WO2010071225A1 - 穀類植物種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質 - Google Patents

穀類植物種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質 Download PDF

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WO2010071225A1
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starch
treatment
dietary fiber
substance
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金内理
小宮山寛
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キリンホールディングス株式会社
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    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Definitions

  • the present invention relates to a substance for suppressing irritable bowel syndrome, which contains insoluble dietary fiber derived from plant seeds and germinated seedlings thereof, and a method for producing the same.
  • the present invention also relates to foods and beverages and pharmaceuticals containing the above substances as active ingredients.
  • IBS Irritable bowel syndrome
  • IBS has been reported to be closely related to changes in intestinal bacteria due to its characteristics, and clinical evaluation of probiotics and prebiotics is progressing. There is no special treatment or diet, and symptomatic treatment is fundamental. From this point of view, providing prebiotics focused on improving the intestinal environment is thought to be a gospel in aiming to improve clinical symptoms with fewer side effects for patients.
  • materials that are food ingredients and are effective for improving the intestinal environment acidic xylo-oligosaccharides (JP 2007-230998), galactomannan and arabinogalactan (specialized) obtained by treating wood chips with hemicellulase Re-WO05 / 056022), plant-derived proanthocyanidins (Japanese Patent Laid-Open No.
  • an object of the present invention is to provide a safe material having an inhibitory action on IBS. Moreover, this invention aims at providing the food-drinks for IBS suppression and IBS inhibitor containing such a raw material.
  • the present inventors have removed starch from the seeds of cereal plants, preferably gramineous plants, and insoluble after subjecting the remaining peels and seed coats to hemicellulase treatment. The insoluble fraction containing dietary fiber was found to have an IBS inhibitory action, and the present invention was completed.
  • the gist of the present invention is as follows.
  • step (b) The substance according to (1) above, wherein the gramineous plant is rice, barley, rye or wheat.
  • step (b) the starch removal treatment is performed by an enzyme treatment using amylase or glucoamylase.
  • step (b) the starch removal treatment is carried out by gelatinization treatment by heating.
  • step (b) the starch removal treatment is carried out by physical destruction treatment.
  • step (b) the physical destruction treatment is carried out by a homogenizer.
  • step (b) The substance as described in (1) above, wherein in step (b), the starch-removed fraction is further subjected to a pressing and peeling treatment.
  • step (9) The material according to (1) above, wherein the raw material used for the starch removal treatment is rice bran, wheat germ or barley malt.
  • step (10) The material according to (1) above, wherein the raw material used for the starch removal treatment is defatted rice bran.
  • the material according to (8) above, wherein the raw material used for the starch removal treatment is wheat bran or barley koji.
  • the substance according to (8) above, wherein the starch-removed fraction is a beer-added koji.
  • step (d) The insoluble fraction in step (d) substantially passes through a 5 to 25 mesh ASTM (American Society for Testing and Materials) standard sieve but does not pass through a 500 mesh ASTM standard sieve.
  • the substance according to any one of (1) to (15) above which comprises: (17) The substance according to (16) above, wherein the insoluble fraction in step (d) consists of a fraction having a particle size that does not substantially pass through a 200 mesh ASTM standard sieve. (18) The substance according to any one of (1) to (17) above, wherein the protein content is 20% by weight or less and the dietary fiber content is 55% by weight or more. (19) The substance according to any one of (1) to (18), wherein the insoluble dietary fiber is partially or completely removed from the aleurone layer.
  • a food or drink for suppressing irritable bowel syndrome comprising the substance according to any one of (1) to (21) as an active ingredient.
  • a pharmaceutical composition for suppressing irritable bowel syndrome comprising the substance according to any one of (1) to (21) as an active ingredient.
  • a method for producing a substance for suppressing irritable bowel syndrome, comprising an insoluble dietary fiber derived from a seed of cereal food comprising the step of collecting (26) The following steps: (a1) A step of preparing a raw material by collecting seed outer fractions obtained by crushing or refining the seeds of a cereal plant; (b1) A step of removing starch by physical disruption to prepare a starch-removed fraction; (c1) passing through a 5 to 25 mesh ASTM (American Society for Testing and Materials) standard sieve from the fraction prepared in step (b1)
  • the method for producing a substance according to (20) above comprising a step of recovering an insoluble fraction that does not pass through a 500 mesh ASTM standard sieve.
  • FIG. 1 shows a photograph of an aleurone layer portion contained in Preparation Sample 1.
  • FIG. 2 shows a photograph of the aleurone layer portion contained in Preparation Sample 2.
  • FIG. 3 shows a photograph of the aleurone layer part contained in Preparation Sample 3.
  • FIG. 4 shows a photograph of the aleurone layer portion in Preparation Example 3 when amylase is not allowed to act at 65 ° C. and only starch is removed with cold water.
  • FIG. 5 shows a photograph of the aleurone layer portion contained in Preparation Sample 4.
  • FIG. 6 shows a photograph of the aleurone layer portion contained in Preparation Sample 5.
  • FIG. 7 shows a photograph of the aleurone layer part contained in Preparation Sample 6.
  • FIG. 8 shows a photograph of the aleurone layer portion contained in the prepared sample 14.
  • FIG. 9 shows a photograph of the aleurone layer portion contained in the prepared sample 15.
  • FIG. 10 shows a comparison of fecal excretion between the experimental group and the comparative group in the restraint stress model. In the figure, the asterisk indicates a significant difference (P ⁇ 0.05).
  • FIG. 11 shows a comparison in which the pain threshold value by the barostat method between the experimental group and the comparative group in the restraint stress model is indicated by the pressure of the CRD (Collective Distination). In the figure, the asterisk indicates a significant difference (P ⁇ 0.05).
  • the pain threshold was determined by AWR (abdominal withdrawal reflex; Al-Chaer ED, Kawasaki M, Pasricha PJ., Gastroenterology.
  • FIG. 12 shows a comparison of serotonin content of the colonic mucosa between the experimental group and the comparative group in the restraint stress model. In the figure, the asterisk indicates a significant difference (P ⁇ 0.05).
  • FIG. 13 shows a photograph of the aleurone layer portion contained in the prepared sample 21.
  • FIG. 14 shows a photograph of the aleurone layer portion contained in the prepared sample 22.
  • FIG. 15 shows a photograph of the aleurone layer portion contained in the prepared sample 23.
  • FIG. 16 shows the recovery rate when the prepared samples 21 and 22 were re-degraded with an enzyme.
  • FIG. 17 shows the amount of free sugar when the prepared samples 21 and 22 are re-degraded with an enzyme.
  • FIG. 18 shows the effect of improving clinical findings in a human patient with irritable bowel syndrome who ingested an insoluble dietary fiber-containing substance prepared according to Preparation Example 16.
  • the IBS-suppressing substance of the present invention is based on the finding that an insoluble fraction containing insoluble dietary fiber derived from the seeds of a cereal plant (hereinafter also referred to as “insoluble dietary fiber-containing substance”) has an IBS-suppressing action.
  • insoluble dietary fiber-containing substance an insoluble fraction containing insoluble dietary fiber derived from the seeds of a cereal plant
  • the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention is characterized in that it contains insoluble dietary fiber derived from the seeds of cereal plants, preferably gramineous plants.
  • Examples of gramineous plants that can be used in the present invention include all plants classified as gramineous in the plant classification table. Specific examples include rice, barley, wheat, rye, awa, hie, corn, and the like, but are not limited thereto. Of these, rice, barley, rye and wheat are preferably used.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention is produced by recovering an insoluble fraction produced by enzymatic treatment of a starch-removed fraction from which a starch or the like is removed using a grain plant, preferably a grass plant seed. can do.
  • Step (a) a step of preparing a raw material by crushing the seeds of a cereal plant or by collecting a fraction outside the seeds produced by mashing; (b) removing the starch from the raw material (C) a step of enzymatic treatment of the fraction prepared in step (b) with an enzyme having hemicellulase activity; and (d) a step of recovering an insoluble fraction from the enzyme-treated solution. It can manufacture by the process containing.
  • Step (a) is a step of obtaining a raw material of the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention from the seeds of a cereal plant by grinding and / or milling.
  • the pulverization can be performed by, for example, a roll mill, a disk mill, a hammer mill or the like.
  • milling means removing and separating pericarp, seed coat, germ, etc. from the seeds of cereal plants, which can be carried out by a machine having the principle of scraping the surface, such as a rice mill or a stone mill. it can.
  • the seed outer fraction containing the pericarp, seed coat, and germ produced by this treatment can be used as the raw material in step (b).
  • This step may include a threshing treatment if the seeds contain husks in addition to grinding and / or milling the seeds of the cereal plant.
  • the seeds of the cereal plant to be used may be either germinated or ungerminated.
  • Step (a) can be omitted when a material that has been subjected to substantially the same treatment is used as a raw material.
  • Non-limiting examples of such materials include bran, which is produced as a secondary product when wheat flour is produced, and rice bran, which is produced as a secondary product after milling. The use of such materials is preferred from the standpoint that most of the starch in the cereal plant seeds has already been removed and that the steps are simplified.
  • rice bran it is preferable to use a defatted rice bran produced after degreasing the rice bran. This is because defatted rice bran is a less expensive material than rice bran and is superior in flavor.
  • Step (b) is a step in which starch is removed from the raw material prepared in step (a) to prepare a starch-removed fraction.
  • Any method may be used for the starch removal treatment as long as it can remove starch from the raw material.
  • starch decomposition treatment by an enzyme gelatinization by heating and removal by sieving after gelatinization, physical destruction It can be performed by a starch removal treatment by, for example.
  • the starch removal treatment is carried out by saccharification treatment with an enzyme, it can be carried out by using amylase or glucoamylase without limitation.
  • amylase and glucoamylase examples include, but are not limited to, for example, trade name orientase (manufactured by HBI), trade name Kokugen (manufactured by Daiwa Kasei Co., Ltd.), trade name Sumiteam (new) NIPPON CHEMICAL INDUSTRY CO., LTD.), Commercially available enzyme preparations such as Termamyl (manufactured by Novozymes), trade name Gluczyme (manufactured by Amano Enzyme), Trichoderma spp., Thermomyces sp., Aurelobasidium sp., Streptomyces sp.
  • amylase and glucoamylase produced by microorganisms such as Aspergillus genus, Clostridium genus, Bacillus genus, Thermotoga genus, Termocus genus, Cardoseram genus, Thermomonospora genus, Humicola genus, Rhizopus genus, Penicillium genus.
  • the enzyme used in the present invention can be in any form such as a purified enzyme, a crude enzyme, and an immobilized enzyme as long as the enzyme activity is maintained.
  • An immobilized enzyme is an enzyme bound to a carrier such as a polymer, polysaccharide, or inorganic substance.
  • the crude enzyme includes, for example, an enzyme-containing extract from an enzyme-containing microorganism and a processed product such as a dried product.
  • the saccharification treatment is generally performed at a temperature of 10 to 90 ° C., preferably 30 to 60 ° C., and a pH of 3 to 10, preferably 5 to 7. It is preferable to carry out at a value close to the optimum pH.
  • the enzyme treatment time can be 30 minutes to overnight, for example, 3 hours.
  • the addition amount of the enzyme can be set by those skilled in the art according to the amount of the raw material prepared.
  • Gelatinization by heating can be performed by utilizing a phenomenon in which starch is suspended in water and heated, whereby starch granules absorb water and gradually expand to eventually disintegrate and dissolve.
  • the gelatinized starch can be removed by solid-liquid separation with a sieve.
  • the starch removal process by physical destruction can be performed by a process using, for example, a homogenizer, a high-speed mixer, a homomixer, a homodisterer, or the like.
  • the starch removal treatment by these physical destructions not only starch removal but also a part of the aleurone layer can be removed.
  • the starch removal treatment can be performed by simply heating without adding amylase or glucoamylase externally. In this case, it is because the germinated seed itself produces amylase.
  • a material that has been subjected to substantially the same treatment as steps (a) to (b) may be used in the subsequent steps as a starch-removed fraction.
  • a starch-removed fraction As a non-limiting example of such a material, beer-added straw that is barley malt produced when producing beer can be mentioned. The use of such a material is also preferable from the viewpoint that most of the starch has already been removed and that the steps are simplified.
  • the starch-removed fraction prepared in step (b) may contain grain skin, germ, other proteins, lipids, etc. in addition to the main components of the aleurone layer, pericarp and seed coat. Plant tissues such as the aleurone layer, pericarp and seed coat of malt are described in Alexander W.
  • Step (b) can further include a pressure stripping treatment of the starch removal fraction.
  • Condensation peeling treatment is a treatment that peels a part of the layer by applying a force parallel to the oppressing surface by passing a composition consisting of multiple layers through an appropriate gap in a roll mill with slightly different rotational speeds of the two rolls. Point to. Any crusher having a structure that applies a compressive force to the material to be treated can be used for the compaction peeling treatment.
  • a mortar-shaped crushing processing apparatus in which the gap and the rotation speed are controlled can be used for the pressure-removal process. It is particularly desirable to use a roll mill. At that time, the gap between the rolls is 0.15 to 0.01 mm, preferably 0.08 to 0.02 mm, but a size that allows efficient physical crushing of the multilayer to be peeled is selected. To do. Thereby, the aleurone layer contained in the starch removal fraction is exposed, and the removal process of the aleurone layer by the hemicellulase enzyme treatment in step (c) can be made more efficient.
  • the presence / absence of the pressing and peeling treatment can be appropriately selected by those skilled in the art according to the raw material used and the type and state of the starch-removed fraction.
  • the pressure-shrinking treatment should be performed.
  • the flat peeling treatment can be omitted.
  • there is also a suggestion that such a crushing exfoliation treatment can be omitted when germinating seeds are used as cereal plant seeds.
  • Step (b) can further comprise a sieving treatment in the presence of water of the starch removal fraction.
  • This sieving treatment removes a large amount of non-target substances contained in the husk and other starch-removed fractions, and a fraction mainly composed of an aleurone layer, pericarp and seed coat (hereinafter also referred to as pericarp / seed coat fraction). ) For rough fractionation.
