TWI777059B

TWI777059B - 肌肉減少症之預防劑及治療劑

Info

Publication number: TWI777059B
Application number: TW108113676A
Authority: TW
Inventors: 稻田全規; 梶原大輔
Original assignee: 國立大學法人東京農工大學; 日商大鵬藥品工業股份有限公司
Priority date: 2018-04-19
Filing date: 2019-04-18
Publication date: 2022-09-11
Also published as: US20210161908A1; US11883410B2; JPWO2019203296A1; TW202011992A; EP3782648B1; MA52306A; WO2019203296A1; EP3782648A1; CN111989119A; JP6991315B2

Abstract

一種肌肉減少症之預防劑及/或治療劑，係以前列腺素D2產生抑制劑作為有效成分。

Description

肌肉減少症之預防劑及治療劑

發明領域本發明有關肌肉減少症之預防劑及/或治療劑。

肌肉減少症是特徵在於進行性及全身性之骨格肌量及肌力下降的疾病，在超過60歲之美國人男女中約30%、以及在超過80歲中有50%會發生此症狀(非專利文獻1)。肌肉減少症被認為會對2~5%高齡者帶來移動能力障礙(非專利文獻2)。高齡者的肌肉量及肌力減少時常以身體機能性能力下降的形式出現，而會導致更低的生活品質，以及增加有害健康事件(例如，跌倒及跌倒後的骨折)的風險。

肌肉減少症包含一次性(加齡性)肌肉減少症及二次性肌肉減少症，前述一次性(加齡性)肌肉減少症是除了加齡以外無明顯原因者，前述二次性肌肉減少症是明顯有1個以上加齡以外之原因者。因住院等而持續長時間不使用肌肉狀態之情況下所產生的廢用性肌萎縮，就包含在二次性肌肉減少症中。

眼下還沒有一個肌肉減少症治療的核准藥。由於在高齡化社會中其患者數只會不斷增加，因此治療藥的研製是有所需求的。

在前列腺素D2產生抑制劑方面，已有報告提出4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺、N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺、及4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶等(專利文獻1~3)。

先行技術文獻專利文獻專利文獻1：國際公開WO2010/104024號公報專利文獻2：國際公開WO2007/007778號公報專利文獻3：國際公開WO95/01350號公報

非專利文獻非專利文獻1：Baumgartner et al. Am J Epidemiol. 1998;147:755-63. 非專利文獻2：Dam et al. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2014;69:584-90.

發明概要發明欲解決之課題本發明之目的在於提供一種新穎之肌肉減少症的預防劑及/或治療劑。

用以解決課題之手段本發明人等針對肌肉減少症之預防方法及治療方法一再研究，結果發現，藉由投予前列腺素D2產生抑制劑，可預防及治療肌肉減少症。本發明是基於該知識進一步一再探討而藉此完成者。

亦即，本發明包含以下態樣：項1、一種肌肉減少症之預防劑及/或治療劑，係以前列腺素D2產生抑制劑作為有效成分。

項2、如項1之預防劑及/或治療劑，其中前列腺素D2產生抑制劑為H-PGDS阻斷劑。

項3、如項1或2之預防劑及/或治療劑，其中前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺、N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺、4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶、N-(4-(3-(2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)乙基)吡咯啶-1-基)苯基)-4-(吡啶-2-基亞甲基)哌啶-1-甲醯胺或4-((1-甲基吡咯-2-基)-羰基)-N-(1-(4-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-乙基)-苯基)-哌啶-4-基)-1-哌嗪甲醯胺。

項4、如項3之預防劑及/或治療劑，其中前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺。

項5、一種用於預防及/或治療肌肉減少症之醫藥組成物，含有前列腺素D2產生抑制劑。

項6、如項5之醫藥組成物，其中前列腺素D2產生抑制劑為H-PGDS阻斷劑。

項7、如項5或6之醫藥組成物，其中前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺、N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺、4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶、N-(4-(3-(2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)乙基)吡咯啶-1-基)苯基)-4-(吡啶-2-基亞甲基)哌啶-1-甲醯胺或4-((1-甲基吡咯-2-基)-羰基)-N-(1-(4-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-乙基)-苯基)-哌啶-4-基)-1-哌嗪甲醯胺。

