WO2016065442A1 - Composições farmacêuticas antiinflamatórias, proliferativas, protetoras e mucoadesivas, solúveis e estáveis; seu uso no tratamento dos quadros de mucosite e processo de obtenção; composição farmacêutica de base para o preparo das composições farmacêuticas e seu processo de obtenção - Google Patents

Composições farmacêuticas antiinflamatórias, proliferativas, protetoras e mucoadesivas, solúveis e estáveis; seu uso no tratamento dos quadros de mucosite e processo de obtenção; composição farmacêutica de base para o preparo das composições farmacêuticas e seu processo de obtenção Download PDF

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curcuminoids
bidens pilosa
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Marize Campos Valadares BOZINIS
Eliana Martins LIMA
Aline Carvalho BATISTA
Ricardo Neves MARRETO
Elismauro Francisco DE MENDONÇA
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Fbm Indústria Farmacêutica Ltda.
Universidade Federal De Goiás - Ufg
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Definitions

  • the present invention is a pharmaceutical composition with extended release mucoadhesive characteristics containing the complementary combination of Curcuma longa L. extract or fractions with curcuminoid content greater than 5% and Bidens pilosa (Bd) extract for the treatment of inflammatory diseases.
  • oral cavity (stomatitis) and gastrointestinal tract such as, for example, radio-induced mucositis and / or chemotherapy and aphthous lesions.
  • inflammatory skin lesions and vaginal mucositis are targets of therapy with the compositions in question.
  • Radio and / or chemo-induced mucositis is the most common complication in the treatment of malignant neoplasms, affecting 80 to 100% of patients. Mucositis is the most important acute side effect in cancer treatment. In patients undergoing radiotherapy with dose hyperfractionation the incidence is 100%, in conventional radiotherapy it reaches 97%, and when associated with chemotherapy it reaches 90%.
  • mucositis In cases of exclusive chemotherapy the incidence reaches 22%. In bone marrow transplantation, the incidence of mucositis is 80 to 100%. The main clinical manifestations of mucositis include erythema, edema, bleeding, ulceration and pseudomembrane formation. Ulcerations result in severe pain and almost always require nutritional support and parenteral analgesics. Clinical evaluation and measurement of mucositis intensity are made through indices proposed by the WHO.
  • mucositis Difficulty in swallowing solid and liquid foods, speech and chewing limitations, weight loss and the need for parenteral feeding are complications resulting from mucositis. Another aggravating factor of mucositis is the susceptibility to infection by opportunistic microorganisms that invade damaged tissues predisposing to severe infections and even sepsis, significantly increasing morbidity.
  • the painful component associated with the severity of mucositis may be sufficiently debilitating to cause a reduction in the proposed chemotherapy protocol and temporary or permanent interruption of radiotherapy.
  • antioxidants such as amifostine, melatonin and allopurinol.
  • Mucosal protectors such as benzidamine sucralfate and anesthetically acting anti-inflammatories are also used.
  • Drugs commonly used to treat cancer such as methotrexate, which inhibits DNA synthesis, tend to produce mucositis. Similar effects are seen with alkylating agents such as 5-fluorouracil, which is often used to treat malignant tumors of the gastrointestinal tract.
  • Gastrointestinal cell destruction observed in ant ineoplastic mucositis and / or radiotherapy is a result of cellular hypoproliferation, villus atrophy, crypt deepening, which results from absorptive dysfunction, alteration of electrolyte secretion, mainly Na + and K + , thus causing the diarrhea.
  • gastrointestinal tract mucositis as the term alimentary mucositis, in which it observes inflammation, erosion and ulcerative lesions in the alimentary tract, secondary to cancer chemotherapy / radiotherapy or previous procedures to bone marrow transplantation.
  • vaginal mucositis in women has also been reported.
  • the mechanisms of the development of alimentary mucositis and / or mucosal inflammatory processes have been described in four phases: initial period, restitution, inflammation, recovery.
  • the initial phase occurs by the action of agents that block DNA synthesis by topoisomerase inhibition and thymidylate synthesis.
  • RNA ribonucleic acid
  • All of these changes inhibit mitotic processes, affecting cellular integrity and triggering the influx of inflammatory and immune cells.
  • cell division arrests for a few hours and apoptosis occurs.
  • This phase is characterized by fluid loss and bacterial colonization.
  • Apoptosis or programmed cell death in intestinal mucositis may be physiological or induced by chemotherapy or radiotherapy.
  • the large amount of apoptotic cells generated in the intestinal crypt was observed in mice receiving chemotherapy and in intestinal biopsy samples from tumor patients receiving antineoplastic treatment.
  • cytotoxic medicinal products that cause apoptosis in stem cells in the small intestine crypt can be highlighted, which inhibited its regeneration and, therefore, created a deficit in the number of stem cells.
  • This deficit generated morphometric alterations such as villous atrophy and crypt hypoplasia in the intestine. Therefore, the Apoptosis plays a critical role in chemotherapy-induced mucositis.
  • the mechanism of induction of small cell intestinal apoptosis by chemotherapy is still uncertain, but may be correlated with the release of proinflammatory factors such as IL- ⁇ due to pathophysiological changes in the intestinal mucosa that received chemotherapy.
  • IL- ⁇ is significantly increased in intestinal mucosal tissue of rats receiving chemotherapy. High IL- ⁇ expression was also observed in peripheral blood serum from an animal model receiving chemotherapy (Wu et al., 2011; Wu et al., 2010).
  • IL- ⁇ is involved in the body's inflammatory reaction
  • other studies have found that this cytokine could induce apoptosis in various cell types.
  • Apoptosis induction in various cell types occurs since IL- ⁇ is involved in the activation of a number of apoptosis-related factors, such as Bax and Bcl-2 (Meirovitz, et., 2010).
  • IL-1Ra Interleukin-1 Receptor Antagonist
  • IL-1 receptor interleukin-1 receptor
  • Stomatitis is defined as any inflammatory process that affects the oral cavity.
  • Inflammatory lesions can have several etiologies: infectious, autoimmune, traumatic, neoplastic or drug reactions. They may present as isolated lesions, being a local manifestation of a systemic disorder or they may originate from local involvement, eventually leading to the general involvement of the individual. Oral lesions are classified according to their macroscopic appearance into white, vesicobullous, aphthous, and tongue lesions.
  • Macroscopic aspects of the lesions are related to their etiology, for example: White lesions are associated with candidiasis, leukoplakia, lichen planus, Fordyce granules, nicotinic stomatitis, hairy leukoplakia, syphilis.
  • Vesicobullous lesions are associated with herpes simplex, herpes zoster, pemphigus, pemphigoid, erythema multiforme, Stevens-Johnson syndrome; Aphid lesions are related to recurrent aphthous stomatitis, Behcet's disease, systemic lupus erythematosus, mucositis, chemical burn, orthodontic trauma; Tongue injuries are related to cleft tongue, benign migratory glossitis (geographical language), medial rhomboid glossitis, glossodynia.
  • Oral ulcers also called aphthous ulcers, aphthous stomatitis or simply canker sores, are very common lesions of the oral mucosa, with inflammatory background, affecting about 20% of the population.
  • canker sores are benign lesions that usually do not cause major problems other than discomfort, however, some more serious oral cavity diseases may manifest with very similar ulcerated lesions.
  • An example is oral cavity cancer, which in the early stages may look like a cold sore.
  • Canker sores that take longer to heal are those that appear in places where there is constant contact with teeth or food, suffering repeated trauma throughout the day. Some people have large thrush, called major thrush, larger than 1 cm and deep.
  • Foot-and-mouth lesions appear to be caused by an imbalance of the immune system.
  • Some of the known triggers are: Local trauma, such as accidental bites; Psychological stress; Few hours of sleep; Helicobacter pylori, the same bacteria that causes gastric ulcer;
  • oral ulcers caused by systemic diseases are multiple and recurrent.
  • canker sores usually painless and accompanied by skin lesions and joint pain, as well as systemic symptoms such as low fever and tiredness.
  • Behcet's disease also an autoimmune disease
  • canker sores are multiple, recurrent and accompanied by ulcers also on the genitals. Eye damage is also common.
  • celiac disease and Crohn's disease canker sores come with intestinal symptoms such as diarrhea and bloody stools.
  • Neutropenia which is the drop in the number of neutrophils in the blood, is also a cause of oral ulcers. It is usually seen in patients undergoing chemotherapy, but can occur in any disease or medication that causes neutropenia.
  • the HIV virus can cause oral ulcers in advanced stages (when there are already criteria for AIDS) and also in the acute phase of virus infection.
  • Coxsackie virus (herpangina) infection very common in children, can result in sore throats, fever, small oral ulcers and lesions on the palms and soles.
  • Syphilis both primary and secondary, can result in oral ulcers. These ulcers are usually multiple and in the secondary phase take time to heal.
  • Cold sores appear as vesicles that can become small ulcers after breaking up. It does not look much like cold sore, but can be confused by lay people.
  • Some cancers of the oral cavity may present as ulcerations, initially being confused with common canker sores.
  • Curcumin and related substances are low molecular weight phenolic compounds that are yellowish in color and come from the rhizome of the Curcuma longa L. plant.
  • Curcuma longa L curcuminoids have been used for generations to treat Many diseases including inflammation, skin sores, liver and biliary disorders, cough as well as tumors. Curcuma longa is reported in the literature as safe for human use (Dadhaniya, et al., 2011).
  • curcumin is understood to be the high purity substance of the formula C 2 H 2 O 6 6 or in admixture with other curcuminoids present in the roots of Curcuma longa L. in different proportions, as well as in other species. vegetables.
  • Bidens pilosa extracts is understood to mean all preparations from different parts or all, preprocessed or unprocessed, of the Bidens pilosa species. These extracts can be obtained from conventional extraction processes, as maceration, percolation and others, as well as from unconventional extraction processes, such as extraction by ultrasound, microwave, supercritical fluid, among others. Also considered is the use of atomized, lyophilized dry extracts or concentrated extracts or fractions purified by various methods.
  • Curcuma longa in compositions acting as an immunomodulatory agent in view of its anti-IL-1 action.
  • Bidens pilosa (Bd) is a Brazilian plant popularly used as teas for the treatment of liver disease. It has proven anti-inflammatory, antioxidant, antiallergic, antimicrobial, healing and fibroblast-inducing action.
  • Bd Bidens pilosa
  • plant resources are a strategy of great relevance for the development of new medicines, as these materials may have unique biological activities due to the associated action of different substances, which sometimes act via different mechanisms of action and their use. complementary.
  • the use of these materials may in certain cases be safer in relation to drug therapy with synthetic drugs.
  • anteriority refers to the prevention and treatment of tissue damage in a patient undergoing radiotherapy, in cancer of larynx, esophagus, nasopharyngeal oral cavity, causing radiation-induced mucositis.
  • curcumin in oil, associated with an antioxidant, and an edible oil, preferably a vegetable oil, such as sunflower oil, and preferably with the antioxidant being vitamin "E” or - tocopherol.
  • Bidens pilosa (Bd) and Curcuma Longa could be It is advantageously employed for the manufacture of a preparation used to obtain a safe, nontoxic medicament with useful pharmacological properties capable of promoting the recovery of skin lesions, mucous membranes and tissues with inflammatory processes.
