UA80418C2 - Methods of inducing ovulation using phosphodiesterase inhibitor as non-polypeptide camp level modulator.and method of collecting oocytes for in vitro fertilization - Google Patents

Description

10. Спосіб за п. 3, який відрізняється тим, що в іл)етиламін (М-11294А; Марр Незвєагсіп Сепіге Ца.), організм згаданої самки додатково вводять лютеї- атизорам (Ріїгег), 5-(3-диклопентилокси-4- нізуючий гормон у зниженій концентрації порівняно метоксифеніл)піридин-2-карбоксамід (СР-353164; з відомими схемами для індукування овуляції пе- Ріїгег), метил-3-(2,4-діоксо-3-бензил-1,3- ред лютеальною фазою овуляторного циклу сам- дигідропіридиної(2,3-4|Іпіримідиніл|бензоат (СР-

Ки. 77059; Ріїге), СР-146523 (Ріїге), СР-293321 11. Спосіб за п. 3, який відрізняється тим, що в (Ріїге)), СІ-14044 (Ріїхге), РО-189659 (Ріїхем), СІ- організм згаданої самки для індукування овуляції 1018 (Ріїге), СР-220629 (Ріїгег), 1-(З-нітрофеніл)- перед лютеальною фазою овуляторного циклу 3-(4-піридилметил)-1,3-дигідропіридиної2,3- самки додатково вводять також хоріонічний гона- 4|піримідин-2,4-діон (к5-25344-000; Воспе дотропін. Віозсіепсе), мезопрам (Зспегіпд А), М-(2,5- 12. Спосіб за п. 3, який відрізняється тим, що в дихлор(З-піридил))(8-метокси(5- організм згаданої самки додатково вводять хоріо- хіноліл))карбоксамід (0-4418; Спігозсіепсе), Т-2585 нічний гонадотропін у зниженій концентрації порів- (Тапабе Зеїуаки), 4-(4-метокси-3-(5- няно з відомими схемами для індукування овуляції фенілпентилокси)феніл|-2-метилбензойна кисло- перед лютеальною фазою овуляторного циклу та, ХТ-044 (Нокипки Опімегейу), ХТ-611 (Капгажа самки. Опімегтзйу), МАХ-126120 (Уууєїп-Ауегві 13. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що РПпаптасешіса!в Іпс.), 1-аза-10-(3- неполіпептидний модулятор рівня САМР вводять в циклопентилокси-4-метоксифеніл)-7,8-диметил-3- організм згаданої самки в момент часу, який від- оксаспіро(4.5|дец-7-ен-2-он. (МУАХ-122331;. Муеїн- повідає моменту введення в організм згаданої Ауегзі РПпаптасешііса!в Іпс.), І(35)-3-(3- самки по або ІН за відомою схемою індукування циклопентилокси-4-метоксифеніл)-2-метил-5- овуляції. оксопіразолідиніл|-М-(З-піридилметил)карбоксамід 14. Спосіб за п. 13, де неполіпептидний модулятор (УУАХ-1270938; Умуекп-Ауетгзі Рпаптасеціїса!5 Іпс.), рівня САМР вводять спільно з ПСО або І Н. РОВ-093 (УУуеїй-Ауеєегві РНаптасешіса!в Іпс.), З3- 15. Спосіб за п. 13, де неполіпептидний модулятор (1,3-діоксобензо|с|азолін-2-іл)-3-(3- рівня САМР вводять окремо і не вводять спільно з циклопентилокси-4-метоксифеніл)-пропанамід посо або 1 н. (СОС-801; СеЇдепе Согр.), СО-7085 (Седепе 16. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що Согр.), СОС-998 (СеІдепе Согр.), МС5-613 (СМАБ), інгібітор, фосфодіестерази вибраний з групи, до СНн-3697 (СпПігозсіеєпсе), СН-3442 (СпПігозсієпсе), якої входять: Сн-2874 (Спігозсіеєпсе), СН-4139 (СпПігозсієпсе), роліпрам, арофілін (АїІтіга!!), АгійоФ (тіпКіїпе АРА-114597 (КПпбпе-Рошепс Вогег), АРВ-122818

Вееспат), рофлуміласт (Вук сцдеп), денбуфілін (Епбпе-Рошепс Когег), (таз,7к)-7-(3- (бтіКіїпе Вееспат), Н5-17597 (Бупіех), 502- циклопентилокси-4-метоксифеніл)-7а-метил-

І5О-844 (Момапйів), 4-(2,3-біс(гідроксиметил)-6,7- 2,5,6,7,7а-пентагідро-2-азапіролізин-3-он, СМУУ- діетоксинафтилі|-1-(2-гідроксіетил)-гідропіридин-2- 3600 (Супіахо-Мейсоте), КЕ-19514 (Куосуа Накко он (Т-440; Тапабре Зеїуаки), метил-3-І6-(2Н-3,4,5,6- Кодуо Со Ца.), СН-422 (СешШеси Стоцир), СН-673 тетрагідропіран-2-ілокси)-2-(3- (СешШеспі Сгоцр), СН-928 (Сешесп Спгоцр), О-22888 тієнілкарбоніл)бензо|р|фуран-З-іл|пропаноат (Вау- (Авіа Меадіса) АМ/О-12-232 (Авіа Меадіса), УМ- ег), 2-метил-1-(2-(метилетил)(8-гідропіразоло|1,5- 58997 (Матапоисні), ІС-485 (ІСОБ5 Согр.), КМ/-4490 а|Іпіридин-3-іл)|пропан-1-он (ібуділаст; Куогіп), М- (Куоша Накко Кодуо Со. Це), умМ-976 (3,5-дихлор(4-піридил))(3З-циклопентилокси-4- (Матапоишсні), 5сп-351591 (Сешесп Стор), АМ/О- метоксифеніл)карбоксамід (ВР 73401; КПпопе- 12-343 (Авіа Меадіса), М-(3,5-дихлор(4-піридил))-2-

Рошепс Когег), (1Е)-1-аза-2-(3-цдциклопентилокси-4- 11-К4-фторфеніл)метилі|-5-гідроксіїндолін-3-ілу-2- метоксифеніл)проп-1-еніламіноат (РОА-641; оксоацетамід (АМУ/О-12-281; Авіа Медіса), ібуди-

Атегісап Ноте Ргодисів), 4-ціан-4-(3- ласт (Куогіп Рпаппасешіса! Со. Ца.)), циломіласт циклопентилокси-4-метоксифеніл)циклогексан- (ЗтійнКіїпе Вееспат), ВАХ-19-8004 (Вауег), метил- карбонова кислота (58207499; ЗтЙНКІЇїпе 3-2-((4-хлорфеніл)карбоніл|-6-

Вееспат), ципамфілін (ЗтйпКіїпе Вееспат), 5-|3- гідроксибензо|р|Іфуран-З-іліупропаноат, 5-метил-4- (25)біцикло(2.2.1|гепт-2-илокси)-4-метоксифеніл|- ((4-метилтіофеніл)карбоніл|-4-імідазолін-2-он, 5,6- 1,3-діазапергідроїн-2-он (СР-80633; Ріїгег), 1-(3- діетоксибензо|р|тіофен-2-карбонова кислота нітрофеніл)-3-(З-піридилметил)-1,3- (Тірепеїаз|) та 4-(3-бромфеніл)-1-етил-7- дигідропіридиної(2,3-4|Іпіримідин-2,4-діон (кК5- метилгідропіридино|2,3-б|Іпіридин-2-он. (УМ-58897; 25344; Зупієх), 4-(18)-1-феніл-2-(4-піридил)етил)- Уатапоисні). 2-циклопентилокси-1-метоксибензол (СОР-840; 17. Спосіб за п. 1, де інгібітор фосфодіестерази

Сеїнесп), (3-4(З-циклопентилокси-4- вибраний з групи, до якої входять: метоксифеніл)метилі|аміно)зпіразол-4-іл)метан-1- теофілін, ізобутилметилксантин, АН-21-132,. Ога- ол, Ко-20-1724 (Коспе Ноїдіпд Ас), пікламіласт, 30029 (Огдапоп), Ого-20241 (Огдапоп), Ого-9731 доксофілін (Іпбзійшо Віоіодісєо Спетіоїегарісо АВС (Огдапоп), зардаверин, вінпоцетин, ЕНМА (МЕР-1),

ЗрА), АРА-132294 (ВЕПпПбпе-Рошепс Вогег), АРВ- мілринон, сигуазодан, запринаст, ЗК 96231, 117658А (ЕПпПбпе-Рошепс ВРогеп), І-787258 (Мегск толафентрин (Вук спшідеп), філамінаст (Му/ует-

Его55ї Сапада), Е-4021 (Еїзаї Со. Ца.), арг-248 Ауегві Рпаптасеціїса!5). (Сіахо МУеОсоте), 5КЕ-107806 (5тіНнКіїпе 18. Спосіб за п. 1, де інгібітор фосфодіестерази

Вееспат), ІРІ-4088 (ІпПйагуте РНаптасеціісаїЇв вибраний з групи, до якої входять: ца.) (3-К(З-циклопентилокси-4- цис-4-ціано-4-(З-диклопентилокси)-4- метоксифеніл)метил|-8-(метилетил)пурин-6- метоксифеніл)-циклогексан-І-карбонова кислота;

З-(циклопентилокси)-М-(3,5-дихлорпіридин-4-іл)-4- 19. Спосіб збирання овоцитів для запліднення іп метоксибензамід; гідрохлорид 2-(4-(6,7-діетокси- міо, який включає збирання овоцитів від самки, у 2,3-біс(гідроксиметил)нафталін-1-іл)піридин-2-іл)- якої овуляція була індукована способом за будь- 4-(З-піридин)фталазин-1(2Н)-ону; 7-бензиламіно-6- яким з пп. 1-18. хлор-2-піперазино-4-піролідиноптеридин.

Цей винахід стосується способів підвищення нейроендокринною реакцією на підвищений рівень фертильності у самок шляхом індукування овуля- естрогену та поступово зростаючі концентрації ції із застосуванням неполіпептидного модулятора прогестерону є преовуляторне виділення гонадо- рівнів САМР. тропінів, яке обговорюється нижче.

Овуляція - це процес вивільнення яйцеклітини На протязі овуляторної фази має місце зміна або яйцеклітин з яєчників. Часовий режим овуляції нейроендокринної реакції на естрогени та прогес- в межах менструального циклу має першорядне терон. У цей момент циклу підвищений рівень ест- значення для запліднення. Добре відомо, що фо- рогенів спричиняє різке зростання рівнів Е5Н та лікули набувають здатності до овуляції після росту ІН у сироватці крові; внаслідок позитивного зворо- та визрівання; ці процеси стимулюються гонадо- тного зв'язку з гіпоталамусом, естроген тепер сти- тропінами гіпофіза. За ріст фолікула відповідаль- мулює швидке зростання рівня СпКкН та подаль- ним є переважно фолікулостимуляційний гормон шого вивільнення ЕН та ІН з гіпофіза. Цей викид (ЕН), а овуляцію стимулює лютеїнізуючий гормон гонадотропінів викликає завершення визрівання (-Н). Цей координований процес стимульованого фолікулів та спричиняє розрив домінантного, або гонадотропінами визрівання фолікулів забезпечує граафового, фолікула та вивільнення яйцеклітини нормальний стан яйцеклітин при овуляції. Відпо- через приблизно 16-24год після піка ІН. В період відно підготовлена яйцеклітина придатна до за- після преовуляторного викиду рівень естрадіолу в пліднення сперматозоїдом через кілька годин піс- сироватці крові поступово знижується, а рівень ля овуляції. прогестерону в плазмі починає підвищуватися.

