WO1995009695A1 - Ionenaustauscher - Google Patents

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WO1995009695A1
WO1995009695A1 PCT/EP1994/003168 EP9403168W WO9509695A1 WO 1995009695 A1 WO1995009695 A1 WO 1995009695A1 EP 9403168 W EP9403168 W EP 9403168W WO 9509695 A1 WO9509695 A1 WO 9509695A1
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separation
alkyl
exchange chromatography
ion exchange
polymers
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Egbert Müller
Roland Gensert
Peter Poguntke
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Merck Patent Gmbh
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    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/3278—Polymers being grafted on the carrier
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction
    • B01D15/361—Ion-exchange
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
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    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
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    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/327—Polymers obtained by reactions involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
    • B01J39/26—Cation exchangers for chromatographic processes

Definitions

  • the invention relates to separation materials for ion exchange chromatography.
  • Ionic graft polymers are known from DE 38 11 042 for ion exchange chromatography, in particular of macromolecules of biological origin (biopolymers), in which all monomer units have the respective ionic structural elements. Despite the generally excellent properties of these ion exchangers, it was found in individual applications that individual analyte bands were only insufficiently separated.
  • the object of the present invention is to provide release materials with improved properties.
  • CR1R2 CR3
  • R1, R2 and R3 independently of one another H or CH3,
  • R4 is H, C1-C5-alkyl or C6-C12-aryl and n is an integer between 1 and 5
  • the invention thus relates to separating materials for ion exchange chromatography based on hydroxyl-containing base supports, on the surfaces of which polymers are covalently bonded, characterized in that
  • the base support contains aliphatic hydroxyl groups
  • the polymers contain both monomer units of the formula II and of the formula III,
  • I 0 C - O - (CH2) n - CH-CH-R4
  • R, R2 and R3 are independent of each other H or CH3.
  • R4 is H, C1-C5-alkyl or C6-C12-aryl, n is an integer between 1 and 5, one radical X OH and the other radical X NR5R6, N + R5R6R7 or SO3H and
  • the invention relates to the use of the separation materials according to the invention in the separation of mixtures of at least two substances, in particular for the separation of biopolymers, by means of ion exchange chromatography.
  • the invention also relates to processes for the preparation of separating materials for ion exchange chromatography, characterized in that activated carrier materials containing oxirane known from DE 43 10964 with sulfurous acid or its salts or with primary, secondary or tertiary amines of the formula IV
  • the invention relates to processes for the separation of mixtures of at least two substances, in particular for the separation of biopolymers, by means of ion exchange chromatography using the separation materials according to the invention.
  • Figure 1 shows an elution curve (breakthrough curve); experimental details can be found in application example A.
  • Figure 2 shows an elution curve of a chromatographic separation of human serum albumin, ovalbumin and conalbumin; Experimental details can be found in application example C.
  • sulfuric acid or its salts can be used for the production of cation exchangers with sulfonyl groups.
  • Primary, secondary or tertiary alkylamines having 1 to 4 carbon atoms in the alkyl chain (s) can be used for the preparation of anion exchangers. Consequently, the radicals R5, R6 and R7 can each independently of one another denote methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl or tert-butyl, it being possible for one or two of these radicals also to be hydrogen .
  • methylamine, dimethylamine, ethylamine, diethylamine, ethylmethylamine, propylamine, dipropylamine or methylpropylamine can be used for the production of anion exchangers with amino groups.
  • Dimethylamine or diethylamine are preferably used.
  • Triethylamine, ethyldimethylamine or diethylmethylamine can be used, with the use of trimethylamine being preferred.
  • the compounds mentioned react with the oxirane system, sulfonated cation exchangers being formed when using sulfurous acid or its compounds.
  • sulfonated cation exchangers being formed when using sulfurous acid or its compounds.
  • anion exchangers with amino groups are formed
  • anion exchangers with quaternary ammonium groups are formed.
  • Excess oxirane groups are hydrolyzed to diol groups with dilute sulfuric acid.
