WO2021230144A1 - 擬似移動層方式クロマト分離方法及び擬似移動層方式クロマト分離システム - Google Patents
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Definitions
- the present invention relates to a pseudo-moving layer type chromatographic separation method and a pseudo-moving layer type chromatographic separation system.
- a plurality of unit packed towers (hereinafter, simply “packed towers") filled with an adsorbent having a selective adsorption ability for a specific component among two or more components contained in the stock solution. Also called “column”), they are connected in series via piping, and the packed bed at the most downstream part and the packed tower at the most upstream part are connected to construct an endless circulation system. do.
- the stock solution and eluent are supplied to this circulation system, and the fast moving speed (weakly adsorptive fraction) and slow (strongly adsorptive fraction) in the circulation system, and the moving speed if necessary.
- Patent Document 1 describes a step of extracting a medium-adsorbent fraction while supplying an eluent and a stock solution to a series of improved pseudo-moving layer devices, and a weakly adsorbable fraction and a strong adsorption while supplying an eluent.
- a method for continuously separating three or more fractions having different affinities for an adsorbent by repeating the step of extracting the sex fraction is disclosed.
- one kind of eluent is basically used. Therefore, when a stock solution containing a component having strong adsorptivity to an adsorbent or a stock solution containing a component that easily causes tailing (a phenomenon in which the concentration distribution becomes broad) is supplied to the circulation system, these components are desorbed (desorbed). Therefore, it is necessary to use a large amount of eluent.
- the use of a large amount of eluent leads to an increase in the concentration cost of the withdrawal liquid, and also leads to a decrease in the production amount of the target purified product per adsorbent.
- the chromatographic separation of the pseudo-moving layer method can continuously obtain the desired purified object with high purity, its application to the medical field and the like is also being studied.
- fragments that do not function sufficiently as an antibody produced by cleavage of the antibody and antibodies aggregate in the extract or culture solution of the cultured cells that produce the antibody. Huge aggregates are formed.
- the fragment has few sites of interaction with the adsorbent and has weak adsorptivity to the adsorbent. On the contrary, the aggregate has strong adsorptivity to the adsorbent.
- the present invention is a chromatographic separation method using a pseudo-moving layer method, which enables high-purity chromatographic separation of components to be purified in a stock solution with a smaller amount of adsorbent.
- the challenge is to provide.
- Another object of the present invention is to provide a chromatographic separation system suitable for carrying out the above chromatographic separation method.
- the present inventors used two or more eluents in the chromatographic separation method using the pseudo-moving layer method, and also used the undiluted solution supply port in the circulatory system and the strongly adsorptive fraction. It has been found that the above-mentioned problems can be solved by setting the extraction port, the medium adsorption fraction extraction outlet, and the weak adsorption fraction extraction outlet in a specific positional relationship.
- the present invention has been further studied based on these findings and has been completed.
- a stock solution supply port F In the piping of the circulation system, a stock solution supply port F, two or more eluent supply ports D corresponding to each of the two or more kinds of eluents, and a weakly adsorbable fraction containing the weakly adsorbable component.
- An outlet A, an outlet B for a medium adsorptive fraction containing the medium adsorptive component, and an outlet C for a strong adsorptive fraction containing the strong adsorptive component are provided.
- the positions of the outlet A, the outlet B, and the outlet C are as follows (a) to (c): (A)
- the outlet B is provided on the downstream side of the stock solution supply port F with at least one section interposed therebetween.
- the outlet C is provided in a pipe having the stock solution supply port F, or the outlet C is provided on the upstream side of the stock solution supply port F with at least one section interposed therebetween.
- the outlet A is provided in the pipe having the outlet B, or the outlet A is provided on the downstream side of the outlet B with at least one section interposed therebetween.
- the chromatographic separation method comprises repeating the following steps (A) and (B) in order: a pseudo-moving layer type chromatographic separation method: [Step (A)]
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F, and two or more kinds of eluents are supplied simultaneously or separately from the two or more eluent supply ports D, and the weakly adsorbable fraction is supplied from the outlet A.
- Step (B) After the completion of the step (A), the stock solution supply port F, the eluent supply port D, the outlet A, the outlet B, and the outlet C are located on the downstream side while maintaining their relative positional relationships. Steps to move to. [2] Using the above-mentioned two or more kinds of eluents, the following sub-steps (A1-8), (A2-8), (A3-8) and (A4-8) are performed in the step (A) [1]. Pseudo-moving layer method chromatographic separation method described in 1.
- ⁇ Substep (A1-8)> The undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 2 as the undiluted solution supply port F, and the weakly adsorbable fraction is extracted from the undiluted outlet A with the downstream end of section 3 as the outlet A;
- ⁇ Substep (A2-8)> The upstream end of Section 1 is used as the eluent supply port D-II to supply the eluent d-II from the eluent supply port D-II, and the upstream end of Section 2 is used as the eluent supply port D-III.
- the strongly adsorbent fraction is extracted, the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream end of section 3 is the eluent.
- the eluent d-III is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II
- the upstream end of section 3 is the eluent.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 3 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 2; ⁇ Substep (A4-8)>
- the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 2 is used as the outlet B to extract the medium adsorptive fraction from the outlet B, and the upstream end of section 3 is used as the eluent supply port D-IV from the eluent supply port D-IV.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the downstream side of section 2 is supplied.
- the eluent is extracted from the eluent supply port D-IV with the end as the medium adsorptive fraction extraction outlet B and the eluent supply port D-IV at the upstream end of section 3 as the eluent supply port D-IV.
- the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI with the upstream end of section 1 as the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the outlet C from the outlet C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted, the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream end of section 3 is the eluent.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 3 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 2; ⁇ Substep (A4-10)>
- the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 2 is used as the outlet B to extract the medium adsorptive fraction from the outlet B, and the upstream end of section 3 is used as the eluent supply port D-IV from the eluent supply port D-IV.
- It is divided into five sections 1 to 5 that are continuous in an annular shape from the side to the downstream side, and is intermediate between the weakly adsorbable component and the strongly adsorbent component to the adsorbent contained in the undiluted solution.
- It is a pseudo-moving layer type chromatographic separation method including separating a medium-adsorptive component having a good adsorptivity using two or more kinds of eluents.
- a stock solution supply port F two or more eluent supply ports D corresponding to each of the two or more kinds of eluents, and a weakly adsorbable fraction containing the weakly adsorbable component.
- An outlet A, an outlet B for a medium adsorptive fraction containing the medium adsorptive component, and an outlet C for a strong adsorptive fraction containing the strong adsorptive component are provided.
- the positions of the outlet A, the outlet B, and the outlet C are as follows (a) to (c): (A) The outlet B is provided on the downstream side of the stock solution supply port F with at least one section interposed therebetween. (B) The outlet C is provided in a pipe having the stock solution supply port F, or the outlet C is provided on the upstream side of the stock solution supply port F with at least one section interposed therebetween.
- the outlet A is provided in the pipe having the outlet B, or the outlet A is provided on the downstream side of the outlet B with at least one section interposed therebetween.
- the chromatographic separation method comprises repeating the following steps (A) and (B) in order: a pseudo-moving layer type chromatographic separation method: [Step (A)]
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F, and two or more kinds of eluents are supplied simultaneously or separately from the two or more eluent supply ports D, and the weakly adsorbable fraction is supplied from the outlet A.
- Step (B) After the completion of the step (A), the stock solution supply port F, the eluent supply port D, the outlet A, the outlet B, and the outlet C are located on the downstream side while maintaining their relative positional relationships. Steps to move to. [6] The pseudo-moving layer according to [5], wherein the following sub-steps (A1-11), (A2-11) and (A3-11) are performed in the step (A) using the two or more kinds of eluents.
- Method Chromatographic separation method ⁇ Substep (A1-11)>
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F, and the eluent is supplied from the eluent supply port D-III with the upstream end of section 4 as the eluent supply port D-III.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the outlet A.
- the strongly adsorptive fraction is extracted, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-III.
- the eluent d-III By supplying the eluent d-III and extracting the weakly adsorbable fraction from the outlet A. Make the desorption force of the eluent circulating in Section 1 the strongest, The desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3; ⁇ Substep (A3-11)>
- the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 3 is used as the outlet B to extract the medium adsorptive fraction from the outlet B, and the upstream end of section 4 is used as the eluent supply port D-IV from the eluent supply port D-IV.
- the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI with the upstream end of section 1 as the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the outlet C from the outlet C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted, the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream end of section 4 is the eluent.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3; ⁇ Substep (A4-12)>
- the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 3 is used as the outlet B to extract the medium adsorptive fraction from the outlet B, and the upstream end of section 4 is used as the eluent supply port D-IV from the eluent supply port D-IV.
- the terms “upstream” and “downstream” are used with respect to the flow direction of the fluid in the circulatory system. That is, the “upstream side” with respect to a certain part of the circulatory system means the side where the fluid flows toward the part, and the “downstream side” means the side where the fluid flows out from the part. means.
- the "strongly adsorbent component” means a component having a strong adsorptive power to an adsorbent among a plurality of components contained in the undiluted solution, and the “weakly adsorbable component” is contained in the undiluted solution.
- the "medium adsorptive component” has a weaker adsorptive property to the adsorbent than the strong adsorbent component, but adsorbs more than the weak adsorbent component. It means a component having strong adsorptivity to the agent.
- strong adsorption “medium adsorption” and “weak adsorption” refer to the relative strength of the adsorption force when comparing the adsorption force of each component contained in the undiluted solution to the adsorbent. Is shown.
- strongly adsorbable component may each be composed of a single component or a plurality of components. Further, the plurality of components may have the same or different adsorption power.
- the grouping of each component in the undiluted solution into “strongly adsorptive component”, “medium adsorptive component” and “weakly adsorptive component” can be appropriately set according to the purpose.
- the two kinds of components are combined in the order of the strongest adsorptive power to make a strong adsorptive component, and the component with the third strongest adsorptive power to the adsorbent is medium-adsorbed.
- a component having the weakest adsorptive power to a sex component or an adsorbent can be positioned as a weak adsorbent component.
- the component with the strongest adsorptive power to the adsorbent is the strong adsorptive component
- the component with the second and third adsorptive power to the adsorbent is combined to be the medium adsorptive component
- the component with the weakest adsorptive power to the adsorbent can also be positioned as a weakly adsorptive component.
- the component with the strongest adsorptive power to the adsorbent is the strong adsorptive component
- the component with the second adsorbent power is the medium adsorptive component
- the component with the third adsorbent power to the adsorbent is the weakest component. It can also be positioned as a weakly adsorptive component.
- the "desorption force" of the eluent means the strength of the action of desorbing the component adsorbed on the adsorbent from the adsorbent.
- the components to be purified in the undiluted solution can be separated with high purity while suppressing the amount of the adsorbent used.
- the pseudo-moving layer-type chromatographic separation system of the present invention can be suitably used for carrying out the pseudo-moving layer-type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 1 is a system diagram showing an example of the pseudo-moving layer type chromatographic separation system of the present invention.
- FIG. 2 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in one embodiment of the pseudo-moving layer-type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 3 is a flow chart of each sub-step that completes the step (A) shown in FIG. 2, carries out the step (B), and constitutes the subsequent step (A).
- FIG. 4 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in another embodiment of the pseudo-moving layer-type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 5 is a flow chart of each sub-step constituting the step (B) after the step (A) shown in FIG. 4 is completed.
- FIG. 1 is a system diagram showing an example of the pseudo-moving layer type chromatographic separation system of the present invention.
- FIG. 2 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in one embodiment of the pseudo
- FIG. 6 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 7 is a flow chart of each sub-step constituting the step (B) after the step (A) shown in FIG. 6 is completed.
- FIG. 8 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 9 is a flow chart of each sub-step constituting the step (B) after the step (A) shown in FIG. 8 is completed.
- FIG. 10 is a flow chart showing the operation process of the single column step gradient in Comparative Examples 1 and 2.
- FIG. 10 is a flow chart showing the operation process of the single column step gradient in Comparative Examples 1 and 2.
- FIG. 11 is a flow chart showing an operation process of pseudo mobile phase chromatographic separation in Comparative Example 3.
- FIG. 12 is a flow chart showing an operation process of pseudo mobile phase chromatographic separation in Comparative Example 4.
- FIG. 13 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 14 is a flow chart of each sub-step that completes the step (A) shown in FIG. 13, carries out the step (B), and constitutes the subsequent step (A).
- FIG. 15 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 16 is a flow chart of each sub-step constituting the step (B) after the step (A) shown in FIG. 15 is completed.
- FIG. 17 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 18 is a flow chart of each sub-step that completes the step (A) shown in FIG. 17, carries out the step (B), and constitutes the subsequent step (A).
- FIG. 19 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 20 is a flow chart of each sub-step constituting the step (B) after the step (A) shown in FIG. 19 is completed.
- FIG. 21 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 22 is a flow chart of each sub-step that completes the step (A) shown in FIG. 21, carries out the step (B), and constitutes the subsequent step (A).
- FIG. 23 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 24 is a flow chart of each sub-step that completes the step (A) shown in FIG. 23, performs the step (B), and constitutes the subsequent step (A).
- FIG. 22 is a flow chart of each sub-step that completes the step (A) shown in FIG. 21, carries out the step (B), and constitutes the subsequent step (A).
- FIG. 23 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic
- FIG. 25 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 26 is a flow chart of each sub-step that completes the step (A) shown in FIG. 25, performs the step (B), and constitutes the subsequent step (A).
- FIG. 27 is a flow chart of each sub-step constituting step (A) in still another embodiment of the pseudo-moving layer type chromatographic separation method of the present invention.
- FIG. 28 is a flow chart of each sub-step that completes the step (A) shown in FIG. 27, performs the step (B), and constitutes the subsequent step (A).
- the method of the present invention is carried out using a circulation system in which a plurality of unit packed towers filled with an adsorbent are connected in series and in an endless manner via a pipe.
- the circulatory system itself used in the pseudo-moving layer method is known, and for example, Japanese Patent Application Laid-Open No. 2009-36536 and Japanese Patent No. 4606092 can be referred to.
- the circulatory system will be described below with reference to the drawings, but the present invention is not limited to these aspects except as specified in the present invention. It should be noted that the drawings referred to below are explanatory views for facilitating the understanding of the present invention, and the size and relative magnitude relationship of each configuration may be changed in magnitude for convenience of explanation, and the actual relationship may be used. It is not shown as it is.
- FIG. 1 A preferred embodiment of the circulatory system used in the method of the present invention is shown in FIG.
- the circulation system 100 shown in FIG. 1 is provided with four unit packed towers (columns) filled with an adsorbent Ab (unit packed towers 10a, 10b, 10c, 10d), and the outlets of the unit packed towers are adjacent to each other. It is connected to the entrance of the unit packed tower via the pipe 1, and each unit packed tower is connected in series as a whole. Then, the outlet of the rearmost unit packed tower (for example, the unit packed tower 10d) is connected to the inlet of the frontmost unit packed tower (for example, the unit packed tower 10a) via the pipe 1, and all the unit packed towers are endless. They are connected in a shape (annular).
- the unit filling columns 10a to 10d may have the same or different internal shapes, sizes, and filling amounts of the adsorbents. As the unit filling columns 10a to 10d, it is preferable to use ones having the same internal shape, size, and filling amount of the adsorbent (preferably the same ones).
- a circulation pump P1 for circulating a fluid in the direction of an arrow can be arranged in the circulation system 100.
- the circulation pump P1 is preferably a metering pump.
- shutoff valves R1, R2, R3, and R4 capable of blocking the flow of fluid to the unit filling tower on the downstream side thereof are provided. It is provided.
