CN1228344C - 薯蓣皂苷的制备方法、药物制剂及其医药新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从穿龙薯蓣或盾叶薯蓣中工业化提取制备薯蓣皂苷的新方法以及薯蓣皂苷的新用途。将中药穿龙薯蓣或盾叶薯蓣用50%-95%的乙醇回流提取，调节pH值或经柱层析纯化，可得到用于中药新药研究的原料药。本发明提取纯化的薯蓣皂苷，具有预防和治疗高血脂症，抑制胆固醇吸收、抑制血小板凝集，抗心肌缺血等疾病的作用，也可用于冠心病、心胶痛、心肌梗塞、脑血栓等疾病的预防和治疗。
Description
技术领域
本发明是关于薯蓣皂苷(Dioscin)提取制备新方法、药物制剂及其新用途的发明，其新用途包括薯蓣皂苷在制备具有抗高血脂症、抗心肌缺血、抑制血小板凝集，治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞、脑血栓和抑制胆固醇吸收作用的药物中的应用，属于中药领域。
背景技术
薯蓣皂苷(Dioscin)存在于薯蓣科植物穿龙薯蓣(Dioscorea NipponicaMakino)和盾叶薯蓣(D.zingiberensis wright)的根茎和地上茎叶部分，穿龙薯蓣和盾叶薯蓣均具有活血舒筋、消食利水等作用。两者均含有丰富的甾体皂苷，总皂苷用酸降解可得薯蓣皂苷元和替告皂苷元。薯蓣皂苷元是合成激素的主要原料，同时也具有降血脂和抑制胆固醇吸收的作用。用穿山龙为原料制成的制剂有注射剂、片剂等，用于风湿性关节炎，这些制剂在工艺上都比较粗糙，一般多用水煎煮醇沉淀或醇提取水沉淀的传统方法。制成的针剂和片剂的内在成分不清楚，确切地说，是穿山龙的混合物制成的制剂，对产品的内在质量无法严格控制，更难以说明制剂中哪种物质是活性成分。所以疗效难以保证。薯蓣皂苷是脂溶性甾体皂苷，几乎不溶于水，而传统的提取工艺采用水煎煮、乙醇沉淀的方法，这种方法将真正的有效成分薯蓣皂苷单体化合物基本除去而未能保留，得到的仅是水溶性总皂苷的混合物。也有人将水溶性总皂苷错称为薯蓣皂苷。实际上，薯蓣皂苷是具有下述化学结构式的单体化合物，其英文名称为Dioscin。
将薯蓣皂苷用于制备预防和治疗高血脂症、抑制胆固醇吸收、抑制血小板凝集和抗心肌缺血症的药物至今未见报道。
发明内容
本发明目的之一是提供一种薯蓣皂苷的制备方法，以解决不能产业化大量制备薯蓣皂苷的问题。
本发明目的之二是提供了薯蓣皂苷的药物制剂。
本发明目的之三是提供了薯蓣皂苷的新制药用途。
本发明薯蓣皂苷的制备方法包括如下几种不同的提取工艺：
方法一：
以中药穿龙薯蓣和盾叶薯蓣为原料，先用水浸提，弃去浸出液。然后用乙醇回流提取，将提取液进行柱层析。收集洗脱液，减压回收溶剂后用D101大孔吸附树脂纯化，先用去离子水洗3个保留体积，再用40％乙醇洗脱，最后用80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液，减压回收乙醇，用90％乙醇反复重结晶，得薯蓣皂苷。
方法二：
以穿龙薯蓣或盾叶薯蓣为原料，先用水浸提，弃去浸出液，加氧化钙或氢氧化钙混合均匀，用乙醇回流提取，提取液减压回浓缩，离心或过滤，不溶物再用乙醇加热溶解，并加入活性炭，回流提取，趁热过滤，滤液减压回收乙醇，离心或过滤，滤饼干燥得薯蓣皂苷结晶。
方法三：
以穿龙薯蓣或盾叶薯蓣为原料，先用水浸提，弃去浸出液，然后用乙醇回流提取，提取液减压回收至稠膏状，再用氧化钙或氢氧化钙、活性炭、硅藻土与稠膏混合、干燥、粉碎，再用含10％乙酸乙酯的95％乙醇溶液回流提取，提取液再经中性氧化铝柱层析分离，收集洗脱液，回收溶剂，用90％乙醇反复重结晶，得薯蓣皂苷(Dioscin)结晶。
方法四：
