WO2021193589A1

WO2021193589A1 - 検査方法、検査キット及び検査システム

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Publication number: WO2021193589A1
Application number: PCT/JP2021/011864
Authority: WO
Inventors: 良教赤木; 芳秀澤田; 大山　力; 徹米山
Original assignee: 積水化学工業株式会社; 国立大学法人弘前大学
Priority date: 2020-03-23
Filing date: 2021-03-23
Publication date: 2021-09-30
Also published as: JPWO2021193589A1

Abstract

試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を高い精度で求めることができる検査方法を提供する。　本発明に係る検査方法は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する検査方法であって、検査用器具を用いる検査方法であり、検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、ナノ構造表面と試料とを接触させる工程と、前記試料を接触させた後の状態のナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、前記粒状物を接触させた後の状態のナノ構造表面に光を照射して、測定光スペクトルを取得する工程とを備え、前記測定光スペクトルを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する。

Description

検査方法、検査キット及び検査システム

　本発明は、特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する検査方法に関する。また、本発明は、特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定するために用いられる検査キット及び検査システムに関する。

　癌の診断として、血液中に含まれる腫瘍マーカーの濃度を測定する血液検査が行われている。しかしながら、従来の検査方法では、検査精度が低いため、偽陽性率及び偽陰性率を十分に低くすることは困難である。

　また、近年、検査精度を向上させるために、腫瘍マーカーが有する糖鎖に着目した癌の判定方法の開発が行われている。これは、癌患者の腫瘍マーカーの糖鎖の構造と、健常者の腫瘍マーカーの糖鎖の構造とが異なっているとの知見に基づく。

　下記の特許文献１～３には、糖鎖に着目した癌の判定方法が開示されている。

　下記の特許文献１には、ヒトハプトグロビンのアミノ酸配列のＮ末端より１８４番目のアスパラギン又は／及び２１１番目のアスパラギンに結合しているフコシル化糖鎖を検出することを特徴とする膵臓癌判定方法が開示されている。

　下記の特許文献２には、ムラサキモクワンジュレクチン（ＢＰＡ）及びオサジオレンジレクチン（ＭＰＡ）が、がん細胞表面の糖鎖に結合する作用を利用した前立腺がん判定方法が開示されている。

　下記の特許文献３には、生体由来試料中の遊離型ＰＳＡ量に対する糖鎖の末端シアル酸残基が糖鎖の末端から２番目のガラクトース残基にα（２，３）結合した糖鎖を有する遊離型ＰＳＡ量の比率を決定し、その比率が４０％又はそれより高い場合に前立腺癌であるかその蓋然性が高いと判定する前立腺癌の判定方法が開示されている。なお、ＰＳＡとは、前立腺特異抗原である。

特開２００９－１６８４７０号公報特開２０１３－１５６２４５号公報ＷＯ２０１７／１３０５７８Ａ１

　特許文献１～３に記載の方法では、特定の糖鎖を有する抗原（腫瘍マーカー）の濃度を、ある程度の精度で求めることができる。しかしながら、通常、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量は微量であるため、特許文献１～３に記載の方法では、測定精度を十分に高めることは困難である。特に、特許文献２に記載の方法では、検出方法として発色法が用いられているため、測定精度を十分に高めることはより一層困難である。

　本発明の目的は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を高い精度で求めることができる検査方法を提供することである。また、本発明の目的は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を高い精度で求めることができる検査方法を提供することである。さらに、本発明の目的は、上記検査方法に用いることができる検査キット及び検査システムを提供することである。

　本発明の広い局面によれば、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する検査方法であって、検査用器具を用いる検査方法であり、前記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、前記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、前記ナノ構造表面と前記試料とを接触させる工程と、前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、前記粒状物を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、測定光スペクトルを取得する工程とを備え、前記測定光スペクトルを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する、検査方法が提供される。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記検査方法は、前記試料を接触させる前の状態、又は前記粒状物を接触させる前の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備え、前記測定光スペクトルと前記基準光スペクトルとを比較することにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する。

　本発明の広い局面によれば、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する検査方法であって、検査用器具を用いる検査方法であり、前記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、前記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、前記ナノ構造表面と前記試料とを接触させる工程と、前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程と、前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、前記粒状物を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、第２の測定光スペクトルを取得する工程とを備え、前記第１の測定光スペクトルと前記第２の測定光スペクトルとを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する、検査方法が提供される。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記第１の測定光スペクトルを用いて、前記抗体と結合している抗原の含有量を求め、かつ、前記第２の測定光スペクトルを用いて、前記粒状物と結合している前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を求めることにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記粒状物と結合している前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量の、前記抗体と結合している抗原の含有量に対する比を求めることにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記検査方法は、前記試料を接触させる前の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備え、前記第１の測定光スペクトルと前記第２の測定光スペクトルと前記基準光スペクトルとを比較することにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程において、前記ナノ構造表面に、液中に分散した前記粒状物を接触させ、前記液１ｍＬあたり、前記粒状物が有する前記レクチンの含有量が、１μｇ以上２０μｇ以下である。

　本発明の広い局面によれば、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する検査方法であって、検査用器具を用いる検査方法であり、前記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、前記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、前記ナノ構造表面と前記試料とを接触させる工程と、前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、前記粒状物を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、測定光スペクトルを取得する工程とを備え、前記測定光スペクトルを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する、検査方法が提供される。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記検査方法は、前記試料を接触させる前の状態、又は前記粒状物を接触させる前の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備え、前記測定光スペクトルと前記基準光スペクトルとを比較することにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する。

　本発明の広い局面によれば、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する検査方法であって、検査用器具を用いる検査方法であり、前記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、前記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、前記ナノ構造表面と前記試料とを接触させる工程と、前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程と、前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、前記粒状物を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、第２の測定光スペクトルを取得する工程とを備え、前記第１の測定光スペクトルと前記第２の測定光スペクトルとを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する、検査方法が提供される。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記第１の測定光スペクトルを用いて、前記抗体と結合している前立腺特異抗原の含有量を求め、かつ、前記第２の測定光スペクトルを用いて、前記粒状物と結合している前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を求めることにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記粒状物と結合している前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量の、前記抗体と結合している前立腺特異抗原の含有量に対する比を求めることにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記検査方法は、前記試料を接触させる前の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備え、前記第１の測定光スペクトルと前記第２の測定光スペクトルと前記基準光スペクトルとを比較することにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記ナノ構造表面が、複数の凹部又は複数の凸部による周期構造を有する表面である。

　本発明に係る検査方法のある特定の局面では、前記壁部が、壁部本体と、前記壁部本体の表面上に配置された金属層とを有し、前記金属層が、前記ナノ構造表面の少なくとも一部を構成している。

　本発明の広い局面によれば、ナノ構造表面を有する壁部、及び前記ナノ構造表面に配置された抗体を備える検査用器具本体と、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物とを備える、検査キットが提供される。

　本発明に係る検査キットのある特定の局面では、前記ナノ構造表面が、複数の凹部又は複数の凸部による周期構造を有する表面である。

　本発明に係る検査キットのある特定の局面では、前記壁部が、壁部本体と、前記壁部本体の表面上に配置された金属層とを有し、前記金属層が、前記ナノ構造表面の少なくとも一部を構成している。

　本発明の広い局面によれば、ナノ構造表面を有する壁部、及び前記ナノ構造表面に配置された抗体を備える検査用器具本体と、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物と、前記検査用器具本体の前記ナノ構造表面に光を照射するための照射部と、前記ナノ構造表面に照射された光を受光するための受光部とを備える、検査システムが提供される。

　本発明に係る検査システムのある特定の局面では、前記ナノ構造表面が、複数の凹部又は複数の凸部による周期構造を有する表面である。

　本発明に係る検査システムのある特定の局面では、前記壁部が、壁部本体と、前記壁部本体の表面上に配置された金属層とを有し、前記金属層が、前記ナノ構造表面の少なくとも一部を構成している。

　本発明に係る検査方法、検査キット及び検査システムでは、上記の構成が備えられているので、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を高い精度で求めることができる。また、本発明に係る検査方法、検査キット及び検査システムでは、上記の構成が備えられているので、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を高い精度で求めることができる。

図１は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す正面断面図である。図２は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す平面図である。図３は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す正面断面図である。図４は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す正面断面図である。図５は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す平面図である。図６（ａ），（ｂ）は、本発明の一実施形態に係る検査方法の各工程を説明するための断面図である。図７（ｃ），（ｄ）は、本発明の一実施形態に係る検査方法の各工程を説明するための断面図である。図８（ｅ）は、本発明の一実施形態に係る検査方法の各工程を説明するための断面図である。図９は、本発明の検査方法の一例を説明するための拡大正面図である。図１０は、本発明の検査方法の一例を説明するための拡大正面図である。図１１は、本発明の第１の実施形態に係る検査システムの模式図である。図１２は、本発明の第２の実施形態に係る検査システムの模式図である。図１３は、実施例１における特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の濃度とピークのシフト量Δλとの関係を示す図である。図１４は、実施例２で得られた反射光のスペクトルである。

　以下、本発明を詳細に説明する。

　本発明に係る検査方法（以下、検査方法（１Ａ）と記載することがある）は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する検査方法である。本発明に係る検査方法（１Ａ）は、検査用器具を用いる検査方法である。本発明に係る検査方法（１Ａ）では、上記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、上記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備える。

　本発明に係る検査方法（１Ａ）は、以下の工程（ａ）～（ｃ）を備える。

　工程（ａ）：上記ナノ構造表面と上記試料とを接触させる工程。

　工程（ｂ）：上記試料を接触させた後の状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程。

　工程（ｃ）：上記粒状物を接触させた後の状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、測定光スペクトルを取得する工程。

　本発明に係る検査方法（１Ａ）では、上記測定光スペクトルを用いて、上記試料に含まれる上記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する。本発明に係る検査方法（１Ａ）では、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を決定することができる。