- a fraction containing a large amount of a weakly adsorbent component to the adsorbent Ab (in the present specification, " The weakly adsorptive fraction extraction lines 2a, 2b, 2c, and 2d for extracting the "weakly adsorptive fraction to the adsorbent Ab" or simply "weakly adsorbent fraction") are branched and arranged.
- Each weakly adsorbing fraction extraction line 2a, 2b, 2c, 2d has a weakly adsorbing fraction extraction valve A1, A2, A3, A4 capable of opening and closing each weakly adsorbing fraction extraction line, respectively. It is provided.
- the weakly adsorptive fraction extraction lines 2a, 2b, 2c and 2d are merged into one weakly adsorptive fraction confluence tube 2J.
- a fraction containing a large amount of a medium adsorptive component to the adsorbent Ab (the present specification).
- 3a, 3b, 3c, and 3d are branched and arranged.
- the medium-adsorption fraction extraction lines 3a, 3b, 3c, and 3d have medium-adsorption fraction extraction valves B1, B2, B3, and B4 that can open and close each medium-adsorption fraction extraction line, respectively. It is provided.
- the medium adsorptive fraction extraction lines 3a, 3b, 3c, and 3d are merged into one medium adsorptive fraction confluence tube 3J.
- a fraction containing a large amount of a strong adsorptive component to the adsorbent Ab (the present specification).
- 4a, 4b, 4c, and 4d are branched and arranged.
- the strong adsorptive fraction extraction lines 4a, 4b, 4c, and 4d have strong adsorptive fraction extraction valves C1, C2, C3, and C4 that can open and close each strong adsorptive fraction extraction line, respectively. It is provided.
- the strongly adsorptive fraction extraction lines 4a, 4b, 4c, and 4d are merged into one strong adsorptive fraction confluence tube 4J.
- any one of the weakly adsorptive fraction extraction valves A1, A2, A3, and A4 is opened.
- the connection site between the weak adsorption fraction extraction line on which the opened weak adsorption fraction extraction valve is installed and the pipe 1 is the extraction / outlet of the weak adsorption fraction in step (A) described later. It becomes A.
- any one of the medium adsorption fraction extraction valves B1, B2, B3 and B4 is opened.
- the connection site between the medium adsorption fraction extraction line on which the opened medium adsorption fraction extraction valve is installed and the pipe 1 is the extraction / outlet of the medium adsorption fraction in step (A) described later. It becomes B.
- step (A) described later any one of the strongly adsorptive fraction extraction valves C1, C2, C3 and C4 is opened.
- the connection site between the strong adsorptive fraction extraction line on which the opened strong adsorptive fraction extraction valve is installed and the pipe 1 is the outlet for the strong adsorptive fraction in step (A) described later. It becomes C.
- the circulatory system 100 may be provided with a safety valve (or relief valve) (not shown) at an appropriate portion in order to prevent the pressure of the circulatory system 100 from rising too much. Further, it is preferable to provide check valves T1, T2, T3, and T4 for preventing backflow between two adjacent unit filling towers.
- the circulation system 100 has a configuration in which the undiluted solution 7 contained in the undiluted solution tank 6 can be supplied. Further, the circulation system 100 has a configuration in which two or more kinds of eluents can be supplied. In FIG. 1, as an example, a mode in which four kinds of eluents are supplied is shown.
- the undiluted solution 7 is supplied via the undiluted solution supply line 11 by the undiluted solution supply pump P2 whose supply flow rate can be controlled.
- the stock solution supply pump P2 is preferably a metering pump. As shown in FIG.
- the undiluted solution supply line 11 is branched into four undiluted solution supply branch lines 11a, 11b, 11c, 11d, and the undiluted solution is supplied through the undiluted solution supply branch lines 11a, 11b, 11c, 11d, respectively. It is configured so that it can be supplied to the entrances of each unit packed bed 10a, 10b, 10c, and 10d.
- the undiluted solution supply branch lines 11a, 11b, 11c, 11d are provided with openable and closable undiluted solution supply valves F1, F2, F3, and F4, and pass through the undiluted solution supply branch line having an opened undiluted solution supply valve.
- the undiluted solution is supplied to the unit filling tower connected downstream.
- step (A) described later any one of the stock solution supply valves F1, F2, F3, and F4 is opened.
- the connection portion between the undiluted solution supply branch line in which the opened undiluted solution supply valve is installed and the pipe 1 becomes the undiluted solution supply port F in step (A) described later.
- FIG. 1 shows a form in which four types of eluents having different desorption forces are supplied.
- the eluent 9a contained in the eluent tank 8a is supplied to the eluent supply line 12 by the eluent supply pump P3 whose supply flow rate can be controlled.
- the eluent 9b contained in the eluent tank 8b is supplied to the eluent supply line 13 by the eluent supply pump P4 whose supply flow rate can be controlled.
- the eluent 9c contained in the eluent tank 8c is supplied to the eluent supply line 14 by the eluent supply pump P5 whose supply flow rate can be controlled.
- the eluent 9d contained in the eluent tank 8d is supplied to the eluent supply line 15 by the eluent supply pump P6 whose supply flow rate can be controlled.
- the eluent supply pumps P3 to P6 are preferably metering pumps.
- the eluent supply line 12 is branched into four eluent supply branch lines 12a, 12b, 12c, 12d as shown in FIG. 1, and elutes through the eluent supply branch lines 12a, 12b, 12c, 12d.
- the liquid can be supplied to the inlets of each unit filling tower 10a, 10b, 10c, and 10d.
- Each eluent supply branch line 12a, 12b, 12c, 12d is provided with an eluent supply valve E1a, E2a, E3a, E4a that can be opened and closed, and an eluent supply branch line having an opened eluent supply valve is provided.
- the eluate is supplied through the unit filling tower connected downstream thereof.
- the eluent supply line 13 is branched into four eluent supply branch lines 13a, 13b, 13c, 13d, and the eluent supply line 14 is divided into four eluent supply branch lines 14a, 14b, 14c, 14d.
- the eluent supply line 15 is branched into four eluent supply branch lines 15a, 15b, 15c, 15d, and each eluent can be supplied to the inlet of each unit filling column 10a, 10b, 10c, 10d. It has a good structure.
- the eluent supply branch lines 13a, 13b, 13c, and 13d are provided with eluent supply valves E1b, E2b, E3b, and E4b that can be opened and closed, respectively, and the eluent supply branch lines 14a, 14b, 14c, and 14d are provided with eluent supply branch lines 14a, 14b, 14c, and 14d, respectively.
- Eluent supply valves E1c, E2c, E3c, and E4c that can be opened and closed are provided, respectively, and the eluent supply branch lines 15a, 15b, 15c, and 15d are provided with eluent supply valves E1d, E2d, and E3d that can be opened and closed, respectively. E4d is provided.
- step (A) described later the connection portion between the eluent supply branch line in which the opened eluent supply valve is installed and the pipe 1 becomes the eluent supply port D. Since two or more types of eluents are used in the method of the present invention, there are a plurality of eluent supply valves to be opened in step (A) described later. Therefore, in step (A) described later, there are a number (two or more) of eluent supply ports D according to the type of eluent to be used.
- the circulation system determines the positions of the stock solution supply port F, the outlet A for the weakly adsorbent fraction, the outlet B for the medium adsorptive fraction, and the outlet C for the strongly adsorbent fraction. , The relationship satisfies the following (a) to (c).
- the medium adsorptive fraction extraction port B is provided downstream of the stock solution supply port F with at least one unit filling tower (at least one section) interposed therebetween.
- the strong adsorptive fraction extraction port C is provided in the pipe having the stock solution supply port F, or the strong adsorptive fraction extraction port C is provided in at least one unit filling tower (at least) of the stock solution supply port F. It is installed on the upstream side with one section) in between.
- “providing the strong adsorptive fraction extraction port C in the pipe having the stock solution supply port F” means that a unit filling tower is provided between the strong adsorptive fraction extraction port C and the stock solution supply port F. It means that it is not arranged.
- the strong adsorptive fraction extraction port C is located on the upstream side of the same pipe as the stock solution supply port F. prepare. This applies to all the relationships between the outlet and the supply port provided in the same pipe. In other words, in the circulation system, if a certain outlet and supply port are provided in the same pipe (when the outlet and supply port are provided without sandwiching the unit filling tower), the outlet is the supply port. It is placed on the upstream side of the same pipe. This is to prevent the supplied liquid from being withdrawn from the outlet before it reaches the unit filling tower downstream of the supplied liquid. In the above (b), it is preferable that the strongly adsorptive fraction extraction port C is provided on the upstream side of the stock solution supply port F with at least one unit filling tower (at least one section) interposed therebetween.
- the weakly adsorbable fraction extraction outlet A is provided in the pipe having the medium adsorption fraction extraction outlet B, or the weak adsorption fraction extraction outlet A is provided in the medium adsorption fraction extraction outlet B. It is installed on the downstream side of at least one unit filling tower (at least one section).
- "providing the weakly adsorbable fraction extraction port A in the pipe having the medium adsorption fraction extraction port B” means that the weak adsorption fraction extraction outlet A and the medium adsorption fraction extraction outlet B are used. It means that the unit filling tower is not arranged between.
- the weakly adsorbable fraction extraction port A may be provided on the downstream side of the medium adsorption fraction extraction outlet B with at least one unit packed tower (at least one section) interposed therebetween. preferable.
- Step (A) The undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F, and two or more kinds of eluents are supplied from two or more eluent supply ports D at the same time or separately, and the weakly adsorbable fraction is supplied from the weakly adsorbable fraction outlet A.
- step (A) the total amount of the undiluted solution supplied from the undiluted solution supply port F and the amount of the eluent supplied from the eluent supply port D, and the weakly adsorbable fraction extraction port A are extracted.
- the amount of liquid drawn from Y is the same as the amount of liquid supplied from X. Further, when the liquid is supplied from the downstream side of X and the upstream side of Y, the amount of the liquid extracted from Y is the amount of the liquid supplied from X and the amount of the liquid downstream from X. It is the same as the total amount of the liquid supplied from the upstream side of Y.
- the supply amount of the eluent supplied from the eluent supply port D1 and the extraction amount of the strongly adsorptive fraction extracted from the strong adsorptive fraction extraction port C are the same. be.
- the total of the supply amount of the eluent supplied from the eluent supply port D2 and the supply amount of the stock solution supplied from the stock solution supply port F is the weakly adsorbable fraction extraction port A. It is the same as the amount of the weakly adsorptive fraction extracted from.
- the above-mentioned "supply simultaneously or separately” means that the products are supplied without a time difference (without shifting the supply timing), or with a time difference (supply timing is shifted). ) Means to supply.
- one step (A) when two or more supply ports for supplying two or more kinds of liquids are arranged in the same pipe (two or more supply ports do not sandwich the unit filling tower in the pipe).
- the two or more kinds of liquids are not supplied at the same time. That is, in one step (A), the supply of the two or more kinds of liquids is performed as different sub-steps.
- the two or more outlets for extracting two or more fractions are arranged in the same pipe (two or more outlets do not sandwich the unit packed tower in the pipe).
- the two or more fractions are not extracted at the same time. That is, in one step (A), the extraction of the two or more kinds of fractions is performed as different sub-steps.
- Step (B) After the completion of the step (A), the stock solution supply port F, the eluent supply port D, the weakly adsorbable fraction extraction port A, the medium adsorption fraction extraction port B, and the strong adsorption fraction extraction port C are relative to each other.
- step (A) when the connection portion between the undiluted solution supply branch line in which the undiluted solution supply valve F1 is installed and the pipe 1 is the undiluted solution supply port F, in step (B), the undiluted solution supply port F becomes The undiluted solution supply branch line F2 in which the undiluted solution supply valve F2 is installed and the pipe 1 are connected to each other.
- step (B) the undiluted solution supply port F becomes The undiluted solution supply branch line F2 in which the undiluted solution supply valve F2 is installed and the pipe 1 are connected to each other.
- the eluent supply port D the weakly adsorbable fraction extraction port A, the medium adsorption fraction extraction port B, and the strong adsorption fraction extraction port C.
- the transfer of each of the above supply ports and outlets to the downstream side of one unit filling tower can be performed by adjusting the opening and closing of various pumps and various valves arranged in the circulation system.
- step (A2) each unit packed tower in the step (A) immediately before the step (B).
- the liquid is supplied and withdrawn to each unit filling tower on the downstream side of the step (A1) by one amount in the same manner as in the case of the above.
- the step (A) is preferably composed of a plurality of substeps.
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F, two or more kinds of each eluent are supplied from two or more eluent supply ports D, and the weakly adsorbable fraction is weakly adsorbed from the extraction port A.
- substep the extraction of the medium adsorption fraction, the extraction of the medium adsorption fraction from the medium adsorption fraction extraction outlet B, and the extraction of the strong adsorption fraction from the strong adsorption fraction extraction outlet C are performed is determined by the present invention. It can be appropriately set according to the purpose within the range that does not impair the effect of.
- the step (A) preferably includes a sub-step for supplying the undiluted solution and a sub-step for not supplying the undiluted solution. That is, it is preferable that there is a time for supplying the undiluted solution and a time for not supplying the undiluted solution in the step (A).
- step (A) two or more kinds of eluents are supplied. It is preferable that the supply port of the eluent having the strongest desorption force among these two or more kinds of eluents is provided in the pipe on the upstream side of the strongly adsorptive fraction extraction port C with the unit packed tower in between. For the remaining eluent supply port or undiluted solution supply port, install it in the same pipe as the eluent supply port with the strongest desorption force, or install a unit filling tower rather than the eluent supply port with the strongest desorption force. It is preferable to provide it on the upstream side by sandwiching it.
- one of the pipes until reaching the pipe is provided with an eluent supply port or a stock solution supply port other than the strongest eluent.
- the strongest eluent is provided.
- the eluent supply port is provided in the pipe connecting the two or more unit filling towers. Or it means that the undiluted solution supply port is not provided).
- the two or more supply ports corresponding to these may be partially provided in the same pipe, or each of them may be provided. May be provided in separate pipes sandwiching the unit filling tower.
- the supply port of the eluent other than the strongest eluent and the stock solution supply port may be provided in the same pipe. It is a preferred embodiment of the present invention that one of the supply ports of the eluent other than the eluent having the strongest desorption force is provided in the same pipe as the supply port of the eluent having the strongest desorption force. be.
- step (A) while supplying the eluent having the strongest desorbing power among two or more kinds of eluents, the strong adsorptivity is the same as the supply amount of the eluent having the strongest desorbing power from the downstream thereof. It is preferable to use a form in which the fraction is extracted. In this case, at least one unit packed tower is arranged between the supply port of the eluent having the strongest desorption force and the strongly adsorptive fraction extraction port downstream thereof, and another supply port is arranged between them. Is preferably in a non-existent form.
- step (A) while supplying the eluent having the second strongest desorption force among two or more kinds of eluents, adsorption in the same amount as the supply amount of the eluent having the second strongest desorbing force from the downstream thereof. It is preferable to provide a time zone (sub-step) for extracting the sex fraction.
- at least one unit-filled tower preferably a plurality of unit-filled towers is arranged between the supply port of the eluent having the second strongest desorption force and the middle-adsorbing fraction extraction outlet downstream thereof.
- step (A) While performing step (A), it is preferable to always extract the weakly adsorptive fraction. Therefore, even when the step (A) is composed of a plurality of substeps, it is preferable that the weakly adsorptive fraction is always extracted in the plurality of substeps.
