WO2004046163A1 - エルゴステロールの分離方法 - Google Patents

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insoluble organic
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Hideo Kawachi
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Kaneka Corporation
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane

Definitions

  • the present invention relates to a method for separating ergosterol.
  • Ergosterol is a useful sterol contained in microorganisms such as fungi, which is a precursor of vitamin D2. It is known that when this ergosterol is crystallized in a water-insoluble organic solvent, a granular aggregate having good solid-liquid separation properties can be obtained (Japanese Patent Laid-Open No. 2002-80492). However, in this case, the actual yield is significantly lower than the crystal yield expected from the solubility of ergosterol in the organic solvent, and the unrecovered portion is more flocculent than the filtrate after solid-liquid separation. There was a problem that it became fine crystals and gradually precipitated.
  • the present invention provides a solution to the above-mentioned problem of the deterioration of the yield, and by obtaining enolegosterol crystals in a high yield, it is preferable that the solidification of ergosterol having good solid-liquid separation property is achieved.
  • An object of the present invention is to provide an industrially advantageous method for separating ergosterol by allowing the aggregate to be obtained in a high yield.
  • the method for separating ergosterol according to the present invention is characterized by supplying water to a water-insoluble organic solvent solution. According to the present invention, generation of ergosterol crystals is promoted, and a high yield can be achieved. In addition, the amount of water to supply By controlling the concentration, the formation of ergosterol aggregates having good solid-liquid separation properties is promoted, and a high yield can be achieved. In addition, the ergosterol aggregate obtained when the amount of water is controlled contains an amorphous component in the crystal and has a crystallization rate of 5%.
  • An aggregate of about 0 to 90% can be obtained.
  • the present invention provides a method for separating ergosterol, wherein when ergosterol is separated from a water-insoluble organic solvent solution containing ergosterol, water is supplied to the solution to precipitate ergosterol. About.
  • the present invention also relates to the above method, wherein the amount of water to be supplied is within a range not separating into a water-insoluble organic solvent and two liquid phases.
  • the present invention provides a method of extracting ergosterol from a microorganism containing ergosterol with a water-insoluble organic solvent, the method comprising the steps of: The above method, wherein the solution is a solution that has been exchanged for a water-insoluble organic solvent after extraction with the above;
  • the water-insoluble organic solvent is hexane, heptane, octane or a mixture thereof;
  • the method of supplying water is a method of continuously or intermittently humidifying a gas phase portion of an apparatus for depositing ergosterol
  • the present invention relates to the above method, wherein ergosterol precipitated and separated is an aggregate having a crystallization ratio of 50% to 90%.
  • the present invention also relates to an ergosterol aggregate having a crystallization ratio of 50% to 90%.
  • the method for separating ergosterol of the present invention is characterized in that ergosterol is precipitated by supplying water to a water-insoluble organic solvent solution containing ergosterol.
  • Ergosterol is a useful sterol contained in microorganisms such as fungi, which is a precursor of vitamin D2.
  • Representative fungi include shiitake, Mushrooms such as maitake; yeast; rhizobia and the like found in the roots of legumes.
  • Other microorganisms include unicellular algae such as chlorella.
  • the water-insoluble organic solvent as referred to in the present invention refers to a substance whose general property is shown to be insoluble or hardly soluble in water according to, for example, chemical substance safety data.
  • Aliphatic hydrocarbons such as benzene, heptane and octane; aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene and xylene; and halogenated hydrocarbons such as methylene chloride, chloroform and carbon tetrachloride. These can be used alone or in combination of two or more. Among these, an aliphatic hydrocarbon having low solubility of ergosterol is preferred from the viewpoint that it is necessary to perform an operation of precipitating ergosterol. Among them, hexane, heptane, octane, and mixtures thereof are more preferable.
  • water-insoluble organic solvent solution containing ergosterol examples include, for example, a water-insoluble organic solvent solution in which only ergosterol is dissolved; a water-insoluble organic solvent solution from microorganisms such as fungi containing ergosterol.
