WO2014023081A1 - 青嵩素衍生物及其制法和应用 - Google Patents
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- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
Definitions
- the invention belongs to the field of chemical medicine. Specifically, it relates to novel artemisinin derivatives and processes and applications thereof. Background technique
- Artemisia annua L. is also an annual herb. Artemisinin is a sesquiterpene lactone antimalarial drug extracted from Chinese herbal medicine Artemisia annua L. in the early 1970s by Chinese pharmaceutical workers. Based on this structure, it has been synthesized and semi-synthesized into a series of antimalarial activities. Derivatives such as dihydroartemisinin, artesunate, artemether, dihydroartemether, arteether, and the like.
- Artemisinin Artemisia S
- DHA Dihydroartemisinin
- ARS Artesunate
- Artemisinin and its derivatives have been recognized worldwide for their rapid onset and efficacy. High, low toxicity and other advantages.
- artemisinin drugs also have a variety of other pharmacological effects, such as anti-schistosomiasis, antiarrhythmia, antiasthmatic, anti-endotoxin, anti-allergy, lupus erythematosus, immunosuppression.
- IC50 The average half-inhibitory concentration IC50 was 12.3 ⁇ , including leukemia, colon cancer, melanoma, Selective killing of various tumor cells including prostate cancer, liver cancer, ovarian cancer, breast cancer, cervical cancer, human poorly differentiated squamous epithelial rhinitis, etc. Artesunate has obvious effects on leukemia cells and rectal cancer cells. Cytotoxicity, its semi-inhibitory concentration (IC50) was 1.1 1 ⁇ 0.56 and 2.13 ⁇ 0.74 ⁇ , respectively.
- the literature also analyzed 464 drug activity-related genes (including drug resistance genes, DNA damage repair genes, apoptosis-regulating genes, proliferation-related genes, proto-oncogenes, tumor suppression) before and after artesunate, arteether and artemether.
- Gene and cytokine expression profiles 208 genes were found to be involved in the anti-tumor activity of the above three artemisinin drugs, mainly related to proliferation-related genes, oncogenes and tumor suppressor genes such as catalase and glutathione. Synthase, thioredoxin peroxidase, and thioredoxin reductase.
- Another object of the present invention is to provide a use of the artemisinin derivative for inhibiting tumors.
- X is -0-, -S-, -NH- or -CH 2 -; Y is -CO- or -CH 2 -; Z is -CH 2 -, -0-, -CO-, -CH 2 CO-, -CH 2 NH -, -CH 2 0-, -C0CH 2 -, -NHCH 2 -, -0CH 2 -, or -NH-; n is an integer from 0 to 5; k is 0 or 1;
- P is selected from the following ety):
- R, R4 are each independently a group selected from the group consisting of: hydrogen, halogen, CC 12 straight or branched fluorenyl, C 2 -C 12 straight or branched An unsaturated hydrocarbon group, a C 3 -C 12 cycloalkyl group, a cyano group, a nitro group, an amino group or an amine group substituted with a mercapto group, a hydroxyl group, a hydroxymethyl group, a trifluoromethyl group, a trifluoromethoxy group, a carboxyl group, a nonylbenzene group a substituted, substituted phenyl, naphthyl, biphenylyl, or substituted or unsubstituted saturated or unsaturated c 3 -c 12 heterocyclyl, wherein said substituent is selected from the group consisting of: halogen, trifluoromethyl, acetylene a base, a hydroxyl group, an amino group, a d
- R 7 is a group selected from the group consisting of one or two at any position on the phenyl ring: hydrogen, halogen, -Cn straight or branched fluorenyl, C 2 -C 12 straight or branched unsaturated Hydrocarbyl, C 3 -C 12 cycloalkyl, ethynyl, cyano, nitro, amino, hydroxy, hydroxymethyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, carboxy, nonylphenyl, substituted phenyl, naphthalene Base, biphenyl, or substituted or unsubstituted saturated or unsaturated C 3 -C 12 heterocyclic group, benzyl alcohol group, substituted benzyl alcohol group, hydrazine, hydrazine-dimethyl group, hydrazine, hydrazine-diethyl a substituent, wherein the substituent is selected from the group consisting of: halogen, trifluoromethyl, e
- R 8 and R 9 are each independently "" ⁇ - W - (D) Plant ( E ) r - where
- W is hydrogen, oxygen, NH, halogen, dC 12 linear or branched alkyl or alkylene, C 2 -C 12 linear or branched unsaturated hydrocarbon or alkylene (preferably ethyl), c 3 -c 12 cycloalkyl or cycloalkyl, cyano, nitro, amino, hydroxy, dc 4 hydroxydecyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, carboxy, nonylphenyl, substituted phenyl, naphthalene a base, a biphenyl group, or a substituted or unsubstituted saturated or unsaturated C 3 -C 12 heterocyclic or heterocyclylene group, anthracene, fluorenyl-dimethyl, anthracene, fluorene-diethyl, wherein The substituent is selected from the group consisting of halogen, trifluoromethyl, ethynyl, hydroxy, amino, dC
- D is carbonyl, -C 2 straight or branched fluorenyl or fluorenylene, C 2 -C 12 straight or branched unsaturated hydrocarbon or alkylene, substituted or unsubstituted saturated or unsaturated c 3 a -12 12heterocyclyl or heterocyclylene group, wherein the substituent is selected from the group consisting of halogen, trifluoromethyl, ethynyl, hydroxy, amino, dC 4 hydroxydecyl, carboxy or dC 4 amine fluorenyl or Aldehyde; £ is a 12 or 12 linear or branched alkyl or alkylene group, a C 2 -C 12 linear or branched unsaturated hydrocarbon or alkylene group, a substituted or unsubstituted saturated or unsaturated C 3 a -C 12 heterocyclic or heterocyclylene group, wherein the substituent is selected from the group consisting of halogen, trifluoromethyl,
- A is a linking group selected from the group consisting of
- B is a linking group selected from the group consisting of:
- m 0 or 1.
- the P is linked by -(A) m - or -(B) m -.
- R and R4 are each independently a group selected from the group consisting of hydrogen, halogen, cyano, nitro, amino or substituted by ⁇ -alkyl. Amino, hydroxy, hydroxymethyl, trifluoromethyl, trifluoromethoxy, carboxy, nonylphenyl, substituted phenyl, naphthyl or biphenyl.
- R and R4 are each independently a group selected from the group consisting of hydrogen or an amine group substituted with a ⁇ -alkyl group, which is substituted at any position on the benzene ring.
- q or t are each independently 1 or 4.
- R 7 is hydrogen or halogen substituted at one or two positions on the phenyl ring.
- R 8 and R 9 are each independently " ⁇ - W - ( D ) r ( E > r ⁇ " , wherein W is oxygen or NH;
- D is carbonyl, dC 6 linear or branched fluorenyl or fluorenylene, C 2 -C 6 linear or branched unsaturated hydrocarbon or alkylene, substituted or unsubstituted saturated or unsaturated C 3 - a C 6 heterocyclic group or a heterocyclic group (preferably a C 3 -C 6 heterocyclic group or a heterocyclic group having 1 to 3 hetero atoms selected from oxygen, nitrogen or sulfur);
- £ 1 is a straight or branched alkyl or alkylene group, a C 2 -C 6 linear or branched unsaturated hydrocarbon or alkylene group, a substituted or unsubstituted saturated or unsaturated C 3 -C 6 a heterocyclic group or a heterocyclic group (preferably having 1-3 heteroatoms selected from oxygen, nitrogen or heterocyclyl ⁇ 6 sulfur heteroatoms or heterocyclylene);
- j and r are each independently an integer of 0 to 5.
- D is a carbonyl group, a linear fluorenyl group or an alkylene group, an unsubstituted saturated 3 6 heterocyclic group (preferably C 3 - containing one hetero atom selected from oxygen, nitrogen or sulfur) C 6 heterocyclic group).
- j, r are each independently 0 or 1.
- X is -0-, -NH- or -CH 2 -.
- X is -0-, -NH- or -CH 2 -; and Z is -0-, -CO-, -NH- or -CH 2 -.
- X is -0-, -NH- or -CH 2 - ; Z is -0-, -CO-, -NH- or -CH 2 - ; and n is 0 or 1.
- X is -0-, -NH- or -CH 2 - ; Z is -0-, -CO-, -NH- or -CH 2 - ; n is 0 or 1; and m is 0 or 1.
- a process for the preparation of an artemisinin derivative according to the first aspect of the invention comprising the method of: subjecting RaNH or RaNH 2 and RbCOOH to acid-base condensation reaction, or RaCOOH and RbNH or RbNH 2 performing an acid-base condensation reaction, or subjecting RaOH and RbCOOH to an esterification reaction to form a compound of formula I;
- RaNH or RaNH 2 , RaCOOH ⁇ RaOH are compounds selected from the group consisting of:
- RbNH or RbNH 2 , RbCOOH are compounds selected from the group consisting of:
- R, q, R4, t are as defined in the first aspect of the invention.
- R 2 and R 3 are combined with an adjacent N: piperazine, 4-hydroxy- 4 -alkylpiperidine.
- R 5 and R 6 are each independently a group selected from the group consisting of:
- the heterocycloalkyl or aromatic heterocyclic ring contains 1 to 2 hetero atoms selected from the group consisting of oxygen, nitrogen and sulfur.
- the J is a phenyl group or a naphthyl ring. Or pyridine,
- an artemisinin derivative according to the first aspect of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a medicament for treating a tumor, inhibiting tumor or tumor cell growth.
- the artemisinin derivative is a compound of formula I, and in formula I, X is -0- or -CH 2 - ; Y is -CO- or -CH 2 - ; Z is - 0-, -CH 2 -, -CO- or -CH 2 CO-; n is an integer from 0 to 2; k is 0 or 1;
- P is a group selected from the group consisting of:
- n 0 or 1:
- the artemisinin derivative is selected from the group consisting of
- the artemisinin derivative is a compound of formula I, and in formula I, X is -0- or -CH 2 Y is -CO- or -CH 2 -; Z is -0- , -CH 2 -, -CO- or -CH 2 CO-; n is an integer from 0 to 2; k is 0 or 1; P is a group selected from the group below
- ⁇ is, ⁇ 1 is 0 or 1;
- n is 0 or 1;
- the artemisinin derivative is a compound of formula I, and in formula I, X is -0- or -CH 2 - Y is -CO- or -CH 2 - ; Z is -0-, -CH 2 -, -CO- or -CH 2 CO- ; n is an integer from 0 to 2; k is 0 or 1 m is 0 or 1 :
- R is hydrogen, q is 1; or Where m is 0, R is hydrogen, and q is 1; or
- n is 0 or 1;
- R4 is a diethyl substituted amino group, and t is 1;
- n 0 or 1
- R4 is a diethyl substituted amino group, and t is 1 ;
- the artemisinin derivative is selected from the group consisting of -
- the tumor comprises liver cancer, ovarian cancer, prostate cancer, glioma, gastrointestinal stromal tumor, breast cancer, lymphoma, leukemia, lung cancer, or colon cancer.
- a pharmaceutical composition comprising: (a) 0.0001 to 99.99% by weight of the artemisinin derivative of the first aspect of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof; (b) a pharmaceutically acceptable carrier.
- the pharmaceutical composition further comprises an antitumor drug selected from the group consisting of carboplatin, gemcitabine, artemisinin, dihydroartemisinin, and artesunate.
- a fifth aspect of the invention there is provided a method of treating the subject, the artemisinin derivative of the first aspect of the invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, or the fourth aspect of the invention Pharmaceutical composition.
- the method of treatment is for treating a tumor, inhibiting tumor or tumor cell growth.
- a medicament for inhibiting migration of a tumor cell-inducing macrophage or tumor-associated macrophage and/or a drug for inhibiting apoptosis of a macrophage in a microenvironment ;
- a sensitizer for the preparation of a PDGF inhibitor is provided.
- a pharmaceutical composition comprising: an active ingredient a: an artemisinin derivative according to the first aspect of the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof; and an active ingredient b: Anti-cancer drugs.
- the anticancer drug is a PDGF inhibitor.
- the PDGF inhibitor comprises sunitinib, Imatinib, AG13736 (Axitinib), Masitinib, Pazopanib, ( Solafenib, Nintedanib, Cediranib, etc.
- the pharmaceutical composition further comprises a pharmaceutically acceptable carrier.
- the content ratio of the active ingredient (a) to the active ingredient (b) in the pharmaceutical composition is
- a method of treating cancer comprises the steps of: administering to a cancer patient an artemisinin derivative according to the first aspect of the invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, the pharmaceutical composition according to the fourth or sixth aspect of the invention; or
- the method includes the steps of:
- the cancer patient is administered separately: (i) the artemisinin derivative of the first aspect of the invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, the pharmaceutical composition according to the fourth or sixth aspect of the invention; )Anti-cancer drugs.
- the anticancer drug is a PDGF inhibitor.
- the PDGF inhibitor comprises: sunitinib, Imatinib, AG 13736 (Axitinib), Masitinib, Pazopanib (Sorafenib), Satifenib, intedanib, Cediranib, etc.
- the ratio of the artemisinin derivative or the pharmaceutically acceptable salt thereof to the anticancer drug according to the first aspect of the invention is from 1:0.1 to 1:10; preferably 1: 0.5-1: 5 or 1: 0.1-1: 1.
- Figure 1 shows the anticancer effects of AR7 and DHA in various tumor types; wherein, Figure A shows that AR7 and DHA inhibit the growth of ovarian cancer cells in vitro; B shows that AR7 and DHA inhibit the growth of liver cancer cells in vitro. Figure C shows that AR7 and DHA inhibit the growth of glioma cells in vitro; Panel D shows the growth of primary cells inhibiting gastrointestinal stromal tumors by AR7 and DHA in vitro.
- Figure 2 shows the growth inhibitory effects of AR7 and DHA on lymphoma cells.
- Figure 3 shows that AR7 inhibits the growth of ovarian and hepatocarcinoma tumors in vivo in vivo; among them, Panels A and B show that AR7 inhibits the growth of ovarian cancer in vivo; Figure C shows that AR7 inhibits the growth of liver cancer tumors in vivo.
- Figure 4 shows the in vivo antitumor activity of AR7 and DHA in A2780 and OVC AR-3 ovarian cancer xenograft models in nude mice; wherein, A1, B1, and C1 images show allogeneic xenografts in A2780 ovarian cancer in nude mice In vivo antitumor activity in the model; A2, B2, and C2 images show in vivo antitumor activity in the OVCAR-3 ovarian cancer xenograft model.
- Figure 5 shows the inhibition of tumor migration by AR7 and DHA.
- Figure 6 shows the inhibitory effect of AR7 on the proliferation of A2780 and OVC AR-3 cells and the induction of apoptosis.
- Figure 7 shows the effect of AR7 on macrophages in the microenvironment.
- Figure 8 shows the interference and blockade of AR7 on the interaction of tumor cells with tumor microenvironment.
- Figure 9 shows the sensitizing effect of AR7 on clinical anti-tumor drugs. detailed description
- the inventors have unexpectedly discovered a novel structure of artemisinin derivatives by long-term and intensive research, and the artemisinin derivatives have more excellent effects of inhibiting tumor or tumor cell growth. On this basis, the inventors have completed the present invention.