- the method of the present invention it is preferable to use three or more kinds of eluents having different desorption forces from each other, more preferably to use four or more kinds of eluents having different desorption forces from each other, and 4 to 6 having different desorption forces from each other. It is more preferable to use a kind of eluent, and it is particularly preferable to use 4 or 5 kinds of eluents having different desorption forces from each other.
- the type of eluent is not particularly limited, and is appropriately set depending on the relationship between the type of adsorbent and the type of components in the undiluted solution.
- a plurality of eluents having different desorbing powers can be prepared by changing the salt concentration of the eluent.
- a cation exchange resin when used, a plurality of eluents having different NaCl concentrations can be used as two or more kinds of eluents.
- a preferred embodiment of the combination of sub-steps in the above step (A) will be described below. These embodiments can be carried out by using the system of FIG. 1 or by using a system that can implement the desired embodiment according to the system of FIG. Further, the following embodiment is an example of the present invention.
- two or more kinds of eluents positioned as the following eluent d-1 are prepared, and eluent d-1 is prepared. It is also possible to change the type of eluent d-1 used between the substeps of supplying. This also applies to the eluents d-II to d-V.
- liquids d-1 may be the same as each other or may be different from each other. This also applies to the eluents d-II to d-V.
- a circulatory system having four or more unit packed towers is used. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into four sections 1 to 4 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the first embodiment, the following sub-steps (A1-1), (A2-1) and (A3-1) are performed in the step (A).
- step (A) includes sub-steps X, Y and Z, and sub-steps X and Y. And Z can be appropriately set as long as the effect of the present invention is not impaired. Further, the step (A) may include other substeps other than the substeps X, Y and Z.
- a form of "performing sub-steps X, Y and Z in step (A)” typically includes a form in which sub-steps X, Y and Z are sequentially performed as step (A), and the present invention has this embodiment. Not limited to.
- performing sub-steps X, Y and Z in step (A) means that sub-step Y is performed immediately after sub-step X, sub-step Z is performed immediately after sub-step Y, and immediately after sub-step Z. It is not limited to the form in which the step (B) is performed and the sub-step X is performed immediately after the step (B).
- At least one between the sub-step Z and the step (B) can incorporate other sub-steps (sub-steps other than sub-steps X, Y and Z) as long as the effects of the present invention are not impaired.
- the desired effect may be obtained even if additional substeps other than substeps X, Y and Z are included, which is referred to herein. It is easy to understand if you are a person skilled in the art.
- ⁇ Substep (A1-1)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI to supply the eluent d-I from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction outlet C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream side of section 3 is supplied.
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the end as the undiluted solution supply port F, and the weakly adsorbable fraction is extracted from the undiluted outlet A with the downstream end of the section 4 as the weakly adsorbable fraction extraction port A.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 3 and 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 2.
- the supply of each of the above liquids and the extraction of each fraction are performed continuously (that is, in the sub-step (A1-1), the supply of each of the above liquids is always performed. All of the extraction of each fraction is done constantly.)
- the description of the strength of the desorption force of the eluent described in each substep is the strength of the desorption force of the eluent in the substep, and the desorption of the eluent in different substeps. It does not explain the strength of power.
- the desorption force of the eluent flowing through the section 1 is maximized in one sub-step constituting the step (A), and the section 1 is also included in another sub-step constituting the step (A).
- the desorbing force of the eluent flowing is the strongest, the desorbing force of the eluent flowing through section 1 in the one substep and the eluent flowing through section 1 in the other substep.
- the desorption force of is the same or different.
- ⁇ Substep (A2-1)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the eluent d-III is supplied from the eluent supply port D-III with the upstream end of Section 3 as the eluent supply port D-III, and the weakly adsorbable fraction is extracted from the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 2 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 3 and 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 2.
- the eluent supply port D-III in the sub-step (A2-1) is provided in the same pipe as the stock solution supply port F in the sub-step (A1-1).
- ⁇ Substep (A3-1)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 3 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 4 is used as the eluent supply port D-IV.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 3 and 4 may be the same as the desorbing force of the eluent flowing through section 4 in the sub-step (A3-1). preferable.
- sub-step (A1-1) there is a sub-step for carrying out the following sub-step (A1-1ex), but the sub-step (A1-1) is limited to the sub-step (A1-1ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A1-1ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- the downstream end of Section 4 is designated as a weakly adsorptive fraction extraction outlet A, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the extraction outlet A.
- sub-step (A2-1) there is a sub-step for carrying out the following sub-step (A2-1ex), but the sub-step (A2-1) is limited to the sub-step (A2-1ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A2-1ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- the eluent supply port D3 in this sub-step (A2-1ex) is provided in the same pipe as the stock solution supply port F in the sub-step (A1-1).
- sub-step (A3-1) there is a sub-step for carrying out the following sub-step (A3-1ex), but the sub-step (A3-1) is limited to the sub-step (A3-1ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-1ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied.
- the downstream end of Section 3 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- step (A) performs the above substeps (A1-1ex), (A2-1ex) and (A3-1ex) in order is shown. Shown in 2.
- the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower (numbered in order from the left).
- FIG. 3 shows a flow chart in the case where the sub-steps (A1-1ex), (A2-1ex) and (A3-1ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 2 are shifted one by one to the downstream side in FIG. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 2 and then performing step (B) is set as one set, and by performing four sets of this, the form shown in FIG. 2 is restored again.
- the second embodiment also uses a circulatory system having four or more unit packed towers, as in the first embodiment. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into four sections 1 to 4 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the second embodiment, the following sub-steps (A1-2), (A2-2) and (A3-2) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A1-2)> The eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 1 as the eluent supply port D-II, and the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 1 as the eluent supply port D-II, and the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- ⁇ Substep (A2-2)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream side of section 3 is supplied.
- the eluent d-III is supplied from the eluent supply port D-III with the end as the eluent supply port D-III, and the weakly adsorbable fraction is extracted from the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 2 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 3 and 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 2.
- the eluent supply port DI in the sub-step (A2-2) is provided in the same pipe as the eluent supply port D-II in the sub-step (A1-2). Further, the eluent supply port D-III is provided in the same pipe as the stock solution supply port F. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A2-2) is stronger than the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A1-2).
- ⁇ Substep (A3-2)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent supply port D-II in the sub-step (A2-2) is used.
- Eluent d-II is supplied, the downstream end of section 3 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 4 is the eluent supply port D.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3.
- sub-step (A1-2) there is a sub-step in which the following sub-step (A1-2ex) is performed, but the sub-step (A1-2) is limited to the sub-step (A1-2ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A1-2ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D2, the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- the downstream end of Section 4 is designated as a weakly adsorptive fraction extraction outlet A, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the extraction outlet A.
- Sub-step (A2-2) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-2ex) is performed, but the sub-step (A2-2) is limited to the sub-step (A2-2ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A2-2ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- the eluent supply port D1 in this sub-step (A2-2ex) is provided in the same pipe as the eluent supply port D2 in the sub-step (A1-2ex).
- the eluent supply port D3 is provided in the same pipe as the stock solution supply port F in the sub-step (A1-2ex).
- sub-step (A3-2) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-2ex) is performed, but the sub-step (A3-2) is limited to the sub-step (A3-2ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-2ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2 in the sub-step (A2-2ex).
- the downstream end of Section 3 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- each section has one unit packed tower as an example
- the flow diagram in the case where the above step (A) performs the above substeps (A1-2ex), (A2-2ex) and (A3-2ex) in order is shown. Shown in 4.
- the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- the sex fraction extraction outlet A, the medium adsorption fraction extraction outlet B, and the strong adsorption fraction extraction outlet C are moved to the downstream side while maintaining their relative positional relationships, and then the above sub-step (A1).
- -2ex), (A2-2ex) and (A3-2ex) are shown in FIG.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 4 are shifted one by one to the downstream side in FIG. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 4 and then performing step (B) is set as one set, and by performing this four sets, the form shown in FIG. 4 is restored again.
- the third embodiment uses a circulatory system having five or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into five sections 1 to 5 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the third embodiment, the following sub-steps (A1-3), (A2-3) and (A3-3) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A1-3)> The eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 1 as the eluent supply port D-II, and the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- the undiluted solution is supplied from, and the eluent d-III is supplied from the eluent supply port D-III with the upstream end of section 4 as the eluent supply port D-III, and the downstream end of section 5 is a weakly adsorptive image.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 3 is the same as the desorbing force of the eluent flowing through sections 1 and 2, or weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 1 and 2.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 3.
- ⁇ Substep (A2-3)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorptive fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the eluent supply port is used.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A2-3) is stronger than the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A1-3).
- the eluent supply port DI in the sub-step (A2-3) is provided in the same pipe as the eluent supply port D-II in the sub-step (A1-3).
- ⁇ Substep (A3-3)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent supply port D-II in the sub-step (A2-3) is used.
- Eluent d-II is supplied, the downstream end of section 4 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 5 is the eluent supply port D.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2, 3 and 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2, 3 and 4.
- sub-step (A1-3) there is a sub-step for carrying out the following sub-step (A1-3ex), but the sub-step (A1-3) is limited to the sub-step (A1-3ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A1-3ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D2, the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2. The undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- Section 4 With the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D3, the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the downstream end of Section 5 is designated as a weakly adsorptive fraction extraction outlet A, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the extraction outlet A.
- sub-step (A2-3) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-3ex) is performed, but the sub-step (A2-3) is limited to the sub-step (A2-3ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A2-3ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 is supplied from the eluent supply port D3, and the eluate d3 is supplied.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- the eluent supply port D1 in this sub-step (A2-3ex) is provided in the same pipe as the eluent supply port D2 in the sub-step (A1-3ex).
- sub-step (A3-3) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-3ex) is performed, but the sub-step (A3-3) is limited to the sub-step (A3-3ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-3ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2 in the sub-step (A2-3ex).
- the downstream end of Section 4 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of section 5 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- each section has one unit packed tower as an example
- the flow diagram in the case where the above step (A) performs the above substeps (A1-3ex), (A2-3ex) and (A3-3ex) in order is shown. Shown in 6.
- the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- the sex fraction extraction outlet A, the medium adsorption fraction extraction outlet B, and the strong adsorption fraction extraction outlet C are moved to the downstream side while maintaining their relative positional relationships, and then the above sub-step (A1).
- -3ex), (A2-3ex) and (A3-3ex) are shown in FIG. 7 as a flow chart.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 6 are shifted one by one to the downstream side in FIG. 7. In this case, starting from the step (A) shown in FIG. 6 and then performing the step (B) is set as one set, and by performing this five sets, the form shown in FIG. 6 is restored again.
- the fourth embodiment uses a circulatory system having seven or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into five sections 1 to 5 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, five kinds of eluents d-I to d-V having different desorption forces are used. In the fourth embodiment, the following sub-steps (A1-4), (A2-4) and (A3-4) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A1-4)> The eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 1 as the eluent supply port D-II, and the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- the undiluted solution is supplied from, and the eluent d-III is supplied from the eluent supply port D-III with the upstream end of section 4 as the eluent supply port D-III, and the downstream end of section 5 is the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 3 is the same as the desorbing force of the eluent flowing through sections 1 and 2, or weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 1 and 2.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 3.
- ⁇ Substep (A2-4)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream side of section 4 is supplied.
- the eluent d-IV is supplied from the eluent supply port D-IV with the end as the eluent supply port D-IV, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3.
- the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A2-4) is stronger than the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A1-4).
- the eluent supply port DI in the sub-step (A2-4) is provided in the same pipe as the eluent supply port D-II in the sub-step (A1-4).
- ⁇ Substep (A3-4)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent is discharged from the eluent supply port D2 in the sub-step (A2-4).
- d2 is supplied, the downstream end of section 4 is used as the medium adsorptive fraction extraction port B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 5 is used as the eluent supply port DV.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2, 3 and 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2, 3 and 4.
- sub-step (A1-4) there is a sub-step for carrying out the following sub-step (A1-4ex), but the sub-step (A1-4) is limited to the sub-step (A1-4ex). It's not a thing.
- Substep (A1-4ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D2, the eluent d2 having the second strongest desorption force among the five types of eluents is supplied from the eluent supply port D2. The undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- Section 4 With the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D3, the eluent d3 having the weakest desorption force among the five types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the downstream end of Section 5 is designated as a weakly adsorptive fraction extraction outlet A, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the extraction outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through the sections 4 and 5 may be the same as the desorbing force of the eluent flowing through the section 5 in the sub-step (A3-4). preferable.
- sub-step (A2-4) there is a sub-step for carrying out the following sub-step (A2-4ex), but the sub-step (A2-4) is limited to the sub-step (A2-4ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A2-4ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the five types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the five types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d4 having the fourth strongest desorption force among the five types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- the eluent supply port D1 in this sub-step (A2-4ex) is provided in the same pipe as the eluent supply port D2 in the sub-step (A1-4ex).
- sub-step (A3-4) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-4ex) is performed, but the sub-step (A3-4) is limited to the sub-step (A3-4ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-4ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2 in the sub-step (A2-4ex).
- the downstream end of Section 4 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of section 5 as the eluent supply port D5
- the eluent d5 having the third strongest desorption force among the five types of eluents is supplied from the eluent supply port D5.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- FIG. 8 shows an example of the flow when the step (A) performs the sub-steps (A1-4ex), (A2-4ex) and (A3-4ex) in order.
- the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- the form shown in FIG. 8 has seven unit-filled towers, one unit-filled tower in section 1, two unit-filled towers in section 2, two unit-filled towers in section 3, and section 4 in section 4. One unit packed tower is included, and section 5 contains one unit packed tower.
- step (A) in which the sub-steps (A1-4ex), (A2-4ex) and (A3-4ex) are performed in order is completed, the stock solution supply port F, the eluent supply port D, and weak adsorption are performed by the step (B).
- the sex fraction extraction outlet A, the medium adsorption fraction extraction outlet B, and the strong adsorption fraction extraction outlet C are moved to the downstream side while maintaining their relative positional relationships, and then the above sub-step (A1).
- -4ex), (A2-4ex) and (A3-4ex) are shown in FIG. 9 as a flow chart.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 8 are shifted to the downstream side by one unit packed tower in FIG. 9. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 8 and then performing step (B) is set as one set, and by performing 7 sets of this, the form shown in FIG. 8 is restored again.
- the fifth embodiment uses a circulatory system having five or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into five sections 1 to 5 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the fifth embodiment, the following sub-steps (A1-5), (A2-5) and (A3-5) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A1-5)> The undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F, and the eluent d is supplied from the eluent supply port D-III with the upstream end of section 4 as the eluent supply port D-III.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the outlet A.
- ⁇ Substep (A2-5)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorptive fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the eluent supply port is used.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3.
- ⁇ Substep (A3-5)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 4 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 5 is used as the eluent supply port D-IV.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2, 3 and 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2, 3 and 4. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A3-5) is the same as the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A2-5).
- sub-step (A1-5) there is a sub-step in which the following sub-step (A1-5ex) is performed, but the sub-step (A1-5) is limited to the sub-step (A1-5ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A1-5ex)> The undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F. With the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D3, the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the downstream end of Section 5 is designated as a weakly adsorptive fraction extraction outlet A, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the extraction outlet A.
- sub-step (A2-5) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-5ex) is performed, but the sub-step (A2-5) is limited to the sub-step (A2-5ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A2-5ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 is supplied from the eluent supply port D3, and the eluate d3 is supplied.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A3-5) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-5ex) is performed, but the sub-step (A3-5) is limited to the sub-step (A3-5ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-5ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied.
- the downstream end of Section 4 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of section 5 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- each section has one unit packed tower as an example
- the flow diagram in the case where the above step (A) performs the above substeps (A1-5ex), (A2-5ex) and (A3-5ex) in order is shown. It is shown in 13.
