimmen, wurden folgende Enzymtests durchgeführt: 20 pg der rekombinanten Wildtyp CH3H bzw. 50 pg der Hyb-rid-Proteine wurden mit 0,25 nmol [14C]-markierten Chalkon- oder Flavonoid-Substraten in Anwesenheit von 10 mM NADPH und 0,1 Μ KH2PO4-K2HPO4 (mit 0,4% Na-Ascorbat, pH: 7,5)-Puffer bei 30° C inkubiert. Nach 30 min wurden die enzymatischen Reaktionen mit 10 pl Eisessig gestoppt und die phenolischen Verbindungen zweifach mit EtOAc extrahiert. Die organischen Phasen wurden auf Celluloseplatten aufgetragen und in CAW (Chloroform: Eisessig Wasser, 10:9:1) chromatographiert. Detektion und Quantifizierung der Radioaktivität erfolgte mittels TLC Analyse.

KINETISCHE DATEN

[0081] Kinetische Daten (scheinbare Michaelis-Konstante (Km) und maximale Reaktionsge- 8/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 schwindigkeit (Vmax)) wurden mittels Line-weaver-Burk-Geraden bestimmt.

ERGEBNISSE

KLONIERUNG UND SEQUENZANALYSE DER COSMOS SULPHUREUS CH3H CDNA

[0082] In diesem Beispiel konnte die komplette codierende Sequenz einer cDNA aus Cosmos sulphureus mithilfe von degenerierten Primern aus verschiedenen Asteraceae Arten (NCBI GenBank Acc-Nos: FJ216431, FJ753549, FJ753550, ABA64468, ABB29899, FJ753548 und AF313488) und anschließenden RACE-Techniken isoliert werden. Die abgeleitete Aminosäuresequenz dieses Klons verfügt über alle konservierten Motive von membrangebundenen CytP450-Proteinen (wie den N-terminalen hydrophoben Membrananker, die hochkonservierte Häm-Domäne usw.). Die Sequenz dieses cDNA-Klons wurde in die EMBL/GenBank-Datenbanken unter der folgenden Accession-Number eingetragen: FJ216429. Alignments mit F3'H-Sequenzen, hauptsächlich aus Asteraceae-Arten, welche nicht oder nur im geringen Ausmaß in der Lage sind, Chalkone zu hydroxylieren, zeigen, dass die abgeleitete Aminosäuresequenz von der isolierten cDNA aus Cosmos sulphureus hohe Sequenzidentitäten mit den alignierten F3'Hs aufweist. Das paarweise Alignment mit der schon charakterisierten F3'H aus Cosmos sulphureus (Acc.-No: FJ216426) zeigt, dass diese beiden Sequenzen nicht identisch sind und über eine Sequenzidentität von 84% verfügen (Fig. 1).

ENZYMAKTIVITÄTEN DER PUTATIVEN COSMOS SULPHUREUS CH3H

[0083] In enzymatischen Studien mit dem rekombinanten Enzym, welches bei der heterologen Expression des cDNA-Klons aus Cosmos sulphureus gewonnen wurde, konnten hohe katalytische CH3H-Aktivitäten mit dem 6'-Deoxychalkon Isoliquiritigenin gezeigt werden. Kinetische Studien zeigten, dass der höchste Vmax/Km (18,01/s*kg) mit Iso als Substrat beobachtbar ist (Tabelle 1).

[0084] Deshalb wurde dieses Protein aus Cosmos sulphureus CH3H genannt. Zum Vergleich wurde die rekombinante F3'H aus Cosmos sulphureus (Accession No: FJ216426) mit den gleichen Substraten getestet. Diese Tests bestätigten die F3'H-Aktivität und die fehlende CH3H-Aktivität dieses Enzyms. Die Umsatzraten der beiden rekombinanten Proteine sind in Fig. 4 aufgelistet.

IDENTIFIZIERUNG VON REGIONEN, DIE BEI DER CH3H-REAKTION EINE ROLLE SPIELEN KÖNNTEN

[0085] Um Regionen zu identifizieren, die bei der CH3H Aktivität in C. sulphureus CH3H eine Rolle spielen könnten, wurden Alignment Studien durchgeführt. Dabei wurden die bereits erwähnten F3'H Aminosäuresequenzen verwendet, deren rekombinante Enzyme nicht in der Lage sind, Chalkone zu hydroxylieren (Schlangen et al. 2009, Plant Science 177 (2009) 97-102). Bei Analyse des Alignments konnte festgestellt werden, dass eine Region, die als putative Substraterkennungsregion (SRS1) in CytP450 Enzymen von Gotoh (1992) beschrieben wurde, in der CH3H-Sequenz von C. sulphureus auffällige Unterschiede zu den jeweiligen SRS1-Regionen der anderen F3'H-Aminosäuresequenzen aufweist. Weiters kann in der Cosmos sulphureus CH3H Sequenz eine Region D(192)GSAGGDP(199) detektiert werden, die nur in dieser Aminosäuresequenz vorhanden ist (Fig. 2). Im paarweisen Alignment mit der C. sulphureus F3'H kann man sehen, dass die CH3H eine Insertion von vier Aminosäureresten verglichen mit der F3'H aufweist (SAGG-Region, Fig. 1), und die benachbarten Reste der inserierten vier Aminosäurereste sind auch unterschiedlich in der CH3H (SAGG+N-Region, Fig. 1).

KONSTRUKTION VON CHIMÄREN GENEN

[0086] Um identifizieren zu können, ob die auffälligen Regionen, die in den Alignments gefunden wurden, einen Einfluss auf die CH3H-Aktivität haben, wurden fünf Chimäre Gene konstruiert, die C. sulphureus CH3H und C. sulphureus F3'H cDNA Fragmente enthalten (C1-C5, Fig. 4 und 5): C1: Aminosäurepositionen 1-196: F3'H und 201-512: CH3H; C2: Aminosäurepositionen 1-210: CH3H und 211-512: F3'H; C3: Aminosäurepositionen 1-119: CH3H und 124-512: 9/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 F3'H; C4: Aminosäurepositionen 1-193: CH3H und 198-512: F3'H. Die Aminosäurepositionen basieren auf dem paarweisen Alignment von C. sulphureus F3'H and CH3H. Alle Primer, die für die Herstellung der Chimären Gene verwendet wurden, sind in Fig. 5 aufgelistet, und eine schematische Darstellung der Chimären Gene ist in Fig. 4 dargestellt.

KONSTRUKTION VON MUTIERTEN CDNAS MIT INSERTIONEN UND DELETIONEN GEZIELTE MUTAGENESE

[0087] Aufgrund der besonderen Eigenschaften der Aminosäure Prolin (Prolin ist ein Helix- und Faltblattbrecher und wird häufig in Loops oder Turns gefunden) wurde P199 aus der SAGG+N-Region in A199 gemäß dem Alanin, welches in der Cosmos sulphureus F3'H Sequenz an dieser Position gefunden werden kann, (Fig. 1), mutiert. Die dafür verwendeten Primer und eine schematische Darstellung können jeweils in Tabelle 3 und Fig. 4 gefunden werden.

ENZYM-AKTIVITÄTEN DER HETEROLOG EXPRIMIERTEN CHIMÄREN UND MUTIERTEN ENZYME

[0088] Insgesamt wurden zwei native Enzyme aus C. sulphureus als auch fünf Chimäre (C1-C5) und drei mutierte Enzyme (M1, M2 und M3, Fig. 4) heterolog in Hefe exprimiert. Studien mit den rekombinanten Enzymen bezüglich ihrer Substratakzeptanz zeigten, dass alle exprimierten Enzyme außer M3 F3'H-Aktivität besitzen (Fig. 4). Die Hydroxylierung von Chalkonen konnte jedoch nur mit den Chimären Genen C1, C2 und C5 als auch mit M1 beobachtet werden. Mit dem rekombinanten Enzym C1 konnte jedoch nur eine geringe CH3H-Aktivität, verglichen mit der F3'H-Aktivität und der CH3H-Aktivität der anderen rekombinanten Enzyme, beobachtet werden.

[0089] Um kinetische Daten mit verschiedenen Substraten zu bestimmen, wurden kinetische Studien mit den rekombinanten Enzymen durchgeführt. Diese kinetischen Daten sind in Tabelle 1 aufgelistet. AUSFÜHRUNGSVARIANTE: [0090] Die Herstellung von transgenen Apfelbäumen erfolgt durch Transformation von jungen Apfelblättern mittels Agrobakterium, wie in der Literatur beschrieben (Szankowski et al.; Plant Cell Rep 2003, 22 141-149). Die Pflanzen werden im Gewächshaus als selbstbewurzelte Pflanzen oder aufgepropft auf eine herkömmliche Unterlage unter Freilandlicht-ähnlichen Bedingungen getestet. Die Blätter werden auf einen erhöhten 3-Hydroxyphloretingehalt mittels HPLC untersucht, beispielsweise nach der Methode von Sato et al., 2001 (Plant Science 160, 229-336). Ein Zusammenhang zwischen Pathogenabwehr und 3-Hydroxyphloretin ist aus der Literatur bekannt (Elstner, E.F., Oßwald, W., Schneider, I., 1996. Phytopathologie. Allgemeine und biochemische Grundlagen. Spektrum Akademischer Verlag, Heidelberg, Berlin, Oxford.). Eine erhöhte Resistenz gegen Erwinia amylovora der transgenen Äpfel, die das erfindungsgemäße Nukleotid überexprimieren, kann folgendermaßen getestet werden: Die Sprossen werden 3-4 Wochen vor der Testung auf eine Höhe von 10 cm zurückgeschnitten. Die Bakterien werden auf King's B-Agarplatten für 24 h angezogen und anschließend in Phosphatpuffer resuspendiert. Die Zellkonzentration wird spektrophotometrisch auf 107 cfu/ml eingestellt. Als Negativkontrolle wird Phosphatpuffer auf leere King's B-Agarplatten geleert und wieder dekantiert. Zur Inokulation werden die Blattspitzen der beiden jüngsten, entfalteten Blätter mit einer Schere abgeschnitten, die zuvor in eine Kulturlösung mit dem Erreger getaucht wurde. Pro transgener Linie werden 10-20 Individuen getestet und mit der Kontrolle verglichen. Der Infektionsgrad wird aus dem Verhältnis der Länge des geschädigten Triebs im Vergleich zur Gesamttrieblänge berechnet. 10/109

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, SEQUENCE LISTIG <110> Technische Universität Wien <120> chalcone Hydroxylase <130> R 54497 <140> AT 1342/2009 <141> 2009-08-26 <160> 49 <170> patentin Version 3.5

<210> 1 <211> 1539 <212> DNA atgactattc tacccctact actctaccct tccctaactg ccttactact gtacgtactt 60 cttaacctgc gcccccgtca ccctaaccgt ctcccgccgg gaccaagccc atggccgatc 120 gtcggaaacc taccgcacct cggcgcgagt ccgcatcagt cgctggcgac gttggccgca 180 aagtacggcc cgttgatgta cctccgactc gggtttgttg acgtggtggt ggcggcgtct 240 gcttcagtcg ctgcacagtt tttaaaagtt catgatctta acttcgcaag ccggccgctg 300 agctctggcg ggaagtatat cgcgtataat tatcaggata tggtgtttgc accgtacggt 360 ccgagatggc ggatgcttag gaagatttgc tccgtgcata tgttttctgc taaagcaatg 420 gacggatttc gtcatgttcg gcaggaggaa gtagctatac tcacgcgcac tttagtaagc 480 gctggaaaat cgccggtgaa gttaggtcaa atacttaacg tgtgcaccac gaacgcatta 540 gcacgagtgg tgttaggtcg gagagtattc gccgacggaa gtgcaggtgg tgatccgaag 600 gcggatgagt tcaaggatat ggtggtggag ctgatggtgt tggccggaga atttcacatc 660 ggtgacttta tcccggcgct tgactggctg gacctgcaag gcattaaaaa caagatgaag 720 aaacttcacg ctcgattcga ttcgttcctt cacgggatcc ttgaagagca taagtccggc 780 aagtttggcg rnrrnantM tggtgatttg ttgagcacat tnatftrntt “3-----Zt-- gaaggatgat 840 gccgatggtg aaggcgggaa gctttcagat gttgaaatca aagctttgct tctgaactta 900 tttgtcgccg gaacagacac atcatcaagt acagtggaat gggcaatagc cgagctaatt 960 cgacatccaa agctactaaa acaagcccaa aaagaaatgg acaatgtagt tggtcgagac 1020 cggcttgtaa ctgaattaga cttaaacgag ttaaattttc tacaagccat tgtaaaagag 1080 acctttaggc ttcacccttc aacaccactc tcgttaccaa gaattgcatc agagagttgt 1140 gaagttgacg gatattacat tcccaaggga tccacgctcc ttgttaatgt gtgggccatt 1200 gctcgtgacc cgaatgtgtg ggctgaccca cttgaattcc ggcccatgcg gttcttgcct 1260 ggaggcgaaa agcctaatgt tgatgttcaa ggaaacaact ttgaagttat accgtttggg 1320 gctgggcgaa ggatttgtgt gggtattagt ctagggttga gaatggtcca gctacttgtt 1380 gcaacattgg ttcaaacctt tgattgggaa ttggctaatg ggttaaaccc ggagaagcta 1440 aacatggatg aagcctttgg gttaaccctt cagaaggctg agcccttgat ggtgcaccca 1500 <213> Cosmos sulphureus <400> 1 11/109 2 2 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 1539 atgccgagac tagctccaca cgtgtatgga agtcattaa

<210> 2 <211> 512 <212> PRT <213> Cosmos sulphureus <4oo> ; > Met Thr Ile Leu Pro Leu Leu Leu Tyr Pro Ser Leu Thr Ala Leu Leu 1 5 10 15 Leu Tyr Val Leu Leu Asn Leu Arg Pro Arg His pro Asn Arg Leu pro 20 25 30 pro Gly pro ser Pro Trp pro Ile val Gly Asn Leu pro His Leu Gly 35 40 45 Ala Ser Pro His Gin ser Leu Ala Thr Leu Ala Ala Lys Tyr Gly Pro 50 55 60 Leu Met Tyr Leu Arg Leu Gly Phe val Asp val val val Ala Ala ser 65 70 75 80 Ala ser val Ala Ala Gin Phe Leu Lys val His ASp Leu Asn Phe Ala 85 90 95 Ser Arg Pro Leu Ser Ser Gly Gly Lys Tyr Ile Ala Tyr Asn Tyr Gin 100 105 110 ASp Met val Phe Ala pro Tyr Gly Pro Arg Trp Arg Met Leu Arg Lys 115 120 125 He CVS ser val His Met Phe Ser Ala Lys Ala Met Asp Gly Phe Arg 130 135 140 His Val Arg Gin Glu Glu val Ala Ile Leu Thr Arg Thr Leu val ser 145 150 155 160 Ala Gly Lys Ser pro val Lys Leu Gly Gin Ile Leu Asn val cys Thr 165 170 175 Thr Asn Ala Leu Ala Arg val val Leu Gly Arg Arg val Phe Ala Asp 180 185 190 Gly Ser Ala Gly Gly Asp Pro Lys Ala Asp Glu Phe Lys ASp Met val 195 200 205 val Glu Leu Met val Leu Ala Gly Glu Phe His ile Gly Asp Phe ile 210 215 220 Pro Ala Leu Asp Trp Leu Asp Leu Gin Gly ile Lys Asn Lys Met Lys 225 230 235 240 12/109

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Lys Leu His Ala Arg Phe ASP ser phe 3 Leu His Gly ile Leu Glu Glu 245 250 255 His Lys ser Gly Lys Phe Gly Ala Pro ser His Gly ASp Leu Leu Ser 260 265 270 Thr Leu Ile Ser Leu Lys Asp ASp Ala Asp Gly Glu Gly Gly Lys Leu 275 280 285 ser Asp val Glu ile Lys Ala Leu Leu Leu Asn Leu Phe val Ala Gly 290 295 300 Thr Asp Thr ser ser ser Thr val Glu Trp Ala ile Ala Glu Leu Ile 305 310 315 320 Arg His Pro Lys Leu Leu Lys Gin Ala Gin Lys Glu Met ASP Asn val 325 330 335 val Gly Arg A5P Arg Leu val Thr Glu Leu Asp Leu Asn GlU Leu Asn 340 345 350 Phe Leu Gin Ala ile val Lys Glu Thr Phe Arg Leu His pro Ser Thr 355 360 365 pro Leu ser Leu pro Arg ile Ala ser Glu ser cys Glu val Asp Gly 370 375 380 Tyr Tyr ile Pro Lys Gly ser Thr Leu Leu val Asn Val Trp Ala ile 385 390 395 400 Ala Arg Asp Pro Asn val Trp Ala Asp Pro Leu Glu Phe Arg Pro Met 405 410 415 Arg Phe Leu Pro Gly Gly Glu Lys Pro Asn val Asp val Gin Gly Asn 420 425 430 Asn Phe Glu Val ile pro phe Gly Ala Gly Arg Arg ile Cys Val Gly 435 440 445 ile Ser Leu Gly Leu Arg Met val Gin Leu Leu val Ala Thr Leu val 450 455 460 Gin 465 Thr Phe Asp Trp Glu 470 Leu Ala Asn Gly Leu 475 Asn Pro Glu Lys Leu 480 Asn Met Asp Glu Ala phe Gly Leu Thr Leu Gin Lys Ala Glu Pro Leu 485 490 495 Met val His Pro Met pro Arg Leu Ala Pro His val Tyr Gly Ser His 500 505 510 <210> 3 13/109

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<211> 12 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Motif <220> <221> MISC_FEATURE <222> (8)..(8)

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Phe Ala Ser Arg Pro Leu Ser xaa xaa Gly xaa xaa 1 5 10 <210> 4 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Motif <220>

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<211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Motif 14/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 5 <220>

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Phe Ala Ser Arg Pro Leu Ser Ser Gly Gly xaa Xaa 1 5 10 <210> 6 <211> 38

<212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 6 gaccacgcgt ategatgteg aetttttttt tttttttt 38 <210> 7

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<212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 9 atgactattc tacccctact actc 15/109 24 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

<210> 10 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 10 ccttaatgac ttccatacac gtg 23 <210> 11 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 11 cttcgcatca cgctcaccg <210> 12 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 12 gcggatgagt tcaaggatat gg

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österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 7 gcggatgagt tcaaggatat gg 22

<210> 16 <211> 28 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 16 aggatgtctc aacttacaac aataaacc 28

<210> 17 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer 24 <400> 17 atgactattc tacccctact actc

<210> 18 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 18 gtacggtgca aacaccatat c 21

<210> 19 <211> 17 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer 17 <400> 19 ggtcctcggt ggcggat

<210> 20 <211> 28 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 20 aggatgtctc aacttacaac aataaacc 28 <210> 21 <211> 24

<212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer 17/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 8 <400> 21 atgactattc tacccctact actc 24 <210> 22 <211> 17 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer# <400> 22 ttcgcatctc cgtcggc 17 <210> 23 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 23 ggcggatgag ttcaaggata tg 22 <210> 24 <211> 28 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 24 aggatgtctc aacttacaac aataaacc 28 <210> 25 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 25 atgactattc tacccctact actc 24 <210> 26 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 26 gtacggtgca aacaccatat c 21 <210> 27 <211> 17 <212> DNA <213> Artificial Sequence 18/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 9 <220> <223> Primer <400> 27 ggtcctcggt ggcggat <210> 28 <2ll> 28 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 28 aggatgtctc aacttacaac aataaacc 28 <210> 29 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 29 atgactattc tacccctact actc 24 <210> 30 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 30 tccgtcggcg aatactctc <210> 31 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 31 gatccgaagg cggatgagtt 20 <210> 32 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 32 ccttaatgac ttccatacac gtg 23

<210> 33 <211> 24 <212> DNA 19/109 10 10 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 <213> Artificial sequence <220> 24 <223> Primer <400> 33 atgactattc tacccctact actc

<210> 34 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 34 cacctgcact tccgtcacga atactctcct gcc 33

<210> 35 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Primer <400> 35 gtgatgcgaa ggcggatgag 20

<210> 36 <211> 28 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 36 aggatgtctc aacttacaac aataaacc 28

<210> 37 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Primer <400> 37 atccgccttc gcatcacca 19

