WO2001021582A1

WO2001021582A1 - Biphenylderivate als nhe-3-inhibitoren

Info

Publication number: WO2001021582A1
Application number: PCT/EP2000/008616
Authority: WO
Inventors: Dieter Dorsch; Peter Raddatz; Norbert Beier; Claudia Wilm
Original assignee: Merck Patent Gmbh
Priority date: 1999-09-22
Filing date: 2000-09-04
Publication date: 2001-03-29
Also published as: MXPA02003087A; SK3342002A3; AU7649700A; EP1214291A1; NO20021407L; PL355097A1; ZA200203095B; HUP0202891A3; CZ2002815A3; CA2387529A1; JP2004500338A; KR20020033818A; NO20021407D0; CN1555356A; BR0014199A; DE19945302A1; HUP0202891A2

Abstract

Verbindungen der Formel (I), worin X, R?1, R2, R3, R4 und R5¿ die in Patentanspruch 1 angegebene Bedeutung haben, sind Inhibitoren des Natrium/Protonen-Austauschers Subtyp 3 (NHE-3).

Description

Biphenylderivate als NHE-3-lnhibitoren

ie Erfindung betrifft Verbindungen der Formel I

worin

R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C(=NH)-NH₂, das auch einfach durch -COA, -CO-[C(R⁶)₂]_n-Ar, -COOA,

-OH oder durch eine konventionelle Aminoschutzgruppe substituiert sein kann,

NH-C(=NH)-NH₂, -CO-N=C(NH₂)₂,

R², R³, R⁵ jeweils unabhängig voneinander H, A, OR⁶, N(R⁶)₂, NO₂, CN, Hai, NHCOA, NHCOAr, NHSO₂A, NHSO₂Ar, COOR^e CON(R⁶)₂, CONHAr, COR⁶, COAr, S(O)_nA, S(O)_nAr,

-0-[C(R⁶)₂]_m-COOR⁶, -[C(R⁶)₂]_p-COOR⁶, -O-[C(R⁶)₂]_π C COONN((RR⁶⁶))₂₂,, --[[CC((RR⁶⁶))₂₂]]p_p--CCOONr (R⁶)₂, -O-[C(R⁶)₂]_m-CONHAr, oder -[C(R⁶)₂]_p-CONHAr,

X -[C(R⁶)₂]_n-, -CR⁶=CR⁶-, -[C(R⁶)₂]_n-O-, -O-[C(R⁶)₂]_n- -COO-, -OOC-, -CONR⁶- oder -NR⁶CO-,

R^c H, A oder Benzyl, A Alkyl mit 1-20 C-Atomen, worin eine oder zwei CH₂-Gruppen durch O- oder S-Atome oder durch -CR⁶=CR⁶-Gruppen und/oder 1-7 H-Atome durch F ersetzt sein können,

Ar unsubstituiertes oder ein-, zwei- oder dreifach durch A, Ar',

OR⁶, OAr^*, N(R⁶)₂, NO₂, CN, Hai, NHCOA, NHCOAr',

NHS0₂A, NHSO₂Ar', COOR⁶, CON(R⁶)₂, CONHAr', COR⁶, COAr', S(O)_nA oder S(O)_nAr' substituiertes Phenyl oder 0 Naphthyl.

Ar' unsubstituiertes oder ein-, zwei- oder dreifach durch A, OR⁶,

N(R⁶)₂, NO₂, CN, Hai, NHCOA, COOR⁶, CON(R⁶)₂, COR⁶ _. ,- oder S(O)_nA substituiertes Phenyl oder Naphthyl,

Hai F, Cl, Br oder I,

n 0, 1 oder 2,

20

m 1 oder 2,

p 1 oder 2 bedeutet,

25 sowie deren Salze und Solvate als NHE-3-lnhιbιtoren

Andere Inhibitoren des Natnum/Protonen-Austauschers Subtyp 3 sind z.B in der EP 0 825 178 beschrieben

30

Der Erfindung lag die Aufgabe zugrunde, neue Verbindungen mit wertvollen Eigenschaften aufzufinden, insbesondere solche, die zur Herstellung von Arzneimitteln verwendet werden können

35 In der DE 19819548 ist beschrieben, daß die Verbindungen der Formel I und ihre Salze Faktor Xa inhibierende Eigenschaften aufweisen und daher zur Bekämpfung und Verhütung von thromboembo schen Erkrankungen wie Thrombose, myocardialem Infarkt, Arteπosklerose, Entzündungen, Apoplexie, Angina pectons, Restenose nach Angioplastie und Claudicatio intermittens eingesetzt werden können

Überraschenderweise wurde gefunden, daß die Verbindungen der Formel I und ihre Salze bei guter Vertraglichkeit den Natπum/Protoπen-Aus- tauscher Subtyp 3 inhibieren

Die Verbindungen der Formel I können als Arzneimittelwirkstoffe in der Human- und Veterinärmedizin eingesetzt werden

Es ist bekannt, daß der Na⁺/H⁺-Austauscher eine Familie mit mindestens 6 unterschiedlichen Isoformen darstellt (NHE-1 bis NHE-6), die nun alle klo- niert sind Wahrend der Subtyp NHE-1 ubiquitar im ganzen Korper in allen Geweben verteilt ist, werden die übrigen NHE-Subtypen selektiv in spezifischen Organen wie in der Niere oder in der Lumenwand und Kontralumi- nalwand des Dünndarms expπmiert Diese Verteilung spiegelt die spezifi- sehen Funktionen wider, denen die verschiedenen Isoformen dienen, nämlich einerseits die Regulation des intrazellularen pH-Werts und des Zellvolumens durch den Subtyp NHE-1 und andererseits die Na⁺-Auf- nahme und -Wiederaufnahme in Darm und Niere durch die Isoformen NHE-2 bzw NHE-3 Die Isoform NHE-4 wurde hauptsächlich im Magen gefunden Die Expression von NHE-5 beschrankt sich auf Gehirn und Neuronengewebe NHE-6 stellt diejenige Isoform dar, die den Natnumproto- nenaustauscher in den Mitochondπen bildet

Die Isoform NHE-3 wird insbesondere in der Apicalmembran der proxima- len Nierentubuli exprimiert, ein NHE-3-Hemmstoff übt daher u a eine Nie- renschutzwirkung aus

Die therapeutische Verwendung eines selektiven Hemmstoffs für NHE-3-

Isoformen ist vielseitig NHE-3-Hemmstoffe hemmen oder verringern Ge- webeschaden und Zellnekrosen nach pathophysiologischen hypoxischen und ischemischen Ereignissen, die zu einer Aktivierung der NHE-Aktivitat fuhren, wie dies wahrend Nierenischamie oder wahrend der Entfernung, des Transports und der Reperfusion einer Niere bei der Nierenverpflan

Die Verbindungen der Formel I wirken blutdrucksenkend und eignen sich als Arzneimittelwirkstoffe zur Behandlung der Hypertonie Weiterhin eignen sie sich als Diuretika

Die Verbindungen der Formel I wirken alleine oder in Verbindung mit NHE- Inhibitoren anderer Subtypspezifitat antiischamisch und können verwendet werden bei Thrombosen, Atherosklerose, Gefaßspasmen, zum Schutz von

Organen, z B Niere und Leber, vor und wahrend Operationen, sowie bei chronischem oder akutem Nierenversagen

Weiterhin können sie verwendet werden zur Behandlung von Schlaganfall, des Hirnodems, Ischämien des Nervensystems, verschiedenen Formen des Schocks sowie zur Verbesserung des Atemantriebs bei beispielsweise folgenden Zustanden zentrale Schlafapnoen, plötzlicher Kindstod, postoperative Hypoxie und anderen Atemstorungen

Durch die Kombination mit einem Carboanhydrase-Hemmer kann die At- mungstatigkeit weiter verbessert werden Die Verbindungen der Formel I wirken inhibierend auf die Pro ferationen von Zellen, beispielsweise der Fibroblasten-Zellproliferation und der Pro- liferation der glatten Gefaßmuskelzellen und können daher zur Behandlung von Krankheiten verwendet werden, bei denen die Zellpro feration eine primäre oder sekundäre Ursache darstellt Die Verbindungen der Formel I können verwendet werden gegen diabeti- sche Spatkomplikationen, Krebserkrankungen, fibrotische Erkrankungen, endotheliale Disfunktion, Organhypertrophien und -hyperplasien, insbesondere bei Prostatahyperplasie bzw Prostatahypertrophie Ferner eignen sie sich als Diagnostika zur Bestimmung und Unterschei- duπg bestimmter Formen der Hypertonie, der Atherosklerose, des Diabetes und proliferativer Erkrankungen

Da die Verbindungen der Formel I auch den Spiegel der Serumlipoprotei- ne vorteilhaft beeinflussen, können sie zur Behandlung eines erhöhten Blutfettspiegels alleine oder in Kombination mit anderen Arzneimitteln ein- gesetzt werden Gegenstand der Erfindung ist die Verwendung von Verbindungen der Formel I nach Anspruch 1 und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Thrombosen, ischämischen Zuständen des Herzens, des peripheren und zentralen Nervensystems und des Schlaganfalls, ischämischen Zuständen peripherer Organe und Gliedmaßen und zur Behandlung von Schockzuständen.

Gegenstand der Erfindung ist weiter die Verwendung von Verbindungen der Formel I nach Anspruch 1 und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate zur Herstellung eines Arzneimittels zum Einsatz bei chirurgischen Operationen und Organtransplantationen und zur Konservierung und Lagerung von Transplantaten für chirurgische Maßnahmen.