- the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- FIG. 14 shows a flow chart in the case where (-5ex), (A2-5ex) and (A3-5ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 13 are shifted one by one to the downstream side in FIG. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 13 and then performing step (B) is set as one set, and by performing this five sets, the form shown in FIG. 13 is restored again.
- the sixth embodiment uses a circulatory system having five or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into five sections 1 to 5 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the sixth embodiment, the following sub-steps (A1-6), (A2-6) and (A3-6) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A1-6)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port D-II to supply the eluent d-II from the eluent supply port D-II, and the downstream end of section 3 is used as the medium adsorptive fraction extraction port B.
- the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, the eluent d-IV is supplied from the eluent supply port D-IV with the upstream end of section 4 as the eluent supply port D-IV, and the downstream side of section 5 is supplied.
- ⁇ Substep (A2-6)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of the section 3 as the undiluted solution supply port F, and the upstream end of the section 4 is the eluent supply port D-III.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 3 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 3. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A2-6) is stronger than the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A1-6).
- the eluent supply port DI in the sub-step (A2-6) is provided in the same pipe as the eluent supply port D-II in the sub-step (A1-6).
- ⁇ Substep (A3-6)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the upstream end of section 2 is used as the eluent supply port D-II as the eluent.
- supplying the eluent d-II from the supply port D-II supplying the eluent d-III from the eluent supply port D-III, and extracting the weakly adsorbable fraction from the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A3-6) is the same as the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A2-6).
- sub-step (A1-6) there is a sub-step in which the following sub-step (A1-6ex) is performed, but the sub-step (A1-6) is limited to the sub-step (A1-6ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A1-6ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D2, the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the downstream end of Section 3 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- Section 4 With the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D4, the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the downstream end of Section 5 is designated as a weakly adsorptive fraction extraction outlet A, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the extraction outlet A.
- sub-step (A2-6) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-6ex) is performed, but the sub-step (A2-6) is limited to the sub-step (A2-6ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A2-6ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A3-6) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-6ex) is performed, but the sub-step (A3-6) is limited to the sub-step (A3-6ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-6ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2 with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D2.
- the eluent d3 is supplied from the eluent supply port D3, and the eluate d3 is supplied.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- each section has one unit packed tower as an example
- the flow diagram in the case where the above step (A) performs the above substeps (A1-6ex), (A2-6ex) and (A3-6ex) in order is shown. Shown in 15. In FIG. 15, the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- the stock solution supply port F, the eluent supply port D and the weak adsorption are performed by the step (B).
- FIG. 16 shows a flow chart in the case where (6ex), (A2-6ex) and (A3-6ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 15 are shifted one by one to the downstream side in FIG. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 15 and then performing step (B) is set as one set, and by performing this five sets, the form shown in FIG. 15 is restored again.
- Embodiment 7 uses a circulatory system having five or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into five sections 1 to 5 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the seventh embodiment, the following sub-steps (A1-7), (A2-7) and (A3-7) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A1-7)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorptive fraction is extracted from the outlet C, the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F, and the upstream end of section 4 is used as the eluent supply port D-III.
- the weakly adsorbent fraction is extracted from the outlet A.
- the desorption force of the eluent flowing through Section 1 is stronger than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 3.
- ⁇ Substep (A2-7)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the upstream end of section 2 is used as the eluent supply port D-II as the eluent.
- supplying the eluent d-II from the supply port D-II supplying the eluent d-III from the eluent supply port D-III, and extracting the weakly adsorbable fraction from the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3.
- ⁇ Substep (A3-7)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 4 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 5 is used as the eluent supply port D-IV.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2, 3 and 4 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2, 3 and 4.
- sub-step (A1-7) there is a sub-step in which the following sub-step (A1-7ex) is performed, but the sub-step (A1-7) is limited to the sub-step (A1-7ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A1-7ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the downstream end of Section 5 is designated as a weakly adsorptive fraction extraction outlet A, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the extraction outlet A.
- sub-step (A2-7) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-7ex) is performed, but the sub-step (A2-7) is limited to the sub-step (A2-7ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A2-7ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d3 is supplied from the eluent supply port D3, and the eluate d3 is supplied.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A3-7) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-7ex) is performed, but the sub-step (A3-7) is limited to the sub-step (A3-7ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-7ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied.
- the downstream end of Section 4 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of section 5 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- each section has one unit packed tower as an example
- the flow diagram in the case where the above step (A) performs the above substeps (A1-7ex), (A2-7ex) and (A3-7ex) in order is shown. Shown in 17.
- the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- FIG. 18 shows a flow chart in the case where (-7ex), (A2-7ex) and (A3-7ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 17 are shifted one by one to the downstream side in FIG. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 17 and then performing step (B) is set as one set, and by performing this in five sets, the form shown in FIG. 17 is restored again.
- the eighth embodiment uses a circulatory system having three or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into three sections 1 to 3 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the eighth embodiment, the following sub-steps (A1-8), (A2-8), (A3-8) and (A4-8) are sequentially performed as the step (A).
- Section 1 The upstream end of Section 1 is used as the eluent supply port D-II to supply the eluent d-II from the eluent supply port D-II, and the upstream end of Section 2 is used as the eluent supply port D-III.
- the upstream end of Section 2 is used as the eluent supply port D-III.
- ⁇ Substep (A3-8)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream side of section 3 is supplied.
- the eluent d-III is supplied from the eluent supply port D-III with the end as the eluent supply port D-III, and the weakly adsorbable fraction is extracted from the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 2 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 2.
- ⁇ Substep (A4-8)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 2 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 3 is used as the eluent supply port D-IV.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 2 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 2. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A4-8) is the same as the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A3-8).
- sub-step (A2-8) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-8ex) is performed, but the sub-step (A2-8) is limited to the sub-step (A2-8ex). It's not a thing.
- Substep (A2-8ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D2, the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A3-8) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-8ex) is performed, but the sub-step (A3-8) is limited to the sub-step (A3-8ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-8ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A4-8) there is a sub-step for carrying out the following sub-step (A4-8ex), but the sub-step (A4-8) is limited to the sub-step (A4-8ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A4-8ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied.
- the downstream end of Section 2 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of Section 3 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- the above step (A) performs the above substeps (A1-8), (A2-8ex), (A3-8ex) and (A4-8ex) in order.
- the flow diagram of the case is shown in FIG. In FIG. 19, the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- FIG. 20 shows a flow chart in the case where the above sub-steps (A1-8), (A2-8ex), (A3-8ex) and (A4-8ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 19 are shifted one by one to the downstream side in FIG. 20. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 19 and then performing step (B) is set as one set, and by performing three sets of this, the form shown in FIG. 19 is restored again.
- the ninth embodiment uses a circulatory system having three or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into three sections 1 to 3 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the ninth embodiment, the following sub-steps (A1-9), (A2-9), (A3-9) and (A4-9) are sequentially performed as the step (A).
- Section 1 The upstream end of Section 1 is used as the eluent supply port D-II to supply the eluent d-II from the eluent supply port D-II, and the upstream end of Section 2 is used as the eluent supply port D-III.
- the upstream end of Section 2 is used as the eluent supply port D-III.
- ⁇ Substep (A4-9)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the downstream side of section 2 is supplied.
- the eluent is extracted from the eluent supply port D-IV with the end as the medium adsorptive fraction extraction outlet B and the eluent supply port D-IV at the upstream end of section 3 as the eluent supply port D-IV.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 2 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 2.
- sub-step (A2-9) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-9ex) is performed, but the sub-step (A2-9) is limited to the sub-step (A2-9ex). It's not a thing.
- Substep (A2-9ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D2, the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A3-9) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-9ex) is performed, but the sub-step (A3-9) is limited to the sub-step (A3-9ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-9ex)> The eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied. With the upstream end of Section 3 as the eluent supply port D3, the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A4-9) there is a sub-step in which the following sub-step (A4-9ex) is performed, but the sub-step (A4-9) is limited to the sub-step (A4-9ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A4-9ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the downstream end of Section 2 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- the above step (A) performs the above substeps (A1-9), (A2-9ex), (A3-9ex) and (A4-9ex) in order.
- the flow diagram of the case is shown in FIG. In FIG. 21, the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- FIG. 22 shows a flow chart in the case where the above sub-steps (A1-9), (A2-9ex), (A3-9ex) and (A4-9ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 21 are shifted one by one to the downstream side in FIG. 22. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 21 and then performing step (B) is set as one set, and by performing three sets of this, the form shown in FIG. 21 is restored again.
- the tenth embodiment uses a circulatory system having three or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into three sections 1 to 3 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the tenth embodiment, the following sub-steps (A1-10), (A2-10), (A3-10) and (A4-10) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A2-10)> The eluent d-IV is supplied from the eluent supply port D-IV with the upstream end of Section 2 as the eluent supply port D-IV, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the outlet A. At this time, the relationship between the desorption force of the undiluted solution of the sub-step (A1-10) and the eluent d-IV is set so that the undiluted solution ⁇ d-IV.
- ⁇ Substep (A3-10)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream side of section 3 is supplied.
- the eluent d-III is supplied from the eluent supply port D-III with the end as the eluent supply port D-III, and the weakly adsorbable fraction is extracted from the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 2 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 2.
- ⁇ Substep (A4-10)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 2 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 3 is used as the eluent supply port D-IV.
- the desorbing force of the eluent flowing through Section 2 is weaker than the desorbing force of the eluent flowing through Section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through section 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 2. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A4-10) is the same as the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A3-10).
- sub-step (A2-10) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-10ex) is performed, but the sub-step (A2-10) is limited to the sub-step (A2-10ex). It's not a thing.
- Substep (A2-10ex)> With the upstream end of Section 2 as the eluent supply port D4, the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4. The weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A3-10) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-10ex) is performed, but the sub-step (A3-10) is limited to the sub-step (A3-10ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-10ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A4-10) a sub-step for carrying out the following sub-step (A4-10ex) can be mentioned, but the sub-step (A4-10) is limited to the sub-step (A4-10ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A4-10ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied.
- the downstream end of Section 2 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of Section 3 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- the above step (A) performs the above substeps (A1-10), (A2-10ex), (A3-10ex) and (A4-10ex) in order.
- the flow diagram of the case is shown in FIG. In FIG. 23, the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- FIG. 24 shows a flow chart in the case where the above sub-steps (A1-10), (A2-10ex), (A3-10ex) and (A4-10ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 23 are shifted one by one to the downstream side in FIG. 24. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 23 and then performing step (B) is set as one set, and by performing this three sets, the form shown in FIG. 23 is restored again.
- the eleventh embodiment uses a circulatory system having five or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into five sections 1 to 5 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In the eighth embodiment, the following sub-steps (A1-11), (A2-11) and (A3-11) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A1-11)> The undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F, and the eluent d is supplied from the eluent supply port D-III with the upstream end of section 4 as the eluent supply port D-III.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the outlet A.
- ⁇ Substep (A2-11)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorptive fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the eluent supply port is used.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3.
- ⁇ Substep (A3-11)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 3 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 4 is used as the eluent supply port D-IV.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A3-11) is the same as the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A2-11).
- sub-step (A1-11) there is a sub-step in which the following sub-step (A1-11ex) is performed, but the sub-step (A1-11) is limited to the sub-step (A1-11ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A1-11ex)> The undiluted solution is supplied from the undiluted solution supply port F with the upstream end of section 3 as the undiluted solution supply port F. With the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D3, the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the downstream end of Section 5 is designated as a weakly adsorptive fraction extraction outlet A, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the extraction outlet A.
- sub-step (A2-11) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-11ex) is performed, but the sub-step (A2-11) is limited to the sub-step (A2-11ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A2-11ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 is supplied from the eluent supply port D3, and the eluate d3 is supplied.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A3-11) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-11ex) is performed, but the sub-step (A3-11) is limited to the sub-step (A3-11ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-11ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied.
- the downstream end of Section 3 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- each section has one unit packed tower as an example
- the flow diagram in the case where the above step (A) performs the above substeps (A1-11ex), (A2-11ex) and (A3-11ex) in order is shown. Shown in 25.
- the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- FIG. 26 shows a flow chart in the case where (-11ex), (A2-11ex) and (A3-11ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 25 are shifted one by one to the downstream side in FIG. 26. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 25 and then performing step (B) is set as one set, and by performing this in five sets, the form shown in FIG. 25 is restored again.
- the twelfth embodiment uses a circulatory system having five or more unit packed towers. Then, it is assumed that this circulatory system is divided into five sections 1 to 5 which are continuous in an annular shape from the upstream side to the downstream side so that each section has at least one unit packed tower. Further, as the eluent, four kinds of eluents d-I to d-IV having different desorption forces are used. In this embodiment 12, the following sub-steps (A1-12), (A2-12), (A3-12) and (A4-12) are sequentially performed as the step (A).
- ⁇ Substep (A2-12)> The eluent d-IV is supplied from the eluent supply port D-IV with the upstream end of Section 3 as the eluent supply port D-IV, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the outlet A. At this time, the relationship between the desorption force of the undiluted solution and the eluent d-IV in the sub-step (A1-9) is set so that the undiluted solution ⁇ d-IV.
- ⁇ Substep (A3-12)> The upstream end of section 1 is used as the eluent supply port DI, and the eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, and the downstream end of section 1 is used as the strongly adsorptive fraction extraction port C.
- the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II with the upstream end of section 2 as the eluent supply port D-II, and the upstream side of section 4 is supplied.
- the eluent d-III is supplied from the eluent supply port D-III with the end as the eluent supply port D-III, and the weakly adsorptive fraction is extracted from the outlet A.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3.
- ⁇ Substep (A4-12)> The eluent d-I is supplied from the eluent supply port DI, the strongly adsorbent fraction is extracted from the outlet C, and the eluent d-II is supplied from the eluent supply port D-II.
- the downstream end of section 3 is used as the medium adsorptive fraction extraction outlet B, the medium adsorptive fraction is extracted from the outlet B, and the upstream end of section 4 is used as the eluent supply port D-IV.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through section 1.
- the desorbing force of the eluent flowing through sections 4 and 5 is made weaker than the desorbing force of the eluent flowing through sections 2 and 3. It is preferable that the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in this sub-step (A4-12) is the same as the desorbing force of the eluent flowing through the section 1 in the sub-step (A3-12).
- sub-step (A2-12) there is a sub-step in which the following sub-step (A2-12ex) is performed, but the sub-step (A2-12) is limited to the sub-step (A2-12ex). It's not a thing.
- Substep (A2-12ex)> With the upstream end of Section 3 as the eluent supply port D4, the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4. The weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A3-12) there is a sub-step in which the following sub-step (A3-12ex) is performed, but the sub-step (A3-12) is limited to the sub-step (A3-12ex). It's not a thing.
- ⁇ Sub-step (A3-12ex)> With the upstream end of Section 1 as the eluent supply port D1, the eluent d1 having the strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D1.
- the downstream end of Section 1 is designated as a strong adsorptive fraction extraction port C, and the strong adsorptive fraction is extracted from the extraction port C.
- the eluent d2 having the second strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D2.
- the eluent d3 having the weakest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D3.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- sub-step (A4-12) there is a sub-step for carrying out the following sub-step (A4-12ex), but the sub-step (A4-12) is limited to the sub-step (A4-12ex). It's not a thing.
- ⁇ Substep (A4-12ex)> The eluent d1 is supplied from the eluent supply port D1 to supply the eluent d1.
- the strong adsorptive fraction is extracted from the strong adsorptive fraction outlet C.
- the eluent d2 is supplied from the eluent supply port D2, and the eluate d2 is supplied.
- the downstream end of Section 3 is designated as a medium adsorptive fraction extraction port B, and the medium adsorptive fraction is extracted from the extraction port B.
