WO2018194416A1 - 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1ｈ-피라졸-5-올 염산염의 신규 결정형 고체 화합물 - Google Patents

3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1ｈ-피라졸-5-올 염산염의 신규 결정형 고체 화합물 Download PDF

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이수진
이승찬
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Definitions

  • the present invention provides a novel crystalline solid compound, 3-phenyl-4-propyl-1- (pyridin-2-yl) -1 H -pyrazole-5-ol hydrochloride, a method for preparing the compound, and a compound of the active ingredient It relates to a pharmaceutical composition comprising a.
  • 3-phenyl-4-propyl-1- (pyridin-2-yl) -1 H -pyrazole-5-ol hydrochloride represented by the following Chemical Formula 1 (hereinafter, abbreviated as 'hydrochloride compound') or as the following Chemical Formula 2
  • 'free base compound' 3-phenyl-4-propyl-1- (pyridin-2-yl) -1 H -pyrazole-5-ol
  • Korean Patent No. 10-1280160 It is synthesized and reported for the first time in patent document 1).
  • Republic of Korea Patent No. 10-1280160 Patent Document 1
  • Republic of Korea Patent No. 10-1633957 Patent Document 2
  • Republic of Korea Patent Application No. 10-2017-0024083 Patent Document 3
  • ROS reactive oxygen species
  • Patent Document 2 discloses a method for producing a compound represented by Formula 1 or Formula 2. Specifically, in the production method disclosed in Patent Document 2, 2-propyl-3-oxo-3-phenylpropionic acid ethyl ester and 2-hydrazinopyridine are heated and refluxed in an ethanol solvent to wash the solid produced with hexane and ethyl acetate. Vacuum drying to prepare a free base compound represented by the formula (2).
  • Patent Documents 1 and 2 the compound represented by Formula 1 or Formula 2 was obtained as an amorphous solid compound instead of a crystalline compound.
  • amorphous or noncrystalline form compounds have a larger surface area for particles than crystalline form compounds.
  • the amorphous or amorphous compound has the advantage that the solubility in the solvent is excellent kinetics, but has a disadvantage in that the stability is lower than the crystalline compound because it does not have a lattice energy due to crystallization.
  • the crystalline compound has a unique crystal pattern.
  • the pattern may be single crystalline or there may be two or more polymorphic forms.
  • the polymorphic compounds may show differences in moisture content and the like, and physical properties such as solubility and melting point are also different.
  • when the pharmaceutical raw material is a polymorphic compound it may affect the dissolution and disintegration of the preparation due to the change in the crystal form, which may also affect the oral absolute absorption rate.
  • the polymorphic compounds may have different crystal forms even though they have the same chemical structure, and thus may show differences in the stability and physiological activity of the compounds.
  • a crystalline polymorphic compound applied for medical use it may have a great influence on the ease of preparation, solubility, storage stability, ease of preparation, and pharmacological activity in vivo, depending on the crystal form. Therefore, it is very important to select the crystalline form required as a pharmaceutical raw material according to the route of administration, dosage and the like.
  • the criteria for the selection of generic crystalline drugs are due to the physicochemical properties of the crystalline forms, for example, to select the thermodynamic most stable crystalline forms, or to select crystalline forms optimized for the manufacture of pharmaceuticals and drugs, or to improve the solubility and dissolution rate of drugs. Or a crystalline form that can change the pharmacokinetic properties.
  • Patent Document 1 Republic of Korea Patent No. 10-1280160
  • Patent Document 2 Republic of Korea Patent Registration 10-1633957
  • Patent Document 3 Korean Patent Application No. 10-2017-0024083
  • the present inventors prepared a new crystalline compound of the hydrochloride compound represented by Formula 1, which is used as a pharmaceutical raw material, has excellent physical properties and stability, and can be thermodynamically stabilized so that crystal transition does not occur due to changes over time under storage conditions. Thus, the present invention has been completed.
  • an object of the present invention is to provide a novel crystalline hydrochloride compound represented by the following formula (1).
  • Another object of the present invention is to provide a method for preparing a crystalline hydrochloride compound represented by Chemical Formula 1.
  • the present invention has another object to provide a pharmaceutical composition containing a crystalline hydrochloride compound represented by the formula (1) as an active ingredient.
  • the present invention provides a crystalline hydrochloride compound represented by the following formula (1), the maximum endothermic temperature measured by a differential scanning calorimeter (DSC) is 134.25 ⁇ 3 °C.
  • the crystalline hydrochloride compound represented by Chemical Formula 1 has a 2 ⁇ diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °) having a relative intensity of 15% or more by X-ray powder diffraction analysis of 7.15, 10.72, 13.36, 15.99, 16.39, 16.71, 17.14, 19.61, 21.50, 21.82, 23.46, 24.08 and 25.91.
  • the present invention provides a method for preparing a crystalline hydrochloride compound represented by Chemical Formula 1, including the following preparation step:
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating a disease mediated by reactive oxygen species (ROS), wherein the crystalline hydrochloride compound represented by Chemical Formula 1 is included as an active ingredient.
  • ROS reactive oxygen species
  • a method for treating, preventing or alleviating a disease mediated by reactive oxygen species (ROS) of a subject patient wherein the method comprises an effective amount of a crystalline hydrochloride compound represented by Chemical Formula 1
  • ROS reactive oxygen species
  • crystalline hydrochloride compound represented by the formula (1) in the manufacture of a medicament for the treatment, prevention or alleviation of diseases mediated by reactive oxygen species (ROS).
  • ROS reactive oxygen species
  • a crystalline hydrochloride compound represented by the formula (1) for use in the treatment, prevention or alleviation of diseases mediated by reactive oxygen species (ROS).
  • ROS reactive oxygen species
  • the disease mediated by the reactive oxygen species may be osteoporosis.
  • the disease mediated by the reactive oxygen species is selected from the group consisting of diabetic nephropathy, hypertensive nephropathy, glomerulonephritis, pyelonephritis, interstitial nephritis, lupus nephritis, polycystic kidney disease and renal failure It may be one or more kidney disease.
  • the disease mediated by reactive oxygen species is diabetic retinopathy (DR), diabetic macular edema, age-related Macular Degeneration, prematurity retinopathy (ROP), nodules Choroidal choroidal vasculopathy, ischemic proliferative retinopathy, Retinitis Pigmentosa, cone dystrophy, PVR, retinal artery occlusion, retinal vein occlusion Pterygium, retinitis, keratitis, conjunctivitis, uveitis, Lever's optic atrophy, retinal detachment, retinal pigment epithelial detachment, neovascular glaucoma, corneal neovascularization, retinal neovascularization, choroidal neovascularization (CNV) and viral infection It may be one or more eye diseases selected from the group consisting of.
  • DR diabetic retinopathy
  • ROP prematurity retinopathy
  • the pharmaceutical composition is in the form of a powder selected from the group consisting of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, ointments, creams, suppositories, eye drops and injections. It may be formulated.
  • the crystalline hydrochloride compound represented by the formula (1) provided by the present invention is a novel material that has not been reported in the literature, and it is remarkably excellent in heat and moisture stability compared to the amorphous hydrochloride compound.
  • the crystalline hydrochloride compound provided by the present invention has excellent stability when compared to various crystalline acid addition salt compounds prepared by adding an acid other than hydrochloric acid.
  • the crystalline hydrochloride compound provided by the present invention not only has favorable physical properties for drug production, but also has excellent stability against heat and moisture, and thus the drug prepared does not decompose or crystallize the active ingredient even after being stored for a long time beyond the shelf life. It is stable and preserved without transition.
  • the crystalline hydrochloride compound provided by the present invention is useful as an active ingredient in the manufacture of a medicament for the prevention or treatment of osteoporosis, kidney disease, eye disease.
  • the crystalline hydrochloride compound can be easily used as a pharmaceutical raw material of a drug formulated as an oral preparation, an injectable preparation or an eye drop.
  • FIG. 2 is an X-ray powder diffraction pattern of crystalline 3-phenyl-4-propyl-1- (pyridin-2-yl) -1 H -pyrazole-5-ol (crystalline freebase compound).
  • Figure 3 is a DSC thermal analysis of the crystalline free base compound.
  • the present invention relates to a novel crystalline hydrochloride compound, a method for preparing the compound, and a pharmaceutical composition comprising the compound as an active ingredient.
  • the crystalline hydrochloride compound characterized by the present invention is a novel substance which has not been reported in the literature, and has favorable physical properties for drug preparation, is stable against heat and moisture, and does not decompose the active ingredient or cause crystalline transition during flow storage. It is a compound with sufficient stability.
  • Crystalline hydrochloride compound provided by the present invention is a hydrochloric acid added to the 3-phenyl-4-propyl-1- (pyridin-2-yl) -1 H -pyrazole-5-ol nucleus as shown in the following formula (1) Acid addition salt compound.
  • the pyridine group of the mother nucleus which forms acid addition salts, is a relatively weak base, and the hydroxy group (-OH) at the pyrazole C5 position can form a hydrogen bond with the nitrogen atom (N) of the pyridine.
  • the basicity of pyridine may be weaker than.