Овуляція є точно визначеним в часі процесом, Після овуляції постовуляторні яєчникові фолі- який регулюється стимуляцією яєчників гонадо- кули під впливом ІН зазнають лютеїнізації і утво- тропінами гіпофіза і модулюється ростовими та рюють жовте тіло (лютеальна фаза). Діагностич- біохімічними реакціями яєчників на стимуляцію ними маркерами лютеальної фази менструального гонадотропінами (наприклад, стероїдогенними циклу є помітне підвищення секреції прогестерону реакціями, секрецією інгібіну тощо). На протязі жовтим тілом, та перетворення матки як реакція нормального менструального циклу у жінок ці гор- на прогестерон. З продукуванням прогестерону в мони вивільнюються та діють у циклічному режимі. лютеальній фазі пов'язане менш виразне підви-

Менструальний цикл можна за функціональними щення рівнів естрогенів у сироватці крові. В той ознаками розділити на три фази: фолікулярну, час як рівні прогестерону та естрогенів зростають, овуляторну та лютеальну. Фолікулярний період рівні СН та ЕЗН знижуються на протязі більшої починається наприкінці лютеальної фази поперед- частини лютеальної фази. Наприкінці лютеальної нього циклу, в якому заплінення не мало місця, фази менструального циклу, в якому запліднення перед менструацією або одночасно з її початком. не мало місця, відбувається регрес жовтого тіла, і

Цикл починається з тимчасового підвищення рівня рівень ЕЗН починає зростати для ініціювання рос-

ЕН у крові, яке стимулює розвиток групи фоліку- ту фолікулів у наступному циклі. лів у яєчниках. Розмір фолікулів, стимульованих Е5Н та ІН відрізняються один від одного здат- до росту, становить приблизно 5мм у діаметрі. ністю стимулювати відповідно розвиток фолікулів

При нормальному менструальному циклі на протя- та овуляцію. Відомо, що обидва гормони стиму- зі фолікулярної фази розвивається звичайно один люють підвищення концентрації внутрішньоклітин- великий, або домінантний, фолікул, котрий і зрос- ного циклічного аденозинмонофосфату (САМР). тає до визрівання. У людей розмір фолікула, який Показано, що агенти, які імітують САМР, напри- вважається готовим до овуляції, становить приб- клад, форсколін або стабільні аналоги САМР, в лизно 15мм у діаметрі або більше. дослідженнях іп міго спричиняють ефекти, подібні

Другою подією великого значення, яка відбу- до ефектів ЕН, у зернистих клітинах із незрілих вається в яєчниках під час фолікулярної фази, є фолікулів та ефекти, подібні до ефектів ІН, у клі- те, що у зернистих клітинах яєчникових фолікулів тинах зі зрілих фолікулів. Хоча як для Е5Н, так і утворюються рецептори ІН, і ці клітини набувають для ІН запропоновані альтернативні внутрішньок- підвищеної чутливості до ІН. Секреція естрадіолу літинні механізми дії, вважається, що реакцією на та естрону з яєчників спочатку зростає повільно, обидва гонадотропіни є стимуляція виділення паралельно зі збільшенням діаметра фолікула та САМР. В такому разі підвищення рівня САМР пов'я- підвищенням чутливості фолікула до ІН. Відносно зане з розвитком та визріванням фолікулів, а інду- підвищені рівні естрогену та інгібіну спричиняють кування овуляції залежить від типу клітин та при- пригнічення секреції гормону вивільнення гонадо- сутності або відсутності відповідних рецепторів. тропіну (СПЕКН) із гіпоталамуса та секреції гонадо- Дійсно, було показано, що у мишей з дефіцитом тропіну з гіпофіза. Продукування естрогену дося- конкретної фосфодіестерази овуляція порушуєть- гає максимуму за день до піка ІН, іі ся, і чутливість зернистих клітин до гонадотропінів знижена. За другим аспектом, цей винахід пропонує за-

Способи лікування неплідності, які застосову- стосування непептидного модулятора рівня САМР, ються на даний час у клініці, включають вплив на за варіантом, якому віддається перевага, інгібітора деякі з регуляторних подій, описаних вище. Одним РОЕ, за варіантом, якому віддається більша пере- із засобів, які стимулюють ріст фолікулів та засто- вага, інгібітора РОЕ4, для індукування овуляції у совуються для лікування ановуляції, є кломіфен. пацієнтки.

Кломіфен є нестероїдним антиестрогеном, який За третім аспектом, цей винахід пропонує за- конкурує з естрогенами на їхніх паратопах. Вважа- стосування непептидного модулятора рівня САМР, ється, що кломіфен зв'язується з рецепторами за варіантом, якому віддається перевага, інгібітора естрогенів у гіпоталамусі та гіпофізі та блокує не- РОЕ, за варіантом, якому віддається більша пере- гативний зворотній зв'язок, на який діють яєчникові вага, інгібітора РОЕ4, для виготовлення лікар- естрогени. Результатом є підвищений вихід гона- ського засобу для індукування овуляції у пацієнтки дотропінів (ЕН та ІН) на ранній стадії фолікуляр- в схемі лікування, за якою перед індукуванням ної фази. Дія кломіфену полягає в підвищенні рів- овуляції індукується визрівання фолікулів кломі- ня ендогенного БЕЗН у сироватці крові та феном або інгібітором ароматази, за варіантом, покращенні росту та визрівання фолікулів. Пода- якому віддається перевага, інгібітором ароматази, льший вплив або ендогенного ІН, або екзогенного вибраним із групи, до якої входять УМ-511, лет-

ГН/Со (хоріонічного гонадотропіну) індукує овуля- розол, фадрозол та анастрозол, за варіантом, цію у пацієнток. якому віддається більша перевага, з групи, до якої

Окрім кломіфену, жінок лікують, застосовуючи входять летрозол та анастрозол. схеми індукування овуляції, які включають викори- За четвертим аспектом, цей винахід пропонує стання комерційно доступних препаратів людських застосування непептидного модулятора рівня гонадотропінів, в тому числі фолікулостимуляцій- САМР, за варіантом, якому віддається перевага, ного гормону (Е5Н) та лютеїнізуючого гормону інгібітора РОЕ, за варіантом, якому віддається (ІН) або хоріонічного гонадотропіну (СО). Усі ці більша перевага, інгібітора РОЕ4, для індукування засоби вперше були одержані шляхом очищення з овуляції у пацієнтки в схемі лікування, за якою сечі вагітних жінок, а більш сучасним способом їх перед індукуванням овуляції індукується визріван- одержання є рекомбінантна технологія. Як прави- ня фолікулів кломіфеном або інгібітором аромата- ло, таке лікування має високу ефективність відно- зи, за варіантом, якому віддається перевага, інгібі- сно стимулювання фолікулогенезу та стероїдоге- тором ароматази, вибраним із групи, до якої незу. Ускладнення при такому лікуванні виникають входять УМ-511, летрозол, фадрозол та анастро- внаслідок того, що згадані препарати та схеми зол, за варіантом, якому віддається більша пере- здатні гіперстимулювати розвиток фолікулів та вага, з групи, до якої входять летрозол та анастро- їхнє визрівання. У деяких пацієнток може виникати зол. гіперстимуляція яєчників, наслідком якої може бу- За п'ятим аспектом, винахід пропонує ком- ти множинна овуляція та подальша багатоплід- плект для застосування при індукуванні овуляції, ність. Гіперстимуляція яєчників не тільки може який включає в себе дозу непептидного модулято- загрожувати життю матері, але й, як правило, при- ра рівня САМР, за варіантом, якому віддається зводить до народження дітей зі зниженою масою перевага, інгібітора РОЕ, за варіантом, якому від- тіла, які потім потребують інтенсивного догляду. дається більша перевага, інгібітора РОЕЯ4, та ін-

Вважається, що основні ускладнення, які припису- струкції з його застосування для індукування ову- ються індукованій гонадотропінами гіперстимуляції ляції. та багатоплідною вагітністю, виникають внаслідок За шостим аспектом, винахід пропонує ком- довготривалого ефекту ПСО (хоріонічного гонадо- плект для застосування при індукуванні овуляції тропіну людини). Крім того, застосування гонадо- та/або в технології сприяння репродукції (АКТ), тропінів в схемах індукування овуляції може після який включає в себе достатні добові дози Е5Н ін'єкцій спричинити побічні реакції, які можуть мати та/або сполуки, що має ефект, подібний до ефекту як локальний, так і системний характер. Таким ЕН, за варіантом, якому віддається перевага, чином, розроблення схем індукування овуляції із кломіфену або інгібітора ароматази, за варіантом, застосуванням пероральних активних речовин із якому віддається більша перевага, інгібітора аро- пом'якшеною активністю, подібною до дії гонадо- матази, вибраного з групи, до якої входять УМ- тропінів, мало б значний позитивний ефект у порі- 511, летрозол, фадрозол та анастрозол, для спри- внянні зі способами лікування, при яких застосо- чинення визрівання фолікулів, та достатню для вуються високоактивні препарати для ін'єкцій. Ще індукування овуляції дозу непептидного модулято- більше значення мало б розроблення схем індуку- ра рівня САМР, за варіантом, якому віддається вання овуляції, при яких досягалася б менша інте- перевага, інгібітора РОЕ, за варіантом, якому від- нсивність гіперстимуляції яєчників і, отже, забез- дається більша перевага, інгібітора РОЕЯ4, та ін- печувалася б більша безпека для матері та струкції із застосування комплекту при індукуванні кращий стан здоров'я новонароджених. овуляції або в АКТ.

За першим аспектом, цей винахід пропонує За сьомим аспектом, цей винахід пропонує за- застосування непептидного модулятора рівня стосування непептидного модулятора рівня САМР,

САМР, за варіантом, якому віддається перевага, за варіантом, якому віддається перевага, інгібітора інгібітора РОЕ (фосфодіестерази), за варіантом, РОЕ, за варіантом, якому віддається більша пере- якому віддається більша перевага, інгібітора вага, інгібітора РОЕ4, для індукування овуляції у

РОЕ4, для виготовлення лікарського засобу для пацієнтки в схемі лікування, за якою для індуку- індукування овуляції у пацієнтки. вання овуляції застосовуються також ПСО або 1Н,

та пСо або ІН застосовуються у зменшеній дозі Таким чином, цей винахід передбачає засто- порівняно з кількістю ПСО або ІН, нормально не- сування неполіпептидного модулятора рівня САМР обхідною для індукування овуляції у тієї самої па- як низькомолекулярного лікарського засобу (на- цієнтки. приклад, інгібітора фосфодіестерази), який вво-

Цей винахід стосується способу підвищення диться в організм перорально, а не шляхом ін'єк- фертильності у самок, який включає введення в ції, яка є необхідним способом введення протеїнів організм самки неполіпептидного модулятора рів- в існуючих схемах індукування овуляції. Перора- ня циклічного аденозинмонофосфату (САМР). В льне введення виключає гострі та системні побічні іншому аспекті, винахід передбачає конкретне ефекти, пов'язані з такими ін'єкціями. В першу чер- введення в організм неполіпептидного модулятора гу, згаданий низькомолекулярний лікарський засіб рівня САМР для індукування овуляції домінантного є ефективним при індукуванні овуляції і може за- зрілого фолікула перед лютеальною фазою овуля- стосовуватися окремо або в комбінації чи без ком- торного циклу. До неполіпептидних модуляторів бінації з ІН або СО, і, альтернативно, з нижчими рівня САМР, яким віддається перевага, належать концентраціями ІН або Со порівняно з використо- інгібітори фосфодіестерази, зокрема, інгібітори вуваними на цей час, і, отже, зменшує імовірність ізоформ фосфодіестерази-4. гіперстимуляції яєчників та пов'язаних із нею ризи-

Хоча вплив інгібіторів РОЕ на стимульоване ків. Таким чином, можна запобігти багатоплідності

ІН вивільнення стероїдів із зернистих клітин іп та ускладнень, загрозливих для матері та новона- мійго є відомим, цей винахід розкриває два нових роджених. Крім того, цей винахід передбачає мо- виявлених факти. По-перше, інгібітори РОЕ не жливість більш раннього діагностичного тестуван- покращують стимульований ЕЗН ріст іп мімо, не- ня на вагітність у порівнянні з існуючими схемами зважаючи на загальновизнану роль САМР в меха- індукування овуляції, які включають застосування нізмах дії як ЕЗН, так і ІН у клітинах. Крім того, са. наведено свідоцтва, що інгібітори РОЕ покращу- Способи лікування за цим винаходом корисні ють стимульоване гонадотропінами вивільнення для лікування неплідності у людей, але також у стероїдів іп мійго, що додатково ілюструє новий інших ссавців (наприклад, у коней та сільськогос- вплив інгібіторів РОЕ на овуляцію, яка залежить подарьких тварин, наприклад, у великої рогатої від ІН. По-друге, інгібітори РОЕ збільшують коефі- худоби, овець, корів тощо), та в інших видів, на- цієнт овуляції іп мімо у відсутності доданих ІН або приклад, риб та птахів (наприклад, курей тощо). пСо. З урахуванням активності інгібіторів РОЕ при Короткий опис фігур пероральному застосуванні, цей другий виявлений На Ффіг.1 схематично зображена узагальнена факт забезпечує основу для першої потенціально схема індукування овуляції у людей. безін'єкційної схеми індукування овуляції, оскільки На Фіг.2 показано у вигляді стовпчастої діаг- інгібітори РОЕ можуть застосовуватися в поєднан- рами вплив інгібіторів фосфодіестерази (тобто ні з відомими схемами, як описано нижче. сполуки 1 та сполуки 2) на підвищення внутріш-

Цей винахід також передбачає стимуляцію ро- ньоклітинного рівня САМР у зернистих клітинах іп звитку фолікулів перед застосуванням неполіпеп- міо. тидного модулятора рівня САМР, яка включає вве- На Фіг.3 показано у вигляді стовпчастої діаг- дення в організм пацієнтки засобу, який підвищує рами вплив інгібітора фосфодіестерази (тобто концентрацію ЕЗН на протязі фолікулярної фази сполуки 1) на визрівання фолікулів у пацюків іп овуляторного циклу пацієнтки. Підвищення рівня мімо.

