WO2015133928A1 - Противовирусное средство - Google Patents

Противовирусное средство Download PDF

Info

Publication number
WO2015133928A1
WO2015133928A1 PCT/RU2014/000917 RU2014000917W WO2015133928A1 WO 2015133928 A1 WO2015133928 A1 WO 2015133928A1 RU 2014000917 W RU2014000917 W RU 2014000917W WO 2015133928 A1 WO2015133928 A1 WO 2015133928A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
virus
viruses
antiviral agent
antiviral
agent
Prior art date
Application number
PCT/RU2014/000917
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Римма Ильинична АШКИНАЗИ
Original Assignee
Римма Ильинична АШКИНАЗИ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Римма Ильинична АШКИНАЗИ filed Critical Римма Ильинична АШКИНАЗИ
Priority to US15/124,289 priority Critical patent/US10299480B2/en
Priority to EP14884461.6A priority patent/EP3115394B1/en
Publication of WO2015133928A1 publication Critical patent/WO2015133928A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N47/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid
    • A01N47/40—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides
    • A01N47/42—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic compounds containing a carbon atom not being member of a ring and having no bond to a carbon or hydrogen atom, e.g. derivatives of carbonic acid the carbon atom having a double or triple bond to nitrogen, e.g. cyanates, cyanamides containing —N=CX2 groups, e.g. isothiourea
    • A01N47/44—Guanidine; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/74—Synthetic polymeric materials
    • A61K31/785—Polymers containing nitrogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C281/00—Derivatives of carbonic acid containing functional groups covered by groups C07C269/00 - C07C279/00 in which at least one nitrogen atom of these functional groups is further bound to another nitrogen atom not being part of a nitro or nitroso group
    • C07C281/16—Compounds containing any of the groups, e.g. aminoguanidine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G73/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a linkage containing nitrogen with or without oxygen or carbon in the main chain of the macromolecule, not provided for in groups C08G12/00 - C08G71/00
    • C08G73/02—Polyamines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G2310/00—Agricultural use or equipment
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Definitions

