WO2015056729A1 - 機能性飼料 - Google Patents
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- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Definitions
- the present invention is a cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol and / or cardol-containing monogastric or juvenile ruminant body weight gain promoter and / or feed efficiency improving agent, and these This is a method for promoting the increase in the mass of a monogastric animal or a juvenile ruminant, and a method for improving the feed efficiency. Furthermore, the present invention relates to an intestinal flora improving agent and a feed, a method for improving the intestinal flora using them, a diarrhea reducing agent and a feed, and a method for reducing diarrhea using them.
- livestock feed is fed with grains such as corn as a mixed feed in order to accelerate its growth.
- food shortages due to population growth and global abnormal weather frequently affect the harvest of agricultural products.
- monogastric animals such as pigs and chickens
- enzymes are supplied for the purpose of improving the availability of the supplied feed.
- cecum and colon are developed in pigs, there is a report that about 30% of the total energy absorption is obtained from short chain fatty acids produced by fermentation of bacteria in the cecum and colon (non-patented).
- Reference 1) the intestinal microflora is considered to have a great influence on the improvement of productivity.
- Non-Patent Document 2 describes that cashew nut shell liquid has an antibacterial action.
- Non-Patent Document 3 describes a result suggesting a methane suppression effect in a test tube test result using anacardic acid which is one component of cashew nut shell liquid.
- Patent Document 1 includes a coccidiasis alleviating agent characterized by containing cashew nut shell liquid and / or an alcardic acid as an active ingredient, and a coccidiosis reducing agent characterized by containing cashew nut shell liquid and / or anacardic acid. The feed is described.
- Patent Document 2 as a means for improving rumen fermentation of ruminants and the like, by utilizing a feed containing cashew nut shell liquid as an active ingredient, and adding cashew nut shell liquid to bovine rumen liquid, It is described that production can be suppressed and propionic acid production can be promoted.
- cashew nut shell liquid for disease prevention and treatment, and to improve rumen fermentation in ruminants.
- cashew nut shell liquid is used to promote weight gain in juvenile ruminants, improve feed efficiency, reduce diarrhea, and improve intestinal flora.
- the present invention promotes the growth of healthy monogastric animals or juvenile ruminants without using antibiotics, improves productivity, or reduces diarrhea, and further improves the intestinal flora This is the issue.
- the present inventors have found that healthy monogastric animals or juveniles can be obtained using cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol, and / or cardol.
- the present inventors have found that it is effective in promoting the increase in body weight of young ruminants, improving feed efficiency, reducing diarrhea, and improving the gut microbiota.
- the present inventors have thus completed the present invention.
- the present invention is as follows. (1) Promotion of weight gain and / or improvement of feed efficiency of monogastric or juvenile ruminants characterized by containing cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol, and / or cardol Agent. (2) The feed demand rate is reduced by 3% or more as compared to the group to which cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol and / or cardol is not administered, the increase according to (1) Body promoting and / or feed efficiency improving agent.
- the weight gain per day is 2% or more compared to the group not administered with cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol, and / or cardol, (1) or ( 2) The agent for promoting weight gain and / or improving feed efficiency as described.
- the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency according to any one of (1) to (3) which has an effect of improving intestinal flora.
- a diarrhea reducing agent for monogastric animals or juvenile ruminants comprising cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol, and / or cardol.
- the diarrhea reducing agent according to (15) which is for pigs, horses, poultry, pets, or young ruminants with no ruminant development.
- a feed for reducing diarrhea comprising cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol, and / or cardol.
- (19) The feed for reducing diarrhea according to (18), which is for pigs, horses, poultry, pets, or juvenile ruminants with no ruminant development.
- (20) A monogastric or juvenile ruminant, characterized by administering cashew nut shell oil, heat-treated cashew nut shell oil, anacardic acid, cardanol, and / or cardol to a monogastric or juvenile ruminant How to reduce diarrhea.
- (21) The method according to (20), wherein cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol, and / or cardol are administered in an amount of 0.001 g to 100 g / head / day.
- Improving body weight gain and productivity of monogastric or juvenile ruminants by using the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency and the intestinal flora improving agent of the present invention, or feed containing them. Can do. Further, by using the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency and the intestinal flora improving agent of the present invention, or a feed containing them, a monogastric animal or juvenile ruminant animal can be used without using antibiotics. Can promote growth. Furthermore, by using the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency and the intestinal flora improving agent of the present invention, or the feed containing them, decomposition of dietary fiber etc.
- the rate can be improved and feed efficiency can be improved. Further, by using the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency and the intestinal flora improving agent of the present invention, or a feed containing them, it is possible to prevent healthy monogastric animals or juvenile ruminants such as preventing diarrhea. Productivity can be improved.
- the change of average body weight (kg) during the breeding period in the control group and CNSL group is shown.
- the feed demand rate in the control group and CNSL group is shown.
- concentration (micromol / L) of the short chain fatty acid in the cecal vein in a control group and CNSL group is shown.
- concentration (micromol / L) of the short chain fatty acid in the portal vein in a control group and CNSL group is shown.
- the crypt depth ( ⁇ m) of cecal epithelial cells in the control group and CNSL group is shown.
- the body weight gain promoting and / or feed efficiency improving agent, diarrhea reducing agent and intestinal flora improving agent of the present invention contain cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell oil, anacardic acid, cardanol and / or cardol. It is characterized by that.
- Cashew nut shell oil is an oily liquid contained in the shell of cashew nut coconut tree (Anacardium occidentale L.).
- Cashew nut shell oil contains anacardic acid, cardanol, and cardol as its components. In general, anacardic acid is converted to cardanol by heat treatment.
- Cashew nut shell oil extracted by squeezing cashew nut shell is 55 to 80% by mass of anacardic acid and 5 to 20 cardanol as described in J. Agric. Food Chem. 2001, 49, 2548-2551. % By weight and 5-30% by weight of cardol.
- the heat-treated cashew nut shell oil obtained by heat treating cashew nut shell oil at 70 ° C.
- Cashew nut shell oil obtained by storing cashew nut shell oil at room temperature (20 ° C) for about one year or longer may be converted to cardanol by decarboxylation of anacardic acid, which is the main component of cashew nut shell oil. It contains 0 to 40% by mass of acid, 30 to 80% by mass of cardanol, and 5 to 30% by mass of cardol.
- Cashew nut shell oil can be obtained as a vegetable oil extracted by pressing cashew nut shells. Moreover, cashew nut shell liquid can also be obtained by extraction, for example, solvent extraction of cashew nut shell. Further, cashew nut shell liquid can be obtained by a method described in JP-A-8-231410, for example, a solvent extraction method. In addition, the cashew nut shell oil may be a shell containing cashew nut shell oil obtained by pulverizing and crushing a cashew nut shell, or a cashew nut shell containing cashew nut shell oil. Cashew nut skin is the thin skin between the cashew nut shell and the embryo. A commercially available cashew nut shell liquid can also be used.
- the heat-treated cashew nut shell liquid of the present invention can be obtained by heating the cashew nut shell oil obtained as described above to 70 ° C or higher, preferably 130 ° C or higher. Moreover, cashew nut shell liquid obtained by storing cashew nut shell oil at room temperature (20 ° C.) for about one year or more may be used.
- the heat-treated cashew nut shell oil of the present invention may be obtained by compressing and extracting cashew nut shell from a cashew nut shell and heating it to 130 ° C.
- the heat-treated cashew nut shell liquid of the present invention may be any of the cashew nut shell oils obtained as described above, and the shell containing the cashew nut shell oil obtained by pulverizing and crushing the heated cashew nut shells Heated cashew nut peel containing cashew nut shell liquid may also be used.
- domestic animals such as pigs, horses, poultry (chicken, etc.), pets (dogs, cats, rabbits, etc.) have side effects such as reduced digestibility, diarrhea, and poor appetite, depending on the antibiotics and feed being fed. Symptoms are observed and death may occur, but the cashew nut shell liquid and heat-treated cashew nut shell oil of the present invention have no problem of side effects.
- the content of cashew nut shell liquid in the body weight gain promoting and / or feed efficiency improving agent, diarrhea reducing agent and intestinal flora improving agent of the present invention is preferably 0.1% by mass to 100% by mass, more preferably It is 0.5 mass% to 100 mass%, most preferably 1.0 mass% to 100 mass%. If it is 0.1 mass% or more, a predetermined amount of the drug can provide a body weight gain promoting effect, a feed efficiency improving effect, a diarrhea reducing agent, and an intestinal flora improving effect.
- the content of the weight gain promoting and / or feed efficiency improving agent, diarrhea reducing agent and intestinal flora improving agent in the feed additive of the present invention is preferably 0.1% by mass to 100% by mass, more preferably It is 0.5 mass% to 100 mass%, most preferably 1.0 mass% to 100 mass%.