Е5Н за цим винаходом стосується тільки розвитку На Фіг.4 у вигляді стовпчастої діаграми пока- та визрівання фолікулів, але не індукування ову- зано вплив інгібітора фосфодіестерази (тобто спо- ляції. До засобів, яким віддається перевага, нале- луки 1) на овуляцію у пацюків іп мімо у присутності жать сам ЕЗН, кломіфен, селективні модулятори са. рецепторів естрогенів, інгібітори ароматази та се- На Фіг.5 у вигляді стовпчастої діаграми пока- лективні модулятори нейроендокринного регулю- зано вплив інгібітора фосфодіестерази (тобто спо- вання продукування ЕН. луки 1) на овуляцію у пацюків іп мімо у присутності

За ще одним аспектом, винахід передбачає та у відсутності СО. спільне введення в організм неполіпептидного На Фіг.6 у вигляді стовпчастої діаграми пока- модулятора рівня САМР та ІН або хоріонічного зано вплив інгібітора фосфодіестерази (тобто спо- гонадотропіну (бо) перед лютеальною фазою луки 2) на овуляцію у пацюків іп мімо у присутності овуляторного циклу самки. Таке спільне введення та у відсутності СО. можна здійснювати послідовно або одночасно, а На Фіг.7 у вигляді стовпчастої діаграми пока- також однаковими або різними способами (напри- зано вплив інгібітора фосфодіестерази (тобто спо- клад, парентерально та/або перорально). Крім луки 2) на овуляцію після перорального та підшкі- того, винахід передбачає застосування нижчих рного введення. концентрацій ІН або Со у порівнянні з концентра- На Фіг.8 у вигляді стовпчастої діаграми пока- ціями, які застосовуються за існуючими схемами зано вплив інгібітора РОЕ сполуки З на овуляцію іп індукування овуляції, і зниження, таким чином, мімо після перорального та підшкірного введення. імовірності гіперстимуляції яєчників. На Фіг.9 у вигляді стовпчастої діаграми пока-

Крім того, цей винахід передбачає застосу- зано вплив інгібітора РОЕ сполуки 4 на овуляцію іп вання неполіпептидного модулятора рівня САМР мімо у присутності та у відсутності субефективної як лікарського засобу для заміни ІН або ПСО при дози ПСО. збиранні овоцитів для запліднення іп міго або для На Фіг.10 у вигляді стовпчастої діаграми пока- підвищення ефективності дії ІН або по. зано вплив інгібітора РОЕ сполуки 2 на овуляцію та фертильність. традіолу та інгібіну В під впливом граафова фолі-

Ї. Визначення кула, що розвивається.

Як правило, подані нижче слова або вирази Термін "перед лютеальною фазою" означає вживаються в описі, прикладах та формулі вина- період менструального циклу перед переходом від ходу у значеннях, що відповідають поданим ви- фолікулярної фази, котра регулюється естрогена- значенням. ми, до лютеальної фази, що регулюється прогес- "Введення в організм" означає доставку лікар- тероном. Рівні естрогенів перед лютеальною фа- ського засобу в організм самки. В контексті цього зою, як правило, перевищують або дорівнюють винаходу цей термін охоплює доставку неполіпеп- 150пг/мл на фолікул для фолікула діаметром тидного модулятора рівня САМР та/або засобу, 16мм, при цьому діаметр фолікула, як правило, не який підвищує концентрацію ЕН. Більш детально менше ніж 14мм. Ці критерії не є абсолютними і значення цього терміну описані в розділі "Фарма- варіюють від пацієнтки до пацієнтки. В контексті цевтичні композиції" цього опису. цього винаходу та з точки зору моменту введення

Термін "овуляція" стосовно до цього винаходу неполіпептидного модулятора рівня САМР, неполі- означає процес вивільнення яйцеклітини або яй- пептидний модулятор рівня САМР можна вводити цеклітин з яєчників. При наближенні середини ци- в організм самки в момент часу, який відповідає клу відбувається різкий зріст рівня естрогенів, піс- відомій схемі індукування овуляції, за якою в орга- ля якого відбувається викид ІН та, меншою мірою, нізм згаданої самки звичайно вводяться ПСО або

ЕН. Ці зміни індукують овуляцію домінантного ІН. фолікула. Овуляція полягає в швидкому збільшен- Термін "овуляторний цикл" або "менструаль- ні розміру фолікула з подальшим висуванням фо- ний цикл" означає циклічну послідовність подій, які лікула над поверхнею кори яєчника. Нарешті, роз- відбуваються протягом характерного для даного рив фолікула спричиняє викид овоцитного виду періоду часу, яка включає ріст та розвиток комплексу. Потім залишок домінантного фолікула фолікулів, їх активізацію, селекцію, домінування, перетворюється в жовте тіло. овуляцію та утворення й вмирання жовтого тіла.

Термін "ановуляція" означає відсутність ову- Функційно згаданий цикл можна підрозділити на ляції. три фази: фолікулярну, овуляторну та лютеальну.

Термін "неполіпептидний модулятор рівня Цей цикл може зватися також менструальним цик-

САМР" стосується сполук, які в повному обсязі не лом. складаються з амінокислот, незалежно від глікози- Термін "індукування овуляції" означає процес, дування, і прямим або непрямим шляхом спричи- в якому поліпептид(и) та/або синтетична хімічна няють зростання внутрішньоклітинного рівня речовина застосовуються з метою викликати ову-

САМР. Такі сполуки можуть спричинити підвищен- ляцію у самок, які в іншому разі є ановуляторними; ня рівня САМР шляхом стимуляції синтезу САМР результатом цього процесу є індукування розриву або пригнічення його розкладу, або ж обома цими фолікула та овуляція здатних до запліднення ово- шляхами. Прикладами модуляторів, які інтенсифі- цитів. Індукування овуляції не охоплює попередніх кують синтез САМР, є активатори аденілциклази, подій на протязі овуляторного циклу, які включа- наприклад, форсколін. Прикладами модуляторів, ють визрівання та розвиток фолікулів. які послаблюють розклад сАМР, є інгібітори фос- Термін "гіперстимуляція яєчників" стосується фодіестерази, наприклад, теофілін. фармакологічного втручання в овуляторний або

Термін "самка" означає особу або особину жі- ановуляторний менструальний цикл. Це втручання ночої статі певного виду, в організм якої вводяться викликає визрівання множинних фолікулів, наслід- лікарські засоби за цим винаходом. Це визначення ком якого є кодомінування кількох фолікулів та охоплює людей, інших ссавців та інші види, напри- наявність кількох здатних до запліднення овоцитів. клад, риб та свійських птахів. Термін "фолікул" означає заповнений рідиною

Термін "Інгібітор фосфодіестерази" стосується пухирець, що оточує яйцеклітину; цей пухирець хімічних сполук, які блокують або пригнічують фо- містить також зернисті клітини. сфодіестерази (РОЕ), які інактивують відповідні Термін "розвиток фолікула" означає поступо- циклічні нуклеотиди-мішені (тобто САМР та сОоМР) вий ріст та розвиток яєчникових фолікулів, зокре- шляхом гідролітичного розщеплення зв'язку 3'- ма, під час фолікулярної фази овуляторного цик- фосфодіефіру, результатом чого є пасивне нагро- лу, результатом якого є активізація та домінування мадження специфічних циклічних нуклеотидів. фолікула, призначеного для овуляції.

Інгібітори можуть бути неселективними і діяти на Термін "фолікулостимуляційний гормон (ЕН) всі ізоформи фосфодіестерази або селективними та його ізоформи" стосується гормону, який виді- відносно конкретних ізоформ. Ці сполуки описані ляється гіпофізом та стимулює ріст яєчникових нижче. фолікулів, та ізоформ ЕЗН, описаних, наприклад, в

Термін "ізоформи фосфодіестерази" стосуєть- патенті США Ме5,087,615, включеного до цього ся сімейства ізоферментів або ізоформ, відповіда- опису шляхом посилання. льних за метаболізм або розклад внутрішньоклі- Термін "селективні модулятори рецепторів ес- тинних вторинних месенджерів, САМР та сОМР. трогенів" стосується хімічних сполук або поліпеп-

Специфічні ізоформи можуть мати високоселекти- тидів, які діють як антагоністи рецепторів естроге- вну клітинну та субклітинну локалізацію. Прикла- нів на рівні гіпоталамуса та гіпофіза та як агоністи - дами ізоформ фосфодіестерази є РОЕЗ та РОЕ4. на рівні матки. Прикладами таких модуляторів мо-

Термін "фолікулярна фаза" означає першу ча- жуть бути тамоксифен, ралоксифен, тореміфен, стину менструального циклу, яка характеризується кломіфен та дролоксифен. Джерело - поступовим підвищенням рівнів циркулюючих ес- Епаосііпоіоду, 1999, 138(12):5476-5484 - включено до цього опису шляхом посилання. Термін "засіб, що підвищує концентрацію ЕН"

Термін "інгібітори ароматази" стосується хіміч- означає будь-яку композицію речовин, протеїн або них сполук або поліпептидів, які блокують або при- синтетичну хімічну сполуку, яка, будучи введена в гнічують активність ароматази, котра є фермен- організм самки, підвищує рівень концентрації ЕН том, що перетворює андрогени в естрогени. у сироватці крові прямим або непрямим шляхом,

Прикладами інгібіторів ароматази є летрозол, ана- тобто шляхом введення Е5Н як такого або засобу, строзол та ворозол. Джерела: 1) 39. Ььої який стимулює ендогенне продукування ЕЗН або

Епаосііпоіоду, 2000 Ребр., 164(2):225-238; і 2) 9. ої пригнічує його ендогенний розклад. Визначення

Зіегоїй Віоспетізігу апа Моїіесшаг Віоіоду, 1997 цього виразу та такого засобу охоплює сполуки, які

Аріїї, 61(3-6): 157-166, включено до цього опису можуть не підвищувати концентрацію ЕН, але шляхом посилання. мають біологічну функцію та активність фолікулос-

Термін "аналогічні стероїдогенні ферменти" тимуляційного гормону. охоплює будь-який фермент, який бере участь у ІЇ. Принципи індукування овуляції каталізі біохімічних реакцій, результатом яких є Проблеми неадекватності або невідповідності синтез естрогенів та прогестерону, в тому числі 3- рівнів гонадотропінів як причини овуляторної дис- р-гідроксистероїд-дегідрогенази; до інгібіторів цьо- функції відомі з 1960-х років. Клінічна ефективність го ферменту належать даїдзеїн, геністеїн, біочанін застосування різноманітних препаратів гонадотро-

А та формононетин. Джерело, .. ої біегоїй пінів була пропорційна до кількості введеного ЕН.

