TWI721975B

TWI721975B - 抗ｐａｃａｐ抗體及其用途

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Publication number: TWI721975B
Application number: TW105111815A
Authority: TW
Inventors: 瑪麗亞克里斯蒂娜盧米斯; 馬帝茲李奧Ｆ賈西亞; 班傑明Ｈ杜薩; 丹尼爾Ｓ艾利森; 凱瑟琳Ｌ漢德里克斯; 艾森Ｗ歐加拉; 珮樊; 傑佛瑞ＴＬ史密斯; 約翰Ａ雷特漢; 查理卡拉塞克; 珍妮穆里根; 米歇爾斯考利金; 艾瑞卡史都華; 凡妮莎Ｌ魯賓; 珍斯Ｊ比爾葛林
Original assignee: 美商艾爾德生物製藥股份有限公司
Priority date: 2015-04-16
Filing date: 2016-04-15
Publication date: 2021-03-21
Also published as: EP3283169A1; JP2018516071A; JP6924148B2; EP3283516A4; JP6752222B2; AU2016249140B8; WO2016168757A1; KR20180002685A; JP6752223B2; US10899834B2; EP3283517A2; CN108055848A; CN108137677B; IL254945A0; US20210277106A1; US20160362488A1; TW201702266A; TW201643198A; AU2016249408A1; US20210380676A1

Abstract

本發明係有關對PACAP具有結合特異性之拮抗性抗體及其抗原結合片段。此等抗體抑制、阻斷或中和至少一種與PACAP相關之生物效應，例如血管舒張。在示例性實施例中，此等抗體及其抗原結合片段可包含本文所描述之特定V_H 、V_L 及CDR多肽。在一些實施例中，此等抗體及其抗原結合片段結合於及/或競爭結合於人類PACAP上之特定抗原決定基。本發明進一步有關使用此等拮抗性抗PACAP抗體及其結合片段來診斷、評估及治療與PACAP相關之疾病及病症，以及對諸如血管舒張、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化之PACAP相關活性之拮抗作用在治療上有益之病狀，例如頭痛及偏頭痛適應症。

Description

抗PACAP抗體及其用途

相關申請案之交叉參考

本申請案主張2015年4月16日申請之美國臨時申請案第62/148,550號、2015年4月16日申請之美國臨時申請案第62/148,557號、2015年4月16日申請之美國臨時申請案第62/148,562號、2015年4月16日申請之美國臨時申請案第62/148,596號、2015年4月16日申請之美國臨時申請案第62/148,643號、2015年4月16日申請之美國臨時申請案第62/148,583號、2015年4月16日申請之美國臨時申請案第62/148,640號的權益，該等臨時申請案各自特此以全文引用之方式併入。

序列揭示內容

本申請案包括命名為「43257o5808.txt」之電子序列表文本文件作為其揭示內容之一部分，該文本文件之大小為525,090位元組且創建於2016年2月29日，其特此以全文併入。

本發明大體上關於抗體及其抗原結合片段，較佳人類化、嵌合及人類抗體及其抗原結合片段；及含有此類抗體及其抗原結合片段之組合物，其中此類抗體及其抗原結合片段特異性結合於垂體腺苷酸環化酶活化多肽(「PACAP」)；及該等抗體、抗原結合片段及其組合物之治療及診斷用途。

垂體腺苷酸環化酶活化多肽(「PACAP」)為分泌素/血管活性腸肽(「VIP」）/生長激素釋放激素(「GHRH」)家族之成員。PACAP為一種多功能血管舒張肽，其以兩種α-醯胺化活性形式存在，一種具有38個胺基酸(PACAP38；SEQ ID NO：1241)，而另一種具有27個胺基酸(PACAP27；SEQ ID NO：1242)。兩種肽N端具有相同之27個胺基酸且由相同的前驅蛋白preproPACAP合成(參見Moody等人，Curr.Opin.Endocrinol.Diabetes Obes., 18(1)：61-67,2011)。PACAP38為更普遍的活性形式，其佔哺乳動物組織中PACAP形式之高達90%(參見Kaiser及Russo,Neuropeptides ,47：451-461,2013)。PACAP38之序列在所有哺乳動物中為一致的，且與禽類及兩棲動物異種同源物相差僅一個胺基酸(參見Vaudry等人，Pharmacol.Rev. ,52：269-324,2000)。分泌素/VIP/GHRH家族包括哺乳動物肽組胺酸甲硫胺酸醯胺(「PHM」)、分泌素、胰高血糖素、胰高血糖素樣肽-1(「GLP1」)、胰高血糖素樣肽-2(「GLP2」)、葡萄糖依賴性促胰島素多肽(「GIP」)及生長激素釋放因子(「GRF」)。PACAP27在胺基酸層面與VIP具有68%序列一致性(參見Vaudry等人2000)。

PACAP廣泛分佈於腦及周圍器官中，例如內分泌系統、生殖腺、交感神經元、呼吸系統、胃腸道、心血管系統及泌尿生殖道(參見Schytz等人Neurotherapeutics ,7：191-196,2010)。特定而言，PACAP表現於整個神經系統中，包括存在於三叉神經血管系統、三叉神經節、脊髓、下丘腦及垂體中。PACAP以多種作用在神經發育、神經保護、神經調節、神經原性炎症及傷害感受中發揮作用(參見Kaiser及Russo(2013))。

與其廣泛分佈一致，PACAP發揮多效性效應，包括調節神經遞質釋放、血管舒張、枝氣管擴張；及活化腸道活動力；增加胰島素及組胺分泌；以及刺激細胞增殖及/或分化。PACAP已顯示在許多組織中充當激素、神經激素、神經遞質及營養因子(參見Vaudry等人，Pharmacological Rev. ,52(2)：269-324,2000)。

PACAP之生物效應係經由三種不同G蛋白偶合受體介導：PAC1-R、1型血管活性腸肽受體(「VPAC1-R」)及2型血管活性腸肽受體(「VPAC2-R」)。此等受體表現於不同的組織中。PAC1-R在神經系統(例如嗅球、丘腦、下丘腦、小腦及脊髓背角)、垂體及腎上腺中尤其豐富。相比之下，VPAC1-R及VPAC2-R主要表現於肺、肝臟及睪丸中，不過其同樣已在其他組織中被偵測到。已在神經系統(例如大腦皮層及海馬)、肺臟之平滑肌細胞、肝臟、腸道、巨核細胞及血小板中偵測到VPAC1-R表現。VPAC1-R與受體相關膜蛋白(「RAMP」，尤其RAMP2)締合(參見 Christopoulos等人，J.Biol.Chem. ,278：3293-3297,2002)。VPAC2-R表現型態包括神經(例如丘腦、海馬、腦幹及背根神經節(「DRG」))、心血管系統、胃腸系統、胰臟及生殖系統(參見Usdin等人，Endocrin. ,135：2662-2680,1994；Sheward等人，Neurosci. ,67：409-418,1995)。

PAC1-R對PACAP38及PACAP27具選擇性。特定而言，PAC1-R以比VIP大100-1000倍之親和力結合於PACAP，亦即，對於PACAP27/PACAP38而言K_D 為約0.5nM相較於對於VIP而言K_D 為約500nM。相反地，VPAC1-R及VPAC2-R對於PACAP及VIP具有相同親和力(K_D 為約1nM)(參見Schytz等人(2010))。

當活化時，此等受體全部能夠引起下游之環單磷酸腺苷(「cAMP」)產生及/或磷脂酶C(「PLC」)之活化及/或磷脂酶D(「PLD」)之調節。特定而言，PAC1-R偶合至通過cAMP及Ca²⁺ 起作用之雙重信號傳導路徑，而VPAC1-R及VPAC2-R主要偶合至腺苷醯環化酶。PAC1-R偶合至G_s 蛋白，其活化腺苷醯環化酶以形成cAMP，cAMP又活化蛋白激酶A。PAC1-R亦偶合至Gq且藉此活化PLC，PLC產生磷酸肌醇，磷酸肌醇增加自細胞內鈣儲庫之胞質鈣釋放。存在一些證明PAC1-R在PLD活化中之作用的證據(參見McCulloch等人，Ann.N.Y.Acad.Sci., 921：175-185,2000)。另一PACAP信號傳導路徑經由活化非選擇性陽離子通道導致細胞內鈉含量升高(參見Roy等人，American Journal of Physiology：Regulatory,Integrative and Comparative Physiology, 304(12)：R1070-R1084,2013)。

假設PACAP在包括但不限於偏頭痛、頭痛及疼痛之許多疾病及病症中起作用，不過PACAP之此類作用尚未在臨床上得到證實。鹹信偏頭痛具有神經血管組分。偏頭痛影響美國約10%之成年群體且典型地伴隨劇烈頭痛。約20-30%之偏頭痛患者經歷預兆，包括先於及/或伴隨事件之局灶性神經現象。若干觀測結果已表明PACAP在偏頭痛中之作用：(1)在人類中在偏頭痛突發(發作)期間與發作間含量相比PACAP之血漿含量升高(參見Tuka等人，Cephalalgia, 33(13)：1085-1095,2013)；(2)輸注PACAP38觸發在健康個體中之頭痛及在偏頭痛患者中之頭痛隨後偏頭痛樣突發(分別參見Schytz等人，Brain, 132：16-25 2009；及Amin等人，Brain, 137：779-794, 2014)；(3)PACAP誘導之血管舒張可在神經原性炎症中起作用(參見Kaiser及Russo,Neuropeptides, 47：451-461,2013)；及(4)PACAP誘導之偏頭痛與畏光、聲音恐怖、噁心有關，且對曲普坦類藥物(triptans)作出反應(參見Amin等人，Brain ,32：140-1492012)。亦已顯示PACAP誘導血管舒張、畏光以及肥大細胞去顆粒作用及神經元活化(參見Markovics等人，Neurobiology of Disease, 45：633-644 2012；Baun等人，Cephalalgia, 32(4)：337-345,2012；Chan等人，Pharmacology & Therapeutics, 129：332-351,2011)。

偏頭痛之一種有效治療為投與曲普坦類藥物，其為基於色胺之藥物家族，包括舒馬曲坦(sumatriptan)及利紮曲坦(rizatriptan)。此家族之成員對多種血清素受體，包括5-HT_1B 、5-HT_1D 及5-HT_1F 具有親和力。此藥物家族之成員選擇性壓迫腦血管，而且對冠狀血管引起血管收縮效應(參見Durham,New Eng.J.Med. ,350(11)：1073-75,2004)。在具有已確定之心臟病的患者中在投藥後存在理論冠狀動脈痙攣危險，且在攝入曲普坦類藥物之後在罕見情況下可發生心臟事件。因此，其對於一些具有冠狀血管病之患者而言為禁忌的。

類似地，疼痛可常常通過投與某些麻醉劑或非類固醇消炎藥(「NSAID」)而得到解決。然而，投與此等治療常常具有消極結果。NSAID具有引起腎衰竭、腸出血及肝臟功能障礙之可能性。麻醉劑具有引起噁心、嘔吐、心理功能受損及成癮之可能性。因此，需要鑑別出用於疼痛之替代治療以避免此等消極結果中之某些。

PACAP亦可參與不是偏頭痛、頭痛及疼痛之疾病及病症。舉例而言，PACAP可與以下疾病相關聯或甚至在其中發揮因果作用：焦慮障礙(WO 2012/106407)；血小板減少(WO 2004/062684)；及炎性皮膚疾病(WO 2010/007175)。PACAP及PAC1-R多形性與雌性之外傷後應激症候群(「PTSD」)、重性抑鬱障礙及廣泛性焦慮障礙有關，暗示PACAP在此等病狀中之作用。另外，18三體患者具有過量PACAP且展現缺陷型巨核細胞成熟，此支持PACAP在血小板減少中之作用(參見Schytz等人2010；及Moody等人，Curr.Opin.Endocrinol.Diabetes Obes., 18(1)：61-67,2011)。

另外，PACAP及其他神經肽(諸如降血鈣素基因相關肽 (「CGRP」)、物質P、神經激肽A、緩激肽及內皮素-1)表現於下泌尿道(「LUT」)中(參見Arms及Vizzard,Handbook Exp.Pharmacol., 202：395-423 2011)且據報導可在LUT功能障礙及泌尿道病症(諸如泌尿道感染(「UTI」)、排泄異常、尿急、夜尿症、尿失禁、膀胱過度活動症)及與此類病狀相關之疼痛中起作用。

亦已提出PACAP及PACAP受體調節炎性及神經性疼痛且已參與促傷害感受與抗傷害感受(參見Davis-Taber等人，J.Pain, 9(5)：449-56 2008)。PACAP亦已報導為脊髓去敏感及誘導神經性疼痛所需的(參見Mabuchi等人，J.Neurosci. ,24(33)：7283-91,2004)。另外，嗎啡戒斷行據報道在PACAP-受體缺陷型小鼠中有所改變，進一步表明PACAP在嗎啡戒斷抗焦慮劑反應中之作用(參見Martin等人，Mol.Brain Res., 110(1)：109-18 2003)。

在一個態樣中，本發明大體上係關於拮抗、抑制、中和或阻斷與人類PACAP相關之至少一種生物效應之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段。在某些實施例中，如下文所論述，抗PACAP抗體及其抗原結合片段抑制或中和由包括PACAP27及/或PACAP38之PACAP引發之至少一種生物效應。在其他實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者的活化；及/或中和或抑制PACAP對PAC1-R之活化；及/或抑制PACAP例如經由醣胺聚醣(「GAG」)結合於細胞表面。在其他實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之每一者；或能夠抑制PACAP結合於PAC1-R。在其他實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段抑制PACAP誘導之cAMP產生。在其他實施例中，單獨或呈組合形式之抗PACAP抗體及其抗原結合片段當向個體(例如人類)投與時降低PACAP誘導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。在相關實施例中，人類或人類化抗PACAP抗體及其抗原結合片段適合用於治療具有與增加之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化相關之急性、陣發性或慢性病狀的人類個體。

在另一實施例中，該方法提供一種真核宿主細胞，其為選自由以下組成之群的哺乳動物宿主細胞：幼倉鼠腎(「BHK」)細胞；中國倉鼠卵巢(「CHO」)細胞；小鼠足細胞(「TM4」細胞)；非洲綠猴腎細胞(「VERO-76」細胞)；人類子宮頸癌(「HELA」)細胞；犬腎細胞(「MDCK」)；布法羅大鼠(buffalo rat)肝(「BRL」)細胞；人類肺細胞；人類肝(「Hep G2」)細胞；小鼠乳房腫瘤(「MMT」)細胞；TRI細胞；MRC 5細胞；及FS4細胞。較佳地，哺乳動物宿主細胞為CHO細胞。更佳地，哺乳動物宿主細胞為CHO K1細胞。

在一較佳實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段不實質上與VIP相互作用(結合)。本發明亦涵蓋此類抗PACAP抗體及其抗原結合片段之治療用途(作為單一療法或組合治療)及診斷用途。

更特定而言，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包括人類、人類化及嵌合抗體及其片段，以及scFv、駱駝抗體、鯊魚抗體、奈米抗體、免疫球蛋白新抗原受體(「IgNAR」)、片段抗原結合(「Fab」)片段、Fab' 片段、MetMab樣抗體、雙特異性抗體、單價抗體片段及F(ab' )₂ 片段。另外，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段可實質上缺少或完全沒有N-糖基化及/或O-糖基化。在一個實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含人類恆定域，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體或其片段之人類恆定域。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含Fc區，該Fc區已經修飾以改變(增強或削弱)效應功能、半衰期、蛋白水解或糖基化中之至少一者。舉例而言，該Fc區可含有改變或消除N-糖基化及/或O-糖基化之一或多種突變。

在一些實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段以例如如藉由ELISA、生物層干涉術(「BLI」)、動力排除分析(KINEXA®,Sapidyne Instruments,Boise,ID)或例如在25℃或37℃下之SPR所測定小於或等於5×10^-5 M、10^-5 M、5×10^-6 M、10^-6 M、5×10^-7 M、10^-7 M、5×10^-8 M、10^-8 M、 5×10^-9 M、10^-9 M、5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M、10^-12 M、5×10^-13 M或10^-13 M之K_D 結合於PACAP。較佳地，人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段以小於或等於5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M或10^-12 M之K_D 結合於PACAP。較佳地，人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段以小於約100nM、小於約40nM、小於約1nM、小於約100pM、小於約50pM或小於約25pM之K_D 結合於PACAP。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段以約10pM與約100pM之間的K_D 結合於PACAP。在另一實施例中，人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段以小於或等於5×10^-4 s^-1 、10^-4 s^-1 、5×10^-5 s^-1 或10^-5 s^-1 之解離速率(k_off )結合於PACAP。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段將特異性結合於線性或構象抗原決定基及/或與選自由Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H組成之群的抗PACAP抗體競爭結合於在人類PACAP上之相同線性或構象抗原決定基(下文揭示此等抗PACAP抗體之可變區及恆定區之特定胺基酸序列，及編碼此類可變區及恆定區之核酸，及如使用丙胺酸掃描法所測定之藉此結合之抗原決定基)。特定而言，本發明涵蓋與選自由Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H組成之群的抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體及其抗原結合片段。如下文所揭示，在示例性實施例中，抗原決定基係使用丙胺酸掃描突變策略來測定。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其與Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8及Ab9中之任一者或前述各項中之任一者的結合片段結合於相同之抗原決定基。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其特異性結合於人類PACAP 或其含有對應胺基酸殘基之片段或變異體上之抗原決定基，其中該抗原決定基選自由以下組成之群：i.人類PACAP之殘基7、10、13及14中之至少一者；ii.人類PACAP之殘基5、6、8、10及13中之至少一者；iii.人類PACAP之殘基6、8、9、10及13中之至少一者；iv.人類PACAP之殘基5、6、8、9、10及13中之至少一者；v.人類PACAP之殘基7、10、12、13、14及17中之至少一者；vi.人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、12及13中之至少一者；vii.人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、13及14中之至少一者；viii.人類PACAP之殘基6、8、10、11、13、14及18中之至少一者；ix.人類PACAP之殘基8、9、10、13、14、17及18中之至少一者；x.人類PACAP之殘基3、4、5、6、7、10、13及14中之至少一者；xi.人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、12、13及14中之至少一者；xii.人類PACAP之殘基5、6、9、10、12、13、14及17中之至少一者；xiii.人類PACAP之殘基6、8、10、11、13、14、18及22中之至少一者；xiv.人類PACAP之殘基8、9、10、11、12、13、14、17及21中之至少一者；xv.人類PACAP之殘基4、5、6、8、9、10、12、13、14及17中之至少一者；xvi.(i)-(xv)中之任一者之殘基中之至少兩者；xvii.(i)-(xv)中之任一者之殘基中之至少三者；xviii.(i)-(xv)中之任一者之殘基中之至少四者；xix.(ii)-(xv)中之任一者之殘基中之至少五者；xx.(iv)-(xv)中之任一者之殘基中之至少六者；xxi.(vi)-(xv)中之任一者之殘基中之至少七者；xxii.(x)-(xv)中之任一者之殘基中之至少八者；xxiii.(xiv)或(xv)之殘基中之至少九者； xxiv.(xv)之殘基中之所有十者；在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體或其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其特異性結合於人類PACAP或其可含有對應胺基酸殘基且可包括人類PACAP之殘基8及/或14之片段或變異體上的抗原決定基。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其特異性結合於人類PACAP或其存在於人類野生型PACAP38中但不存在於人類野生型人類PACAP27中之含有對應胺基酸殘基之片段或變異體上的抗原決定基。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其特異性結合於其特異性結合於人類PACAP或其含有對應胺基酸殘基之片段或變異體上之抗原決定基，其中該抗原決定基係藉由例如如實例12中所揭示之丙胺酸掃描或另一業內公知方法來鑑別。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其特異性結合於人類PACAP或其含有對應胺基酸殘基之片段或變異體上之抗原決定基，其中該抗原決定基由如以上所描述之(i)-(xv)中之任一者之殘基組成。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其特異性結合於人類PACAP或其存在於人類野生型PACAP38及人類野生型人類PACAP27中且含有對應胺基酸殘基之片段或變異體上的抗原決定基。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其特異性結合於人類野生型人類PACAP38，但其不結合或不大量結合於人類野生型人類PACAP27。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其針對人類PACAP38具有比該抗體或抗體片段對人類PACAP27之K_D 低(強)至少10倍、100倍、1,000倍、10,000倍或100,000倍的K_D 。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其不結合於或不大量結合於人類血管活性腸肽(「VIP」)。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其針對人類PACAP之K_D 比該抗體或抗體片段對人類VIP之K_D 小(弱)至少10倍、100倍、1,000倍、10,000倍或100,000倍。

在一些實施例中，本發明提供一種抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，其包含選自由Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H組成之群的抗PACAP抗體之至少2個互補決定區(「CDR」)，或至少3個CDR，或至少4個CDR，或至少5個CDR，或所有六個CDR。在所有6個CDR均不存在之情況下，較佳至少存在V_H CDR3及V_L CDR3。在示例性實施例中，抗體及其抗原結合片段包含Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H中之一者的可變重(「V_H 」)鏈及/或可變輕(「V_L 」)鏈。

在一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段，其包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：4組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：6組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：8組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：24組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：26組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：28組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：2具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：22具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在一更特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：22之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP 抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：21之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：44組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：46組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：48組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：64組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：66組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：68組成之CDR3序列。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)包含與SEQ ID NO：42具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：62具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：42之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：62之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：41之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：61之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，可包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：84組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：86組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：88組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：104組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：106組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：108組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：82具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：102具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：82之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：102之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：81之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：101之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，可包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：124組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：126組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：128組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：144組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：146組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：148組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：122具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：142具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：122之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：142之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：121之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：141之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，可包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：164組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：166組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：168組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：184組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：186組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：188組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：162具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：182具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：162之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：182之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：161 之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：181之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：204組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：206組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：208組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：224組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：226組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：228組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：202具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：222具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：202之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：222之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：201之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：221之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：244組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：246組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：248組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：264組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：266組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：268組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：242具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：262具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：242之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：262之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：241之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：261之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：284組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：286組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：288組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：304組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：306組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：308組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：282具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：302具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：282之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：302之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：281之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：301之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：324組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：326組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：328組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：344組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：346組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：348組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：322具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：342具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：322之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：342之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：321之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：341之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：364組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：366組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：368組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：384組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：386組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：388組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：362具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：382具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：362之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：382之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：361之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：381之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：484組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：486組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：488組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：504組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：506組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：508組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：482具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：502具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：482之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：502之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：481之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：501之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：524組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：526組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：528組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：544組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：546組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：548組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：522具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：542具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：522之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：542之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：521之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：541之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：564組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：566組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：568組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：584組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：586組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：588組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：562具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：582具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：562之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：582之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：561之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：581之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：604組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：606組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：608組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：624組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：626組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：628組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：602具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：622具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：602之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：622之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：601之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：621之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：644組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：646組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：648組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：664組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：666組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：668組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：642具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：662具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：642之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：662之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：641之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：661之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：684組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：686組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：688組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：704組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：706組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：708組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：682具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：702具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：682之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：702之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ D NO：681之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：701之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：724組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：726組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：728組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：744組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：746組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：748組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：722具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：742具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：722之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：742之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：721之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：741之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：764組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：766組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：768組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：784組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：786組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：788組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：762具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：782具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：762之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：782之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：761之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：781之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：804組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：806組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：808組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：824組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：826組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：828組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：802具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：822具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：802之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：822之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：801之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：821之胺基酸序列的輕鏈。

另外，在一些實施例中，抗PACAP抗體及抗原結合片段可包含所揭示之抗體中之任一者的序列變異體，其藉由誘變(例如親和力成熟)加以修飾以改變一或多種特性，諸如結合親和力或免疫原性。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段係直接或間接結合於另一部分，諸如可偵測標記或治療劑。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段抑制或中和由PACAP引發之至少一種生物效應；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R之活化；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之每一者；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R；及/或抑制PACAP例如經由GAG結合於細胞表面；抑制PACAP誘導之cAMP產生；及/或當向個體投與時降低PACAP誘導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。

在另一實施例中，人類或人類化抗PACAP抗體及其抗原結合片段適合用於治療具有與增加之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化相關之急性、陣發性或慢性病狀的人類個體。

在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段不實質上與VIP相互作用(亦即結合)。較佳地，抗PACAP抗體及其抗原結合片段針對PACAP具有與VIP相比更強的親和力，亦即雖然存在一些交叉反應性，但與VIP相比抗體優先結合於PACAP。舉例而言，該等抗體及其抗原結合片段對PACAP之親和力比該等抗體及其抗原結合片段對VIP之親和力強至少10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、10000倍、30000倍、100000倍、300000倍、1000000倍、3000000倍、10000000倍、30000000倍或更強(例如該等抗體或片段結合於人類PACAP之K_D 比結合於VIP之K_D 低10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、10000倍、30000倍、100000倍、300000倍、1000000倍、3000000倍、10000000倍或30000000倍)。

在一個實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段與例如包含化學連接子之至少一個效應子部分連接。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段與例如包含螢光染料、酶、受質、生物發光物質、放射性物質、化學發光部分或其混合物之一或多個可偵測部分連接。

在一個實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段與一或多個功能部分連接。

本發明亦涵蓋針對如上文所描述之抗PACAP抗體及其抗原結合片段產生之抗體，例如抗遺傳型抗體。此外，本發明提供一種使用抗遺傳型抗體來監測個體中該等抗PACAP抗體及其抗原結合片段之活體內含量或中和正在投與該抗PACAP抗體或其抗原結合片段之個體中的該抗PACAP抗體的方法。

此外，本發明涵蓋一種適合用於治療、預防或診斷用途之組合物，其包含治療、預防或診斷有效量之至少一種如本文所描述之抗PACAP抗體或抗原結合片段。特定而言，本文提供用於治療或預防偏頭痛或其他頭痛適應症之含有本發明抗PACAP抗體或其結合片段之組合物及劑型。本文亦提供用於治療或預防畏光之含有本發明抗PACAP抗體或其結合片段之劑型。組合物可適合用於皮下投與、肌肉內投與及/或靜脈內投與。組合物可為凍乾的。在一些實施例中，組合物進一步包含醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑或其混合物。

另外，在一些實施例中，組合物進一步包含另一活性劑，例如化學治療劑、止痛劑、抗炎劑、免疫抑制劑、細胞因子、抗增殖劑及止吐劑。較佳地，另一治療劑為止痛劑，例如NSAID、類阿片止痛劑、抗體(例如抗人類神經生長因子(「NGF」)抗體或抗體片段；或抗人類CGRP或抗人類CGRP-受體抗體或抗體片段)；或非抗體生物劑，諸如NGF或CGRP多肽片段或綴合物；或BOTOX®(肉毒桿菌毒素)。適合用於與本發明抗PACAP抗體組合之NSAID包括但不限於環氧合酶1及/或環氧合酶2抑制劑；丙酸衍生物，包括布洛芬(ibuprofen)、萘普生(naproxen)、消痛靈(naprosyn)、雙氯芬酸(diclofenac)及酮洛芬(ketoprofen)；乙酸衍生物，包括托美汀(tolmetin)及舒林酸(sulindac)；滅酸衍生物，包括甲滅酸(mefenamic acid)及甲氯滅酸(meclofenamic acid)；聯苯甲酸衍生物，包括二氟尼柳(diflunisal)及氟苯柳(flufenisal)；及昔康類(oxicams)，包括吡羅昔康(piroxim)、舒多昔康(sudoxicam)及伊索昔康(isoxicam)。適合用於與本發明抗PACAP抗體組合之類阿片止痛劑包括例如可待因(codeine)、二氫可待因、嗎啡或嗎啡衍生物或其醫藥學上可接受之鹽、二乙醯嗎啡、氫可酮(hydrocodone)、氫嗎啡酮、左啡諾(levorphanol)、氧嗎啡酮、阿芬太尼(alfentanil)、丁丙諾啡 (buprenorphine)、布托啡諾(butorphanol)、芬太尼(fentanyl)、舒芬太尼(sufentanil)、嘜啶(meperidine)、美沙酮(methadone)、納布啡(nalbuphine)、丙氧芬(propoxyphene)及噴他佐辛(pentazocine)或其醫藥學上可接受之鹽。類阿片止痛劑與抗PACAP抗體或其抗原結合片段之組合投與可增加藉此引發之止痛效應。

本發明進一步涵蓋一種編碼本文所描述之抗PACAP抗體或抗原結合片段的經分離之核酸序列，以及含有此等經分離之核酸序列之載體。

另外，本發明提供一種包含以上所闡述之此等經分離之核酸序列或載體之宿主細胞。宿主細胞可為真核宿主細胞，其為選自由以下組成之群的哺乳動物宿主細胞：幼倉鼠腎(「BHK」)細胞；中國倉鼠卵巢(「CHO」)細胞；小鼠足細胞(「TM4」細胞)；非洲綠猴腎細胞(「VERO-76」細胞)；人類子宮頸癌(「HELA」)細胞；犬腎細胞(「MDCK」)；布法羅大鼠肝(「BRL」)細胞；人類肺細胞；人類肝(「Hep G2」)細胞；小鼠乳房腫瘤(「MMT」)細胞；TRI細胞；MRC 5細胞；及FS4細胞。較佳地，哺乳動物宿主細胞為CHO細胞。更佳地，哺乳動物宿主細胞為CHO K1細胞。宿主細胞可為原核細胞，亦即細菌細胞；或真核細胞，包括哺乳動物、真菌、酵母、禽類或昆蟲細胞。在一個實施例中，宿主細胞為絲狀真菌或為酵母細胞。較佳地，酵母種類屬於畢赤酵母屬(Pichia )。最佳地，畢赤酵母屬之種類選自巴斯德畢赤氏酵母(Pichia pastoris )、甲醇畢赤酵母(Pichia methanolica )及多形漢遜酵母(Hansenula polymorpha )(安格斯畢赤酵母(Pichia angusta ))。

本發明進一步提供一種表現抗PACAP抗體及其抗原結合片段，典型地人類、人類化或嵌合抗體及其抗原結合片段之方法，該方法包括在提供該抗體或其抗原結合片段之表現的條件下培養本文所描述之宿主細胞。宿主細胞可為細胞培養物，諸如中國倉鼠卵巢(「CHO」)細胞或多倍體酵母培養物，其每公升穩定表現至少10-25mg之該抗體或其抗原結合片段及將其分泌至培養基中。多倍體酵母可藉由包括以下之方法製備：(i)將含有可操作地鍵聯至啟動子及信號序列之一或多個編碼該抗體之異源聚核苷酸的至少一種表現載體引入單倍體酵母細胞中；(ii)由該第一及/或第二單倍體酵母細胞藉由交配或原生質球融合產生多倍體酵母；(iii)選擇穩定表現該抗體之多倍體酵母細胞；及(iv)由將該抗體穩定表現至培養基中之該等多倍體酵母細胞產生穩定多倍體酵母培養物。較佳地，酵母種類屬於畢赤酵母屬。

在其他實施例中，哺乳動物細胞培養物可藉由包括以下之方法來製備：(i)將含有可操作地鍵聯至啟動子及信號序列之編碼該抗體之一或多個異源聚核苷酸的至少一種表現載體引入哺乳動物細胞中；(ii)產生用於培養之單一細胞，以表現一或多個編碼該抗體之異源聚核苷酸；(iii)選擇穩定表現該抗體之哺乳動物細胞；及(iv)由將該抗體穩定表現至培養基中之該哺乳動物細胞產生細胞培養物。較佳地，哺乳動物細胞種類為CHO細胞。

本發明進一步係關於抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類抗體、人類化抗體或嵌合抗體或其片段之治療及診斷用途。

在一個實施例中，本發明提供一種用於阻斷、抑制或中和個體中與PACAP相關之一或多種生物效應的方法，其包括向個體投與有效量之拮抗、抑制、中和或阻斷與人類PACAP相關之至少一種生物效應的人類或人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段。在一特定實施例中，該方法採用與選自Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H之抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同或重疊之線性或構象抗原決定基及/或競爭結合於相同或重疊之線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。

在另一實施例中，本發明提供一種用於阻斷、抑制或中和個體中與PACAP相關之一或多種生物效應的方法，其包括向個體投與有效量之拮抗、抑制、中和或阻斷與人類PACAP相關之至少一種生物效應且不實質上與VIP相互作用(結合)的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段，例如抗PACAP抗體或其抗原結合片段針對PACAP具有與VIP相比更強之親和力，亦即雖然存在一些交叉反應性，抗體仍與VIP相比優先結合於PACAP。舉例而言，該抗體或其抗原結合片段對PACAP之親和力比該抗體或其抗原結合片段對VIP之親和力高至少10倍、30倍、100倍、 300倍、1000倍、3000倍、10000倍、30000倍、100000倍、300000倍、1000000倍、3000000倍、10000000倍、30000000倍或更高(例如該抗體或片段結合於人類PACAP之K_D 比結合於VIP之K_D 低10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、10000倍、30000倍、100000倍、300000倍、1000000倍、3000000倍、10000000倍、30000000倍或更低)。在一特定實施例中，該方法採用與選自Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H之抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同或重疊之線性或構象抗原決定基及/或競爭結合於相同或重疊之線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。

在另一實施例中，本發明提供一種用於阻斷、抑制或中和個體中與PACAP相關之一或多種生物效應的方法，其包括向個體投與有效量之人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段，該人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段抑制或中和由PACAP引發之至少一種生物效應；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R之活化；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之每一者；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R；及/或能夠抑制PACAP例如經由GAG結合於細胞表面；抑制PACAP誘導之cAMP產生；及/或當向個體投與時降低PACAP誘導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。在一特定實施例中，該方法採用與選自Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H之抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同或重疊之線性或構象抗原決定基及/或競爭結合於相同或重疊之線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。

在另一實施例中，本發明提供一種用於治療或預防個體之頭痛或偏頭痛之發作、頻率、嚴重程度或持續時間的方法，其包括向個體投與有效量之人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段，該人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段抑制或中和由PACAP引發之至少一種生物效應；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R之活化；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之每一者；能夠抑制PACAP結合於PAC1-R；及/或能夠抑制PACAP例如經由GAG結合於細胞表面；抑制PACAP誘導之cAMP產生；及/或當向個體投與時降低PACAP誘導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。在另一實施例中，本發明提供一種用於治療或預防人類個體之與增加之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化相關之急性、陣發性或慢性病狀的方法。

在一特定實施例中，該方法採用與選自Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H之抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同或重疊之線性或構象抗原決定基及/或競爭結合於相同或重疊之線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。抗原決定基可使用例如丙胺酸掃描突變策略來鑑別。

在一特定實施例中，藉由投與本發明抗PACAP抗體及其抗原結合片段治療及/或防止之頭痛或偏頭痛選自有預兆或無預兆偏頭痛、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛及緊張性頭痛。

在另一特定實施例中，個體具有與畏光相關之眼部病症，其選自由以下組成之群：色盲、無虹膜、由抗膽鹼能藥物引起之畏光、無晶狀體(眼睛中不存在晶狀體)、牛眼症(角膜與虹膜之間的角度異常小)、白內障、錐體營養不良、先天性眼睛異常、病毒性結膜炎(「紅眼病」)、角膜擦傷、角膜營養不良、角膜潰瘍、角膜上皮破壞、晶狀體異位、眼內炎、由疾病、損傷或感染引起之眼外傷，諸如瞼板腺囊腫、鞏膜表層炎、青光眼、圓錐形角膜或視神經發育不全、水眼症或先天性青光眼虹膜炎、視神經炎、色素播散症候群、瞳孔擴張(自然或化學誘發)、視網膜脫離、角膜或鞏膜瘢痕形成及葡萄膜炎。

在另一特定實施例中，個體具有與畏光相關之神經系統相關病狀或神經病狀，其選自由以下組成之群：自閉症譜系病症、查理氏畸形(chiari malformation)、誦讀困難、包括肌痛性腦脊髓炎(亦稱為「慢性疲勞症候群」)之腦炎、腦膜炎、蛛網膜下出血、顱後窩腫瘤、強直性脊柱炎、白化病、核黃素缺乏症、苯并二氮呯類(長期使用或戒斷苯并二氮呯類)、化學治療、切昆貢亞熱(chikungunya)、胱胺酸病、埃-當二氏症候群(Ehlers-Danlos syndrome)、宿醉、流感、傳染性單核細胞增多症、鎂缺乏症、汞中毒、偏頭痛、狂犬病及II型酪胺酸血症(亦稱為「裏-漢二氏症候群(Richner-Hanhart syndrome)」)。

在另一特定實施例中，個體具有選自由以下組成之群的畏光相關病症：偏頭痛(具有或不具有預兆)、虹膜炎、葡萄膜炎、腦膜炎、抑鬱症、雙極性障礙、叢集性頭痛或另一三叉神經自主性頭痛(「TAC」)或瞼痙攣、抑鬱症、廣場恐怖症、外傷後應激障礙(「PTSD」)、外傷性腦損傷及雙極性障礙。

在另一實施例中，本發明提供一種用於中和PACAP誘導之PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R信號傳導的方法，其包括向有需要之個體投與有效量之與選自Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H之抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同或重疊之線性或構象抗原決定基及/或競爭結合於相同或重疊之線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。

在另一實施例中，本發明提供一種用於抑制PACAP誘導之cAMP產生的方法，其包括向有需要之個體投與有效量之與選自Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H之抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同或重疊之線性或構象抗原決定基及/或競爭結合於相同或重疊之線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。

在另一實施例中，本發明提供一種用於抑制PACAP誘導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化的方法，其包括向有需要之個體投與有效量之與選自Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H之抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同或重疊之線性或構象抗原決定基及/或競爭結合於相同或重疊之線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。

在另一實施例中，本發明提供一種用於治療或預防個體中與升高之PACAP含量相關之病狀的方法，其包括向有需要之個體投與有效量之與選自Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H之抗PACAP抗體特異性結合於在人類PACAP上之相同或重疊之線性或構象抗原決定基及/或競爭結合於相同或重疊之線性或構象抗原決定基的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。抗原決定基可使用例如丙胺酸掃描突變策略來鑑別。

適合用於本發明中之示例性抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含V_H 鏈，其具有與選自SEQ ID NO：2；42；82；122；162；202；242；282；322；362；482；522；562；602；642；682；722；762；及802之V_H 鏈具有至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%序列一致性之胺基酸序列；及/或V_L 鏈，其具有與選自選自SEQ ID NO：22；62；102；142；182；222；262；302；342；382；502；542；582；622；662；702；742；782；及822之V_L 鏈具有至少80、85、90、95、96、97、98、99或100%序列一致性之胺基酸序列；且/或其中包含之至少2個、3個、4個、5個或所有6個CDR。

在一個實施例中，該等方法中採用之抗PACAP抗體或其抗原結合片段結合於PACAP27及/或PACAP38且阻斷PACAP27及/或PACAP38結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R。在另一實施例中，該等方法中採用之抗PACAP抗體或其抗原結合片段結合於PACAP27及/或PACAP38且阻斷PACAP27及/或PACAP38結合於PAC1-R、VPAC1-R 及VPAC2-R中之每一者。較佳地，抗PACAP抗體或其抗原結合片段結合於PACAP27及/或PACAP38且阻斷PACAP27及/或PACAP38結合於PAC1-R。

更特定而言，根據本發明之方法中採用之抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包括人類、人類化及嵌合抗體及其片段以及scFv、駱駝抗體、鯊魚抗體、奈米抗體、IgNAR、Fab片段、Fab' 片段、MetMab樣抗體、雙特異性抗體、單價抗體片段及F(ab' )₂ 片段。另外，根據本發明之方法採用之抗PACAP抗體或其抗原結合片段可實質上缺少或完全沒有N-糖基化及/或O-糖基化。在一個實施例中，所涵蓋之方法中所用之抗PACAP抗體或其抗原結合片段包含人類恆定域，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體。在另一實施例中，抗PACAP抗體或其抗原結合片段包含Fc區，該Fc區已經修飾以改變(增強或削弱)效應功能、半衰期、蛋白水解或糖基化中之至少一者。舉例而言，該Fc區可含有改變或消除N-糖基化及/或O-糖基化之一或多種突變。

在一個實施例中，本發明方法採用以小於或等於5×10^-5 M、10^-5 M、5×10^-6 M、10^-6 M、5×10^-7 M、10^-7 M、5×10^-8 M、10^-8 M、5×10^-9 M、10^-9 M、5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M、10^-12 M、5×10^-13 M或10^-13 M之K_D 結合於PACAP的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。較佳地，人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段以小於或等於5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M或10^-12 M之K_D 結合於PACAP。更佳地，該等方法採用以小於約100nM、小於約40nM、小於約1nM、小於約100pM、小於約50pM或小於約25pM之K_D 結合於PACAP的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段。或者，抗PACAP抗體或其抗原結合片段以在約10pM與約100pM之間的K_D 結合於PACAP。在另一實施例中，人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段以小於或等於5×10^-4 s^-1 、10^-4 s^-1 、5×10^-5 s^-1 或10^-5 s^-1 之解離速率(k_off )結合於PACAP。

在另一實施例中，用於本發明方法中之抗PACAP抗體或其抗原結合片段直接或間接與另一部分(諸如可偵測標記或治療劑)連接；與例如包含化學連接子之至少一個效應子部分連接；及/或與例如包含螢光染料、酶、受質、生物發光物質、放射性物質、化學發光部分或其混合物之一或多個可偵測部分連接；及/或與一或多個功能部分連接。

在另一實施例中，該方法進一步包括分開投與或共投與例如選自化學治療劑、止痛劑、抗炎劑、免疫抑制劑、細胞因子、抗增殖劑及止吐劑之另一藥劑。較佳地，另一治療劑為止痛劑，例如NSAID(諸如環氧合酶1及/或環氧合酶2抑制劑；丙酸衍生物，包括布洛芬、萘普生、消痛靈、雙氯芬酸及酮洛芬；乙酸衍生物，包括托美汀及舒林酸；滅酸衍生物，包括甲滅酸及甲氯滅酸；聯苯甲酸衍生物，包括二氟尼柳及氟苯柳；及昔康類，包括吡羅昔康、舒多昔康及伊索昔康)、類阿片止痛劑(諸如嗎啡或嗎啡衍生物或其醫藥學上可接受之鹽；可待因、二氫可待因、二乙醯嗎啡、氫可酮、氫嗎啡酮、左啡諾、氧嗎啡酮、阿芬太尼、丁丙諾啡、布托啡諾、芬太尼、舒芬太尼、嘜啶、美沙酮、納布啡、丙氧芬及噴他佐辛或其醫藥學上可接受之鹽)、另一抗體(諸如抗NGF抗體或抗體片段或抗CGRP或抗CGRP受體(「抗CGRP-R」)抗體或抗體片段)或非抗體生物劑，例如BOTOX®。

在一個實施例中，組合投與類阿片止痛劑與抗PACAP抗體或其抗原結合片段與單獨投與之類阿片止痛劑或抗PACAP抗體或其抗原結合片段相比增加止痛效應。

在另一實施例中，個體先前已經治療(「經治療個體」)且接受抗CGRP或抗CGRP-R抗體或其抗體片段。經治療個體可為未適當地對抗CGRP或抗CGRP-R抗體治療(「不良反應者」)作出反應之偏頭痛患者。或者，經治療個體可先前已接受至少一種抗CGRP或抗CGRP-R抗體或其抗體片段投與，且已引發對該抗體或其抗體片段之免疫反應。示例性抗CGRP及抗CGRP-R抗體及其抗體片段揭示於美國專利第9,102,731號；第9,115,194號；第8,734,802號；第8,623,366號；第8,597,649號；及第8,586,045號；及美國專利申請公開案第20120294822號、第20120294802號及第20120294797號中，該等專利各自之內容以全文引用之方式併入本文中。

本發明之一態樣大體上係關於可拮抗、抑制、中和或阻斷與人類PACAP相關之至少一種生物效應的抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗人類PACAP抗體或其抗體片段。

此外，本發明係有關於抗PACAP抗體及其抗原結合片段，其可包括與選自由Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8及Ab9組成之群的抗體或其抗原結合片段特異性地競爭結合於人類PACAP的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段。

另外，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段可包括可特異性結合於由選自由Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8及Ab9組成之群的抗PACAP抗體或其抗原結合片段結合之至少一個線性或構象抗原決定基的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段。抗原決定基可藉由例如如實例12中所揭示之丙胺酸掃描或另一業內公知方法來鑑別。另外，在另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包括可與Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8及Ab9中之任一者或其抗原結合片段結合於相同之抗原決定基的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段。抗原決定基可藉由例如如實例12中所揭示之丙胺酸掃描或另一業內公知方法來鑑別。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體或其抗原結合片段可包括可特異性結合於人類PACAP或其含有對應胺基酸殘基之片段或變異體上之抗原決定基的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其中該抗原決定基包括以下中之一或多者：i.人類PACAP之殘基7、10、13及14中之至少一者；ii.人類PACAP之殘基5、6、8、10及13中之至少一者；iii.人類PACAP之殘基6、8、9、10及13中之至少一者；iv.人類PACAP之殘基5、6、8、9、10及13中之至少一者；v.人類PACAP之殘基7、10、12、13、14及17中之至少一者；vi.人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、12及13中之至少一者； vii.人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、13及14中之至少一者；viii.人類PACAP之殘基6、8、10、11、13、14及18中之至少一者；ix.人類PACAP之殘基8、9、10、13、14、17及18中之至少一者；x.人類PACAP之殘基3、4、5、6、7、10、13及14中之至少一者；xi.人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、12、13及14中之至少一者；xii.人類PACAP之殘基5、6、9、10、12、13、14及17中之至少一者；xiii.人類PACAP之殘基6、8、10、11、13、14、18及22中之至少一者；xiv.人類PACAP之殘基8、9、10、11、12、13、14、17及21中之至少一者；xv.人類PACAP之殘基4、5、6、8、9、10、12、13、14及17中之至少一者；xvi.(i)-(xv)中之任一者之殘基中之至少兩者；xvii.(i)-(xv)中之任一者之殘基中之至少三者；xviii.(i)-(xv)中之任一者之殘基中之至少四者；xix.(ii)-(xv)中之任一者之殘基中之至少五者；xx.(iv)-(xv)中之任一者之殘基中之至少六者；xxi.(vi)-(xv)中之任一者之殘基中之至少七者；xxii.(x)-(xv)中之任一者之殘基中之至少八者；xxiii.(xiv)或(xv)之殘基中之至少九者；及xxiv.(xv)之殘基中之所有十者；在本發明之一特定實施例中，本發明之抗PACAP抗體或其抗原結合片段可包括特異性結合於人類PACAP或其可含有對應胺基酸殘基且可包括人類PACAP之殘基8及/或14之片段或變異體上之抗原決定基的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段。另外，在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體或其抗原結合片段可包括特異性結合於人類PACAP(或其可存在於人類野生型PACAP38中且含有對應胺基酸殘基之片段或變異體)上之抗原決定基但不結合人類野生型人類PACAP27的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段。抗原決定基可藉由例如如實例12中所揭示之丙胺酸掃描或另一業內公知方法來鑑別。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體或其抗原結合片段可包括可特異性結合於人類PACAP或其含有對應胺基酸殘基之片段或變異體上之抗原決定基的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段，其中該抗原決定基可由如上文所描述之(i)-(xv)中之任一者之殘基組成。抗原決定基可藉由例如如實例12中所揭示之丙胺酸掃描或另一業內公知方法來鑑別。

本發明之另一態樣亦涵蓋抗PACAP抗體或其抗原結合片段，其可包括特異性結合於可存在於人類野生型PACAP38及人類野生型人類PACAP27中之人類PACAP(或其可含有對應胺基酸殘基之片段或變異體)上之抗原決定基的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段。

另外，抗PACAP抗體或其抗原結合片段可包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段，其可特異性結合於人類野生型人類PACAP38，但其可能不結合或不大量結合於人類野生型人類PACAP27。本發明亦可涵蓋可包括可特異性地與人類PACAP38之殘基28及31相互作用的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段的抗PACAP抗體或其抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包括針對人類PACAP38可具有可能比該抗體或抗體片段對人類PACAP27之K_D 低(強)至少10倍、100倍、1000倍、10,000倍或100,000倍之K_D 的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段。

在另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包括不結合於或不大量結合於人類血管活性腸肽(「VIP」)之人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段。該等抗PACAP抗體或其抗體片段針對人類PACAP可具有可能比該抗體或抗體片段對人類VIP之KD低(強)至少10倍、100倍、1000倍、10,000倍或100,000倍之KD。

在本發明之實施例中，如本文所揭示之人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段可抑制或可中和由人類PACAP引發之至少一種生物效應。

在另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包括可包含以下特性中之一或多者的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段：(a)抑制、阻斷或防止PACAP對PAC1受體(「PAC1-R」)、1型血管活性腸肽受體(「VPAC1-R」)及/或2型血管活性腸肽受體(「VPAC2-R」)中之至少一者的活化；(b)抑制、阻斷或防止PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者的活化；(c)抑制、阻斷或防止PACAP對PAC1-R之活化；(d)能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者；(e)能夠抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之每一者；(f)可能夠抑制PACAP結合於PAC1-R-表現細胞；(g)能夠抑制PACAP結合於VPAC1-R-表現細胞；(h)能夠抑制PACAP結合於VPAC2-R-表現細胞；(i)抑制PACAP例如經由醣胺聚醣(「GAG」)結合於細胞表面；(j)不抑制PACAP介導之此類抗體例如經由GAG與細胞表面之結合；(k)抑制PACAP介導之此類抗體例如經由醣胺聚醣(「GAG」)與細胞表面之結合；(l)抑制、阻斷或防止PACAP誘導之cAMP產生；及/或(m)當向個體投與時降低PACAP誘導之血管舒張畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。