  • This sieving process can be performed, for example, by passing the starch-removed fraction through a mesh having an appropriate sieve size and removing the fraction remaining on the mesh.
  • the size of the mesh sieve used in the sieving process may vary depending on the raw material used and the starch-removed fraction, but is typically ASTM (American Society for Testing and Materials) standard. Sieves of 5 to 25 mesh, such as 12 mesh, 16 mesh, and 20 mesh are used.
  • This treatment is preferable from the viewpoint of handling of subsequent operations because a large amount of non-target substance can be removed.
  • the step (b) it is preferable to use the above-described pressure flat peeling treatment and sieving treatment in combination. In this case, this combination of treatments is preferably repeated 2 to 5 times. This is because a fraction mainly composed of an aleurone layer, pericarp and seed coat can be obtained more efficiently.
  • a pretreatment such as a crushing exfoliation treatment according to the type of cereal plant seed to be used, its germination state, the type of raw material, and the like.
  • steps (a) to (b) can be defined as pretreatment steps for more efficiently decomposing the aleurone layer by the hemicellulase enzyme treatment of step (c). Therefore, regarding the starch-removed fraction to be used in step (c), it is confirmed before step (c) whether the pretreatment by steps (a) to (b) has been optimally performed. It may be preferable to add or repeat a pretreatment such as a stripping treatment. In that case, for example, it is possible to determine whether the pretreatment is optimally performed by microscopic observation of the tissue in the starch removal processing fraction prepared in steps (a) to (b) or analysis using the iodine starch reaction. Conceivable.
  • Step (c) is a step of removing the aleurone layer contained in the starch-removed fraction or the pericarp / seed coat fraction prepared in step (b) as described above.
  • This step includes enzymatic treatment of the starch removal fraction or the peel / seed coat fraction with an enzyme having hemicellulase enzyme activity.
  • enzymes having hemicellulase enzyme activity include, but are not limited to, ⁇ -glucosidase, cellulase, xylosidase, xylanase, mannosidase, mannanase, arabinosidase, arabanase, pectinase, A glucanase etc.
  • hemicellulase that can be used in the present invention include, but are not limited to, trade name Cellulosin (manufactured by HIBI), trade name Multifect 720 (manufactured by Gencore Kyowa Co., Ltd.), trade name, and the like.
  • the enzyme used in the present invention can be in any form such as a purified enzyme, a crude enzyme, and an immobilized enzyme as long as the enzyme activity is maintained.
  • An immobilized enzyme is an enzyme bound to a carrier such as a polymer, polysaccharide, or inorganic substance.
  • the crude enzyme includes, for example, an enzyme-containing extract from an enzyme-containing microorganism and a processed product such as a dried product.
  • the hemicellulase enzyme treatment is generally carried out at a temperature of 10 to 90 ° C., preferably 30 to 60 ° C., a pH of 3 to 10, preferably 5 to 7. It is preferable to carry out at a value close to the optimum pH.
  • the enzyme treatment time can be 30 minutes to overnight.
  • the addition amount of an enzyme can be set by those skilled in the art according to the amount of the prepared starch-removed fraction or pericarp / seed coat fraction.
  • a fluorescence microscope or an electron microscope As an analysis method using a fluorescence microscope, “PLANT MICROTECHNIQUE AND MICROSCOPY” STEN E. It can be confirmed by a method common to those skilled in the art as described in Chapter 7 (p87 to 119) by RUZEN.
  • Step (c) preferably includes a degreasing treatment after the hemicellulase treatment. Thereby, the taste quality and quality of the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention can be improved.
  • Step (d) is a step of collecting the insoluble fraction in the enzyme treatment solution of step (c).
  • an insoluble fraction that passes through a 5-25 mesh ASTM standard sieve but does not pass through a 500 mesh ASTM standard sieve is recovered in this step.
  • this sieving process can be performed by a two-stage method.
  • the hemicellulase treatment solution is sieved with a first mesh, and the fraction that has passed through the sieve is sieved with a second mesh that is finer than the first mesh, and the insoluble matter remaining on the sieve is retained.
  • An insoluble fraction rich in dietary fiber ie, insoluble dietary fiber-containing material
  • the size of the sieve meshes of the first mesh and the second mesh used in the sieving process is not particularly limited as long as it is a combination that can collect a fraction having the above particle size. For example, select 5-25 mesh of ASTM standard sieve as the first mesh, for example, 12 mesh, 16 mesh, preferably 20-25 mesh, and select 50-500 mesh of ASTM standard sieve as the second mesh. Can do.
  • step (d) By this sieving treatment, a desired fraction in the enzyme treatment solution can be obtained.
  • the insoluble fraction recovered in step (d) may be recovered as a fraction that does not pass through the 200-mesh ASTM standard sieve by using a 50-200 mesh ASTM standard sieve as the second mesh. Good.
  • step (b) when the pericarp / seed coat fraction has already been roughly fractionated, step (d) is not necessarily performed in a two-stage manner, and the sieve using the second mesh is used. What is necessary is just to collect
  • the insoluble fraction obtained in step (d) is usually dried by lyophilization or the like, and can be used as the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention, preferably without further processing such as fine pulverization.
  • the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention thus produced is preferably substantially passed through a 5 to 25 mesh ASTM standard sieve based on the sieving process of step (d), but a 500 mesh ASTM. It consists of a fraction that does not pass through a standard sieve.
  • “substantially” is used with the intention that the insoluble dietary fiber-containing material in which a component outside the particle size range is slightly mixed is also included in the scope of the present invention.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention comprising a fraction that substantially passes through a 5 to 25 mesh ASTM standard sieve but does not pass through a 500 mesh ASTM standard sieve has a fraction of at least 90% of the above particle size. , Preferably 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% or 99%, most preferably 100%.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention obtained by the above production method has a protein content of preferably 20% by weight or less, such as 15% by weight or less, 10% by weight or less, and the like.
  • the content is preferably 55% by weight or more, more preferably 60% by weight or more, still more preferably 70% by weight or more, for example, 75% by weight or more, 80% by weight or more.
  • the protein content here is obtained from a numerical value obtained by multiplying the nitrogen amount obtained by the Kjeldahl method by 6.25 as a protein conversion coefficient. Further, the content of dietary fiber is determined based on the AOAC method.
  • the insoluble dietary fiber contained in the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention has the aleurone layer partially or completely removed.
  • “partially” means that 70% or more, preferably 80% or more, more preferably 90% or more, more preferably 95% or more, most preferably 99% or more of the aleurone layer of insoluble dietary fiber is removed. It means being done. It is preferable that the aleurone layer of the insoluble dietary fiber is completely removed. The fact that the aleurone layer of the insoluble dietary fiber is partially or completely removed is confirmed by visual confirmation with a fluorescence microscope or an electron microscope as described above, for example, the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention Can be confirmed by subjecting to a hemicellulase enzyme treatment and evaluating the recovery after the treatment.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention is a fraction from which most of the aleurone layer has been removed as described above, the recovery rate after the treatment is very high even if it is subjected to a second hemicellulase enzyme treatment. is there.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention is reconstituted overnight with a 4.0% hemicellulase preparation (Sumiteam NX, manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.). It can be characterized by having a recovery of at least about 70% or more, preferably at least about 80% or more when subjected to hemicellulase enzyme treatment.
  • the “recovery rate” here refers to the weight of the obtained insoluble dietary fiber-containing substance as 100%, and this is treated again with an enzyme treatment (4.0% hemicellulase, pH 4.5, 50 ° C., overnight). Is the relative value of the weight of the substance obtained by freeze-drying.
  • Other characteristics of the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention include swelling ability.
  • the swelling ability refers to the property that water molecules are taken into the insoluble dietary fiber-containing substance (between plant tissues) and the particles expand and become large.
  • the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention has a swelling ability.
  • insoluble dietary fiber-containing material For example, a certain amount of insoluble dietary fiber-containing material is weighed into a graduated cylinder, and a certain amount of water is added to the graduated cylinder for a certain period of time. Can be confirmed by quantitative determination.
  • the swelling ability of the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention can be characterized by swelling to a volume of 20 to 35 ml per gram.
  • the production of the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention in the case where beer-added koji is used as the starch-removing fraction and wheat bran or rice koji is used as the raw material will be specifically described.
  • the production of the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention is a barley malt produced when beer is produced, beer-added rice bran, bran produced secondary when producing flour, and secondary after rice polishing. It is economically preferable to use rice bran that is produced automatically.
  • the method described in Japanese Patent Publication No. 4-31666 Can be used as a specific example of the method for obtaining the insoluble dietary fiber-containing material of the present invention.
  • the wet beer preparation koji is pressed and pulverized, and the obtained pressed and pulverized product is screened in the presence of water to obtain a fraction containing a large amount of pericarp / seed coat and aleurone layer. It may be prepared and treated with hemicellulase. More specifically, in order to remove the barley peculiar to barley, the wet beer-mixed koji is subjected to a crushing peeling process. Any crusher having a structure that gives a compressive force to the raw material to be treated can be used for the pressure peeling treatment of the beer brewer's koji, but the use of a roll mill is particularly desirable.
  • the gap between the rolls is 0.15 to 0.01 mm, preferably 0.08 to 0.02 mm, and the size is selected so that the multilayer material to be peeled can be efficiently physically crushed. It is desirable to adjust the water content in the beer masher to 65% or more when the beer masher is pressed and peeled.
  • the obtained pressed and peeled product is sieved in the presence of water. By this sieving treatment, the husk fraction remains on the sieve, and the pericarp / seed coat fraction rich in the alloy layer passes through the sieve.
  • the size of the sieve mesh is 5 to 20 mesh, preferably 16 to 20 mesh of ASTM standard sieve.
  • sieving is further performed using a finer sieve than the previous sieve.
  • the pericarp / seed coat fraction remains on the sieve, and the pericarp / seed coat fraction can be prepared.
  • the size of the latter sieve mesh is 50 to 200 mesh of ASTM standard sieve. It is preferable to repeat the above-mentioned pressing and peeling treatment and this sieving treatment 2 to 5 times.
  • the pericarp / seed coat fraction obtained as described above was subjected to hemicellulase treatment, and sieved again with 50 to 200 mesh of an ASTM standard sieve to remove the degradation product of hemicellulase and remained on the sieve.
  • the insoluble fraction is the target insoluble dietary fiber-containing material.
  • the insoluble dietary fiber-containing material thus obtained is usually used after being dried.
  • the drying method is not particularly limited, and specific examples include a freeze-drying method.
  • the starch is decomposed by suspending the dried wheat bran in a solution containing amylase or glucoamylase. Apply the process to be. After the amylase reaction is performed for a long time (for example, 30 minutes to overnight), for the efficiency of the hemicellulase enzyme treatment, for example, a pressing and peeling treatment with a roll mill is performed.
  • the gap between the rolls is 0.15 to 0.01 mm, preferably 0.08 to 0.02 mm, and the size is selected so that the multilayer material to be peeled can be efficiently physically crushed.
  • the sieve mesh is sieved with 50 to 200 mesh, preferably 200 mesh, of an ASTM standard sieve to remove degradation products by amylase, and the pericarp / seed coat fraction remaining on the sieve is collected. Next, this fraction is suspended in a solution containing hemicellulase and reacted for a long time (for example, 30 minutes to overnight).
  • the sieve mesh is 50 to 200 mesh, preferably 200 mesh, of an ASTM standard sieve.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention can be obtained by sieving, removing the degradation product due to hemicellulase, and collecting the insoluble fraction remaining on the sieve.
  • the insoluble dietary fiber-containing material thus obtained is usually used after being dried.
  • the drying method is not particularly limited, and specific examples include a freeze-drying method.
  • the sieve mesh is sieved with 50 to 200 mesh, preferably 200 mesh, of an ASTM standard sieve to remove degradation products by amylase, Collect the pericarp and seed coat fraction remaining in Next, this fraction is suspended in a solution containing hemicellulase and reacted for a long time (for example, 30 minutes to overnight).
  • the sieve mesh is 50 to 200 mesh, preferably 200 mesh, of an ASTM standard sieve.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention can be obtained by sieving, removing the degradation product due to hemicellulase, and collecting the fraction remaining on the sieve.
  • the insoluble food-containing substance thus obtained is usually used after being dried.
  • the drying method is not particularly limited, and examples thereof include a freeze drying method.
  • the manufacturing method of the insoluble dietary fiber containing substance of this invention is not limited to the said method.
  • insoluble dietary fiber-containing substances having the following characteristics (i) to (iii) from the seeds of cereal plants: (i) Consisting essentially of a fraction of a particle size that passes through a 5-25 mesh ASTM standard sieve but does not pass through a 500 mesh ASTM standard sieve; (ii) has a protein content of 20 wt% or less and a dietary fiber content And (iii) the aleurone layer of insoluble dietary fiber is partially or completely removed.
  • the following steps (a1) Seed outer fraction produced by grinding or scouring seeds of cereal plants (B1) a step of subjecting the raw material to a starch removal treatment including physical destruction; (c1) an ASTM standard of 5 to 25 mesh from the fraction prepared in step (b1) And a method comprising collecting an insoluble fraction that passes through a sieve but does not pass through a 500 mesh ASTM standard sieve.
  • This method can be performed in the same manner as the above method except that it is subjected to starch removal treatment including physical destruction and does not include an enzyme treatment step with an enzyme having hemicellulase activity.
  • the starch removal process by physical destruction can be performed by a process using, for example, a homogenizer, a high-speed mixer, a homomixer, a homogenizer, or the like.
  • the aleurone layer can be removed together with the starch removal treatment.
  • the starch removal treatment is preferably performed a plurality of times, for example, 2 to 5 times in combination with the sieving treatment described in step (b) of the method.
  • the starch removal treatment may be used in combination with starch removal treatment other than physical destruction, such as starch decomposition treatment with an enzyme, gelatinization by heating, and removal by sieving after gelatinization.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention produced as described above is characterized in that it is ingested and administered for IBS suppression.
