WO2000053563A1

WO2000053563A1 - Nouveaux ligands de recepteurs nucleaires ppar

Info

Publication number: WO2000053563A1
Application number: PCT/JP2000/001497
Authority: WO
Inventors: Gakuzo Tamura; Kunio Ando; Junji Magae
Original assignee: Nuclear Receptor Research Limited; Institute Of Research And Innovation
Priority date: 1999-03-11
Filing date: 2000-03-13
Publication date: 2000-09-14
Also published as: NO20014394D0; EP1176134A4; CN1348436A; MXPA01009127A; KR20020010581A; TR200202077T2; TR200103002T2; EP1176134A1; AU2943300A; CA2366281A1; NO20014394L; BR0009474A

Description

明細書核内リセプ夕一 PPARの新規リガンド技術分野

本発明は、核内リセプタ一 PPARのリガンド及び PPARリセプ夕一のリガンド依存性に遺伝子の発現を制御することにより改善される疾患の治療及び/又は予防に関する。背景技術

本発明は医療用医薬品を産業上の利用分野とし、ヒトを含む動物の代謝性疾患、慢性炎症並びに悪性腫瘍を治療する医薬品の候補化合物を包含する。ステロイド、レチノイド、活性ビタミン D3及び甲状腺ホルモンなどは、超微量で動物に対し顕著な生理活性を示す。これらは水に溶解せず有機溶媒に溶解するので、一括して脂溶性ホルモンと呼ばれている。脂溶性ホルモンが超微量で特異的な作用を発現するメカニズムの研究が進むにつれ、その作用機作には共通性があることがわかってきた。これらの脂溶性ホルモンは細胞質に存在するリセプ夕一と結合した後に遺伝子の特定部位に結合し、遺伝子の情報発現を直接コントロールすることにより生理作用を発揮するのである。核内リセプ夕一をコードする DNAの分析から、核内リセプ夕一の構造に驚くべき相同性があることが明らかにされた。これらの脂溶性ホルモンが動物細胞にはたらきかけるためには、細胞膜を透過し細胞質に存在する核内リセプターに結合する必要がある。ホルモンと結合した核内リセプ夕一は核膜を通過して核内に移行し、二つのリセプター同士が結合した二量体（ダイマー）となって染色体のホルモン認識部位に結合し、遺伝子の情報発現をコントロールするのである。

脂溶性ホルモンと結合した核内リセプターが遺伝子の情報発現をコントロールするためには、二つのリセプタ一同士が結合してダイマ一を形成する必要がある。ダイマーにも同じリセプター同士が結合するホモダイマーと、異なるリセプター間で結合するへテロダイマ一の場合とがある。性ホルモン、副腎皮質ホルモンなどのステロイドは、同じリセプ夕一同士が結合したホモダイマ一として作用する。一方、多くの脂溶性ホルモンは、ヘテロダイマーとして作用を発揮する。ヘテロダイマ一を形成するリセプターの場合、対となりうるリセプ夕一は何でもよいわけではない。ほとんどがレチノィド Xリセプター (RXR)と呼ばれる核内リセプ夕一とへテロダイマ一を形成し、染色体の認識部位に結合するのである。これらの脂溶性ホルモンのリセプ夕一が作用を発揮するに当たり、なぜレチノィド Xリセプ夕一と結合しなければならないの力、その理由はまだよくわかっていない。一方、多くの製薬会社が心臓の冠状動脈硬化症（冠動脈硬化）治療及び又は予防薬の研究開発を行ってきた。先進国で死亡原因の一位を占める心臓冠状動脈の硬化性病変は、血液中に低比重リポ蛋白質 (LDL)が過剰に存在する高 LDL血症を最も危険な発症因子としている。 LDLは多量のコレステロールを含んでいるので、高 LDL血症は高コレステロール血症とも言い換えることができる。冠動脈硬化を治療及び又は予防するため、高 LDL血症を治療する血清脂質低下剤が多年にわたって探し求められてきた。 1960年代、最初に血清脂質低下剤として登場したのが、クロフイブレートと呼ばれる薬物である。クロフイブレートは、作用機作も明確でないままに、冠動脈硬化症の患者だけでなく脳動脈硬化症、大腿動脈の硬化症である間歇性跛行、あるいは冠動脈硬化のリスクが高い]！型糖尿病の患者などに多量に使われ、一時的に大きな商業的成功を収めた。しかし、二つの欠陥があつたため次第に使用されなくなった。一つは作用特性が血清総コレステロールを低下させると云うよりは、血清中性脂肪を多量に含む超低比重リポ蛋白質 (VLDL)を低下させる点にあったこと、第二に多数の冠動脈硬化症患者が参加する幾つかの二重盲検試験の結果、クロフイブレートは偽薬より心筋梗塞死が多発したり、偽薬群とのあいだに差異がなかったり、副作用が多発したりで、薬効が必ずしも明確でなかったためである。一方、クロフイブレートを患者に投与した臨床家側からは、薬物の作用機作にかかわる重要な情報がもたらされていたのである。

Π型糖尿病患者は血管障害を起こす確率が健常者と比べ十倍ほど高く、平均寿命も約十年短命とされている。したがって、血管障害を予防するため、多数の Π 型糖尿病患者がクロフイブレートを投与された。ところが、血糖降下剤であるスルフォニル尿素系薬物とクロフイブレートを併用した Π型糖尿病患者の中に、低血糖昏睡を起こす患者が高い頻度で出現したのである。本来、高血糖状態が持続する Π型糖尿病患者に低血糖昏睡は起こらないはずである。昏睡を起こした症例をしらべてみると、スルフ才ニル尿素剤により刺激された滕臓ランゲルハンス島 3細胞が多量のインスリンを放出する一方で、クロフイブレートが末梢組織のィンスリン抵抗性を軽減したため、双方が相乗的に働いて血糖が急速に低下したことが判明した。つまり、クロフイブレート及びその誘導体は末梢組織におけるィンスリン抵抗性の軽減効果を期待できることが以前からわかっていたのである。

1982年には本発明者はァスコクロリン誘導体、 AS-6が正常及びストレブトゾトシン投与の齧歯類動物において、血糖及びインスリンを低下させることを発表した (Agr. Biol. Chem. 46: 2865-69, 1982)。 1980年代後半に入ると、幾つかの製薬会社が Π型糖尿病の特徴であるィンスリン抵抗性を改善する薬物の研究開発に着手するようになった。候補化合物をデザインする上でモデル化合物となったのは、末梢組織のインスリン感受性を増強するクロフイブレ一ト（ァリロキシ系化合物）と血糖降下作用があるチアゾリジンを一つの化合物に統合した武田薬品のシグリ夕ゾンであった。この化合物は効力が不足して開発に失敗したが、その後のチアゾリジンジェンジオン系化合物 (TZD)のモデル化合物となった点で高く評価される。引き続いてトログリ夕ゾン、ピオダリ夕ゾン、ロジグリタゾンなどの TZD 系薬物が開発され、 Π型糖尿病の治療はインスリン抵抗性解除を主要な薬効とする TZDの出現により転機を迎えた。 TZDの作用機作は当初全く不明であつたが、クロフイブレイ卜の研究が端緒になって作用機作が解明されたのである。リガンド不明な核内リセプ夕ー（ォーファン · リセプ夕一） PPAR aが、クロフイブレートよつて活性化されるところから、 TZD も PPARのリガンドとして遺伝子情報の発現を制御している可能性が示唆されたのである。 PPARとはクロフイブレートが肝臓のパーォキシソームを増殖させ、肝臓の肥大化を誘発することにちなんだ名称で、パーォキシソーム増殖剤応答性リセプター（peroxisome proliferator-activated receptors) と呼ばれるリセプタ一群である。クロフイブレィ卜と部分的に共通の化学構造を有する TZDなどについても、当然のことながら PPARリセプ夕一との相互作用について検討が行われたのである。その結果、 TZD の標的細胞は白色脂肪細胞であり、 TZD は白色脂肪細胞に多量に発現する核内リセプ夕一 PPAR Ύを活性化するリガンドであることが明らかにされた。この発見は Π型糖尿病の成因に関する仮説の修正を迫るものであった。それまでは、白色脂肪組織は脂肪を貯蔵するサイレン卜な組織であって、 Π型糖尿病患者のィンスリン感受性低下は肝臓ないしは筋肉におけるィンスリン抵抗性発現に原因があると考えられていたのである。

それ以降、白色脂肪組織は、いわゆる生活習慣病と呼ばれる多くの疾患の予防、治療のターゲット臓器と考えられるようになり、脂肪細胞の分化とその調節機構について、分子レベルでの知見が多数集積してきた。現在では PPAR rが白色脂肪組織、リンパ系組織、副腎及び腸管に顕著に発現していることがわかっている。脂肪組織の場合には、 PPAR rの補助因子 (CBP及び類似分子)との共役のもとに、脂肪細胞の分化に重要な役割を果たすこと、さらにリノ一ル酸ゃァラキドン酸などの食事性脂肪酸が PPARファミリーのリガンドであることが明らかにされ、食事療法や薬物療法の標的として PPAR ファミリ一の重要性が増してきている。 PPAR-CBPを中心とする脂肪細胞分化の分子機構を解明することにより、脂肪組織におけるエネルギー代謝調節機構の一端が明らかとなり、肥満をベースとした生活習慣病に対する新たな治療、創薬の標的が見出されることが大いに期待されている。 PPARには三種類あり、 PPAR αは主として肝細胞に分布し、 PPAR 3は全身に、 PPAR Tは脂肪細胞、副腎、リンパ系組織及び腸管に分布する。過食のため中性脂肪を多量に貯蔵し肥大化した脂肪細胞は、アデイボサイト力インと総称される一群のサイトカインを産生し循環血中に放出する。このアディポサイトカインが末梢組織のィンスリン感受性を低下させることが次第に明確になってきたのである。アディポサイトカインの中には TNF- αが含まれていることは注目に値しよう。 TNF- αは動物に投与すると、末梢組織におけるグルコースの取り込みを強く抑制し、末期ガン患者の悪液質を惹起することがわかっているからである。