  • the invention relates to antiviral agents, namely to synthetic biologically active derivatives, and can be used in the pharmaceutical industry, medicine, crop production and in biotechnology.
  • the claimed substance has a pronounced antiviral activity directed against various simple and complex viruses containing RNA or DHK, and is able to inactivate these viruses in the free extracellular position.
  • Viral infections are one of the most serious problems of modern medicine. Most viral infections either do not have the means to treat them at all, or are extremely difficult to treat. This is due to the lack of effectiveness of existing drugs and the variability of pathogens, leading to the emergence of resistant forms. Similar problems are relevant for veterinary medicine and agriculture. Yet fewer drugs exist that can act on viruses outside the cells, due to the complete absence of metabolism in viruses, which is the main target of antimicrobials.
  • Viruses consisting of organic molecules are not living organisms, do not have a cellular structure, are deprived of metabolism, which makes them maximally resistant to various influences, including chemicals and drugs.
  • the number of viruses that cause diseases of humans, animals and plants is constantly increasing, mainly due to the improvement of methods for their detection, as well as the spread in connection with human economic activity (the development of new territories, mainly in Africa) and the formation of new variants of already known viruses (variability influenza viruses, etc.).
  • the number of publicly available antiseptics for industry, medicine, veterinary medicine and agriculture is clearly insufficient.
  • Most of the existing drugs have a number of pronounced disadvantages, and, above all, toxicity, unpleasant odor, low efficiency.
  • the formation and spread of resistant viral clones is observed. All this increases the relevance of creating new drugs that can act on viral particles.
  • CG is effective against the herpes virus with a 10-minute action, reducing the number of its particles by 5-6 orders of magnitude and under the same conditions practically did not act on simple viruses lacking an additional membrane, adenoviruses and polyviruses. There is no reliable data on the activity of CG against bacterial viruses - bacteriophages. Despite the obvious drawbacks, CG is by far the most common means of influencing viral particles in order to inactivate them. State of the art
  • Known antiviral agent based on melanin containing water-soluble melanin in a concentration of from 0.002 mg / ml to 25 mg / ml, obtained by extraction from the basidiomycete Inonotus obliquus and having antiviral activity against influenza viruses, herpes simplex type 2, immunodeficiency (HIV-1) and smallpox vaccines, RU 2480227, publ. 04/27/2013.
  • microbicidal antiviral agent for inhibiting herpes simplex and cytomegalovirus viruses, RU 2012130924 A, publ. 01/27/2014.
  • Y is selected from the group consisting of aryl, heteroaryl, substituted aryl and substituted heteroaryl;
  • NO is selected from the group consisting of a six-membered arylene ring, a six-membered heteroarylene ring containing one, two or three heteroatoms from ⁇ , O or S, WO 2008008912 A1, publ. 01/17/2008.
  • This tool is active, in practice, only against viruses of the Flaviviridae family, causing cirrhosis and liver cancer in humans and animals.
  • an antiviral agent as well as the claimed one containing hydrazine groups and carbonyl fragments: an antiviral agent based on 4- ⁇ 3,5-dioxo-4-
  • An object of the present invention is to provide a broad-spectrum antiviral agent having activity against viruses in both the intracellular and extracellular positions.
  • an antiviral agent based on poly- ⁇ -hydrazino (imino) methyl-1, 6-hexanediamine-poly- ⁇ 1-amino (imino) methyl-1, 6-hexanediamine of the general formula:
  • HX is an acid
  • n 3 - 20
  • the implementation of the distinguishing features of the invention provides an extension of the spectrum of action of the antiviral agent, as well as its activity against viruses in both the intracellular and extracellular positions.
  • reaction mixture was heated and the mass temperature was adjusted to a constant reaction temperature of 190 ° C for 1 h with the gradual distillation of water and ammonia. Maintained at the reaction temperature for 30 minutes, purging the system with nitrogen. After that, the system was cooled to 160 ° C and the hot syrupy mass was poured onto a metal pan, cooled and 169.9 products were obtained in the form of a solid, practically colorless transparent glassy substance.
  • the resulting polymer is non-stereoregular, that is, the relative position of the alternating units of hydrazine and 1, 6-diaminohexane in the polymer chain can be any. But the average quantitative ratio of these units, given by the proportion of the starting reagents, in each example has a constant value.
  • the substance of the antiviral agent has a nanostructure.
  • the nanostructure was determined by dynamic light scattering using a Malvern Instruments Nanosizer Nano-ZS particle size analyzer and using a FEI Tecnai G212Cryo l2 transmission electron microscope with the ability to cool samples by the boiling point of liquid nitrogen.
  • the solution contains globules 10-15 nm in size. Electron microscopic examination also revealed globules of 10-15 nm.
  • the antiviral agent was used as a 1.0% aqueous solution.
  • the exposure time of the virus with the agent was 0.5-2.0 minutes at a temperature of 20 ⁇ 2 ° C.
  • Human viruses were grown in cell culture. Antiviral activity was determined by inactivation on the surface of artificial skin. In the experiments, a neutralizer (cattle serum) was used. Virus reproduction in cells was evaluated by the virus-induced cytopathic effect by the degree of inhibition of the infectious titer of the virus, measured in lg TCID 50 (50% tissue cytopathic infectious dose). To work with the polio virus, a transplantable culture of Vero green monkey kidney cells was used.
  • the antiviral agent has virucidal activity against simple RNA containing the virus.
  • Adenoviruses of various serotypes cause infectious diseases of humans and animals (cattle, birds, sheep, dogs). Infectious diseases of animals caused by adenoviruses are characterized by damage to the mucous membranes of the respiratory system, intestines, eyes, and lymphoid tissue.
  • a transplantable human cell line HeLa was used. Virus reproduction in cells was evaluated by virus-induced cytopathic effect by the degree of inhibition of the infectious titer of the virus, measured in lg
  • the antiviral agent was used as a 0.5% aqueous solution.
  • the exposure time of the virus with the agent was 0.5-2.0 minutes at a temperature of 20 ⁇ 2 ° C.
  • Table 3 The results of the study of the virucidal activity of an antiviral agent in the processing of test objects infected with adenoviruses with a 0.5% solution are presented in Table 3.
  • test agent has virucidal activity against simple DNA containing human and animal adenoviruses.
  • Herpes viruses of various serotypes cause infectious diseases of humans and animals. Infections of these viruses are manifested by lesions of the mucous membranes, skin, malignant transformation of cells.
  • Vero green monkey kidney cell culture was used to work with the herpes virus.
  • Virus reproduction in cells was evaluated by the virus-induced cytopathic effect by the degree of inhibition of the infectious titer of the virus, measured in lg TCID 50 .
  • the antiviral agent was used as a 1.0% aqueous solution.
  • the exposure time of the virus with the tool was 0.5-4.0 minutes at a temperature of 20 ⁇ 2 ° C.
  • test agent has virucidal activity against complex DNA viruses.
  • the antiviral agent was used as a 0.5% aqueous solution.
  • the exposure time of the virus with the tool was 0.5-4.0 minutes at a temperature of 20 ⁇ 2 ° C.
  • Hepatitis C viruses were grown in cell culture. Antiviral activity was determined by inactivation on the surface of artificial skin. In the experiments, a neutralizer (cattle serum) was used. Virus reproduction in cells was evaluated by the virus-induced cytopathic effect by the degree of inhibition of the infectious titer of the virus, measured in lg TCID 50 . A pig embryo kidney cell culture (SPEV) was used to work with hepatitis C virus.
  • SPEV pig embryo kidney cell culture
  • test agent has virucidal activity against complex RNA containing hepatitis C virus.
  • Human immunodeficiency viruses of various serotypes cause infectious diseases of humans and animals (monkeys).
  • MT-4 lymphoblastoid cells were used. Virus reproduction in cells was evaluated by the virus-induced cytopathic effect by the degree of inhibition of the infectious titer of the virus, measured in 1 TCID 50 .
  • the antiviral agent was used as a 1.0% aqueous solution.
  • the exposure time of the virus with the tool was 0.5-4.0 minutes at a temperature of 20 ⁇ 2 ° C.
  • test agent has virucidal activity against complex RNA containing human and animal immunodeficiency virus.
  • the antiviral agent was used as a 0.5% aqueous solution.
  • the exposure time of the virus with the tool was 0.5-4.0 minutes at a temperature of 20 ⁇ 2 ° C.
  • Viruses were grown on cell culture. Antiviral activity was determined by inactivation on the surface of artificial skin. In the experiments, a neutralizer (cattle serum) was used. Virus reproduction in cells was evaluated by the virus-induced cytopathic effect by the degree of inhibition of the infectious titer of the virus, measured in lg TCID 50 . Dog kidney cells (MDCK) were used to work with influenza A virus.
  • test agent has virucidal activity against complex RNA containing the influenza virus that causes diseases in humans and animals.
  • the used mixture of bacteriophage viruses is completely inactivated.
  • PVX potato X virus
  • Potato viruses were placed in a 1.0% antiviral solution for 60 seconds, precipitated on millipore filters, washed with isotonic sodium chloride solution, after which the viruses were washed off, the cells were prepared and infected in vitro using microclonal cuttings.
  • test results of the claimed funds showed that it has a virucidal effect on various, including unrelated simple and complex, DNA and RNA containing viruses of humans, animals, plants and bacteria.
  • test results of the claimed funds showed that it has a virucidal effect on various, including unrelated, simple and complex, DNA and RNA containing viruses of humans, animals, plants and bacteria

