WO2022039345A1 - 이소오카닌 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 - Google Patents

이소오카닌 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물 Download PDF

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inflammatory disease
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Definitions

  • the present invention relates to a composition for preventing, improving or treating inflammatory diseases comprising isookanin as an active ingredient. More specifically, prevention and improvement of inflammatory diseases such as atopic dermatitis, psoriasis, acne, edema, rosacea (erythema of the skin), sunburn, rheumatoid arthritis, osteoarthritis or inflammatory bowel disease containing isoocanin as an active ingredient or to a composition for treatment.
  • inflammatory diseases such as atopic dermatitis, psoriasis, acne, edema, rosacea (erythema of the skin), sunburn, rheumatoid arthritis, osteoarthritis or inflammatory bowel disease containing isoocanin as an active ingredient or to a composition for treatment.
  • Inflammation is a local protective reaction induced by injury or destruction of tissue, which acts to destroy, weaken, or mask both the injury-causing agent and the injured tissue.
  • Inflammation reaction occurs when cells or tissues are damaged or infected with various external infectious agents (bacteria, fungi, viruses, and various types of allergens), enzyme activation and inflammation appearing in relation to various inflammatory mediators and immune cells in local blood vessels and body fluids. It is accompanied by a series of complex physiological reactions such as mediator secretion, body fluid infiltration, cell migration, and tissue destruction, and external symptoms such as erythema, edema, fever, and pain.
  • various infectious agents bacteria, fungi, viruses, and various types of allergens
  • enzyme activation and inflammation appearing in relation to various inflammatory mediators and immune cells in local blood vessels and body fluids. It is accompanied by a series of complex physiological reactions such as mediator secretion, body fluid infiltration, cell migration, and tissue destruction, and external symptoms such as erythema, edema, fever
  • the inflammatory reaction removes external infectious agents and regenerates damaged tissues to restore the function of the living organism.
  • diseases within the joints such as rheumatoid arthritis, skin diseases such as psoriasis, and allergic inflammatory diseases such as bronchial asthma. Therefore, many efforts have been made to find and remove substances involved in the inflammatory response in the development of treatment methods for these diseases (Jongdae Ji et al., 2004).
  • prostaglandin As substances mediating inflammation, prostaglandin (PG), cytokines, chemokines, bradykinin, nitric oxide, histamine, complement, adhesion molecules, and the like are known. Among them, prostaglandin is involved in physiological or pathological changes in the body, such as inflammation, platelet aggregation, and neurotransmitter release. PGE 2 is the most well-known and well-studied prostaglandin, which mediates vasodilation, edema, fever, and pain (Aoki et al , 2012). In addition, PGE 2 is involved in tissue damage by inducing the production of matrix metalloproteinases (MMPs) in inflammatory diseases such as periodontitis . It plays an important role in the mechanism of inflammation and tissue destruction in arthritis (Bingham et al ., 2002).
  • MMPs matrix metalloproteinases
  • COX cyclooxygenase
  • PG cyclooxygenase
  • COX-1 is continuously expressed and is responsible for physiological functions such as platelet aggregation, gastric mucosa protection, and renal function regulation
  • COX-2 is expressed by stimuli such as inflammation. Therefore, COX is known to play a therapeutic role in the treatment of pain, fever and inflammation as a target of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs).
  • NSAIDs nonsteroidal anti-inflammatory drugs
  • COX-2 under normal conditions is known to mediate various physiological phenomena such as immune responses, but it is reported that abnormal overexpression or overactivation of COX-2 is closely related to the invention and development of various diseases.
  • NSAIDs are widely used for the treatment of various types of acute and chronic inflammatory diseases.
  • ulcers have been reported in 25% of patients who have taken NSAIDs for a long time, and NSAID-related gastrointestinal side effects have become an important issue.
  • Both the anti-inflammatory efficacy and side effects of NSAIDs on the gastrointestinal tract are caused by the inhibition of cyclooxygenase (COX). Therefore, the discovery of new COX-2 inhibitors is a way to solve the side effects of NSAIDs in the treatment of inflammatory diseases.
  • COX cyclooxygenase
  • Angiogenesis is a process in which new capillaries are formed from existing microvessels. In adults, vascular endothelial cells grow very slowly and do not divide relatively well compared to other types of cells. In general, the process of angiogenesis is the decomposition of the vascular basement membrane due to protease by the stimulation of angiogenesis promoters, the migration and proliferation of vascular endothelial cells, and the formation of a lumen by vascular endothelial cell differentiation. made by creating However, there are diseases caused by the pathological growth of angiogenesis not being controlled autonomously.
  • Diseases related to angiogenesis appearing in pathological conditions include hemangioma, angiofibroma, vascular malformation, and cardiovascular diseases such as arteriosclerosis, vascular adhesion, and edematous sclerosis.
  • cardiovascular diseases such as arteriosclerosis, vascular adhesion, and edematous sclerosis.
  • arteriosclerosis vascular adhesion
  • edematous sclerosis There are glaucoma, diabetic retinopathy, corneal disease caused by neovascularization, macular degeneration, pterygium, retinal degeneration, retrocapsular fibroplasia, granular conjunctivitis, and the like.
  • angiogenesis is also the cause of many eye diseases that cause blindness in millions of people worldwide each year (Witmer et al . 2003). Since angiogenesis inhibitors can be applied as therapeutic agents for these various angiogenesis-related diseases, recently, studies to treat these diseases by inhibiting angiogenesis have been actively conducted.
  • Rosacea a skin disease caused by inflammatory angiogenesis, is a common chronic inflammatory skin disease characterized by erythema, papules, telangiectasia, edema, pustules, or a combination of these symptoms.
  • immune system dysregulation which appears in many skin inflammatory diseases such as atopic dermatitis and chronic urticaria, was found, and cathelicidin and the main serine protease that plays a role in converting it into an activated form were found.
  • the baseline expression level of phosphorus kallikrein 5 is increased.
  • TLR-2 Toll like receptor-2
  • cytokines and chemokines When activated by external stimuli or triggers, it is known to induce an inflammatory response through the production of pro-inflammatory cytokines and chemokines, and increase the expression of kallikrein-5, an epidermal protease.
  • kallikrein-5 an epidermal protease.
  • cathelicidin or kallikrein 5 increases due to external changes or abnormalities in the internal immune system, and cathelicidin is converted into an active peptide such as LL-37 by kallikrein 5, leading to inflammation, angiogenesis, and capillary expansion.
  • TLR2 Toll-like receptor 2
  • Janus kinase is known as an enzyme that commands a protein that plays a central role in the regulation of immunity and inflammation, and is divided into four types: JAK1, JAK2, JAK3 and TYK2.
  • JAK1 phosphorylates the tyrosine residue of the cytokine receptor and binds to the cytoplasmic gene regulatory protein, STAT.
  • STAT is phosphorylated by JAK and activated. Activated STATs are dissociated from the receptor to form dimers and then migrate to the nucleus to promote the expression of specific genes.
  • JAK inhibitors are known to improve autoimmune diseases, allergic diseases and chronic inflammatory diseases by inhibiting the action of JAK, which plays an important role in intracellular immune activation signaling, and suppressing the overactivation of the immune response, atopic dermatitis, vitiligo , hair loss, rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus, psoriasis, asthma, and inflammatory bowel disease.
  • Selective JAK inhibitors developed to target JAK include Abbvie's Upadacitinib (JAK1 inhibitor, oral), Lilly's Baricitinib (JAK1/2 inhibitor, oral), Pfizer's Abrocitinib (JAK1 inhibitor, oral), and Tofacitinib (Pan JAK inhibitor, Oral). ), Incyte/Pfizer’s Ruxolitinib (JAK1/2 inhibitor, topical), and Japan Tobacco Industry’s Delgocitinib (Pan JAK inhibitor, oral or topical), etc. Ruxolitinib and Tofacitinib are FDA-approved.
  • isookanin is a plant-derived compound, such as reports that it is isolated as a flavonoid component in the Asteraceae . It has been reported that an isookanin derivative (isookanin 7-O-glucoside) isolated from Asteraceae has antioxidant activity (Wolniak et al ., 2007) and amylase inhibitory activity (Yang et al ., 2012). However, it has not yet been revealed about the improvement of arthritis, ophthalmic disease, cancer disease, colitis, atopic dermatitis, hot flushes, rosacea, etc. through isoocanine inflammation and angiogenesis inhibition.
  • isoookanin is effective for the improvement of chronic inflammatory diseases, immune diseases, and neovascularization-related diseases, as well as excellent human safety due to no skin irritation and cytotoxicity.
  • One object of the present invention is to provide a composition for preventing, improving, or treating an inflammatory disease comprising isookanin or a salt thereof as an active ingredient.
  • One specific object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating inflammatory diseases comprising isookanin or a salt thereof as an active ingredient.
  • Another specific object of the present invention is to provide a composition for external application for skin for preventing or improving inflammatory diseases comprising isookanin or a salt thereof as an active ingredient.
  • Another specific object of the present invention is to provide a quasi-drug composition for preventing or improving inflammatory diseases comprising isookanin or a salt thereof as an active ingredient.
  • Another specific object of the present invention is to provide a cosmetic composition for preventing or improving inflammatory diseases comprising isookanin or a salt thereof as an active ingredient.
  • Another specific object of the present invention is to provide a food composition for preventing or improving inflammatory diseases comprising isookanin or a salt thereof as an active ingredient.
  • Another object of the present invention is to prevent, treat, or improve an inflammatory disease of an individual by administering a composition for preventing, improving, or treating an inflammatory disease comprising isookanin or a salt thereof as an active ingredient to provide a way to
  • the present invention provides a composition for preventing, improving, or treating an inflammatory disease comprising isookanin or a salt thereof as an active ingredient.
  • isookanin is a compound (C 15 H 12 O 6 ) having a structure of the following formula (1).
  • the salt may be in the form of a pharmaceutically, cosmetic, and/or food acceptable salt or a form that becomes isoocanin in the body (eg, a prodrug).
  • Such salts include acid addition salts formed with free acids or metal salts formed with bases that are pharmaceutically, cosmetically and/or food acceptable.
  • the free acid may be an inorganic acid or an organic acid. Examples of the inorganic acid include hydrochloric acid, sulfuric acid, hydrobromic acid, sulfurous acid or phosphoric acid. Examples of the organic acid may include citric acid, acetic acid, maleic acid, humic acid, gluconic acid, methanesulfonic acid, and the like.
  • the metal salt includes an alkali metal salt or an alkaline earth metal salt, and sodium, potassium or calcium salt may be usefully used.
  • the isoocanin or a salt thereof of the present invention may be extracted and separated from a natural source, chemically synthesized, or synthesized by microorganisms.
  • the natural sources include, but are not necessarily limited to, Asteraceae ( Coreopsis tinctoria Nutt.) and genus Bidens , Albizzia julibrissin DURAZZ . ), etc.
  • isoocanin or a salt thereof of the present invention inhibits the activity of Janus kinase, an immunomodulatory factor, thereby inhibiting the activation of STAT, a cytoplasmic gene regulatory protein, which is induced by activated STAT. It is possible to prevent, improve and treat inflammatory diseases by effectively suppressing the inflammatory response caused by an excessive immune response.
  • the isoocanin or a salt thereof of the present invention is useful as an inhibitor of the activity of Janus kinase.
  • isoocanin or a salt thereof of the present invention inhibits the activation of Toll like receptor-2 (TLR-2) signaling, and cyclooxygenase-2 (COX-2)
  • TLR-2 Toll like receptor-2
  • COX-2 cyclooxygenase-2
  • oroocanin or a salt thereof of the present invention is useful as a TLR-2 activity inhibitor, a COX-2 activity inhibitor, a prostaglandin activity inhibitor, and a kallikrein-5 activity inhibitor.
  • isoocanin or a salt thereof of the present invention is useful for the prevention, improvement, and treatment of inflammatory diseases caused by excessive inflammatory reactions caused by external or internal causes.
  • inflammation is a local protective reaction induced by injury or destruction of tissue, which acts to destroy, weaken, or mask both the injury-causing substance and the injured tissue.
  • the "inflammatory disease” is a disease with inflammation as the main lesion, and is not necessarily limited thereto, but includes gastrointestinal inflammatory diseases, skin inflammatory diseases, respiratory inflammatory diseases, inflammatory diseases of the eyes, autoimmune diseases, etc. .
  • the gastrointestinal inflammatory disease is inflammatory bowel disease, ulcerative colitis (colitis, pancolitis, ulcerative proctitis and left-sided colitis), Crohn's disease, collagenous colitis, lymphocytic colitis, Behcet's disease, various gastrointestinal inflammatory diseases including, but not limited to, celiac disease, immune checkpoint inhibitor induced colitis, ileitis, eosinophilic esophagitis, graft-versus-host disease-associated colitis and infectious colitis.
  • the skin inflammatory disease is atopic dermatitis, alopecia areata, vitiligo, psoriasis, acne, edema, hot flushes, rosacea, skin erythema, sunburn, dermatomyositis, skin T-cell lymphoma and subtypes (Sezary syndrome), bacteria Common sarcoma, Paged's disease reticulum, granulomatous skin, lymphomaniform papules, chronic pityriasis lichen, acute peptic lichen lichenoidus, CD30+ cutaneous T-cell lymphoma, secondary cutaneous CD30+ large-cell lymphoma, non-mycosis fungoides CD30-skin large T-cell lymphoma, multiforme T-cell lymphoma, Lennard's lymphoma, subcutaneous T-cell lymphoma, angiocentral lymphoma, blast NK-cell lymphoma), papillae no
  • Pemphigus pseudopoems cutaneous manifestations of graft-versus-host disease, pemphigus pseudopoems, discoid lupus, granuloma annulus, lichen simplex chronic, vulvar/scrotal/perianal pruritus, lichen scleroderma, postherpetic neuralgia pruritus, lichen planus folliculitis and solitary folliculitis. It may include a number of skin inflammatory or pruritus diseases, including but not limited to.
  • the respiratory inflammatory disease is asthma, chronic obstructive pulmonary disease, cystic fibrosis, pneumonia, chronic obstructive pulmonary disease (COPD), cystic fibrosis (CF), pneumonia, interstitial lung disease (including idiopathic pulmonary fibrosis), acute lung injury, Acute respiratory distress syndrome, bronchitis, emphysema, bronchiolitis obliterans, bronchiolitis obliterans organitis (also known as COS), primary graft disorder (PGD), organoleptic pneumonia (OP), acute rejection (AR), lymphocytic bronchiolitis (LB). , chronic lung allograft disorder (CLAD), restrictive CLAD (rCLAD or RAS), neutrophil allograft disorder, allergic rhinitis or a number of respiratory related inflammatory diseases including but not limited to sarcoids.