- the content of the feed additive in the feed of the present invention is preferably 0.005% by mass to 20% by mass, more preferably 0.01% by mass to 20% by mass, and further preferably 0.05% by mass to 20% by mass. %.
- the content of cashew nut shell liquid in the feed is preferably 0.
- the content may be 0.001% to 2.0% by mass, more preferably 0.005% to 1.0% by mass, and still more preferably 0.01% to 0.5% by mass. If it is 0.001% by mass or more, a predetermined amount of feed can increase body weight and / or improve feed efficiency, reduce diarrhea and intestinal flora, and if it is 2.0% by mass or less, feed It is preferable because it does not affect the composition.
- the cashew nut shell oil used in the present invention may be used as it is or after pulverized and crushed, or the cashew nut skin may be used.
- Converted to oil (CNSL) (cashew nut shell contains 25-30% by weight of CNSL, and cashew nut peel contains 0.5-3.0% by weight of CNSL), promoting body weight gain And / or the feed efficiency improving agent, the diarrhea reducing agent, the intestinal flora improving agent, the feed additive, and the content in the feed may be within the above range.
- the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency, reducing agent for diarrhea and improving agent for intestinal flora of the present invention may contain anacardic acid, cardanol or cardol instead of cashew nut shell liquid.
- anacardic acid used in the present invention examples include natural products anacardic acid, synthetic anacardic acid, and derivatives thereof. Commercial anacardic acid may also be used.
- anacardic acid is obtained by using cashew nut oil obtained by extracting cashew nut shells with an organic solvent using, for example, silica gel column chromatography, n-hexane, acetic acid. It can be obtained by elution with changing the ratio of the mixed solvent of ethyl and acetic acid (JP-A-3-240721, JP-A-3-240716, etc.).
- Such anacardic acid has the same content as cashew nut shell liquid, and can be included in a body weight gain promoting agent and / or feed efficiency improving agent, diarrhea reducing agent, intestinal flora improving agent, feed additive, feed .
- the cardanol used in the present invention includes natural product cardanol, synthetic cardanol, and derivatives thereof.
- the cardanol used in the present invention can be obtained by decarboxylating anacardic acid, which is the main component of cashew nut shell liquid.
- Such cardanol has the same content as cashew nut shell liquid and can be included in a body weight gain promoting and / or feed efficiency improving agent, diarrhea reducing agent, intestinal flora improving agent, feed additive, and feed.
- the mass ratio of anacardic acid and cardanol in the heat-treated cashew nut shell oil is preferably 0: 100 to 20:80.
- the cardol used in the present invention includes a natural product cardol, a synthetic cardol, and derivatives thereof.
- the cardol used in the present invention can also be obtained by purification from cashew nut shell liquid.
- Such cardol can be contained in the same amount as cashew nut shell liquid and in a body weight gain promoting and / or feed efficiency improving agent, diarrhea reducing agent, intestinal flora improving agent, feed additive, and feed.
- Examples of animals that can be used to promote weight gain and / or improve feed efficiency, reduce diarrhea, and improve intestinal flora of the present invention include pigs, horses, poultry (chicken, etc.), pets (dogs, cats, rabbits, etc.) Monogastric animals such as puppy pets, and juvenile ruminants that have not developed a ruminant stomach (if cattle, less than 12 months of age when the ruminant stomach is completed, more preferably less than 4 months of age when the esophageal groove reflex remains
- the increase in short-chain fatty acids in the intestine such as promotion of body weight gain in healthy animals, improvement of feed efficiency and intestinal flora, for example, improvement of various nutrient digestibility or increase of short-chain fatty acid producing bacteria As long as is a useful animal, it is not limited thereto.
- the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency and the agent for improving intestinal flora of the present invention are preferably administered to pigs of 6 months after weaning, and more preferably pigs of 3 months after weaning. It is.
- the diarrhea reducing agent of the present invention is preferably administered to pigs after weaning.
- the agent for promoting weight gain and / or improving feed efficiency, reducing diarrhea and improving gut microbiota of the present invention is applied to monogastric animals such as pigs or young ruminants, so that cashew nut shell liquid, heat treatment Compared to a non-administration control that does not receive cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol, and / or cardol, for example, the body weight per day increases or the feed demand rate decreases, preferably 1
- the weight gain per day is 2% or more, or the feed demand rate is reduced by 3% or more. More preferably, it is reduced by 5% or more.
- the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency, reducing diarrhea, and improving gut microbiota of the present invention are administered to monogastric animals such as pigs or juvenile ruminants, for example, various nutrients.
- monogastric animals such as pigs or juvenile ruminants, for example, various nutrients.
- the digestibility of the ingredient is improved, or the intestinal flora is improved, and the number of short-chain fatty acid-producing bacteria in the intestine is increased compared to the non-administered control.
- short-chain fatty acids for example, Acetic acid, propionic acid, butyric acid.
- the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency, the agent for reducing diarrhea, and the agent for improving intestinal flora increase propionate in blood by 60% or more and n-butyric acid concentration by 30% or more.
- the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency the agent for reducing diarrhea and the agent for improving intestinal flora of the present invention, the nutritional digestibility of monogastric animals or young ruminants is increased, the intake energy is increased, and the growth is increased. It can contribute to promotion, prevention of diseases such as diarrhea, and improvement of feed efficiency.
- the dosage form of the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency, reducing diarrhea, and improving gut microbiota of the present invention is not particularly limited.
- powder, pellet, granule, liquid, solid, tablet, capsule It can be in any form such as an agent or an emulsion.
- the agent for promoting body weight gain and / or feed efficiency, the agent for reducing diarrhea and the agent for improving intestinal flora of the present invention are cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol and / or cardol, and necessary Depending on the case, it can be produced by mixing arbitrary ingredients and formulating them.
- the cashew nut shell containing cashew nut shell oil, the crushed and crushed cashew nut shell, and the cashew nut peel may be directly mixed with other optional components to promote the increase in the weight of the present invention and / or feed efficiency. It can be used as an improving agent, a diarrhea reducing agent, and an intestinal flora improving agent. Furthermore, without mixing with other optional components, the cashew nut shell itself, the crushed and crushed cashew nut shell itself, or the cashew nut shell itself can be used as a feed additive and further as a feed.
- the weight gain promoting and / or feed efficiency improving agent, diarrhea reducing agent and intestinal flora improving agent of the present invention are preferably a powder containing silica, more preferably silica having an average particle size of 150 ⁇ m or more, and cashew nuts.
- Shell oil, heat-treated cashew nut shell liquid, anacardic acid, cardanol, and / or cardol are adsorbed and contained in silica.
- Such a silica preparation is described, for example, in International Publication WO2009 / 151048.
- the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency, the agent for reducing diarrhea and the agent for improving intestinal flora include cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell oil, anacardic acid, cardanol and / or cardol, Diatomaceous earth, bentonite, montmorillonite, zeolite, perlite, acid clay, activated clay, and silicic acid may be mixed as appropriate to provide a feed additive.
- Such an oil absorbent is described in, for example, International Publication No. WO2011 / 013592 pamphlet.
- the body weight gain promoting and / or feed efficiency improving agent, diarrhea reducing agent and gut microbiota improving agent of the present invention are mixed with other feed ingredients used for pet food and pet supplements (hereinafter referred to as feed). And can be used as feed.
- feed used for pet food and pet supplements
- the type of feed and ingredients other than cashew nut shell liquid are not particularly limited.
- the feed is for monogastric animals such as dogs, cats and rabbits.
- the feed of the present invention can be produced by adding a feed additive to a feed component as it is and mixing them.
- the feed additive may be in a liquid or gel form for easy mixing.
- water, vegetable oils such as soybean oil, rapeseed oil and corn oil, liquid animal oils, water-soluble polymer compounds such as polyvinyl alcohol, polyvinyl pyrrolidone and polyacrylic acid can be used as the liquid carrier.
- a water-soluble polysaccharide such as alginic acid, sodium alginate, xanthan gum, sodium caseinate, gum arabic, guar gum, tamarind seed polysaccharide.
- the feed of the present invention may contain saccharides (lactose, trehalose, etc.), maize, milo, bran, rice bran, defatted pork, dried rice bran, compressed barley, pressed corn, soybean meal, corn flour, rice flour, soybean flour, etc. Good.
- saccharides lactose, trehalose, etc.
- maize milo, bran, rice bran, defatted pork, dried rice bran, compressed barley, pressed corn, soybean meal, corn flour, rice flour, soybean flour, etc. Good.
- the concentration in these feeds is preferably 1 to 90% by mass, more preferably 5 to 75% by mass, and still more preferably 10 to 50% by mass.
- the feed of the present invention can also be used to grow monogastric animals such as pigs, horses, poultry (such as chickens), pets (competing animals such as dogs, cats, and rabbits), and young ruminants that do not develop a ruminant stomach. It may further contain optional components such as a component effective for promotion, a nutritional supplement component, and a component that enhances storage stability.