  • Monomer units of the formula III are present in an amount of 5 to 50 mole percent, preferably between 10 and 30 mole percent; the other monomer units have the diol structure according to formula II.
  • the loading density can be adjusted by the choice of the concentration of the reactants, ie the sulphurous acid or the amines.
  • Example 1 Production of an oxirane-activated carrier starting from Fractogel®-TSK HW 65 (S)
  • the washed reaction product is suspended in 100 ml of a 0.5 M sulfuric acid solution and slowly stirred at 40 ° C. for two hours. It is then washed with 0.25 M phosphate buffer (pH 7) to the neutral point, then with water. The gel is stored in aqueous suspension with the addition of 0.02% sodium azide.
  • the resulting DEA anion exchanger has a capacity of 160 mg bovine serum albumin / ml gel.
  • the preparation is carried out as described in Example 2, 100 ml of aqueous trimethylamine solution (30%) being used instead of the diethylamine.
  • the resulting quaternary anion exchanger has a capacity of 130 mg bovine serum albumin / ml gel.
  • Support material produced according to Example 2, is filled into a SuperFormance® glass column (50 x 10 mm) and equilibrated with the application buffer (50 mM TRIS buffer, pH 8.3). A solution of bovine serum albumin (10 mg / ml) in this buffer is applied continuously (flow: 0.5 ml / min) and the elution diagram is measured by photometry at 280 nm. The capacity is determined from the breakthrough curve.
  • the application buffer 50 mM TRIS buffer, pH 8.3
  • a solution of bovine serum albumin (10 mg / ml) in this buffer is applied continuously (flow: 0.5 ml / min) and the elution diagram is measured by photometry at 280 nm. The capacity is determined from the breakthrough curve.
  • control 40 ° C 50 ° C 60 ° C
  • Support material produced according to Example 2, is filled into a SuperFormance® glass column (50 x 10 mm) and coated with the application buffer (20 mM
  • TRIS buffer, pH 8.0 TRIS buffer, pH 8.0
  • a mixture containing human serum albumin, ovaibumin and conalbumin (4 mg / ml each) is applied (200 ⁇ l). Elution is carried out at a flow of 1 ml / min with a gradient of 0 to 1.0 M NaCl in 20 mM TRIS buffer, pH 8.0 (duration 100 minutes). The elution diagram is measured by photometry at 280 nm.

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  • Chemical & Material Sciences (AREA)
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  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Graft Or Block Polymers (AREA)
  • Treatment Of Water By Ion Exchange (AREA)
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Abstract

Die Erfindung betrifft Trennmaterialien für die Ionenaustauschchromatographie auf der Grundlage von hydroxylgruppenhaltigen Basisträgern, auf deren Oberflächen Polymere kovalent gebunden sind, dadurch gekennzeichnet, daß a) der Basisträger aliphatische Hydroxylgruppen enthält, b) die kovalentgebundenen Polymeren über eine endständige Monomereinheit an den Basisträger gebunden sind, c) die Polymeren sowohl Monomereinheiten der Formel (II) als auch der Formel (III) enthalten, d) die Monomereinheiten linear verknüpft sind. In Formel (II) und (III), bedeuten R?1, R2 und R3¿ unabhängig voneinander H oder CH¿3?, R?4 H, C¿1-C5-Alkyl oder C6-C12-Aryl, n eine ganze Zahl zwischen 1 und 5, ein Rest X OH und der andere Rest X NR?5R6, N+R5R6R7¿ oder SO¿3?H und R?5, R6 und R7¿ unabhängig voneinander C¿1?-C4-Alkyl, wobei einer oder beide Reste R?5¿ und/oder R6 auch H sein können.

Description

Ionenaustauscher
Die Erfindung betrifft Trennmaterialien für die lonenaustauschchromato- graphie.
