CN1519002A - 一种中药提取物及制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种中药提取物及制备方法和应用，它是以芍药、甘草为原料提取制备的。该提取物至少含50％重量百分比的芍药总苷、甘草酸和总黄酮苷。其制备方法是芍药和/或甘草加水煎煮、滤过，合并提取液，通过大孔吸附树脂富集有效成分，用醇洗脱，收集醇洗脱液，减压回收醇，浓缩成浸膏、干燥。本发明的中药提取物，可用于制备治疗慢性乙型病毒性肝炎的药物，其有效成分明确，含量高，主要成分的含量和比例相对固定，质量稳定可控，安全有效，成本较低。

Description

一种中药提取物及制备方法和应用

                        技术领域

本发明涉及一种中药提取物，特别是芍药、甘草的提取物及其制备方法和它的医疗用途。

                        技术背景

慢性乙型肝炎是由于感染乙肝病毒长期不能清除所致的肝脏病变，是当今世界常见的难治病症之一。慢性乙型病毒性肝炎发病率甚高，据美国亚特兰大疾病控制中心报道，全世界约有2.7亿HBsAg携带者。我国至少有6亿人感染过乙型肝炎病毒，HBsAg携带者约1.2亿人，其中1/4最终发展成为慢性乙型病毒性肝炎。慢性乙型病毒性肝炎传播途径复杂，病程长，易反复和慢性化，与肝硬化和肝癌密切相关，对人体健康危害很大，现已成为最流行的传染病，国家每年仅直接用于肝炎的医疗费用高达500亿元。在全球范围内，至今也没有找到治疗肝炎的特效药或理想的首选药物，成为人类医药领域的一大憾事。西医多用干扰素、拉米夫丁等治疗，但价格昂贵，且易反复，疗效不稳定，对所适宜的病症有严格的要求。有关专家指出，从天然中药材中研制开发生产治疗肝炎类药物，以中医药理论为指导，筛选、挖掘传统的中药复方，具有开发生产周期短，研制费用低，毒副作用小，产品价格不高等西药类产品不可比拟的优点，极有可能产生具有世界先进水平的治疗肝炎的特效和首选药。从2001年夏季抗肝炎药品平面广告发布情况看，目前在国内销售的抗肝炎药品有：速立特牌肝喜乐胶囊、蒂达胶囊、健民慢肝宁、肝毒净颗粒、奥星胶囊、雪域肝泰康、双虎清肝颗粒、葵花牌护肝片等66个品牌。多数品牌具有一定的疗效，如改善肝功能，修复损伤的肝细胞，防止肝纤维化，抑制病变复制，调控免疫等。尽管如此，上述品种大多为中药复方粗制剂，产品档次不高，技术含量低，服用量大，有效成分不明确，可测成分含量低，缺乏严格的质量标准和规范化的质量控制体系。

                        发明内容

芍药甘草汤为张仲景《伤寒论》肝病证名方，由芍药和甘草组成，具有养血敛阴、柔肝和脾、缓急止痛，泻肝热、利小便、解毒和化瘀的作用，为补泻兼施、阴阳两调之剂，乃治黄疸、肝病之良方。现代药理学研究和临床实践证明芍药甘草汤对急、慢性肝炎有肯定的疗效(参考文献1-3)，同时确定芍药和甘草的主要有效成分和部位分别为芍药总苷、甘草酸和甘草黄酮(参考文献4-8)。由于汤剂中可测成分含量低，难以建立规范的质量控制标准，以有效部位以及有效部位的混合物来制备抗乙型病毒性肝炎的药物尚未见报道。

本发明在芍药甘草汤剂的基础上，提供一种中药提取物——芍苷多苷即芍药总苷、甘草酸、总黄酮苷的混合物，主要有效成分清楚，含量高且相对稳定，质量可控。

本发明的技术方案是：提供一种中药提取物，以重量比计，至少含50％的芍药总苷、甘草酸和总黄酮苷。其中，含(重量比)芍药总苷10-40％、甘草酸10-30％、总黄酮苷5-20％。优选的是含芍药总苷25-35％、甘草酸10-20％、总黄酮苷8-16％。