一方、リンパ系組織に発現する PPARrについては、脂肪組織以外にも、脾臓、腸管及び副腎で多量に発現していることが知られていて、これらの臓器に発現している ΡΡΑΙΙ τの役割についても研究が進んできた。中でもリンパ系細胞に発現する PPAR rの役割について、 1998年、注目すべき論文が二つ発表されている (M. Ricote et. al.， NATURE 391: 79-82, 1998； C. Jiang, A. T. Ting and B. Seed. NATURE 391: 82-86, 1998)。これらは、慢性炎症と PPAR Tの関連に焦点を当てた研究である。炎症局所に浸潤した活性化マクロファージは、 TNF- a、 IL-1 β、 IL-6のような炎症性サイトカインを活発に生合成して炎症を慢性化させる。上記の論文は、活性化マクロファージの培養液に PPAR rのリガンドである非ステロイド系鎮痛消炎剤を加えると、炎症性サイトカイン産生に関連する遺伝子の転写が用量依存性に抑制されること、及び非ステロイド系鎮痛消炎剤は、転写促進因子 AP-1, STAT及び NF- / Bと部分的に競合することにより、炎症性サイト力イン遺伝子の発現を抑制することを明らかにした。従って、非ステロイド系鎮痛消炎剤は、核内リセプ夕ー PPAR rを活性化することにより IL-1 、 TNF ¾ よび IL-6などの炎症性サイトカイン遺伝子がメッセンジャ一 RNAに転写されるのを抑制し、その結果として炎症性サイトカインの生合成を抑制する。現行の TZD 系化合物は、活性化マクロファージの炎症性サイトカイン産生をほとんど抑制しないので、慢性炎症治療への応用は考えられない。しかし、 PPAR了リガンドによる炎症性サイトカインの産生抑制は、 PPARが多量に発現している動脈硬化の病巣、糖尿病性合併症、慢性関節リューマチに代表される慢性炎症及び悪性腫瘍の治療に結びつく可能性を秘めている。

非ステロイド系鎮痛消炎剤の作用機作は、急性に炎症局所に痛みと腫脹をもたらすプロスタグランジンの産生抑制にある。しかし、炎症が慢性化する過程では、プロスタグランジン産生と並んで TNF aなどの炎症性サイトカイン放出が大きな役割を果たしていることは、 TNF aあるいは IL-6 リセプタ一に対するモノクローナル抗体を全身投与すると、慢性関節リューマチ等の慢性炎症を改善させることからも明らかである。急性炎症の治療に使われる非ステロイド系鎮痛消炎剤は、長期連用が難しい。消化管粘膜におけるプロスタグランジン生合成を抑制し、高率に消化性潰瘍を発症させるからである。慢性炎症治療のためには、炎症性サイトカイン産生を抑制するが、プロスタグランジン生合成を阻害しない薬物の開発が要望されている。最近、心臓の冠動脈硬化症は、慢性肝炎、糸球体腎炎、慢性塍炎、慢性関節リューマチなどと並んで典型的な慢性炎症であると主張するロスの学説 (R Ross, New Eng. J. Medicine340: 115-126, 1999年)が広く承認されるようになった。つまり活性化マクロファージによる炎症性サイトカイン産生を抑制する治療法は、冠動脈硬化症、慢性肝炎、糸球体腎炎、慢性滕炎及び慢性関節リューマチ等の慢性炎症が関与する難病を治療可能にする潜在力を持っている。ある種の悪性腫瘍は多量の TNFを産生し、患者に悪液質と呼ばれる代謝性の荒廃状態を惹起する。この状態に陥った患者は、摂取するエネルギーを同化することができず、エネルギーバランスが負に転化し急速に衰弱してゆく。それとともに、免疫能も低下するので、日和見感染菌が増殖し、敗血症を起こして死亡することが多い。ガン患者の 7割は、ガンで死亡するのではなく、日和見感染菌による敗血症で死亡するのである。従って、悪性腫瘍の TNF a産生を制御することは、担ガン患者の延命にとって必須である。興味あることに、大腸ガンの細胞は多量の PPARァを発現している力 TNF O!産生はまったく制御されていない。つまり、大腸ガンの細胞に発現した PPARは、リガンドにより活性化されないので TNF aの産生を制御できないのである。その証拠には、大腸ガン患者に PPARr のリガンドであるサリンダックを与えると、 TNFひの産生を抑制し一時的に寛快状態を導入できる。もちろん、サリンダックは非ステロイド系鎮痛消炎剤であるから、プロスタグランジンの生合成を抑制するため長期に投与することは難しい。この事実は細胞内における核内リセプ夕一が多量に発現するだけでは不十分で、核内リセプターが遺伝情報の転写を制御するには必要にして十分な量の特異的リガンドが外部から供給される必要があることを物語っている。つまり、消化器ガン患者の治療及び延命にとって、 PPAR Tリガンドは大きな役割を果たす可能性がある。

慢性関節リューマチを代表とする慢性炎症の治療に用いられる薬剤は、急性炎症の治療に用いられる非ステロイド系鎮痛消炎剤あるいは糖コルチコィドが転用されているだけで、慢性炎症に対する特異的な治療薬はまだ存在しないと云ってもよい。非ステロイド系鎮痛消炎剤は、プロスタグランジン生合成を阻害するため、連用すると消化性潰瘍など消化器系への副作用が頻発する欠点がある。一方、糖コルチコイドも、プロスタグランジン生合成の阻害、免疫抑制による感染症の多発、糖尿病など代謝異常の誘発、投薬を中止すると投薬前よりかえって症状が悪化するリバウンド現象など、たくさんの副作用を抱えている。これらの薬物に依存する現行の慢性炎症治療法は、患者の生活の質 (Quality of Life; (¾OL)を顕著に改善しているとは言い難い。さらに注目すべきは細小血管の炎症を背景として発症する糖尿病性合併症である。糖尿病性合併症も慢性の血管炎症が基になって発症するので、慢性炎症に対し特異的に改善効果を発揮する薬物が開発されれば予防 Z治療できる可能性が大きい。慢性関節リューマチ、動脈硬化、糖尿病性細小血管症、結節性動脈周囲炎及び動脈瘤などの慢性血管炎症に対する治療は、副作用頻発による QOL低下なしに慢性炎症を治療することが出来る薬物の出現が望まれる。今後、慢性炎症に対する消炎剤として PPARァのリガンドが活発な研究の対象として浮上することが予測されている。

PPAR rとへテロダイマーを形成し、遺伝子情報の発現を制御している核内リセプ夕一 RXRのリガンドが、 Π型糖尿病の代謝異常に対しどのような作用を示すかは注目の的であった。この問題に示唆を与える最初の研究が、 1997年に発表された。（Nature 386: 407-410, 1997年）。この研究は前骨髄性白血病、力ポジ肉腫などの治療薬として開発中のレチノィド誘導体 LG100268及び LGD1069が、細胞培養及び動物実験において、（ 1 )細胞培養で遺伝子情報の発現を制御すること、（2 )遺伝性肥満糖尿病マウス ob/ob及び db/dbに経口投与すると、インスリン感受性を増強し、血糖、血清中性脂肪及び血清インスリンを劇的に低下させること、（3 ) それぞれ単独では薬効が発現しない少量レチノイド誘導体と TZDを併用投与すると RXRのリガンドと PPARァのリガンドは in vivo及び in vitroで相乗作用を示すと報告している。しかし、同一の化合物が RXR及び PPAR両リセプ夕一のリガンドとして働く可能性については、これまで言及されたことも、発表されたこともなかった。発明の概要

発明者は、代謝性疾患及び慢性炎症の治療及びノ予防に有効な手段を見出すために研究し、ァスコクロリン、その類縁化合物、並びにそれらの誘導体からなる群から選ばれたレチノイド Xリセプターに結合するリガンドを先に特許出願した (特願平 1 0— 3 7 7 9 0 5号、及び国際出願 P C TZ J P / 0 7 0 1 2 )。本発明者はさらに検討を進めたところ、ァスコクロリン及びァスコフラノン、その誘導体が PPARァリセプ夕一に結合し遺伝子の発現を制御することを発見するとともに、先の特許出願に包含される RXRのリガンドであるァスコクロリンの 2位及び/または 4位の水酸基を置換基により置換した誘導体が、 PPAR了リセプ夕一にも結合し遺伝子の発現を制御することを発見した。このような化合物が同時に二つの核内リセプターのリガンドとして作用することは、従来、まったく知られていない新しい知見である。

即ち、本発明は、ァスコフラノン、ァスコフラノン同族体又はァスコクロリン同族体である、核内リセプ夕ー PPARのリガンドを提供する。これらは、哺乳動物における核内リセプター PPARリガンド依存性の遺伝情報の転写の制御により改善される疾患又は状態の治療及びノ又は予防のため、より詳細にはィンスリン抵抗性発現による Π型糖尿病を含む糖尿病；高血圧症又は脳血管障害；心臓冠状動脈硬化症を含む動脈硬化症；糖尿病合併症；血管、肝臓、腎臓、関節、腸管及び勝臓を含む臓器の慢性炎症、並びに自己免疫疾患に関連する慢性炎症を含む慢性炎症；末期ガン患者に起こる悪液質；大腸ガン、胃ガン、及び肝臓ガンを含む消化器系のガンの治療及びノ又は予防のため、並びに哺乳動物における塍臓ランゲルハンス島) 3細胞が変性及び/又は壊死するのを阻止するために、使用することができる。図面の簡単な説明