  • FIG. 1 is a molecular model in which 3-phenyl-4-propyl-1- (pyridin-2-yl) -1 H -pyrazole-5-ol freebase has the most stable form in which molecular energy can be minimized in terms of molecular mechanics.
  • the hydroxy group at the pyrazole C5 position is hydrogen-bonded with the nitrogen atom of the pyridine.
  • the melting point is lower than that of the pharmaceutically acceptable salt compound.
  • the likelihood of decomposition products being increased is higher.
  • various flexible materials may be generated, including the decomposition product of Chemical Formula 3.
  • crystalline hydrochloride compounds to drugs are: first, physically stable to be applied to the synthesis of pharmaceutically acceptable salts or to the formulation of pharmaceutical ingredients; and secondly, by chronological changes during storage distribution. It should not be easily transferred to the crystalline form, and third, it should be possible to minimize the formation of analogues, including the NO ⁇ compound of pyridine represented by the formula (3) during storage circulation.
  • the present inventors studied to select an acid addition salt compound capable of more dynamically stabilizing 3-phenyl-4-propyl-1- (pyridin-2-yl) -1 H -pyrazole-5-ol freebase. It was. That is, various crystalline hydrochloride compounds added with crystalline hydrochloride compounds and pharmaceutically acceptable acids having higher acidity and no volatility than hydrochloric acid (HCl) were prepared, and the stability of the prepared acid addition salt compounds was compared.
  • the crystalline hydrochloride compound provided by the present invention is a hydrochloride-added hydrochloride compound, which is the most stable among various crystalline acid addition salt compounds. Can be preserved.
  • the present invention also provides a method for preparing a crystalline hydrochloride compound. Specifically, the method for preparing a crystalline hydrochloride compound according to the present invention,
  • Step a) is performed according to the manufacturing method disclosed in Korean Patent Registration No. 10-1633957 (Patent Document 2) to prepare a crude product (crude product).
  • the step b) is a process of solidifying the crude product, after dissolving the crude product in normal hexane to cool to produce a solid.
  • a slight heating may be required for complete dissolution, the heating may be appropriately performed in the temperature range of 50 ⁇ 60 °C.
  • the cooling is suitable in the range of -20 ⁇ -10 °C, if the cooling temperature is too high, the production rate of the solid may be slow and the yield is low, if the cooling temperature is too low, crystals may not be produced during the subsequent crystallization process. have.
  • step c) the resulting solid is filtered, washed and dried to obtain an amorphous free base compound.
  • the washing may be performed using normal hexane cooled to 0-10 ° C. as a solvent.
  • the drying may be carried out at room temperature, or may be vacuum dried at 30 ⁇ 40 °C.
  • Step d) is a process of crystallizing the amorphous free base compound. Specifically, the amorphous free base compound is added to a mixed solvent containing acetonitrile and distilled water in a weight ratio of 1 to 1, and vigorously stirred at 20 to 25 ° C. to produce crystals.
  • the weight ratio of the acetonitrile and distilled water may be a weight ratio of 1: 0.5 ⁇ 2.
  • Step e) is a process of filtering the resulting crystals, washing with a solvent and drying to obtain a crystalline free base compound.
  • a washing solvent a mixed solvent containing acetonitrile and distilled water in a weight ratio of 1 to 1 is used, and the solvent is preferably cooled to 0 to 10 ° C.
  • the drying may be carried out by a conventional drying method, for example, lyophilization, rotary evaporation drying, spray drying, vacuum drying or fluid bed drying, and specifically, may be performed by vacuum drying. Preferably it can be vacuum-dried at 30-40 degreeC.
  • Step f) is a process of reacting the crystalline free base compound with hydrochloric acid to generate a solid of hydrochloric acid addition salt.
  • the hydrochloride production reaction is carried out in an isopropyl ether solvent.
  • the hydrochloric acid may be diluted with isopropyl ether to prepare a solution of 0.5 to 2 M concentration.
  • the reaction temperature is -10 ⁇ 10 °C is suitable, more preferably 0 ⁇ 5 °C can be maintained.
  • Step g) is a process of crystallizing the hydrochloride solid. Specifically, the amorphous hydrochloride compound is added to a mixed solvent containing tert -butyl ether and toluene in a weight ratio of 1 to 1, and vigorously stirred at 5 to 10 ° C. to produce crystals.
  • Step h) is a process of obtaining the crystalline hydrochloride compound by filtration, washing and drying the resulting crystals.
  • the washing solvent is a mixed solvent containing tert -butyl ether and toluene in a weight ratio of 1: 1, and the solvent is preferably used after cooling to 0 ⁇ 10 °C.
  • the drying may be carried out by a conventional drying method, for example, lyophilization, rotary evaporation drying, spray drying, vacuum drying or fluid bed drying, and specifically, may be performed by vacuum drying. Preferably it can be vacuum-dried at 30-40 degreeC.
  • the present invention also provides a pharmaceutical composition containing a crystalline hydrochloride compound as an active ingredient.
  • an amorphous hydrochloride compound is a disease mediated by reactive oxygen species (ROS), and is particularly effective as an active ingredient of a pharmaceutical composition for treating osteoporosis, kidney disease, and eye disease.
  • ROS reactive oxygen species
  • the crystalline hydrochloride compound provided by the present invention also has the activity of inhibiting the generation of reactive oxygen species (ROS), based on this pharmacological mechanism, the pharmaceutical composition containing the crystalline hydrochloride compound as an active ingredient is osteoporosis, kidney disease, eye It can be used for the treatment or prevention of diseases.
  • the kidney disease may be selected from the group consisting of diabetic nephropathy, hypertensive nephropathy, glomerulonephritis, pyelonephritis, interstitial nephritis, lupus nephritis, polycystic kidney disease and renal failure.
  • the ocular diseases include diabetic retinopathy (DR), diabetic macular edema, age-related Macular Degeneration, prematurity retinopathy (ROP), polypoidal choroidal vasculopathy, ischemic proliferative retinopathy, Retinitis Pigmentosa, cone dystrophy, proliferative vitreoretinopathy (PVR), retinal artery occlusion, retinal vein occlusion, pterygium, retinitis, keratitis, conjunctivitis, uveitis, leprosy Optic nerve atrophy, retinal detachment, retinal pigment epithelial detachment, neovascular glaucoma, corneal neovascularization, retinal neovascularization, choroidal neovascularization (CNV), and viral infection.
  • DR diabetic retinopathy
  • ROP prematurity retinopathy
  • PVR proliferative vitreo
  • the pharmaceutical composition of the present invention contains a crystalline hydrochloride compound as an active ingredient.
  • the content of the active ingredient may be calculated in consideration of the age, weight, etc. of the patient, and generally may be contained in the range of 0.01 to 10% by weight based on the total amount of the pharmaceutical composition.
  • composition of the present invention may include pharmaceutically acceptable additives such as carriers, diluents, binders, disintegrants, lubricants, pH adjusting agents, antioxidants, dissolution aids, etc. within the scope of not impairing the effect of the active ingredient. have.
  • pharmaceutically acceptable additives such as carriers, diluents, binders, disintegrants, lubricants, pH adjusting agents, antioxidants, dissolution aids, etc.
  • Examples of pharmaceutically acceptable additives that can be used to formulate the pharmaceutical compositions of the invention include microcrystalline cellulose, xylitol, erythritol, methyl cellulose, polyvinylpyrrolidone, starch, acacia, alginate, gelatin, lactose, Dextrose, sucrose, propylhydroxybene, joate, cellulose, water, methylhydroxybenzoate, magnesium stearate talc, sorbitol, mannitol, maltitol, calcium phosphate, calcium silicate, mineral oil and the like can be used.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is in the form of a dosage form selected from the group consisting of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, ointments, creams, suppositories, eye drops and injections according to conventional formulation methods. It can be formulated as.
  • the present invention places no particular limitation on the formulation form.
  • Eye drops or injections containing pharmaceutically acceptable salts may optionally include, without limitation, tonicity agents, buffers, osmotic agents, and the like, commonly used in the art.
  • the resulting solid was filtered under reduced pressure and the solid was washed with normal hexane cooled to 0-10 ° C.
  • a crystalline free base compound (12.9 g, 46.2 mmol) was added to a round flask, dissolved in isopropyl ether (300 mL) under a nitrogen atmosphere, and then a 1 M hydrochloric acid-isopropyl ether solution was added at 0 ⁇ 5 ° C. for 10 minutes. The reaction was stirred at 0-5 ° C. for 1 hour to give a solid compound. The resulting solid compound was filtered under reduced pressure under nitrogen atmosphere and washed with isopropyl ether (30 mL) cooled to 10 ° C. or lower.
  • the amorphous free base compound (12.9 g, 46.2 mmol) prepared in Comparative Example 1 was added to a round flask, dissolved in diethyl ether (300 mL), and a hydrochloric acid-diethyl ether solution having a concentration of 2M was added at 0 to 5 ° C. Added for minutes. The resulting solid compound was filtered under reduced pressure, washed with hexane and ethyl acetate and dried in vacuo to yield an amorphous hydrochloride compound.