  • Curcumin the main representative of curcuminoids, is a phytopharmaceutical extracted from the roots of Curcuma longa L., which has numerous therapeutic activities, including chemoprotective, antioxidant, antimicrobial and anti-inflammatory activities.
  • Curcumin is the most abundant curcumin in the roots of Curcuma longa. Phenyl, hydroxyl and methyl groups are related to the biological actions of this substance.
  • curcumin exhibits reduced aqueous solubility in pH media. acid and rapidly degrades in alkaline pH media.
  • solubility / stability behavior hinders the effective administration of this substance, particularly due to its low aqueous solubility, greatly hindering the development of a drug to be administered orally, with easy absorption and assured stability. It is therefore very important, and one of the principal objects of the present invention, to develop a composition for the prevention and treatment of inflammatory diseases, such as mucositis, capable of employing curcumin in aqueous-based preparations having therapeutically appropriate concentrations and considerable stability.
  • Extractive preparations obtained from Bidens pilosa represent another material of great natural origin that has attracted the attention of the scientific community. There are numerous traditional uses of these extracts, including the fight against malaria, hepatitis, laryngitis, headache and gastric problems.
  • the extracts obtained from Bidens pilosa have proven antibacterial, antioxidant and immunomodulatory action. Some of these activities are probably related to the presence of flavonoids in Bidens pilosa extracts.
  • Bidens pilosa (Bd) are very promising and numerous patents have been filed protecting its use as herbicide, anti-inflammatory, cosmetic and in the treatment of metabolic syndrome.
  • formulations used in the treatment of mucositis should have features that aid in therapeutic success, such as high retention, penetration and stability in the environment, such as the oral, skin or gastrointestinal environment.
  • the present invention has demonstrated the scope of a composition with innovative characteristics containing the association of Curcuma longa (its extracts or fractions) associated with the glycerinated extract of Bd which has an important proliferative and anti-inflammatory effect, and formulation related to results superior to the effects of these substances when evaluated separately in animals exposed to 5-fluoracil.
  • Mucositis is an inflammatory condition of the mucosa, which is atrophic, swollen, erythematous, and sometimes ulcerated. This condition is almost, but not only, invariably observed in cancer patients undergoing radiotherapy and chemotherapy.
  • Inflammatory lesions in the mucosa lead to a drastic reduction in patients' quality of life and may impede the continuation of radiotherapy or chemotherapy. Additionally, colonization of ulcerated inflammatory lesions by opportunistic pathogens, particularly the oral cavity, can lead to sepsis and death.
  • Treatments based on reliable clinical evidence can still be considered scarce.
  • Some State-of-the-art procedures and related drugs with adequate clinical evidence can be used as adjuvants in mucositis caused by cytotoxic chemotherapy, such as pre-bone marrow transplantation conditioning.
  • FIGURE 3 Treatment scheme of the animals submitted to the study.
  • FIGURE 4 Histopathological section (eosin-hematoxylin) of duodenal segment of 5-fluoracil exposed animal (A); untreated control animal (B); and animal treated with formulation containing curcuminoids (7.5mg / kg) and exposed to 5-fluoracil (C).
  • FIGURE 5 Histopathological section (eosin-hematoxylin) of duodenal segment of 5-fluoracil exposed animal (A); untreated control animal (B); and animal treated with glycerinated extract of Bidens pilosa (125mg / kg) and exposed to 5-fluoracil (C).
  • FIGURE 6 Histopathological section (eosin-hematoxylin) of the duodenal segment of 5-fluoracil exposed animal (A); untreated control animal (B); and animal treated with mucoadhesive formulation and curcuminoids (7.5mg / kg) plus Bidens pilosa (125mg / kg) and exposed to 5-fluoracil (C).
  • the starting liquid formulations of the present invention are the base for the preparation of different pharmaceutical or cosmetic forms, such as mouthwash, mouth spray, drops, syrups, elixirs, among others for internal or external use.
  • a base liquid formulation was prepared, and in the pharmaceutical forms derived therefrom, a block copolymer chosen from poly (oxyethylene), poly (oxypropylene), poloxamer 407, or poloxamer 188 was employed. , which was used due to its mucoadhesive and solubilizing properties.
  • the present invention relates to obtaining multiparticulate curcumin-containing polymeric systems at a concentration of 1 to 50% by weight.
  • These systems are made up of at least one bioadhesive naturally occurring polymer. They are also constituted by a polymeric or lipid component capable of releasing the active ingredient in a prolonged way on the mucosal surface.
  • Solvents such as distilled water, propylene glycol and polyethylene glycol 400 were employed as vehicles and also as solubilizers.
  • Antioxidants such as butylhydroxytoluene, sodium bisulfite and sodium metabisulfite were used to maximize the oxidative stability of the formulations in the usual amounts of 0.01 to 1% v / v of the formulations.
  • formulations containing distilled water or a mixture of water and propylene glycol (1: 1, v / v) were prepared at room temperature with the aid of mechanical stirring (500 rpm).
  • curcuminoids in these formulations was performed under constant mechanical agitation and the solutions obtained in this way had a concentration below 2.5 mg / mL.
  • Step I Preparation of formulations containing distilled water or mixture of water and propylene glycol (1: 1, v / v) at room temperature with the aid of mechanical stirring (500 rpm);
  • step - the curcuminoid is added under constant mechanical stirring to obtain an even solution with a concentration below 2.5 mg / ml;
  • step - the addition of poloxamer mixture of water with propylene glycol and curcuminoid
  • the procedure for incorporating poloxamer into the mixture comprised dividing its total mass into two equal portions, followed by adding them with water and propylene glycol. After poloxamer dispersion, the fractions were mixed under mechanical agitation and the resulting formulation had good physical appearance, but as discussed above it was not able to fully dissolve curcuminoids (see formulation PI 01, Figure 01).
  • Step 4 adding to the mixture of water with propylene glycol, and poloxamer curcuminoid with a co-solvent;
  • Figure 2 shows the improvement caused by the addition of this constituent.
  • the ternary mixture between water: PEG 400: propylene glycol (30: 20: 50, v / v / v) containing poloxamer (15%) was able to solubilize most of the added curcuminoid mass (2.5 mg / mL).
  • the Visual inspection showed the presence of small amount of precipitated material ( Figure 02, formulation PI02).
  • propylene glycol from 45% to 55%, more preferably 50%;
  • polyethylene glycol 400 from 25% to 35%, and more preferably 30%;
  • the poloxamer polymeric surfactant was added at a concentration of 15% (w / v) according to the procedure described above.
  • Formulation PI03 represented the starting point for the development of solutions with higher concentration of curcuminoids and for those containing curcuminoids and Bidens pilosa extract, as described below.
  • the preferred base formulation PI03 of the present invention consists of:
  • Curcuminoids - 2.5 mg / mL and solvent system preferably consisting of:
  • Phase II After its complete dispersion, the solution of Phase II was poured into the mixture of Phase I containing propylene glycol and PEG 400. - Phase III
  • formulation PI04 By applying this new procedure, it was possible to dissolve up to 25 mg / mL curcuminoids in the preparation, which remained physically stable for a long time at room temperature and was termed as formulation PI04.
  • the incorporation of the extract of Bidens pilosa in formulation PI04 was accomplished by replacing the entire distilled water mass and by 20% of the propylene glycol mass with the glycerinated plant extract. - PHASE IV.
  • the formulation contains the polymeric mucoadhesive agent (poloxamer, 15%, w / v) as well as sodium bisulfite and butylhydroxytoluene at usual concentrations.
  • the method of preparing formulation CBd was exactly the same as that described above for formulation PI04.
  • the active principles objects of the present invention have been successfully associated in the CBd formulation. No precipitation, turbidity, lump formation, gelation or any other signs of incompatibility between the active ingredients were observed.
  • the bioadhesive component was successfully incorporated in the presence of constituents of Bidens pilosa extract.
  • liquid petroleum jelly (5% w / w);
  • Poloxamer (15% w / w) and propylene glycol (6% w / w) were added to this phase.
  • Methylparaben (0.1% w / w), propylparaben (0.05% w / w) and butylhydroxytoluene (0.05% w / w) were used as preservatives. All components of the oil phase were added to a jacketed vessel, and the temperature of the mixture was increased to 75 ° C. After the mixture reached the temperature required for complete melting of the solid materials, the curcuminoids were added to a final concentration of 25mg / mL. After this addition a new period of mechanical stirring (500 rpm) followed until all the curcuminoid mass was dissolved in the oily base.
  • Bidens pilosa glycolic extract (65%, w / w) was heated to a temperature of 75 ° C. Then the aqueous extract was poured into the oil phase under constant mechanical stirring (500 rpm). After mixing was complete the heating was turned off and stirring was continued until the resulting product reached room temperature (about 25 ° C).
  • Solid formulations which may be tablets, tablets or capsules, and more preferably in tablet form, have been developed using mannitol as a diluent and poloxamer as a mucoadhesive agent.
  • the granulation liquid used was the extract itself. Hairy bidens at 35 to 45% w / v ratio.
  • the mass of each component of the mixture is as follows: (1) Curcuminoids (25 to 200 mg per tablet); Mannitol (250 to 350 mg per tablet); Poloxamer (100 to 140 mg per tablet); Microcrystalline cellulose (200 to 400 mg); Sodium metabisulfite (5 to 15 mg) and citric acid (20 to 40 mg).
  • the mixing phase of the powders was initiated by the injection of heated air (45-65 ° C) with a flow rate of 15 to 25 m 3 per hour for a period of 10 to 15 minutes. After the mixing step, the granulation liquid was added to it in three steps. Between each granulation step a drying step was performed (maintenance of fluidization conditions without addition of liquid). All powders were sieved in stainless steel sieves (250 micron aperture mesh) prior to the mixing operation.
  • the granules were compressed into a rotary table compression machine containing 8 sets of punches (numbers 13 to 15, depending on formulation). The hardness of the tablets was adjusted during the process.
  • the diet was classic, with standard commercial feed and water supplied ad libitum.
  • Severity of diarrhea was rated using the following scale: 0, normal (normal or absent stools); 1, light (soft stools a little wet); 2, moderate (wet stool with moderate perianal inflammation and change in coat color) and 3, severe stool (aqueous with severe perianal inflammation and change in coat color).
  • test substance for each group was accomplished by oral route (gavage) for 6 days, with 5-FU doses were administered intraperitoneally in 4 to 6 days.
  • 5-FU doses were administered intraperitoneally in 4 to 6 days.
  • the first study deals with the evaluation of a formulation containing only curcuminoids.
  • Group II 7.5 mg / kg curcuminoid + 5-FU;
  • Group III 15 mg / kg curcuminoid + 5-FU;
  • Group IV positive control (5-FU);
  • Group V negative control (water).
  • Groups I, II or III received prophylactic treatment with the curcuminoid formulation and on days 4, 5 and 6 they also received a 5-FU injection 4 hours after treatment and were euthanized 24 hours after treatment.
  • the duodenal portion of each animal was extracted and then paraffin blocks (58 - 60 ° C) were mounted to obtain microscopic images after staining by Hematoxylin and Eosin technique.
  • the mucosal proliferative effect was assessed by immunohistochemistry with the cyclin D marker.