- halogen means fluoro, chloro, bromo and iodo.
- -C ⁇ straight or branched alkyl means a straight or branched alkyl group having from 1 to 12 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl Base, hexyl, etc.
- C 2 -C 12 straight or branched unsaturated hydrocarbon group means a straight or branched chain alkenyl or alkynyl group having 2 to 12 carbon atoms, such as ethylene, propylene, butylene, Acetylene, propyne, butadiene, etc.
- C 3 -C 12 cycloalkyl group as used in the present invention means a cycloalkyl group having 3 to 12 carbon atoms, a cycloalkenyl group or a cycloalkynyl group such as a cyclopropyl group, a cyclobutyl group, a cyclobutenyl group or a cyclopentyl group. Alkenyl and so on.
- substituted or unsubstituted saturated or unsaturated C ⁇ cyclyl means saturated with from 3 to 12 carbon atoms containing one or more (e.g., 2) heteroatoms such as oxygen, nitrogen, sulfur, and the like.
- an unsaturated heterocyclic group and the heterocyclic group may be substituted or unsubstituted, wherein the substituent is selected from the group consisting of halogen, trifluoromethyl, ethynyl, hydroxy, amino, dC 4 hydroxy Alkyl (such as hydroxymethyl, hydroxyethyl, hydroxypropyl, hydroxybutyl), carboxyl, dC 4 amine thiol (such as amine methyl (NH 2 CH 2 -), amine ethyl, amine propyl, amine Butyl) or aldehyde group and the like.
- the substituent is selected from the group consisting of halogen, trifluoromethyl, ethynyl, hydroxy, amino, dC 4 hydroxy Alkyl (such as hydroxymethyl, hydroxyethyl, hydroxypropyl, hydroxybutyl), carboxyl, dC 4 amine thiol (such as amine methyl (NH 2 CH 2
- hydroxyalkyl alkyl refers to the dC-C4 alkyl substituted with hydroxy, such as hydroxymethyl, hydroxyethyl, hydroxypropyl, hydroxybutyl and the like.
- 4-hydroxy- 4 -mercaptopiperidine means that the 4-position of piperidine is substituted with a hydroxy CC 4 alkyl group.
- the "integer of 0 to 5" used in the present invention means 0, 1, 2, 3, 4 or 5.
- the "integer of 1 to 4" used in the present invention means 1, 2, 3 or 4. Active ingredient
- the term "compound of the invention” refers to a compound of formula I.
- the term also encompasses various crystalline forms, pharmaceutically acceptable salts, hydrates or solvates of the compounds of formula I.
- the compounds of the invention may have asymmetric centers, chiral axes and chiral planes, and may exist in the form of enantiomers, diastereomers, racemates, or mixtures thereof.
- the present invention provides a pharmaceutically acceptable salt of a compound of formula I, for example comprising: (0) a compound of formula I is reacted with an inorganic or organic acid to form a conventional non-toxic salt.
- a conventional non-toxic salt can be passed through a compound of formula I.
- an inorganic acid or an organic acid Prepared by reacting an inorganic acid or an organic acid, the hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric acid, aminosulfonic acid, phosphoric acid, etc., and the organic acid including citric acid, tartaric acid, lactic acid, pyruvic acid, acetic acid, Benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, methanesulfonic acid, naphthalenesulfonic acid, ethanesulfonic acid, naphthalene disulfonic acid, maleic acid, malic acid, malonic acid, fumaric acid, succinic acid, propionic acid, oxalic acid, three Fluoroacetic acid, stearic acid, pamoic acid, hydroxymaleic acid, phenylacetic acid, benzoic acid, salicylic acid, glutamic acid, ascorbic acid, p-aminobenzenesul
- the present invention provides a preferred process for the preparation of a compound of formula I, comprising the steps of: a hydroxyl-containing intermediate RaOH, an amino or amino group-containing intermediate RaNH or RaNH 2 or a carboxyl group-containing intermediate RaCOOH, respectively and correspondingly
- the amino or amino group-containing intermediate RbNH or RbNH 2 , or the carboxyl group-containing intermediate RbCOOH is dissolved in CH 2 C1 2 in the presence of EDCI and DMAP at a certain temperature (eg room temperature or 18-30 ° C) Stirring for a period of time (preferably 1-48 hours; preferably 5-40 hours; more preferably 20-30 hours; optimally 24 hours) provides a compound of formula I.
- the corresponding reactions are: (1) RaNH or RaNH 2 and RbCOOH are subjected to acid-base condensation reaction to form an amide compound of formula I; (2) RaCOOH and RbNH or RbNH 2 are subjected to acid-base condensation reaction to form An amide of the compound of the formula I; (3) an esterification reaction of RaOH and RbCOOH to form an ester of the compound of the formula I.
- the intermediate compounds used in the present invention may be commercially available or may be prepared by methods well known to those skilled in the art, for example, preferably, but not limited to, prepared as follows, and the following conditions are not applicable to the present invention.
- the preparation of the intermediates used constitutes any limitation.
- carboxyl-containing intermediate RaCOOH can be any compound having a carboxyl group or preferably from the group below
- Dihydroartemisinin (Compound 1) and cyclobutyric anhydride (Compound 2) are dissolved in an inert solvent (such as CH 2 C1 2 ), added with imidazole, stirred at a certain temperature (such as room temperature) for a period of time (such as l -5h or 3h), thereby obtaining compound 3.
- Dihydroartemisinin (Compound 1) is dissolved in an inert solvent (such as CH 2 C1 2 ), a base (such as pyridine) is added, and after cooling (such as to about (TC), benzoyl chloride is added dropwise, and the reaction is carried out for a period of time. At time (e.g., 18h), compound 5 is obtained.
- Dissolve compound 6 in an inert solvent such as a mixed solvent of dioxane and water
- an oxidizing reagent such as
- Os0 4 (catalytic amount) / NaI0 4 ) and 2,6-lutidine are reacted at a certain temperature (e.g., room temperature) for a certain period of time (e.g., 24 h) to give Compound 7.
- a certain temperature e.g., room temperature
- a certain period of time e.g. 24 h
- Dissolve compound 6 in an inert solvent such as diethyl ether
- an inert solvent such as diethyl ether
- a solution of BH 3 SMe 2 in an inert solvent such as tetrahydrofuran
- the pH is adjusted to alkaline (such as greater than 7)
- stirring for a period of time such as l Omin
- adding 30% H 2 0 2 stirring a section
- stirring a section After the time (e.g., lh), after raising the temperature (e.g., to room temperature;), stirring for a while (e.g., lh) gives compound 9.
- Dissolve compound 9 in an inert solvent such as CH 2 C1 2
- a base such as triethylamine
- TsCl at a certain temperature (such as about 0 ° C)
- raise the temperature such as to room temperature.
- Compound 10 is obtained for a period of time (e.g., 20 h).
- Dissolve compound 13 in an inert solvent such as CH 2 CI 2 ;>, add a base (such as triethylamine), at a certain temperature (such as O'C), add methylsulfonyl chloride (MsCl), and raise the temperature ( After a period of time (e.g., to 20 h), the compound 14 is obtained.
- an inert solvent such as CH 2 CI 2 ;>, add a base (such as triethylamine), at a certain temperature (such as O'C), add methylsulfonyl chloride (MsCl), and raise the temperature ( After a period of time (e.g., to 20 h), the compound 14 is obtained.
- step h of method (3) The procedure is the same as step h of method (3), except that compound 14 is substituted for compound 10.
- Dissolve dihydroartemisinin (Compound 1) in an inert solvent such as CH 2 C1 2
- an azide reagent such as N a N 3
- TMSC1 trimethyl chlorosilane
- a catalytic amount of Nal is added, and after raising the temperature (for example, to room temperature), the reaction is carried out for a certain period of time (for example, 30 hours) to obtain a compound 17.
- TMSC1 trimethyl chlorosilane
- Compound 17 is dissolved in an inert solvent (such as tetrahydrofuran), added with triphenylphosphine (Ph 3 P) and a small amount of water, protected by an inert gas (such as nitrogen), at a temperature (such as about 80 ° C), the reaction Compound 18 is obtained over a period of time (e.g., 10 h).
- an inert solvent such as tetrahydrofuran
- an inert gas such as nitrogen
- step h of method (3) The procedure is the same as step h of method (3), except that compound 19 is substituted for compound 10.
- an amino or amino group-containing intermediate RaNH or RaNH 2 , or a hydroxyl group-containing intermediate RaOH may be any amino or amino group-containing intermediate RaNH or RaNH 2 , or a hydroxyl group-containing intermediate RaOH.
- the preparation method of the amino or amino group-containing intermediate RaNH or RaNH 2 , or the hydroxyl group-containing intermediate RaOH may preferably, but not limited to, be carried out as follows, including:
- Method (2) Preparation of Compound 25-28, Compound 46-1, or Compound 46 2.1 Compounds 25-28, Compound 46-1
- a compound having a protecting group such as a tert-butoxycarbonyl group (i.e., Boc) is subjected to deprotection in an inert solvent in the presence of acid trifluoroacetic acid to give compound 46.
- Dissolve compound 10 or compound 14 in an inert solvent such as EtOH
- an inert solvent such as EtOH
- ammonia water and react at a certain temperature (such as room temperature;) for a period of time (such as 1 - 10 days, preferably 5 days) to obtain compound 29 Or compound 30.
- the fragment P may be a compound having an amino group or an amine group, and may be reacted with the above two types of compounds accordingly to form a corresponding amide compound or ester compound, preferably a compound and its preparation, as follows (but not Limited to: Method (1): Preparation of Compound 32 or Compound 47
- Dissolve compound 34 in an inert solvent such as tetrahydrofuran
- a base such as triethylamine eq
- cool such as to about 0
- an inert gas such as nitrogen
- add chloroacetyl chloride 2.0 eq
- the reaction is carried out for a period of time (e.g., 2 h) to give the compound 35.
- Dissolve compound 37 in an inert solvent such as CH 2 C1 2
- adding the corresponding anhydride ie
- stirring at a certain temperature (such as 40 ° C) for a period of time (such as 1-20 hours, or 5-15 hours) to obtain compound 38.
- the corresponding acid anhydride may be selected from the group consisting of: phthalic anhydride, 5-7-membered cyclic anhydride, and 5-7-membered heterocyclic acid anhydride.
- the corresponding acid anhydride is phthalic acid
- the compound 38-1 is obtained.
- R4 and t are as defined above, and R 5 defines the definition of the same fragment B.
- the compound 43 is dissolved in an inert solvent (such as tetrahydrofuran), and a base (such as NaOH or the like) is added thereto, and stirred at a certain temperature (e.g., room temperature) for a period of time (e.g., 2 h) to obtain a compound 44.
- a certain temperature e.g., room temperature
- a period of time e.g. 2 h
- Dissolve compound 44 in an inert solvent such as CH 2 C1 2
- R4, or t are as defined above, the definition of R 6 as defined fragment of the B.
- the compound of the present invention has excellent antitumor activity
- the compound of the present invention and a pharmaceutically acceptable inorganic or organic salt thereof, and a pharmaceutical composition containing the compound of the present invention as a main active ingredient can be used for treating a tumor.
- compositions of the present invention comprise a safe or effective amount of a compound of the present invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable excipient or carrier.
- Safe and effective amount means that the amount of the compound is sufficient to significantly improve the condition without causing serious side effects.
- the pharmaceutical composition contains from 1 to 2000 mg of the compound of the invention per agent, more preferably from 10 to 200 mg of the compound of the invention.
- the "one dose” is a capsule or a tablet.
- “Pharmaceutically acceptable carrier” means: one or more compatible solid or liquid fillers or gel materials which are suitable for human use and which must be of sufficient purity and of sufficiently low toxicity. By “compatibility” it is meant herein that the components of the composition are capable of intermixing with the compounds of the invention and with each other without significantly reducing the efficacy of the compound.
- pharmaceutically acceptable carriers are cellulose and its derivatives (such as sodium carboxymethylcellulose, sodium ethylcellulose, cellulose acetate, etc.), gelatin, talc, solid lubricants (such as stearic acid).
- magnesium stearate magnesium stearate
- calcium sulfate vegetable oils (such as soybean oil, sesame oil, peanut oil, olive oil, etc.), polyols (such as propylene glycol, glycerin, mannitol, sorbitol, etc.), emulsifiers (such as Tween®), moist Wet agents (such as sodium lauryl sulfate), colorants, flavoring agents, stabilizers, antioxidants, preservatives, pyrogen-free water, and the like.
- vegetable oils such as soybean oil, sesame oil, peanut oil, olive oil, etc.
- polyols such as propylene glycol, glycerin, mannitol, sorbitol, etc.
- emulsifiers such as Tween®
- moist Wet agents such as sodium lauryl sulfate
- colorants such as sodium lauryl sulfate
- flavoring agents such as pepperminophen®
- the mode of administration of the compound or pharmaceutical composition of the present invention is not particularly limited, and representative modes of administration include, but are not limited to, oral, intratumoral, rectal, parenteral (intravenous, intramuscular or subcutaneous), and topical administration.
- the administration is by injection.
- the compounds of the invention may be administered alone or in combination with other pharmaceutically acceptable compounds or biopharmaceuticals (e.g., active ingredient b as described herein).
- other pharmaceutically acceptable compounds or biopharmaceuticals e.g., active ingredient b as described herein.
- the active ingredient b according to the present invention is an anticancer drug mainly comprising a PDGF inhibitor.
- the PDGF inhibitor of the present invention may be any substance which inhibits PDGF activity or inhibits expression of a PDGF receptor or factor.
- the substance that inhibits PDGF activity includes, but is not limited to: PDGF antibody, or sunitinib, Imatinib, AG13736 (Axitinib), Masitinib, Pazoline Pazopanib, Sorafenib, intedanib, Cediranib, Cediranib, Motesanib, Linifinib and other drugs.
- a safe and effective amount of a compound of the invention is applied to a mammal (e.g., a human) in need of treatment wherein the dosage is a pharmaceutically effective effective dosage, for a 60 kg body weight
- the dose to be administered is usually from 1 to 2000 mg, preferably from 20 to 500 mg.
- specific doses should also consider factors such as the route of administration, the health of the patient, etc., which are within the skill of the skilled physician.
- a pharmaceutical composition for anti-tumor comprising an artemisinin derivative according to the invention and a pharmaceutically acceptable carrier or excipient.
- step h of 3 The method is the same as step h of 3, except that compound 14 is substituted for compound 10.
- step i of 3 The method is the same as step i of 3, except that compound 15 is used instead of compound 1 1.
- step h of 3 The method is the same as step h of 3, except that compound 19 is substituted for compound 10.
- step a of 1 The method is the same as step a of 1, except that compound 18 is used instead of compound 1.
- Amino or amine containing intermediates RaNH or RaNH 2 Amino or amine containing intermediates RaNH or RaNH 2
- TZ6000/Cl0iN3/X3d ⁇ 8 ⁇ please ⁇ OAV
- the main steps were as follows: The collected A2780, OVCAR-3 or Hep3B cells were resuspended in serum-free medium containing 20% (v/v) Matrigel (BD Biosciences, Bedford, MA). Then, an equal amount of cells ( ⁇ 5 > ⁇ 10 6 cells/0.2 ml) were injected subcutaneously into the left groin of the mice. Tumor growth and mouse body weight were monitored every 3 days and the size of the tumor was measured simultaneously.
