WO2010043110A1

WO2010043110A1 - 一种制备高纯度左旋卡尼汀的方法

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Publication number: WO2010043110A1
Application number: PCT/CN2009/001122
Authority: WO
Inventors: 顾书华; 王学成; 李庆宜
Original assignee: 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司
Priority date: 2008-10-13
Filing date: 2009-10-09
Publication date: 2010-04-22
Also published as: US20110263897A1; JP2012505258A; CN101723843A; US9096493B2; EP2360141B1; CN101723843B; EP2360141A1; EP2360141A4

Description

一种制备高纯度左旋卡尼汀的方法技术领域

本发明涉及一种制备高纯度左旋卡尼汀的方法，更具体地讲，本发明涉及通过检测和控制左旋卡尼汀合成工艺中手性原料和手性中间体的含量，从而得到高纯度左旋卡尼汀产物的方法。技术背景

左旋卡尼汀又称左旋肉碱，普遍存在于哺乳动物组织中，也存在于一些植物和微生物中，主要药理作用是将长链脂肪酸转运入线粒体中进行氧化产生能量，广泛应用于药品和保健食品中。 1905 年 Gulewitsch和 Krimberg从肉提取物中发现了左旋卡尼汀。

天然的卡尼汀都是左旋卡尼汀，只有左旋卡尼汀才具有生理活性。目前药用的左旋卡尼汀通常都是通过化学合成获得的，人工合成的左旋卡尼汀并不像天然提取的左旋卡尼汀，由于原料和合成工艺等原因，很难保证得到绝对的左旋卡尼汀，一般会含有其旋光对应异构体右卡尼汀。而右卡尼汀对肉碱乙酰转移酶 (CAT)和肉碱脂肪酰转移酶 (PTC) 有竞争性抑制作用，大约有 10%的患者服用混旋体的卡尼汀后发生重症肌无力样的症状（《马丁戴尔大药典》第 33版 Pagel356)，因此考虑到用药安全，需要严格控制人工合成左旋卡尼汀中的右旋异构体含量。

1988年日本专利 UP63185947) 描述了以手性环氧氯丙烷为原料，经季铵盐化、腈化、水解、除盐得。这种方法使用光学纯的化合物为原料制备左旋卡尼汀，不需拆分。该专利没有报道手性原料中光学异构体含量多少以及如何精确测定，也没有报道最终左旋卡尼汀成品中的左旋异构体含量和右旋异构体含量。

光学活性季胺盐的制备（JP3287567A) 中只介绍了以手性环氧氯丙垸为原料制备 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铰，只提及 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵是光学活性卡尼汀合成中间体，该专利报道了制备的 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵的旋光度，也没有报道原料和中间体的光学异构体的含量以及如何精确测定。

L- (-) -肉碱的合成报道（合成化学， vol, 12， 2004)，具体描述了以手性环氧氯丙烷为原料通过胺化反应制备 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铰，再经过氰化制备 L- ( - ) -氯化 -3-氰基 -2-羟丙基三甲铵，最后水解合成左旋卡尼汀，其中对环氧氯丙垸、中间体和成品进行了比旋度检测。也没有报道原料、中间体和成品中的光学异构体的含量以及如何精确测定，按其方法制备高纯度左旋卡尼汀的成本很高。另一关于 L- (-) -肉碱合成报道（中国医药杂志， 2006， 37 ( 12) )，以手性 salen-Coin(2)，即 [(R， R)，N,N'-双 -(3， 5-二叔丁基水杨醛) -1， 2-环乙二胺（2-)]乙酸钴为催化剂，水解拆分外消旋环氧氯丙垸,得到 S-环氧氯丙烷，再经季胺化、氰化、水解及离子交换得左旋卡尼汀。其中也只对 S-环氧氯丙垸、中间体和成品进行了比旋度检测，但也没有报道原料、中间体和成品中的光学异构体的含量以及如何精确测定，更没有报道如何对其进行控制，以降低成本和提高左旋卡尼汀的纯度。