  • the second study was performed with a formulation containing only glycerin extract of Bd in 3 (three) different doses (75, 100 and 125mg / kg).
  • Group I 75 mg / kg Bd + 5-FU;
  • Group II 100 mg / kg Bd + 5-FU;
  • Group IV positive control (5-FU);
  • Group V negative control (water).
  • the third study aimed to evaluate a formulation with the association of curcuminoids (75mg / kg) and Bd (125mg / kg) (CBd).
  • Group IV positive control (5-FU);
  • Group V negative control (water).
  • Hispatological section showed a reduction in local inflammation and cellular hyperproliferation demonstrated by increased crypts and villi in animals treated with the combination (Figure 6C).
  • Serum IL-1 ⁇ levels were analyzed using Elisa IL- ⁇ dosing kits according to the manufacturer's instructions.
  • the present invention aims to use the formulation containing the combination of Curcuma longa from Curcuma longa and Bidens pilosa for the treatment of mucosal diseases, such as radiotherapy and / or chemotherapy-induced gastrointestinal tract mucositis.
  • innovative pharmaceutical with controlled release mucoadhesive properties that will provide an additional prophylactic and / or therapeutic alternative to the medical clinic treatments.
  • Interleukin 1 receptor antagonist decreased lethality and intestinal toxicity of 5- Fluorouracil in a mouse mucositis model. Biomed Pharmacother. 2011, 65 (5): 339-44.

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Abstract

A presente invenção trata de composições farmacêuticas com características mucoadesivas e de liberação prolongada contendo a associação do extrato ou frações da Curcuma longa L. com teor de curcuminóide superior a 5% e extrato de Bidens pilosa (Bd), que apresenta um importante efeito proliferativo e anti-inflamatório, para o tratamento de doenças inflamatórias da cavidade oral (estomatites) e do trato gastrointestinal, como por exemplo, mucosites induzidas por radio e/ou quimioterapia e lesões aftosas. Adicionalmente, lesões cutâneas de caráter inflamatório e mucosite vaginal. Tratam-se de composições obtidas a partir de uma formulação líquida de base, contendo um sistema solvente de base aquosa. É, portanto, objetivo da presente invenção, obter preparações farmacêuticas, desenvolver seus processos de obtenção e estabelecer seus usos. Essas preparações contém associação entre o extrato de Bidens pilosa (ou suas frações) e o extrato Curcuma longa (ou suas frações) em proporções de 1:10 a 10:1, incorporados em 25 formas farmacêuticas semi-sólidas, líquidas ou sólidas contendo componente bio(muco)adesivo natural ou sintético, diluentes, veículos, aglutinantes, desintegrantes, nas faixas de concentração de 1 a 75% em peso, dos agentes ativos de origem vegetal.

Description

"COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ANTIINFLAMATÓRIAS ,
PROLIFERATIVAS , PROTETORAS E MUCOADESIVAS , SOLÚVEIS E ESTÁVEIS; SEU USO NO TRATAMENTO DOS QUADROS DE MUCOSITE E PROCESSO DE OBTENÇÃO; COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA DE BASE PARA O PREPARO DAS COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS E SEU PROCESSO DE OBTENÇÃO"
CAMPO DE APLICAÇÃO
A presente invenção trata de uma composição farmacêutica com características mucoadesivas e de liberação prolongada contendo a associação complementar do extrato ou frações da Curcuma longa L. com teor de curcuminóide superior a 5% e extrato de Bidens pilosa (Bd) para o tratamento de doenças inflamatórias da cavidade oral ( estomatites ) e do trato gastrointestinal, como, por exemplo, mucosites induzidas por radio e/ou quimioterapia e lesões aftosas. Adicionalmente, lesões cutâneas de caráter inflamatório e quadros de mucosite vaginal são alvos da terapia com as composições em questão.
ESTADO DA ARTE
A mucosite radio e/ou quimio-induzida é a complicação mais comum no tratamento de neoplasias malignas, que acomete 80 a 100% dos pacientes. A mucosite é o efeito colateral agudo mais importante no tratamento do câncer. Em pacientes submetidos à radioterapia com hiperfracionamento de dose a incidência é de 100%, na radioterapia convencional chega a 97%, e quando associada à quimioterapia atinge 90%.
Nos casos de quimioterapia exclusiva a incidência chega a 22%. No transplante de medula óssea, a incidência de mucosite é de 80 a 100%. As principais manifestações clínicas da mucosite incluem eritema, edema, sangramento, ulceração e formação de pseudomembrana . As ulcerações resultam em dor intensa e quase sempre necessitam de suporte nutricional e analgésicos por via parenteral . A avaliação clinica e a mensuração da intensidade da mucosite são feitas através de índices propostos pela OMS.
A dificuldade de deglutição de alimentos sólidos e líquidos, limitação da fala e da mastigação, perda de peso e necessidade de alimentação parenteral, são complicações resultantes da mucosite. Outro fator agravante da mucosite é a susceptibilidade à infecção por microorganismos oportunistas que invadem os tecidos lesados predispondo às infecções graves e até a sepse, aumentando significativamente a morbidade.
O componente doloroso associado com a gravidade da mucosite pode ser suficientemente debilitante para causar redução do protocolo quimioterápico proposto e interrupção temporária ou permanente da radioterapia.
A interrupção do tratamento radioterápico e alterações na dose da quimioterapia têm sido associadas com maior recorrência do tumor, com a consequente diminuição da sobrevida .
Essa complicação resulta em internação hospitalar com aumento do custo do atendimento ao paciente. Os tratamentos empregados para a mucosite são paliativos e diversificados, envolvendo terapêuticas profiláticas e tentativas de atenuar a dor .
Alternativas para o tratamento da mucosite incluem a administração de antioxidantes, como a amifostina, a melatonina e o alopurinol.
Protetores da mucosa como sucralfato de benzidamina e antiinflamatórios com ação anestésica também são utilizados.
No entanto, ainda não está estabelecido um tratamento "padrão-ouro" para a mucosite, sendo de extrema importância o desenvolvimento de novos recursos terapêuticos efetivos e acessíveis ao paciente oncológico e/ou pacientes com indicação de transplante de medula óssea.
Medicamentos comumente usados no tratamento do câncer como, por exemplo, metotrexato, que inibe a síntese de DNA, tendem a produzir mucosite. Efeitos similares são vistos com agentes alquilantes, como o 5-fluorouracil, usado com frequência no tratamento de tumores malignos do trato gastrointestinal .
A destruição celular gastrointestinal observada na mucosite por ant ineoplásicos e/ou radioterapia é resultado da hipoproliferação celular, com atrofia das vilosidades, aprofundamento das criptas, que resulta de disfunção absortiva, alteração na secreção de eletrólitos, principalmente Na+ e K+, ocasionando assim a diarréia.
Atualmente, alguns autores descrevem a mucosite do trato gastrointestinal como o termo mucosite alimentar, quadro em que observa inflamação, erosão e lesões ulcerativas no trato alimentar, secundárias à quimioterapia/radioterapia do câncer ou ainda de procedimentos anteriores ao transplante de medula óssea. Neste contexto, a mucosite vaginal nas mulheres também tem sido relatada.
Os mecanismos do desenvolvimento da mucosite alimentar e/ou processos inflamatórios que acometem mucosas têm sido descritos em quatro fases: período inicial, restituição, inflamação, recuperação. A fase inicial ocorre pela ação de agentes que bloqueiam a síntese do DNA por inibição da topoisomerase e síntese do timidilato. Pode também ocorrer alterações na molécula do ácido ribonucléico (RNA) e formação de radicais livres. Todas essas alterações inibem processos mitóticos, afetando a integridade celular e provocando estímulo para o influxo de células inflamatórias e imunes. Durante a segunda fase, ocorre paralisação da divisão celular por algumas horas e apoptose. Há, portanto, uma indução da perda progressiva de células nas criptas, a qual ativa os processos de restituição. Nesta etapa há um colapso na profundidade e número de criptas, encurtamento das vilosidades e depleção das células caliciformes . Esta fase se caracteriza por perdas de fluidos e colonização bacteriana .
Por fim, no processo de recuperação ocorre uma significativa proliferação celular, que leva a restauração funcional das criptas e/ou tecidos . Consequentemente ocorre uma recuperação das estruturas teciduais, como as vilosidades, com recuperação da superfície absortiva do intestino .
A apoptose ou morte celular programada, na mucosite intestinal, pode ser fisiológica ou induzida por quimioterapia ou radioterapia. A grande quantidade de células apoptóticas gerada na cripta intestinal foi observada em camundongos que receberam a quimioterapia e em amostras de biópsia intestinal de pacientes com tumor que receberam tratamento antineoplásico .
Estudos prévios (Sonis et al . , 1978; Carl, 1995; Pico et al . , 1998; Kõstler et al . , 2001; Epstein and Schubert 2003; Sonis, et al., 2004; Armstrong and McCaffrey, 2006;) tinham considerado que a génese da mucosite intestinal induzida por quimioterapia foi correlacionada com efeitos apoptóticos de fármacos citotóxicos sobre as pequenas células intestinais.
Como exemplo pode-se destacar medicamentos citotóxicos causadores de apoptose em células-tronco na cripta do intestino delgado, os quais inibiram a regeneração do mesmo e, portanto, criaram um déficit no número de células tronco. Este déficit gerou alterações morfométricas como atrofia das vilosidades e hipoplasia da cripta no intestino. Logo, a apoptose desempenha um papel critico na mucosite induzida pela quimioterapia.
Portanto, constitui-se em um objetivo da presente invenção, o desenvolvimento de uma composição que exerça ação inibidora e/ou controladora da apoptose intestinal induzida por quimioterapia.
0 mecanismo de indução de apoptose intestinal de pequenas células pela quimioterapia ainda é incerto, mas pode estar correlacionado com a liberação dos fatores pró- inflamatórios como a IL-Ιβ, devido a mudanças patofisiológicas da mucosa intestinal que recebeu quimioterapia .
Estudos demonstram que a IL-Ιβ tem sua expressão significativamente aumentada no tecido da mucosa intestinal de ratos que receberam quimioterapia. A alta expressão de IL-Ιβ também foi observada no soro do sangue periférico de modelo animal que recebeu quimioterapia (Wu et al.,2011; Wu et al. ,2010) .
Embora a IL-Ιβ esteja envolvida na reação inflamatória do organismo, outros estudos descobriram que essa citocina poderia induzir o fenómeno da apoptose em vários tipos de células. A indução de apoptose em vários tipos de células ocorre uma vez que IL-Ιβ está envolvida na ativação de uma série de fatores relacionados a apoptose, tais como Bax e Bcl-2 (Meirovitz, et., 2010) .
O processo de apoptose intestinal induzida pela quimioterapia foi acompanhado pelo aumento da regulação dos fatores pró-apoptóticos (Bax, Caspase-3, Bak, e P53) e diminuição da regulação de fatores anti-apoptóticos (Bcl-2 e Bcl-XL) em pequenas células da cripta intestinal, que levou à génese da mucosite intestinal em pequenas células. Portanto, a IL-Ιβ possivelmente está envolvida na apoptose de pequenas células das criptas intestinais após a quimioterapia . O antagonista do receptor da interleucina-1 (IL-lRa) é uma proteína natural que possui efeitos biológicos antagónicos da IL-1, o que pode antagonizar o papel inibidor de IL-1 sobre a proliferação de células endoteliais e promover o crescimento de células endoteliais através da ligação com receptor da interleucina -I(IL-IR) . Vários estudos relatam também o papel inibidor de IL-lRa na apoptose celular em diferentes modelos experimentais (wu, et a., 2011; Yoshida, et al . , 2006) .