- mice When the tumor grew to a touchable size ( ⁇ 70 mg), the mice were randomized into a treatment group and a control group (5 rats per group).
- the dose of AR7 is 5, 10 or 25 mg/kg body weight, the frequency of administration is daily (from day 0), and the route of administration is subcutaneous injection (positive drug: such as carboplatin or gemcitabine) It is 120 mg/kg body weight).
- the control group was injected with physiological saline.
- mice The 24 artemisinin derivatives of the present invention were selected and tested, and the compounds were compounds ARK AR3, AR4, AR7, AR9, AR 13, AR35, AR37-AR53, respectively.
- Control compound dihydroartemisinin (DHA), artemisinin (ARS), melphalan, aminoglutethimide and deoxyfluorouridine.
- DHA dihydroartemisinin
- ARS artemisinin
- melphalan aminoglutethimide
- deoxyfluorouridine The cytotoxicity of the above 24 artemisinin derivatives and control drugs against the following four groups of cells was compared according to a conventional method.
- DHA >50 >50 >50 >50 4J5 5.65 44.43 >50 >50 >50 >50
- B is Melphalan; D is Aminoglutethimide; E is deoxyfluorouridine ( Doxifluridin), ARS (artemisinin), DHA (dihydroartemisinin); wt means wild type, nut means mutation, null means deletion.
- Panel A shows that AR7 can inhibit the viability of ovarian cancer cells A2780, OVCAR3 and SK-OV3 in a dose-dependent manner; and compared with DHA, AR7 shows a certain anti-cancer advantage, and the inhibitory effect on IOSE 144 of normal ovarian epithelial cells is not obvious.
- Panel B shows that AR7 has a significant inhibitory effect on hepatoma cell Hep3B and hepatoma portal vein cell plug PVTT2, and its inhibitory effect is more significant than DHA. It showed a certain protective effect on normal liver cells 7702.
- Panel C shows: In glioma cell lines SHG-44, A 172, and U251, AR7 significantly inhibited the growth of tumor cells, and the inhibitory effect showed a certain advantage compared with DHA.
- Panel D shows that AR7 has a certain inhibitory effect on primary GIST cells, and its anticancer effect is also significantly higher than DHA.
- AR7 and DHA have significant inhibitory effects on three lymphoma cell lines, and AR7 has a higher inhibitory effect than DHA.
- CBP carboplatin
- FIG. 3 Figure A, AR7 resulted in a growth inhibition rate of 40.5%, 58.4%, and 73.6% of A2780 xenograft tumors at doses of 5 mg/kg, 10 mg/kg, and 25 tng/kg, respectively (with physiological saline). Compared with the control group) (PO.05); As shown in Figure B, Figure B, AR7 resulted in 49.7%, 65.7% of the OVCAR-3 tumor model at doses of 5 mg/kg, 10 mg/kg and 25 mg/kg, respectively. And 82.6% of tumor growth inhibition (P ⁇ 0.05).
- the inhibitory effect of 25 mg/kg AR7 on tumor was close to that of 120 mg/Kg CBP.
- AR7 resulted in a growth inhibition rate of 23.8%, 46.4% and 56.7% of Hep3B xenograft tumors at doses of 5 mg/kg, 10 mg/kg and 25 mg/kg, respectively (compared with the control group given to saline) (P ⁇ 0.05).
- the tumor inhibition rate was 66.7%.
- the inhibitory effect of 25 mg/kg AR7 on tumors was close to that of 120 mg/Kg gemcitabine.
- A2780 and OVCAR-3 ovarian cancer xenograft models were established to detect the antitumor activity of AR7 and DHA in vivo.
- the changes in body weight of nude mice before and after administration were measured to detect the toxic side effects of the drug on the animals.
- AR7 has a better inhibitory effect on the growth of tumor cells A2780 and OVCAR-3 in animals than DHA.
- AR7 can inhibit 71%, while DHA can only inhibit 41%;
- AR7 can inhibit 63%, while DHA can only inhibit 43%.
- Fig. 4, B1 and B2 The tumor mass of the AR7 treatment group was significantly reduced.
- AR7 was able to reduce 64.37%, while 011-8 was only 40.15%.
- AR7 was reduced by 57.61%, while DHA was only 22.82%.
- A2780 cells were incubated with ⁇ or 25 ⁇ AR7 or DHA for 8 hours, and the control group was treated with the same volume of DMSO. The drug was then withdrawn and the same number of cells were resuspended in serum-free 1640 medium and planted in the tmnswell upper chamber while 1640 medium containing 10% FBS was added as a chemotactic agent in the lower chamber. After 8-12 hours, wipe off the transwdl without passing through the cells and fix the staining statistics to the number of cells that migrated to the contralateral side.
- AR7 can significantly inhibit the transfer of A2780. Under 25 ⁇ , AR7 can inhibit 96%, while 011 can only inhibit 71.97%.
- mice Stably expressing the luciferase A2780 cells, resuspended in serum-free RPMI 1640 medium and then an equal amount of cells were injected intraperitoneally (about 3x l 0 6 cells /0.2ml) inside the peritoneal cavity of mice.
- IVIS Lumina Bioluminescence The growth of the tumor was monitored in real time and the body weight of the mice was recorded. After a certain period of injection, the mice were equally divided into a treatment group and a control group according to the fluorescence intensity of the tumor.
- Treatment group AR7 ( ⁇ ⁇ and 25 ⁇ )
- All drugs were administered intraperitoneally.
- the frequency of administration is daily, and it is stopped for two days per week.
- the tumor imaging growth was monitored in real time using a live imaging system during treatment.
- AR7 inhibits the progression of tumor cells by inhibiting the proliferation of ovarian cancer cell lines ⁇ 2780 and OVCAR-3, inducing apoptosis and inducing cell cycle arrest.
- AR7 is able to induce apoptosis in tumor cells in a concentration-dependent manner. At 5 ⁇ and 10 ⁇ , 405%, 705%, 318%, and 708.2% of apoptosis were induced in ⁇ 2780 and OVCAR-3, respectively. As shown in Figure 6 B 1 and Figure 2.
- AR7 is able to induce blockade of ⁇ 2780 and OVCAR-3 cells in S phase, both in a concentration- and time-dependent manner. As shown in Fig. 6, C1, C2, C3, and C4.
- a model PMArTHPl was constructed to test the effect of AR7 on this cell model, which in turn mimics the effects of AR7 on the tumor microenvironment.
- Human monocyte THP-1 was treated with 200 nM PMA for 48 hours and then stimulated with 20 ng/mL IL-4 for 24 hours, then cultured with RPIM1640 complete medium for 48 hours, thereby inducing PMArTHP l cells as M2 macrophages. .
- THP1 cells were stimulated with PMA/IL-4, and several common THP1s, such as CD14, FE/80, and CD206, were successfully factored into macrophage factors, indicating the success of the experimental model.
- CTRL indicates DMSO
- Treatment group ⁇ 7 (1 ⁇ , 5 ⁇ and ⁇ ⁇ )
- AR7 is cytotoxic to PMArTHP1 cells and has a strong killing effect on DHA. As shown in Figure D, Figure D.
- AR7 can induce apoptosis of PMArTHP1 cells, and under ⁇ , it can increase the ratio of apoptosis by 1.5-fold, while DHA has a 0.2-fold increase. As shown in the figure in Figure 7.
- AR7 is able to inhibit the migration of PMArTHP1, and at ⁇ , it can inhibit the migration of PMArTHP1 by 78%, and DHA has only 36% inhibition at this concentration. As shown in the F diagram of Figure 7.
- AR7 reduces the expression of PDGFRa (shown in Figure H, H), PD PDGFRp (shown in Figure 1 of Figure 7), and PDGFAA (shown in Figure G, G).
- the K map of 7 shows the expression of mRNA.
- AR7 can play a role in macrophages in the tumor microenvironment, which in turn affects the progression of the tumor.
- 2.4.7 AR7 can interfere with and block the interaction of tumor cells with the tumor microenvironment, thereby inhibiting tumor progression.
- THP1 or PMArTHP1 cells were resuspended in serum-free 1640 medium, the same number was planted in the transwell upper chamber, and A2780 serum-free cell supernatant before and after AR7 treatment was added as a chemotactic agent in the lower chamber. After a certain period of time, the transwell did not pass through the cells, and the fixed staining statistics migrated to the contralateral cells.
- AR7 can inhibit the migration-inducing ability of tumor cells to PMArTHP1, and can achieve 55.6% inhibition of ⁇ 2780 induction ability after 25 ⁇ treatment of A2780, while DHA only achieved 27.2% inhibition in this process. As shown in the figure in Figure 8.
- AR7 is able to block its migration or invasion-inducing effects on tumor cells by inhibiting PMArTHP- ⁇ . After treatment with PMArTHP1 at 25 ⁇ , 94% inhibition of PMArTHP1 inducibility was achieved, while DHA had only 68% inhibition. As shown in Figure C, Figure C. (d) AR7 inhibits PMArTHP-1 secretion of IL-6, RANTES, ⁇ -1 ⁇ , and ⁇ 1 ⁇ . As shown in the figure in Figure 8. 2.4.8 Sensitization of AR7
- Sunitinib is a new type of multi-targeted therapeutic drug in the clinic. The inventors tested the sensitization effect of AR7 on this drug.
- A2780 and OVCAR-3 ovarian cancer xenograft models in nude mice The build method is similar to 1.2.
- Human ovarian cancer cells A2780 and OVC AR-3 were inoculated subcutaneously into B ALB/c nude mice to establish a xenograft model of ovarian cancer in nude mice.
- Tumor size was measured every two days, and after 3 weeks of treatment, the medication was stopped. The medication was:
- Control group Oral 0.2 ml solvent / day.
- AR7 group intraperitoneal injection of AR7 10 mg/kg/day, 5 days per week.
- C sunitinib group gavage sunitinib 25 mg/kg/day, 5 days a week.
- AR7 combined with sunitinib group intragastric sunitinib 25 mg/kg/day, intraperitoneal injection of AR7 10 mg/kg/day, 5 days per week. Tumor size was measured every two days and discontinued after 3 weeks of treatment.
- Fig. 9A1 and A2 The results of the experiment are shown in Fig. 9A1 and A2.
- the growth of A2780 and OVCAR-3 ovarian cancer xenografts in nude mice was inhibited by the treatment with sunitinib.
- the inhibition rates of single drugs were 84% and 60%, respectively.
- the inhibition rate after sunitinib treatment reached 92% and 68%.
- AR7 can inhibit the progression of tumorigenesis by acting on the tumor cells themselves and the tumor microenvironment. AR7 can sensitize sunitinib. It can be seen that AR7 is a compound having a drug-like property.