Für die lonenaustauschchromatographie insbesondere von Makromole¬ külen biologischen Ursprungs (Biopolymere) sind aus DE 38 11 042 ionische Pfropfpolymere bekannt, bei denen alle Monomereinheiten die jeweiligen ionischen Strukturelemente aufweisen. Trotz der im allgemeinen hervorragenden Eigenschaften dieser Ionenaustauscher, wurde bei einzelnen Anwendungen gefunden, daß einzelne Analytbanden nur unzu¬ reichend getrennt waren. Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, Trennmaterialien mit verbesserten Eigenschaften bereitzustellen.
Aus der Anmeldung DE 43 10964 sind oxiranhaltige aktivierte Träger¬ materialien bekannt, bei denen Monomere der Formel I auf einen hydroxyl- gruppenhaltigen Basisträger aufgepfropft sind,
CR1R2 = CR3
0 = C-0-(CH2)n-CH-CH-R4
\ /
0
worin
R1 , R2 und R3 unabhängig voneinander H oder CH3,
R4 H, C1 -C5-Alkyl oder C6-C12-Aryl und n eine ganze Zahl zwischen 1 und 5
bedeuten. Es wurde gefunden, daß sich diese aktivierten Trägermaterialien in an sich bekannter Weise zu Trennmaterialien für die lonenaustauschchromato- graphie umsetzen lassen. Die resultierenden Trennmaterialien weisen verbesserte Eigenschaften auf.
Gegenstand der Erfindung sind somit Trennmaterialien für die lonenaus- tauschchromatographie auf der Grundlage von hydroxylgruppenhaltigen Basisträgern, auf deren Oberflächen Polymere kovalent gebunden sind, dadurch gekennzeichnet, daß
a) der Basisträger aliphatische Hydroxylgruppen enthält,
b) die kovalentgebundenen Polymeren über eine endständige Monomer¬ einheit an den Basisträger gebunden sind,
c) die Polymeren sowohl Monomereinheiten der Formel II als auch der Formel III enthalten,
d) die Monomereinheiten linear verknüpft sind,
-(CR1R2-CR3)-
0 = C - O - (CH2)n - CH-CH-R4
; »
OH OH
-(CR1 R2-CR3)-
I 0 = C - O - (CH2)n - CH-CH-R4 ||| t
X X
worin
R , R2 und R3 unabhängig voneinander H oder CH3.
R4 H, C1 -C5-Alkyl oder C6-C12-Aryl, n eine ganze Zahl zwischen 1 und 5, ein Rest X OH und der andere Rest X NR5R6, N+R5R6R7 oder SO3H und
R5, R6 und R7 unabhängig voneinander
Cι-C4-Alkyl, wobei einer oder beide Reste R5 und/oder R6 auch H sein können,
bedeuten.
Gegenstand der Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Trennmaterialien bei der Trennung von Gemischen mindestens zweier Substanzen, insbesondere zur Trennung von Biopolymeren, mittels lonen- austauschchromatographie.
Gegenstand der Erfindung sind auch Verfahren zur Herstellung von Trenn¬ materialien für die lonenaustauschchromatographie, dadurch gekennzeich¬ net, daß aus DE 43 10964 bekannte oxiranhaltige aktivierte Trägermateria- lien mit schwefliger Säure oder ihren Salzen oder mit primären, sekundären oder tertiären Aminen der Formel IV
NR5R6R7 IV
umgesetzt werden, worin
R5, R6 und R7 unabhängig voneinander
Cι-C4-Alkyl, wobei einer oder zwei dieser Reste auch H sein können,
bedeuten.
Gegenstand der Erfindung sind Verfahren zur Trennung von Gemischen mindestens zweier Substanzen, insbesondere zur Trennung von Biopoly- meren, mittels lonenaustauschchromatographie unter Verwendung der erfindungsgemäßen Trennmaterialien. Abbildung 1 stellt eine Elutionskurve (Durchbruchkurve) dar; experimentelle Einzelheiten finden sich in Anwendungsbeispiel A. Abbildung 2 stellt eine Elutionskurve einer chromatographischen Trennung von humanem Serumalbumin, Ovalbumin und Conalbumin dar; experimentelle Einzel¬ heiten finden sich in Anwendungsbeispiel C.