Estudos sugerem que o forte aumento de IL-Ιβ no organismo após a quimioterapia, pode estar envolvido na ativação do processo de apoptose das células do intestino delgado (Vissink et al . , 2003; Peterson, 1999; Fall- Dickson, et al . , 2007; Logan, et al . , 2007) .
Dentro desse contexto, é importante ressaltar que vários estudos (Vathsala, et al . , 2012; Líier, et al . , 2011) na literatura têm relatado a ação imunomoduladora da curcumina. Dentre estes, alguns autores relataram a sua importante ação anti-IL-1.
Define-se estomatite como sendo qualquer processo inflamatório que acometa a cavidade oral. As lesões inflamatórias podem ter diversas etiologias: infecciosas, auto-imunes, traumáticas, neoplásicas ou reações medicamentosas. Podem se apresentar como lesões isoladas, sendo manifestação local de um distúrbio sistémico ou podem ser originadas a partir do comprometimento local, levando, eventualmente, ao acometimento geral do indivíduo. Lesões orais são classificadas de acordo com seu aspecto macroscópico em lesões brancas, vesico-bolhosas , aftóides e lesões da língua.
Os aspectos macroscópicos das lesões se relacionam com sua etiologia, por exemplo: Lesões brancas estão associadas a candidíase, leucoplasia, líquen plano, grânulos de Fordyce, estomatite nicotínica, leucoplasia pilosa, sífilis secundária; Lesões vesico-bolhosas estão associadas a herpes simples, herpes zoster, pênfigo, penfigóide, eritema multiforme, síndrome de Stevens- Johnson; Lesões aftóides estão relacionadas a estomatite aftóide recidivante, doença de Behçet, lúpus eritematoso sistémico, mucosite, queimadura química, traumas por aparelhos ortodonticos ; Lesões da língua estão relacionadas a língua fissurada, glossite migratória benigna (língua geográfica), glossite rombóide mediana, glossodínea.
As úlceras orais, também chamadas de úlceras aftosas, estomatites aftóides ou simplesmente aftas, são lesões muito comuns da mucosa oral, de fundo inflamatório, e que acometem cerca de 20% da população. Geralmente, as aftas são lesões benignas que não costumam causar maiores problemas além do desconforto, entretanto, algumas doenças mais graves da cavidade oral podem se manifestar com lesões ulceradas muito semelhantes. Um exemplo é o câncer da cavidade oral, que nas fases iniciais pode se parecer com uma afta. As aftas que demoram mais tempo para curar são aquelas que surgem em locais onde há contato constante com os dentes ou com alimentos, sofrendo traumatismos repetidos ao longo do dia. Algumas pessoas apresentam aftas grandes, chamadas de aftas major, maiores que 1 cm e profundas. Estas demoram até seis semanas para desaparecer e podem deixar cicatriz. Existe ainda a afta herpetiforme, formada por múltiplas úlceras pequenas que se juntam e transformam-se em uma lesão grande. Estas aftas podem vir acompanhadas de linfonodos no pescoço (línguas) e, por vezes, de febre baixa e mal estar.
As lesões aftosas parecem ser provocadas por um desequilíbrio do sistema imune. Alguns dos gatilhos conhecidos são: Traumas locais, como mordidas acidentais; Estresse psicológico; Poucas horas de sono; Helicobacter pylori, a mesma bactéria que causa úlcera gástrica; Algumas pastas de dentes que contenham lauril sulfato de sódio; Refluxo gastroesofágico ; Alimentos como chocolate, café, refrigerantes, tomate e abacaxi; Cigarro; Alterações hormonais durante o ciclo menstrual; Deficiência de algumas vitaminas e minerais, como vitamina B12, vitamina C, zinco, ferro ou ácido fólico; Fármacos, como anti-inflamatórios, rapamicina, metotrexato, aspirina e atenolol. Normalmente, as úlceras orais causadas por doenças sistémicas são múltiplas e recorrentes. Costumam ter algumas características diferentes das aftas comuns e são acompanhadas de outros sintomas. Nos quadros de lúpus, a aftas costumam ser indolores e acompanhadas de lesões de pele e dores nas articulações, além de sintomas sistémicos, como febre baixa e cansaço. Na doença de Behcet, também uma doença autoimune, as aftas são múltiplas, recorrentes e acompanhadas de úlceras também nos órgãos genitais. Também é comum haver lesões nos olhos. Na doença celíaca e na doença de Crohn, as aftas vêm em conjunto com sintomas intestinais, como diarréia e sangue nas fezes. Neutropenia, que é a queda no número de neutrófilos no sangue, também é causa de úlceras orais. Normalmente é visto em pacientes sob quimioterapia, mas pode ocorrer em qualquer doença ou medicamento que cause neutropenia.
Várias infecções podem causar úlceras orais semelhantes a aftas :
O vírus HIV pode causar úlceras orais em fases avançadas (quando já há critérios para AIDS) e também na fase aguda da infecção pelo vírus. Infecção pelo Coxsackie vírus (herpangina) , muito comum em crianças, pode resultar em dores de garganta, febre, pequenas úlceras orais e lesões nas palmas das mãos e plantas dos pés. A sífilis, tanto a fase primária como secundária, pode resultar em úlceras orais. Essas úlceras são normalmente múltiplas e na fase secundária demoram a cicatrizar. O herpes labial se apresenta como vesículas que podem virar pequenas úlceras após romperem-se . O aspecto não é muito parecido com afta, mas pode ser confundido por leigos. Alguns cânceres da cavidade oral podem se apresentar como ulcerações, sendo inicialmente confundidos com aftas comuns.
Além das lesões da cavidade oral associadas a processos inflamtórios , lesões cutâneas causadas por diversas etiologias, como o pé diabético são comuns e tratadas com substâncias com potencial antiinflamtório/proliferativo para promover o reparo do tecido. Entre as manifestações de praticamente todas as doenças cutâneas, destaca-se o aparecimento de vários tipos de lesões que alteram o aspecto da pele. As lesões cutâneas são muito distintas, como por exemplo, as maculas, pápulas, perda de tecido, vesículas, bolhas, pústulas, crostas, dentre outras.
A curcumina e substâncias relacionadas (os curcuminóides ) são compostos fenólicos de baixo peso molecular caracterizados por coloração amarelada e que são oriundos do rizoma da planta Curcuma longa L. Na medicina Asiática os curcuminóides da Curcuma longa L têm sido utilizados por gerações para o tratamento de muitas doenças, incluindo a inflamação, feridas na pele, desordens hepáticas e biliares, tosse, bem como tumores. A Curcuma longa é relatada na literatura como segura para o uso humano (Dadhaniya, et al . , 2011) .
Na presente invenção, entende-se o termo "curcumina" como a substância de fórmula molecular C2iH2o06 de alta pureza ou em mistura com outros curcuminóides presentes nas raízes de Curcuma longa L. em diferentes proporções, bem como em outras espécies vegetais.
Da mesma forma, na presente invenção, entende-se o termo extratos de "Bidens pilosa" , como todas as preparações oriundas das diferentes partes ou do todo, pré-processado ou não, da espécie Bidens pilosa. Esses extratos podem ser obtidos a partir de processos de extração convencionais, como a maceração, percolação e outros, assim como, a partir de processos não convencionais de extração, a exemplo da extração por ultrasom, microondas, fluido supercritico, entre outros. Considera-se ainda, a utilização de extratos secos atomizados, liofilizados ou extratos concentrados ou frações purificadas por métodos diversos.
Constitui-se, dessa forma, um objeto adicional da presente invenção, o emprego da Curcuma longa em composições, atuando como agente imunomodulador face à sua ação anti-IL-1.
A Bidens pilosa (Bd) é uma planta brasileira popularmente usada na forma de chás para o tratamento de doenças hepáticas. Possui comprovada ação anti-inflamatória, antioxidante, antialérgica, antimicrobiana, cicatrizante e indutora de fibroblastos .
O estado da arte demonstra que estudos clínicos comprovaram que a Bd é capaz de promover a recuperação das lesões das mucosas. Paralelamente, estudos clínicos duplo- cego randomizados e controlados, de preparação contendo a Bd comprovou efeito antialérgico do mesmo sem apresentar efeitos tóxicos clínicos (Corren, et al . , 2008) . Estudos toxicológicos pré-clínicos demonstraram que a Bd não apresenta genotoxicidade (Costa et al . , 2007) .
Constitui-se, portanto, um objetivo adicional da presente invenção, o provimento de uma composição feita a partir de preparações contendo Bidens pilosa (Bd) , isenta de efeitos tóxicos e promovendo ações diversas, em preparados empregados para promover a recuperação das lesões cutâneas e das mucosas.
O uso dos recursos vegetais é uma estratégia de grande relevância para o desenvolvimento de novos medicamentos, pois esses materiais podem apresentar atividades biológicas únicas devido à ação associada de diferentes substâncias, que por vezes, atuam via mecanismos de ação diferentes e complementares. O uso desses materiais pode, em certos casos, se apresentar como mais seguro em relação à terapia medicamentosa com fármacos sintéticos.
Entretanto, existem inúmeros desafios tecnológicos relacionados ao desenvolvimento de produtos farmacêuticos que contenham misturas complexas de substâncias naturais. De fato, a padronização, a garantia da estabilidade e da eficácia dessas preparações é tarefa complexa que exige desenvolvimento inovador.
Tentativas anteriores foram realizadas empregando associações de substâncias naturais, dentre as quais se pode destacar a curcumina, um antioxidante fenólico extraído do rizoma da planta Curcuma longa. Tais esforços anteriores podem ser representados pelo documento WO200388986, publicado em 30/10/2003, que se refere a uma combinação da curcumina com um antioxidante e pelo menos um óleo comestível usado para a prevenção e tratamento de danos a tecidos de pacientes submetidos a tratamento radioterápico . Basicamente, a anterioridade se refere à prevenção e tratamento de danos causados aos tecidos de um paciente submetido à radioterapia, em tratamentos de câncer de laringe, esôfago, cavidade oral nasofaríngea, acarretando mucosite induzida pela radiação.
Na referência, é proposto o uso da curcumina em óleo, associado a um antioxidante, e a um óleo comestível, de preferência um óleo vegetal, tal como óleo de girassol, e preferencialmente, sendo escolhido como o antioxidante a vitamina "E" ou -tocoferol.
Assim, pode ser observado que a anterioridade não antecipa nem sugere, o emprego de um preparado baseado na associação da Curcuma longa, sob a forma de extrato ou fração ou substância isolada, com extratos de Bidens pilosa.
Inesperadamente, observou-se que a atuação associada da Bidens pilosa (Bd) e da Curcuma Longa poderia ser vanta osamente empregada para a produção de uma preparação usada na obtenção de um medicamento seguro, atóxico e com propriedades farmacológicas úteis, capaz de promover a recuperação das lesões cutâneas, das mucosas e tecidos com processos inflamatórios.