<210> 38 <211> 1602 <212> PRT <213> cosmos sulphureus <400> 38

Ala Thr Gly Ala Cys Thr Ala Thr Thr Cys Thr Ala cys cys cys Cys 15 10 15

Thr Ala Cys Thr Ala Cys Thr Cys Thr Ala Cys Cys Cys Thr Thr Cys 20 25 30 20/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 11 cys cys Thr Ala Ala Cys Thr Gly cys Cys Thr Thr Ala Cys Thr Ala 35 40 45 cys Thr Gly Thr Ala cys Gly Thr Ala cys Thr Thr Cys Thr Thr Ala 50 55 60 Ala Cys Cys Thr Gly Cys Gly Cys cys Cys cys cys Gly Thr cys Ala 65 70 75 80 cys Cys Cys Thr Ala Ala Cys cys Gly Thr Cys Thr Cys cys cys Gly 85 90 95 Cys cys Gly Gly Gly Al a cys Cys Ala Ala Gly Cys cys Cys Ala Thr 100 105 110 Gly Gly Cys Cys Gly Ala Thr cys Gly Thr cys uiy --Ί .. uiy Ala Al i m i α Λ 1 n i a 115 120 125 Cys Cys Thr Ala Cys Cys Gly Cys Ala cys cys Thr cys Gly Gly cys 130 135 140 Ala cys Ala Ala Cys Thr cys Cys Gly cys Ala Thr cys Ala Cys Thr 145 150 155 160 Cys Gly cys Thr Thr Gly cys Gly Gly cys Ala Thr Thr Gly Gly Cys 165 170 175 Gly Gly Cys Ala Ala Ala Gly Thr Ala cys Gly Gly Cys cys Cys Gly 180 185 190 Thr Thr Gly Ala Thr Gly cys Ala Cys Cys Thr Cys cys Gly Ala Cys 195 200 205 Thr Cys Gly Gly Cys Thr Thr Thr Gly Thr Thr Gly Ala Cys Gly Thr 210 215 220 Gly Gly Thr Gly Gly Thr Gly Gly Cys Cys Gly cys Cys Thr cys Thr 225 230 235 240 Gly Cys Gly Thr Cys Ala Gly Thr cys Gly Cys Thr Thr cys Ala Cys 245 250 255 Ala Gly Thr Thr Thr Thr Thr Gly Ala Ala Ala Ala cys Thr Cys Ala 260 265 270 Thr Gly Ala Cys Gly cys Gly Ala Ala Thr Thr Thr cys Gly cys Cys 275 280 285 Ala Gly Cys Cys Gly Gly Cys Cys Gly Cys cys Gly Ala Ala cys Thr 290 295 300 21 /109 12 12 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Cys Cys Gly Gly Cys Gly Cys Gly Gly Ala Gly Cys Ala Thr Ala Thr 305 310 315 320 Gly Gly Cys Gly Thr 325 Ala Thr Ala Ala Thr 330 Thr Ala Thr Cys Ala 335 Gly Gly Ala Thr Cys Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Thr Gly cys Gly cys 340 345 350 cys Gly Thr Ala cys Gly Gly Thr Cys Cys Thr cys Gly Gly Thr Gly 355 360 365 Gly Cys 370 Gly Gly Ala Thr Gly 375 Cys Thr Thr cys Gly 380 Gly Ala Ala Gly Ala Thr Ala Thr Gly Cys Thr Cys Cys Gly Thr Gly Cys Ala Cys cys 385 390 395 400 Thr Ala Thr Thr Thr Thr Cys Cys Gly Gly Cys Ala Ala Ala Gly Cys 405 410 415 Ala Cys Thr Cys Gly Ala Thr Gly Ala cys Thr Thr Cys Cys Gly Thr 420 425 430 cys Ala Thr Gly Thr Thr Cys Gly Gly cys Ala Gly Gly Ala Gly Gly 435 440 445 Ala Ala Gly Thr Ala Gly Cys Gly Gly Thr Ala Cys Thr Gly Ala Cys 450 455 460 Gly Cys Gly Cys Gly Cys Thr Thr Thr Ala Gly Cys Cys Gly Gly Thr 465 470 475 480 Gly Cys Gly Gly Gly Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Cys Cys Gly Gly 485 490 495 Thr Gly Ala Ala Ala Thr Thr Ala Gly Gly Thr cys Ala Ala cys Thr 500 505 510 Gly cys Thr Thr Ala Gly Cys Gly Thr Gly Thr Gly cys Ala cys Cys 515 520 525 Ala Cys Cys Ala Ala cys Gly cys Ala Thr Thr Ala Gly cys Ala cys 530 535 540 Gly Ala Gly Thr Gly Ala Thr Gly Thr Thr Ala Gly Gly cys Ala Gly 545 550 555 560 Gly Ala Gly Ala Gly Thr Ala Thr Thr cys Gly Gly Thr Gly Ala Gly 565 570 575 Cys Gly Thr Gly Ala Thr Gly Cys Gly Ala Ala Gly Gly Cys Gly Gly 580 585 590 22/109 13 13 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Ala Thr Gly Ala Gly Thr Thr cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr Ala Thr 595 600 605 Gly Gly Thr Gly Gly Thr Gly Gly Ala Gly Ala Thr Gly Ala Thr Gly 610 615 620 Gly 625 Thr Gly Thr Thr Gly 630 Gly Cys Gly Gly Gly 635 Ala Gly Ala Ala Thr 640 Thr Cys Ala Ala Thr Ala Thr cys Gly Gly Thr Gly Ala Cys Thr Thr 645 650 655 Thr Ala Thr Cys Cys Cys Gly Gly Cys Gly Cys Thr Thr Gly Ala cys 660 665 670 Thr Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala cys cys Thr Gly cys Ala Ala Gly 675 680 685 Gly Cys Ala Thr Cys Ala Cys Gly Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Thr 690 695 700 Gly Ala Ala Gly Ala Ala Gly cys Thr Gly cys Ala cys Gly cys Thr 705 710 715 720 Cys Ala Ala Thr Thr cys Gly Ala Thr Thr cys Gly Thr Thr Thr Cys 725 730 735 Thr Thr Ala Ala cys Ala cys Gly Ala Thr Thr Cys Thr Thr Gly Ala 740 745 750 Ala Gly Ala Gly Cys Ala Thr Ala Ala Ala Ala cys cys Gly Gly cys 755 760 765 Ala Ala Gly Gly Gly Cys Gly Gly Cys Thr Cys Thr Thr Cys Gly Ala 770 775 780 Gly Thr cys Ala cys Ala Gly Gly Gly Ala Thr Thr Thr Gly Thr cys 785 790 795 800 Gly Ala Gly Cys Ala cys Gly Cys Thr Gly Ala Thr Thr Gly Cys Ala 805 810 815 Cys Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr Gly Ala Thr Gly cys cys Gly 820 825 830 Ala Thr Gly Gly Ala Gly Ala Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Ala Ala 835 840 845 Ala Cys Thr Thr Thr cys Ala Gly Ala Thr Ala Thr Thr Gly Ala Ala 850 855 860 23/109 14 14 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Ala Thr Cys Ala Ala Ala Gly cys Thr Thr Thr Gly Cys Thr Thr cys 865 870 875 880 Thr Gly Ala Ala Cys Thr Thr Ala Thr Thr cys Ala Thr Thr Gly cys 885 890 895 Gly Gly Gly Ala Ala cys Ala Gly Ala Thr Ala cys Ala Thr Cys Ala 900 905 910 Thr cys Thr Ala Gly Cys Ala cys cys Gly Thr Gly Gly Ala Ala Thr 915 920 925 Gly Gly 930 Gly cys Ala Ala Thr 935 Ala Gly Cys Thr Gly 940 Ala Ala cys Thr Ala Ala Thr Thr Cys Gly Cys Thr Gly Thr cys cys Ala Cys Ala Ala 945 950 955 960 Ala Thr Ala Cys Thr Ala cys Gly Gly cys Ala Ala Gly Cys Ala Cys 965 970 975 Ala cys Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala Thr Gly Gly Ala cys Ala Ala 980 985 990

Thr Gly Thr Thr Gly Thr Thr Gly Gly Thr cys Gly Ala Gly Ala Gly 995 1000 1005 cys Gly Gly cys Thr Thr Gly Thr Ala Ala Cys cys Gly Ala Ala 1010 1015 1020 Thr cys Ala Gly Ala Cys Cys Thr Thr Gly Gly Thr Ala Ala Ala 1025 1030 1035 Cys Thr Ala Ala Cys Ala Thr Thr Cys Cys Thr cys cys Ala Ala 1040 1045 1050 Gly Cys Cys Ala Thr Thr Gly Thr Ala Ala Ala Gly Gly Ala Gly 1055 1060 1065 Ala cys cys Thr Thr Thr Ala Gly Ala Cys Thr Cys cys Ala Cys 1070 1075 1080 Cys Cys Gly Thr Cys Thr Ala cys Ala cys cys Ala cys Thr Cys 1085 1090 1095 Thr Cys Ala Thr Thr Gly Cys Cys Ala Ala Gly Ala Ala Thr Thr 1100 1105 1110 Gly cys Gly Thr Cys cys Gly Ala Gly Ala Gly Thr Thr Gly Thr 1115 1120 1125 Gly Ala Ala Ala Thr Thr Gly Ala Thr Gly Gly Cys Thr Ala Thr 1130 1135 1140 24/109 österreichisches AT 508 554 B1 2011-02-15 Patentamt 15

Thr Thr cys Ala Thr Thr cys Cys Thr Ala Ala Gly Gly Gly Gly 1145 1150 1155 Thr Cys cys Ala cys Ala Cys Thr Thr cys Thr Thr Gly Thr Thr 1160 1165 1170 Ala Ala Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly cys cys Ala Thr Thr 1175 1180 1185 Gly Cys cys Cys Gly Thr Gly Ala cys Cys Cys Ala Ala Ala Ala 1190 1195 1200 Ala Thr Gly Thr Gly Gly Ala Cys Gly Gly Ala Thr Cys cys Ala 1205 1210 1215 cys Thr Thr Gly Ala Ala Thr Thr Thr Ala Gly Gly Cys cys Cys 1220 1225 1230 Ala Cys Ala Cys Gly Gly Thr Thr Cys Thr Thr Gly Cys cys Cys 1235 1240 1245 Gly Gly Ala Gly Gly Thr Gly Ala Ala Ala Ala Ala cys Cys Cys 1250 1255 1260 Ala Ala Thr Gly Thr Thr Gly Ala Thr Gly Thr Thr Ala Ala Ala 1265 1270 1275 Gly Gly Ala Ala Ala Thr Gly Ala Cys Thr Thr Cys Gly Ala Gly 1280 1285 1290 Gly Thr Thr Ala Thr Ala Cys cys Ala Thr Thr Thr Gly Gly Gly 1295 1300 1305 Gly Cys Cys Gly Gly Ala cys Gly Ala Ala Gly Gly Ala Thr Thr 1310 1315 1320 Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly Thr Ala Thr Thr Ala Gly Cys 1325 1330 1335 cys Thr Ala Gly Gly Gly Thr Thr Gly Ala Gly Ala Ala Thr Gly 1340 1345 1350 Gly Thr Cys Cys Ala Gly Thr Thr Gly cys Thr Thr Gly Thr cys 1355 1360 1365 Gly Cys Thr Ala cys Gly cys Thr Ala Gly Thr cys cys Ala Ala 1370 1375 1380 Ala cys Cys Thr Thr Thr Gly Ala cys Thr Gly Gly Gly Ala Ala 1385 1390 1395 25/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 16 Thr Thr Gly Gly Cys Thr Ala Ala Cys Gly Gly Gly Gly Thr Ala 1400 1405 1410 Cys Thr Ala cys Cys Cys Gly Ala Gly Ala Ala Gly Cys Thr Cys 1415 1420 1425 Ala Ala Cys Ala Thr Gly Ala Ala Thr Gly Ala Ala Gly cys Gly 1430 1435 1440 Thr Thr Thr Gly Gly Gly Cys Thr Ala Ala Cys Cys Cys Thr Thr 1445 1450 1455 cys Ala Ala Ala Gly Ala Gly cys cys Gly Ala Gly cys cys cys 1460 1465 1470 Thr Thr Gly Ala Thr Ala Gly Thr Gly Thr Ala Cys Cys Cys Gly 1475 1480 1485 Ala Ala Gly Cys Cys Gly Ala Gly Gly cys Thr Ala Gly cys Thr 1490 1495 1500 Cys cys Thr Cys Ala cys Gly Thr Ala Thr Ala Thr Gly Ala Ala 1505 1510 1515 Ala Gly Thr Gly Gly Thr Thr Ala Ala Gly Gly Ala cys Thr Ala 1520 1525 1530 Ala Ala Thr Thr Thr Cys Cys Gly Thr Thr Thr Gly Ala Ala Ala 1535 1540 1545 Ala Thr Thr Ala Ala Ala Thr Ala Ala Ala Thr Thr Thr Gly Thr 1550 1555 1560 Ala Thr Thr Thr Cys Thr Gly Thr Thr Thr Thr Gly Gly Thr Thr 1565 1570 1575 Thr Ala Thr Thr Gly Thr Thr Gly Thr Ala Ala Gly Thr Thr Gly 1580 1585 1590 Ala Gly Ala Cys Ala Thr Cys cys Thr 1595 1600

<210> B9 <211> 1645 <212> PRT <213> Dahlia variabilis <400> 39

Ala Thr Gly Gly cys cys Ala Thr Thr cys Thr Ala Ala cys cys Cys 15 10 15

Thr Ala Cys Thr Ala Cys Thr Thr Thr Ala Cys Ala Cys Cys Thr Cys 20 25 30 26/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 17

Cys Ala Thr 35 cys Ala cys Thr Thr 40 Cys cys cys cys 8* Gly Thr Gly cys Thr 50 Gly Thr Ala Cys Thr Cys cys Thr Gly 60 cys Thr Thr Ala Ala Cys Cys Thr Gly cys Gly Cys Ala cys Cys cys Gly Thr cys Ala 65 70 75 80 cys cys cys Thr Ala 85 Ala cys Cys Gly Thr 90 Cys Thr cys cys cys 95 Thr cys cys cys Gly 100 Gly cys cys Cys Ala 105 Ala cys cys Cys Cys 110 Ala Thr Gly Gly Cys 115 Cys Gly Ala Thr cys 120 Gly Thr cys Gly Gly 125 Ala Ala Ala Cys cys 130 Thr Cys Cys cys & cys Ala Cys Cys Thr 140 Cys Gly Gly Cys Ala Cys Ala Ala Thr Thr Cys Cys Gly cys Ala cys cys Ala cys Thr 145 150 155 160 cys Gly Cys Thr Ala Gly cys Gly cys Giy Gly cys Thr Gly Gly Cys 165 170 175 Gly Gly Thr Ala Ala Ala Gly Thr Ala cys Gly Gly cys Cys cys Gly 180 185 190 Thr Thr Gly 195 Ala Thr Gly cys Ala 200 cys cys Thr Cys cys 205 Gly Cys cys Thr cys Gly Gly cys Thr Thr cys Gly Thr Thr Gly Ala Cys Gly Thr 210 215 220 Gly Gly Thr Gly Gly Thr Cys Gly Cys cys Gly Cys cys Thr Cys Gly 225 230 235 240 Gly Cys Gly Thr Cys Cys Gly Thr cys Gly cys Thr Gly cys Thr cys 245 250 255 Ala Gly Thr Thr Thr Thr Thr Ala Ala Ala Ala Ala cys Thr Ala Ala 260 265 270 Thr Gly Ala cys Gly cys Gly Ala Thr Thr Thr Thr cys Gly Cys Cys 275 280 285 Ala Gly 290 cys cys Gly Gly cys 295 Cys Gly cys cys Gly 300 Ala Ala cys Thr Cys Cys Gly Gly Cys Gly Cys Gly Ala Ala Gly Cys Ala Thr Ala Thr 27/109 18 18 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 305 310 315 320 cys Gly cys Gly Thr 325 Ala Thr Ala Ala cys 330 Thr Ala Cys cys Ala 335 Gly Gly Ala Thr cys Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Thr Gly Cys Ala Cys 340 345 350 Cys Gly Thr Ala cys Gly Gly Thr Cys cys Gly cys Gly Gly Thr Gly 355 360 365 Gly Cys Gly Gly Ala Thr Gly Cys Thr Gly cys Gly Gly Ala Ala Gly 370 375 380 Ala Thr Cys Thr Gly Cys Thr Cys Gly Gly Thr Gly Cys Ala cys cys 385 390 395 400 Thr Thr Thr Thr Cys Thr cys Cys Gly Cys Cys Ala Ala Ala Gly Cys 405 410 415 cys cys Thr cys Gly Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr Cys Cys Gly Thr 420 425 430 Cys Ala Thr Ala Thr Thr cys Gly Ala cys Ala Gly Gly Ala Gly Gly 435 440 445 Ala Gly Gly Thr Gly Gly Cys Gly Ala Thr Ala cys Thr cys Ala Cys 450 455 460 Ala Cys Gly Thr Gly Cys Thr Thr Thr Gly Ala Thr cys Gly Gly Cys 465 470 475 480 Gly cys Cys Gly Gly Ala Gly Ala Ala Thr Cys Ala Ala cys Gly Gly 485 490 495 Thr Gly Ala Ala Ala Cys Thr Ala Gly Gly Thr Cys Ala Ala Cys Thr 500 505 510 Ala Cys Thr Cys Ala Ala cys Gly Thr Gly Thr Gly cys Ala cys cys 515 520 525 Ala cys Ala Ala Ala Cys Gly Cys Ala Thr Thr Ala Gly Cys Gly Cys 530 535 540 Gly Thr Gly Thr Gly Ala Thr Gly Thr Thr Ala Gly Gly Thr Ala Gly 545 550 555 560 Gly Ala Gly Ala Gly Thr Gly Thr Thr cys Gly Gly Cys Gly Ala Cys 565 570 575 Ala Cys Cys Gly Gly Thr Gly Ala Thr cys Thr Ala Ala Ala Gly Gly 580 585 590 28/109 19 19 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Cys Gly Gly 595 Ala Thr Gly Ala Gly 600 Thr Thr Thr Ala Ala 605 Ala Gly Ala Thr Ala Thr Gly Gly Thr Gly Gly Thr Thr cys Ala Gly cys Thr Gly 610 615 620 Ala Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Gly Gly Cys Cys Gly Gly Ala Gly 625 630 635 640 Ala Ala Thr Thr Thr Ala Ala cys Ala Thr Thr Gly Gly Thr Gly Ala 645 650 655 Cys Thr Thr Thr Ala Thr Cys Cys Cys Gly Gly Cys Gly cys Thr Thr 660 665 670 Gly Ala Cys Thr Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala Cys Ala Thr Gly Cys 675 680 685 Ala Ala Gly Gly cys Ala Thr Thr Gly Cys Gly Ala Ala Gly Ala Ala 690 695 700 Gly Ala Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala cys Thr cys cys Ala Thr 705 710 715 720 Gly Cys Thr Cys Ala Ala Thr Thr Thr Gly Ala Thr Thr cys Gly Thr 725 730 735 Thr cys cys Thr Thr Ala Ala cys Gly cys Gly Ala Thr Cys Cys Thr 740 745 750 Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala Cys Ala Thr Ala Ala Ala Thr cys cys 755 760 765 Gly Gly Cys Ala Ala Thr Gly Gly cys cys Gly cys Ala Cys Gly Thr 770 775 780 Cys Gly Gly Gly Thr cys Ala Cys Gly Gly Thr Gly Ala Cys Thr Thr 785 790 795 800 Gly Cys Thr Gly Ala Gly Cys Ala Cys Gly Cys Thr Gly Ala Thr Cys 805 810 815 Gly cys Ala Cys Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr Gly Ala Thr Gly 820 825 830 cys Thr Gly Ala Cys Gly Gly Thr Gly Ala Gly Gly Gly Thr Gly Gly 835 840 845 Gly Ala Ala Ala Cys Thr Thr Thr cys Ala Gly Ala Thr Ala Thr Thr 850 855 860 Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Ala Ala Gly cys Thr Thr Thr Gly Thr 29/109 20 20 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 865 870 875 880 Thr Ala Cys Thr Gly Ala Ala Cys Thr Thr Ala Thr Thr cys Gly Thr 885 890 895 Thr Gly Cys Ala Gly Gly Ala Ala Cys Ala Gly Ala Cys Ala Cys Gly 900 905 910 Thr cys Ala Thr Cys Thr Ala Gly Cys Ala Cys Ala Gly Thr Gly Gly 915 920 925 Ala Ala Thr Gly Gly Gly Cys Ala Ala Thr Ala Gly Cys Cys Gly Ala 930 935 940 Ala Cys Thr Cys Ala Thr Thr Cys Gly Cys Cys Ala Thr Cys Cys Ala 945 950 955 960 cys Gly Ala Ala Thr Gly Cys Thr Ala Ala Ala Ala Cys Ala Ala Gly 965 970 975 cys cys cys Ala Ala Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala Thr Gly Gly Ala 980 985 990 cys Ala Ala cys Gly Thr Ala Gly Thr Thr Gly Gly Cys Cys Gly Al 995 1000 1005 Gly Ala cys cys Gly Gly cys Thr Thr Gly Thr Ala Thr Cys Cys 1010 1015 1020 Gly Ala Ala Thr cys Thr Gly Ala Thr Cys Thr Cys Ala Gly cys 1025 1030 1035 cys Ala Ala cys Thr Ala Cys cys Ala Thr Thr cys cys Thr Cys 1040 1045 1050 Cys Ala Ala Gly cys cys Ala Thr Thr Gly Thr Ala Ala Ala Gly 1055 1060 1065 Gly Ala Gly Ala Cys cys Thr Thr Thr Ala Gly Ala Cys Thr cys 1070 1075 1080 Cys Ala Cys cys cys cys Thr Cys Ala Ala Cys Ala cys cys cys 1085 1090 1095 Cys Thr Cys Thr cys cys Thr Thr Gly Cys Cys Ala Ala Gly Ala 1100 1105 1110 Ala Thr Cys Thr Cys Ala Thr Cys Cys Gly Ala Gly Ala Ala Thr 1115 1120 1125 Thr Gly cys Gly r Ala . Ala Gly Thr Thr Gly Ala Cys Gly Gly Gly 1130 1135 1140 30/109 21 21 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Thr Ala Thr cys Ala cys Ala Thr Thr cys cys Ala Ala Ala Ala 1145 1150 1155 Gly Gly Ala Thr Cys cys Ala cys Ala Cys Thr Cys Cys Thr cys 1160 1165 1170 Gly Thr cys Ala Ala Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly Cys Cys 1175 1180 1185 Ala Thr Thr Gly cys Thr Cys Gly Thr Gly Ala Cys Cys cys Ala 1190 1195 1200 Ala Ala Gly Ala Thr Gly Thr Gly Gly Gly Cys Gly Gly Ala cys 1205 1210 1215 Cys cys Ala Cys Thr Thr Gly Ala Gly Thr Thr Cys cys Gly Cys 1220 1225 1230 Cys Cys cys Gly Cys Ala Cys Gly Gly Thr Thr Cys Thr Thr Gly 1235 1240 1245 Cys Cys Thr Gly Gly Ala Gly Gly Cys Gly Ala Ala Ala Ala Gly 1250 1255 1260 Cys Cys Cys Ala Ala Thr Gly Thr Thr Gly Ala Thr Gly Thr Gly 1265 1270 1275 Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr Thr 1280 1285 1290 Gly Ala Ala Gly Thr Thr Ala Thr Ala Cys Cys Gly Thr Thr Cys 1295 1300 1305 Gly Gly Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala Cys Gly Ala Ala Gly Gly 1310 1315 1320 Ala Thr Thr Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly Thr Ala Thr Thr 1325 1330 1335 Ala Gly Cys Cys Thr Cys Gly Gly Gly Thr Thr Gly Ala Gly Gly 1340 1345 1350 Ala Thr Gly Gly Thr Cys cys Ala Gly Thr Thr Gly Cys Thr Thr 1355 1360 1365 Gly Thr Thr Gly cys Ala Ala Cys Gly Thr Cys Gly Gly Thr Cys 1370 1375 1380 cys Ala Gly Ala Cys cys Thr Thr Cys Gly Ala Thr Thr Gly Gly 1385 1390 1395 Gly Ala Ala Thr Thr Ala Gly Cys Thr Ala Ala Cys Gly Gly Gly 31 /109 22 22 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 1400 1405 1410

