WO2007026928A1

WO2007026928A1 - 神経因性疼痛治療剤

Info

Publication number: WO2007026928A1
Application number: PCT/JP2006/317583
Authority: WO
Inventors: Tsutomu Tanabe
Original assignee: Japan Science And Technology Agency; National University Corporation Tokyo Medical And Dental University
Priority date: 2005-08-31
Filing date: 2006-08-30
Publication date: 2007-03-08
Also published as: JP2007063205A

Abstract

本発明は、難治性疾患である神経因性疼痛に対し優れた治療効果を有する神経因性疼痛治療剤を提供する。より具体的には、本発明は、ＰＩ３キナーゼ選択的阻害剤（特にウォルトマニン）を有効成分として含有する神経因性疼痛治療剤、ＰＩ３キナーゼ選択的阻害剤を有効成分として含有する神経因性疼痛治療用医薬組成物、ＰＩ３キナーゼ選択的阻害剤を用いる神経因性疼痛の治療方法などを提供する。

Description

明細書

神経因性疼痛治療剤技術分野

本発明は、神経因性疼痛に対して優れた疼痛抑制作用を有する神経因性疼痛治療剤、そのような治療剤を用いる神経因性疼痛の治療方法等に関する。背景技術

神経因性疼痛は末梢神経系または中枢神経系の損傷、機能障害などを原因として生じる痛みであり、モルヒネなどのォピオイド受容体作動薬が十分に奏効しない難治性疼痛である。 · 神経因性疼痛を伴う疾患としては、例えば、帯状疱疹後神経痛、三叉神経痛、糖尿病性神経痛、術後や外傷後の遷延痛など、痛覚過敏ゃァ口ディユアの症状を呈する疾患を挙げることができる。

従来の薬物療法において使用されてきた鎮痛剤としては、モルヒネに代表される中枢性オビオイド受容体作動薬、インドメタシンに代表される非ステ口ィド系抗炎症剤（N S A I D s) などが知られている。し力し、これらの鎮痛剤は神経因性疼痛に対して一般的に効果が小さく、通常の侵害受容性疼痛に有効である鎮痛剤（特に麻薬性鎮痛薬など）は特に効果が小さいことが知られている。そして、麻薬性鎮痛薬の神経因性疼痛に対する鎮痛効果の不十分さが神経因性疼痛の大きな特徴とされ、場合によってはこの特徴を利用して神経因性疼痛の診断を行なつている。

神経因性疼痛の発生には様々な要素が複雑に関係していると考えられている。これまで、神経因性疼痛の治療法としては、神経ブロックや、脊髄硬膜外電気刺激などの神経外科学的治療、三環系抗うつ薬、バクロフェン等の薬剤の腰部髄腔内投与などが知られている。し力し、これらの治療法には、十分な効果が得られなかったり、副作用を伴うという問題がある。また、外用剤として、カプサイシンクリームが、神経末端から放出される発痛物質サブスタンス Pを枯渴させ、疼痛を軽減させることにより、帯状疱疹後神経痛、乳房切除後の疼痛症候群に効果があるという報告もある。し力し、カブサイシンによる灼熱痛を—伴うという問題もあるなど、有用性や安全性の面で問題がある。このように、神経因性疼痛は難治性の疾患であり、未だ有効な治療法は確立されていない。

ホスファチジルイノシトール 3キナーゼ（P 1 3キナーゼ）はホスファチジルイノシトール（P I)のイノシトール環の D— 3位をリン酸化する脂質キナーゼの一種である。 P I 3キナーゼは、チロシンキナーゼ内蔵型の受容体ならぴに G蛋白共役型の受容体からの情報により活性化され、これらの受容体に結合するリガンドの各種の作用を伝達して細胞の生命活動に深く関与している。すなわち P I 3キナーゼは種々の細胞外からの刺激に応じて活性化されるシグナル因子であり一般的に、（1) タンパク質キナーゼなどを活性化することにより、核へのシグ 'ナル伝達を司る；（2) 抗アポトーシスのシグナル伝達を行なう；（3) 細胞骨格の調整を介して細胞の運動性や形態の変化に関与する；（4) 物質の輸送、分泌の調節に関与する、などの役割を果たしていることが判ってきている（Curr Opin Cell Biol. 17 :141-149, 2005) 。