  • Acid addition salts were prepared by adding various acids to crystalline 3-phenyl-4-propyl-1- (pyridin-2-yl) -1 H -pyrazole-5-ol (crystalline free base). Crystallization methods include various methods known in the literature, such as reaction crystallization, cooling crystallization, drawing-out crystallization, and evaporation crystallization. Was used. A crystalline acid addition salt compound was prepared using about 20 kinds of acids, of which Table 1 shows the crystalline acid addition salt compound prepared by evaporation crystallization.
  • the crystalline free base compound (12.9 g, 46.2 mmol) was added to a round flask, and the acid shown in Table 1 was added thereto.
  • 20 mL of anhydrous methanol was added to each reaction, and the mixture was heated to about 50-60 ° C. to completely dissolve it.
  • the flask was opened and the Kimwipes TM tissue paper was covered with an air inlet for air passage, wrapped in a rubber band and stored for 36 hours in a fume hood. At this time, the internal temperature of the fume hood was maintained between 23 ⁇ 26 °C.
  • the resulting solid was filtered, washed with normal hexane (5 mL) cooled to 10 ° C. or lower, and then dried in vacuo to give each crystalline acid addition salt.
  • test compound was placed in a Petri dish under accelerated storage conditions at a temperature of 40 ° C. and a relative humidity of 75% and exposed for 7 days without sealing.
  • the water content of each test compound was measured with a Karl-Fischer moisture meter.
  • Table 2 summarizes the water content (%) of each test compound measured during the storage period.
  • the compound having a crystalline form has a small initial moisture content compared to the amorphous compound, and also shows a significant difference in water content after 7 days under accelerated storage conditions. Can be. Therefore, the crystalline free base compound or the crystalline hydrochloride compound is very hygroscopic and has a characteristic that the moisture content does not increase over time and is saturated, and thus it is useful for pharmaceutical use as a pharmaceutical raw material.
  • test compound was placed in a stability chamber under long-term storage conditions at a temperature of 25 ° C. and a relative humidity of 60% and stored for 6 months.
  • each test compound was placed in a double polyethylene bag, filled with a silica gel pouch between the polyethylene bags, and placed in a fiber drum.
  • Table 3 summarizes the results of the measurement of the concentration of the degradation product of Formula 3 and the concentration of the total analog by HPLC analysis after storage under long-term storage conditions for 6 months.
  • UV Detector UV Detector (246 nm)
  • Salt Form of Formula 1 Degradation product concentration of formula 3 (%) % Of total lead Early 6 months Early 6 months Free base compound Crystal Form (Example 1) 0.05 0.09 0.32 0.47 Amorphous (Comparative Example 1) 0.06 0.65 0.26 7.58 Hydrochloride compound Crystal Form (Example 2) 0.03 0.08 0.28 0.45 Amorphous (Comparative Example 2) 0.05 0.92 0.35 5.87 Crystalline acid addition salt (Comparative Example 3) Fumarate 0.07 0.27 0.45 1.35 Hemi1,5-naphthalene disulfonate 0.08 0.35 0.52 1.24 Succinate 0.09 0.38 0.48 1.65 L-tartarate 0.10 0.54 0.40 1.85 L-maleic acid salt 0.12 0.78 0.58 3.27
  • the amorphous free base compound (Comparative Example 1) has a significantly higher concentration of the decomposition product represented by the formula (3). You can see that. In the case of the concentration of the total flexible material measured after 6 months compared to the initial, it can be seen that the amorphous free base compound (Comparative Example 1) is significantly increased compared to the crystalline free base compound (Example 1). In addition, in the hydrochloride compound, the amorphous hydrochloride compound (Comparative Example 2) shows that desorption of hydrochloric acid (HCl) occurred.
  • HCl hydrochloric acid
  • the amorphous hydrochloride compound (Comparative Example 2) has a significantly higher concentration of the decomposition product represented by the formula (3) compared to the crystalline hydrochloride compound (Example 2).
  • the concentration of the flexible material is relatively higher than that of the crystalline hydrochloride compound (Example 2) because the amorphous hydrochloride compound (Comparative Example 2) has low thermodynamic stability even when the concentration of the flexible material is compared.
  • the crystalline hydrochloride compound when compared with the crystalline acid addition salt compound to which an acid other than hydrochloric acid is added, the crystalline hydrochloride compound (Example 2) has a concentration and a flexible substance of the decomposition product represented by the formula (3) in comparison with the crystalline acid addition salt compound (Comparative Example 3). It can be seen that the concentration of is significantly low. Therefore, the crystalline hydrochloride compound is the most stable among the various crystalline acid addition salt compounds.
  • test compound was placed in a polyethylene bag (bag) in a stability chamber under a temperature of 40 °C and 75% relative humidity and stored for 4 weeks. And, the results were compared with the PXRD and DSC analysis results measured after 4 weeks and the initial state, respectively. The results are summarized in Table 4 below.
  • the crystalline free base compound (Example 1) and the crystalline hydrochloride compound (Example 2) were identified as PXRD and DSC four weeks after storage, and it can be seen that no crystal transition occurred due to changes over time. Thus, it can be seen that the crystalline free base compound (Example 1) and the crystalline hydrochloride compound (Example 2) are stable compounds.
  • X-ray powder diffraction analysis of the crystalline free base compound and the crystalline hydrochloride compound prepared in Examples 1 and 2 used Cu K ⁇ rays on a Bruker D8 Advance X-ray powder diffractometer.
  • the diffractometer was equipped with the driving force, and the amount of current was set to 45 kV and 40 mA.
  • the divergence and scattering slits were set to 1 ° and the light receiving slit was set to 0.2 mm. 2 ⁇ was measured at 6 ° / minute from 5 to 35 °.
  • PXRD analysis results are shown in FIGS. 2 and 5.
  • Table 5 shows the results of X-ray powder diffraction analysis to summarize the 2 ⁇ diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °) whose relative intensity is 5% or more for the crystalline free base compound, and the relative intensity for the crystalline hydrochloride compound.
  • DSC N-650 obtained from SCINCO was used and DSC measurements were carried out in a sealed pan at a scan rate of 10 ° C./min from 20 ° C. to 150 ° C. under a nitrogen stream. The results are shown in FIGS. 3 and 6, respectively.
  • the crystalline free base compound showed a characteristic endothermic peak at 73.54 ⁇ 3 °C
  • the crystalline hydrochloride compound showed a characteristic endothermic peak at 134.25 ⁇ 3 °C.
  • the amorphous free base compound prepared in Comparative Example 1 was confirmed that the melting point is not constant and completely melted at 60 °C or more.
  • the amorphous hydrochloride compound prepared in Comparative Example 2 also has a melting point that is not constant, has a property of slowly melting in a wide temperature range, and is completely melted at 160 ° C. or higher. Given this point. It can be seen that the crystalline compound provided by the present invention is a separate compound having completely different physicochemical properties compared with the amorphous compound.
  • the crystalline free base compound represented by the general formula (1) and the crystalline hydrochloride compound represented by the general formula (2) have no hygroscopicity, have excellent stability, and are unlikely to undergo crystallization due to changes over time. It can be confirmed that it is optimized as a pharmaceutical raw material compared to the conventional material.

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Abstract

본 발명은 신규의 결정형 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 염산염과 이 화합물의 제조방법, 그리고 이 화합물을 활성성분으로 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.

Description

3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1Ｈ-피라졸-5-올 염산염의 신규 결정형 고체 화합물
본 발명은 신규의 결정형 고체 화합물인 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 염산염과 이 화합물의 제조방법, 그리고 이 화합물을 활성성분으로 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
하기 화학식 1로 표시되는 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 염산염 (이하, '염산염 화합물'이라 약칭함) 또는 하기 화학식 2로 표시되는 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 (이하, '유리염기 화합물'이라 약칭함)은 대한민국 등록특허 10-1280160호 (특허문헌 1)에서 최초로 합성되어 보고되어 있다
Figure PCTKR2018004604-appb-C000001
Figure PCTKR2018004604-appb-C000002
또한, 대한민국 등록특허 10-1280160호 (특허문헌 1), 대한민국 등록특허 10-1633957호 (특허문헌 2) 및 대한민국 특허출원 10-2017-0024083호 (특허문헌 3)에서는 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 화합물이 활성산소종 (Reactive oxygen species, ROS)의 생성을 억제하는 활성이 우수함을 밝히고 있다. 또한, 이러한 약리기전을 토대로 하여 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 화합물이 골다공증, 신장질환, 안질환의 치료용 약학 조성물의 활성성분으로서 유효한 것으로 보고되어 있다.
또한, 대한민국 등록특허 10-1633957호 (특허문헌 2)에는 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 화합물의 제조방법이 개시되어 있다. 상기 특허문헌 2에 개시된 제조방법에서는 구체적으로, 2-프로필-3-옥소-3-페닐프로피온산 에틸 에스터와 2-히드라지노피리딘을 에탄올 용매에서 가열 환류하여 생성된 고체를 헥산과 에틸아세테이트로 세척하고 진공 건조시켜 상기 화학식 2로 표시되는 유리염기 화합물을 제조한다. 그리고, 제조된 유리염기 화합물을 디에틸에테르에 용해시킨 후에, 0℃에서 HCl/디에틸에테르 용액을 적가하여 생성된 고체를 헥산과 에틸아세테이트로 세척하고 진공 건조시켜 상기 화학식 1로 표시되는 염산염 화합물을 제조하고 있다.