Thr Thr Ala Ala Ala Gly cys cys Gly Gly Ala Gly Ala Ala Gly 1415 1420 1425 Cys Thr cys Ala Ala Cys Ala Thr Gly Ala Ala Thr Gly Ala Ala 1430 1435 1440 Gly Cys Thr Thr Ala Thr Gly Gly Gly cys Thr Ala Ala cys cys 1445 1450 1455 Cys Thr Thr Cys Ala Ala Ala Gly Ala Gly Ala Ala Gly Ala Gly 1460 1465 1470 Cys Cys Cys Thr Thr Gly Gly Thr Gly Gly Thr Gly Cys Ala Cys 1475 1480 1485 cys cys Ala Ala Ala Gly Cys cys Gly Ala Gly Gly Thr Thr Ala 1490 1495 1500 Gly cys Thr Cys Cys Thr Cys Ala Thr Gly Thr Ala Thr Ala Thr 1505 1510 1515 Gly Ala Ala Ala Gly Thr Gly Gly Thr Thr Ala Ala Ala Gly Ala 1520 1525 1530 Thr Thr Gly Ala cys Thr Ala Gly Thr Thr Gly Thr Cys Gly Thr 1535 1540 1545 Thr Thr Gly Gly Ala Ala Ala Ala Thr Thr Gly Ala Thr Ala Gly 1550 1555 1560 Cys Thr Thr Thr cys Ala Ala Thr Thr Ala Ala Ala cys Ala Gly 1565 1570 1575 Gly Thr Thr Ala Thr Gly Thr Thr Thr Gly Thr Thr Gly Thr Ala 1580 1585 1590 Thr cys Thr Ala Cys Gly Thr Thr Gly Thr Ala Cys Gly Thr Thr 1595 1600 1605 Ala Ala Thr Thr Gly Thr Thr Thr Thr Ala Ala Gly Thr Thr Gly 1610 1615 1620 Ala Gly Ala Ala Cys Ala cys Cys Cys Ala Ala Thr Thr Thr Gly 1625 1630 1635 Thr Ala Ala Thr Gly Gly Gly 1640 1645

<210> 40 <211> 1700 <212> PRT 32/109 23 23 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 <213> Tagetes erecta <40Q> 40

Ala Thr Gly Thr cys cys Ala Thr Thr Cys Thr Ala Ala Cys Cys Cys 1 5 10 15 Thr Ala Cys Thr Ala Cys Thr Thr Thr Ala Cys Ala cys Cys Thr cys 20 25 30 Cys Ala Thr 35 Cys Ala Cys Thr Thr 40 Cys Cys Cys Cys 8* Gly Thr Gly cys Thr Gly Thr Ala cys cys Thr cys cys Thr Gly cys Thr Thr Ala 50 55 60 Ala Cys Cys Thr Gly Cys Gly Cys Ala cys cys Cys Gly Thr cys Ala 6S 70 75 80 Cys cys Cys Thr Ala Ala Cys Cys Gly Thr cys Thr cys cys cys Thr 85 90 95 cys cys cys Glx Gly cys Cys Cys Ala Ala Cys Cys Cys Cys Ala Thr 100 105 110 Gly Gly cys Cys Gly Ala Thr cys Gly Thr Cys Gly Gly Ala Ala Ala 115 120 125 Cys Cys 130 Thr cys cys cys 13? Cys Ala cys Cys Thr 140 Cys Gly Gly Cys Ala Cys Ala Ala Thr Thr Cys Cys Gly cys Ala Cys Cys Ala Cys Thr 145 150 155 160 cys Gly cys Thr Ala Gly cys Gly cys Gly Gly cys Thr Gly Gly Cys 165 170 175 Gly Gly Thr Ala Ala Ala Gly Thr Ala cys Gly Gly cys cys cys Gly 180 185 190 Thr Thr Gly Ala Thr Gly cys Ala cys cys Thr cys cys Gly Cys Cys 195 200 205 Thr Cys Gly Gly Cys Thr Thr Cys Gly Thr Thr Gly Ala Cys Gly Thr 210 215 220 Gly Gly Thr Gly Gly Thr Cys Gly Cys cys Gly cys cys Thr cys ciy 225 230 235 240 Gly cys Gly Thr cys cys Gly Thr cys Gly Cys Thr Gly Cys Thr Cys 245 250 255 Ala Gly Thr Thr Thr Thr Thr Ala Ala Ala Ala Ala Cys Thr Ala Ala 260 265 270 33/109 österreichisches AT 508 554 B1 2011-02-15 Patentamt 24

Thr Gly Ala Cys Gly cys Gly Ala Thr Thr Thr Thr Cys Gly Cys Cys 275 280 285 Ala Gly cys Cys Gly Gly Cys cys Gly Cys Cys Gly Ala Ala cys Thr 290 295 300 Cys 305 cys Gly Gly Cys Gly 310 Cys Gly Ala Ala Gly 315 cys Ala Thr Ala Thr 320 Cys Gly Cys Gly Thr Ala Thr Ala Ala cys Thr Ala Cys cys Ala Gly 325 330 335 Gly Ala Thr Cys Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Thr Gly cys Ala Cys 340 345 350 cys Gly Thr 355 Ala cys Gly Gly Thr 360 cys Cys Gly cys Gly 365 Gly Thr Gly Gly Cys Gly Gly Ala Thr Gly Cys Thr Gly Cys Gly Gly Ala Ala Gly 370 375 380 Ala Thr Cys Thr Gly cys Thr Cys Gly Gly Thr Gly cys Ala cys Cys 385 390 395 400 Thr Thr Thr Thr Cys Thr Cys cys Gly cys Cys Ala Ala Ala Gly cys 405 410 415 cys Cys Thr Cys Gly Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr cys cys Gly Thr 420 425 430 cys Ala Thr Ala Thr Thr cys Gly Ala Cys Ala Gly Gly Ala Gly Gly 435 440 445 Ala Glv Gly Thr Gly Gly CVS Glv Ala Thr Ala rvs Thr Cys A.lä Tue »7 - 450 455 4'6Ö Ala cys Gly Thr Gly Cys Thr Thr Thr Gly Ala Thr Cys Gly Gly cys 465 470 475 480 Gly cys cys Gly Gly 485 Ala Gly Ala Ala Thr 490 Cys Ala Ala Cys Gly 495 Gly Thr Gly Ala Ala Ala Cys Thr Ala Gly Gly Thr Cys Ala Ala Cys Thr 500 505 510 Ala Cys Thr Cys Ala Ala Cys Gly Thr Gly Thr Gly cys Ala cys cys 515 520 525 Ala Cys Ala Ala Ala cys Gly Cys Ala Thr Thr Ala Gly cys Gly Cys 530 535 540 34/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Gly Thr Gly Thr Gly Ala Thr Gly Thr Thr Ala Gly Gly Thr Ala Gly 545 550 555 560 Gly Ala Gly Ala Gly Thr Gly Thr Thr Cys Gly Gly Cys Gly Ala Cys 565 570 575 Ala cys cys Gly Gly Thr Gly Ala Thr Cys Thr Ala Ala Ala Gly Gly 580 585 590 cys Gly Gly Ala Thr Gly Ala Gly Thr Thr Thr Ala Ala Ala Gly Ala 595 600 605 Thr Ala Thr Gly Gly Thr Gly Gly Thr Thr cys Ala Gly cys Thr Gly 610 615 620 Ala Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Gly Gly cys Cys Gly Gly Ala Gly 625 630 635 640 Ala Ala Thr Thr Thr Ala Ala Cys Ala Thr Thr Gly Gly Thr Gly Ala 645 650 655 cys Thr Thr Thr Ala Thr Cys cys Cys Gly Gly cys Gly Cys Thr Thr 660 665 670 Gly Ala Cys Thr Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala cys Ala Thr Gly Cys 675 680 685 Ala Ala Gly Gly Cys Ala Thr Thr Ala Cys Gly Ala Ala Gly Ala Ala 690 695 700 Gly Ala Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala Cys Thr Cys Cys Ala Thr 705 710 715 720 Gly cys Thr cys Ala Ala Thr Thr Thr Gly Ala Thr Thr Cys Gly Thr 725 730 735 Thr cys Cys Thr Thr Ala Ala cys Gly Cys Gly Ala Thr Thr Cys Thr 740 745 750 Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala cys Ala Thr Ala Ala Ala Thr Cys cys 755 760 765 cys Gly Gly cys Ala Thr Gly Gly Cys Cys Gly cys Ala Cys Gly Thr 770 775 780 Cys Gly Gly Gly Thr cys Ala cys Gly Gly Thr Gly Ala Cys Thr Thr 785 790 795 800 Gly cys Thr Gly Ala Gly cys Ala cys Gly Cys Thr Gly Ala Thr cys 805 810 815 Gly cys Ala cys Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr Gly Ala Thr Gly 820 825 830 35/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 26

Gly Ala Ala Ala cys Thr Thr Thr Cys Ala Gly Ala Thr Ala Thr Thr 850 855 860

Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Ala Ala Gly Cys Thr Thr Thr Gly Thr 865 870 875 880

Thr Ala Cys Thr Gly Ala Ala Cys Thr Thr Ala Thr Thr Cys Gly Thr 885 890 895

Thr Gly cys Ala Gly Gly Ala Ala Cys Ala Gly Ala Cys Ala Cys Gly 900 905 910

Thr cys Ala Thr Cys Thr Ala Gly cys Ala cys Ala Gly Thr Gly Gly 915 920 925

Ala Ala Thr Gly Gly Gly cys Ala Ala Thr Ala Gly Cys Cys Gly Ala 930 935 940

Ala cys Thr Cys Ala Thr Thr Cys Gly cys Cys Ala Thr Cys Cys Ala 945 950 955 960

Cys Gly Ala Ala Thr Gly cys Thr Ala Ala Ala Ala Cys Ala Ala Gly 965 970 975 cys Cys cys Ala Ala Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala Thr Gly Gly Ala 980 985 990 cys Ala Ala Cys Gly Thr Ala Gly Thr Thr Gly Gly cys cys Gly Ala 995 1000 1005

Gly Ala cys Cys Gly Gly Cys Thr Thr Gly Thr Ala Thr Cys Cys 1010 1015 1020

Gly Ala Ala Thr Cys Thr Gly Ala Thr Cys Thr cys Ala Gly Cys 1025 1030 l03* cys Ala Ala Cys Thr Ala Cys cys Ala Thr Thr Cys cys Thr cys 1040 1045 1050 cys Ala Ala Gly Cys Cys Ala Thr Thr Gly Thr Ala Ala Ala Gly 1055 1060 1065

Gly Ala Gly Ala Cys Cys Thr Thr Thr Ala Gly Ala Cys Thr Cys 1070 1075 1080 cys Ala cys cys cys Cys Thr Cys Ala Ala cys Ala Cys cys Cys 1085 1090 1095 36/109 27 27 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 cys Thr Cys Thr Cys Cys Thr Thr Gly cys cys Ala Ala Gly Ala 1100 1105 1110 Ala Thr Cys Thr Cys Ala Thr Cys Cys Gly Ala Gly Ala Ala Thr 1115 1120 1125 Thr Gly cys Gly Ala Ala Gly Thr Thr Gly Ala Cys Gly Gly Gly 1130 1135 1140 Thr Ala Thr Cys Ala Cys Ala Thr Thr Cys Cys Ala Ala Ala Ala 1145 1150 1155 Gly Gly Ala Thr cys cys Ala Cys Ala cys Thr cys cys Thr Cys 1160 1165 1170 Gly Thr Cys Ala Ala Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly cys cys 1175 1180 1185 Ala Thr Thr Gly cys Thr Cys Gly Thr Gly Ala Cys cys Cys Ala 1190 1195 1200 Ala Ala Gly Ala Thr Gly Thr Gly Gly Gly Cys Gly Gly Ala cys 1205 1210 1215 Cys Cys Ala cys Thr Thr Gly Ala Gly Thr Thr cys cys Gly cys 1220 1225 1230 Cys Cys cys Ala cys Ala Cys Gly Gly Thr Thr Cys Thr Thr Gly 1235 1240 1245 cys cys Thr Gly Gly Ala Gly Gly cys Gly Ala Ala Ala Ala Gly 1250 1255 1260 cys Cys cys Ala Ala Thr Gly Thr Thr Gly Ala Thr Gly Thr Gly 1265 1270 1275 Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr Thr 1280 1285 1290 Gly Ala Ala Gly Thr Thr Ala Thr Ala Cys Cys Gly Thr Thr cys 1295 1300 1305 Gly Gly Gly Gly cys Thr Gly Gly Gly Cys Gly Ala Ala Gly Gly 1310 1315 1320 Ala Thr Thr Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly Thr Ala Thr Thr 1325 1330 1335 Ala Gly Cys Cys Thr cys Gly Gly Gly Thr Thr Gly Ala Gly Gly 1340 1345 1350 Ala Thr Gly Gly Thr cys Cys Ala Gly Thr Thr Gly Cys Thr Thr 1355 1360 1365 37/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 28

Gly Thr Thr Gly Cys Ala Ala cys Gly Thr Thr Gly Gly Thr Cys 1370 1375 1380 Cys Ala Gly Ala cys cys Thr Thr cys Gly Ala Thr Thr Gly Gly 1385 1390 1395 Gly Ala Ala Thr Thr Ala Gly cys Thr Ala Ala Cys Gly Gly Gly 1400 1405 1410 Thr Thr Ala Ala Ala Gly Cys cys Gly Gly Ala Gly Ala Ala Gly 1415 1420 1425 Cys Thr cys Ala Ala cys Ala Thr Gly Ala Ala Thr Gly Ala Ala 1430 1435 1440 Gly cys Thr Thr Ala Thr Gly Gly Gly cys Thr Ala Ala Cys cys 1445 1450 1455 cys Thr Thr Cys Ala Ala Ala Gly Ala Gly Ala Ala Gly Ala Gly 1460 1465 1470 Cys Cys Cys Thr Thr Gly Gly Thr Gly Gly Thr Gly Cys Ala cys 1475 1480 1485 Cys cys Ala Ala Ala Gly Cys Cys Gly Ala Gly Gly Thr Thr Ala 1490 1495 1500 Gly Cys Thr cys cys Thr cys Ala Thr Gly Thr Ala Thr Ala Thr 1505 1510 1515 Gly Ala Ala Ala Gly Thr Gly Gly Thr Thr Ala Ala Ala Gly Ala 1520 1525 1530 Thr Thr Gly Ala Cys Thr Ala Gly Thr Thr Gly Thr Cys Gly Thr 1535 1540 1545 Thr Thr Gly Gly Ala Ala Ala Ala Thr Thr Gly Ala Thr Ala Ala 1550 1555 1560 cys Thr Thr Thr cys Ala Ala Thr Thr Ala Ala Ala Cys Ala Gly 1565 1570 1575 Gly Thr Thr Ala Thr Gly Thr Thr Thr Gly Thr Thr Gly Thr Ala 1580 1585 1590 Thr cys Thr Ala cys Gly Thr Thr Gly Thr Ala Cys Gly Thr Thr 1595 1600 1605 Ala Ala Thr Thr Gly Thr Thr Thr Thr Ala Ala Gly Thr Thr Gly 1610 1615 1620 38/109 29 29 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Ala Gly Ala Ala Cys Ala Cys Cys cys Ala Ala Thr Thr Thr Gly 1625 1630 1635