  • solvents used for the extraction include, for example, water-soluble organic solvents such as acetone, ethanol and 2-propanol; and mixtures of these water-soluble organic solvents and the above-mentioned water-insoluble organic solvents.
  • the obtained extract When ergosterol is extracted from microorganisms such as fungi containing ergosterol with a water-insoluble organic solvent, the obtained extract may be used as it is in the next precipitation step, or After extraction with a more soluble water-insoluble organic solvent (aromatic hydrocarbon, halogenated hydrocarbon), it is converted into a less water-soluble organic solvent (aliphatic hydrocarbon) with lower ergosterol solubility. The exchanged solution may be used in the next precipitation step.
  • a more soluble water-insoluble organic solvent aromatic hydrocarbon, halogenated hydrocarbon
  • a cooling crystallization method in which the solubility is lowered by lowering the solution temperature to lower the solubility to precipitate the target substance, as is generally known, or an organic method.
  • Evaporation crystallization in which the target substance is precipitated by evaporating and concentrating the solvent, can be applied. It is preferable to use the cooling crystallization method rather than the evaporation crystallization method in which water evaporates and is lost.
  • the apparatus used for the precipitation of ergosterol is not particularly limited, but, for example, a batch type crystallizer using a jacketed stirring tank, or a liquid continuously supplied from one or more stirring tanks with a jacket. Examples include a continuous crystallizer for supplying and extracting, and a columnar continuous crystallizer.
  • water is supplied when ergosterol is precipitated, and the amount of supplied water is preferably in a range that does not separate into a water-insoluble organic solvent and two liquid phases.
  • the amount of water that does not separate into the water-insoluble organic solvent and the two liquid phases is the amount of a trace amount of water that can be dissolved in the water-insoluble organic solvent.
  • the amount of the water is related to the solubility of the water in the water-insoluble organic solvent and varies somewhat depending on the type of the water-insoluble organic solvent.For example, hexane is used as the water-insoluble organic solvent. In this case, the amount of water is preferably about 1 to 100 ppm based on hexane.
  • a method of supplying water by humidifying the gas phase portion (portion where gas exists) in the apparatus for precipitating ergosterol is used to maintain the liquid phase in a uniform state.
  • the method of humidifying the gas phase is not particularly limited as long as water can be supplied to such an extent that it does not separate into two liquid phases. For example, a method of directly feeding steam; a flow of nitrogen gas or the like passed through water A method of supplying atomized water generated by using an ultrasonic humidifier; a method of flowing a gas that has passed through the generated atomized water.
  • water is supplied by continuously or intermittently humidifying the gas phase part of the apparatus for precipitating ergosterol.
  • the crystallization temperature is preferably from 130 to 80 ° C, more preferably from 120 to 60 ° C.
  • the crystallization time is preferably 0.5 to 24 hours, more preferably 1 to 6 hours.
  • the cooling rate is preferably 0.05 to 3 ° C / min, more preferably 0.1 to 1 ° C.
  • the recovery of ergosterol is preferably at least 60%, more preferably at least 70%, further preferably at least 80%, particularly preferably at least 90%.
  • ergosterol precipitated and separated by controlling the amount of water to be supplied is a granular aggregate having good solid-liquid separation properties. It is not just a hydrate crystal, but an agglomerate containing hydrate crystals and an amorphous component in the crystal. Since the amorphous component does not contain water of crystallization, aggregates can be efficiently precipitated with a smaller amount of water than is necessary to obtain the entire amount as hydrate crystals, and the yield can be improved. . For this reason, it is preferable that the amorphous component is large, but if it is too large, it cannot be obtained as an aggregate. Therefore, the crystallization ratio of the ergosterol aggregate is preferably 50% or more and 90% or less, more preferably 60% or more and 80% or less.
  • the crystallization ratio can be measured by X-ray diffraction or the like, but can also be determined by measuring hydrated water by thermogravimetric analysis.
  • the value determined by measuring by thermogravimetric analysis is adopted as the crystallization ratio.