　本発明に係る検査方法（１Ａ）では、工程（ａ）において、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とを結合させることができる。工程（ａ）は、上記ナノ構造表面と上記試料とを接触させて、上記抗体と、上記試料に含まれる抗原とを結合させる工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（１Ａ）では、工程（ｂ）において、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させることができる。また、工程（ｂ）において、上記試料に含まれる抗原のうち、上記特定の糖鎖を有する抗原と、上記粒状物とを上記レクチンを介して結合させることができる。工程（ｂ）は、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させ、上記試料に含まれる抗原のうち、上記特定の糖鎖を有する抗原と、上記粒状物とを上記レクチンを介して結合させる工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（１Ａ）では、工程（ｃ）において、上記特定の糖鎖を有する抗原と上記粒状物とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射することができる。工程（ｃ）は、上記特定の糖鎖を有する抗原と上記粒状物とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、測定光スペクトルを取得する工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（以下、検査方法（１Ｂ）と記載することがある）は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する検査方法である。本発明に係る検査方法（１Ｂ）は、検査用器具を用いる検査方法である。本発明に係る検査方法（１Ｂ）では、上記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、上記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備える。

　本発明に係る検査方法（１Ｂ）は、以下の工程（ａ）～（ｄ）を備える。

　工程（ｂ）：上記試料を接触させた後の状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程。

　工程（ｃ）：上記粒状物を接触させた後の状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程。

　工程（ｄ）：上記粒状物を接触させた後の状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、第２の測定光スペクトルを取得する工程。

　本発明に係る検査方法（１Ｂ）では、上記第１の測定光スペクトルと上記第２の測定光スペクトルとを用いて、上記試料に含まれる上記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する。本発明に係る検査方法（１Ｂ）では、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を決定することができる。

　本発明に係る検査方法（１Ｂ）では、工程（ａ）において、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とを結合させることができる。工程（ａ）は、上記ナノ構造表面と上記試料とを接触させて、上記抗体と、上記試料に含まれる抗原とを結合させる工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（１Ｂ）では、工程（ｂ）において、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射することができる。工程（ｂ）は、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（１Ｂ）では、工程（ｃ）において、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させることができる。また、工程（ｃ）において、上記試料に含まれる抗原のうち、上記特定の糖鎖を有する抗原と、上記粒状物とを上記レクチンを介して結合させることができる。工程（ｃ）は、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させ、上記試料に含まれる抗原のうち、上記特定の糖鎖を有する抗原と、上記粒状物とを上記レクチンを介して結合させる工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（１Ｂ）では、工程（ｄ）において、上記特定の糖鎖を有する抗原と上記粒状物とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射することができる。工程（ｄ）は、上記特定の糖鎖を有する抗原と上記粒状物とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、第２の測定光スペクトルを取得する工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（１Ａ），（１Ｂ）では、上記の構成が備えられているので、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を高い精度で求めることができる。

　本発明に係る検査方法（以下、検査方法（２Ａ）と記載することがある）は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する検査方法である。本発明に係る検査方法（２Ａ）は、検査用器具を用いる検査方法である。本発明に係る検査方法（２Ａ）では、上記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、上記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備える。

　本発明に係る検査方法（２Ａ）は、以下の工程（ａ）～（ｃ）を備える。

　本発明に係る検査方法（２Ａ）では、上記測定光スペクトルを用いて、上記試料に含まれる上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する。本発明に係る検査方法（２Ａ）では、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を決定することができる。

　本発明に係る検査方法（２Ａ）では、工程（ａ）において、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とを結合させることができる。工程（ａ）は、上記ナノ構造表面と上記試料とを接触させて、上記抗体と、上記試料に含まれる前立腺特異抗原とを結合させる工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（２Ａ）では、工程（ｂ）において、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させることができる。また、工程（ｂ）において、上記試料に含まれる前立腺特異抗原のうち、上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原と、上記粒状物とを上記レクチンを介して結合させることができる。工程（ｂ）は、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させ、上記試料に含まれる前立腺特異抗原のうち、上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原と、上記粒状物とを上記レクチンを介して結合させる工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（２Ａ）では、工程（ｃ）において、上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原と上記粒状物とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射することができる。工程（ｃ）は、上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原と上記粒状物とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、測定光スペクトルを取得する工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（以下、検査方法（２Ｂ）と記載することがある）は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する検査方法である。本発明に係る検査方法（２Ｂ）は、検査用器具を用いる検査方法である。本発明に係る検査方法（２Ｂ）では、上記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、上記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備える。

　本発明に係る検査方法（２Ｂ）は、以下の工程（ａ）～（ｄ）を備える。

　工程（ｃ）：上記試料を接触させた後の状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程。

　本発明に係る検査方法（２Ｂ）では、上記第１の測定光スペクトルと上記第２の測定光スペクトルとを用いて、上記試料に含まれる上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する。本発明に係る検査方法（２Ｂ）では、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を決定することができる。

　本発明に係る検査方法（２Ｂ）では、工程（ａ）において、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とを結合させることができる。工程（ａ）は、上記ナノ構造表面と上記試料とを接触させて、上記抗体と、上記試料に含まれる前立腺特異抗原とを結合させる工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（２Ｂ）では、工程（ｂ）において、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射することができる。工程（ｂ）は、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（２Ｂ）では、工程（ｃ）において、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させることができる。また、工程（ｃ）において、上記試料に含まれる前立腺特異抗原のうち、上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原と、上記粒状物とを上記レクチンを介して結合させることができる。工程（ｃ）は、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とが結合した状態の上記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させ、上記試料に含まれる前立腺特異抗原のうち、上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原と、上記粒状物とを上記レクチンを介して結合させる工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（２Ｂ）では、工程（ｄ）において、上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原と上記粒状物とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射することができる。工程（ｄ）は、上記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原と上記粒状物とが結合した状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、第２の測定光スペクトルを取得する工程であることが好ましい。

　本発明に係る検査方法（２Ａ），（２Ｂ）では、上記の構成が備えられているので、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を高い精度で求めることができる。

　上記検査方法（２Ａ），（２Ｂ）ではそれぞれ、上記検査方法（１Ａ），（１Ｂ）における抗原として、前立腺特異抗原（ｐｒｏｓｔａｔｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ａｎｔｉｇｅｎ，ＰＳＡ）が用いられている。

　上記検査方法の測定原理について以下に説明する。なお、以下の説明において、「特定の糖鎖を有する抗原」を、「特定の糖鎖を有する抗原Ｘ」又は「抗原Ｘ」と記載することがある。また、以下の説明において、「特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原」を、「特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原Ｘ」又は「前立腺特異抗原Ｘ」と記載することがある。

　本発明では、抗体を備える特定の検査用器具が用いられているので、該抗体と、試料に含まれる抗原（ＰＳＡ等）とが結合する。上記抗体と結合する抗原には、特定の糖鎖を有する抗原Ｘと、該特定の糖鎖を有さない抗原とが含まれる。特定の糖鎖を有する抗原Ｘと、該特定の糖鎖を有さない抗原とは、同種類の抗原である。上記抗原Ｘは、例えば、抗原（特定の糖鎖を有さない抗原）において、糖鎖構造に変異が生じた抗原である。上記特定の糖鎖とは、例えば、患者（癌患者等）と健常者とで構造が異なる糖鎖である。ＰＳＡは、末端シアル酸がα（２，６）結合である糖鎖を有する。しかしながら、癌患者のＰＳＡには、末端シアル酸がα（２，３）結合である糖鎖を有するＰＳＡも含まれる（特許文献１）。本発明では、レクチンを表面に有する粒状物を用いることにより、上記抗原Ｘ（末端シアル酸がα（２，３）結合である糖鎖を有するＰＳＡ等）を特異的に認識することができる。

　さらに、本発明では、特定の構造を有する検査用器具が用いられているので、上記抗原Ｘと結合した粒状物を、ナノ構造表面上に保持させることができる。

　上記ナノ構造表面上に上記粒状物が保持されると、上記ナノ構造表面の屈折率ｎ_１が変化するため、上記ナノ構造表面に起因する回折光の波長λが変化する。従って、上記ナノ構造表面に光を照射したときの反射光のスペクトルの変化を検出することで、抗原Ｘの濃度を測定することができる。

　本発明では、上記粒状物が上記ナノ構造表面上に保持される前後において、上記ナノ構造表面の屈折率ｎ_１の変化量を格段に大きくすることができる。すなわち、上記ナノ構造表面上に上記粒状物をわずかに保持させるだけで、反射光のスペクトルを検出可能な程度に変化させることができる。従って、抗原Ｘの濃度の測定精度を飛躍的に高めることができる。

　上記抗原Ｘと結合した粒状物は、凝集状態の粒状物であってもよく、凝集状態の粒状物でなくてもよい。従来、凝集物による光の散乱を検出することにより、被検査物質の濃度を測定する方法が用いられることがある。しかしながら、従来の方法では、特に低濃度の場合において測定が困難であると考えられる。すなわち、凝集物が一定の大きさ（例えばマイクロメートルオーダー）になるまでは検出できなかったり、凝集の度合いにばらつきがあることで精度が低かったりすると考えられる。本発明では、抗原Ｘと結合した粒状物がナノ構造表面側にわずかに存在することで、該ナノ構造表面からの光学的応答（例えば反射光強度）が変化することが見出されている。このため、本発明では、上記粒状物が、凝集状態の粒状物でなかったり、抗原Ｘが低濃度であったりしても、より一層高い精度で濃度を測定できる。また、本発明では、抗原Ｘの濃度を従来よりも迅速に測定することができる。

　検査方法（１Ａ），（１Ｂ）は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の濃度を測定する検査方法であることが好ましい。検査方法（２Ａ），（２Ｂ）は、試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の濃度を測定する検査方法であることが好ましい。

　検査方法（１Ａ），（１Ｂ）は、特定の糖鎖を有する抗原（抗原Ｘ）と、特定の糖鎖を有さない抗原とを含む試料において、上記抗原Ｘと上記特定の糖鎖を有さない抗原とが同じ種類の抗原であり、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定する検査方法であることが好ましい。検査方法（２Ａ），（２Ｂ）は、特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原（前立腺特異抗原Ｘ）と、特定の糖鎖を有さない前立腺特異抗原とを含む試料において、上記試料に含まれる上記前立腺特異抗原Ｘの含有量を測定する検査方法であることが好ましい。

　以下、図面を参照しつつ、本発明の具体的な実施形態を説明する。なお、以下の図面は、模式的に記載されており、図面に描画された物体の寸法の比率等は、現実の物体の寸法の比率等とは異なる場合がある。具体的な物体の寸法の比率等は、以下の説明を参酌して判断されるべきである。特に、参照する図面では、凹部の大きさは、図示の便宜上、拡大して示されている。実際の凹部は、ナノサイズであり、より微細である。また、参照する図面では、抗体、抗原、糖鎖、抗体と抗原との結合及び抗原とレクチンとの結合等は、図示の便宜上、簡略化して示されている。