Віоспетівіу апа Моїіесшаг Віоіоду, 1996 Арії, Перші одержані результати свідчили, що екзоген- 58(1):95-101, включено до цього опису шляхом ний ІН не є необхідним для адекватного фолікуло- посилання. генезу при індукуванні овуляції. Проте виявилося,

Термін "кломіфен" означає 2-(4-(2-хлор-1,2- що жінки, які одержували тільки екзогенний ЕН, діфенілетеніл)фенокси|-М,М-діетилетанамін та не здатні продукувати фолікулярний естрадіол в його солі. адекватній кількості для індукування овуляції. Ви-

Термін "лютеїнізуючий гормон" означає гор- явилося, що присутність щонайменше деякої кіль- мон, який виділяється гіпофізом і виконує подвійну кості екзогенного або ендогенного ІН має важливе функцію: викликає вивільнення яйцеклітини з до- значення для індукування овуляції у людей. На мінантного фолікула та стимулює секрецію проге- Ффіг1 схематично зображено узагальнену схему стерону з жовтого тіла. індукування овуляції. Пацієнтці вводять препарат

Термін "знижені концентрації" означає концен- ЕН в кількості 75МО на добу протягом перших 7 трації введеного засобу, знижені у порівнянні зі днів. В кінці 7-го дня виконують ультразвукове ска- стандартними концентраціями введених засобів. В нування для оцінки діаметра фолікулів та вимірю- контексті цього винаходу в організм пацієнтки вво- ють рівень естрадіолу в сироватці крові. Якщо діа- дять нижчі концентрації ІН або Со, ніж за відоми- метр фолікулів менше ніж 12мм, то подвоюють ми схемами індукування овуляції. дозу ЕЗН і повторно виконують ультразвукове

Термін "відомі схеми індукування овуляції" сканування через інші 5-7 днів. Пацієнтки з фолі- означає сучасні способи індукування овуляції, які кулами діаметром 215мм одержують овуляторну включають застосування кломіфену, гонадотропі- дозу ПСО у вигляді болюса. нів (тобто ЕН, ІН або Со) або комбінації цих за- І. Узагальнена схема індукування овуляції собів для сприяння фолікулогенезу та індукованій Індукування овуляції являє собою рівною мі- овуляції у ановуляторних самок. Ці схеми варію- рою мистецтво та науку. Незважаючи на значну ють стосовно до часового режиму, частоти вве- кількість систематизованих методик лікування, дення та концентрації введених засобів. Це визна- жодний з підходів або конкретних способів не є чення охоплює модифікації відомих схем, якщо однозначно правильним. Проте застосовуються вони вимагають введення ПСО або ІН у певний деякі принципи, які забезпечують основу безпеч- момент часу в період застосування схеми індуку- ного та ефективного лікування. Слід зазначити, вання овуляції. До цього опису включено шляхом однак, що описані нижче критерії індукування ову- посилання способи лікування жіночої неплідності, ляції подано тільки як приклади і можуть варіюва- стимуляції фолікулогенезу та індукування овуляції, ти в широких межах залежно від клініки, стану па- описані в таких монографіях: "Репродуктивна ен- цієнтки та мети лікування. докринологія, хірургія та технологія" (Кергодисіїме Перший цикл включає, як правило, щоденне

ЕпдосііпоІоду, Зигдегу, апа ТесппоЇоду, МоїЇ.1 апа введення Е5Н, починаючи з 4-7-го дня після при- 2, ЕБайогев: Е.У. Адавні, У.А. Носк апа 7. Нозепулакв, пинення кровотечі. Виконується моніторинг росту

Прріпсой-Камеп Рибі., Рпйаде!рпіа, 1996) та "Су- та реакції фолікулів шляхом ультразвукового дос- часна практика терапії жіночої неплідності" лідження та визначення рівня естрогенів. Адекват-

ІБРетаїе ІптепіШу Тпегару Сигтепі Ргасіїсе, Еаїюогв: на стимуляція фолікулів досягається звичайно за 7. Зподат, СМ. Ном/ієз апа Н.5. уУасобе, Мапіп 7-14 днів безперервного застосування ЕН. Ліку-

Оипії Ца., Гопаоп, 1999). вання Е5Н протягом менше ніж 8 днів пов'язане з

Термін "хоріонічний гонадотропін" означає глі- підвищенням коефіцієнта спонтанного викидня у копротеїновий гормон, біологічно та імунологічно вагітних пацієнток. подібний до гіпофізного ІН. При нормальній вагіт- Після досягнення достатнього ступеня розвит- ності СО продукується плацентою і може бути ви- ку фолікулів (два фолікули діаметром 16-183мм у користаний як діагностичний маркер вагітності за сукупності з поступовим зростанням рівня естро- ознакою його підвищеної концентрації у сироватці генів у сироватці крові до 500-100Опг/мл) вводять крові. Абревіатура по означає хоріонічний гона- пСо (5000 або 10000МО). Момент введення ПСО дотропін людини. має важливе значення, оскільки основні усклад-

нення, що пов'язані з індукованою гонадотропіна- гія, хірургія та технологія" ІКергодисіїме ми гіперстимуляцією та багатоплідною вагітністю, Епадосііпоіюду, Зигдегу, апа Тесппоіоду, МоІ.1 апа ймовірно, виникають внаслідок надмірної тривало- 2, Едіюгв: Е.У. Адавні, У.А. РоскК апа 7. Нозепжмакв, сті дії ПСО. Хоча період напіввиведення ПСО ста- Прріпсоц-Камеп Рибі., Рпйаде!рніа, 1996) та "Су- новить приблизно д8год, його можна виявити в кро- часна практика терапії жіночої неплідності" ві пацієнтки протягом 7-10 діб після ін'єкції і на цій ІРетаїе Іпбтепійу Тнпегару Сштепі Ргасіїсе, Еайогв: основі поставити неправильний діагноз вагітності 7. Зподат, СМ. Номіевз апа Н.5. уасоре5, Мапіп як успішного результату лікування. Після введення Оипії: Ца., Гопаоп, 1999).

ПСО партнерам повідомляють, що вони повинні ІМ. Способи за цим винаходом мати статеві стосунки найближчої ночі та ще один Цей винахід стосується способу індукування або два рази протягом наступних 48год. овуляції, який включає введення в організм самки

Фундаментальне правило відносно введення неполіпептидного модулятора рівня САМР у схемі гонадотропіну полягає в тому, що кожний цикл індукування овуляції, де згаданий модулятор за- лікування має бути індивідуалізованим, контролю- стосовують для підвищення ефективності або для ватися та коригуватися відповідним чином. Моні- заміни введення ПСО (або ІН), які звичайно вво- торинг необхідний не тільки для підвищення кое- дять перед лютеальною фазою індукованого або фіцієнтів овуляції та вагітності але й для природного овуляторного циклу. зменшення ризику сильної гіперстимуляції яєчни- Модулятор можна вводити окремо або спільно ків та її потенціальних наслідків та багатоплідних з ПСО (або ІН), одночасно або послідовно з цими вагітностей. засобами, а також однаковими або різними

Ця мета досягається шляхом частого визна- шляхами (наприклад, парентерально або перора- чення рівня естрадіолу в плазмі та сироватці крові льно). та ультразвуковим дослідженням яєчників. Рівні За іншим аспектом, винахід передбачає спіль- естрадіолу, як правило, корелюють із кількістю не одночасне або послідовне введення неполіпеп- фолікулів, що ростуть, але не обов'язково з кількі- тидного модулятора рівня САМР та ІН або Со стю зрілих фолікулів. Застосування рівнів естра- перед лютеальною фазою овуляторного циклу діолу як маркера зрілості фолікулів може в разі самки. Крім того, оскільки вважається, що основні присутності великої кількості дрібних фолікулів ускладнення, що пов'язані з індукованою гонадо- призвести до невірного висновку про зрілість фо- тропінами гіперстимуляцією та багатоплідною вагі- лікулів, наслідком чого може стати передчасне тністю, ймовірно, виникають внаслідок надмірної введення ПСО. Оскільки ріст фолікула безпосере- тривалості дії ПСО, винахід передбачає введення дньо корелює з визріванням яйцеклітини, то оцінка в організм пацієнтки знижених концентрацій СН середнього діаметра фолікулів ультразвуковим або Со у порівнянні з концентраціями, які застосо- методом може бути кращим індикатором зрілості вуються у відомих схемах індукування овуляції, і, фолікулів при визначенні моменту введення ПСО. таким чином, зниження ймовірності гіперстимуля-

Тому рівні естрогенів мають застосовуватися для ції яєчників і, отже, запобігання негативним ефек- оцінки ранніх стадій розвитку фолікулів як індика- там, пов'язаним із таким станом: багатоплідності, тор реакції на гонадотропін, а для оцінки кількості малій масі тіла новонароджених та ускладненням та розміру фолікулів, що визрівають, слід застосо- зі здоров'ям матері. вувати ультразвук. Слід відзначити, що введення в організм не-

Метою лікування в більшості випадків є забез- поліпептидного модулятора рівня САМР не спри- печення максимальної можливості одноплідної чиняє терапевтичного впливу на визрівання та вагітності при одночасному зниженні ризику вини- розвиток фолікулів на протязі овуляторного циклу. кнення синдрому гіперстимуляції. Виявлено, що Таким чином, цей винахід стосується способу оптимальними є рівні естрадіолу в межах від індукування овуляції який включає введення в 1000Опг/мл до 1500пг/мл, проте реальні рівні мо- організм самки неполіпептидного модулятора рів- жуть варіювати залежно від використовуваного ня циклічного аденозинмонофосфату (САМР). Не- лабораторного методу та досвіду лікаря. Ризик поліпептидні модулятори рівня САМР прямим або гіперстимуляції збільшується при підвищених рів- непрямим шляхом спричиняють зростання внутрі- нях естрадіолу. Як правило, якщо рівень естрадіо- шньоклітинного рівня САМР. Такі сполуки можуть лу в сироватці крові перевищує 2000пг/мл, ПСО спричинити підвищення рівня САМР шляхом сти- слід вводити дуже обережно або відкласти і дати муляції синтезу САМР або пригнічення його роз- фолікулам регресувати. При гіпогонадотропному кладу, або ж обома цими шляхами. Прикладами гіпогеніталізмі ризик тяжкої гіперстимуляції при модуляторів, які інтенсифікують синтез САМР, є рівні естрадіолу понад 2400пг/мл становить 595 у активатори аденілциклази, наприклад, форсколін. циклах із завагітнінням та 195 у циклах без завагіт- Прикладами модуляторів, які послаблюють розк- ніння. Крім того, оскільки гіперстимуляція має тен- лад САМР, є інгібітори фосфодіестерази, напри- денцію корелювати з присутньою кількістю фолі- клад, теофілін. До неполіпептидних модуляторів кулів, рішення про відкладення застосування ПСО рівня САМР, яким віддається перевага, належать може базуватися на виявленні 10 або більше фо- інгібітори фосфодіестерази, зокрема, інгібітори лікулів, що розвиваються, при ультразвуковому ізоформ фосфодіестерази-4. дослідженні. За ще одним аспектом, винахід передбачає

До цього опису включено шляхом посилання конкретне введення в організм неполіпептидного способи лікування жіночої неплідності, стимуляції модулятора рівня САМР перед лютеальною фазою фолікулогенезу та індукування овуляції, описані в овуляторного циклу як засобу для підвищення таких монографіях: "Репродуктивна ендокриноло- ефективності ПСО або для заміни ПСО за схемою індукування овуляції, в якій ПСО вводять, як пра- т вило, наприкінці фолікулярної фази, але перед | й кв лютеальною фазою овуляторного циклу. І ще

Моментом введення неполіпептидного моду- Шо ай лятора рівня САМР, якому віддається перевага, є фе час перед лютеальною фазою овуляторного цик- й лу. я ; у олив пово, Застосуоання Ной оно виклопентил або циклогексил, ЯР є : й етил, ВЗ є група карбонової кислоти, складного ного модулятора рівня САМР перед індукуванням ефіру або первинного аміду, гідроксиметил або овуляції, яка включає введення в організм пацієнт- карбоніл, і Р: є ціаногрупа: ки засобу, який ЗОмоНу ЕеН на протя. фолікулос- Сполуки, розкриті в патентах США Ме5,710,160 уляційного гормону (ГЗН) на протязі фолікуля- та Мов 710,170 |Мегск Егові Сапада, Іпс./ рної фази овуляторного циклу пацієнтки. До засобів, яким віддається перевага, належать сам Ж, сли

ЕН, кломіфен, селективні модулятори рецепторів . г ! Я естрогенів, інгібітори ароматази та засоби, які не є и ни й

ЕБН, але мають біологічну функцію та активність Ше

ЕН. Таким чином, введення описаних у цьому Мой документі засобів у певний момент часу відносно в з росту та визрівання фолікула заявлено як спосіб де Р. вибраний з групи, до якої входять Н, СО- удосконалення процесу овуляції та подальшого (4-мепіперазиніл), СО-(4-піролідиніл), СНМОН, 5- запліднення, яке має відбутися для забезпечення тетразоліл, (СНЮНСН:І, СОСН:з, СОМНеО»СН»5, вагітності. СОМНБЗО»2РІИ, СОМНЗО»СЕ», СОМНОЗО»СеНаСнНз(о),

Слід відзначити, що в разі, коли неполіпептид- СНа.СОМНЗО»РИ, СНгСОМНОО»СЕ», СОН(СЕ з)» та ний модулятор рівня САМР застосовується окремо, 502МНСОсСеНаснНЗз(о). а не спільно з ПСО, цей винахід передбачає мож- Сполуки, розкриті в УМО 98/2007 (Рагміп ливість більш раннього діагностичного тестування різсомегу), прикладами яких є: на вагітність у порівнянні з існуючими схемами чк і как дн індукування овуляції, які включають застосування нд нора

М. Інгібітори фосфодіестерази їж "й

Як інгібітори фосфодіестерази, придатні для й Й застосування як неполіпептидні модулятори рівня Сполуки, розкриті в УМО 98/14432 (дап55зеп

САМР, в способах за цим винаходом можуть бути Рпагт ММ): застосовані практично будь-які нетоксичні інгібіто- т І ри РОЕ, в тому числі селективні та неселективні ві Ж" інгібітори РОЕ4. До придатних неселективних інгі- Не ль шк а біторів РОЕ4 та комбінованих інгібіторів о .

