WO2016186177A1 - Ｗｔ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の併用 - Google Patents

Ｗｔ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の併用 Download PDF

Info

Publication number
WO2016186177A1
WO2016186177A1 PCT/JP2016/064923 JP2016064923W WO2016186177A1 WO 2016186177 A1 WO2016186177 A1 WO 2016186177A1 JP 2016064923 W JP2016064923 W JP 2016064923W WO 2016186177 A1 WO2016186177 A1 WO 2016186177A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
peptide
seq
cancer
antibody
pharmaceutical composition
Prior art date
Application number
PCT/JP2016/064923
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
秀夫 高須
恵弥 中村
後藤　正志
奈津子 杉辺
Original Assignee
大日本住友製薬株式会社
株式会社癌免疫研究所
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 大日本住友製薬株式会社, 株式会社癌免疫研究所 filed Critical 大日本住友製薬株式会社
Priority to CA2986367A priority Critical patent/CA2986367A1/en
Priority to JP2017519401A priority patent/JP6515182B2/ja
Priority to EP16796570.6A priority patent/EP3299028A4/en
Priority to US15/575,162 priority patent/US20180140691A1/en
Priority to CN201680042322.XA priority patent/CN107921106B/zh
Publication of WO2016186177A1 publication Critical patent/WO2016186177A1/ja
Priority to HK18107308.2A priority patent/HK1250213A1/zh
Priority to HK18108240.1A priority patent/HK1248546A1/zh

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0011—Cancer antigens
    • A61K39/001152—Transcription factors, e.g. SOX or c-MYC
    • A61K39/001153—Wilms tumor 1 [WT1]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/82—Translation products from oncogenes

