WO2022172994A1 - オリゴヌクレオチドの製造方法 - Google Patents

オリゴヌクレオチドの製造方法 Download PDF

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WO2022172994A1
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optionally substituted
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formula
ring
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敦彦 早川
泰介 市丸
聡 井上
大輔 高橋
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味の素株式会社
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
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    • C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
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    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Definitions

  • the present invention relates to a method for producing oligonucleotides.
  • the phosphoramidite method and the H-phosphonate method are widely used as methods for producing oligonucleotides.
  • a phosphoramidite (compound (1)) and a nucleoside (compound (2)) are condensed to have a phosphite ester bond.
  • An oligonucleotide (compound (4)) is obtained by synthesizing an oligonucleotide precursor (compound (3)) and then oxidizing the oligonucleotide precursor.
  • the "compound represented by formula (1)" may be abbreviated as "compound (1)”.
  • Compounds represented by other formulas, groups represented by other formulas, etc. may also be abbreviated.
  • DMTr represents a 4,4'-dimethoxytrityl group
  • i-Pr represents an isopropyl group
  • CE represents a 2-cyanoethyl group
  • Base and Base' represent an optionally protected nucleobase.
  • R represents a protecting group or solid support.
  • nucleosides instead of nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (for example, oligonucleotides having a thiophosphate ester bond) may be condensed. Further, in the phosphoramidite method, instead of oxidizing the oligonucleotide precursor, sulfuration of the oligonucleotide precursor may be performed.
  • H-phosphonate (compound (5)) and pivaloyl chloride (PivCl) are reacted to form an activated H-phosphonate (compound ( 6)), condensing it with a nucleoside (compound (7)) to synthesize an oligonucleotide precursor having a phosphonate ester bond (compound (8)), and then oxidizing the oligonucleotide precursor An oligonucleotide (compound (9)) is obtained by doing so.
  • DMTr represents 4,4′-dimethoxytrityl
  • N(Et) 3 represents triethylamine
  • Base and Base′ represent an optionally protected nucleobase
  • Piv represents a pivaloyl group
  • R represents a protecting group or solid support.
  • nucleosides instead of nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (for example, oligonucleotides with thiophosphate ester bonds) may be condensed. Also, in the H-phosphonate method, instead of oxidizing the oligonucleotide precursor, sulfuration of the oligonucleotide precursor may be performed.
  • H-phosphonate (compound 1) and nucleoside (compound 2) are synthesized in the presence of a large amount of triphenylphosphine and a large amount of 2,2'-dipyridyl disulfide, as shown by the following formula. is disclosed to condense and oxidize to produce a dinucleotide (compound 4).
  • DMTr represents 4,4′-dimethoxytrityl
  • Th represents a thymine base
  • PPh 3 represents a triphenylphosphine
  • Ac represents an acetyl group.
  • Non-Patent Document 2 and Patent Document 1 do not disclose a method for producing an oligonucleotide
  • benzoisothiazolone is produced by triethyl phosphite (P(OEt) 3 ) as represented by the following formula. ) derivative (compound 1) (in other words, oxidation of triethyl phosphite (P(OEt) 3 ) by the benzisothiazolone derivative (compound 1) to give triethyl phosphate (O ⁇ P(OEt) 3 ).
  • forming is disclosed.
  • iodine is widely used as an oxidizing agent for oxidizing an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond (for example, the compound represented by formula (3) above).
  • iodine is widely used as an oxidizing agent for oxidizing an oligonucleotide precursor having a phosphonate ester bond (for example, the compound represented by the above formula (8)).
  • the present inventors have found that when iodine is used as an oxidizing agent for oligonucleotide precursors with phosphite linkages, the phosphite linkage sites of the precursors interact with the oxidizing agent to decompose. It was found that a by-product formed by In addition to phosphite or phosphonate linkages, oxidation of oligonucleotide precursors having thiophosphate linkages with iodine converts the thiophosphate linkages to phosphate linkages, forming It was found that a by-product (hereinafter sometimes referred to as "desulfurized product”) is generated.
  • the present invention has been made in view of the circumstances described above, and an object of the present invention is to provide an oligonucleotide capable of suppressing the formation of the above-mentioned deletion product or desulfurization product compared to the case of using iodine. It is to provide a manufacturing method.
  • a method for producing an oligonucleotide having a phosphate ester bond by oxidizing an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond or a phosphonate ester bond with an oxidizing agent comprising:
  • the oxidizing agent has the formula (I):
  • R 1a represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group
  • Ring A represents a 5- or 6-membered unsaturated heterocyclic ring
  • m represents an integer of 0 to 3
  • m R 2a each independently represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group, and when m is an integer of 2 or more, adjacent Two R 2a 's may form an optionally substituted condensed ring together with ring A.
  • R 1b represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group
  • Ring B represents a 6-membered aromatic hydrocarbon ring or a 5- or 6-membered aromatic heterocycle
  • n represents an integer of 0 to 5
  • Each of the n R 2b independently represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group, and when n is an integer of 2 or more, adjacent Two R 2b 's may form an optionally substituted bicyclic condensed aromatic heterocyclic ring together with ring B.
  • a compound represented by (excluding 2,2-dipyridyl disulfide) The method according to [1] above.
  • R 1c represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group
  • p represents 0 or 1
  • R 2c represents a hydrogen atom, an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group
  • Ring C represents a 6-membered aromatic hydrocarbon ring, a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocyclic ring, or a 10-membered bicyclic condensed aromatic heterocyclic ring containing a nitrogen atom
  • q represents an integer of 0 to 4
  • q R 3c each independently represent an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group.
  • the compound represented by the formula (Ic) is 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one, 2-isopropylisothiazolo[5,4-b]pyridine- 3(2H)-one, 2-isopropylisothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one, 2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-phenyl-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 2-(2,6-dimethylphenyl)-5-nitro-1,2-benzothiazol-3(2H)-one , 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-(4-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H) -one, 2-[1-methyl-1-(2-pyridyl)ethyl
  • the compound represented by formula (Ic) is 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one, 2-isopropylisothiazolo[5,4-b]pyridine- 3(2H)-one, 2-isopropylisothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one, 2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-phenyl-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 2-(2,6-dimethylphenyl)-5-nitro-1,2-benzothiazol-3(2H)-one , 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H
  • the compound represented by the formula (Ib) is 2,2'-dibenzothiazolyl disulfide, 2-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid, 3-(2-benzothiazolyldithio ) propanoic acid, 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide, 2,2′-dibenzoxazolyl disulfide, 5,5′-di(1,2,3-triazolyl) disulfide, 5,5′-dithiobis(1- phenyl-1H-tetrazole), 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide), 4,4′-dipyridyl disulfide, 3-(2-pyridyldithio)propanoic acid, 2,2′-dithiobis(1H-imidazole ), and 2,2′-dithiobis(1-methyl-1H-imidazole).
  • an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond or a phosphonate ester bond (1) an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensation of a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide with a phosphoramidized nucleoside, nucleotide or oligonucleotide; or (2) an oligonucleotide and , which is an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensation with a phosphoramidite, the method according to any one of [1] to [9].
  • a method for producing an oligonucleotide by one-pot synthesis comprising: The one-pot synthesis is In a solution containing a non-polar solvent, a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) having a hydrophobic protecting group, a hydroxyl group protected with a temporary protecting group removable under acidic conditions, and phosphoramidated Further, an oligo which is condensed with a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) and has a phosphite ester bond and a hydrophobic protecting group and the hydroxyl group is protected by a temporary protecting group removable under acidic conditions step (1) of forming a nucleotide precursor (c); A quenching agent (i) for the phosphoramidated nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) is added to the solution after step (1) to quench the phosphoramidated nucleoside,
  • step (3) of forming an oligonucleotide (d) protected with a temporary protecting group step (4) of adding a quenching agent (ii) for the oxidizing agent to the solution after step (3) to quench the oxidizing agent; adding an acid to the solution after step (4) to remove the temporary protecting group removable under acidic conditions of the oligonucleotide (d), resulting in an oligonucleotide having an unprotected hydroxyl group and a hydrophobic protecting group;
  • R 1a represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group
  • Ring A represents a 5- or 6-membered unsaturated heterocyclic ring
  • m represents an integer of 0 to 3
  • m R 2a each independently represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group, and when m is an integer of 2 or more, adjacent Two R 2a 's may form an optionally substituted condensed ring together with ring A.
  • R 1b represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group
  • Ring B represents a 6-membered aromatic hydrocarbon ring or a 5- or 6-membered aromatic heterocycle
  • n represents an integer of 0 to 5
  • Each of the n R 2b independently represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group, and when n is an integer of 2 or more, adjacent Two R 2b 's may form an optionally substituted bicyclic condensed aromatic heterocyclic ring together with ring B.
  • a compound represented by (excluding 2,2-dipyridyl disulfide) The method according to [12] above.
  • R 1c represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group
  • p represents 0 or 1
  • R 2c represents a hydrogen atom, an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group
  • Ring C represents a 6-membered aromatic hydrocarbon ring, a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocyclic ring, or a 10-membered bicyclic condensed aromatic heterocyclic ring containing a nitrogen atom
  • q represents an integer of 0 to 4
  • q R 3c each independently represent an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group.
  • the compound represented by the formula (Ic) is 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one, 2-isopropylisothiazolo[5,4-b]pyridine- 3(2H)-one, 2-isopropylisothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one, 2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-phenyl-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 2-(2,6-dimethylphenyl)-5-nitro-1,2-benzothiazol-3(2H)-one , 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-(4-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H) -one, 2-[1-methyl-1-(2-pyridyl)ethyl
  • the compound represented by formula (Ic) is 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one, 2-isopropylisothiazolo[5,4-b]pyridine- 3(2H)-one, 2-isopropylisothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one, 2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-phenyl-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 2-(2,6-dimethylphenyl)-5-nitro-1,2-benzothiazol-3(2H)-one , 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one, 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H
  • the compound represented by the formula (Ib) is 2,2'-dibenzothiazolyl disulfide, 2-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid, 3-(2-benzothiazolyldithio ) propanoic acid, 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide, 2,2′-dibenzoxazolyl disulfide, 5,5′-di(1,2,3-triazolyl) disulfide, 5,5′-dithiobis(1- phenyl-1H-tetrazole), 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide), 4,4′-dipyridyl disulfide, 3-(2-pyridyldithio)propanoic acid, 2,2′-dithiobis(1H-imidazole ), and 2,2′-dithiobis(1-methyl-1H-imidazole).
  • the quenching agent (ii) is an organophosphorus compound.
  • the organic phosphorus compound is at least one selected from the group consisting of phosphines, phosphite triesters, phosphite esters, phosphonite diesters and phosphinate esters. .
  • the organic phosphorus compound is a phosphine.
  • the one-pot synthesis further comprises step (6) of adding a base to the solution after step (5) after step (5) and before step (7), above [12] to [24 ]
  • step (6) of adding a base to the solution after step (5) after step (5) and before step (7), above [12] to [24 ] The method according to any one of
  • oligonucleotide precursor (c) is an oligonucleotide precursor having a thiophosphate ester bond in addition to a phosphite ester bond the method of.
  • R 1n represents an optionally substituted phenyl group
  • p′ represents 0, ring C′′ represents a 10-membered bicyclic condensed aromatic heterocycle containing a nitrogen atom
  • q ' indicates 0, or
  • R 1n represents an optionally substituted phenyl group
  • p′ represents 0, ring C′′ represents a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocycle
  • q′ represents 1
  • R 3n represents a C 1-6 perfluoroalkyl group
  • R 1n represents an optionally substituted phenyl group
  • p′ represents 1, ring C′′ represents a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocycle
  • q′ represents 0, or
  • R 1n represents a pyridyl group substituted with one C 1-6 alkyl group
  • p′ represents 0, ring C′′ represents a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocyclic ring
  • q ' indicates 0.
  • the compound represented by the formula (In) is 2-phenylisothiazolo[5,4-b]quinolin-3(2H)-one, 2-phenyl-5-trifluoromethylisothiazolo[5, 4-b]pyridin-3(2H)-one, 2-phenyl-2H-1,2-benzothiazin-3(4H)-one, or 2-(4-methyl-2-pyridinyl)isothiazolo[5,4- b]
  • the compound according to the above [27] which is pyridin-3(2H)-one.
  • oligonucleotides by suppressing the production of the above-mentioned deletion products or desulfurization products compared to the case of using iodine.
  • C ab means having a carbon number of a or more and b or less (a and b are integers).
  • halogen atom means a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom or an iodine atom.
  • hydrocarbon group includes, for example, an aliphatic hydrocarbon group, an araliphatic hydrocarbon group, a monocyclic saturated hydrocarbon group, an aromatic hydrocarbon group, and the like. includes monovalent groups and divalent groups such as alkyl groups, alkenyl groups, alkynyl groups, cycloalkyl groups, aryl groups, aralkyl groups and alkylene groups.
  • alkyl (group) may be linear or branched.
  • Alkyl (group) includes an alkyl group having 1 or more carbon atoms, preferably a C 1-10 alkyl group, more preferably a C 1-6 if there is no particular limitation on the carbon number range. is an alkyl group. Specific examples include methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, hexyl and the like.
  • alkenyl (group) may be linear or branched.
  • Alkenyl (group) includes, for example, a C 2-6 alkenyl group and the like. Specific examples include vinyl, 1-propenyl, allyl, isopropenyl, butenyl, isobutenyl and the like.
  • alkynyl (group) may be linear or branched.
  • Alkynyl (group) includes, for example, a C 2-6 alkynyl group and the like. Specific examples include ethynyl, 1-propynyl, 2-propynyl, 1-butynyl, 2-butynyl, 3-butynyl, 1-pentynyl, 2-pentynyl, 3-pentynyl, 4-pentynyl, 1-hexynyl, 2- Hexynyl, 3-hexynyl, 4-hexynyl, 5-hexynyl and the like.
  • cycloalkyl (group) means a cyclic alkyl group, and includes, for example, a C 3-8 cycloalkyl group, preferably a C 3-6 cycloalkyl group. Specific examples thereof include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, cyclooctyl and the like.
  • aryl (group) means a monocyclic or polycyclic (condensed) aromatic hydrocarbon group, such as phenyl, 1-naphthyl, 2-naphthyl, biphenylyl, 1-anthryl and C 6-14 aryl groups such as , 2-anthryl and the like. Among them, a C 6-10 aryl group is more preferred, and phenyl is particularly preferred.
  • heteroaryl refers to a monocyclic or polycyclic (condensed) aromatic ring containing heteroatoms selected from nitrogen, sulfur and oxygen atoms in addition to carbon atoms. group heterocyclic group.
  • Heteroaryl groups include, for example, 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl groups and 8- to 14-membered fused polycyclic heteroaryl groups.
  • heteroaryl includes, for example, thienyl, furyl, pyrrolyl, imidazolyl, pyrazolyl, thiazolyl, isothiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, pyridyl, (pyridine-N- oxid)-yl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, 1,2,4-thiadiazolyl, 1,3,4-thiadiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, triazinyl, etc. mentioned.
  • the "heteroaryl group” includes a (pyridin-N-oxide)-yl group represented by the following formula (where * indicates the bonding position).
  • the "5- or 6-membered monocyclic nitrogen-containing heteroaryl (group)” includes, for example, the above-mentioned “5- or 6-membered monocyclic heteroaryl (group)” Examples include those containing at least one or more nitrogen atoms as atoms.
  • 8- to 14-membered condensed polycyclic heteroaryl includes, for example, benzothiophenyl, benzofuranyl, benzimidazolyl, benzoxazolyl, benzisoxazolyl, benzothiazolyl, benzisothiazolyl, ryl, benzotriazolyl, imidazopyridinyl, thienopyridinyl, furopyridinyl, pyrrolopyridinyl, pyrazolopyridinyl, oxazolopyridinyl, thiazolopyridinyl, imidazopyrazinyl, imidazopyrimidinyl, thienopyrimidinyl, furopyrimidinyl, pyrrolopyrimidinyl, pyrazolopyrimidinyl, oxazolopyrimidinyl, thiazolopyrimidinyl, pyrazolotriazinyl,
  • the "8- to 14-membered condensed polycyclic nitrogen-containing heteroaryl (group)” includes, for example, the aforementioned “8- to 14-membered condensed polycyclic heteroaryl (group)", Examples include those containing at least one or more nitrogen atoms as ring-constituting atoms.
  • aralkyl (group) includes C 7-20 aralkyl groups, preferably C 7-16 aralkyl groups (C 6-10 aryl-C 1-6 alkyl groups). Specific examples thereof include benzyl, 1-phenylethyl, 2-phenylethyl, 1-phenylpropyl, naphthylmethyl, 1-naphthylethyl, 1-naphthylpropyl and the like.
  • alkylene (group) may be linear or branched.
  • the “alkylene (group)” includes an alkylene group having 1 or more carbon atoms, preferably a C 1-10 alkylene group, more preferably a C 1-6 alkylene group, unless the carbon number range is particularly limited. It is an alkylene group. Specific examples include methylene, ethylene, propylene, butylene, pentylene and hexylene.
  • alkoxy (group) may be linear or branched.
  • Alkoxy (group) includes an alkoxy group having 1 or more carbon atoms, preferably a C 1-10 alkoxy group, more preferably a C 1-6 alkoxy group when there is no particular limitation on the carbon number range. It is an alkoxy group. Specific examples thereof include methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, isobutoxy, sec-butoxy, tert-butoxy, pentyloxy, hexyloxy and the like.
  • acyl (group) may be linear or branched.
  • Examples of “acyl (group)” include C 1-6 alkanoyl group, C 7-13 aroyl group and the like.
  • Specific examples of “acyl (group)” include formyl, acetyl, n-propionyl, isopropionyl, n-butyryl, isobutyryl, pivaloyl, valeryl, hexanoyl, benzoyl, naphthoyl, levulinyl and the like.
  • “Acyl (group)” may be substituted.
  • the term "6-membered aromatic hydrocarbon ring” means a benzene ring.
  • the "6-membered aromatic hydrocarbon ring” forms part of the condensed ring
  • the "6-membered aromatic hydrocarbon ring” means a benzene ring forming part of the condensed ring. do.
  • 5- or 6-membered aromatic heterocyclic ring includes, for example, thiophene ring, furan ring, 1H-pyrrole ring, imidazole ring, pyrazole ring, thiazole ring, isothiazole ring, oxazole ring, isoxazole ring, 1,2,4-oxadiazole ring, 1,3,4-oxadiazole ring, 1,2,4-thiadiazole ring, 1,3,4-thiadiazole ring, triazole ring, tetrazole ring, pyridine ring , pyridine-N-oxide ring, pyrazine ring, pyrimidine ring, pyridazine ring, triazine ring and the like.
  • aromatic heterocycle includes pyridine-N-oxide ring.
  • the "4- to 8-membered nitrogen-containing heterocyclic ring” includes, for example, azetidine ring, pyrrolidine ring, pyrroline ring, 2H-pyrrole ring, piperidine ring, piperazine ring, azacycloheptane ring, azacyclooctane ring , 1H-pyrrole ring, imidazole ring, pyrazole ring, thiazole ring, isothiazole ring, oxazole ring, isoxazole ring, 1,2,4-oxadiazole ring, 1,3,4-oxadiazole ring, 1, 2,4-thiadiazole ring, 1,3,4-thiadiazole ring, triazole ring, tetrazole ring, pyridine ring, pyridine-N-oxide ring, pyrazine ring, pyrimidine ring, pyridazine ring, tria
  • the "5- or 6-membered nitrogen-containing heterocyclic ring” includes, for example, the above-mentioned “4- to 8-membered nitrogen-containing heterocyclic ring” having 5 or 6 ring-constituting atoms. be done.
  • the "6-membered nitrogen-containing aromatic heterocyclic ring” includes, for example, pyridine ring, pyridine-N-oxide ring, pyrazine ring, pyrimidine ring, pyridazine ring, triazine ring and the like.
  • the "bicyclic condensed nitrogen-containing heterocyclic ring” includes, for example, pyrrolidine ring, decahydroisoquinoline ring, decahydroquinoline ring, benzothiophene ring, benzofuran ring, isobenzofuran ring, benzimidazole ring, benzo oxazole ring, benzisoxazole ring, benzothiazole ring, benzisothiazole ring, benzotriazole ring, indole ring, isoindole ring, 1H-indazole ring, purine ring, isoquinoline ring, 5,6,7,8-tetrahydro isoquinoline ring, quinoline ring, 5,6,7,8-tetrahydroquinoline ring, phthalazine ring, pteridine ring, naphthyridine ring, quinoxaline ring, quinazoline ring, cinn
  • the "bicyclic condensed aromatic heterocyclic ring” includes, for example, a benzothiophene ring, a benzofuran ring, an isobenzofuran ring, a benzimidazole ring, a benzoxazole ring, a benzisoxazole ring, a benzothiazole ring, a benzo isothiazole ring, benzotriazole ring, indole ring, isoindole ring, 1H-indazole ring, purine ring, isoquinoline ring, 5,6,7,8-tetrahydroisoquinoline ring, quinoline ring, 5,6,7,8 -tetrahydroquinoline ring, phthalazine ring, pteridine ring, naphthyridine ring, quinoxaline ring, quinazoline ring, cinnoline ring and the like.
  • the "bicyclic condensed aromatic heterocycle” includes one ring that is an aromatic heterocycle and the other ring that is a non-aromatic heterocyclic ring or a non-aromatic hydrocarbon ring. Also included are certain bicyclic fused rings (eg, 5,6,7,8-tetrahydroisoquinoline rings).
  • the "nitrogen atom-containing 10-membered bicyclic condensed aromatic heterocycle” includes, for example, 5,6,7,8-tetrahydroisoquinoline ring, quinoline ring and the like.
  • a perchloroalkyl group e.g., trichlor
  • a "perchloroalkyl group” means an alkyl group in which all hydrogen atoms are substituted with chlorine atoms.
  • perfluoroalkyl group means an alkyl group in which all hydrogen atoms are substituted with fluorine atoms.
  • the "substituent” includes, for example, the above-mentioned halogen atom, alkyl group, aralkyl group, alkoxy group, acyl group, alkenyl group, alkynyl group, cycloalkyl group, aryl group, hydroxyl group, nitro cyano group, guanidyl group, carboxy group, alkoxycarbonyl group (the alkoxy moiety is the same as the alkoxy group), sulfo group, phospho group, alkylsulfanyl group (the alkyl moiety is the same as the alkyl group), alkylsulfinyl group (alkyl part is the same as the alkyl group), alkylsulfonyl group (the alkyl part is the same as the alkyl group), amino group, monoalkylamino group (the alkyl part is the same as the alkyl group), dialkylamino group (the alkyl part is the
  • the "hydroxyl-protecting group” is not particularly limited, and known protecting groups can be used.
  • the protecting group include methyl group, benzyl group, p-methoxybenzyl group, tert-butyl group, methoxymethyl group, 2-methoxyethyl group, 2-tetrahydropyranyl group, 2-ethoxyethyl group, 2- Cyanoethyl group, (2-cyanoethoxy)methyl group, 1-(2-cyanoethoxy)ethyl group, bis(2-acetoxyethoxy)methyl (ACE) group, (2-nitrobenzyl)oxymethyl (NBOM) group, ( 2-(trimethylsilyl)ethoxy)methyl (SEM) group, 1-(2-cyanoethoxy)ethyl group, 2-((4-methylphenyl)sulfonyl)ethoxymethyl (TEM) group, tert-butyldithiomethyl (DTM) group, ((2-(methylthio)phenyl-N
  • the "temporary protecting group for a hydroxyl group removable under acidic conditions” includes, for example, a trityl group, a 9-phenyl-9-xanthenyl group, a 9-phenyl-9-thioxanthenyl group, a 1,1-bis (4-Methoxyphenyl) -1-phenylmethyl group (herein sometimes referred to as “4,4'-dimethoxytrityl group”) and other bis (C 1-6 alkoxy) trityl groups, 1-( and mono(C 1-18 alkoxy)trityl groups such as 4-methoxyphenyl)-1,1-diphenylmethyl group (which may be referred to as “4-monomethoxytrityl group” in this specification).
  • the temporary protective group is preferably 4,4'-dimethoxytrityl group or 4-monomethoxytrityl group, more preferably 4,4'-dimethoxytr
  • the "amino-protecting group” is not particularly limited, and known protecting groups can be used.
  • the protecting group include pivaloyl group, pivaloyloxymethyl group, acetyl group, trifluoroacetyl group, phenoxyacetyl group, 4-isopropylphenoxyacetyl group, 4-tert-butylphenoxyacetyl group, benzoyl group and isobutyryl group.
  • (2-hexyl)decanoyl group dimethylformamidinyl group, 1-(dimethylamino)ethylidene group, and 9-fluorenylmethyloxycarbonyl group.
  • protecting group for a phosphate group is not particularly limited, and known protecting groups can be used.
  • Phosphate protecting groups include, for example: 2-cyanoethyl group represented by the following formula (Pg-1), 2-[2-(4,4′-dimethoxytrityloxy)ethylsulfonyl]ethyl group represented by the following formula (Pg-2), [3-(4,4′-dimethoxytrityloxy)-2,2-di(ethoxycarbonyl)]propyl group represented by the following formula (Pg-3), [3-(4,4'-dimethoxytrityloxy)-2,2-di(N-methylcarbamoyl)]propyl group represented by the following formula (Pg-4).
  • the phosphate group-protecting group is preferably a 2-cyanoethyl group.
  • Me represents a methyl group
  • Et represents an ethyl group
  • DMTr represents a 4,4'-dimethoxytrityl group
  • * represents a bonding position with a phosphate group.
  • hydrophobic protecting group for example, a protecting group described as “anchor” in WO 2017/104836 can be used.
  • the hydrophobic protecting group is preferably a protecting group represented by the following formula (Pg-5): **L-Y-Z (Pg-5) [In the formula, ** indicates the position of attachment to the group to be protected; L is a single bond, or formula (Pg-i-1) or (Pg-i-2):
  • R 1p and R 2p each independently represent a C 1-22 hydrocarbon group
  • L 1 represents an optionally substituted divalent C 1-22 hydrocarbon group, and —CH 2 — in the divalent C 1-22 hydrocarbon group may be replaced with a linker
  • R 4p represents a C 1-22 alkylene group
  • R 3p and R 5p each independently represent a hydrogen atom or a C 1 -22 alkyl group, or R 3p and R 5p together may form a ring).
  • Y represents a single bond, an oxygen atom, or NR (R represents a hydrogen atom, an alkyl group or an aralkyl group); and Z represents formulas (Pg-ii-1) to formulas (Pg-ii-5 ) either:
  • Ring A' represents a benzene ring
  • Ring B' represents a cyclohexane ring
  • Ring D' represents a naphthalene ring or a bicyclic condensed aromatic heterocycle
  • R 6p is a hydrogen atom, or when R b is a group represented by the following formula ( Pg -iii), R 6p of ring A' or ring B' is may represent a single bond or -O- to form a condensed ring together with ring A' or ring B' and ring C'
  • k represents an integer of 1 to 4
  • Ring C' represents a benzene ring: j represents an integer from 0 to 4; j Q are each independently as defined above; j R 9p each independently represents a hydrocarbon group in which a linear aliphatic hydrocarbon group having 10 or more carbon atoms is bonded via a single bond or a linker; R 8p represents a hydrogen atom, or represents a single bond or -O- together with R 6p of ring A' or ring B' to form a condensed ring together with ring A' or ring B' and ring C' may form Ring C' is, in addition to j QR 9p , a halogen atom, a C 1-6 alkyl group optionally substituted with a halogen atom, and a C 1-6 alkoxy group optionally substituted with a halogen atom It may have a substituent selected from the group consisting of ), or R a and R b together form an oxo group;
  • ring A', ring C', R6p and R8p form a condensed ring
  • ring A' and ring C' each represent a benzene ring portion in the condensed ring.
  • ring B', ring C', R 6p and R 8p form a condensed ring
  • ring C' represents a benzene ring moiety in the condensed ring
  • ring B' represents a cyclohexane ring moiety in the condensed ring.
  • the linear aliphatic hydrocarbon group having 10 or more carbon atoms is preferably a group selected from a linear C 10-40 alkyl group and a linear C 10-40 alkenyl group, more preferably linear C 10-40 alkyl group, more preferably linear C 10-30 alkyl group, particularly preferably linear C 12-28 alkyl group, most preferably linear is a C 14-26 alkyl group.
  • hydrocarbon group in which a linear aliphatic hydrocarbon group having 10 or more carbon atoms is bonded via a single bond or a linker is preferably a linear C 10-40 alkyl group, 1 to 3 benzyl group in which a linear C 10-40 alkyl group is bonded via —O—, or cyclohexylmethyl in which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are bonded via —O— is the base.
  • L 1 is a divalent C 1-22 hydrocarbon group; and L 2 is a single bond.
  • L 1 is an ethylene group
  • L 1 is an ethylene group
  • L 1 is an ethylene group
  • L 1 is an optionally substituted phenylene group
  • L represented by formula (Pg-i-1) is particularly preferably a succinyl group.
  • L represented by formula (Pg-i-2) in formula (Pg-5) will be described.
  • L 1 in formula (Pg-i-2) is preferably a divalent C 6-10 aromatic hydrocarbon group, more preferably a phenylene group.
  • L 2 in formula (Pg-i-2) is preferably a single bond.
  • a preferred combination of L 1 and L 2 in formula (Pg-i-2) is a combination in which L 1 is a divalent C 6-10 aromatic hydrocarbon group and L 2 is a single bond.
  • a more preferred combination of L 1 and L 2 in formula (Pg-i-2) is a combination in which L 1 is a phenylene group and L 2 is a single bond.
  • R 1p and R 2p in formula (Pg-i-2) are each independently preferably a C 1-22 alkyl group, more preferably a C 1-10 alkyl group.
  • a preferred embodiment of L represented by formula (Pg-i-2) is R 1p and R 2p are each independently a C 1-22 alkyl group; L 1 is a divalent C 6-10 aromatic hydrocarbon group; and L 2 is a group that is a single bond.
  • R 1p and R 2p are each independently a C 1-10 alkyl group; L 1 is a phenylene group; and L 2 is a group that is a single bond.
  • R is preferably a hydrogen atom, a C 1-6 alkyl group or a C 7-16 aralkyl group, more preferably a hydrogen atom, methyl, ethyl or It is benzyl, more preferably a hydrogen atom.
  • Y is preferably a single bond, an oxygen atom or NR, more preferably a single bond or an oxygen atom.
  • R 6p is preferably a hydrogen atom.
  • R a and R b are preferably hydrogen atoms or together form an oxo group.
  • a preferred embodiment of Z represented by formula (Pg-ii-1) is R a and R b are hydrogen atoms; R 6p is a hydrogen atom; k is an integer from 1 to 3; the k Q's are —O—; and the k R 7p 's are each independently a linear C 10-40 alkyl group, is the base.
  • R a and R b are hydrogen atoms;
  • R 6p is a hydrogen atom;
  • k is an integer from 1 to 3;
  • k Q are —O—;
  • k R 7p are each independently a benzyl group to which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are bonded via —O— , or a cyclohexylmethyl group in which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are linked via —O—, is the base.
  • R a is a hydrogen atom
  • R 6p is a hydrogen atom
  • k is an integer from 1 to 3
  • k R 7p are each independently a linear C 10-40 alkyl group
  • R b is of formula (Pg-iii) (formula in which * is a binding position, j is an integer of 0 to 3, j Qs are -O-, and j R 9p are each independently a linear C 10- 40 is an alkyl group
  • R 8p is a hydrogen atom. is the base.
  • R a is a hydrogen atom
  • k is an integer from 1 to 3
  • k R 7p are each independently a linear C 10-40 alkyl group
  • R b is of formula (Pg-iii) (formula in which * is a binding position, j is an integer of 0 to 3, j Qs are -O-, and j R 9p are each independently a linear C 10- 40 alkyl group, and R 8p represents a single bond or -O- together with R 6p to form a condensed ring with ring A' and ring C'.)
  • R 8p represents a single bond or -O- together with R 6p to form a condensed ring with ring A' and ring C'.
  • Z represented by formula (Pg-ii-1) is R a and R b together form an oxo group; R 6p is a hydrogen atom; k is an integer from 1 to 3; the k Q's are —O—; and the k R 7p 's are each independently a linear C 10-40 alkyl group, is the base.
  • Z represented by formula (Pg-ii-1) is R a and R b together form an oxo group;
  • R 6p is a hydrogen atom;
  • k is an integer from 1 to 3;
  • k number of Q is -O-;
  • k R 7p are each independently a benzyl group in which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are bonded via —O—, or 1 to 3 linear C 10 -40 alkyl group is a cyclohexylmethyl group bonded via -O-, is the base.
  • a preferred embodiment of Z represented by formula (Pg-ii-2) is R 6p is a hydrogen atom; k is an integer from 1 to 3; k Q are —O—; and k R 7p are each independently a linear C 10-40 alkyl group, 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups is a benzyl group bonded via -O-, or a cyclohexylmethyl group bonded via -O- with 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups, is the base.
  • R 6p is preferably a hydrogen atom.
  • R a and R b are preferably hydrogen atoms or together form an oxo group.
  • a preferred embodiment of Z represented by formula (Pg-ii-3) is R a and R b are hydrogen atoms; R 6p is a hydrogen atom; k is an integer from 1 to 3; the k Q's are —O—; and the k R 7p 's are each independently a linear C 10-40 alkyl group, is the base.
  • R a and R b are hydrogen atoms;
  • R 6p is a hydrogen atom;
  • k is an integer from 1 to 3;
  • k Q are —O—;
  • k R 7p are each independently a benzyl group to which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are bonded via —O— , or a cyclohexylmethyl group in which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are linked via —O—, is the base.
  • R a is a hydrogen atom
  • R 6p is a hydrogen atom
  • k is an integer from 1 to 3
  • k R 7p are each independently a linear C 10-40 alkyl group
  • R b is of formula (Pg-iii) (formula in which * is a binding position, j is an integer of 0 to 3, j Qs are -O-, and j R 9p are each independently a linear C 10- 40 is an alkyl group
  • R 8p is a hydrogen atom. is the base.
  • R a is a hydrogen atom; k is an integer from 1 to 3; and k R 7p are each independently a linear C 10-40 alkyl group; and R b is of formula (Pg-iii) (formula in which * is a binding position, j is an integer of 0 to 3, j Qs are -O-, and j R 9p are each independently a linear C 10- 40 alkyl group, and R 8p represents a single bond or -O- together with R 6p to form a condensed ring with ring B' and ring C'). , is the base.
  • R a and R b together form an oxo group
  • R 6p is a hydrogen atom
  • k is an integer from 1 to 3
  • the k Q's are —O—
  • the k R 7p 's are each independently a linear C 10-40 alkyl group, is the base.
  • R a and R b together form an oxo group
  • R 6p is a hydrogen atom
  • k is an integer from 1 to 3
  • k number of Q is -O-
  • k R 7p are each independently a benzyl group in which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are bonded via —O—, or 1 to 3 linear C 10 -40 alkyl group is a cyclohexylmethyl group bonded via -O-, is the base.
  • a preferred embodiment of Z represented by formula (Pg-ii-4) is Ring D' is a naphthalene ring; R a and R b are hydrogen atoms; k is an integer from 1 to 3; k Q′ are —O—; and k R 7p are each independently a linear C 10-40 alkyl group, 1 to 3 linear C 10-40 alkyl the group is a benzyl group linked via -O-, or a cyclohexylmethyl group linked via -O- with 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups, is the base.
  • Z represented by formula (Pg-ii-4) is ring D' is an indole ring; R a and R b are hydrogen atoms; k is 1; Q′ is a single bond; and R 7p is a linear C 10-40 alkyl group, benzyl in which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are bonded via —O— or a cyclohexylmethyl group to which 1 to 3 linear C 10-40 alkyl groups are attached via —O—; and R 7p is a group attached to the nitrogen atom of the indole ring be.
  • a preferred embodiment of Z represented by formula (Pg-ii-5) is u is 1 or 2; and R 10p is a C 4-10 perfluoroalkyl group.
  • Z is preferably a group represented by formula (Pg-ii-1), formula (Pg-ii-2) or formula (Pg-ii-3).
  • the protecting group (Pg-5) is preferably L is a succinyl group or a group represented by formula (Pg-i-2) (wherein R 1p and R 2p are each independently C 1-10 alkyl L 1 is a divalent phenylene group, and L 2 is a single bond.), and YZ is a 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzyloxy group, 3,5-bis(docosyloxy)benzyloxy group, 3,5-bis[3′,4′,5′-tris(octadecyloxy)benzyloxy]benzyloxy group, 3,4,5-tris[3′, 4′,5′-tris(octadecyloxy)benzyloxy]benzyloxy group, 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzylamino group, 2,4-bis(docosyloxy)benzylamino group, 3,5-bis (docosyloxy)benzylamino group
  • the protecting group (Pg-5) is more preferably L is a succinyl group, and YZ is a 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzyloxy group, a 3,5-bis(docosyloxy)benzyloxy group, 3,5-bis[3′, 4′,5′-tris(octadecyloxy)benzyloxy]benzyloxy group, 3,4,5-tris[3′,4′,5′-tris(octadecyloxy)benzyloxy]benzyloxy group, 3,4 , 5-tris(octadecyloxy)benzylamino group, 2,4-bis(docosyloxy)benzylamino group, 3,5-bis(docosyloxy)benzylamino group, bis(4-docosyloxyphenyl)methylamino group, 4 -Methoxy-2-[3',4',5'-tris(octadecyloxy
  • the protecting group (Pg-5) is more preferably L is a succinyl group, and YZ is a 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzyloxy group, a 3,4,5-tris(octadecyloxy)cyclohexylmethyloxy group, 3,5-bis (docosyloxy)cyclohexylmethyloxy group, 3,5-bis[3',4',5'-tris(octadecyloxy)cyclohexylmethyloxy]cyclohexylmethyloxy group, 3,4,5-tris[3',4' ,5′-tris(octadecyloxy)cyclohexylmethyloxy]cyclohexylmethyloxy group, 3,4,5-tris(octadecyloxy)cyclohexylmethylamino group, 2,4-bis(docosyloxy)cyclohexylmethylamino group, 3,5 -bis(docosyloxy)
  • the protecting group (Pg-5) is particularly preferably L is a succinyl group, and YZ is a 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzyloxy group, a 3,4,5-tris(octadecyloxy)cyclohexylmethyloxy group or a phenyl(2,3 ,4-tris(octadecyloxy)phenyl)methylamino group, or LY is a succinyl-1,4-piperazinediyl group, and Z is 3,4,5-tris( octadecyloxy)benzoyl group.
  • the protecting group (Pg-5) is most preferably L is a succinyl group, and YZ is a 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzyloxy group or a 3,4,5-tris(octadecyloxy)cyclohexylmethyloxy group or LY is a succinyl-1,4-piperazinediyl group and Z is a 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzoyl group.
  • the protecting group (Pg-5), and the compounds used to form it, are prepared by known methods (e.g., WO2017/104836, WO2019/131719, WO2020/235658, It can be formed or manufactured by a method described in Japanese Patent Publication No. 2021/039935 or International Publication No. 2021/198883) or a method analogous thereto.
  • solid-phase support is not particularly limited as long as it is used for solid-phase synthesis of oligonucleotide synthesis in the relevant field, and examples thereof include glass beads, resin beads, and the like. mentioned.
  • the support or resin used as a solid phase carrier can be any support or resin known in the art and suitable for use in solid phase synthesis.
  • Said supports or resins include, for example, polystyrene supports (which may be further functionalized with, for example, p-methylbenzyl-hydrylamine), diatomaceous earth-encapsulated polydimethylacrylamide (pepsin K), silica, microparticles, Examples include porous glass, amphipathic polystyrene-polyethylene glycol (PEG) resin, PEG-polyamide, PEG-polyester resin, Wang-PEG resin, Rink-amide PEG resin, and the like. Said support or resin may be modified. Modified supports or resins include, for example, long chain alkylamino Controlled Pore Glass (lcaa CPG) and the like.
  • nucleoside which is a constituent unit of an oligonucleotide, means that a nucleobase is a sugar (for example, 2-deoxyribose, ribose, and a divalent organic group at the 2- and 4-position carbon atoms).
  • nucleobase is not particularly limited as long as it is used for the synthesis of nucleic acids. and purine bases such as adenyl group (adenine base) and guanyl group (guanine base).
  • optionally protected nucleobase means that, for example, an amino group, a carbonyl group, etc. in the nucleobase may be protected.
  • the optionally protected nucleobase is preferably a nucleobase the amino group of which may be protected with the aforementioned amino group-protecting group, more preferably a nucleobase having no amino group, or the aforementioned amino group. It is a nucleobase having an amino group protected with a group-protecting group.
  • carbonyl groups such as phenol, 2,5-dichlorophenol, 3-chlorophenol, 3,5-dichlorophenol, 2-formylphenol, 2-naphthol, 4-methoxyphenol, 4-chlorophenol, 2-nitrophenol , 4-nitrophenol, 4-acetylaminophenol, pentafluorophenol, 4-pivaloyloxybenzyl alcohol, 4-nitrophenethyl alcohol, 2-(methylsulfonyl)ethanol, 2-(phenylsulfonyl)ethanol, 2-cyanoethanol , 2-(trimethylsilyl)ethanol, dimethylcarbamic acid chloride, diethylcarbamic acid chloride, ethylphenylcarbamic acid chloride, 1-pyrrolidinecarboxylic acid chloride, 4-morpholinecarboxylic acid chloride, diphenylcarbamic acid chloride, etc., to obtain a carbonyl Groups can be protected.
  • nucleobase as used herein means that a nucleobase is a substituent (e.g., a halogen atom, an alkyl group, an aralkyl group, an alkoxy group, an acyl group, an alkoxyalkyl group, a hydroxyl group, an amino group, a monoalkylamino, a dialkylamino , carboxy, cyano, nitro, etc.) substituted modified nucleobases (e.g., 8-bromoadenyl, 8-bromoguanyl, 5-bromocytosyl, 5-iodocytosyl, 5-bromouracil, 5-iodo uracil group, 5-fluorouracil group, 5-methylcytosyl group, 8-oxoguanyl group, hypoxanthinyl group, etc.) are also included.
  • a substituent e.g., a halogen atom, an alkyl group, an aralkyl
  • “Sugar” in the present specification also includes amino sugar in which the hydroxyl group is replaced by an amino group, and ribose in which the 2-position hydroxyl group is replaced by a halogen atom.
  • amino sugars include, for example, 2-deoxyribose in which the 3-position hydroxyl group is replaced by an amino group, ribose in which the 3-position hydroxyl group is replaced by an amino group, and 3-position hydroxyl group is replaced by an amino group and the 2-position hydroxyl group is replaced by an amino group.
  • amino sugars include, for example, 2-deoxyribose in which the 3-position hydroxyl group is replaced by an amino group, ribose in which the 3-position hydroxyl group is replaced by an amino group, and 3-position hydroxyl group is replaced by an amino group and the 2-position hydroxyl group is replaced by an amino group.
  • examples thereof include ribose substituted with halogen (in the following formula, Xs represents a halogen atom).
  • 2-deoxyribose or ribose in which the 2- and 4-position carbon atoms are bonded by a divalent organic group 2-deoxyribose or ribose in which the 3- and 5-position carbon atoms are bonded by a divalent organic group
  • Examples of ribose, or 2-deoxyribose or ribose in which the 3- and 4-position carbon atoms are bonded by a divalent organic group include the following compounds.
  • R represents a hydrogen atom, an optionally substituted hydrocarbon group, an optionally substituted hydroxyl group, or an optionally substituted amino group
  • R′ represents a hydrogen atom or a hydroxyl group
  • the hydroxyl group ( -OH ) in the phosphate group is replaced with a group (e.g., a protected phosphorus acid group) are also included in the "phosphate group".
  • phosphite ester bond refers to a bond represented by the following formula (P1-1), or represented by the following formula (P1-2) in which the oxygen atom in the bond is replaced with NH. (In the formula below, * indicates the bonding position).
  • phosphonate ester bond refers to a bond represented by the following formula (P2-1), or represented by the following formula (P2-2) in which the oxygen atom in the bond is replaced with NH. represents a bond (in the following formula, * indicates a bond position).
  • phosphate ester bond refers to a bond represented by the following formula (P3-1), or represented by the following formula (P3-2) in which the oxygen atom in the bond is replaced with NH. represents a bond (in the following formula, * indicates a bond position).
  • thiophosphate bond refers to a bond represented by the following formula (P4-1), or represented by the following formula (P4-2) in which the oxygen atom in the bond is replaced with NH. represents a bond (in the following formula, * indicates a bond position).
  • nucleotide means a compound in which a phosphate group is bound to a nucleoside.
  • the description of the phosphate group is as described above.
  • oligonucleotide means a compound in which one or more nucleotides are linked to a nucleoside.
  • the "oligonucleotide” includes not only oligonucleotides having a phosphate ester bond represented by the formula (P3-1), but also oligonucleotides having a phosphate ester bond represented by the formula (P3-2). Nucleotides, oligonucleosides having a thiophosphate ester bond represented by the above formula (P4-1), and oligonucleosides having a thiophosphate ester bond represented by the above formula (P4-2) are also included.
  • the number of nucleosides in the oligonucleotide in the present invention is not particularly limited, it is preferably 2-50, more preferably 2-30.
  • phosphoramidite refers to a phosphite diester monoamide (P(OR) 2 (NR 2 ), and each of the four R's independently represents an optionally substituted alkyl group. , said NR 2 may be combined with each other to form a cyclic amino group).
  • phosphoramidated nucleoside refers to a group represented by —X n —P(OR)(NR 2 ) in a nucleoside (wherein X n represents an oxygen atom or NH , the three Rs each independently represent an optionally substituted alkyl group, and the NR 2 may combine with each other to form a cyclic amino group).
  • X n represents an oxygen atom or NH
  • the three Rs each independently represent an optionally substituted alkyl group, and the NR 2 may combine with each other to form a cyclic amino group.
  • the term “phosphoramidated nucleotide” refers to a group represented by —X n —P (OR) (NR 2 ) in a nucleotide (wherein X n represents an oxygen atom or NH , the three Rs each independently represent an optionally substituted alkyl group, and the NR 2 may combine with each other to form a cyclic amino group).
  • X n represents an oxygen atom or NH
  • the three Rs each independently represent an optionally substituted alkyl group, and the NR 2 may combine with each other to form a cyclic amino group.
  • X n represents an oxygen atom or NH
  • the three Rs each independently represent an optionally substituted alkyl group
  • the NR 2 may combine with each other to form a cyclic amino group.
  • phosphoramidated oligonucleotide refers to a group represented by —X n —P(OR)(NR 2 ) in an oligonucleotide (wherein X n is an oxygen atom or NH , and each of the three Rs independently represents an optionally substituted alkyl group, and the NR 2 is two Rs that are bonded to each other to form a cyclic amino group).
  • X n is an oxygen atom or NH
  • each of the three Rs independently represents an optionally substituted alkyl group
  • the NR 2 is two Rs that are bonded to each other to form a cyclic amino group
  • oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond means a precursor in which the phosphate ester bond in the oligonucleotide is replaced with a phosphite ester bond. Oligonucleotides with phosphate ester linkages can be produced by oxidizing this precursor.
  • Oligonucleotide precursors with phosphite ester linkages are preferably phosphorous acid, obtained by condensation of (1) nucleosides, nucleotides or oligonucleotides with phosphoramidized nucleosides, nucleotides or oligonucleotides or (2) an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensing an oligonucleotide with a phosphoramidite.
  • Oligonucleotide precursors with phosphite ester linkages are more preferably obtained by condensation of nucleosides, nucleotides or oligonucleotides with phosphoramidated nucleosides, nucleotides or oligonucleotides, phosphite ester linkages is an oligonucleotide precursor having
  • Oligonucleotide precursors having a phosphite ester bond are more preferably protected with a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) having a hydrophobic protecting group and a temporary protecting group in which the hydroxyl group is removable under acidic conditions.
  • nucleosides, nucleotides or oligonucleotide precursors with phosphite ester linkages obtained by condensation with nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (b) which are polymorphic and phosphoramidized.
  • the condensation includes condensation in which the oligonucleotide chain is extended in the direction from the 3′ end to the 5′ end (hereinafter referred to as “3′-5′ condensation”) and oligonucleotide chain extension in the direction from the 5′ end to the 3′ end.
  • Any condensation hereinafter referred to as “5′-3′ condensation” that extends the nucleotide chain may be used.
  • Preferred nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (a) and phosphoramidized nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (b) in each of 3′-5′ condensation and 5′-3′ condensation are described below in order. do.
  • nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) is, for example, the formula (a-I):
  • r represents an integer of 0 or more; r + 1 Base 1 each independently represents a nucleobase that may be protected; r+1 X n1 each independently represent an oxygen atom or NH; r+1 X n2 each independently represents a hydrogen atom, a halogen atom, an optionally protected hydroxyl group, or a divalent organic group that binds to the 2- and 4-position carbon atoms; r R 10 each independently represents an oxygen atom or a sulfur atom; r R p1 each independently represents a phosphate-protecting group; Pg is **L-Y-Z (wherein ** represents the bonding position with X n1 ), **L-Y-Sp (wherein ** represents the bonding position with X n1 , and Sp indicates a solid phase support) or a solid phase support; is. ] and compounds represented by (ie, nucleosides or oligonucleotides).
  • compound (aI) is a nucleoside, and when r is 1 or more, compound (aI) is an oligonucleotide.
  • r is preferably 49 or less, more preferably 29 or less, still more preferably 19 or less, particularly preferably 4 or less, and most preferably 2 or less.
  • the amino group of Base 1 which is a nucleobase, is preferably protected with a protecting group.
  • the amino group-protecting group include the aforementioned amino group-protecting groups, and the amino group-protecting group of Base 1 is preferably an acetyl group, a phenoxyacetyl group, a 4-isopropylphenoxyacetyl group, a benzoyl group, isobutyryl group, (2-hexyl)decanoyl group, dimethylformamidinyl group, and ⁇ NC(R 11 )—N(R 12 )(R 13 ) (wherein R 11 represents a methyl group; , R 12 and R 13 each independently represent a C 1-6 alkyl group, or R 11 and R 12 together represent a 5- or 6-membered nitrogen-containing group together with the carbon and nitrogen atoms to which they are attached. may form a heterocyclic ring).