- Example 61 Pharmaceutical Composition
Landscapes
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Abstract
提供了式（I）所示的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐，或其对映异构体、非对映异构体、外消旋体，以及所述化合物的药物组合物、制法和应用。式（I）所示的青蒿素衍生物对治疗肿瘤有优异的效果。
Description
青蒿素衍生物及其制法和应用 技术领域
本发明属于化学医药领域。 具体地， 涉及新型青蒿素衍生物及其制法和应用。 背景技术
青蒿， 属菊科， 又名黄花蒿 (Artemisia anaua L)是一年生草本植物。 青蒿素是我国药 学工作者于 20世纪 70年代初从中药青蒿中提取的倍半萜内酯类抗疟药物， 并在此结构基 础上又相继合成、 半合成出一系列具有抗疟活性的衍生物， 如双氢青蒿素、 青蒿琥酯、 蒿甲醚、 双氢蒿甲醚、 蒿乙醚等。
以下是
青蒿素 （ART) 蒿甲 S (ARM) 二氢青蒿素 （DHA) 青蒿琥酯（ARS) 青蒿素及其衍生物的抗疟活性已得到世界公认， 具有起效快、 药效高、 毒副作用低 等优点。 除广泛应用于抗疟治疗外， 青蒿素类药物还具有其它多种药理作用， 如抗血吸 虫作用， 抗心律失常、 平喘， 抗内毒素， 抗变态反应、 红斑狼疮、 免疫抑制等作用。
随着对青蒿素及其衍生物活性研究的不断深入， 揭示了该类化合物还具有一定的抗 肿瘤作用， 对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用。 例如， Efferth等 (Efferth T, Olbrich A, Bauer R. , 人肿瘤细胞系对抗疟疾药物青蒿琥酯、 蒿乙醚、 和蒿甲醚响应的 mRNA表达模 _if(mRNA expression profiles for the response of human tumor cell lines to the antimalarial drugs artesunate, arteether, and artemether)生物化学药学 (Biochem Pharmacol.) 2002 Aug 15;64:617-23) , 研究了青蒿琥酯、 蒿乙醚及蒿甲醚对 55种肿瘤细胞的细胞毒作用， 结果 显示三种化合物对 55种肿瘤细胞的增殖均有抑制作用， 青蒿琥酯作用最为显著， 平均半 抑制浓度 IC50 是 12.3μΜ， 对包括白血病、 结肠癌、 黑色素瘤、 前列腺癌、 肝癌、 卵巢癌、 乳腺癌、 宫颈癌、 人低分化鳞状上皮鼻炎癌等在内的多种肿瘤细胞有选择性杀伤作用， 青蒿琥酯对白血病细胞和直肠癌细胞有明显的细胞毒作用， 其半抑制浓度 (IC50)分别为 1.1 1 ± 0.56 禾口 2.13 ± 0.74 μΜ。
该文献还分析了青蒿琥酯、 蒿乙醚及蒿甲醚作用前后 464个药物活性相关基因 (包括 耐药基因， DNA损伤修复基因， 凋亡调节基因， 增殖相关基因， 原癌基因， 抑癌基因及 细胞因子）的表达谱， 发现 208个基因与上述三种青蒿素类药物抗肿瘤活性相关， 主要涉 及增殖相关基因、 癌基因及抑癌基因， 如过氧化氢酶、 谷胱氨酸合成酶、 硫氧还蛋白过 氧化物酶以及硫氧还蛋白还原酶等。
目前， 现有技术主要是对双氢青蒿素、 靑蒿琥酯、 蒿乙醚、 和蒿甲醚的研究， 本领 域技术人员有必要研发一类结构新颖、 抗肿瘤效果的优异的青蒿素衍生物。
发明内容
本发明的目的是提供一种具有抗肿瘤效果的青蒿素衍生物及其制法。
本发明另一目的是提供所述青蒿素衍生物在抑制肿瘤方面的应用。
在本发明第一方面中， 提供了结构如式 I所示的青蒿素衍生物或其药学上可接受的 盐， 或其对映异构体、 非对映异构
I
其中， X为 -0-、 -S -、 -NH-或 -CH2-; Y为 -CO-或 -CH2-; Z为 -CH2-、 -0-、 -CO-, -CH2CO-、 -CH2NH -、 -CH20-、 -C0CH2-、 -NHCH2-、 -0CH2-、 或 -NH-; n为 0~5的整数； k为 0或 1 ;
P为选自下 ety):
其中， R、 R4各自独立地为苯环上任意位置取代的选自下组的基团： 氢、 卤素、 C C12 直链或支链的垸基、 C2-C12直链或支链的不饱和烃基、 C3-C12环烃基、 氰基、 硝基、 氨基 或被 垸基所取代的胺基、 羟基、 羟甲基、 三氟甲基、 三氟甲氧基、 羧基、 巯基苯基、 取代的苯基、 萘基、 联苯基、 或者取代或未取代的饱和或者不饱和的 c3-c12杂环基， 其中 所述取代基选自： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 d-C4羟垸基、 羧基或 胺垸基或醛基；
q、 t各自独立地为 1〜4的整数；
R7为苯环上一个或两个任意位置取代的选自下组的基团： 氢、 卤素、 -Cn直链或支 链的垸基、 C2-C12直链或支链的不饱和烃基、 C3-C12环烃基、 乙炔基、 氰基、 硝基、 氨基、 羟基、 羟甲基、 三氟甲基、 三氟甲氧基、 羧基、 巯基苯基、 取代的苯基、 萘基、 联苯基、 或者取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C12杂环基， 苄醇基、 取代的苄醇基、 Ν,Ν-二甲 基， Ν,Ν-二乙基， 其中所述取代基选自： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 羟烷基、 羧基或 胺烷基或醛基；
R8、 R9各自独立地为 ""^― W— (D)厂 (E) r— 其中，
W为氢、 氧、 NH、 卤素、 d-C12直链或支链的烷基或亚烷基、 C2-C12直链或支链的不 饱和烃基或亚烃基 (优选乙块基)、 c3-c12环烃基或亚环烃基、 氰基、 硝基、 氨基、 羟基、 d-c4羟垸基、 三氟甲基、 三氟甲氧基、 羧基、 巯基苯基、 取代的苯基、 萘基、 联苯基、 或者取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C12杂环基或亚杂环基、 Ν,Ν-二甲基， Ν,Ν-二乙 基， 其中所述取代基选自下组： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 d-C4羟垸基、 羧基或 胺烷基或醛基；
D为羰基、 -Cl2直链或支链的垸基或亚垸基、 C2-C12直链或支链的不饱和烃基或亚 烃基、取代或未取代的饱和或者不饱和的 c3-c12杂环基或亚杂环基， 其中所述取代基选自 下组： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 d-C4羟垸基、 羧基或 d-C4胺垸基或醛基； £为 1 12直链或支链的烷基或亚烷基、 C2-C12直链或支链的不饱和烃基或亚烃基、 取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C12杂环基或亚杂环基， 其中所述取代基选自下组： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 C,-C4羟烷基、 羧基或 C C4胺烷基或醛基； j、 r各自独立地为 0~5的整数；
A为选自下组的连接基
B为选自下组的连接基团:
m为 0或 1。
在另一优选例中， 所述的 P通过 -(A)m -或 -(B)m -进行连接。
在另一优选例中， R、 R4各自独立地为苯环上任意位置取代的选自下组的基团： 氢、 卤素、 氰基、 硝基、 氨基或被^-^烷基所取代的胺基、 羟基、 羟甲基、 三氟甲基、 三氟 甲氧基、 羧基、 巯基苯基、 取代的苯基、 萘基或联苯基。
在另一优选例中， R、 R4各自独立地为苯环上任意位置取代的选自下组的基团： 氢或 被^-^烷基所取代的胺基。
在另一优选例中， q或 t各自独立地为 1或 4。
在另一优选例中， R7为苯环上一个或两个任意位置取代的氢或卤素。
在另一优选例中， R8、 R9各自独立地为 "^—W— (D)r(E> r—— " , 其中， W为氧或 NH;
D为羰基、 d-C6直链或支链的垸基或亚垸基、 C2-C6直链或支链的不饱和烃基或亚烃 基、 取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C6杂环基或亚杂环基 (优选含 1-3个选自氧、 氮 或硫的杂原子的 C3-C6杂环基或亚杂环基)；
£为 1 6直链或支链的烷基或亚烷基、 C2-C6直链或支链的不饱和烃基或亚烃基、 取 代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C6杂环基或亚杂环基 (优选含 1 -3个选自氧、 氮或硫的 杂原子的 ^ 6杂环基或亚杂环基)；
j、 r各自独立地为 0~5的整数。
在另一优选例中， D为羰基、 直链的垸基或亚烷基、 未取代的饱和的 3 6杂环 基 (优选含 1个选自氧、 氮或硫的杂原子的 C3-C6杂环基)。
在另一优选例中， £为 1 4直链的亚烷基或 C2-C4直链的不饱和亚烃基（如 -CH2CH=CH -)。
在另一优选例中， j、 r各自独立地为 0或 1。
在另一优选例中， X为 -0-、 -NH-或 -CH2-。
在另一优选例中， X为 -0-、 -NH-或 -CH2-; 且 Z为- 0-、 -CO-、 -NH-或 -CH2-。
在另一优选例中， X为 -0-、 -NH-或 -CH2-; Z为 -0-、 -CO-、 -NH-或 -CH2-; 且 n为 0或 1。 在另一优选例中， X为 -0-、 -NH-或 -CH2-; Z为 -0-、 -CO-、 -NH-或 -CH2-; n为 0或 1 ; 且 m为 0或 1。
一 选例中， 为选自下组的化合物：
180εΖ0/ 0Ζ OAV
TZ6000/ClOZM3/X3d
—9—
-01-
TZ6000/Cl0ZN3/X3d I80£請 Ϊ0Ζ OAV
-II -
TZ6000/ClOZN3/X3d I80£請 ΪΟΖ OAV
在本发明第二方面中， 提供了本发明第一方面所述的青蒿素衍生物的制备方法， 包 括方法：将 RaNH或 RaNH2和 RbCOOH进行酸碱缩合反应、或将 RaCOOH和 RbNH或 RbNH2 进行酸碱縮合反应、 或将 RaOH和 RbCOOH进行成酯反应， 从而形成式 I化合物；
其中， RaNH或 RaNH2、 RaCOOH ^ RaOH为选自下组的化合物：
28 29 30 46
RbNH或 RbNH2、 RbCOOH为选自下组的化合物：
ci
2TFA
、0, 、N
GG9
其中， R、 q、 R4、 t的定义同本发明第一方面所述；
R2、 R3与相邻的 N共同构成： 哌嗪、 4-羟 4烷基哌啶. 4 d-C4烷基哌嗪; R5、 R6各自独立地为选自下组的基团：
在另一优选例中， 所述杂环烷基或芳杂环含有 1〜2个选自氧、 氮、 硫的杂原子, 在另一优选例中， 所述 J为 、 苯基、 奈环、 或吡啶，
在本发明第三方面中， 提供了本发明第一方面所述的青蒿素衍生物或其药学上可接 受的盐的用途， 用于制备治疗肿瘤、 抑制肿瘤或肿瘤细胞生长的药物。
在另一优选例中， 所述的青蒿素衍生物为式 I化合物， 且式 I中， X为 -0-或 -CH2-; Y 为 -CO-或 -CH2-; Z为 -0-、 -CH2-、 -CO-或 -CH2CO-; n为 0~2的整数； k为 0或 1 ;
P为选自下组的基团：
且用于制备治疗前列腺癌、 抑制前列腺癌或其细胞生长的药物。
在另一优选例中， 所述青蒿素衍生物选自下
在另一优选例中， 所述的青蒿素衍生物为式 I化合物， 且式 I中， X为 -0-或 -CH2 Y 为 -CO-或 -CH2-; Z为 -0-、 -CH2-、 -CO-或 -CH2CO-; n为 0~2的整数； k为 0或 1 ;
P为选自下组的基团
且用于制备治疗肝癌、 抑制肝癌或其细胞生长的药物<
在另一优选例中， 所述青蒿素
在另一优选例屮， 所述的青蒿素衍生物为式 I化合物， 且式 I中， X为 -0-或 -CH2-
Y为 -CO-或 -CH2-; Z为 -0-、 -CH2-、 -CO-或 -CH2CO-; n为 0~2的整数； k为 0或 1 m为 0或 1:
为 0或 1， R为氢， q为 1; 或
， 其中， m为 0， R为氢， q为 1; 或
， m为 0或 1;
且 用于制备治疗卵巢癌、 抑制卵巢癌或其细胞生长的药物。
在另一优选例中， 所述青蒿素衍生物选自下组-
TZ6000/ClOZN3/X3d I80£請 ΪΟΖ OAV
在另一优选例中， 所述肿瘤包括肝癌、 卵巢癌、 前列腺癌、 神经胶质瘤、 胃肠间质 瘤、 乳腺癌、 淋巴瘤、 白血病、 肺癌、 或结肠癌。
在本发明第四方面中， 提供了一种药物组合物， 包括： （a) 0.0001 -99.99wt%的本发 明第一方面所述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐； 和 （b) 药学上可接受的载体。
在另一优选例中， 所述药物组合物还包含选自下组的抗肿瘤药物： 卡铂、 吉西他滨、 青蒿素、 二氢青蒿素、 青蒿琥酯。
在本发明第五方面中， 提供了一种治疗方法， 对需要的对象施用本发明第一方面所 述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐或本发明第四方面所述的药物组合物。
在另一优选例中， 所述治疗方法用于治疗肿瘤、 抑制肿瘤或肿瘤细胞生长。
在本发明第五方面中， 提供了一种本发明第一方面所述的青蒿素衍生物或其药学上 可接受的盐的用途， 用于制备抑制肿瘤或肿瘤细胞转移、 抑制肿瘤细胞增殖、 诱导肿瘤 细胞凋亡和 /或诱导肿瘤细胞周期阻滞的药物；
用于制备抑制 PDGFAA、 PDGFBB、 PDGFRot和 /或 PDGFR 3表达的药物；
用于制备抑制肿瘤细胞诱导巨噬细胞或肿瘤相关巨噬细胞的迁移的药物和 /或抑制 诱导微环境中巨噬细胞凋亡的药物；
用于制备抑制 IL-6、 RANTES ！^ -^和/或！^ -^表达的药物； 和 /或
用于制备 PDGF抑制剂的增敏剂。
在本发明第六方面中， 提供了一种药物组合物， 含有： 活性成分 a: 如本发明第一方 面所述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐； 以及活性成分 b: 抗癌药物。