  • COS chronic respiratory distress syndrome
  • bronchitis emphysema
  • bronchiolitis obliterans
  • the inflammatory disease of the eye includes, but is not limited to, uveitis, diabetic retinopathy, diabetic macular edema, dry eye, age-related macular degeneration, retinal vein occlusion (RVO) and atopic keratoconjunctivitis.
  • uveitis diabetic retinopathy, diabetic macular edema, dry eye, age-related macular degeneration, retinal vein occlusion (RVO) and atopic keratoconjunctivitis.
  • the autoimmune diseases and the like include other inflammatory diseases, autoimmune diseases or cancers, examples of which include arthritis, rheumatoid arthritis, juvenile rheumatoid arthritis, transplant rejection, dry eye, psoriatic arthritis, diabetes, insulin dependent diabetes mellitus, exercise Neurological disease, myelodysplastic syndrome, pain, sarcopenia, cachexia, septic shock, systemic lupus erythematosus, leukemia, chronic lymphocytic leukemia, chronic myelogenous leukemia, acute lymphocytic leukemia, acute myeloid leukemia, ankylosing spondylitis, myelofibrosis, B- Cell lymphoma, hepatocellular carcinoma, Hodgkin's disease, breast cancer, multiple myeloma, melanoma, non-Hodgkin's lymphoma, non-small cell lung cancer, ovarian clear cell carcinoma, ovarian tumor, pancreatic tumor, polypsys
  • composition comprising isoocanin or a salt thereof according to the present invention is the same as the above-mentioned gastrointestinal inflammatory disease, skin inflammatory disease, respiratory inflammatory disease, inflammatory disease of the eye, autoimmune disease, etc. that affect the prevention, improvement, or treatment It can be used in combination with one or more active agents that act by a mechanism or a different mechanism.
  • Such active agents may be, for example, aminosalicylates, steroids, histamine H1 receptor antagonists, histamine H4 receptor antagonists, calcineurin inhibitors, systemic immunosuppressants, anti-TNF ⁇ antibodies, TNF alpha ligand inhibitors, TNF binding agents, anti-VLA-4 Antibody, anti-integrin ⁇ 4 ⁇ 7 antibody, anti-bacterial agent, glucocorticoid agonist, nuclear factor kappa B inhibitor, 5-lipoxygenase inhibitor, integrin alpha-4/beta-7 antagonist, cyclooxygenase inhibitor, IL-2 antagonist , IL-4 antagonist, IL-5 antagonist, IL-10 antagonist, IL-12 antagonist, IL-13 antagonist, IL-17 antagonist, IL-23 antagonist, leukotriene BLT receptor antagonist, IL-6 antagonist, IL-8 antagonist , integrin antagonists, IL-4 receptor modulators, nicotine acetylcholine receptor agonists, PPAR gamma agonists, sphingo
  • aminosalicylates include, but are not limited to, mesalamine, osalazine and sulfasalazine.
  • steroids include, but are not limited to, prednisone, prednisolone, hydrocortisone, budesonide, beclomethasone and fluticasone.
  • Systemic immunosuppressants useful for the treatment of the inflammatory disorders include, but are not limited to, cyclosporine, azathioprine, methotrexate, 6-mercaptopurine, and tacrolimus.
  • anti-TNF ⁇ antibodies including but not limited to infliximab, adalimumab, golimumab, and certolizumab
  • Useful compounds that act by different mechanisms include anti-VLA-4 antibodies such as natalizumab, anti-integrin ⁇ 4 ⁇ 7 antibodies such as vedolizumab, anti-bacterial agents such as rifaximin, and anti-diarrheal drugs such as loperamide.
  • the content of the isookanin or its salt is less than 0.0001% by weight, the prevention, improvement, and therapeutic effect of inflammatory diseases cannot be expected, and when it exceeds 70.0% by weight, improvement of symptoms according to inflammatory diseases according to the increase in the content The effect is insignificant and difficulties arise in preparing the formulation.
  • the composition of the present invention is provided as a pharmaceutical composition for preventing or treating inflammatory diseases.
  • the isoocanin or a salt thereof, and an inflammatory disease for example, a gastrointestinal inflammatory disease, a skin inflammatory disease, a respiratory inflammatory disease, an inflammatory disease of the eye, or an autoimmune disease, etc. preventive or therapeutic effects are the same as described above.
  • prevention in the present invention refers to any action that inhibits or delays the onset of an inflammatory disease by administration of the pharmaceutical composition according to the present invention, and “treatment” refers to the suspicion and It means any action that improves or beneficially changes the symptoms of the affected individual.
  • the prevention or treatment of the inflammatory disease is by inhibiting the activity of Janus kinase by the isoocanin, thereby inhibiting the activation of STAT, a cytoplasmic gene regulatory protein, excessive immune response induced by activated STAT.
  • Inhibits inflammation caused by It may be achieved by inhibiting angiogenesis induced by prostaglandins and inhibiting the activation of the peptide LL-37 by inhibiting the activity of the epidermal protease kallikrein-5.
  • the term "pharmaceutical composition” refers to one prepared for the purpose of preventing or treating a disease, and each may be formulated in various forms according to a conventional method and used. For example, it can be formulated in oral dosage forms such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, and aerosols, and diluents or excipients such as lubricants, wetting agents, flavoring agents, emulsifying agents, suspending agents, preservatives, surfactants, etc.
  • composition of the present invention may be used by a method such as direct application or dispersal to a skin lesion of a skin inflammatory disease.
  • the composition of the present invention is not limited to the above site and may be applied to any site where an inflammatory disease has occurred.
  • each formulation it can be prepared by further including a carrier known in the art, such as a pharmaceutically acceptable carrier, such as a buffer, an analgesic agent, a solubilizer, an isotonic agent, a stabilizer, a base, and the like.
  • a pharmaceutically acceptable carrier such as a buffer, an analgesic agent, a solubilizer, an isotonic agent, a stabilizer, a base, and the like.
  • the term "pharmaceutically acceptable carrier” may refer to a carrier or diluent that does not inhibit the biological activity and properties of the injected active ingredient without stimulating the organism.
  • the type of carrier usable in the present invention is not particularly limited, and any carrier commonly used in the art and pharmaceutically acceptable may be used.
  • Non-limiting examples of the carrier include saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, albumin injection solution, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol, and the like. These may be used alone or in mixture of two or more.
  • the carrier may be a non-naturally occurring carrier.
  • the composition of the present invention can be administered in a pharmaceutically effective amount.
  • the pharmaceutically effective amount means an amount sufficient to treat a disease with a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment and not to cause side effects, and the effective dose level is determined by the patient's health condition, disease type, severity, The activity of the drug, the sensitivity to the drug, the administration method, administration time, administration route and excretion rate, treatment period, factors including drugs used in combination or concurrently, and other factors well known in the medical field may be determined according to factors. Specifically, it is generally 0.001 mg to 300 mg per 1 kg of body weight of the administered subject, and may be administered in divided doses once or several times a day at regular time intervals according to the judgment of a doctor or pharmacist, but is not limited thereto.
  • composition of the present invention may be used alone or in combination with other active pharmaceutically active compounds exhibiting an effect of preventing or ameliorating an inflammatory disease or forming an appropriate group.
  • active pharmaceutically active compounds exhibiting an effect of preventing or ameliorating an inflammatory disease or forming an appropriate group.
  • Such an example is as described above.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or may be administered in combination with other therapeutic agents, and may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents. and may be administered single or multiple. Taking all of the above factors into consideration, it is important to administer an amount that can obtain the maximum effect with a minimum amount without causing side effects, and can be easily determined by those skilled in the art.
  • the term "administration” means introducing the pharmaceutical composition of the present invention to an individual by any suitable method, and the administration route of the composition of the present invention is oral or parenteral as long as it can reach the target tissue. It can be administered through
  • the method of administration of the pharmaceutical composition according to the present invention is not particularly limited, and may follow a method commonly used in the art.
  • the composition may be administered by oral administration or parenteral administration.
  • the composition of the present invention may be used by a method such as direct application or dispersion to a skin lesion of a skin inflammatory disease.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be prepared in various dosage forms depending on the desired administration method.
  • the administration frequency of the composition of the present invention is not particularly limited thereto, but may be administered once a day or administered several times by dividing the dose.
  • the present invention provides a method for preventing or treating an inflammatory disease comprising administering to an individual a pharmaceutical composition comprising isoocanine or a salt thereof.
  • the isoocanin or a salt thereof, and the prevention and treatment effects of inflammatory diseases are the same as described above.
  • the term “individual” may refer to any animal, including humans, that has or is likely to develop an inflammatory disease.
  • the animal may be a mammal, such as a cow, a horse, a sheep, a pig, a goat, a camel, an antelope, a dog, or a cat, in need of treatment for symptoms similar to those of a human as well as humans, but is not limited thereto.
  • the prevention or treatment method of the present invention may include administering the composition in a pharmaceutically effective amount to an individual who has or is at risk of developing an inflammatory disease.
  • the method of administration is the same as described above.
  • the prevention may refer to any action of inhibiting or delaying the onset of an inflammatory disease by administering the composition for prevention, improvement, or treatment of an inflammatory disease according to the present invention to an individual.
  • the treatment may refer to any action of administering the composition of the present invention to a subject suspected of having an inflammatory disease so that the symptoms of the inflammatory disease are improved or beneficial.
  • the pharmaceutical composition comprising the isoocanin or a salt thereof is the same as described above.
  • the composition of the present invention may include a pharmaceutically acceptable carrier, excipient or diluent in addition to the active ingredients described above.
  • the carrier, excipient and diluent include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia gum, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrup, methyl cellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil.
  • a suitable dosage of the composition of the present invention may vary depending on the patient's condition and weight, the degree of disease, drug form, and time, but may be appropriately selected by those skilled in the art. Specifically, the dosage of isoocanin or a salt thereof may be 0.001 to 300 mg/Kg. In addition, in the case of an external preparation, it is recommended to apply it once to 5 times a day in an amount of 1.0 to 3.0 ml based on an adult and continue it for at least 1 month. However, the dosage does not limit the scope of the present invention.
  • the composition of the present invention is provided as a cosmetic composition for preventing or improving skin inflammatory diseases.
  • the isoocanin or its salt, and the prevention or improvement of inflammatory diseases, particularly skin inflammatory diseases, are the same as those described above.
  • the term “improvement” refers to any action in which the symptoms of an inflammatory disease suspect and affected individual are improved or beneficially changed by the prevention, improvement, or administration of the composition for treatment of the inflammatory disease. That is, the “improvement” refers to suppression, alleviation, or elimination of an inflammatory disease caused by an increase in the expression and activity of the epidermal protease kallikrein-5 or an immune overreaction or prostaglandin in an individual.
  • the prevention or improvement of the skin inflammatory disease is an immune response induced by the activated STAT by inhibiting the activity of Janus kinase by the isoocanin to inhibit the activation of STAT, a cytoplasmic gene regulatory protein. Inhibits inflammation caused by excess and/or inhibits the activation of Toll like receptor-2 (TLR-2) signaling, and inhibits the expression and activity of cyclooxygenase-2, an enzyme that produces prostaglandins This may be achieved by inhibiting angiogenesis induced by prostaglandins and inhibiting the activation of the peptide LL-37 by inhibiting the activity of the epidermal protease kallikrein-5.
  • TLR-2 Toll like receptor-2
  • Isookanin or a salt thereof according to the present invention comprises 0.0001 to 70.0% by weight, preferably 0.001 to 68.0% by weight, based on the weight of the total cosmetic composition.
  • skin inflammatory diseases such as atopic dermatitis, alopecia areata, vitiligo, psoriasis, acne, edema, hot flushes, rosacea, skin erythema, sunburn , dermatomyositis, cutaneous T-cell lymphoma and subtypes (Sezary syndrome, mycosis fungoides, Paged's disease reticulosis, granulomatous flaccid skin, lymphomapous papulosis, chronic pityriasis lichenus, acute peptic lichen lichenaceae, CD30+ cutaneous T-cell lymphoma, secondary cutaneous CD30+ large cell lymphom
  • the cosmetic composition may additionally include ingredients commonly used in cosmetic compositions in addition to the isookanin or a salt thereof as an active ingredient.
  • it may contain conventional adjuvants and carriers such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and fragrances.
  • the cosmetic composition may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art.
  • it can be formulated as a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation or spray, and the like.
  • it may be prepared in the form of a nourishing cream, astringent lotion, softening lotion, lotion, essence, nutrition gel or massage cream.
  • astringent lotion astringent lotion
  • softening lotion lotion, essence, nutrition gel or massage cream.
  • it is not particularly limited thereto.
  • the formulation of the cosmetic composition is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tragacanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide, etc. can be used
  • lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in particular, in the case of a spray, additional chlorofluorohydrocarbon, propellants such as propane/butane or dimethyl ether.
  • a solvent, solubilizer or emulsifier may be used as a carrier component.
  • a solvent, solubilizer or emulsifier may be used as a carrier component.
  • water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1,3-butylglycol oil, glycerol aliphatic esters, fatty acid esters of polyethylene glycol or sorbitan may be used. there is.
  • the formulation of the cosmetic composition is a suspension
  • a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol
  • a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester, and polyoxyethylene sorbitan ester
  • Crystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracanth may be used.
  • the formulation of the cosmetic composition is surfactant-containing cleansing
  • Amide ether sulfates, alkylamidobetaines, fatty alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters can be used.
  • the cosmetic composition is a soap, a surfactant-containing cleansing formulation, or a surfactant-free cleansing formulation
  • the soap is liquid soap, powder soap, solid soap, and oil soap
  • the surfactant-containing cleansing formulation is a cleansing foam, cleansing water, cleansing towel, and cleansing pack
  • the surfactant-free cleansing formulation is a cleansing cream , cleansing lotion, cleansing water, and cleansing gel, but not limited thereto.
  • composition of the present invention is provided as a composition for external application to the skin for preventing or improving inflammatory diseases.
  • the isoocanin or its salt, and the prevention or improvement of inflammatory diseases are the same as described above.
  • composition for external application for skin may be formulated containing a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base.
  • a cosmetically or dermatologically acceptable medium or base for example, solutions, gels, solids, kneaded dry products, emulsions obtained by dispersing the oily phase in an aqueous phase, suspensions, microemulsions, microcapsules, microgranules or, ionic (liposomes) and It may be provided in the form of a non-ionic vesicular dispersant, or in the form of a cream, skin, lotion, powder, ointment, spray, pack or concealer stick. It can also be used in the form of a foam or in the form of an aerosol composition further containing a compressed propellant.