項8、如項7之醫藥組成物，其中前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺。

項9、一種肌肉減少症之預防方法及/或治療方法，包含投予有效量之前列腺素D2產生抑制劑的步驟。

項10、如項9之預防方法及/或治療方法，其中前列腺素D2產生抑制劑為H-PGDS阻斷劑。

項11、如項9或10之預防方法及/或治療方法，其中前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺、N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺、4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶、N-(4-(3-(2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)乙基)吡咯啶-1-基)苯基)-4-(吡啶-2-基亞甲基)哌啶-1-甲醯胺或4-((1-甲基吡咯-2-基)-羰基)-N-(1-(4-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-乙基)-苯基)-哌啶-4-基)-1-哌嗪甲醯胺。

項12、如項11之預防方法及/或治療方法，其中前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺。

項13、一種前列腺素D2產生抑制劑，用來預防及/或治療肌肉減少症。

項14、如項13之前列腺素D2產生抑制劑，該前列腺素D2產生抑制劑為H-PGDS阻斷劑。

項15、如項13或14之前列腺素D2產生抑制劑，其為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺、N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺、4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶、N-(4-(3-(2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)乙基)吡咯啶-1-基)苯基)-4-(吡啶-2-基亞甲基)哌啶-1-甲醯胺或4-((1-甲基吡咯-2-基)-羰基)-N-(1-(4-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-乙基)-苯基)-哌啶-4-基)-1-哌嗪甲醯胺。

項16、如項15之前列腺素D2產生抑制劑，該前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺。

項17、一種前列腺素D2產生抑制劑之用途，用於製造肌肉減少症之預防劑及/或治療劑。

項18、如項17之用途，其中前列腺素D2產生抑制劑為H-PGDS阻斷劑。

項19、如項17或18之用途，其中前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺、N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺、4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶、N-(4-(3-(2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)乙基)吡咯啶-1-基)苯基)-4-(吡啶-2-基亞甲基)哌啶-1-甲醯胺或4-((1-甲基吡咯-2-基)-羰基)-N-(1-(4-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-乙基)-苯基)-哌啶-4-基)-1-哌嗪甲醯胺。

項20、如項19之用途，其中前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺。

發明效果依據本發明，可幾乎沒有副作用且有效的預防及治療肌肉減少症。

用以實施發明之形態本發明有關於以前列腺素D2產生抑制劑作為有效成分之肌肉減少症的預防劑及/或治療劑。

(i)前列腺素D2產生抑制劑本發明中的「前列腺素D2產生抑制劑」只要是可阻斷前列腺素D2(在本說明書中亦有記載為PGD2之情況)之合成的藥劑，則無特別限制。

PGD2是在結合有抗原與免疫球蛋白E之複合體且經活化之肥大細胞中，產生、放出最多量的炎症性介質(mediator)。PGD2關乎作為以過敏疾病為首之各式各樣疾病的發病、惡化因子之機能以及活體內調節機制。

生成PGD2之合成酵素是稱為前列腺素D合成酵素，已知存在造血型酵素與脂質運載蛋白型(lipocalin type)酵素這2種。人類的造血型前列腺素D合成酵素(Hematopoietic Prostaglandin D Synthase, H-PGDS)主藥分布在胎盤、肺、胎生期肝臟、淋巴節、腦、心臟、胸腺、骨髄及脾臟。又，在細胞層級上，有報告指出在腦內的微膠細胞、骨髄巨核球、皮膚的朗格漢細胞；肝臟的庫佛氏細胞；巨噬細胞；樹狀細胞等許多的抗原呈現細胞、肥大細胞及Th2細胞有表現。

本發明之PGD2產生抑制劑可為阻斷造血型酵素及脂質運載蛋白型酵素任一之合成活性者。從預防及/或治療在肌肉有症狀之肌肉減少症的觀點來看，宜為阻斷源自造血型前列腺素D合成酵素(H-PGDS)之PGD2合成的藥劑(H-PGDS阻斷劑)。