关于左旋卡尼汀中右卡尼汀的检测方法，文献报道如下：

文献（J. Pharm. Biomed. Anal. 30 (2002) 209-218 ) 报道了 HPLC联合使用衍生化试剂 (+) -FLEC ( ( + ) -1- ( 9-芴基） - 氯甲酸乙酯）测定左旋卡尼汀中右旋体的方法，该方法中只是测定成品中左旋卡尼汀中右旋体的方法，没有报道合成左旋卡尼汀工艺过程中如何检测原料和中间体中对映异构体含量，更没有报道如何对其进行控制，以降低成本和提高左旋卡尼汀的纯度。

由于手性 S-环氧氯丙垸也是通过化学合成或生物转化而得，如果光测定旋光度，不精确测定其光学异构体的含量，原料中就可能有光学对映异构体杂质参与左旋卡尼汀各步的合成反应，由于使用该手性原料合成左旋卡尼汀工艺不进行拆分，所以最终成品中就可能含有光学对映异构体杂质。此外，由于从原料开始合成左旋卡尼汀的歩骤多，在合成过程中易发生消旋反应，因此必须在精确测定和控制原料中异构体的含量基础上，精确测定每一步反应产物的光学纯度，才能保证是否发生消旋反应影响成品的光学纯度。

由于左旋卡尼汀中右旋体对人体有危害，因此，需要研究一个有效方法，通过在每一歩的合成过程中灵敏检测原料和中间体的光学异构体纯度，控制每一歩光学异构体杂质的含量，保证最终得到高光学纯度的左旋卡尼汀成品，这对于保证人类健康，提高人工合成左旋卡尼汀纯度，具有重要作用；同时，为了保护环境，在繁多的人工合成左旋卡尼汀的生产步骤过程中，保证每一步反应的成品率，不让不合格的中间体进入下个化学反应过程，减少污染环境的环节，降低三废处理费用，这对于节能减排也具有重要的作用。发明内容

本发明的目的在于提供一种制备高纯度左旋卡尼汀的方法，其特在在于，在以 S-环氧氯丙烷为原料人工合成左旋卡尼汀的工艺过程中，通过检测和控制手性原料和手性中间体的含量，从而得纯度按重量计高于 97%的左旋卡尼汀产物，其中右旋卡尼汀含量低于 2%，该方法包括下述步骤：

( 1 ) .通过气相色谱和手性柱检测起始原料 S-环氧氯丙垸的光学异构体含量，控制 S-环氧氯丙垸中的左旋异构体含量在 0-12% W/W;

(2) .通过旋光仪检测合成工艺中化学中间体 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵的比旋度，控制其比旋度的值在 -26.0° 〜- 29.4° ；

(3 ) .使用手性衍生化试剂检测中间体混合物中 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的光学纯度和其中右旋异构体的含量，控制该右旋异构体的含量在 0〜3.6%W/W_;

其中所述手性衍生化试剂为光学活性纯的 D型或 L型下式（II ) 化合物：

(II)

式中带 * 的碳原子是手性碳原子； R代表具有 1-6个碳原子的直链或支链垸基,或具有 6-10个碳原子的芳烷基，或具有 2-6个碳原子的直链或支链烯基或炔基，或具有 3-6个碳原子的环垸基； X代表卤素。

本发明优选的光学活性纯的式（II) 化合物是其中 R代表甲基、乙基、异丙基、丁基或苄基， X代表 C1或 Br的那些化合物。

本发明方法中使用的更优选的光学活性纯的式（Π ) 化合物是固体结晶形式。其中优选下述化合物的固体结晶形式：（+ ) α -甲基 -6-甲氧基 -2-萘乙酰氯，（-) α -甲基 -6-甲氧基 -2-萘乙酰氯，（+ ) α -甲基 -6-乙氧基 -2-萘乙酰氯和（-) α -甲基 -6-乙氧基 -2-萘乙酰氯。

本发明方法中使用的最优选的式（Π )化合物是（+ ) α -甲基 -6-甲氧基 -2-萘乙酰氯和（+ ) α _甲基 _₆_乙氧基—2—萘乙酰氯以及它们的固体结晶形式。

在一个优选的实例中，本发明方法的步骤（3 ) 中，检测中间体 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的光学纯度和其中的右旋异构体含量的方法包括以下步骤：

( 1 ) 制备衍生化试剂溶液：在避光条件下， D型- 或 L型光学活性纯的式（II) 化合物溶解于溶剂中，制备成浓度为 0.01 〜100 mg/ml的溶液；

(2) 配制供试品溶液：取适量供试品 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵，经过盐酸进行水解；加入氨水调节溶液的 PH值至中性成供试品溶液；