  • These compositions can be prepared according to conventional methods in the art.
  • composition for external application for skin is a fatty substance, an organic solvent, a solubilizer, a thickener, a gelling agent, an emollient, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, a surfactant, water, an ionic type or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or any other commonly used in cosmetics. It may contain adjuvants commonly used in the field of cosmetology or dermatology, such as ingredients. The adjuvant is introduced in an amount generally used in the field of cosmetology or dermatology.
  • the composition of the present invention provides a quasi-drug composition for preventing or improving inflammatory diseases.
  • the isoocanin or its salt, and the prevention or improvement of inflammatory diseases are the same as described above.
  • quasi-drug refers to articles with a milder action than pharmaceuticals among articles used for the purpose of diagnosing, treating, improving, alleviating, treating or preventing diseases of humans or animals.
  • quasi-drugs exclude products used for pharmaceutical purposes, and include products used for the treatment or prevention of diseases in humans/animals, and products with minor or no direct action on the human body.
  • the quasi-drugs may include external preparations for skin and personal care products. More specifically, it may be a disinfectant cleaner, shower foam, gargrin, wet tissue, detergent soap, hand wash, or ointment, but is not limited thereto.
  • composition according to the present invention when used as a quasi-drug additive, the composition may be added as it is or used together with other quasi-drugs or quasi-drug ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method.
  • the mixing amount of the active ingredient may be suitably determined according to the purpose of use.
  • the isoocanin or a salt thereof of the present invention has no skin irritation and cytotoxicity, and has excellent stability to the human body, so it has almost no side effects to the human body.
  • a composition for preventing, improving, and treating inflammatory diseases such as inflammatory diseases, respiratory inflammatory diseases, inflammatory diseases of the eyes, and autoimmune diseases, specifically cosmetic compositions, pharmaceutical compositions, compositions for external application for skin, and quasi-drug compositions to be used safely and usefully can
  • composition comprising isoocanin or a salt thereof of the present invention as an active ingredient has excellent human stability due to no skin irritation and cytotoxicity, and JAK1 activity inhibitory effect, kallikrein-5 activity inhibitory effect, and TLR-2 activation inhibitory effect; It is very effective in preventing, improving and treating inflammatory diseases because of its excellent efficacy in inhibiting COX-2 expression and activity, inhibiting the production of prostaglandin PGE 2 , and inhibiting angiogenesis induced by PGE 2 . Therefore, an active ingredient in a cosmetic composition, pharmaceutical composition, external application for skin composition and quasi-drug composition for the prevention, improvement or treatment of inflammatory diseases, particularly gastrointestinal inflammatory diseases, skin inflammatory diseases, respiratory inflammatory diseases, inflammatory diseases of the eyes, autoimmune diseases, etc. can be used usefully.
  • Isookanin isookanin
  • 2 is a graph showing the inhibitory efficacy of kallikrein-5 activity of isookanin.
  • 3 is a graph showing the inhibitory efficacy of TLR-2 activation of isookanin.
  • 5 is a graph showing the inhibitory efficacy of COX-2 enzyme activity of isookanin.
  • FIG. 6 is a graph showing the inhibitory efficacy of PGE 2 expression induced by ultraviolet irradiation of isookanin.
  • FIG. 8 is a graph showing the efficacy of inhibiting the proliferation of human vascular endothelial cells induced by PGE 2 treatment of isookanin.
  • FIG. 9 is a photograph showing the efficacy of inhibiting the migration of human vascular endothelial cells induced by PGE 2 treatment of isookanin.
  • FIG. 10 is a graph showing the efficacy of inhibiting tube formation of human vascular endothelial cells induced by PGE 2 treatment of isookanin.
  • 11 is a photograph showing the efficacy of inhibiting tube formation of human vascular endothelial cells induced by PGE 2 treatment of isookanin.
  • HTRF is a TR-FRET (time-resolved fluorescence resonance energy transfer technology) analysis method that is applied to high-throughput screening (HTS) and is one of the methods widely used in drug development.
  • TR-FRET time-resolved fluorescence resonance energy transfer technology
  • HTRF KinEaseTM-TK kit All components of the HTRF KinEaseTM-TK kit were handled according to the instructions.Kinase reacts with an appropriate substrate in the presence and absence of a sample and detects reagent This is to measure the ability of a test substance to inhibit kinase activity by capturing the phosphorylated substrate by simply following two steps.
  • the kinase reacts with the appropriate substrate in the presence and absence of the sample.
  • Enzyme buffer is supplemented instead of the sample to serve as a control group (-), and a 100 nM treatment group with Ruxolitinib is used as a positive control group.
  • the kinase will phosphorylate the substrate.
  • the TK substrate-biotin is incubated with the kinase and ATP is added to initiate the enzymatic reaction.
  • the enzyme mixture containing the test sample and ATP was added to a HTRF 96-well low volume plate (Cisbio, France) and reacted at room temperature for 15 minutes.
  • An appropriate TK Substrate-biotin is added to the mixture and reacted for 2 hours.
  • Eu-cryptate and XL665 conjugates are added to the mixture.
  • the detection reagent will capture the phosphorylated substrate and the resulting TR-FRET signal is proportional to the phosphorylation level.
  • FIG. 1 The results of measuring the activity of inhibiting Janus kinase 1 activity of Isookanin using the HTRF KinEaseTM-TK kit are shown in FIG. 1 . As shown here, it was confirmed that isookanin significantly inhibited Janus kinase 1 activity.
  • kallikrein-5 To measure the enzymatic activity of kallikrein-5, a trypsin-like proteolytic enzyme present in keratinocytes of the skin, recombinant kallikrein-5 (R&D systems, USA) and fluorescence-coupled substrate Boc-Val-Pro-Arg -AMC (R&D systems, USA) was reacted to measure the enzyme activity. Isookanin was treated with 50 ⁇ l of 2 ⁇ g/ml recombinant kallikrein-5 at each concentration (10, 20 ppm), reacted for 10 minutes at room temperature, and then 50 ⁇ l of 800 ⁇ M kallikrein-5 substrate was added.
  • a trypsin inhibitor Leupeptin (Sigma aldrich, USA) was used, and as a negative control, a condition not treated with recombinant kallikrein was used.
  • the degree of activity is based on the value obtained by subtracting the lowest fluorescence value from the highest fluorescence value of each condition measurement value. were compared, and the results are shown in FIG. 2 .
  • isookanin (Isookanin) exhibited a concentration-dependent inhibitory effect on kallikrein-5 activity.
  • HEK-BlueTM TLR2 cell line (Invivogen, USA) transfected with TLR-2 and secreted embryonic alkaline phosphatase (SEAP) reporter genes were used. Since NF-kB and AP-1 are activated by TLR-2 activation, SEAP is generated and secreted out of the cell. Specifically, the HEK-BlueTM TLR2 cell line was cultured in DMEM containing 10% FBS and then inoculated in a 48-well plate at the number of 1 ⁇ 10 5 cells per well, followed by pretreatment with Isookanin for 1 hour.
  • SEAP embryonic alkaline phosphatase
  • chitin is a constituent factor of Demodex and is known as a major inducer of inflammatory rosacea.
  • the chitin used in the experiment was treated by separating it into a size of 40 ⁇ 70 ⁇ m. 20 ⁇ l of the cell culture supernatant cultured for 12 hours was removed, mixed with 80 ⁇ l of QUANTI-Blue TM (Invivogen, USA), and reacted at 37° C. for 1 hour. The degree of TLR-2 activation was measured by comparing the degree of color development due to the reaction of Quanti-Blue and SEAP secreted out of the cell, and the results are shown in FIG. 3 .
  • isookanin (Isookanin) showed the efficacy of effectively inhibiting the activation of TLR-2 signaling induced by chitin.
  • Mouse macrophage (RAW 264.7) was inoculated to about 2 ⁇ 10 5 cells per well in a 24-well microplate, and incubated for 24 hours at 37° C. in a 5% CO 2 incubator.
  • RAW264.7 cells were transfected with a COX-2 promoter luciferase reporter plasmid, and then treated with 1, 5, and 10 ppm of isookanin, respectively, and then cultured with LPS (100 ng/mL). After that, the cell culture medium was collected. Then, the luciferase enzyme activity was measured using a microplate reader (Sunrise, Tecan, Switzerland), and as a negative control (-), mouse macrophages not treated with Isookanin and LPS were used. The results are shown in FIG. 4 .
  • Figure 4 is a graph showing the effect of inhibiting the activation of the COX-2 promoter in mouse macrophages by LPS of isookanin. As shown here, isookanin (Isookanin) showed the effect of suppressing the LPS-induced COX-2 promoter activity in a concentration-dependent manner.
  • COX-2 enzyme inhibitory activity was measured using the cyclooxygenase (COX) Activity Assay Kit (BioVision).
  • COX Probe 2 ⁇ l, Diluted COX Cofactor 4 ⁇ l, and Isookanin were added in each concentration (5, 10 and 20 ppm) to the COX Assay Buffer included in the kit.
  • DMSO was added instead of isookanin.
  • the experiment was carried out by adding Celecoxib, a COX-2 inhibitor, as a control. The results of measuring COX-2 activity are shown in FIG. 5 .
  • isookanin showed an effect of inhibiting the activity of the COX-2 enzyme in a concentration-dependent manner.
  • Example 6 Measurement of the inhibitory efficacy of PGE 2 expression induced by ultraviolet irradiation of isookanin
  • Human Epidermal Keratinocytes were inoculated to about 2 ⁇ 10 5 cells per well in a 24-well microplate, and incubated for 24 hours at 37° C. in a 5% CO 2 incubator. After that, 1, 5 and 10 ppm of isookanin was treated, respectively, and then irradiated with ultraviolet rays (UVB 20mJ/cm 2 ) and cultured, and then the cell culture solution was collected. Then, the secretion level of PGE 2 was measured using an ELISA kit. As a negative control (-), human keratinocytes that were not treated with isookanin and ultraviolet (UVB) were used. The results are shown in FIG. 6 .
  • isookanin (Isookanin) showed an effect of inhibiting the expression of PGE 2 in a concentration-dependent manner.
  • Example 7 Measurement of the inhibitory efficacy of PGE 2 expression induced by LPS of isookanin
  • Mouse macrophage (RAW 264.7) was inoculated to about 2 ⁇ 10 5 cells per well in a 24-well microplate, and incubated for 24 hours at 37° C. in a 5% CO 2 incubator. After that, 1, 5, and 10 ppm of isookanin was treated, respectively, and then LPS (100ng/mL) was treated and cultured, and then the cell culture solution was collected. Then, the secretion level of PGE 2 was measured using an ELISA kit, and as a negative control (-), isookanin and mouse macrophages not treated with LPS were used. The results are shown in FIG. 7 .
  • isookanin (Isookanin) showed an effect of inhibiting the expression of PGE 2 induced by LPS in a concentration-dependent manner.
  • Example 8 Measurement of the inhibitory effect on human vascular endothelial cell proliferation induced by PGE 2 treatment of isookanin
  • HMEC-1 Human microvascular epithelial cells
  • MCDB131 Medium (Thermo Fisher, USA) containing 10 ng/ml EGF, 1 ⁇ g/mL cortisol, 10 mM glutamine, and 10% FBS.
  • the 24-well plate was inoculated at the number of 5 ⁇ 10 4 cells per well, and incubated at 37° C. in a 5% concentration CO 2 incubator for 24 hours.
  • Each well was pre-treated with isookanin at each concentration for 1 hour, and then treated with PGE 2 at a concentration of 20 ⁇ M and cultured again for 48 hours. After culturing for 48 hours, the degree of proliferation of vascular cells was measured using the MTT assay, and the results are shown in FIG. 8 .
  • isookanin exhibited the efficacy of effectively inhibiting the proliferation of human vascular endothelial cells induced by PGE 2 .
  • Example 9 Measurement of inhibitory effect on human vascular endothelial cell migration (Migration) induced by PGE 2 treatment of isookanin
  • HMEC-1 Human vascular endothelial cells (HMEC-1) were seeded in a 12-well plate at the number of 2 ⁇ 10 5 cells per well and cultured at 37° C. in a 5% CO 2 incubator for 24 hours. After cooling the cells to 80% or more in each well, scrape the center of the well using a yellow pipette tip, and pre-treat each well with isookanin for 2 hours at each concentration, followed by 20 ⁇ M concentration. of PGE 2 and treated with VEGF 100ng/ml as a negative control group, and incubated again for 24 hours. After culturing for 24 hours, the degree of migration of vascular cells was observed using a microscope, and the results were photographed with a microscope camera and are shown in FIG. 9 .
  • FIG. 9 is a photograph showing the inhibitory effect of isookanin on human blood vessel cell migration.
  • PGE 2 promoted the migration of vascular endothelial cells similar to VEGF, a representative angiogenesis factor that induces angiogenesis, and isookanin inhibited the migration of human vascular endothelial cells induced by PGE 2 . It showed an effective inhibitory effect.
  • Example 10 Measurement of the inhibitory effect on human vascular cell tube formation induced by PGE 2 treatment of isookanin
  • HMEC-1 Human vascular endothelial cells (HMEC-1) were inoculated in a 24-well plate with Matrigel at the number of 1.2 ⁇ 10 5 cells per well, and each well was pretreated with 10 ppm of isookanin for 2 hours. Then, PGE 2 at a concentration of 20 ⁇ M was treated and 100 ng/ml of VEGF was treated as a negative control, and incubated again for 24 hours. After culturing for 24 hours, the degree of tube formation of vascular cells was observed using a microscope, and the results were photographed with a microscope camera and analyzed with Image J, and are shown in FIGS. 10 and 11 .
  • FIGS. 10 and 11 are graphs and photographs showing the inhibitory effect of isookanin on tube formation in human blood vessels.
  • PGE 2 promoted tube formation of vascular cells similar to VEGF, a representative angiogenesis factor that induces angiogenesis, and isookanin induced tube formation of human vascular endothelial cells induced by PGE 2 . showed the effect of effectively inhibiting
  • a skin safety verification experiment was performed to confirm that isookanin according to the present invention is safe for human skin. For this purpose, a cumulative skin irritation test was conducted.
  • a nourishing cream containing 0.1%, 0.5%, and 1% of Isookanin, respectively, was prepared. Specifically, the aqueous phase purified water, triethanolamine, and propylene glycol were heated to 70° C. and dissolved, and then beeswax, liquid paraffin, oily components, emulsifiers and preservatives were heated to 70° C. and dissolved, and emulsified. After the emulsification was completed, the solution was cooled to 45° C., and 0.1%, 0.5%, and 1% of Isookanin were added and dispersed, respectively, and then cooled to 30°C. As the content of isookanin was increased to 0.1%, 0.5%, and 1%, the content of liquid paraffin was reduced to 9.91%, 9.51%, and 9.01%, respectively, to prepare a nourishing cream.