Figure PCTKR2018004604-appb-I000001
상기 특허문헌 1과 2에서는 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 화합물이 결정형 화합물이 아닌 비결정성 고체 화합물로서 수득되었다.
한편, 무정형 (amorphous form) 또는 비결정성 (noncrystalline form) 화합물은 결정질 (crystalline form) 화합물에 대비하여 상대적으로 입자의 표면적이 크다. 이에, 무정형 또는 비결정질 화합물은 속도론적으로 용매에 대한 용해도는 우수하다는 장점은 있지만, 결정화에 따른 격자에너지를 갖고 있지 않기 때문에 결정질 화합물에 대비하여 안정성이 낮다는 단점이 있다.
또한, 결정형 화합물은 특유의 결정 패턴을 가지고 있다. 그 패턴은 단일 결정형이거나 또는 두 가지 혹은 그 이상의 결정다형 (polymorphic form)이 존재할 수도 있다. 또한, 결정다형 화합물들은 서로 함습성 등에서 차이를 나타낼 수 있으며, 용해도, 녹는점 등의 물리적 특성도 서로 다르다. 또한 의약원료가 결정다형 화합물인 경우 결정형이 달라짐으로 인해 제제의 용출 및 붕해에도 영향을 줄 수 있으며, 이로 인해 경구 절대 흡수율에도 영향을 미칠 수 있다.
즉, 결정다형 화합물들은 화학구조식이 동일할지라도 서로 다른 결정 형태를 가지고 있음으로 인하여 화합물의 안정성과 생리적인 활성에서 차이를 보일 수 있다. 특히, 의약용도로 적용되는 결정다형 화합물의 경우는 결정 형태에 따라 의약원료 제조의 용이성, 용해도, 저장 안정성, 완제 제조의 용이성 및 생체 내 약리활성에 많은 영향을 줄 수 있다. 따라서 투여 경로, 용법용량 등에 따라 의약원료로서 요구되는 결정형을 선정하는 것은 매우 중요하다. 일반적인 결정형 약물의 선정 기준은 결정형의 물리화학적 특성에 기인하게 되는데, 예를 들면 열역학적으로 가장 안정한 결정형을 선택하거나, 의약원료 및 완제 제조에 최적화된 결정형을 선택하거나, 약물의 용해도 및 용해 속도를 개선하거나 약동학적 특성의 변화를 줄 수 있는 결정형을 선택할 수 있다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
(특허문헌 1) 대한민국 등록특허 10-1280160호
(특허문헌 2) 대한민국 등록특허 10-1633957호
(특허문헌 3) 대한민국 특허출원 10-2017-0024083호
본 발명자들은 의약 원료로 사용되어 우수한 물성과 안정성을 가지고 있고, 그리고 보관 조건 하에서 경시변화에 의해 결정전이가 발생하지 않도록 열역학적으로 안정화될 수 있는 상기 화학식 1로 표시되는 염산염 화합물의 새로운 결정형 화합물을 제조함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규의 결정형 염산염 화합물을 제공하는데 목적이 있다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2018004604-appb-I000002
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물의 제조방법을 제공하는데 다른 목적이 있다.
또한, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물이 활성성분으로 포함된 약학 조성물을 제공하는데 다른 목적이 있다.
상기 과제를 해결하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 시차주사 열량계 (DSC)로 측정한 최대 흡열온도가 134.25±3 ℃인, 하기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물을 제공한다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2018004604-appb-I000003
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물은 X-선 분말 회절 분석하여 상대강도가 15% 이상인 2θ 회절각 (2θ±0.2°)이 7.15, 10.72, 13.36, 15.99, 16.39, 16.71, 17.14, 19.61, 21.50, 21.82, 23.46, 24.08 및 25.91 일 수 있다.
본 발명은 다른 하나의 양태로서, 하기의 제조단계를 포함하는 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물의 제조방법을 제공한다 :
a) 2-프로필-3-옥소-3-페닐프로피온산 에틸 에스터와 2-히드라지노피리딘을 반응시켜 얻어진 조생성물을 수득하는 단계;
b) 조생성물을 노르말 헥산에 녹인 후에, -20 ~ -10 ℃까지 서서히 냉각시켜 고체를 생성시키는 단계;
c) 생성된 고체를 여과, 세척 및 건조하여 비결정성 유리염기 화합물을 얻는 단계;
d) 비결정성 유리염기 화합물을 아세토니트릴과 증류수가 동량으로 포함된 혼합용매에 가하고 20 ~ 25 ℃에서 격렬하게 교반하여 결정을 생성시키는 단계;
e) 생성된 결정을 여과, 세척 및 건조하여 하기 화학식 2로 표시되는 결정형 유리염기 화합물을 얻는 단계;
f) 결정형 유리염기 화합물을 염산-이소프로필에테르 용액과 반응시켜 염산염 고체를 생성시키는 단계;
g) 염산염 고체를 tert-부틸에테르와 톨루엔이 동량으로 포함된 혼합용매에 가하고 5 ~ 10 ℃에서 격렬하게 교반하여 결정을 생성시키는 단계; 및
h) 생성된 결정을 여과, 세척 및 건조하여 하기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물을 얻는 단계.
[화학식 2]
Figure PCTKR2018004604-appb-I000004
[화학식 1]
Figure PCTKR2018004604-appb-I000005
본 발명은 다른 하나의 양태로서, 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물이 활성성분으로 포함되어 있는, 활성산소종 (ROS)에 의해 매개되는 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 하나의 양태로서, 대상 환자의 활성산소종 (ROS)에 의해 매개되는 질환을 치료, 예방 또는 경감하기 위한 방법으로써, 상기 방법은 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물의 유효량을 이를 필요로 하는 대상에게 투여함을 포함하는 방법을 제공한다.
본 발명의 다른 하나의 양태로서, 활성산소종 (ROS)에 의해 매개되는 질환의 치료, 예방 또는 경감을 위한 약제를 제조하는데 있어서의 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명의 다른 하나의 양태로서, 활성산소종 (ROS)에 의해 매개되는 질환의 치료, 예방 또는 경감에 사용하기 위한 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물을 제공한다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 활성산소종에 의해 매개되는 질환은 골다공증일 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 활성산소종에 의해 매개되는 질환은 당뇨병성 신증, 고혈압성 신증, 사구체 신염, 신우 신염, 간질성 신염, 루프스 신장염, 다낭성 신장질환 및 신부전증으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 신장질환일 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 활성산소종에 의해 매개되는 질환은 당뇨망막병증 (DR), 당뇨황반부종, 가령성 황반변성증 (Age-related Macular Degeneration), 미숙아망막병증 (ROP), 결절맥락막혈관병증 (polypoidal choroidal vasculopathy), 허혈성증식망막증 (ischemic proliferative retinopathy), 망막색소변성증 (Retinitis Pigmentosa), 원추세포 이영양증 (cone dystrophy), 증식성유리체망막증 (PVR), 망막동맥폐색증, 망막정맥폐색증, 익상편 (Pterygium), 망막염, 각막염, 결막염, 포도막염, 레버씨 시신경위축증, 망막박리, 망막색소상피박리, 신생혈관녹내장, 각막 신혈관신생, 망막 신혈관신생, 맥락막 신혈관신생 (CNV) 및 바이러스 감염으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 안질환일 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 약학 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸, 연고, 크림, 좌제, 점안제(Eye drop) 및 주사제로 이루어진 군에서 선택된 제형 형태로 제제화될 수 있다.
본 발명이 제공하는 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물은 문헌에 보고된 바 없는 신규 물질로서, 비결정성 염산염 화합물에 대비하여 열과 수분에 대한 안정성이 현저하게 우수하다.
또한, 본 발명이 제공하는 결정형 염산염 화합물은 염산이 아닌 다른 산을 부가하여 제조된 다양한 결정형 산부가염 화합물에 비교하였을 때도 안정성이 우수하다.
또한, 본 발명이 제공하는 결정형 염산염 화합물은 약물 제조에 유리한 물성을 가지고 있을 뿐만 아니라, 열과 수분에 대한 안정성이 우수하여 제조된 약물은 유통기간을 초과하여 장기간 보관되어서도 활성성분이 분해되지 않거나 결정형이 전이되지 않고 안정하게 보존된다.
따라서 본 발명이 제공하는 결정형 염산염 화합물은 골다공증, 신장질환, 안질환의 예방 또는 치료를 목적하는 약제 제조 시에 활성성분으로 유용하다. 구체적으로, 결정형 염산염 화합물은 경구용 제제, 주사용 제제 또는 점안제로 제형화되는 약물의 의약원료로서 용이하게 사용될 수 있다.
도 1은 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올의 분자모형 사진이다.
