WO1982003392A1 - Uracil derivatives,process for their preparation,and medicinal composition containing same - Google Patents

Description

明 細 香

.ゥ ラ シ ル誘導体、 その製法.及び

それを含有する医案組成物

技 術 分 野

本発明は新規な ゥ ラ シ ル誘導体、 その製法及びそれを 含有する 医薬組成物に関する。 さ らに詳し く は 、 本発明 は免疫調節能を有し 、 従って慢性関節 リ ューマチのよ う' な免疫疾患に対し 効果的で且つウ イ ル ス性疾患及びガ ン の免疫療法にも有用な、 し かも毒作用が弱 く 医薬とし て 極めて望ま し 'い 、 新規なゥ ラ シ ル誘導体なら びに それを 含有す る医案組成物に関する も のである。

' 背 景 技 術

従来 リ ュ ーマチ などの免疫疾患に対し 、 ス テ ロ イ ド系 及び非ステ α ィ ド系抗炎症剤が臨床的にも^多 く 使われ ている。 しかし こ れ らの多 く の薬剤も 薬物本来の効杲、 副作用及び毒性などの点において未だ充分満足 出来る も のではない。

発 明 の 開 示

本発明の 目的は 、 免疫応答に関する細胞に特異的効果 を及ぼし 、 宿主の免疫応答を変える锄 きを有する 、 新規 な ゥ ラ シ ル誘導 ^:およびその製法の提供にあ る。

本癸 のいま一つの 目的は免疫調節能を有する 、 毒作 用の弱い医案組成物の提供に ある。

α. ρι. 本発钥の.ゥ ラ シ ル誘導体はー設式 U)

( 式中、 Rは水素原子又は炭素数 〜 4 の ァ ノレ キノレ基 を表わす）

で表わされる。

ー設式（1)で表わされる化合物は、 般式 (2)

( 式中 、 Rは水素原子又は炭素数 1 〜 4 のア ル キル基 を表わす ）

で示される シ リ ル化ピ リ ミ ジ ゾ類と一設式 (3)

X - COCO 一 X (3)

( 式中、 Xはハ ロ ゲン原子又は炭素数 1 〜 4 のアルコ キシ基を表わす ）

で示される化合物とを反応さ¹せる こ とによって得られる 。

本癸明に よる免疫調節能を有する 医案組成物はー設式

ί C"PI ^- o (1)で表わされる化合物と'医菜とし て許容し 得る 担体とか り /よ る o

癸明を実施する ための最 良の形態

一般式（1)で表わされる ゥ ラ シル誘導体は 、 例えば次の 化合物を包含する （ 但し 一般式（1)の中の ピ リ ミ ジ ン環は 種 々の互変異性構造を と り 得.る ) 0 ビス 〔 2 ， 4 - ジ ォ キ ソ - ( 1 H , 3 H ) ピ リ ミ ジ ン 一 ； I 一 ィ ル 〕 エ タ ン ジ オ ン 、 ビス 〔 2 ， 4 ー ジ ォ キ ソ ー 5 — メ チル ー （ 1 H , 3 H ) ピ リ ミ ジ ン 一 1 ー ィ ノレ 〕 エ タ ン ジ オ ン 、 ビス 〔 2 4 ー ジォキ ソ'一 5 — ェチノレ - ( 1 H , 3 H ) ピ リ ミ ジ ン - 1 ー ィ ノレ 〕 エ タ ン ジ オ ン 、 ビス ！： 2 ， 4 ー ジ ォ キ ソ ー 5 一 _n 一 プ ロ ピ ノレ ー （ 1 H , 3 H ) ピ リ ミ ジ ン 一 1 - ィ ノレ 〕 エ タ ン ジ オ ン 、 ビス 〔 2 ， 4 ー ジ ォ キ ソ - 5 — i 一 プ ロ ピノレ ー （ 1 H ， 3 H ) ピ リ ミ ジ ン 一 1 ー ィ ノレ 〕 エ タ ン ジ オ ン 、 ビス 〔 2 , 4 - ジォキ ソ ー 5 — n - ブチル ー C 1 H , 3 H ) ビ リ ミ ジ ン - 1 一 イ ソレ 〕 エ タ ン ジ オン 及 び ビス ！： 2 , 4 — ジ ォキ ソ - 5 - t - ブチル ー （ 1 H , 3 H ) ピ リ ミ ジ ン - ; I ー ィ ノレ 〕 エ タ ン ジ オ ン o