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к противовирусным средствам, а именно, к синтетическим биологически активным производным, и может быть использовано в фармацевтической промышленности, медицине, растениеводстве и в биотехнологиях. Противовирусное средство на основе поли-N1-гидразино(имино)метил-1,6-гександиамин-поли-N1-амино(имино)метил-1,6-гександиамина общей формулы (I) где: НХ - кислота, n=3-20, m=4-20, обладающее активностью в отношении просто- и сложноустроенных, содержащих РНК или DHK вирусов человека, животных, растений, бактерий и грибов. Создается противовирусное средство широкого спектра действия, обладающее активностью в отношении вирусов как во внутриклеточном, так и во внеклеточном положении.

Description

Противовирусное средство Область техники
Изобретение относится к противовирусным средствам, а именно, к синтетическим биологически активным производным, и может быть использовано в фармацевтической промышленности, медицине, растениеводстве и в биотехнологиях.
Заявленное вещество имеет выраженную противовирусную активность, направленную против различных просто- и сложноустроенных вирусов, содержащих РНК или DHK, и способно инактивировать эти вирусы в свободном внеклеточном положении.
Вирусные инфекции представляют одну из наиболее серьезных проблем современной медицины. Большинство вирусных инфекций или вообще не имеют средств для их лечения, или крайне плохо поддаются лечению. Это связано с недостаточной эффективностью существующих препаратов и изменчивостью возбудителей, приводящей к появлению устойчивых форм. Схожие проблемы актуальны для ветеринарии и сельского хозяйства. Еще меньше существует препаратов, способных действовать на вирусы вне клеток, что объясняется полным отсутствием у вирусов метаболизма, который является основной мишенью противомикробных препаратов.
Вирусы, состоящие из органических молекул, не являются живыми организмами, не имеют клеточного строения, лишены метаболизма, что делает их максимально устойчивыми к различным воздействиям, в том числе химических веществ и лекарственных препаратов.
Число вирусов, вызывающих болезни человека, животных и растений непрерывно увеличивается, в основном, за счет совершенствования методов их выявления, а также распространения в связи с экономической деятельностью человека (освоение новых территорий, преимущественно в Африке) и формирования новых вариантов уже известных вирусов (изменчивость вирусов гриппа и др.). Число общедоступных антисептиков для промышленности, медицины, ветеринарии и сельского хозяйства является явно недостаточным. Большая часть существующих препаратов имеет ряд выраженных недостатков, и, прежде всего, токсичность, неприятный запах, малую эффективность. Наблюдается формирование и распространение устойчивых вирусных клонов. Все это повышает актуальность создания новых препаратов, способных действовать на вирусные частицы.
Известно, что инактивировать вирусы могут некоторые дезинфицирующие вещества, которые обладают достаточно высокой токсичностью, в связи с чем, их нельзя использовать непосредственно у человека. Известно средство, которое обладает антивирусной активностью при сравнительно низкой токсичности - хлоргексидина биглюконат (ХГ). Имеются неоднозначные данные разных авторов о действии ХГ на разные вирусы как по их спектру, так и времени воздействия. Так указывают, что ХГ активен только против сложноустроенных вирусов, имеющих дополнительную липидно-белковую оболочку, Denton G.W. 1991. Chlorhexidine, р.274-289. In Block S.S..(ed), Disinfection, sterilization and preservation, 4th ed. Lea and Fibiger, Philadelphia, PA. J. clin. Path., 1972, 25, 76-78.
ХГ эффективен против вируса герпеса при 10 минутном действии снижая количество его частиц на 5-6 порядков и в этих же условиях практически не действовал на простоустроенные вирусы, лишенные дополнительной оболочки, аденовирусы и поливирусы. Нет надежных данных об активности ХГ против вирусов бактерий - бактериофагов. Несмотря на очевидные недостатки ХГ на сегодня является самым распространенным средством воздействия на вирусные частицы с целью их инактивации. Предшествующий уровень техники
Известно противовирусное средство на основе меланина, содержащее водорастворимый меланин в концентрации от 0,002 мг/мл до 25 мг/мл, полученный экстракцией из базидиального гриба Inonotus obliquus и обладающий противовирусной активностью в отношении вирусов гриппа, простого герпеса 2-го типа, иммунодефицита (ВИЧ- 1) и осповакцины, RU 2480227, опубл. 27.04.2013.
Недостатком данного средства является узкий спектр действия.
Известно противовирусное средство на основе производного фуллерена С6о КВ-517, имеющего структурную формулу
Figure imgf000005_0001
в качестве микробицидного противовирусного средства для ингибирования вирусов простого герпеса и цитомегаловируса, RU 2012130924 А, опубл. 27.01.2014.
Эффективность этого средства весьма мала, предположительно, оно может быть использовано в профилактических целях.
Известно антивирусное средство с общей структурной формулой:
Figure imgf000005_0002
где Y выбран из группы, состоящей из арила, гетероарила, замещенного арила и замещенного гетероарила;
НЕТ выбран из группы, состоящей из шестичленного ариленового цикла, шестичленного гетероариленового цикла, содержащего один, два или три гетероатома из Ν, О или S, WO 2008008912 А1 , опубл. 17.01.2008.