- Such optional components include, for example, viable agents such as Enterococcus, Bacillus, and Bifidobacteria; enzymes such as amylase and lipase; vitamins such as L-ascorbic acid, choline chloride, inositol, and folic acid; potassium chloride, citrate Minerals such as iron acid, magnesium oxide, phosphates; amino acids such as DL-alanine, DL-methionine, L-lysine hydrochloride; organic acids such as fumaric acid, butyric acid, lactic acid, acetic acid and their salts; ethoxyquin, dibutylhydroxy Antioxidants such as toluene; Antifungal agents such as calcium propionate; Binders such as carboxymethylcellulose (CMC), sodium caseinate and sodium polyacrylate; Emulsifiers such as glycerin fatty acid ester and sorbitan fatty acid ester; Astaxanthin and canthaxanthin Various pigments; various Este
- the feed of the present invention is suitable for breeding pigs, horses, poultry (chicken, etc.), pets (competing animals such as dogs, cats, rabbits, etc.) and juvenile ruminants that have not developed a ruminant stomach.
- the amount of feed to be ingested can be appropriately adjusted according to the type of animal, body weight, age, sex, health condition, ingredients of feed, etc.
- cashew nut shell liquid, heat-treated cashew nut shell oil, anacardic acid contained in the feed , Cardanol and / or cardol is preferably 0.001 to 100 g / head / day, more preferably 0.001 to 50 g / head / day, and still more preferably 0.001 to 10 g / head / day.
- a method for ingesting and rearing a feed a commonly used method can be employed depending on the type of monogastric animal. Examples of the present invention will be described below, but the present invention is not limited to such examples.
- CNSL Cashew nut shell liquid
- HPLC Waters 600, Nippon Waters Co., Ltd.
- detector Waters 490E, Nihon Waters Co., Ltd.
- printer Chomadzu Corporation
- column SUPELCOSIL LC18, SUPELCO Co.
- a solvent of acetonitrile: water: acetic acid of 80: 20: 1 (volume ratio) was used, and the flow rate was 2 ml / min. Detection was performed at an absorbance of 280 nm.
- Cashew nut shell liquid contained 65.7% by mass of anacardic acid, 5.1% by mass of cardanol, and 23.5% by mass of cardol. Further, CNSL was heated at 100 ° C. to obtain heat-treated CNSL. When the composition was measured in the same manner, anacardic acid was not contained, and 71.2% by mass of cardanol and 24.1% by mass of cardol were contained. Thereafter, 600 g of anhydrous silicic acid (Sipernat 2200, manufactured by Evonik Degussa Japan Co., Ltd.) was mixed with 400 g of CNSL and heat-treated CNSL to prepare CNSL-containing silica and heat-treated CNSL-containing silica.
- anhydrous silicic acid Sipernat 2200, manufactured by Evonik Degussa Japan Co., Ltd.
- Example 1 Eight WLD hybrid weaned piglets (one abdomen) were tested and the growth promoting effect of CNSL was verified.
- One litter was weaned at 22 days of age and assigned to 2 groups of 4 each so that sex and weight were as uniform as possible.
- Each group is housed in a swine chamber, and CNSL-containing silica preparation (formulation addition amount 400 ppm, CNSL addition final concentration 200 ppm) and control preparation (silica 400 ppm) are added to the basic feed from 0 to 4 weeks after the start of the test. I was paid. Drinking was free drinking. At 0, 1, 2, 3 and 4 weeks after the start of the test, the body weight and feed intake of all the heads were measured.
- the nutritional components of the basic feed were as shown in Table 1.
- feed intake during the feeding test period was as shown in Table 3.
- weight gain was particularly good on the 14th to 28th days after the start of the test using late-stage artificial milk as the basic feed, and as a result, the feed demand rate (the amount of feed (kg) required to increase body weight of 1 kg) was about 12 % Improvement. Since there was no significant change in feed intake, it was assumed that the nutritional digestibility of the ingested feed was improved, leading to good weight gain.
- Example 2 Eight WLD hybrid weaned piglets (one belly) were tested and the growth promoting effect of heat-treated CNSL was verified.
- One litter was weaned at 20 days of age and assigned to 2 groups of 4 each so that sex and weight were as uniform as possible.
- Each group is housed in a pig shed, and heat treated CNSL-containing silica preparation (preparation amount 400 ppm, final heat treatment CNSL addition concentration 200 ppm) and control preparation (silica 400 ppm) from 0 to 4 weeks after the start of the test. And added. Drinking was free drinking. At 0, 1, 2, 3 and 4 weeks after the start of the test, the body weight and feed intake of all the heads were measured.
- the nutritional components of the basic feed were as shown in Table 1.
- feed intake during the feeding test period was as shown in Table 5.
- weight gain was particularly good on the 14th to 28th days after the start of the test using late-stage artificial milk as the basic feed, and as a result, the feed demand rate (the amount of feed (kg) required to increase body weight of 1 kg) was about 11 % Improvement. Since there was no significant change in feed intake, it was assumed that the nutritional digestibility of the ingested feed was improved, leading to good weight gain.
- Example 3 Hybrid piglets (34 days old) and 8 (same abdomen) raised on a general integrated farm were used.
- the feed for late weaning SDS No. 2 (manufactured in Japan) was used as the basic feed.
- the nutritional components of the basic feed were as shown in Table 1.
- the test group was divided into two groups, a control group and a CNSL 1,000 ppm feed addition group (2,500 ppm as a silica preparation). However, the number of males and females was aligned as much as possible, and four animals were assigned to each section in consideration of uniform body weight. After the body weight was measured at the time of introduction, only the basic feed was fed for 3 days to acclimate to the facility and the feed.
- CNSL-added feed was fed freely from the start of the test, and drinking water was also freely consumed throughout the test period.
- the test period was 2 weeks, and feed intake and water consumption were measured every day at 10 am throughout the test period.
- Body weight was measured at the start of the test, 7 days after the start of the test and 14 days after the start of the test.
- all animals were necropsied and cecal venous blood and portal vein blood were collected.
- cecal contents and tissue sampling of the central cecum were also performed. The collected tissue was immediately washed with physiological saline and fixed with formalin.
- the captured image was analyzed with image analysis software (DP2-BSW, Olympus), and the crypt depth of the cecum was calculated.
- DP2-BSW image analysis software
- bacterial genomic DNA was extracted from the cecum contents at the time of necropsy using QuickGene-810 system and QuickGene DNA tissue kit (FujiFilm).
- the PCR reaction was performed once using each.
- ICycler Bio-Rad
- the reaction conditions were 95 ° C. 5 m, (95 ° C. 30 s, 57 ° C.
- CCTACGGGAGGCAGCAG in the base sequence of each forward primer corresponds to the sequence of 357F
- CCGTCAATTCMTTTRAGT in the base sequence of the reverse primer (SEQ ID NO: 5) corresponds to the sequence of 926R.
- the base sequence of the obtained PCR product was determined with a next-generation sequencer (Genome Sequencer FLX + System (GS FLX +), Roche). The determined sequence was compared with the sequence registered in GenBank, and the flora analysis was performed.
- Table 7 and FIG. 3 show the concentration of short-chain fatty acid in the cecal vein
- Table 8 and FIG. 4 show the concentration of short-chain fatty acid in the portal vein. It was speculated that the total short chain fatty acid concentration increased in both the portal vein and cecal vein blood, and the digestibility of the feed was improved. Furthermore, it was also revealed that the concentrations of propionic acid and n-butyric acid in the portal vein and cecal vein blood were significantly increased.
- SEQ ID NO: 6 was 99% identical to Roseburia faecis
- SEQ ID NO: 7 was 99% identical to Megasphaera elsdenii.
- Roseburia faecis is known as the major intestinal butyrate-producing bacterium, and increased in this study from 3.1% to 10.6% with CNSL feeding.
- Megasphaera elsdenii is not only a butyric acid-producing bacterium, but also known as a lactic acid-utilizing propionic acid-producing bacterium, and it was confirmed that it significantly increased from 0.7% to 3.6% with CNSL feeding (Table 10).
- M.iielsdenii can be used as a probiotic to reduce excess lactic acid in the large intestine (Tsukahara et. Al., 2002, Ushida et. Al., 2002, Hashizume et. Al ., 2003, Tsukahara et. Al., 2006).
- the agent for promoting body weight gain and / or improving feed efficiency, reducing agent for diarrhea, improving agent for intestinal flora and feed containing them of the present invention are useful in the field of livestock.