　図１は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す正面断面図である。図２は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す平面図である。図１では、図２のＡ－Ａ線に沿う検査用器具の断面図が示されている。

　図１，２に示す検査用器具１は、ナノ構造表面２ａを有する壁部２と、ナノ構造表面２ａの表面に配置された抗体３とを有する検査用器具本体４を備える。検査用器具本体４は、壁部２と抗体３とを有する部材である。

　壁部２は、壁部本体２１と、金属層２２とを備える。金属層２２は、壁部本体２１の表面上に配置されている。金属層２２は、ナノ構造表面２ａの少なくとも一部を構成している。壁部２、壁部本体２１及び金属層２２はそれぞれ、ナノ構造を表面に有する。ナノ構造表面２ａは、複数の凹部による周期構造２Ａを有する表面である。

　上記周期構造における凹部の半径ｒ_１は、該凹部の底面の半径である。また、上記周期構造の周期ｄは、最も近接する凹部同士の中心間距離である。

　抗体３は、ナノ構造表面２ａの表面に固定されている。また、抗体３は、金属層２２の表面に配置されており、固定されている。

　検査用器具１では、壁部２は、検査用器具１の底部である。検査用器具１は、壁部２（底部）の周期構造２Ａの側方において、壁部２（底部）から立設している側壁部５を備える。検査用器具１は、壁部２と側壁部５とで囲まれた収納部７を有する。収納部７に、試料を収納することができる。

　検査用器具１は、側壁部５の壁部２側とは反対側に配置された蓋体６を備える。レクチンを表面に有する粒状物８は、蓋体６の表面上に配置されている。収納部７に試料が収納されているとき、蓋体６が収納部７上に配置されていることにより、収納部７において、試料と粒状物８とを接触させることができる。例えば、抗体３と試料に含まれる抗原とを結合させた後、蓋体６を配置することにより、試料と粒状物８とを接触させることができる。このため、特定の糖鎖を有する抗原Ｘと、粒状物８におけるレクチンとを容易に反応させることができる。本実施形態においては、粒状物８は、壁部２の周期構造２Ａの上方に配置されている。

　検査用器具１は、壁部２と、抗体３と、側壁部５と、蓋体６とを備える検査チップである。検査用器具１は、マイクロチップである。図２に示すように、検査用器具１は、導入部９を有する。導入部９は、側壁部５が設けられていない部分である。導入部９から、試料を収納部７に導入することができる。なお、導入部は、蓋部に設けられていてもよい。検査用器具は、導入部９と接続する微細流路を備えていてもよく、例えば、被検査物質の前処理を行う空間や廃液経路等を備えていてもよい。

　壁部２及び周期構造２Ａは、複数の凹部を有する。本実施形態においては、凹部の形状は、円柱状である。ナノ構造表面２ａは、複数の凹部による周期構造２Ａを有する表面である。

　上記凹部は、規則的に配置されている。本実施形態において、凹部は、第１の方向（図２の上下方向）と、第１の方向と直交する第２の方向（図２の左右方向）とに、等間隔かつ複数列で配置されている。凹部は、二次元周期構造を有する。複数の凹部による壁部２の周期構造２Ａは、六方格子構造を有する。

　本実施形態においては、上記周期構造２Ａの周期ｄは、測定する光の波長と同程度である。光の波長と同程度の周期において、比較的大きな屈折率の変化がある媒質には、特定の波長域の光は侵入することができずに反射され、特定の波長域外の波長の光は透過する。上記のような媒質に侵入することができない光の波長域は、フォトニックバンドギャップと呼ばれる。照射する光の角度等を適切に設定することにより、上記周期構造においてフォトニックバンドギャップが生じる。検査時に、フォトニックバンドギャップの波長域において反射光のピークが生じる。屈折率の変化により、上記ピーク強度が大きく変化するため、測定精度をより一層高めることができる。また、金属層が備えられていることにより、測定精度をかなり高めることができ、抗原Ｘの濃度が低濃度であっても測定精度を高めることができる。

　図３は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す正面断面図である。

　図３に示す検査用器具１Ａと、図１に示す検査用器具１とでは、粒状物８の有無のみが異なる。検査用器具１Ａでは、検査用器具１とは異なり、粒状物８が備えられていない。検査用器具１Ａでは、抗体３と試料に含まれる抗原とを結合させた後に、導入部から収納部７に上記粒状物を導入したり、蓋体６を取り外して収納部７に上記粒状物を導入したりすることができる。

　図４は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す正面断面図である。図５は、本発明に係る検査方法に用いられる検査用器具の一例を模式的に示す平面図である。図４では、図５のＢ－Ｂ線に沿う検査用器具の断面図が示されている。

　検査用器具１Ｂは、シャーレと、蓋体６Ｂとを備える。シャーレは、ナノ構造表面２Ｂａを有する壁部２Ｂと、ナノ構造表面２Ｂａの表面に配置された抗体３Ｂとを有する検査用器具本体４Ｂである。検査用器具本体４Ｂは、壁部２Ｂと抗体３Ｂとを有する部材である。

　壁部２Ｂは、壁部本体２１Ｂと、金属層２２Ｂとを備える。金属層２２Ｂは、壁部本体２１Ｂの表面上に配置されている。金属層２２Ｂは、ナノ構造表面２Ｂａの少なくとも一部を構成している。壁部２Ｂ、壁部本体２１Ｂ及び金属層２２Ｂはそれぞれ、ナノ構造を表面に有する。ナノ構造表面２Ｂａは、複数の凹部による周期構造２ＢＡを有する表面である。

　抗体３Ｂは、ナノ構造表面２Ｂａの表面に固定されている。また、抗体３Ｂは、金属層２２Ｂの表面に配置されており、固定されている。

　検査用器具１Ｂでは、壁部２Ｂは、検査用器具１Ｂの底部及び側壁部を構成している。検査用器具１Ｂでは、底部と側壁部とが一体的に構成されており、１つの器具（容器）として構成されている。検査用器具１Ｂは、壁部２Ｂ（底部及び側壁部）により囲まれた収納部７Ｂを有する。収納部７Ｂに、試料を収納することができる。

　レクチンを表面に有する粒状物８は、蓋体６Ｂの表面上に配置されている。収納部７Ｂに試料が収納されているとき、蓋体６Ｂが収納部７Ｂ上に配置されていることにより、収納部７Ｂにおいて、試料と粒状物８とを接触させることができる。例えば、抗体３Ｂと試料に含まれる抗原とを結合させた後、蓋体６Ｂを配置することにより、試料と粒状物８とを接触させることができる。このため、特定の糖鎖を有する抗原Ｘと、粒状物８におけるレクチンとを容易に反応させることができる。

　なお、検査用器具は検査用器具１Ｂに示す形状で、粒状物８が備えられていなくてもよい。この場合には、抗体３Ｂと試料に含まれる抗原とを結合させた後に、蓋体６Ｂを取り外して収納部７Ｂに上記粒状物を導入したりすることができる。

　図１～図５では、複数の凹部により周期構造が形成されている。検査用器具は、複数の凸部により周期構造が形成されていてもよい。

　図６～図８を用いて、本発明に係る検査方法の一例を説明する。

　図６（ａ），（ｂ）、図７（ｃ），（ｄ）及び図８（ｅ）は、本発明の一実施形態に係る検査方法の各工程を説明するための断面図である。

　図６～図８では、検査用器具の検査用器具本体部分が拡大して示されている。図６～図８では、図１に示す検査用器具１が用いられており、具体的には、ナノ構造表面２ａを有する壁部２と、抗体３とを備える検査用器具が用いられている。壁部２は、壁部本体２１と、金属層２２とを備える。ナノ構造表面２ａは周期構造を有する表面である。

　＜基準光スペクトルを取得する工程＞
　図６（ａ）に示すように、試料が導入される前の検査用器具のナノ構造表面２ａ（抗体３が配置されたナノ構造表面２ａ）に、光Ｌ１を照射する。次いで、ナノ構造表面２ａ（抗体３が配置されたナノ構造表面２ａ）から反射された光Ｌ２の強度を測定し、基準光スペクトルを取得する。すなわち、試料とナノ構造表面２ａとを接触させる前のナノ構造表面２ａに光Ｌ１を照射して、基準光スペクトルを取得する。抗体３と試料に含まれる抗原とが結合していない状態のナノ構造表面２ａに光Ｌ１を照射して、基準光スペクトルを取得する。

　なお、後述するように、検査方法（１Ａ），（２Ａ）では、粒状物とナノ構造表面２ａとを接触させる前のナノ構造表面２ａに光Ｌ１を照射して、基準光スペクトルを取得してもよい。抗原Ｘと粒状物とが結合していない状態（抗体３と試料に含まれる抗原とが結合しており、かつ抗原Ｘと粒状物とが結合していない状態）のナノ構造表面２ａに光Ｌ１を照射して、基準光スペクトルを取得してもよい。

　上記基準光スペクトルを取得する工程では、ナノ構造表面に液体が存在しない状態で光が照射されてもよく、液体が存在する状態で光が照射されてもよい。上記液体としては、水、生理食塩水及び試料の溶媒等が挙げられる。

　なお、本発明に係る検査方法は、上記基準光スペクトルを取得する工程を備えていてもよく、備えていなくてもよい。

　検査方法（１Ａ）は、試料を接触させる前の状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。検査方法（１Ａ）は、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とが結合していない状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。検査方法（１Ａ）は、上記基準光スペクトルを取得する工程を備え、上記測定光スペクトル取得する工程において得られる測定光スペクトルと、上記基準光スペクトルとを比較することにより、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。この場合には、上記基準光スペクトルと、上記測定光スペクトルとを比較することより、試料に含まれる抗原Ｘの含有量をより一層高い精度で求めることができる。

　検査方法（２Ａ）は、試料を接触させる前の状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。検査方法（２Ａ）は、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とが結合していない状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。検査方法（２Ａ）は、上記基準光スペクトルを取得する工程を備え、上記測定光スペクトル取得する工程において得られる測定光スペクトルと、上記基準光スペクトルとを比較することにより、上記試料に含まれる上記前立腺特異抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。この場合には、上記基準光スペクトルと、上記測定光スペクトルとを比較することより、試料に含まれる前立腺特異抗原Ｘの含有量をより一層高い精度で求めることができる。