本発明 ;'こよる ゥ ラ シ ル誘導体を製造する に当 って、 一 設式（2)で示される シ リ ル化 ピ リ ミ ジ ン類を一般式（3)で示 される化合物に対し 2 倍モル以上、 好ま し く は 2 倍モ ル を用'いて溶媒中で反応させる 0 ゥ ラ シル類はー設に溶媒 に溶け難 く 、 反応速度が遅いの で、 シ リ ル化する ことに

0.V.PI よ り溶媒に 可溶性め活性化合物とし て用いるが、 このも- のは蒸留などによ り単難精製が可能である。 しかしなが ら 、 一般式 (2)で示される シ リ ル化ピ リ ジ ン類は精製する こ とな く用いるこ とも 出来る。

利用可能なシ リ ル化剤には、 例えば ト リ メ チル ク α α シ ラ ン 、 へ キサ メ チ ノレ ジ シ ラ ザン 、 Ν ， 0 - ビス （ ト リ メ チルシ リ ル ） ァセ ト ア ミ ド及び Ν , 0 ビス （ ト リ メ チ ノレ シ リ ノレ ） 卜 リ フ ノレ オ ロ アセ 卜 ア ミ ドなどが挙げら れ る（？ また通常へキサ メ チル ジシ ラ ザンを甩いる場合には ト リ メ チル ク '口 口 シ ラ ンを併用するのも有利であ る。 こ れ らのシ リ ル化剤を用 いてゥ ラ シ ル類をシ リ ル化する際 に例えばピ リ ジンなどの溶媒中で行なう こ とも 可能であ る。 シ リ ル化反応は室温でも進行するが硫酸ァ ン モニ ゥ ムのよう な触媒を用いたり 加熱や加圧によ り反応を促進 する こ と も 出来る。

シ リ ル化ピ リ ジ ン類と一般式 (3)の化合物 との反応は一 設に ピ リ ジ ン 、 テ ト ラ ヒ ド ロ フ ラ ン 、 ジ ォ キ サ ン 、 Ν ， Ν - ジ メ チ ノレ ホ ノレ ム ア ミ ド 、 Ν , Ν — ジ メ チ ノレ ア セ ト ァ ミ ド 、 ァ セ ト ニ ト リ ゾレ 、 ベ ン ゼン 、 ト ゾレ エ ン 、 キ シ レ ン など 溶媒中で行なわれる。 ま たー設式（3)で： Xがハロ ゲ ン原子の場合は 卜 リ エチ ルァ ミ ン のよ うな ¾捕集剤を用 いる こ とは有益であ る。 反応は室温以下の温度でも進行 するが、 場合によ り 加熱する こ とも可能であ る ο —設式 (3)で示される化合物の具体例と し ては 、 ォキサ リ ルク ロ ラ イ ド 、 ォキサ リ ル ブロ マイ ド 、 ジェ チ ルォキサ レー ト 及びジ - t - ブチルォキサ レ ー ト などが拳げられる。

本発明の前記一般式（1)で表わされる化合物は 、 薬理的 活性を有している。 特に驚 く べき ことに本発明の化合物 は免疫調節能を有する こ とが見出された こ とであ り 、 ま た本癸明化合物の毒性は弱 く 医薬と して極めて 有用であ o

次にこのこ とを試験例をもって説明する。

動物を用.い'て免疫調節作用を試験する為に多数の実験 系が常用 されている。 その中で最も 代表的な 試験であ る 遅延型過敏反応の増強試験の結果を以下に 試験例とし て 例示する。