Definitions

  • the present invention relates to the combined use of a WT1 antigen peptide and an immunomodulator.
  • CTLs cytotoxic T cells
  • MHC Major Histocompatibility Complex
  • MHC is called human leukocyte antigen (HLA) in humans, and HLA-A, B and Cw are known.
  • a tumor antigen peptide is produced by synthesizing a protein that is highly expressed in a tumor, that is, a tumor antigen protein, in a cell and then degrading in a cell by a protease.
  • the produced tumor antigen peptide binds to the MHC class I antigen in the endoplasmic reticulum to form a complex, and is carried to the cell surface to present the antigen.
  • the tumor-reactive CTL recognizes this antigen-presented tumor antigen peptide (killer peptide) and exhibits an antitumor effect through cytotoxicity and production of lymphokines.
  • WT1 is a gene identified as a responsible gene for Wilms tumor, which is renal cancer of children, and is a transcription factor having a zinc finger structure (see Non-Patent Document 1). Initially, the WT1 gene was considered to be a tumor suppressor gene, but subsequent studies have shown that it acts rather as an oncogene in hematopoietic tumors and solid tumors.
  • WT1 is highly expressed in many malignant tumors (see Non-Patent Document 2).
  • WT1 is considered to be a new cancer antigen protein in leukemia and solid cancer (see Non-Patent Document 3). Therefore, cancer vaccine therapy and dendritic cell therapy using WT1 protein or WT1 protein-derived peptide, TCR-like antibody that recognizes WT1 protein-derived peptide and HLA complex, or chimeric antigen receptor using TCR-like antibody ( CAR) gene-modified T cell therapy is under development.
  • CAR TCR-like antibody
  • WT1 protein for example, WT1 126-134 peptide, WT1 235-243 peptide, WT1 10-18 peptide, WT1 187-195 peptide, WT1 302-310 peptide, and the like WT1 37-45 peptide bound to MHC class I
  • Patent Document 1 Patent Document 2
  • Patent Documents 4 and 5 Non-Patent Documents 4 and 5
  • helper T (Th1) cells may be mentioned as cells that play an important role in cancer immunotherapy.
  • an antigen protein is degraded by intracellular lysosomes, and a part of a fragment peptide composed of amino acids of about 13 to 17 residues binds to an MHC class II molecule as an antigen peptide (helper peptide).
  • Th1 cells in which a complex of an antigen peptide and an MHC class II molecule is presented on the TCR / CD3 complex and activated promotes the induction and activation of CTL.
  • HLA-DR, DQ and DP are known as human MHC class II molecules, and a plurality of helper peptides derived from the WT1 protein have been identified so far (see Non-Patent Documents 6 and 7).
  • Non-Patent Document 8 a drug that interacts with a molecule involved in the transmission of a co-stimulatory signal on an antigen-presenting cell and / or T cell in T cell activation by the antigen-presenting cell can transmit the co-stimulatory signal. It is known that it can be controlled (see Non-Patent Document 8).
  • PD-1 is a receptor belonging to the CD28 family expressed on activated lymphocytes (T cells, B cells and NKT cells) and myeloid cells, and PD-1 ligand (PD ⁇ ) expressed on antigen-presenting cells.
  • L1 and PD-L2 bind to each other and transmit an inhibitory signal to lymphocytes to negatively regulate lymphocyte activation.
  • PD-L1 has been shown to be expressed in various tumor tissues in addition to antigen-presenting cells. That is, cancer uses PD-L1 to avoid attacks from CTL.
  • Non-Patent Documents 9 and 10 antibodies that inhibit the function of immune checkpoint molecules have been developed (see Non-Patent Documents 9 and 10). These antibodies release CTL exhaustion.
  • anti-PD-1 antibody and anti-PD-L1 antibody inhibit the binding between PD-1 and PD-L1, and restore the cytotoxic activity of CTL.
  • clinical trials of anti-PD-1 antibody or anti-PD-L1 antibody have been conducted for patients such as non-small cell lung cancer and melanoma, and remarkable effects have been observed.
  • patients such as non-small cell lung cancer and melanoma
  • remarkable effects have been observed.
  • only about 20 to 30% of patients show remarkable effects, and treatment with anti-PD-1 antibody or anti-PD-L1 antibody is sufficiently satisfied, such as suffering a strong immune-related adverse event.
  • Treatment with anti-PD-1 antibody or anti-PD-L1 antibody is sufficiently satisfied, such as suffering a strong immune-related adverse event.
  • the problem to be solved by the present invention is to provide a method and a medicament for treating or preventing cancer using a WT1 antigen peptide and an immunomodulator.
  • Possible causes of inadequate effects of anti-PD-1 antibody and anti-PD-L1 antibody include a small amount of CTL in the tumor and dependence on a strong immunosuppressive mechanism other than PD-1 / PD-L1. .
  • combined use with cancer vaccines and inhibitors of immune checkpoint molecules other than PD-1 and PD-L1 is expected.
  • the present inventors examined the combined use of cancer vaccines that increase tumor-reactive CTLs in tumors and inhibitors of immune checkpoint molecules or other immunomodulators. As a result of intensive studies using mice, the present inventors have found that administration of a WT1 antigen peptide results in the expression of immune checkpoint molecules in CD8-positive T cells, particularly WT1-specific killer T cells and CD4-positive T cells.
  • induced and WT1-specific killer T cells are stimulated to activate in response to immunomodulators such as immune checkpoint inhibitors. Furthermore, as a result of earnest research using human-derived peripheral blood mononuclear cells, the combined use of a WT1 antigen peptide and an immunomodulator results in efficient induction of WT1-specific killer T cells from naive T cells, And WT1-specific killer T cells induced by WT1 antigenic peptides were found to be activated in response to immunomodulators.
  • the present invention relates to the following.
  • Item 1 A pharmaceutical composition for treating or preventing cancer, comprising a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof in combination with an immunomodulator.
  • Item 2. A pharmaceutical composition for treating or preventing cancer, comprising an immunomodulator, in combination with a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Item 3. A pharmaceutical composition for treating or preventing cancer, comprising an immunomodulator and a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Item 4. The pharmaceutical composition according to any one of Items 1 to 3, wherein the WT1 antigen peptide is a WT1 killer peptide.
  • WT1 killer peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 2), CMTWNQMNL (SEQ ID NO: 3), CYTWNQMNL (SEQ ID NO: 4), ALLPAVPSL (SEQ ID NO: 5), SLGEQQYSV (SEQ ID NO: 6), RVPGVAPTL (SEQ ID NO: 7), VLDFAPPGA, (SEQ ID NO: 8), C-CMTWNQMNL (SEQ ID NO: 9) (wherein the bond between C and C represents a disulfide bond), C-CYTWNQMNL (SEQ ID NO: 10) (wherein the bond between C and C represents a disulfide bond)
  • WT1 killer peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 2), CMTWNQMNL (SEQ ID NO: 3), CYTWNQMNL (SEQ ID NO: 4), ALLPAVPSL (SEQ ID NO: 5), C-CYTWNQMNL (SEQ ID NO: 10) and YMFPNAPYL (SEQ ID NO: 26)
  • Item 6 A pharmaceutical composition according to Item 5, which is a compound represented by: or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Item 7. Item 7.
  • WT1 helper peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof Less than: KRYFKLSHHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 11), SGQARMFPNAPNAPLPSCLES (SEQ ID NO: 12), RSDELVRHNHMHQRNMTKL (SEQ ID NO: 13), PGCNKRYFKLLSHLQMHSRHKTG (SEQ ID NO: 14), CNKRYFKLSHHLQMHSRK (SEQ ID NO: 15), CNKRYFKLLSHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 16), CNKRYFKLLSHLQMHSRKHTG (SEQ ID NO: 17), WAPVLDFAPPGASAYGSL (SEQ ID NO: 18), CWAPVLDFAPPGASAYGSL (SEQ ID NO: 19), WAPVLDFAPPGASAYGSLC (SEQ ID NO: 20) and SGQAYMFPNAPYLPSCLES (SEQ ID NO: 37) A peptide consisting of any amino acid sequence selected
  • Item 9 The pharmaceutical composition according to Item 7 or 8, which is a peptide comprising the amino acid sequence and having helper T cell-inducing activity; or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Item 10. WT1 helper peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, Less than: KRYFKLSHHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 11), PGCNKRYFKLLSHLQMHSRHKTG (SEQ ID NO: 14), WAPVLDFAPPGASAYGSL (SEQ ID NO: 18) and SGQAYMFPNAPYLPSCLES (SEQ ID NO: 37)
  • Item 10 The pharmaceutical composition according to Item 9, which is a peptide consisting of any amino acid sequence selected from: or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the WT1 killer peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof is RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 2) or a pharmaceutically acceptable salt thereof; Item 11.
  • the WT1 killer peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof is RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 2) or a pharmaceutically acceptable salt thereof; Item 11.
  • the pharmaceutical composition according to Item 10 wherein the WT1 helper peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof is PGCNKRYFKLLSHLQMHSRHKTG (SEQ ID NO: 14) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the WT1 killer peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof is ALLPAVPSL (SEQ ID NO: 5) or a pharmaceutically acceptable salt thereof;
  • the pharmaceutical composition according to Item 10, wherein the WT1 helper peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof is KRYFKLLSHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 11) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Item 14 The pharmaceutical composition according to Item 10, wherein the WT1 helper peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof is KRYFKLLSHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 11) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the WT1 killer peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof is YMFPNAPYL (SEQ ID NO: 26) or a pharmaceutically acceptable salt thereof; Item 11.
  • the WT1 killer peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof has the formula (3): (In the formula, the bond between C and C represents a disulfide bond.) Or a pharmaceutically acceptable salt thereof, Item 11.
  • the pharmaceutical composition according to Item 10 wherein the WT1 helper peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof is WAPVLDFAPPGASAYGSL (SEQ ID NO: 18) or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Item 16. The pharmaceutical composition according to any one of Items 1 to 15, which is used as a cancer vaccine.
  • An immunomodulator (1) immune checkpoint inhibitor, (2) a costimulatory molecule agonist, Item 17.
  • Item 19 The pharmaceutical composition according to Item 17 or 18, wherein the immunomodulator is an immune checkpoint inhibitor. Item 20.
  • Immune checkpoint inhibitors (1) CTLA-4, (2) PD-1, (3) LAG-3, (4) BTLA, (5) KIR, (6) TIM-3, (7) PD-L1, (8) PD-L2, (9) B7-H3, (10) B7-H4, (11) HVEM, (12) GAL9, (13) CD160, (14) VISTA, (15) BTNL2, (16) TIGIT, (17) PVR, (18) BTN1A1, (19) BTN2A2, (20) BTN3A2 and (21) CSF-1R Item 20.
  • the immune checkpoint inhibitor is one or more against a molecule selected from the group consisting of CTLA-4, PD-1, LAG-3, TIM-3, BTLA, VISTA, HVEM, TIGIT, PVR, PD-L1 and CD160 Item 21.
  • Item 22. The pharmaceutical composition according to Item 21, wherein the immune checkpoint inhibitor is an agent for CTLA-4.
  • Item 22. The pharmaceutical composition according to Item 21, wherein the immune checkpoint inhibitor is a drug against LAG-3.
  • the pharmaceutical composition according to Item 21, wherein the immune checkpoint inhibitor is a drug against TIM-3. Item 26. Item 22. The pharmaceutical composition according to Item 21, wherein the immune checkpoint inhibitor is a drug against BTLA. Item 27. Item 22. The pharmaceutical composition according to Item 21, wherein the immune checkpoint inhibitor is a drug against HVEM. Item 28. Item 22. The pharmaceutical composition according to Item 21, wherein the immune checkpoint inhibitor is a drug against TIGIT. Item 29. Item 22. The pharmaceutical composition according to Item 21, wherein the immune checkpoint inhibitor is a drug against PVR. Item 30. Item 22. The pharmaceutical composition according to Item 21, wherein the immune checkpoint inhibitor is a drug against CD160. Item 31. Item 22.
  • Item 32. The pharmaceutical composition according to any one of Items 19 to 31, wherein the immune checkpoint inhibitor is an antibody.
  • Item 34. The pharmaceutical composition according to Item 33, wherein the antibody to PD-1 is nivolumab or pembrolizumab.
  • Item 34. Item 34.
  • the pharmaceutical composition according to Item 33, wherein the antibody to PD-L1 is Durvalumab, Atezolizumab (MPDL3280A) or BMS-936559.
  • Item 19 The pharmaceutical composition according to Item 17 or 18, wherein the immunomodulator is a costimulatory molecule agonist agent.
  • Item 36 A costimulatory molecule agonist, (1) 4-1BB, (2) 4-1BB-L, (3) OX40, (4) OX40-L, (5) GITR, (6) CD28, (7) CD40, (8) CD40-L, (9) ICOS, (10) ICOS-L, (11) LIGHT, and (12) CD27 Item 36.
  • the pharmaceutical composition according to Item 35 which is one or more drugs for a molecule selected from the group consisting of: Item 37. Item 37.
  • the pharmaceutical composition according to Item 36, wherein the costimulatory molecule agonist agent is one or more agents for a molecule selected from the group consisting of 4-1BB, OX40, GITR, CD40, and ICOS.
  • Item 38. The pharmaceutical composition according to Item 37, wherein the costimulatory molecule agonist agent is an agent for 4-1BB.
  • Item 39. Item 38.
  • the pharmaceutical composition according to Item 37, wherein the costimulatory molecule agonist is an agent for OX40.
  • Item 38. The pharmaceutical composition according to Item 37, wherein the costimulatory molecule agonist agent is an agent for GITR.
  • the pharmaceutical composition according to Item 37, wherein the costimulatory molecule agonist is an agent for CD40.
  • Item 38. The pharmaceutical composition according to Item 37, wherein the costimulatory molecule agonist is an agent for ICOS.
  • Item 43. The pharmaceutical composition according to any one of Items 35 to 42, wherein the costimulatory molecule agonist agent is an antibody.
  • Item 44. Item 19. The pharmaceutical composition according to Item 17 or 18, wherein the immunomodulator is an immune activator.
  • TLR Toll-like receptor
  • TLR agonists (1) TLR1 / 2 agonist, (2) TLR2 agonist, (3) TLR3 agonist, (4) TLR4 agonist, (5) TLR5 agonist, (6) TLR6 / 2 agonist, (7) TLR7 agonist, (8) TLR7 / 8 agonist, (9) TLR7 / 9 agonist, (10) TLR8 agonist, Item 46.
  • the pharmaceutical composition according to Item 45 which is one or more drugs selected from the group consisting of (11) a TLR9 agonist and (12) a TLR11 agonist.
  • the pharmaceutical composition of claim 46, wherein the TLR agonist is one or more drugs selected from the group consisting of a TLR3 agonist, a TLR7 agonist, a TLR7 / 8 agonist, and a TLR9 agonist.
  • Item 52. The pharmaceutical composition according to any one of Items 45 to 51, wherein the Toll-like receptor agonist is a nucleic acid.
  • Item 53. The pharmaceutical composition according to Item 17 or 18, wherein the immunomodulator is a small molecule inhibitor.
  • Item 54. Item 53.
  • the small molecule inhibitor is one or more drugs selected from the group consisting of ⁇ -catenin inhibitors, IDO inhibitors, COX-2 inhibitors, CXCR4 inhibitors, STAT3 inhibitors and multikinase inhibitors.
  • the pharmaceutical composition according to claim 54, wherein the small molecule inhibitor is a ⁇ -catenin inhibitor.
  • Cancer is leukemia, myelodysplastic syndrome, multiple myeloma, malignant lymphoma, stomach cancer, colon cancer, lung cancer, breast cancer, germ cell cancer, liver cancer, skin cancer, bladder cancer, prostate cancer, uterine cancer, cervical cancer, ovary Cancer, brain tumor, bone cancer, pancreatic cancer, head and neck cancer, skin or intraorbital malignant melanoma, rectal cancer, anal cancer, testicular cancer, fallopian carcinoma, endometrial carcinoma, cervical carcinoma, vaginal carcinoma, vulva carcinoma , Hodgkin disease, non-Hodgkin lymphoma, esophageal cancer, small intestine cancer, endocrine cancer, thyroid cancer, parathyroid cancer, adrenal cancer, soft tissue sarcoma, urethral cancer, penile cancer, acute myeloid leukemia, chronic myelogenous leukemia, acute lymph Blastic leukemia, chronic or acute leukemia including chronic lymphocytic leukemia, childhood solid
  • the pharmaceutical composition according to any one of Items 1 to 60 selected from the group consisting of renal cell carcinoma and asbestos-induced cancer.
  • Item 62. Item 62.
  • Item 63. Item 62.
  • the pharmaceutical composition according to any one of Items 1, 2, and 4-61, wherein the WT1 antigen peptide is administered before administration of the immunomodulator.
  • Item 67. The pharmaceutical composition according to any one of Items 1 to 66 for treating cancer.
  • Item 67. Item 70.
  • Item 68. 68. A method for treating or preventing cancer, comprising administering a WT1 antigen peptide defined in any one of Items 1 to 67 or a pharmaceutically acceptable salt thereof and an immunomodulator to a mammal.
  • Item 70 The method according to Item 68, wherein the WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof and the immunomodulator are administered simultaneously or separately.
  • Item 70. 68. A kit for treating or preventing cancer, comprising the WT1 antigen peptide defined in any one of Items 1 to 67 or a pharmaceutically acceptable salt thereof and an immunomodulator.
  • the invention also relates to: A method for treating or preventing cancer comprising administering a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof and an immunomodulator to a mammal; A WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the treatment or prevention of cancer, in combination with an immunomodulator; An immunomodulator for use in the treatment or prevention of cancer, in combination with a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof; Use of a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the manufacture of a medicament for treating or preventing cancer, in combination with an immunomodulator; For the manufacture of a medicament for treating or preventing cancer, in combination with a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof, the use of an immunomodulator; and for the manufacture of a medicament for treating or preventing cancer , WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof and an immunomodulator.
  • the invention also relates to: A method for treating or preventing cancer comprising administering to a mammal a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof and an immune checkpoint inhibitor; A WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the treatment or prevention of cancer, in combination with an immune checkpoint inhibitor; An immune checkpoint inhibitor for use in the treatment or prevention of cancer, in combination with a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof; Use of a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the manufacture of a medicament for treating or preventing cancer, in combination with an immune checkpoint inhibitor; Use of an immune checkpoint inhibitor for the manufacture of a medicament for treating or preventing cancer, in combination with a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and the manufacture of a medicament for treating or preventing cancer Use of a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof and an immune checkpoint inhibitor.
  • a method, a pharmaceutical composition and a kit for treating or preventing cancer characterized by using a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof together with an immunomodulator.
  • the present invention also provides a method, a pharmaceutical composition, and a kit for treating or preventing cancer, characterized by combining a WT1 antigen peptide or a pharmaceutically acceptable salt thereof and an immunomodulator. .
  • the horizontal axis indicates the staining intensity of the anti-CD8 antibody
  • the vertical axis indicates the staining intensity of the HLA tetramer
  • the dots in the area surrounded by the dashed line in the square represent WT1 antigen peptide-specific CTL.
  • the horizontal axis indicates the staining intensity of the anti-CD8 antibody
  • the vertical axis indicates the staining intensity of the HLA tetramer
  • the dots in the area surrounded by the dashed line in the square represent WT1 antigen peptide-specific CTL.
  • the horizontal axis indicates the staining intensity of the anti-CD8 antibody
  • the vertical axis indicates the staining intensity of the HLA tetramer
  • the dots in the area surrounded by the dashed line in the square represent WT1 antigen peptide-specific CTL.
  • the vertical axis represents the number of spots detected by IFN- ⁇ ELISPOT.
  • the change in the expression of PD-1 in mouse splenocytes by vaccine administration is shown.
  • the horizontal axis represents the staining intensity of PD-1 by flow cytometry analysis.
  • the one-dot short chain line represents the CD8 positive tetramer positive fraction derived from the spleen of the vaccine-treated individual, the broken line represents the CD8 positive tetramer negative fraction derived from the spleen of the vaccine administered individual, and the solid line represents the CD8 positive tetramer negative fraction derived from the spleen of the non-vaccinated individual.
  • the analysis results are shown.
  • a dotted line shows the result using isotype control.
  • Detection of PD-1 in CD4 positive T cells The change in the expression of PD-1 in mouse splenocytes by vaccine administration is shown.
  • the horizontal axis represents the staining intensity of PD-1 by flow cytometry analysis.
  • a broken line shows the analysis result about CD4 positive T cell derived from a vaccine administration individual spleen cell, and a continuous line shows the analysis result about CD4 positive T cell derived from a vaccine non-administration individual spleen cell.
  • a dotted line shows the result using isotype control.
  • Detection of PD-1 in CD4 / CD8 negative cells The change in the expression of PD-1 in mouse splenocytes by vaccine administration is shown.
  • the horizontal axis represents the staining intensity of PD-1 by flow cytometry analysis.
  • a broken line shows the analysis result about CD4 / CD8 negative cell derived from a vaccine administration individual spleen cell, and a continuous line shows the analysis result about CD4 / CD8 negative cell derived from a vaccine non-administration individual spleen cell.
  • a dotted line shows the result using isotype control.
  • the expression change of PD-L1 in mouse spleen cells by vaccine administration is shown.
  • the horizontal axis represents the staining intensity of PD-L1 by flow cytometry analysis.
  • the one-dot short chain line represents the CD8 positive tetramer positive fraction derived from the spleen of the vaccine-treated individual, the broken line represents the CD8 positive tetramer negative fraction derived from the spleen of the vaccine administered individual, and the solid line represents the CD8 positive tetramer negative fraction derived from the spleen of the non-vaccinated individual.
  • the analysis results are shown.
  • a dotted line shows the result using isotype control.
  • Detection of PD-L1 in CD4 positive T cells The expression change of PD-L1 in mouse spleen cells by vaccine administration is shown.
  • the horizontal axis represents the staining intensity of PD-L1 by flow cytometry analysis.
  • a broken line shows the analysis result about CD4 positive T cell derived from a vaccine administration individual spleen cell, and a continuous line shows the analysis result about CD4 positive T cell derived from a vaccine non-administration individual spleen cell.
  • a dotted line shows the result using isotype control.
  • Detection of PD-L1 in the CD4 / CD8 negative cell fraction The expression change of PD-L1 in mouse spleen cells by vaccine administration is shown.
  • the horizontal axis represents the staining intensity of PD-L1 by flow cytometry analysis.
  • a broken line shows the analysis result about CD4 / CD8 negative cell derived from a vaccine administration individual spleen cell, and a continuous line shows the analysis result about CD4 / CD8 negative cell derived from a vaccine non-administration individual spleen cell.
  • a dotted line shows the result using isotype control.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ by immune checkpoint inhibitor treatment (C).
  • WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice were treated with anti-BTLA antibody or isotype control antibody, and IFN- ⁇ producing ability was observed when co-cultured with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells. The result measured by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-TIM-3 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice are treated with anti-LAG-3 antibody or isotype control antibody and co-cultured with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-L1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ by immune checkpoint inhibitor treatment (G).
  • WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice were treated with anti-HVEM antibody or isotype control antibody, and IFN- ⁇ producing ability was observed when co-cultured with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells. The result measured by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ by immune checkpoint inhibitor treatment (H).
  • WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice were treated with anti-VISTA antibody or isotype control antibody, and IFN- ⁇ producing ability was observed when co-cultured with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells. The result measured by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ by immune checkpoint inhibitor treatment (I).
  • WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice were treated with anti-PVR antibody or isotype control antibody, and IFN- ⁇ producing ability was observed when co-cultured with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result measured by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ by immune checkpoint inhibitor treatment A. The results of measuring IFN- ⁇ production ability by ELISA when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in a vaccinated tumor-bearing mouse were treated with anti-PD-1 antibody or isotype control antibody and cultured are shown. Production of IFN- ⁇ by immune checkpoint inhibitor treatment (B). The results of measuring IFN- ⁇ production ability by ELISA when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in a vaccinated tumor-bearing mouse were treated with anti-CTLA-4 antibody or isotype control antibody and cultured are shown. Production of IFN- ⁇ by immune checkpoint inhibitor treatment (C).
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-L1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-OX-40 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-L1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-OX-40 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-L1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-PD-L1 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production upon treatment of WT1 antigen peptide-specific T cells induced in vaccinated mice with anti-OX-40 antibody or isotype control antibody and co-culture with WT1 killer peptide and LLC-HHD-WT1 tumor cells The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • mice transplanted with EL4-A24 / Kb-WT1 tumor cells were administered vehicle (group a), anti-PD-1 antibody (group b), vaccine (group c), anti-PD-1 antibody and vaccine (group d)
  • the mean tumor volume is shown.
  • mice transplanted with EL4-A24 / Kb-WT1 tumor cells were administered vehicle (group a), anti-CTLA-4 antibody (group b), vaccine (group c), anti-CTLA-4 antibody and vaccine (group d)
  • group a mice transplanted with EL4-A24 / Kb-WT1 tumor cells were administered vehicle (group a), anti-CTLA-4 antibody (group b), vaccine (group c), anti-CTLA-4 antibody and vaccine (group d)
  • the mean tumor volume is shown.
  • shaft shows the ratio of WT1 antigen peptide specific CTL contained in the spleen cell of the mouse
  • shaft shows the ratio of WT1 antigen peptide specific CTL contained in the spleen cell of the mouse
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-PD-1 antibody A. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in mice administered killer vaccine are treated with anti-PD-1 antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-B7-H4 antibody A. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in mice administered killer vaccine were treated with anti-B7-H4 antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-B7-H4 antibody B. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in cocktail vaccine-treated mice were treated with anti-B7-H4 antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-PD-L1 antibody A. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in mice administered killer vaccine were treated with anti-PD-L1 antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-PD-L1 antibody B. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in cocktail vaccine-treated mice were treated with anti-PD-L1 antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-4-1BB antibody A. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in mice administered killer vaccine were treated with anti-4-1BB antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-4-1BB antibody B. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in cocktail vaccine-treated mice were treated with anti-4-1BB antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-OX-40 antibody A. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in mice administered killer vaccine were treated with anti-OX-40 antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • IFN- ⁇ production by treatment with anti-OX-40 antibody B. IFN- ⁇ production when WT1 antigen peptide-specific T cells induced in cocktail vaccine-treated mice are treated with anti-OX-40 antibody and co-cultured with LLC-HHD-WT1 tumor cells in the presence of WT1 killer peptide The result of having measured ability by ELISA is shown.
  • the present invention relates to the combined use of a WT1 antigen peptide and an immunomodulator.
  • the “WT1 antigen peptide” has an amino acid sequence derived from WT1 protein, binds to MHC class I or MHC class II, and is presented on the cell surface as a complex, whereby killer T cells or It means a peptide that induces helper T cells.
  • WT1 antigen peptide that binds to MHC class I and induces killer T cells is referred to as “WT1 killer peptide”
  • WT1 helper peptide a peptide that binds to MHC class II and induces helper T cells
  • WT1 helper peptide a peptide that binds to MHC class II and induces helper T cells.
  • Examples of the WT1 protein include, but are not limited to, mouse or human WT1 protein, preferably human WT1 protein.
  • the human WT1 protein has the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1.
  • the term “WT1 antigen peptide” encompasses pharmaceutically acceptable salts thereof.
  • the WT1 antigen peptide may be a modified product obtained by modifying a part or all of amino acid residues in the amino acid sequence.
  • a modified form can be modified by a known method.
  • the modified product may be, for example, a product obtained by subjecting a functional group in the side chain of an amino acid residue constituting a peptide to esterification, alkylation, halogenation, phosphorylation, sulfonation, amidation or the like.
  • Various substances can be bound to the N-terminus and / or C-terminus of the peptide. For example, amino acids, peptides, analogs thereof and the like may be bound.
  • these substances When these substances are bound to the WT1 antigen peptide, these substances may be processed by, for example, an in vivo enzyme or a process such as intracellular processing to finally produce the WT1 antigen peptide.
  • Good These substances may be those that adjust the solubility of the peptide, or those that improve the stability such as protease resistance, and for example, the peptide may be specifically applied to a predetermined tissue or organ. It may be delivered, or may have an effect of enhancing the efficiency of antigen-presenting cell uptake.
  • These substances may also be those that increase the ability to induce CTL, for example, killer peptides or helper peptides other than the WT1 antigen peptide or pharmaceutically acceptable salts thereof.
  • the WT1 antigen peptide may be one in which amino acid residues are bonded by bonds other than peptide bonds such as carbon-carbon bond, carbon-nitrogen bond, and carbon-sulfur bond. Furthermore, the WT1 antigen peptide may contain one or more D-form amino acids.
  • amino acid residue means a part corresponding to one unit of amino acid constituting the peptide or protein on the peptide or protein molecule.
  • amino acid residue includes a natural or non-natural ⁇ -amino acid residue, ⁇ -amino acid residue, ⁇ -amino acid residue or ⁇ -amino acid residue. Specific examples include natural ⁇ -amino acid residues, ornithine residues, homoserine residues, homocysteine residues, ⁇ -alanine, ⁇ -aminobutanoic acid or ⁇ -aminopentanoic acid.
  • amino acid residue in the present invention is indicated by an abbreviation, it is described by the following abbreviation.
  • Ala or A alanine residue Arg or R: Arginine residue Asn or N: Asparagine residue Asp or D: Aspartic acid residue Cys or C: Cysteine residue Gln or Q: Glutamine residue Glu or E: Glutamic acid residue Gly or G: Glycine residue His or H: histidine residue Ile or I: isoleucine residue Leu or L: Leucine residue Lys or K: Lysine residue Met or M: methionine residue Phe or F: phenylalanine residue Pro or P: proline residue Ser or S: Serine residue Thr or T: Threonine residue Trp or W: Tryptophan residue Tyr or Y: tyrosine residue Val or V: valine residue Abu: 2-aminobutyric acid residue (also called ⁇ -aminobutyric acid residue) Orn: Ornith
  • the amino acid sequence of the “peptide” in the present invention is described according to a conventional method such that the amino acid residue of the N-terminal amino acid is located on the left side and the amino acid residue of the C-terminal amino acid is located on the right side.
  • the amino group of the amino acid residue of the N-terminal amino acid is bonded to a hydrogen atom
  • the carbonyl group of the amino acid residue of the C-terminal amino acid is bonded to a hydroxyl group.
  • the divalent group of the peptide means a group bonded through the amino group of the amino acid residue of the N-terminal amino acid and the carbonyl group of the amino acid residue of the C-terminal amino acid.
  • the amino group of the amino acid residue of the N-terminal amino acid is a hydrogen atom unless otherwise specified for the peptide corresponding to the partial structure.
  • the carbonyl group of the amino acid residue of the C-terminal amino acid is bonded to the hydroxyl group.
  • MHC is called human leukocyte antigen (HLA) in humans.
  • HLA corresponding to MHC class I molecules is classified into subtypes such as HLA-A, B, Cw, F and G.
  • MHC class I-restricted means a property of inducing killer cells by binding to MHC class I molecules.
  • the “MHC class I restriction” preferably includes HLA-A restriction, HLA-B restriction, or HLA-Cw restriction.
  • HLA-A polymorphism examples include 27 or more types such as HLA-A1, HLA-A2, and HLA-A24.
  • HLA-B polymorphism examples include HLA-B7, HLA-B40, and HLA-B44.
  • the HLA-Cw polymorphism includes 10 or more types such as HLA-Cw0301, HLA-Cw0401, and HLA-Cw0602. Among these polymorphisms, HLA-A2 and HLA-A24 are preferable.
  • the WT1 antigen peptide is a WT1 killer peptide that binds to MHC class I and induces killer T cells (cytotoxic T cells (CTL)).
  • the WT1 killer peptide induces WT1-specific killer T cells by being presented on the cell surface as a complex with MHC class I.
  • the WT1 killer peptide is a partial peptide consisting of 7 to 30 amino acids that are contiguous in the amino acid sequence of the human WT1 protein set forth in SEQ ID NO: 1, or a variant thereof.
  • WT1 antigen peptide the following amino acid sequence: RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 2), CMTWNQMNL (SEQ ID NO: 3), CYTWNQMNL (SEQ ID NO: 4), ALLPAVPSL (SEQ ID NO: 5), SLGEQQYSV (SEQ ID NO: 6), RVPGVAPTL (SEQ ID NO: 7), VLDFAPPGA (SEQ ID NO: 8), C-CMTWNQMNL (SEQ ID NO: 9) (wherein the bond between C and C represents a disulfide bond), and C-CYTWNQMNL (SEQ ID NO: 10) (wherein the bond between C and C is Represents a disulfide bond.)
  • a peptide consisting of any amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 2 to 10 and a modified amino acid containing an amino acid residue modification in any amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 2 to 10 Peptides having a sequence and having CTL-inducing activity can be mentioned. More preferred is a peptide consisting of any amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 2 to 10. Even more preferably, a peptide consisting of any amino acid sequence selected from SEQ ID NOs: 2 to 6, 8, and 10 can be mentioned.
  • peptide containing an amino acid sequence means a peptide in which an additional amino acid is added to the N-terminal amino acid and / or C-terminal amino acid of the amino acid sequence as usual.
  • a peptide including a modified amino acid sequence containing a modified amino acid residue in the amino acid sequence and having CTL-inducing activity is also referred to as “modified killer peptide”.
  • the modified killer peptide comprises an amino acid sequence in which one to several, preferably one to three amino acids are deleted, substituted and / or added in the amino acid sequence, binds to MHC class I, Means peptide to be derived.
  • Examples of the substitution position of the amino acid to be substituted include 1-position (N-terminal), 2-position, 3-position and 9-position in the case of a peptide consisting of 9-residue amino acids.
  • the number of amino acids to be added (including insertion) is preferably 1 or 2, more preferably 1.
  • a preferred addition position includes the C-terminus.
  • the number of amino acids to be deleted is preferably 1.
  • the added amino acid or the substituted amino acid may be an unnatural amino acid other than the 20 kinds of amino acids encoded by the gene.
  • binding motif there is regularity (binding motif) of the amino acid sequence of a peptide that can bind to the HLA antigen for each polymorphism of the HLA subtype.
  • a binding motif of HLA-A24 in a peptide consisting of 8 to 11 amino acids, the amino acid at position 2 is Tyr, Phe, Met or Trp, and the C-terminal amino acid is Phe, Leu, Ile, It is known to be Trp or Met (J. Immunol., 152, p3913, 1994; J. Immunol., 155, p4307, 1994; Immunogenetics, 41, p178, 1995).
  • substitution at position 2 with Tyr, Phe, Met or Trp and / or position 9 with Phe, Leu, Ile, Trp or Met is possible.
  • the substituted peptide is preferred as the modified killer peptide.
  • the amino acid at the 2nd position is Leu or Met and the C-terminal amino acid is Val or Leu in a peptide consisting of 8 to 11 amino acids.
  • modified killer peptides include the following peptides: Is a modified killer peptide of RMFPNAPYL (SEQ ID NO: 2), RYFPNAPYL (SEQ ID NO: 21) (see WO 03/106682), FFPNAPYL (SEQ ID NO: 22), RLFPNAPYL (SEQ ID NO: 23), RMMPNAPYL (SEQ ID NO: 24), RMFPNAPYV (SEQ ID NO: 25) and YMFPNAPYL (SEQ ID NO: 26) (see WO 2009/072610); CMTWNQMNL (SEQ ID NO: 3) is a modified killer peptide, CYTWNQMNL (SEQ ID NO: 4) (see WO02 / 79253), Xaa-Met-Thr-Trp-Asn-Gln-Met-Asn-Leu (SEQ ID NO: 27), (Xaa in this sequence represents Ser or Ala) and Xaa-Tyr-
  • the WT1 killer peptide is Formula (1): (In the formula, the bond between C and C represents a disulfide bond.) A compound represented by Formula (2): (In the formula, the bond between C and C represents a disulfide bond.) Or a compound represented by formula (3): (In the formula, the bond between C and C represents a disulfide bond.) It is a compound represented by these.
  • WT1 antigen peptides include, in addition to the peptides and compounds listed above, compounds described in International Publication No. 2014/157692.
  • the WT1 antigen peptide is a WT1 helper peptide that binds to MHC class II and induces helper T cells (CD4-positive T cells).
  • the WT1 helper peptide induces WT1-specific helper T cells by being presented on the cell surface as a complex with MHC class II.
  • WT1-specific helper T cells produce various cytokines such as IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, or interferon (IFN), and are a subset of B cells and other T cell subsets. Promotes proliferation, differentiation and maturation. Therefore, the WT1 helper peptide activates helper T cells, induces and maintains CTL differentiation, and activates effector cells such as macrophages, and thus can be used for efficient treatment or prevention of cancer.
  • HLA corresponding to MHC class II molecules is classified into subtypes such as HLA-DR, DQ and DP.
  • MHC class II restricted means the property of binding to MHC class II molecules to induce helper T cells.
  • the “MHC class II restriction” preferably includes HLA-DR restriction, HLA-DQ restriction or HLA-DP restriction.
  • the WT1 helper peptide is a partial peptide consisting of 7 to 30 residues, preferably 14 to 30 amino acids that are continuous in the amino acid sequence of the human WT1 protein set forth in SEQ ID NO: 1, or a variant thereof. is there.
  • WT1 helper peptides include the following amino acid sequences: KRYFKLSHHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 11), SGQARMFPNAPNAPLPSCLES (SEQ ID NO: 12), RSDELVRHNHMHQRNMTKL (SEQ ID NO: 13), PGCNKRYFKLLSHLQMHSRHKTG (SEQ ID NO: 14), CNKRYFKLSHHLQMHSRK (SEQ ID NO: 15), CNKRYFKLLSHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 16), CNKRYFKLLSHLQMHSRKHTG (SEQ ID NO: 17), WAPVLDFAPPGASAYGSL (SEQ ID NO: 18), CWAPVLDFAPPGASAYGSL (SEQ ID NO: 19), WAPVLDFAPPGASAYGSLC (SEQ ID NO: 20), SGQARMFPNAPYLPSC (SEQ ID NO: 34), SGQAYMFPNAPYLPSC (SEQ ID NO: 35
  • Peptides having a modified amino acid sequence containing a group modification and having a helper T cell inducing activity can be mentioned. More preferably, it is a peptide consisting of any amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 11-20 and 34-40, and even more preferably, from any amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 11-20 The peptide is mentioned.
  • a peptide containing a modified amino acid sequence containing a modified amino acid residue in the amino acid sequence and having a helper T cell inducing activity is also referred to as a “modified helper peptide”.
  • the modified helper peptide consists of an amino acid sequence in which one to several, preferably one to three amino acids are deleted, substituted and / or added in the amino acid sequence, and binds to MHC class II. It means a peptide that induces cells.
  • the added amino acid or the substituted amino acid may be an unnatural amino acid other than the 20 kinds of amino acids encoded by the gene.
  • modified helper peptides include the following peptides: SGQARMFPNAPYLPSCLES (SEQ ID NO: 36) is a modified helper peptide, SGQAYMFPNAPYLPSCLES (SEQ ID NO: 37) (see International Publication No. 2007/120673), SGQARMFPNAPNAPLPSC (SEQ ID NO: 34) and SGQAYMFPNAPYLPSC (SEQ ID NO: 35); and It is a modified helper peptide of PGCNKRYFKLSHLQMHSRKHTG (SEQ ID NO: 40).
  • PGCNKRYFKLSHHLQMHSRK (SEQ ID NO: 38), PGCNKRYFKLSHHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 39), KRYFKLSHHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 11), CNKRYFKLSHHLQMHSRK (SEQ ID NO: 15), CNKRYFKLLSHLQMHSRKH (SEQ ID NO: 16) and CNKRYFKLLSHLQMHSRRKHTG (SEQ ID NO: 17).
  • WT1 antigen peptide can be produced according to a method used in normal peptide synthesis. Production methods include literature (Peptide Synthesis, Interscience, New York, 1966; The Proteins, Vol 2, Academic Press Inc., New York, 1976; Peptide Synthesis, Maruzen Co., Ltd. ), 1975; peptide synthesis basics and experiments, Maruzen Co., Ltd., 1985; Pharmaceutical Development, Vol. 14, Peptide Synthesis, Hirokawa Shoten, 1991).
  • a method of producing by a solid phase synthesizer using the Fmoc method or Boc method and a method of producing by sequentially condensing Boc-amino acid or Z-amino acid by a liquid phase synthesis method (Fmoc is 9-fluorene).
  • Fmoc is 9-fluorene
  • Nylmethoxycarbonyl group, Boc represents t-butoxycarbonyl group, and Z represents benzyloxycarbonyl group).
  • protecting groups such as amino group, carboxy group, mercapto group, etc. are protected with appropriate protective groups using protection and deprotection techniques as necessary. can do. Suitable protecting groups, protecting methods, and deprotecting methods are described in detail in “ProtectiveProtectGroups In Organic Synthesis 2nd Edition (John Wiley & Sons, Inc .; 1990)".
  • the protecting group for the mercapto group includes an acetamidomethyl group or a trityl group.
  • the disulfide bond can be formed between two different peptides containing a cysteine residue or between a peptide containing a cysteine residue and a cysteine according to a method used in normal peptide chemistry. Can be formed. Disulfide bond formation methods are described in the literature (Peptide Synthesis, Interscience, New York, 1966; The Proteins, Vol 2, Academic Press Inc., New York, 1976; peptide synthesis, Maruzen (Inc.), 1975; Basics and experiments of peptide synthesis, Maruzen Co., Ltd., 1985; Pharmaceutical Development, Vol. 14, Peptide Synthesis, Hirokawa Shoten, 1991).
  • disulfide when a peptide has one cysteine residue, disulfide is obtained by removing all protecting groups including a mercapto group protecting group on the cysteine side chain and then oxidizing in an inert solvent.
  • a compound having a bond (disulfide compound) can be produced.
  • it can manufacture by mixing two intermediates which have a mercapto group in a suitable solvent, and oxidizing.
  • oxidation method a known method for forming a disulfide bond by ordinary peptide synthesis may be appropriately selected.
  • iodine oxidation a method of subjecting to an air oxidation reaction under alkaline conditions, or a method of forming a disulfide bond by adding an oxidizing agent under alkaline or acidic conditions.
  • the oxidizing agent include iodine, dimethyl sulfoxide (DMSO), potassium ferricyanide and the like.
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • the solvent water, acetic acid, methanol, chloroform, DMF or DMSO, or a mixture thereof can be used. Oxidation reactions often give a mixture of symmetrical, asymmetrical disulfide compounds.
  • the target asymmetric disulfide compound can be obtained by purification by various chromatography or recrystallization.
  • a selective disulfide bond can be formed by mixing an intermediate having an activated mercapto group and an intermediate having a mercapto group.
  • the intermediate having an activated mercapto group include a mercapto group to which an Npys group (3-nitro-2-pyridinesulfenyl group) is bonded.
  • a selective disulfide bond is formed by adding the other intermediate after activating the mercapto group in advance by mixing one intermediate with, for example, 2,2′-dithiobis (5-nitropyridine). (Tetrahedron Letters. Vol.37. No.9, pp.1347-1350).
  • a dimer in which a disulfide bond is formed between the target cysteine residues can be obtained by combining the protecting groups of the cysteine side chains in a specific combination.
  • Combinations of the protecting groups include MeBzl (methylbenzyl) group and Acm (acetamidomethyl) group, Trt (trityl) group and Acm group, Npys (3-nitro-2-pyridylthio) group and Acm group, S-Bu- and t (S-tert-butyl) group and Acm group.
  • WT1 antigen peptide may be a killer peptide and a helper peptide, or two different killer peptides or helper peptides bound via a disulfide bond.
  • Such a peptide can be synthesized by a method including the following steps (1) to (3).
  • step (1) using Fmoc-C (Mmt) A-SBn and the first antigen peptide, the carbonyl group of the C-terminal amino acid of C (Mmt) A and the N-terminal amino group of the first antigen peptide are Synthesize the bound peptide.
  • Fmoc represents a 9-fluorenylmethoxycarbonyl group.
  • Mmt represents a monomethoxytrityl group.
  • SBn represents a thiobenzyl group.
  • the step (1) using the peptide obtained in the step (1) and the second antigen peptide in which one cysteine residue protected with an Npys group is bonded to the N-terminus, the step (1)
  • the peptide obtained by combining the thioether group of the cysteine residue of the first antigen peptide and the thioether group of the cysteine residue bonded to the N-terminus of the second antigen peptide in the peptide obtained in (1) is synthesized.
  • “Npys” represents a 3-nitro-2-pyridylthio group.
  • step (3) using the peptide obtained in the step (2) and a third antigen peptide containing a cysteine residue protected with an SPy group, the peptide in the peptide obtained in the step (2) A peptide in which the thioether group of the cysteine residue bonded to the N-terminus of the second antigen peptide and the thioether group of the cysteine residue of the third antigen peptide are combined is synthesized.
  • SPy represents a 2-pyridyl sulfide group.
  • the obtained WT1 antigen peptide can be purified according to a method known to those skilled in the art or a method used in ordinary peptide chemistry. For example, it can be purified by various chromatography (for example, silica gel column chromatography, ion exchange column chromatography, gel filtration, or reverse phase chromatography) or recrystallization.
  • chromatography for example, silica gel column chromatography, ion exchange column chromatography, gel filtration, or reverse phase chromatography
  • the recrystallization solvent includes alcohol solvents such as methanol, ethanol or 2-propanol, ether solvents such as diethyl ether, ester solvents such as ethyl acetate, aromatic hydrocarbon solvents such as benzene or toluene, acetone A ketone solvent such as hexane, a hydrocarbon solvent such as hexane, an aprotic solvent such as dimethylformamide or acetonitrile, water, or a mixed solvent thereof can be used.
  • alcohol solvents such as methanol, ethanol or 2-propanol
  • ether solvents such as diethyl ether
  • ester solvents such as ethyl acetate
  • aromatic hydrocarbon solvents such as benzene or toluene
  • acetone A ketone solvent such as hexane
  • a hydrocarbon solvent such as hexane
  • an aprotic solvent such as dimethylformamide or acetonitrile
  • the WT1 antigen peptide When the WT1 antigen peptide has one or more asymmetric points, it can be produced by using a raw material (amino acid) having the asymmetric point according to a usual method. In order to increase the optical purity of the WT1 antigen peptide, optical resolution or the like may be performed at an appropriate stage of the production process.
  • a WT1 antigen peptide or an intermediate thereof in an inert solvent for example, an alcohol solvent such as methanol, ethanol or 2-propanol, an ether solvent such as diethyl ether, an ester solvent such as ethyl acetate, Hydrocarbon solvents such as toluene, aprotic solvents such as acetonitrile, and mixed solvents thereof
  • optically active acids for example, monocarboxylic acids such as mandelic acid, N-benzyloxyalanine, or lactic acid, tartaric acid, o-diisopropylidene tartaric acid or dicarboxylic acid such as malic acid, or sulfonic acid such as camphorsulfonic acid or bromocamphorsulfonic acid
  • a diastereomeric method for example, an alcohol solvent such as methanol, ethanol or 2-propanol, an ether solvent such as diethyl ether, an ester solvent such as ethyl
  • a salt is formed with an optically active amine (for example, an organic amine such as ⁇ -phenethylamine, quinine, quinidine, cinchonidine, cinchonine, strychnine).
  • an optically active amine for example, an organic amine such as ⁇ -phenethylamine, quinine, quinidine, cinchonidine, cinchonine, strychnine.
  • the optical division can also be performed.
  • the temperature at which the salt is formed is selected from the range from room temperature to the boiling point of the solvent. In order to improve the optical purity, it is desirable to raise the temperature once to near the boiling point of the solvent. When the precipitated salt is collected by filtration, the yield can be improved by cooling as necessary.
  • the amount of the optically active acid or amine used is in the range of about 0.5 to about 2.0 equivalents, preferably in the range of about 1 equivalent, relative to the substrate. Crystals in an inert solvent as necessary (for example, alcohol solvents such as methanol, ethanol, 2-propanol, ether solvents such as diethyl ether, ester solvents such as ethyl acetate, hydrocarbon solvents such as toluene, acetonitrile, etc. And a high-purity optically active salt can be obtained. Further, if necessary, the optically resolved salt can be treated with an acid or base by a conventional method to obtain a free form.
  • “pharmaceutically acceptable salts” include acid addition salts and base addition salts.
  • the acid addition salts include inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, hydroiodide, nitrate and phosphate, citrate, oxalate, acetate, formate , Propionate, benzoate, trifluoroacetate, maleate, tartrate, methanesulfonate, benzenesulfonate, paratoluenesulfonate, and other organic acid salts.
  • inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, hydroiodide, nitrate and phosphate, citrate, oxalate, acetate, formate , Propionate, benzoate, trifluoroacetate, maleate, tartrate, methanesulfonate, benzenesulfonate, paratoluenesulfonate, and
  • Inorganic base salts such as sodium salt, potassium salt, calcium salt, magnesium salt, ammonium salt, organic base salts such as triethylammonium salt, triethanolammonium salt, pyridinium salt, diisopropylammonium salt, and the like, and arginine, Examples thereof include amino acid salts such as basic or acidic amino acids such as aspartic acid and glutamic acid.
  • RMFPNAPYL SEQ ID NO: 2
  • CMTWNQMNL SEQ ID NO: 3
  • CYTWNQMNL SEQ ID NO: 4
  • ALLPAVPSL SEQ ID NO: 5
  • SLGEQQYSV SEQ ID NO: 6
  • RVPGVAPTL SEQ ID NO: 7
  • VLDFAPPGA VLDFAPPGA
  • C-CMTWNQMNL SEQ ID NO: 9
  • the bond between C and C represents a disulfide bond
  • C-CYTWNQMNL SEQ ID NO: 10
  • the bond between C and C is A peptide comprising any amino acid sequence selected from: Any one of the amino acid sequences selected from SEQ ID NOs: 2 to 10, wherein one to several amino acids have a deleted, substituted, and / or added amino acid sequence and have a CTL-inducing activity; or Examples include acid addition salts and base addition salt
  • the acid addition salts include inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, hydroiodide, nitrate and phosphate, citrate, oxalate, acetate, formate , Propionate, benzoate, trifluoroacetate, maleate, tartrate, methanesulfonate, benzenesulfonate, paratoluenesulfonate, and other organic acid salts.
  • inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, hydroiodide, nitrate and phosphate, citrate, oxalate, acetate, formate , Propionate, benzoate, trifluoroacetate, maleate, tartrate, methanesulfonate, benzenesulfonate, paratoluenesulfonate, and other organic acid salts.
  • Inorganic base salts such as sodium salt, potassium salt, calcium salt, magnesium salt, ammonium salt, organic base salts such as triethylammonium salt, triethanolammonium salt, pyridinium salt, diisopropylammonium salt, and the like, and arginine, Examples thereof include amino acid salts such as basic or acidic amino acids such as aspartic acid and glutamic acid.
  • KRYFKLSHHLQMHSRKH SEQ ID NO: 11
  • SGQARMFPNAPNAPLPSCLES SEQ ID NO: 12
  • RSDELVRHNHMHQRNMTKL SEQ ID NO: 13
  • PGCNKRYFKLLSHLQMHSRHKTG SEQ ID NO: 14
  • CNKRYFKLSHHLQMHSRK SEQ ID NO: 15
  • CNKRYFKLLSHLQMHSRKH SEQ ID NO: 16
  • CNKRYFKLLSHLQMHSRKHTG SEQ ID NO: 17
  • WAPVLDFAPPGASAYGSL SEQ ID NO: 18
  • CWAPVLDFAPPGASAYGSL SEQ ID NO: 19
  • WAPVLDFAPPGASAYGSLC SEQ ID NO: 20
  • the acid addition salts include inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, hydroiodide, nitrate and phosphate, citrate, oxalate, acetate, formate , Propionate, benzoate, trifluoroacetate, maleate, tartrate, methanesulfonate, benzenesulfonate, paratoluenesulfonate, and other organic acid salts.
  • inorganic acid salts such as hydrochloride, hydrobromide, sulfate, hydroiodide, nitrate and phosphate, citrate, oxalate, acetate, formate , Propionate, benzoate, trifluoroacetate, maleate, tartrate, methanesulfonate, benzenesulfonate, paratoluenesulfonate, and other organic acid salts.
  • Inorganic base salts such as sodium salt, potassium salt, calcium salt, magnesium salt, ammonium salt, organic base salts such as triethylammonium salt, triethanolammonium salt, pyridinium salt, diisopropylammonium salt, and the like, and arginine, Examples thereof include amino acid salts such as basic or acidic amino acids such as aspartic acid and glutamic acid.
  • Examples of pharmaceutically acceptable salts of the WT1 antigen peptide include, but are not limited to, RMFPNAPYL acetate, CMTWNQMNL acetate, CYTWNQMNL acetate, ALLPAVPSL Acetate, SLGEQQYSV acetate, RVPGVAPTL acetate, VLDFAPPGA acetate, C-CMTWNQMNL acetate, C-CYTWNQMNL acetate, KRYFKLSHHLQMHSRKH acetate, SGQARMFPNAPYLPSCLES acetate, RSDELVRHHNMHQRNMTKL acetate, PGCNKRYFKLLSHLQMHSRKHTG acetate, CNKRYFKLSHHLQMHSRK acetate, CNKRYFKLLSHLQMHSRKH acetate, CNKRYFKLLSHLQMHSRKHTG acetate, WAPVLDFAPPGASAYGSL acetate, CWAPVLDFAPPG
  • the WT1 antigen peptide of the present invention or a solvate such as a pharmaceutically acceptable salt hydrate or ethanol solvate thereof is also included in the present invention.
  • the present invention also includes all possible stereoisomers, such as all diastereomers, enantiomers, etc. of the WT1 antigen peptide, and crystal forms of all embodiments.
  • the CTL-inducing activity of the WT1 antigen peptide can be measured by the HLA tetramer method (Int. J. Cancer: 100, 565-570 (2002)) or limiting dilution method (Nat. Med .: 4, 321-327 (1998)). This can be confirmed by measuring the number.
  • HLA-A24-restricted CTL inducing activity use the HLA-A24 model mouse described in WO 02/47474 and Int. J. Cancer: 100, 565-570 (2002), etc. Can be examined.
  • the helper T cell-inducing activity of the WT1 antigen peptide can be examined by a known method such as the method described in Cancer Immunol. Immunother. 51: 271 (2002).
  • the term “immunomodulator” refers to a costimulatory signal by interacting with a molecule involved in transmission of a costimulatory signal on an antigen-presenting cell and / or T cell in T cell activation by the antigen-presenting cell. Anything that controls transmission and also controls the function of molecules involved in the establishment of immune tolerance (immunosuppression) directly or indirectly in the immune mechanism.
  • An “immunomodulatory agent” can be, but is not limited to, an agent selected from antibodies, nucleic acids, proteins, peptides and small molecule compounds.
  • the term “antibody” includes antibody fragments.
  • antibody fragments include antibody heavy and light chain variable regions (VH and VL), F (ab ') 2, Fab', Fab, Fv, Fd, sdFv, scFV and the like.
  • VH and VL antibody heavy and light chain variable regions
  • F (ab ') 2 F (ab ') 2
  • Fab' Fab
  • Fv Fd
  • sdFv scFV
  • protein means any protein except antibodies.
  • Immunomodulators include, for example, immune checkpoint inhibitors, costimulatory molecule agonist agents, immune activators, and small molecule inhibitors.
  • Immune checkpoint inhibitor inhibits immunosuppressive action by cancer cells and antigen-presenting cells.
  • Immune checkpoint inhibitors include, but are not limited to, drugs against molecules selected from the group consisting of: (1) CTLA-4 (ipilimumab, tremelimumab, etc.); (2) PD-1 (nivolumab, (3) LAG-3 (IMP-321, BMS-986016, etc.); (4) BTLA; (5) KIR (IPH2101) Pembrolizumab, AMP-224, AMP-514 (MEDIA0680), Pidilizumab (CT-011), etc.); (6) TIM-3; (7) PD-L1 (Durvalumab (MEDi 4736), MPDL3280A, BMS-936559, Averumab (MSB0010718C), etc.); (8) PD-L2; (9) B7-H3 (MGA) -271 etc.); (10) B7-H4; (1 (12) GAL9; (13) CD160; (1
  • Costimulatory molecule agonist activates T cells by transmitting co-stimulatory molecules via T-cells and antigen-presenting cells via co-stimulatory molecules and attenuates the immunosuppressive effect of cancer cells and antigen-presenting cells
  • Costimulatory molecule agonist agents include, but are not limited to, agents for molecules selected from the following groups: (1) 4-1BB (2) 4-1BB-L; (3) OX40 (4) OX40 (5) GITR; (6) CD28; (7) CD40; (8) CD40-L (9) ICOS; (10) ICOS-L; (11) LIGHT; and (12) CD27.
  • Immune activators efficiently stimulate killer T cells in lymph nodes by directly or indirectly activating immune cells such as T cells and dendritic cells.
  • Immune activators include, but are not limited to, Toll-like receptor (TLR) agonists, interferon gene stimulating factor (STING) agonists, cytokines, or drugs for heat shock protein (HSP).
  • TLR Toll-like receptor
  • STING interferon gene stimulating factor
  • cytokines cytokines
  • HSP heat shock protein
  • the “Toll-like receptor (TLR) agonist” is not particularly limited.
  • the “cytokine” is not particularly limited, but for example, IL-1 ⁇ , IL-1 ⁇ , IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL -9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, interferon (INF) - ⁇ , INF- ⁇ , Examples include INF- ⁇ , SCF, GM-CSF, G-CSF, M-CSF, erythropoietin, thrombopoietin, MIP (macrophage inflammatory protein) and MCP (monocyte chemoattractant protein).
  • HSP Heat shock protein
  • HSP90 inhibitors include, but are not limited to, Tanespimycin (17-AAG), Luminespib (AUY-922, NVP-AUY922), Alvespimycin (17-DMAG) hydrochloride, Ganetespib (STA-9090), BIIB021, Onalespib (AT13387), Geldanamycin, NVP-BEP800, SNX-2112 (PF-0428473), PF-4929113 (SNX-5422), KW-2478, XL888, VER155008, VER-50589, CH5138303, VER-49009 NMS-E973, PU-H71, HSP990 (NVP-HSP990), or KNK437.
  • histone deacetylation inhibitor histone demethylation inhibitor, histone acetylase inhibitor, histone methylase inhibitor, DNA methyltransferase inhibition Agent, anthracycline antibiotic, platinum preparation, MAPK inhibitor, ⁇ -catenin inhibitor, STAT3 inhibitor, NF-kB inhibitor, JAK inhibitor, mTOR inhibitor, IDO inhibitor, COX-2 inhibitor CXCR4 inhibitor Agents, arginase inhibitors and the like.
  • the “histone deacetylation inhibitor” is not particularly limited.
  • vorinostat SAHA, MK0683
  • entinostat MS-275
  • panobinostat LH589
  • TSA trichostatin A
  • mosetinostat MCD0103
  • BG45 BRD73955
  • Berinostat PXD101
  • Romidepsin FK228, Decipeptide
  • 4SC-202 HPOB
  • LMK-235 CAY10603
  • Taskinimod TMP269
  • Nexturastat A Rocilinostat (109Y-1256), RCP1296, R Scriptaid
  • Tubastatin A Pracinostat (SB939)
  • CUDC-101 M344, PCI 34051
  • dasinostat LAQ824)
  • tubastatin A hydrochloride abexinostat (PCI-24781)
  • CUDC-907 AR-42
  • sodium phenylbutyrate sodium phenylbutyrate
  • the “histone demethylation inhibitor” is not particularly limited.
  • GSK J4 HCl, OG-L002, JIB-04, IOX1, SP2509, ORY-1001 (RG-6016), GSK J1, ML324, GSK- LSD1, 2HCl and the like can be mentioned.
  • the “histone acetylase inhibitor” is not particularly limited, and examples thereof include C646, MG149, Remodelin, and Anacardic Acid.
  • the “histone methylase inhibitor” is not particularly limited, but for example, Pinometostat (EPZ5676), EPZ005678, GSK343, BIX01294, Tazemetostat (EPZ6438), 3-deazaneplanocin A (DZNeP) HCl, UNC1999C, MG-9, SG-102, Entacapone, EPZ015666, UNC0379, EI1, MI-2 (Menin-MLLMLInhibitor), MI-3 (Menin-MLL Inhibitor), PFI-2, GSK126, EPZ04777, BRD4770, GSK-2816126 and UNC0631.
  • the “DNA methyltransferase inhibitor” is not particularly limited, and examples thereof include decitabine, azatidine, RG108, thioguanine, zebraline, SGI-110, CC-486, SGI-1027, romegatorib and procainamide hydrochloride. .
  • anthracycline antibiotics inhibit DNA from being unwound by insertion between DNA strands.
  • examples of the anthracycline antibiotics include, but are not limited to, doxorubicin, liposomal doxorubicin, daunorubicin, pirarubicin, epirubicin, idarubicin, aclarubicin, amrubicin, aloin or mitoxatron.
  • platinum preparation is not particularly limited, and examples thereof include cisplatin, carboplatin, miboplatin, nedaplatin, satraplatin (JM-126), oxaliplatin (ELOXATIN), triplatin tetranitrate, and their DDS preparations.
  • the “MAPK inhibitor” is not particularly limited, but for example, SB203580, dramapimod (BIRB796), SB202190 (FHPI), LY2228820, VX-702, SB239063, Pexmetinib (ARRY-614), PH-797804, VX-745 or And TAK-715.
  • the “ ⁇ -catenin inhibitor” is not particularly limited.
  • XAV-939, ICG-001, IWR-1-endo, Wnt-C59 (C59), LGK-974, KY02111, IWP-2, IWP- L6, WIKI4, FH535, etc. are mentioned.
  • STAT3 inhibitor is not particularly limited.
  • S3I-201 Static, niclosamide, nifloxazide, napabucasin (BBI-608), cryptotanshinone, HO-3867, WHI-P154, FLLL32, STA-21, Examples thereof include WP1066 and SH-4-54.
  • NF-kB inhibitor is not particularly limited, and examples thereof include QNZ (EVP 4593), sodium 4-aminosalicylate, JSH-23, phenethyl caffeate, sodium salicylate, andrographolide or SC75741.
  • Examples of the “JAK inhibitor” include, but are not limited to, for example, ruxolitinib (INCB018424), tofacitinib (CP-6690550) citrate, AZD1480, fedratinib (SAR302503, TG101348), AT9283, tyrophostin B42 (AG-490), thimerotinib (CYT387), Tofacitinib (CP-690550, Tasocitinib), WP1066, TG101209, Gandotinib (LY2784544), NVP-BSK8052HCl, Varisitinib (LY30009104, INCB02850, CEP-33715B, CEP-33715BH) , S-luxoritinib (INCB018424), ZM39923 HCl, de Runochinibu (VX-509), Cerdulatinib (PRT062070, PRT2070), Firugochinibu (GL
  • the “mTOR inhibitor” is not particularly limited.
  • sirolimus rapamycin
  • deforolimus AP23573, MK-8669
  • everolimus RAD-001
  • temsirolimus CI-779, NSC683864
  • zotarolimus ABT-578)
  • biolimus A9 umilolimus
  • AZD8055 KU-0063794
  • Voxtalisib XL765, SAR245409
  • Torkinib PP242
  • the “IDO inhibitor” is not particularly limited, and examples thereof include NLG919, INCB024360 analog, indoximod (NLG-8189), and Epacadostat (INCB024360).
  • COX2 inhibitor examples include, but are not limited to, valdecoxib, rofecoxib, carprofen, celecoxib, lumiracoxib, tolfenamic acid, nimesulide, niflumic acid, Asaraldehyde, lornoxicam, sodium meclofenamic acid, amphenac sodium hydrate, diclofenac Examples thereof include sodium, ketoprofen, ketorolac, naproxen sodium, indomethacin, ibuprofen, aspirin, mefenamic acid, bromfenac sodium, oxaprozin, zaltoprofen and nepafenac.
  • CXCR4 inhibitor is not particularly limited, and examples thereof include WZ811, Plerixafor (AMD3100), Plerixafor 8HCl (AMD3100 8HCl), and the like.
  • the WT1 antigen peptide of the present invention shows an excellent anticancer effect even when used in combination with an immunomodulator, but the effect is further enhanced by combining it with several drugs in combination (multi-drug combination). Or improve the patient's QOL.
  • the WT1 antigen peptide of the present application includes “hormone therapy agent”, “immunotherapy agent”, “biological preparation”, “cell growth factor”, “cell growth factor inhibitor”, “cell growth factor receptor inhibitor”, It can be used in combination with one or more drugs selected from the group consisting of “radiotherapy agent”, “adjuvant” or “chemotherapeutic agent”.
  • the WT1 antigen peptide of the present application can be used in combination with 1 to 5 drugs selected from the above group. More preferably, the WT1 antigen peptide of the present application can be used in combination with 1 to 3 drugs selected from the above group. Particularly preferably, the WT1 antigen peptide of the present application can be used in combination with one drug selected from the above group.
  • a drug that can be used in combination with the WT1 antigen peptide and immunomodulator of the present application is abbreviated as a concomitant drug.
  • the dose of the concomitant drug can be appropriately selected based on the clinically used dose.
  • “Hormonal therapy agents” include corticosteroids (eg, steroidal anti-inflammatory drugs, estrogen preparations, progesterone preparations, androgen preparations, etc.), antiestrogens, estrogen regulators, estrogen synthesis inhibitors, antiandrogens, Examples include androgen regulators, androgen synthesis inhibitors, LH-RH agonist formulations, LH-RH antagonist formulations, aromatase inhibitors, steroid lactonase inhibitors, pill formulations, or agents that delay the metabolism of retinoids and retinoids.
  • corticosteroids eg, steroidal anti-inflammatory drugs, estrogen preparations, progesterone preparations, androgen preparations, etc.
  • antiestrogens eg., antiestrogens, estrogen regulators, estrogen synthesis inhibitors, antiandrogens
  • Examples include androgen regulators, androgen synthesis inhibitors, LH-RH agonist formulations, LH-RH antagonist formulations, aromat
  • hormoneal therapeutic agent examples include phosfestol, diethylstilbestrol, fluoxymesterol, chlorotrianicene, methyltestosterone, medroxyprogesterone acetate, megestrol acetate, chlormadinone acetate, cyproterone acetate, danazol, allyl Estrenol, gestrinone, mepartricin, raloxifene, oleroxifene, levormeloxifene, tamoxifen citrate, toremifene citrate, iodoxifene, pill formulation, mepithiostan, testrolactone, aminoglutethimide, goserelin acetate, buserelin, Leuprorelin, leuprolide, droloxifene, epithiostanol, ethynyl estradiol sulfonate, estramustine, fadrozole hydrochloride, Stro
  • immunotherapy agent examples include picibanil, krestin, schizophyllan, lentinan, ubenimex, interferon (IL) - ⁇ , interferon (IL) - ⁇ , interferon (IL) - ⁇ , interleukin, macrophage colony stimulating factor, granule Sphere colony stimulating factor, erythropoietin, lymphotoxin, BCG vaccine, corynebacterium parbum, levamisole, polysaccharide K, procodazole, anti-CTLA4 antibody, anti-PD-1 antibody or TLR agonist (eg TLR7 agonist, TLR8 agonist) Medicine, TLR9 agonist) and the like.
  • TLR agonist eg TLR7 agonist, TLR8 agonist
  • the “biological product” is not particularly limited, and examples thereof include interleukin-2 (Aldesleukin), interferon- ⁇ , interferon- ⁇ , interferon- ⁇ , erythropoietin (EPO), granulocyte colony-stimulating factor (filtrate).
  • interleukin-2 Aldesleukin
  • interferon- ⁇ interferon- ⁇
  • interferon- ⁇ interferon- ⁇
  • EPO erythropoietin
  • filtrate granulocyte colony-stimulating factor
  • the cell growth factor in the “cell growth factor”, “cell growth factor inhibitor” and “cell growth factor receptor inhibitor” may be any substance that promotes cell growth, such as molecular weight. Is a peptide of 20,000 or less, and a factor that exerts an action at a low concentration by binding to a receptor.
  • the “cell growth factor” is not particularly limited.
  • epidermal growth factor EGF
  • insulin-like growth factor IGF
  • IGF insulin-like growth factor
  • TGF Transforming Growth Factor
  • TGF TGF-alpha, TGF-beta
  • Nerve Growth Factor NGF
  • BDNF Brain-derived Neurotrophic Factor
  • VEGF Vascular Endothelial Growth Factor
  • CSF Colony Stimulating Factor
  • G-CSF Granulocyte-Colony Stimulating Factor
  • G-CSF Granulocyte Macrophage Colony Stimulating factor
  • GM-CSF Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor
  • platelet-derived growth factor PDGF
  • EPO erythropoietin
  • FGF Fibroblast Growth Factor
  • the “cell growth factor inhibitor” is not particularly limited, but for example, epidermal growth factor inhibitor (EGF inhibitor), insulin-like growth factor inhibitor (IGF inhibitor), nerve growth factor inhibitor (NGF inhibitor) Brain-derived neurotrophic factor inhibitor (NGF inhibitor), vascular endothelial growth factor inhibitor (VEGF inhibitor), colony stimulating factor inhibitor (CSF inhibitor), platelet-derived growth factor inhibitor (PDGF inhibitor), Examples include erythropoietin inhibitor (EPO inhibitor), fibroblast growth factor inhibitor (FGF inhibitor), hepatocyte growth factor inhibitor (HGF inhibitor), heregulin inhibitor, or angiopoietin inhibitor.
  • a cell growth factor inhibitor is synonymous with a growth factor inhibitor.
  • the “cell growth factor receptor inhibitor” is not particularly limited, and for example, epidermal growth factor receptor inhibitor (EGFR inhibitor), insulin-like growth factor receptor inhibitor (IGFR inhibitor), nerve growth factor receptor Body inhibitor (NGFR inhibitor), brain-derived neurotrophic factor receptor inhibitor (NGFR inhibitor), vascular endothelial growth factor inhibitor (VEGF inhibitor), colony stimulating factor inhibitor (CSF inhibitor), platelet-derived Growth factor receptor inhibitor (PDGFR inhibitor), erythropoietin receptor inhibitor (EPOR inhibitor), fibroblast growth factor receptor inhibitor (FGFR inhibitor), hepatocyte growth factor receptor inhibitor (HGFR inhibitor) ), A heregulin receptor inhibitor, or an angiopoietin receptor inhibitor.
  • the cell growth factor receptor inhibitor is synonymous with the growth factor receptor inhibitor.