以穿龙薯蓣或盾叶薯蓣为原料，用乙醇提取两次，合并提取液，用1％的药用活性碳在乙醇液中脱色，除去非皂苷类脂溶性物质。回收乙醇至无醇味；用正丁醇萃取3次，合并正丁醇萃取液，用去离子水清洗正丁醇提取液，弃去水相，正丁醇可溶部分再用无水硫酸钠脱水纯化，放置，过滤，减压回收正丁醇，真空干燥得棕黄色粉末，为薯蓣总皂苷。将总皂苷在制备型中低压柱层析上分离，全程收集所有流分，最后用乙醇将柱上的所有样品全部洗脱，以薄层色谱和高效液相色谱鉴定含有薯蓣皂苷的组分，合并得薯蓣皂苷部分。
本发明上述方法可以用于产业化大量制备单体薯蓣皂苷。
通过高效液相色谱和液—质联用系统进行分析，验证本发明方法制备的物质就是薯蓣皂苷。
1、高效液相(HPLC)分析
仪器：美国Agillent1100型高效液相色谱仪(配四元泵、二级管阵列检测器、自动进样器、柱温箱、软件为Agillent1100型多种数自动处理系统)。
条件：色谱柱为Zorbax C18反相硅胶柱(4.6cm×150cm)，进样量为5ul，流动相为甲醇∶水＝90∶10，流速为1.0ml/min，检测波长为215nm。
分析结果：薯蓣皂苷保留时间为10.385min。
2、液—质联用(LC/MSD)分析
仪器：美国Agillent液—质联用仪(配四元泵、补偿单元泵、二级管阵列检测器、自动进样器、柱温箱、软件为Agillent1100型多种数据处理系统)。
条件：色谱柱为ZOBAX EXTEND C18柱，流动相为乙腈∶水(PH为3.5)＝80∶20。流速为0.9ml/min，柱后补偿促离子化试剂氨水溶液(0.1ml/min)，质谱条件为负离子模式(NEG)电喷雾(API-ESI)扫描。
经中国科学院长春分院分析测试中心通过电喷雾质谱、红外、核磁等光谱分析确定了本发明提取的化合物是薯蓣皂苷(Dioscin)
薯蓣皂苷存在于薯蓣总皂苷当中，但是，在本发明完成之前没有关于薯蓣皂苷单体预防和治疗高血脂症、冠心病、心绞痛等方面的药理实验报道，本发明基于对薯蓣总皂苷的分离、纯化，进行了对比性药效学试验，证明了薯蓣总皂苷中的单体薯蓣皂苷(Dioscin)是预防和治疗高血脂症、冠心病、心绞痛的主要活性成分，属于脂溶性甾体皂苷，几乎不溶于水；从总皂苷中分离出薯蓣皂苷后的剩余部分(即水溶性总皂苷，以下简称WSS)经药效学试验证明对降血脂和抗心肌缺血等方面基本上无活性。本发明首次证明了薯蓣皂苷是预防和治疗高血脂症、冠心病、心绞痛的有效成分，具有抗高血脂症、抑制胆固醇症、抗心肌缺血和抗血小板凝集的药理作用。
按药剂学方法，可以将本发明制备的薯蓣皂苷制备成多种临床药物剂型，包括口服制剂或非肠道给药的剂型。所说的口服制剂选自于片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂当中的一种；所说的非肠道给药剂型选自于注射剂、气雾剂、栓剂或皮下给药剂型当中的一种。
本发明药物优选含有1％-99％的薯蓣皂苷和99％-1％的赋形剂，优选含有30％80％的薯蓣皂苷和70％-20％的药用赋形剂，最好含有60％-70％的薯蓣皂苷和40％-30％的赋形剂。
本发明药物中的辅料是指常规的药物赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂等。
本发明药物中还可以含有用于降血脂和治疗心脑血管疾病的其他活性成分。
本发明制得的薯蓣皂苷及其药物制剂具有抗高血脂症、抑制胆固醇症、抗心肌缺血和抗血小板凝集、治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞、脑血栓等作用。这些药理作用，通过以下药效学实验例得到证实。
下述的药品与试剂、仪器、动物和数据处理方法适用于以下全部实验例。
药品与试剂：薯蓣皂苷和水溶性总皂苷(WSS)由吉林天药科技有限公司研究所植化室提供，前者为白色针状结晶，后者为棕黄色粉末；地奥心血康胶囊(黄山药总苷)购于中科院成都地奥制药公司，批号为990609；烟酸片购于上海九福药业公司，批号为991001：胆固醇由上海新兴化工试剂研究所提供，批号为981201；脂必妥由成都九泓制药厂出品，批号990905；安妥明为北京制药厂产品；丙硫氧嘧啶由第二军医大学朝晖制药厂提供，批号为981004；酶法测定胆固醇试剂由上海医学科学有限公司提供；ADP购于上海伯奥生物科技有限公司；其它试剂均为分析纯。