在另一优选例中， 所述抗癌药物为 PDGF抑制剂。
在另一优选例中， 所述 PDGF抑制剂包括舒尼替尼（sunitinib)、 伊马替尼 (Imatinib)、 AG13736 (Axitinib), 马赛替尼（Masitinib)、 帕唑帕尼（Pazopanib)、 （索拉菲尼） Sorafenib、 阿法替尼 (Nintedanib)、 西地尼布（Cediranib)等。
在另一优选例中， 所述药物组合物还含有药学上可接受的载体。
在另一优选例中， 所述药物组合物中， 活性成分 (a)与活性成分 (b)的含量比为
1 :0.1 -1 : 10； 优选 1 : 0.5-1： 5或 1 : 0.1— 1 : 1。
在本发明第七方面中， 提供了一种癌症治疗方法，
所述方法包括步骤： 给癌症患者施用本发明第一方面所述的青蒿素衍生物或其药学 上可接受的盐、 本发明第四方面或第六方面所述的药物组合物； 或
所述方法包括步骤：
给癌症患者分别施用：（i) 本发明第一方面所述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的 盐、 本发明第四方面或第六方面所述的药物组合物； 和 (Π)抗癌药物。
在另一优选例中， 所述抗癌药物为 PDGF抑制剂。
在另一优选例中， 所述 PDGF抑制剂包括： 舒尼替尼 (sunitinib)、 伊马替尼 (Imatinib)、 AG 13736 (Axitinib), 马赛替尼（Masitinib)、 帕唑帕尼（Pazopanib)、 （索拉菲尼） Sorafenib、 阿法替尼 ( intedanib)、 西地尼布（Cediranib)等。
在另一优选例中， 本发明第一方面所述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐与抗 癌药物）的施用量之比为 1 :0.1-1 :10; 优选 1 : 0.5-1： 5或 1 : 0.1— 1 : 1。
应理解， 在本发明范围内中， 本发明的上述各技术特征和在下文 (如实施例）中具体 描述的各技术特征之间都可以互相组合， 从而构成新的或优选的技术方案。 限于篇幅， 在此不再 累述。 附图说明
图 1显示了 AR7和 DHA的在多种肿瘤类型中的抗癌效果比较； 其中， A图显示了 AR7 和 DHA体外抑制卵巢癌细胞的生长； B图显示了 AR7和 DHA体外抑制肝癌细胞的生长； C 图显示了 AR7和 DHA体外抑制神经胶质瘤细胞的生长； D图显示了 AR7和 DHA体外抑制胃 肠间质瘤的原代细胞的生长。
图 2显示了 AR7和 DHA对淋巴瘤细胞的生长抑制作用。
图 3显示了 AR7体内抑制体内显著抑制卵巢癌和肝癌肿瘤的生长； 其中， A图和 B图 显示了 AR7体内抑制卵巢癌的生长； C图显示了 AR7体内抑制肝癌肿瘤的生长。
图 4显示了 AR7和 DHA在 A2780和 OVC AR-3卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型中的体内抗 肿瘤活性； 其中， A1图、 B1图、 C1图显示了在 A2780卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型中的体 内抗肿瘤活性； A2图、 B2图、 C2图显示了在 OVCAR-3卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型中的 体内抗肿瘤活性。
图 5显示了 AR7和 DHA对肿瘤迁移的抑制作用。
图 6显示了 AR7对 A2780和 OVC AR-3细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用。
图 7显示了 AR7对微环境中巨噬细胞的作用。
图 8显示了 AR7对肿瘤细胞与肿瘤微环境相互作用的干扰和阻滞作用。
图 9显示了 AR7对临床抗肿瘤药物的增敏作用。 具体实施方式
本发明人通过长期而深入的研究， 意外地发现一类结构新颖的青蒿素衍生物， 所述 青蒿素衍生物具有更加优异的抑制肿瘤或肿瘤细胞生长的效果。 在此基础上， 发明人完 成了本发明。
本发明所用"卤素"是指氟、 氯、 溴和碘。
本发明所用" -C^直链或支链的烷基"是指含有 1 -12个碳原子的直链或含支链的烷 基， 如甲基、 乙基、 丙基、 丁基、 戊基、 己基等等。
本发明所用" C2-C12直链或支链的不饱和烃基"是指含 2-12个碳原子的直链或含支链 的烯基或炔基， 如乙烯、 丙烯、 丁烯、 乙炔、 丙炔、 丁块等等。
本发明所用" C3-C12环烃基 "是指含有 3-12个碳原子的环垸基， 环烯基或环炔基， 例如 环丙基、 环丁基、 环丁烯基、 环戊烯基等等。
本发明所用"取代或未取代的饱和或者不饱和的 C ^^环基"是指含 3-12个碳原子， 含一个或多个 (如 2个)氧、 氮、 硫等杂原子的饱和或不饱和的杂环基， 且所述杂环基可以 是被取代或未取代的， 其中所述取代基选自下组： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨 基、 d-C4羟烷基 (如羟甲基、 羟乙基、 羟丙基、 羟丁基)、 羧基、 d-C4胺垸基 (如胺甲基 (NH2CH2-)、 胺乙基、 胺丙基、 胺丁基)或醛基等。
本发明所用"羟 4烷基"是指被羟基取代的 d-C4烷基， 例如羟甲基、 羟乙基、 羟丙 基、 羟丁基等。
本发明所用" 4-羟 4垸基哌啶"是指哌啶 4位被羟 C C4烷基取代。
本发明所用" 0〜5的整数 "是指 0、 1、 2、 3、 4或 5。
本发明所用" 1〜4的整数 "是指 1、 2、 3或 4。 活性成分
如本文所用， 术语"本发明化合物 "指式 I所示的化合物。 该术语还包括及式 I化合物 的各种晶型形式、 药学上可接受的盐、 水合物或溶剂合物。
本发明化合物可能具有不对称中心、 手性轴和手性平面， 并且可以以对映异构体、 非对映异构体、 外消旋体、 或其混合物的形式存在。
本发明提供了式 I化合物的药学上可接受的盐， 例如包括： （0 式 I化合物与无机酸或 有机酸反应形成常规的无毒盐。 例如， 常规的无毒盐可通过式 I化合物与无机酸或有机酸 反应制得， 所述无机酸包括盐酸、 氢溴酸、 硫酸、 硝酸、 胺基磺酸和磷酸等， 以及所述 有机酸包括柠檬酸、 酒石酸、 乳酸、 丙酮酸、 乙酸、 苯磺酸、 对甲苯磺酸、 甲磺酸、 萘 磺酸、 乙磺酸、 萘二磺酸、 马来酸、 苹果酸、 丙二酸、 富马酸、 琥珀酸、 丙酸、 草酸、 三氟乙酸、 硬酯酸、 扑酸、 羟基马来酸、 苯乙酸、 苯甲酸、 水杨酸、 谷氨酸、 抗坏血酸、 对胺基苯磺酸、 2-乙酰氧基苯甲酸和羟乙磺酸等； 或者通式 (I)化合物与丙酸、 草酸、 丙 二酸、 琥珀酸、 富马酸、 马来酸、 乳酸、 苹果酸、 酒石酸、 柠檬酸、 天冬氨酸或谷氨酸 形成酯后再与无机碱形成的钠盐、 钾盐、 钙盐、 铝盐或铵盐； （ii)式 I化合物与有机碱形成 的甲胺盐、 乙胺盐或乙醇胺盐； （iii) 式 I化合物与赖氨酸、 精氨酸、 鸟氨酸形成酯后， 再 与盐酸、 氢溴酸、 氢氟酸、 硫酸、 硝酸、 磷酸形成的对应的无机酸盐或与甲酸、 乙酸、 苦味酸、 甲磺酸和乙磺酸形成的对应的有机酸盐。 式 I化合物的制备
下面更具体地描述本发明式 I化合物的制备方法，但这些具体方法不对本发明构成任 何限制。 本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法 组合起来而方便的制得， 这样的组合可由本发明所属领域的技术人员容易地进行。
本发明所用"室温"是指 15-30°C， 优选 18-25°C。 本发明所用"过夜"通常是指为 12-16 小时，
本发明提供了一种优选的式 I化合物的制备方法， 包括步骤： 将含羟基的中间体 RaOH、 含氨基或胺基的中间体 RaNH或 RaNH2或含羧基的中间体 RaCOOH, 分别和相应 地含氨基或胺基的中间体 RbNH或 RbNH2、 或含羧基的中间体 RbCOOH溶于 CH2C12中， 在 EDCI和 DMAP的存在下，于一定温度 (如室温或 18-30°C)下，搅拌一段时间 (优选 1-48小时； 较佳地为 5-40小时； 更佳地为 20-30小时； 最佳地为 24小时)， 得到式 I化合物。
其中， 相应的反应分别为： （1) 将 RaNH或 RaNH2和 RbCOOH进行酸碱缩合反应， 从 而形成酰胺类式 I化合物； （2) 将 RaCOOH和 RbNH或 RbNH2进行酸碱缩合反应， 从而形成 酰胺类式 I化合物； （3) 将 RaOH和 RbCOOH进行成酯反应， 从而形成酯类式 I化合物。 中间体及其制备
本发明所用中间体化合物可以是市售可得的， 也可以是按本领域普通技术人员所熟 知的方法制得， 例如优选 (但不限于)按如下方法进行制备， 且以下条件并不对本发明所用 的中间体的制备构成任何限制。
(-) , 含羧基的中间体 RaCOOH可以为任何具有羧基的化合物或优选自下组的化合
a. 将二氢青蒿素 (化合物 1)和环丁酸酐 (化合物 2)溶于惰性溶剂 (如 CH2C12)中，加入咪 唑， 于一定温度 (如室温)下， 搅拌一段时间 (如 l -5h或 3h)， 从而得到化合物 3。
方
b. 将二氢青蒿素 (化合物 1)溶于惰性溶剂 (如 CH2C12)中， 加入碱 (如吡啶)， 冷却 (如到 约 (TC )后， 滴加苯甲酰氯， 反应一段时间 (如 18h), 得到化合物 5。
c 将丙烯基三甲基硅烷溶于惰性溶剂 (如 1 , 2-二氯乙垸)中， 加入 ZnCl2， 于一定温 度 (如约 0°C )下， 惰性气体 (如氮气等)保护下， 滴加化合物 5的惰性溶剂 (如 1,2-二氯乙烷) 溶液， 于一定温度 (如约 0Ό )继续反应一段时间 (如 lh)， 转至室温搅拌一段时间 (如 3h)， 从 而得到化合物 6。
d. 将化合物 6溶于惰性溶剂（如二氧六环和水的混合溶剂）中， 加入氧化试剂（如
Os04(催化量 )/NaI04)以及 2,6-二甲基吡啶， 于一定温度 (如室温)反应一段时间 (如 24h)， 从 而得到化合物 7。
e. 将化合物 7溶于惰性溶剂（如叔丁醇和水的混合溶剂）中， 加入 2-甲基 1-丁烯， NaH2P04. NaC102 ) 于一定温度 (如室温)下， 反应一段时间（如 2h)， 得到化合物 8。 方法 (3):
f. 将化合物 6溶于惰性溶剂 (如乙醚)中， 冷却 (如到约 -20°C )后， 加入 BH3SMe2的惰性 溶剂 (如四氢呋喃)溶液，反应一段时间 (如 1 -30小时；较佳地为 5-20小时），加入少量 Na2C〇3 溶液， pH值调到碱性 (如大于 7)， 搅拌一段时间 (如 l Omin)后， 加入 30%的 H202, 搅拌一段
时间 (如 lh)后， 升温 (如至室温；)后， 搅拌一段时间（如 lh)， 得到化合物 9。
g. 将化合物 9溶于惰性溶剂 (如 CH2C12)中， 加入碱 (如三乙胺）， 在一定温度 (如约 0°C ) 下， 加入 TsCl, 升温 (如至室温)后， 反应一段时间 (如 20h)， 得到化合物 10。
N"^| 0 h. 将化合物 10溶于惰性溶剂 (如四氢呋喃)中，加入相应的仲胺 (例如， ^N 。 ）， 于一定温度 (如 80°C )下， 反应一段时间 (如 5h), 得到化合物 1 1。
i. 将化合物 1 1溶于惰性溶剂 (如四氢呋喃）中，加入 NaOH的水溶液，反应一段时间 (如 3h), 得到化合物 12。
j. 将化合物 7溶于惰性溶齐 IJ (如甲醇）中，加入还原齐 IJ (如 NaBH4)，反应一段时间（如 3h)， 得到化合物 13。
k. 将化合物 13溶于惰性溶剂 (如 CH2CI2;>中， 加入碱 (如三乙胺)， 在一定温度 (如 O'C ) 下， 加入甲基磺酰氯 (MsCl), 升温 (如至室温)后， 反应一段时间 (如 20h)， 得到化合物 14。
h. 步骤同方法 (3)的步骤 h， 不同点在于用化合物 14代替化合物 10。
i. 步骤同方法 (3)的步骤 i， 不同点在于用化合物 15代替化合物 1 1。 方法 (5):
1. 将二氢青蒿素 (化合物 1)溶于惰性溶剂 (如 CH2C12)巾， 加入叠氮化试剂 (如 NaN3), 在一定温度 (如约 0°C )下， 滴加三甲基氯硅垸 (TMSC1)， 滴加完毕后， 加入催化量的 Nal, 升温 (如至室温)后， 反应一段时间 (如 30h)， 得到化合物 17。
m. 将化合物 17溶于惰性溶剂 (如四氢呋喃)中， 加入三苯基磷 (Ph3P)和少量水， 惰性 气体 (如氮气等)保护， 在一点温度 (如约 80°C )下， 反应一段时间 (如 10h)， 得到化合物 18。
n. 将化合物 18溶于惰性溶剂 (如无水 CH2C12)中， 加入碱 (如三乙胺)， 在一定温度 (如 约 0°C )下， 滴加氯乙酰氯的溶液 (如 CH2C12溶液)， 反应一段时间 (如 2h), 得到化合物 19。
h. 步骤同方法 (3)的步骤 h， 不同点在于用化合物 19代替化合物 10。
i. 步骤同方法 (3)的步骤 i， 不同点在于用化合物 20代替化合物 1 1。 方法 (6): 化合物 22的
a. 步骤同方法 (1)的步骤 a， 不同点在于用化合物 18代替化合物 1。
(二）、 含氨基或胺基的中间体 RaNH或 RaNH2， 或含羟基的中间体 RaOH可以为任何
含氨基或胺基的中间体 RaNH或 RaNH2， 或含羟基的中间体 RaOH的制备方法可优选 (但不限于)按如下方法进行， 包括：
方法 (1):
h. 制备方法同中间体及其制备 (一)中方法 (3)的步骤 h， 不同点在于用化合物 19代替 化合物 10， 和相应的仲胺 (如哌嗪， 或 N-羟乙基哌嗪)反应。 方法 (2): 化合物 25-28、 化合物 46-1、 或化合物 46的制备
2.1 化合物 25-28、 化合物 46-1
h. 制法同中间体及其制备 (一）中方法 (3)的步骤 h， 不同点在于相应的仲胺分别为哌
将带保护基团 (如叔丁氧羰基， 即 Boc)的化合物 (如化合物 46-1)于惰性溶剂中， 在酸 三氟乙酸)的存在下， 进行脱去保护基反应， 从而得到化合物 46。 方法
o. 将化合物 10或化合物 14溶于惰性溶剂 (如 EtOH)中， 加入氨水， 于一定温度 (如室 温；)下， 反应一段时间 (如 1 -10天， 优选 5天)， 从而得到化合物 29或化合物 30.