本發明之PGD2產生抑制劑可為以前列腺素D合成酵素為標的之低分子化合物、針對前列腺素D合成酵素的專一性抗體(例如，可阻斷前列腺素D合成酵素之合成酵素活性的抗體)、針對前列腺素D合成酵素之反義寡核苷酸、適體等的任一。

可舉下列化合物等或其藥學上容許的鹽：下述化學式所示的4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺(本說明書中亦有記載為「化合物(1)」的情況)，

[化學式1]

下述化學式所示的4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶(本說明書中亦有記載為「化合物(2)」的情況)，

[化學式2]

作為PGD2產生抑制劑，下述化學式所示的N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺(本說明書中亦有記載為「化合物(3)」的情況)，

[化學式3]

下述化學式所示的N-(4-(3-(2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)乙基)吡咯啶-1-基)苯基)-4-(吡啶-2-基亞甲基)哌啶-1-甲醯胺(本說明書中亦有記載為「化合物(4)」的情況)，

[化學式4]

下述化學式所示的4-((1-甲基吡咯-2-基)-羰基)-N-(1-(4-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-乙基)-苯基)- 哌啶-4-基)-1-哌嗪甲醯胺(本說明書中亦有記載為「化合物(5)」的情況)，

[化學式5]

並且，宜為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺。

所謂「藥學上容許的鹽」是化合物之具有所欲藥理活性的鹽，且意指從包含無機或有機鹼及無機或有機酸之藥學上容許的非毒性鹼或酸所調製的鹽。

如此鹽具體可舉，與鹽酸、溴化氫酸、碘化氫酸、硫酸、硝酸、磷酸等無機酸的酸加成鹽；與甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、乳酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、碳酸、苦味酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、穀氨醯胺酸等有機酸的酸加成鹽；與鈉、鉀、鎂、鈣、鋁等無機鹼的鹽；與甲胺、乙胺、甲葡胺(meglumine)、乙醇胺等有機鹼的鹽；或與離胺酸、精胺酸、鳥胺酸等之鹼性胺基酸的鹽；及銨鹽。

本發明之PGD2產生抑制劑可利用眾所皆知的有機合成法來製造。例如，4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺可依照國際公開WO2010/104024號公報之記載方法來製造。N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺可依照國際公開WO2007/007778號公報之記載方法來製造。4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶可依照國際公開WO95/01350號公報之記載方法來製造。N-(4-(3-(2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)乙基)吡咯啶-1-基)苯基)-4-(吡啶-2-基亞甲基)哌啶-1-甲醯胺可依照國際公開WO2012/033069號公報之記載方法來製造。4-((1-甲基吡咯-2-基)-羰基)-N-(1-(4-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-乙基)-苯基)- 哌啶-4-基)-1-哌嗪甲醯胺可依照國際公開WO2011/090062號公報之記載方法來製造。

(ii)肌肉減少症所謂肌肉減少症，是特徵在於進行性及全身性之骨格肌量及肌力下降的疾病。在European Working Group on Sarcopenia in Older People(EWGSOP)提倡的分類中，將僅可觀察到肌肉量下降現象的情況稱為「肌肉減少症前期(pre-sarcopenia)」；將可觀察到肌肉量下降之現象、以及肌力下降或身體能力下降之任1，共計2個現象的情況稱為「肌肉減少症」；將可觀察到肌肉量減少現象、肌力減少現象及身體能力減少現象這3個現象的情況稱為「嚴重肌肉減少症」。本說明書中所述「肌肉減少症」中包含「肌肉減少症前期」、「肌肉減少症」、「嚴重肌肉減少症」之任一。

肌肉減少症包含一次性(加齡性)肌肉減少症及二次性肌肉減少症，前述一次性(加齡性)肌肉減少症是除了加齡以外無明顯原因者，前述二次性肌肉減少症是明顯有1個以上加齡以外之原因者。二次性肌肉減少症包含起因於活動量下降者、源自於疾病者(例如，伴隨嚴重臟器衰竭、炎症性疾病、惡性腫瘤、內分泌疾病等而產生者)、源自於營養素攝取不足者，主要分類成這3種。因住院等而持續長時間不使用肌肉狀態之情況下所產生的廢用性肌萎縮，就包含在二次性肌肉減少症中。