塩化ピ ク リ ル （ 2 - ク ロ 口 一 1 ， 3 , 5 - 卜 リ ニ ト ロ ベ ン ゼ ン ） を皮膚に塗布する ことに よ り マ ウス に誘導 さ れ る遅延型過敏症は典型的な細胞性免疫現象と して知 ら れてお り 、 実験系と しては世界的に汎用されている系の 一つであ る 〔 Asherson.G.L. and Ptak, "W. ： Contact and de layed hypersens it ivi ty in the mo use I . Act ive sensi t ization and p ss ive transf er. Immunology, 2_5 , 40 5 - 4 1 6 ( l 9 6 8 ) )o

こ の実験系を'遅延型過敏症増強試験に用いた。

試験例 1 〔 遅延型過敏反応の増強試験〕

C PI 試験方法 ： I C R系錐性マ ウ ス体重 3 0 前後の ものを

1 群 8匹と し て使用した。

慼作は 、 ォ リ ー ブ油 とァ セ ト ンを 4 ： ： [ に溶かした液 に 3 % ·となるよ うに塩化 ヒ⁶ク リ ルを溶解したものを、 剃 毛したマウ スの腹部に塗布して行なった。

感作と同時に本発明の化合物を 0. 2 % カ ルボキシメ チ ル セル 口 ー ス生理食塩液に溶解又はけん濁したものを、 マ ウ ス体重 1 当 り 5 0 ^の割合で経口投与した。 対照 群は 0. 2 % カ ル ボ キ シ メ チルセ ル ロ ー ス生理食塩液を同 様に投与し た'。

遅延型過敏症の惹起 （ チ ャ レ ン ジ ） は惑作から 7 日 後 に 、 1 %の塩化 ビク リ ルを溶 したオリ 一ブ油を ¾み込 ませ： Γこ フ ェ ル トを鉗子に巻いた もので、 マ ウ スの耳をは さんで塗布して行なった。 チ ャ レ ン ジ前と チ ャ レ ンジ の 2 4 時間後のマ ウ ス の耳の厚さ を測定し 厚さの増加率

( 8匹の両耳の平均値 ） を表 1 に示した。

なお比較とし て レ バミ ゾー ル塩酸塩を用いて同様に試 験した結杲も示した。

試験結杲 つい て F * t 検定を行ない 、 対照群に対し て危険率 P く 0. 0 5 で有意なも のには * 印を付した ₀

結杲 ： 本発明化合物を感作と同時に投与する と 、 チ ヤ レ ン ジによ り惹起さ れる遅延型過敏反応は増強された。

本癸明の化合物は比較に用いァこ レ バ ミ ゾール と同等ない

C. PI VT.PO し それ以上の活性が認め られた。

すなわち 、 本発明の化合 ½はマウ スの細胞性免疫応答 を調節する 作用 （ 免疫調節作用 ） を有し ている と考えら れる o

表 1 遅延型過敏反応の増強試験

次に 、 結核齒ア ジュバ ン トを注射す る こ とに よ り発症 する ラ ッ 卜 の アジ ュバン ト 関節炎は ヒ 卜慢性関節 リ ウ マ チの実験モ デル とし て頻周 されている 。

本症の発症横構は十分明 らかにされていないが、 細胞 性免疫が重要な役割を濱じ'ている こ とが知られている。

この公知のア ジュバ ン ト 関節炎試験を用 いて、 本発明の "U R EA ひ MPI 一 3 一 化合物の免疫調節能を調べた。

試験例 2 〔 アジュバ ン ト 関節炎試翁 〕

試験方法 ： SD 系雄性ラ ッ ト 8週令を用い、 ヒ ト型結 核菌 、 Myc obacterium tuberculosis )乾燥死菌体 0.4

を流動パラ フ ィ ン 0. 1 中にけん濁させて、 右後肢足镞 皮内に注入し た。 本発明の化合物はアジュバン ト 注入前 後計 9 回皮下投与した。 化合物は 0. 2 % カ ル ボキ シメ チ ル セ ル ロ ー ス生理食塩液に溶' またはけん濁して、 体重