Landscapes
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Abstract
本発明は、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤を提供する。
Description
本発明は、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有する単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進剤及び／又は飼料効率改善剤、並びにこれらを用いた単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進方法、飼料効率改善方法である。さらには、腸内菌叢改善剤及び飼料並びにこれらを用いた腸内菌叢を改善する方法、下痢症低減剤及び飼料並びにこれらを用いた下痢症を低減する方法に関するものである。
抗生物質を家畜飼料に少量添加することにより家畜の成長が促進されることが１９４０年代に発見され、それ以来、家畜の成長を促進したり、疾病を予防したりする手段として、家畜の飼料に抗生物質を添加することが広く行われてきた。抗生物質は、家畜の病原菌感染の予防、代謝の改善、腸内の有害菌の増殖抑制の作用を示し、結果として疾病を予防し、成長を促進すると考えられているが、詳細は依然として不明である。その一方で、飼料に抗生物質を混ぜることは、結果的に抗生物質を外環境に広くばら撒くこととなり、畜産界においても抗生物質耐性菌の出現が問題となっている。例えば、代表的な抗生物質耐性菌であるMRSA（メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus））は、馬などの家畜でも発見されていることが報告されている。このような背景下、近年では、抗生物質の飼料への添加が厳しく規制されるようになってきている。例えば、欧州では２００６年までに抗生物質の飼料への使用が全面禁止され、日本でも使用できる抗生物質の数が段階的に減ってきている。また、このような動きと相まって、生産者からは抗生物質の代替物についての要望が大きくなっている。
家畜飼料には、その生育を速めるためにトウモロコシなどの穀物を配合飼料として与えることが一般的に行われている。一方で、人口増加による食糧不足や世界的な異常気象が農産物の収穫に影響を与えることも度々起きている。このような状況下で、家畜に与える飼料を効率的に活用し、より少ない飼料でなるべく多くの家畜を飼育できる技術の確立が望まれている。例えば、豚や鶏といった単胃動物では、給与した飼料の利用性を向上する目的で酵素類を給与している事例が多い。さらに、豚においては盲腸・結腸が発達しているため、総エネルギー吸収量の約３０％を盲腸、結腸における細菌類の発酵によって産生される短鎖脂肪酸から得ているという報告もあり（非特許文献１）、その生産性の向上に腸内菌叢が大きな影響を与えると考えられている。
非特許文献２には、カシューナッツ殻油には抗菌作用があることが記載されている。非特許文献３には、カシューナッツ殻油の１成分であるアナカルド酸を用いた試験管試験結果でのメタン抑制効果を示唆した結果が記載されている。特許文献１には、カシューナッツ殻油及び／又はアルカルド酸類を有効成分として含有することを特徴とするコクシジウム症軽減剤並びにカシューナッツ殻油及び／又はアナカルド酸類を配合することを特徴とするコクシジウム症軽減用飼料について記載されている。特許文献２には、反芻動物などのルーメン発酵を改善する手段として、カシューナッツ殻油を有効成分として含有する飼料を活用すること、そして、カシューナッツ殻油をウシのルーメン液に添加することにより、メタン生成を抑制し、プロピオン酸生成を促進できることが記載されている。
以上のように、カシューナッツ殻油の抗菌作用を活用して病気予防・病気治療に活用することや、反芻動物でのルーメン発酵改善に活用することは知られているが、健常な単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進、飼料効率改善、下痢症の低減、および腸内菌叢の改善にカシューナッツ殻油を活用する事例は知られていない。
Pig Journal, 2013.7.15, p58-60
H. Muroi, et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry, 12, 583-587 (2004)
C. J. Van Nevel., et al., Applied Microbiology, 21, 365-366(1971)
本発明は、抗生物質を使用することなく、健常な単胃動物又は幼若反芻動物の増体を促進し生産性を向上する、もしくは下痢症を低減させる、さらには腸内菌叢を改善することを課題とする。
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを使用すると、健常な単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進および飼料効率改善、下痢症の低減、さらには腸内菌叢の改善に効果があることを見出した。本発明者らは、このようにして本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は以下のとおりである。
（１）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（２）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールが投与されていない群と比べて、飼料要求率が３％以上低減される、（１）記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（３）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールが投与されていない群と比べて、１日当たりの増体重が２％以上である、（１）または（２）記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（４）腸内菌叢を改善する効果を有する、（１）～（３）のいずれか１項記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（５）豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である（１）～（４）のいずれか１項記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（６）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善用飼料。
（７）豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である（６）記載の増体促進及び／又は飼料効率改善用飼料。
（８）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを単胃動物又は幼若反芻動物に投与することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善方法。
（９）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１００ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、（８）記載の方法。
（１０）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１０ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、（９）記載の方法。
（１１）単胃動物又は幼若反芻動物が豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物である（８）～（１０）のいずれか１項記載の方法。
（１２）単胃動物が離乳後～６ヵ月齢の豚である、（１１）記載の方法。
（１３）単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率の改善に用いるための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドール。
（１４）単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善剤の製造のための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールの使用。
（１５）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症低減剤。
（１６）豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である（１５）記載の下痢症低減剤。
（１７）下痢症が離乳後の豚に発症する、（１６）記載の下痢症防除剤。
（１８）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、下痢症低減用飼料。
（１９）豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である、（１８）記載の下痢症低減用飼料。
（２０）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを単胃動物又は幼若反芻動物に投与することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症を低減する方法。
（２１）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１００ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、（２０）記載の方法。
（２２）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１０ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、（２１）記載の方法。
（２３）単胃動物又は幼若反芻動物が豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物である（２０）～（２２）のいずれか１項記載の方法。
（２４）単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症の低減に用いるための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドール。
（２５）単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症低減剤の製造のための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールの使用。
（１）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（２）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールが投与されていない群と比べて、飼料要求率が３％以上低減される、（１）記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（３）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールが投与されていない群と比べて、１日当たりの増体重が２％以上である、（１）または（２）記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（４）腸内菌叢を改善する効果を有する、（１）～（３）のいずれか１項記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（５）豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である（１）～（４）のいずれか１項記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