  • the patching method used a pin chamber (Finn chamber, Epitest Ltd, Finland). After 15 ⁇ l of each of the above external preparations for skin was dripped into the chamber, patching was performed. The degree of the reaction shown on the skin each time was scored using Equation 1 below, and the results are shown in Table 1 below.
  • Average reactivity [[ ⁇ (response index ⁇ reactivity)/ (total number of subjects ⁇ highest score (4 points)) ⁇ ] ⁇ 100] ⁇ number of tests (9 times)
  • isookanin according to the present invention was determined to be a safe material for human skin that does not show a distinct cumulative stimulation pattern.
  • composition of the present invention may be prepared as a formulation example as follows, but is not limited thereto.
  • a softening lotion containing isookanin as an active ingredient was prepared according to a conventional method.
  • Nutrient lotion containing isookanin as an active ingredient was prepared according to a conventional method as shown in Table 3 below.
  • ingredient weight% Isookanin 0.01 polyvinyl alcohol 13.0 Sodium Carboxymethylcellulose 0.2 allantoin 0.1 ethanol 5.0 nonylphenyl ether 0.3 Preservatives, micro pigments, micro fragrances and micro-purified water 81.39 sum 100.0
  • ingredient content (g) Isookanin 0.1 diethanolamine 1.5 Starch polyvinylptolidone 5.0 propylene glycol 30.0 Purified water 63.4 sum 100.0

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Abstract

본 발명은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부 자극 및 세포 독성이 없어 인체 안정성이 우수하면서도 JAK1 활성 억제 효능, 칼리크레인-5 활성 억제 효능, TLR-2 활성화 억제 효능, 사이클로옥시게나아제-2 발현 및 억제 효능, 프로스타글란딘 E2의 생성 억제 효능, 및 PGE 2에 의해 유도된 신생혈관생성(angiogenesis) 억제 효능이 매우 우수하여 염증성 질환을 예방, 개선 및 치료하는데 매우 효과적이다. 따라서, 본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 조성물은 염증성 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 화장료 조성물, 약학 조성물, 피부 외용제 조성물 및 의약외품 조성물에 유효성분으로 유용하게 이용할 수 있다.

Description

이소오카닌 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물
본 발명은 이소오카닌(Isookanin)을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로는 이소오카닌을 유효성분으로 포함하는 아토피성 피부염, 건선, 여드름, 부종, 로사시아(피부홍반), 일광화상, 류마티스성 관절염, 골관절염 또는 염증성 장질환 등의 염증성 질환을 예방, 개선 또는 치료하기 위한 조성물에 관한 것이다.
염증이란 조직의 상해 또는 파괴에 의해 유발되는 국소 보호 반응으로, 이는 상해 유발 물질과 상해된 조직 모두를 파괴하거나, 약화시키거나 또는 차폐하는 작용을 한다. 염증반응은 세포 또는 조직이 손상되거나 다양한 외부감염원 (박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질)에 감염되었을 때 국소 혈관과 체액 중 각종 염증 매개 인자 및 면역세포가 관련되어 나타나는 효소 활성화, 염증매개 물질 분비, 체액 침윤, 세포 이동, 조직 파괴 등 일련의 복합적인 생리적 반응과 홍반, 부종, 발열, 통증 등 외적 증상들을 동반한다.
정상인 경우 염증반응은 외부감염원을 제거하고 손상된 조직을 재생하여 생명체 기능회복작용을 하지만 항원이 제거되지 않거나 내부물질이 원인이 되어 염증반응이 과도하거나 지속적으로 일어나면 인체의 생명을 위협하는 질환으로서 급성염증, 류마티스 관절염과 같은 관절 내에서의 질환, 건선 등의 형태로 나타나는 피부질환 및 기관지 천식 등의 알레르기성 염증질환 등이 나타나게 된다. 따라서 이들 질환의 치료 방법의 개발에 있어 염증반응에 관여하는 물질을 찾아 제거하려는 많은 노력이 있어왔다 (지종대 등, 2004).
염증을 매개하는 물질로 prostaglandin(PG), 사이토카인(cytokine), chemokine, bradykinin, nitric oxide, histamine, complement, adhesion molecule 등이 알려져 있다. 이들 중 prostaglandin은 염증, 혈소판 응집(platelet aggregation), 신경전달물질의 분비(neurotransmitter release) 등과 같은 생리적이거나 병리적인 체내 변화에 관여한다. PGE 2는 가장 잘 알려져 있고 많은 연구가 이루어진 prostaglandin으로 혈관 확장, 부종, 발열, 동통 등을 매개한다(Aoki et al,. 2012). 또한 PGE 2는 치주염(periodontitis)과 같은 염증질환에서 MMPs(matrix metalloproteinases)의 생성을 유도하여 조직 손상에 관여하며, 류마티스 관절염 환자에서 얻은 대식세포에서 다량의 PGE 2가 생성되고 생성된 PGE 2는 류마티스 관절염에서의 염증반응과 조직 파괴 기전에 중요한 역할을 한다 (Bingham et al., 2002).
한편, cyclooxygenase(COX)는 다양한 염증성 질환과 관련이 있는 주요 효소이며 PG 생합성 과정의 첫 단계인 arachidonic acid를 PG으로 변환시키는 효소이다. COX는 두 종류 이상의 isoenzyme이 존재하는데 이들 중 COX-1은 지속적으로 발현하여 혈소판 응집, 위 점막 보호, 신기능 조절 등의 생리적 기능을 담당하고 COX-2는 염증 등의 자극에 의해 발현된다. 따라서, COX는 비스테로이드성 항염증성 약물(nonsteroidal anti-inflammatory drug, NSAIDs)의 타겟으로, 통증, 발열 및 염증의 치료에 치료학적인 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 정상적인 상태에서의 COX-2는 면역반응과 같은 다양한 생리학적 현상들을 매개하는 것으로 알려져 있지만, COX-2의 비정상적인 과발현 또는 과활성화는 다양한 질환들의 발명 및 발달과 밀접하게 관련이 되어 있는 것으로 보고되고 있다 (Minghetti et al., 2004). NSAID는 다양한 종류의 급성 및 만성 염증 질환의 치료를 위하여 널리 이용되고 있다. 그런데 NSAID를 장기간 복용한 환자의 25%에서 궤양이 발생한 것이 보고되어 NSAID 연관된 위장관 부작용이 중요한 문제가 되고 있다. NSAID가 염증을 감소시키는 효능과 위장관에 미치는 부작용은 모두 cyclooxygenase(COX)의 억제에 의하여 발생한다. 따라서 새로운 COX-2 저해제의 발굴은 염증질환 치료에 있어 NSAID의 부작용을 해결하는 방안이다.
혈관신생(angiogenesis)이란 기존의 미세혈관으로부터 새로운 모세혈관이 형성되는 과정으로서, 성인의 경우 혈관내피세포는 매우 느리게 자라며, 다른 종류의 세포에 비하여 상대적으로 잘 분열하지 않는다. 혈관신생이 일어나는 과정은 일반적으로 혈관신생 촉진인자의 자극에 의하여 프로테아제로 인한 혈관 기저막의 분해, 혈관 내피세포의 이동, 증식 및 혈관 내피세포 분화에 의한 관강의 형성으로 혈관이 재구성되어 새로운 모세혈관이 생성되는 것으로 이루어진다. 그러나 혈관신생이 자율적으로 조절되지 못하고 병적으로 성장함으로써 야기되는 질환들이 있다. 병리학적 상태에서 나타나는 혈관신생에 관련된 질환으로는 혈관종, 혈관섬유종, 혈관기형 및 심혈관 질환인 동맥경화, 혈관유착, 부종성 경화증이 있고, 혈관신생에 의한 안과 질환으로는 각막이식성 혈관신생, 혈관신생성 녹내장, 당뇨병성 망막증, 신생혈관에 의한 각막 질환, 반점의 변성, 익상편, 망막 변성, 후수정체 섬유 증식증, 과립성 결막염 등이 있다. 또한 관절염과 같은 만성 염증성 질환, 건선, 모세관 확장증, 화농성 육아종, 지루성 피부염, 여드름과 같은 피부과 질환, 알츠하이머 및 비만도 혈관신생과 관련이 있으며, 암의 성장과 전이는 반드시 혈관신생에 의존한다 (D'Amato et al., 1996). 해마다 전 세계적으로 수백만 명이 실명하게 되는 많은 안과질환도 혈관신생이 원인이 되고 있다(Witmer et al. 2003). 혈관신생 억제제를 이러한 각종 혈관신생 관련 질환의 치료제로 적용할 수 있으므로, 최근에 혈관신생을 억제시켜서 상기 질환들을 치료하려는 연구가 활발히 진행되고 있다.
염증성 혈관신생으로 인해 발생되는 피부질환인 로사시아(rosacea)는 피부의 홍반, 구진, 모세혈관 확장증, 부종, 농포 또는 이러한 증상의 조합을 특징으로 하는 일반적인 만성 염증성 피부 질환이다. 로사시아 환자들에서는 아토피 피부염 및 만성 두드러기와 같은 많은 피부 염증성 질환에서 나타나는 면역시스템 조절 장애가 발견되었으며, 카텔리시딘(cathelicidin)과 이를 활성화 형태로 바꾸는 역할을 하는 주된 세린단백질가수분해효소(serine protease)인 칼리크레인 5(kallikrein 5)의 기준 발현 정도가 증가되어 있다. 또한 선천성 면역계의 주요한 패턴인식 수용체인 톨유사수용체-2 (Toll like receptor-2, TLR-2)는 로사시아 피부질환에서 발현이 증가함을 관찰했다. 외부자극 또는 유발인자에 의해 활성화될 때, 전염증성 사이토카인 및 케모카인 등의 생성을 통해 염증반응을 유도하며 표피 프로테아제인 칼리크레인-5의 발현을 증가시키는 것으로 알려져 있다. 피부는 외부변화 또는 내부 면역시스템 이상에 의해 카텔리시딘이나 칼리크레인 5의 발현이 증가하고 카텔리시딘은 칼리크레인 5에 의해 LL-37와 같은 활성형 펩티드로 바뀌면서 염증, 혈관신생, 모세혈관 확장 등 작용을 하여 안면홍조 또는 로사시아 등 피부질환을 유발할 수 있다(Takahashi et al., 2017). 또한 최근의 연구에 의하면 여드름균 C. acnes가 선천면역에 중요한 세포인 조직구와 호중구에 작용하여 염증성 사이토카인을 발생시키며 이러한 과정에는 Toll-like receptor 2 (TLR2) 수용체가 작용한다고 보고하여, 여드름의 병인에 C. acnes에 의한 선천성 면역의 주 매개체인 TLR2가 관여함을 시사하였다.
야누스키나제 (Janus kinase: JAK)는 면역과 염증조절의 중추적 역할을 하는 단백질에 명령을 내리는 효소로 알려져 있으며, JAK1, JAK2, JAK3 그리고 TYK2 등 4종류로 구분된다. JAK의 다양한 기능들 중 STAT 단백질과 함께 사이토카인 (cytokine)에 신속하게 신호전달경로를 제공하는 것이 가장 많이 알려져 있다. 그 과정을 간단히 보면, 활성화된 JAK은 cytokine 수용체의 tyrosine 잔기를 인산화시켜 세포질의 유전자 조절 단백질인 STAT와 결합하게 된다. 이때 STAT는 JAK에 의해 인산화되어 활성화된다. 활성화된 STAT는 수용체에서 분리되어 이량체를 형성한 후 핵으로 이동하여 특정 유전자의 발현을 촉진한다. JAK 억제제는 세포내 면역 활성화 신호전달에서 중요한 역할을 하는 JAK의 작용을 저해하고 면역반응의 과잉 활성화를 억제함에 따라 자가면역질환, 알레르기성 질환 및 만성 염증질환을 개선하는 것으로 알려져 아토피성 피부염, 백반증, 탈모, 류마티스성 관절염, 전신성홍반 루푸스, 건선, 천식, 염증성 장질환에 있어 최근 주목 받고 있는 연구 타겟이다. JAK을 타겟으로 개발된 선택적인 JAK 억제제는 Abbvie의 Upadacitinib(JAK1 inhibitor, oral), Lilly의 Baricitinib(JAK1/2 inhibitor, oral), Pfizer의 Abrocitinib(JAK1 inhibitor, oral)와 Tofacitinib(Pan JAK inhibitor, Oral), Incyte/Pfizer의 Ruxolitinib(JAK1/2 inhibitor, topical), 일본담배산업(Japan Tobacco)의 Delgocitinib(Pan JAK inhibitor, oral or topical) 등이 있으며, 현재 phase 2 또는 phase 3 시험 중에 있으며, 이들 중 Ruxolitinib와 Tofacitinib은 FDA 승인이 되었다.
한편, 이소오카닌(isookanin, 화학식: C 15H 12O 6)은 국화과( Asteraceae)에서 플라보노이드 성분으로 분리되었다는 보도가 있는 등 식물 유래의 화합물이다. 국화과에서 분리된 이소오카닌 유도체(isookanin 7-O-glucoside)는 항산화 활성(Wolniak et al., 2007), 아밀라제 억제 활성(Yang et al., 2012)이 있다고 보도된 바가 있었다. 하지만 아직까지 이소오카닌의 염증 및 신생혈관억제를 통한 관절염, 안과질환, 암질환, 대장염, 아토피성 피부염 및 안면홍조, 로사시아 등의 개선에 관해서는 밝혀진 바가 없다.
이에 본 발명자들은 이소오카닌(isookanin)이 만성 염증질환, 면역질환 및 신생혈관 관련 질환의 개선에 관해 효능이 있을 뿐만 아니라 피부자극 및 세포독성이 없어 인체 안전성이 우수하다는 것을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
[선행기술문헌]
지종대, 이영호, 송관규. 종설: Prostaglandin E2: 면역 및 염증반응에서의 역할. Journal of Rheumatic Diseases (구 대한류마티스학회지) 11(4), 2004, 307-316.
Tomohiro Aoki, Shuh Narumiya, Prostaglandins and chronic inflammation. Trends in Pharmacological Science 33(6), 2012: 304-311
Bingham, Clifton O. The pathogenesis of rheumatoid arthritis: pivotal cytokines involved in bone degradation and inflammation. The Journal of Rheumatology Supplement 65, 2002, 3-9.