Gegenstand der Erfindung ist auch die Verwendung von Verbindungen der

Formel I nach Anspruch 1 und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Krankheiten, bei denen die Zeilproliferation eine primäre oder sekundäre Ursache darstellt, zur Behandlung oder Prophylaxe von Störungen des Fettstoffwechsels oder gestörtem Atemantrieb.

Gegenstand der Erfindung ist ferner die Verwendung von Verbindungen der Formel I nach Anspruch 1 und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von ischämischer Niere, ischämischen Darmerkrankungen oder zur Prophylaxe von akutem oder chronischen Nierenerkrankungen.

Methoden zur Identifizierung von Substanzen, die den Natrium/Protonen- Austauscher Substyp 3 inhibieren, sind z.B. in US 5,871 ,919 beschrieben.

Für alle Reste in den Verbindungen der Formel I, die mehrfach auftreten, wie z.B. R⁶, gilt, daß deren Bedeutungen unabhängig voneinander sind.

Unter Hydraten und Solvaten versteht man z.B. die Hemi-, Mono- oder Dihydrate, unter Solvaten z.B. Alkoholadditionsverbindungen wie z.B. mit

Methanol oder Ethanol. In den vorstehenden Formeln bedeutet A Alkyl, ist linear oder verzweigt, und hat 1 bis 20, vorzugsweise 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 oder

12 C-Atome. A bedeutet vorzugsweise Methyl, weiterhin Ethyl, Propyl, Iso- propyl, Butyl, Isobutyl, sek.-Butyl oder tert.-Butyl, ferner auch Pentyl, 1-, 2- oder 3-Methylbutyl, 1 ,1- , 1 ,2- oder 2,2-Dimethylpropyl, 1-Ethylpropyl, He- xyl, 1- , 2- , 3- oder 4-Methylpentyl, 1 ,1- , 1 ,2- , 1 ,3- , 2,2- , 2,3- oder 3,3- Dimethylbutyl, 1- oder 2-Ethylbutyl, 1-Ethyl-1-methylpropyl, 1-Ethyl-2- methylpropyl, 1 ,1 ,2- oder 1 ,2,2-Trimethylpropyl, Heptyl, Octyl, Nonyl oder Decyl.

A bedeutet weiterhin z.B. Trifluormethyl, Pentafluorethyl, Allyl oder Crotyl.

COR⁶ ist Acyl und bedeutet vorzugsweise Formyl, Acetyl, Propionyl, ferner auch Butyryl, Pentanoyl oder Hexanoyl. COOR⁶ bedeutet vorzugsweise Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Pro- poxycarbonyl oder Butoxycarbonyl.

Hai bedeutet vorzugsweise F, Cl oder Br, aber auch I.

R², R³ und R⁵ bedeuten, jeweils unabhängig voneinander, vorzugsweise H,

Fluor, Chlor, Brom, lod, Hydroxy, Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Nitro, Amino, Methylamino, Dimethylamino, Ethylamino, Diethylamino, Acetamido, Sul- fonamido, Methylsulfonamido, Phenyisulfonamido, Methylthio, Ethylthio, Methylsulfinyl, Ethylsulfinyl, Methylsulfonyl, Ethylsulfonyl, Phenylsulfinyl, Phenylsulfonyl, Cyan, Carboxy, Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Car- boxymethoxy, Methoxycarbonylmethoxy, Carboxymethyl, Methoxycar- bonylmethyl, Aminocarbonylmethoxy, Aminocarbonylmethyl, N-Phenyl- aminocarbonylmethoxy, N-Phenylaminocarbonylmethyl, ferner auch Acyl oder Benzoyl.

9 c Insbesondere bedeuten R , R H.

R³ bedeutet insbesondere z.B. H, COOA oder -OCH₂COOR⁶, wobei R⁶ H oder Alkyl mit 1-4 C-Atomen bedeutet.

R^δ bedeutet H, A oder Benzyl, insbesondere jedoch H oder Alkyl mit 1-4 C- Atomen.

X bedeutet vorzugsweise z.B. -CH₂-, -CH=CH-, -CH₂O-, -O-CH₂-, -COO-, -OOC-, -CONH- oder -NHCO-; ganz besonders bevorzugt ist -CH₂O-, -O- CH₂- oder -CH₂-CH₂-.

Ar bedeutet vorzugsweise unsubstituiertes Phenyl oder Naphthyl, weiterhin vorzugsweise z.B. durch A, Fluor, Chlor, Brom, lod, Hydroxy, Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Butoxy, Pentyloxy, Hexyloxy, Benzyloxy, Phenethyloxy, Methylthio, Ethylthio, Methylsulfinyl, Ethylsulfinyl, Methylsulfonyl, Ethyl- sulfonyl, Phenylsuifinyl, Phenylsulfonyl, Nitro, Amino, Methylamino, Ethyl- amino, Dimethylamino, Diethylamino, Formamido, Acetamido, Propionyl- amino, Butyrylamino, Methylsulfonamido, Ethylsulfonamido, Propylsulfon- amido, Butylsulfonamido, Phenylsulfonamido, (4-Methylphenyl)-sulfon- amido, Carboxymethoxy, Carboxyethoxy, Methoxycarbonylmethoxy, Me- thoxycarbonylethoxy, Hydroxymethoxy, Hydroxyethoxy, Methoxyethoxy, Carboxy, Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, Cyan, Phenylaminocarbonyl, Acyl oder Benzoyl mono-, di- oder trisubstituiertes Phenyl oder Naphthyl, ferner auch Biphenyl.

Ar bedeutet daher bevorzugt z.B. o-, m- oder p-Tolyl, o-, m- oder p-Ethyl- phenyl, o-, m- oder p-Propylphenyl, o-, m- oder p-lsopropylphenyl, o-, m- oder p-tert.-Butylphenyl, o-, m- oder p-Hydroxyphenyl, o-, m- oder p-Nitro- phenyl, o-, m- oder p-Aminophenyl, o-, m- oder p-(N-Methylamino)-phenyl, o-, m- oder p-Acetamidophenyl, o-, m- oder p-Methoxyphenyl, o-, m- oder p-Ethoxyphenyl, o-, m- oder p-Carboxyphenyl, o-, m- oder p-Methoxycar- bonylphenyl, o-, m- oder p-(N,N-Dimethylamino)-phenyl, o-, m- oder p-(N- Ethylamino)-phenyl, o-, m- oder p-(N,N-Diethylamino)-phenyl, o-, m- oder p-Acetylphenyl, o-, m- oder p-Formylphenyl, o-, m- oder p-Fluorphenyl, o-, m- oder p-Bromphenyl, o-, m- oder p- Chlorphenyl, o-, m- oder p-Methyl- sulfonylphenyl, o-, m- oder p-(Phenylsulfonamido)-phenyl, o-, m- oder p- (Methylsulfonamido)-phenyl, o-, m- oder p-Methylthiophenyl, weiter bevorzugt 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- oder 3,5-Difluorphenyl, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- oder 3,5-Dichlorphenyl, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- oder 3,5-Dibrom- phenyl, 2,4- oder 2,5-Dinitrophenyl, 2,5- oder 3,4-Dimethoxyphenyl, 3- Nitro-4-chlorphenyl, 3-Amino-4-chlor-, 2-Amino-3-chlor-, 2-Amino-4-chlor-, 2-Amino-5-chlor- oder 2-Amino-6-chlorphenyl, 2-Nitro-4-N,N-dimethyl- amino- oder 3-Nitro-4-N,N-dimethylaminophenyl, 2,3-Diaminophenyl, 2,3,4-, 2,3,5-, 2,3,6-, 2,4,6- oder 3,4,5-Thchlorphenyl, 2,4,6-Trimethoxy- phenyl, 2-Hydroxy-3,5-dichlorphenyl, p-lodphenyl, 3,6-Dichlor-4-amino- phenyl, 4-Fluor-3-chlorphenyl, 2-Fluor-4-bromphenyl, 2,5-Difluor-4-brom- phenyl, 3-Brom-6-methoxyphenyl, 3-Chlor-6-methoxyphenyl, 3-Chlor-4- acetamidophenyl, 3-Fluor-4-methoxyphenyl, 3-Amino-6-methylphenyl, 3- Chlor-4-acetamidophenyl oder 2,5-Dimethyl-4-chlorphenyl.

Ar' bedeutet insbesondere z.B. Phenyl oder Naphthyl, ferner bevorzugt z.B. o-, m- oder p-Tolyl, o-, m- oder p-Ethylphenyl, o-, m- oder p-Propyl- phenyl, o-, m- oder p-lsopropylphenyl, o-, m- oder p-tert.-Butylphenyl, o-, m- oder p-Hydroxyphenyl. o-, m- oder p-Nitrophenyl, o-, m- oder p-Aminophenyl, o-, m- oder p-(N-Methylamino)-phenyl, o-, m- oder p-Acetamidophenyl, o-, m- oder p-Methoxyphenyl, o-, m- oder p-Ethoxyphenyl, o-, m- oder p-Carboxyphenyl, o-, m- oder p-Methoxycarbonylphenyl, o-, m- oder p-(N,N-Dimethylamino)-phenyl, o-, m- oder p-(N-Ethylamino)-phenyl, o-, m- oder p-(N,N-Diethyiamino)-phenyl, o-, m- oder p-Acetylphenyl, o-, m- oder p-Formylphenyl, o-, m- oder p-Fluorphenyl, o-, m- oder p-Bromphenyl, o-, m- oder p- Chlorphenyl oder o-, m- oder p-Methylsulfonylphenyl.