Данное средство активно, практически, только в отношении вирусов семейства Flaviviridae, вызывающих цирроз и рак печени у человека и животных.
Наиболее близким к заявленному средству с точки зрения структуры является противовирусное средство, так же, как и заявленное, содержащее гидразиновые группы и карбонильные фрагменты: противовирусное средство на основе 4-{3,5-Диоксо-4-
2 6 8 10
азатетрацикло[5.3.2.0АО.0°',и] додец- 1 1 -ен-4-ил } -4-азатетрацикло [5.3.2.0 ' .0 ' ] додец- 1 1-ен-3,5-дион формулы:
Figure imgf000006_0001
обладающее активностью в отношении ортопоксвирусов, патогенных для человека и животных, RU 2423359 С 1 , опубл. 10.07.201 1. Его недостатком, как и приведенных выше аналогов, является узкий спектр действия, невысокая эффективность, особенно, в отношении вирусов в свободном внеклеточном положении.
Раскрытие изобретения
Задачей настоящего изобретения является создание противовирусного средства широкого спектра действия, обладающего активностью в отношении вирусов как во внутриклеточном, так и во внеклеточном положении.
Согласно изобретению задача решается противовирусным средством на основе поли- -гидразино(имино)метил-1 ,6- гександиамин-поли-Ν 1 -амино(имино)метил- 1 ,6-гександиамина общей формулы:
Figure imgf000007_0001
где: НХ - кислота, п = 3 - 20, m = 4 - 20, обладающее активностью в отношении просто- и сложноустроенных, содержащих РНК или DHK вирусов человека, животных, растений, бактерий и грибов.
При nxm < 12 активность препарата недостаточна, при nxm > 400 вещество становится малорастворимым в воде и биологических средах и потому малоэффективным. Заявителем не выявлены какие-либо технические решения, идентичные заявленному, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения условию патентоспособности «Новизна» («N»).
Реализация отличительных признаков изобретения обеспечивает расширение спектра действия противовирусного средства, а также его активность в отношении вирусов как во внутриклеточном, так и во внеклеточном положении.
Заявителем не обнаружены какие-либо источники информации, содержащие сведения о влиянии заявленных отличительных признаков на достигаемый вследствие их реализации технический результат, что, по мнению заявителя, свидетельствует о соответствии данного технического решения критерию «Изобретательский уровень» («IS»).
Краткое описание чертежей
В дальнейшем изобретение поясняется подробным описанием примеров его осуществления без ссылок на чертежи.
Лучший вариант осуществления изобретения
Примеры получения противовирусного средства.
Пример 1 : п = 5, m = 6.
В трехгорлую колбу вместимостью 1 л, снабженную трубкой для подачи инертного газа, термометром и газоотводной трубкой, загружали 95,5 г (1 моль) иминомочевины гидрохлорида (46,8 масс.%), 103,4 г (0.89 моль) 1 ,6-диаминогексана (ДГ) (50,7 масс.%) и 5,0 г (0.1 моль) гидразингидрата (2,5 масс.%), после чего колбу продували азотом. Содержимое колбы перемешивали и помещали в воздушный термостат, а газоотводную трубку подсоединяли к приемнику для улавливания аммиака. Затем при продувании азотом со скоростью 30-40 мл/мин нагревали реакционную смесь и в течение 1ч доводили температуру массы до постоянной температуры реакции 190°С с постепенной отгонкой воды и аммиака. Выдерживали при температуре реакции 30 мин, продувая систему азотом. После этого охлаждали систему до 160°С и горячую сиропообразную массу выливали на металлический противень, охлаждали и получили 169,9 продукта в виде твердого, практически, бесцветного прозрачного стекловидного вещества.
Пример 2. Противовирусное средство получали аналогично примеру 1, при этом п = 10, m = 10, ДГ = 0.50 моль, ГГ = 0.1 моль. Температуры и время выдержки приведены в таблице 1.
Пример 3. Получение вещества осуществляли аналогично примеру 1 , п = 28, m = 20, ДГ = 1.8 моль, ГГ = 0.1 моль, температура реакции и время выдержки приведены в таблице 1.
Образующийся полимер является нестереорегулярным, то есть, взаимное расположение чередующихся звеньев гидразина и 1 ,6-диаминогексана в полимерной цепочке может быть любым. Но усредненное количественное соотношение этих звеньев, задаваемое пропорцией исходных реагентов, в каждом примере имеет постоянное значение.
Субстанция противовирусного средства имеет наноструктуру. Наноструктура определена методами динамического рассеяния света с использованием анализатора размера частиц Malvern Instruments Nanosizer Nano-ZS и с использованием просвечивающего электронного микроскопа FEI Tecnai G212Cryo l2 с возможностью охлаждения образцов по температуре кипения жидкого азота.
Методом динамического рассеяния света установлено, что при концентрации препарата 0,05 мг/мл в растворе содержатся глобулы размером 10- 15 нм. При электронно-микроскопическом исследовании также были выявлены глобулы 10-15 нм.
Ниже приведены примеры использования заявленного противовирусного средства.
Пример 1.
Изучение действия противовирусного средства на простоустроенный РНК содержащий полиовирус вирус, вызывающий полиомиелит, относящийся к семейству Picornaviridae, вызывающий заболевания людей.
Противовирусное средство использовали в виде 1 ,0% водного раствора. Время выдержки вируса со средством составило 0,5-2.0 минут при температуре 20±2°С.