  • compound (aI) has a plurality of amino groups, the number of amino-protecting
  • the halogen atom of Xn2 is preferably a fluorine atom or a chlorine atom, more preferably a fluorine atom.
  • the optionally protected hydroxyl-protecting group of X n2 includes, for example, the hydroxyl-protecting groups described above, preferably a methyl group, a 2-methoxyethyl group, a triethylsilyl group, a triisopropylsilyl group, or a tert -butyldimethylsilyl group, (2-cyanoethoxy)methyl group and 1-(2-cyanoethoxy)ethyl group.
  • the "divalent organic group bonded to the 2-position carbon atom and the 4-position carbon atom" of Xn2 is not particularly limited as long as it bonds to the 2-position carbon atom and the 4-position carbon atom of the nucleoside.
  • the divalent organic group include an optionally substituted C 2-7 alkylene group, —O—, —NR 33 — (R 33 represents a hydrogen atom or a C 1-6 alkyl group), -S-, -CO-, -COO-, -OCONR 34 - (R 34 represents a hydrogen atom or a C 1-6 alkyl group) and -CONR 35 - (R 35 represents a hydrogen atom or a C 1-6 alkyl group and a divalent organic group composed of an optionally substituted C 1-7 alkylene group, and the like.
  • the “divalent organic group bonded to the 2-position carbon atom and the 4-position carbon atom” includes an optionally substituted C 2-7 alkylene group, —OR i — (R i is bonded to the 4-position carbon atom a C 1-6 alkylene group), -O-NR 33 -R j - (R j represents a C 1-6 alkylene group bonded to the 4-position carbon atom, and R 33 has the same meaning as defined above), - OR k -OR l - (R k represents a C 1-6 alkylene group and R l represents a C 1-6 alkylene group that bonds and bridges with the 4-position carbon atom) is preferred, and -OR i - (R i has the same meaning as above), —O—NR 33 —R j — (R j and R 33 have the same meaning as above), —OR k —OR l — (R k and R l has the same meaning as above) is more preferred.
  • the “divalent organic group bonded to the 2- and 4-position carbon atoms” includes —O—CH 2 —, —O—CH 2 —CH 2 —, —O—NR 33 —CH 2 —(R 33 has the same meaning as above), -O-CH 2 -O-CH 2 - is more preferred, -O-CH 2 -, -O-CH 2 -CH 2 -, -O-NH-CH 2 -, —O—N(CH 3 )—CH 2 — and —O—CH 2 —O—CH 2 — (each of which the left side binds to the 2-position carbon atom and the right side binds to the 4-position carbon atom) are further preferable.
  • Each of r+1 X n2 is independently preferably a hydrogen atom, a halogen atom, or an optionally protected hydroxyl group, more preferably a hydrogen atom, a fluorine atom, or an optionally protected hydroxyl group.
  • Examples of the r number of R p1 include the aforementioned phosphoric acid group-protecting group, preferably a 2-cyanoethyl group.
  • compound (aI) is a nucleoside or oligonucleotide supported on a solid support.
  • Pg is preferably **LYZ (in the formula, ** indicates the binding position with Xn1 ) or a solid phase carrier, more preferably **LYZ.
  • the definitions and explanations of L, Y and Z are the same as the definitions and explanations of L, Y and Z for protecting group (Pg-5) above.
  • the phosphoroamidated nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) is, for example, the formula (bI):
  • s represents an integer of 0 or more; s + 1 Base 2 each independently represents a nucleic acid base that may be protected; s+1 X n3 each independently represent an oxygen atom or NH; s+1 X n4 each independently represents a hydrogen atom, a halogen atom, an optionally protected hydroxyl group, or a divalent organic group that binds to the 2- and 4-position carbon atoms; Q′′ represents a temporary protecting group removable under acidic conditions for the hydroxyl group; s R 14 each independently represents an oxygen atom or a sulfur atom; s+1 R p2 each independently represent a phosphate-protecting group; and R 15 and R 16 each independently represent an alkyl group or form together with an adjacent nitrogen atom It represents a 5- or 6-membered saturated cyclic amino group, and such a saturated cyclic amino group may have one oxygen atom or one sulfur atom as a ring-constituting atom in addition to the nitrogen atom.
  • Base 2 each independently represents
  • compound (bI) When s is 0, compound (bI) is a phosphoramidated nucleoside, and when s is 1 or more, compound (bI) is a phosphoramidite oligonucleotide. be.
  • s is preferably 49 or less, more preferably 29 or less, still more preferably 19 or less, particularly preferably 4 or less, and most preferably 2 or less.
  • the amino group of Base 2 which is a nucleobase, is preferably protected with a protecting group.
  • the protecting group the -LYZ group described above can be used in addition to the protecting group for the amino group described above.
  • compound (bI) has a plurality of
  • Xn4 in the formula (bI) is the same as the description of Xn2 in the formula (aI).
  • Each of s+1 X n4 is independently preferably a hydrogen atom, a halogen atom, or an optionally protected hydroxyl group, more preferably a hydrogen atom or an optionally protected hydroxyl group.
  • R p2 in formula (b-I) above is the same as the description of R p1 in formula (a-I) above.
  • Examples of s+1 R p2 include the aforementioned phosphate group-protecting groups, preferably a 2-cyanoethyl group.
  • R 15 and R 16 in the above formula (bI) are each independently preferably a C 1-10 alkyl group or a 5- or 6-membered saturated group formed together with adjacent nitrogen atoms. It is a cyclic amino group, more preferably a C 1-10 alkyl group, still more preferably a C 1-6 alkyl group.
  • Compound (aI) and compound (bI) can be produced by a known method (eg, the method described in International Publication No. 2017/104836) or a method analogous thereto.
  • An oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensation of compound (aI) and compound (bI) is a compound represented by the following formula (cI) (the following formula The definitions and explanations for the symbols (cI) are as described above).
  • compound (cI) is an oligonucleotide precursor supported on a solid support.
  • Pg is preferably **LYZ (in the formula, ** indicates the binding position with Xn1 ) or a solid phase carrier, more preferably **LYZ.
  • At least one of s R 14 and r R 10 is preferably a sulfur atom.
  • nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) is, for example, the formula (a-I'):
  • r represents an integer of 0 or more; r + 1 Base 1 each independently represents a nucleobase that may be protected; r X n1 each independently represents an oxygen atom or NH; r+1 X n2 each independently represents a hydrogen atom, a halogen atom, an optionally protected hydroxyl group, or a divalent organic group that binds to the 2- and 4-position carbon atoms; X n5 represents a hydroxyl group or an amino group; r R 10 each independently represents an oxygen atom or a sulfur atom; r R p1 each independently represents a phosphate-protecting group; Pg is **L-Y-Z (in the formula, ** indicates the bonding position with the oxygen atom), **L-Y-Sp (wherein, ** indicates the bonding position with X n1 , and Sp indicates a solid phase support) or a solid phase support; are the same. ] and compounds represented by (ie, nucleosides or oligonu).
  • Xn5 in formula (aI') is preferably a hydroxyl group.
  • the explanation of the symbols other than X n5 is the same as the explanation of the symbols in the above formula (aI).
  • Pg in the formula (aI') is **LY-Sp (wherein ** represents the binding position with X n1 and Sp represents the solid phase carrier) or a solid phase carrier
  • compound (aI') is a nucleoside or oligonucleotide supported on a solid support.
  • Pg is preferably **LYZ (in the formula, ** indicates the bonding position with an oxygen atom) or a solid phase carrier, more preferably **LYZ.
  • nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) is, for example, the formula (b-I'):
  • s represents an integer of 0 or more; s + 1 Base 2 each independently represents a nucleic acid base that may be protected; s X n3 each independently represent an oxygen atom or NH; s+1 X n4 each independently represents a hydrogen atom, a halogen atom, an optionally protected hydroxyl group, or a divalent organic group that binds to the 2- and 4-position carbon atoms; X n6 represents a hydroxyl group protected with a temporary protecting group removable under acidic conditions, or an amino group protected with a temporary protecting group removable under acidic conditions; s R 14 each independently represents an oxygen atom or a sulfur atom; s+1 R p2 each independently represent a phosphate protecting group; and R 15 and R 16 each independently represent an alkyl group or form together with an adjacent nitrogen atom It represents a 5- or 6-membered saturated cyclic amino group, and such a saturated cyclic amino group may have one oxygen atom or one sulfur atom as a ring
  • Xn6 is preferably a hydroxyl group protected with a temporary protecting group removable under acidic conditions.
  • the explanation of the symbols other than Xn6 is the same as the explanation of the symbols in the above formula (bI).
  • Compound (a-I') and compound (b-I') can be produced by a known method (eg, the method described in International Publication No. 2017/104836) or a method analogous thereto.
  • An oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensation of compound (a-I') and compound (b-I') has the following formula (c-I'):
  • r represents an integer of 0 or more; r + 1 Base 1 each independently represents a nucleobase that may be protected; r+1 X n1 each independently represent an oxygen atom or NH; r+1 X n2 each independently represents a hydrogen atom, a halogen atom, an optionally protected hydroxyl group, or a divalent organic group that binds to the 2- and 4-position carbon atoms; r R 10 each independently represents an oxygen atom or a sulfur atom; r R p1 each independently represents a phosphate-protecting group; s represents an integer of 0 or more; s + 1 Base 2 each independently represents a nucleic acid base that may be protected; s X n3 each independently represent an oxygen atom or NH; s+1 X n4 each independently represents a hydrogen atom, a halogen atom, an optionally protected hydroxyl group, or a divalent organic group that binds to the 2- and 4-position carbon atoms;
  • Pg in the formula (cI′) is **LY-Sp (wherein ** indicates the binding position with X n1 and Sp indicates a solid phase carrier) or a solid phase carrier
  • compound (cI') is an oligonucleotide precursor supported on a solid support.
  • Pg is preferably **LYZ (in the formula, ** indicates the bonding position with an oxygen atom) or a solid phase carrier, more preferably **LYZ.
  • At least one of r R 10 and s R 14 is preferably a sulfur atom.
  • an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensing an oligonucleotide with a phosphoramidite will be explained.
  • the precursor include formula ( ⁇ -I) or formula ( ⁇ -I′):
  • t represents an integer of 1 or more, t + 1
  • Base 1 each independently represents a nucleobase that may be protected
  • t+1 X n1 each independently represents an oxygen atom or NH
  • t+1 X n2 each independently represents a hydrogen atom, a halogen atom, an optionally protected hydroxyl group, or a divalent organic group that binds to the 2- and 4-position carbon atoms
  • t R 10 each independently represents an oxygen atom or a sulfur atom
  • t R p1 and R p3 each independently represent a phosphate group-protecting group
  • R p4 represents an alkyl group having a protected amino group, or a protecting group for a phosphate group
  • Pg is **L-Y-Z (in the formula, ** indicates the bonding position with X n1 or the bonding position with the oxygen atom), **L-Y-Sp (wherein ** is X n1 , and Sp indicates a solid phase support) or a
  • Pg in the formula ( ⁇ -I) or formula ( ⁇ -I′) is **LY-Sp (wherein ** represents the binding position with Xn1 , and Sp represents the solid phase carrier ) or a solid phase support, compound ( ⁇ -I) or compound ( ⁇ -I′) is an oligonucleotide precursor supported on the solid phase support.
  • Pg is preferably **LYZ (in the formula, ** indicates the bonding position with an oxygen atom) or a solid phase carrier, more preferably **LYZ.
  • t is preferably 49 or less, more preferably 29 or less, still more preferably 19 or less, particularly preferably 4 or less, and most preferably 2 or less.
  • Examples of the "phosphate group-protecting group" of R p3 and R p4 include the aforementioned phosphate group-protecting groups.
  • R p3 is preferably a 2-cyanoethyl group.
  • the "protected amino group” in the "alkyl group having a protected amino group” of R p4 includes, for example, an amino group protected by the aforementioned amino group-protecting group.
  • the “alkyl group having a protected amino group” for R p4 is preferably a C 1-6 alkyl group having a protected amino group, more preferably a 6-(trifluoroacetylamino)hexyl group.
  • R p4 is preferably a 2-cyanoethyl group or a 6-(trifluoroacetylamino)hexyl group. Descriptions of other symbols are as described above.
  • oligonucleotide precursor having a phosphonate ester bond means a precursor in which the phosphate ester bond in the oligonucleotide is replaced with a phosphonate ester bond. Oligonucleotides with phosphate ester linkages can be produced by oxidizing this precursor.
  • Oligonucleotide precursors with phosphonate ester linkages are preferably nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (a) with hydrophobic protecting groups and H - oligonucleotide precursors with phosphonate ester linkages obtained by condensation with phosphonates (B).
  • the H-phosphonate (B) may be used in the form of a salt such as triethylamine salt.
  • the condensation may be either 3'-5' condensation or 5'-3' condensation.
  • Preferred nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (a) and H-phosphonates (B) for 3'-5' condensation and 5'-3' condensation, respectively, are described in order.
  • nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) is preferably compound (aI) as described above.
  • the H-phosphonate (B) includes, for example, compounds represented by the following formula (BI) (definition and explanation of symbols in the following formula (BI) are , the same as the definition and explanation of the symbols in the formula (bI).).
  • Compound (BI) can be produced by a known method (eg, the method described in Acta Biochimica Polonica. 1998, 45, 907-915.) or a method analogous thereto.
  • the oligonucleotide precursor having a phosphonate ester bond obtained by condensation of the compound (aI) and the compound (BI) is a compound represented by the following formula (C-I) (the following formula (C -I) is the same as the definition and explanation of the symbols in formula (cI) above).
  • compound (C-I) is an oligonucleotide precursor supported on a solid support.
  • Pg is preferably **LYZ (in the formula, ** indicates the binding position with Xn1 ) or a solid phase carrier, more preferably **LYZ.
  • At least one of s R 14 and r R 10 is preferably a sulfur atom.
  • nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) is preferably the aforementioned compound (a-I').
  • the H-phosphonate (B) includes, for example, compounds represented by the following formula (BI′) (definition and explanation of the symbols of the following formula (BI′) are , the same as the definitions and explanations of the symbols in the above formula (bI′)).
  • Compound (BI') is produced by a known method (for example, the method described in Phosphorus Chemistry II. Topics in Current Chemistry, vol 361. Springer, Cham. Recent Advances in H-Phosphonate Chemistry) or a method analogous thereto. be able to.
  • An oligonucleotide precursor having a phosphonate ester bond obtained by condensation of compound (aI') and compound (BI') is a compound represented by the following formula (CI') (
  • the definitions and explanations of the symbols in the formula (C-I') are the same as the definitions and explanations of the symbols in the formula (c-I').).
  • Pg in the formula (C-I') is **LY-Sp (wherein ** represents the binding position with Xn1 and Sp represents a solid phase carrier) or a solid phase carrier
  • compound (CI) is an oligonucleotide precursor supported on a solid support.
  • Pg is preferably **LYZ (in the formula, ** indicates the bonding position with an oxygen atom) or a solid phase carrier, more preferably **LYZ.
  • At least one of r R 10 and s R 14 is preferably a sulfur atom.
  • one-pot synthesis refers to a synthesis consisting of multiple steps, including a step of synthesizing an intermediate and a step of synthesizing the desired final product, wherein the synthesis does not isolate said intermediate. means.
  • the "step of synthesizing an intermediate” may be one or two or more.
  • a compound represented by (excluding 2,2-dipyridyl disulfide) to oxidize an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond or a phosphonate ester bond to obtain an oligo having a phosphate ester bond It is characterized by producing nucleotides.
  • Compound (I) may be used alone or in combination of two or more.
  • Oxidizing Agent Compound (I) (excluding 2,2-dipyridyl disulfide), which is an oxidizing agent used in the production method of the present invention, will be described below.
  • R 1 in the formula (I) is a halogen atom
  • R 2 in the formula (I) is an optionally substituted aryl group or a substituted is a good heteroaryl group.
  • R 1 in the formula (I) is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or a substituted is an optionally substituted heteroaryl group
  • R 2 in the above formula (I) is an optionally substituted aryl group or an optionally substituted heteroaryl group.
  • R 1 and R 2 in the above formula (I) form an optionally substituted heterocyclic ring together with the sulfur atom and oxygen atom to which they are attached.
  • R 1 in formula (I) is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group; ), together with the sulfur atom and nitrogen atom to which they are attached, form an optionally substituted heterocyclic ring, or ( 2 ) R 1 and R 3 in the formula ( I) together with the nitrogen atom to which they are attached form an optionally substituted heterocyclic ring, and R 2 in the above formula (I) is an optionally substituted aryl group or an optionally substituted hetero It is an aryl group.
  • X 1 is —N(—R 3 )—, and R 1 is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted a heteroaryl group, and R 2 and R 3 form an optionally substituted heterocyclic ring together with the sulfur atom and nitrogen atom to which they are attached (herein referred to as "compound (IA)") described), and in the above formula (I), X 1 is a sulfur atom, and R 1 is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group, and R 2 is an optionally substituted aryl group or an optionally substituted heteroaryl group (excluding 2,2-dipyridyl disulfide) (hereinafter referred to as compounds ( IB)”) is preferred.
  • X 1 is a sulfur atom or -N(-R 3 )-, R 1 is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group;
  • R 2 is an optionally substituted aryl group or an optionally substituted heteroaryl group, and when X 1 is -N(-R 3 )-, R 2 and R 3 are preferably compounds (excluding 2,2-dipyridyl disulfide) that form an optionally substituted heterocyclic ring together with the sulfur atom and nitrogen atom to which they are attached.
  • compound (IA) and compound (IB) will be described below.
  • R 1 in formula (I) is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group, preferably an optionally substituted C 1-10 alkyl group, an optionally substituted phenyl group, an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group, or an optionally substituted 8-14 is a membered fused polycyclic heteroaryl group.
  • R 2 and R 3 in formula (I) form an optionally substituted heterocyclic ring together with the sulfur atom and nitrogen atom to which they are attached.
  • Compound (Ia) is preferably a compound represented by the following formula (Ia). Compound (Ia) may be used alone or in combination of two or more.
  • R 1a in the formula (Ia) is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group, preferably optionally substituted It is a C 1-10 alkyl group, an optionally substituted phenyl group, or an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group.
  • Ring A in the formula (Ia) is a 5- or 6-membered unsaturated heterocyclic ring.
  • n in the above formula (Ia) is an integer of 0 to 3
  • m R 2a are each independently an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron It is an withdrawing group, preferably an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, or an electron withdrawing group.
  • "m is 0" means that R2a is absent.
  • the 5- or 6-membered unsaturated heterocyclic ring for ring A is a ring represented by any one of the following formulas (r2) to (r4) [the symbols in the formulas are defined as described above. ]. Note that R 2a is omitted in the following formulas (r2) to (r4).
  • the condensed ring formed by two adjacent R 2a and ring A is preferably a bicyclic or tricyclic condensed ring, more preferably a bicyclic condensed ring.
  • Examples of the condensed ring include rings represented by any one of the following formulas (r5) to (r25).
  • the fused ring may be substituted.
  • Compound (Ia) is preferably a compound represented by the following formula (Ic).
  • R 1c in the formula (Ic) is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group, preferably optionally substituted It is a C 1-6 alkyl group, an optionally substituted phenyl group, or an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group.
  • R 1c is preferably selected from the group consisting of (1) an optionally substituted phenyl group and an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group; a C 1-6 alkyl group optionally substituted with 1 or 2 substituents, (2) a phenyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group, or (3) 5- or 6-membered optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; is a monocyclic heteroaryl group.
  • R 1c is preferably (1) a group consisting of an optionally substituted phenyl group and an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group a C 1-6 alkyl group optionally substituted with 1 or 2 substituents selected from (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; or (3) 1 to 1 selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group It is a pyridyl group optionally substituted with 4 substituents.
  • R 1c is preferably (1) a C 1-6 alkyl group optionally substituted with 1 or 2 pyridyl groups, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom and a nitro group; or (3) an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, and a nitro group. It is a pyridyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents.
  • R 1c is preferably (1) a C 1-6 alkyl group optionally substituted with 1 or 2 pyridyl groups, (2) a phenyl group optionally substituted with 1 or 2 C 1-6 alkyl groups, or (3) a pyridyl group (especially a 2-pyridyl group or a 4-pyridyl group) is.
  • R 1c is preferably (1) a C 1-6 alkyl group, (2) a phenyl group optionally substituted with 1 or 2 substituents selected from the group consisting of a C 1-6 alkyl group, a C 1-6 alkoxy group and a halogen atom, or (3) 1 C A pyridyl group substituted with a 1-6 alkyl group (eg, 4-methyl-2-pyridyl group) is.
  • p in the above formula (Ic) is 0 or 1, preferably 0;
  • p is 0 means that —CH(R 2c )— in formula (Ic) does not exist.
  • R 2c in the formula (Ic) is a hydrogen atom, an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group, preferably a hydrogen atom or a substituted may be a C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, or an electron-withdrawing group.
  • Ring C in the formula (Ic) is a 6-membered aromatic hydrocarbon ring, a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocycle, or a 10-membered bicyclic condensed aromatic heterocycle containing a nitrogen atom.
  • the ring C is preferably a 6-membered aromatic hydrocarbon ring (i.e., benzene ring) or a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocyclic ring, more preferably a benzene ring or It is a pyridine ring, more preferably a pyridine ring.
  • the ring C is preferably a benzene ring, a pyridine ring or a quinoline ring.
  • q in the formula (Ic) is an integer of 0 to 4, preferably an integer of 0 to 2, more preferably 0 or 1.
  • q is 0
  • R3c is absent.
  • each of the q R 3cs in the formula (Ic) are each independently an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group.
  • each of the q R 3cs is preferably an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, or It is an electron-withdrawing group, more preferably a halogen atom or a nitro group, still more preferably a nitro group.
  • q R 3c are each independently preferably an electron-withdrawing group, more preferably a halogen atom, a C 1-6 perfluoroalkyl group or a nitro group , more preferably a C 1-6 perfluoroalkyl group or a nitro group, particularly preferably a trifluoromethyl group.
  • Suitable compounds (Ic) include the following compounds. Each of the following compounds may be used alone or in combination of two or more.
  • R 1c is (1) optionally substituted with 1 or 2 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted phenyl group and an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group; a good C 1-6 alkyl group, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; or (3) 1 to 1 selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group
  • R 1c is (1) a C 1-6 alkyl group optionally substituted with 1 or 2 pyridyl groups, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom and a nitro group; or (3) an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, and a nitro group.
  • a pyridyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents
  • p is 0,
  • Ring C is a benzene ring or a pyridine ring
  • q is an integer from 0 to 2
  • a compound in which q R 3c are each independently a halogen atom or a nitro group (referred to herein as “compound (Ic-iii)”).
  • R 1c is (1) optionally substituted with 1 or 2 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted phenyl group and an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group; a good C 1-6 alkyl group, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; or (3) 1 to 1 selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group
  • R 1c is (1) a C 1-6 alkyl group, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom and a nitro group; or (3) an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, and a nitro group.
  • a pyridyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents
  • p is 0 or 1
  • Ring C is a benzene ring, a pyridine ring or a quinoline ring
  • q is an integer from 0 to 2
  • a compound in which q R 3c are each independently a halogen atom, a C 1-6 perfluoroalkyl group or a nitro group referred to herein as “compound (Ic-iii′)”).
  • Preferable specific examples of the compound (Ic) include compounds represented by any one of the following formulas (Ic-1) to (Ic-17).
  • compound (Ic) is preferably 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-1)), 2-isopropyl isothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-2)), 2-isopropylisothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic -3)), 2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one (compound (Ic-4)), 5-nitro-2-phenyl-1,2-benzothiazol- 3(2H)-one (compound (Ic-5)), 2-(2,6-dimethylphenyl)-5-nitro-1,2-benzothiazol-3(2H)-one (compound (Ic-6) ), 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3 (compound (Ic-6) ), 5-
  • compound (Ic) is preferably 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-1)), 2 - isopropylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-2)), 2-isopropylisothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-3)), 2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3(2H)-one (compound (Ic-4)), 5-nitro-2-phenyl-1,2-benzo Thiazol-3(2H)-one (compound (Ic-5)), 2-(2,6-dimethylphenyl)-5-nitro-1,2-benzothiazol-3(2H)-one (compound (Ic- 6)), 5-nitro-2-(2-pyridyl)-1,2-benzothiazol-3 (compound (Ic-6)), 5-nitro
  • compound (Ic) is preferably 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-1)), 2 -isopropylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-2)), 5-nitro-2-phenyl-1,2-benzothiazol-3(2H)-one ( Compound (Ic-5)), 2-phenylisothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one (Compound (Ic-10)), 2-phenylisothiazolo[5,4-b]quinoline -3(2H)-one (compound (Ic-11)), 2-phenyl-5-trifluoromethylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-12)) , 2-phenyl-2H-1,2-benzothiazin-3(4
  • compound (Ic) is preferably 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-1)), 2 - isopropylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-2)), 2-phenylisothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-10)), 2-phenylisothiazolo[5,4-b]quinolin-3(2H)-one (compound (Ic-11)), 2-phenyl-5-trifluoromethylisothiazolo[5, 4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-12)), 2-phenyl-2H-1,2-benzothiazin-3(4H)-one (compound (Ic-13)), 2- (2,6-dimethylphenyl)isothiazolo[5,4
  • compound (Ic) is most preferably 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-1)).
  • R 1 in formula (I) is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group, preferably an optionally substituted C 1-10 alkyl group, an optionally substituted phenyl group, an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group, or an optionally substituted 8-14 is a membered fused polycyclic heteroaryl group.
  • R 2 in formula (I) above is an optionally substituted aryl group or an optionally substituted heteroaryl group, preferably an optionally substituted phenyl group, substituted is an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group, or an optionally substituted 8- to 14-membered condensed polycyclic heteroaryl group.
  • Compound (Ib) is preferably a compound represented by formula (Ib) below (excluding 2,2-dipyridyl disulfide). Compound (Ib) may be used alone or in combination of two or more.
  • R 1b in the formula (Ib) is an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group, preferably optionally substituted C 1-10 alkyl group, optionally substituted phenyl group, optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group, or optionally substituted 8- to 14-membered condensed polycyclic group It is a heteroaryl group.
  • R 1b is more preferably (1) an alkyl group substituted with one carboxy group, (2) a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (4) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; solyl group, (5) optionally substituted alkyl group, optionally substituted alkoxy group and 5-(1 , 2,3-triazoly
  • R 1b is more preferably (1) an alkyl group substituted with one carboxy group, (2) a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (4) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; zolyl group, (5) optionally substituted alkyl group, optionally substituted alkoxy group and 5-(1 , 2,3-triazolyl) group, (6) a 1H-tetrazol-5-yl group optional
  • R 1b is particularly preferably (1) a C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzothiazolyl group, which may be (3) substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzimidazolyl group, which may be (4) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzoxazolyl group, which may be (5) substituted with 1 or 2 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6
  • R 1b is most preferably C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 5- (1,2,3-triazolyl) group, 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group, (pyridin-N-oxide)-2-yl group, 4-pyridyl group, or 2-pyridyl group.
  • R 1b is more preferably (1) an alkyl group substituted with one carboxy group, (2) a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (4) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; solyl group, (5) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent selected from the group consisting of
  • R 1b is more preferably (1) a C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzothiazolyl group, which may be (3) substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzimidazolyl group, which may be (4) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzoxazolyl group, which may be (5) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent selected from the group consisting of an optionally substituted
  • R 1b is particularly preferably C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 1- phenyl-1H-tetrazol-5-yl group, (pyridin-N-oxide)-2-yl group, 4-pyridyl group, or 2-pyridyl group.
  • Ring B in the formula (Ib) is a 6-membered aromatic hydrocarbon ring (i.e., benzene ring) or a 5- or 6-membered aromatic heterocyclic ring, preferably a 5- or 6-membered aromatic heterocyclic ring , more preferably a triazole ring, a tetrazole ring, a pyridine ring or a pyridine-N-oxide ring, still more preferably a tetrazole ring, a pyridine ring or a pyridine-N-oxide ring.
  • n in the formula (Ib) is an integer of 0 to 5, and each of the n R 2b is independently an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron It is an attracting group, more preferably an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, or an electron withdrawing group.
  • n is 0
  • R2b is absent.
  • n in the formula (Ib) is an integer of 2 or more, two adjacent R 2b together with ring B are an optionally substituted bicyclic condensed aromatic heterocyclic ring (preferably substituted optionally substituted benzimidazole ring, optionally substituted benzoxazole ring, or optionally substituted benzothiazole ring).
  • 2-benzothiazolyl group which may be (2) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; zolyl group, (4) optionally substituted alkyl group, optionally substituted alkoxy group and 5-(1 , 2,3-triazolyl) group, (5) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group and an optionally substituted
  • the group (r1) is more preferably (1) 1 to 4 selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group 2-benzothiazolyl group optionally substituted with one substituent, (2) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; zolyl group, (4) optionally substituted alkyl group, optionally substituted alkoxy group and 5-(1 , 2,3-triazolyl) group, (5) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent selected from the group consisting of an optionally substituted alky
  • the group (r1) is more preferably from (1) an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of (2) substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzimidazolyl group, which may be (3) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzoxazolyl group, which may be (4) substituted with 1 or 2 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group
  • the group (r1) is particularly preferably a 2-benzothiazolyl group, a 2-benzimidazolyl group, a 2-benzoxazolyl group, a 5-(1,2,3-triazolyl) group, a 1-phenyl- 1H-tetrazol-5-yl group, (pyridin-N-oxide)-2-yl group, 4-pyridyl group or 2-pyridyl group, most preferably 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2- benzoxazolyl group, 5-(1,2,3-triazolyl) group, 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group, or (pyridin-N-oxide)-2-yl group.
  • the group (r1) is preferably (1) an optionally substituted alkyl group, optionally substituted a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an alkoxy group and an electron-withdrawing group; (2) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; solyl group, (4) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group and an optionally substituted
  • the group (r1) is more preferably selected from (1) an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group
  • 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of (2) substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group
  • 2-benzimidazolyl group which may be (3) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group
  • 2-benzoxazolyl group which may be (4) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group and an optionally substituted pheny
  • the group (r1) is particularly preferably a 2-benzothiazolyl group, a 2-benzimidazolyl group, a 2-benzoxazolyl group, a 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group, a (pyridine-N -oxid)-2-yl, 4-pyridyl, or 2-pyridyl, most preferably 2-benzothiazolyl, 2-benzimidazolyl, 2-benzoxazolyl, 1-phenyl-1H-tetrazole -5-yl group or (pyridin-N-oxide)-2-yl group.
  • Suitable compounds (Ib) include the following compounds. Each of the following compounds may be used alone or in combination of two or more.
  • R 1b is (1) an alkyl group substituted with one carboxy group, (2) a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (4) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; zolyl group, (5) optionally substituted alkyl group, optionally substituted alkoxy group and 5-(1 , 2,3-triazolyl) group, (6) a 1H-t
  • R 1b is (1) an alkyl group substituted with one carboxy group, (2) a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (4) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; zolyl group, (5) optionally substituted alkyl group, optionally substituted alkoxy group and 5-(1 , 2,3-triazolyl) group, (6) a 1H-
  • R 1b is (1) a C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzothiazolyl group, which may be (3) substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzimidazolyl group, which may be (4) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzoxazolyl group, which may be (5) substituted with 1 or 2 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C
  • a 2-pyridyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents and the group (r1) is (1) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group;
  • 2-benzothiazolyl group which may be (2) substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group;
  • 2-benzimidazolyl group which may be (3) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group;
  • 2-benzoxazolyl group which may be (4) substituted with 1 or 2 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substitute
  • R 1b is a C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 5-(1,2,3-triazolyl) group , 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl, (pyridin-N-oxide)-2-yl, 4-pyridyl, or 2-pyridyl, and group (r1) is 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 5-(1,2,3-triazolyl) group, 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group, (pyridine-N-oxide)-2 -yl group, 4-pyridyl group, or 2-pyridyl group (referred to herein as “compound (Ib-iv)”).
  • R 1b is a C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 5-(1,2,3-triazolyl) group , 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl, (pyridin-N-oxide)-2-yl, 4-pyridyl, or 2-pyridyl, and group (r1) is 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 5-(1,2,3-triazolyl) group, 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group, or (pyridine-N-oxide)- It is a compound having a 2-yl group (sometimes referred to as “compound (Ib-v)” in this specification).
  • R 1b is (1) an alkyl group substituted with one carboxy group, (2) a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (3) a 2-benzimidazolyl group optionally substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , (4) 2-benzoxoxa optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron withdrawing group; zolyl group, (5) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group and an
  • R 1b is (1) a C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzothiazolyl group, which may be (3) substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzimidazolyl group, which may be (4) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group; 2-benzoxazolyl group, which may be (5) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent
  • a 2-pyridyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents, and the group (r1) is (1) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group;
  • 2-benzothiazolyl group which may be (2) substituted with 1 to 5 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group;
  • 2-benzimidazolyl group which may be (3) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group and an electron-withdrawing group;
  • 2-benzoxazolyl group which may be (4) a 1H-tetrazol-5-yl group optionally substituted with one substituent selected from the group consisting of an optionally
  • R 1b is a C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group , (pyridin-N-oxide)-2-yl group, 4-pyridyl group, or 2-pyridyl group, and group (r1) is 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group, (pyridin-N-oxide)-2-yl group, 4-pyridyl group, or 2-pyridyl group (herein referred to as “compound (Ib -iii')").
  • R 1b is a C 1-6 alkyl group substituted with one carboxy group, 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group , (pyridin-N-oxide)-2-yl group, 4-pyridyl group, or 2-pyridyl group, and group (r1) is 2-benzothiazolyl group, 2-benzimidazolyl group, 2-benzoxazolyl group, 1-phenyl-1H-tetrazol-5-yl group, or (pyridin-N-oxide)-2-yl group (herein referred to as "compound (Ib-iv')" There is).
  • Preferred specific examples of the compound (Ib) include compounds represented by any of the following formulas (Ib-1) to (Ib-12) (Ph in the following formula (Ib-7) is a phenyl group; show).
  • compound (Ib) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (Compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (Compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (Compound (Ib-4)), 2, 2'-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5'-di(1,2,3-triazolyl) disulfide (compound (Ib-6)), 5,5'-dithiobis (1 -phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)), 4,4′-dipyridyl disulfide (com
  • compound (Ib) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2'-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5'-di(1,2,3-triazolyl) disulfide (compound (Ib-6)), 5,5'-dithiobis (1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)), 4,4′-dipyridyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzo
  • compound (Ib) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2′-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5′-dithiobis(1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), 2,2′-dithiobis ( pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)), 4,4′-dipyridyl disulfide (compound (Ib-9)), and 3-(2-pyridyldithio)propanoic acid (compound (Ib-1)), 2-(2-benz
  • compound (Ib) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2'-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5'-di(1,2,3-triazolyl) disulfide (compound (Ib-6)), 5,5'-dithiobis At least one selected from the group consisting of (1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)) and 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)) be.
  • compound (Ib-1) 2,2′-di
  • compound (Ib) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2′-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5′-dithiobis(1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), and 2,2′-dithiobis It is at least one selected from the group consisting of (pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)).
  • compound (Ib) is most preferably 2,2'-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)).
  • Compound (ID), compound (IE), compound (IF) and compound (IG) may be used singly or in combination of two or more.
  • Compound (ID), compound (IE), compound (IF) and compound (IG) are described in order below.
  • Compound (ID) A compound (ID) in which X 1 in the above formula (I) is a single bond will be described.
  • R 1d in the formula (Id) is preferably a chlorine atom.
  • R 2d in the formula (Id) is preferably an optionally substituted heteroaryl group, more preferably an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl with an electron-withdrawing group. group, more preferably a pyridyl group optionally substituted with a nitro group.
  • Suitable compounds (Id) include the following compounds. Each of the following compounds may be used alone or in combination of two or more.
  • R 1d is a chlorine atom
  • R 2d is a 5- or 6-membered monocyclic heteroaryl group optionally substituted with an electron-withdrawing group (this specification Described as “compound (Id-ii)” in the book).
  • a preferred specific example of the compound (Id) is 3-nitro-2-pyridinesulfenyl chloride represented by the following formula (Id-1).
  • R 1e and R 2e each independently represent an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted aryl group, or an optionally substituted heteroaryl group.
  • R 1e and R 2e in the formula (Ie) are each independently preferably an optionally substituted aryl group, more preferably an optionally substituted phenyl group.
  • a preferred specific example of compound (Ie) is (S)-phenyl benzenethiosulfonate represented by the following formula (Ie-1).
  • Ring D represents a 6-membered aromatic hydrocarbon ring or a 5- or 6-membered aromatic heterocycle
  • w represents an integer from 0 to 4
  • w R 1f each independently represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group
  • R 2f represents a hydrogen atom, an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group
  • v represents an integer of 0-3.
  • It is a compound represented by Compound (If) may be used alone or in combination of two or more.
  • Ring D in the formula (If) is preferably a 6-membered aromatic hydrocarbon ring (that is, a benzene ring).
  • w in the formula (If) is preferably an integer of 0 to 2, more preferably 0 or 1.
  • "w is 0" means that R 1f does not exist.
  • Each of w R 1f in the above formula (If) is preferably an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom or nitro is the base.
  • R 2f in the formula (If) is preferably a hydrogen atom, an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, or an electron-withdrawing group , more preferably a hydrogen atom, an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom or a nitro group.
  • v in the above formula (If) is preferably 0.
  • “v is 0” means that —CH 2 — in parentheses in the above formula (If) does not exist.
  • Suitable compounds include the following compounds. Each of the following compounds may be used alone or in combination of two or more.
  • Ring D is a benzene ring
  • w is preferably an integer of 0 to 2
  • w R 1f are each independently an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group can be
  • Ring D is a benzene ring
  • w is preferably an integer of 0 to 2
  • w R 1f are each independently an optionally substituted C 1-6 alkyl group or an optionally substituted C 1-6 alkoxy group , a halogen atom or a nitro group
  • v is an integer from 0 to 3 (referred to herein as "compound (If-ii)").
  • Ring D is a benzene ring
  • w is preferably an integer of 0 or 1
  • R 1f is an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom or a nitro group
  • a preferred specific example of the compound (If) is 3H-2,1-benzoxathiol-3-one represented by the following formula (If-1).
  • Ring E represents a 4- to 8-membered nitrogen-containing heterocyclic ring
  • x represents an integer from 0 to 6
  • x R 1g each independently represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, an oxo group, or an electron-withdrawing group
  • x is an integer of 2 or more
  • two adjacent R 1g together with ring E may form an optionally substituted bicyclic condensed nitrogen-containing heterocyclic ring
  • R 2g is , represents an optionally substituted aryl group or an optionally substituted heteroaryl group.
  • It is a compound represented by Compound (Ig) may be used alone or in combination of two or more.
  • R 2g in the formula (Ig) is preferably an optionally substituted heteroaryl group, more preferably an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic nitrogen-containing heteroaryl group, or It is an optionally substituted 8- to 14-membered condensed polycyclic nitrogen-containing heteroaryl group.
  • R 2g is more preferably (1) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group.
  • optionally substituted 2-pyridyl group or (2) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group It is a 2-benzothiazolyl group which may be substituted.
  • R 2g is particularly preferably (1) 1 to 1 selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom and a nitro group a 2-pyridyl group optionally substituted by 4 substituents, or (2) an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, and a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of a nitro group.
  • R 2g is most preferably a 2-pyridyl group or a 2-benzothiazolyl group.
  • x in the formula (Ig) is an integer of 0-6, preferably an integer of 2-6.
  • x is 0" means that R 1g is absent.
  • x R 1g in the formula (Ig) are each independently preferably optionally substituted C 1-6 alkyl group, optionally substituted C 1-6 alkoxy group, oxo group, halogen an atom, or a nitro group.
  • Ring F represents a 4- to 8-membered nitrogen-containing heterocyclic ring
  • y represents an integer of 0 to 4
  • each of y R 3g independently represents an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group
  • y is an integer of 2 or more
  • two adjacent R 3g may together with ring F form an optionally substituted bicyclic condensed nitrogen-containing heterocyclic ring.
  • y in the formula (r17′) is 0-4.
  • "y is 0" means that R3g is absent.
  • the y R 3g in the formula (r17′) are each independently preferably an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, or Two nitro groups or adjacent R 3g preferably together with ring F form an optionally substituted bicyclic fused nitrogen-containing heterocycle.
  • the bicyclic condensed nitrogen-containing heterocyclic ring preferably has 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group is an isoindole ring optionally substituted with, more preferably consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, and a nitro group It is an isoindole ring optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group.
  • Ring F is preferably a pyrrolidine ring or selected from the group consisting of optionally substituted alkyl groups, optionally substituted alkoxy groups and electron-withdrawing groups together with two adjacent R 3g forms an isoindole ring optionally substituted with 1 to 4 substituents.
  • Ring F is more preferably a pyrrolidine ring, or together with two adjacent R 3g , optionally substituted C 1-6 alkyl group, optionally substituted C 1-6 alkoxy group, halogen It forms an isoindole ring optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of atoms and nitro groups.
  • Suitable compounds (Ig') include the following compounds. Each of the following compounds may be used alone or in combination of two or more.
  • Ring F is a pyrrolidine ring
  • y is an integer from 0 to 4
  • y R 3g are each independently an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group
  • R 2g is an optionally substituted heteroaryl group
  • Ring F is a pyrrolidine ring
  • y is an integer from 0 to 4
  • y R 3g are each independently an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group
  • R 2g is an optionally substituted 5 or a compound that is a 6-membered monocyclic nitrogen-containing heteroaryl group, or an optionally substituted 8- to 14-membered condensed polycyclic nitrogen-containing heteroaryl group (herein referred to as "compound (Ig-ii -a)”).
  • Ring F In the formula (Ig'), Ring F, together with two adjacent R 3g , with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group forming an optionally substituted isoindole ring, and R 2g is an optionally substituted 5- or 6-membered monocyclic nitrogen-containing heteroaryl group, or an optionally substituted 8- to 14-membered is a condensed polycyclic nitrogen-containing heteroaryl group (referred to herein as “compound (Ig-ii-b)”).
  • Ring F is a pyrrolidine ring
  • y is an integer from 0 to 4
  • y R 3g are each independently an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group, or an electron-withdrawing group
  • a 2-pyridyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group
  • a compound that is a benzothiazolyl group referred to herein as “compound (Ig-iii-a)”).
  • Ring F together with two adjacent R 3g , with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group forming an optionally substituted isoindole ring
  • R 2g is (1) a 2-pyridyl group optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group; , or (2) optionally substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted alkyl group, an optionally substituted alkoxy group and an electron-withdrawing group
  • a compound that is a benzothiazolyl group referred to herein as “compound (Ig-iii-b)”).
  • Ring F is a pyrrolidine ring
  • y is an integer from 0 to 4
  • R 3g are each independently an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, or a nitro group
  • R 2g is (1) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom and a nitro group
  • R 2g is (1) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom and a nitro group
  • Ring F is selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, and a nitro group; forming an isoindole ring optionally substituted with 1 to 4 substituents, and R 2g is (1) substituted with 1 to 4 substituents selected from the group consisting of an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom and a nitro group; or (2) an optionally substituted C 1-6 alkyl group, an optionally substituted C 1-6 alkoxy group, a halogen atom, and a nitro group
  • a compound that is a 2-benzothiazolyl group optionally substituted with 1 to 4 selected substituents referred to herein as “compound (Ig-iv-b)”.
  • Preferred specific examples of the compound (Ig) include 1-(2-pyridinylthio)-2,5-pyrrolidinedione represented by the following formula (Ig-1), 1- (2-benzothiazolylthio)-2,5-pyrrolidinedione, 2-(2-pyridinylthio)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione represented by the following formula (Ig-3), and Examples include 2-(2-benzothiazolylthio)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione represented by the following formula (Ig-4).
  • compound (I) is preferably compound (Ia) and/or compound (Ib).
  • compound (Ic) is preferred.
  • compound (I) is preferably compound (Ib) and/or compound (Ic), more preferably compound (Ib-i) and/or compound (Ic-i) is more preferably compound (Ib-ii) and/or compound (Ic-ii), still more preferably compound (Ib-iii) and/or compound (Ic-iii), still more preferably Compound (Ib-iv) and/or compound (Ic-iv), particularly preferably compound (Ib-v) and/or compound (Ic-iv).
  • compound (I) is preferably compound (Ib-i') and/or compound (Ic-i'), more preferably compound (Ib-ii') and/or compound (Ic-ii'), more preferably compound (Ib-iii') and/or compound (Ic-iii'), still more preferably compound (Ib-iv') and/or Compound (Ic-iv').
  • compound (I) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2'-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5'-di(1,2,3-triazolyl) disulfide (compound (Ib-6)), 5,5'-dithiobis (1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)), 4,4′-dipyridyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothi
  • compound (I) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2'-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5'-di(1,2,3-triazolyl) disulfide (compound (Ib-6)), 5,5'-dithiobis (1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)), 4,4′-dipyridyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothi
  • compound (I) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2'-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5'-di(1,2,3-triazolyl) disulfide (compound (Ib-6)), 5,5'-dithiobis (1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)), 2-phenylisothiazolo[5,4- b]
  • compound (I) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2'-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5'-di(1,2,3-triazolyl) disulfide (compound (Ib-6)), 5,5'-dithiobis (1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)), 4,4′-dipyridyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothi
  • compound (I) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothiazolyldithio) propanoic acid (compound (Ib-2)), 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)), 2,2′-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)), 2,2′-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)), 5,5′-dithiobis(1-phenyl-1H-tetrazole) (compound (Ib-7)), 2,2′-dithiobis ( pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)), 4,4′-dipyridyl disulfide (compound (Ib-9)), 3-(2-pyridyldithio)propanoic acid (compound (Ib-1)), 2-(2-benzothi
  • compound (I) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-phenylisothiazolo[5,4-b ] pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-1)), 2-isopropylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-2)), 2-phenyl isothiazolo[4,5-c]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-10)), 2-phenylisothiazolo[5,4-b]quinolin-3(2H)-one (compound (Ic -11)), 2-phenyl-5-trifluoromethylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-12)), 2-phenyl-2H-1,2- benzothiazin-3(4H)-one (compound (Ib-1)), 2-phenyl-2H
  • compound (I) is preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)), 2-phenylisothiazolo[5,4-b ] Pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-1)), 2-phenyl-5-trifluoromethylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-12 )), 2-phenyl-2H-1,2-benzothiazin-3(4H)-one (compound (Ic-13)), 2-(2,6-dimethylphenyl)isothiazolo[5,4-b]pyridine- 3(2H)-one (compound (Ic-14)), 2-(4-methyl-2-pyridinyl)isothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-15)) , 2-(4-methoxyphenyl)iso
  • compound (I) is particularly preferably 2,2′-dibenzothiazolyl disulfide (compound (Ib-1)) and/or 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridine -3(2H)-one (compound (Ic-1)), most preferably 2-phenylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-1)) be.
  • Compound (I) may be a commercially available product or may be produced by a known method.
  • compound (Ib-1) ie, 2,2'-dibenzothiazolyl disulfide, MBTS
  • MBTS 2,2'-dibenzothiazolyl disulfide
  • Compound (Ib) can be produced, for example, by oxidation and coupling of a thiol, as shown in the formula below.
  • oxidizing agents for oxidizing compound (Ib-1s) and compound (Ib-2s) include hydrogen peroxide, iodine, oxygen, N-bromosuccinimide, N-chlorosuccinimide and the like. Only one kind of oxidizing agent may be used, or two or more kinds thereof may be used in combination.
  • the amount of the oxidizing agent used is preferably 1-10 mol, more preferably 1-5 mol, per 1 mol of compound (Ib-1s) and compound (Ib-2s) in total.
  • Compound (Ib-2s) is preferably used in approximately the same amount as compound (Ib-1s).
  • This reaction is carried out in a suitable solvent that does not interfere with the reaction.
  • suitable solvent examples include ester solvents such as ethyl acetate and isopropyl acetate; polar ether solvents such as 1,4-dioxane and tetrahydrofuran; halogen solvents such as dichloromethane and chloroform; Aromatic solvents and the like can be mentioned.
  • the amount of the solvent to be used is preferably 1-20 mL, more preferably 3-10 mL, per 1 mmol of compound (Ib-1s) and compound (Ib-2s) in total.
  • the reaction temperature is preferably -10°C to 50°C, more preferably 0°C to 40°C, and the reaction time is preferably 1 to 24 hours, more preferably 1 to 10 hours.
  • compound (Ib) can be recovered by a known method (eg, extraction, etc.).
  • the recovered compound (Ib) can be purified by known means (eg, recrystallization, chromatography, etc.).
  • This step is a step of synthesizing the acid chloride of compound (Ic-1s). Specifically, compound (Ic-1s) and an excess amount of thionyl chloride (e.g., 10 mol per 1 mol of compound (Ic-1s)) are added to a reactor and refluxed for 1 hour to 1 night. An acid chloride of compound (Ic-1s) is obtained.
  • compound (Ic-1s) and an excess amount of thionyl chloride e.g. 10 mol per 1 mol of compound (Ic-1s)
  • This step is preferably performed under an inert atmosphere (for example, under an argon atmosphere).
  • an inert atmosphere for example, under an argon atmosphere.
  • This step is to synthesize compound (Ic-2s) by reacting an acid chloride of compound (Ic-1s) with an appropriate amine (R 4c —NH 2 ). Specifically, the solid containing the acid chloride of compound (Ic-1s) obtained in step A1, an appropriate amine (R 4c —NH 2 ) and a base are added to an appropriate solvent and reacted to obtain compound (Ic). -2s) is obtained.
  • the base may be either an organic base or an inorganic base, preferably triethylamine.
  • the amounts of R 4c -NH 2 and the base to be used are each preferably about 1 to 1.5 mol per 1 mol of the acid chloride of compound (Ic-1s).
  • This step is performed in an appropriate solvent that does not inhibit the reaction.
  • the solvent include polar ether solvents such as 1,4-dioxane and tetrahydrofuran (THF), with THF being preferred.