（６）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善用飼料。
（７）豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である（６）記載の増体促進及び／又は飼料効率改善用飼料。
（８）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを単胃動物又は幼若反芻動物に投与することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善方法。
（９）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１００ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、（８）記載の方法。
（１０）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１０ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、（９）記載の方法。
（１１）単胃動物又は幼若反芻動物が豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物である（８）～（１０）のいずれか１項記載の方法。
（１２）単胃動物が離乳後～６ヵ月齢の豚である、（１１）記載の方法。
（１３）単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率の改善に用いるための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドール。
（１４）単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善剤の製造のための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールの使用。
（１５）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症低減剤。
（１６）豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である（１５）記載の下痢症低減剤。
（１７）下痢症が離乳後の豚に発症する、（１６）記載の下痢症防除剤。
（１８）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、下痢症低減用飼料。
（１９）豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である、（１８）記載の下痢症低減用飼料。
（２０）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを単胃動物又は幼若反芻動物に投与することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症を低減する方法。
（２１）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１００ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、（２０）記載の方法。
（２２）カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１０ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、（２１）記載の方法。
（２３）単胃動物又は幼若反芻動物が豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物である（２０）～（２２）のいずれか１項記載の方法。
（２４）単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症の低減に用いるための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドール。
（２５）単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症低減剤の製造のための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールの使用。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤並びに腸内菌叢改善剤、またはそれらを含む飼料を使用することにより、単胃動物又は幼若反芻動物の増体および生産性を改善することができる。また、本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤並びに腸内菌叢改善剤、またはそれらを含む飼料を使用することにより、抗生物質を使用することなく、単胃動物又は幼若反芻動物の成長を促進することができる。さらに、本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤並びに腸内菌叢改善剤、またはそれらを含む飼料を使用することにより、未消化のまま盲腸・結腸に流れてきた食物繊維等の分解率を向上させ、飼料効率を向上させることができる。また、本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤並びに腸内菌叢改善剤、またはそれらを含む飼料を使用することにより、下痢の防止など、健常な単胃動物又は幼若反芻動物の生産性を向上させることができる。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤は、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする。
カシューナッツ殻油は、カシューナッツ ツリー(Anacardium occidentale L.)の実の殻に含まれる油状の液体である。カシューナッツ殻油は、その成分として、アナカルド酸、カルダノール、カルドールを含むものである。一般に、アナカルド酸は加熱処理することによりカルダノールに変換する。カシューナッツの殻を圧搾することにより抽出したカシューナッツ殻油は、J. Agric. Food Chem. 2001, 49, 2548-2551に記載されるように、アナカルド酸を５５～８０質量％、カルダノールを５～２０質量％、カルドールを５～３０質量％含むものである。カシューナッツ殻油を７０℃以上、好ましくは１３０℃以上で加熱処理した加熱処理カシューナッツ殻油は、カシューナッツ殻油の主成分のアナカルド酸が脱炭酸しカルダノールに変換され、アナカルド酸を０～１０質量％、カルダノールを５５～８０質量％、カルドールを５～３０質量％含むものとなる。カシューナッツ殻油を常温（２０℃）で、約１年以上保管して得られるカシューナッツ殻油は、カシューナッツ殻油の主成分のアナカルド酸が脱炭酸しカルダノールに変換される場合があり、その場合アナカルド酸を０～４０質量％、カルダノールを３０～８０質量％、カルドールを５～３０質量％含むものとなる。
カシューナッツ殻油は、カシューナッツの殻を圧搾することにより抽出した植物油として得ることができる。また、カシューナッツ殻油は、抽出により、例えば、カシューナッツ殻を溶剤抽出して得ることもできる。さらに、カシューナッツ殻油は、特開平８－２３１４１０号公報に記載されている方法によって、例えば、溶剤抽出法によって得ることができる。カシューナッツ殻油は、その他にも、カシューナッツの殻を粉砕・破砕して得られたカシューナッツ殻油を含む殻や、カシューナッツ殻油を含むカシューナッツ皮であってもよい。カシューナッツの皮とは、カシューナッツの殻と胚（ナッツ）の間にある薄い皮のことである。また、カシューナッツ殻油は、市販品を用いることもできる。本発明の加熱処理カシューナッツ殻油は、上記のようにして得られたカシューナッツ殻油を、７０℃以上、好ましくは１３０℃以上に加熱することによって得ることができる。また、カシューナッツ殻油を常温（２０℃）で、約１年以上保管して得られるカシューナッツ殻油であってもよい。本発明の加熱処理カシューナッツ殻油は、カシューナッツの殻から圧搾抽出（カシューナッツ殻油）し、これを１３０℃に加熱処理して得たものでもよい。本発明の加熱処理カシューナッツ殻油は、上記のようにして得られたカシューナッツ殻油のいずれであってもよく、加熱したカシューナッツの殻を粉砕・破砕して得られたカシューナッツ殻油を含む殻や、カシューナッツ殻油を含む加熱したカシューナッツ皮であってもよい。豚、馬、家禽（鶏など）、ペット（犬、猫、ウサギなどの愛玩動物）等の家畜は、給餌される抗生物質や飼料によっては、消化率の低下、下痢、食欲不振等の副作用の症状が見られ、死に至ることもあるが、本発明のカシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油は、副作用の問題がない。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤中のカシューナッツ殻油の含有量は、好ましくは０．１質量％～１００質量％、より好ましくは０．５質量％～１００質量％、最も好ましくは１．０質量％～１００質量％である。０．１質量％以上であれば所定量の薬剤で増体促進効果、飼料効率改善効果、下痢症低減剤および腸内菌叢改善効果を奏することができる。本発明の飼料添加剤中の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤の含有量は、好ましくは０．１質量％～１００質量％、より好ましくは０．５質量％～１００質量％、最も好ましくは１．０質量％～１００質量％である。本発明の飼料中の飼料添加剤の含有量は、好ましくは０．００５質量％～２０質量％、より好ましくは０．０１質量％～２０質量％、さらに好ましくは０．０５質量％～２０質量％である。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤を飼料中に含有させて用いるときは、飼料中のカシューナッツ殻油の含有量が、好ましくは０．００１質量％～２．０質量％、より好ましくは０．００５質量％～１．０質量％、さらに好ましくは０．０１質量％～０．５質量％となるようにすればよい。０．００１質量％以上であれば所定量の飼料で増体促進及び／又は飼料効率改善、下痢症低減並びに腸内菌叢改善効果を奏することができ、２．０質量％以下であれば飼料組成に影響を与えないので好ましい。本発明において使用されるカシューナッツ殻油は、油分を含有するカシューナッツの殻をそのまま又はこれを粉砕・破砕したものを用いてもよいし、カシューナッツ皮を用いてもよいが、含有しているカシューナッツ殻油（ＣＮＳＬ）に換算して（カシューナッツ殻にはＣＮＳＬが２５～３０質量％含まれており、カシューナッツ皮中にはＣＮＳＬが０．５～３．０質量％含まれている）、増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤、腸内菌叢改善剤、飼料添加剤、飼料中の含有量を上記範囲内とすればよい。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤は、カシューナッツ殻油の代わりに、アナカルド酸、カルダノール、またはカルドールを含んでいてもよい。