(3 ) 配制对照品溶液：取适量消旋卡尼汀配制对照品溶液；

(4) 衍生化反应：取适量光学活性纯式（Π ) 化合物衍生化试剂，与含左旋卡尼汀（或右旋卡尼汀）的供试品溶液和卡尼汀对照品溶液混匀，在溶剂的存在下，在 20°C〜95°C的温度下，使上述步骤（1 ) 的衍生化试剂分别与上述步骤（2)和（3 ) 的供试样品溶液和对照品溶液接触，发生衍生化反应，产生左旋卡尼汀和右旋卡尼汀衍生物；

(5 ) 使用 HPLC法测定上述步骤（4) 中供试品溶液和对照品溶液中左旋卡尼汀和右旋卡尼汀衍生物的含量，并由此计算出供试品溶液中左旋异构体 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵和右旋异构体 D-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的含量。

本发明详述如下：

以 S-环氧氯丙垸为原料人工合成左旋卡尼汀的工艺中（如化学反应式 I所示），提供了一套不同生产环节质量控制的关键技术，能够提高成品中左旋卡尼汀的光学纯度，减少有害的右旋异构体含量，大大的降低成本，制备高纯度左旋卡尼汀的方法。

一、通过气相色谱和手性柱灵敏检测 S-环氧氯丙垸的光学异构体含量，控制使用的原料 S-环氧氯丙垸中的左旋异构体含量在 0-12%，左旋卡尼汀光学纯度达到 97%以上，右旋体含量在 2%以下。

二、通过旋光仪控制合成工艺中化学中间体 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵比旋度在 -26.0° 〜 -29.4° ，成品左旋卡尼汀中左旋异构体光学纯度可以达到 97%以上，右旋体含量在 2%以下。

三、通过使用本发明的手性衍生化试剂，灵敏检测中间体 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的光学纯度和其中的右旋异构体含量，控制该中间体的右旋异构体含量在 0〜3.6%，成品中的左旋卡尼汀光学纯度达到 97%以上，右旋体含量在 2%以下。

本发明所提及的左旋卡尼汀手性合成工艺如下：

以手性 S-环氧氯丙烷为原料，首先与三甲胺盐酸盐发生胺化生成 L-季胺盐（L-氯化 -3- 氯 -2-羟丙基三甲铵），季钹盐与氰化钠发生氰化反应生成 L-腈化物（L-氯化 -3-氰基 -2-羟丙基三甲铰），在浓盐酸条件下水解生成卡尼汀盐酸盐，经过电渗析除盐、浓缩、精制得到左旋卡尼汀成品。

本发明提及的左旋卡尼汀手性合成还包括以 L-季胺盐或 L-腈化物为起始原料通过以上工艺流程制备左旋卡尼汀。

反应方程式： '〇卜

化学反应式 I

本发明公开了灵敏检测 s-环氧氯丙垸的光学纯度的方法，其特征是使用手性衍生化试剂，通过气相色谱和手性柱，优选采用中泰科技公司 ZT 手性柱（0.25 X 0.5 X 20，生产系列号 —08-01-001 ), 进样口温度 120〜180°C，柱温 80〜100°C，检测器温度 200〜240°C，氮气做载气，分流比为 4: 1。

光学活性纯的式（Π) 化合物优选其固体结晶。也可以将光学活性纯式（II) 化合物以其固体结晶溶于溶剂中配置成一定浓度的溶液使用。其溶剂选自：乙醚、丙醚、四氢呋喃、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、丙腈、乙酸乙酯、正己垸、二氯甲垸、氯仿，或他们任意两种或多种的混合物；其溶液浓度为 0.01 〜100 mg/ml。特别优选乙腈为溶剂，浓度为 1-10 mg/ml。

本发明还公开了检测反应混合物中中间体 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的光学纯度和右旋异构体含量的方法，该检测方法包括以下步骤：

( 1 ) 制备衍生化试剂溶液：在避光条件下，含 D型-或 L型光学活性纯式（II) 化合物溶解于上述的溶剂中，配制成浓度为 0.01 〜100 mg/ml的溶液。光学活性纯式（II) 化合物优选（+ ) α -甲基 -6-甲氧基 -2-萘乙酰氯，溶剂优选乙腈，溶液的浓度优选 l-10 mg/ml。

