WO2021024801A1 - 軟骨再生促進用組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
〔1〕下記一般式(1)で示されるフラボノイドを有効成分として含む軟骨再生促進用組成物。
〔2〕軟骨細胞への分化を促進する上記〔1〕に記載の軟骨再生促進用組成物。
〔3〕R1及びR3は、水素原子を表す上記〔1〕又は〔2〕に記載の軟骨再生促進用組成物。
〔4〕R2及びR4は、水酸基を表す上記〔1〕~〔3〕のいずれかに記載の軟骨再生促進用組成物。
〔5〕一般式(1)で示されるフラボノイドが、下記一般式(2)で示されるフラボノイドである上記〔1〕~〔4〕のいずれかに記載の軟骨再生促進用組成物。
〔6〕一般式(1)で示されるフラボノイドが、ケルセチン、ヘスペレチン、タキシフォリン、イソラムネチン、エリオジクチオール、ルテオリン及びモリンからなる群より選択される1種以上である上記〔1〕~〔5〕のいずれかに記載の軟骨再生促進用組成物。
〔7〕上記一般式(1)で示されるフラボノイドを投与する、軟骨再生促進方法。
〔8〕軟骨再生を促進するための、上記一般式(1)で示されるフラボノイドの使用。
一般式(1)で示されるフラボノイドは、1種であってもよく、2種以上であってもよい。本明細書中、一般式(1)で示されるフラボノイドを単にフラボノイドともいう。
一般式(1)において、炭素数1~2のアルコキシ基は、メトキシ基又はエトキシ基であり、好ましくはメトキシ基である。
R6は、好ましくは水酸基又はメトキシ基である。R7が、水素原子を表す場合、R8は、水酸基又は炭素数1~2のアルコキシ基を表す。R8が、水素原子を表す場合、R7は、水酸基又は炭素数1~2のアルコキシ基を表す。R7は、好ましくは水素原子、水酸基又はメトキシ基である。R8は、好ましくは水素原子又は水酸基である。
一般式(2)において、R7aが水素原子を表す場合、R8aは水酸基又はメトキシ基を表す。R8aが水素原子を表す場合、R7aは水酸基又はメトキシ基を表す。一態様において、R7aが水素原子、水酸基又はメトキシ基であり、R8aが水素原子又は水酸基であることが好ましい。
軟骨細胞への分化を促進することにより、軟骨の再生を促進することができる。従って一般式(1)で示されるフラボノイドは軟骨再生促進のために有用である。本発明の軟骨再生促進用組成物は、軟骨細胞への分化を促進して軟骨再生を促進するために使用され得る。軟骨の再生を促進することにより、軟骨を増加させることが可能となる。このため軟骨再生を促進することは、例えば、軟骨の減少予防において有用である。また、軟骨再生を促進することにより、減少した軟骨を修復することができる。本発明の軟骨再生促進用組成物は、間葉系幹細胞の軟骨細胞への分化促進用組成物として使用することもできる。
本発明の軟骨再生促進用組成物は、飲食品、医薬品、医薬部外品、飼料等の形態とすることができる。本発明の軟骨再生促進用組成物は、それ自体が軟骨再生促進のための飲食品、医薬品、医薬部外品、飼料等であってもよく、これらに配合して使用される素材又は製剤等であってもよい。
本発明の軟骨再生促進用組成物は、一例として、剤の形態で提供することができるが、本形態に限定されるものではない。当該剤をそのまま組成物として、又は、当該剤を含む組成物として提供することもできる。一態様において、本発明の軟骨再生促進用組成物は、軟骨再生促進剤ということもできる。
本発明の軟骨再生促進用組成物は、経口用組成物、非経口用組成物のいずれであってもよいが、好ましくは経口用組成物である。経口用組成物としては、飲食品、経口用の医薬品、医薬部外品、飼料が挙げられ、好ましくは飲食品又は経口用医薬品であり、より好ましくは飲食品である。
本発明の軟骨再生促進用組成物中の一般式(1)で示されるフラボノイドの含有量は、例えば、該組成物中に0.0001重量%以上が好ましく、0.001重量%以上がより好ましく、また、90重量%以下が好ましく、50重量%以下がより好ましい。一態様において、一般式(1)で示されるフラボノイドの含有量は、軟骨再生促進用組成物中に0.0001~90重量%が好ましく、0.001~50重量%がより好ましい。上記含有量は、上記フラボノイドを2種以上含有する場合は、これらの合計含有量である。
本明細書で症状又は疾患の予防は、症状若しくは疾患の発症を防止すること、症状若しくは疾患の発症を遅延させること、症状若しくは疾患の発症率を低下させること、症状若しくは疾患の発症のリスクを軽減することなどを包含する。症状又は疾患の改善は、対象を症状若しくは疾患から回復させること、症状若しくは疾患を緩和すること、症状の悪化若しくは疾患の進行を遅延させること若しくは防止することなどを包含する。