Dementsprechend ist Gegenstand der Erfindung insbesondere die Ver- wendung derjenigen Verbindungen der Formel I, in denen mindestens einer der genannten Reste eine der vorstehend angegebenen bevorzugten Bedeutungen hat. Einige bevorzugte Gruppen von Verbindungen können durch die folgenden Teilformeln la bis li ausgedrückt werden, die der Formel I entsprechen und worin die nicht näher bezeichneten Reste die bei der Formel I angegebene Bedeutung haben, worin jedoch

in la R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C(=NH)-NH₂, das auch einfach durch OH substituiert sein kann oder -CO-N=C(NH₂)₂ bedeuten; in Ib R², R⁵ H bedeuten; in Ic R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C(=NH)-NH₂, das auch einfach durch OH substituiert sein kann oder

-CO-N=C(NH₂)₂, R², R⁵ H und

R³ H oder COOR⁶, bedeuten, in Id R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C(=NH)-NH₂, das auch einfach durch OH substituiert sein kann oder

-CO-N=C(NH₂)₂, R², R⁵ H und

R³ H, COOR⁶ oder -O-(CH₂)COOR⁶, bedeuten, in le X -CH₂-O- oder -O-CH₂- bedeuten, in If R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C(=NH)-NH₂, das auch einfach durch OH substituiert sein kann oder -CO-N=C(NH₂)₂, R², R⁵ H,

R³ H oder COOR⁶ und

X -CH₂-0- oder -O-CH₂- bedeuten, in Ig R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C(=NH)-NH₂, das auch einfach durch OH substituiert sein kann oder -CO-N=C(NH₂)₂, R², R⁵ H,

R³ H, COOR⁶ oder -O-(CH₂)COOR⁶,und

-CH2-O-, -O-CH2- oder -CH₂-CH₂- bedeuten, in Ih R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C(=NH)-NH₂, das auch einfach durch OH substituiert sein kann oder -CO-N=C(NH₂)₂, R², R⁵ H,

R³ H, COOR⁶, -O-CH₂-COOR⁶, CH₂-COOR⁶, -O-CH₂- CON(R⁶)₂, CH₂-CON(R⁶)₂, -O-CH₂-CONHAr oder

CH₂-CONHAr, X -CH₂-O-, -O-CH2- oder -CH₂-CH₂-,

R⁶ H oder A,

A Alkyl mit 1-4 C-Atomen, bedeuten, in li R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C auch einfach durch OH substituiert sein kann oder

-CO-N=C(NH₂)₂,

R², R⁵ H,

R^J H, COOR⁶, -O-CH₂-COOR⁶, CH₂-COOR⁶, -O-CH₂-

CON(R⁶)₂, oder CH₂-CON(R⁶)₂,

X -CH₂-O-, -O-CH₂- oder -CH₂-CH₂-,

R⁶ H oder A,

A Alkyl mit 1-4 C-Atomen, bedeuten

Die Verbindungen der Formel I und auch die Ausgangsstoffe zu ihrer Herstellung werden im übrigen nach an sich bekannten Methoden hergestellt, wie sie in der Literatur (z B in den Standardwerken wie Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart) beschrieben sind, und zwar unter Reaktionsbedingungen, die für die genannten Umsetzungen bekannt und geeignet sind Dabei kann man auch von an sich bekannten, hier nicht naher erwähnten Varianten Gebrauch machen

Die Ausgangsstoffe können, falls erwünscht, auch in situ gebildet werden, so daß man sie aus dem Reaktionsgemisch nicht isoliert, sondern sofort weiter zu den Verbindungen der Formel I umsetzt

Verbindungen der Formel I können vorzugsweise erhalten werden, indem man Verbindungen der Formel I aus einem ihrer funktionellen Derivate durch Behandeln mit einem solvolysierenden oder hydrogenolysierenden Mittel in Freiheit setzt Bevorzugte Ausgangsstoffe für die Solvolyse bzw Hydrogenolyse sind solche, die sonst der Formel I entsprechen, aber anstelle einer oder mehrerer freier Amino- und/oder Hydroxygruppen entsprechende geschützte Ammo- und/oder Hydroxygruppen enthalten, vorzugsweise solche, die an- stelle eines H-Atoms, das mit einem N-Atom verbunden ist, eine Aminoschutzgruppe tragen, insbesondere solche, die anstelle einer HN- Gruppe eine R'-N-Gruppe tragen, worin R' eine Aminoschutzgruppe bedeutet, und/oder solche, die anstelle des H-Atoms einer Hydroxygruppe eine Hydroxyschutzgruppe tragen, z B solche, die der Formel I entspre- chen, jedoch anstelle einer Gruppe -COOH eine Gruppe -COOR" tragen, worin R" eine Hydroxyschutzgruppe bedeutet

Bevorzugte Ausgangsstoffe sind auch die Oxadiazoldenvate, die in die entsprechenden Amidinoverbindungen überfuhrt werden können

Die Einfuhrung der Oxadiazolgruppe gelingt z B durch Umsetzung der

Cyanverbindungen mit Hydroxylamin und Reaktion mit Phosgen, Dial- kylcarbonat, Chlorameisensaureester, N,N'-Carbonyldιιmιdazol oder Ace- tanhydnd

Es können auch mehrere - gleiche oder verschiedene - geschützte Amino- und/oder Hydroxygruppen im Molekül des Ausgangsstoffes vorhanden sein Falls die vorhandenen Schutzgruppen voneinander verschieden sind, können sie in vielen Fallen selektiv abgespalten werden

Der Ausdruck "Aminoschutzgruppe" ist allgemein bekannt und bezieht sich auf Gruppen, die geeignet sind, eine Aminogruppe vor chemischen Umsetzungen zu schützen (zu blockieren), die aber leicht entfernbar sind, nachdem die gewünschte chemische Reaktion an anderen Stellen des Moleküls durchgeführt worden ist Typisch für solche Gruppen sind insbe- sondere unsubstituierte oder substituierte Acyl-, Aryl-, Aralkoxymethyl- oder Aralkylgruppen Da die Aminoschutzgruppen nach der gewünschten Reaktion (oder Reaktionsfolge) entfernt werden, ist ihre Art und Große im übrigen nicht kritisch, bevorzugt werden jedoch solche mit 1-20, insbesondere 1-8 C-Atomen Der Ausdruck "Acylgruppe" ist im Zusammenhang mit dem vorliegenden Verfahren in weitestem Sinne aufzufassen Er umschließt von ahphatischen, araliphatischen, aromatischen oder hetero- cyc schen Carbonsauren oder Suifonsauren abgeleitete Acylgruppen sowie insbesondere Alkoxycarbonyl-, Aryloxycarbonyl- und vor allem Aral- koxycarbonylgruppen Beispiele für derartige Acylgruppen sind Alkanoyl wie Acetyl, Propionyl, Butyryl, Aralkanoyl wie Phenylacetyl, Aroyl wie Ben- zoyl oder Toluyl, Aryloxyalkanoyl wie POA, Alkoxycarbonyl wie Methoxycarbonyl, Ethoxycarbonyl, 2,2,2-Trιchlorethoxycarbonyl, BOC (tert -Butyl- oxycarbonyl), 2-lodethoxycarbonyl, Aralkyloxycarbonyl wie CBZ ("Carbo- benzoxy"), 4-Methoxybenzyloxycarbonyl, FMOC, Arylsulfonyl wie Mtr Bevorzugte Aminoschutzgruppen sind BOC und Mtr, ferner CBZ, Fmoc, Ben- zyl und Acetyl

Der Ausdruck "Hydroxyschutzgruppe" ist ebenfalls allgemein bekannt und bezieht sich auf Gruppen, die geeignet sind, eine Hydroxygruppe vor chemischen Umsetzungen zu schützen, die aber leicht entfernbar sind, nach- dem die gewünschte chemische Reaktion an anderen Stellen des Moleküls durchgeführt worden ist Typisch für solche Gruppen sind die oben genannten unsubstituierten oder substituierten Aryl-, Aralkyl- oder Acylgruppen, ferner auch Alkylgruppen Die Natur und Große der Hydroxy- schutzgruppen ist nicht kritisch, da sie nach der gewünschten chemischen Reaktion oder Reaktionsfolge wieder entfernt werden, bevorzugt sind

Gruppen mit 1-20, insbesondere 1-10 C-Atomen Beispiele für Hydroxy- schutzgruppen sind u a Benzyl, p-Nitrobenzoyl, p-Toluolsulfonyl, tert - Butyl und Acetyl, wobei Benzyl und tert -Butyl besonders bevorzugt sind

Das In-Freiheit-Setzen der Verbindungen der Formel I aus ihren funktionel- len Derivaten gelingt - je nach der benutzten Schutzgruppe - z B mit starken Sauren, zweckmäßig mit TFA oder Perchlorsaure, aber auch mit anderen starken anorganischen Sauren wie Salzsaure oder Schwefelsaure starken organischen Carbonsauren wie Tnchloressigsaure oder Sulfonsau- ren wie Benzol- oder p-Toluolsulfonsaure Die Anwesenheit eines zusätzlichen inerten Losungsmittels ist möglich, aber nicht immer erforderlich Als inerte Losungsmittel eignen sich vorzugsweise organische, beispielsweise Carbonsauren wie Essigsaure, Ether wie Tetrahydrofuran oder Dioxan, Amide wie DMF, halogenierte Kohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, fer- ner auch Alkohole wie Methanol, Ethanol oder Isopropanol, sowie Wasser

Ferner kommen Gemische der vorgenannten Losungsmittel in Frage TFA wird vorzugsweise im Überschuß ohne Zusatz eines weiteren Lösungsmittels verwendet, Perchlorsäure in Form eines Gemisches aus Essigsäure und 70 %iger Perchlorsäure im Verhältnis 9:1. Die Reaktionstemperaturen für die Spaltung liegen zweckmäßig zwischen etwa 0 und etwa 50°, vorzugsweise arbeitet man zwischen 15 und 30° (Raumtemperatur).