肌肉減少症與肌肉有症狀之後天性肌肉病變、遺傳性肌肉病變等各種肌肉病變(myopathy)在發病機制上是不同且有所區別。再者，後天性肌肉病變之具體例可例示肌炎。遺傳性肌肉病變之具體例可例示肌肉營養不良症。肌肉病變是因肌肉萎縮導致肌力逐漸下降的進行性罕見疾病，大多從年輕就發病，如代表性疾病之杜興氏肌肉營養不良症(Duchenne Muscular Dystrophy)。反之，肌肉減少症是由於肌肉之合成與分解的天秤失衡、肌肉量減少而發病的疾病。又，可認為在肌肉減少症上並無如杜興氏肌肉營養不良症中之肌萎縮蛋白(dystrophin)基因突變這樣直接的遺傳性原因。又，肌炎等炎症性肌肉病變是在肌肉本身發生自體專一性炎症的疾病。反之，肌肉減少症有時會伴隨肌肉以外組織之炎症性疾病(例如，類風濕性關節炎、肺結核、炎症性腸疾病等)而發病。

(iii)預防劑及治療劑本說明書中，所謂「治療」意指治癒或改善通常肌肉減少症所伴隨之症狀，或者抑制症狀。所謂「預防」，意指將肌肉減少症所伴隨症狀之表現防範於未然。

本發明之預防劑及治療劑可以單獨提供有效成分之PGD2產生抑制劑。又，預防劑及治療劑，除了有效成分之PGD2產生抑制劑之外，亦可視需要摻合藥學上之載劑等。依此，本發明預防劑及治療劑可以調製做成由1個成分構成或含有2個以上成分的醫藥組成物。

本發明預防劑及治療劑可視需要使用藥學上容許之載劑，並利用眾所皆知的方法製造成各種投予製劑。投予形態可為口服或非口服之任一。該製劑形態並無特別限制，可例示錠劑、被覆錠劑、丸劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、液劑、懸浮劑、乳劑等口服劑，注射劑、栓劑、吸入劑等非口服劑等。

成形成錠劑之形態時，在載劑方面，可使用例如乳糖、白糖、氯化鈉、葡萄糖、尿素、澱粉、碳酸鈣、高嶺土、結晶纖維素、矽酸等賦形劑；水、乙醇、丙醇、玉米澱粉、單糖漿、葡萄糖液、澱粉液、明膠溶液、羧甲基纖維素、蟲膠、甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、磷酸鉀、聚乙烯吡咯烷酮等結合劑；乾燥澱粉、海藻酸鈉、寒天末、昆布糖末、碳酸氫鈉、碳酸鈣、聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯類、月桂基硫酸鈉、硬脂酸單甘油酯、乳糖等崩解劑；白糖、硬脂酸、可可脂、氫化油等崩壞抑制劑；4級銨鹽、月桂基硫酸鈉等吸收促進劑；甘油、澱粉等保溼劑；澱粉、乳糖、高嶺土、膨土、膠狀矽酸酸等吸著劑；純化滑石、硬脂酸鹽、硼酸末、聚乙二醇等潤滑劑等。進一步，錠劑視需要可做成施加有通常劑皮之錠劑，例如，糖衣錠、明膠被覆錠、腸溶被錠、膜衣錠、雙重錠、多層錠等。

成形成丸劑之形態時，在載劑方面，可使用例如，葡萄糖、乳糖、澱粉、可可脂、硬化植物油、高嶺土、滑石等賦形劑；阿拉伯膠末，黃蓍膠末、明膠、乙醇等結合劑；昆布糖、寒天末等崩解劑等。膠囊劑可依照常法，並與上述例示之各種載劑混合並填充於硬質明膠膠囊、軟質膠囊等來調製。

做成口服用液體製劑時，可使用矯味/氣味改善劑、緩衝劑、穩定劑等，並藉由常法來製造內服液劑、糖漿劑、酏劑等。此時，在矯味/氣味改善劑方面可舉白糖、橙皮、檸檬酸、酒石酸等；在緩衝劑方面可舉檸檬酸鈉等；在穩定劑方面可舉黃蓍膠、阿拉伯膠、明膠等。