(三：)、 片段 P可以是具有氨基或胺基的化合物， 可以相应地和上述两类化合物进行反 应，从而形成相应的酰胺类化合物或酯类化合物，优选化合物及其制备，如下 (但不限于): 方法 (1 ): 化合物 32或化合物 47的制备
p. 将化合物 31或化合物 47-1溶于惰性溶剂 (如甲醇)屮，加入氯化亚砜 (S0C12), 回流, 反应一段时间（如 12h)， 得到化合物 32或化合物 47;
其中， R、 q的定义同上文所述。
q. 将化合物 31或化合物 47-1溶于惰性溶剂 (如二氧六环)中， 加入碱 (如三 胺)， 二碳 酸二叔丁酯， 于一定温度 (如室温)下， 搅拌一段时间 (如 3h)， 得到化合物 33或化合物 48， 其中， R或 q的定义同方法 (1)中所述。 方法 (3
r. 将化合物 34溶于惰性溶剂 (如四氢呋喃）中， 加入碱 (如三乙胺 eq)， 冷却（如到约 0 ), 惰性气体 (如氮气等)保护， 滴加氯乙酰氯 (2.0 eq)， 反应一段时间 (如 2h), 得到化合 物 35。
s. 将化合物 35溶于惰性溶剂 (如四氢呋喃）中， 加入相应的仲胺 ( R2R3 , 如哌嗪、 4- 羟甲基哌啶和 4-羟乙基哌啶），于一定温度 (如 80°C )，反应一段时间 (如 5h；)，得到化合物 36。 方法 (4): 化合物 38的
其中， 所述相应的酸酐， 可选自： 邻苯二甲酸酐、 5-7元环酸酐， 5-7元杂环酸酐。 当所述相应的酸酐为邻苯二甲酸 得到化合物 38-1。
方法
u. 将氰基乙酸甲酯溶于惰性溶剂 (如乙醇)中， 加入相应的胺 ( R5H), 回流一段时间 (如 1 -20小时或 8-16小吋）， 得到化合物 40;
CHO
V. 将化合物 40和相应的取代的邻醛基苯酚（ v OH )溶于惰性溶剂 (如乙醇)中， 回流一段时间 (如 1 -20小时或 8- 16小时）， 得到化合物 41 ;
z. 将化合物 41溶于惰性溶剂 (如 EtOH和 AcOH的混合溶剂;)中，加入 4-羟基苄胺， 回流 一段时间（如 1-20小时或 8-16小时）， 得到化合物 54。
上述各式中， R4、 t的定义同上文所述， R5定义同片段 B的定义。
w. 将化合物 42和丙二酸二乙酯溶于惰性溶剂 (如甲醇)中，回流一段时间 (如 1 -20小时 或 8- 16小时）， 得到化合物 43。
X. 将化合物 43溶于惰性溶剂 (如四氢呋喃）中， 加入碱 (如 NaOH等）， 于一定温度 (如 室温)下， 搅拌一段时间 (如 2h)， 得到化合物 44。
y. 将化合物 44溶于惰性溶剂 (如 CH2C12)中， 加入相应的胺 ( HR6)， EDCI, DMAP， 于一定温度 (如室温)下， 搅拌一段时间 (如 5h)， 得到化合物 45。
其中， R4或 t定义同上， 所述 R6的定义同片段 B的定义。 药物组合物和施用方法
由于本发明化合物具有优异抗肿瘤活性， 因此本发明化合物及其药学上可接受的无 机或有机盐， 以及含有本发明化合物为主要活性成分的药物组合物可用于治疗肿瘤。
本发明的药物组合物包含安全有效量范围内的本发明化合物或其药学上可接受的 盐及药学上可以接受的赋形剂或载体。 其中"安全有效量"指的是： 化合物的量足以明显 改善病情， 而不至于产生严重的副作用。 通常， 药物组合物含有 l-2000mg本发明化合物 / 剂， 更佳地， 含有 10-200mg本发明化合物 /剂。 较佳地， 所述的"一剂"为一个胶囊或药片。
"药学上可以接受的载体"指的是： 一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质， 它们适合于人使用， 而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。 "相容性"在此指的是组合 物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和， 而不明显降低化合物的药效。 药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物 (如羧甲基纤维素钠、 乙基纤维素 钠、 纤维素乙酸酯等)、 明胶、 滑石、 固体润滑剂 (如硬脂酸、 硬脂酸镁)、 硫酸钙、 植物 油 (如豆油、 芝麻油、 花生油、 橄榄油等）、 多元醇 (如丙二醇、 甘油、 甘露醇、 山梨醇等)、 乳化剂 (如吐温 ®)、 润湿剂 (如十二烷基硫酸钠）、 着色剂、 调味剂、 稳定剂、 抗氧化剂、 防腐剂、 无热原水等。
本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括 (但并 不限于)： 口服、 瘤内、 直肠、 肠胃外 (静脉内、 肌肉内或皮下）、 和局部给药， 优选注射 给药。
本发明化合物可以单独给药，或者与其他药学上可接受的化合物或生物药物 (如本发 明所述的活性成分 b)联合给药。
本发明所述的活性成分 b为抗癌药物， 主要包括 PDGF抑制剂。本发明所述 PDGF抑制 剂可为任意一种可抑制 PDGF活性或抑制 PDGF受体或因子表达的物质。 例如， 所述抑制 PDGF活性的物质包括 (但不限于）： PDGF抗体，或舒尼替尼 (sunitinib)、伊马替尼 (Imatinib)、 AG13736 (Axitinib), 马赛替尼（Masitinib)、 帕唑帕尼（Pazopanib)、 （索拉菲尼） Sorafenib、 阿法替尼（ intedanib)、 西地尼布（Cediranib)、 Cediranib、 Motesanib、 Linifinib等药物。
使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物 (如 人)， 其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量， 对于 60kg体重的人而言， 日给药剂 量通常为 l〜2000mg， 优选 20〜500mg。 当然， 具体剂量还应考虑给药途径、 病人健康状 况等因素， 这些都是熟练医师技能范围之内的。 本发明主要优点在于：
1. 提供了一类结构新颖、 抗肿瘤效果优异的青蒿素衍生物。
2. 提供了一种用于抗肿瘤的药物组合物，包含本发明所述的青蒿素衍生物以及药学 上可接受的载体或赋形剂。
下面结合具体实施， 进一歩阐述本发明。 应理解， 这些实施例仅用于说明本发明而
不用于限制本发明的范围。 下列实施例中未注明具体条件的实验方法， 通常按照常规条 件， 例如 Sambrook等人， 分子克隆： 实验室手册 (New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989)中所述的条件， 或按照制造厂商所建议的条件。 除非另外说明， 否则百分比 和份数按重量计算。 本发明所用原料若非特别说明， 均市售可得或按照常规方法制得。 中间体制备实施例
1. 含羧基的中间体 RaCOOH
1.1 化合物 3的
2
a. 将化合物 1(1.0 eq)和化合物 2(1.6 eq)溶于 CH2C12中， 加入咪唑（1.2 eq)， 室温搅拌 3h， 得到化合物 3。
1.2 化
3
b. 将二氢青蒿素（l .O eq)溶于 CH2C12中， 加入吡啶 (6.0 eq), 冷却到 0°C后， 滴加苯甲 酰氯 (化合物 2， 1.5 eq), 反应 18h， 得到化合物 5。
c 将丙烯基三甲基硅垸 (5.0 eq)溶于 1 , 2-二氯乙烷中， 加入 ZnCl2(1.2 eq)， 在 0°C下， N2保护下， 滴加化合物 5(1.0 eq)的 1 ,2-二氯乙垸溶液， 在 0°C继续反应 lh， 转至室温搅拌 3h， 得到化合物 6。
d. 将化合物 6(1.0 eq)溶于二氧六环和水的混合溶剂中， 加入 Os04(催化量 ) NaI04(l .l eq), 2,6-二甲基吡啶 (2.0 eq)， 室温反应 24h， 得到化合物 7。
e. 将化合物 7(1.0 eq)溶于叔丁醇和水的混合溶剂中， 加入 2-甲基 1 -丁烯（1.2 eq) , NaH2PO4(2.0 eq), NaC102(1.2 eq), 室温反应 2h, 得到化合物 8。
1.3 化合物 12的制备
f. 将化合物 6(1.0 eq)溶于乙醚中， 冷却到 -20°C， 加入 BH3SMe2的四氢呋喃溶液（1.2 eq), 反应过夜， 加入少量 Na2C03溶液， pH值调到碱性（> 7)， 搅拌 lOmin后， 加入 30%的 ¾02, 搅拌 lh后， 转至室温搅拌 lh， 得到化合物 9。
g. 将化合物 9(1.0 eq)溶于 CH2C12中，加入三乙胺 (5.0 eq),在 (TC下，加入 TsCl(2.0 eq), 转至室温反应 20h， 得到化合物 10。 h. 将化合物 10(1 eq)溶于四氢呋喃中， 加入
化合物 1 1。
i. 将化合物 l l(l .O eq)溶于四氢呋喃中， 加入 2M的 NaOH的水溶液（1.5 eq)， 反应 3h， 得到化合物 12。
1.4 化合 16的制备
j. 将化合物 7(1.0 eq)溶于甲醇中， 加入 NaBH4(l .2 eq)， 反应 3h， 得到化合物 13。 k. 将化合物 13(1.0 eq)溶于 CH2C12中， 加入三乙胺 (5.0 eq)， 在 0°C下， 加入 MsCl(1.5 eq), 转室温反应 20h， 得到化合物 14。
h. 制法同 3的步骤 h， 不同点在于用化合物 14代替化合物 10。
i. 制法同 3的步骤 i， 不同点在于用化合物 15代替化合物 1 1。
1.5 化合物 21的制备
1. 将二氢青蒿素 (化合物 1， 1.0 eq)溶于 CH2C12中， 加入 NaN3(3.0 eq), 在 0°C下， 滴 加 TMSC1(1.5 eq)， 滴加完毕后， 加入催化量的 Nal， 转至室温反应 30h， 得到化合物 17。
m. 将化合物 17(1.0 eq)溶于四氢呋喃中，加入 Ph3P(5.0 eq)和少量水， N2保护，在 80°C 下， 反应 10h， 得到化合物 18。
n. 将化合物 18溶于无水 CH2C12中， 加入三乙胺， 在 0°C下， 滴加氯乙酰氯（1.5 eq)的 C¾C12溶液， 反应 2h， 得到化合物 19。
h. 制法同 3的步骤 h， 不同点在于用化合物 19代替化合物 10。
a. 制法同 1的步骤 a， 不同点在于用化合物 18代替化合物 1。 含氨基或胺基的中间体 RaNH或 RaNH2
o. 将化合物 10或化合物 14溶于 EtOH中， 加入氨水， 室温反应 5天， 从而得到化合物 29或化合物 30。 3. 具有氨基或胺基的片段 P
3.1. 化合物 47的制备
47- 1 47
p. 将化合物 47- 1 (1 eq)溶于甲醇中， 加入氯化亚砜 (SOC12)(4.0 eq)， 回流， 反应 12h， 得到化合物 47
3.2. 化合物 48的制备
47- 1 48
q. 将化合物 47- 1 (1 eq)溶于二氧六环中， 加入三乙胺 (2.0 eq)， Boc2O(1.0 eq), 室温搅 拌 3h, 得到化合物 48。
3.3. 化合物 38-1的制备
37 38-1
t. 将化合物 37(1.0 eq)溶于 CH2CI2中， 加入邻苯二甲酸酐（1.0 eq)， 4(TC搅拌过夜， 得 到化合物 38-1。
3.4. 化合物 BB10的制备
3.4.1 化合
55 56 57
aaa.将巴豆酸溶于 CC14中， 加入少量 (PhCO)20和 1.2 eq的 NBS， 升温至 80°C , 反 后: 过滤， 浓缩滤液， 用正己烷重结晶， 得到化合物 56。
bbb.将化合物 56溶于 S0C12中， 室温搅拌 12h后， 旋干 SOCl2， 得到化合物 57。
3.4.2 化合物 BB10:
aa.将 lOg 化合物 BB 1， 醋酸甲脒 8g(L3 eq) 置于 100ml茄形瓶中， 混合均匀， 微波 炉中反应 4min(60 %功率）。 冷却后， 加入 30ml水， 洗涤固体， 过滤得 10g化合物 BB2， 收 率 95 %。
bb.将 10g 化合物 BB2冰浴下缓慢加入浓硫酸和发烟硝酸 (20ml ： 20ml)混酸中， 加完 升温至 90°C， 反应约 1小时。 将反应液倒入 300ml冰水中， 析出固体， 过滤， 收集固体得 化合物 BB3的粗品 12g。
cc. 将 10g化合物 BB3置于 40ml乙腈中， 依次加入三氯氧磷 8.3g， 三乙胺 5.4g， 然 后加热至 80°C反应至 TLC监测反应完全后。
dd. 将 7.8g 3-氯 4-氟苯胺的二氧六环 (50ml)溶液滴加入反应液中， 析出固体， TLC监 测反应完全后， 加入 40ml水， 用 KOH溶液调节 pH至微碱性， 过滤， 得到黄色固体化合物 BB5粗品。 将固体置于锥形瓶中， 加入适量四氢呋喃， 超声洗涤固体， 过滤得 13g化合物 BB5。
ee.将 10g 化合物 BB5溶于 40ml DMF中， 加入苯亚磺酸钠 6.1 g， 加完升温至 90°C反应 2小时， TLC监测反应完全后， 将反应液冷却后搅拌下倒入 150ml水中， 过滤， 收集固体， 干燥， 得 1 1.5g化合物 BB6。
ff. 将 10g化合物 BB6分散于 60ml DMF中， 冰浴下缓慢加入 NaH 1.8g(2 eq), 加完转 室温搅拌 3h， tic监测反应完全后， 倒入 200ml水中， 过滤， 干燥， 得 7.6g化合物 BB7。
gg. 将 7.6g化合物 BB7溶于 35ml DMF中， 加入 2.5g Raney镍， 1.8g 氯化铵， 氢化反 应过夜。 反应完全后， 滤去不溶物， 搅拌下将滤液倒入 350ml水中， 析出固体， 过滤， 收 集固体， 得 6.4g化合物 BB8。
hh. 将 2g 化合物 BB8 用于四氢呋喃中， 冷却到 0°C， 滴加化合物 57的四氢呋喃溶液 (1.5 eq), 然后转至室温搅拌 2h后， 加入水， 用乙酸乙酯萃取， 干燥得到化合物 BB9 粗品。
ii. 将 200mg 化合物 BB9 溶于 5mL DMF中， 加入 10 eq的哌嗪， 室温搅拌过夜， 得到 化合物 BB 10。
3.5. 化合物 GG9的制备
3.5.1 化合物 59:
Br, 、Br ► f N Br
58 BocN-/ 59
ccc. 将 5g化合物 58 溶于 20mL DMF中， 加入 10 eq的 1 -Boc-哌嗪， 100°C反应 12h， 得
到化合物 59。
aa.将 20g化合物 GG1， 醋酸甲脒 17g(1.3 eq)置于 100ml茄形瓶屮， 混合均匀， 微波炉 中反应 4min(60 %功率）。 冷却后， 加入 30ml水， 洗涤固体， 过滤得 20g化合物 GG2。
gg. 将 20g 化合物 GG2溶于 l OOmL甲磺酸中， 加入 MgS04搅拌， 得到 15g化合物 GG3。 kk. 将 15g化合物 GG3置于 40ml吡啶中， 加入醋酐（1.5 eq)， 室温搅拌过夜， 反应完全 后， 倒入水中， 析出固体， 过滤得到化合物 GG4。
cc. 将 10g化合物 GG4置于 40ml乙腈中， 依次加入三氯氧磷 8.3g， 三乙胺 5.4g， 然 后加热至 80°C反应， TLC监测反应完全后；
dd. 将 7.8g 3-氯 4-氟苯胺的二氧六环 (50ml)溶液滴加入反应液中， 析出固体， TLC监 测反应完全后， 加入 40ml水， 用 KOH溶液调节 pH至微碱性， 过滤， 水洗， 得到黄色固体 化合物 GG6粗品。 将固体置于锥形瓶中， 加入适量四氢呋喃， 超声洗漆固体， 过滤得 13g 化合物 GG6。
11. 将 10g化合物 GG6溶于 200ml 四氢呋喃中， 30mL水， 1 .5 eq的 NaOH，室温搅拌 4h， TLC监测反应完全后， 用盐酸调节 pH值为 4, 将反应液， 倒入 500ml水中， 过滤， 收集固 体， 干燥， 得 7 8g化合物 GG。
mm. 将 5g化合物 GG7分散于 50ml DMF中， 加入 K2CO3(2.0 eq)， 化合物 59(1 .2 eq)， 80°C反应 3h , tic监测反应完全后， 倒入 400ml水中， 过滤， 干燥， 得 5.5g化合物 GG8。
nn. 将 2g化合物 GG8分散于 50ml CH2C12中， 加入 3mL TFA室温反应 3h， TLC监测反 应完全后， 旋干反应液， 得到化合物 GG9。 实施例 1 : 化合物 AR1