  • THF tetrahydrofuran
  • the amount of the solvent to be used is not particularly limited as long as it can dissolve the solid, but it is preferably about 5 to 10 mL per 1 mmol of the acid chloride of compound (Ic-1s).
  • This step is preferably performed at a low temperature (for example, about 0°C). Completion of the reaction can be confirmed by TLC or the like. After completion of the reaction, compound (Ic-2s) can be recovered by known means (eg concentration and extraction).
  • This step is a step of synthesizing compound (Ic-3s) by reacting compound (Ic-2s) with tert-butylthiol. Specifically, compound (Ic-3s) is obtained by reacting compound (Ic-2s) with tert-butylthiol in the presence of a base in an appropriate solvent.
  • the amount of tert-butylthiol to be used is preferably about 1 to 1.5 mol per 1 mol of compound (Ic-2s).
  • Examples of the base used in this step include alkali metal hydroxides such as sodium hydroxide and potassium hydroxide, with sodium hydroxide being preferred.
  • the amount of the base to be used is preferably about 1 to 2 mol per 1 mol of compound (Ic-3s).
  • This step is performed in an appropriate solvent that does not inhibit the reaction.
  • the solvent include amide solvents such as dimethylformamide (DMF), dimethylacetamide, and N-methylpiperidone, with DMF being preferred.
  • the amount of the solvent to be used is not particularly limited as long as it can dissolve the compound (Ic-2s), but it is preferably about 5 to 10 mL per 1 mmol of the compound (Ic-2s).
  • the reaction temperature in this step is about room temperature (eg, 25°C), and the reaction time is, for example, 1 hour to 1 night, preferably about 3 to 20 hours.
  • the compound (Ic-3s) can be recovered by known means (eg solid-liquid separation).
  • This step is a step of synthesizing compound (Ic) in which Y 1c is carbonyl by a ring closure reaction of compound (Ic-3s). This step can be carried out by two methods of steps A4-1 and A4-2 below.
  • Step A4-1 In this step, compound (Ic-3s), dimethylsulfoxide (DMSO), and chlorotrimethylsilane (TMSCl) are added to an appropriate solvent, and the resulting reaction mixture is reacted at about room temperature (eg, 25° C.). , Y 1c is a carbonyl.
  • the amount of DMSO used is preferably about 1-2 mol per 1 mol of compound (Ic-3s).
  • the amount of TMSCl to be used is preferably about 1 to 1.5 mol per 1 mol of compound (Ic-3s).
  • This step is performed in an appropriate solvent that does not inhibit the reaction.
  • the solvent include halogen-based solvents such as chloroform, dichloromethane, and 1,2-dichloroethane, with dichloromethane being preferred.
  • the amount of the solvent to be used is not particularly limited as long as the compound (Ic-3s) can be dissolved therein, but it is preferably about 2 to 5 mL per 1 mmol of the compound (Ic-3s).
  • the reaction time of this step is, for example, 1 hour to 1 night, preferably about 5 to 10 hours.
  • the compound (Ic) wherein Y1c is carbonyl can be recovered by known means (eg solid-liquid separation).
  • the recovered compound (Ic) can be purified by known means (eg, recrystallization, chromatography, etc.).
  • Step A4-2 In this step, compound (Ic-3s) and meta-chloroperbenzoic acid (mCPBA) are reacted in an appropriate solvent to obtain a sulfoxide intermediate, which is then heated to give a compound in which Y 1c is carbonyl. Synthesize (Ic).
  • the amount of mCPBA used is preferably about 1 to 1.5 mol per 1 mol of compound (Ic-3s).
  • the reaction with compound (Ic-3s) and meta-chloroperbenzoic acid (mCPBA) is carried out in an appropriate solvent that does not inhibit the reaction.
  • the solvent include halogen-based solvents such as chloroform, dichloromethane, and 1,2-dichloroethane, with dichloromethane being preferred.
  • the amount of the solvent to be used is not particularly limited as long as the compound (Ic-3s) can be dissolved therein, but it is preferably about 8 to 15 mL per 1 mmol of the compound (Ic-3s).
  • the reaction with compound (Ic-3s) and meta-chloroperbenzoic acid (mCPBA) is preferably carried out at a low temperature (eg, around 0°C).
  • the reaction time is, for example, about 30 minutes to 1 hour.
  • the sulfoxide intermediate can be recovered by known means (eg, extraction followed by concentration and recrystallization, etc.).
  • Compound (Ic) wherein Y1c is carbonyl can be synthesized by heating the recovered sulfoxide intermediate in a suitable solvent that does not inhibit the cyclization reaction.
  • suitable solvent include toluene, xylene, pyridine, and combinations thereof, with a combination of toluene and pyridine being preferred.
  • the reaction temperature is preferably 70°C to 120°C.
  • the synthesized compound (Ic) can be purified by known means (eg, recrystallization, chromatography, etc.).
  • the compound (Ic-2s) (ie, an intermediate for synthesizing compound (Ic) wherein Y1c is carbonyl) can also be produced, for example, by the steps shown below.
  • Step A2' This step is a step of synthesizing compound (Ic-2s) by reacting compound (Ic-1s) with a suitable amine (R 4c —NH 2 ) using a condensing agent.
  • Condensing agents used in this step include, for example, dicyclohexylcarbodiimide (DCC), diisopropylcarbodiimide (DIC), 1-ethyl-3-[3-(dimethylamino)propyl]carbodiimide (EDC) and its hydrochloride (EDC ⁇ HCl), (benzotriazol-1-yloxy) tripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBop), O-(benzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium tetrafluoro Borate (TBTU), 1-[bis(dimethylamino)methylene]-5-chloro-1H-benzotriazolium-3-oxide hexafluorophosphate (HCTU), O-benzotriazole-N,N,N',N '-tetramethyluronium hexafluorophosphate (HBTU)
  • R 4c —NH 2 and the condensing agent to be used are each preferably about 1 to 5 mol per 1 mol of compound (Ic-1s).
  • a base may be used in this step.
  • the base may be either an organic base or an inorganic base, preferably triethylamine.
  • a base When a base is used, its amount is preferably about 1 to 5 mol per 1 mol of compound (Ic-1s).
  • This step is performed in an appropriate solvent that does not inhibit the reaction.
  • the solvent include polar ether solvents such as 1,4-dioxane and tetrahydrofuran (THF), with THF being preferred.
  • the amount of the solvent to be used is not particularly limited, but is preferably about 1 to 10 mL per 1 mmol of compound (Ic-1s).
  • the reaction temperature in this step is about room temperature (eg, 25°C), and the reaction time is, for example, 1 hour to 1 night, preferably about 3 to 20 hours.
  • This step is preferably performed under an inert atmosphere (for example, under an argon atmosphere). Completion of the reaction can be confirmed by TLC or the like.
  • compound (Ic-2s) can be recovered by known means (eg concentration and extraction).
  • oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond or a phosphonate ester bond (hereinafter referred to as "oligonucleotide (sometimes abbreviated as "precursor") is oxidized.
  • the amount of compound (I) relative to the total oxidizing agent used in the production method of the present invention is preferably 80 mol% or more, more preferably 90 mol% or more.
  • the oxidizing agent more preferably comprises compound (I).
  • the amount of compound (I) used is preferably 1-15 mol, more preferably 1-10 mol, and still more preferably 1-5 mol, per 1 mol of the oligonucleotide precursor.
  • the oligonucleotide precursor is preferably (1) an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensation of a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide with a phosphoramidized nucleoside, nucleotide or oligonucleotide, or (2) an oligonucleotide and an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensation with a phosphoramidite.
  • the oligonucleotide precursor of (1) for example, the compound (cI) (that is, obtained by condensation of the compound (aI) and the compound (bI), phosphorous acid an oligonucleotide precursor having an ester bond), and the compound (cI') (that is, phosphorous acid obtained by condensation of the compound (aI') and the compound (bI') oligonucleotide precursors having an ester bond).
  • the oligonucleotide precursor of (2) include the compound ( ⁇ -I) and the compound ( ⁇ -I').
  • Oligonucleotide precursors with phosphite ester linkages are more preferably obtained by condensation of nucleosides, nucleotides or oligonucleotides with phosphoramidated nucleosides, nucleotides or oligonucleotides, phosphite ester linkages is an oligonucleotide precursor having
  • the oligonucleotide precursor is more preferably a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) having a hydrophobic protecting group, a hydroxyl group protected with a temporary protecting group removable under acidic conditions, and a phosphoramidite nucleosides, nucleotides or oligonucleotide precursors with phosphite linkages obtained by condensation with oligonucleotides (b).
  • the oligonucleotide precursor is particularly preferably the compound (cI) in which Pg is **LYZ (that is, the compound (aI) in which Pg is **LYZ) and Oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond obtained by condensation with the compound (bI)), or the compound (cI') wherein Pg is **LYZ (i.e. , an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond, obtained by condensation of the compound (aI′) and the compound (bI′), wherein Pg is **LYZ. be.
  • the oligonucleotide precursor is preferably an oligonucleotide precursor having a thiophosphate ester bond in addition to a phosphite ester bond or a phosphonate ester bond.
  • an oligonucleotide precursor having a thiophosphate ester bond is oxidized with iodine, a by-product (desulfurized product) obtained by converting the thiophosphate ester bond to a phosphate ester bond is produced. According to the present invention using , the generation of this desulfurized product can be suppressed.
  • Water present in the system acts as a source of oxygen atoms and thus can promote oxidation of the oligonucleotide precursor.
  • the amount of water is preferably 0.5 to 200 mol, more preferably 1 to 100 mol, still more preferably 1 to 50 mol, per 1 mol of the oligonucleotide precursor.
  • the reaction temperature for oxidation of the oligonucleotide precursor is preferably 10 to 50° C., more preferably 15 to 40° C., and the reaction time is preferably 5 minutes to 5 hours, more preferably 30 minutes to 3 hours. be.
  • the oxidation of the oligonucleotide precursor is preferably carried out in a solution containing a non-polar solvent.
  • concentration of oligonucleotide precursors in the solution is not particularly limited as long as they are dissolved in the solvent, but is preferably 1 to 30% by weight.
  • nonpolar solvents examples include halogen solvents such as chloroform, dichloromethane, and 1,2-dichloroethane; aromatic solvents such as benzene, toluene, xylene, and mesitylene; ester solvents such as ethyl acetate and isopropyl acetate; Aliphatic solvents such as pentane, heptane, octane, nonane and cyclohexane; and non-polar ether solvents such as diethyl ether, cyclopentyl methyl ether and tert-butyl methyl ether. Only one type of nonpolar solvent may be used, or two or more types may be used in combination.
  • halogen solvents such as chloroform, dichloromethane, and 1,2-dichloroethane
  • aromatic solvents such as benzene, toluene, xylene, and mesitylene
  • ester solvents such as ethyl
  • the non-polar solvent is preferably at least one selected from the group consisting of halogen solvents, aromatic solvents, ester solvents and aliphatic solvents, more preferably halogen solvents and toluene, still more preferably It is at least one selected from the group consisting of chloroform, dichloromethane and toluene, and particularly preferably dichloromethane.
  • a solution containing a non-polar solvent may further contain an aprotic polar solvent.
  • the aprotic polar solvent include nitrile solvents such as acetonitrile and propionitrile; polar ether solvents such as tetrahydrofuran; and pyridine. Among these, nitrile solvents are preferred, and acetonitrile and pyridine are more preferred.
  • the amount of the aprotic polar solvent used is preferably 10-100 mL, more preferably 10-50 mL, per 100 mL of the non-polar solvent.
  • the production method of the present invention can also be carried out by one-pot synthesis.
  • the one-pot synthesis is In a solution containing a non-polar solvent, a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) having a hydrophobic protecting group, and a hydroxyl group protected with a temporary protecting group removable under acidic conditions, and phosphoramidated condensed with a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b), having a phosphite ester bond and a hydrophobic protecting group, and a hydroxyl group protected with a temporary protecting group removable under acidic conditions step (1) of forming an oligonucleotide precursor (c);
  • a quenching agent (i) for the phosphoramidated nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) is added to the solution after step (1) to quench the phosphoramidated nucleoside, nucleotide
  • step (3) of forming an oligonucleotide (d) protected with a temporary protecting group step (4) of adding a quenching agent (ii) for the oxidizing agent to the solution after step (3) to quench the oxidizing agent; adding an acid to the solution after step (4) to remove the temporary protecting group removable under acidic conditions of the oligonucleotide (d), resulting in an oligonucleotide having an unprotected hydroxyl group and a hydrophobic protecting group; step (5) of forming (e); If necessary, a step (6) of adding a base to the solution after step (5), and a step of adding a polar solvent to the solution containing the oligonucleotide (e) to precipitate the oligonucleotide (e).
  • the oxidizing agent is compound (I) (excluding 2,2-dipyridyl disulfide).
  • intermediates that is, the oligonucleotide precursor (c) obtained in step (1) and the oligonucleotide (d) obtained in step (3)
  • step (1) the oligonucleotide precursor (c) obtained in step (1)
  • step (3) the oligonucleotide (d) obtained in step (3)
  • Step (1) (condensation)
  • a nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) having a hydrophobic protecting group and a hydroxyl group are protected with a temporary protecting group removable under acidic conditions.
  • a group-protected oligonucleotide precursor (c) is formed.
  • the hydrophobic protecting group possessed by the nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) is the protecting group (Pg-5).
  • the description of the protecting group (Pg-5) is as described above.
  • the temporary protective group for the hydroxyl group of the phosphoramidized nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) is preferably a 4,4'-dimethoxytrityl group or a 4-mono It is a methoxytrityl group, more preferably a 4,4'-dimethoxytrityl group.
  • the combination of said nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) used in step (1) and said phosphoroamidated nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) is preferably combined with said compound (aI) A combination with the compound (bI), or a combination of the compound (aI') and the compound (bI'), more preferably Pg is **LYZ a combination of compound (aI) and said compound (bI), or said compound (aI') wherein Pg is **L-Y-Z and said compound (b-I') is a combination of
  • Step (1) is performed in a solution containing a non-polar solvent.
  • nonpolar solvents include halogen solvents such as chloroform, dichloromethane, and 1,2-dichloroethane; aromatic solvents such as benzene, toluene, xylene, and mesitylene; ester solvents such as ethyl acetate and isopropyl acetate; Aliphatic solvents such as pentane, heptane, octane, nonane and cyclohexane; and non-polar ether solvents such as diethyl ether, cyclopentyl methyl ether and tert-butyl methyl ether.
  • nonpolar solvent is preferably at least one selected from the group consisting of halogen solvents, aromatic solvents, ester solvents and aliphatic solvents, more preferably selected from the group consisting of halogen solvents and toluene. At least one, more preferably at least one selected from the group consisting of chloroform, dichloromethane and toluene, particularly preferably dichloromethane and/or toluene.
  • the steps after step (1) are similarly carried out in a solution containing a non-polar solvent.
  • a solution containing a non-polar solvent may further contain an aprotic polar solvent.
  • the aprotic polar solvent include nitrile solvents such as acetonitrile and propionitrile; polar ether solvents such as tetrahydrofuran; among these, nitrile solvents are preferred, and acetonitrile is more preferred.
  • the amount of the aprotic polar solvent used is preferably 10-100 mL, more preferably 10-50 mL, per 100 mL of the non-polar solvent.
  • the amount of the phosphoramidized nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) used is, for example, 1 to 10 mol, preferably 1 to 5 mol, per 1 mol of the nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (a) used. is.
  • the concentration of said nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (a) in solution is preferably 1-30% by weight.
  • the reaction temperature in step (1) is not particularly limited as long as the condensation proceeds, but is, for example, 0 to 100°C, preferably 20 to 50°C.
  • the reaction time varies depending on the type of raw materials used, the reaction temperature, etc., and is, for example, 5 minutes to 24 hours.
  • a known activator may be used to promote condensation.
  • activating agents include pyridine trifluoroacetate, tetrazole, 5-ethylthio-1H-tetrazole, 5-benzylthio-1H-tetrazole, 4,5-dicyanoimidazole and the like. Only one activator may be used, or two or more may be used in combination. When an activator is used, the amount used is preferably 0.5 to 10 mol, more preferably 1 to 5 mol, per 1 mol of the phosphoramidized nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b). be.
  • Step (2) Quenching phosphoroamidated nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b))
  • a quenching agent (i) of the phosphoramidated nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) is added to the solution after step (1) to remove the phosphoramidated , nucleosides, nucleotides or oligonucleotides (b).
  • the quenching agent (i) may be used alone or in combination of two or more. Quenching agents (i) include, for example, water, alcohols, phenols and amines.
  • Alcohols that can be used as quenching agent (i) include, for example, methanol, 2-propanol, t-butanol, 2,2,2,-trifluoroethanol, tetrahydrofurfuryl alcohol, furfuryl alcohol, 2,3- optionally halogenated monohydric alcohols such as O-isopropylidene-D-ribofuranose and 3′-O-triisopropylsilyl-thymidine; and optionally halogenated polyhydric alcohols such as ethylene glycol and diethylene glycol. mentioned.
  • Phenols that can be used as the quenching agent (i) include, for example, 4-nitrophenol and pentafluorophenol.
  • Amines that can be used as quenching agents (i) include, for example, morpholine.
  • the amount of quenching agent (i) used is preferably 1 to 20 mol, more preferably 1 ⁇ 10 mol, more preferably 1-5 mol.
  • the quenching agent (i) is preferably water.
  • the subsequent oxidation in step (3) can be facilitated by using water as quenching agent (i).
  • the amount used is preferably 1 to 1 mol of the phosphoramidized nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) used in step (1). 20 mol, more preferably 2 to 15 mol, still more preferably 2 to 10 mol.
  • the temperature of the solution after addition of the quenching agent (i) is not particularly limited as long as the phosphoramidized nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) can be quenched, preferably 5 to 40° C., more preferably. is 15-30°C.
  • the stirring time of the solution after addition of quenching agent (i) varies depending on the type of quenching agent (i) used, temperature, etc., but is, for example, 10 minutes to 3 hours.
  • step (3) (oxidation)
  • compound (I) excluding 2,2-dipyridyl disulfide
  • step (3) compound (I) (excluding 2,2-dipyridyl disulfide) is used as an oxidizing agent to oxidize the phosphite ester bond of the oligonucleotide precursor (c) to form phosphoric acid. It is characterized by conversion to an ester bond.
  • step (3) an oxidizing agent (i.e., compound (I)) is added to the solution after step (2) to oxidize the oligonucleotide precursor (c), resulting in a phosphate ester bond and An oligonucleotide (d) is formed which has a hydrophobic protecting group and whose hydroxyl group is protected with a temporary protecting group that can be removed under acidic conditions. Descriptions of oxidizing agents and oxidation are provided above.
  • the oligonucleotide precursor (c) is preferably an oligonucleotide precursor having a thiophosphate ester bond in addition to a phosphite ester bond.
  • Aromatic amine is preferably added to the solution after step (3).
  • Aromatic amines may be used alone or in combination of two or more. Addition of an aromatic amine can further suppress the formation of defect bodies.
  • the addition of the aromatic amine may be after step (3) and before the addition of the quenching agent in step (4), or the quenching agent (ii) and the aromatic amine may be added simultaneously in step (4). Alternatively, quenching agent (ii) and aromatic amine may be added sequentially in step (4).
  • aromatic amines examples include aniline, 2-chloroaniline, 3-chloroaniline, 2,4-dichloroaniline, 2-fluoroaniline, 4-methoxyaniline, 4-nitroaniline, 2,6-dichloroaniline, 2 , 6-xylidine and the like.
  • Aromatic amines are preferably aniline, 2-chloroaniline, 3-chloroaniline, 2,4-dichloroaniline, 2-fluoroaniline, 4-methoxyaniline, 4-nitroaniline, 2,6-dichloroaniline, 2, At least one selected from the group consisting of 6-xylidine, more preferably 2-chloroaniline and/or 2,6-xylidine, still more preferably 2,6-xylidine (that is, 2,6-dimethylaniline ).
  • the amount of aromatic amine used is preferably 1 to 20 mol, more preferably 1 to 10 mol, and still more preferably 1 to 5 mol, per 1 mol of the oxidizing agent used in step (3). be.
  • Step (4) quenching of oxidizing agent
  • the oxidizing agent quenching agent (ii) is added to the solution after step (3) to quench the oxidizing agent.
  • the quenching agent (ii) may be used alone or in combination of two or more.
  • the quenching agent (ii) is preferably an organophosphorus compound. Only one type of organic phosphorus compound may be used, or two or more types may be used in combination.
  • the organic phosphorus compound is preferably at least one selected from the group consisting of phosphines, phosphite triesters, phosphite esters, phosphonite diesters and phosphinate esters, and more preferably phosphines.
  • phosphines phosphite triesters, phosphite esters, phosphonite diesters and phosphinate esters, and more preferably phosphines.
  • phosphines and the like may be used alone or in combination of two or more.
  • Phosphines are compounds represented by the formula: P(R) 3 (wherein the three R's each independently represent a hydrogen atom, an alkyl group or an aryl group). Phosphines include, for example, triphenylphosphine and methyldiphenylphosphine.
  • a phosphite triester is a compound represented by the formula: P(OR') 3 (wherein the three R's each independently represent an alkyl group or an aryl group).
  • Phosphite triesters include, for example, triethyl phosphite.
  • Phosphite esters have the formula: P(OR')(R) 2 (wherein the two R's each independently represent a hydrogen atom, an alkyl group or an aryl group, and R' is an alkyl group or an aryl It is a compound represented by ).
  • Phosphite esters include, for example, ethoxydiphenylphosphine and the like.
  • Phosphonite diesters have the formula: P(R)(OR') 2, where R represents a hydrogen atom, an alkyl group or an aryl group, and two R' are each independently an alkyl group or (representing an aryl group).
  • Examples of phosphonous diesters include diethoxyphenylphosphine and the like.
  • Phosphinate esters include, for example, 9,10-dihydro-9-oxa-10-phosphaphenanthrene 10-oxide represented by the following formula.
  • the quenching agent (ii) is preferably triphenylphosphine, methyldiphenylphosphine, triethyl phosphite, ethoxydiphenylphosphine, diethoxyphenylphosphine, and 9,10-dihydro-9- It is at least one selected from the group consisting of oxa-10-phosphaphenanthrene 10-oxide, more preferably triphenylphosphine and/or methyldiphenylphosphine, still more preferably triphenylphosphine.
  • the amount of the quenching agent (ii) to be used is sufficient as long as it can quench the surplus of the oxidizing agent in the step (3). It is preferably 1 to 10 mol, more preferably 1 to 5 mol, per 1 mol of phosphoramidized nucleoside, nucleotide or oligonucleotide (b) used in step (1)).
  • the temperature of the solution after addition of the quenching agent (ii) is not particularly limited as long as the oxidizing agent can be quenched, but is preferably 0°C to 50°C, more preferably 10°C to 40°C.
  • the stirring time of the solution after addition of quenching agent (ii) varies depending on the type of quenching agent (ii) used, temperature, etc., but is preferably 5 minutes to 5 hours, more preferably 5 minutes to 2 hours.
  • Step (5) (removal of temporary protecting group)
  • an acid is added to the solution after step (4) to remove temporary protecting groups removable under acidic conditions of said oligonucleotide (d), resulting in unprotected hydroxyl groups and hydrophobic
  • An oligonucleotide (e) with protecting groups is formed. Only one type of acid may be used, or two or more types may be used in combination.
  • the acid is not particularly limited as long as it can remove the temporary protecting group well, and examples thereof include trifluoroacetic acid, dichloroacetic acid, trifluoromethanesulfonic acid, trichloroacetic acid, methanesulfonic acid, hydrochloric acid, acetic acid, p-toluenesulfonic acid and the like. .
  • trifluoroacetic acid, dichloroacetic acid, trifluoromethanesulfonic acid and trichloroacetic acid are more preferred, trifluoroacetic acid, dichloroacetic acid and trifluoromethanesulfonic acid are more preferred, trifluoroacetic acid and trifluoromethane Sulfonic acids are even more preferred, and trifluoroacetic acid is particularly preferred.
  • the amount of acid used is, for example, 1 to 100 mol, preferably 1 to 40 mol, per 1 mol of oligonucleotide (d).
  • the reaction temperature in step (5) is not particularly limited as long as the reaction proceeds, but is, for example, -10°C to 50°C, more preferably 0°C to 40°C.
  • the reaction time varies depending on the oligonucleotide (d) used, the type of acid, the type of nonpolar solvent, the reaction temperature, etc., and is, for example, 5 minutes to 5 hours.
  • a cation scavenger is preferably added to the solution before, during or after removal of the temporary protecting group of oligonucleotide (d). That is, it is preferable to remove the temporary protecting group in the presence of the cation scavenger, or to add the cation scavenger to the reaction solution after removing the temporary protecting group. Only one kind of cation scavenger may be used, or two or more kinds thereof may be used in combination.
  • the cation scavenger is not particularly limited as long as the removed temporary protecting group does not reprotect or undergo a side reaction to the deprotected functional group, but pyrrole, 2-methylpyrrole, 3-methylpyrrole, 2 ,3-dimethylpyrrole, 2,4-dimethylpyrrole and other pyrrole derivatives; , 6,7-dimethylindole, 5-methoxyindole, and other indole derivatives; 2-methylfuran, 2,3-dimethylfuran, 2-methyl-3-(methylthio)furan, menthofuran, and other furan derivatives. can be done.
  • the amount of the cation scavenger to be used is preferably 1-50 mol, more preferably 5-20 mol, per 1 mol of the oligonucleotide (d).
  • Step (6) neutralization
  • the one-pot synthesis includes step (6) of adding a base to the solution after step (5) after step (5) and before step (7). ) may be further included.
  • step (7) solid-liquid separation
  • step (6) neutralization
  • organic bases include pyridine, 2,4,6-trimethylpyridine, benzimidazole, 1,2,4-triazole, N-phenylimidazole, 2-amino-4,6-dimethylpyrimidine, 1,10-phenanthroline. , imidazole, N-methylimidazole, 2-chlorobenzimidazole, 2-bromobenzimidazole, 2-methylimidazole, 2-phenylbenzimidazole, N-phenylbenzimidazole, 5-nitrobenzimidazole and the like.
  • pyridine, 2,4,6-trimethylpyridine, benzimidazole, 1,2,4-triazole, N-phenylimidazole, N-methylimidazole, 2-amino-4,6-dimethylpyrimidine, 1, 10-phenanthroline is preferred
  • pyridine, 2,4,6-trimethylpyridine, benzimidazole, 1,2,4-triazole, N-phenylimidazole are more preferred
  • pyridine, 2,4,6-trimethylpyridine, benzimidazole, 1,2,4-triazole is more preferred
  • pyridine, 2,4,6-trimethylpyridine and benzimidazole are particularly preferred.
  • the amount of base used in step (6) is preferably 1 to 10 mol, more preferably 1 to 3 mol, per 1 mol of acid used in step (5).
  • Step (7) solid-liquid separation
  • a polar solvent is added to the solution containing the oligonucleotide (e) (i.e., the solution after step (5) or, if necessary, the solution after step (6)) to obtain the oligonucleotide (e) is deposited.
  • Polar solvents used in step (7) include, for example, alcohol solvents such as methanol, ethanol and isopropanol; nitrile solvents such as acetonitrile and propionitrile; ketone solvents such as acetone and 2-butanone; polar ether solvents such as dioxane and tetrahydrofuran; amide solvents such as dimethylformamide, dimethylacetamide and N-methylpiperidone; sulfoxide solvents such as dimethylsulfoxide; A polar solvent may use only 1 type and may use 2 or more types together. Among these, nitrile solvents are preferable, and acetonitrile is more preferable.
  • the amount of the polar solvent added in the solid-liquid separation is preferably 1 to 20 mL, more preferably 5 to 20 mL, per 1 mL of the nonpolar solvent contained in the solution. , more preferably 5-10 mL.
  • a precipitation accelerator for example, 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzylpivalate
  • WO 2016/117663 a precipitation accelerator
  • the precipitated oligonucleotide (e) can be recovered by known means such as filtration.
  • the oligonucleotide chain can be extended by repeating the one-pot synthesis including steps (1) to (5) and (7) (preferably steps (1) to (7)).
  • a method for producing an oligonucleotide by repeating such one-pot synthesis is also included in the production method of the present invention.
  • the protecting group eg, phosphate group protecting group, hydrophobic protecting group
  • the resulting oligonucleotide (e) is removed by a known method.
  • the present invention provides novel compounds of the formula (In):
  • R 1n represents an optionally substituted phenyl group
  • p′ represents 0, ring C′′ represents a nitrogen atom-containing 10-membered bicyclic condensed aromatic heterocycle
  • q ' indicates 0,
  • R 1n represents an optionally substituted phenyl group
  • p′ represents 0, ring C′′ represents a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocycle
  • q′ represents 1
  • R 3n represents a C 1-6 perfluoroalkyl group
  • R 1n represents an optionally substituted phenyl group
  • p′ represents 1, ring C′′ represents a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocycle
  • q′ represents 0,
  • R 1n represents a pyridyl group substituted with one C 1-6 alkyl group
  • p′ represents 0, ring C′′ represents a 6-membered nitrogen-containing aromatic heterocyclic ring
  • q ' indicates 0.
  • a compound represented by is also provided.
  • the compound (In) is oxidized to oxidize an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond or a phosphonate ester bond (particularly, an oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond). useful as an agent. Only one compound (In) may be used, or two or more thereof may be used in combination.
  • the "optionally substituted phenyl group” of R 1n is preferably a phenyl group.
  • the “pyridyl group substituted with 1 C 1-6 alkyl group” of R 1n is preferably a pyridyl group substituted with 1 methyl group, more preferably 4-methyl-2-pyridyl is the base.
  • the "nitrogen atom-containing 10-membered bicyclic fused aromatic heterocycle" of ring C" is preferably a quinoline ring.
  • the "6-membered nitrogen-containing aromatic heterocycle” of Ring C" is preferably a pyridine ring.
  • the “C 1-6 perfluoroalkyl group” of R 3n is preferably a trifluoromethyl group.
  • Compound (In) is preferably 2-phenylisothiazolo[5,4-b]quinolin-3(2H)-one (compound (Ic-11)), 2-phenyl-5-trifluoromethylisothiazolo[5 ,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-12)), 2-phenyl-2H-1,2-benzothiazin-3(4H)-one (compound (Ic-13)), or 2-(4-methyl-2-pyridinyl)isothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (compound (Ic-15)).
  • Compound (In) can be prepared by the above-mentioned "method for producing compound (Ic) wherein Y 1c is carbonyl", synthesis examples described later, known methods (e.g., the method described in Supporting Information of Non-Patent Document 2), or It can be manufactured by the method according to.
  • oligonucleotide HO-T-SUC-TOB: deoxythymidin-3′-yl 3,4,5-tris(octadecyloxy)benzylsuccinate
  • HO-T(S)T-SUC-TOB deoxythymidine-3′-[O -(2-cyanoethyl)]phosphorothionyl deoxythymidin-3′-yl-[3,4,5-tris(octadecyloxy)benzyl]succinate
  • oligonucleotide precursor DMTrO-G(III)A(S)C(S)T(S)T-SUC-TOB: 5′-O-(4,4′-dimethoxytrityl)-N 2 -isobutyryl-deoxyguanosine-3′- [O-(2-cyanoethyl)]phosphityl N 6 -[1-(dimethylamino)ethylidene]-deoxyadenosine-3′-[O-(2-cyanoethyl)]phosphorothionyl N 4 -benzoyl-deoxycytidine 3′-[ O-(2-cyanoethyl)]phosphorothionyl deoxythymidine-3'-[O-(2-cyanoethyl)]phosphorothionyl deoxythymidin-3'-yl-[3,4,5-tris(octadecyloxy)benzyl]succinate DMT
  • Synthesis Example 1 Synthesis of oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond . 5.0 mmol), dehydrated dichloromethane (100 mL) and dehydrated acetonitrile (30 mL) were added to prepare a solution. dT-CE phosphoramidite (3.0 g, 4.0 mmol) and triphenylphosphine (270 mg, 1.0 mmol) were then added and the solution was stirred for 30 minutes. Subsequently 5-ethylthio-1H-tetrazole (530 mg, 4.0 mmol) was added and the solution was stirred at room temperature for 45 minutes.
  • 2,2,2-Trifluoroethanol (1.5 mL, 20 mmol) was then added to the solution and stirred at room temperature for 30 minutes, followed by 2,6-dimethylaniline (1.8 mL, 15 mmol) and POS (1.0 g). , 5.1 mmol) was added and the solution was stirred at room temperature for 1.0 hour. After that, 2,3-dimethylfuran (2.1 mL, 20 mmol), trifluoroacetic acid (5.2 mL, 68 mmol), and 2,6-dimethylaniline (83.5 ⁇ L, 0.7 ⁇ mol) were sequentially added, and the solution was brought to room temperature. and stirred for 55 minutes.
  • Example 1 Compound (Ib-1) was added to a 20 mL two-necked flask under an argon oxide atmosphere, and the solid obtained in Synthesis Example 1 (100.0 mg: DMTrO-G (III) A (S) C ( S)T(S)T-SUC-TOB (56.9 mg, 17.4 ⁇ mol), dehydrated dichloromethane (0.9 mL) and dehydrated acetonitrile (0.3 mL) were added to prepare a solution. Water (9 ⁇ L, 0.5 mmol) and compound (Ib-1) (12.1 mg, 36.4 ⁇ mol) were then sequentially added, and the solution was stirred at room temperature for 60 minutes.
  • Triphenylphosphine (4.6 mg, 18 ⁇ mol) was then added and the solution was stirred for 30 minutes. Subsequently, acetonitrile (10 mL) was added, and the precipitated solid was collected by suction filtration using a Kiriyama funnel, dried, and Piv-TOB and the pentamer oligonucleotide DMTrO-G(O)A. A mixture of (S)C(S)T(S)T-SUC-TOB was obtained (82 mg, 82% yield). In addition, the compound (Ib-1) used the commercial item. m/z: Calcd. 3277.48, Found 1639.75 [M+2H] 2+
  • Example 2 Compound (Ic-1) was added to a 20 mL two-necked flask under an argon oxide atmosphere, and the solid obtained in Synthesis Example 1 (100 mg: DMTrO-G(III)A(S)C(S)T (57 mg as (S)T-SUC-TOB, 17 ⁇ mol), dehydrated dichloromethane (0.9 mL), and dehydrated acetonitrile (0.3 mL) were added to prepare a solution. Water (9 ⁇ L, 0.5 mmol) and compound (Ic-1) (8.0 mg, 35 ⁇ mol) were then sequentially added and the solution was stirred at room temperature for 60 minutes.
  • Triphenylphosphine (4.7 mg, 18 ⁇ mol) was then added and the solution was stirred for 30 minutes. Subsequently, acetonitrile (10 mL) was added, the precipitated solid was collected by suction filtration using a Kiriyama funnel, dried, and Piv-TOB and the pentameric oligonucleotide DMTrO-G(O)A(S ) to give a mixture of C(S)T(S)T-SUC-TOB (83 mg, 83% yield).
  • the compound (Ic-1) used was synthesized by the method described in Supporting Information of Non-Patent Document 2. m/z: Calcd. 3277.48, Found 1639.75 [M+2H] 2+
  • Triphenylphosphine (4.8 mg, 18 ⁇ mol) was then added and the solution was stirred for 30 minutes. Subsequently, acetonitrile (10 mL) was added, and the precipitated solid was collected by suction filtration using a Kiriyama funnel, dried, and Piv-TOB and the pentameric oligonucleotide DMTrO-G(O)A ( A mixture of S)C(S)T(S)T-SUC-TOB was obtained (83 mg, 83% yield). m/z: Calcd. 3277.48, Found 1639.75 [M+2H] 2+
  • Example 1 The solid (10 mg) obtained in Example 1, Example 2 or Comparative Example 1 and 28% by weight aqueous ammonia (5 mL) were placed in an autoclave, heated at 65° C. for 4 hours, and then cooled to room temperature. After removing insoluble matter in the reaction solution with a syringe filter, it was concentrated under reduced pressure with a centrifugal evaporator, and the oligonucleotide DMTrO-G(O)A(S)C(S)T(S)T-OH having a thiophosphate ester bond was obtained. (hereinafter referred to as "the oligonucleotide of interest”) was obtained. m/z: Calcd. 1827.36, Found 1826.34 [MH] -
  • the resulting mixture containing the oligonucleotide of interest and the desulfurized product was analyzed by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS).
  • LC-MS liquid chromatography-mass spectrometry
  • EIC extracted ion chromatogram
  • Percentage of desulfurized product (%) (peak area of desulfurized product/peak area of target oligonucleotide) x 100
  • the ratio (%) of the desulfurized product was calculated. Table 1 shows the results.
  • Synthesis Example 2 Synthesis of Oligonucleotide Precursor Having Phosphonate Ester Bond HO-T-SUC-TOB (500 mg, 400 ⁇ mol), dT-H-phosphonate TEA salt (568 mg, 800 ⁇ mol) in a 200 mL three-necked flask under an argon atmosphere. , anhydrous dichloromethane (10 mL), and anhydrous pyridine (10 mL) were added to form a solution. Subsequently pivaloyl chloride (0.2 mL, 1.6 mmol) was added and the solution was stirred for 1 hour.
  • Example 3 Using compound (Ic-1), the oligonucleotide precursor (171 mg, 93 ⁇ mol) obtained in Synthesis Example 2, dichloromethane (4.7 mL), and acetonitrile were placed in a 50 mL two-necked flask under an oxidized argon atmosphere. (1.4 mL) was added to prepare a solution. Subsequently, water (60 ⁇ L), compound (Ic-1) (43 mg, 189 ⁇ mol) and diazabicycloundecene (DBU) (55 ⁇ L, 372 ⁇ mol) were added and the solution was stirred at room temperature for 2 hours.
  • DBU diazabicycloundecene
  • Example 4 Using compound (Ib-1), the oligonucleotide precursor (170 mg, 93 ⁇ mol) obtained in Synthesis Example 2, dichloromethane (4.7 mL), and acetonitrile were placed in a 50 mL two-necked flask under an oxidized argon atmosphere. (1.4 mL) was added to prepare a solution. Subsequently, compound (Ib-1) (62 mg, 186 ⁇ mol) and DBU (55 ⁇ L, 372 ⁇ mol) were added and the solution was stirred at room temperature for 2 hours.
  • Non-Patent Document 1 ARKIVOC 2009 (iii) 264-273
  • H-phosphonate compound 1
  • a nucleoside compound 2
  • compound 4 a dinucleotide
  • the obtained solid (10 mg) and 28% by weight aqueous ammonia (5 mL) were placed in an autoclave, heated at 65°C for 4 hours, and then cooled to room temperature. After removing insoluble matter in the reaction solution with a syringe filter, the solution was concentrated under reduced pressure with a centrifugal evaporator, and the obtained concentrate was subjected to LC-MS analysis.
  • the obtained solid (10 mg) and 28% by weight aqueous ammonia (5 mL) were placed in an autoclave, heated at 65°C for 4 hours, and then cooled to room temperature. After removing insoluble matter in the reaction solution with a syringe filter, the solution was concentrated under reduced pressure with a centrifugal evaporator, and the obtained concentrate was subjected to LC-MS analysis.
  • oligonucleotide of interest The amount of the oligonucleotide HO-T(S)T(S)T-OH having an evaluation thiophosphate ester bond (hereinafter referred to as the "oligonucleotide of interest"), and the oligonucleotide of interest and the oxidizing agent (2 ,2′-dipyridyl disulfide or compound (Ib-1)) formed by reaction (hereinafter referred to as “by-product”) was measured as follows, and the amount of by-product was calculated.
  • Synthesis Example 3 Synthesis of 2-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-2)) In a 200 mL eggplant flask, tetrahydrofuran (100 mL), 2-mercaptopropionic acid (10 mmol), and compound ( Ib-1) (20 mmol) was added and the solution was stirred for 24 hours. After that, the solution was filtered, the solvent of the filtrate was distilled off under reduced pressure, and the resulting concentrate was purified by silica gel column chromatography to obtain the desired product (1.6 g).
  • Synthesis Example 4 Synthesis of 3-(2-benzothiazolyldithio)propanoic acid (compound (Ib-3)) Tetrahydrofuran (100 mL), 3-mercaptopropionic acid (10 mmol), and compound ( Ib-1) (20 mmol) was added to prepare a solution and the solution was stirred for 24 hours. After that, the solution was filtered, the solvent of the filtrate was distilled off under reduced pressure, and the resulting concentrate was purified by silica gel column chromatography to obtain the desired product (1.3 g).
  • Synthesis Example 5 Synthesis of 2,2'-dibenzimidazolyl disulfide (compound (Ib-4)) Dichloromethane (150 mL), 2-mercaptobenzimidazole (20 mmol), and triethylamine (22 mmol) were added to a 300 mL round-bottom flask, and then Iodine (11 mmol) was added and the solution was stirred for 3 hours. Thereafter, the solution was filtered, the solvent of the filtrate was distilled off under reduced pressure, and the resulting concentrate was recrystallized using diethyl ether and ethanol to obtain the desired product (2.5 g).
  • Synthesis Example 6 Synthesis of 2,2'-dibenzoxazolyl disulfide (compound (Ib-5)) 2-mercaptobenzoxazole (1.5 g, 10 mmol) and ethyl acetate (18 mL) were added to a 30 mL eggplant flask. , a solution was prepared. Hydrogen peroxide (33% by weight, 489 ⁇ L) was added dropwise to the solution at 0° C. over 60 minutes, then the solution was warmed to room temperature and stirred for 2.5 hours. Water (1.4 mL) was added to the solution and the mixture was stirred for 10 minutes, then the organic layer was separated and the aqueous layer was extracted twice with ethyl acetate (5 mL).
  • Synthesis Example 7 Synthesis of 2,2′-dithiobis(pyridine-N-oxide) (compound (Ib-8)) Into a 100 mL round-bottomed flask, 2-mercaptopyridine-N-oxide (3.8 g, 30 mmol) and water ( 27 mL) was added to prepare a solution. Hydrogen peroxide (33% by weight, 3.2 mL) was added dropwise to the solution at 0° C. over 60 minutes, then the solution was heated to 40° C. and stirred for 1 hour. The solution was filtered to collect a solid, which was washed with methanol and dried under reduced pressure to obtain the target product (1.2 g).
  • Synthesis Example 8 Synthesis of oligonucleotide precursor having a phosphite ester bond. Anhydrous acetonitrile (26 mL) was added to form a solution. Then molecular sieves 3A (1.7 g), triphenylphosphine (227 mg, 867 ⁇ mol), dT-CE phosphoramidite (2.6 g, 3.5 mmol) and 5-ethylthio-1H-tetrazole (452 mg, 3.47 mmol). were sequentially added, and the mixture was stirred at room temperature for 60 minutes. Trifluoroethanol (1.3 mL, 17 mmol) was added to the reaction solution and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes.
  • Examples 5-15 and Comparative Example 2 DMTrO-C(III)T(S)T-SUC-TOB (60 mg, 25 ⁇ mol), dehydrated dichloromethane (1.3 mL) and dehydrated acetonitrile in oxidation flasks using various oxidizing agents. (0.4 mL) was added to prepare a solution. After water (17 ⁇ L) was added to the solution, various oxidizing agents (38 ⁇ mol) shown in Table 3 below were added, and the mixture was stirred at room temperature for 3 hours to oxidize the trimer oligonucleotide DMTrO—C(O). T(S)T-SUC-TOB (hereinafter referred to as "oxidant”) was synthesized.
  • oxidant T(S)T-SUC-TOB
  • the oligonucleotide precursor can be oxidized more efficiently than the 2,2'-dipyridyl disulfide used in .
  • Example 16 Synthesis of DMTrO-Af(O)Cm(O)T(O)T-OH using compound (Ib-1) as an oxidizing agent Under an argon atmosphere, HO-T-SUC was placed in a 300 mL two-necked flask. -TOB (351 mg, 284 ⁇ mol), Piv-TOB (350 mg, 350 ⁇ mol), dehydrated dichloromethane (14 mL) and dehydrated acetonitrile (4 mL) were added to prepare a solution.
  • Triphenylphosphine (74.2 mg, 283 ⁇ mol) was then added and the solution was stirred for 30 minutes before the sequential addition of 2,3-dimethylfuran (298 ⁇ L, 2.83 mmol) and trifluoroacetic acid (563 ⁇ L, 7.35 mmol). , the solution was stirred at room temperature for 30 minutes. Further trifluoroacetic acid (86.6 ⁇ L, 1.13 mmol) was added and the solution was stirred at room temperature for 30 minutes. Pyridine (2.0 mL, 25 mmol) and water (120 ⁇ L) were then sequentially added to the solution, and the solution was stirred at room temperature for 60 minutes.
  • Piv-TOB and trimer were produced in the same manner as above, except that the solid obtained above (766 mg) and 2'-OMe-C-CE phosphoramidite were used instead of dT-CE phosphoramidite.
  • a mixture of oligonucleotides HO-Cm(O)T(O)T-SUC-TOB was obtained (875 mg, 98% yield). m/z: Calcd. 2070.17, Found 2071.19 [M+H] +
  • Example 17 Synthesis of DMTrO-Af(O)Cm(O)T(O)T-OH using compound (Ic-1) as an oxidizing agent Compound (Ib-1) was changed to compound (Ic-1) An aqueous solution of DMTrO--Af(O)Cm(O)T(O)T--OH was obtained in the same manner as in Example 16 except for the above. m/z: Calcd. 1498.39, Found 1497.37 [MH] -
  • Comparative Example 3 Synthesis of DMTrO-Af(O)Cm(O)T(O)T-OH using iodine as an oxidizing agent Under an argon atmosphere, HO-T-SUC-TOB (354 mg, 286 ⁇ mol) and Piv-TOB (351 mg, 352 ⁇ mol) were added, followed by dry dichloromethane (14 mL) and dry acetonitrile (4.2 mL) to prepare a solution. Then dT-CE phosphoramidite (406 mg, 545 ⁇ mol) and 5-ethylthio-1H-tetrazole (70.1 mg, 539 ⁇ mol) were added sequentially and the solution was stirred at room temperature for 45 minutes.
  • Piv-TOB and trimer were produced in the same manner as above, except that the solid obtained above (812 mg) and 2'-OMe-C-CE phosphoramidite were used instead of dT-CE phosphoramidite.
  • a mixture of oligonucleotides HO-Cm(O)T(O)T-SUC-TOB was obtained (893 mg, 94% yield). m/z: Calcd. 2070.17, Found 2071.19 [M+H] +
  • DMTrO-Af(O)Cm(O)T(O)T-OH (hereinafter "Oligonucleotide of interest")
  • DMTrO-Af(O)Cm(O)T-OH or DMTrO which is a trimer lacking the second or third residue from the oligonucleotide of interest, respectively -Af(O)T(O)T-OH (hereinafter referred to as "deficiency”) was measured by MS analysis.
  • Example 18 Synthesis of HO-Af(O)Cm(O)T(O)T-SUC-TOB using compound (Ic-1) as oxidant (with addition of aromatic amine) HO-T-SUC-TOB (6.4 g, 5.2 mmol), Piv-TOB (13 g, 13 mmol), dehydrated dichloromethane (349 mL) and dehydrated acetonitrile (98 mL) were added to a 3 L three-necked flask under an argon atmosphere. , a solution was prepared.
  • Triphenylphosphine 1. g, 5.2 mmol
  • 2,6-xylidine 5.5 mL, 45 mmol
  • 2,3-dimethylfuran 5.4 mL, 52 mmol
  • trifluoroacetic acid 13.8 mL, 180 mmol
  • Pyridine 43.7 mL, 541 mmol
  • water 2.5 mL
  • DMTrO-Af(O)Cm(O)T(O)T-SUC-TOB (3.4 mg) obtained above and 28% by weight aqueous ammonia (5 mL) were placed in an autoclave and heated at 65° C. for 4 hours. After that, it was cooled to room temperature. After removing insoluble matter in the reaction solution with a syringe filter, the solution was concentrated under reduced pressure with a centrifugal evaporator to obtain an aqueous solution of DMTrO-Af(O)Cm(O)T(O)T-OH. m/z: Calcd. 1498.39, Found 1497.37 [MH] -
  • Example 17 and Example 18 DMTrO-Af(O)Cm(O)T(O)T-OH in the aqueous solution obtained in Example 17 and Example 18 (hereinafter referred to as "oligonucleotide of interest” ), and DMTrO-Af(O)Cm(O)T-OH or DMTrO-Af(O)T(O), which are trimers lacking the second or third residue from the oligonucleotide of interest, respectively. ) T—OH (hereinafter referred to as “deleted body”) was measured by MS analysis.
  • Example 19 Synthesis of HO- MeC (O)A(O)G(O)T(S)T-SUC-TOB using compound (Ib-1) as oxidant HO-T(S)T-SUC-TOB (250 mg, 88 ⁇ mol), dehydrated dichloromethane (4.4 mL) and dehydrated acetonitrile (1.3 mL) were added to the flask to prepare a solution.
  • dG-CE phosphoramidite 149 mg, 176 ⁇ mol
  • 5-ethylthio-1H-tetrazole 23 mg, 0.18 mmol
  • 2,2,2-Trifluoroethanol 38 ⁇ L, 0.53 mmol was then added to the solution and the solution was stirred at room temperature for 30 minutes. Subsequently, water (70 ⁇ L) and compound (Ib-1) (59 mg, 18 mmol) were added and the solution was stirred at room temperature for 60 minutes. After sampling a portion of the solution, 2,3-dimethylfuran (46 ⁇ L, 0.88 mmol) and trifluoroacetic acid (102 ⁇ L, 1.32 mmol) were added sequentially to the solution, and the solution was stirred at room temperature for 80 minutes.
  • Example 20 Synthesis of HO-MeC(O)A(O)G(O)T(S)T-SUC-TOB using compound (Ib-1) as oxidant ( with addition of aromatic amine)
  • compound (Ib-1) as oxidant (with addition of aromatic amine)
  • 2,6-xylidine 3 mol per 1 mol of compound (Ib-1) was added as an aromatic amine.
  • SUC-TOB was obtained (121 mg).