　検査方法（１Ｂ）は、試料を接触させる前の状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。検査方法（１Ｂ）は、上記抗体と上記試料に含まれる抗原とが結合していない状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。この場合、検査方法（１Ｂ）では、上記第１の測定光スペクトルと、上記第２の測定光スペクトルと、上記基準光スペクトルとを比較することにより、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。検査方法（１Ｂ）では、上記基準光スペクトル又は上記第１の測定光スペクトルと、上記第２の測定光スペクトルとを比較することにより、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。

　検査方法（２Ｂ）は、試料を接触させる前の状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。検査方法（２Ｂ）は、上記抗体と上記試料に含まれる前立腺特異抗原とが結合していない状態の上記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。この場合、検査方法（２Ｂ）では、上記第１の測定光スペクトルと、上記第２の測定光スペクトルと、上記基準光スペクトルとを比較することにより、上記試料に含まれる上記前立腺特異抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。検査方法（２Ｂ）では、上記基準光スペクトル又は上記第１の測定光スペクトルと、上記第２の測定光スペクトルとを比較することにより、上記試料に含まれる上記前立腺特異抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。

　＜ナノ構造表面と試料とを接触させる工程＞
　ナノ構造表面２ａと試料とを接触させる。ナノ構造表面２ａと試料とを接触させることにより、図６（ｂ）に示すように、ナノ構造表面２ａに配置された抗体３と、試料に含まれる抗原とを結合させることができる。試料中には、抗体３と結合可能な抗原Ｘ及び抗原Ｙが含まれる。抗原Ｘは、上述の特定の糖鎖を有する抗原Ｘ（前立腺特異抗原Ｘ等）である。抗原Ｙは、特定の糖鎖を有さない抗原（特定の糖鎖を有さない前立腺特異抗原等）である。抗原Ｘと抗原Ｙとは、同種類の抗原である。抗原Ｘは、特定の糖鎖（図６（ｂ）においては、黒塗りの丸印で示す）を有する。抗原Ｙは、特定の糖鎖とは異なる糖鎖（図６（ｂ）においては、黒塗りの三角印で示す）を有する。抗原Ｘは、特定の種類の抗原のうち、糖鎖構造に変異が生じた抗原であり、抗原Ｙは、特定の種類の抗原のうち、糖鎖構造に変異が生じていない抗原である。

　上記ナノ構造表面と試料とを接触させる工程において、ナノ構造表面に配置された抗体と試料に含まれる抗原とを結合させる際の反応条件（反応温度及び反応時間等）は、適宜設定される。

　上記ナノ構造表面と試料とを接触させる工程の実施後、試料を除去する操作を行ってもよい。また、上記ナノ構造表面と試料とを接触させる工程の実施後、上記抗体と結合していない抗原等の成分を除去するために、液体を添加するなどして洗浄操作を行ってもよい。また、添加した液体を除く操作を行ってもよい。

　＜基準光スペクトルを取得する工程（検査方法（１Ａ），（２Ａ））、及び、第１の測定光スペクトルを取得する工程（検査方法（１Ｂ），（２Ｂ））＞
　検査方法（１Ａ），（２Ａ）は、粒状物を接触させる前の状態（粒状物とナノ構造表面とを接触させる前の状態）のナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。検査方法（１Ａ），（２Ａ）は、抗原Ｘと粒状物とが結合していない状態（抗体と試料に含まれる抗原とが結合しており、かつ抗原Ｘと粒状物とが結合していない状態）のナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。検査方法（１Ａ），（２Ａ）は、上記ナノ構造表面に配置された抗体と、上記抗体（特定の糖鎖を有する抗原及び特定の糖鎖を有さない抗原）とが結合した状態、かつ特定の糖鎖を有する抗原と粒状物とが結合していない状態のナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備えることが好ましい。

　図７（ｃ）に示すように、検査方法（１Ａ），（２Ａ）では、抗体３と抗原Ｘ、及び、抗体３と抗原Ｙとが結合しており、かつ抗原Ｘと粒状物とが結合していない状態のナノ構造表面２ａに、光Ｌ１を照射する。次いで、ナノ構造表面２ａから反射された光Ｌ２の強度を測定し、基準光スペクトルを取得する。

　なお、検査方法（１Ａ），（２Ａ）は、上記基準光スペクトルを取得する工程を備えていてもよく、備えていなくてもよい。

　検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）は、試料を接触させた後の状態のナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程を備える。検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）は、上記ナノ構造表面に配置された抗体と、上記抗体（特定の糖鎖を有する抗原及び特定の糖鎖を有さない抗原）とが結合した状態のナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程を備える。

　図７（ｃ）に示すように、検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、抗体３と抗原Ｘ、及び、抗体３と抗原Ｙとが結合した状態のナノ構造表面２ａに、光Ｌ１を照射する。次いで、ナノ構造表面２ａから反射された光Ｌ２の強度を測定し、第１の測定光スペクトルを取得する。

　上記基準光スペクトルを取得する工程、及び、上記第１の測定光スペクトルを取得する工程では、ナノ構造表面に液体が存在しない状態で光が照射されてもよく、液体が存在する状態で光が照射されてもよい。上記ナノ構造表面と試料とを接触させる工程の実施後に、水分を除去して、ナノ構造表面に液体が存在しない状態で光が照射されてもよい。上記ナノ構造表面と試料とを接触させる工程の実施後に、水分を除去せずに、ナノ構造表面に液体が存在する状態で光が照射されてもよい。

　＜特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程＞
　図７（ｄ）に示すように、上記試料を接触させた後の状態のナノ構造表面２ａに、特定の糖鎖を認識するレクチン８２を表面に有する粒状物を接触させる。抗体３と抗原Ｘ、及び、抗体３と抗原Ｙとが結合した状態のナノ構造表面２ａに、特定の糖鎖を認識するレクチン８２を有する粒状物８を接触させ、抗原のうち、抗原Ｘと粒状物８とをレクチン８２を介して結合させることができる。

　粒状物８は、粒状物本体８１と、粒状物本体８１の表面上に配置されたレクチン８２とを有する。本実施形態では、粒状物本体８１は、ラテックス粒子であり、粒状物８は、レクチンを表面に有するラテックス粒子である。レクチン８２は、抗原Ｘが有する特定の糖鎖（図７（ｄ）における黒塗りの丸印で示す糖鎖）を特異的に認識する。レクチン８２は、抗原Ｘと結合可能であり、抗原Ｙとは結合可能ではない。

　したがって、本工程では、上記抗体と結合している抗原のうち、特定の糖鎖を有する抗原Ｘと、上記粒状物とがレクチンを介して結合する。

　特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程において、抗原とレクチンとの反応条件（反応温度及び反応時間等）は、適宜設定される。

　特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程において、ナノ構造表面に、液中に分散した上記粒状物を接触させることが好ましい。この場合、上記液１ｍＬあたり、上記粒状物が有するレクチンの含有量は、好ましくは１μｇ以上、より好ましくは３μｇ以上、好ましくは２０μｇ以下、より好ましくは１５μｇ以下である。レクチンの含有量が上記下限以上及び上記上限以下であると、抗原とレクチンとの反応をより一層効率的に進行させることができる。

　上記特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程の実施後、上記抗原と結合していない粒状物を除去する工程を備えることが好ましい。

　＜測定光スペクトルを取得する工程（検査方法（１Ａ），（２Ａ））、及び、第２の測定光スペクトルを取得する工程（検査方法（１Ｂ），（２Ｂ））＞
　図８（ｅ）に示すように、粒状物を接触させた後の状態のナノ構造表面２ａに、光Ｌ１を照射する。抗原Ｘと粒状物８とが結合した状態のナノ構造表面２ａに、光Ｌ１を照射する。次いで、ナノ構造表面２ａから反射された光Ｌ２の強度を測定し、測定光スペクトルを取得する。検査方法（１Ａ），（２Ａ）では、この測定光スペクトルを用いて、試料に含まれる抗原Ｘの含有量が測定される。検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、この測定光スペクトルを第２の測定光スペクトルとして、上記第１の測定光スペクトルと、該第２の測定光スペクトルとを用いて、試料に含まれる抗原Ｘの含有量が測定される。

　上記特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程において、抗原Ｘと粒状物８とが結合することにより、該粒状物８は、ナノ構造表面２ａに保持される。ナノ構造表面２ａに照射され、該ナノ構造表面２ａから反射された光Ｌ２の強度は、光Ｌ１と比べて低くなる。従って、試料に含まれる抗原Ｘの含有量を高い精度で求めることができる。

　本工程では、ナノ構造表面に液体が存在しない状態で光が照射されてもよく、液体が存在する状態で光が照射されてもよい。上記特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程の実施後に、水分を除去して、ナノ構造表面に液体が存在しない状態で光が照射されてもよい。上記特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程の実施後に、水分を除去せずに、ナノ構造表面に液体が存在する状態で光が照射されてもよい。

　図９及び図１０は、本発明の検査方法の一例を説明するための拡大正面図である。図９及び図１０では、測定光スペクトルを取得する工程（検査方法（１Ａ），（２Ａ））、及び、第２の測定光スペクトルを取得する工程（検査方法（１Ｂ），（２Ｂ））の図が示されている。図９及び図１０では、図示の便宜上、抗体、抗原及びレクチン等は省略されている。

　図９に示すように、粒状物８（抗原Ｘと粒状物８とが結合した粒状物）の上記壁部の凹部における充填率が高い状態で光Ｌ１を照射してもよい。図１０に示すように、粒状物８（抗原Ｘと粒状物８とが結合した粒状物）の上記壁部の凹部における充填率が低い状態で光Ｌ１を照射してもよい。図９の状態で光Ｌ１を照射した場合、図１０の状態で光Ｌ１を照射する場合と比べて、ナノ構造表面２ａから反射された光Ｌ２の強度を高めることができる。図１０の状態で光Ｌ１を照射した場合、図９の状態で光Ｌ１を照射する場合と比べて、検査時間を短くすることができる。