図 1は、化合物- 17による遺伝性肥満糖尿病マウス (db/dbマウス)の多飲多尿の改善と尿糖排泄抑制効果を表す。

図 2は、化合物- 25による db/dbマウスの血糖値と尿糖排泄の変動を表す。実験開始の二日前に 12週令の db/dbマウス、 10頭の尾静脈から採血し、一群の平均血糖値が 720-740 mg/dlになるように二群に分けた。一群を対照群、他の一群を化合物- 25投与群とし、化合物- 25は 60 mg/kgを一日一回経口投与した。令：対照群、：化合物- 25投与群。 **P<0.01 and ***P<0.001, in Student t-test. 図 3は、化合物- 1と化合物- 25による NODマウスの I型糖尿病発症予防効果を表す。 ♦：対照群、 ▲：化合物- 1の 25mg/kg群、口：化合物- 1の 50mg/kg群、 X：化合物- 25の 50mg/kg群。それぞれ一群は 10頭から構成されている。 24 週目における I型糖尿病の発症率は、対照群 70%、化合物- 1の 25mg/kg群が 30%、化合物- 1及び- 25の 50mg/kg群が 10%で、後二者と対照群との間には出現率の検定で 5%の有意差がある。

図 4は、表面プラズモン共鳴センサ一による化合物- 27 とピオダリ夕ゾンの結合試験の結果を表す。ピオダリ夕ゾンは結合しないのでシグナルが発生しないが、化合物- 27は明らかにシグナルが発生する。発明の開示

本発明は、ァスコフラノン；並びにァスコフラノン同族体又はァスコクロリン同族体であって、少なくともォルシルアルデヒド部分を有し、該ォルシルアルデヒド部分の 2位及び Z又は 4位の水酸基の水素が、一（Ci C ) アルキル若しくはァルケニル、ァリール、（ (^〜 (：）アルキルァリール、一 CH₂C〇〇 H、 — CH₂COO (C₁〜C₁₅) アルキル、 — C ( =〇）（Ci C ) アルキル、一 C ( = 0) ァリール、 — C ( = 0) ( ^〜。）アルキルァリール、 ― C ( = 0) (CH₂) ^₁₅COOH, ニコチノィル又はイソニコチノィルからなる群より選択される基により置換されている前記同族体；からなる群より選択される化合物である、核内リセプ夕一 PPARのリガンドを提供する。本明細書で「ァスコフラノン同族体」というときは、特別な場合を除き、ァスコフラノンと類似の構造を有する化合物をいい、少なくともォルシルアルデヒド部分を有し、オルシルアルデヒド部分の 3位置には適当な側鎖（例えば、テルぺノイド）を有し、 5位置はァスコフラノンと同様 C 1であってもよく、 Hであってもよく、かつ核内リセプタ一 PPARに結合することができるものをいい、デヒドロアスコクロリンも含まれる。本明細書で「ァスコクロリン同族体」というときは、特別な場合を除き、ァスコクロリンと類似の構造を有する化合物をいい、少なくともオルシルアルデヒド部分を有し、ォルシルアルデヒド部分の 3位置には適当な側鎖（例えば、テルぺノイド）を有し、 5位置はァスコクロリンと同様 C 1であってもよく、 Hであってもよく（このときァスコクロリン類縁化合物ということもある）、かつ核内リセプター PPARに結合することができるものいう。本発明はまた、式：

ぼ中、

Xは、

であり；

R¹は、 H、 - ((^〜(：^ アルキル又はアルケニル、又は— C (=〇） (C,

C₅) アルキルであり； R²は、 H、 ― （(^〜(：^ アルキル又はアルケニル、

— CH₂COOH —CH₂COO ((^〜(：₅) アルキル、 — C ( = 0) (Ci

C₅) アルキル、一 C (=〇） (CH₂) ^₅COOH, ニコチノィル又はイソ二コチノィルであり；及び R³は、 H又は C Iである（但し、ァスコクロリンを除く） ] で表される化合物である、核内リセプ夕ー PPARのリガンドを提供する。本発明の PPARのリガンドは、以下を含む。

ァスコフラノン及びその誘導体、即ち、式（1) ：

表 1. ァスコフラノン及びその誘導体

化合物 # R₂ 備考

1 H H ァスコフラノン (AF)

2 H -COCH3 4-0-ァセチル誘導体

3 H -CH₃ 4-0-メチル AF

4 -CH₃ -CH₃ 2.4-ジメチル AF

5 -COCH3 •CH₃ 4-0-メチル、 2-0-ァセチル AF

6 -CH₃ -COCH3 2-0-メチル、 4-0-ァセチル AF

7 •CH₃ H 2-0-メチル AF 新規化合物

8 H

4-0·ェチル AT

9 H •allyl 4-0-ァリル AF

10 H -butyl 4-0-ブチル AF

11 H -CH₂COOH

12 H -CH₂COOCH₃

13 H -nicotinoyl

14 H -iso-nicotinoyl 新規化合物

15 H -CO(CH₂)₃COOH 新規化合物ァスコクロリン及びその誘導体、即ち式（2 )

1 C□ + π r

K! ii₂ Ill ^

16 Η H Aascochlorin (AS)

17 Η -CH₃ 4-O-MeAS

18 -CH₃ -CH₃ 2.4-diMeAS

19 -COCHg -CH₃

20 ■CH₃ -COCHg

23 H -Allyl

24 H -butyl

25 H -CH₂COOH

26 H -nicotinoyl

27 -CH₃ -CH₂COOH 新規化合物

28 -CH₃ -CH₂COOCH₂CH₃ 新規化合物

29 H -CO(CH₂)₂COOH 新規化合物

30 H -iso-nicotinoyl 新規化合物

31 -CH₃ -iso-nicotinoyl 新規化合物ァスコクロリン類縁化合物、即ち式（3 ) :

表 3ァスコクロリン類縁化合物

化合物 # Κ·₂ R₃

32 Η H

33 -CH₃ H

34 -COCH_a H 及び、式（4)

表 4._ァスコクロリン類緣化合物

化合物 # 2 R₃

35 H H

並びに、デヒドロアスコクロリン及びその誘導体、即ち式（5)

式（5) 中、ォルシルアルデヒド 2位置の水酸基の Hは、 ― （ ^ Cs) アルキル又はアルケニル、又は一 C (=0)

アルキルで置換されていてもよく； R₂は、 H - (Ci Cs) アルキル又はアルケニル、 —CH₂C〇〇H — CH₂C〇〇（Ci Cg) アルキル、 — C ( =〇）（Ci Cs) アルキル、 ― C ( = 0) (CH₂) ^₅COOH ニコチノィル又はイソニコチノィルであり；及び 5位置の C 1は、 Hでもよい。このような化合物は新規な化合物である。本発明の化合物における化学構造上の特徴は、このようにォルシルアルデヒド基にテルぺノィド側鎖が結合する構造を持っていることである。生物学的な特徴は、 PPARリセプター結合部位を連結した移入遺伝子を哺乳動物細胞内で用量依存性に発現させる点にある。製造方法

本発明の化合物は、糸状菌 Ascochyta viciaeなどを培養することにより産生される代謝産物ァスコクロリン、ァスコフラノン及びそれらの類縁物質、さらに、それらを有機化学的に修飾した誘導体に大別される。ァスコフラノンは発明者の一人が 1972 年に報告した糸状菌 Ascochyta viciae が産生する抗生物質 (Tetrahedron Letters No. 25, 2541-2544) で、本菌はァスコフラノンと同時にァスコクロリンをも産生する。一方、ァスコクロリンは Ascochyta viciae以外に Nectria coccmea、 Fusarium sp.、 Cylindocarpon lucidium、 Cylindrocladium ilicicola, Cylindrocladium sp.， Verticillium sp. 等の糸状菌が産生することが報告されているが、ァスコフラノンがこれらの糸状菌から単離されたという報告はない。ァスコフラノンは Ascocyta viciaeに特異的な代謝産物である。

デヒドロアスコフラノンは、ァスコフラノンを出発物質として、そのテトラハイド口フラン環から、定法に従って脱水素反応を行うことにより、合成することができる。また、ァシル化、アルキル化されたデヒドロアスコクロリンは、次の方法によって合成することができる。なお、この方法はァスコクロリン及びァスコフラノン、並びにそれらの誘導体のァシル化、アルキル化のためにも用いることができる。

なお、本明細書でいうァリールとは、芳香族炭化水素から水素原子 1個を除いた残りの原子団をいい、フエニル、トリル、キシリル、ビフエニル、ナフチル、アントリル、フエナントリル、及びこれらが 1〜 3個の置換基によって置換されたものを含む。該置換基は（(^〜 ^ アルキル若しくはアルケニル、クロルを含むハロ、又はニトロを含む。

ァシル化

アルキル化

2-0- ン誘導体

ァスコクロリン及びァスコフラノン誘導体が結合した PPARァリセプターの X 線回折による検討から、ォルシルアルデヒド 2位の水酸基は、リセプ夕一蛋白とリガンドとの相互作用を弱める方向に働いていることが分かった。従って、 2位の水酸基をアルキル化した 2-O-methyl誘導体は母化合物より ΡΡΑΙΙτリセプ夕一を強く活性化する。 2位の水酸基をアルキル基に置換する方法は次のとおり。

置換して結晶化が可能なアルキル基としては，メチル、ェチル、プロピル、イソプロピル、プチルイソブチル、卜ブチル、ァリル基など。作用

本発明者はァスコフラノンを齧歯類動物に経口投与すると、きわめて毒性が弱く、しかも標準飼料及び高脂肪飼料のいずれで飼育した場合でも、ラットの血清脂質を低下させる作用を示すことを報告した（J. Antibiotics 24:お 681-686, 1973 及び Jpn. J. Pharmacol. 25: 35-39, 1975)。さらに本発明者らは、高血圧症のモデルである DOCA高血圧ラットにァスコフラノンを経口投与すると、血圧の上昇は抑制しないが心血管病の指標を改善させることを報告している（Eur. J. Pharmacol. 69: 429-438, 1981)。ァスコフラノンがなぜこのような作用を示すのかについては、長いこと謎であった。ァスコフラノンが核内リセプ夕ースーパーファミリ一に属する PPARのリガンドとして作用し、遺伝情報の発現を制御することにより上記の作用を発揮していること発見したのはごく最近のことである。一方、先行出願においてァスコクロリン、その類縁化合物及び誘導体が、細胞培養で RXRないし RAR結合部位を連結した移入遺伝子の発現を用量依存性に増大させることを見出し、それらが RXR及び RARリセプタ一のリガンドであることを証明した。それらの知見をまとめ、医薬のための用途特許を出願している。本発明の化合物のなかでは、ァスコフラノン、その類縁物質及び誘導体は、 PPAR リセプターの特異的リガンドであって、レチノイド X (RXR) 及びオールトランス―レチノイン酸（RAR) リセプ夕ーを活性化しない。ァスコクロリンのオルシルアルデヒド 2位及び Z又は 4位の水酸基を置換基で修飾した化合物群は、核内リセプタースーパ一ファミリ一に属する PPAR及び RXRの双方を活性化し、移入遺伝子の発現を昂進させる。つまり、二つのリセプ夕一と結合するリガンドであることが大きな特徴である。つまり、本発明の化合物は先行出願とほぼ同様の薬理作用を持っている。