上述的中药提取物的制备方法，包括：a、芍药和/或甘草加水煎煮，滤过，合并提取液，b、通过大孔吸附树脂富集有效成分，用醇洗脱，收集醇洗脱液，c、减压回收醇，浓缩成浸膏，干燥。其中，步骤a优选的是芍药与甘草共同煎煮，步骤b优选的醇为50-90％乙醇。

所述的中药提取物可直接用于治疗慢性乙型病毒性肝炎，也可以加上药用辅料或载体，制备成口服制剂。优选的剂型是片剂、胶囊或口服液。

本发明的中药提取物，有效成分明确，含量高，主要成分的含量和比例相对固定，质量稳定可控，安全有效，成本较低。

附图说明：图1为本发明的提取物中芍药总苷含量测定的HPLC色谱图。

图2为本发明的提取物中甘草酸含量测定的HPLC色谱图。

图3为本发明的提取物中黄酮苷含量测定的HPLC色谱图。

                        具体实施方式：

本发明的中药提取物——芍甘多苷的制备：

5000g芍药和甘草加12倍量的水，煎煮提取3次，每次1小时，滤过，合并提取液，通过大孔吸附树脂柱，先用适量的水洗涤，再用70％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成浸膏，减压干燥，即得芍甘多苷294g，收率为5.9％。经含量测定，含芍药总苷、甘草酸和总黄酮苷总量为52.9％，其中芍药总苷29.4％、甘草酸13.7％、总黄酮苷9.8％。

含量测定的方法：

芍药总苷  照高效液相色谱法(中国药典2000版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-醋酸-异丙醇(67∶173∶4∶4)为流动相；检测波长为230nm。理论板数按苯甲酸峰计算应不低于1500。

对照品溶液的制备  精密称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的芍药苷对照品适量，加5％NaOH溶液制成每1ml含0.5mg的溶液，精密吸取该溶液1ml，置5ml具塞试管中，沸水浴水解2小时，冷却，移至25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液的制备  取本品约35mg，精密称定，置25ml量瓶中，加5％氢氧化钠溶液约20ml，超声处理5分钟，用5％氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀，精密吸取该溶液1ml，置5ml具塞试管中，沸水浴水解2小时，冷却，移至20ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，离心，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，得到HPLC图谱如附图1，测定，即得。

本品按干燥品计算，含芍药总苷以芍药苷(C₂₃H₂₈O₁₁)计，应为10-40％。

甘草酸  照高效液相色谱法(中国药典2000版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(67∶33∶1)为流动相；检测波长为250nm。理论板数按甘草酸单铵盐峰计算应不低于2000。

对照品溶液的制备  精密称取甘草酸单铵盐对照品适量，加流动相制成每1ml含0.02mg的溶液(折合甘草酸为0.01959mg)。

供试品溶液的制备取本品约35mg，精密称定，置25ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，离心，即得。

测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，得到HPLC图谱如附图2，测定，即得。

本品按干燥品计算，含甘草酸(C₄₂H₆₈O₁₆)应为10-30％。

总黄酮苷  照高效液相色谱法(中国药典2000版一部附录VI D)测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(52∶48∶0.3)为流动相；检测波长为310nm。理论板数按甘草素峰计算应不低于1500。

对照品溶液的制备  精密称取甘草素和异甘草素对照品适量，加甲醇分别制成每1ml含甘草素16μg、异甘草素8μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加2.5mol/L盐酸甲醇溶液约20ml，超声处理5分钟，用2.5mol/L盐酸甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取4ml，置50ml圆底烧瓶中，加2.5mol/L盐酸甲醇溶液4ml，于75℃水浴回流水解1小时，冷却，转入25ml量瓶中，加5mol/L氢氧化钠溶液适量，调PH至弱酸性，再加甲醇至刻度，摇匀，离心，即得。