  • thermogravimetric analysis is performed on the naturally dried agglomerates so that water of crystallization is not lost, and the amount of crystal components in the agglomerates, that is, the crystallization ratio, can be obtained by measuring the water content. .
  • the crystallization ratio is determined as follows.
  • the particle size of the obtained granular aggregate is preferably at least 50 / xm, more preferably at least 100 ⁇ m.
  • the obtained crystals were granular aggregates with a particle size of 100 to 200 ⁇ m, had good solid-liquid separation properties, and had a good recovery (based on the amount charged and the solution concentration measured) of 78%.
  • a thermogravimetric analyzer (TG / DTA220, manufactured by Seiko Denshi Kogyo)
  • the temperature was increased from 30 ° C to 180 ° C at 10 ° C / min, the weight loss was measured, and the crystallization ratio was determined.
  • the crystallization ratio of this aggregate was 66%.
  • a hexane solution of ergosterol adjusted to a concentration of 4 g / L was continuously supplied to a tower-type continuous crystallizer having an inner diameter of 3 Omm and a height of 45 Omm.
  • the operation of the crystallizer was performed at a temperature at the outlet at the top of the tower of 10 ° C, a stirring rotation speed of 100 rpm, and a liquid supply speed of 5 m1 / min (The feed liquid was kept at about 50 ° C.)
  • the average residence time was 60 minutes.
  • the humidified nitrogen gas was passed through the trap tube filled with water from the nozzle through the gas phase at the upper end of the device.
  • a hexane solution containing enoregosterol at a concentration of 4 g / L (50 Om1) was filtered into a batch type crystallizer using a 500 ml separable flask, and charged from 45 ° C to 10 ° C with stirring. It was cooled at 0.2 ° C. During cooling, 0.5 ml of water was added. The added water could not be dissolved in hexane and remained as droplets until the end of cooling. After cooling, solid-liquid separation was performed, and