Minghetti, Luisa. Cyclooxygenase-2 (COX-2) in inflammatory and degenerative brain diseases. Journal of Neuropathology & Experimental Neurology 63(9), 2004, 901-910.
D'Amato, Robert J., and Anthony P. Adamis. Angiogenesis inhibition in age-related macular degeneration. Ophthalmology 102(9), 1995, 1261-1262.
Witmer et al. Vascular endothelial growth factors and angiogenesis in eye disease. Progress in retinal and eye research 22(1), 2003, 1-29.
Takahashi Toshiya, and Richard L. Gallo. The critical and multifunctional roles of antimicrobial peptides in dermatology." Dermatologic clinics 35(1), 2017, 39-50.
Schwartz et al. JAK inhibition as a therapeutic strategy for immune and inflammatory diseases. Nature Reviews Drug Discovery 16(12), 2017, 843.
Wolniak et al. Antioxidant activity of extracts and flavonoids from Bidens tripartita. Acta Pol Pharm 64(5), 2007, 441-447.
Yang et al. Phenolics from Bidens bipinnata and their amylase inhibitory properties. Fitoterapia 83(7), 2012, 1169-1175.
본 발명의 하나의 목적은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 하나의 구체적인 목적은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 구체적인 목적은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 구체적인 목적은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 구체적인 목적은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 구체적인 목적은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물을 개체에 투여하여 개체의 염증성 질환을 예방, 치료, 또는 개선하는 방법을 제공하는 것이다.
하나의 양태로서, 본 발명은 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명에 있어서, 이소오카닌(Isookanin)은 하기 화학식 1의 구조를 갖는 화합물(C 15H 12O 6)이다.
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본 발명에 있어서, 염은 약학적, 화장품학적 및/또는 식품학적으로 허용되는 염의 형태 또는 체내에서 이소오카닌이 되는 형태(예로, 프로드러그)일 수 있다. 그와 같은 염으로는 약학적, 화장품학적 및/또는 식품학적으로 허용되는 유리산(free acid)에 의해 형성되는 산부가염 또는 염기에 의해 형성되는 금속염이 있다. 상기 유리산은 무기산과 유기산이 사용될 수 있다. 무기산의 예로는 염산, 황산, 브롬산, 아황산 또는 인산 등이 사용될 수 있다. 유기산의 예로는 구연산, 초산, 말레인산, 후마산, 글루콘산, 메탄술폰산 등이 사용될 수 있다. 상기 금속염은 알칼리 금속염 또는 알칼리 토금속염이 있으며, 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염이 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염은 자연원(natural source)으로부터 추출 및 분리하거나 화학적으로 합성하거나 미생물에 의해 합성하여 이용할 수 있다. 상기 자연원은 반드시 이로 제한되는 것은 아니지만, 국화과 기생초( Coreopsis tinctoria Nutt.) 및 도깨비바늘( Bidens)속, 콩과 자귀나무( Albizzia julibrissin DURAZZ.) 및 서아프리카산의 고목(okan Cylicodiscus gabunensis Harms.) 등이 있다.
하나의 구체적 실시에서, 본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염은 면역조절인자인 야누스키나아제(Janus kinase)의 활성을 억제하여 세포질의 유전자 조절 단백질인 STAT의 활성화를 저해함으로써 활성화된 STAT에 의해 유도되는 면역반응 과잉으로 인한 염증반응을 효과적으로 억제하여 염증성 질환을 예방, 개선 및 치료할 수 있다.
따라서, 본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염은 야누스키나아제(Janus kinase)의 활성 저해제로서 유용하다.
또 하나의 구체적 실시에서, 본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염은 톨유사수용체-2(Toll like receptor-2, TLR-2) 신호전달의 활성화를 억제하고, cyclooxygenase-2(COX-2)의 전사단계에서의 프로모터 활성화 억제 및 효소활성을 억제하여 프로스타글란딘의 생성을 억제함으로써 염증성 장질환, 골관절염, 두통, 조직 상처나 염증으로 인한 통증을 개선하고 프로스타글란딘에 의해 유도된 신생혈관생성(angiogenesis)을 억제하며, 표피의 프로테아제 칼리크레인-5의 활성을 억제하여 펩타이드 LL-37의 활성화를 저해함으로써 염증 물질에 의해 유도되는 다양한 질환을 예방, 개선 및 치료할 수 있다.
따라서, 본 발명의 오소오카닌 또는 이의 염은 TLR-2 활성 저해제, COX-2 활성 저해제, 프로스타글란딘 활성 저해제, 및 칼리크레인-5 활성 저해제로서 유용하다.
이에 따라 본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염은 외부 환경 또는 인체 내부 원인에 의해 발생하는 과도한 염증반응에 의한 염증성 질환의 예방, 개선 및 치료에 유용하다.
본 발명에 있어서, “염증”이란 조직의 상해 또는 파괴에 의해 유발되는 국소 보호 반응으로, 이는 상해 유발 물질과 상해된 조직 모두를 파괴하거나, 약화시키거나 또는 차폐하는 작용을 한다.
본 발명에 있어서, 상기 “염증성 질환”은 염증을 주병변으로 하는 질환으로서, 반드시 이로 제한되는 것은 아니지만, 위장관 염증성 질환, 피부 염증성 질환, 호흡기 염증성 질환, 눈의 염증성 질환, 자가 면역 질환 등이 있다.
상기 위장관 염증성 질환은 염증성 장 질환, 궤양성 대장염 (직장구불창자염, 전대장염(pancolitis), 궤양성 직장염 및 좌측 대장염), 크론병, 콜라겐성 대장염, 림프구성 대장염, 베체트병(Behcet's disease), 셀리악병 (celiac disease), 면역 체크 포인트 억제제 유도 대장염, 회장염, 호산구성 식도염, 이식편 대 숙주 질환 관련 대장염 및 감염성 대장염을 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 위장관 염증성 질환을 포함할 수 있다.
상기 피부 염증성 질환은 아토피성 피부염, 원형 탈모증, 백반증, 건선, 여드름, 부종, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반, 일광화상, 피부 근육염, 피부 T 세포 림프종 및 아형 (세자리 증후군 (Sezary syndrome), 균상식육종, 파제드병모양그물증, 육아종 이완 피부, 림프종모양구진증, 만성 태선양 비강진, 급성 두창상 태선양 비강진, CD30+ 피부 T-세포 림프종, 이차 피부 CD30+ 대세포 림프종, 비-균상식육종 CD30- 피부 큰 T-세포 림프종, 다형성 T-세포 림프종, 레너트 림프종, 피하 T-세포 림프종, 혈관중심 림프종, 아구성 NK-세포 림프종), 결절성 양진, 편평태선, 일차 국소 피부아밀로이드증, 수포성 유사천포창, 이식편 대 숙주 질환의 피부 징후, 유사천포창, 원판상 루푸스, 고리육아종, 만성단순태선, 외음부/음낭/항문 주위 가려움증, 경화태선, 대상포진 후 신경통 가려움증, 모낭성 편평태선 및 독발성 모낭염을 포함하나 이에 제한되지 않는 다수의 피부 염증 또는 소양증 질환을 포함할 수 있다.
상기 호흡기 염증성 질환은 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환, 낭포성 섬유증, 폐렴, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 낭포성 섬유증 (CF), 폐렴, 간질성 폐 질환 (특발성 폐 섬유증 포함), 급성 폐 손상, 급성 호흡곤란 증후군, 기관지염, 폐기종, 폐쇄성 세기관지염, 폐쇄성 세기관지 기질화 폐렴 (COS라고도 함), 일차 이식편 장애(PGD), 기질화 폐렴 (OP), 급성 거부반응 (AR), 림파구성 세기관지염 (LB), 만성 폐 동종 이식편 장애 (CLAD), 제한성 CLAD (rCLAD 또는 RAS), 호중구 동종 이식편 장애, 알레르기성 비염 또는 사르코이드을 포함하나, 이에 제한되지 않는 다수의 호흡기 관련 염증 질환을 포함할 수 있다.
상기 눈의 염증성 질환은 포도막염, 당뇨병성 망막 병증, 당뇨병성 황반 부종, 안구 건조증, 노인 황반 변성, 망막 정맥 폐색 (RVO) 및 아토피성 각결막염을 포함하나, 이에 제한되지 않는 다수의 눈의 염증성 질환을 포함할 수 있다.
상기 자가 면역 질환 등은 다른 염증성 질환, 자가 면역 질환 또는 암 등을 포함하는데, 이의 예로는 관절염, 류마티스 관절염, 소아 류마티스 관절염, 이식 거부반응, 안구 건조증, 건선성 관절염, 당뇨병, 인슐린 의존성 당뇨병, 운동 신경 질환, 골수이형성 증후군, 통증, 근육 감소증, 악액질, 패혈성 쇼크, 전신성 홍반 루푸스, 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 강직성 척추염, 골수섬유증, B-세포 림프종, 간세포 암종, 호지킨병, 유방암, 다발성 골수종, 흑색종, 비-호지킨 림프종, 비소 세포 폐암, 난소 투명 세포암, 난소 종양, 췌장 종양, 진성 다혈증, 쇼그렌 증후군, 연조직 육종, 육종, 비장 비대증, T-세포 림프종 및 지중해 빈혈증(thalassemia major) 등이 있다.
본 발명에 따른 이소오카닌 또는 이의 염을 포함하는 조성물은 상술한 위장관 염증성 질환, 피부 염증성 질환, 호흡기 염증성 질환, 눈의 염증성 질환, 자가 면역 질환 등의 예방, 개선, 또는 치료에 영향을 주는 동일한 메커니즘 또는 상이한 메커니즘으로 작용하는 하나 이상의 활성제와 조합되어 사용될 수 있다.
상기 활성제는 예를 들어, 아미노살리실레이트, 스테로이드, 히스타민 H1 수용체 길항제, 히스타민 H4 수용체 길항제, 칼시뉴린 억제제, 전신 면역 억제제, 항-TNFα 항체, TNF 알파 리간드 억제제, TNF 결합제, 항-VLA-4 항체, 항-인테그린 α4β7 항체, 항-박테리아제, 글루코코르티코이드 작용제, 핵 인자 카파 B 억제제, 5-리폭시게나아제 억제제, 인테그린 알파-4/베타-7 길항제, 시클로옥시게나아제 억제제, IL-2 길항제, IL-4 길항제, IL-5 길항제, IL-10 길항제, IL-12 길항제, IL-13 길항제, IL-17 길항제, IL-23 길항제, 류코트리엔 BLT 수용체 길항제, IL-6 길항제, IL-8 길항제, 인테그린 길항제, IL-4 수용체 조절제, 니코틴 아세틸콜린 수용체 작용제, PPAR 감마 작용제, 스핑고신-1-포스페이트 수용체-1 조절제, B-림프구 항원 CD20 억제제, 칼시뉴린 억제제, CD3 길항제, 세포 부착 분자 억제제, 호산구 퍼옥시다아제 억제제, 헤파린 작용제, ICAM1 유전자 억제제, IL-13 길항제, IL-2 수용체 알파 서브유닛 억제제, 인슐린 증감제, 인터페론 베타 리간드, 인터페론 감마 수용체 길항제, 인터류킨-1 베타 리간드 조절제, MAdCAM 억제제, PDE 4 억제제, 스핑고신-1-포스페이트 수용체-1 작용제, TLR-9 작용제, 아세틸콜린에스테라아제 억제제, ACTH 수용체 작용제, 액티빈 수용체 길항제, CCR5 케모카인 길항제, CCR9 케모카인 길항제, PDE 4 억제제, G-단백질 결합 수용체-44 길항제, , 5-HT 1a 수용체 길항제, 5-HT 2b 수용체 길항제, 알파 2 아드레날린 수용체 작용제, 칸나비노이드 CB1 수용체 길항제, CCR3 케모카인, 길항제, 콜라게나아제 억제제, 시토졸 포스포리파아제 A2 억제제, 에오탁신 리간드 억제제, GATA 3 전사 인자 억제제, 면역 글로불린 E 길항제, 면역글로불린 E 조절제, 인터페론 감마 수용체 길항제, 인터루킨 33 리간드 억제제, 인터루킨-31 수용체 길항제, 류코트리엔 길항제, 간 X 수용체 작용제, 간 X 수용체 베타 작용제, 핵 인자 카파 B 억제제, OX-40 수용체길항제, PGD2 길항제, 포스포리파아제 A2 억제제, SH2 도메인 이노시톨 포스파타아제 1 자극제, 흉선 기질 림프단백질 리간드 억제제, TLR 조절제, TNF 알파 리간드 조절제 또는 바닐로이드 VR1 길항제 및 항-설사약을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
상기 아미노살리실레이트의 예는 메살라민, 오살라진 및 술파살라진을 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 상기 스테로이드의 예는 프레드니손, 프레드니솔론, 히드로코르티손, 부데소니드, 베클로메타손 및 플루티카손이 포함되나, 이에 제한되지 않는다. 상기 염증성 장애의 치료에 유용한 전신 면역 억제제는 시클로스포린, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 6-메르캅토퓨린 및 타크롤리무스를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 인플릭시맙, 아달리무맙, 골리무맙 및 세르톨리주맙을 포함하나 이에 제한되지 않는 항-TNFα 항체는 병용 요법에 사용될 수 있다. 다른 메카니즘에 의해 작용하는 유용한 화합물은 나탈리주맙과 같은 항-VLA-4 항체, 베돌리주맙과 같은 항-인테그린 α4β7 항체, 리팍시민과 같은 항-박테리아제 및 로페라미드와 같은 항-설사약을 포함한다.
본 발명의 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물은 전체 조성물의 중량을 기준으로 하여 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 0.0001 내지 70.0 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 68.0 중량%, 보다 바람직하게는 0.001 내지 50 중량%를 포함한다. 상기 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우 염증성 질환의 예방, 개선, 및 치료 효과를 기대할 수 없고, 70.0 중량%를 초과하는 경우 함량 증가에 따른 염증성 질환에 따른 증상의 개선 효과가 미미하며 제형을 제조하는데 어려움이 발생한다.
하나의 구체적 양태로서, 본 발명의 상기 조성물은 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물로서 제공된다.