1 k_?あたり 5 ^の割合で投与し た。 了ジュバ ン 卜 注入 日 よ り 試験終了 ·まで左後肢の浮盧の容積測定を行ない腫脹 率を箕定して結杲を表 2 'に示した。 なお、 比較として レ バ ミ ソ：ール塩酸塩を甩いて試翳し た結杲も示した。 試験 結果について F · t 検定を行ない 0. 2 % カ ソレボキシ メ チ ル セ ル 口一ス生理食塩液のみを投与した対照群に対して 危 ^:率 P < 0.0 5 で有意のも のには * 印を付した。

結杲 ： 本発钥の化合物により ア ジュバン ト関節^の 2 次炎症は抑制され、 その作甩は対照群に対し統計学的に 有意であった。

本癸钥の化合物は比較に用いた レ バ ミ ゾー ル以上の活 栓が認められた o すなわち 、 本発明の化合物は免疫調節 能 、 また、 抗関節炎作用を有している と考えら れる。

Ο.'ΡΙ 2 ア ジュ バ ン ト 関節炎試験

）

本発明の化合 は試験例 1 と試験例 2に示し 7"こよう に 免疫調節剤 とし ての活性が強力であ り 、 従って免疫能の 異常が伴う こ.とが知ら れてい る疾患 、 例えば慢性関節 リ ゥ マチなどの 自 巳免疫疾患の治療に有効であ る。 次に本 -発明の医案の有効成分の毒性試験を試験例 3 に示す。

試験例 3 〔 経 口投与によ る急性毒性試験 〕

試驗方法 ： d dY錐性マ ウ ス 、 1 群 5 匹を用い生理食塩 水に溶霹またはけ.ん濁し た試験例 1 および 2 で用いた薬 物を経口投与し た。 投与後 7 日 間 H適を観察し 、 推定

L D ₅。値を求めた。 結果 Γ 本発明の医薬の有効成分の推定 L D_{5 fl}値は 1, 0 0 0 以上であった o この値は レ バ ミ ゾール · 塩酸塩の推 定 LD₅₀ 2 0 0 〜 3 0 0 に比べる とはるかに大 き く 、 本発明の有効成分の毒性は弱いと考えられる 。

本発 の医案は通常の免疫調節剤又は制通剤 と同様の 剤型及び投与方法により これを用いる こと ができ る。 例 えば経口投与剤としてはカ プセル剤 、 穎粒剤、 丸剤、 細 粒剤、 錠剤、 シ ロ ッ プ剤など と し て用いる こ とができ る 。 ま た直腸内投与剤としては坐剤が適当であり 、 注射剤 と しては皮下、 '筋肉 内又は静脈内投与剤などを闱いるこ と ができる o

本発 §9の医藥組成物は作用物質を 、 好ま し く は約 1 0 〜 9 5 %、 特に 1 5 〜 9 0 %含有し 、 それ自侓公知の方 法、 例えば通常の混合法、 粒化法、 · 糖衣化法、 溶液法ま たは冷凍乾燥法によって製造さ れる。 経口投与剤は作用 物質を固体担体と組合せ、 所望に.よ り適当な助剤が添加 される。 担体物質としては糖類、 セ ル ロ ー ス調製品およ び リ ン 酸 カ ル シ ウ ムなどが用いられ、 結合剤、 散布剤 ( 例えばでんぷん ） 、 流動制御剤、 滑剤などが助剤とし て用いられる。 さ らにその他投与形態に応じて適宜の物 質が添加混合される。

本発明の免疫調節剤の適用疾患とし ては、 免疫铵能異 常を伴う こ とが知られている疾患、 例えば谩性関節リ ゥ マチ、 多癸性筋炎などの 自 已免疫疾患、 各種の感染症、 各種の癌などがあ り その疾患の患者の免疫機能正常化 が 期待できる o