РОЕЗ/РОЕЯ4 належать теофілін, ізобутилметил- де ВЕ! є Н або СН», В? є СНз або СНР», ВЗ є ци- ксантин, АН-21-132, Ог9а-30029 (Огдапоп), Ого- клопентил, інданіл, циклопропілметил, РИ(СНг)», 20241 (Огдапоп), Ога-9731 (Огдапоп), зардаверин, ТФ. вінпоцетин, ЕНМА (МЕР-1), мілринон, сигуазодан, Сполуки, розкриті в УМО 98/18796 (Момапів): запринаст, ЗК 96231, толафентрин (Вук скол сошідеп), філамінаст (Умует-Ауегві М ще й

Рпаптасеціїса!в). яр

Особлива перевага віддається селективним -щ г інгібіторам, специфічним щодо РОЕ4. Численні пу відомі селективні інгібітори РОЕ4 належать до од- з ного із шести класів хімічних структур: аналогів де Х є МН, ОН, МНРИ, МРП», РИ, СенаСО»Н та роліпраму, ксантинів, нітраквазонів, бензофуранів, У є СІ, СМ, МО». Сполуки, розкриті в УМО 97/49702 нафталінів та хінолінів. Прикладами аналогів (Ріїгег, Іпс.), прикладом яких є: ролшраму є імідазолідинони та піролізидинони - г а міметики ролшраму та Ко 20-1724, а також бенза- о, ші мідні похідні роліпраму, наприклад, ЕР 73401 не ві Ки (Кпопе Рошепс Когег). До аналогів ксантину нале- ричд жать денбуфілін (ЗтійКіїпе Вееспат) та арофілін де (АІтіга!І). Аналогами нітраквазону є, наприклад, й

СР-77,059 (Ріїгег) та ряд піриді/2,3(Ппіридазин-5- оце в УМО 97/48697 (Нпопе онів (Зупіех). До аналогів бензофурану належить І

ЕР-685479 (Вауег). До аналогів нафталіну нале- жить Т-440 (Тапаре Зеїуаки); до аналогів хіноліну належить 502-І502-844 (Момапів).

Більша перевага віддається переліченим ниж- че сполукам:

Сполуки, розкриті в УМО 97/42174 (Рії?ег, Іпс.):

КЗ алкоксикарбоніл або аміногрупа; Б є водень, а галоген, аміногрупа або Сі-С4-алкіл; Є є водень і ше або галоген; БЕЗ" є водень або галоген; п є 1 або 2; т є 1 або 2, причому сума п та т може мати тільки -о значення 2 або 3; солі цих сполук та М-оксиди пі-

Алея ридинів або їхні солі. са Сполуки, розкриті в патенті США Моб,316,472 з . де В" є циклопентан, циклопропіл, РИ(СНг)з, (Мегск Етові Сапада): бензил або Н, В: є СН», бензил, тозил або Н, ЕЗ є вва,

Снз або СІ, А є СН, С-алкіл, ОабоМм,ї В є С або М. іш

Сполуки, розкриті в УМО 98/02440 (Вауег АС): ть ри ок п ях пе зак ше х я «ее фай шк або їхні фармацевтично прийнятні солі або гі- де В! є СнН»з, ОН, О-аліл, ОСН»з, СаоНвб, пропіл драти, де: або ацетил, В? є 3-СІ, 2,4-СіІ», 3-МО», 3-Вг, 4-Е, 4-СІ, У означає М або М-оксид; 2,4-(СНЗз)» або 2,4-(СНзО)». уєой,1 або 2;

Сполуки, розкриті в УМО 97/44337, УМО В! та 22 незалежно один від одного вибрані з 97/44036, УМО 97/44322 (Спіговсієпсе Ца.): групи, до якої входять Н, Сі1-Сев-алкіл та галоген-Сі1-

КЕ. ій г Св-алкіл; ра Й Я, «Се і ВАЗ та В" незалежно один від одного вибрані з

Я щі КО 15 М групи, до якої входять Н та Сі-Св-алкіл, або ЕЗ та

Е " . ВУ, приєднані до одного й того самого атому вуг- де В! є СНз, етил або пропіл, Р? та ВЗ незале- лецю, спільно являють собою карбонільний атом жно один від одного вибрані з групи, до якої вхо- кисню, або МК? та Р", приєднані до різних атомів дять Н, факультативно заміщений арил або гете- вуглецю, в комбінації з атомами вуглецю, до яких роарил, і Б? та Б5 незалежно один від одного вони приєднані, разом із будь-якими атомами, роз- вибрані з групи, до якої входять ацил, алкіл (факу- ташованими між ними, утворюють насичену 5-, 6- льтативно заміщений ОН або галогеном), арил, або Таленну карбоциклічну групу; гетероарил та ацил, заміщений арилом або гете- НА" та РК" незалежно один від одного вибрані з роарилом. групи, до якої входять Н, Сі-Св-алкіл, галоген-Сі1-

Сполуки, розкриті в патенті США Меб,303,789 Св-алкіл та СМ; (Вук Сцдеп І отрегд Спетіса! Рабгік трон): п є ціле число від 0 до 6; а Аг! є ароматична група. рен не Особлива перевага віддається переліченим ан -е нижче сполукам: "Ж ще роліпрам, арофілін (АІтіга!|), АгШоФ же (бтіййКіїпе Вееспат), рофлуміласт (Вук Сшідеп), бно денбуфілін (ЗтіййКіпе Вееспат), 5-17597 5 (Зупіех), 5Ю2-ІЗО-844 (Момапів), 4-(2,3- де В! є Сі-Св-алкокси-, Сз-С7-циклоалкокси-, біс(гідроксиметил)-6,7-діетоксинафтилі|-1-(2-

Сз-СУ-циклоалкілметокси-, бензилоксигрупа або гідроксіетил)-гідропіридин-2-он (1-440; Тапаре

Сі-Сзалкоксигрупа, повністю або переважно замі- зЗеїуаки), метил-3-(6-(2Н-3,4,5,6-тетрагідропіран-2- щена фтором; Р? є водень; ЕЗ є водень; або В: та ілокси)-2-(3З-тієнілкарбоніл)бензо|рІфуран-3-

ВЗ спільно утворюють метиленову групу; В" є во- іл|Іпропаноат (Вауег), 2-метил-1-(2-(метилетил)(8- день, Сі-Св-алкіл, Сі-Св-алкокси-Сі-Са-алкіл, Сі- гідропіразоло|1,5-а|піридин-3-іл)|пропан-1-он (ібу-

Св-алкілтіо-Сі-Са-алкіл, С1і-Св-алкілсульфініл-С1- діласт; Куогіп), М-(3,5-дихлор(4-піридил))(3-

Са4-алкіл, Сі-Св-алкілсульфоніл-С1-Са-алкіл, С1-Св- циклопентилокси-4-метоксифеніл)карбоксамід (ЕР алкілкарбоніл, Сз-С-циклоалкіл, Сз3-С7- 73401; КПпбпе-Рошепс Когег), (1Е)-1-аза-2-(3- циклоалкілметил, феніл-Сі-Са-алкіл або Сі-С4- циклопентилокси-4-метоксифеніл)проп-1- алкіл, повністю або переважно заміщений фтором; еніламінооат (РОА-641; Атегісап Ноте Ргодисів),

В? є феніл, піридил, феніл, заміщений Р!, ВР: та 4-ціан-4-(3-циклопентилокси-4-

ВЗ, або піридил, заміщений В", А», ВЄ та Р", де метоксифеніл)циклогексан-карбонова кислота

В є гідроксил, галоген, ціаногрупа, карбоксил, (58207499; ЗтіййпКіпе Вееспат), ципамфілін трифторметил, Сі1-Са-алкіл, Сі-С--алкоксигрупа, (ЗтіййКіїпе Вееспат), 5-(3-(25)біцикло(2.2.1|гепт-

Сі-Са-алкоксикарбоніл, Сі-С«-алкілкарбоніл, С1-С4- 2-ілокси)-4-метоксифеніл|-1,3-діазапергідроїн-2-он алкілкарбонілокси-, аміно-, моно- або ди-С1-С4- (СР-80633; Ріїгег), 1-(З-нітрофеніл)-3-(3- алкіламіно- або С1і-С4-алкілкарбоніламіногрупа; 92 піридилметил)-1,3-дигідропіридиної|2,3- є водень, гідроксил, галоген, аміногрупа, трифто- а|Іпіримідин-2,4-діон (К5-25344; бупієх), 4-(18)-1- рметил, Сі-Са-алкіл або С1і-С-алкоксигрупа; ВЗ є феніл-2-(4-піридил)етил)-2-циклопентилокси-1- водень, галоген, Сі-С-алкіл або /Сі-С4- метоксибензол (СОР-840; СеїШесн), (3-(3- алкоксигрупа; ВЕУ є гідроксил, галоген, ціаногрупа, циклопентилокси-4- карбоксил, С1-Са-алкіл, Сі-С--алкоксигрупа, С1-С4- метоксифеніл)метилі|аміно)піразол-4-іл)метан-1-

ол, Ко-20-1724 (Коспе Ноїдіпд АС), пікламіласт, для ініціювання овуляції після росту та визрівання доксофілін (Іпбзійшо Віоіодісєо Спетіоїегарісо АВС фолікулів, індукованого ЕЗН. В межах обсягу ви-

ЗрА), АРА-132294 (ЕПпПбпе-Рошіепс Вогег), АРВ- находу знаходиться також застосування інгібітора 117658А (КПпбпе-Рошепс Вогег), І1-787258 (Мегск РОЕ, за варіантом, якому віддається перевага,

Его55ї Сапада), Е-4021 (Еїзаї Со. Ца.), арг-248 інгібітора РОЕ4, для ініціювання овуляції після (Сіахо МУейсоте), ЗКЕ-107806 (5тййнКппе росту та визрівання фолікулів, індукованого сполу-

Вееспат), ІРІ-4088 (Іпйалгуте РНаптасешіса!в кою або препаратом, що діє як ЕЗН. Замісником ца.) (3-К(З-циклопентилокси-4- або підсилювачем ефективності лікування ЕН, метоксифеніл)метил|-8-(метилетил)пурин-6- яким віддається особлива перевага, є інгібітор іл)етиламін (М-11294А; Марр Незеєагсіп Сепіге Ца.), ароматази, наприклад, УМ-511 (Матапоиспії), лет- атізорам (Ріїгег), 5-(З-циклопентилокси-4- розол (Момапів), анастрозол (Авігалепеса) або метоксифеніл)піридин-2-карбоксамід (СР-353164; фадрозол (Момапів). У схемі технології сприяння

Ріїгег), метил-3-(2,4-діоксо-3-бензил-1,3- продуктивності (АКТ), якій віддається перевага, де дигідропіридиної2,3-4|піримідиніл|бензоат (СР- бажано одержати множинні овоцити для заплід- 77059; Ріїге), СР-146523 (Ріїге), СР-293321 нення іп міїго, пацієнткам вводять інгібітор аро- (Ріїге)), СІ-1044 (Ріїге), РО-189659 (Ріїгег), СІ- матази (наприклад, 2,5-5мг/добу або приблизно 1018 (Ріїге)), СР-220629 (Ріїгег), 1-(З-нітрофеніл)- таку кількість летрозолу або анастрозолу) в період 3-(4-піридилметил)-1,3-дигідропіридиної|2,3- від 3-го до 7-го дня (або приблизно в такий період) 4|піримідин-2,4-діон (к5-25344-000; Воспе або в період від 3-го до 8-го дня (або приблизно в

Віозсіепсе), мезопрам (Зспегіпд Ас), М-(2,5- такий період) менструального циклу в комбінації дихлор(З-піридил))(8-метокси(5- спільно з приблизно 50-225МО/добу, за варіантом, хіноліл))карбоксамід (0-4418; Спігозсіепсе), Т-2585 якому віддається перевага, 50-150МО/добу, Е5Н, (Тапаре Зеїуаки), 4-(Ї4-метокси-3-(5- починаючи в період від приблизно 3-го до прибли- фенілпентилокси)феніл|-2-метилбензойна кисло- зно 7-го дня менструального циклу, і продовжують та, ХТ-044 (Нокигпки Опімегейу), ХТ-611 (Капгажа застосування ЕЗН до наявності щонайменше двох

Опімегейу), МАХ-126120 (Уууекп-Ауегві домінантних фолікулів середнього діаметра приб-

Рпаптасешіса!їв Іпс.), 1-аза-10-(3- лизно 16бмм або більше. В цей момент вводять циклопентилокси-4-метоксифеніл)-7,8-диметил-3- інгібітор РОЕ, за варіантом, якому віддається пе- оксаспіро(4.5|дец-7-ен-2-он. (МУАМ-12233 І; Муеїн- ревага, інгібітор РОЕЯ, в дозі, достатній для ініцію-