成形成栓劑之形態時，在載劑方面可使用例如，聚乙二醇、可可脂、高級醇、高級醇之酯類、明膠、半合成甘油酯等。

做成注射劑時，液劑、乳劑及懸浮劑宜為殺菌且與血液等張。又，成形成該等形態時，在稀釋劑方面可使用例如，水、乳酸水溶液、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(Macrogol)、乙氧化異硬脂醇、聚氧乙烯化異硬脂醇，聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯類等。

再者，此時，可使醫藥製劑中含有用以調製等張性溶液之充分量的食鹽、葡萄糖或甘油，又，亦可添加通常之助溶劑、緩衝劑、無痛劑等。

做成吸引劑時，可舉噴霧劑(aerosol)、粉末狀吸入劑、液狀吸入劑等各種形態。

進一步，上述各製劑中視需要亦可摻合著色劑、保存劑、香料、風味劑、甘味劑等，或是其他醫藥品。

所謂1日投予量，表示在1日投予之有效成分量。針對本發明預防劑及治療劑，在PGD2產生抑制劑投予日之1日投予量因患者之症狀、體重、年齡、性別等而異，無法一概決定。從肌肉減少症預防及/或治療效果的觀點來看，通常在成人(體重50kg)上宜為50~4000mg/day，且以100~4000mg/day為佳、以400~1600mg/day更佳。又，PGD2產生抑制劑宜以使在已投予患者之血中濃度成為1000~800000ng・hr/mL、且宜成為1500~40000ng・hr/mL來投予。

又，上述各投予單位形態中所應摻合之前列腺素D2產生抑制劑的量，視其要適用患者之症狀或其劑形等而無固定。一般而言，在每投予單位形態上，在口服劑宜做成0.05~1000mg、在注射劑宜做成0.01~500mg、在栓劑宜做成1~1000mg。

本發明之預防劑及治療劑，可因應各種製劑形態、患者之年齡、性別與其他條件、患者症狀之程度等來適宜決定。例如，錠劑、丸劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、液劑、懸浮劑及乳劑可進行口服投予。注射劑可以單獨或與葡萄糖、胺基酸等通常之補液混合來進行靜脈內投予，進一步，可視需要單獨來進行動脈內、肌肉內、皮內、皮下或者腹腔內投予。栓劑可進行直腸內投予。

本發明預防劑及治療劑之投予對象可例示人類、猴子、小鼠、大鼠、兔子、狗、貓、牛、馬、豬、綿羊等哺乳類。

本發明預防劑及治療劑之投予對象的年齡並無特別限定。在治療人類之一次性(加齡性)肌肉減少症時，可設定為伴隨加齡而導致一次性(加齡性)肌肉減少症發病之傾向變高的60歲以上、且宜為70歲以上、以80歲以上更佳。另一方面，包含廢用性肌萎縮等之二次性肌肉減少症在高齡者以外亦有發病的情況，而不問投予對象的年齡。

本發明包含以下態樣。一種肌肉減少症之預防劑及/或治療劑，以前列腺素D2產生抑制劑為有效成分。一種用以預防及/或治療肌肉減少症之醫藥組成物，含有前列腺素D2產生抑制劑。一種肌肉減少症之預防方法及/或治療方法，包含對有必要之對象投予有效量的前列腺素D2產生抑制劑。一種前列腺素D2產生抑制劑，用來預防及/或治療肌肉減少症。一種前列腺素D2產生抑制劑之用途，用於製造肌肉減少症之預防劑及/或治療劑。

實施例以下將舉試驗例以更詳細說明本發明，然本發明並未受限於該等。

試驗例1　尾部懸吊處置小鼠中肌萎縮抑制作用的評價(之1) 對8週齡之C57/BL6J雄性小鼠(日本SLC股份有限公司、靜岡、日本)實施尾部懸吊處置，做成下肢的廢用性肌萎縮模式。

尾部懸吊處置是遵循Skelet Muscle.2015；5:34.之記載來進行。具體而言，以小鼠後肢不著地的方式固定小鼠的尾巴，並使該狀態維持2週左右。已知，藉由尾部懸吊處置，引起後肢之骨格肌量及肌力的下降，可製作肌肉減少症之1態樣的廢用性肌萎縮之實驗模式。