the crystals were dried under reduced pressure and taken out. The recovery (measured on the basis of the charged amount and the solution concentration) was as good as 87%, but the crystals were needle-shaped. In addition, thermogravimetric analysis was carried out in the same manner as described above, and the crystallization ratio of this crystal was 95%.
  • ergosterol crystals can be obtained in high yield.
  • by controlling the amount of water supplied it is possible to obtain a high-yield granular ergosterol aggregate having good solid-liquid separation properties.

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Abstract

　本発明は、エルゴステロールを含有する非水溶性の有機溶媒溶液よりエルゴステロールを分離する際、当該溶液に水を供給し、エルゴステロールを析出させることを特徴とするエルゴステロールの分離方法である。本発明の方法を用いることにより、エルゴステロール結晶を高収率で得ることができる。さらに、供給する水分量を制御することにより、固液分離性の良い粒状のエルゴステロール凝集体を高収率で得ることができる。

Description

明細書
エルゴステロールの分離方法
技術分野
本発明は、 エルゴステロールの分離方法に関する。 背景技術
エルゴステロールは、 菌類等の微生物に含有されるステロールの一種で、 ビタ ミン D 2の前駆体である有用な物質である。 このエルゴステロールを非水溶性の 有機溶媒中で晶析すると、 固液分離性の良い粒状の凝集体が得られることが知ら れている （特開 2002 _ 80492号公報） 。 しかしながらこの場合、 ェルゴ ステロールの該有機溶媒への溶解度から期待される結晶の収率に対して実際の収 率は著しく低くなり、 回収されなかった分は固液分離後のろ液より綿状の微細結 晶となって次第に析出してくるという問題があった。 一方、 エルゴステロールは 水和物結晶を生成するということは知られていた （S. E. Hu 1 1 e t a 1. , Ac t a C r y s t. B 32 , 2370— 2373 (1976) ) 力 そのことと上記のような問題との関連は明らかではなかった。 発明の要約
本発明は上記のような収率の悪化という問題に解決法を提供し、 エノレゴステロ ール結晶を高収率で得られるようにすることによって、 好ましくは、 固液分離性 の良いエルゴステロールの凝集体を高収率で得られるようにすることによって、 工業的に有利なエルゴステロールの分離方法を提供するものである。
本発明者はエルゴステロールの晶析に関して種々の実験検討を行った結果、 ェ ルゴステロールの晶析時の水分量が収率に大きく影響していることを初めて見い だし、 この知見に基づいて本発明を完成するに至った。
本発明によるエルゴステロールの分離方法は、 非水溶性の有機溶媒溶液に水分 を供給することを特徴とするものである。 本発明によれば、 エルゴステロール結 晶の生成が促され、 高収率化を達成することができる。 さらに、 供給する水分量 を制御することによって、 固液分離性の良いエルゴステロールの凝集体の生成が 促され、 高収率化を達成することができる。 また、 水分量を制御した際に得られ るエルゴステロールの凝集体は、 結晶中にアモルファス成分を含む、 結晶化率 5
0〜9 0 %程度の凝集体とすることができる。
即ち、 本発明は、 エルゴステロールを含有する非水溶性の有機溶媒溶液よりェ ルゴステロールを分離する際、 当該溶液に水を供給し、 エルゴステロールを析出 させることを特徴とするエルゴステロールの分離方法に関する。
また、 本発明は、 供給する水の量が、 非水溶性の有機溶媒と 2液相に分離しな い範囲の量である上記方法に関する。