　測定精度をより一層高める観点からは、測定を行うときの粒状物の上記壁部の凹部における充填率は、好ましくは１％以上、より好ましくは１０％以上、より一層好ましくは３０％以上、更に好ましくは５０％以上、更に一層好ましくは７０％以上、特に好ましくは９０％以上、最も好ましくは９５％以上である。上記充填率は、１００％以下であってもよく、１００％未満であってもよく、９９％以下であってもよい。上記充填率は、上記壁部の凹部の体積に占める粒状物の体積である。上記充填率は、凸部間に粒状物が保持される場合に、凸部間の体積に占める粒状物の体積である。

　＜抗原Ｘの含有量を測定する方法の詳細＞
　検査方法（１Ａ），（２Ａ）では、上記測定光スペクトルを用いて、上記試料に含まれる上記抗原Ｘ（前立腺特異抗原Ｘ）の含有量を測定する。本発明の効果をより一層効果的に発揮する観点からは、検査方法（１Ａ），（２Ａ）では、測定光スペクトルと上記基準光スペクトルとを比較することにより、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。本発明の効果をより一層効果的に発揮する観点からは、検査方法（１Ａ），（２Ａ）では、上記測定光スペクトルと上記基準光スペクトルとを用いて、測定光強度と基準光強度との相対値を取得して、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。また、検査方法（１Ａ），（２Ａ）では、Ｘ軸を時間とし、Ｙ軸を時間と共に変化する測定光スペクトルのピーク波長としたときに得られる傾き（測定光強度の変化割合）から、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定してもよい。

　上記測定光強度と上記基準光強度との相対値を取得する際には、上記測定光強度と上記基準光強度との差の値を相対値としてもよく、上記測定光強度と上記基準光強度との比の値を相対値としてもよい。また、差や比に適宜数学的な操作を加えた値を相対値としてもよい。例えば、以下のようにして、抗原Ｘの含有量を測定することができる。

　抗原Ｘ（前立腺特異抗原Ｘ）の濃度が既知である試料に対して、基準光スペクトルを取得する工程、ナノ構造表面と試料とを接触させる工程、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程及び測定光スペクトルを取得する工程を行い、あらかじめ検量線を作成しておく。また、上記基準光スペクトルと上記測定光スペクトルとを比較してその相対値を取得する。次いで、既知の抗原Ｘの濃度と、上記相対値との関係を複数プロットし、近似直線又は近似式を作成する。同様に、抗原Ｘ（前立腺特異抗原Ｘ）の濃度が未知である試料に対して、上記各工程を行い、得られた相対値を上記近似直線又は上記近似式に代入することで、試料中の抗原Ｘ（前立腺特異抗原Ｘ）の濃度を測定することができる。

　検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、上記第１の測定光スペクトルと上記第２の測定光スペクトルとを用いて、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定する。検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、上記第１の測定光スペクトルを用いて、上記抗体と結合している抗原の含有量を求め、かつ、上記第２の測定光スペクトルを用いて、上記粒状物と結合している上記抗原Ｘの含有量を求めることにより、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、上記粒状物と結合している上記抗原Ｘの含有量の、上記抗体と結合している抗原の含有量に対する比（上記粒状物と結合している上記抗原Ｘの含有量／上記抗体と結合している抗原の含有量）を求めることにより、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することがより好ましい。検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、上記第１の測定光スペクトルと上記第２の測定光スペクトルと上記基準光スペクトルとを比較することにより、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。この場合には、本発明の効果をより一層効果的に発揮することができる。

　検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、上記第１の測定光スペクトルを用いて第１の測定光強度を取得することが好ましく、上記第２の測定光スペクトルを用いて第２の測定光強度を取得することが好ましく、上記基準光スペクトルを用いて基準光強度を取得することが好ましい。また、検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、上記第１の測定光強度と上記第２の測定光強度との相対値、又は、上記第１の測定光強度と上記第２の測定光強度と上記基準光スペクトルとの相対値を取得して、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することが好ましい。また、検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、Ｘ軸を時間とし、Ｙ軸を時間と共に変化する第２の測定光スペクトルのピーク波長としたときに得られる傾き（第２の測定光強度の変化割合）と、上記第１の測定光スペクトルとから、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定してもよい。

　検査方法（１Ｂ），（２Ｂ）では、抗原Ｘの濃度が未知であるが、抗原の濃度が既知である試料を用いて、上記試料に含まれる上記抗原Ｘの含有量を測定することができる。

　なお、ナノ構造表面に照射する光の波長は、ナノ構造表面の形状及びサイズ等に応じて、適宜変更することができる。上記ナノ構造表面に照射する光として、典型的には可視光線を用いることができる一方で、赤外線又は紫外線も用いることができる。また、上記基準光スペクトル、上記測定光スペクトル（第１，２の測定光スペクトル）を取得するために、典型的にはナノ構造表面からの反射光を測定することができる一方で、透過光を測定してもよい。また、スペクトルを取得することができれば、直接の反射光や透過光ではなく、何らかの光学的操作を加えた光を検出してもよい。

　（検査用器具のその他の詳細）
　上記検査用器具は、ナノ構造表面と、該ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備える。上記ナノ構造表面は、ナノメールオーダーのサイズを有する複数の凹部又は複数の凸部を有する表面である。本発明の効果をより一層効果的に発揮する観点からは、上記ナノ構造表面が、複数の凹部又は複数の凸部による周期構造を有する表面であることが好ましい。

　上記抗体は、上記ナノ構造表面の凹部の底面に配置されていてもよく、上記ナノ構造表面の凸部の先端面に配置されていてもよい。また、上記抗体は、上記ナノ構造表面の凹部又は凸部の側面上に配置されていてもよい。上記抗体は、上記ナノ構造表面の凹部の底面又は上記ナノ構造表面の凸部の先端面に少なくとも配置されていることが好ましい。この場合には、ナノ構造表面から反射する光の強度をより一層大きく変化させ、本発明の効果をより一層効果的に発揮することができる。

　本発明の効果を更により一層効果的に発揮する観点からは、上記周期構造の周期ｄは、好ましくは５０ｎｍ以上、より好ましくは２００ｎｍ以上、更に好ましくは２５０ｎｍ以上であり、好ましくは８００ｎｍ以下、より好ましくは５００ｎｍ以下、更に好ましくは４５０ｎｍ以下である。

　上記周期構造の周期ｄとは、それぞれの凸部又は凹部の先端（先端が平面等である場合は中心部）と、それに最も隣接する凸部又は凹部の先端（先端が平面である場合は中心部）との間隔を意味する。

　本発明の効果を更により一層効果的に発揮する観点からは、上記周期構造における上記凹部の半径ｒ_１又は上記凸部の半径ｒ_２は、好ましくは２０ｎｍ以上、より好ましくは３０ｎｍ以上、更に好ましくは４０ｎｍ以上であり、好ましくは３００ｎｍ以下、より好ましくは２００ｎｍ以下、更に好ましくは１５０ｎｍ以下である。

　上記周期構造における上記凹部の半径ｒ_１又は上記凸部の半径ｒ_２は、該凹部の底面の半径であり、該凸部の上面（先端面）の半径である。上記周期構造における上記凹部の半径ｒ_１又は上記凸部の半径ｒ_２とは、該凹部の底面又は該凸部の上面の形状が円形である場合に、円の半径を意味し、該凹部の底面又は該凸部の上面の形状が円形以外の形状である場合に、該円形以外の形状の内接円の半径を意味する。

　上記壁部の周期構造では、複数の凹部が規則的に配置されていてもよく、複数の凸部が規則的に配置されていてもよい。

　本発明の効果をより一層効果的に発揮する観点からは、上記壁部は、壁部本体と、該壁部本体の表面上に配置された金属層とを有することが好ましい。但し、上記壁部は、金属層を有さなくてもよい。

　上記金属層は、上記ナノ構造表面の少なくとも一部を構成していることが好ましい。上記金属層は、上記ナノ構造表面の全体を構成していてもよく、一部を構成していてもよい。上記金属層は、上記壁部本体の全体の表面上に配置されていてもよく、上記壁部本体の一部の表面上に配置されていてもよい。上記金属層は、例えば、上記壁部本体の周期構造における凹部又は凸部の側面上に配置されていなくてもよい。上記金属層を上記壁部本体の周期構造の表面上に部分的又は全体に配置することにより、上記金属層の表面に、上記壁部本体の周期構造に対応した周期構造を容易に形成することができる。

　上記金属層は、上記壁部本体の周期構造における凹部の底面又は凸部の上面（先端面）にのみ配置されていてもよく、凹部又は凸部の側面にのみ配置されていてもよい。したがって、上記金属層は上記複数の凹部又は上記複数の凸部の表面全体に配置されていなくてもよい。また、上記金属層は、上記壁部本体の周期構造における凹部の底面又は凸部の上面にのみ配置されていてもよく、凹部又は凸部の側面にのみ配置されていてもよい。本発明の効果を効果的に発揮する観点から、上記金属層は、上記ナノ構造表面の全体を構成していることが好ましい。

　上記ナノ構造表面における凸部又は凹部の形状や配置は、検査用の光を照射する方向及び角度に応じて、適宜変更することができる。上記ナノ構造表面における凸部の底面又は凹部の上面の形状は、平面であってもよく、曲面であってもよく、点状であってもよい。凸部又は凹部は溝状の形状であってもよい。例えば、凸部又は凹部の形状は、角柱状、角錐状又は円錐状であってもよい。上記周期構造はそれぞれ、１次元周期構造であってもよく、２次元周期構造であってもよい。

　上記周期構造としては、斜方格子構造、長方格子構造、面心格子構造、六方格子構造、及び正方格子構造等が挙げられる。上記周期構造が有するフォトニックバンドギャップの波長をより一層容易に調整し、本発明の効果をより一層効果的に発揮させる観点から、上記周期構造はそれぞれ、斜方格子構造、長方格子構造、六方格子構造、又は正方格子構造であることが好ましい。

　上記周期構造の周期ｄは、粒状物の粒子径以上であることが好ましい。

　上記周期構造における凸部間の開口面積又は凹部の開口面積は、好ましくは２５００ｎｍ^２以上、より好ましくは１００００ｎｍ^２以上、好ましくは６４００００ｎｍ^２以下、より好ましくは１６００００ｎｍ^２以下である。上記開口面積が上記下限以上及び上記上限以下であると、本発明の効果をより一層効果的に発揮することができる。

　上記周期構造における凸部の高さ又は凹部の深さは、好ましくは５０ｎｍ以上、より好ましくは１００ｎｍ以上、好ましくは８００ｎｍ以下、より好ましくは４００ｎｍ以下である。なお、上記凸部の高さ又は凹部の深さが上記下限以上及び上記上限以下であると、本発明の効果をより一層効果的に発揮することができる。