(2 ) 配制供试品溶液：取适量供试品 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵，经过盐酸进行水解。优选腈化物和 30%盐酸的重量 /体积比为 27.5g_: 40ml, 在 70Ό〜80Ό保温 5小时，降温至室温，加入氨水调节溶液的 ΡΗ值至中性成供试品溶液。

(3 ) 配制对照品溶液：取适量消旋卡尼汀配制对照品溶液。

(4) 衍生化反应：取适量光学活性纯式（II) 化合物衍生化试剂，与含左旋卡尼汀（或右旋卡尼汀）的供试品溶液和卡尼汀对照品溶液混匀，在溶剂的存在下，在 20Τ 〜 95Ό的温度下，使上述步骤（1 ) 的衍生化试剂分别与上述步骤（2 ) 和（3 ) 的供试样品溶液和对照品溶液接触，发生衍生化反应，产生左旋卡尼汀和右旋卡尼汀衍生物。

(5 ) HPLC法测定：使用 HPLC法测定上述步骤（4) 中供试品溶液和对照品溶液中左旋卡尼汀和右旋卡尼汀衍生物的含量，并由此计算出供试品溶液中左旋异构体 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵和右旋异构体 D-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的含量。

本发明还公开了使用 HPLC法和手性衍生化试剂测定成品中左旋卡尼汀和右旋卡尼汀的含量，其中的供试品不需经过水解而直接配置成供试品溶液。

通过实施以上不同生产制备环节质量控制的关键技术，可以制得高纯度左旋卡尼汀的制备方法，其中左旋卡尼汀含量可以达到 97%以上，右旋卡尼汀含量可以控制在 2%以下，这可以有效控制人工合成的左旋卡尼汀中有害的右旋卡尼汀杂质对于人体的损害，而且通过对反应原料和反应物中产物和杂质的精确控制，大大地降低了成本，提高了产品的质量。附图说明- 图 1 消旋环氧氯丙垸光学纯度检测谱图

图 2 深圳亚王康丽 S-环氧氯丙垸光学纯度检测气相色谱图

图 3 上海科利生物医药 S-环氧氯丙烷光学纯度检测气相色谱图

图 4 加 10%消旋体后环氧氯丙垸光学纯度检测气相色谱图

图 5 加 20%消旋体后环氧氯丙烷光学纯度检测气相色谱图

图 6 用深圳的 S-环氧氯丙垸制备的左旋卡尼汀右旋体检测高效液相色谱图

图 7 用上海的 S-环氧氯丙烷制备的左旋卡尼汀右旋体检测高效液相色谱图具体实施方式

下述实施例仅用于解释本发明，而不是对本发明范围的限制。实施例 1 建立气相色谱检测环氧氯丙烷光学纯度方法

( 1 ) 手性气相色谱柱的选择

方法建立的过程中，选择了不同厂家生产的手性柱进行试验，不同色谱柱例表，见表 1。

表 1 环氧氯丙垸光学纯度检测手性柱选择实验数据

手性柱型号供应商手性柱参数分离度

CHIRALDEX B-PM 南京科捷分析仪器有限公司 30 X 0.25 0.21

FS-L1P0DEX® A 德国 MACHEREY-NAGEL公司 50 x 0.25 mm 1D 0.78 ZT手性柱中科安泰 0.25X0.5X20 1.87

CHIRALDEX B-DA 天津博能科技 30X0.25 0.12 通过对比试验，只有中科安泰的 ΖΤ手性柱能较好的分离环氧氯丙垸的左旋体和右旋体，分离度达到了 1.87，符合要求。

中科安泰的 ΖΤ手性柱的参数如下：

ΖΤ手性柱购自- -中科安泰；最高使用温度 20(TC_;

固定液一 ZKAT-chiralB; 执行标准： Q/ZKAT(H-2005;

生产系列号 ~08-01-001_; 货号 --802103-4;

(2) 色谱条件

进样温度： 150°C_; 柱温： 85 °C; 检测温度： 220 °C_;

载气： N2气；柱前压： 0.04MPa (15.9ml/min); 尾吹： 0.12MPa

¾气： O.lMPa ；空气： 0.08MPa;