—方、ウォルトマニンは四半世紀も前に単離精製された真菌ぺニシリゥムゥォルトマニンの代謝産物であり、 P I 3キナーゼに対して強力な阻害作用を有し、かつ強力な抗がん剤として効果のある物質として知られている（E n d o c r Re l a t C a n c e r. 8 ： 237-248, 2001) 。しかしながら、ゥオルトマニンは、高用量で実験動物において致死的毒性を有することが確認されており、使用量に注意する必要がある。

一方、これまでに P I 3キナーゼ選択的阻害剤であるウォルトマニンが神経因性疼痛に対して有効であることを示すあるいは示唆する報告はない。発明の開示

上記のように神経因性疼痛の治療剤に関する研究は種々行われているが、神経因性疼痛に有効な薬剤は未だ知られていないのが現状である。このような状況において、本発明の目的は、神経因性疼痛という難治性疼痛に優れた効果を発揮する新規な神経因性疼痛治療剤を提供することにある。

本発明者らは上記の課題を達成すべく独自の発想に基づき研究を進めたところ、難治性神経因性疼痛モデルにおいて、 P I 3キナーゼ（ホスファチジルイノシトール 3キナーゼ) 阻害剤が高い鎮痛効果を示すことを見出し、本発明を完成させた。

すなわち、本発明は、次のような神経因性疼痛治療剤、神経因性疼痛の治療のための医薬組成物、神経因性疼痛の治療方法などを提供する。

(1) ホスファチジルイノシトール 3キナーゼ（P 1 3キナーゼ）選択的阻害剤を有効成分として含有する神経因性疼痛治療剤。

(2) 前記 P I 3キナーゼ選択的阻害剤が、ウォルトマニン、 2- (4-モルホリニル）- 8—フエ二ノレ -4H-1—ベンゾピラン - 4 -オン（LY 2 940 0 2) 、 LY 9 8 0 4902及びそれらの塩から選択される上記（1) 記載の神経因性疼痛治療剤。 (3) 前記 P I 3キナーゼ選択的阻害剤がウォルトマニンである上記（1) 又は (2) に記載の神経因性疼痛治療剤。

(4) 神経因性疼痛が、帯状疱疹後神経痛、三叉神経痛、糖尿病性神経痛、がん性疼痛、術後や外傷後の遷延痛、痛覚過敏、ァロディニァ、開胸術後痛、 CRP S、多発性硬化症による疼痛、 A I D S、視床痛、脊髄障害による対麻痺性疼痛、無知覚性疼痛及び幻胺痛における神経因性疼痛から選択される一以上の症状である上記（1) 〜（3) のいずれかに記載の神経因性疼痛治療剤。

(5) P I 3キナーゼ選択的阻害剤及び薬学的に許容し得る担体を含有する神経因性疼痛治療のための医薬組成物。

(6) P I 3キナーゼ選択的阻害剤の有効量を哺乳動物に投与して神経因性疼痛を治療する方法。

(7) 神経因性疼痛治療剤の製造のための P I 3キナーゼ選択的阻害剤の使用。本発明の神経因性疼痛治療剤は、帯状疱疹後神経痛、三叉神経痛、糖尿病性神経痛、がん性疼痛、術後や外傷後の遷延痛、痛覚過敏、ァロディニァ等の症状を呈する神経因性疼痛の治療に有効である。図面の簡単な説明

図 1は、実施例 1の実験結果を示す図であって、疼痛過敏症のラットにゥオルトマニンを腹腔内投与し、機械刺激に対する痛覚閾値の変化を示した図である。図 2は、実施例 2の実験結果を示す図であって、疼痛過敏症のラットにゥオルトマニンを腹腔内投与し、熱刺激に対する痛覚閾値の変化を示した図である発明を実施するための最良の形態

以下、本発明を詳細に説明する。

本発明は、 P I 3キナーゼ選択的阻害剤を有効成分として含有する神経因性疼痛治療剤、 P I 3キナーゼ選択的阻害剤及び薬学的に許容できる担体を含有する神経因性疼痛の治療のための医薬組成物、 P I 3キナーゼ選択的阻害剤を用いる神経因性疼痛の治療方法を提供する。ウォルトマニンを代表とする P I 3キナーゼ選択的阻害剤は種々知られているが、驚くべきことに、本発明者は、この P I 3キナーゼ選択的阻害剤が単独で神経因性疼痛に対し治療効果があることを初めて見出したものである。