도 2는 결정형 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 (결정형 유리염기 화합물)의 X-선 분말 회절 패턴이다.
도 3은 결정형 유리염기 화합물의 DSC 열분석도이다.
도 4는 결정형 유리염기 화합물의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 5는 결정형 유리염기 화합물의 X-선 분말 회절 패턴이다.
도 6은 결정형 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 염산염 (결정형 염산염 화합물)의 DSC 열분석도이다.
도 7은 결정형 염산염 화합물의 1H NMR 스펙트럼이다.
도 8은 결정형 염산염 화합물과 다른 결정형 산부가염 화합물의 X-선 분말 회절 패턴이다.
본 발명은 신규의 결정형 염산염 화합물, 이 화합물의 제조방법, 그리고 이 화합물이 활성성분으로 포함된 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명이 특징으로 하는 결정형 염산염 화합물은 문헌에 보고된 바 없는 신규 물질로서, 약물 제조에 유리한 물성을 가지고 있고, 열과 수분에 대하여 안정하고, 유동 보관 중에 활성성분이 분해되거나 결정형 전이가 발생하지 않는 되는 안정성이 충분히 확보된 화합물이다.
본 발명이 제공하는 결정형 염산염 화합물은 하기 화학식 1로 표시되 바와 같이 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 모핵에 염산이 부가된 산부가염 화합물이다.
[화학식 1]
Figure PCTKR2018004604-appb-I000006
그러나 산부가염을 형성하게 되는 모핵의 피리딘 그룹이 상대적으로 약한 염기인데다가, 피라졸 C5 위치의 하이드록시 그룹 (-OH)이 피리딘의 질소원자 (N)와 수소결합을 형성할 수 있기 때문에 일반적인 경우보다 피리딘의 염기도가 더 약해질 수 있다. 이는 도 1의 분자모형을 통해 확인할 수 있다. 도 1은 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 유리염기가 분자역학적으로 에너지를 최소화할 수 있는 가장 안정된 형태를 갖고 있는 분자모형 사진으로, 피라졸 C5 위치의 하이드록시 그룹이 피리딘의 질소원자와 수소결합을 이루고 있는 것을 확인할 수 있다.
본 발명자들의 실험결과에 의하면, 종래 제조방법으로 제조된 비결정성 염산염 화합물은 보관 중에 염화수소 (HCl)가 지속적으로 탈리되고, 그 결과 분해산물로서 하기 화학식 3으로 표시되는 화합물이 생성되는 것을 확인할 수 있었다.
[화학식 3]
Figure PCTKR2018004604-appb-I000007
3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 유리염기의 경우 약제학적 허용 가능한 염화합물에 대비하여 융점이 보다 낮기 때문에 상기 화학식 3으로 표시되는 분해산물의 발생 가능성은 더 높다. 또한, 수분이나 열에 노출되는 시간이 길어질수록 상기 화학식 3으로 분해산물을 비롯하여 여러 유연물질이 생성될 수 있다.
결정형 염산염 화합물이 약물로 적용되기 위한 요건으로는, 첫째, 약학적으로 허용 가능한 염의 합성과정이나 의약원료로서 제제화하는 과정에 적용될 수 있도록 물리적으로 안정해야 하고, 둘째, 보관 유통 중에 경시변화에 의해 다른 결정 형태로 쉽게 전이되지 않아야 하고, 셋째, 보관 유통 중에 화학식 3으로 표시되는 피리딘의 N-O- 화합물을 비롯한 유연물질의 생성을 최소화할 수 있어야 한다.
이에, 본 발명자들은 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 유리염기를 보다 역학적으로 안정화시킬 수 있는 산부가염 화합물을 선정하기 위하여 연구하였다. 즉, 결정형 염산염 화합물과, 그리고 염산 (HCl)보다 산도가 더 높고 휘발성이 없는 약제학적으로 허용되는 산이 부가된 다양한 결정형 염화합물을 제조하고, 제조된 산부가염 화합물들에 대하여 안정성을 비교 실험하였다. 통상적으로 염산이 부가된 결정형 염산염 화합물에 대비하여, 피리딘과 염산의 pKa 값 보다 큰 pKa 값을 가지면서 비휘발성인 산이 부가된 산부가염 화합물이 모핵으로부터 산의 탈리를 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 예측될 수 있다. 그러나, 본 발명자들의 비교 실험에 의하면 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올을 모핵으로 하는 다양한 결정형 산부가염 화합물들 중에서도 결정형 염산염 화합물이 약물 보관조건 하에서 가장 안정하다는 예기치 않은 결과를 얻게 되었다. [하기의 실험예 2 참고]
따라서, 본 발명이 제공하는 결정형 염산염 화합물은 염산이 부가된 염화합물로서, 여러 결정형 산부가염 화합물 중에서도 가장 안정적이므로 약물의 활성성분으로 사용되어서는 유통기간 내에 장기간 보관되어서도 활성성분이 분해되지 않고 안정되게 보존될 수 있다.
또한, 본 발명은 결정형 염산염 화합물의 제조방법을 제공한다. 본 발명에 따른 결정형 염산염 화합물의 제조방법은 구체적으로,
a) 2-프로필-3-옥소-3-페닐프로피온산 에틸 에스터와 2-히드라지노피리딘을 반응시켜 얻어진 조생성물을 수득하는 단계;
b) 조생성물을 노르말 헥산에 녹인 후에, -20 ~ -10 ℃까지 서서히 냉각시켜 고체를 생성시키는 단계;
c) 생성된 고체를 여과, 세척 및 건조하여 비결정성 유리염기 화합물을 얻는 단계;
d) 비결정성 유리염기 화합물을 아세토니트릴과 증류수가 동량으로 포함된 혼합용매에 가하고 20 ~ 25 ℃에서 격렬하게 교반하여 결정을 생성시키는 단계;
e) 생성된 결정을 여과, 세척 및 건조하여 하기 화학식 2로 표시되는 결정형 유리염기 화합물을 얻는 단계;
f) 결정형 유리염기 화합물을 염산-이소프로필에테르 용액과 반응시켜 염산염 고체를 생성시키는 단계;
g) 염산염 고체를 tert-부틸에테르와 톨루엔이 동량으로 포함된 혼합용매에 가하고 5 ~ 10 ℃에서 격렬하게 교반하여 결정을 생성시키는 단계; 및
h) 생성된 결정을 여과, 세척 및 건조하여 하기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물을 얻는 단계; 를 포함한다
[화학식 2]
Figure PCTKR2018004604-appb-I000008
[화학식 1]
Figure PCTKR2018004604-appb-I000009
본 발명에 따른 결정형 염산염 화합물의 제조방법을 각 단계별로 보다 구체적으로 설명하면 하기와 같다.
상기 a)단계는 대한민국 등록특허 10-1633957호 (특허문헌 2)에 개시된 제조방법에 의거하여 수행하여 조생성물 (crude product)을 제조한다.
상기 b)단계는 조생성물을 고체화하는 과정으로서, 노르말 헥산에 조생성물을 용해시킨 후에 냉각하여 고체를 생성시킨다. 상기 조생성물을 용해하는 과정에서는 완전한 용해를 위하여 약간의 가열이 필요할 수 있는데, 가열은 50 ~ 60 ℃ 온도 범위에서 적절히 수행할 수 있다. 상기 냉각은 -20 ~ -10 ℃ 범위가 적당하며, 냉각온도가 너무 높으면 고체의 생성속도가 느리고 수율이 적을 수 있고, 냉각온도가 너무 낮으면 이후에 진행되는 결정화 과정에서 결정이 생성되지 않을 수 있다.
상기 c)단계는 생성된 고체를 여과, 세척 및 건조하여 비결정성 유리염기 화합물을 얻는다. 상기 세척은 0 ~ 10 ℃로 냉각된 노르말 헥산을 용매로 사용하여 수행할 수 있다. 상기 건조는 상온에서 진행하거나, 30 ~ 40 ℃에서 진공 건조할 수 있다.
상기 d)단계는 비결정성 유리염기 화합물을 결정화하는 과정이다. 구체적으로, 비결정성 유리염기 화합물을 아세토니트릴과 증류수가 1: 1 중량비로 포함된 혼합용매에 가하고 20 ~ 25 ℃에서 격렬하게 교반하여 결정을 생성시킨다. 상기 아세토니트릴과 증류수의 중량비는 1:0.5~2의 중량비일 수 있다.
상기 e)단계는 생성된 결정을 여과하고 용매로 세척하고 건조하여 결정형 유리염기 화합물을 얻는 과정이다. 상기 세척용매는 아세토니트릴과 증류수가 1: 1 중량비로 포함된 혼합용매를 사용하며, 상기 용매는 0 ~ 10 ℃로 냉각하여 사용하는 것이 좋다. 상기 건조는 통상의 건조방법, 예를 들어 동결건조, 회전증발건조, 분무건조, 진공건조 또는 유동층 건조에 의해 수행될 수 있으며, 구체적으로 진공건조에 의해 수행될 수 있다. 좋기로는 30 ~ 40 ℃에서 진공 건조할 수 있다.