仪器：生化自动分析仪，美国Encore公司；TYXN-91型血液凝集仪，上海通用机电技术研究所；RM-6000型多道生理记录仪，日本光电公司出品；LIANG-100微机显示自动记录血液血浆粘度计；BT87-2型实验性体内血栓形成测定仪；CORMNG-178血气分析仪。
动物：昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄兼用，购自吉林省中医中药研究院动物饲养室；Wistar大鼠，体重130-170g；250-300g，雌雄兼用，购自吉林省药品检验所。
数据处理：结果以平均值±标准误差(X±S)表示，组间差异用双侧t检验。
实验例1 薯蓣皂苷对高脂血症的预防作用
昆明种小鼠110只，雌雄各半，体重18-23g，随机分成9组，分组及给药剂量见表1。用生理盐水将烟酸片、地奥心血康、WSS和薯蓣皂苷分别制成溶液和混悬液，供灌胃(ig)给药。以上各组ig体积为0.2ml/10g体重。实验中除第1组喂饲普通饲料外，第2-9组均喂饲高脂饲料(在普通饲料中加入1％胆固醇、10％猪油、和0.3％胆酸)。在喂饲高脂饲料同时给药，共给药7d。于给药后第8d摘除眼球取血，37℃温孵1h，离心(3000rpm，15分钟)，取血清，用生化自动分析仪测定血清总胆固醇(Tch)含量，结果见表1。
表1 薯蓣皂苷体内对小鼠高脂血症的预防作用
组别 剂量 动物数 Tch
(mg/kg) (n) mmol/L
空白对照组 - 13 2.25±0.54
模型对照组 - 10 9.34±1.94###
胆固醇+烟酸片 300 10 6.59±1.23**
胆固醇+地奥心血康 150 13 7.82±2.18
胆固醇+地奥心血康 300 10 7.73±1.28*
胆固醇+WSS 150 11 7.85±1.97
胆固醇+WSS 300 10 7.65±1.12*
胆固醇+薯蓣皂苷 150 10 6.46±1.26***
胆固醇+薯蓣皂苷 300 11 6.65±1.04***
与空白对照组比较 ###p＜0.001
与模型对照组比较 *p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001
上述结果表明，给小鼠ig地奥心血康(150和300mg/kg)、WSS(150和300mg/kg)和薯蓣皂苷(150和300mg/kg)时，薯蓣皂苷对小鼠高胆固醇血症有非常显著的预防作用，而WSS和地奥心血康只有大剂量才有较弱的预防作用。
实验例2 薯蓣皂苷对高胆固醇血症小鼠血清总胆固醇的影响
取昆明种小鼠90只，雄性，体重20±2g，按体重分为8组，并按表2所示剂量连续灌胃给药7日，于第6天禁食，16h后除空白对照组外，其余各组均腹腔注射75％新鲜蛋黄乳0.5ml/20g，16h后各组小鼠眶静脉取血，分离血清做总胆固醇Tch测定。结果表明薯蓣皂苷能拮抗蛋黄乳液所致小鼠血清Tch含量的升高，且有显著性差异，而WSS无此作用，见表2。
表2 薯蓣皂苷对高胆固醇血症小鼠血清总胆固醇的影响
组别 剂量 Tch
mg/kg mmol/L
空白对照组 - 2.48±0.40***
模型对照组 - 14.37±3.77
脂必妥 525 11.85±4.20
WSS 300 11.88±3.93
WSS 150 12.75±5.21
薯蓣皂苷 300 9.34±2.27**
薯蓣皂苷 150 11.29±2.11*
薯蓣皂苷 75 11.84±3.99
与模型对照组比较 *P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
实验例3 薯蓣皂苷对小鼠实验性高脂血症的治疗作用