　上述した凸部間の開口面積、凹部の開口面積、凸部の高さ、及び凹部の深さは、粒状物の種類及びサイズ、並びに凸部又は凹部の形状等により適宜変更できる。周期構造の周期、凸部又は凹部の形状及びサイズを調整することで、反射光の強度を最適化することができる。

　複数の開口面積、及び、複数の凸部の高さ又は複数の凹部の深さを完全に一致させることは困難である場合がある。測定精度に大きな影響がない範囲で、周期構造の周期にばらつきがあってもよい。測定におけるノイズを効果的に小さくする観点からは、周期構造における凸部間の複数の開口面積又は凹部の複数の開口面積の標準偏差は、好ましくは１０％以下、より好ましくは５％以下である。

　本発明の効果をより一層効果的に発揮する観点からは、上記壁部本体の周期構造の表面の表面積（複数の凹部又は複数の凸部）１００％中、上記金属層が配置されている表面積は、好ましくは６０％以上、より好ましくは７０％以上、更に好ましくは８０％以上、特に好ましくは９０％以上、最も好ましくは１００％である。上記金属層は、上記壁部本体の周期構造の全体の表面上に配置されていることが最も好ましい。上記金属層も、複数の凹部又は複数の凸部による周期構造を有することが好ましい。

　上記検査用器具は、下記式（１）及び下記式（２）において、正の整数ｍがいずれかのときに上記壁部の周期構造が有する回折光の波長λのとりうる値が、３００ｎｍ以上１６００ｎｍ以下となるように、上記壁部の周期構造の周期、上記複数の凹部又は上記複数の凸部の半径、及び上記周期構造の屈折率を調整することが好ましい。この場合には、一般的に入手が容易な光源を用いることができる。

　上記式（１）又は上記式（２）中、ｍは次数を表し、λは回折光の波長（ｎｍ）を表し、ｄは上記壁部の周期構造の周期（ｎｍ）を表し、ｎ_０は実効屈折率を表し、θは光の入射角度を表し、ｆは空隙率を表し、ｎ_１は上記壁部の周期構造の屈折率を表し、ｎ_２は空隙物質の屈折率を表す。空隙率であるｆは、単位体積あたりの隙間の占有率である。

　なお、上記壁部の周期構造の屈折率ｎ_１とは、上記壁部の周期構造において、空隙部分を含まず、上記金属層を含む部分の屈折率をいう。

　本発明の効果をより一層効果的に発揮する観点からは、上記式（１）中、次数ｍは、好ましくは１、２又は３であり、より好ましくは１又は２であり、さらに好ましくは１である。

　上記式（１）及び上記式（２）において求められる回折光の波長λは、好ましくは４００ｎｍ以上、より好ましくは６５０ｎｍ以上であり、好ましくは１２００ｎｍ以下、より好ましくは１０００ｎｍ以下である。

　上記壁部本体の材料としては、樹脂及びガラス等が挙げられる。

　上記樹脂としては、ポリエチレンテレフタレート樹脂、ポリエチレンナフタレート樹脂、シクロオレフィンポリマー樹脂、シクロオレフィンコポリマー樹脂、ポリイミド樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレア樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、及びポリメタクリル酸メチル樹脂等が挙げられる。上記樹脂は、１種のみが用いられてもよく、２種以上が併用されてもよい。

　抗原Ｘの濃度を液体中で測定する観点、抗原Ｘの濃度がかなり低い場合でも抗原Ｘの濃度を高い精度で測定する観点から、上記金属の屈折率は、上記試料の屈折率よりも大きいことが好ましい。

　上記金属層の屈折率は、上記試料の屈折率よりも、０．３以上で大きいことが好ましく、０．４以上で大きいことがより好ましく、０．５以上で大きいことがより一層好ましく、０．６以上で大きいことが更に好ましく、０．７以上で大きいことが特に好ましく、０．８以上で大きいことが最も好ましい。この場合には、抗原Ｘの濃度を液体中で良好に測定することができ、抗原Ｘの濃度がかなり低い場合でも抗原Ｘの濃度をより一層高い精度で測定することができる。

　上記金属層の屈折率は、好ましくは１．６以上、より好ましくは１．７以上、より一層好ましくは１．８以上、更に好ましくは１．９以上、特に好ましくは２．０以上、最も好ましくは２．１以上である。上記金属層の屈折率が上記下限以上であると、試料の屈折率との差を大きくすることができるので、抗原Ｘの濃度を液体中で良好に測定することができ、抗原Ｘの濃度がかなり低い場合でも、抗原Ｘの濃度をより一層高い精度で測定することができる。

　上記金属層の屈折率及び上記試料の屈折率は、分光エリプソメーター（例えば、堀場製作所社製「ＵＶＩＳＥＬ２」）を用いて測定することができる。

　上記金属層は、金属を含む。上記金属としては、亜鉛、銀、金、チタン、ケイ素、アルミニウム、スズ、銅、鉄、モリブデン、ニオブ、チタニウム、白金、タングステン、クロム、錫、ニッケル、タンタル、ジルコニウム、ハフニウム、イットリウム、ビスマス、アンチモン、インジウム及びこれらの合金等が挙げられる。また、上記金属としては、シリコン及び炭化ケイ素（ＳｉＣ）等が挙げられる。上記金属は、１種のみが用いられてもよく、２種以上が併用されてもよい。

　上記金属層は、金属酸化物層であってもよい。上記金属酸化物層としては、ＺｎＳｎＯ_３層、酸化亜鉛層、酸化クロム層、酸化第二鉄層、及び酸化チタン層等が挙げられる。

　上記金属層は、シリコン層であることがより好ましい。上記シリコンとしては、単結晶シリコン、多結晶シリコン、マイクロクリスタルシリコン、及びアモルファスシリコン等が挙げられる。

　上記シリコン層は、単結晶シリコン層、多結晶シリコン層、マイクロクリスタルシリコン層、又はアモルファスシリコン層であることが好ましく、アモルファスシリコン層であることがより好ましい。上記アモルファスシリコンは、水素化アモルファスシリコンであってもよい。

　上記金属層をシリコン層とすることにより、該金属層の屈折率をより一層大きくすることができ、上記金属層をアモルファスシリコン層とすることにより、該金属層の屈折率を特に大きくすることができる。上記金属層がアモルファスシリコン層等のシリコン層である場合には、例えば、該金属層の屈折率を４．５とすることができる。このため、金属層と、試料との屈折率差をかなり大きくすることができ、抗原Ｘの濃度をより一層高い精度で測定することができる。

　上記壁部本体の周期構造における上記凹部又は上記凸部の上面に配置された上記金属層の平均厚みを、金属層の平均厚み（１）とする。上記壁部本体の周期構造における上記凹部又は上記凸部の側面に配置された上記金属層の平均厚みを、金属層の平均厚み（２）とする。

　本発明の効果をより一層効果的に発揮する観点からは、上記金属層の平均厚み（１）は、好ましくは１ｎｍ以上、より好ましくは５ｎｍ以上、更に好ましくは８ｎｍ以上、好ましくは２４０ｎｍ以下、より好ましくは２００ｎｍ以下、更に好ましくは１５０ｎｍ以下、特に好ましくは５０ｎｍ以下である。

　上記金属層の平均厚み（１）の、上記金属層の平均厚み（２）に対する比（金属層の平均厚み（１）／金属層の平均厚み（２））は、好ましくは１．０以上、より好ましくは２以上、好ましくは１０以下、より好ましくは４以下である。上記比（金属層の平均厚み（１）／金属層の平均厚み（２））が上記下限以上及び上記上限以下であると、本発明の効果をより一層効果的に発揮することができる。

　上記金属層の平均厚み（１）及び上記金属層の平均厚み（２）は、例えば、ＦＥ－ＴＥＭ（例えば、日本電子社製「ＪＥＭ－ＡＲＭ２００Ｆ」）を用いて、金属層の断面を観察することで測定することができる。ＦＥ－ＴＥＭにより得られた断面ＴＥＭ像から、各点の距離が１００ｎｍ以上離れた任意の５点以上を選択し、各点において測定した厚みの平均値を平均厚みとする。

　上記検査用器具本体及び上記検査用器具は、検査チップであってもよく、マイクロ流体デバイスであってもよい。

　上記壁部の上記ナノ構造表面及び上記周期構造は、例えば、収納部の成形時に賦形することができる。また、ナノ構造表面及び周期構造を有さない壁部又は壁部本体を得た後、該壁部又は該壁部本体の表面を賦形処理することにより、上記ナノ構造表面及び上記周期構造を有する壁部又は壁部本体を得ることもできる。

　上記金属層の形成方法としては、スパッタリング（反応性スパッタリング法、ＲＦスパッタリング法）、及び蒸着法（プラズマ蒸着法等、真空蒸着法（ＥＢ蒸着法、イオンプレーティング法、ＩＡＤ法））等が挙げられる。上記金属層を上記壁部本体の周期構造の表面上に良好に形成する観点からは、上記金属層は、スパッタリングにより形成されていることが好ましく、スパッタリング膜であることが好ましい。

　上記壁部は、検査用器具の側壁部であってもよい。この場合には、例えば、電気泳動等により、粒状物をナノ構造表面に堆積させることができる。

　（糖鎖を有する抗原）
　上記糖鎖を有する抗原としては、糖タンパク質等が挙げられる。上記抗原としては、腫瘍マーカー、尿タンパク、抗酸化マーカー、糖尿病マーカー及びアミロイド等が挙げられる。上記腫瘍マーカーとしては、前立腺癌のマーカーである前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、大腸癌のマーカーであるＣＥＡ、乳癌のマーカーであるＣＡ１５－３、及び肺癌のマーカーであるＡＥＰ等が挙げられる。また、上記抗原としては、脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）、及び心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）、アルツハイマー病のマーカーであるアミロイドβ及びタウタンパク等が挙げられる。