상기 f)단계는 결정형 유리염기 화합물을 염산과 반응시켜 염산부가염의 고체를 생성시키는 과정이다. 상기 염산염 생성반응은 이소프로필에테르 용매에서 수행한다. 상기 염산은 이소프로필에테르에 희석시켜 0.5 ~ 2 M 농도의 용액으로 제조하여 사용할 수 있다. 반응온도는 -10 ~ 10 ℃가 적합하며, 보다 좋기로는 0 ~ 5 ℃를 유지할 수 있다.
상기 g)단계는 염산염 고체를 결정화하는 과정이다. 구체적으로, 비결정성 염산염 화합물을 tert-부틸에테르와 톨루엔이 1: 1 중량비로 포함된 혼합용매에 가하고 5 ~ 10 ℃에서 격렬하게 교반하여 결정을 생성시킨다.
상기 h)단계는 생성된 결정을 여과, 세척 및 건조하여 결정형 염산염 화합물을 얻는 과정이다. 상기 세척용매는 tert-부틸에테르와 톨루엔이 1: 1 중량비로 포함된 혼합용매를 사용하며, 상기 용매는 0 ~ 10 ℃로 냉각하여 사용하는 것이 좋다. 상기 건조는 통상의 건조방법, 예를 들어 동결건조, 회전증발건조, 분무건조, 진공건조 또는 유동층 건조에 의해 수행될 수 있으며, 구체적으로 진공건조에 의해 수행될 수 있다. 좋기로는 30 ~ 40 ℃에서 진공 건조할 수 있다.
또한, 본 발명은 결정형 염산염 화합물이 활성성분으로 포함된 약학 조성물을 제공한다.
특허문헌 1 내지 3에 의하면, 비결정성 염산염 화합물은 활성산소종 (Reactive oxygen species, ROS)에 의해 매개되는 질환으로서 구체적으로는 골다공증, 신장질환, 안질환의 치료용 약학 조성물의 활성성분으로서 유효하다. 따라서 본 발명이 제공하는 결정형 염산염 화합물 역시 활성산소종 (ROS)의 생성을 억제하는 활성을 가지고 있으므로, 이러한 약리기전을 토대로 하면 결정형 염산염 화합물이 활성성분으로 포함된 약학 조성물은 골다공증, 신장질환, 안질환의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.
상기 신장질환은 질환은 당뇨병성 신증, 고혈압성 신증, 사구체 신염, 신우 신염, 간질성 신염, 루프스 신장염, 다낭성 신장질환 및 신부전증으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
상기 안질환은 당뇨망막병증 (DR), 당뇨황반부종, 가령성 황반변성증 (Age-related Macular Degeneration), 미숙아망막병증 (ROP), 결절맥락막혈관병증 (polypoidal choroidal vasculopathy), 허혈성증식망막증 (ischemic proliferative retinopathy), 망막색소변성증 (Retinitis Pigmentosa), 원추세포 이영양증 (cone dystrophy), 증식성유리체망막증 (PVR), 망막동맥폐색증, 망막정맥폐색증, 익상편 (Pterygium), 망막염, 각막염, 결막염, 포도막염, 레버씨 시신경위축증, 망막박리, 망막색소상피박리, 신생혈관녹내장, 각막 신혈관신생, 망막 신혈관신생, 맥락막 신혈관신생 (CNV) 및 바이러스 감염으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 활성성분으로서 결정형 염산염 화합물을 포함한다. 상기 활성성분의 함량은 환자의 나이, 몸무게 등을 고려하여 산정될 수 있는데, 일반적으로 약학 조성물 총 충량을 기준으로 0.01 내지 10 중량% 범위로 함유될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 유효성분의 효과를 헤치지 않는 범위 내에서 담체, 희석제, 결합제, 붕해제, 윤활제, pH 조절제, 산화방지제, 용해보조제 등의 약학적으로 허용 가능한 첨가제를 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물을 제형화하는데 사용될 수 있는 약학적으로 허용 가능한 첨가제의 예로는 미정질 셀룰로즈, 자일리톨, 에리스리톨, 메틸 셀룰오스, 폴리비닐피롤리돈, 전분, 아카시아, 알지네이트, 젤라틴, 락토즈, 덱스트로오스, 수크오스, 프로필히드록시벤, 조에이트, 셀룰로오스, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트 탈크, 솔비톨, 만니톨, 말티톨, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 또는 광물유 등이 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 약학 조성물은 통상의 제제화 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸, 연고, 크림, 좌제, 점안제(Eye drop) 및 주사제로 이루어진 군에서 선택된 제형 형태로 제형화될 수 있다. 본 발명은 상기 제형 형태에 특별한 제한을 두지 않는다.
또한, 본 발명에 따른 점안제 또는 주사제 조성물을 제조할 때에는 주사용수를 사용하여 제조할 수 있다. 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 점안제나 주사제는 당업계에서 통상적으로 사용되는 등장화제, 완충액, 삼투화제 등을 제한되지 않고 선택적으로 포함할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
[실시예]
실시예 1. 결정형 유리염기 화합물의 제조
둥근 플라스크에 2-프로필-3-옥소-3-페닐프로피온산 에틸 에스터 (5.6 g, 51.4 mmol), 2-히드라지노피리딘 (11.5 g, 49 mmol)를 넣고 반응 용매 없이 질소 대기 하에서 24시간 동안 150 ℃에서 교반하였다. 반응액을 실온으로 냉각시킨 후에 잔사를 실리카 젤 컬럼 크로마토그래피 (30 g; n-Hexane/EtOAc = 5/1)를 통과시켜 정제하고 감압 농축하였다. 생성된 고체 화합물에 노르말 헥산 (70 mL)을 가하고 서서히 승온시켜 용해시킨 후, -20 ℃까지 1시간에 걸쳐 서서히 냉각시켰다. 생성된 고체를 감압 여과하고, 0 ~ 10 ℃로 냉각된 노르말 헥산으로 고체를 세척하였다. 세척된 고체를 아세토니트릴 : 증류수 = 1 : 1의 혼합용매 (100 mL)에 가한 후 25 ℃에서 격렬하게 1시간 동안 교반하여 결정을 생성시켰다. 생성된 결정을 여과하고 10 ℃ 이하로 냉각시킨 아세토니트릴 : 증류수 = 1 : 1의 혼합용매로 씻어주고, 40 ℃에서 12시간 진공 건조하여 결정형 유리염기 화합물을 얻었다.
상기 실시예 1에서 제조된 결정형 유리염기 화합물에 대한 X-선 분말 회절 (PXRD) 분석도, DSC 열분석도 및 1H NMR 스펙트럼은 각각 도 2 내지 도 4에 첨부하였다.
실시예 2. 결정형 염산염 화합물의 제조
둥근 플라스크에 결정형 유리염기 화합물 (12.9 g, 46.2 mmol)을 넣고 질소 대기 하에서 이소프로필에테르 (300 mL)에 녹인 후 1M 농도의 염산-이소프로필에테르 용액을 0 ~ 5℃에서 10분 동안 가하였다. 반응물을 0 ~ 5℃에서 1시간 동안 교반하여 고체 화합물을 생성시켰다. 생성된 고체 화합물을 질소 대기 하에서 감압 여과하고, 10 ℃ 이하로 냉각시킨 이소프로필에테르 (30 mL)로 세척하였다. 세척된 고체 화합물을 tert-부틸에테르 : 톨루엔 = 1 : 1 (50 mL)에 가한 후 질소 대기 하에서 5 ~ 10 ℃에서 격렬하게 1시간 동안 교반하여 결정을 생성시켰다. 생성된 결정을 여과하고 10 ℃ 이하로 냉각시킨 tert-부틸에테르 : 톨루엔 = 1 : 1의 혼합용매로 씻어주고, 40 ℃에서 12시간 건조하여 흰색의 결정형 염산염 화합물을 얻었다.
상기 실시예 2에서 제조된 결정형 염산염 화합물에 대한 X-선 분말 회절 분석도, DSC 열분석도 및 1H NMR 스펙트럼은 각각 도 5 내지 도 7에 첨부하였다.
비교예 1. 비결정성 유리염기 화합물의 제조
둥근 플라스크에 2-프로필-3-옥소-3-페닐프로피온산 에틸 에스터 (5.6 g, 51.4 mmol), 2-히드라지노피리딘 (11.5 g, 49 mmol)를 넣고 반응 용매 없이 질소 대기 하에서 3일 동안 150 ℃에서 교반하였다. 반응액을 실온으로 냉각시킨 후에 감압 농축하고, 헥산과 에틸아세테이트로 세척하고 진공 건조시켜 비결정성 유리염기 화합물을 얻었다.
비교예 2. 비결정성 염산염 화합물의 제조
둥근 플라스크에 상기 비교예 1에서 제조한 비결정성 유리염기 화합물(12.9 g, 46.2 mmol)을 넣고 디에틸에테르 (300 mL)에 녹인 후 2M 농도의 염산-디에틸에테르 용액을 0 ~ 5℃에서 10분 동안 가하였다. 생성된 고체 화합물을 감압 여과하고, 헥산과 에틸아세테이트로 세척하고 진공 건조시켜 비결정성 염산염 화합물을 얻었다.