Gly Gly Ala Thr Gly Gly Gly Thr Thr Ala Thr Ala Thr Ala Thr 1640 1645 1650

Thr Cys Gly Thr Thr Ala Ala Gly Thr Thr Ala Ala Thr Ala Ala 1655 1660 1665

Thr Ala Ala Ala Ala Thr Ala Ala Ala Thr Ala Thr Thr Gly Cys 1670 1675 1680

Ala Thr Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1685 1690 1695

Ala Ala 1700

<210> 41 <2ll> 1625 <212> PRT <213> Rudbeckia hirta <400> 41

Ala Thr Gly Gly cys cys Ala Thr Thr cys Thr Ala Ala cys Cys cys 1 5 10 15 Thr Ala cys Thr Ala cys Thr Thr Thr Ala cys Ala cys Cys Thr Cys 20 25 30 Cys Ala Thr cys Ala cys Thr Thr cys Cys Cys Thr Cys Gly Thr Gly 35 40 45 cys Thr Gly Thr Ala Cys cys Thr cys Cys Thr Gly cys Thr Thr Ala 50 55 60 Ala cys cys Thr Gly Cys Gly cys Ala cys cys cys Gly Thr cys Ala 65 70 75 80 Cys Cys cys Thr Ala Ala cys Cys Gly Thr Cys Thr Cys cys cys Ala 85 90 95 cys cys Cys Gly Gly Cys cys cys Ala Ala cys Cys cys cys Ala Thr 100 105 110 Gly Gly Cys Cys Gly Ala Thr Cys Gly Thr cys Gly Gly Ala Ala Ala 115 120 125 cys cys Thr Cys Cys cys Gly Cys Ala cys Cys Thr cys Gly Gly Thr 130 135 140 Ala Cys Ala Ala Thr Thr cys Cys Ala cys Ala Cys cys Ala cys Thr 145 150 155 160 39/109

AT 508 554 B1 2011-02-15 30 cys Gly Cys Thr Ala Gly cys Gly Cys Gly Gly Thr Thr Gly Gly Cys 165 170 175 cys Gly cys Ala Ala Ala Gly Thr Ala cys Gly Gly cys cys Cys Gly 180 185 190 Thr Thr Gly 195 Ala Thr Gly cys Ala 200 cys cys Thr Cys cys 205 Gly Cys cys Thr cys 210 Gly Gly cys Thr Thr 215 cys Gly Thr Thr Gly 220 Ala Cys Gly Thr Gly 225 Gly Thr Gly Gly Thr 230 Cys Gly cys Gly Gly 235 cys cys Thr cys Gly 240 Gly Cys Gly Thr Cys Cys Gly Thr cys Gly cys Thr Gly cys Thr Cys 245 250 255 Ala Gly Thr Thr Thr Thr Thr Gly Ala Ala Ala Ala cys Thr Ala Ala 260 265 270 Thr Gly Ala cys Gly cys Gly Ala Thr Thr Thr Thr Cys Gly cys cys 275 280 285 Ala Gly 290 cys Cys Gly Gly Cys 295 Cys Gly Cys Cys Gly 300 Ala Ala cys Thr cys 305 cys Gly Gly cys Gly 310 cys Gly Ala Ala Gly 315 cys Ala Thr Ala Thr 320 cys Gly Cys Gly Thr Ala Thr Ala Ala Cys Thr Ala cys cys Ala Gly 325 330 335 Gly Ala Thr cys 340 Thr Gly Gly Thr Gly 345 Thr Thr Thr Gly cys 350 Ala cys Cys Ala Thr Ala cys Gly Gly Thr Cys cys Gly Cys Gly Gly Thr Gly 355 360 365 Gly SS Gly Gly Ala Thr Gly 375 Cys Thr Gly Cys Gly 380 Gly Ala Ala Gly Ala Thr Cys Thr Gly cys Thr Cys Gly Gly Thr Gly Cys Ala Cys cys 385 390 395 400 Thr Thr Thr Thr cys Thr Cys Cys Gly Cys Cys Ala Ala Ala Gly cys 405 410 415 Ala cys Thr Cys Gly Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr cys Cys Gly Thr 420 425 430 Cys Ala Thr Ala Thr Thr cys Gly Ala Cys Ala Gly Gly Ala Gly Gly 40/109 31 31 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 435 440 445

Ala Gly Gly Thr Gly Gly Cys Gly Ala Thr Ala cys Thr Cys Ala Cys 450 455 460 Ala cys Gly Thr Gly cys Thr Thr Thr Gly Ala Thr Cys Gly Gly cys 465 470 475 480 Gly cys Cys Gly Gly Ala Gly Ala Ala Thr Cys Ala Ala Cys Gly Gly 485 490 495 Thr Gly Ala Ala Ala cys Thr Ala Gly Gly Thr cys Ala Ala Cys Thr 500 505 510 Ala Cys Thr 515 Cys Ala Ala Cys Gly 520 Thr Gly Thr Gly Cys 525 Ala Cys cys Ala cys 530 Ala Ala Ala Cys Gly 535 cys Ala Thr Thr Ala 540 Gly Cys Gly Cys Gly Thr Gly Thr Gly Ala Thr Gly Thr Thr Ala Gly Gly cys Ala Gly 545 550 555 560 Gly Ala Gly Ala Gly Thr Gly Thr Thr cys Ala Gly Cys Gly Ala cys 565 570 575 Ala cys cys Gly Gly Thr Gly Ala Thr cys Thr Ala Ala Ala Gly Gly 580 585 590 Cys Gly Gly Ala Thr Gly Ala Gly Thr Thr Thr Ala Ala Ala Gly Ala 595 600 605 Thr Ala Thr Gly Gly Thr Gly Gly Thr Thr cys Ala Gly Cys Thr Gly 610 615 620 Ala Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Gly Gly Cys cys Gly Gly Ala Gly 625 630 635 640 Ala Ala Thr Thr Thr Ala Ala cys Ala Thr Thr Gly Gly Thr Gly Ala 645 650 655 cys Thr Thr Thr Ala Thr cys Cys cys Gly Gly cys Gly Cys Thr Thr 660 665 670 Gly Ala cys Thr Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala cys Ala Thr Thr Cys 675 680 685 Ala Ala Gly Gly cys Ala Thr Thr Ala cys Gly Ala Ala Gly Ala Ala 690 695 700 Gly Ala Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala Cys Thr cys cys Ala Thr 705 710 715 720 41 /109 32 32 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Gly cys Thr cys Ala Ala Thr Thr Thr Gly Ala Thr Thr Cys Gly Thr 725 730 735 Thr Cys Cys Thr Thr Ala Ala cys Gly Cys Gly Ala Thr Cys Cys Thr 740 745 750 Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala Cys Ala Thr Ala Ala Ala Thr cys cys 755 760 765 Gly Gly 770 cys Ala Ala Thr Gly 775 Gly Cys Cys Gly cys 780 Ala Cys Gly Thr cys Gly Gly Gly Thr cys Ala cys Gly Gly Thr Gly Ala Cys Thr Thr n 5 790 795 800 Gly cys Thr Gly Ala Gly cys Ala Cys Gly Cys Thr Gly Ala Thr cys 805 810 815 Gly Cys Ala Cys Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr Gly Ala Thr Gly 820 825 830 cys Thr Gly 835 Ala cys Gly Gly Thr 840 Gly Ala Gly Gly Gly 845 Thr Gly Gly Gly Ala Ala Ala cys Thr Thr Thr Cys Ala Gly Ala Thr Ala Thr Thr 850 855 860 Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Ala Ala Gly cys Thr Thr Thr Gly cys 865 870 875 880 Thr Ala cys Thr Gly Ala Ala cys Thr Thr Ala Thr Thr cys Gly Thr 885 890 895 Thr Gly Cys Ala Gly Gly Ala Ala Cys Ala Gly Ala cys Ala Cys Gly 900 905 910 Thr cys Ala Thr Cys Thr Ala Gly Cys Ala cys Ala Gly Thr Gly Gly 915 920 925 Ala Ala Thr Gly Gly Gly Cys Ala Ala Thr Ala Gly cys cys Gly Ala 930 935 940 Ala Cys Thr Cys Ala Thr Thr Cys Gly cys cys Ala Thr cys Cys Ala 945 950 955 960 Cys Gly Ala Ala Thr Gly Cys Thr Ala Ala Ala Ala Cys Ala Ala Gly 965 970 975 cys cys cys Ala Ala Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala Thr Gly Gly Ala 980 985 990 Cys Ala Ala Cys Gly Thr Ala Gly Thr Thr Gly Gly cys Cys Gly Al 42/109 33 33 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 995 1000 1005

Gly Ala Cys Cys Gly Gly Cys Thr Thr Gly Thr Ala Thr cys Cys 1010 1015 1020 Gly Ala 1025 Ala Thr cys Thr Gly 1030 Ala Thr Cys Thr cys 1035 Gly Gly cys Cys Ala Ala Cys Thr Ala Cys Cys Ala Thr Thr Cys Cys Thr Cys 1040 1045 1050 cys Ala Ala Gly Cys cys Ala Thr Thr Gly Thr Ala Ala Ala Gly 1055 1060 1065 Gly Ala Gly Ala cys cys Thr Thr Thr Ala Gly Ala cys Thr cys 1070 1075 1080 Cys Ala Cys Cys Cys Thr Thr Cys Ala Ala Cys Ala Cys Cys Cys 1085 1090 1095 Cys Thr Cys Thr Cys Cys Thr Thr Gly cys Cys Ala Ala Gly Ala 1100 1105 1110 Ala Thr cys Thr cys Ala Thr cys cys Gly Ala Gly Ala Ala Thr 1115 1120 1125 Thr Gly Cys Gly Ala Ala Gly Thr Thr Gly Ala Cys Gly Gly Gly 1130 1135 1140 Thr Ala Thr Cys Ala Cys Ala Thr Thr Cys Cys Ala Ala Ala Ala 1145 1150 1155 Gly Gly Ala Thr cys Cys Ala cys Ala Cys Thr cys Cys Thr Thr 1160 1165 1170 Gly Thr cys Ala Ala cys Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly Cys Cys 1175 1180 1185 Ala Thr Thr Gly Cys Thr Cys Gly Thr Gly Ala cys cys cys Ala 1190 1195 1200 Ala Ala Gly Ala Thr Gly Thr Gly Gly Gly Cys Gly Gly Ala Cys 1205 1210 1215 Cys Cys Ala Cys Thr Thr Gly Ala Gly Thr Thr cys cys Gly cys 1220 1225 1230 Cys Cys cys Ala Cys Ala Cys Gly Gly Thr Thr Cys Thr Thr Gly 1235 1240 1245 Cys cys Thr Gly Gly Ala Gly Gly cys Gly Ala Ala Ala Ala Gly 1250 1255 1260 43/109 34 34 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 cys Cys cys Ala Ala Thr Gly Thr Thr Gly Ala Thr Gly Thr Gly 1265 1270 1275 Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr Thr 1280 1285 1290 Gly Ala Ala Gly Thr Thr Ala Thr Ala cys cys Gly Thr Thr cys 1295 1300 1305 Gly Gly Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala cys Gly Ala Ala Gly Gly 1310 1315 1320 Ala Thr Thr Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly Thr Ala Thr Thr 1325 1330 1335 Ala Gly Cys Cys Thr Cys Gly Gly Gly Thr Thr Gly Ala Gly Gly 1340 1345 1350 Ala Thr Gly Gly Thr Cys Cys Ala Ala Thr Thr Gly cys Thr Thr 1355 1360 1365 Gly Thr Thr Gly Cys Ala Ala cys Gly Thr Thr Gly Gly Thr cys 1370 1375 1380 Cys Ala Gly Ala Cys Cys Thr Thr cys Gly Ala Thr Thr Gly Gly 1385 1390 1395 Gly Ala Ala Thr Thr Gly Gly Cys Thr Ala Ala Cys Gly Gly Gly 1400 1405 1410 Thr Thr Ala Gly Ala Gly Cys cys Gly Gly Ala Gly Ala Ala Gly 1415 1420 1425 cys Thr cys Ala Ala cys Ala Thr Gly Ala Ala Thr Gly Ala Ala 1430 1435 1440 Gly Cys Thr Thr Ala Thr Gly Gly Gly cys Thr Ala Ala Cys cys 1445 1450 1455 cys Thr Thr Cys Ala Ala Ala Gly Ala Gly Ala Ala Gly Ala Gly 1460 1465 1470 cys cys Cys Thr Thr Gly Ala Thr Gly Gly Thr Gly cys Ala cys 1475 1480 1485 cys cys Ala Ala Ala Gly Cys Cys Gly Ala Gly Gly Thr Thr Ala 1490 1495 1500 Gly Cys Thr Cys cys Thr Cys Ala Thr Gly Thr Ala Thr Ala Thr 1505 1510 1515 Gly Ala Ala Ala Gly Thr Gly Gly Thr Thr Ala Ala Gly Gly Ala 44/109 35 35 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 1520 1525 1530 cys Thr Gly Ala cys Thr Ala Gly Thr Thr Gly Thr Cys Ala cys 1535 1540 1545

Thr Thr Thr cys Ala Ala Thr Ala Ala Ala Ala Cys Ala Gly Gly 1550 1555 1560

Thr Thr Gly Thr Thr Thr Gly Cys Thr Gly Thr Ala Thr cys Thr 1565 1570 1575

Ala Cys Gly Thr Thr Gly Thr Ala Cys Gly Thr Thr Ala Ala Thr 1580 1585 1590

Thr Thr Gly Thr Ala Ala Gly Thr Thr Gly Ala Gly Ala Ala Cys 1595 1600 1605

Ala cys Cys cys Ala Ala Thr Thr Thr Gly Thr Ala Ala Thr Gly 1610 1615 1620

Gly Gly 1625

<210> 42 <211> 1740 <212> PRT <213> Echinops bannaticus <400> 42

Cys Cys Thr Cys Cys Ala Ala Ala cys Thr Cys Cys Ala Thr Ala Thr 15 10 15

Gly Thr Ala Ala Ala Ala Thr Gly Ala Cys cys Ala Thr Thr Cys Thr 20 25 30

Ala Ala cys Cys Thr Thr cys Cys Thr cys Cys Thr Gly Thr Ala cys 35 40 45

Ala cys Cys Thr Gly Cys Ala Thr Thr Ala cys Thr Gly Gly Gly Thr 50 55 60

Thr Ala Gly Thr Cys Thr Thr Cys Thr Ala Thr Gly cys Ala Thr Thr 65 70 75 80

Gly Cys Ala cys Thr Thr Gly Thr Thr Thr Ala Ala Cys Cys Thr Gly 85 90 95 cys Gly Cys Ala Cys Ala Cys cys Thr Cys Ala Cys Cys Gly Thr Ala 100 105 110

Ala cys cys Gly Cys Cys Thr Cys Cys Cys Cys Cys Cys cys Gly Gly 115 120 125 45/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 36

Cys Cys 130 Cys Ala Ala cys Ala 135 cys cys Ala Thr Gly 140 Gly cys cys Ala Ala Thr Cys Gly Thr cys Gly Gly cys Ala Ala Cys Thr Thr Ala cys 145 150 155 160 Cys Ala Cys Ala Thr 165 cys Thr cys Gly Gly 170 Cys Ala Gly Ala Gly 175 Thr Thr cys Cys Gly cys Ala cys Cys Ala Thr Thr Cys Gly cys Thr Gly 180 185 190 Gly cys Gly Gly Ala cys Thr Thr Gly Gly Cys Gly Ala cys Ala Ala 195 200 205 Ala Gly 210 Thr Ala cys Gly Gly 215 cys cys Cys Gly Thr 220 Thr Gly cys Thr Gly Cys Ala Thr cys Thr Cys cys Gly Gly cys Thr cys Gly Gly Ala 225 230 235 240 Thr Thr Thr Gly Thr 245 Thr Gly Ala cys Gly 250 Thr Gly Gly Thr & Gly Thr Gly Gly Cys 260 cys Gly Gly Ala Thr 265 Cys Gly Gly cys Thr 270 Thr cys Thr Gly Thr Cys Gly cys Cys Gly cys Ala Cys Ala Giy Thr Thr Thr 275 280 285 Thr Thr Gly Ala Ala Gly Gly Thr Thr cys Ala Thr Gly Ala Thr Gly 290 295 300 cys Gly Ala Ala Thr Thr Thr Cys Gly cys Thr Ala Gly cys Ala 305 310 315 320 Gly Cys cys Gly cys 325 cys Gly Ala Ala iS Thr Cys cys Gly Gly 335 Ala Gly cys Gly Ala Ala Gly Cys Ala Thr Ala Thr Gly Gly cys Gly Thr 340 345 350 Ala Thr Ala Ala Thr Thr Ala Thr cys Ala Gly Gly Ala Thr Ala Thr 355 360 365 Gly Gly Thr Gly Thr Thr Cys Gly Cys Ala Cys Cys Gly Thr Ala cys 370 375 380 Gly Gly Thr Cys cys Gly Ala Ala Ala Thr Gly Gly Cys Gly Gly Ala 385 390 395 400 Thr Gly Cys Thr Thr cys Gly Gly Ala Ala Gly Ala Thr Thr Thr Gly 405 410 415 46/109 37 37 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 cys Thr cys Gly 420 Gly Thr Gly Cys Ala 425 Cys Cys Thr Thr Thr 430 Thr cys Thr cys Thr Ala cys cys Ala Ala Ala Gly cys Ala Cys Thr Cys Gly 435 440 445 Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr cys Cys Gly Thr cys Ala cys Gly Thr 450 455 460 Thr cys Gly Thr Cys Ala Gly Gly Ala Gly Gly Ala Gly Gly Thr Ala 465 470 475 480 Gly Cys Gly Ala Thr Ala Cys Thr Thr Gly Cys Thr Cys Gly Cys Gly 485 490 495 Cys Thr Thr Thr Gly Gly Thr cys Gly Gly Ala Gly cys Cys Gly Gly 500 505 510 Ala Gly Ala Ala Thr Cys Ala Ala Cys Gly Gly Thr Gly Ala Ala Ala 515 520 525 Thr Thr Ala Gly Gly Thr cys Ala Gly Thr Thr Ala cys Thr Thr Ala 530 535 540 Ala cys Gly Thr Gly Thr Gly Cys Ala cys cys Ala cys Ala Ala Ala 545 550 555 560 cys Gly cys Gly Thr Thr Ala Gly Cys Ala Cys Gly Ala Gly Thr Thr 565 570 575 Ala Thr Gly Thr Thr Ala Gly Gly Cys Ala Gly Gly Ala Gly Ala Gly 580 585 590 Thr Gly Thr Thr Thr Gly Gly cys Gly Ala Thr Gly Gly Ala Ala Gly 595 600 605 Thr Gly Gly Ala Gly Gly cys Gly Gly cys Gly Ala Thr Thr cys Gly 610 615 620 Ala Ala Gly Thr cys Gly Gly Ala Thr Gly Ala Ala Thr Thr Thr Ala 625 630 635 640 Ala Gly Gly Ala Thr Ala Thr Gly Gly Thr Gly Ala Thr Gly Gly Ala 645 650 655 Gly Ala Thr Gly Ala Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Gly Gly cys cys 660 665 670 Gly Gly Ala Gly Ala Ala Thr Thr cys Ala Ala cys Ala Thr Cys Gly 675 680 685 47/109 38 38 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Gly Cys Gly Ala cys Thr Thr cys Ala Thr Thr Cys Cys Gly Gly cys 690 695 700 Thr Cys Thr Gly Gly Ala Cys Thr Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala cys 705 710 715 720 Cys Thr Gly cys Ala Ala Thr cys cys Gly Thr Gly Ala cys Gly Ala 725 730 735 Ala Ala Ala Ala Gly Ala Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala cys Thr 740 745 750 cys cys Ala Thr Gly Thr Thr Cys Gly Gly Thr Thr cys Gly Ala Thr 755 760 765 Thr Cys Gly Thr Thr Cys cys Thr Thr Ala Ala Thr Ala Cys Gly Ala 770 775 780 Thr Cys Cys Thr Gly Gly Ala Ala Gly Ala Gly cys Ala Thr Ala Ala 785 790 795 800 Ala Ala Gly Thr Gly Gly Thr Ala Ala Thr Ala Thr Gly Gly Ala Thr 805 810 815 Thr Thr Thr Gly Thr Gly Ala Gly Cys Ala Gly Gly Thr Thr Gly Ala 820 825 830 Thr Thr Thr Cys Cys Gly Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr Gly Ala 835 840 845 Thr Gly Cys Ala Gly Ala Cys Gly Gly Ala Cys Ala Gly Gly Gly Ala 850 855 860 Gly Gly Gly Ala Ala Gly Cys Thr Thr Thr Cys Ala Gly Ala cys Ala 865 870 875 880 Cys Cys Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Ala Ala Gly Cys Thr Thr Thr 885 890 895 Ala cys Thr Thr cys Thr Gly Ala Ala Thr Thr Thr Gly Thr Thr Thr 900 905 910 Gly cys Cys Gly Cys Gly Gly Gly Ala Ala cys Ala Gly Ala cys Ala 915 920 925 cys Ala Thr cys Ala Thr cys Thr Ala Gly cys Ala Cys Thr Gly Thr 930 935 940 Thr Gly Ala Ala Thr Gly Gly Gly Cys Ala Ala Thr cys Gly cys cys 945 950 955 960 Gly Ala Ala Cys Thr Cys Ala Thr Thr Cys Gly Ala cys Ala Thr cys 965 970 975 48/109 39 39 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Cys Ala Cys Ala Ala Cys Thr Ala Thr Thr Gly Ala Ala Gly Cys Ala 980 985 990