상기 이소오카닌 또는 이의 염, 그리고 염증성 질환, 예를 들어 위장관 염증성 질환, 피부 염증성 질환, 호흡기 염증성 질환, 눈의 염증성 질환, 자가 면역 질환 등의 예방 또는 치료 효과에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명에서의 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학 조성물의 투여에 의해 염증성 질환의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 상기 약학 조성물의 투여에 의해 염증성 질환의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 상기 염증성 질환의 예방 또는 치료는 상기 이소오카닌에 의해 야누스키나아제(Janus kinase)의 활성을 억제하여 세포질의 유전자 조절 단백질인 STAT의 활성화를 저해함으로써 활성화된 STAT에 의해 유도되는 면역반응 과잉으로 인한 염증을 억제하고/억제하거나, 톨유사수용체-2(Toll like receptor-2, TLR-2) 신호전달의 활성화를 억제하고, 프로스타글란딘을 생성하는 효소인 cyclooxygenase-2의 발현 및 활성을 억제하여 프로스타글란딘에 의해 유도되는 신생혈관생성(angiogenesis)을 억제하며, 표피의 프로테아제 칼리크레인-5의 활성을 억제하여 펩타이드 LL-37의 활성화를 저해함으로써 달성되는 것일 수 있다.
본 발명의 용어, "약학 조성물"은 질병의 예방 또는 치료를 목적으로 제조된 것을 의미하며, 각각 통상의 방법에 따라 다양한 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 예컨대, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형으로 제형화할 수 있고, 윤활제, 습윤제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 비경구형 제형으로 제형화하여 사용될 수 있다. 또한, 외용제, 좌제, 피부외용제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 구체적 예로서, 본 발명의 조성물은 피부 염증성 질환의 피부병변에 직접 도포 또는 산포하는 등의 방법에 의해 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 상기 부위에만 한정되지 않고 염증성 질환이 발병한 어느 부위든 적용될 수 있다.
또한, 각각의 제형에 따라 약학적으로 허용가능한 담체, 예컨대 완충제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제, 기제 등 당업계에 공지된 담체를 추가로 포함하여 제조할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용 가능한 담체"란 생물체를 자극하지 않으면서, 주입되는 유효성분의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 의미할 수 있다. 본 발명에 사용 가능한 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되고 약학적으로 허용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 담체는 비자연적 담체 (non-naturally occuring carrier)일 수 있다.
본 발명의 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여할 수 있다. 상기 약학적으로 유효한 양은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 건강상태, 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 구체적으로 투여 개체의 몸무게 1㎏ 당 일반적으로 1일 0.001㎎ 내지 300㎎이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 단독으로 또는 염증성 질환의 예방 또는 개선 효과를 나타내는 기타 약학적 활성 화합물과 결합하여 또는 적당한 집합을 이루어 사용될 수 있다. 이러한 예는 상술한 바와 같다.
본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여할 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용을 유발하지 않으면서 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명에서 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 개체에게 본 발명의 약학적 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 본 발명의 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물의 투여 방식은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방식에 따를 수 있다. 상기 투여 방식의 비제한적인 예로, 조성물을 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다. 하나의 구체적 예로, 본 발명의 조성물은 피부 염증성 질환의 피부병변에 직접 도포 또는 산포하는 등의 방법에 의해 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 목적하는 투여 방식에 따라 다양한 제형으로 제작될 수 있다.
본 발명의 조성물의 투여빈도는 특별히 이에 제한되지 않으나, 1일 1회 투여하거나 또는 용량을 분할하여 수회 투여할 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 이소오카닌 또는 이의 염을 포함하는 약학 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
상기 이소오카닌 또는 이의 염, 그리고 염증성 질환의 예방 및 치료 효과는 전술한 바와 같다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개체"란, 염증성 질환이 발병되었거나 발병할 가능성이 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미할 수 있다. 상기 동물은 인간뿐만 아니라 이와 유사한 증상의 치료를 필요로 하는 소, 말, 양, 돼지, 염소, 낙타, 영양, 개, 고양이 등의 포유동물일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 상기 예방 또는 치료 방법은 구체적으로, 염증성 질환이 발병하였거나 발병할 위험이 있는 개체에 상기 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 투여하는 방법은, 상기에 전술한 바와 같다.
상기 예방은 본 발명에 따른 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물을 개체에 투여하여 염증성 질환의 발병을 억제시키거나 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.
또한, 상기 치료는 본 발명의 상기 조성물을 염증성 질환 발병 의심 개체에 투여하여 염증성 질환의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미할 수 있다.
상기 이소오카닌 또는 이의 염을 포함하는 약학적 조성물에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명의 조성물은 투여를 위하여, 상기 기재한 유효성분 이외에 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로오스, 폴리비닐피 롤리돈, 셀룰로오스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로오스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일을 들 수 있다.
본 발명의 조성물의 적합한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 구체적으로, 상기 이소오카닌 또는 이의 염의 투여량은 0.001~300㎎/Kg일 수 있다. 또한 외용제인 경우에는 성인 기준으로 1.0 내지 3.0㎖의 양으로 1일 1회 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속 하는 것이 좋다. 다만, 상기 투여량은 본 발명의 범위를 한정하는 것이 아니다.
하나의 구체적 양태로서, 본 발명의 상기 조성물은 피부 염증성 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물로 제공된다.
상기 이소오카닌 또는 이의 염, 그리고 염증성 질환, 특히 피부 염증성 질환의 예방 또는 개선에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명에 있어서, 용어 “개선”은 상기 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물의 투여에 의해 염증성 질환의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다. 즉, 상기 “개선”은 개체에서 면역과잉 반응 또는 프로스타글란딘으로 인해 염증이 발생하거나 표피 프로테아제 칼리크레인-5의 발현 및 활성의 증가로 발생하는 염증성 질환의 발병 억제, 경감, 제거를 의미한다.
본 발명에서 상기 피부 염증성 질환의 예방 또는 개선은 상기 이소오카닌에 의해 야누스키나아제(Janus kinase)의 활성을 억제하여 세포질의 유전자 조절 단백질인 STAT의 활성화를 저해함으로써 활성화된 STAT에 의해 유도되는 면역반응 과잉으로 인한 염증을 억제하고/억제하거나, 톨유사수용체-2(Toll like receptor-2, TLR-2) 신호전달의 활성화를 억제하고, 프로스타글란딘을 생성하는 효소인 cyclooxygenase-2의 발현 및 활성을 억제하여 프로스타글란딘에 의해 유도되는 신생혈관생성(angiogenesis)을 억제하며, 표피의 프로테아제 칼리크레인-5의 활성을 억제하여 펩타이드 LL-37의 활성화를 저해함으로써 달성되는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염은 전체 화장료 조성물의 중량을 기준으로 하여 0.0001 내지 70.0 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 68.0 중량%를 포함한다. 상기 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우 피부 염증성 질환, 예를 들어 아토피성 피부염, 원형 탈모증, 백반증, 건선, 여드름, 부종, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반, 일광화상, 피부 근육염, 피부 T 세포 림프종 및 아형 (세자리 증후군 (Sezary syndrome), 균상식육종, 파제드병모양그물증, 육아종 이완 피부, 림프종모양구진증, 만성 태선양 비강진, 급성 두창상 태선양 비강진, CD30+ 피부 T-세포 림프종, 이차 피부 CD30+ 대세포 림프종, 비-균상식육종 CD30- 피부 큰 T-세포 림프종, 다형성 T-세포 림프종, 레너트 림프종, 피하 T-세포 림프종, 혈관중심 림프종, 아구성 NK-세포 림프종), 결절성 양진, 편평태선, 일차 국소 피부아밀로이드증, 수포성 유사천포창, 이식편 대 숙주 질환의 피부 징후, 유사천포창, 원판상 루푸스, 고리육아종, 만성단순태선, 외음부/음낭/항문 주위 가려움증, 경화태선, 대상포진 후 신경통 가려움증, 모낭성 편평태선 및 독발성 모낭염 등의 염증성 피부 증상의 개선 및 예방 효과를 기대할 수 없고, 70.0 중량%를 초과하는 경우 함량 증가에 따른 염증성 피부 증상의 개선 효과가 미미하며 화장료 제형을 제조하는데 어려움이 발생한다.
본 발명에 있어서, 상기 화장료 조성물은 유효성분으로서 상기 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 추가적으로 포함할 수 있다. 예를 들어, 항산화제, 안정화제, 가용화제, 비타민, 안료 및 항료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 또는 스프레이 등으로 제형화될 수 있다. 보다 상세하게는, 영양 크림, 수렴 화장수, 유연 화장수, 로션, 에센스, 영양젤 또는 마사지 크림 등의 제형으로 제조될 수 있다. 그러나, 특별히 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라가칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용될 수 있다. 예를 들어, 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.
또 하나의 구체적 양태로서, 본 발명의 조성물은 염증성 질환의 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물로 제공된다.
상기 이소오카닌 또는 이의 염, 그리고 염증성 질환의 예방 또는 개선에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이, 팩 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
또한, 본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.
또 다른 하나의 구체적 양태로서, 본 발명의 조성물은 염증성 질환의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다.
상기 이소오카닌 또는 이의 염, 그리고 염증성 질환의 예방 또는 개선에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어 "의약외품"은 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 개선, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 물품들 중 의약품보다 작용이 경미한 물품들을 의미한다. 예를 들어, 의약외품은 의약품의 용도로 사용되는 물품을 제외한 것으로, 사람/동물의 질병 치료나 예방에 쓰이는 제품, 인체에 대한 작용이 경미하거나 직접 작용하지 않는 제품 등이 포함된다.
구체적으로, 상기 의약외품은 피부외용제 및 개인위생용품을 포함할 수 있다. 보다 구체적으로 소독청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제비누, 핸드워시, 또는 연고제일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
본 발명에 따른 상기 조성물을 의약외품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 의약외품 또는 의약외품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염은 피부자극 및 세포독성이 없고 인체 안정성이 우수하여 인체에 대한 부작용이 거의 없는 물질로서 아토피성 피부염, 건선, 여드름, 안면홍조, 로사시아, 위장관 염증성 질환, 피부 염증성 질환, 호흡기 염증성 질환, 눈의 염증성 질환, 자가 면역 질환 등의 염증성 질환을 예방, 개선 및 치료하기 위한 조성물, 구체적으로는 화장료 조성물, 약학 조성물, 피부 외용제 조성물 및 의약외품 조성물에 안전하면서도 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 이소오카닌 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 조성물은 피부 자극 및 세포 독성이 없어 인체 안정성이 우수하면서도 JAK1 활성 억제 효능, 칼리크레인-5 활성 억제 효능, 및 TLR-2 활성화 억제 효능, COX-2 발현 및 활성 억제효능, 프로스타글란딘인 PGE 2의 생성 억제 효능, PGE 2에 의해 유도된 신생혈관생성(angiogenesis) 억제 효능이 매우 우수하여 염증성 질환을 예방, 개선 및 치료하는데 매우 효과적이다. 따라서, 염증성 질환, 특히 위장관 염증성 질환, 피부 염증성 질환, 호흡기 염증성 질환, 눈의 염증성 질환, 자가 면역 질환 등의 예방, 개선 또는 치료를 위한 화장료 조성물, 약학 조성물, 피부 외용제 조성물 및 의약외품 조성물에 유효성분으로 유용하게 이용할 수 있다.
도 1은 이소오카닌(Isookanin)의 Janus kinase 1 활성 억제 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 2는 이소오카닌(Isookanin)의 칼리크레인-5 활성 억제 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 3은 이소오카닌(Isookanin)의 TLR-2 활성화 억제 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 4는 이소오카닌(Isookanin)의 LPS에 의해 유발된 COX-2 프로모터 활성화 억제 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 5는 이소오카닌(Isookanin)의 COX-2 효소활성 억제 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 6은 이소오카닌(Isookanin)의 자외선 조사에 의해 유발된 PGE 2 발현 억제 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 7는 이소오카닌(Isookanin)의 LPS에 의해 유발된 PGE 2 발현 억제 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 8는 이소오카닌(Isookanin)의 PGE 2 처리에 의해 유발된 인간 혈관내피세포 증식을 억제하는 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 9은 이소오카닌(Isookanin)의 PGE 2 처리에 의해 유발된 인간 혈관내피세포의 이동(Migration)을 억제하는 효능을 사진으로 나타낸 것이다.
도 10은 이소오카닌(Isookanin)의 PGE 2 처리에 의해 유발된 인간 혈관내피세포의 튜브 형성(tube formation)을 억제하는 효능을 그래프로 나타낸 것이다.
도 11은 이소오카닌(Isookanin)의 PGE 2 처리에 의해 유발된 인간 혈관내피세포의 튜브 형성(tube formation)을 억제하는 효능을 사진으로 나타낸 것이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.
실시예 1: 이소오카닌(Isookanin)의 야누스 키나제 1(Janus kinase 1) 활성 억제효능 측정
이소오카닌(Isookanin)의 야누스 키나제 1(Janus kinase 1) 활성 억제능은 HTRF KinEASE-TK kit (Cisbio,프랑스)를 이용하여 측정하였다. HTRF는 TR-FRET (time-resolved fluorescence resonance energy transfer technology) 분석 방법으로 HTS (high-throughput screening)에 적용되어 의약품 개발에 많이 사용되는 방법 중의 하나이다. 일반적인 사이토카인(cytokines) 측정부터 효소 활성(enzyme activity), 단백질 인산화(protein phosphorylation), 단백질 상호작용(protein protein interaction_, cAMP 측정 등을 acceptor/donor 반응을 통한 형광으로 측정할 수 있으며, 두 가지 파장대에서 측정하므로 buffer, medium 등의 간섭을 감소시킬 수 있는 장점이 있다. HTRF KinEase™-TK kit의 모든 구성요소들은 설명서에 따라 다루어졌다. 키나제는 샘플의 존재 및 부재 하에 적절한 기질과 반응시키고 검출 시약에 의해 인산화된 기질을 포착하는 방식으로 테스트 물질의 키나제 활성 억제능을 측정하는 것이다. 간단히 다음과 같은 두 단계를 거친다.
단계 1. 키나제 반응
키나제는 샘플의 존재 및 부재 하에 적절한 기질과 반응시킨다. 효소 완충제를 샘플 대신 보충하여 대조군(-)으로 하고 록소리티닙(Ruxolitinib) 100nM 처리군을 양성대조군(positive cotrol)으로 한다. 이 단계 동안, 키나제는 기질을 인산화할 것이다. TK 기질-비오틴은 키나제와 함께 배양되며 효소 반응을 시작하기 위해 ATP를 첨가한다. 순서는 테스트 샘플 및 ATP를 포함하는 효소 혼합체를 HTRF 96-well low volume plate (Cisbio, 프랑스)에 첨가하고 실온에서 15분간 반응시킨다. 상기 혼합물에 적당한 TK Substrate-biotin를 첨가하여 2시간 반응시킨다.
단계 2. 형광 검출
반응이 끝난 상기 혼합물에 Eu-cryptate와 XL665 conjugates를 첨가한다. 검출 시약은 인산화된 기질을 포착할 것이며 결과적인 TR-FRET 신호는 인산화 수준에 비례한다.