비교예 3. 다양한 결정형 산부가염 화합물의 제조
결정형 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 (결정형 유리염기)에 다양한 산을 부가하여 산부가염을 제조하였다. 결정화 방법으로는 문헌에 공지된 다양한 방법 예를 들면 반응성 결정화법 (Reaction crystallization), 냉각 결정화법 (Cooling crystallization), 드로우닝-아웃 결정화법 (Drowning-out crystallization), 증발 결정화법 (Evaporation crystallization)을 이용하였다. 20여 종의 산을 이용하여 결정성 산부가염 화합물을 제조하였으며, 그 중 하기 표 1에는 증발 결정화법 (Evaporation crystallization)을 이용하여 제조된 결정형 산부가염 화합물을 나타내었다.
구체적으로, 둥근 플라스크에 결정형 유리염기 화합물 (12.9 g, 46.2 mmol)를 넣고 하기 표 1에 나타낸 산을 첨가하였다. 각각의 반응물에 무수 메탄올 20 mL를 가하고 50~60 ℃ 정도로 가열하여 완전히 녹였다. 플라스크 마개를 열고 공기가 통할 수 있도록 Kimwipes™ 티슈 페이퍼를 입구에 덮은 후에 고무 밴드로 감은 다음, 흄후드 (Fume hood) 내에서 36시간 동안 보관하였다. 이 때 흄후드의 내부 온도는 23 ~ 26 ℃ 사이를 유지하였다. 생성된 고체를 여과하고, 10 ℃ 이하로 냉각된 노르말 헥산 (5 mL)으로 씻어준 후에 진공 건조하여 각각의 결정형 산부가염을 얻었다.
구 분 산의 종류 유리염기 : 산의 몰비
샘플 1 푸마르산 1 : 1
샘플 2 1,5-나프탈렌 디술폰산 1 : 0.5 (Hemi-salt)
샘플 3 숙신산 1 : 1
샘플 4 L-타르타르산 1 : 1
샘플 5 L-말릭산 1 : 1
상기 실시예 2에서 제조한 결정형 염산염 화합물과 상기 비교예 3에서 제조한 다양한 결정형 산부가염 화합물에 대하여 X-선 분말 회절 분석한 결과는 도 8에 나타내었다.
[실험예]
실험예 1. 흡습성 시험
결정형 유리염기 화합물 (실시예 1), 결정형 염산염 화합물 (실시예 2), 비결정성 유리염기 화합물 (비교예 1), 비결정성 염산염 화합물 (비교예 2) 및 다양한 결정형 산부가염 화합물 (비교예 3) 각각에 대하여 흡습성 비교실험을 실시하였다.
시험화합물은 온도 40 ℃ 및 상대습도 75%의 가속 보관조건 하에서 페트리 디쉬 (Petri dish)에 넣고 밀봉하지 않은 채 7일간 노출시켰다. 각 시험화합물의 함수율은 칼 피셔 (Karl-Fischer) 수분 측정기로 측정하였다. 하기 표 2에는 보관기간 중에 측정한 각 시험화합물의 함수율 (%)을 정리하여 나타내었다.
구 분 함수율 (%)
초기 1일 3일 7일
유리염기화합물 결정형 (실시예1) 0.26 0.29 0.32 0.34
비결정성 (비교예1) 0.33 1.30 2.27 2.95
염산염화합물 결정형 (실시예2) 0.25 0.31 0.37 0.39
비결정성 (비교예2) 0.31 1.98 3.54 7.52
결정형산부가염(비교예3) 푸마르산염 0.28 0.34 0.38 0.40
헤미1,5-나프탈렌 디술폰산염 0.12 0.12 0.13 0.15
숙신산염 0.37 0.42 0.44 0.48
L-타르타르산염 0.33 0.34 0.34 0.38
L-말릭산염 0.45 1.58 1.75 2.80
상기 표 2의 결과에 의하면, 유리염기 화합물과 염산염 화합물의 경우 결정형을 가지는 화합물이 비결정성 화합물에 대비하여 초기 함수율이 적을 뿐만 아니라 가속 보관조건에서 7일 후에는 함수율에서 현저한 차이를 나타내고 있음을 확인할 수 있다. 따라서 결정형 유리염기 화합물 또는 결정형 염산염 화합물은 흡습성이 매우 적을 뿐더러 시간 경과에 따라 함수율이 늘어나지 않고 포화 (saturation)되는 특성을 지니기 때문에 의약원료로서 약제학적으로 사용하기에 유용하다.또한, 염산 이외에 다른 산이 부가된 결정형 산부가염 화합물들 (비교예 3)과 대비하였을 때, 결정형 염산염 화합물은 결정형 1,5-나프탈렌디술폰산염, 결정형 말릭산염을 제외하고 나머지 결정형 산부가염에 대비하여 흡습성이 우수하다는 것을 알 수 있다.
실험예 2. 안정성 비교 시험
결정형 유리염기 화합물 (실시예 1), 결정형 염산염 화합물 (실시예 2), 비결정성 유리염기 화합물 (비교예 1), 비결정성 염산염 화합물 (비교예 2) 및 다양한 결정형 산부가염 화합물 (비교예 3) 각각에 대하여 안정성 비교실험을 실시하였다.
시험화합물은 온도 25 ℃ 및 상대습도 60%의 장기 보존조건 하에서 안정성 챔버에 넣고 6개월 동안 보관하였다. 보관은 각 시험화합물을 이중 폴리에틸렌 백 (bag)에 넣어 두었고, 상기 폴리에틸렌 백의 사이에 실리카 젤 파우치를 충진한 후, 소형 종이상자 (Fiber drum)에 넣었다.
하기 표 3에는 6개월 동안 장기 보존조건으로 보관한 후에 측정한 상기 화학식 3의 분해산물의 농도와 전체 유연물질의 농도를 HPLC 분석을 통해 측정한 결과를 정리하여 나타내었다.
[액체크로마토그래피 (HPLC)의 분석 조건]
컬럼: 4.6mm X 250mm, 5um, 100Å pore size
컬럼온도: 35℃
검출기: UV Detector (246 nm)
유속: 1.0 mL/min
시간: 55 분
이동상의 구배 조건 :
Figure PCTKR2018004604-appb-I000010
화학식 1의 염 형태 화학식 3의 분해산물 농도 (%) 전체 유연물질의 농도 (%)
초기 6개월 초기 6개월
유리염기화합물 결정형 (실시예1) 0.05 0.09 0.32 0.47
비결정성 (비교예1) 0.06 0.65 0.26 7.58
염산염 화합물 결정형 (실시예2) 0.03 0.08 0.28 0.45
비결정성 (비교예2) 0.05 0.92 0.35 5.87
결정형산부가염(비교예3) 푸마르산염 0.07 0.27 0.45 1.35
헤미1,5-나프탈렌 디술폰산염 0.08 0.35 0.52 1.24
숙신산염 0.09 0.38 0.48 1.65
L-타르타르산염 0.10 0.54 0.40 1.85
L-말릭산염 0.12 0.78 0.58 3.27
상기 표 3의 결과에 의하면, 유리염기 화합물을 비교할 경우 결정형 유리염기 화합물 (실시예 1)에 대비하여 비결정성 유리염기 화합물 (비교예 1)은 화학식 3으로 표시되는 분해산물의 농도가 현저하게 높다는 것을 확인할 수 있다. 초기 대비하여 6개월 후에 측정된 전체 유연물질의 농도의 경우, 결정형 유리염기 화합물 (실시예 1)에 대비하여 비결정성 유리염기 화합물 (비교예 1)은 확연하게 증가함을 확인할 수 있다. 또한, 염산염 화합물에 있어 비결정성 염산염 화합물 (비교예 2)은 염산 (HCl)의 탈리현상이 발생하였음을 알 수 있다. 그 결과로 비결정성 염산염 화합물 (비교예 2)은 결정형 염산염 화합물 (실시예 2)에 대비하여 화학식 3으로 표시되는 분해산물의 농도가 현저하게 높다는 것을 알 수 있다. 또한, 유연물질의 농도를 대비하더라도 비결정성 염산염 화합물 (비교예 2)은 열역학적 안정성이 낮기 때문에 결정형 염산염 화합물 (실시예 2)에 대비하여 유연물질의 농도가 상대적으로 높다는 것을 알 수 있다.
또한, 염산 이외에 다른 산이 부가된 결정형 산부가염 화합물과 대비하였을 때, 결정형 염산염 화합물 (실시예 2)은 결정형 산부가염 화합물 (비교예 3)과 대비하여 화학식 3으로 표시되는 분해산물의 농도 및 유연물질의 농도가 현저하게 낮음을 확인할 수 있다. 따라서, 결정형 염산염 화합물은 다양한 결정형 산부가염 화합물들 중에서도 가장 안정성이 우수하다.
실험예 3. 결정전이 (Polymorphic transition) 여부 평가
결정형 유리염기 화합물 (실시예 1)과 결정형 염산염 화합물 (실시예 2)에 대하여 보관조건에서 결정전이 현상이 발생하는지를 확인하기 위하여, 초기 상태의 PXRD 분석 결과와 경시 변화에 따른 결정전이 가능성을 알아보았다.