　上記糖鎖を有する抗原は、腫瘍マーカーであることが好ましく、前立腺特異抗原であることがより好ましい。

　上記検査方法は、癌の判定方法に用いられる検査方法であることが好ましい。

　（レクチンを表面に有する粒状物）
　上記レクチンを表面に有する粒状物は、粒状物本体と、該粒状物本体の表面上に配置されたレクチンとを有する。上記粒状物本体としては、ラテックス粒子、及び金属粒子等が挙げられる。すなわち、上記粒状物としては、レクチンを表面に有するラテックス粒子、及びレクチンを表面に有する金属粒子等が挙げられる。上記金属粒子としては、金粒子、及び銀粒子等が挙げられる。

　（試料）
　上記試料は、３７℃で液体であることが好ましい。上記試料としては、生体試料を含む液が挙げられる。上記生体試料としては、血液、血清、血漿、髄液、尿、便、組織、細胞、核酸抽出液、及びタンパク質抽出液等が挙げられる。上記生体試料が血液である場合には、上記金属層は、シリコン層であることが好ましく、アモルファスシリコン層であることがより好ましい。なお、上記血液には、例えば、クエン酸、ヘパリン及びエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）等の抗凝固剤等の公知の薬剤が添加されていてもよい。

　一般に、血液に含まれる被検査物質の濃度を血中で測定する場合には、赤血球から漏出したヘモグロビンの影響によって、測定精度が低下することがある。例えばヘモグロビンが有する特定の吸収スペクトルによって測定精度が低下することがある。これに対して、アモルファスシリコンは、波長６５０ｎｍ以下の光を効果的に吸収するので、ヘモグロビン存在下でも測定精度を高めることができる。さらに、アモルファスシリコン層では、屈折率を４．５程度にまで高めることができるので、血中に含まれる抗原Ｘの濃度をより一層高い精度で測定することができる。

　（検査キット）
　本発明に係る検査キットは、ナノ構造表面を有する壁部、及び上記ナノ構造表面に配置された抗体を備える検査用器具本体と、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物とを備える。上記検査キットにおける上記検査用器具本体は、上述した検査用器具本体であることが好ましい。

　上記検査キットは、上記試料が検査用器具本体に導入される前の部材である。上記検査キットを用いて、上述した検査方法に用いることができる検査用器具等を作製することができる。

　上記検査用器具本体は、検査チップであることが好ましい。

　上記検査キットにおいて、上記粒状物は、検査用器具を構成する部材の一部として構成されていてもよく、検査用器具とは異なる部材として構成されていてもよい。

　上記粒状物が検査用器具を構成する部材の一部として構成されている検査キットとしては、図１に示す検査用器具１及び図４に示す検査用器具１Ｂを作製可能な検査キット等が挙げられる。この検査キットは、上記検査用器具本体と、蓋体の表面上に配置された粒状物とを備える。

　上記粒状物が検査用器具とは異なる部材として構成されている検査キットとしては、図３に示す検査用器具１Ａを作製可能な検査キット等が挙げられる。この検査キットは、上記検査用器具本体と、第１の容器の収容された粒状物とを備える。検査用器具を組み立てた後、第１の容器に収容された粒状物を該検査用器具に導入することにより、上記検査を行うことができる。

　（検査システム）
　本発明に係る検査キットは、ナノ構造表面を有する壁部、及び上記ナノ構造表面に配置された抗体を備える検査用器具本体と、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物と、上記検査用器具本体の上記ナノ構造表面に光を照射するための照射部と、上記ナノ構造表面に照射された光を受光するための受光部とを備える。

　上記検査用器具本体は、検査チップであることが好ましい。上記検査システムは、検査装置であってもよい。

　図１１は、本発明の第１の実施形態に係る検査システムの模式図である。

　検査システム５０は、図４，５に示す検査用器具１Ｂと、照射部５１と、受光部５２とを備える。

　検査用器具１Ｂは、ナノ構造表面を有する壁部と、上記ナノ構造表面に配置された抗体を備える検査用器具本体を備える。また、検査用器具１Ｂは、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を備える。

　照射部５１は、検査用器具１Ｂのナノ構造表面に光Ｌ１を照射するための光源である。受光部５２は、上記ナノ構造表面に照射された光Ｌ２を受光するための測定器である。受光部５２は、上記ナノ構造表面から反射された光Ｌ２を受光する。検査システム５０により、上述した検査方法によって、抗原Ｘの濃度を高精度に測定することができる。

　検査用器具は、図１１に示すように、上記ナノ構造表面に対して、－９０度以上９０度以下の入射角θで光を照射して用いられる。入射角θは、ナノ構造表面を有する上記壁部の表面に対する光の入射方向であり、より具体的には、ナノ構造表面を有する上記壁部の表面に沿う方向Ｘと、入射光Ｌ１方向とのなす角である。入射角θの最小値は－９０度であり、最大値は９０度である。入射角θが負の値の場合、上記ナノ構造表面の裏側から光が照射されることを意味する。本発明の効果をより一層効果的に発揮する観点からは、上記入射角θは、好ましくは－３０度以上３０度以下、より好ましくは０度以上３０度以下、さらに好ましくは０度である。なお、照射部５１と受光部５２とは、同一の箇所に設置されていてもよい。

　図１２は、本発明の第２の実施形態に係る検査システムの模式図である。

　検査システム５０Ａは、図１，２に示す検査用器具１と、検査用器具１を設置している設置部５３と、照射部５１と、受光部５２とを備える。

　検査用器具１は、ナノ構造表面を有する壁部と、上記ナノ構造表面に配置された抗体を備える検査用器具本体を備える。また、検査用器具１は、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を備える。

　設置部５３は、試料が送液される流路５４を有する。流路５４は、検査用器具１の導入部９に接続されている。試料を、流路５４から検査用器具１の収納部に導入することにより、抗原と抗体との反応を開始させることができる。検査システム５０Ａにより、上述した検査方法によって、抗原Ｘの濃度を高精度に測定することができる。検査用器具１を設置部５３に設置することにより、容易に検査を行うことができる。

　上記検査システムでは、上記粒状物は、上記流路５４から検査用器具１の収納部に導入してもよい。

　上記検査システムは、上記マイクロ流体デバイスである検査用器具と、上記照射部と、上記受光部とを備えるマイクロ流体デバイスシステムであってもよい。

　本発明に係る検査方法では、例えば、試料に含まれる１ｆｇ／ｍＬ以上１００ｐｇ／ｍＬ以下の抗原Ｘ（前立腺特異抗原Ｘ）の濃度を好適に測定することができる。本発明に係る検査用器具は、例えば、抗原Ｘ（前立腺特異抗原Ｘ）を含む試料の屈折率が１．０以上１．５以下であっても、該試料に含まれる抗原Ｘ（前立腺特異抗原Ｘ）の濃度を好適に測定することができる。

　以下、実施例を挙げることにより、本発明を具体的に説明する。本発明は、以下の実施例に限定されない。

　（実施例１）
　図１，２に類似し、以下に示す構造を有する検査用器具を用いて、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）濃度と、反射スペクトルの波長シフトとの関係を求めた。

　検査用器具の作製：
　壁部本体の材料は、屈折率１．５のシクロオレフィン樹脂とした。壁部本体の周期構造における凸部の形状は円柱状とした。壁部本体の周期構造の全体の表面上に、スパッタリングにより、屈折率４のアモルファスシリコン層（金属層）を形成した。このようにして、壁部本体と金属層とにより壁部（底部）を形成し、該壁部の表面に周期構造（壁部の周期構造）を形成した。次いで、ＰＳＡ抗体を含む水溶液を金属層の表面に添加した。次いで、固定液としてグルタルアルデヒドを壁部に添加し、上記金属層の表面にＰＳＡ抗体を固定化した。次いで、エタノールアミンを壁部に添加して未反応のアルデヒド基をブロッキングした。次いで、検査用器具を乾燥させた。このようにして、上記金属層の表面にＰＳＡ抗体を修飾した。なお、用いた検査用器具の詳細を以下に示す。

　壁部の周期構造：三角格子構造
　壁部の周期構造の周期：４６０ｎｍ
　壁部の周期構造における凸部の半径：１１５ｎｍ
　壁部の周期構造が有するフォトニックバンドギャップの波長：５８０ｎｍ
　壁部本体の周期構造における凸部の上面に配置された金属層の平均厚み：１０ｎｍ
　壁部本体の周期構造における凸部の側面に配置された金属層の平均厚み：８ｎｍ

　試料の作製：
　ＰＳＡと生理食塩水とを混合して以下の試料１～３を調製した。なお、試料に含まれる全ＰＳＡの濃度と、末端シアル酸がα（２，３）結合である糖鎖を有するＰＳＡ（前立腺特異抗原Ｘ、以下、ＰＳＡ－Ｘと記載することがある）の濃度とを以下に示す。

　試料１：全ＰＳＡの濃度１０００ｐｇ／ｍＬ（ＰＳＡ－Ｘの濃度：３０ｐｇ／ｍＬ）
　試料２：全ＰＳＡの濃度１０００ｐｇ／ｍＬ（ＰＳＡ－Ｘの濃度：１５０ｐｇ／ｍＬ）
　試料３：全ＰＳＡの濃度１０００ｐｇ／ｍＬ（ＰＳＡ－Ｘの濃度：３００ｐｇ／ｍＬ）

　なお、試料１～３の屈折率は１．３であった。

　レクチンを表面に有する粒状物：
　末端シアル酸がα（２，３）結合である糖鎖を認識するレクチンを表面に有するラテックス粒子を用いた。

　測定：
　得られた検査用器具のナノ構造表面（周期構造）に光を照射し、周期構造からの反射光のスペクトル（基準光スペクトル）を取得した。基準光スペクトルは、５８０．０ｎｍの波長にピークを有していた。次いで、検査用器具の収納部に、得られた試料を収納した。３０分間静置し、検査用器具に備えられたＰＳＡ抗体と、試料中のＰＳＡとを結合させた。次いで、収納部に収納された液を除去した。

　上記レクチンを表面に有するラテックス粒子を含む液（ラテックス粒子含有液）を調製した。なお、得られた液１ｍＬあたり、上記レクチン表面に有するラテックス粒子が有するレクチンの含有量は１０μｇとした。

　次に、上記ラテックス粒子含有液を、検査用器具の収納部に収納した。３０分間静置し、ＰＳＡのうち、末端シアル酸がα（２，３）結合である糖鎖を有するＰＳＡ（ＰＳＡ－Ｘ）と、ラテックス粒子とをレクチンを介して結合させた。次いで、収納部に収納された液を除去することにより、ＰＳＡと結合してないラテックス粒子を収納部から除去した。