本發明亦可有關於在人類個體中可能為實質上非免疫原性之可較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段的抗PACAP抗體及其抗原結合片段。本發明亦可關於可較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，其可適合用於治療具有與增加之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化相關之急性、陣發性或慢性病狀的人類個體。

本發明亦可包括抗PACAP抗體及其抗原結合片段，其可較佳為可包含可選自Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8或Ab9之抗PACAP抗體之至少2個互補決定區(「CDR」)、較佳包括VH CDR3及/或VL CDR3的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段。本發明之另一額外實施例可包括抗PACAP抗體及其抗原結合片段，其可較佳為可包含選自Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、 Ab1.H、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8或Ab9之抗PACAP抗體之至少3個、至少4個、至少5個或所有6個CDR的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段。在所有6個CDR可能均不存在之情況下，較佳至少可存在VH CDR3及VL CDR3。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗體片段，可包含本發明之抗體或抗體片段中之任一者的可含有可推定地改變結合親和力或免疫原性之一或多種修飾的序列變異體。

在一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段，其包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：4組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：6組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：8組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：24組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：26組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：28組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：2具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：22具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在一更特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：22之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：21之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段，包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：44組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：46組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：48組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：64組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：66組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：68組成之CDR3序列。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)包含與SEQ ID NO：42具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：62具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：42之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：62之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：41之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：61之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，可包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：164組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：166組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：168組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：184組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：186組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：188組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(.a)包含與SEQ ID NO：162具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：182具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：162之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：182之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：161之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：181之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：284組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：286組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：288組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：304組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：306組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：308組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：282具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：302具有至少80、85、90、95、96、97、 98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：282之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：302之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：281之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：301之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：364組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：366組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：368組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：384組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：386組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：388組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：362具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：382具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP 抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：362之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：382之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：361之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：381之胺基酸序列的輕鏈。

在另一特定實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：684組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：686組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：688組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：704組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：706組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：708組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：682具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：702具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：682之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：702之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：681之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：701之胺基酸序列的輕鏈。

另外，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段可包括人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其中抗體或抗體片段可選自由以下組成之群：scFv、駱駝抗體、奈米抗體、免疫球蛋白新抗原受體(「IgNAR」)、片段抗原結合(「Fab」)片段、Fab'片段、MetMab樣抗體、單價抗體片段及F(ab’)₂ 片段。在另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，可實質上缺少或完全沒有N-糖基化及/或O-糖基化。另外，本發明涵蓋本發明之一實施例，其中本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，可包含人類恆定域，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體或其片段之人類恆定域。

本發明之另一實施例係關於抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其中該等抗體或抗體片段可包含Fc區，該Fc區可已經修飾以改變效應功能、半衰期、蛋白水解或糖基化中之至少一者，例如其中該Fc區可含有可改變或消除N-糖基化及/或O-糖基化之一或多種突變。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，可以例如如可藉由ELISA、生物層干涉術(「BLI」)、KINEXA或在25℃或37℃下之表面電漿共振所測定小於或等於5×10^-5 M、10^-5 M、5×10^-6 M、10^-6 M、5×10^-7 M、10^-7 M、5×10^-8 M、10^-8 M、5×10^-9 M、10^-9 M、5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M、10^-12 M、5×10^-13 M或10^-13 M之結合親和力(KD)結合於PACAP。另外，本發明之另一實施例係有關於抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其中該等抗體或抗體片段可以小於或等於5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M或10^-12 M之結合親和力(KD)結合於PACAP。另外，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，可包括以小於或等於5×10^-4 s^-1 、10^-4 s^-1 、5×10^-5 s^-1 或10^-5 s^-1 之解離速率(k_off )結合於PACAP的抗PACAP抗體或抗體片段。

本發明之另一實施例係關於抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其中該等抗體及抗體片段可直接或間接與可偵測標記或治療劑連接。本發明之另一實施例係有關於抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其當向個體投與時可抑制或可中和由PACAP引發之至少一種生物效應。本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，可中和或可抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R或VPAC2-R中之至少一者的活化；可中和或可抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者的活化；可中和或可抑制PACAP對PAC1-R之活化；可能夠抑制或防止PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R或VPAC2-R中之至少一者；可能夠抑制或防止PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者；可能夠抑制或防止PACAP結合於PAC1-R-表現細胞、VPAC1-R-表現細胞及/或VPAC2-R-表現細胞；可抑制或阻斷PACAP誘導之cAMP產生；可當向個體投與時可降低PACAP誘導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，可以可小於約100nM之K_D ；以可小於約40nM之K_D ；以可小於約100pM之K_D ；以可小於約50pM之K_D ；以可小於約25pM之K_D ；或以可在約10pM與約100pM之間的K_D 結合於PACAP。本發明亦涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其可針對PACAP具有與VIP相比更強之結合親和力且/或其可不結合於VIP，例如其中該等抗體或其抗體片段可對PACAP具有可比該抗體或抗體片段對VIP之親和力強至少10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、10000倍、30000倍、100000倍、300000倍、1000000倍、3000000倍、10000000倍、30000000倍或更多倍的親和力。

在另一實施例中，本發明係有關於抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其可與至少一個效應子部分連接，例如其中該效應子部分可包含化學連接子。在另一實施例中，本發明係有關於抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，其可與一或多個可偵測部分連接，例如其中該等可偵測部分可包含螢光染料、酶、受質、生物發光物質、放射性物質、化學發光部分及/或其混合物。另外，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，可與一或多個功能部分連接。

本發明之另一實施例係關於可針對抗PACAP抗體或抗體片段產生之抗遺傳型抗體，其中該等抗遺傳型抗體視情況可中和可與其結合之抗PACAP抗體之一或多種生物效應。本發明之此實施例亦可關於一種使用該抗遺傳型抗體來監測個體中該抗PACAP抗體或抗體片段之活體內含量或中和個體中該抗PACAP抗體之活體內效應之方法。

在另一實施例中，本發明係有關於一種可適合用於治療、預防或診斷用途之組合物，藉此該組合物可包含治療、預防或診斷有效量之至少一種抗PACAP抗體或抗體片段或抗遺傳型抗體，例如其中該組合物可適合用於經由注射、局部、經口、吸入或經皮投與；可適合用於皮下、靜脈內、肌肉內、局部、經口、吸入、鼻內、頰內、陰道、肛門、經皮、腹膜內或鞘內投與；且/或其中該組合物可適合用於皮下靜脈內或肌肉內投與。本發明亦涵蓋本發明之一實施例，其中至少一種抗PACAP抗體或抗體片段或抗遺傳型抗體之該組合物可為凍乾的；且/或其中該組合物可包含醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑或其混合物。本發明之該組合物可進一步包含至少一種另一活性劑，例如其中另一活性劑可選自由以下組成之群：化學治療劑、止痛劑、抗炎劑、免疫抑制劑、細胞因子、抗增殖劑、止吐劑及/或細胞毒素。該組合物亦可為凍乾的、穩定的且/或可經調配用於藉由注射投與。

本發明之另一實施例涵蓋一種經分離之核酸序列，其可編碼抗PACAP抗體或抗體片段或抗遺傳型抗體，且其中該或該等經分離之核酸序列可含於載體中。另外，在本發明之一實施例中，宿主細胞可包含該或該等經分離之核酸序列，其中該宿主細胞可為哺乳動物、細菌、真菌、酵母、禽類、兩棲動物、植物或昆蟲細胞；且/或該宿主細胞可為絲狀真菌或酵母。其中該宿主細胞可為酵母細胞，該酵母可選自以下屬：阿斯黴屬(Arxiozyma )；埃克波眉酵母屬(Ascobotryozyma )；固囊酵母屬(Citeromyces )；德巴利酵母屬(Debaryomyces )；德克酵母屬(Dekkera )；假囊酵母屬(Eremothecium )；伊薩酵母屬(Issatchenkia )；哈薩克酵母屬(Kazachstania )；克魯維酵母屬(Kluyveromyces )；柯達酵母屬(Kodamaea )；路德酵母屬(Lodderomyces )；管囊酵母屬(Pachysolen )；畢赤酵母屬；糖酵母屬(Saccharomyces )；土星形酵母屬(Saturnispora )；特派斯波羅酵母屬(Tetrapisispora )；有孢圓酵母屬(Torulaspora )；擬威爾氏酵母屬(Williopsis )；及接合酵母屬(Zygosaccharomyces )；或者該酵母可為畢赤酵母屬。在本發明之一實施例中，酵母宿主細胞可選自巴斯德畢赤氏酵母、甲醇畢赤酵母及多形漢遜酵母(安格斯畢赤酵母)。

本發明亦關於一種表現抗PACAP抗體或抗體片段之方法，其可包括在可提供該抗體或抗體片段之表現的條件下培養任何但不限於本文所揭示之宿主細胞。另外，本發明係有關於該方法，其中宿主細胞可為可穩定表現且可分泌該抗體或抗體片段之酵母細胞或CHO細胞。舉例而言，該酵母細胞可為可藉由可包括以下之方法製備的多倍體酵母：(i)將含有可操作地鍵聯至啟動子及信號序列之編碼該抗體之一或多個異源聚核苷酸的至少一種表現載體引入單倍體酵母細胞中；(ii)由該第一及/或第二單倍體酵母細胞藉由交配或原生質球融合產生多倍體酵母；(iii)選擇穩定表現該抗體之多倍體酵母細胞；及(iv)由將該抗體穩定表現至培養基中之該等多倍體酵母細胞產生穩定多倍體酵母培養物；且該多倍體酵母可屬於畢赤酵母屬。另外，在另一實施例中，本發明涵蓋一種表現抗PACAP抗體或抗體片段之方法，其可包括培養宿主細胞，其中該宿主細胞可為哺乳動物細胞，例如CHO細胞。

另外，本發明係有關於一種可阻斷、抑制、阻斷或中和個體中與PACAP相關之一或多種生物效應的方法，其可包括向該個體投與治療或預防有效量之可拮抗、抑制、中和或阻斷與人類PACAP相關之至少一種生物效應的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段。本發明之另一態樣係關於一種可阻斷、抑制或中和個體中與PACAP相關之一或多種生物效應的方法，其可包括向個體投與治療或預防有效量之可拮抗、抑制、中和或阻斷與人類PACAP相關之至少一種生物效應且可不實質上與VIP相互作用(結合)的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段。

本發明之另一態樣大體上係關於一種可阻斷、抑制或中和個體中與PACAP相關之一或多種生物效應(例如血管舒縮效應)的方法，其可包括向個體投與治療或預防有效量之人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，該人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段可包含以下中之一或多者：抑制、阻斷或中和由PACAP引發之至少一種生物效應；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者的活化；抑制、阻斷或中和PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R之活化；抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者；抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之每一者；抑制PACAP結合於PAC1-R-表現細胞；抑制PACAP結合於VPAC1-R及/或VPAC2-R-表現細胞；不抑制PACAP介導之此類抗體例如經由醣胺聚醣(「GAG」)與細胞表面之結合；抑制PACAP例如經由醣胺聚醣(「GAG」)結合於細胞表面；抑制PACAP 誘導之cAMP產生；及/或當向個體投與時降低PACAP誘導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。

本發明之另一實施例係關於一種可阻斷、抑制或中和個體中可能與PACAP有關或可能由PACAP引發之血管舒張(例如硬腦膜動脈之血管舒張)的方法，其可包括向個體投與治療或預防有效量之可阻斷、抑制或中和與PACAP相關或由PACAP引發之血管舒張的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段。

本發明之另一實施例係有關於一種可治療或預防個體之頭痛或偏頭痛之發作、頻率、嚴重程度或持續時間的方法，例如其中該頭痛或偏頭痛可選自有預兆偏頭痛、無預兆偏頭痛、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、慢性偏頭痛、藥物過度使用頭痛及緊張性頭痛，該方法可包括向有需要之個體投與有效量之人類、人類化或嵌合抗人類PACAP抗體或抗體片段，該人類、人類化或嵌合抗人類PACAP抗體或抗體片段可引發以下效應中之一或多者：抑制或中和由PACAP引發之至少一種生物效應；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者的活化；中和或抑制PACAP對PAC1-R之活化；抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之至少一者；抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R中之每一者；抑制PACAP結合於PAC1-R-表現細胞；抑制PACAP結合於VPAC1-R及/或VPAC2-R-表現細胞；不抑制PACAP介導之此類抗體例如經由GAG與細胞表面之結合；抑制PACAP例如經由醣胺聚醣(「GAG」)結合於細胞表面；抑制PACAP誘導之環單磷酸腺苷(「cAMP」)產生；及/或當向個體投與時降低PACAP誘導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。

本發明之另一實施例係關於一種治療可能具有可能與增加之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及神經元活化中之至少一者有關之急性、陣發性或慢性病狀或該等病狀之組合的人類個體之方法，其可包括向有需要之個體投與有效量之拮抗性人類、人類化或嵌合抗人類PACAP抗體或抗體片段。

本發明亦係有關於本文所揭示之方法中之任一者，其可如下實現藉由投與治療或預防有效量之至少一種人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段；且/或其中該抗PACAP抗體可為人類抗體或抗體片段；且/或其中該抗PACAP抗體可為人類化抗體或抗體片段；且/或其中該抗PACAP抗體可為嵌合抗體或抗體片段。

本發明之另一實施例亦係關於一種方法，其中本發明之抗PACAP抗體或抗體片段可結合於PACAP27及/或PACAP38且可阻斷PACAP27及/或PACAP38結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R。本發明之另一實施例係有關於一種方法，其中該抗PACAP抗體或抗體片段可結合於PACAP27及/或PACAP38且可阻斷PACAP27及/或PACAP38結合於PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R中之每一者。本發明之另一實施例係關於一種方法，其中該抗PACAP抗體或抗體片段可結合於PACAP27及/或PACAP38且可阻斷PACAP27及/或PACAP38結合於PAC1-R-表現細胞。另外，本發明之該抗PACAP抗體或抗體片段可對PACAP具有可比該抗體或抗體片段對VIP之親和力強至少10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、10000倍、30000倍、100000倍、300000倍、1000000倍、3000000倍、10000000倍、30000000倍或更多倍的親和力。

本發明涵蓋一種可阻斷、抑制、阻斷或中和個體中與PACAP相關之一或多種生物效應的方法，其可包括向該個體投與治療或預防有效量之可拮抗、抑制、中和或阻斷與人類PACAP相關之至少一種生物效應的人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段，且其中該個體可能具有選自由以下組成之群的病狀：有預兆偏頭痛、無預兆偏頭痛、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、緊張性頭痛、一般頭痛、熱潮紅、畏光、慢性陣發性偏頭痛、歸因於頭部之潛在結構問題的繼發性頭痛、歸因於頸部之潛在結構問題的繼發性頭痛、顱神經痛、竇性頭痛、與竇炎相關之頭痛、過敏反應誘導之頭痛、過敏反應誘導之偏頭痛、三叉神經痛、皰疹後神經痛、幻肢痛、纖維肌痛、反射交感性營養不良、疼痛、慢性疼痛、炎性疼痛、手術後切口疼痛、手術後疼痛、外傷相關疼痛、下背疼痛、眼睛疼痛、牙齒疼痛、複合區域性疼痛症候群、癌症疼痛、原發性或轉移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質疏鬆性骨折疼痛、由灼傷引起之疼痛、痛風性關節疼痛、與鐮狀細胞危象相關之疼痛、與顳下頜病症相關之疼痛、肝硬化、肝炎、神經原性疼痛、神經性疼痛、傷害性疼痛、內臟疼痛、月經疼痛、卵巢痛、骨關節炎疼痛、類風濕性關節炎疼痛、糖尿病性神經病變、坐骨神經痛、消化不良、腸易激症候群、炎性腸道疾病、克羅恩氏病(Crohn’s disease)、迴腸炎、潰瘍性結腸炎、腎絞痛、痛經、膀胱炎、間質性膀胱炎、月經期、分娩、絕經期、胰臟炎、精神分裂症、抑鬱症、外傷後應激障礙(「PTSD」)、焦慮障礙、自體免疫糖尿病、休格倫氏症候群(Sjögren’s syndrome)、多發性硬化、膀胱過度活動症、枝氣管高反應性、氣喘、中風、枝氣管炎、枝氣管擴張、肺氣腫、慢性阻塞性肺病(「COPD」)、炎性皮炎、腺組織中之腺癌瘤、器官之胚性組織中的胚細胞瘤、上皮組織中之癌瘤、形成血細胞之組織中的白血病、淋巴組織中之淋巴瘤、骨髓中之骨髓瘤、結締組織或支持組織中之肉瘤、腎上腺癌、愛滋病相關淋巴瘤、貧血、膀胱癌、骨癌、腦癌、乳癌、類癌瘤腫瘤、子宮頸癌、化學治療、結腸癌、血細胞減少症、子宮內膜癌、食管癌、胃癌、頭癌、頸癌、肝膽癌、腎癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、霍奇金氏病(Hodgkin's disease)、非霍奇金氏病、神經系統腫瘤、口腔癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、直腸癌、皮膚癌、胃癌、睪丸癌、甲狀腺癌、尿道癌、骨髓癌、多發性骨髓瘤、轉移到骨骼之腫瘤、浸潤神經及空腔性臟器之腫瘤、神經結構附近之腫瘤、尋常痤瘡、異位性皮炎、蕁麻疹、瘢痕瘤、肥厚性瘢痕及紅斑痤瘡、內皮功能障礙、雷諾氏症候群(Raynaud's syndrome)、冠心病(「CHD」)、冠狀動脈疾病(「CAD」)、心臟衰竭、周圍動脈疾病(「PAD」)、糖尿病、肺動脈高血壓(「PH」)、結締組織病症、過敏性皮炎、銀屑病、瘙癢、神經原性皮膚發紅、紅斑、結節病、休克、敗血病、鴉片劑戒斷症候群、嗎啡耐受及癲癇症。另外，該個體可能具有選自由偏頭痛、頭痛及疼痛相關疾病或病狀組成之群的病狀，其中該頭痛或偏頭痛可選自由以下組成之群：有預兆偏頭痛、無預兆偏頭痛、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、慢性偏頭痛、藥物過度使用頭痛及緊張性頭痛。另外，該個體可能具有與畏光相關之眼部病症，其可選自由以下組成之群：色盲、無虹膜、由抗膽鹼能藥物引起之畏光、無晶狀體、牛眼症、白內障、錐體營養不良、先天性眼睛異常、病毒性結膜炎、角膜擦傷、角膜營養不良、角膜潰瘍、角膜上皮破壞、晶狀體異位、眼內炎、由疾病引起之眼外傷、由損傷引起之眼外傷、由感染引起之眼外傷、瞼板腺囊腫、鞏膜表層炎、青光眼、圓錐形角膜、視神經發育不全、水眼症、先天性青光眼虹膜炎、視神經炎、色素播散症候群、瞳孔擴張、視網膜脫離、角膜瘢痕形成、鞏膜瘢痕形成及葡萄膜炎。另外，該個體可能具有與畏光相關之神經系統相關病狀或神經病狀，其可選自由以下組成之群：自閉症譜系病症、查理氏畸形、誦讀困難、腦炎、腦膜炎、蛛網膜下出血、顱後窩腫瘤、強直性脊柱炎、白化病、核黃素缺乏症、苯并二氮呯類、化學治療、切昆貢亞熱、胱胺酸病、埃-當二氏症候群、宿醉、流感、傳染性單核細胞增多症、鎂缺乏症、汞中毒、偏頭痛、狂犬病及II型酪胺酸血症。另外，該個體可具有可選自由以下組成之群的畏光相關病症：有預兆偏頭痛、無預兆偏頭痛、虹膜炎、葡萄膜炎、腦膜炎、抑鬱症、雙極性障礙、叢集性頭痛或另一三叉神經自主性頭痛(「TAC」)或瞼痙攣、抑鬱症、廣場恐怖症及雙極性障礙。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中該方法與可為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段的抗體或抗體片段有關；且/或其中該抗體或抗體片段可為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或抗體片段；且/或其中該抗體或抗體片段可為可與可選自Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8或Ab9之抗PACAP抗體包含相同之CDR的抗PACAP抗體或抗體片段。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體或其抗原結合片段，其包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：4組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：6組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：8組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：24組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：26組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：28組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與 SEQ ID NO：2具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：22具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在一更特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：22之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：21之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：44組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：46組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：48組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：64組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：66組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：68組成之CDR3序列。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)包含與SEQ ID NO：42具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：62具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：42之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：62之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：41之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：61之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，可包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：84組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：86組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：88組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：104組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：106組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：108 組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：82具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：102具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：82之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：102之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：81之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：101之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，可包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：124組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：126組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：128組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：144組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：146組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：148組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：122具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：142具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一特定實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：122之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：142之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：121之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：141之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段，較佳人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，可包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：164組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：166組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：168組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：184組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：186組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：188組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：162具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：182具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：162之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：182之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：161之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：181之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：204組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：206組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：208組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：224組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：226組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：228組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：202具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：222具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：202之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：222之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：201之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：221之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：244組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：246組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO： 248組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：264組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：266組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：268組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)包含與SEQ ID NO：242具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)包含與SEQ ID NO：262具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：242之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：262之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：241之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：261之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：284組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：286組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：288組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：304組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：306組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：308組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：282具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：302具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：282之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：302之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：281之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：301之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：324組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：326組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：328組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：344組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：346組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：348組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：322具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：342具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：322之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：342之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：321之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：341之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：364組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：366組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：368組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：384組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：386組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：388組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：362具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：382具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：362之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：382之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：361之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：381之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP 抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：484組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：486組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：488組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：504組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：506組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：508組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：482具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：502具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：482之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：502之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：481之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：501之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：524組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：526組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：528組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：544組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：546組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：548組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：522具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：542具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：522之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：542之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：521之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：541之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：564組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：566組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：568組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：584組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：586組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：588組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：562具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：582具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：562之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：582之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：561之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：581之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：604組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：606組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：608組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：624組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：626組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：628組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：602具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：622具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：602之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：622之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：601之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：621之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：644組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：646組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：648組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：664組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：666組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：668組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：642具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：662具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：642之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：662之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：641之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：661之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：684組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：686組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：688組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：704組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：706組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：708組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：682具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：702具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：682之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：702之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：681之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：701之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：724組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：726組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：728組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：744組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：746組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：748組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：722具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：742具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：722之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：742之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：721之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：741之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：764組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：766組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：768組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：784組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：786組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：788組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：762具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：782具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：762之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：782之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：761之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：781之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中根據本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段較佳為人類、人類化或嵌合抗PACAP抗體及其抗原結合片段，且包含(a)可變重鏈，其包含由SEQ ID NO：804組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：806組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：808組成之CDR3序列；及/或(b)可變輕鏈，其包含由SEQ ID NO：824組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：826組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：828組成之CDR3序列。或者，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可含有包含與SEQ ID NO：802具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變重鏈，及/或包含與SEQ ID NO：822具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列的可變輕鏈。在另一實施例中，抗PACAP抗體及其抗原結合片段包含(a)具有SEQ ID NO：802之胺基酸序列的可變重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：822之胺基酸序列的可變輕鏈。更特定而言，抗PACAP抗體及其抗原結合片段可包含(a)具有SEQ ID NO：801之胺基酸序列的重鏈，及/或(b)具有SEQ ID NO：821之胺基酸序列的輕鏈。

本發明亦係關於本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可選自由以下組成之群：scFv、駱駝抗體、奈米抗體、免疫球蛋白新抗原受體(「IgNAR」)、片段抗原結合(「Fab」)片段、Fab'片段、MetMab樣抗體、單價抗體片段及F(ab’)₂ 片段。另外，本發明係關於本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可實質上缺少或完全沒有N-糖基化及/或O-糖基化。另外，本發明係有關於本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可包含人類恆定域，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體之人類恆定域。

本發明之另一態樣係有關於本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可包含Fc區，該Fc區可已經修飾以改變效應功能、半衰期、蛋白水解或糖基化中之至少一者，例如Fc區可含有改變或消除N-糖基化及/或O-糖基化之一或多種突變。

本發明之另一態樣係關於本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可以小於或等於5×10^-5 M、10^-5 M、5×10^-6 M、10^-6 M、5×10^-7 M、10^-7 M、5×10^-8 M、10^-8 M、5×10^-9 M、10^-9 M、5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M、10^-12 M、5×10^-13 M或10^-13 M之結合親和力(K_D )結合於PACAP。另外，本文所揭示之方法中之任一者的該抗PACAP抗體或抗體片段可以小於或等於5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M或10^-12 M之結合親和力(K_D )結合於PACAP。本發明之另一實施例係有關於本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可以小於或等於5×10^-4 s^-1 、10^-4 s^-1 、5×10^-5 s^-1 或10^-5 s^-1 之解離速率(k_off )結合於PACAP。

此外，本發明涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可直接或間接與可偵測標記或治療劑連接。另外，本發明係關於本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可以可小於約100nM、小於約40nM、小於約1nM、小於約100pM、小於約50pM或小於約25pM之K_D 結合於PACAP。另外，本發明涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中抗PACAP抗體或抗體片段可以可在約10pM與約100pM之間的KD結合於PACAP。本發明進一步係有關於本文所揭示之方法中之任一者，其中該方法可進一步包括分開投與或共投與另一藥劑，例如其中另一試劑可選自化學治療劑、止痛劑、抗炎劑、免疫抑制劑、細胞因子、抗增殖劑、止吐劑或細胞毒素。另外，本發明涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中另一治療劑可為止痛劑，且該止痛劑可為非類固醇消炎藥(「NSAID」)、類阿片止痛劑、另一抗體或非抗體生物劑，且另外其中該另一抗體可為抗NGF抗體或抗體片段；且/或可為抗降血鈣素基因相關肽(「CGRP」)抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段。本發明亦係有關於本文所揭示之方法中之任一者，其中該NSAID可為環氧合酶1及/或環氧合酶2抑制劑；且/或其中該NSAID可選自由以下組成之群：(1)丙酸衍生物，包括布洛芬、萘普生、消痛靈、雙氯芬酸及酮洛芬；(2)乙酸衍生物，包括托美汀及舒林酸；(3)滅酸衍生物，包括甲滅酸及甲氯滅酸；(4)聯苯甲酸衍生物，包括二氟尼柳及氟苯柳；及(5)昔康類，包括吡羅昔康、舒多昔康及伊索昔康。本發明進一步係關於本文所揭示之方法中之任一者，其中該類阿片止痛劑可選自由以下組成之群：可待因、二氫可待因、二乙醯嗎啡、氫可酮、氫嗎啡酮、左啡諾、氧嗎啡酮、阿芬太尼、丁丙諾啡、布托啡諾、芬太尼、舒芬太尼、嘜啶、美沙酮、納布啡、丙氧芬、噴他佐辛及其醫藥學上可接受之鹽；且/或其中類阿片止痛劑可為嗎啡或嗎啡衍生物或其醫藥學上可接受之鹽；且/或其中類阿片止痛劑及抗PACAP抗體或抗原結合片段之組合投與與單獨投與類阿片止痛劑或抗PACAP抗體或抗原結合片段相比可增加止痛效應。

此外，本發明係關於本文所揭示之方法中之任一者，其中本文所揭示之方法中之任一者的個體可能先前已接受抗CGRP抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段；且/或其中該個體可為可能未適當地對抗CGRP抗體及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段治療作出反應之偏頭痛患者；且/或其中該個體可能先前已接受至少一種抗CGRP抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段投與，從而可能已引發對抗CGRP抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段之免疫反應。

此外，本發明涵蓋本文所揭示之方法中之任一者，其中本發明之抗體或其抗原結合片段可改善或治療有需要之個體的一或多種與PACAP表現相關之病狀，該病狀可選自由以下組成之群：有預兆偏頭痛、無預兆偏頭痛、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、緊張性頭痛、一般頭痛、熱潮紅、畏光、慢性陣發性偏頭痛、歸因於頭部之潛在結構問題的繼發性頭痛、歸因於頸部之潛在結構問題的繼發性頭痛、顱神經痛、竇性頭痛、與竇炎相關之頭痛、過敏反應誘導之頭痛、過敏反應誘導之偏頭痛、三叉神經痛、皰疹後神經痛、幻肢痛、纖維肌痛、反射交感性營養不良、疼痛、慢性疼痛、炎性疼痛、手術後切口疼痛、手術後疼痛、外傷相關疼痛、下背疼痛、眼睛疼痛、牙齒疼痛、複合區域性疼痛症候群、癌症疼痛、原發性或轉移性骨癌疼痛、骨折疼痛、骨質疏鬆性骨折疼痛、由灼傷引起之疼痛、痛風性關節疼痛、與鐮狀細胞危象相關之疼痛、與顳下頜病症相關之疼痛、肝硬化、肝炎、神經原性疼痛、神經性疼痛、傷害性疼痛、內臟疼痛、月經疼痛、卵巢痛、骨關節炎疼痛、類風濕性關節炎疼痛、糖尿病性神經病變、坐骨神經痛、消化不良、腸易激症候群、炎性腸道疾病、克羅恩氏病、迴腸炎、潰瘍性結腸炎、腎絞痛、痛經、膀胱炎、間質性膀胱炎、月經期、分娩、絕經期、胰臟炎、精神分裂症、抑鬱症、外傷後應激障礙、焦慮障礙、自體免疫糖尿病、休格倫氏症候群、多發性硬化、膀胱過度活動症、枝氣管高反應性、氣喘、中風、枝氣管炎、枝氣管擴張、肺氣腫、慢性阻塞性肺病(「COPD」)、炎性皮炎、腺組織中之腺癌瘤、器官之胚性組織中的胚細胞瘤、上皮組織中之癌瘤、形成血細胞之組織中的白血病、淋巴組織中之淋巴瘤、骨髓中之骨髓瘤、結締組織或支持組織中之肉瘤、腎上腺癌、愛滋病相關淋巴瘤、貧血、膀胱癌、骨癌、腦癌、乳癌、類癌瘤腫瘤、子宮頸癌、化學治療、結腸癌、血細胞減少症、子宮內膜癌、食管癌、胃癌、頭癌、頸癌、肝膽癌、腎癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏病、神經系統腫瘤、口腔癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、直腸癌、皮膚癌、胃癌、睪丸癌、甲狀腺癌、尿道癌、骨髓癌、多發性骨髓瘤、轉移到骨骼之腫瘤、浸潤神經及空腔性臟器之腫瘤、神經結構附近之腫瘤、尋常痤瘡、異位性皮炎、蕁麻疹、瘢痕瘤、肥厚性瘢痕及紅斑痤瘡、內皮功能障礙、雷諾氏症候群、冠心病(「CHD」)、冠狀動脈疾病(「CAD」)、心臟衰竭、周圍動脈疾病(「PAD」)、糖尿病、肺動脈高血壓(「PH」)、結締組織病症、過敏性皮炎、銀屑病、瘙癢、神經原性皮膚發紅、紅斑、結節病、休克、敗血病、鴉片劑戒斷症候群、嗎啡耐受及癲癇症。

在本發明之另一實施例中，如本文所揭示之抗PACAP抗體或抗體片段或方法可抑制PACAP對血管舒張之影響；及/或可抑制PACAP對cAMP產生之影響；及/或可抑制PACAP對PLC之影響，從而導致降低之Ca++及PLD含量；及/或可抑制PACAP對腺苷酸環化酶活性之影響；及/或可抑制PACAP對其結合於PAC1-R、VPAC1-R或VPAC2-R中之任一者或全部之影響；及/或可抑制PACAP對神經發育之影響；可抑制PACAP對神經保護之影響；及/或可抑制PACAP對神經調節之影響；及/或可抑制PACAP對神經原性炎症之影響；及/或可抑制PACAP對傷害感受之影響；及/或可調節PACAP例如經由至少一種GAG與細胞表面結合之相互作用，例如其中至少一種該GAG可包含肝素、軟骨素、角蛋白及透明質酸中之一或多者，且另外其中該抗體或抗體片段或方法可阻斷或抑制PACAP38及/或PACAP27之非受體依賴性細胞吸收且/或可抑制或可阻斷細胞對PACAP38及/或PACAP27之GAG依賴性吸收。

本發明之另一實施例係關於治療或預防之方法，其可包括投與本發明之抗PACAP抗體或抗體片段。另外，本發明係有關於一種可用於人類治療之組合物，其可含有本發明之抗PACAP抗體或抗體片段。該組合物可含有另一活性劑，例如其中另一藥劑可選自化學治療劑、止痛劑、抗炎劑、免疫抑制劑、細胞因子、抗增殖劑、止吐劑及/或細胞毒素。其中該另一藥劑可為止痛劑，該止痛劑可為NSAID、類阿片止痛劑、另一抗體或非抗體生物劑。當該另一試劑可為止痛劑，該止痛劑可為另一抗體時，另一抗體可為抗NGF抗體或抗體片段，且/或其他抗體可為抗降血鈣素基因相關肽(「CGRP」)抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段。其中該另一藥劑可為NSAID，該NSAID可為環氧合酶1及/或環氧合酶2抑制劑；及/或該NSAID可選自由以下組成之群：(1)丙酸衍生物，包括布洛芬、萘普生、消痛靈、雙氯芬酸及酮洛芬；(2)乙酸衍生物，包括托美汀及舒林酸；(3)滅酸衍生物，包括甲滅酸及甲氯滅酸；(4)聯苯甲酸衍生物，包括二氟尼柳及氟苯柳；及(5)昔康類，包括吡羅昔康、舒多昔康及伊索昔康。其中該另一藥劑可為類阿片止痛劑，該類阿片止痛劑可選自由以下組成之群：可待因、二氫可待因、二乙醯嗎啡、氫可酮、氫嗎啡酮、左啡諾、氧嗎啡酮、阿芬太尼、丁丙諾啡、布托啡諾、芬太尼、舒芬太尼、嘜啶、美沙酮、納布啡、丙氧芬、噴他佐辛及其醫藥學上可接受之鹽；且/或該類阿片止痛劑可為嗎啡或嗎啡衍生物或其醫藥學上可接受之鹽；且/或該類阿片止痛劑及根據本發明之抗PACAP抗體或抗原結合片段可與單獨投與之類阿片止痛劑或抗PACAP抗體或抗原結合片段相比增加止痛效應。

在本發明之另一實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體或片段或組合物(其中抗PACAP抗體或片段及另一活性劑可彼此組合或可以組合形式投與)可對PACAP相關效應(例如偏頭痛)之治療或預防或對疼痛引發協同或相加作用。本發明之另一實施例另外涵蓋根據本發明之抗PACAP 抗體或片段或組合物，其可用於治療或診斷，例如偏頭痛治療或預防。本發明之另一實施例係關於根據本發明之抗PACAP抗體或片段或組合物，其可用於治療以下中之一或多者：熱潮紅、有預兆或無預兆偏頭痛、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、慢性偏頭痛、藥物過度使用頭痛或緊張性頭痛。

本發明之另一實施例係有關於根據本發明之抗PACAP抗體或片段或組合物，其可用於改善、控制、降低例如以下頭痛之發病率或延遲其發展或進展：有預兆或無預兆偏頭痛、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、慢性偏頭痛、藥物過度使用頭痛或緊張性頭痛。在本發明之一實施例中，用途可為用於可能先前已接受或可能正在接受抗CGRP抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段之個體，且另外其中該個體可為可能未適當地對抗CGRP抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段治療作出反應之偏頭痛患者；且/或其中該個體可能先前已接受至少一種抗CGRP抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段投與，從而可能已引發對抗CGRP抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段之免疫反應。

圖1A-1B 提供藉由FR及CDR比對之抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23(分別為SEQ ID NO：2；42；82；682；642；482；722；522；762；802；562；602；122；162；202；242；282；322；362；882；及922)之可變重鏈區的多肽序列。

圖2A-2B 提供藉由FR及CDR比對之抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23(分別為SEQ ID NO：22；62；102；702；662；502；742；542；782；822；582；622；142；182；222；262；302；342；382；902；及942)之可變輕鏈區的多肽序列。

圖3A-3F 提供藉由FR及CDR比對之編碼抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、 Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23(分別為SEQ ID NO：12；52；92；692；652；492；732；532；772；812；572；612；132；172；212；252；292；332；372；892；及932)之可變重鏈區的聚核苷酸序列。

圖4A-4E 提供藉由FR及CDR比對之編碼抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23(分別為SEQ ID NO：32；72；112；712；672；512；752；552；792；832；592；632；152；192；232；272；312；352；392；912；及952)之可變輕鏈區的聚核苷酸序列。

圖5 提供抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23之重鏈的包括可變區及CDR之某些抗體重鏈蛋白質序列特徵的多肽序列座標。

圖6 提供抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23之重鏈的包括恆定區及構架區FR之某些抗體重鏈蛋白質序列特徵的多肽序列座標。

圖7 提供抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23之輕鏈的包括可變區及CDR之某些抗體輕鏈蛋白質序列特徵之多肽序列座標。

圖8 提供抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23之輕鏈的包括恆定區及構架區FR之某些抗體輕鏈蛋白質序列特徵的多肽序列座標。

圖9 提供抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23之重鏈的包括可變區及CDR之某些抗體重鏈DNA序列特徵之聚核苷酸序列座標。

圖10 提供抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23之重鏈的包括恆定區及FR之某些抗體重鏈DNA序列特徵之聚核苷酸序列座標。

圖11 提供抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23之輕鏈的包括可變區及CDR之某些抗體輕鏈DNA序列特徵之聚核苷酸序列座標。

圖12 提供抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22及Ab23之輕鏈的包括恆定區及FR之某些抗體輕鏈DNA序列特徵之聚核苷酸序列座標。

圖13A-V 提供在下文之實例1中之方案之後分別所獲得的Ab1(圖13A )、Ab2(圖13B )、Ab3(圖13C )、Ab4(圖13D )、Ab5(圖13E )、Ab6(圖13F )、Ab7(圖13G )、Ab8(圖13H )、Ab9(圖13I )、Ab10(圖13J )、Ab11(圖13K )、Ab12(圖13L )、Ab13(圖13M )、Ab14(圖13N )、Ab15(圖13O )、Ab16(圖13P )、Ab17(圖13Q )、Ab18(圖13R )、Ab19(圖13S )、Ab1.H、(圖13T )、Ab22(圖13U )及Ab23(圖13V )之代表性競爭性結合資料。

圖14A-BB 提供顯示在下文之實例5中之方案之後所獲得的Ab1介導(圖14A )、Ab2介導(圖14B )、Ab3介導(圖14C )、Ab4介導(圖14D )、Ab5介導(圖14E )、Ab6介導(圖14F )、Ab7介導(圖14G )、Ab8介導(圖14H )、Ab9介導(圖14I )、Ab10介導(圖14J )、Ab11介導(圖14K )、Ab12介導(圖14L )、Ab13介導(圖14M )、Ab14介導(圖14N )、Ab15介導(圖14O )、Ab16介導(圖14P )、Ab17介導(圖14Q )、Ab18介導(圖14R )、Ab19介導(圖14S )、Ab1.H介導(圖14T )、Ab10.H介導(圖14U )、Ab22介導(圖14V )、Ab23介導(圖14W )、Ab3.H介導(圖14X )、Ab4.H介導(圖14Y )、Ab5.H介導(圖14Z )、Ab9.H介導(圖14AA )及Ab12.H介導(圖14BB )之對PACAP38結合於PAC1-R-表現PC-12細胞之抑制作用的代表性資料。

圖15A-J 提供顯示在下文之實例6中之方案之後所獲得的在PACAP38存在下Ab1.H(圖15A )、Ab3.H(圖15B )、Ab4.H(圖15C )、Ab5.H(圖15D )、Ab9.H(圖15E )、Ab12.H(圖15F )、Ab10(圖15G )、Ab10.H(圖15H )、Ab22(圖15I )及Ab23(圖15J )結合於PAC1-R-表現PC-12細胞的代表性資料。

圖16A-BB 提供顯示在下文之實例1中之方案之後所獲得的Ab1介導(圖16A )、Ab2介導(圖16B )、Ab3介導(圖16C )、Ab4介導(圖16D )、Ab5介導(圖16E )、Ab6介導(圖16F )、Ab7介導(圖16G )、Ab8介導(圖16H )、Ab9介導(圖16I )、Ab10介導(圖16J )、Ab11介導(圖16K )、Ab12介導(圖16L )、Ab13介導(圖16M )、Ab14介導(圖16N )、Ab15介導(圖16O )、Ab16介導(圖16P )、Ab17介導(圖16Q )、Ab18介導(圖16R )、Ab19介導(圖16S )、Ab1.H介導(圖16T )、Ab10.H介導(圖16U )、Ab22介導(圖16V )、Ab23介導(圖16W )、Ab3.H介導(圖16X )、Ab4.H介導(圖16Y )、Ab5.H介導(圖16Z )、Ab9.H介導(圖16AA )及Ab12.H介導(圖16BB )之對PACAP38驅動之經由PAC1-R-表現PC-12細胞產生cAMP之抑制作用的代表性資料。

圖17A-BB 提供顯示在下文之實例1中之方案之後所獲得的Ab1介導(圖17A )、Ab2介導(圖17B )、Ab3介導(圖17C )、Ab4介導(圖17D )、Ab5介導(圖17E )、Ab6介導(圖17F )、Ab7介導(圖17G )、Ab8介導(圖17H )、Ab9介導(圖17I )、Ab10介導(圖17J )、Ab11介導(圖17K )、Ab12介導(圖17L )、Ab13介導(圖17M )、Ab14介導(圖17N )、Ab15介導(圖17O )、Ab16介導(圖17P )、Ab17介導(圖17Q )、Ab18介導(圖17 R)、Ab19介導(圖17S )、Ab1.H介導(圖17T )、Ab10.H介導(圖17U ),Ab22介導(圖17V )、Ab23介導(圖17W )、Ab3.H介導(圖17X )、Ab4.H介導(圖17Y )、Ab5.H介導(圖17Z )、Ab9.H介導(圖17AA )及Ab12.H介導(圖17BB )之對PACAP27驅動之經由PAC1-R-表現PC-12細胞產生cAMP之抑制作用的代表性資料。

圖18A-BB 提供顯示在下文之實例3中之方案之後所獲得的Ab1介導(圖18A )、Ab2介導(圖18B )、Ab3介導(圖18C )、Ab4介導(圖18D )、Ab5介導(圖18E )、Ab6介導(圖18F )、Ab7介導(圖18G )、Ab8介導(圖18H )、Ab9介導(圖18I )、Ab10介導(圖18J )、Ab11介導(圖18K )、Ab12介導(圖 18L )、Ab13介導(圖18M )、Ab14介導(圖18N )、Ab15介導(圖18O )、Ab16介導(圖18P )、Ab17介導(圖18Q )、Ab18介導(圖18R )、Ab19介導(圖18S )、Ab1.H介導(圖18T )、Ab10.H介導(圖18U )、Ab22介導(圖18V )、Ab23介導(圖18W )、Ab3.H介導(圖18X )、Ab4.H介導(圖18Y )、Ab5.H介導(圖18Z )、Ab9.H介導(圖18AA )及Ab12.H介導(圖18BB )之對PACAP38驅動之經由VPAC1-R-表現CHO-K1細胞產生cAMP之抑制作用的代表性資料。

圖19A-BB 提供顯示在下文之實例4中之方案之後所獲得的Ab1介導(圖19A )、Ab2介導(圖19B )、Ab3介導(圖19C )、Ab4介導(圖19D )、Ab5介導(圖19E )、Ab6介導(圖19F )、Ab7介導(圖19G )、Ab8介導(圖19H )、Ab9介導(圖19I )、Ab10介導(圖19J )、Ab11介導(圖19K )、Ab12介導(圖19L )、Ab13介導(圖19M )、Ab14介導(圖19N )、Ab15介導(圖19O )、Ab16介導(圖19P )、Ab17介導(圖19Q )、Ab18介導(圖19R )、Ab19介導(圖19S )、Ab1.H介導(圖19 T)、Ab10.H介導(圖19U )、Ab22介導(圖19V )、Ab23介導(圖19W )、Ab3.H介導(圖19X )、Ab4.H介導(圖19Y )、Ab5.H介導(圖19Z )、Ab9.H介導(圖19AA )及Ab12.H介導(圖19BB )之對PACAP38驅動之經由VPAC2-R-表現CHO-K1細胞產生cAMP之抑制作用的代表性資料。

圖20 提供顯示在下文之實例7中之方案之後所獲得的在兔模型中相對於媒劑對照藉由在PACAP38投與之後投與Ab1.H所獲得之血管舒張降低的代表性資料。

圖21 提供顯示在下文之實例8中之方案之後所獲得的在兔模型中相對於同型抗體對照藉由在PACAP38投與之後投與Ab10所獲得之血管舒張降低的代表性資料。

圖22A 提供在下文之實例9中之方案之後所獲得的經標記Ab1及未經標記Ab10之抗原決定基分箱資料。

圖22B 提供在下文之實例9中之方案之後所獲得的未標記Ab1及經標記Ab10之抗原決定基分箱資料。

圖23 提供顯示在下文之實例11中之方案之後所獲得的在齧齒動物畏光模型中投與PACAP及抗PACAP抗體Ab1.H之活體內效應的代表性資料，該模型偵測與適當對照動物相比經處理動物(小鼠)每5分鐘時間間隔在光中所消耗之時間量。

圖24 提供顯示在下文之實例11中之方案之後所獲得的在齧齒動物畏光動物模型中投與PACAP及抗PACAP抗體Ab1.H之活體內效應的代表性資料，該模型偵測與適當對照動物相比經處理動物(小鼠)在光中所消耗之平均時間量。

圖25 提供顯示在下文之實例11中之方案之後所獲得的在齧齒動物畏光模型中投與PACAP及抗PACAP抗體Ab10.H之活體內效應的代表性資料，該模型偵測與適當對照動物相比經處理動物(小鼠)在光中所消耗之時間量。

圖26A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab1結合於PACAP丙胺酸掃描突變體5A、6A、8A、10A及13A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖26B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab1結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-4A、7A、9A、11A、12A及14A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖27A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab2結合於PACAP丙胺酸掃描突變體5A、6A、8A、9A、10A、13A及14A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖27B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab2結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-4A、7A、11A、12A及15A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖28A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗 PACAP抗體Ab13結合於PACAP丙胺酸掃描突變體6A、8A、9A、10A及13A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖28B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab13結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-5A、7A、11A、12A及14A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的結合動力學量測的結果。

圖29A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab14結合於PACAP丙胺酸掃描突變體5A、6A、8A、9A、10A及13A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖29B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab14結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-4A、7A、11A、12A及14A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖30A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab15結合於PACAP丙胺酸掃描突變體5A、6A、8A、9A、10A、12A、13A及14A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖30B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab15結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-4A、7A、11A及15A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖31A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab16結合於PACAP丙胺酸掃描突變體6A、8A、10A及13A 以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖31B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab16結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-5A、7A、9A、11A、12A及14A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖32A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab17結合於PACAP丙胺酸掃描突變體5A、6A、8A、10A及13A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖32B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab17結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-4A、7A、9A、11A、12A及14A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖33A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab18結合於PACAP丙胺酸掃描突變體5A、6A、8A、9A、10A、12A及13A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖33B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab18結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-4A、7A、11A及14A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖34A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab19結合於PACAP丙胺酸掃描突變體4A、5A、6A、8A、9A、10A、12A、13A、14A及17A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38)) (陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖34B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab19結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-3A、7A、11A、15A、16A及18V-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖35A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab5結合於PACAP丙胺酸掃描突變體3A、4A、5A、6A、7A、10A、13A及14A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖35B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab5結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A、2A、8A、9A、11A、12A及15A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖36A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab7結合於PACAP丙胺酸掃描突變體6A、8A、10A、11A、13A、14A及18V以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖36B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab7結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-5A、7A、9A、12A、15A-17A及19A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖37A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab11結合於PACAP丙胺酸掃描突變體6A、8A、10A、11A、 13A、14A、18V及22A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖37B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab11結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-5A、7A、9A、12A、15A-17A、19A-21A及23A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖38A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab12結合於PACAP丙胺酸掃描突變體6A、8A、10A、11A、13A、14A及18V以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖38B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab12結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-5A、7A、9A、12A、15A-17A及19A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖39A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab4結合於PACAP丙胺酸掃描突變體8A、9A、10A、13A、14A、17A及18V以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖39B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab4結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-7A、11A、12A、15A、16A及19A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖40A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗 PACAP抗體Ab3結合於PACAP丙胺酸掃描突變體8A、9A、10A、11A、12A、13A、14A、17A及21A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖40B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab3結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-7A、15A、16A、18A-20A及22A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖41A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab6結合於PACAP丙胺酸掃描突變體5A、6A、9A、10A、12A、13A、14A及17A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖41B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab6結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-4A、7A、8A、11A、15A、16A及18V-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖42A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab8結合於PACAP丙胺酸掃描突變體7A、10A、13A及14A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖42B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab8結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-6A、8A、9A、11A、12A及15A-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖43A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗 PACAP抗體Ab9結合於PACAP丙胺酸掃描突變體7A、10A、12A、13A、14A及17A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖43B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab9結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-6A、8A、9A、11A、15A、16A及18V-38A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖44A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab22結合於PACAP丙胺酸掃描突變體22A、23A、27A、28A及31A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖44B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab22結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-21A、24V-26A、29A及30A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖45A 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab23結合於PACAP丙胺酸掃描突變體12A、20A、23A、24V、26A、27A及28A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖45B 呈現在下文之實例12中之方案之後所獲得的抗PACAP抗體Ab23結合於PACAP丙胺酸掃描突變體1A-11A、13A-19A、21A、22A、25V及29A-31A以及包括野生型PACAP(經標記huPACAP(1-38))(陽性對照)及1x運行緩衝液(陰性對照)之對照的基於表面電漿共振之結合動力學量測的結果。