Die Gruppen BOC, OBut und Mtr können z. B. bevorzugt mit TFA in Di- chlormethan oder mit etwa 3 bis 5n HCI in Dioxan bei 15-30° abgespalten werden, die FMOC-Gruppe mit einer etwa 5- bis 50 %igen Lösung von Dimethylamin, Diethylamin oder Piperidin in DMF bei 15-30°.

Hydrogenolytisch entfernbare Schutzgruppen (z. B. CBZ, Benzyl oder die Freisetzung der Amidinogruppe aus ihrem Oxadiazolderivat) können z. B. durch Behandeln mit Wasserstoff in Gegenwart eines Katalysators (z. B. eines Edelmetallkatalysators wie Palladium, zweckmäßig auf einem Träger wie Kohle oder wie feuchtes Raney-Nickel unter Zusatz von z.B. Essigsäure) abgespalten werden. Als Lösungsmittel eignen sich dabei die oben angegebenen, insbesondere z. B. Alkohole wie Methanol oder Ethanol oder Amide wie DMF. Die Hydrogenolyse wird in der Regel bei Temperaturen zwischen etwa 0 und 100° und Drucken zwischen etwa 1 und 200 bar, bevorzugt bei 20-30° und 1-10 bar durchgeführt. Eine Hydrogenolyse der CBZ-Gruppe gelingt z. B. gut an 5 bis 10 %igem Pd/C in Methanol oder mit Ammoniumformiat (anstelle von Wasserstoff) an Pd/C in Methanol/DMF bei 20-30°.

Verbindungen der Formel I, worin R¹ und R⁴ -C(=NH)-NH₂ bedeuten, können vorzugsweise aus der entsprechenden Cyanverbindung erhalten werden. Die Umwandlung einer Cyangruppe in eine Amidinogruppe erfolgt durch Umsetzung mit z.B. Hydroxylamin und anschließender Reduktion des N-

Hydroxyamidins mit Wasserstoff in Anwesenheit eines Katalysators wie z.B. Pd/C oder Raney-Nickel.

Zur Herstellung eines Amidins der Formel I (R¹ = -C(=NH)-NH₂) kann man an ein Nitril der Formel I (R¹ = CN) auch Ammoniak anlagern. Die Anlage- rung erfolgt bevorzugt mehrstufig, indem man in an sich bekannter Weise a) das Nitril mit H₂S in ein Thioamid umwandelt, das mit einem Alkylie- rungsmittel, z.B. CH₃I, in den entsprechenden S-Alkyl-imidothioester übergeführt wird, welcher seinerseits mit NH₃ zum Amidin reagiert, b) das Nitril mit einem Alkohol, z.B. Ethanol in Gegenwart von HCI in den entsprechenden Imidoester umwandelt und diesen mit Ammoniak behandelt, oder c) das Nitril mit Lithium-bis-(trimethylsilyl)-amid umsetzt und das Produkt anschließend hydrolysiert.

Herstellung der Cyanverbindungen erfolgt nach an sich bekannten Methoden.

Verbindungen der Formel I, wo n R¹ und R⁴ -CON(=NH)-NH₂ bedeuten, können vorzugsweise aus den entsprechenden Alkoxycarbonylverbindun- gen erhalten werden, indem man mit Guanidin umsetzt.

Es ist ferner möglich, eine Verbindung der Formel I in eine andere Verbindung der Formel I umzuwandeln, indem man einen oder mehrere Rest(e), R¹ , R², R³, R⁴ und/oder R⁵ in einen oder mehrere Rest(e) R¹, R², R³, R⁴ und/oder R⁵ umwandelt, z.B. indem man eine Aminogruppe acyliert oder Nitrogruppen (beispielsweise durch Hydrierung an Raney-Nickel oder Pd-Kohle in einem inerten Lösungsmittel wie Methanol oder Ethanol) zu

Aminogruppen reduziert.

Ester können z.B. mit Essigsäure oder mit NaOH oder KOH in Wasser, Wasser-THF oder Wasser-Dioxan bei Temperaturen zwischen 0 und 100° verseift werden.

Ferner kann man freie Aminogruppen in üblicher Weise mit einem Säure- chlohd oder -anhydrid acylieren oder mit einem unsubstituierten oder substituierten Alkylhalogenid alkylieren, zweckmäßig in einem inerten Lö- sungsmittel wie Dichlormethan oder THF und /oder in Gegenwart einer Base wie Triethylamin oder Pyridin bei Temperaturen zwischen -60 und +30°.

Die Umsetzung erfolgt in der Regel in einem inerten Lösungsmittel, in Ge- genwart eines säurebindenden Mittels vorzugsweise eines Alkali- oder Er- dalkalimetall-hydroxids, -carbonats oder -bicarbonats oder eines anderen Salzes einer schwachen Saure der Alkali- oder Erdalkalimetalle, vorzugsweise des Kaliums, Natriums, Calciums oder Cäsiums Auch der Zusatz einer organischen Base wie Tnethylamin, Dimethylanilin, Pyπdin oder Chinolin oder eines Überschusses der Aminkomponente der Formel II bzw des Alkylierungsderivates der Formel III kann gunstig sein Die Reaktionszeit egt je nach den angewendeten Bedingungen zwischen einigen Minuten und 14 Tagen, die Reaktionstemperatur zwischen etwa 0° und 150°, normalerweise zwischen 20° und 130°

Als inerte Losungsmittel eignen sich z B Kohlenwasserstoffe wie Hexan, Petrolether, Benzol, Toluol oder Xylol, chlorierte Kohlenwasserstoffe wie Trichlorethylen, 1 ,2-Dιchlorethan, Tetrachlorkohlenstoff, Chloroform oder Dichlormethan, Alkohole wie Methanol, Ethanol, Isopropanol, n-Propanol, n-Butanol oder tert -Butanol, Ether wie Diethylether, Dnsopropylether, Te- trahydrofuran (THF) oder Dioxan, Glykolether wie Ethylenglykolmono- methyl- oder -monoethylether (Methylglykol oder Ethylglykol), Ethylen- glykoldimethylether (Diglyme), Ketone wie Aceton oder Butanon, Amide wie Acetamid, Dimethylacetamid, N-Methylpyrrolidon (NMP) oder Dime- thylformamid (DMF), Nitnle wie Acetonitnl, Suifoxide wie Dimethylsulfoxid (DMSO) Schwefelkohlenstoff, Carbonsauren wie Ameisensaure oder Essigsaure Nitroverbindungen wie Nitromethan oder Nitrobenzol, Ester wie Ethylacetat oder Gemische der genannten Losungsmittel

Eine Base der Formel I kann mit einer Saure in das zugehörige Saure- additionssalz übergeführt werden, beispielsweise durch Umsetzung äquivalenter Mengen der Base und der Saure in einem inerten Losungsmittel wie Ethanol und anschließendes Eindampfen Für diese Umsetzung kommen insbesondere Sauren in Frage, die physiologisch unbedenkliche Salze liefern So können anorganische Sauren verwendet werden, z B Schwefelsaure, Salpetersaure, Halogenwasserstoffsauren wie Chlorwasserstoffsaure oder Bromwasserstoffsaure, Phosphorsauren wie Ortho- phosphorsaure, Sulfaminsaure, ferner organische Sauren, insbesondere aliphatische, alicyclische, araliphatische, aromatische oder heterocyclische ein- oder mehrbasige Carbon-, Sulfon- oder Schwefelsauren, z B Amei- sensaure, Essigsaure, Propionsaure, Pivalinsaure, Diethylessigsaure,

Malonsaure, Bernsteinsaure, Pimelinsaure, Fumarsaure, Maleinsäure, Milchsaure, Weinsaure, Apfelsaure, Citronensaure, Gluconsaure, Ascor- binsaure, Nicotinsaure, Isonicotinsaure, Methan- oder Ethansulfonsaure, Ethandisulfonsaure, 2-Hydroxyethansulfonsaure, Benzolsulfonsaure, p- Toluolsulfonsaure, Naphthalin-mono- und -disulfonsauren, Laurylschwefel- saure Salze mit physiologisch nicht unbedenklichen Sauren, z B Pikrate, können zur Isolierung und /oder Aufreinigung der Verbindungen der Formel I verwendet werden

Andererseits können Verbindungen der Formel I mit Basen (z B Natπum- oder Kaliumhydroxid oder -carbonat) in die entsprechenden Metall-, insbesondere Alkalimetall- oder Erdalkalimetall-, oder in die entsprechenden Ammoniumsalze umgewandelt werden

Auch physiologisch unbedenkliche organische Basen, wie z B Ethanol- amin können verwendet werden

Gegenstand der Erfindung ist ferner die Verwendung der Verbindungen der Formel I als NHE-3-lnhιbιtoren und/oder ihrer physiologisch unbedenklichen Salze zur Herstellung pharmazeutischer Zubereitungen, insbesondere auf nicht-chemischem Wege Hierbei können sie zusammen mit min- destens einem festen, flussigen und/oder halbflussigen Trager- oder Hilfsstoff und gegebenenfalls in Kombination mit einem oder mehreren weiteren Wirkstoffen in eine geeignete Dosierungsform gebracht werden