Erfindungsgemäß können für die Herstellung von Kationenaustauschern mit Sulfonylgruppen schwefelige Säure oder ihre Salze verwendet werden. Für die Herstellung von Anionenaustauschern können primäre, sekundäre oder tertiäre Alkylamine mit 1 - 4 C-Atomen in der oder den Alkylkette(n) verwendet werden. Folglich können die Reste R5, R6 und R7 jeweils unab¬ hängig voneinander Methyl, Ethyl, Propyl, iso-Propyl, n-Butyl, iso-Butyl oder tert.-Butyl bedeuten, wobei ein oder zwei dieser Reste auch Wasser- stoff bedeuten können. Somit können beispielsweise für die Herstellung von Anionenaustauschern mit Aminogruppen Methylamin, Dimethylamin, Ethylamin, Diethylamin, Ethylmethylamin, Propylamin, Dipropylamin oder Methylpropylamin verwendet werden. Bevorzugt werden Dimethyl- oder Diethylamin verwandt. Für die Herstellung von Anionenaustauschern mit quaternären Ammoniumgruppen können beispielsweise Trimethylamin,
Triethylamin, Ethyldimethylamin oder Diethylmethylamin verwendet werden, wobei die Verwendung von Trimethylamin bevorzugt ist.
Die genannten Verbindungen reagieren mit dem Oxiransystem, wobei bei Verwendung von schwefliger Säure oder ihren Verbindungen sulfonierte Kationenaustauscher entstehen. Bei der Verwendung von primären oder sekundären Aminen entstehen Anionenaustauscher mit Aminogruppen, bei der Verwendung von tertiären Aminen Anionenaustauscher mit quaternären Ammoniumgruppen. Überschüssige Oxirangruppen werden mit verdünnter Schwefelsäure zu Diolgruppen hydrolysiert. Die genannten ionischen
Monomereinheiten der Formel III sind zu 5 bis 50 Molprozent, bevorzugt zwischen 10 und 30 Molprozent enthalten; die übrigen Monomereinheiten besitzen die Diolstruktur nach Formel II. Die Beladungsdichte läßt sich durch die Wahl der Konzentration der Reaktionspartner, d.h. der schwef- ügen Säure beziehungsweise der Amine, einstellen. Auch ohne weitere Ausführungen wird davon ausgegangen, daß ein Fachmann die obige Beschreibung in weitesten Umfang nutzen kann. Die bevorzugten Ausführungsformen sind deswegen lediglich als beschreibende, keineswegs als in irgendeine Weise limitierende Offenbarung aufzufassen.
Die vollständige Offenbarung aller vor- und nachstehend aufgeführten Anmeldungen, Patente und Veröffentlichungen, sowie der korrespondierenden Anmeldung DE 4333 821, eingereicht am 04.10.1993, sind durch Bezugnahme in diese Anmeldung eingeführt.
Die folgenden Beispiele sollen den Gegenstand näher erläutern; diese Beispiele stellen keine Einschränkung des Erfindungsgegenstandes dar.
Beispiele
Die folgenden Reaktionen werden in einem 500 ml Dreihalskolben mit Rührer ausgeführt. Die Suspensionen werden durch Filtration auf einer Glasfritte (G2) gewaschen.
Beispiel 1: Herstellung eines oxiran-aktivierten Trägers ausgehend von Fractogel®-TSK HW 65 (S)
Zu einer Suspension aus 100 ml sedimentiertem Fractogel®-TSK H W 65 (S) und 66 ml Wasser werden mit 3 g Ammoniumcer(IV)nitrat (gelöst in einer Mischung aus 180 ml Wasser und 3 g HNO3 (65%)) bei Raumtempe¬ ratur unter starkem Rühren vermischt. Nach 1 Minute erfolgt die Zugabe einer Lösung von 6 g (2,3-Epoxypropyl)-methacrylat in 44 ml Dioxan. Es wird eine Stunde weitergerührt. Anschließend wird das Reaktionsprodukt zweimal mit je 200 ml Wasser gewaschen. Beispiel 2: Synthese eines mit Diethylamin substituierten Trägermaterials
100 g abfiltriertes Gel hergestellt nach Beispiel 1 werden in 100 ml Wasser suspendiert und 100 ml Diethylamin zugegeben. Anschließend wird