在實施尾部懸吊處置之期間中，攝食含有0.01、0.1及0.3質量%化合物(1)之飼料2週(化合物(1)投予組)。在對照方面，準備無實施尾部懸吊處置的通常飼育組，及以不含化合物之飼料來進行攝食的對照尾部懸吊處置組。試驗數是以各組n＝8來實施。

從實驗開始(尾部懸吊處置開始及含有化合物飼料的開始攝食)二週後，進行小鼠後肢的μCT(micro-computed tomography)攝影。使用三維容量分析軟體，測定脛骨周緣部(小腿三頭肌)之肌體積。μCT攝影是使用微焦點X線CT系統(μCT: SMX-90T、股份有限公司島津製作所製)來進行。於圖1顯示μCT圖像之一例。

使用藉由μCT圖像作成之三維圖像，求出小鼠下肢的腓骨中點，並計測以中點為起點之測定區域中的全肌量體積。小腿包含腓腸肌、比目魚肌、脛骨前肌、伸趾長肌。小腿三頭肌表示腓腸肌與比目魚肌。結果顯示於圖2。

進一步，從進行尾部懸吊處置後之小鼠後肢採取腓腸肌、比目魚肌、脛骨前肌及伸趾長肌，並分別測定溼重量(肌質量)。結果顯示在圖3。

從圖2顯示之結果可判斷出，在對照尾部懸吊處置組中，因為尾部懸吊而可觀察到顯著的肌減少，然在化合物投予組中，因攝食化合物(1)之混合飼料，肌減少是顯著的被抑制。

從圖3所示結果可看出，在對照尾部懸吊處置組，在後肢的任一肌中肌質量皆減少，在化合物投予組，在後肢的任一肌中肌肉量的下降皆有改善傾向。

進一步，將從進行尾部懸吊處置後之小鼠下肢採取的腓腸肌進行急速冷凍，之後添加PBS，並使用均質機進行破碎。對破碎液進行10分鐘的離心(4℃、15,000rpm)，並回收上清液。利用ELISA法(Prostaglandin D2 ELISA、Cayman Chemical公司製)，測定上清液所含有之PGD2濃度。藉由上清液之總蛋白質濃度校正ELISA法之測定結果，決定肌肉中每1mg蛋白質之PGD2含量(ng/mg of protein)。結果顯示在圖4。可明確了解到，藉由尾部懸吊處置，骨格肌中PGD2產生是亢進的。

再者，顯著差異檢定是使用學生t檢定。圖中，針對無實施尾部懸吊處置之通常飼育組(尾部懸吊處置(-))，＊、＊＊及＊＊＊是分別表示P>0.05、P>0.01及P>0.001。針對以不含化合物之飼料來進行攝食之對照尾部懸吊處置組(尾部懸吊處置(＋))，＃、＃＃及＃＃＃是分別表示P>0.05、P>0.01及P>0.001。

透過在尾部懸吊處理之同時開始攝食化合物(1)混合飼料，可驗證本發明化合物之預防效果及治療效果。從上述圖1至圖3所示結果可明確了解，本發明化合物(1)對肌減少及肌肉量之下降有預防效果及治療效果。

試驗例2　評價小鼠中化合物之血中動態使7週齡之C57BL/6小鼠(雄性、日本Charles River股份有限公司、體重20.7-23.7g)攝食含有0.01、0.1及0.3質量%化合物(1)之混合飼料13日。

在第12日之第10、13、17、21時及第13日之10時，使用動物刺血針進行顏面採血。

血液是使用已塗布肝素之血比容管來回收約75μL。離心後，將血漿中之化合物濃度使用液相層析質量分析法(LC/MS)來測定。測定結果顯示在表1。可確認到，透過攝食含有化合物(1)之混合飼料，在自0.01質量%至0.3質量%之範圍內，有用量依賴性之血中化合物濃度的上昇。