Gegenstand der Erfindung sind ferner pharmazeutische Zubereitungen, enthaltend mindestens einen NHE-3-lnhιbιtor der Formel I und/oder eines seiner physiologisch unbedenklichen Salze und Solvate

Diese Zubereitungen können als Arzneimittel in der Human- oder Veterinärmedizin verwendet werden Als Tragerstoffe kommen organische oder anorganische Substanzen in Frage, die sich für die enterale (z B orale), parenterale oder topische Applikation eignen und mit den neuen Verbindungen nicht reagieren, beispielsweise Wasser, pflanzliche Ole, Benzyl- alkohole, Alkylenglykole, Polyethylenglykole, Glycenntriacetat, Gelatine, Kohlehydrate wie Lactose oder Starke, Magnesiumstearat, Talk, Vaseline Zur oralen Anwendung dienen insbesondere Tabletten, Pillen, Dragees, Kapseln, Pulver Granulate, Sirupe, Safte oder Tropfen, zur rektalen An- wendung Suppositoπen, zur parenteralen Anwendung Losungen, vorzugsweise ohge oder wassrige Losungen, ferner Suspensionen, Emulsionen oder Implantate, für die topische Anwendung Salben, Cremes oder Puder, oder transdermal in Patches Die neuen Verbindungen können auch lyophilisiert und die erhaltenen Lyo- phihsate z B zur Herstellung von Injektionspraparaten verwendet werden Die angegebenen Zubereitungen können sterilisiert sein und/oder Hilfs- stoffe wie Gleit-, Konservierungs-, Stabihsierungs- und/oder Netzmittel, Emulgatoren, Salze zur Beeinflussung des osmotischen Druckes, Puffer- Substanzen, Färb-, Geschmacks- und /oder mehrere weitere Wirkstoffe enthalten, z B ein oder mehrere Vitamine

Als pharmazeutische Zubereitung für die Verabreichung in Form von Aerosolen oder Sprays sind geeignet z B Losungen, Suspensionen oder Emulsionen des Wirkstoffs der Formel I in einem pharmazeutisch unbedenkh- chen Losungsmittel

Die Verbindungen der Formel I und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und Solvate können zur Behandlung und/oder Prophylaxe der oben beschrieben Krankheiten oder Krankheitszustanden verwendet werden

Dabei werden die erfindungsgemaßen Substanzen in der Regel vorzugsweise in Dosierungen zwischen etwa 0,1 und 100 mg, insbesondere zwischen 1 und 10 mg pro Dosierungseinheit verabreicht Die tägliche Dosierung hegt vorzugsweise zwischen etwa 0,001 und 10 mg/kg Korpergewicht Die spezielle Dosis für jeden Patienten hangt jedoch von den verschiedensten Faktoren ab, beispielsweise von der Wirksamkeit der eingesetzten speziellen Verbindung, vom Alter, Korpergewicht, allgemeinen Gesundheitszustand, Geschlecht, von der Kost, vom Verabreichungszeitpunkt und -weg, von der Ausscheidungsgeschwindigkeit, Arzneistoffkombination und Schwere der jeweiligen Erkrankung, welcher die Therapie gilt Die orale

Applikation ist bevorzugt

Vor- und nachstehend sind alle Temperaturen in °C angegeben In den nachfolgenden Beispielen bedeutet "übliche Aufarbeitung" Man gibt, falls erforderlich Wasser hinzu, stellt, falls erforderlich, je nach Konstitution des Endprodukts auf pH-Werte zwischen 2 und 10 ein, extrahiert mit Ethyla- cetat oder Dichlormethan, trennt ab, trocknet die organische Phase über Natriumsulfat, dampft ein und reinigt durch Chromatographie an Kieselgel und /oder durch Kristallisation

Massenspektrometne (MS) El (Elektronenstoß-Ionisation) M⁺ FAB (Fast Atom Bombardment) (M+H)⁺

Beispiel 1

Eine Losung von 2,06 g 3-Brombenzonιtπl und 1 ,50 g 3-Tolylboronsaure in 50 ml Dimethoxyethan wird mit 247 mg Palladιum(ll)acetat, 335 mg Tπ-o- tolyl-phosphin, 20 ml Wasser und 954 mg wasserfreiem Natπumcarbonat versetzt und unter Ruhren 18 Stunden bei 100° C erhitzt Man arbeitet wie üblich auf, chromatographiert den Ruckstand an einer Kieselgelsaule mit Petrolether/Ethylacetat 9 1 und erhalt 3'-Methylbιphenyl-3-carbonιtrιl als farblosen Feststoff ("A"), El 193 Eine Losung von 1 ,17 g "A" in 10 ml Tetrachlorkohlenstoff wird mit 1 ,09 g

N-Bromsuccιnιmιd (NBS) und 60 mg Azobisisobutyronitril versetzt und 18 Stunden bei 70° C erhitzt Man arbeitet wie üblich auf, chromatographiert den Ruckstand an einer Kieselgelsaule mit Petrolether/Ethylacetat 9 1 und erhalt 3'-Brommethylbιphenyl-3-carbonιtrιl als farblosen Feststoff ("B") Eine Losung von 500 mg "B" und 238 mg 3-Hydroxybenzonιtrιl in 10 ml

Acetonitnl wird mit 652 mg Casiumcarbonat versetzt und 40 Stunden bei Raumtemperatur gerührt Nachubhcher Aufarbeitung wird der Ruckstand an einer reversed-phase-Saule mit Acetonitril/Wasser 65 35 chromatographiert Man erhalt als farblosen Feststoff 3'-(3-Cyanphenoxymethyl)- bιphenyl-3-carbonιtrιl ("C"), FAB 311

Eine Losung von 90 mg "C" und 125 mg Hydroxylammoniumchlorid in 10 ml Ethanol wird mit 1 ,2 g polymergebundenem Dimethylaminopyridin (DMAP) versetzt und 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt Man filtriert ab entfernt das Losungsmittel und erhalt N-Hydroxy-3'-[3-(N-hydroxy- carbamιmιdoyl)-phenoxymethyl]-bιphenyl-3-carboxamιdιn ("D") als farblosen Feststoff, FAB 377

Eine Losung von 76 mg "D" in 10 ml Methanol wird mit 100 mg wasserfeuchtem Raney-Nickel und 30 mg Essigsaure versetzt und 18 Stunden bei Raumtemperatur und Normaldruck hydriert Man filtriert ab, entfernt das Losungsmittel und erhalt 3'-(3-Carbamιmιdoyl-phenoxymethyl)- bιphenyl-3-carboxamιdιn, Acetat, El 327 (M^τ - NH₃), 310 (M⁺ - 2 NH₃)

Analog erhält man die Verbindungen

3'-(3-Carbamimidoyl-phenoxymethyl)-biphenyl-4-carboxamidin, D acetat, FAB 345;

3'-(4-Carbamimidoyl-phenoxymethyl)-biphenyl-4-carboxamidin, D acetat, FAB 345;

3'-(4-Carbamimidoyl-phenoxymethyl)-biphenyl-3-carboxamidin, D acetat, FAB 345;

4'-(4-Carbamimidoyl-phenoxymethyl) biphenyl-4-carboxamidin,

4'-(4-Carbamimidoyl-phenoxymethyl) biphenyl-3-carboxamidin,

4'-(3-Carbamimidoyl-phenoxymethyl) biphenyl-3-carboxamidin und

4'-(3-Carbamimidoyl-phenoxymethyl) biphenyl-4-carboxamidin.

Beispiel 2

Analog Beispiel 1 erhält man durch Umsetzung von 3-Brombenzonitril mit

3-Methoxyphenylboronsäure die Verbindung 3'-Methoxybiphenyl-3- carbonitril.

Durch anschließende Etherspaltung mit Aluminiumtriiodid in Acetonitril und

Umsetzung mit 3-Brommethyl-benzonithl erhält man 3'-(3-Cyan- benzyloxy)-biphenyl-3-carbonithl.

Durch Umsetzung mit Hydroxylamin und Reduktion mit Wasserstoff unter

Ra-Ni-Katalyse erhält man 3'-(3-Carbamimidoyl-benzyloxy)-biphenyl-3- carboxamidin

Analog erhält man 4'-(4-Carbamιmιdoyl-benzyloxy)-bιphenyl-4-carboxamιdιn, Diacetat, FAB

345,

4'-(3-Carbamιmιdoyl-benzyloxy)-bιphenyl-4-carboxamιdιn, Diacetat, FAB

345

Beispiel 3

Analog Beispiel 1 erhalt man durch Umsetzung von 3-Cyanphenylboron- saure mit 3-Brom-5-methyl-benzoesauremethylester die Verbindung 3'- Cyan-5-methyl-bιphenyl-3-carbonsauremethylester Durch Bromierung mit

NBS und Umsetzung mit 3-Hydroxybenzonιtrιl erhalt man 3'-Cyan-5-(3- Cyan-phenoxymethyl)-bιphenyl-3-carbonsauremethylester Reaktion mit Hydroxylamin und Reduktion mit H₂/ Ra-Ni ergibt die Verbindung 3'-Carbamιmιdoyl-5-(3-carbamιmιdoyl-phenoxymethyl)-bιphenyi-3- carbonsauremethylester

Durch Verseifung des Esters mit wassriger NaOH erhalt man daraus 3'-

Carbamιmιdoyl-5-(3-carbamιmιdoyl-phenoxymethyl)-bιphenyl-3- carbonsaure

Durch Chromatographie an reversed-phase-Saule mit Acetoni- tril/WasserTFA-Gemisch erhalt man 3'-Carbamιmιdoyl-5-(3- carbamιmιdoyl-phenoxymethyl)-bιphenyl-3-carbonsaure, Bistπfluoracetat

Analog erhalt man die Verbindungen

4'-Carbamιmιdoyl-4-(4-carbamιmιdoyl-phenoxymethyl)-bιphenyl-3- carbonsauremethylester, FAB 403,

4'-Carbamιmιdoyl-4-(3-carbamιmιdoyl-phenoxymethyl)-bιphenyl-2- carbonsauremethylester, FAB 403, 3'-Carbamimidoyl-4-(4-carbamimidoyl-phenoxymethyl)-biphenyl-2- carbonsäuremethylester, FAB 403;

3'-Carbamimidoyl-4-(3-carbamimidoyl-phenoxymethyl)-biphenyl-2- carbonsäuremethylester, FAB 403;

4'-Carbamimidoyl-5-(3-carbamimidoyl-phenoxymethyl)-biphenyl-4- carbonsäuremethylester, FAB 403;

3'-Carbamimidoyl-5-(3-carbamimidoyl-phenoxymethyl)-biphenyl-4- carbonsäuremethylester, FAB 403.