  • IBS also called irritable bowel syndrome
  • IBS is a general term for diseases that arise mainly as a result of abnormalities in colonic movement and visceral perception.
  • IBS there are no visible abnormalities such as inflammation and ulcers, but abnormal bowel movements such as diarrhea and constipation and symptoms such as tension in the lower abdomen due to excessive gas are observed.
  • IBS can be classified into four types, unstable type, chronic diarrhea type, secretory type, and gas type, depending on how symptoms appear, the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention may be used for any IBS type.
  • the term “suppress IBS” refers to ameliorating or preventing one or more symptoms associated with IBS and ameliorating or maintaining one or more parameter values associated with IBS.
  • Symptoms include constipation, diarrhea, abdominal pain, abdominal fullness, urgency, residual stool, etc.
  • Improve symptoms means improving the severity, duration of sickness, and frequency of occurrence of those symptoms. That means.
  • the parameter values include serotonin content of the mucosa of the large intestine, pain threshold in the large intestine, fecal excretion during stress loading, and the like. Recovering to an equivalent state with or without presence.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention can suppress IBS by ingestion and administration as it is as a substance for suppressing IBS or as an active ingredient in foods and drinks or medicines. Moreover, it can prevent having IBS by daily ingestion and administration.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention is 1 g or more, 2 g or more, 3 g or more, 4 g or more, 5 g or more, 6 g or more, 7 g or more, 8 g or more, 9 g or more, preferably 10 g or more per day. It is desirable to ingest and administer 12 g or more, 14 g or more, 16 g or more, 18 g or more, 20 g or more, 30 g or more.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention is a component obtained by treating a seed of a cereal plant with a food enzyme, it can be incorporated into daily eating habits. Moreover, the time of administration or ingestion may be any time before, between and after meals.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention is blended in a food or drink to provide a food or drink for suppressing IBS, it can be processed into any food form. Examples of foods and drinks that can contain the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention include natural products and foods and drinks including processed products thereof.
  • the compounding quantity changes with forms of food-drinks, about 0.1-90g, Preferably about 1-50g can be mix
  • foods and drinks include, but are not limited to, functional foods such as tablets, powders, granules, capsules, and jelly, and cereal processing such as breads, confectionery, cookies, and biscuits.
  • Products, milk products such as milk, yogurt and ice cream, carbonated drinks, soft drinks, fruit juice drinks, drinks such as medicinal drinks, prepared foods and processed foods.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention is blended as an active ingredient in a pharmaceutical product (pharmaceutical composition), it can be formulated as an IBS inhibitor.
  • the administration form of the preparation is not particularly limited, and examples of the administration route include oral administration and enteral administration.
  • the substance for suppressing IBS of the present invention may be administered as it is, but together with pharmaceutically acceptable excipients, solutions, suspensions, powders, granules, tablets, capsules Or the like.
  • pharmaceutically acceptable excipients include, but are not limited to, sugars such as lactose, sucrose, and glucose, inorganic substances such as starch, calcium carbonate, and calcium sulfate, crystalline cellulose, distilled water, and purified water.
  • Commonly used oils such as sesame oil, soybean oil, corn oil, olive oil and cottonseed oil can be exemplified.
  • additives such as binders, lubricants, dispersants, suspending agents, emulsifiers, diluents, buffers, antioxidants, and bacterial inhibitors can be used. It is also possible to mix or use together with other pharmaceutical products.
  • the above preparation may be sterilized.
  • the subject to which the medicament of the present invention is applied is not particularly limited, and may be any of a healthy person, an IBS patient, a patient being treated for IBS, a healthy person who is considering the prevention of IBS, and the like. Further, the subject is not limited to humans, and may be applied to animals other than humans.
  • the dosage of the pharmaceutical agent of the present invention varies depending on various factors such as the age, weight, sex, and obesity level of the subject, but typically the insoluble food-containing substance of the present invention is 1 g per day. 2 g or more, 3 g or more, 4 g or more, 5 g or more, 6 g or more, 7 g or more, 8 g or more, 9 g or more, preferably 10 g or more, 12 g or more, 14 g or more, 16 g or more, 18 g or more, 20 g or more, 30 g or more
  • the dosage is not particularly limited.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention is a component that can efficiently suppress IBS and is obtained by treating the seeds of a cereal plant with a food enzyme. Or it is useful for use in medicine. Furthermore, since the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention can be produced from relatively inexpensive raw materials such as rice bran and wheat bran, it is excellent in terms of cost.
  • the food / beverage product or the pharmaceutical composition contains the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention, it can be detected by the following method. That is, after first suspending food / beverage products or a pharmaceutical composition in water, it is sieved using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve in water, and an insoluble fraction is collected.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention can be detected by staining the insoluble fraction with a staining reagent suitable for staining Nile Blue or other hydrophobic substances and observing with a fluorescence microscope or the like.
  • a staining reagent suitable for staining Nile Blue or other hydrophobic substances and observing with a fluorescence microscope or the like.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance of the present invention can be distinguished from other insoluble compositions by the feature that the layer to be dyed and the layer not to be dyed overlap.
  • Other reagents suitable for staining include Sudan III, Sudan Black, Oil Red, Fluoro Yellow 088, and the like.
  • the% display is based on weight.
  • crude protein was measured using the Kjeldahl method (nitrogen protein conversion factor was 6.25), and crude fat was measured using a Soxhlet extraction method using diethyl ether as an extraction solvent. did.
  • the content of dietary fiber was determined based on the AOAC method.
  • Preparation Example 1 Beer preparation ⁇ ⁇ roll mill
  • a wet beer brewer's beer (water content: 77.6% by weight) is pressed and peeled with a roll mill (roll rotation speed: 100 rpm, roll gap: 0.08 mm), and then 16 mesh sieve in water (ASTM standard: sieve mesh) And the passing fraction is further sieved using a 50 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.300 mm) sieve, and the fraction that does not pass is collected and subjected to lyophilization. After that, an insoluble dietary fiber-containing material was obtained. This was designated as Preparation Sample 1. The analysis values are as shown in Table 1 below.
  • FIG. 2 the scanning electron micrograph image of the aleurone layer part contained in the preparation sample 1 is shown in FIG. [Preparation Example 2] (Beer stocking ⁇ roll mill + hemicellulase) A wet beer brewer's beer (water content: 77.6% by weight) is pressed and peeled with a roll mill (roll rotation speed: 100 rpm, roll gap: 0.08 mm), and then 16 mesh sieve in water (ASTM standard: sieve mesh) The fraction passed through was further sieved using a 50 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.300 mm) sieve, and the fraction not passing through was collected.
  • the collected fraction was reacted with hemicellulase preparation (Sumiteam NX, manufactured by Shin Nippon Kagaku Kogyo Co., Ltd., Japan) 1.0% in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) overnight. After completely decomposing the layer, it is sieved in water using a 200 mesh (sieving aperture: 0.075 mm) sieve, and the fraction that does not pass is collected and subjected to lyophilization. Obtained. This was designated as Preparation Sample 2. The analysis values are as shown in Table 1 below. Moreover, the scanning electron micrograph image of the aleurone layer part contained in the preparation sample 2 is shown in FIG.
  • Preparation Sample 3 After starch decomposition, it is sieved using a 12 mesh sieve (ASTM standard: sieve opening 1.68 mm) in water, and the passing fraction is further sieved using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve. The fraction that did not pass through was collected and subjected to lyophilization to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. This was designated as Preparation Sample 3.
  • the analysis values are as shown in Table 2 below.
  • the scanning electron micrograph image of the aleurone layer part contained in the preparation sample 3 is shown in FIG. Incidentally, the aleurone layer when amylase is not allowed to act at 65 ° C. and only starch is removed with cold water is in a state as shown in FIG.
  • the fraction that does not pass through is collected, and the hemicellulase preparation (Sumiteam NX, manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0% is reacted overnight in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.).
  • the aleurone layer of the plant tissue was completely decomposed. Again, it was sieved in water using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve, and the fraction that did not pass was collected and lyophilized to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. This was designated as Preparation Sample 4.
  • the analysis values are as shown in Table 2 below.
  • the scanning electron micrograph image of the aleurone layer part contained in the preparation sample 4 is shown in FIG.
  • Preparation Sample 5 After starch decomposition, it is sieved using a 12 mesh sieve (ASTM standard: sieve opening 1.68 mm) in water, and the passing fraction is further sieved using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve. The fraction that did not pass through was collected and subjected to lyophilization to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. This was designated as Preparation Sample 5.
  • the analysis values are as shown in Table 3 below.
  • the scanning electron micrograph image of the aleurone layer part contained in the preparation sample 5 is shown in FIG.
  • the collected fraction was reacted with hemicellulase preparation (Sumiteam NX, manufactured by Shin Nippon Kagaku Kogyo Co., Ltd.) 1.0% in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) overnight.
  • the layer was completely decomposed. Again, it was sieved in water using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve, and the fraction that did not pass was collected and lyophilized to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance.
  • the analysis values are as shown in Table 3 below.
  • the aleurone layer partial scanning electron micrograph image contained in the preparation sample 6 is shown in FIG.
  • hemicellulase preparation (Sumiteam NX, manufactured by Shin Nippon Kagaku Kogyo Co., Ltd.) is allowed to react overnight in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.), so that the aleurone layer of the plant tissue is completely removed. After decomposing, sieving using 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve in water, collecting the fraction that did not pass and subjecting it to lyophilization, an insoluble dietary fiber-containing substance was obtained. . This was designated as Preparation Sample 8. The analysis values are as shown in Table 4 below.
  • Preparation Example 9 (Naked malt ⁇ starch decomposition + roll mill + hemicellulase) Again, the same treatment as in Preparation Example 4 was performed to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. This was designated as Preparation Sample 9. The analysis values are as shown in Table 4 below.
  • Preparation Example 10 (rice bran ⁇ starch degradation + hemicellulase) Made from rice bran. The starch in rice bran was decomposed by reacting 2.0% of an amylase preparation (Sumiteam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 65 ° C.) for 3 hours.
  • Preparation Sample 10 This was designated as Preparation Sample 10. The analysis values are as shown in Table 5 below.
  • Preparation Example 11 (rice bran ⁇ starch degradation + hemicellulase) Again, the same treatment as in Preparation Example 10 was performed to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. This was designated as Preparation Sample 11. The analysis values are as shown in Table 6 below.
  • Preparation Example 12 (rice bran ⁇ starch decomposition + hemicellulase ⁇ degreasing treatment) Made from rice bran.
  • the starch in rice bran was decomposed by reacting 2.0% of an amylase preparation (Sumiteam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 65 ° C.) for 3 hours. After decomposing starch, it was sieved using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve in water, and the fraction not passing through was collected. Next, the hemicellulase preparation (Sumiteam NX manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0% is reacted overnight in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) to completely decompose the aleurone layer of the plant tissue.
  • an amylase preparation Suditeam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.
  • 50 mM acetate buffer pH 4.5, 65 ° C.
  • Preparation Sample 12 (Fusuma ⁇ starch degradation + hemicellulase) The raw material was bran.
  • Amylase preparation (Sumiteam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 2.0% was reacted in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 65 ° C.) for 3 hours to decompose starch in the bran. After decomposing starch, it was sieved using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve in water, and the fraction not passing through was collected. Next, the hemicellulase preparation (Sumiteam NX manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0% is reacted overnight in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) to completely decompose the aleurone layer of the plant tissue.
  • Preparation Sample 13 (Rice bran ⁇ starch degradation + hemicellulase) Made from rice bran.
  • the starch in rice bran was decomposed by reacting 2.0% of an amylase preparation (Sumiteam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 65 ° C.) for 3 hours.
  • Preparation Sample 14 This was designated as Preparation Sample 14.
  • the analysis values are as shown in Table 8 below.
  • FIG. 15 the scanning electron micrograph image of the aleurone layer part contained in the preparation sample 14 is shown in FIG. [Preparation Example 15] (Rice removal by rice bran ⁇ homogenization stirring) A rice stirrer is used as a raw material and is suspended in water. k. By subjecting to ROBOMIX at room temperature (10,000 RPM, approx. 20 minutes), sieving with 200-mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve in water and collecting the fraction that does not pass through The starch was removed. This operation was repeated twice to increase the starch removal efficiency. In addition, a sterilization step of heating at 80 ° C. was incorporated during the second operation.
  • Preparation Sample 15 The analysis values are as shown in Table 8 below. Moreover, the scanning electron micrograph image of the aleurone layer part contained in the preparation sample 15 is shown in FIG.
  • the hemicellulase preparation (Sumiteam NX manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0% is reacted overnight in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) to completely decompose the aleurone layer of the plant tissue. After that, it was sieved again in water using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve, and the fraction that did not pass was collected and subjected to lyophilization to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. . This was designated as Preparation Sample 16. The analysis values are as shown in Table 8 below.
  • [Preparation Example 17] (rice bran ⁇ starch decomposition + hemicellulase ⁇ fraction not passing through 200 mesh) Made from rice bran.
  • the starch in rice bran was decomposed by reacting 2.0% of an amylase preparation (Sumiteam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 65 ° C.) for 3 hours. After decomposing starch, it was sieved using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve in water, and the fraction not passing through was collected.
  • an amylase preparation Suditeam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.
  • 50 mM acetate buffer pH 4.5, 65 ° C.
  • the hemicellulase preparation (Sumiteam NX manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0% is reacted overnight in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) to completely decompose the aleurone layer of the plant tissue. After that, it was sieved again in water using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve, and the fraction that did not pass was collected and lyophilized to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. This was designated as Preparation Sample 17.
  • the analysis values are as shown in Table 9 below.
  • [Preparation Example 18] (rice bran ⁇ starch degradation + hemicellulase ⁇ 200-500 mesh fraction) Made from rice bran.
  • the starch in rice bran was decomposed by reacting 2.0% of an amylase preparation (Sumiteam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 65 ° C.) for 3 hours. After decomposing starch, it was sieved using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve in water, and the fraction not passing through was collected.