さらに、 本発明は、 エルゴステロールを含有する非水溶性の有機溶媒溶液が、 エルゴステ口ールを含有する微生物から非水溶性の有機溶媒によりエルゴステ口 ールを抽出した溶液、 又は、 他の溶媒で抽出後に非水溶性の有機溶媒に交換され た溶液である上記方法；
非水溶性の有機溶媒が、 へキサン、 ヘプタン、 オクタン又はこれらの混合物であ る上記方法；
水を供給する方法が、 エルゴステロールを析出させる装置の気相部を連続的ある いは間欠的に加湿する方法である上記方法；
析出し、 分離されるエルゴステロールが、 結晶化率 5 0 %以上 9 0 %以下の凝集 体である上記方法に関する。
また、 本発明は、 結晶化率が 5 0 %以上 9 0 %以下であるエルゴステロール凝 集体に関する。 発明の詳細な開示
以下に、 本発明について詳細に説明する。
本発明のエルゴステロールの分離方法は、 エルゴステロールを含有する非水溶 性の有機溶媒溶液に水を供給して、 エルゴステロールを析出させることを特徴と するものである。
エルゴステロールは、 菌類等の微生物に含有されるステロールの一種で、 ビタ ミン D 2の前駆体である有用な物質である。 代表的な菌類としては、 シィタケ、 マイタケ等のキノコ類；酵母；マメ科植物の根にみられる根粒菌等が挙げられる。 また、 その他の微生物としては、 クロレラ等の単細胞藻類等が挙げられる。 本発明でいう非水溶性の有機溶媒とは、 その一般的性質として例えば化学物質 安全性データ等で水に不溶あるいは難溶と示されるような物質を指し、 具体的に は、 例えば、 へキサン、 ヘプタン、 オクタン等の脂肪族炭化水素；ベンゼン、 ト ルェン、 キシレン等の芳香族炭化水素；塩化メチレン、 クロ口ホルム、 四塩化炭 素等のハロゲン化炭化水素等が挙げられる。 これらは 1種でも 2種以上でも用い ることができる。 このうち、 エルゴステロールを析出する操作を行う必要がある という観点から、 エルゴステロールの溶解性が低い脂肪族炭化水素が好ましい。 なかでも、 へキサン、 ヘプタン、 オクタン、 これらの混合物等がより好ましい。 エルゴステロールを含有する非水溶性の有機溶媒溶液としては、 例えば、 単に エルゴステロールのみが溶解している非水溶性の有機溶媒溶液； エルゴステロ一 ルを含有する菌類等の微生物から非水溶性の有機溶媒によりエルゴステ口ールを 抽出した抽出液；エルゴステロールを含有する菌類等の微生物から他の溶媒によ りエルゴステロールを抽出後、 非水溶性の有機溶媒に交換した溶液等が挙げられ る。
抽出に用いる他の溶媒としては、 例えば、 アセ トン、 エタノール、 2—プロパ ノール等の水溶性の有機溶媒； これら水溶性の有機溶媒と前述の非水溶性の有機 溶媒との混合物が挙げられる。
なお、 エルゴステロールを含有する菌類等の微生物から非水溶性の有機溶媒に よりエルゴステロールを抽出する場合、 得られた抽出液をそのまま次の析出工程 で用いてもよいし、 又は、 エルゴステロールの溶解性がより高い非水溶性の有機 溶媒 （芳香族炭化水素、 ハロゲン化炭化水素） で抽出した後、 これをエルゴステ ロールの溶解性がより低い非水溶性の有機溶媒 （脂肪族炭化水素） に交換した溶 液を、 次の析出工程で用いてもよい。
エルゴステロールを含有する非水溶性の有機溶媒溶液よりエルゴステロールを 析出させる際、 一般に知られているような溶液温度を下げることにより溶解度を 低下させて目的物を析出させる冷却晶析法や、 有機溶媒を蒸発させて濃縮するこ とにより目的物を析出させる蒸発晶析法が適用できるが、 本発明では、 共沸等に より水が蒸発し失われる蒸発晶析法よりも、 冷却晶析法を用いる方が好ましい。 エルゴステロールを析出させる際に用いる装置としては、 特に制限されないが、 例えば、 ジャケット付き撹袢槽を用いた回分式晶析装置、 1基又は複数のジャケ ット付き撹拌槽より連続的に液の供給 ·抜き取りを行う連続式晶析装置、 塔形の 連続晶析装置等が挙げられる。
本発明においては、 エルゴステロールを析出させる際に水を供給するものであ るが、 供給する水の量は、 非水溶性の有機溶媒と 2液相に分離しない範囲の量が 好ましい。 ここで、 非水溶性の有機溶媒と 2液相に分離しない範囲の水の量とは、 非水溶性の有機溶媒に溶解できる極微量の水の量である。 当該水の量は、 非水溶 性の有機溶媒への水の溶解度に関係し、 非水溶性の有機溶媒の種類によって多少 異なるものであるが、 例えば、 非水溶性の有機溶媒としてへキサンを用いる場合、 水の量は、 へキサンに対して 1〜 1 0 0 p p m程度であることが好ましい。 水の量が多すぎると、 非水溶性の有機溶媒の相と水相の 2液相となるので操作 しにくくなるほか、 エルゴステロールが針状の結晶となって固液分離性が低下す る傾向がある。 一方、 水を全く供給しないと、 結晶が析出しなくなって収率が低 下する。