Beispiel 4

Analog Beispiel 1 erhält man durch Umsetzung von 3-Brombenzoesäure- methylester mit 3-Tolylboronsäure 3'-Methylbiphenyl-3-carbonsäuremethyl- ester. Durch Bromierung mit NBS und Umsetzung mit 3-Hydroxybenzoe- säuremethylester erhält man daraus 3'-(3-Methoxycarbonyl-phenoxy- methyl)-biphenyl-3-carbonsäuremethylester. Durch Umsetzung mit Guani- dinhydrochlorid in methanolischer Natriummethaπolatlösung erhält man daraus N-[3'-(3-Guanidinocarbonyl-phenoxymethyl)-biphenyl-3-carbonyl]- guanidin

Analog erhält man die Verbindung N-[4'-(4-Guanidinocarbonyl- phenoxymethyl)-biphenyl-4-carbonyl]-guanidin. Beispiel 5

Eine Losung von 7,0 g 3-Brom-5-methylphenol und 5,97 g Bromessigsau- remethylester sowie 13 g Casiumcarbonat in 100 ml Acetonitnl wird bei Raumtemperatur über Nacht gerührt Nach üblicher Aufarbeitung erhalt man 9,70 g (3-Brom-5-methylphenoxy)-essιgsauremethylester ("AB") Eine Suspension von 2,0 g "AB", 100 mg Tetrakιs(trιphenylphosphιn)- Palladium und 0,85 g Nat umcarbonat in 50 ml Toluol wird zum Sieden erhitzt Dann wird eine Losung von 2,94 g 3-Cyanphenylboronsaure in 30 ml Methanol zugetropft und 14 Stunden unter Ruckfluß erhitzt Man arbeitet wie üblich auf und erhalt 2,17 g (3'-Cyan-5-methyl-bιphenyl-3-yloxy)- essigsauremethylester ("AC")

Eine Losung von 1 ,2 g "AC" und 0,765 g NBS in 50 ml Tetrachlorkohlenstoff wird bei Raumtemperatur mit UV-Licht bestrahlt Nach üblicher Aufar- beitung erhalt man 1 ,54 g (3'-Cyan-5-brommethyl-bιphenyl-3-yloxy)- essigsauremethylester ("AD")

Eine Losung von 185 mg "AD", 63,1 mg 4-Hydroxybenzonιtrιl und 172,7 mg Casiumcarbonat in 10 ml Acetonitril wird bei Raumtemperatur 4 Tage gerührt Nach üblicher Aufarbeitung erhalt man [3'-Cyan-5-(4- cyanphenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]-essιgsauremethylester ("AE")

Eine Losung von 60 mg "AE", 69,5 mg Hydroxylammoniumchlond und 101 mg Tπethylamin in 10 ml Methanol wird 14 Stunden unter Ruckfluß erhitzt Nach Entfernen des Losungsmittels wird in Wasser aufgenommen Man trennt ab und erhalt 70 mg [3'-N-Hydroxyamιdιno-5-(4-N-hydroxyamιdιno- phenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]-essιgsauremethylester ("AF") Durch

Reduktion mit H₂/Raney-Nιckel erhalt man daraus [3'-Amιdιno-5-(4- amιdιnophenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]-essιgsauremethylester, FAB 433

Analog erhalt man die Verbindungen

[4'-Amιdιno-5-(4-amιdιnophenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]- essigsauremethylester, FAB 433

[3'-Amιdιno-5-(3-amιdιnophenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]- essigsauremethylester, FAB 433

[4'-Amιdιno-5-(3-amιdιnophenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]- essigsauremethylester, FAB 433

Ersetzt man in der ersten Stufe Bromessigsauremethylester durch Brom- essigsaure-tert -butylester so können die in der letzten Stufe erhaltenen tert -Butylester mit Trifluoressigsaure gespalten werden und man erhalt die entsprechenden Carbonsauren

[3'-Amιdιno-5-(4-amιdιnophenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]- essigsaure, Bistrifluoracetat, FAB 419,

[4'-Amιdιno-5-(4-amιdιnophenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]- essigsaure, [3'-Amιdιno-5-(3-amιdιnophenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]- essigsaure,

[4'-Amιdιno-5-(3-amιdιnophenoxymethyl)-bιphenyl-3-yloxy]- essigsaure

Beispiel 6

Eine Losung von 5,0 g 3'-Brommethyl-bιphenyl-3-carbonιtrιl und 5 ml Tn- ethylphosphit werden zusammengεgeben und langsam auf 150° erhitzt

Man rührt 6 h bei 150° nach und erhalt nach üblicher Aufarbeitung 6,05 g (3'-Cyan-bιphenyl-3-ylmethyl)-phosphonsauredιethylester ("BA") Zu einer Losung von 1 ,0 g "BA" und 3-Cyanbenzaldehyd in 20 ml Ethy- lenglycoldimethylether gibt man unter Eiskuhlung und Stickstoff 150 mg Natriumhydrid Man rührt 4 Stunden nach, arbeitet wie ublichauf und erhalt

0,93 g 3'-[2-(3-Cyanphenyl)-vιnyl]-bιphenyl-3-carbonιtrιl ("BB") Nach Hydrierung von 360 mg "BB" mit Pd-C-5 % in Methanol erhalt man 360 mg 3'-[2-(3-Cyanphenyl)-ethyl]-bιphenyl-3-carbonιtrιl ("BC") Nach Umsetzung mit Hydroxylammmoniumchlorid und Hydrierung mit Raney- Nickel erhalt man analog Beispiel 1 die Verbindung 3'-[2-(3-Amιdιno- phenyl)-ethyl]-bιphenyl-3-carboxamιdιn, FAB 343

Analog erhalt man die Verbindung 3'-[2-(4-Amιdιnophenyl)-ethyl]-bιphenyl- 3-carboxamιdιn, FAB 343 Beispiel 7

Die Verbindung N-[3'-(4-Guanidinocarbonyl-benzyloxy)-biphenyl-3- carbonylj-guanidin, Dihydrochlohd, FAB 431

erhält man z.B. gemäß nachstehendem Reaktionsschema:

1-Chlor- 1-met ylpyπdιnιumιodιd N- ethylpyrro don N-Ethyldnsopropylamiπ (Mukaiyama)

Analog erhalt man nachstehende Verbindungen

N-[3'-(3-Guanιdιnocarbonyl-benzyloxy)-bιphenyl-3-carbonyl]-guanιdιn, Dihydrochloπd, FAB 431 ,

N-[3'-(4-Guanιdιnocarbonyl-benzyloxy)-bιphenyl-4-carbonyl]-guanιdιn, Dihydrochlond, FAB 431 ,

N-[3'-(3-Guanιdιnocarbonyl-benzyloxy)-bιphenyl-4-carbonyl]-guanιdιn,

Dihydrochlond, FAB 431

Pharmakoloqisc e Tests

Im folgenden ist die Methodik dargestellt, die zur Charakterisierung der Verbindungen der Formel I als NHE-3-lnhιbιtoren verwendet wurde

Die Verbindungen der Formel I wurden in bezug auf ihre Selektivität ge- genuber den Isoformen NHE-1 bis NHE-3 charakterisiert Die drei Isoformen wurden in Maus-Fibroblastenzellinien stabil expnmiert Die Hemmwirkung der Verbindungen wurde durch Bestimmung der ElPA-empfindlichen ²²Na⁺-Aufnahme in die Zellen nach intrazellularer Acidose beurteilt Zur Charakterisierung der Na⁺/H⁺-Austauschhemmstoffe in bezug auf ihre Isoformselektivitat untersuchten wir die Verbindungen auf ihre Hemmung der NHE-Isoformen NHE-1 , -2 und -3, die in einer Maus- Fibroblastenzellinie stabil expnmiert wurden (siehe Verfahrenstell), dadurch, daß die ElPA-empfindhche ²²Na⁺-Aufnahme in die Zellen nach intrazellularer Acidose bestimmt wurde