Вирусы человека выращивали на культуре клеток. Противовирусную активность определяли методом инактивации на поверхности искусственной кожи. В экспериментах использован нейтрализатор (сыворотка крупного рогатого скота). Репродукцию вируса в клетках оценивали по вирусиндуцированному цитопатическому эффекту по степени ингибирования инфекционного титра вируса, измеряемого в lg ТЦИД50 (50%-тканевая цитопатическая инфекционная доза). Для работы с вирусом полиомиелита использовали перевиваемую культуру клеток почки зеленых мартышек Vero.
Результаты исследования вирулицидной активности средства при обработке тест-объектов, инфицированных вирусом полиомиелита 1,0% раствором противовирусного средства, представлены в Таблице 2.
Таким образом, противовирусное средство обладает вирулицидной активностью по отношению к простоустроенному РНК содержащему вирусу.
Пример 2.
Изучение действия противовирусного средства на простоустроенных ДНК содержащих аденовирусах. Аденовирусы различных серотипов вызывают инфекционные болезни человека и животных (крупного рогатого скота, птиц, овец, собак). Инфекционные болезни животных, вызываемые аденовирусами, характеризуются поражением слизистых оболочек органов дыхания, кишечника, глаз, а также лимфоидной ткани.
Для работы с аденовирусом использовали перевиваемую линию клеток человека HeLa. Репродукцию вирусов в клетках оценивали по вирусиндуцированному цитопатическому эффекту по степени ингибирования инфекционного титра вируса, измеряемого в lg
Figure imgf000011_0001
Противовирусное средство использовали в виде 0,5% водного раствора. Время выдержки вируса со средством составило 0,5-2.0 минут при температуре 20±2°С. Результаты исследования вирулицидной активности противовирусного средства при обработке тест-объектов, инфицированных аденовирусами 0,5% раствором, представлены в Таблице 3.
Таким образом, испытуемое средство обладает вирулицидной активностью по отношению к простоустроенным ДНК содержащим аденовирусам человека и животных.
Пример 3.
Изучение действия противовирусного средства на сложноустроенных ДНК содержащих вирусах простого герпеса. Вирусы герпеса различных серотипов вызывают инфекционные болезни человека и животных. Инфекции этих вирусов проявляются поражениями слизистых, кожи, злокачественной трансформацией клеток.
Для работы с вирусом герпеса использовали перевиваемую культуру клеток почки зеленых мартышек Vero. Репродукцию вируса в клетках оценивали по вирусиндуцированному цитопатическому эффекту по степени ингибирования инфекционного титра вируса, измеряемого в lg ТЦИД50.
Противовирусное средство использовали в виде 1,0% водного раствора. Время выдержки вируса со средством составило 0,5-4.0 минут при температуре 20±2°С.
Результаты исследования вирулицидной активности средства при обработке тест-объектов, инфицированных вирусом простого герпеса 1 ,0% раствором, представлены в Таблице 4. Таким образом, испытуемое средство обладает вирулицидной активностью по отношению к сложноустроенным ДНК содержащим вирусам.
Пример 4.
Изучение действия противовирусного средства на сложноу строенный РНК содержащий вирус гепатита С, относящийся к семейству Flaviviridae, вызывающий заболевания людей, а также приматов и собак.
Противовирусное средство использовали в виде 0,5 % водного раствора. Время выдержки вируса со средством составило 0,5-4.0 минут при температуре 20±2°С.
Вирусы гепатита С выращивали на культуре клеток. Противовирусную активность определяли методом инактивации на поверхности искусственной кожи. В экспериментах использован нейтрализатор (сыворотка крупного рогатого скота). Репродукцию вируса в клетках оценивали по вирусиндуцированному цитопатическому эффекту по степени ингибирования инфекционного титра вируса, измеряемого в lg ТЦИД50. Для работы с вирусом гепатита С использовали культуру клеток почки эмбриона свиньи (СПЭВ).
Результаты исследования вирулицидной активности средства при обработке тест-объектов, инфицированных вирусом гепатита С 0,5% раствором, представлены в Таблице 5.
Таким образом, испытуемое средство обладает вирулицидной активностью по отношению к сложноустроенному РНК содержащему вирусу гепатита С. Пример 5.
Изучение действия противовирусного средства на сложноустроенные РНК содержащие вирусы иммунодефицита человека. Вирусы иммунодефицита человека различных серотипов вызывают инфекционные болезни человека и животных (обезьяны).
Для работы с вирусом иммунодефицита использовали лимфобластоидные клетки человека МТ-4. Репродукцию вируса в клетках оценивали по вирусиндуцированному цитопатическому эффекту по степени ингибирования инфекционного титра вируса, измеряемого в 1 ТЦИД50.
Противовирусное средство использовали в виде 1 ,0% водного раствора. Время выдержки вируса со средством составило 0,5-4.0 минут при температуре 20±2°С.
Результаты исследования вирулицидной активности средства при обработке тест-объектов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека 1,0% раствором, представлены в Таблице 6.
Таким образом, испытуемое средство обладает вирулицидной активностью по отношению к сложноустроенному РНК содержащему вирусу иммунодефицита человека и животных.
Пример 6.
Изучение действия противовирусного средства на сложноустроенный РНК содержащий вирус гриппа А, вызывающий заболевания людей и животных (птиц, свиней, лошадей).