本発明の医案の投与法及び剤型はその疾患の種類、 患 者の状態などに応じて適宜選択する こ とが望まし い。 投 与量は絰ロ投与の場合には体重 1 当 り の 1 日 量は 0. 5

W ないし 1 0 0 好ま し'く は 1 Wないし 3 0 が適当 で あ り 、 直腸内投与の場合には 1 ないし 1 0 0 、 静派 内投与の場合には 1 ないし 1 Q 、 皮下投与ま たは筋 肉内投与の場'合には 1 ないし 3 0 がそれぞれ適当 で あるが、' これら の投与量に ついてはその疾患の種類、 患 者の状態などに応じて さ らに適当量を還定する こ とが望 ま .しい。 またその疾患の種類、 患者の状態に よっては必 要に応じて他の薬剤を併用する'こ とによ り 、 本発明の有 効成分の治療効果を増大 させる こと も可能である。 例を あげれば通の化学療法剤 、 例えばア ル キ ル化剤、 代謝掊 抗剤などが患者の免疫能を低下させる副作用を持ってい るので、 のよ うな薬剤を投与する場合に本発明の有効 成分を 用する こ とによ り 、 それら薬剤の副作用の発現 を防止し て相乗的に治療効果を高める こ とが期待でき る。

以下本発明のゥ ラ シ ル誘導体の製造に 関する 実施^を 記載する。

実旌例 1 ゥ ラ シル 2.2 4 をへキサメ チル ジ シラ ザン 2 中 に加え 1 2 O X:で挽拌した o 約 3 0 分で均一溶液が得ら れ 、 次いで遏剰のへキサメ チルジシ ラ ザンを渎圧下に留 去し 、 残留物を乾燥テ ト ラ ヒ ド α フ ラ ン 2 0 に溶獰し た。 この溶液を 5 匸以下に冷却し 、 ォキサ リ ル ク ロラ イ ド 1.2 7 を加え、 3 0 分間攙拌し た後 ト リ ェ チルア ミ ン 2.1 を加え更に 3 0 分間攬拌し 、 次いで 5 0 TCで 2 時間反応を読けた。 反応混合物から 溶媒類を镔圧下に除 去した後、 シ リ カ ゲルカ ラ ムク ロ マ ト グラ フ ィ ーに付し ク ロ 口 ホル ム '- テ ト ラ ヒ ド σ フ ラ ン （ 2 0 ： 1 ：) の混合 溶媒で溶出し ビス 〔 2 ， 4 - ジ才 キ ソ - ( 1 H , 3 Η ) ビ リ ミ ジ ン - 1 - イ ソレ 〕 ェ 'タ ン ジ オ ン' 1.3 7 ？ を得た ο

融点 ： 2 6 0 〜 2 6 2 Q ( 分^ )

元素分析値 ： 'C₁₀H_eN₄O_e と して

C H N

理論値^ 43.18 2.17 20.14 .

実驗儘 43.12 1.99 20.17

NMR ( H ^Ue , ppm ) ： 6.10C2H , d J 8.0Hz )

8.20C2H， d J 8.0Hz ) 12.3C2H， s ： D₂0で鉄） 実旌例 2

ゥ ラ シゾレ 3.4 を N ， 0 — ビス （ ト リ メ チノレ シ リ ノレ ） ァ セ ト ア ミ ド 3 0 ηζ£中に加え封管中、 1 1 5 でシ リ ル

OMPI 化した。 得られた溶液から減圧下、 過剰の N , 0 - ビス C ト リ メ チル シ リ ル ） ァセ ト ア ミ ドなどを留去し た後、 ジ ェ チ ルォキサ レ ー 卜 2.2 とキシ レ ン 5 とを加え 還流温度で 8 時間反応した。 反応混合物から粗生成物を 濾別し 、 実施例 1 の条件でカ ラ ム ク ロ マ ト グラ フ ィ ーを 行ないビ ス ！： 2 , 4 - ジォキ ソ ー （ 1 H , 3 H ) ピ リ ミ ジ ン ー 1 一 ィ ル 〕 エタ ン ジオン 1.7 1 ^ を得た。