一態様において、投与対象として、軟骨再生促進を必要とする又は希望する対象が挙げられる。本発明の軟骨再生促進用組成物は、例えば、軟骨再生促進により予防又は改善が期待できる症状又は疾患の予防等を目的として、健常者に対して使用することもできる。
本発明の一実施態様において、本発明の軟骨再生促進用組成物は、上記の表示が付された飲食品であることが好ましい。また上記の表示は、上記の機能を得るために用いる旨の表示であってもよい。
上記一般式(1)で示されるフラボノイドを投与する、軟骨再生促進方法。
軟骨再生を促進するための、一般式(1)で示されるフラボノイドの使用。
上記方法及び使用は、治療的な方法又は使用であってもよく、非治療的な方法又は使用であってもよい。一般式(1)で示されるフラボノイドを対象に投与する(摂取させる)と、間葉系幹細胞の軟骨細胞への分化を促進することができ、軟骨再生を促進することができる。軟骨再生促進は、例えば、上記の軟骨の欠損、軟骨損傷、変形性関節症(変形性膝関節症等)等の症状又は疾患の予防又は改善に有用である。
購入したヒト滑膜細胞(東洋紡(株)製、HFLS(Normal):凍結細胞(adult)、Code No.CA40805a)を150mmの培養ディッシュ(Corning社製)に50cells/cm2の低密度で播種し14日間培養した。
上記のヒト滑膜細胞の培養は、以下の培地で行った。
α-MEM(ナカライテスク(株)製)
10% fetal bovine serum(Sigma-Aldrich社製)
Antibiotic-Antimycotic Mixed Stock Solution(ナカライテスク(株)製)
(培地組成)
DMEM high-glucose(Thermo Fisher Scientific社製)
50μg/mL L-Ascorbic acid 2-phosphate sesquimagnesium salt hydrate(Sigma-Aldrich社製)
40μg/mL L-Proline(Sigma-Aldrich社製)
100μg/mL Sodium pyruvate(Sigma-Aldrich社製)
50mg/mL ITS+Premix(Corning社製)
10ng/mL transforming growth factor β3(Sigma-Aldrich社製)
100nM dexamethasone(Sigma-Aldrich社製)
50ng/mL 骨形成タンパク質2(BMP-2)(Sigma-Aldrich社製)
ケルセチン(ナカライテスク(株)社製)、イソラムネチン(フナコシ(株)製)又はエリオジクチオール(フナコシ(株)製)を被験化合物に使用し、培地中の被験化合物の最終濃度を5μMとした以外は、実施例1と同じ方法で試験を行った。軟骨ペレットの重量(g)(ペレット重量(N=3の平均))、ペレット重量の標準誤差(SE)を表2に示す。コントロールの軟骨ペレットの重量を100%とした、被験化合物を添加した場合の軟骨ペレットの重量の相対値を、増加率(%)として表2に示す。有意差検定は実施例1と同じ方法で行い、5%以下を有意とした。
ルテオリン(フナコシ(株)製)又はモリン(ナカライテスク(株)製)を被験化合物に使用し、培地中の被験化合物の最終濃度を5μMとした以外は、実施例1と同じ方法で試験を行った。軟骨ペレットの重量(g)(ペレット重量(N=3の平均))、ペレット重量の標準誤差(SE)を表3に示す。コントロールの軟骨ペレットの重量を100%とした、被験化合物を添加した場合の軟骨ペレットの重量の相対値を、増加率(%)として表3に示す。有意差検定は実施例1と同じ方法で行い、5%以下を有意とし、10%以下を有意傾向とした。モリンにより、コントロールと比較して軟骨ペレット重量の有意な増加が確認された。ルテオリンについても、コントロールと比較して軟骨ペレット重量の増加が確認された。
表4に示す化合物を被験化合物に使用し、N=1で試験を行った以外は、実施例1と同じ方法で試験を行った。コントロールの軟骨ペレットの重量を100%とした、被験化合物を添加した場合の軟骨ペレットの重量の相対値を、増加率(%)として表4に示す。No.1~15の化合物は、培地中の最終濃度を5μM、No.16~21の化合物は、培地中の最終濃度を50μMとした。
Claims (8)
- 軟骨細胞への分化を促進する請求項1に記載の軟骨再生促進用組成物。
- R1及びR3は、水素原子を表す請求項1又は2に記載の軟骨再生促進用組成物。
- R2及びR4は、水酸基を表す請求項1~3のいずれか一項に記載の軟骨再生促進用組成物。
- 一般式(1)で示されるフラボノイドが、ケルセチン、ヘスペレチン、タキシフォリン、イソラムネチン、エリオジクチオール、ルテオリン及びモリンからなる群より選択される1種以上である請求項1~5のいずれか一項に記載の軟骨再生促進用組成物。
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