  • the “radiotherapy agent” is not particularly limited, and examples thereof include radioactive substances and radiosensitizers.
  • Adjuvant is used to suppress side effects and vomiting caused by anticancer agents, and is not particularly limited.
  • aprepitant ondansetron, lorazepam, dexamethasone, diphenhydramine, ranitidine, cimetidine, ranitidine, famotidine, cimetidine , Procrit, epoetin alfa, filgrastim, oprelbekin, leucovorin and granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF).
  • chemotherapeutic agent is not particularly limited, but for example, alkylating agents, platinum preparations, antimetabolites, topoisomerase inhibitors, DNA intercalators, antimitotic agents, anticancer antibiotics, plant-derived anticancer agents, Epigenetic drugs, immunomodulators, molecular targeted therapeutics, angiogenesis inhibitors and other chemotherapeutic agents are used. A typical example is described below.
  • alkylating agent examples include, but are not limited to, nitrogen mustard, nitrogen mustard hydrochloride-N-oxide, chlorambucil, cyclophosphamide, ifosfamide, thiotepa, carbocon, improsulfan tosylate, busulfan, hydrochloric acid Nimustine, mitoblonitol, melphalan, dacarbazine, procarbazine, ranimustine, sodium estramstin phosphate, triethylenemelamine, carmustine, lomustine, streptozidine, piprobroman, etoglucid, altretamine, ambermuthine, dibrospium hydrochloride, fotemustine, predumustine , Uramustine, semustine, pumitepa, ribomustine, temozolomide, treosulphane, trophosfami , Dinostatin styramar, Adzeresin, Systemustin,
  • platinum preparation is not particularly limited, and examples thereof include cisplatin, carboplatin, miboplatin, nedaplatin, satraplatin, oxaliplatin, triplatin tetranitrate, and their DDS preparations.
  • the “antimetabolite” is not particularly limited, and examples thereof include a folate antimetabolite, a pyrimidine metabolism inhibitor, a purine metabolism inhibitor, a ribonucleotide reductase inhibitor, and a nucleotide analog.
  • the “antimetabolite” is not particularly limited, but for example, mercaptopurine, 6-mercaptopurine riboside, thioinosine, methotrexate, pemetrexed, eocitabine, enocitabine, cytarabine, cytarabine okphosphatate, ancitabine hydrochloride, 5-FU drug (For example, fluorouracil, carzonal, bennan, luconal, lunabon, tegafur, tegafur uracil, tegafur gimeracil oteracil potassium (TS-1), UFT, doxyfluridine, carmofur, galocitabine, emitefur, capecitabine, etc.) , Leucoporin calcium, tabloid, butosine, folinate calcium, levofolinate calcium, cladribine, emiteful, fludara , Gemcitabine, hydroxycarpamide, pentostatin, pyritrexim, i
  • topoisomerase inhibitor is not particularly limited, and for example, doxorubicin, daunorubicin, epirubicin, idarubicin, anthracenedione, mitoxantrone, mitomycin C, bleomycin, dactinomycin, pricatomycin, irinotecan, camptothecin, rubitecan, belotecan , Etoposide, teniposide, topotecan, amsacrine and their DDS preparations.
  • the “DNA intercalator” is not particularly limited, and examples thereof include proflavine, doxorubicin (adriamycin), daunorubicin, dactinomycin, thalidomide, and their DDS preparations.
  • the “anti-mitotic agent” is not particularly limited, but for example, paclitaxel, paclitaxel derivatives (eg, DHA paclitaxel, polyglutamate paclitaxel, nabupaclitaxel, paclitaxel micelle, 7 ⁇ -glucosyloxyacetyl paclitaxel, BMS-275183, etc.) , Docetaxel, vinol levin, vincristine, vinblastine, vindesine, vinzolidine, etoposide, teniposide, ixabepilone, larotaxel, oltaxel, tecetaxel, ispineci, colchicine, vinflunine and their DDS preparations.
  • paclitaxel paclitaxel derivatives (eg, DHA paclitaxel, polyglutamate paclitaxel, nabupaclitaxel, paclitaxel micelle, 7 ⁇ -glucosyloxyacetyl paclitaxel
  • anticancer antibiotic For example, actinomycin D, actinomycin C, mitomycin C, chromomycin A3, mitramycin A, bleomycin hydrochloride, bleomycin sulfate, pepromycin sulfate, daunorubicin hydrochloride, doxorubicin hydrochloride , Aclarubicin hydrochloride, pirarubicin hydrochloride, epirubicin hydrochloride, alumubicin hydrochloride, neocalcinostatin, dinostatin stimaramer, myramicin, sarcomomycin, carcinophylline, mitotane, zorubicin hydrochloride, mitoxantrone hydrochloride, idarubicin hydrochloride, liposomal doxo Virucine and their DDS formulations are exemplified.
  • the “plant-derived anticancer agent” is not particularly limited.
  • a DNA methylation inhibitor for example, a histone deacetylase (HDAC) inhibitor, a DNA methyltransferase (DNMT) inhibitor, a histone deacetylase activator , Histone demethylase inhibitors, methylated nucleotides, and the like.
  • HDAC histone deacetylase
  • DNMT DNA methyltransferase
  • Histone demethylase inhibitors methylated nucleotides, and the like.
  • the “epigenomic drug” is not particularly limited, and for example, vorinostat, belinostat, mosetinostat (MGCD0103), entinostat (SNDX-275), romidepsin, azacitidine, decitabine, GSK28779552 2Hl, SGC707, ORY-1001 (RG-6011) ), PFI-4, SirReal2, GSK2801, CPI-360, GSK503, AMI-1, CPI-169 and their DDS preparations.
  • the “immunomodulator” is not particularly limited, and examples thereof include thalidomide, lenalidomide, pomalidomide, and their DDS preparations.
  • the “molecular target therapeutic agent” may be a low molecular compound or an antibody.
  • the “molecular target therapeutic agent” is not particularly limited, and examples thereof include a kinase inhibitor, a proteasome inhibitor, a monoclonal antibody, an mTOR inhibitor, a TNF inhibitor, and a T cell inhibitor.
  • Kinase inhibitors are not particularly limited, but include, for example, tyrosine kinase inhibitors, serine / threonine kinase inhibitors, Raf kinase inhibitors, CDK (cyclin dependent kinase) inhibitors, and MEK (mitogen activation). Protein kinase) inhibitors and the like.
  • the ⁇ kinase inhibitor '' is not particularly limited. Serichinibu, Arekuchinibu, RUXOLITINIB, tofacitinib Iburuchinibu, sorafenib, vemurafenib, Dabrafenib, Paruboshikuribu, Trametinib, REGORAFENIB, Sejibanibu, lestaurtinib, Bandechinibu, vatalanib, seliciclib, Chibanchinibu, canertinib, Perichinibu, Tesebachinibu, cediranib, motesanib, midostaurin, Forechinibu, Kabozanteinibu, Selumetinib, neratinib, boraseltib, Rakachinibu enzastaurin, Tandeyuchinibu, semaxanib, Alvocidib, ICR-62, AEE788, PD0325901,
  • proteasome inhibitor is not particularly limited, and examples thereof include bortezomib, carfilzomib, and their DDS preparations.
  • the “monoclonal antibody” is not particularly limited, and for example, anti-CD22 antibody, anti-CD20 antibody, anti-CD25 antibody, anti-CD30 antibody, anti-CD33 antibody, anti-CD5 antibody, anti-CD52 antibody, anti-epidermal growth factor receptor antibody ( EGFR antibody), anti-vascular endothelial growth factor antibody (VEGF antibody), anti-TNF- ⁇ antibody, anti-IL-1 receptor antibody, anti-IL-2 receptor antibody, anti-IL-5 receptor antibody, anti-IL-6 receptor antibody, Anti-HER2 antibody, anti-IgE antibody, anti-IgG antibody, anti-RS virus antibody, anti-CCR4 antibody, anti-CTLA-4 (cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4, CD152) antibody, anti-PD-1 antibody, anti-RANKL (receptor) activator of nuclear factor ⁇ B ligand) antibody, anti-c-Met An antibody, an anti-CXCR4 antibody, etc. are mentioned.
  • the ⁇ monoclonal antibody '' is not particularly limited. , Ranibizumab, Sertolizumab, Ocrelizumab, Mogum Rizumab, Eculizumab, Pertuzumab, Alemtumab, MO Examples of DDS preparations It is done.
  • mTOR inhibitor examples include, but are not limited to, for example, everolimus (RAD001), rapamycin (sirolimus), AZD8055, temsirolimus (CCI-779, NSC683864) KU-0063794, Voxtalisib (XL-765, SAR245409), MHY1485 (BEZ235), PI-103, Torkinib (PP242) Ridaforolimus (Deforolimus, MK-8669), INK-128 (MLN0128), Torin1, Omiparisi (GSK2126458, GSK458), OSI-027, PF-0469150, G -0980, RG7422), GSK1059615, Gedatric (PF-05212384, PKI-587) , WYE-132, PP121, WYE-354, AZD2014, Torin2, WYE-687, CH5132799, WAY-600, ETP-46464, GDC-
  • TNF inhibitor is not particularly limited, and examples thereof include etanercept, lenalidomide (CC-5013), pomalidomide, thalidomide, necrostatin-1 or QNZ (EVP 4593).
  • T cell inhibitor is not particularly limited, and examples thereof include abatacept.
  • angiogenesis inhibitor examples include, but are not limited to, CM101, IFN- ⁇ , IL-12, platelet factor-4, suramin, cemaxanib, thrombospondin, VEGFR antagonist, angiogenesis-inhibiting steroid plus Heparin, cartilage-derived angiogenesis inhibitor, matrix metalloprotease inhibitor, batimastat, marimastat, angiostatin, endostatin, 2-methoxyestradiol, tecogalan, thrombospondin, ⁇ V ⁇ 3 inhibitor, linimide, ADH-1, E7820 And their DDS preparations.
  • the “other chemotherapeutic agent” is not particularly limited, and examples thereof include fistenalide, sobuzoxane, obatoclax, efaproxiral, tipifarnib, and lonafarnib.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is not particularly limited other than the WT1 antigen peptide and / or immunomodulator as an active ingredient, and may contain, for example, a pharmaceutically acceptable carrier. Moreover, since the WT1 antigen peptide contained in the pharmaceutical composition of the present invention induces WT1-specific CTL and / or helper T cells, in order to enhance the induction efficiency, the pharmaceutical composition of the present invention is an appropriate adjuvant. Or may be administered with a suitable adjuvant.
  • the “pharmaceutically acceptable carrier” of the present invention does not show toxicity to cells or mammals exposed to the carrier at the dose and concentration used.
  • a pharmaceutically acceptable carrier is often an aqueous pH buffered solution.
  • pharmaceutically acceptable carriers include: buffering agents (eg, phosphoric acid, citric acid, lactic acid, tartaric acid, trifluoroacetic acid and other organic acids); antioxidants (including ascorbic acid); low Molecular weight polypeptide (less than about 10 residues); protein (eg, serum albumin, gelatin or immunoglobulin); hydrophilic polymer (eg, polyvinylpyrrolidone); amino acid (eg, glycine, glutamine, asparagine, arginine, methionine or lysine); monosaccharide , Disaccharides and other carbohydrates (eg glucose, mannose or dextrin); chelating agents (eg EDTA); sugar alcohols (eg mannitol, trehalose or sorbitol):
  • the pharmaceutically acceptable carrier of the present invention is, for example, a large slow-release protein, polypeptide, liposome, polysaccharide, polylactose, polyglycolic acid, polymerized amino acid, amino acid copolymer, and inactive virus particles. It can be a macromolecule that is metabolized.
  • the WT1 antigen peptide can also be administered as a liposome preparation, a preparation having a particle diameter bound to beads having a diameter of several ⁇ m, a preparation having a lipid bound thereto, or the like.
  • the pharmaceutical composition of the present invention contains an appropriate adjuvant or can be administered together with an adjuvant so that cellular immunity can be established efficiently.
  • Adjuvants described in the literature (Clin. Microbiol. Rev., 7: 277-289, 1994) and the like can be applied, and specifically include bacterial cell-derived components, GM-CSF, interleukin- 2. Cytokines such as interleukin-7 or interleukin-12, plant-derived components, marine organism-derived components, mineral gels such as aluminum hydroxide, surfactants such as lysolecithin and pluronic polyols, polyanions, peptides, or oil emulsions A liquid (emulsion formulation) etc. can be mentioned.
  • the cell-derived components include lipid A (lipid A), its derivative monophospholino lipid A (monophosphoryl lipid A), dead cells of bacteria (including Mycobacterium genus bacteria such as BCG bacteria), bacteria-derived Examples thereof include proteins, polynucleotides, Freund's Incomplete Adjuvant, Freund's Complete Adjuvant, cell wall skeletal components (for example, BCG-CWS and the like), trehalose dimycolate (TDM) and the like.
  • lipid A lipid A
  • monophospholino lipid A monophosphoryl lipid A
  • dead cells of bacteria including Mycobacterium genus bacteria such as BCG bacteria
  • bacteria-derived examples thereof include proteins, polynucleotides, Freund's Incomplete Adjuvant, Freund's Complete Adjuvant, cell wall skeletal components (for example, BCG-CWS and the like), trehalose dimycolate (TDM) and the like.
  • Precipitating adjuvant represents an inorganic suspending agent to which a peptide is adsorbed.
  • Specific examples of the precipitating adjuvant include sodium hydroxide, aluminum hydroxide (Alum), calcium phosphate, aluminum phosphate, alum, pepes, carboxyvinyl polymer, and the like.
  • An oily adjuvant represents an oil emulsion in which an aqueous solution containing a peptide is wrapped with mineral oil to form micelles and emulsified.
  • oil-based adjuvant examples include liquid paraffin, lanolin, Freund's adjuvant (Freund's complete adjuvant, Freund's incomplete adjuvant), montanide, W / O emulsion (see WO2006 / 078059) and the like, but are not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is not particularly limited, but sugar alcohols such as mannitol, trehalose, and lactose, or hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, acetic acid, citric acid, tartaric acid, lactic acid, maleic acid, phosphoric acid, sodium hydroxide, Potassium hydroxide, aqueous ammonia, sodium acetate hydrate, anhydrous sodium acetate, sodium citrate hydrate, sodium dihydrogen citrate, sodium tartrate, disodium phosphate, dipotassium phosphate, sodium dihydrogen phosphate, phosphorus PH regulators, diluents, buffers, suspending agents, wetting agents, solubilizers, dispersants, preservatives and / or commonly used in pharmaceutical formulations, selected from potassium dihydrogen acid and trisodium phosphate, etc. Coloring agents can also be included.
  • sugar alcohols such as mannitol, trehalose, and lactose,
  • the pharmaceutical composition of the present invention is used as a solid preparation for internal use for oral administration, a liquid for internal use, and an injection, external preparation, suppository, inhalant, nasal preparation, etc. for parenteral administration.
  • solid preparation for internal use for oral administration include tablets, pills, capsules, powders, granules and the like.
  • Capsules include hard capsules and soft capsules. Tablets include sublingual tablets, buccal adhesive tablets, buccal quick disintegrating tablets and the like.
  • one or more active substances are left as they are, or excipients (lactose, mannitol, glucose, microcrystalline cellulose, starch, etc.), binders (hydroxypropylcellulose, polyvinylpyrrolidone, Mixed with magnesium metasilicate aluminate, etc., disintegrating agent (calcium cellulose glycolate, etc.), lubricant (magnesium stearate, etc.), stabilizer, solubilizing agent (glutamic acid, aspartic acid, etc.), etc. According to the formulation.
  • excipients lactose, mannitol, glucose, microcrystalline cellulose, starch, etc.
  • binders hydroxypropylcellulose, polyvinylpyrrolidone, Mixed with magnesium metasilicate aluminate, etc.
  • disintegrating agent calcium cellulose glycolate, etc.
  • lubricant magnesium stearate, etc.
  • solubilizing agent glycolutamic acid, aspartic acid, etc.
  • a coating agent sucrose, gelatin, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose phthalate, etc.
  • capsules of absorbable substances such as gelatin.
  • additives such as preservatives, antioxidants, colorants, sweeteners and the like that are commonly used can be added as necessary.
  • Sublingual tablets are manufactured according to known methods. For example, one or more active substances, excipients (lactose, mannitol, glucose, microcrystalline cellulose, colloidal silica, starch, etc.), binders (hydroxypropylcellulose, polyvinylpyrrolidone, magnesium aluminate metasilicate, etc.), disintegration Agents (starch, L-hydroxypropylcellulose, carboxymethylcellulose, croscarmellose sodium, calcium calcium glycolate, etc.), lubricants (magnesium stearate, etc.), swelling agents (hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, carbopol, Carboxymethylcellulose, polyvinyl alcohol, xanthan gum, guar gum, etc.), swelling aids (glucose, fructose, mannitol, xylitol, erythritol) Maltose, trehalose, phosphate, citrate, silicate, glycine, glutamic acid,
  • a coating agent sucrose, gelatin, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose phthalate, etc.
  • additives such as preservatives, antioxidants, colorants, sweeteners and the like that are commonly used can be added as necessary.
  • Oral adhesive tablets are produced according to known methods.
  • one or more active substances excipients (lactose, mannitol, glucose, microcrystalline cellulose, colloidal silica, starch, etc.), binders (hydroxypropylcellulose, polyvinylpyrrolidone, magnesium aluminate metasilicate, etc.), disintegration Agents (starch, L-hydroxypropylcellulose, carboxymethylcellulose, croscarmellose sodium, calcium calcium glycolate, etc.), lubricants (magnesium stearate, etc.), adhesives (hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, carbopol, Carboxymethylcellulose, polyvinyl alcohol, xanthan gum, guar gum, etc.), adhesion aids (glucose, fructose, mannitol, xylitol, erythritol) Maltose, trehalose, phosphate, citrate, silicate, glycine, glutamic acid
  • a coating agent sucrose, gelatin, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose phthalate, etc.
  • additives such as preservatives, antioxidants, colorants, sweeteners and the like that are commonly used can be added as necessary.
  • Oral quick disintegrating tablets are produced according to known methods.
  • one or more active substances as they are, or a coating agent (ethylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, acrylic acid / methacrylic acid copolymer, etc.) suitable for raw powder or granulated raw powder, plasticizer (polyethylene)
  • Active substances coated with glycol, triethyl citrate, etc. excipients (lactose, mannitol, glucose, microcrystalline cellulose, colloidal silica, starch, etc.), binders (hydroxypropylcellulose, polyvinylpyrrolidone, metasilicic acid) Magnesium aluminate, etc.), disintegrants (starch, L-hydroxypropylcellulose, carboxymethylcellulose, croscarmellose sodium, calcium calcium glycolate, etc.), lubricants (stearin Magnesium), dispersion aids (glucose, fructose, mannitol, xylit
  • ком ⁇ онент is mixed and used in a conventional manner. If necessary, it may be coated with a coating agent (sucrose, gelatin, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose phthalate, etc.), or may be coated with two or more layers. Moreover, additives such as preservatives, antioxidants, colorants, sweeteners and the like that are commonly used can be added as necessary.
  • a coating agent sucrose, gelatin, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose phthalate, etc.
  • additives such as preservatives, antioxidants, colorants, sweeteners and the like that are commonly used can be added as necessary.
  • Oral solutions for oral administration include pharmaceutically acceptable solutions, suspensions, emulsions, syrups, elixirs and the like.
  • one or more active substances are dissolved, suspended or emulsified in a commonly used diluent (purified water, ethanol or a mixture thereof).
  • this liquid agent may contain a wetting agent, a suspending agent, an emulsifier, a sweetening agent, a flavoring agent, a fragrance, a preservative, a buffering agent and the like.
  • External dosage forms for parenteral administration include, for example, ointments, gels, creams, poultices, patches, liniments, sprays, inhalants, sprays, aerosols, eye drops, and Nasal drops and the like are included. These contain one or more active substances and are produced by known methods or commonly used formulations.
  • the ointment is manufactured by a known or commonly used formulation. For example, it is prepared by grinding or melting one or more active substances in a base.
  • the ointment base is selected from known or commonly used ones.
  • higher fatty acids or higher fatty acid esters such as adipic acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid, adipic acid ester, myristic acid ester, palmitic acid ester, stearic acid ester, oleic acid ester, etc.
  • waxes beeswax) , Whale wax, ceresin, etc.
  • surfactants polyoxyethylene alkyl ether phosphates, etc.
  • higher alcohols cetanol, stearyl alcohol, cetostearyl alcohol, etc.
  • silicone oils dimethylpolysiloxane, etc.
  • hydrocarbons Hydrophilic petrolatum, white petrolatum, purified lanolin, liquid paraffin, etc.
  • Gel is manufactured by a known or commonly used formulation. For example, it is prepared by melting one or more active substances in a base.
  • the gel base is selected from known or commonly used ones.
  • lower alcohols ethanol, isopropyl alcohol, etc.
  • gelling agents carboxymethyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, ethyl cellulose, etc.
  • neutralizing agents triethanolamine, diisopropanolamine, etc.
  • surfactants monostearin
  • Acid polyethylene glycol, etc. gums, water, absorption promoters, anti-rash agents, or a mixture of two or more.
  • a preservative, an antioxidant, a flavoring agent and the like may be included.
  • Creams are manufactured by known or commonly used formulations. For example, it is prepared by melting or emulsifying one or more active substances in a base.
  • the cream base is selected from known or commonly used ones. For example, higher fatty acid esters, lower alcohols, hydrocarbons, polyhydric alcohols (propylene glycol, 1,3-butylene glycol, etc.), higher alcohols (2-hexyldecanol, cetanol, etc.), emulsifiers (polyoxyethylene alkyl ethers, fatty acids) Esters etc.), water, absorption promoters, anti-rash agents, or a mixture of two or more of them may be used. Furthermore, a preservative, an antioxidant, a flavoring agent and the like may be included.
  • the poultice is manufactured by a known or commonly used formulation. For example, it is produced by melting one or more active substances in a base material, and applying it as a kneaded product on a support.
  • the poultice base is selected from known or commonly used ones. For example, thickeners (polyacrylic acid, polyvinylpyrrolidone, gum arabic, starch, gelatin, methylcellulose, etc.), wetting agents (urea, glycerin, propylene glycol, etc.), fillers (kaolin, zinc oxide, talc, calcium, magnesium, etc.) ), Water, a solubilizing agent, a tackifier, and a rash prevention agent, or a mixture of two or more thereof. Furthermore, a preservative, an antioxidant, a flavoring agent and the like may be included.
  • the patch is manufactured by a known or commonly used formulation. For example, it is produced by melting one or more active substances in a base and spreading and coating them on a support.
  • the base for patch is selected from known or commonly used ones. For example, those selected from a polymer base, fats and oils, higher fatty acids, tackifiers and anti-rash agents may be used alone or in admixture of two or more. Furthermore, a preservative, an antioxidant, a flavoring agent and the like may be included.
  • the liniment is manufactured by a known or commonly used formulation.
  • one or more active substances may be dissolved, suspended or used alone or in combination of two or more selected from water, alcohol (ethanol, polyethylene glycol, etc.), higher fatty acids, glycerin, soap, emulsifier, suspending agent, etc. Prepared by emulsification.
  • a preservative, an antioxidant, a flavoring agent and the like may be included.
  • Sprays, inhalants, and sprays include buffers that provide isotonicity with stabilizers such as sodium bisulfite in addition to commonly used diluents, such as sodium chloride, sodium citrate or citric acid.
  • stabilizers such as sodium bisulfite
  • diluents such as sodium chloride, sodium citrate or citric acid.
  • An isotonic agent such as sodium bisulfite
  • injections for parenteral administration are solutions, suspensions, emulsions and solid injections used by dissolving or suspending in a solvent at the time of use.
  • An injection is used by dissolving, suspending or emulsifying one or more active substances in a solvent.
  • the solvent for example, distilled water for injection, physiological saline, vegetable oil, propylene glycol, polyethylene glycol, alcohols such as ethanol, and combinations thereof are used.
  • this injection may contain a stabilizer, a solubilizing agent (glutamic acid, aspartic acid, polysorbate 80 (registered trademark), etc.), a suspending agent, an emulsifier, a soothing agent, a buffering agent, a preservative, and the like.
  • a sterile solid preparation for example, a lyophilized product, can be produced and used by dissolving it in sterilized or sterile distilled water for injection or other solvent before use.
  • Inhalants for parenteral administration include aerosols, inhalable powders or inhalable solutions, which are used by dissolving or suspending them in water or other suitable media at the time of use. It may be. These inhalants are produced according to known methods. For example, in the case of inhalation solutions, preservatives (benzalkonium chloride, parabens, etc.), coloring agents, buffering agents (sodium phosphate, sodium acetate, etc.), isotonic agents (sodium chloride, concentrated glycerin, etc.) , And thickeners (such as cariboxyvinyl polymer) and absorption accelerators are appropriately selected as necessary.
  • preservatives benzalkonium chloride, parabens, etc.
  • coloring agents for example, in the case of inhalation solutions, preservatives (benzalkonium chloride, parabens, etc.), coloring agents, buffering agents (sodium phosphate, sodium acetate, etc.), isotonic agents (so
  • lubricants stearic acid and its salts
  • binders starch, dextrin, etc.
  • excipients lactose, cellulose, etc.
  • colorants e.g., kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, etc., binders (starch, dextrin, etc.), excipients (lactose, cellulose, etc.), colorants, preservatives (benzalkonium chloride) , Parabens, etc.), absorption promoters and the like are appropriately selected as necessary.
  • a nebulizer (atomizer, nebulizer) is usually used when administering a solution for inhalation, and an inhalation administration device for powder drug is usually used when administering a powder for inhalation.
  • sprays may contain a buffer that provides isotonicity with a stabilizer such as sodium bisulfite, for example, an isotonic agent such as sodium chloride, sodium citrate or citric acid. You may contain.
  • a stabilizer such as sodium bisulfite
  • an isotonic agent such as sodium chloride, sodium citrate or citric acid. You may contain.
  • the production method of the spray is described in detail in, for example, US Pat. No. 2,868,691 and US Pat. No. 3,095,355.
  • compositions for parenteral administration include suppositories for rectal administration and pessaries for intravaginal administration, which contain one or more active substances and are prescribed by conventional methods.
  • the pharmaceutical composition comprising a WT1 antigen peptide is one or more pharmaceutically acceptable selected from the group consisting of trehalose, mannitol, methionine, citric acid, lactic acid, tartaric acid, acetic acid, trifluoroacetic acid and a pH adjusting agent.
  • Carrier one or more pharmaceutically acceptable selected from the group consisting of trehalose, mannitol, methionine, citric acid, lactic acid, tartaric acid, acetic acid, trifluoroacetic acid and a pH adjusting agent.
  • the pharmaceutical composition comprising an immunomodulator is one or more selected from the group consisting of mannitol, sodium citrate hydrate, sodium chloride, diethylenetriaminepentaacetic acid, polysorbate 80 TM and a pH adjuster. Contains a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the administration method of the WT1 antigen peptide and the immunomodulator can be appropriately selected according to conditions such as the type of disease, the state of the subject, and the target site.
  • Such administration methods include, for example, intravenous, intramuscular, intradermal, intraperitoneal, subcutaneous, or spinal administration, or other parenteral routes of administration, such as by injection or infusion.
  • parenteral administration means a mode of administration by normal injection other than intestinal and topical administration, and is intravenous, intramuscular, intraarterial, intrathecal peritoneal, intracapsular, intraorbital, heart Includes, but is not limited to, intradermal, intraperitoneal, transtracheal, subcutaneous, epidermal, intraarticular, subcapsular, intrathecal, intraspinal, epidural and intrasternal injection and infusion.
  • the WT1 antigen peptide may be administered by lymphocyte therapy or DC (dendritic cell) therapy.
  • the immunomodulating agent can be administered by a transdermal administration route or a transmucosal administration route such as intranasal, intraoral, intravaginal, intrarectal or sublingual.
  • the WT1 antigen peptide of the present invention can prevent or treat cancer more effectively when combined with non-drug therapy in addition to an immunomodulator.
  • non-drug therapy include surgery, radiation therapy, gene therapy, hyperthermia, cryotherapy, laser ablation, etc., and two or more of these can be combined.
  • the pharmaceutical composition of the present invention or the pharmaceutical composition of the present invention and a concomitant drug are used before or after non-pharmaceutical therapy such as surgery, or before or after treatment combining two or three non-drug therapies. By doing so, effects such as inhibition of resistance development, prolongation of disease-free (Disease-Free Survival), suppression of cancer metastasis or recurrence, and life extension can be obtained.
  • the dose of the WT1 antigen peptide and the immunomodulator, the dosage form of the pharmaceutical composition, the number of administrations, and the like can be appropriately selected according to conditions such as the type of disease, the condition of the subject, and the target site.
  • the dose per dose of the WT1 antigen peptide is usually 0.0001 mg to 1000 mg, preferably 0.001 mg to 1000 mg, more preferably 0.1 mg to 10 mg.
  • the dose of the immunomodulator per kg body weight is usually 0.0001 mg to 1000 mg, preferably 0.001 mg to 1000 mg, more preferably 0.1 mg to 10 mg.
  • an “effective amount” is an amount of a WT1 antigen peptide or immunomodulator that completely or partially inhibits the progression of cancer or at least partially alleviates one or more symptoms of cancer. Or a combination of two or more WT1 antigen peptides or immunomodulators.
  • An effective amount can be a therapeutically or prophylactically effective amount. Effective amounts are determined by the patient's age and sex, the condition being treated, the severity of the condition, and the outcome sought. For a given patient, the effective amount can be determined by methods known to those skilled in the art.
  • the present invention can be used for the treatment or prevention (including prevention of recurrence) of a cancer in which the WT1 gene is expressed or a cancer accompanied by an increase in the expression level of the WT1 gene. Therefore, as an example of cancer in the present invention, in one embodiment, hematological cancer such as leukemia, myelodysplastic syndrome, multiple myeloma or malignant lymphoma, or stomach cancer, colon cancer, lung cancer, breast cancer, germ cell cancer, liver cancer , Solid cancers such as skin cancer, bladder cancer, prostate cancer, uterine cancer, cervical cancer, ovarian cancer, glioblastoma multiforme, malignant melanoma, non-small cell lung cancer, renal cell cancer or brain tumor.
  • hematological cancer such as leukemia, myelodysplastic syndrome, multiple myeloma or malignant lymphoma, or stomach cancer, colon cancer, lung cancer, breast cancer, germ cell cancer, liver cancer .
  • Solid cancers such as skin cancer, bladder cancer
  • the present invention is also expected to increase the T cell activation threshold and activate the tumor response in the host by using an immunomodulator together. Therefore, as examples of cancer in the present invention, as other embodiments, bone cancer, pancreatic cancer, head and neck cancer, malignant melanoma of the skin or orbit, rectal cancer, anal cancer, testicular cancer, carcinoma of the fallopian tube, endometrium Carcinoma, cervical carcinoma, vaginal carcinoma, vulvar carcinoma, Hodgkin disease, non-Hodgkin lymphoma, esophageal cancer, small intestine cancer, endocrine cancer, thyroid cancer, parathyroid cancer, adrenal cancer, soft tissue sarcoma, urethral cancer, penile cancer, Acute myeloid leukemia, chronic myelogenous leukemia, acute lymphoblastic leukemia, chronic or acute leukemia including chronic lymphocytic leukemia, childhood solid cancer, lymphocytic lymphoma, renal or ureteral cancer, renal pelvic carcinoma, central
  • mammal includes human and non-human animals.
  • Non-human animals include, but are not limited to, mammals such as non-human primates, sheep, dogs, cats, horses, cows.
  • mammals particularly human patients in need of enhanced immune response, are preferred.
  • the present invention is particularly suitable for the treatment of human patients with diseases that can be expected to be treated by promoting a T cell mediated immune response.
  • the WT1 antigen peptide and the immunomodulator may be contained in separate preparations or in a single preparation. That is, the pharmaceutical composition of the present invention includes a pharmaceutical composition containing a WT1 antigen peptide used in combination with an immunomodulator, a pharmaceutical composition containing an immunomodulator used in combination with a WT1 antigen peptide, or a WT1 antigen peptide and an immunomodulator. And a pharmaceutical composition (that is, a combination drug).
  • the pharmaceutical composition of the present invention can also be provided as a kit.
  • the kit includes a pharmaceutical composition containing a WT1 antigen peptide and a pharmaceutical composition containing an immunomodulator.
  • the pharmaceutical composition and kit of the present invention can be provided together with package inserts, packaging containers, instruction manuals, etc. describing the usage, dosage and the like in the combined use of the WT1 antigen peptide and an immunomodulator.
  • the pharmaceutical compositions and kits of the present invention can be provided as cancer therapeutics.
  • the WT1 antigen peptide and the immunomodulator may be administered simultaneously or separately. Further, the WT1 antigen peptide and the immunomodulator may be administered simultaneously or separately with a further concomitant drug.
  • “administered simultaneously” means that they are administered on the same administration schedule, and the active ingredient may be contained in a single preparation or in another preparation. When an active ingredient is contained in another formulation, all the formulations may be administered once and each formulation may be administered sequentially.
  • “Separate administration” means administration on different administration schedules, and after administration of one, the other is administered at a certain interval, either of which may be administered first, and the interval Is also optional. The frequency of administration of each active ingredient may be the same or different. For example, one may be administered once a day and the other may be administered twice or more a day.
  • the compounding ratio can be appropriately selected depending on the administration subject, administration route, target disease, symptom, or a combination thereof.
  • the administration subject is a human
  • the immunomodulator or the concomitant drug can be used in an amount of 0.01 to 100 parts by weight with respect to 1 part by weight of the WT1 antigen peptide.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be used in further combination with drugs such as antiemetics, sleep inducers, anticonvulsants, etc. for the purpose of suppressing side effects.
  • drugs such as antiemetics, sleep inducers, anticonvulsants, etc. for the purpose of suppressing side effects.
  • WT1 antigen peptide is a drug that increases tumor-reactive CTL in the tumor
  • the combination of WT1 antigen peptide and immunomodulator can reduce the dose of immunomodulator, that is, reduce adverse events There is a possibility.
  • the combined use of the WT1 antigen peptide and the immunomodulator may provide a patient with a therapeutic method that has both higher effects and higher safety.
  • Example 1 Combined effect of immune checkpoint inhibitor on tumor antigen peptide-specific cytotoxic T cell induction from human peripheral blood mononuclear cells
  • HLA-A * 02 01-positive adult peripheral blood mononuclear cells (PBMC) (CTL) were asleep, suspended in culture and 1.5 ⁇ in a U-bottom 96-well plate. The cells were seeded at 10 5 cells / well. Using a culture medium containing 5% human serum (Lonza) and 1% MEM non-essential amino acid solution (100 ⁇ ) (Life Technologies) in AIM V medium (Life Technologies) at 37 ° C., 5% CO The culture was performed under the conditions of 2 .
  • PBMC peripheral blood mononuclear cells
  • Mouse IgG1, ⁇ (BioLegend) was used as an isotype antibody of anti-human PD-1 antibody
  • Mouse IgG2b, ⁇ (BioLegend) was used as an isotype antibody of anti-human PD-L1 antibody.
  • anti-human PD-1 antibody, Mouse IgG2b, and ⁇ were added at 10 ⁇ g / mL, respectively.
  • anti-human PD-L1 antibody and Mouse IgG1, ⁇ were added at 10 ⁇ g / mL, respectively.
  • Mouse IgG1, ⁇ and Mouse IgG2b, ⁇ were added at 10 ⁇ g / mL, respectively.
  • WT1 killer peptide (compound of formula (3)) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 18) were added to the cultured cells at 20 ⁇ g / mL, respectively.
  • human IL-2 (Yoshio Shionogi) was added to 50 U / mL. Five and nine days after the start of the culture, half of the culture solution was replaced with a culture solution containing 100 U / mL human IL-2.
  • killer peptide A-specific CTL and killer peptide B-specific CTL were not detected in 24 samples.
  • group A to which anti-human PD-1 antibody was added killer peptide B-specific CTL was detected in 1 of 24 samples (FIG. 1).
  • group B to which anti-human PD-L1 antibody was added killer peptide A-specific CTL was detected in 1 sample (FIG. 2) and killer peptide B-specific CTL was detected in 2 samples (FIG. 3). The results are shown in Fig. 1-3.
  • the anti-human PD-1 antibody and anti-human PD-1 antibody which are immune checkpoint inhibitors, can enhance the efficiency of inducing CTL in a PBMC in vitro WT1 antigen peptide-stimulated culture system. Indicated.
  • Example 2 Effect of immune checkpoint inhibitor on immune response to peptide of WT1 antigen peptide-specific CTL
  • HLA-A * 02 01-positive adult peripheral blood mononuclear cells (CTL) were asleep, suspended in culture medium, and seeded in U-bottom 96-well plates.
  • CTL peripheral blood mononuclear cells
  • 20 ⁇ g / mL WT1 was added to a culture medium containing 5% human serum (Lonza) in AIM V medium (Life Technologies) and 1% MEM non-essential amino acid solution (100 ⁇ ) (Life Technologies).
  • the killer peptide B specific CTL was analyzed using Miltenyi Biotec).
  • Cells in wells in which killer peptide B (SEQ ID NO: 8) -specific CTL was detected were mixed to obtain a WT1 antigen peptide-specific CTL cell line.
  • the WT1 antigen peptide-specific CTL cell line was cryopreserved using a cell cryopreservation solution CELLBANKER (Nippon Zenyaku Kogyo).
  • the cryopreserved WT1 antigen peptide-specific CTL cell line was put to sleep and cultured overnight in a culture solution supplemented with 100 U / mL human IL-2 (Yoshio Shionogi).
  • the cells were collected, washed with the culture medium, and then added with anti-human PD-1 antibody (EH12.2H7) (Group A), and added with anti-human PD-L1 antibody (29E.243) (Group B) ), And a control group (group C) to which no anti-human PD-1 antibody and anti-human PD-L1 antibody were added, were cultured for 2 hours.
  • anti-human PD-1 antibody and Mouse IgG2b, ⁇ were added at 10 ⁇ g / mL, respectively.
  • anti-human PD-L1 antibody and Mouse IgG1, ⁇ were added at 10 ⁇ g / mL, respectively.
  • mouse IgG1, ⁇ and Mouse IgG2b, ⁇ were added at 10 ⁇ g / mL, respectively.
  • the same antibody as in Example 1 was used.
  • the specific response of the cells to the peptide was measured using IFN- ⁇ ELISPOT Set (BD).
  • Cells treated as described above were added to ELISPOT plates, and cultured for 18 hours, divided into groups to which killer peptide B (SEQ ID NO: 8) was added at 40 ⁇ g / mL and not. There were 2 samples in each group. Thereafter, the plate was processed according to the manufacturer's protocol, and spots were developed with ACE Substrate Set (BD). The number of spots was measured with an ELISPOT analyzer (C.T.L). For each of the A group, the B group, and the C group, the average value of the number of spots of the sample to which the peptide was not added was subtracted from the average value of the number of spots of the sample to which the peptide was added.
  • killer peptide B SEQ ID NO: 8
  • Example 3 Expression change of immune checkpoint molecule in mouse splenocytes administered cocktail cocktail of WT1 killer peptide and WT1 helper peptide HLA-A * 02 : 01 transgenic mice (C57BL / 6CrHLA-A2.1DR1) used in this study were A mouse that lacks mouse MHC and expresses a chimeric HLA of human MHC HLA-A02: 01 and mouse MHC H-2D b, and HLA-DRB1 * 01: 01 (Eur J Immunol .2004; 34: 3060-9).
  • CTL By using this mouse, it is possible to induce CTL with a peptide capable of binding to human HLA-A * 02 : 01. It is also possible to induce helper T cells with a peptide capable of binding to human HLA-DRB1 * 01 : 01 and evaluate the CTL induction enhancing effect.
  • a composition comprising a WT1 killer peptide (compound of formula (3)) and a WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 18) was mixed with an equal amount of incomplete Freund's adjuvant Montanide (ISA51VG) to make an emulsion.
  • the obtained cocktail vaccine (hereinafter referred to as vaccine) was administered twice into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice at weekly intervals (per mouse immunization). 1 mg WT1 killer peptide and 0.75 mg WT1 helper peptide).
  • mice in the vaccine administration group and the non-administration group were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed and spleen cells were prepared.
  • the splenocytes were treated with FITC-labeled anti-CD8 antibody (BD Pharmingen), PE-labeled anti-CD4 antibody (BD Pharmingen), HLA tetramer reagent for PE-labeled WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 8), MBL, and APC.
  • APC-labeled isotype control (BD Pharmingen, clone J43), APC-labeled isotype control (BD Pharmingen, Hamster IgG2, ⁇ ) antibody, APC-labeled anti-PD-L1 antibody (manufactured by BioLegends, clone 10F.9G2), and After staining with an APC-labeled isotype control (eBioscience, Rat IgG2b, ⁇ ) antibody, analysis was performed using a flow cytometer MACSQuant Analyzer (Miltenyi Biotec).
  • the one-dot short chain line is a CD8 positive tetramer positive fraction derived from a spleen cell administered with a vaccine
  • a broken line is a CD8 positive tetramer negative fraction derived from a spleen cell administered with a vaccine
  • a solid line is derived from a spleen non-vaccinated individual
  • the expression of PD-1 (FIG. 5) and PD-L1 (FIG. 8) in the CD8 positive tetramer negative fraction is shown.
  • the dotted line indicates the staining result using the isotype control.
  • the broken line indicates CD4 positive T cells (FIGS.
  • CD4 negative CD8 negative cells derived from the spleen of the vaccine recipient, and the solid line indicates the spleen of the non-vaccinated individual.
  • Expression of PD-1 (FIGS. 6 and 7) and PD-L1 (FIGS. 9 and 10) in CD4 positive T cells (FIGS. 6 and 9) derived from CD4 negative CD8 negative cells (FIGS. 7 and 10) Indicates.
  • the dotted line indicates the staining result using the isotype control.
  • high expression induction of PD-1 was observed in CD8 positive T cells, particularly CD8 positive WT1 tetramer positive T cells by vaccine administration (FIGS. 5-7).
  • PD-L1 was expressed in all cells regardless of whether or not vaccine was administered, but CD4 positive T cells showed increased expression by vaccine administration (FIGS. 8-10). From these results, it was found that PD-1 or PD-L1 expression was induced in WT1-specific CD8-positive T cells or CD4-positive T cells by vaccine administration.
  • Example 4 Action of immune checkpoint inhibitor on immune response of WT1 antigen peptide-specific T cells to tumor cells
  • a composition containing a WT1 killer peptide and a WT1 helper peptide is mixed with an equal amount of montanide and emulsified. Thereafter, it was administered into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice (1 mg of WT1 killer peptide and 0.75 mg of WT1 helper peptide were administered per immunization of one mouse).
  • the mice were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed, and a spleen cell suspension was prepared using Complete T-cell medeium (hereinafter CTM).
  • CTM Complete T-cell medeium
  • the WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) was dissolved in DMSO to 40 mg / mL, and further diluted to 500 ⁇ g / mL with CTM. This peptide solution was added to a part of the prepared splenocytes, and left at 37 ° C., 5% CO 2 at a final concentration of 100 ⁇ g / mL for about 1 hour. After washing excess peptide with CTM, peptide-pulsed splenocytes and non-peptide-pulsed splenocytes were mixed at a ratio of 1:10.
  • an anti-PD-1 antibody Bio X cell, clone RMP1-14
  • an isotype control antibody Bio X cell, Rat IgGa, ⁇
  • the cultured spleen cells were washed with RPMI1640 medium containing 10% FBS to obtain responder cells.
  • WT1 killer peptide SEQ ID NO: 2 was dissolved in DMSO to 40 mg / mL, and further diluted to 100 ⁇ g / mL in RPMI 1640 medium containing 10% FBS.
  • the mouse lymphoma-derived cell line EL4 S3-Rob (Eur J Immunol. 1990; 20: 171-7) was replaced with the ⁇ 3 domain of the HHD (human HLA-A * 02 : 01 molecule) and the ⁇ 3 domain of the mouse MHC class I molecule H-2Db.
  • a cell line stably expressing the substituted chimeric HLA molecule (J Exp Med. 1997; 185: 2043-51) (hereinafter EL4HHD) was suspended in the above-mentioned peptide-containing RPMI1640 medium or peptide-free RPMI1640 medium, It was left to stand at 37 ° C. and 5% CO 2 for 1 hour.
  • Combination of an antibody against PD-1 or PD-L1 and a WT1 antigen peptide leads to efficient induction of WT1-specific T cells, and increased expression of immune checkpoint molecules in T cells induced by vaccine administration It was found that the activity of WT1 antigen peptide-specific T cells induced by the WT1 antigen peptide is increased by treatment with an antibody against PD-1 or PD-L1. From this, it is expected that the combination therapy of the WT1 antigen peptide and the immune checkpoint inhibitor synergistically improves the therapeutic effect of each single agent, and can contribute to the improvement of the therapeutic effect of cancer and the improvement of QOL.
  • Example 5 Action of various concomitant agents on immune response to WT1 antigen peptide-specific T cells and tumor cells
  • WT1 killer peptide compound of formula (3)
  • WT1 helper peptide SEQ ID NO: 18
  • the prepared WT1 killer peptide solution was added to a part of the splenocytes and allowed to stand at 37 ° C. and 5% CO 2 at a final concentration of 100 ⁇ g / mL for about 1 hour. After washing excess peptide with CTM, peptide-pulsed splenocytes and non-peptide-pulsed cells were mixed at a ratio of 1:10, and seeded at a U-bottom 96-well plate at 3.85 ⁇ 10 5 cells / well.
  • an X-ray was obtained from a cell line obtained by stably expressing HHD and the WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) in the mouse Lewis lung cancer-derived cell line LLC (hereinafter also referred to as LLC-HHD-WT1 tumor cell).
  • LLC-HHD-WT1 tumor cell LLC-HHD-WT1 tumor cell.
  • the LLC-HHD-WT1 tumor cells were seeded and mixed at 5 ⁇ 10 4 cells / well or 3.5 ⁇ 10 4 cells / well in a U-bottom 96-well plate seeded with splenocytes, and mixed with CTM (medium), Alternatively, an isotype control antibody, an immune checkpoint inhibitor, a costimulatory molecule agonist antibody, a TLR agonist, or a ⁇ -catenin inhibitor was added and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 for about 3 days.
  • anti-PD-1 antibody BioLegend, clone 29F.1A12
  • anti-TIM-3 antibody BioLegend, clone RMT3-23
  • anti-CD160 antibody eBioscience, clone eBioCNX46-3
  • Anti-LAG-3 antibody BioLegend, clone C9B7W
  • anti-BTLA antibody BioLegend, clone 6A6
  • anti-PD-L1 antibody eBiosciecne, clone MIH5
  • anti-VISTA antibody BioLegend, clone MH5A
  • anti-PVR antibody Hycult Biotech, clone 3F1
  • Anti-4-1BB antibody (Bio X Cell, clone LOB12.3), anti-OX-40 antibody (Bio X Cell, clone OX-86), anti-GITR antibody (BioLegend, clone DTA) as costimulatory molecule agonist antibodies -1), anti-CD-40 antibody (BioLegend, clone 1C10) was used at a final concentration of 30 ⁇ g / mL.
  • Rat IgG2a ⁇ (BD Pharmingen) as an isotype control antibody corresponding to anti-PD-1 antibody, anti-TIM-3 antibody, anti-CD160 antibody, and anti-CD-40 antibody, and anti-PD-L1 antibody and anti-PVR antibody
  • Rat IgG2a (Bio X Cell) as an isotype control antibody
  • Armenian Hamster IgG (eBioscience) as an antitype control antibody corresponding to anti-BTLA antibody, anti-HVEM antibody, and anti-VISTA antibody
  • anti-LAG-3 antibody anti-4 Rat IgG1 ⁇ (eBiosciecne) was used as an isotype control antibody corresponding to the ⁇ 1BB antibody and anti-OX-40 antibody
  • Rat IgG2b (Bio X Cell) was used as an isotype control antibody corresponding to the anti-GITR antibody.
  • TLR3 agonist PolyI C HMW (GE Healthcare, final concentration 30 ⁇ g / mL) and PolyI: C LMW (GeneDesign, final concentration 30 ⁇ g / mL), TLR7 agonist Imiquimod (final concentration 10 ⁇ g) / ML), R848 as TLR7 / 8 agonist (final concentration 1 ⁇ mol / L), and CpG-ODN-D19 (final concentration 1 ⁇ mol / L) as TLR9 agonist, CpG-ODN-1826 (final concentration 1 ⁇ mol / L) ), And CpG-ODN-C583 (final concentration 1 ⁇ mol / L).
  • XAV939 was used at a final concentration of 5 ⁇ mol / L.
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • Fig. 12-15 The results are shown in Fig. 12-15.
  • the immune checkpoint inhibitor is added and cultured (FIGS. 12A to 12I) or when the costimulatory molecule agonist antibody is added and cultured (FIGS. 13A to 13D), the isotype control antibody for each is added and cultured. In comparison, high IFN- ⁇ production was observed. Also, when TLR agonists (FIGS. 14A to 14D) or ⁇ -catenin inhibitors (FIG. 15) were added and cultured, compared to the case where CTM medium was added and cultured, IFN- ⁇ production was higher. Accepted the amount.
  • Example 6 Effects of various concomitant agents on the immune activity of WT1 antigen peptide-specific T cells derived from tumor-bearing organisms HLA-A2402 / Kb (human HLA-A * 24: 02 ⁇ 3 domain of mouse MHC class in mouse lymphoma cell line EL4 A cell line stably expressing a WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 4) and an EL4-A24 / Kb-WT1 tumor cell (also described as EL4-A24 / Kb-WT1 tumor cells) ) was suspended in Hanks balanced salt solution and transplanted into the ventral skin of HLA-A * 24 : 02 transgenic mice (3 ⁇ 10 5 or 5 ⁇ 10 5 per mouse).
  • a composition containing a WT1 killer peptide (compound of formula (3)) and a WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 18) was mixed with an equal amount of montanide and emulsified.
  • HLA-A * 24 : 02 transgenic mice were administered in two portions in the forelimb root bark and in the hindlimb root bark (1 mg of WT1 killer peptide and 0.75 mg per mouse dose) Of WT1 helper peptide).
  • 15 days after tumor implantation the mice were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed and a spleen cell suspension was prepared using CTM.
  • the spleen cells were seeded in a U-bottom 96-well plate at 3.85 ⁇ 10 5 cells / well, and CTM, isotype control antibody, immune checkpoint inhibitor, or costimulatory molecule agonist antibody was added at 37 ° C. Cultured for about 3 days under 5% CO 2 .
  • an immune checkpoint inhibitor anti-PD-1 antibody (BioLegend, clone 29F.1A12), anti-CTLA-4 antibody (BioLegend, clone UC10-4B9), anti-TIGIT antibody (Bio X Cell, clone 1G9) Used at a final concentration of 30 ⁇ g / mL.
  • an anti-ICOS antibody (BioLegend, clone C398.4A) was used at a final concentration of 30 ⁇ g / mL.
  • Rat IgG2a ⁇ (BD Pharmingen) as an isotype control antibody corresponding to anti-PD-1 antibody
  • Armenian Hamster IgG eBioscience
  • Mouse IgG1 (Bio X Cell) was used as a corresponding isotype control antibody.
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • Example 7 Effects of various concomitant agents on immune response to WT1 antigen peptide-specific T cells and tumor cells Montanide in an equal amount of a composition containing WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 11) And then emulsified and administered into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice (0.3 mg of WT1 killer peptide and 0.3 mg of WT1 helper peptide were administered to each mouse) ).
  • the mice were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed and a spleen cell suspension was prepared using CTM.
  • WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) was dissolved in DMSO at 40 mg / mL.
  • the prepared WT1 killer peptide solution was added to a part of the splenocytes and allowed to stand at 37 ° C. and 5% CO 2 at a final concentration of 100 ⁇ g / mL for about 1 hour.
  • peptide-pulsed splenocytes and non-peptide-pulsed cells were mixed at a ratio of 1:10, and seeded at a U-bottom 96-well plate at 3.85 ⁇ 10 5 cells / well.
  • LLC-HHD-WT1 tumor cells were irradiated with X-rays (50 Gy), cultured in the presence of mouse recombinant IFN- ⁇ at a final concentration of 100 ng / mL for about 2 days, and washed with CTM.
  • This LLC-HHD-WT1 tumor cell is seeded and mixed in a U-bottom 96-well plate seeded with splenocytes at 3.5 ⁇ 10 4 cells / well, and mixed with CTM, isotype control antibody, or immune checkpoint inhibitor Alternatively, a costimulatory molecule agonist antibody was added and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 for about 3 days.
  • anti-PD-1 antibody BioLegend, clone 29F.1A12
  • anti-B7-H4 antibody BioLegend, clone HMH4-5G1
  • anti-PD-L1 antibody eBiosciecne, clone MIH5
  • costimulatory molecule agonist antibodies anti-4-1BB antibody (Bio X Cell, clone LOB12.3) and anti-OX-40 antibody (Bio X Cell, clone OX-86) were used at a final concentration of 30 ⁇ g / mL.
  • Rat IgG2a ⁇ (BD Pharmingen) as an isotype control antibody corresponding to anti-PD-1 antibody
  • Rat IgG2a Bio X Cell
  • Rat IgG1 ⁇ eBiosciecne
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • FIGS. 18-19 The results are shown in FIGS. 18-19.
  • the immune checkpoint inhibitor is added and cultured (FIGS. 18A-C), or when the costimulatory molecule agonist antibody is added and cultured (FIGS. 19A-B), the isotype control antibody for each is added and cultured. In comparison, high IFN- ⁇ production was observed. From these results, it was shown that the immune checkpoint inhibitor and the costimulatory molecule agonist enhance the reactivity of the WT1 antigen peptide-specific CTL to peptides and tumor cells.
  • Example 8 Effects of various concomitant agents on immune response to WT1 antigen peptide-specific T cells and tumor cells Montanide in an equal amount of a composition containing WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 14) And then emulsified and administered into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice (0.3 mg of WT1 killer peptide and 0.3 mg of WT1 helper peptide were administered to each mouse) ).
  • the mice were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed and a spleen cell suspension was prepared using CTM.
  • WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) was dissolved in DMSO at 40 mg / mL.
  • the prepared WT1 killer peptide solution was added to a part of the splenocytes and allowed to stand at 37 ° C. and 5% CO 2 at a final concentration of 100 ⁇ g / mL for about 1 hour.
  • peptide-pulsed splenocytes and non-peptide-pulsed cells were mixed at a ratio of 1:10, and seeded at a U-bottom 96-well plate at 3.85 ⁇ 10 5 cells / well.
  • LLC-HHD-WT1 tumor cells were irradiated with X-rays (50 Gy), cultured in the presence of mouse recombinant IFN- ⁇ at a final concentration of 100 ng / mL for about 2 days, and washed with CTM.
  • This LLC-HHD-WT1 tumor cell is seeded and mixed in a U-bottom 96-well plate seeded with splenocytes at 3.5 ⁇ 10 4 cells / well, and mixed with CTM, isotype control antibody, or immune checkpoint inhibitor Alternatively, a costimulatory molecule agonist antibody was added and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 for about 3 days.
  • anti-PD-1 antibody BioLegend, clone 29F.1A12
  • anti-B7-H4 antibody BioLegend, clone HMH4-5G1
  • anti-PD-L1 antibody eBiosciecne, clone MIH5
  • costimulatory molecule agonist antibodies anti-4-1BB antibody (Bio X Cell, clone LOB12.3) and anti-OX-40 antibody (Bio X Cell, clone OX-86) were used at a final concentration of 30 ⁇ g / mL.
  • Rat IgG2a ⁇ (BD Pharmingen) as an isotype control antibody corresponding to anti-PD-1 antibody
  • Rat IgG2a Bio X Cell
  • Rat IgG1 ⁇ eBiosciecne
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • Fig. 20-21 The results are shown in Fig. 20-21.
  • the immune checkpoint inhibitor is added and cultured (FIGS. 20A to 20C), or when the costimulatory molecule agonist antibody is added and cultured (FIGS. 21A and B), the isotype control antibody for each is added and cultured. In comparison, high IFN- ⁇ production was observed. From these results, it was shown that the immune checkpoint inhibitor and the costimulatory molecule agonist enhance the reactivity of the WT1 antigen peptide-specific CTL to peptides and tumor cells.
  • Example 9 Effects of various concomitant agents on immune response to WT1 antigen peptide-specific T cells and tumor cells Montanide in an equal amount of a composition containing WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 26) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 37) And then emulsified and administered into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice (0.234 mg of WT1 killer peptide and 0.234 mg of WT1 helper peptide were administered to each mouse) ).
  • the mice were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed and a spleen cell suspension was prepared using CTM.
  • the WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 26) was dissolved in DMSO at 40 mg / mL.
  • the prepared WT1 killer peptide solution was added to a part of the splenocytes and allowed to stand at 37 ° C. and 5% CO 2 at a final concentration of 100 ⁇ g / mL for about 1 hour.
  • peptide-pulsed splenocytes and non-peptide-pulsed cells were mixed at a ratio of 1:10, and seeded at a U-bottom 96-well plate at 3.85 ⁇ 10 5 cells / well.
  • LLC-HHD-WT1 tumor cells were irradiated with X-rays (50 Gy), cultured in the presence of mouse recombinant IFN- ⁇ at a final concentration of 100 ng / mL for about 2 days, and washed with CTM.
  • This LLC-HHD-WT1 tumor cell is seeded and mixed in a U-bottom 96-well plate seeded with splenocytes at 3.5 ⁇ 10 4 cells / well, and mixed with CTM, isotype control antibody, or immune checkpoint inhibitor was added and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 for about 3 days.
  • anti-PD-1 antibody BioLegend, clone 29F.1A12
  • anti-PD-L1 antibody eBiosciecne, clone MIH5
  • Rat IgG2a ⁇ (BD Pharmingen) was used as an isotype control antibody corresponding to the anti-PD-1 antibody
  • Rat IgG2a (Bio X Cell) was used as an isotype control antibody corresponding to the anti-PD-L1 antibody.
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • Example 10 Effects of various concomitant agents on immune response to WT1 antigen peptide-specific T cells and tumor cells Montanide in an equal amount of a composition containing WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 5) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 11) And then emulsified and administered into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice (0.3 mg of WT1 killer peptide and 0.3 mg of WT1 helper peptide were administered to each mouse) ).
  • the mice were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed and a spleen cell suspension was prepared using CTM.
  • WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 5) was dissolved in DMSO at 40 mg / mL.
  • the prepared WT1 killer peptide solution was added to a part of the splenocytes and allowed to stand at 37 ° C. and 5% CO 2 at a final concentration of 100 ⁇ g / mL for about 1 hour.
  • peptide-pulsed splenocytes and non-peptide-pulsed cells were mixed at a ratio of 1:10, and seeded at a U-bottom 96-well plate at 3.85 ⁇ 10 5 cells / well.
  • LLC-HHD-WT1 tumor cells were irradiated with X-rays (50 Gy), cultured in the presence of mouse recombinant IFN- ⁇ at a final concentration of 100 ng / mL for about 2 days, and washed with CTM.
  • This LLC-HHD-WT1 tumor cell is seeded and mixed in a U-bottom 96-well plate seeded with splenocytes at 3.5 ⁇ 10 4 cells / well, and mixed with CTM, isotype control antibody, or immune checkpoint inhibitor Alternatively, a costimulatory molecule agonist antibody was added and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 for about 3 days.
  • anti-PD-1 antibody BioLegend, clone 29F.1A12
  • anti-B7-H4 antibody BioLegend, clone HMH4-5G1
  • anti-PD-L1 antibody eBiosciecne, clone MIH5
  • Anti-4-1BB antibody Bio X Cell, clone LOB12.3
  • anti-OX-40 antibody Bio X Cell, clone OX-86
  • anti-GITR antibody BioLegend, clone DTA
  • Rat IgG2a ⁇ (BD Pharmingen) as an isotype control antibody corresponding to anti-PD-1 antibody
  • Rat IgG2a Bio X Cell
  • Rat IgG2a Bio X Cell
  • Armenian Hamster IgG eBioscience
  • Rat IgG1 ⁇ eBiosciecne
  • Rat IgG2b Bio X Cell
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • FIGS. 23-24 The results are shown in FIGS. 23-24.
  • the immune checkpoint inhibitor is added and cultured (FIGS. 23A to C), or when the costimulatory molecule agonist antibody is added and cultured (FIGS. 24A to C), the isotype control antibody for each is added and cultured. In comparison, high IFN- ⁇ production was observed. From these results, it was shown that the immune checkpoint inhibitor and the costimulatory molecule agonist enhance the reactivity of the WT1 antigen peptide-specific CTL to peptides and tumor cells.
  • Example 11 Immune checkpoint inhibitor was used to enhance the effect this study vaccine for in vivo tumor growth inhibitory effect of HLA-A * 24:02 transgenic mice (C57BL / 6CrHLA-A24 / Kb ) is a human MHC HLA A mouse that expresses a chimeric HLA of A24: 02 and mouse MHC, H-2Kb (Int. J. Cancer 2002; 100: 565-570). By using this mouse, CTL can be induced with a peptide capable of binding to human HLA-A * 24:02.
  • EL4-A24 / Kb-WT1 tumor cells were suspended in Hank's balanced salt solution and transplanted into the ventral skin of HLA-A * 24: 02 transgenic mice (3 ⁇ 10 5 per mouse) .
  • a group (group d) to administer vaccine and anti-PD-1 antibody was established. Five mice were used for each group.
  • mice in groups a and b were mixed with an equal amount of montanide and emulsified with a composition containing water for injection. Were administered in two locations (0.1 mL was administered per administration per mouse).
  • the mice of group c and group d were mixed with a composition containing WT1 killer peptide (compound of formula (3)) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 18) with an equal amount of montanide, and then emulsified.
  • -A * 24 : 02 transgenic mice were administered in two parts in the forelimb and hindlimb roots (0.5 mg of WT1 killer peptide and 0.375 mg per dose per mouse) Of WT1 helper peptide).
  • phosphate buffered saline was administered intraperitoneally to mice in group a (0.1 mL per dose per mouse). Administration).
  • Anti-PD-1 antibody Bio X Cell, clone RMP1-14
  • An isotype control antibody Bio X Cell, rat IgG2a
  • Tumor diameter was measured 4 days, 7 days, 10 days, 11 days, 17 days, and 21 days after tumor transplantation, and the tumor volume and the percentage of tumor rejection individuals were calculated.
  • Example 12 Vaccine enhancement effect against in vivo tumor growth suppression effect by immune checkpoint inhibitor
  • EL4-A24 / Kb-WT1 tumor cells were suspended in Hank's balanced salt solution and transplanted into the ventral skin of HLA-A * 24: 02 transgenic mice (3 ⁇ 10 5 per mouse) .
  • a group (group d) to administer vaccine and anti-CTLA-4 antibody was established. Six mice were used for each group.
  • mice in groups a and b were mixed with an equal amount of montanide and emulsified with a composition containing water for injection. It was administered in two places in the hindlimb root bark (0.1 mL was administered per administration per mouse).
  • the mice of group c and group d were mixed with a composition containing WT1 killer peptide (compound of formula (3)) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 18) with an equal amount of montanide, and then emulsified.
  • Example 13 Effect of various concomitant agents on WT1 antigen peptide-specific T cell peptide induced by cocktail vaccine and immunoreactivity to tumor cells Includes WT1 killer peptide (compound of formula (3)) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 18)
  • the composition was mixed with an equal amount of Montanide to make an emulsion and then administered into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice (0.5 mg of WT1 killer peptide and 0. 1 per mouse). 375 mg WT1 helper peptide administered).
  • a composition containing a WT1 killer peptide (compound of formula (3)) was mixed with an equal amount of montanide to make an emulsion, and then administered into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice ( 0.5 mg of WT1 killer peptide was administered per mouse).
  • the mice were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed and spleen cells were prepared using CTM.
  • the spleen cells were stained with HLA tetramer reagent (MBL) against FITC-labeled anti-CD8 antibody (BD Pharmingen) and PE-labeled WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2), and killer peptide-specific using a flow cytometer. CTL analysis was performed.
  • a WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) solution was added to a part of the spleen cells, and left at 37 ° C., 5% CO 2 at a final concentration of 100 ⁇ g / mL for about 1 hour.
  • peptide-pulsed splenocytes and non-peptide-pulsed cells were mixed at a ratio of 1:10 and seeded in a U-bottom 96-well plate at 3.85 ⁇ 10 5 cells / well at 37 ° C. Cultured for about 3 days under 5% CO 2 .
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • LLC-HHD-WT1 tumor cells were irradiated with X-rays (50 Gy), then cultured in the presence of mouse recombinant IFN- ⁇ at a final concentration of 100 ng / mL for about 2 days, and washed with CTM. .
  • This LLC-HHD-WT1 tumor cell is seeded and mixed in a U-bottom 96-well plate seeded with splenocytes at 3.5 ⁇ 10 4 cells / well, and mixed with CTM, isotype control antibody, or immune checkpoint inhibitor Alternatively, a costimulatory molecule agonist antibody or ⁇ -catenin inhibitor was added and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 for about 3 days.
  • anti-PD-1 antibody BioLegend, clone 29F.1A12
  • anti-LAG-3 antibody BioLegend, clone C9B7W
  • anti-BTLA antibody BioLegend, clone 6A6
  • An antibody eBiosciecne, clone MIH5
  • an anti-VISTA antibody BioLegend, clone MH5A
  • Anti-4-1BB antibody (Bio X Cell, clone LOB12.3), anti-OX-40 antibody (Bio X Cell, clone OX-86), anti-GITR antibody (BioLegend, clone DTA) as costimulatory molecule agonist antibodies -1) was used at a final concentration of 30 ⁇ g / mL.
  • Rat IgG2a ⁇ (BD Pharmingen) as an isotype control antibody corresponding to anti-PD-1 antibody
  • Rat IgG2a Bio X Cell
  • Rat IgG2a Bio X Cell
  • Armenian Hamster IgG eBioscience
  • Rat IgG1 ⁇ eBiosciecne
  • Rat IgG2b Bio X Cell
  • XAV939 was used as an isotype control antibody corresponding to the antibody.
  • XAV939 was used as a final concentration of 5 ⁇ mol / L.
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • FIGS. 27-32 The results are shown in FIGS. 27-32.
  • the spleen cells of a mouse administered with a vaccine containing WT1 killer peptide (compound of formula (3)) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 18) (hereinafter referred to as cocktail vaccine a) 1.9 times WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) specific compared to spleen cells of mice administered with a vaccine containing only the killer peptide (compound of formula (3)) (hereinafter referred to as killer vaccine a) CTL was included (FIG. 27).
  • the spleen cells of the mice administered with cocktail vaccine a were compared with the spleen cells of the mice administered with killer vaccine a, compared with the WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2)
  • the amount of IFN- ⁇ produced was 6.9 times when no addition was made, and 12 times when WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) was added (FIG. 29). From these results, the CTL contained in the spleen cells of the mice administered with the killer vaccine a is strongly inhibited by tumor cells compared to the CTL contained in the spleen cells of the mice administered with the cocktail vaccine a. Indicated.
  • Example 14 Action of Various Concomitant Agents on WT1 Antigen Peptide Specific T Cell Peptide Induced by Cocktail Vaccine and Immunoreactivity to Tumor Cells
  • Composition Containing WT1 Killer Peptide (SEQ ID NO: 2) and WT1 Helper Peptide (SEQ ID NO: 11) was mixed with an equal amount of montanide to make an emulsion, and then administered into the ridge skin of HLA-A * 02 : 01 transgenic mice (0.3 mg of WT1 killer peptide and 0.3 mg of each mouse). Administration of WT1 helper peptide).
  • a composition containing the WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) was mixed with an equal amount of montanide to make an emulsion, and then administered into the ridge skin of the HLA-A * 02 : 01 transgenic mouse (mouse 1 Each animal received 0.3 mg of WT1 killer peptide).
  • the mice were euthanized with CO 2 gas, and then the spleen was removed and spleen cells were prepared using CTM.
  • the spleen cells were stained with HLA tetramer reagent (MBL) against FITC-labeled anti-CD8 antibody (BD Pharmingen) and PE-labeled WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2), and killer peptide-specific using a flow cytometer. CTL analysis was performed.
  • a WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) solution was added to a part of the spleen cells, and left at 37 ° C., 5% CO 2 at a final concentration of 100 ⁇ g / mL for about 1 hour.
  • peptide-pulsed splenocytes and non-peptide-pulsed cells were mixed at a ratio of 1:10 and seeded in a U-bottom 96-well plate at 3.85 ⁇ 10 5 cells / well at 37 ° C. Cultured for about 3 days under 5% CO 2 .
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • LLC-HHD-WT1 tumor cells were irradiated with X-rays (50 Gy), then cultured in the presence of mouse recombinant IFN- ⁇ at a final concentration of 100 ng / mL for about 2 days, and washed with CTM. .
  • This LLC-HHD-WT1 tumor cell was seeded and mixed at a U-bottom 96-well plate seeded with splenocytes at 3.5 ⁇ 10 4 cells / well and mixed with an isotype control antibody, immune checkpoint inhibitor, Stimulating molecule agonist antibody was added and cultured at 37 ° C. under 5% CO 2 for about 3 days.
  • anti-PD-1 antibody BioLegend, clone 29F.1A12
  • anti-B7-H4 antibody BioLegend, clone HMH4-5G1
  • anti-PD-L1 antibody eBiosciecne, clone MIH5
  • costimulatory molecule agonist antibodies anti-4-1BB antibody (Bio X Cell, clone LOB12.3) and anti-OX-40 antibody (Bio X Cell, clone OX-86) were used at a final concentration of 30 ⁇ g / mL.
  • Rat IgG2a ⁇ (BD Pharmingen) as an isotype control antibody corresponding to anti-PD-1 antibody
  • Rat IgG2a Bio X Cell
  • Rat IgG1 ⁇ eBiosciecne
  • the concentration of mouse IFN- ⁇ contained in the culture supernatant was measured with an ELISA kit (R & D Systems).
  • FIGS. 33-39 The results are shown in FIGS. 33-39.
  • the spleen cells of a mouse administered with a vaccine containing WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) and WT1 helper peptide (SEQ ID NO: 11) are WT1 killer peptide.
  • cocktail vaccine b WT1 killer peptide.
  • the WT1 killer peptide (SEQ ID NO: 2) specific CTL is contained 1.3 times as much. (FIG. 33).
  • mice administered with cocktail vaccine b by the combination agent were remarkably activated as in Example 7, but the spleen cells of the mice administered with killer vaccine b were hardly activated. From these results, in order to enhance the reactivity of the WT1 antigen peptide-specific CTL against the WT1 peptide and tumor cells by an immune checkpoint inhibitor and a costimulatory molecule agonist agent in the tumor, It became clear that it was important to include both killer peptides and helper peptides.
  • the present invention can be used in the field of pharmaceuticals and the like, for example, in the development or manufacturing field of cancer therapeutics and preventives.