이소오카닌(Isookanin)의 야누스 키나제 1(Janus kinase 1) 활성 억제능을 HTRF KinEase™-TK kit를 이용하여 측정한 결과를 도 1에 나타내었다. 여기서 보듯이 이소오카닌(Isookanin)은 야누스 키나제 1(Janus kinase 1) 활성을 현저히 억제함을 확인할 수 있었다.
실시예 2: 이소오카닌(Isookanin)의 칼리크레인-5 활성 억제효능 측정
피부의 각질세포에 존재하는 트립신 유사 단백질분해효소인 칼리크레인-5의 효소활성을 측정하기 위해, 재조합 칼리크레인-5 (R&D systems, 미국)와 형광이 결합된 기질인 Boc-Val-Pro-Arg-AMC (R&D systems, 미국)를 반응시켜 효소활성을 측정하였다. 이소오카닌(Isookanin)을 2 μg/ml 재조합 칼리크레인-5 50 μl에 농도별 (10, 20 ppm)로 처리하여 실온에서 10분간 먼저 반응시킨 뒤, 800 μM 칼리크레인-5 기질 50 μl을 더하여 380 nm/480 nm 형광에서 5분간 카이네틱 모드로 측정하였다. 양성대조군으로는 트립신 저해제인 류펩틴(Leupeptin) (Sigma aldrich, 미국)을 사용하였고, 음성대조군으로는 재조합 칼리크레인을 처리하지 않은 조건을 사용하였다. 활성 정도는 각 조건 측정값의 최고 형광값에서 최저 형광값을 빼준 값을 기준으로, 이소오카닌(Isookanin) 무처리군의 형광값과 비교하여 이소오카닌(Isookanin) 처리군의 형광값 정도를 비교하였으며, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2는 이소오카닌(Isookanin)의 칼리크레인-5 활성 억제효과를 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 이소오카닌(Isookanin)은 농도 의존적으로 칼리크레인-5 활성 억제 효과를 나타내었다.
실시예 3: 이소오카닌(Isookanin)의 TLR-2 활성화 억제 효과 측정
이소오카닌(Isookanin)의 TLR-2 활성화 억제에 의한 염증유발 억제효능을 측정하였다. TLR-2와 SEAP (secreted embryonic alkaline phosphatase) reporter gene이 함께 형질주입된 HEK-Blue™ TLR2 cell line (Invivogen, 미국)을 사용하였으며, SEAP reporter gene은 전사인자인 NF-kB와 AP-1 결합 부위를 포함하고 있으므로, TLR-2 활성화에 의해 NF-kB와 AP-1을 활성화되면 SEAP을 생성하여 세포외로 분비하게 된다. 구체적으로 HEK-Blue™ TLR2 cell line을 10% FBS가 포함된 DMEM에 배양한 후 48-웰 플레이트에 웰 당 1 × 10 5 세포수로 접종시킨 뒤 이소오카닌(Isookanin)을 1시간 동안 전처리한 다음 키틴 (Carbosynth, 미국)을 처리하여 12 시간 동안 다시 배양하였다. 여기서 키틴은 모낭충의 구성인자로 염증성 로사시아의 주요한 유발인자로 알려져 있다. 실험에 사용한 키틴은 40 ~ 70 μm 크기로 분리하여 처리하였다. 12시간 배양한 세포 배양 상등액 20 μl를 덜어낸 다음 QUANTI-Blue ™ (Invivogen, 미국) 80 μl와 섞은 후 37℃에서 1시간 동안 반응시켰다. TLR-2 활성화 정도는 Quanti-Blue와 세포외로 분비된 SEAP의 반응으로 인한 발색정도를 비교하여 측정하였고 그 결과를 도 3에 나타내었다.
도 3은 이소오카닌(Isookanin)의 TLR-2 신호전달 활성 억제 효능을 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 이소오카닌(Isookanin)은 키틴에 의해 유도된 TLR-2 신호전달의 활성화를 효과적으로 억제하는 효능을 나타내었다.
실시예 4: 이소오카닌(Isookanin)의 LPS에 의해 유발된 COX-2 프로모터 활성화 억제 효능 측정
마우스 대식세포 (Mouse macrophage, RAW 264.7)를 24-웰 마이크로 플레이트에 웰당 약 2 × 10 5개의 세포가 되도록 접종시키고, 5% 농도의 CO 2배양기에 37℃로 24시간 동안 배양하였다. RAW264.7 세포는 COX-2 프로모터 루시퍼라제 리포터 플라스미드로 트랜스펙션하였으며, 그 후 1, 5 및 10 ppm의 이소오카닌(Isookanin)을 각각 처리한 다음 LPS (100 ng/mL)을 처리하여 배양한 후 세포 배양액을 수집하였다. 그 다음 마이크로플레이트 리더(Sunrise, Tecan, Switzerland)를 이용하여 루시퍼라제 효소 활성을 측정하였고 음성대조군(-)으로는 이소오카닌(Isookanin) 및 LPS를 처리하지 않은 마우스 대식세포를 사용하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4는 이소오카닌(Isookanin)의 LPS에 의한 마우스 대식세포의 COX-2 프로모터 활성화 억제 효과를 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 이소오카닌(Isookanin)은 농도 의존적으로 LPS에 의해 유도된 COX-2 프로모터 활성을 억제하는 효과를 나타내었다.
실시예 5: 이소오카닌(Isookanin)의 COX-2 효소 활성 저해 효능 측정
COX-2 효소 저해활성은 cyclooxygenase (COX) Activity Assay Kit (BioVision)을 이용해서 측정하였다. 키트에 포함한 COX Assay Buffer에 COX Probe 2μl, Diluted COX Cofactor 4μl, 이소오카닌(Isookanin)을 농도별 (5, 10 및 20 ppm)로 각각 첨가하고 음성대조군으로는 이소오카닌 대신 DMSO를 첨가하였고 양성대조군으로 COX-2 Inhibitor인 Celecoxib를 첨가하여 실험을 진행하였다. COX-2 활성을 측정한 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5는 이소오카닌(Isookanin)의 COX-2 효소 저해 활성을 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 이소오카닌(Isookanin)은 농도 의존적으로 COX-2 효소의 활성을 억제하는 효과를 나타내었다.
실시예 6: 이소오카닌(Isookanin)의 자외선 조사에 의해 유발된 PGE 2 발현 억제 효능 측정
인간각질세포(Human Epidermal Keratinocytes, HEKn)를 24-웰 마이크로 플레이트에 웰당 약 2 × 10 5개의 세포가 되도록 접종시키고, 5% 농도의 CO 2 배양기에 37℃로 24시간 동안 배양하였다. 그 후 1, 5 및 10 ppm의 이소오카닌(Isookanin)을 각각 처리한 다음 자외선(UVB 20mJ/cm 2)을 조사하여 배양한 후 세포 배양액을 수집하였다. 그 다음 ELISA kit을 이용하여 PGE 2의 분비정도를 측정하였고 음성대조군(-)으로는 이소오카닌(Isookanin) 및 자외선(UVB)를 처리하지 않은 인간각질세포를 사용하였다. 그 결과를 도 6에 나타내었다.
도 6은 이소오카닌(Isookanin)의 자외선에 의한 인간각질세포의 PGE 2 발현 억제 효과를 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 이소오카닌(Isookanin)은 농도 의존적으로 PGE 2의 발현을 억제하는 효과를 나타내었다.
실시예 7: 이소오카닌(Isookanin)의 LPS에 의해 유발된 PGE 2발현 억제 효능 측정
마우스 대식세포 (Mouse macrophage, RAW 264.7)를 24-웰 마이크로 플레이트에 웰당 약 2 × 10 5개의 세포가 되도록 접종시키고, 5% 농도의 CO 2배양기에 37℃로 24시간 동안 배양하였다. 그 후 1, 5 및 10 ppm의 이소오카닌(Isookanin)을 각각 처리한 다음 LPS (100ng/mL)을 처리하여 배양한 후 세포 배양액을 수집하였다. 그 다음 ELISA kit을 이용하여 PGE 2의 분비정도를 측정하였고 음성대조군(-)으로는 이소오카닌(Isookanin) 및 LPS를 처리하지 않은 마우스 대식세포를 사용하였다. 그 결과를 도 7에 나타내었다.
도 7는 이소오카닌(Isookanin)의 LPS에 의한 마우스 대식세포의 PGE 2 발현 억제 효과를 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 이소오카닌(Isookanin)은 농도 의존적으로 LPS에 의해 유도된 PGE 2의 발현을 억제하는 효과를 나타내었다.
실시예 8: 이소오카닌(Isookanin)의 PGE 2 처리에 의해 유발된 인간 혈관내피세포 증식 억제 효과 측정
인간 혈관내피세포 (human microvascular epithelial cells, HMEC-1, ATCC, 미국)를 10 ng/ml EGF, 1 μg/mL 코티솔, 10 mM 글루타민, 10% FBS가 포함된 MCDB131 Medium (Thermo Fisher, 미국)에 배양한 후 24-웰 플레이트에 웰 당 5 × 10 4 세포수로 접종시키고 5% 농도의 CO 2 배양기에서 37℃, 24시간 동안 배양하였다. 배양한 각 웰에 이소오카닌(Isookanin)을 각각의 농도별로 1시간 동안 전처리한 다음 20 μM 농도의 PGE 2을 처리하여 48시간 동안 다시 배양하였다. 48시간 배양 후 혈관세포의 증식 정도를 MTT 분석법을 이용하여 측정하였고 그 결과를 도 8에 나타내었다.
도 8은 이소오카닌(Isookanin)의 인간 혈관내피세포 증식 억제 효능을 보여주는 그래프이다. 여기에서 보듯이, 이소오카닌(Isookanin)은 PGE 2에 의해 유도된 인간 혈관내피세포의 증식을 효과적으로 억제하는 효능을 나타내었다.
실시예 9: 이소오카닌(Isookanin)의 PGE 2 처리에 의해 유발된 인간 혈관내피세포 이동(Migration) 억제 효과 측정
인간 혈관내피세포 (HMEC-1)를 12-웰 플레이트에 웰 당 2 × 10 5세포수로 접종시키고 5% 농도의 CO 2 배양기에서 37℃, 24시간 동안 배양하였다. 각 well에 세포가 80% 이상 차게 키운 뒤 yellow pipette tip을 이용하여 well의 중앙 부위를 긁어준 뒤 배양한 각 웰에 이소오카닌(Isookanin)을 각각의 농도별로 2시간 동안 전처리한 다음 20 μM 농도의 PGE 2을 처리하고 음성대조군으로 VEGF 100ng/ml을 처리하여 24시간 동안 다시 배양하였다. 24시간 배양 후 혈관세포의 이동 정도를 현미경을 이용하여 관찰하였고 그 결과를 현미경 카메라로 촬영하여 도 9에 나타내었다.
도 9는 이소오카닌(Isookanin)의 인간 혈관세포 이동 억제 효능을 보여주는 사진이다. 여기에서 보듯이, PGE 2는 혈관신생을 유도하는 대표적 혈관생성인자인 VEGF와 유사하게 혈관내피세포의 이동을 촉진하였으며 이소오카닌(Isookanin)은 PGE 2에 의해 유도된 인간 혈관내피세포의 이동을 효과적으로 억제하는 효능을 나타내었다.
실시예 10: 이소오카닌(Isookanin)의 PGE 2 처리에 의해 유발된 인간 혈관세포 tube formation 억제 효과 측정
인간 혈관내피세포 (HMEC-1)를 마트리겔(Matrigel)이 깔려있는 24-웰 플레이트에 웰 당 1.2 × 10 5 세포수로 접종시키고 각 웰에 이소오카닌(Isookanin)을 10ppm로 2시간 동안 전처리한 다음 20 μM 농도의 PGE 2을 처리하고 음성대조군으로 VEGF 100ng/ml을 처리하여 24시간 동안 다시 배양하였다. 24시간 배양 후 혈관세포의 튜브 형성 정도를 현미경을 이용하여 관찰하였고 그 결과를 현미경 카메라로 촬영하고 Image J로 분석하여 도 10 및 11에 나타내었다.
도 10 및 11은 이소오카닌(Isookanin)의 인간 혈관세포 튜브 형성 억제 효능을 보여주는 그래프 및 사진이다. 여기에서 보듯이, PGE 2은 혈관신생을 유도하는 대표적 혈관생성인자인 VEGF와 유사하게 혈관세포의 튜브형성을 촉진하였으며 이소오카닌(Isookanin)은 PGE 2에 의해 유도된 인간 혈관내피세포의 튜브형성을 효과적으로 억제하는 효능을 나타내었다.
실시예 11: 이소오카닌(Isookanin)의 인체 피부에 대한 안전성 확인 시험
본 발명에 따른 이소오카닌(Isookanin)이 인체피부에 안전한지 확인하기 위하여 피부 안전성 검증 실험을 수행하였다. 이를 위해 피부누적자극시험을 실시하였다.
이소오카닌(Isookanin)을 각각 0.1%, 0.5% 및 1%를 함유한 영양 크림을 제조하였다. 구체적으로, 수상인 정제수, 트리에탄올아민 및 프로필렌 글리콜을 70℃로 가열하고 용해시킨 후, 밀납, 유동파라핀, 유상성분, 유화제 및 방부제를 70℃로 가열하여 용해한 액을 첨가하여 유화시켰다. 유화가 완료된 후 상기 용액을 45℃로 냉각시키고 이소오카닌(Isookanin)을 각각 0.1%, 0.5% 및 1% 첨가하고 분산시킨 다음 30℃로 냉각하였다. 상기 이소오카닌(Isookanin)의 함량을 0.1%, 0.5% 및 1%로 증가시킴에 따라서 유동파라핀의 함량을 각각 9.91%, 9.51% 및 9.01%로 줄여가며 영양크림을 제조하였다.
상기와 같이 제조한 영양크림을 사용하여 건강한 30명의 성인을 대상으로 윗 팔뚝 부위에 격일로 총 9회의 24시간 누적 첩포를 시행하여 이소오카닌(Isookanin)이 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다.
첩포 방법은 핀 챔버 (Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부외용제를 15 ㎕씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 하기 수학식 1을 이용하여 점수화 하였으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.
[수학식 1]
평균반응도 = [[{(반응지수 × 반응도)/ (총 피검자수 × 최고점수(4점))}] × 100] ÷ 검사회수(9회)
반응도에서 ±는 1점, +는 2점 및 ++는 4점의 점수를 부여하며, 평균반응도가 3 미만일 때 안전한 조성물로 판정된다.