圖46A 呈現PACAP丙胺酸掃描突變體對抗體結合之影響的概述。在圖46A 之第1欄中，沿VIP一級序列由胺基酸殘基1-27按其空間排列順序列出了VIP殘基。在圖46A 之第2欄中，沿PACAP一級序列由胺基酸殘基1-27按其空間排列順序列出了PACAP殘基。圖46A 之第3欄提供VIP與PACAP之按沿其一級多肽序列空間排列之對應於1-27之各殘基的編號。在圖46A 之第4-12欄中，列出了在丙胺酸掃描研究期間所測試之抗體Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18及Ab19及經測定有助於PACAP/抗體結合之PACAP殘基(諸如5A、6A)。

圖46B 呈現PACAP丙胺酸掃描突變體對抗體結合之影響的概述。在圖46B 之第1欄中，列出了VIP殘基28。在圖46B 之第2欄中，沿PACAP一級序列由胺基酸殘基28-38按其空間排列順序列出了PACAP殘基。圖46B 之第3欄提供按沿VIP及PACAP之一級多肽序列的空間排列對應於VIP之殘基28及PACAP之殘基28-38中之每一者的編號。在圖46B 之第4-12欄中，列出了在丙胺酸掃描研究期間所測試之抗體Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18及Ab19及經測定有助於PACAP/抗體結合之PACAP殘基(諸如5A、6A)。

圖47A 呈現PACAP丙胺酸掃描突變體對抗體結合之影響的概述。在圖47A 之第1欄中，沿VIP一級序列由胺基酸殘基1-27按其空間排列順序列出了VIP殘基。在圖47A 之第2欄中，沿PACAP一級序列由胺基酸殘基1-27按其空間排列順序列出了PACAP殘基。圖47A 之第3欄提供VIP與PACAP之按沿其一級多肽序列空間排列之對應於1-27之各殘基的編號。在圖47A 之第4-12欄中，列出了在丙胺酸掃描研究期間所測試之抗體Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8、Ab9、Ab22及Ab23及經測定有助於PACAP/抗體結合之PACAP殘基(諸如5A、6A)。

圖47B 呈現PACAP丙胺酸掃描突變體對抗體結合之影響的概述。在圖47B 之第1欄中，列出了VIP殘基28。在圖47B 之第2欄中，沿PACAP一級序列由胺基酸殘基28-38按其空間排列順序列出了PACAP殘基。圖47B 之第3欄提供按沿VIP及PACAP之一級多肽序列的空間排列對應於VIP之殘基28及PACAP之殘基28-38中之每一者的編號。在圖 47B 之第4-12欄中，列出了在丙胺酸掃描研究期間所測試之抗體Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8、Ab9、Ab22及Ab23及經測定有助於PACAP/抗體結合之PACAP殘基(諸如5A、6A)。

定義

應瞭解，本發明不限於所描述之特定方法、方案、細胞株、動物物種或屬及試劑，因此可變化。亦應瞭解，本文所用之術語係僅出於描述特定實施例之目的，且不欲限制本發明之範疇，本發明之範疇將僅受隨附申請專利範圍限制。除非上下文另外明確指示，否則如本文所用之單數形式「一種(或一個)(a/an)」及「該」包括複數指示物。因此，舉例而言，提及「一個細胞」包括多個此類細胞且提及「該蛋白質」包括提及一或多種蛋白質及其熟習此項技術者已知之等效物等。除非明確指明，否則本文所用之所有技術及科學術語均具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所理解相同之含義。

垂體腺苷酸環化酶活化多肽(PACAP)： 如本文所用，除非另外說明，否則PACAP包括任何哺乳動物形式之PACAP，且特定而言涵蓋以下智人PACAP27及智人PACAP38胺基酸序列：PACAP38：HSDGIFTDSYSRYRKQMAVKKYLAAVLGKRYKQRVKNK(SEQ ID NO：1241)，其中C端離胺酸經醯胺化；並且涵蓋此序列之任何突變體、剪接變異體、同種型、異種同源物、同源物及變異體。

PACAP27：HSDGIFTDSYSRYRKQMAVKKYLAAVL(SEQ ID NO：1242)，其中C端白胺酸經醯胺化；並且涵蓋此序列之任何突變體、剪接變異體、同種型、異種同源物、同源物及變異體。

「畏光」在本文中係指對光之視覺知覺的異常不耐性之症狀，有時另外藉由異常或不合理的懼怕光或藉由眼睛存在實際物理光敏感性來定義。在本發明中，畏光包括特定而言與偏頭痛、叢集性頭痛及可觸發偏頭痛或叢集性頭痛之光厭惡行為的其他神經原因相關之光厭惡。患者/ 個體可因與眼睛或神經系統有關之若干不同醫學病狀而產生畏光。畏光可由增加之對光之反應引起，其開始於目視系統中之任何步驟，諸如：(i)過多光進入眼睛，(ii)若眼睛損傷(諸如在角膜擦傷及視網膜損傷之情況下)，或若瞳孔不能通常收縮(在動眼神經之損傷存在下所見)，則過多光可進入眼睛，(iii)視網膜中之光感受器的過度刺激，(iv)過量電脈衝到達視神經，及(v)中樞神經系統之過度反應。

「有效治療或預防畏光」在本文中係指在投與有效量之根據本發明之抗PACAP抗體或其抗原結合片段之後抑制有需要之個體(例如具有活性偏頭痛發作或叢集性頭痛之個體或有偏頭痛或叢集性頭痛或本文中確定之其他畏光相關病症中之一者的傾向的個體)的光厭惡行為或畏光或抑制光厭惡行為或畏光之發作。該治療可以單一療法形式或與另一活性劑(諸如托比拉邁(topiramate)或二氫麥角胺)結合來實現。

術語「偏頭痛」係指一種複雜且使人喪失能力之神經病症，其可在四個階段期間進展：前驅症狀、預兆、頭痛及後期症狀。偏頭痛由國際頭痛協會定義為持續4-72小時且特徵為以下中之至少兩者的頭痛：單側定位、搏動品質、中度至重度疼痛強度；及因運動(諸如行走)而加重。此外，頭痛必定伴有以下中之至少一者：噁心及/或嘔吐、畏光或聲音恐怖。偏頭痛亦可伴有預兆，其典型地在前兆或前驅症狀階段期間之最後期限之前，且常常導致視覺變化，例如移動穿過視野之閃光性暗點。前驅症狀亦可伴有其他症狀，例如疲勞、胃腸道問題及情緒改變。偏頭痛患者常常在延長之時間內無行為能力。後期症狀為最終階段且在發作之後發生，在該時間期間偏頭痛患者可感覺筋疲力盡或適度精神愉快。

術語「頭痛」係指頭部之任何區域中的疼痛。頭痛可發生在頭部之一側或兩側、被孤立至某一位置、自一個點輻射穿過頭部或具有老虎鉗樣品質。頭痛可為銳痛、搏動感覺或鈍痛。頭痛可逐漸或突然出現，且其可持續小於一小時或持續若干天。

術語「疼痛相關疾病或病狀」係指完全或部分藉由急性及/或慢性疼痛定義之任何疾病或病狀。疼痛通常定義為與實際或潛在組織損傷相關之使人不愉快的感覺及情緒經歷或根據此類損傷進行描述。疼痛可歸類為神經原性疼痛、神經性疼痛、炎性疼痛或傷害性疼痛。

術語「類阿片止痛劑」在本文中係指具有嗎啡樣之天然或合成之所有藥物。合成及半合成類阿片止痛劑為五種化學類別之化合物的衍生物：菲；苯基庚胺；苯基哌啶；嗎啡喃；及苯并嗎啡喃，該等物質全部在該術語範疇內。示例性類阿片止痛劑包括可待因、二氫可待因、二乙醯嗎啡、氫可酮、氫嗎啡酮、左啡諾、氧嗎啡酮、阿芬太尼、丁丙諾啡、布托啡諾、芬太尼、舒芬太尼、嘜啶、美沙酮、納布啡、丙氧芬及噴他佐辛或其醫藥學上可接受之鹽。

術語「NSAID」係指非類固醇抗炎化合物。NSAID係藉助於其抑制環氧合酶之能力進行分類。環氧合酶1及環氧合酶2為環氧合酶之兩個主要同種型且大多數標準NSAID為兩個同種型之混合抑制劑。大多數標準NSAID屬於以下五種結構類別中之一者：(1)丙酸衍生物，諸如布洛芬、萘普生、消痛靈、雙氯芬酸及酮洛芬；(2)乙酸衍生物，諸如托美汀及舒林酸；(3)滅酸衍生物，諸如甲滅酸及甲氯滅酸；(4)聯苯甲酸衍生物，諸如二氟尼柳及氟苯柳；及(5)昔康類，諸如吡羅昔康、舒多昔康及伊索昔康。已描述另一類NSAID，其選擇性抑制環氧合酶2。COX-2抑制劑已描述於例如美國專利第5,616,601號；第5,604,260號；第5,593,994號；第5,550,142號；第5,536,752號；第5,521,213號；第5,475,995號；第5,639,780號；第5,604,253號；第5,552,422號；第5,510,368號；第5,436,265號；第5,409,944號；及第5,130,311號中，該等專利全部以引用之方式併入本文中。某些示例性COX-2抑制劑包括塞來昔布(celecoxib)(SC-58635)、DUP-697、弗洛舒利(flosulide)(CGP-28238)、美洛昔康(meloxicam)、6-甲氧基-2萘乙酸(6-MNA)、羅非昔布(rofecoxib)、MK-966、萘丁美酮(6-MNA之前藥)、尼美舒利(nimesulide)、NS-398、SC-5766、SC-58215、T-614；或其組合。

如本文所用，「治療」為用於獲得有益或所需臨床結果之途徑。出於本發明之目的，有益或所需臨床結果包括但不限於以下中之一或多者：PACAP相關病狀(諸如偏頭痛或頭痛)之任何態樣的改善。舉例而言，在頭痛或偏頭痛治療之情形下，其包括減輕嚴重程度、緩解疼痛強度及其他相關症狀、降低復發頻率、提高罹患頭痛之彼等的生活質量及降低治療頭痛所需之其他藥物之劑量。對於偏頭痛，其他相關症狀包括但不限於噁心、嘔吐及光敏感性、聲音及/或移動。對於叢集性頭痛，其他相關症狀包括但不限於眼睛下方或周圍腫脹、眼淚過多、紅眼、流鼻涕或鼻內充血及面部充紅。

「降低發病率」或「預防」或「防止」意謂降低特定疾病、病狀、症狀或病症的嚴重程度中之任一者(術語疾病、病狀及病症在本申請案通篇中可互換使用)。嚴重程度降低包括藉由例如降低對通常用於病狀之藥物或治療之需要、減少藥物或治療之量及/或減少暴露於藥物或治療來減少藥物及/或治療。嚴重程度降低亦包括減少特定病狀、症狀或病症之持續時間及/或降低其頻率(包括例如延遲或增加個體中下一次陣發性發作之時間)。

「改善」頭痛或頭痛或偏頭痛或其他PACAP相關病狀之一或多種症狀意謂與不投與抗PACAP拮抗劑抗體相比減輕或改善病狀(例如頭痛或偏頭痛)之一或多種症狀。「改善」亦包括縮短或減少症狀之持續時間。

如本文所用，「控制頭痛」或「控制偏頭痛」或「控制」另一PACAP相關病狀係指維持或降低病狀(例如頭痛或偏頭痛)之一或多種症狀的嚴重程度或持續時間或個體中頭痛或偏頭痛發作之頻率(與治療之前的水準相比)。舉例而言，與治療前之水準相比個體之頭部疼痛之持續時間或嚴重程度或發作頻率降低至少約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%中之任一者。頭部疼痛之持續時間或嚴重程度或發作頻率降低可持續任何長度之時間，例如2週、4週(1個月)、8週(2個月)、16週(3個月)、4個月、5個月、6個月、9個月、12個月等。

如其中所用，「延遲」PACAP相關病狀(諸如偏頭痛或頭痛)之發展意謂延緩、防礙、減慢、延遲、穩定及/或推遲病狀或疾病之進展。此延遲可視該病狀或疾病史及/或正在治療之個體而定具有不同長度之時間。如熟習此項技術者顯而易見，充足或顯著延遲可事實上涵蓋預防，因為個體不發展頭痛(例如偏頭痛)。「延遲」症狀發展之方法為當與不使用該方法相比時，在給定時間範圍內降低症狀發展之概率及/或在給定時間範圍內降低症狀之程度的方法。此類比較典型地係基於使用統計顯著性數目之個體進行的臨床研究。

PACAP相關病狀(諸如偏頭痛或頭痛)之「發展」或「進展」意謂最初表現及/或隨之而來的病症進展。頭痛或偏頭痛之發展可為可偵測的且使用如此項技術中所熟知之標準臨床技術來評估。然而，發展亦指可能不可偵測之進展。出於本發明之目的，發展或進展係指症狀之生物過程。「發展」包括產生、復發及發作。如本文所用，病狀(諸如頭痛或偏頭痛)之「發作」或「產生」包括最初發作及/或復發。

如本文所用，藥物、化合物或醫藥組合物之「有效劑量」或「有效量」為足以實現有益或所需結果之量。對於預防用途，有益或所需結果包括諸如以下之結果：消除或降低疾病，包括疾病之生物化學、組織及/或行為症狀；其在疾病發展期間存在之併發症及中間病理表型的風險、減輕其嚴重程度或延遲其開始。對於治療用途，有益或所需結果包括諸如以下之臨床結果：降低頭痛發作之疼痛強度、持續時間或頻率及降低由頭痛，包括其在疾病發展期間存在之併發症及中間病理表型引起之一或多種症狀(生物化學、組織及/或行為)；提高罹患疾病之彼等的生活品質；降低治療疾病所需之其他藥物的劑量；增強另一藥物的效果；及/或延遲患者之疾病的進展。有效劑量可以一或多次投與進行投與。出於本發明之目的，藥物、化合物或醫藥組合物之有效劑量為足以直接或間接實現預防性或治療性治療的量。如在臨床背景下所瞭解，藥物、化合物或醫藥組合物之有效劑量可能結合或可能不結合另一藥物、化合物或醫藥組合物來實現。因此，「有效劑量」可在投與一或多種治療劑之情形下考慮，且若結合一或多種其他藥劑可能實現或實現所需結果，則單一藥劑可視為以有效量給予。

「適合之宿主細胞」或「宿主細胞」通常包括任何細胞，其中本發明抗PACAP抗體及其抗原結合片段可使用輕易可獲得之技術及物質重組產生。舉例而言，本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段可根據習知技術在經基因工程改造之宿主細胞中產生。適合之宿主細胞為可用外源性DNA轉型或轉染且在培養物中生長之彼等細胞類型，且包括細菌、真菌細胞(例如酵母)及經培養之高等真核細胞(包括經培養之多細胞有機體細胞)，尤其經培養之哺乳動物細胞，例如人類或非人類哺乳動物細胞。在一示例性實施例中，此等抗體可表現於CHO細胞中。用於操縱經選殖DNA分子且將外源性DNA引入多種宿主細胞中之技術由以下文獻揭示：Sambrook等人，Molecular Cloning：A Laboratory Manual ，第2版，Cold Spring Harbor,N.Y.：Cold Spring Harbor Laboratory Press(1989)及Current Protocols in Molecular Biology ,Ausubel等人編，New York,NY：Green and Wiley and Sons(1993)。

在一些示例性實施例中，抗體可表現於交配勝任型酵母中，例如可在培養物中生長之任何單倍體、二倍體或四倍體酵母。適合用於發酵表現方法中之酵母可以單倍體、二倍體或其他多倍體形式存在。給定倍數性之細胞在適當條件下可以彼形式增殖無限代數。二倍體細胞亦可形成孢子以形成單倍體細胞。連續交配可通過二倍體菌株之進一步交配或融合產生四倍體菌株。本發明涵蓋單倍體酵母之用途，以及例如藉由交配或原生質球融合產生之二倍體或其他多倍體酵母細胞。舉例而言，此類酵母可包括酵母科之成員，其包括阿斯黴屬；埃克波眉酵母屬；固囊酵母屬；德巴利酵母屬；德克酵母屬；假囊酵母屬；伊薩酵母屬；哈薩克酵母屬；克魯維酵母屬；柯達酵母屬；路德酵母屬；管囊酵母屬；畢赤酵母屬；糖酵母屬；土星形酵母屬；特派斯波羅酵母屬；有孢圓酵母屬；擬威爾氏酵母屬；及接合酵母屬。可能適合用於本發明中之其他類型之酵母包括耶氏酵母屬(Yarrowia )；紅冬孢酵母屬(Rhodosporidium )；假絲酵母屬(Candida )；漢遜酵母屬；線黑粉酵母屬(Filobasium )；鎖擲酵母屬(Sporidiobolus )；布勒擲孢酵母屬(Bullera )；白冬孢酵母屬(Leucosporidium )及線黑粉酵母屬(Filobasidella )。

在本發明之一較佳示例性實施例中，用於抗體表現之交配勝任型酵母可包含畢赤酵母屬之成員。在本發明之另一較佳示例性實施例中，畢赤酵母屬之交配勝任型酵母為以下種類中之一者：巴斯德畢赤氏酵母、甲醇畢赤酵母及多形漢遜酵母(安格斯畢赤酵母)。在本發明之一尤其較佳實施例中，畢赤酵母屬之交配勝任型酵母為種類巴斯德畢赤氏酵母。

「可選標記物」在本文中係指如例如通過轉型事件賦予接受基因之細胞生長表型(物理生長特徵)的基因或基因片段。可選標記物允許細胞在不接受彼可選標記基因之細胞不能生長之條件下在選擇性生長培養基中存活且生長。可選標記基因通常分為若干類型，包括陽性可選標記基因，諸如當兩個溫度敏感型(「ts」)突變體雜交或ts突變體轉型時賦予細胞對抗生素或其他藥物、溫度之耐性的基因；陰性可選標記基因，諸如賦予細胞在沒有為不具有生物合成基因之所有細胞所需之特定營養物的培養基中生長之能力的生物合成基因，或使細胞不能在不具有野生型基因之細胞旁邊生長之經誘變處理之生物合成基因；及類似物。適合之標記物包括但不限於：ZEO；G418；LYS3；MET1；MET3a；ADE1；ADE3；URA3；及類似物。

「表現載體」在本文中係指含有有助於對外來蛋白在目標宿主細胞(例如細菌、昆蟲、酵母、植物、兩棲動物、爬行動物、禽類或哺乳動物細胞)內表現進行操縱之元件的DNA載體，且最典型為酵母或哺乳動物細胞，例如CHO細胞。適宜地，首先在細菌宿主(例如大腸桿菌(E.coli ))中執行對序列之操縱且產生用於轉型之DNA，且通常載體將包括用於促進此類操縱之序列，包括細菌複製起點及適當的細菌選擇標記物。選擇標記物編碼為在選擇性培養基中生長之轉型宿主細胞之存活或生長所必需的蛋白質。未經含有選擇基因之載體轉型的宿主細胞在培養基中不會存活。典型選擇基因編碼(a)賦予對抗生素或其他毒素之耐藥性，(b)補充營養缺陷型缺陷，或(c)供應不可自複合培養基中獲得之關鍵營養物的蛋白質。用於酵母轉型之示例性載體及方法為描述於例如Burke,D.,Dawson,D.及Stearns,T.,Methods in yeast genetics：a Cold Spring Harbor Laboratorycourse manual ,Plainview,NY：Cold Spring Harbor Laboratory Press(2000)中。

用於本發明方法中之表現載體可包括酵母或哺乳動物特定序列，包括用於鑑別轉型宿主菌株之可選營養缺陷型標記物或藥物標記物。藥物標記物可進一步用於擴增酵母宿主細胞中之載體的拷貝數。

所關注之多肽編碼序列可操作地鍵聯至轉錄及轉譯調控序列，該等調控序列提供多肽於所需宿主細胞(例如酵母或哺乳動物細胞)中之表現。此等載體組分可包括但不限於以下中之一或多者：增強子元件、啟動子及轉錄終止序列。亦可包括用於分泌多肽之序列，例如信號序列及類似序列。視情況存在複製起點，例如酵母複製起點，因為表現載體常常整合至宿主細胞基因組中。在本發明之一個實施例中，所關注之多肽可操作地鍵聯或融合至使得多肽自酵母二倍體細胞之分泌最佳化的序列。

核酸在與另一核酸序列處於一定功能關係中時為「可操作地鍵聯」的。舉例而言，若信號序列之DNA經表現為參與多肽分泌之前蛋白，則該信號序列之DNA可操作地鍵聯至該多肽之DNA；若啟動子或增強子影響編碼序列之轉錄，則該啟動子或增強子可操作地鍵聯至該序列。通常，「可操作地鍵聯」意謂鍵聯之DNA序列為連續的，且在分泌前導子之情況下，為連續的且處於閱讀框架中。然而，增強子未必為連續的。鍵聯係藉由在合宜之限制位點處連接或者經由熟習此項技術者所熟悉的PCR/重組方法來實現(GATEWAY^R Technology；Invitrogen,Carlsbad California)。若此類位點不存在，則根據習知作法使用合成寡核苷酸銜接子或連接子。

啟動子為位於結構基因之起始密碼子上游(5')(通常約100至1000bp內)之未轉譯序列，其控制與其可操作地鍵聯之特定核酸序列之轉錄及轉譯。此類啟動子分為若干類別：誘導型、組成型及抑制型啟動子(其響應於不存在抑制子而增加轉錄水準)。可誘導啟動子可響應於培養條件之改變(例如存在或不存在營養物或溫度改變)而引起受其控制之DNA的轉錄水準增加。

啟動子片段亦可充當表現載體同源重組及整合至宿主細胞(例如酵母細胞)基因組中之相同位點中之位點；或者，可選標記物可用作同源重組之位點。畢赤酵母屬轉型描述於Cregg等人，Mol.Cell.Biol., 5：3376-3385(1985)中。適合用於不同真核及原核細胞中之啟動子為熟知的且可商購獲得。

所關注之多肽可不僅直接地而且以與異源多肽(例如信號序列或在成熟蛋白或多肽之N端具有特定裂解位點的其他多肽)之融合多肽形式重組產生。一般而言，信號序列可為載體之組分，或其可為插入載體中之多肽編碼序列之一部分。較佳選擇之異源信號序列為通過宿主細胞(例如哺乳動物細胞、昆蟲細胞或酵母細胞)內可用之標準通路中之一者識別及加工的異源信號序列。另外，此等信號肽序列可經工程設計以在表現系統中提供增強之分泌。所關注之分泌信號亦包括哺乳動物及酵母信號序列，其可與所分泌之蛋白質異源，或可為所分泌之蛋白質的天然序列。信號序列包括前肽序列，且在一些情況下可包括原肽序列。許多此類信號序列為此項技術中已知的，包括存在於免疫球蛋白鏈上之信號序列，例如K28前原毒素序列、PHA-E、FACE、人類MCP-1、人類血清白蛋白信號序列、人類Ig重鏈、人類Ig輕鏈及類似物。舉例而言，參見Hashimoto等人，Protein Eng., 11(2)：75(1998)；及Kobayashi等人，Therapeutic Apheresis, 2(4)：257(1998))。

可藉由將轉錄活化序列插入載體中來增加轉錄。此等活化序列為DNA之順式作用元件，通常為約10至300bp，其作用於啟動子來增加其轉錄。轉錄增強子在內含子內以及在編碼序列本身內之取向及位置為相對獨立的，已被發現在轉錄單元之5'及3'端。增強子可在編碼序列之位置5'或3'剪接至表現載體中，但較佳為位於啟動子之位點5'。

用於真核宿主細胞中之表現載體亦可含有為終止轉錄及穩定mRNA所必需之序列。此類序列通常在真核或病毒DNA或cDNA之未轉譯區域中轉譯終止密碼子之3'端可獲得。此等區域含有轉錄為mRNA之未轉譯部分中之聚腺苷酸化片段的核苷酸區段。

含有以上所列組分之適合之載體的構築採用標準連接技術或PCR/重組方法。將經分離之質粒或DNA片段裂解、定制且以產生所需質粒所需要之形式或經由重組方法再連接。為了分析以確認所構築之質粒中之序列正確，使用連接混合物來轉型宿主細胞，且在適當時藉由抗生素耐藥性(例如氨比西林(ampicillin)或博來黴素(Zeocin))來選擇成功的轉型體。製備來自轉型體之質粒，藉由限制性核酸內切酶消化進行分析，且/或測序。

作為限制及連接片段之替代方案，可使用基於特異性附著(「att 」)位點及重組酶之重組方法來將DNA序列插入載體中。此類方法例如由Landy,Ann.Rev.Biochem. ,58：913-949(1989)描述；且為熟習此項技術者已知的。此類方法利用由λ噬菌體與大腸桿菌編碼之重組蛋白之混合物介導的分子間DNA重組。重組發生在相互作用DNA分子上之att 位點之間。關於att 位點之描述，參見Weisberg及Landy,Site-Specific Recombination in Phage Lambda ,Lambda II ,第211-250頁，Cold Spring Harbor,NY：Cold Spring Harbor Press(1983)。轉換側接重組位點之DNA區段，使得在重組之後，att 位點為包含由各親本載體所貢獻之序列的雜合序列。重組可發生在任何拓撲結構之DNA之間。

att 位點可如下引入所關注之序列：藉由將所關注之序列連接至適當載體中；通過使用特定引物產生含有att B位點之PCR產物；產生選殖至含有att 位點之適當載體中的cDNA文庫；及類似物。

如本文所用，摺疊係指多肽及蛋白質之三維結構，其中胺基酸殘基之間的相互作用起穩定結構之作用。雖然非共價相互作用在確定結構中為重要的，但是通常所關注之蛋白質將具有由兩個半胱胺酸殘基形成之分子內及/或分子間共價二硫鍵。對於天然存在之蛋白質及多肽或衍生物及其變異體，適當之摺疊典型地為產生最佳生物活性之排列，且可適宜地藉由分析活性(例如配位體結合、酶活性等)進行監測。

在一些情況下，例如在所需產物具有合成來源之情況下，基於生物活性之分析將意義較小。此類分子之適當摺疊可基於物理特性、能量考慮、模型化研究及類似方法來確定。

表現宿主可藉由引入編碼一或多種增強摺疊及二硫鍵形成之酶(亦即摺疊酶、伴侶蛋白等)的序列來進一步修飾。此類序列可使用如此項技術中已知之載體、標記物等組成性地或誘導性地表現於酵母宿主細胞中。較佳地，通過靶向方法將包括對於所需表現模式而言足夠之轉錄調控元件的序列穩定整合在酵母基因組中。

舉例而言，真核蛋白質二硫化物異構酶(「PDI」)不僅為蛋白質半胱胺酸氧化及二硫鍵異構化之有效催化劑，並且展現伴侶活性。PDI之共表現可促進產生具有多個二硫鍵之活性蛋白質。亦關注免疫球蛋白重鏈結合蛋白(「BIP」)；親環素；及類似物之表現。在本發明之一個實施例中，單倍體親本菌株中之每一者表現不同的摺疊酶，例如一個菌株可表現BIP，而另一菌株可表現PDI或其組合。

經培養之哺乳動物細胞亦為用於產生所揭示之抗PACAP抗體及其抗原結合片段的較佳示例性宿主。如所提及，CHO細胞尤其適合用於表現抗體。此項技術中已知許多用於在哺乳動物細胞中製造單株抗體之程序。(參見Galfre,G.及Milstein,C.,Methods Enzym. ,73：3-46,1981；Basalp等人，Turk.J.Biol. ,24：189-196,2000；Wurm,F.M.,Nat.Biotechnol. ,22：1393-1398,2004；及Li等人，mAbs ,2(5)：466-477,2010)。如下文中進一步詳細提及，哺乳動物單株抗體製造流程中採用之常用宿主細胞株包括但不限於人類胚胎視網膜母細胞細胞株PER.C6®(Crucell N.V.,Leiden,The Netherlands)、NS0鼠骨髓瘤細胞(Medical Research Council,London,UK)、CV1猴腎細胞株、293人類胚胎腎細胞株、BHK幼倉鼠腎細胞株、VERO非洲綠猴腎細胞株、人類子宮頸癌細胞株HELA、MDCK大腎細胞、BRL布法羅大鼠肝細胞、W138人類肺細胞、HepG2人類肝細胞、MMT小鼠乳房腫瘤細胞、TRI細胞、MRC5細胞、Fs4細胞、骨髓瘤或淋巴瘤細胞或中國倉鼠(灰倉鼠(Cricetulus griseus ))卵巢(CHO)細胞及類似物。此項技術中已知適用於及經最佳化用於產生重組單株抗體之CHO細胞之許多不同亞純系或亞細胞株，諸如DP12(CHO K1 dhfr-)細胞株、NS0細胞為NS-1細胞之對氮雜鳥嘌呤具抵抗力之非Ig分泌型非輕鏈合成型亞純系。其他中國倉鼠及CHO細胞為可商購獲得的(來自ATCC等)，包括CHO-DXB11(CHO-DUKX)、CHO-pro3、CHO-DG44、CHO 1-15、CHO DP-12、Lec2、M1WT3、Lec8、pgsA-745及類似物，該等細胞全部經基因變更以針對各種參數對細胞株進行最佳化。單株抗體通常係使用分批給料法製造，藉此單株抗體鏈表現於哺乳動物細胞株中且分泌至生物反應器中之組織培養基中。培養基(或饋料)係連續供應至生物反應器中以使重組蛋白表現最大化。然後由所收集之培養基純化重組單株抗體。在一些情況下，需要其他步驟以通過二硫鍵還原等再組裝抗體。此類製備方法可按比例放大為大到單一批次10,000L或更多。再常規為通過使用此類細胞株及方法獲得多達20皮克/細胞/天，從而提供高達10g/L或更高之效價，10kL至25kL之生物反應器達到15至100kg。(Li等人，2010)。以下提供此製備方法之各種細節，包括將編碼抗體之聚核苷酸選殖至表現載體中，用此等表現載體轉染細胞，選擇轉染細胞，及由此等細胞表現及純化重組單株抗體。

為在哺乳動物細胞中重組產生抗PACAP抗體或抗原結合片段，通常將編碼抗體或其片段之核酸插入可重制載體中用於進一步選殖(DNA擴增)或用於表現。編碼抗體之DNA係使用習知程序(例如藉由使用能夠特異性結合於編碼抗體之重鏈及輕鏈的DNA寡核苷酸探針)容易地分離或合成。載體組分通常包括但不限於以下中之一或多者：信號序列、複製起點、一或多種標記基因、增強子元件、啟動子及轉錄終止序列。啟動子、終止子、可選標記物、載體及其他元件之選擇為熟習此項技術者之水準內的常規設計的一個問題。許多此類元件為此項技術中已知的且為通過商業供應商可獲得的。

本發明之抗體可不僅直接地而且以與異源多肽之融合多肽形式重組產生，該異源多肽較佳為信號序列或在成熟蛋白或多肽之N端具有特定裂解位點的其他多肽。較佳選擇之同源或異源信號序列為由宿主細胞識別及加工(亦即藉由信號肽酶裂解)之信號序列。在哺乳動物細胞表現中，哺乳動物信號序列以及病毒分泌前導子(例如單純性皰疹gD信號)為可用的。

此類表現載體及選殖載體通常將含有使載體能夠在一或多種所選宿主細胞中複製之核酸序列。典型地，在選殖載體中，此序列為使載體能夠獨立於宿主染色體DNA進行複製之序列，且包括複製起點或自發複製序列。對於多種細菌、酵母及病毒而言，此類序列為熟知的，例如質粒pBR322之複製起點適合於大多數革蘭氏陰性細菌(Gram-negative bacteria)，2mu質粒起點適合於酵母，而各種病毒起點(猿猴病毒40(「SV40」)、多形瘤、腺病毒、水泡性口膜炎病毒(「VSV」)或牛乳頭狀瘤病毒(「BPV」)適用於哺乳動物細胞中之選殖載體。一般而言，哺乳動物表現載體不需要複製起點組分(可典型地使用SV40起點，僅因其含有早期啟動子)。

此等載體亦將典型地含有選擇基因，亦稱為可選標記物。典型選擇基因編碼(a)賦予對抗生素或其他毒素(例如氨比西林、新黴素(neomycin)、胺甲喋呤(methotrexate)或四環素(tetracycline))之耐藥性，(b)補充營養缺陷型缺陷，或(c)供應不可由複合培養基獲得之關鍵營養物的蛋白質，例如關於芽孢桿菌屬之編碼D-丙胺酸消旋酶的基因。

選擇方案之一個實例使用藥物來阻止宿主細胞生長。通常使用藥物選擇來選擇已插入外來DNA之經培養之哺乳動物細胞。此類細胞通常稱為「轉染體」。已在選擇性試劑存在下培養且能夠將所關注之基因傳至其子代的細胞稱為「穩定轉染體」。此類主導選擇之實例使用藥物新黴素、黴酚酸(mycophenolic acid)及潮黴素(hygromycin)。示例性可選標記物為編碼對抗生素新黴素之耐藥性的基因。選擇係在新黴素型藥物(諸如G-418或類似物)存在下進行。經異源基因成功轉型之彼等細胞產生賦予耐藥性之蛋白質且因此在選擇方案中存活下來。

亦可使用選擇系統來增加所關注之基因的表現水準，此為稱為「擴增」之過程。典型地藉由在低含量之選擇性試劑存在下培養細胞且然後增加選擇性試劑之量以選擇產生所引入基因之高含量產物的細胞來進行轉染體之擴增。示例性適合於哺乳動物細胞之可選標記物為能夠鑑別勝任吸收抗體核酸之細胞的彼等，諸如二氫葉酸還原酶(「DHFR」)、胸苷激酶、金屬硫蛋白-I及金屬硫蛋白-II(較佳靈長類動物金屬硫蛋白基因)、腺苷脫胺酶、鳥胺酸脫羧酶等。

舉例而言，用於哺乳動物細胞之可擴增可選標記物為二氫葉酸還原酶，其賦予對胺甲喋呤之耐藥性。亦可使用其他耐藥性基因(例如耐潮黴素性、多耐藥性、嘌呤黴素轉乙醯酶)。首先藉由在含有胺甲喋呤(「MTX」)(DHFR之競爭性拮抗劑)之培養基中培養所有轉型體來鑑別經DHFR選擇基因轉型之細胞。當採用野生型DHFR時適當之宿主細胞為缺乏DHFR活性之中國倉鼠卵巢(「CHO」)細胞株。

或者，可根據細胞在含有針對可選標記物之選擇試劑(諸如胺基醣苷抗生素，例如卡那黴素(kanamycin)、新黴素或G-418)的培養基中之生長情況來選擇用編碼抗體(野生型DHFR蛋白)之DNA序列轉型或共轉型之宿主細胞(尤其含有內源性DHFR之野生型宿主)，及另一可選標記物，諸如胺基醣苷3'-磷酸轉移酶(「APH」)。參見美國專利第4,965,199號。

此等載體可包含增強子序列，其促進編碼抗體之DNA的轉錄。許多增強子序列已知來自哺乳動物基因(例如球蛋白、彈性酶、白蛋白、甲胎蛋白及胰島素)。經常使用之增強子為衍生自真核細胞病毒之增強子。其實例包括位於複製起點後側(bp 100-270)之SV40增強子、巨細胞病毒早期啟動子增強子、位於複製起點後側之多形瘤增強子及腺病毒增強子(關於用於活化真核啟動子之增強元件，參見Yaniv,Nature, 297：17-18,1982)。增強子可在抗體編碼序列之位置5'或3'處剪接至載體中，但較佳為位於啟動子之位點5'。

表現及選殖載體通常亦將包含由宿主有機體識別且可操作地鍵聯至抗體核酸之啟動子。真核生物之啟動子序列為已知的。實際上所有真核基因均具有定位於轉錄起始之位點上游約25至30個鹼基處的富AT區。在許多基因之轉錄起點上游70至80個鹼基處發現之另一序列為CNCAAT區，其中N可為任何核苷酸。在大多數真核基因之3'端為AATAAA序列，其可為添加聚腺苷酸尾至編碼序列之3'端的信號。所有此等序列均適合地插入真核表現載體。

抗體在哺乳動物宿主細胞中自載體轉錄係例如由獲自諸如多瘤病毒、禽痘病毒、腺病毒(諸如腺病毒2)、BPV、禽類肉瘤病毒、巨細胞病毒、逆轉錄病毒、B型肝炎病毒且最佳SV40之病毒的基因組之啟動子；異源哺乳動物啟動子，例如肌動蛋白啟動子或免疫球蛋白啟動子；熱休克啟動子控制，前提條件為此類啟動子與宿主細胞系統相容。

SV40病毒之早期及晚期啟動子宜以亦含有SV40病毒複製起點之SV40限制片段形式獲得。人類巨細胞病毒之立即早期啟動子宜以HindIII E限制片段之形式獲得。用於使用BPV作為載體在哺乳動物宿主中表現DNA之系統揭示於美國專利第4,419,446號中。此系統之改良描述於美國專利第4,601,978號中。關於人類β-干擾素cDNA在來自單純皰疹病毒之胸苷激酶啟動子的控制下在小鼠細胞中之表現亦參見Reyes等人，Nature, 297：598-601(1982)。或者，可使用勞斯氏肉瘤病毒(rous sarcoma virus)長末端重複序列作為啟動子。

可使用強轉錄啟動子，諸如來自SV40、巨細胞病毒或骨髓增殖性肉瘤病毒之啟動子。參見例如美國專利第4,956,288號及美國專利公開案第20030103986號。其他適合之啟動子包括來自金屬硫蛋白基因(美國專利第4,579,821號及第4,601,978號)之彼等及腺病毒主要晚期啟動子。用於哺乳動物細胞中之表現載體包括pZP-1、pZP-9及pZMP21，其已分別以登錄號98669、98668及PTA-5266保藏於美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection)(10801 University Blvd.,Manassas,VA.USA)；及此等載體之衍生物。

用於真核宿主細胞(酵母、真菌、昆蟲、植物、動物、人類或來自其他多細胞有機體之有核細胞)中之表現載體通常亦將含有為終止轉錄及穩定mRNA所必需之序列。此類序列通常可由真核或病毒DNA或cDNA之5'及有時3'未轉譯區域獲得。此等區域含有轉錄為編碼抗體之mRNA的未轉譯部分中之聚腺苷酸化片段的核苷酸區段。一種適用之轉錄終止組分為牛生長激素聚腺苷酸化區域。參見WO 94/11026及其中所揭示之表現載體。

適合用於選殖或表現本發明抗體之宿主細胞包括上文所描述之原核生物、酵母或高級真核生物細胞。然而，脊椎動物細胞已受到最大關注，且在培養物中繁殖脊椎動物細胞已變成常規程序。適用之哺乳動物宿主細胞株之實例為由SV40轉型之猴腎CV1細胞株(COS-1(ATCC編號CRL 1650)；及COS-7，ATCC CRL 1651)；人類胚胎腎細胞株(經亞選殖用於在懸浮培養物中生長之293或293細胞，(ATCC編號CRL 1573；Graham等人，J.Gen.Virol.,36：59-72(1977))；幼倉鼠腎細胞(BHK，ATCC CCL 10、ATCC編號CRL 1632；BHK 570，ATCC編號CRL 10314)；CHO細胞(CHO-K1，ATCC編號CCL 61；CHO-DG44，Urlaub等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA ,77：4216-4220(1980))；小鼠足細胞(TM4，Mather,Biol.Reprod.,23：243-251(1980))；猴腎細胞(CV1 ATCC CCL 70)；非洲綠猴腎細胞(VERO-76，ATCC CRL-1587)；人類子宮頸癌細胞(HELA，ATCC CCL 2)；犬腎細胞(MDCK，ATCC CCL 34)；布法羅大鼠肝細胞(BRL 3A，ATCC CRL 1442)；人類肺細胞(W138，ATCC CCL 75)；人類肝細胞(Hep G2，HB 8065)；小鼠乳房腫瘤(MMT 060562，ATCC CCL51)；TRI細胞(Mather等人，Annals N.Y.Acad.Sci. ,383：44-68(1982))；MRC 5細胞；FS4細胞；及人類肝細胞瘤細胞株(Hep G2)。其他適合之細胞株為此項技術中已知的且可購自公共保藏所，諸如美國典型培養物保藏中心(Manassas,VA)。

宿主細胞經上述表現或選殖載體轉型以產生抗體，且在適當時經改良之習知培養基中培養，用於如上文所論述誘導啟動子、選擇轉型體或擴增編碼所需序列之基因。

用於產生本發明之抗體的哺乳動物宿主細胞可在多種培養基中培養。諸如以下之可商購獲得之培養基適合用於培養宿主細胞：漢姆氏(Ham's)F10(Sigma-Aldrich Corporation,St.Louis,MO)、最低必需培養基((「MEM」(Sigma-Aldrich Corporation,St.Louis,MO)、洛斯維公園紀念所(Roswell Park Memorial Institute)-1640培養基(「RPMI-1640」，Sigma-Aldrich Corporation,St.Louis,MO)及杜爾貝科氏改良伊格爾培養基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)((「DMEM」，Sigma-Aldrich Corporation,St.Louis,MO)。此外，描述於Ham等人，Meth.Enz., 58：44(1979)；Barnes等人，Anal.Biochem., 102：255(1980)；美國專利第4,767,704號；第4,657,866號；第4,927,762號；第4,560,655號；或第5,122,469號；WO 90/03430；WO 87/00195；或美國專利復審編號30,985中之培養基中之任一者均可用作宿主細胞之培養基。此等培養基中之任一者均可根據需要補充有激素及/或其他生長因子(諸如胰島素、轉鐵蛋白或表皮生長因子)、鹽(諸如氯化鈉、鈣鹽、鎂鹽及磷酸鹽)、緩衝液(諸如HEPES)、核苷酸(諸如腺苷及胸腺嘧啶)、抗生素(諸如慶大黴素(Gentamycin)藥物)、痕量元素(定義為通常以在微莫耳範圍內之最終濃度存在的無機化合物)及葡萄糖或等效能量來源。亦可以熟習此項技術者將已知之適當濃度包括任何其他必要的補充物。培養條件(諸如溫度、pH值及類似物)為先前在經選擇用於表現之宿主細胞的情況下所使用之彼等，且對普通熟練技工而言將顯而易見。研製及最佳化培養基及培養條件之方法為此項技術中已知的。(參見Gronemeyer等人，Bioengineering ,1(4)：188-212,2014)。

在將培養條件最佳化且選擇較佳細胞株純系之後，將此等細胞(黏附細胞或懸浮培養物)最典型地以分批饋料方法在涉及連續饋送具有培養基及饋料之細胞培養物的生物反應器(許多模型為可商購獲得的)中培養，針對所選擇之特定細胞株進行最佳化且出於此目的進行選擇。(參見Butler,M.,Appl.Microbiol.Biotechnol. ,68：283-291,2005；及Kelley,B.,mAb , 1(5)：443-452,2009)。灌注系統亦為可用的，其中培養基及饋料連續地供應至培養物中，同時相同體積之培養基自生物反應器中取出。(Wurm,2004)。亦可商購獲得之合成培養基可用於使細胞在分批饋料培養基中生長，從而避免諸如在使用動物組分(諸如牛血清白蛋白等)之情況下受到外部來源污染之可能。然而，可商購獲得不含動物組分之水解產物以幫助增加細胞密度、培養物活力及產率。(Li等人，2010)。已進行許多研究來試圖最佳化細胞培養基，包括謹慎注意滾瓶中可獲得之頂部空間、生長及表現階段期間之氧化還原電位、在製備期間存在用於維持二硫鍵之還原劑等。(參見例如Hutterer等人，mAbs ,5(4)：608-613,2013；及Mullan等人，BMC Proceed. ,5(增刊8)：p110,2011)。已開發出各種方法來解決在重組單株抗體製備期間之有害氧化之可能性。(參見例如美國專利第8,574,869號)。可藉由連續饋送營養物或以分開投與各量之形式使培養細胞生長。常常藉由在細胞生長期間使用探針在線地藉由直接連接至經校準之分析儀或離線地藉由操作者干預來監測各種製程參數，諸如細胞濃度、pH值、溫度、CO₂ 、dO₂ 、滲透壓、代謝產物(諸如葡萄糖、乳酸鹽、麩醯胺及麩胺酸鹽及類似物)之量。培養步驟亦典型地涉及以此項技術中已知用於細胞選擇之任何手段確保在培養物中生長之細胞維持轉染重組基因。

在發酵之後(亦即當達到最大細胞生長及重組蛋白表現時)，典型地在培養步驟之後進行收穫步驟，藉此自培養基中分離細胞且藉此獲得所收穫之細胞培養基。(參見Liu等人，mAbs ,2(5)：480-499,2010)。典型地，在培養之後進行各種涉及管柱層析及類似製程之純化步驟，以將重組單株抗體與細胞成分及細胞培養基組分分離。此重組單株抗體製備階段所需之確切純化步驟取決於蛋白質表現之位點(亦即在細胞本身之胞質液中)或蛋白質分泌至細胞培養基中之通常更佳之途徑。可使用此項技術中已知之技術分離各種細胞成分，諸如差速離心技術、基於重力之細胞沈降及/或尺寸排阻層析/過濾技術，其可包括切向流微過濾或深度過濾。(參見Pollock等人，Biotechnol.Bioeng. ,110：206-219,2013；及Liu等人，2010)。細胞組分之離心可藉由使用連續盤疊式離心機隨後使用深度及膜式過濾器澄清化而大規模地達成。(參見Kelley,2009)。最經常地，在澄清化之後，歸因於蛋白質A對抗體之Fc結構域之高親和力將重組蛋白藉由蛋白質A層析法進一步純化，且典型地使用低pH值/酸化洗脫步驟(典型地，酸化步驟與預防性病毒失活步驟組合)來進行。亦可採用使用酸性或陽離子聚電解質之絮凝及/或沈澱步驟來將懸浮培養物中之動物細胞與可溶性蛋白質分離。(Liu等人，2010)。最後，典型地使用陰離子交換層析及陽離子交換層析、疏水性相互作用層析(「HIC」)、疏水性電荷誘導層析(HCIC)、使用陶瓷羥磷灰石(Ca₅ (PO₄ )₃ OH)₂ )之羥磷灰石層析及此等技術之組合對重組單株抗體之溶液進行精製。所需單株抗體之最終調配及濃縮可藉由使用超離心技術來達成。純化產率典型地為70至80%。(Kelley,2009)。

術語「所需蛋白質 」或「所需抗體 」可互換使用且通常指對靶標具特異性之親本抗體，亦即PACAP或嵌合或人類化抗體或其如本文所描述由其衍生之結合部分。術語「抗體」旨在包括任何配合且識別抗原決定基之具特定形狀之含多肽鏈之分子結構，其中一或多種非共價鍵結相互作用使分子結構與抗原決定基之間的複合物穩定。原型抗體分子為免疫球蛋白，且來自所有來源(例如人類、齧齒動物、兔、奶牛、綿羊、豬、狗、其他哺乳動物、雞、其他禽類等)之所有類型之免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA、IgE、IgD等)均視為「抗體」。用於產生適合作為根據本發明之起始物質的抗體之較佳來源為兔。其實例包括嵌合抗體、人類抗體及其他非人類哺乳動物抗體、人類化抗體、單鏈抗體(諸如scFv)、駱駝抗體、奈米抗體、IgNAR(可例如衍生自鯊魚之單鏈抗體)、小模組化免疫藥物(「SMIP」)及抗體片段，諸如Fab、Fab'、F(ab')₂ 及類似物(參見Streltsov等人，Protein Sci., 14(11)：2901-9,(2005)；Greenberg等人，Nature, 374(6518)：168-73,(1995)；Nuttall等人，Mol.Immunol., 38(4)：313-26,(2001)；Hamers-Casterman等人，Nature, 363(6428)：446-8,(1993)；Gill等人，Curr.Opin.Biotechnol., (6)：653-8,(2006))。