Ауетві РНпаптасешісаїв Іпс.), І(35)-3-(3- вання овуляції. циклопентилокси-4-метоксифеніл)-2-метил-5- За альтернативним варіантом, інгібітор аро- оксопіразолідинілі| -М-(З-піридилметил)карбоксамід матази можна застосовувати як єдиний засіб сти- (УУАУ-1270938; Умуеїп-Ауегвії Рпаптасеціїсаїв Іпс.), муляції росту фолікула (тобто у відсутності Е5Н) із

РОВ-093 (УУуєїй-Ауегзі РПНаптасешісаї!в Іпс.), З- використанням підвищеної дози інгібітора аро- (1,3-діоксобензо|с|азолін-2-іл)-3-(3- матази (наприклад, 2-10мг/добу летрозолу або циклопентилокси-4-метоксифеніл)-пропанамід анастрозолу) та/або подовження періоду застосу- (СОС-801; СеЇдепе Согр.), СО-7085 (Седепе вання (наприклад, у дні 3-8, 3-9 або 3-10). При ви-

Согр.), СОС-998 (Седепе Согр.), МС5-613 (СМАБ), явленні достатньої зрілості фолікула за даними

СНн-3697 (СпПігозсіеєпсе), СН-3442 (Спігозсієпсе), ультразвукового дослідження вводять інгібітор

СНн-2874 (СпПігозсіеєпсе), СН-4139 (Спігозсієпсе), РОЕ, за варіантом, якому віддається перевага,

АРА-114597 (Апопе-Рошепс Рогег), АРА-122818 інгібітор РОЕЯ4, в дозі, достатній для ініціювання (Апопе-Рошепс Вогег!), (Та5,78)-7-(3- овуляції. Ця схема дозволяє відбирати множинні циклопентилокси-4-метоксифеніл)-7а-метил- овоцити при уникненні ін'єкцій, оскільки всі засто- 2,5,6,7,7а-пентагідро-2-азапіролізин-3-он, СУМ- совані засоби можна вживати перорально. 3600 (Сушіахо-М/ейсоте), КЕ-19514 (Куожа Накко При індукуванні овуляції бажано забезпечити

Кодуо Со Ца.), СнН-422 (СеШеси Стор), СН-673 вивільнення лише однієї яйцеклітини. Ця мета, (СеШесп Сгоир), СН-928 (СеШеси Стгоцир), О-22888 згідно з винаходом, досягається застосуванням (Азіа Меадіса), АМ/О-12-232 (Авіа Меадіса), УМ- Е5Н для стимуляції росту та визрівання фолікулів 58997 (Матапоиснпі), ІС-485 (ІСОБ5 Согр.), КМУ-4490 із подальшим введенням інгібітора РОЕ, за варіан- (Куоша Накко Кодуо Со. Ца4.), /УМм-976 том, якому віддається перевага, інгібітора РОЕ4, (Матапоишсні), 5сп-351591 (СеШеспи Сгоцр), АМ/О- для ініціювання овуляції. В межах обсягу винаходу 12-343 (Авіа Меадіса), М-(3,5-дихлор(4-піридил))-2- знаходяться також схеми індукування овуляції, де (1-К4-фторфеніл)метил)|-5-гідроксіїндолін-З-іл -ок- рост та визрівання фолікулів індукуються замінни- соацетамід (АМ/О-12-281; Авіа Меаїса), ібуділаст ком ЕЗН, наприклад, інгібітором ароматази. (Куогіп РПагтасешіса! Со. Ца.), циломіласт За схемою індукування овуляції, якій віддаєть- (ФтіййКНпе Вееспат), ВАХ-19-8004 (Вауег), ме- ся перевага, пацієнтці вводять дозу інгібітора аро- тил-3-(2-І(4-хлорфеніл)карбоніл|-6- матази (наприклад, 2,5-5мг/добу летрозолу або гідроксибензо|р|Іфуран-З3-ілупропаноат, 5-метил-4- анастрозолу) в період приблизно від 3-го до приб- ((4-метилтіофеніл)карбоніл|-4-імідазолін-2-он, 5,6- лизно 7-го дня або з приблизно 5-го до приблизно діетоксибензо|б|гіофен-2-карбонова кислота 9-го дня менструального циклу (у відсутності ЕН). (Тібепеїаз), та 4-(3-бромфеніл)-1-етил-7- Альтернативним варіантом є введення однієї дози метилгідропіридино(2,3-бБ|Іпіридин-2-он. (иМ-58897; інгібітора ароматази (наприклад, 5-3Омг летрозолу

Уатапоисні). або анастрозолу, за варіантом, якому віддається

За одним варіантом здійснення, винахід пе- перевага, 10мг або 20мг) на 3-й або 4-й день мен- редбачає застосування інгібітора РОЕ, за варіан- струального циклу. Овуляцію ініціюють відповід- том, якому віддається перевага, інгібітора РОЕА4, ною дозою інгібітора РОЕ, за варіантом, якому віддається перевага, інгібітора РОЕ4. Така схема дисперсій для ін'єкцій. До носіїв, придатних для забезпечує методику індукування овуляції, що не внутрішньовенного введення, належать фізіологі- вимагає ін'єкцій. чний сольовий розчин, бактеріостатична вода,

МІ. Фармацевтичні композиції Стеторпог Ем (ВАБ5Е, Рагсірапу, М.9.) та сольо-

Неполіпептидні модулятори рівні САМР та за- вий розчин із фосфатним буфером (РВ5). У всіх соби, що підвищують концентрацію Е5Н в організ- випадках композиція має бути стерильною та до- мі самки (які звуться також "активними сполука- сить текучою для легкого введення за допомогою ми"), за цим винаходом, а також їхні похідні, шприца. Вона має бути стабільною в умовах виго- фрагменти, аналоги та гомологи можна включати товлення та зберігання та захищеною від забруд- в фармацевтичні композиції, придатні для засто- нення мікроорганізмами, наприклад, бактеріями та сування. Такі композиції містять, як правило, акти- грибками. Носієм може бути розчинник або диспе- вні сполуки та фармацевтично прийнятний носій. У рсійне середовище, що містить, наприклад, воду, значенні, вживаному в цьому описі, термін "фар- етанол, поліол (наприклад, гліцерин, пропіленглі- мацевтично прийнятний носій" охоплює будь-які коль та рідкі поліетиленгліколі тощо) та відповідні розчинники, дисперсійні середовища, покриття, суміші цих речовин. Відповідну текучість можна бактерицидні та фунгіцидні засоби, ізотонізуючі забезпечити, наприклад, шляхом застосування засоби та засоби для затримання поглинання то- покриттів, наприклад, лецитину, забезпечення що, сумісні з фармацевтичним застосуванням. необхідного розміру частинок у випадку дисперсії

Придатні розчинники описані в останньому виданні та застосування поверхнево-активних речовин. монографії "Фармацевтичні науки" (Кетіпдіоп' Запобігання впливу мікроорганізмів досягається

РПпагтасешіса! 5сіепсе5), що є стандартним довід- застосуванням різноманітних антибактеріальних ником у галузі, який включено до цього опису шля- та протигрибкових засобів, наприклад, парабенів, хом посилання. Прикладами таких носіїв або роз- хлорбутанолу, фенолу, аскорбінової кислоти, ти- ріджувачів, яким віддається перевага, є вода, меросалу тощо. В багатьох випадках доцільно сольовий розчин, розчин Рінгера, розчин декстро- вводити в композиції ізотонізуючі засоби, напри- зи та 5-процентний розчин сироваткового альбумі- клад, цукри, поліспирти, наприклад, маніт, сорбіт, ну людини, але не тільки ці речовини. Можна ви- хлорид натрію. Пролонговане поглинання компо- користовувати ліпосоми, а також неводні носії, зицій для ін'єкцій можна забезпечити введенням в наприклад, нелеткі олії. Застосування таких сере- композицію засобу, що сповільнює всмоктування, довищ та засобів для фармацевтично активних наприклад, моностеарату алюмінію та желатину. речовин добре відомі в галузі. Мається на увазі їх Стерильні розчини для ін'єкцій можна виготов- застосування в композиціях, за винятком випадків, ляти шляхом введення активної речовини в необ- коли будь-яке звичайне середовище або засіб є хідній кількості у відповідний розчинник, в разі не- несумісними з активною сполукою. Композиції мо- обхідності спільно з одним або кількома жуть містити також додаткові активні сполуки. інгредієнтами, переліченими вище, з подальшою

Фармацевтичні композиції за цим винаходом стерилізацією фільтруванням. Дисперсії, як пра- виготовляють у формах, сумісних з обраним шля- вило, виготовляють шляхом введення активної хом введення в організм. Прикладами шляхів вве- речовини у стерильний носій, який містить основне дення є парентеральний (наприклад, внутрішньо- дисперсійне середовище та інші необхідні інгреді- венний, внутрішньошкірний, підшкірний), єнти з числа речовин, перелічених вище. У випад- пероральний, інгаляційний, черезшкірний (місце- ку стерильних порошків для приготування стери- вий), черезоболонковий та ректальний. Розчини льних розчинів для ін'єкцій способами або суспензії, застосовувані для парентерального, виготовлення є вакуумне сушіння та сублімаційне внутрішньошкірного або підшкірного застосування, сушіння, при цьому порошок активного інгредієнта можуть містити такі компоненти: стерильний роз- з домішкою будь-якого бажаного додаткового інг- ріджувач, наприклад, воду для ін'єкцій, сольовий редієнта одержують із попередньо стерилізовано- розчин, нелеткі олії, поліетиленгліколі, гліцерин, го фільтруванням розчину відповідних речовин. пропіленгліколь або інші синтетичні розчинники; Композиції для перорального застосування, як протимікробні засоби, наприклад, бензиловий правило, містять інертний розріджувач або їстів- спирт або метилпарабен; антиоксиданти, напри- ний носій. Вони можуть бути вміщені в желатинові клад, аскорбінову кислоту або бісульфіт натрію; капсули або спресовані в таблетки. Для перораль- комплексоутворювачі, наприклад, етилендіамін- ного терапевтичного застосування активну сполу- тетраоцтову кислоту; буфери, наприклад, ацетати, ку можна поєднати з наповнювачами та вживати у цитрати або фосфати, та засоби для встановлен- формі таблеток, пастилок або капсул. Пероральні ня тонічності, наприклад, хлорид натрію або дек- композиції можна також виготовляти з використан- строзу. Значення рН можна встановлювати за до- ням рідкого носія для застосування у формі рідин помогою кислот або основ, наприклад, для полоскання рота, при цьому сполуку в рідкому хлористоводневої кислоти або гідроксиду натрію. носії вводять у порожнину рота, ополіскують рот і

Парентеральні препарати можуть бути вміщені в випльовують або ковтають композицію. Компози- ампули, одноразові шприци або багатодозові фла- ція може містити фармацевтично сумісні в'яжучі кони, виготовлені зі скла або пластмаси. засоби та/або допоміжні речовини. Таблетки, пі-

До фармацевтичних композицій, придатних люлі, капсули, пастилки тощо можуть містити для введення шляхом ін'єкцій, належать стерильні будь-які нижчевказані інгредієнти або сполуки водні розчини (якщо активні речовини є водороз- аналогічного характеру: в'яжучу речовину, напри- чинними) або дисперсії та стерильні порошки для клад, мікрокристалічну целюлозу, трагантову ка- негайного виготовлення стерильних розчинів або медь або желатин; наповнювач, наприклад, крох-

маль або лактозу, дезінтегратор, наприклад, аль- які не впливають негативно на активні сполуки гінову кислоту, Примогель або кукурудзяний крох- внаслідок реакцій з ними та не є шкідливими для маль; змащувальний засіб, наприклад, стеарат пацієнта, що їх вживає. До придатних фармацев- магнію або Стеротекс; ковзний засіб, наприклад, тично прийнятних носіїв належать вода, сольові колоїдний діоксид кремнію: підсолоджувач, напри- розчини, спирт, рослинні олії, поліетиленгліколі, клад, сахарозу або сахарин; або смакоароматичну желатин, лактоза, амілоза, стеарат магнію, тальк, домішку, наприклад, м'ятну, апельсинову або ме- кремнієва кислота, в'язкий парафін, парфумерні тилсаліцилат. олії, моно- та дигліцериди жирних кислот, складні

Для введення способом інгаляції сполуки пос- ефіри мінеральних жирних кислот, гідроксиметил- тачаються у формі аерозольних спреїв із контей- целюлоза, полівінілпіролідон тощо, але не тільки нерів або розподілювачів, що знаходяться під тис- ці речовини. Фармацевтичні композиції можна сте- ком, які містять відповідний пропелент, наприклад, рилізувати та, за бажанням, змішувати з допоміж- газ, як-от, діоксид водню, або розпилювачів. ними речовинами, наприклад, змащувальними