Na presente invenção, obteve-se um preparado no qual é empregado Bidens pilosa (picão preto) sob a forma de extrato glicerinado, e que foi formulado con untamente com o extrato ou fração do extrato de Curcuma longa com teor de curcuminóides superior a 5%.
A curcumina, principal representante dos curcuminóides, é um fitofármaco extraído das raízes da Curcuma longa L. que apresenta inúmeras atividades terapêuticas, dentre essas, as atividades quimioprotetora, antioxidante, antimicrobiana e antiinflamatória .
A curcumina é o curcuminóide mais abundante nas raízes da Curcuma longa. Grupamentos fenílicos, hidroxílicos e metílicos estão relacionados às ações biológicas dessa substância .
Alguns aspectos de grande relevância devem ser considerados para garantir o uso adequado desse composto. Um problema relevante, e que carecia de solução adequada no estado da técnica, visando a obtenção de uma composição em que se promovesse a associação dos agentes vegetais integrantes da presente invenção, reside no fato de que a curcumina apresenta reduzida solubilidade aquosa em meios com pH ácido e se degrada rapidamente em meios com pH alcalino .
Seu comportamento de solubilidade/estabilidade dificulta a administração eficaz dessa substância, particularmente devido à sua baixa solubilidade aquosa, dificultando sobremaneira o desenvolvimento de um medicamento a ser administrado por via oral, com fácil absorção e estabilidade assegurada. Portanto, é muito importante, e constitui-se em um dos objetos principais da presente invenção, desenvolver uma composição para prevenção e tratamento de doenças inflamatórias, a exemplo mucosite, capaz de empregar a curcumina em preparações de base aquosa que apresentem concentrações terapeuticamente adequadas e estabilidade considerável .
De forma similar, é importante garantir a dissolução adequada dessa substância a partir de formas farmacêuticas sólidas, de tal modo que a biodisponibilidade da preparação medicamentosa sob a forma sólida seja adequada.
As preparações extrativas obtidas a partir da Bidens pilosa representam outro material de origem natural de grande importância e que tem chamado atenção da comunidade cientifica. São inúmeros os usos tradicionais desses extratos, incluindo o combate à malária, à hepatite, laringites, cefaléias e problemas gástricos.
Os extratos obtidos a partir da Bidens pilosa (Bd) têm comprovada ação antibacteriana, antioxidante e imunomoduladora . Algumas dessas atividades estão provavelmente relacionadas à presença de flavonóides nos extratos da Bidens pilosa.
Outras classes de metabólitos secundários também estão presentes nos extratos, como por exemplo, os alcalóides, as saponinas, os triterpenos e os poliacetilenos . As atividades biológicas da Bidens pilosa (Bd) são bastante promissoras e inúmeras patentes foram depositadas protegendo seu uso como herbicida, antiinflamatório, cosmético e no tratamento da síndrome metabólica.
Devido à composição complexa dos extratos vegetais e às características especiais de solubilidade e estabilidade da curcumina, a associação desses agentes em formulações estáveis e eficazes exige desenvolvimento tecnológico inovador, que se constitui em um dos principais aspectos da presente invenção.
Além disso, as formulações usadas no tratamento da mucosite devem possuir características que auxiliem no sucesso terapêutico, tais como elevada retenção, penetração e estabilidade no ambiente, a exemplo do ambiente oral, cutâneo ou gastrointestinal.
A presente invenção demonstrou o alcance de uma composição com características inovadoras contendo a associação da Curcuma longa (seus extratos ou frações) associada ao extrato glicerinado da Bd que apresenta um importante efeito proliferativo e antiinflamatório, e formulação correlata com resultados superiores aos efeitos destas substancias quando avaliadas separadamente, em animais expostos ao 5-fluoracil.
A mucosite é uma condição inflamatória da mucosa, a qual se apresenta atrófica, intumescida, eritematosa e, por vezes, ulcerada. Essa condição é quase que, mas não apenas, invariavelmente observada em pacientes com diagnóstico de câncer que estão sob tratamento radioterápico e quimioterápico .
As lesões inflamatórias na mucosa levam a uma redução drástica da qualidade de vida dos pacientes e podem impedir a continuação do tratamento radio ou quimioterápico. Adicionalmente, a colonização das lesões inflamatórias ulceradas por patógenos oportunistas, particularmente da cavidade oral, pode levar a quadros de sepse e morte.
Devido ao reconhecimento de sua importância, esforços académicos e clínicos têm sido realizados para melhorar a prevenção e o tratamento da mucosite. Apesar disso, as estratégias profiláticas e terapêuticas ainda são bastante limitadas .
Tratamentos baseados em evidências clínicas confiáveis ainda podem ser considerados como escassos. Alguns procedimentos do estado da técnica e medicamentos correlatos, com comprovação clinica adequada podem ser utilizados como adjuvantes nos quadros de mucosite causada por quimioterapia citotóxica, como, por exemplo, no condicionamento pré-transplante de medula óssea.
O uso da palifermina (fator de crescimento de fibroblastos KGFF1) foi recentemente aprovado para tal. O beneficio clinico da crioterapia também foi demonstrado nesses casos.
Por outro lado, apesar dos medicamentos acima citados que auxiliam na diminuição do sofrimento dos pacientes acometidos com a mucosite, por outro lado, ainda não se acham disponíveis medicamentos específicos, para o tratamento e/ou prevenção da mucosite relacionada à radioterapia, com resultados curativos desta afecção.
As preparações usadas na clínica atualmente não são registradas para essa finalidade e/ou não têm sua utilização baseada em evidências clínicas confiáveis.
Mais particularmente ainda, não foram desenvolvidos e, por conseguinte, não constam do estado da técnica, preparações medicamentosas confiáveis, constituídas da associação de extrato glicerinado de Bidens pilosa e Curcuma Longa, seus extratos ou frações, com adequada solubilidade aquosa e estabilidade, e que apresentem efetividade no tratamento de mucositis em pacientes com diagnóstico de câncer, sob tratamento radioterápico e quimioterápico .
Dentro desse contexto, fica evidente a necessidade em desenvolver novos medicamentos que atuem especificamente na prevenção e/ou tratamento dos diversos quadros de mucosite.
É, portanto, um objetivo da presente invenção, obter preparações farmacêuticas contendo associação entre o extrato de Bidens pilosa e o extrato Curcuma longa (ou suas frações) em proporções de 1:10 a 10:1, incorporados em formas farmacêuticas semi-sólidas , líquidas ou sólidas contendo componente bioadesivo natural ou sintético, diluentes, veículos, aglutinantes, desintegrantes , nas faixas de concentração de 1 a 75% em peso, dos agentes ativos de origem vegetal .
É objetivo da presente invenção, desenvolver sistemas de liberação prolongada bioadesivos que garantam a solubilidade e estabilidade dos diferentes princípios ativos incorporados .
É ainda um objetivo adicional da presente invenção, desenvolver um método de produção dessas formas farmacêuticas/sistemas de liberação.
É objetivo da presente invenção, desenvolver métodos para a prevenção e tratamento de condições inflamatórias, infecciosas, irritativas, ulceradas ou não, que afetam as mucosas do trato digestivo, em especial, a mucosa bucal, assim como de outras mucosas do organismo humano ou de outros mamíferos, tais como a mucosa retal, vaginal e nasal.
BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
Figura 01 - Formulação PI01. Corpo de fundo constituído por curcuminóides .
FIGURA 2 - Formulação PI02. Efeito da adição de polietilenoglicol 400.
FIGURA 3 - Esquema de tratamento dos animais submetidos ao estudo.
FIGURA 4 - Corte histopatológico (eosina-hematoxilina) do segmento duodenal de animal exposto do 5-fluoracil (A) ; animal controle sem tratamento (B) ; e animal tratado com formulação contendo curcuminóides (7,5mg/kg) e expostos ao 5-fluoracil (C) .
FIGURA 5 - Corte histopatológico (eosina-hematoxilina) do segmento duodenal de animal exposto do 5-fluoracil (A) ; animal controle sem tratamento (B) ; e animal tratado com extrato glicerinado de Bidens pilosa (125mg/kg) e expostos ao 5-fluoracil (C) .
FIGURA 6 - Corte histopatológico (eosina-hematoxilina) do segmento duodenal de animal exposto do 5-fluoracil (A) ; animal controle sem tratamento (B) ; e animal tratado com formulação mucoadesiva e de curcuminóides (7,5mg/kg) mais Bidens pilosa (125mg/kg) e expostos ao 5-fluoracil (C) .
DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO
As formulações liquidas de partida da presente invenção constituem-se no elemento de base para o preparo de diferentes formas farmacêuticas ou cosméticas, tais como enxaguatório bucal, spray bucal, gotas, xaropes, elixires, entre outras de uso interno ou externo.
Em uma primeira modalidade de que trata a presente invenção, uma formulação liquida base foi preparada, e nas formas farmacêuticas dela derivadas, empregou-se um copolimero em bloco escolhido dentre poli (oxietileno) , poli (oxipropileno) , poloxamer 407, ou poloxamer 188, que foi usado devido as suas propriedades mucoadesivas e solubilizantes .
Em outro aspecto, a presente invenção se relaciona à obtenção de sistemas poliméricos multiparticulados contendo curcumina na concentração de 1 a 50% por peso. Esses sistemas são constituídos por pelo menos um polímero de origem natural bioadesivo. São ainda, constituídos por um componente polimérico ou lipídico capaz de liberar o principio ativo de forma prolongada na superfície da mucosa.
Solventes como a água destilada, propilenoglicol e polietilenoglicol 400 foram empregados como veículos e também como solubilizantes.
Antioxidantes como o butilhidroxitolueno, bissulfito de sódio e metabissulfito de sódio foram utilizados para maximizar a estabilidade oxidativa das formulações, nas quantidades usuais de 0,01 a 1% v/v das formulações.
Desenvolvimento das formulações liquidas
A descrição a seguir, relativa ao preparo da formulação liquida de base da presente invenção, apresenta tanto as formulações que se constituem no elemento inovador da presente invenção, como também inclui aquelas etapas, que pelo seu resultado insatisfatório, demonstram a real efetividade do que foi realmente desenvolvido com sucesso pelos inventores da presente invenção.
Inicialmente, formulações contendo água destilada ou mistura de água e propilenoglicol (1:1, v/v) foram preparadas sob temperatura ambiente com auxilio de agitação mecânica (500 rpm) .
A adição dos curcuminóides nestas formulações foi realizada sob agitação mecânica constante e as soluções obtidas desta forma apresentaram concentração inferior a 2,5 mg/mL. A adição de poloxamer a esta mistura aumentou sobremaneira a dissolução dos curcuminóides. A incorporação de 15% (p/v) desse polímero em uma mistura de água: propilenoglicol (1:1) levou a melhora na solubilização dos curcuminóides na preparação.
Por outro lado, verificou-se que as soluções obtidas após a incorporação de 15% (p/v) de poloxamer ainda apresentavam concentração de curcuminóides inferior a 2,5 mg/mL, mostrando-se ainda insatisfatório tal procedimento. Adicionando-se diretamente o poloxamer no propilenoglicol, ocorreu uma dispersão grosseira que não pode ser empregada para os fins medicamentosos a que se destina o preparado.