舉例而言，可藉由基因工程設計產生抗體或其抗原結合片段。在此技術中，如同在其他方法之情況下，使產生抗體之細胞對所希望的抗原或免疫原敏感。使用PCR擴增使用分離自抗體產生細胞之信使RNA作為模板來製備cDNA。藉由將經擴增免疫球蛋白cDNA之適當部分插入表現載體中來產生載體之文庫，該等載體各自含有保留初始抗原特異性之一個重鏈基因及一個輕鏈基因。藉由將重鏈基因文庫與輕鏈基因文庫組合來構建組合文庫。此舉產生共表現重鏈及輕鏈之純系(類似於抗體分子之Fab片段或抗原結合片段)的文庫。將帶有此等基因之載體共轉染至宿主細胞中。當在轉染宿主中誘導抗體基因合成時，重鏈及輕鏈蛋白質自組裝以產生活性抗體，該等活性抗體可藉由用抗原或免疫原篩選來進行偵測。

所關注之抗體編碼序列包括由天然序列編碼之彼等，以及由於遺傳密碼之簡併而與所揭示之核酸序列不一致的核酸及其變異體。變異體多肽可包括胺基酸(「aa」)取代、添加或缺失。胺基酸取代可為保守胺基酸取代或用於消除非必需胺基酸之取代，從而改變糖基化位點，或藉由不為功能所必需之一或多個半胱胺酸殘基之取代或缺失而使錯誤摺疊減至最少。變異體可經設計使得保留蛋白質特定區域(例如功能結構域、催化性胺基酸殘基等)之生物活性或具有增強之生物活性。變異體亦包括本文所揭示之多肽的片段，尤其生物活性片段及/或對應於功能結構域之片段。用於活體外誘變經選殖基因之技術為已知的。本發明中亦包括多肽，該等多肽已使用普通分子生物技術加以修飾，以改良其對蛋白降解之抗性或最佳化可溶解特性或使得其更適合作為治療劑。

嵌合抗體可藉由重組手段藉由將獲自一個物種之抗體產生細胞的V_L 及V_H 區與來自另一物種之恆定輕鏈及重鏈區組合來製備。典型地，嵌合抗體利用齧齒動物或兔可變區及人類恆定區，以產生主要具有人類結構域之抗體。此類嵌合抗體之製備為此項技術中熟知的，且可藉由標準手段來達成(如例如美國專利第5,624,659號中所描述，該專利以全文引用之方式併入本文中)。進一步預期本發明之嵌合抗體之人類恆定區可選自IgG1、IgG2、IgG3及IgG4恆定區。

人類化抗體經工程設計以含有甚至更類似人類之免疫球蛋白結構域，且僅併有動物衍生型抗體之互補決定區。此係藉由仔細檢查單株抗體之可變區之高變環之序列，且使其與人類抗體鏈之結構相配合來實現。雖然表面上為複雜的，但該方法實際上卻為簡單的。參見例如美國專利第6,187,287號，其以引用之方式完全併入本文中。

除整個免疫球蛋白(或其重組對應物)之外，亦可合成包含抗原決定基結合位點之免疫球蛋白片段(例如Fab'、F(ab’)₂ 或其他片段)。「片段」或最小免疫球蛋白可利用重組免疫球蛋白技術進行設計。舉例而言，用於本發明中之「Fv」免疫球蛋白可藉由合成融合之可變輕鏈區及可變重鏈區來產生。抗體之組合亦為所關注的，例如雙功能抗體，其包含兩種不同之Fv特異性。在本發明之另一實施例中，免疫球蛋白片段涵蓋小分子免疫藥物(「SMIP」)、駱駝抗體、奈米抗體及IgNAR。

免疫球蛋白及其片段可經轉譯後修飾，例如以添加可用於本發明之方法和組合物中的效應子部分，諸如化學連接子、可偵測部分(諸如螢光染料、酶、毒素、受質、生物發光物質、放射性物質、化學發光部分及類似物)或特異性結合部分(諸如鏈黴親和素、親和素或生物素及類似物)。下文提供其他效應分子之實例。

若根據遺傳密碼轉譯聚核苷酸序列產生多肽序列(亦即聚核苷酸序列「編碼」多肽序列)，則該聚核苷酸序列「對應」於該多肽序列，若兩個聚核苷酸序列編碼相同之多肽序列，則該兩個聚核苷酸序列中之一個聚核苷酸序列「對應」於另一聚核苷酸序列。

DNA構築體之「異源」區域或結構域為在更大DNA分子內可鑑別之DNA區段，該區段在自然界中不與該更大分子結合存在。因此，當異源區域編碼哺乳動物基因時，側接該基因之DNA通常不側接原始有機體之基因組中的哺乳動物基因組DNA。異源區域之另一實例為一構築體，其中編碼序列本身在自然界中不存在(例如基因組編碼序列含有內含子之cDNA或具有不同於天然基因之密碼子的合成序列)。對偶基因變異或天然存在之突變事件不會產生如本文所定義之DNA的異源區域。

「編碼序列」為密碼子之框內序列，其對應於或編碼蛋白質或肽序列。若兩個編碼序列或其互補序列編碼相同之胺基酸序列，則該兩個編碼序列彼此對應。與適當之調控序列結合之編碼序列可轉錄且轉譯成多肽。聚腺苷酸化信號及轉錄終止序列通常將位於編碼序列之3'端。「啟動子序列」為能夠引發下游(3'方向)編碼序列之轉錄且典型地含有用於結合影響編碼序列之轉錄的調控分子(例如轉錄因子)的其他位點的DNA調控區。當RNA聚合酶結合細胞中之啟動子序列且將編碼序列轉錄至mRNA中，然後該mRNA又轉譯成由編碼序列編碼之蛋白質時，編碼序列「受啟動子序列控制」或「可操作地鍵聯」至啟動子。

如今充分理解了脊椎動物中之抗體的一般結構。參見Edelman,G.M.,Ann.N.Y.Acad.Sci. ,190：5(1971)。抗體由兩條相同之分子量為約23,000道爾頓之輕多肽鏈(「輕鏈」)及兩條相同之分子量為53,000-70,000之重鏈(「重鏈」)組成。該四條鏈由二硫鍵連接成「Y」組態，其中輕鏈承托起始於「Y」組態之開口處的重鏈。「Y」組態之「分支」部分指定為F_ab 區；「Y」組態之主幹部分指定為F_C 區。胺基酸序列取向為自「Y」組態頂部之N端至各鏈底部之C端。N端具有可變區，該可變區對引發其之抗原具有特異性，且所述N端之長度為約100個胺基酸，在輕鏈與重鏈之間以及在抗體之間存在略微不同。

在各鏈中可變區與恆定區鍵聯，該恆定區延伸鏈之剩餘長度且在抗體之特定類別內不會隨抗體之特異性(亦即引發其之抗原)而變化。存在五種已知主要類別之恆定區，其決定免疫球蛋白分子之類別(對應於γ、μ、α、δ及ε(gamma、mu、alpha、delta或epsilon)重鏈恆定區之IgG、IgM、IgA、IgD及IgE)。恆定區或類別決定抗體之後續效應功能，包括補體活化(參見Kabat,E.A.,Structural Concepts in Immunology and Immunochemistry ，第2版，第413-436頁，New York,NY：Holt,Rinehart,Winston(1976))及其他細胞反應(參見Andrews等人，Clinical Immuniology ，第1-18頁，W.B.Sanders,Philadelphia,PA(1980)；Kohl等人，Immunology ,48：187(1983))；而可變區決定將與其反應之抗原。輕鏈歸類為κ(kappa)或λ(lambda)。各重鏈類別可用κ或λ輕鏈製備。當藉由雜交瘤或藉由B細胞來產生免疫球蛋白時，輕鏈及重鏈彼此共價鍵結，且兩條重鏈之「尾部」部分藉由共價二硫鍵彼此鍵結。

表述「可變區」或「VR」係指抗體中各對輕鏈及重鏈內直接參與抗體與抗原結合之結構域。各重鏈在一個末端具有可變域(V_H )，隨後為許多恆定域。各輕鏈在一個末端具有可變域(V_L )而在其另一末端具有恆定域；輕鏈之恆定域與重鏈之第一恆定域對準，且輕鏈可變域與重鏈之可變域對準。

表述「互補決定區」、「高變區」或「CDR」係指存在於抗體之輕鏈或重鏈之可變區中之高變區或互補決定區(「CDR」)中之一或多者(參見Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest ，第4版.,Bethesda,MD：U.S.Dept.of Health and Human Services,Public Health Service,National Institutes of Health(1987))。此等表述包括如Kabat等人(Sequences of Proteins of Immunological Interest ,NIH公開案第91-3242號，Bethesda,MD：U.S.Dept.of Health and Human Services,National Institutes of Health(1983))所定義之高變區或抗體之3維結構中的高變環(Chothia及Lesk,J.Mol.Biol., 196：901-917(1987))。各鏈中之CDR藉由構架區(「FR」)而保持緊密鄰近，且與來自另一鏈之CDR一起有助於形成抗原結合位點。在CDR內存在已描述為選擇性決定區(SDR)之選擇胺基酸，該等選擇性決定區表示在抗體-抗原相互作用中由CDR使用之關鍵接觸殘基(參見Kashmiri等人，Methods ,36(1)：25-34(2005))。

「抗原決定基」或「結合位點」為抗原上與抗原結合肽(諸如抗體)特異性結合之範圍或區域。蛋白質抗原決定基可包含直接參與結合之胺基酸殘基(亦稱為抗原決定基之免疫優勢組分)及不直接參與結合之其他胺基酸殘基，諸如由特異性抗原結合肽有效阻斷之胺基酸殘基(換言之，該等胺基酸殘基在特異性抗原結合肽之「足跡」內)。術語抗原決定基在本文中包括在特異性結合於抗PACAP抗體之PACAP(亦即PACAP38及PACAP27)之任何特定區域中的兩種類型之胺基酸結合位點。PACAP可包含許多不同之抗原決定基，其可包括但不限於(1)線性肽抗原決定位，(2)構象抗原決定位，其由在成熟PACAP構象中彼此靠近定位之一或多個連續胺基酸組成；及(3)轉譯後抗原決定位，其完全或部分由與PACAP蛋白質共價連接之分子結構(諸如碳水化合物基團)組成。特定而言，術語「抗原決定基」包括蛋白質或肽(例如PACAP)中之特定殘基，其如藉由諸如丙胺酸掃描技術之已知及公認之方法所確定參與抗體與此類蛋白質或肽之結合。此類方法例示於本文中。

片語抗體(例如第一抗體)與另一抗體(例如第二抗體)「實質上」或「至少部分」結合相同之抗原決定基意謂第一抗體之抗原決定基結合位點包含抗原上構成第二抗體之抗原決定基結合位點的至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多之胺基酸殘基。另外，如上文所描述，第一抗體與第二抗體實質上或部分結合相同或重疊之抗原決定基意謂第一及第二抗體競爭結合於抗原。因此，術語「與單株抗體結合於實質上相同之抗原決定基或決定位」意謂一種抗體與該抗體「競爭」。

片語「與所關注之抗體結合於相同或重疊之抗原決定基或決定位」意謂抗體與該所關注之抗體「競爭」在與該所關注之抗體特異性結合之PACAP上的至少一個(例如至少2個、至少3個、至少4個、至少5個)或所有殘基。與本文所描述之單株抗體結合於實質上或基本上相同之抗原決定基的一或多種抗體之鑑別可使用丙胺酸掃描輕易地確定。另外，可評估抗體競爭之多種免疫篩選分析中之任一者。許多此類分析係常規地進行實踐且為此項技術中熟知的(參見例如1997年8月26日發佈之美國專利第5,660,827號，其以引用之方式特定地併入本文中)。應瞭解，實際上確定與本文所描述之抗體結合的抗原決定基無論如何不需要鑑別與本文所描述之單株抗體結合於相同或實質上相同或重疊之抗原決定基的抗體。

舉例而言，在所要檢驗之測試抗體獲自不同來源動物，或甚至具有不同Ig同型之情況下，可採用簡單競爭分析，其中對照抗體與測試抗體混合且然後施加於含有PACAP之樣品中。基於ELISA、放射免疫分析、西方墨點法(Western blotting)及使用BIACORE®(GE Healthcare Life Sciences,Marlborough,MA)分析之方案適合用於此類簡單競爭研究中。

在某些實施例中，在施加於PACAP38或PACAP27抗原樣品中之前，將對照抗PACAP抗體與不同量之測試抗體(例如以約1：1、1：2、1：10或約1：100之比率)預混合一段時間。在其他實施例中，對照物及不同量之測試抗體可簡單地分開添加且在暴露於PACAP38或PACAP27抗原樣品期間混合。只要結合抗體可與游離抗體區別開(例如藉由使用分離或洗滌技術來消除未結合抗體)且對照抗體可與測試抗體區別開(例如藉由使用物種特異性或同型特異性二級抗體或藉由用可偵測標記特異性標記對照抗體)，即可確定測試抗體是否降低對照抗體與PACAP38或PACAP27抗原之結合，從而表明測試抗體實質上與對照抗PACAP抗體識別相同之抗原決定基。(經標記)對照抗體在完全不相關抗體(不結合PACAP)存在下之結合可充當對照高值。對照低值可藉由將經標記對照抗體與相同但未標記之對照抗體一起孵育而獲得，其中將發生競爭且降低經標記抗體之結合。在測試分析中，在測試抗體存在下經標記抗體反應性顯著降低指示識別實質上相同之抗原決定基的測試抗體，亦即與經標記對照抗體競爭之測試抗體。舉例而言，在約1：1或1：10與約1：100之間的任何測試抗體比率下使對照抗體與PACAP38或PACAP27之結合降低至少約50%(諸如至少約60%)或更佳至少約70%(例如約65-100%)之任何測試抗體均視為與對照抗體結合於實質上相同或重疊之抗原決定基或決定位的抗體。

較佳地，此類測試抗體將使對照抗體與PACAP38或PACAP27抗原之結合降低至在不存在測試抗體情況下所觀測之對照抗體之結合的較佳至少約50%、至少約60%、至少約80%或至少約90%(例如約95%)。

亦可有利地採用以飽和濃度將測試抗體施加至固定PACAP38或PACAP27之表面的簡單競爭分析。簡單競爭分析中之表面較佳為BIACORE®(GE Healthcare Life Sciences,Marlborough,MA)晶片(或適合用於表面電漿共振(「SPR」)分析之其他培養基)。量測結合PACAP38或PACAP27之對照抗體與PACAP塗佈之表面的結合。將此單獨對照抗體之含有PACAP38或PACAP27之表面的結合與在測試抗體存在下對照抗體之結合相比較。在測試抗體存在下對照抗體對含有PACAP38或PACAP27之表面之結合顯著降低表明測試抗體與對照抗體識別實質上相同之抗原決定基，使得測試抗體與對照抗體「競爭」。使對照抗體之結合降低至少約20%或更多、至少約40%、至少約50%、至少約70%或更多之任何測試抗體均可視為與對照抗體結合於實質上相同之抗原決定基或決定位的抗體。較佳地，此類測試抗體將使對照抗體與PACAP38或PACAP27之結合降低至少約50%(例如至少約60%、至少約70%或更多)。應瞭解，對照抗體及測試抗體之順序可顛倒；亦即對照抗體可首先結合於表面且然後此後在競爭分析中使測試抗體與表面接觸。較佳地，使用例示於下文之實例9中的「三明治型」結合分析。或者，對PACAP38或PACAP27抗原具有更大親和力之抗體首先結合於含有PACAP38或PACAP27之表面，因為將預期關於第二抗體所見之結合降低(假設抗體為競爭性的)將具有更大量值。此類分析之其他實例提供於例如Saunal及Regenmortel,J.Immunol.Methods, 183：33-41(1995)中，其揭示內容係以引用之方式併入本文中。

此外，可特定而言使用基於西方墨點之分析來測定抗體與另一抗體結合在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基還是結合由測試抗體結合之抗原決定基。在此分析中，製備對應於由抗體(PACAP蛋白)結合之抗原的肽之文庫，該等肽包含蛋白質之典型地10-25、10-20或10-15胺基酸長的重疊部分。合成此等涵蓋PACAP序列之不同的重疊胺基酸肽且使其與PEPSPOTS^TM 硝基纖維素膜(JPT Peptide Technologies,Berlin,Germany)共價結合。然後製備墨點且根據製造商之建議進行探查。

基本上，免疫墨點分析然後藉由螢光手段偵測文庫中之何種肽結合於測試抗體且藉此可鑑別抗原(亦即PACAP)上之何種殘基與測試抗體相互作用。(參見美國專利第7,935,340號，其以引用之方式併入本文中)。

各種抗原決定基定位技術為此項技術中已知的。舉例而言，抗原與抗體之X射線共結晶；NMR；SPR(例如在25℃或37℃下)；基於陣列之寡肽掃描(或「肽掃描分析」)；定點誘變(例如丙胺酸掃描)；誘變定位；氫-氘交換；噬菌體展示；及限制性蛋白水解為此項技術中熟知之所有抗原決定基定位技術(參見例如Epitope Mapping Protocols：第二版，Methods in Molecular Biology ，編者Mike Schutkowski及Ulrich Reineke，第2版，New York,NY：Humana Press(2009)及Epitope Mapping Protocols,Methods in Molecular Biology， 編者Glenn Morris，第1版，New York,NY：Humana Press(1996)，該兩個專利均以全文引用之方式併入本文中)。

與本文所描述之單株抗體(例如Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H)結合於實質上或基本上相同之抗原決定基的一或多種抗體之鑑別可使用可評估抗體競爭之各種免疫篩選分析中之任一者而輕易地確定。此類分析中有許多係常規地進行實踐且為此項技術中熟知的(參見例如於1997年8月26日發佈之美國專利第5,660,827號，其以引用之方式併入本文中)。應瞭解，確定與本文所描述之抗體結合的抗原決定基無論如何不需要鑑別與本文所描述之單株抗體結合於相同或實質上相同之抗原決定基的抗體。

舉例而言，在所要檢驗之測試抗體獲自不同來源動物，或甚至具有不同之Ig同型之情況下，可採用簡單競爭分析，其中對照抗體(例如Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H中之一者)與測試抗體混合且然後施加於含有PACAP38及PACAP27中之任一者或兩者之樣品中，PACAP38及PACAP27中之每一者已知由Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H結合。基於ELISA、放射免疫分析、西方墨點法及BIACORE®(GE Healthcare Life Sciences,Marlborough,MA)分析(如本文在實例部分中所描述)之方案適合用於此類簡單競爭研究中。

在某些實施例中，該方法包括在施加於PACAP抗原樣品中之前，將對照抗體與不同量之測試抗體(例如以約1：1、1：2、1：10或約1：100之比率)預混合一段時間。在其他實施例中，對照物及不同量之測試抗體可分開添加且在暴露於PACAP抗原樣品期間混合。只要結合抗體可與游離抗體區別開(例如藉由使用分離或洗滌技術來消除未結合抗體)且對照抗體可與測試抗體區別開(例如藉由使用物種特異性或同型特異性二級抗體或藉由用可偵測標記物特異性標記對照抗體)，該方法即可用於確定測試抗體降低對照抗體與PACAP抗原之結合，從而表明測試抗體與對照抗體(例如Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H)識別實質上相同之抗原決定基。(經標記)對照抗體在完全不相關抗體(不結合PACAP)存在下之結合可充當對照高值。對照低值可藉由將經標記對照抗體與相同但未標記之對照抗體一起孵育而獲得，其中將發生競爭且降低經標記抗體之結合。在測試分析中，在測試抗體存在下經標記抗體反應性顯著降低指示識別實質上相同之抗原決定基的測試抗體，亦即與經標記對照抗體競爭之測試抗體。舉例而言，在任何對照Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H：測試抗體比率或在約1：1或1：10與約1：100之間的Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H：測試抗體比率下，使Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H與PACAP38與PACAP27抗原之結合降低至少約50%(諸如至少約60%)或更佳至少約70%(例如約65-100%)之任何測試抗體均視為分別與Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H結合於實質上相同之抗原決定基或決定位的抗體。較佳地，此類測試抗體將使Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H與PACAP38及PACAP27抗原中之至少一者、較佳每一者之結合降低至在不存在測試抗體情況下所觀測之Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H之結合的較佳至少約50%、至少約60%、至少約80%及至少約90%(例如約95%)。此等方法可適合於鑑別及/或評估與其他對照抗體競爭之抗體。

亦可有利地採用以飽和濃度將測試抗體施加至使固定PACAP38或PACAP27或兩者之表面的簡單競爭分析。簡單競爭分析中之表面較佳屬於適合於OCTET®及/或PROTEON®之培養基。量測對照抗體(例如Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H)與PACAP塗佈之表面的結合。將此單獨對照抗體與含有PACAP之表面的結合與在測試抗體存在下對照抗體之結合相比較。在測試抗體存在下對照抗體對含有PACAP之表面之結合顯著降低表明測試抗體與對照抗體識別實質上相同之抗原決定基，使得測試抗體與對照抗體「競爭」。使對照抗體(諸如Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H)與PACAP38與PACAP27抗原之結合降低至少約20%或更多、至少約40%、至少約50%、至少約70%或更多的任何測試抗體均可視為與對照抗體(例如Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H)結合於實質上相同之抗原決定基或決定位的抗體。較佳地，此類測試抗體將使對照抗體(例如Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19或Ab1.H)與PACAP抗原之結合降低至少約50%(例如至少約60%、至少約70%或更多)。應瞭解，對照抗體及測試抗體之順序可顛倒；亦即對照抗體可首先結合於表面且然後此後在競爭分析中使測試抗體與表面接觸。較佳地，對PACAP38及PACAP27具有更高親和力之抗體首先結合於含有PACAP之表面，因為將預期，關於第二抗體所見之結合降低(假設抗體為競爭性的)將具有更大量值。此類分析之其他實例提供於例如Saunal及Regenmortel,J.Immunol.Methods, 183：33-41(1989)中，其揭示內容係以引用之方式併入本文中。

確定抗體、其抗原結合片段或抗體衍生物是否結合於以上定義之抗原決定基區域中之一者內可以熟習此項技術者已知之方式進行。在此類定位/表徵方法之另一實例中，可藉由抗原決定基「足跡」使用在PACAP38及PACAP27蛋白質中暴露之胺/羧基之化學修飾來確定抗PACAP抗體之抗原決定基區域。此類足跡技術之一個特定實例為使用藉由質譜法偵測之氫-氘交換(「HXMS」)，其中受體及配位體蛋白質醯胺質子進行氫/氘交換、結合及反向交換，其中參與蛋白結合之骨架醯胺基受保護而免於反向交換且因此保持氘化。相關區域可在此點上藉由胃蛋白酶蛋白水解、快速微孔高效液相層析分離及/或電噴霧電離質譜法來鑑別(參見例如Ehring H.,Analytical Biochemistry ,267(2)：252-259,(1999)；及Engen,J.R.及Smith,D.L.,Anal.Chem. ,73：256A-265A,(2001))。適合之抗原決定基鑑別技術之另一實例為核磁共振抗原決定基定位(「NMR」)，其中典型地將游離抗原及與抗原結合肽(諸如抗體)複合之抗原的二維NMR譜中之信號的位置相比較。典型地用¹⁵ N選擇性同位素標記抗原，使得在NMR譜中僅可見到對應於抗原之信號而不可見來自抗原結合肽之信號。典型地，與在游離抗原之譜中相比，源於參與與抗原結合肽之相互作用的胺基酸的抗原信號在複合物之譜中將移動位置，且參與結合之胺基酸可以彼方式鑑別，參見例如Ernst Schering Res.Found.Workshop, (44)：149-67(2004)；Huang等人，J.Mol.Biol. ,281(1)：61-67(1998)；及Saito及Patterson,Methods, 9(3)：516-24(1996))。亦可使用質譜(「MS」)法來執行抗原決定基定位/表徵(參見例如Downard,J.Mass Spectrom. ,35(4)：493-503(2000)及Kiselar及Downard,Anal.Chem. ,71(9)：1792-801(1999))。

蛋白酶消化技術亦可在抗原決定基定位及鑑別之情形下適用。可藉由蛋白酶消化，例如藉由以約1：50之比率使用胰蛋白酶在37℃及pH 7-8下對PACAP38或PACAP27隔夜(「o/n」)消化繼而質譜(「MS」)分析進行肽鑑別來確定抗原決定位相關區域/序列。隨後可藉由將進行胰蛋白酶消化之樣品與同抗體一起培育且接著藉由例如胰蛋白酶進行消化(從而揭露抗體之足跡)之樣品相比較來鑑別由抗PACAP抗體保護而免於胰蛋白酶裂解之肽。其他酶(如糜蛋白酶或胃蛋白酶)可用於類似抗原決定基表徵方法中。此外，酶促消化可提供分析在PACAP結合多肽之情形下潛在抗原決定位序列是否處於PACAP之區域內的快速方法。若多肽未表面暴露，則其很可能在免疫原性/抗原性方面為不相關的(關於類似技術之論述，參見例如Manca,Ann.Ist.Super.Sanit

., 27(1)：15-9(1991))。

定點誘變為適合用於表徵結合抗原決定基之另一技術。舉例而言，在「丙胺酸掃描」定點誘變(亦稱為例如丙胺酸掃描、丙胺酸掃描誘變、丙胺酸掃描突變、組合丙胺酸掃描或丙胺酸點突變形成)中，通過諸如例如直接肽或蛋白質合成、定點誘變、GENEART^TM 誘變服務(Thermo Fisher Scientific,Waltham,MA U.S.A.)或獵槍誘變之方法使蛋白質區段內之各殘基經丙胺酸殘基(或另一殘基，諸如纈胺酸，其中丙胺酸存在於野生型序列中)置換。藉此使用此技術產生分子之一系列單點突變體；所產生之突變體數目等於分子中殘基之數目，各殘基一次一個地經單一丙胺酸殘基置換。丙胺酸因其可模擬許多其他胺基酸可能具有之二級結構偏好的不龐大、化學上具惰性之甲基官能基而通常用於置換天然(野生型)殘基。隨後，可使用諸如但不限於SPR結合實驗之方法來量測用丙胺酸置換天然殘基對丙胺酸掃描突變體與其結合配偶體之結合親和力具有的影響。若突變導致結合親和力顯著降低，則很可能突變殘基參與結合。對結構性抗原決定基具特異性之單株抗體(亦即不結合去摺疊蛋白質之抗體)可用作結合親和力實驗之陽性對照，以驗證丙胺酸置換不影響蛋白質之總體三級結構(因為蛋白質之總體摺疊的改變可間接影響結合且藉此產生假陽性結果)。參見例如Clackson及Wells,Science ,267：383-386(1995)；Weiss等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA ,97(16)：8950-8954(2000)；及Wells,Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 93：1-6(1996)。在實例12中，使用丙胺酸掃描法來鑑別PACAP中與本文所揭示之抗PACAP抗體特異性相互作用之特定抗原決定基或殘基。

電鏡顯微術亦可用於抗原決定基「足跡」。舉例而言，Wang等人，Nature, 355：275-278(1992)使用低溫電鏡顯微術、三維圖像再建及X射線晶體照像術之協調應用來測定天然豇豆花葉病毒衣殼表面之Fab片段的物理足跡。

其他形式之用於抗原決定基評估之「不含標記物」的分析包括SPR(商業上以BIACORE®系統(GE Healthcare Life Sciences,Marlborough,MA)形式出售)及反射干涉光譜學(「RifS」)(參見例如Fagerstam等人，Journal of Molecular Recognition, 3：208-14(1990)；Nice等人，J.Chromatogr. ,646：159-168(1993)；Leipert等人，Angew.Chem.Int.Ed. ,37：3308-3311(1998)；Kroger等人，Biosensors and Bioelectronics, 17：937-944(2002))。

表現「構架區」或「FR」係指抗體之輕鏈及重鏈之可變區內的構架區中之一或多者(參見Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest ,第4版，Bethesda,MD：U.S.Dept.of Health and Human Services,Public Health Service,National Institutes of Health(1987))。此等表述包括介於抗體之輕鏈及重鏈之可變區內的CDR之間的彼等胺基酸序列區域。

術語「Fc區」用於定義免疫球蛋白重鏈之C端區域。「Fc區」可為天然序列Fc區或變異體Fc區。雖然免疫球蛋白重鏈之Fc區的邊界可變化，但人類IgG重鏈Fc區通常定義為自位置Cys226，或自Pro230之胺基酸殘基延伸至其羧基末端。Fc區中殘基之編號為Kabat之EU索引之編號(Kabat等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest ，第5版，Bethesda,MD：U.S.Dept.of Health and Human Services,Public Health Service,National Institutes of Health(1991))。免疫球蛋白之Fc區通常包含兩個恆定域CH2及CH3。

術語「Fc受體」及「FcR」描述結合於抗體之Fc區的受體。較佳FcR為天然序列人類FcR。此外，較佳FcR為結合IgG抗體之FcR(γ受體)且包括FcγRI、FcγRII及FcγRIII子類之受體，包括對偶變異體及或者此等受體之剪接形式。FcγRII受體包括FcγRIIA(「活化受體」)及FcγRIIB(「抑制受體」)，其具有主要在其胞漿域方面有所不同之類似胺基酸序列。FcR評述於Ravetch及Kinet,Ann.Rev.Immunol. ,9：457-92(1991)；Capel等人，Immunomethods, 4：25-34(1994)；及de Haas等人，J.Lab.Clin.Med. ,126：330-41(1995)中。「FcR」亦包括新生受體FcRn，其負責將母體IgG轉移至胎兒(Guyer等人，J.Immunol. ,117：587(1976)；及Kim等人，J.Immunol. ,24：249(1994))，且其主要發揮調節及/或延長抗體在循環中之半衰期的功能。在所揭示之抗PACAP抗體經糖基化之情況下，由於表現系統及/或序列，本發明抗體預期結合FcRn受體，但不結合(或在最低程度上結合)Fcγ受體。

「功能Fc區」具有天然序列Fc區之至少一種效應功能。示例性「效應功能」包括C1q結合；補體依賴性細胞毒性(「CDC」)；Fc受體結合；抗體依賴性細胞介導之細胞毒性(「ADCC」)；噬菌作用；下調細胞表面受體(例如B細胞受體(「BCR」))等。此類效應功能通常需要Fc區與結合域(例如抗體可變域)組合且可使用此項技術中已知用於評估此類抗體效應功能之各種分析來評估。

「天然序列Fc區」包含與自然界中存在之Fc區的胺基酸序列一致之胺基酸序列。「變異體Fc區」包含由於至少一個胺基酸修飾而不同於天然序列Fc區但保留天然序列Fc區之至少一種效應功能的胺基酸序列。較佳地，變異體Fc區與天然序列Fc區或與親本多肽之Fc區相比，例如來自約一個至約十胺基酸取代具有至少一個胺基酸取代，且較佳在天然序列Fc區中或在親本多肽之Fc區中之約一個至約五個胺基酸取代。本文之變異體Fc區將較佳與天然序列Fc區及/或與親本多肽之Fc區具有至少約80%序列一致性，且最佳與其具有至少約90%序列一致性，更佳與其具有至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%或至少約99%序列一致性。

對PACAP具有結合活性之抗PACAP抗體及其結合片段

PACAP為在整個中樞神經系統(「CNS」)及周邊表現之多功能血管舒張肽。PACAP為分泌素/VIP/GRH家族之成員。PACAP以兩種α-醯胺化活性形式存在：PACAP38(SEQ ID NO：1241)及PACAP27(SEQ ID NO：1242)。在本文中，除非明確指示，否則術語「PACAP」包括PACAP38及PACAP27中之任一者或兩者。PACAP在物種之間為高度保守的。

在人類中，PACAP衍生自176胺基酸前驅蛋白(preproPACAP)且該基因位於染色體18p11，其中PACAP38由外顯子5編碼(Vaudry等人，Pharmacol.Rev., 61：283-357(2009))。preproPACAP含有N端24胺基酸信號蛋白、29胺基酸PACAP相關肽及C端結構域中之PACAP。前驅體由激素原轉化酶代謝成生物活性PACAP38及PACAP27。

VIP(SEQ ID NO：1243)與PACAP屬於相同蛋白質家族且與PACAP享有高同源性，亦即VIP與PACAP27在胺基酸層面上具有68%序列同源性以及類似之總體二級結構，亦即在C端之長α-螺旋結構。

PACAP之作用係經由三種不同之G蛋白偶合受體介導：PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R。VPAC1-R可與所有受體相關膜蛋白(「RAMP」，Kaiser及Russo,Neuropeptides ,47：451-461(2013))締合。PAC1-R對PACAP具選擇性，而VPAC1-R及VPAC2-R以高親和力結合於VIP與PACAP兩者。PAC1-R以比VIP高100-1000倍之親和力結合於PACAP，亦即對於PACAP27/PACAP38而言K_D 為約0.5nM相較於對於VIP而言K_D 為約500nM。相反地，VPAC1-R及VPAC2-R對於PACAP及VIP具有相同親和力(K_D 為約1nM)(參見Schytz等人(2010))。所有三種受體廣泛表現於周圍組織與CNS中，其中PAC1-R主要表現CNS中，在嗅球、丘腦、下丘腦、海馬之齒狀廻及小腦之顆粒細胞中最豐富(Hashimoto等人，J.Comp.Neurol., 371：567-577(1996)；Shioda等人，Neurosci.Res., 28：345-354(1997))。

PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R之活化使得腺苷酸環化酶活性增加且因此cAMP產量增加。然而，PACAP受體亦可通過PLC介導其效應，從而產生增加之Ca²⁺ 含量及PLD。

PACAP具有廣泛範圍之生物效應，包括在神經發育、神經保護、神經調節、神經原性炎症及傷害感受中之作用。PACAP亦經報導與醣胺聚醣(「GAG」)相互作用。GAG為由重複二醣單元組成之長不分枝多醣，諸如肝素、軟骨素、角蛋白及透明質酸。已證實PACAP之細胞吸收取決於GAG蛋白之表現且PACAP結合於硫酸化GAG。特定而言，確定結合於GAG之PACAP38能夠誘導PACAP38之非受體依賴性細胞吸收。此研究進一步證實，PACAP38中之無規捲繞-至-α-螺旋轉變為PACAP38之GAG依賴性吸收所必需的，因為不能經歷結構轉變之突變體PACAP38不像PACAP38之野生型形式那樣有效地由含GAG細胞株內化(Neree等人，FEBS Lett. ,588(24)：4590-4596,2014)。在跟蹤研究中，確定PACAP群集GAG(亦即肝素)之能力與其充當細胞穿透肽(「CPP」)之能力直接相關。假定此活性可歸因於在分泌素/胰高血糖素/GHRH家族成員(諸如PACAP)中存在之肝素結合或Cardin-Weintraub模體(Neree等人，Int.J.Mol.Sci. ,16：27391-27400,2015)。有趣地，Neree等人(2015)呈現證實PACAP38能夠在活體外群集硫酸化GAG之資料。此等資料表明，所觀測到之群集效應對於GAG介導之PACAP38細胞吸收而言為重要的，因為其他肽(諸如胰高血糖素)對硫酸化GAG(肝素)展示更高結合親和力但不像PACAP38那樣有效地由細胞內化。另外，據報導，在細胞暴露於PACAP之活體外研究中，軟骨形成增加，包括富含硫酸化GAG蛋白之軟骨基質，此與其在各種細胞應激反應期間表現之推定保護性作用一致(Juhász等人，PLoS ONE ,9(3)：e91541,2014)。使用在質膜上缺少PACAP特異性受體之細胞類型，諸如CHO-K1細胞，Doan等人呈現證實此類細胞參與各種形式之螢光標記PACAP38及PACAP27之非受體依賴性細胞吸收之能力的資料(Doan等人，Biochem.Biophys.Acta ,1823：940-949,2012)。

本發明提供結合PACAP(包括人類PACAP)之示例性抗體或其抗原結合片段。結合PACAP之其他抗體或其抗原結合片段(包括具有不同CDR及抗原決定基特異性之彼等)可使用本說明書之揭示內容及使用此項技術中通常已知之方法使用獲得。此類抗體及其抗原結合片段拮抗PACAP在活體內之生物效應且因此適合用於治療或預防PACAP相關病狀，包括例如頭痛、偏頭痛、疼痛、畏光、熱潮紅、PTSD及焦慮障礙。在較佳實施例中，根據本發明之抗體或其抗原結合片段包含本文所描述之抗PACAP抗體及其抗原結合片段之一或多個CDR、V_L 鏈及/或V_H 鏈。

在一些實施例中，根據本發明之抗PACAP抗體或其抗原結合片段將妨礙、阻斷、降低或調節PACAP與其受體(例如PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R)之間的相互作用。在一些情況下，根據本發明之抗PACAP抗體或其抗原結合片段為「中和」的，例如其完全阻止PACAP與PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R之特異性相互作用。在一些實施例中，抗體或其抗原結合片段中和PACAP，例如藉由在阻止PACAP特異性結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R之位置及/或以此方式保持結合於PACAP。

在一些實施例中，根據本發明之抗體或其抗原結合片段能夠抑制PACAP介導之活性(包括結合於PAC1-R-表現細胞)。在一些實施例中，根據本發明之抗體或其抗原結合片段為人類化的，諸如針對PACAP之人類化兔抗體。

如所提及，根據本發明之抗PACAP抗體或其抗原結合片段具有多種用途。舉例而言，本發明抗體及片段可適合用於治療應用，以及診斷性地用於結合分析中。本發明抗PACAP抗體或其抗原結合片段適用於PACAP(尤其人類PACAP或其配位體)之親和力純化及用於鑑別PACAP活性之其他拮抗劑的篩選分析。一些抗體或其抗原結合片段適用於抑制PACAP與PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R之結合，或抑制PACAP介導之活性及/或生物效應。

如本文所用，術語「與PACAP相關之一或多種生物效應」係指由PACAP介導、誘導或以其他方式可歸因於PACAP之任何生物效應，例如結合特性、功能特性及具有生物重要性之其他特性。PACAP之非限制性示例性生物效應包括PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R； PACAP活化PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R介導之信號傳導；PACAP介導之cAMP產量增加；PACAP介導之PLC活性增加；PACAP介導之PLD活性增加；PACAP介導之Ca²⁺ 含量增加；及PACAP介導之血管舒張、畏光、肥大細胞去顆粒作用及/或神經元活化。本發明抗PACAP抗體能夠抑制此等示例性PACAP生物活性中之一者、其組合或全部。舉例而言，本文提供之抗PACAP抗體及其抗原結合片段能夠抑制PACAP誘導之血管舒張(參見實例7及實例8)。

根據本發明之抗體或其抗原結合片段可用於多種治療應用。舉例而言，在一些實施例中，抗PACAP抗體或其抗原結合片段適用於治療與PACAP相關之病狀，諸如但不限於偏頭痛(具有或不具有預兆)、偏癱性偏頭痛、從集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、緊張性頭痛、一般頭痛、熱潮紅、畏光、慢性陣發性偏頭痛、歸因於頭部或頸部之潛在結構問題的繼發性頭痛、顱神經痛、竇性頭痛(例如與竇炎相關之頭痛)、過敏反應誘導之頭痛或偏頭痛、疼痛、慢性疼痛、神經炎性或炎性疼痛、手術後切口疼痛、手術後疼痛、外傷相關疼痛、眼睛疼痛、牙齒疼痛、複合區域性疼痛症候群、癌症疼痛(例如原發性或轉移性骨癌疼痛)、骨折疼痛、骨質疏鬆性骨折疼痛、由灼傷引起之疼痛、痛風性關節疼痛、與鐮狀細胞危象相關之疼痛、與顳下頜病症相關之疼痛、肝硬化、肝炎、神經原性疼痛、神經性疼痛、傷害性疼痛、內臟疼痛、三叉神經痛、皰疹後神經痛、幻肢痛、纖維肌痛、月經疼痛、卵巢痛、反射交感性營養不良、骨關節炎或類風濕性關節炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經病變、坐骨神經痛、消化不良、腸易激症候群、炎性腸道疾病、克羅恩氏病、迴腸炎、潰瘍性結腸炎、腎絞痛、痛經、膀胱炎、間質性膀胱炎、月經期、分娩、絕經期、胰臟炎、精神分裂症、抑鬱症、PTSD、焦慮障礙、糖尿病、自體免疫糖尿病、內皮功能障礙、缺血、雷諾氏症候群、冠心病(「CHD」)、冠狀動脈疾病(「CAD」)、心臟衰竭、周圍動脈疾病(「PAD」)、肺動脈高血壓(「PH」)、結締組織病症、中風、休格倫氏症候群、多發性硬化、枝氣管高反應性、氣喘、枝氣管炎、枝氣管擴張、肺氣腫、慢性阻塞性肺病(「COPD」)、炎性皮炎、腺組織中之腺癌瘤、器官之胚性組織中的胚細胞瘤、上皮組織中之癌瘤、形成血細胞之組織中的白血病、淋巴組織中之淋巴瘤、骨髓中之骨髓瘤、結締組織或支持組織中之肉瘤、腎上腺癌、愛滋病相關淋巴瘤、貧血、膀胱癌、骨癌、腦癌、乳癌、類癌瘤腫瘤、子宮頸癌、化學治療、結腸癌、血細胞減少症、子宮內膜癌、食管癌、胃癌、頭癌、頸癌、肝膽癌、腎癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏病、神經系統腫瘤、口腔癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、直腸癌、皮膚癌、胃癌、睪丸癌、甲狀腺癌、尿道癌、骨髓癌、多發性骨髓瘤、轉移到骨骼之腫瘤、浸潤神經及空腔性臟器之腫瘤、神經結構附近之腫瘤、尋常痤瘡、異位性皮炎、蕁麻疹、瘢痕瘤、肥厚性瘢痕及紅斑痤瘡、過敏性皮炎、銀屑病、瘙癢、神經原性皮膚發紅、紅斑、重量減輕、厭食、結節病、休克、敗血病、鴉片劑戒斷症候群、嗎啡耐受、癲癇症、LUT病症，諸如泌尿道感染、排泄異常、尿急、夜尿症、尿失禁、膀胱過度活動症；且用於預防或緩解與此類LUT病狀相關之疼痛。

內臟疼痛(亦即與內臟或身體之內部器官相關之疼痛)的特定實例包括影響諸如以下之器官的疼痛：心臟、肺臟、生殖器官、膀胱、輸尿管、消化器官、肝臟、胰臟、脾臟及腎。與此相關之病狀包括例如胰臟炎、分娩、與腸梗阻相關之腹部外科手術、膀胱炎、月經期或痛經。同樣地，腎疼痛、上腹痛、胸膜痛及令人痛苦之膽絞痛、闌尾炎疼痛全部可視為內臟疼痛。胸骨下疼痛或來自早期心肌梗塞之壓力亦為內臟痛。胃部、十二指腸或結腸之疾病可引起內臟疼痛。通常遇到之引起內臟疼痛之胃腸道(「GI」)病症包括功能性腸道病症(「FBD」)及炎性腸道疾病(「IBD」)。此類GI病症可進一步包括胃-食管回流、消化不良、腸易激症候群(「IBS」)及功能性腹痛症候群(「FAPS」)及就IBD而言，克羅恩氏病、迴腸炎及潰瘍性結腸炎。

本發明抗PACAP抗體及其抗原結合片段可單獨或與包括其他生物製品之其他活性劑或藥物結合使用，以治療任何個體，其中在治療上需要阻斷、抑制或中和PACAP之活體內效應或阻斷或抑制PACAP與其受體PAC1-R、VPAC1-R及VPAC2-R之相互作用。

此部分中鑑別根據本發明之示例性抗PACAP抗體及其抗原結合片段及其特異性CDR。出於方便之目的，各所例示抗體或其抗原結合片段及對應序列係藉由特定名稱分開鑑別，亦即Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18及Ab19。

構成本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段對PACAP具有結合親和力，其中該結合親和力包含抗PACAP抗體或其抗原結合片段特異性結合於PACAP38及PACAP27，但不結合VIP，及/或抗體或其抗原結合片段特異性結合於PACAP38，但不結合於PACAP27或VIP，及/或抗體或其抗原結合片段特異性結合於PACAP38及/或PACAP27內之線性及/或構象抗原決定基。更特定而言，與根據本發明之拮抗性抗PACAP抗體或其抗原結合片段結合之PACAP38及/或PACAP27之抗原決定基將包括在實例12及/或其他抗原決定基鑑別方法中所鑑別之彼等或其殘基(如藉由使用丙胺酸掃描所測定)。

示例性抗PACAP抗體多肽序列

抗體Ab1

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：1之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：2之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：10之重鏈恆定區組成。

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含以下所闡述之序列的可變重鏈序列：

(SEQ ID NO：2)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab1結合相同之抗原決定基，且含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：10)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：21之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：22之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：30之輕鏈恆定區組成。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含以下所闡述之序列的可變輕鏈序列：

(SEQ ID NO：22)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab1結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：30)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：1之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：6；及SEQ ID NO：8之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：2之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：21之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：24；SEQ ID NO：26；及SEQ ID NO：28之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：1之重鏈序列或SEQ ID NO：2之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：5；SEQ ID NO：7；及SEQ ID NO：9之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：21之輕鏈序列或SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：23；SEQ ID NO：25；SEQ ID NO：27；及SEQ ID NO：29之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段或片段包含以上所闡述之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2之多肽序列或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：21或SEQ ID NO：22之多肽序列或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：1之重鏈序列或SEQ ID NO：2之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：6；及SEQ ID NO：8之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：21之輕鏈序列或SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：24；SEQ ID NO：26；及SEQ ID NO：28之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：1之重鏈序列或SEQ ID NO：2之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：5；SEQ ID NO：7；及SEQ ID NO：9之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：21之輕鏈序列或SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：23；SEQ ID NO：25；SEQ ID NO：27；及SEQ ID NO：29之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：2之可變重鏈區；SEQ ID NO：22之可變輕鏈區；SEQ ID NO：2之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：6；及SEQ ID NO：8)；及SEQ ID NO：22之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：24；SEQ ID NO：26；及SEQ ID NO：28)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：2之可變重鏈區；SEQ ID NO：22之可變輕鏈區；SEQ ID NO：2之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：5；SEQ ID NO：7；及SEQ ID NO：9)；及SEQ ID NO：22之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：23；SEQ ID NO：25；SEQ ID NO：27；及SEQ ID NO：29)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：1及SEQ ID NO：21，或SEQ ID NO：2及SEQ ID NO：22或者由其組成之Ab1，或包含Ab1之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab1競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab1至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab1結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab1而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：2之可變重鏈序列及SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：2及/或SEQ ID NO：22之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab1之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab1)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab1之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab1.H

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：41之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：42之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：50之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：42)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab1.H結合相同之抗原決定基，且其含有包含 SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：50)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：61之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：62之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：70之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：62)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab1.H結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：70)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：41之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：44；SEQ ID NO：46；及SEQ ID NO：48之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：42之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：61之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：64；SEQ ID NO：66；及SEQ ID NO：68之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：41之重鏈序列或SEQ ID NO：42之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：43；SEQ ID NO：45；SEQ ID NO：47；及SEQ ID NO：49之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：61之輕鏈序列或SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：63；SEQ ID NO：65；SEQ ID NO：67；及SEQ ID NO：69之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：41或SEQ ID NO：42之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：61或SEQ ID NO：62之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：41之重鏈序列或SEQ ID NO：42之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：44；SEQ ID NO：46；及SEQ ID NO：48之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：61之輕鏈序列或SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：64；SEQ ID NO：66；及SEQ ID NO：68之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：41之重鏈序列或SEQ ID NO：42之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：43；SEQ ID NO：45；SEQ ID NO：47；及SEQ ID NO：49之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：61之輕鏈序列或SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：63；SEQ ID NO：65；SEQ ID NO：67；及SEQ ID NO：69之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：42之可變重鏈區；SEQ ID NO：62之可變輕鏈區；SEQ ID NO：42之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：44；SEQ ID NO：46；及SEQ ID NO：48)；及SEQ ID NO：62之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：64；SEQ ID NO：66；及SEQ ID NO：68)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：42之可變重鏈區；SEQ ID NO：62之可變輕鏈區；SEQ ID NO：42之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：43；SEQ ID NO：45；SEQ ID NO：47；及SEQ ID NO：49)；及SEQ ID NO：62之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：63；SEQ ID NO：65；SEQ ID NO：67；及SEQ ID NO：69)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：41及SEQ ID NO：61，或SEQ ID NO：42及SEQ ID NO：62或者由其組成之Ab1.H，或包含Ab1.H之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab1.H競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab1.H至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab1.H結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab1.H而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：42之可變重鏈序列及SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：42及/或SEQ D NO：62之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab1.H之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab1.H)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab1.H之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab2