测定法  分别精密吸取上述两种对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，得到HPLC图谱如附图3，测定，分别计算二种黄酮苷元的含量，以下式换算成总黄酮苷的含量。

总黄酮苷含量＝(甘草素含量+异甘草素含量)×1.6327

本品按干燥品计算，含总黄酮苷应为5-20％；芍药总苷、甘草酸、总黄酮苷的总量不得少于50.0％。

以上述方法制备的本发明的中药提取物所作的药动学研究表明，大鼠以相同剂量的甘草酸分别ig给予芍甘多苷和甘草总苷后测得甘草酸和甘草次酸的血药药浓度波动较大，按非室模型处理，计算t_1/2，K，AUC_0～∞。甘草酸和甘草次酸的主要药代动力学参数见表1。结果：大鼠灌胃芍甘多苷与甘草总苷组比较，甘草酸和甘草次酸的C_max和AUC_0～∞均显著增大(P＜0.01)。

             表1  甘草酸与甘草次酸的主要药代动力学参数n＝3， x±S

                           甘草酸                       甘草次酸

参数

                   甘草多苷      芍甘多苷        甘草多苷       芍甘多苷

AUC/mg.h.L^-1      126±42       3613±996^*     23.64±3.94    215±26^*

t_1/2/h            7.24±1.78    4.56±1.02      3.85±1.76      3.03±0.91

t_max/h            2.21±0.51    2.06±0.41      0.91±0.45      0.58±0.17

c_max/mg.L^-1      13.4±4.9     615.3±228^*    3.07±0.94      41.3±3.84^*

与甘草多苷组比较(t检验或t’检验)：^*P＜0.01。

结论：大鼠分别灌胃给与芍甘多苷和甘草总苷，甘草酸和甘草次酸的药动学特征显示出显著性差异，主要表现为芍甘多苷组甘草酸和甘草次酸血药浓度、生物利用度显著增高。芍甘多苷组对甘草总苷组甘草酸、甘草次酸的相对生物利用度为28.7和9.1，证明芍药总苷与甘草总苷配伍即芍甘多苷有协同增效作用(参考文献9)，因此，使用芍苷多苷比单独使用其中任意一种有效成分效果更好。

再用以上方法制备的提取物进行药理实验：

本发明提供的中药提取物——芍甘多苷，经药效学研究显示有以下作用效果：

(1)芍甘多苷灌胃给药对小鼠CCl₄急性肝损伤、小鼠D-氨基半乳糖急性肝损伤、大鼠CCl₄慢性肝损伤(肝纤维化)均有显著降低转氨酶、减轻肝损伤组织病理改变作用，对慢性肝损伤大鼠可明显抑制肝内胶原纤维增生，阻止肝硬化的形成。如表2至5所示。

表2  芍甘多苷对CCl4所致大鼠慢性肝损伤血清ALT、AST的影响( x±S)

组别          动物数       剂量            ALT                  AST

              (只)         (mg/kg×d)      (IU/L)               (IU/L)

对照组        10           -               24.67±4.00^***      354.56±85.06^***

模型组        11           -               55.47±12.69         500.64±109.26

芍甘多苷      10           88×60          37.86±11.91^***     419.44±64.14^**

芍甘多苷      10           264×60         45.15±6.89^**       384.89±44.71^***

芍甘多苷      11           528×60         40.43±12.19^***     355.50±53.72^***

鳖甲软肝片    11           1200×60        47.10±11.07^*      409.59±197.07^*

益肝灵        13           46.2×60        44.44±13.15^**      385.98±101.62^***

与模型组比较(t检验或t′检验)：^*P＞0.05；^**P＜0.05；^***P＜0.01.