  • an amylase preparation Suditeam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.
  • 50 mM acetate buffer pH 4.5, 65 ° C.
  • the hemicellulase preparation (Sumiteam NX manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0% is reacted overnight in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) to completely decompose the aleurone layer of the plant tissue. After that, it is sieved again in water using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve, and the passing fraction is recovered and further filtered to 500 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.025 mm). ) Sieving using a sieve, the fraction not passing through was collected and lyophilized to obtain a substance containing insoluble dietary fiber. This was designated as Preparation Sample 18. The analysis values are as shown in Table 9 below.
  • [Preparation Example 19] (rice bran ⁇ starch degradation + hemicellulase ⁇ fraction not passing through 200 mesh)
  • the raw material was defatted rice bran (manufactured by Tsukino Food Industry Co., Ltd.).
  • the starch in rice bran was decomposed by reacting 2.0% of an amylase preparation (Sumiteam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 65 ° C.) for 3 hours. After decomposing starch, it was sieved using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve in water, and the fraction not passing through was collected.
  • the hemicellulase preparation (Sumiteam NX manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0% is reacted overnight in 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) to completely decompose the aleurone layer of the plant tissue. After that, it was sieved again in water using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve, and the fraction that did not pass was collected and subjected to lyophilization to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. . This was designated as Preparation Sample 19. The analysis values are as shown in Table 10 below.
  • Preparation Example 20 (Preparation Example 19 ⁇ Fine Grinding ⁇ 500 mesh passing fraction)
  • the insoluble dietary fiber-containing material obtained in Preparation Example 19 was finely pulverized (processed by Micro Foods Japan Co., Ltd.), suspended in water, and sieved in water with a 500 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve. After sieving, the fraction passing through was collected and lyophilized to obtain a substance containing insoluble dietary fiber. This was designated as Preparation Sample 20.
  • the analysis values are as shown in Table 10 below.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance prepared according to Preparation Example 16 was used to test whether symptoms or parameter values related to IBS could be improved.
  • the composition of the control feed and the experimental feed used in the following test is as shown in Table 11.
  • the restraint stress method (Miyata K, Insoluble food fiber of the present invention using Kamato T, Nishida A, Ito H, Yuki H, Yamano M, Tsutsuumi R, Katsumiyama Y, Nissan K., J Pharmacol Exp Ther. 1992; 261: 297-303.) was evaluated for the IBS inhibitory action.
  • Test Example 2 ten 5-week-old male SD rats were used in each group, and the groups were three groups: a control group, an experimental group, and coronel as a positive control. After acclimatization for one week, group by weight. Thereafter, the animals were reared with each feed for 10 days, with 5 animals in each group half being stressed and the other half not stressed. After 10 days of breeding, a restraint stress load was applied for 3 consecutive days, and one stress was 4 hours, giving a load of 3 consecutive days.
  • the pain threshold value was measured by the barostat method immediately after the end of the stress load on the third day.
  • the pain threshold was determined by AWR (abdominal withdrawal reflex; Al-Chaer ED, Kawasaki M, Pasricha PJ., Gastroenterology. 2000 Nov; 119 (5): 1276-85). Individuals who were not stressed performed pain threshold measurement on another day. The results are shown in FIG. As shown in FIG. 11, when restraint stress was applied, a significant decrease in CRD (pain sensation threshold due to expansion of the large intestine) was confirmed in the control group, but a significant decrease occurred in the experimental group and the coronel of the positive control. In addition, a decrease in pain threshold confirmed by IBS was suppressed.
  • Preparation Example 21 (defatted rice bran ⁇ starch decomposition + hemicellulase) An insoluble dietary fiber-containing substance was prepared in the same manner as in Preparation Example 16 using defatted rice bran as a raw material.
  • amylase preparation (Sumiteam AS manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0%, after adding lactic acid to adjust pH (pH 4.5, 65 ° C.), reacting for 3 hours to decompose starch in rice bran did.
  • FIG. 14 shows a scanning electron micrograph image of the aleurone layer portion contained in the prepared sample 22.
  • Preparation Example 23 Re-hemicellulase treatment of the prepared sample
  • prepared sample 22 was hemicellulase preparation (Sumiteam NX manufactured by Shin Nippon Chemical Industry Co., Ltd.) 1.0%
  • lactic acid was added to adjust pH (pH 4.5, 50 ° C.), reacted overnight, and again in water Sieving using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve, the fraction that did not pass through was collected and freeze-dried to obtain an insoluble dietary fiber-containing substance. This was designated as Preparation Sample 23.
  • FIG. 15 shows a scanning electron micrograph image of the aleurone layer portion contained in the prepared sample 23.
  • Test Example 2 The prepared samples 21 and 22 were again reacted overnight with a hemicellulase preparation (Sumiteam NX, manufactured by Shinnippon Kagaku Kogyo Co., Ltd.) in a 50 mM acetate buffer (pH 4.5, 50 ° C.) overnight, and again in water. Sieving using a 200 mesh (ASTM standard: sieve opening 0.075 mm) sieve, the fraction that did not pass was collected and subjected to lyophilization, and then the recovery rate was calculated.
  • a hemicellulase preparation Suditeam NX, manufactured by Shinnippon Kagaku Kogyo Co., Ltd.
  • 50 mM acetate buffer pH 4.5, 50 ° C.
  • the prepared sample 21 was prepared in the same manner as in Preparation Example 16 in which the IBS suppression effect was actually demonstrated in Test Example 1. From the above results, the prepared sample having a recovery rate of at least about 70% or more, preferably about 80% or more when subjected to re-degradation by hemicellulase treatment under the same conditions as in the test example, has an IBS inhibitory effect. Can be inferred.
  • the insoluble dietary fiber-containing substance was ingested at 10 to 15 g per day for 4 weeks, and clinical findings after the ingestion and patient's impression of life were evaluated according to the following items.
  • the study participants were male 4 and female 1 (average age 31 years old) who participated in the study and all of them were taking IBS drugs, but they were resistant cases.
  • the evaluation method was performed in accordance with the method described in Am J Gastroenterol 101; 1581-1590, 2006 as shown in Table 14.
  • a novel substance for suppressing IBS (hereinafter also referred to as IBS suppressing substance) is provided.
  • the substance for suppressing IBS of the present invention is rich in insoluble dietary fiber derived from the seeds of cereal plants, preferably gramineous plants, and has the advantage that it has no side effects, so it is useful for use in foods and drinks or drugs for suppressing IBS. It is.
  • the substance containing insoluble dietary fiber derived from the seeds of the cereal plant of the present invention, preferably Gramineae is one of the IBS-inhibiting effects, for example, symptoms related to IBS such as rapid fecal excretion and stress threshold reduction during stress loading. It is provided as an IBS-suppressing substance that can effectively reduce one or more. All publications, patents and patent applications cited herein are incorporated herein by reference in their entirety.

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Abstract

この発明は、穀類植物の種子又はその発芽幼種子を酵素処理することで得られる不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質、並びに、該物質を含有する、かつ過敏性腸症候群に対して抑制的な作用を有する、飲食品及び医薬品を提供する。

Description

穀類植物種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質
　本発明は、植物の種子及びその発芽幼種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質とその製造方法に関する。本発明はまた、上記物質を有効成分とする飲食品及び医薬品に関する。
　過敏性腸症候群（以下、ＩＢＳとも称する）は腸管の機能的な過敏性を特徴とするもので、腸管の運動機能、分泌機能などの亢進の結果、便秘や下痢などの便通異常、腹痛、不定愁訴などの胃腸症状を呈する症候群である。器質的疾患がなく、その症状の発現や増悪には、心理的な要因も寄与しているとされている。診断基準は世界的にはＲＯＭＥ　ＩＩＩが標準とされており、腹部症状、その病悩期間、症状発現の頻度、排便との関連などがそのパラメータとされている。正確な患者数は不明であるが、アメリカでの罹患率は１０~２０％、日本では１５％前後とされている（過敏性腸症候群　脳と腸の対話を求めて　佐々木大輔著、中山書店、東京、日本）。