- the upstream end of Section 4 as the eluent supply port D4
- the eluent d4 having the third strongest desorption force among the four types of eluents is supplied from the eluent supply port D4.
- the weakly adsorptive fraction is extracted from the weakly adsorptive fraction extraction outlet A.
- the above step (A) performs the above substeps (A1-12), (A2-12ex), (A3-12ex) and (A4-12ex) in order.
- the flow diagram of the case is shown in FIG. 27.
- the square enclosure indicates one unit packed tower, and the numbers in the enclosure indicate the number of the unit packed tower.
- FIG. 28 shows a flow chart in the case where the above sub-steps (A1-12), (A2-12ex), (A3-12ex) and (A4-12ex) are performed in order.
- the unit packed towers arranged in each section shown in FIG. 27 are shifted one by one to the downstream side in FIG. 28. In this case, starting from step (A) shown in FIG. 27 and then performing step (B) is set as one set, and by performing this in five sets, the form shown in FIG. 27 is restored again.
- supplying the target liquid to the target place or extracting the target liquid from the target place is the operation of the pumps provided in the circulatory system and the opening and closing of the valves at each place as appropriate. It can be adjusted to. That is, the method itself of supplying the target fluid in the circulatory system and extracting the target fraction is known. Further, the supply flow rate and the withdrawal flow rate of each liquid can be appropriately set according to the purpose such as processing efficiency.
- the component to be purified may be any of a strongly adsorptive component, a medium adsorptive component, and a weak adsorptive component, and among them, the method is suitable for purifying the medium adsorptive component.
- the method of the present invention can be suitably used for protein purification. Since the medium-adsorbent component can be obtained with high purity by the method of the present invention, it is a suitable method for obtaining the target protein with high purity from the undiluted solution containing the decomposition products and aggregates in addition to the target protein. be.
- the protein is not particularly limited, and for example, an antibody can be used as a component to be purified.
- the "antibody” may be a naturally occurring antibody, a chimeric antibody, or an antibody fragmented by an enzyme or the like (for example, F (ab') 2 fragment, Fab. 'Fragment, Fab fragment). It also includes single chain antibodies and their dimers (diabodies) or trimers (triabodies), or minibodies. It may also be a single domain antibody. It should be noted that these are examples, and all proteins or derivatives thereof having a specific binding ability to an antigen are included in the concept of an antibody in the present invention.
- the antibody purified by the method of the present invention can also be applied as an antibody drug.
- a method for producing an antibody drug can be provided by applying the method of the present invention to separate the antibody contained in the undiluted solution. More specifically, according to the method of the present invention, an antibody drug can be obtained by using a culture solution of antibody-producing cells and / or an extract of antibody-producing cells as a stock solution and separating the antibody contained therein. can.
- the "culture solution of antibody-producing cells” and the “extract of antibody-producing cells” refer to the culture solution of antibody-producing cells and the extract of antibody-producing cells for various treatments such as centrifugation and chromatographic separation. Therefore, it is meant to include those in a state of being fractionated or purified to some extent.
- the adsorbent to be filled in the unit packed column is appropriately selected according to the component to be purified, and various adsorbents can be adopted.
- a strongly acidic cation exchange resin a weakly acidic cation exchange resin, a strongly basic anion exchange resin, a weakly basic anion exchange resin, a synthetic adsorbent, a zeolite, a silica gel, and a functionally modified silica gel (preferably).
- Octadecylsilyl-modified silica gel), other gel filtration chromatography materials, and affinity-adsorbents can be used as adsorbents.
- the adsorbent is preferably an ion exchange resin.
- a cation exchange resin can be preferably used.
- the pseudo-moving layer chromatographic separation system of the present invention is a system for carrying out the method of the present invention. That is, the pseudo-moving layer type chromatographic separation system of the present invention has the above-mentioned configuration of the circulatory system, and the circulatory system can repeat the operation of the above-mentioned step (A) and the operation of the above-mentioned step (B) in order. It is a system.
- Fragment 1 is a protein contained in a fraction having a molecular weight peaking at around 5000 and having a molecular weight of less than 25,000
- Fragment 2 is a protein contained in a fraction having a molecular weight of 25,000 or more and less than 50,000.
- the antibody was a protein contained in a fraction having a molecular weight of 50,000 or more and less than 300,000 with a peak at around 150,000.
- the aggregate was a protein contained in a fraction having a molecular weight of 300,000 or more.
- the composition of the following components was determined by high performance liquid chromatography (HPLC) using an analytical column (Tosoh TSKgel G3000SWXL).
- Cation exchange resin as an adsorbent (trade name: Fractogel (TM) EMD SO 3 - (M) , manufactured by Merck) was used.
- ⁇ Operating conditions> The following steps 1 to 6 were performed in order.
- the flow charts of steps 1 to 6 are shown in FIG.
- the following operating conditions are such that the recovery rate of Fragment 1 and Fragment 2 for the weakly adsorptive fraction is 98% or more, the recovery rate of the antibody for the medium adsorptive fraction is 98% or more, and the recovery rate for the strong adsorptive fraction is 98% or more.
- the condition was such that the recovery rate of the agglomerates was 98% or more. This also applies to each of the comparative examples and examples described later.
- FIG. 11 shows a flow chart of the operation of Comparative Example 3. Ten cycles were carried out with the first to fourth steps shown in FIG. 11 as one cycle. Between each step, a stock solution supply port F, an eluent supply port D (D1 to D3), a weakly adsorbable fraction extraction port A, a medium adsorption fraction extraction port B, and a strong adsorption fraction extraction port C are provided. , The step of shifting to the downstream side by one column while maintaining these relative positional relationships is performed.
- the first to fourth steps shown in FIG. 11 correspond to the step (A) of the present invention, but unlike the step (A), they are not composed of a plurality of substeps (in other words,).
- “D1”, “D2” and “D3” in FIG. 11 are all eluent supply ports, and eluents D1, D2 and D3 are supplied, respectively.
- “C” in FIG. 11 is a strong adsorptive fraction extraction port, and the strong adsorptive fraction is extracted.
- “B” is a medium adsorptive fraction extraction port and a medium adsorptive fraction is extracted
- "A” is a weak adsorptive fraction extraction outlet and a weak adsorptive fraction is extracted.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D3) and the undiluted solution (F) in each step shown in FIG. 11 are as follows.
- the flow rate of the liquid to be extracted is not shown in the table below, the flow rate of the strongly adsorbent fraction extracted from the strongly adsorptive fraction extraction port C is the same as the flow rate for supplying the eluent D1. .. Further, the flow rate of the medium adsorptive fraction extracted from the medium adsorptive fraction extraction port B is the same as the flow rate of supplying the eluent D2.
- the flow rate of the weakly adsorbable fraction extracted from the weakly adsorbable fraction extraction port A is the sum of the flow rate of supplying the eluent D3 and the flow rate of supplying the undiluted solution from the undiluted solution supply port F. That is, the supply flow rate and the extraction flow rate are always the same, and this also applies to the following comparative examples or examples.
- FIG. 12 shows a flow chart of the operation of Comparative Example 4. Ten cycles were carried out with the first to fourth steps shown in FIG. 12 as one cycle. Each step shown in FIG. 12 is composed of two sub-steps, a first sub-step and a second sub-step, and the second sub-step is a fluid in the circulatory system without supplying or withdrawing the liquid. Is to circulate.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D3) and the undiluted solution (F) in each step shown in FIG. 12 were as follows.
- Step (A) was configured by the combination of the sub-steps shown in FIG. This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and four sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D4) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- Step (A) was configured by the combination of the sub-steps shown in FIG. This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and four sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D4) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- Example 2 The separation treatment efficiency in Example 2 was 18.610 (L-stock solution) / (LR) ⁇ h.
- Step (A) was configured by the combination of the sub-steps shown in FIG. This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and five sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D4) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- Step (A) was configured by the combination of the sub-steps shown in FIG. This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and seven sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D5) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- a weakly adsorbable fraction extraction port A, a medium adsorptive fraction extraction port B, and a strong adsorptive fraction in the circulation system are used by using two or more kinds of eluents.
- the weak adsorbent component, the medium adsorbent component, and the strong adsorbent component can be used with less adsorbent. It can be seen that the amount can be sufficiently purified and separated. From this example, it was shown that the target antibody can be obtained in a medium adsorptive fraction with high purity and high efficiency.
- Step (A) was configured by combining the sub-steps shown in FIG. This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and five sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D4) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- Step (A) was configured by the combination of the sub-steps shown in FIG. This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and five sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D4) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- Step (A) was configured by the combination of the sub-steps shown in FIG. This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and five sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D4) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- Example 7 The separation treatment efficiency in Example 7 was 16.502 (L-stock solution) / (LR) ⁇ h.
- Step (A) was configured by the combination of the sub-steps shown in FIG. This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and three sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D4) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- Step (A) was configured by the combination of the sub-steps shown in FIG. 21.
- This step (A) and the subsequent step (B) were set as one set, and three sets were performed to make one cycle, and 10 cycles were carried out.
- the supply flow rates of the eluents (D1 to D4) and the undiluted solution (F) in each step (A) were as follows.
- the undiluted solution is chromatographically separated by the multi-column gradient pseudo moving layer method in the same manner as in each of the above embodiments. Tried (Examples 10-12).
- the operating conditions are that the recovery rate of Fragment 1 and Fragment 2 for the weakly adsorptive fraction is 98% or more, the recovery rate of the antibody for the medium adsorptive fraction is 98% or more, and the recovery rate for the strong adsorptive fraction is 98% or more.
- the separation processing efficiency of 13 (L-stock solution) / (LR) ⁇ h or more could be realized in any of the embodiments.
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Abstract
Description
特許文献1には、1系列の改良された擬似移動層装置に、溶離液と原液を供給しながら中吸着性画分を抜き出す工程と、溶離液を供給しながら弱吸着性画分と強吸着性画分を抜き出す工程とを繰り返すことにより、吸着剤に対する親和力が異なる3つ以上の画分を連続的に分離する方法が開示されている。
また、このようなクロマト分離の実用化においては、必要な吸着剤量をできるだけ減らして分離処理効率を高め、低コスト化を実現することも重要である。
しかし、本発明者らが上記各特許文献に記載の技術をはじめ従来の擬似移動層方式によるクロマト分離を検討したところ、上記の目的を十分に達成することが難しいことが分かってきた。
また、本発明は、上記クロマト分離方法の実施に好適なクロマト分離システムを提供することを課題とする。
〔1〕
吸着剤が充填された3つ以上の単位充填塔が配管を介して直列かつ無端状に連結された循環系を用い、該循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した3つのセクション1~3に区切り、原液中に含まれる、前記吸着剤に対して弱吸着性成分と、強吸着性成分と、両成分の中間的な吸着性の中吸着性成分とを、2種以上の溶離液を用いて分離することを含む擬似移動層方式クロマト分離方法であって、
前記循環系の前記配管には、原液供給口Fと、前記2種以上の各溶離液に対応する2つ以上の溶離液供給口Dと、前記弱吸着性成分を含む弱吸着性画分の抜出口Aと、前記中吸着性成分を含む中吸着性画分の抜出口Bと、前記強吸着性成分を含む強吸着性画分の抜出口Cとが設けられ、該原液供給口F、該抜出口A、該抜出口B及び該抜出口Cの位置を下記(a)~(c)とし:
(a)前記抜出口Bを、前記原液供給口Fの、少なくとも1つのセクションを挟んで下流側に設ける;
(b)前記抜出口Cを、前記原液供給口Fを有する配管に設けるか、又は、前記抜出口Cを、前記原液供給口Fの、少なくとも1つのセクションを挟んで上流側に設ける;
(c)前記抜出口Aを、前記抜出口Bを有する配管に設けるか、又は、前記抜出口Aを、前記抜出口Bの、少なくとも1つのセクションを挟んで下流側に設ける;
前記クロマト分離方法は下記ステップ(A)及び(B)を順に繰り返すことを含む、擬似移動層方式クロマト分離方法:
[ステップ(A)]
前記原液供給口Fから原液を、前記2つ以上の溶離液供給口Dから2種以上の溶離液を、それぞれ同時に又は別々に供給し、かつ、前記抜出口Aから弱吸着性画分を、前記抜出口Bから中吸着性画分を、前記抜出口Cから強吸着性画分を、それぞれ同時に又は別々に抜き出すステップ;
[ステップ(B)]
前記ステップ(A)終了後、前記原液供給口F、前記溶離液供給口D、前記抜出口A、前記抜出口B及び前記抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させるステップ。
〔2〕
前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-8)、(A2-8)、(A3-8)及び(A4-8)を行う、〔1〕に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-8)>
セクション2の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A2-8)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A3-8)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を前記抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A4-8)>
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を前記抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
〔3〕
前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-9)、(A2-9)、(A3-9)及び(A4-9)を行う、〔1〕に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-9)>
セクション2の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A2-9)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A3-9)>
前記溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A4-9)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
〔4〕
前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-10)、(A2-10)、(A3-10)及び(A4-10)を行う、〔1〕に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-10)>
セクション2の上流側末端を前記原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A2-10)>
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして、該溶離液供給口D-IVから、前記原液と脱着力が同じ又は前記原液よりも脱着力が強い溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A3-10)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を前記抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A4-10)>
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を前記抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
〔5〕
吸着剤が充填された5つ以上の単位充填塔が配管を介して直列かつ無端状に連結された循環系を用い、該循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切り、原液中に含まれる、前記吸着剤に対して弱吸着性成分と、強吸着性成分と、両成分の中間的な吸着性の中吸着性成分とを、2種以上の溶離液を用いて分離することを含む擬似移動層方式クロマト分離方法であって、
前記循環系の前記配管には、原液供給口Fと、前記2種以上の各溶離液に対応する2つ以上の溶離液供給口Dと、前記弱吸着性成分を含む弱吸着性画分の抜出口Aと、前記中吸着性成分を含む中吸着性画分の抜出口Bと、前記強吸着性成分を含む強吸着性画分の抜出口Cとが設けられ、該原液供給口F、該抜出口A、該抜出口B及び該抜出口Cの位置を下記(a)~(c)とし:
(a)前記抜出口Bを、前記原液供給口Fの、少なくとも1つのセクションを挟んで下流側に設ける;
(b)前記抜出口Cを、前記原液供給口Fを有する配管に設けるか、又は、前記抜出口Cを、前記原液供給口Fの、少なくとも1つのセクションを挟んで上流側に設ける;
(c)前記抜出口Aを、前記抜出口Bを有する配管に設けるか、又は、前記抜出口Aを、前記抜出口Bの、少なくとも1つのセクションを挟んで下流側に設ける;
前記クロマト分離方法は下記ステップ(A)及び(B)を順に繰り返すことを含む、擬似移動層方式クロマト分離方法:
[ステップ(A)]
前記原液供給口Fから原液を、前記2つ以上の溶離液供給口Dから2種以上の溶離液を、それぞれ同時に又は別々に供給し、かつ、前記抜出口Aから弱吸着性画分を、前記抜出口Bから中吸着性画分を、前記抜出口Cから強吸着性画分を、それぞれ同時に又は別々に抜き出すステップ;
[ステップ(B)]
前記ステップ(A)終了後、前記原液供給口F、前記溶離液供給口D、前記抜出口A、前記抜出口B及び前記抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させるステップ。
〔6〕
前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-11)、(A2-11)及び(A3-11)を行う、〔5〕に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-11)>
セクション3の上流側末端を前記原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、セクション5の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A2-11)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を前記抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、前記溶離液供給口D-IIIから前記溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A3-11)>
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
〔7〕
前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-12)、(A2-12)、(A3-12)及び(A4-12)を行う、〔5〕に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-12)>
セクション3の上流側末端を前記原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション5の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A2-12)>
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして、該溶離液供給口D-IVから、前記原液と脱着力が同じ又は前記原液よりも脱着力が強い溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A3-12)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を前記抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A4-12)>
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
本明細書において、「強吸着性成分」とは、原液中に含まれる複数成分のうち、吸着剤に対する吸着力が強い成分を意味し、「弱吸着性成分」とは、原液中に含まれる複数成分のうち、吸着剤に対する吸着力が弱い成分を意味し、「中吸着性成分」とは、上記強吸着性成分よりも吸着剤に対する吸着性が弱いが、上記弱吸着性成分よりは吸着剤に対する吸着性が強い成分を意味する。つまり「強吸着性」、「中吸着性」及び「弱吸着性」との用語は、原液中に含まれる各成分の吸着剤に対する吸着力を比較した際の、相対的な吸着力の強さを示すものである。
上記の「強吸着性成分」、「中吸着性成分」及び「弱吸着性成分」は、それぞれ、単一成分からなってもよく、複数の成分からなってもよい。また、当該複数の成分は吸着力が同じでも異なってもよい。
原液中の各成分の、「強吸着性成分」、「中吸着性成分」及び「弱吸着性成分」へのグループ分けは、目的に応じて適宜に設定することができる。原液が4種の成分を含む場合を例にとると、吸着剤に対する吸着力が強い順に2種の成分を合わせて強吸着性成分とし、吸着剤に対する吸着力が3番目に強い成分を中吸着性成分、吸着剤に対する吸着力が最も弱い成分を弱吸着性成分として位置付けることができる。また、吸着剤に対する吸着力が最も強い成分を強吸着性成分、吸着剤に対する吸着力が2番目の成分と3番目の成分を合わせて中吸着性成分、吸着剤に対する吸着力が最も弱い成分を弱吸着性成分として位置付けることもできる。また、吸着剤に対する吸着力が最も強い成分を強吸着性成分、吸着剤に対する吸着力が2番目の成分を中吸着性成分、吸着剤に対する吸着力が3番目の成分と最も弱い成分を合わせて弱吸着性成分として位置付けることもできる。原液が5種以上の成分を含む場合にも、同様に、種々のグループ分けに基づく分離、精製をすることができる。
本発明において、溶離液の「脱着力」とは、吸着剤に吸着した成分を、当該吸着剤から脱離させる作用の強さを意味する。
当該循環系について図面を用いて以下に説明するが、本発明は、本発明で規定すること以外はこれらの態様に限定されるものではない。
なお、以下で言及する図面は本発明の理解を容易にするための説明図であり、各構成のサイズや相対的な大小関係は説明の便宜上大小を変えている場合があり、実際の関係をそのまま示すものではない。また、本発明で規定する事項以外はこれらの図面に示された形状、相対的な位置関係等に限定されるものでもない。
また、本発明で規定すること以外の条件、例えば、単位充填塔の容量、配管の管内断面積や長さ、循環系に供給する液の流速等は、目的に応じて適宜に設定することができる。
そして、最後部の単位充填塔(例えば単位充填塔10d)の出口は、最前部の単位充填塔(例えば単位充填塔10a)の入口へと配管1を介して連結され、全単位充填塔は無端状に(円環状に)連結されている。かかる構成により、循環系100内に、流体を循環させることが可能となる。単位充填塔10a~10dは、内部の形、サイズ、吸着剤の充填量が互いに同一でも異なっていてもよい。単位充填塔10a~10dは、内部の形、サイズ、吸着剤の充填量がいずれも等価なもの(好ましくは同じもの)を用いることが好ましい。
また、後述するステップ(A)の中で、中吸着性画分抜出弁B1、B2、B3、B4のいずれかが開弁された状態となる。当該開弁された中吸着性画分抜出弁が設置された中吸着性画分抜出ラインと、配管1との連結部位が、後述するステップ(A)における中吸着性画分の抜出口Bとなる。
また、後述するステップ(A)の中で、強吸着性画分抜出弁C1、C2、C3、C4のいずれかが開弁された状態となる。当該開弁された強吸着性画分抜出弁が設置された強吸着性画分抜出ラインと、配管1との連結部位が、後述するステップ(A)における強吸着性画分の抜出口Cとなる。
原液7は、供給流量を制御可能な原液供給ポンプP2により、原液供給ライン11を介して供給される。原液供給ポンプP2は定量ポンプであることが好ましい。原液供給ライン11は、図1に示すように4本の原液供給分岐ライン11a、11b、11c、11dに分岐され、各原液供給分岐ライン11a、11b、11c、11dを介して、原液を、それぞれ各単位充填塔10a、10b、10c、10dの入り口へと供給可能な構成となっている。各原液供給分岐ライン11a、11b、11c、11dには、開閉可能な原液供給弁F1、F2、F3、F4が設けられ、開弁された原液供給弁を有する原液供給分岐ラインを通って、その下流に連結する単位充填塔へと原液が供給される。
後述するステップ(A)の中で、上記原液供給弁F1、F2、F3、F4のいずれかが開弁された状態となる。当該開弁された原液供給弁が設置された原液供給分岐ラインと、配管1との連結部位が、後述するステップ(A)における原液供給口Fとなる。
溶離液供給ポンプP3~P6は定量ポンプであることが好ましい。溶離液供給ライン12は、図1に示すように4本の溶離液供給分岐ライン12a、12b、12c、12dに分岐され、各溶離液供給分岐ライン12a、12b、12c、12dを介して、溶離液を、各単位充填塔10a、10b、10c、10dの入り口へと供給可能な構成となっている。各溶離液供給分岐ライン12a、12b、12c、12dには、開閉可能な溶離液供給弁E1a、E2a、E3a、E4aが設けられ、開弁された溶離液供給弁を有する溶離液供給分岐ラインを通って、その下流に連結する単位充填塔へと溶離液が供給される。
同様に、溶離液供給ライン13は4本の溶離液供給分岐ライン13a、13b、13c、13dに分岐され、溶離液供給ライン14は4本の溶離液供給分岐ライン14a、14b、14c、14dに分岐され、溶離液供給ライン15は4本の溶離液供給分岐ライン15a、15b、15c、15dに分岐され、各溶離液を、各単位充填塔10a、10b、10c、10dの入り口へと供給可能な構成となっている。
溶離液供給分岐ライン13a、13b、13c、13dには、それぞれ、開閉可能な溶離液供給弁E1b、E2b、E3b、E4bが設けられ、溶離液供給分岐ライン14a、14b、14c、14dには、それぞれ、開閉可能な溶離液供給弁E1c、E2c、E3c、E4cが設けられ、溶離液供給分岐ライン15a、15b、15c、15dには、それぞれ、開閉可能な溶離液供給弁E1d、E2d、E3d、E4dが設けられている。
後述するステップ(A)の中で、開弁された溶離液供給弁が設置された溶離液供給分岐ラインと、配管1との連結部位が、溶離液供給口Dとなる。本発明の方法では、溶離液を2種以上用いるため、後述するステップ(A)の中で、開弁される溶離液供給弁は複数ある。したがって、後述するステップ(A)の中で、溶離液供給口Dは、使用する溶離液の種類に応じた数(2つ以上)存在することになる。
本発明の方法において、循環系は、原液供給口Fと、弱吸着性画分の抜出口Aと、中吸着性画分の抜出口Bと、強吸着性画分の抜出口Cの位置を、下記(a)~(c)を満たす関係とする。すなわち、後述するステップ(A)及び(B)の繰り返しにおいて、原液供給口Fと、弱吸着性画分の抜出口Aと、中吸着性画分の抜出口Bと、強吸着性画分の抜出口Cとの、互いの相対的な位置関係が、当該(a)~(c)を常に満たしている。
ここで、「強吸着性画分抜出口Cを、原液供給口Fを有する配管に設ける」とは、強吸着性画分抜出口Cと、原液供給口Fとの間に、単位充填塔が配されていないことを意味する。
また、「強吸着性画分抜出口Cを、原液供給口Fを有する配管に設ける」場合、強吸着性画分抜出口Cの方が、原液供給口Fよりも、同じ配管の上流側に設ける。このことは、同じ配管に設けられた抜出口と供給口との関係のすべてに当てはまる。つまり、循環系において、ある抜出口と供給口が同じ配管に設けられている場合(単位充填塔を挟まずに抜出口と供給口が設けられている場合)、抜出口の方を、供給口よりも、同じ配管の上流側に配置する。これは、供給した液がその下流の単位充填塔に届く前に、当該液が抜出口から抜き出されてしまうことを防ぐためである。
上記(b)は、強吸着性画分抜出口Cを、原液供給口Fの、少なくとも1つの単位充填塔(少なくとも1つのセクション)を挟んで上流側に設ける形態であることが好ましい。
ここで、「弱吸着性画分抜出口Aを、中吸着性画分抜出口Bを有する配管に設ける」とは、弱吸着性画分抜出口Aと、中吸着性画分抜出口Bとの間に、単位充填塔が配されていないことを意味する。
上記(c)は、弱吸着性画分抜出口Aを、中吸着性画分抜出口Bの、少なくとも1つの単位充填塔(少なくとも1つのセクション)を挟んで下流側に設ける形態であることが好ましい。
原液供給口Fから原液を、2つ以上の溶離液供給口Dから2種以上の溶離液を、それぞれ同時に又は別々に供給し、かつ、弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を、中吸着性画分抜出口Bから中吸着性画分を、強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を、それぞれ同時に又は別々に抜き出すステップ。
ここで、ステップ(A)において、原液供給口Fから供給される原液の量と、溶離液供給口Dから供給される溶離液の量との合計と、弱吸着性画分抜出口Aから抜き出される弱吸着性画分の量と、中吸着性画分抜出口Bから抜き出される中吸着性画分の量と、強吸着性画分抜出口Cから抜き出される強吸着性画分Cの量との合計とは、一致する。すなわち、循環系内に液が供給されている状態においては、それと同じ量だけ、循環系内から液が抜き出される。
より詳細に説明すると、ある供給口(X)から液が供給され、その下流側のある抜出口(Y)から液が抜き出される場合において、Xよりも下流側でYよりも上流側から液が供給されていない場合、Yから抜き出される液の量は、Xから供給される液の量と同じである。また、Xよりも下流側でYよりも上流側から液が供給されている場合には、Yから抜き出される液の量は、Xから供給される液の量と、Xよりも下流側でYよりも上流側から供給されている液の量との合計と同じである。例えば図2のサブステップ(A1-1)において、溶離液供給口D1から供給する溶離液の供給量と、強吸着性画分抜出口Cから抜き出す強吸着性画分の抜出量は同じである。また、同じくサブステップ(A1-1)において、溶離液供給口D2から供給する溶離液の供給量と原液供給口Fから供給する原液の供給量との合計は、弱吸着性画分抜出口Aから抜き出す弱吸着性画分の量と同じである。
また、上記の「同時に又は別々に供給」するとは、時間的な差を設けず(供給するタイミングをずらさず)に供給するか、又は、時間的な差を設けて(供給するタイミングをずらして)供給することを意味する。ただし、一のステップ(A)内において、同じ配管に2種以上の液を供給する2つ以上の供給口が配される場合(配管に2つ以上の供給口が単位充填塔を挟まずに配され、当該2つ以上の各供給口から異なる液を供給する場合)には、当該2種以上の液の供給は同時には行わない。すなわち、一のステップ(A)の中で、当該2種以上の液の供給を異なるサブステップとして行う。同様に、一のステップ(A)内において、同じ配管に2種以上の画分を抜き出す2つ以上の抜出口が配される場合(配管に2つ以上の抜出口が単位充填塔を挟まずに配され、当該2つ以上の各抜出口から異なる画分を抜き出す場合)には、当該2種以上の画分の抜き出しは同時には行わない。すなわち、一のステップ(A)の中で、当該2種以上の画分の抜き出しを異なるサブステップとして行う。
前記ステップ(A)終了後、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させるステップ。
この下流側への移行は、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま、単位充填塔1個分だけ下流側へと移行させることを意味する。
例えば、ステップ(A)において、原液供給弁F1が設置された原液供給分岐ラインと配管1との連結部位が原液供給口Fであった場合、ステップ(B)により、この原液供給口Fは、原液供給弁F2が設置された原液供給分岐ラインと配管1との連結部位へと移行することになる。このことは、前記溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cについても同様である。また、上記の各供給口及び抜出口の、単位充填塔1個分の下流側への移行は、循環系に配した各種ポンプや各種弁の開閉を調節することにより行うことができる。
ステップ(B)の実施により、続くステップ(A)(ステップ(A2)と称す。)において、当該ステップ(B)の直前のステップ(A)(ステップ(A1)と称す。)において各単位充填塔に対して行ったのと同じように、液の供給及び抜き出しを、ステップ(A1)よりも一つ分だけ下流側の各単位充填塔に対して行うことになる。
なかでも本発明の方法では、上記ステップ(A)は、原液を供給するサブステップと、原液を供給しないサブステップとを含むことが好ましい。すなわち、ステップ(A)の中に、原液を供給する時間と、原液を供給しない時間があることが好ましい。
なお、脱着力が最も強い溶離液以外の溶離液の供給口のうち1つの供給口を、脱着力が最も強い溶離液の供給口と同じ配管に設けることは、本発明の好ましい一実施形態である。
溶離液の種類は特に制限されず、吸着剤の種類や原液中の成分の種類との関係により適宜に設定される。例えば、吸着剤としてイオン交換樹脂を用いる場合、溶離液の塩濃度を変えることにより、脱着力が異なる複数の溶離液を調製することができる。例えば、陽イオン交換樹脂を用いる場合には、NaCl濃度を変えた複数の溶離液を、2種以上の溶離液として用いることができる。
すなわち本発明では、ある実施形態において「溶離液d-1」という場合、この実施形態において、異なるサブステップで「溶離液d-1」を使用する場合には、異なるサブステップで使用する「溶離液d-1」は互いに同じでもよいし、異なってもよい。このことは、溶離液d-II~d-Vについても同様である。
実施形態1では、単位充填塔を4つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した4つのセクション1~4に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態1においては、ステップ(A)において下記サブステップ(A1-1)、(A2-1)及び(A3-1)を行う。
本発明において、「ステップ(A)においてサブステップX、Y及びZを行う」とは、ステップ(A)が、サブステップX、Y及びZを含んでいることを意味し、サブステップX,Y及びZを行う順序は、本発明の効果を損なわない範囲で適宜に設定することができる。また、ステップ(A)は、サブステップX、Y及びZ以外の、他のサブステップを含んでもよい。
「ステップ(A)においてサブステップX、Y及びZを行う」形態として、典型的には、ステップ(A)としてサブステップX、Y及びZを順に行う形態が挙げられるが、本発明はこの形態に限定されない。すなわち、「ステップ(A)においてサブステップX、Y及びZを行う」とは、サブステップXの直後にサブステップYを行い、サブステップYの直後にサブステップZを行い、サブステップZの直後にステップ(B)を行い、ステップ(B)の直後にサブステップXを行う形態に限られない。例えば、上記の他のサブステップを含む形態では、サブステップXの前(ステップ(B)とサブステップXとの間)、サブステップXとYとの間、サブステップYとZとの間、サブステップZとステップ(B)との間の少なくとも1つにおいて、本発明の効果を損なわない範囲で、他のサブステップ(サブステップX、Y及びZ以外のサブステップ)を組み込むことができる。供給流量、流速、溶離液強さ等の調整により、サブステップX,Y及びZ以外の付加的なサブステップを込み込んでも目的の効果が得られる場合があり、このことは本明細書に接した当業者であれば容易に理解することである。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3及び4を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
サブステップ(A1-1)では、上記の各液の供給と、各画分の抜き出しが、連続的に行われる(すなわち、サブステップ(A1-1)では常に、上記の各液の供給と、各画分の抜き出しのすべてが絶え間なく行われている。)。このことは、以降に説明する各サブステップにおいても同様である。
また、本発明ないし本明細書において、各サブステップで説明する溶離液の脱着力の強弱の説明は、当該サブステップ内における溶離液の脱着力の強弱であり、異なるサブステップにおける溶離液の脱着力の強弱を説明するものではない。例えば、ステップ(A)を構成する一のサブステップにおいてセクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くすることが説明され、当該ステップ(A)を構成する別のサブステップにおいてもセクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くすることが説明されている場合、当該一のサブステップにおいてセクション1を流通する溶離液の脱着力と、当該別のサブステップにおいてセクション1を流通する溶離液の脱着力とは、同じでもよいし、異なっていてもよい。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3及び4を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A2-1)における溶離液供給口D-IIIは、上記サブステップ(A1-1)における原液供給口Fと同じ配管に設けられている。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
<サブステップ(A1-1ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして、該原液供給口Fから原液を供給し、
セクション4の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして、該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A2-1ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
このサブステップ(A2-1ex)における溶離液供給口D3は、上記サブステップ(A1-1)における原液供給口Fと同じ配管に設けられている。
<サブステップ(A3-1ex)>
前記溶離液供給口D1から溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-1ex)、(A2-1ex)及び(A3-1ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、前記溶離液供給口D、前記弱吸着性画分抜出口A、前記中吸着性画分抜出口B及び前記強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-1ex)、(A2-1ex)及び(A3-1ex)を順に行った場合のフロー図を図3に示す。図2に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図3では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図2に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを4セット行うことにより、再び図2に示す形態に戻ることになる。
実施形態2も実施形態1と同様に、単位充填塔を4つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した4つのセクション1~4に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態2においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-2)、(A2-2)及び(A3-2)を順に行う。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション3及び4を流通する溶離液の脱着力を、セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3及び4を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A2-2)における溶離液供給口D-Iは、上記サブステップ(A1-2)における溶離液供給口D-IIと同じ配管に設けられている。また、溶離液供給口D-IIIは、原液供給口Fと同じ配管に設けられている。
このサブステップ(A2-2)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A1-2)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力よりも強いことが好ましい。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、サブステップ(A2-2)における前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