本発明の化合物が示す薬理効果は、次の通りである。一つは生活習慣病に対する改善効果であって、 Π型糖尿病、本態性高血圧症、虚血性心疾患、高脂血症及びこれらの疾患に合併する疾患があげられる。さらに PPARが多量に発現する悪性腫瘍とそれに随伴する症状が、本発明の化合物による治療及び予防の対象になる。具体的には PPARが多量に発現する末期の消化器ガン及びそれに随伴する悪液質の治療に有効に使用できる。また、本発明の化合物は、各種臓器及び組織における慢性炎症の治療及び予防に有用である。血管の慢性炎症である結節性動脈周囲炎（動脈瘤）、冠動脈硬化症、脳血管障害及び糖尿病の細小血管症、慢性関節リューマチなどが、その代表的な適用疾患である。しかも、本発明の化合物は、

TZDのように白色脂肪組織に発現する PPARrだけを活性化する特異的なリガンドではなく、広くリンパ系組織、副腎及び腸管に発現する PPARァをも活性化させる点が大きな特徴である。 PPARは血管平滑筋細胞に発現しているので、 PPAR の活性化よる炎症性サイトカイン遺伝子の転写制御は、炎症サイトカインの転写因子 NF- κ Βを減少させ、血管の慢性炎症改善が期待できる（B. Staels et al.， Nature, 393: 790-795， 1998年）。つまり、本発明にかかわる化合物はアディポサィ卜カイン及び炎症性サイトカインの過剰産生に基づく諸疾患に有効であり、適用範囲は本特許に記載された実施例の範囲にとどまるものではない。核内リセプター PPARを同様に活性化するチアゾリジンジンジェンジオン系化合物 (TZD系）と比べ、本発明の化合物が広範囲の薬効を示す理由は、リセプ夕一との結合様式に違いがあるためと思われる。すなわち、 TZD系は PPAR Tリセプ夕一を固定化レたビアコアカラムにまったく結合しないのに対し、本発明の化合物は in vitro でも PPARァリセプ夕一に結合する。剤形

本発明の化合物を投与する場合、類似の用途に供される薬剤が許容されている任意の投与経路で純品の形または適当な医薬組成物の形で製剤化して投与することができる。従って投与は、例えば錠剤、座剤、丸剤、カプセル剤、散剤、液剤、懸濁剤、乳剤、クリーム剤、ローション剤、エアロゾール剤、軟膏剤、ゲル化剤などのような固体、半固体、凍結乾燥粉末または液体投与形態で、例えば経口、鼻腔内、非経口または局所的に、好ましくは正確な用量を 1回に投与しうる適当な単位用量形態で実施することができる。この組成物は通常の製薬用担体または賦形剤および本発明の化合物からなり、さらにその他の医療用医薬品、担体および吸収補助剤などを含有してもよい。一般に製剤上許容しうる組成物は、投与しようとする剤形に応じて、本発明の化合物を約 1〜99 (重量）％含有し、適当な医薬添加物を約 99〜： 1 %含有している。この組成物は、医療用医薬品として本発明の化合物を約 5〜75%含有し、残りは適当な医薬品用賦形剤を含有している。本発明の化合物が病態を改善するために有効な一日あたりの投与量は、成人の体重 kgあたりで 0.1〜20 mg/kgにあり、望ましくは 0.2〜5 mg/kgである。

先に詳細に説明した疾患に対する好ましい投与形態は、疾患の程度に応じて調節可能に設定した投薬量を選定できるように製剤化することである。製剤化にあたつて最も重要なことは、本発明の化合物群が脂溶性であることに由来する制約である。核内リセプタ一 ·スーパーファミリ一のリガンドは、脂溶性ホルモンないしビ夕ミンであり、従つて、本発明の化合物も脂溶性であることは当然である。経口投与用として製剤上許容できる添加物は、例えばマンニット、乳糖、でんぷん、ステアリン酸マグネシウム、サッカリン 'ナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、ゼラチン、シュクロース、炭酸マグネシウムなどのような通常使用可能な任意の賦形剤を加えて調整する。そのような組成物は、液剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤および徐放製剤などの形態をとる。組成物は錠剤または丸剤の形態が好ましいが、そのような組成物は本発明の化合物と一緒に乳糖、シユークロース、リン酸にカルシウムなどの希釈剤、でんぷんおよびその誘導体のような崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムなどのような滑沢剤、およびでんぷん、ァラビアゴム、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、セルロースおよびそれらの誘導体のような結合剤、さらに高度に脂溶性で浼水性である本発明の化合物粒子表面を水で濡らす作用を示す界面活性剤、脂溶性の添加物、胆汁酸、リン脂質などを含有する。脂肪族系の合成界面活性剤又は有機溶媒可溶の高分子助剤を含有することは特に好ましい。これらの例としては、例えば、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ハイドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、ベントナイト、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルべ一ト 8 0、ソルビ夕ンモノ脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシル 4 0等がある。

製剤上で特に重要なことは、本発明の化合物が物性の点で発水性であることに由来する制約である。一般に脂溶性薬物の消化管吸収は、薬物粒子から単分子が水に溶ける速度に支配される。水に溶けた脂溶性薬物は、消化管粘膜の吸収部位に到達すると、事実上バリアフリーで急速に吸収されるからである。水に難溶性の薬物であっても、水への溶解速度が速やかであれば、経口投与により速やかに吸収され、バイオアベイラビリティが大きくなる。しかるに、本発明の化合物は、水の溶ける速度がきわめて遅いことが知られている。従って、製剤化する場合には、水への溶解速度を速めるための添加物及び製剤化工程での工夫が必要である。本発明の化合物のように水に難溶性かつ水への溶解速度がきわめて遅い場合、水への溶解を促進するための工夫の一つは、薬物粒子直径をできるだけ小さくすること、すなわち、（1 )水と粒子が接触する表面積を広げるため微粒子化することである。しかし、単に微粒子化しても、粒子表面が浼水性のため水と接触できず、微粒子として分散しなければ、水への溶解速度は大きくならない。従って、粒子表面が水と接触できるようにするため、（2 )本発明の化合物と界面活性剤あるいは脂溶性基と水溶性基を併有する高分子を共存させる必要がある。また、（3 )薬物粒子から単分子が遊離しやすくする工夫も必須である。すなわち、薬物粒子が結晶の場合には、結晶の格子から単分子が遊離するため必要な自由エネルギーが小さい結晶形を選択すること、さらに本発明の化合物をァモルファス化して単分子が遊離しやすくする製剤化工程が必要である。これら本発明の化合物を製剤化するため必要な条件は、すべて本発明の化合物発明の請求項に記載されるとおりである。ッフ塩基

本発明の化合物は、血中では、そのアルデヒド基と血清蛋白のアミノ基とが反応して、シッフ塩基を形成することができる。本発明の化合物と血清蛋白によるシッフ塩基の形成は、消化管から吸収された遊離体の生物活性を一時的にマスクし、活性がある遊離体を徐々に標的組織に供給する緩衝作用を果たしているのである。また、このシッフ塩基は標的細胞表層に吸着しエンドサイト一シスにより細胞内に取り込まれて加水分解を受け、遊離の化合物を再生する。遊離の化合物は貯蔵脂肪の油滴中に溶け込み、脂肪細胞内では少しずつ細胞質に溶解して作用を発揮する。さらに白色脂肪組織の貯蔵脂肪がエネルギー源として他の組織に運ばれる際には、脂肪と一緒に運搬されて行く。つまり、同時に貯蔵の役割をも担つているのである。本発明の化合物は他の組織にはほとんど取り込まれず、貯蔵脂肪の油滴が存在しないので蓄積せず毒性も示さない。以下、本発明の実施例をあげるが、本発明がこれらの実施例に拘束されないことは云うまでもない。調製

デヒドロアスコフラノン

ァスコフラノンのテトラハイドロフラン環から水素を 2分子の脱水素したデヒドロアスコフラノンは次のように合成した。水酸化ナトリウム 0.16g (4.0 mml) を脱イオン水 0.7 mlに溶解し、水浴で冷却しながら AgN0₃ (0.34 g, 2.00 mml) の脱イオン水溶液 (0.7 ml)を少しずつ加えた、生成した硝酸銀の水懸濁液にァスコフラノン (0.2 g, 0.476 mmol)のジォキサン溶液（1.4 ml)を加えた。反応混合物を室温で三時間撹拌した後、水一ジォキサン混合溶媒 (1:1)で希釈し、セライ卜で濾過した濾液を 6N-HC1で酸性としてからジクロルメタンで抽出した。ジクロルメタン層を水、飽和食塩水で洗浄した後、 MgS0₄で乾燥し、減圧濃縮した。残査をシリ力ゲル Πカラムクロマトグラフィーにかけ、ジクロルメタン：ァセトン（60:1) により精製してデヒドロアスコフラノン 0.047 g (収率 24%) を得た。