分流速度： 47ml/min (用泡沫流量计测得）；分流比 =4: 1

进样浓度：样品用乙醚稀释 250倍；进样量： lwL

(3) 检测限

取消旋环氧氯丙垸，用乙醚作溶剂，依次配制下面五个浓度的样品溶液 0.004 μ l/ml、 0.008 μ 1/mK 0.016 ul/mK 0.024 ul/mK 0.032 ul/ml, 依次进样检测。

试验结果表明，样品浓度为 0.032μ1/ιη1的（R) -环氧氯丙垸色谱峰的信噪比约为 3: 1。即（R) -环氧氯丙烷的检测限浓度为 0.016μ l/ml，因进样量为 1 μ 1,所以其检测限为 1.6X 10"⁵

实施例 2 测定反应中间体（L-3—氰基一 2—羟丙基三甲铵）的右旋异构体含量

精密称取 L-3—氰基一 2—羟丙基三甲铵 27.5mg于 lOOmL容量瓶中，加 40μ L30%盐酸

75°C水解 5h后滴加氨水调节溶液的 PH值至 7.0，加水定容，再精密移取 10ml于 100ml容量瓶中，加水定容，作为供试品溶液。

另精密称量消旋卡尼汀 20mg于 lOOmL的容量瓶中，加水溶解，定容，再精密移取 lml 于 100ml容量瓶中，加水定容，作为对照品溶液。

分别精密吸取 30 L 对照品溶液、供试品溶液至 5mL 棕色容量瓶中，再各自加入

0.05mol/L碳酸缓冲液 (ρΗ=10.3) 30μί、吡啶乙腈溶液（每 lml 乙腈中含吡啶 5ul) lOOul 和 0.5%的衍生化试剂 100 wL，混匀，密塞于 60°C水浴中反应 90min，取出，用 0.05mol/L 乙酸缓冲液（pH=4.0) 稀释至刻度，过滤。分别精密吸取供试品和对照品衍生化反应后的溶液各 10 ul注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法分别以峰面积计算样品中右旋异构体的

HPLC检测方法如下：

Agilent 1100 型高效液相色谱仪;荧光检测器；色谱柱： C18 -ODS 柱（4.6 X I 50mm， 5 μ m); 总流速： lml/min; 流动相：以三乙胺缓冲溶液（磷酸 8ml，三乙胺 15ml, 加水 1500ml, 调 pH至 5.4) - -四氢呋喃混合液为流动相，时间梯度如下表 2:

表 2 HPLC时间梯度表

时间（min ) 三乙胺缓冲溶液（％) 四氢呋喃（％)

0 75 25

10 75 25

11 30 70

18 30 70

19 75 25

25 75 25 测得 L-3—氰基一 2—羟丙基三甲钹中右旋异构体的含量见表 3。

表 3 L-3—氰基一 2—羟丙基三甲铵的右旋异构体含量测定结果

1 2 3 4 5 6 平均值 RSD 右旋体的含量 (%) 1. 22 1. 26 1. 20 1. 25 1. 23 1. 23 1. 23 1. 74 % 实施例 3 以不同光学纯度的 S-环氧氯丙垸为原料制备左旋卡尼汀

步骤 1 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵的制备

先按照实施例 1方法测定原料 S-环氧氯丙烷中左旋异构体的含量。

其次，向 250ml三口烧瓶中加入三甲钹盐酸盐水溶液 60g，搅拌，冷却物料至 10〜20°C，滴加 S-环氧氯丙垸 35g ，滴加完毕，继续搅拌保温 2〜4小时，然后将反应液升温至 30〜70 °C，保温 2〜4小时。减压旋蒸至适量，冷冻析晶，烘干得 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铰 55.2克，收率 89.0%，熔点： 212.0〜215.6°C。使用旋光仪器测定旋光度。

步骤 2 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的制备

向 250ml三口烧瓶中加入 50克 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵，加水 40ml，搅拌，升温至 30°C〜 7(TC，加入氰化钠 48g，保温 4小时，减压浓缩，冷冻至 0Ό以下，抽滤烘干得 L-3-氰基 -2- 羟丙基三甲铵 43.8g，收率 92.1 % , 熔点 252.8〜253.4°C。步骤 3 左旋卡尼汀的制备