Ala Gly Cys Cys Cys Ala Ala Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala Thr Gly 995 1000 1005 cys Thr 1100

Gly Ala 1010 Cys Gly 1025 Ala Cys 1040 Ala Gly 1055 Cys Thr 1070 Ala Ala 1085 cys cys 1115 Ala Gly 1130 Ala Cys 1145 Gly Gly 1160 Ala Ala 1175 cys Thr 1190 Gly Cys 1205 Cys Cys 1220 cys Ala cys cys Ala Thr Ala Gly Thr Thr Gly Gly Thr 1015 1020 Ala Gly Ala Cys cys 1030 Gly Gly Cys Thr Ala 1035 Gly Thr Thr Thr Gly Ala Ala Gly 1045 Thr Gly Gly Ala cys 1050 cys Thr Ala Thr Ala Gly Ala Cys Thr Ala Ala Cys Ala Thr Thr cys 1060 1065 cys cys Ala Ala Gly cys Cys Ala Thr Thr Gly Thr Gly 1075 1080 Gly Gly Ala Gly Ala 1090 Thr Ala Thr Thr Thr 1095 Ala Gly Gly cys Cys Ala Thr Cys cys Gly Thr Cys Ala Ala Cys Ala 1105 1110 Ala cys Thr cys Thr Cys Ala Thr Thr Gly Cys Cys Ala 1120 1125 Gly Ala Thr Thr Gly Cys Ala Thr Cys Ala Gly Ala cys 1135 1140 Thr Thr Gly Thr Gly Ala Gly Gly Thr Thr Gly Ala Cys 1150 1155 Ala Thr Ala Thr Thr Ala Thr Ala Thr Thr Cys Cys Thr 1165 1170 Ala Gly Gly Ala Thr Cys Cys Ala Cys Gly cys Thr cys 1180 1185 Thr Gly Thr Thr Ala Ala Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly 1195 1200 Cys Ala Thr Cys Thr Cys Thr Cys Gly Ala Gly Ala Cys 1210 1215 Ala Ala Ala Ala Ala Thr Ala Thr Gly Gly Thr cys cys 1225 1230 49/109 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 40 Ala Ala Thr cys Cys Ala cys Thr Thr Gly Ala Ala Thr Thr cys 1235 1240 1245 Cys Ala Ala Cys Cys cys Ala cys Thr Cys Gly Ala Thr Thr cys 1250 1255 1260 Thr Thr Gly cys Cys Thr Gly Gly Thr Gly Gly Thr Gly Ala Ala 1265 1270 1275 Ala Ala Gly cys cys Ala Gly Ala Thr Gly cys cys Gly Ala Thr 1280 1285 1290 Gly Thr Cys Ala Ala Gly Gly Gly Ala Ala Ala Thr Gly Ala Thr 1295 1300 1305 Thr Thr Thr Gly Ala Gly Cys Thr Cys Ala Thr Ala Cys Cys Ala 1310 1315 1320 Thr Thr Thr Gly Gly Gly Gly cys Thr Gly Gly Ala cys Gly Ala 1325 1330 1335 Ala Gly Gly Ala Thr Thr Thr Gly Thr Gly cys Ala Gly Gly Thr 1340 1345 1350 Ala Thr Gly Ala Gly Thr cys Thr Gly Gly Gly Ala Thr Thr Ala 1355 1360 1365 Ala Ala Gly Ala Thr Gly Gly Thr cys cys Ala Gly Thr Thr Ala 1370 1375 1380 Cys Thr Cys Ala Cys Thr Gly Cys Ala Ala Cys Thr cys Thr Ala 1385 1390 1395 Gly Thr cys Cys Ala Thr Gly cys Ala Thr Thr cys Gly Ala Thr 1400 1405 1410 Thr Gly Gly Gly Ala Ala Thr Thr Gly Gly Cys Thr Ala Ala cys 1415 1420 1425 Gly Gly Gly Thr Thr Ala Gly Ala Cys cys cys Ala Gly Ala Thr 1430 1435 1440 Ala Ala Gly cys Thr Cys Ala Ala cys Ala Thr Gly Gly Ala Ala 1445 1450 1455 Gly Ala Ala Gly Cys Cys Thr Ala Thr Gly Gly Gly Thr Thr Ala 1460 1465 1470 Ala cys cys cys Thr Cys Cys Ala Ala Ala Gly Gly Gly Cys Thr 1475 1480 1485 Ala Cys Ala cys cys Cys Thr Thr Gly Ala Thr Gly Gly Thr Gly 1490 1495 1500 50/109 41 41 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Cys Ala Cys Cys Cys Ala Ala Gly Gly cys cys Ala Ala Gly Gly 1505 1510 1515 Thr Thr Ala Gly Cys Cys Cys Cys Thr cys Ala Thr Gly Thr Ala 1520 1525 1530 Thr Ala cys Cys Ala Ala Ala Gly Thr Gly Gly Thr Thr Ala Ala 1535 1540 1545 Gly Gly Ala Cys Thr Thr Ala Ala cys cys Cys Gly Thr Thr Ala 1550 1555 1560 Thr Thr Thr Ala Thr Thr Cys Gly cys Ala Thr Thr Thr Thr Thr 1565 1570 1575 Gly Thr Thr Thr Gly Cys Gly Ala Ala Ala Thr Thr Ala Ala Thr 1580 1585 1590 Thr Ala Ala Thr Cys Ala Thr Ala Thr Thr Thr Thr cys Thr Cys 1595 1600 1605 Thr Ala Gly Cys Gly Ala Thr Thr Ala Thr Gly Thr Ala Cys Gly 1610 1615 1620 Thr Thr Cys Thr cys Thr Ala Ala Ala Ala Ala Thr Gly Thr Thr 1625 1630 1635 Thr Thr Thr Thr Thr Thr Ala Ala Thr Thr Ala Thr Cys Thr Thr 1640 1645 1650 Ala Thr Thr cys Ala Thr Gly Thr Ala Ala Gly Thr Thr Gly Thr 1655 1660 1665 Thr Thr Cys Ala Thr Gly Thr Thr Thr Thr Gly Gly Cys Thr Ala 1 Γ7Λ XU/ U 1 C 7C XV' J ican AUUV Ala Ala Thr Ala Ala Ala Thr Ala Ala Thr Thr Thr Ala Ala Ala 1685 1690 1695 Thr Ala Cys Thr Cys Ala Thr Cys Thr Ala Thr cys Ala Thr Thr 1700 1705 1710 Thr Cys Thr Thr Thr cys Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1715 1720 1725 Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1730 1735 1740

<210> 43 <211> 1578 <212> PRT <213> Centaurea cyanus 51 /109 42 42 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 <400> 43

Ala Thr Gly Ala Cys Ala Thr Thr Thr cys Thr Ala cys cys cys cys 1 5 10 15 Thr Gly Gly Thr Thr cys Thr Ala Thr Ala Cys Ala Cys Cys Thr Cys 20 25 30 Thr Gly Thr 35 Cys Gly Cys Cys cys 40 Thr Gly Thr Thr Ala 45 Cys Thr cys Cys Thr cys Thr Ala cys Gly Thr Ala Thr Thr Gly Cys Thr Thr Ala 50 55 60 Ala cys cys Thr Ala cys Gly cys Ala Cys Cys Cys Cys Thr Cys Gly 65 70 75 80 Cys Thr Cys Gly Ala Ala cys cys Gly Cys Cys Gly Gly cys Thr Thr 85 90 95 Cys cys cys Cys cys Cys Gly Gly cys cys Cys Gly Ala cys cys Cys 100 105 110 Cys Gly Thr Gly Gly cys cys Gly Ala Thr Ala Gly Thr cys Gly Gly 115 120 125 Ala Ala Ala Cys Thr Thr Gly cys cys Thr Cys Ala Thr Cys Thr Cys 130 135 140 Gly Gly Cys Ala Ala Gly Ala Thr Gly cys cys Thr cys Ala cys Cys 145 150 155 160 Ala Thr Gly cys Ala Thr Thr Gly Gly cys Cys Gly Cys Ala Ala Thr 165 170 175 Gly Gly cys Gly Gly Ala Cys Ala Ala Gly Thr Ala Cys Gly Gly cys 180 185 190 cys Cys cys Thr Thr Gly Ala Thr Gly Cys Ala Thr cys Thr Ala cys 195 200 205 Gly Gly Thr Thr cys Gly Gly Cys Gly Thr Thr Gly Thr Gly Gly Ala 210 215 220 Cys Gly Thr Cys Gly Thr Gly Gly Thr Gly Gly cys cys Gly Cys Gly 225 230 235 240 Thr cys Thr Gly cys Thr Thr Cys cys Gly Thr Gly Gly Cys Cys Gly 245 250 255 cys Thr cys Ala Gly Thr Thr Thr Thr Thr Gly Ala Ala Gly Gly Thr 260 265 270 52/109 43 43 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 cys cys Ala 275 cys Gly Ala cys Gly 280 Cys Gly Ala Ala cys 285 Thr Thr cys Gly Cys Gly Ala Gly cys Ala Gly Gly Cys cys Gly Cys cys Cys Ala 290 295 300 Ala cys Thr cys cys Gly Gly Gly Gly cys Gly Ala Ala Gly cys Ala 305 310 315 320 Thr cys Thr cys Gly Cys Gly Thr Ala Cys Gly Ala Thr Thr Ala Thr 325 330 335 Cys Ala Gly Gly 340 Ala Thr Cys Thr Cys 345 Gly Thr Gly Thr Thr 350 Thr Gly cys cys Cys Cys Ala Thr Ala cys Gly Gly Thr Cys Thr Gly Ala Ala 355 360 365 Gly Thr 370 Gly Gly Ala Gly Gly 375 Ala Thr Gly cys Thr 380 Thr Cys Gly Gly Ala Ala Gly Ala Thr cys Thr Gly Cys Thr Cys Gly Gly Thr Gly cys 385 390 395 400 Ala Thr cys Thr Gly Thr Thr Cys Thr Cys Gly Ala Ala Thr Ala Ala 405 410 415 Gly Gly cys Ala 420 cys Thr Cys Gly Ala 425 Thr Gly Ala Thr Thr 430 Thr Cys Cys Gly Thr Cys Ala cys Gly Thr Thr Cys Gly Thr Gly Ala Gly Gly 435 440 445 Ala Gly Gly Ala Gly Gly Thr Gly Gly Cys Gly Gly Thr Thr Thr Thr 450 455 460 Gly Ala Cys cys Cys Gly Thr Gly Cys Thr Thr Thr Gly Gly Cys cys 465 470 475 480 Gly Gly Ala Gly cys 485 cys Gly Gly Ala Gly 490 Gly Ala Thr cys Gly 495 Ala cys Gly Gly Thr 500 Gly Gly Cys Thr Thr 505 Thr Ala Gly Gly Thr 510 Cys Ala Ala Thr Thr Ala cys Thr Thr Ala Ala cys Gly Thr Thr Thr Gly Cys 515 520 525 Ala Cys cys Ala Cys Ala Ala Ala Cys Gly Cys Thr Thr Thr Gly Gly 530 535 540 cys Ala cys Gly Ala Gly Thr Gly Ala Thr Gly Thr Thr Ala Gly Gly 53/109 44 44 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 545 550 555 560

Thr Ala Gly Gly Ala Gly Ala Gly Thr Ala Thr Thr Thr Gly Gly Thr 565 570 575 Gly Ala cys Gly 580 Gly Thr Ala Gly Cys 585 Gly Gly Ala Gly Gly 590 cys Gly Gly Ala Gly Ala Thr cys Gly Gly Ala Ala Gly Gly cys Gly Gly Ala 595 600 605 Thr Gly Ala Ala Thr Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala Ala Ala Thr Gly 610 615 620 Gly Thr Gly Gly Thr Thr Gly Ala Ala Ala Thr Gly Ala Thr Gly Gly 625 630 635 640 Thr Ala Thr Thr Gly Gly Cys cys Gly Gly Ala Gly Ala Ala Thr Thr 645 650 655 Cys Ala Ala Cys Ala Thr cys Gly Gly cys Gly Ala Cys Thr Thr cys 660 665 670 Ala Thr Thr Cys Cys Gly Gly Cys Gly cys Thr Thr Gly Ala Thr Thr 675 680 685 Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala Cys Cys Thr Gly Cys Ala Ala Gly Gly 690 695 700 Cys Gly Thr Ala Ala cys Cys Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Thr Gly 705 710 715 720 Ala Ala Ala Ala Ala Cys Cys Thr cys Cys Ala Thr Cys Thr Cys cys 725 730 735 Gly Ala Thr Thr Thr Gly Ala Thr Thr cys Gly Thr Thr Thr cys Thr 740 745 750 Thr Ala Ala Cys Gly Ala Ala Ala Thr cys cys Thr cys Gly Ala Ala 755 760 765 Gly Ala Cys Cys Ala Thr Ala Ala Ala Ala Ala Thr Gly Gly cys Gly 770 775 780 Gly Thr Gly Ala Cys Ala Thr Cys Ala Thr Cys Ala Cys Thr Thr Cys 785 790 795 800 Cys Gly Gly Thr Ala Ala cys Gly Thr Gly Gly Ala Cys Thr Thr Gly 805 810 815 cys Thr Ala Ala Cys cys Ala Cys Gly Thr Thr Gly Ala Thr Thr Thr 820 825 830 54/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 45 cys Ala Cys Thr cys Ala Ala Gly Gly Ala cys Gly Ala cys Gly Cys 835 840 845 cys Gly Ala Thr Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Gly Thr Gly Gly Gly 850 855 860

Ala Ala Gly cys Thr Thr Thr cys Ala Gly Ala cys Ala Thr cys Gly 865 870 875 880

Ala Ala Ala Thr cys Ala Ala Ala Gly Cys Thr Ala Thr Ala cys Thr 885 890 895

Thr Cys Thr Gly Ala Ala Thr Thr Thr Ala Thr Thr Thr Ala Cys Thr 900 905 910

Gly Cys Thr Gly Gly Ala Ala Cys Ala Gly Ala Cys Ala Cys Gly Thr 915 920 925

Cys Ala Thr Cys Thr Ala Gly Thr Ala Cys Gly Gly Thr Gly Gly Ala 930 935 940

Ala Thr Gly Gly Gly Cys Ala Ala Thr Gly Gly Cys Ala Gly Ala Ala 945 950 955 960

Cys Thr Thr Ala Thr Thr cys Gly Ala Thr Ala Thr Cys Cys Ala cys 965 970 975

Ala Ala Cys Thr Ala Ala Thr Gly Cys Ala Ala Ala Ala Ala Gly cys 980 985 990

Cys Cys Ala Ala Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala Thr Ala Gly Ala Ala 995 1000 1005

Ala Gly cys Gly Thr Ala Gly Thr Cys Gly Gly Thr Ala Gly Gly 1010 1015 1020

Gly Ala cys Cys Gly Ala cys Thr Thr Gly Thr Ala Thr Cys Thr 1025 1030 1035

Gly Ala Ala Thr Thr Gly Gly Ala cys cys Thr Ala Cys Cys Cys 1040 1045 1050

Cys Gly Ala Cys Thr Ala Ala Cys Gly Thr Thr cys cys Thr Thr 1055 1060 1065

Gly Ala Ala Gly Cys Cys Gly Thr Thr Gly Thr Gly Ala Ala Gly 1070 1075 1080

Gly Ala Ala Ala cys Cys Thr Thr Thr Ala Gly Gly cys Thr Cys 1085 1090 1095

Cys Ala Cys Cys Cys Gly Thr Cys Gly Ala cys cys cys Cys Ala 55/109 46 46 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 1100 1105 1110 cys Thr Ala Thr cys Cys Thr Thr Gly Cys Cys Thr Ala Gly Ala 1115 1120 1125 Ala Thr Gly Gly cys Ala Thr Thr Ala Gly Ala Gly Ala Gly Thr 1130 1135 1140 Thr Gly Thr Gly Ala Ala Gly Thr cys Gly Ala Thr Gly Gly Gly 1145 1150 1155 Thr Ala Thr Thr Ala Cys Ala Thr Thr Cys cys Cys Ala Ala Ala 1160 1165 1170 Gly Sfc Ala Thr cys cys Ala 1180 Cys Gly Cys Thr Thr 1185 Cys Thr Thr Gly Thr Thr Ala Ala cys Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly cys Cys 1190 1195 1200 Ala Thr Thr Gly cys Thr Cys Gly Ala Gly Ala Cys Cys cys Ala 1205 1210 1215 Ala Ala Ala Ala Thr Gly Thr Gly Gly Gly Ala Thr Gly Ala Cys 1220 1225 1230 cys cys Gly cys Thr Thr Gly Ala Ala Thr Thr Cys cys Gly Ala 1235 1240 1245 cys Cys Thr Ala Gly Ala Cys Gly Ala Thr Thr Cys Thr Thr Gly 1250 1255 1260 Cys Cys Ala Ala Gly Ala Gly Gly Thr Gly Ala Ala Ala Ala Ala 1265 1270 1275 cys Cys Gly Ala Ala Thr Gly cys Thr Ala Ala Thr Gly Thr Gly 1280 1285 1290 Ala Ala Ala Gly Gly Ala Ala Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr cys 1295 1300 1305 Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Thr Ala Cys cys Gly Thr Thr Thr 1310 1315 1320 Gly Gly Gly Gly cys Thr Gly Gly Ala cys Gly Ala Ala Gly Ala 1325 1330 1335 Ala Thr Thr Thr Gly Thr Gly Cys Ala Gly Gly cys Ala Thr Gly 1340 1345 1350 Ala Gly cys Cys Thr Ala Gly Gly Gly Thr Thr Ala Ala Gly Gly 1355 1360 1365 56/109 47 47 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Ala Thr Gly Gly Thr Cys Cys Ala Gly Thr Thr Gly cys Thr Cys 1370 1375 1380 Ala Cys Cys Gly Cys Gly Ala Cys Ala Cys Thr Gly Gly Thr Cys 1385 1390 1395 cys Ala Thr Gly Cys Cys Thr Thr Thr Gly Ala Thr Thr Gly Gly 1400 1405 1410 Ala Ala Ala Thr Thr Gly Gly Cys Thr Ala Ala Thr Gly Gly Gly 1415 1420 1425 Thr Thr Ala Gly Ala cys Thr Cys Ala Gly Ala Gly Ala Ala Ala 1430 1435 1440 Thr Thr Gly Ala Ala Cys Ala Thr Gly Ala Ala Ala Gly Ala Ala 1445 1450 1455 Gly Cys Thr Thr Ala Thr Gly Gly Gly Thr Thr Ala Ala cys cys 1460 1465 1470 cys Thr Thr Cys Ala Ala Ala Gly Gly Gly Ala Thr Gly Thr Ala 1475 1480 1485 cys cys Thr Thr Thr Gly Ala Thr Gly Gly Thr Ala Cys Ala Cys 1490 1495 1500 cys cys Thr Ala Gly cys Cys cys Ala Ala Gly Gly Thr Thr Ala 1505 1510 1515 Gly Cys Thr Cys cys cys Gly Ala Gly Thr Thr Ala Thr Ala Cys 1520 1525 1530 Ala Ala Ala Ala Gly Thr Gly Gly Thr Thr Ala Ala Gly Gly Thr 1535 1540 1545 Cys Thr Thr Gly Ala Ala Ala Ala Ala Cys cys Ala Ala Thr Gly 1550 1555 1560 Thr Ala Gly Thr Gly Gly Thr cys Thr Ala Thr Ala Gly Cys Ala 1565 1570 1575