融点 139.5-140.5で IR (cm-1): 1680, 1635, 1555 Ή NMR (ppm): 1.35 (6H, s)， 1.82 (3H, br s)， 1.84 (3H， br s), 2.13 (2H, br t， J=7.2 Hz), 2.33 (2H， br q, J=7.5 Hz), 2.60 (3H， s), 3.40 (2H, d, J=7.2 Hz). 10.14 (1H， s), 12.69 (1H， s) ¹³C NMR (ppm): 12.93, 14.44, 16.13， 22.03, 23.03 (probably two overlapping peaks), 27.05, 38.29, 88.10, 98.52, 113.14, 113.59, 114.21, 121.90, 125.76, 135.03, 137.71, 138.12， 156.17, 162.15， 184.66, 193.30, 207.20 元素分析実測値 (％) C, 65.88; H, 6.54. 計算値 (％) C, 65.94; H, 6.50

調製 2

A . 4- O-Ethoxycarbonvlmethvl-2- O-methylascochlorin (1)；ィ匕合物 27 水素化ナトリゥム (60%, 23.1 mg, 0.578 mmol)をペン夕ンで洗浄後、 DMF (1 ml) に懸濁した。これに 2-O-methylascochlorin (0.220 g, 0.525 mmol)の DMF(2 ml) 溶液を滴下し、室温で 3 0分撹拌した後、ブロモ酢酸ェチル (0.0641 ml, 0.578 mmol)を加え、 5 0でで 4時間撹拌した。反応液を飽和塩化アンモニゥム水溶液にあけてエーテル抽出し、有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシゥムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Si0₂ 15 g，へキサン-酢酸ェチル）により精製して 0.204 g (77%)の（1) を得た（無色粘稠油状物質， as a colorless gum) 。

IR (film): 1765, 1713, 1694. NMR (CDC1₃, 500 MHz): 0.70 (3H， s), 0.80 (3H, d， J=6.7 Hz), 0.83 (3H, d, J=6.9 Hz), 1.31 (3H， t, J=7.0 Hz), 1.58-1.67 (1H， m), 1.90 (3H， br s), 1.90-1.96 (2H, m)， 2.34-2.44 (3H， m), 2.63 (3H， s)， 3.65 (2H, d, J=7.0 Hz), 3.88 (3H, s), 4.29 (2H, q， J=7.0 Hz), 4.61 (2H， s)， 5.39 (1H, d, J=16.0 Hz), 5.46 (1H， t, J=7.0 Hz), 5.89 (1H, d， J=16.0 Hz), 10.42 (1H, s). ESMS (electrospray mass spectrum, positive) (m/z): 505 {(M+H)⁺, C₂₈H₃₇0₆ ³⁵C1 + H+}， 507 {(M+H)⁺, C₂₈H₃₇0₆ ³⁷C1 + H⁺}

B . 4-ひ Carboxymethyl-2-ひ methylascochlorin (2)；化合物 27

上記で得られた (1) (0.207 g, 0.409 mmol)をメタノール (6.2 ml)に溶解し、 20% 炭酸力リゥム水溶液 (1 ml, 1.45 mmol)を加えて、室温で 2時間撹拌した。反応液を 3N塩酸で pH2に調整した後、ェ一テルで抽出した。有機層を水、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（SiO₂ 15 g, ジクロロメタン -メタノール）により精製して 0.122 g (63%)の（2) を得た（無色粘稠油状物質， as a colorless gumノ。

IR (film): 1715， 1696. NMR (CDC1₃, 500 MHz): 0.70 (3H, s), 0.81 (3H， d, J=6.8 Hz), 0.83 (3H, d, J=6.8 Hz), 1.62 (1H， qd, J=13.5, 6.0 Hz), 1.91 (3H， br s), 1.91-1.97 (2H， m)， 2.34-2.45 (3H, m)， 2.63 (3H, s), 3.62 (2H， d, J=6.9 Hz), 3.84 (3H， s), 4.65 (2H, s), 5.42 (1H, d, J=16.0 Hz), 5.43 (1H， t, J=6.9 Hz), 5.89 (1H， d, J=16.0 Hz), 10.42 (1H, s). 調製 3

4- Q-(4-Carboxybutanoyl)ascochlorin (4)；ィ匕合物 29

ascochlorin (0.150 g, 0.358 mmol) を無水ピリジン (1.5 ml) に溶解し、 4-ジメチルァミノピリジン (4.4 mg, 0.036 mmol)とグルタル酸無水物 (0.049 g, 0.430 mmol)を加えた。反応液を 5 0でで一夜撹拌後、 1N塩酸を加えて pH2とし、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一（Si0₂ 13 g，へキサン-酢酸ェチル）により精製して 0.081 g(42%)の（4) を無色結晶として得た。

m 120-123で IR(KBr disc): -3000, 1771, 1711， 1649. NMR (CDC1₃, 500 MHz): 0.70 (3H， s), 0.81 (3H, d, J=7.0 Hz), 0.83 (3H， d, J=7.0 Hz), 1.59- 1.66 (1H, m)， 1.88 (3H， s), 1.89-1.96 (2H， m)， 2.12 (2H, qui, J=7.2 Hz), 2.34- 2.45 (3H, m), 2.55 (2H， t, J= 7.2 Hz), 2.65 (3H， s), 2.76 (2H, t, J=7.2 Hz), 3.42 (2H, br d, J=6.0 Hz), 5.35 (1H， t, J=7.0 Hz), 5.39 (1H, d, J=16.0 Hz), 5.87 (1H, d, J=16.0 Hz), 10.30 (1H, s)， 12.54 (1H, s). 調製 4

4- O-Isonicotinoyl-2- O-methylascochlorin (5)；ィ匕合物 31

2-ひ methylascochlorin (61.3 mg, 0.146 mmol) を無水ピリジン（1 ml) に溶解し、塩化イソニコチノィル塩酸塩（71.7 mg, 0.403 mmol)を加えた。反応液を室温で 3時間撹拌後、水を加えてさらに 3 0分撹拌し、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和硫酸銅水溶液、水、飽和重曹水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、残滓をシリ力ゲルカラムクロマトグラフィー（SiO₂ 10 g, へキサン-酢酸ェチル）により精製して 69.3mg (90%)の（5) を得た（無色粘稠油状物質， as a colorless gum) 。

IR(film): 1760， 1710, 1700. NMR (CDC1₃, 500 MHz): 0.69 (3H, s)， 0.76-0.83 (6H, br), 1.59-1.64 (1H, m), 1.65 (3H, br s), 1.85-1.96 (2H, m), 2.32-2.45 (3H, m), 2.67 (3H, s), 3.39-3.50 (1H, br), 3.50-3.63 (1H, br), 3.88 (3H, s), 5.29 (1H， d, J=16.0 Hz), 5.34 (IH, t, J=7.0 Hz), 5.82 (1H， d, J=16.0 Hz), 7.79-7.99 (2H， m), 8.87 (2H, m), 10.49 (IH, s). ESMS (electrospray mass spectrum, positive) (m/z): 524 {(M+H)⁺, C₃₀H₃₄NO₅ ³⁵Cl + H+}， 526 {(M+H)⁺, C₃₀H₃₄NO₅ ³⁷Cl + H+}。調製 5

4- O-Isonicotinoylascochlorin (6)；ィ匕合物 30

ascochlorin (0.200 g, 0.494 mmol) を無水ピリジン（1 ml) に溶解し、塩化ィソニコチノィル塩酸塩（0.242 g, 1.36 mmol)を加えた。反応液を室温で 3時間撹拌後、水を加えてさらに 3 0分撹拌し、エーテルで抽出した。有機層を飽和硫酸銅水溶液、水、飽和重曹水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシゥムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、生成した結晶をへキサン-エーテルから再結晶することにより精製して 0.199 g (79%)の（6) を無色結晶として得た。 - mp 119-121^ IR(film): 1752， 1711, 1642. NMR (CDC1₃, 500 MHz): 0.68 (3H, s), 0.79 (3H, d, J=7.0 Hz), 0.81 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.59-1.65 (1H， m), 1.68 (3H, br s)， 1.86-1.96 (2H, m), 2.33-2.44 (3H, m), 2.69 (3H， s), 3.34-3.46 (IH, br), 3.46-3.60 (IH, br), 5.29 (IH, d, J=16.0 Hz), 5.36 (1H， t， J=7.0 Hz), 5.82 (IH, d, J=16.0 Hz), 8.01 (2H， br d， J=4.6 Hz), 8.85-8.95 (2H, br), 10.35 (IH, s), 12.60 (IH, s). ESMS (electrospray mass spectrum, negative) (m/z): 508 {(M-H)', C₂₉H₃₂NO₅ ³⁵Cl - H+}， 510 {(M-H)", C₂₉H₃₂N0₅ ³⁷C1 - H+}。調製 6

A . 4-ひ Acetyl-2-ひ methvascofuranone (8) ；化合物 27の前駆体

4-O-ascofuranone (0.301 g, 0.651 mmol)をァセトン (2 ml)に溶解し、炭酸力リゥム (99 mg， 0.716 mmol) , ヨウ化メチル (0.0484 ml, 0.781 mmol)を加えて 2時間加熱環流した。反応液をろ過後、ろ液をエーテルで希釈して水、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（SiO₂ 10 g，へキサン-酢酸ェチル）により精製して 75.5 mg (24%)の（8) を得た（無色粘稠油状物質, as a colorless gum) 。

NMR (CDCI3, 500 MHz): 1.22 (3H, s)， 1.28 (3H, s)， 1.64 (3H， s), 1.77 (3H， br s)， 2.04 (2H， t, J=7.8 Hz), 2.09-2.20 (2H， m), 2.35 (3H, s), 2.39 (1H， dd, J=18.2, 10.0 Hz), 2.47 (1H， dd, J=18.0, 6.2 Hz), 2.63 (3H, s), 3.33 (2H, d， J=6.5 Hz), 3.83 (3H, s), 4.52 (1H， dd, J=10.0, 6.2 Hz), 5.08 (1H, tq, J=6.5, 1.3 Hz), 5.52 (1H, t, J=6.6 Hz), 10.44 (1H， s).