  • Example 21 Oligonucleotides that are 20-mers (DMTrO-Um(O)Cm(O)Am(O)Am(O)Gm(S)Gm(S)Am(S)Am(S)Gm(S) Am(S)Um(S)Gm(S)Gm(S)Cm(S)Am(S)Um(S)Um(S)Cm(S)Um-OH) (SEQ ID NO: 1) Solid Phase Synthesis Oligonucleotides that are 20-mer mers of the above sequence were synthesized by solid phase synthesis by the phosphoramidite method (in the above sequence, Am represents a 2′-O-methyladenosine residue, Cm represents a 2′ -O- represents a methylcytidine residue, Gm represents a 2'-O-methylguanosine residue, Um represents a 2'-O-methyluridine residue, (O) represents the formula (P3- 1) represents a phosphate este
  • 5′-O-(4,4′-dimethoxytrityl)-2′-O-methyluridine supported at 41 ⁇ mol/g on a porous glass (CPG) solid phase carrier (manufactured by ChemGenes) (solid Amount of phase carrier: 24 mg, amount of 5′-O-(4,4′-dimethoxytrityl)-2′-O-methyluridine: 1 ⁇ mol) was placed in a column equipped with a glass filter, and an oligonucleotide synthesizer (trade name “ nS-8", manufactured by Gene Design), synthesis was carried out from the 3' side to the 5' side.
  • CPG porous glass
  • a mixed solution of 10% by weight acetic anhydride in THF and a THF solution of 1-methylimidazole and pyridine was used as a capping reagent, and a dichloromethane solution of trichloroacetic acid (TCA) was used as a detritylation reagent.
  • TCA trichloroacetic acid
  • an oxidizing agent (1) 0.01 M pyridine solution of compound (Ib-1), (2) 0.1 M pyridine solution of compound (Ic-1), or (3) 0.02 M compound (Ic- The acetonitrile solution of 1) was used.
  • Dehydrated DMF (10 mL) was added to the solid to prepare a diluted solution.
  • dehydrated DMF (2 mL) sodium hydroxide (0.48 g, 12 mmol), and tert-butyl mercaptan (1.4 mL, 12 mmol) were added to a 100 mL flask and stirred under ice-cooling to obtain After the diluent was added dropwise to the resulting mixture, the mixture was warmed to room temperature and stirred for 4 hours. Water (120 mL) was then slowly added dropwise to the mixture under an ice bath.
  • the precipitated solid was collected by filtration, ethanol (400 mL) was added, the mixture was stirred at 100° C., and then the mixture was cooled to room temperature. The solid that precipitated out of the mixture was collected by filtration and the solid obtained was dried under reduced pressure (1.7 g). Also, the filtrate was concentrated under reduced pressure, ethanol (400 mL) was added, the mixture was stirred at 100° C., water (200 mL) was added dropwise, and the mixture was cooled to room temperature. The solid that precipitated out of the mixture was collected by filtration and the resulting solid was dried under reduced pressure (0.85g). The resulting 1.7 g of solid was mixed with 0.85 g of solid, of which 2.0 g was used in the next step.
  • Synthesis Example 10 Synthesis of 2-phenyl-5-trifluoromethylisothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (Compound (Ic-12)) Into a 200 mL flask was added 2-chloro-5- (Trifluoromethyl)pyridine-3-carboxylic acid (2.5 g, 11 mmol) and thionyl chloride (37 mL) were added and the mixture was stirred at 80° C. for 4 hours. After thionyl chloride was distilled off under reduced pressure, toluene (30 mL) was added, and the resulting solution was concentrated under reduced pressure to obtain a concentrate.
  • 2-chloro-5- (Trifluoromethyl)pyridine-3-carboxylic acid 2.5 g, 11 mmol
  • thionyl chloride 37 mL
  • Dehydrated DMF (5 mL) was added to the solid to prepare a diluted solution. Further, under an argon atmosphere, dehydrated DMF (2 mL), sodium hydroxide (0.47 g, 12 mmol) and tert-butyl mercaptan (1.3 mL, 11 mmol) were added to a 100 mL flask and stirred under ice cooling to obtain After the diluent was added dropwise to the resulting mixture, the mixture was warmed to room temperature and stirred for 4 hours. After that, water (70 mL) was slowly added dropwise to the mixture under ice-cooling.
  • the precipitated solid was collected by filtration, ethanol (30 mL) was added, the mixture was stirred at 100° C., water (30 mL) was added dropwise, and the mixture was cooled to room temperature. The precipitated solid was collected by filtration, and the resulting solid was dried under reduced pressure. Ethanol (30 mL) was added to the resulting solid, the mixture was stirred at 100° C., water (30 mL) was added dropwise, and the mixture was cooled to room temperature. The precipitated solid was collected by filtration and the solid obtained was dried under reduced pressure (3.4 g).
  • Synthesis Example 11 Synthesis of 2-phenyl-2H-1,2-benzothiazin-3(4H)-one (Compound (Ic-13))
  • 2-chloropyridine-3-acetonitrile 5 .0 g, 33 mmol
  • 4 mol/L aqueous sodium hydroxide solution 75 mL
  • 6 mol/L hydrochloric acid 60 mL was slowly added dropwise under ice-cooling, and the mixture was stirred for 1 hour.
  • the precipitated solid was collected by filtration, washed with 2-propanol (40 mL) and dried under reduced pressure (5.6 g).
  • Dehydrated DMF (20 mL) was added to the concentrate to prepare a diluted solution. Also, under an argon atmosphere, dehydrated DMF (2 mL), sodium hydroxide (2.6 g, 64 mmol), and tert-butyl mercaptan (4.4 mL, 39 mmol) were added to a 300 mL flask and stirred for 10 minutes under ice-cooling. After the diluent was added dropwise to the obtained mixture, the mixture was stirred at 110° C. for 23 hours. After that, water (260 mL) was slowly added dropwise to the mixture under ice-cooling.
  • Synthesis Example 12 Synthesis of 2-(4-methyl-2-pyridinyl)isothiazolo[5,4-b]pyridin-3(2H)-one (Compound (Ic-15)) -Chloropyridine-3-carbonyl chloride (5.0 g, 28 mmol) and anhydrous THF (12 mL) were added and the mixture was stirred under ice cooling. To the resulting mixture, a solution of triethylamine (4.8 mL, 34 mmol), 2-amino-5-methylpyridine (3.7 g, 34 mmol) and anhydrous THF (28 mL) was added dropwise over 30 minutes and warmed to room temperature. and stirred for 23 hours.
  • Triethylamine 4.8 mL, 34 mmol
  • 2-amino-5-methylpyridine 3.7 g, 34 mmol
  • anhydrous THF 28 mL
  • Dehydrated DMF (20 mL) was added to the concentrate to prepare a diluted solution. Further, under an argon atmosphere, dehydrated DMF (4 mL), sodium hydroxide (1.3 g, 34 mmol), and tert-butyl mercaptan (3.6 mL, 32 mmol) were added to a 300 mL flask and stirred under ice cooling to obtain After the diluent was added dropwise to the resulting mixture, the mixture was warmed to room temperature and stirred for 5 hours. After that, water (240 mL) was slowly added dropwise to the mixture over 25 minutes under ice-cooling.
  • the precipitated solid was collected by filtration, ethanol (60 mL) was added, the mixture was stirred at 100° C., water (60 mL) was added dropwise, and the mixture was cooled under ice cooling. The precipitated solid was collected by filtration and the solid obtained was dried under reduced pressure (5.4 g).
  • Synthesis Example 13 Synthesis of Oligonucleotide Precursor Having Phosphite Ester Bond Under an argon atmosphere, HO- Me C-SUC-TOB (15.1 g, 11.2 mmol) and Piv-TOB (30.1 g) were placed in a 500 mL flask. , 30.2 mmol), dehydrated chloroform (562 mL) and dehydrated acetonitrile (169 mL) were added to prepare a solution. Molecular sieves 3A (11.2 g), dG-CE phosphoramidite (18.9 g, 22.5 mmol) and triphenylphosphine (1.5 g, 5.6 mmol) were then added and the solution was stirred for 30 minutes.
  • Examples 22-41 and Comparative Example 4 A mixture of DMTrO-G(III)A(S)G(S) Me C-SUC-TOB and Piv-TOB (100 mg: DMTrO- G(III)A(S)G(S) Me 2 C-SUC-TOB (52.8 mg, 0.018 mmol) and dry dichloromethane (0.9 mL) were added to prepare a solution. After adding pyridine (0.11 mmol) and water (8.8 ⁇ L) to the solution, various oxidizing agents (53 ⁇ mol) shown in Tables 7 to 9 below were added and stirred at room temperature for 3 hours for oxidation.
  • the oligonucleotide DMTrO-G(O)A(S)G(S) Me C-SUC-TOB was synthesized.
  • Triphenylphosphine (9.2 mg, 35 ⁇ mol) was then added and the solution was stirred at room temperature for 30 minutes. After that, acetonitrile (129 mL) was added, and the precipitated solid was collected by suction filtration using a Kiriyama funnel and then dried under reduced pressure. A mixture of S)G(S) MeC -SUC-TOB was obtained. m/z: Calcd. 3013.49, Found 3014.54 [M+H] +
  • Compounds (Ib-2) to (Ib-5) and compound (Ib-8) used were those obtained in Synthesis Examples 3 to 7 described above.
  • Compounds (Ic-11) to (Ic-13) and compound (Ic-15) used were those obtained in Synthesis Examples 9 to 12 described above.
  • Compound (Ic-1), Compound (Ic-2), Compound (Ic-5), Compound (Ic-10), Compound (Ic-14), Compound (Ic-16) and Compound (Ic-17) are The one synthesized by the method described in Supporting Information of Non-Patent Document 2 was used. Other oxidizing agents used were commercially available products.
  • sulfide Sulfurizing G(III) A(S) G(S) Me C-SUC-TOB to form DMTrO-G(S) A(S) G(S) Me C-SUC-TOB (hereinafter "sulfide" ) was synthesized to prepare a test solution containing an oxidant and a sulfide.
  • oligonucleotides by suppressing the production of the above-mentioned truncated forms or desulfurized forms compared to the case where iodine is used.
  • Oligonucleotides obtained by the production method of the present invention can be used for human or veterinary pharmaceuticals (RNA, DNA, oligonucleotide medicines, etc.), functional foods, foods for specified health uses, foods, chemical products, biological and industrial products. It can be used for various applications such as polymer materials.

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Abstract

本発明は、亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体を、酸化剤によって酸化して、リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドを製造する方法であって、前記酸化剤が、式（Ｉ）で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）である方法（式中の記号の定義は明細書に記載した通りである）を提供する。

Description

オリゴヌクレオチドの製造方法
　本発明は、オリゴヌクレオチドの製造方法に関するものである。
　オリゴヌクレオチドの製造方法として、ホスホロアミダイト法およびＨ－ホスホネート法が広く用いられている。酸化を行うホスホロアミダイト法では、例えば、下記式で表されるように、ホスホロアミダイト（化合物（１））とヌクレオシド（化合物（２））とを縮合して、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体（化合物（３））を合成し、次いで該オリゴヌクレオチド前駆体を酸化することによって、オリゴヌクレオチド（化合物（４））が得られる。なお、本明細書中、「式（１）で表される化合物」を「化合物（１）」と略称することがある。他の式で表される化合物、他の式で表される基等も、同様に略称することがある。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
［式中、ＤＭＴｒは４，４’－ジメトキシトリチル基を示し、ｉ－Ｐｒはイソプロピル基を示し、ＣＥは２－シアノエチル基を示し、ＢａｓｅおよびＢａｓｅ’は保護されていてもよい核酸塩基を示し、並びにＲは保護基または固相担体を示す。］
　なお、ホスホロアミダイト法では、ヌクレオシドに換えてヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（例えば、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド）を縮合させてもよい。また、ホスホロアミダイト法では、オリゴヌクレオチド前駆体の酸化に換えて、オリゴヌクレオチド前駆体の硫化を行ってもよい。
　酸化を行うＨ－ホスホネート法では、例えば下記式で表されるように、Ｈ－ホスホネート（化合物（５））と塩化ピバロイル（ＰｉｖＣｌ）とを反応させて、活性化されたＨ－ホスホネート（化合物（６））を合成し、これとヌクレオシド（化合物（７））とを縮合して、ホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体（化合物（８））を合成し、次いで該オリゴヌクレオチド前駆体を酸化することによってオリゴヌクレオチド（化合物（９））が得られる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
［式中、ＤＭＴｒは４，４’－ジメトキシトリチルを示し、Ｎ（Ｅｔ）３はトリエチルアミンを示し、ＢａｓｅおよびＢａｓｅ’は保護されていてもよい核酸塩基を示し、Ｐｉｖはピバロイル基を示し、並びにＲは保護基または固相担体を示す。］
　なお、Ｈ－ホスホネート法では、ヌクレオシドに換えてヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（例えば、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド）を縮合させてもよい。また、Ｈ－ホスホネート法では、オリゴヌクレオチド前駆体の酸化に換えて、オリゴヌクレオチド前駆体の硫化を行ってもよい。
　前述のような代表的なホスホロアミダイト法およびＨ－ホスホネート法以外にも、様々なオリゴヌクレオチドの製造方法が提案されている。例えば、非特許文献１には、下記式で示されるように、多量のトリフェニルホスフィンおよび多量の２，２’－ジピリジルジスルフィドの存在下で、Ｈ－ホスホネート（化合物１）およびヌクレオシド（化合物２）を、縮合および酸化して、ジヌクレオチド（化合物４）を製造することが開示されている。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
［式中、ＤＭＴｒは４，４’－ジメトキシトリチルを示し、Ｔｈはチミン塩基を示し、ＰＰｈ３はトリフェニルホスフィンを示し、およびＡｃはアセチル基を示す。］
　また、非特許文献２および特許文献１には、オリゴヌクレオチドの製造方法は開示されていないが、下記式で表されるように、亜リン酸トリエチル（Ｐ（ＯＥｔ）３）によってベンゾイソチアゾロン（benzoisothiazolone）誘導体（化合物１）を還元すること（言い換えれば、ベンゾイソチアゾロン誘導体（化合物１）によって亜リン酸トリエチル（Ｐ（ＯＥｔ）３）を酸化してリン酸トリエチル（Ｏ＝Ｐ（ＯＥｔ）３）を形成すること）が開示されている。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
国際公開第２０１７／０７０１５７号
ARKIVOC 2009 (iii) 264-273 J. Am. Chem. Soc. 2016, 138, 6715-6718
　ホスホロアミダイト法では、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体（例えば前記式（３）で表される化合物）の酸化に使用される酸化剤としてヨウ素が広く用いられている。また、Ｈ－ホスホネート法でも、ホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体（例えば前記式（８）で表される化合物）の酸化に使用される酸化剤としてヨウ素が広く用いられている。
　この点、本発明者らは、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体のための酸化剤としてヨウ素を用いると、前駆体の亜リン酸エステル結合部位が酸化剤と作用して分解することによって形成される副生成物（以下「欠損体」と記載することがある）が生成することを見出した。また、亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合に加えて、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体をヨウ素を用いて酸化すると、前記チオリン酸エステル結合がリン酸エステル結合に転化することによって形成される副生成物（以下「脱硫体」と記載することがある）が生成することを見出した。
　本発明は上記のような事情に着目してなされたものであって、その目的は、ヨウ素を使用する場合に比べて、前述の欠損体または脱硫体の生成を抑制することができるオリゴヌクレオチドの製造方法を提供することにある。
　本発明者らが鋭意検討を重ねた結果、式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
［式中、
　Ｘ１は、単結合、硫黄原子、酸素原子、－Ｓ（＝Ｏ）２－または－Ｎ（－Ｒ３）－を示し、
　Ｘ１が単結合である場合、Ｒ１は、ハロゲン原子を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　Ｘ１が硫黄原子または－Ｓ（＝Ｏ）２－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　Ｘ１が酸素原子である場合、Ｒ１およびＲ２は、それらが結合する硫黄原子および酸素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びに
　Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、並びにＲ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成するか、またはＲ１およびＲ３は、それらが結合する窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びにＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。］
で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）を酸化剤として用いて亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体を酸化することによって、前述の副生成物の生成を抑制することができることを見出した。この知見に基づく本発明は、以下の通りである。
　［１］　亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体を、酸化剤によって酸化して、リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドを製造する方法であって、
　前記酸化剤が、式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
［式中、
　Ｘ１は、単結合、硫黄原子、酸素原子、－Ｓ（＝Ｏ）２－または－Ｎ（－Ｒ３）－を示し、
　Ｘ１が単結合である場合、Ｒ１は、ハロゲン原子を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　Ｘ１が硫黄原子または－Ｓ（＝Ｏ）２－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　Ｘ１が酸素原子である場合、Ｒ１およびＲ２は、それらが結合する硫黄原子および酸素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びに
　Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、並びにＲ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成するか、またはＲ１およびＲ３は、それらが結合する窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びにＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。］
で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）である方法。
　［２］　前記式（Ｉ）で表される化合物が、式（Ｉａ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
［式中、
　Ｒ１ａは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　環Ａは、５または６員の不飽和複素環を示し、
　Ｙ１ａは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－を示し、
　ｍは、０～３の整数を示し、
　ｍ個のＲ２ａは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
　ｍが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ａは、環Ａと共に、置換されていてもよい縮合環を形成していてもよい。］
で表される化合物、および／または式（Ｉｂ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
［式中、
　Ｒ１ｂは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　環Ｂは、６員の芳香族炭化水素環、または５若しくは６員の芳香族複素環を示し、
　ｎは、０～５の整数を示し、
　ｎ個のＲ２ｂは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
　ｎが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ｂは、環Ｂと共に、置換されていてもよい２環式の縮合芳香族複素環を形成していてもよい。］
で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）
である、前記［１］に記載の方法。
　［３］　前記式（Ｉａ）で表される化合物が、式（Ｉｃ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
［式中、
　Ｒ１ｃは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　Ｙ１ｃは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－を示し、
　ｐは、０または１を示し、
　Ｒ２ｃは、水素原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、
　環Ｃは、６員の芳香族炭化水素環、６員の含窒素芳香族複素環、または窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環を示し、
　ｑは、０～４の整数を示し、および
　ｑ個のＲ３ｃは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示す。］
で表される化合物である、前記［２］に記載の方法。
　［４］　前記式（Ｉｃ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オンからなる群から選ばれる少なくとも一つである、前記［３］に記載の方法。
　［５］　前記環Ｃが、６員の芳香族炭化水素環または６員の含窒素芳香族複素環である、前記［３］に記載の方法。
　［６］　前記式（Ｉｃ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、および２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オンからなる群から選ばれる少なくとも一つである、前記［５］に記載の方法。
　［７］　前記式（Ｉｂ）で表される化合物における式（ｒ１）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
で表される基が、
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（１０）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～３個の置換基で置換されていてもよい２－イミダゾリル基
である、前記［２］～［６］のいずれか一つに記載の方法。
　［８］　前記式（Ｉｂ）で表される化合物が、２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）、４，４’－ジピリジルジスルフィド、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸、２，２’－ジチオビス（１Ｈ－イミダゾール）、および２，２’－ジチオビス（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール）からなる群から選ばれる少なくとも一つである、前記［７］に記載の方法。
　［９］　前記酸化を水の存在下で行う、前記［１］～［８］のいずれか一つに記載の方法。
　［１０］　亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体が、
（１）ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドとの縮合によって得られた亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体、または
（２）オリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイトとの縮合によって得られた亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体
である、前記［１］～［９］のいずれか一つに記載の方法。
　［１１］　亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体が、亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合に加えて、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である、前記［１］～［１０］のいずれか一つに記載の方法。
　［１２］　ワンポット合成によってオリゴヌクレオチドを製造する方法であって、
　前記ワンポット合成が、
　非極性溶媒を含む溶液中で、疎水性保護基を有するヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）と、水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されており、且つホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）とを縮合して、亜リン酸エステル結合および疎水性保護基を有し、且つ水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているオリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）を形成する工程（１）、
　工程（１）後の溶液に、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）のクエンチ剤（ｉ）を添加して、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）をクエンチする工程（２）、
　工程（２）後の溶液に酸化剤を添加して、前記オリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）を酸化して、リン酸エステル結合および疎水性保護基を有し、且つ水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているオリゴヌクレオチド（ｄ）を形成する工程（３）、
　工程（３）後の溶液に酸化剤のクエンチ剤（ｉｉ）を添加して、酸化剤をクエンチする工程（４）、
　工程（４）後の溶液に酸を添加して、前記オリゴヌクレオチド（ｄ）の酸性条件下で除去可能な一時保護基を除去して、保護されていない水酸基および疎水性保護基を有するオリゴヌクレオチド（ｅ）を形成する工程（５）、並びに
　前記オリゴヌクレオチド（ｅ）を含む溶液に極性溶媒を添加して、前記オリゴヌクレオチド（ｅ）を析出させる工程（７）
を含み、並びに
　前記酸化剤が、式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
［式中、
　Ｘ１は、単結合、硫黄原子、酸素原子、－Ｓ（＝Ｏ）２－または－Ｎ（－Ｒ３）－を示し、
　Ｘ１が単結合である場合、Ｒ１は、ハロゲン原子を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　Ｘ１が硫黄原子または－Ｓ（＝Ｏ）２－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　Ｘ１が酸素原子である場合、Ｒ１およびＲ２は、それらが結合する硫黄原子および酸素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びに
　Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、並びにＲ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成するか、またはＲ１およびＲ３は、それらが結合する窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びにＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。］
で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）である方法。
　［１３］　前記式（Ｉ）で表される化合物が、式（Ｉａ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
［式中、
　Ｒ１ａは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　環Ａは、５または６員の不飽和複素環を示し、
　Ｙ１ａは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－を示し、
　ｍは、０～３の整数を示し、
　ｍ個のＲ２ａは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
　ｍが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ａは、環Ａと共に、置換されていてもよい縮合環を形成していてもよい。］
で表される化合物、および／または式（Ｉｂ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
［式中、
　Ｒ１ｂは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　環Ｂは、６員の芳香族炭化水素環、または５若しくは６員の芳香族複素環を示し、
　ｎは、０～５の整数を示し、
　ｎ個のＲ２ｂは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
　ｎが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ｂは、環Ｂと共に、置換されていてもよい２環式の縮合芳香族複素環を形成していてもよい。］
で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）
である、前記［１２］に記載の方法。
　［１４］　前記式（Ｉａ）で表される化合物が、式（Ｉｃ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
［式中、
　Ｒ１ｃは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
　Ｙ１ｃは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－を示し、
　ｐは、０または１を示し、
　Ｒ２ｃは、水素原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、
　環Ｃは、６員の芳香族炭化水素環、６員の含窒素芳香族複素環、または窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環を示し、
　ｑは、０～４の整数を示し、および
　ｑ個のＲ３ｃは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示す。］
で表される化合物である、前記［１３］に記載の方法。
　［１５］　前記式（Ｉｃ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オンからなる群から選ばれる少なくとも一つである、前記［１４］に記載の方法。
　［１６］　前記環Ｃが、６員の芳香族炭化水素環または６員の含窒素芳香族複素環である、前記［１４］に記載の方法。
　［１７］　前記式（Ｉｃ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、および２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オンからなる群から選ばれる少なくとも一つである、前記［１６］に記載の方法。
　［１８］　前記式（Ｉｂ）で表される化合物における式（ｒ１）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
で表される基が、
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（１０）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～３個の置換基で置換されていてもよい２－イミダゾリル基
である、前記［１３］～［１７］のいずれか一つに記載の方法。
　［１９］　前記式（Ｉｂ）で表される化合物が、２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）、４，４’－ジピリジルジスルフィド、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸、２，２’－ジチオビス（１Ｈ－イミダゾール）、および２，２’－ジチオビス（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール）からなる群から選ばれる少なくとも一つである、前記［１８］に記載の方法。
　［２０］　前記クエンチ剤（ｉ）が水である、前記［１２］～［１９］のいずれか一つに記載の方法。
　［２１］　前記クエンチ剤（ｉｉ）が有機リン化合物である、前記［１２］～［２０］のいずれか一つに記載の方法。
　［２２］　有機リン化合物が、ホスフィン類、亜リン酸トリエステル、亜ホスフィン酸エステル、亜ホスホン酸ジエステルおよびホスフィン酸エステルからなる群から選ばれる少なくとも一つである、前記［２１］に記載の方法。
　［２３］　有機リン化合物がホスフィン類である、前記［２１］に記載の方法。
　［２４］　前記ワンポット合成が、工程（３）後の溶液に、芳香族アミン類を添加することをさらに含む、前記［１２］～［２３］のいずれか一つに記載の方法。
　［２５］　前記ワンポット合成が、工程（５）の後および工程（７）の前に、工程（５）後の溶液に塩基を添加する工程（６）をさらに含む、前記［１２］～［２４］のいずれか一つに記載の方法。
　［２６］　前記オリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）が、亜リン酸エステル結合に加えて、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である、前記［１２］～［２５］のいずれか一つに記載の方法。
　［２７］　式（Ｉｎ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000027
［式中、
　（１）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示すか、
　（２）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、ｑ’は１を示し、およびＲ３ｎはＣ１－６パーフルオロアルキル基を示すか、
　（３）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は１を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示すか、または
　（４）Ｒ１ｎは１個のＣ１－６アルキル基で置換されているピリジル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示す。］
で表される化合物。
　［２８］　前記式（Ｉｎ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン、または２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オンである前記［２７］に記載の化合物。
　本発明によれば、ヨウ素を使用する場合に比べて、前述の欠損体または脱硫体の生成を抑制して、オリゴヌクレオチドを製造することができる。
１．用語
　まず、本明細書中で使用する用語について説明する。なお、特段の記載がない限り、本明細書に記載する用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されるのと同じ意味を有する。
１－１．基に関する用語
　本明細書中、「Ｃａ－ｂ」とは、炭素数がａ以上ｂ以下（ａ、ｂは整数を示す）を意味する。
　本明細書中、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。
　本明細書中、「炭化水素基」としては、例えば、脂肪族炭化水素基、芳香脂肪族炭化水素基、単環式飽和炭化水素基および芳香族炭化水素基等が挙げられ、その具体例としては、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基、アルキレン基等の１価基および２価基が挙げられる。
　本明細書中、「アルキル（基）」は、直鎖状または分岐鎖状のいずれでもよい。「アルキル（基）」としては、炭素数１以上のアルキル基が挙げられ、特に炭素数範囲の限定がない場合には、好ましくはＣ１－１０アルキル基であり、より好ましくはＣ１－６アルキル基である。その具体例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、ヘキシル等が挙げられる。
　本明細書中、「アルケニル（基）」は、直鎖状または分岐鎖状のいずれでもよい。「アルケニル（基）」としては、例えば、Ｃ２－６アルケニル基等が挙げられる。具体的には、例えば、ビニル、１－プロペニル、アリル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル等が挙げられる。
　本明細書中、「アルキニル（基）」は、直鎖状または分岐鎖状のいずれでもよい。「アルキニル（基）」としては、例えば、Ｃ２－６アルキニル基等が挙げられる。その具体例としては、エチニル、１－プロピニル、２－プロピニル、１－ブチニル、２－ブチニル、３－ブチニル、１－ペンチニル、２－ペンチニル、３－ペンチニル、４－ペンチニル、１－ヘキシニル、２－ヘキシニル、３－ヘキシニル、４－ヘキシニル、５－ヘキシニル等が挙げられる。
　本明細書中、「シクロアルキル（基）」は、環状アルキル基を意味し、例えばＣ３－８シクロアルキル基、好ましくはＣ３－６シクロアルキル基が挙げられる。その具体例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等が挙げられる。
　本明細書中、「アリール（基）」は、単環式または多環式（縮合）の芳香族炭化水素基を意味し、例えば、フェニル、１－ナフチル、２－ナフチル、ビフェニリル、１－アントリル、２－アントリル等のＣ６－１４アリール基が挙げられる。中でもＣ６－１０アリール基がより好ましく、フェニルが特に好ましい。
　本明細書中、「ヘテロアリール（基）」は、炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれるヘテロ原子を環構成原子として含有する単環式または多環式（縮合）の芳香族複素環基を意味する。ヘテロアリール基としては、例えば、５または６員の単環式ヘテロアリール基および８～１４員の縮合多環式ヘテロアリール基が挙げられる。
　本明細書中、「５または６員の単環式ヘテロアリール（基）」としては、例えば、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピリジル、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－イル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、１，２，４－オキサジアゾリル、１，３，４－オキサジアゾリル、１，２，４－チアジアゾリル、１，３，４－チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジニル等が挙げられる。なお、本発明において「ヘテロアリール基」は、下記式で示される（ピリジン－Ｎ－オキシド）－イル基を包含する（下記式中、＊は結合位置を示す）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000028
　本明細書中、「５または６員の単環式の含窒素ヘテロアリール（基）」としては、例えば、前述の「５または６員の単環式ヘテロアリール（基）」のうち、環構成原子として少なくとも１個以上の窒素原子を含有するものが挙げられる。
　本明細書中、「８～１４員の縮合多環式ヘテロアリール（基）」としては、例えば、ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、イミダゾピリジニル、チエノピリジニル、フロピリジニル、ピロロピリジニル、ピラゾロピリジニル、オキサゾロピリジニル、チアゾロピリジニル、イミダゾピラジニル、イミダゾピリミジニル、チエノピリミジニル、フロピリミジニル、ピロロピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、オキサゾロピリミジニル、チアゾロピリミジニル、ピラゾロトリアジニル、ナフト［２，３－ｂ］チエニル、フェノキサチイニル、インドリル、イソインドリル、１Ｈ－インダゾリル、プリニル、イソキノリル、キノリル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、カルバゾリル、β－カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル等が挙げられる。
　本明細書中、「８～１４員の縮合多環式の含窒素ヘテロアリール（基）」としては、例えば、前述の「８～１４員の縮合多環式ヘテロアリール（基）」のうち、環構成原子として少なくとも１個以上の窒素原子を含有するものが挙げられる。
　本明細書中、「アラルキル（基）」としては、Ｃ７－２０アラルキル基が挙げられ、好ましくはＣ７－１６アラルキル基（Ｃ６－１０アリール－Ｃ１－６アルキル基）である。その具体例としては、ベンジル、１－フェニルエチル、２－フェニルエチル、１－フェニルプロピル、ナフチルメチル、１－ナフチルエチル、１－ナフチルプロピル等が挙げられる。
　本明細書中、「アルキレン（基）」は、直鎖状または分岐鎖状のいずれでもよい。「アルキレン（基）」としては、炭素数１以上のアルキレン基が挙げられ、特に炭素数範囲の限定がない場合には、好ましくはＣ１－１０アルキレン基であり、より好ましくはＣ１－６アルキレン基である。その具体例としては、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレンが挙げられる。
　本明細書中、「アルコキシ（基）」は、直鎖状または分岐鎖状のいずれでもよい。「アルコキシ（基）」としては、炭素数１以上のアルコキシ基が挙げられ、特に炭素数範囲の限定がない場合には、好ましくはＣ１－１０アルコキシ基であり、より好ましくはＣ１－６アルコキシ基である。その具体例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ等が挙げられる。
　本明細書中、「アシル（基）」は、直鎖状または分岐鎖状のいずれでもよい。「アシル（基）」としては、例えば、Ｃ１－６アルカノイル基、Ｃ７－１３アロイル基等が挙げられる。「アシル（基）」の具体例としては、ホルミル、アセチル、ｎ－プロピオニル、イソプロピオニル、ｎ－ブチリル、イソブチリル、ピバロイル、バレリル、ヘキサノイル、ベンゾイル、ナフトイル、レブリニル等が挙げられる。「アシル（基）」は、置換されていてもよい。
　本明細書中、「６員の芳香族炭化水素環」とは、ベンゼン環を意味する。「６員の芳香族炭化水素環」が縮合環の一部を形成している場合、「６員の芳香族炭化水素環」とは、縮合環の一部を形成しているベンゼン環を意味する。
　本明細書中、「５または６員の芳香族複素環」としては、例えば、チオフェン環、フラン環、１Ｈ－ピロール環、イミダゾール環、ピラゾール環、チアゾール環、イソチアゾール環、オキサゾール環、イソオキサゾール環、１，２，４－オキサジアゾール環、１，３，４－オキサジアゾール環、１，２，４－チアジアゾール環、１，３，４－チアジアゾール環、トリアゾール環、テトラゾール環、ピリジン環、ピリジン－Ｎ－オキシド環、ピラジン環、ピリミジン環、ピリダジン環、トリアジン環等が挙げられる。なお、本発明において「芳香族複素環」は、ピリジン－Ｎ－オキシド環を包含する。
　本明細書中、「４～８員の含窒素複素環」としては、例えば、アゼチジン環、ピロリジン環、ピロリン環、２Ｈ－ピロール環、ピペリジン環、ピペラジン環、アザシクロヘプタン環、アザシクロオクタン環、１Ｈ－ピロール環、イミダゾール環、ピラゾール環、チアゾール環、イソチアゾール環、オキサゾール環、イソオキサゾール環、１，２，４－オキサジアゾール環、１，３，４－オキサジアゾール環、１，２，４－チアジアゾール環、１，３，４－チアジアゾール環、トリアゾール環、テトラゾール環、ピリジン環、ピリジン－Ｎ－オキシド環、ピラジン環、ピリミジン環、ピリダジン環、トリアジン環等が挙げられる。
　本明細書中、「５または６員の含窒素複素環」としては、例えば、前述の「４～８員の含窒素複素環」のうち、環構成原子が５または６個であるものが挙げられる。
　本明細書中、「６員の含窒素芳香族複素環」としては、例えば、ピリジン環、ピリジン－Ｎ－オキシド環、ピラジン環、ピリミジン環、ピリダジン環、トリアジン環等が挙げられる。
　本明細書中、「２環式の縮合含窒素複素環」としては、例えば、ピロリジン環、デカヒドロイソキノリン環、デカヒドロキノリン環、ベンゾチオフェン環、ベンゾフラン環、イソベンゾフラン環、ベンゾイミダゾール環、ベンゾオキサゾール環、ベンゾイソオキサゾール環、ベンゾチアゾール環、ベンゾイソチアゾール環、ベンゾトリアゾール環、インド－ル環、イソインドール環、１Ｈ－インダゾール環、プリン環、イソキノリン環、５，６，７，８－テトラヒドロイソキノリン環、キノリン環、５，６，７，８－テトラヒドロキノリン環、フタラジン環、プテリジン環、ナフチリジン環、キノキサリン環、キナゾリン環、シンノリン環等が挙げられる。
　本明細書中、「２環式の縮合芳香族複素環」としては、例えば、ベンゾチオフェン環、ベンゾフラン環、イソベンゾフラン環、ベンゾイミダゾール環、ベンゾオキサゾール環、ベンゾイソオキサゾール環、ベンゾチアゾール環、ベンゾイソチアゾール環、ベンゾトリアゾール環、インド－ル環、イソインドール環、１Ｈ－インダゾール環、プリン環、イソキノリン環、５，６，７，８－テトラヒドロイソキノリン環、キノリン環、５，６，７，８－テトラヒドロキノリン環、フタラジン環、プテリジン環、ナフチリジン環、キノキサリン環、キナゾリン環、シンノリン環等が挙げられる。なお、本明細書中の「２環式の縮合芳香族複素環」には、一つの環が芳香族複素環であり、もう一つの環が非芳香族複素環または非芳香族炭化水素環である２環式の縮合環（例えば、５，６，７，８－テトラヒドロイソキノリン環）も含まれる。
　本明細書中、「窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環」としては、例えば、５，６，７，８－テトラヒドロイソキノリン環、キノリン環等が挙げられる。
　本明細書中、「電子求引性基」としては、例えば、ハロゲン原子、パークロロアルキル基（例、トリクロロメチル基）、パーフルオロアルキル基（例、トリフルオロメチル基）、ニトロ基、シアノ基、ホルミル基、アルキルカルボニル基（－ＣＯ－Ｒ、Ｒ：アルキル基）、パークロロアルキルカルボニル基（－ＣＯ－Ｒ、Ｒ：パークロロアルキル基）、パーフルオロアルキルカルボニル基（－ＣＯ－Ｒ、Ｒ：パーフルオロアルキル基）、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基（－ＣＯ－ＯＲ、Ｒ：アルキル基）、アルキルスルホニル基（－Ｓ（＝Ｏ）２－Ｒ、Ｒ：アルキル基）、スルホ基等が挙げられる。
　本明細書中、「パークロロアルキル基」とは、全ての水素原子が塩素原子で置換されたアルキル基を意味する。
　本明細書中、「パーフルオロアルキル基」とは、全ての水素原子がフッ素原子で置換されたアルキル基を意味する。
　本明細書中、「リンカー」としては、例えば、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＮＲ’－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’－、－ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｓ－、－ＳＯ－、－ＳＯ２－、－Ｓｉ（Ｒ’）（Ｒ”）Ｏ－、－Ｓｉ（Ｒ’）（Ｒ”）－（Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立に、水素原子またはＣ１－２２炭化水素基を示す）等が挙げられる。リンカーは、好ましくは－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－Ｓ－、－ＳＯ－、－ＳＯ２－、－Ｓｉ（Ｒ’）（Ｒ”）Ｏ－、または－Ｓｉ（Ｒ’）（Ｒ”）－（Ｒ’およびＲ”は、それぞれ独立に、水素原子またはＣ１－２２炭化水素基を示す）である。
　本明細書中、「置換基」としては、例えば、前述のハロゲン原子、アルキル基、アラルキル基、アルコキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基に加えて、水酸基、ニトロ基、シアノ基、グアニジル基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基（アルコキシ部は前記アルコキシ基と同様）、スルホ基、ホスホ基、アルキルスルファニル基 （アルキル部は前記アルキル基と同様）、アルキルスルフィニル基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、アルキルスルホニル基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、アミノ基、モノアルキルアミノ基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、ジアルキルアミノ基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、オキソ基等が挙げられる。
　本明細書中、「水酸基の保護基」に特に限定はなく、公知の保護基を使用することができる。該保護基としては、例えば、メチル基、ベンジル基、ｐ－メトキシベンジル基、ｔｅｒｔ－ブチル基、メトキシメチル基、２－メトキシエチル基、２－テトラヒドロピラニル基、２－エトキシエチル基、２－シアノエチル基、（２－シアノエトキシ）メチル基、１－（２－シアノエトキシ）エチル基、ビス（２－アセトキシエトキシ）メチル（ＡＣＥ）基、（２－ニトロベンジル）オキシメチル（ＮＢＯＭ）基、（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル（ＳＥＭ）基、１－（２－シアノエトキシ）エチル基、２－（（４－メチルフェニル）スルホニル）エトキシメチル（ＴＥＭ）基、ｔｅｒｔ－ブチルジチオメチル（ＤＴＭ）基、（（２－（メチルチオ）フェニル）チオ）メチル（ＭＰＴＭ）基、（Ｎ－ジクロロアセチル－Ｎ－メチル）アミノベンジルオキシメチル（ＤＣＭＡＢＯＭ）基、（２－アセチルエチル）カルボニルオキシメチル基（当該分野において「アセタールレブニリルエステル（ＡＬＥ）基」とも呼ばれる）、フェニルカルバモイル基、１，１－ジオキソチオモルホリン－４－チオカルバモイル基、アセチル基、ピバロイル基、ベンゾイル基、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル基、［（トリイソプロピルシリル）オキシ］メチル（Ｔｏｍ）基、１－（４－クロロフェニル）－４－エトキシピペリジン－４－イル（Ｃｐｅｐ）基等が挙げられる。
　本明細書中、「水酸基の酸性条件下で除去可能な一時保護基」としては、例えば、トリチル基、９－フェニル－９－キサンテニル基、９－フェニル－９－チオキサンテニル基、１，１－ビス（４－メトキシフェニル）－１－フェニルメチル基（本明細書中「４，４’－ジメトキシトリチル基」と記載することがある）等のビス（Ｃ１－６アルコキシ）トリチル基、１－（４－メトキシフェニル）－１，１－ジフェニルメチル基（本明細書中「４－モノメトキシトリチル基」と記載することがある）等のモノ（Ｃ１－１８アルコキシ）トリチル基等が挙げられる。脱保護の容易さ等の観点から、前記一時保護基は、好ましくは４，４’－ジメトキシトリチル基または４－モノメトキシトリチル基であり、より好ましくは４，４’－ジメトキシトリチル基である。
　本明細書中、「アミノ基の保護基」に特に限定はなく、公知の保護基を使用することができる。該保護基としては、例えば、ピバロイル基、ピバロイロキシメチル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、フェノキシアセチル基、４－イソプロピルフェノキシアセチル基、４－ｔｅｒｔ－ブチルフェノキシアセチル基、ベンゾイル基、イソブチリル基、（２－ヘキシル）デカノイル基、ジメチルホルムアミジニル基、１－（ジメチルアミノ）エチリデン基、９－フルオレニルメチルオキシカルボニル基を挙げることができる。これらの中で、アセチル基、フェノキシアセチル基、４－イソプロピルフェノキシアセチル基、ベンゾイル基、イソブチリル基、（２－ヘキシル）デカノイル基、ジメチルホルムアミジニル基、および＝ＮＣ（Ｒ１１）－Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）で表される基（式中、Ｒ１１は、メチル基を示し、Ｒ１２およびＲ１３は、それぞれ独立にＣ１－６アルキル基を示すか、またはＲ１１およびＲ１２が一緒になって、それらが結合する炭素原子および窒素原子と共に５または６員の含窒素複素環を形成していてもよい。）等が挙げられる。前記＝ＮＣ（Ｒ１１）－Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）で表される基としては、例えば、１－（ジメチルアミノ）エチリデン基が挙げられる。
　本明細書中、「リン酸基の保護基」に特に限定はなく、公知の保護基を使用することができる。リン酸基の保護基としては、例えば、以下のものが挙げられる：
下記式（Ｐｇ－１）で表される２－シアノエチル基、
下記式（Ｐｇ－２）で表される２－［２－（４，４’－ジメトキシトリチルオキシ）エチルスルホニル］エチル基、
下記式（Ｐｇ－３）で表される［３－（４，４’－ジメトキシトリチルオキシ）－２，２－ジ（エトキシカルボニル）］プロピル基、
下記式（Ｐｇ－４）で表される［３－（４，４’－ジメトキシトリチルオキシ）－２，２－ジ（Ｎ－メチルカルバモイル）］プロピル基。
　リン酸基の保護基は、好ましくは２－シアノエチル基である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000029
［式中、Ｍｅは、メチル基を示し、Ｅｔは、エチル基を示し、ＤＭＴｒは、４，４’－ジメトキシトリチル基を示し、および＊は、リン酸基との結合位置を示す。］
　本明細書中、「疎水性保護基」としては、例えば、国際公開第２０１７／１０４８３６号に「アンカー」と記載されている保護基を使用することができる。
　疎水性保護基は、好ましくは、下記式（Ｐｇ－５）で表される保護基である：
＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ　　　（Ｐｇ－５）
［式中、
　＊＊は保護される基との結合位置を示し；
　Ｌは、単結合、または式（Ｐｇ－ｉ－１）若しくは（Ｐｇ－ｉ－２）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000030
（式中、
　＊は、Ｙとの結合位置を示し；
　＊＊は前記と同義であり；
　Ｒ１ｐおよびＲ２ｐは、それぞれ独立に、Ｃ１－２２炭化水素基を示し；
　Ｌ１は、置換されていてもよい２価のＣ１－２２炭化水素基を示し、前記２価のＣ１－２２炭化水素基中の－ＣＨ２－はリンカーで置き換わっていてもよく；
　Ｌ２は、単結合を示すか、または＊＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３ｐ）－Ｒ４ｐ－Ｎ（Ｒ５ｐ）＊＊＊＊（式中、＊＊＊は、Ｌ１との結合位置を示し、＊＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ４ｐは、Ｃ１－２２アルキレン基を示し、Ｒ３ｐおよびＲ５ｐは、それぞれ独立に、水素原子若しくはＣ１－２２アルキル基を示すか、またはＲ３ｐおよびＲ５ｐが一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基を示し；
　Ｙは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示し；および
　Ｚは、式（Ｐｇ－ｉｉ－１）～式（Ｐｇ－ｉｉ－５）のいずれか：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000031
［式中、
　＊は、結合位置を示し；
　環Ａ’は、ベンゼン環を示し；
　環Ｂ’は、シクロヘキサン環を示し；
　環Ｄ’は、ナフタレン環または２環式の縮合芳香族複素環を示し；
　Ｒ６ｐは、水素原子であるか、或いはＲｂが、下記式（Ｐｇ－ｉｉｉ）で表される基である場合には、環Ａ’または環Ｂ’のＲ６ｐは、Ｒ８ｐと一緒になって単結合または－Ｏ－を示して、環Ａ’または環Ｂ’および環Ｃ’と共に縮合環を形成していてもよく；
　ｋは、１～４の整数を示し；
　ｋ個のＱは、それぞれ独立に、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＮＲ’－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’－または－ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）－（前記式中、Ｒ’は、それぞれ独立に、水素原子またはＣ１－６アルキル基を示す）を示し（ｋ個のＱは、好ましくは、それぞれ独立に、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－または－ＮＨＣ（＝Ｏ）－を示し）；
　ｋ個のＱ’は、それぞれ独立に、単結合、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＮＲ’－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’－または－ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）－（前記式中、Ｒ’は、それぞれ独立に、水素原子またはＣ１－６アルキル基を示す）を示し；
　ｋ個のＲ７ｐは、それぞれ独立に、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
　環Ａ’および環Ｂ’は、それぞれ独立に、ｋ個のＱＲ７ｐに加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
　Ｒａは、水素原子を示し；および
　Ｒｂは、水素原子、または式（Ｐｇ－ｉｉｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000032
（式中、
　＊は、結合位置を示し；
　環Ｃ’は、ベンゼン環を示し：
　ｊは、０～４の整数を示し；
　ｊ個のＱは、それぞれ独立に、前記と同義であり；
　ｊ個のＲ９ｐは、それぞれ独立に、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
　Ｒ８ｐは、水素原子を示すか、或いは環Ａ’または環Ｂ’のＲ６ｐと一緒になって単結合または－Ｏ－を示して、環Ａ’または環Ｂ’および環Ｃ’と共に縮合環を形成していてもよく；
　環Ｃ’は、ｊ個のＱＲ９ｐに加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示すか、或いは
　ＲａおよびＲｂが、一緒になってオキソ基を形成し；
　ｕは、１または２を示し；および
　Ｒ１０ｐは、Ｃ２－２１パーフルオロアルキル基を示す。］
で表される基を示す。］
　なお、環Ａ’、環Ｃ’、Ｒ６ｐおよびＲ８ｐが縮合環を形成する場合、環Ａ’および環Ｃ’は、それぞれ、前記縮合環中のベンゼン環部分を示す。環Ｂ’、環Ｃ’、Ｒ６ｐおよびＲ８ｐが縮合環を形成する場合、環Ｃ’は、前記縮合環中のベンゼン環部分を示し、環Ｂ’は、前記縮合環中のシクロヘキサン環部分を示す。
　前記炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基は、好ましくは直鎖状のＣ１０－４０アルキル基および直鎖状のＣ１０－４０アルケニル基から選ばれる基であり、より好ましくは直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり、さらに好ましくは直鎖状のＣ１０－３０アルキル基であり、特に好ましくは直鎖状のＣ１２－２８アルキル基であり、最も好ましくは直鎖状のＣ１４－２６アルキル基である。
　前記リンカーは、好ましくは－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＮＲ’－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ’－または－ＮＲ’Ｃ（＝Ｏ）－（Ｒ’は、水素原子またはＣ１－２２炭化水素基を示す）であり、より好ましくは－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－または－ＮＨＣ（＝Ｏ）－であり、さらに好ましくは－Ｏ－である。
　前記「炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基」は、好ましくは、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基、１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したベンジル基、または１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したシクロヘキシルメチル基である。
　Ｑは、好ましくは－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－または－ＮＨＣ（＝Ｏ）－であり、より好ましくは－Ｏ－である。
　Ｑ’は、好ましくは単結合、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－または－ＮＨＣ（＝Ｏ）－であり、より好ましくは単結合または－Ｏ－である。
　式（Ｐｇ－５）において、式（Ｐｇ－ｉ－１）で表されるＬの好ましい態様は、
　Ｌ１が、２価のＣ１－２２炭化水素基、またはＣＨ２－Ｏ－１，４－フェニレン－Ｏ－ＣＨ２であり；および
　Ｌ２が、単結合であるか、または＊＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３ｐ）－Ｒ４ｐ－Ｎ（Ｒ５ｐ）＊＊＊＊（式中、＊＊＊は、Ｌ１との結合位置を示し、＊＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ４ｐは、Ｃ１－６アルキレン基を示し、Ｒ３ｐおよびＲ５ｐは、それぞれ独立に水素原子、若しくは置換されていてもよいＣ１－６アルキル基を示すか、またはＲ３ｐおよびＲ５ｐが一緒になって、置換されていてもよいＣ１－６アルキレン基を形成していてもよい。）で表される基である
基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
　Ｌ１が、２価のＣ１－２２炭化水素基であり；および
　Ｌ２が単結合である
基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
　Ｌ１が、エチレン基であり；および
　Ｌ２が、＊＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３ｐ）－Ｒ４ｐ－Ｎ（Ｒ５ｐ）＊＊＊＊（式中、＊＊＊は、Ｌ１との結合位置を示し、＊＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ４ｐは、Ｃ１－２２アルキレン基を示し、Ｒ３ｐおよびＲ５ｐは、それぞれ独立に、水素原子若しくはＣ１－２２アルキル基を示すか、またはＲ３ｐおよびＲ５ｐが一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基である
基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
　Ｌ１が、エチレン基であり；および
　Ｌ２が、＊＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３ｐ）－Ｒ４ｐ－Ｎ（Ｒ５ｐ）＊＊＊＊（式中、＊＊＊は、Ｌ１との結合位置を示し、＊＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｎ（Ｒ３ｐ）－Ｒ４ｐ－Ｎ（Ｒ５ｐ）部分が、１，４－ピペラジンジイル基を形成する。）で表される基である
基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
　Ｌ１が、エチレン基であり；および
　Ｌ２が、＊＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３ｐ）－Ｒ４ｐ－Ｎ（Ｒ５ｐ）＊＊＊＊（式中、＊＊＊は、Ｌ１との結合位置を示し、＊＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ４ｐは、ペンチレン基、またはヘキシレン基を示し、Ｒ３ｐおよびＲ５ｐは、それぞれ独立に、水素原子またはメチル基を示す。）で表される基である
基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
　Ｌ１が、置換基を有していてもよいフェニレン基であり；および
　Ｌ２が、＊＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ３ｐ）－Ｒ４ｐ－Ｎ（Ｒ５ｐ）＊＊＊＊（式中、＊＊＊は、Ｌ１との結合位置を示し、＊＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｎ（Ｒ３ｐ）－Ｒ４ｐ－Ｎ（Ｒ５ｐ）部分が、１，４－ピペラジンジイル基を形成する。）で表される基である
基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－１）で表されるＬは、特に好ましくはスクシニル基である。
　次に、式（Ｐｇ－５）において式（Ｐｇ－ｉ－２）で表されるＬについて説明する。
　式（Ｐｇ－ｉ－２）中のＬ１は、好ましくは２価のＣ６－１０芳香族炭化水素基であり、より好ましくはフェニレン基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－２）中のＬ２は、好ましくは単結合である。
　式（Ｐｇ－ｉ－２）中のＬ１およびＬ２の好ましい組合せとしては、Ｌ１が２価のＣ６－１０芳香族炭化水素基であり、Ｌ２が単結合である、組合せである。式（Ｐｇ－ｉ－２）中のＬ１およびＬ２のより好ましい組合せとしては、Ｌ１がフェニレン基であり、Ｌ２が単結合である、組合せである。
　式（Ｐｇ－ｉ－２）中のＲ１ｐおよびＲ２ｐは、それぞれ独立に、好ましくはＣ１－２２アルキル基であり、より好ましくはＣ１－１０アルキル基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－２）で表されるＬの好ましい態様は、
　Ｒ１ｐおよびＲ２ｐが、それぞれ独立に、Ｃ１－２２アルキル基であり；
　Ｌ１が、２価のＣ６－１０芳香族炭化水素基であり；および
　Ｌ２が、単結合である
基である。
　式（Ｐｇ－ｉ－２）で表されるＬの別の好ましい態様は、