本発明において使用されるアナカルド酸としては、天然物アナカルド酸、合成アナカルド酸、それらの誘導体が挙げられる。また、市販のアナカルド酸を用いてもよい。アナカルド酸は、特開平８－２３１４１０号公報に記載されるように、カシューナッツの殻を有機溶剤で抽出処理して得られたカシューナッツ油を、例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてｎ－ヘキサン、酢酸エチルおよび酢酸の混合溶媒の比率を変えて溶出する（特開平３－２４０７２１号公報、特開平３－２４０７１６号公報など）ことによって得ることができる。このようなアナカルド酸は、カシューナッツ殻油と同様の含有量で、増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤、腸内菌叢改善剤、飼料添加剤、飼料に含めることができる。
本発明において使用されるカルダノールとしては、天然物カルダノール、合成カルダノール、それらの誘導体が挙げられる。また、本発明において使用されるカルダノールは、カシューナッツ殻油の主成分のアナカルド酸を脱炭酸することにより、得ることができる。このようなカルダノールは、カシューナッツ殻油と同様の含有量で、増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤、腸内菌叢改善剤、飼料添加剤、飼料に含めることができる。なお、加熱処理カシューナッツ殻油を用いる場合、加熱処理カシューナッツ殻油中のアナカルド酸とカルダノールとの質量比は、好ましくは、０：１００～２０：８０である。
本発明において使用されるカルドールとしては、天然物カルドール、合成カルドール、それらの誘導体が挙げられる。また、本発明において使用されるカルドールは、カシューナッツ殻油から精製することにより、得ることもできる。このようなカルドールは、カシューナッツ殻油と同様の含有量で、増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤、腸内菌叢改善剤、飼料添加剤、飼料に含めることができる。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤の対象となる動物は、豚、馬、家禽（鶏など）、ペット（犬、猫、ウサギなどの愛玩動物）などの単胃動物、及び、反芻胃が発達していない幼若反芻動物（牛であれば反芻胃が完成する12ヵ月齢未満、より好ましくは食道溝反射の残る4ヵ月齢未満）であるが、健常な動物の増体促進、飼料効率改善および腸内菌叢改善、例えば、各種栄養消化性の向上、または短鎖脂肪酸産生菌の増加など腸内での短鎖脂肪酸の増加が有用な動物である限り、これらに限定されない。本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤並びに腸内菌叢改善剤は、離乳後～６ヵ月齢の豚に投与されることが好ましく、さらに好ましくは、離乳後～３ヵ月齢の豚である。本発明の下痢症低減剤は、離乳後の豚に投与されることが好ましい。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤は、豚などの単胃動物又は幼若反芻動物に投与することにより、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを投与しない、非投与コントロールと比較して、例えば、１日当たりの体重が増加するか、または、飼料要求率が低下し、好ましくは、１日当たりの増体重が２％以上であるか、または、飼料要求率が３％以上低減される。さらに好ましくは５％以上低減される。また、本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤は、豚などの単胃動物又は幼若反芻動物に投与することにより、例えば、各種栄養成分の消化率が改善される、または腸内菌叢が改善され、非投与コントロールと比較して、腸内で短鎖脂肪酸生産菌が増加し、結果として、腸内で短鎖脂肪酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、酪酸）が増加する。本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤により、好ましくは、血中のプロピオン酸が６０％以上、ｎ－酪酸の濃度が３０％以上増加する。前述の通り、特に豚は盲腸・結腸が発達しているため、総エネルギー吸収量の約３０％を盲腸、結腸における細菌類の発酵によって産生される短鎖脂肪酸から得ている（非特許文献１）。すなわち、本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤によって、単胃動物又は幼若反芻動物の栄養消化性の向上、摂取エネルギーの増加、成長促進、下痢などの疾病予防、及び飼料効率向上に寄与することができる。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤の剤形は特に制限されず、例えば、粉剤、ペレット、粒剤、液体、固体、錠剤、カプセル剤、乳剤など任意の形態とすることができる。本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤は、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドール、並びに必要に応じて任意成分を混合し、製剤化することにより製造することができる。なお、剤形の形態によっては、カシューナッツ殻油を含んだカシューナッツ殻、カシューナッツ殻の粉砕・破砕物、カシューナッツ皮をそのまま他の任意成分と混合させて、本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤とすることができる。さらに、他の任意成分と混合させず、カシューナッツ殻そのもの、カシューナッツ殻の粉砕・破砕物そのもの、またはカシューナッツ皮そのものを、飼料添加剤、さらには飼料とすることもできる。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤は、好ましくはシリカ、より好ましくは平均粒径が１５０μｍ以上であるシリカを含む粉剤であり、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールがシリカに吸着・含有されている。このようなシリカ製剤は、例えば、国際公開ＷＯ２００９／１５１０４８号パンフレットに記載されている。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤には、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールと、珪藻土、ベントナイト、モンモリロナイト、ゼオライト、パーライト、酸性白土、活性白土、ケイ酸を適宜混和して飼料添加剤としても良い。このような吸油剤は、例えば、国際公開ＷＯ２０１１／０１３５９２号パンフレットに記載されている。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤並びに腸内菌叢改善剤は、ペットフード、ペット用サプリメント（以下、飼料という。）に用いられる他の飼料成分と混合して、飼料とすることができる。飼料の種類や、カシューナッツ殻油以外の成分は、特に制限されない。飼料は、犬、猫、ウサギなどの単胃動物用である。
本発明の飼料は、飼料添加剤をそのまま飼料成分に添加し、混合して製造することができる。この際、粉末状、固形状の飼料添加剤を用いる場合は、混合を容易にするために飼料添加剤を液状又はゲル状の形態にしてもよい。この場合は、水、大豆油、菜種油、コーン油などの植物油、液体動物油、ポリビニルアルコールやポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸などの水溶性高分子化合物を液体担体として用いることができる。また、飼料中におけるカシューナッツ殻油の均一性を保つために、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、キサンタンガム、カゼインナトリウム、アラビアゴム、グアーガム、タマリンド種子多糖類などの水溶性多糖類を配合することも好ましい。
本発明の飼料は、糖類（乳糖、トレハロースなど）、メイズ、マイロ、ふすま、米糠、脱脂糠、乾燥糠、圧ぺん大麦、圧ぺんトウモロコシ、大豆粕、トウモロコシ粉、米粉、大豆粉などを含んでもよい。これらの飼料中の濃度としては、好ましくは１～９０質量％、より好ましくは５～７５質量％、さらに好ましくは１０～５０質量％である。
本発明の飼料は、また、豚、馬、家禽（鶏など）、ペット（犬、猫、ウサギなどの愛玩動物）などの単胃動物、及び反芻胃が発達していない幼若反芻動物の成長促進に有効な成分、栄養補助成分、保存安定性を高める成分等の任意成分をさらに含むものであってもよい。このような任意成分としては、例えば、エンテロコッカス類、バチルス類、ビフィズス菌類等の生菌剤；アミラーゼ、リパーゼ等の酵素；Ｌ－アスコルビン酸、塩化コリン、イノシトール、葉酸等のビタミン；塩化カリウム、クエン酸鉄、酸化マグネシウム、リン酸塩類等のミネラル；ＤＬ－アラニン、ＤＬ－メチオニン、塩酸Ｌ－リジン等のアミノ酸；フマル酸、酪酸、乳酸、酢酸及びそれらの塩類等の有機酸；エトキシキン、ジブチルヒドロキシトルエン等の抗酸化剤；プロピオン酸カルシウム等の防カビ剤；カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、カゼインナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム等の粘結剤；グリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル等の乳化剤；アスタキサンチン、カンタキサンチン等の色素；各種エステル、エーテル、ケトン類等の着香料が挙げられる。
本発明の飼料は、豚、馬、家禽（鶏など）、ペット（犬、猫、ウサギなどの愛玩動物）、反芻胃が発達していない幼若反芻動物の飼育に好適である。摂取させる飼料の量は、動物の種類、体重、年齢、性別、健康状態、飼料の成分などにより適宜調節することができ、このとき飼料に含まれるカシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールが好ましくは０．００１～１００ｇ／頭・日、より好ましくは０．００１～５０ｇ／頭・日、さらに好ましくは０．００１～１０ｇ／頭・日である。飼料を摂取させる方法及び飼育する方法は、単胃動物の種類に応じて、通常用いられる方法をとることができる。以下、本発明の実施例を説明するが、本発明はかかる実施例に限定されるものではない。
製造例１
Thao Nguyen Co., Ltd.よりカシューナッツ殻油（CNSL）を購入した。ＣＮＳＬの組成は以下の方法で測定した。すなわち、HPLC（Waters600、日本ウォーターズ株式会社）、検出機（Waters490E、日本ウォーターズ株式会社）、プリンタ（クロマトパックＣ－Ｒ６Ａ、島津製作所）、カラム（SUPELCOSIL LC18、SUPELCO社）を用いた。アセトニトリル：水：酢酸が８０：２０：１（容量比）の溶媒を用い、流速は２ｍｌ／分とした。２８０ｎｍの吸光度で検出した。カシューナッツ殻油には、アナカルド酸が６５．７質量％、カルダノールが５．１質量％、カルドールが２３．５質量％含まれていた。さらにCNSLを100℃にて加熱して加熱処理CNSLを得た。同様に組成を測定したところ、アナカルド酸は含まれず、カルダノールが７１．２質量％、カルドールが２４．１質量％含まれていた。その後、CNSLおよび加熱処理CNSL ４００ｇに対し、無水ケイ酸（エボニックデグサジャパン（株）製、Sipernat 2200）６００ｇを混合してCNSL含有シリカおよび加熱処理CNSL含有シリカを作成した。