Системне застосування можна здійснювати засобами, консервантами, стабілізаторами, змочу- також черезоболонковим або черезшкірним спо- вачами, емульгаторами, солями для впливу на собами. Для черезоболонкового або черезшкірно- осмотичний тиск, буферами, барвниками, смакоа- го введення в композиції використовують пенетра- роматичними речовинами та/або ароматизатора- нти, придатні для подолання відповідного бар'єру. ми тощо, які не впливають негативно на активні

Такі пенетранти, як правило, відомі в галузі. До сполуки внаслідок реакцій з ними. них належать, наприклад, для черезоболонкового Особливо доцільним є виготовлення перора- застосування - детергенти, солі жовчних кислот та льних або парентеральних композицій у формі похідні фузидової кислоти. Черезоболонкове вве- дозованих одиниць для спрощення застосування дення можна здійснювати шляхом застосування та додержання рівномірності дозування. Термін назальних спреїв або супозиторіїв. Для черезшкір- "дозована одиниця" у значенні, вживаному в цьому ного введення активні компоненти вводять до описі, означає фізично дискретну одиницю, прида- складу мазей, бальзамів, гелів або кремів, загаль- тну як одинична доза для пацієнта, котрий підля- новідомих у галузі. гає лікуванню. Кожна одиниця містить заздалегідь

Для неполіпептидних модуляторів рівня САМР, визначену кількість активної сполуки, розраховану в тому числі інгібіторів фосфодіестерази, а також на досягнення бажаного терапевтичного ефекту, в кломіфену, селективних модуляторів рецепторів поєднанні з необхідним фармацевтичним носієм. естрогенів, інгібіторів ароматази та інгібіторів сте- Технічні вимоги до форм дозованих одиниць за роїдогенних ферментів, шляхом застосування, цим винаходом визначаються конкретними харак- якому віддається перевага, є пероральний. Ці ак- теристиками активної сполуки та необхідного кон- тивні сполуки можна вводити в організм також пі- кретного терапевтичного ефекту і прямо залежать дшкірно шляхом ін'єкції, внутрішньовенно або ва- від цих характеристик, а також від обмежень, при- гінально (для локального застосування). Для Е5Н, таманних галузі виготовлення композицій даної

ІН або ПСО способом введення, якому віддається активної сполуки для лікування певних пацієнтів. перевага, є підшкірна ін'єкція, але можна застосо- Мається на увазі, що конкретні кількості актив- вувати також внутрішньовенне введення. них сполук, застосовуваних у даній терапії, яким

Сполуки можна виготовляти у формі супозито- віддається перевага, варіюють залежно від конк- ріїв (наприклад, зі звичайними основами супозито- ретної застосовуваної сполуки, конкретних компо- ріїв, наприклад, какаовою олією та іншими гліце- зицій, способу введення в організм, конкретного ридами) або затримуючих клізм для ректального місця введення тощо. Оптимальні характеристики або вагінального введення. застосування для даної методики легко визначити

За одним варіантом здійснення винаходу, ак- фахівцю шляхом проведення звичайних тестів для тивні сполуки поєднують із носіями, які запобіга- визначення дозування, які виконуються з ураху- ють швидкому виведенню сполук з організму, на- ванням вищезазначених рекомендацій. Дивись приклад, у формі композицій пролонгованої дії, в також Кетіпдіоп'є РПаптасешіса! Зсіепсе5. Як тому числі імплантатів та мікрокапсульованих те- правило, придатна ефективна доза однієї або кі- рапевтичних систем. При цьому можна застосову- лькох сполук за цим винаходом, особливо при ви- вати біосумісні полімери, що піддаються біорозк- користанні сполуки (сполук) підвищеної ефектив- ладу, наприклад, етилен-вінілацетат, ності, лежить у межах від 0,0їмг до 100мг на поліангідриди, полігліколеву кислоту, колаген, кілограм маси тіла пацієнта на добу, за варіантом, складні поліортоефіри та полімолочну кислоту. якому віддається перевага, від 0,01мг до 20мг на

Способи виготовлення таких композицій є очевид- кілограм маси тіла пацієнта на добу, за варіантом, ними для фахівців. Такі матеріали можна також якому віддається більша перевага, від 0,05мг до одержати на комерційних засадах від фірм Аїга 4мг на кілограм маси тіла пацієнта на добу. Бажа-

Согрогайоп та Мома Рпагтасешіса!5, Іпс. ну дозу вводять один раз на добу або у вигляді

Сполуки за цим винаходом можна застосову- кількох часткових доз, наприклад, 2-4 часткових вати окремо або в комбінації з одним або кількома доз, які вводять через відповідні інтервали часу іншими терапевтичними засобами, як вказано ви- протягом доби або за іншою відповідною схемою. ще, у формі фармацевтичної композиції в суміші зі Такі часткові дози можна застосовувати у формі звичайним наповнювачем, тобто фармацевтично дозованих одиниць, кожна з яких містить, напри- прийнятними органічними або неорганічними носі- клад, від 0,05мг до 10мг сполуки (сполук) за цим ями, придатними для перорального, парентераль- винаходом. ного, ентерального або місцевого застосування, Фармацевтичні композиції можна вміщувати в контейнер, упаковку або розподілювач разом з норазову овуляторну дозу ПСО (20МО). Інгібітори інструкцією із застосування. РОЕ застосовували в поєднанні із субоптималь-

Винахід ілюстровано поданими нижче необ- ними дозами Е5ЗН. Усі ін'єкції виконували підшкір- межувальними прикладами. но. Овуляцію визначали через 18год після введен-

МІІ. Приклади ня ПСО шляхом рахування овоцитів у фалопієвих

Розроблено модель овуляції іп мімо, в якій ЕЗН трубах. Результати виражені у формі середнього вводять незрілим пацюкам двічі на день протягом значення плюс/мінус стандартне відхилення. По- 2-3 днів для індукування визрівання фолікулів, казані на Фіг.3 дані характеризують середню кіль- після чого вводять одноразову овуляторну дозу кість овоцитів у трубах усіх пацюків кожної групи та поСо. Одноразова ін'єкція неполіпептидного моду- кількість овулюючих пацюків. Як видно з Фіг.3, інгі- лятора рівня САМР (наприклад, Сполуки 1, Сполу- бітор РОЕ (Сполука 1) пригнічує (а не стимулює) ки 2 тощо), застосована в комбінації із субовуля- овуляцію при введенні в дозі 5Омг/кг. Ці результа- торною дозою по або окремо, викликала ти свідчать, що підвищені дози інгібітора РОЕ не індукування овуляції. Ці результати узгоджуються посилюють здатність субоптимальної дози ЕН з моделлю, в якій підвищені рівні САМР підвищу- готувати фолікули до овуляції. ють ефективність ПСО або замінюють ПСО, але не Приклад 3. Вплив інгібітора РОЕ - Сполуки 1

ЕН. Роль Е5Н в будь-якій схемі індукування ову- на овуляцію в присутності субефективної дози ляції полягає в сприянні розвитку та визріванню "Са іп мімо фолікулів, але не в індукуванні овуляції. Овуляцію зрілих яєчникових фолікулів, утво-

Сполуки за Прикладами 1-9 ідентифіковано, як рення яких у статевонезрілих самок пацюків було вказано нижче: стимульоване дією ефективної дози ЕН

Сполука 1 - цис-4-ціано-4-(3- (2,16МО/ін'єкцію для кожної тварини; двічі на день циклопентилокси)-4-метоксифеніл)-циклогексан-1- протягом 2 днів) індукували одноразовою ін'єкцією карбонова кислота; по. Останній вводили в субефективній дозі (3

Сполука 2 - З-(циклопентилокси)-М-(3,5- МО) з одночасним введенням Сполуки 1 (50мг/кг, дихлорпіридин-4-іл)-4-метоксибензамід; 10мг/кг та їмг/кг)у в момент останнього введення

Сполука З - 2-(4-(6,7-діетокси-2,3- ЕН або без такого введення. Овуляцію визначали біс(гідроксиметил)нафталін-1-іл)пірвдин-2-іл)4-(3- через 18год після введення ПСО шляхом рахуван- піридин)фталазин-1(2Н)-он, гідрохлорид; і ня овоцитів у фалопієвих трубах. Як видно з Фіг.4,

Сполука 4 - 7-бензиламіно-б-хлор-2- одноразова ін'єкція Сполуки 1, введена спільно з піперазино-4-піролідиноптеридин. субовуляторною дозою ПСО, спричиняла індуку-

Приклад 1. Вплив Сполуки 1 та Сполуки 2 на вання овуляції. Усі ін'єкції виконували підшкірно. рівень САМР в зернистих клітинах яєчників пацюків Результати виражені у формі середнього значення при застосуванні окремо або в комбінації з гонадо- плюс/мінус стандартне відхилення. Ці дані свід- тропінами іп міо. чать, що неполіпептидний модулятор рівня САМР,

У статевонезрілих пацюків лінії Зргадице- в даному разі інгібітор РОЕ, посилює стимульова-

Ваулеу у віці 25 днів після видалення гіпофіза та ну ПСО овуляцію при застосуванні субоптимальної оброблення діетилстильбестролом видаляли яєч- дози по. Таким чином, показано ефект Сполуки ники. Яєчники кілька разів проколювали голками 1, яка є відомим інгібітором РОЕ. 27 калібру для вивільнення зернистих клітин із Приклад 4. Вплив інгібітора РОЕ - Сполуки 1 фолікулів. Клітини промивали та повторно суспен- на овуляцію в присутності та у відсутності субефе- дували в середовищі МеСоув5 5А з домішкою 0,190 ктивної дози ПСО іп мімо

ВБА та 2мкМ андростендіону. Життєздатні клітини Після індукованого ЕЗН визрівання фолікулів в кількості 100,000 висівали в б-лункові культиву- (2,16МО/ін'єкцію для кожної тварини; двічі на день вальні чашки в 1,0мл середовища (зі Сполукою 1 протягом 2 днів) вводили Сполуку 1 із застосуван- та Сполукою 2 в концентрації 25мкМ окремо або в ням або без застосування субефективної дози комбінації з малою дозою гонадотропіну, 0,1пМ). по. Овуляцію визначали через 18 год після вве-

Культури інкубували при 37"С при 10095 вологості дення пСОС/Сполуки 1 шляхом рахування овоцитів в атмосфері 595 СО» протягом 48год. Кондиціоно- у фалопієвих трубах. Одержані дані характеризу- вані середовища аналізували методом сАМР- ють середню кількість овоцитів у трубах усіх пацю- специфічного радіоіїмунного аналізу (КІА). Резуль- ків кожної групи та кількість овулюючих пацюків. Як тати виражені у формі середнього значення видно з Фіг.5, одноразова ін'єкція Сполуки 1, вико- плюс/мінус стандартне відхилення. Як видно з нана окремо, без субовуляторної дози ПСО, спри-

Фіг.2, Сполуки 17 та 2 викликають значне підви- чинила індукування овуляції у пацюків, котрі попе- щення рівня САМР у присутності субефективних редньо одержували Е5Н. Результати виражені у концентрацій гонадотропіну. формі середнього значення плюс/мінус стандарт-

Приклад 2. Вплив інгібітора РОЕ - Сполуки 1 не відхилення. Ці дані свідчать, що неполіпептид- на визрівання фолікулів іп мімо ний модулятор рівня САМР, в даному разі інгібітор

Зрілі яєчникові фолікули, утворення яких у РОЕ - Сполука 1, здатний індукувати овуляцію у статевонезрілих самок пацюків було стимульоване відсутності введеного ПСО. Попередні експериме- дією субоптимальної дози ЕН (1,08МО/ін'єкцію нти, а також експеримент за цим Прикладом, пока- для кожної тварини; двічі на день протягом З днів) зують, що фолікули, підготовлені такими дозами з одночасним застосуванням Сполуки 1 (0,1мг/кг; ЕН, не овулюють спонтанно, а вимагають пода- 1Тмг/кг, тОмг/кг та 50мг/кг за одну ін'єкцію, двічі на льшого введення ПСО. день протягом З днів) або без такого застосуван- Приклад 5. Вплив інгібітора РОЕ - Сполуки 2 ня. Разом з останньою ін'єкцією ЕЗН вводили од- на овуляцію в присутності та у відсутності субефе-

ктивної дози ПСО іп мімо застосуванням або без застосування субефектив-

Після індукованого ЕЗН визрівання фолікулів ної дози ПСО. Овуляцію визначали через 18год (2,16МО/ін'єкцію для кожної тварини; двічі на день після введення ПСс/Сполуки 4 шляхом рахування протягом 2 днів) вводили Сполуку 2 із застосуван- овоцитів у фалопієвих трубах. Одержані дані ха- ням або без застосування субефективної дози рактеризують середню кількість овоцитів у трубах пСо. Овуляцію визначали через 18год після вве- усіх пацюків кожної групи та кількість овулюючих дення пСс/Сполуки 2 шляхом рахування овоцитів пацюків. Як видно з Фіг.9, одноразова ін'єкція Спо- у фалопієвих трубах. Одержані дані характеризу- луки 4, виконана в комбінації із субовуляторною ють середню кількість овоцитів у трубах усіх пацю- дозою пСО, спричинила індукування овуляції у ків кожної групи та кількість овулюючих пацюків. пацюків, котрі попередньо одержували Е5Н. Спо-

Результати виражені у формі середнього значення лука 4, введена окремо, не індукувала овуляції плюс/мінус стандартне відхилення. Як видно з або індукувала її в дуже слабкому ступені. Резуль-

Фіг.б6, одноразова ін'єкція Сполуки 2, виконана ок- тати виражені у формі середнього значення ремо, без субовуляторної дози ПСО, спричинила плюс/мінус стандартне відхилення. Ці дані свід- індукування овуляції у пацюків, котрі попередньо чать, що неполіпептидний модулятор рівня САМР, одержували ЕН. Ці дані свідчать, що неполіпеп- в даному разі інгібітор РОЕ - Сполука 4, сам по тидний модулятор рівня САМР, в даному разі інгі- собі недостатній для індукування овуляції, здатний бітор РОЕ - Сполука 2, здатний індукувати овуля- індукувати овуляцію у присутності субефективної цію у відсутності введеного ПСО. дози ПСО.