昆明种小鼠100只，雌雄各半，体重18-23g，随机分成9组，分组及给药剂量见表3。用生理盐水将烟酸片、地奥心血康、WSS和薯蓣皂苷分别制成溶液和混悬液，供灌胃(ig)给药。以上各组ig体积为0.2ml/10g体重。实验中除第1组喂饲普通饲料外，第2-9组均喂饲高脂饲料(配方同实验例1)。各组饲以高脂饲料8d(血中胆固醇含量明显升高)后，按表3所示剂量给药，于给药后第8d，摘除眼球取血，37℃温孵1h，离心(3000rpm，15分钟)，取血清，用生化自动分析仪测定血清总胆固醇(Tch)含量。结果见表3。
表3 薯蓣皂苷体内对小鼠实验性高脂血症的治疗作用
组别 剂量 动物数 Tch
(mg/kg) (n) mmol/L
空白对照组 - 12 2.28±0.72
模型对照组 - 10 9.17±2.80*
胆固醇+烟酸片 300 8 **
胆固醇+地奥心血康 150 8 8.85±2.14
胆固醇+地奥心血康 300 12 9.20±2.00
WSS 150 10 6.78±2.80*
WSS 300 12 8.82±3.25
胆固醇+薯蓣皂苷 150 11 8.74±2.16
胆固醇+薯蓣皂苷 300 10 6.87±1.83*
5.27±1.67*
*
与空白对照组比较 ###p＜0.001
与模型对照组比较 *p＜0.05，**p＜0.01
由表3可见，给小鼠ig薯蓣皂苷(150和300mg/kg)时，对小鼠高胆固醇血症有明显的治疗作用，地奥心血康(300mg/kg)也有一定的作用，其它各组无效。
实验例4 薯蓣皂苷对高脂血症大鼠的影响
取Wistar大鼠70只，雄性，体重150±20g。按体重分为6组，除第一组(空白组)给普通饲料外，其余5组均以高脂饲料(10％蛋黄粉、5％猪油、5％胆盐、85％基础饲料)喂饲大鼠，共喂30天，然后从喂饲高脂饲料后第10日起按表4所示剂量灌胃给药，每天1次，共给药20天，末次给药后1h称重，断头取血，测血中总胆固醇(Tch)、甘油三酯(TG)，高密度脂蛋白(HDL-C)、底密度蛋白质(LDL-C)，结果表明：薯蓣皂苷能显著降低高脂血症大鼠血清Tch、TG、LDL-C含量，对HDL-C含量各组间无显著差异，但能降低LDL-C/HDL-C比值，还能显著抑制高脂血症大鼠的体重增长，见表4。
表4 薯蓣皂苷对大鼠高脂血症的影响
| 组别 | 剂量mg/kg | Tch(mmol/L) | TG(mmol/L) | HDL-C(mmol/L) | LDL-C(mmol/L) | LDL-C/HDL-C | 体重增长率(％) |
| 空白对照组模型对照组脂必妥薯蓣皂苷薯蓣皂苷薯蓣皂苷 | --52530015075 | 1.53±0.23**+3.27±0.502.65±0.591.72±0.55***2.49±0.72*2.71±0.61* | 0.61±0.14***1.35±0.181.13±0.211.07±0.13**1.06±0.25**1.18±0.22* | 1.00±0.141.08±0.151.03±0.121.01±0.151.04±0.111.03±0.1 5 | 0.30±0.12***1.47±0.301.15±0.31*1.01±0.32**1.12±0.32*1.17±0.33* | 0.30±0.11***1.37±0.281.10±0.301.01±0.32*1.10±0.371.15±0.31 | 25.5±9.89***62.6±15.4247.2±12.06*39.2±9.54***42.9±10.83**57.0±11.16 |
与模型对照组比较 *p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001
实验例5 薯蓣皂苷的抗血栓作用
取大鼠80只，随机分为7组，按表5所示剂量每日灌胃给药一次，连续给药7天，第4天给药后30min后，除空白对照组外，其余动物皮下注射盐酸肾上腺素注射液Adr(0.1％)0.1ml/只，30min后置于1.5摄氏度水中游泳5min，第5天在相同条件下重复游泳一次，第6天给药后30min，再注射一次Adr，末次给药后30min，于动物腹腔注射戊巴比妥钠35mg/kg，麻醉大鼠，然后从大鼠腹主动脉取血，测血栓形成。结果显示：薯蓣皂苷能明显抑制血瘀大鼠体外血栓的形成，降低血栓的重量，缩短血栓的长度，其余各组无此作用，见表5。