Material und Methoden

LAP1-Zellιnιen, die die unterschiedlichen NHE-Isoformen exprimieren

Die LAP1-Zellιnιen, die die Isoformen NHE-1 , -2 und -3 exprimieren (eine

Maus-Fibroblastenzellinie), wurden von Prof J Pouyssegur (Nice, Frank- reich) erhalten Die Transfektionen wurden nach dem Verfahren von Fran- chi et al (1986) durchgeführt Die Zellen wurden in Dulbeccos modifiziertem Eagle-Medium (DMEM) mit 10% inaktiviertem fötalem Kalberserum (FKS) kultiviert Zur Selektion der NHE-expπmierenden Zellen wurde das sogenannte "Saureabtotungsverfahren" von Sardet et al (1989) verwendet Die Zellen wurden zuerst 30 Minuten in einem NH CI-haltιgen bicar- bonat- und natriumfreien Puffer durch Waschen mit einem bicarbonat-, NH CI- und natriumfreien Puffer entfernt und es wurde mit einem bicarbo- natfreien NaCI-haltigen Puffer inkubiert Nur diejenigen zellen, die NHE funktionell exprimieren, konnten in der intrazellularen Ansauerung, der sie ausgesetzt wurden, überleben

Charakterisierung von NHE-Hemmstoffen in bezug auf ihre Isoformselekti- vitat

Mit den obengenannten Maus-Fibroblastenzellinien, die die Isoformen NHE-1 , NHE-2 und NHE-3 exprimieren, wurden Verbindungen nach der von Counillon et al (1993) und Scholz et al (1995) beschriebenen Vorgehensweise auf Selektivität gegnuber den Isoformen geprüft Die Zellen wurden intrazellular nach dem NH CI-Prepulse-Verfahren und anschließend durch Inkubation in einem bicarbonatfreien ²²Na⁺-haltιgen Puffer angesäuert Aufgrund der intrazellularen Ansauerung wurde NHE aktiviert und Natrium wurde in die zellen aufgenommen Die Auswirkung der Prufverbindung wurde als Hemmung der EIPA (Ethyl-isopropylamilond)- empfindlichen ²²Na⁺-Aufnahme ausgedruckt

Die Zellen die NHE-1 , NHE-2 und NHE-3 expπmierten, wurden in einer Dichte von 5-7,5 x 10⁴ Zellen/Napfchen in Mikrotiterplatten mit 24 Napfchen ubeπmpft und 24 bis 48 Stunden bis zur Konfluenz gezüchtet Das Medium wurde abgesaugt und die Zellen wurden 60 Minuten bei 37° C im NH₄CI-Puffer (50 inM NH₄CI, 70 mM Chohnchlond, 15 mM MOPS, pH 7,0) inkubiert Anschließend wurde der Puffer entfernt und die Zellen wurden rasch zweimal mit dem Chohnchlond-Waschpuffer (120 mM Chohnchlond, 15 mM PIPES/Tris, 0,1 mM Ouabain, 1 mM MgCI₂, 2 mM CaCI₂, pH 7,4) uberschichtet, in diesem Puffer wurden die Zellen 6 Minuten inkubiert Nach Ablaufen der Inkubationszeit wurde der Inkubationspuffer abgesaugt

Zwecks Entfernung extrazellularer Radioaktivität wurden die Zellen viermal rasch mit eiskalter phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) gewaschen. Danach wurden die Zellen durch Zusatz von 0,3 ml 0,1 N NaOH pro Näpfchen solubilisiert. Die zellfragmenthaltigen Lösungen wurden in Szintillati- onsröhrchen überführt. Jedes Näpfchen wurde noch zweimal mit 0,3 ml 0,1 N NaOH gewaschen und die Waschlösungen wurden ebenfalls in die entsprechenden Szintillationsröhrchen gegeben. Die das Zellysat enthaltenden Röhrchen wurden mit Szintillationscocktail versetzt und die in die Zellen aufgenommene Radioaktivität wurde durch Bestimmung der ß- Strahlung bestimmt.

Hemmung der Na⁺-Aufnahme in Kaninchen-Erythrozyten

Die Na⁺/H⁺-Austauschaktivität wurde auch durch Beobachtung der Aufnahme von ²²Na⁺-lonen in sauergestellte Kaninchen-Erythrozyten be- stimmt. Kaninchen-Erythrozyten haben bei Untersuchungen zur Na⁺/H⁺- Austauschaktivität breite Anwendung gefunden (Escobales & Fugueroa, 1991 ; Morgan & Canessa, 1990). Der ElPA-empfindliche Anteil der ²²Na⁺- Aufnahme in sauergestellte Erythrozyten wurde als Na⁺/H⁺-abhängige ²²Na⁺-Aufnahme angesehen.

Zellpräparation

Die Präparation der roten Blutkörperchen sowie die interne Ansauerung der roten Blutkörperchen wurden in starker Anlehnung an die Verfahren von Morgan und Canessa (1990) durchgeführt.

Das Blut wurde von Kaninchen erhalten (z.B. New Zealand White). Es wurde in 50-ml-Falcon-Zenthfugenröhrchen aufgefangen, die 5 ml Natri- umheparinlösung (250 U/ml) enthielten. Das Blut und die Heparinlösung wurden gut vermischt. Die roten Blutkörperchen wurden durch Zentrifuga- tion bei 2000 x g bei 4° C gewonnen; Plasma und Leukozytenmanschette wurden entfernt. Die verbleibende Lösung wurde durch 200-μm-Gaze filtriert. Das Filtrat wurde mit Waschpuffer wieder auf das ursprüngliche Volumen suspendiert (140 mM KCl, 0,15 mM MgCI₂, 10 mM TRIS/MOPS, pH 7,4). Die roten Blutkörperchen wurden wiederum durch Zentrifugation ge- wonnen (2000 x g, 4° C). Der Waschvorgang wurde zweimal wiederholt. Intrazelluläre Ansauerung

Zur intrazellulären Ansauerung wurden 5 ml der abgesetzten gesammelten roten Blutkörperchen wiederum mit 45 ml Ansäuerungspuffer suspendiert (170 mM KCl, 0,15 mM MgCI₂, 0,1 mM Ouabain, 10 mM Glucose, 10 mM

Saccharose, 20 mM Tris/Mes, pH 6,2). Die Suspension der roten Blutkörperchen wurde 10 Minuten bei 37° C inkubiert (unter gelegentlichem Mischen). Um den internen pH zu fixieren, versetzt man mit bis zu 200 μM und 1 mM DIDS bzw. DIAMOX (acetazolamid). Man inkubierte noch 30 Mi- nuten bei 37° C.

Die roten Blutkörperchen wurden anschließend durch Zentrifugation gewonnen (4 Minuten bei 2000 x g, 4° C); sie wurden wiederum mit eiskalter ungepufferter Waschlösung (170 mM KCl, 40 mM Saccharose, 0,15 mM MgCI₂) suspendiert und damit viermal gewaschen.

Inkubation sowie Messung der ²²Na⁺-Aufnahme

Die Inkubation wurde in Macrowell-Tube-Streifen in einem Format von 8 x 12 durchgeführt. Mit der Inkubation wurde dadurch begonnen, daß man 200 μl Inkubationspuffer (160 mM KCl, ²²NaCI (37 MBq/Näpfchen), 10 mM

NaCI, 0,15 mM MgCI₂, 0,1 mM Ouabain, 10 mM Glucose, 40 mM Saccharose, 10 mM Tris/MOPS, ph 8,0, 0,5 mM Diamox, 1 % DMSO) mit 20 μl der (vorgewärmten) angesäuerten Lösung der roten Blutkörperchen versetzte. Die Prüfsubstanzen wurden zuerst mit 100% DMSO gelöst und die Lösung wurde anschließend mit Inkubationspuffer auf die entsprechenden Konzentrationen verdünnt. Man inkubierte 5 Minuten bei 37° C. (In Vorversuchen wurde gezeigt, daß unter diesen Inkubationsbedingungen die ²²Na- Aufnahmerate während der 5-minütigen Inkubationsdauer linear war). Die Inkubation wurd edurch Zugabe von 800 μl eiskalter Stopplösung (112 mM MgCl₂, 0,1 mM Ouabain) gestoppt. Die Röhrchen wurden kurzfristig auf Eis aufbewahrt. Anschließend wurden die Röhrchen mit Parafilm abgedeckt und die roten Blutkörperchen wurden durch 7-minütige Zentrifugation bei 2000 x g und 4° C gewonnen. Der Überstand wurde mit einem selbstgemachten Absaugegerät abgesaugt, mit dem man 4 nebeneinan- derliegende Röhrchen gleichzeitig absaugen konnte; Abstandhalterringe an den weiteren Enden der Spitzen verhinderten, daß die Spitzen zu tief in die Röhrchen eintauchten und man das Pellet der roten Blutkörperchen absaugte. Alle ²²Na-haltigen Überstände sowie Waschlösungen wurden aufbewahrt und als radioaktiver Abfall entsorgt. Die roten Blutkörperchen wurden dreimal mit 900 μl eiskalter Stopplösung gewaschen, und zwar dadurch, daß man den oben beschriebenen Sus- pendierungs-.Zenthfugationsschritt wiederholte. Nach dem letzten Waschen wurde das Pellet der roten Blutkörperchen mit 200 μl Wasser versetzt. Anschließend wurden die Röhrchen 2 x 30 Minuten mit Ultraschall behandelt. Anschließend wurden die Macrowell-Tube-Streifen auseinan- dergenommen und jedes Röhrchen wurde kopfüber in ein eigenes Szintil- lationsröhrchen gegeben; durch leichtes Schütteln entleerte sich die hä- molysierte Lösung der roten Blutkörperchen in das Szintillationsgläschen. Jedes Gläschen wurde mit 3 ml der Szintillationsflüssigkeit Aquasafe 300 PS versetzt, und die Gläschen wurden mit Verschlüssen versehen und gut gemischt.