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：81之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：82之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：90之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：82)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab2結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：90)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：101之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：102之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：110之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：102)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab2結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：110)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：81之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：84；SEQ ID NO：86；及SEQ ID NO：88之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：82之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：101之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：104；SEQ ID NO：106；及SEQ ID NO：108之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：81之重鏈序列或SEQ ID NO：82之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：83；SEQ ID NO：85；SEQ ID NO：87；及SEQ ID NO：89之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：101之輕鏈序列或SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：105；SEQ ID NO：107；及SEQ ID NO：109之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：81或SEQ ID NO：82之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：101或SEQ ID NO：102之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：81之重鏈序列或SEQ ID NO：82之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：84；SEQ ID NO：86；及SEQ ID NO：88之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：101之輕鏈序列或SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：104；SEQ ID NO：106；及SEQ ID NO：108之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：81之重鏈序列或SEQ ID NO：82之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：83；SEQ ID NO：85；SEQ ID NO：87；及SEQ ID NO：89之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：101之輕鏈序列或SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：105；SEQ ID NO：107；及SEQ ID NO：109之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：82之可變重鏈區；SEQ ID NO：102之可變輕鏈區；SEQ ID NO：82之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：84；SEQ ID NO：86；及SEQ ID NO：88)；及SEQ ID NO：102之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：104；SEQ ID NO：106；及SEQ ID NO：108)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：82之可變重鏈區；SEQ ID NO： 102之可變輕鏈區；SEQ ID NO：82之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：83；SEQ ID NO：85；SEQ ID NO：87；及SEQ ID NO：89)；及SEQ ID NO：102之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：105；SEQ ID NO：107；及SEQ ID NO：109)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：81及SEQ ID NO：101，或SEQ ID NO：82及SEQ ID NO：102或者由其組成之Ab2，或包含Ab2之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab2競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab2至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab2結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab2而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：82之可變重鏈序列及SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：82及/或SEQ ID NO：102之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab2之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab2)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab2之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab3

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：681之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：682之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：690之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：682)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab3結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：690)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：701之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：702之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：710之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：702)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab3結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：710)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：681之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：684；SEQ ID NO：686；及SEQ ID NO：688之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：682之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：701之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：704；SEQ ID NO：706；及SEQ ID NO：708之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：681之重鏈序列或SEQ ID NO：682之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：683；SEQ ID NO：685；SEQ ID NO：687；及SEQ ID NO：689之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：701之輕鏈序列或SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：703；SEQ ID NO：705；SEQ ID NO：707；及SEQ ID NO：709之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：681或SEQ ID NO：682之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：701或SEQ ID NO：702之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：681之重鏈序列或SEQ ID NO：682之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：684；SEQ ID NO：686；及SEQ ID NO：688之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：701之輕鏈序列或SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：704；SEQ ID NO：706；及SEQ ID NO：708之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：681之重鏈序列或SEQ ID NO：682之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：683；SEQ ID NO：685；SEQ ID NO：687；及SEQ ID NO：689之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：701之輕鏈序列或SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：703；SEQ ID NO：705；SEQ ID NO：707；及SEQ ID NO：709之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：682之可變重鏈區；SEQ ID NO：702之可變輕鏈區；SEQ ID NO：682之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：684；SEQ ID NO：686；及SEQ ID NO：688)；及SEQ ID NO：702之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：704；SEQ ID NO：706；及SEQ ID NO：708)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：682之可變重鏈區；SEQ ID NO：682之可變輕鏈區；SEQ ID NO：682之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：683；SEQ ID NO：685；SEQ ID NO：687；及SEQ ID NO：689)；及SEQ ID NO：702之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：703；SEQ ID NO：705；SEQ ID NO：707；及SEQ ID NO：709)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：681及SEQ ID NO：701，或SEQ ID NO：682及SEQ ID NO：702或者由其組成之Ab3，或包含Ab3之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab3競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab3至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab3結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab3而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：682之可變重鏈序列及SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：682及/或SEQ ID NO：702之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab3之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab3)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab3之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab4

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：641之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：642之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：650之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：642)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab4結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：650)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：661之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：662之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：670之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：662)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab4結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：670)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：641之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：644；SEQ ID NO：646；及SEQ ID NO：648之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：642之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：661之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：664；SEQ ID NO：666；及SEQ ID NO：668之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：641之重鏈序列或SEQ ID NO：642之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：643；SEQ ID NO：645；SEQ ID NO：647；及SEQ ID NO：649之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：661之輕鏈序列或SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：663；SEQ ID NO：665；SEQ ID NO：667；及SEQ ID NO：669之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：641或SEQ ID NO：642之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：661或SEQ ID NO：662之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：641之重鏈序列或SEQ ID NO：642之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：644；SEQ ID NO：646；及SEQ ID NO：648之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：661之輕鏈序列或SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：664；SEQ ID NO：666；及SEQ ID NO：668之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：641之重鏈序列或SEQ ID NO：642之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：643；SEQ ID NO：645；SEQ ID NO：647；及SEQ ID NO：649之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：661之輕鏈序列或SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：663；SEQ ID NO：665；SEQ ID NO：667；及SEQ ID NO：669之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：642之可變重鏈區；SEQ ID NO：662之可變輕鏈區；SEQ ID NO：642之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：644；SEQ ID NO：646；及SEQ ID NO：648)；及SEQ ID NO：662之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：664；SEQ ID NO：666；及SEQ ID NO：668)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：642之可變重鏈區；SEQ ID NO：662之可變輕鏈區；SEQ ID NO：642之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：643；SEQ ID NO：645；SEQ ID NO：647；及SEQ ID NO：649)；及SEQ ID NO：662之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：663；SEQ ID NO：665；SEQ ID NO：667；及SEQ ID NO：669)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：641及SEQ ID NO：661，或SEQ ID NO：642及SEQ ID NO：662或者由其組成之Ab4，或包含Ab4之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab4競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab4至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab4結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab4而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：642之可變重鏈序列及SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：642及/或SEQ ID NO：662之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab4之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab4)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab4之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab5

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：481之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：482之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：490之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：482)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab5結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：490)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：501之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：502之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：510之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：502)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab5結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：510)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：481之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：484；SEQ ID NO：486；及SEQ ID NO：488之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：482之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：501之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：504；SEQ ID NO：506；及SEQ ID NO：508之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：502之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：481之重鏈序列或SEQ ID NO：482之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：483；SEQ ID NO：485；SEQ ID NO：487；及SEQ ID NO：489之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：501之輕鏈序列或SEQ ID NO：502之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：505；SEQ ID NO：507；及SEQ ID NO：509之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：481或SEQ ID NO：482之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：501或SEQ ID NO：502之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：481之重鏈序列或SEQ ID NO：482之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：484；SEQ ID NO：486；及SEQ ID NO：488之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：501之輕鏈序列或SEQ ID NO： 502之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：504；SEQ ID NO：506；及SEQ ID NO：508之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：481之重鏈序列或SEQ ID NO：482之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：483；SEQ ID NO：485；SEQ ID NO：487；及SEQ ID NO：489之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：501之輕鏈序列或SEQ ID NO：502之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：505；SEQ ID NO：507；及SEQ ID NO：509之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：482之可變重鏈區；SEQ ID NO：502之可變輕鏈區；SEQ ID NO：482之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：484；SEQ ID NO：486；及SEQ ID NO：488)；及SEQ ID NO：502之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：504；SEQ ID NO：506；及SEQ ID NO：508)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：482之可變重鏈區；SEQ ID NO：502之可變輕鏈區；SEQ ID NO：482之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：483；SEQ ID NO：485；SEQ ID NO：487；及SEQ ID NO：489)；及SEQ ID NO：502之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：505；SEQ ID NO：507；及SEQ ID NO：509)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：481及SEQ ID NO：501，或SEQ ID NO：482及SEQ ID NO：502或者由其組成之Ab5，或包含Ab5之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab5競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab5至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab5結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab5而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：482之可變重鏈序列及SEQ ID NO：502之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：482及/或SEQ ID NO：502之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab5之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab5)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab5之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab6

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：721之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：722之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：730之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：722)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab6結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：730)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：741之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：742之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：750之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：742)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab6結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：750)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：721之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：724；SEQ ID NO：726；及SEQ ID NO：728之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：722之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：741之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：744；SEQ ID NO：746；及SEQ ID NO：748之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：721之重鏈序列或SEQ ID NO：722之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：723；SEQ ID NO：725；SEQ ID NO：727；及SEQ ID NO：729之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：741之輕鏈序列或SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：743；SEQ ID NO：745；SEQ ID NO：747；及SEQ ID NO：749之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：721或SEQ ID NO：722之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：741或SEQ ID NO：742之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：721之重鏈序列或SEQ ID NO：722之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：724；SEQ ID NO：726；及SEQ ID NO：728之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：741之輕鏈序列或SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：744；SEQ ID NO：746；及SEQ ID NO：748之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：721之重鏈序列或SEQ ID NO：722之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：723；SEQ ID NO：725；SEQ ID NO：727；及SEQ ID NO：729之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：741之輕鏈序列或SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：743；SEQ ID NO：745；SEQ ID NO：747；及SEQ ID NO：749之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：722之可變重鏈區；SEQ ID NO：742之可變輕鏈區；SEQ ID NO：722之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：724；SEQ ID NO：726；及SEQ ID NO：728)；及SEQ ID NO：742之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：744；SEQ ID NO：746；及SEQ ID NO：748)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：722之可變重鏈區；SEQ ID NO：742之可變輕鏈區；SEQ ID NO：722之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：723；SEQ ID NO：725；SEQ ID NO：727；及SEQ ID NO：729)；及SEQ ID NO：742之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：743；SEQ ID NO：745；SEQ ID NO：747；及SEQ ID NO：749)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：721及SEQ ID NO：741，或SEQ ID NO：722及SEQ ID NO：742或者由其組成之Ab6，或包含Ab6之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab6競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab6至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab6結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab6而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：722之可變重鏈序列及SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：722及/或SEQ ID NO：742之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab6之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab6)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab6之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者 (包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab7

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：521之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：522之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：530之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：522)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab7結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：530)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：541之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：542之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：550之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：542)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab7結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：550)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：521之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：524；SEQ ID NO：526；及SEQ ID NO：528之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：522之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：541之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：544；SEQ ID NO：546；及SEQ ID NO：548之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：521之重鏈序列或SEQ ID NO：522之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：523；SEQ ID NO：525；SEQ ID NO：527；及SEQ ID NO：529之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：541之輕鏈序列或SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：545；SEQ ID NO：547；及SEQ ID NO：549之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：521或SEQ ID NO：522之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：541或SEQ ID NO：542之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：521之重鏈序列或SEQ ID NO：522之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：524；SEQ ID NO：526；及SEQ ID NO：528之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：541之輕鏈序列或SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：544；SEQ ID NO：546；及SEQ ID NO：548之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：521之重鏈序列或SEQ ID NO：522之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：523；SEQ ID NO：525；SEQ ID NO：527；及SEQ ID NO：529之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：541之輕鏈序列或SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：545；SEQ ID NO：547；及SEQ ID NO：549之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：522之可變重鏈區；SEQ ID NO：542之可變輕鏈區；SEQ ID NO：522之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：524；SEQ ID NO：526；及SEQ ID NO：528)；及SEQ ID NO：542之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：544；SEQ ID NO：546；及SEQ ID NO：548)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：522之可變重鏈區；SEQ ID NO：542之可變輕鏈區；SEQ ID NO：522之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：523；SEQ ID NO：525；SEQ ID NO：527；及SEQ ID NO：529)；及SEQ ID NO：542之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：545；SEQ ID NO：547；及SEQ ID NO：549)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：521及SEQ ID NO：541，或SEQ ID NO：522及SEQ ID NO：542或者由其組成之Ab7，或包含Ab7之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab7競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab7至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab7結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab7而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：522之可變重鏈序列及SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：522及/或SEQ ID NO：542之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由 Ab7之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab7)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab7之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab8

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：761之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：762之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：770之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：762)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab8結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：770)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：781之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：782之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：790之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：782)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab8結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：790)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：761之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：764；SEQ ID NO：766；及SEQ ID NO：768之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：762之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：781之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：784；SEQ ID NO：786；及SEQ ID NO：788之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：761之重鏈序列或SEQ ID NO：762之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：763；SEQ ID NO：765；SEQ ID NO：767；及SEQ ID NO：769之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：781之輕鏈序列或SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：783；SEQ ID NO：785；SEQ ID NO：787；及SEQ ID NO：789之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：761或SEQ ID NO：762之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：781或SEQ ID NO：782之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：761之重鏈序列或SEQ ID NO：762之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：764；SEQ ID NO：766；及SEQ ID NO：768之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：781之輕鏈序列或SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：784；SEQ ID NO：786；及SEQ ID NO：788之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：761之重鏈序列或SEQ ID NO： 762之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：763；SEQ ID NO：765；SEQ ID NO：767；及SEQ ID NO：769之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：781之輕鏈序列或SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：783；SEQ ID NO：785；SEQ ID NO：787；及SEQ ID NO：789之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：762之可變重鏈區；SEQ ID NO：782之可變輕鏈區；SEQ ID NO：762之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：764；SEQ ID NO：766；及SEQ ID NO：768)；及SEQ ID NO：782之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：784；SEQ ID NO：786；及SEQ ID NO：788)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：762之可變重鏈區；SEQ ID NO：782之可變輕鏈區；SEQ ID NO：762之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：763；SEQ ID NO：765；SEQ ID NO：767；及SEQ ID NO：769)；及SEQ ID NO：782之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：783；SEQ ID NO：785；SEQ ID NO：787；及SEQ ID NO：789)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：761及SEQ ID NO：781，或SEQ ID NO：762及SEQ ID NO：782或者由其組成之Ab8，或包含Ab8之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab8競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab8至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab8結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab8而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：762之可變重鏈序列及SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：762及/或SEQ ID NO：782之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab8之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab8)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab8之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab9

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：801之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：802之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：810之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：802)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab9結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：810)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：821之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：822之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：830之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：822)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab9結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：830)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：801之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：804；SEQ ID NO：806；及SEQ ID NO：808之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：802之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：821之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：824；SEQ ID NO：826；及SEQ ID NO：828之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：801之重鏈序列或SEQ ID NO：802之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：803；SEQ ID NO：805；SEQ ID NO：807；及SEQ ID NO：809之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：821之輕鏈序列或SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：823；SEQ ID NO：825；SEQ ID NO：827；及SEQ ID NO：829之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：801或SEQ ID NO：802之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：821或SEQ ID NO：822之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：801之重鏈序列或SEQ ID NO：802之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：804；SEQ ID NO：806；及SEQ ID NO：808之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或 95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：821之輕鏈序列或SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：824；SEQ ID NO：826；及SEQ ID NO：828之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：801之重鏈序列或SEQ ID NO：802之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：803；SEQ ID NO：805；SEQ ID NO：807；及SEQ ID NO：809之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：821之輕鏈序列或SEQ ID NQ：822之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：823；SEQ ID NO：825；SEQ ID NO：827；及SEQ ID NO：829之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：802之可變重鏈區；SEQ ID NO：822之可變輕鏈區；SEQ ID NO：802之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：804；SEQ ID NO：806；及SEQ ID NO：808)；及SEQ ID NO：822之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：824；SEQ ID NO：826；及SEQ ID NO：828)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：802之可變重鏈區；SEQ ID NO：822之可變輕鏈區；SEQ ID NO：802之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：803；SEQ ID NO：805；SEQ ID NO：807；及SEQ ID NO：809)；及SEQ ID NO：822之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：823；SEQ ID NO： 825；SEQ ID NO：827；及SEQ ID NO：829)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：801及SEQ ID NO：821，或SEQ ID NO：802及SEQ ID NO：822或者由其組成之Ab9，或包含Ab9之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab9競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab9至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab9結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab9而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：802之可變重鏈序列及SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：802及/或SEQ ID NO：822之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab9之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab9)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab9之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab11

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：561之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：562之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：570之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：562)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab11結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：570)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：581之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：582之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：590之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：582)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab11結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：590)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：561之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：564；SEQ ID NO：566；及SEQ ID NO：568之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：562之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：581之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：584；SEQ ID NO：586；及SEQ ID NO：588之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：561之重鏈序列或SEQ ID NO：562之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：563；SEQ ID NO：565；SEQ ID NO：567；及SEQ ID NO：569之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：581之輕鏈序列或SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：585；SEQ ID NO：587；及SEQ ID NO：589之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：561或SEQ ID NO：562之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：581或SEQ ID NO：582之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：561之重鏈序列或SEQ ID NO：562之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：564；SEQ ID NO：566；及SEQ ID NO：568之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：581之輕鏈序列或SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：584；SEQ ID NO：586；及SEQ ID NO：588之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：561之重鏈序列或SEQ ID NO：562之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：563；SEQ ID NO：565；SEQ ID NO：567；及SEQ ID NO：569之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：581之輕鏈序列或SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：585；SEQ ID NO：587；及SEQ ID NO：589之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：562之可變重鏈區；SEQ ID NO：582之可變輕鏈區；SEQ ID NO：562之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO： 564；SEQ ID NO：566；及SEQ ID NO：568)；及SEQ ID NO：582之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：584；SEQ ID NO：586；及SEQ ID NO：588)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：562之可變重鏈區；SEQ ID NO：582之可變輕鏈區；SEQ ID NO：562之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：563；SEQ ID NO：565；SEQ ID NO：567；及SEQ ID NO：569)；及SEQ ID NO：582之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：585；SEQ ID NO：587；及SEQ ID NO：589)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：561及SEQ ID NO：581，或SEQ ID NO：562及SEQ ID NO：582或者由其組成之Ab11，或包含Ab11之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab11競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab11至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab11結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab11而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：562之可變重鏈序列及SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：562及/或SEQ ID NO：582之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab11之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab11)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab11之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab12

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：601之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：602之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：610之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：602)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab12結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：610)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：621之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：622之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：630之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：622)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab12結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：630)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：601之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：604；SEQ ID NO：606；及SEQ ID NO：608之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：602之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：621之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：624；SEQ ID NO：626；及SEQ ID NO：628之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：601之重鏈序列或SEQ ID NO：602之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：603；SEQ ID NO：605；SEQ ID NO：607；及SEQ ID NO：609之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：621之輕鏈序列或SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的 SEQ ID NO：623；SEQ ID NO：625；SEQ ID NO：627；及SEQ ID NO：629之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：601或SEQ ID NO：602之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：621或SEQ ID NO：622之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：601之重鏈序列或SEQ ID NO：602之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：604；SEQ ID NO：606；及SEQ ID NO：608之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：621之輕鏈序列或SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：624；SEQ ID NO：626；及SEQ ID NO：628之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：601之重鏈序列或SEQ ID NO：602之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：603；SEQ ID NO：605；SEQ ID NO：607；及SEQ ID NO：609之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：621之輕鏈序列或SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：623；SEQ ID NO：625；SEQ ID NO：627；及SEQ ID NO：629之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：602之可變重鏈區；SEQ ID NO：622之可變輕鏈區；SEQ ID NO：602之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：604；SEQ ID NO：606；及SEQ ID NO：608)；及SEQ ID NO：622之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：624；SEQ ID NO：626；及SEQ ID NO：628)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：602之可變重鏈區；SEQ ID NO：622之可變輕鏈區；SEQ ID NO：602之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：603；SEQ ID NO：605；SEQ ID NO：607；及SEQ ID NO：609)；及SEQ ID NO：622之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：623；SEQ ID NO：625；SEQ ID NO：627；及SEQ ID NO：629)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：601及SEQ ID NO：621，或SEQ ID NO：602及SEQ ID NO：622或者由其組成之Ab12，或包含Ab12之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab12競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab12至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab12結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab12而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：602之可變重鏈序列及SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：602及/或SEQ ID NO：622之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab12之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab12)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab12之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab13

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：121之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：122之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：130之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：122)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab13結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：130)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：141之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：142之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：150之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：142)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab13結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：150)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：121之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：126；及SEQ ID NO：128之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：122之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：141之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：144；SEQ ID NO：146；及SEQ ID NO：148之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：121之重鏈序列或SEQ ID NO：122之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：123；SEQ ID NO：125；SEQ ID NO：127；及SEQ ID NO：129之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：141之輕鏈序列或SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：143；SEQ ID NO：145；SEQ ID NO：147；及SEQ ID NO：149之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：121或SEQ ID NO：122之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：141或SEQ ID NO：142之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：121之重鏈序列或SEQ ID NO：122之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：126；及SEQ ID NO：128之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：141之輕鏈序列或SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：144；SEQ ID NO：146；及SEQ ID NO：148之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或 95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：121之重鏈序列或SEQ D NO：122之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：123；SEQ ID NO：125；SEQ ID NO：127；及SEQ ID NO：129之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：141之輕鏈序列或SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：143；SEQ ID NO：145；SEQ ID NO：147；及SEQ ID NO：149之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：122之可變重鏈區；SEQ ID NO：142之可變輕鏈區；SEQ ID NO：122之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：126；及SEQ ID NO：128)；及SEQ ID NO：142之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：144；SEQ ID NO：146；及SEQ ID NO：148)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：122之可變重鏈區；SEQ ID NO：142之可變輕鏈區；SEQ ID NO：122之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：123；SEQ ID NO：125；SEQ ID NO：127；及SEQ ID NO：129)；及SEQ ID NO：142之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：143；SEQ ID NO：145；SEQ ID NO：147；及SEQ ID NO：149)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：121及SEQ ID NO：141，或SEQ ID NO：122及SEQ ID NO：142或者由其組成之Ab13，或包含Ab13之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab13競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab13至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab13結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab13而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：122之可變重鏈序列及SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：122及/或SEQ ID NO：142之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab13之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab13)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab13之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab14

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：161之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：162之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：170之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：162)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab14結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：170)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：181之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：182之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：190之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：182)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab14結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：190)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：161之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：164；SEQ ID NO：166；及SEQ ID NO：168之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：162之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：181之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：184；SEQ ID NO：186；及SEQ ID NO：188之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：161之重鏈序列或SEQ ID NO：162之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：163；SEQ ID NO：165；SEQ ID NO：167；及SEQ ID NO：169之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：181之輕鏈序列或SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：185；SEQ ID NO：187；及SEQ ID NO：189之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：161或SEQ ID NO：162之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：181或SEQ ID NO：182之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：161之重鏈序列或SEQ ID NO：162之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：164；SEQ ID NO：166；及SEQ ID NO：168之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：181之輕鏈序列或SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：184；SEQ ID NO：186；及SEQ ID NO：188之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：161之重鏈序列或SEQ ID NO：162之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：163；SEQ ID NO：165；SEQ ID NO：167；及SEQ ID NO：169之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：181之輕鏈序列或SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：185；SEQ ID NO：187；及SEQ ID NO：189之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：162之可變重鏈區；SEQ ID NO：182之可變輕鏈區；SEQ ID NO：162之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：164；SEQ ID NO：166；及SEQ ID NO：168)；及SEQ ID NO：182之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：184；SEQ ID NO：186；及SEQ ID NO：188)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：162之可變重鏈區； SEQ ID NO：182之可變輕鏈區；SEQ ID NO：162之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：163；SEQ ID NO：165；SEQ ID NO：167；及SEQ ID NO：169)；及SEQ ID NO：182之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：185；SEQ ID NO：187；及SEQ ID NO：189)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：161及SEQ ID NO：181，或SEQ ID NO：162及SEQ ID NO：182或者由其組成之Ab14，或包含Ab14之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab14競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab14至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab14結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab14而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：162之可變重鏈序列及SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：162及/或SEQ ID NO：182之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab14之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab14)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab14之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab15

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：201之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：202之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：210之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：202)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab15結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：210)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：221之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：222之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：230之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：222)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab15結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：230)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：201之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：206；及SEQ ID NO：208之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：202之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：221之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：224；SEQ ID NO：226；及SEQ ID NO：228之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：201之重鏈序列或SEQ ID NO：202之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：203；SEQ ID NO：205；SEQ ID NO：207；及SEQ ID NO：209之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：221之輕鏈序列或SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：223；SEQ ID NO：225；SEQ ID NO：227；及SEQ ID NO：229之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：201或SEQ ID NO：202之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：221或SEQ ID NO：222之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：201之重鏈序列或SEQ ID NO：202之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：206；及SEQ ID NO：208之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：221之輕鏈序列或SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：224；SEQ ID NO：226；及SEQ ID NO：228之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：201之重鏈序列或SEQ ID NO：202之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：203；SEQ ID NO：205；SEQ ID NO：207；及SEQ ID NO：209之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：221之輕鏈序列或SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：223；SEQ ID NO：225；SEQ ID NO：227；及SEQ ID NO：229之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：202之可變重鏈區；SEQ ID NO：222之可變輕鏈區；SEQ ID NO：202之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：206；及SEQ ID NO：208)；及SEQ ID NO：222之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：224；SEQ ID NO：226；及SEQ ID NO：228)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：202之可變重鏈區；SEQ ID NO：222之可變輕鏈區；SEQ ID NO：202之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：203；SEQ ID NO：205；SEQ ID NO：207；及SEQ ID NO：209)；及SEQ ID NO：222之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：223；SEQ ID NO：225；SEQ ID NO：227；及SEQ ID NO：229)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：201及SEQ ID NO：221，或SEQ ID NO：202及SEQ ID NO：222或者由其組成之Ab15，或包含Ab15之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab15競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab15至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab15結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab15而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：202之可變重鏈序列及SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：202及/或SEQ ID NO：222之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab15之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab15)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO 或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab15之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab16

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：241之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：242之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：250之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：242)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab16結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：250)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：261之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：262之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：270之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：262)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab16結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：270)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：241之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：244；SEQ ID NO：246；及SEQ ID NO：248之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：242之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：261之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：264；SEQ ID NO：266；及SEQ ID NO：268之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：241之重鏈序列或SEQ ID NO：242之可變重鏈序列之 FR(恆定區)的SEQ ID NO：243；SEQ ID NO：245；SEQ ID NO：247；及SEQ ID NO：249之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：261之輕鏈序列或SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：265；SEQ ID NO：267；及SEQ ID NO：269之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：241或SEQ ID NO：242之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：261或SEQ ID NO：262之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：241之重鏈序列或SEQ ID NO：242之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：244；SEQ ID NO：246；及SEQ ID NO：248之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：261之輕鏈序列或SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：264；SEQ ID NO：266；及SEQ ID NO：268之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：241之重鏈序列或SEQ ID NO：242之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：243；SEQ ID NO：245；SEQ ID NO：247；及SEQ ID NO：249之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：261之輕鏈序列或SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：265；SEQ ID NO：267；及SEQ ID NO：269之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：242之可變重鏈區；SEQ ID NO：262之可變輕鏈區；SEQ ID NO：242之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：244；SEQ ID NO：246；及SEQ ID NO：248)；及SEQ ID NO：262之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：264；SEQ ID NO：266；及SEQ ID NO：268)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：242之可變重鏈區；SEQ ID NO：262之可變輕鏈區；SEQ ID NO：242之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：243；SEQ ID NO：245；SEQ ID NO：247；及SEQ ID NO：249)；及SEQ ID NO：262之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：265；SEQ ID NO：267；及SEQ ID NO：269)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：241及SEQ ID NO：261，或SEQ ID NO：242及SEQ ID NO：262或者由其組成之Ab16，或包含Ab16之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab16競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab16至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab16結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab16而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：242之可變重鏈序列及SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：242及/或SEQ ID NO：262之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab16之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab16)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab16之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab17

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：281之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：282之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：290之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：282)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab17結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：290)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：301之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：302之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：310之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：302)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab17結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：310)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：281之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：286；及SEQ ID NO：288之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：282之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：301之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：304；SEQ ID NO：306；及SEQ ID NO：308之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：281之重鏈序列或SEQ ID NO：282之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：283；SEQ ID NO：285；SEQ ID NO：287；及SEQ ID NO：289之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：301之輕鏈序列或SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：303；SEQ ID NO：305；SEQ ID NO：307；及SEQ ID NO：309之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：281或SEQ ID NO：282之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：301或SEQ ID NO：302之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：281之重鏈序列或SEQ ID NO：282之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：286；及SEQ ID NO：288之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：301之輕鏈序列或SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：304；SEQ ID NO：306；及SEQ ID NO：308之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：281之重鏈序列或SEQ ID NO：282之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：283；SEQ ID NO：285；SEQ ID NO：287；及SEQ ID NO：289之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：301之輕鏈序列或SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：303；SEQ ID NO：305；SEQ ID NO：307；及SEQ ID NO：309之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：282之可變重鏈區；SEQ ID NO：302之可變輕鏈區；SEQ ID NO：282之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：286；及SEQ ID NO：288)；及SEQ ID NO：302之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：304；SEQ ID NO：306；及SEQ ID NO：308)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：282之可變重鏈區；SEQ ID NO：302之可變輕鏈區；SEQ ID NO：282之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：283；SEQ ID NO：285；SEQ ID NO：287；及SEQ ID NO：289)；及SEQ ID NO：302之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：303；SEQ ID NO：305；SEQ ID NO：307；及SEQ ID NO：309)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：281及SEQ ID NO：301，或SEQ ID NO：282及SEQ ID NO：302或者由其組成之Ab17，或包含Ab17之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab17競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab17至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab17結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab17而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：282之可變重鏈序列及SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：282及/或SEQ ID NO：302之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab17之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab17)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab17之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab18

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：321之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：322之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：330之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：322)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab18結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：330)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：341之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：342之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：350之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：342)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab18結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：350)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：321之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：324；SEQ ID NO：326；及SEQ ID NO：328之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：322之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：341之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：344；SEQ ID NO：346；及SEQ ID NO：348之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：321之重鏈序列或SEQ ID NO：322之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：323；SEQ ID NO：325；SEQ ID NO：327；及SEQ ID NO：329之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：341之輕鏈序列或SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：343；SEQ ID NO：345；SEQ ID NO：347；及SEQ ID NO：349之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：321或SEQ ID NO：322之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：341或SEQ ID NO：342之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：321之重鏈序列或SEQ ID NO：322之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：324；SEQ ID NO：326；及SEQ ID NO：328之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：341之輕鏈序列或SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：344；SEQ ID NO：346；及SEQ ID NO：348之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：321之重鏈序列或SEQ ID NO：322之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：323；SEQ ID NO：325；SEQ ID NO：327；及SEQ ID NO：329之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：341之輕鏈序列或SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：343；SEQ ID NO：345；SEQ ID NO：347；及SEQ ID NO：349之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：322之可變重鏈區；SEQ ID NO：342之可變輕鏈區；SEQ ID NO：322之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：324；SEQ ID NO：326；及SEQ ID NO：328)；及SEQ ID NO：342之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：344；SEQ ID NO：346；及SEQ ID NO： 348)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：322之可變重鏈區；SEQ ID NO：342之可變輕鏈區；SEQ ID NO：322之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：323；SEQ ID NO：325；SEQ ID NO：327；及SEQ ID NO：329)；及SEQ ID NO：342之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：343；SEQ ID NO：345；SEQ ID NO：347；及SEQ ID NO：349)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：321及SEQ ID NO：341，或SEQ ID NO：322及SEQ ID NO：342或者由其組成之Ab18，或包含Ab18之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab18競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab18至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab18結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab18而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：322之可變重鏈序列及SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：322及/或SEQ ID NO：342之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab18之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab18)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab18之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

抗體Ab19

在一個實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其具有包含SEQ ID NO：361之序列的重鏈序列，該重鏈序列由SEQ ID NO：362之重鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：370之重鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：362)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab19結合相同之抗原決定基，且其含有包含SEQ ID NO：1244、1245或1246之多肽或包含以下所闡述之序列的恆定重鏈序列：

(SEQ ID NO：370)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有包含SEQ ID NO：381之序列的輕鏈序列，該輕鏈序列由SEQ ID NO：382之輕鏈可變區鍵聯至SEQ ID NO：390之輕鏈恆定區組成。

(SEQ ID NO：382)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其與Ab19結合相同之抗原決定基，且其含有包含以下所闡述之序列的恆定輕鏈序列：

(SEQ ID NO：390)。

在另一實施例中，本發明包括對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段，其含有對應於SEQ ID NO：361之重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：364；SEQ ID NO：366；及SEQ ID NO：368之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：362之可變重鏈序列，且/或其進一步含有對應於SEQ ID NO：381之輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：384；SEQ ID NO：386；及SEQ ID NO：388之多肽序列中之一者、兩者或三者，或其含有SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列，或含有與其至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列之組合的抗體或抗原結合片段。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含所例示之可變重鏈及可變輕鏈序列或上文所闡述之重鏈及輕鏈序列中之一或多者或與其至少90%或95%一致之序列的組合，或者由其組成。

本發明進一步涵蓋抗PACAP抗體及抗原結合片段，其包含對應於SEQ ID NO：361之重鏈序列或SEQ ID NO：362之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：363；SEQ ID NO：365；SEQ ID NO：367；及SEQ ID NO：369之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，及/或對應於SEQ ID NO：381之輕鏈序列或SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：385；SEQ ID NO：387；及SEQ ID NO：389之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或此等多肽序列之組合，或與其至少80%、90%、95%、96%、97%、98%或99%一致的序列。

在本發明之另一實施例中，本發明之抗PACAP抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：361或SEQ ID NO：362之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，本發明之抗體及抗原結合片段包含SEQ ID NO：381或SEQ ID NO：382之多肽序列，或與其至少90%或95%一致之多肽，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：361之重鏈序列或SEQ ID NO：362之可變重鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：364；SEQ ID NO：366；及SEQ ID NO：368之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：381之輕鏈序列或SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：384；SEQ ID NO：386；及SEQ ID NO：388之多肽序列中之一者、兩者或三者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：361之重鏈序列或SEQ ID NO：362之可變重鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：363；SEQ ID NO：365；SEQ ID NO：367；及SEQ ID NO：369之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之本發明抗體及抗原結合片段包含對應於SEQ ID NO：381之輕鏈序列或SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：385；SEQ ID NO：387；及SEQ ID NO：389之多肽序列中之一者、兩者、三者或四者，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括本文所描述之抗體片段中之一或多者的抗PACAP抗體及抗原結合片段。在本發明之一個實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體及抗原結合片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：362之可變重鏈區；SEQ ID NO：382之可變輕鏈區；SEQ ID NO：362之可變重鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：364；SEQ ID NO：366；及SEQ ID NO：368)；及SEQ ID NO：382之可變輕鏈區之互補決定區(SEQ ID NO：384；SEQ ID NO：386；及SEQ ID NO：388)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，對PACAP具有結合特異性之抗體的片段包含以下抗體片段中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：SEQ ID NO：362之可變重鏈區；SEQ ID NO：382之可變輕鏈區；SEQ ID NO：362之可變重鏈區之構架區(SEQ ID NO：363；SEQ ID NO：365；SEQ ID NO：367；及SEQ ID NO：369)；及SEQ ID NO：382之可變輕鏈區之構架區(SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：385；SEQ ID NO：387；及SEQ ID NO：389)，或與其至少90%或95%一致之序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體為包含SEQ ID NO：361及SEQ ID NO：381，或SEQ ID NO：362及SEQ ID NO：382或者由其組成之Ab19，或包含Ab19之CDR且具有本文所闡述之生物活性中之至少一者的抗體或抗原結合片段，或在結合PACAP時與Ab19競爭之抗PACAP抗體，較佳為含有與Ab19至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列的抗體，或與Ab19結合於在PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體。

在本發明之另一實施例中，抗原結合片段包含對PACAP具有結合特異性之Fab片段，或者由其組成。就抗體Ab19而言，Fab片段較佳包括SEQ ID NO：362之可變重鏈序列及SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列，或與其至少90%、95%、96%、97%、98%或99%一致之序列。本發明之此實施例進一步包括含有SEQ ID NO：362及/或SEQ ID NO：382之保留對PACAP之結合特異性的添加、缺失及變異體的Fab。

在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可藉由Ab19之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)而產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab19)及Fab片段可經由在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如單倍體或二倍體酵母，諸如單倍體或二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

在另一實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸，包括Ab19之重鏈及/或輕鏈，以及以上所列之FR、CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)或與其至少90%或95%一致之序列的片段、變異體及組合。

在另一實施例中，本發明涵蓋一種經分離之抗PACAP抗體，其包含選自以下之V_H 多肽序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：42、SEQ ID NO：82、SEQ ID NO：122、SEQ ID NO：162、SEQ ID NO：202、SEQ ID NO：242、SEQ ID NO：282、SEQ ID NO：322、SEQ ID NO：362、SEQ ID NO：482；SEQ ID NO：522；SEQ ID NO：562；SEQ ID NO：602；SEQ ID NO：642；SEQ ID NO：682；SEQ ID NO：722；SEQ ID NO：762；SEQ ID NO：802，或其變異體；且進一步包含選自以下之V_L 多肽序列：SEQ ID NO：22、SEQ ID NO：62、SEQ ID NO：102、SEQ ID NO：142、SEQ ID NO：182、SEQ ID NO：222、SEQ ID NO：262、SEQ ID NO：302、SEQ ID NO：342、SEQ ID NO：382、SEQ ID NO：502；SEQ ID NO：542；SEQ ID NO：582；SEQ ID NO：622；SEQ ID NO：662；SEQ ID NO：702；SEQ ID NO：742；SEQ ID NO：782；SEQ ID NO：822，或其變異體，其中該V_H 或V_L 多肽中之構架區殘基(「FR殘基」)及/或CDR殘基中之一或多者已經另一胺基酸殘基取代，從而產生特異性結合PACAP之抗PACAP抗體。本發明亦包括此等抗體之人類化及嵌合形式。嵌合及人類化抗體可包括衍生自IgG1、IgG2、IgG3或IgG4恆定區之Fc。

在本發明之一個實施例中，嵌合或人類化抗體或片段或V_H 或V_L 多肽源於或衍生自一或多種兔抗體，例如分離自純系兔B細胞群之兔抗體。

在一些態樣中，本發明提供一種包含編碼如本文所揭示之抗 PACAP抗體或其片段之核酸分子的載體。在一些實施例中，本發明提供一種包含編碼如本文所揭示之抗PACAP抗體或其片段之核酸分子的宿主細胞。

在一些態樣中，本發明提供一種經分離之抗體或其抗原結合片段，其與本文所揭示之抗體或其抗原結合片段競爭結合於PACAP。

在一些態樣中，本發明提供一種編碼如本文所揭示之抗體或其抗原結合片段的核酸分子。

在一些態樣中，本發明提供一種醫藥或診斷組合物，其包含至少一種如本文所揭示之抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，本發明提供一種用於治療或預防與個體中升高之PACAP含量相關之病狀的方法，其包括向有需要之個體投與有效量之至少一種如本文所揭示之分離抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，本發明提供一種抑制個體中PACAP與PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R之結合的方法，其包括投與有效量之至少一種如本文所揭示之抗體或其抗原結合片段。

在一些態樣中，本發明提供一種選擇性結合於PACAP之抗體或其抗原結合片段，其中該抗體或其抗原結合片段以小於或等於5×10^-5 M、10^-5 M、5×10^-6 M、10^-6 M、5×10^-7 M、10^-7 M、5×10^-8 M、10^-8 M、5×10^-9 M、10^-9 M、5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M、10^-12 M、5×10^-13 M或10^-13 M之K_D ；較佳以小於或等於5×10^-10 M、10^-10 M、5×10^-11 M、10^-11 M、5×10^-12 M或10^-12 M之K_D ；更佳以小於約100pM、小於約50pM、小於約40pM、小於約25pM、小於約1pM、在約10pM及約100pM之間、在約1pM及約100pM之間或在約1pM及約10pM之間的K_D 結合於PACAP。較佳地，抗PACAP抗體或其抗原結合片段與VIP不具有交叉反應性或具有最小交叉反應性。

本發明抗體及其抗原結合片段可經轉譯後修飾以添加效應子部分，諸如化學連接子；可偵測部分，諸如螢光染料、酶、受質、生物發光物質、放射性物質及化學發光部分；或功能部分，諸如鏈黴親和素、親和素、生物素、細胞毒素、細胞毒性試劑及放射性物質。

抗體及其抗原結合片段亦可經化學修飾以提供其他優點，諸如增加多肽之溶解度、穩定性及循環時間(活體內半衰期)，或降低免疫原性(參見美國專利第4,179,337號)。用於衍生化之化學部分可選自水溶性聚合物，諸如聚乙二醇、乙二醇/丙二醇共聚物、羧甲基纖維素、右旋糖酐、聚乙烯醇及類似物。抗體及其片段可在分子內之無規位置或在分子內之預定位置經修飾，且可包括一個、兩個、三個或更多個連接之化學部分。

聚合物可具有任何分子量，且可為分枝的或不分枝的。對於聚乙二醇，為便於處理及製造，較佳分子量在約1kDa與約100kDa之間(術語「約」表明在聚乙二醇之製備中，一些分子將比所述分子量更重，一些更輕)。視所需治療型態(例如所需持續釋放之持續時間、對生物活性之效應(如果有)、處理之容易性、抗原性之程度或缺乏抗原性及聚乙二醇對治療性蛋白質或類似物之其他已知效應)而定，可使用其他大小。舉例而言，聚乙二醇可具有約200、500、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、8500、9000、9500、10,000、10,500、11,000、11,500、12,000、12,500、13,000、13,500、14,000、14,500、15,000、15,500、16,000、16,500、17,000、17,500、18,000、18,500、19,000、19,500、20,000、25,000、30,000、35,000、40,000、50,000、55,000、60,000、65,000、70,000、75,000、80,000、85,000、90,000、95,000或100,000kDa之平均分子量。分枝鏈聚乙二醇描述於例如美國專利第5,643,575號；Morpurgo等人，Appl.Biochem.Biotechnol. ,56：59-72(1996)；Vorobjev等人，Nucleosides and Nucleotides, 18：2745-2750(1999)；及Caliceti等人，Bioconjug.Chem., 10：638-646(1999)中，該等參考文獻中之每一者的揭示內容係以引用之方式併入本文中。

存在熟習此項技術者可用之許多連接方法(參見例如以引用之方式併入本文中之EP 0 401 384，其揭示一種將PEG偶合至G-CSF之方法；及Malik等人，Exp.Hematol. ,20：1028-1035(1992)(報導使用三氟乙烷磺醯氯對GM-CSF進行聚乙二醇化))。舉例而言，聚乙二醇可通過胺基酸殘基經由反應基團(諸如游離胺基或羧基)共價結合。反應基團為可結合經活化之聚乙二醇分子的彼等。具有自由胺基之胺基酸殘基可包括離胺酸殘基及N 端胺基酸殘基；具有自由羧基之彼等可包括天冬胺酸殘基、麩胺酸殘基及C端胺基酸殘基。巰基亦可用作用於連接聚乙二醇分子之反應基團。出於治療目的較佳為在胺基處連接，諸如在N端或離胺酸基團處連接。

如上文提出，聚乙二醇可經由鍵聯至許多胺基酸殘基中之任一者與蛋白質連接。舉例而言，聚乙二醇可經由共價鍵結至離胺酸、組胺酸、天冬胺酸、麩胺酸或半胱胺酸殘基鍵聯至多肽。可採用一或多種反應化學來將聚乙二醇連接至特定胺基酸殘基(例如離胺酸、組胺酸、天冬胺酸、麩胺酸或半胱胺酸)或連接至超過一種類型之胺基酸殘基(例如離胺酸、組胺酸、天冬胺酸、麩胺酸、半胱胺酸及其組合)。

或者，抗體或其抗原結合片段可經由與白蛋白(包括但不限於重組人類血清白蛋白或其片段或變異體(參見例如美國專利第5,876,969號、EP 0 413 622及美國專利第5,766,883號，其以全文引用之方式併入本文中))，或其他循環血液蛋白(諸如轉鐵蛋白或鐵蛋白)融合而具有增加之活體內半衰期。在一較佳實施例中，本發明之多肽及/或抗體(包括其片段或變異體)與成熟形式之人類血清白蛋白(亦即如以全文引用之方式併入本文中的EP 0 322 094之圖1 及2 中所示之人類血清白蛋白之胺基酸1-585)融合。編碼本發明之融合蛋白的聚核苷酸亦由本發明涵蓋。

關於可偵測部分，其他示例性酶包括但不限於酶、乙醯膽鹼酯酶、鹼性磷酸酶、β-半乳醣苷酶及螢光素酶。其他示例性螢光物質包括但不限於羅丹明(rhodamine)、螢光素、異硫氰酸螢光素、傘形酮、二氯三嗪基胺、藻紅蛋白及丹磺醯氯(dansyl chloride)。其他示例性化學發光部分包括但不限於流明諾(luminol)。其他示例性生物發光物質包括但不限於螢光素及水母發光蛋白。其他示例性放射性物質包括但不限於碘125(¹²⁵ I)、碳14(¹⁴ C)、硫35(³⁵ S)、氚(³ H)及磷32(³² P)。

用於使抗體或其抗原結合片段與可偵測部分及類似物結合之方法為此項技術中已知的，諸如由Hunter等人，Nature, 144：945(1962)；David等人，Biochemistry, 13：1014(1974)；Pain等人，J.Immunol.Meth. ,40：219(1981)；及Nygren,J.,Histochem.and Cytochem. ,30：407(1982)描述之彼等方法。

本文所描述之實施例進一步包括實質上與本文所闡述之抗體、抗體片段、雙功能抗體、SMIP、駱駝抗體、奈米抗體、IgNAR、多肽、可變區及CDR同源之變異體及等效物。此等物質可含有例如保守取代突變(亦即一或多個胺基酸由類似胺基酸取代)。舉例而言，保守取代係指胺基酸經相同一般類別內之另一胺基酸，例如一個酸性胺基酸經另一酸性胺基酸、一個鹼性胺基酸經另一鹼性胺基酸或一個中性胺基酸由另一中性胺基酸取代。保守胺基酸取代之目的為此項技術中熟知的。

在另一實施例中，本發明涵蓋與本文所闡述之抗原結合片段、可變區及CDR之多肽序列中之任何一或多者具有至少90%或更大序列同源性的多肽序列。更佳地，本發明涵蓋與本文所闡述之抗原結合片段、可變區及CDR之多肽序列中之任何一或多者具有至少95%或更大序列同源性，甚至更佳至少98%或更大序列同源性，且更佳至少99%或更大序列同源性的多肽序列。

用於測定核酸與胺基酸序列之間的同源性的方法為一般熟習此項技術者熟知的。

在另一實施例中，本發明進一步涵蓋本文所闡述之抗原結合片段、可變區及CDR之進一步具有抗PACAP活性的上文敍述之多肽同源物。本文闡述了抗PACAP活性之非限制性實例，例如抑制PACAP結合於PAC1-R、VPAC1-R及/或VPAC2-R，藉此導致cAMP之產量降低的能力。

在另一實施例中，本發明進一步涵蓋產生及使用結合前述序列中之任一者的抗體，包括但不限於抗遺傳型抗體。在一示例性實施例中，可向已接受抗PACAP抗體之個體投與此類抗遺傳型抗體，以調節、降低或中和抗PACAP抗體效應。此類抗體亦可適用於治療以存在抗PACAP抗體為特徵之自體免疫疾病。此類抗體(例如抗遺傳型抗體)之另一示例性用途為用於偵測本發明之抗PACAP抗體，例如監測存在於個體之血液或其他人體流體中之抗PACAP抗體的含量。舉例而言，在一個實施例中，本發明提供一種之方法使用抗遺傳型抗體來監測個體中該抗PACAP抗體及其抗原結合片段之活體內含量或中和正在投與該抗PACAP抗體或其抗原結合片段之個體中的該抗PACAP抗體。

本發明亦涵蓋包含經本文所描述之其他聚核苷酸序列中之任一者取代之本文所描述之多肽或聚核苷酸序列中之任一者的抗PACAP抗體。舉例而言(但不限於此)本發明涵蓋包含本文所描述之可變輕鏈及可變重鏈序列中之任一者的組合的抗體，且進一步涵蓋因用本文所描述之CDR序列中之任一者取代本文所描述之其他CDR序列中之任一者而產生的抗體。

編碼抗PACAP抗體多肽之示例性聚核苷酸

本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽之聚核苷酸。

抗體Ab1

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：1之重鏈序列且由SEQ ID NO：12之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：20之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：11之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：2之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：12)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：10之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：20)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：21之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：32之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：40之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：31之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：22之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：32)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：30之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：40)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：1之重鏈序列或SEQ ID NO：2之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO： 14；SEQ ID NO：16；及SEQ ID NO：18之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：21之輕鏈序列或SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：34；SEQ ID NO：36；及SEQ ID NO：38之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：1之重鏈序列或SEQ ID NO：2之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：13；SEQ ID NO：15；SEQ ID NO：17；及SEQ ID NO：19之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：21之輕鏈序列或SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：33；SEQ ID NO：35；SEQ ID NO：37；及SEQ ID NO：39之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：1之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：11；編碼SEQ ID NO：2之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：12；編碼SEQ ID NO：21之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：31；編碼SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：32；編碼SEQ ID NO：1之重鏈序列或SEQ ID NO：2之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：14；SEQ ID NO：16；及SEQ ID NO：18)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：21之輕鏈序列或SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：34；SEQ ID NO：36；及SEQ ID NO：38)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：1之重鏈序列或SEQ ID NO：2之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：13；SEQ ID NO：15；SEQ ID NO：17；及SEQ ID NO：19)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：21之輕鏈序列或SEQ ID NO：22之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：33；SEQ ID NO：35；SEQ ID NO：37；及SEQ ID NO：39)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab1而言，編碼全長Ab1抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：1之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：11，及編碼SEQ ID NO：21之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：31，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab1之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab1)或其Fab片段可經由Ab1聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab1.H