実施例 3

チ ミ ン 2.5 2 とへキサメ チノレジシ ラ ザン 6 をピ リ ジ ン 2 0 中'に加え、 還流温度で 4 時間撗捽し た。 得ら れた均一溶液から 適剰のシ リ ル化剤、 ピ リ ジ ン などを減 圧下で除去じ 、 残留物をテ ト ラ ヒ ド ロ フ ラ ン 2 0 ) ^中 こ 溶かし 5 TC に.保つた。 この溶液にォ キサ リ ル ク ロ ラ イ ド 1.2 7 及び 卜 リ エ チ ル ァ ミ ン 2.0 ^ を力 Π.えた。 次い で 室温で 1 時間、 4 0 〜 5 0 で 2 時間撩拌し 、 得られた 混合.物から 溶媒類を除去した後粗生成物を力 ラ ム ク ロ マ 卜 グラ フ ィ 一に付し 、 ク ロ ロ ホ ノレ ム 一 テ ト ラ ヒ ド α フ ラ ン 〔 2 0 ： 1 ：) の混合溶媒で溶出し ビス （： 5 - メ チル - 2 ， 4 ー ジォキ ソ - ( 1 H , 3 Η ) ビ リ ミ ジ ン - 1 ー ィ ル 〕 エ タ ン ジ オ ン 1.9 を得た ο

融点 ： 2 3 0 〜 2 3 2 Ό ( 分鹩 ）

元素分析値 ： C H^N+Oe とし て .

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Claims

請 求 の 範 囲 一般式（1)

(1)

( 式中 、 R は K素原子又は炭素教 1 〜 4 の ア ルキ ル 基を表わす ）

で表わ される ゥ ラ シ ル誘導体。

2. —般式（1Γにおいて、 が水素または メ チ ル基であ る 請求の範囲第 1 項記載の ゥ 'ラ シ ル誘導体。

3. ビス ！： 2 , 4 — ジォ キ ソ 一 く 1 H , 3 H ) ピ リ ミ ジ ン - 1 - ィ ル 〕 エ タ ン ジオ ン である請求の範囲第 2 '項 記載の ゥ.ラ シル誘導体。 -

4. ビス 〔 5 — メ チソレ ー 2 ， 4 ー ジォキ ソ ー （ 1 H ，

3 H ：) ピ リ ミ.ジ ン - 1 一 ィ ノレ 〕 エ タ ン ジ ォ であ る請 求の範囲第 2 項記載のゥ ラ シル誘導体。

5. —殺式（2) .

R

OS i (C ) 3 ( 式中、 Rは K素原子又は炭素数 1 〜 4 のア ルキ ル 基を表わす ）

で表わされる シ リ ル化ビリ ミ ジ ン類とー設式 (3)

X - COCO - X (3).

( 式中、 Xはハ ロ ゲン原子又は炭素数 1 〜 4 のア ル コ キ シ基を表わす）

で示される化合物とを反応させる こ とを特徵とする一 殺式（1)

0 0 は）

( 式中、 Rの定義はー設式 (2)の場合と同 じである ） - で表わ される ゥ ラ シ ル誘導体の製法。

6. 一般式（1)

(1)

( 式中、 Rは水素原子または炭素数 1 〜 4のアルキ ル基を表わす ）

で示される ゥ ラ シ ル誘導体と医案として許容し得る担 体とからなる こ とを特徵とする 免疫調節能を有する医

C.V.FI 案組成物。

7. 慢性関節 リ ユ ー マチの治療に利用 される請求の範囲 第 S項記載の免疫調節能を有する 医案組成物 0

8. ガン の免疫療法に利用される請求の範囲第 項記载 の免疫調節能を有する 医薬組成物 o .

9. ウイ ル ス性疾患の治療に利用 される請求の範囲第 S 項記載の免疫調節能を有する医薬組成物。

C.V.PI