　Ｒ１ｐおよびＲ２ｐが、それぞれ独立に、Ｃ１－１０アルキル基であり；
　Ｌ１が、フェニレン基であり；および
　Ｌ２が、単結合である
基である。
　式（Ｐｇ－５）におけるＹがＮＲである場合、前記Ｒは、好ましくは、水素原子、Ｃ１－６アルキル基またはＣ７－１６アラルキル基であり、より好ましくは水素原子、メチル、エチルまたはベンジルであり、さらに好ましくは水素原子である。Ｙは、好ましくは単結合、酸素原子またはＮＲであり、より好ましくは単結合または酸素原子である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－１）において、Ｒ６ｐは水素原子であることが好ましい。また、式（Ｐｇ－ｉｉ－１）において、ＲａおよびＲｂが、水素原子であるか、または一緒になってオキソ基を形成することが好ましい。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－１）で表されるＺの好ましい態様は、
　ＲａおよびＲｂが、水素原子であり；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－１）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　ＲａおよびＲｂが、水素原子であり；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したベンジル基、または１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したシクロヘキシルメチル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－１）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　Ｒａが、水素原子であり；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり；および
　Ｒｂが、式（Ｐｇ－ｉｉｉ）（式中、＊は結合位置であり、ｊが、０～３の整数であり、ｊ個のＱが、－Ｏ－であり、ｊ個のＲ９ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり、およびＲ８ｐが、水素原子である。）で表される基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－１）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　Ｒａが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり；および
　Ｒｂが、式（Ｐｇ－ｉｉｉ）（式中、＊は結合位置であり、ｊが、０～３の整数であり、ｊ個のＱが、－Ｏ－であり、ｊ個のＲ９ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり、およびＲ８ｐは、Ｒ６ｐと一緒になって単結合または－Ｏ－を示して、環Ａ’および環Ｃ’と共に縮合環を形成する。）で表される基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－１）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　ＲａおよびＲｂが、一緒になってオキソ基を形成し；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－１）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　ＲａおよびＲｂが、一緒になってオキソ基を形成し；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したベンジル基、または１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したシクロヘキシルメチル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－２）で表されるＺの好ましい態様は、
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基、１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したベンジル基、または１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したシクロヘキシルメチル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－３）において、Ｒ６ｐは水素原子であることが好ましい。また、式（Ｐｇ－ｉｉ－３）において、ＲａおよびＲｂが、水素原子であるか、または一緒になってオキソ基を形成することが好ましい。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－３）で表されるＺの好ましい態様は、
　ＲａおよびＲｂが、水素原子であり；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－３）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　ＲａおよびＲｂが、水素原子であり；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したベンジル基、または１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したシクロヘキシルメチル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－３）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　Ｒａが、水素原子であり；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり；および
　Ｒｂが、式（Ｐｇ－ｉｉｉ）（式中、＊は結合位置であり、ｊが、０～３の整数であり、ｊ個のＱが、－Ｏ－であり、ｊ個のＲ９ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり、およびＲ８ｐが、水素原子である。）で表される基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－３）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　Ｒａが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり；および
　Ｒｂが、式（Ｐｇ－ｉｉｉ）（式中、＊は結合位置であり、ｊが、０～３の整数であり、ｊ個のＱが、－Ｏ－であり、ｊ個のＲ９ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基であり、およびＲ８ｐは、Ｒ６ｐと一緒になって単結合または－Ｏ－を示して、環Ｂ’および環Ｃ’と共に縮合環を形成する。）で表される基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－３）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　ＲａおよびＲｂが、一緒になってオキソ基を形成し；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－３）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　ＲａおよびＲｂが、一緒になってオキソ基を形成し；
　Ｒ６ｐが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱが、－Ｏ－であり；
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したベンジル基、または１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したシクロヘキシルメチル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－４）で表されるＺの好ましい態様は、
　環Ｄ’が、ナフタレン環であり；
　ＲａおよびＲｂが、水素原子であり；
　ｋが、１～３の整数であり；
　ｋ個のＱ’が、－Ｏ－であり；および
　ｋ個のＲ７ｐが、それぞれ独立に、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基、１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したベンジル基、または１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したシクロヘキシルメチル基である、
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－４）で表されるＺの好ましい別の態様は、
　環Ｄ’が、インドール環であり；
　ＲａおよびＲｂが、水素原子であり；
　ｋが、１であり；
　Ｑ’が、単結合であり；および
　Ｒ７ｐが、直鎖状のＣ１０－４０アルキル基、１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したベンジル基、または１～３個の直鎖状のＣ１０－４０アルキル基が－Ｏ－を介して結合したシクロヘキシルメチル基であり；および
　Ｒ７ｐが、インドール環の窒素原子に結合している
基である。
　式（Ｐｇ－ｉｉ－５）で表されるＺの好ましい態様は、
　ｕが、１または２であり；および
　Ｒ１０ｐが、Ｃ４－１０パーフルオロアルキル基である
基である。
　Ｚは、好ましくは式（Ｐｇ－ｉｉ－１）、式（Ｐｇ－ｉｉ－２）または式（Ｐｇ－ｉｉ－３）で表される基である。
　保護基（Ｐｇ－５）は、好ましくは、
　Ｌが、スクシニル基であるか、または式（Ｐｇ－ｉ－２）で表される基（式（Ｐｇ－ｉ－２）中、Ｒ１ｐおよびＲ２ｐが、それぞれ独立に、Ｃ１－１０アルキル基であり、Ｌ１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ２が、単結合である。）であり、および
　Ｙ－Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルアミノ基、２，４－ビス（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、ビス（４－ドコシルオキシフェニル）メチルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］ベンジルアミノ基、２，４－ビス（ドデシルオキシ）ベンジルアミノ基、フェニル（２，３，４－トリス（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基、ビス［４－（１２－ドコシルオキシドデシルオキシ）フェニル］メチルアミノ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルオキシ基、３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルオキシ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、２，４－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、ビス（４－ドコシルオキシシクロへキシル）メチルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、２，４－ビス（ドデシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、フェニル（２，３，４－トリス（オクタデシルオキシ）シクロへキシル）メチルアミノ基、ビス［４－（１２－ドコシルオキシドデシルオキシ）シクロへキシル］メチルアミノ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、または３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基である
基であるか、または
　Ｌ－Ｙが、単結合またはスクシニル－１，４－ピペラジンジイル基であり、および
　Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基、または３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基である
基である。
　保護基（Ｐｇ－５）は、より好ましくは、
　Ｌが、スクシニル基であり、および
　Ｙ－Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルアミノ基、２，４－ビス（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、ビス（４－ドコシルオキシフェニル）メチルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］ベンジルアミノ基、２，４－ビス（ドデシルオキシ）ベンジルアミノ基、フェニル（２，３，４－トリス（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基、ビス［４－（１２－ドコシルオキシドデシルオキシ）フェニル］メチルアミノ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルオキシ基、３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルオキシ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、２，４－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、ビス（４－ドコシルオキシシクロへキシル）メチルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、２，４－ビス（ドデシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、フェニル（２，３，４－トリス（オクタデシルオキシ）シクロへキシル）メチルアミノ基、ビス［４－（１２－ドコシルオキシドデシルオキシ）シクロへキシル］メチルアミノ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、または３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基である
基であるか、または
　Ｌ－Ｙが、単結合またはスクシニル－１，４－ピペラジンジイル基であり、および
　Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基、または３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基である
基である。
　保護基（Ｐｇ－５）は、さらに好ましくは、
　Ｌが、スクシニル基であり、および
　Ｙ－Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルオキシ基、３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルオキシ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、２，４－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、３，５－ビス（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、４－メトキシ－２－［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、２，４－ビス（ドデシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、３，５－ビス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、または３，４，５－トリス［３’，４’，５’－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基である
基であるか、または
　Ｌ－Ｙが、単結合またはスクシニル－１，４－ピペラジンジイル基であり、および
　Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基である
基である。
　保護基（Ｐｇ－５）は、特に好ましくは、
　Ｌが、スクシニル基であり、および
　Ｙ－Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基またはフェニル（２，３，４－トリス（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基である
基であるか、または
　Ｌ－Ｙが、スクシニル－１，４－ピペラジンジイル基であり、および
　Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基である
基である。
　保護基（Ｐｇ－５）は、最も好ましくは、
　Ｌが、スクシニル基であり、および
　Ｙ－Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、または３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基である
基であるか、または
　Ｌ－Ｙが、スクシニル－１，４－ピペラジンジイル基であり、および
　Ｚが、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基である
基である。
　保護基（Ｐｇ－５）、およびそれを形成するために用いられる化合物は、公知の方法（例えば国際公開第２０１７／１０４８３６号、国際公開第２０１９／１３１７１９号、国際公開第２０２０／２３５６５８号、国際公開第２０２１／０３９９３５号または国際公開第２０２１／１９８８８３号に記載の方法）またはそれに準じた方法によって、形成または製造することができる。
１－２．オリゴヌクレオチド合成に関する用語
　本明細書中、「固相担体」とは、当該分野においてオリゴヌクレオチド合成の固相合成に使用されるものであれば特に制限されず、例えば、ガラスビーズ、樹脂ビーズ等が挙げられる。固相担体として用いられる支持体または樹脂は、当技術分野において公知であり、固相合成での使用に適した、あらゆる支持体または樹脂であり得る。前記支持体または樹脂としては、例えば、ポリスチレン支持体（ポリスチレン支持体は、例えばｐ－メチルベンジル－ヒドリルアミンによってさらに機能化されていてもよい）、珪藻土封入ポリジメチルアクリルアミド（ペプシンＫ）、シリカ、微細孔性ガラス、両親媒性のポリスチレン－ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）樹脂、ＰＥＧ－ポリアミド、ＰＥＧ－ポリエステル樹脂、Ｗａｎｇ－ＰＥＧレジン、Ｒｉｎｋ－アミドＰＥＧレジン等が挙げられる。前記支持体または樹脂は、修飾されていてもよい。修飾された支持体または樹脂としては、例えば、長鎖アルキルアミノ制御細孔ガラス（long chain alkylamino Controlled Pore Glass, lcaa CPG）等が挙げられる。
　本明細書中、オリゴヌクレオチドの構成単位となる「ヌクレオシド」とは、核酸塩基が糖（例えば、２－デオキシリボース、リボース、２位炭素原子および４位炭素原子が２価の有機基により結合された２－デオキシリボースまたはリボース、３位炭素原子および５位炭素原子が２価の有機基により結合された２－デオキシリボースまたはリボース、３位炭素原子および４位炭素原子が２価の有機基により結合された２－デオキシリボースまたはリボースなど）の１位にＮ－グリコシド化により結合された化合物を意味する。
　本明細書中、「核酸塩基」とは、核酸の合成に使用されるものであれば特に制限されず、例えば、シトシル基（シトシン塩基）、ウラシル基（ウラシル塩基）、チミニル基（チミン塩基）等のピリミジン塩基、アデニル基（アデニン塩基）、グアニル基（グアニン塩基）等のプリン塩基を挙げることができる。また、「保護されていてもよい核酸塩基」とは、例えば、核酸塩基中のアミノ基、カルボニル基等が保護されていてもよいことを意味する。保護されていてもよい核酸塩基は、好ましくは前述のアミノ基の保護基でアミノ基が保護されていてもよい核酸塩基であり、より好ましくはアミノ基を有さない核酸塩基、または前述のアミノ基の保護基で保護されたアミノ基を有する核酸塩基である。
　カルボニル基に、例えば、フェノール、２，５－ジクロロフェノール、３－クロロフェノール、３，５－ジクロロフェノール、２－ホルミルフェノール、２－ナフトール、４－メトキシフェノール、４－クロロフェノール、２－ニトロフェノール、４－ニトロフェノール、４－アセチルアミノフェノール、ペンタフルオロフェノール、４－ピバロイロキシベンジルアルコール、４－ニトロフェネチルアルコール、２－（メチルスルホニル）エタノール、２－（フェニルスルホニル）エタノール、２－シアノエタノール、２－（トリメチルシリル）エタノール、ジメチルカルバミン酸クロライド、ジエチルカルバミン酸クロライド、エチルフェニルカルバミン酸クロライド、１－ピロリジンカルボン酸クロライド、４－モルホリンカルボン酸クロライド、ジフェニルカルバミン酸クロライド等を反応せることによって、カルボニル基を保護することができる。
　本明細書中の「核酸塩基」には、核酸塩基が置換基（例えば、ハロゲン原子、アルキル基、アラルキル基、アルコキシ基、アシル基、アルコキシアルキル基、水酸基、アミノ基、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシ、シアノ、ニトロ等）で置換されている修飾核酸塩基（例えば、８－ブロモアデニル基、８－ブロモグアニル基、５－ブロモシトシル基、５－ヨードシトシル基、５－ブロモウラシル基、５－ヨードウラシル基、５－フルオロウラシル基、５－メチルシトシル基、８－オキソグアニル基、ヒポキサンチニル基等）も包含される。
　本明細書中の「糖」は、水酸基がアミノ基に置き換わったアミノ糖、および２位水酸基がハロゲン原子に置き換わったリボースも包含する。
　アミノ糖としては、例えば、以下に示すような３位水酸基がアミノ基に置き換わった２－デオキシリボース、３位水酸基がアミノ基に置き換わったリボース、および３位水酸基がアミノ基に、２位水酸基がハロゲンに置き換わったリボースが挙げられる（下記式中、Ｘｓはハロゲン原子を示す。）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000033
　２位炭素原子および４位炭素原子が２価の有機基により結合された２－デオキシリボースまたはリボース、３位炭素原子および５位炭素原子が２価の有機基により結合された２－デオキシリボースまたはリボース、または３位炭素原子および４位炭素原子が２価の有機基により結合された２－デオキシリボースまたはリボースとしては、例えば、以下の化合物が挙げられる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000034
［式中、Ｒは、水素原子、置換されていてもよい炭化水素基、置換されていてもよい水酸基、または置換されていてもよいアミノ基を示し、およびＲ’は、水素原子または水酸基を示す。］
　本明細書中の「リン酸基」は、－Ｏ－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２だけでなく、酸素原子が硫黄原子またはＮＨに置き換わった基（例えば、－Ｏ－Ｐ（＝Ｓ）（ＯＨ）２、－ＮＨ－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、－ＮＨ－Ｐ（＝Ｓ）（ＯＨ）２）も包含する。また、リン酸基中の水酸基（－ＯＨ）が－ＯＲｐ（式中、Ｒｐは、有機基（例えば、リン酸基の保護基）を示す）に置き換わった基（例えば、保護されたリン酸基）も、「リン酸基」に包含される。
　本明細書中、「亜リン酸エステル結合」とは、下記式（Ｐ１－１）で表される結合、または前記結合中の酸素原子がＮＨに置き換わった下記式（Ｐ１－２）で表される結合を表す（下記式中、＊は結合位置を示す）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000035
　本明細書中、「ホスホン酸エステル結合」とは、下記式（Ｐ２－１）で表される結合、または前記結合中の酸素原子がＮＨに置き換わった下記式（Ｐ２－２）で表される結合を表す（下記式中、＊は結合位置を示す）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000036
　本明細書中、「リン酸エステル結合」とは、下記式（Ｐ３－１）で表される結合、または前記結合中の酸素原子がＮＨに置き換わった下記式（Ｐ３－２）で表される結合を表す（下記式中、＊は結合位置を示す）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000037
　本明細書中、「チオリン酸エステル結合」とは、下記式（Ｐ４－１）で表される結合、または前記結合中の酸素原子がＮＨに置き換わった下記式（Ｐ４－２）で表される結合を表す（下記式中、＊は結合位置を示す）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000038
　本明細書中、「ヌクレオチド」とは、ヌクレオシドにリン酸基が結合した化合物を意味する。なお、リン酸基の説明は、前述の通りである。
　本明細書中、「オリゴヌクレオチド」とは、ヌクレオシドにヌクレオチドが１個以上連結した化合物を意味する。なお、「オリゴヌクレオチド」には、前記式（Ｐ３－１）で表されるリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドだけでなく、前記式（Ｐ３－２）で表されるリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド、前記式（Ｐ４－１）で表されるチオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオシド、および前記式（Ｐ４－２）で表されるチオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオシドも包含される。本発明におけるオリゴヌクレオチド中のヌクレオシドの数は特に限定されないが、好ましくは２～５０、より好ましくは２～３０である。
　本明細書中、「ホスホロアミダイト」とは、亜リン酸ジエステルのモノアミド（Ｐ（ＯＲ）２（ＮＲ２）、４個のＲは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基を示し、前記ＮＲ２は、二つのＲが互いに結合して、環状アミノ基を形成してもよい）を意味する。
　本明細書中、「ホスホロアミダイト化されたヌクレオシド」とは、ヌクレオシドに－Ｘｎ－Ｐ（ＯＲ）（ＮＲ２）で表される基（式中、Ｘｎは、酸素原子またはＮＨを示し、３個のＲは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基を示し、前記ＮＲ２は、二つのＲが互いに結合して、環状アミノ基を形成してもよい）を導入することによって得られる化合物を意味する。
　本明細書中、「ホスホロアミダイト化されたヌクレオチド」とは、ヌクレオチドに－Ｘｎ－Ｐ（ＯＲ）（ＮＲ２）で表される基（式中、Ｘｎは、酸素原子またはＮＨを示し、３個のＲは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基を示し、前記ＮＲ２は、二つのＲが互いに結合して、環状アミノ基を形成してもよい）を導入することによって得られる、－Ｘｎ－Ｐ（ＯＲ）（ＮＲ２）で表される基およびリン酸基を有する化合物を意味する。なお、前記リン酸基は、置換されていてもよい。
　本明細書中、「ホスホロアミダイト化されたオリゴヌクレオチド」とは、オリゴヌクレオチドに－Ｘｎ－Ｐ（ＯＲ）（ＮＲ２）で表される基（式中、Ｘｎは、酸素原子またはＮＨを示し、３個のＲは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基を示し、前記ＮＲ２は、二つのＲが互いに結合して、環状アミノ基を形成してもよい）を導入することによって得られる化合物を意味する。
　本明細書中、「亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体」とは、オリゴヌクレオチド中のリン酸エステル結合が亜リン酸エステル結合に置き換わった前駆体を意味する。この前駆体を酸化することによって、リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドを製造することができる。
　亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、好ましくは
（１）ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドとの縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体、または
（２）オリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイトとの縮合によって得られた亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体
である。
　亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、より好ましくはヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドとの縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である。
　亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、さらに好ましくは疎水性保護基を有する、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）と、水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されており、且つホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）との縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である。
　前記縮合は、３’末端から５’末端への方向にオリゴヌクレオチド鎖の伸長を行う縮合（以下「３’－５’縮合」と記載する）および５’末端から３’末端への方向にオリゴヌクレオチド鎖の伸長を行う縮合（以下「５’－３’縮合」と記載する）のいずれでもよい。以下、３’－５’縮合および５’－３’縮合のそれぞれにおいて好ましい前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）および前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）を順に説明する。
　３’－５’縮合において、前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）としては、例えば式（ａ－Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000039
［式中、
　ｒは、０以上の整数を示し；
　ｒ＋１個のＢａｓｅ１は、それぞれ独立に、保護されていてもよい核酸塩基を示し；
　ｒ＋１個のＸｎ１は、それぞれ独立に、酸素原子またはＮＨを示し；
　ｒ＋１個のＸｎ２は、それぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、保護されていてもよい水酸基、または２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基を示し；
　ｒ個のＲ１０は、それぞれ独立に、酸素原子または硫黄原子を示し；
　ｒ個のＲｐ１は、それぞれ独立に、リン酸基の保護基を示し；
　Ｐｇは、＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示す）、＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体を示し；並びに
　Ｌ、ＹおよびＺの定義および説明は、前述の保護基（Ｐｇ－５）でのＬ、ＹおよびＺの定義および説明と同じである。］
で表される化合物（即ち、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド）が挙げられる。
　ｒが０である場合、化合物（ａ－Ｉ）はヌクレオシドであり、ｒが１以上である場合、化合物（ａ－Ｉ）はオリゴヌクレオチドである。ｒは、４９以下が好ましく、２９以下がより好ましく、１９以下がさらに好ましく、４以下が特に好ましく、２以下が最も好ましい。
　核酸塩基であるＢａｓｅ１のアミノ基は、保護基で保護されていることが好ましい。アミノ基の保護基としては、例えば前述のアミノ基の保護基が挙げられるが、Ｂａｓｅ１のアミノ基の保護基は、好ましくはアセチル基、フェノキシアセチル基、４－イソプロピルフェノキシアセチル基、ベンゾイル基、イソブチリル基、（２－ヘキシル）デカノイル基、ジメチルホルムアミジニル基、および＝ＮＣ（Ｒ１１）－Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）で表される（式中、Ｒ１１は、メチル基を示し、Ｒ１２およびＲ１３は、それぞれ独立にＣ１－６アルキル基を示すか、またはＲ１１およびＲ１２が一緒になって、それらが結合する炭素原子および窒素原子と共に５または６員の含窒素複素環を形成していてもよい。）である。化合物（ａ－Ｉ）が複数のアミノ基を有する場合、アミノ基の保護基は１種のみでもよく、２種以上でもよい。
　Ｘｎ２のハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子が好ましく、フッ素原子がより好ましい。
　Ｘｎ２の保護されていてもよい水酸基の保護基としては、例えば前述の水酸基の保護基が挙げられるが、好ましくはメチル基、２－メトキシエチル基、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、またはｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル基、（２－シアノエトキシ）メチル基、１－（２－シアノエトキシ）エチル基である。
　Ｘｎ２の「２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基」としては、ヌクレオシドの２位炭素原子および４位炭素原子と結合する限り特に限定はない。この２価の有機基としては、例えば、置換されていてもよいＣ２－７アルキレン基、並びに－Ｏ－、－ＮＲ３３－（Ｒ３３は水素原子またはＣ１－６アルキル基を示す）、－Ｓ－、－ＣＯ－、－ＣＯＯ－、－ＯＣＯＮＲ３４－（Ｒ３４は水素原子またはＣ１－６アルキル基を示す）および－ＣＯＮＲ３５－（Ｒ３５は水素原子またはＣ１－６アルキル基を示す）から選ばれる２価のリンカーと、置換されていてもよいＣ１－７アルキレン基とから構成される２価の有機基等が挙げられる。Ｃ１－７アルキレン基およびＣ２－７アルキレン基が有していてもよい置換基としては、例えば、メチリデン基（ＣＨ２＝）が挙げられる。
　「２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基」としては、置換されていてもよいＣ２－７アルキレン基、－ＯＲｉ－（Ｒｉは４位炭素原子と結合するＣ１－６アルキレン基を示す）、－Ｏ－ＮＲ３３－Ｒｊ－（Ｒｊは４位炭素原子と結合するＣ１－６アルキレン基を示し、Ｒ３３は前記と同義を示す）、－Ｏ－Ｒｋ－Ｏ－Ｒｌ－（ＲｋはＣ１－６アルキレン基を示し、Ｒｌは４位炭素原子と結合架橋するＣ１－６アルキレン基を示す）が好ましく、－ＯＲｉ－（Ｒｉは前記と同義を示す）、－Ｏ－ＮＲ３３－Ｒｊ－（ＲｊおよびＲ３３は前記と同義を示す）、－Ｏ－Ｒｋ－Ｏ－Ｒｌ－（ＲｋおよびＲｌは前記と同義を示す）がより好ましい。Ｒｉ、Ｒｊ、ＲｋおよびＲｌで示されるＣ１－６アルキレン基としては、それぞれ独立に、メチレン基またはエチレン基が好ましい。
　「２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基」としては、－Ｏ－ＣＨ２－、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－、－Ｏ－ＮＲ３３－ＣＨ２－（Ｒ３３は前記と同義を示す）、－Ｏ－ＣＨ２－Ｏ－ＣＨ２－がより好ましく、－Ｏ－ＣＨ２－、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－、－Ｏ－ＮＨ－ＣＨ２－、－Ｏ－Ｎ（ＣＨ３）－ＣＨ２－、－Ｏ－ＣＨ２－Ｏ－ＣＨ２－（それぞれ、左側が２位炭素原子に結合し、右側が４位炭素原子に結合する。）がさらに好ましい。
　ｒ＋１個のＸｎ２は、それぞれ独立に、好ましくは水素原子、ハロゲン原子、または保護されていてもよい水酸基であり、より好ましくは水素原子、フッ素原子または保護されていてもよい水酸基である。
　ｒ個のＲｐ１としては、例えば前述のリン酸基の保護基が挙げられるが、好ましくは２－シアノエチル基である。
　前記式（ａ－Ｉ）中のＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体である場合、化合物（ａ－Ｉ）は、固相担体に担持されたヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドである。Ｐｇは、好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示す）または固相担体であり、より好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである。Ｌ、ＹおよびＺの定義および説明は、前述の保護基（Ｐｇ－５）でのＬ、ＹおよびＺの定義および説明と同じである。
　３’－５’縮合において、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）としては、例えば
式（ｂ－Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000040
［式中、
　ｓは、０以上の整数を示し；
　ｓ＋１個のＢａｓｅ２は、それぞれ独立に、保護されていてもよい核酸塩基を示し；
　ｓ＋１個のＸｎ３は、それぞれ独立に、酸素原子またはＮＨを示し；
　ｓ＋１個のＸｎ４は、それぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、保護されていてもよい水酸基、または２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基を示し；
　Ｑ”は、水酸基の酸性条件下で除去可能な一時保護基を示し；
　ｓ個のＲ１４は、それぞれ独立に、酸素原子または硫黄原子を示し；
　ｓ＋１個のＲｐ２は、それぞれ独立に、リン酸基の保護基を示し；並びに
　Ｒ１５およびＲ１６は、それぞれ独立に、アルキル基を示すか、または隣接する窒素原子と一緒になって形成する５または６員の飽和環状アミノ基を示し、かかる飽和環状アミノ基は、窒素原子の他に環構成原子として酸素原子または硫黄原子を１個有していてもよい。］
で表される化合物（即ち、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド）が挙げられる。
　ｓが０である場合、化合物（ｂ－Ｉ）は、ホスホロアミダイト化されたヌクレオシドであり、ｓが１以上である場合、化合物（ｂ－Ｉ）は、ホスホロアミダイト化されたオリゴヌクレオチドである。化合物（ｂ－Ｉ）において、ｓは、４９以下が好ましく、２９以下がより好ましく、１９以下がさらに好ましく、４以下が特に好ましく、２以下が最も好ましい。
　核酸塩基であるＢａｓｅ２のアミノ基は、保護基で保護されていることが好ましい。該保護基としては、前述のアミノ基の保護基に加えて、前述の－Ｌ－Ｙ－Ｚ基を使用することができる。該保護基は、好ましくは前述のアミノ基の保護基であり、より好ましくは、アセチル基、フェノキシアセチル基、４－イソプロピルフェノキシアセチル基、ベンゾイル基、イソブチリル基、（２－ヘキシル）デカノイル基、ジメチルホルムアミジニル基、および＝ＮＣ（Ｒ１１）－Ｎ（Ｒ１２）（Ｒ１３）で表される基（式中、Ｒ１１は、メチル基を示し、Ｒ１２およびＲ１３は、それぞれ独立にＣ１－６アルキル基を示すか、またはＲ１１およびＲ１２が一緒になって、それらが結合する炭素原子および窒素原子と共に５または６員の含窒素複素環を形成していてもよい。）である。化合物（ｂ－Ｉ）が複数のアミノ基を有する場合、アミノ基の保護基は１種のみでもよく、２種以上でもよい。
　前記式（ｂ－Ｉ）中のＸｎ４の説明は、前記式（ａ－Ｉ）中のＸｎ２の説明と同じである。ｓ＋１個のＸｎ４は、それぞれ独立に、好ましくは水素原子、ハロゲン原子、または保護されていてもよい水酸基であり、より好ましくは水素原子または保護されていてもよい水酸基である。
　前記式（ｂ－Ｉ）中のＲｐ２の説明は、前記式（ａ－Ｉ）中のＲｐ１の説明と同じである。
　ｓ＋１個のＲｐ２としては、例えば前述のリン酸基の保護基が挙げられるが、好ましくは２－シアノエチル基である。
　前記式（ｂ－Ｉ）中のＲ１５およびＲ１６は、それぞれ独立に、好ましくはＣ１－１０アルキル基であるか、または隣接する窒素原子と一緒になって形成する５または６員の飽和環状アミノ基であり、より好ましくはＣ１－１０アルキル基であり、さらに好ましくはＣ１－６アルキル基である。
　化合物（ａ－Ｉ）および化合物（ｂ－Ｉ）は、公知の方法（例えば国際公開第２０１７／１０４８３６号に記載の方法）またはそれに準じた方法によって製造することができる。
　化合物（ａ－Ｉ）および化合物（ｂ－Ｉ）の縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、下記式（ｃ－Ｉ）で表される化合物である（下記式（ｃ－Ｉ）の記号の定義および説明は前述の通りである）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000041
　前記式（ｃ－Ｉ）中のＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体である場合、化合物（ｃ－Ｉ）は、固相担体に担持されたオリゴヌクレオチド前駆体である。Ｐｇは、好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示す）または固相担体であり、より好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである。
　前記式（ｃ－Ｉ）中、ｓ個のＲ１４およびｒ個のＲ１０の少なくとも一つが硫黄原子であることが好ましい。
　５’－３’縮合において、前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）としては、例えば式（ａ－Ｉ’）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000042
［式中、
　ｒは、０以上の整数を示し；
　ｒ＋１個のＢａｓｅ１は、それぞれ独立に、保護されていてもよい核酸塩基を示し；
　ｒ個のＸｎ１は、それぞれ独立に、酸素原子またはＮＨを示し；
　ｒ＋１個のＸｎ２は、それぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、保護されていてもよい水酸基、または２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基を示し；
　Ｘｎ５は、水酸基またはアミノ基を示し；
　ｒ個のＲ１０は、それぞれ独立に、酸素原子または硫黄原子を示し；
　ｒ個のＲｐ１は、それぞれ独立に、リン酸基の保護基を示し；
　Ｐｇは、＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊は、酸素原子との結合位置を示す）、＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体を示し；並びに
　Ｌ、ＹおよびＺの定義および説明は、前述の保護基（Ｐｇ－５）でのＬ、ＹおよびＺの定義および説明と同じである。］
で表される化合物（即ち、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド）が挙げられる。
　式（ａ－Ｉ’）中のＸｎ５は、好ましくは水酸基である。Ｘｎ５以外の記号の説明は、前記式（ａ－Ｉ）中の記号の説明と同じである。
　前記式（ａ－Ｉ’）中のＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体である場合、化合物（ａ－Ｉ’）は、固相担体に担持されたヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドである。Ｐｇは、好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊は、酸素原子との結合位置を示す）または固相担体であり、より好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである。
　５’－３’縮合において、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）としては、例えば式（ｂ－Ｉ’）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000043
［式中、
　ｓは、０以上の整数を示し；
　ｓ＋１個のＢａｓｅ２は、それぞれ独立に、保護されていてもよい核酸塩基を示し；
　ｓ個のＸｎ３は、それぞれ独立に、酸素原子またはＮＨを示し；
　ｓ＋１個のＸｎ４は、それぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、保護されていてもよい水酸基、または２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基を示し；
　Ｘｎ６は、酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されている水酸基、または酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているアミノ基を示し；
　ｓ個のＲ１４は、それぞれ独立に、酸素原子または硫黄原子を示し；
　ｓ＋１個のＲｐ２は、それぞれ独立に、リン酸基の保護基を示し；並びに
　Ｒ１５およびＲ１６は、それぞれ独立に、アルキル基を示すか、または隣接する窒素原子と一緒になって形成する５または６員の飽和環状アミノ基を示し、かかる飽和環状アミノ基は、窒素原子の他に環構成原子として酸素原子または硫黄原子を１個有していてもよい。］
で表される化合物が挙げられる。
　Ｘｎ６は、好ましくは酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されている水酸基である。Ｘｎ６以外の記号の説明は、前記式（ｂ－Ｉ）中の記号の説明と同じである。
　化合物（ａ－Ｉ’）および化合物（ｂ－Ｉ’）は、公知の方法（例えば国際公開第２０１７／１０４８３６号に記載の方法）またはそれに準じた方法によって製造することができる。
　化合物（ａ－Ｉ’）および化合物（ｂ－Ｉ’）の縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、下記式（ｃ－Ｉ’）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000044
［式中、
　ｒは、０以上の整数を示し；
　ｒ＋１個のＢａｓｅ１は、それぞれ独立に、保護されていてもよい核酸塩基を示し；
　ｒ＋１個のＸｎ１は、それぞれ独立に、酸素原子またはＮＨを示し；
　ｒ＋１個のＸｎ２は、それぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、保護されていてもよい水酸基、または２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基を示し；
　ｒ個のＲ１０は、それぞれ独立に、酸素原子または硫黄原子を示し；
　ｒ個のＲｐ１は、それぞれ独立に、リン酸基の保護基を示し；
　ｓは、０以上の整数を示し；
　ｓ＋１個のＢａｓｅ２は、それぞれ独立に、保護されていてもよい核酸塩基を示し；
　ｓ個のＸｎ３は、それぞれ独立に、酸素原子またはＮＨを示し；
　ｓ＋１個のＸｎ４は、それぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、保護されていてもよい水酸基、または２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基を示し；
　Ｘｎ６は、酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されている水酸基、または酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているアミノ基を示し；
　ｓ個のＲ１４は、それぞれ独立に、酸素原子または硫黄原子を示し；
　ｓ＋１個のＲｐ２は、それぞれ独立に、リン酸基の保護基を示し；
　Ｐｇは、＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊は、酸素原子との結合位置を示す）、＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体を示し；並びに
　Ｌ、ＹおよびＺの定義および説明は、前述の保護基（Ｐｇ－５）でのＬ、ＹおよびＺの定義および説明と同じである。］
で表される化合物である（式中の記号の説明は前述の通りである）。
　前記式（ｃ－Ｉ’）中のＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体である場合、化合物（ｃ－Ｉ’）は、固相担体に担持されたオリゴヌクレオチド前駆体である。Ｐｇは、好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊は、酸素原子との結合位置を示す）または固相担体であり、より好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである。
　前記式（ｃ－Ｉ’）中、ｒ個のＲ１０およびｓ個のＲ１４の少なくとも一つが硫黄原子であることが好ましい。
　次に「オリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイトとの縮合によって得られた亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体」を説明する。前記前駆体としては、例えば、式（γ－Ｉ）または式（γ－Ｉ’）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000045
［式中、
　ｔは、１以上の整数を示し、
　ｔ＋１個のＢａｓｅ１は、それぞれ独立に、保護されていてもよい核酸塩基を示し；
　ｔ＋１個のＸｎ１は、それぞれ独立に、酸素原子またはＮＨを示し；
　ｔ＋１個のＸｎ２は、それぞれ独立に、水素原子、ハロゲン原子、保護されていてもよい水酸基、または２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基を示し；
　ｔ個のＲ１０は、それぞれ独立に、酸素原子または硫黄原子を示し；
　ｔ個のＲｐ１およびＲｐ３は、それぞれ独立に、リン酸基の保護基を示し；
　Ｒｐ４は、保護されたアミノ基を有するアルキル基、またはリン酸基の保護基を示し；
　Ｐｇは、＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊は、Ｘｎ１との結合位置または酸素原子との結合位置を示す）、＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体を示し；並びに
　Ｌ、ＹおよびＺの定義および説明は、前述の保護基（Ｐｇ－５）でのＬ、ＹおよびＺの定義および説明と同じである。］
で表される化合物が挙げられる。
　前記式（γ－Ｉ）または式（γ－Ｉ’）中のＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体である場合、化合物（γ－Ｉ）または化合物（γ－Ｉ’）は、固相担体に担持されたオリゴヌクレオチド前駆体である。Ｐｇは、好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊は、酸素原子との結合位置を示す）または固相担体であり、より好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである。
　前記式（γ－Ｉ）および式（γ－Ｉ’）中の記号について説明する。ｔは、４９以下が好ましく、２９以下がより好ましく、１９以下がさらに好ましく、４以下が特に好ましく、２以下が最も好ましい。Ｒｐ３およびＲｐ４の「リン酸基の保護基」としては、例えば、前述のリン酸基の保護基が挙げられる。Ｒｐ３は、好ましくは２－シアノエチル基である。Ｒｐ４の「保護されたアミノ基を有するアルキル基」中の「保護されたアミノ基」としては、例えば、前述のアミノ基の保護基で保護されたアミノ基が挙げられる。Ｒｐ４の「保護されたアミノ基を有するアルキル基」は、好ましくは保護されたアミノ基を有するＣ１－６アルキル基であり、より好ましくは６－（トリフルオロアセチルアミノ）ヘキシル基である。Ｒｐ４は、好ましく２－シアノエチル基または６－（トリフルオロアセチルアミノ）ヘキシル基である。その他の記号の説明は、前述の通りである。
　本明細書中、「ホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体」とは、オリゴヌクレオチド中のリン酸エステル結合がホスホン酸エステル結合に置き換わった前駆体を意味する。この前駆体を酸化することによって、リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドを製造することができる。
　ホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、好ましくは、疎水性保護基を有する、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）と、水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されたＨ－ホスホネート（Ｂ）との縮合によって得られた、ホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である。前記Ｈ－ホスホネート（Ｂ）は、トリエチルアミン塩等の塩の形態で使用してもよい。
　前記縮合は、３’－５’縮合および５’－３’縮合のいずれでもよい。３’－５’縮合および５’－３’縮合のそれぞれにおいて好ましい前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）および前記Ｈ－ホスホネート（Ｂ）を順に説明する。
　３’－５’縮合において、前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）は、好ましくは、前述の化合物（ａ－Ｉ）である。
　３’－５’縮合において、前記Ｈ－ホスホネート（Ｂ）としては、例えば下記式（Ｂ－Ｉ）で表される化合物が挙げられる（下記式（Ｂ－Ｉ）中の記号の定義および説明は、前記式（ｂ－Ｉ）中の記号の定義および説明と同じである。）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000046
　化合物（Ｂ－Ｉ）は、公知の方法（例えば Acta Biochimica Polonica.1998, 45, 907-915. に記載の方法）またはそれに準じた方法によって製造することができる。
　化合物（ａ－Ｉ）および化合物（Ｂ－Ｉ）の縮合によって得られたホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、下記式（Ｃ－Ｉ）で表される化合物である（下記式（Ｃ－Ｉ）中の記号の定義および説明は、前記式（ｃ－Ｉ）中の記号の定義および説明と同じである。）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000047
　前記式（Ｃ－Ｉ）中のＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体である場合、化合物（Ｃ－Ｉ）は、固相担体に担持されたオリゴヌクレオチド前駆体である。Ｐｇは、好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊は、Ｘｎ１との結合位置を示す）または固相担体であり、より好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである。
　前記式（Ｃ－Ｉ）中、ｓ個のＲ１４およびｒ個のＲ１０の少なくとも一つが硫黄原子であることが好ましい。
　５’－３’縮合において、前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）は、好ましくは、前述の化合物（ａ－Ｉ’）である。
　５’－３’縮合において、Ｈ－ホスホネート（Ｂ）としては、例えば下記式（Ｂ－Ｉ’）で表される化合物が挙げられる（下記式（Ｂ－Ｉ’）の記号の定義および説明は、前記式（ｂ－Ｉ’）中の記号の定義および説明と同じである）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000048
　化合物（Ｂ－Ｉ’）は、公知の方法（例えば Phosphorus Chemistry II. Topics in Current Chemistry, vol 361. Springer, Cham. Recent Advances in H-Phosphonate Chemistry に記載の方法）またはそれに準じた方法によって製造することができる。
　化合物（ａ－Ｉ’）および化合物（Ｂ－Ｉ’）の縮合によって得られたホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、下記式（Ｃ－Ｉ’）で表される化合物である（下記式（Ｃ－Ｉ’）中の記号の定義および説明は、前記式（ｃ－Ｉ’）中の記号の定義および説明と同じである。）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000049
　前記式（Ｃ－Ｉ’）中のＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｓｐ（式中、＊＊はＸｎ１との結合位置を示し、およびＳｐは固相担体を示す）または固相担体である場合、化合物（Ｃ－Ｉ）は、固相担体に担持されたオリゴヌクレオチド前駆体である。Ｐｇは、好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚ（式中、＊＊は、酸素原子との結合位置を示す）または固相担体であり、より好ましくは＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである。
　前記式（Ｃ－Ｉ’）中、ｒ個のＲ１０およびｓ個のＲ１４の少なくとも一つが硫黄原子であることが好ましい。
　本明細書中、「ワンポット合成」とは、中間体を合成する工程および目的の最終生成物を合成する工程を含む多段階の工程からなる合成であって、前記中間体を単離しない合成を意味する。なお、前記「中間体を合成する工程」は、一つのみでもよく、二つ以上でもよい。
２．本発明の製造方法
　以下、本発明の製造方法について説明する。本発明の製造方法は、酸化剤として下記式（Ｉ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000050
で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）を使用して、亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体を酸化して、リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドを製造することを特徴とする。化合物（Ｉ）は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
２－１．酸化剤
　以下、本発明の製造方法で使用する酸化剤である、化合物（Ｉ）（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）について説明する。
　前記式（Ｉ）中のＸ１は、単結合、硫黄原子、酸素原子、－Ｓ（＝Ｏ）２－または－Ｎ（－Ｒ３）－である。
　Ｘ１が単結合である場合、前記式（Ｉ）中のＲ１は、ハロゲン原子であり、および前記式（Ｉ）中のＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である。
　Ｘ１が硫黄原子または－Ｓ（＝Ｏ）２－である場合、前記式（Ｉ）中のＲ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、および前記式（Ｉ）中のＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である。
　Ｘ１が酸素原子である場合、前記式（Ｉ）中のＲ１およびＲ２は、それらが結合する硫黄原子および酸素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成する。
　Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－である場合、
　（１）前記式（Ｉ）中のＲ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、並びに前記式（Ｉ）中のＲ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成するか、または
　（２）前記式（Ｉ）中のＲ１およびＲ３は、それらが結合する窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びに前記式（Ｉ）中のＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である。
２－１－１．化合物（ＩＡ）および化合物（ＩＢ）
　化合物（Ｉ）の中でも、
　前記式（Ｉ）中の、Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－であり、Ｒ１が、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、並びにＲ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成する化合物（本明細書中「化合物（ＩＡ）」と記載する）、並びに
　前記式（Ｉ）中の、Ｘ１が、硫黄原子であり、Ｒ１が、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、およびＲ２が、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）（以下、化合物（ＩＢ）」と記載する）
が好ましい。
　即ち、化合物（Ｉ）の中でも、
　Ｘ１が、硫黄原子または－Ｎ（－Ｒ３）－であり、
　Ｒ１が、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、
　Ｘ１が硫黄原子である場合、Ｒ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、並びに
　Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－である場合、Ｒ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成する
化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）が好ましい。
　以下、まず、化合物（ＩＡ）および化合物（ＩＢ）について説明する。
２－１－１Ａ．化合物（ＩＡ）
　まず、化合物（ＩＡ）について説明する。化合物（ＩＡ）において、前記式（Ｉ）中のＲ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、好ましくは置換されていてもよいＣ１－１０アルキル基、置換されていてもよいフェニル基、置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基、または置換されていてもよい８～１４員の縮合多環式ヘテロアリール基である。
　化合物（ＩＡ）において、前記式（Ｉ）中のＲ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成する。
２－１－１Ａ－１．化合物（Ｉａ）
　化合物（ＩＡ）は、好ましくは下記式（Ｉａ）で表される化合物である。化合物（Ｉａ）は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000051
　以下、化合物（Ｉａ）の各基について説明する。
　前記式（Ｉａ）中のＲ１ａは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、好ましくは置換されていてもよいＣ１－１０アルキル基、置換されていてもよいフェニル基、または置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基である。
　前記式（Ｉａ）中の環Ａは、５または６員の不飽和複素環である。前記式（Ｉａ）中のＹ１ａは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－であり、好ましくは－Ｃ（＝Ｏ）－である。
　前記式（Ｉａ）中のｍは、０～３の整数であり、およびｍ個のＲ２ａは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、好ましくは置換されていてもＣ１－６よいアルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基である。ここで「ｍが０である」とは、Ｒ２ａが存在しないことを意味する。
　前記式（Ｉａ）中のｍが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ａは、環Ａと共に、置換されていてもよい縮合環を形成していてもよい。
　環Ａである５または６員の不飽和複素環は、下記式（ｒ２）～（ｒ４）のいずれかで表される環である［式中の記号の定義は前記の通りである。］。なお、下記式（ｒ２）～（ｒ４）ではＲ２ａを省略している。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000052
　隣接する２個のＲ２ａおよび環Ａが形成する縮合環は、好ましくは２環式または３環式の縮合環であり、より好ましくは２環式の縮合環である。該縮合環としては、例えば、下記式（ｒ５）～（ｒ２５）のいずれかで表される環が挙げられる。該縮合環は置換されていてもよい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000053
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000054
２－１－１Ａ－２．化合物（Ｉｃ）
　化合物（Ｉａ）は、好ましくは下記式（Ｉｃ）で表される化合物である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000055
　以下、化合物（Ｉｃ）の各基について説明する。
　前記式（Ｉｃ）中のＲ１ｃは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、好ましくは置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいフェニル基、または置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基である。
　本発明の製造方法の一態様において、Ｒ１ｃは、好ましくは
　（１）置換されていてもよいフェニル基および置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基
である。
　本発明の製造方法の別の一態様において、Ｒ１ｃは、好ましくは
　（１）置換されていてもよいフェニル基および置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基からなる群から選ばれる選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいピリジル基
である。
　本発明の製造方法の別の一態様において、Ｒ１ｃは、好ましくは
　（１）１または２個のピリジル基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいピリジル基
である。
　本発明の製造方法の別の一態様において、Ｒ１ｃは、好ましくは
　（１）１または２個のピリジル基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）１または２個のＣ１－６アルキル基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）ピリジル基（特に、２－ピリジル基または４－ピリジル基）
である。
　本発明の製造方法の別の一態様において、Ｒ１ｃは、好ましくは
　（１）Ｃ１－６アルキル基、
　（２）Ｃ１－６アルキル基、Ｃ１－６アルコキシ基およびハロゲン原子からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）１個のＣ１－６アルキル基で置換されているピリジル基（例、４－メチル－２－ピリジル基）
である。
　前記式（Ｉｃ）中のＹ１ｃは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－であり、好ましくは－Ｃ（＝Ｏ）－である。
　前記式（Ｉｃ）中のｐは、０または１であり、好ましくは０である。ここで「ｐが０である」とは、式（Ｉｃ）中の－ＣＨ（Ｒ２ｃ）－が存在しないことを意味する。
　前記式（Ｉｃ）中のＲ２ｃは、水素原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、好ましくは水素原子、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基である。
　前記式（Ｉｃ）中の環Ｃは、６員の芳香族炭化水素環、６員の含窒素芳香族複素環、または窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環である。
　本発明の製造方法の一態様において、前記環Ｃは、好ましくは６員の芳香族炭化水素環（即ち、ベンゼン環）または６員の含窒素芳香族複素環であり、より好ましくはベンゼン環またはピリジン環であり、さらに好ましくはピリジン環である。
　本発明の製造方法の別の一態様において、前記環Ｃは、好ましくはベンゼン環、ピリジン環またはキノリン環である。
　前記式（Ｉｃ）中のｑは、０～４の整数であり、好ましくは０～２の整数であり、より好ましくは０または１である。ここで「ｑが０である」とは、Ｒ３ｃが存在しないことを意味する。
　前記式（Ｉｃ）中のｑ個のＲ３ｃは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基である。
　本発明の製造方法の一態様において、ｑ個のＲ３ｃは、それぞれ独立に、好ましくは置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基であり、より好ましくはハロゲン原子またはニトロ基であり、さらに好ましくはニトロ基である。
　本発明の製造方法の別の一態様において、ｑ個のＲ３ｃは、それぞれ独立に、好ましくは電子求引性基であり、より好ましくはハロゲン原子、Ｃ１－６パーフルオロアルキル基またはニトロ基であり、さらに好ましくはＣ１－６パーフルオロアルキル基またはニトロ基であり、特に好ましくはトリフルオロメチル基である。
　好適な化合物（Ｉｃ）としては、以下の化合物が挙げられる。以下の化合物は、いずれも１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
（化合物（Ｉｃ－ｉ））
　前記式（Ｉｃ）中の、
　Ｒ１ｃが、
　（１）置換されていてもよいフェニル基および置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基
であり、
　Ｙ１ｃが、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－であり、
　ｐが、０または１であり、
　Ｒ２ｃが、水素原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、
　環Ｃが、６員の芳香族炭化水素環または６員の含窒素芳香族複素環であり、
　ｑが、０～４の整数であり、並びに
　ｑ個のＲ３ｃが、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基である
化合物（本明細書中「化合物（Ｉｃ－ｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｃ－ｉｉ））
　前記式（Ｉｃ）中の、
　Ｒ１ｃが、
　（１）置換されていてもよいフェニル基および置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基からなる群から選ばれる選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいピリジル基
であり、
　Ｙ１ｃが、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－であり
　ｐが、０または１であり、
　Ｒ２ｃが、水素原子、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基であり、
　環Ｃが、６員の芳香族炭化水素環または６員の含窒素芳香族複素環であり、
　ｑが、０～２の整数であり、並びに
　ｑ個のＲ３ｃが、それぞれ独立に、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基である
化合物（本明細書中「化合物（Ｉｃ－ｉｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｃ－ｉｉｉ））
　前記式（Ｉｃ）中の、
　Ｒ１ｃが、
　（１）１または２個のピリジル基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいピリジル基
であり、
　Ｙ１ｃが、－Ｃ（＝Ｏ）－であり
　ｐが、０であり、
　環Ｃが、ベンゼン環またはピリジン環であり、
　ｑが、０～２の整数であり、
　ｑ個のＲ３ｃが、それぞれ独立に、ハロゲン原子またはニトロ基である
化合物（本明細書中「化合物（Ｉｃ－ｉｉｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｃ－ｉｖ））
　前記式（Ｉｃ）中の、
　Ｒ１ｃが、
　（１）１または２個のピリジル基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）１または２個のＣ１－６アルキル基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）ピリジル基（特に、２－ピリジル基または４－ピリジル基）
であり、
　Ｙ１ｃが、－Ｃ（＝Ｏ）－であり
　ｐが、０であり、
　環Ｃが、ベンゼン環またはピリジン環であり、
　ｑが、０～２の整数であり、並びに
　ｑ個のＲ３ｃが、ニトロ基である
化合物（本明細書中「化合物（Ｉｃ－ｉｖ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｃ－ｉ’））
　前記式（Ｉｃ）中の、
　Ｒ１ｃが、
　（１）置換されていてもよいフェニル基および置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基
であり、
　Ｙ１ｃが、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－であり、
　ｐが、０または１であり、
　Ｒ２ｃが、水素原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、
　環Ｃが、６員の芳香族炭化水素環、６員の含窒素芳香族複素環、または窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環であり、
　ｑが、０～４の整数であり、並びに
　ｑ個のＲ３ｃが、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基である
化合物（本明細書中「化合物（Ｉｃ－ｉ’）」と記載する）。
（化合物（Ｉｃ－ｉｉ’））
　前記式（Ｉｃ）中の、
　Ｒ１ｃが、
　（１）置換されていてもよいフェニル基および置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基からなる群から選ばれる選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいピリジル基
であり、
　Ｙ１ｃが、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－であり
　ｐが、０または１であり、
　Ｒ２ｃが、水素原子、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基であり、
　環Ｃが、６員の芳香族炭化水素環、６員の含窒素芳香族複素環、または窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環であり、
　ｑが、０～２の整数であり、並びに
　ｑ個のＲ３ｃが、それぞれ独立に、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基である
化合物（本明細書中「化合物（Ｉｃ－ｉｉ’）」と記載する）。
（化合物（Ｉｃ－ｉｉｉ’））
　前記式（Ｉｃ）中の、
　Ｒ１ｃが、
　（１）Ｃ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいピリジル基
であり、
　Ｙ１ｃが、－Ｃ（＝Ｏ）－であり
　ｐが、０または１であり、
　環Ｃが、ベンゼン環、ピリジン環またはキノリン環であり、
　ｑが、０～２の整数であり、
　ｑ個のＲ３ｃが、それぞれ独立に、ハロゲン原子、Ｃ１－６パーフルオロアルキル基またはニトロ基である
化合物（本明細書中「化合物（Ｉｃ－ｉｉｉ’）」と記載する）。
（化合物（Ｉｃ－ｉｖ’））
　前記式（Ｉｃ）中の、
　Ｒ１ｃが、
　（１）Ｃ１－６アルキル基、
　（２）Ｃ１－６アルキル基、Ｃ１－６アルコキシ基およびハロゲン原子からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（３）１または２個のＣ１－６アルキル基で置換されているピリジル基（例、４－メチル－２－ピリジル基）
であり、
　Ｙ１ｃが、－Ｃ（＝Ｏ）－であり
　ｐが、０または１であり、
　環Ｃが、ベンゼン環、ピリジン環またはキノリン環であり、
　ｑが、０～２の整数であり、並びに
　ｑ個のＲ３ｃが、Ｃ１－６パーフルオロアルキル基である
化合物（本明細書中「化合物（Ｉｃ－ｉｖ’）」と記載する）。
（化合物（Ｉｃ）の好ましい具体例）
　化合物（Ｉｃ）の好ましい具体例としては、下記式（Ｉｃ－１）～（Ｉｃ－１７）のいずれかで表される化合物が挙げられる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000056
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000057