B . 2- O-methvlascofuranone (7)；化合物 27

上で得た (8)(63.5 mg, 0.133 mmol)をメタノール (4.2 ml)に溶解し、 1 %水酸化ナトリゥム水溶液 (4.2 ml, 1.05 mmol) を加え室温で 4時間撹拌した。反応液を 2N 塩酸で中和した後、メタノールを留去し、残滓を水で希釈して酢酸ェチルで抽出した。有機層を水、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシゥムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一（Si0₂ 10 g, へキサン-酢酸ェチル）により精製して 52.1 mg (90%) の（7 ) を得た（無色粘稠油状物質， as a colorless gum) 。

IR(film): 3390， 1756, 1686, 1564. NMR (CDC1₃, 500 MHz): 1.22 (3H， s), 1.29 (3H， s), 1.64 (3H, br s)， 1.80 (3H， br s)， 2.06 (2H， t, J=7.5 Hz), 2.12-2.22 (2H, m), 2.40 (1H, dd, J=18.0, 10.0 Hz), 2.47 (1H, dd, J=18.0, 6.5 Hz), 2.66 (3H， s)， 3.42 (2H， d, J=6.6 Hz), 3.82 (3H， s), 4.53 (1H, dd, J=10.0, 6.5 Hz), 5.20 (1H, tq, J=6.9, 1.2 Hz), 5.51 (1H， t, J=6.9 Hz), 6.35 (1H, s)， 10.37 (1H, s). ESMS (electrospray mass spectrum, negative) (m/z): 433 {(M-H)', C₂₄H₃₁0₅ ³⁵C1 - H+}， 435 {(M- ); C₂₄H₃₁O₅ ³⁷Cl - H+}。調製 7

4- O-(4-Carboxybutanoyl)ascofuranone C9)；ィ匕合物 15

sacofuranone (0.100 g, 0.238 mmol) を無水ピリジン（1 ml) に溶解し、 4-ジメチルァミノピリジン (2.9 mg, 0.04 mmol)とグルタル酸無水物 (0.033 g, 0.490 mmol)を加えた。反応液を 5 0 で一夜撹拌後、 1N塩酸を加えて pH2とし、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、残滓をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一（SiO₂ 10 g, へキサン-酢酸ェチル）により精製して 0.040 g (32%)の（9) を得た（無色粘稠油状物質， as a colorless gum) 。

IR(film): -3000, 1752, 1713, 1638. NMR (CDC1₃, 500 MHz): 1.23 (3H， s), 1.29 (3H, s), 1.63 (3H, br s)， 1.74 (3H， br s), 2.02 (2H, t, J=7.5 Hz), 2.11 (2H, qui, J=7.0 Hz), 2.12-2.17 (2H, m), 2.37 (1H， dd, J=18.2， 10.0 Hz), 2.44 (1H， dd, J=18.2, 6.3 Hz), 2.54 (2H， t, J=7.0 Hz), 2.65 (3H, s), 2.76 (2H, t, J=7.0 Hz), 3.24-3.31 (2H, br), 4.55 (1H， dd, J=10.0, 6.3 Hz), 5.07 (1H， tq, J=7.0, 1.5 Hz), 5.50 (1H, br t, J=7.0 Hz), 10.30 (1H， s)， 12.52 (1H, s). 調製 9

4-ひ Isonicotinoylascochlorin (10)；ィヒ合物 14

ascofuranone (0.200 g, 0.476 mmol) を無水ピリジン（1 ml) に溶解し、塩化ィソニコチノィル塩酸塩（0.233 g, 1.31 mmol)を加えた。反応液を室温で 1時間撹拌後、水を加えてさらに 3 0分撹拌し、エーテルで抽出した。有機層を飽和硫酸銅水溶液、水、飽和重曹水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸マグネシゥムで乾燥した。乾燥剤を濾別した後、減圧濃縮し、残滓をシリカゲルカラムク口マトグラフィー（Si0₂ 10 g, へキサン-酢酸ェチル）により精製して 0.135 g (54%) の（10) を得た（無色粘稠油状物質， as a colorless gum) 。

IR(film): 1756, 1644. NMR (CDC1₃, 500 MHz): 1.21 (3H, s)， 1.28 (3H， s)， 1.53 (3H, br s)， 1.62 (3H, br s), 1.88-1.97 (2H, m), 2.02-2.12 (2H， m), 2.35 (1H, dd, J=18.0, 10.0 Hz), 2.42 (1H, dd, J=18.0, 6.3 Hz), 2.69 (3H， s), 3.21-3.33 (1H, br), 3.33-3.46 (1H， br), 4.51 (1H, dd, J-10.0, 6.3 Hz), 5.09 (1H， br t， J=7.0 Hz), 5.48 (1H, br t， J=7.0 Hz), 8.00-8.02 (2H， m), 8.89-8.91 (2H, m), 10.35 (1H, s), 12.60 (1H, s). ESMS (electrospray mass spectrum, negative) (m/z): 524 {(Μ-Η)·, C₂₉H₃₂N0₆ ³⁵C1 - H+}， 526 {(M-H) -， C₂₉H₃₂N0₆ ³⁷C1 - H+} 実施例 1

一錠中に化合物- 1、 63mg、セスキォレエート ·ソルビ夕ン 10 mg、粉末シリ力ゲル 10 mg、とうもろこし澱粉 40 mg、レヒドロキシプロピルセルロース (PO-30) 50 mg、ヒドロシキプロピルセルロース- SL 12 mg 微結晶セルロース 46 mg、カルポキシメチルセルロース ·ナトリウム塩 10 mg、ステアリン酸カルシウム 3 mg、タルク 6 mgを含むよう各原料を混合し、定法通りに顆粒化してから打錠して錠剤化した。実施例 2

粉砕した化合物- 11、 63 gに乳糖 50グラム、コーンスターチ 60 g、 L-ヒドロキシプロピルセルローズ 30 g、ヒドロキシプロピルセルローズ- SL 12 g、微結晶セルローズ 46 g、カルボキシメチルセルローズ Πナトリウム塩 10 g、ステアリン酸カルシウム 3 g、タルク 6 gを混合し、定法通りに顆粒化してから打錠して一錠が 0.25 gの錠剤とした。実施例 3

化合物- 21、 100 g、微結晶セルローズ 70 g、乳糖 35 g、カルボキシメチルセルローズ ·カルシウム塩 70 g、コーンス夕一チ 70 g及びステアリン酸マグネシゥム 5 gを混合し、定法通りに打錠して一錠が 0.35 の錠剤を調整した。実施例 4

移入遺伝子活性検定系において、本発明の化合物はリポーター遺伝子の発現を増大させた。すなわち、 PPAR応答エレメントによって発現が制御されるリボー夕一遺伝子プラスミドと PPARァ発現プラスミドを COS-1細胞に導入した後、その導入細胞を本発明の化合物で処理すると、リポーター遺伝子の発現量が増加する。この結果は本発明の化合物が PPARのァゴニストであり、これらの化合物が PPARを介して遺伝子の発現を制御していることを示している。

COS-1 細胞へのプラスミド導入：遺伝子導入は Life Technologies 社の LipofectAMINE試薬を用いて定法通りに行つた。 1 X 10⁵の細胞を 10%ゥシ胎児血清を含む 2 mlのダルべッコの最小培地 (DMEM)に分散させて 35 mmのぺトリ皿に流し込み、炭酸ガス孵卵器中で 17時間培養した。次に培地を除去し、ぺトリ皿に接着している細胞をリン酸生理食塩水 (PBS)で洗浄した後、 LipofectAMINE 試薬を用いて遺伝子導入を行った。すなわち、 PPAR応答エレメントによって発現が制御されるルシフェラーゼ遺伝子プラスミド、 PPAR発現プラスミド及び遺伝子導入率をしらべるため 3ガラクトシダ一ゼ遺伝子プラスミドをそれぞれ 4 mg、 4 rag, 2 mg 含む最小血清培地、 OptiMEM(Life Tecnologies 社) 500 ml と LipofectAMINE 50 mlを溶かした OptiMEM 500 mlをあらかじめ混合して、室温で 15分間保温した。この混合液 100 mlと OptiMEM 400 mlを混合してぺトリ皿に加え、炭酸ガス孵卵器中で三時間 37でで保温した。遺伝子導入用培地をべトリ皿から吸引して除去し、活性炭処理した血清 10%と被験物質を含む DMEM 培地を加え、 37°Cで 20時間培養した。被験物質としては化合物番号 1、 11， 12 及び 20、対照としてピオダリ夕ゾン及びトロダリ夕ゾンを加えた。さらに、被験物質の溶媒であるジメチルスルフォキシド（最終濃度 0.1 % ) を培地に加えた。ペトリ皿の培地を吸引して除去した後、 250 mlの培養細胞溶解液（25 mM Tris phosphate bufter ( H 7.8)、 2 mM 1,2-diaminocyclo-hexane-N, Ν,Ν',Ν'- tetraacetate, 10% glyceroL 1% Triton X- 100を加え、ラバ一ポリスマンで細胞を剥離して集めた。凍結融解して細胞を完全に破壊した後、 4°Cで遠心分離 (15,000 rpm, 2 min)した上清を測定用の試料とした。 20 mlの上清に 100 mlのルシフェラ一ゼ基質溶液 (2.14 mg Co-A, 100 ml 470 mM D-Luciferin, 200 ml 530 mM ATP, 2 mlの DTT-Tricine buffer (pH 7.8)を添加し、ルミノメーター (ATTO ルミノセンサー AB-2000)で蛍光を測定した。導入効率測定用の /3ガラクトシダ一 I JEには、 Luminescent β -galactosidase detection kit II (Clontech)を用いて、蛍光をルミノメータ一で測定した。結果は表 5で示すように本発明の化合物は PPARの特異的なリガンドであることが判明した。表 5 . 本発明の化合物による PPARリセプ夕一の活性化と移入遺伝子の転写増大