由於體重約20g之小鼠每1日攝餌量為4g左右(假定吃的時候沒有撒出)，可推定化合物之1日攝取量為0.4mg(0.01質量%混合飼料)、4mg(0.1質量%混合飼料)、12mg(0.3質量%混合飼料)。體重換算值為20mg/kg(0.01質量%混合飼料)、200mg/kg(0.1質量%混合飼料)及600mg/kg(0.3質量%混合飼料)。

[表1]

試驗例3　尾部懸吊處置小鼠中肌萎縮抑制作用的評價(之2) 對8週齡之C57/BL6J雄性小鼠(日本SLC股份有限公司、靜岡、日本)實施尾部懸吊處置，做成下肢的廢用性肌萎縮模式。

實施尾部懸吊處置之期間中，攝食含有0.01質量%化合物(1)、化合物(2)、化合物(3)、化合物(4)及化合物(5)之飼料2週(化合物(1)投予組、化合物(2)投予組、化合物(3)投予組、化合物(4)投予組及化合物(5)投予組)。在對照方面，準備無實施尾部懸吊處置之通常飼育組，及以不含化合物之飼料來進行攝食的對照尾部懸吊處置組。試驗數是以各組n＝8來實施。

從實驗開始(尾部懸吊處置開始及含有化合物飼料的開始攝食)二週後，進行小鼠後肢的μCT攝影。使用三維容量分析軟體，測定脛骨周緣部(小腿三頭肌)之肌體積。μCT攝影是使用微焦點X線CT系統(μCT: SMX-90T、股份有限公司島津製作所製)來進行。於圖5顯示μCT圖像之一例。

使用藉由μCT圖像作成之三維圖像，求出小鼠下肢的腓骨中點，並計測以中點為起點之測定區域中的全肌量體積。結果顯示於圖6。又，以對照尾部懸吊處置組作為基準之肌體積的增加率顯示在圖7。增加率是藉由(化合物投予組-對照尾部懸吊處置組)/(通常飼育組-對照尾部懸吊處置組)×100來算出。

進一步，從進行尾部懸吊處置後之小鼠後肢採取腓腸肌，測定溼重量(肌質量)。結果顯示在圖8。又，以對照尾部懸吊處置組作為基準之肌質量的增加率顯示在圖9。增加率是藉由(化合物投予組-對照尾部懸吊處置組)/(通常飼育組-對照尾部懸吊處置組)×100來算出。

從圖6、圖7所示結果可判斷出，在對照尾部懸吊處置組中，因為尾部懸吊而可觀察到顯著的肌減少，然在化合物投予組中，因攝食化合物(1)、化合物(3)、化合物(4)及化合物(5)之混合飼料，肌減少是顯著的被抑制。另一方面，可觀察到攝食化合物(2)之混合飼料有抑制肌減少的傾向，然無法達到顯著抑制肌減少。

從圖8、圖9所示結果可看出，在對照尾部懸吊處置組中，腓腸肌的質量有減少，在化合物投予組中，因攝食化合物(1)、化合物(3)、化合物(4)及化合物(5)之混合飼料，肌肉量之下降有顯著改善。另一方面，攝食化合物(2)之混合飼料顯示出肌肉量下降的改善傾向，然並未發現顯著差異。

再者，顯著差異檢定是使用學生t檢定。圖中，針對無實施尾部懸吊處置之通常飼育組(尾部懸吊處置(-))，＊是表示P>0.001。針對以不含化合物之飼料來進行攝食之對照尾部懸吊處置組(尾部懸吊處置(＋))，＃及＃＃是分別表示P>0.05及P>0.01。

透過在尾部懸吊處理之同時開始攝食化合物混合飼料，可驗證本發明化合物之預防效果及治療效果。從上述圖5至圖9所示結果可看出，在化合物(1)、化合物(3)、化合物(4)、化合物(5)有顯著的改善，在化合物(2)中亦有改善的傾向。就此，本發明化合物對肌減少及肌肉量下降之預防效果及治療效果是顯而易見的。

試驗例4　尾部懸吊處置小鼠中的肌萎縮抑制作用(之3) 對8週齡之C57/BL6J雄性小鼠(日本SLC股份有限公司、靜岡、日本)實施尾部懸吊處置，做成下肢的廢用性肌萎縮模式。