Приклад 6. Вплив інгібітора РОЕ - Сполуки 2 Приклад 9. Вплив інгібітора РОЕ - Сполуки 2 на овуляцію іп мімо після перорального та підшкір- на овуляцію та фертильність Визрівання фолікулів ного введення у статевонезрілих пацюків індукували ЕН

Після індукованого ЕЗН визрівання фолікулів (4, 33МО/ін'єкцію для кожної тварини; двічі на день (2,16МО/ін'єкцію для кожної тварини; двічі на день протягом 2 днів) та сироватковим гонадотропіном протягом 2 днів) вводили Сполуку 2 або підшкірно вагітних кобил (РМ5С) (1,5МО/ін'єкцію для кожної (5йирсшціі5), або перорально шляхом згодовування. тварини; двічі на день протягом 2 днів). Поперед-

Овуляцію визначали через 18 год після введення нім дослідженням було виявлено, що ця комбіна-

Сполуки 2 шляхом рахування овоцитів у фалопіє- ція індукує визрівання фолікулів та сприяє поведі- вих трубах. Одержані дані характеризують серед- нці, характерній для готовності до парування, при ню кількість овоцитів у трубах усіх пацюків кожної низькому ступені спонтанної овуляції у відсутності групи та кількість овулюючих пацюків. Результати додаткової ін'єкції ПСО. Потім пацюки, індуковані виражені у формі середнього значення плюс/мінус ЕН та РМ5О, одержували Сполуку 2 (12 тварин) стандартне відхилення. Як видно з Фіг.7, підшкірне або носій (12 тварин) шляхом підшкірного введен- або пероральне введення Сполуки 2 спричинило ня. В одній підгрупі пацюків (б тварин в кожній гру- індукування овуляції у пацюків, котрі попередньо пі) визначали овуляцію через 18год після введен- одержували ЕН. Ці дані свідчать, що неполіпеп- ня Сполуки 2 або носія рахування овоцитів у тидний модулятор рівня САМР, в даному разі інгі- фалопієвих трубах. Для оцінки фертильності іншу бітор РОЕ - Сполука 2, здатний індукувати овуля- підгрупу тварин (по 6 з кожної групи) залишали на цію при пероральному застосуванні. ніч поодинці в клітці з одним дорослим пацюком-

Приклад 7. Вплив інгібітора РОЕ - Сполуки З самцем, фертильність якого була перевірена. На- на овуляцію іп мімо після перорального та підшкір- ступного дня самця видаляли, а самок вміщували ного введення в спільні клітки по групах до дня пологів. Реєстру-

Після індукованого ЕЗН визрівання фолікулів вали кількість живих доношених дитинчат, що спо- (2,16МО/ін'єкцію для кожної тварини; двічі на день стерігалися при пологах. Як видно з Фіг.10, одно- протягом 2 днів) вводили Сполуку З або підшкірно разова ін'єкція Сполуки 2 спричиняла індукування (5йирсшціі5), або перорально шляхом згодовування. овуляції у пацюків, які попердньо одержували ЕН

Овуляцію визначали через 18год після введення та РМ5О. Крім того, пацюки, які одержували Спо-

Сполуки З шляхом рахування овоцитів у фалопіє- луку 2, мали більшу кількість живих дитинчат на вих трубах. Одержані дані характеризують серед- момент пологів. Результати як для овуляції, так і ню кількість овоцитів у трубах усіх пацюків кожної для кількості дитинчат виражені у формі середньо- групи та кількість овулюючих пацюків. Результати го значення плюс/мінус стандартне відхилення. Ці виражені у формі середнього значення плюс/мінус дані свідчать, що неполіпептидний модулятор рів- стандартне відхилення. Як видно з Фіг.8, підшкірне ня САМР, в даному разі інгібітор РОЕ - Сполука 2, або пероральне введення Сполуки З спричинило індукує овуляцію яйцеклітин, які здатні до заплід- індукування овуляції у пацюків, котрі попередньо нення іп мімо. одержували ЕН. Ці дані свідчать, що неполіпеп- Обсяг винаходу не обмежується конкретними тидний модулятор рівня САМР, в даному разі інгі- варіантами здійснення, описаними в цьому доку- бітор РОЕ - Сполука 2, здатний індукувати овуля- менті. Дійсно, різноманітні модифікації винаходу, цію при пероральному застосуванні. окрім описаних, є очевидними для фахівців із ви-

Приклад 8. Вплив інгібітора РОЕ - Сполуки 4 щенаведеного опису та фігур, що додаються. Такі на овуляцію в присутності та у відсутності субефе- модифікації слід вважати такими, що охоплюються ктивної дози ПСО іп мімо обсягом винаходу. Повний зміст усіх публікацій,

Після індукованого ЕЗН визрівання фолікулів патентів та опублікованих заявок на патенти, які (2,16МО/ін'єкцію для кожної тварини; двічі на день цитуються в цій заявці, включено до неї шляхом протягом 2 днів) вводили підшкірно Сполуку 4 із посилання.

: і 3 Ба З уламок гинтз ї НІ Без ! З тонапогпропіном (НКТ МИ

Я Гям | г І Н тонадетюям ст : з Н шт ЗБ І т : Е я | : ! ЗВИЧАЙНА МЕТОДИКА ! р ВЕ Бо і шх що ОО Же МО, : в Бак БИ : вка докінантини ї 5 Ше НО : аомо оющевкоюмх ак дюхумо : 8. ПВ ї БичНга

Тов г м : щоб ВК Я Б, її беж : - М ПО з це не бе | у

Н о зай ДК хномкомех лихе ДИ ! 1 Я Зк : СПОН й хз сх ос Е : вх Б; і ПОКНАННЄ поно : 54 Ро ШІ КХ ! нов свввенеря: НК, Е ікрою зисвр МО Кут ї І п кн ІОНИ І МА Ко і | с 1веШоу века В, ВУ АК В, ї і сере ЗМІ мкМ З МЕМ З МКМ 25 мкм

Н Н доните ороня- осиодує смолу сполує спажу» : Н дотро- киї ки? ки 1 ки?

Т. дддддтлдлдди чна кддддддтинт тт Медидти тт АА АД ААААА АН АТАКА НАДА ціну 7 - ха. щі

Е й 21 |! ж р Б и е - 5 ж «ж ж « з з їв т ся нії 5 5 5 5 а Я 5 8 ЕІ В 5 Б димі я 2 г 5 А ІА ІЗ В В оту ке й В і й 8 Е Е ж Е г В Е пет

Зя |з 5 Її ВЩЯ є 5 5 ЕЕ НН з Б

Ех - ш Е Ах е - т я ря ст т - - ВЕ. ХВ

Шк мій Кк С ох ах х Е В т щи ше ши ше яв 155 -в З БТ ВЕ і х В ХЕ г КУ х Н у ше ше Би в ши ше ше ше . я 18 5 5 ЮНО я б се ше ни я НЕ

ЕЕ еВ | 5 се ши ши Ши Ш

ЗВ гі СК ІВОЯІ ого 4 т СО ст РИМІ КОще Я ш Н В КК пс НВО І КВУ СВК я З в н- обкл їй МНЕ,

ЗНІМОК З з1окі3аа Я ах з 10 ре Й пишна тех стеттттт

ТБ сон пкщію на З Зк жа МВ БОЖА ОО НС (МО на дного г я ІВ 3 3 З

Слохука | (мг/кх наужну зобов б вмію - ЛВМИНУКЕ) ! пек я Сполука 1 (мг/кг й о о з у хо

ФІГ. 5 ФІГ, 6 ст К Я зе ах

З СО (З Мо/падюха) ве Сб вСО (3 Мо/натюка) Без СО 55- ча 49 хо м за і ха ях й - п зу і їм Я їй ! 50- т . В Її ре К- ян) х м і х 383 зо зе СУ 47 8 5 сш В "ТЕ в 5

Е 5 | з 2 Ж Е 8 ще З Е з х я я в Я я. 8 8 З 45 5 ЕЇ я що 804 В в Е в зві 5 я ЗЕ кла: М Кк й ж 518 В В як т 5 ри я В Е Би й о зі З "з. Ь ш т ща че в є г! В Е в В КО 1 ЕЕ Я 5 З х тв ши ше ши шо миши ЧЕ Я 04 ГУ Е і: о З є - ре Б Волиянед В ії В

Ерне ш ш я шен ше 5.18 З сш ще й о що 5 5 "в "в а й В -і З З В

КЕ за Б г ЛІК -В щ БЕ ВОМ о ко

В п 18 Є в Бочв а дтсте БНОНЕ в БІ я ши не Б не Б Де рі ве 1 І я Ве о п ШЕ с т ян ве в ше Ех Нау в ЕЕ Ка ля вяое ; с. жо ВІ Мне що в Б У о а А зв. радше, БОЖА в тут КЕ ро

Свв . БМК, а 4 10 БО о 10 50 мова ' 0 во

Сполука 1 (мес/кт) Сполука З (мг/кг)

їїй . ТНашкірно Перорально

Плшкірно Перорально х че . я В вх о : т і ов в - щ, в м я Ії т - - т ж м'я 4 М іо Ех Н і |: - - В а

Еш ее 3882

Ві я ок ! я 8 ка 5-5 Зв 5 го з ш Б й й ЕЕ г ев ве я й в-щИ ва я Е В

З зо Ф вом - - в'я В о 26 - «Ф в ж най о;

В - - КЕ В 25 ше В ря Е БЕ са е ті

Е5еЯ Е в 5 хв -О ЕІ Е а в'я бат БТ шен ши ши и в ши ) Із із Ем зді а Я

ЕВ 20 ! 5 сш 5 5) як За в 5 8 хе А ЕЗ

ЗЕ в. 8 г Ге) а г Ук що в в ЕІ Е і-й

Ж зв веж БОЖЕ сект ВЕ БЕ н: А З ві в З Ме БАХ НИ Кия в Те ву Де м В 12 ноу ВН ву Б - БИК ІКОЕУмІ

БИ Ве тах В КК ке

В ВСЕ я БИК ПСИ ВМ до Тех в є КЕ е геида ко у 5 5 роде о

Доревою АМЕТе ай В вида БНАУ с; ДН) ЛЯ, Ух, - 2 з їй Бо 1 чо м о 1 10 но з 19 56

Сполука 2 (мг/кт) Сполука З (мг/кг)

ФІГ. 9 ФІГ. 10

З ВС З МОлийнока) реє вСО е з5 (7 Серемня кількість овульованих яйнеклітин 5. х х , т і КРИ. Середня кількість живих.

КО Ром Зі доношених дитицохт - я і і

ЗВ 2» КК зві 25

Не: ш - БІ 2 20

ЩЕ | Я БЕ

КЕ 454 кое ІК їв щх 2 ссу 58 ВК т и

Шо 3 МО В 5 рун я) ав Й з т ЕН ії - ш-п. ВО Б с. І КОРЕЯ о отлкюстунезтсек НЕЛККЇ КЕ, вірне я шия різ пеня 4

Сполука З (УТУКЕ) Носій Сполука 2

Комп'ютерна верстка В. Мацело Підписне Тираж 26 прим.

Міністерство освіти і науки України

Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна

ДП "Український інститут промислової власності", вул. Глазунова, 1, м. Київ - 42, 01601