Abstract

本発明は、癌を治療または予防するための、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫調節剤との併用に関する。

Description

ＷＴ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の併用
　本発明は、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤との併用に関する。
　生体による腫瘍細胞やウイルス感染細胞等の排除には細胞性免疫、とりわけ細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬと称する）が重要な働きをしている。ＣＴＬは、腫瘍細胞上の抗原ペプチド（腫瘍抗原ペプチド）とＭＨＣ（Ｍａｊｏｒ Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｃｏｍｐｌｅｘ）クラスＩ抗原との複合体を認識した前駆体Ｔ細胞が分化増殖して生成されるものであり、癌細胞を攻撃する。
　ＭＨＣは、ヒトではヒト白血球型抗原（ＨＬＡ）と呼ばれ、ＨＬＡ－Ａ、ＢおよびＣｗなどが知られている。腫瘍抗原ペプチドは、腫瘍で高発現しているタンパク質、すなわち腫瘍抗原タンパク質が細胞内で合成された後、プロテアーゼにより細胞内で分解されることによって生成される。生成された腫瘍抗原ペプチドは、小胞体内でＭＨＣクラスＩ抗原と結合して複合体を形成し、細胞表面に運ばれて抗原提示される。この抗原提示された腫瘍抗原ペプチド（キラーペプチド）を腫瘍反応性のＣＴＬが認識し、細胞傷害作用やリンフォカインの産生を介して抗腫瘍効果を示す。
　腫瘍抗原タンパク質または腫瘍抗原由来のキラーペプチドをいわゆるがん免疫療法剤（がんワクチン）の主成分として利用することにより、がん患者の体内のがん特異的ＣＴＬを増強させる治療法の開発が検討されている。例えば、ＷＴ１（Ｗｉｌｍ’ｓ　ｔｕｍｏｒ １）を標的とした癌免疫療法が開発されつつある。ＷＴ１は小児の腎癌であるウイルムス腫瘍の責任遺伝子として同定された遺伝子であり、ジンクフィンガー構造を有する転写因子である（非特許文献１参照）。当初、ＷＴ１遺伝子は癌抑制遺伝子であるとされたが、その後の研究により、造血器腫瘍や固形癌においてはむしろ癌遺伝子として働くことが示された。また、ＷＴ１遺伝子は多くの悪性腫瘍において高発現していることが報告されている（非特許文献２参照）。ＷＴ１は、白血病および固形癌における新しい癌抗原タンパク質であると考えられている（非特許文献３参照）。そこで、ＷＴ１タンパクあるいはＷＴ１タンパク由来のペプチドを利用した癌ワクチン療法や樹状細胞療法、ＷＴ１タンパク由来のペプチドとＨＬＡ複合体を認識するＴＣＲ様抗体、あるいはＴＣＲ様抗体を利用したキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）遺伝子改変Ｔ細胞療法などが開発中である。
　当該ＷＴ１タンパク質に関して、例えば、ＷＴ１１２６－１３４ペプチド、ＷＴ１２３５－２４３ペプチド、ＷＴ１１０－１８ペプチド、ＷＴ１１８７－１９５ペプチド、ＷＴ１３０２－３１０ペプチド、およびＷＴ１３７－４５ペプチドなど、ＭＨＣクラスＩに結合し提示されるキラーペプチドが報告されている（特許文献１、特許文献２、非特許文献４および５参照）。
　また、癌免疫療法において重要な働きをしている細胞としては、ＣＴＬの他にヘルパーＴ（Ｔｈ１）細胞が挙げられる。一般的に、抗原タンパク質は細胞内リソソームで分解され、１３～１７残基程度のアミノ酸から構成される断片ペプチドの一部が、抗原ペプチド（ヘルパーペプチド）としてＭＨＣクラスＩＩ分子に結合する。その後、抗原ペプチドとＭＨＣクラスＩＩ分子の複合体がＴＣＲ・ＣＤ３複合体に提示されて活性化されたＴｈ１細胞は、ＣＴＬの誘導および活性化を促す。ヒトのＭＨＣクラスＩＩ分子としてＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱおよびＤＰなどが知られており、ＷＴ１タンパクに由来する複数のヘルパーペプチドがこれまで同定されている（非特許文献６および７参照）
　近年、免疫調節機構には、相互に連関し、免疫を抑制又は寛容する複数の刺激シグナルが存在することが見出されている。また、本機構を利用し、抗原提示細胞によるＴ細胞活性化において抗原提示細胞上及び／またはＴ細胞上の補助刺激シグナルの伝達に関与する分子に相互作用する薬剤が、補助刺激シグナルの伝達を制御できることが知られている（非特許文献８参照）。
　その一つの例として、腫瘍中にＣＴＬが存在するにもかかわらず、腫瘍が縮小しないケースが観察される。その一つの原因として、腫瘍に浸潤したＣＴＬが早期に疲弊し、腫瘍細胞の殺傷能力、複数のサイトカイン産生能力、増殖能力を消失し、細胞死に陥っていることが示唆されている。この疲弊現象はＣＴＬの細胞膜表面に発現する免疫チェックポイント分子から負のシグナルが入ることによることが明らかとなってきた。
　これまでに、免疫チェックポイント分子として、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＬＡＧ－３、ＫＩＲ、ＴＩＭ－３、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＶＩＳＴＡ／ＰＤ－１Ｈ、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＣＤ１６０、ＧＡＬ９、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲ、ＢＴＮＬ２、ＢＴＮ１Ａ１、ＢＴＮ２Ａ２、ＢＴＮ３Ａ２、ＣＤ２４４などが報告されている（非特許文献８および９参照）。例えば、ＰＤ－１は、活性化リンパ球（Ｔ細胞、Ｂ細胞及びＮＫＴ細胞）及び骨髄系細胞に発現するＣＤ２８ファミリーに属する受容体であり、抗原提示細胞に発現するＰＤ－１リガンド（ＰＤ―Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２）と結合し、リンパ球に抑制性シグナルを伝達してリンパ球の活性化状態を負に調節する。ＰＤ－Ｌ１は、抗原提示細胞以外に様々な腫瘍組織にも発現していることが明らかとなっている。すなわち、癌は、ＰＤ－Ｌ１を利用してＣＴＬからの攻撃を回避している。
　そこで近年、免疫チェックポイント分子の機能を阻害する抗体が開発され始めている（非特許文献９および１０参照）。これら抗体はＣＴＬの疲弊状態を解除する。例えば、抗ＰＤ－１抗体や抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＰＤ－１とＰＤ－Ｌ１との結合を阻害し、ＣＴＬの細胞傷害活性を回復させる。実際、非小細胞肺がんやメラノーマなどの患者を対象として抗ＰＤ－１抗体あるいは抗ＰＤ－Ｌ１抗体の臨床試験が実施され、顕著な効果が認められている。しかし、著効を示す患者は約２～３割程度に過ぎず、強い免疫関連有害事象を被るなど、抗ＰＤ－１抗体あるいは抗ＰＤ－Ｌ１抗体を用いた治療法は十分に満足された状況にはない。
国際公開第００／０６６０２号 国際公開第００／１８７９５号
Am J Hum Genet. 1993; 52: 192-203 Blood.1997; 89: 1405-1412 Immunogenetics. 2000; 51: 99-107 Clin Cancer Res. 2005; 11: 8799-807 Blood. 2008 Oct 1; 112(7): 2956-64 J Immunother. 2007; 30: 282-93 Cancer Immunol Immunother. 2010; 59: 1467-79 Nat Rev Cancer. 2012; 12: 252-64 Nat Rev Drug Discov. 2015 Aug; 14 (8): 561-8 Nat Rev Drug Discov. 2013 Feb; 12 (2): 130-46
　本発明が解決しようとする課題は、ＷＴ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤を利用した癌を治療または予防するための方法および医薬を提供することにある。
　抗ＰＤ－１抗体や抗ＰＤ－Ｌ１抗体の効果が十分でない原因として、腫瘍内のＣＴＬ量が少ない、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１以外の強い免疫抑制メカニズムに依存している、などが考えられる。そこで、癌ワクチンとの併用やＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１以外の免疫チェックポイント分子の阻害剤との併用が期待される。本発明者らは、腫瘍内の腫瘍反応性のＣＴＬを増加させる癌ワクチンと免疫チェックポイント分子の阻害剤又はその他免疫調節剤との併用について検討した。本発明者らは、マウスを利用して鋭意研究を行った結果、ＷＴ１抗原ペプチドの投与によって、ＣＤ８陽性Ｔ細胞とりわけＷＴ１特異的キラーＴ細胞及びＣＤ４陽性Ｔ細胞において、免疫チェックポイント分子の発現が誘導されること、および誘導されたＷＴ１特異的キラーＴ細胞は、免疫チェックポイント阻害剤などの免疫調節剤に反応して活性化が促されることを見出した。更に、ヒト由来末梢血単核細胞を利用して鋭意研究を行った結果、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤との併用によって、ナイーブＴ細胞からＷＴ１特異的キラーＴ細胞の誘導が効率よく起こること、およびＷＴ１抗原ペプチドによって誘導されたＷＴ１特異的キラーＴ細胞は、免疫調節剤に反応して活性化が促されることを見出した。本発明においては、更なる併用効果の向上について鋭意検討し、上記組合せにおいて、更にＷＴ１キラーペプチドとＷＴ１ヘルパーペプチドを組み合わせた癌ワクチンを用いることにより癌細胞による抑制を受けないＣＴＬが誘導され、これによって免疫調節剤との併用効果が著しく向上できることを見出した。
　すなわち、本発明は、以下のものに関する。
項１．
　免疫調節剤と併用される、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む、癌を治療または予防するための医薬組成物。
項２．
　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と併用される、免疫調節剤を含む、癌を治療または予防するための医薬組成物。
項３．
　免疫調節剤とＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩とを含む、癌を治療または予防するための医薬組成物。
項４．
　ＷＴ１抗原ペプチドがＷＴ１キラーペプチドである、項１～３のいずれかに記載の医薬組成物。
項５．
　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：３）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：４）、
ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　（配列番号：５）、
ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ　（配列番号：６）、
ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ　（配列番号：７）、
ＶＬＤＦＡＰＰＧＡ、（配列番号：８）、
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：９）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：１０）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２１）、および
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２６）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド；
前記配列番号２～１０、２１および２６から選択されるいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチド；もしくは
式（１）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
 （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、
式（２）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
 （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、および
式（３）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
 （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物
　からなる群から選択される化合物；またはその薬学上許容される塩である、項４に記載の医薬組成物。
項６．
　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号：２）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：３）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：４）、
ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　（配列番号：５）、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：１０）、および
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２６）
から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド；もしくは
式（３）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
 （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物；またはその薬学上許容される塩である、項５に記載の医薬組成物。
項７．
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩をさらに含む、項４～６のいずれかに記載の医薬組成物。
項８．
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩と併用される、項４～６のいずれかに記載の医薬組成物。
項９．
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、
　以下：
ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１１）、
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号：１２）、
ＲＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭＨＱＲＮＭＴＫＬ　（配列番号：１３）、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１４）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　（配列番号：１５）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１６）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１７）、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１８）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１９）、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ　（配列番号：２０）、および
ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　　（配列番号：３７）
から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド；もしくは
前記配列番号１１～２０から選択されるいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つヘルパーＴ細胞誘導活性を有するペプチド；またはその薬学上許容される塩である、項７または８に記載の医薬組成物。
項１０．
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、
　以下：
ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１１）、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１４）、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１８）、および
ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　　（配列番号：３７）
から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩である、項９に記載の医薬組成物。
項１１．
　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号：２）またはその薬学上許容される塩であり、
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ（配列番号：１１）またはその薬学上許容される塩である、項１０に記載の医薬組成物。
項１２．
　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号：２）またはその薬学上許容される塩であり、
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ（配列番号：１４）またはその薬学上許容される塩である、項１０に記載の医薬組成物。
項１３．
　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ（配列番号：５）またはその薬学上許容される塩であり、
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ（配列番号：１１）またはその薬学上許容される塩である、項１０に記載の医薬組成物。
項１４．
　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号：２６）またはその薬学上許容される塩であり、
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号：３７）またはその薬学上許容される塩である、項１０に記載の医薬組成物。
項１５．
　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、式（３）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
 （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩であり、
　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ（配列番号：１８）またはその薬学上許容される塩である、項１０に記載の医薬組成物。
項１６．
　癌ワクチンとして使用される、項１～１５のいずれかに記載の医薬組成物。
項１７．
　免疫調節剤が、
（１）免疫チェックポイント阻害剤、
（２）共刺激分子アゴニスト剤、
（３）免疫活性化剤、および
（４）低分子阻害剤
からなる群から選択される１以上の薬剤である、項１～１６のいずれかに記載の医薬組成物。
項１８．
　免疫調節剤が抗体、核酸、タンパク質、ペプチドまたは低分子化合物である、項１７に記載の医薬組成物。
項１９．
　免疫調節剤が、免疫チェックポイント阻害剤である、項１７または１８に記載の医薬組成物。
項２０．
　免疫チェックポイント阻害剤が、
（１）ＣＴＬＡ－４、
（２）ＰＤ－１、
（３）ＬＡＧ－３、
（４）ＢＴＬＡ、
（５）ＫＩＲ、
（６）ＴＩＭ－３、
（７）ＰＤ－Ｌ１、
（８）ＰＤ－Ｌ２、
（９）Ｂ７－Ｈ３、
（１０）Ｂ７－Ｈ４、
（１１）ＨＶＥＭ、
（１２）ＧＡＬ９、
（１３）ＣＤ１６０、
（１４）ＶＩＳＴＡ、
（１５）ＢＴＮＬ２、
（１６）ＴＩＧＩＴ、
（１７）ＰＶＲ、
（１８）ＢＴＮ１Ａ１、
（１９）ＢＴＮ２Ａ２、
（２０）ＢＴＮ３Ａ２、および
（２１）ＣＳＦ－１Ｒ
からなる群から選択される分子に対する１以上の薬剤である、項１９に記載の医薬組成物。
項２１．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲ、ＰＤ－Ｌ１およびＣＤ１６０からなる群から選択される分子に対する１以上の薬剤である、項２０に記載の医薬組成物。
項２２．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１に対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項２３．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ－４に対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項２４．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＬＡＧ－３に対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項２５．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＴＩＭ－３に対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項２６．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＢＴＬＡに対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項２７．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＨＶＥＭに対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項２８．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＴＩＧＩＴに対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項２９．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＶＲに対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項３０．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＤ１６０に対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項３１．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＳＦ－１Ｒに対する薬剤である、項２１に記載の医薬組成物。
項３２．
　免疫チェックポイント阻害剤が、抗体である、項１９～３１のいずれかに記載の医薬組成物。
項３３．
　免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１に対する抗体である、項３２に記載の医薬組成物。
項３３．
　ＰＤ－１に対する抗体が、ニボルマブまたはペンブロリズマブである、項３３に記載の医薬組成物。
項３４．
　ＰＤ－Ｌ１に対する抗体が、Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ、Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ）またはＢＭＳ－９３６５５９である、項３３に記載の医薬組成物。
項３５．
　免疫調節剤が、共刺激分子アゴニスト剤である、項１７または１８に記載の医薬組成物。
項３６．
　共刺激分子アゴニスト剤が、
（１）４－１ＢＢ、
（２）４－１ＢＢ－Ｌ、
（３）ＯＸ４０、
（４）ＯＸ４０－Ｌ、
（５）ＧＩＴＲ、
（６）ＣＤ２８、
（７）ＣＤ４０、
（８）ＣＤ４０－Ｌ、
（９）ＩＣＯＳ、
（１０）ＩＣＯＳ－Ｌ、
（１１）ＬＩＧＨＴ、および
（１２）ＣＤ２７
からなる群から選択される分子に対する１以上の薬剤である、項３５に記載の医薬組成物。
項３７．
　共刺激分子アゴニスト剤が、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ４０およびＩＣＯＳからなる群から選択される分子に対する１以上の薬剤である、項３６に記載の医薬組成物。
項３８．
　共刺激分子アゴニスト剤が、４－１ＢＢに対する薬剤である、項３７に記載の医薬組成物。
項３９．
　共刺激分子アゴニスト剤が、ＯＸ４０に対する薬剤である、項３７に記載の医薬組成物。
項４０．
　共刺激分子アゴニスト剤が、ＧＩＴＲに対する薬剤である、項３７に記載の医薬組成物。
項４１．
　共刺激分子アゴニスト剤が、ＣＤ４０に対する薬剤である、項３７に記載の医薬組成物。
項４２．
　共刺激分子アゴニスト剤が、ＩＣＯＳに対する薬剤である、項３７に記載の医薬組成物。
項４３．
　共刺激分子アゴニスト剤が、抗体である、項３５～４２のいずれかに記載の医薬組成物。
項４４．
　免疫調節剤が、免疫活性化剤である、項１７または１８に記載の医薬組成物。
項４５．
　免疫活性化剤が、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）作動薬である、項４４に記載の医薬組成物。
項４６．
　ＴＬＲ作動薬が、
（１）ＴＬＲ１／２作動薬、
（２）ＴＬＲ２作動薬、
（３）ＴＬＲ３作動薬、
（４）ＴＬＲ４作動薬、
（５）ＴＬＲ５作動薬、
（６）ＴＬＲ６／２作動薬、
（７）ＴＬＲ７作動薬、
（８）ＴＬＲ７／８作動薬、
（９）ＴＬＲ７／９作動薬、
（１０）ＴＬＲ８作動薬、
（１１）ＴＬＲ９作動薬、および
（１２）ＴＬＲ１１作動薬
からなる群から選択される１以上の薬剤である、項４５に記載の医薬組成物。
項４７．
　ＴＬＲ作動薬が、ＴＬＲ３作動薬、ＴＬＲ７作動薬、ＴＬＲ７／８作動薬、およびＴＬＲ９作動薬からなる群から選択される１以上の薬剤である、請求項４６に記載の医薬組成物。
項４８．
　Ｔｏｌｌ様受容体作動薬が、ＴＬＲ３作動薬である、項４７に記載の医薬組成物。
項４９．
　Ｔｏｌｌ様受容体作動薬が、ＴＬＲ７作動薬である、項４７に記載の医薬組成物。
項５０．
　Ｔｏｌｌ様受容体作動薬が、ＴＬＲ７／８作動薬である、項４７に記載の医薬組成物。
項５１．
　Ｔｏｌｌ様受容体作動薬が、ＴＬＲ９作動薬である、項４７に記載の医薬組成物。
項５２．
　Ｔｏｌｌ様受容体作動薬が、核酸である、項４５～５１のいずれかに記載の医薬組成物。
項５３．
　免疫調節剤が、低分子阻害剤である、項１７または１８に記載の医薬組成物。
項５４．
　低分子阻害剤が、β―カテニン阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ＣＯＸ－２阻害剤、ＣＸＣＲ４阻害剤、ＳＴＡＴ３阻害剤およびマルチキナーゼ阻害剤からなる群から選択される１以上の薬剤である、項５３に記載の医薬組成物。
項５５．
　低分子阻害剤が、β―カテニン阻害剤である、請求項５４に記載の医薬組成物。
項５６．
　低分子阻害剤が、ＩＤＯ阻害剤である、項５４に記載の医薬組成物。
項５７．
　低分子阻害剤が、ＣＯＸ－２阻害剤である、項５４に記載の医薬組成物。
項５８．
　低分子阻害剤が、ＣＸＣＲ４阻害剤である、項５４に記載の医薬組成物。
項５９．
　低分子阻害剤が、ＳＴＡＴ３阻害剤である、項５４に記載の医薬組成物。
項６０．
　低分子阻害剤が、マルチキナーゼ阻害剤である、項５４に記載の医薬組成物。
項６１．
　癌が、白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、悪性リンパ腫、胃癌、大腸癌、肺癌、乳癌、胚細胞癌、肝癌、皮膚癌、膀胱癌、前立腺癌、子宮癌、子宮頸癌、卵巣癌、脳腫瘍、骨癌、膵癌、頭頚部癌、皮膚または眼窩内悪性メラノーマ、直腸癌、肛門部癌、精巣癌、卵管のカルシノーマ、子宮内膜カルシノーマ、子宮頚部カルシノーマ、膣カルシノーマ、外陰部カルシノーマ、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、柔組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病を含む慢性または急性白血病、小児固形癌、リンパ球性リンパ腫、腎臓または尿管の癌、腎盂カルシノーマ、中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍新脈管形成、脊椎腫瘍、脳幹グリオーム、下垂体アデノーマ、カポシ肉腫、扁平上皮癌、扁平細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫、多型性膠芽腫、悪性黒色腫、非小細胞肺がん、腎細胞癌およびアスベスト誘発癌からなる群から選択される、項１～６０のいずれかに記載の医薬組成物。
項６２．
　ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤とが同時に投与される、項１～６１のいずれかに記載の医薬組成物。
項６３．
　ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤とが別々に投与される、項１、２、および４～６１のいずれかに記載の医薬組成物。
項６４．
　ＷＴ１抗原ペプチドが免疫調節剤の投与前に投与される、項１、２、および４～６１のいずれかに記載の医薬組成物。
項６５．
　ＷＴ１抗原ペプチドが免疫調節剤の投与後に投与される、項１、２、および４～６１のいずれかに記載の医薬組成物。
項６６．
　癌を治療するための、項１～６６のいずれかに記載の医薬組成物。
項６７．
　薬学上許容される担体をさらに含む、項１～６６のいずれかに記載の医薬組成物。
項６８．
　項１～６７のいずれかに規定されるＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫調節剤とを哺乳動物に投与することを含む、癌を治療または予防するための方法。
項６９．
　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫調節剤とを同時にまたは別々に投与する、項６８に記載の方法。
項７０．
　項１～６７のいずれかに規定されるＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫調節剤とを含む、癌を治療または予防するためのキット。
　本発明はまた、以下のものに関する：
　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫調節剤とを哺乳動物に投与することを含む、癌を治療または予防するための方法；
　免疫調節剤と併用される、癌の治療または予防における使用のための、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩；
　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と併用される、癌の治療または予防における使用のための、免疫調節剤；
　免疫調節剤と併用される、癌を治療または予防するための医薬の製造のため、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩の使用；
　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と併用される、癌を治療または予防するための医薬の製造のため、免疫調節剤の使用；および
　癌を治療または予防するための医薬の製造のため、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩および免疫調節剤の使用。
　本発明はまた、以下のものに関する：
　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫チェックポイント阻害剤とを哺乳動物に投与することを含む、癌を治療または予防するための方法；
　免疫チェックポイント阻害剤と併用される、癌の治療または予防における使用のための、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩；
　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と併用される、癌の治療または予防における使用のための、免疫チェックポイント阻害剤；
　免疫チェックポイント阻害剤と併用される、癌を治療または予防するための医薬の製造のため、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩の使用；
　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と併用される、癌を治療または予防するための医薬の製造のため、免疫チェックポイント阻害剤の使用；および
　癌を治療または予防するための医薬の製造のため、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩および免疫チェックポイント阻害剤の使用。
　本発明により、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫調節剤とを併用することを特徴とする、癌を治療または予防するための方法、医薬組成物およびキットが提供される。また、本発明により、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫調節剤とを組み合わせることを特徴とする、癌の治療または予防するための方法、医薬組成物、およびキットが提供される。
抗ＰＤ－１抗体処理群のキラーペプチドＢ特異的ＣＴＬの検出。横軸は、抗ＣＤ８抗体の染色強度、縦軸はＨＬＡテトラマーの染色強度を示し、四角の破線で囲まれた領域内のドットは、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬを表す。
抗ＰＤ－Ｌ１抗体処理群のキラーペプチドＡ特異的ＣＴＬの検出。横軸は、抗ＣＤ８抗体の染色強度、縦軸はＨＬＡテトラマーの染色強度を示し、四角の破線で囲まれた領域内のドットは、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬを表す。
抗ＰＤ－Ｌ１抗体処理群のキラーペプチドＢ特異的ＣＴＬの検出。横軸は、抗ＣＤ８抗体の染色強度、縦軸はＨＬＡテトラマーの染色強度を示し、四角の破線で囲まれた領域内のドットは、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬを表す。
ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬの検出。縦軸は、ＩＦＮ－γＥＬＩＳＰＯＴで検出されたスポット数を示す。
ＣＤ８陽性Ｔ細胞におけるＰＤ－１の検出。ワクチン投与によるマウス脾細胞におけるＰＤ－１の発現変化を示す。横軸にフローサイトメトリー解析によるＰＤ－１の染色強度を表す。１点短鎖線はワクチン投与個体脾臓由来のＣＤ８陽性テトラマー陽性画分、破線はワクチン投与個体脾臓由来のＣＤ８陽性テトラマー陰性画分、実線はワクチン非投与個体脾臓由来のＣＤ８陽性テトラマー陰性画分を対象とした解析結果を示す。また、点線はアイソタイプコントロールを用いた結果を示す。
ＣＤ４陽性Ｔ細胞におけるＰＤ－１の検出。ワクチン投与によるマウス脾細胞におけるＰＤ－１の発現変化を示す。横軸にフローサイトメトリー解析によるＰＤ－１の染色強度を表す。破線はワクチン投与個体脾細胞由来のＣＤ４陽性Ｔ細胞についての解析結果を、実線はワクチン非投与個体脾細胞由来のＣＤ４陽性Ｔ細胞についての解析結果を示す。また、点線はアイソタイプコントロールを用いた結果を示す。
ＣＤ４／ＣＤ８陰性細胞におけるＰＤ－１の検出。ワクチン投与によるマウス脾細胞におけるＰＤ－１の発現変化を示す。横軸にフローサイトメトリー解析によるＰＤ－１の染色強度を表す。破線はワクチン投与個体脾細胞由来のＣＤ４／ＣＤ８陰性細胞についての解析結果を、実線はワクチン非投与個体脾細胞由来のＣＤ４／ＣＤ８陰性細胞についての解析結果を示す。また、点線はアイソタイプコントロールを用いた結果を示す。
ＣＤ８陽性Ｔ細胞におけるＰＤ－Ｌ１の検出。ワクチン投与によるマウス脾細胞におけるＰＤ－Ｌ１の発現変化を示す。横軸にフローサイトメトリー解析によるＰＤ－Ｌ１の染色強度を表す。１点短鎖線はワクチン投与個体脾臓由来のＣＤ８陽性テトラマー陽性画分、破線はワクチン投与個体脾臓由来のＣＤ８陽性テトラマー陰性画分、実線はワクチン非投与個体脾臓由来のＣＤ８陽性テトラマー陰性画分を対象とした解析結果を示す。また、点線はアイソタイプコントロールを用いた結果を示す。
ＣＤ４陽性Ｔ細胞におけるＰＤ－Ｌ１の検出。ワクチン投与によるマウス脾細胞におけるＰＤ－Ｌ１の発現変化を示す。横軸にフローサイトメトリー解析によるＰＤ－Ｌ１の染色強度を表す。破線はワクチン投与個体脾細胞由来のＣＤ４陽性Ｔ細胞についての解析結果を、実線はワクチン非投与個体脾細胞由来のＣＤ４陽性Ｔ細胞についての解析結果を示す。また、点線はアイソタイプコントロールを用いた結果を示す。
ＣＤ４／ＣＤ８陰性細胞画分におけるＰＤ－Ｌ１の検出。ワクチン投与によるマウス脾細胞におけるＰＤ－Ｌ１の発現変化を示す。横軸にフローサイトメトリー解析によるＰＤ－Ｌ１の染色強度を表す。破線はワクチン投与個体脾細胞由来のＣＤ４／ＣＤ８陰性細胞についての解析結果を、実線はワクチン非投与個体脾細胞由来のＣＤ４／ＣＤ８陰性細胞についての解析結果を示す。また、点線はアイソタイプコントロールを用いた結果を示す。
抗ＰＤ－１抗体処理によるＩＦＮ－γの産生。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体で処理し、ＥＬ４ＨＨＤ腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＣＤ１６０抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＢＴＬＡ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｄ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＴＩＭ－３抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｅ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＬＡＧ－３抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｆ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｇ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＨＶＥＭ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｈ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＶＩＳＴＡ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｉ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＶＲ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗４－１ＢＢ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＯＸ－４０抗体（Ｂ）またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＧＩＴＲ抗体（Ｃ）またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｄ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＣＤ４０抗体（Ｄ）またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
Ｔｏｌｌ様受容体作動薬処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＰｏｌｙＩ：Ｃで処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
Ｔｏｌｌ様受容体作動薬処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＩｍｉｑｕｉｍｏｄで処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
Ｔｏｌｌ様受容体作動薬処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＲ８４８で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
Ｔｏｌｌ様受容体作動薬処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｄ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＣｐＧ－ＯＤＮで処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
β―カテニン阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＸＡＶ９３９で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与した担がんマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し培養した時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。 免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与した担がんマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＣＴＬＡ－４抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し培養した時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。 免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与した担がんマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＴＩＧＩＴ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し培養した時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生。ワクチン投与した担がんマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＩＣＯＳ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し培養した時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗Ｂ７－Ｈ４抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗４－１ＢＢ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＯＸ－４０抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗Ｂ７－Ｈ４抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗４－１ＢＢ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＯＸ－４０抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗Ｂ７－Ｈ４抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－Ｌ１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗４－１ＢＢ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＯＸ－４０抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＧＩＴＲ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチドおよびＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞との共培養時におけるＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗ＰＤ－１抗体とワクチンの併用によるイン・ビボ腫瘍増殖抑制作用。ＥＬ４―Ａ２４／Ｋｂ―ＷＴ１腫瘍細胞を移植したマウスにビークル（ａ群）、抗ＰＤ－１抗体（ｂ群）、ワクチン（ｃ群）、抗ＰＤ－１抗体とワクチン（ｄ群）を投与したときの、平均腫瘍容積を示す。
抗ＣＴＬＡ－４抗体とワクチンの併用によるイン・ビボ腫瘍増殖抑制作用。ＥＬ４―Ａ２４／Ｋｂ―ＷＴ１腫瘍細胞を移植したマウスにビークル（ａ群）、抗ＣＴＬＡ－４抗体（ｂ群）、ワクチン（ｃ群）、抗ＣＴＬＡ－４抗体とワクチン（ｄ群）を投与したときの、平均腫瘍容積を示す。
ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのＨＬＡテトラマーによる検出。縦軸は、ワクチンを投与したマウスの脾細胞中に含まれるＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬの割合を示す。
ＷＴ１抗原ペプチド刺激によるＩＦＮ－γの産生。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＷＴ１キラーペプチド添加下で培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
ＷＴ１抗原ペプチド刺激によるＩＦＮ－γの産生。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を、ＷＴ１キラーペプチド非添加下あるいは添加下で、ＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド非添加下あるいは添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＢＴＬＡ抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＬＡＧ－３抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｄ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－Ｌ１抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
免疫チェックポイント阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｅ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＶＩＳＴＡ抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗４－１ＢＢ抗体またはアイソタイプコントロール抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド非添加下あるいは添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＯＸ－４０抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
共刺激分子アゴニスト抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｃ）。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＧＩＴＲ抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
β―カテニン阻害剤処理によるＩＦＮ－γの産生。ワクチン投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＸＡＶ９３９で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのＨＬＡテトラマーによる検出。縦軸は、ワクチンを投与したマウスの脾細胞中に含まれるＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬの割合を示す。
ＷＴ１抗原ペプチド刺激によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。キラーワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＷＴ１キラーペプチド添加下で培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
ＷＴ１抗原ペプチド刺激によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。カクテルワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞をＷＴ１キラーペプチド添加下で培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗ＰＤ－１抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。キラーワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗ＰＤ－１抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。カクテルワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－１抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す
抗Ｂ７－Ｈ４抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。キラーワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗Ｂ７－Ｈ４抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗Ｂ７－Ｈ４抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。カクテルワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗Ｂ７－Ｈ４抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗ＰＤ－Ｌ１抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。キラーワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－Ｌ１抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗ＰＤ－Ｌ１抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。カクテルワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＰＤ－Ｌ１抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗４－１ＢＢ抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。キラーワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗４－１ＢＢ抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗４－１ＢＢ抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。カクテルワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗４－１ＢＢ抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗ＯＸ－４０抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ａ）。キラーワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＯＸ－４０抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
抗ＯＸ－４０抗体処理によるＩＦＮ－γの産生（Ｂ）。カクテルワクチンを投与したマウスで誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞を抗ＯＸ－４０抗体で処理し、ＷＴ１キラーペプチド添加下でＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞と共培養したときのＩＦＮ－γ産生能をＥＬＩＳＡによって測定した結果を示す。
　以下、本発明の実施形態について詳細に説明する。
　本発明は、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤との併用に関する。
　本明細書において、「ＷＴ１抗原ペプチド」とは、ＷＴ１タンパク質由来のアミノ酸配列を有し、ＭＨＣクラスＩまたはＭＨＣクラスＩＩに結合し、複合体として細胞表面に提示されることにより、キラーＴ細胞またはヘルパーＴ細胞を誘導するペプチドを意味する。本明細書において、ＭＨＣクラスＩに結合し、キラーＴ細胞を誘導するＷＴ１抗原ペプチドを「ＷＴ１キラーペプチド」、ＭＨＣクラスＩＩに結合し、ヘルパーＴ細胞を誘導するペプチドを「ＷＴ１ヘルパーペプチド」と称する。ＷＴ１タンパク質は、限定はされないが、マウスまたはヒトＷＴ１タンパク質が例示され、好ましくはヒトＷＴ１タンパク質である。ヒトＷＴ１タンパク質は、配列番号：１のアミノ酸配列を有する。本明細書中、文脈上不適切でない限り、「ＷＴ１抗原ペプチド」との用語はその薬学上許容される塩を包含する。
　ＷＴ１抗原ペプチドは、そのアミノ酸配列中のアミノ酸残基の一部または全部を修飾した修飾体であってもよい。そのような修飾体は、公知の方法にて修飾することができる。修飾体は、例えば、ペプチドを構成するアミノ酸残基の側鎖中の官能基にエステル化、アルキル化、ハロゲン化、リン酸化、スルホン化、アミド化などを施したものであってもよい。また、ペプチドのＮ末端および／またはＣ末端に、種々の物質を結合させることができる。例えば、アミノ酸、ペプチド、それらのアナログ等を結合させてもよい。ＷＴ１抗原ペプチドにこれらの物質が結合している場合、これらの物質が例えば、生体内酵素により、あるいは細胞内プロセッシングなどの過程により処理され、最終的に当該ＷＴ１抗原ペプチドを生じるものであってもよい。これらの物質は、ペプチドの溶解性を調整するものであってもよく、耐プロテアーゼ作用等その安定性を向上させるものであってもよく、また例えば、所定の組織・器官に特異的にペプチドをデリバリーするようなものであってもよく、あるいはまた抗原提示細胞の取り込み効率を増強させる作用などを有するものであってもよい。これらの物質はまた、ＣＴＬ誘導能を増大させるもの、例えば、当該ＷＴ１抗原ペプチド以外のキラーペプチドまたはヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩であってもよい。
　ＷＴ１抗原ペプチドは、炭素－炭素結合、炭素－窒素結合、炭素－硫黄結合などのペプチド結合以外の結合によってアミノ酸残基が結合したものであってもよい。さらにＷＴ１抗原ペプチドは、１またはそれ以上のＤ－体アミノ酸を含んでいてもよい。
　上記のＷＴ１抗原ペプチドの修飾体は例示であり、当業者であれば容易にそのバリエーションを想定し、製造し、効果を調べ、用いることができる。
　本発明における「アミノ酸残基」とは、ペプチドまたはタンパク質分子上で、ペプチドまたはタンパク質を構成しているアミノ酸の一単位に当たる部分を意味する。「アミノ酸残基」としては、天然もしくは非天然のα－アミノ酸残基、β－アミノ酸残基、γ－アミノ酸残基またはδ－アミノ酸残基が挙げられる。具体的には、天然のα－アミノ酸残基、オルニチン残基、ホモセリン残基、ホモシステイン残基、β－アラニン、γ－アミノブタン酸またはδ－アミノペンタン酸などが挙げられる。
　本発明における「アミノ酸残基」を略号で表示する場合、次の略号で記述する。
AlaまたはＡ：アラニン残基
ArgまたはＲ：アルギニン残基
AsnまたはＮ：アスパラギン残基
AspまたはＤ：アスパラギン酸残基
CysまたはＣ：システイン残基
GlnまたはＱ：グルタミン残基
GluまたはＥ：グルタミン酸残基
GlyまたはＧ：グリシン残基
HisまたはＨ：ヒスチジン残基
IleまたはＩ：イソロイシン残基
LeuまたはＬ：ロイシン残基
LysまたはＫ：リジン残基
MetまたはＭ：メチオニン残基
PheまたはＦ：フェニルアラニン残基
ProまたはＰ：プロリン残基
SerまたはＳ：セリン残基
ThrまたはＴ：スレオニン残基
TrpまたはＷ：トリプトファン残基
TyrまたはＹ：チロシン残基
ValまたはＶ：バリン残基
Abu：２－アミノ酪酸残基（α－アミノ酪酸残基とも言う）
Orn：オルニチン残基
Cit：シトルリン残基
　本発明における「ペプチド」のアミノ酸配列は、常法に従って、Ｎ末端アミノ酸のアミノ酸残基が左側に位置し、Ｃ末端アミノ酸のアミノ酸残基が右側に位置するように記述する。また「ペプチド」において、特に断りの無い限り、Ｎ末端アミノ酸のアミノ酸残基のアミノ基は水素原子と結合し、Ｃ末端アミノ酸のアミノ酸残基のカルボニル基は水酸基と結合している。ペプチドの二価基とは、Ｎ末端アミノ酸のアミノ酸残基のアミノ基およびＣ末端アミノ酸のアミノ酸残基のカルボニル基を介して結合する基を意味する。本発明の化合物において、たとえば式（１）～（３）で表される化合物において、その部分構造にあたるペプチドについても、特に断りの無い限り、Ｎ末端アミノ酸のアミノ酸残基のアミノ基は水素原子と結合し、Ｃ末端アミノ酸のアミノ酸残基のカルボニル基は水酸基と結合している。
　ＭＨＣは、ヒトではヒト白血球型抗原（ＨＬＡ）と呼ばれる。ＭＨＣクラスＩ分子に相当するＨＬＡは、ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃｗ、ＦおよびＧなどのサブタイプに分類される。本明細書において「ＭＨＣクラスＩ拘束性」とは、ＭＨＣクラスＩ分子と結合してキラー細胞を誘導する特性を意味する。「ＭＨＣクラスＩ拘束性」として、好ましくは、ＨＬＡ－Ａ拘束性、ＨＬＡ－Ｂ拘束性またはＨＬＡ－Ｃｗ拘束性が挙げられる。
　ＨＬＡの各サブタイプについて、多型（対立遺伝子）が知られている。ＨＬＡ－Ａの多型としては、ＨＬＡ－Ａ１、ＨＬＡ－Ａ２、ＨＬＡ－Ａ２４などの２７種以上が挙げられ、ＨＬＡ－Ｂの多型としては、ＨＬＡ－Ｂ７、ＨＬＡ－Ｂ４０、ＨＬＡ－Ｂ４４などの５９種以上が挙げられ、ＨＬＡ－Ｃｗの多型としては、ＨＬＡ－Ｃｗ０３０１、ＨＬＡ－Ｃｗ０４０１、ＨＬＡ－Ｃｗ０６０２などの１０種以上が挙げられる。これら多型の中、好ましくは、ＨＬＡ－Ａ２やＨＬＡ－Ａ２４が挙げられる。
　一態様において、ＷＴ１抗原ペプチドは、ＭＨＣクラスＩに結合し、キラーＴ細胞（細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ））を誘導する、ＷＴ１キラーペプチドである。ＷＴ１キラーペプチドは、ＭＨＣクラスＩとの複合体として細胞表面に提示されることにより、ＷＴ1特異的キラーＴ細胞を誘導する。
　一態様において、ＷＴ１キラーペプチドは、配列番号：１に記載のヒトのＷＴ１タンパク質のアミノ酸配列において連続する７～３０残基のアミノ酸からなる部分ペプチドまたはその改変体である。かかるＷＴ１抗原ペプチドとして、以下のアミノ酸配列：
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：３）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：４）、
ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　（配列番号：５）、
ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ　（配列番号：６）、
ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ　（配列番号：７）、
ＶＬＤＦＡＰＰＧＡ　（配列番号：８）、
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：９）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、および
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：１０）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
から選択されるいずれかのアミノ酸配列を含むペプチド、並びに配列番号：２～１０から選択されるいずれかのアミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチドが挙げられる。好ましくは、配列番号：２～１０から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド、および配列番号：２～１０から選択されるいずれかのアミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列からなり且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチドが挙げられる。より好ましくは、配列番号：２～１０から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチドが挙げられる。さらにより好ましくは、配列番号：２～６、８および１０から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチドが挙げられる。
　本明細書において「アミノ酸配列を含むペプチド」とは、通常のように、当該アミノ酸配列のＮ末端アミノ酸および／またはＣ末端アミノ酸に更なるアミノ酸が付加されたペプチドを意味する。
　本明細書において「アミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチド」は、「改変キラーペプチド」とも呼ばれる。当該改変キラーペプチドは、アミノ酸配列において、１個～数個、好ましくは１～３個のアミノ酸が、欠失、置換および／または付加されたアミノ酸配列からなり、ＭＨＣクラスＩに結合し、ＣＴＬを誘導するペプチドを意味する。置換されるアミノ酸の置換位置としては、９残基のアミノ酸からなるペプチドの場合、１位（Ｎ末端）、２位、３位および９位が挙げられる。付加（挿入も包含される）されるアミノ酸の数は好ましくは１または２であり、より好ましくは１である。好ましい付加位置としては、Ｃ末端が挙げられる。欠失されるアミノ酸の数は好ましくは１である。改変において、付加されるアミノ酸または置換されるアミノ酸は、遺伝子によりコードされる２０種類のアミノ酸以外の非天然アミノ酸であってもよい。
　ＨＬＡのサブタイプの多型ごとに、ＨＬＡ抗原に結合できるペプチドのアミノ酸配列の規則性（結合モチーフ）が存在することが知られている。例えば、ＨＬＡ－Ａ２４の結合モチーフとして、８～１１残基のアミノ酸からなるペプチドにおいて、２位のアミノ酸が、Tyr、Phe、MetまたはTrpであり、Ｃ末端のアミノ酸が、Phe、Leu、Ile、TrpまたはMetであることが知られている（J. Immunol., 152, p3913, 1994; J. Immunol., 155, p4307, 1994; Immunogenetics, 41, p178, 1995）。よって、例えば９残基のアミノ酸からなるペプチドの場合、２位がTyr、Phe、MetまたはTrpにより、および／または９位がPhe、Leu、Ile、TrpまたはMetにより、置換することが可能であり、当該置換がなされたペプチドが改変キラーペプチドとして好ましい。同様に、ＨＬＡ－Ａ２の結合モチーフとして、８～１１残基のアミノ酸からなるペプチドにおいて、２位のアミノ酸が、LeuまたはMetであり、Ｃ末端のアミノ酸が、ValまたはLeuであることが知られていることから、例えば９残基のアミノ酸からなるペプチドの場合、２位がLeuまたはMetにより、および／または９位がValまたはLeuにより、置換することが可能であり、当該置換がなされたペプチドが改変キラーペプチドとして好ましい。
　改変キラーペプチドとしては例えば、次のようなペプチドが挙げられる：
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２）の改変キラーペプチドである、
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２１）（国際公開第０３／１０６６８２号参照）、
ＦＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２２）、
ＲＬＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２３）、
ＲＭＭＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２４）、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＶ　（配列番号：２５）および
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２６）（国際公開第２００９／０７２６１０号参照）；

ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：３）の改変キラーペプチドである、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：４）（国際公開第０２／７９２５３号参照）、
Xaa-Met-Thr-Trp-Asn-Gln-Met-Asn-Leu　（配列番号：２７）、
（本配列中XaaはSerまたはAlaを表す）および
Xaa-Tyr-Thr-Trp-Asn-Gln-Met-Asn-Leu　（配列番号：２８）
（本配列中XaaはSer、Ala、Abu、Arg、Lys、Orn、Cit、Leu、PheまたはAsnを表す）（国際公開２００４／０２６８９７号参照）；

ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　（配列番号：５）の改変キラーペプチドである、
ＡＹＬＰＡＶＰＳＬ　（配列番号：２９）（国際公開第２００３／１０６６８２号参照）；

ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ　（配列番号：６）の改変キラーペプチドである、
ＦＬＧＥＱＱＹＳＶ　（配列番号：３０）、
ＳＭＧＥＱＱＹＳＶ　（配列番号：３１）および
ＳＬＭＥＱＱＹＳＶ　（配列番号：３２）（国際公開第２００９／０７２６１０号参照）；並びに

ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ　（配列番号：７）の改変キラーペプチドである、
ＲＹＰＧＶＡＰＴＬ　（配列番号：３３）（国際公開第２００３／１０６６８２号参照）。
　一態様において、ＷＴ１キラーペプチドは、
式（１）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
 （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、
式（２）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
 （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、または
式（３）：
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
 （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物
である。
　ＷＴ１抗原ペプチド（キラーペプチドおよびヘルパーペプチド）としては、前記に挙げられているペプチドおよび化合物の他に、国際公開第２０１４／１５７６９２号に記載される化合物も含まれる。
　一態様において、ＷＴ１抗原ペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩに結合し、ヘルパーＴ細胞（ＣＤ４陽性Ｔ細胞）を誘導する、ＷＴ１ヘルパーペプチドである。ＷＴ１ヘルパーペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩとの複合体として細胞表面に提示されることにより、ＷＴ1特異的ヘルパーＴ細胞を誘導する。ＷＴ1特異的ヘルパーＴ細胞は、各種サイトカイン（例えば、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－５，ＩＬ－６、またはインターフェロン（ＩＦＮ）など）を産生し、Ｂ細胞およびその他のＴ細胞のサブセットの増殖、分化、成熟を促進する。よって、ＷＴ１ヘルパーペプチドは、ヘルパーＴ細胞を活性化し、ＣＴＬの分化の誘導や維持およびマクロファージなどのエフェクター細胞の活性化作用を発揮するため、効率的な癌の治療または予防に使用可能である。
　ＭＨＣクラスＩＩ分子に相当するＨＬＡは、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱおよびＤＰなどのサブタイプに分類される。本明細書において「ＭＨＣクラスＩＩ拘束性」とは、ＭＨＣクラスＩＩ分子と結合してヘルパーＴ細胞を誘導する特性を意味する。「ＭＨＣクラスＩＩ拘束性」として、好ましくは、ＨＬＡ－ＤＲ拘束性、ＨＬＡ－ＤＱ拘束性またはＨＬＡ－ＤＰ拘束性が挙げられる。
　一態様において、ＷＴ１ヘルパーペプチドは、配列番号：１に記載のヒトのＷＴ１タンパク質のアミノ酸配列において連続する７～３０残基、好ましくは１４～３０残基のアミノ酸からなる部分ペプチドまたはその改変体である。かかるＷＴ１ヘルパーペプチドとしては、以下のアミノ酸配列： 
ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１１）、
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号：１２）、
ＲＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭＨＱＲＮＭＴＫＬ　（配列番号：１３）、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１４）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　（配列番号：１５）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１６）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１７）、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１８）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１９）、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ　（配列番号：２０）、
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣ　（配列番号：３４）、
ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣ　（配列番号：３５）、
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　（配列番号：３６）、
ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　　（配列番号：３７）、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　（配列番号：３８）、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：３９）、ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：４０）、
ＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬ　（配列番号：４４）、
ＬＫＧＶＡＡＧＳＳＳＳＶＫＷＴ　（配列番号：４５）および
ＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：４６）
から選択されるいずれかのアミノ酸配列を含むペプチド、および配列番号：１１～２０、３４～４０および４４～４６から選択されるいずれかのアミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列を含み且つヘルパーＴ細胞誘導活性を有するペプチド、が挙げられる。好ましくは、配列番号：１１～２０および３４～４０から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド、および配列番号：１１～２０および３４～４０から選択されるいずれかのアミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列からなり且つヘルパーＴ細胞誘導活性を有するペプチドが挙げられる。より好ましくは、配列番号：１１～２０および３４～４０から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチドであり、さらにより好ましくは、配列番号：１１～２０から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチドが挙げられる。
　本明細書において「アミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列を含み且つヘルパーＴ細胞誘導活性を有するペプチド」は、「改変ヘルパーペプチド」とも呼ばれる。当該改変ヘルパーペプチドは、アミノ酸配列において、１個～数個、好ましくは１～３個のアミノ酸が、欠失、置換および／または付加されたアミノ酸配列からなり、ＭＨＣクラスＩＩに結合し、ヘルパーＴ細胞を誘導するペプチドを意味する。改変において、付加されるアミノ酸または置換されるアミノ酸は、遺伝子によりコードされる２０種類のアミノ酸以外の非天然アミノ酸であってもよい。
　改変ヘルパーペプチドとしては例えば、次のようなペプチドが挙げられる：
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　（配列番号：３６）の改変ヘルパーペプチドである、
ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　（配列番号：３７）（国際公開第２００７／１２０６７３号参照）、
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣ　（配列番号：３４）および
ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣ　（配列番号：３５）；並びに

ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：４０）の改変ヘルパーペプチドである、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　（配列番号：３８）、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：３９）、
ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１１）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　（配列番号：１５）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１６）および
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１７）。
　ＷＴ１抗原ペプチドは、通常のペプチド合成において用いられる方法に準じて製造することができる。製造方法としては、文献（ペプタイド・シンセシス（Peptide Synthesis）, Interscience, New York, 1966；ザ・プロテインズ（The Proteins）, Vol 2, Academic Press Inc., New York, 1976；ペプチド合成，丸善（株），１９７５；ペプチド合成の基礎と実験、丸善（株），１９８５；医薬品の開発 続 第１４巻・ペプチド合成，広川書店，１９９１）などに記載されている方法が挙げられる。例えば、Ｆｍｏｃ法もしくはＢｏｃ法を用いて固相合成機で製造する方法や、Ｂｏｃ－アミノ酸もしくはＺ－アミノ酸を液相合成法で逐次縮合させて製造する方法が挙げられる（Ｆｍｏｃは９－フルオレニルメトキシカルボニル基、Ｂｏｃはｔ－ブトキシカルボニル基、Ｚはベンジルオキシカルボニル基をそれぞれ表わす）。
　ＷＴ１抗原ペプチドを製造するための中間体において、アミノ基、カルボキシ基、メルカプト基などの官能基は、必要に応じて保護、脱保護の技術を用い、適当な保護基で保護し、また脱保護することができる。好適な保護基、保護する方法、および脱保護する方法としては、「Protective Groups in Organic Synthesis 2nd Edition (John Wiley & Sons, Inc.;1990)」などに詳細に記載されている。たとえば、メルカプト基の保護基としてはアセトアミドメチル基またはトリチル基などが挙げられる。
　ＷＴ１抗原ペプチドがジスルフィド結合を有する場合、通常のペプチド化学に用いられる方法に準じて、システイン残基を含む異なる２つのペプチド間で、またはシステイン残基を含むペプチドとシステイン間で、当該ジスルフィド結合を形成することができる。ジスルフィド結合の形成方法は、文献（ペプタイド・シンセシス（Peptide Synthesis）, Interscience, New York, 1966; ザ・プロテインズ（The Proteins）, Vol 2, Academic Press Inc., New York, 1976；ペプチド合成，丸善（株），１９７５；ペプチド合成の基礎と実験、丸善（株），１９８５；医薬品の開発 続 第１４巻・ペプチド合成，広川書店，１９９１）などに記載されている方法が挙げられる。
　具体的には、ペプチドに含まれるシステイン残基が１個の場合、システイン側鎖上のメルカプト基の保護基を含むすべての保護基を除去した後、不活性溶媒中で酸化させることにより、ジスルフィド結合を有する化合物（ジスルフィド化合物）を製造することができる。また、メルカプト基を持つ２つの中間体を適当な溶媒中に混合し酸化することにより製造することができる。当該酸化の方法としては、通常のペプチド合成でジスルフィド結合を形成させる公知の方法を適宜選択すればよい。例えば、ヨウ素酸化、アルカリ条件下で空気酸化反応に付す方法、またはアルカリ性もしくは酸性条件下酸化剤を添加してジスルフィド結合を形成する方法などが挙げられる。ここで、酸化剤としては、ヨウ素、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、フェリシアン化カリウムなどが挙げられる。溶媒としては水、酢酸、メタノール、クロロホルム、ＤＭＦもしくはＤＭＳＯなど、またはこれらの混合液を用いることができる。酸化反応によりしばしば、対称、非対称性ジスルフィド化合物の混合物を与える。目的の非対称性ジスルフィド化合物は種々のクロマトグラフィー、または再結晶などで精製することによって得ることができる。あるいは活性化されたメルカプト基をもつ中間体とメルカプト基をもつ中間体を混合することにより選択的なジスルフィド結合を形成することができる。活性化されたメルカプト基をもつ中間体としては、Ｎｐｙｓ基（３－ニトロ－２－ピリジンスルフェニル基）が結合したメルカプト基などが挙げられる。あるいは、あらかじめ一方の中間体と例えば２，２'－ジチオビス（５－ニトロピリジン）を混合することによりメルカプト基を活性化した後、他方の中間体を加えることにより選択的なジスルフィド結合を形成することができる（Tetrahedron Letters. Vol.37. No.9, pp.1347-1350）。
　ペプチドに含まれるシステイン残基が２個以上の場合も、前記と同様の方法を用いることができる。この場合はジスルフィド結合様式が異なる異性体が得られる。システイン側鎖の保護基を特定の組み合わせにすることにより、目的のシステイン残基間でジスルフィド結合を形成した二量体を得ることができる。前記保護基の組み合わせとしては、ＭｅＢｚｌ（メチルベンジル）基とＡｃｍ（アセトアミドメチル）基、Ｔｒｔ（トリチル）基とＡｃｍ基、Ｎｐｙｓ（３－ニトロ－２－ピリジルチオ）基とＡｃｍ基、Ｓ－Ｂｕ－ｔ（Ｓ－ｔｅｒｔ－ブチル）基とＡｃｍ基などが挙げられる。例えばＭｅＢｚｌ基とＡｃｍ基の組み合わせの場合、まずＭｅＢｚｌ基とシステイン側鎖以外のその他の保護基を除去した後、ペプチド単量体を含む溶液を空気酸化反応に付して脱保護されたシステイン残基間にジスルフィド結合を形成し、次いでヨウ素による脱保護および酸化を行ってＡｃｍ基で保護されていたシステイン残基間にジスルフィド結合を形成する方法などが挙げられる。
　ＷＴ１抗原ペプチドは、キラーペプチドとヘルパーペプチド、または２つの異なるキラーペプチドもしくはヘルパーペプチドを、ジスルフィド結合を介して結合させたものであってもよい。かかるペプチドは、以下の工程（１）～（３）を含む方法により合成することができる。
　工程（１）においては、Ｆｍｏｃ－Ｃ（Ｍｍｔ）Ａ－ＳＢｎおよび第一の抗原ペプチドを用いて、Ｃ（Ｍｍｔ）ＡのＣ末端アミノ酸のカルボニル基と第一の抗原ペプチドのＮ末端アミノ基が結合したペプチドを合成する。ここで、「Ｆｍｏｃ」は、９－フルオレニルメトキシカルボニル基を表す。「Ｍｍｔ」は、モノメトキシトリチル基を表す。「ＳＢｎ」は、チオベンジル基を表す。
　工程（２）においては、前記工程（１）で得られたペプチドおよびＮｐｙｓ基で保護された１つのシステイン残基がＮ末端に結合している第二の抗原ペプチドを用いて、前記工程（１）で得られたペプチド中の第一の抗原ペプチドのシステイン残基のチオエーテル基と第二の抗原ペプチドのＮ末端に結合しているシステイン残基のチオエーテル基が結合したペプチドを合成する。ここで、「Ｎｐｙｓ」は、３－ニトロ－２－ピリジルチオ基を表す。
　工程（３）においては、前記工程（２）で得られたペプチドおよびＳＰｙ基で保護されたシステイン残基を含む第三の抗原ペプチドを用いて、前記工程（２）で得られたペプチド中の第二の抗原ペプチドのＮ末端に結合しているシステイン残基のチオエーテル基と第三の抗原ペプチドのシステイン残基のチオエーテル基が結合したペプチドを合成する。ここで、「ＳＰｙ」は、２－ピリジルスルフィド基を表す。
　得られたＷＴ１抗原ペプチドは、当業者に公知の方法や通常のペプチド化学に用いられる方法に準じて精製することができる。例えば、種々のクロマトグラフィー（例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィー、イオン交換カラムクロマトグラフィー、ゲルろ過、もしくは逆相クロマトグラフィー）、または再結晶などで精製することができる。例えば、再結晶溶媒としては、メタノール、エタノールもしくは２－プロパノールなどのアルコール系溶媒、ジエチルエーテルなどのエーテル系溶媒、酢酸エチルなどのエステル系溶媒、ベンゼンもしくはトルエンなどの芳香族炭化水素系溶媒、アセトンなどのケトン系溶媒、ヘキサンなどの炭化水素系溶媒、ジメチルホルムアミドもしくはアセトニトリルなどの非プロトン系溶媒、水、またはこれらの混合溶媒などを用いることができる。その他精製方法としては、実験化学講座（日本化学会編、丸善）１巻などに記載された方法などを用いることができる。
　ジスルフィド化合物の精製方法は、文献（ペプタイド・シンセシス（Peptide Synthesis）, Interscience, New York, 1966；ザ・プロテインズ（The Proteins），Ｖol 2, Academic Press Inc., New York, 1976；ペプチド合成，丸善（株），１９７５；ペプチド合成の基礎と実験、丸善（株），１９８５；医薬品の開発 続 第１４巻・ペプチド合成，広川書店，１９９１）などに記載されている。中でも、ＨＰＬＣが好ましい。
　ＷＴ１抗原ペプチドにおいて、１つ以上の不斉点がある場合、通常の方法に従って、その不斉点を有する原料（アミノ酸）を用いることによって、製造することができる。また、ＷＴ１抗原ペプチドの光学純度を上げるために、製造工程の適当な段階で光学分割などを行ってもよい。光学分割法として例えば、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその中間体を不活性溶媒中（例えばメタノール、エタノール、もしくは２－プロパノールなどのアルコール系溶媒、ジエチルエーテルなどのエーテル系溶媒、酢酸エチルなどのエステル系溶媒、トルエンなどの炭化水素系溶媒、またはアセトニトリルなどの非プロトン系溶媒、およびこれらの混合溶媒）、光学活性な酸（例えば、マンデル酸、Ｎ－ベンジルオキシアラニン、もしくは乳酸などのモノカルボン酸、酒石酸、ｏ－ジイソプロピリデン酒石酸もしくはリンゴ酸などのジカルボン酸、またはカンファースルフォン酸もしくはブロモカンファースルフォン酸などのスルホン酸）と塩を形成させるジアステレオマー法により行うことができる。ＷＴ１抗原ペプチドまたはその中間体がカルボキシ基などの酸性官能基を有する場合は、光学活性なアミン（例えばα－フェネチルアミン、キニン、キニジン、シンコニジン、シンコニン、ストリキニーネなどの有機アミン）と塩を形成させることにより光学分割を行うこともできる。
　塩を形成させる温度としては、室温から溶媒の沸点までの範囲から選択される。光学純度を向上させるためには、一旦、溶媒の沸点付近まで温度を上げることが望ましい。析出した塩を濾取する際、必要に応じて冷却し収率を向上させることができる。光学活性な酸、またはアミンの使用量は、基質に対し約０．５～約２．０当量の範囲、好ましくは１当量前後の範囲が適当である。必要に応じ結晶を不活性溶媒中（例えばメタノール、エタノール、２－プロパノールなどのアルコール系溶媒、ジエチルエーテルなどのエーテル系溶媒、酢酸エチルなどのエステル系溶媒、トルエンなどの炭化水素系溶媒、アセトニトリルなどの非プロトン系溶媒およびこれらの混合溶媒）で再結晶し、高純度の光学活性な塩を得ることもできる。また、必要に応じて光学分割した塩を通常の方法で酸または塩基で処理しフリー体として得ることもできる。
　本発明における「薬学上許容される塩」としては、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。例えば、酸付加塩としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、ギ酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩などの有機酸塩が挙げられ、塩基付加塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩などの無機塩基塩、トリエチルアンモニウム塩、トリエタノールアンモニウム塩、ピリジニウム塩、ジイソプロピルアンモニウム塩などの有機塩基塩などが挙げられ、さらにはアルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸などの塩基性あるいは酸性アミノ酸といったアミノ酸塩が挙げられる。
　ＷＴ１キラーペプチドの薬学上許容される塩としては、例えば、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：３）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：４）、
ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　（配列番号：５）、
ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ　（配列番号：６）、
ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ　（配列番号：７）、
ＶＬＤＦＡＰＰＧＡ、（配列番号：８）、
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：９）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、および
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：１０）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド；
前記配列番号２～１０から選択されるいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチド；または
式（１）～（３）で表される化合物の、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。例えば、酸付加塩としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、ギ酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩などの有機酸塩が挙げられ、塩基付加塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩などの無機塩基塩、トリエチルアンモニウム塩、トリエタノールアンモニウム塩、ピリジニウム塩、ジイソプロピルアンモニウム塩などの有機塩基塩などが挙げられ、さらにはアルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸などの塩基性あるいは酸性アミノ酸といったアミノ酸塩が挙げられる。
　ＷＴ１ヘルパーペプチドの薬学上許容される塩としては、例えば、
ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１１）、
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号：１２）、
ＲＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭＨＱＲＮＭＴＫＬ　（配列番号：１３）、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１４）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　（配列番号：１５）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１６）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１７）、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１８）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１９）および
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ　（配列番号：２０）
から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド；または
前記配列番号１１～２０から選択されるいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つヘルパーＴ細胞誘導活性を有するペプチドの、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。例えば、酸付加塩としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、酢酸塩、ギ酸塩、プロピオン酸塩、安息香酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩などの有機酸塩が挙げられ、塩基付加塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩などの無機塩基塩、トリエチルアンモニウム塩、トリエタノールアンモニウム塩、ピリジニウム塩、ジイソプロピルアンモニウム塩などの有機塩基塩などが挙げられ、さらにはアルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸などの塩基性あるいは酸性アミノ酸といったアミノ酸塩が挙げられる。
　ＷＴ１抗原ペプチドの薬学上許容される塩の例としては、特にこれに限定されないが、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ　酢酸塩、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　酢酸塩、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　酢酸塩、
ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　酢酸塩、
ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ　酢酸塩、
ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ　酢酸塩、
ＶＬＤＦＡＰＰＧＡ　酢酸塩、
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　酢酸塩、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　酢酸塩、
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
 ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　酢酸塩、
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　酢酸塩、
ＲＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭＨＱＲＮＭＴＫＬ　酢酸塩、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　酢酸塩、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　酢酸塩、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　酢酸塩、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　酢酸塩、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　酢酸塩、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　酢酸塩、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ　酢酸塩、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ　トリフルオロ酢酸塩、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　トリフルオロ酢酸塩、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　トリフルオロ酢酸塩、
ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　トリフルオロ酢酸塩、
ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ　トリフルオロ酢酸塩、
ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ　トリフルオロ酢酸塩、
ＶＬＤＦＡＰＰＧＡ　トリフルオロ酢酸塩、
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　トリフルオロ酢酸塩、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　トリフルオロ酢酸塩、
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
 ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　トリフルオロ酢酸塩、
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　トリフルオロ酢酸塩、
ＲＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭＨＱＲＮＭＴＫＬ　トリフルオロ酢酸塩、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　トリフルオロ酢酸塩、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　トリフルオロ酢酸塩、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　トリフルオロ酢酸塩、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　トリフルオロ酢酸塩、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　トリフルオロ酢酸塩、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　トリフルオロ酢酸塩、および
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ　トリフルオロ酢酸塩
が挙げられる。
　本発明のＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩の水和物、エタノール溶媒和物などの溶媒和物も、本発明に含まれる。さらに、本発明は、ＷＴ１抗原ペプチドのあらゆるジアステレオマー、エナンチオマーなどの存在し得るあらゆる立体異性体、およびあらゆる態様の結晶形も包含している。
　ＷＴ１抗原ペプチドのＣＴＬ誘導活性は、ＨＬＡテトラマー法（Int. J. Cancer: 100, 565-570 (2002)）または限界希釈法（Nat. Med.: 4, 321-327 (1998)）によりＣＴＬの数を測定することにより確認することができる。あるいは、例えばＨＬＡ－Ａ２４拘束性のＣＴＬ誘導活性の場合、国際公開第０２／４７４７４号およびInt. J. Cancer: 100, 565-570 (2002)に記述されたＨＬＡ－Ａ２４モデルマウスを用いることなどにより調べることができる。ＷＴ１抗原ペプチドのヘルパーＴ細胞誘導活性は、例えばCancer Immunol. Immunother. 51:271(2002)に記載の方法などの公知の方法により調べることができる。
　本発明において「免疫調節剤」とは、抗原提示細胞によるＴ細胞活性化において抗原提示細胞上及び／またはＴ細胞上の補助刺激シグナルの伝達に関与する分子に相互作用することにより補助刺激シグナルの伝達を制御する、また、免疫機構において直接的または間接的に免疫寛容（免疫抑制）の成立に関与する分子の機能を制御するもの全てをいう。「免疫調節剤」は、抗体、核酸、タンパク質、ペプチドおよび低分子化合物から選択される薬剤であり得るが、これらに限定されない。「免疫調節剤」に関する記載において、「抗体」なる用語には抗体断片も含まれる。抗体断片としては、抗体の重鎖および軽鎖可変領域（ＶＨおよびＶＬ）、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆｖ、Ｆｄ、ｓｄＦｖ、ｓｃＦＶなどが例示される。「免疫調節剤」に関する記載において、タンパク質は抗体を除くあらゆるタンパク質を意味する。「免疫調節剤」には、例えば、免疫チェックポイント阻害剤、共刺激分子アゴニスト剤、免疫活性化剤、および低分子阻害剤が含まれる。
　「免疫チェックポイント阻害剤」は、癌細胞や抗原提示細胞による免疫抑制作用を阻害する。免疫チェックポイント阻害剤としては、特に限定されないが、以下からなる群から選択される分子に対する薬剤が挙げられる：（１）ＣＴＬＡ－４（イピリムマブ、トレメリムマブなど）；（２）ＰＤ－１（ニボルマブ、ペンブロリズマブ、ＡＭＰ－２２４、ＡＭＰ－５１４（ＭＥＤＩ０６８０）、ピディリズマブ（ＣＴ－０１１）など）；（３）ＬＡＧ－３（ＩＭＰ－３２１、ＢＭＳ－９８６０１６など）；（４）ＢＴＬＡ；（５）ＫＩＲ（ＩＰＨ２１０１など）；（６）ＴＩＭ－３；（７）ＰＤ－Ｌ１（Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ（ＭＥＤＩ４７３６）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＢＭＳ－９３６５５９、アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃ）など）；（８）ＰＤ－Ｌ２；（９）Ｂ７－Ｈ３（ＭＧＡ－２７１など）；（１０）Ｂ７－Ｈ４；（１１）ＨＶＥＭ；（１２）ＧＡＬ９；（１３）ＣＤ１６０；（１４）ＶＩＳＴＡ；（１５）ＢＴＮＬ２；（１６）ＴＩＧＩＴ；（１７）ＰＶＲ；（１８）ＢＴＮ１Ａ１；（１９）ＢＴＮ２Ａ２；（２０）ＢＴＮ３Ａ２（Nat Rev Drug Discov. 2013; 12: 130-146；日経メディカル　Cancer Review 2014; 9；Nat Rev Immunol. 2014; 14: 559-69）；および（２１）ＣＳＦ１－Ｒ。
　「共刺激分子アゴニスト剤」は、Ｔ細胞上や抗原提示細胞上の共刺激分子を介した補助シグナルを伝達することにより、T細胞を活性化し、癌細胞や抗原提示細胞による免疫抑制作用を減弱させる。共刺激分子アゴニスト剤としては、特に限定されないが、以下の群から選択される分子に対する薬剤が挙げられる：（１）４－１ＢＢ（２）４－１ＢＢ－Ｌ；（３）ＯＸ４０（４）ＯＸ４０－Ｌ；（５）ＧＩＴＲ；（６）ＣＤ２８；（７）ＣＤ４０；（８）ＣＤ４０－Ｌ（９）ＩＣＯＳ；（１０）ＩＣＯＳ－Ｌ；（１１）ＬＩＧＨＴ；および（１２）ＣＤ２７。
　「免疫活性化剤」は、Ｔ細胞や樹状細胞など免疫細胞を直接的あるいは間接的に活性化させることにより、リンパ節においてキラーＴ細胞を効率良く刺激する。免疫活性化剤としては、特に限定されないが、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）作動薬、インターフェロン遺伝子刺激因子（ＳＴＩＮＧ）作動薬、サイトカイン、またはヒートショックプロテイン（ＨＳＰ）に対する薬剤が挙げられる。
　「Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）作動薬」としては、特に限定されないが、例えば、ＴＬＲ１／２作動薬、ＴＬＲ２作動薬、ＴＬＲ３作動薬（ＰｏｌｙＩ：Ｃなど）、ＴＬＲ４作動薬（Ｓ型リポ多糖、パクリタキセル、リピドＡ、モノホスホリルリピドＡなど）、ＴＬＲ５作動薬（フランジェリンなど）、ＴＬＲ６／２作動薬（ＭＡＬＰ－２など）、ＴＬＲ７作動薬、ＴＬＲ７／８作動薬（ガーディキモド、イミキモド、ロキソリビン、レシキモド（Ｒ８４８）など）、ＴＬＲ７／９作動薬（ヒドロキシクロロキン硫酸塩など）、ＴＬＲ８作動薬（モトリモド（ＶＴＸ－２３３７）など）、ＴＬＲ９作動薬（ＣｐＧ－ＯＤＮなど）、ＴＬＲ１１作動薬（プロフィリン）などが挙げられる。
　「サイトカイン」としては、特に限定されないが、例えば、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１４、ＩＬ－１５、ＩＬ－１６、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、インターフェロン（ＩＮＦ）－α、ＩＮＦ－β、ＩＮＦ－γ、ＳＣＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、Ｇ－ＣＳＦ、Ｍ－ＣＳＦ、エリスロポエチン、トロンポポエチン、ＭＩＰ（macrophage inflammatory protein）およびＭＣＰ（monocyte chemoattractant protein）などが挙げられる。
　「ヒートショックプロテイン（ＨＳＰ）」としては、特に限定されないが、ＨＳＰ７０、ＨＳＰ９０、ＨＳＰ９０α、ＨＳＰ９０β、ＨＳＰ１０５、ＨＳＰ７２，ＨＳＰ４０などが挙げられる。ＨＳＰに対する薬剤には、ＨＳＰ阻害剤が含まれる。例えば、ＨＳＰ９０阻害剤として、特に限定されないが、タネスピマイシン（１７－ＡＡＧ）、ルミネスピブ（ＡＵＹ－９２２、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）塩酸塩、ガネテスピブ（ＳＴＡ－９０９０）、ＢＩＩＢ０２１、オナレスピブ（ＡＴ１３３８７）、ゲルダナマイシン、ＮＶＰ－ＢＥＰ８００、ＳＮＸ－２１１２（ＰＦ－０４９２８４７３）、ＰＦ－４９２９１１３（ＳＮＸ－５４２２）、ＫＷ－２４７８、ＸＬ８８８、ＶＥＲ１５５００８、ＶＥＲ－５０５８９、ＣＨ５１３８３０３、ＶＥＲ－４９００９、ＮＭＳ－Ｅ９７３、ＰＵ－Ｈ７１、ＨＳＰ９９０（ＮＶＰ－ＨＳＰ９９０）またはＫＮＫ４３７などが挙げられる。
　「低分子阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ヒストン脱アセチル化阻害剤、ヒストン脱メチル化阻害薬、ヒストンアセチル化酵素阻害剤、ヒストンメチル化酵素阻害剤、ＤＮＡメチル基転移酵素阻害剤、アントラサイクリン系抗生物質、白金製剤、ＭＡＰＫ阻害剤、β－カテニン阻害剤、ＳＴＡＴ３阻害剤、ＮＦ－ｋＢ阻害剤、ＪＡＫ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ＣＯＸ－２阻害剤ＣＸＣＲ４阻害剤およびアルギナーゼ阻害剤などが挙げられる。
　「ヒストン脱アセチル化阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ボリノスタット（ＳＡＨＡ、ＭＫ０６８３）、エンチノスタット（ＭＳ－２７５）、パノビノスタット（ＬＢＨ５８９）、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、モセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）、ＢＧ４５、ＢＲＤ７３９５４、ベリノスタット（ＰＸＤ１０１）、ロミデプシン（ＦＫ２２８、デシペプチド）、４ＳＣ－２０２、ＨＰＯＢ、ＬＭＫ－２３５、ＣＡＹ１０６０３、タスキニモド、ＴＭＰ２６９、Ｎｅｘｔｕｒａｓｔａｔ　Ａ、Ｒｏｃｉｌｉｎｏｓｔａｔ（ＡＣＹ－１２１５）、ＲＧＦＰ９６６、ＲＧ２８３３（ＲＧＦＰ１０９）、Ｓｃｒｉｐｔａｉｄ、ツバスタチンＡ、Ｐｒａｃｉｎｏｓｔａｔ（ＳＢ９３９）、ＣＵＤＣ－１０１、Ｍ３４４、ＰＣＩ－３４０５１、ダシノスタット（ＬＡＱ８２４）、ツバスタチンＡ塩酸塩、アベキシノスタット（ＰＣＩ－２４７８１）、ＣＵＤＣ－９０７、ＡＲ－４２、フェニル酪酸ナトリウム、レスミノスタット、ツバシン、キシノスタット（ＪＮＪ－２６４８１５８５）二塩酸塩、ＭＣ１５６８、Ｇｉｖｉｎｏｓｔａｔ（ＩＴＦ２３５７）、Ｄｒｏｘｉｎｏｓｔａｔ、Ｃｈｉｄａｍｉｄｅ（Ｃ　Ｓ０５５、ＨＢＩ－８０００）、ＣＨＲ－２４８５、ＣＨＲ－３９９６、ＤＡＣ－０６０、ＦＲＭ－０３３４（ＥＶＰ－０３３４）、ＭＧＣＤ－２９０、ＣＸＤ－１０１（ＡＺＤ－９４６８）、ＣＧ２００７４５、アルギニン酪酸塩、スルフォラファン、ＳＨＰ－１４１、ＣＵＤＣ－９０７、ＹＭ７５３（ＯＢＰー８０１）、バルプロ酸ナトリウム、アピシジンおよびＣＩ９９４（Ｔａｃｅｄｉｎａｌｉｎｅ）などが挙げられる。
　「ヒストン脱メチル化阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ＧＳＫ　Ｊ４　ＨＣｌ、ＯＧ－Ｌ００２、ＪＩＢ－０４、ＩＯＸ１、ＳＰ２５０９、ＯＲＹ－１００１（ＲＧ－６０１６）、ＧＳＫ　Ｊ１、ＭＬ３２４、ＧＳＫ－ＬＳＤ１　２ＨＣｌなどが挙げられる。
　「ヒストンアセチル化酵素阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、Ｃ６４６、ＭＧ１４９、Ｒｅｍｏｄｅｌｉｎ、およびＡｎａｃａｒｄｉｃ　Ａｃｉｄなどが挙げられる。
　「ヒストンメチル化酵素阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、Ｐｉｎｏｍｅｔｏｓｔａｔ（ＥＰＺ５６７６）、ＥＰＺ００５６７８、ＧＳＫ３４３、ＢＩＸ０１２９４、Ｔａｚｅｍｅｔｏｓｔａｔ（ＥＰＺ６４３８）、３－ｄｅａｚａｎｅｐｌａｎｏｃｉｎ Ａ（ＤＺＮｅＰ）ＨＣｌ、ＵＮＣ１９９９、ＭＭ－１０２、ＳＧＣ０９４６、エンタカポン、ＥＰＺ０１５６６６、ＵＮＣ０３７９、ＥＩ１、ＭＩ－２（Menin-MLL Inhibitor）、ＭＩ－３（Menin-MLL Inhibitor）、ＰＦＩ－２、ＧＳＫ１２６、ＥＰＺ０４７７７、ＢＲＤ４７７０、ＧＳＫ－２８１６１２６およびＵＮＣ０６３１などが挙げられる。
　「ＤＮＡメチル基転移酵素阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、デシタビン、アザチジン、ＲＧ１０８、チオグアニン、ゼブラリン、ＳＧＩ－１１０、ＣＣ－４８６、ＳＧＩ－１０２７、ロメグアトリブおよびプロカイナミド塩酸塩などが挙げられる。
　「アントラサイクリン系抗生物質」は、ＤＮＡ鎖間への挿入によって、ＤＮＡがほどかれることを阻害する。アントラサイクリン系抗生物質としては、特に限定されないが、例えば、ドキソルビシン、リポソーマルドキソルビシン、ダウノルビシン、ピラルビシン、エピルビシン、イダルビシン、アクラルビシン、アムルビシン、アロインまたはミトキサトロンなどが挙げられる。
　「白金製剤」としては、特に限定されないが、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、ミボプラチン、ネダプラチン、サトラプラチン（ＪＭ－１２６）、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ）、四硝酸トリプラチンまたはそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「ＭＡＰＫ阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ＳＢ２０３５８０、ドラマピモド（ＢＩＲＢ７９６）、ＳＢ２０２１９０（ＦＨＰＩ）、ＬＹ２２２８８２０、ＶＸ－７０２、ＳＢ２３９０６３、Ｐｅｘｍｅｔｉｎｉｂ（ＡＲＲＹ－６１４）、ＰＨ－７９７８０４、ＶＸ－７４５またはＴＡＫ－７１５などが挙げられる。
　「β―カテニン阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ＸＡＶ－９３９、ＩＣＧ－００１、ＩＷＲ－１－ｅｎｄｏ、Ｗｎｔ－Ｃ５９（Ｃ５９）、ＬＧＫ－９７４、ＫＹ０２１１１、ＩＷＰ－２、ＩＷＰ－Ｌ６、ＷＩＫＩ４またはＦＨ５３５などが挙げられる。
　「ＳＴＡＴ３阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、Ｓ３Ｉ－２０１、Ｓｔａｔｔｉｃ、ニクロサミド、ニフロキサジド、ナパブカシン（ＢＢＩ－６０８）、クリプトタンシノン、ＨＯ－３８６７、ＷＨＩ－Ｐ１５４、ＦＬＬＬ３２、ＳＴＡ－２１、ＷＰ１０６６またはＳＨ－４－５４などが挙げられる。
　「ＮＦ－ｋＢ阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ＱＮＺ（ＥＶＰ４５９３）、4-アミノサリチル酸ナトリウム、ＪＳＨ－２３、カフェイン酸フェネチル、サリチル酸ナトリウム、アンドログラホリドまたはＳＣ７５７４１などが挙げられる。
　「ＪＡＫ阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ルキソリチニブ（ＩＮＣＢ０１８４２４）、トファシチニブ（ＣＰ－６９０５５０）クエン酸塩、ＡＺＤ１４８０、フェドラチニブ（ＳＡＲ３０２５０３、ＴＧ１０１３４８）、ＡＴ９２８３、チロホスチンＢ４２（ＡＧ－４９０）、モメロチニブ（ＣＹＴ３８７）、トファシチニブ（ＣＰ－６９０５５０、タソシチニブ）、ＷＰ１０６６、ＴＧ１０１２０９、ガンドチニブ（ＬＹ２７８４５４４）、ＮＶＰ－ＢＳＫ８０５　２ＨＣｌ、バリシチニブ（ＬＹ３００９１０４、ＩＮＣＢ０２８５０）、ＡＺ９６０、ＣＥＰ－３３７７９、パクリチニブ（ＳＢ１５１８）、ＷＨＩ－Ｐ１５４、ＸＬ０１９、Ｓ－ルクソリチニブ（ＩＮＣＢ０１８４２４）、ＺＭ３９９２３　ＨＣｌ、デセルノチニブ（ＶＸ－５０９）、Ｃｅｒｄｕｌａｔｉｎｉｂ（ＰＲＴ０６２０７０、ＰＲＴ２０７０）、フィルゴチニブ（ＧＬＰＧ０６３４）、ＦＬＬＬ３２、ペフィシチニブ（ＡＳＰ０１５Ｋ、ＪＮＪ－５４７８１５３２）、ＧＬＰＧ０６３４　ａｎａｌｏｇｕｅ、Ｇｏ６９７６またはＣｕｒｃｕｍｏｌなどが挙げられる。
　「ｍＴＯＲ阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、シロリムス（ラパマイシン）、デフォロリムス（ＡＰ２３５７３、ＭＫ－８６６９）、エベロリムス（ＲＡＤ－００１）、テムシロリムス（ＣＣＩ－７７９、ＮＳＣ６８３８６４）、ゾタロリムス（ＡＢＴ－５７８）、およびバイオリムスＡ９（ウミロリムス）、ＡＺＤ８０５５、ＫＵ－００６３７９４、Ｖｏｘｔａｌｉｓｉｂ（ＸＬ７６５、ＳＡＲ２４５４０９）、ＭＨＹ１４８５、ダクトリシブ（ＢＥＺ２３５、ＮＶＰ－ＢＥＺ２３５）またはＰＩ－１０３、Ｔｏｒｋｉｎｉｂ（ＰＰ２４２）などが挙げられる。
　「ＩＤＯ阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ＮＬＧ９１９、ＩＮＣＢ０２４３６０アナログ、インドキシモド（ＮＬＧ－８１８９）およびＥｐａｃａｄｏｓｔａｔ（ＩＮＣＢ０２４３６０）などが挙げられる。
　「ＣＯＸ２阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、バルデコキシブ、ロフェコキシブ、カルプロフェン、セレコキシブ、ルミラコキシブ、トルフェナム酸、ニメスリド、ニフルム酸、Ａｓａｒａｌｄｅｈｙｄｅ、ロルノキシカム、メクロフェナミン酸ナトリウム、アンフェナックナトリウム水和物、ジクロフェナクナトリウム、ケトプロフェン、ケトロラック、ナプロキセンナトリウム、インドメタシン、イブプロフェン、アスピリン、メフェナム酸、ブロムフェナクナトリウム、オキサプロジン、ザルトプロフェンおよびネパフェナックなどが挙げられる。
「ＣＸＣＲ４阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ＷＺ８１１、Ｐｌｅｒｉｘａｆｏｒ（ＡＭＤ３１００）およびＰｌｅｒｉｘａｆｏｒ　８ＨＣｌ（ＡＭＤ３１００　８ＨＣｌ）などが挙げられる。
　本発明のＷＴ１抗原ペプチドは、免疫調節剤と併用しても優れた抗癌作用を示すが、更に幾つかの薬剤と複合的に併用（多剤併用）することにより、その効果がより一層増強され又は患者のＱＯＬを改善させることができる。
　本願のＷＴ１抗原ペプチドは、「ホルモン療法剤」、「免疫療法剤」、「生物学的製剤」、「細胞増殖因子」、「細胞増殖因子阻害剤」、「細胞増殖因子受容体阻害剤」、「放射線療法剤」、「補助剤」もしくは「化学療法剤」からなる群から選択される１又は複数の薬物と併用して用いることができる。好ましくは、本願のＷＴ１抗原ペプチドは、上記群から選択される１乃至５の薬物と併用して用いることができる。更に好ましくは、本願のＷＴ１抗原ペプチドは、上記群から選択される１乃至３の薬物と併用して用いることができる。特に好ましくは、本願のＷＴ１抗原ペプチドは、上記群から選択される１の薬物と併用して用いることができる。以下、本願のＷＴ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤と併用し得る薬物を併用薬物と略記する。併用薬物の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として適宜選択することができる。
　「ホルモン療法剤」としては、副腎皮質ホルモン系薬剤（例えば、ステロイド系抗炎症薬、エストロゲン製剤、プロゲステロン製剤、アンドロゲン製剤など）、抗エストロゲン剤、エストロゲン調整剤、エストロゲン合成阻害剤、抗アンドロゲン剤、アンドロゲン調整剤、アンドロゲン合成阻害剤、ＬＨ－ＲＨアゴニスト製剤、ＬＨ－ＲＨアンタゴニスト製剤、アロマターゼ阻害剤、ステロイドラクトナーゼ阻害剤、ピル製剤、またはレチノイド及びレチノイドの代謝を遅らせる薬剤などが挙げられる。
　「ホルモン療法剤」としては、例えば、ホスフェストロール、ジエチルスチルベストロール、フルオキシメステロール、クロロトリアニセン、メチルテストステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、酢酸クロルマジノン、酢酸シプロテロン、ダナゾール、アリルエストレノール、ゲストリノン、メパルトリシン、ラロキシフェン、オルメロキシフェン、レボルメロキシフェン、クエン酸タモキシフェン、クエン酸トレミフェン、ヨードキシフェン、ピル製剤、メピチオスタン、テストロラクトン、アミノグルテチイミド、酢酸ゴセレリン、ブセレリン、リュープロレリン、ロイプロリド、ドロロキシフェン、エピチオスタノール、スルホン酸エチニルエストラジオール、エストラムスチン、塩酸ファドロゾール、アナストロゾール、テロラゾール、ケトコナゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、フォルメスタン、エキセメスタン、フルタミド、ビカルタミド、ニルタミド、エンザルタミド、ミフェプリストン、フィナステロド、デキサメタゾン、プレドニゾロン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、アビラテロン、リアロゾール、ベキサロテンまたはＤＮ１０１などが挙げられる。
　「免疫療法剤」としては、例えば、ピシバニール、クレスチン、シゾフィラン、レンチナン、ウベニメクス、インターフェロン（ＩＬ）－α、インターフェロン（ＩＬ）－β、インターフェロン（ＩＬ）－γ、インターロイキン、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、エリスロポイエチン、リンホトキシン、ＢＣＧワクチン、コリネバクテリウムパルブム、レバミゾール、ポリサッカライドＫ、プロコダゾール、抗ＣＴＬＡ４抗体、抗ＰＤ－１抗体またはＴＬＲ作動薬（例えば、ＴＬＲ７作動薬、ＴＬＲ８作動薬、ＴＬＲ９作動薬）などが挙げられる。
　「生物学的製剤」としては、特に限定されないが、例えば、インターロイキン－２（Ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）、インターフェロン－α、インターフェロン－β、インターフェロン－γ、エリスロポイエチン（ＥＰＯ）、顆粒球コロニー刺激因子（フィルグラスチン）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（サルグラモスチム）、ＩＬ１３－ＰＥ３８ＱＱＲ、バチルスカルメット－ゲラン、レバミゾール、オクトレオチド、ＣＰＧ７９０９、Ｐｒｏｖｅｎｇｅ、ＧＶＡＸ、Ｍｙｖａｘ、Ｆａｖｌｄ、レナリドマイド、トラスツズマブ、リツキシマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、アレムツズマブ、エンドスタチン、イブリツモマブチウキセタン、トシツモマブ、セツキシマブ、ザノリムマブ、オファツムマブ、ＨＧＳ－ＥＴＲ１、ペルツズマブ、Ｍ２００、ＳＧＮ－３０、マツズマブ、アデカツマブ、デノスマブ、ザルツムマブ、ＭＤＸ－０６０、ニモツズマブ、ＭＯＲＡｂ－００３、Ｖｉｔａｘｉｎ、ＭＤＸ－１０１、ＭＤＸ－０１０、ＤＰＣ４抗体、ＮＦ－１抗体、ＮＦ－２抗体、Ｒｂ抗体、ｐ５３抗体、ＷＴ１抗体、ＢＲＣＡ１抗体、ＢＲＣＡ２抗体、ガングリオシド（ＧＭ２）、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、α－フェトプロテイン（ＡＦＰ）、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、黒色腫関連抗原（ＭＡＲＴ－１、ｇａｐ１００、ＭＡＧＥ１，３チロシン）、乳頭腫ウイルスＥ６およびＥ７断片、またはそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　前記「細胞増殖因子」、「細胞増殖因子阻害剤」および「細胞増殖因子受容体阻害剤」における細胞増殖因子は、細胞増殖を促進する物質であれば、どのようなものでもよく、例えば、分子量が２０，０００以下のペプチドで、受容体との結合により低濃度で作用を発揮する因子があげられる。
　「細胞増殖因子」として、特に限定されないが、例えば、上皮成長因子（Epidermal Growth Factor：ＥＧＦ）、インスリン様成長因子（Insulin－Like Growth Factor：ＩＧＦ（例えば、インスリン、ＩＧＦ－１、ＩＧＦ－２など））、トランスフォーミング成長因子（Transforming Growth Factor：ＴＧＦ（例えば、ＴＧＦーａｌｐｈａ、ＴＧＦ－ｂｅｔａ））、神経成長因子（Nerve Growth Factor：ＮＧＦ）、脳由来神経栄養因子（Brain－derived Neurotrophic Factor：ＢＤＮＦ）、血管内皮細胞増殖因子（Vesicular Endothelial Growth Factor：ＶＥＧＦ）、コロニー刺激因子（Colony Stimulating Factor：ＣＳＦ（例えば、顆粒球コロニー刺激因子（Granulocyte－Colony Stimulating Factor：Ｇ－ＣＳＦ））、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（Granulocyte－Macrophage－Colony Stimulating Factor：ＧＭ－ＣＳＦ））、血小板由来成長因子（Platelet－Derived Growth Factor：ＰＤＧＦ）、エリスロポエチン（Erythropoietin：ＥＰＯ）、線維芽細胞増殖因子（Fibroblast Growth Factor：ＦＧＦ、（例えば、酸性ＦＧＦ、塩基性ＦＧＦ、ＫＧＫ（Keratinocyte Growth Factor）、ＦＧＦ－１０など））、肝細胞増殖因子（Hepatocyte Growth Factor：ＨＧＦ）へレグリン、またはアンジオポエチンなどが挙げられる。なお、細胞増殖因子は、成長因子と同義である。
　「細胞増殖因子阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、上皮成長因子阻害剤（ＥＧＦ阻害剤）、インスリン様成長因子阻害剤（ＩＧＦ阻害剤）、神経成長因子阻害剤（ＮＧＦ阻害剤）、脳由来神経栄養因子阻害剤（ＮＧＦ阻害剤）、血管内皮細胞増殖因子阻害剤（ＶＥＧＦ阻害剤）、コロニー刺激因子阻害剤（ＣＳＦ阻害剤）、血小板由来成長因子阻害剤（ＰＤＧＦ阻害剤）、エリスロポエチン阻害剤（ＥＰＯ阻害剤）、線維芽細胞増殖因子阻害剤（ＦＧＦ阻害剤）、肝細胞増殖因子阻害剤（ＨＧＦ阻害剤）、へレグリン阻害剤、またはアンジオポエチン阻害剤などが挙げられる。なお、細胞増殖因子阻害剤は、成長因子阻害剤と同義である。
　「細胞増殖因子受容体阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、上皮成長因子受容体阻害剤（ＥＧＦＲ阻害剤）、インスリン様成長因子受容体阻害剤（ＩＧＦＲ阻害剤）、神経成長因子受容体阻害剤（ＮＧＦＲ阻害剤）、脳由来神経栄養因子受容体阻害剤（ＮＧＦＲ阻害剤）、血管内皮細胞増殖因子阻害剤（ＶＥＧＦ阻害剤）、コロニー刺激因子阻害剤（ＣＳＦ阻害剤）、血小板由来成長因子受容体阻害剤（ＰＤＧＦＲ阻害剤）、エリスロポエチン受容体阻害剤（ＥＰＯＲ阻害剤）、線維芽細胞増殖因子受容体阻害剤（ＦＧＦＲ阻害剤）、肝細胞増殖因子受容体阻害剤（ＨＧＦＲ阻害剤）、へレグリン受容体阻害剤、またはアンジオポエチン受容体阻害剤などが挙げられる。なお、細胞増殖因子受容体阻害剤は、成長因子受容体阻害剤と同義である。
　「放射線療法剤」として、特に限定されないが、例えば、放射性物質及び放射性増感剤などが挙げられる。
　「補助剤」は、抗がん剤による副作用や嘔吐を抑制するために用いられ、特に限定されないが、例えば、アプレピタント、オンダンセトロン、ロラゼパム、デキサメタゾン、ジフェンヒドラミン、ラニチジン、シメチジン、ラニチジン、ファモチジン、シメチジン、プロクリット、エポエチンアルファ、フィルグラスチム、オプレルベキン、ロイコボリン及び顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）などが挙げられる。
　「化学療法剤」としては、特に限定されないが、例えば、アルキル化剤、白金製剤、代謝拮抗剤、トポイソメラーゼ阻害剤、ＤＮＡインターカレータ、抗有糸分裂剤、抗癌性抗生物質、植物由来抗癌剤、エピゲノム薬、免疫調整薬、分子標的治療薬、新脈管形成阻害剤及びその他の化学療法剤などが用いられる。代表的な例を次に記載する。
　「アルキル化剤」としては、特に限定されないが、例えば、ナイトロジェンマスタード、塩酸ナイトロジェンマスタード－Ｎ－オキシド、クロラムブシル、シクロフォスファミド、イホスファミド、チオテパ、カルボコン、トシル酸インプロスルファン、ブスルファン、塩酸ニムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、ダカルバジン、プロカルバジン、ラニムスチン、リン酸エストラムスチンナトリウム、トリエチレンメラミン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾジン、ピポブロマン、エトグルシド、アルトレタミン、アンバムスチン、塩酸ジブロスピジウム、フォテムスチン、プレドニムスチン、ベンダムスチン、ウラムスチン、セムスチン、プミテパ、リボムスチン、テモゾロミド、トレオスルファン、トロフォスファミド、ジノスタチンスチマラマー、アドゼレシン、システムスチン、ビゼレシン、メクロエタミン、ウラシルマスタード、ストレプトゾシン、トラベクテジン、ベカテリン、クロルメチン、マンノスルファン、トリアジコン、プロカルバシン、カンホスファミド、ニトロソウレア及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「白金製剤」としては、特に限定されないが、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、ミボプラチン、ネダプラチン、サトラプラチン、オキサリプラチン、四硝酸トリプラチン及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「代謝拮抗剤」としては、特に限定されないが、例えば、葉酸代謝拮抗薬、ピリミジン代謝阻害薬、プリン代謝阻害薬、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害薬、及びヌクレオチドアナログが挙げられる。
　「代謝拮抗剤」としては、特に限定されないが、例えば、メルカプトプリン、６－メルカプトプリンリボシド、チオイノシン、メトトレキサート、ペメトレキセド、エオシタビン、エノシタビン、シタラビン、シタラビンオクフォスファート、塩酸アンシタビン、５－ＦＵ系薬剤（例えば、フルオロウラシル、カルゾナール、ベンナン、ルコナール、ルナボン、テガフール、テガフール・ウラシル、テガフール・ギメラシル・オテラシルカリウム（ＴＳ－１）、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、ガロシタビン、エミテフール、カペシタビンなど）、アミノプテリン、ネララビン、ロイコポリンカルシウム、タブロイド、ブトシン、フォリネイトカルシウム、レボフォリネイトカルシウム、クラドリビン、エミテフール、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシカルパミド、ペントスタチン、ピリトレキシム、イドキシウリジン、ミトグアゾン、チアゾフリン、アンバムスチン、ベンダムスチン、フロクスウリジン、ネララビン、ロイコボリン、ヒドロキシ尿素、チオグアニン、アスパラギナーゼ、ボルテゾミブ、ラルチトレキセド、クロファラビン、エノシタビン、サパシタビン、アザシチジン、スルファジアジン、スルファメトキサゾール、トリメトプリム、Ｌｉｐｒｏｘｓｔａｔｉｎ－１、Ｄ４４７６、Ｘａｎｔｈｏｈｕｍｏｌ、Ｅｐａｃａｄｏｓｔａｔ（ＩＮＣＢ０２４３６０）、Ｖｉｄｏｆｌｕｄｉｍｕｓ、Ｐ７Ｃ３、ＧＭＸ１７７８（ＣＨＳ８２８）、ＮＣＴ－５０１、ＳＷ０３３２９１、Ｒｏ６１－８０４８及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「トポイソメラーゼ阻害薬」としては、特に限定されないが、例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、アントラセンジオン、ミトキサントロン、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、プリカトマイシン、イリノテカン、カンプトテシン、ルビテカン、ベロテカン、エトポシド、テニポシド、トポテカン、アムサクリン及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「ＤＮＡインターカレータ」としては、特に限定されないが、例えば、プロフラビン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、サリドマイド及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「抗有糸分裂剤」としては、特に限定されないが、例えば、パクリタキセル、パクリタキセル誘導体（例えば、ＤＨＡパクリタキセル、ポリグルタメート化パクリタキセル、ナブパクリタキセル、パクリタキセルミセル、７α‐グルコシルオキシアセチルパクリタキセル、ＢＭＳ－２７５１８３など）、ドセタキセル、ビノルレビン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、ビンゾリジン、エトポシド、テニポシド、イクサベピロン、ラロタキセル、オルタタキセル、テセタキセル、イスピネシブ、コルヒチン、ビンフルニン及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「抗癌性抗生物質」としては、特に限定されないが、例えば、アクチノマイシンＤ、アクチノマイシンＣ、マイトマイシンＣ、クロモマイシンＡ３、ミトラマイシンＡ、塩酸ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸エピルビシン、塩酸アルムビシン、ネオカルチノスタチン、ジノスタチンスチマラマー、ミスラマイシン、ザルコマイシン、カルチノフィリン、ミトタン、塩酸ゾルビシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸イダルビシン、リポソーマルドキソビルシン及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「植物由来抗癌剤」としては、特に限定されないが、例えば、イリノテカン、ノギテカン、エトポシド、リン酸エトポシド、エリブリン、ソブゾキサン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、テニポシド、パクリタキセル、パクリタキセル注射剤、ドセタキセル、ＤＪ－９２７、ビノレルビン、トポテカン及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「エピゲノム薬」としては、特に限定されないが、例えば、ＤＮＡメチル化阻害薬、ヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）阻害剤、ＤＮＡメチル基転移酵素（ＤＮＭＴ）阻害剤、ヒストン脱アセチル化酵素活性化剤、ヒストン脱メチル化酵素阻害剤およびメチル化ヌクレオチドなどが挙げられる。
　「エピゲノム薬」としては、特に限定されないが、例えば、ボリノスタット、ベリノスタット、モセチノスタット（ＭＧＣＤ０１０３）、エンチノスタット（ＳＮＤＸ－２７５）、ロミデプシン、アザシチジン、デシタビン、ＧＳＫ２８７９５５２　２Ｈｌ、ＳＧＣ７０７、ＯＲＹ－１００１（ＲＧ－６０１６）、ＰＦＩ－４、ＳｉｒＲｅａｌ２、ＧＳＫ２８０１、ＣＰＩ－３６０、ＧＳＫ５０３、ＡＭＩ－１、ＣＰＩ－１６９及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「免疫調整薬」としては、特に限定されないが、例えば、サリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「分子標的治療薬」は、低分子化合物であっても抗体であってもよい。「分子標的治療薬」としては、特に限定されないが、例えば、キナーゼ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、モノクローナル抗体、ｍＴＯＲ阻害剤、ＴＮＦ阻害薬、及びＴ細胞阻害薬などが挙げられる。
　「キナーゼ阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、チロシンキナーゼ阻害剤、セリン／スレオニンキナーゼ阻害剤、Ｒａｆキナーゼ阻害剤、ＣＤＫ（サイクリン依存性キナーゼ）阻害剤、及びＭＥＫ（分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ）阻害剤などが挙げられる。
　具体的には、「キナーゼ阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、ダサチニブ、ボスチニブ、バンデタニブ、スニチニブ、アキシチニブ、パゾパニブ、レンバチニブ、ラパチニブ、ニンテダニブ、ニロチニブ、クリゾチニブ、セリチニブ、アレクチニブ、ルキソリチニブ、トファシチニブ、イブルチニブ、ソラフェニブ、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、パルボシクリブ、トラメチニブ、レゴラフェニブ、セジバニブ、レスタウルチニブ、バンデチニブ、バタラニブ、セリシクリブ、チバンチニブ、カネルチニブ、ペリチニブ、テセバチニブ、セジラニブ、モテサニブ、ミドスタウリン、フォレチニブ、カボザンテイニブ、セルメチニブ、ネラチニブ、ボラセルチブ、サラカチニブ、エンザスタウリン、タンデュチニブ、セマキサニブ、アルボシジブ、ＩＣＲ－６２、ＡＥＥ７８８、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ１５３０３５、ＴＫ７８７、ＢＢＩ５０３、Ｅ６２０１、Ｅ７０５０及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「プロテアソーム阻害剤」としては、特に限定されないが、例えば、ボルテゾミブ、カルフィルゾミブ及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「モノクローナル抗体」としては、特に限定されないが、例えば、抗ＣＤ２２抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ２５抗体、抗ＣＤ３０抗体、抗ＣＤ３３抗体、抗ＣＤ５抗体、抗ＣＤ５２抗体、抗上皮成長因子受容体抗体（ＥＧＦＲ抗体）、抗血管内皮細胞増殖因子抗体（ＶＥＧＦ抗体）、抗ＴＮＦ－α抗体、抗ＩＬ－１レセプター抗体、抗ＩＬ－２レセプター抗体、抗ＩＬ－５レセプター抗体、抗ＩＬ－６レセプター抗体、抗ＨＥＲ２抗体、抗ＩｇＥ抗体、抗ＩｇＧ抗体、抗ＲＳウィルス抗体、抗ＣＣＲ４抗体、抗ＣＴＬＡ－４（細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４、ＣＤ１５２）抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＲＡＮＫＬ（ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅａｒ　ｆａｃｔｏｒ　κＢ　ｌｉｇａｎｄ）抗体、抗ｃ－Ｍｅｔ抗体、抗ＣＸＣＲ４抗体などが挙げられる。
　具体的には、「モノクローナル抗体」としては、特に限定されないが、例えば、イブリツモマブ チウキセタン、リツキシマブ、セツキシマブ、インフリキシマブ、バシリキシマブ、ブレンツキシマブ ベドチン、トシリズマブ、トラスツズマブ、ベバシズマブ、オマリズマブ、メポリズマブ、ゲムツズマブ、オゾガマイシン、パリビズマブ、ラニビズマブ、セルトリズマブ、オクレリズマブ、モガムリズマブ、エクリズマブ、ペルツズマブ、アレムツズマブ、イノツズマブ、パニツムマブ、オファツムマブ、ゴリムマブ、アダリムマブ、ラムシルマブ、ニボルマブ、アナキンラ、デノスマブ、イピリムマブ、ペンブロリズマブ、マツズマブ、ファルレツズマブ、ＭＯＲＡｂ－００４、ＭＯＲＡ－ｂ００９及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「ｍＴＯＲ阻害剤」として、特に限定されないが、例えば、エベロリムス（ＲＡＤ００１）、ラパマイシン（シロリムス）、ＡＺＤ８０５５、テムシロリムス（ＣＣＩ－７７９、ＮＳＣ６８３８６４）ＫＵ－００６３７９４、Ｖｏｘｔａｌｉｓｉｂ（ＸＬ－７６５、ＳＡＲ２４５４０９）、ＭＨＹ１４８５、ダクトリシブ（ＢＥＺ２３５）、ＰＩ－１０３、Ｔｏｒｋｉｎｉｂ（ＰＰ２４２）リダフォロリムス（デフォロリムス、ＭＫ－８６６９）、ＩＮＫ－１２８（ＭＬＮ０１２８）、Ｔｏｒｉｎ１、オミパリシブ（ＧＳＫ２１２６４５８、ＧＳＫ４５８）、ＯＳＩ－０２７、ＰＦ－０４６９１５０２、アピトリシブ（ＧＤＣ－０９８０、ＲＧ７４２２）、ＧＳＫ１０５９６１５、ゲダトリシブ（ＰＦ－０５２１２３８４、ＰＫＩ－５８７）、ＷＹＥ－１３２、ＰＰ１２１、ＷＹＥ－３５４、ＡＺＤ２０１４、Ｔｏｒｉｎ２、ＷＹＥ－６８７、ＣＨ５１３２７９９、ＷＡＹ－６００、ＥＴＰ－４６４６４、ＧＤＣ－０３４９、ＸＬ３８８、ゾタロリムス（ＡＢＴ－５７８）、タクロリムス（ＦＫ５０６）ＢＧＴ２２６（ＮＶＰ－ＢＧＴ２２６）、パロミド５２９（Ｐ５２９）、クリソファン酸及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「ＴＮＦ阻害薬」として、特に限定されないが、例えば、エタネルセプト、レナリドミド（ＣＣ－５０１３）、ポマリドミド、サリドマイド、ネクロスタチン-１またはＱＮＺ（ＥＶＰ４５９３）などが挙げられる。
　「Ｔ細胞阻害薬」として、特に限定されないが、例えば、アバタセプトなどが挙げられる。
　「新脈管形成阻害剤」として、特に限定されないが、例えば、ＣＭ１０１、ＩＦＮ－α、ＩＬ－１２、血小板因子－４、スラミン、セマキサニブ、トロンボスポンジン、ＶＥＧＦＲアンタゴニスト、新脈管形成抑制ステロイドプラスヘパリン、軟骨由来新脈管形成阻止因子、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、バチマスタット、マリマスタット、アンギオスタチン、エンドスタチン、２－メトキシエストラジオール、テコガラン、トロンボスポンジン、αＶβ３阻害剤、リノミド、ＡＤＨ－１、Ｅ７８２０及びそれらのＤＤＳ製剤などが挙げられる。
　「その他の化学療法剤」としては、特に限定されないが、例えば、フィステナリド、ソブゾキサン、オバトクラックス、エファプロキシラール、チピファルニブ、ロナファルニブなどが挙げられる。
　本発明の医薬組成物は、有効成分としての上記ＷＴ１抗原ペプチドおよび／または免疫調節剤以外に、特に限定されないが、例えば、薬学上許容される担体を含んでいてもよい。また本発明の医薬組成物に含まれるＷＴ１抗原ペプチドは、ＷＴ１特異的ＣＴＬおよび／またはヘルパーＴ細胞を誘導することから、その誘導効率を増強させるために、本発明の医薬組成物は適当なアジュバントを含むか、あるいは適当なアジュバントと共に投与されてもよい。
　本発明の「薬学上許容される担体」は、用いられる用量及び濃度で当該担体を曝露される細胞又は哺乳動物に対して毒性を示さない。薬学上許容される担体はしばしばpH緩衝水溶液である。薬学上許容される担体の例には以下が含まれる：緩衝剤（例えばリン酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、トリフルオロ酢酸及び他の有機酸）；抗酸化剤（アスコルビン酸を含む）；低分子量ポリペプチド（約10残基未満）；タンパク質（例えば血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリン）；親水性ポリマー（例えばポリビニルピロリドン）；アミノ酸（例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、メチオニン又はリジン）；単糖類、二糖類及び他の炭水化物（例えばグルコース、マンノース又はデキストリン）；キレート剤（例えばEDTA）；糖アルコール（例えばマンニトール、トレハロース又はソルビトール）：安定化剤（例えばジエチレントリアミン五酢酸）；塩形成対イオン（例えばナトリウム）；溶解補助剤（例えばポリソルベート８０（登録商標））及び／又は非イオン性界面活性剤（例えばTWEEN（登録商標）、ポリエチレングリコール（PEG）及びPLURONICS（登録商標））。また、本発明の薬学上許容される担体は、例えば、タンパク質、ポリペプチド、リポソーム、多糖、ポリ乳糖、ポリグリコール酸、重合アミノ酸、アミノ酸共重合体、および不活性ウィルス粒子などの大型の緩慢に代謝される巨大分子であってよい。また、ＷＴ１抗原ペプチドは、リポソーム製剤、直径数μｍのビーズに結合させた粒子径の製剤、リピッドを結合させた製剤などにして投与することもできる。
　本発明の医薬組成物は、細胞性免疫が効率的に成立するように、適当なアジュバントを含むか、アジュバントとともに投与することができる。アジュバントとしては、文献（Clin. Microbiol. Rev., 7: 277-289, 1994）に記載のあるものなどが応用可能であり、具体的には、菌体由来成分、ＧＭ－ＣＳＦ、インターロイキン－２、インターロイキン－７もしくはインターロイキン－１２などのサイトカイン、植物由来成分、海洋生物由来成分、水酸化アルミニウムの如き鉱物ゲル、リソレシチン、プルロニックポリオールの如き界面活性剤、ポリアニオン、ペプチド、または油乳濁液（エマルジョン製剤）などが挙げることができる。菌体由来成分としては、リピドＡ（lipid A）、その誘導体であるモノホスホリノリピドＡ（monophosphoryl lipid A）、菌体（ＢＣＧ菌などのMycobacterium属細菌が挙げられる）の死菌、細菌由来のタンパク質、ポリヌクレオチド、フロイント不完全アジュバント（Freund's Incomplete Adjuvant）、フロイント完全アジュバント（Freund's Complete Adjuvant）、細胞壁骨格成分（例えばＢＣＧ－ＣＷＳなどが挙げられる）、トレハロースジミコレート（ＴＤＭ）などが挙げられる。
　また、アジュバントとして、沈降性アジュバントと油性アジュバントを挙げることができる。沈降性アジュバントは、ペプチドが吸着する無機物の懸濁剤を表す。沈降性アジュバントとしては、具体的には、水酸化ナトリウム、水酸化アルミニウム（アラム、Alum）、リン酸カルシウム、リン酸アルミニウム、ミョウバン、ペペス、カルボキシビニルポリマー等が挙げられる。油性アジュバントは、ペプチドを含む水溶液を鉱油で包みミセルをつくり乳化する油乳剤を表す。油性アジュバントとしては、具体的には、流動パラフィン、ラノリン、フロイントアジュバント（フロイント完全アジュバント、フロイント不完全アジュバント）、モンタナイド、Ｗ／Ｏエマルション（ＷＯ２００６／０７８０５９参照）等が挙げられるがこれに限定されない。
　本発明の医薬組成物は、特に限定されないが、マンニトール、トレハロース、およびラクトース等の糖アルコール、または塩酸、硫酸、硝酸、酢酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、マレイン酸、リン酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア水、酢酸ナトリウム水和物、無水酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム水和物、クエン酸二水素ナトリウム、酒石酸ナトリウム、リン酸二ナトリウム、リン酸二カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウムおよびリン酸三ナトリウム等から選択される、一般に医薬品製剤に用いられるpH調整剤、希釈剤、緩衝剤、懸濁剤、湿潤剤、可溶化剤、分散剤、保存剤および／または着色剤を含むこともできる。
　本発明の医薬組成物は、経口投与のための内服用固形剤、内服用液剤および、非経口投与のための注射剤、外用剤、坐剤、吸入剤、経鼻剤等として用いられる。経口投与のための内服用固形剤には、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等が含まれる。カプセル剤には、ハードカプセルおよびソフトカプセルが含まれる。また錠剤には舌下錠、口腔内貼付錠、口腔内速崩壊錠などが含まれる。
　このような内服用固形剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質はそのままか、または賦形剤（ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、デンプン等）、結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壊剤（繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、安定化剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸等）等と混合され、常法に従って製剤化して用いられる。また、必要によりコーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。さらにゼラチンのような吸収されうる物質のカプセルも包含される。また、必要に応じて常用される防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤等の添加物を加えることもできる。
　舌下錠は公知の方法に準じて製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物質に賦形剤（ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、コロイダルシリカ、デンプン等）、結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壊剤（デンプン、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、膨潤剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カーボポール、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルアルコール、キサンタンガム、グアーガム等）、膨潤補助剤（グルコース、フルクトース、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルトース、トレハロース、リン酸塩、クエン酸塩、ケイ酸塩、グリシン、グルタミン酸、アルギニン等）、安定化剤、溶解補助剤（ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グルタミン酸、アスパラギン酸等）、香味料（オレンジ、ストロベリー、ミント、レモン、バニラ等）等と混合され、常法に従って製剤化して用いられる。また、必要によりコーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。また、必要に応じて常用される防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤等の添加物を加えることもできる。
　口腔内貼付錠は公知の方法に準じて製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物質に賦形剤（ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、コロイダルシリカ、デンプン等）、結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壊剤（デンプン、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、付着剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カーボポール、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルアルコール、キサンタンガム、グアーガム等）、付着補助剤（グルコース、フルクトース、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルトース、トレハロース、リン酸塩、クエン酸塩、ケイ酸塩、グリシン、グルタミン酸、アルギニン等）、安定化剤、溶解補助剤（ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グルタミン酸、アスパラギン酸等）、香味料（オレンジ、ストロベリー、ミント、レモン、バニラ等）等と混合され、常法に従って製剤化して用いられる。また、必要によりコーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。また、必要に応じて常用される防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤等の添加物を加えることもできる。
　口腔内速崩壊錠は公知の方法に準じて製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物質をそのまま、あるいは原末もしくは造粒原末粒子に適当なコーティング剤（エチルセルロース、ヒドキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アクリル酸メタクリル酸コポリマー等）、可塑剤（ポリエチレングリコール、クエン酸トリエチル等）を用いて被覆を施した活性物質に賦形剤（ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、コロイダルシリカ、デンプン等）、結合剤（ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等）、崩壊剤（デンプン、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、繊維素グリコール酸カルシウム等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、分散補助剤（グルコース、フルクトース、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルトース、トレハロース、リン酸塩、クエン酸塩、ケイ酸塩、グリシン、グルタミン酸、アルギニン等）、安定化剤、溶解補助剤（ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、グルタミン酸、アスパラギン酸等）、香味料（オレンジ、ストロベリー、ミント、レモン、バニラ等）等と混合され、常法に従って製剤化して用いられる。また、必要によりコーティング剤（白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等）で被覆していてもよいし、また２以上の層で被覆していてもよい。また、必要に応じて常用される防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤等の添加物を加えることもできる。
　経口投与のための内服用液剤は、薬学上許容される水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤等を含む。このような液剤においては、ひとつまたはそれ以上の活性物質が、一般的に用いられる希釈剤（精製水、エタノールまたはそれらの混液等）に溶解、懸濁または乳化される。さらにこの液剤は、湿潤剤、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、保存剤、緩衝剤等を含有していてもよい。
　非経口投与のための外用剤の剤形には、例えば、軟膏剤、ゲル剤、クリーム剤、湿布剤、貼付剤、リニメント剤、噴霧剤、吸入剤、スプレー剤、エアゾル剤、点眼剤、および点鼻剤等が含まれる。これらはひとつまたはそれ以上の活性物質を含み、公知の方法または通常使用されている処方により製造される。
　軟膏剤は公知または通常使用されている処方により製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物質を基剤に研和、または溶融させて調製される。軟膏基剤は公知あるいは通常使用されているものから選ばれる。例えば、高級脂肪酸または高級脂肪酸エステル（アジピン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、アジピン酸エステル、ミリスチン酸エステル、パルミチン酸エステル、ステアリン酸エステル、オレイン酸エステル等）、ロウ類（ミツロウ、鯨ロウ、セレシン等）、界面活性剤（ポリオキシエチレンアルキルエーテルリン酸エステル等）、高級アルコール（セタノール、ステアリルアルコール、セトステアリルアルコール等）、シリコン油（ジメチルポリシロキサン等）、炭化水素類（親水ワセリン、白色ワセリン、精製ラノリン、流動パラフィン等）、グリコール類（エチレングリコール、ジエチレングリコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、マクロゴール等）、植物油（ヒマシ油、オリーブ油、ごま油、テレピン油等）、動物油（ミンク油、卵黄油、スクワラン、スクワレン等）、水、吸収促進剤、かぶれ防止剤から選ばれるもの単独または２種以上を混合して用いられる。さらに、保湿剤、保存剤、安定化剤、抗酸化剤、着香剤等を含んでいてもよい。
　ゲル剤は公知または通常使用されている処方により製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物質を基剤に溶融させて調製される。ゲル基剤は公知あるいは通常使用されているものから選ばれる。例えば、低級アルコール（エタノール、イソプロピルアルコール等）、ゲル化剤（カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース等）、中和剤（トリエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン等）、界面活性剤（モノステアリン酸ポリエチレングリコール等）、ガム類、水、吸収促進剤、かぶれ防止剤から選ばれるもの単独または２種以上を混合して用いられる。さらに、保存剤、抗酸化剤、着香剤等を含んでいてもよい。　クリーム剤は公知または通常使用されている処方により製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物質を基剤に溶融または乳化させて調製される。クリーム基剤は公知あるいは通常使用されているものから選ばれる。例えば、高級脂肪酸エステル、低級アルコール、炭化水素類、多価アルコール（プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール等）、高級アルコール（２－ヘキシルデカノール、セタノール等）、乳化剤（ポリオキシエチレンアルキルエーテル類、脂肪酸エステル類等）、水、吸収促進剤、かぶれ防止剤から選ばれるもの単独または２種以上を混合して用いられる。さらに、保存剤、抗酸化剤、着香剤等を含んでいてもよい。
　湿布剤は公知または通常使用されている処方により製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物質を基剤に溶融させ、練合物とし支持体上に展延塗布して製造される。湿布基剤は公知あるいは通常使用されているものから選ばれる。例えば、増粘剤（ポリアクリル酸、ポリビニルピロリドン、アラビアゴム、デンプン、ゼラチン、メチルセルロース等）、湿潤剤（尿素、グリセリン、プロピレングリコール等）、充填剤（カオリン、酸化亜鉛、タルク、カルシウム、マグネシウム等）、水、溶解補助剤、粘着付与剤、かぶれ防止剤から選ばれるもの単独または２種以上を混合して用いられる。さらに、保存剤、抗酸化剤、着香剤等を含んでいてもよい。