Противовирусное средство использовали в виде 0,5 % водного раствора. Время выдержки вируса со средством составило 0,5-4.0 минут при температуре 20±2°С. Вирусы выращивали на культуре клеток. Противовирусную активность определяли методом инактивации на поверхности искусственной кожи. В экспериментах использован нейтрализатор (сыворотка крупного рогатого скота). Репродукцию вируса в клетках оценивали по вирусиндуцированному цитопатическому эффекту по степени ингибирования инфекционного титра вируса, измеряемого в lg ТЦИД50. Для работы с вирусом гриппа А использовали клетки почки собаки (MDCK).
Результаты исследования вирулицидной активности средства при обработке тест-объектов, инфицированных вирусом гриппа А 0,5% раствором, представлены в Таблице 7.
Таким образом, испытуемое средство обладает вирулицидной активностью по отношению к сложноустроенному РНК содержащему вирусу гриппа, вызывающему заболевания людей и животных.
Пример 7.
Действие противовирусного средства на вирусы бактерий (бактериофаги)
Для исследования использовали коммерческий комплекс бактериальных вирусов, используемый для лечения кишечных инфекций, вызванных бактериями родов Shigella, Escherichia, Salmonella Proteus, Pseudomonas Staphylococcus .
Тестирование проводили на штамме Shigella flexneri' 2a VT- 13-678. . aeruginosa VT-900, P.vulgaris VT-12-445 S. aureus VT- 209. Бактериофаги помещали в 0,5% раствор противовирусного средства на 60 секунд, осаждали на миллипоровых фильтрах, промывали изотоническим раствором хлорида натрия, после чего смывали бактериофаги и определяли их титр методом агаровых слоев.
Таким образом, за одну минуту происходит полная инактивация использованной смеси вирусов-бактериофагов.
Результаты обработки вирусов бактерий противовирусным средством представлены в Таблице 8.
Пример 8.
Подавляющее большинство вирусов растений является РНК содержащими, простоустроенными вирусами. Таковым является и использованный в исследовании Х-вирус картофеля (Potato virus X, PVX),
Вирусы картофеля помещали в 1.0 % раствор противовирусного средства на 60 секунд, осаждали на миллипоровых фильтрах, промывали изотоническим раствором хлорида натрия, после чего смывали вирусы, готовили и заражали клетки в условиях микроклонального черенкования in vitro.
При первом черенковании проводили анализ на пораженность вирусами методом иммуноферментного анализа с фиксированием результатов анализов фотометром. Результаты исследования показали, что обработка Х-вируса картофеля противовирусным препаратом полностью подавляет вирусную инфекцию.
Результаты испытаний заявленного средства показали, что оно обладает вирулицидным действием на различные, в том числе, неродственные просто- и сложноустроенные, ДНК и РНК содержащие вирусы человека, животных, растений и бактерий.
Результаты пораженности вирусом представлены в Таблице 9.
Результаты исследования показали, что обработка Х-вируса картофеля противовирусным препаратом полностью подавляет вирусную инфекцию.
Результаты испытаний заявленного средства показали, что оно обладает вирулицидным действием на различные, в том числе, неродственные просто- и сложноустроенные, ДНК и РНК содержащие вирусы человека, животных, растений и бактерий
Промышленная применимость
Для реализации изобретения используются известные материалы и оборудование, что обусловливает, по мнению заявителя, соответствие изобретения критерию «Промышленная применимость» («IA»).
Таблица 1.
Показатели получения вещества по Примеру 3.
Figure imgf000018_0001
Таблица 2.
Исследование вирулицидной активности средства при обработке тест- объектов, инфицированных вирусом полиомиелита 1 ,0% раствором противовирусного средства.
Время Степень Способ
Тест обеззараживания, ингибирования, обработки мин lg тцид50
0,5 3,2
1 ,0 4,0
Искусственная кожа 2,0 4,5 Протирание
2,5 х 2 раза 4,5 Таблица 3.
Исследование вирулицидной активности противовирусного средства при обработке тест-объектов, инфицированных аденовирусами 0,5%
раствором.
Figure imgf000019_0001
Таблица 4.
Исследование вирулицидной активности средства при обработке тест- объектов, инфицированных вирусом простого герпеса 1,0% раствором.
Время Степень Способ
Тест обеззараживания, ингибирования, обработки мин lg тцид50
Смешивание
Суспензионный тест вирус:
1 ,0 1 ,0
средство (1 :9)
0,5 2,0
1 ,0 2,5
Искусственная кожа 2,0 3,0 Протирание
1,5 х 2 раза 4,0 Таблица 5.
Исследование вирулицидной активности средства при обработке тест- объектов, инфицированных вирусом гепатита С 0,5% раствором.
Figure imgf000020_0001
Таблица 6.
Исследование вирулицидной активности средства при обработке тест- объектов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека 1 ,0% раствором.
Время Степень Способ
Тест обеззараживания, ингибирования, обработки мин lg ТЦИД50
Смешивание
Суспензионный тест 1 ,0 3,5 вирус:
средство (1 :9)
0,5 4,0
1 ,0 4,0
Искусственная кожа 2,0 4,5 Протирание
1 ,5 х 2 раза 5,0 Таблица 7.
Исследование вирулицидной активности средства при обработке тест- объектов, инфицированных вирусом гриппа А 0,5% раствором.
Figure imgf000021_0001
Таблица 8.
Обработка вирусов бактерий противовирусным средством.
Тест-микроб Титр вируса до Титр вируса Титр вируса обработки после 30 секунд после 60 секунд воздействия воздействия
Shigella flexneri 2а 105/мл 10 0
P. aeruginosa VT-900 105/мл 10 0
P.vulgaris VT-12-445 104/мл 0.5 0
S. aureus VT-209 106мл 40 0 Таблица 9.
Пораженность вирусом.
Поглощение при 490 нм
Испытуемое растение
7 дней 14 дней
Положительный
0.09 0.850
контроль
Отрицательный
0.07 0.09
контроль
Противовирусное
0.07 0.08
средство