なお、 水を液体で供給すると、 その供給量が最終的に 2液相に分離しない量で あっても、 液相が一時的に不均一な状態となり、 その際に水が局在する場所で針 状結晶を生成することがある。 それを防ぐために、 水の供給方法として、 ェルゴ ステロールを析出させる装置における気相部 （気体が存在する部分） を加湿する ことにより水を供給し、 液相を均一な状態に維持する方法をとることが好ましい。 気相部を加湿する方法としては、 2液相に分離しない程度に水を供給できるも のであれば特に制限されず、 例えば、 直接水蒸気を送り込む方法；水中を通過さ せた窒素ガス等を流通させておく方法；超音波加湿機等を用いて発生させた霧状 の水を供給する方法；発生させた霧状の水中を通過させたガスを流通させる方法 等が挙げられる。
また、 水は連続的あるいは間欠的に供給するのが好ましい。 より好ましくは、 エルゴステロールを析出させる装置の気相部を連続的あるいは間欠的に加湿する ことにより、 水を供給することである。 晶析温度としては、 好ましくは一 3 0〜8 0 °C、 より好ましくは一 2 0 ~ 6 0 °Cである。 晶析時間としては、 好ましくは 0 . 5〜2 4時間、 より好ましくは 1 〜6時間である。 また、 徐々に冷却して晶析する場合には、 冷却速度としては、 好ましくは 0 . 0 5〜3 °C/分、 より好ましくは 0 . 1〜1 °Cノ分である。 上述のようにしてエルゴステロールを析出させた後、 ろ過等により固液分離し て、 エルゴステロールを分離することができる。 また、 分離されたエルゴステロ —ルを、 常温又は加温下、 常圧又は減圧下で乾燥することにより、 エルゴステロ ールの結晶を得ることができる。
エルゴステロールの回収率は、 好ましくは 6 0 %以上、 より好ましくは 7 0 % 以上、 さらに好ましくは 8 0 %以上、 特に好ましくは 9 0 %以上である。
本発明のエルゴステロールの分離方法のうち、 特に、 供給する水分量を制御す ることにより析出、 分離されたエルゴステロールは、 固液分離性の良い粒状の凝 集体であるが、 一般に知られている単なる水和物結晶ではなく、 結晶中に、 水和 物結晶とアモルファス （非晶質） 成分を含む凝集体となる。 アモルファス成分は 結晶水を含有しないため、 全量を水和物結晶として得るために必要な水分量より も少ない水分量で、 効率よく凝集体を析出させることができ、 収率を向上させる ことができる。 そのため、 アモルファス成分は多いことが好ましいが、 あまりに 多いと凝集体として得ることができなくなる。 よって、 エルゴステロール凝集体 の結晶化率としては 5 0 %以上 9 0 %以下が好ましく、 より好ましくは 6 0 %以 上 8 0 %以下である。
上記のような特徴のある凝集体においても、 やはり結晶成分を構成するために 微量の水を必要とするので、 エルゴステロールを析出させる際に水を供給しない 場合には、 系中の水分が消費されてなくなり、 収率は上がらない。
上記結晶化率は、 X線回折等で測定できるが、 水和している水を熱重量分析に より測定して求めることもできる。 なお、 本明細書においては、 結晶化率は、 熱 重量分析により測定して求めた値を採用している。 つまり、 結晶水が失われない ように自然乾燥した凝集体について熱重量分析を行い、 その含水量を測定するこ とによって、 凝集体中の結晶成分の量、 即ち結晶化率を求めることができる。 具体的には、 以下のようにして結晶化率を求める。 自然乾燥した凝集体中の結 晶成分は 1水和物であり、 アモルファス成分は水を含まないと考えられるので、 凝集体中に存在する水のモル数 =結晶のモル数である。 また、 分析に供したサン プルの重量を W、 測定される重量減少量を Δ νとすると、
結晶のモル数 M c = Δ w÷水の分子量
エルゴステロールの全モル数 M= (W- Δ w) ÷エルゴステロールの分子量 で表され、 結晶化率 = (Mc/M) X I 00 として求める。
また、 得られた粒状の凝集体の粒径としては、 好ましくは 50 /xm以上、 より 好ましくは 100 μ m以上である。 発明を実施するための最良の形態
以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、 本発明はこれら実施例に限定され るものではない。
(実施例 1 )