구체적으로, 시험화합물은 폴리에틸렌 백 (bag)에 넣어 온도 40 ℃ 및 상대습도 75%의 조건 하에서 안정성 챔버에 넣고 4주 동안 보관하였다. 그리고, 초기 상태와 4주 후에 각각 측정한 PXRD 및 DSC 분석 결과를 비교하였다. 그 결과는 하기 표 4에 정리하여 나타내었다.
구 분 결정형 유리염기 결정형 염산염
초기 4주 초기 4주
DSC 흡열 온도 73.54 ℃ 72.8 ℃ 134.25 ℃ 133.4 ℃
PXRD 분석결과 동일 결정형 동일 결정형
비교판단결과 결정전이 없음 결정전이 없음
결정형 유리염기 화합물 (실시예 1)과 결정형 염산염 화합물 (실시예 2)은 보관 후 4주가 지난 시점에 PXRD와 DSC를 확인해 본 결과, 경시 변화에 따른 결정전이가 발생되지 않았음을 알 수 있다. 따라서 결정형 유리염기 화합물 (실시예 1)과 결정형 염산염 화합물 (실시예 2)은 안정한 화합물임을 알 수 있다.
실험예 4. 물성 분석
(1) 분말 X-선 회절 (PXRD) 분석
상기 실시예 1과 2에서 제조된 결정형 유리염기 화합물과 결정형 염산염 화합물에 대한 X-선 분말 회절 분석은 브루커 (Bruker)사의 D8 Advance X-선 분말 회절계 상에서 Cu Kα선을 사용하였다. 회절계에는 관동력이 장치되어 있고, 전류량은 45 kV 및 40 mA로 설정하였다. 발산 및 산란 슬릿은 1°로 설정하였고, 수광 슬릿은 0.2 mm 로 설정하였다. 2θ는 5 에서 35°까지 6°/minute로 측정하였다. PXRD 분석결과는 도 2와 도 5에 나타내었다.
또한, 하기 표 5는 X-선 분말 회절 분석 결과로서 결정형 유리염기 화합물의 경우는 상대강도가 5% 이상인 2θ 회절각 (2θ±0.2°)을 정리하여 나타내었고, 결정형 염산염 화합물의 경우는 상대강도가 15% 이상인 2θ 회절각 (2θ±0.2°)을 정리하여 나타내었다.
결정형 유리염기 결정형 염산염
회절각(2θ, °) d-격자간격 (Å) 상대세기(%) 회절각(2θ, °) d-격자간격 (Å) 상대세기(%)
6.30 14.0278 100.0 7.15 12.3515 70.3
10.06 8.7902 5.5 10.72 8.2494 100.0
14.81 5.9750 7.0 13.36 6.6219 24.0
18.95 4.6795 12.6 15.99 5.5390 16.7
25.37 3.5080 8.0 16.39 5.4052 37.4
16.71 5.3023 18.7
17.14 5.1686 27.9
19.61 4.5226 44.4
21.50 4.1297 59.6
21.82 4.0708 17.4
23.46 3.7893 20.3
24.08 3.6927 56.5
25.14 3.5396 15.0
25.91 3.4356 21.6
27.36 3.2574 15.4
(2) 온도 시차주사 열량법 (DSC) 분석상기 실시예 1과 2에서 제조된 결정형 유리염기 화합물과 결정형 염산염 화합물의 녹는점은 온도 시차주사 열량법 (DSC) 분석을 통해 측정하였다.
SCINCO사로부터 입수한 DSC N-650을 사용하였으며, 질소기류 하에 20℃에서 150℃까지 10℃/min의 스캔속도로, 밀폐 팬에서 DSC 측정을 수행하였다. 그 결과는 도 3 및 도 6에 각각 나타내었다.
도 3 및 도 6에 의하면, 결정형 유리염기 화합물은 73.54±3 ℃에서 특징적인 흡열피크를 보이며, 결정형 염산염 화합물은 134.25±3 ℃에서 특징적인 흡열피크를 보였다.
또한, 비교예 1에서 제조된 비결정성 유리염기 화합물은 녹는점이 일정하지 않으며 60 ℃ 이상에서 완전히 용융되는 것을 확인하였다. 비교예 2에서 제조된 비결정성 염산염 화합물 역시 녹는점이 일정하지 않으며 넓은 온도 영역에서 서서히 용융되는 특성을 갖고, 160 ℃ 이상에서 완전히 용융되었다. 이러한 점을 감안할 때. 본원발명이 제공하는 결정형 화합물은 비결정성 화합물과 대비하여 물리화학적 특성이 전혀 다른 별개 화합물임을 알 수 있다.
이상의 실험결과에 의하면, 상기 화학식 1로 표시되는 결정형 유리염기 화합물과 상기 화학식 2로 표시되는 결정형 염산염 화합물은 흡습성이 없고, 안정성이 우수하며, 경시 변화에 따른 결정전이 가능성이 낮아 다른 결정형 산부가염 및 종래의 물질 대비 의약원료로서 최적화된 것임을 확인할 수 있었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다.
따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (8)

  1. 시차주사 열량계 (DSC)로 측정한 최대 흡열온도가 134.25±3 ℃인, 하기 화학식 1로 표시되는 결정형 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 염산염.
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2018004604-appb-I000011
  2. 제 1 항에 있어서,
    X-선 분말 회절 분석하여 상대강도가 15% 이상인 2θ 회절각 (2θ±0.2°)이 7.15, 10.72, 13.36, 15.99, 16.39, 16.71, 17.14, 19.61, 21.50, 21.82, 23.46, 24.08, 25.91 및 27.36 인 것을 특징으로 하는 결정형 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 염산염.
  3. a) 2-프로필-3-옥소-3-페닐프로피온산 에틸 에스터와 2-히드라지노피리딘을 반응시켜 얻어진 조생성물을 수득하는 단계;
    b) 조생성물을 노르말 헥산에 녹인 후에, -20 ~ -10 ℃까지 서서히 냉각시켜 고체를 생성시키는 단계;
    c) 생성된 고체를 여과, 세척 및 건조하여 비결정성 유리염기 화합물을 얻는 단계;
    d) 비결정성 유리염기 화합물을 아세토니트릴과 증류수가 동량으로 포함된 혼합용매에 가하고 20 ~ 25 ℃에서 격렬하게 교반하여 결정을 생성시키는 단계;
    e) 생성된 결정을 여과, 세척 및 건조하여 하기 화학식 2로 표시되는 결정형 유리염기 화합물을 얻는 단계;
    f) 결정형 유리염기 화합물을 염산-이소프로필에테르 용액과 반응시켜 염산염 고체를 생성시키는 단계;
    g) 염산염 고체를 tert-부틸에테르와 톨루엔이 동량으로 포함된 혼합용매에 가하고 5 ~ 10 ℃에서 격렬하게 교반하여 결정을 생성시키는 단계; 및
    h) 생성된 결정을 여과, 세척 및 건조하여 하기 화학식 1로 표시되는 결정형 염산염 화합물을 얻는 단계;
    를 포함하는 결정형 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 염산염의 제조방법.
    [화학식 2]
    Figure PCTKR2018004604-appb-I000012
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2018004604-appb-I000013
  4. 제 1 항 또는 제 2 항의 결정형 3-페닐-4-프로필-1-(피리딘-2-일)-1H-피라졸-5-올 염산염이 활성성분으로 포함되어 있는, 활성산소종 (ROS)에 의해 매개되는 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  5. 제 4 항에 있어서,
    상기 활성산소종에 의해 매개되는 질환은 골다공증인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  6. 제 4 항에 있어서,
    상기 활성산소종에 의해 매개되는 질환은 당뇨병성 신증, 고혈압성 신증, 사구체 신염, 신우 신염, 간질성 신염, 루프스 신장염, 다낭성 신장질환 및 신부전증으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 신장질환인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  7. 제 4 항에 있어서,
    상기 활성산소종에 의해 매개되는 질환은 당뇨망막병증 (DR), 당뇨황반부종, 가령성 황반변성증 (Age-related Macular Degeneration), 미숙아망막병증 (ROP), 결절맥락막혈관병증 (polypoidal choroidal vasculopathy), 허혈성증식망막증 (ischemic proliferative retinopathy), 망막색소변성증 (Retinitis Pigmentosa), 원추세포 이영양증 (cone dystrophy), 증식성유리체망막증 (PVR), 망막동맥폐색증, 망막정맥폐색증, 익상편 (Pterygium), 망막염, 각막염, 결막염, 포도막염, 레버씨 시신경위축증, 망막박리, 망막색소상피박리, 신생혈관녹내장, 각막 신혈관신생, 망막 신혈관신생, 맥락막 신혈관신생 (CNV) 및 바이러스 감염으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 안질환인 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  8. 제 4 항에 있어서,
    상기 약학 조성물은 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸, 연고, 크림, 좌제, 점안제(Eye drop) 및 주사제로 이루어진 군에서 선택된 제형 형태로 제제화된 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
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