Thao Nguyen Co., Ltd.よりカシューナッツ殻油（CNSL）を購入した。ＣＮＳＬの組成は以下の方法で測定した。すなわち、HPLC（Waters600、日本ウォーターズ株式会社）、検出機（Waters490E、日本ウォーターズ株式会社）、プリンタ（クロマトパックＣ－Ｒ６Ａ、島津製作所）、カラム（SUPELCOSIL LC18、SUPELCO社）を用いた。アセトニトリル：水：酢酸が８０：２０：１（容量比）の溶媒を用い、流速は２ｍｌ／分とした。２８０ｎｍの吸光度で検出した。カシューナッツ殻油には、アナカルド酸が６５．７質量％、カルダノールが５．１質量％、カルドールが２３．５質量％含まれていた。さらにCNSLを100℃にて加熱して加熱処理CNSLを得た。同様に組成を測定したところ、アナカルド酸は含まれず、カルダノールが７１．２質量％、カルドールが２４．１質量％含まれていた。その後、CNSLおよび加熱処理CNSL ４００ｇに対し、無水ケイ酸（エボニックデグサジャパン（株）製、Sipernat 2200）６００ｇを混合してCNSL含有シリカおよび加熱処理CNSL含有シリカを作成した。
実施例１
WLD交雑離乳仔豚８頭（１腹）を供試し、CNSLによる成長促進効果を検証した。１腹仔を22日齢で離乳させ、性別および体重が出来るだけ均一になるよう4頭ずつ2群に割り付けた。群ごとに豚房へ収容し、試験開始後0～4週まで基礎飼料にCNSL含有シリカ製剤（製剤添加量400 ppm、CNSL添加終濃度200 ppm）および対照製剤（シリカ400 ppm）を添加して給与した。飲水は自由飲水とした。試験開始後0, 1, 2, 3および4週に、全頭の体重および飼料摂取量の測定を行った。なお、基礎飼料の栄養成分は表１に示す通りであった。
WLD交雑離乳仔豚８頭（１腹）を供試し、CNSLによる成長促進効果を検証した。１腹仔を22日齢で離乳させ、性別および体重が出来るだけ均一になるよう4頭ずつ2群に割り付けた。群ごとに豚房へ収容し、試験開始後0～4週まで基礎飼料にCNSL含有シリカ製剤（製剤添加量400 ppm、CNSL添加終濃度200 ppm）および対照製剤（シリカ400 ppm）を添加して給与した。飲水は自由飲水とした。試験開始後0, 1, 2, 3および4週に、全頭の体重および飼料摂取量の測定を行った。なお、基礎飼料の栄養成分は表１に示す通りであった。
給与試験の結果は表２に示す通りであった。
CNSLの4週間給与によって、仔豚の体重が増加する傾向が得られた。
CNSLの4週間給与によって、仔豚の体重が増加する傾向が得られた。
さらに給与試験期間中の飼料摂取量は表３に示す通りであった。
これら給与試験においては特に後期人工乳を基礎飼料とした試験開始14～28日に増体重が良好となり、その結果、飼料要求率（体重1kgの増加に要する飼料の量(kg)）が約12％改善されたことが分かる。飼料摂取量には大きな変化が見られなかったことから、摂取した飼料の栄養消化性が改善され、良好な増体重に繋がったことが推察される。
これら給与試験においては特に後期人工乳を基礎飼料とした試験開始14～28日に増体重が良好となり、その結果、飼料要求率（体重1kgの増加に要する飼料の量(kg)）が約12％改善されたことが分かる。飼料摂取量には大きな変化が見られなかったことから、摂取した飼料の栄養消化性が改善され、良好な増体重に繋がったことが推察される。
実施例２
WLD交雑離乳仔豚８頭（１腹）を供試し、加熱処理CNSLによる成長促進効果を検証した。１腹仔を20日齢で離乳させ、性別および体重が出来るだけ均一になるよう4頭ずつ2群に割り付けた。群ごとに豚房へ収容し、試験開始後0～4週まで基礎飼料に加熱処理CNSL含有シリカ製剤（製剤添加量400 ppm、加熱処理CNSL添加終濃度200 ppm）および対照製剤（シリカ400 ppm）を添加して給与した。飲水は自由飲水とした。試験開始後0, 1, 2, 3および4週に、全頭の体重および飼料摂取量の測定を行った。なお、基礎飼料の栄養成分は表１に示す通りであった。
WLD交雑離乳仔豚８頭（１腹）を供試し、加熱処理CNSLによる成長促進効果を検証した。１腹仔を20日齢で離乳させ、性別および体重が出来るだけ均一になるよう4頭ずつ2群に割り付けた。群ごとに豚房へ収容し、試験開始後0～4週まで基礎飼料に加熱処理CNSL含有シリカ製剤（製剤添加量400 ppm、加熱処理CNSL添加終濃度200 ppm）および対照製剤（シリカ400 ppm）を添加して給与した。飲水は自由飲水とした。試験開始後0, 1, 2, 3および4週に、全頭の体重および飼料摂取量の測定を行った。なお、基礎飼料の栄養成分は表１に示す通りであった。
給与試験の結果は表４に示す通りであった。
加熱処理CNSLの4週間給与によって、仔豚の体重が増加する傾向が得られた。
加熱処理CNSLの4週間給与によって、仔豚の体重が増加する傾向が得られた。
さらに給与試験期間中の飼料摂取量は表５に示す通りであった。
これら給与試験においては特に後期人工乳を基礎飼料とした試験開始14～28日に増体重が良好となり、その結果、飼料要求率（体重1kgの増加に要する飼料の量(kg)）が約１１％改善されたことが分かる。飼料摂取量には大きな変化が見られなかったことから、摂取した飼料の栄養消化性が改善され、良好な増体重に繋がったことが推察される。
これら給与試験においては特に後期人工乳を基礎飼料とした試験開始14～28日に増体重が良好となり、その結果、飼料要求率（体重1kgの増加に要する飼料の量(kg)）が約１１％改善されたことが分かる。飼料摂取量には大きな変化が見られなかったことから、摂取した飼料の栄養消化性が改善され、良好な増体重に繋がったことが推察される。
実施例３
一般的な一貫経営農場で飼育されている交雑種仔豚（３４日齢）、８頭（同一腹）を使用した。基礎飼料として離乳後期用飼料SDS No. 2（日本配合飼料製）を使用した。基礎飼料の栄養成分は表１に示す通りであった。試験群は対照区およびCNSL 1,000 ppm飼料添加（シリカ製剤として2,500 ppm）区の２区とした。ただし、雄および雌の数を出来る限り揃え、さらに体重が均一になるように配慮して、４頭ずつ各区に割り付けた。
導入時に体重測定を行った後、３日間基礎飼料のみを給与して、施設及び飼料に馴致させた。試験開始時からCNSL添加飼料を自由摂取にて給餌させ、飲水も試験期間を通して自由摂取とした。試験期間は２週間とし、試験期間を通して飼料摂取量及び飲水量を毎日朝１０時に計測した。試験開始時、試験開始後７日および試験開始後１４日に体重を測定した。また、試験終了時に全頭剖検し、盲腸静脈血および門脈血の採材を行った。さらに組織および盲腸発酵への影響を観察するため、盲腸内容物および盲腸中央部の組織採材も行った。採取した組織は直ちに生理食塩水にて洗浄し、ホルマリンにて組織固定した。
一般的な一貫経営農場で飼育されている交雑種仔豚（３４日齢）、８頭（同一腹）を使用した。基礎飼料として離乳後期用飼料SDS No. 2（日本配合飼料製）を使用した。基礎飼料の栄養成分は表１に示す通りであった。試験群は対照区およびCNSL 1,000 ppm飼料添加（シリカ製剤として2,500 ppm）区の２区とした。ただし、雄および雌の数を出来る限り揃え、さらに体重が均一になるように配慮して、４頭ずつ各区に割り付けた。
導入時に体重測定を行った後、３日間基礎飼料のみを給与して、施設及び飼料に馴致させた。試験開始時からCNSL添加飼料を自由摂取にて給餌させ、飲水も試験期間を通して自由摂取とした。試験期間は２週間とし、試験期間を通して飼料摂取量及び飲水量を毎日朝１０時に計測した。試験開始時、試験開始後７日および試験開始後１４日に体重を測定した。また、試験終了時に全頭剖検し、盲腸静脈血および門脈血の採材を行った。さらに組織および盲腸発酵への影響を観察するため、盲腸内容物および盲腸中央部の組織採材も行った。採取した組織は直ちに生理食塩水にて洗浄し、ホルマリンにて組織固定した。
斃殺はペントバルビタール麻酔下における放血にて実施した。その後開腹し、上記に示す通りの採材を行った。採材サンプルは、各々以下の通りの解析を行った。
（１）体重および飼料摂取量の変化
実施例１と同様に解析を行った。
（２）血中短鎖脂肪酸濃度の測定
採取した血液は、血清を分取後、凍結し、nonpolar DB-5MS capillary column (30 m× 0.25 mm I.D. × 0.25 μm; J&W Scientific, Folsom, CA, USA)を装着したGCMS-QP2010 Ultra (島津製作所)を用いて短鎖脂肪酸（酢酸、プロピオン酸、ｎ－酪酸）の濃度を測定した。
（３）病理組織学的検査
採取した盲腸中央部の組織は、パラフィン切片作成、ＨＥ染色後、光学顕微鏡（BX51、オリンパス）で観察し、デジタルカメラ（DP25、オリンパス）で画像を取り込んだ。取り込んだ画像は画像解析ソフト（DP2-BSW、オリンパス）で解析し、盲腸の陰窩の深さを算出した。
（４）腸内細菌の菌叢解析
各試験区で２頭を選抜し、剖検時の盲腸内容物からQuickGene-810 system及びQuickGene DNA tissue kit（FujiFilm）を用いて細菌ゲノムDNAを抽出した。次に、１６ＳｒＤＮＡを増幅するため、フォワードプライマー（配列番号１）とリバースプライマー（配列番号５）のセット、フォワードプライマー（配列番号２）とリバースプライマー（配列番号５）のセット、フォワードプライマー（配列番号３）とリバースプライマー（配列番号５）のセット、およびフォワードプライマー（配列番号４）とリバースプライマー（配列番号５）のセットを用い、１頭から得られた細菌ゲノムDNA当たり、４通りのプライマーセットを用いて各々１回ＰＣＲ反応を行った。ＰＣＲ反応にはiCycler（ バイオ・ラッド）を用い、反応条件は95℃ 5m、（95℃ 30s、57℃ 30s、72℃ 1m)x30回、72℃ 5minとした。なお、各フォワードプライマーの塩基配列（配列番号１～４）中のCCTACGGGAGGCAGCAGは357Fの配列、リバースプライマーの塩基配列（配列番号５）中のCCGTCAATTCMTTTRAGTは926Rの配列に相当する。得られたＰＣＲ産物の塩基配列は、次世代シークエンサー（Genome Sequencer FLX＋System(GS FLX＋）、Roche社）で決定した。決定した配列をGenBankに登録されている配列と比較し、菌叢解析を行った。
（１）体重および飼料摂取量の変化
実施例１と同様に解析を行った。
（２）血中短鎖脂肪酸濃度の測定
採取した血液は、血清を分取後、凍結し、nonpolar DB-5MS capillary column (30 m× 0.25 mm I.D. × 0.25 μm; J&W Scientific, Folsom, CA, USA)を装着したGCMS-QP2010 Ultra (島津製作所)を用いて短鎖脂肪酸（酢酸、プロピオン酸、ｎ－酪酸）の濃度を測定した。
（３）病理組織学的検査
採取した盲腸中央部の組織は、パラフィン切片作成、ＨＥ染色後、光学顕微鏡（BX51、オリンパス）で観察し、デジタルカメラ（DP25、オリンパス）で画像を取り込んだ。取り込んだ画像は画像解析ソフト（DP2-BSW、オリンパス）で解析し、盲腸の陰窩の深さを算出した。
（４）腸内細菌の菌叢解析
各試験区で２頭を選抜し、剖検時の盲腸内容物からQuickGene-810 system及びQuickGene DNA tissue kit（FujiFilm）を用いて細菌ゲノムDNAを抽出した。次に、１６ＳｒＤＮＡを増幅するため、フォワードプライマー（配列番号１）とリバースプライマー（配列番号５）のセット、フォワードプライマー（配列番号２）とリバースプライマー（配列番号５）のセット、フォワードプライマー（配列番号３）とリバースプライマー（配列番号５）のセット、およびフォワードプライマー（配列番号４）とリバースプライマー（配列番号５）のセットを用い、１頭から得られた細菌ゲノムDNA当たり、４通りのプライマーセットを用いて各々１回ＰＣＲ反応を行った。ＰＣＲ反応にはiCycler（ バイオ・ラッド）を用い、反応条件は95℃ 5m、（95℃ 30s、57℃ 30s、72℃ 1m)x30回、72℃ 5minとした。なお、各フォワードプライマーの塩基配列（配列番号１～４）中のCCTACGGGAGGCAGCAGは357Fの配列、リバースプライマーの塩基配列（配列番号５）中のCCGTCAATTCMTTTRAGTは926Rの配列に相当する。得られたＰＣＲ産物の塩基配列は、次世代シークエンサー（Genome Sequencer FLX＋System(GS FLX＋）、Roche社）で決定した。決定した配列をGenBankに登録されている配列と比較し、菌叢解析を行った。