将化合物 3(1 .0 eq)和二 (2-二氯乙基)胺盐酸盐（1 .3 eq)溶于 CH2C12中，加入 EDCI( 1 .2 eq) 禾口 DMAP(1 .2 eq)， 室温搅拌 24h， 得到化合物 AR1。 Ή NMR (400 MHz, CDC13) δ 0.83-0.86 (m, 3H), 0.94-0.95 (m, 4H), 1.13-1 .70 (m, 13H), 2.33-2.36 (m, 1 H), 2.53-2.61 (m, 4H), 3.48 (brs, 4H), 3.64 (brs, 4H), 5.02 (s, 1 H), 6.06 (s， 1 H); ESI-MS m/z 508 [M + H]+. 实施例 2 : 化合物 AR2
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主要步骤如下： 将收集的 A2780， OVCAR-3或 Hep3B细胞， 重悬于无血清并含 20%(v/v)Matrigel(BD Biosciences, Bedford, MA)的无血清培养基中。 然后皮下注射等量细 胞(〜5 >< 106 cells/0.2 ml)于小鼠的左侧腹股沟。每 3天监测肿瘤的生长情况和小鼠的体重并 同时测量检测肿瘤的大小。
等到肿瘤成长至可触摸大小 (~70mg)时，将小鼠随机分成治疗组和对照组 (每组 5只老 鼠）。 AR7的给药剂量为 5、 10或 25mg/kg体重， 给药频率为每天给药（自第 0天起)， 给药途 径为皮下注射给药 (阳性药物：如卡铂或吉西他滨给药剂量为 120mg/kg体重)。对照组注射 生理盐水。
2. 青蒿素衍生物抗肿瘤活性筛选
2.1 实验化合物和对照化合物对实体瘤细胞系和永生化的对照细胞的半数抑制率 (IC5o)的对比
实验化合物： 挑选本发明中的 24种青蒿素衍生物进行实验， 化合物分别是化合物 ARK AR3、 AR4、 AR7、 AR9、 AR 13、 AR35、 AR37~AR53。 对照化合物： 双氢青蒿素 (DHA)、 青蒿素 (ARS)、 美法仑、 氨鲁米特和去氧氟尿苷。 按照常规的方法， 比较上述 24 种青蒿素衍生物和对照药物对以下四组细胞的细胞毒性。
表 1 实体瘤细胞系和永生化的对照细胞
比较结果如表 2所示，化合物 AR1、 AR3、 AR4、 AR7、 AR9、 AR13、 AR35、 AR37-AR53 对于肝癌和卵巢癌细胞生长都具有抑制效应， 且均优于青蒿素的抑制效果。 其中 AR7是 其中抗肿瘤效果最为明显的药物之一， 尤其是对肝癌细胞和卵巢癌细胞的抑制活性显著 高于双氢青蒿素 (DHA)和美法仑 (Melphalan)。 与对照药物相比， 其 IC50降低大于 10倍。
表 2 : AR1 -59系列化合物对多种肿瘤细胞的半数抑制率 (IC50) 化 7702 HepG2 Ηφ3Β IOSE144 A2780 OVCAR-3 MCF10A MCF7 MDAMB231 PC-3 DU145 编 正常 正常 正常
口
. 细胞 p53wt p53mut 细胞 p53wt p53mut 细胞 p53wt p53mut p53null p53mut
1 AR1 >50 11.45 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50
2 AR3 29.85 >50 >50 >50 2.51 633 >50 >50 >50 >50 >50
3 AR4 6.14 0.96 0.7 11.4 0.95 0.96 1525 >50 >50 >50 15.78
4 AR7 49.52 0.93 1.04 43.64 0.86 0.83 8.87 >50 >50 >50 4339
5 AR9 3.18 9.53 1.92 623 139 0.7 ― ― ― ― ―
6 AR13 3632 0/76 0.64 15.17 129 1.6 >50 >50 >50 >50 >50
7 AK35 4.19 0.86 1.13 422 0J8 0.56 10.74 >50 >50 >50 >50
8 AR37 >50 >50 121 21.75 0.86 1.16 8.17 >50 >50 >50 37.11
9 AR38 26.08 >50 1.03 >50 0.88 1 4 2728 >50 >50 >50 >50
10 AR39 >50 >50 1.01 22.04 1.05 124 19.84 >50 >50 >50 >50
11 AR40 >50 24.87 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50
12 AR41 >50 >50 2.88 >50 4.54 14.44 22.54 >50 26.06 >50 >50
13 AR42 4.4 >50 33.63 12.77 0.83 0.88 8.47 >50 >50 >50 >50
14 AR43 >50 >50 >50 >50 2.63 3.97 ― ― ― ― ―
15 AR44 38.14 >50 >50 >50 10.84 37.43 ― ― ― ― ―
16 AR45 >50 >50 >50 >50 2.46 10.11 ― ― ― ― ―
17 AR46 >50 >50 >50 >50 12.6 14.91 ― ― ― ― ―
18 AR47 >50 36.63 14.74 >50 15.79 >50 ― ― ― ― ―
19 AR48 >50 13.02 8.18 >50 10.99 >50 ― ― ― ― ―
20 AR49 >50 >50 >50 >50 8.64 30.67 ― ― ― ― ―
21 AR50 >50 14.81 5.52 10.79 8.19 5.83 ― ― ― ― ―
22 AR51 >50 >50 4.66 38.12 14.44 824 ― ― ― ― ―
23 AR52 6.08 424 4.71 >50 10.5 13.67 ― ― ― ― ―
24 AR53 835 1322 6.17 29.74 653 11.67 ― ― ― ― ―
25 B >50 36.49 >50 >50 >50 5.19 >50 >50 >50 >50 >50
26 D >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50
27 E >50 >50 1324 16.46 >50 >50 8.51 >50 >50 >50 >50
28 ARS >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50 >50
29 DHA >50 >50 >50 >50 4J5 5.65 44.43 >50 >50 >50 >50 注： B为美法仑 （Melphalan) ; D为氨鲁米特 （Aminoglutethimide)； E为去氧氟尿苷 (Doxifluridin) , ARS (青蒿素）， DHA (二氢青蒿素）； wt表示野生型， nut表示突变， null表 示缺失。 2.2 AR7与 DHA体外抗肿瘤效果比较
比较 AR7与 DHA分别在卵巢癌、 肝癌、 神经胶质瘤不同细胞系以及胃肠间质瘤病人 肿瘤原代细胞 (所述原代细胞是在临床新鲜的胃肠间质瘤 (GIST)样本中， 分离出的原代的 肿瘤细胞)中的体外抗肿瘤效果， 实验方法同上述步骤 1.1中所述。
结果如图 1 D所示， 结果表明 AR7体外抗肿瘤效果优于 DHA。 图 1中，
A图表明： AR7可以剂量依赖的抑制卵巢癌细胞 A2780、 OVCAR3、 SK-OV3细胞活 力； 且与 DHA相比， AR7表现出一定的抗癌优势， 对卵巢正常上皮细胞 IOSE 144抑制效应 不明显。
B图显示： AR7对肝癌细胞 Hep3B及肝癌门静脉癌栓细胞 PVTT2具有显著的抑制作 用， 其抑制效果较 DHA更为显著。 而对正常肝细胞 7702则表现出一定的保护作用。
C图显示： 在神经胶质瘤细胞株 SHG-44、 A 172、 U251中， AR7显著抑制肿瘤细胞的 生长， 抑制效果与 DHA相比， 表现出一定的优势。
D图显示： AR7对于原代的 GIST细胞具有一定的抑制作用， 其抗癌效果也显著高于 DHA。 2.3 AR7与 DHA对血液系统肿瘤的抑制效果比较
比较 AR7和 DHA , 对三种 Burkitt' s淋巴瘤（Raj i、 BJAB、 NAMALWA)的生长抑制作
用， 实验方法同上述步骤 1.1中所述。
结果如图 2显示， AR7和 DHA对于三种淋巴瘤细胞系具有明显的抑制作用， 并且 AR7 的抑制效果要高于 DHA。 2.4 AR7体内抗肿瘤活性
2.4.1 建立 A2780和 OVCAR-3卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型，来检测实验药物和阳性药 物的抗肿瘤效果。 并测试用药前后裸鼠体重的变化， 以监测药物对动物的毒副作用， 实 验方法同上述步骤 1.2中所述。
实验药物： AR7
阳性药物： 卡铂 (CBP)
阴性对照： 生理盐水 (Saline)
结果如图 3的 A图和 B图所示， 结果表明： AR7可以剂量依赖的抑制卵巢癌细胞 A2780 和 OVCAR3在动物体内的生长， 且抑制效果优于卡铂： 相同的抑制率下， 所用的剂量远 少于卡铂。且在整个治疗过程中， 动物的体重与对照组相比并没有明显的差异， 提示 AR7 对小鼠无明显的毒副作用。
如图 3的 A图所示， AR7在剂量为 5mg/kg， 10mg/kg和 25tng/kg情况下分别导致 A2780异 体移植肿瘤 40.5%, 58.4%和 73.6%的生长抑制率 (与给生理盐水的对照组相比) (PO.05); 如图 3的 B图所示， AR7在剂量为 5mg/kg， 10mg/kg和 25mg/kg情况下， 分别导致 OVCAR-3肿瘤模型 49.7%, 65.7%和 82.6%的肿瘤生长抑制 (P<0.05)。
其中， 25mg/kg AR7对于肿瘤的抑制效果接近于与 120mg/Kg CBP治疗效果。
2.4.2 建立 Hep3B肝癌裸鼠异体移植瘤模型， 来检测实验药物和阳性药物的抗肿瘤 效果。 并测试用药前后裸鼠体重的变化， 以监测药物对动物的毒副作用， 实验方法同上 述步骤 1.2中所述。
实验药物： AR7
阳性药物： 吉西他滨 (GEMZAR)
阴性对照： 生理盐水 (Saline)
如图 3的 C图所示， 结果表明： AR7可以剂量依赖的抑制 Hep3B肝癌， 且抑制效果优 于吉西他滨： 相同的抑制率下， 所用的剂量远少于卡铂。 且在治疗过程中， 小鼠的体重 也未发现明显的变化。
其中， AR7在剂量为 5mg/kg, 10mg/kg和 25mg/kg情况下分别导致 Hep3B异体移 植肿瘤 23.8%, 46.4%和 56.7%的生长抑制率 (与给生理盐水的对照组相比) (P<0.05)。 用 120mg/kg阳性药物吉西他滨治疗后， 肿瘤的抑制率为 66.7%。 25mg/kg AR7对于 肿瘤的抑制效果接近于与 120mg/Kg 吉西他滨的治疗效果。
2.4.3 AR7与 DHA体内抗肿瘤活性比较
建立 A2780和 OVCAR-3 卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型，检测 AR7和 DHA的体内抗肿瘤 活性。 并测量给药前后裸鼠体重的变化， 以检测药物对动物的毒副作用。
实验方法：
与上述步骤 1.2类似， 不同点在于：
实验药物： AR7(25mg/kg)
阳性药物： DHA(25mg/kg)
CTRL:表示蓖麻油、乙醇和生理盐水溶剂 (蓖麻油 ： 乙醇 ： 生理盐水 =5:5:90, v/v/v)。 实验结果：
结果如图 4的 A1图、 A2图所示： AR7具有比 DHA更好地抑制肿瘤细胞 A2780和 OVCAR-3在动物体内生长的作用。 对 A2780卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型， AR7能够抑制 71%, 而 DHA只能抑制 41%; 对 OVCAR-3裸鼠异体移植瘤模型， AR7能够抑制 63%, 而 DHA只能抑制 43%。
实验结束后， 取出肿瘤块测量肿瘤的大小。 结果如图 4的 B1图、 B2图所示： AR7治疗 组的肿瘤块重量有明显的减轻。 在 A2780卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型 AR7能减轻 64.37%， 而011八只有40.15%。在 OVCAR-3卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型 AR7能减轻 57.61%, 而 DHA 只有 22.82%。
在整个治疗过程中， 动物的体重与对照组相比没有明显的差异， 表明 AR7对小鼠无 明显的毒副作用 (如图 4的 C1图、 C2图所示：)。
2.4.4 体内和体外 AR7与 DHA抑制肿瘤转移活性比较
一、 体外实验
(a) 进行体外 transwdl侵袭实验。
实验方法：
将 A2780细胞给予 Ι ΟμΜ或 25μΜ AR7或 DHA孵育 8个小时， 对照组给予相同体积浓度 的 DMSO处理。 然后撤去药物将处理后相同数目的细胞重悬于无血清 1640培养基， 种植 在 tmnswell上室， 同时在下室中加入含有 10%FBS的 1640培养基作为趋化剂。 8-12小时后 擦去 transwdl未穿过细胞， 并固定染色统计迁移到对侧的细胞数目。
实验结果：
如图 5的 A图所示： AR7能够显著抑制 A2780的转移， 在 25μΜ下， AR7能抑制 96%, 而 011八只能抑制71 .97%。
(b) 细胞活力检测
在体外 transwdl侵袭实验的实验条件下， 发明人检测了细胞的活力。
结果如图 5的 B图所示： 药物对细胞的活力没有显著性影响。这表明药物对细胞转移的 抑制是通过对细胞的运动能力的抑制作用， 而不是通过药物对细胞的杀伤作用。 二、 体内实验
建立卵巢癌的腹腔原位模型， 以检测 AR7对肿瘤细胞在体内播散和转移的影响。 实验方法：
四到六周龄的雌性 BALB/C(nU/nU)购自上海斯莱克实验动物有限公司（Shanghai Experimental Animal Center),并按规定饲养于 SPF级动物房。
将稳定表达荧光素酶的 A2780细胞， 重悬于无血清的 RPMI 1640培养基中， 然后腹腔 注射等量细胞 (约为 3x l 06 细胞数 /0.2ml)于小鼠的腹腔内部。利用 IVIS Lumina生物荧光系
统实时监测肿瘤的生长情况， 并记录小鼠的体重。 注射一定时间后， 根据肿瘤的荧光强 度将小鼠平均分成治疗组和对照组。
CTRL:表示蓖麻油、乙醇和生理盐水溶剂 (蓖麻油 ： 乙醇 ： 生理盐水 =5 :5:90， ν/ν/ν)。 治疗组： AR7 (Ι ΟμΜ和 25μΜ)
对照组： ΟΗΑ (25μΜ)
所有药物均通过腹腔给药。 给药频率为每天给药， 每周停歇两天。 治疗过程中利用 活体成像系统实时监测肿瘤的生长状况。
实验结果
结果如图 5的 C图和 D图所示： 随着时间的推移， 对照组的 Α2780肿瘤在小鼠腹腔里播 散，荧光素酶的活性越来越强，而 AR7处理组能够导致 99.4%的抑制，而 DHA组只有 65.1 % 的抑制。 这些数据表明 AR7具有比 DHA 更强的抑制肿瘤转移的能力。
在整个治疗过程中， 动物的体重与对照组相比没有明显的差异， 表明 AR7对小鼠无 明显的毒副作用 (如图 5的 Ε图所示)。 2.4.5 AR7抑制肿瘤细胞进程
体外实验表明 AR7通过抑制卵巢癌细胞系 Α2780和 OVCAR-3的增值， 诱导细胞凋亡和 诱导细胞周期阻滞以抑制肿瘤细胞的进程。
实验方法： AR7对细胞周期分布的影响采用 ΡΙ染色及流式细胞仪分析 DNA含量的方法 进行测定。 大体步骤为： 卵巢癌 Α2780和 OVCAR-3细胞经过不同浓度的 AR7处理 24小时 后， 离心收集细胞， 然后加入预冷的 70%乙醇 (700μί无水乙醇和 300μί的 PBS)于 4°C固定 过夜。 之后离心弃去固定液， 经 PBS清洗后加入 Ι ΟΟμί (100 g/mL) RNase A于 37°C孵育 30分钟， 然后加入 500 的 PI染色液 (50 g/mL)于黑暗中放置染色 15分钟， 然后用流式细 胞仪（Cell Lab Quanta™ SC flow cytometer; Beckman Coulter, USA)检测并分析细胞的 DNA含量进而得到各个周期 (G0-G1、 S和 G2/M期）的细胞的百分比。
实验结果：
(a) 在 10μΜ下， AR7能够显著抑制肿瘤细胞的增值， 对 Α2780和 OVCAR-3增值的抑制 基本都可以达到 80%以上。 如图 6的 A1图和 Α2图所示。