受容体の活性化

化合物名

PPAR PPAE /3 ΡΡΑΕ τ

+ + + + ピオグリタゾン + + + +

化合物- 1

化合物- 7

化合物- 21 + +

化合物- 25

化合物- 26 + +

化合物- 27 + +

化合物- 29

デヒドロアスコフラノン + +

活性化の度合いは次のように表した。

<10"⁶Μ以下に活性化のピークがある

10·⁶〜10-⁵Μに活性化のピークがある

+ + ： 10-⁵~10·⁴Μに活性化のピークがある

+ ： >10·⁴Μにピークがある実施例 5

本発明の化合物は、結節性動脈周囲炎及び動脈瘤を阻止する効果を示す。動脈瘤阻止効果を判定するため、定量的に取り扱えるラット高血圧症モデルを用い、腸間膜動脈に生じた動脈瘤を計測し統計処理して効果を判定した。摘出した腸間膜から膜部分をピンセットで除去し、残った細動脈をホルマリン固定した後、月旨肪染色した。動脈の本数及び動脈瘤の数を三回数え、平均して細動脈一本あたりの動脈瘤数を算出する方法である。高血圧モデルとしては、片側の腎臓を摘出して腎機能を低下させたラッ卜に、飲料水としては血漿の浸透圧よりやや高い 0.9% の食塩水を与え、一週間ごとにミネラル ·コルチコィドであるデォキシコルチコステロン 'アセテート（DOCA) を 10 mg/kg皮下投与した。麻酔下にウイス夕一系雄ラット（12頭）から左側腎臓を摘出した。腎臓摘出ラットは一週間の回復期間の後に無作為に二群に群分けした (n=6)。二群のなかの一つを対照群、他方を化合物- 1投与群とした。化合物- 1は実験開始三週目から 100 mg/kgを強制経口投与した。実験期間は 7週間とし、実験開始とともに各群の摂餌量、飲水量、尿量、体重及び血圧を三日ごとに測定した。

血圧は急速に上昇し 3週目には平均血圧が 180 mmHgを越えた。三週目から化合物- 1の経口投与を開始したが、対照群と比べ有意な血圧上昇阻止作用は認められなかった。 7週目に解剖し、腸間膜動脈を摘出し、ホルマリン処理の後、脂肪染色して動脈瘤の数を数えた。高血圧対照群は、すべての個体に動脈瘤を認め、一本の腸間膜動脈あたり平均 1.72±0.74個 (mean土 SE)の動脈瘤を数え、高血圧性の動脈病変が進展していることを示唆した。化合物- 1群では一本の細動脈あたりの動脈瘤は平均 0.51 ±0.37個 (mean土 SE)であった。本発明の化合物は、結節性動脈周囲炎から動脈瘤への進展を抑制することは明らかである。実施例 6

化合物- 17の遺伝性肥満糖尿病マウス C57BL/ksj db/dbにおける多飲多尿の改善と尿糖排泄抑制効果を次のような実験で証明した。 30~32週令の雄性 db/db マウス 10頭をランダムで 2群に分け (n=5)、一方を対照群、他方を化合物- 17群とした。飼料および飲料水を自由摂取させた。飼料は日本クレアのマウス Πラット様標準飼料 CE-2粉末とし、化合物- Γ7をアセトンに溶かした後、溶液を飼料に振りかけ、風乾してアセトンを飛散させてからペレツトに成形した。化合物- 17 の添加量は、飼料の 0.1%である。対照飼料も同量のアセトンを振りかけた後、ペレツトイ匕した。

両群とも最初の 7日間は対照飼料を与え、摂餌量、尿量、尿糖濃度および尿糖排泄量をしらベた。次の 5日間は治療群に化合物- 17を 0.1%混合した飼料を与えた。薬物投与群はさらに 4 日間、対照飼料に戻して飼育してから、 20〜24 日目の 5日間は再び 0.1%化合物- 17含有飼料を与えた。 db/dbマウスは代謝ケージに個別飼育すると、摂餌量、飲水量が大きく変動するので、 5頭をラット用代謝ケージに収容し、ケージ毎に得られた数値は 5で除して図 1に示した。図 1から明らかなように、化合物- 17 を飼料に混合して与えると、尿量、尿糖濃度及び尿糖排泄量が激減することがわかる。投与を中止しても 24時間後でも尿糖排泄量は、対照期間と比べて 50%以下で化合物- 17は持ち越し効果を有することがわかる。実施例 7 (ストレブトゾトシン糖尿病に対するァスコフラノンの軽減作用）

体重約 250グラムのウィスター系雄ラットにストレプトゾトシン（50 mg/kg) を尾静脈から注入し、インスリン欠乏性糖尿病モデルを作成した。化合物- 1はストレプトゾトシン投与の直後から一日一回、 100 mg/kgをァラビアゴム液に懸濁して経口投与した。動物は 7日目と 14 日目に採尿ケージに 24時間収容し、 24 時間用を採取した。表 6に示すように健常対照群の飲水量と比べ糖尿病対照群のそれは 7日目で 4.1倍、 14日目で 4.5倍に増加した。これに対し、化合物- 1投与群では糖尿病対照群と比べ、 7日目で 41.4%、 14日目で 43.6%と有意に低いレべルに抑制された。三群の摂餌量、飲水量、尿量及び尿糖排泄量を表に示した。糖尿病対照群の摂餌量は健常対照群と比べ約 1.5倍に増加し、化合物- 1投与群では糖尿病対照群と比べ 7日目で 14.3%、 14日目で 23.3%それぞれ有意に減少した。しかし、体重増加は健常群が 80 g/週であるのに対し、糖尿病対照群は僅かに 18 gl 週の増加にとどまった。化合物- 1投与群は、糖尿病対照群より摂餌量が少ないにもかかわらず 30 g/週の体重増加を示した。化合物- 1の投与によって代謝が改善され、尿糖の排泄が大きく減少したためである。表 6

糖尿病対照群、 n=9、糖尿病化合物- 1投与群、 n=8，健常対照群、 n=5

*Pく 0.05， **P<0.01, in Student's t-test. 実施例 8

10頭の 12週令 db/dbマウス尾静脈から採血し、両群の平均血糖値が 700 mg/dl 前後になるよう 5頭ずつ二群に分け、一群を対照群、他方を化合物- 25 投与群として採尿ケージに収容した。化合物- 25は一日一回、 60 mg/kgを経口投与した。実験開始から 1， 2 , 3， 5 , 7及び 1 0日目に尾静脈から少量を採血して血糖を測定した。また、同じタイミングで 2 4時間尿を集め、尿糖排泄量を酵素法で測定した。結果は図 2に示すとおり尿糖は投与開始の翌日で半分に減少しており、 3日目以降は 90%以上も排泄量が減少した。血糖は投与 3日目から有意に減少し、 7日目で 30%以上の低下率を示した。実施例 9

体重 2 5グラムの雌性 NODマウス 4 0頭をランダムに 4群に分け、一群を対照群、一群を化合物- 1 50mg k_g投与群、一群を化合物- 1 (25mg/kg) 投与群、残りの一群を化合物- 25 (50 mg/kg) 投与群とした。化合物- 1及び化合物- 25は 2% アラビアゴム液に懸濁して毎週二回、月曜と金曜に腹腔内に投与した。マウスは 2 4週間飼育し、この間月曜と金曜に尿糖検出テープを用いて尿糖排泄の有無を検査した（図 3 )。実施例 1 0

表面プラズモン共鳴センサ一は（商品名：ビアコア ·カラム）を使って固定した PPARrリセプターに本発明の化合物が結合するかどうかを検定した。図 4に化合物- 27と対照として用いたピオダリ夕ゾンについてのセンサ一グラムを示す。図から明らかなように本発明の化合物は in vitroでも PPAR rリセプ夕一に結合するのに対し、対照として用いたピオグリタゾンは結合しない。実施例 1 1 (担ガンマウスの化合物- 1による高脂血症阻止）

この実験では悪疫質の指標として、正確な測定が難しい血中の TNF aより簡単に測定できる血清中性脂肪を選び、定量化が困難な TNFひの動態を知るための補助マーカ一とした。雄性の 5週令 ddY系マウス 4 0頭を無作為に 5群に分け (n=8)、そのうち 4群の腹腔内にエーリツヒ腹水ガン細胞 2 X 10⁶個を移植した。ガン細胞を移植しない群は、健常対照群とした。ガン細胞の移植 2 4時間後から三つの群に化合物- 1をそれぞれ 100〜400 mg/kgを腹腔内投与し、残りの一群は化合物 -1を含まぬ溶媒である 0.1%ツイ一ン -80 (0.2 ml) のみを投与した。ガン細胞移植の 8日目に担ガンマウスの心臓より採決し、分離した血清を用いて中性脂肪を定量し、血中の TNF aは免疫電気泳動法で検出した。

表 7 . 化合物- 1による担ガンマウスの高中性脂肪血症阻止作用一 (平均値士標準誤差）投与量体重血清中性脂肪

統計的有意差 ^a) 血中 TNFひ

(mg/kg) ^g/mouse) (mg/dl)

0 40.0 ± 1.0 401.1土 73.8 ++++

100 38·0± 1.0 258·2± 53·2 NS +++

200 36.7 ±0.7 185.1 ±26.2* Pぐ 0.02 ++

400 31.3± 1.1 99.1 ± 18.3** P<0.002 ++

0 (正常対照群） 30.0±0.5 47.7土 3.5*** Pぐ 0.001 +

a) Student's t-test. (n=8) 担ガンマウスの体重増加は、ガン細胞増殖に伴って増加する腹水貯留によるものである。

表 7に示すように対照群マウスの血清中性脂肪は、健常マウスのそれと比べ大きく上昇している。さらに飼料の摂取量を健常と担ガンで比較すると、担ガンマウスの摂取量は日を追って減少し、 6日目を過ぎるあたりからエネルギーバランスはネガティブになっていることが伺われる。つまり、エーリツヒ腹水ガンによる死因は、飼料から摂取するエネルギーが消費を下回ったための餓死である。ガン細胞からの TNFひ過剰放出による (a)異化反応の昂進、（ )末梢組織におけるィンスリン抵抗性の発現によるグルコース同化反応の低下、（c)ガン細胞によるダルコースの優先的な消費が重なり、生体はエネルギー不足を補うため筋肉の蛋白質を動員し、肝臓で中性脂肪に転換して末梢組織に送り込む状態に陥っていることを示唆している。