　次に、この検査用器具のナノ構造表面（周期構造）に光を照射し、周期構造からの反射光のスペクトル（測定光スペクトル）を取得した。測定光スペクトルは、表１に示す波長にピークを有していた。

　なお、基準光スペクトル、測定光スペクトルの取得の際には、０度の入射角で光（白色光）を照射し、その反射された光の強度（評価光強度）を測定した。

　詳細及び結果を表１及び図１３に示す。図１３は、実施例１における特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原（ＰＳＡ－Ｘ）の濃度とピークのシフト量Δλとの関係を示す図である。この結果から、ＰＳＡ－Ｘの濃度に依存して、ピークのシフト量Δλが変化することを確認することができた。

　（実施例２）
　図１，２に類似し、以下に示す構造を有する検査用器具を用いて、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）濃度と、反射スペクトルの波長シフトとの関係を求めた。

　壁部の周期構造：三角格子構造
　壁部の周期構造の周期：４６０ｎｍ
　壁部の周期構造における凸部の半径：１１５ｎｍ
　壁部の周期構造が有するフォトニックバンドギャップの波長：５２６ｎｍ
　壁部本体の周期構造における凸部の上面に配置された金属層の平均厚み：９ｎｍ
　壁部本体の周期構造における凸部の側面に配置された金属層の平均厚み：７ｎｍ

　試料の作製：
　ＰＳＡと生理食塩水とを混合して以下の試料４を調製した。なお、試料に含まれる全ＰＳＡの濃度と、末端シアル酸がα（２，３）結合である糖鎖を有するＰＳＡ（前立腺特異抗原Ｘ、以下、ＰＳＡ－Ｘと記載することがある）の濃度とを以下に示す。

　試料４：全ＰＳＡの濃度１０００ｐｇ／ｍＬ（ＰＳＡ－Ｘの濃度：１００ｐｇ／ｍＬ）

　なお、試料４の屈折率は１．３であった。

　レクチンを表面に有する粒状物：
　実施例１で用いたものと同じラテックス粒子を用いた。

　測定：
　得られた検査用器具のナノ構造表面（周期構造）に光を照射し、周期構造からの反射光のスペクトル（基準光スペクトル）を取得した。次いで、検査用器具の収納部に、得られた試料４を収納した。３０分間静置し、検査用器具に備えられたＰＳＡ抗体と、試料中のＰＳＡとを結合させた。次いで、収納部に収納された液を除去した。

　次に、この検査用器具のナノ構造表面（周期構造）に光を照射し、周期構造からの反射光のスペクトル（第１の測定光スペクトル）を取得した。

　次に、上記レクチンを表面に有するラテックス粒子を含む液（ラテックス粒子含有液）を調製した。なお、得られた液１ｍＬあたり、上記レクチン表面に有するラテックス粒子が有するレクチンの含有量は１０μｇとした。

　次に、この検査用器具のナノ構造表面（周期構造）に光を照射し、周期構造からの反射光のスペクトル（第２の測定光スペクトル）を取得した。

　なお、基準光スペクトル、第１の測定光スペクトル、第２の測定光スペクトルの取得の際には、０度の入射角で光（白色光）を照射し、その反射された光の強度（評価光強度）を測定した。

　得られた反射光のスペクトルを図１４に示す。図１４中、Ｓ_０はＰＳＡ抗体を添加後の反射光のスペクトル（基準光スペクトル）であり、Ｓ_１はＰＳＡを添加後かつラテックス粒子含有液を添加前の反射光のスペクトル（第１の測定光スペクトル）であり、Ｓ_２はラテックス粒子含有液を添加後の反射光のスペクトル（第２の測定光スペクトル）である。なお、Ｓ_ＮはＰＳＡ抗体を添加前の検査用器具の反射光のスペクトルである。

　この結果から、基準光スペクトルと第１の測定光スペクトルのピークの変化量Δλ_１を取得することができた。また、第１の測定光スペクトルと第２の測定光スペクトルのピークの変化量Δλ_２を取得することができた。

　１，１Ａ，１Ｂ…検査用器具
　２，２Ｂ…壁部
　２Ａ，２ＢＡ…周期構造
　２ａ，２Ｂａ…ナノ構造表面
　３，３Ｂ…抗体
　４，４Ｂ…検査用器具本体
　５…側壁部
　６，６Ｂ…蓋体
　７，７Ｂ…収納部
　８…粒状物
　９…導入部
　２１，２１Ｂ…壁部本体
　２２，２２Ｂ…金属層
　５０，５０Ａ…検査システム
　５１…照射部
　５２…受光部
　５３…設置部
　５４…流路
　８１…粒状物本体
　８２…レクチン
　Ｘ，Ｙ…抗原
　ｄ…周期
　ｒ_１…半径

Claims

　試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する検査方法であって、
　検査用器具を用いる検査方法であり、
　前記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、前記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、
　前記ナノ構造表面と前記試料とを接触させる工程と、
　前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、
　前記粒状物を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、測定光スペクトルを取得する工程とを備え、
　前記測定光スペクトルを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する、検査方法。
　前記試料を接触させる前の状態、又は前記粒状物を接触させる前の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備え、
　前記測定光スペクトルと前記基準光スペクトルとを比較することにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する、請求項１に記載の検査方法。
　試料に含まれる特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する検査方法であって、
　検査用器具を用いる検査方法であり、
　前記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、前記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、
　前記ナノ構造表面と前記試料とを接触させる工程と、
　前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程と、
　前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、
　前記粒状物を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、第２の測定光スペクトルを取得する工程とを備え、
　前記第１の測定光スペクトルと前記第２の測定光スペクトルとを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する、検査方法。
　前記第１の測定光スペクトルを用いて、前記抗体と結合している抗原の含有量を求め、かつ、前記第２の測定光スペクトルを用いて、前記粒状物と結合している前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を求めることにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する、請求項３に記載の検査方法。
　前記粒状物と結合している前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量の、前記抗体と結合している抗原の含有量に対する比を求めることにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する、請求項４に記載の検査方法。
　前記試料を接触させる前の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備え、
　前記第１の測定光スペクトルと前記第２の測定光スペクトルと前記基準光スペクトルとを比較することにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する抗原の含有量を測定する、請求項３～５のいずれか１項に記載の検査方法。
　前記特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程において、前記ナノ構造表面に、液中に分散した前記粒状物を接触させ、
　前記液１ｍＬあたり、前記粒状物が有する前記レクチンの含有量が、１μｇ以上２０μｇ以下である、請求項１～６のいずれか１項に記載の検査方法。
　試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する検査方法であって、
　検査用器具を用いる検査方法であり、
　前記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、前記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、
　前記ナノ構造表面と前記試料とを接触させる工程と、
　前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、
　前記粒状物を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、測定光スペクトルを取得する工程とを備え、
　前記測定光スペクトルを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する、検査方法。
　前記試料を接触させる前の状態、又は前記粒状物を接触させる前の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備え、
　前記測定光スペクトルと前記基準光スペクトルとを比較することにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する、請求項８に記載の検査方法。
　試料に含まれる特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する検査方法であって、
　検査用器具を用いる検査方法であり、
　前記検査用器具は、ナノ構造表面を有する壁部と、前記ナノ構造表面に配置された抗体とを有する検査用器具本体を備え、
　前記ナノ構造表面と前記試料とを接触させる工程と、
　前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、第１の測定光スペクトルを取得する工程と、
　前記試料を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に、特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程と、
　前記粒状物を接触させた後の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、第２の測定光スペクトルを取得する工程とを備え、
　前記第１の測定光スペクトルと前記第２の測定光スペクトルとを用いて、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する、検査方法。
　前記第１の測定光スペクトルを用いて、前記抗体と結合している前立腺特異抗原の含有量を求め、かつ、前記第２の測定光スペクトルを用いて、前記粒状物と結合している前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を求めることにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する、請求項１０に記載の検査方法。
　前記粒状物と結合している前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量の、前記抗体と結合している前立腺特異抗原の含有量に対する比を求めることにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する、請求項１１に記載の検査方法。
　前記試料を接触させる前の状態の前記ナノ構造表面に光を照射して、基準光スペクトルを取得する工程を備え、
　前記第１の測定光スペクトルと前記第２の測定光スペクトルと前記基準光スペクトルとを比較することにより、前記試料に含まれる前記特定の糖鎖を有する前立腺特異抗原の含有量を測定する、請求項１０～１２のいずれか１項に記載の検査方法。
　前記特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物を接触させる工程において、前記ナノ構造表面に、液中に分散した前記粒状物を接触させ、
　前記液１ｍＬあたり、前記粒状物が有する前記レクチンの含有量が、１μｇ以上２０μｇ以下である、請求項８～１３のいずれか１項に記載の検査方法。
　前記ナノ構造表面が、複数の凹部又は複数の凸部による周期構造を有する表面である、請求項１～１４のいずれか１項に記載の検査方法。
　前記壁部が、壁部本体と、前記壁部本体の表面上に配置された金属層とを有し、
　前記金属層が、前記ナノ構造表面の少なくとも一部を構成している、請求項１～１５のいずれか１項に記載の検査方法。
　ナノ構造表面を有する壁部、及び前記ナノ構造表面に配置された抗体を備える検査用器具本体と、
　特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物とを備える、検査キット。
　前記ナノ構造表面が、複数の凹部又は複数の凸部による周期構造を有する表面である、請求項１７に記載の検査キット。
　前記壁部が、壁部本体と、前記壁部本体の表面上に配置された金属層とを有し、
　前記金属層が、前記ナノ構造表面の少なくとも一部を構成している、請求項１７又は１８に記載の検査キット。
　ナノ構造表面を有する壁部、及び前記ナノ構造表面に配置された抗体を備える検査用器具本体と、
　特定の糖鎖を認識するレクチンを表面に有する粒状物と、
　前記検査用器具本体の前記ナノ構造表面に光を照射するための照射部と、
　前記ナノ構造表面に照射された光を受光するための受光部とを備える、検査システム。
　前記ナノ構造表面が、複数の凹部又は複数の凸部による周期構造を有する表面である、請求項２０に記載の検査システム。
　前記壁部が、壁部本体と、前記壁部本体の表面上に配置された金属層とを有し、
　前記金属層が、前記ナノ構造表面の少なくとも一部を構成している、請求項２０又は２１に記載の検査システム。