시험물질 반응이 나타난 피검자 수 평균반응도
1주 2주 3주
1차 2차 3차 4차 5차 6차 7차 8차 9차
± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋
대조군
(스쿠알렌)		 - - - - - - 1 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.09
이소오카닌
(0.1%)
[시험군 1]		 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.00
이소오카닌
(0.5%) [시험군 2]		 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.00
이소오카닌
(1%)
[시험군 3]		 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.00
상기 표 1에 나타난 바와 같이, 시험군 1, 2 및 3 모두 ±, + 및 ++에 해당하는 사람의 수가 모두 0명이고, 평균 반응도 역시 0.00이었다. 상기 시험결과 3 이하의 평균반응도를 나타내므로, 본 발명에 따른 이소오카닌(Isookanin)은 뚜렷한 누적자극 양상을 나타내지 않는 인체 피부에 안전한 물질로 판정되었다.
본 발명의 조성물은 하기와 같이 제제예로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
제제예 1 : 화장료 제제
1-1. 유연화장수
하기의 표 2와 같이 이소오카닌(Isookanin)을 유효성분으로 포함하는 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
이소오카닌(Isookanin) 0.01
글리세린 3.0
부틸렌 글리콜 2.0
프로필렌 글리콜 2.0
카복시비닐폴리머 0.1
에탄올 10.0
트리에탄올아민 0.1
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량 정제수 82.79
총계 100.0
1-2. 영양화장수
하기의 표 3과 같이 이소오카닌(Isookanin)을 유효성분으로 포함하는 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
이소오카닌(Isookanin) 0.01
밀납 4.0
폴리소르베이트 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.5
유동파라핀 5.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5.0
글리세린 3.0
부틸렌 글리콜 3.0
프로필렌 글리콜 3.0
카복시비닐폴리머 0.1
트리에탄올아민 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 69.69
총계 100.0
1-3. 영양크림
하기의 표 4와 같이 이소오카닌(Isookanin)을 유효성분으로 포함하는 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
이소오카닌(Isookanin) 0.01
밀납 10.0
폴리소르베이트 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.5
유동파라핀 10.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 5.0
글리세린 5.0
부틸렌 글리콜 3.0
프로필렌 글리콜 3.0
트리에탄올아민 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 56.79
총계 100.0
1-4. 마사지 크림
하기의 표 5와 같이 이소오카닌(Isookanin)을 유효성분으로 포함하는 마사지크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
이소오카닌(Isookanin) 0.01
밀납 10.0
폴리소르베이트 60 1.5
소르비탄세스퀴올레이트 0.8
유동파라핀 40.0
스쿠알란 5.0
카프릴릭/카프릭 트리글리세라이드 4.0
글리세린 5.0
부틸렌 글리콜 3.0
프로필렌 글리콜 3.0
트리에탄올아민 0.2
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 27.49
총계 100.0
1-5. 팩
하기의 표 6과 같이 이소오카닌(Isookanin)을 유효성분으로 포함하는 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
성분 중량%
이소오카닌(Isookanin) 0.01
폴리비닐알콜 13.0
소듐카복시메틸셀룰로스 0.2
알란토인 0.1
에탄올 5.0
노닐페닐에테르 0.3
방부제, 미량색소, 미량향료 및 미량정제수 81.39
총계 100.0
제제예 2 : 약제학적 제제
2-1. 연고제의 제조
성분 함량(g)
이소오카닌(Isookanin) 0.1
디에탄올아민 1.5
전분폴리비닐프톨리돈 5.0
프로필렌글리콜 30.0
정제수 63.4
총계 100.0
2-2. 연질 캡슐제의 제조
성분 함량(mg)
이소오카닌(Isookanin) 1
젤라틴 141
글리세롤 56.5
에틸바닐린 1
파라옥시안식향산메틸 0.45
파라옥시안식향산프로필 0.05
총계 200.00

Claims (16)

  1. 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 피부 염증성 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 피부 염증성 질환은 아토피성 피부염, 원형 탈모증, 백반증, 건선, 여드름, 부종, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반, 일광화상, 피부 근육염, 피부 T 세포 림프종 및 아형, 결절성 양진, 편평태선, 일차 국소 피부아밀로이드증, 수포성 유사천포창, 이식편 대 숙주 질환의 피부 징후, 유사천포창, 원판상 루푸스, 고리육아종, 만성단순태선, 외음부/음낭/항문 주위 가려움증, 경화태선, 대상포진 후 신경통 가려움증, 모낭성 편평태선 및 독발성 모낭염로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 피부 염증성 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 이소오카닌 또는 이의 염은 야누스키나아제(Janus kinase)의 활성화, TLR-2 활성화, COX-2 발현 및 활성, 프로스타글란딘인 PGE 2의 생성, 및 PGE 2에 의해 유도된 신생혈관생성(angiogenesis)을 억제하는 활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 피부 염증성 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 염증성 피부용 화장료 조성물.
  5. 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 염증성 질환은 위장관 염증성 질환, 피부 염증성 질환, 호흡기 염증성 질환, 눈의 염증성 질환, 또는 자가 면역 질환인 것을 특징으로 하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 위장관 염증성 질환은 염증성 장 질환, 궤양성 대장염, 론병, 콜라겐성 대장염, 림프구성 대장염, 베체트병(Behcet's disease), 셀리악병 (celiac disease), 면역 체크 포인트 억제제 유도 대장염, 회장염, 호산구성 식도염, 이식편 대 숙주 질환 관련 대장염 및 감염성 대장염으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  8. 제6항에 있어서, 상기 피부 염증성 질환은 아토피성 피부염, 원형 탈모증, 백반증, 건선, 여드름, 부종, 안면홍조, 로사시아, 피부 홍반, 일광화상, 피부 근육염, 피부 T 세포 림프종 및 아형, 결절성 양진, 편평태선, 일차 국소 피부아밀로이드증, 수포성 유사천포창, 이식편 대 숙주 질환의 피부 징후, 유사천포창, 원판상 루푸스, 고리육아종, 만성단순태선, 외음부/음낭/항문 주위 가려움증, 경화태선, 대상포진 후 신경통 가려움증, 모낭성 편평태선 및 독발성 모낭염로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  9. 제6항에 있어서, 상기 호흡기 염증성 질환은 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환, 낭포성 섬유증, 폐렴, 만성 폐쇄성 폐 질환(COPD), 낭포성 섬유증 (CF), 폐렴, 간질성 폐 질환 (특발성 폐 섬유증 포함), 급성 폐 손상, 급성 호흡곤란 증후군, 기관지염, 폐기종, 폐쇄성 세기관지염, 폐쇄성 세기관지 기질화 폐렴 (COS라고도 함), 일차 이식편 장애(PGD), 기질화 폐렴 (OP), 급성 거부반응 (AR), 림파구성 세기관지염 (LB), 만성 폐 동종 이식편 장애 (CLAD), 제한성 CLAD (rCLAD 또는 RAS), 호중구 동종 이식편 장애, 알레르기성 비염 및 사르코이드로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  10. 제6항에 있어서, 상기 눈의 염증성 질환은 포도막염, 당뇨병성 망막 병증, 당뇨병성 황반 부종, 안구 건조증, 노인 황반 변성, 망막 정맥 폐색 (RVO) 및 아토피성 각결막염으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  11. 제6항에 있어서, 상기 자가 면역 질환은 관절염, 류마티스 관절염, 소아 류마티스 관절염, 이식 거부반응, 안구 건조증, 건선성 관절염, 당뇨병, 인슐린 의존성 당뇨병, 운동 신경 질환, 골수이형성 증후군, 통증, 근육 감소증, 악액질, 패혈성 쇼크, 전신성 홍반 루푸스, 백혈병, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 강직성 척추염, 골수섬유증, B-세포 림프종, 간세포 암종, 호지킨병, 유방암, 다발성 골수종, 흑색종, 비-호지킨 림프종, 비소 세포 폐암, 난소 투명 세포암, 난소 종양, 췌장 종양, 진성 다혈증, 쇼그렌 증후군, 연조직 육종, 육종, 비장 비대증, T-세포 림프종 및 지중해 빈혈증(thalassemia major)로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  12. 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 피부 외용제 조성물로,
    상기 염증성 질환은 아토피성 피부염, 건선, 여드름, 안면홍조증, 로사시아, 홍반, 일광화상, 전신성 홍반루푸스, 백반증, 탈모, 류마티스성 관절염, 골관절염, 궤양성 대장염, 크론병, 치주염, 지루성 두피염, 죽상동맥경화, 화농성 육아종, 안구 건조증 및 두통으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
  13. 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는, 염증성 질환의 예방 또는 개선용 의약외품 조성물로,
    상기 염증성 질환은 아토피성 피부염, 건선, 여드름, 안면홍조증, 로사시아, 홍반, 일광화상, 전신성 홍반루푸스, 백반증, 탈모, 류마티스성 관절염, 골관절염, 궤양성 대장염, 크론병, 치주염, 지루성 두피염, 죽상동맥경화, 화농성 육아종, 안구 건조증 및 두통으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 의약외품 조성물.
  14. 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물로,
    상기 염증성 질환은 아토피성 피부염, 건선, 여드름, 안면홍조증, 로사시아, 홍반, 일광화상, 전신성 홍반루푸스, 백반증, 탈모, 류마티스성 관절염, 골관절염, 궤양성 대장염, 크론병, 치주염, 지루성 두피염, 죽상동맥경화, 화농성 육아종, 안구 건조증 및 두통으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
  15. 이소오카닌(Isookanin) 또는 이의 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료용 조성물을 개체에 투여하여 개체의 염증성 질환의 예방, 개선, 또는 치료 방법으로,
    상기 염증성 질환은 위장관 염증성 질환, 피부 염증성 질환, 호흡기 염증성 질환, 눈의 염증성 질환, 또는 자가 면역 질환인 것을 특징으로 하는 방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 염증성 질환은 아토피성 피부염, 건선, 여드름, 안면홍조증, 로사시아, 홍반, 일광화상, 전신성 홍반루푸스, 백반증, 탈모, 류마티스성 관절염, 골관절염, 궤양성 대장염, 크론병, 치주염, 지루성 두피염, 죽상동맥경화, 화농성 육아종, 안구 건조증 및 두통으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법.
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040038914A1 (en) * 2000-06-28 2004-02-26 Jean Krutmann Flavone/ flavanone derivatives for the systemic treatment and prophlaxis of uv-induced dermatoses
CN101548982A (zh) * 2009-05-12 2009-10-07 中国人民解放军第二军医大学 一种二氢黄酮类化合物在制备防治糖尿病药物中的应用
WO2019141802A1 (fr) * 2018-01-19 2019-07-25 Valbiotis Extrait obtenu a partir de plusieurs plantes pour son utilisation dans la prevention et/ou le traitement des maladies chroniques inflammatoires de l'intestin

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2623398B1 (fr) * 1987-11-19 1990-04-06 Iphym Sa Compositions medicamenteuses a base de flavonoides et de saponines extraits de chrysanthellum. procede de preparation et applications therapeutiques
JPH07118151A (ja) * 1993-10-21 1995-05-09 Kureha Chem Ind Co Ltd アトピー性皮膚炎治療剤
AU689036B2 (en) * 1995-05-10 1998-03-19 Kureha Chemical Industry Co., Ltd. Pharmaceutical composition containing substance inhibiting HSP47 production
CN1899340A (zh) * 2006-07-12 2007-01-24 中国人民解放军第二军医大学 鬼针草提取物及其应用
KR20120111771A (ko) * 2011-03-28 2012-10-11 동화약품주식회사 상백피에서 단리된 화합물의 용도
CN110897961A (zh) * 2019-12-23 2020-03-24 安徽云指智数据科技有限公司 一种棠梨花复方抗氧化养颜爽肤水及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040038914A1 (en) * 2000-06-28 2004-02-26 Jean Krutmann Flavone/ flavanone derivatives for the systemic treatment and prophlaxis of uv-induced dermatoses
CN101548982A (zh) * 2009-05-12 2009-10-07 中国人民解放军第二军医大学 一种二氢黄酮类化合物在制备防治糖尿病药物中的应用
WO2019141802A1 (fr) * 2018-01-19 2019-07-25 Valbiotis Extrait obtenu a partir de plusieurs plantes pour son utilisation dans la prevention et/ou le traitement des maladies chroniques inflammatoires de l'intestin

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALIYU ABDULLAHI, SHAARI MOHD ROSLY, AHMAD SAYUTI NURUL SYAHIRAH, REDUAN MOHD FARHAN HANIF, SITHAMBARAM SHANMUGAVELU, NOORDIN MUSTA: "Subacute Oral Administration of Clinacanthus nutans Ethanolic Leaf Extract Induced Liver and Kidney Toxicities in ICR Mice", MOLECULES, vol. 25, no. 11, 5 June 2020 (2020-06-05), XP055901626, DOI: 10.3390/molecules25112631 *
COJOCARIU ROXANA; CIOBICA ALIN; BALMUS IOANA-MIRUNA; GUENNE SAMSON; TRIFAN ANCA; STANCIU CAROL; HRI?CU LUMINITA; LEFTER RADU: "Antioxidant Capacity and Behavioral Relevance of a Polyphenolic Extract of Chrysanthellum americanumin a Rat Model of Irritable Bowel Syndrome.", OXIDATIVE MEDICINE AND CELLULAR LONGEVITY, HINDAWI LIMITED, vol. 2019, 1 January 2019 (2019-01-01), pages 3492767 - 3492767-13, XP009530286, ISSN: 1942-0994, DOI: 10.1155/2019/3492767 *
WU JYH-HORNG, TUNG YU-TANG, CHIEN SHIH-CHANG, WANG SHENG-YANG, KUO YUEH-HSIUNG, SHYUR LIE-FEN, CHANG SHANG-TZEN: "Effect of Phytocompounds from the Heartwood of Acacia confusa on Inflammatory Mediator Production", JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, US, vol. 56, no. 5, 1 March 2008 (2008-03-01), US , pages 1567 - 1573, XP055901622, ISSN: 0021-8561, DOI: 10.1021/jf072922s *
XIN YING-JI, CHOI SOOJUNG, ROH KYUNG-BAEG, CHO EUNAE, JI HYANGGI, WEON JIN BAE, PARK DEOKHOON, WHANG WAN KYUNN, JUNG EUNSUN: "Anti-Inflammatory Activity and Mechanism of Isookanin, Isolated by Bioassay-Guided Fractionation from Bidens pilosa L.", MOLECULES, vol. 26, no. 2, 1 January 2021 (2021-01-01), pages 255, XP055901612, DOI: 10.3390/molecules26020255 *

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