　治療法は、器質的な異常が除外されたあとで、その症状により決定される。まずは食事指導と生活習慣指導を行い、症状に応じて消化管運動調節薬、高分子重合体（コロネル）、乳酸菌製剤、下剤などを組み合わせて処方する。食事療法としては、カプサイシンなどを含む香辛料や刺激物の回避、食物繊維の摂取、アレルギーが疑われる場合はアレルゲン除去食の提案などが第一選択として行われる。ＩＢＳはその特性上腸内細菌の変化とも密接な関係にあることが報告され、プロバイオティクスやプレバイオティクスの臨床評価も進んでいるが、病因がしっかり確定していない中で、いまだ決定的な治療法や食事療法がなく、基本的には対症療法が基本である。
　そのような観点からも腸内環境改善に焦点を絞ったプレバイオティクスの提供は、患者にとって副作用が少なく、臨床症状の改善を目指すうえで福音となると考えられる。
　食品成分であって、尚且つ腸内環境改善に有効な素材としては、木材のチップをヘミセルラーゼ処理することで得られる酸性キシロオリゴ糖（特開２００７−２３０９９８）、ガラクトマンナン及びアラビノガラクタン（特再　ＷＯ０５／０５６０２２）、植物由来プロアントシアニジン（特開２００７−７７１２２）、イネ科植物の発芽種子由来タンパク質及び不溶性食物センイ（特開２００５−２３２１７８）が挙げられる。また、穀物をヘミセルラーゼ処理し、その不溶性残査画分に食品としての機能性付加した報告としては、ふすまをヘミセルラーゼ処理した抗潰瘍剤（特開２００６−１２４３７０）、小麦ふすまをヘミセルラーゼ処理した腎臓病患者用食物繊維素材（特開平０６−７０７２０）、穀物ふすまを酵素処理及び湿式粉砕して得られた果皮画分とアロイロン画分からなる精製ふすまからアロイロンタンパク質に富む画分を得る方法、及び食品や飼料への該画分の使用（特表２００４−５２００５８）等が報告されているが、ＩＢＳ抑制作用についての報告例はない。
　そこで本発明は、ＩＢＳに対して抑制的な作用を有する安全な素材を提供することを目的とする。また、本発明はかかる素材を含むＩＢＳ抑制用飲食品及びＩＢＳ抑制剤を提供することを目的とする。
　本発明者らは、前記課題を解決すべく検討を重ねた結果、穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子から澱粉を除去し、残存した果皮・種皮等にヘミセルラーゼ処理を施した後の不溶性食物繊維を含有する不溶性画分が、ＩＢＳ抑制作用を有することを見出し、本発明を完成した。本発明の要旨は、以下の通りである。
　（１）以下のステップ：（ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；（ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び（ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップを含む処理により製造される穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含む、過敏性腸症候群抑制用物質。
　（２）穀類植物はイネ科植物であることを特徴とする上記（１）記載の物質。
　（３）イネ科植物は、米、大麦、ライ麦又は小麦であることを特徴とする上記（２）記載の物質。
　（４）ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理をアミラーゼ又はグルコアミラーゼを用いた酵素処理により実施することを特徴とする上記（１）記載の物質。
　（５）ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理を加熱による糊化処理により実施することを特徴とする上記（１）記載の物質。
　（６）ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理を物理的破壊処理により実施することを特徴とする上記（１）記載の物質。
　（７）物理的破壊処理をホモジナイザーにより実施することを特徴とする上記（６）記載の物質。
　（８）ステップ（ｂ）において、澱粉除去画分をさらに圧扁剥離処理に供することを特徴とする、上記（１）記載の物質。
　（９）前記澱粉除去処理に供する原料物質は米糠、小麦麦芽又は大麦麦芽であることを特徴とする上記（１）記載の物質。
　（１０）前記澱粉除去処理に供する原料物質は脱脂米糠であることを特徴とする上記（１）記載の物質。
　（１１）前記澱粉除去処理に供する原料物質は小麦ふすま又は大麦搗精粕であることを特徴とする上記（８）記載の物質。
　（１２）前記澱粉除去画分はビール仕込み粕であることを特徴とする上記（８）記載の物質。
　（１３）ヘミセルラーゼ活性を有する酵素がキシラナーゼであることを特徴とする上記（１）~（１２）のいずれか記載の物質。
　（１４）ステップ（ｃ）において、さらにプロテアーゼを併用することを特徴とする上記（１）~（１３）のいずれか記載の物質。
　（１５）ステップ（ｃ）後に脱脂処理をさらに含むことを特徴とする上記（１）~（１４）のいずれか記載の物質。
　（１６）ステップ（ｄ）の不溶性画分は、実質的に、５~２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなることを特徴とする上記（１）~（１５）のいずれか記載の物質。
　（１７）ステップ（ｄ）の不溶性画分は、実質的に２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなることを特徴とする上記（１６）記載の物質。
　（１８）タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上であることを特徴とする上記（１）~（１７）のいずれか記載の物質。
　（１９）不溶性食物繊維はアロイロン層が部分的に又は完全に除去されている、上記（１）~（１８）のいずれか記載の物質。
　（２０）以下の特徴：
（ｉ）実質的に５~２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなる；
（ｉｉ）タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上である；及び
（ｉｉｉ）不溶性食物繊維のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されているを有する、穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質。
　（２１）実質的に２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分からなることを特徴とする上記（２０）記載の物質。
　（２２）上記（１）~（２１）のいずれか記載の物質を有効成分として含む、過敏性腸症候群抑制用飲食品。
　（２３）上記（１）~（２１）のいずれか記載の物質を有効成分として含む、過敏性腸症候群抑制用医薬組成物。
　（２４）過敏性腸症候群を抑制するための飲食品又は医薬品を製造するための、上記（１）~（２１）のいずれか記載の物質の使用。
　（２５）以下のステップ：（ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；（ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び（ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップを含む、穀類食物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質の製造方法。
　（２６）以下のステップ：（ａ１）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ１）原料物質を物理的破壊によって澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；（ｃ１）ステップ（ｂ１）で調製した画分から５~２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない不溶性画分を回収するステップを含む、上記（２０）記載の物質の製造方法。
　（２７）上記（２５）又は（２６）記載の方法によって製造されるものである、上記（２０）又は（２１）記載の過敏性腸症候群抑制用物質。
　本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願２００８−３２１４９６号の明細書および／または図面に記載される内容を包含する。
　図１は、調製試料１に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図２は、調製試料２に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図３は、調製試料３に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図４は、調製例３において、アミラーゼを６５℃で作用させず冷水で澱粉のみを除去した場合のアロイロン層部分の写真図を示す。
　図５は、調製試料４に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図６は、調製試料５に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図７は、調製試料６に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図８は、調製試料１４に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図９は、調製試料１５に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図１０は、拘束ストレスモデルにおける、実験群及び比較群間の糞便排泄量の比較を示す。図中、星印は有意差（Ｐ＜０．０５）を示している。
　図１１は、拘束ストレスモデルにおける、実験群及び比較群間のバロスタット法による痛覚閾値をＣＲＤ（ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ｄｉｓｔｅｎｓｉｏｎ）の圧力で示した比較を示す。図中、星印は有意差（Ｐ＜０．０５）を示している。痛覚閾値はＡＷＲ（ａｂｄｏｒｍｉｎａｌ　ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ　ｒｅｆｌｅｘ；Ａｌ−Ｃｈａｅｒ　ＥＤ，Ｋａｗａｓａｋｉ　Ｍ，Ｐａｓｒｉｃｈａ　ＰＪ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０００　Ｎｏｖ；１１９（５）：１２７６−８５）により判定した。
　図１２は、拘束ストレスモデルにおける、実験群及び比較群間の大腸粘膜のセロトニン含量の比較を示す。図中、星印は有意差（Ｐ＜０．０５）を示している。
　図１３は、調製試料２１に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図１４は、調製試料２２に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図１５は、調製試料２３に含まれるアロイロン層部分の写真図を示す。
　図１６は、調製試料２１、２２を酵素で再分解した際の回収率を示す。
　図１７は、調製試料２１、２２を酵素で再分解した際の遊離の糖量を示す。
　図１８は、調製例１６に従って調製した不溶性食物繊維含有物質を摂取した過敏性腸症候群ヒト患者における臨床所見改善効果を示す。
　本発明のＩＢＳ抑制用物質は、穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する不溶性画分（以下、「不溶性食物繊維含有物質」とも称する）が、ＩＢＳ抑制作用を有するという知見に基づいている。
　以下、本発明の不溶性食物含有物質及びその製造方法、並びに該物質を有効成分とするＩＢＳ抑制用の飲食品及び医薬品について説明する。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質は、穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有することを特徴とする。
　本発明に使用することができるイネ科植物として、植物分類表において、イネ科に分類される全ての植物が挙げられる。具体的には米、大麦、小麦、ライ麦、あわ、ひえ、とうもろこし等が例示されるが、これに限定されるものではない。このうち、米、大麦、ライ麦及び小麦などを使用することが好ましい。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質は、穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子を原料にして、澱粉等を除去した澱粉除去画分を酵素処理することにより生じる不溶性画分を回収することにより製造することができる。
　具体的には、（ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精により生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；（ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び（ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップを含む処理により製造することができる。
　ステップ（ａ）は、粉砕及び／又は搗精により、穀類植物の種子から本発明の不溶性食物繊維含有物質の原料物質を得るステップである。粉砕は、例えばロールミル、ディスクミル、ハンマーミル等によって行うことができる。また搗精は、穀類植物の種子から果皮、種皮、胚芽等を除去・分離することを意味し、これは例えば、精米機または石臼のように表面を削り取る原理を有している機器によって行うことができる。搗精を行う場合には、この処理により生じる果皮、種皮、胚芽を含む種子外側画分をステップ（ｂ）の原料物質とすることができる。このステップは、穀類植物の種子を粉砕及び／又は搗精の他、種子が穀皮を含むものである場合には脱穀処理を含んでもよい。また使用する穀類植物の種子は発芽又は未発芽のものいずれを用いてもよい。
　ステップ（ａ）は、実質的に同等の処理が施されている材料を原料物質として使用する場合には、省略することができる。かかる材料の非限定的な例としては、小麦粉を製造した際に副次的に生成されるふすま、精米後に副次的に生成される米糠などが挙げられる。このような材料の使用は、既に穀類植物種子中の大部分の澱粉が除去されていること、及びステップの簡略化の観点から好ましい。原料物質として米糠を使用する場合には、米糠に脱脂処理を施した後に生じる脱脂米糠を使用することが好ましい。脱脂米糠は、米糠よりも安価な材料であり、香味的にも優れているからである。また等量の米糠を用いる場合に比較して、より多くの不溶性食物繊維含有物質を得ることができるという利点も有する。
　ステップ（ｂ）は、ステップ（ａ）で調製した原料物質から澱粉を除去し、澱粉除去画分を調製するステップである。この澱粉除去処理は、原料物質から澱粉を除去できる方法であればどのような方法を用いてもよく、例えば酵素による澱粉分解処理、加熱による糊化と糊化後の篩いによる除去、物理的破壊による澱粉除去処理などにより行うことができる。
　澱粉除去処理を酵素による糖化処理により行う場合には、非限定的にアミラーゼ又はグルコアミラーゼを用いることにより行うことができる。本発明に使用することができるアミラーゼ及びグルコアミラーゼとして、これに限定されるものではないが、例えば商品名オリエンターゼ（エイチビィアイ社製）、商品名コクゲン（大和化成社製）、商品名スミチーム（新日本化学工業社製）、商品名ターマミル（ノボザイムズ社製）、商品名グルクザイム（天野エンザイム社製）などの市販の酵素製剤や、トリコデルマ属、テルモミセス属、オウレオバシヂウム属、ストレプトミセス属、アスペルギルス属、クロストリジウム属、バチルス属、テルモトガ属、テルモアスクス属、カルドセラム属、テルモモノスポラ属、フミコーラ属、リゾップス属、ペニシリウム属などの微生物により生産されるアミラーゼ、グルコアミラーゼが挙げられる。本発明で使用する上記酵素は、酵素活性を保持する限り、精製酵素、粗製酵素、固定化酵素などの任意の形態とすることができる。固定化酵素は、ポリマー、多糖類、無機物質などの担体に結合された酵素である。粗製酵素は、例えば酵素含有微生物からの酵素含有抽出物、乾燥物などの処理物を含む。また糖化処理は、一般的には、１０~９０℃、好ましくは３０~６０℃の温度、３~１０、好ましくは５~７のｐＨで行うが、使用するアミラーゼ、グルコアミラーゼの至適温度又は至適ｐＨ近位の値にて行うことが好ましい。また酵素処理時間は、３０分~一晩、例えば３時間とすることができる。なお、酵素の添加量は、調製した原料物質の量に応じて当業者が設定することができる。
　加熱による糊化は、澱粉を水中に懸濁し加熱することにより、澱粉粒が吸水して次第に膨張して最終的には粒子が崩壊し、溶解する現象を利用することによって行うことができる。その後、糊化した澱粉は篩いにより固液分離することによって除去することができる。
　物理的破壊による澱粉除去処理は、例えばホモジナイザー、高速ミキサー、ホモミキサー、ホモジスターラーなどを用いた処理によって行うことができる。これらの物理的破壊による澱粉除去処理によって、澱粉の除去だけでなく、アロイロン層の一部除去を行うこともできる。
　穀類植物の種子として発芽形態のものを使用する場合は、アミラーゼ又はグルコアミラーゼを外的に添加することなく、単に加熱することをもって澱粉除去処理を行うことができる。この場合には、発芽種子自身がアミラーゼを産生しているからである。
　本発明の製造方法において、実質的にステップ（ａ）~（ｂ）と同等の処理が施されている材料を澱粉除去画分として以降のステップに使用してもよい。かかる材料の非限定的な例としては、ビールを製造した際に生じる大麦麦芽であるビール仕込み粕を挙げることができる。このような材料の使用は、既に大部分の澱粉が除去されていること、及びステップの簡略化の観点からも好ましい。
　ステップ（ｂ）により調製される澱粉除去画分には、アロイロン層、果皮、種皮の主要成分の他、穀皮、胚芽、その他タンパク質、脂質等が含まれていてもよい。麦芽のアロイロン層、果皮、種皮などの植物組織は、Ａｌｅｘａｎｄｅｒ　Ｗ．ＭａｃＧｒｅｇｏｒら編集のＢａｒｌｅｙ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｐ４６　Ｆｉｇ．８に示されている。またＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｅｒｅａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　３６（２００２）２６１−２８４において、これらがイネ科植物の種子に共通して存在していることが示されている。
　ステップ（ｂ）は、澱粉除去画分の圧扁剥離処理をさらに含むことができる。圧扁剥離処理とは、二つのロールの回転速度が微妙に異なるロールミルの適切な隙間に多層からなる組成物を通すことで、圧扁面に平行した力が加わり層の一部を剥離させる処理を指す。圧扁剥離処理には被処理原料に圧縮力を与える構造の粉砕機であればいかなる物でも使用可能である。例えば、圧扁剥離処理には、回転速度の異なるロールミル以外にも、隙間と回転速度が制御された臼状の圧扁処理装置なども使用することができる。特にロールミルを使用することが望ましい。その際、ロール間の間隙は０．１５~０．０１ｍｍ、好ましくは０．０８~０．０２ｍｍであるものとするが、剥離させる多層物に効率的な物理的破砕が施されるサイズを選択する。これにより、澱粉除去画分中に含まれるアロイロン層が露出し、ステップ（ｃ）のヘミセルラーゼ酵素処理によるアロイロン層の除去処理をより効率的なものとすることができる。圧扁剥離処理の有無は、使用する原料物質、澱粉除去画分の種類や状態に応じて当業者が適宜選択することができる。例えば、原料物質、澱粉除去画分として小麦ふすま、大麦搗精粕及びビール仕込み粕を使用する場合に圧扁剥離処理を行うこととし、米糠、脱脂米糠、小麦麦芽及び大麦麦芽を使用する場合に圧扁剥離処理を行わないこととすることができる。また、穀類植物種子として発芽種子を使用する場合にも、かかる圧扁剥離処理を省略できるとの示唆も存在する。