表3芍甘多苷对CCI4所致大鼠慢性肝损伤血清ALB、GLB的影响( x±S)

组别          动物数       剂量            ALB                   GLB

              (只)         (mg/kg×d)      (g/L)                 (g/L)

对照组        10           -               41.37±3.49^***       49.08±5.38^*

模型组        11           -               36.35±2.54           50.54±4.46

芍甘多苷      10           88×60          36.80±1.64^*         52.17±3.48^*

芍甘多苷      10           264×60         37.89±2.51^*         51.55±3.92^*

芍甘多苷      11           528×60         35.81±3.48^*         52.06±5.22^*

鳖甲软肝片    11           1200×60        35.29±2.87^*         51.43±6.76^*

益肝灵        13           46.2×60        35.14±3.09^*         51.31±5.05^*

与模型组比较(t检验或t′检验)：^*P＞0.05；^**P＜0.05；^***P＜0.01。

 表4  甘多苷对CCl₄所致大鼠慢性肝损伤血清唾液酸及肝组织羟脯氨酸的影响( x±S)

组别           动物数      剂量            肝组织羟脯氨酸         血清SA

               (只)        (mg/kg×d)      (μg/mg)               (mmol/L)

对照组         10          -               1.04±0.27^***         2.74±0.57^*

模型组         11          -               2.41±0.58             2.53±0.41

芍甘多苷       10          88×60          2.24±0.79^*           2.47±0.32^*

芍甘多苷       10          264×60         1.52±0.29^***          2.43±0.23^*

芍甘多苷       11          528×60         2.00±0.50^*           2.73±0.68^*

鳖甲软肝片     11          1200×60        2.12±0.40^*           2.96±0.33^***

益肝灵         13          46.2×60        2.16±0.47^*           3.13±0.75^***

与模型组比较(t检验或t′检验)：^*P＞0.05；^**P＜0.05；^***P＜0.01.

表5    芍甘多苷对CCI₄所致大鼠慢性肝损伤病理评分的影响( x±S)

组别           动物数      剂量             肝纤维化病理评分

               (只)        (mg/kg×d)       (平均记分值)

正常对照       10          -                0.10±0.32^###

模型对照       11          -                3.36±1.63

芍甘多苷       10          88×60           2.60±0.70^##

芍甘多苷       10          264×60          2.20±0.63^###

芍甘多苷       11          528×60          2.54±1.04^##

鳖甲软肝片     11          1200×60         3.00±1.2^#

益肝灵         13          46.2×60         2.54±1.05^##

与模型组比较(秩和检验)：^#P＞0.05；^##P＜0.05；^###P＜0.01.

(2)芍甘多苷体外无明显细胞毒性作用浓度下，在第4天、第8天对HBV转染的HepG 2215细胞株排泌HBsAg、HBeAg以及2215细胞HBV-DNA的表达具有明显的抑制作用，提示芍甘多苷在体外有显著抗HBV活性。如表6至8所示。

表6  芍甘多苷在2.2.15细胞中对HB_sAg的影响(二批实验结果)

批次	芍甘多苷浓度mg/ml	4天				8天
										Cpm(x±S)	抑制率％	P/N	IC50mg/ml	cpm(x±S)	抑制率％	P/N	IC50mg/ml
		I	8	835±66**	96.76	2.29	0.5	6881±484**	94.51									2.45	0.76
4	1960±99**									88.22	5.71	3459±239**	90.05	3.63
			2	1797±219**	89.46	5.22		1429±86**	88.28						4.10
1	4725±301**									67.23	14.12	1275±385**	64.96	10.27
			0.5	6909±371**	50.66	20.76		887±102**	25.65						20.67
细胞对照	13582±306										41.04	9114±463		27.46
			II	8	817±61**	96.74		2.24	0.5						905±26**	29.22	2.51	0.622
4	1397±254**	92.11					4.01			1013±8**	19.80	2.83
				2	1659±249**	89.73		4.79					1216±117**	15.42	3.45
1	3698±149**	73.75					10.99			2272±159**	9.56	6.66
				0.5	5204±228**	61.72		15.57					6287±291**	3.42	10.86
细胞对照	12937±170						39.08			9636±1192		29.04
				空白对照	80