一方、化合物-を投与した群は、用量依存性に血清中性脂肪の増加が抑制され、血糖値の有意な増大がみられ、血中 TNF aも低下傾向になるところから、化合物 -1はガン細胞による TNF Q!産生を抑制していることが示された。

Claims

請求の範囲

；並びにァスコフラノン同族体又はァスコクロリン同族体であって、少なくともォルシルアルデヒド部分を有し、該ォルシルアルデヒド部分の 2位及びノ又は 4位の水酸基の水素が、一（0^〜（：₁₅ アルキル若しくはァルケニル、ァリール、（(^〜（：₁₅) アルキルァリール、 — CH₂COOH、一 CH₂COO ( ^ アルキル、 —C =〇）（(^〜(：₁₅ アルキル、 -C (=0) ァリール、 —C (=0) (じ〜^ アルキルァリール、 — C (= 〇） (CH₂) ₁₅COOH、ニコチノィル又はイソニコチノィルからなる群より選択される基により置換されている前記同族体；からなる群より選択される化合物である、核内リセプ夕ー PPARのリガンド。

2. 化合物が、式

[式中、

Xは、

であり；

1^は、 H、一（(^〜(：₅) アルキル又はアルケニル、又は一 C ( =〇） (C, 〜C₅) アルキルであり；

R₂は、 H、一（ ^ Cs) アルキル又はアルケニル、 — CH₂C〇OH、一 C H₂COO ((^〜（：₅) アルキル、 —C (=0) (Ci Cs) アルキル、一 C (= O) (CH₂) ^₅COOH, ニコチノィル又はイソニコチノィルであり；及び R₃は、 H又は C 1である

(但し、 Xが

であり、が Hであり、 R₂が Hであり、かつ R₃が C 1である場合を除く） ] で表される、請求項 1に記載の核内リセプター PPARのリガンド。

3. 式 0

う H₃C OR₂

R₃

[式中、

Xが、

であり；は、 H、 - (Ct Cs) アルキル又はアルケニル、又は— C (=0) (C ₂〜C₅) アルキルであり；

R₂は、 H、一 CH₂C〇OH、 —CH₂C〇〇（（^〜€：₅) アルキル、 — C (=〇）（Ci Cs) アルキル、 — C (=〇） (CH₂) ^sCOOH, ニコチノィル又はイソニコチノィルであり；及び

R₃は、 H又は C 1である

(但し、が Hであり、 R₂が Hであり、かつ R₃が C 1であるときを除く）力、：又は Xが、

であり；は、 H、 - ((^〜(：₅) アルキル又はアルケニル、又は—C ( =〇） (C i Cs) アルキルであり；

R₂は、 H、 ― （(^〜(：^ アルキル又はアルケニル、 — CH₂C〇〇H、一 CH₂C〇〇（Ci Cs) アルキル、 —C (=0) ((^〜。アルキル、一 C

、ニコチノィル又はイソニコチノィルであり；及び

R₃は、 H又は C 1である]

で表される化合物、又はその医薬として許容できる塩。

4. 式：

ぼ中

R¹は、 H、一（(^〜(：^ アルキル又はアルケニル、又は一 C ( = 0) (Cj C₅) アルキルであり；及び

R²は、 H、一（(^〜(：^ アルキル、 — CH₂COOH、 -CH₂COO (C_: 〜(： ₅) アルキル、 — C ( = 0) ((^〜(：アルキル、一 C (=0) (CH₂) ^₅COOH, ニコチノィル又はイソニコチノィルである

(但し、 R¹が Hであり、かつ R²がー CH₂COOH又はニコチノィルである場合を除く） ]

で表される化合物、又はその医薬として許容できる塩。

'

5. 請求項 3又は 4に記載の化合物である、核内リセプ夕ー PPARのリガンド。

6. 核内リセプタ一 PPARリガンド依存性の遺伝情報の転写の制御により改善される疾患又は状態の治療及び Z又は予防のために有効な量の請求項 1、 2 又は 5項に記載の核内リセプター PPARのリガンドと、医薬として許容できる添加物とを含む、前記疾患又は状態の治療及び Z又は予防用医薬組成物。

7. 疾患又は状態が、ィンスリン抵抗性発現による Π型糖尿病を含む糖尿病；高血圧症又は脳血管障害；心臓冠状動脈硬化症を含む動脈硬化症；糖尿病合併症；血管、肝臓、腎臓、関節、腸管及び膝臓を含む臓器の慢性炎症、並びに自己免疫疾患に関連する慢性炎症を含む慢性炎症；末期ガン患者に起こる悪液質；大腸ガン、胃ガン、及び肝臓ガンを含む消化器系のガンである、請求項 6に記載の医薬組成物。

8. 滕臓ランゲルハンス島 0細胞が変性及び/又は壊死するのを阻止するために有効な量の請求項 1、 2又は 5項に記載の核内リセプター PPARのリガンドと、医薬として許容できる添加物とを含む、隧臓ランゲルハンス島 3細胞が変性及び Z又は壊死するのを阻止し、前記細胞にインスリン産生機能を保持させるための組成物。

9 . 添加物が、脂肪族系合成界面活性剤又は有機溶媒可溶高分子助剤である、請求項 6、 7又は 8項に記載の組成物。

1 0 . 哺乳動物における核内リセプ夕一 PPARリガンド依存性の遺伝情報の転写の制御により改善される疾患又は状態の治療及び又は予防のための方法であって、治療及び/又は予防のために有効な量の請求項 1、 2、 3又は 4に記載の化合物を、所望により医薬として許容できる添加物とともに、哺乳動物に投与することを含む、前記方法。

1 1 . 疾患又は状態が、ィンスリン抵抗性発現による Π型糖尿病を含む糖尿病；高血圧症又は脳血管障害；心臓冠状動脈硬化症を含む動脈硬化症；糖尿病合併症；血管、肝臓、腎臓、関節、腸管及び降臓を含む臓器の慢性炎症、並びに自己免疫疾患に関連する慢性炎症を含む慢性炎症；末期ガン患者に起こる悪液質；大腸ガン、胃ガン、及び肝臓ガンを含む消化器系のガンである、請求項 1 0に記載の方法。

1 2 . 哺乳動物における滕臓ランゲルハンス島 /3細胞が変性及びノ又は壊死するのを阻止するための方法であって、変性及びノ又は壊死するのを阻止するために有効な量の請求項 1、 2、 3又は 4項に記載の化合物を、所望により医薬として許容できる添加物とともに、哺乳動物に投与することを含む、前記方法。

1 3 . 添加物が、脂肪族系合成界面活性剤又は有機溶媒可溶高分子助剤である、請求項 1 0、 1 1又は 1 2に記載の方法。

1 4 . 哺乳動物における核内リセプタ一 PPARリガンド依存性の遺伝情報の転写の制御により改善される疾患又は状態の治療及び Z又は予防のための、所望により医薬として許容できる添加物をともに用いる、治療及びノ又は予防のために有効な量の請求項 1、 2、 3又は 4に記載の化合物の使用。

1 5 . 疾患又は状態が、インスリン抵抗性発現による Π型糖尿病を含む糖尿病；高血圧症又は脳血管障害；心臓冠状動脈硬化症を含む動脈硬化症；糖尿病合併症；血管、肝臓、腎臓、関節、腸管及び膝臓を含む臓器の慢性炎症、並びに自己免疫疾患に関連する慢性炎症を含む慢性炎症；末期ガン患者に起こる悪液質；大腸ガン、胃ガン、及び肝臓ガンを含む消化器系のガンである、請求項 1 4に記載の使用。

1 6 . 哺乳動物における滕臓ランゲルハンス島 /3細胞が変性及びノ又は壊死するのを阻止するために、所望により医薬として許容できる添加物をともに用いる、変性及び又は壊死するのを阻止するために有効な量の請求項 1、 2、 3又は 4に記載の化合物の使用。

1 7 . 添加物が、脂肪族系合成界面活性剤又は有機溶媒可溶高分子助剤である、請求項 1 4、 1 5又は 1 6に記載の使用。

1 8 . 哺乳動物における核内リセプ夕一 PPARリガンド依存性の遺伝情報の転写の制御により改善される疾患又は状態の治療及び/又は予防用医薬の製造のための、所望により医薬として許容できる添加物をともに用いる、請求項 1、 2、 3又は 4に記載の化合物の使用。

1 9 . 疾患又は状態が、インスリン抵抗性発現による Π型糖尿病を含む糖尿病；高血圧症又は脳血管障害；心臓冠状動脈硬化症を含む動脈硬化症；糖尿病合併症；血管、肝臓、腎臓、関節、腸管及び塍臓を含む臓器の慢性炎症、並びに自己免疫疾患に関連する慢性炎症を含む慢性炎症；末期ガン患者に起こる悪液質；大腸ガン、胃ガン、及び肝臓ガンを含む消化器系のガンである、請求項 1 8に記載の使用。

2 0 . 哺乳動物における滕臓ランゲルハンス島) 3細胞が変性及びノ又は壊死するのを阻止するための医薬の製造のための、所望により医薬として許容できる添加物をともに用いる、請求項 1、 2、 3又は 4項に記載の化合物の使用。

2 1 . 添加物が、脂肪族系合成界面活性剤又は有機溶媒可溶高分子助剤である、請求項 1 8、 1 9又は 2 0に記載の使用。

2 2 . 核内リセプ夕ー PPARのリガンドとして機能可能な化合物と血清タンパク質のアミノ基とのシッフ塩基であって、該化合物が請求項 1、 2、 3又は 4 に記載の化合物である、前記シッフ塩基。