　ステップ（ｂ）は、澱粉除去画分の水の存在下での篩い分け処理をさらに含むことができる。この篩い分け処理は、穀皮やその他澱粉除去画分中に大量に含まれる非標的物質を除去し、アロイロン層、果皮及び種皮を主成分とする画分（以下、果皮・種皮画分とも称する）を粗分画することを目的とするものである。この篩い分け処理は、例えば、澱粉除去画分を適切な篩い目のサイズを有するメッシュを通過させ、メッシュ上に残った画分を除去することによって行うことができる。この篩い分け処理にて使用するメッシュの篩い目のサイズは、使用する原料物質、澱粉除去画分に応じて変化する場合があるが、典型的には、ＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いの５~２５メッシュ、例えば１２メッシュ、１６メッシュ、２０メッシュを使用する。この処理は、大量の非標的物質を除去することができるため、以降の操作のハンドリングの観点からも好ましい。
　ステップ（ｂ）において、上記圧扁剥離処理と篩い分け処理とを併用することが好ましい。この場合、好ましくは、この処理の組合せを２~５回繰り返して行う。これにより、アロイロン層、果皮及び種皮を主成分とする画分をより効率的に得ることができるからである。
　上記したように、使用する穀類植物種子の種類及びその発芽状態並びに原料物質の種類などに応じて、圧扁剥離処理等の前処理の有無を決めることができる。すなわち、上記ステップ（ａ）~（ｂ）は、ステップ（ｃ）のヘミセルラーゼ酵素処理によるアロイロン層の分解をより効率的に行うための前処理ステップとして規定することができる。したがって、ステップ（ｃ）に供する澱粉除去画分に関し、ステップ（ｃ）の前に、ステップ（ａ）~（ｂ）による前処理が最適になされているかを確認し、必要に応じて、圧扁剥離処理等の前処理を追加又は反復することが好ましいであろう。その際、例えばステップ（ａ）~（ｂ）により調製した澱粉除去処理画分中の組織の顕微鏡観察等又はヨウ素澱粉反応を利用した分析により、前処理が最適になされているかを判断することが考えられる。
　ステップ（ｃ）は、上記の通り、ステップ（ｂ）で調製した澱粉除去画分又は果皮・種皮画分に含まれるアロイロン層を除去するステップである。このステップは、ヘミセルラーゼ酵素活性を有する酵素による澱粉除去画分又は果皮・種皮画分の酵素処理を含む。このステップで使用することができるヘミセルラーゼ酵素活性を有する酵素として、これに限定されるものではないが、例えばβ−グルコシダーゼ、セルラーゼ、キシロシダーゼ、キシラナーゼ、マンノシダーゼ、マンナナーゼ、アラビノシダーゼ、アラバナーゼ、ペクチナーゼ、グルカナーゼなどを挙げることができる。特にキシラナーゼを含むキシラン分解酵素を使用することが好ましい。具体的に、本発明に使用することができるヘミセルラーセとして、これに限定されるものではないが、例えば、商品名セルロシン（エイチビィアイ社製）、商品名マルチフェクト７２０（ジェンコア協和社製）、商品名スミチーム（新日本化学工業社製）、商品名ペントパン（ノボザイムズ社製）、商品名ヘミセルラーゼ「アマノ」９０（天野エンザイム社製）などの市販の酵素製剤や、トリコデルマ属、テルモミセス属、オウレオバシヂウム属、ストレプトミセス属、アスペルギルス属、クロストリジウム属、バチルス属、テルモトガ属、テルモアスクス属、カルドセラム属、テルモモノスポラ属、フミコーラ属、リゾップス属、ペニシリウム属などの微生物により生産されるキシラナーゼを挙げることができる。
　本発明で使用する上記酵素は、酵素活性を保持する限り、精製酵素、粗製酵素、固定化酵素などの任意の形態とすることができる。固定化酵素は、ポリマー、多糖類、無機物質などの担体に結合された酵素である。粗製酵素は、例えば酵素含有微生物からの酵素含有抽出物、乾燥物などの処理物を含む。ヘミセルラーゼ酵素処理は、一般的には、１０~９０℃、好ましくは３０~６０℃の温度、３~１０、好ましくは５~７のｐＨで行うが、使用するヘミセルラーゼ酵素の至適温度又は至適ｐＨ近位の値にて行うことが好ましい。また酵素処理時間は、３０分~一晩とすることができる。なお、酵素の添加量は、調製した澱粉除去画分又は果皮・種皮画分の量に応じて当業者が設定することができる。ヘミセルラーゼ酵素処理後、澱粉除去画分又は果皮・種皮画分中のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されていることを蛍光顕微鏡又は電子顕微鏡などで視覚的に確認することが好ましい。蛍光顕微鏡での分析法としては、「ＰＬＡＮＴ　ＭＩＣＲＯＴＥＣＨＮＩＱＵＥ　ＡＮＤ　ＭＩＣＲＯＳＣＯＰＹ」ＳＴＥＶＥＮ　Ｅ．ＲＵＺＥＮ著　Ｃｈａｐｔｅｒ７（ｐ８７~１１９）に記載されているような当業者に一般的な方法で確認することができる。また、電子顕微鏡での分析法としても、当業者が一般的に用いる方法で確認することができる。
　ステップ（ｃ）の酵素処理において、プロテアーゼ処理を併用することが好ましい。これにより、アロイロン層を分解するために使用するヘミセルラーゼ酵素活性を有する酵素の量を、該酵素を単独で使用するよりも１／５~１／１０倍量まで減らすことができ、コスト面で有利である。
　ステップ（ｃ）は、ヘミセルラーゼ処理後の脱脂処理を含むことが好ましい。これにより、本発明の不溶性食物繊維含有物質の味質を改善及び品質を向上することができる。脱脂の方法は、特に限定されないが、例えばエタノール、アセトン、ヘキサンなどを用いた脱脂処理により行うことができる。これらの技術は当業者に自明である。なお、上記澱粉除去処理に供する原料物質として脱脂米糠を使用する場合には、かかる脱脂処理を行わなくても上記利点が得られる点に留意する。
　ステップ（ｄ）は、ステップ（ｃ）の酵素処理液中の不溶性画分を回収するステップである。好ましくは、このステップで５~２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格の篩いを通過しない不溶性画分が回収される。
　具体的に、この篩い分け処理は、２段階方式により行うことができる。即ち、ヘミセルラーゼ処理液を第１のメッシュにて篩い分けし、篩いを通過した画分を第１のメッシュよりも篩い目の細かい第２のメッシュにて篩い分けし、篩い上に残った不溶性食物繊維に富む不溶性画分（すなわち、不溶性食物繊維含有物質）を回収する。この篩い分け処理にて使用する第１のメッシュと第２のメッシュの篩い目のサイズは、上記粒度を有する画分を回収できるような組合せであれば特に制限されない。例えば、第１のメッシュとしてＡＳＴＭ規格篩いの５~２５メッシュ、例えば１２メッシュ、１６メッシュ、好ましくは２０~２５メッシュを選択し、第２のメッシュとしてＡＳＴＭ規格篩いの５０~５００メッシュを選択することができる。この篩い分け処理により、酵素処理液中の目的の画分を得ることができる。
　或いは、ステップ（ｄ）で回収される不溶性画分は、第２のメッシュとして５０~２００メッシュのＡＳＴＭ規格の篩いを用いることで、２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分として回収してもよい。
　なお、ステップ（ｂ）において、既に果皮・種皮画分を粗分画している場合には、必ずしもステップ（ｄ）を２段階方式にて行う必要はなく、上記第２のメッシュを用いた篩い分け処理により、篩い上に残った画分を回収すればよい。
　ステップ（ｄ）で取得した不溶性画分は、通常、凍結乾燥等により乾燥し、好ましくは微粉砕等の更なる加工を施すことなく、本発明の不溶性食物繊維含有物質として使用することができる。
　このようにして製造される本発明の不溶性食物繊維含有物質は、ステップ（ｄ）の篩い分け処理に基づき、好ましくは実質的に５~２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分からなる。本明細書で使用する「実質的に」とは、上記粒度範囲外の成分がわずかながら混入している不溶性食物繊維含有物質も本発明の範囲に含まれることを意図すべく使用される。したがって、実質的に５~２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分からなる本発明の不溶性食物繊維含有物質は、上記粒度の画分を少なくとも９０％以上、好ましくは９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％、最も好ましくは１００％含んでいる。
　また、上記の製法によって得られるような本発明の不溶性食物繊維含有物質は、タンパク質の含量が、好ましくは２０重量％以下、例えば１５重量％以下、１０重量％以下などであり、不溶性食物繊維の含量が、好ましくは５５重量％以上、より好ましくは６０重量％以上、さらに好ましくは７０重量％以上、例えば７５重量％以上、８０重量％以上などであるという性質を有する。ここでいうタンパク質の含量とは、ケルダール法を用いて得られた窒素量に、タンパク質換算係数として６．２５を乗じて得た数値から求めたものである。また、食物繊維の含量は、ＡＯＡＣ法に基づいて求めたものである。
　また本発明の不溶性食物繊維含有物質に含まれる不溶性食物繊維は、アロイロン層が部分的に又は完全に除去されている。ここでいう「部分的に」とは、不溶性食物繊維のアロイロン層の７０％以上、好ましくは８０％以上、より好ましくは９０％以上、より好ましくは９５％以上、最も好ましくは９９％以上が除去されていることをいう。前記不溶性食物繊維のアロイロン層は完全に除去されていることが好ましい。
　不溶性食物繊維のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されていることは、上記のように蛍光顕微鏡又は電子顕微鏡などで視覚的に確認することによる他、例えば、本発明の不溶性食物繊維含有物質をヘミセルラーゼ酵素処理に供し、当該処理後の回収率を評価することによって確認することができる。本発明の不溶性食物繊維含有物質は上記の通りアロイロン層の大部分が除去されている画分であるため、再度のヘミセルラーゼ酵素処理に供しても当該処理後の回収率が非常に高いものである。具体的に、本発明の不溶性食物繊維含有物質は、５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）４．０％ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）で一晩の再度のヘミセルラーゼ酵素処理に供した際に、少なくとも約７０％以上、好ましくは少なくとも約８０％以上の回収率を有することによって特徴付けることができる。なお、ここでいう「回収率」とは、取得された不溶性食物繊維含有物質の重量を１００％として、これに再度酵素処理（４．０％ヘミセルラーゼ、ｐＨ４．５、５０℃、一晩）を行った後に、凍結乾燥により得られた物質重量の相対的な値をいう。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質が有するその他の特徴として、膨潤能を挙げることができる。ここで膨潤能とは、不溶性食物繊維含有物質内（植物組織の間）に水分子を取り込み、粒子が膨らんで大きくなる特性をいう。本発明の不溶性食物繊維含有物質が膨潤能を有することは、例えば、不溶性食物繊維含有物質を一定量メスシリンダーに計り取り、それに一定量の水を入れて一定時間置き、メスシリンダーの目盛りにより膨らみを定量することによって確認することができる。本発明の不溶性食物繊維含有物質の膨潤能は、１ｇ当たり２０ｍｌ~３５ｍｌの容積にまで膨らむことで特徴付けることができる。
　以下、澱粉除去画分としてビール仕込み粕を、原料物質として小麦ふすま、米糠を使用した場合の本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造について具体的に説明する。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造は、上記の通り、ビールを製造した際に生じる大麦麦芽であるビール仕込み粕、小麦粉を製造した際に副次的に生成されるふすま、精米後に副次的に生成される米糠など利用することが経済的に好ましい。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造にビール仕込み粕を使用する場合、本発明の不溶性食物繊維含有物質を得る具体的な方法の例として、特公平４−３１６６６号公報に記載された方法を用いることができる。すなわち、湿体状態にあるビール仕込み粕を圧扁粉砕処理し、得られた圧扁粉砕処理物を水の存在下において、篩い分け処理にて果皮・種皮及びアロイロン層を大量に含む画分を調製し、それをヘミセルラーゼにて処理すればよい。
　より具体的には、大麦特有の穀皮を除去するために、湿体状態のビール仕込み粕を圧扁剥離処理する。ビール仕込み粕の圧扁剥離処理には被処理原料に圧縮力を与える構造の粉砕機であればいかなる物でも使用可能であるが、特にロールミルの使用が望ましい。ロール間の間隙は０．１５~０．０１ｍｍ、好ましくは０．０８~０．０２ｍｍであるものとするが、剥離させる多層物が効率的に物理的破砕が行われるサイズを選択する。ビール仕込み粕を圧扁剥離処理する際に、ビール仕込み粕中の水分を６５％以上に調整することが望ましい。次に、得られた圧扁剥離処理物を水の存在下において篩い分け処理する。この篩い分け処理により、穀皮画分が篩い上に残り、アロイロン層に富む果皮・種皮画分が篩いを通過する。篩い目の寸法はＡＳＴＭ規格篩いの５~２０メッシュ、好ましくは１６~２０メッシュとする。以上の作業により、大麦特有の穀皮を多量に含む画分を除去することができる。また、果皮・種皮画分を効率よく得るためには、更に、先の篩いより目の細かい篩いを用いて篩い分けを行う。その際に、果皮・種皮画分は篩いの上に残り、果皮・種皮画分を調製することができる。後者の篩い目の寸法は、ＡＳＴＭ規格篩いの５０~２００メッシュとする。前記の圧扁剥離処理とこの篩い分け処理とを２~５回繰り返して行うのが好ましい。上記のようにして得られた果皮・種皮画分にヘミセルラーゼ処理を行い、再度ＡＳＴＭ規格篩いの５０~２００メッシュにて篩い分けし、ヘミセルラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った不溶性画分が、目的の不溶性食物繊維含有物質である。こうして取得した不溶性食物繊維含有物質は、通常、乾燥させてから用いる。乾燥方法は特に限定されないが具体例としては、凍結乾燥による方法などが挙げられる。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造に小麦ふすまを使用する場合、まず澱粉を除去するために、乾燥状態の小麦ふすまをアミラーゼ又はグルコアミラーゼを含んだ溶液に懸濁することにより、澱粉を分解させる処理を施す。長時間（例えば３０分~一晩）アミラーゼ反応を施した後、ヘミセルラーゼ酵素処理の効率化のために、例えばロールミルによる圧扁剥離処理を行う。ロール間の間隙は、０．１５~０．０１ｍｍ、好ましくは０．０８~０．０２ｍｍであるものとするが、剥離させる多層物が効率的に物理的破砕が行われるサイズを選択する。次に、篩い目がＡＳＴＭ規格篩いの５０~２００メッシュ、好ましくは２００メッシュにて篩い分けし、アミラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った果皮・種皮画分を回収する。次に、本画分をヘミセルラーゼを含んだ溶液に懸濁し、長時間（例えば３０分~一晩）反応後、同様に、篩い目がＡＳＴＭ規格篩いの５０~２００メッシュ、好ましくは２００メッシュにて篩い分けし、ヘミセルラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った不溶性画分を回収することにより、本発明の不溶性食物繊維含有物質を得ることができる。こうして取得した不溶性食物繊維含有物質は、通常、乾燥させてから用いられる。乾燥方法は特に限定されないが具体例としては、凍結乾燥による方法などが挙げられる。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造に米糠を使用する場合、まず澱粉を除去するために、乾燥状態の米糠をアミラーゼ又はグルコアミラーゼを含んだ溶液に懸濁することにより、澱粉を分解させる処理を施す。長時間（例えば３０分~一晩）アミラーゼ反応を施した後に、篩い目がＡＳＴＭ規格篩いの５０~２００メッシュ、好ましくは２００メッシュにて篩い分けし、アミラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った果皮・種皮画分を回収する。次に、本画分をヘミセルラーゼを含んだ溶液に懸濁し、長時間（例えば３０分~一晩）反応後、同様に、篩い目がＡＳＴＭ規格篩いの５０~２００メッシュ、好ましくは２００メッシュにて篩い分けし、ヘミセルラーゼによる分解物を除去し、篩いの上に残った画分を回収することにより本発明の不溶性食物繊維含有物質を得ることができる。こうして取得したこの不溶性食物含有物質は、通常、乾燥させてから用いられる。乾燥方法は特に限定されないが、凍結乾燥による方法などが挙げられる。
　以上、本発明の不溶性食物繊維含有物質及びその製造方法を説明してきたが、本発明の不溶性食物繊維含有物質の製造方法は上記方法に限定されるものではない。すなわち、穀類植物の種子から、以下の特徴（ｉ）~（ｉｉｉ）を有する不溶性食物繊維含有物質を製造することができるものであれば、他の製造方法を採用してもよい：（ｉ）実質的に、５~２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなり；（ｉｉ）タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上であり；かつ（ｉｉｉ）不溶性食物繊維のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されている。
　上記特徴を有する本発明の不溶性食物繊維含有物質の代替的な製造方法の例として、以下のステップ：（ａ１）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；（ｂ１）原料物質を物理的破壊を含む澱粉除去処理に供するステップ；（ｃ１）ステップ（ｂ１）で調製した画分から５~２５メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない不溶性画分を回収するステップを含む方法が挙げられる。
　この方法は、物理的破壊を含む澱粉除去処理に供する点、及びヘミセルラーゼ活性を有する酵素による酵素処理ステップを含まない点を除き、上記方法と同様にして行うことができる。
　この方法において、物理的破壊による澱粉除去処理は、例えばホモジナイザー、高速ミキサー、ホモミキサー、ホモジスターラーなどを用いた処理によって行うことができる。これにより澱粉除去処理に併せてアロイロン層の除去を行うことができる。
　上記澱粉除去処理は、上記方法のステップ（ｂ）で説明した篩い分け処理を併用して複数回、例えば２~５回実施することが好ましい。これにより澱粉除去処理とこれに伴うアロイロン層の除去をより効率的に行うことができる。
　上記澱粉除去処理は、物理的破壊以外の他の澱粉除去処理、例えば酵素による澱粉分解処理、加熱による糊化、糊化後の篩いによる除去を併用してもよい。