<サブステップ(A1-2ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして、該原液供給口Fから原液を供給し、
セクション4の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして、該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A2-2ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
このサブステップ(A2-2ex)における溶離液供給口D1は、上記サブステップ(A1-2ex)における溶離液供給口D2と同じ配管に設けられている。また、溶離液供給口D3は、上記サブステップ(A1-2ex)における原液供給口Fと同じ配管に設けられている。
<サブステップ(A3-2ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
サブステップ(A2-2ex)における前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-2ex)、(A2-2ex)及び(A3-2ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-2ex)、(A2-2ex)及び(A3-2ex)を順に行った場合のフロー図を図5に示す。図4に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図5では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図4に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを4セット行うことにより、再び図4に示す形態に戻ることになる。
実施形態3は、単位充填塔を5つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態3においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-3)、(A2-3)及び(A3-3)を順に行う。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力と同じか又はセクション1及び2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、前記溶離液供給口D-IIIから前記溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A2-3)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A1-3)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力よりも強いことが好ましい。
このサブステップ(A2-3)における溶離液供給口D-Iは、上記サブステップ(A1-3)における溶離液供給口D-IIと同じ配管に設けられている。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、サブステップ(A2-3)における前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション4の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション5の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2、3及び4を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2、3及び4を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
<サブステップ(A1-3ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして、該原液供給口Fから原液を供給し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして、該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A2-3ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
前記溶離液供給口D3から前記溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
このサブステップ(A2-3ex)における溶離液供給口D1は、上記サブステップ(A1-3ex)における溶離液供給口D2と同じ配管に設けられている。
<サブステップ(A3-3ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
サブステップ(A2-3ex)における前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション4の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション5の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-3ex)、(A2-3ex)及び(A3-3ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-3ex)、(A2-3ex)及び(A3-3ex)を順に行った場合のフロー図を図7に示す。図6に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図7では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図6に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを5セット行うことにより、再び図6に示す形態に戻ることになる。
実施形態4は、単位充填塔を7つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる5種の溶離液d-I~d-Vを用いる。
この実施形態4においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-4)、(A2-4)及び(A3-4)を順に行う。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、セクション5の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力と同じか又はセクション1及び2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A2-4)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A1-4)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力よりも強いことが好ましい。
このサブステップ(A2-4)における溶離液供給口D-Iは、上記サブステップ(A1-4)における溶離液供給口D-IIと同じ配管に設けられている。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、サブステップ(A2-4)における前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、セクション4の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション5の上流側末端を溶離液供給口D-Vとして、該溶離液供給口D-Vから溶離液d-Vを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2、3及び4を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2、3及び4を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
<サブステップ(A1-4ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から5種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして、該原液供給口Fから原液を供給し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から5種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして、該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A2-4ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から5種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から5種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から5種の溶離液のうち脱着力が4番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
このサブステップ(A2-4ex)における溶離液供給口D1は、上記サブステップ(A1-4ex)における溶離液供給口D2と同じ配管に設けられている。
<サブステップ(A3-4ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
サブステップ(A2-4ex)における前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション4の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション5の上流側末端を溶離液供給口D5として、該溶離液供給口D5から5種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d5を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-4ex)、(A2-4ex)及び(A3-4ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-4ex)、(A2-4ex)及び(A3-4ex)を順に行った場合のフロー図を図9に示す。図8に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図9では単位充填塔1つ分ずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図8に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを7セット行うことにより、再び図8に示す形態に戻ることになる。
実施形態5は、単位充填塔を5つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態5においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-5)、(A2-5)及び(A3-5)を順に行う。
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、前記溶離液供給口D-IIIから前記溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション4の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション5の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2、3及び4を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2、3及び4を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A3-5)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A2-5)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力と同じであることが好ましい。
<サブステップ(A1-5ex)>
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして、該原液供給口Fから原液を供給し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして、該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A2-5ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
前記溶離液供給口D3から前記溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A3-5ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション4の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション5の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-5ex)、(A2-5ex)及び(A3-5ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-5ex)、(A2-5ex)及び(A3-5ex)を順に行った場合のフロー図を図14に示す。図13に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図14では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図13に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを5セット行うことにより、再び図13に示す形態に戻ることになる。
実施形態6は、単位充填塔を5つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態6においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-6)、(A2-6)及び(A3-6)を順に行う。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1、2及び3を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション1、2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を前記原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A2-6)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A1-6)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力よりも強いことが好ましい。
このサブステップ(A2-6)における溶離液供給口D-Iは、上記サブステップ(A1-6)における溶離液供給口D-IIと同じ配管に設けられている。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、前記溶離液供給口D-IIIから前記溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A3-6)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A2-6)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力と同じであることが好ましい。
<サブステップ(A1-6ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして、該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A2-6ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして、該原液供給口Fから原液を供給し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A3-6ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
前記溶離液供給口D3から前記溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-6ex)、(A2-6ex)及び(A3-6ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-6ex)、(A2-6ex)及び(A3-6ex)を順に行った場合のフロー図を図16に示す。図15に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図16では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図15に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを5セット行うことにより、再び図15に示す形態に戻ることになる。
実施形態7は、単位充填塔を5つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態7においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-7)、(A2-7)及び(A3-7)を順に行う。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、セクション5の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、前記溶離液供給口D-IIIから前記溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション4の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション5の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2、3及び4を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2、3及び4を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
<サブステップ(A1-7ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして、該原液供給口Fから原液を供給し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして、該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A2-7ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D3から前記溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A3-7ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション4の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション5の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-7ex)、(A2-7ex)及び(A3-7ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-7ex)、(A2-7ex)及び(A3-7ex)を順に行った場合のフロー図を図18に示す。図17に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図18では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図17に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを5セット行うことにより、再び図17に示す形態に戻ることになる。
実施形態8は、単位充填塔を3つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した3つのセクション1~3に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態8においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-8)、(A2-8)、(A3-8)及び(A4-8)を順に行う。
セクション2の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A4-8)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A3-8)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力と同じであることが好ましい。
<サブステップ(A2-8ex)>
セクション1の上流側末端を溶離供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A3-8ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A4-8ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション2の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-8)、(A2-8ex)、(A3-8ex)及び(A4-8ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-8)、(A2-8ex)、(A3-8ex)及び(A4-8ex)を順に行った場合のフロー図を図20に示す。図19に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図20では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図19に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを3セット行うことにより、再び図19に示す形態に戻ることになる。
実施形態9は、単位充填塔を3つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した3つのセクション1~3に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態9においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-9)、(A2-9)、(A3-9)及び(A4-9)を順に行う。
セクション2の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
前記溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
<サブステップ(A2-9ex)>
セクション1の上流側末端を溶離供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A3-9ex)>
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A4-9ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション2の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-9)、(A2-9ex)、(A3-9ex)及び(A4-9ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-9)、(A2-9ex)、(A3-9ex)及び(A4-9ex)を順に行った場合のフロー図を図22に示す。図21に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図22では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図21に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを3セット行うことにより、再び図21に示す形態に戻ることになる。
実施形態10は、単位充填塔を3つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した3つのセクション1~3に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態10においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-10)、(A2-10)、(A3-10)及び(A4-10)を順に行う。
セクション2の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。このとき、サブステップ(A1-10)の原液と溶離液d-IVの脱着力の関係が原液≦d-IVとなるように設定する。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A4-10)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A3-10)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力と同じであることが好ましい。
<サブステップ(A2-10ex)>
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A3-10ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A4-10ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション2の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-10)、(A2-10ex)、(A3-10ex)及び(A4-10ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-10)、(A2-10ex)、(A3-10ex)及び(A4-10ex)を順に行った場合のフロー図を図24に示す。図23に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図24では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図23に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを3セット行うことにより、再び図23に示す形態に戻ることになる。
実施形態11は、単位充填塔を5つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態8においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-11)、(A2-11)及び(A3-11)を順に行う。
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、前記溶離液供給口D-IIIから前記溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A3-11)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A2-11)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力と同じであることが好ましい。
<サブステップ(A1-11ex)>
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして、該原液供給口Fから原液を供給し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして、該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A2-11ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
前記溶離液供給口D3から前記溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A3-11ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-11ex)、(A2-11ex)及び(A3-11ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-11ex)、(A2-11ex)及び(A3-11ex)を順に行った場合のフロー図を図26に示す。図25に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図26では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図25に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを5セット行うことにより、再び図25に示す形態に戻ることになる。