Claims

Формула изобретения
Противовирусное средство на основе поли-М- гидразино(имино)метил- 1 ,6-гександиамин-поли-1ЧГ 1 - амино(имино)метил- 1 ,6-гександиамина общей формулы :
Figure imgf000023_0001
где: НХ - кислота, п = 3 - 20, m = 4 - 20, обладающее активностью в отношении просто- и сложноустроенных, содержащих РНК или DHK вирусов человека, животных, растений, бактерий и грибов.
PCT/RU2014/000917 2014-03-07 2014-12-10 Противовирусное средство WO2015133928A1 (ru)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US15/124,289 US10299480B2 (en) 2014-03-07 2014-12-10 Antiviral agent
EP14884461.6A EP3115394B1 (en) 2014-03-07 2014-12-10 Antiviral agent

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2014109125/15A RU2546006C1 (ru) 2014-03-07 2014-03-07 Противовирусное средство
RU2014109125 2014-03-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2015133928A1 true WO2015133928A1 (ru) 2015-09-11

Family

ID=53295693

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2014/000917 WO2015133928A1 (ru) 2014-03-07 2014-12-10 Противовирусное средство

Country Status (4)

Country Link
US (1) US10299480B2 (ru)
EP (1) EP3115394B1 (ru)
RU (1) RU2546006C1 (ru)
WO (1) WO2015133928A1 (ru)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2546006C1 (ru) 2014-03-07 2015-04-10 Римма Ильинична Ашкинази Противовирусное средство
US10080728B2 (en) 2015-01-20 2018-09-25 Viktor Veniaminovich Tets Hemostatic agent
WO2018217743A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Viktor Veniaminovich Tets Fractionated antimicrobial compositions and use thereof
KR102266875B1 (ko) * 2019-12-12 2021-06-18 대한민국 감자 바이러스 y 방제용 화합물
AU2022255940A1 (en) * 2021-04-05 2023-11-23 Georgy Tets Bioactive products

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2176651C2 (ru) * 1999-11-11 2001-12-10 Институт эколого-технологических проблем Способ получения блоксополимера алкиленгуанидина с полиалкиленамином и блоксополимер
RU2422137C1 (ru) * 2009-10-08 2011-06-27 Виктор Вениаминович Тец Способ получения биоцидного полигуанидина и биоцидный полигуанидин
WO2011135577A1 (en) * 2010-04-29 2011-11-03 Bios Agricorp Pvt. Ltd. Polyhexamethyleneguanidine and its salts based disinfectant.

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2039735C1 (ru) 1993-04-29 1995-07-20 Петр Александрович Гембицкий Способ получения дезинфицирующего средства
WO1996028570A1 (en) 1995-03-09 1996-09-19 Xechem, Inc. A rapid method of and diagnostic kit for the detection of microorganisms
US6984499B2 (en) 1997-10-02 2006-01-10 Idexx Laboratories, Inc. Method and apparatus for concurrently detecting pathogenic organisms and antimicrobial susceptibility
RU2141452C1 (ru) 1998-05-26 1999-11-20 ООО "Торговый дом "Красный химик" Способ получения кобальт (ii) сульфата
US20020010150A1 (en) 2000-04-28 2002-01-24 Cortese Stephanie M. Homostatic compositions of polyacids and polyalkylene oxides and methods for their use
RU2176523C1 (ru) 2000-06-16 2001-12-10 Региональная общественная организация - Институт эколого-технологических проблем Дезинфицирующее средство при туберкулезе
AU2003222845A1 (en) 2002-05-03 2003-11-17 Schering Aktiengesellschaft Thiazolidinones and the use thereof as polo-like kinase inhibitors
US8100872B2 (en) 2002-10-23 2012-01-24 Tyco Healthcare Group Lp Medical dressing containing antimicrobial agent
RU2230734C1 (ru) 2003-06-09 2004-06-20 Общество с ограниченной ответственностью "Международный институт эколого-технологических проблем" Производные полигуанидинов
RU2324478C2 (ru) 2006-06-27 2008-05-20 Общество с ограниченной ответственностью "Международный институт эколого-технологических проблем" Способ получения биоцидного полигуанидина и биоцидный полигуанидин
CN101490058A (zh) 2006-07-14 2009-07-22 健亚生物科技公司 抗病毒剂
CN101711188A (zh) * 2008-02-28 2010-05-19 卡登特网络体系股份有限公司 包括至少一个内部增压室的可定位刮刀刀片
RU2423359C1 (ru) * 2009-12-02 2011-07-10 Федеральное государственное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора) Противовирусное средство
CN102453315B (zh) 2010-10-22 2014-05-28 中国石油化工股份有限公司 一种抗菌防霉聚乳酸组合物及其制备方法
ES2882911T3 (es) 2011-04-27 2021-12-03 Biomup France Sas Composiciones hemostáticas
RU2480227C2 (ru) * 2011-07-01 2013-04-27 Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" (ФБУН ГНЦ ВИ "Вектор") Противовирусное средство на основе меланина
MX355924B (es) 2011-10-11 2018-05-04 Baxter Int Composicion hemostatica.
US8829053B2 (en) 2011-12-07 2014-09-09 Rochal Industries Llp Biocidal compositions and methods of using the same
RU2533232C2 (ru) * 2012-07-20 2014-11-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И. Ивановского" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГБУ "НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского" Минздравсоцразвития России Применение поликарбоксильного производного фуллерена в качестве микробицидного противовирусного средства
CN103705535A (zh) 2013-12-27 2014-04-09 王东宇 壳聚糖妇科凝胶及其制备方法
RU2546006C1 (ru) 2014-03-07 2015-04-10 Римма Ильинична Ашкинази Противовирусное средство
US10080728B2 (en) 2015-01-20 2018-09-25 Viktor Veniaminovich Tets Hemostatic agent