50 Om 1セパラプルフラスコを用いた回分式晶析装置に、 濃度 4 gZLのェ ルゴステロール含有へキサン溶液 500m lをろ過して仕込み、 撹拌しながら液 温が 45でから 10°Cになるまで 0. 2 °C/分の冷却速度で冷却した。 35°Cか らは 25分おきに容器の上部を開放し、 40°Cの温水で加湿した空気をシリンジ で 100m lずつ送り込んだ。 冷却晶析終了後、 吸引ろ過装置により固液分離し、 乾燥して凝集体を得た。 得られた結晶は、 粒径 100〜 200 μ mの粒状の凝集 体で、 固液分離性は良く、 回収率 （仕込み量基準、 溶液濃度を測定） は 78%と 良好であった。 また、 熱重量分析装置 （セイコー電子工業製 TG/DTA220 ) を用いて、 30°Cから 180°Cまで 10°C/分で昇温して重量減少を測定し、 結晶化率を求めた結果、 この凝集体の結晶化率は 66%であった。
(実施例 2)
濃度 4 g/Lに調整したエルゴステロールのへキサン溶液を、 内径 3 Omm、 高さ 45 Ommの塔型連続晶析装置に連続的に供給した。 晶析装置の操作は、 塔 頂の抜き出し口温度 10 °C、 撹拌回転速度 100 r p m、 液供給速度 5 m 1 /分 (供給液は約 50°Cに保温） 、 平均滞留時間 60分で行った。 装置の上端の気相 部にはノズルより水を入れたトラップ管をくぐらせて加湿した窒素ガスを流通さ せておいた。 装置内で析出し、 沈降した結晶をサンプリングしたところ、 粒径 2 00 m程度の粒状の凝集体で固液分離性は良かった。 1時間運転後の回収率 （ 仕込み量基準、 装置出口の溶液濃度を測定） は 77%と良好であった。 また、 上 記と同様に熱重量分析を行ったところ、 この結晶の結晶化率は 60%であった。
(実施例 3)
500m lセパラブルフラスコを用いた回分式晶析装置に、 濃度 4 g/Lのェ ノレゴステロール含有へキサン溶液 50 Om 1をろ過して仕込み、 撹拌しながら 4 5°Cから 10°Cまで 0. 2 °Cノ分で冷却した。 冷却途中で水 0. 5m lを添加し た。 添加した水はへキサンには溶解できず、 液滴として冷却終了まで存在した。 冷却終了後、 固液分離し、 結晶を減圧乾燥して取り出した。 回収率 （仕込み量基 準、 溶液濃度を測定） は 87%と良好であつたが、 結晶は針状となった。 また、 上記と同様に熱重量分析を行ったところ、 この結晶の結晶化率は 95%であった。
(比較例 1 )
500m lセパラブルフラスコを用いた回分式晶析装置に、 濃度 4 g/Lのェ ルゴステロール含有へキサン溶液 500m lをろ過して仕込み、 撹拌しながら 4 5°Cから 1 0°Cまで 0. 2 °CZ分で冷却した。 装置は冷却終了まで密閉した状態 とした。 冷却終了後、 固液分離し、 結晶を減圧乾燥して取り出した。 得られた結 晶は約 200 /xmの粒状の凝集体で、 固液分離性は良かったが、 回収率 （仕込み 量基準、 溶液濃度を測定） は 53%と悪かった。 産業上の利用可能性
本発明によれば、 エルゴステロール結晶を高収率で得ることが可能となる。 ま た、 供給する水分量を制御することにより、 固液分離性の良い粒状のエルゴステ ロール凝集体を高収率で得ることが可能となる。

Claims

請求の範囲
1 . エルゴステロールを含有する非水溶性の有機溶媒溶液よりエルゴステロ一 ルを分離する際、 当該溶液に水を供給し、 エルゴステロールを析出させることを 特徴とするエルゴステロールの分離方法。
2 . 供給する水の量が、 非水溶性の有機溶媒と 2液相に分離しない範囲の量で あることを特徴とする請求の範囲第 1項記載の方法。
3 . エルゴステロールを含有する非水溶性の有機溶媒溶液が、 エルゴステロ一 ルを含有する微生物から非水溶性の有機溶媒によりヱルゴステロールを抽出した 溶液、 又は、 他の溶媒で抽出後に非水溶性の有機溶媒に交換された溶液であるこ とを特徴とする請求の範囲第 1又は 2項記載の方法。
4 . 非水溶性の有機溶媒が、 へキサン、 ヘプタン、 オクタン又はこれらの混合 物であることを特徴とする請求の範囲第 1〜 3項のいずれかに記載の方法。
5 . 水を供給する方法が、 エルゴステロールを析出させる装置の気相部を連続 的あるいは間欠的に加湿する方法であることを特徴とする請求の範囲第 1〜 4項 のいずれかに記載の方法。
6 . 析出し、 分離されるエルゴステロールが、 結晶化率 5 0 %以上 9 0 %以下 の凝集体であることを特徴とする請求の範囲第 1〜 5項のいずれかに記載の方法。
7 . 結晶化率が 5 0 %以上 9 0 %以下であるエルゴステロール凝集体
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