　上記のようにして製造した本発明の不溶性食物繊維含有物質は、ＩＢＳ抑制のために摂取・投与されるものであることを特徴とする。ＩＢＳは、過敏性大腸症候群とも称され、主として大腸の運動及び内臓知覚の異常の結果として生じる疾患の総称である。ＩＢＳにおいては、炎症や潰瘍など目に見える異常は認められないが、下痢や便秘などの便通の異常や、ガス過多による下腹部の張りなどの症状が認められる。症状の現れ方によって、不安定型、慢性下痢型、分泌型、ガス型の４種に分けることができるが、本発明の不溶性食物繊維含有物質はいずれのＩＢＳ型に対して使用してもよい。本明細書で使用する「ＩＢＳを抑制する」という用語は、ＩＢＳに関連する症状の１つ以上を改善又は予防すること、及びＩＢＳに関連するパラメータ値の１つ以上を改善又は維持することをいう。前記症状としては、便秘、下痢、腹痛、腹部膨満感、便意切迫感、残便感などが挙げられ、「症状を改善する」とはそれら症状の重症度、病悩期間、発現頻度を改善することをいう。また、前記パラメータ値としては、大腸粘膜のセロトニン含量、大腸での痛覚閾値、ストレス負荷時の糞便排泄量などが挙げられ、「パラメータ値を改善する」とは、それらのパラメータ値をストレス負荷の有無で同等の状態にまで回復させることをいう。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質は、ＩＢＳ抑制用物質としてそのまま又は飲食品若しくは医薬中の有効成分として摂取・投与することで、ＩＢＳを抑制することができる。また、日常的に摂取・投与することによりＩＢＳに罹ることを予防することができる。この目的のために、本発明の不溶性食物繊維含有物質を１日あたり１ｇ以上、２ｇ以上、３ｇ以上、４ｇ以上、５ｇ以上、６ｇ以上、７ｇ以上、８ｇ以上、９ｇ以上、好ましくは１０ｇ以上、１２ｇ以上、１４ｇ以上、１６ｇ以上、１８ｇ以上、２０ｇ以上、３０ｇ以上摂取・投与することが望ましい。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質は、穀類植物の種子から食品用酵素により処理して得られた成分であるので、日常の食生活に取り入れることができる。また、投与ないしは摂取の時期は、食前、食間及び食後のいずれの時期でもよい。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質を飲食品に配合してＩＢＳ抑制用飲食品を提供する場合、あらゆる食品形態に加工することが可能である。本発明の不溶性食物繊維含有物質を配合することのできる飲食品としては、天然物及びその加工品を含む飲食物等を挙げることができる。またその配合量は、飲食品の形態に応じて異なるが、１００ｇに対し、本発明の不溶性食物繊維含有物質を０．１~９０ｇ、好ましくは１~５０ｇ程度配合することができる。
　飲食品の例としては、これに限定されるものではないが、錠剤形、粉末状、顆粒状、カプセル状、ゼリー状等の機能性食品、パン類、菓子類、クッキー、ビスケット等の穀類加工品、牛乳、ヨーグルト、アイスクリーム等の乳製品類、炭酸飲料、清涼飲料、果汁入り飲料、薬系ドリンク等の飲料、惣菜や加工食品等が挙げられる。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質を医薬品（医薬組成物）中の有効成分として配合する場合には、ＩＢＳ抑制剤として製剤化することができる。製剤の投与形態は特に限定されないが、例えば投与経路として、経口投与、経腸投与等を挙げることができる。経口投与又は経腸投与の場合、本発明のＩＢＳ抑制用物質をそのまま投与してもよいが、医薬的に許容できる賦形剤とともに、液剤、懸濁剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤などの形態で投与してもよい。
　医薬的に許容できる賦形剤としては、これに限定されるものではないが、乳糖、ショ糖、ブドウ糖などの糖類、デンプン、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム等の無機物、結晶セルロース、蒸留水、精製水、ゴマ油、ダイズ油、トウモロコシ油、オリーブ油、綿実油等の一般に使用されているものを例示することができる。また賦形剤の他、結合剤、滑沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤などの添加剤を使用することができる。他の医薬品と混合、或いは併用することも可能である。なお、上記の製剤は殺菌処理を行なってもよい。
　本発明の医薬を適用する対象は特に限定されず、健常者、ＩＢＳ患者、ＩＢＳの治療中の患者、ＩＢＳの予防を検討している健常者等のいずれであってもよい。またその対象はヒトに限らず、ヒト以外の動物に適用してもよい。
　本発明の医薬品の投与量は、被験者の年齢、体重、性別、肥満の程度など、様々な要因に応じて変化するが、典型的には、本発明の不溶性食物含有物質を１日あたり、１ｇ以上、２ｇ以上、３ｇ以上、４ｇ以上、５ｇ以上、６ｇ以上、７ｇ以上、８ｇ以上、９ｇ以上、好ましくは１０ｇ以上、１２ｇ以上、１４ｇ以上、１６ｇ以上、１８ｇ以上、２０ｇ以上、３０ｇ以上投与する量とし、投与間隔は特に制限されない。
　本発明の不溶性食物繊維含有物質は、効率的にＩＢＳを抑制することができ、かつ、穀類植物の種子から食品用酵素により処理して得られた成分であるので、安全性が高く、飲食品又は医薬における使用に有用である。
　さらに、本発明の不溶性食物繊維含有物質は、米糠や小麦ふすまといった、比較的安価な原料から製造することが可能であるため、コスト面にも優れている。
　飲食品又は医薬品組成物に、本発明の不溶性食物繊維含有物質が含まれている場合は、以下の方法で検出することができる。すなわち、最初に飲食品又は医薬品組成物を水に懸濁した後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、不溶性画分を回収する。そして、ナイルブルー又はその他の疎水性物質の染色等に適した染色試薬で前記不溶性画分を染色し、蛍光顕微鏡などで観察することにより、本発明の不溶性食物繊維含有物質を検出することができる。その際、本発明の不溶性食物繊維含有物質は、染色される層と染色されない層が重なっているという特徴により、他の不溶性組成物と区別することができる。染色に適したその他の試薬としては、ズダン　ＩＩＩ、ズダンブラック、オイルレッド、フルオロルイエロー０８８などが挙げられる。
　以下の調製例及び試験例により、本発明をさらに具体的に説明する。但し、本発明の範囲はこれらの具体例により限定されるものではない。調製例及び試験例中、特に断らない限り、％表示は重量基準によるものとする。また、分析により求める各成分値について、粗タンパク質はケルダール法を（窒素のタンパク質換算係数は６．２５とした。）用いて、粗脂肪はジエチルエーテルを抽出溶媒としたソックスレー抽出法を用いて測定した。食物繊維の含量は、ＡＯＡＣ法に基づいて求めた。
〔調製例１〕（ビール仕込み粕⇒ロールミル）
　湿体状態のビール仕込み粕（水分：７７．６重量％）をロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で１６メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．１８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに５０メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．３００ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１とした。この分析値は下記表１に示すとおりである。また、調製試料１に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図１に示す。
〔調製例２〕（ビール仕込み粕⇒ロールミル＋ヘミセルラーゼ）
　湿体状態のビール仕込み粕（水分：７７．６重量％）をロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で１６メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．１８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに５０メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．３００ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。回収した画分にヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社（日本）製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、水中で２００メッシュ（篩い目開き：０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料２とした。この分析値は下記表１に示すとおりである。また、調製試料２に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図２に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
 〔調製例３〕（裸麦芽⇒澱粉分解）
　発芽した裸大麦（裸麦芽）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数５００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、加水して６５℃で３時間保持して、裸麦芽の持つアミラーゼを利用して澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料３とした。この分析値は下記表２に示すとおりである。また、調製試料３に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図３に示す。ちなみにアミラーゼを６５℃で作用させず冷水で澱粉のみを除去した場合のアロイロン層は、図４のような状態となる。
〔調製例４〕（裸麦芽⇒澱粉分解＋ロールミル＋ヘミセルラーゼ）
　発芽した裸大麦（裸麦芽）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数５００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、加水して６５℃で３時間保持して、裸麦芽の持つアミラーゼを利用して澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、回収した画分を湿体状態でロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収し、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した。再度、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料４とした。この分析値は下記表２に示すとおりである。また、調製試料４に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図５に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
 〔調製例５〕（裸大麦⇒澱粉分解）
　未発芽の裸大麦（裸大麦）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数８００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、裸大麦中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料５とした。この分析値は下記表３に示すとおりである。また、調製試料５に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図６に示す。
〔調製例６〕（裸大麦⇒澱粉分解＋ロールミル＋ヘミセルラーゼ）
　未発芽の裸大麦（裸大麦）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数８００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、裸大麦中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。回収した画分を湿体状態でロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、回収した画分にヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した。再度、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料６とした。この分析値は下記表３に示すとおりである。また、調製試料６に含まれるアロイロン層部分走査型電子顕微鏡写真像を図７に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
 〔調製例７〕（裸麦芽⇒澱粉分解＋ロールミル）
　発芽した裸大麦（裸麦芽）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数５００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、加水して６５℃で３時間保持して、裸麦芽の持つアミラーゼを利用して澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で１２メッシュ篩い（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き１．６８ｍｍ）を用いて篩い分けし、通過画分をさらに２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。回収した画分を湿体状態でロールミル（ロール回転数：１００ｒｐｍ、ロール間隙：０．０８ｍｍ）で圧扁剥離処理後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料７とした。この分析値は下記表４に示すとおりである。
〔調製例８〕（（裸麦芽⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
　発芽した裸大麦（裸麦芽）を原料とした。佐竹製作所製の醸造用テスト精米機ＴＤＢ２Ａ（使用回転数５００ｒｐｍ）により穀皮を除去した後に、それをディスクミルにより粉砕した。その後、加水して６５℃で３時間保持して、裸麦芽の持つアミラーゼを利用して澱粉を分解した。澱粉分解後に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料８とした。この分析値は下記表４に示すとおりである。
〔調製例９〕（裸麦芽⇒澱粉分解＋ロールミル＋ヘミセルラーゼ）
　再度、調製例４と同様の処理を行い、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料９とした。この分析値は下記表４に示すとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
 〔調製例１０〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
　米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１０とした。この分析値は下記表５に示すとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
 〔調製例１１〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
　再度、調製例１０と同様の処理を行い、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１１とした。この分析値は下記表６に示すとおりである。
〔調製例１２〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ⇒脱脂処理）
　米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。回収した画分をエタノールにより脱脂処理を行い、凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１２とした。この分析値は下記表６に示すとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
 〔調製例１３〕（ふすま⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
　ふすまを原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、ふすま中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１３とした。この分析値は下記表７に示すとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
 〔調製例１４〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
　米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１４とした。この分析値は下記表８に示すとおりである。また、調製試料１４に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図８に示す。
〔調製例１５〕（米糠⇒ホモジナイズ攪拌による澱粉除去）
　米糠を原料として水に懸濁し、特殊機化工業株式会社製（現プライミクス株式会社）攪拌機Ｔ．ｋ．ロボミックスに常温で供した後（１０，０００ＲＰＭ、約２０分）、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収することにより澱粉を除去した。この操作を２回繰り返し、澱粉の除去効率を高めた。また、２回目の操作時には、８０℃加温という殺菌工程を組み入れた。最後に、２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、回収した通過しない画分を凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１５とした。この分析値は下記表８に示すとおりである。また、調製試料１５に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図９に示す。
〔調製例１６〕（脱脂米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
　脱脂米糠（築野食品工業株式会社製）を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１６とした。この分析値は下記表８に示すとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000008
 〔調製例１７〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ⇒２００メッシュを通過しない画分）
　米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥して、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１７とした。この分析値は下記表９に示すとおりである。
〔調製例１８〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ⇒２００~５００メッシュ画分）
　米糠を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過する画分を回収してそれをさらに５００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０２５ｍｍ）篩を用いて篩分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥して、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１８とした。この分析値は下記表９に示すとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000009