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：41之重鏈序列且由SEQ ID NO：52之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：60之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：51之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：42之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：52)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：50之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：60)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：61之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：72之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：80之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：71之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：62之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：72)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：70之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：80)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：41之重鏈序列或SEQ ID NO：42之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：54；SEQ ID NO：56；及SEQ ID NO：58之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：61之輕鏈序列或SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：74；SEQ ID NO：76；及SEQ ID NO：78之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體的或其抗原結合片段之聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：41之重鏈序列或SEQ ID NO：42之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：53；SEQ ID NO：55；SEQ ID NO：57；及SEQ ID NO：59之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：61之輕鏈序列或SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：73；SEQ ID NO：75；SEQ ID NO：77；及SEQ ID NO：79之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：41之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：51；編碼SEQ ID NO：42之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：52；編碼SEQ ID NO：61之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：71；編碼SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：72；編碼SEQ ID NO：41之重鏈序列或SEQ ID NO：42之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：54；SEQ ID NO：56；及SEQ ID NO：58)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：61之輕鏈序列或SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：74；SEQ ID NO：76；及SEQ ID NO：78)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：41之重鏈序列或SEQ ID NO：42之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：53；SEQ ID NO：55；SEQ ID NO：57；及SEQ ID NO：59)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：61之輕鏈序列或SEQ ID NO：62之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：73；SEQ ID NO：75；SEQ ID NO：77；及SEQ ID NO：79)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab1.H而言，編碼全長Ab1.H抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：41之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：51，及編碼SEQ ID NO：61之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：71，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab1.H之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab1.H)或其Fab片段可經由Ab1.H聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab2

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：81且由SEQ ID NO：92之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：100之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：91之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：82之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：92)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：90之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：100)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：101之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：112之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：120之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：111之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：102之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：112)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：110之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：120)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：81之重鏈序列或SEQ ID NO：82之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：94；SEQ ID NO：96；及SEQ ID NO：98之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：101之輕鏈序列或SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：114；SEQ ID NO：116；及SEQ ID NO：118之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：81之重鏈序列或SEQ ID NO：82之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：93；SEQ ID NO：95；SEQ ID NO：97；及SEQ ID NO：99之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：101之輕鏈序列或SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：113；SEQ ID NO：115；SEQ ID NO：117；及SEQ ID NO：119之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：81之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：91；編碼SEQ ID NO：82之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：92；編碼SEQ ID NO：101之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：111；編碼SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：112；編碼SEQ ID NO：81之重鏈序列或SEQ ID NO：82之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：94；SEQ ID NO：96；及SEQ ID NO：98)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：101之輕鏈序列或SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：114；SEQ ID NO：116；及SEQ ID NO：118)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：81之重鏈序列或SEQ ID NO：82之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：93；SEQ ID NO：95；SEQ ID NO：97；及SEQ ID NO：99)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：101之輕鏈序列或SEQ ID NO：102之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：113；SEQ ID NO：115；SEQ ID NO：117；及SEQ ID NO：119)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab2而言，編碼全長Ab2抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：81之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：91，及編碼SEQ ID NO：101之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：111，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab2之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab2)或其Fab片段可經由Ab2聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab3

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：681且由SEQ ID NO：692之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：700之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：691之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：682之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：692)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：690之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：700)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：701之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：712之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：720之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：711之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：702之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：712)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：710之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：720)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：681之重鏈序列或SEQ ID NO：682之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：694；SEQ ID NO：696；及SEQ ID NO：698之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：701之輕鏈序列或SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：714；SEQ ID NO：716；及SEQ ID NO：718之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：681之重鏈序列或SEQ ID NO：682之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：693；SEQ ID NO：695；SEQ ID NO：697；及SEQ ID NO：699之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：701之輕鏈序列或SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：713；SEQ ID NO：715；SEQ ID NO：717；及SEQ ID NO：719之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：681之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：691；編碼SEQ ID NO：682之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：692；編碼SEQ ID NO：701之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：711；編碼SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：712；編碼SEQ ID NO：681之重鏈序列或SEQ ID NO：682之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：694；SEQ ID NO：696；及SEQ ID NO：698)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：701之輕鏈序列或SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：714；SEQ ID NO：716；及SEQ ID NO：718)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：681之重鏈序列或SEQ ID NO：682之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：693；SEQ ID NO：695；SEQ ID NO：697；及SEQ ID NO：699)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：701之輕鏈序列或SEQ ID NO：702之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：713；SEQ ID NO：715；SEQ ID NO：717；及SEQ ID NO：719)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab3而言，編碼全長Ab3抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：681之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：691，及編碼SEQ ID NO：701之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：711，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab3之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab3)或其Fab片段可經由Ab3聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab4

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：641且由SEQ ID NO：652之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：660之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：651之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：642之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：652)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：650之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：660)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：661之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：672之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：680之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：671之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：662之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：672)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：670之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：680)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：641之重鏈序列或SEQ ID NO：642之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：654；SEQ ID NO：656；及SEQ ID NO：658之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：661之輕鏈序列或SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：674；SEQ ID NO：676；及SEQ ID NO：678之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：641之重鏈序列或SEQ ID NO：642之可變重鏈序列之ER(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：653；SEQ ID NO：655；SEQ ID NO：657；及SEQ ID NO：659之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：661之輕鏈序列或SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：673；SEQ ID NO：675；SEQ ID NO：677；及SEQ ID NO：679之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：641之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：651；編碼SEQ ID NO：642之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：652；編碼SEQ ID NO：661之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：671；編碼SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：672；編碼SEQ ID NO：641之重鏈序列或SEQ ID NO：642之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：654；SEQ ID NO：656；及SEQ ID NO：658)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：661之輕鏈序列或SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：674；SEQ ID NO：676；及SEQ ID NO：678)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：641之重鏈序列或SEQ ID NO：642之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：653；SEQ ID NO：655；SEQ ID NO：657；及SEQ ID NO：659)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：661之輕鏈序列或SEQ ID NO：662之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：673；SEQ ID NO：675；SEQ ID NO：677；及SEQ ID NO：679)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab4而言，編碼全長Ab4抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：641之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：651，及編碼SEQ ID NO：661之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：671，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如 CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab4之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab4)或其Fab片段可經由Ab4聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab5

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：481且由SEQ ID NO：492之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：500之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：491之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：482之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：492)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：490之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：500)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：501之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：512之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：520之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：511之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：502之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：512)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：510之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：520)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：481之重鏈序列或 SEQ ID NO：482之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：494；SEQ ID NO：496；及SEQ ID NO：498之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：501之輕鏈序列或SEQ ID NO：502之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：514；SEQ ID NO：516；及SEQ ID NO：518之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：481之重鏈序列或SEQ ID NO：482之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：493；SEQ ID NO：495；SEQ ID NO：497；及SEQ ID NO：499之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：501之輕鏈序列或SEQ ID NO：502之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：513；SEQ ID NO：515；SEQ ID NO：517；及SEQ ID NO：519之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：481之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：491；編碼SEQ ID NO：482之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：492；編碼SEQ ID NO：501之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：511；編碼SEQ ID NO：502之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：512；編碼SEQ ID NO：481之重鏈序列或SEQ ID NO：482之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：494；SEQ ID NO：496；及SEQ ID NO：498)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：501之輕鏈序列或SEQ ID NO：502 之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：514；SEQ ID NO：516；及SEQ ID NO：518)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：481之重鏈序列或SEQ ID NO：482之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：493；SEQ ID NO：495；SEQ ID NO：497；及SEQ ID NO：499)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：501之輕鏈序列或SEQ ID NO：502之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：513；SEQ ID NO：515；SEQ ID NO：517；及SEQ ID NO：519)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab5而言，編碼全長Ab5抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：481之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：491，及編碼SEQ ID NO：501之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：511，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab5之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab5)或其Fab片段可經由Ab5聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab6

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：721且由SEQ ID NO：732之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：740之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：731之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：722之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：732)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：730之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：740)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：741之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：752之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：760之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：751之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：742之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：752)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：750之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：760)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：721之重鏈序列或SEQ ID NO：722之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：734；SEQ ID NO：736；及SEQ ID NO：738之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：741之輕鏈序列或SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：754；SEQ ID NO：756；及SEQ ID NO：758之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：721之重鏈序列或SEQ ID NO：722之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：733；SEQ ID NO：735；SEQ ID NO：737；及SEQ ID NO：739之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：741之輕鏈序列或SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：753；SEQ ID NO：755；SEQ ID NO：757；及SEQ ID NO：759之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：721之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：731；編碼SEQ ID NO：722之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：732；編碼SEQ ID NO：741之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：751；編碼SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：752；編碼SEQ ID NO：721之重鏈序列或SEQ ID NO：722之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：734；SEQ ID NO：736；及SEQ ID NO：738)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：741之輕鏈序列或SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：754；SEQ ID NO：756；及SEQ ID NO：758)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：721之重鏈序列或SEQ ID NO：722之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：733；SEQ ID NO：735；SEQ ID NO：737；及SEQ ID NO：739)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：741之輕鏈序列或SEQ ID NO：742之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：753；SEQ ID NO：755；SEQ ID NO：757；及SEQ ID NO：759)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab6而言，編碼全長Ab6抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：721之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：731，及編碼SEQ ID NO：741之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：751，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab6之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP 抗體(諸如Ab6)或其Fab片段可經由Ab6聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab7

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：521且由SEQ ID NO：532之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：540之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：531之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：522之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：532)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：530之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：540)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：541之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：552之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：560之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：551之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：542之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：552)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：550之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：560)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：521之重鏈序列或SEQ ID NO：522之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：534；SEQ ID NO：536；及SEQ ID NO：538之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：541之輕鏈序列或SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：554；SEQ ID NO：556；及SEQ ID NO：558之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：521之重鏈序列或SEQ ID NO：522之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：533；SEQ ID NO：535；SEQ ID NO：537；及SEQ ID NO：539之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：541之輕鏈序列或SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：553；SEQ ID NO：555；SEQ ID NO：557；及SEQ ID NO：559之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：521之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：531；編碼SEQ ID NO：522之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：532；編碼SEQ ID NO：541之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：551；編碼SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：552；編碼SEQ ID NO：521之重鏈序列或SEQ ID NO：522之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：534；SEQ ID NO：536；及SEQ ID NO：538)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：541之輕鏈序列或SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：554；SEQ ID NO：556；及SEQ ID NO：558)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：521之重鏈序列或SEQ ID NO：522之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：533；SEQ ID NO：535；SEQ ID NO：537；及SEQ ID NO：539)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：541之輕鏈序列或SEQ ID NO：542之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：553；SEQ ID NO：555；SEQ ID NO：557；及SEQ ID NO：559)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab7而言，編碼全長Ab7抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：521之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：531，及編碼SEQ ID NO：541之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：551，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab7之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab7)或其Fab片段可經由Ab7聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab8

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：761且由SEQ ID NO：772之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：780之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：771之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：762之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：772)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：770之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：780)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：781之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：792之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：800之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：791之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：782之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：792)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：790之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：800)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：761之重鏈序列或SEQ ID NO：762之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：774；SEQ ID NO：776；及SEQ ID NO：778之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：781之輕鏈序列或SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：794；SEQ ID NO：796；及SEQ ID NO：798之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：761之重鏈序列或SEQ ID NO：762之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：773；SEQ ID NO：775；SEQ ID NO：777；及SEQ ID NO：779之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：781之輕鏈序列或SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：793；SEQ ID NO：795；SEQ ID NO：797；及SEQ ID NO：799之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：761之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：771；編碼SEQ ID NO：762之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：772；編碼SEQ ID NO：781之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：791；編碼SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：792；編碼SEQ ID NO：761之重鏈序列或SEQ ID NO：762之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：774；SEQ ID NO：776；及SEQ ID NO：778)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：781之輕鏈序列或SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：794；SEQ ID NO：796；及SEQ ID NO：798)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：761之重鏈序列或SEQ ID NO：762之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：773；SEQ ID NO：775；SEQ ID NO：777；及SEQ ID NO：779)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：781之輕鏈序列或SEQ ID NO：782之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：793；SEQ ID NO：795；SEQ ID NO：797；及SEQ ID NO：799)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab8而言，編碼全長Ab8抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：761之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：771，及編碼SEQ ID NO：781之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：791，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab8之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab8)或其Fab片段可經由Ab8聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab9

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：801且由SEQ ID NO：812之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：820之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：811之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：802之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：812)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：810之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：820)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：821之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：832之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：840之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：831之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：822之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：832)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：830之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：840)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：801之重鏈序列或SEQ ID NO：802之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：814；SEQ ID NO：816；及SEQ ID NO：818之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：821之輕鏈序列或SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：834；SEQ ID NO：836；及SEQ ID NO：838之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：801之重鏈序列或SEQ ID NO：802之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：813；SEQ ID NO：815；SEQ ID NO：817；及SEQ ID NO：819之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：821之輕鏈序列或SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：833；SEQ ID NO：835；SEQ ID NO：837；及SEQ ID NO：839之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：801之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：811；編碼SEQ ID NO：802之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：812；編碼SEQ ID NO：821之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：831；編碼SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：832；編碼SEQ ID NO：801之重鏈序列或SEQ ID NO：802之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：814；SEQ ID NO：816；及SEQ ID NO：818)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：821之輕鏈序列或SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：834；SEQ ID NO：836；及SEQ ID NO：838)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：801之重鏈序列或SEQ ID NO：802之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：813；SEQ ID NO：815；SEQ ID NO：817；及SEQ ID NO：819)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：821之輕鏈序列或SEQ ID NO：822之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：833；SEQ ID NO：835；SEQ ID NO：837；及SEQ ID NO：839)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab9而言，編碼全長Ab9抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：801之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：811，及編碼SEQ ID NO：821之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：831，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab9之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab9)或其Fab片段可經由Ab9聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab11

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：561且由SEQ ID NO：572之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：580之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：571之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：562之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：572)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：570之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：580)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：581之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：592之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：600之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：591之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：582之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：592)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：590之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：600)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：561之重鏈序列或SEQ ID NO：562之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：574；SEQ ID NO：576；及SEQ ID NO：578之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：581之輕鏈序列或SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：594；SEQ ID NO：596；及SEQ ID NO：598之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：561之重鏈序列或SEQ ID NO：562之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：573；SEQ ID NO：575；SEQ ID NO：577；及SEQ ID NO：579之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：581之輕鏈序列或SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：593；SEQ ID NO：595；SEQ ID NO：597；及SEQ ID NO：599之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：561之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：571；編碼SEQ ID NO：562之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：572；編碼SEQ ID NO：581之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：591；編碼SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：592；編碼SEQ ID NO：561之重鏈序列或SEQ ID NO：562之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：574；SEQ ID NO：576；及SEQ ID NO：578)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：581之輕鏈序列或SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：594；SEQ ID NO：596；及SEQ ID NO：598)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：561之重鏈序列或SEQ ID NO：562之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：573；SEQ ID NO：575；SEQ ID NO：577；及SEQ ID NO：579)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：581之輕鏈序列或SEQ ID NO：582之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：593；SEQ ID NO：595；SEQ ID NO：597；及SEQ ID NO：599)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab11而言，編碼全長Ab11抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：561之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：571，及編碼SEQ ID NO：581之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：591，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab11之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab11)或其Fab片段可經由Ab11聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab12

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：601且由SEQ ID NO：612之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：620之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：611之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：602之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：612)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：610之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：620)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：621之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：632之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：640之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：631之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：622之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：632)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：630之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：640)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：601之重鏈序列或SEQ ID NO：602之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：614；SEQ ID NO：616；及SEQ ID NO：618之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：621之輕鏈序列或SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：634；SEQ ID NO：636；及SEQ ID NO：638之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：601之重鏈序列或SEQ ID NO：602之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：613；SEQ ID NO：615；SEQ ID NO：617；及SEQ ID NO：619之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：621之輕鏈序列或SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：633；SEQ ID NO：635； SEQ ID NO：637；及SEQ ID NO：639之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：601之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：611；編碼SEQ ID NO：602之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：612；編碼SEQ ID NO：621之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：631；編碼SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：632；編碼SEQ ID NO：601之重鏈序列或SEQ ID NO：602之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：614；SEQ ID NO：616；及SEQ ID NO：618)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：621之輕鏈序列或SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：634；SEQ ID NO：636；及SEQ ID NO：638)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：601之重鏈序列或SEQ ID NO：602之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：613；SEQ ID NO：615；SEQ ID NO：617；及SEQ ID NO：619)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：621之輕鏈序列或SEQ ID NO：622之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：633；SEQ ID NO：635；SEQ ID NO：637；及SEQ ID NO：639)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab12而言，編碼全長Ab12抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：601之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：611，及編碼SEQ ID NO：621之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：631，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab12之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab12)或其Fab片段可經由Ab12聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab13

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：121且由SEQ ID NO：132之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：140之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：131之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：122之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：132)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：130之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：140)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：141之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：152之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：160之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：151之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：142之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：152)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：150之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：160)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：121之重鏈序列或SEQ ID NO：122之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：134；SEQ ID NO：136；及SEQ ID NO：138之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：141之輕鏈序列或SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：154；SEQ ID NO：156；及SEQ ID NO：158之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：121之重鏈序列或SEQ ID NO：122之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：133；SEQ ID NO：135；SEQ ID NO：137；及SEQ ID NO：139之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：141之輕鏈序列或SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：153；SEQ ID NO：155；SEQ ID NO：157；及SEQ ID NO：159之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：121之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：131；編碼SEQ ID NO：122之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：132；編碼SEQ ID NO：141之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：151；編碼SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：152；編碼SEQ ID NO：121之重鏈序列或SEQ ID NO：122之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：134；SEQ ID NO：136；及SEQ ID NO：138)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：141之輕鏈序列或SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：154；SEQ ID NO：156；及SEQ ID NO：158)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：121之重鏈序列或SEQ ID NO：122之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：133；SEQ ID NO：135；SEQ ID NO：137；及SEQ ID NO：139)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：141之輕鏈序列或SEQ ID NO：142之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：153；SEQ ID NO：155；SEQ ID NO：157；及SEQ ID NO：159)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab13而言，編碼全長Ab13抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：121之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：131，及編碼SEQ ID NO：141之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：151，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab13之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab13)或其Fab片段可經由Ab13聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab14

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：161且由SEQ ID NO：172之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：180之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：171之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：162之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：172)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：170之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：180)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：181之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：192之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：200之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：191之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：182之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：192)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：190之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：200)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：161之重鏈序列或SEQ ID NO：162之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：174；SEQ ID NO：176；及SEQ ID NO：178之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：181之輕鏈序列或SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：194；SEQ ID NO：196；及SEQ ID NO：198之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：161之重鏈序列或SEQ ID NO：162之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：173；SEQ ID NO：175；SEQ ID NO：177；及SEQ ID NO：179之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：181之輕鏈序列或SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：193；SEQ ID NO：195；SEQ ID NO：197；及SEQ ID NO：199之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：161之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：171；編碼SEQ ID NO：162之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：172；編碼SEQ ID NO：181之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：191；編碼SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：192；編碼SEQ ID NO：161之重鏈序列或SEQ ID NO：162之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：174；SEQ ID NO：176；及SEQ ID NO：178)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：181之輕鏈序列或SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：194；SEQ ID NO：196；及SEQ ID NO：198)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：161之重鏈序列或SEQ ID NO：162之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：173；SEQ ID NO：175；SEQ ID NO：177；及SEQ ID NO：179)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：181之輕鏈序列或SEQ ID NO：182之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：193；SEQ ID NO：195；SEQ ID NO：197；及SEQ ID NO：199)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab14而言，編碼全長Ab14抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：161之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：171，及編碼SEQ ID NO：181之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：191，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab14之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab14)或其Fab片段可經由Ab14聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab15

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：201且由SEQ ID NO：212之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：220之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：211之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：202之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：212)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：210之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：220)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：221之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：232之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：240之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：231之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：222之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：232)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：230之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：240)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：201之重鏈序列或SEQ ID NO：202之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：214；SEQ ID NO：216；及SEQ ID NO：218之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：221之輕鏈序列或SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：234；SEQ ID NO：236；及SEQ ID NO：238之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：201之重鏈序列或SEQ ID NO：202之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：213；SEQ ID NO：215；SEQ ID NO：217；及SEQ ID NO：219之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：221之輕鏈序列或SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：233；SEQ ID NO：235；SEQ ID NO：237；及SEQ ID NO：239之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：201之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：211；編碼SEQ ID NO：202之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：212；編碼SEQ ID NO：221之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：231；編碼SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：232；編碼SEQ ID NO：201之重鏈序列或SEQ ID NO：202之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：214；SEQ ID NO：216；及SEQ ID NO：218)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：221之輕鏈序列或SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：234；SEQ ID NO：236；及SEQ ID NO：238)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：201之重鏈序列或SEQ ID NO：202之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：213；SEQ ID NO：215；SEQ ID NO：217；及SEQ ID NO：219)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：221之輕鏈序列或SEQ ID NO：222之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：233；SEQ ID NO：235；SEQ ID NO：237；及SEQ ID NO：239)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對 PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab15而言，編碼全長Ab15抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：201之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：211，及編碼SEQ ID NO：221之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：231，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab15之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab15)或其Fab片段可經由Ab15聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab16

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：241且由SEQ ID NO：252之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：260之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：251之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：242之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：252)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：250之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：260)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：261之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：272之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：280之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：271之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：262之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：272)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：270之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：280)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：241之重鏈序列或SEQ ID NO：242之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：254；SEQ ID NO：256；及SEQ ID NO：258之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：261之輕鏈序列或SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：274；SEQ ID NO：276；及SEQ ID NO：278之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：241之重鏈序列或SEQ ID NO：242之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：253；SEQ ID NO：255；SEQ ID NO：257；及SEQ ID NO：259之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：261之輕鏈序列或SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：273；SEQ ID NO：275；SEQ ID NO：277；及SEQ ID NO：279之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：241之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：251；編碼SEQ ID NO：242之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：252；編碼SEQ ID NO：261之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：271；編碼SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：272；編碼SEQ ID NO：241之重鏈序列或SEQ ID NO：242之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：254；SEQ ID NO：256；及SEQ ID NO：258)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：261之輕鏈序列或SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：274；SEQ ID NO：276；及SEQ ID NO：278)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：241之重鏈序列或SEQ ID NO：242之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：253；SEQ ID NO：255；SEQ ID NO：257；及SEQ ID NO：259)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：261之輕鏈序列或SEQ ID NO：262之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：273；SEQ ID NO：275；SEQ ID NO：277；及SEQ ID NO：279)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab16而言，編碼全長Ab16抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：241之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：251，及編碼SEQ ID NO：261之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：271，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab16之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab16)或其Fab片段可經由Ab16聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab17

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：281且由SEQ ID NO：292之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：300之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：291之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：282之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：292)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：290之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：300)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：301之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：312之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：320之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：311之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：302之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：312)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：310之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：320)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：281之重鏈序列或SEQ ID NO：282之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：294；SEQ ID NO：296；及SEQ ID NO：298之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：301之輕鏈序列或SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：314；SEQ ID NO：316；及SEQ ID NO：318之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：281之重鏈序列或SEQ ID NO：282之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：293；SEQ ID NO：295；SEQ ID NO：297；及SEQ ID NO：299之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：301之輕鏈序列或SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：313；SEQ ID NO：315；SEQ ID NO：317；及SEQ ID NO：319之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：281之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：291；編碼SEQ ID NO：282之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：292；編碼SEQ ID NO：301之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：311；編碼SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：312；編碼SEQ ID NO：281之重鏈序列或SEQ ID NO：282之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：294；SEQ ID NO：296；及SEQ ID NO：298)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：301之輕鏈序列或SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：314；SEQ ID NO：316；及SEQ ID NO：318)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：281之重鏈序列或SEQ ID NO：282之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：293；SEQ ID NO：295；SEQ ID NO：297；及SEQ ID NO：299)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：301之輕鏈序列或SEQ ID NO：302之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：313；SEQ ID NO：315；SEQ ID NO：317；及SEQ ID NO：319)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab17而言，編碼全長Ab17抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：281之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：291，及編碼SEQ ID NO：301之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：311，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如 CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab17之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab17)或其Fab片段可經由Ab17聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab18

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：321且由SEQ ID NO：332之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：340之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：331之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：322之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：332)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：330之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：340)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：341之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：352之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：360之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：351之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：342之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：352)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：350之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：360)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：321之重鏈序列或 SEQ ID NO：322之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：334；SEQ ID NO：336；及SEQ ID NO：338之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：341之輕鏈序列或SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：354；SEQ ID NO：356；及SEQ ID NO：358之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：321之重鏈序列或SEQ ID NO：322之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：333；SEQ ID NO：335；SEQ ID NO：337；及SEQ ID NO：339之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：341之輕鏈序列或SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：353；SEQ ID NO：355；SEQ ID NO：357；及SEQ ID NO：359之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：321之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：331；編碼SEQ ID NO：322之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：332；編碼SEQ ID NO：341之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：351；編碼SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：352；編碼SEQ ID NO：321之重鏈序列或SEQ ID NO：322之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：334；SEQ ID NO：336；及SEQ ID NO：338)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：341之輕鏈序列或SEQ ID NO：342 之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：354；SEQ ID NO：356；及SEQ ID NO：358)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：321之重鏈序列或SEQ ID NO：322之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：333；SEQ ID NO：335；SEQ ID NO：337；及SEQ ID NO：339)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：341之輕鏈序列或SEQ ID NO：342之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：353；SEQ ID NO：355；SEQ ID NO：357；及SEQ ID NO：359)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab18而言，編碼全長Ab18抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：321之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：331，及編碼SEQ ID NO：341之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：351，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab18之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗PACAP抗體(諸如Ab18)或其Fab片段可經由Ab18聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

抗體Ab19

在一個實施例中，本發明進一步關於編碼對PACAP具有結合特異性之抗體多肽的聚核苷酸。在本發明之一個實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：361且由SEQ ID NO：372之重鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：380之重鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：371之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：362之可變重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：372)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：370之恆定重鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：380)。

在本發明之另一實施例中，聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：381之輕鏈多肽序列且由SEQ ID NO：392之輕鏈可變區編碼序列及SEQ ID NO：400之輕鏈恆定區編碼序列組成的SEQ ID NO：391之聚核苷酸序列，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：382之可變輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：392)。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：390之恆定輕鏈多肽序列的以下聚核苷酸序列，或者由其組成：

(SEQ ID NO：400)。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：361之重鏈序列或SEQ ID NO：362之可變重鏈序列之CDR(高變區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：374；SEQ ID NO：376；及SEQ ID NO：378之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：381之輕鏈序列或SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列之CDR(高變區)的SEQ ID NO：394；SEQ ID NO：396；及SEQ ID NO：398之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其抗原結合片段的聚核苷酸包含編碼上文所闡述之CDR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的聚核苷酸之組合，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含對應於編碼SEQ ID NO：361之重鏈序列或SEQ ID NO：362之可變重鏈序列之FR(恆定區)的聚核苷酸的SEQ ID NO：373；SEQ ID NO：375；SEQ ID NO：377；及SEQ ID NO：379之聚核苷酸序列中之一或多者，及/或對應於SEQ ID NO：381之輕鏈序列或SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列之FR(恆定區)的SEQ ID NO：393；SEQ ID NO：395；SEQ ID NO：397；及SEQ ID NO：399之聚核苷酸序列中之一或多者，或此等聚核苷酸序列之組合，或者由其組成。在本發明之另一實施例中，編碼本發明之抗體或其片段之聚核苷酸包含以上所闡述之FR、可變重鏈及可變輕鏈序列及重鏈及輕鏈序列中之一或多者(包括其所有)的組合，或者由其組成。

本發明亦涵蓋包括編碼本文所描述之抗原結合片段的聚核苷酸序列中之一或多者的聚核苷酸序列。在本發明之一個實施例中，編碼對PACAP具有結合特異性之抗原結合片段的聚核苷酸包含以下編碼抗原結合片段之聚核苷酸中之一者、兩者、三者或更多者(包括所有)：編碼SEQ ID NO：361之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：371；編碼SEQ ID NO：362之可變重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：372；編碼SEQ ID NO：381之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：391；編碼SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：392；編碼SEQ ID NO：361之重鏈序列或SEQ ID NO：362之可變重鏈序列之CDR(SEQ ID NO：374；SEQ ID NO：376；及SEQ ID NO：378)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：381之輕鏈序列或SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列之CDR(SEQ ID NO：394；SEQ ID NO：396；及SEQ ID NO：398)的聚核苷酸；編碼SEQ ID NO：361之重鏈序列或SEQ ID NO：362之可變重鏈序列之FR(SEQ ID NO：373；SEQ ID NO：375；SEQ ID NO：377；及SEQ ID NO：379)的聚核苷酸；及編碼SEQ ID NO：381之輕鏈序列或SEQ ID NO：382之可變輕鏈序列之FR(SEQ ID NO：393；SEQ ID NO：395；SEQ ID NO：397；及SEQ ID NO：399)的聚核苷酸，或者由其組成。

在本發明之另一實施例中，本發明之聚核苷酸包含編碼對PACAP具有結合特異性之Fab片段的聚核苷酸，或者由其組成。就抗體Ab19而言，編碼全長Ab19抗體之聚核苷酸包含編碼SEQ ID NO：361之重鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：371，及編碼SEQ ID NO：381之輕鏈序列的聚核苷酸SEQ ID NO：391，或者由其組成。

本發明之另一實施例涵蓋併入用於在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK-293細胞)中或在真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，諸如畢赤酵母屬酵母)中表現之表現載體中之此等聚核苷酸。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。在本文所描述之本發明之一個實施例中，Fab片段可在適合之宿主中表現全長聚核苷酸之後藉由Ab19之酶促消化(例如木瓜蛋白酶)產生。在本發明之另一實施例中，抗 PACAP抗體(諸如Ab19)或其Fab片段可經由Ab19聚核苷酸在哺乳動物細胞(諸如CHO、NSO或HEK 293細胞)、真菌、昆蟲或微生物系統(諸如酵母細胞，例如二倍體酵母，諸如二倍體畢赤酵母屬；及其他酵母菌株)中之表現來產生。適合之畢赤酵母屬種類包括但不限於巴斯德畢赤氏酵母。

亦涵蓋包含該等聚核苷酸之宿主細胞及載體。

本發明進一步涵蓋包含編碼如本文所闡述之可變重及輕鏈多肽序列以及個別CDR(高變區)的聚核苷酸序列的載體，以及包含該等載體序列之宿主細胞。在本發明之實施例中，宿主細胞為哺乳動物細胞，諸如CHO細胞。在本發明之實施例中，宿主細胞為酵母細胞，諸如畢赤酵母屬之酵母細胞。

B細胞篩選及分離

在一個實施例中，本發明涵蓋抗原特異性B細胞之純系群體的製備及分離，該抗原特異性B細胞純系群體可用於分離至少一種PACAP抗原特異性細胞，該至少一種PACAP抗原特異性細胞可用於產生對所需PACAP抗原具特異性之針對PACAP之單株抗體或對應於此類抗體之核酸序列。製備及分離該抗原特異性B細胞純系群體之方法教示於例如頒予Carvalho-Jensen等人之美國專利公開案第US 2007/0269868號中，該專利公開案之揭示內容以全文引用之方式併入本文中。製備及分離該抗原特異性B細胞純系群體之方法亦在本文中教示於實例中。根據尺寸或密度「富集」細胞群體之方法為此項技術中已知的。參見例如美國專利第5,627,052號。除了藉由抗原特異性來富集細胞群體之外，亦可使用此等步驟。

將抗體人類化之方法

在另一實施例中，本發明涵蓋用於將抗體重鏈及輕鏈人類化之方法。可適用於抗PACAP抗體之用於將抗體重鏈及輕鏈人類化之方法教示於例如頒予Olson等人之美國專利公開案第US 2009/0022659號及頒予Garcia-Martinez等人之美國專利第7,935,340號中，該等專利各自之揭示內容其以全文引用之方式併入本文中。

產生抗體及其片段之方法

在另一實施例中，本發明涵蓋用於產生抗PACAP抗體及其片段之方法。用於產生由交配勝任型酵母之多倍體、較佳二倍體或四倍體菌株分泌的抗PACAP抗體及其片段之方法教示於例如頒予Olson等人之美國專利公開案第US 2009/0022659號及頒予Garcia-Martinez等人之美國專利第7,935,340號中，該等專利各自之揭示內容以全文引用之方式併入本文中。

產生抗體之其他方法為一般熟習此項技術者熟知的。舉例而言，產生嵌合抗體之方法如今為此項技術中熟知的(參見例如頒予Cabilly等人之美國專利第4,816,567號；Morrison等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. ,81：8651-55(1984)；Neuberger等人，Nature, 314：268-270(1985)；Boulianne,G.L.等人，Nature, 312：643-46(1984)，該等參考文獻各自以全文引用之方式併入本文中)。

同樣地，產生人類化抗體之其他方法如今為此項技術中熟知的(參見例如頒予Queen等人之美國專利第5,530,101號、第5,585,089號、第5,693,762號及第6,180,370號；頒予Winter之美國專利第5,225,539號及第6,548,640號；頒予Carter等人之美國專利第6,054,297號、第6,407,213號及第6,639,055號；頒予Adair之美國專利第6,632,927號；Jones,P.T.等人，Nature, 321：522-525(1986)；Reichmann,L.等人，Nature, 332：323-327(1988)；Verhoeyen,M.等人，Science, 239：1534-36(1988)，該等參考文獻各自以全文引用之方式併入本文中)。

具有PACAP結合特異性之本發明之抗體多肽亦可藉由使用一般熟習此項技術者熟知之習知技術構築含有啟動子(視情況作為真核或原核操縱子之組分)及編碼抗體重鏈之DNA序列的表現載體來產生，其中編碼為抗體特異性所需之CDR的DNA序列係衍生自非人類細胞來源，較佳兔B細胞來源，而編碼抗體鏈之其餘部分的DNA序列係衍生自人類細胞來源。

第二表現載體係使用一般熟習此項技術者熟知之相同習知方法產生，該表現載體含有啟動子(視情況作為真核或原核操縱子之組分)及編碼抗體輕鏈之DNA序列，其中編碼為抗體特異性所需之CDR的DNA 序列係衍生自非人類細胞來源，較佳兔B細胞來源，而編碼抗體鏈之其餘部分的DNA序列係衍生自人類細胞來源。

一般熟習此項技術者熟知之按照慣例技術將表現載體轉染至宿主細胞中，以產生經轉染宿主細胞，將該經轉染宿主細胞藉由一般熟習此項技術者熟知之習知技術培養以產生該等抗體多肽。

宿主細胞可用上文所描述之兩個表現載體共轉染，第一表現載體含有編碼啟動子(視情況作為真核或原核操縱子之組分)及輕鏈衍生多肽的DNA，而第二載體含有編碼啟動子(視情況作為真核或原核操縱子之組分)及重鏈衍生多肽的DNA。兩個載體含有不同之可選標記物，但較佳達成重及輕鏈多肽之實質上相同之表現。或者，可使用單一載體，該載體包括編碼重鏈與輕鏈多肽之DNA。重鏈及輕鏈之編碼序列可包含cDNA、基因組DNA或兩者。

用於表現抗體多肽之宿主細胞可為細菌細胞，諸如大腸桿菌；或真核細胞，諸如巴斯德畢赤氏酵母。在本發明之一個實施例中，可使用明確確定用於此目的之類型的哺乳動物細胞，諸如骨髓瘤細胞、CHO細胞株、NSO細胞株或HEK293細胞株。

可用於構築載體之一般方法、為產生宿主細胞所需之轉染方法及為由該等宿主細胞產生抗體多肽所需之培養方法全部包括習知技術。雖然用於產生抗體之細胞株較佳為哺乳動物細胞株，但是可替代地使用任何其他適合之細胞株，諸如細菌細胞株，諸如大腸桿菌衍生之細菌菌株；或酵母細胞株。

類似地，抗體多肽在產生後可根據此項技術中之標準程序進行純化，諸如交叉流過濾、硫酸銨沈澱、親和管柱層析、疏水性相互作用層析(「HIC」)及類似方法。

本文所描述之抗體多肽亦可用於設計及合成將適用於與本發明之抗體多肽相同之治療應用的肽或非肽模擬物(參見例如Saragobi等人，Science, 253：792-795，(1991)，其內容以全文引用之方式併入本文中)。

篩選分析

在此描述之篩選分析經設計用於鑑別高親和力抗PACAP Ab，其可適合用於治療展現PACAP相關疾病或病症之症狀之個體的與PACAP相關之疾病及病症。

在一些實施例中，抗體係用作診斷工具。抗體可用於分析存在於樣品及/或個體中之PACAP的量。如熟習此項技術者將瞭解，此類抗體無需為中和抗體。在一些實施例中，診斷抗體不為中和抗體。在一些實施例中，診斷抗體結合於與中和抗體所結合不同之抗原決定基。在一些實施例中，兩種抗體彼此不競爭。

在一些實施例中，本文所揭示之抗體係用於或提供於用於偵測哺乳動物組織或細胞中之PACAP的分析套組及/或方法中，以篩選/診斷與PACAP含量改變相關之疾病或病症。套組包含結合PACAP之抗體及用於指示抗體與PACAP結合(若存在)及視情況PACAP蛋白質含量之構件。可使用各種用於指示抗體存在之構件。舉例而言，可使螢光團、其他分子探針或酶鍵聯至抗體，且可以多種方式觀測抗體之存在。用於篩選此類病症之方法可涉及使用套組，或簡單地使用所揭示之抗體中之一者及確定抗體是否結合於樣品中之PACAP。如熟習此項技術者將瞭解，高含量或升高含量之PACAP將導致更大量之抗體結合於樣品中之PACAP。因此，可使用抗體結合之程度來確定樣品中有多少PACAP。具有大於預定量(例如不具有PACAP相關病症之人將具有的量或範圍)之量的PACAP的個體或樣品可經表徵為具有PACAP介導之病症，例如偏頭痛、頭痛、疼痛或其他病狀。

本發明進一步提供用於偵測本發明之抗PACAP抗體與PACAP之結合的套組。特定而言，套組可用於偵測PACAP與本發明之抗PACAP抗體或其免疫活性片段之特異性反應性的存在。套組亦可包括結合於受質之抗體、與抗原具有反應性之二級抗體及用於偵測二級抗體與抗原之反應的試劑。此類套組可為ELISA套組且可包含受質、一級和二級抗體(適當時)及任何其他必需試劑，諸如如本文所描述之可偵測部分、酶受質及染色試劑。診斷套組亦可呈免疫墨點套組形式。診斷套組亦可呈化學發光套組(Meso Scale Discovery,Gaithersburg,MD)形式。診斷套組亦可為基於鑭系元素之偵測套組(PerkinElmer,San Jose,CA)。

熟練臨床醫師將瞭解，生物樣品包括但不限於血清、血漿、尿液、唾液、黏液、胸膜液、滑液及脊髓液。

改善或減輕與PACAP相關之疾病及病症之症狀或治療或預防與PACAP相關之疾病及病症的方法

在本發明之另一實施例中，本文所描述之抗PACAP抗體或其抗原結合片段適用於改善或減輕與PACAP相關之疾病及病症之症狀或治療或預防與PACAP相關之疾病及病症。本文所描述之抗PACAP抗體或其抗原結合片段以及組合亦可以如下文更詳細描述之醫藥組合物形式以治療有效量向需要治療與PACAP相關之疾病及病症的患者投與。

在本發明之另一實施例中，本文所描述之抗PACAP抗體或其抗原結合片段適用(單獨或與另一藥劑組合)於改善或減輕與PACAP相關之疾病或病狀之症狀或治療或預防與PACAP相關之疾病或病狀。

在本發明之另一實施例中，在存在或不存在第二藥劑之情況下，本文所描述之抗PACAP抗體或其抗原結合片段適用於改善或減輕以下非限制性列表之疾病及病症之症狀或治療或預防以下非限制性列表之疾病及病症：偏頭痛(具有或不具有預兆)、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、緊張性頭痛、一般頭痛、熱潮紅、畏光、慢性陣發性偏頭痛、歸因於頭部或頸部之潛在結構問題的繼發性頭痛、顱神經痛、竇性頭痛(例如與竇炎相關之頭痛)、過敏反應誘導之頭痛或偏頭痛、疼痛、慢性疼痛、神經炎性或炎性疼痛、手術後切口疼痛、手術後疼痛、外傷相關疼痛、眼睛疼痛、牙齒疼痛、複合區域性疼痛症候群、癌症疼痛(例如原發性或轉移性骨癌疼痛)、骨折疼痛、骨質疏鬆性骨折疼痛由灼傷引起之疼痛、由灼傷產生之疼痛、痛風性關節疼痛、與鐮狀細胞危象相關之疼痛、與顳下頜病症相關之疼痛、肝硬化、肝炎、神經原性疼痛、神經性疼痛、傷害性疼痛、內臟疼痛、三叉神經痛、皰疹後神經痛、幻肢痛、纖維肌痛、月經疼痛、卵巢痛、反射交感性營養不良、骨關節炎或類風濕性關節炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經病變、坐骨神經痛、消化不良、腸易激症候群、炎性腸道疾病、克羅恩氏病、迴腸炎、潰瘍性結腸炎、腎絞痛、痛經、膀胱炎、間質性膀胱炎、月經期、分娩、絕經期、胰臟炎、精神分裂症、抑鬱症、外傷後應激障礙、焦慮障礙、糖尿病、自體免疫糖尿病、內皮功能障礙、缺血、雷諾氏症候群、冠心病(「CHD」)、冠狀動脈疾病(「CAD」)、心臟衰竭、周圍動脈疾病(「PAD」)、肺動脈高血壓(「PH」)、結締組織病症、中風、休格倫氏症候群、多發性硬化、枝氣管高反應性、氣喘、枝氣管炎、枝氣管擴張、肺氣腫、慢性阻塞性肺病(「COPD」)、炎性皮炎、腺組織中之腺癌瘤、器官之胚性組織中的胚細胞瘤、上皮組織中之癌瘤、形成血細胞之組織中的白血病、淋巴組織中之淋巴瘤、骨髓中之骨髓瘤、結締組織或支持組織中之肉瘤、腎上腺癌、愛滋病相關淋巴瘤、貧血、膀胱癌、骨癌、腦癌、乳癌、類癌瘤腫瘤、子宮頸癌、化學治療、結腸癌、血細胞減少症、子宮內膜癌、食管癌、胃癌、頭癌、頸癌、肝膽癌、腎癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏病、神經系統腫瘤、口腔癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、直腸癌、皮膚癌、胃癌、睪丸癌、甲狀腺癌、尿道癌、骨髓癌、多發性骨髓瘤、轉移到骨骼之腫瘤、浸潤神經及空腔性臟器之腫瘤、神經結構附近之腫瘤。進一步較佳地，癌症疼痛包含內臟疼痛，較佳為由胰臟癌及/或腹部中之轉移瘤引起的內臟疼痛。進一步較佳地，癌症疼痛包含軀幹疼痛，較佳為歸因於以下中之一或多者之軀幹疼痛：骨骼中之轉移、手術後疼痛、結締組織之肉瘤癌症、骨組織之癌症、骨髓之成血細胞之癌症、多發性骨髓瘤、白血病、原發性或繼發性骨癌、尋常痤瘡、異位性皮炎、蕁麻疹、瘢痕瘤、肥厚性瘢痕及紅斑痤瘡、過敏性皮炎、銀屑病、瘙癢、神經原性皮膚發紅、紅斑、重量減輕、厭食、結節病、休克、敗血病、鴉片劑戒斷症候群、嗎啡耐受、癲癇症、下泌尿道(「LUT」)病症，諸如泌尿道感染、排泄異常、尿急、夜尿症、尿失禁、膀胱過度活動症，且用於預防或緩解與此類LUT病狀相關之疼痛。較佳地，本文所描述之本發明抗PACAP抗體及抗原結合片段適用於改善或減輕偏頭痛、頭痛及疼痛相關疾病或病狀之症狀；治療或預防偏頭痛、頭痛及疼痛相關疾病或病狀之症狀。

特定而言，本發明抗PACAP抗體及抗原結合片段亦可適用於改善或減輕與頭痛及/或偏頭痛一起存在以及獨立於頭痛及/或偏頭痛存在之畏光之症狀；治療或預防與頭痛及/或偏頭痛一起存在以及獨立於頭痛及/或偏頭痛存在之畏光。

偏頭痛患者當曝露於光時典型地發展惡化疼痛及偏頭痛症狀，此現象稱為畏光。畏光亦為眼部病症，諸如虹膜炎及葡萄膜炎；及顱內病症，諸如腦膜炎中常見的。在經典視覺通路中，光活化視網膜中之桿體及錐體，其活化經由視神經投射至側膝體核、上丘且然後視覺皮層之視網膜神經節細胞。此通路包括成像及非成像資料。新通路(非成像資訊)允許經由視交叉上核維持正常晝夜節律且由固有感光性視網膜神經節細胞(ipRGC)調控。此等ipRGC與桿體及錐體無關且含有視黑素(一種感光色素)。

Noseda,R.等人，Nat.Neurosci., 13：239-245(2010)研究了具有偏頭痛之失明個體，且將此等發現與涉及追蹤在感覺來自硬膜之疼痛時投射至各區域的ipRGC投影之大鼠模型相關聯。在具有偏頭痛之失明患者中，6個歸因於嚴重視神經損傷或雙側摘除而不具有光感覺。此等個體經歷異常睡眠模式及不良瞳孔光反應。其偏頭痛不隨光曝露而惡化。相比之下，儘管圖像感覺極輕微但能夠偵測光之14個失明個體具有正常睡眠模式及正常瞳孔光反射。儘管存在廣泛桿體及錐體變性，但在偏頭痛發作期間在光曝露之情況下此等患者具有惡化之偏頭痛症狀，表明ipRGC，而不是桿體及錐體，在畏光中為重要的。

如藉由在大鼠中進行順行追蹤所證實，非成像腦區域之此等視網膜投影投射至後丘腦之對側背尾端區域。ipRGC輸入至此區域調節亦投射至此區域之硬膜敏感性疼痛神經元。對硬腦膜疼痛及光輸入雙重敏感之丘腦神經元廣泛地投射至多個皮層區域，包括初級體感皮層、初級和次級運動皮層、頂葉聯合皮層及初級和次級視覺皮層。此等皮層投影可幫助解釋除畏光之外的其他常見偏頭痛症狀，諸如運動無辦或不協調、視力障礙及集中度不良。

畏光亦隨附其他較不頻繁但同樣使失去能力之病狀，諸如叢集性頭痛及其他三叉神經自主性頭痛及瞼痙攣。引起畏光之機制涉及三叉神經的系統。失明患者之畏光表明來自非視覺通路之貢獻。此外，三叉神經自主性頭痛(較不常見之原發性頭痛病症之群)之特徵為經常與同側畏光相關之單側三叉神經介導之疼痛。

畏光之常見原因包括偏頭痛頭痛、白內障或嚴重眼科疾病，諸如葡萄膜炎或角膜擦傷。與畏光相關之病症的更詳盡列表包括眼睛相關原因，諸如色盲、無虹膜、可能因抗膽鹼能藥物使虹膜括約肌麻痹而引起之畏光、無晶狀體(眼睛中不存在晶狀體)、牛眼症(角膜與虹膜之間的角度異常小)、白內障、錐體營養不良、先天性眼睛異常、病毒性結膜炎(「紅眼」)、角膜擦傷、角膜營養不良、角膜潰瘍、角膜上皮破壞(諸如由角膜異物或角膜炎所引起之角膜上皮破壞)、晶狀體異位、眼內炎、由疾病、損傷或感染引起之眼外傷，諸如瞼板腺囊腫、鞏膜表層炎、青光眼、圓錐形角膜或視神經發育不全、水眼症或先天性青光眼虹膜炎、視神經炎、色素播散症候群、瞳孔擴張(自然或化學誘發)、視網膜脫離、角膜或鞏膜瘢痕形成及葡萄膜炎。

此外，畏光具有神經-系統相關原因或神經原因，包括：自閉症譜系病症、查理氏畸形、誦讀困難、包括肌痛性腦脊髓炎(亦稱為慢性疲勞症候群)之腦炎、腦膜炎、蛛網膜下出血、顱後窩腫瘤以及其他原因，諸如強直性脊柱炎、白化病、核黃素缺乏症、苯并二氮呯類(長期使用或戒斷苯并二氮呯類)、化學治療、切昆貢亞熱、胱胺酸病、埃-當二氏症候群、宿醉、流感、傳染性單核細胞增多症、鎂缺乏症、汞中毒、偏頭痛、狂犬病及II型酪胺酸血症(亦稱為「裏-漢二氏症候群」)。