　本発明の製造方法の一態様において、化合物（Ｉｃ）は、好ましくは２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－３））、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－４））、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－５））、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－６））、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－７））、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－８））、２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－９））、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１０））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１１））、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１４））、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１６））、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１７））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉｃ）は、好ましくは２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－３））、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－４））、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－５））、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－６））、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－７））、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－８））、および２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－９））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉｃ）は、好ましくは２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－５））、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１０））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１１））、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））、２－（２，６ージメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１４））、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））、２－（４ーメトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１６））、および２－（４ーフルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１７））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉｃ）は、好ましくは２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１０））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１１））、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））、２－（２，６ージメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１４））、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））、２－（４ーメトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１６））、および２－（４ーフルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１７））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法において、化合物（Ｉｃ）は、最も好ましくは２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））である。
２－１－１Ｂ．化合物（ＩＢ）
　次に、化合物（ＩＢ）について説明する。化合物（ＩＢ）において、前記式（Ｉ）中のＲ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、好ましくは置換されていてもよいＣ１－１０アルキル基、置換されていてもよいフェニル基、置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基、または置換されていてもよい８～１４員の縮合多環式ヘテロアリール基である。
　化合物（ＩＢ）において、前記式（Ｉ）中のＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、好ましくは置換されていてもよいフェニル基、置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基、または置換されていてもよい８～１４員の縮合多環式ヘテロアリール基である。
２－１－１Ｂ－１．化合物（Ｉｂ）
　化合物（ＩＢ）は、好ましくは下記式（Ｉｂ）で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）である。化合物（Ｉｂ）は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000058
　以下、化合物（Ｉｂ）の各基について説明する。
　前記式（Ｉｂ）中のＲ１ｂは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、好ましくは置換されていてもよいＣ１－１０アルキル基、置換されていてもよいフェニル基、置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基、または置換されていてもよい８～１４員の縮合多環式ヘテロアリール基である。
　本発明の製造方法の一態様（以下「態様（Ａ）」と記載する）において、Ｒ１ｂは、より好ましくは
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたアルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、
　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
　（１０）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（１１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～３個の置換基で置換されていてもよい２－イミダゾリル基
である。
　態様（Ａ）において、Ｒ１ｂは、さらに好ましくは
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたアルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である。
　態様（Ａ）において、Ｒ１ｂは、特に好ましくは
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（６）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基および置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（７）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（８）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（９）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である。
　態様（Ａ）において、Ｒ１ｂは、最も好ましくは、１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、５－（１，２，３－トリアゾリル）基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基である。
　本発明の製造方法の別の一態様（以下「態様（Ｂ）」と記載する）において、Ｒ１ｂは、より好ましくは
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたアルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である。
　態様（Ｂ）において、Ｒ１ｂは、さらに好ましくは
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基および置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（８）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である。
　態様（Ｂ）において、Ｒ１ｂは、特に好ましくは、１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基である。
　前記式（Ｉｂ）中の環Ｂは、６員の芳香族炭化水素環（即ち、ベンゼン環）、または５若しくは６員の芳香族複素環であり、好ましくは５または６員の芳香族複素環であり、より好ましくはトリアゾール環、テトラゾール環、ピリジン環またはピリジン－Ｎ－オキシド環であり、さらに好ましくはテトラゾール環、ピリジン環またはピリジン－Ｎ－オキシド環である。
　前記式（Ｉｂ）中のｎは、０～５の整数であり、ｎ個のＲ２ｂは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、より好ましくは置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基である。ここで、「ｎが０である」とは、Ｒ２ｂが存在しないことを意味する。
　前記式（Ｉｂ）中のｎが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ｂは、環Ｂと共に、置換されていてもよい２環式の縮合芳香族複素環（好ましくは置換されていてもよいベンゾイミダゾール環、置換されていてもよいベンゾオキサゾール環、または置換されていてもよいベンゾチアゾール環）を形成していてもよい。
　本発明の製造方法の一態様（以下「態様（Ｃ）」と記載する）において、化合物（Ｉｂ）における式（ｒ１）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000059
で表される基は、好ましくは
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（１０）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～３個の置換基で置換されていてもよい２－イミダゾリル基
である。
　態様（Ｃ）において、基（ｒ１）は、より好ましくは
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である。
　態様（Ｃ）において、基（ｒ１）は、さらに好ましくは
　（１）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（５）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基および置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（８）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である。
　態様（Ｃ）において、基（ｒ１）は、特に好ましくは２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、５－（１，２，３－トリアゾリル）基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基であり、最も好ましくは２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、５－（１，２，３－トリアゾリル）基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、または（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基である。
　本発明の製造方法の別の一態様（以下「態様（Ｄ）」と記載する）において、基（ｒ１）は、好ましくは
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である。
　態様（Ｄ）において、基（ｒ１）は、さらに好ましくは
　（１）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基および置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（５）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（６）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（７）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である。
　態様（Ｄ）において、基（ｒ１）は、特に好ましくは２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基であり、最も好ましくは２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、または（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基である。
　好適な化合物（Ｉｂ）としては、以下の化合物が挙げられる。以下の化合物は、いずれも１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
（化合物（Ｉｂ－ｉ））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたアルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、
　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
　（１０）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（１１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～３個の置換基で置換されていてもよい２－イミダゾリル基
であり、並びに
　基（ｒ１）が、
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
　（１０）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～３個の置換基で置換されていてもよい２－イミダゾリル基
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｂ－ｉｉ））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたアルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
であり、並びに
　基（ｒ１）が、
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｉｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｂ－ｉｉｉ））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（６）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基および置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（７）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（８）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（９）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
であり、並びに
　基（ｒ１）が、
　（１）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
　（５）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基および置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（８）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｉｉｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｂ－ｉｖ））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、５－（１，２，３－トリアゾリル）基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基であり、および
　基（ｒ１）が、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、５－（１，２，３－トリアゾリル）基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｉｖ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｂ－ｖ））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、５－（１，２，３－トリアゾリル）基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基であり、および
　基（ｒ１）が、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、５－（１，２，３－トリアゾリル）基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、または（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｖ）」と記載することがある）である。
（化合物（Ｉｂ－ｉ’））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたアルキル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
であり、並びに
　基（ｒ１）が、
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（５）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｉ’）」と記載する）。
（化合物（Ｉｂ－ｉｉ’））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、
　（１）１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（４）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（５）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基および置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（６）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（７）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（８）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
であり、並びに
　基（ｒ１）が、
　（１）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
　（３）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
　（４）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基および置換されていてもよいフェニル基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
　（５）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
　（６）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、または
　（７）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｉｉ’）」と記載する）。
（化合物（Ｉｂ－ｉｉｉ’））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基であり、および
　基（ｒ１）が、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｉｉｉ’）」と記載する）。
（化合物（Ｉｂ－ｉｖ’））
　前記式（Ｉｂ）中の、
　Ｒ１ｂが、１個のカルボキシ基で置換されたＣ１－６アルキル基、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、４－ピリジル基、または２－ピリジル基であり、および
　基（ｒ１）が、２－ベンゾチアゾリル基、２－ベンゾイミダゾリル基、２－ベンゾオキサゾリル基、１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、または（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｂ－ｉｖ’）」と記載することがある）である。
（化合物（Ｉｂ）の好ましい具体例）
　化合物（Ｉｂ）の好ましい具体例としては、下記式（Ｉｂ－１）～（Ｉｂ－１２）のいずれかで表される化合物が挙げられる（下記式（Ｉｂ－７）中のＰｈはフェニル基を示す）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000060
　本発明の製造方法の一態様において、化合物（Ｉｂ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド（化合物（Ｉｂ－６））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））、４，４’－ジピリジルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－９））、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－１０））、２，２’－ジチオビス（１Ｈ－イミダゾール）（化合物（Ｉｂ－１１））、および２，２’－ジチオビス（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール）（化合物（Ｉｂ－１２））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉｂ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド（化合物（Ｉｂ－６））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））、４，４’－ジピリジルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－９））、および３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－１０））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉｂ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））、４，４’－ジピリジルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－９））、および３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－１０））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉｂ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド（化合物（Ｉｂ－６））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、および２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉｂ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、および２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法のにおいて、化合物（Ｉｂ）は、最も好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））である。
２－１－２．化合物（ＩＤ）～化合物（ＩＧ）
　前述の化合物（ＩＡ）および化合物（ＩＢ）以外の化合物（Ｉ）は、以下の化合物に分類することができる：
　前記式（Ｉ）中の、Ｘ１が、単結合であり、Ｒ１が、ハロゲン原子であり、および前記式（Ｉ）中のＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（ＩＤ）」と記載する）、
　前記式（Ｉ）中の、Ｘ１が、－Ｓ（＝Ｏ）２－であり、Ｒ１が、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基であり、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（ＩＥ）」と記載する）、
　前記式（Ｉ）中の、Ｘ１が、酸素原子であり、並びにＲ１およびＲ２が、それらが結合する硫黄原子および酸素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成する化合物（本明細書中「化合物（ＩＦ）」と記載する）、並びに
　前記式（Ｉ）中の、Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－であり、Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びにＲ２が、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（ＩＧ）」と記載する）。
　化合物（ＩＤ）、化合物（ＩＥ）、化合物（ＩＦ）および化合物（ＩＧ）は、いずれも１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。以下、化合物（ＩＤ）、化合物（ＩＥ）、化合物（ＩＦ）および化合物（ＩＧ）について順に説明する。
２－１－２Ｄ．化合物（ＩＤ）
　前記式（Ｉ）中のＸ１が単結合である化合物（ＩＤ）について説明する。化合物（ＩＤ）は、下記式（Ｉｄ）：
Ｒ２ｄ－Ｓ－Ｒ１ｄ　　　（Ｉｄ）
［式中、Ｒ１ｄは、ハロゲン原子を示し、およびＲ２ｄは、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。］。
で表すことができる。化合物（Ｉｄ）（＝化合物（ＩＤ））は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　前記式（Ｉｄ）中のＲ１ｄは、好ましくは塩素原子である。前記式（Ｉｄ）中のＲ２ｄは、好ましくは置換されていてもよいヘテロアリール基であり、より好ましくは電子求引性基で置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基であり、さらに好ましくはニトロ基で置換されていてもよいピリジル基である。
　好適な化合物（Ｉｄ）としては、以下の化合物が挙げられる。以下の化合物は、いずれも１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
（化合物（Ｉｄ－ｉ））
　前記式（Ｉｄ）中、Ｒ１ｄが、ハロゲン原子であり、およびＲ２ｄが、置換されていてもよいヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｄ－ｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｄ－ｉｉ））
　前記式（Ｉｄ）中、Ｒ１ｄが、塩素原子であり、およびＲ２ｄが、電子求引性基で置換されていてもよい５または６員の単環式ヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｄ－ｉｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｄ－ｉｉｉ））
　前記式（Ｉｄ）中、Ｒ１ｄが、塩素原子であり、およびＲ２ｄが、ニトロ基で置換されていてもよいピリジル基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｄ－ｉｉｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｄ）の好ましい具体例）
　化合物（Ｉｄ）の好ましい具体例は、下記式（Ｉｄ－１）で表される３－ニトロ－２－ピリジンスルフェニルクロリドである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000061
２－１－２Ｅ．化合物（ＩＥ）
　前記式（Ｉ）中のＸ１が－Ｓ（＝Ｏ）２－である化合物（ＩＥ）について説明する。化合物（ＩＥ）は、下記式（Ｉｅ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000062
［式中、Ｒ１ｅおよびＲ２ｅは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。］
で表すことができる。化合物（Ｉｅ）（＝化合物（ＩＥ））は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　前記式（Ｉｅ）中のＲ１ｅおよびＲ２ｅは、それぞれ独立に、好ましくは置換されていてもよいアリール基であり、より好ましくは置換されていてもよいフェニル基である。
（化合物（Ｉｅ）の好ましい具体例）
　化合物（Ｉｅ）の好ましい具体例は、下記式（Ｉｅ－１）で表される（Ｓ）－フェニル
　ベンゼンチオスルホナートである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000063
２－１－２Ｆ．化合物（ＩＦ）
　前記式（Ｉ）中の、Ｘ１が、酸素原子であり、並びにＲ１およびＲ２が、それらが結合する硫黄原子および酸素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成する化合物（ＩＦ）について説明する。化合物（ＩＦ）は、好ましくは、下記式（Ｉｆ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000064
［式中、
　環Ｄは、６員の芳香族炭化水素環または５若しくは６員の芳香族複素環を示し、
　ｗは、０～４の整数を示し、
　ｗ個のＲ１ｆは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、
　Ｘ１ｆは、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｓ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－または－ＣＨＲ２ｆ－を示し、
　Ｒ２ｆは、水素原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
　ｖは、０～３の整数を示す。］
で表される化合物である。化合物（Ｉｆ）は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　前記式（Ｉｆ）中の環Ｄは、好ましくは６員の芳香族炭化水素環（即ち、ベンゼン環）である。
　前記式（Ｉｆ）中のｗは、好ましくは０～２の整数であり、より好ましくは０または１である。ここで「ｗが０である」とは、Ｒ１ｆが存在しないことを意味する。
　前記式（Ｉｆ）中のｗ個のＲ１ｆは、それぞれ独立に、好ましくは置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子またはニトロ基である。
　前記式（Ｉｆ）中のＲ２ｆは、好ましくは水素原子、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、または電子求引性基であり、より好ましくは水素原子、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子またはニトロ基である。
　前記式（Ｉｆ）中のＸ１ｆは、好ましくは－Ｃ（＝Ｏ）－である。
　前記式（Ｉｆ）中のｖは、好ましくは０である。ここで「ｖが０である」とは、前記式（Ｉｆ）中の括弧内の－ＣＨ２－が存在しないことを意味する。
　好適な化合物（Ｉｆ）としては、以下の化合物が挙げられる。以下の化合物は、いずれも１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
（化合物（Ｉｆ－ｉ）
　前記式（Ｉｆ）中の、
　環Ｄが、ベンゼン環であり、
　ｗが、好ましくは０～２の整数であり、および
　ｗ個のＲ１ｆが、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、
　Ｘ１ｆが、－Ｃ（＝Ｏ）－であり、および
　ｖが、０～３の整数である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｆ－ｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｆ－ｉｉ）
　前記式（Ｉｆ）中の、
　環Ｄが、ベンゼン環であり、
　ｗが、好ましくは０～２の整数であり、および
　ｗ個のＲ１ｆが、それぞれ独立に、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子またはニトロ基であり、
　Ｘ１ｆが、－Ｃ（＝Ｏ）－であり、および
　ｖが、０～３の整数である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｆ－ｉｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｆ－ｉｉｉ）
　前記式（Ｉｆ）中の、
　環Ｄが、ベンゼン環であり、
　ｗが、好ましくは０または１の整数であり、
　Ｒ１ｆが、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子またはニトロ基であり、および
　Ｘ１ｆが、－Ｃ（＝Ｏ）－であり、
　ｖが、０である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｆ－ｉｉｉ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｆ）の好ましい具体例）
　化合物（Ｉｆ）の好ましい具体例は、下記式（Ｉｆ－１）で表される３Ｈ－２，１－ベンゾオキサチオール－３－オンである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000065
２－１－２Ｇ．化合物（ＩＧ）
　前記式（Ｉ）中の、Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－であり、Ｒ１およびＲ３が、それらが結合する窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びにＲ２が、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基である化合物（ＩＧ）について説明する。化合物（ＩＧ）は、好ましくは、下記式（Ｉｇ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000066
［式中、
　環Ｅは、４～８員の含窒素複素環を示し、
　ｘは、０～６の整数を示し、
　ｘ個のＲ１ｇは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、オキソ基、または電子求引性基を示し、
　ｘが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ１ｇは、環Ｅと共に、置換されていてもよい２環式の縮合含窒素複素環を形成していてもよく、および
　Ｒ２ｇは、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。］
で表される化合物である。化合物（Ｉｇ）は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　前記式（Ｉｇ）中のＲ２ｇは、好ましくは置換されていてもよいヘテロアリール基であり、より好ましくは置換されていてもよい５若しくは６員の単環式の含窒素ヘテロアリール基、または置換されていてもよい８～１４員の縮合多環式の含窒素ヘテロアリール基である。
　Ｒ２ｇは、さらに好ましくは
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、または
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基
である。
　Ｒ２ｇは、特に好ましくは
　（１）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、または
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基
である。
　Ｒ２ｇは、最も好ましくは２－ピリジル基または２－ベンゾチアゾリル基である。
　前記式（Ｉｇ）中のｘは、０～６の整数であり、好ましくは２～６の整数である。ここで「ｘが０である」とは、Ｒ１ｇが存在しないことを意味する。
　前記式（Ｉｇ）中のｘ個のＲ１ｇは、それぞれ独立に、好ましくは置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、オキソ基、ハロゲン原子、またはニトロ基である。
　化合物（Ｉｇ）における式（ｒ１７）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000067
で表される基は、好ましくは式（ｒ１７’）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000068
［式中、
　環Ｆは、４～８員の含窒素複素環を示し、
　ｙは、０～４の整数を示し、および
　ｙ個のＲ３ｇは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、
　ｙが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ３ｇは、環Ｆと共に、置換されていてもよい２環式の縮合含窒素複素環を形成していてもよい。］
で表される基である。
　前記式（ｒ１７’）中のｙは、０～４である。ここで「ｙが０である」とは、Ｒ３ｇが存在しないことを意味する。
　前記式（ｒ１７’）中のｙ個のＲ３ｇは、それぞれ独立に、好ましくは置換されていてもＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、またはニトロ基であるか、または隣接する２個のＲ３ｇは、好ましくは、環Ｆと共に、置換されていてもよい２環式の縮合含窒素複素環を形成する。前記２環式の縮合含窒素複素環は、好ましくは置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいイソインドール環であり、より好ましくは置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいイソインドール環である。
　環Ｆは、好ましくはピロリジン環であるか、または隣接する２個のＲ３ｇと共に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいイソインドール環を形成する。
　環Ｆは、より好ましくはピロリジン環であるか、または隣接する２個のＲ３ｇと共に、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいイソインドール環を形成する。
　化合物（Ｉｇ）は、好ましくは下記式（Ｉｇ’）で表される、イミド結合（－Ｃ（＝Ｏ）－Ｎ（－Ｓ－Ｒ２ｇ）－Ｃ（＝Ｏ）－）を有する化合物である（下記式中の記号の定義は、前述の通りである）。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000069
　好適な化合物（Ｉｇ’）としては、以下の化合物が挙げられる。以下の化合物は、いずれも１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
（化合物（Ｉｇ－ｉ－ａ））
　前記式（Ｉｇ’）中の、
　環Ｆが、ピロリジン環であり、
　ｙが、０～４の整数であり、
　ｙ個のＲ３ｇが、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、
　Ｒ２ｇが、置換されていてもよいヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｇ－ｉ－ａ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｇ－ｉ－ｂ））
　前記式（Ｉｇ’）中の、
　環Ｆが、隣接する２個のＲ３ｇと共に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいイソインドール環を形成し、および
　Ｒ２ｇが、置換されていてもよいヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｇ－ｉ－ｂ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｇ－ｉｉ－ａ））
　前記式（Ｉｇ’）中の、
　環Ｆが、ピロリジン環であり、
　ｙが、０～４の整数であり、
　ｙ個のＲ３ｇが、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、および
　Ｒ２ｇが、置換されていてもよい５若しくは６員の単環式の含窒素ヘテロアリール基、または置換されていてもよい８～１４員の縮合多環式の含窒素ヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｇ－ｉｉ－ａ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｇ－ｉｉ－ｂ））
　前記式（Ｉｇ’）中の、
　環Ｆが、隣接する２個のＲ３ｇと共に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいイソインドール環を形成し、および
　Ｒ２ｇが、置換されていてもよい５若しくは６員の単環式の含窒素ヘテロアリール基、または置換されていてもよい８～１４員の縮合多環式の含窒素ヘテロアリール基である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｇ－ｉｉ－ｂ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｇ－ｉｉｉ－ａ））
　前記式（Ｉｇ’）中の、
　環Ｆが、ピロリジン環であり、
　ｙが、０～４の整数であり、
　ｙ個のＲ３ｇが、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基であり、および
　Ｒ２ｇが、
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、または
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｇ－ｉｉｉ－ａ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｇ－ｉｉｉ－ｂ））
　前記式（Ｉｇ’）中の、
　環Ｆが、隣接する２個のＲ３ｇと共に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいイソインドール環を形成し、および
　Ｒ２ｇが、
　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、または
　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｇ－ｉｉｉ－ｂ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｇ－ｉｖ－ａ））
　前記式（Ｉｇ’）中の、
　環Ｆが、ピロリジン環であり、
　ｙが、０～４の整数であり、
　ｙ個のＲ３ｇが、それぞれ独立に、置換されていてもＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、またはニトロ基であり、
　Ｒ２ｇが、
　（１）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、または
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｇ－ｉｖ－ａ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｇ－ｉｖ－ｂ））
　前記式（Ｉｇ’）中の、
　環Ｆが、隣接する２個のＲ３ｇと共に、置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよいイソインドール環を形成し、および
　Ｒ２ｇが、
　（１）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、または
　（２）置換されていてもよいＣ１－６アルキル基、置換されていてもよいＣ１－６アルコキシ基、ハロゲン原子、およびニトロ基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基
である化合物（本明細書中「化合物（Ｉｇ－ｉｖ－ｂ）」と記載する）。
（化合物（Ｉｇ）の好ましい具体例）
　化合物（Ｉｇ）の好ましい具体例としては、下記式（Ｉｇ－１）で表される１－（２－ピリジニルチオ）－２，５－ピロリジンジオン、下記式（Ｉｇ－２）で表される１－（２－ベンゾチアゾリルチオ）－２，５－ピロリジンジオン、下記式（Ｉｇ－３）で表される２－（２－ピリジニルチオ）－１Ｈ－イソインドール－１，３（２Ｈ）－ジオン、および下記式（Ｉｇ－４）で表される２－（２－ベンゾチアゾリルチオ）－１Ｈ－イソインドール－１，３（２Ｈ）－ジオンが挙げられる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000070
２－１－３．好ましい化合物（Ｉ）
　本発明の製造方法において、化合物（Ｉ）は、好ましくは化合物（Ｉａ）および／または化合物（Ｉｂ）である。化合物（Ｉａ）の中でも、化合物（Ｉｃ）が好ましい。
　本発明の製造方法の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは化合物（Ｉｂ）および／または化合物（Ｉｃ）であり、より好ましくは化合物（Ｉｂ－ｉ）および／または化合物（Ｉｃ－ｉ）であり、より一層好ましくは化合物（Ｉｂ－ｉｉ）および／または化合物（Ｉｃ－ｉｉ）であり、さらに好ましくは化合物（Ｉｂ－ｉｉｉ）および／または化合物（Ｉｃ－ｉｉｉ）であり、さらに一層好ましくは化合物（Ｉｂ－ｉｖ）および／または化合物（Ｉｃ－ｉｖ）であり、特に好ましくは化合物（Ｉｂ－ｖ）および／または化合物（Ｉｃ－ｉｖ）である。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは化合物（Ｉｂ－ｉ’）および／または化合物（Ｉｃ－ｉ’）であり、より好ましくは化合物（Ｉｂ－ｉｉ’）および／または化合物（Ｉｃ－ｉｉ’）であり、より一層好ましくは化合物（Ｉｂ－ｉｉｉ’）および／または化合物（Ｉｃ－ｉｉｉ’）であり、さらに好ましくは化合物（Ｉｂ－ｉｖ’）および／または化合物（Ｉｃ－ｉｖ’）である。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド（化合物（Ｉｂ－６））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））、４，４’－ジピリジルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－９））、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－１０））、２，２’－ジチオビス（１Ｈ－イミダゾール）（化合物（Ｉｂ－１１））、２，２’－ジチオビス（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール）（化合物（Ｉｂ－１２））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－３））、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－４））、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－５））、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－６））、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－７））、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－８））、および２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－９））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド（化合物（Ｉｂ－６））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））、４，４’－ジピリジルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－９））、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－１０））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－３））、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－４））、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－５））、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－６））、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－７））、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－８））、および２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－９））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド（化合物（Ｉｂ－６））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－３））、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－４））、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－５））、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－６））、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－７））、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－８））、および２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－９））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド（化合物（Ｉｂ－６））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））、４，４’－ジピリジルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－９））、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－１０））、２，２’－ジチオビス（１Ｈ－イミダゾール）（化合物（Ｉｂ－１１））、２，２’－ジチオビス（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール）（化合物（Ｉｂ－１２））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－３））、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－４））、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－５））、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－６））、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－７））、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－８））、２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－９））、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１０））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１１））、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１４））、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１６））、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１７））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）（化合物（Ｉｂ－７））、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））、４，４’－ジピリジルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－９））、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－１０））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－５））、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１０））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１１））、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１４））、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１６））、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１７））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－２））、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１０））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１１））、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１４））、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１６））、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１７））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法の別の一態様において、化合物（Ｉ）は、好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１４））、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１６））、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１７））からなる群から選ばれる少なくとも一つである。
　本発明の製造方法において、化合物（Ｉ）は、特に好ましくは２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－１））および／または２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））であり、最も好ましくは２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１））である。
２－１－４．化合物（Ｉ）の製造方法
　化合物（Ｉ）は、市販品を使用してもよく、公知の方法によって製造してもよい。例えば、化合物（Ｉｂ－１）（即ち、２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド、ＭＢＴＳ）等は市販されている。
　化合物（Ｉ）の製造方法の例として、代表的な製造方法を以下に示すが、製造方法はこれらに限定されない。
　化合物（Ｉ）は、以下に示す代表的な製造方法、後述する合成例、公知の方法（例えば、非特許文献２の Supporting Information に記載の方法）またはそれらに準じた方法によって製造することができる。
　以下、代表的な製造方法における各工程の反応の略図を示すが、略図中の各記号は、前記と同義である。
（化合物（Ｉｂ）の製造方法）
　化合物（Ｉｂ）は、例えば、下記式に示すように、チオールの酸化およびカップリングによって製造することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000071
　化合物（Ｉｂ－１ｓ）および化合物（Ｉｂ－２ｓ）を酸化するための酸化剤としては、例えば、過酸化水素、ヨウ素、酸素、Ｎ－ブロモスクシンイミド、Ｎ－クロロスクシンイミド等が挙げられる。酸化剤は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　酸化剤の使用量は、化合物（Ｉｂ－１ｓ）および化合物（Ｉｂ－２ｓ）の合計１ｍｏｌに対して、好ましくは１～１０ｍｏｌ、より好ましくは１～５ｍｏｌである。化合物（Ｉｂ－２ｓ）は、化合物（Ｉｂ－１ｓ）に対してほぼ等量で使用することが好ましい。
　この反応は、反応を阻害しない適切な溶媒中で行われる。前記溶媒としては、例えば、酢酸エチル、酢酸イソプロピル等のエステル系溶媒；１，４－ジオキサン、テトラヒドロフラン等の極性エーテル系溶媒；ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲン系溶媒；ベンゼン、トルエン、キシレン、メシチレン等の芳香族系溶媒等が挙げられる。前記溶媒の使用量は、化合物（Ｉｂ－１ｓ）および化合物（Ｉｂ－２ｓ）の合計１ｍｍｏｌに対して、好ましくは１～２０ｍＬ、より好ましくは３～１０ｍＬである。
　この反応温度は、好ましくは－１０℃～５０℃、より好ましくは０℃～４０℃であり、その反応時間は、好ましくは１～２４時間、より好ましくは１～１０時間である。
　前記反応後、公知の方法（例えば抽出等）によって化合物（Ｉｂ）を回収することができる。回収した化合物（Ｉｂ）は、公知の手段（例えば再結晶、クロマトグラフィー等）によって精製することができる。
（Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）の製造方法）
　Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）は、例えば、以下に示す工程によって製造することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000072
工程Ａ１
　本工程は、化合物（Ｉｃ－１ｓ）の酸塩化物を合成する工程である。詳しくは、反応器に、化合物（Ｉｃ－１ｓ）と、過剰量の塩化チオニル（例えば、化合物（Ｉｃ－１ｓ）１ｍｏｌに対して１０ｍｏｌ）とを添加し、１時間～１晩還流することによって、化合物（Ｉｃ－１ｓ）の酸塩化物が得られる。
　本工程は、不活性雰囲気下（例えば、アルゴン雰囲気下）で行うことが好ましい。反応完了後、塩化チオニルを留去することによって、化合物（Ｉｃ－１ｓ）の酸塩化物を含む固体を回収することができる。
工程Ａ２
　本工程は、化合物（Ｉｃ－１ｓ）の酸塩化物と、適切なアミン（Ｒ４ｃ－ＮＨ２）とを反応させることによって、化合物（Ｉｃ－２ｓ）を合成する工程である。詳しくは、工程Ａ１で得られた化合物（Ｉｃ－１ｓ）の酸塩化物を含む固体、適切なアミン（Ｒ４ｃ－ＮＨ２）および塩基を適切な溶媒に添加し、反応させることによって化合物（Ｉｃ－２ｓ）が得られる。
　塩基は、有機塩基および無機塩基のいずれでもよく、好ましくはトリエチルアミンである。Ｒ４ｃ－ＮＨ２および塩基の使用量は、それぞれ、化合物（Ｉｃ－１ｓ）の酸塩化物１ｍｏｌに対して、好ましくは１～１．５ｍｏｌ程度である。
　本工程は、反応を阻害しない適切な溶媒中で行われる。前記溶媒としては、例えば、１，４－ジオキサン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）等の極性エーテル系溶媒が挙げられ、ＴＨＦが好ましい。前記溶媒の使用量は、前記固体を溶解できれば特に限定はないが、化合物（Ｉｃ－１ｓ）の酸塩化物１ｍｍｏｌに対して、好ましくは５～１０ｍＬ程度である。
　本工程は、低温（例えば０℃程度）で行うことが好ましい。反応の完了はＴＬＣ等によって確認することができる。反応完了後、公知の手段（例えば濃縮および抽出）によって、化合物（Ｉｃ－２ｓ）を回収することができる。
工程Ａ３
　本工程は、化合物（Ｉｃ－２ｓ）とｔｅｒｔ－ブチルチオールとを反応させることによって、化合物（Ｉｃ－３ｓ）を合成する工程である。詳しくは、化合物（Ｉｃ－２ｓ）とｔｅｒｔ－ブチルチオールとを、塩基の存在下、適切な溶媒中で反応させることによって、化合物（Ｉｃ－３ｓ）が得られる。
　ｔｅｒｔ－ブチルチオールの使用量は、化合物（Ｉｃ－２ｓ）１ｍｏｌに対して、好ましくは１～１．５ｍｏｌ程度である。
　本工程で使用する塩基としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等のアルカリ金属水酸化物が挙げられ、水酸化ナトリウムが好ましい。塩基の使用量は、化合物（Ｉｃ－３ｓ）１ｍｏｌに対して、好ましくは１～２ｍｏｌ程度である。
　本工程は、反応を阻害しない適切な溶媒中で行われる。前記溶媒としては、例えば、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチルピペリドン等のアミド系溶媒が挙げられ、ＤＭＦが好ましい。前記溶媒の使用量は、化合物（Ｉｃ－２ｓ）を溶解できれば特に限定はないが、化合物（Ｉｃ－２ｓ）１ｍｍｏｌに対して、好ましくは５～１０ｍＬ程度である。
　本工程の反応温度は、室温程度（例えば２５℃）であり、その時間は、例えば１時間～１晩、好ましくは３～２０時間程度である。反応完了後、公知の手段（例えば固液分離）によって、化合物（Ｉｃ－３ｓ）を回収することができる。
工程Ａ４
　本工程は、化合物（Ｉｃ－３ｓ）の閉環反応によって、Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）を合成する工程である。以下の工程Ａ４－１および工程Ａ４－２の二通りのやり方によって、本工程を行うことができる。
工程Ａ４－１
　本工程では、化合物（Ｉｃ－３ｓ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、およびクロロトリメチルシラン（ＴＭＳＣｌ）を適切な溶媒に添加し、得られた反応混合物を室温程度（例えば２５℃）で反応させることによって、Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）を合成する。
　ＤＭＳＯの使用量は、化合物（Ｉｃ－３ｓ）１ｍｏｌに対して、好ましくは１～２ｍｏｌ程度である。ＴＭＳＣｌの使用量は、化合物（Ｉｃ－３ｓ）１ｍｏｌに対して、好ましくは１～１．５ｍｏｌ程度である。
　本工程は、反応を阻害しない適切な溶媒中で行われる。前記溶媒としては、例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒が挙げられ、ジクロロメタンが好ましい。前記溶媒の使用量は、化合物（Ｉｃ－３ｓ）が溶解できれば特に限定はないが、化合物（Ｉｃ－３ｓ）１ｍｍｏｌに対して、好ましくは２～５ｍＬ程度である。
　本工程の反応時間は、例えば１時間～１晩、好ましくは５～１０時間程度である。反応完了後、公知の手段（例えば固液分離）によって、Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）を回収することができる。回収した化合物（Ｉｃ）は、公知の手段（例えば再結晶、クロマトグラフィー等）によって精製することができる。
工程Ａ４－２
　本工程では、化合物（Ｉｃ－３ｓ）およびメタクロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）を、適切な溶媒中で反応させ、スルホキシド中間体を得た後、これを加熱することによって、Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）を合成する。
　ｍＣＰＢＡの使用量は、化合物（Ｉｃ－３ｓ）１ｍｏｌに対して、好ましくは１～１．５ｍｏｌ程度である。
　化合物（Ｉｃ－３ｓ）およびメタクロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）との反応は、反応を阻害しない適切な溶媒中で行われる。前記溶媒としては、例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒が挙げられ、ジクロロメタンが好ましい。前記溶媒の使用量は、化合物（Ｉｃ－３ｓ）が溶解できれば特に限定はないが、化合物（Ｉｃ－３ｓ）１ｍｍｏｌに対して、好ましくは８～１５ｍＬ程度である。
　化合物（Ｉｃ－３ｓ）およびメタクロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）との反応は、低温（例えば０℃程度）で行うことが好ましい。その反応時間は、例えば３０分～１時間程度である。反応完了後、公知の手段（例えば抽出の後に濃縮および再結晶等）によって、スルホキシド中間体を回収することができる。
　回収したスルホキシド中間体を、その環化反応を阻害しない適切な溶媒中で加熱することで、Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）を合成することができる。前記溶媒としては、例えばトルエン、キシレン、ピリジンおよびこれらの組合せが挙げられ、トルエンとピリジンの組合せが好ましい。前記反応温度は７０℃～１２０℃が好ましい。合成した化合物（Ｉｃ）は、公知の手段（例えば再結晶、クロマトグラフィー等）によって精製することができる。
　前記化合物（Ｉｃ－２ｓ）（即ち、Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）を合成するための中間体）は、例えば、以下に示す工程によって製造することもできる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000073
工程Ａ２’
　本工程は、縮合剤を使用して、化合物（Ｉｃ－１ｓ）と、適切なアミン（Ｒ４ｃ－ＮＨ２）とを反応させることによって化合物（Ｉｃ－２ｓ）を合成する工程である。
　本工程で使用する縮合剤としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、１－エチル－３－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド（ＥＤＣ）およびその塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ）、ヘキサフルオロリン酸（ベンゾトリアゾール－１－イルオキシ）トリピロリジノホスホニウム（ＰｙＢｏｐ）、Ｏ－（ベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム　テトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－５－クロロ－１Ｈ－ベンゾトリアゾリウム－３－オキシド　ヘキサフルオロホスフェート（ＨＣＴＵ）、Ｏ－ベンゾトリアゾール－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウム　ヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）等が挙げられる。これらの中で、ＥＤＣ・ＨＣｌが好ましい。
　Ｒ４ｃ－ＮＨ２および縮合剤の使用量は、それぞれ、化合物（Ｉｃ－１ｓ）１ｍｏｌに対して、好ましくは１～５ｍｏｌ程度である。
　本工程では塩基を使用してもよい。塩基は、有機塩基および無機塩基のいずれでもよく、好ましくはトリエチルアミンである。塩基を使用する場合、その量は、化合物（Ｉｃ－１ｓ）１ｍｏｌに対して、好ましくは１～５ｍｏｌ程度である。
　本工程は、反応を阻害しない適切な溶媒中で行われる。前記溶媒としては、例えば、１，４－ジオキサン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）等の極性エーテル系溶媒が挙げられ、ＴＨＦが好ましい。前記溶媒の使用量は、特に限定はないが、化合物（Ｉｃ－１ｓ）１ｍｍｏｌに対して、好ましくは１～１０ｍＬ程度である。
　本工程の反応温度は、室温程度（例えば２５℃）であり、その時間は、例えば１時間～１晩、好ましくは３～２０時間程度である。本工程は、不活性雰囲気下（例えば、アルゴン雰囲気下）で行うことが好ましい。反応の完了はＴＬＣ等によって確認することができる。反応完了後、公知の手段（例えば濃縮および抽出）によって、化合物（Ｉｃ－２ｓ）を回収することができる。
２－２．酸化
　本発明の製造方法は、化合物（Ｉ）（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）を使用して、亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体（以下「オリゴヌクレオチド前駆体」と略称することがある）を酸化することを特徴とする。
　酸化剤として化合物（Ｉ）を使用することによって、副生成物（欠損体および脱硫体）の生成を抑制することができる。副生成物の生成を抑制するために、本発明の製造方法で使用する酸化剤全体に対する化合物（Ｉ）の量は、好ましくは８０ｍｏｌ％以上、より好ましくは９０ｍｏｌ％以上である。本発明の製造方法において酸化剤は、さらに好ましくは化合物（Ｉ）からなる。
　酸化反応の完結性の観点から、化合物（Ｉ）の使用量は、オリゴヌクレオチド前駆体１ｍｏｌに対して、好ましくは１～１５ｍｏｌ、より好ましくは１～１０ｍｏｌ、さらに好ましくは１～５ｍｏｌである。
　オリゴヌクレオチド前駆体は、好ましくは、
（１）ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドとの縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体、または
（２）オリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイトとの縮合によって得られた亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体
である。前記（１）のオリゴヌクレオチド前駆体としては、例えば、前記化合物（ｃ－Ｉ）（即ち、前記化合物（ａ－Ｉ）と前記化合物（ｂ－Ｉ）との縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体）、および前記化合物（ｃ－Ｉ’）（即ち、前記化合物（ａ－Ｉ’）と前記化合物（ｂ－Ｉ’）との縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体）が挙げられる。前記（２）のオリゴヌクレオチド前駆体としては、例えば、前記化合物（γ－Ｉ）および前記化合物（γ－Ｉ’）が挙げられる。
　亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体は、より好ましくはヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドとの縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である。
　オリゴヌクレオチド前駆体は、さらに好ましくは、疎水性保護基を有する、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）と、水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されており、且つホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）との縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である。
　オリゴヌクレオチド前駆体は、特に好ましくは、Ｐｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである前記化合物（ｃ－Ｉ）（即ち、Ｐｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである前記化合物（ａ－Ｉ）と前記化合物（ｂ－Ｉ）との縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体）、またはＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである前記化合物（ｃ－Ｉ’）（即ち、Ｐｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである前記化合物（ａ－Ｉ’）と前記化合物（ｂ－Ｉ’）との縮合によって得られた、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体）である。
　オリゴヌクレオチド前駆体は、好ましくは亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合に加えて、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である。チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体をヨウ素で酸化すると、チオリン酸エステル結合がリン酸エステル結合に転化して得られる副生成物（脱硫体）が生成するが、酸化剤として化合物（Ｉ）を使用する本発明によれば、この脱硫体の生成を抑制することができる。
　オリゴヌクレオチド前駆体の酸化を水の存在下で行うことが好ましい。系中に存在する水は、酸素原子の供給源として作用するため、オリゴヌクレオチド前駆体の酸化を促進することができる。水の量は、オリゴヌクレオチド前駆体１ｍｏｌに対して、好ましくは０．５～２００ｍｏｌ、より好ましくは１～１００ｍｏｌ、さらに好ましくは１～５０ｍｏｌである。
　オリゴヌクレオチド前駆体の酸化の反応温度は、好ましくは１０～５０℃、より好ましくは１５～４０℃であり、その反応時間は、好ましくは５分～５時間、より好ましくは３０分～３時間である。
　オリゴヌクレオチド前駆体の酸化は、非極性溶媒を含む溶液中で行うことが好ましい。溶液中のオリゴヌクレオチド前駆体の濃度は、それらが溶媒に溶解していれば特に限定されないが、好ましくは１～３０重量％である。
　非極性溶媒としては、例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ベンゼン、トルエン、キシレン、メシチレン等の芳香族系溶媒；酢酸エチル、酢酸イソプロピル等のエステル系溶媒；ヘキサン、ペンタン、ヘプタン、オクタン、ノナン、シクロヘキサン等の脂肪族系溶媒；ジエチルエーテル、シクロペンチルメチルエーテル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル等の非極性エーテル系溶媒が挙げられる。非極性溶媒は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。非極性溶媒は、好ましくはハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、エステル系溶媒および脂肪族系溶媒からなる群から選ばれる少なくとも一つであり、より好ましくはハロゲン系溶媒およびトルエンであり、さらに好ましくはクロロホルム、ジクロロメタンおよびトルエンからなる群から選ばれる少なくとも一つであり、特に好ましくはジクロロメタンである。
　非極性溶媒を含む溶液は、さらに非プロトン性極性溶媒を含んでいてもよい。非プロトン性極性溶媒としては、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系溶媒；テトラヒドロフラン等の極性エーテル系溶媒；ピリジン等が挙げられ、これらの中でニトリル系溶媒が好ましく、アセトニトリルまたはピリジンがより好ましい。非プロトン性極性溶媒の使用量は、非極性溶媒１００ｍＬに対して、好ましくは１０～１００ｍＬ、より好ましくは１０～５０ｍＬである。
２－３．ワンポット合成
　本発明の製造方法は、ワンポット合成で行うこともできる。
　該ワンポット合成は、
　非極性溶媒を含む溶液中で、疎水性保護基を有する、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）と、水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されており、且つホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）とを縮合して、亜リン酸エステル結合および疎水性保護基を有し、且つ水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているオリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）を形成する工程（１）、