Die in die roten Blutkörperchen aufgenommene Radioaktivität wurde in einem Szintillationszähler durch Verfolgen des ß-Zerfalls bestimmt. Pro Substanzkonzentration wurde die bestimmung in dreifacher Wiederholung durchgeführt. Von jedem Wert wurde das Mittel der Zählungsbe- Stimmung in gegenwart von 10 μM EIPA subtrahiert, um die nicht-Na⁺/H⁺- abhängige ²²Na⁺-Aufπahme in die Erythrozyten einzubeziehen. Das Mittel der verbleibenden Zählungen in Abwesenheit einer Substanz wurde als 100-%-Kontrolle verwendet; die Mittelwerte in Gegenwart der Prüfverbindungen wurden als Prozentsatz dieses Kontrollwerts ausgedrückt. Die pro- zentmäßigen Aufπahmedaten wurden semilogarithmisch aufgetragen;

IC50-Werte wurden dadurch erzielt, daß man unter Verwendung der Gleichung f(x) = 100/(1 + (IC50/x)^**n) die Werte an eine nichtlineare Kurve an- passte.

Literatur:

Counillon et al. (1993) Mol. Pharmacol. 44: 1041-1045 Escobales und Figueroa (1991) J. Membrane Biol. 120, 41-49 Franchi et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 83: 9388-9392 Morgan und Canessa (1990) J. Membrane Biol. 118, 193-214 Sardet et al. (1989) Cell 56: 271-280

Scholz et al. (1995) Cardiovasc. Res. 29: 260-268 Testergebnisse

IC50 (NHE-3) = 1-2 μM

Diacetat;

Code EMD 221963 IC50 (NHE-3) = 1 μM

Diacetat;

Code EMD 246326 IC50 (NHE-3) = 3 μM .

Diacetat;

Code EMD 246327 IC50 (NHE-3) = 3-4 μM.

Die nachfolgenden Beispiele betreffen pharmazeutische Zubereitungen

Beispiel A: Injektionsgläser

Eine Losung von 100 g eines NHE-3-lnhιbιtors der Formel I und 5 g Dina- tnumhydrogenphosphat wird in 3 I zweifach destilliertem Wasser mit 2 n Salzsaure auf pH 6,5 eingestellt, steril filtriert, in Injektionsglaser abgefüllt, unter sterilen Bedingungen lyophilisiert und steril verschlossen Jedes In- jektionsglas enthalt 5 mg Wirkstoff

Beispiel B: Suppositorien

Man schmilzt ein Gemisch von 20 g eines NHE-3-lnhιbιtors der Formel I mit 100 g Sojalecithin und 1400 g Kakaobutter, gießt in Formen und laßt erkalten Jedes Suppositoπum enthalt 20 mg Wirkstoff

Beispiel C: Lösung

Man bereitet eine Losung aus 1 g eines NHE-3-lnhιbιtors der Formel I, 9,38 g NaH₂P0₄ 2 H₂O, 28,48 g Na₂HPO₄ 12 H₂O und 0,1 g Benzalko- niumchloπd in 940 ml zweifach destilliertem Wasser Man stellt auf pH 6,8 ein, füllt auf 1 I auf und sterilisiert durch Bestrahlung Diese Losung kann in Form von Augentropfen verwendet werden

Beispiel D: Salbe

Man mischt 500 mg eines NHE-3-lnhιbιtors der Formel I mit 99,5 g Vaseline unter aseptischen Bedingungen

Beispiel E: Tabletten

Ein Gemisch von 1 kg eines NHE-3-lnhιbιtors der Formel I, 4 kg Lactose, 1 ,2 kg Kartoffelstarke, 0,2 kg Talk und 0,1 kg Magnesiumstearat wird in üblicher Weise zu Tabletten verpreßt, derart, daß jede Tablette 10 mg Wirkstoff enthalt Beispiel F: Dragees

Analog Beispiel E werden Tabletten gepreßt, die anschließend in üblicher Weise mit einem Überzug aus Saccharose, Kartoffelstarke, Talk, Tragant und Farbstoff überzogen werden

Beispiel G: Kapsein

2 kg eines NHE-3-lnhιbιtors der Formel I werden in üblicher weise in Hart- gelatmekapseln gefüllt, so daß jede Kapsel 20 mg des Wirkstoffs enthalt

Beispiel H: Ampullen

Eine Losung von 1 kg NHE-3-lnhιbιtor der Formel I in 60 I zweifach destil- hertem Wasser wird steril filtriert, in Ampullen abgefüllt, unter sterilen Bedingungen lyophilisiert und steril verschlossen Jede Ampulle enthalt 10 mg Wirkstoff

Claims

Patentansprüche

Verbindungen der Formel I

worin

R¹ , R⁴ jeweils unabhängig voneinander -C(=NH)-NH₂, das auch einfach durch -COA, -CO-[C(R⁶)₂]_n-Ar, -COOA, -OH oder durch eine konventionelle Aminoschutzgruppe substituiert sein kann, NH-C(=NH)-NH₂, -CO-N=C(NH₂) ,

R², R³, R⁵ jeweils unabhängig voneinander H, A, OR⁶, N(R⁶)₂,

N0₂, CN, Hai, NHCOA, NHCOAr, NHS0₂A, NHSO₂Ar, COOR⁶, CON(R⁶)₂, CONHAr, COR⁶, COAr, S(O)_nA S(O)_nAr, -O-[C(R⁶)₂]_m-COOR⁶, -[C(R⁶)₂]_p-COOR⁶, -O-[C(R⁶)₂]m-CON(R⁶)₂, -[C(R⁶)₂]_p-CON(R⁶)₂, -O-[C(R⁶)₂]_m-CONHAr oder -[C(R⁶)₂]_P-CONHAr,

X -[C(R⁶)₂]_n-, -CR°=CR⁶-, -[C(R⁶)₂]_n-O-, -0-[C(R⁶)₂]_n-, -COO-, -OOC-, -CONR⁶- oder -NR⁶CO-, R⁶ H, A oder Benzyl,

A Alkyl mit 1 -20 C-Atomen, worin eine oder zwei CH₂-

Gruppen durch O- oder S-Atome oder durch -CR⁶=CR⁶-

Gruppen und/oder 1 -7 H-Atome durch F ersetzt sein können,

Ar unsubstituiertes oder ein-, zwei- oder dreifach durch A, Ar'. OR⁶, OAr', N(R⁶)₂. NO₂, CN, Hai, NHCOA,

NHCOAr', NHSO₂A, NHSO₂Ar', COOR⁶, CON(R⁶)₂, CONHAr', COR⁶, COAr', S(O)_nA oder S(O)_πAr' substitu- lertes Phenyl oder Naphthyl,

Ar' unsubstituiertes oder ein-, zwei- oder dreifach durch A,

OR⁶, N(R⁶)₂, N0₂, CN, Hai, NHCOA, COOR⁶, CON(R⁶)₂, COR⁶ oder S(O)_nA substituiertes Phenyl oder Naphthyl,

Hai F, Cl, Br oder I,

n 0, 1 oder 2,

m 1 oder 2,

p 1 oder 2 bedeutet,

sowie deren Salze und Solvate als NHE-3-lnhιbιtoren

Verbindungen gemäß Anspruch 1

a) 3'-(3-Carbamιmιdoyl-phenoxymethyl)-bιphenyl-3- carboxamidin, b) 3'-(3-Carbamιmιdoyl-benzyloxy)-bιphenyl-3-carboxamιdιn, c) 3'-Carbamimidoyl-5-(3-carbamimidoyl-phenoxymethyl)- biphenyl-3-carbonsäure; d) N-[3'-(3-Guanidinocarbonyl-phenoxymethyl)-biphenyl-3- carbonylj-guanidin; e) [3'-Amidino-5-(4-amidinophenoxymethyl)-biphenyl-3-yloxy]- essigsäuremethylester; f) [3'-Amidino-5-(4-amidinophenoxymethyl)-biphenyl-3-yloxy]- essigsäure

sowie deren Salze und Solvate als NHE-3-lnhibitoren.

3. Verwendung von Verbindungen der Formel I nach Anspruch 1 und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Thrombosen, ischämischen Zuständen des Herzens, des peripheren und zentralen

Nervensystems und des Schlaganfalls, ischämischen Zuständen pe- ripherer Organe und Gliedmaßen und zur Behandlung von Schockzuständen.

4. Verwendung von Verbindungen der Formel I nach Anspruch 1 und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate zur Herstellung eines Arzneimittels zum Einsatz bei chirurgischen Operationen und Organtransplantationen und zur Konservierung und Lagerung von Transplantaten für chirurgische Maßnahmen.

5. Verwendung von Verbindungen der Formel I nach Anspruch 1 und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Krankheiten, bei denen die Zeilproliferation eine primäre oder sekundäre Ursache dar- stellt, zur Behandlung oder Prophylaxe von Störungen des Fettstoffwechsels oder gestörtem Atemantrieb.

6. Verwendung von Verbindungen der Formel I nach Anspruch 1 und ihre physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate zur Her- Stellung eines Arzneimittels zur Behandlung von ischämischer Niere, ischamischen Darmerkrankungen oder zur Prophylaxe von akutem oder chronischen Nierenerkrankungen

Pharmazeutische Zubereitung, gekennzeichnet durch einen Gehalt mindestens eines NHE-3-lnhιbιtors nach Anspruch 1 und/oder einem shrer physiologisch unbedenklichen Salze und/oder Solvate