向 250ml单口烧瓶内加入 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵 27.5g和 30%盐酸 40ml，开搅拌，升温至 70°C〜80°C，保温 5小时。保温结束后， 70°C减压蒸馏去除过量的盐酸，蒸熘结束后降温至到 20Ό，加入 20%的氨水 20g，降温至 0'C，抽滤除去氯化铵，母液加入活性炭 3g，脱色后将料液除盐并减压蒸馏，蒸干后，加入 50ml乙醇 5(TC〜8(TC回流 1小时，回流结束后，降温至 20°C，滴加 125ml丙酮。滴加完毕后，抽滤烘干得左旋卡尼汀产品 18.6克，收率 75.4 %。

结果- 采用不同光学纯度的 S-环氧氯丙垸制备成品左旋卡尼汀实验数据见表 4:

表 4不同光学纯度的 S-环氧氯丙烷制备成品左旋卡尼汀实验数据序各种 S-环氧氯丙垸 S-环氧氯丙垸中左成品左旋卡尼汀中右旋成品中左旋体

收率 /% 号样品旋体的量 /% 体的量 /% 含量 /%

深圳亚王康利 S-环

1 1.73 0.42 99.1 62.4 氧氯丙烷

上海科利生物医药

2 0.38 0.26 99.5 62.8

S-环氧氯丙烷

加入 10»/。消旋体的

3 6.52 0.95 98.3 61.9

S-环氧氯丙烷

加入 20%消旋体的

4 1 1.58 1.92 97.1 62.0

S-环氧氯丙垸不同光学纯度的 S-环氧氯丙烷中左旋体和右旋体的量检测见附图 1一附图 5 ，左卡尼汀中右旋体检测高效液相色谱图见附图 6—附图 7。

附图 1 -图 5气相谱图对应的检测数据见表 5 - —表 9

表 5附图 1对应的检测数据

峰号峰名保留时间峰高峰面积含量

1 (R)-环氧氯丙烷 2.898 3829.946 16227.346 50.1291

2 (S)-环氧氯丙烷 3.163 3149.135 16143.754 49.8709 总计 6979.081 32371.100 100.0000 表 6附图 2对应的检测数据

峰号峰名保留时间峰高峰面积含量

1 (R)-环氧氯丙烷 2.890 203.576 633.192 1.7296

2 (S)-环氧氯丙垸 3.015 5645.121 35975.609 98.2704 总计 5848.697 36608.802 100.0000

表 7附图 3对应的检测数据

峰号峰名保留时间峰高峰面积含量

1 (R)-环氧氯丙垸 2.890 58.222 191.331 0.3775

2 (S)-环氧氯丙烷 2.990 7110.056 50491.469 99.6225 总计 7168.278 50682.800 100.0000

表 8附图 4对应的检测数据

峰号峰名保留时间峰高峰面积含量

1 (R)-环氧氯丙烷 2.757 732.945 2318.192 6.5203

2 (S)-环氧氯丙烷 2.915 5477.438 33235.359 93.4797 总计 6210.384 35553.552 100.0000

表 9附图 5对应的检测数据

峰号峰名保留时间峰高峰面积含量

1 (R)-环氧氯丙烷 2.848 1144.774 3841.400 11.574

2 (S)-环氧氯丙烷 3.023 5028.600 29348.500 88.4260 总计 6173.374 33189.900 100.0000 实施例 4 以 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵为原料制备左旋卡尼汀

参照实施例 3所用方法，歩骤 2采用不同比旋度的 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵制备成品左旋卡尼汀实验数据见表 10: 表 10 不同比旋度的 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵制备成品左旋卡尼汀实验数据

原料 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵成品左旋卡尼汀中右旋体的成品中左旋体含

序号收率 /% 比旋度量 /% 量 /%

1 -28.7° 0.42 99.0 69.8

2 -29.3 ° 0.23 99.6 70.5

3 -27.5 ° 0.94 98.1 70.1

4 -26. Γ 1.89 97.4 69.5 实施例 5 以 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵为原料制备左旋卡尼汀

参照实施例 3所用方法，步骤 3采用不同光学纯度的 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵制备成品左旋卡尼汀实验数据见表 11 : 表 11 不同光学纯度的 3-氰基 -2-羟丙基三甲铵制备成品左旋卡尼汀实验数据