20 Stunden bei Raumtemperatur weitergerührt. Danach wird das Reak¬ tionsprodukt zweimal mit je 100 ml Wasser gewaschen.
Das gewaschene Reaktionsprodukt wird in 100 ml einer 0.5 M Schwefel- säurelösung suspendiert und zwei Stunden bei 40 °C langsam gerührt. Danach wird mit 0,25 M Phosphatpuffer (pH 7) bis zum Neutralpunkt, an¬ schließend mit Wasser gewaschen. Das Gel wird in wäßriger Suspension unter Zusatz von 0,02 % Natriumazid gelagert.
Der resultierende DEA-Anionenaustauscher weist eine Kapazität von 160 mg Rinderserumalbumin/ml Gel auf.
Beispiel 3: Synthese eines mit Trimethylamin substituierten Trägermaterials
Die Herstellung erfolgt wie in Beispiel 2 beschrieben, wobei statt des Diethylamins 100 ml wäßrige Trimethylaminlösung (30 %) eingesetzt werden.
Der resultierende quaternäre Anionenaustauscher weist eine Kapazität von 130 mg Rinderserumalbumin/ml Gel auf.
Beispiel 4: Synthese eines sulfonierten Trägermaterials
100 g abfiltriertes Gel hergestellt nach Beispiel 1 werden in einer Lösung von Na2Sθ3 (100 g/l) in Natriumphosphatpuffer 20 g/l; pH 8) suspendiert und bei 60 °C drei Stunden gerührt. Danach wird das Reaktionsprodukt zweimal mit je 100 ml Wasser gewaschen. Das gewaschene Reaktionsprodukt wird in 100 ml einer 0.5 M Schwefel¬ säurelösung suspendiert und zwei Stunden bei 40 °C langsam gerührt. Danach wird mit 0,25 M Phosphatpuffer (pH 7) bis zum Neutralpunkt, anschließend mit Wasser gewaschen. Das Gel wird in wäßriger Suspen¬ sion unter Zusatz von 0,02 % Natriumazid gelagert.
Anwendunqsbeispiel A: Ermittlung der Bindungskapazität mit
Rinderserumalbumin (Durchbruchkurve)
Trägermaterial, hergestellt nach Beispiel 2, wird in eine SuperFormance® Glassäule (50 x 10 mm) gefüllt und mit dem Auftragepuffer (50 mM TRIS-Puffer, pH 8,3) äquilibriert. Eine Lösung von Rinderserumalbumin (10 mg/ml) in diesem Puffer wird kontinuierlich aufgetragen (Fluß: 0,5 ml/min) und das Elutionsdiagramm durch Photometrie bei 280 nm gemessen. Aus der Durchbruchskurve wird die Kapazität bestimmt.
Es wird eine steile Durchbruchskurve gefunden; die Kapazitätsberechnung ergibt 158 mg Rinderserumalbumin/ml Gel (siehe Abbildung 1).