実施形態12は、単位充填塔を5つ以上有する循環系を用いる。そして、この循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切ったものを想定する。また、溶離液として、脱着力の異なる4種の溶離液d-I~d-IVを用いる。
この実施形態12においては、ステップ(A)として下記サブステップ(A1-12)、(A2-12)、(A3-12)及び(A4-12)を順に行う。
セクション3の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション5の下流側末端を弱吸着性画分抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。このとき、サブステップ(A1-9)における原液と溶離液d-IVの脱着力の関係が原液≦d-IVとなるように設定する。
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
このサブステップ(A4-12)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力は、上記サブステップ(A3-12)においてセクション1を流通する溶離液の脱着力と同じであることが好ましい。
<サブステップ(A2-12ex)>
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A3-12ex)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D1として、該溶離液供給口D1から4種の溶離液のうち脱着力が最も強い溶離液d1を供給し、
セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして、該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D2として、該溶離液供給口D2から4種の溶離液のうち脱着力が2番目に強い溶離液d2を供給し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D3として、該溶離液供給口D3から4種の溶離液のうち脱着力が最も弱い溶離液d3を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
<サブステップ(A4-12ex)>
前記溶離液供給口D1から前記溶離液d1を供給し、
前記強吸着性画分抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、
前記溶離液供給口D2から前記溶離液d2を供給し、
セクション3の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして、該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、
セクション4の上流側末端を溶離液供給口D4として、該溶離液供給口D4から4種の溶離液のうち脱着力が3番目に強い溶離液d4を供給し、
前記弱吸着性画分抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す。
上記サブステップ(A1-12)、(A2-12ex)、(A3-12ex)及び(A4-12ex)を順に行うステップ(A)が終了後、ステップ(B)により、原液供給口F、溶離液供給口D、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させ、次いで上記サブステップ(A1-12)、(A2-12ex)、(A3-12ex)及び(A4-12ex)を順に行った場合のフロー図を図28に示す。図27に示す、各セクションに配される単位充填塔が、図28では1つずつ下流側のものへとシフトする。この場合、図27に示すステップ(A)からスタートし、次いでステップ(B)を行うことを1セットとし、これを5セット行うことにより、再び図27に示す形態に戻ることになる。
上記タンパク質に特に制限はなく、例えば、抗体を精製対象成分とすることができる。 本発明において「抗体」とは、天然に存在する抗体でもよく、キメラ抗体であってもよく、酵素等によりフラグメント化された抗体であってもよい(例えば、F(ab’)2フラグメント、Fab’フラグメント、Fabフラグメント)。また、単鎖抗体やその2量体(ダイアボディー)もしくは3量体(トリアボディー)、又はミニボディーも含まれる。また、シングルドメイン抗体であってもよい。なお、これらは一例であり、抗原に対して特異的な結合能を有するタンパク質ないしその誘導体はすべて、本発明における抗体の概念に含まれるものとする。
本発明の方法で高純度化した抗体は、抗体医薬としての適用も可能である。すなわち、本発明の方法を適用して原液中に含まれる抗体を分取することにより、抗体医薬の製造方法を提供することができる。より具体的には、本発明の方法により、抗体産生細胞の培養液及び/又は抗体産生細胞の抽出液を原液とし、その中に含まれる抗体を分取することにより、抗体医薬を得ることができる。本発明において「抗体産生細胞の培養液」や「抗体産生細胞の抽出液」は、抗体産生細胞の培養液や抗体産生細胞の抽出液を、遠心分離処理やクロマト分離処理等の各種処理に付して、ある程度分画ないし精製等された状態としたものを包含する意味である。
精製対象成分がタンパク質の場合、吸着剤はイオン交換樹脂が好ましい。なかでも陽イオン交換樹脂を好適に用いることができる。
ヒトのイムノグロブリンG2(IgG2)を産生する細胞を培養し、その培養液の上澄みを透析により脱塩したのち、NaClを加えて塩濃度を調整したものを原液とした。この上澄み中に含まれる抗体と、そのフラグメント及び凝集体の含有量は下記の通りである。下表中、フラグメント1は分子量5000付近をピークとする分子量が25000未満の画分に含まれるタンパク質とし、フラグメント2は分子量が25000以上50000未満の画分に含まれるタンパク質とした。また、抗体は分子量150000付近をピークとする分子量が50000以上300000未満の画分に含まれるタンパク質とした。また、凝集体は分子量が300000以上の画分に含まれるタンパク質とした。下記成分組成は、分析カラム(東ソーTSKgel G3000SWXL)を用いた高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により決定した。
吸着剤として陽イオン交換樹脂(商品名:Fractogel(登録商標)EMD SO3 -(M)、メルク社製)を用いた。
下記A液及びB液を用いて各種NaCl濃度のリン酸緩衝液を調製し、溶離液として用いた。
<A液>
20mMリン酸緩衝液 pH6.0
<B液>
NaClを0.3M(17.53g/L)の濃度で含有する20mMリン酸緩衝液 pH6.0
<カラム>
直径10mm×長さ100mm 1本
<原液>
原液中のNaCl濃度は2.05g/Lとした。
<溶離液>
下記溶離液を用いた。
下記工程1~6を順に行った。工程1~6のフロー図を図10に示した。
下記運転条件は、弱吸着性画分へのフラグメント1及びフラグメント2の回収率が98%以上、中吸着性画分への抗体の回収率が98%以上、かつ、強吸着性画分への凝集体の回収率が98%以上となる条件とした。このことは、後記する各比較例及び実施例においても同じである。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及びフラグメント2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。この回収率は、100×[画分中の質量]/[原液中の質量]により算出される。
吸着剤の体積(単位:「L(リットル)-R」、RはResinの略)当たり、時間(単位:「h(hour)」当たりの原液の処理量(単位:「L(リットル)-原液」を分離処理効率とした。なお、後述するカラムを複数本用いるマルチカラム系では、吸着剤の体積は、すべてのカラムに含まれる吸着剤の総量である。
比較例1における分離処理効率は、6.04(L-原液)/(L-R)・hであった。
<カラム>
直径10mm×長さ400mm 1本
<原液>
原液中のNaCl濃度は2.05g/Lとした。
<溶離液>
下記溶離液を用いた。
下記工程1~6を順に行った。工程1~6のフロー図は図10の通りである。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及びフラグメント2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
比較例2における分離処理効率は、12.51(L-原液)/(L-R)・hであった。
<カラム>
直径10mm×長さ100mm 4本
<原液>
原液中のNaCl濃度は2.23g/Lとした。
<溶離液>
下記溶離液を用いた。
図11に比較例3の運転のフロー図を示す。図11に示す第1~第4ステップを1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップの間には、原液供給口F、溶離液供給口D(D1~D3)、弱吸着性画分抜出口A、中吸着性画分抜出口B及び強吸着性画分抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったままカラム1つ分だけ下流側へと移行させるステップを行っている。
なお、図11に示す第1~第4ステップは、本発明のステップ(A)に対応するが、当該ステップ(A)とは異なり、複数のサブステップから構成されるものではない(換言すれば、1つのサブステップで1つのステップが構成されている。)。図11中の「D1」、「D2」及び「D3」はいずれも溶離液供給口であり、それぞれ、溶離液D1、D2及びD3が供給される。図11中の「C」は強吸着性画分抜出口であり、強吸着性画分が抜き出される。同様に「B」は中吸着性画分抜出口であり、中吸着性画分が抜き出され、「A」は弱吸着性画分抜出口であり、弱吸着性画分が抜き出される。
図11に示す各ステップにおける溶離液(D1~D3)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。なお、下表には抜き出される液の流速を記載していないが、強吸着性画分抜出口Cから抜き出される強吸着性画分の流速は溶離液D1を供給する流速と同じである。また、中吸着性画分抜出口Bから抜き出される中吸着性画分の流速は溶離液D2を供給する流速と同じである。また、弱吸着性画分抜出口Aから抜き出される弱吸着性画分の流速は、溶離液D3を供給する流速と、原液供給口Fから原液を供給する流速の合計となる。つまり、供給流量と抜出流量は常に同じであり、このことは以降の比較例ないし実施例でも同様である。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及びフラグメント2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
比較例3における分離処理効率は、7.11(L-原液)/(L-R)・hであった。
<カラム>
直径10mm×長さ100mm 4本
<原液>
原液中のNaCl濃度は2.24g/Lとした。
<溶離液>
下記溶離液を用いた。
図12に比較例4の運転のフロー図を示す。図12に示す第1~第4ステップを1サイクルとして、10サイクル実施した。なお、図12に示す各ステップは、第1サブステップと第2サブステップの2つのサブステップから構成され、第2サブステップは液の供給と抜き出しのいずれも行わずに、循環系内の流体を循環させるものである。
図12に示す各ステップにおける溶離液(D1~D3)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
比較例4における分離処理効率は、7.19(L-原液)/(L-R)・hであった。
<カラム>
直径10mm×長さ100mm 4本
<原液>
原液中のNaCl濃度は1.93g/Lとした。
<溶離液>
下記溶離液を用いた。
図2に示すサブステップの組み合わせによりステップ(A)を構成した。このステップ(A)とそれに続くステップ(B)を1セットとし、これを4セット行って1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップ(A)における溶離液(D1~D4)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例1における分離処理効率は、19.696(L-原液)/(L-R)・hであった。
図4に示すサブステップの組み合わせによりステップ(A)を構成した。このステップ(A)とそれに続くステップ(B)を1セットとし、これを4セット行って1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップ(A)における溶離液(D1~D4)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例2における分離処理効率は、18.610(L-原液)/(L-R)・hであった。
図6に示すサブステップの組み合わせによりステップ(A)を構成した。このステップ(A)とそれに続くステップ(B)を1セットとし、これを5セット行って1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップ(A)における溶離液(D1~D4)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例3における分離処理効率は、16.499(L-原液)/(L-R)・hであった。
図8に示すサブステップの組み合わせによりステップ(A)を構成した。このステップ(A)とそれに続くステップ(B)を1セットとし、これを7セット行って1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップ(A)における溶離液(D1~D5)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例4における分離処理効率は、15.225(L-原液)/(L-R)・hであった。
<カラム>
直径10mm×長さ80mm 5本
<原液>
原液中のNaCl濃度は2.46g/Lとした。
<溶離液>
下記溶離液を用いた。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例5における分離処理効率は、16.502(L-原液)/(L-R)・hであった。
図15に示すサブステップの組み合わせによりステップ(A)を構成した。このステップ(A)とそれに続くステップ(B)を1セットとし、これを5セット行って1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップ(A)における溶離液(D1~D4)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例6における分離処理効率は、18.898(L-原液)/(L-R)・hであった。
図17に示すサブステップの組み合わせによりステップ(A)を構成した。このステップ(A)とそれに続くステップ(B)を1セットとし、これを5セット行って1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップ(A)における溶離液(D1~D4)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例7における分離処理効率は、16.502(L-原液)/(L-R)・hであった。
図19に示すサブステップの組み合わせによりステップ(A)を構成した。このステップ(A)とそれに続くステップ(B)を1セットとし、これを3セット行って1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップ(A)における溶離液(D1~D4)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例8における分離処理効率は、17.362(L-原液)/(L-R)・hであった。
図21に示すサブステップの組み合わせによりステップ(A)を構成した。このステップ(A)とそれに続くステップ(B)を1セットとし、これを3セット行って1サイクルとして、10サイクル実施した。各ステップ(A)における溶離液(D1~D4)と原液(F)の供給流速は下記の通りとした。
-回収率-
弱吸着性画分へのフラグメント1及び2の回収率、中吸着性画分への抗体の回収率、強吸着性画分への凝集体の回収率を下表に示す。
実施例9における分離処理効率は、18.956(L-原液)/(L-R)・hであった。
10a、10b、10c、10d 単位充填塔(カラム)
Ab 吸着剤
R1、R2、R3、R4 遮断弁
2a、2b、2c、2d 弱吸着性画分抜出ライン
A1、A2、A3、A4 弱吸着性画分抜出弁
3a、3b、3c、3d 中吸着性画分抜出ライン
B1、B2、B3、B4 中吸着性画分抜出弁
4a、4b、4c、4d 強吸着性画分抜出ライン
C1、C2、C3、C4 強吸着性画分抜出弁
T1、T2、T3、T4 逆止弁
1 配管
2J 弱吸着性画分合流管
3J 中吸着性画分合流管
4J 強吸着性画分合流管
6 原液タンク
7 原液
8a、8b、8c、8d 溶離液タンク
9a、9b、9c、9d 溶離液
11 原液供給ライン
11a、11b、11c、11d 原液供給分岐ライン
F1、F2、F3、F4 原液供給弁
12、13、14、15 溶離液供給ライン
12a、12b、12c、12d 溶離液供給分岐ライン
13a、13b、13c、13d 溶離液供給分岐ライン
14a、14b、14c、14d 溶離液供給分岐ライン
15a、15b、15c、15d 溶離液供給分岐ライン
E1a、E2a、E3a、E4a 溶離液供給弁
E1b、E2b、E3b、E4b 溶離液供給弁
E1c、E2c、E3c、E4c 溶離液供給弁
E1d、E2d、E3d、E4d 溶離液供給弁
P1 循環ポンプ
P2 原液供給ポンプ
P3、P4、P5、P6 溶離液供給ポンプ
Claims (7)
- 吸着剤が充填された3つ以上の単位充填塔が配管を介して直列かつ無端状に連結された循環系を用い、該循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した3つのセクション1~3に区切り、原液中に含まれる、前記吸着剤に対して弱吸着性成分と、強吸着性成分と、両成分の中間的な吸着性の中吸着性成分とを、2種以上の溶離液を用いて分離することを含む擬似移動層方式クロマト分離方法であって、
前記循環系の前記配管には、原液供給口Fと、前記2種以上の各溶離液に対応する2つ以上の溶離液供給口Dと、前記弱吸着性成分を含む弱吸着性画分の抜出口Aと、前記中吸着性成分を含む中吸着性画分の抜出口Bと、前記強吸着性成分を含む強吸着性画分の抜出口Cとが設けられ、該原液供給口F、該抜出口A、該抜出口B及び該抜出口Cの位置を下記(a)~(c)とし:
(a)前記抜出口Bを、前記原液供給口Fの、少なくとも1つのセクションを挟んで下流側に設ける;
(b)前記抜出口Cを、前記原液供給口Fを有する配管に設けるか、又は、前記抜出口Cを、前記原液供給口Fの、少なくとも1つのセクションを挟んで上流側に設ける;
(c)前記抜出口Aを、前記抜出口Bを有する配管に設けるか、又は、前記抜出口Aを、前記抜出口Bの、少なくとも1つのセクションを挟んで下流側に設ける;
前記クロマト分離方法は下記ステップ(A)及び(B)を順に繰り返すことを含む、擬似移動層方式クロマト分離方法:
[ステップ(A)]
前記原液供給口Fから原液を、前記2つ以上の溶離液供給口Dから2種以上の溶離液を、それぞれ同時に又は別々に供給し、かつ、前記抜出口Aから弱吸着性画分を、前記抜出口Bから中吸着性画分を、前記抜出口Cから強吸着性画分を、それぞれ同時に又は別々に抜き出すステップ;
[ステップ(B)]
前記ステップ(A)終了後、前記原液供給口F、前記溶離液供給口D、前記抜出口A、前記抜出口B及び前記抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させるステップ。 - 前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-8)、(A2-8)、(A3-8)及び(A4-8)を行う、請求項1に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-8)>
セクション2の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A2-8)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A3-8)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を前記抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A4-8)>
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を前記抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。 - 前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-9)、(A2-9)、(A3-9)及び(A4-9)を行う、請求項1に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-9)>
セクション2の上流側末端を原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A2-9)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A3-9)>
前記溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1及び2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A4-9)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を強吸着性画分抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を中吸着性画分抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。 - 前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-10)、(A2-10)、(A3-10)及び(A4-10)を行う、請求項1に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-10)>
セクション2の上流側末端を前記原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A2-10)>
セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして、該溶離液供給口D-IVから、前記原液と脱着力が同じ又は前記原液よりも脱着力が強い溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A3-10)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を前記抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A4-10)>
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション2の下流側末端を前記抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を、セクション2を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。 - 吸着剤が充填された5つ以上の単位充填塔が配管を介して直列かつ無端状に連結された循環系を用い、該循環系を、各セクションが少なくとも1つの単位充填塔を有するように上流側から下流側に向けて円環状に連続した5つのセクション1~5に区切り、原液中に含まれる、前記吸着剤に対して弱吸着性成分と、強吸着性成分と、両成分の中間的な吸着性の中吸着性成分とを、2種以上の溶離液を用いて分離することを含む擬似移動層方式クロマト分離方法であって、
前記循環系の前記配管には、原液供給口Fと、前記2種以上の各溶離液に対応する2つ以上の溶離液供給口Dと、前記弱吸着性成分を含む弱吸着性画分の抜出口Aと、前記中吸着性成分を含む中吸着性画分の抜出口Bと、前記強吸着性成分を含む強吸着性画分の抜出口Cとが設けられ、該原液供給口F、該抜出口A、該抜出口B及び該抜出口Cの位置を下記(a)~(c)とし:
(a)前記抜出口Bを、前記原液供給口Fの、少なくとも1つのセクションを挟んで下流側に設ける;
(b)前記抜出口Cを、前記原液供給口Fを有する配管に設けるか、又は、前記抜出口Cを、前記原液供給口Fの、少なくとも1つのセクション挟んで上流側に設ける;
(c)前記抜出口Aを、前記抜出口Bを有する配管に設けるか、又は、前記抜出口Aを、前記抜出口Bの、少なくとも1つのセクションを挟んで下流側に設ける;
前記クロマト分離方法は下記ステップ(A)及び(B)を順に繰り返すことを含む、擬似移動層方式クロマト分離方法:
[ステップ(A)]
前記原液供給口Fから原液を、前記2つ以上の溶離液供給口Dから2種以上の溶離液を、それぞれ同時に又は別々に供給し、かつ、前記抜出口Aから弱吸着性画分を、前記抜出口Bから中吸着性画分を、前記抜出口Cから強吸着性画分を、それぞれ同時に又は別々に抜き出すステップ;
[ステップ(B)]
前記ステップ(A)終了後、前記原液供給口F、前記溶離液供給口D、前記抜出口A、前記抜出口B及び前記抜出口Cを、これらの相対的な位置関係を保ったまま下流側へと移行させるステップ。 - 前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-11)、(A2-11)及び(A3-11)を行う、請求項5に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-11)>
セクション3の上流側末端を前記原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、セクション5の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション3を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A2-11)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を前記抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、前記溶離液供給口D-IIIから前記溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A3-11)>
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。 - 前記の2種以上の溶離液を用いて、前記ステップ(A)において下記サブステップ(A1-12)、(A2-12)、(A3-12)及び(A4-12)を行う、請求項5に記載の擬似移動層方式クロマト分離方法:
<サブステップ(A1-12)>
セクション3の上流側末端を前記原液供給口Fとして該原液供給口Fから原液を供給し、セクション5の下流側末端を前記抜出口Aとして該抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A2-12)>
セクション3の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして、該溶離液供給口D-IVから、前記原液と脱着力が同じ又は前記原液よりも脱着力が強い溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出す;
<サブステップ(A3-12)>
セクション1の上流側末端を溶離液供給口D-Iとして該溶離液供給口D-Iから溶離液d-Iを供給し、セクション1の下流側末端を前記抜出口Cとして該抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、セクション2の上流側末端を溶離液供給口D-IIとして該溶離液供給口D-IIから溶離液d-IIを供給し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IIIとして該溶離液供給口D-IIIから溶離液d-IIIを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする;
<サブステップ(A4-12)>
前記溶離液供給口D-Iから前記溶離液d-Iを供給し、前記抜出口Cから強吸着性画分を抜き出し、前記溶離液供給口D-IIから前記溶離液d-IIを供給し、セクション3の下流側末端を前記抜出口Bとして該抜出口Bから中吸着性画分を抜き出し、セクション4の上流側末端を溶離液供給口D-IVとして該溶離液供給口D-IVから溶離液d-IVを供給し、前記抜出口Aから弱吸着性画分を抜き出すことにより、
セクション1を流通する溶離液の脱着力を最も強くし、
セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力を、セクション1を流通する溶離液の脱着力よりも弱くし、
セクション4及び5を流通する溶離液の脱着力を、セクション2及び3を流通する溶離液の脱着力よりも弱くする。
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