　貼付剤は公知または通常使用されている処方により製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物質を基剤に溶融させ、支持体上に展延塗布して製造される。貼付剤用基剤は公知あるいは通常使用されているものから選ばれる。例えば、高分子基剤、油脂、高級脂肪酸、粘着付与剤、かぶれ防止剤から選ばれるもの単独または２種以上を混合して用いられる。さらに、保存剤、抗酸化剤、着香剤等を含んでいてもよい。
　リニメント剤は公知または通常使用されている処方により製造される。例えば、ひとつまたはそれ以上の活性物を水、アルコール（エタノール、ポリエチレングリコール等）、高級脂肪酸、グリセリン、セッケン、乳化剤、懸濁化剤等から選ばれるもの単独または２種以上に溶解、懸濁または乳化させて調製される。さらに、保存剤、抗酸化剤、着香剤等を含んでいてもよい。
　噴霧剤、吸入剤、およびスプレー剤は、一般的に用いられる希釈剤以外に亜硫酸水素ナトリウムのような安定化剤と等張性を与えるような緩衝剤、例えば塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウムあるいはクエン酸のような等張剤を含有していてもよい。
　非経口投与のための注射剤としては、溶液、懸濁液、乳濁液および用時溶剤に溶解または懸濁して用いる固形の注射剤を包含する。注射剤は、ひとつまたはそれ以上の活性物質を溶剤に溶解、懸濁または乳化させて用いられる。溶剤として、例えば注射用蒸留水、生理食塩水、植物油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エタノールのようなアルコール類等およびそれらの組み合わせが用いられる。さらにこの注射剤は、安定化剤、溶解補助剤（グルタミン酸、アスパラギン酸、ポリソルベート８０（登録商標）等）、懸濁化剤、乳化剤、無痛化剤、緩衝剤、保存剤等を含んでいてもよい。これらは最終工程において滅菌するか無菌操作法によって製造される。また無菌の固形剤、例えば凍結乾燥品を製造し、その使用前に無菌化または無菌の注射用蒸留水または他の溶剤に溶解して使用することもできる。
　非経口投与のための吸入剤としては、エアロゾル剤、吸入用粉末剤又は吸入用液剤が含まれ、当該吸入用液剤は用時に水又は他の適当な媒体に溶解又は懸濁させて使用する形態であってもよい。これらの吸入剤は公知の方法に準じて製造される。例えば、吸入用液剤の場合には、防腐剤（塩化ベンザルコニウム、パラベン等）、着色剤、緩衝化剤（リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム等）、等張化剤（塩化ナトリウム、濃グリセリン等）、増粘剤（カリボキシビニルポリマー等）、吸収促進剤などを必要に応じて適宜選択して調製される。
　吸入用粉末剤の場合には、滑沢剤（ステアリン酸およびその塩等）、結合剤（デンプン、デキストリン等）、賦形剤（乳糖、セルロース等）、着色剤、防腐剤（塩化ベンザルコニウム、パラベン等）、吸収促進剤などを必要に応じて適宜選択して調製される。
　吸入用液剤を投与する際には通常噴霧器（アトマイザー、ネブライザー）が使用され、吸入用粉末剤を投与する際には通常粉末薬剤用吸入投与器が使用される。
　スプレー剤は、一般的に用いられる希釈剤以外に亜硫酸水素ナトリウムのような安定化剤と等張性を与えるような緩衝剤、例えば塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウムあるいはクエン酸のような等張剤を含有していてもよい。スプレー剤の製造方法は、例えば、米国特許第２，８６８，６９１号明細書および米国特許第３，０９５，３５５号明細書に詳しく記載されている。
　非経口投与のためその他の組成物としては、ひとつまたはそれ以上の活性物質を含み、常法により処方される直腸内投与のための坐剤および腟内投与のためのペッサリー等が含まれる。
　一態様において、ＷＴ１抗原ペプチドを含む医薬組成物は、トレハロース、マンニトール、メチオニン、クエン酸、乳酸、酒石酸、酢酸、トリフルオロ酢酸およびｐＨ調整剤からなる群から選択される１以上の薬学上許容される担体を含む。
　一態様において、免疫調節剤を含む医薬組成物は、マンニトール、クエン酸ナトリウム水和物、塩化ナトリウム、ジエチレントリアミン五酢酸、ポリソルベート８０（商標登録）およびｐＨ調整剤からなる群から選択される１以上の薬学上許容される担体を含む。
　ＷＴ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の投与方法は、疾患の種類、対象の状態、標的部位などの条件に応じて適宜選択することができる。前記投与方法は、例えば、注射または輸液による、静脈内、筋肉内、皮膚内、腹腔内、皮下、もしくは脊髄投与、または他の非経口投与経路を含む。また、本文中、「非経口投与」とは、腸および局所投与以外の通常の注入による投与様式を意味し、静脈内、筋肉内、動脈内、くも膜下腹腔内、被膜内、眼窩内、心臓内、皮膚内、腹腔内、経気管的、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内注入および点滴が含まれるが、これらに限定されない。ＷＴ１抗原ペプチドは、リンパ球療法またはＤＣ（樹状細胞）療法により投与されてもよい。また、免疫調節剤は、経皮投与経路、または鼻腔内、口腔内、膣内、直腸内、舌下などの経粘膜投与経路により投与できる。
　本発明のＷＴ１抗原ペプチドは、免疫調節剤に加えて、非薬剤療法と組み合わせることにより、より効果的に癌を予防または治療することができる。非薬剤療法としては、例えば、手術、放射線療法、遺伝子治療、温熱療法、凍結療法、レーザー灼熱療法などが挙げられ、これらを２種以上組み合わせることもできる。例えば、本発明の医薬組成物、または本発明の医薬組成物と併用薬物とを、手術等の非薬剤療法の前または後に、あるいは２または３種の非薬剤療法を組み合わせた治療前または後に使用することによって、耐性発現の阻止、無病期（Disease-Free Survival）の延長、癌転移あるいは再発の抑制、延命等の効果が得られる。
　ＷＴ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の投与量、医薬組成物の剤形、投与回数などは、疾患の種類、対象の状態、標的部位などの条件に応じて適宜選択できる。ＷＴ１抗原ペプチドの1回あたりの投与量は、通常、０．０００１ｍｇ～１０００ｍｇ、好ましくは、０．００１ｍｇ～１０００ｍｇ、より好ましくは０．１ｍｇ～１０ｍｇである。免疫調節剤の体重１ｋｇあたりの投与量は、通常、０．０００１ｍｇ～１０００ｍｇ、好ましくは、０．００１ｍｇ～１０００ｍｇ、より好ましくは０．１ｍｇ～１０ｍｇである。
　本明細書において、「有効量」とは、癌の進行を完全または部分的に阻害するか、あるいは、癌の１以上の症状を少なくとも部分的に緩和する、ＷＴ１抗原ペプチドもしくは免疫調節剤の量、または２種類以上のＷＴ１抗原ペプチドもしくは免疫調節剤の組合せの量である。有効量は、治療的または予防的に有効な量であり得る。有効量は、患者の年齢および性別、処置される状態、状態の重度、ならびに求められている結果などにより決定される。所定の患者について、有効量は、当業者に知られる方法によって決定することができる。
　本発明は、ＷＴ１遺伝子が発現している癌やＷＴ１遺伝子の発現レベルの上昇を伴う癌の治療または予防（再発防止を含む）として用いることができる。よって、本発明における癌の例としては、一態様において、白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫もしくは悪性リンパ腫などの血液性癌、または胃癌、大腸癌、肺癌、乳癌、胚細胞癌、肝癌、皮膚癌、膀胱癌、前立腺癌、子宮癌、子宮頸癌、卵巣癌、多型性膠芽腫、悪性黒色腫、非小細胞肺がん、腎細胞癌もしくは脳腫瘍などの固形癌が挙げられる。
　本発明はまた、免疫調節剤を併用することにより、Ｔ細胞活性化閾値を上昇させ、宿主における腫瘍応答を活性化することが期待される。よって、本発明における癌の例としては、その他の態様として、骨癌、膵癌、頭頚部癌、皮膚または眼窩内悪性メラノーマ、直腸癌、肛門部癌、精巣癌、卵管のカルシノーマ、子宮内膜カルシノーマ、子宮頚部カルシノーマ、膣カルシノーマ、外陰部カルシノーマ、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、柔組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病を含む慢性または急性白血病、小児固形癌、リンパ球性リンパ腫、腎臓または尿管の癌、腎盂カルシノーマ、中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍新脈管形成、脊椎腫瘍、脳幹グリオーム、下垂体アデノーマ、カポシ肉腫、扁平上皮癌、扁平細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベスト誘発癌を含む環境誘発癌および上記癌の組み合わせが挙げられる。また、本発明は、転移性癌、特にＰＤ－Ｌ１を発現する転移性癌の治療に対しても有用であることが期待される（Iwai et al., Int. Immunol. 17: 133-144, 2005）。
　本明細書において、「哺乳動物」には、ヒトおよび非ヒト動物類が含まれる。非ヒト動物には、特に限定されないが、例えば、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシのような哺乳類が含まれる。哺乳動物の中では、ヒト、特に、免疫応答増強を必要としているヒト患者が好ましい。従って、本発明は、Ｔ細胞介在性免疫応答を促進することにより治療が期待できる疾患を有するヒト患者の治療に特に適している。
　本発明において、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤とは、それぞれ別の製剤に含まれていても、単一の製剤に含まれていてもよい。すなわち、本発明の医薬組成物は、免疫調節剤と併用されるＷＴ１抗原ペプチドを含む医薬組成物、ＷＴ１抗原ペプチドと併用される免疫調節剤を含む医薬組成物、またはＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤とを含む医薬組成物（すなわち、配合剤）でありうる。本発明の医薬組成物は、キットとして提供することもでき、例えばキットは、ＷＴ１抗原ペプチドを含む医薬組成物と免疫調節剤とを含む医薬組成物とを含む。本発明の医薬組成物およびキットは、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤との併用における用法・用量等を記載した添付文書、包装容器、取扱説明書等とともに提供されうる。ある態様において、本発明の医薬組成物およびキットは、癌治療用医薬品として提供されうる。
　本発明において、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤は、同時に投与しても、別々に投与してもよい。また、ＷＴ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤は、さらなる併用薬物と、同時に投与しても、別々に投与してもよい。本発明において「同時に投与する」とは、同一の投与スケジュールで投与することを意味し、有効成分は単一の製剤に含まれていても、別の製剤に含まれていてもよい。有効成分が別の製剤に含まれる場合、全ての製剤を単回で投与してもよく、各製剤を連続して投与してもよい。「別々に投与する」とは、異なる投与スケジュールで投与することを意味し、一方を投与した後、一定の間隔をおいて他方を投与するが、いずれを先に投与してもよく、その間隔も任意である。各有効成分の投与回数は、同じであっても異なっていてもよく、例えば、一方を１日１回投与し、他方を１日２回以上投与してもよい。
　有効成分が単一の製剤に含まれる場合、その配合比は、投与対象、投与経路、対象疾患、症状、またはこれらの組み合わせなどにより適宜選択することができる。例えば投与対象がヒトである場合、免疫調節剤または併用薬物は、ＷＴ１抗原ペプチド１重量部に対し０．０１～１００重量部用いることができる。
　本発明の医薬組成物は、副作用抑制の目的として、制吐剤、睡眠導入剤、抗痙攣薬などの薬剤とさらに組み合わせて用いることができる。
　ＷＴ１抗原ペプチドは、腫瘍内に腫瘍反応性のＣＴＬを増加させる薬剤であるため、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤との併用により、免疫調節剤の投与量を減弱できる可能性、即ち有害事象を軽減できる可能性がある。このように、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤との併用により、より高い効果とより高い安全を併せ持った治療法を患者に提供できる可能性がある。
　以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらによりなんら限定されるものではない。
実施例１：
ヒト末梢血単核球からの腫瘍抗原ペプチド特異的細胞傷害性T細胞誘導に対する免疫チェックポイント阻害剤の併用効果
　凍結保存されたＨＬＡ－Ａ＊０２：０１陽性の成人由来の末梢血単核球（ＰＢＭＣ）（C.T.L社）を起眠し、培養液に懸濁し、Ｕ底の９６ウェルプレートに１．５×１０５細胞/穴になるように播種した。ＡＩＭ　Ｖ培地(Life Technologies社)にヒト血清(Lonza社)を５％、ＭＥＭ非必須アミノ酸溶液（100×）(Life Technologies社)を1％含有する培養液を使用し、３７℃、５％　ＣＯ２の条件下で培養した。播種したＰＢＭＣに抗ヒトＰＤ－１抗体を添加する群（Ａ群）、抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体を添加する群（Ｂ群）、および抗ヒトＰＤ－１抗体および抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体を添加しない対照群（Ｃ群）を設定した。各群２４サンプル（２４ウェル）とした。抗ヒトＰＤ－１抗体は、クローンEH12.2H7(BioLegend社)、抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体は、29E.243(BioLegend社)を使用した。また、抗ヒトＰＤ－１抗体のアイソタイプ抗体として、Mouse IgG1, κ(BioLegend社)、抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体のアイソタイプ抗体として、Mouse IgG2b, κ(BioLegend社)を使用した。
　Ａ群には、抗ヒトＰＤ－１抗体およびMouse IgG2b, κをそれぞれ１０μｇ／ｍＬになるように添加した。Ｂ群には、抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体およびMouse IgG1, κをそれぞれ１０μｇ／ｍＬになるように添加した。Ｃ群には、Mouse IgG1, κおよびMouse IgG2b, κをそれぞれ１０μｇ／ｍＬになるように添加した。培養開始から１日後にＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）、ＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１８）をそれぞれ２０μｇ／ｍＬになるように培養細胞に添加した。培養開始から２日後にヒトＩＬ－２（塩野義製薬）を５０Ｕ／ｍＬになるように添加した。培養開始から５日後と９日後に培養液の半量を１００Ｕ／ｍＬのヒトＩＬ－２を含む培養液で交換した。培養開始から１３日後に各群２４サンプルの培養細胞を回収し、ＰＥ標識されたキラーペプチドＡ（配列番号：２）に対するＨＬＡテトラマー試薬（MBL社）とＦＩＴＣ標識された抗ＣＤ８抗体（BD社）の組み合わせ、または、ＰＥ標識されたキラーペプチドＢ（配列番号：８）に対するＨＬＡテトラマー試薬（MBL社）とＦＩＴＣ標識された抗ＣＤ８抗体（BD社）の組み合わせで染色し、フローサイトメーター MACSQuant Analyzer (Miltenyi Biotec社)を用いてキラーペプチド特異的ＣＴＬの解析を行った。
　抗ヒトＰＤ－１抗体および抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体を添加しなかったＣ群では、２４サンプル中でキラーペプチドＡ特異的ＣＴＬおよびキラーペプチドＢ特異的ＣＴＬは、検出されなかった。抗ヒトＰＤ－１抗体を添加したＡ群では、キラーペプチドＢ特異的ＣＴＬが、２４サンプル中１サンプルで検出された（図１）。抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体を添加したＢ群では、２４サンプル中キラーペプチドＡ特異的ＣＴＬが１サンプル（図２）、キラーペプチドＢ特異的ＣＴＬが２サンプル（図３）で検出された。結果を図１－３に示した。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤の抗ヒトＰＤ－１抗体および抗ヒトＰＤ－１抗体は、ＰＢＭＣのｉｎ　ｖｉｔｒｏでのＷＴ１抗原ペプチド刺激の培養系で、ＣＴＬの誘導効率を増強することが示された。
実施例２：
ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのペプチドに対する免疫応答性に対する免疫チェックポイント阻害剤の作用
　凍結保存されたＨＬＡ－Ａ＊０２：０１陽性の成人由来の末梢血単核球（C.T.L社）を起眠し、培養液に懸濁し、Ｕ底の９６穴プレートに播種した。培養には、ＡＩＭ　Ｖ培地(Life Technologies社)にヒト血清(Lonza社)を５％、ＭＥＭ非必須アミノ酸溶液（１００×）(Life Technologies社)を１％含有する培養液に２０μｇ／ｍＬのＷＴ１キラーペプチドＢ、１００Ｕ／ｍＬのヒトＩＬ－２（塩野義製薬）を添加した培養液を使用した。培養開始３日後、７日後、および１１日後に培養液の半量を新しい培養液に交換した。培養開始１３日後にウェル毎に細胞を回収し、ＰＥ標識されたキラーペプチドＢに対するＨＬＡテトラマー試薬（MBL社）とＦＩＴＣ標識された抗ＣＤ８抗体（BD社）で染色し、フローサイトメーター MACSQuant Analyzer (Miltenyi Biotec社)を用いてキラーペプチドＢ特異的ＣＴＬの解析を行った。キラーペプチドＢ（配列番号：８）特異的ＣＴＬが検出されたウェルの細胞を混合し、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬ細胞株とした。ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬ細胞株は、細胞凍結保存液CELLBANKER(日本全薬工業)を用いて凍結保存した。
　凍結保存したＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬ細胞株を起眠し、１００Ｕ／ｍＬのヒトＩＬ－２（塩野義製薬）を添加した培養液で一晩培養した。細胞を回収して、培養液で洗浄後、抗ヒトＰＤ－１抗体（EH12.2H7）を添加する群（Ａ群）、抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体（29E.243）を添加する群（Ｂ群）、および抗ヒトＰＤ－１抗体および抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体を添加しない対照群（Ｃ群）の３条件で２時間培養した。Ａ群には、抗ヒトＰＤ－１抗体およびMouse IgG2b, κをそれぞれ１０μｇ／ｍＬになるように添加した。Ｂ群には、抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体およびMouse IgG1, κをそれぞれ１０μｇ／ｍＬになるように添加した。Ｃ群には、Mouse IgG1, κおよびMouse IgG2b, κをそれぞれ１０μｇ／ｍＬになるように添加した。実施例１と同じ抗体を使用した。細胞のペプチドに対する特異的な反応をIFN-γ ELISPOT Set (BD社)を用いて測定した。前述のように処理した細胞をELISPOTのプレートに添加し、キラーペプチドＢ（配列番号８）を４０μｇ／ｍＬで添加する群としない群に分けて１８時間培養した。各群２サンプルとした。その後、メーカーのプロトコールに従ってプレートの処理を行い、ACE Substrate Set (BD社)でスポットを発色させた。スポットの数をELISPOTアナライザー（C.T.L社）で計測した。Ａ群、Ｂ群、およびＣ群のそれぞれについて、ペプチド添加したサンプルのスポット数の平均値からペプチド無添加のサンプルのスポット数の平均値を減じて、測定結果とした。
　その結果、対照群のＣ群に対して、抗ヒトＰＤ－１抗体で処理したＡ群は１．７倍、抗ヒトＰＤ－Ｌ１抗体で処理したＢ群は１．４倍のスポットが検出された。結果を図４に示した。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤は、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのペプチドに対する反応性を増強することが示された。
実施例３：
　ＷＴ１キラーペプチドおよびＷＴ１ヘルパーペプチドのカクテルワクチンを投与したマウス脾細胞における免疫チェックポイント分子の発現変化
　本試験に使用したＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウス（Ｃ５７ＢＬ／６ＣｒＨＬＡ－Ａ２．１ＤＲ１）は、マウスのＭＨＣを欠損し、ヒトのＭＨＣであるＨＬＡ－Ａ０２：０１とマウスＭＨＣであるＨ－２ＤｂとのキメラＨＬＡと、ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０１：０１とを発現するマウスである（Eur J Immunol.2004;34:3060-9）。本マウスを用いることで、ヒトのＨＬＡ－Ａ＊０２：０１に結合し得るペプチドでＣＴＬを誘導することが可能である。また、ヒトのＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０１：０１に結合し得るペプチドでヘルパーＴ細胞を誘導し、ＣＴＬ誘導増強効果を評価することも可能である。
　ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１８）を含む組成物を、等量の不完全フロイントアジュバントであるモンタナイド（ＩＳＡ５１ＶＧ）と混合しエマルション化させた。得られたカクテルワクチン（以下、ワクチンと記載する）を、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に、１週間間隔で２回投与した（マウス１匹の１回の免疫につき、１ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．７５ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。最終投与の１週間後に、ワクチン投与群および非投与群のマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、脾細胞を調製した。この脾細胞をＦＩＴＣ標識抗ＣＤ８抗体（BD Pharmingen社）、ＰＥ標識抗ＣＤ４抗体（BD Pharmingen社）、ＰＥ標識されたＷＴ１キラーペプチド(配列番号：８)に対するＨＬＡテトラマー試薬（ＭＢＬ社製）、ＡＰＣ標識抗ＰＤ－１抗体（BD Pharmingen社、クローンJ43）、ＡＰＣ標識アイソタイプコントロール（BD Pharmingen社、Hamster IgG2, κ）抗体、ＡＰＣ標識抗ＰＤ－Ｌ１抗体（BioLegends社製、クローン10F.9G2）、およびＡＰＣ標識アイソタイプコントロール（eBioscience社、Rat IgG2b, κ）抗体で染色し、フローサイトメーターMACSQuant Analyzer（Miltenyi Biotec社）を用いて解析を行った。
　結果を図５－１０に示した。図５および８において、１点短鎖線はワクチン投与個体脾細胞由来のＣＤ８陽性テトラマー陽性画分、破線はワクチン投与個体脾細胞由来のＣＤ８陽性テトラマー陰性画分、実線はワクチン非投与個体脾臓由来のＣＤ８陽性テトラマー陰性分画におけるＰＤ－１（図５）およびＰＤ－Ｌ１（図８）の発現を示す。点線はアイソタイプコントロールを用いた染色結果を示す。図６、７、９および１０において、破線はワクチン投与個体脾臓由来のＣＤ４陽性Ｔ細胞（図６および図９）またはＣＤ４陰性ＣＤ８陰性細胞（図７および図１０）、実線はワクチン非投与個体脾臓由来のＣＤ４陽性Ｔ細胞（図６および図９）またはＣＤ４陰性ＣＤ８陰性細胞（図７および図１０）におけるＰＤ－１（図６および図７）およびＰＤ－Ｌ１（図９および図１０）の発現を示す。点線はアイソタイプコントロールを用いた染色結果を示す。その結果、ワクチン投与によりＣＤ８陽性Ｔ細胞、特にＣＤ８陽性ＷＴ１テトラマー陽性Ｔ細胞においてＰＤ－１の高い発現誘導が認められた（図５－７）。ＰＤ－Ｌ１ついては、ワクチン投与の有無にかかわらず、いずれの細胞においても発現を認めたが、ＣＤ４陽性Ｔ細胞ではワクチン投与によって発現上昇が認められた（図８－１０）。これらの結果から、ワクチン投与によってＷＴ１特異的なＣＤ８陽性Ｔ細胞あるいはＣＤ４陽性Ｔ細胞において、それぞれＰＤ－１あるいはＰＤ－Ｌ１の発現が誘導されることが判明した。
実施例４：
　ＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞の腫瘍細胞に対する免疫応答性における免疫チェックポイント阻害剤の作用
　実施例３と同様にＷＴ１キラーペプチドおよびＷＴ１ヘルパーペプチドを含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹の１回の免疫につき、１ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．７５ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。最終投与の１週間後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、Complete T-cell medeium（以下ＣＴＭ）を用いて脾細胞懸濁液を調製した。ＷＴ１キラーペプチド(配列番号：２)をＤＭＳＯで４０ｍｇ／ｍＬに溶解し、さらにＣＴＭで５００μｇ／ｍＬに希釈した。調製した脾細胞の一部にこのペプチド溶液を添加し、最終濃度１００μｇ／ｍＬで約１時間、３７℃、５％ ＣＯ２下に静置した。ＣＴＭで余分なペプチドを洗浄後、ペプチドパルスした脾細胞と非ペプチドパルス脾細胞を１：１０の割合で混合した。この脾細胞懸濁液に抗ＰＤ－１抗体（Bio X cell社製、クローンRMP1-14）、またはアイソタイプコントロール抗体（Bio X cell社製、Rat IgGa, κ）を１０μｇ／ｍＬで添加し、３７℃、５％ ＣＯ２下で５日間培養した。培養した脾細胞を１０％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ１６４０培地で洗浄し、Ｒｅｓｐｏｎｄｅｒ細胞とした。次に、ＷＴ１キラーペプチド(配列番号：２)をＤＭＳＯで４０ｍｇ／ｍＬに溶解し、さらに１０％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ１６４０培地で１００μｇ／ｍＬに希釈した。マウスリンパ腫由来細胞株EL4 S3- Rob(Eur J Immunol.1990;20:171-7）にHHD（ヒトＨＬＡ－Ａ＊０２：０１分子のα３ドメインをマウスＭＨＣクラスＩ分子Ｈ－２Ｄｂのα３ドメインと置換したキメラＨＬＡ分子）を安定発現させた細胞株（J Exp Med.1997;185:2043-51）（以下、ＥＬ４ＨＨＤ）を上記のペプチド含有ＲＰＭＩ１６４０培地、またはペプチド非含有ＲＰＭＩ１６４０培地で懸濁し、約１時間、３７℃、５％ ＣＯ２下に静置した。１０％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ１６４０培地で余分なペプチドを洗浄し、Ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ細胞とした。Ｕ底９６穴プレートにＳｔｉｍｕｌａｔｏｒ細胞であるＥＬ４ＨＨＤを１×１０５細胞／穴、Ｒｅｓｐｏｎｄｅｒ細胞である５日間培養した脾細胞を５×１０５細胞／穴で播種して混合し、３７℃、５％ ＣＯ２下で２４時間培養した。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ－γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　その結果、ペプチド前処理したＳｔｉｍｕｌａｔｏｒ細胞と混合したＲｅｓｐｏｎｄｅｒ細胞からのみＩＦＮ－γ産生が認められた。さらに、抗ＰＤ－１抗体を添加して培養したＲｅｓｐｏｎｄｅｒ細胞において、アイソタイプコントロールを添加して培養したＲｅｓｐｏｎｄｅｒ細胞と比べて、高いＩＦＮ－γ産生量を認めた。一方、Ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ細胞をペプチド前処理しなかった場合はＲｅｓｐｏｎｄｅｒ細胞からのＩＦＮ－γ産生がほとんど認められなかった。このことから、ＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞がＩＦＮ－γを産生したと考えられた。以上より、ワクチン投与によって体内で誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞は、抗ＰＤ－１抗体の処理によって活性化が促され、腫瘍細胞に対する免疫応答性を増強することが見出された。
　ＰＤ－１あるいはＰＤ－Ｌ１に対する抗体とＷＴ１抗原ペプチドとの併用によってＷＴ１特異的Ｔ細胞が効率よく誘導されるようになること、ワクチン投与によって誘導されたＴ細胞において免疫チェックポイント分子の発現が高まっていること、ＷＴ１抗原ペプチドによって誘導されたＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞の活性はＰＤ－１あるいはＰＤ－Ｌ１に対する抗体の処理によって高まることを見出した。これより、ＷＴ１抗原ペプチドと免疫チェックポイント阻害剤との併用療法は各単剤の治療効果を相乗的に向上させ、癌の治療効果の向上およびＱＯＬの改善に貢献できることが期待される。
実施例５： 
ＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞のペプチドおよび腫瘍細胞に対する免疫応答性における各種併用剤の作用
　ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１８）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．５ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．３７５ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。投与の１週間後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、ＣＴＭを用いて脾細胞懸濁液を調製した。ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）をＤＭＳＯで４０ｍｇ／ｍＬに溶解した。脾細胞の一部に調製したＷＴ１キラーペプチド溶液を添加し、最終濃度１００μｇ／ｍＬで約１時間、３７℃、５％ＣＯ２下に静置した。ＣＴＭで余分なペプチドを洗浄後、ペプチドパルスした脾細胞と非ペプチドパルス細胞を１：１０の割合で混合し、Ｕ底９６穴プレートに３．８５×１０５細胞／穴で播種した。腫瘍細胞として、マウスルイス肺がん由来細胞株ＬＬＣにＨＨＤおよびＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）を安定発現させた細胞株（本明細書中、ＬＬＣ―ＨＨＤ―ＷＴ１腫瘍細胞とも記載する）にＸ線（５０Ｇｙ）照射した後に最終濃度１００ｎｇ／ｍＬのマウスリコンビナントＩＦＮ―γの存在下で約２日間培養し、ＣＴＭで洗浄した。このＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞を、脾細胞を播種したＵ底９６穴プレートに５×１０４細胞／穴あるいは３．５×１０４細胞／穴で播種して混合し、ＣＴＭ（培地）、あるいはアイソタイプコントロール抗体、あるいは免疫チェックポイント阻害剤、あるいは共刺激分子アゴニスト抗体、あるいはＴＬＲ作動薬、あるいはβ―カテニン阻害剤を添加して３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。免疫チェックポイント阻害剤としては抗ＰＤ－１抗体（BioLegend社、クローン29F.1A12）、抗ＴＩＭ－３抗体（BioLegend社、クローンRMT3-23）、抗ＣＤ１６０抗体（eBioscience社、クローンeBioCNX46-3）、抗ＬＡＧ－３抗体（BioLegend社、クローンC9B7W）、抗ＢＴＬＡ抗体（BioLegend社、クローン6A6）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（eBiosciecne社、クローンMIH5）、抗ＨＶＥＭ抗体（BioLegend社、クローンHMHV-1B18）、抗ＶＩＳＴＡ抗体（BioLegend社、クローンMH5A）、抗ＰＶＲ抗体（Hycult Biotech社、クローン3F1）を最終濃度１０μｇ／ｍＬで用いた。共刺激分子アゴニスト抗体としては抗４－１ＢＢ抗体（Bio X Cell社、クローンLOB12.3）、抗ＯＸ－４０抗体（Bio X Cell社、クローンOX-86）、抗ＧＩＴＲ抗体（BioLegend社、クローンDTA-1）、抗ＣＤ－４０抗体（BioLegend社、クローン1C10）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。抗ＰＤ―１抗体、抗ＴＩＭ－３抗体、抗ＣＤ１６０抗体、および抗ＣＤ－４０抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａκ（BD Pharmingen社）を、抗ＰＤ－Ｌ１抗体および抗ＰＶＲ抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａ（Bio X Cell社）を、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＨＶＥＭ抗体、および抗ＶＩＳＴＡ抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＡｒｍｅｎｉａｎ　Ｈａｍｓｔｅｒ　ＩｇＧ（eBioscience社）を、抗ＬＡＧ－３抗体、抗４－１ＢＢ抗体および抗ＯＸ－４０抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ１κ（eBiosciecne社）を、抗ＧＩＴＲ抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ｂ（Bio X Cell社）を用いた。ＴＬＲ作動薬としてはＴＬＲ３作動薬であるＰｏｌｙＩ：Ｃ　ＨＭＷ（GEヘルスケア、最終濃度３０μｇ／ｍＬ）およびＰｏｌｙＩ：Ｃ　ＬＭＷ（GeneDesign、最終濃度３０μｇ／ｍＬ）、ＴＬＲ７作動薬であるＩｍｉｑｕｉｍｏｄ（最終濃度１０μｇ／ｍＬ）、ＴＬＲ７／８作動薬であるＲ８４８（最終濃度１μｍｏｌ／Ｌ）、およびＴＬＲ９作動薬であるＣｐＧ－ＯＤＮ－Ｄ１９（最終濃度１μｍｏｌ／Ｌ）、ＣｐＧ－ＯＤＮ－１８２６（最終濃度１μｍｏｌ／Ｌ）、およびＣｐＧ－ＯＤＮ－Ｃ５８３（最終濃度１μｍｏｌ／Ｌ）を用いた。β―カテニン阻害剤としてはＸＡＶ９３９を最終濃度５μｍｏｌ／Ｌで用いた。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ―γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　結果を図１２－１５に示した。免疫チェックポイント阻害剤を添加し培養した場合（図１２Ａ～Ｉ）あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加し培養した場合（図１３Ａ～Ｄ）には、それぞれに対するアイソタイプコントロール抗体を添加し培養した場合と比較して、高いＩＦＮ－γ産生量を認めた。また、ＴＬＲ作動薬（図１４Ａ～Ｄ）、あるいはβ―カテニン阻害剤（図１５）を添加し培養した場合には、ＣＴＭ培地を添加して培養した場合と比較して、高いＩＦＮ－γ産生量を認めた。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤、共刺激分子アゴニスト剤、ＴＬＲ作動薬、β―カテニン阻害剤は、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのペプチドおよび腫瘍細胞に対する反応性を増強することが示された。
実施例６： 
担がん生体由来のＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞の免疫活性における各種併用剤の作用
　マウスリンパ腫細胞株ＥＬ４にＨＬＡ－Ａ２４０２／Ｋｂ（ヒトＨＬＡ－Ａ＊２４：０２分子のα３ドメインをマウスＭＨＣクラスＩ分子Ｈ－２Ｋｂのα３ドメインと置換したキメラＨＬＡ分子）およびＷＴ１キラーペプチド（配列番号：４）を安定発現させた細胞株（本明細書中、ＥＬ４―Ａ２４／Ｋｂ―ＷＴ１腫瘍細胞とも記載する）をハンクス平衡塩溶液中に浮遊させ、ＨＬＡ－Ａ＊２４：０２遺伝子導入マウスの腹側部皮内に移植した（マウス１匹につき、３×１０５個あるいは５×１０５個）。腫瘍細胞を移植した１日後および８日後に、ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１８）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊２４：０２遺伝子導入マウスの前肢付け根皮内および後肢付け根皮内に２か所に分けて投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、１ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．７５ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。腫瘍移植１５日後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、ＣＴＭを用いて脾細胞懸濁液を調製した。この脾細胞をＵ底９６穴プレートに３．８５×１０５細胞／穴で播種し、ＣＴＭ、あるいはアイソタイプコントロール抗体、あるいは免疫チェックポイント阻害剤、あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加して３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。免疫チェックポイント阻害剤としては抗ＰＤ－１抗体（BioLegend社、クローン29F.1A12）、抗ＣＴＬＡ―４抗体（BioLegend社、クローンUC10-4B9）、抗TIGIT抗体（Bio X Cell社、クローン1G9）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。共刺激分子アゴニスト抗体としては抗ＩＣＯＳ抗体（BioLegend社、クローンC398.4A）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。抗ＰＤ―１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａκ（BD Pharmingen社）を、抗ＣＴＬＡ－４抗体および抗ＩＣＯＳ抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＡｒｍｅｎｉａｎ　Ｈａｍｓｔｅｒ　ＩｇＧ（eBioscience社）を、抗ＴＩＧＩＴ抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＭｏｕｓｅ　ＩｇＧ１（Bio X Cell社）を用いた。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ―γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　結果を図１６－１７に示した。免疫チェックポイント阻害剤を添加し培養した場合（図１６Ａ～Ｃ）あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加し培養した場合（図１７）には、それぞれに対するアイソタイプコントロール抗体を添加し培養した場合と比較して、高いＩＦＮ－γ産生量を認めた。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤、共刺激分子アゴニスト剤は、担がん生体に由来するＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬの免疫活性を増強することが示された。
実施例７：
ＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞のペプチドおよび腫瘍細胞に対する免疫応答性における各種併用剤の作用
　ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１１）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．３ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．３ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。投与の１週間後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、ＣＴＭを用いて脾細胞懸濁液を調製した。ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）をＤＭＳＯで４０ｍｇ／ｍＬに溶解した。脾細胞の一部に調製したＷＴ１キラーペプチド溶液を添加し、最終濃度１００μｇ／ｍＬで約１時間、３７℃、５％ＣＯ２下に静置した。ＣＴＭで余分なペプチドを洗浄後、ペプチドパルスした脾細胞と非ペプチドパルス細胞を１：１０の割合で混合し、Ｕ底９６穴プレートに３．８５×１０５細胞／穴で播種した。腫瘍細胞として、ＬＬＣ―ＨＨＤ―ＷＴ１腫瘍細胞にＸ線（５０Ｇｙ）照射した後に最終濃度１００ｎｇ／ｍＬのマウスリコンビナントＩＦＮ―γの存在下で約２日間培養し、ＣＴＭで洗浄した。このＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞を、脾細胞を播種したＵ底９６穴プレートに３．５×１０４細胞／穴で播種して混合し、ＣＴＭ、あるいはアイソタイプコントロール抗体、あるいは免疫チェックポイント阻害剤、あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加して３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。免疫チェックポイント阻害剤としては抗ＰＤ－１抗体（BioLegend社、クローン29F.1A12）、抗Ｂ７－Ｈ４抗体（BioLegend社、クローンHMH4-5G1）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（eBiosciecne社、クローンMIH5）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。共刺激分子アゴニスト抗体としては抗４－１ＢＢ抗体（Bio X Cell社、クローンLOB12.3）、抗ＯＸ－４０抗体（Bio X Cell社、クローンOX-86）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。抗ＰＤ―１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａκ（BD Pharmingen社）を、抗ＰＤ－Ｌ１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａ（Bio X Cell社）を、抗Ｂ７－Ｈ４抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＡｒｍｅｎｉａｎ　Ｈａｍｓｔｅｒ　ＩｇＧ（eBioscience社）を、抗４－１ＢＢ抗体および抗ＯＸ－４０抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ１κ（eBiosciecne社）を用いた。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ―γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　結果を図１８－１９に示した。免疫チェックポイント阻害剤を添加し培養した場合（図１８Ａ～Ｃ）あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加し培養した場合（図１９Ａ～Ｂ）には、それぞれに対するアイソタイプコントロール抗体を添加し培養した場合と比較して、高いＩＦＮ－γ産生量を認めた。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤、共刺激分子アゴニスト剤は、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのペプチドおよび腫瘍細胞に対する反応性を増強することが示された。
実施例８： 
ＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞のペプチドおよび腫瘍細胞に対する免疫応答性における各種併用剤の作用
　ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１４）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．３ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．３ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。投与の１週間後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、ＣＴＭを用いて脾細胞懸濁液を調製した。ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）をＤＭＳＯで４０ｍｇ／ｍＬに溶解した。脾細胞の一部に調製したＷＴ１キラーペプチド溶液を添加し、最終濃度１００μｇ／ｍＬで約１時間、３７℃、５％ＣＯ２下に静置した。ＣＴＭで余分なペプチドを洗浄後、ペプチドパルスした脾細胞と非ペプチドパルス細胞を１：１０の割合で混合し、Ｕ底９６穴プレートに３．８５×１０５細胞／穴で播種した。腫瘍細胞として、ＬＬＣ―ＨＨＤ―ＷＴ１腫瘍細胞にＸ線（５０Ｇｙ）照射した後に最終濃度１００ｎｇ／ｍＬのマウスリコンビナントＩＦＮ―γの存在下で約２日間培養し、ＣＴＭで洗浄した。このＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞を、脾細胞を播種したＵ底９６穴プレートに３．５×１０４細胞／穴で播種して混合し、ＣＴＭ、あるいはアイソタイプコントロール抗体、あるいは免疫チェックポイント阻害剤、あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加して３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。免疫チェックポイント阻害剤としては抗ＰＤ－１抗体（BioLegend社、クローン29F.1A12）、抗Ｂ７－Ｈ４抗体（BioLegend社、クローンHMH4-5G1）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（eBiosciecne社、クローンMIH5）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。共刺激分子アゴニスト抗体としては抗４－１ＢＢ抗体（Bio X Cell社、クローンLOB12.3）、抗ＯＸ－４０抗体（Bio X Cell社、クローンOX-86）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。抗ＰＤ－１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａκ（BD Pharmingen社）を、抗ＰＤ－Ｌ１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａ（Bio X Cell社）を、抗Ｂ７－Ｈ４抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＡｒｍｅｎｉａｎ　Ｈａｍｓｔｅｒ　ＩｇＧ（eBioscience社）を、抗４－１ＢＢ抗体および抗ＯＸ－４０抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ１κ（eBiosciecne社）を用いた。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ－γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　結果を図２０－２１に示した。免疫チェックポイント阻害剤を添加し培養した場合（図２０Ａ～Ｃ）あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加し培養した場合（図２１Ａ～Ｂ）には、それぞれに対するアイソタイプコントロール抗体を添加し培養した場合と比較して、高いＩＦＮ－γ産生量を認めた。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤、共刺激分子アゴニスト剤は、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのペプチドおよび腫瘍細胞に対する反応性を増強することが示された。
実施例９： 
ＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞のペプチドおよび腫瘍細胞に対する免疫応答性における各種併用剤の作用
　ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２６）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：３７）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．２３４ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．２３４ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。投与の１週間後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、ＣＴＭを用いて脾細胞懸濁液を調製した。ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２６）をＤＭＳＯで４０ｍｇ／ｍＬに溶解した。脾細胞の一部に調製したＷＴ１キラーペプチド溶液を添加し、最終濃度１００μｇ／ｍＬで約１時間、３７℃、５％ＣＯ２下に静置した。ＣＴＭで余分なペプチドを洗浄後、ペプチドパルスした脾細胞と非ペプチドパルス細胞を１：１０の割合で混合し、Ｕ底９６穴プレートに３．８５×１０５細胞／穴で播種した。腫瘍細胞として、ＬＬＣ―ＨＨＤ―ＷＴ１腫瘍細胞にＸ線（５０Ｇｙ）照射した後に最終濃度１００ｎｇ／ｍＬのマウスリコンビナントＩＦＮ―γの存在下で約２日間培養し、ＣＴＭで洗浄した。このＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞を、脾細胞を播種したＵ底９６穴プレートに３．５×１０４細胞／穴で播種して混合し、ＣＴＭ、あるいはアイソタイプコントロール抗体、あるいは免疫チェックポイント阻害剤を添加して３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。免疫チェックポイント阻害剤としては抗ＰＤ－１抗体（BioLegend社、クローン29F.1A12）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（eBiosciecne社、クローンMIH5）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。抗ＰＤ－１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａκ（BD Pharmingen社）を、抗ＰＤ－Ｌ１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａ（Bio X Cell社）を用いた。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ－γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　結果を図２２に示した。免疫チェックポイント阻害剤を添加し培養した場合には、それぞれに対するアイソタイプコントロール抗体を添加し培養した場合と比較して、高いＩＦＮ－γ産生量を認めた。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤は、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのペプチドおよび腫瘍細胞に対する反応性を増強することが示された。
実施例１０：
ＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞のペプチドおよび腫瘍細胞に対する免疫応答性における各種併用剤の作用
　ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：５）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１１）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．３ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．３ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。投与の１週間後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、ＣＴＭを用いて脾細胞懸濁液を調製した。ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：５）をＤＭＳＯで４０ｍｇ／ｍＬに溶解した。脾細胞の一部に調製したＷＴ１キラーペプチド溶液を添加し、最終濃度１００μｇ／ｍＬで約１時間、３７℃、５％ＣＯ２下に静置した。ＣＴＭで余分なペプチドを洗浄後、ペプチドパルスした脾細胞と非ペプチドパルス細胞を１：１０の割合で混合し、Ｕ底９６穴プレートに３．８５×１０５細胞／穴で播種した。腫瘍細胞として、ＬＬＣ―ＨＨＤ―ＷＴ１腫瘍細胞にＸ線（５０Ｇｙ）照射した後に最終濃度１００ｎｇ／ｍＬのマウスリコンビナントＩＦＮ―γの存在下で約２日間培養し、ＣＴＭで洗浄した。このＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞を、脾細胞を播種したＵ底９６穴プレートに３．５×１０４細胞／穴で播種して混合し、ＣＴＭ、あるいはアイソタイプコントロール抗体、あるいは免疫チェックポイント阻害剤、あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加して３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。免疫チェックポイント阻害剤としては抗ＰＤ－１抗体（BioLegend社、クローン29F.1A12）、抗Ｂ７－Ｈ４抗体（BioLegend社、クローンHMH4-5G1）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（eBiosciecne社、クローンMIH5）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。共刺激分子アゴニスト抗体としては抗４－１ＢＢ抗体（Bio X Cell社、クローンLOB12.3）、抗ＯＸ－４０抗体（Bio X Cell社、クローンOX-86）、抗ＧＩＴＲ抗体（BioLegend社、クローンDTA-1）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。抗ＰＤ―１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａκ（BD Pharmingen社）を、抗ＰＤ－Ｌ１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａ（Bio X Cell社）を、抗Ｂ７－Ｈ４抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＡｒｍｅｎｉａｎ　Ｈａｍｓｔｅｒ　ＩｇＧ（eBioscience社）を、抗４－１ＢＢ抗体および抗ＯＸ－４０抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ１κ（eBiosciecne社）を、抗ＧＩＴＲ抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ｂ（Bio X Cell社）を用いた。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ―γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　結果を図２３－２４に示した。免疫チェックポイント阻害剤を添加し培養した場合（図２３Ａ～Ｃ）あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加し培養した場合（図２４Ａ～Ｃ）には、それぞれに対するアイソタイプコントロール抗体を添加し培養した場合と比較して、高いＩＦＮ－γ産生量を認めた。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤、共刺激分子アゴニスト剤は、ＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのペプチドおよび腫瘍細胞に対する反応性を増強することが示された。
実施例１１： 
免疫チェックポイント阻害剤によるイン・ビボ腫瘍増殖抑制効果に対するワクチンの増強効果
　本試験に使用したＨＬＡ－Ａ＊２４：０２遺伝子導入マウス（Ｃ５７ＢＬ／６ＣｒＨＬＡ－Ａ２４／Ｋｂ）は、ヒトのＭＨＣであるＨＬＡ－Ａ２４：０２とマウスＭＨＣであるＨ－２ＫｂとのキメラＨＬＡを発現するマウスである（Int. J. Cancer 2002；100：565-570）。本マウスを用いることで、ヒトのＨＬＡ－Ａ＊２４：０２に結合し得るペプチドでＣＴＬを誘導することが可能である。
　ＥＬ４―Ａ２４／Ｋｂ―ＷＴ１腫瘍細胞をハンクス平衡塩溶液中に浮遊させ、ＨＬＡ－Ａ＊２４：０２遺伝子導入マウスの腹側部皮内に移植した（マウス１匹につき、３×１０５個）。ビークル（モンタナイドとリン酸緩衝生理食塩水）を投与する群（ａ群）、モンタナイドと抗ＰＤ－１抗体を投与する群（ｂ群）、ワクチンとアイソタイプコントロール抗体を投与する群（ｃ群）、ワクチンと抗ＰＤ－１抗体を投与する群（ｄ群）を設定した。それぞれの群について５匹のマウスを使用した。腫瘍細胞を移植した１日後および８日後に、ａ群およびｂ群のマウスには注射用水を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、前肢付け根皮内および後肢付け根皮内に２か所に分けて投与した（マウス１匹に対する1回の投与につき、０．１ｍＬを投与）。ｃ群およびｄ群のマウスには、ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１８）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊２４：０２遺伝子導入マウスの前肢付け根皮内および後肢付け根皮内に２か所に分けて投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．５ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．３７５ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。腫瘍細胞を移植した１日後、４日後、８日後、および１１日後に、ａ群のマウスの腹腔内にリン酸緩衝生理食塩水を投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．１ｍＬを投与）。ｂ群およびｄ群のマウスの腹腔内には抗ＰＤ－１抗体（Bio X Cell社、クローンRMP1-14）を投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．２ｍｇを投与）。ｃ群のマウスの腹腔内にはアイソタイプコントロール抗体（Bio X Cell社、rat IgG2a）を投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．２ｍｇを投与）。腫瘍移植４日後、７日後、１０日後、１１日後、１７日後、および２１日後に腫瘍径を測定し、腫瘍容積および腫瘍拒絶個体の割合を算出した。
　結果を図２５に示した。抗ＰＤ－１抗体（ｂ群）あるいはＷＴ１ワクチン（ｃ群）は、腫瘍細胞の増殖をビークル（ａ群）に対して有意に抑制した（パラメトリックDunnett型多重検定、＊：ｐ＜０．０５）。更に、抗ＰＤ－１抗体にＷＴ１ワクチンを併用することによって、腫瘍細胞の増殖はより顕著に抑制された（ｄ群、＊＊：ｐ＜０．０１）。また、表１に示す通り、腫瘍移植後１１日目における腫瘍拒絶個体の割合を算出したところ、抗ＰＤ－１抗体投与群においては腫瘍拒絶個体がまったく認められなかったが、ＷＴ１ワクチンを併用することによって、４０％の個体が腫瘍を拒絶することが明らかになった。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤にＷＴ１ワクチンを併用することによって、腫瘍に対する増殖抑制が増強されること、また、治療応答性が向上することが示された。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000019
実施例１２： 
免疫チェックポイント阻害剤によるイン・ビボ腫瘍増殖抑制効果に対するワクチンの増強効果
　ＥＬ４―Ａ２４／Ｋｂ―ＷＴ１腫瘍細胞をハンクス平衡塩溶液中に浮遊させ、ＨＬＡ－Ａ＊２４：０２遺伝子導入マウスの腹側部皮内に移植した（マウス１匹につき、３×１０５個）。ビークル（モンタナイドとリン酸緩衝生理食塩水）を投与する群（ａ群）、モンタナイドと抗ＣＴＬＡ－４抗体を投与する群（ｂ群）、ワクチンとアイソタイプコントロール抗体を投与する群（ｃ群）、ワクチンと抗ＣＴＬＡ－４抗体を投与する群（ｄ群）を設定した。それぞれの群について、６匹のマウスを使用した。腫瘍細胞を移植した３日前、４日後、および１０日後に、ａ群およびｂ群のマウスには注射用水を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、前肢付け根皮内および後肢付け根皮内に２か所に分けて投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．１ｍＬを投与）。ｃ群およびｄ群のマウスには、ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１８）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊２４：０２遺伝子導入マウスの前肢付け根皮内および後肢付け根皮内に２か所に分けて投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．５ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．３７５ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。腫瘍細胞を移植した１日後、４日後、７日後、および１０日後に、ａ群のマウスの腹腔内にリン酸緩衝生理食塩水を投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．１ｍＬを投与）。ｂ群およびｄ群のマウスの腹腔内には抗ＣＴＬＡ－４抗体（Bio X Cell社、クローンUC10-4F10-11）を投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．２ｍｇを投与）。ｃ群のマウスの腹腔内にはアイソタイプコントロール抗体（Bio X Cell社、Armenian hamster IgG）を投与した（マウス１匹に対する１回の投与につき、０．２ｍｇを投与）。腫瘍移植２１日後に腫瘍径を測定し、腫瘍容積を算出した。
　結果を図２６に示した。抗ＣＴＬＡ－４抗体（ｂ群）あるいはＷＴ１ワクチン（ｃ群）は、腫瘍細胞の増殖をビークル（ａ群）に対して有意に抑制しなかった（パラメトリックDunnett型多重検定、ＮＳ：no significant difference）。一方で、抗ＣＴＬＡ－４抗体にＷＴ１ワクチンを併用することによって、腫瘍細胞の増殖は有意に抑制された（ｄ群、＊：ｐ＜０．０５）。これらの結果より、免疫チェックポイント阻害剤にＷＴ１ワクチンを併用することによって、腫瘍に対する増殖抑制が増強されることが示された。
実施例１３： 
カクテルワクチンで誘導したＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞のペプチドおよび腫瘍細胞に対する免疫応答性における各種併用剤の作用
　ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１８）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．５ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．３７５ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。あるいは、ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．５ｍｇのＷＴ１キラーペプチドを投与）。投与の１週間後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、ＣＴＭを用いて脾細胞を調製した。この脾細胞をＦＩＴＣ標識抗ＣＤ８抗体（BD Pharmingen社）およびＰＥ標識されたＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）に対するＨＬＡテトラマー試薬（MBL社）で染色し、フローサイトメーターを用いてキラーペプチド特異的ＣＴＬの解析を行った。
　また、脾細胞の一部にＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）溶液を添加し、最終濃度１００μｇ／ｍＬで約１時間、３７℃、５％ＣＯ２下に静置した。ＣＴＭで余分なペプチドを洗浄後、ペプチドパルスした脾細胞と非ペプチドパルス細胞を１：１０の割合で混合してＵ底９６穴プレートに３．８５×１０５細胞／穴で播種し、３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ―γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　また、実施例５と同様に、ＬＬＣ―ＨＨＤ―ＷＴ１腫瘍細胞にＸ線（５０Ｇｙ）照射した後に最終濃度１００ｎｇ／ｍＬのマウスリコンビナントＩＦＮ―γの存在下で約２日間培養し、ＣＴＭで洗浄した。このＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞を、脾細胞を播種したＵ底９６穴プレートに３．５×１０４細胞／穴で播種して混合し、ＣＴＭ、あるいはアイソタイプコントロール抗体、あるいは免疫チェックポイント阻害剤、あるいは共刺激分子アゴニスト抗体、あるいはβ―カテニン阻害剤を添加して３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。免疫チェックポイント阻害剤としては抗ＰＤ－１抗体（BioLegend社、クローン29F.1A12）、抗ＬＡＧ－３抗体（BioLegend社、クローンC9B7W）、抗ＢＴＬＡ抗体（BioLegend社、クローン6A6）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（eBiosciecne社、クローンMIH5）、抗ＶＩＳＴＡ抗体（BioLegend社、クローンMH5A）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。共刺激分子アゴニスト抗体としては抗４－１ＢＢ抗体（Bio X Cell社、クローンLOB12.3）、抗ＯＸ－４０抗体（Bio X Cell社、クローンOX-86）、抗ＧＩＴＲ抗体（BioLegend社、クローンDTA-1）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。抗ＰＤ―１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａκ（BD Pharmingen社）を、抗ＰＤ－Ｌ１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａ（Bio X Cell社）を、抗ＢＴＬＡ抗体および抗ＶＩＳＴＡ抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＡｒｍｅｎｉａｎ　Ｈａｍｓｔｅｒ　ＩｇＧ（eBioscience社）を、抗ＬＡＧ－３抗体、抗４－１ＢＢ抗体および抗ＯＸ－４０抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ１κ（eBiosciecne社）を、抗ＧＩＴＲ抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ｂ（Bio X Cell社）を用いた。β―カテニン阻害剤としてはＸＡＶ９３９を最終濃度５μｍｏｌ／Ｌで用いた。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ―γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　結果を図２７－３２に示した。
　フローサイトメトリー解析の結果、ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１８）を含むワクチン（以下、カクテルワクチンａとする）を投与したマウスの脾細胞は、ＷＴ１キラーペプチド（式（３）の化合物）のみを含むワクチン（以下、キラーワクチンａとする）を投与したマウスの脾細胞と比べて、１．９倍のＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）特異的ＣＴＬを含んでいた（図２７）。これらの脾細胞をＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）の添加下で培養したところ、カクテルワクチンａを投与したマウスの脾細胞は、キラーワクチンａを投与したマウスの脾細胞と比べて、２倍のＩＦＮ―γ産生量を示した（図２８）。一方で、これらの脾細胞を腫瘍細胞と混合した上で、ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）非添加下あるいは添加下で培養したところ、腫瘍細胞と混合しなかった場合（図２８）と比較して脾細胞からのＩＦＮ－γ産生量は抑制されたが、カクテルワクチンａを投与したマウスの脾細胞は、キラーワクチンａを投与したマウスの脾細胞と比べて、ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）非添加下では６．９倍、ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）添加下では１２倍のＩＦＮ―γ産生量を示した（図２９）。これらの結果より、キラーワクチンａを投与したマウスの脾細胞中に含まれるＣＴＬは、カクテルワクチンａを投与したマウスの脾細胞中に含まれるＣＴＬと比べて、腫瘍細胞による抑制を強く受けることが示された。更には、腫瘍細胞の存在下でＷＴ１キラーペプチドに加えて免疫チェックポイント阻害剤（図３０）、共刺激分子アゴニスト抗体（図３１）、あるいはβ―カテニン阻害剤（図３２）を添加したところ、これらの併用剤によってカクテルワクチンａを投与したマウスの脾細胞は実施例５と同様に著しく活性化したが、キラーワクチンａを投与したマウスの脾細胞はほとんど活性化されなかった。これらの結果より、腫瘍中において、免疫チェックポイント阻害剤、共刺激分子アゴニスト剤、β―カテニン阻害剤によってＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのＷＴ１ペプチドおよび腫瘍細胞に対する反応性が増強されるためには、投与されるＷＴ１ワクチンにキラーペプチドとヘルパーペプチドの双方が含まれていることが重要であることが明らかとなった。
実施例１４： 
カクテルワクチンで誘導したＷＴ１抗原ペプチド特異的Ｔ細胞のペプチドおよび腫瘍細胞に対する免疫応答性における各種併用剤の作用
　ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１１）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．３ｍｇのＷＴ１キラーペプチドと０．３ｍｇのＷＴ１ヘルパーペプチドを投与）。あるいは、ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）を含む組成物を等量のモンタナイドと混合しエマルション化させたのち、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１遺伝子導入マウスの尾根部皮内に投与した（マウス１匹につき、０．３ｍｇのＷＴ１キラーペプチドを投与）。投与の１週間後にマウスをＣＯ２ガスにより安楽死させたのち脾臓を摘出し、ＣＴＭを用いて脾細胞を調製した。この脾細胞をＦＩＴＣ標識抗ＣＤ８抗体（BD Pharmingen社）およびＰＥ標識されたＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）に対するＨＬＡテトラマー試薬（MBL社）で染色し、フローサイトメーターを用いてキラーペプチド特異的ＣＴＬの解析を行った。
　また、脾細胞の一部にＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）溶液を添加し、最終濃度１００μｇ／ｍＬで約１時間、３７℃、５％ＣＯ２下に静置した。ＣＴＭで余分なペプチドを洗浄後、ペプチドパルスした脾細胞と非ペプチドパルス細胞を１：１０の割合で混合してＵ底９６穴プレートに３．８５×１０５細胞／穴で播種し、３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ―γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　また、実施例７と同様に、ＬＬＣ―ＨＨＤ―ＷＴ１腫瘍細胞にＸ線（５０Ｇｙ）照射した後に最終濃度１００ｎｇ／ｍＬのマウスリコンビナントＩＦＮ―γの存在下で約２日間培養し、ＣＴＭで洗浄した。このＬＬＣ－ＨＨＤ－ＷＴ１腫瘍細胞を、脾細胞を播種したＵ底９６穴プレートに３．５×１０４細胞／穴で播種して混合し、アイソタイプコントロール抗体、あるいは免疫チェックポイント阻害剤、あるいは共刺激分子アゴニスト抗体を添加して３７℃、５％ＣＯ２下で約３日間培養した。免疫チェックポイント阻害剤としては抗ＰＤ－１抗体（BioLegend社、クローン29F.1A12）、抗Ｂ７－Ｈ４抗体（BioLegend社、クローンHMH4-5G1）、抗ＰＤ－Ｌ１抗体（eBiosciecne社、クローンMIH5）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。共刺激分子アゴニスト抗体としては抗４－１ＢＢ抗体（Bio X Cell社、クローンLOB12.3）、抗ＯＸ－４０抗体（Bio X Cell社、クローンOX-86）を最終濃度３０μｇ／ｍＬで用いた。抗ＰＤ―１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａκ（BD Pharmingen社）を、抗ＰＤ－Ｌ１抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ２ａ（Bio X Cell社）を、抗Ｂ７－Ｈ４抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＡｒｍｅｎｉａｎ　Ｈａｍｓｔｅｒ　ＩｇＧ（eBioscience社）を、抗４－１ＢＢ抗体および抗ＯＸ－４０抗体に対応するアイソタイプコントロール抗体としてＲａｔ　ＩｇＧ１κ（eBiosciecne社）を用いた。この培養上清中に含まれるマウスＩＦＮ―γの濃度をＥＬＩＳＡキット（R&D Systems）で測定した。
　結果を図３３－３９に示した。
　フローサイトメトリー解析の結果、ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）およびＷＴ１ヘルパーペプチド（配列番号：１１）を含むワクチン（以下、カクテルワクチンｂとする）を投与したマウスの脾細胞は、ＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）のみを含むワクチン（以下、キラーワクチンｂとする）を投与したマウスの脾細胞と比べて、１．３倍のＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）特異的ＣＴＬを含んでいた（図３３）。これらの脾細胞をＷＴ１キラーペプチド（配列番号：２）の添加下で培養したところ、カクテルワクチンｂを投与したマウスの脾細胞は、キラーワクチンｂを投与したマウスの脾細胞と比べて、２．６倍のＩＦＮ―γ産生量を示した（図３４Ａ－Ｂ）。これらの脾細胞を腫瘍細胞の存在下でＷＴ１キラーペプチドに加えて免疫チェックポイント阻害剤（図３５－３７）あるいは共刺激分子アゴニスト抗体（図３８－３９）を添加して培養したところ、これらの併用剤によってカクテルワクチンｂを投与したマウスの脾細胞は実施例７と同様に著しく活性化したが、キラーワクチンｂを投与したマウスの脾細胞はほとんど活性化されなかった。これらの結果より、腫瘍中において、免疫チェックポイント阻害剤、共刺激分子アゴニスト剤によってＷＴ１抗原ペプチド特異的ＣＴＬのＷＴ１ペプチドおよび腫瘍細胞に対する反応性が増強されるためには、投与されるＷＴ１ワクチンにキラーペプチドとヘルパーペプチドの双方が含まれていることが重要であることが明らかとなった。
　本発明は、医薬品などの分野、例えば、癌の治療薬及び予防薬の開発、又は製造分野において利用可能である。
配列番号：２　ペプチド
配列番号：３　ペプチド
配列番号：４　ペプチド
配列番号：５　ペプチド
配列番号：６　ペプチド
配列番号：７　ペプチド
配列番号：８　ペプチド
配列番号：９　ペプチド
配列番号：１０　ペプチド
配列番号：１１　ペプチド
配列番号：１２　ペプチド
配列番号：１３　ペプチド
配列番号：１４　ペプチド
配列番号：１５　ペプチド
配列番号：１６　ペプチド
配列番号：１７　ペプチド
配列番号：１８　ペプチド
配列番号：１９　ペプチド
配列番号：２０　ペプチド
配列番号：２１　ペプチド
配列番号：２２　ペプチド
配列番号：２３　ペプチド
配列番号：２４　ペプチド
配列番号：２５　ペプチド
配列番号：２６　ペプチド
配列番号：２７　ペプチド
配列番号：２８　ペプチド
配列番号：２９　ペプチド
配列番号：３０　ペプチド
配列番号：３１　ペプチド
配列番号：３２　ペプチド
配列番号：３３　ペプチド
配列番号：３４　ペプチド
配列番号：３５　ペプチド
配列番号：３６　ペプチド
配列番号：３７　ペプチド
配列番号：３８　ペプチド
配列番号：３９　ペプチド
配列番号：４０　ペプチド
配列番号：４１　式（１）の化合物
配列番号：４２　式（２）の化合物
配列番号：４３　式（３）の化合物
配列番号：４４　ペプチド
配列番号：４５　ペプチド
配列番号：４６　ペプチド