Portanto conclui-se que como primeira etapa do processo de preparação de formulação líquida de base para o preparo de diferentes formas farmacêuticas ou cosméticas, tais como enxaguatório bucal, spray bucal, gotas, xaropes, elixires, entre outras, de uso interno ou externo, a base de curcuminóides , constitui-se de:
Ia etapa - preparo de formulações contendo água destilada ou mistura de água e propilenoglicol (1:1, v/v) sob temperatura ambiente com auxilio de agitação mecânica (500 rpm) ;
- 2a etapa - adiciona-se o curcuminóide sob agitação mecânica constante, obtendo-se uma solução ainda com concentração inferior a 2,5 mg/mL;
- 3a etapa - adição de poloxamer à mistura de água com propileno glicol e curcuminóide;
O procedimento de incorporação do poloxamer na mistura compreendeu a divisão de sua massa total em duas porções iguais, seguido da adição das mesmas com água e com propilenoglicol. Após a dispersão do poloxamer, as frações foram misturadas sob agitação mecânica e a formulação resultante apresentou bom aspecto físico, mas como discutido acima, a mesma não foi capaz de dissolver totalmente os curcuminóides (ver formulação PI 01, Figura 01) .
4 a etapa - adição à mistura de água com propileno glicol, curcuminóide e poloxamer, com um co-solvente;
Visando ampliar a quantidade de curcuminóides dissolvida, outro co-solvente (polietilenoglicol 400, PEG 400) foi adicionado à formulação (formulação PI02) .
Nessa nova formulação, a concentração de PEG 400 foi de
20% (v/v) , e o mesmo foi incorporado à custa da redução na quantidade de água da formulação (de 50% para 30% do volume total ) .
A Figura 2 mostra a melhora ocasionada pela adição desse constituinte. Dessa forma, a mistura ternária entre água: PEG 400: propilenoglicol (30: 20: 50, v/v/v) contendo poloxamer (15%) foi capaz de solubilizar a maior parte da massa de curcuminóides adicionada (2,5 mg/mL) . No entanto, a inspeção visual mostrou a presença de pequena quantidade de material precipitado (Figura 02, formulação PI02) .
- correção do sistema solvente da 4a etapa - Com o intuito de aumentar ainda mais a capacidade de solubilização dos curcuminóides na formulação realizou-se outra modificação na composição do sistema solvente, que passou a conter maior quantidade de PEG 400 (30%, v/v) . Esse aumento se deu à custa de nova redução na quantidade de água da preparação que passou a ser de 20% (v/v) (formulação PI03) . Essa nova alteração permitiu a solubilização total da massa de curcuminóides adicionada e a solução resultante continha então 2,5 mg/mL de curcuminóides. O sistema solvente preferencial, nessa formulação base está expresso a seguir :
_(1) propilenoglicol de 45% a 55%, mais preferencialmente, 50%;
-(2) polietilenoglicol 400, de 25% a 35%, e mais preferencialmente, 30%;
-(3) água purificada, de 15% a 25%, e mais preferencialmente 20 %.
O tensoativo polimérico poloxamer foi adicionado na concentração de 15% (p/v) , de acordo com o procedimento descrito acima.
A formulação PI03 representou o ponto de partida para o desenvolvimento de soluções com maior concentração de curcuminóides e para aquelas contendo curcuminóides e extrato de Bidens pilosa, conforme descrito abaixo.
Dessa forma, a formulação PI03, de base, preferencial, da presente invenção, constitui-se de:
Curcuminóides - 2,5 mg/mL e sistema solvente, preferencialmente constituído por:
Solvente - propilenoglicol 50% v/v
Co-solvente - polietilenoglicol 400 30% v/v
Tensoativo - poloxamer 15% p/v Veiculo - água purificada 20% v/v
Desenvolvimento de formulações contendo curcuminóides e Bidens pilosa
Inicialmente, observou-se que para o preparo de composições liquidas preparadas a partir de uma mistura sinérgica contendo a associação da formulação liquida de base com extrato de Curcuma Longa e extrato de Bidens pilosa, ao se adicionar concentrações maiores de curcuminóides (7,5 mg/mL) à formulação PI03, ocorriam a formação de grande quantidade de precipitado. Isso ocasionou a alteração da técnica do preparo da composição da presente invenção, como pontuado a seguir.
(1) Foi preparada uma mistura de PEG 400 com propilenoglicol e essa mistura foi aquecida com auxilio de chapa aquecedora mantida à 65°C;
(2) A massa de poloxamer da formulação foi dividida em partes iguais e uma das partes foi dispersa na mistura propilenoglicol e PEG 400, aquecida - FASE I ;
(3) Em seguida, procedeu-se à adição dos curcuminóides nessa mistura sob agitação mecânica (500 rpm) por 30 minutos, ainda sob aquecimento ( 65°C) ;
(4) A outra metade da massa de poloxamer foi adicionada na fase aquosa sob temperatura ambiente - FASE II .
- (5) Após sua completa dispersão, a solução da FASE II foi vertida sobre a mistura da FASE I, contendo propilenoglicol e PEG 400. - FASE III
(6) A mistura final foi então mantida sob agitação até que a temperatura da mesma chegasse a 25°C (aproximadamente 30 minutos) .
Pela aplicação deste novo procedimento, foi possível dissolver até 25 mg/mL de curcuminóides na preparação, a qual permaneceu fisicamente estável por tempo prolongado sob temperatura ambiente e foi denominada como formulação PI04. A incorporação do extrato de Bidens pilosa na formulação PI04 foi realizada pela substituição de toda a massa de água destilada e por 20% da massa de propilenoglicol pelo extrato vegetal glicerinado. - FASE IV.
Dessa forma, essa formulação, denominada CBd, contém:
(1) propilenoglicol, 30% (v/v);
(2) polietilenoglicol 400, 30% (v/v);
(3) extrato glicerinado de Bidens pilosa, 40% (v/v) . Além desses componentes líquidos, a formulação contém o agente mucoadesivo polimérico (poloxamer, 15%, p/v) , assim como bissulfito de sódio e butilhidroxitolueno em concentrações usuais. O método de preparo da formulação CBd foi exatamente igual ao descrito acima para a formulação PI04.
Os princípios ativos objetos da presente invenção foram associados com sucesso na formulação CBd. Não foi observado nenhum tipo de precipitação, turvação, formação de grumos, geleificação ou qualquer outro sinal de incompatibilidade entre os princípios ativos. Além disso, o componente bioadesivo foi incorporado com sucesso na presença dos constituintes do extrato de Bidens pilosa.
A estabilidade dessas formulações foi comprovada pelo emprego de um protocolo de estabilidade acelerada, mostrando que o decaimento na concentração de curcuminóides e polifenóis totais esteve dentro do limite legalmente estabelecido. A porcentagem remanescente de curcuminóides após 180 dias de ensaio foi de 92, 25% e a porcentagem de polifenóis totais foi de 96,20% em relação ao teor inicial. Preparo de uma formulação semi-sólida contendo curcuminóides e Bidens pilosa
O desenvolvimento de formulação semi-sólida foi realizado visando o preparo de uma base tipo gel creme, contendo na fase oleosa, em quantidades podendo variar de 10 a 14,75% p/p da formulação total dos componentes oleosos, e contendo os seguintes componentes nas quantidades preferenciais de:
-(1) vaselina liquida (5%, p/p);
-(2) ácido esteárico (3%, p/p);
-(3) álcool cetilico (0,4%, p/p);
-(4) álcool cetoestearilico (0,35%, p/p);
-(5) monoestearato de glicerila (3%, p/p);
-(6) miristato de isopropila (1%, p/p) .
Poloxamer (15%, p/p) e propilenoglicol (6%, p/p) foram adicionados a esta fase. Como conservantes foram utilizados o metilparabeno (0,1%, p/p), o propilparabeno (0,05%, p/p) e o butilhidroxitolueno (0,05%, p/p) . Todos os componentes da fase oleosa foram adicionados a um recipiente encamisado, e a temperatura da mistura foi aumentada para 75°C. Após a mistura atingir a temperatura requerida para a completa fusão dos materiais sólidos, os curcuminóides foram adicionados até uma concentração final de 25mg/mL. Após essa adição seguiu-se novo período de agitação mecânica (500 rpm) até que toda a massa de curcuminóides estivesse dissolvida na base oleosa.
Em um segundo recipiente encamisado, o extrato glicólico de Bidens pilosa (65%, p/p) foi aquecido até a temperatura de 75°C. Em seguida, o extrato aquoso foi vertido sobre a fase oleosa, sob constante agitação mecânica (500 rpm) . Após a mistura ser completada o aquecimento foi desligado e a agitação foi mantida até que o produto resultante atingisse a temperatura ambiente (cerca de 25°C) . Preparo de uma formulação sólida contendo curcuminóides e Bidens pilosa
As formulações sólidas, que podem ser pastilhas, comprimidos ou cápsulas, e mais preferencialmente na forma farmacêutica de pastilhas, foram desenvolvidas usando manitol como diluente e poloxamer como agente mucoadesivo. O líquido de granulação utilizado foi o próprio extrato de Bidens pilosa à razão de 35 a 45% p/v. A massa de cada componente da mistura está expressa a seguir: (1) Curcuminóides (25 a 200 mg por comprimido) ; Manitol (250 a 350 mg por comprimido); Poloxamer (100 a 140 mg por comprimido) ; Celulose microcristalina (200 a 400 mg) ; Metabissulfito de sódio (5 a 15 mg) e ácido cítrico (20 a 40 mg) .
Novecentos e trinta gramas das misturas acima descritas foram inseridos na câmara de processamento de um equipamento de leito fluidizado para realização das operações de mistura e granulação.
A etapa de mistura dos pós foi iniciada pela injeção de ar aquecido (45-65 °C) com vazão de 15 a 25 m3 por hora, pelo período de 10 a 15 minutos. Após a etapa de mistura, o líquido de granulação foi adicionado à mesma em três etapas. Entre cada uma das etapas de granulação foi realizada uma etapa de secagem (manutenção das condições de fluidização sem adição de líquido) . Todos os pós foram tamisados em tamis de aço inoxidável (malha de abertura de 250 micrômetros) antes da realização da operação de mistura.
Os grânulos foram comprimidos em máquina de compressão rotatória equipada com mesa contendo 8 jogos de punções (números 13 a 15, dependendo da formulação) . A dureza dos comprimidos foi acertada durante o processo.
Avaliações in vitro das formulações mucoadesivas contendo curcuminóides, Bd e sua associação.
Estudos realizados pelos inventores da presente invenção demonstraram que a associação da fração de Curcuma longa com teor de curcuminóides superior a 5% ao extrato glicerinado de Bd apresentou um importante efeito hiperproliferativo e anti-inflamatório superior aos efeitos destas substancias quando avaliadas separadamente em animais expostos ao 5-fluoracil. Foi observado efeito protetor contra a mucosite induzida pelo 5-fluoracil (5-FU) superior ao afeito protetor dos curcuminóides ou do Bd avaliados separadamente, tanto na forma profilática quanto terapêutica .
Os estudos foram conduzidos em camundongos Swiss, machos, com idade entre 10 e 14 semanas, mantidos em sala climatizada sob temperatura constante de 24 ± 2°C e condições ambientais de 12:12 horas no ciclo luz-escuro.