Anwendunqsbeispiel B: Ermittlung der Bindungskapazität mit
Rinderserumalbumin nach Behandlung mit 1 M NaOH
Je 10 ml Trägermaterial, hergestellt nach Beispiel 3, werden in je 40 ml 1 M NaOH suspendiert und im Wasserbad unter gelegentlichem Schütteln zwei Stunden erwärmt (40, 50 und 60 °C). Anschließend werden die Proben in 50 mM TRIS-Puffer (pH 8,3) suspendiert. Die Bindungskapazität wird wie in Anwendungsbeispiel A beschrieben bestimmt:
Behandlung: Kontrolle 40 °C 50 °C 60 °C
Bindungskapazität
(mg/ BSA ml) 84,7 105,7 84,4 73,3 Anwendungsbeispiel C: Trennung von humanem Serumalbumin,
Ovaibumin und Conalbumin
Trägermaterial, hergestellt nach Beispiel 2, wird in eine SuperFormance® Glassäule (50 x 10 mm) gefüllt und mit dem Auftragepuffer (20 mM
TRIS-Puffer, pH 8,0) äquilibriert. Eine Mischung enthaltend humanes Serumalbumin, Ovaibumin und Conalbumin (je 4 mg/ml) wird aufgetragen (200 μl). Eluiert wird bei einem Fluß von 1 ml/min mit einem Gradienten von 0 bis 1,0 M NaCI in 20 mM TRIS-Puffer, pH 8,0 (Dauer 100 Minuten). Das Elutionsdiagramm wird durch Photometrie bei 280 nm gemessen.
Die drei Proteine werden vollständig getrennt (siehe Abbildung 2).

Claims

Patentansprüche
1. Trennmaterialien für die lonenaustauschchromatographie auf der Grundlage von hydroxylgruppenhaltigen Basisträgern, auf deren Oberflächen Polymere kovalent gebunden sind, dadurch gekennzeichnet, daß
a) der Basisträger aliphatische Hydroxylgruppen enthält,
b) die kovalentgebundenen Polymeren über eine endständige
Monomereinheit an den Basisträger gebunden sind,
c) die Polymeren sowohl Monomereinheiten der Formel II als auch der Formel III enthalten,
d) die Monomereinheiten linear verknüpft sind,
-(CR1R2-CR3)-
I 0 = C - 0 - (CH2)n - CH-CH-R4 II f OH I OH
-(CR1R2-CR3)-
I
0 = C - O - (CH2)n - CH-CH-R4 III
I I
X X
worin
R , R2 und R3 unabhängig voneinander
H oder CH3,
R4 H, C1 -C5-Alkyl oder C6-C12-Aryl, n eine ganze Zahl zwischen 1 und 5,
ein Rest X OH und der andere Rest X NR5R6, N+R5R6R7 oder SO3H
und
R5. R6 und R7 unabhängig voneinander
C1 -C4-Alkyl, wobei einer oder beide Reste R-5 und/oder R6 auch H sein können,
bedeuten.
2. Verwendung von Trennmaterialien mit den Merkmalen von Anspruch 1 bei der Trennung von Gemischen mindestens zweier Substanzen, insbesondere zur Trennung von Biopolymeren, mittels lonenaustauschchromatographie.
3. Verfahren zur Herstellung von Trennmaterialien für die lonenaus¬ tauschchromatographie, dadurch gekennzeichnet, daß oxiranhaltige aktivierte Trägermaterialien, bei denen Monomere der Formel I auf einen hydroxylgruppenhaltigen Basisträger aufgepfropft sind,
CR1R2 =CR3
I
0 = C-0-(CH2)n-CH-CH-R4 I
\ t
0
worin
R , R2 und R3 unabhängig voneinander
H oder CH3, R4 H, C1 -C5-Alkyl oder C6-C12-Aryl
und
n eine ganze Zahl zwischen 1 und 5
bedeuten, mit schwefliger Säure oder ihren Salzen oder mit primären, sekundären oder tertiären Aminen der Formel IV,
NR5R6R7 IV
worin
R5, R6 und R7 unabhängig voneinander
Cι-C4-Alkyl, wobei einer oder zwei dieser Reste auch H sein können,
bedeuten, umgesetzt werden.
4. Verfahren zur Trennung von Gemischen mindestens zweier Substan¬ zen, insbesondere zur Trennung von Biopolymeren, mittels lonenaus¬ tauschchromatographie unter Verwendung von Trennmaterialien mit den Merkmalen von Anspruch 1.
PCT/EP1994/003168 1993-10-04 1994-09-22 Ionenaustauscher WO1995009695A1 (de)

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