本発明において用いるウォルトマニンは、 P I 3キナーゼを選択的に阻害する化合物である。ここで、「P I 3キナーゼに対して選択的に阻害」とは、 P I 3 キナーゼの機能を特異的に阻害するが、その濃度では他のリン酸化酵素を阻害しないことをいう（例えば P I 4キナーゼゃミオシン軽鎖キナーゼでは阻害するのに 100倍濃度が必要）。 P I 3キナーゼに対する選択的阻害作用は、公知の手法、例えば、 J. B i o l . Ch em. 268 ： 25846 (1 993) に記載によって確認することができる。

本明細書において用いる「治療」なる用語は、一般的には、ヒト及ぴヒト以外の哺乳動物の症状を改善させることを意味する。また「改善」なる用語は、例えば、本発明の治療剤を投与しない場合と比較して、疾患の程度が軽減する場合及ぴ悪化しない場合を指し、予防という意味をも包含する。さらに「医薬組成物」なる用語は、本発明において有用な活性成分（ウォルトマニン等）と医薬の調製において用いられる担体等の添加物を含有する組成物を意味する。

本発明において用いられる P I 3キナーゼ（ホスファチジルイノシトール 3 キナーゼ）選択的阻害作用を有する化合物は、特に限定されないが、好ましくはゥオルトマニン (Wortmannin： C a l b i o c h em, L a J o 1 l a, C A : C a t . No. 68 16 75) 、 2- (4_モルホリ二ル）- 8-フエ-ル- 4H- 1-ベンゾピラン - 4 -オン ·塩酸塩 (2- (4-Morpholinyl) -8-phenyl-4H-l-benzopyran-4- one hydrochloride： LY294002 ； J. B i o l . C h e m. , 269, 5241， (1994) P I 3 K阻害性抗がん剤、日本ィーライリリー）、 LY 9804902及びそれらの薬学的に許容し得る塩等が上げられる。これらはいずれも公知であり、この中で特に好ましくはウォルトマニンである。ウォルトマニンは公知であり、ぺニシリウムウォルトマニンの培養液から単離された自然発生の化合物であって、その合成経路や基本構造は米国特許番号 5480906に示されており、あるいはメルクインデックス（Th e Me r c k I n d e x, 13 ^th E d i t i o n (2001) により参照することができる。

なお、本明細書中、「P I 3キナーゼ選択的阻害剤を有効成分として含有する」という用語は、 P I 3キナーゼ選択的阻害剤として公知の化合物およびこの化合物の医薬的に許容し得る形態（例えば、その塩、エステル、アミド、水和または溶媒和形態、ラセミ混合物、光学的に純粋な形態、プロドラッグ等) での使用を全て包含する意味で用いられる。

したがって、本発明において用いられる有効成分としての化合物はフリー体であっても、医薬的に許容される塩であってもよい。このような「塩」は、酸塩と塩基塩を含む。酸塩としては、たとえば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、クェン酸塩、酸性クェン酸塩、酒石酸塩、重酒石酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、ダルコン酸塩、糖酸塩、安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、ェタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、 p—トルエンスルホン酸塩、 1， 1 '一メチレン一ビス一（2—ヒドロキシ一 3—ナフトェ酸）塩などが挙げられる。塩基塩としては、たとえば、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカリ金属塩、力ルシゥム塩、マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アンモニゥム塩、 N— メチルダルカミン塩などの水溶性ァミン付加塩、低級アル力ノールァンモニゥム塩、薬学的に許容することができる有機ァミンの他の塩基から誘導される塩を挙げることができる。

本発明の神経因性疼痛治療剤及び組成物は、神経因性疼痛の治療に有効である。そのような神経因性疼痛の例としては、例えば、帯状疱疹後神経痛、三叉神経痛、糖尿病性神経痛、がん性疼痛、術後や外傷後の遷延痛、痛覚過敏、ァロディニァ、開胸術後痛、 C R P S、多発性硬化症による疼痛、 A I D S、視床痛、脊髄障害による対麻痺性疼痛、無知覚性疼痛、幻肢痛における神経因性疼痛などが含まれる。本発明の神経因性疼痛治療剤は、特に、痛覚過敏、ァロディニァの治療に有効である。

本発明の神経因性疼痛治療剤の投与形態は特に制限は無く、凝口的あるいは非経口的に投与することが出来る。本発明の神経因性疼痛治療剤の有効成分である P I 3キナーゼ選択的阻害剤は単独で配合されても良いが、これに製薬学的に許容しうる担体あるいは製剤用添加物を配合して製剤の形態で提供することもできる。この場合、本発明の有効成分である P I 3キナーゼ選択的阻害剤は、例えば、製剤中、 0 . 1〜9 9 . 9重量％含有することができる。