O regime alimentar foi o clássico, com ração comercial padrão e água fornecidos ad libitum.
A mucosite instestinal foi induzida via intraperitoneal
(i.p.) com injeção de 5-FU no 4o, 5o e 6o dias em dose única de 200 mg/kg/dia. O grau da doença foi avaliado pelo registro diário da pontuação da diarréia dos dias 0-8.
Cada animal foi examinado duas vezes ao dia. A gravidade da diarréia foi classificada utilizando a seguinte escala: 0, normal (fezes normais ou ausentes) ; 1, leve (fezes mole um pouco molhada) ; 2, moderada (fezes úmida e com moderada inflamação perianal e alteração na coloração da pelagem) e 3, nas fezes grave (aquosa com grave inflamação perianal e alteração na coloração da pelagem) .
A média dos valores de diarréia foi utilizada para avaliar a gravidade da mesma (n = 5 por grupo) .
Foram realizados 3 estudos independentes:
a) avaliação do efeito protetor dos curcuminóides;
b) avaliação do efeito protetor da Bd;
c) avaliação do efeito protetor da associação de curcuminóides e BD.
Os tratamentos nos 3 estudos foi realizado conforme o esquema apresentado na Figura 3.
A administração da substancia teste para cada grupo foi realizada por via oral (gavagem) durante 6 dias, sendo que doses de 5-FU foram administradas por via intraperitoneal no 4o ao 6o dia. O primeiro estudo trata da avaliação de uma formulação contendo apenas curcuminóides . Os grupos de tratamento (n=5/grupo) ficaram assim distribuídos:
Grupo I: 3,7 mg/kg curcuminóide + 5-FU;
Grupo II: 7,5 mg/kg curcuminóide + 5-FU;
Grupo III: 15 mg/kg curcuminóide + 5-FU;
Grupo IV: controle positivo (5-FU);
Grupo V: controle negativo (água) .
Os grupos I, II ou III, receberam tratamento profilático, com a formulação contendo curcuminóides e nos dias 4, 5 e 6 receberam também uma injeção de 5-FU, 4 horas depois do tratamento, sendo eutanasiados 24 horas após o tratamento. A porção duodenal de cada animal foi extraída e em seguida foram montados os blocos em parafina (58 - 60° C) para a obtenção de imagens microscópicas após a coloração através da técnica de Hematoxilina e Eosina. Além disto, o efeito proliferativo das mucosas foi avaliado por imunohistoquímica com o marcador ciclina D.
Neste estudo, os resultados demonstraram que os animais tratados com a formulação de curcuminóides, de forma dose- dependente, apresentaram uma menor debilidade com ou inexistência de diarréia, quando comparado ao grupo somente exposto ao 5-FU. Melhores resultados foram observados com a dose de 7,5 mg/kg.
O estudo histopatologico (Figura 4) mostrou que a exposição de animais ao protocolo com 5-FU induz ao aparecimento de mucosite com perda da integridade do revestimento epitelial, aparecimento de bolhas, encurtamento das criptas e encurtamento das vilosidades com a presença de grande infiltrado inflamatório (Figura 4A) .
Por outro lado, o tratamento com a formulação de curcuminóides, em especial a dose de 7,5 mg/kg preservou a integridade do epitélio, as criptas e as vilosidades, quando comparado ao controle normal, como visto nas figuras 4B e 4C. Observamos ainda uma tendência a aumento do tamanho das vilosidades, sugerindo um efeito estimulador de proliferação celular .
O segundo estudo foi realizado com uma formulação contendo apenas extrato glicerinado de Bd em 3 (três) diferentes doses (75, 100 e 125mg/kg) . Os grupos de tratamento (n=5/grupo) ficaram assim distribuídos:
Grupo I: 75 mg/kg Bd + 5-FU;
Grupo II: 100 mg/kg Bd + 5-FU;
Grupo III: 125 mg/kg Bd + 5-FU;
Grupo IV: controle positivo (5-FU) ;
Grupo V: controle negativo (água) .
Os resultados obtidos neste estudo demonstraram que o extrato glicerinado da Bd foi eficaz para proteger contra a indução da mucosite pelo 5-FU de forma dose- dependente. O estudo histopatologico visto naFigura 5 mostrou, conforme descrito anteriormente, que a exposição ao 5-FU induz um quadro grave de mucosite. Por outro lado, o tratamento com o extrato glicerinado de Bd, em especial a dose de 125mg/kg preservou a integridade do epitélio, as criptas e a vilosidades, quando comparado ao controle normal (Figura 5B e 5C) .
O terceiro estudo buscou avaliar uma formulação com a associação de curcuminóides (75mg/kg) e Bd (125mg/kg) (CBd) . Os grupos de tratamento (n=5/grupo) ficaram assim
distribuídos :
Grupo I: CBd + 5-FU;
Grupo II: CBd + 5-FU;
Grupo III: CBd + 5-FU;
Grupo IV: controle positivo (5-FU) ;
Grupo V: controle negativo (água) .
Neste estudo os resultados mostraram, além dos resultados acima relatados com o tratamento das substancias isoladamente, uma redução drástica do infiltrado inflamatório com um aumento da profileração celular, ou seja, a associação promoveu um efeito protetor superior ao efeito isolado dos curcuminóides e Bd contra a mucosite.
O corte hispatologico mostrou uma redução da inflamação local e com hiperproliferação celular demonstrado pelo aumento das criptas e das vilosidades nos animais tratados com a associação (Figura 6C) .
Destes animais foram coletadas amostras de sangue periférico por punção retro orbital. Os nives séricos de IL- 1β foram analisados por meio de kits de Elisa para dosagem de IL-Ιβ de acordo com as instruções do fabricante.
Os resultados demonstraram que a indução de mucosite nos animais expostos ao 5-FU produziu um aumento significativo de IL-Ιβ nos animais controle. Já os animais tratados com a formulação contendo a associação de curcuminóides (7,5 mg/kg) e Bd (125mg/kg) (CBd) , os níveis de IL-Ιβ foram semelhantes aos encontrados nos animais controle. Estudos realizados com formulação contendo somente a curcumina ou contendo somente a Bd, também reduziram os níveis de IL-Ιβ, porém de forma muito menos eficaz. O que sugeriu um efeito superior da associação dos ativos. Este resultado sugere ainda uma redução da apoptose nas células epiteliais induzido pelo medicamento. Ademais, nos animais tratados com a formulação CBd a gravidade da mucosite foi menor, quando comparado ao grupo controle.
A presente invenção tem como objetivo a utilização da formulação contendo a associação de curcuminóides oriundos da Curcuma longa com Bidens pilosa para o tratamento de doenças que acometem mucosas, a exemplo a mucosite do trato gastrointestinal induzida por radio e/ou quimioterapia, com base em formulação farmacêutica inovadora com propriedades mucoadesivas , de liberação controlada que proporcionará uma alternativa profilática e/ou terapêutica adicional aos tratamentos empregados na clínica médica. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
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Claims

REIVINDICAÇÕES
1. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ANTIINFLAMATÓRIAS , PROLIFERATIVAS , PROTETORAS E MUCOADESIVAS , SOLÚVEIS E ESTÁVEIS, caracterizadas pelo fato de conterem extrato de Curcuma longa e/ou suas frações, presente em formulação de base aquosa contendo outros solventes misciveis em água, em associação com extrato de Bidens pilosa, em proporções de 1:10 a 10:1. Tais associações são incorporadas em formas farmacêuticas liquidas, semi-sólidas ou sólidas, contendo bio (muco ) adesivo natural ou sintético e excipientes farmaceuticamente aceitáveis na faixa de concentração total de 1 a 75% em peso, com base no peso total dos agentes ativos de origem vegetal .
2. Composições armacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas pelo fato de que são empregados curcuminóides obtidos do rizoma da Cúrcuma longa L. , e preferencialmente, a Curcumina .
3. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por possuírem como excipientes farmacêuticos além do componente bio (muco) adesivo, diluentes, veículos, aglutinantes e desintegrantes .
4. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1 ou 3, caracterizadas por possuírem componente bio (muco) adesivo, copolímero em bloco, constituído por poli (oxietileno) , poli (oxiproprileno) , poloxamer 407, ou poloxamer 188.
5. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 4, caracterizadas por possuírem componente bio (muco ) adesivo preferencial, os poloxamers, à razão de 15% p/v, para as formulações sob a forma líquida, semi-sólida ou sólida.
6. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1 ou 3, caracterizadas por possuírem manitol como diluente, contendo a associação de curcuminóides e extrato de Bidens pilosa (Bd) .
7. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1 ou 3, caracterizadas por possuírem como veiculo, a água destilada, para as formulações sob a forma líquida ou semi- sólida .
8. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação
1, caracterizadas por possuírem antioxidantes e estabilizantes adicionais, bissulfito de sódio e metabissulfito de sódio e/ou butil hidroxitolueno , EDTA, para as formulações sob a forma líquida, semi-sólida ou sólida .
9. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por serem também empregados como solventes, água destilada, propilenoglicol e polietilenoglicol .
10. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por serem usadas como emulsi ficante ou estabilizante, em formulações semi-sólidas , o álcool cetílico.
11. Composição farmacêutica de base, a ser associada nas composições da reivindicação 1, caracterizada por conter extrato de Curcuma longa, a ser associada sinergicamente ao extrato de Bidens pilosa, ser líquida e constituir-se de: a) Curcuminóides na quantidade de 2,5 mg/mL a 25 mg/mL; b) Um sistema solvente contendo:
- propilenoglicol de 25% a 55% v/v, da solução total, como solvente;
polietilenoglicol 400, de 25% a 35% v/v da solução total, como co-solvente;
água purificada, de 15% a 40% v/v, da solução total, como veículo.
12. Composição armacêutica de base, de acordo com a reivindicação 11, caracterizada por apresentar sistema solvente constituído, preferencialmente, de propilenoglicol a 40% v/v, polietilenoglicol 400 a 30% v/v e água purificada a 30% v/v da solução total.
13. Composição farmacêutica de base, de acordo com a reivindicação 11 ou 12, caracterizada por ser empregado como tensoativo polimérico o poloxamer, na concentração de 15% (p/v), da solução total.
14. Composição farmacêutica de base, de acordo com a reivindicação 8 ou 11, caracterizada por serem empregados antioxidantes e estabilizantes adicionais na formulação líquida, escolhido dentre bissulfito de sódio e metabissulfito de sódio, EDTA e/ou butilhidroxitolueno.
15. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por serem composições líquidas contendo uma mistura sinérgica da associação de extrato de Curcuma Longa e extrato de Bidens pilosa, compreenderem de 2,5 a 25 mg/mL de curcuminóides na formulação líquida de base, constituída pelo extrato de cúrcuma longa e sistema solvente de base aquosa, extrato de Bidens pilosa, poloxamer, como agente mucoadesivo polimérico .
16. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 15, caracterizadas por presença da água como veículo na composição contendo extrato glicerinado de Bidens pilosa, podendo variar de 0% a 40% v/v da solução total.
17. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 15, caracterizadas por conter uma formulação líquida de base associada ao extrato de Bidens pilosa, e ser constituída por: a) Como componentes líquidos, curcuminóides dissolvidos em sistema solvente constituído por propilenoglicol à razão de 25 a 35% v/v, polietilenoglicol à razão de 25 a 35% v/v, e poloxamer adicionado na fase aquosa à razão de 15% p/v;
b) Extrato glicerinado de Bidens pilosa à razão de 35 a 45% v/v; e
c) Bissulfito de sódio e butilhidroxitolueno como antioxidantes e estabilizantes oxidativos nas razões totais de 0,01 a 1% v/v da formulação aquosa.
18. Composições armacêuticas, de acordo com a reivindicação 15 ou 17, caracterizadas por possuírem formulação liquida de base contendo preferencialmente 25 mg/mL de curcuminóides e sistema solvente composto por propilenoglicol a 30% v/v, polietilenoglicol 400 a 30% v/v e poloxamer a 15% p/v, associada ao extrato glicerinado de Bidens pilosa a 40% v/v, antioxidante à razão de 0,05%, sendo a água substituída pelo extrato vegetal glicerinado na formulação final.
19. Composições armacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por possuírem composição semi-sólida contendo mistura sinérgica de curcuminóides e extrato de Bidens pilosa, compreendendo:
A) de 2,5 a 30 mg/mL de curcuminóides, dissolvidos em uma fase oleosa, correspondendo de 10 a 14,75% p/p da formulação total, componentes oleosos sendo constituídos por:
- vaselina líquida;
- ácido esteárico;
- álcool cetílico;
- álcool cetoesteárico ;
- monoestearato de glicerila;
- Miristato de isopropila; e,
B) Sendo adicionados ainda; - poloxamer como agente mucoadesivo polimérico;
- propilenoglicol como solvente; e
OExtrato glicólico de Bidens pilosa.
20. Composições armacêuticas, de acordo com a reivindicação 19, caracterizadas por possuírem a fase oleosa das composições semi-sólidas contendo uma mistura sinérgica de curcuminóides e extrato de Bidens pilosa, compreendendo preferencialmente :
- vaselina líquida à razão de 5% p/p;
- ácido esteárico à razão de 3% p/p;
- álcool cetílico à razão de 0,4% p/p;
- álcool cetoesteárico à razão de 0,35% p/p;
- monoestearato de glicerila à razão de 3%; e
- Miristato de isopropila à razão de 1% p/p.
21. Composições armacêuticas, de acordo com a reivindicação 19 ou 20, caracterizadas por possuírem preferencialmente, o poloxamer estar na razão de 15% p/p, o propilenoglicol estar na razão de 6% p/p e os conservantes metilparabeno na razão de 0,1% p/p, propilparabeno na razão de 0,05% e o butilhidroxitolueno (BHT) na razão de 0,05%p/p.
22. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 19 ou 20, caracterizadas por possuírem, o extrato glicólico de Bidens pilosa, na razão de 65% p/p, da composição final.
23. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas por formulações sólidas constituídas de uma mistura em que a massa dos componentes para cada forma farmacêutica sólida ser de:
- Curcuminóides - de 25 a 200 mg;
- Manitol - de 250 a 350 mg;
- Poloxamer - de 100 a 140 mg;
- Celulose microcristalina - de 200 a 400mg; - Metabissulfito de sódio de 5 a 15 mg; e
- Ácido cítrico - de 20 a 40 mg.
24. Composições armacêuticas, de acordo com a reivindicação 23, caracterizadas por serem formulações sólidas que empregam o manitol como diluente e o poloxamer como agente mucoadesivo.
25. Composições armacêuticas, de acordo com a reivindicação 23, caracterizadas por serem formulações sólidas que empregam como líquido de granulação o próprio extrato de Bidens pilosa à razão de 35 a 45% p/v.
26. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 23, caracterizadas por serem formulações sólidas que se apresentam sob a forma de pastilhas, comprimidos ou cápsulas.
27. Composições farmacêuticas, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadas pela associação da fração de Curcuma longa apresentando efeito hiperproliferativo e anti- inflamatório, com teor de curcuminóides ao menos superior a 5% e extrato glicerinado de Bidens pilosa (Bd) .
28. PROCESSO DE OBTENÇÃO DE COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA DE BASE PARA O PREPARO DAS COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ANTIINFLAMATÓRIAS, PROLIFERATIVAS , PROTETORAS E
MUCOADESIVAS, SOLÚVEIS E ESTÁVEIS da reivindicação 1, caracterizado por, se constituir das seguintes etapas:
Ia etapa - Preparo de formulações contendo água destilada ou mistura de água destilada e propilenoglicol à razão de 1:1 v/v, em temperatura ambiente, sob agitação mecânica de, ao menos, 500 rpm;
2a etapa - Adição de curcuminóides sob agitação mecânica constante, obtendo-se uma solução com concentração de curcuminóides inferior a 2,5mg/mL; 3a etapa - Adição de Poloxamer à mistura de água com propilenoglicol e curcuminóides ; Ainda nessa etapa, para a incorporação do poloxamer, sua massa total foi dividida em duas porções iguais seguido da adição das mesmas com água e propilenoglicol; após a dispersão do Poloxamer as frações foram misturadas sob agitação mecânica; e
4 a etapa - adição de um co-solvente à mistura de água com propilenoglicol, curcuminóide e poloxamer, sendo o co- solvente o polietilenoglicol 400 - PEG 400, adicionado à mistura para promover a melhor dissolução dos curcuminóides.
29. PROCESSO DE OBTENÇÃO DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS ANTIINFLAMATÓRIAS, PROLIFERATIVAS , PROTETORAS E
MUCOADESIVAS, SOLÚVEIS E ESTÁVEIS, da reivindicação 1, caracterizada por ser formulação liquida contendo a associação sinérgica de extratos de curcuminóides e extrato glicerinado de Bidens pilosa, ser obtida através das seguintes etapas:
FASE I -
(1) Preparo de uma mistura de PEG 400 com propilenoglicol e aquecimento dessa mistura à 65°C;
(2) Dividir a massa de poloxamer a ser introduzida na formulação em partes iguais e dispersar cada parte na mistura propilenoglicol e PEG 400, aquecida;
FASE II -
(3) Adicionar 25mg/mL de curcuminóides nessa mistura sob agitação mecânica (500 rpm) por 30 minutos, ainda sob aquecimento ( 65°C) ;
(4) Adicionar a outra metade da massa de poloxamer na fase aquosa, sob temperatura ambiente;
FASE III -
(5) Após sua completa dispersão, verter a solução da FASE II sobre a mistura da FASE I, contendo propilenoglicol e PEG 400. (6) Manter a mistura final sob agitação até que a temperatura da mesma chegue a 25°C, obtendo-se a dissolução total de 25mg/mL dos curcuminóides da preparação, permanecendo estáveis por tempo prolongado sob temperatura ambiente;
FASE IV -
Incorporação do extrato de Bidens pilosa na formulação da FASE III, mediante a substituição de toda a massa de água destilada e por 20% da massa de propilenoglicol , pelo extrato vegetal glicerinado;
- Obtenção de uma formulação liquida contendo:
(1) propilenoglicol, 30% (v/v) ;
(2) polietilenoglicol 400, 30% (v/v) ;
(3) extrato glicerinado de Bidens pilosa, 40% (v/v) .
30. PROCESSO , conforme reivindicação 29, caracterizado por, a composição liquida obtida no processo conter o agente mucoadesivo polimérico Poloxamer a 15% p/v, e ainda conter o bissulfito de sódio e butilhidroxitolueno em concentrações usuais de 0,01 a 1%.
31. PROCESSO , conforme reivindicação 29, caracterizado por, a composição semi-sólida possuir uma fase oleosa em quantidades de 10 a 14,75% p/p da formulação total dos componentes oleosos, na qual o extrato de curcuminóides é dissolvido e que é preparada adicionando-se em um recipiente encamisado, preferencialmente nas quantidades:
FASE OLEOSA -
-(1) vaselina liquida (5%, p/p) ;
-(2) ácido esteárico (3%, p/p) ;
-(3) álcool cetilico (0,4%, p/p) ;
-(4) álcool cetoestearilico (0,35%, p/p) ;
-(5) monoestearato de glicerila (3%, p/p) ;
-(6) miristato de isopropila (1%, p/p) ; - Adicionar também, nesta fase, Poloxamer (15%, p/p) e propilenoglicol (6%, p/p);
- Adicionar como conservantes, metilparabeno (0,1%, p/p), propilparabeno (0,05%, p/p) e o butilhidroxitolueno (0,05%, p/p) ;
Aumentar a temperatura da mistura no recipiente encamisado até atingir 75° C;
- Aguardar a completa fusão dos materiais sólidos;
- Acrescentar os curcuminóides até uma concentração final de 25mg/mL;
- Agitar a mistura por meio de agitação mecânica (500 rpm) , até que toda a massa de curcuminóides tenha sido dissolvida na base oleosa;
Preparo da mistura sinérgica dos extratos vegetais
- Aquecer o extrato glicólico de Bidens pilosa em uma concentração de 65% p/p, em um segundo recipiente encamisado, a uma temperatura de 75° C;
Verter o extrato aquoso sobre a fase oleosa, sob constante agitação mecânica (500 rpm) ;
- Após completa mistura, desligar o aquecimento, mantendo a agitação, até que o produto resultante atinja a temperatura ambiente (cerca de 25° C) .
32. Processo, de acordo com a reivindicação 29, caracterizado por, a formulação sólida contendo a associação sinérgica de extratos de curcuminóides e extrato glicerinado de Bidens pilosa, ser obtida através das seguintes etapas: - (1) Adicionar para cada forma farmacêutica sólida, de 250 a 350mg de manitol, como diluente, à massa de curcuminóides com 25 a 200mg;
- (2) À mistura anterior adicionar de 100 a 140 mg de Poloxamer, como agente mucoadesivo; de 200 a 400 mg de Celulose microcristalina; de 5 a 15 mg de Metabissulfito de sódio e de 20 a 40 mg de ácido cítrico; - (3) Inserir a mistura dos componentes sólidos na câmara de processamento de um equipamento de leito fluidizado, para as operações de mistura e granulação;
(4) Injetar ar aquecido a 45 - 65° C, para dar inicio à mistura dos pós, com vazão de 15 a 25 m3 por hora, por um período de 10 a 15 minutos;
- (5) Adicionar o líquido de granulação em 3 (três) etapas;
(6) Realizar uma etapa de secagem entre cada uma das etapas de granulação, mantendo as condições de fluidização sem a adição de líquido;
- Tamisar todos os pós em tamis de aço inoxidável, com malha de abertura de 250 micrômetros, antes da realização da operação de mistura;
- Comprimir os grânulos obtidos em máquina de compressão.
33. Processo, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado por, ser utilizado como líquido de granulação próprio extrato de Bidens pilosa à razão de 35 a 45% p/v.
34. Processo, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado por, a formulação sólida obtida ser na forma de pastilha, comprimido ou cápsula.
35. Uso da associação em composições de extrato de Curcuma longa L., e mais particularmente da Curcumina, com extrato glicerinado de Bidens pilosa, caracterizado por ser na preparação de um medicamento para tratar mucosite, doenças cutâneas e quadros de estomatites de etiologia diversa.
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