(b) AR7能够诱导肿瘤细胞的凋亡， 并呈现浓度依赖性的提高。 在 5μΜ、 10μΜ的浓度 处理下， 在 Α2780和 OVCAR-3分别诱导了 405%、 705%和 318%、 708.2%的凋亡。 如图 6 的 B 1图和 Β2图所示。
(c) AR7能够诱导 Α2780和 OVCAR-3细胞在 S期的阻滞， 而且具有浓度和时间依赖性。 如图 6的 C 1图、 C2图、 C3图、 C4图所示。
2.4.6 AR7 抑制肿瘤微环境中的巨噬细胞
构建一个模型 PMArTHPl , 测试 AR7对这个细胞模型的影响， 进而模拟 AR7对肿瘤微 环境的影响。
PMArTHPl构建方法：
人单核细胞 THP-1经 200nM的 PMA处理 48小时后用 20ng/mL IL-4继续刺激 24小时， 然 后用 RPIM1640完全培养基培养 48小时， 以此诱导的 PMArTHP l细胞为 M2型巨噬细胞。
通过用 PMA/IL-4刺激 THPl细胞， 并检测了 CD14、 FE/80、 CD206这几个常见的 THPl 成功分型为巨噬细胞的因子， 表明实验模型的成功。
实验方法： 分别对构建的 PMArTHPl进行给药：
CTRL: 表示 DMSO
治疗组： ΑΙ 7 (1 μΜ、 5μΜ和 Ι ΟμΜ)
对照组： ϋΗΑ (ΙΟμΜ)
实验结果：
(a) AR7对 PMArTHPl细胞具有杀伤性， 杀伤作用强与 DHA。 如图 7的 D图所示。
(b) AR7能够诱导 PMArTHPl细胞的凋亡， 在 ΙΟμΜ下， 能够增加 1.5倍的凋亡比例， 而 DHA只有 0.2倍的增加比例。 如图 7的 Ε图所示。
(c) AR7 能够抑制 PMArTHPl 的迁移， 在 ΙΟμΜ下， 能够 78%抑制 PMArTHPl 的迁移， 而在该浓度下 DHA只有 36%的抑制。 如图 7的 F图所示。
(d) AR7 能够抑制 PMArTHPl 的侵袭， 在 ΙΟμΜ下， 能够 89.7%抑制 PMArTHPl 的转 移， 而在该浓度下 DHA只有 52.1%的抑制。 如图 7的 G图所示。
(e)PDGF 受体和因子都与细胞的生长和迁移有关， 发明人检测了 AR7是否通过降低
PMArTHPl中 PDGF 受体和因子的表达， 进而影响 PMArTHPl的细胞活性和迁移能力。
实验表明 AR7 降低了 PDGFRa (如图 7的 H图所示） 禾 B PDGFRp (如图 7的 I图所示）的表 达， 以及 PDGFAA (如图 7的 G图所示） 禾 n PDGFBB (如图 7的 K图所示） mRNA的表达。
可见， AR7能够针对肿瘤微环境中的巨噬细胞发挥作用， 进而影响肿瘤的进程。
2.4.7 AR7能够干扰和阻滞肿瘤细胞与肿瘤微环境的相互作用， 进而抑制肿瘤的进 展。
实验方法： 将 THP1或者 PMArTHPl细胞重悬于无血清 1640培养基， 相同数目种植在 transwell上室， 同时在下室中加入 AR7处理前后的 A2780无血清的细胞上清作为趋化剂。 一定时间后擦去 transwell未穿过细胞， 并固定染色统计迁移到对侧的细胞数目。
细胞因子表达谱的分泌通过 Bio-Rad悬浮芯片细胞因子试剂盒检测 (Bio-Plex Mouse Cytokine Assays, Bio-Rad Laboratories, Inc；)。 将等量的不同处理的细胞无血清培养上清离 心弃去细胞碎片， 并根据试剂盒说明书要求检测相关细胞因子的表达。
实验结果：
(a) AR7能够抑制肿瘤细胞对微环境中 THP1的招募作用， 在 25μΜ时达到了 88.3%的抑 制。 该过程可以减少肿瘤细胞周围的单核细胞的数量， 也会导致减少了肿瘤相关性巨噬 细胞的数量。 如图 8的 Α图所示。
(b) AR7 能够抑制肿瘤细胞对 PMArTHPl的迁移诱导能力， 能在 25μΜ处理 A2780后， 能达到了对 Α2780诱导能力 55.6%的抑制， 而 DHA 在这个过程中只达到了 27.2%的抑制。 如图 8的 Β图所示。
(c) AR7能够通过抑制 PMArTHP-Ι ,从而阻断其对肿瘤细胞的迁移或侵袭诱导作用。 在 25μΜ处理 PMArTHPl后， 能达到对 PMArTHPl诱导能力 94%的抑制， 而 DHA只有 68%的 抑制。 如图 8的 C图所示。
(d) AR7能够抑制 PMArTHP- 1分泌 IL-6,RANTES ,ΜΙΡ- 1 α,ΜΙΡ一 1 β。 如图 8的 Ε图所示。 2.4.8 AR7的增敏作用
Sunitinib是临床上一种新型多靶向性的治疗药物， 发明人检测了 AR7对这种药物的增 敏作用。
构建 A2780和 OVCAR-3 卵巢癌裸鼠异体移植瘤模型。 构建方法与 1.2类似。 将人卵巢 癌细胞 A2780和 OVC AR-3分别接种于 B ALB/c裸鼠皮下， 建立卵巢癌裸鼠异体移植瘤模 型。 待肿瘤长至一定大小， 根据不同组别用药。 每隔两天测量肿瘤大小， 治疗 3周后， 停 止用药， 用药情况为：
A. 对照组： 灌胃 0.2ml溶剂 /天。
B. AR7组： 腹腔注射 AR7 10mg/kg/天， 每星期 5天。
C sunitinib组： 灌胃 sunitinib 25 mg/kg/天， 每星期 5天。
D. AR7联合 sunitinib组： 灌胃 sunitinib 25 mg/kg/天， 腹腔注射 AR7 10mg/kg/天， 每星 期 5天。 每隔两天测量肿瘤大小， 治疗 3周后停止用药。
实验结果如图 9的 A1图和 A2图所示， A2780和 OVCAR-3 卵巢癌裸鼠异体移植瘤在经 sunitinib治疗后生长得到了抑制， 单药抑制率分别为 84%和 60%, AR7联合 sunitinib治疗后 抑制率达到了 92%和 68%。
实验结果如图 9的 B1图和 B2图所示， A2780和 OVCAR-3 卵巢癌裸鼠异体移植瘤经 sunitinib治疗后肿瘤的重量减少了 79.15%和 52.06%， AR7联合 sunitinib治疗后抑制率达到 了 86%和 59%。
可见， AR7和 sunitinib联用效果都高于单药的抑制率， 二者变现出协调作用。
在整个治疗过程中， 动物的体重与对照组相比没有明显的差异， 表明 AR7对小鼠无明 显的毒副作用。 如图 9的 C1图和 C2图所示。 综上所述-
AR7可以通过作用与肿瘤细胞本身和肿瘤微环境从而抑制肿瘤发生发展的进程。 AR7 可以对 sunitinib进行增敏作用。 可见， AR7是一个具有成药性的化合物。 实施例 61 药物组合物
化合物 AR1〜AR59中任一化合物或其组合 5〜20g
淀粉 140g
微晶纤维素 60g
按常规方法， 将上述物质混合均匀后， 装入普通明胶胶囊， 得到 1000颗胶囊。 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考， 就如同每一篇文献被单独引 用作为参考那样。 此外应理解， 在阅读了本发明的上述讲授内容之后， 本领域技术人员 可以对本发明作各种改动或修改， 这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定 的范围。
Claims
1. 一种结构如式 I所示的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐， 或其对映异构体、非 对映异构体或外消旋体，
I
其中， X为 -0-、 -S -、 -NH-或 -CH2-;
Y为 -CO-或 -CH2-;
Z为 -CH2-、 -0-、 -CO-, -CH2CO-、 -CH2NH -、 -CH20-、 -COCH2-、 -NHCH2-、 -OCH2- 或 -NH-;
n为 0~5的整数； k为 0或 1 ;
P为选
其中， R、 R4各自独立地为苯环上任意位置取代的选自下组的基团： 氢、 卤素、 -C 直链或支链的烷基、 C2-C12直链或支链的不饱和烃基、 C3- C12环烃基、 氰基、 硝基、 氨基
或被 -C4垸基所取代的胺基、 羟基、 羟甲基、 三氟甲基、 三氟甲氧基、 羧基、 巯基苯基、 取代的苯基、 萘基、 联苯基、 或者取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C12杂环基， 其中 所述取代基选自： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 羟垸基、 羧基或 d-C4 胺烷基或醛基；
q、 t各自独立地为 1〜4的整数；
R7为苯环上一个或两个任意位置取代的选自下组的基团： 氢、 卤素、 ^^直链或支 链的垸基、 C2-C12直链或支链的不饱和烃基、 C3-C12环烃基、 乙炔基、 氰基、 硝基、 氨基、 羟基、 羟甲基、 三氟甲基、 三氟甲氧基、 羧基、 巯基苯基、 取代的苯基、 萘基、 联苯基、 或者取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C12杂环基， 苄醇基、取代的苄醇基、 Ν,Ν-二甲 基， Ν,Ν-二乙基， 其中所述取代基选自： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 - 羟垸基、 羧基或 胺垸基或醛基；
R8、 R9各自独立地为—卜 W— (D)厂 (E) r—— ¾"， 其中，
W为氢、 氧、 ΝΗ、 卤素、 ^直链或支链的烷基或亚垸基、 C2-C12直链或支链的不 饱和烃基或亚烃基、 C3-C12环烃基或亚环烃基、 氰基、 硝基、 氨基、 羟基、 d-C4羟烷基、 三氟甲基、 三氟甲氧基、 羧基、 巯基苯基、 取代的苯基、 萘基、 联苯基、 或者取代或未 取代的饱和或者不饱和的 C3-C12杂环基或亚杂环基、 Ν,Ν-二甲基， Ν,Ν-二乙基， 其中所述 取代基选自下组： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 羟烷基、 羧基或 d-C4 胺垸基或醛基；
D为羰基、 ^直链或支链的垸基或亚烷基、 C2-C12直链或支链的不饱和烃基或亚 烃基、取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C12杂环基或亚杂环基， 其中所述取代基选自 下组： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 Ci- 羟烷基、 羧基或 C1 -C4胺垸基或醛 基；
E为C1-C12直链或支链的垸基或亚烷基、 C2-C12直链或支链的不饱和烃基或亚烃基、 取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C12杂环基或亚杂环基， 其中所述取代基选自下组： 卤素、 三氟甲基、 乙炔基、 羟基、 氨基、 d-C4羟烷基、 羧基或 d- 胺垸基或醛基； j、 r各自独立地为 0~5的整数；
A为选自下组的连接基
B为选自下组的连接基团:
m为 0或 1。
2. 如权利要求 1所述的青蒿素衍生物， 其特征在于， R8 R9各自独立地为 — W— (D)r(E>r— 其中， W为氧或 NH;
D为羰基、 d-C6直链或支链的垸基或亚垸基、 C2-C6直链或支链的不饱和烃基或亚烃 基、 取代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C6杂环基或亚杂环基；
E为 C C6直链或支链的垸基或亚垸基、 C2-C6直链或支链的不饱和烃基或亚烃基、 取 代或未取代的饱和或者不饱和的 C3-C6杂环基或亚杂环基；
j、 r各自独立地为 0~5的整数。
3. 如权利要求 1所述的青蒿素衍生物， 其特征在于， X为 -0-、 -NH-或 -CH2-。
4. 如权利要求 1所述的青蒿素衍生物， 其特征在于， X为 -0-、 -NH-或 -CH2-; 且 Z为 -0-、 -CO-, -NH-或 -CH2-。
5. 如权利要求 1所述的青蒿素衍生物， 其特征在于， X为 -0-、 -NH-或 -CH2-; Z为 -0-、 -CO-, -NH-或 -CH2-; 且 n为 0或 1。
6. 如权利要求 1所述的青蒿素衍生物， 其特征在于， X为 -0-、 -NH-或 -CH2-; Z为 -0-、 -CO-、 -NH-或 -C¾-; n为 0或 1 ; 且 m为 0或 1。
7. 如权利要求 1所述的青蒿素衍生物， 其特
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8. 一种权利要求 1 -7任一项所述的青蒿素衍生物的制备方法，其特征在于，包括方法： 将 RaNH或 RaNH^flRbCOOH进行酸碱缩合反应、 或将 RaCOOH和 RbNH或 RbNH2进行酸 碱缩合反应、 或将 RaOH和 RbCOOH进行成酯反应， 从而形成式 I化合物；
其中， RaNH或 RaNH2、 RaCOOH. RaOH为选自下组的化合物：
12 13
其中， R、 q、 R4、 t的定义同权利要求 1中所述；
R2、 R3与相邻的 N共同构成： 哌嗪、 4-羟 C C4烷基哌啶、 4-羟^ 4烷基哌嗪; R5、 R6各自独立地为选自下组的基团：
9. 一种权利要求 1-7任一项所述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐的用途，其特 征在于， 用于制备治疗肿瘤、 抑制肿瘤或肿瘤细胞生长的药物。
10. 如权利要求 9所述的用途， 其特征在于， 所述的青蒿素衍生物为式 I化合物， 且式 I中， X为 -0-或 -CH2-;
Y为 -CO-或 -CH2-;
Z为 -0-、 -CH2-、 -CO-或 -C¾CO-;
n为 0~2的整数； k为 0或 1 ;
P为选自下组的基团：
其中， B为 ， m为 0或 1; 或
ο 、 、0
FjC" — ΰ' 'm 其廿中， A A为 ， 111为0或 1;
且 用于制备治疗前列腺癌、 抑制前列腺癌或其细胞生长的药物。
11. 如权利要求 9所述的用途， 其特征在于， 所述的青蒿素衍生物为式 I化合物， 且式
I中， X为 -0-或 -CH2-;
Y为 -CO-或 -CH2-;
Z为 -0-、 -CH2-、 -CO-或 -CH2CO-;
n为 0~2的整数； k为 0或 1;
P为选自下组的基团：
且 用于制备治疗肝癌、 抑制肝癌或其细胞生长的药物。
12. 如权利要求 9所述的用途， 其特征在于， 所述的青蒿素衍生物为式 I化合物， 且式 I中， X为 -0-或 -CH2-;
Y为 -CO-或 -CH2-;
Z为 -0-、 -CH2-、 -CO-或 -CH2CO-;
n为 0~2的整数； k为 0或 1;
1:
为氢， q为 1; 或
m为 0或 1; 或
1; 或
且 用于制备治疗卵巢癌、 抑制卵巢癌或其细胞生长的药物。
13. 一种药物组合物， 其特征在于， 包括： （a) 0.0001 -99.99wt%的权利要求 1 -7任一 项所述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐； 和 （b) 药学上可接受的载体。
14. 一种权利要求 1 -7任一项所述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐的用途， 其 特征在于，
用于制备抑制肿瘤或肿瘤细胞转移、 抑制肿瘤细胞增殖、 诱导肿瘤细胞凋亡和 /或诱 导肿瘤细胞周期阻滞的药物；
用于制备抑制 PDGFAA、 PDGFBB , PDGFRa禾口 /或 PDGFRp表达的药物； 用于制备抑制肿瘤细胞诱导巨噬细胞或肿瘤相关巨噬细胞的迁移的药物和 /或抑制 诱导微环境中巨噬细胞凋亡的药物；
用于制备抑制 IL-6、 RANTES、 ΜΙΡ-1 α和 /或 ΜΙΡ-1 β表达的药物； 和 /或
用于制备 PDGF抑制剂的增敏剂。
15. 一种药物组合物， 其特征在于， 含有： 活性成分 a: 如权利要求 1-7任一项所述的 青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐； 以及 活性成分 b: 抗癌药物。
16. 一种癌症治疗方法， 其特征在于，
所述方法包括步骤：
给癌症患者施用权利要求 1-7任一项所述的青蒿素衍生物或其药学上可接受的盐、如 权利要求 13或权利要求 15所述的药物组合物； 或
所述方法包括步骤：
给癌症患者分别施用： （i)如权利要求 1-7任一项所述的青蒿素衍生物或其药学上可 接受的盐、 如权利要求 13或权利要求 15所述的药物组合物； 和 （i i ) 抗癌药物。
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