表5 薯蓣皂苷对急性血瘀模型大鼠体外血栓形成的影响
组别 剂量 血栓长 湿重 干重
mg/kg (cm) (mg) (mg)
空白对照组 - 2.55±0.90*** 144.3±42.2*** 37.3±13.05***
模型对照组 - 9.10±2.40 482.1±144.7 124.0±39.46
地奥心血康 300 5.48±2.57** 281.7±139.8** 90.8±35.05
WSS 300 6.92±2.02 398.4±129.3 102.7±42.36
WSS 150 7.25±3.47 403.5±135.5 112.4±43.57
薯蓣皂苷 300 5.80±1.73** 265.3±71.7*** 67.0±20.75**
薯蓣皂苷 150 6.89±2.32 353.0±121.1* 98.2±38.99
与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
实验例6 对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响
分组、给药、造模及处理同实验例5。从大鼠腹主动脉取血测其全血比粘度、血浆比粘度、红细胞压积及血沉，结果见表6。
表6 薯蓣皂苷对急性血瘀模型大鼠的血液流变影响
| 组别 | 剂量mg/kg | 全血比粘度 | 血浆比粘度 | 红细胞压积(％) | 血沉(nm/n) | |
| 高切 | 低切 | |||||
| 空白对照组模型对照组地奥心血康薯蓣皂苷薯蓣皂苷 | --300300150 | 6.193±1.181*9.160±1.7906.499±0.997*6.110±1.004*6.189±1.002* | 9.120±1.924**13.256±2.83110.066±1.7659.268±3.451*10.511±4.413 | 1.679±0.0711.714±0.1301.602±0.1521.616±0.0691.617±0.154 | 41.0±3.39943.4±1.64741.8±2.99140.9±3.85539.1±3.929** | 1.40±0.9661.90±0.8761.72±0.7552.06±1.2081.70±0.789 |
与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，
从表6可见，薯蓣皂苷可降低急性血瘀大鼠的全血比粘度，对其它指标无明显影响。
实验例7 薯蓣皂苷对异丙肾上腺素所致心肌缺血小鼠血清中LDH、CPK和心肌组织中MDA含量的影响
取小鼠80只，雌性，体重20±2g，按体重均分8组，于第7日内按表7所示剂量，每日灌胃给药一次，第1、2组给同体积水10ml/kg，于给药后第4-6天，第1组皮下注射生理盐水10ml/kg，第2-8组皮下注射异丙肾上腺素4mg/kg，于末次给异丙肾上腺素后24h，眶静脉取血后，测定小鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)含量，取心肌组织测丙二醛(MDA)含量，结果表明，薯蓣皂苷能明显降低由于异丙肾上腺素所致心肌缺血小鼠血清中LDH和CPK的活性，以及心肌组织中丙二醛含量，且有显著差异；而WSS只在大剂量时(300mg)时才对LDH的降低有一定作用，对CPK及MDA没有作用，见表7。
表7 薯蓣皂苷对异丙肾上腺素所致心肌缺血小鼠血清中LDH和CPK的影响
组别 剂量 LDH CPK MDA
mg/kg (U/dL) (U/DL) (nmol/L)
空白对照组 - 846±106** 7.59±0.963** 57.4±12.08*