<210> 44 <211> 1539 <212> PRT <213> Gerbera hybrid cultivar Dl <400> 44

Ala Thr Gly Ala cys Gly cys Cys Thr Thr Thr Ala Ala Cys Gly Cys 15 10 15

Thr Cys Cys Thr Thr Ala Thr Cys Gly Gly Cys Ala cys Cys Thr Gly 20 25 30 57/109 48 48 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Thr Gly Thr Cys Ala Cys Thr Gly Gly Ala Thr Thr Ala Thr Thr Cys 35 40 45 Cys Thr Cys Thr Ala cys Gly Thr Gly Thr Thr Gly Cys Thr Thr Ala 50 55 60 Ala Cys Cys Gly Gly Thr Gly Cys Ala Cys cys Cys Gly Thr Ala Ala 65 70 75 80 Cys cys cys Thr Ala Ala Cys cys Gly Cys Cys Thr Cys cys Cys Gly 85 90 95 Cys cys Cys Gly Gly Cys Cys Cys Ala Ala Cys Gly cys cys Ala Thr 100 105 110 Gly Gly cys Cys Gly Gly Thr Cys Gly Thr Cys Gly Gly Ala Ala Ala 115 120 125 Cys cys 130 Thr Ala cys cys Gly 135 cys Ala Thr Cys Thr 140 Cys Gly Gly Cys Ala Cys Thr Ala Thr Ala Cys Cys Ala cys Ala Cys Cys Ala cys Thr 145 150 155 160 Cys Gly Cys Thr Gly Gly Cys Gly Gly Cys Gly Ala Thr Gly Gly Cys 165 170 175 Gly Ala Ala Gly Ala Ala Gly Thr Ala Thr Gly Gly Cys Cys cys Gly 180 185 190 Thr Thr Gly Ala Thr Gly Cys Ala Cys Cys Thr Cys Cys Gly Gly cys 195 200 205 Thr Ala Gly Gly Cys Thr Thr cys Gly Thr Cys Gly Ala cys Gly Thr 210 215 220 Cys Gly Thr Gly Gly Thr Gly Gly Cys Cys Gly Cys Cys Thr cys cys 225 230 235 240 Gly cys cys Thr cys cys Gly Thr Cys Gly cys Cys Gly cys Gly cys 245 250 255 Ala Gly Thr Thr Thr Thr Thr Gly Ala Ala Gly Ala cys Thr Cys Ala 260 265 270 Cys Gly Ala cys Gly cys Gly Ala Ala Cys Thr Thr cys Gly Cys Cys 275 280 285 Gly Ala Thr cys Gly Gly cys Cys Thr Cys cys Gly Ala Ala Cys Thr 290 295 300 58/109 49 49 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 cys cys Gly Gly Ala Gly Cys Cys Ala Ala Gly cys Ala Thr Ala Thr 305 310 315 320 Cys Gly cys Gly Thr Ala Thr Ala Ala Thr Thr Ala Thr Cys Ala Gly 325 330 335 Gly Ala Thr cys Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Thr Gly cys Thr cys 340 345 350 Cys Gly Thr Ala cys Gly Gly Thr Cys Cys Gly Cys Gly Gly Thr Gly 355 360 365 Gly Cys 370 Gly Gly Ala Thr Gly 375 cys Thr Thr Cys Gly 380 Gly Ala Ala Gly Ala Thr Thr Thr Gly Cys Thr cys Gly Gly Thr Gly Cys Ala cys cys 385 390 395 400 Thr Gly Thr Thr Thr Thr cys cys Ala cys cys Ala Ala Ala Gly Cys 405 410 415 Gly cys Thr cys Gly Ala Thr Gly Ala Thr Thr Thr cys Cys Gly Gly 420 425 430 Cys Ala Cys Gly Thr Cys Cys Gly Gly Cys Ala Gly Gly Ala Gly Gly 435 440 445 Ala Gly Gly Thr Ala Gly cys Gly Ala Thr Ala cys Thr Ala Gly cys 450 455 460 Gly Cys Gly cys Gly cys Thr Thr Thr Gly Gly Thr Cys Gly Gly cys 465 470 475 480 Gly Cys Cys Gly Gly Ala Ala Ala Ala Thr Cys Ala cys Cys Gly Gly 485 490 495 Thr Gly Ala Ala Ala Thr Thr Ala Gly Gly Thr Cys Ala Gly Thr Thr 500 505 510 Ala cys Thr Gly Ala Ala Cys Gly Thr Gly Thr Gly cys Ala cys Cys 515 520 525 Ala Cys Ala Ala Ala cys Gly Cys Ala Thr Thr Gly Gly cys Gly cys 530 535 540 Gly Ala Gly Thr Gly Ala Thr Gly Thr Thr Ala Gly Gly Gly Ala Gly 545 550 555 560 Gly Ala Gly Ala Gly Thr Ala Thr Thr Thr Gly Ala Cys Thr cys Cys 565 570 575 Gly Gly cys Gly Ala Thr Gly Cys Thr Cys Ala Gly Gly Cys Gly Gly 580 585 590 59/109 50 50 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Ala Thr Gly Ala Gly Thr Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala cys Ala Thr 595 600 605 Gly Gly Thr Gly Gly Thr Thr Gly Ala Gly Cys Thr Gly Ala Thr Gly 610 615 620 Gly Thr Gly Thr Thr Ala Gly Cys Cys Gly Gly Ala Gly Ala Ala Thr 625 630 635 640 Thr Cys Ala Ala Cys Ala Thr Cys Gly Gly cys Gly Ala cys Thr Thr 645 650 655 Cys Ala Thr cys cys Cys cys Gly Thr Gly cys Thr Thr Gly Ala Cys 660 665 670 Thr Gly Gly cys Thr Gly Gly Ala Cys cys Thr Gly Cys Ala Ala Gly 675 680 685 Gly cys Gly Thr Gly Ala cys Gly Ala Ala Gly Ala Ala Gly Ala Thr 690 695 700 Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala cys Thr cys cys Ala Cys Gly Cys Gly 705 710 715 720 Ala Ala Ala Thr Thr cys Gly Ala cys Thr cys Gly Thr Thr Cys Cys 725 730 735 Thr Thr Ala Ala cys Ala cys Gly Ala Thr cys cys Thr Cys Gly Ala 740 745 750 Ala Gly Ala Ala cys Ala Thr Ala Ala Ala Ala cys Cys Gly Gly Cys 755 760 765 Gly cys 770 Cys Gly Gly Thr Gly 775 Ala cys Gly Gly Thr 780 Gly Thr cys Gly Cys Gly Thr Cys Gly Gly Gly Thr Ala Ala Ala Gly Thr Thr Gly Ala 785 790 795 800 cys Thr Thr Gly Thr Thr Gly Ala Gly Cys Ala Cys Gly Thr Thr Gly 805 810 815 Ala Thr Thr Thr Cys Gly Cys Thr Gly Ala Ala Gly Gly Ala Thr Gly 820 825 830 Ala Cys Gly Cys Ala Gly Ala Thr Gly Gly Ala Gly Ala Gly Gly Gly 835 840 845 Ala Gly Gly Gly Ala Ala Gly Cys Thr Gly Thr cys Gly Gly Ala Cys 850 855 860 60/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 51

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Thr Gly Cys Thr Thr cys Thr Gly Ala Ala Cys Thr Thr Ala Thr Thr 885 890 895 cys Ala Cys Ala Gly Cys Gly Gly Gly Gly Ala cys Thr Gly Ala cys 900 905 910

Ala Cys Ala Thr Cys Ala Thr Cys Thr Ala Gly Thr Ala Cys Thr Ala 915 920 925

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Ala Ala Gly Cys cys cys Gly Ala Ala Ala Ala Gly Ala Ala Ala Thr 980 985 990

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Cys cys Ala Cys Thr Ala Thr Cys Ala cys Thr Gly Cys Cys Ala 1100 1105 1110

Ala Gly Gly Ala Thr Gly Gly Cys Ala Thr Thr Gly Gly Ala Ala 1115 1120 1125

Ala Gly Thr Thr Gly Thr Gly Ala Gly Gly Thr Thr Gly Gly Cys 1130 1135 1140 61 /109 österreichisches 508 554 B1 2011 -02-15 Patentamt 52

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Gly Gly Gly Thr Thr Ala Ala Ala Cys Cys cys Ala Ala Ala Gly 1415 1420 1425

Ala Ala Gly Cys Thr Thr Ala Ala cys Ala Thr Gly Gly Ala Ala 1430 1435 1440

Gly Ala Gly Gly Cys Thr Thr Ala Cys Gly Gly Gly Cys Thr Gly 1445 1450 1455

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Gly Cys Ala Cys cys Gly Thr Thr Ala Gly Thr Gly Gly Thr Thr 1475 1480 1485

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Thr Thr Ala Gly Cys Cys Cys Cys Ala Cys Ala Thr Gly Thr Ala 1505 1510 1515

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Gly Thr Cys Thr Ala Gly 1535

<210> 45 <211> 1801 <212> PRT <213> Osteospermum hybrid cultivar <400> 45

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Thr Thr Cys Thr Thr Ala Thr Thr Thr Ala Thr Thr Thr Ala Thr Thr 20 25 30

Thr Ala Thr Thr Ala Cys Ala Cys Ala Thr Ala Cys Ala Thr Ala Ala 35 40 45

Gly Thr Ala Ala Ala Ala Thr Gly Ala Cys Cys Ala Thr Thr Thr Thr 50 55 60

Ala Cys Cys Cys Cys Thr Thr Gly Thr Ala Cys Thr Cys Thr Ala Cys 65 70 75 80

Ala Gly Thr Thr Gly Cys Ala Thr Cys Ala Cys Thr Gly Gly Ala Thr 85 90 95 63/109 54 54 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Thr Ala Gly Thr Gly Ala Thr cys Thr Ala Thr Gly Thr Ala cys Thr 100 105 110 Gly Cys Thr Thr Ala Ala Cys cys Thr Gly Cys Gly Cys Ala cys cys 115 120 125 Cys Gly Thr cys Ala Cys Thr cys Thr Ala Ala cys Cys Gly cys Cys 130 135 140 Thr Gly Cys Cys Cys Cys Cys Thr Gly Gly Gly Cys cys cys Ala cys 145 150 155 160 Ala cys cys Ala Thr Gly Gly cys Cys Gly Ala Thr cys Gly Thr cys 165 170 175 Gly Gly Ala Ala Ala cys cys Thr Ala cys Cys Gly cys Ala Thr Cys 180 185 190 Thr Cys Gly Gly Cys Gly Thr Ala Gly Thr Thr cys cys Gly cys Ala 195 200 205 Thr Cys Ala Cys Thr cys Gly Cys Thr Gly Gly Cys Gly Gly cys Ala 210 215 220 Ala Thr Gly Gly Cys Gly Gly Ala Ala Ala Ala Ala Thr Ala Cys Gly 225 230 235 240 Gly Thr cys Cys Gly Thr Thr Gly Ala Thr Gly cys Ala Thr cys Thr 245 250 255 cys cys Gly Gly Thr Thr Ala Gly Gly Thr Thr Thr Thr Gly Thr Thr 260 265 270 Gly Ala Cys Gly Thr Gly Gly Thr Gly Gly Thr Gly Gly cys Gly Gly 275 280 285 Cys Gly Thr Cys Thr Gly Cys Thr Gly Cys Cys Gly Thr Thr Gly Cys 290 295 300 Thr Gly cys Thr cys Ala Gly Thr Thr Thr Thr Thr Gly Ala Ala Ala 305 310 315 320 Gly Thr Thr Cys Ala Thr Gly Ala Thr Gly Cys Gly Ala Ala Thr Thr 325 330 335 Thr Thr Gly cys Gly Ala Gly Thr Ala Gly Ala Cys Cys Gly cys Cys 340 345 350 Thr Ala Ala Thr Thr Cys Cys Gly Gly Thr Gly cys Gly Ala Ala Ala 355 360 365 Cys Ala Thr Ala Thr Ala Gly Cys Gly Thr Ala Thr Ala Ala Thr Thr 64/109 55 55 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 370 375 380

Ala Thr cys Ala Ala Gly Ala Cys Thr Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr 385 390 395 400 Thr Gly Cys Gly cys Cys Gly Thr Ala Cys Thr Ala Cys Gly Gly Thr 405 410 415 Cys cys Gly Cys Gly Gly Thr Gly Gly Cys Gly Thr Ala Thr Gly Cys 420 425 430 Thr Thr Cys Gly Gly Ala Ala Gly Ala Thr Thr Thr Gly cys Thr cys 435 440 445 cys Gly Thr Thr cys Ala Cys Cys Thr Gly Thr Thr Thr Thr Cys Thr 450 455 460 Thr cys Thr Ala Ala Ala Gly Cys Gly cys Thr Thr Gly Ala Thr Gly 465 470 475 480 Ala Thr Thr Thr Cys Cys Gly Gly Cys Ala Thr Gly Thr cys cys Gly 485 490 495 Cys cys Ala Gly Gly Ala Gly Gly Ala Gly Gly Thr Gly Gly Cys Gly 500 505 510 Ala Thr Ala Cys Thr Gly Ala cys Gly cys Gly cys Gly Cys Thr Thr 515 520 525 Thr Gly Ala Thr cys Gly Gly Cys Gly Cys Cys Gly Gly Thr Gly Ala 530 535 540 cys Thr cys Gly cys cys Gly Gly Thr Gly Ala Ala Ala cys Thr Ala 545 550 555 560 Gly Gly Thr Cys Ala Ala Thr Thr Ala Cys Thr Gly Ala Ala Cys Gly 565 570 575 Thr Gly Thr Gly cys Ala cys Ala Ala cys Ala Ala Ala cys Gly Cys 580 585 590 Ala Thr Thr Gly Gly Cys Gly Cys Gly Cys Gly Thr Gly Ala Thr Gly 595 600 605 Thr Thr Ala Gly Gly Thr Ala Ala Gly Ala Gly Ala Gly Thr Ala Thr 610 615 620 Thr cys Gly Gly Thr Gly Ala Cys Ala Gly Ala Ala Gly Thr Gly Gly 625 630 635 640 Thr Gly Gly cys Gly Gly Thr Gly Ala Thr Cys Cys Ala Ala Ala Gly 645 650 655 65/109

AT 508 554 B1 2011-02-15 56

Gly cys Gly Gly Ala Thr Gly Ala Gly Thr Thr cys Ala Ala Gly Gly 660 665 670 Ala Thr Ala Thr Gly Gly Thr Gly Gly Thr Thr Gly Ala Gly Gly Thr 675 680 685 Gly Ala Thr Gly Gly Ala Gly Thr Thr Gly Gly cys cys Gly Gly Ala 690 695 700 Gly Ala Ala Thr Thr Cys Ala Ala Thr Ala Thr cys Gly Gly Thr Gly 705 710 715 720 Ala Thr Thr Thr Thr Ala Thr Ala cys Cys Gly Gly Thr Gly Cys Thr 725 730 735 Thr Gly Ala Thr Thr cys Thr Cys Thr cys Gly Ala Thr cys Thr Gly 740 745 750 cys Ala Ala Gly Gly Ala Ala Thr Cys Gly Cys Gly Ala Ala Gly Ala 755 760 765 Ala Gly Ala Thr Gly Ala Ala Gly Gly Ala Ala cys Thr Thr cys Ala 770 775 780 Cys Gly Thr Gly cys Gly Ala Thr Thr Thr Gly Ala Thr Thr Cys Gly 785 790 795 800 Thr Thr Cys Cys Thr Thr Gly Gly Thr Ala Ala Gly Ala Thr cys Cys 805 810 815 Thr Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala cys Ala Thr Ala Ala Ala Ala cys 820 825 830 cys Gly Gly Cys Ala Ala Cys Gly Gly Thr Gly Gly cys Gly cys Gly 855 840 845 Thr cys Gly Ala Gly Thr Cys Ala Ala Cys Ala cys Ala Cys Thr Gly 850 855 860 Ala Cys Thr Thr Gly Thr Thr Gly Ala cys Thr Ala cys cys Thr Thr 865 870 875 880 Gly Ala Thr Thr Thr Cys Ala Cys Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr 885 890 895 Gly Ala Thr Ala Cys Thr Gly Ala Thr Gly Ala Ala Gly Ala Gly Gly 900 905 910 Gly Thr Gly Gly Gly Ala Ala Gly Cys Thr Thr Thr Cys Ala Gly Ala 915 920 925 Cys Ala Thr Thr Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Ala Ala Gly Cys Thr 66/109 57 57 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 930 935 940

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Gly Thr Thr Thr Cys Thr Gly Thr Ala Ala Gly Thr Gly Ala Thr 1745 1750 1755

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Thr Gly Ala Thr Gly Cys Gly Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1790 1795 1800

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Gly Ala Ala Ala Ala cys Thr Cys Cys Gly Thr Cys Thr Ala Cys Ala 15 10 15

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Cys Thr Thr Thr Thr Thr Gly Ala Ala cys cys Gly Ala Ala cys cys 35 40 45

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Ala Ala Thr cys Ala Thr Cys Thr Ala Cys Gly Cys Cys Thr Gly cys 85 90 95

Gly Thr Cys Ala Cys Thr Gly Gly Gly Ala Thr Ala Gly Cys Ala Gly 100 105 110

Cys Cys Thr Ala Thr Gly Thr Ala Thr Thr Gly Cys Thr Ala Ala Ala 115 120 125

Cys Cys Thr Gly Cys Gly Gly Ala Ala Cys Cys Gly Thr Cys Gly Gly 130 135 140

Gly Cys Ala Ala Ala Ala Cys Gly Cys Cys Thr Gly Cys Cys Gly Cys 145 150 155 160 cys Cys Gly Gly cys cys Cys Ala Ala Cys Cys Cys Cys Ala Thr Gly 165 170 175 70/109 61 61 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Gly cys cys Cys Ala Thr Ala Gly Thr cys Gly 180 185

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Gly Thr Gly Gly Thr Gly Gly Cys Gly Gly cys 290 295 cys Ala Thr Cys Cys Gly Thr Cys Gly Cys Thr 305 310 315

Gly Thr Thr Thr Thr Thr Gly Ala Ala Gly Gly 325 330

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Gly Ala Ala 190 Ala Cys Cys Gly Gly Thr Ala 205 Cys Ala Cys Thr cys 220 Thr Ala Gly cys Ala 240 Ala cys cys Gly 255 Thr Cys Gly Thr Cys Thr 270 Ala Cys Gly Thr Gly 285 Ala Thr cys Gly Gly 300 Gly cys Ala Cys Ala 320 cys Thr Cys Ala Thr 335 Cys Gly Cys cys Ala 350 Ala Ala Thr Thr cys 365 Ala Thr Ala Thr Gly 380 Thr cys Ala Gly Gly 400 Gly Cys Gly Cys Cys 415 Gly Gly Thr Gly Gly 430 Gly Ala Ala Ala Ala 445 62 62 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

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Thr Thr Ala Ala Thr Ala Thr Ala Ala Thr Thr Gly Gly Ala Gly 1640 1645 1650

Thr Thr Thr Gly Thr Gly Thr Thr Thr cys Ala Ala Ala Ala Ala 1655 1660 1665

Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1670 1675

<210> 47 <211> 1981 <212> PRT <213> Antirrhinum majus <400> 47

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Thr Thr Thr Ala Ala Thr Thr Ala cys Gly Ala Thr Gly Gly Ala Thr 65 70 75 80