与细胞对照相比：^**p＜0.01 ^*p＜0.05

表7    芍甘多苷在2.2.15细胞中对HB_eAg的影响(二批实验结果)

批次	芍甘多苷浓度mg/ml	4天				8天
										cpm(x±S)	抑制率％	P/N	IC50mg/ml	cpm(x±S)	抑制率％	P/N	IC50mg/ml
		I	8	526±62**	102.06	0.81	0.501	538±68**	101.51									0.83	0.5
4	720±61**									9832	1.16	545±156**	101.39	0.84
			2	991±28**	93.11	1.65		588±66**	100.71						0.92
1	2308±226**									67.74	4.07	547±8.3**	101.36	0.847
			0.5	3233±455**	49.93	5.76		1942±663**	79.51						3.367
细胞对照	5826±527										10.51	6935±1154		12.54
			II	8	466±81**	103.28		0.69	0.62						637±86**	99.92	1.01	0.5
4	698±41**	98.72					1.12			576±102**	101.15	0.89
				2	907±145**	94.61		1.51					668±43**	99.29	1.06
1	2388±351**	65.49					4.21			2240±148**	67.40	3.94
				0.5	3527±231**	43.09		6.307					2760±240**	56.85	4.89
细胞对照	5719±364						10.31			5563±666		10.03
				空白对照	87

与细胞对照相比：^**p＜0.01  ^*p＜0.05

表8  芍甘多苷在2215细胞HBV-DNA的表达的影响(二批实验结果)

批次	芍甘多苷浓度mg/ml	cpm(x±S)	抑制率％	IC50mg/ml
					I	8	835±66**	96.76	0.5
4	1960±99**	88.22
			2	1797±219**		89.46
1	4725±301**	67.23
			0.5	6909±371**		50.66
细胞对照	13582±306
			II	8		817±61		96.74	0.5
4	1397±254**	92.11
				2	1659±249**	89.73
1	3698±146**	73.75
				0.5	5204±228**	61.72
细胞对照	12937±170

与细胞对照相比：^**p＜0.01 ^*p＜0.05

(3)鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染鸭体内试验，芍甘多苷口服可以显著降低鸭血清中的DHBV DNA和DHBsAg滴度，停药后7天仍可保持一定的抑制作用，表明芍甘多苷在鸭体内有明显的抗鸭乙型肝炎病毒的作用。如表9至10所示。

表9  芍甘多苷对DHBV感染鸭血清DHBV DNA滴度的影响( x±S)

组别	DHBV DNA(volume)
							用药前	用药7天	用药14天	用药21天	用药28天	停药7天
	淀粉胶囊组	1689.29±358.91	1837.01±346.60	2018.62±437.14	1758.64±363.39	1785.18±249.21							1590.14±277.56
拉米夫定							1777.79±459.22	1512.15±434.40	1676.26±553.66	1488.36±360.04*	1466.84±378.30*	1736.60±439.11
	芍甘多苷小剂量组	1679.98±342.43	1568.68±393.11	1391.55±347.86**	1389.88±279.59**	1425.04±509.78							1563.77±426.27
芍甘多苷中剂量组							1863.92±234.73	1866.43±349.05	1938.17±285.07	1797.86±347.20	1704.85±186.06	1716.13±166.62
	芍甘多苷大剂量组	1798.56±176.14	1722.52±227.89	1718.00±208.09	1676.95±244.41	1689.40±208.10							1755.19±206.51
正常对照组							-	-	-	-	-	-

注：上表所列为各组DNA斑点volume值的平均数及标准差，统计学采用配对t检验(“^*”：p＜0.05；“^**”：p＜0.01)，为用药组不同时间DNA斑点值与同组用药前DNA斑点值的比较。