L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铰中成品左旋卡尼汀中右旋体的成品中左旋体含

序号收率 /%

右旋体的量 /% W% W%

1 0.78 0.40 99.】 75.8

2 0.41 0.28 99.4 76.2

3 1.9 0.95 98.3 75.4

4 3.6 1.87 97.5 75.6

Claims

权利要求书

1. 一种制备高纯度左旋卡尼汀的方法，其特在在于，在以 S-环氧氯丙垸为原料人工合成左旋卡尼汀的工艺过程中，通过检测和控制手性原料和手性中间体的含量，从而得纯度按重量计高于 97%的左旋卡尼汀产物，其中右旋卡尼汀含量低于 2%，该方法包括下述步骤：

(1) 通过气相色谱和手性柱检测起始原料 S-环氧氯丙垸的光学异构体含量，控制 S-环氧氯丙垸中的左旋异构体含量在 0-12% W/W-,

(2) 通过旋光仪检测合成工艺中化学中间体 L-3-氯 -2-羟丙基三甲铵的比旋度，控制其比旋度的值在 -26.0° 〜- 29.4° ；

(3) 使用手性衍生化试剂检测中间体混合物中 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的光学纯度和其中右旋异构体的含量，控制该右旋异构体的含量在 0〜3.6%W/W;

其中所述手性衍生化试剂为光学活性纯的 D型或 L型下式（II) 化合物：

(II)

式中带 * 的碳原子是手性碳原子； R代表具有 1-6个碳原子的直链或支链垸基，或具有 6-10个碳原子的芳烷基，或具有 2-6个碳原子的直链或支链烯基或炔基，或具有 3-6个碳原子的环烷基； X代表卤素。

2. 权利要求 1所述的方法，其中在所述光学活性纯的式（II) 化合物中， R代表甲基、乙基、异丙基、丁基或苄基； X代表 C1或 Br。

3. 权利要求 1所述的方法，其中所述光学活性纯的式（II) 化合物是固体结晶形式。

4. 权利要求 3所述的方法，其中所述的式（II) 化合物选自（+ ) α -甲基 -6-甲氧基 -2-萘乙酰氯，（-) α -甲基 -6-甲氧基 -2-萘乙酰氯，（+ ) α -甲基 -6-乙氧基 -2-萘乙酰氯和（-) α -甲基 -6-乙氧基 -2-萘乙酰氯。

5. 权利要求 4所述的方法，其中所述的式（II) 化合物是（+ ) α -甲基 -6-甲氧基 -2-萘乙酰氯。

6. 权利要求 1-5任一项所述的方法，其中所述的衍生化试剂溶于溶剂中配置成 0.01 〜 100mg/ml浓度的溶液使用，其溶剂选自：乙醚、丙醚、四氢呋喃、丙酮、甲基乙基酮、乙腈、丙腈、乙酸乙酯、正己垸、二氯甲垸、氯仿，或他们任意两种或多种的混合物。

7. 权利要求 6所述的方法，其中所述的溶剂是乙腈，溶液浓度为 1 〜10mg/ml。

8. 权利要求 1所述的方法，其中步骤（3 ) 中检测中间体 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的光学纯度和其中的右旋异构体含量的方法包括以下步骤：

( 1 ) 制备衍生化试剂溶液：在避光条件下， D型或 L型光学活性纯的式（II) 化合物溶解于溶剂中，制备成浓度为 0.01 〜100 mg/ml的溶液；

( 3 ) 配制对照品溶液：取适量消旋卡尼汀配制对照品溶液；

(4) 衍生化反应：取适量光学活性纯式（II) 化合物衍生化试剂，与含左旋卡尼汀（或右旋卡尼汀）的供试品溶液和卡尼汀对照品溶液混匀，在溶剂的存在下，在 20°C〜95°C的温度下，使上述步骤（1 ) 的衍生化试剂分别与上述步骤（2) 和（3 ) 的供试样品溶液和对照品溶液接触，发生衍生化反应，产生左旋卡尼汀和右旋卡尼汀衍生物；

(5 ) 使用 HPLC法测定上述歩骤（4 ) 中供试品溶液和对照品溶液中左旋卡尼汀和右旋卡尼汀衍生物的含量，并由此计算出供试品溶液中左旋异构体 L-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵和右旋异构体 D-3-氰基 -2-羟丙基三甲铵的含量。