Gly Ala Thr Ala Thr Thr Ala Gly cys Ala Thr Ala Ala cys Cys Ala 85 90 95 76/109 67 67 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Gly Cys Thr Thr Ala Thr Thr Gly Gly Thr Gly cys cys Ala Thr Gly 100 105 110 Thr Ala cys Thr Thr Thr Thr Ala Thr Ala Thr Thr Ala Gly Gly Gly 115 120 125 Thr Thr Cys Thr Thr Gly cys Thr Thr Cys Thr Ala Thr Ala Thr Thr 130 135 140 cys Cys Thr Thr cys Cys Thr Cys Ala Ala cys Ala Gly Ala Ala Ala 145 150 155 160 Ala Gly Thr Ala Ala Ala Gly cys Cys Ala cys Thr Gly Cys cys Ala 165 170 175 cys cys Thr Gly Gly Ala Cys Cys Gly Ala Ala Gly Cys Cys Ala Thr 180 185 190 Gly Gly Cys cys Cys Ala Thr cys Gly Thr cys Gly Gly Ala Ala Ala 195 200 205 Thr cys Thr Gly cys Cys Ala Cys Ala Thr Cys Thr Thr Gly Gly Gly 210 215 220 cys cys Gly Ala Ala Gly Cys Cys Cys cys Ala cys Cys Ala Gly Thr 225 230 235 240 Cys Gly Ala Thr Gly Gly Cys Gly Gly Cys Gly cys Thr Gly Gly Cys 245 250 255 Ala cys Gly Gly Gly Thr Gly Cys Ala cys Gly Gly cys cys cys Ala 260 265 270 Thr Thr Ala Ala Thr Thr cys Ala Thr cys Thr Gly Ala Ala Gly Ala 275 280 285 Thr Gly Gly Gly Cys Thr Thr Thr Gly Thr Gly Cys Ala Thr Gly Thr 290 295 300 Gly Gly Thr Thr Gly Thr Gly Gly Cys cys Thr cys Cys Thr Cys Ala 305 310 315 320 Gly Cys Ala Thr Cys 325 Cys Gly Thr Thr Gly 330 cys Gly Gly Ala Gly 335 Ala Ala Ala Thr Thr Thr Cys Thr Gly Ala Ala Gly Gly Thr Gly cys Ala 340 345 350 Thr Gly Ala cys Gly cys Ala Ala Ala cys Thr Thr Cys Thr cys Gly 355 360 365 Ala Gly cys Ala Gly Gly cys Cys Thr cys Cys cys Ala Ala Thr Thr 77/109 68 68 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 370 375 380 Gly Gly Gly Thr Gly 390 Cys Ala Ala Ala Ala 395 cys Ala cys Gly Thr 400 Gly Gly cys cys Thr 405 Ala cys Ala Ala Cys 410 Thr Ala Thr cys Ala 415 Gly Gly Ala cys Thr Thr Gly Gly Thr Cys Thr Thr Thr Gly Cys Thr cys 420 425 430 cys Thr Thr Ala Thr Gly Gly cys cys Cys Ala Cys Gly cys Thr Gly 435 440 445 Gly cys 450 Gly Gly Ala Thr Gly 455 Cys Thr Cys Ala Gly 460 Gly Ala Ala Ala Ala Thr Cys Thr Gly Thr Gly Cys Ala Cys Thr cys cys Ala cys cys 465 470 475 480 Thr cys Thr Thr cys Thr cys Cys Gly Cys Cys Ala Ala Ala Gly cys 485 490 495 Cys Thr Thr Gly Ala Ala cys Gly Ala Cys Thr Thr Cys Ala cys Ala 500 505 510 Cys Ala Cys Gly Thr cys Ala Gly Ala cys Ala Gly Gly Ala Thr Gly 515 520 525 Ala Gly Gly Thr Gly Gly Gly Gly Ala Thr cys Cys Thr Cys Ala cys 530 535 540 Thr Cys Gly cys Gly Thr Thr Cys Thr Ala Gly cys Ala Gly Ala Thr 545 550 555 560 Gly Cys Ala Gly Gly Ala Gly Ala Ala Ala cys Gly cys Cys Gly Thr 565 570 575 Thr Gly Ala Ala Ala Thr Thr Ala Gly Gly Gly Cys Ala Gly Ala Thr 580 585 590 Gly Ala Thr Gly Ala Ala Cys Ala Cys Ala Thr Gly cys Gly cys Cys 595 600 605 Ala Cys Cys Ala Ala Thr Gly cys Ala Ala Thr Ala Gly Cys Gly cys 610 615 620 Gly Thr Gly Thr Thr Ala Thr Gly Thr Thr Gly Gly Gly Thr cys Gly 625 630 635 640 Ala Cys Gly Cys Gly Thr Gly Gly Thr Thr Gly Gly Ala cys Ala Cys 645 650 655 78/109 69 69 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Gly cys Ala Gly Ala Cys Thr Cys Ala Ala Ala Gly Gly Cys Gly Gly 660 665 670 Ala Gly Gly Ala Gly Thr Thr Thr Ala Ala Gly Gly cys Ala Ala Thr 675 680 685 Gly Gly Thr Ala Gly Thr Gly Gly Ala Gly Thr Thr Gly Ala Thr Gly 690 695 700 Gly Thr Ala Thr Thr Ala Gly cys Thr Gly Gly Thr Gly Thr Gly Thr 705 710 715 720 Thr cys Ala Ala Cys Thr Thr Ala Gly Gly Thr Gly Ala Thr Thr Thr 725 730 735 Thr Ala Thr cys cys Cys Ala cys cys Thr Cys Thr Thr Gly Ala Ala 740 745 750 Ala Ala Ala Thr Thr Gly Gly Ala Thr cys Thr Thr Cys Ala Ala Gly 755 760 765 Gly Thr Gly Thr cys Ala Thr Thr Gly cys Thr Ala Ala Gly Ala Thr 770 775 780 Gly Ala Ala Gly Ala Ala Gly Cys Thr Thr Cys Ala cys Thr Thr Gly 785 790 795 800 Cys Gly Thr Thr Thr cys Gly Ala Cys Thr Cys Gly Thr Thr Cys Thr 805 810 815 Thr Gly Ala Gly Thr Ala Ala Gly Ala Thr cys cys Thr Thr Gly Ala 820 825 830 Ala Gly Al a Cys Cys Ala Cys Ala Ala Gly Ala Thr cys Ala Ala Cys 835 840 845 Ala Gly Cys Thr Cys Ala Gly Ala Thr Gly Ala Ala Ala cys Cys Ala 850 855 860 Ala Ala Gly Gly cys Cys Ala Thr Thr cys Gly Gly Ala Thr Thr Thr 865 870 875 880 Gly Thr Thr Gly Ala Ala cys Ala Thr Gly Thr Thr Ala Ala Thr Thr 885 890 895 Thr Cys Thr Thr Thr Gly Ala Al a Gly Gly Ala cys Gly Cys Thr Gly 900 905 910 Ala Thr Gly Ala Thr Gly Cys Cys Gly Ala Ala Gly Gly Ala Gly Gly 915 920 925 Gly Ala Gly Gly cys Thr Cys Ala Cys Cys Gly Ala Cys Gly Thr Ala 79/109 70t> österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 930 935 940

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Cys Gly Ala Gly Gly Ala Thr Cys Gly cys Ala Cys Ala Thr Gly 1190 1195 1200 80/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 71

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Ala Thr Gly Gly Ala Thr Ala cys Thr Thr Gly Ala Thr Thr Cys 1220 1225 1230

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Gly Gly Gly Cys Ala Ala Thr Thr Gly Cys Thr Cys Gly Cys Gly 1265 1270 1275

Ala Thr Cys Cys Ala Ala Ala Thr Gly Thr Gly Thr Gly Gly Gly 1280 1285 1290

Ala Thr Gly Ala Ala Cys Cys Ala Cys Thr Ala Gly Ala Gly Thr 1295 1300 1305

Thr cys Cys Gly Gly Cys Cys Thr Gly Ala Ala cys Gly Ala Thr 1310 1315 1320

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Ala Ala Ala Ala Gly Cys Cys Thr Ala Ala Thr Gly Thr cys Gly 1340 1345 1350

Ala Thr Gly Thr Thr Ala Gly Ala Gly Gly Gly Ala Ala Thr Gly 1355 1360 1365

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Gly Ala Ala Gly Ala Ala Thr Thr Thr Gly Thr Gly Cys Ala Gly 1400 1405 1410

Gly Ala Ala Thr Gly Ala Gly cys Thr Thr Ala Gly Gly Ala Ala 1415 1420 1425

Thr Ala Cys Gly Thr Ala Thr Gly Gly Thr Cys Cys Ala Gly Thr 1430 1435 1440

Thr Gly Thr Thr Gly Ala Cys Ala Gly cys Ala Ala cys Thr Thr 1445 1450 1455

Thr Gly Ala Thr cys Cys Ala Thr Gly Cys Gly Thr Thr Thr Gly 81 /109 72 72 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 1460 1465 1470

Ala cys Thr Thr Thr Gly Ala Thr Thr Thr Gly Gly Cys Gly Gly 1475 1480 1485 Ala Thr Gly Gly Ala cys Ala Gly Thr Thr Gly Cys Cys Thr Gly 1490 1495 1500 Ala Ala Ala Gly cys Thr Thr Ala Ala Ala Cys Ala Thr Gly Gly 1505 1510 1515 Ala Gly Gly Ala Ala Gly Cys Thr Thr Ala Thr Gly Gly Gly cys 1520 1525 1530 Thr Gly Ala Cys Cys Thr Thr Gly Cys Ala Ala Cys Gly Ala Gly 1535 1540 1545 cys Thr Gly Ala cys cys cys Thr Thr Thr Gly Gly Thr Ala Gly 1550 1555 1560 Thr Gly cys Ala Cys Cys Cys Gly Ala Ala Gly cys cys Thr Ala 1565 1570 1575 Gly Gly Thr Thr Gly Gly Cys Ala Cys Cys Thr Cys Ala Thr Gly 1580 1585 1590 Thr Thr Thr Ala Thr cys Ala Ala Ala cys Thr Thr Ala Gly Gly 1595 1600 1605 Ala Cys Thr cys Ala Thr Gly Thr Thr Thr Ala Gly Ala Gly Ala 1610 1615 1620 Ala cys cys Thr Cys Thr Thr Gly Thr Thr Gly Thr Thr Thr Thr 1625 1630 1635 Ala Thr Cys Ala Gly Ala Thr Thr Gly Ala Ala Gly Thr Gly Thr 1640 1645 1650 Gly Ala Thr Gly Thr Cys Cys Ala Ala Gly Ala Cys Cys Cys Cys 1655 1660 1665 Cys Thr Thr Thr Ala Thr Thr Ala Gly cys Ala Thr Ala Ala Gly 1670 1675 1680 Thr Ala Cys Cys Thr Ala Cys Cys Cys Ala Thr Gly Gly Cys Gly 1685 1690 1695 cys Ala Thr Cys Thr Gly Thr Ala Ala Thr Ala Ala Ala Ala Thr 1700 1705 1710 cys Thr Gly Gly Gly Thr Cys Ala Ala Ala Thr Gly Cys Cys Ala 1715 1720 1725 82/109 73 73 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Ala Ala Ala cys Thr Ala cys Thr Cys Gly Thr Gly Thr Gly Thr 1730 1735 1740 Thr Ala Thr Cys Thr cys cys Ala cys Thr Thr Gly Gly cys Ala 1745 1750 1755 Ala Thr Thr Ala Ala Ala Gly Thr cys Cys Thr Ala Thr Gly Thr 1760 1765 1770 Thr Ala Thr Thr Thr Cys Ala Ala Thr Thr Ala Gly cys Ala Ala 1775 1780 1785 Ala Ala 1790 Ala Ala Ala cys cys 1795 Cys Cys Thr Gly Thr 1800 Gly cys Ala cys Ala 1805 Ala Thr Ala cys Cys 1810 Ala Ala Ala Cys Thr 1815 Thr Thr Gly cys Thr cys Cys Cys Ala Ala Thr Thr cys Cys cys Ala Ala cys 1820 1825 1830 Thr Cys Ala Thr Thr Thr Thr cys Ala Ala cys Thr Thr Thr Gly 1835 1840 1845 Ala Cys Thr Gly Gly Ala Thr Gly Cys Ala Ala Ala Ala Thr Gly 1850 1855 1860 Gly Cys Cys Thr Thr Thr Thr Thr Gly Cys cys cys Ala Thr Ala 1865 1870 1875 Thr Ala 1880 Thr Ala Ala Ala Gly 1885 cys Thr Thr Cys Thr 1890 Ala Ala Thr cys Ala Thr Thr Thr Ala Ala Gly Ala Ala Thr Thr Thr Thr Ala 1895 1900 1905 cys Thr Thr cys Ala Ala Ala Gly Ala Thr Thr Thr Thr Gly Ala 1910 1915 1920 Ala Ala cys Thr Ala Ala Ala Ala Thr Thr Cys Thr Thr Thr Thr 1925 1930 1935 Thr Cys Ala Thr Thr Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1940 1945 1950 Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1955 1960 1965 Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1970 1975 1980 <210> 48 83/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 74

<211> 1542 <212> PRT <213> Arabidopsis thaliana chromosome v <400> 48

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AT 508 554 B1 2011-02-15 cys cys Gly Ala 260 Gly Cys Ala Gly Thr 265 Thr cys Thr Thr Gly 270 Ala Ala Ala Ala Thr 275 Ala cys Ala cys Gly 280 Ala Cys Gly Cys Cys 285 Ala Ala Thr Thr Thr 290 Cys Gly cys Thr Ala 295 Gly Cys cys Gly Ala 300 cys Cys Ala Cys Cys Ala Ala Ala Cys Thr Cys Ala Gly Gly Ala Gly cys Thr Ala Ala B05 310 315 320 Ala Cys Ala cys Ala Thr Gly Gly Cys Ala Thr Ala Thr Ala Ala cys 325 330 335 Thr Ala Thr Cys Ala Ala Gly Ala Thr Cys Thr Thr Gly Thr Cys Thr 340 345 350 Thr Thr Gly Cys Ala Cys Cys Thr Thr Ala cys Gly Gly Ala cys Ala 355 360 365 cys cys Gly Ala Thr Gly Gly Ala Gly Ala Cys Thr Gly Thr Thr Gly 370 375 380 Ala Gly Ala Ala Ala Gly Ala Thr Thr Ala Gly Thr Thr Cys Thr Gly 385 390 395 400 Thr Thr Cys Ala Thr cys Thr Ala Thr Thr Thr Thr Cys Ala Gly cys 405 410 415 Thr Ala Ala Ala 420 Gly Cys Thr Cys Thr 425 Cys Gly Ala Ala Gly 430 Ala Thr Thr Thr cys Ala Ala Ala cys Ala Thr Gly Thr Thr Cys Gly Ala Cys 435 440 445 Ala Gly Gly Ala Ala Gly Ala Gly Gly Thr Thr Gly Gly Ala Ala cys 450 455 460 Gly cys Thr Ala Ala Cys Gly Cys Gly Gly Gly Ala Gly Cys Thr Ala 465 470 475 480 Gly Thr Gly Cys Gly 485 Thr Gly Thr Thr Gly 490 Gly Cys Ala Cys Gly 495 Ala Ala Ala Cys Cys Cys Gly Thr Gly Ala Ala Thr Thr Thr Ala Gly Gly 500 505 510 Cys cys Ala Gly Thr Thr Gly Gly Thr Gly Ala Ala Cys Ala Thr Gly 515 520 525 Thr Gly Thr Gly Thr Ala Gly Thr Cys Ala Ala Cys Gly cys Thr Cys 530 535 540 85/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 76

Thr 545 Ala Gly Gly Ala Cys 550 Gly Ala Gly Ala Ala Thr Gly Ala Thr 560 Cys Gly Gly Ala Cys 565 Gly Gly cys Gly Ala 570 Thr Thr Gly Thr Thr 575 Cys Gly Gly Cys Gly 580 cys cys Gly Ala 8! Gly Cys Cys Gly Ala 590 Thr Cys Ala Thr Ala ΓΛΡ Ala Ala Gly Cys Thr Gly Ala Cys Gly Ala Gly Thr Thr 595 600 605 Thr cys 610 Gly Ala Thr cys Ala 615 Ala Thr Gly Gly Thr 620 Gly Ala Cys Gly Gly 625 Ala Ala Ala Thr Gly 630 Ala Thr Gly Gly cys 635 Thr cys Thr cys Gly 640 cys Cys Gly Gly Ala Gly Thr Ala Thr Thr cys Ala Ala Cys Ala Thr 645 650 655 Cys Gly Gly Ala Gly Ala cys Thr Thr cys Gly Thr Gly Cys cys Gly 660 665 670 Thr cys Ala cys Thr Thr Gly Ala Thr Thr Gly Gly Thr Thr Ala Gly 675 680 685 Ala Thr Thr Thr Ala Cys Ala Ala Gly Gly Cys Gly Thr Cys Gly Cys 690 695 700 Thr Gly Gly Thr Ala Ala Ala Ala Thr Gly Ala Ala Ala Cys Gly Gly 705 710 715 720 Cys Thr Thr Cys Ala Cys Ala Ala Gly Ala Gly Ala Thr Thr cys Gly 725 730 735 Ala Cys Gly cys Thr Thr Thr Thr cys Thr Ala Thr cys Gly Thr Cys 740 745 750 Gly Ala Thr Thr Thr Thr Gly Ala Ala Ala Gly Ala Gly Cys Ala Cys 755 760 765 Gly Ala Ala Ala Thr Gly Ala Ala cys Gly Gly Thr cys Ala Ala Gly 770 775 780 Ala Thr Cys Ala Ala Ala Ala Gly cys Ala Thr Ala cys Ala Gly Ala 785 790 795 800 Thr Ala Thr Gly Cys Thr Thr Ala Gly Cys Ala Cys Thr Thr Thr Ala 805 810 815 86/109 77 77 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Ala Thr Cys Thr Cys Cys Cys Thr Thr Ala Ala Ala Gly Gly Ala Ala 820 825 830 cys Thr Gly Ala Thr cys Thr Thr Gly Ala Cys Gly Gly Thr Gly Ala 835 840 845 cys Gly Gly Ala Gly Gly Ala Ala Gly Cys Thr Thr Ala Ala Cys Gly 850 855 860 Gly Ala Thr Ala cys Thr Gly Ala Gly Ala Thr Thr Ala Ala Ala Gly 865 870 875 880 Cys cys Thr Thr Gly cys Thr Ala Thr Thr Gly Ala Ala Cys Ala Thr 885 890 895 Gly Thr Thr cys 900 Ala Cys Ala Gly cys 905 Thr Gly Gly Ala Ala 910 Cys Thr Gly Ala Cys Ala Cys Gly Thr Cys Ala Gly Cys Ala Ala Gly Thr Ala 915 920 925 cys Gly Gly Thr Gly Gly Ala Cys Thr Gly Gly Gly Cys Thr Ala Thr 930 935 940 Ala Gly Cys Thr Gly Ala Ala Cys Thr Thr Ala Thr Cys cys Gly Thr 945 950 955 960 cys Ala Cys cys cys Gly Gly Ala Thr Ala Thr Ala Ala Thr Gly Gly 965 970 975 Thr Thr Ala Ala Ala Gly Cys cys cys Ala Ala Gly Ala Ala Gly Ala 980 985 990 Ala Cys Thr Thr Gly Ala Thr Ala Thr Thr Gly Thr Thr Gly Thr Gl 995 1000 1005

Gly Gly Cys Cys Gly Thr Gly Ala Cys Ala Gly Gly Cys Cys Thr 1010 1015 1020

Gly Thr Thr Ala Ala Thr Gly Ala Ala Thr cys Ala Gly Ala Cys 1025 1030 1035

Ala Thr Cys Gly cys Thr Cys Ala Gly cys Thr Thr Cys Cys Thr 1040 1045 1050

Thr Ala Cys Cys Thr Thr Cys Ala Gly Gly cys Gly Gly Thr Thr 1055 1060 1065

Ala Thr Cys Ala Ala Ala Gly Ala Gly Ala Ala Thr Thr Thr Cys 1070 1075 1080

Ala Gly Gly Cys Thr Thr Cys Ala Thr cys Cys Ala Cys Cys Ala 1085 1090 1095 87/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 78