表10  芍甘多苷对DHBV感染鸭血清DHBsAg OD值的影响( x±S)

组别	用药前	用药7天	用药14天	用药21天	用药28天	停药7天
							淀粉胶囊组	1.104±0.549	1.145±0.529	1.257±0.586	1.028±0.541	0.921±0.443	0.907±0.401
拉米夫定	0.929±0.608	0.635±0.402	0.724±0.435	0.538±0.326	0.415±0.246	0.528±0.328
							芍甘多苷小剂量组	1.048±0.572	0.930±0.644	0.813±0.570	0.943±0.672	0.787±0.484	0.692±0.406**
芍甘多苷中剂量组	1.309±0.483	0.902±0.327*	1.071±0.458	0.750±0.262	0.440±0.217	0.701±0.289
							芍甘多苷大剂量组	1.165±0.591	0.965±0.615	0.983±0.625	0.941±0.464	0.962±0.492	0.928±0.692
正常对照组	0.168±0.240	0.207±0.429	0.243±0.546	0.339±0.837	0.236±0.526	0.140±0.227

注：上表所列为各组DHB_sAg OD值平均数及标准差，统计学采用配对t检验

(“^*”：p＜0.05；“^**”：p＜0.01)，为用药组不同时间DHB_sAg OD与同组用药前DHB_sAg OD值的比较。

(4)芍甘多苷灌胃给药可以显著增加正常大鼠胆汁分泌量，对异硫氢酸-1-奈酯造成的小鼠实验性黄疸具有显著的退黄作用。如表11所示。

表11  芍甘多苷对正常大鼠胆汁流量的影响

组别        动物数       剂量                                      胆汁流量(ml)

            (只)         (mg/kg)     -30(min)             30(min)              60(min)                90(min)

对照组      10            -          0.41±0.17           0.33±0.11           0.34±0.12             0.35±0.09

芍甘多苷    10            88         0.33±0.10^*         0.35±0.08^*         0.38±0.09^*          0.35±0.10^*

芍甘多苷    10            264        0.41±0.10^*         0.45±0.12^**        0.40±0.10^*          0.42±0.13^*

芍甘多苷    10            528        0.33±0.08^*         0.47±0.09^***       0.46±0.08^**          0.45±0.08^**

舒胆通      10            24         0.34±0.13^*         0.43±0.13^*         0.44±0.11^*          0.43±0.11^*

组别        动物数        剂量                       胆汁流量增加率(％)

            (只)          (mg/kg)    30(min)              60(min)              90(min)

对照组      10            -          -18.35±16.49        -15.09±15.97        -9.67±25.02

芍甘多苷    10            88         15.51±44.26^**      29.14±58.35^**      16.42±47.51^*

芍甘多苷    10            264        12.00±28.56^***     -0.20±15.85^**       5.65±28.39^*

芍甘多苷    10            528        50.22±51.50^***     47.07±47.58^***      45.79±44.22^***

舒胆通      10            24         33.52±33.31^***     38.76±43.22^***      31.90±34.57^***

与模型组比较(t检验或t’检验)：^*P＞0.05；^**P＜0.05；^***P＜0.01.

上述实验方法及观察指标均按照国内外公认的评价抗乙型病毒性肝炎药物的标准进行，符合国家药品监督管理局关于抗乙型病毒性肝炎药物的药效学研究的技术要求。

上述实验证明，本发明的中药提取物是抗乙型肝炎病毒的有效物质，同时，本发明的中药提取物——芍苷多苷，以重量比计，至少含50％的芍药总苷、甘草酸和总黄酮苷。其中，含(重量比)芍药总苷10-40％、甘草酸10-30％、总黄酮苷5-20％。有效成分明确，含量高，且含量和比例相对固定，质量稳定可控，安全有效，成本较低，为制备治疗乙型病毒性肝炎的药物提供了新途径。