製薬学的に許容しうる担体あるいは添加剤としては、.例えば賦形剤、崩壊剤、崩壊補助剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、色素、希釈剤、溶解剤、溶解補助剤、等張化剤、 p H調整剤、安定化剤等を用いることが出来る。

経口投与に適する製剤の例としては、例えば散剤、錠剤、カプセル剤、細粒剤、顆粒剤、液剤またはシロップ剤等を挙げることが出来る。経口投与の場合、微晶質セルロース、クェン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸ジカリウム、ダリシンのような種々の賦形剤を、澱粉、好適にはとうもろこし、じやがいもまたはタピオ力の澱粉、およびアルギン酸やある種のケィ酸複塩のような種々の崩壌剤、およびポリビュルピロリドン、蔗糖、ゼラチン、アラビアゴムのような顆粒形成結合剤と共に使用することができる。また、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリゥム、タルク等の滑沢剤も錠剤形成に非常に有効であることが多レ、。同種の固体組成物をゼラチン力プセルに充填して使用することもできる。これに関連して好適な物質としてラクトースまたは乳糖の他、高分子量のポリエチレンダリコールを挙げることができる。経口投与用として水性懸濁液および/またはエリキシルにしたい場合、活性成分を各種の甘味料または香味料、着色料または染料と併用する他、必要であれば乳化剤および Zまたは懸濁化剤も併用し、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン等、およびそれらを組み合わせた希釈剤と共に使用することができる。

非経口投与に適する製剤としては、例えば注射剤、坐剤等を挙げることが出来る。非経口投与の場合、本発明の有効成分をゴマ油または落花生油のいずれかに溶解するか、あるいはプロピレングリコール水溶液に溶解した溶液を使用することができる。水溶液は必要に応じて適宜に緩衝し（好適には pH 8以上）、液体希釈剤をまず等張にする必要がある。このような水溶液は静脈内注射に適し、油性溶液は関節内注射、筋肉注射および皮下注射に適する。これらすベての溶液を無菌状態で製造するには、当業者に周知の標準的な製薬技術で容易に達成することができる。さらに、本発明の有効成分は皮膚など局所的に投与することも可能である。この場合は標準的な医薬慣行によりクリーム、ゼリー、ペースト、軟膏の形で局所投与するのが望ましい。

本発明の神経因性疼痛治療剤の投与量は特に限定されず、疼痛の種類、患者の年齢や症状、投与経路、治療の目的、併用薬剤の有無等の種々の条件に応じて適切な投与量を選択することが可能である。しかしながら、ウォルトマニンは、高容量で実験動物において致死的毒性を有することが確認されており、使用量に注意する必要がある。

通常経口投与の場合、 1日の投与量は，約 0. 0001から 5 Omg/k g、好ましくは約 0. 001から 1 OmgZk g、更に好ましくは約 0. 01から 1 mg/k gが適当であり，これを 1回であるいは 2乃至 4回に分けて投与する。静脈投与される場合は、 1日の投与量は，約 0. 0001から lmgZk g、好ましくは約 0. 0001から 0. lmg/k gが適当で、 1日 1回乃至複数回に分けて投与する。投与量は症状，年令,.性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。実施例

以下、本発明を実施例に基づいてより具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではない。

(使用した実験材料及び一般的実験方法）

(1) モデル動物

実験動物として、 6週齢の雄性ラット（体重： 198.5〜223.8g) に、 L5/L6脊髄神経に完全結紮を施し作製した疼痛過敏症モデルを用いた。 ( 2 ) 群分け、

機械刺激テストは、 Dynamic Planter Aesthesiometer (37400、ゥゴパジル社）、熱刺激テストは、足底熱刺激装置（Planter test 7370、ゥゴバジル社）を用いて、モデル動物の足の疼痛閾値をそれぞれ測定し、各実験日の投与前に測定した疼痛閾値が均一になるように群分けした。なお、機械刺激では、モデル動物の足の疼痛閾値が 8. 0g以上の動物は試験から除外し、熱刺激では、モデル足の疼痛閾値が 10秒以上の動物は試験から除外した。

( 3 ) 被験物質の調製

被験物質については、メノウ製乳鉢および乳棒を用いて、原末を粉砕したのち、媒体である 0. 5w/v%カルボキシメチルセルロースナトリウム（CM C— N a ) を徐々に加えて均一な懸濁液とした。投与液の濃度調整（0. 06, 0. 6及び 6. Omg/ml 液）は、メスシリンダーあるいはメスフラスコを用いて行ない、調整はすべて用時とした。