 〔調製例１９〕（米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ⇒２００メッシュを通過しない画分）
　脱脂米糠（築野食品工業株式会社製）を原料とした。アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）２．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、６５℃）で３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％を５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を完全に分解した後、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料１９とした。この分析値は下記表１０に示すとおりである。
〔調製例２０〕（調製例１９⇒微粉砕⇒５００メッシュを通過画分）
　調製例１９において得られた不溶性食物繊維含有物質を微粉砕化（マイクロフーズジャパン株式会社加工）した後に、水に懸濁させ、水中で５００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過する画分を回収後、凍結乾燥して不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料２０とした。この分析値は下記表１０に示すとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000010
 〔試験例１〕　上記調製例１６に従って調製した不溶性食物繊維含有物質を用いてＩＢＳに関連する症状又はパラメータ値を改善できるかについて試験した。
　下記試験に使用した対照飼料、実験飼料の組成は表１１に示す通りである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000011
 　実験動物に対照飼料、実験飼料を投与し、順化したのちに、広くＩＢＳモデル作成に使用されている方法のうち、ＩＢＳ治療薬の動物評価にも使用されている拘束ストレス法（Ｍｉｙａｔａ　Ｋ，Ｋａｍａｔｏ　Ｔ，Ｎｉｓｈｉｄａ　Ａ，Ｉｔｏ　Ｈ，Ｙｕｋｉ　Ｈ，Ｙａｍａｎｏ　Ｍ，Ｔｓｕｔｓｕｍｉ　Ｒ，Ｋａｔｓｕｙａｍａ　Ｙ，Ｈｏｎｄａ　Ｋ．，Ｊ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｅｘｐ　Ｔｈｅｒ．１９９２；２６１：２９７−３０３．）を用いて本発明の不溶性食物繊維含有物質のＩＢＳ抑制作用について評価した。具体的には、拘束ケージを用いて動物に拘束ストレスを１日４時間、連続３日与えて、ストレス負荷時の糞便排泄量、大腸での痛覚閾値、及び大腸粘膜のセロトニン含量を評価した。
〔糞便排泄量評価〕
　本試験では、５週令の雄のＳＤラットを各群１０匹用い、群は対照群、実験群の２群とした。１週間環境順化後に、体重で組分けした。その後１０日間各飼料で飼育し、各群半分の５匹をストレス負荷あり、残り半分をストレス負荷なしとした。１０日の飼育後に連続３日の拘束ストレス負荷を行い、１回のストレスは４時間とし、連続３日の負荷とした。詳細は宮田らの方法（前掲）を参考にした。簡潔に説明すると、夏目製作所（日本）のラット用拘束ケージにラットを４時間保定した。その後解放して通常の飼育ケージにもどした。なお、ストレス負荷をしない個体はそのままの飼育を継続した。
　本試験ではストレス負荷開始時から終了時まで、すべての個体から採便し、乾燥重量を測定し、３日分の平均値を４時間当たりの糞便排泄量とした。結果を図１０に示す。
　図１０に示すように、拘束ストレスを負荷すると、対照群では糞便排泄が有意に増加するが、実験群ではその増加を抑制し、抗ストレス作用が確認された。
〔大腸における痛覚閾値評価〕
　試験例２では、５週令の雄のＳＤラットを各群１０匹用い、群は対照群、実験群、陽性対照としてのコロネルの３群とした。１週間環境順化後に、体重で組分けする。その後１０日間各飼料で飼育し、各群半分の５匹をストレス負荷あり、残り半分をストレス負荷なしとした。１０日の飼育後に連続３日の拘束ストレス負荷を行い、１回のストレスは４時間とし、連続３日の負荷とした。３日目のストレス負荷終了直後にバロスタット法により痛覚閾値の測定を行った。痛覚閾値はＡＷＲ（ａｂｄｏｒｍｉｎａｌ　ｗｉｔｈｄｒａｗａｌ　ｒｅｆｌｅｘ；Ａｌ−Ｃｈａｅｒ　ＥＤ，Ｋａｗａｓａｋｉ　Ｍ，Ｐａｓｒｉｃｈａ　ＰＪ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０００　Ｎｏｖ；１１９（５）：１２７６−８５）により判定した。ストレス負荷をしない個体は別の日に痛覚閾値測定を実施した。結果を図１１に示す。
　図１１に示すように、拘束ストレスを負荷すると、対照群ではＣＲＤ（大腸の拡張による痛覚閾値）の有意な低下が確認されたが、実験群、および陽性対照のコロネルではその有意な低下が生じず、ＩＢＳで確認されている痛覚閾値の低下が抑制された。
〔大腸粘膜のセロトニン含量の評価〕
　本試験では、上記と同じように飼育、ストレス負荷を行い、３日目のストレス負荷終了直後に麻酔下で解剖に供し、大腸を摘出し、大腸粘膜中のセロトニン含量を市販のＥＬＩＳＡキット（Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ　ＥＩＡ，Ｌａｂｏｒ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｋａ　Ｎｏｒｄ　ＧｍｂＨ）で測定した。結果を図１２に示す。
　図１２に示すように、拘束ストレスを負荷すると、対照群では大腸粘膜では消化管運動に関係するセロトニンの急激な放出が生じる。対照群ではストレスの負荷により有意な上昇が認められるが、実験群、コロネルではその上昇は有意なものではなく、抗ストレス作用が確認された。
〔調製例２１〕（脱脂米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ）
　脱脂米糠を原料とし、調製例１６と同様にして不溶性食物繊維含有物質を調製した。すなわち、アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）１．０％で、乳酸を添加してｐＨを調製後（ｐＨ４．５、６５℃）、３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）０．５％で、乳酸を添加してｐＨを調製後（ｐＨ４．５、５０℃）、１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を分解した後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料２１とした。この分析値は下記表１２に示すとおりである。
　また、調製試料２１に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図１３に示す。
〔調製例２２〕（脱脂米糠⇒澱粉分解＋ヘミセルラーゼ、酵素量を調製例２１より低減化）
　脱脂米糠を原料として、アミラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＡＳ）０．５％で、乳酸を添加してｐＨを調製後（ｐＨ４．５、６５℃）、３時間反応させて、米糠中の澱粉を分解した。澱粉分解後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収した。次に、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）０．２％で、乳酸を添加してｐＨを調製後（ｐＨ４．５、５０℃）、１晩反応させて、植物組織のアロイロン層を分解した後、水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、不溶性食物繊維含有物質を得た。
　これを調製試料２２とした。この分析値は下記表１２に示すとおりである。また、調製試料２２に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図１４に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000012
 〔調製例２３〕（調製試料の再ヘミセルラーゼ処理）
　再度、調製試料２２をヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）１．０％、乳酸を添加してｐＨを調整後（ｐＨ４．５、５０℃）、１晩反応させ、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供し、不溶性食物繊維含有物質を得た。これを調製試料２３とした。調製試料２３の分析値は下記表１３に示すとおりである。また、調製試料２３に含まれるアロイロン層部分の走査型電子顕微鏡写真像を図１５に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000013
 〔試験例２〕
　調製試料２１、２２を、再度、ヘミセルラーゼ製剤（新日本化学工業社製スミチームＮＸ）４．０％で、５０ｍＭ酢酸緩衝液中（ｐＨ４．５、５０℃）で１晩反応させ、再び水中で２００メッシュ（ＡＳＴＭ規格：篩い目開き０．０７５ｍｍ）篩いを用いて篩い分けし、通過しない画分を回収して凍結乾燥に供した後、回収率を算出した。また、ヘミセルラーゼ処理の際にアロイロン層を構成する主だった糖として、アラビノース、キシロースの遊離量も調査した。
〔試験例２の結果〕
　調製試料２１をヘミセルラーゼで再分解した際の回収率は７８％であり、調製試料２２を同様に分解した際の回収率は６９％であった（図１６）。また、各試料を分解した際の遊離のアラビノース、キシロース量を調査した結果、いずれも調製試料２２を分解した場合の方が遊離のアラビノース、キシロースが多いことが判明した（図１７）。アラビノース、キシロースは、アロイロン層を構成する主要な糖であり、ヘミセルラーゼ処理によりこれらの糖が遊離しているということは、ヘミセルラーゼ処理により、アロイロン層が分解されていると推察できる。
　調製試料２１は、試験例１において実際にそのＩＢＳ抑制効果が立証された調製例１６と同様にして調製されたものである。上記結果から、当該試験例と同様の条件下でのヘミセルラーゼ処理による再分解に供した際に、回収率が少なくとも約７０％以上、好ましくは約８０％以上である調製試料にはＩＢＳ抑制効果が認められると推認できる。また、この指標をもって、アロイロン層の分解度合いを表現することができる。
〔試験例３〕（過敏性腸症候群患者における臨床所見改善効果）
　患者選択基準としてＲｏｍｅ　ＩＩＩ基準に準拠したＩＢＳ患者のうち、下痢型の患者とし、１６~７４歳の男女で、医師により試験参加が判断した通院患者で、上記調製例１６に従って調製した不溶性食物繊維含有物質の摂取を受けることに対して十分な説明を受けた後に承諾し、摂取試験に協力する事に同意する者を対象とした。（除外基準としては、他の合併症を有する症例のうち、薬効に影響すると考えられる薬剤の摂取を必要とする症例、癌或いはｄｙｓｐｌａｓｉａを合併している症例、妊娠している可能性のある婦人、妊婦、胃腸管切除歴のある症例、腸管の閉塞症状が認められる症例、米に対してアレルギー症状を有する症例、その他、医師が摂取試験の対象として不適切と判断した症例とした。）当該不溶性食物繊維含有物質を１日１０~１５ｇ、４週間摂取して、摂取後の臨床所見、患者の生活印象などを以下の項目にしたがって評価した。試験参加者は男性４、女性１（平均年齢３１歳）が試験に参加し、全員がＩＢＳ治療薬の摂取を受けているが、抵抗性を有する症例であった。評価方法は表１４のとおりＡｍ　Ｊ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ１０１；１５８１−１５９０，２００６に記載の方法に準じて行った。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000014
 　各項目について１：著明改善、２：中等度改善、３：軽度改善、４：不変、５：悪化、６：判定不能の６段階で判定した。また、臨床所見総合改善度は上記指標に安全性に関する結果も踏まえ、総合的に勘案して試験を担当する医師が同じく６段階で評価した。結果を図１８に示す。
　図１８に示すように、当該不溶性食物繊維含有物質の摂取を４週間継続（平均１２ｇ／日の摂取量であった）することで、全般改善度、ならびに臨床所見総合評価が改善することが確認された。さらに、この試験においては、当該不溶性食物繊維含有物質の摂取との関連性を示す有害事象は認められず、過敏性腸症候群患者においても安全性に問題となる懸念はないと考えられた。
　本発明によれば、ＩＢＳを抑制するための新規な物質（以下、ＩＢＳ抑制用物質とも称する）が提供される。
　本発明のＩＢＳ抑制用物質は、穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子由来の不溶性食物繊維を豊富に含み、副作用がないという利点を有するため、ＩＢＳ抑制用の飲食品又は医薬における使用に有用である。
　本発明の穀類植物、好ましくはイネ科植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する物質は、ＩＢＳ抑制効果、例えばストレス負荷時の急激な糞便排泄や痛覚閾値低下などのＩＢＳに関連する症状の１つ以上を有効に軽減することができるＩＢＳ抑制用物質として提供される。
　本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。

Claims (27)

  1. 　以下のステップ：
    （ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；
    （ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；
    （ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び
    （ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップ
    を含む処理により製造される穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含む、過敏性腸症候群抑制用物質。
  2. 　穀類植物はイネ科植物であることを特徴とする請求項１記載の物質。
  3. 　イネ科植物は、米、大麦、ライ麦又は小麦であることを特徴とする請求項２記載の物質。
  4. 　ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理をアミラーゼ又はグルコアミラーゼを用いた酵素処理により実施することを特徴とする請求項１記載の物質。
  5. 　ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理を加熱による糊化処理により実施することを特徴とする請求項１記載の物質。
  6. 　ステップ（ｂ）において、澱粉除去処理を物理的破壊処理により実施することを特徴とする請求項１記載の物質。
  7. 　物理的破壊処理をホモジナイザーにより実施することを特徴とする請求項６記載の物質。
  8. 　ステップ（ｂ）において、澱粉除去画分をさらに圧扁剥離処理に供することを特徴とする、請求項１記載の物質。
  9. 　前記澱粉除去処理に供する原料物質は米糠、小麦麦芽又は大麦麦芽であることを特徴とする請求項１記載の物質。
  10. 　前記澱粉除去処理に供する原料物質は脱脂米糠であることを特徴とする請求項１記載の物質。
  11. 　前記澱粉除去処理に供する原料物質は小麦ふすま又は大麦搗精粕であることを特徴とする請求項８記載の物質。
  12. 　前記澱粉除去画分はビール仕込み粕であることを特徴とする請求項８記載の物質。
  13. 　ヘミセルラーゼ活性を有する酵素がキシラナーゼであることを特徴とする請求項１~１２のいずれか１項記載の物質。
  14. 　ステップ（ｃ）において、さらにプロテアーゼを併用することを特徴とする請求項１~１３のいずれか１項記載の物質。
  15. 　ステップ（ｃ）後に脱脂処理をさらに含むことを特徴とする請求項１~１４のいずれか１項記載の物質。
  16. 　ステップ（ｄ）の不溶性画分は、実質的に、５~２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなることを特徴とする請求項１~１５のいずれか１項記載の物質。
  17. 　ステップ（ｄ）の不溶性画分は、実質的に２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなることを特徴とする請求項１６記載の物質。
  18. 　タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上であることを特徴とする請求項１~１７のいずれか１項記載の物質。
  19. 　不溶性食物繊維はアロイロン層が部分的に又は完全に除去されている、請求項１~１８のいずれか１項記載の物質。
  20. 　以下の特徴：
    （ｉ）実質的に５~２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない粒度の画分からなる；
    （ｉｉ）タンパク質含量が２０重量％以下であり、かつ食物繊維含量が５５重量％以上である；及び
    （ｉｉｉ）不溶性食物繊維のアロイロン層が部分的に又は完全に除去されている
    を有する、穀類植物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質。
  21. 　実質的に２００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない画分からなることを特徴とする請求項２０記載の物質。
  22. 　請求項１~２１のいずれか１項記載の物質を有効成分として含む、過敏性腸症候群抑制用飲食品。
  23. 　請求項１~２１のいずれか１項記載の物質を有効成分として含む、過敏性腸症候群抑制用医薬組成物。
  24. 　過敏性腸症候群を抑制するための飲食品又は医薬品を製造するための、請求項１~２１のいずれか１項記載の物質の使用。
  25. 　以下のステップ：
    （ａ）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；
    （ｂ）原料物質を澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；
    （ｃ）ステップ（ｂ）で調製した画分をヘミセルラーゼ活性を有する酵素によって酵素処理するステップ；及び
    （ｄ）酵素処理液から不溶性画分を回収するステップ
    を含む、穀類食物の種子由来の不溶性食物繊維を含有する過敏性腸症候群抑制用物質の製造方法。
  26. 　以下のステップ：
    （ａ１）穀類植物の種子を、粉砕することによって、又は搗精することにより生じる種子外側画分を回収することによって、原料物質を調製するステップ；
    （ｂ１）原料物質を物理的破壊によって澱粉除去処理して澱粉除去画分を調製するステップ；
    （ｃ１）ステップ（ｂ１）で調製した画分から５~２５メッシュのＡＳＴＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　ｆｏｒ　Ｔｅｓｔｉｎｇ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌｓ）規格篩いを通過するが、５００メッシュのＡＳＴＭ規格篩いを通過しない不溶性画分を回収するステップ
    を含む、請求項２０記載の物質の製造方法。
  27. 　請求項２５又は２６記載の方法によって製造されるものである、請求項２０又は２１記載の過敏性腸症候群抑制用物質。
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