下面结合实施例对本发明作进一步说明，但并非对本发明的限制。

实施例一

中药提取物的制备：

1000g芍药和甘草加10倍量的水，煎煮提取3次，每次1小时，滤过，合并提取液，通过大孔吸附树脂柱，先用适量的水洗涤，再用60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成浸膏，减压干燥，即得芍甘多苷64.2g，收率为6.42％。经测定，含芍药总苷、甘草酸和总黄酮苷总量为54.1％，其中芍药总苷28.6％、甘草酸16.1％、总黄酮苷9.4％。加入药用淀粉17.5g，混匀，装制胶囊0.28g/粒，用法与用量为每次2粒，一日三次。

实施例二

1000g芍药和甘草加15倍量的水，煎煮提取2次，每次2小时，滤过，合并提取液，通过大孔吸附树脂柱，先用适量的水洗涤，再用75％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成浸膏，减压干燥，即得芍甘多苷61.8g，收率为6.18％。经测定，含芍药总苷、甘草酸和总黄酮苷总量为56.6％，其中，芍药总苷31.2％、甘草酸14.8％、总黄酮苷10.6％。加入药用淀粉21.5g，混匀，制成片剂0.3g/片，用法与用量为每次2片，一日三次。

实施例三

取实施例1或2制备的中药提取物芍甘多苷44g，加水900ml，用氨试液调节PH值为7，再加水调整总量至1000ml，搅拌，滤过，灌装，每支10ml，灭菌，即得。用法与用量为每次1支，一日三次。

参考文献：

1、梁炳银，余英宏，范杉，等。芍药甘草汤治疗148例病毒性肝炎的临床观察，上海中医药杂志，1989，(6)：4。

2、中华人民共和国卫生部  药品标准  中药成方制剂，第17册，1998：209。

3、刘陶世，黄耀洲。甘芍注射液对小鼠实验性肝损伤的保护作用，中成药，2000，22(5)：358。

4、中华人民共和国卫生部  药品标准  中药成方制剂，第17册，1998：64。

5、李德华，李德宇，李永光。甘草化学成分与药理作用研究进展，中医药药信息，1995，(5)：31。

6、戴俐明，陈学广，徐叔云。白芍总甙对实验性肝炎的保护作用，中国药理学通报，1993，9(6)：449。

7、周金黄，刘干中主编。中药药理与临床研究进展(第一册)，北京：中国科学技术出版社，1992：49。

8、王根生，韩哲武。甘草类黄酮对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的影响，药学学报，1993，28(8)：572

9、项琪，程刚，陈济民。芍药甘草汤在大鼠体内药代动力学研究，中国药学杂志，2000，35(9)：615。

Claims (9)

1、一种中药提取物，其特征是：以重量比计，至少含50％的芍药总苷、甘草酸和总黄酮苷。

2、根据权利要求1所述的中药提取物，其特征是：以重量比计，含芍药总苷10-40％、甘草酸10-30％、总黄酮苷5-20％。

3、根据权利要求1或2所述中药提取物，其特征是：以重量比计，含芍药总苷25-35％、甘草酸10-20％、总黄酮苷8-16％。

4、权利要求1所述的中药提取物的制备方法，其特征是：包括：a、芍药和/或甘草加水煎煮，滤过，合并提取液，b、通过大孔吸附树脂富集有效成分，用醇洗脱，收集醇洗脱液，c、减压回收醇，浓缩成浸膏，干燥。

5、根据权利要求4所述的方法，其特征是：步骤a优选的是芍药与甘草共同煎煮。

6、根据权利要求4所述的方法，其特征是：步骤b优选的醇为50-90％乙醇。

7、权利要求1所述的中药提取物在制备治疗慢性乙型病毒性肝炎的药物制剂中的应用。

8、权利要求1所述的中药提取物，加上药用辅料或载体，制备成口服制剂。

9、根据权利要求8所述的中药提取物，其特征是：口服制剂是片剂、胶囊或口服液。

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