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2176651C2 (ru) * 1999-11-11 2001-12-10 Институт эколого-технологических проблем Способ получения блоксополимера алкиленгуанидина с полиалкиленамином и блоксополимер
RU2422137C1 (ru) * 2009-10-08 2011-06-27 Виктор Вениаминович Тец Способ получения биоцидного полигуанидина и биоцидный полигуанидин
WO2011135577A1 (en) * 2010-04-29 2011-11-03 Bios Agricorp Pvt. Ltd. Polyhexamethyleneguanidine and its salts based disinfectant.

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP3115394A4 *

Also Published As

Publication number Publication date
US20170013838A1 (en) 2017-01-19
EP3115394B1 (en) 2022-03-30
EP3115394A4 (en) 2017-08-30
RU2546006C1 (ru) 2015-04-10
EP3115394A1 (en) 2017-01-11
US10299480B2 (en) 2019-05-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2546006C1 (ru) Противовирусное средство
CN110438091B (zh) 一株新的肺炎克雷伯氏菌噬菌体及其应用
Dos Santos et al. Silver nanoparticles: therapeutical uses, toxicity, and safety issues
Nazir et al. Long-term study on tenacity of avian influenza viruses in water (distilled water, normal saline, and surface water) at different temperatures
US20110269936A1 (en) Method for Producing Biocidal Polyguanidine, and Biocidal Polyguanidine
Saleh et al. Antiprotozoal effects of metal nanoparticles against Ichthyophthirius multifiliis
Li et al. Preparation and characterization of a permanently antimicrobial polymeric material by covalent bonding
Pangestika et al. Antiviral activity effect of silver nanoparticles (Agnps) solution against the growth of infectious bursal disease virus on embryonated chicken eggs with Elisa test
Zeedan et al. Evaluations of potential antiviral effects of green zinc oxide and silver nanoparticles against bovine herpesvirus-1
RU2345794C2 (ru) Дезинфицирующее средство
CN113521261A (zh) 一种抗冠状病毒和细菌双重纳米免洗消毒凝胶及其制备方法和应用
Abdelkader et al. Green synthesis, characterization and antimicrobial activity of biosynthesized silver nanoparticles using Ziziphus spina-christi leaf extracts
RU2443705C1 (ru) Средство, обладающее антибактериальной активностью
JP5612314B2 (ja) ウィルス・細菌を破壊しその感染増殖を抑制する薬剤および方法
CN109303065A (zh) 一种去除微生物污染的液体及使用方法
Zubairov et al. Characterization of chlorine-free biocidal agents based on nontoxic or slightly toxic azaadamantane compounds
Assylbekov et al. THE EFFECTIVENESS OF THE USE OF IODINE DISINFECTANT IN POULTRY FARMS
RU2236854C1 (ru) Обеззараживающее средство
Alkhalefa et al. In vitro investigation of the antiviral activity of propolis and chitosan nanoparticles against the genotype VII Newcastle disease virus
CN113367155B (zh) 一种过硫酸氢钾复合物消毒剂及其应用
CN102579490A (zh) 一种纳米银抗病毒溶液及其制作方法
RU2511042C1 (ru) ШТАММ ХС-18 ВИРУСА ЯДЕРНОГО ПОЛИЭДРОЗА ХЛОПКОВОЙ СОВКИ Helicoverpa armigera Hbn, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ИНСЕКТИЦИДНОГО ПРЕПАРАТА
Al-Gheethi et al. Survival and Disinfection of Sars-Cov-2 in Environment and Contaminated Surface
RU2391821C2 (ru) Терапевтическое средство &#34;фузобаквелт&#34; на основе наносомной субстанции
GuoA et al. ENVIRONMENTAL DETECTION OF H5N2 HIGHLY PATHOGENIC AVIAN INFLUENZA VIRUS IN THE ENVIRONMENT OF INFECTED TURKEY FARMS IN MINNESOTA

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 14884461

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 15124289

Country of ref document: US

REEP Request for entry into the european phase

Ref document number: 2014884461

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2014884461

Country of ref document: EP