Ala cys Ala Cys Cys Ala Cys Thr cys Thr cys Gly Thr Thr Ala 1100 1105 1110 Cys Cys Ala cys Ala cys Ala Thr cys Gly cys Gly Thr cys Ala 1115 1120 1125 Gly Ala Gly Ala Gly cys Thr Gly Thr Gly Ala Gly Ala Ttir cys 1130 1135 1140 Ala Ala cys Gly Gly cys Ttir Ala cys Cys Ala Thr Ala Thr cys 1145 1150 1155 cys Cys 1160 Gly Ala Ala Ala Gly 1165 Gly Ala Thr cys Gly 1170 Ala cys Thr Cys Thr Ala Thr Thr Gly Ala Cys Gly Ala Ala cys Ala Thr Ala 1175 1180 1185 Thr Gly Gly Gly cys Cys Ala Thr Ala Gly Cys Cys Cys Gly Thr 1190 1195 1200 Gly Ala Cys Cys Cys Gly Gly Ala Thr Cys Ala Ala Thr Gly Gly 1205 1210 1215 Thr Cys Cys Gly Ala cys cys cys Gly Thr Thr Ala Gly cys Ala 1220 1225 1230 Thr Thr Thr Ala Ala Ala cys cys cys Gly Ala Gly Ala Gly Ala 1235 1240 1245 Thr Thr Cys Thr Thr Ala Cys Cys Cys Gly Gly Thr Gly Gly Thr 1250 1255 1260 Gly Ala Ala Ala Ala Ala Thr cys Cys Gly Gly cys Gly Thr Thr 1265 1270 1275 Gly Ala Thr Gly Thr Gly Ala Ala Ala Gly Gly Ala Ala Gly Cys 1280 1285 1290 Gly Ala Thr Thr Thr cys Gly Ala Gly cys Thr Ala Ala Thr Ala 1295 1300 1305 Cys Cys Gly Thr Thr Cys Gly Gly Ala Gly cys Thr Gly Gly Gly 1310 1315 1320 Ala Gly Gly Ala Gly Ala Ala Thr Cys Thr Gly Thr Gly cys Cys 1325 1330 1335 Gly Gly Thr Thr Thr Ala Ala Gly Thr Thr Thr Ala Gly Gly Gly 1340 1345 1350 88/109 österreichisches AT 508 554 B1 2011-02-15 Patentamt 79 Thr Thr Ala Cys Gly Thr Ala Cys Gly Ala Thr Thr Cys Ala Gly 1355 1360 1365 Thr Thr Thr Cys Thr Thr Ala Cys Gly Gly cys Gly Ala Cys Gly 1370 1375 1380 Thr Thr Gly Gly Thr Thr Cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr Thr Thr 1385 1390 1395 Gly Ala Thr Thr Gly Gly Gly Ala Ala Thr Thr Ala Gly cys Thr 1400 1405 1410 Gly Gly Ala Gly Gly Ala Gly Thr Thr Ala Cys Gly Cys Cys Gly 1415 1420 1425 Gly Ala Gly Ala Ala Gly Cys Thr Gly Ala Ala Thr Ala Thr Gly 1430 1435 1440 Gly Ala Gly Gly Ala Gly Ala Gly Thr Thr Ala Thr Gly Gly Gly 1445 1450 1455 cys Thr Thr Ala Cys Ala Cys Thr Gly Cys Ala Ala Ala Gly Ala 1460 1465 1470 Gly Cys Gly Gly Thr Thr cys cys Thr Thr Thr Gly Gly Thr Gly 1475 1480 1485 Gly Thr Ala Cys Ala Thr Cys cys Thr Ala Ala Gly cys cys Ala 1490 1495 1500 Ala Gly Gly Thr Thr Gly Gly cys Thr Cys Cys Gly Ala Ala Cys 1505 1510 1515 Gly Thr Thr Thr Ala Thr Gly Gly Ala cys Thr Cys Gly Gly Gly 1520 1525 1530 Thr Cys Gly Gly Gly Thr Thr Ala Ala 1535 1540

<210> 49 <211> 1704 <212> PRT <213> Callistephus chinensis <400> 49

Ala Thr Thr Ala cys Ala Thr cys cys cys cys Cys Thr Cys Ala Cys 15 10 15

Ala Thr Gly Thr Gly cys Ala Ala Thr Gly Ala Cys Cys Ala Thr Thr 20 25 30

Thr Thr Ala cys Cys Cys Thr Thr Thr Ala Thr Thr Thr Thr cys Thr 35 40 45 89/109 80 80 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Ala cys 50 Ala Cys Ala Thr Gly 55 Thr Ala Thr Cys Ala 60 Cys Thr Gly Cys Cys Thr Thr Ala Gly Thr Gly cys Thr cys Thr Ala Thr Gly Thr Ala 65 70 75 80 Thr Thr Gly Cys Thr Thr Ala Ala Cys cys Thr Thr Thr Thr Gly Ala 85 90 95 cys cys cys Gly Thr Ala Ala Cys Cys Cys Ala Ala Ala cys cys Gly 100 105 110 cys Cys Thr Thr cys cys Cys Cys Cys Ala Gly Gly Thr cys cys Ala 115 120 125 Ala Cys cys cys Cys Ala Thr Gly Gly cys cys cys Ala Thr Ala Gly 130 135 140 Thr Thr Gly Gly Ala Ala Ala cys cys Thr Ala Cys Cys Ala Cys Ala 145 150 155 160 cys cys Thr Thr Gly Gly Cys Ala Thr Gly Ala Thr Ala Cys Cys Ala 165 170 175 Cys Ala Cys Cys Ala Cys Thr cys Ala Thr Thr Ala Gly Cys Gly Gly 180 185 190 cys cys Thr Thr Gly Gly cys cys cys Ala Ala Ala Ala Gly Thr Ala 195 200 205 Thr Gly Gly Thr cys cys Gly cys Thr Gly Ala Thr Gly Cys Ala Cys 210 215 220 cys Thr Ala Cys Gly Cys cys Thr Cys Gly Gly Gly Thr Thr Thr Gly 225 230 235 240 Thr Thr Gly Ala Cys Gly Thr Gly Gly Thr Cys Gly Thr Gly Gly Cys 245 250 255 cys Gly cys Gly Thr cys Ala Gly Cys Ala Thr cys Cys Gly Thr Thr 260 265 270 Gly cys Gly Gly cys Ala Cys Ala Ala Thr Thr Thr Cys Thr Ala Ala 275 280 285 Ala Ala Ala Cys Thr cys Ala Thr Gly Ala cys Gly Cys Ala Ala Ala 290 295 300 cys Thr Thr Thr Gly cys Ala Ala Gly Thr Ala Gly Ala Cys cys Ala 305 310 315 320 cys cys Cys Ala Ala cys Thr Cys Thr Gly Gly Ala Gly cys cys Ala 90/109 81 81 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 325 330 335 Ala Gly cys Ala Thr Ala Thr Thr Gly cys Cys Thr Ala Thr Ala Ala 340 345 350 Cys Thr Ala Thr cys Ala Ala Gly Ala Thr cys Thr Thr Gly Thr Gly 355 360 365 Thr Thr cys Gly Cys Ala Cys Cys Thr Thr Ala Thr Gly Gly Thr cys 370 375 380 cys Ala Ala Gly Gly Thr Gly Gly cys Gly Ala Ala Thr Gly Cys Thr 385 390 395 400 Thr Ala Gly Gly Ala Ala Ala Ala Thr Thr Thr Gly Thr Thr cys Gly 405 410 415 Gly Thr Thr Cys Ala Cys Thr Thr Gly Thr Thr Thr Thr Cys Cys Ala 420 425 430 cys Thr Ala Ala Ala Gly cys Ala Cys Thr Ala Gly Ala Cys Gly Ala 435 440 445 Cys Thr Thr Cys cys Gly Thr Cys Ala Thr Gly Thr Thr Cys Gly Ala 450 455 460 Gly Ala Gly Gly Ala Ala Gly Ala Gly Gly Thr Ala Gly cys Gly Ala 465 470 475 480 Thr Ala Cys Thr Gly Ala cys Gly Cys Gly Ala Gly Thr Gly Thr Thr 485 490 495 Ala Gly Thr Cys Cys Ala Thr Gly cys Gly Gly Gly Thr Gly Ala Ala 500 505 510 Thr cys Ala Gly Cys Gly Gly Thr Gly Ala Ala Ala Thr Thr Ala Gly 515 520 525 Gly Ala 530 cys Ala Ala cys Thr 535 Ala Cys Thr Gly Ala 540 Ala cys Gly Thr Gly Thr Gly Cys Ala cys cys Ala Cys Ala Ala Ala Cys Gly cys Gly 545 550 555 560 Thr Thr Ala Gly Cys Ala cys Gly Ala Gly Thr Gly Ala Thr Gly Cys 565 570 575 Thr Ala Gly Gly Cys Cys Gly Gly Ala Gly Ala Gly Thr Thr Thr Thr 580 585 590 Cys Gly cys Gly Gly Ala Cys Gly Gly cys Ala Gly Thr Gly Ala Ala 595 600 605 91 /109 82 82 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Gly Gly 610 Cys Cys Gly Gly Gly 615 Gly Ala Gly Thr cys 620 Gly Ala Cys Cys cys Ala Ala Ala Gly Gly Cys Ala Gly Ala Thr Gly Ala Gly Thr Thr 625 630 635 640 Cys Ala Ala Gly Gly 645 Ala Cys Ala Thr Gly 650 Gly Thr Gly Gly Thr 655 Gly Gly Ala Ala Cys Thr cys Ala Thr Gly Gly Ala Ala Thr Thr Ala Gly 660 665 670 cys Cys Gly Gly Thr Gly Ala Ala Thr Thr cys Ala Ala cys Ala Thr 675 680 685 Ala Gly Gly Thr Gly Ala Cys Thr Thr Cys Ala Thr Ala Cys Cys Ala 690 695 700 cys cys Ala Cys Thr Thr Gly Ala Cys Thr Gly Cys cys Thr Thr Gly 705 710 715 720 Ala Thr Thr Thr Gly Cys Ala Ala Gly Gly cys Ala Thr Cys Ala Cys 725 730 735 Cys Ala Ala Ala Ala Ala Gly Ala Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala 740 745 750 Cys Thr Thr 755 Cys Ala Thr Gly cys 760 Thr Cys Gly Ala Thr 765 Thr Cys Gly Ala cys Ala Ala Gly Thr Thr Thr Cys Thr Thr Ala Ala Cys Ala Thr 770 775 780 cys Ala Thr cys Cys Thr Ala Gly Ala Cys Gly Ala cys Cys Ala Thr 785 790 795 800 Ala Ala Ala Ala Thr cys Gly Ala Ala Ala Ala Ala Gly Gly cys Gly 805 810 815 Cys Gly Gly cys cys Gly Gly Cys Cys Gly Cys cys Gly Thr cys Ala 820 825 830 Thr Ala Gly Thr Gly Ala Cys Thr Thr Gly cys Thr Gly Ala cys Cys 835 840 845 Ala Cys Gly Cys Thr Gly Ala Thr Thr Thr cys Ala cys Thr Cys Ala 850 855 860 Ala Gly Gly Ala Thr Gly Thr Thr Gly Ala Thr Gly cys Thr Gly cys 865 870 875 880 Thr Gly Ala Thr Gly Ala Thr Gly Ala Thr Gly Ala Ala Gly Ala Ala 92/109 83 83 österreichisches Patentamt 885 AT 508 554 B1 2011-02-15 890 895

Gly Gly Gly Ala Ala Ala Cys Thr Thr Thr Cys Ala Gly Ala Cys Ala 900 905 910

Thr Thr Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Ala Gly Gly cys Thr Thr Thr 915 920 925

Gly cys Thr Cys Cys Thr Gly Ala Ala cys Thr Thr Ala Thr Thr Thr 930 935 940

Gly cys Thr Gly Cys Ala Gly Gly Ala Ala Cys Ala Gly Ala Cys Ala 945 950 955 960

Cys Ala Thr Cys Ala Thr Cys Thr Ala Gly Thr Ala Cys Cys Gly Thr 965 970 975

Gly Gly Ala Ala Thr Gly Gly Gly Cys Ala Gly Thr Ala Gly cys cys 980 985 990

Gly Ala Ala Cys Thr Thr Ala Thr Thr cys Gly Thr cys Ala Thr cys 995 1000 1005

Cys Gly Gly Ala Ala Cys Thr Ala Thr Thr Gly Ala Ala Ala Cys 1010 1015 1020

Ala Ala Gly cys Ala Cys Gly Cys Gly Ala Ala Gly Ala Ala Ala 1025 1030 1035

Thr Gly Gly Ala Thr Ala Thr Cys Gly Thr Ala Gly Thr Thr Gly 1040 1045 1050

Gly Thr Cys Gly Ala Gly Ala Cys Cys Gly Gly Cys Thr Thr Gly 1055 1060 1065

Thr Ala Ala Cys Cys Gly Ala Ala Thr Thr Gly Gly Ala Cys Thr 1070 1075 1080

Thr Ala Ala Gly Cys Cys Gly Gly cys Thr Ala Ala cys Ala Thr 1085 1090 1095

Thr Cys cys Thr Ala cys Ala Ala Gly Cys Cys Ala Thr Thr Gly 1100 1105 1110

Thr Gly Ala Ala Gly Gly Ala Gly Ala cys Cys Thr Thr Thr Ala 1115 1120 1125

Gly Gly cys Thr Cys Cys Ala cys Cys Cys Thr Thr cys Gly Ala 1130 1135 1140 cys Gly cys Cys Ala Cys Thr Cys Thr Cys Cys cys Thr Thr cys 1145 1150 1155 93/109

österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 84 cys Ala Ala Gly Gly Ala Thr Gly Gly cys Gly Thr cys Gly Gly 1160 1165 1170 Ala Gly Ala Gly Thr Thr Gly Cys Gly Ala Gly Gly Thr Gly Gly 1175 1180 1185 Ala Thr Gly Gly Gly Thr Ala Cys Thr Ala Cys Ala Thr Thr cys 1190 1195 1200 cys cys Ala Ala Ala Gly Gly Ala Thr Cys Cys Ala cys Ala cys 1205 1210 1215 Thr cys cys Thr Thr Gly Thr Thr Ala Ala Thr Gly Thr Ala Thr 1220 1225 1230 Gly Gly Gly cys cys Ala Thr Ala Gly Cys Cys Cys Gly cys Gly 1235 1240 1245 Ala Cys cys cys Ala Ala Ala Ala Ala Thr Gly Thr Gly Gly Ala 1250 1255 1260 Cys Thr Ala Al a cys cys Cys Ala cys Thr Thr Gly Ala Gly Thr 1265 1270 1275 Thr Cys Ala Gly Gly cys Cys cys Ala Gly Thr cys Gly Gly Thr 1280 1285 1290 Thr Cys Thr Thr Ala Cys cys cys Gly Gly Gly Gly Gly Thr Gly 1295 1300 1305 Ala Ala Ala Ala Gly Cys Cys Cys Gly Ala Thr Gly Cys Ala Gly 1310 1315 1320 Ala Thr Ala Thr Cys Ala Ala Ala Gly Gly Ala Ala Ala Thr Gly 1325 1330 1335 Ala Thr Thr Thr Thr Gly Ala Gly Gly Thr Cys Ala Thr Ala Cys 1340 1345 1350 Cys Ala Thr Thr Thr Gly Gly Gly Gly Cys cys Gly Gly Gly Ala 1355 1360 1365 Gly Ala Ala Gly Ala Ala Thr Ala Thr Gly Thr Gly cys Gly Gly 1370 1375 1380 Gly Thr Ala Thr Gly Ala Gly cys cys Thr Ala Gly Gly Gly Ala 1385 1390 1395 Thr Gly Ala Gly Ala Ala Thr Gly Gly Thr cys cys Ala Gly Thr 1400 1405 1410 Thr Gly Cys Thr Cys Ala Thr Thr Gly Cys Ala Ala cys Ala Thr 94/109 85 85 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 1415 1420 1425

Thr Gly Gly Thr Cys cys Ala Ala Ala Cys cys Thr Thr Thr Gly 1430 1435 1440 A.la Thr Thr Gly Gly Gly Ala Ala Thr Thr Gly Gly cys Thr Ala 1445 1450 1455 Ala Thr Gly Gly Gly Thr Thr Ala Gly Ala cys cys cys Gly Gly 1460 1465 1470 Ala Gly Ala Ala Gly cys Thr cys Ala Ala cys Ala Thr Gly Gly 1475 1480 1485 Ala Ala Gly Ala Ala Gly Cys Thr Thr Ala cys Gly Gly Gly Cys 1490 1495 1500 Thr Ala Ala cys cys Cys Thr Thr Cys Ala Ala Ala Gly Gly Gly 1505 1510 1515 cys Thr Gly Ala Ala cys Cys Cys Thr Thr Ala Ala Thr Gly Gly 1520 1525 1530 Thr Gly cys Ala Cys cys Cys Ala Ala Gly Gly cys cys Cys Ala 1535 1540 1545 Gly Gly Cys Thr Ala Thr Cys Thr Cys Cys cys cys Ala Thr Gly 1550 1555 1560 Thr Ala Thr Ala Thr Gly Ala Ala Ala Gly Thr cys Gly Thr Thr 1565 1570 1575 Ala Ala Gly Gly Ala cys Thr Ala Ala Ala Ala Cys Gly Gly Ala 1580 1585 1590 Thr Thr Thr Thr Gly Gly Thr Gly Thr Thr Thr Thr Gly Gly Thr 1595 1600 1605 Thr Ala Gly cys Cys Ala Ala Gly Thr Thr Gly Gly Ala Ala Ala 1610 1615 1620 Thr Thr cys Gly Gly Cys Ala Thr Thr Thr Gly Thr Ala Thr Thr 1625 1630 1635 Thr Cys Ala Ala Ala Thr Gly Ala Thr Thr Ala Thr Gly Gly Ala 1640 1645 1650 Ala Ala Gly Thr Ala Ala Thr Gly Thr Cys Thr Thr Thr Gly cys 1655 1660 1665 Thr Cys Thr Thr Cys Gly Ala Ala Thr Thr Gly Thr Thr Gly Gly 1670 1675 1680 95/109 86 österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15

Thr Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1685 1690 1695

Ala Ala Ala Ala Ala Ala 1700 96/109

Claims (7)

1. österreichisches Patentamt AT 508 554 B1 2011-02-15 Patentansprüche 1. Isoliertes Nukleinsäuremolekül, umfassend eine Nukleotidsequenz, welche für ein Polypeptid mit Chalkon 3-Hydroxylase-Aktivität kodiert, wobei die Nukleotidsequenz SEQ ID Nr. 1 umfasst oder mindestens 60% Identität zu SEQ ID Nr. 1 aufweist oder in der Lage ist mit einem Molekül umfassend die Sequenz aus SEQ ID Nr. 1 zu hybridisieren, wobei die Nukleotidsequenz für ein Polypeptid kodiert, welches das Motiv FASRPLSXiX2GX3 (GSAGGD)n um- fasst, wobei X! Threonin oder Serin, X2 Alanin oder Glycin, X3 eine beliebige Aminosäuresequenz mit 50 bis 200 Aminosäuren und n 0 oder 1 ist.
2. 2. Nukleinsäuremolekül nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Motiv FASRPLSTAGX3(GSAGGD)n oder FASRPLSSGGX3(GSAGGD)n ist.
3. 3. Vektor umfassend ein Nukleinsäuremolekül gemäß Anspruch 1 oder 2.
4. 4. Zelle, insbesondere Pflanzenzelle, umfassend ein Nukleinsäuremolekül gemäß Anspruch 1 oder 2 oder einen Vektor gemäß Anspruch 3.
5. 5. Transgene Pflanze umfassend ein Nukleinsäuremolekül gemäß Anspruch 1 oder 2 oder einen Vektor gemäß Anspruch 3.
6. 6. Transgene Pflanze nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass die Pflanze ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Zierpflanzen, insbesondere Petunien, Usambaraveilchen, Azaleen, Rhododendren, Pelargonien, Fuchsien, Cyclamen, Weihnachtssterne, Antirrhinum, Aster (Asteraceae), Begonia (Begoniaceae), Callistephus (Asteraceae), Cam-panula (Campanulaceae), Catharanthus (Apocynaceae), Chrysanthemum (Asteraceae), Cineraria (Asteraceae), Dedanthremum (Asteraceae), Dianthus (Caryophyllaceae), Dahlia (Asteraceae), Euphorbia (Euphorbiaceae), Gerbera (Asteraceae), Hydrangea (Hydrangea-ceae), Lilium (Liliaceae), Lisianthus (= Eustoma (Gentianaceae)), Myosotis (Boraginaceae), Nierembergia (Solanaceae), Orchidaceae, Osteospermum (Asteraceae), Rosa (Rosa-ceae), Scaevola (Goodeniaceae), Sinningia (Gesneriaceae), Streptocarpus (Gesneria-ceae), Torenia (Linderniaceae), Tulipa (Liliaceae), Verbena (Verbenaceae), Veronica (Plantaginaceae), Viola (Violaceae) und Malus sp..
7. 7. Schnittblume oder Samen einer transgenen Pflanze nach Anspruch 5 oder 6. Hierzu 12 Blatt Zeichnungen 97/109