模型对照组 - 1005±106 12.82±4.239 70.5±10.56
地奥心血康 300 891±69* 9.11±0.707* 59.1±15.61
WSS 300 895±66* 10.62±0.932 60.2±16.72
WSS 150 970±102 11.35±3.246 70.6±7.93
薯蓣皂苷 300 794±54*** 8.26±1.182** 54.8±14.98*
薯蓣皂苷 150 833±155** 9.74±1.470* 57.8±10.99*
薯蓣皂苷 75 950±100 10.53±0.851 59.8±8.43*
与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
实验例8 薯蓣皂苷对异丙肾上腺素所致心肌缺血小鼠抗乏氧的影响
取雄性小鼠90只，按体重均分8组，于7日内按表8所示剂量灌胃给药，每日给药一次，于末次给药后30分钟，皮下注射(第一组除外)异丙肾上腺素5ml/kg，15分钟后做抗乏氧实验。结果表明，薯蓣皂苷能明显延长异丙肾上腺素所致心肌缺血小鼠死亡时间，且有显著性差异，而WSS无此作用，见表8。
表8 薯蓣皂苷对异丙肾上腺素所致心肌缺血小鼠抗乏氧的影响
| 组别 | 剂量mg/kg | 死亡时间(分) |
| 空白对照组模型对照组地奥心血康WSSWSS薯蓣皂苷薯蓣皂苷薯蓣皂苷 | --30030015030015075 | 31.8±8.63***16.0±3.6520.6±3.40**19.2±3.1717.9±3.6322.2±5.67**20.6±4.12*19.3±4.06 |
与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001
实验例9 薯蓣皂苷对亚硝酸钠所致心肌缺血小鼠抗乏氧的影响
取雌性小鼠40只，按体重均分4组，于7日内按表9所示剂量灌胃给药，末次给药后30分钟，除对照组外，其余各组均腹腔注射0.25％亚硝酸钠10ml/kg，15min后将小鼠放入内装钠石灰5g的125ml广口瓶中，每瓶一只，加盖密封，观察并记录以小鼠呼吸停止作为缺氧死亡时间。结果表明，薯蓣皂苷对亚硝酸钠所致心肌缺血小鼠死亡时间无影响，见表9。
表9 薯蓣皂苷对亚硝酸所致心肌缺血小鼠抗乏氧的影响
| 组别 | 剂量mg/kg | n | 死亡时间(分) |
| 空白对照组模型对照组薯蓣皂苷薯蓣皂苷 | --300150 | 1010910 | 25.5±4.5222.9±3.4824.7±4.7423.8±3.58 |
具体实施方式
实施例1
穿龙薯蓣或盾叶薯蓣1kg，先用10000ml的常水室温浸提12小时，弃去浸出液，再用8000ml的去离子水浸提12小时，弃去浸液。然后用95％乙醇8000ml回流提取3小时，滤出提取液，再用80％乙醇6000ml回流提取2小时，滤出提出取液，将两次提取液合并；提取液在中性氧化铝柱(4cm×50cm)上层析。收集洗脱液，减压回收溶剂后用D101大孔吸附树脂(4cm×60cm)纯化，先用去离子水洗3个保留体积，再用40％乙醇1500ml洗脱，最后用80％乙醇洗脱2000ml，收集80％乙醇洗脱液，减压回收乙醇，用90％乙醇反复重结晶，得薯蓣皂苷(Dioscin)约15g(收率1.5％)。
实施例2
穿龙薯蓣或盾叶薯蓣1kg，先用10000ml常水室温浸提12小时，弃去浸出液，再用8000ml的去离子水浸提12小时，弃去浸液，加30g氧化钙或氢氧化钙混合均匀，用95％乙醇8000ml回流提取3小时，再用85％乙醇6000ml回流提取2小时，合并提取液，减压回收至1000ml，放置、离心或过滤，不溶物再用95％乙醇2000ml加热溶解，并加入10g活性炭，回流10分钟，趁热过滤，滤液减压回收乙醇至500ml，放置过夜，离心或过滤，滤饼干燥得薯蓣皂苷(Dioscin)结晶约14g(收率1.4％)。
实施例3