實施尾部懸吊處置1週後，攝食含有0.3質量%化合物(1)之飼料2週(化合物(1)投予組)。在對照方面，準備無實施尾部懸吊處置之通常飼育組，及以不含化合物之飼料來進行3週攝食的對照尾部懸吊處置組。試驗數是以各組n＝8來實施。

在尾部懸吊前、懸吊1週後、懸吊2週後及懸吊3週後，進行小鼠後肢的μCT攝影。使用三維容量分析軟體，測定脛骨周緣部(小腿三頭肌)的肌體積。μCT攝影是使用微焦點X線CT系統(μCT: SMX-90T、股份有限公司島津製作所製)來進行。於圖10顯示在懸吊3週後之μCT圖像的一例。

使用藉由μCT圖像作成之三維圖像，求出小鼠下肢的腓骨中點，並計測以中點為起點之測定區域中的全肌量體積。體積變化之結果顯示在圖11。

進一步，從進行尾部懸吊處置三週後之小鼠後肢採取腓腸肌，測定溼重量(肌質量)。結果顯示在圖12。

從圖11所示結果可知，在對照尾部懸吊處置組中，因為尾部懸吊而從1週後可觀察到顯著的肌減少，在2週後肌減少是進一步的促進，到3週後該程度仍是持續。相對於此，藉由從尾部懸吊處置1週後攝食化合物(1)之混合飼料，沒有看到進一步的肌減少，肌肉量反而顯示出有增加的傾向。在2週後及3週後的肌肉量與對照尾部懸吊處置組相比，是顯著的高値，判斷化合物(1)具有治療效果。

從圖12所示結果可知，在對照尾部懸吊處置組中腓腸肌的質量有減少，在化合物投予組中，可看出因攝食化合物(1)之混合飼料而對肌肉量有顯著治療效果。

從尾部懸吊處理開始至1週後，可觀察到顯著的肌減少。透過在尾部懸吊開始1週後開始攝食化合物(1)混合飼料，可驗證本發明化合物之治療效果。根據上述圖10至圖12之結果，本發明化合物(1)對肌減少及肌肉量之下降的治療效果是顯而易見的。

圖1顯示尾部懸吊處置小鼠之小腿三頭肌μCT圖像。圖2顯示尾部懸吊處置小鼠之肌體積之測定結果。圖3顯示尾部懸吊處置小鼠之肌質量之測定結果。圖4顯示在尾部懸吊處置小鼠中之前列腺素D2含量。圖5顯示尾部懸吊處置小鼠之小腿三頭肌μCT圖像。圖6顯示尾部懸吊處置小鼠之肌體積之測定結果。圖7顯示在尾部懸吊處置小鼠中之肌體積增加率。圖8顯示尾部懸吊處置小鼠之肌質量之測定結果。圖9顯示在尾部懸吊處置小鼠中之肌質量增加率。圖10顯示尾部懸吊處置3週後之小鼠小腿三頭肌μCT圖像。圖11顯示尾部懸吊處置小鼠之肌體積變化之測定結果。圖12顯示對尾部懸吊處置3週後之小鼠測定肌質量之結果。

(無)

Claims

一種前列腺素D2產生抑制劑用於製造肌肉減少症之預防劑及/或治療劑之用途，其中該前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺、N-甲氧基-N-甲基-4-(5-苯甲醯基苯并咪唑-2-基)-3,5-二甲基吡咯-2-甲醯胺、4-(二苯基甲氧基)-1-[3-(2H-四唑-5-基)丙基]哌啶、N-(4-(3-(2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)乙基)吡咯啶-1-基)苯基)-4-(吡啶-2-基亞甲基)哌啶-1-甲醯胺或4-((1-甲基吡咯-2-基)-羰基)-N-(1-(4-(2-(1H-1,2,3-三唑-1-基)-乙基)-苯基)-哌啶-4-基)-1-哌嗪甲醯胺，或者其等藥學上容許的鹽。
如請求項1之用途，其中該前列腺素D2產生抑制劑為4-{(1-甲基-1H-吡咯-2-基)羰基}-N-[4-{4-(4-嗎啉基羰基)-1-哌啶基}苯基]-1-哌嗪甲醯胺，或其藥學上容許的鹽。