另外，已知在抑鬱症、雙極性障礙及廣場恐怖症中畏光為增加的。

本文所描述之本發明抗PACAP抗體及抗原結合片段可有效治療或預防較佳具有外傷後應激障礙(「PTSD」)之個體或具有外傷性腦損傷之個體的此等病狀中之任一者中的畏光。

如下文所論述，可根據原因將頭痛進行歸類。

原發性頭痛. 原發性頭痛係由頭部之疼痛敏感性結構的間題或過度活化而引起。原發性頭痛通常不視為基礎疾病之症狀。實際上，腦中之化學活動性、頭部顱骨外側之神經或血管或頭部及頸部之肌肉或此等因素之組合可在原發性頭痛中起作用。一些人可帶有使其更可能發展此類頭痛之基因。示例性常見原發性頭痛包括但不限於叢集性頭痛；緊張性頭痛(或緊張型頭痛)；及三叉神經自主性頭痛(「TAC」)，包括陣發性偏頭痛。存在可視為原發性頭痛類型之其他頭痛模式，例如慢性每天頭痛、咳嗽頭痛、運動頭痛及性頭痛。此等頭痛較不常見且具有不同特徵，諸如反常持續時間或與某一活性相關之疼痛。雖然此等頭痛通常視為原發性的，其中之每一者可為基礎疾病之症狀。另外，一些原發性頭痛可由生活方式因素觸發，包括：酒精；某些食物(例如含有硝酸鹽之經預加工之肉)；睡眠改變或缺乏睡眠；姿勢不良；省略進餐；及壓力。

繼發性頭痛. 繼發性頭痛為可活化頭部之疼痛敏感性神經之疾病的症狀。許多嚴重程度可極大地變化之病狀可引起繼發性頭痛。繼發性頭痛之示例性來源包括但不限於急性竇炎；動脈撕裂(頸動脈或脊椎解剖)；腦中之靜脈血栓形成；腦動脈瘤；腦動靜脈畸形；一氧化碳中毒；查理氏畸形；震盪；脫水；牙齒問題；耳部感染(中耳)；腦炎；巨細胞性動脈炎；青光眼；宿醉；流感(流行感冒)；顱內血腫；用於治療其他病症之藥物；腦膜炎；麩胺酸單鈉(「MSG」)；過度使用疼痛藥物；恐慌發作；震盪後症候群；來自例如頭盔或護目鏡之緊密貼合之頭飾的壓力；假性腦瘤；弓形體病；及三叉神經痛。繼發性頭痛之特定類型包括但不限於外部擠壓頭痛(引起壓力之頭飾的結合)；霜淇淋頭痛(通常稱為「腦冷凍」)；反彈性頭痛(由過度使用疼痛藥物引起)；竇性頭痛(由竇腔炎症及充血引起)；脊髓頭痛(由腦脊髓液含量低、可能存在之外傷結果、脊椎抽液或脊椎麻醉引起)；及雷鳴頭痛(涉及突然、嚴重頭痛之病症群體)。

可藉由投與本發明之抗PACAP抗體治療及/或預防的示例性、非限制性疼痛相關疾病及病症包括由與神經原性、神經性、炎性或傷害性疼痛相關之任何病狀產生的疼痛。較佳地，疼痛相關病症將與在疼痛位點處增加之PACAP有關。

在某些實施例中，所要治療之疼痛相關病症為由惡性腫瘤或由選自中之一或多者的癌症引起之癌症疼痛：腺組織中之腺癌瘤、器官之胚性組織中的胚細胞瘤、上皮組織中之癌瘤、形成血細胞之組織中的白血病、淋巴組織中之淋巴瘤、骨髓中之骨髓瘤、結締組織或支持組織中之肉瘤、腎上腺癌、愛滋病相關淋巴瘤、貧血、膀胱癌、骨癌、腦癌、乳癌、類癌瘤腫瘤、子宮頸癌、化學治療、結腸癌、血細胞減少症、子宮內膜癌、食管癌、胃癌、頭癌、頸症、肝膽癌、腎癌、白血病、肝癌、肺癌、淋巴瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏病、神經系統腫瘤、口腔癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、直腸癌、皮膚癌、胃癌、睪丸癌、甲狀腺癌、尿道癌、骨髓癌、多發性骨髓瘤、轉移到骨骼之腫瘤、浸潤神經及空腔性臟器之腫瘤、神經結構附近之腫瘤。進一步較佳地，癌症疼痛包含內臟疼痛，較佳為由胰臟癌及/或腹部中之轉移瘤引起的內臟疼痛。進一步較佳地，癌症疼痛包含軀幹疼痛，較佳為歸因於以下中之一或多者的軀幹疼痛：骨骼中之轉移、手術後疼痛、結締組織之肉瘤癌症、骨組織之癌症、骨髓之成血細胞之癌症、多發性骨髓瘤、白血病、原發性或繼發性骨癌。

在其他實施例中，所要治療之疼痛相關病狀與神經性疼痛有關，且較佳被治療者包括例如三叉神經痛、皰疹後神經痛、幻肢痛、纖維肌痛及反射交感性營養不良。

其他示例性疼痛相關疾病或病狀包括但不限於一般疼痛、慢性疼痛、炎性疼痛、手術後切口疼痛、手術後疼痛、外傷相關疼痛、下背疼痛、眼睛疼痛、牙齒疼痛、複合區域性疼痛症候群、癌症疼痛(例如原發性或轉移性骨癌疼痛)、骨折疼痛、骨質疏鬆性骨折疼痛、由灼傷引起之疼痛、痛風性關節疼痛、與鐮狀細胞危象相關之疼痛、與顳下頜病症相關之疼痛、肝硬化、肝炎、神經原性疼痛、神經性疼痛、傷害性疼痛、內臟疼痛、三叉神經痛、皰疹後神經痛、幻肢痛、纖維肌痛、月經疼痛、卵巢痛、反射交感性營養不良、骨關節炎或類風濕性關節炎疼痛、下背疼痛、糖尿病性神經病變、坐骨神經痛、消化不良、腸易激症候群、炎性腸道疾病、克羅恩氏病、迴腸炎、潰瘍性結腸炎、腎絞痛、痛經、膀胱炎、間質性膀胱炎、月經期、分娩、絕經期、胰臟炎、精神分裂症、抑鬱症、外傷後應激障礙、焦慮障礙、糖尿病、自體免疫糖尿病、內皮功能障礙、缺血、雷諾氏症候群、冠心病(「CHD」)、冠狀動脈疾病(「CAD」)、心臟衰竭、周圍動脈疾病(「PAD」)、肺動脈高血壓(「PH」)、結締組織病症、中風、休格倫氏症候群、多發性硬化、膀胱過度活動症、枝氣管高反應性、氣喘、枝氣管炎、枝氣管擴張、肺氣腫、慢性阻塞性肺病(「COPD」)、炎性皮炎、尋常痤瘡、異位性皮炎、蕁麻疹、瘢痕瘤、肥厚性瘢痕及紅斑痤瘡、過敏性皮炎、銀屑病、搔癢、神經原性皮膚發紅、紅斑、結節病、休克、敗血病及鴉片劑戒斷症候群。

因此，本發明包括通過使用本發明之抗體及抗原結合片段來治療、預防及/或改善與PACAP活性或PACAP上調相關之任何疾病或病症(包括以上所提及之示例性疼痛相關疾病、病症及病狀中之任一者)的方法。

另外，本發明PACAP抗體及抗原結合片段可單獨或與例如類阿片及非類阿片止痛劑(諸如NSAID)之其他活性劑結合使用，以引發止痛或增強另一止痛劑之功效。

本發明抗體潛在地可與任何類阿片止痛劑或NSAID或另一止痛劑(可能為另一抗體或另一生物劑，諸如抗NGF或抗CGRP或抗CGRP-R抗體或抗體片段或NGF、CGRP或CGRP-R多肽片段或結合物)組合，以增加或增強疼痛管理。此可允許此類止痛劑化合物持續更長時間或以降低之劑量投與，藉此潛在地緩解與共相關之有害副作用。

特別關注的是本發明抗PACAP抗體及抗體片段與抗CGRP抗體(例如ALD403)或抗CGRP-R抗體或抗體片段之共投與，以及此外，本發明抗PACAP抗體及抗體片段用於治療先前已接受抗CGRP或抗CGRP-R抗體或抗體片段之個體的用途。舉例而言，先前經治療之個體(先前已接受至少一次抗CGRP或抗CGRP-R抗體或抗體片段投與的個體)可為未適當地對抗CGRP或抗CGRP-R抗體治療作出反應(「不良反應者」)及/或已引發對抗CGRP或抗CGRP-R抗體或抗體片段之免疫反應的偏頭痛患者。

同樣地，例如在治療偏頭痛患者時本發明抗PACAP抗體及抗原結合片段與BOTOX®(肉毒桿菌毒素)之共投與亦為特別關注的。在一些情況下，偏頭痛患者可未適當地對先前治療作出反應(「不良反應者」)且/或已引發對先前治療之免疫反應。

在一些實施例中，可與本發明抗PACAP抗體或抗原結合片段結合使用阿司匹林(aspirin)及/或乙醯胺基酚。阿司匹林為另一類型之非類固醇抗炎化合物。

投與醫藥調配物之個體可為例如需要此類治療、預防及/或改善之任何人類或非人類動物，或將以其他方式受益於PACAP介導之活性之抑制或減弱的個體。舉例而言，個體可為經診斷具有上述疾病或病症中之任一者或被認為處於受上述疾病或病症中之任一者折磨的風險中的個體。本發明進一步包括本文所揭示之醫藥調配物中之任一者在用於治療、預防及/或改善與PACAP活性相關之任何疾病或病症(包括以上所提及之示例性疾病、病症及病狀中之任一者)的藥劑之製造中的用途。

投與

在本發明之一個實施例中，本文所描述之抗PACAP抗體或其PACAP結合片段，以及該等抗體或其抗原結合片段的組合係以在0.1mg/ml與約0.5、1、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190或200mg/ml+/-10%誤差中之任一者之間的濃度向個體投與。

在本發明之另一實施例中，本文所描述之抗PACAP抗體及其片段係以每公斤受體個體體重約0.01與100.0或200.0mg之間的劑量向個體投與。在某些實施例中，視PACAP相關疾病之類型及嚴重程度而定，約1μg/kg至50mg/kg(例如0.1-20mg/kg)之抗體為用於向患者投與之初始候選劑量，無論例如藉由一或多次分開投與，還是藉由連續輸注。在另一實施例中，約1μg/kg至15mg/kg(例如0.1mg/kg-10mg/kg)之抗體為用於向患者投與之初始候選劑量。典型日劑量可在約1μg/kg至100mg/kg或更多的範圍內，此取決於若干因素，例如正在治療之特定哺乳動物、個別患者之臨床病狀、病症之原因、藥劑遞送位點、投藥方法、投藥時程及執業醫師已知之其他因素。然而，其他給藥方案可為適用的。

舉例而言，除本文所論述之相對劑量(mg/kg)之外，本發明抗PACAP抗體及其抗原結合片段可以絕對劑量(mg)向個體投與。因此，在本發明之一個實施例中，不管投藥途徑為何，本文所描述之抗PACAP抗體及其抗原結合片段係以約1微克與約1000毫克之間的劑量向個體投與。

在本發明之一較佳實施例中，本文所描述之抗PACAP抗體或其抗PACAP抗原結合片段以及該等抗體或其抗原結合片段之組合係以每二十六週一次或更低(諸如每十六週一次或更低、每八週一次或更低、每四週一次或更低、每兩週一次或更低、每週一次或更低或每天一次或更低)之頻率向受體個體投與。

根據較佳實施例，含有藥劑或醫藥組合物之抗體係經由選自以下中之一或多者之途徑周圍地向個體投與：經口、舌下、經頰、表面、直腸、經由吸入、經皮、皮下、靜脈內、動脈內或肌肉內、經由心內投與、骨內、皮內、腹膜內、經黏膜、經陰道、玻璃體內、經上表皮、關節內、關節周圍或局部。

Fab片段可每兩週或更不頻繁、每週或更不頻繁、每天一次或更不頻繁、每天多次及/或每幾小時一次地投與。在本發明之一個實施例中，患者接受一天1至6次以分開劑量或以連續灌注形式給予之每天0.1mg/kg至40mg/kg之Fab片段對獲得所需結果而言為有效的。

應瞭解，向給定患者投與之抗體或Fab之濃度可比以上所闡述之示例性投與濃度更大或更低。

熟習此項技術者將能夠例如由本文之揭示內容及以下文獻中之教示指導通過常規實驗確定有效劑量及投與頻率：Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics ,Brunton,L.L.等人編，第11版，New York,New York：McGraw-Hill(2006)；Howland,R.D.等人，Pharmacology ，第864卷，Lippincott's illustrated reviews. ,Philadelphia,PA：Lippincott Williams & Wilkins(2006)；及Golan,D.E.,Principles of pharmacology：the pathophysiologic basis of drug therapy ,Philadelphia,PA：Lippincott Williams & Wilkins(2007)。

在本發明之另一實施例中，本文所描述之抗PACAP抗體或其PACAP結合片段以及該等抗體或其抗原結合片段之組合係以醫藥調配物形式向個體投與。在一較佳實施例中，個體為人類。

「醫藥組合物」或「藥劑」係指適合用於向個體、較佳哺乳動物、更佳人類投與之化學或生物組合物。此類組合物可經特定調配用於經由包括但不限於以下之許多途徑中之一或多者來投與：頰內、經皮、硬膜外、吸入、動脈內、心臟內、腦室內、皮內、肌肉內、鼻內、眼內、腹膜內、脊柱內、鞘內、靜脈內、經口、非經腸、經由灌腸劑或栓劑經直腸、皮下、皮膚下、舌下、經皮及經黏膜。此外，可藉助於注射劑、粉末、液體、凝膠、滴劑或其他投與手段進行投與。

在本發明之一個實施例中，本文所描述之抗PACAP抗體或其PACAP結合片段以及該等抗體或其抗原結合片段之組合可視情況與一或多種活性劑組合投與。此類活性劑包括止痛劑、抗組胺、退熱劑、抗炎劑、抗生素、抗病毒劑及抗細胞因子劑。活性劑包括下列之促效劑、拮抗劑及調節劑：TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-13、IL-18、IFN-α、IFN-γ、BAFF、CXCL13、IP-10、VEGF、EPO、EGF、HRG、肝細胞生長因子(「HGF」)、鐵調素(Hepcidin)、NGF、CGRP，包括針對前述各項中之任一者具反應性的抗體及針對其受體中之任一者具反應性的抗體。活性劑亦包括但不限於2-芳基丙酸、醋氯芬酸(aceclofenac)、阿西美辛(acemetacin)、乙醯水楊酸(阿司匹林)、阿氯芬酸(alclofenac)、阿明洛芬(alminoprofen)、阿洛普令(amoxiprin)、胺基安替比林(ampyrone)、芳基脂肪酸、阿紮丙酮(azapropazone)、撲炎痛(benorylate)/貝諾酯(benorilate)、苯噁洛芬(benoxaprofen)、溴芬酸(bromfenac)、卡洛芬(carprofen)、塞來昔布、水楊酸膽鹼鎂、氯非宗(clofezone)、COX-2抑制劑、右旋布洛芬(dexibuprofen)、右旋酮洛芬(dexketoprofen)、雙氯芬酸、二氟尼柳、屈昔康(droxicam)、乙柳醯胺(ethenzamide)、依託度酸(etodolac)、依託昔布(etoricoxib)、伐斯胺(faislamine)、滅酸、芬布芬(fenbufen)、非諾洛芬(fenoprofen)、氟滅酸、氟諾洛芬(flunoxaprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、布洛芬、異丁普生(ibuproxam)、吲哚美辛(indomethacin)、吲哚洛芬(indoprofen)、酮保泰松(kebuzone)、酮洛芬、酮咯酸(ketorolac)、氯諾昔康(lornoxicam)、洛索洛芬(loxoprofen)、魯米昔布(lumiracoxib)、水楊酸鎂、甲氯滅酸、甲滅酸、美洛昔康、安乃近(metamizole)、水楊酸甲酯、莫非保松(mofebutazone)、萘丁美酮(nabumetone)、萘普生、N-芳基鄰胺基苯甲酸、NGF、奧沙美辛(oxametacin)、奧沙普秦(oxaprozin)、昔康類、羥保泰松、催產素、帕瑞昔布(parecoxib)、非那宗(phenazone)、苯基保泰松(phenylbutazone)、苯基保泰松、吡羅昔康、吡洛芬(pirprofen)、洛芬(profen)、丙谷美辛(proglumetacin)、吡唑啶衍生物、羅非昔布、水楊酸水楊酯、水楊醯胺、水楊酸酯、P物質、磺拉宗(sulfinpyrazone)、舒林酸、舒洛芬(suprofen)、替諾昔康(tenoxicam)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、托芬那酸(tolfenamic acid)、托美汀及伐地昔布(valdecoxib)。舉例而言，所選抗PACAP抗體或其PACAP結合片段以及此等抗體或抗原結合片段之組合可視情況與催產素組合投與，例如關於鼻內遞送以鼻內調配物形式投與。

抗組胺可為對抗組胺之作用或其自細胞(例如肥大細胞)釋放的任何化合物。抗組胺包括但不限於阿伐司汀(acrivastine)、阿司咪唑(astemizole)、阿紮他定(azatadine)、氮卓斯汀(azelastine)、貝他斯汀(betatastine)、溴苯那敏(brompheniramine)、布克立嗪(buclizine)、西替利嗪(cetirizine)、西替利嗪類似物、氯芬胺、氯馬斯汀(clemastine)、CS 560、塞庚啶(cyproheptadine)、地洛他定(desloratadine)、右氯苯那敏(dexchlorpheniramine)、依巴斯汀(ebastine)、依匹斯汀、非索非那定(fexofenadine)、HSR 609、羥嗪、左卡巴斯汀(levocabastine)、氯雷他定(loratadine)、甲東莨菪鹼(methscopolamine)、咪唑斯汀(mizolastine)、諾阿司咪唑(norastemizole)、苯茚胺(phenindamine)、普魯米近(promethazine)、吡拉明(pyrilamine)、特非那定(terfenadine)及曲尼司特(tranilast)。

抗生素包括但不限於阿米卡星(amikacin)、胺基醣苷(aminoglycoside)、阿莫西林(amoxicillin)、氨比西林、安莎黴素(ansamycin)、胂凡納明(arsphenamine)、阿奇黴素(azithromycin)、阿洛西林(azlocillin)、氨曲南(aztreonam)、桿菌肽素(bacitracin)、碳頭孢烯(carbacephem)、碳青黴烯(carbapenem)、卡本西林(carbenicillin)、頭孢克洛(cefaclor)、頭孢羥氨苄(cefadroxil)、頭孢氨苄(cefalexin)、頭孢噻吩(cefalothin)、先鋒黴素(cefalotin)、頭孢孟多(cefamandole)、頭孢唑啉(cefazolin)、頭孢地尼(cefdinir)、頭孢妥侖(cefditoren)、頭孢吡肟(cefepime)、頭孢克肟(cefixime)、頭孢哌酮(cefoperazone)、頭孢噻肟(cefotaxime)、頭孢西丁(cefoxitin)、頭孢泊肟(cefpodoxime)、頭孢羅齊(cefprozil)、頭孢他啶(ceftazidime)、頭孢布烯(ceftibuten)、頭孢唑肟(ceftizoxime)、頭孢吡普(ceftobiprole)、頭孢曲松(ceftriaxone)、頭孢呋辛(cefuroxime)、頭孢菌素(cephalosporin)、氯黴素(chloramphenicol)、西司他汀(cilastatin)、環丙沙星(ciprofloxacin)、克拉黴素(clarithromycin)、克林黴素(clindamycin)、氯唑西林(cloxacillin)、柯利黴素 (colistin)、複方新諾明(co-trimoxazole)、達福普汀(dalfopristin)、地美環素(demeclocycline)、雙氯西林(dicloxacillin)、地紅黴素(dirithromycin)、多利培南(doripenem)、多西環素(doxycycline)、依諾沙星(enoxacin)、厄他培南(ertapenem)、紅黴素(erythromycin)、乙胺丁醇(ethambutol)、氟氯西林(flucloxacillin)、磷黴素(fosfomycin)、呋喃唑酮(furazolidone)、夫西地酸(fusidic acid)、加替沙星(gatifloxacin)、格爾德黴素(geldanamycin)、慶大黴素(gentamicin)、醣肽(glycopeptide)、除莠黴素(herbimycin)、亞胺培南(imipenem)、異菸肼(isoniazid)、卡那黴素、洛氟沙星(levofloxacin)、林可黴素(lincomycin)、利奈唑胺(linezolid)、洛美沙星(lomefloxacin)、氯碳頭孢(loracarbef)、大環內酯(macrolide)、磺胺米隆(mafenide)、美羅培南(meropenem)、甲氧西林(methcillin)、甲硝唑(metronidazole)、美洛西林(mezlocillin)、米諾環素(minocycline)、單環內醯胺(monobactam)、莫西沙星(moxifloxacin)、莫匹羅星(mupirocin)、萘夫西林(nafcillin)、新黴素、奈替米星(netilmicin)、硝基呋喃妥英(nitrofurantoin)、諾氟沙星(norfloxacin)、氧氟沙星(ofloxacin)、苯唑西林(oxacillin)、氧四環素(oxytetracycline)、巴龍黴素(paromomycin)、青黴素(penicillin)、青黴素類(penicillins)、哌拉西林(piperacillin)、平板黴素(platensimycin)、多黏菌素B(polymyxin B)、多肽、普隆托西(prontosil)、吡嗪醯胺(pyrazinamide)、喹諾酮、奎奴普汀(quinupristin)、立汎黴素(rifampicin)、利福平(rifampin)、羅紅黴素(roxithromycin)、狀觀黴素(spectinomyein)、鏈黴素(streptomycin)、磺乙醯胺(sulfacetamide)、磺胺甲二唑(sulfamethizole)、對胺基苯磺醯胺(sulfanilamide)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、磺胺異噁唑(sulfisoxazole)、磺醯胺(sulfonamide)、替考拉寧(teicoplanin)、泰利黴素(telithromycin)、四環素、四環素類(tetracyclines)、替卡西林(ticarcillin)、替硝唑(tinidazole)、妥布黴素(tobramycin)、甲氧苄啶(trimethoprim)、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑(trimethoprim-sulfamethoxazole)、醋竹桃黴素(troleandomycin)、曲氟沙星(trovafloxacin)及萬古黴素(vancomycin)。

活性劑亦包括醛固酮、倍氯米松(beclomethasone)、倍他米松(betamethasone)、皮質類固醇、考的索(cortisol)、乙酸可的松(cortisone acetate)、乙酸去氧皮質酮(deoxycorticosterone acetate)、地塞米松(dexamethasone)、乙酸氟氫可的松(fludrocortisone acetate)、糖皮質素(glucocorticoid)、氫化可的松(hydrocortisone)、甲基潑尼松龍(methylprednisolone)、潑尼松龍(prednisolone)、潑尼松(prednisone)、類固醇及曲安西龍(triamcinolone)。亦涵蓋此等活性劑之任何適合的組合。

「醫藥賦形劑」或「醫藥學上可接受之賦形劑」為在其中調配活性治療劑之載劑，通常為液體。在本發明之一個實施例中，活性治療劑為本文所描述之人類化抗體，或其一或多個片段。賦形劑通常不提供任何藥理學活性至調配物，不過其可提供化學及/或生物穩定性及釋放特徵。示例性調配物可見於Remington’s Pharmaceutical Sciences ,Gennaro,A.編，第19版，Philadelphia,PA：Williams and Wilkins(1995)中，該參考文獻係以引用之方式併入本文中。

如本文所用「醫藥學上可接受之載劑」或「賦形劑」包括生理學上相容之任何及所有溶劑、分散介質、塗料、抗細菌及抗真菌劑、等張劑及吸收延遲劑。在一個實施例中，載劑適合用於非經腸投與。或者，載劑可適合用於靜脈內、腹膜內、肌肉內或舌下投與。醫藥學上可接受之載劑包括無菌水溶液或分散體及用於無菌可注射溶液或分散體之臨時製備的無菌粉末。此類介質及試劑用於醫藥活性物質之用途為此項技術中熟知的。除非任何習知介質或試劑與活性化合物不相容，否則涵蓋其在本發明之醫藥組合物中的用途。亦可將補充活性化合物併入組合物中。

醫藥組合物典型地必須為無菌的且在製造及儲存條件下穩定。本發明涵蓋醫藥組合物以凍乾形式存在。組合物可調配成溶液、微乳液、脂質體或其他適合於高藥物濃度之有序結構的形式。載劑可為含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇及液體聚乙二醇)及其適合之混合物的溶劑或分散介質。本發明進一步涵蓋將穩定劑包括在醫藥組合物中。可例如藉由在分散體之情況下維持所需粒度及藉由使用表面活性劑來維持適當之流動性。

在許多情況下，將較佳在組合物中包括等張劑，例如糖；多元醇，諸如甘露糖醇及山梨糖醇；或氯化鈉。可藉由包括延遲吸收之試劑(例如單硬脂酸鹽及明膠)來延長可注射組合物之吸收。此外，鹼性多肽可調配成限時釋放調配物，例如呈包括緩慢釋放聚合物之組合物形式。活性化合物可用將保護化合物不快速釋放之載劑製備，諸如控制釋放調配物，包括插入物、經皮貼片及微囊封遞送系統。可使用生物可降解之生物相容聚合物，諸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、膠原蛋白、聚原酸酯、聚乳酸、聚乳酸及聚乙醇酸共聚物(「PLG」)。用於製備此類調配物之許多方法為熟習此項技術者已知的。

對於所敍述之實施例中之每一者，化合物可藉由多種劑型進行投與。涵蓋一般熟習此項技術者已知之任何生物學可接受之劑型及其組合。此類劑型之實例包括但不限於可複水粉末、酏劑、液體、溶液、懸浮液、乳液、粉末、顆粒、粒子、微粒、可分散顆粒、扁囊劑、吸入劑、氣溶膠吸入劑、貼片、粒子吸入劑、植入物、貯庫植入物、可注射劑(包括皮下、肌肉內、靜脈內及皮內)、輸注劑及其組合。

以上對本發明之各種所說明之實施例的描述不旨在為詳盡的或將本發明限於所揭示之精確形式。如熟習相關技術者將認可，雖然本文出於說明性目的描述了本發明之特定實施例及實例，但各種等效修改形式可能在本發明範疇內。除上文所描述之實例以外，本發明之本文所提供之教示可適用於其他目的。

可根據以上實施方式對本發明作出此等及其他改變。一般而言，在以下申請專利範圍中，所用之術語不應理解為將本發明限於本說明書及申請專利範圍中所揭示之特定實施例。因此，本發明不由本揭示內容限制，而實際上本發明之範疇完全由以下申請專利範圍確定。

本發明可以除描述於前述描述及實例中之彼等以外的方式進行實踐。根據以上教示，本發明之許多修改及變化形式係為可能的，且因此在隨附申請專利範圍之範疇內。

與用於獲得抗原特異性B細胞之純系群體之方法有關的某些教示係揭示於美國專利公開案第US 2013/0316353號中，該專利公開案之揭示內容係以全文引用之方式併入本文中。

與兔衍生之單株抗體的人源化及用於維持抗原結合親和力的較佳序列修飾有關之某些教示揭示於2008年5月21日申請之標題為Novel Rabbit Antibody Humanization Methods and Humanized Rabbit Antibodies 之國際公開案第WO 2008/144757號中，該國際公開案之揭示內容以全文引用之方式併入本文中。

與使用交配勝任型酵母產生抗體或其片段及對應方法有關之某些教示揭示於美國專利公開案第US2006/0270045號中，該公開案之揭示內容以全文引用之方式併入本文中。

與在畢赤酵母屬中產生抗體或其片段及用於獲得及純化抗體之較佳方法有關的某些教示亦揭示於美國專利公開案第2014/0288272號；第2014/0287952號；第2013/0055888號；及第2012/0277408號中，該等專利公開案中之每一者的揭示內容以全文引用之方式併入本文中。

與產生抗體或其片段在CHO細胞中及用於獲得及純化抗體之示例性方法有關的某些教示亦揭示於美國專利及公開案第7,932,087號；第2009/0285795號；第9,090,672號；及第2010/0221781號中；該等專利及公開案中之每一者的揭示內容以全文引用之方式併入本文中。

某些抗PACAP抗體聚核苷酸及多肽揭示於所申請之此專利申請案隨附的序列表中，且該序列表之揭示內容以全文引用之方式併入本文中。

發明背景、實施方式及實例中所引用之各文獻的全部揭示內容(包括專利、專利申請案、雜誌文章、摘要、手冊、書或其他揭示內容)係以全文引用之方式併入本文中。

公佈以下實施例，以便為一般熟習此項技術者提供對如何製備及使用本發明之完整揭示內容及描述，且不欲限制什麼被視為本發明之範疇。已努力確保所用數值(如量、溫度、濃度等)之準確性，但應允許一些實驗誤差及偏差。除非另有陳述，否則份數為重量份，分子量為平均分子量，溫度係以攝氏度計；且壓力是大氣壓或接近大氣壓。

實例

實例1：選擇性結合PACAP之抗體的製備

藉由使用實質上如本文所描述之抗體選擇方案，產生對 PACAP38及PACAP27具特異性之一組抗體及僅對PACAP38具特異性之一組抗體。

免疫策略

將兔用PACAP38(American Peptide,Vista,CA)(SEQ ID NO：1241)免疫。如下製備肽來進行免疫。將溶解於補充至1M NaCl中之杜爾貝科氏磷酸鹽緩衝鹽水(「DPBS」)中之0.15ml體積之10mg/ml鑰孔戚血藍素(「KLH」)與1.0ml之1mg/ml肽(溶解於去離子水中)組合。然後，添加1.0ml之40mM碳二醯亞胺，然後在室溫下在溫和混合下進行12-小時孵育。藉由滲析至DPBS中然後無菌過濾來移除過量碳二醯亞胺及未結合之肽。接著，添加等於KLH之初始質量的未結合肽，然後準備用於注射至兔中。或者，在不存在碳二醯亞胺化學品之情況下將相等質量之無菌KLH及肽混合。

藉由用DPBS將200μg之抗原稀釋至0.5ml且與相等體積之完全弗氏佐劑(Freund’s adjuvant)混合以便在第1天進行皮下1ml注射來執行免疫。

在第21天及第42天用不完全弗氏佐劑執行100μg之加強注射。

抗體選擇功能效價評估

為確定中和PACAP38(SEQ ID NO：1241)之抗體經由PAC1-R誘導信號傳導，首先將多株抗體溶液經由蛋白質A純化且滲析至中性緩衝液中。簡單來說，將抗體溶液以4倍最終濃度(100pM)與PACAP38(SEQ ID NO：1241)一起孵育1h。在孵育抗體/抗原複合物之同時，將PAC1-R表現PC-12細胞(Japanese Collection of Research Bioresources Cell Bank)洗滌且以每毫升2×10⁶ 個細胞再懸浮於細胞培養基中。將細胞(10μl)及抗原/抗體複合物(40μl)轉移至均相時間解析螢光(「HTRF」)板且在室溫下振盪30min。在孵育之後，添加含於溶解緩衝液中之20μl之(1：20稀釋)經Eu³⁺ 穴合物標記之mAb抗cAMP及20μl之(1：20稀釋)經d2標記之cAMP，且在振盪之同時將板孵育1h。在孵育之後，讀取板(激發330nm，發射620/665nm)，且測定620：665信號之比率。

組織收穫

一旦建立可接受之效價，即將兔處死。收穫脾臟、淋巴結及全血且如下進行加工：藉由將組織離解且用20cc注射器之柱塞推動穿過70μm之無菌線網(Thermo Fisher Scientific,Waltham,MA)將脾臟及淋巴結加工成單一細胞懸浮液。將細胞收集於磷酸鹽緩衝鹽水(「PBS」)中。然後藉由離心將細胞洗滌兩次。在最後一次洗滌之後，藉由台盼藍(trypan blue)測定細胞密度。將細胞在1500RPM下離心用於10分鐘；然後棄去上清液。將細胞再懸浮於適當體積之含10%二甲亞碸(「DMSO」，Sigma-Aldrich Co.,St.Louis,MO)之胎牛血清(「FBS」HYCLONE^TM ,GE Healthcare Life Sciences,Marlborough,MA)中且以每小瓶1ml進行分配。將小瓶在-70℃下儲存在慢速冷凍室中24小時且儲存於液氮中。

藉由將全血與相等份數之PBS混合來分離外周血單核細胞(「PBMC」)。將35ml之全血混合物小心地鋪至8ml之LYMPHOLYTE®兔(Cedarlane Laboratories,Burlington,Ontario)上放入45ml錐形管(Corning,Corning,NY)中且在無制動器之情況下在2500RPM下在室溫下離心30分鐘。在離心之後，使用玻璃巴斯德移液管(VWR International,Radnor,PA)小心地移去PBMC層，合併且放入清潔之50ml小瓶中。藉由在室溫下在1500RPM下離心10分鐘用PBS將細胞洗滌兩次，且藉由台盼藍染色測定細胞密度。在最後一次洗滌之後，將細胞再懸浮於適當體積之10% DMSO/FBS培養基中且如上文所描述進行冷凍。

B細胞選擇、富集及培養條件

在建立B細胞培養當天，將PBMC、脾細胞或淋巴結小瓶解凍以供使用。自液氮罐移出小瓶且放置於37℃水浴中直至解凍。將小瓶之含容物轉移至15ml錐形離心管(Corning,Inc.,Corning,NY)中，且向管中緩慢添加10ml之改良型RPMI。將細胞在2000RPM下離心5分鐘，且棄去上清液。將細胞再懸浮於10ml之新鮮培養基中。藉由台盼藍測定細胞密度及活力。

對於抗PACAP38產生B細胞之陽性選擇，如下將生物素化 PACAP38(SEQ ID NO：1241)預加載至鏈黴親和素珠粒上。將75μl之鏈黴親和素珠粒(Miltenyi Biotec,Auburn,CA)與N端生物素化PACAP38(10μg/ml最終濃度)及補充有0.5%不含生物素牛血清白蛋白(「BSA」)及2mM EDTA(「PBF」)的300μl之PBS混合。將此混合物在4℃下孵育30分鐘，且使用MACS®分離管柱(Miltenyi Biotec,Auburn,CA)用1ml沖洗液移除未結合生物素化PACAP38(AnaSpec,Fremont,CA)來移除未結合之物質。藉由自磁鐵剝離將結合之物質沖出且用於將來自以上之細胞以每1×10⁷ 個細胞100μl進行再懸浮。然後將混合物在4℃下孵育30分鐘且用10ml之PBF洗滌一次。在洗滌之後，將細胞再懸浮於500μl之PBF中且放在一旁。將MACS®MS管柱(Miltenyi Biotec,Auburn,CA)用500μl之PBF在磁力架(Miltenyi Biotec,Auburn,CA)上預沖洗。通過前置過濾器將細胞懸浮液施加至管柱，且收集未結合之級分。將管柱用2.5ml之PBF緩衝液洗滌。將管柱自磁力架移去且放置於清潔、無菌之1.5ml EPPENDORF^TM 管上。將1ml之PBF緩衝液添加至管柱頂部，且收集陽性選擇細胞。藉由台盼藍染色測定陽性細胞級分之產率及活力。陽性選擇產生平均1%之起始細胞濃度。

建立中試細胞篩選以提供關於用於培養之接種水準的資訊。將板以每孔5、10、25、50、100或200個經富集B細胞進行接種。此外，各孔含有以每孔250μl之最終體積含於高葡萄糖改良型RPMI培養基中的每孔25-50K個細胞之經照射EL-4.B5細胞(5,000拉德)及適當含量之活化兔T細胞上清液(參見美國專利申請公開案第20070269868號)(視製備方法而定在1-5%範圍內)。將培養物在37℃下在4% CO₂ 中孵育5至7天。

藉由抗原識別(ELISA)進行B細胞培養物篩選

為鑑別產生抗PACAP38抗體之孔，藉由抗原識別(ELISA)測試B細胞上清液。簡單來說，在室溫下將NEUTRAVIDIN^TM 塗佈之板(Thermo Fisher Scientific,Waltham,MA)用在ELISA緩衝液(0.5%魚皮明膠於PBS，pH 7.4中)中稀釋之N端或C端生物素化PACAP38(AnaSpec Inc.,Fremont,CA)(每孔50μl；1μg/ml)塗佈約1小時或者在4℃下隔夜。然後在室溫下用ELISA緩衝液將板進一步阻斷一個小時且使用含0.05%Tween 20之PBS(「洗滌緩衝液」)進行洗滌。將B細胞上清液樣品(50μl)轉移至孔上且在室溫下孵育一個小時。在此孵育之後，將板用洗滌緩衝液洗滌。為進行顯影，將抗兔特異性Fc-辣根過氧化物酶(「Fc-HRP」)(於ELISA緩衝液中之1：5000稀釋液)添加至孔上且在室溫下孵育45分鐘。在使用洗滌溶液進行3次洗滌步驟之後，將板使用3,3' ,5,5' -四甲基聯苯胺(「TMB」)受質在室溫下顯影兩分鐘，且使用0.5M HCl中止反應。在450nm下讀取孔吸光度。

為鑑別不識別VIP(SEQ ID NO：1243)之產生抗PACAP38抗體之孔，藉由ELISA測試根據ELISA為PACAP38結合陽性之孔的上清液對VIP之結合。簡單來說，使生物素化VIP(AnaSpec Inc.,Fremont,CA)結合至NEUTRAVIDIN^TM 塗佈之板(每孔50μg，每微升各肽1μg)上。在未事先稀釋之情況下測試B細胞上清液樣品(50μl)。此分析中之鑑別可指示與緊密相關肽VIP之交叉反應性。

使用一或多種分析鑑別B細胞上清液中之功能活性

為鑑別阻斷PACAP38經由PAC1-R信號傳導之產生抗PACAP38抗體的孔，在cAMP HTRF分析(Cisbio US,Bedford,MA)中測試根據ELISA為PACAP38結合陽性之孔的上清液。將上清液(78μl)與2μl 5nM PACAP38(American Peptide Company,Sunnyvale,CA)一起在37℃下預孵育1小時。在孵育期間，如關於效價評估所描述製備PC-12細胞。將細胞(10μl)及抗原/抗體複合物(40μl)轉移至HTRF板且在室溫下振盪30分鐘。在孵育之後，添加含於溶解緩衝液中之20μl之(1：20稀釋)經Eu³⁺ 穴合物標記之mAb抗cAMP及20μl之(1：20稀釋)經d2標記之cAMP，且在振盪之同時將板孵育1小時。在孵育之後，讀取板(激發330nm，發射620/665nm)，且測定620：665信號之比率。

抗原特異性B細胞之分離

分離抗原特異性B細胞(關於一般方法參見共同擁有之公開案第WO 2014/146074號，其特此以全文引用之方式併入)。自-70℃移去含有所關注之孔的板，且使用200μl之培養基(10% RPMI完全，每孔55μM β-巰基乙醇(「BME」))洗滌五次來回收各孔之細胞。藉由離心沈澱所回收之細胞且小心地移去上清液。然後將各孔之細胞再懸浮於100μl之培養基中且轉移至96孔板。將細胞在37℃下孵育90分鐘。在孵育之後，藉由離心沈澱細胞，用異硫氰酸螢光素標記(「FITC-標記」)之抗兔IgG(最終濃度6.25μg/ml)(Creative Diagnostics,Shirley,NY)染色，且用多至2ml螢光活化細胞分選緩衝液(「FACS緩衝液」)(含2%FBS之杜爾貝科氏PBS)洗滌且再懸浮於250μl之FACS緩衝液中。

將組成類似於彙集之所關注孔的來自相同培養組之對照孔解凍且與目標孔一起染色。將此等樣品最初在FACS(BD INFLUX^TM ,Becton,Dickinson and Company,Franklin Lakes,NJ)上運行，且針對IgG、活力及區分B細胞與鼠EL4細胞之物理參數(前向散射(「FSC」)/側向散射(「SSC」))進行設門。在設門之後，運行所關注之樣品，且將一致物理(FSC/SSC)群體之IgG陽性、活細胞分別分選至預加載有RT-PCR萬能混合物(master mix)之96孔板的孔中。分選超過每孔8個細胞。自分選儀移出經分選之板且直接轉移至熱循環器以用於PCR。

FACS-分選之B細胞之抗體序列的擴增及序列測定

使用基於經組合RT-PCR之方法自單一細胞分選之B細胞回收抗體序列。設計含有限制酶之引物以在目標免疫球蛋白基因(諸如兔免疫球蛋白序列)之保守及恆定區(重鏈及輕鏈)中退火，且使用兩步巢式PCR回收來擴增抗體序列。將各孔之擴增子測序並分析。針對重組蛋白表現對來自所得序列群集之代表性抗體進行選擇。經由限制酶消化及連接且經由古蔔森法(Gibson method)將由兔細胞擴增之原始重鏈及輕鏈可變區選殖至人類重鏈及輕鏈恆定區中表現載體中。將含有亞選殖DNA片段之載體擴增並純化。在表現之前驗證亞選殖重鏈及輕鏈之序列。

具有所需抗原特異性及/或功能特性之單株抗體的重組製備

為測定自特異性B細胞回收之抗體的抗原特異性及功能特性，將重鏈及輕鏈質粒共轉染以產生用於測試之兔/人類嵌合抗體。簡單來說，將重鏈及輕鏈嵌合質粒瞬時轉染至HEK-293細胞中。允許轉染物孵育5-7天，且在收穫之後，藉由離心沈澱細胞。提交上清液供經由蛋白質A進行純化。然後在多種分析中評估所得純化嵌合抗體以證實特異性及效能。

使用上述方法，鑑別結合PACAP38及PACAP27或僅結合 PACAP38但不結合或不大量結合於VIP之許多功能性(拮抗性)抗體。示例性拮抗性抗PACAP抗體之多肽及示例性編碼序列含於所包括之生物序列表中。

此等實例中所用之全長抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8、Ab9、Ab22及Ab23以分別具有SEQ ID NO：1；41；81；121；161；201；241；281；321；361；481；521；561；601；641；681；721；761；801；881；及921之序列的重鏈多肽，及分別為SEQ ID NO：21；61；101；141；181；221；261；301；341；381；501；541；581；621；661；701；741；781；821；901；及941的輕鏈多肽表示。抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8、Ab9、Ab22及Ab23之重鏈多肽分別由SEQ ID NO：11；51；91；131；171；211；251；291；331；371；491；531；571；611；651；691；731；771；811；891；及931之聚核苷酸表示。抗體Ab1、Ab1.H、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8、Ab9、Ab22及Ab23之輕鏈多肽分別由SEQ ID NO：31；71；111；151；191；231；271；311；351391；511；551；591；631；671；711；751；791；831；911；及951之聚核苷酸表示。該等抗體之其他特徵係藉由圖1-12 中之SEQ ID NO加以鑑別。

抗體根據競爭性HTRF結合分析之抗原結合特異性

下文進一步描述根據本發明產生之示例性抗PACAP38及抗PACAP27抗體之結合及功能特性。

為鑑別優先結合PACAP38(SEQ ID NO：1241)及PACAP27(SEQ ID NO：1242)但不結合VIP(SEQ ID NO：1243)之抗體，或為鑑別特異性結合PACAP38但不大量結合PACAP27或不大量結合VIP之抗體等，執行競爭HTRF結合分析。

以平行方式，將10μl之抗體稀釋系列(最高最終濃度為100nM)與單獨的或與PACAP27(350nM最終)或VIP(350nM最終)(亦即分別10倍PACAP27或10倍VIP)組合的10μl之N端或C端生物素化PACAP38 (35nM最終)在HTRF板中一起孵育。將20μl之經Eu³⁺ 穴合物標記之抗人類Fc供體及20μl之經d2標記之鏈黴親和素受體添加至各孔中且在室溫下孵育1小時。在620及665nm下以300μsec之延遲量測螢光。

圖13A-T 提供Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H與PACAP38及與PACAP27結合及VIP不能與PACAP38之結合競爭的代表性資料。圖13U 及圖13V 提供抗PACAP抗體Ab22及Ab23與PACAP38結合及PACAP27或VIP不能與PACAP38之結合競爭的代表性資料。VIP對結合於PACAP38缺乏影響指示其不能與PACAP38之結合競爭。此等結果證實Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19及Ab1.H結合於PACAP38及PACAP27，但不結合(或不大量結合)VIP。此等結果亦證實Ab22及Ab23結合於PACAP38，但不結合(或不大量結合)PACAP27或VIP。

基於結合曲線計算各抗體之EC₅₀ 值(亦即在指定時間段內在基線與最大值之間的中途產生反應的抗體之濃度)且顯示於下表1中。結果證實Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22、Ab23及Ab1.H以高親和力結合於且識別人類PACAP38。產生了抗體Ab1之人類化形式且藉由附加之「.H」加以鑑別(亦即Ab1.H)，其亦以高親和力結合PACAP38。

抗PACAP抗體中和PACAP38誘導及PACAP27誘導之cAMP產生的能力

在基於細胞之分析中測試抗PACAP抗體中和PACAP38誘導及PACAP27誘導之PAC1-R信號傳導的能力。

對於用於鑑別中和PACAP38誘導及PACAP27誘導之經由PAC1-R之信號傳導的抗體Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22、Ab23、Ab1.H、Ab10.H、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H，將抗體溶液與PACAP38或PACAP27以4倍最終濃度(100pM)一起孵育1小時。在孵育抗體/抗原複合物之同時，將PAC1-R表現PC-12細胞(Japanese Collection of Research Bioresources Cell Bank)洗滌且以每毫升2×10⁶ 個細胞再懸浮於細胞培養基中。將細胞(10μl)及抗原/抗體複合物(40μl)轉移至HTRF板且在室溫下振盪30分鐘。在孵育之後，添加含於溶解緩衝液中之20μl之(1：20稀釋)經Eu³⁺ 穴合物標記之mAb抗cAMP及20μl之(1：20稀釋)經d2標記之cAMP，且在振盪之同時將板孵育1小時。在孵育之後，讀取板(激發330nm，發射620/665nm)，且測定620：665信號之比率。各孔中PACAP38及PACAP27之最終濃度為0.1nM。

圖16A-BB (PACAP38)及圖17A-BB (PACAP27)顯示代表使用所測試之抗體獲得之抑制曲線的抑制曲線(關於Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab10.H、Ab22、Ab23、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H)。將各抗體之抑制結果定量，得到IC₅₀ 值，其概括於下表2中。此等結果證實抗PACAP抗體Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab22、Ab23、Ab1.H、Ab10.H、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H抑制在表現PAC1-R之細胞中PACAP38誘導之cAMP增加(參見圖16A-BB )。另外，此等結果證實抗PACAP抗體Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab10.H、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H抑制在表現PAC1-R之細胞中PACAP27誘導之cAMP增加，而Ab22或Ab23則不抑制(參見圖17A-BB )。

*n/a：因為此等Ab具PACAP38特異性而不具活性

實例2：抗PACAP抗體之結合親和力

在PROTEON^TM XPR36(Bio-Rad,Hercules,CA)上使用SPR估計單株抗體對人類PACAP之結合親和力。將抗體固定至通用胺偶合(「GLC」或「GLM」)晶片(Bio-Rad,Hercules,CA)之表面。在購自Teknova(目錄號1192，Teknova,Hollister,CA)且補充有0.25M精胺酸(來自J.T.BAKER®)、0.2mg/ml BSA(Jackson Immuno Research Labs,West Grove,PA)及0.005%疊氮化鈉(VWR International,Radnor,PA)的1 x PBST緩衝液(4.3mM磷酸鈉，1.4mM磷酸鉀，135mM NaCl，2.7mM KCl，0.05%聚山梨醇酯-20)中製備人類PACAP38(SEQ ID NO：1241)之稀釋系列，且使用調節至7的pH值來查詢抗體。以2-4分鐘之締合時間及3-120分鐘之解離時間典型地依序運行抗原(在1.23nM至100nM範圍內)，用PROTEON^TM 管理軟體(v3.1.0.6(Bio-Rad,Hercules,CA))分組且使用1：1朗繆爾結合模型(Langmuir binding model)進行擬合。在分析物查詢之間使用0.85%磷酸使表面再生。計算在締合時間限於擴散速率附近(1.0×10⁶ )及解離時間限於1.5×10^-5 (其中未觀測到可辨別之解離)之情況下的各抗體之單個K_D 。

使用相同程序來測定抗體對人類VIP(SEQ ID NO：1243)及PACAP27(SEQ ID NO：1242)之結合親和力，不過肽濃度在1.23nM至1000nM範圍內，且締合時間為200秒而解離時間為3-120分鐘。