　工程（１）後の溶液に、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）のクエンチ剤（ｉ）を添加して、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）をクエンチする工程（２）
　工程（２）後の溶液に酸化剤を添加して、前記オリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）を酸化して、リン酸エステル結合および疎水性保護基を有し、且つ水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているオリゴヌクレオチド（ｄ）を形成する工程（３）、
　工程（３）後の溶液に酸化剤のクエンチ剤（ｉｉ）を添加して、酸化剤をクエンチする工程（４）、
　工程（４）後の溶液に酸を添加して、前記オリゴヌクレオチド（ｄ）の酸性条件下で除去可能な一時保護基を除去して、保護されていない水酸基および疎水性保護基を有するオリゴヌクレオチド（ｅ）を形成する工程（５）、
　必要に応じて、工程（５）後の溶液に塩基を添加する工程（６）、並びに
　前記オリゴヌクレオチド（ｅ）を含む溶液に極性溶媒を添加して、前記オリゴヌクレオチド（ｅ）を析出させる工程（７）
を含み、並びに
　前記酸化剤が、化合物（Ｉ）（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）であることを特徴とする。ここで、ワンポット合成による本発明の製造方法は、中間体（即ち、工程（１）で得られたオリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）、および工程（３）で得られたオリゴヌクレオチド（ｄ））を単離しないことを特徴とする。以下、該ワンポット合成の各工程を順に説明する。
（工程（１）（縮合））
　工程（１）では、非極性溶媒を含む溶液中で、疎水性保護基を有する、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）と、水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されており、且つホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）とを縮合して、亜リン酸エステル結合および疎水性保護基を有し、且つ水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているオリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）を形成する。
　前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）が有する疎水性保護基は、前記保護基（Ｐｇ－５）である。保護基（Ｐｇ－５）の説明は、前述の通りである。
　前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）が有する水酸基の一時保護基は、脱保護の容易さ等の観点から、好ましくは４，４’－ジメトキシトリチル基または４－モノメトキシトリチル基であり、より好ましくは４，４’－ジメトキシトリチル基である。
　工程（１）で使用する前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）と前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）との組合せは、好ましくは前記化合物（ａ－Ｉ）と前記化合物（ｂ－Ｉ）との組合せ、または前記化合物（ａ－Ｉ’）と前記化合物（ｂ－Ｉ’）との組合せであり、より好ましくはＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである前記化合物（ａ－Ｉ）と、前記化合物（ｂ－Ｉ）との組合せ、またはＰｇが＊＊Ｌ－Ｙ－Ｚである前記化合物（ａ－Ｉ’）と、前記化合物（ｂ－Ｉ’）との組合せである。
　工程（１）は、非極性溶媒を含む溶液中で行われる。非極性溶媒としては、例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２－ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ベンゼン、トルエン、キシレン、メシチレン等の芳香族系溶媒；酢酸エチル、酢酸イソプロピル等のエステル系溶媒；ヘキサン、ペンタン、ヘプタン、オクタン、ノナン、シクロヘキサン等の脂肪族系溶媒；ジエチルエーテル、シクロペンチルメチルエーテル、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル等の非極性エーテル系溶媒が挙げられる。非極性溶媒は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。非極性溶媒は、好ましくはハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、エステル系溶媒および脂肪族系溶媒からなる群から選ばれる少なくとも一つであり、より好ましくはハロゲン系溶媒およびトルエンからなる群から選ばれる少なくとも一つであり、さらに好ましくはクロロホルム、ジクロロメタンおよびトルエンからなる群から選ばれる少なくとも一つであり、特に好ましくはジクロロメタンおよび／またはトルエンである。工程（１）以降の工程も、同様に非極性溶媒を含む溶液中で行われる。
　非極性溶媒を含む溶液は、さらに非プロトン性極性溶媒を含んでいてもよい。非プロトン性極性溶媒としては、アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系溶媒；テトラヒドロフラン等の極性エーテル系溶媒等が挙げられ、これらの中でニトリル系溶媒が好ましく、アセトニトリルがより好ましい。非プロトン性極性溶媒の使用量は、非極性溶媒１００ｍＬに対して、好ましくは１０～１００ｍＬ、より好ましくは１０～５０ｍＬである。
　前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）の使用量は、前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）の使用量１ｍｏｌに対して、例えば１～１０ｍｏｌ、好ましくは１～５ｍｏｌである。溶液中の前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）の濃度は、好ましくは１～３０重量％である。
　工程（１）の反応温度は、縮合が進行しさえすれば特に限定されないが、例えば０～１００℃、好ましくは２０～５０℃である。反応時間は、使用する原料の種類、反応温度等によって異なるが、例えば５分～２４時間である。
　縮合を促進するため、公知の活性化剤を使用してもよい。活性化剤としては、例えば、ピリジン・トリフルオロ酢酸塩、テトラゾール、５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール、５－ベンジルチオ－１Ｈ－テトラゾール、４，５－ジシアノイミダゾール等が挙げられる。活性化剤は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。活性化剤を使用する場合、その使用量は、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）１ｍｏｌに対して、好ましくは０．５～１０ｍｏｌ、より好ましくは１～５ｍｏｌである。
（工程（２）（ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）のクエンチ））
　工程（２）では、工程（１）後の溶液に、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）のクエンチ剤（ｉ）を添加して、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）をクエンチする。
　クエンチ剤（ｉ）は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。クエンチ剤（ｉ）としては、例えば、水、アルコール類、フェノール類およびアミン類が挙げられる。
　クエンチ剤（ｉ）として使用し得るアルコール類としては、例えば、メタノール、２－プロパノール、ｔ－ブタノール、２，２，２，－トリフルオロエタノール、テトラヒドロフルフリルアルコール、フルフリルアルコール、２，３－Ｏ－イソプロピリデン－Ｄ－リボフラノース、３’－Ｏ－トリイソプロピルシリル－チミジン等のハロゲン化されていてもよい１価アルコール、エチレングリコール、ジエチレングリコール等のハロゲン化されていてもよい多価アルコールが挙げられる。
　クエンチ剤（ｉ）として使用し得るフェノール類としては、例えば、４－ニトロフェノールやペンタフルオロフェノールが挙げられる。クエンチ剤（ｉ）として使用し得るアミン類としては、例えば、モルホリンが挙げられる。
　クエンチ剤（ｉ）の使用量は、工程（１）でのホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）の使用量１ｍｏｌに対して、好ましくは１～２０ｍｏｌ、より好ましくは１～１０ｍｏｌ、さらに好ましくは１～５ｍｏｌである。
　クエンチ剤（ｉ）は、好ましくは水である。クエンチ剤（ｉ）として水を使用することによって、その後の工程（３）の酸化を促進することができる。クエンチ剤（ｉ）として水を使用する場合、その使用量は、ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）の工程（１）における使用量１ｍｏｌに対して、好ましくは１～２０ｍｏｌ、より好ましくは２～１５ｍｏｌ、さらに好ましくは２～１０ｍｏｌである。
　クエンチ剤（ｉ）の添加後の溶液の温度は、ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）がクエンチできさえすれば特に限定されないが、好ましくは５～４０℃、より好ましくは１５～３０℃である。クエンチ剤（ｉ）の添加後の溶液の撹拌時間は、使用するクエンチ剤（ｉ）の種類、温度等によって異なるが、例えば１０分～３時間である。
（工程（３）（酸化））
　工程（３）は、酸化剤として化合物（Ｉ）（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）を用いて、前記オリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）の亜リン酸エステル結合を酸化して、リン酸エステル結合に転化することを特徴とする。詳しくは、工程（３）では、工程（２）後の溶液に酸化剤（即ち、化合物（Ｉ））を添加して、前記オリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）を酸化して、リン酸エステル結合および疎水性保護基を有し、且つ水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているオリゴヌクレオチド（ｄ）を形成する。酸化剤および酸化の説明は、前述の通りである。
　本発明の製造方法では脱硫体の生成を抑制できるため、前記オリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）は、亜リン酸エステル結合に加えて、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体であることが好ましい。
（芳香族アミンの添加）
　工程（３）後の溶液に、芳香族アミンを添加することが好ましい。芳香族アミンは、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。芳香族アミンを添加することによって、欠損体の生成をさらに抑制することができる。芳香族アミンの添加は、工程（３）の後、工程（４）のクエンチ剤の添加前に行ってもよく、工程（４）でクエンチ剤（ｉｉ）および芳香族アミンを同時に添加してもよく、工程（４）でクエンチ剤（ｉｉ）および芳香族アミンを順次添加してもよい。
　芳香族アミンとしては、例えば、アニリン、２－クロロアニリン、３－クロロアニリン、２，４－ジクロロアニリン、２－フルオロアニリン、４－メトキシアニリン、４－ニトロアニリン、２，６－ジクロロアニリン、２，６－キシリジン等が挙げられる。
　芳香族アミンは、好ましくはアニリン、２－クロロアニリン、３－クロロアニリン、２，４－ジクロロアニリン、２－フルオロアニリン、４－メトキシアニリン、４－ニトロアニリン、２，６－ジクロロアニリン、２，６－キシリジンからなる郡から選ばれる少なくとも一つであり、より好ましくは２－クロロアニリンおよび／または２，６－キシリジンであり、さらに好ましくは２，６－キシリジン（即ち、２，６－ジメチルアニリン）である。
　欠損体の抑制の観点から、芳香族アミンの使用量は、工程（３）で使用した酸化剤１ｍｏｌに対して、好ましくは１～２０ｍｏｌ、より好ましくは１～１０ｍｏｌ、さらに好ましくは１～５ｍｏｌである。
（工程（４）（酸化剤のクエンチ））
　工程（４）では、工程（３）後の溶液に酸化剤のクエンチ剤（ｉｉ）を添加して、酸化剤をクエンチする。クエンチ剤（ｉｉ）は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　クエンチ剤（ｉｉ）は、好ましくは有機リン化合物である。有機リン化合物は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　有機リン化合物は、好ましくはホスフィン類、亜リン酸トリエステル、亜ホスフィン酸エステル、亜ホスホン酸ジエステルおよびホスフィン酸エステルからなる群から選ばれる少なくとも一つであり、より好ましくはホスフィン類である。前記ホスフィン類等は、いずれも、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　ホスフィン類は、式：Ｐ（Ｒ）３（式中、三つのＲは、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基またはアリール基を示す）で表される化合物である。ホスフィン類としては、例えば、トリフェニルホスフィン、メチルジフェニルホスフィン等が挙げられる。
　亜リン酸トリエステルは、式：Ｐ（ＯＲ’）３（式中、三つのＲ’は、それぞれ独立に、アルキル基またはアリール基を示す）で表される化合物である。亜リン酸トリエステルとしては、例えば、亜リン酸トリエチル等が挙げられる。
　亜ホスフィン酸エステルは、式：Ｐ（ＯＲ’）（Ｒ）２（式中、二つのＲは、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基またはアリール基を示し、およびＲ’は、アルキル基またはアリール基を示す）で表される化合物である。亜ホスフィン酸エステルとしては、例えば、エトキシジフェニルホスフィン等が挙げられる。
　亜ホスホン酸ジエステルは、式：Ｐ（Ｒ）（ＯＲ’）２、（式中、Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基を示し、および二つのＲ’は、それぞれ独立に、アルキル基またはアリール基を示す）で表される化合物である。亜ホスホン酸ジエステルとしては、例えば、ジエトキシフェニルホスフィン等が挙げられる。
　ホスフィン酸エステルは、式：Ｐ（＝Ｏ）（Ｒ）２（ＯＲ’）（式中、二つのＲは、それぞれ独立に、水素原子、アルキル基またはアリール基を示し、Ｒ’は、アルキル基またはアリール基を示し、並びに一つのＲおよびＲ’は、それらが結合するリン原子および酸素原子と共に複素環を形成していてもよい）で表される化合物である。ホスフィン酸エステルとしては、例えば、下記式で表される９，１０－ジヒドロ－９－オキサ－１０－ホスファフェナントレン　１０－オキシド等が挙げられる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000074
　本発明の製造方法の一態様において、クエンチ剤（ｉｉ）は、好ましくはトリフェニルホスフィン、メチルジフェニルホスフィン、亜リン酸トリエチル、エトキシジフェニルホスフィン、ジエトキシフェニルホスフィン、および９，１０－ジヒドロ－９－オキサ－１０－ホスファフェナントレン　１０－オキシドからなる群から選ばれる少なくとも一つであり、より好ましくはトリフェニルホスフィンおよび／またはメチルジフェニルホスフィンであり、さらに好ましくはトリフェニルホスフィンである。
　クエンチ剤（ｉｉ）の使用量は、工程（３）での酸化剤の余剰分をクエンチできればよく、酸化剤の余剰量（即ち、「酸化剤の工程（３）での使用量」－「前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）の工程（１）での使用量」）の１ｍｏｌあたり、好ましくは１～１０ｍｏｌ、より好ましくは１～５ｍｏｌである。
　クエンチ剤（ｉｉ）の添加後の溶液の温度は、酸化剤がクエンチできさえすれば特に限定されないが、好ましくは０℃～５０℃、より好ましくは１０℃～４０℃である。クエンチ剤（ｉｉ）の添加後の溶液の撹拌時間は、使用するクエンチ剤（ｉｉ）の種類、温度等によって異なるが、好ましくは５分～５時間、より好ましくは５分～２時間である。
（工程（５）（一時保護基の除去））
　工程（５）では、工程（４）後の溶液に酸を添加して、前記オリゴヌクレオチド（ｄ）の酸性条件下で除去可能な一時保護基を除去して、保護されていない水酸基および疎水性保護基を有するオリゴヌクレオチド（ｅ）を形成する。酸は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　酸は、一時保護基を良好に除去できれば特に限定されないが、例えば、トリフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリクロロ酢酸、メタンスルホン酸、塩酸、酢酸、ｐ－トルエンスルホン酸等が挙げられる。良好な一時保護基の除去の観点から、トリフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリクロロ酢酸がより好ましく、トリフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸がさらに好ましく、トリフルオロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸がさらに一層好ましく、トリフルオロ酢酸が特に好ましい。
　酸の使用量は、オリゴヌクレオチド（ｄ）１ｍｏｌに対し、例えば１～１００ｍｏｌ、好ましくは１～４０ｍｏｌである。
　工程（５）の反応温度は、反応が進行しさえすれば特に限定されないが、例えば－１０℃～５０℃、より好ましくは０℃～４０℃である。反応時間は、使用するオリゴヌクレオチド（ｄ）、酸の種類および非極性溶媒の種類、反応温度等により異なるが、例えば５分～５時間である。
　オリゴヌクレオチド（ｄ）の一時保護基の除去前、その間または除去後に、カチオン捕捉剤を溶液に添加することが好ましい。即ち、一時保護基の除去をカチオン捕捉剤の存在下で行うか、または一時保護基の除去後に反応液にカチオン捕捉剤を添加することが好ましい。カチオン捕捉剤は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　カチオン捕捉剤としては、除去された一時保護基による再保護または脱保護された官能基への副反応が進行しなければ、特に限定されないが、ピロール、２－メチルピロール、３－メチルピロール、２，３－ジメチルピロール、２，４－ジメチルピロール等のピロール誘導体；インドール、３－メチルインドール、４－メチルインドール、５－メチルインドール、６－メチルインドール、７－メチルインドール、５，６－ジメチルインドール、６，７－ジメチルインドール、５－メトキシインドール等のインドール誘導体；２－メチルフラン、２，３－ジメチルフラン、２－メチル－３－（メチルチオ）フラン、メントフラン等のフラン誘導体を使用することができる。カチオン捕捉剤の使用量は、前記オリゴヌクレオチド（ｄ）１ｍｏｌに対して、好ましくは１～５０ｍｏｌ、より好ましくは５～２０ｍｏｌである。
（工程（６）（中和））
　工程（５）で使用した酸を中和するために、前記ワンポット合成は、工程（５）の後および工程（７）の前に、工程（５）後の溶液に塩基を添加する工程（６）をさらに含んでいてもよい。但し、工程（７）（固液分離）および洗浄を行うことによって、工程（５）で使用した酸をオリゴヌクレオチド（ｅ）から除去することができるため、工程（６）（中和）は必須ではない。
　塩基は１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。塩基としては、有機塩基が好ましい。有機塩基としては、例えば、ピリジン、２，４，６－トリメチルピリジン、ベンズイミダゾール、１，２，４－トリアゾール、Ｎ－フェニルイミダゾール、２－アミノ－４，６－ジメチルピリミジン、１，１０－フェナントロリン、イミダゾール、Ｎ－メチルイミダゾール、２－クロロベンズイミダゾール、２－ブロモベンズイミダゾール、２－メチルイミダゾール、２－フェニルベンズイミダゾール、Ｎ－フェニルベンズイミダゾール、５－ニトロベンズイミダゾールなどが挙げられる。これらの中で、ピリジン、２，４，６－トリメチルピリジン、ベンズイミダゾール、１，２，４－トリアゾール、Ｎ－フェニルイミダゾール、Ｎ－メチルイミダゾール、２－アミノ－４，６－ジメチルピリミジン、１，１０－フェナントロリンが好ましく、ピリジン、２，４，６－トリメチルピリジン、ベンズイミダゾール、１，２，４－トリアゾール、Ｎ－フェニルイミダゾールがより好ましく、ピリジン、２，４，６－トリメチルピリジン、ベンズイミダゾール、１，２，４－トリアゾールがさらに好ましく、ピリジン、２，４，６－トリメチルピリジン、ベンズイミダゾールが特に好ましい。
　工程（６）における塩基の使用量は、工程（５）における酸の使用量１ｍｏｌに対して、好ましくは１～１０ｍｏｌであり、より好ましくは１～３ｍｏｌである。
（工程（７）（固液分離））
　工程（７）では、前記オリゴヌクレオチド（ｅ）を含む溶液（即ち、工程（５）後の溶液、または必要に応じて工程（６）後の溶液）に極性溶媒を添加して、前記オリゴヌクレオチド（ｅ）を析出させる。
　工程（７）で使用する極性溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール系溶媒；アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系溶媒；アセトン、２－ブタノン等のケトン系溶媒；１，４－ジオキサン、テトラヒドロフラン等の極性エーテル系溶媒；ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ－メチルピペリドン等のアミド系溶媒、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド系溶媒；水等が挙げられる。極性溶媒は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。これらの中でも、ニトリル系溶媒が好ましく、アセトニトリルがより好ましい。
　前記オリゴヌクレオチド（ｅ）の回収率を高めるために、固液分離における極性溶媒の添加量は、溶液中に含まれる非極性溶媒１ｍＬに対して、好ましくは１～２０ｍＬ、より好ましくは５～２０ｍＬ、さらに好ましくは５～１０ｍＬである。
　前記オリゴヌクレオチド（ｅ）の回収率を高めるために、国際公開第２０１６／１１７６６３号に記載されているような沈殿促進剤（例えば、３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルピバレート）を使用してもよい。
　析出した前記オリゴヌクレオチド（ｅ）は、濾過等の公知の手段によって回収することができる。
　工程（１）～（５）および（７）（好ましくは工程（１）～（７））を含むワンポット合成を繰り返すことによって、オリゴヌクレオチド鎖を伸長させることができる。このようなワンポット合成を繰り返すオリゴヌクレオチドの製造方法も、本発明の製造方法に包含される。
（脱保護）
　本発明の製造方法では、工程（７）（固液分離）の後に、得られたオリゴヌクレオチド（ｅ）の保護基（例えば、リン酸基の保護基、疎水性保護基）を、公知の方法によって除去する工程を含んでいてもよい。例えば、リン酸基の保護基である２－シアノエチル基および前述の保護基（Ｐｇ－５）等は、アンモニア水、アンモニア水／エタノール溶液、またはアンモニア水およびメチルアミン水溶液の混合液で処理することによって除去することができる。
３．新規化合物
　本発明は、オリゴヌクレオチドの製造方法において有用な、式（Ｉｎ）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000075
［式中、
　（１）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示すか、
　（２）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、ｑ’は１を示し、およびＲ３ｎはＣ１－６パーフルオロアルキル基を示すか、
　（３）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は１を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示すか、または
　（４）Ｒ１ｎは１個のＣ１－６アルキル基で置換されているピリジル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示す。］
で表される化合物も提供する。
　化合物（Ｉｎ）は、オリゴヌクレオチドの製造方法において、亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体（特に、亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体）を酸化するための酸化剤として有用である。化合物（Ｉｎ）は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。
　前記式（Ｉｎ）中、「ｐ’は０を示す」とは、式（Ｉｎ）中の括弧で括られた－ＣＨ２－が存在しないことを意味する。
　前記式（Ｉｎ）中、「ｑ’は０を示す」とは、式（Ｉｎ）中のＲ３ｎが存在しないことを意味する。
　Ｒ１ｎの「置換されていてもよいフェニル基」は、好ましくはフェニル基である。
　Ｒ１ｎの「１個のＣ１－６アルキル基で置換されているピリジル基」は、好ましくは１個のメチル基で置換されているピリジル基であり、より好ましくは４－メチル－２－ピリジル基である。
　環Ｃ”の「窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環」は、好ましくはキノリン環である。
　環Ｃ”の「６員の含窒素芳香族複素環」は、好ましくはピリジン環である。
　Ｒ３ｎの「Ｃ１－６パーフルオロアルキル基」は、好ましくはトリフルオロメチル基である。
　化合物（Ｉｎ）は、好ましくは２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１１））、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））、または２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））である。
　化合物（Ｉｎ）は、前述の「Ｙ１ｃがカルボニルである化合物（Ｉｃ）の製造方法」、後述する合成例、公知の方法（例えば、非特許文献２の Supporting Information に記載の方法）またはそれらに準じた方法によって製造することができる。
　以下、実施例等を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例等によって制限を受けるものではなく、上記・下記の趣旨に適合し得る範囲で適当に変更を加えて実施することも可能であり、それらはいずれも本発明の技術的範囲に包含される。
　以下の実施例等に記載の「室温」とは、「２０℃～３０℃」を意味する。
　また、以下の実施例等で使用する略号の意味は、以下の通りである。
　ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
　ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
　ＳＵＣ：スクシニル
　ＴＯＢ：３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ
　Ｐｉｖ－ＴＯＢ：３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルピバレート
　ＤＤＴＴ：［（Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノメチリデン）アミノ］－３Ｈ－１，２，４－ジチアゾリン－３－チオン
　ＰＯＳ：５－フェニル－３Ｈ－１，２，４－ジチアゾール－３－オン
　ＤＭＴｒ：４，４’－ジメトキシトリチル
（ホスホロアミダイトまたはＨ－ホスホネート）
　２’－ＯＭｅ－Ｃ－ＣＥ　ホスホロアミダイト：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ４－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルシチジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）－（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピル）］－ホスホロアミダイト
　ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）－（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピル）］－ホスホロアミダイト
　ｄＣ－ＣＥ　ホスホロアミダイト：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ４－ベンゾイル－デオキシシチジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）－（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピル）］－ホスホロアミダイト
　５－Ｍｅ－ｄＣ（Ｂｚ）－ＣＥ　ホスホロアミダイト：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ４－ベンゾイル－２’－デオキシ－５－メチルシチジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）－（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピル）］－ホスホロアミダイト
　ｄＡ－ＣＥ　ホスホロアミダイト：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）－（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピル）］－ホスホロアミダイト
　ｄＧ－ＣＥ　ホスホロアミダイト：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ２－イソブチリル－２’－Ｏ－メチルグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）－（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピル）］－ホスホロアミダイト
　２’－Ｆ－Ａ－ＣＥ　ホスホロアミダイト：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ４－ベンゾイル－２’－フルオロ－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）－（Ｎ，Ｎ－ジイソプロピル）］－ホスホロアミダイト
　ｄＴ－Ｈ－ホスホネートＴＥＡ塩：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－デオキシチミジン－３’－Ｈ－ホスホネートのトリエチルアミン塩
（オリゴヌクレオチド）
　ＨＯ－Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：デオキシチミジン－３’－イル３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジルスクシネート
　ＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ａｍ（Ｓ）Ｃｍ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ６－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルシチジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ｃｍ（Ｏ）Ａｍ（Ｓ）Ｃｍ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ４－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルシチジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　Ｎ６－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルシチジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ４－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルシチジン　３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ６－ベンゾイル－２’－フルオロ－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　Ｎ４－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルシチジン　３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ６－ベンゾイル－２’－フルオロ－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　Ｎ４－ベンゾイル－２’－Ｏ－メチルシチジン　３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－フルオロ－デオキシアデノシン－３’－ホスホリル－２’－Ｏ－メチルシチジン－３’－ホスホリル－デオキシチミジン－３’－ホスホリル－デオキシチミジン
　ＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ－ＯＨ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－フルオロ－デオキシアデノシン－３’－ホスホリル－２’－Ｏ－メチルシチジン－３’－ホスホリル－デオキシチミジン
　ＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－フルオロ－デオキシアデノシン－３’－ホスホリル－デオキシチミジン－３’－ホスホリル－デオキシチミジン
　ＨＯ－Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－デオキシシチジン　３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスフィチル　Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－デオキシシチジン　３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネートＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－デオキシシチジン　３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＯＨ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－デオキシグアノシン－３’－ホスホリル－デオキシアデノシン－３’－ホスホロチオニル－デオキシシチジン－３’－ホスホロチオニル－デオキシチミジン－３’－ホスホロチオニル－デオキシチミジン
　ＤＭＴｒＯ－Ｔ（ＯＨ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－デオキシチミジン－３’－ホスホリル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ａ（Ｏ）Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－ＭｅＣ（Ｏ）Ａ（Ｏ）Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ４－ベンゾイル－２’－デオキシ－５－メチルシチジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＯＨ：デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル－デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル－デオキシチミジン
　ＤＭＴｒＯ－Ｃ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ４－ベンゾイル－デオキシシチジン　３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ４－ベンゾイル－デオキシシチジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ４－ベンゾイル－５－メチル－２’－デオキシシチジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－５－メチル－２’－デオキシシチジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＨＯ－Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－５－メチル－２’－デオキシシチジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホリル　Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－５－メチル－２’－デオキシシチジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｓ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－５－メチル－２’－デオキシシチジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＯＨ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－デオキシグアノシン－３’－ホスホリル－デオキシアデノシン－３’－ホスホロチオニル－デオキシグアノシン－３’－ホスホロチオニル－５－メチル－２’－デオキシシチジン
（オリゴヌクレオチド前駆体）
　ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスフィチル　Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－デオキシシチジン　３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
ＤＭＴｒＯ－Ｃ（ＩＩＩ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ４－ベンゾイル－デオキシシチジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスフィチル　デオキシチミジン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ｔ（Ｈ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－デオキシチミジン－３’－ホスホニル　デオキシチミジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
　ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ：５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスフィチル　Ｎ６－［１－（ジメチルアミノ）エチリデン］－デオキシアデノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ２－イソブチリル－デオキシグアノシン－３’－［Ｏ－（２－シアノエチル）］ホスホロチオニル　Ｎ４－ベンゾイル－５－メチル－２’－デオキシシチジン－３’－イル－［３，４，５－トリス（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート
合成例１：亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体の合成
　アルゴン雰囲気下、１０００ｍＬのフラスコにＨＯ－Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（２．５ｇ，２．０ｍｍｏｌ）、Ｐｉｖ－ＴＯＢ（５．０ｇ，５．０ｍｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（１００ｍＬ）および脱水アセトニトリル（３０ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（３．０ｇ，４．０ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２７０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を３０分撹拌した。続いて、５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（５３０ｍｇ，４．０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で４５分撹拌した。その後、溶液に２，２，２－トリフルオロエタノール（１．５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した後、２，６－ジメチルアニリン（１．８ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）およびＰＯＳ（１．０ｇ、５．１ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で溶液を１．０時間撹拌した。その後、２，３－ジメチルフラン（２．１ｍＬ，２０ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（５．２ｍＬ，６８ｍｍｏｌ）、および２，６－ジメチルアニリン（８３．５μＬ、０．７μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で５５分撹拌した。さらにトリフルオロ酢酸（６２０μＬ，８．１ｍｍｏｌ）および２，６－ジメチルアニリン（１０μＬ、０．１０μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で１５分撹拌した。続いて溶液にピリジン（１９ｍＬ，２３０ｍｍｏｌ）およびメタノール（８７０μＬ）を順次加え、溶液を室温にて１１５分撹拌した。その後、アセトニトリル（１Ｌ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび２量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（８．１ｇ、収率９８％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１６１０．０３，Ｆｏｕｎｄ　１６１１．０６［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（８．１ｇ）と、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりにｄＣ－ＣＥ　ホスホロアミダイトとを用いたこと以外は上記と同様にして、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび３量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（８．７ｇ、収率９７％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２０７２．１１，Ｆｏｕｎｄ　２０７３．１４［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（２．８ｇ）と、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりにｄＡ－ＣＥ　ホスホロアミダイトとを用いたこと以外は上記と同様にして、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび４量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（３．０ｇ、収率９８％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２５２３．２３，Ｆｏｕｎｄ　１２６２．６３［Ｍ＋２Ｈ］２＋
　アルゴン雰囲気下、１００ｍＬの二口フラスコに上記で得られた固体（４００ｍｇ）、脱水ジクロロメタン（４．０ｍＬ）および脱水アセトニトリル（１．２ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、ｄＧ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（１３６ｍｇ，１６１μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（２１．１ｍｇ，１６２μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６０分撹拌した。その後、アセトニトリル（３０ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢと、５量体であるオリゴヌクレオチド前駆体ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（４５３ｍｇ、収率９９％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　３２６１．４９，Ｆｏｕｎｄ　１６３１．６７［Ｍ＋２Ｈ］２＋
実施例１：化合物（Ｉｂ－１）を用いた酸化
　アルゴン雰囲気下、２０ｍＬの二口フラスコに、合成例１で得られた固体（１００．０ｍｇ：ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢとして５６．９ｍｇ、１７．４μｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（０．９ｍＬ）および脱水アセトニトリル（０．３ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、水（９μＬ，０．５ｍｍｏｌ）および化合物（Ｉｂ－１）（１２．１ｍｇ，３６．４μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６０分撹拌した。その後、トリフェニルホスフィン（４．６ｍｇ，１８μｍｏｌ）を加え、溶液を３０分撹拌した。続いて、アセトニトリル（１０ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢと、５量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（８２ｍｇ、収率８２％）。
　なお、化合物（Ｉｂー１）は市販品を使用した。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　３２７７．４８，Ｆｏｕｎｄ　１６３９．７５［Ｍ＋２Ｈ］２＋
実施例２：化合物（Ｉｃ－１）を用いた酸化
　アルゴン雰囲気下、２０ｍＬの二口フラスコに合成例１で得られた固体（１００ｍｇ：ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢとして５７ｍｇ、１７μｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（０．９ｍＬ）、および脱水アセトニトリル（０．３ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、水（９μＬ，０．５ｍｍｏｌ）および化合物（Ｉｃ－１）（８．０ｍｇ，３５μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６０分撹拌した。その後、トリフェニルホスフィン（４．７ｍｇ，１８μｍｏｌ）を加え、溶液を３０分撹拌した。続いて、アセトニトリル（１０ｍＬ）を添加し、析出した固体をキリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび５量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（８３ｍｇ、収率８３％）。
　なお、化合物（Ｉｃ－１）は、非特許文献２のSupporting Information に記載の方法によって合成したものを使用した。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．３２７７．４８，Ｆｏｕｎｄ　１６３９．７５［Ｍ＋２Ｈ］２＋
比較例１：ヨウ素を用いた酸化
　アルゴン雰囲気下、２０ｍＬの二口フラスコに合成例１で得られた固体（１００ｍｇ：ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢとして５７ｍｇ、１７μｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（０．９ｍＬ）、および脱水アセトニトリル（０．３ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、水（９μＬ，０．５ｍｍｏｌ）、ピリジン（５．７μＬ，７１μｍｏｌ）およびヨウ素（８．８ｍｇ，３５μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６０分撹拌した。その後、トリフェニルホスフィン（４．８ｍｇ，１８μｍｏｌ）を加え、溶液を３０分撹拌した。続いて、アセトニトリル（１０ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび５量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（８３ｍｇ、収率８３％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　３２７７．４８，Ｆｏｕｎｄ　１６３９．７５［Ｍ＋２Ｈ］２＋
実施例１、実施例２および比較例１の対比
　以下のようにして、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド、およびチオリン酸エステル結合がリン酸エステル結合に転化して得られた副生成物（以下「脱硫体」と記載する）を分析し、脱硫体の割合を算出した。
　実施例１、実施例２または比較例１で得られた固体（１０ｍｇ）および２８重量％アンモニア水（５ｍＬ）をオートクレーブに入れて、６５℃で４時間加熱した後、室温まで冷却した。シリンジフィルターにより反応液中の不溶物を除去した後、遠心エバポレーターで減圧濃縮し、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＯＨ（以下「目的のオリゴヌクレオチド」と記載する）を得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１８２７．３６，Ｆｏｕｎｄ　１８２６．３４［Ｍ－Ｈ］－
　得られた目的のオリゴヌクレオチドおよび脱硫体を含む混合物を、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）により分析した。観測された各化合物（目的のオリゴヌクレオチドおよび脱硫体）の抽出イオンクロマトグラム（ＥＩＣ）を用いて、各化合物のピーク面積を算出し、下記式：
　脱硫体の割合（％）＝（脱硫体のピーク面積／目的のオリゴヌクレオチドのピーク面積）×１００
により、脱硫体の割合（％）を算出した。結果を表１に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000076
　表１の結果から明らかなように、酸化剤として、ヨウ素の代わりに化合物（Ｉｂ－１）または化合物（Ｉｃ－１）を使用することによって、脱硫体の生成を抑制することができる。
合成例２：ホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体の合成
　アルゴン雰囲気下、２００ｍＬの三口フラスコにＨＯ－Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（５００ｍｇ，４００μｍｏｌ）、ｄＴ－Ｈ－ホスホネートＴＥＡ塩（５６８ｍｇ，８００μｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（１０ｍＬ）、および脱水ピリジン（１０ｍＬ）を加え、溶液を調製した。続いて、塩化ピバロイル（０．２ｍＬ，１．６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を１時間撹拌した。その後アセトニトリル（１４０ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いる吸引濾過で回収した後、乾燥し、２量体であるオリゴヌクレオチド前駆体ＤＭＴｒＯ－Ｔ（Ｈ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを得た（７２７ｍｇ、収率９８％）。
実施例３：化合物（Ｉｃ－１）を用いた酸化
　アルゴン雰囲気下、５０ｍＬの二口フラスコに合成例２で得られたオリゴヌクレオチド前駆体（１７１ｍｇ，９３μｍｏｌ）、ジクロロメタン（４．７ｍＬ）、およびアセトニトリル（１．４ｍＬ）を加え、溶液を調製した。続いて、水（６０μＬ）、化合物（Ｉｃ－１）（４３ｍｇ，１８９μｍｏｌ）およびジアザビシクロウンデセン（ＤＢＵ）（５５μＬ，３７２μｍｏｌ）を加えて、溶液を室温で２時間撹拌した。その後、アセトニトリル（４２ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、２量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｔ（ＯＨ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを定量的に得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１８４３．１６，Ｆｏｕｎｄ　１８４２．１５［Ｍ－Ｈ］－
実施例４：化合物（Ｉｂ－１）を用いた酸化
　アルゴン雰囲気下、５０ｍＬの二口フラスコに合成例２で得られたオリゴヌクレオチド前駆体（１７０ｍｇ，９３μｍｏｌ）、ジクロロメタン（４．７ｍＬ）、およびアセトニトリル（１．４ｍＬ）を加え、溶液を調製した。続いて、化合物（Ｉｂ－１）（６２ｍｇ，１８６μｍｏｌ）およびＤＢＵ（５５μＬ，３７２μｍｏｌ）を加えて、溶液を室温で２時間撹拌した。その後、アセトニトリル（４２ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、２量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｔ（ＯＨ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを定量的に得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１８４３．１６，Ｆｏｕｎｄ　１８４２．１５［Ｍ－Ｈ］－
実験例１
　非特許文献１（ARKIVOC 2009 (iii) 264-273）には、下記式で示されるように、多量のトリフェニルホスフィンおよび多量の２，２’－ジピリジルジスルフィドの存在下で、Ｈ－ホスホネート（化合物１）およびヌクレオシド（化合物２）を、縮合および酸化して、ジヌクレオチド（化合物４）を製造することが開示されている。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000077
　また、オリゴヌクレオチド合成で伸長を繰り返していくと、意図せずに、オリゴヌクレチドのチオリン酸エステル部分の保護基（例えば、２－シアノエチル基）が除去されることがある。そこで、チオリン酸エステル部分の保護基が除去されたオリゴヌクレオチドと、非特許文献１で使用される２，２’－ジピリジルジスルフィドまたは本発明で使用される化合物（Ｉｂ－１）とを反応させて、２，２’－ジピリジルジスルフィドおよび化合物（Ｉｂ－１）を評価した。なお、以下の実験では、非特許文献１に記載の反応条件に合わせて、基質（即ち、チオリン酸エステル部分の保護基が除去されたオリゴヌクレオチド）に対して、多量の２，２’－ジピリジルジスルフィドまたは多量の化合物（Ｉｂ－１）を使用した。
（１）２，２’－ジピリジルジスルフィドおよびトリフェニルホスフィンを用いた実験
　２－シアノエチル基が除去されたＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢおよびＰｉｖ－ＴＯＢの混合物（４０ｍｇ：ＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢとして２０ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を、脱水ジクロロメタン（０．３ｍＬ）および脱水ピリジン（０．３ｍＬ）に溶解させて溶液を調製し、トリフェニルホスフィン（１５ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）および２，２’－ジピリジルジスルフィド（２５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温にて４．５時間撹拌した。その後、溶液にアセトニトリル（７ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、減圧乾燥し、固体を得た（３１．２ｍｇ）。
　得られた固体（１０ｍｇ）および２８重量％アンモニア水（５ｍＬ）をオートクレーブに入れて、６５℃で４時間加熱した後、室温まで冷却した。シリンジフィルターにより反応液中の不溶物を除去した後、遠心エバポレーターで減圧濃縮し、得られた濃縮物のＬＣ－ＭＳ分析を行った。
（２）化合物（Ｉｂ－１）および水を用いた実験
　シアノエチル基が除去されたＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢおよびＰｉｖ－ＴＯＢの混合物（４０ｍｇ：ＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢとして２０ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を、脱水ジクロロメタン（０．３ｍＬ）および脱水ピリジン（０．３ｍＬ）に溶解させて溶液を調製し、水（６μＬ、０．３ｍｍｏｌ）および化合物（Ｉｂ－１）（３９ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温にて４．５時間撹拌した。その後、溶液にアセトニトリル（７ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、減圧乾燥し、定量的に固体を得た。
　得られた固体（１０ｍｇ）および２８重量％アンモニア水（５ｍＬ）をオートクレーブに入れて、６５℃で４時間加熱した後、室温まで冷却した。シリンジフィルターにより反応液中の不溶物を除去した後、遠心エバポレーターで減圧濃縮し、得られた濃縮物のＬＣ－ＭＳ分析を行った。
（３）評価
　チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＯＨ（以下「目的のオリゴヌクレオチド」と記載する）の量、および目的のオリゴヌクレオチドと酸化剤（２，２’－ジピリジルジスルフィドまたは化合物（Ｉｂ－１））とが反応して形成された副生成物（以下「副生成物」と記載する）の量を以下のようにして測定し、副生成物の割合を算出した。詳しくは、上記実験で得られた濃縮物をＬＣ－ＭＳにより分析し、観測された各化合物（目的のオリゴヌクレオチドおよび副生成物）の抽出イオンクロマトグラム（ＥＩＣ）を用いて、各化合物のピーク面積を算出し、下記式：
　副生成物の割合（％）＝（副生成物のピーク面積／（目的のオリゴヌクレオチドのピーク面積＋副生成物のピーク面積）×１００
により副生成物の割合を算出した。結果を表２に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000078
　表２に示すように、２，２’－ジピリジルジスルフィドおよびトリフェニルホスフィンを用いると、多量の副生成物が生じた。一方、多量の化合物（Ｉｂ－１）および水を用いても、副生成物は検出されなかった。なお、２，２’－ジピリジルジスルフィドおよびトリフェニルホスフィンを使用する非特許文献１に記載の方法では、この実験例１で示す結果と同様に、多量の副生成物が生じる。
合成例３：２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））の合成
　２００ｍＬのナスフラスコに、テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）、２－メルカプトプロピオン酸（１０ｍｍｏｌ）、および化合物（Ｉｂ－１）（２０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を２４時間撹拌した。その後、溶液を濾過し、濾液の溶媒を減圧留去した後、得られた濃縮物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、目的物（１．６ｇ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ４）δ　７．９１（ｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．４７（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），３．８９（ｑ，Ｊ＝７．１，１Ｈ），１．５８（ｄ，Ｊ＝７．１，３Ｈ）
合成例４：３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））の合成
　２００ｍＬのナスフラスコに、テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）、３－メルカプトプロピオン酸（１０ｍｍｏｌ）、および化合物（Ｉｂ－１）（２０ｍｍｏｌ）を加えて溶液を調製し、溶液を２４時間撹拌した。その後、溶液を濾過し、濾液の溶媒を減圧留去した後、得られた濃縮物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、目的物（１．３ｇ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ　７．９３（ｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．４８（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１Ｈ），３．２４（ｔ，Ｊ＝６．８，２Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝６．８，２Ｈ）．
合成例５：２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－４））の合成
　３００ｍＬのナスフラスコにジクロロメタン（１５０ｍＬ）、２－メルカプトベンゾイミダゾール（２０ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（２２ｍｍｏｌ）を加え、その後ヨウ素（１１ｍｍｏｌ）を加え、溶液を３時間撹拌した。その後、溶液を濾過し、濾液の溶媒を減圧留去した後、得られた濃縮物を、ジエチルエーテルおよびエタノールを用いて再結晶し、目的物（２．５ｇ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ＝７．５８－７．５６（ｍ，４Ｈ），７．２６－７．２２（ｍ，４Ｈ）．
合成例６：２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド（化合物（Ｉｂ－５））の合成
　３０ｍＬのナスフラスコに２－メルカプトベンゾオキサゾール（１．５ｇ，１０ｍｍｏｌ）および酢酸エチル（１８ｍＬ）を加えて、溶液を調製した。溶液に、過酸化水素（３３重量％，４８９μＬ）を０℃で６０分かけて滴下した後、溶液を室温に昇温し、２．５時間撹拌した。溶液に水（１．４ｍＬ）を加え、混合物を１０分撹拌した後、有機層を分取し、水層を酢酸エチル（５ｍＬ）で２回抽出した。抽出で得られた溶液を、硫酸ナトリウムで乾燥し、その溶媒を減圧除去した。得られた固体を氷冷したジエチルエーテルで洗浄した後、ジエチルエーテルにて再結晶した。析出した固体を濾過によって回収した後、減圧乾燥し、目的物（２１０ｍｇ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ＝７．７６－７．６９（ｍ，２Ｈ），７．５８－７．５０（ｍ，２Ｈ），７．４２－７．３２（ｍ，４Ｈ）．
合成例７：２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）（化合物（Ｉｂ－８））の合成
　１００ｍＬのナスフラスコに２－メルカプトピリジン－Ｎ－オキシド（３．８ｇ，３０ｍｍｏｌ）および水（２７ｍＬ）を加えて、溶液を調製した。溶液に、過酸化水素（３３重量％，３．２ｍＬ）を０℃で６０分かけて滴下した後、溶液を４０℃に昇温し、１時間撹拌した。溶液を濾過して、固体を回収し、回収した固体をメタノールで洗浄し、減圧乾燥して、目的物（１．２ｇ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ－ｄ）δ＝８．３１（ｄ，Ｊ＝５．２，２Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝６．４，２Ｈ），７．３４－７．２４（ｍ，２Ｈ），７．２０（ｄｄ，Ｊ＝６．４，２Ｈ）．
合成例８：亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体の合成
　アルゴン雰囲気下、２００ｍＬの二口フラスコにＨＯ－Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（２．１ｇ，１．７ｍｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（８７ｍＬ）および脱水アセトニトリル（２６ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、モレキュラーシーブ３Ａ（１．７ｇ）、トリフェニルホスフィン（２２７ｍｇ，８６７μｍｏｌ）、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（２．６ｇ，３．５ｍｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（４５２ｍｇ，３．４７ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で６０分撹拌した。反応溶液にトリフルオロエタノール（１．３ｍＬ，１７ｍｍｏｌ）を加え室温で３０分撹拌した。その後、２，６－キシリジン（２．６ｍＬ，２１ｍｍｏｌ）およびＤＤＴＴ（８９２，４．３４ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で６０分撹拌した。モレキュラーシーブ３Ａを濾過によって除去した後、インドール（２．０ｇ，１７ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（４．８ｍＬ，６３ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で３０分撹拌した。さらにトリフルオロ酢酸（２６５μＬ，３．４６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した。その後、溶液にピリジン（１６ｍＬ，２００ｍｍｏｌ）および水（７４２μＬ）を順次加え、溶液を室温にて６０分撹拌した。その後、アセトニトリル（８５８ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、２量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを得た（２．６ｇ、収率９４％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．１６１０．０３，Ｆｏｕｎｄ　１６１１．０５［Ｍ＋Ｈ］＋
　アルゴン雰囲気下、１００ｍＬの二口フラスコにＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（１．３ｇ，８１１μｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（４０ｍＬ）および脱水アセトニトリル（１２ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、モレキュラーシーブ３Ａ（８１６ｍｇ）、トリフェニルホスフィン（１０９ｍｇ，４１７μｍｏｌ）、ｄＣ（Ｂｚ）－ＣＥ　ホスホロアミダイト（１．４ｇ，１．６ｍｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（２１２ｍｇ，１．６３μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６０分撹拌した。モレキュラーシーブ３Ａを濾過によって除去した後、アセトニトリル（３０ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、３量体であるオリゴヌクレオチド前駆体ＤＭＴｒＯ－Ｃ（ＩＩＩ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを得た（１．８ｇ、収率９６％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２３４２．２６，Ｆｏｕｎｄ　２３４３．２８［Ｍ＋Ｈ］＋
実施例５～１５および比較例２：各種酸化剤を用いた酸化
　フラスコにＤＭＴｒＯ－Ｃ（ＩＩＩ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（６０ｍｇ，２５μｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（１．３ｍＬ）および脱水アセトニトリル（０．４ｍＬ）を加え、溶液を調製した。溶液に水（１７μＬ）を加えた後、下記表３に示す各種酸化剤（３８μｍｏｌ）を添加し、室温で３時間撹拌して酸化を行い、３量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｃ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（以下「酸化体」と記載する）を合成した。なお、下記表３に示すように、酸化剤として２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－２））または３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸（化合物（Ｉｂ－３））を使用した実施例６および７では、上記のように水の存在下での酸化に加えて、前記操作で溶液に水を添加せず、無水条件下での酸化も行った。
　なお、化合物（Ｉｂ－２）～化合物（Ｉｂ－５）および化合物（Ｉｂ－８）は、前述の合成例３～７で得られたものを使用した。
　化合物（Ｉｃ－１）は、非特許文献２の Supporting Information に記載の方法によって合成したものを使用した。
　その他の酸化剤は、市販品を使用した。
実施例５～１５および比較例２の対比
　実施例５～１５および比較例２の酸化後の溶液（１０μＬ）およびＤＤＴＴ（１ｍｇ）を１ｍＬバイアル瓶の中に入れ、テトラヒドロフラン（４５０μＬ）で希釈した後、ＤＢＵ（２０μＬ）を入れて、溶液を室温で３０秒間撹拌して、未反応のＤＭＴｒＯ－Ｃ（ＩＩＩ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを硫化して、ＤＭＴｒＯ－Ｃ（Ｓ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（以下「硫化体」）を合成して、酸化体および硫化体を含む試験液を調製した。得られた試験液のＭＳ分析を行い、観測された各化合物（酸化体（即ち、目的のオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｃ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ）および硫化体）のアバンダンスを用いて、下記式：
　酸化体の割合（％）＝（酸化体のアバンダンス／（酸化体のアバンダンス＋硫化体のアバンダンス））×１００
により、酸化体の割合を算出した。結果を表３に示す。なお、表３の実施例６および７の括弧内の数値は、無水条件下で酸化を行った際の酸化体の割合を示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000079
　表３に示されるように、酸化剤として化合物（Ｉｂ－１）～化合物（Ｉｂ－１０）または化合物（Ｉｃ－１）を使用することによって、非特許文献１（ARKIVOC 2009 (iii) 264-273）で使用されている２，２’－ジピリジルジスルフィドに比べて、オリゴヌクレオチド前駆体を効率的に酸化することができる。
実施例１６：酸化剤として化合物（Ｉｂ－１）を用いたＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨの合成
　アルゴン雰囲気下、３００ｍＬの二口フラスコにＨＯ－Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（３５１ｍｇ，２８４μｍｏｌ）、Ｐｉｖ－ＴＯＢ（３５０ｍｇ，３５０μｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（１４ｍＬ）および脱水アセトニトリル（４ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（４０２ｍｇ，５４０μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（６９．９ｍｇ，５３７μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で４５分撹拌した。さらに、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（２１ｍｇ，２９μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（３．７ｍｇ，２８μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３５分撹拌した。その後、水（１８４μＬ，１０．２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した。溶液に化合物（Ｉｂ－１）（２８２ｍｇ，８４８μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で６０分撹拌した。その後、トリフェニルホスフィン（７４．２ｍｇ，２８３μｍｏｌ）を加え、溶液を３０分撹拌した後、２，３－ジメチルフラン（２９８μＬ，２．８３ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（５６３μＬ，７．３５ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で３０分撹拌した。さらに、トリフルオロ酢酸（８６．６μＬ，１．１３ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した。続いて溶液にピリジン（２．０ｍＬ，２５ｍｍｏｌ）および水（１２０μＬ）を順次加え、溶液を室温にて６０分撹拌した。その後、アセトニトリル（１７０ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、減圧乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび２量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（７６６ｍｇ、収率９６％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１５９４．０６，Ｆｏｕｎｄ　１５９５．０７［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（７６６ｍｇ）と、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりに２’－ＯＭｅ－Ｃ－ＣＥ　ホスホロアミダイトとを用いたこと以外は上記と同様にしてＰｉｖ－ＴＯＢおよび３量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（８７５ｍｇ、収率９８％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．２０７０．１７，Ｆｏｕｎｄ　２０７１．１９［Ｍ＋Ｈ］＋
　アルゴン雰囲気下、２００ｍＬの二口フラスコに上記で得られた固体（８７５ｍｇ）、脱水ジクロロメタン（１３ｍＬ）および脱水アセトニトリル（４ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、２’－Ｆ－Ａ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（４４１ｍｇ，５０３μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（６５．７ｍｇ，５０５μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で４５分撹拌した。さらに、２’－Ｆ－Ａ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（２５ｍｇ，２８μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（３．４ｍｇ，２６μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で６０分撹拌した。続いて、水（１７２μＬ，９．５４ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で６０分撹拌した後、溶液に化合物（Ｉｂ－１）（２６６ｍｇ，８００μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で６０分撹拌し、その後トリフェニルホスフィン（７１．１ｍｇ，２７１μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した。その後、アセトニトリル（１２９ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、減圧乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび４量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（１００７ｍｇ、収率９３％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．２８６０．４１，Ｆｏｕｎｄ　２８６１．４２［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（９．３ｍｇ）および２８重量％アンモニア水（５ｍＬ）をオートクレーブに入れて、６５℃で４時間加熱した後、室温まで冷却した。シリンジフィルターにより反応液中の不溶物を除去した後、遠心エバポレーターで減圧濃縮し、ＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨの水溶液を得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１４９８．３９，Ｆｏｕｎｄ　１４９７．３７［Ｍ－Ｈ］－