Claims (37)

  1. 　免疫調節剤と併用される、ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む、癌を治療または予防するための医薬組成物。
  2. 　ＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と併用される、免疫調節剤を含む、癌を治療または予防するための医薬組成物。
  3. 　免疫調節剤とＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩とを含む、癌を治療または予防するための医薬組成物。
  4. 　ＷＴ１抗原ペプチドがＷＴ１キラーペプチドである、請求項１～３のいずれかに記載の医薬組成物。
  5. 　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、
    ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２）、
    ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：３）、
    ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：４）、
    ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　（配列番号：５）、
    ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ　（配列番号：６）、
    ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ　（配列番号：７）、
    ＶＬＤＦＡＰＰＧＡ、（配列番号：８）、
    Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：９）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、
    Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：１０）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
    ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２１）、および
    ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２６）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド；
    前記配列番号２～１０、２１および２６から選択されるいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチド；もしくは
    式（１）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
     （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
    で表される化合物、
    式（２）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
     （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
    で表される化合物、および
    式（３）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
     （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
    で表される化合物
    　からなる群から選択される化合物；またはその薬学上許容される塩である、請求項４に記載の医薬組成物。
  6. 　ＷＴ１キラーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、
    ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号：２）、
    ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：３）、
    ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：４）、
    ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ　（配列番号：５）、
    Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ　（配列番号：１０）、および
    ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ　（配列番号：２６）
    から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド；もしくは
    式（３）：
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
     （式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
    で表される化合物；またはその薬学上許容される塩である、請求項５に記載の医薬組成物。
  7. 　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩をさらに含む、請求項４～６のいずれかに記載の医薬組成物。
  8. 　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩と併用される、請求項４～６のいずれかに記載の医薬組成物。
  9. 　ＷＴ１ヘルパーペプチドまたはその薬学上許容される塩が、
    　以下：
    ＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１１）、
    ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ（配列番号：１２）、
    ＲＳＤＥＬＶＲＨＨＮＭＨＱＲＮＭＴＫＬ　（配列番号：１３）、
    ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１４）、
    ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ　（配列番号：１５）、
    ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ　（配列番号：１６）、
    ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ　（配列番号：１７）、
    ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１８）、
    ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ　（配列番号：１９）、
    ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ　（配列番号：２０）、および
    ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ　　（配列番号：３７）
    から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド；もしくは
    前記配列番号１１～２０から選択されるいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つヘルパーＴ細胞誘導活性を有するペプチド；またはその薬学上許容される塩である、請求項７または８に記載の医薬組成物。
  10. 　癌ワクチンとして使用される、請求項１～９のいずれかに記載の医薬組成物。
  11. 　免疫調節剤が、
    （１）免疫チェックポイント阻害剤、
    （２）共刺激分子アゴニスト剤、
    （３）免疫活性化剤、および
    （４）低分子阻害剤
    からなる群から選択される１以上の薬剤である、請求項１～１０のいずれかに記載の医薬組成物。
  12. 　免疫調節剤が、抗体、核酸、タンパク質、ペプチドまたは低分子化合物である、請求項１１に記載の医薬組成物。
  13. 　免疫調節剤が、免疫チェックポイント阻害剤である、請求項１１または１２に記載の医薬組成物。
  14. 　免疫チェックポイント阻害剤が、
    （１）ＣＴＬＡ－４、
    （２）ＰＤ－１、
    （３）ＬＡＧ－３、
    （４）ＢＴＬＡ、
    （５）ＫＩＲ、
    （６）ＴＩＭ－３、
    （７）ＰＤ－Ｌ１、
    （８）ＰＤ－Ｌ２、
    （９）Ｂ７－Ｈ３、
    （１０）Ｂ７－Ｈ４、
    （１１）ＨＶＥＭ、
    （１２）ＧＡＬ９、
    （１３）ＣＤ１６０、
    （１４）ＶＩＳＴＡ、
    （１５）ＢＴＮＬ２、
    （１６）ＴＩＧＩＴ、
    （１７）ＰＶＲ、
    （１８）ＢＴＮ１Ａ１、
    （１９）ＢＴＮ２Ａ２、
    （２０）ＢＴＮ３Ａ２、および
    （２１）ＣＳＦ－１Ｒ
    からなる群から選択される分子に対する１以上の薬剤である、請求項１１～１３のいずれかに記載の医薬組成物。
  15. 　免疫チェックポイント阻害剤が、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＨＶＥＭ、ＴＩＧＩＴ、ＰＶＲ、ＰＤ－Ｌ１およびＣＤ１６０からなる群から選択される分子に対する１以上の薬剤である、請求項１４に記載の医薬組成物。
  16. 　免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１に対する薬剤である、請求項１５に記載の医薬組成物。
  17. 　免疫チェックポイント阻害剤が、抗体である、請求項１１～１６のいずれかに記載の医薬組成物。
  18. 　免疫チェックポイント阻害剤が、ＰＤ－１またはＰＤ－Ｌ１に対する抗体である、請求項１７のいずれかに記載の医薬組成物。
  19. 　ＰＤ－１に対する抗体が、ニボルマブまたはペンブロリズマブである、請求項１８に記載の医薬組成物。
  20. 　ＰＤ－Ｌ１に対する抗体が、Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ、ＭＰＤＬ３２８０ＡまたはＢＭＳ－９３６５５９である、請求項１９に記載の医薬組成物。
  21. 　免疫調節剤が、共刺激分子アゴニスト剤である、請求項１１に記載の医薬組成物。
  22. 　共刺激分子アゴニスト剤が、
    （１）４－１ＢＢ、
    （２）４－１ＢＢ－Ｌ、
    （３）ＯＸ４０、
    （４）ＯＸ４０－Ｌ、
    （５）ＧＩＴＲ、
    （６）ＣＤ２８、
    （７）ＣＤ４０、
    （８）ＣＤ４０－Ｌ、
    （９）ＩＣＯＳ、
    （１０）ＩＣＯＳ－Ｌ、
    （１１）ＬＩＧＨＴ、および
    （１２）ＣＤ２７
    からなる群から選択される分子に対する１以上の薬剤である、請求項２１に記載の医薬組成物。
  23. 　共刺激分子アゴニスト剤が、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ４０およびＩＣＯＳからなる群から選択される分子に対する１以上の薬剤である、請求項２２に記載の医薬組成物。
  24. 　免疫調節剤が、免疫活性化剤である、請求項１１に記載の医薬組成物。
  25. 　免疫活性化剤が、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）作動薬である、請求項２４記載の医薬組成物。
  26. 　ＴＬＲ作動薬が、
    （１）ＴＬＲ１／２作動薬、
    （２）ＴＬＲ２作動薬、
    （３）ＴＬＲ３作動薬、
    （４）ＴＬＲ４作動薬、
    （５）ＴＬＲ５作動薬、
    （６）ＴＬＲ６／２作動薬、
    （７）ＴＬＲ７作動薬、
    （８）ＴＬＲ７／８作動薬、
    （９）ＴＬＲ７／９作動薬、
    （１０）ＴＬＲ８作動薬、
    （１１）ＴＬＲ９作動薬、および
    （１２）ＴＬＲ１１作動薬
    からなる群から選択される１以上の薬剤である、請求項２５に記載の医薬組成物。
  27. 　ＴＬＲ作動薬が、ＴＬＲ３作動薬、ＴＬＲ７作動薬、ＴＬＲ７／８作動薬、およびＴＬＲ９作動薬からなる群から選択される１以上の薬剤である、請求項２６に記載の医薬組成物。
  28. 　免疫調節剤が、低分子阻害剤である、請求項１１に記載の医薬組成物。
  29. 　低分子阻害剤が、β―カテニン阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、ＣＯＸ－２阻害剤、ＣＸＣＲ４阻害剤、ＳＴＡＴ３阻害剤およびマルチキナーゼ阻害剤からなる群から選択される薬剤である、請求項２８に記載の医薬組成物。
  30. 　低分子阻害剤が、β―カテニン阻害剤である、請求項２９に記載の医薬組成物。
  31. 　癌が、白血病、骨髄異形成症候群、多発性骨髄腫、悪性リンパ腫、胃癌、大腸癌、肺癌、乳癌、胚細胞癌、肝癌、皮膚癌、膀胱癌、前立腺癌、子宮癌、子宮頸癌、卵巣癌、脳腫瘍、骨癌、膵癌、頭頚部癌、皮膚または眼窩内悪性メラノーマ、直腸癌、肛門部癌、精巣癌、卵管のカルシノーマ、子宮内膜カルシノーマ、子宮頚部カルシノーマ、膣カルシノーマ、外陰部カルシノーマ、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、柔組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病を含む慢性または急性白血病、小児固形癌、リンパ球性リンパ腫、腎臓または尿管の癌、腎盂カルシノーマ、中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍新脈管形成、脊椎腫瘍、脳幹グリオーム、下垂体アデノーマ、カポシ肉腫、扁平上皮癌、扁平細胞癌、Ｔ細胞リンパ腫、多型性膠芽腫、悪性黒色腫、非小細胞肺がん、腎細胞癌およびアスベスト誘発癌からなる群から選択される、請求項１～３０のいずれかに記載の医薬組成物。
  32. 　ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤とが同時に投与される、請求項１～３１のいずれかに記載の医薬組成物。
  33. 　ＷＴ１抗原ペプチドと免疫調節剤とが別々に投与される、請求項１、２、および４～３１のいずれかに記載の医薬組成物。
  34. 　ＷＴ１抗原ペプチドが免疫調節剤の投与前に投与される、請求項１、２、および４～３１のいずれかに記載の医薬組成物。
  35. 　ＷＴ１抗原ペプチドが免疫調節剤の投与後に投与される、請求項１、２、および４～３１のいずれかに記載の医薬組成物。
  36. 　薬学上許容される担体をさらに含む、請求項１～３５のいずれかに記載の医薬組成物。
  37. 　請求項１～３６のいずれかに規定されるＷＴ１抗原ペプチドまたはその薬学上許容される塩と免疫調節剤とを含む、癌を治療または予防するためのキット。
PCT/JP2016/064923 2015-05-20 2016-05-19 Ｗｔ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の併用 WO2016186177A1 (ja)

Priority Applications (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CA2986367A CA2986367A1 (en) 2015-05-20 2016-05-19 Combination use of wt1 antigen peptide and immunomodulator
JP2017519401A JP6515182B2 (ja) 2015-05-20 2016-05-19 Ｗｔ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の併用
EP16796570.6A EP3299028A4 (en) 2015-05-20 2016-05-19 COMBINATION OF ANTIGEN WT1 PEPTIDE AND IMMUNOMODULATOR
US15/575,162 US20180140691A1 (en) 2015-05-20 2016-05-19 Combination use of wt1 antigen peptide and immunomodulator
CN201680042322.XA CN107921106B (zh) 2015-05-20 2016-05-19 Wt1抗原肽和免疫调节剂的组合用途
HK18107308.2A HK1250213A1 (zh) 2015-05-20 2018-06-05 Wt1抗原肽和免疫調節劑的組合
HK18108240.1A HK1248546A1 (zh) 2015-05-20 2018-06-27 Wt1抗原肽和免疫調節劑的組合

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2015-103145 2015-05-20
JP2015103145 2015-05-20

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2016186177A1 true WO2016186177A1 (ja) 2016-11-24

Family

ID=57320344

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2016/064923 WO2016186177A1 (ja) 2015-05-20 2016-05-19 Ｗｔ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の併用

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20180140691A1 (ja)
EP (1) EP3299028A4 (ja)
JP (4) JP6515182B2 (ja)
CN (1) CN107921106B (ja)
CA (1) CA2986367A1 (ja)
HK (2) HK1250213A1 (ja)
WO (1) WO2016186177A1 (ja)

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018101309A1 (ja) * 2016-11-30 2018-06-07 大日本住友製薬株式会社 Ｗｔ１ヘルパーペプチド及びこれと癌抗原ペプチドコンジュゲート体との組合せ
CN108431022A (zh) * 2015-11-20 2018-08-21 纪念斯隆凯特林癌症中心 用于治疗癌症的方法和组合物
WO2020067453A1 (ja) 2018-09-28 2020-04-02 大日本住友製薬株式会社 注射用組成物
JP2020515632A (ja) * 2017-03-15 2020-05-28 キャンサー リサーチ マレーシア 免疫原性ペプチド組成物
JP2020531854A (ja) * 2017-08-28 2020-11-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 癌の治療および診断のためのｔｉｍ−３アンタゴニスト
JP2021513992A (ja) * 2018-02-19 2021-06-03 コリア ユニバーシティ リサーチ アンド ビジネス ファウンデーションＫｏｒｅａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ 熱ショックタンパク質のエピトープを含むワクチン及びこの用途
WO2021117771A1 (ja) 2019-12-10 2021-06-17 大日本住友製薬株式会社 ペプチドエマルション製剤の調製方法
JP2022031915A (ja) * 2017-10-05 2022-02-22 フルクラム セラピューティクス，インコーポレイテッド Ｆｓｈｄの治療のためにｄｕｘ４および下流遺伝子発現を低減するｐ３８キナーゼ阻害剤
EP3952908A4 (en) * 2019-04-10 2023-01-11 SLSG Limited LLC MULTIVALENT THERAPEUTIC COMPOSITION AND METHODS OF USE FOR TREATING WT1 POSITIVE EXPRESSION CANCERS
US11759509B2 (en) 2013-03-29 2023-09-19 Sumitomo Pharma Co., Ltd. WT1 antigen peptide conjugate vaccine

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11364304B2 (en) 2016-08-25 2022-06-21 Northwestern University Crosslinked micellar spherical nucleic acids
US11696954B2 (en) 2017-04-28 2023-07-11 Exicure Operating Company Synthesis of spherical nucleic acids using lipophilic moieties
AU2019352354A1 (en) * 2018-10-05 2021-05-13 International Institute Of Cancer Immunology, Inc. Prophylactic or therapeutic drug for benign tumor
WO2021021924A1 (en) * 2019-07-29 2021-02-04 Huang Cai Gu Formulation of antibody based drugs for treating lung cancer by inhalation
US20230255978A1 (en) * 2020-05-12 2023-08-17 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for treating glioblastoma
CN111647066B (zh) * 2020-07-01 2020-12-18 维肽瀛(上海)生物技术有限公司 Wt1多肽肿瘤抑制剂
KR20230163364A (ko) * 2021-03-31 2023-11-30 셀레론 테라퓨틱스 리미티드 백신 보조제

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013531970A (ja) * 2010-04-13 2013-08-15 セルデックス・セラピューティクス・インコーポレイテッド ヒトｃｄ２７に結合する抗体およびその使用
JP2014027935A (ja) * 2006-05-03 2014-02-13 Regents Of The Univ Of Colorado A Body Corprate:The Ｃｄ４０アゴニスト抗体／ｉ型インターフェロン相乗性アジュバントの結合体、それを含む複合体、および細胞性免疫を強化する治療としてのその使用
WO2014134165A1 (en) * 2013-02-26 2014-09-04 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Compositions and methods for immunotherapy
JP2014169282A (ja) * 2013-02-05 2014-09-18 Nitto Denko Corp 粘膜投与用ｗｔ１ペプチド癌ワクチン組成物
JP2014221795A (ja) * 2006-10-20 2014-11-27 ユニバーシティ・オブ・サザンプトン Ｃｄ２７アゴニストを単独でまたは他の免疫調節剤と併用して用いる、ヒト免疫療法

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2511538C (en) * 2002-12-30 2013-11-26 3M Innovative Properties Company Immunostimulatory combinations
DE602004023476D1 (de) * 2003-01-15 2009-11-19 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Dimerisiertes peptid
CA2520172C (en) * 2003-03-27 2012-10-02 Lankenau Institute For Medical Research Novel methods for the treatment of cancer with an indoleamine 2, 3-dioxygenase inhibitor
US20040197312A1 (en) * 2003-04-02 2004-10-07 Marina Moskalenko Cytokine-expressing cellular vaccine combinations
AU2004255470B2 (en) * 2003-07-10 2010-08-19 Cytos Biotechnology Ag Packaged virus-like particles
EP1670513B1 (en) * 2003-10-06 2013-01-23 Cedars-Sinai Medical Center Cox-2 inhibitors and dendritic cells for use in the treatment of cancer.
MX2008013993A (es) * 2006-05-03 2009-05-11 Univ Colorado Combinación adyuvante sinergistica de anticuerpo agonista de cd40/interferona tipo 1, conjugados que la contienen y uso de los mismos como un terapeutico para aumentar la inmunidad celular.
DK2370593T3 (en) * 2008-11-28 2016-07-04 Univ Emory A method for determining the effect of PD-1 Antagonists
KR101208587B1 (ko) * 2009-06-24 2012-12-06 여오영 하이드록시클로로퀸을 포함하는 항암 치료를 위한 국소 투여용 주사제 조성물
CN103157108B (zh) * 2011-12-13 2016-01-20 宁云山 免疫调节剂组合物及其药物组合物和应用
CA2858876A1 (en) * 2011-12-15 2013-06-20 The University Of Chicago Methods and compositions for cancer therapy using mutant light molecules with increased affinity to receptors
AR090263A1 (es) * 2012-03-08 2014-10-29 Hoffmann La Roche Terapia combinada de anticuerpos contra el csf-1r humano y las utilizaciones de la misma
CN103830211A (zh) * 2012-11-27 2014-06-04 上海曼克尔瑞生物医药技术有限公司 一种β-catenin蛋白抑制剂-姜黄素在肝癌治疗方面的应用
CA2907782C (en) * 2013-03-29 2021-01-05 Sumitomo Dainippon Pharma Co., Ltd. Wt1 antigen peptide conjugate vaccine
JP2016527303A (ja) * 2013-08-05 2016-09-08 ケンブリッジ エンタープライズ リミテッド がん免疫療法におけるｃｘｃｒ４シグナル伝達の阻害

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2014027935A (ja) * 2006-05-03 2014-02-13 Regents Of The Univ Of Colorado A Body Corprate:The Ｃｄ４０アゴニスト抗体／ｉ型インターフェロン相乗性アジュバントの結合体、それを含む複合体、および細胞性免疫を強化する治療としてのその使用
JP2014221795A (ja) * 2006-10-20 2014-11-27 ユニバーシティ・オブ・サザンプトン Ｃｄ２７アゴニストを単独でまたは他の免疫調節剤と併用して用いる、ヒト免疫療法
JP2013531970A (ja) * 2010-04-13 2013-08-15 セルデックス・セラピューティクス・インコーポレイテッド ヒトｃｄ２７に結合する抗体およびその使用
JP2014169282A (ja) * 2013-02-05 2014-09-18 Nitto Denko Corp 粘膜投与用ｗｔ１ペプチド癌ワクチン組成物
WO2014134165A1 (en) * 2013-02-26 2014-09-04 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Compositions and methods for immunotherapy

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FU, C. ET AL.: "beta-catenin-mediated inhibition of croos-priming: A new mechanism for tumors to evade immunosurveilance", ONCOIMMUNOLOGY, vol. 2, no. 12, 2013, pages e26920, XP055331155, ISSN: 2162-4011 *
RIETHER, C. ET AL.: "Blocking programmed cell death 1 in combination with adoptive cytotoxic T- cell transfer eradicates chronic myelogenous leukemia stem cells", LEUKEMIA, vol. 29, no. 8, February 2015 (2015-02-01), pages 1781 - 5, XP055331159, ISSN: 1476-5551 *
STATHER, D. ET AL.: "High PD-1 Levels at Baseline are Associated With Unfavourable Clinical Outocome in a Wilms Tumour Gene 1 (Wt1) Peptide Vaccination Setting in Leukaemia Patients", J IMMUNOTHER, vol. 34, no. 9, 2011, pages 704, XP009507550, ISSN: 1524-9557 *

Cited By (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11759509B2 (en) 2013-03-29 2023-09-19 Sumitomo Pharma Co., Ltd. WT1 antigen peptide conjugate vaccine
JP6991969B2 (ja) 2015-11-20 2022-03-03 メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター 癌を治療するための方法及び組成物
CN108431022A (zh) * 2015-11-20 2018-08-21 纪念斯隆凯特林癌症中心 用于治疗癌症的方法和组合物
JP2018538265A (ja) * 2015-11-20 2018-12-27 メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター 癌を治療するための方法及び組成物
CN108431022B (zh) * 2015-11-20 2022-08-09 纪念斯隆凯特林癌症中心 用于治疗癌症的方法和组合物
US11033613B2 (en) 2015-11-20 2021-06-15 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Methods and compositions for treating cancer
JPWO2018101309A1 (ja) * 2016-11-30 2019-11-21 大日本住友製薬株式会社 Ｗｔ１ヘルパーペプチド及びこれと癌抗原ペプチドコンジュゲート体との組合せ
JP7209963B2 (ja) 2016-11-30 2023-01-23 住友ファーマ株式会社 Ｗｔ１ヘルパーペプチド及びこれと癌抗原ペプチドコンジュゲート体との組合せ
WO2018101309A1 (ja) * 2016-11-30 2018-06-07 大日本住友製薬株式会社 Ｗｔ１ヘルパーペプチド及びこれと癌抗原ペプチドコンジュゲート体との組合せ
JP7103571B2 (ja) 2017-03-15 2022-07-20 キャンサー リサーチ マレーシア 免疫原性ペプチド組成物
JP2020515632A (ja) * 2017-03-15 2020-05-28 キャンサー リサーチ マレーシア 免疫原性ペプチド組成物
JP2020531854A (ja) * 2017-08-28 2020-11-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 癌の治療および診断のためのｔｉｍ−３アンタゴニスト
JP2022031915A (ja) * 2017-10-05 2022-02-22 フルクラム セラピューティクス，インコーポレイテッド Ｆｓｈｄの治療のためにｄｕｘ４および下流遺伝子発現を低減するｐ３８キナーゼ阻害剤
JP2021513992A (ja) * 2018-02-19 2021-06-03 コリア ユニバーシティ リサーチ アンド ビジネス ファウンデーションＫｏｒｅａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｄ Ｂｕｓｉｎｅｓｓ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ 熱ショックタンパク質のエピトープを含むワクチン及びこの用途
JP7301391B2 (ja) 2018-02-19 2023-07-03 アストン エスシーアイ． インコーポレイテッド 熱ショックタンパク質のエピトープを含むワクチン及びこの用途
WO2020067453A1 (ja) 2018-09-28 2020-04-02 大日本住友製薬株式会社 注射用組成物
EP3952908A4 (en) * 2019-04-10 2023-01-11 SLSG Limited LLC MULTIVALENT THERAPEUTIC COMPOSITION AND METHODS OF USE FOR TREATING WT1 POSITIVE EXPRESSION CANCERS
WO2021117771A1 (ja) 2019-12-10 2021-06-17 大日本住友製薬株式会社 ペプチドエマルション製剤の調製方法

Also Published As

Publication number Publication date
JP6515182B2 (ja) 2019-05-15
HK1248546A1 (zh) 2018-10-19
EP3299028A1 (en) 2018-03-28
US20180140691A1 (en) 2018-05-24
CA2986367A1 (en) 2016-11-24
CN107921106A (zh) 2018-04-17
JP2022000454A (ja) 2022-01-04
HK1250213A1 (zh) 2018-12-07
JP2019135251A (ja) 2019-08-15
JP6956967B2 (ja) 2021-11-02
JP7253210B2 (ja) 2023-04-06
EP3299028A4 (en) 2019-02-27
JP2020075934A (ja) 2020-05-21
JPWO2016186177A1 (ja) 2018-04-12
JP6713160B2 (ja) 2020-06-24
CN107921106B (zh) 2023-09-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7253210B2 (ja) Ｗｔ１抗原ペプチドおよび免疫調節剤の併用
WO2018181648A1 (ja) Ｗｔ１癌抗原ペプチドおよびこれを含むペプチドコンジュゲート体
JP7209963B2 (ja) Ｗｔ１ヘルパーペプチド及びこれと癌抗原ペプチドコンジュゲート体との組合せ
JP2017171678A (ja) 新規ｃｔｌエピトープ４連結ペプチド
WO2019131722A1 (ja) Ｗｔ１由来ペプチドのコンジュゲート体およびこれを含む組成物
JP6077641B2 (ja) 新規ｃｔｌエピトープ５連結ペプチド
JP7209986B2 (ja) 癌を処置するための医薬組成物
JP7162675B2 (ja) 注射用組成物

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 16796570

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2017519401

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

Ref document number: 2986367

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 15575162

Country of ref document: US

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2016796570

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 201680042322.X

Country of ref document: CN