所量測之抗體對PACAP38之親和力列於表3中。

抗體對VIP親合力常數之實例列於表4中。

抗體對PACAP27之親合力常數之實例列於表5中。

表3及5之結合親和力結果呈現證實Ab23與其對PACAP38之結合親和力相比弱結合於PACAP27的資料。表3及5另外呈現證實Ab22不特異性識別PACAP27，但Ab22特異性結合於PACAP38之資料。

實例 3：PACAP38誘導之經由VPAC1-R之信號傳導的抑制

為鑑別中和PACAP38誘導之經由人類VPAC1-R之信號傳導的抗體，將表現人類VPAC1-R之CHO-K1細胞用於基於cAMP HTRF細胞之分析中。以4倍最終濃度(5nM)將抗體稀釋液與PACAP38一起孵育1小時。在將抗體/抗原複合物孵育1小時之同時，將VPAC1-R表現CHO-K1細胞(在Alder Biopharmaceuticals產生，藉由用人類VPAC1-R cDNA穩定轉染CHO-K1細胞(ATCC，目錄號CCL-61)；使用所選純系1進行活體外基於細胞之分析)用0.25%胰蛋白酶剝離4分鐘。洗滌細胞且以每毫升培養基1×10⁶ 個細胞再懸浮。將20μl之Ab/抗原混合物與20μl之細胞混合於HTRF板中且在振盪下孵育30分鐘。向各孔中添加含於溶解緩衝液中之20μl之經Eu³⁺ 穴合物標記之抗cAMP mAb(1：20稀釋)及20μl之(1：20稀釋)經d2標記之cAMP且在振盪下孵育1小時。各孔中PACAP38之最終濃度為5nM。在孵育之後，讀取板(激發330nm，發射620/665nm)，且測定620：665信號之比率。

圖18A-BB 代表藉由此方法獲得之抑制曲線(分別顯示Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab10.H、Ab22、Ab23、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H之結果)。顯示於下表6中之所計算之各抗體的IC₅₀ 值證實Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab10.H、Ab22、Ab23、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H抑制在表現人類VPAC1-R之細胞中PACAP38誘導之cAMP增加。

實例4：PACAP38誘導之經由VPAC2-R之信號傳導的抑制

為鑑別中和PACAP38誘導之經由人類VPAC2-R之信號傳導的抗體，將表現人類VPAC2-R之CHO-K1細胞用於基於cAMP HTRF細胞之分析中。以4倍最終濃度(1nM)將抗體稀釋液與PACAP38一起孵育1h。在將抗體/抗原複合物孵育1小時之同時，將VPAC2-R表現CHO-K1細胞(在Alder Biopharmaceuticals產生，藉由用人類VPAC2-R cDNA穩定轉染CHO-K1細胞(ATCC，目錄號CCL-61)；使用所選純系8進行活體外基於細胞之分析)用0.25%胰蛋白酶剝離4分鐘。洗滌細胞且以每毫升培養基1×10⁶ 個細胞再懸浮。將20μl之Ab/抗原混合物與20μl之細胞混合於HTRF板中且在振盪下孵育30分鐘。向各孔中添加含於溶解緩衝液中之20μl之經Eu³⁺ 穴合物標記之抗cAMP mAb(1：20稀釋)及20μl之(1：20稀釋)經d2標記之cAMP且在振盪下孵育1小時。孔中PACAP38之最終濃度為1nM。在孵育之後，讀取板(激發330nm，發射620/665nm)，且測定620：665信號之比率。

圖19A-BB 代表藉由此方法獲得之抑制曲線(分別顯示Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab10.H、Ab22、Ab23、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H之結果)。顯示於下表7中之所計算之各抗體的IC₅₀ 值證實Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Abl3、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab10.H、Ab22、Ab23、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H抑制在表現人類VPAC2-R之細胞中PACAP38誘導之cAMP增加。

表7抗PACAP抗體對表現人類VPAC2-R之細胞中PACAP38誘導之cAMP

實例5：對PACAP38結合於PAC1-R-表現細胞之抑制

為鑑別阻斷PACAP38結合於PAC1-R-表現細胞之抗體，將表現PAC1-R之黏附PC-12細胞(ATCC,Manassas,VA)用於基於銪之PAC1-R-表現細胞結合分析中。

將抗體溶液以10倍最終濃度(100nM或30nM)與N端生物素化PACAP38一起孵育1h，然後添加至在24h前塗鋪在黑色透明底96 孔板(COSTAR^TM ,Corning Incorporated,Corning,NY)中之PC-12細胞中且在室溫下再孵育1h。在洗滌三次之後，將細胞與20μl經銪標記之鏈黴親和素(PerkinElmer,Waltham,MA)在室溫下一起孵育1h。將細胞洗滌三次，然後向各孔中添加20μl DELFIA®增強溶液(PerkinElmer,Waltham,MA)且在溫和振盪下孵育15分鐘。在SPECTRAMAX®(Molecular Devices,Sunnyvale,CA)讀板儀上讀取板(時間解析螢光(「TRF」))。

圖14A-BB 代表藉由此方法獲得之抑制曲線(分別顯示Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab10.H、Ab22、Ab23、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H之結果)，其中PAC1-R表現細胞為PC-12細胞。顯示於下表8中之所計算之各抗體的IC₅₀ 值證實Ab1、Ab2、Ab3、Ab4、Ab5、Ab6、Ab7、Ab8、Ab9、Ab10、Ab11、Ab12、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab1.H、Ab10.H、Ab22、Ab23、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H抑制PACAP38結合於PAC1-R表現細胞。

實例6：PACAP38介導之抗PACAP抗體與PAC1-R-表現細胞之細胞表面的結合

為鑑別經由PACAP38結合於PAC1-R表現細胞之細胞表面的抗PACAP抗體，將表現PAC1-R之黏附PC-12細胞(Japanese Collection of Research Bioresources Cell Bank)用於基於細胞表面結合之分析中。為執行結合實驗，首先將PAC1-R表現PC-12細胞接種至Corning 96孔白色實底板(Corning,Corning,NY)中。最初將細胞以1×10⁵ 個細胞/孔接種於完全RPMI(「cRPMI」：補充有10%無菌加熱滅活FBS及1%無菌抗生素/抗黴菌素的RPMI培養基)+10% FBS中，且使板在37℃下孵育隔夜。在結合分析當天，將初始濃度為15μg/ml之抗體以1：3比率在單獨的96孔圓底板中在DELFIA®結合緩衝液(50mM Tris，150mM NaCl，0.1%疊氮化物，2%馬血清)(Perkin-Elmer,Waltham,MA)中稀釋至60μL之總體積。如下來準備PACAP38以用於結合分析：藉由將PACAP38在DELFIA®結合緩衝液中稀釋至200nM之濃度，且然後添加60μl之經稀釋PACAP38至各個含抗體之孔中以形成抗體：抗原複合物。在添加PACAP38之後，將抗體：抗原複合物在室溫下在振盪器上孵育1小時。分開地，藉由用DELFIA®洗滌緩衝液(50mM Tris，150mM NaCl，0.1%疊氮化物)(Perkin-Elmer,Waltham,MA)將細胞洗滌兩次來準備PC-12細胞以用於添加抗體：抗原複合物。在洗滌細胞兩次之後且在抗體：抗原複合物之1小時室溫孵育之後，將50μl之抗體：抗原複合物添加至含有細胞之各孔中。然後將細胞與抗體：抗原複合物之混合物在室溫下孵育30分鐘。在此30分鐘孵育之後，將各混合物用DELFIA®洗滌緩衝液(Perkin-Elmer,Waltham,MA)洗滌兩次。

將DELFIA®經銪標記之抗人類IgG偵測試劑(目錄號1244-330，Perkin-Elmer,Waltham,MA)在DELFIA®結合緩衝液中稀釋至300ng/ml之濃度。在稀釋之後，將50μl之抗人類IgG偵測試劑添加至含有細胞之各孔中，且在此添加IgG偵測試劑之後在室溫下孵育30分鐘。在30分鐘室溫孵育完成之後，然後將細胞用DELFIA®洗滌緩衝液洗滌兩次。接著，將50μl之DELFIA®增強溶液(目錄號1244-105，Perkin-Elmer,Waltham,MA)添加至含有細胞之各孔中以在振盪下進行最終15分鐘室溫孵育。然後在SPECTRAMAX®(Molecular Devices,Sunnyvale,CA)讀板儀上讀取板(TRF，激發330nm，發射620nm)。

圖15A-J 代表藉由此方法獲得之結合曲線(分別顯示Ab1.H、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H、Ab12.H、Ab10、Ab10.H、Ab22及Ab23之結果)，其中PAC1-R表現細胞為PC-12細胞。使用此分析，Ab1.H、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H展示在PACAP38存在下結合於PAC1-R表現細胞之表面，而Ab10、Ab10.H、Ab22及Ab23似乎不大量結合於PAC1-R表現細胞之表面。僅在PACAP38存在下觀測到Ab1.H、Ab3.H、Ab4.H、Ab5.H、Ab9.H及Ab12.H結合於PAC1-R細胞之細胞表面。不欲受理論約束，假定抗體與細胞表面結合係藉由PACAP38與存在於細胞表面上之GAG的結合介導，由於先前已證實PACAP38藉由 GAG之結合為PACAP38結合及由PC-12細胞內化之非PAC1-R受體依賴性機制(參見Doan等人(2012)；Juhász等人(2014)；及Neree等人(2015))。

實例7：抗PACAP抗體Ab1.H對在兔中PACAP38誘導之皮膚血管舒張的抑制

已顯示在兔及人類中皮內注射PACAP38引發局部化血管舒張(Warren等人，J.Cardio.Pharmacol. ,29(1)：83-87,(1992)；Seelinger等人，Am.J.Path. ,177(5)：2563-2575(2010))。進行活體內功效研究，以測定在雄性新西蘭白兔中Ab1.H抑制由皮內注射PACAP38誘導之局部化皮膚血管舒張的活性。

將4只兔一組之各組給予90mg/kg之Ab1.H或陰性對照媒劑(25mM組胺酸，250mM山梨糖醇，pH 6.0)。在第0天藉由靜脈(耳靜脈)快速投與執行注射。在各兔PACAP38激發之前，將各動物之肩胛區修剪得沒有毛且用20%(v/v)乙醇水溶液擦拭。在第2天，用氯胺酮鹽酸鹽將動物預麻醉且用異氟烷氣體維持在深度麻醉下。使用SHARPIE®永久性標記在各動物背部確定用於注射之四個位點(所關注區域(「ROI」))。在皮內PACAP38激發之前(基線)及之後35分鐘，使用用於雷射斑點對比分析(「LASCA」)成像之PeriCam PSI NR系統(Perimed,Järfälla,Sweden)監測皮膚血管舒張及血液灌注。如下執行皮內PACAP38激發：各動物接受單次皮內投與(每個位點100μl)之媒劑(一個位點或ROI)及每個位點30皮莫耳之PACAP38(3個位點或3個ROI)。各ROI之血液灌注速率係藉由PeriCam PSI NR系統以灌注單位(「PU」)進行報告且使用PIMSoft(1.5版(Perimed,Järfälla,Sweden))進行分析。

對於各處理組，計算各ROI在Ab1.H或陰性對照投與之後與基線相比之相對%PU變化(各PACAP38激發位點之%PU變化-媒劑位點之%PU變化)。使用GraphPad Prism(5.0d版，GraphPad Software,La Jolla,CA)軟體藉由執行雙尾非配對t檢驗統計評估將Ab1.H組之相對%PU變化與陰性對照組之相對%PU變化相比較。

圖20 證實Ab1.H抑制在兔中PACAP38誘導之皮膚血管舒張，從而指示抗體在中和活體內PACAP38活性方面之有效性。

實例8：抗PACAP抗體Ab10對在兔中PACAP38誘導之皮膚血管舒張的抑制

已顯示在兔及人類中皮內注射PACAP38引發局部化血管舒張(Warren等人(1992)；Seelinger等人(2010))。進行活體內功效研究，以測定在雄性新西蘭白兔中Ab10抑制由皮內注射PACAP38誘導之局部化皮膚血管舒張的活性。

將4只兔一組之各組給予72mg/kg之Ab10或同型抗體對照。在第0天藉由(耳靜脈)快速靜脈內投與進行注射。在各兔PACAP38激發之前，將各動物之肩胛區修剪得沒有毛且用20%(v/v)乙醇水溶液擦拭。在第2天，用氯胺酮鹽酸鹽將動物預麻醉且用異氟烷氣體維持在深度麻醉下。使用SHARPIE®永久性標記在各動物之背部確定用於注射之四個位點(ROI)。在皮內PACAP38激發之前(基線)及之後35分鐘，使用用於LASCA成像(Perimed,Järfälla,Sweden)之PeriCam PSI NR系統監測皮膚血管舒張及血液灌注。如下執行皮內PACAP38激發：各動物接受單次皮內投與(每個位點100μl)之媒劑(一個位點或ROI)及每個位點30皮莫耳之PACAP38(3個位點或3個ROI)。各ROI之血液灌注速率係藉由PeriCam PSI NR系統以PU進行報告且使用PIMSoft(1.5版，Perimed,Järfälla,Sweden)進行分析。

對於各處理組，計算各ROI在Ab10或同型Ab對照投與之後與基線相比之相對%PU變化(各PACAP38激發位點之%PU變化-媒劑位點之%PU變化)。使用GraphPad Prism(5.0d版，GraphPad Software,La Jolla,CA)軟體藉由執行雙尾非配對t檢驗統計評估將Ab10組之相對%PU變化與同型Ab對照組之相對%PU變化相比較。

圖21 證實Ab10抑制在兔中PACAP38誘導之皮膚血管舒張，從而指示抗體在中和活體內PACAP38活性方面之有效性。

實例9：抗PACAP抗體Ab1及Ab10之抗原決定基分箱

根據製造商指南將Ab1以10：1莫耳比用生物素(Thermo Fisher Scientific,Waltham,MA)生物素化。如下執行5步生物層干涉術實驗：在步驟1中，將鏈黴親和素生物傳感器(Pall ForteBio LLC,Menlo Park,CA)在1倍動力學緩衝液(Pall ForteBio LLC,Menlo Park,CA，目錄號18-5032於 DBS中之1：10稀釋液)中平衡50秒。在步驟2中，將生物素化抗體Ab1於1倍動力學緩衝液中之2μg/ml稀釋液在鏈黴親和素生物傳感器上固定500秒。在步驟3中，將抗體官能化生物傳感器在2μM未標記PACAP肽(American Peptide Company,Sunnyvale,CA，目錄號34-0-20)於1倍動力學緩衝液中之溶液中孵育200秒。在步驟4中，將傳感器放入67nM未標記抗體Ab10(圖22A )或作為對照之未標記抗體Ab1(圖22B )於1倍動力學緩衝液中之溶液中以進行1000秒締合步驟。在步驟5期間在1倍動力學緩衝液中進行1000秒解離來監測結合之穩定性。在圖22A 中，經由Ab1-捕獲之PACAP對Ab10之「三明治型」捕獲指示此等兩種抗體對PACAP之同時且非競爭結合。圖22B 中之對照實驗顯示經由Ab1-捕獲之PACAP對Ab1之的「三明治型」捕獲極少。實驗係在For·teBio OCTET® QK儀器(Pall ForteBio LLC,Menlo Park,CA)上在30℃及1000RPM下進行。

實例10：抗PACAP抗體對PACAP27結合於人類PAC1-R之抑制

為鑑別阻斷PACAP27結合於PAC1-R之抗體，將初始濃度為30nM之抗體在孵育緩衝液(50mM Hepes pH 7.4，1mM CaCl₂ ，5mM MgCl₂ ，0.2% BSA)中稀釋且執行連續1：3稀釋。然後將抗體稀釋液(30nM、10nM、3nM、1nM、0.3nM、0.1nM、0.03nM、0.01nM、0.003nM及0.001nM)混合且在孵育緩衝液中在25℃下與0.1nM之經¹²⁵ I標記之PACAP27一起預孵育30分鐘。然後將抗體：經¹²⁵ I標記之PACAP27混合物添加至含於孵育緩衝液中之獲自表現人類重組PAC1-R長同種型之Chem-1細胞之細胞膜的0.5μg等分試樣中。然後將混合物在25℃下孵育1小時。在孵育之後，過濾並洗滌樣品。然後，對濾料進行計數以定量經¹²⁵ I標記之PACAP27。作為實驗對照，使用0.1μM之經標記PACAP27估計對細胞膜之非特異性結合。結果表明Ab1.H、Ab10.H及Ab12.H能夠阻斷PACAP27結合於PAC1-R，藉此證實呈現於表9中之所測試之抗體對配位體-受體結合的抑制。

表9抗PACAP抗體對0.1nM¹²⁵ I-PACAP27結合於PAC1-R之抑制(IC₅₀ )

實例11：抗PACAP抗體對光厭惡之影響

為檢驗抗PACAP抗體對畏光之影響，採用小鼠模型，其中為小鼠投與PACAP以引起畏光。使用如Kaiser等人，J.Neurosci. ,32(44)：15439-15449,2012中所描述之明暗箱使用光厭惡分析偵測畏光。然後為小鼠投與抗PACAP抗體Ab1.H或Ab10.H或不相關對照抗體且定量其對光之厭惡。結果反映在圖23-25 中。

光厭惡分析

如Kaiser等人所描述，測試室為樹脂玻璃開闊場地(27cm寬×27cm深×20.3cm高)，其含有三組16束紅外線陣列(兩組垂直束在1.0cm之高度交叉以偵測小鼠位置及移動，而第三束在7.3cm之高度橫貫腔室之寬度以偵測豎直活動)。藉由暗插入物將場地分成兩個相等大小之區域，該暗插入物為有頂但無底的五面、黑色樹脂玻璃箱。使用紅外線光束允許在兩個區域中進行追蹤。在暗插入物中之開口(5.2cm×6.8cm)允許在區域之間自由運動。雖然暗插入物阻斷直射光，但一些光仍可通過開口進入。將各測試室定位於具有用於通風之風扇(56cm寬×38cm深×36cm高)的消音分隔間(Med Associates,Inc.®,St.Albans,VT)內。使用活性監測v6.02(Med Associated Inc)之電腦用於記錄六個腔室之資料。

對於各腔室，將LED面板附接至消音分隔間之天花板。LED面板含有36個準直1瓦特LED(5500k日光白)(LEDwholesalers.com,Burlingame,CA)。為控制光強度，將各LED面板連接至可調光LED驅動器(LINEARdrive®；eldoLED America Inc.,San Jose,CA)，從而產生3.0×10² 至2.7×10⁴ lx之潛在範圍的光強度。使用放置在LED下方之透明樹脂玻璃託盤上之蠟紙使水準進一步減弱至5.5×10¹ lx。使用放置在測試室地板上之可追蹤雙顯示器光度計(Control Company,Friendswood,TX)量測光強度。在 2.7×10⁴ lx下，LED光在消音室中產生一些熱量，其中暗區在約25℃下而亮區在約27℃下。

在實驗當天，自動物收容處運來小鼠且在標準頭上螢光照明(在收容籠內約200lx)之情況下使其對測試室(約22℃)適應至少30至60分鐘。除非另外指出，否則測試室燈保持打開。此外，在適應期間開啟所有產生聲音之裝置且保留打開直至測試完成。在適應期間測試室內極少有人類存在。執行在0800CST與1400CST之間行為測試。注意任何異常物理條件(例如丟失眼睛)。

在研究中使用十週齡雄性及雌性CD1小鼠(品種號022，Charles River,Wilmington,MA,US)。在測試之前使小鼠自裝運恢復一至兩週。

適應

在放置於明/暗室中之前使所有小鼠在測試室中適應至少30至60分鐘。最初將腔室中之光強度設定為2.7×10³ lx。在腔室中測試小鼠三十分鐘，每天使其暴露於明/暗室。藉由使小鼠暴露於明/暗室兩次來獲得各小鼠在明處之基線時間，且在基線量測之間休息三天之時間(圖23 及25 ，分別為「基線1」及「基線2」或「基線」)。

處理

藉由腹膜內注射為小鼠投與30mg/kg之抗PACAP抗體或對照IgG抗體(陰性對照抗體具有與所測試抗體相同之骨架且識別地高辛(digoxigenin))。然後在測試之前，使小鼠回到其原來的籠中休息一天(24小時)。然後藉由腹膜內注射為小鼠投與0.6mg/kg PACAP或媒劑且休息30分鐘。然後將小鼠放置於明/暗室中30分鐘(圖23 及圖25 ，「處理」)。使各小鼠暴露於明/暗室之後，用殺菌擦布清潔明/暗室及組件並乾燥。約5至7分鐘之後將小鼠放置於明/暗室中，接著如上文所描述為所要測試之小鼠注射PACAP或媒劑。此時間間隔約為在實驗之間清潔明/暗室所需之時間量。

活動力量測

如Kaiser等人，J.Neurosci. ,2012中所描述以5分鐘時間間隔曆時30分鐘測試週期量測活動力。簡單來說，藉由光束來量測豎直運動 (諸如豎起)次數、走動距離(cm，在走動運動狀態期間行進之總距離)、穿箱及休息(不打斷新光束所消耗之時間百分比)。將所有活動力參數正規化為在各區中所消耗之時間以解釋在彼區中所消耗之不同時間量；因此，將各參數之原始值除以在5min時間間隔期間在彼區所消耗之時間。使用GraphPad Prism軟體(GraphPad Software,San Diego,CA)分析在各腔室中所消耗之時間且報告為平均值±標準平均誤差(「SEM」)。藉由雙向重複量測ANOVA計算比較，且使用邦弗倫尼氏多重比較測試(Bonferroni’s multiple-comparison test)進行事後分析。

基於三個準則排除小鼠：(1)在頭兩次暴露於箱之後分析在明處之基線時間，且將在基線處在明處消耗+/-一個平均數標準差時間之任何小鼠自實驗中移出且不給予藥物處理，(2)若小鼠經識別為統計離群值(箱形圖，10-90%)，則將其自分析中排除，及(3)若小鼠移動小於10%之時間(經組合之明及暗)，則將其排除。

在兩個實驗中投與抗體Ab1.H或Ab10.H之小鼠的反應與對照IgG進行比較，結果表明與IgG對照小鼠相比投與PACAP抗體Ab1.H或Ab10.H之小鼠在明處消耗更多時間。圖23 表明小鼠表現正常且在兩次基線量測中類似。另一方面，提供於圖23 中之資料表明，與依次投與抗PACAP抗體Ab1.H及PACAP之小鼠(圓形)相比，依次用對照IgG抗體及PACAP處理之小鼠在明處消耗統計學上更少之時間(方形)。(參見圖23 ，「處理」)。提供於圖25 中之資料亦表明小鼠表現正常且在基線量測中類似。另一方面，提供於圖25 中之資料表明，與依次投與抗PACAP抗體Ab10.H及PACAP之小鼠(倒三角形)相比，依次用對照IgG抗體及PACAP處理之小鼠在明處消耗統計學上更少之時間(三角形)。(參見圖25 ，「處理」)。各量測之間的時間為三天。提供各5-分鐘時間間隔之平均值±SEM。僅投與媒劑之小鼠如正常對照一般表現。提供於圖24 中之資料表明投與抗PACAP抗體Ab1.H或對照IgG及媒劑(分別為「Veh+PAC Ab」及「Veh+Con Ab」)不明顯改變小鼠行為。圖24 亦表明當投與PACAP及對照IgG時(「PACAP+Con Ab」)小鼠在明處之平均時間減少，而投與抗PACAP抗體Ab1.H及PACAP之小鼠展現正常、非光敏感行為(「PACAP+PAC Ab」)。

實例12：抗PACAP抗體之抗原決定基定位

為確定PACAP內含之與本發明之抗PACAP抗體及其抗原結合片段結合之抗原決定基，使用丙胺酸掃描實驗。為執行此等實驗，在各位置使用單點突變用丙胺酸(「Ala」)置換天然胺基酸合成PACAP肽，且量測單點突變之結果，因為其與PACAP與抗體之結合親和力有關。

由於丙胺酸殘基已佔據野生型PACAP之位置18、24及25，根據慣例，將此等Ala殘基用纈胺酸(「Val」)置換以確定移除此等位置之丙胺酸對本發明抗PACAP抗體與PACAP之結合的可能的影響。根據一般慣例，根據PACAP 1-38中之位置繼之以經取代胺基酸之字母編碼來標記此等Ala突變體，例如10A指示PACAP 1-38在胺基酸位置10處經丙胺酸取代。使用SPR在PROTEON^TM XRP36(Bio-Rad Laboratories,Hercules,CA)上偵測單株抗體對人類PACAP及各突變肽之結合。使用標準胺偶合以單一密度將樣品及樣品對照固定至PROTEON^TM GLC傳感器晶片(Bio-Rad Laboratories,Hercules,CA)上。用於固定之運行緩衝液為DPBS/改良(HYCLONE^TM ,GE Healthcare Life Sciences,Marlborough,MA)且固定係在25℃下進行。將PROTEON^TM GLC傳感器晶片(Bio-Rad Laboratories,Hercules,CA)初始化且根據製造商之方案(雙向注射0.5% SDS、50mM NaOH、100mM HCl)進行預調節。

逐步執行固定過程以確保獨特的抗體在PROTEON^TM 晶片(Bio-Rad Laboratories,Hercules,CA)之點中。將晶片之表面用1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)碳二醯亞胺/N-羥基丁二醯亞胺(「EDAC/NHS」)之1：1混合物及30μL/min之流速活化5分鐘。將抗體樣品事先滲析或交換至10mM HEPES 150mM NaCl pH 7.2中，且使用NANODROP^TM 2000分光光度計(Thermo Fisher Scientific,Waltham,MA)定量抗體濃度。固定目標為2000-3000個反應單位(「RU」)。使含抗體樣品(5μg/ml)之10mM乙酸鈉(pH 5.5)以30μL/min流動4分鐘。使用0.3M乙醇胺以30μL/min之流速達成去活化持續5分鐘，伴隨地進行接下來的活化。

在固定之後，將運行緩衝液換成1x PBST(4.3mM磷酸鈉、1.4mM磷酸鉀、135mM NaCl、2.7mM KCl、0.05%TWEEN®)加上0.2M 精胺酸鹽酸鹽(以降低非特異性結合)、BSA(0.2mg/ml，作為載劑)及PROCLIN300®(0.005%作為防腐劑，Sigma Aldrich,St.Louis,MO)，且在注射新的運行緩衝液之情況下使晶片表面再平衡。將人類PACAP肽(1-38)及丙胺酸/纈胺酸突變肽(分子量：4.5kD)之儲備溶液以1mg/ml之濃度添加至運行緩衝液中達到0.45μg/ml(100nM)之最終濃度。然後使用此等混合物以100μL/min之流速持續2分鐘來查詢晶片表面上之個別點且允許離解600秒。在分析物之間藉由添加0.85%磷酸使晶片表面再生。

抗體Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8、Ab9、Ab22及Ab23中之每一者係在與本文所描述相同之條件下檢驗

使用多個參數評估代表突變肽結合於一組抗體之親和力資料的傳感圖。首先對各傳感圖執行視覺檢查以評估相對於野生型PACAP肽(1-38)明顯最大之反應(「R_max 」)。其次，執行對解離階段之視覺檢查，強調相對於野生型PACAP肽之曲線形狀。計算野生型PACAP肽及各突變肽與該組抗體之結合的解離速率(Off-rate/dissociation rate)。最後，作為用於證實各肽變異體(野生型或突變體)之完整性的對照實驗，針對已知結合野生型PACAP之一組抗體之各成員分別測定肽庫之各成員的結合親和力，以確保各Ala突變體PACAP肽展現類似於野生型PACAP肽之結合親和力的結合親和力。所有所描述參數之集體評估確定對PACAP/抗體結合重要之PACAP胺基酸殘基。

關於抗體Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8、Ab9、Ab22及Ab23與野生型PACAP及PACAP突變體之結合的結合及解離資料顯示於圖26A-45B 中。各圖中之上部圖含有似乎對抗體結合重要之PACAP中之殘基的結合資料(在圖形右端進行標記，例如「10A」指示在PACAP之位置10處含有丙胺酸之突變體的結合資料)。下部圖提供代表其餘PACAP丙胺酸突變體(亦即結合於類似於野生型PACAP之所測試之抗體的PACAP丙胺酸突變體)之結合程度的數據點。以其為基礎，殘基經測定可能對抗體結合不重要。作為陽性對照，各圖之上部圖與下部圖亦揭示使用野生型PACAP獲得之結合資料(經標記huPACAP(1-38))。

圖46A-47B 概述基於此等丙胺酸掃描研究中所獲得之資料經測定有助於抗體結合親和力的PACAP殘基位置。各欄中所列之位置標示突變導致PACAP/抗體結合親和力降低之PACAP丙胺酸掃描突變體。根據殘基沿PACAP一級序列之空間排列殘基位置(胺基酸殘基1-38)列於圖46A-47B 之第3欄中。對抗體結合貢獻最大之PACAP殘基位置解釋為連帶地包含由各抗體結合之抗原決定基。基於此等丙胺酸掃描研究中所獲得之資料，推斷由各抗體結合之抗原決定基包含以下殘基：(i)Ab1：人類PACAP之殘基5、6、8、10及13；(ii)Ab2：人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、13及14；(iii)Ab13：人類PACAP之殘基6、8、9、10及13；(iv)Ab14：人類PACAP之殘基5、6、8、9、10及13；(v)Ab15：人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、12、13及14；(vi)Ab16：人類PACAP之殘基5、6、8、10及13；(vii)Ab17：人類PACAP之殘基5、6、8、10及13；(viii)Ab18：人類PACAP之殘基5、6、8、9、10、12及13；(ix)Ab19：人類PACAP之殘基4、5、6、8、9、10、12、13、14及17；(x)Ab5：人類PACAP之殘基3、4、5、6、7、10、13及14；(xi)Ab7：人類PACAP之殘基6、8、10、11、13、14及18；(xii)Ab11：人類PACAP之殘基6、8、10、11、13、14、18及22；(xiii)Ab12：人類PACAP之殘基6、8、10、11、13、14及18；(xiv)Ab4：人類PACAP之殘基8、9、10、13、14、17及18；(xv)Ab3：人類PACAP之殘基8、9、10、11、12、13、14、17及21；(xvi)Ab6：人類PACAP之殘基5、6、9、10、12、13、14及17；(xvii)Ab8：人類PACAP之殘基7、10、13及14； (xviii)Ab9：人類PACAP之殘基7、10、12、13、14及17；(xix)Ab22：人類PACAP之殘基22、23、27、28及31；及(xx)Ab23：人類PACAP之殘基12、20、23、24、26、27及28。

基於丙胺酸掃描實驗結果進一步注意到，抗體Ab1、Ab2、Ab13、Ab14、Ab15、Ab16、Ab17、Ab18、Ab19、Ab5、Ab7、Ab11、Ab12、Ab4、Ab3、Ab6、Ab8及Ab9中之每一者對PACAP之親和力涉及或取決於人類PACAP之殘基10及/或13，且在一些情況下，涉及或進一步取決於殘基8及/或14。

另外，觀測到抗體Ab22及Ab23中之每一者對PACAP之親和力涉及或需要存在於人類野生型PACAP38中但不存在於人類野生型PACAP27中之特定胺基酸殘基，例如PACAP38之殘基28或31。

就前述丙胺酸掃描結果而言，本發明抗PACAP抗體之人類化變異體會與相同或實質上相同之人類PACAP之殘基相互作用，因為與親本(未人類化)抗體相比，人類化不會很大程度上影響人類化抗PACAP抗體與人類PACAP結合之特異性。特定而言，Ab3.H會與Ab3同人類PACAP上之相同殘基相互作用，Ab4.H會與Ab4同人類PACAP上之相同殘基相互作用，Ab5.H會與Ab5同人類PACAP上之相同殘基相互作用，Ab9.H會與Ab9同人類PACAP上之相同殘基相互作用，而Ab12.H會與Ab12同人類PACAP上之相同殘基相互作用。

與本發明抗體結合於在人類PACAP上之相同或重疊之抗原決定基的抗體可使用本文所描述之方法製備及鑑別。預期與本文所鑑別之抗體中之任一者結合於相同或重疊之抗原決定基的抗體將可能具有不存在有意義之結合動力學差異的類似生物活性為合理的。特定而言，類似於所例示之結合此等抗原決定基之抗PACAP抗體，此類抗體會拮抗由PACAP引發之生物效應中之一或多者。另外，結合於此等相同或重疊之抗原決定基或其殘基子集之抗體預期模擬本發明抗體之結合特徵。舉例而言，此類抗體預期選擇性結合於PACAP而不結合或以更少親和力(更弱)結合於VIP或此神經肽家族內的其他肽。

已充分描述且實現本發明，藉由隨後之申請專利範圍來進一步描述本發明。

<110> 美商艾爾德生物製藥股份有限公司(ALDER BIOPHARMACEUTICALS,INC.)

<120> 抗PACAP抗體及其用途

<140> TW 105111815

<141> 2016-04-15

<150> US 62/148,550

<151> 2015-04-16

<150> US 62/148,557

<151> 2015-04-16

<150> US 62/148,562

<151> 2015-04-16

<150> US 62/148,583

<151> 2015-04-16

<150> US 62/148,596

<151> 2015-04-16

<150> US 62/148,640

<151> 2015-04-16

<150> US 62/148,463

<151> 2015-04-16

<160> 1246

<170> PatentIn版本3.5

<210> 1

<211> 443

<212> PRT

<213> 人工

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<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 家兔

<400> 16

<210> 17

<211> 93

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 17

<210> 18

<211> 21

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 18

<210> 19

<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 19

<210> 20

<211> 990

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 20

<210> 21

<211> 216

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<213> 家兔

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<212> DNA

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 30

<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

<213> 家兔

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 16

<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 32

<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 52

<210> 53

<211> 90

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 15

<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 990

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<211> 15

<212> PRT

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<220>

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<220>

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 72

<210> 73

<211> 69

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 36

<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 家兔

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<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 80

<211> 318

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 81

<211> 443

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 82

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 83

<211> 29

<212> PRT

<213> 家兔

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<212> PRT

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<211> 14

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 85

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<211> 16

<212> PRT

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<212> PRT

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<210> 88

<211> 7

<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 91

<210> 92

<211> 339

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 92

<210> 93

<211> 87

<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 家兔

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<211> 93

<212> DNA

<213> 家兔

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<211> 21

<212> DNA

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<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 99

<210> 100

<211> 990

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 100

<210> 101

<211> 217

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 101

<210> 102

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 102

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<211> 23

<212> PRT

<213> 家兔

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<211> 13

<212> PRT

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<212> PRT

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<212> PRT

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 110

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 110

<210> 111

<211> 651

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 112

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 112

<210> 113

<211> 69

<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

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<212> DNA

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<212> DNA

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<212> DNA

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 318

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 122

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 122

<210> 123

<211> 29

<212> PRT

<213> 家兔

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<212> PRT

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<212> PRT

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<211> 16

<212> PRT

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<212> PRT

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<211> 7

<212> PRT

<213> 家兔

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 330

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 130

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<211> 1329

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 131

<210> 132

<211> 339

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 132

<210> 133

<211> 87

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 133

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<211> 15

<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 家兔

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<211> 48

<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 家兔

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<211> 21

<212> DNA

<213> 家兔

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<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 990

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 140

<210> 141

<211> 217

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 141

<210> 142

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 142

<210> 143

<211> 23

<212> PRT

<213> 家兔

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<211> 13

<212> PRT

<213> 家兔

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<211> 15

<212> PRT

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<212> PRT

<213> 家兔

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<212> PRT

<213> 家兔

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<212> PRT

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 150

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 151

<210> 152

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 152

<210> 153

<211> 69

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 153

<210> 154

<211> 39

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 154

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<211> 45

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 155

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<211> 21

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 156

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<212> DNA

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<213> 人工

<220>

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

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<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 483

<211> 29

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 483

<210> 484

<211> 5

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 484

<210> 485

<211> 14

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 485

<210> 486

<211> 16

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 486

<210> 487

<211> 30

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 487

<210> 488

<211> 10

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 488

<210> 489

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 489

<210> 490

<211> 330

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 490

<210> 491

<211> 1335

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 491

<210> 492

<211> 345

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 492

<210> 493

<211> 87

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 493

<210> 494

<211> 15

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 494

<210> 495

<211> 42

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 495

<210> 496

<211> 48

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 496

<210> 497

<211> 90

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 497

<210> 498

<211> 30

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 498

<210> 499

<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 499

<210> 500

<211> 990

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 500

<210> 501

<211> 217

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 501

<210> 502

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 502

<210> 503

<211> 23

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 503

<210> 504

<211> 11

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 504

<210> 505

<211> 15

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 505

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<211> 7

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 506

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<211> 32

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 507

<210> 508

<211> 12

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 508

<210> 509

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 509

<210> 510

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 510

<210> 511

<211> 651

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 511

<210> 512

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 512

<210> 513

<211> 69

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 513

<210> 514

<211> 33

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 514

<210> 515

<211> 45

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 515

<210> 516

<211> 21

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 516

<210> 517

<211> 96

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 517

<210> 518

<211> 36

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 518

<210> 519

<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 519

<210> 520

<211> 318

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 520

<210> 521

<211> 441

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 521

<210> 522

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 522

<210> 523

<211> 29

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 523

<210> 524

<211> 5

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 524

<210> 525

<211> 14

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 525

<210> 526

<211> 16

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 526

<210> 527

<211> 30

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 527

<210> 528

<211> 6

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 528

<210> 529

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 529

<210> 530

<211> 330

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 530

<210> 531

<211> 1323

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 531

<210> 532

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 532

<210> 533

<211> 87

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 533

<210> 534

<211> 15

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 534

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<211> 42

<212> DNA

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<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 家兔

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<213> 家兔

<400> 538

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<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 539

<210> 540

<211> 990

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 540

<210> 541

<211> 218

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 541

<210> 542

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 542

<210> 543

<211> 23

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 543

<210> 544

<211> 13

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 544

<210> 545

<211> 15

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 545

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<211> 7

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 546

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<211> 32

<212> PRT

<213> 家兔

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<211> 11

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 548

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<211> 11

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 549

<210> 550

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 550

<210> 551

<211> 654

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 551

<210> 552

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 552

<210> 553

<211> 69

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 553

<210> 554

<211> 39

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 554

<210> 555

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<212> DNA

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<212> DNA

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<213> 家兔

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<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 559

<210> 560

<211> 318

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 560

<210> 561

<211> 441

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 561

<210> 562

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 562

<210> 563

<211> 29

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 563

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<212> PRT

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<212> PRT

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<212> PRT

<213> 家兔

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 569

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<211> 330

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 570

<210> 571

<211> 1323

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 571

<210> 572

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 572

<210> 573

<211> 87

<212> DNA

<213> 家兔

<400> 573

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<211> 15

<212> DNA

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<212> DNA

<213> 家兔

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<213> 家兔

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<213> 家兔

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<211> 18

<212> DNA

<213> 家兔

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<211> 33

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 990

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 580

<210> 581

<211> 218

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 581

<210> 582

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 582

<210> 583

<211> 23

<212> PRT

<213> 家兔

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<212> PRT

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<212> PRT

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 590

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 591

<210> 592

<211> 336

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 592

<210> 593

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<212> DNA

<213> 家兔

<400> 593

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<212> DNA

<213> 家兔

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<212> DNA

<213> 家兔

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<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 599

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 600

<210> 601

<211> 441

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 601

<210> 602

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 602

<210> 603

<211> 29

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 603

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<212> PRT

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<212> PRT

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<400> 605

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<211> 16

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 606

<210> 607

<211> 30

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 607

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<211> 6

<212> PRT

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<211> 330

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 610

<210> 611

<211> 1323

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 611

<210> 612

<211> 333

<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 612

<210> 613

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<212> DNA

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<213> 家兔

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<212> DNA

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<211> 48

<212> DNA

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<211> 18

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<212> DNA

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 620

<210> 621

<211> 218

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 621

<210> 622

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 622

<210> 623

<211> 23

<212> PRT

<213> 家兔

<400> 623

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<212> PRT

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<211> 15

<212> PRT

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<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 632

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<213> 家兔

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<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<220>

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<223> 人類化抗體序列

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<220>

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<220>

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<220>

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

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<213> 人工

<220>

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<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 721

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

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<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<220>

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<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 750

<210> 751

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<223> 人類化抗體序列

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<213> 人工

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<223> 人類化抗體序列

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<220>

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<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 932

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<213> 家兔

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<213> 家兔

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

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<220>

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<213> 家兔

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<213> 家兔

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<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<212> DNA

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

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<210> 1225

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<210> 1229

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<210> 1230

<400> 1230

000

<210> 1231

<400> 1231

000

<210> 1232

<400> 1232

000

<210> 1233

<400> 1233

000

<210> 1234

<400> 1234

000

<210> 1235

<400> 1235

000

<210> 1236

<400> 1236

000

<210> 1237

<400> 1237

000

<210> 1238

<400> 1238

000

<210> 1239

<400> 1239

000

<210> 1240

<400> 1240

000

<210> 1241

<211> 38

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> MOD_RES

<222> (38)..(38)

<223> 醯胺化

<400> 1241

<210> 1242

<211> 27

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> MOD_RES

<222> (27)..(27)

<223> 醯胺化

<400> 1242

<210> 1243

<211> 28

<212> PRT

<213> 智人

<220>

<221> MOD_RES

<222> (28)..(28)

<223> 醯胺化

<400> 1243

<210> 1244

<211> 330

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 1244

<210> 1245

<211> 330

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 1245

<210> 1246

<211> 330

<212> PRT

<213> 人工

<220>

<223> 人類化抗體序列

<400> 1246

Claims

一種人類、人類化或嵌合的抗人類垂體腺苷酸環化酶活化多肽(「PACAP」)抗體或抗體片段，包含：(i)(a)一重鏈可變區(「VH」)，其包含由SEQ ID NO：4組成之互補決定區1(「CDR1」)序列；由SEQ ID NO：6組成之互補決定區2(「CDR2」)序列；及由SEQ ID NO：8組成之互補決定區3(「CDR3」)序列；及(b)一輕鏈可變區(「VL」)，其包含由SEQ ID NO：24組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：26組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：28組成之CDR3序列；或(ii)(a)一VH，其包含由SEQ ID NO：44組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：46組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：48組成之CDR3序列；及(b)一VL，其包含由SEQ ID NO：64組成之CDR1序列；由SEQ ID NO：66組成之CDR2序列；及由SEQ ID NO：68組成之CDR3序列。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其中：於(i)中，(a)該VH包含與SEQ ID NO：2具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列；及/或(b)該VL包含與SEQ ID NO：22具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列；或於(ii)中，(a)該VH包含與SEQ ID NO：42具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列；及/或(b)該VL包含與SEQ ID NO：62具有至少80、85、90、95、96、97、98或99%序列一致性之胺基酸序列。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其中：於(i)中，(a)該VH包含SEQ ID NO：2之胺基酸序列；及/或(b)該VL包含SEQ ID NO：22之胺基酸序列；或於(ii)中，(a)該VH包含SEQ ID NO：42之胺基酸序列；及/或(b)該VL包含SEQ ID NO：62之胺基酸序列。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其包含：於(i)中，(A)一重鏈，其包含與SEQ ID NO：1具有至少90或95序列一致性之胺基酸序列；及/或(B)一輕鏈，其包含與SEQ ID NO：21具有至少90或95序列一致性之胺基酸序列；或於(ii)中，(A)一重鏈，其包含與SEQ ID NO：41具有至少90或95序列一致性之胺基酸序列；及/或(B)一輕鏈，其包含與SEQ ID NO：61具有至少90或95序列一致性之胺基酸序列。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其包含：於(i)中，(A)一重鏈，其包含SEQ ID NO：1之胺基酸序列；及/或(B)一輕鏈，其包含SEQ ID NO：21之胺基酸序列；或於(ii)中，(A)一重鏈，其包含SEQ ID NO：41之胺基酸序列；及/或(B)一輕鏈，其包含SEQ ID NO：61之胺基酸序列。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其中該人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段與人類PACAP的結合：(I)當在人類PACAP之殘基10的酪胺酸被置換為丙胺酸時，係被除去的；及/或(II)當在人類PACAP之殘基13的酪胺酸被置換為丙胺酸時，係被除去的。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其拮抗、抑制、中和或阻斷與人類PACAP相關之至少一種生物效應，其中該至少一種生物效應係選自於下列：(a)PAC1受體(「PAC1-R」)的活化；(b)1型血管活性腸肽受體(「VPAC1-R」)的活化；(c)2型血管活性腸肽受體(「VPAC2-R」)的活化；(d)在PAC1-R-表現細胞中PAC1-R介導之cAMP增加；(e)在VPAC1-R-表現細胞中VPAC1-R介導之cAMP增加；(f)在VPAC2-R-表現細胞中VPAC2-R介導之cAMP增加；(g)活體內PACAP誘導之血管舒張；(h)PACAP誘導之肥大細胞去顆粒作用；(i)活體內PACAP誘導之神經元活化；或(j)活體內光敏感性。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其抑制人類PACAP結合於：(a)PAC1-R及/或PAC1-R-表現細胞；(b)VPAC1-R及/或VPAC1-R-表現細胞；及/或(c)VPAC2-R及/或VPAC2-R-表現細胞。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其中：(a)經結合於該人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段的人類PACAP能夠結合於表現PAC1-R的細胞；及/或(b)該人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段能夠結合於經結合於PAC1-R的人類PACAP。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其： (I)具有相較於對人類血管活性腸肽(「VIP」)之解離常數(「K_D」)低至少100倍的對人類PACAP之解離常數；及/或(II)以小於或等於10^-9M之K_D結合於PACAP。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其係選自由以下組成之群：scFv、片段抗原結合(「Fab」)片段、Fab’片段、MetMab樣抗體、單價抗體片段及F(ab’)2片段。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其包含下列性質之一或多者：(a)實質上缺少或完全沒有N-糖基化及/或O-糖基化；(b)包含恆定域，該恆定域係衍生自人類IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體；(c)包含Fc區，該Fc區係經修飾以改變效應功能、半衰期、蛋白水解或糖基化中之至少一者；或(d)包含Fc區，該Fc區含有改變或消除N-糖基化及/或O-糖基化之一或多種突變。
如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其係直接或間接與至少一個效應子部分、化學連接子、可偵測部分、功能部分或治療劑連接。
如請求項13之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段，其中該可偵測部分係螢光染料、酶、受質、生物發光物質、放射性物質、化學發光部分或其混合物。
一種適合用於治療、預防或診斷用途之組合物，其包含：(a)治療、預防或診斷有效量之至少一種如請求項1-14中任一項之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段；及(b)醫藥學上可接受之稀釋劑、載劑、增溶劑、乳化劑、防腐劑或其混合物。
如請求項15之適合用於治療、預防或診斷用途之組合物，其係適合用於皮下、靜脈內、肌肉內、局部、經口、吸入、鼻內、頰內、陰道、肛門、經皮、腹膜內或鞘內投與。
如請求項15之適合用於治療、預防或診斷用途之組合物，其係凍乾的。
如請求項15之適合用於治療、預防或診斷用途之組合物，其進一步包含至少一種活性劑，該活性劑係選自止痛劑、抗炎劑及免疫抑制劑。
如請求項15之適合用於治療、預防或診斷用途之組合物，其進一步包含：(a)抗神經生長因子(「NGF」)抗體或抗體片段；(b)抗降血鈣素基因相關肽(「CGRP」)抗體或抗體片段；及/或(c)抗CGRP受體抗體或抗體片段。
一種經分離之核酸序列或核酸序列群，其編碼如請求項1之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段。
一種載體或載體群，其含有如請求項20之經分離之核酸序列或核酸序列群。
一種宿主細胞，其包含如請求項20之經分離之核酸序列或核酸序列群。
如請求項22之宿主細胞，其為一種哺乳動物、細菌、真菌、禽類、兩棲動物、植物或昆蟲細胞。
如請求項22之宿主細胞，其為畢赤酵母屬細胞或中國倉鼠卵巢(「CHO」)細胞。
如請求項22之宿主細胞，其穩定表現及分泌該人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段。
一種表現人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段之方法，其包括在提供該人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段之表現的條件下培養如請求項22之宿主細胞或表現如請求項20之核酸序列或核酸序列群。
一種如請求項1-14中任一項之人類、人類化或嵌合的抗人類PACAP抗體或抗體片段在製備一藥物的用途，該藥物係供使用於治療或預防有其需要的個體之頭痛的發作、頻率、嚴重程度或持續時間。
如請求項27之用途，其中該頭痛係有預兆偏頭痛、無預兆偏頭痛、偏癱性偏頭痛、叢集性頭痛、神經性偏頭痛、慢性頭痛、藥物過度使用頭痛或緊張性頭痛。
如請求項27之用途，其中該個體係先前已接受抗CGRP抗體或抗體片段及/或抗CGRP受體抗體或抗體片段。
如請求項29之用途，其中該個體未適當地對該抗CGRP抗體或抗體片段及/或該抗CGRP受體抗體或抗體片段作出反應，或該個體已引發對該抗CGRP抗體或抗體片段及/或該抗CGRP受體抗體或抗體片段之免疫反應。