実施例１７：酸化剤として化合物（Ｉｃ－１）を用いたＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨの合成
　化合物（Ｉｂ－１）を化合物（Ｉｃ－１）に変えたこと以外は実施例１６と同様にしてＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨの水溶液を得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１４９８．３９，Ｆｏｕｎｄ　１４９７．３７［Ｍ－Ｈ］－
比較例３：酸化剤としてヨウ素を用いたＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨの合成
　アルゴン雰囲気下、２００ｍＬの二口フラスコにＨＯ－Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（３５４ｍｇ，２８６μｍｏｌ）およびＰｉｖ－ＴＯＢ（３５１ｍｇ，３５２μｍｏｌ）を加え、次いで脱水ジクロロメタン（１４ｍＬ）および脱水アセトニトリル（４．２ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（４０６ｍｇ，５４５μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（７０．１ｍｇ，５３９μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で４５分撹拌した。さらに、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（２３ｍｇ，３１μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（４．０ｍｇ，３１μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３５分撹拌した。続いて、水（１８０μＬ，１０．２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した後、溶液にピリジン（９１μＬ，１．１ｍｍｏｌ）およびヨウ素（１４５ｍｇ，５６９μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で９０分撹拌した。その後、２，３－ジメチルフラン（２９８μＬ，２．８３ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（６５０μＬ，８．４８ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で３０分撹拌した。さらにトリフルオロ酢酸（８６．６μＬ，１．１３ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した後、溶液にピリジン（２．３ｍＬ，２９ｍｍｏｌ）および水（１２０μＬ）を順次加え、溶液を室温にて６０分撹拌した。その後、アセトニトリル（１４０ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、減圧乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび２量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を定量的に得た（８２７ｍｇ）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．１５９４．０６，Ｆｏｕｎｄ　１５９５．０７［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（８１２ｍｇ）と、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりに２’－ＯＭｅ－Ｃ－ＣＥ　ホスホロアミダイトを用いたこと以外は上記と同様にして、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび３量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（８９３ｍｇ、収率９４％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．２０７０．１７，Ｆｏｕｎｄ　２０７１．１９［Ｍ＋Ｈ］＋
　アルゴン雰囲気下、２００ｍＬの二口フラスコに上記で得られた固体（８８９ｍｇ）、脱水ジクロロメタン（１３ｍＬ）および脱水アセトニトリル（４．０ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、２’－Ｆ－Ａ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（７２９ｍｇ，８３３μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（１０７ｍｇ，８１９μｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で１０５分撹拌した。続いて、水（１７４μＬ，９．６３ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した後、溶液にピリジン（２００μＬ，２．４８ｍｍｏｌ）およびヨウ素（３１７ｍｇ，１．２５ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６０分撹拌した。さらにトリフェニルホスフィン（１０９ｍｇ，４１４μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した。その後、アセトニトリル（１３７ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、減圧乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび４量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（１０５２ｍｇ、収率９５％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２８６０．４１，Ｆｏｕｎｄ　２８６１．４２［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（９．８ｍｇ）および２８重量％アンモニア水（５ｍＬ）をオートクレーブに入れて、６５℃で４時間加熱した後、室温まで冷却した。シリンジフィルターにより反応液中の不溶物を除去した後、遠心エバポレーターで減圧濃縮し、ＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨの水溶液を得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１４９８．３９，Ｆｏｕｎｄ　１４９７．３７［Ｍ－Ｈ］－
実施例１６、実施例１７および比較例３の対比
　実施例１６、実施例１７および比較例３で得られた水溶液中のＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨ（以下「目的のオリゴヌクレオチド」と記載する）、および目的のオリゴヌクレオチドから２残基目または３残基目がそれぞれ欠損した３量体であるＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ－ＯＨまたはＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨ（以下「欠損体」と記載する）をＭＳ分析で測定した。ＭＳ分析は、観測された各化合物（目的のオリゴヌクレオチドおよび欠損体）の抽出イオンクロマトグラム（ＥＩＣ）を用いて、各化合物のピーク面積を算出し、下記式：
　欠損体量の割合（％）＝（各欠損体のピーク面積の合計／目的のオリゴヌクレオチドのピーク面積）×１００
により欠損体の割合を算出した。結果を表４に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000080
　表４の結果から明らかなように、酸化剤として、ヨウ素の代わりに化合物（Ｉｂ－１）または化合物（Ｉｃ－１）を使用することによって、欠損体の生成を抑制することができる。
実施例１８：酸化剤として化合物（Ｉｃ－１）を用いたＨＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの合成（芳香族アミンの添加有り）
　アルゴン雰囲気下、３Ｌの三つ口フラスコにＨＯ－Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（６．４ｇ，５．２ｍｍｏｌ）、Ｐｉｖ－ＴＯＢ（１３ｇ，１３ｍｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（３４９ｍＬ）および脱水アセトニトリル（９８ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（７．３ｇ，９．８ｍｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（１．３ｇ，９．８ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６５分撹拌した。さらに、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（３８５ｍｇ，５１７μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（６７．３ｍｇ，５１７μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した後、水（９３２μＬ，５１．７ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で４０分撹拌した。続いて、化合物（Ｉｃ－１）（３．５ｇ，１５ｍｍｏｌ）を加え、溶液を６０分撹拌した。溶液に、トリフェニルホスフィン（１．４ｇ，５．２ｍｍｏｌ）および芳香族アミンとして２，６－キシリジン（５．５ｍＬ，４５ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で３０分撹拌した。その後、２，３－ジメチルフラン（５．４ｍＬ，５２ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（１３．８ｍＬ，１８０ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で８０分撹拌した。続いて溶液にピリジン（４３．７ｍＬ，５４１ｍｍｏｌ）および水（２．５ｍＬ）を順次加え、溶液を室温にて９０分撹拌した。その後、アセトニトリルを添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび２量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（２１ｇ，収率９８％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１５９４．０６，Ｆｏｕｎｄ　１５９５．０７［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（２１ｇ）と、ｄＴ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりに２’－ＯＭｅ－Ｃ－ＣＥ　ホスホロアミダイトとを用いたこと以外は上記と同様にして、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび３量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を定量的に得た（２３ｇ）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２０７０．１７，Ｆｏｕｎｄ　２０７１．１９［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（２１ｇ）と、２’－ＯＭｅ－Ｃ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりに２’－Ｆ－Ａ－ＣＥ　ホスホロアミダイトとを用いたこと以外は上記と同様にして、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび４量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（２３ｇ、収率９９％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２５５８．２８，Ｆｏｕｎｄ　２５５９．２９［Ｍ＋Ｈ］＋
　また、芳香族アミンの添加の効果を確認するために、２，３－ジメチルフランを加える前の反応溶液から１．３ｍＬを引き抜いた溶液にアセトニトリル（９ｍＬ）を添加し、析出した固体をキリヤマ漏斗で吸引濾過した後、乾燥することでＰｉｖ－ＴＯＢおよび４量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（６９ｍｇ）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２８６０．４１，Ｆｏｕｎｄ　２８６１．４２［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られたＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（３．４ｍｇ）および２８重量％アンモニア水（５ｍＬ）をオートクレーブに入れて、６５℃で４時間加熱した後、室温まで冷却した。シリンジフィルターにより反応液中の不溶物を除去した後、遠心エバポレーターで減圧濃縮し、ＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨの水溶液を得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．１４９８．３９，Ｆｏｕｎｄ　１４９７．３７［Ｍ－Ｈ］－
実施例１７および実施例１８の対比
　実施例１７および実施例１８で得られた水溶液中のＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨ（以下「目的のオリゴヌクレオチド」と記載する）、および目的のオリゴヌクレオチドから２残基目または３残基目がそれぞれ欠損した３量体であるＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ｔ－ＯＨまたはＤＭＴｒＯ－Ａｆ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＯＨ（以下「欠損体」と記載する）をＭＳ分析で測定した。ＭＳ分析は、観測された各化合物（目的のオリゴヌクレオチドおよび欠損体）の抽出イオンクロマトグラム（ＥＩＣ）を用いて、各化合物のピーク面積を算出し、下記式：
　欠損体量の割合（％）＝（各欠損体のピーク面積の合計／目的のオリゴヌクレオチドのピーク面積）×１００
により欠損体の割合を算出した。結果を表５に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000081
　表５の結果から明らかなように、化合物（Ｉｃ－１）を用いる酸化工程後に、芳香族アミン（２，６－キシリジン）を添加することによって、欠損体の生成をさらに抑制することができる。
実施例１９：酸化剤として化合物（Ｉｂ－１）を用いたＨＯ－ Ｍｅ Ｃ（Ｏ）Ａ（Ｏ）Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの合成
　アルゴン雰囲気下、３０ｍＬの２口フラスコにＨＯ－Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（２５０ｍｇ，８８μｍｏｌ）、脱水ジクロロメタン（４．４ｍＬ）および脱水アセトニトリル（１．３ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後ｄＧ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（１４９ｍｇ，１７６μｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（２３ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で４５分撹拌した。その後、溶液に２，２，２－トリフルオロエタノール（３８μＬ，０．５３ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した。続いて、水（７０μＬ）および化合物（Ｉｂ－１）（５９ｍｇ，１８ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で６０分撹拌した。溶液の一部をサンプリングした後、溶液に２，３－ジメチルフラン（４６μＬ，０．８８ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸（１０２μＬ，１．３２ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で８０分撹拌した。続いて溶液にピリジン（３１９μＬ，３．９５ｍｍｏｌ）および水（１９μＬ）を順次加え、溶液を室温にて９０分撹拌した。その後、アセトニトリルを添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、３量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｏ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを得た（１１１ｍｇ）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２０６２．１５，Ｆｏｕｎｄ　２０６３．１６［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（１１１ｍｇ，３４μｍｏｌ）と、ｄＧ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりにｄＡ－ＣＥ　ホスホロアミダイトとを用いたこと以外は上記と同様にして、４量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ａ（Ｏ）Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを得た（１１３ｍｇ，収率９０％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．２４９７．３０，Ｆｏｕｎｄ　２４９８．３２［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（９９ｍｇ，２７μｍｏｌ）と、ｄＡ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりに５－Ｍｅ－ｄＣ（Ｂｚ）－ＣＥ　ホスホロアミダイトとを用いたこと以外は上記と同様にして、５量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－ＭｅＣ（Ｏ）Ａ（Ｏ）Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを得た（９３ｍｇ，収率８４％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．２９５７．４１，Ｆｏｕｎｄ　１４７９．７１［Ｍ＋２Ｈ］２＋
実施例２０：酸化剤として化合物（Ｉｂ－１）を用いたＨＯ－ Ｍｅ Ｃ（Ｏ）Ａ（Ｏ）Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢの合成（芳香族アミンの添加有り）
　酸化工程（即ち、溶液に化合物（Ｉｂ－１）を加え、溶液を室温で３０分間撹拌した工程）の後に、芳香族アミンとして２，６－キシリジン（化合物（Ｉｂ－１）１ｍｏｌに対して３ｍｏｌ）を溶液に加え、溶液を室温で３０分間撹拌する工程を追加したこと以外は実施例１９と同様にして、ＨＯ－ＭｅＣ（Ｏ）Ａ（Ｏ）Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢを得た（１２１ｍｇ）。
実施例１９および実施例２０の対比
　実施例１９および実施例２０で得られたＨＯ－ＭｅＣ（Ｏ）Ａ（Ｏ）Ｇ（Ｏ）Ｔ（Ｓ）Ｔ－ＳＵＣ－ＴＯＢをテトラヒドロフランに溶解させた後、ＤＢＵでリン酸エステル部分およびチオリン酸エステル部分に結合した保護基（２－シアノエチル基）を除去し、保護基を除去したオリゴヌクレオチド（以下「目的のオリゴヌクレオチド」と記載する）、および目的のオリゴヌクレオチドからＭｅＣ、ＡおよびＧのいずれかが欠損した、４量体であるオリゴヌクレオチド（以下「欠損体」と記載する）をＭＳ分析で測定した。ＭＳ分析は、観測された各化合物（目的のオリゴヌクレオチドおよび欠損体）の抽出イオンクロマトグラム（ＥＩＣ）を用いて、各化合物のピーク面積を算出し、下記式：
　欠損体の割合（％）＝（各欠損体のピーク面積の合計／目的のオリゴヌクレオチドのピーク面積）×１００
により欠損体の割合を算出した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000082
　表６の結果から明らかなように、化合物（Ｉｂ－１）を用いる酸化工程後に、芳香族アミン（２，６－キシリジン）を添加することによって、欠損体の生成をさらに抑制することができる。
実施例２１：２０量体であるオリゴヌクレオチド（ＤＭＴｒＯ－Ｕｍ（Ｏ）Ｃｍ（Ｏ）Ａｍ（Ｏ）Ａｍ（Ｏ）Ｇｍ（Ｓ）Ｇｍ（Ｓ）Ａｍ（Ｓ）Ａｍ（Ｓ）Ｇｍ（Ｓ）Ａｍ（Ｓ）Ｕｍ（Ｓ）Ｇｍ（Ｓ）Ｇｍ（Ｓ）Ｃｍ（Ｓ）Ａｍ（Ｓ）Ｕｍ（Ｓ）Ｕｍ（Ｓ）Ｕｍ（Ｓ）Ｃｍ（Ｓ）Ｕｍ－ＯＨ）（配列番号１）の固相合成
　前記配列の２０ｍｅｒ量体であるオリゴヌクレオチドをホスホロアミダイト法による固相合成で合成した（前記配列中、Ａｍは、２’－Ｏ－メチルアデノシン残基を示し、Ｃｍは、２’－Ｏ－メチルシチジン残基を示し、Ｇｍは、２’－Ｏ－メチルグアノシン残基を示し、Ｕｍは、２’－Ｏ－メチルウリジン残基を示し、（Ｏ）は、前記式（Ｐ３－１）で表されリン酸エステル結合を示し、および（Ｓ）は、前記式（Ｐ４－１）で表されるチオリン酸エステル結合を示す）。
　具体的には５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－メチルウリジンが４１μｍｏｌ／ｇで担持された多孔質ガラス（ＣＰＧ）固相担体（ChemGenes 社製）（固相担体の量：２４ｍｇ、５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－メチルウリジン量：１μｍｏｌ）をグラスフィルター付きのカラムに入れ、オリゴヌクレオチド合成機（商品名「ｎＳ－８」、ジーンデザイン社製）を使用し、３’側から５’側に向かって合成を行なった。ホスホロアミダイトとして、Ｎ６－ベンゾイル－５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－メチルアデノシンホスホロアミダイトとＮ４－アセチル－５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－メチルシチジンホスホロアミダイト、Ｎ２－イソブチリル－５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－メチルグアノシンホスホロアミダイト、５’－Ｏ－（４，４’－ジメトキシトリチル）－２’－Ｏ－メチルウリジンホスホロアミダイトのそれぞれのアセトニトリル溶液を、活性化剤として５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾールのアセトニトリル溶液を、硫化剤としてＤＤＴＴのピリジン溶液を、キャッピング試薬として１０重量％無水酢酸のＴＨＦ溶液および１－メチルイミダゾールおよびピリジンのＴＨＦ溶液の混合溶液を、脱トリチル試薬としてトリクロロ酢酸（ＴＣＡ）のジクロロメタン溶液を用いた。酸化剤として、（１）０．０１Ｍの化合物（Ｉｂ－１）のピリジン溶液、（２）０．１Ｍの化合物（Ｉｃ－１）のピリジン溶液、または（３）０．０２Ｍの化合物（Ｉｃ－１）のアセトニトリル溶液を用いた。
　合成したオリゴヌクレオチドの固相担体からの切り出しおよびその塩基部の脱保護のために、２８重量％アンモニア水およびエタノールの混合溶液（アンモニア水：エタノールの体積比＝３：１）を用いて、５５℃および１５時間、合成したオリゴヌクレオチドを処理した後、固相担体を濾別し、濾液を遠心濃縮機で減圧濃縮した。合成したオリゴヌクレオチドをＬＣ－ＭＳで分析を行い、分子量を測定した。その結果、酸化剤として化合物（Ｉｂ－１）または化合物（Ｉｃ－１）を用いる固相合成によって、目的のオリゴヌクレオチドを合成できたことが確認された。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．７２１５．８８，Ｆｏｕｎｄ　２４０４．４３［Ｍ－３Ｈ］３－
合成例９：２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１１））の合成
　アルゴン雰囲気下、１００ｍＬのフラスコに２－クロロキノリン－３－カルボン酸（２．５ｇ、１２ｍｍｏｌ）、および塩化チオニル（４０ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で１７時間撹拌した。塩化チオニルを減圧下で留去し、さらにトルエン（３０ｍＬ）を加え、得られた溶液を減圧濃縮し、再度トルエン（６０ｍＬ）を加え、得られた溶液を減圧下で乾燥し、固体を得た。得られた固体にＴＨＦ（１５ｍＬ）を加え、氷浴下でトリエチルアミン（２．５ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）とアニリン（１．３ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下した。得られた混合物を室温に昇温し、ＴＨＦ（２ｍＬ）およびトリエチルアミン（０．５ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）を加え、２．５時間撹拌した後、減圧下で溶媒を留去し、ジクロロメタン（５０ｍＬ）を加えた。得られた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で２回、飽和食塩水で1回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾過で除去した後、濾液を減圧下で乾燥して、固体を得た。
　前記固体に脱水ＤＭＦ（１０ｍＬ）を加えて、希釈液を調製した。また、アルゴン雰囲気下、１００ｍＬフラスコに脱水ＤＭＦ（２ｍＬ）、水酸化ナトリウム（０．４８ｇ、１２ｍｍｏｌ）、およびｔｅｒｔ－ブチルメルカプタン（１．４ｍＬ，１２ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下で撹拌し、得られた混合物に、前記希釈液を滴下した後、混合物を室温に昇温し、４時間撹拌した。その後、混合物に、氷浴下で水（１２０ｍＬ）をゆっくり滴下した。析出した固体を濾過により回収し、エタノール（４００ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で撹拌した後、混合物を室温まで冷却した。混合物から析出した固体を濾過によって回収し、得られた固体を減圧下で乾燥した（１．７ｇ）。また、濾液を減圧下で濃縮し、エタノール（４００ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で撹拌した後、水（２００ｍＬ）を滴下し、混合物を室温まで冷却した。混合物から析出した固体を濾過によって回収し、得られた固体を減圧下で乾燥した（０．８５ｇ）。得られた１．７ｇの固体と、０．８５ｇの固体とを混合し、このうちの２．０ｇの固体を次の工程に使用した。
　アルゴン雰囲気下、１００ｍＬフラスコに前記固体（２．０ｇ）およびジクロロメタン（１９ｍＬ）を加え、混合物を氷冷下で１５分間撹拌した。得られた混合物に、メタクロロ過安息香酸（１．５ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌して、有機層を調製した。得られた有機層に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）を加えて室温で３０分間撹拌した。析出固体を濾過で除去し、濾液の水層を除去した後、飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液（２０ｍL）および飽和食塩水（２０ｍL）で有機層を順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、濾過し、減圧濃縮した（１．３ｇ）。得られた濃縮液に、トルエン（７２ｍＬ）およびピリジン（７．２ｍＬ）を加え、混合物を１００℃に昇温し、２時間撹拌した。その後、混合物を室温に冷却し、析出した固体を濾過によって回収した後、得られた固体にエタノール（２００ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で撹拌した後、水（６７ｍＬ）を滴下し、混合物を室温まで冷却した。析出した固体を濾過によって回収した後、得られた固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチルの体積比＝２／１）にて精製した後、減圧濃縮した。得られた濃縮液にエタノールを加え、混合物を１００℃で撹拌した後、水を滴下し、混合物を室温まで冷却した。析出した固体を濾過によって回収した後し、減圧下で乾燥し、目的物を得た（１２１ｍｇ）。
1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.85 (s, 1H), 8.06 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.83 (ddd, J = 8.5, 6.8, 1.5 Hz, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 2H), 7.57 (ddd, J = 8.1, 7.0, 1.0 Hz, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 2H), 7.32 - 7.24 (m, 1H).
m/z: Calcd. 278.05, Found 279.06[M+H]+
合成例１０：２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１２））の合成
　２００ｍＬのフラスコに２－クロロ－５－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－カルボン酸（２．５ｇ、１１ｍｍｏｌ）および塩化チオニル（３７ｍＬ）を加え、混合物を８０℃で４時間撹拌した。塩化チオニルを減圧下で留去した後、トルエン（３０ｍＬ）を加え、得られた溶液を減圧下濃縮して、濃縮液を得た。
　前記濃縮液に脱水ＴＨＦ（５ｍＬ）を加えて、氷冷下で撹拌して、希釈液を調製した。前記希釈液に、トリエチルアミン（１．９ｍＬ，１３ｍｍｏｌ）、アニリン（１．２ｍＬ，１３ｍｍｏｌ）および脱水ＴＨＦ（１０ｍＬ）の溶液を加え、得られた混合物を室温に昇温し、２．５時間撹拌した。減圧下で溶媒を留去した後、得られた残渣にジクロロメタン（３０ｍＬ）および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、撹拌した。水層を除去した後、有機層を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）および飽和食塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で乾燥して、固体を得た（３．１ｇ）。
　前記固体に脱水ＤＭＦ（５ｍＬ）を加えて、希釈液を調製した。また、アルゴン雰囲気下、１００ｍＬフラスコに、脱水ＤＭＦ（２ｍＬ）、水酸化ナトリウム（０．４７ｇ、１２ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ－ブチルメルカプタン（１．３ｍＬ，１１ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下で撹拌し、得られた混合物に、前記希釈液を滴下した後、混合物を室温に昇温し、４時間撹拌した。その後、混合物に、氷冷下で水（７０ｍＬ）をゆっくり滴下した。析出した固体を濾過により回収し、エタノール（３０ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で撹拌した後、水（３０ｍＬ）を滴下し、混合物を室温まで冷却した。析出した固体を濾過によって回収し、得られた固体を減圧下で乾燥した。得られた固体にエタノール（３０ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で撹拌した後、水（３０ｍＬ）を滴下し、混合物を室温まで冷却した。析出した固体を濾過によって回収し、得られた固体を減圧下で乾燥した（３．４ｇ）。
　アルゴン雰囲気下、１００ｍＬフラスコに前記固体（３．４ｇ）およびジクロロメタン（３２ｍＬ）を加え、混合物を氷冷下で１５分間撹拌した。得られた混合物に、メタクロロ過安息香酸（２．５ｇ、１０ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌して、有機層を調製した。得られた有機層に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）を加えて室温で１時間撹拌し、水層を除去した後、飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）および飽和食塩水（５０ｍＬ）で有機層を順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後、濾過し、減圧濃縮した（３．４ｇ）。得られた濃縮液に、トルエン（１８６ｍＬ）およびピリジン（１９ｍＬ）を加え、混合物を１００℃に昇温し、１．５時間撹拌した。その後、混合物を室温に冷却し、減圧下で溶媒を除去した。得られた残渣に、エタノール（１６０ｍＬ）を加え、混合物を１００℃に昇温し、水（８０ｍＬ）をゆっくり滴下した。さらに混合物を、室温で1時間、氷冷下で１５分間撹拌し、析出した固体を濾過によって回収し減圧下で乾燥した。得られた固体に、エタノール（１２０ｍＬ）を加え、混合物を１００℃に昇温し、水（５０ｍＬ）をゆっくり滴下した。さらに混合物を、室温で1時間、氷冷下で１５分間撹拌し、析出した固体を濾過によって回収し、減圧下で乾燥し、目的物を得た（２．１ｇ）。
1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 9.08 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.75 - 7.67 (m, 2H), 7.59 - 7.49 (m, 2H), 7.46 - 7.37 (m, 1H).
m/z: Calcd. 296.02, Found 297.03[M+H]+
合成例１１：２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１３））の合成
　アルゴン雰囲気下、３００ｍＬのフラスコに２－クロロピリジン－３－アセトニトリル(５．０ｇ、３３ｍｍｏｌ）、および４ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（７５ｍＬ）を加え、混合物を１１０℃で１時間撹拌した。混合物を、室温まで冷却した後、１時間撹拌し、氷冷下で６ｍｏｌ／Ｌ塩酸（６０ｍＬ）をゆっくり滴下し、１時間撹拌した。析出した固体を濾過によって回収し、２－プロパノール（４０ｍＬ）で洗浄し、減圧下で乾燥した（５．６ｇ）。
　アルゴン雰囲気下、２００ｍＬのフラスコに前記固体および脱水ＴＨＦ（１０９ｍＬ）を加え、氷冷下で１５分間撹拌した。得られた混合物に、トリエチルアミン（９．２ｍＬ、６６ｍｍｏｌ）、アニリン（３．６ｍＬ、３９ｍｍｏｌ）、および１－エチル－３－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］カルボジイミド塩酸塩（９．４ｇ、４９ｍｍｏｌ）を順次加え、室温に昇温し、２時間撹拌した。混合物に酢酸エチル（１００ｍＬ）を加え、得られた有機層を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で３回、飽和食塩水（１００ｍＬ）で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾過で除去した後、濾液を減圧濃縮して、濃縮液を得た（８．１ｇ）。
　前記濃縮液に脱水ＤＭＦ（２０ｍＬ）を加えて、希釈液を調製した。また、アルゴン雰囲気下、３００ｍＬフラスコに脱水ＤＭＦ（２ｍＬ）、水酸化ナトリウム（２．６ｇ、６４ｍｍｏｌ）、およびｔｅｒｔ－ブチルメルカプタン（４．４ｍＬ，３９ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下で１０分間撹拌し、得られた混合物に、前記希釈液を滴下した後、混合物を１１０℃にて２３時間撹拌した。その後、混合物に、氷冷下で水（２６０ｍＬ）をゆっくり滴下した。混合物に、ジクロロメタンを加え、得られた有機層を、水で２回、飽和食塩水で１回洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾過で除去した後、濾液を減圧濃縮して、濃縮液を得た。得られた濃縮液を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチルの体積比＝１／１）で精製し、減圧下で濃縮して、濃縮液を得た。（１．４ｇ）。
　アルゴン雰囲気下、前記濃縮液にジクロロメタン（１６ｍＬ）を加え、混合物を氷冷下で１５分間撹拌した。得られた混合物に、メタクロロ過安息香酸（１．２ｇ、５．２ｍｍｏｌ）を加え、１時間撹拌して、有機層を調製した。得られた有機層に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１６ｍＬ）を加えて室温で３０分間撹拌し、水層を除去した後、飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）で有機層を洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後濾過し、減圧濃縮した（１．３ｇ）。得られた濃縮液に、トルエン（８５ｍＬ）およびピリジン（８．５ｍＬ）を加え、混合物を１００℃に昇温し、１時間撹拌した後、１２０℃に昇温し、４時間撹拌した。その後、混合物を室温に冷却し、減圧下で溶媒を留去した後、得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチルの体積比＝１／３）にて精製した後、減圧下で濃縮して、濃縮液を得た。得られた濃縮液に、エタノールを加え、１００℃に昇温し、水をゆっくり滴下した。混合物を室温に冷却した後、析出した固体を濾過によって回収し、目的物を得た（１４６ｍｇ）。
1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.82 - 8.71 (m, 1H), 8.28 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 1H), 7.17 - 7.07 (m, 2H), 4.00 (s, 2H).
m/z: Calcd. 242.05, Found 243.05[M+H]+
合成例１２：２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン（化合物（Ｉｃ－１５））の合成
　アルゴン雰囲気下、１００ｍＬのフラスコに２－クロロピリジン－３－カルボニルクロリド（５．０ｇ、２８ｍｍｏｌ）および脱水ＴＨＦ（１２ｍＬ）を加え、混合物を氷冷下で撹拌した。得られた混合物に、トリエチルアミン（４．８ｍＬ、３４ｍｍｏｌ）、２－アミノ－５－メチルピリジン（３．７ｇ、３４ｍｍｏｌ）および脱水ＴＨＦ（２８ｍＬ）の溶液を３０分間かけて滴下し、室温に昇温し２３時間撹拌した。減圧下で溶媒を留去した後、得られた残渣にジクロロメタン（５０ｍＬ）および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）を加え、撹拌した。水層を除去した後、有機層を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）および飽和食塩水（５０ｍＬ）で順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮して、濃縮液を得た（７．１ｇ）。
　前記濃縮液に脱水ＤＭＦ（２０ｍＬ）を加えて、希釈液を調製した。また、アルゴン雰囲気下、３００ｍＬフラスコに、脱水ＤＭＦ（４ｍＬ）、水酸化ナトリウム（１．３ｇ、３４ｍｍｏｌ）、およびｔｅｒｔ－ブチルメルカプタン（３．６ｍＬ，３２ｍｍｏｌ）を加え、氷冷下で撹拌し、得られた混合物に、前記希釈液を滴下した後、混合物を室温に昇温し、５時間撹拌した。その後、混合物に、氷冷下で水（２４０ｍＬ）を２５分間かけてゆっくり滴下した。析出した固体を濾過により回収し、エタノール（６０ｍＬ）を加え、混合物を１００℃で撹拌した後、水（６０ｍＬ）を滴下し、混合物を氷冷下で冷却した。析出した固体を濾過によって回収し、得られた固体を減圧下で乾燥した（５．４ｇ）。
　アルゴン雰囲気下、１００ｍＬフラスコに前記固体、およびジクロロメタン（６０ｍＬ）を加え、混合物を氷冷下で１５分間撹拌した。得られた混合物に、メタクロロ過安息香酸（４．７ｇ、２０ｍｍｏｌ）を加え、２時間撹拌して、有機層を調製した。得られた有機層に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）を加えて室温で１時間撹拌した後、析出した固体を濾過によって除去した。濾液の水層を除去した後、飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）および飽和食塩水（５０ｍＬ）で有機層を順次洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥後濾過し、減圧濃縮した（５．７ｇ）。得られた濃縮液に、トルエン（３５６ｍＬ）およびピリジン（３６ｍＬ）を加え、混合物を１００℃に昇温し、１時間撹拌した。その後、混合物を室温に冷却し、析出した固体を濾過によって除去した後、濾液の溶媒を減圧下を除去した。得られた残渣を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチルの体積比＝１／１）にて精製した後、減圧下で濃縮して、目的物を得た（１．３ｇ）。
1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8.82 (dd, J = 4.8, 1.7 Hz, 1H), 8.60 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.33 (dd, J = 7.9, 1.7 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.66 (dd, J = 8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 7.9, 4.7 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H).
m/z: Calcd. 243.05, Found 244.05[M+H]+
合成例１３：亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体の合成
　アルゴン雰囲気下、５００ｍＬのフラスコにＨＯ－ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（１５．１ｇ，１１．２ｍｍｏｌ）、Ｐｉｖ－ＴＯＢ（３０．１ｇ，３０．２ｍｍｏｌ）、脱水クロロホルム（５６２ｍＬ）および脱水アセトニトリル（１６９ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、モレキュラーシーブ３Ａ（１１．２ｇ）、ｄＧ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（１８．９ｇ，２２．５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（１．５ｇ，５．６ｍｍｏｌ）を加え、溶液を３０分撹拌した。続いて、５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（２．９ｇ，２２．５ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で６０分撹拌した。その後、溶液に２，２，２－トリフルオロエタノール（８．２ｍＬ、１１２ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した後、２，６－ジメチルアニリン（１０ｍＬ、８１ｍｍｏｌ）およびＰＯＳ（５．５ｇ、２８ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で溶液を１．０時間撹拌した。その後、２，３－ジメチルフラン（１１．８ｍＬ，０．１１ｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（２７．１ｍＬ，０．３５ｍｏｌ）、および２，６－ジメチルアニリン（４３６μＬ、３．５ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６０分撹拌した。さらにトリフルオロ酢酸（１．７ｍＬ，２２ｍｍｏｌ）および２，６－ジメチルアニリン（２８μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した。続いて溶液にピリジン（９１ｍＬ，１．１ｍｍｏｌ）および脱水メタノール（７．３ｍＬ）を順次加え、溶液を室温にて１２０分撹拌した。モレキュラーシーブ３Ａを濾過によって除去した後、アセトニトリル（４．７Ｌ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび２量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（５０ｇ、収率９９％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１８０８．１２，Ｆｏｕｎｄ　１８０９．１３［Ｍ＋Ｈ］＋
　上記で得られた固体（５０ｇ）と、脱水クロロホルムの代わりに脱水ジクロロメタンを、ｄＧ－ＣＥ　ホスホロアミダイトの代わりにｄＡ－ＣＥ　ホスホロアミダイトとを用いたこと以外は上記と同様にして、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび３量体であるオリゴヌクレオチドＨＯ－Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（５４．４ｇ、収率９９％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２２５９．２４，Ｆｏｕｎｄ　２２６０．２５［Ｍ＋Ｈ］＋
　アルゴン雰囲気下、２０ｍＬの二口フラスコに上記で得られた固体（３．０ｇ）、脱水ジクロロメタン（３０ｍＬ）および脱水アセトニトリル（９．１ｍＬ）を加え、溶液を調製した。その後、モレキュラーシーブ３Ａ（０．６ｇ）、ｄＧ－ＣＥ　ホスホロアミダイト（１．０ｇ，１．２ｍｍｏｌ）および５－エチルチオ－１Ｈ－テトラゾール（１６１ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）を順次加え、溶液を室温で６０分撹拌した。その後、溶液に２，２，２－トリフルオロエタノール（１９７μＬ、６．１ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分撹拌した。モレキュラーシーブ３Ａを濾過によって除去した後、アセトニトリル（１５２ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢと、４量体であるオリゴヌクレオチド前駆体ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た（３．３ｇ、収率９８％）。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　２９９７．５０，Ｆｏｕｎｄ　１４９９．７５［Ｍ＋２Ｈ］２＋
実施例２２～４１および比較例４：各種酸化剤を用いた酸化
　フラスコにＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢおよびＰｉｖ－ＴＯＢの混合物（１００ｍｇ：ＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢとして５２．８ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、並びに脱水ジクロロメタン（０．９ｍＬ）を加え、溶液を調製した。溶液にピリジン（０．１１ｍｍｏｌ）および水（８．８μＬ）を加えた後、下記表７～９に示す各種酸化剤（５３μｍｏｌ）を添加し、室温で３時間撹拌して酸化を行い、４量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢを合成した。その後、トリフェニルホスフィン（９．２ｍｇ，３５μｍｏｌ）を加え、溶液を室温で３０分撹拌した。その後、アセトニトリル（１２９ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引濾過で回収した後、減圧乾燥し、Ｐｉｖ－ＴＯＢおよび４量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢの混合物を得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．３０１３．４９，Ｆｏｕｎｄ　３０１４．５４［Ｍ＋Ｈ］＋
　なお、化合物（Ｉｂ－２）～化合物（Ｉｂ－５）および化合物（Ｉｂ－８）は、前述の合成例３～７で得られたものを使用した。
　化合物（Ｉｃ－１１）～化合物（Ｉｃ－１３）および化合物（Ｉｃ－１５）は、前述の合成例９～１２で得られたものを使用した。
　化合物（Ｉｃ－１）、化合物（Ｉｃ－２）、化合物（Ｉｃ－５）、化合物（Ｉｃ－１０）、化合物（Ｉｃ－１４）、化合物（Ｉｃ－１６）および化合物（Ｉｃ－１７）は、非特許文献２の Supporting Information に記載の方法によって合成したものを使用した。
　その他の酸化剤は、市販品を使用した。
実施例２２～４１および比較例４の対比（脱硫体の割合）
　以下のようにして、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド、およびチオリン酸エステル結合がリン酸エステル結合に転化して得られた副生成物（以下「脱硫体」と記載する）を分析し、脱硫体の割合を算出した。
　実施例２２～４１または比較例４で得られた固体（５ｍｇ）および２８重量％アンモニア水（５ｍＬ）をオートクレーブに入れて、６５℃で４時間加熱した後、室温まで冷却した。シリンジフィルターにより反応液中の不溶物を除去した後、遠心エバポレーターで減圧濃縮し、チオリン酸エステル結合を有するＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＯＨ（以下「目的のオリゴヌクレオチド」と記載する）の水溶液を得た。
ｍ／ｚ：Ｃａｌｃｄ．　１５４７．３７，Ｆｏｕｎｄ　１５４６．３４［Ｍ－Ｈ］－
　得られた目的のオリゴヌクレオチドおよび脱硫体を含む混合物を、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣ－ＭＳ）により分析した。観測された各化合物（目的のオリゴヌクレオチドおよび脱硫体）の抽出イオンクロマトグラム（ＥＩＣ）を用いて、各化合物のピーク面積を算出し、下記式：
　脱硫体の割合（％）＝（脱硫体のピーク面積／目的のオリゴヌクレオチドのピーク面積）×１００
により脱硫体の割合を算出した。結果を表７および８に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000083
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000084
　表７および８の結果から明らかなように、酸化剤として、ヨウ素の代わりに表７および８に示す化合物（Ｉｃ－１）等を使用することによって、脱硫体の生成を抑制することができる。
実施例２２～３２および比較例４の対比（欠損体の割合）
　前述の実施例２２～３２および比較例４の酸化までの操作を行い、４量体であるオリゴヌクレオチドＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｏ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（以下「酸化体」と記載する）を含む溶液を調製した。この溶液（１０μＬ）およびＤＤＴＴ（１ｍｇ）を１ｍＬバイアル瓶の中に入れ、テトラヒドロフラン（４５０μＬ）で希釈した後、ＤＢＵ（２０μＬ）を入れて、溶液を室温で３０秒間撹拌して、未反応のＤＭＴｒＯ－Ｇ（ＩＩＩ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢを硫化して、ＤＭＴｒＯ－Ｇ（Ｓ）Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ（以下「硫化体」と記載する）を合成して、酸化体および硫化体を含む試験液を調製した。得られた試験液のＭＳ分析を行い、観測された各化合物（目的のオリゴヌクレオチドである酸化体）および欠損体（ＨＯ－Ａ（Ｓ）Ｇ（Ｓ）ＭｅＣ－ＳＵＣ－ＴＯＢ））のアバンダンスを用いて、下記式：
　欠損体の割合（％）＝（欠損体のアバンダンス／酸化体のアバンダンス）×１００
により、欠損体の割合を算出した。結果を表９に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000085
　表９の結果から明らかなように、酸化剤として、ヨウ素の代わりに表９に示す化合物（Ｉｃ－１）等（但し、化合物（Ｉｃ－５）を除く）を使用することによって、欠損体の生成を抑制することができる。
　本発明製造方法によれば、ヨウ素を使用する場合に比べて、前述の欠損体または脱硫体の生成を抑制して、オリゴヌクレオチドを製造することができる。本発明の製造方法によって得られるオリゴヌクレオチドは、人体用または動物用の医薬品（ＲＮＡ、ＤＮＡ、オリゴ核酸医薬等）、機能性食品、特定保健用食品、食品、化成品、生体用や工業用の高分子材料等の各種用途に使用することができる。
　本願は、日本で出願された特願２０２１－２１１７５号を基礎としており、その内容は本願明細書に全て包含される。

Claims (28)

  1. 　亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体を、酸化剤によって酸化して、リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチドを製造する方法であって、
    　前記酸化剤が、式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
    ［式中、
    　Ｘ１は、単結合、硫黄原子、酸素原子、－Ｓ（＝Ｏ）２－または－Ｎ（－Ｒ３）－を示し、
    　Ｘ１が単結合である場合、Ｒ１は、ハロゲン原子を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　Ｘ１が硫黄原子または－Ｓ（＝Ｏ）２－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　Ｘ１が酸素原子である場合、Ｒ１およびＲ２は、それらが結合する硫黄原子および酸素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びに
    　Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、並びにＲ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成するか、またはＲ１およびＲ３は、それらが結合する窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びにＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。］
    で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）である方法。
  2. 　前記式（Ｉ）で表される化合物が、式（Ｉａ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
    ［式中、
    　Ｒ１ａは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　環Ａは、５または６員の不飽和複素環を示し、
    　Ｙ１ａは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－を示し、
    　ｍは、０～３の整数を示し、
    　ｍ個のＲ２ａは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
    　ｍが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ａは、環Ａと共に、置換されていてもよい縮合環を形成していてもよい。］
    で表される化合物、および／または式（Ｉｂ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
    ［式中、
    　Ｒ１ｂは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　環Ｂは、６員の芳香族炭化水素環、または５若しくは６員の芳香族複素環を示し、
    　ｎは、０～５の整数を示し、
    　ｎ個のＲ２ｂは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
    　ｎが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ｂは、環Ｂと共に、置換されていてもよい２環式の縮合芳香族複素環を形成していてもよい。］
    で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）
    である、請求項１に記載の方法。
  3. 　前記式（Ｉａ）で表される化合物が、式（Ｉｃ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
    ［式中、
    　Ｒ１ｃは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　Ｙ１ｃは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－を示し、
    　ｐは、０または１を示し、
    　Ｒ２ｃは、水素原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、
    　環Ｃは、６員の芳香族炭化水素環、６員の含窒素芳香族複素環、または窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環を示し、
    　ｑは、０～４の整数を示し、および
    　ｑ個のＲ３ｃは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示す。］
    で表される化合物である、請求項２に記載の方法。
  4. 　前記式（Ｉｃ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オンからなる群から選ばれる少なくとも一つである、請求項３に記載の方法。
  5. 　前記環Ｃが、６員の芳香族炭化水素環または６員の含窒素芳香族複素環である、請求項３に記載の方法。
  6. 　前記式（Ｉｃ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、および２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オンからなる群から選ばれる少なくとも一つである、請求項５に記載の方法。
  7. 　前記式（Ｉｂ）で表される化合物における式（ｒ１）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
    で表される基が、
    　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
    　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
    　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
    　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
    　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
    　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
    　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、
    　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
    　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
    　（１０）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～３個の置換基で置換されていてもよい２－イミダゾリル基
    である、請求項２～６のいずれか一項に記載の方法。
  8. 　前記式（Ｉｂ）で表される化合物が、２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）、４，４’－ジピリジルジスルフィド、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸、２，２’－ジチオビス（１Ｈ－イミダゾール）、および２，２’－ジチオビス（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール）からなる群から選ばれる少なくとも一つである、請求項７に記載の方法。
  9. 　前記酸化を水の存在下で行う、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
  10. 　亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体が、
    （１）ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドとの縮合によって得られた亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体、または
    （２）オリゴヌクレオチドと、ホスホロアミダイトとの縮合によって得られた亜リン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体
    である、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
  11. 　亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体が、亜リン酸エステル結合またはホスホン酸エステル結合に加えて、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
  12. 　ワンポット合成によってオリゴヌクレオチドを製造する方法であって、
    　前記ワンポット合成が、
    　非極性溶媒を含む溶液中で、疎水性保護基を有するヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ａ）と、水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されており、且つホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）とを縮合して、亜リン酸エステル結合および疎水性保護基を有し、且つ水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているオリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）を形成する工程（１）、
    　工程（１）後の溶液に、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）のクエンチ剤（ｉ）を添加して、前記ホスホロアミダイト化された、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド（ｂ）をクエンチする工程（２）、
    　工程（２）後の溶液に酸化剤を添加して、前記オリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）を酸化して、リン酸エステル結合および疎水性保護基を有し、且つ水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護されているオリゴヌクレオチド（ｄ）を形成する工程（３）、
    　工程（３）後の溶液に酸化剤のクエンチ剤（ｉｉ）を添加して、酸化剤をクエンチする工程（４）、
    　工程（４）後の溶液に酸を添加して、前記オリゴヌクレオチド（ｄ）の酸性条件下で除去可能な一時保護基を除去して、保護されていない水酸基および疎水性保護基を有するオリゴヌクレオチド（ｅ）を形成する工程（５）、並びに
    　前記オリゴヌクレオチド（ｅ）を含む溶液に極性溶媒を添加して、前記オリゴヌクレオチド（ｅ）を析出させる工程（７）
    を含み、並びに
    　前記酸化剤が、式（Ｉ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
    ［式中、
    　Ｘ１は、単結合、硫黄原子、酸素原子、－Ｓ（＝Ｏ）２－または－Ｎ（－Ｒ３）－を示し、
    　Ｘ１が単結合である場合、Ｒ１は、ハロゲン原子を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　Ｘ１が硫黄原子または－Ｓ（＝Ｏ）２－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、およびＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　Ｘ１が酸素原子である場合、Ｒ１およびＲ２は、それらが結合する硫黄原子および酸素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びに
    　Ｘ１が－Ｎ（－Ｒ３）－である場合、Ｒ１は、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、並びにＲ２およびＲ３は、それらが結合する硫黄原子および窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成するか、またはＲ１およびＲ３は、それらが結合する窒素原子と共に、置換されていてもよい複素環を形成し、並びにＲ２は、置換されていてもよいアリール基または置換されていてもよいヘテロアリール基を示す。］
    で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）である方法。
  13. 　前記式（Ｉ）で表される化合物が、式（Ｉａ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
    ［式中、
    　Ｒ１ａは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　環Ａは、５または６員の不飽和複素環を示し、
    　Ｙ１ａは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－を示し、
    　ｍは、０～３の整数を示し、
    　ｍ個のＲ２ａは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
    　ｍが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ａは、環Ａと共に、置換されていてもよい縮合環を形成していてもよい。］
    で表される化合物、および／または式（Ｉｂ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
    ［式中、
    　Ｒ１ｂは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　環Ｂは、６員の芳香族炭化水素環、または５若しくは６員の芳香族複素環を示し、
    　ｎは、０～５の整数を示し、
    　ｎ個のＲ２ｂは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、および
    　ｎが２以上の整数である場合、隣接する２個のＲ２ｂは、環Ｂと共に、置換されていてもよい２環式の縮合芳香族複素環を形成していてもよい。］
    で表される化合物（但し、２，２－ジピリジルジスルフィドを除く）
    である、請求項１２に記載の方法。
  14. 　前記式（Ｉａ）で表される化合物が、式（Ｉｃ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
    ［式中、
    　Ｒ１ｃは、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアリール基、または置換されていてもよいヘテロアリール基を示し、
    　Ｙ１ｃは、－Ｓ（＝Ｏ）－、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｓ）－を示し、
    　ｐは、０または１を示し、
    　Ｒ２ｃは、水素原子、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示し、
    　環Ｃは、６員の芳香族炭化水素環、６員の含窒素芳香族複素環、または窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環を示し、
    　ｑは、０～４の整数を示し、および
    　ｑ個のＲ３ｃは、それぞれ独立に、置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基、または電子求引性基を示す。］
    で表される化合物である、請求項１３に記載の方法。
  15. 　前記式（Ｉｃ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－フェニルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（４－メトキシフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、および２－（４－フルオロフェニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オンからなる群から選ばれる少なくとも一つである、請求項１４に記載の方法。
  16. 　前記環Ｃが、６員の芳香族炭化水素環または６員の含窒素芳香族複素環である、請求項１４に記載の方法。
  17. 　前記式（Ｉｃ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－イソプロピルイソチアゾロ［４，５－ｃ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－フェニル－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、２－（２，６－ジメチルフェニル）－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（２－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、５－ニトロ－２－（４－ピリジル）－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オン、および２－［１－メチル－１－（２－ピリジル）エチル］－５－ニトロ－１，２－ベンゾチアゾール－３（２Ｈ）－オンからなる群から選ばれる少なくとも一つである、請求項１６に記載の方法。
  18. 　前記式（Ｉｂ）で表される化合物における式（ｒ１）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
    で表される基が、
    　（１）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾチアゾリル基、
    　（２）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾイミダゾリル基、
    　（３）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ベンゾオキサゾリル基、
    　（４）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１または２個の置換基で置換されていてもよい５－（１，２，３－トリアゾリル）基、
    　（５）置換されていてもよいアルキル基および置換されていてもよいアリール基からなる群から選ばれる１個の置換基で置換されていてもよい１Ｈ－テトラゾール－５－イル基、
    　（６）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい（ピリジン－Ｎ－オキシド）－２－イル基、
    　（７）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい４－ピリジル基、
    　（８）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～４個の置換基で置換されていてもよい２－ピリジル基、
    　（９）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～５個の置換基で置換されていてもよいフェニル基、または
    　（１０）置換されていてもよいアルキル基、置換されていてもよいアルコキシ基および電子求引性基からなる群から選ばれる１～３個の置換基で置換されていてもよい２－イミダゾリル基
    である、請求項１３～１７のいずれか一項に記載の方法。
  19. 　前記式（Ｉｂ）で表される化合物が、２，２’－ジベンゾチアゾリルジスルフィド、２－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸、３－（２－ベンゾチアゾリルジチオ）プロパン酸、２，２’－ジベンゾイミダゾリルジスルフィド、２，２’－ジベンゾオキサゾリルジスルフィド、５，５’－ジ（１，２，３－トリアゾリル）ジスルフィド、５，５’－ジチオビス（１－フェニル－１Ｈ－テトラゾール）、２，２’－ジチオビス（ピリジン－Ｎ－オキシド）、４，４’－ジピリジルジスルフィド、３－（２－ピリジルジチオ）プロパン酸、２，２’－ジチオビス（１Ｈ－イミダゾール）、および２，２’－ジチオビス（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール）からなる群から選ばれる少なくとも一つである、請求項１８に記載の方法。
  20. 　前記クエンチ剤（ｉ）が水である、請求項１２～１９のいずれか一項に記載の方法。
  21. 　前記クエンチ剤（ｉｉ）が有機リン化合物である、請求項１２～２０のいずれか一項に記載の方法。
  22. 　有機リン化合物が、ホスフィン類、亜リン酸トリエステル、亜ホスフィン酸エステル、亜ホスホン酸ジエステルおよびホスフィン酸エステルからなる群から選ばれる少なくとも一つである、請求項２１に記載の方法。
  23. 　有機リン化合物がホスフィン類である、請求項２１に記載の方法。
  24. 　前記ワンポット合成が、工程（３）後の溶液に、芳香族アミン類を添加することをさらに含む、請求項１２～２３のいずれか一項に記載の方法。
  25. 　前記ワンポット合成が、工程（５）の後および工程（７）の前に、工程（５）後の溶液に塩基を添加する工程（６）をさらに含む、請求項１２～２４のいずれか一項に記載の方法。
  26. 　前記オリゴヌクレオチド前駆体（ｃ）が、亜リン酸エステル結合に加えて、チオリン酸エステル結合を有するオリゴヌクレオチド前駆体である、請求項１２～２５のいずれか一項に記載の方法。
  27. 　式（Ｉｎ）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
    ［式中、
    　（１）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は窒素原子を含有する１０員の２環式の縮合芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示すか、
    　（２）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、ｑ’は１を示し、およびＲ３ｎはＣ１－６パーフルオロアルキル基を示すか、
    　（３）Ｒ１ｎは置換されていてもよいフェニル基を示し、ｐ’は１を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示すか、または
    　（４）Ｒ１ｎは１個のＣ１－６アルキル基で置換されているピリジル基を示し、ｐ’は０を示し、環Ｃ”は６員の含窒素芳香族複素環を示し、およびｑ’は０を示す。］
    で表される化合物。
  28. 　前記式（Ｉｎ）で表される化合物が、２－フェニルイソチアゾロ［５，４－ｂ］キノリン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－５－トリフルオロメチルイソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オン、２－フェニル－２Ｈ－１，２－ベンゾチアジン－３（４Ｈ）－オン、または２－（４－メチル－２－ピリジニル）イソチアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－３（２Ｈ）－オンである請求項２７に記載の化合物。
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