以下に試験結果を記す。
（１）体重および飼料摂取量の変化
飼育期間中の平均体重変化の推移を表６と図１に示した。対照区、CNSL給与区の間に差はなく、両区とも順調に体重が増加した。一方、図２に飼料要求率を示したが、CNSL給与区の飼料要求率は2.05と、対照区の2.19と比較し、約6％ほど低い値となった。この結果は実施例１と比較して軽微な変化であるものの、CNSL給与により体重がより増加し、飼料要求率が改善するという同様の結果を示した。
（１）体重および飼料摂取量の変化
飼育期間中の平均体重変化の推移を表６と図１に示した。対照区、CNSL給与区の間に差はなく、両区とも順調に体重が増加した。一方、図２に飼料要求率を示したが、CNSL給与区の飼料要求率は2.05と、対照区の2.19と比較し、約6％ほど低い値となった。この結果は実施例１と比較して軽微な変化であるものの、CNSL給与により体重がより増加し、飼料要求率が改善するという同様の結果を示した。
（２）血中短鎖脂肪酸濃度の測定
表７、図３に盲腸静脈中の短鎖脂肪酸濃度を示し、そして、表８、図４に門脈中の短鎖脂肪酸濃度を示した。門脈中、盲腸静脈中いずれの血液においても総短鎖脂肪酸濃度が増加し、飼料の消化性が向上したことが推察された。さらに、門脈中および盲腸静脈中血液のプロピオン酸およびｎ-酪酸濃度が顕著に増加していることも明らかとなった。
表７、図３に盲腸静脈中の短鎖脂肪酸濃度を示し、そして、表８、図４に門脈中の短鎖脂肪酸濃度を示した。門脈中、盲腸静脈中いずれの血液においても総短鎖脂肪酸濃度が増加し、飼料の消化性が向上したことが推察された。さらに、門脈中および盲腸静脈中血液のプロピオン酸およびｎ-酪酸濃度が顕著に増加していることも明らかとなった。
（３）病理組織学的検査
盲腸の陰窩を形成する上皮細胞は、盲腸内の発酵によって生成する酪酸を栄養として成長することが明らかとなっている。上皮細胞が酪酸を摂取して成長することにより盲腸陰窩が深くなり、結果として腸管の表面積が増え、短鎖脂肪酸類の吸収能力が増加することに繋がる。表９、図５には盲腸上皮細胞の陰窩深を記載した。これよりCNSL区の陰窩深が対照区と比べて深くなっていることが分かり、血液分析の結果において盲腸静脈血中n-酪酸濃度が増加していることと良く相関していることが分かった。
盲腸の陰窩を形成する上皮細胞は、盲腸内の発酵によって生成する酪酸を栄養として成長することが明らかとなっている。上皮細胞が酪酸を摂取して成長することにより盲腸陰窩が深くなり、結果として腸管の表面積が増え、短鎖脂肪酸類の吸収能力が増加することに繋がる。表９、図５には盲腸上皮細胞の陰窩深を記載した。これよりCNSL区の陰窩深が対照区と比べて深くなっていることが分かり、血液分析の結果において盲腸静脈血中n-酪酸濃度が増加していることと良く相関していることが分かった。
（４）腸内細菌の菌叢解析
盲腸内容物の菌叢解析の結果を示す。
解析の結果、２検体の全菌数を示すOTU（Operational taxonomic unit）数が、CNSL給与区において約5％増加したことが明らかとなった（11,032→11,634）。その中でも配列番号６と配列番号７の塩基配列を有する微生物の顕著な増加が見られた。配列番号６と配列番号７の塩基配列をGenBankに登録されている配列と比較したところ、配列番号６はRoseburia faecis と、配列番号７はMegasphaera elsdeniiと99％一致した。Roseburia faecisは主要な腸内酪酸生成菌として知られており、本試験ではCNSL給与により3.1％から10.6％へ増加した。Megasphaera elsdenii は酪酸生成菌であると同時に、乳酸利用性のプロピオン酸生成菌としても知られており、0.7％から3.6％へとCNSL給与により顕著に増加することが確認された（表１０）。
盲腸内容物の菌叢解析の結果を示す。
解析の結果、２検体の全菌数を示すOTU（Operational taxonomic unit）数が、CNSL給与区において約5％増加したことが明らかとなった（11,032→11,634）。その中でも配列番号６と配列番号７の塩基配列を有する微生物の顕著な増加が見られた。配列番号６と配列番号７の塩基配列をGenBankに登録されている配列と比較したところ、配列番号６はRoseburia faecis と、配列番号７はMegasphaera elsdeniiと99％一致した。Roseburia faecisは主要な腸内酪酸生成菌として知られており、本試験ではCNSL給与により3.1％から10.6％へ増加した。Megasphaera elsdenii は酪酸生成菌であると同時に、乳酸利用性のプロピオン酸生成菌としても知られており、0.7％から3.6％へとCNSL給与により顕著に増加することが確認された（表１０）。
これらの実施例の結果を踏まえると、CNSLおよび加熱処理CNSL給与によっては栄養消化性向上による成長促進および飼料要求率の改善、さらには腸内細菌叢の総菌数増加と菌叢変化による摂取栄養分（総短鎖脂肪酸）の増加が期待されることが分かる。短鎖脂肪酸のうち、酢酸とプロピオン酸は大腸から吸収され栄養源として肝臓へとまわる一方で、酪酸は大腸粘膜上皮細胞のエネルギー源として使用されることが知られている。すなわち、盲腸および大腸で発生する酪酸濃度が増加することで、大腸粘膜上皮組織が肥厚し、丈夫になることで、粘膜傷害性に対する予防効果が期待される（Tsukahara et. al., 2001、2003）。さらに大腸中の乳酸、コハク酸の過剰は下痢を誘発すること、特に豚における過食性消化不良下痢症においては乳酸が過剰になることも知られている。本試験において盲腸中のM. elsdeniiが顕著に増加したことは、単胃動物の下痢症の防止にも大いに貢献することが期待できる。実際にM. elsdeniiをプロバイオティックとして使用し、大腸内の過剰な乳酸を低下させられることは実証されている(Tsukahara et. al., 2002、Ushida et. al., 2002、Hashizume et. al., 2003、Tsukahara et. al., 2006)。
本発明の増体促進及び／又は飼料効率改善剤、下痢症低減剤、腸内菌叢改善剤並びにそれらを含む飼料は、畜産の分野で有用である。
Claims (25)
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールが投与されていない群と比べて、飼料要求率が２％以上低減される、請求項１記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールが投与されていない群と比べて、１日当たりの増体重が２％以上である、請求項１または２記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
- 腸内菌叢を改善する効果を有する、請求項１～３のいずれか１項記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
- 豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である請求項１～４のいずれか１項記載の増体促進及び／又は飼料効率改善剤。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善用飼料。
- 豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である請求項６記載の増体促進及び／又は飼料効率改善用飼料。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを単胃動物又は幼若反芻動物に投与することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善方法。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１００ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、請求項８記載の方法。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１０ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、請求項９記載の方法。
- 単胃動物又は幼若反芻動物が豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物である請求項８～１０のいずれか１項記載の方法。
- 単胃動物が離乳後～６ヵ月齢の豚である、請求項１１記載の方法。
- 単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率の改善に用いるための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドール。
- 単胃動物又は幼若反芻動物の増体促進及び／又は飼料効率改善剤の製造のための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールの使用。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症低減剤。
- 豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である請求項１５記載の下痢症低減剤。
- 下痢症が離乳後の豚に発症する、請求項１６記載の下痢症防除剤。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを含有することを特徴とする、下痢症低減用飼料。
- 豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物用である請求項１８記載の下痢症低減用飼料。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを単胃動物又は幼若反芻動物に投与することを特徴とする、単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症を低減する方法。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１００ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、請求項２０記載の方法。
- カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールを０．００１ｇ～１０ｇ／頭／日 投与することを特徴とする、請求項２１記載の方法。
- 単胃動物又は幼若反芻動物が豚、馬、家禽、ペット、又は反芻胃の発達していない幼若反芻動物である請求項２０～２２のいずれか１項記載の方法。
- 単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症の低減に用いるための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドール。
- 単胃動物又は幼若反芻動物の下痢症低減剤の製造のための、カシューナッツ殻油、加熱処理カシューナッツ殻油、アナカルド酸、カルダノール、及び／又は、カルドールの使用。
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