穿龙薯蓣或盾叶薯蓣1kg，先用10000ml常水室温浸提12小时，弃去浸出液，再用8000ml的去离子水浸提12小时，弃去浸液，然后用85％乙醇8000ml回流提取3小时，滤取提取液，再用85％乙醇6000ml回流提取2小时，合并两次提取液，减压回收至稠膏状，再用20g氧化钙或氢氧化钙、30g活性炭、50g硅藻土与稠膏混合、干燥、粉碎，再用含10％乙酸乙酯的95％乙醇溶液回流提取，提取液再经中性氧化铝柱(4cm×50cm)层析分离，收集洗脱液，回收溶剂，用90％乙醇反复重结晶，得薯蓣皂苷(Dioscin)结晶约13g(收率1.3％)。
实施例4
穿龙薯蓣或盾叶薯蓣1kg，用80％乙醇8000ml提取两次，每次3小时，合并提取液，用1％的药用活性在乙醇液中脱色，除去非皂苷类脂溶性物质。回收乙醇至无醇味(约1500ml)；用正丁醇萃取3次，第一次用正丁醇2000ml，第二次和第三次分别用正丁醇1500ml，合并正丁醇萃取液，用约3000ml的去离子水清洗正丁醇提取液，弃去水相，正丁醇可溶部分再用无水硫酸钠脱水纯化，放置12小时，过滤，减压回收正丁醇，真空干燥(80℃)得棕黄色粉末，为薯蓣总皂苷。将总皂苷在制备型中低压柱层析上分离(层析柱型号为50cm×6cm，洗脱剂为氯仿(65)∶甲醇(35)∶水(30)下层)，全程收集所有流分(每100ml为一流分)，最后用乙醇将柱上的所有样品全部洗脱，以薄层色谱和高效液相色谱鉴定含有薯蓣皂苷的组分合并得薯蓣皂苷部分，其余的所有流分合并得不含薯蓣皂苷的总皂苷部分，用于药效学做比较试验(见药理作用部分)。
实施例5 胶囊剂的制备
薯蓣皂苷原料1000g，药用淀粉1000g，混合均匀，装入1号胶囊，每粒0.2g，每次口服2-3粒，每日两次。
实施例6 片剂的制备
薯蓣皂苷原料1000g，药用淀粉400g，糊精100g，混合均匀，用适量乙醇制粒，经整粒机整粒，压片，每片0.25g，口服，每次2片，每日两次。
实施例7 颗粒剂的制备
薯蓣皂苷原料100g，淀粉1000g，糖粉100g，混合均匀，用适量乙醇制粒，干燥、整粒、分装即得。口服，一次5g，一日两次。
实施例8 注射剂的制备
薯蓣皂苷原料10g，丙二醇20ml，聚乙二醇-400 50ml，注射用水300ml，混合，水浴加热30分钟，加苯甲醇50ml，再用注射用水加至1000ml，在超声波中处理10分钟，再水浴上加热30分钟，调PH值5.5-6.5，过滤澄明，灌封，灭菌即得。每支2ml，肌肉注射，一次2ml，一日1-2次。
Claims (7)
1、薯蓣皂苷在制备用于治疗和预防高血脂症药物中的应用。
2、如权利要求1中所述的应用，其特征在于治疗和预防高血脂症是指抑制胆固醇吸收或降低总胆固醇、甘油三酯、低密度蛋白质含量。
3、薯蓣皂苷在制备用于抗血栓作用药物中的应用。
4、如权利要求3中所述的应用，其特征在于抗血栓作用是指抑制血栓的形成，降低血栓的重量或缩短血栓的长度。
5、如权利要求3中所述的应用，其特征在于抗血栓作用是指降低全血比粘度。
6、薯蓣皂苷在制备用于抗心肌缺血药物中的应用。
7、如权利要求6中所述的应用，其特征在于抗心肌缺血是指降低乳酸脱氢酶、磷酸肌酸激酶或心肌组织中丙二醛含量。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100572553C (zh) * | 2006-09-14 | 2009-12-23 | 中国科学院武汉植物园 | 用薯蓣皂苷青霉菌制备薯蓣皂素的方法 |
| CN100451097C (zh) * | 2006-12-07 | 2009-01-14 | 云南省微生物研究所 | 黑曲霉 |
| CN101358234B (zh) * | 2008-08-02 | 2011-06-22 | 江苏省中国科学院植物研究所 | 中药粉萆薢主要混淆基原叉蕊薯蓣鉴定ISSR-SCARs标记 |
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