( 4 ) 投与方法

披験物質は、脊髄への直接作用の確認を目的としているが、脳関門を通過することが確認されているため、簡易な投与方法である腹腔内投与とした。注射筒及ぴ注射針を用いて、 5ml/kgの容量で腹腔内に投与した。実施例 1 (機械刺激方法）

疼痛過敏症モデルの雄性ラット（280. 9〜330. 2g) を 1群で 5匹使用した。ゥオルトマニン投与前と、投与後 30分、 60分及び 90分に、最大圧力を 15. 0g、最大圧力までに到達する時間： 20秒に設定した刺激装置を用いて左足躕の疼痛閾値を測定した。その結果を図 1に示す。図中、「* *」は Dunnett の多重検定法により Pく 0. 01 で優位差があること、「*」は Dunnett の多重検定法により Pく 0. 05で優位差があることを示す（以下同様）。

図 1に示すように、生理食塩液を投与した対照群では、投与後の最大疼痛閾値力 S 5. 3gを示したのに対し、ウォルトマニンを投与した群では（a ) 0. 3mg/k_g投与の場合、投与後の最大閾値が 6. 5g、 ( b ) 3mg/kg投与の場合、投与後の最大閾値が 9. 5gを示した。このように、ウォルトマニンの投与は、 3mg/kg投与で疼痛閾値を有意に上昇させ、神経因性疼痛における鎮痛効果が確認された。実施例 2 (熱刺激方法）

疼痛過敏症モデルの雄性ラット（315. 0〜383. 0g) を 1群で 5匹使用した。ゥオルトマニン投与前と、投与後 30分、 60分及び 90分に熱刺激強度 35に設定した足底熱刺激装置を用いて左足躕の疼痛閾値を測定した。その結果を図 2に示す。 • 図 2に示すように、生理食塩液を投与した対照群では、投与後の最大疼痛閾値が 7. 2秒を示したのに対し、ウォルトマニンを投与した群では、（a ) 0. 3mg/kg 投与の場合、投与後の最大閾値が 7. 5秒、（b ) 3mg/kg投与の場合、投与後の最大閾値が 10秒を示した。このように、ウォルトマニンの投与は、 3mg/kgの投与で疼痛閾値を有意に上昇させ、神経因性疼痛における鎮痛効果が確認された。

(考察）

上記実施例によって、 P I 3キナーゼ選択的阻害剤が神経因性疼痛の治療に有効であることが明らかとなつた。産業上の利用可能性

以上述ぺたように、本発明の P I 3キナーゼ選択的阻害剤を含有する神経因性疼痛治療剤は、種々の原因による神経因性疼痛の症状を改善する作用を有するので、神経因性疼痛の治療に有効に用いることができる。

Claims

請求の範囲

1. ホスファチジルイノシトール 3キナーゼ（ P I 3キナーゼ）選択的阻害剤を有効成分として含有する神経因性疼痛治療剤。

2. 前記 P I 3キナーゼ選択的阻害剤が、ウォルトマニン、 2_(4-モルホリニノレ）一 8 -フエニル— 4H—卜べンゾピラン— 4 -オン（LY294002) 、 LY980 4902及ぴそれらの塩から選択される前記請求項 1記載の神経因性疼痛治療剤。

3. 前記 P I 3キナーゼ選択的阻害剤がウォルトマニンである前記請求項 1又は 2に記載の神経因性疼痛治療剤。

4. 神経因性疼痛が、帯状疱疹後神経痛、三叉神経痛、''糖尿病性神経痛、がん性疼痛、術後や外傷後の遷延痛、痛覚過敏、ァロディニァ、開胸術後痛、 CRP S、多発性硬化症による疼痛、 AI DS、視床痛、脊髄障害による対麻痺性疼痛、無知覚性疼痛及び幻肢痛における神経因性疼痛から選択される一以上の症状である前記請求項 1〜 3のいずれかに記載の神経因性疼痛治療剤。

5. P I 3キナーゼ選択的阻害剤及び薬学的に許容し得る担体を含有する神経因性疼痛治療のための医薬組成物。

6. P I 3キナーゼ選択的阻害剤の有効量を哺乳動物に投与して神経因性疼痛を治療する方法。

7. 神経因性疼痛治療剤の製造のための P I 3キナーゼ選択的阻害剤の使用。